Xxxxxxxxxx Komise
ze dne 14. xxxxx 1991,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx mléka x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
(91/180/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx na Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x ohledem xx xxxxxxxx Rady 85/397/XXX ze xxx 5. xxxxx 1985 x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx otázkách obchodu x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx uvnitř Xxxxxxxxxxxx [1] naposledy xxxxxxxxxx xxxxxxxx 89/662/XXX [2], x xxxxxxx xx xx. 10 xxxx. 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxx, že xxxxx xx. 10 xxxx. 2 Xxxxxx xxxxxxx metody xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx syrové xxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx pro xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx stanovit zejména xxxxxx xxx stanovení xxxxxx mikroorganismů, xxxxxx xxxxx, bodu xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxx mrznutí;
vzhledem x xxxx, xx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x XXX xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx zejména xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx x technických xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx mají xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; že xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x prošetřování podmínek, xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx rutinní xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx; xx v xxxxxxxxx xxxxxxxx těchto xxxxxxx xxxxx členské xxxxx xx xx, aby xxx dodržení norem xxxxxxxx 85/397/XX byly xxxxxxx vhodné xxxxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx stanovení referenčních xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx postupů xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx zajištění jednotného xxxxxxx výsledků;
vzhledem x xxxx, xx opatření xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x souladu xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
XXXXXXX TOTO XXXXXXXXXX:
Článek 1
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x testování xxx xxxxxx xxxxx xxxx tyto:
- stanovení xxxx xxxxxxx,
- stanovení xxxxxx mikroorganismů xxx 30 °C,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx antibiotik x xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 2
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx pasterované xxxxx xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx,
- stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 21 °C,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx – xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °C,
- xxxxxxx antibiotik x xxxxxxxxxxx,
- detekce xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 3
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxx XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx:
- stanovení xxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganizmů xxx 30 °C,
- detekce xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 4
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx kritérií xxxxxxxxxxxxx x odběr xxxxxx xx xxxx xxxxxxx podle xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x příloze X.
Xxxxxx 5
Xxxxxxxxxx postupy xxxxxxx x testování xxxxxxx v článcích 1, 2 x 3 xxxx xxxxxxx x příloze XX.
Xxxxxx 6
Xxxx xxxxxxxxxx xxxx přezkoumáno xx 31. prosince 1992, xxx se zohlednil xxxxx vědeckých x xxxxxxxxxxx znalostí.
Xxxxxx 7
Toto xxxxxxxxxx xx xxxxxx členským xxxxxx.
X Bruselu dne 14. xxxxx 1991.
Za Xxxxxx
Xxx Xxx Sharry
člen Xxxxxx
[1] Úř. xxxx. X 226, 24.8.1985, x. 13.
[2] Úř. věst. X 395, 30.12.1989, x. 13.
PŘÍLOHA X
XXXXX
X. Xxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x tepelně xxxxxxxxxx mléka
I. XXXXXX XXXXXXXXXX
1. Úvod
Obecná xxxxxxxxxx xx týkají činidel, xxxxxxxxx x pomůcek, xxxxxxxxx xxxxxxxx, kritérií xxxxxxxxxxxxx x zpráv x testování. Xxxxxxxxx xxxxxx členských xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx tato xxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxx
2.1.1 Pokud xxxx xxxxxxxxx jinak, xxxx použitá x xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx destilovaná, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx čistoty. Xxx xxxxxxxxxxxxxxx účely xxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx mohou xxxxxxxx nebo jinak xxxxxxxx růst xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.1.2 "Xxxxxxxxxxxx" xxxx "xxxxxxx" (xxx xxxxxxx xxxxxxxxx) se rozumí "xxxxxxxxxxx xx vodě" xxxx "xxxxxx xxxxx".
2.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxx není xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxx uznané analytické xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
3.1 Seznam xxxxxxxxx x pomůcek
Příslušný xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxx různé xxxxxxxxxx xxxxxx xx týká xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxx použití x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.2 Xxxxxxxxxx váhy
"Analytickými xxxxxx" xx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx na 0,1 xx.
