Xxxxxxxxxx Komise
ze xxx 14. xxxxx 1991,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx mléka x tepelně xxxxxxxxxx xxxxx
(91/180/XXX)
XXXXXX EVROPSKÝCH SPOLEČENSTVÍ,
s xxxxxxx na Smlouvu x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx společenství,
s ohledem xx xxxxxxxx Xxxx 85/397/XXX xx dne 5. xxxxx 1985 x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx otázkách obchodu x xxxxxxx ošetřeným xxxxxx uvnitř Xxxxxxxxxxxx [1] xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 89/662/XXX [2], x xxxxxxx xx xx. 10 xxxx. 2 xxxxxxx směrnice,
vzhledem x tomu, xx xxxxx xx. 10 xxxx. 2 Xxxxxx xxxxxxx metody analýzy x testování, které xx mají používat xxx kontrolu xxxxxxxxxx xxxxx pro syrové xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx mléko;
vzhledem x xxxx, že xxx xxxxxx mléko je xxxxxxxx xxxxxxxx zejména xxxxxx xxx stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, obsahu xxxxx, xxxx mrznutí x přítomnosti xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx xxx xxxxxxxxxxx mléko xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx metody xxx xxxxxxxxx nepřítomnosti xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií, xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx peroxidázy, xxxxxxxxxxxxx antibiotik a xxxx xxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x XXX xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxx mikroorganismů, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx x xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx analýzy x xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx dodržování určitých xxxxx; xx xx xxxxxxx nezbytné xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx rutinní xxxxxx xxxxxxx x testování; xx v xxxxxxxxx xxxxxxxx těchto xxxxxxx xxxxx xxxxxxx státy xx xx, aby xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 85/397/XX xxxx xxxxxxx xxxxxx rutinní xxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx zahrnuje i xxxxxxxxx xxxxxxx analýzy x kriterií xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx jednotného xxxxxxx xxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, že xxxxxxxx xxxxxx rozhodnutí jsou x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
XXXXXXX TOTO ROZHODNUTÍ:
Článek 1
Xxxxxxxxxx postupy xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxx:
- stanovení xxxx mrznutí,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 30 °C,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 2
Referenční xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx pasterované xxxxx xxxx xxxx:
- stanovení xxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxx 21 °C,
- xxxxxxxxx xxxxxx koliformních xxxxxxxx – xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxx antibiotik x xxxxxxxxxxx,
- detekce xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 3
Referenční xxxxxxx xxxxxxx a testování xxx XXX mléko x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx tyto:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- stanovení xxxxxx mikroorganizmů xxx 30 °C,
- detekce xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx.
Článek 4
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx analýzy x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx podle xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x příloze X.
Xxxxxx 5
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx 1, 2 x 3 xxxx xxxxxxx x xxxxxxx XX.
Xxxxxx 6
Xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx 31. xxxxxxxx 1992, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 7
Toto rozhodnutí xx určeno xxxxxxxx xxxxxx.
X Bruselu xxx 14. února 1991.
Xx Xxxxxx
Xxx Xxx Xxxxxx
xxxx Xxxxxx
[1] Úř. xxxx. X 226, 24.8.1985, x. 13.
[2] Xx. xxxx. X 395, 30.12.1989, x. 13.
XXXXXXX X
XXXXX
X. Xxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Odběr vzorků xxxxxxxx x tepelně xxxxxxxxxx xxxxx
X. XXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxx
Xxxxxx ustanovení xx xxxxxx činidel, xxxxxxxxx x pomůcek, xxxxxxxxx xxxxxxxx, kritérií xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx členských xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx vzorků a xxxxxxxxxx xxxxx musí xxxxxxxxx tato xxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxx
2.1.1 Pokud xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx, ředění nebo xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx mohou xxxxxxxx xxxx jinak xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx popsaných xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.1.2 "Xxxxxxxxxxxx" xxxx "xxxxxxx" (bez xxxxxxx xxxxxxxxx) se rozumí "xxxxxxxxxxx xx xxxx" xxxx "xxxxxx vodou".
2.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxx není xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx musí mít xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx a xxxxxxx
3.1 Xxxxxx xxxxxxxxx x pomůcek
Příslušný xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx x se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.2 Xxxxxxxxxx váhy
"Analytickými xxxxxx" xx xxxxxx xxxx x přesností xxxxxx xx 0,1 xx.
4. Xxxxxxxxx výsledků
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx uvedený xx xxxxxx o xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx opakovatelnosti (5.1) xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxx toto xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx splněno, xxxx xx xxxx xxxxxxxx, xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, výsledek xx vypočítá x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
5. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxx x reprodukovatelnost
5.1 Kritéria xxxxxxxxxxxxx uvedená xxx xxxxx postup xxxx xxxxxxxxxx xxxxx:
5.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) xx xxxxxxx, xxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx mezi dvěma xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx výrobkem xx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx přístroj, xxxxxx laboratoř, xxxxxx xxxxxx období).
5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) xx xxxxxxx, xxx kterou leží xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx testů, xxxxxxxxx totožným xxxxxxxx x xxxx testovacím xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx (různí xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx a/nebo xxxxx xxxx).
5.1.3 Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x reprodukovatelnosti, xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, představují 95 % intervaly xxxxxx xxxxxxxxxxxxx podle xxxxxxxx XXX 5725, xxxxx vydání, 1986. Xxxx vypočteny z xxxxxxxx uznaných xxxxxx, xxxxxxxxxxx ve xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx. X xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx x souladu x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
6. Xxxxxx x testování
Zpráva x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx použitý xxxxxx x získané výsledky. Xxxx xxxx musí xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx by xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx všechny informace xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
XX. XXXXX VZORKŮ XXXXXXXX X XXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tento xxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx ošetřeného xxxxx. Xxxxx postup pro xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx x skladování vzorků xx použijí pro xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x pro xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx mléko xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx nádržích.
Postupy xxxxxxx x xxxxxx 2, 4.4, 5 a 6 xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx ošetřeného xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx.
2. Xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xxxx. provedou pověření xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx orgány xxxx xxxxxxxxx laboratoř xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, aby bylo xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx budou xxxxxxxxxxxxxxx x x souladu x xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx příslušné orgány xxxx testovací xxxxxxxxx xxxxxxxx xx nezbytné, xxxxxxx zaměstnance xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx byla xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxx xxx xxxxx vzorků
3.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx musí xxx xxxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxx nebo x xxxxxx vhodného, xxxxxxxxxx xxxxxxxx materiálu, xxx xxxx xxx xxxxxxxx s xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx použití (xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx, xxx.). Xxxxxxx a xxxxxxxx xxx míchání xxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxx dostatečně xxxxxx plochu xxxxxxx, xxx xxxx zajištěno xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx vzniku xxxxxx xxxxx. Naběračky xxxx xxx opatřeny xxxxxx, xxxxxxxxxx dlouhou rukojetí x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx hloubky xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx alespoň 50 ml.
Vzorkovnice x xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx pro odběr xxxxxx (xxxxxx nádob x xxxxx) xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx změnu xxxxxx, která xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx materiál x xxxxxx xx vzorky xxxx mít xxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx x xxxx xxx zakulacené xxxxx.
3.2 Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
Vybavení xxx xxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxx) musí xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx 3.1 x xxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxx se xxx xx sobě xxxxxx xxxxxx vzorků použije xxxxx xxxxxxxx, musí xxx xx xxxxxx xxxxxx vzorku xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx laboratoř xxxx příslušný xxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx výsledků xx xxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxxxx odběru xxxxxx
4.1 Xxxxxx xxxxx
Xxx ohledu xx xxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx být xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxx, xxxx mechanicky.
Vzorek musí xxx xxxxxxx xxxxx xx promíchání, xxxx xx mléko ještě x xxxxxx.
Xxxxx xx x nádrže xxxxxxx xxxxxxx více xxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx, jako xxxxx xxxx xxx odebrán xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx vzorku musí xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx takový, xxx byly xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx a xxx xxx xxxx xxxxx xxxxx promíchat xxxxx xxxx testováním, xxxx xx xxxx hrozilo xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxx xxxxx vzorků
4.2.1 Odběr xxxxxx x xxxxx x xxxxx xx xxxxx
X xxxxxxxx promíchání xxxxxxxxx xxxxxxxx ve xxxxx xxxx konvi xxxxxx x xxxx, xxxxxxx dbát na xx, xxx xx xxxxx řádně promíchalo x xxx xx xx hrdle konve xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Vzorek, xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxx celou xxxxxxx, xx odebere xxxxxxxx xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxx x zemědělském podniku
Míchat xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxx mléka neumožňuje xxxxxxx mechanické míchačky, xxxxxx xxxxx.
4.2.3 Odběr xxxxxx x xxxxx xxx
Xx nezbytné, xxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx, když xx xxxxxx xx xxxxx xxx. Xx účelem xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx může být xxxxxxxx další ruční xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxx, x xxx se xx xxxxxxx vzorek, xxxxxxxx kapacitu misky xxx, xxxxxxx reprezentativní xxxxxx x xxxx xxxxxxx postupem xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.4 Xxxxx xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxx, x xxxxx xx xx provést xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx více nádob, x xxxxx xxxxxx xx odebere xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx jednotlivé xxxxx xxxxxx reprezentativních xxxxxxxx v xxxxxx x xxxxxxxx, které xx xxxxxxx x xxxxxx, ze xxxxx xxx xxxxx ze xxxxxx xxxxxxx. Po xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxx) xxxxxx (xxxxxx) x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
4.2.5 Odběr xxxxxx z xxxxxxx xxxxx – xxxxxxxxxx xxxxxx, cisternové xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx
4.2.5.1 Xxxx xxxxxxx vzorků se xxxxx vhodným xxxxxxxx xxxxxxxx.
X promíchání xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx, cisternových xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.5.2).
Délka xxxxxxxxxx xxxxxx xx době, xx xxxxxx xxxx xxxxx x xxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx promíchání xxxxxxx x xxxxxx x jednotlivých případů xx vhodný xxx xxxxxxx plánovaného xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx výsledků xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx odebraných buď x různých xxxxx xxxxx, xxxx v xxxxxxxxxxxx intervalech xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx. Způsob xxxxxxxxxx xxxxx (syrového mléka xxxx plnotučného mléka) xx xxxxxx, xxxxx xx rozdíl xxxxxx xxxx x obou xxxxxx odebraných za xxxxxx podmínek xxxxx xxx 0,1 %.
Ve xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxx x místě xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xx promíchání xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx celý xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx odběr xxxxxx x xxxxxxxxxxx otvoru. X xxxxxxx odběru xxxxxx x vypouštěcího xxxxxx je třeba xxxxxx xxxxxx dostatečné xxxxxxxx mléka, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx nádob nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxxxxx míchačkou xxxxxxxxxxx xx nádoby x poháněnou xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx otvoru; xxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx,
- v xxxxxxx cisternových xxxxxxx xxxx cisternových xxxxxx xxxxxxxxx mléka x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx, stlačeným x xxxxxx vzduchem. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx a xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
4.3 Automatický a xxxxxxxxxxxxxxx odběr xxxxxx
Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx odběr vzorků xxxxxxxx mléka dodaného xxxxxxxxxx se xxxx xxxxxx podle xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx laboratoří xxxx jiným xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx musí xxx před x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrolám, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx postupů xxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxx x cílem xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx objem xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxx xxxx být xxxxxxx vzorek,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (který xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx vzorku),
- schopnost xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx po xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx příslušný xxxxxxxxx vnitrostátní xxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx,
- minimální objem xxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx preventivní xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.
4.4 Xxxxx vzorků xxxxxxx ošetřeného xxxxx xxxxxxxx k přímé xxxxxx spotřebě x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx spotřebě x xxxxxxxx x maloobchodních xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nádob. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx obchodní xxxxxx nebo x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx, x xx, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx (x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx mléka x xxx xxxxxxxxx).
X xxxxxxx druhu tepelně xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx metodou UHT x sterilizovaného) xx xxxxxxx takový počet xxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx vyšetření, která xxxx být xxxxxxxxx, x to xxxxx xxxxxx poskytnutých testovací xxxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxx xxxxxx příslušného xxxxxx.
5. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx jeho xxxxxxx identifikaci xxxxx xxxxxx analytických xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx orgánu (xxx xxx 2).
6. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx laboratoř pokyny xxxxxxxx se xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx být xxxxxxxx x době mezi xxxxxxx vzorků xxxxxx xxxxxxxxxx, a xx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx má xxx xxxxxxx.
Xxxxxx stanoví toto:
- xxxxx přepravy x xxxxxxxxxx je xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxx nebyly xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zápachu x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx-xx xx xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx průsvitná, xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx teplotách 0 xX až 4 xX. Xxxx xxxx odběrem x xxxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxxx a x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 36 xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 0 xX až 6 xX, není-li xxxx xxxx odběrem x testováním xxxxx xxx 24 hodin,
- xxxxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 0 xX až 4 xX. Doba xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx být xx xxxxxxxxx x x xxxxxx případě nesmí xxxxxxxxxx 24 hodin,
- xxxx xxxxxx mléka xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx skladovány x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxx xxxxxxx vzorku x xxxxxxxx xxxx být xx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx přijmout xxx xxxxxxx testy, xxxx xxxxxxx x popisu xxxxxxx xxxxxxxxxxxx postupů.
XXXXXXX X
XXXXX
X. Stanovení xxxx mrznutí
II. Xxxxxxxxx xxxxxxxx fosfatázy
III. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X
X. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 21 °X
XX. Stanovení xxxxxx koliformních xxxxxxxx – xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X
XXX. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
XXXX. Xxxxxxx xxxxxxxxxx x sulfonamidů
IX. Detekce xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
X. STANOVENÍ XXXX MRZNUTÍ
1. Xxxxxxx x oblast použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, UHT xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx mléka xxxxxx přístroje (termistorového xxxxxxxxx), v němž xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zařízením x xxxxxxxxxxxx snímač xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx bod xxxxxxx xx plató xxxxxx mrznutí, kdežto xxxxx xxx je x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx, že xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx stanovenou xxxx xxxxxx. Xxxxxxxx x xxxx, xx xx mohou xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx, ale x xxxxxx xxxx mrznutí xxxxx a standardních xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx plató. Xxxxxxxxx s pevně xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxx lze xxxxxx xxx odhad podílu xxxxxxx xxxx xxxx x mléce xx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxxx xxxxxx není vyšší xxx 0,18 g xxxxxxxx mléčné na 100 xx (xxx xxx 7.4).
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx Celsia (°C).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx vzorek xxxxx xx v závislosti xx přístroji podchladí xx vhodnou xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx způsobí, xx xxxxxxx rychle xxxxxxx xx x xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxxx xxxxxxxx jako xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxx plató xxxxx xxx mrznutí xxxxx xx xxxxxxxx Celsia.
4. Xxxxxxxxx a pomůcky xx xxxx
Xxxxxxx laboratorní xxxxxxxx, zejména:
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx) x příslušným xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx jiného xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx x xx xxxxxxxx xx xxxxxx.
4.1.1 Chladicí lázeň
Je xxxxx použít xxx xxxx xxxxxxxx lázně.
4.1.1.1 Xxxxxxx typ
Dobře xxxxxxxxx xxxxx obsahující xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx x kapalině xxxxx xxxxx xxx 0,2 °X. Xxxxxxx xxxxxxxx může xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx ± 0,5 °X xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx výrobcem.
Je důležité, xxx x xxxxx xxxx udržována xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Celá xxxxxx zkumavky na xxxxxx pod xxxxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxxx xxxxxxxx kapalinou.
4.1.1.2 Xxxxxxxxxx xxx
Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx proud xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx může xxxxxxx xxxxxxx x rozmezí ± 0,5 °X xx nominální xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx je 33 % (V/V) vodný xxxxxx 1,2-xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx).
4.1.2 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx průměru 1,80 ± 0,2 xx x x xxxxxxx vodiče xxxxxxxxx 0,31 xx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx nižší xxx 2 sekundy x xxxxxxx x (xxx xxxxxxxx) xxxx být xxxxxx. Pracovní napětí, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxxx, xxx xxx − 0,512 °C xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx o 0,0005 °X. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx být ± 5 %.
Když xx xxxxx x xxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx skleněné xxxxxxx xx musí xxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xx xxxxxx x x xxxx, xxxxx je 44,6 ± 0,1 mm xxx xxxxxx okrajem xxxxxxxx (viz xxxxxxx xx xxxxxx 15). Xx třeba xxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx této xxxxxx.
Xxxxxxxx:
β xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx podle xxxxxx
− xX / dT × 1 / X = β / T2
kde:
T je xxxxxxx xx stupních Xxxxxxx
X je xxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxx X,
− xX / xX × 1 / X xxxxxxxx xxxxxxxxxx
β xx xxxxxxxxx, která xxxxxx xx xxxxxxxxx použitém xxx xxxxxx termistoru. X xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx hodnota xxxxx xxx 3000.
4.1.3 Xxxxxx a odečítací xxxxxxxx
4.1.3.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx vyhledávání xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx mrznutí. Xxxxx xx xxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx zůstane xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx ± 0,002 xX xx xxxx xxxxxxx 20 xxxxxx.
4.1.3.2 Xxxxx obsluha
Odpor xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx podobným xxxxxxxxx pomocí nejlepších xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx tolerance xx ± 10 % x jejichž xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx vyšší xxx 2×10−5°X.
Xxxxxxxx (vyrovnávací) xxxxx xx nesmí xxxxxxxx od xxxxxxxxx x celém rozsahu x xxxx než x 0,3 % xxx xxxxxxxxx hodnoty.
Pro xxxxx xxxxxxxxx musí xxx možné xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx 0,001 °X.
4.1.3.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx 0,01 °X x rozmezí xx 0 °X xx –1 °C.
Stabilita xxxxxxxxxxx zařízení x xxxx příslušného xxxxxx xxxx být xxxxxx, xxx xxxxxxxx dvou xx sobě následujících xxxxxx téže xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx 0,001 °C.
Linearita xxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x žádném bodě xxxxxxx xx – 0,400 °X xx – 0,600 °X xxxxx xxxxx než ± 0,001 °X.
4.1.4 Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxx o xxxxxxx 1 xx 1,5 xx, xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx,.
Xxxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx na rozkmit x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxx byl xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx 1,5 mm xxx xx pod touto xxxxxxx.
Xxxxxxxx vibruje xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx ± 1,5 mm), xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx stanovení. Xxxxx míchání xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx termistoru xxxx xxxxx zkumavky.
4.1.5 Xxxxxxxx xx xxxxxxxx mrznutí
Může xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, aby xxxxxxx xxxxxx testovacího vzorku xxxxxxx x xxxx xxxxxxx. X xxxx xxxxx lze použít xxxxxxxx; xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx rozkmitu xxxxxxx xx xxxxx xx dvě sekundy xxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxx stěny xxxxxxxx xx xxxxxx.
4.1.6 Xxxxxxxx xx xxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx (viz xxxxxxx 1) jsou xxxxxxxx x 50,8 ± 0,1 xx xxxxxx; xxxxxx xxxxxx xx 16,0 ± 0,1 xx x xxxxxxx průměr xx 13,5 ± 0,1 xx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx se nesmí xxxxx x více xxx 0,1 xx.
Xxxxxxxx xxxx mít xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx okraje 29,8 xx (21 mm xxx dnem xxxxxxxx), xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx.
4.1.7 Zdroj xxxxxxxxx
Xxxxx napětí xxxx xxx stabilizován xxx xxxxxx nebo vně xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ± 1 % xxxxxxxxx xxxxxxx, když xxxxxx xxxxx xxxxxx x ± 6 %.
4.2 Analytické xxxx
4.3 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 1000 xx, xxxxx A.
4.4 Xxxxxxx, xxxxx odvětraná, xxxxxxxxxxxx xx 130 ± 1 °X
xxxx
Xxxxxxxxxx pec, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 300 ± 25 °X.
4.5 Xxxxxxxxx
5. Xxxxxxx
5.1 Xxxx destilovaná v xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx na 20 ± 2 °X, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx oxid uhličitý.
5.2 Xxxxxxx sodný, xxxxxxx x.x., xxxxx xxxxx, xxxxxx 5 xxxxx xxx xxxxxxx 300 ± 25 °C x xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 24 xxxxx při xxxxxxx 130 ± 1 °X v xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx teplotu v xxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků
Navážit odpovídající xxxxxxxx (xxx xxxxxxx 1) xxxxxxx chloridu xxxxxxx (5.2) do xxxxxxx. Xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxx (5.1), xxxxxxxxxxxxx přelít xxxxxx xx odměrné baňky x xxxxxx 1000 xx a doplnit xx značku xxxxx x xxxxxxx 20 ± 2 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxx xxx 5 °X v xxxxx xxxxxxxxxx polyethylenových xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx 250 ml.
Bod xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 20 °X
|
x NaCl/l |
°C |
|
6,859 |
-0,408 |
|
7,818 |
-0,464 |
|
8,149 |
-0,483 |
|
8,314 |
-0,492 |
|
8,480 |
-0,502 |
|
8,646 |
-0,512 |
|
8,811 |
-0,521 |
|
8,977 |
-0,531 |
|
9,143 |
-0,541 |
|
10,155 |
-0,600 |
Před xxxxxxxx xx standardní roztok xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxx neprotřepávat xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx standardního roztoku xx x láhve xxxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxxx. Xxxxx nepoužívat pipety.
Nepoužívat xxxxxxx z lahví, xxxxx xxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxxxx roztoky xxxxxx dvou xxxxxx, xxxxx neobsahují fungicid (xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 10 x/x).
6. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxx, xxx se xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxx 1 °X xx xxxxxxx, xxx níž se xxxxxxx kalibrace. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx světlu, průvanu xxxx pokojovým xxxxxxxx xxxxxx xxx 26–27 °X.
Xxxxxxx xx, xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx a xx xxx xxxxxx xxxxxxx 12 xxxxx xxxx xxxxxxxxx. Zkontrolovat xxxxxx sondy, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxx standardní roztoky (xxx xxxxxxx xxxx), xxxxxxx xxx xxxxxxx xx xxxxx nad xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx hodnotou bodu xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx. Rozdíl xxxx body xxxxxxx xxxx xxxxxxx by xxxxxxx xxxxx být xxxxx xxx – 0,100 °C.
(U xxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxx xxxx dostupných xxxxxxxxx xx příslušný xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx, xx se ustálí xx dané xxxxxxx xxxx xxxxxxx v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X těchto xxxxxxxxx xxxxx jednoho xxxxxxxxxxxx roztoku, který xx xxxxx xxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxx x kalibračních xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxx).
Xxxxxx pipety xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx, xxxx xxxxx pomocí xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx vyrobeny x xxxxxxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxx xx vzorky xxxxx (xxxxxx xxxx xxxx, xxxxx x xxxxxxxxxx demineralizovanou vodou). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx stejné jako xxxxxxx vzorků xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxx provádět xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx takovým xxxxxxxx, xxxxx po xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx každý roztok xxxxxxxxxx správné hodnoty xxxx xxxxxxx každého x xxxx, xxxx xx xxxx nutná xxxxxxxxx nastavení. Kryoskop xx xxxx xxxxxxxxx x použití x xxxxx ukazuje xxx xxxxxxx vzorku xxxxx, xxxx by xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
7. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
7.1 Xxxxx to xx xxxxxxxx xxxxxxxxx vzorky xxx teplotě xxxx 0 °X x 5 °X.
7.2 Xxxxx xx je nezbytné xxxxxxxx xxxxxxxxx všechna xxxxxxxxx cizí xxxxxxx xxxx xxxx mléčný xxx xx vzorku xx xxxxx a xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx x mlékem x xxxx být xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.3 Xxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxx skladovací xxxxxxx (mezi 0 x 5 °C) xxxx je xxxxx xx xxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx testování. Xx však nezbytné xxxx xx to, xxx standardní xxxxxxx x vzorky xxxxx xxxx při xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx možno xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx bodu xxxxxxx. Xxxxxx, jejichž xxxxxxxx přesahuje 0,18 x kyseliny xxxxxx xx 100 xx xxxxx, nemohou být xxxxxxxxxxx.
7.5 UHT xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx nejméně 20 minut xxxx xxxxxxxxxx v otevřené xxxxxx.
8. Xxxxxx
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx x teplota chladicí xxxxxxxx jsou v xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxx xx xxxxx termistoru xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx se, xxx xx xxxxxxxx kapalina xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx 12 hodin, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx chladicí kapaliny, xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx.
8.2 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxx každou xxxxx xxxxx měřit xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxx s xxxxx xxxxxxx – 0,512 °X), xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx xx sobě xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxx xxx 0,001 °C. Xxxxx se xxxxxx xxxxxx hodnot liší xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxx 0,002 °X, xxxxxxxx xx xxxxx kalibrujte, jak xx xxxxxxx x xxxx 6.
Pokud xx xxxxxxxx používá xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx provádí xxxxxxx xxxxxx za xxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
8.3 Stanovení xxxx xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxx opatrným xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxx se xx xxxxxxx přimíchal xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx xxxxx xx suché x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx xx, xx xxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx x xxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx podle xxxxxx xxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx x mrznutí xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xx 0,1 °X.
(X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; u xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xx se zajistí, xxx mrznutí xxxxxx, xxxx xx ručička xxxx nitka galvanometru xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx.)
Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx mrznutí xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx teplotního xxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xx x xxxxx xxxxxxx xxxxx. Pokud xxxxx xxxxx vzorek rovněž xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx vzorku xx xxxxxxx xx 45 °X x 5 xxxxx xx udržuje xx této xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx testovací xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx testování. Teplota xxxxx xx začátku xxxxxxx rychle stoupne xx na hodnotu, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx x tuto xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, x xxxxxx xxxxxxxx mezi xxxxxxxx mrznutí x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx vzorek xx xxxxxx x xxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxx xxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx ji vodou x xxxxx xxxxx x míchačku xxxxxx xxxxxxx xxxxxx jemnou, xxxxxx x chlupy xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx je xxxxxx xxxx naměřenými xxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (0,004 °X), xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x jiného xxxxxx. Xxxxx jsou xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx na 0,004 °X, xxxxxx xx x použijí xx xxx výpočet xxxxxxxxx xxxxxxxx.
8.4 Chlazení xxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx uložit xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxx xxx vzorky x xxxxxx xxxxxxxx teplotu, xxx xxxxx xxxxxxx x chladu.
(U xxxxxxxxx xxxx kryoskopu xx xxxx možné; v xxxxxxxx případech je xxxxxxxx xx ujistit, xxx xx sonda xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, dokud xx xxxxxxxxx xxxxxx údaje.)
9. Xxxxxxxxx výsledků
9.1 Výpočet
Pokud xx po xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx potvrzena, xx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxx dvou xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx mrznutí, xxxxxxxxxxxx na xxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx součet xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx je liché xxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxx ukazuje tento xxxxxxx:
Xxx xxxxxxx (°X)
|
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx stanovení |
Průměr |
|
|
-0,544 |
-0,545 |
-0,544 |
|
-0,545 |
-0,546 |
-0,546 |
9.2 Xxxxxxxxxxxx
9.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x): 0,004 °X
9.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X): 0,006 °X
Xxxxxxx 1
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1 (xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx ke xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx)
XX. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení aktivity xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxxx
2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x μx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx 4 xx xxxxxx xx 1 xx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx fenol z xxxxxxxxx fenylfosfátu dvojsodného. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (namodralé xxxxx), xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx měří při 610 xx. Xxxx xx provádí porovnání xx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx byl xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Tlumivý xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx barnatého
4.1.1 Xxxxxxxxx xx xxxx 50,0 x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) [Xx(XX)2.8X2X] x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.1.2 Xxxxxxxxx xx xxxx 22,0 g xxxxxxxx borité (X3XX3) x doplnit xx 1000 xx.
4.1.3 Zahřát 500 xx každého xxxxxxx na 50 °X, xxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx asi xx 20 °X, v xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pH xx 10,6 ± 0,1 xxxxxxxx xxxxxxx 4.1.1 xxxx 4.1.2. Xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx roztok xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4.1.4 Xxxx xxxxxxxx zředit xxxxxx stejným objemem xxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxx 6,0 x xxxxxxxxxxxxx sodného (XxXX2) nebo 12,6 x XxXX2.4X2X a 20,0 x xxxxxxxx xxxxxxx (XxXx) x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.3 Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx vzniklého xxxxxxxxx
Xxxxxx 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2) xxxxx xx 100 xx.
4.4 Xxxxxx substrátu
Rozpustit 0,1 g fenylfosfát xxxxxxxxx xxxxxxx, prostý xxxxxx, ve 100 xx xxxxxxxxx roztoku (4.1.3) nebo 0,5 x xxxxxxxxxxxx dvojsodného xx 4,5 xx xxxxxxxxx roztoku xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2), xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx BQC (4.6) x nechat xxxx 30 xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 2,5 xx n-butanolu a xxxxxx xxxx, xxxxx xx butanol-1 neoddělí. Xxxxxxx x odstranit xxxxxxx-1. X xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx dní; před xxxxxxxx vyvolat xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Tlumivý xxxxxxxx xxxxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxxx, x to xxxxxxxx 1 ml xxxxxx roztoku ve 100 xx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.3).
4.5 Xxxxxxxxx xxxxx-xxx
Xxxxxxxxx ve xxxx 3,0 g xxxxxx xxxxxxxxxxx (ZnSO4 · 7X2X) a 0,6 x xxxxxx xxxxxxxxx (XxXX4 · 5X2X) x xxxxxxx xx 100 xx.
4.6 Xxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx XXX)
Xxxxxxxxx x 10 xx 96 % (V/V) xxxxxxxx 40 ± 1 mg 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXX) (C6H2Br2ClNO6).
Skladovat x xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx barvu xxxx je xxxxxx xxx xxxxx xxxxx.
4.7 Xxxxxx xxxxxx měďnatého (XX)
Xxxxxxxxx ve xxxx 0,05 x xxxxxx xxxxxxxxx (XxXX4.5X2X) x xxxxxxx na 100 xx.
4.8 Xxxxxxxxxx roztok xxxxxx
4.8.1 Navážit 200 ± 2 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxx baňky o xxxxxx 100 xx, xxxxxx vodu, xxxxxxxxx x xxxxxxx na 100 xx. Tento xxxxxx může xxx xxxxxxxxx x chladničce xxxxxxx xxxxxx.
4.8.2 Xxxxxx xxxxx 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx 100 xx x xxxxxxxxx. 1 xx xxxxxxxx 200 μx fenolu.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx ze xxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxxxx xxxxxxx xx skla, jakož x xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx.
x) Xxxxxxx typy xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx způsobit xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxx používání xx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
5.1 Xxxxxxxxxx váhy
5.2 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx 37 ± 1 °C.
5.3 Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxx xx xxxxxx xxxxx 610 xx.
5.4 Xxxxxxxx, 16 xxxx 18 × 150 mm, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 5 xx x 10 ml.
5.5 Pipety
5.6 Xxxxxxxx nálevky xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx. x xxxxxxx 5 cm.
5.7 Xxxxxxxx filtry x xxxxxxx xxxxxxx 9 xx xxx xxxxxxx xxxxxxxx filtrace.
5.8 Odměrné xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
6. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
x) Xxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx falešně xxxxxxxxx xxxxxxxx a xx xxxxx se xxx xxxxxxx. Je xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 Testování xxxxxxx xxxxx po xxxxxx vzorků. X xxxxxxx xxxxxxx skladovat xxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxx dva xxx.
6.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx pipety xxxxxx 1 xx xxxxxx xx každé xx xxxx xxxxxxxx (5.4), xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx.
6.3 Xxxxxxxxx
6.3.1 Slepý vzorek xxxxxxxx dvě xxxxxx xx xxxxxx xxxx; xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx hliníkovou xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Rychle xxxxxxxx xx pokojovou xxxxxxx.
6.3.2 Xx xxxxxx xxxxxxx ošetřovat slepý x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx 10 ml xxxxxxx xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxxxxx.
6.3.3 Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 60 xxxxx xx xxxxx xxxxx (5.2) x xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
6.3.4 Stejně xxxx v xxxx 6.3.1 xxxxxxxx dvě xxxxxx xx xxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx pokojovou teplotu.
6.3.5 Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxxxx zinek-měď (4.5) x řádně promíchat.
6.3.6 Xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, vylít xxxxx dva xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx není filtrát xxxxxxxx xxxx; xxxxxxxxxx 5 xx xx xxxxxxxx.
6.3.7 Přidat 5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx zabarvení (4.2).
6.3.8 Xxxxxx 0,1 xx roztoku BQC (4,6), promíchat a 30 xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx teplotě.
6.3.9 V xxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx absorbanci při xxxxxx délce 610 xx.
6.3.10 Xxxxx absorbance xxxxxxxx x bodě 6.3.9 převyšuje absorbanci xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxxxx 20 μx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.4.4, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx testovacího vzorku, xxxxx se opatrně xxxxx do xxxx, xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxxxx kalibrační xxxxxx
6.4.1 Na xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxx (4.8.2) xxxxxxxxx vyhovující xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0 (xxxxxxxxx nebo slepý xxxxx), 2, 5, 10 x 20 μx xxxxxx xx xxxxxxxx. Do xxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx 1 xx xxxx x 1 xx xxxxxx standardních xxxxxxx xxxxxx.
6.4.2 Xx xxxxx xxxxxxxx přidat 1 xx xxxxxxx síranu xxxxxxxxx (4.7), 5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.3), 3 xx vody x 0,1 ml xxxxxxx XXX (4.6); xxxxxxxxx.
6.4.3 Xxxxxx xxxxxxx zabarvení 30 xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
6.4.4 X xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx slepým xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx při xxxxxx délce 610 xx.
6.4.5 Xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (6.4.4) xxxxxxxxx xxx každé xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (6.4.1) xxxxxxxxx regresní xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxx x xxxxxx
7.1.1 Xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (6.3.9) xxxxxxxxx xxxxxxxx fenolu xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (6.4.5).
7.1.2 Xxxxxxxxx aktivitu xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x μx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx mléka podle xxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxxx xxxxxxxxx = 2,4 × X × D
kde
A xx xxxxxxxx xxxxxx x μg získané xxxxx bodu 7.1.1;
X xx xxxxxx xxxxxxx xxx zředění provedené xxxxx bodu 6.3.10 (x xxxxxxx žádného xxxxxxx D = 1).
2,4 je xxxxxx xxxxxxx (5/12 z 1 ml testovacího xxxxxx) – xxx 6.2 ve xxxxxxxxxx x 6.3.2, 6.3.5 x 6.3.6.
7.2 Xxxxxxxxxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) : 2 μg fenolu/ml.
7.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) : 3 (xxxxxxxxx) μx xxxxxx/xx.
7.2.3 Xxxxx se xxxxxxx provede xxxxx 6.3.10, limity xxxxxxx x 7.2.1 a 7.2.2 se xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.
XXX. STANOVENÍ XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx, xxxxx slouží xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx reakce na xxxxxxxxxx:
Xxxxx je mléko xxxxx xxxxxxxxxxx, xx 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx zabarvení.
Negativní xxxxxx xx xxxxxxxxxx:
Xx 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
3. Princip
Peroxidáza rozkládá xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx parafenylendiamin na xxxxxxxxx indofenol (Štorchův xxxx). Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx x xxxxx xxxx (50 °C) 2 x 1,4 xxxxxxxxxxxxxx (X6X8X2) x doplnit xx 100 xx. Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx a xxxxx, x tmavě xxxxx xxxxx xx skleněnou xxxxxx. Xxxxx jednoho xx dvou xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx 1,4 fenylendiaminu vytvoří xxxxxxxxx, kterou xx xxxxxx odstranit.
4.2 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxx 9 xx 30 % xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx 100 xx. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx koncentrované xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx.
Xxxxxx peroxidu xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxx, x xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
5. Xxxxxx
5.1 Xxx 5 xx vzorku xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x vhodným xxxxxx.
5.2 Xxxxxx 5 xx xxxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx (4.1).
5.3 Xxxxxx 2 xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.2).
5.4 30 xxxxxx po promíchání xxxxxxxx zabarvení. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx více xxx 30 sekund xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXX 30 °C
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X. Postup xx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx, pasterované xxxxx, UHT xxxxx xxxx sterilizované mléko, xxxxx bylo 15 xxx xxxxxxxxxxxxx při 30 °X.
2. Definice
"Mikroorganismy" xx rozumějí xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx po xxxxxxx xxxxxxxx xx popsaných xxxxxxxx.
3. Princip
Smíchat xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx x Xxxxxxx miskách x xxxxxx xxxxxxxxx 72 hodin xxx 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx mikroorganismů xx 1 xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx 0,1 xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx nebo XXX xxxxx.
4. Přístroje a xxxxxxx ze skla
Obvyklé xxxxxxxxxxx vybavení, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Horkovzdušná xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °C.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx teplotu 30 ± 1 °X.
4.1.4 xX-xxxx se xxxxxxxxx xxx kompenzaci teploty, xxxxxx xx ± 0,1 jednotky xX.
4.1.5 Xxxxx lázeň, nastavitelná xx 45 ± 1 °C.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x 9 xx ředicího xxxxxxx a pracující xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx obsahu zkumavky.
4.2 Xxxxxxx xx skla
4.2.1 Xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxxx 10 xx primárního xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 xx xxxx zkumavky o xxxxxx 20 ml xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), skleněné xxxx xx sterilního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx, x výpustním otvorem x průměru 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx, bezbarvého skla xxxx sterilního syntetického xxxxxxxxx, xxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx 90 xx 100 xx. Vnitřní xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx 10 xx. Xxx xxxxx mít xxxxx xxxxxxxxxx, které xx xxxxxxx xxxxxxxx kolonií.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx pomůcek ze xxxx:
Xxxxxxx ze xxxx xx xxxxxxxxxxx jedním x xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx 170–175 °X;
x) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °C.
Při xxxxxxx xxxxxxxxx xx nutné xxxx na to, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx proniknutí xxxx: xxxxx xx materiál xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx nádoby xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx – xxxx xx xxxxxxx mlékem
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx extrakt |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx (+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 g |
|
Sušené xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10–15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx by xxxxxx xxxxxxxxx žádné xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx inhibiční xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, trypton, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx x xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx, dokud xx xxxx xxxxx nerozpustí, xxxx xxxxxxxx x xxxx xxx 30 xxxxx.
Xxxxx to xx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); pokud xx je xxxxxxxx, xxxxxxx pH, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 mol/l) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx chlorovodíkové, aby xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx hodnota 6,9 ± 0,1 xxx 25 °C.
5.2 Rozdělení, xxxxxxxxxxx x skladování xxxxxxxxxxxx média
Rozdělit xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxxx xx 100 do 150 xx xx xxxxx xxxx po 12 xx 15 xx do zkumavek (4.2.2). Baňky x xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX kultivačního média.
Pokud xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, skladuje xx v xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx ne xxxx než 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx médium
Kultivační xxxxxx (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx x komerčního xxxxxxxxxxxxx kultivačního média. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xX xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X xxxxxxx podle xxxx 5.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx bodu. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Roztok xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx složky xx xxxx, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xX-xxxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx nezbytné upravit xX roztokem (nejméně 0,1 mol/l) xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x skladování ředidla
Rozdělit xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x autoklávu (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx v temnu xxx teplotě xxxx 1 x 5 °X, avšak xx xxxx než 1 xxxxx po xxxx xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) se xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. Dodržet xxxxxx výrobce. Upravit xX xxxxxxx xxxxx xxxx 6.1, xxxx xxxxxxxx, sterilizovat x xxxxxxxxx ředidla xxxxx xxxx 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxxx kultivačního xxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxx rychle rozpustit xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx vodní xxxxx (4.1.5) na 45 ± 1 °C.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx mléka
Vzorek xxxxx řádně promíchat, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xx 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx nádoby xx xxxxxxx. Xx xxxxx zabránit tvorbě xxxx xxxx pěnu xxxxxx rozptýlit. Xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx neměla xxxxxxxxx xxx minuty.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (10-1) (xxxxxx a pasterované xxxxx)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 ml xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 9 xx xxxxxxx (6.1), xxxxxxx xxxxxx xxxxx přijít xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxx ředidla xxxx být přibližně xxxxxx xxxx teplota xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx toto xxxxxxxx xxxxxx míchačkou (4.1.9).
Xxxxx se xxx xxxxxxxx ředění 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) přenést 1 xx primárního xxxxxx (7.3) xx 9 xx ředidla (6.1) xxxxx xxxxxx x xxxx 7.3.
Xxxxx xx xxx xxxxxx 10−2.
S xxxxx xxxxxx další xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx opakuje xxx xxxxxx, dokud xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx mikroorganismů (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx misek
7.5.1 Xxxxxx mléko: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx vzorku x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx nejméně xxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) připravit xxxxx vhodnou misku.
7.5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx: Sterilní xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx misky (4.2.4) 1 ml xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx desetinného xxxxxx. Musí xxx xxxxxxxxx nejméně dvě xxxxxx. Pro xxxxx xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.5.3 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx mléko (xxxxxxxxxxx xx 15 xxxxx xxxxxxxx xxx 30 °X – směrnice 85/397/XXX, xxxxxxx A xxxxxxxx VII xxx 5):
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 ml xxxxxx mléka (7.2). Xxxxxxxxx xxx xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx kultivačního xxxxx
Xx xxxxx naočkované misky xxxxx xxx 15 xx 18 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Ihned xxxxxxxxx rotací Xxxxxxx xxxxx, xxx po xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx přípravy xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx vzorku xxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxx médiem xxxxx xxxxxxxxx 15 minut.
Nechat xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx médium xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx. Neskládat xx xxxx více xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxx v xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 72 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx x Petriho xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 300 xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx počítání xxx použít xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx xxxxx xxxx xx to, xxx xxxxxxx k xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx x drobnými xxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx pochybností xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx skla x xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx tvořící xxxxxx xx považují xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx tvořící xxxxxx xxxxxxxxx méně než xxxxxxxx misky, xxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx celou misku. Xxxxx xxxxxxx tvořící xxxxxx pokrývají více xxx xxxxxxxx plochy xxxxx, xxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Xxxxxx a xxxxxxxxxxx mléko
8.1.1 Použít xxxxxxxx misek xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 xxxxxxx (viz 8.1.3 x 8.1.4).
8.1.2 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na 1 xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxx tohoto vzorce:
∑C / (x1 + 0,1x2) x
xxx:
∑X ΣX xx xxxxxxx počet xxxxxxx xxxxx xxxx 8.1.1.
(x1 + 0,1 x2)x xx xxxxx xxxxxxxxxxxx vzorku, xxx:
x1 xx xxxxx xxxxx xxx prvním xxxxxxx
x2 xx xxxxx misek xxx xxxxxx xxxxxx
x xx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx dvě xxxxxx xxxxxxx. Když xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx xxx, aby xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxx):
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 kolonií
Ředění 10−3: 33 x 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; = 278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2
= 6290,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.1.3 Xxxxx jsou xxxxxxx xxxxx nižší xxx 10, xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx "nižší xxx 10 x x", xxxxxxx "x" xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx zředění.
8.1.4 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 300 a počítání xx xxxxx, xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx zředění. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xx".
8.2 XXX mléko x xxxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xxxxx xxx 10 xxxxxxx xx 0,1 xx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/EHS.
9. Spolehlivost
Výsledky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kruhových xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
X. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX PŘI 21 °X
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 21 °X x xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxx dní xxxxxxxxxxxxx při 6 xX x cílem xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx psychotropními xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxx xx x xxxxx xxx 6 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx vytvářejí xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx aerobní xxxxxxxx xx popsaných xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx pět xxx xxx 6 °C. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx x Xxxxxxx miskách x xxxxxx inkubovat 25 xxxxx xxx 21 °X. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx pasterovaného xxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Přístroje
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, nastavitelná xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, schopný xxxxxxxx xxxxxxx:
x) 6 ± 0,2 °C
b) 21 ± 1 °C xx xxxxx bodech xxxxxx.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx pro kompenzaci xxxxxxx, přesný xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx lázeň, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx sklo, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Míchačka xxxxxxx xxxxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x 9 ml xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx obsahu xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx ze xxxx
4.2.1 Zkumavky x xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx o xxxxxx 150 až 250 xx xxxx zkumavky x objemu 20 xx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx x průměru 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx misek má xxxxxxx průměr xxx 90 xx 100 x. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx by měla xxx nejméně 10 xx. Xxx nesmí xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Sterilizace xxxxxxx ze skla:
Pomůcky xx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1), xxxxxxx jednu xxxxxx xxx xxxxxxx 170–175 °X;
x) x autoklávu (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx teplotě 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx autoklávu xx xxxxx dbát xx xx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx páry: pokud xx materiál xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xxxxxx by xxxxxx xxx xxxxxxx uzavřeny, xxxxxxx xxxx xxxxx xx měly xxx xxxxx.
Xxxxxxx ze xxxx xxxxxxxxxxxxx x autoklávech xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx páry.
Pipety xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx médium – xxxx xx xxxxxxx xxxxxx
5.1 Složení:
|
Kvasnicový xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx(+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxx mléko |
1,0 x |
|
Xxxx |
10-15 x podle xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx agaru |
|
Voda |
1000 ml |
Sušené xxxxxxxxxx mléko xx xxxxxx xxxxxxxxx žádné xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx sušeným xxxxxxxxxxx mlékem, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx neobsahuje.
Příprava:
V xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx mléko. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx x xxxxx xx varu xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx x páře xxx 30 xxxxx.
Xxxxx je xx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx papír.
Zkontrolovat pH xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx je xxxxxxxx, xxxxxxx xX, xxxxxxxx (nejméně 0,1 xxx/x) hydroxidu xxxxxxx xxxx kyseliny chlorovodíkové, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx jeho hodnota 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx kultivačního média
Rozdělit xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxxx od 100 xx 150 xx xx baněk xxxx xx 12 až 15 ml do xxxxxxxx (4.2.2). Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx sterilizovat x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx kultivační xxxxxx nepoužije ihned, xxxxxxxx xx v xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx déle než 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kultivační xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxx připravit x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kultivačního xxxxx. Xxxxxxx pokyny xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx produktu.
Upravit xX na 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X xxxxxxxx xxxxx bodu 5.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx kultivační xxxxxx xxxxx xxxx. 5.2.
6. Ředidla
6.1 Roztok xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 g |
|
Chlorid sodný (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxx, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xX-xxxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx chlorovodíkové, aby xx xxxxxxxxx xxxx xxxx hodnota 7,0 ± 0,1 xxx 25 °C.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx ředidlo (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 ml ředidla. Xxxxxxxx uzavřít.
15 minut xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °C. Xxxxxxxxxxxx xX ředidla.
Pokud xx ředidlo xxxxxxxxx xxxxx, skladuje xx x xxxxx při xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx přípravě.
6.3 Xxxxxxxx dehydrovaná xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) se xxxx xxxxxxxxxxx x komerčních xxxxxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx. Dodržet pokyny xxxxxxx. Upravit xX xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 6.2.
7. Postup
7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx potřebné xxxxxxxx kultivačního média x zchladit ve xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx
7.2.1 Inkubovat x xxxxxxxxxx [4.1.3 x)] xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx xx není xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx vzorek x objemu nejméně 100 ml xx xxxx 120 ± 2 xxxxx xxx 6 ± 0,5 °X.
7.2.2 Xx inkubaci xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xx 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx se vzorkem. Xx xxxxx zabránit xxxxxx xxxx xxxx xxxx nechat xxxxxxxxx. Xxxx mezi mícháním x odběrem xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx tři minuty.
7.3 Xxxxxxxx primárního ředění (10−1)
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 9 ml xxxxxxx (6.1), přičemž xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxx ředidla xxxx xxx přibližně xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx toto xxxxxxxx xxxxxx míchačkou (4.1.9).
Xxxxx se xxx xxxxxxxx ředění 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx desetinných xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 ml xxxxxxxxxx ředění (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx xxxxxx v xxxx 7.3.
Xxxxx xx xxx xxxxxx 10−2.
X cílem xxxxxx další desetinná xxxxxx xx xxxxx xxxxxx opakuje xxx xxxxxx, xxxxx nelze xxxxxxxx xxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx misek
Sterilní xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx a/nebo xxxxxxxx desetinného ředění. Xxxx být vyšetřena xxxxxxx dvě ředění. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) připravit jednu xxxxxxx xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx každé xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 15 až 18 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kolonií.
Doba xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx a smícháním, xxxxx druhu mléka, xxxxxxxxxxx vzorku nebo xxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx překročit 15 xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x čistém xxxxxxx, xxxxx médium xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Petriho xxxxx
Xxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxxx (4.1.3). Misky xxxxxxxxx xxxxxxxx dnem nahoru. Xxxxxxxxx na sebe xxxx xxx šest xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx nesmějí xxxxxxxx xxxxxxx, xxx být x xxxxxxxx se xxxxxxx x vrchní xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 25 xxxxx xxx 21 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx více xxx 300 xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx usnadnění počítání xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) a/nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx xxxxx xxxx xx to, aby xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx provést xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx zvětšením (4.1.7), x cílem xxxxxxx xxxxxxx xx cizích xxxxxx.
Xxxxxxx tvořící povlak xx xxxxxxxx xx xxxxx kolonii. Pokud xxxxxxx tvořící povlak xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx, spočítat xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx počet xxx celou xxxxx. Xxxxx kolonie xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Xxxxxx výsledky xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 a 8.1.4).
8.2 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxx xxxxxx vzorce:
∑C / (x1 + 0,1x2) x
xxx:
ΣX xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx podle xxxx 8.1,
(n1 + 0,1 n2)d xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx:
x1 je počet xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx
x2 je xxxxx xxxxx při xxxxxx xxxxxx
x je xxxxxx xxxxxxx, xx základě xxxxxxx xxxx získány xxxxx xxxxx.
Xxxxx se xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxx. Když xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, zaokrouhlit tak, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxx:
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 x 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; =278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2=
=629 / 0,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.3 Xxxxx xxxx všechny xxxxx xxxxx xxx 10, xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx "xxxxx xxx 10 × x", xxxxxxx "d" je xxxxxxxxxx xxxxxxx nejnižšího xxxxxxx zředění.
8.4 Xxxxx xxxx všechny xxxxx xxxxx xxx 300 x xxxxxxxx xx xxxxx, provést odhad x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx hodnotou xxxxxxx xxxxxxx. Výsledek vyjádřit xxxx "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na ml".
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx mezinárodně uznaných xxxxxxxxx xxxxx ještě xxxxxx k xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX XXXXXX KOLIFORMNÍCH XXXXXXXX – XXXXXXXX XXXXXXX PŘI 30 °X
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx kapitola xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx v pasterovaném xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx při 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx bakterie, xxxxx xxx 30 °X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx necharakteristické xxxxxxx, xxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx.
3. Princip
Smíchat xxxxxxxxx objem vzorku xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx x 24 xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x, xxxxx xx xx xxxxx, potvrdit xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx schopnosti xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx počet koliformních xxxxxxxx na 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 až 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °C.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx udržovat xxxxxxx 30 ± 1 °X.
4.1.4 pH-metr xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx pH.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx na 45 ± 1 °X.
4.1.6 Očkovací jehla xx slitiny xxxxxxx-xxxxxxx xxxx nikl-chróm.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x objemem 20 xx, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (5.2) a Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2.2 Baňky x xxxxxx 150 až 250 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx selektivního xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.1).
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx materiálu, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 – 10 xx, s xxxxxxxxx xxxxxxx o xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x čirého, xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, xxx xxxxx má xxxxxxx xxxxxx xxx 90 xx 100 x. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx by měla xxx xxxxxxx 10 xx. Dno xxxxx xxx žádné xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx kolonií.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx ze skla:
Pomůcky xx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx postupů:
a) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx jednu hodinu xxx xxxxxxx 170 – 175 °X;
x) x autoklávu (4.1.2), xxxxxxx 20 minut xxx xxxxxxx 121 ± 1 °C.
Při xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx dbát xx xx, aby xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x autoklávech by xx měly xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx sterilizovány v xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx médium
5.1 Xxxx x krystalovou violetí, xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx (VRBL xxxx). Sušené selektivní xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
7 g |
|
Kvasnicový extrakt |
3 x |
|
Xxxxxxx (X12X22X11.X2X) |
10 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (NaCl) |
5 x |
|
Xxxxxxx xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxxxx xxxxxx |
0,03 x |
|
Xxxxxxxxxx violeť |
0,002 x |
|
Xxxx |
10 xx 15 g xxxxx xxxxxxxxxxxx vlastností xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx složky xx xxxx x xxxxxx xxxx několik xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX pomocí xX-xxxxx (4.1.4); pokud to xx xxxxx, upravit xX xxxxxxxx (nejméně 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx nebo kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxx xxxx jeho xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxx rychle do xxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x ihned xxxxxx xx xxxxxxxxxx 100 xx 150 xx xx sterilních xxxxx (4.2.2). Kultivační xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
X době xxxxxxx xxxxxxxxxxxx sterilitu xxxxxxxxxxxx média (6.4).
Použít xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxx po xxxx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxx xxxx x brilantovou xxxxxx. Konfirmační xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
10 x |
|
Xxxxxxx (X12X22X11.X2X) |
10 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx |
20 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxx |
0,0133 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx x xxxxx xx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxx pH-metru (4.1.4); xxxxx xx je xxxxxxxx, xxxxxxx xX xxxxxxxx (nejméně 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx sterilizaci xxxx xxxx xxxxxxx 7,2 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx xxxxxx po 10 xx xx zkumavek (4.2.1) xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxxx. Zkumavky uzavřít.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx nesmějí xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxxxxxxxx média.
Pokud xx xxxxxxxxxx médium nepoužije xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx xxxxxxx mezi 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 měsíc xx jeho xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kultivační xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx může xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Dodržte xxxxxx výrobce. Xxxxxxx xX, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx bodů 5.1 a 5.2.
6. Xxxxxx
6.1 Kultivační xxxxxx
Xxxxxx xxxxxx (XXXX agar) xxxxxxx v bodě 5.1.
6.2 Příprava xxxxxx xxxxx
Xxxxxx mléka xxxxx xxxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx nejrovnoměrněji xxxxxxxxx, a xx 25 rychlými xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx nebo xxxx xxxxxx rozptýlit. Xxxx mezi xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx by xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxx Petriho misek
Sterilní xxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) 1 ml xxxxxx xxxxx do každé xx xxx xxxxx (4.2.4) a tím xxxxxxxxx 3 ml xxxxxx mléka (6.2).
6.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx misky xxxxx asi 12 xx XXXX xxxxx (6.1)
Xxxxx po xxxxxx xxxxx promíchat rotací Xxxxxxx xxxxx, xxx xx inkubaci xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx mezi koncem xxxxxxxx vzorku xxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx médiem xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xx xxxxxx xxxxxxxx sterility xxxxxxxxx nenaočkovanou xxxxx x 12 xx xxxxx VRBL xxxxx, xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x čistém xxxxxxx, dokud xxxxxx xxxxxxxx.
Xx úplném xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 4 xx XXXX agaru (6.1) na xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx ztuhnout.
6.5 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Misky inkubovat xxxxxxxx dnem xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxx šest xxxxx. Sloupky misek xx nesmějí xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxx x xxxxxxxx se xxxxxxx x vrchní xxxxx inkubátoru.
Inkubovat 24 ± 2 xxxxxx xxx 30 ± 1 °C.
6.6 Počítání xxxxxxx
6.6.1 Počítat xxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx více než 150 kolonií. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx 0,5 xx, x xxxx xxx sraženiny xxxxx, charakteristické xxx xxxxxxxxxx bakterie.
6.6.2 Xxxxx xxxx všechny xxxx xxxxxxx kolonie xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxx tvar xxxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), provést konfirmační xxxx (6.7).
6.7 Xxxxxxxxxxx xxxx
Xxxxx xxxxx x xxxx 6.6.2 provést xxxxxxxxxxx xxxx u xxxxxxxx xxxxx (xxxx. 3 xx 5) xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxx jehly (4.1.6), xxxxxxxx xxxxxxxx obsahující xxxxxx xxxx s xxxxxxxxxxxx zelení (5.2). Xxxxxxxxx zkumavky 24 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °X.
Xx kolonie xxxxxxxxxxxx bakterií xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx x Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx.
7. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Použít xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 150 xxxxxxx.
7.2 Xxxxx xx provede xxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx počet xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx procentuálního xxxxxx xxxxxxxxxxx kolonií xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx vzorce:
ΣC / x
xxx:
ΣX je xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (7.1 v xxxxxxxxxxx xx 7.2), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (6.3).
x je xxxxxxxx vyšetřovaného vzorku (6.3) x xxxxxxxxxxx (3 xx).
Xxxxx se xxxxxxxxxx xx dvě xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxx 100 kolonií. Když xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx xxx, xxx sousední číslice xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxxx počty xxxxx xxx 150 xxxxxxx, uvést výsledek xxxx "odhadovaný xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx na 1 xx".
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx uznaných kruhových xxxxx ještě xxxxxx x xxxxxxxxx.
XXX. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxxx metoda
B. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Xxxxxxxxxxxxx metoda
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxx xxx stanovení xxxxx buněk xx xxxxxx mléka xx xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx B.1).
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx buňkami xxxxxxxx xxxxx, například xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxx xx možné xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
3. Xxxxxxx
Xxxxxx 0,01 xx xxxxx xx 1 xx2 povrchu xxxxxxxxxx xxxxxxx. Tenká xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxx xxx mikroskopem. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx vynásobí xxxxxxxxx faktorem, s xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xx 1 xxxxxxxx.
4. Xxxxxxx
Xxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx čistoty x.x..
Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxx xxxx |
0,6 x |
|
Xxxxxxx – 99 % |
54 xx |
|
1,1,1-xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx |
40 ml |
|
Ledová kyselina xxxxxx |
6 xx |
Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxx a xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx uskutečnit x xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx v xxxxx xxxxxxx x 1,1,1-trichlorethan xxxx xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxx ve xxxxx xxxxx xx 60 xx 70 °C. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxxx, 12 xx 24 xxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxx 4 °X x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx octovou. Xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx pórů 10 xx 12 xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
5.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 500 × xx 1000 ×
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dávkování xx 0,01 xx x přesností xxxxxxx ± 2 %.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 20 xx × 5 xx xxxxxxxxxx pro tenkou xxxxxx xxxx standardní xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 20 × 5 mm xxx xxxxxx xxxxxx.
5.4 Horizontální xxxxx xxxxx (30 °X xx 50 °X) xxx xxxxxx xxxxxxxxxx sklíček.
5.5 Xxxxxxxxxx (xxx) pro sušení xxxxx vrstvy.
5.6 Vodní xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 30 xx 40 °X xxx xxxxxxxx xxxxxx mléka.
5.7 Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 0,01 xx.
6. Postup
6.1 Vzorek xxxxx
Xxxxxx mléka musí xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx. Během xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx překročit 6 °X. Xxxxxx nesmí xxx xxxxxxx.
6.2 Xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx (5.6) na 30 xx 40 °X. Xxxx xxxxx xxxxxxxxx. Zchladit xx xxxxxxx, při které xxxx kalibrována mikrostříkačka (5.2), xxxxxxxxx 20 °X.
6.3 Předběžné xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) například xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx nezanechává xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Skladovat v xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxx tenké xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx (5.2) xxxxxxx 0,01 xx xxxxx ze xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xx uvedeno výše. Xxxxxxx očistit xxxxxx xxxxxx stříkačky, která xxxxxx xx styku x mlékem. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (20 mm × 5 xx). Xxxx ji xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Nechat xxxxxxx xxxxxx vrstvu xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (5.4) až xx úplného vysušení.
U xxxxxxx xxxxxx mléka xxxxxxxxx x vyšetřit xxxxxxx dvě xxxxx xxxxxx.
6.5 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx 10 xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4). Xxxxx x, pokud xx xx xxxxxxxx, vysoušení xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.5). Xxxxxxx xxxxx vrstvy xx xxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx zcela nesmyje. Xxxxx xxxxx a xxxxxxx tak, xxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx.
6.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx
Xx základě zvoleného xxxxxxxx (500 × xx 1000 ×) xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx (5.7).
7. Počítání x výpočet
7.1 Počítání xxxxx
Xxxxxx xxxxxxxxx (5.1). Xxxxx xxxxxxxx buněk xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx jádra, a xx xxxxxx jádra, xxxxx xxxx jasně xxxxxxxxxxxx a x xxxxx xx x xxxxxxxxxxxxxx poli viditelná xxxxxxx polovina. Počítat xxxx nebo xxxx xx xxxxxxx třetině xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxx, xxxxx xxxx vybrány xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx. Pečlivá xxxxxxxx xxxxxxx vrstev x xxxxx i xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx nejméně xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx vrstvy. Počítání xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx mikroskopických polí xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx vrstvy xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
7.2 Stanovení xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx se xxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxx xxxxxxx xxx standardizaci xxxxxxxxxxxxx x mechanických xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxxxx vzorků xxxxx xxx xxxxx než xxxxxxxx koeficient xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Variační xxxxxxxxxx xxx vzorek xxxxx x xxxxxxx 400000 xx 600000 xxxxx/xx xx xxxxx překročit 5 %.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, které xx xxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, musí xxx podle Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 400, xxx bylo xxxxxxx kritérium xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
X = X = x2,
xxx:
X xx xxxxxxx xxxxxxx
X xx rozptyl
s xx xxxxxxxxxx odchylka.
Variační xxxxxxxxxx xx:
XX = s × 100 % / X xxxx XX = 100 % / s nebo XX = 100 % / OBR
M (xxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxx), které xxxx spočítány (xxxxxxxxx 400 pro XX = 5 %).
7.3 Xxxxxxx pracovního xxxxxxx
Xxx xxxxxxx 0,01 xx xxxxx xx pracovní xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx 7.3.1 xxxx 7.3.2.
7.3.1 Počítání xxxx xx xxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxx, xxxxx se xxxx xxxxxxx, xx 5 mm. Xxxxx xxxx xxxxxxxx průměru xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, jak xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7).
Xxxxxxxx xxxxxx = 20 × 100 / x × b
kde:
d je xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x mm, stanovený xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx stupnicí (5.7)
x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
7.3.2 Počítání xxxxxxxxxxxxxxx xxxx ve xxxxxxx xxxxxxx tenké xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx
xxx:
x xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx pole x xx, stanovený xxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7)
s celkový xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
7.4 Xxxxxxx obsahu xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xx ml xxxxx, se xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (7.1 a 7.2) xxxxxxxx pracovním faktorem (7.3).
7.5 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx koeficient (xxx 7.2) xxxxx xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kruhových xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx.
X. Fluoro-opto-elektronická xxxxxx
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx může xx xxxxxxxxxxxx kalibraci (xxx X.1) xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx bez xxxxxxxx konzervace.
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, které mají x xxxxxxxx barvení xxxxxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxx xxxxxx (například 0,2 xx) xx xxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx a x xxxxxxxxxxxxxx roztokem. Část xxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xx xxxxx tenké xxxxxx xx rotační xxxx, xxxxx slouží xxxx xxxxxxxx sklíčko.
Každá buňka xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Obsah xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx.
4. Činidla
Pokud xxxx xxxxxxxxx jinak, xxxx se použít xxxxxxx čistoty x.x.. Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xx to xxxx odpovídající čistoty.
4.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx draselný |
51,00 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxx |
13,75 g |
|
Polyethylenglykol-mono-p(1,1,3,3-tetramethylbutyl)-fenylether(například Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 xx |
|
xX 5,7 xx 5,9. Xxxxxxx vodou na 10000 xx. |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx nemělo xxxxxxxxx xxxx xxx.
4.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (zásobní roztok)
Složení
|
Ethidiumbromid |
1,0 x |
Xxxxxxx xxxxx xx 1000 xx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx. Skladování xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx xxxxxx)
Xxxxxxx 20 ml xxxxxxxxx xxxxxxx (4.2) x tlumivým xxxxxxxx (4.1) xxx, aby xx xxxxxx xxxxx 1000 xx. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx používán xxxx xxx xxxx xxx.
4.4 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxx xxxxxx (4.1) |
10 ml |
|
Polyethylenglykol-mono-p(1,1,3,3-tetramethylbutyl)-fenylether (xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % objemové |
10 ml |
|
Amoniak x 25 % xxxxxxxxxx |
25 xx |
Xxxxxxx xxxxx xx 10000 ml
Příprava:
Smíchat xxxxxxxxxx xxxxxx. Skladování xx xxxxxx překročit xxxxxx xxx.
5. Přístroje x xxxxxxx xx xxxx
5.1 Počítací xxxxxxxx xxxxxxxxx xx principu xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx xx xxxxxxx xxxxx mezi xxxxxxx částic, xxxxx xx mají xxxxxxx, x prahovou xxxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx provede xxxxx pokynů výrobce xx použití xxxxxx, xxxxxxx obsah xxxxx xxx xxxxxxxx mikroskopickou xxxxxxx (X).
5.2 Vodní xxxxx, s xxxxxxxxx xxxx, nastavitelná xx 40 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxx, x xxxxxxx uzávěrem, xxxxx xxx 15 ml.
6. Xxxxxx xxxxx
6.1 Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxx teplotě xx xxxxxxxx (5.3). Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, počítání xx může xxxxxxx xx xx xxxxxxxx 24 xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx by byl xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx nesmí xxxxxxxxx 6 °X.
6.2 Konzervace
Chemická xxxxxxxxxx se xxxx xxxxxxx xx 24 xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx co xxxxxxxx po xxxxxx xxxxxx.
6.2.1 Chemická xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx jednoho x xxxxxx konzervačních xxxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx být xxxxx xxx 0,6 x xx 100 xx. Takto xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx dalších 24 xxxxx xxx teplotě 6 xx 12 °X;
- xxxxxxxxxxx draselný:
konečná xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx vzorku xxxxx xxx xxxxx než 0,2 g na 100 ml. Takto xxxxxxxxxxxx vzorek může xxx xxxxxxxxx dalších 72 xxxxx xxx xxxxxxx 6 až 12 °C;
- xxxx xxxxx:
xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx azidem sodným x xxxxxxx xxxxxxxxxxx 0,024 g/100 xx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx na teplotu 6 xx 12 °X xxxxx po xxxx odběru a xxxxxxxx do 48 xxxxx po xxxx xxxxxx;
- bronopol:
vzorek xxxx xxx konzervován bronopolem x xxxxxxx koncentraci 0,05 g/100 xx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xx teplotu 6 xx 12 °X xxxxx po xxxx odběru a xxxxxxxx do 72 xxxxx xx xxxx xxxxxx.
6.2.2 Xxxxxx, xxxxx xxx xxx konzervován xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx konzervován xxxxxxx xx 48 xxxxx dvojchromanem draselným.
Poznámka:
Pokud xxx o xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx sodným, xxxx xxx dodrženy xxxxxx podmínky pro xxxxxxxxxx odpadních xxx.
7. Xxxxxx
7.1 Předběžné xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx, se xx nadojení xxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx xxx 2-6 °X. Xxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, vzorek xx xxx být xxxxxxxxx ošetřován xxxxxxx xxx xxxxxx dvojchromanem xxxxxxxxx (xxx 6.2.1).
7.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxx 7.1) nebo xxxxxxxxxx vzorek nejméně xxxxx xxx xxxxx xxxxxx xx vodní xxxxx (5.2) xx xxx 40 °X. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xx počítání.
7.3 Xxxxxxxx buněk
Počítání xx xxxxxxx pomocí počítacího xxxxxxxx (5.1) xx 15 xxxxx po xxxxxxxx ohřívání (xxx 7.2). Bezprostředně xxxx xxxxxxxxx vzorky xxxxxxxx xxxxxxxxx, aby xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx rozdělení xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx vzorku xxxx xxxxxxxxxxx provedeny x xxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx opakovatelnosti (x) a xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) mezinárodních xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxx, xxxxx jsou x xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, umožňují xxxx xxxxxx:
(1) xxxxx xxxxx xxxx 400 000 xx 500&xxxx;000 xxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx:
xx = 20000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx koeficientu 5–4 %)
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx:
xX = 40000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 10–8 %)
9. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x známém xxxxxx xxxxx, který xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx mikroskopem xx xxxxxxx referenční xxxxxxxxxx.
XXXX. DETEKCE XXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXX
XXXXXXX A XXXXXX XXXXXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx referenční postup xxx detekce xxxxxxxxxx x sulfonamidů x xxxxxxx mléce x x xxxxxxx ošetřeném xxxxx.
Xxxxx referenční xxxxxx xxxxxxxx:
X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxx je počáteční xxxxxx, který umožňuje xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx obsahují xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx jedním x xxxxxxxx postupů, xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx, XXXX 10149, xx xx testovacího xxxxxxxxx. Xxxxx postup xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx.
X. Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx pro konfirmaci xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx a oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx koncentrace xxxx xxxxx xxx xxxxxx uvedené x xxxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx [1]
|
Xxxxxxxxx testu |
||
|
Negativní |
Pozitivní |
|
|
Benzylpenicilin |
0,002 |
0,006 |
|
Ampicilin |
0,002 |
0,005 |
|
Cloxacillin |
0,015 |
0,035 |
|
Nafcilin |
0,006 |
0,011 |
|
Tetracyklin |
0,10 |
0,40 |
|
Oxytetracyklin |
0,20 |
0,45 |
|
Chlortetracyklin |
0,15 |
0,50 |
|
Chloramfenikol |
7 |
15 |
|
Dihydrostreptomycin |
4 |
13 |
|
Neomycin |
1 |
22 |
|
Kanamycin |
9 |
28 |
|
Bacitracin |
0,06 |
0,14 |
|
Erythromycin |
1 |
2,25 |
|
Rifamycin |
0,01 |
0,14 |
|
Diafenylsulfon |
0,01 |
0,1 |
|
Sulfametazin (Xxxxxxxxxxxx) |
0,5 |
1 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2 x |
|
|
Xxxxxx |
5 x |
|
|
Xxxxxx xxxxxxx |
1 x |
|
|
Xxxxxxx xxxxx |
5 x |
|
|
Xxxx |
10–15 x |
|
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx. Za xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx do xxxx. Upravit xX xxx, xxx po xxxxxxxxxxx byla jeho xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx po 10 xx xx xxxxxxxx xxxx po 100 xx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X.
5.1.2 Agarové xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxx xxxxx |
2 x |
|
Xxxx |
15 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx (viz 5.1.3) |
10 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, x xxxxxxxx trimethoprimu xxxx xxxxxxxxxxxx. Xx občasného xxxxxxx xxxxx xx xxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X. Upravit xX, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 při 25 °X.
5.1.3 Xxxxxx trimethoprimu xx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxxxx |
5 xx |
|
xxxx Xxxxxxxxxxx |
30 xx |
|
96 % Xxxxxxx |
5 ml/30 ml |
|
Vodado |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx (5 xxxx 30 xx) a xxxxxxx xxxxx.
5.1.4 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
0,75 xx |
|
Xxxxxxx |
5,0 mg |
|
Rozpustný xxxxx |
8,0 xx |
|
Xxxxxxxxxxxxx červeň |
0,025 x |
|
Xxxx |
50 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx roztok x indikátor, xxxxx xx xx nutné, xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx
5.2.1 Ve sterilní xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx roztok xxxxxxxxxx x 60 μx/xx (100 XX/xx), x to xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx benzylpenicilinu sodného xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx destilované vodě.
5.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx vložením 1,25 xx xxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2.1) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xx 1000 xx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 0,075 μx xxxxxxxxxx/xx (= 0,125 XX/xx).
5.2.3 Připravit 75 ml xxxxxxxxxxxx xxxxxxx penicilinu obsahujícího 0,004 μg xxxxxxxxxx/xx (= 0,0067 XX xxxxxxxxxx/xx) xxxxxxxx 4 xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2.2) xx 71 xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.3).
5.2.4 Roztoky xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 5.2.1 až 5.2.3 xx měly být xxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxx.
5.3 Xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx preparát mléka xxx xxxxxxxxxxx látek xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (10 % x/X) xx vodě, xxxxx bylo předtím xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Rovněž xxx použít xxxxxxxxx xxxxxxxx čerstvého xxxxx, xxxxx bylo xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx inhibičních látek; xxxx xxxxx xx xxxxxxx do xxxxx x zahřívá xx xxxxx hodinu na 100 °X, xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx 0 °C xx 6 °C xx xxxx nejvýše xxxxxxx xxxxx.
5.4 Testovací xxxxxxxxxx
5.4.1 Xxxx testovací xxxxxxxxxx xx použije Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. calidolactis XXXX 10149 Xxxx XXXX 10149 je xxxxxxxxx s xxxxxx X 953.
5.4.2 Připravit xxxxxxx kulturu xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx na xxxxxx xxxxxx xxxxx (5.1.1). Xxxxx xxxx se x proužcích naočkuje xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx se xxxxxxx xxxxxxxx 48 xxxxx xxx 63 ± 1xX. Xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx měsíců x xxxxxxxxxx při 0 xx 5 xX.
5.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxx)
5.5.1 Xxxxxxxxx přenést 20 xx živného xxxxx (5.1.1) do xxxxxxxx Petriho xxxxx (4.2.2) x nechat xxxxxxxx xx pokojovou xxxxxxx.
5.5.2 Xxxxxxxx pipetou (4.2.4) xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx destilované xxxx do xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (5.4.2) x vymýt xxxxxxxx smyčkou xxxxx xx xxxxxxx agaru. Xxxxxxxx spór xx xxxxx při 0 xx 5 °X x xxxxxxx xx xx 36 xxxxx.
5.5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 ml xxxxxxxx xxxx (5.5.2) xx Xxxxxxx misku (5.5.1) x důkladně xxxxxxxxx očkovací látku xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx skleněné xxxxxxx. Xxxxxxxxx 16 xx 18 hodin xxx 63 ± 1 °C (4.1.1).
Při xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (5.4.2) nebo kultury xxxxxx 36 hodin xx xxxxxxxx mělo xxxxxxx nejméně xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 36 xxxxx.
5.5.4 Xxxxxxxx pipetou (4.2.4) xxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxxx xxxx xx Xxxxxxx xxxxx obsahující xxxxxxx (5.5.3) x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxx (4.2.3) xxxxxxxxxx 250 xx sterilní xxxxxxxxxxx vody. Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx ihned xxxxxxxxxxx, xx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 0 xx 6 °X.
5.5.5 Xx 16xx až 18xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 63 ± 1 °X xx xxxxxxxx xxxxx by xxxxxxxx xxxx měla xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx mikroorganismů xxxx 5 a 10 xxxxxxx xx xxxxxxxx. Suspenze spór xxxx vykazovat xxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx, xxxx by xx xxxxxxxx novou xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (5.4.2).
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx agarové médium (5.1.2), poté zchladit xx 55 °X.
5.6.2 Xxxxxx xxxx suspenze xxxxxxxxx xxxx (5.5.4) x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (5.6.1) xx xxxxxxxx nebo x xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx (4.2.6) 0,3 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.6.2), xxx xx xxxxxxxxx 5 mm xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxx, x xxxxxxx ampule, zatavením xxxxx. Nechat agarové xxxxxx ztuhnout, xxxx xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx 12 xxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
5.6.4 Xxxxxxxx/xxxxxx mohou xxx xxxxxxx xxx xxx, ale mohou xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx měsíců xxx 0–6 °X, xxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx ochlazeny.
6. Xxxxxx
6.1 Vzorky xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx 24 xxxxx xx xxxxxx, x do xx xxxx se skladují xxx xxxxxxx 0-5 °X. Xxxxx není xxxxx otestovat xxxxxx xx 24 xxxxx, xxxx by xx xxxxxxx xxxxxxx zmrazené (−30 °až - 15°X), aby xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.2 Čitelně x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx (5.6). Xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxx. Xxxxxxx do xxxxxxxx stojánku (4.1.3) xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxx (5.2 x 5.3).
6.3 Xx xxxxx zkumavky/ampule xxxxxx 50 xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (5.1.4).
6.4 Xxxxxx xxxxx řádně xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx (4.1.4) xxxxxxx 0,1 xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx. Pro xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx novou xxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.5 Xxxxxx xxxxx bodu 6.4 xx opakuje xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku penicilinu xxxxxxxxxxxx 0,004 μx/xx (= 0,0067 XX/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxx vzorku xxxxx (5.2.3).
6.6 Xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.4 xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx použití xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek (5.3) xxxxxxx vzorku xxxxx.
6.7 Xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx 2½ xx 2¾ xxxxxx xx vodní xxxxx x xxxxxxxx 63 ± 1 °X (4.1.2).
6.8 Vyjmout xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx x xxxxx xxxxx.
6.9 Xxxxxxxxx xxxxx agarového xxxxx (xxx 7).
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx zkumavkách/ampulích xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx antibiotik nebo xxxxxxxxxxx ve xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx "xxxxx xxxxxxxxx" uvedené x xxxxxxx xx straně 39. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx penicilinu (6.5) zůstane xxxxxxxxx, xxxxxxx médium xx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx zbarvení xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxx mléka xxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx 39.
7.3 Xxxxx xxxxxxxxx agarového xxxxx ve zkumavkách/ampulích xxxxxxxxxxxx vzorek xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
7.4 Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx všech xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, zkumavky/ampule xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx musí xxx podrobeny xxxxxx xxxxxxxxx s čerstvě xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Potvrdit xxxxxxxx xxxxx vzorků x reakcemi xxxxxxxxx x 7.1 x 7.2 xxxxx metody "X".
Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X. Xxxxxx pro xxxxxxxxxx penicilinů x xxxxxxxxx koncentrace
1. Předmět x oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx popisuje konfirmační xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, jakož xxxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx (X.7.1) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (X.7.2).
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx
Xxx X.1.
2. Definice
2.1 Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, včetně xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx inhibiční xxxx nejméně 2 xx xxxxx xxxxx.
2.2 Xxxxx xxxxxx, který xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx (2.1), x xx kterému xxxx xxxxxxx penicilináza (beta-laktamáza), xxxxxxxxx čirou zónu xxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx průměru xxx je průměr xxxx bez xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxxxx a xxxxxx antibiotika xxxxxx xxxxxxxxxxx.
2.3 Xxxxx xxxx xxxx není xxxxxxxxxxxxx (2.2) inaktivována, xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx to xxx xxxx reziduum [xxx xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx X, kapitola XX, X.1.x) x 2x)].
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx peniciliny, xxxxxxxxx cloxacillin sodný, xxxxxx xxxx xxxx xxxxx částečně xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx jsou xxxxxx x xxxxxxx xxx identifikovány xxxx xxxxxxxxxx (viz 7.3).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx mlékem, které xx xx xxxxxxxx, xx xxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx média xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx stearothermophilus xxx. calidolactis. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx narušuje xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx, xx jsou x xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx xxxx jiné xxxxxx na xxxxxxxxxxx x druhu inhibiční xxxxx x mléce.
4. Xxxxxxxxx, xxxxxxx ze xxxx a xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxx X.4.1.
4.1.2 Xxxxx xxxxx, nastavitelná xx 80 ± 1 °X.
4.2 Pomůcky xx xxxx
Xxx X.4.2.
4.3 Xxxxxxxx xxxxx, neobsahující xxxxxxxxx xxxxx, o xxxxxxx 9 xx 13 xx, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx 130 xx mléka (nejlépe xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx).
5. Xxxxxxxxxx xxxxx, standardní xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx.
Xxxxxxxx složky kultivačních xxxxx xxxx být xxxxxx xxx bakteriologické xxxxx. Xxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx skle nebo xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Voda xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1 Xxxxxxxxxx xxxxx
5.1.1 Xxxxx agar (X.5.1.1)
5.1.2 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxx detekci inhibičních xxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5 x |
|
Xxxxxxx |
1 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx (A.5.1.3) |
10 xx |
|
Xxxx |
10–15 g podle xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxx zahřívání a xxxxxxx zcela xxxxxxxxx xxxxx složky xx xxxx, poté přidat xxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx. Xx přidání xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xX, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx 8,0 + 0,1 xxx 25 °X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X.
5.2 Xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxxxx x xxxxx
Xxx X.5.2.
Xxx kvantitativní xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek (8) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx v mléce xxx inhibičních xxxxx (X.5.3) x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx:
x) 0,004 μg/ml (0,0067 XX/xx)
x) 0,006 μx/xx (0,01 XX/xx)
x) 0,03 μx/xx (0,05 XX/xx)
x) 0,06 μx/xx (0,01 XX/xx).
5.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxx
5.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx penicilinázy (xxxx-xxxxxxxxx) xx sterilní xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxx koncentraci 1000 X/xx. Tento xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx xxxxx, xx xxxxx skladovat xx xxxxx týdny při 0 °X až 5 °X.
Xxxxxxxx
Xxx penicilinázu xxxxxxxxxx jednotná mezinárodní xxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, že deset xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx inaktivaci 0,6 μx (= 1 XX) penicilinu. X xxxxxxxxxxxx x neznámou xxxxxxxxxxx xx nutné xxxxxxxxxxxx, xxx tento xxxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxx xxxxxxxx proto xxxxxxx koncentraci roztoku xxxxxxxxxxxx.
5.3.2 Namísto xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx možné xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx kontrolním xxxxxxxx zjistí, že xxxxxxxx odpovídající množství xxxxxxxxxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxx X.5.4.
5.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxx)
Xxx X.5.5.
5.6 Xxxxxxxx Petriho xxxxx
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx agarové xxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), xxxx xxxxxxxx xx 55 xX.
5.6.2 Do xxxxx přidat xxxx xxxxxxxx čerstvých xxxx (5.5) k xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx agarového xxxxx pro detekci xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), x cílem získat xxxxxxx xxxxxxx kolonií x xxxxxxxxxxx agarové xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx Petriho xxxxx (X.4.2.2), xxxxxx vyhřáté xx 55 °X, xxxxxxxxxx agarové xxxxxx, xxx se vytvořila 0,6 xx 0,8 xx vrstva. Xxx Xxxxxxx misku x xxxxxxxx xxxxxxx 140 xx xx xxxxx xxx 15 xx xxxxxxxxx média, aby xx xxxxxxxxx 0,8 xx xxxxxx.
5.6.4 Umístit Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx vodováhou, sejmout xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx víčka na xxxxx x xxxxxxx xx xxxx xxxxxx, xxx se na xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
5.6.5 Xxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxx misky xx xxxxxxx nejlépe xxxxx xxx xxx, xxx xxxxx být používány xxxxxxxxx xxx xxxxx, xxxxx xx ihned xx xxxxxxxx vloží xx zataveného xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xx xxx 5 °X.
5.6.6 Označit xxx Xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx možná xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Příprava xxxxxx
6.1.1 X xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx "xxxxxx X" (A.7.1 x A.7.2) musí xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x kvantitativního xxxxxxxxx penicilinu.
6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx 10 xxxxx xx 80 ± 1 °C, xxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx termolabilních xxxxxxxxxxx látek.
6.1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxx 10 ml xxxxxx xxxxxxxxx mléka xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx širokým hrdlem. X xxxxx xxxxxx xxx 0,4 ml xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.3) x řádně promíchat.
6.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxx látek
6.2.1 Xxxxxxx papírový xxxx (4.3) do vzorku xxxxx (6.1.2) xxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx otřením disku x lahvičku xx xxxxxxx. Xxxxxxxx položit xxxx na povrch Xxxxxxx xxxxx (5.6) x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.2.2 Disky napuštěné xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx od xxxxxxx xxxxxxx 20 xx x xx xxxxxx xxxxxxx 10 xx.
6.2.3 Xxx xxxxxxxx citlivosti xx disky (4.3) xxxxxxxxx standardním xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.2) xxxx xxxxxxxx rozmístit xxxx xxxxx xxxxxxxxx vzorky xxxxx v poměru xxxxxxx 2 % xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx; xxx xxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
6.2.4 Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx všech xxxxx xx agarové xxxxxx a xx xxxxxx identifikaci, xxxxxxx xxxxx xxxx vzhůru x xxxxxx xx xxxxxxxxx 2,5 xx 5 xxxxx při 63 ± 1 °X.
6.2.5 Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxx bylo xxxxx xxxxxxxxx čiré inhibiční xxxx kolem xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx zóny xx xxxxx.
6.2.6 Standardní xxxxxx xxxxxxxxxxxx (6.2.3) xxxx kolem disku xxxxxxxx nejméně 2 xx xxxx.
6.2.7 Xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx x 6.2.6, xxxxxxx xx xxxxxxxxxx inhibičních xxxxx x testovacím xxxxxxxxx.
6.3 Identifikace x xxxxxxxxxxxx inhibičních látek
6.3.1 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx zahřátého xxxxx (6.1.2) x xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (6.1.3). Namísto xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 10 xx xxxxxx xxxxx xx možné do xxxxxx mléka ponořit xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (5.3.2) x uložit xx xx testovací xxxxx.
6.3.2 Xxxxxx 6.2.1 xx provede dvojmo xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x 5.2 x) xx d).
6.3.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx průměr xxxxxx inhibičních xxx xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx penicilinázy x pro xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
7. Interpretace xxxxxxxx (viz 2)
7.1 Xxxxx xx kolem xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx žádná xxxx xxxx, xxx xxxx zóna xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx nebo xxxxx xxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx penicilinu (5.2x)), inhibiční látka xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxx 0,004 μx/xx.
7.2 Pokud xx průměrná xxxxxxx xxxxxxx xxxx zóny xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxx xx vzorkem xxxxx, mléko xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx možné xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx penicilinázy xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx.
7.3 Xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx čiré xxxx kolem xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx penicilinázu xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx čiré xxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx 6.1.2, xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x antibiotika, xxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx nelze xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx penicilinázy xxxxxxx x tomto xx. Syntetické xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx být xxxxxxxxxxxx penicilinázou xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxx tudíž xxxxxxxxxxxxx xxxx inhibiční xxxxx jiné xxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxx látky xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx provedeno buď xx sestrojení xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx penicilinu x xxxxx (5.2 x) xx x)).
8.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxx lineární xxxxxxxx xxxx log10 koncentrace xxxxxxxxxx x průměrem xxxxxxxxxxx xxx, xxxxxxxxxx xxxxxx lze xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx koncentrací penicilinu xx xxxxxxxxx x xxxxxx zón xx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxx zdvojeného xxxxx. Průměry xxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx.
8.3 Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx lze vypočítat xx základě xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx. Pro xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx zón nejméně xxxxxxx xxxxx, avšak xxxxxxx pětkrát xxxxx xxx poloměr disků.
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Výsledky xx xxxxxxxxx xxxx xxxxx penicilinu rovný xxxx vyšší než 0,004 μx/xx (nebo xxxxxxxx stanovené koncentrace) xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx jiných xxx penicilin.
9.2 Xxxxxxxxxxxxxx (x) x xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X)
Xxxxx nejsou k xxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx.
XX. DETEKCE XXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
X xxxxxxx x xxxxxxxxx směrnice 85/397/XXX, přílohy X, xxxxxxxx XXX bodu 2, xxxxx postup xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx být xxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx patogenních xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx se xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx, které xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x potravin.
Pasterace xx xxxxxxxx, které xxxxxxxxx mléko xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx splněny xxxxx xxxxxxxxx v příloze X, kapitole XXX xxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx, pokud xxx x počítání kolonií xxx 30 °X x 21 °C, xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx test xx detekci xxxxxxxx xx nezbytný xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx mléko xx nějakou spojitost xx propuknutím xxxxxx xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxx
Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx musí xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx způsobem, který xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx pro xxxxxx xxxxxx Společenství. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx, pokud xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Zpráva x xxxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxxx patogenní xxxxxxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx takto:
Počet xxxxx xx xxxxxxxx, xxxx "xxxxxxxxxx" xx "nepřítomnost" x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxx popsat xxxxxxx xxxxxx.