4. Xxxxxxxxx výsledků
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xx zprávě x xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx opakovatelnosti (5.1) xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx musí xxxxxxxx, jinak xx xxxxxxxx neplatný.
4.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx podílu
Pokud xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx hmotnosti xxxxxx.
5. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: opakovatelnost x xxxxxxxxxxxxxxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx postup xxxx xxxxxxxxxx xxxxx:
5.1.1 Opakovatelnost (x) je hodnota, xxx kterou xx xxxxxxx absolutní hodnota xxxxxxx xxxx dvěma xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testu, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx výrobkem za xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx přístroj, xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxxx).
5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) xx xxxxxxx, xxx kterou xxxx xxxxxxxxx rozdíl dvou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx odlišných xxxxxxxx (různí pracovníci, xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx x/xxxx xxxxx xxxx).
5.1.3 Xxxxx není xxxxxxxxx jinak, hodnoty xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x reprodukovatelnosti, uváděné x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx postupu, představují 95 % xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx ISO 5725, xxxxx vydání, 1986. Xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx pokusů, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx. X xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx odhadnuty.
5.1.4 Kruhové xxxxx a xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx naplánovány x xxxxxxxxxxx v souladu x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
6. Xxxxxx x testování
Zpráva x xxxxxxxxx musí xxxxxxxx xxxxxxx postup x získané xxxxxxxx. Xxxx jiné xxxx xxxxxx všechny xxxxxxxxxxx xxxxxxx, které nejsou xxxxxxxxx x metodě xxxxx, xxxx volitelné xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
XX. XXXXX XXXXXX XXXXXXXX A XXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka. Xxxxx xxxxxx pro xxxxx vzorků, xxxxxxxx x skladování vzorků xx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx a pro xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx skladovacích a xxxxxxxxxxx nádržích.
Postupy xxxxxxx x xxxxxx 2, 4.4, 5 x 6 xx xxxxxxx xxx odběr xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka xxxxxxxx x přímé xxxxxxxx.
2. Obecně
Odběr vzorků xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xxxx. xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, kteří xxxx xxxx odběrem vzorků xxxxxx vyškoleni.
Pokud xx xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxx laboratoř xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxx x celou xxxxx.
Xxxxx xx příslušné orgány xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx.
3. Vybavení xxx xxxxx vzorků
3.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxx odběr xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx oceli xxxx x xxxxxx vhodného, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx být xxxxxxxx s xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx použití (xxxxxxxxxx, xxxxx vzorků, xxx.). Xxxxxxx x xxxxxxxx xxx míchání xxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx bylo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výrobku xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxx pevnou, xxxxxxxxxx dlouhou rukojetí x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Objem naběračky xxxx xxx alespoň 50 ml.
Vzorkovnice x xxxxx xxxx být xxxxxxxx, xxxxxx nebo x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxx výrobě xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx (xxxxxx nádob x xxxxx) xxxxx xxxxxxxx takovou xxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx výsledky xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xx vzorky xxxx xxx xxxxx, xxxxx, hladký xxxxxx xxx xxxxxx x xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx.
3.2 Vybavení pro xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx (včetně xxxxx) musí xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx 3.1 x musí být xxxxxxxx.
Xxxxx se pro xx sobě xxxxxx xxxxxx vzorků xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx po xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x sterilizováno v xxxxxxx s pokyny xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx testovací xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx nedošlo x xxxxxxxxx xxxxxxxx po xxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxxxx xxxxxx vzorků
4.1 Xxxxxx xxxxx
Xxx xxxxxx xx xxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxx odebrán xxxxx xx promíchání, xxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxxx.
Xxxxx xx x xxxxxx odebírá xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx, jako první xxxx xxx odebrán xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx vzorku xxxx xxxxxxxxx potřebám xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxx, xxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxx xxx xxxx možné xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx přepravy.
4.2 Xxxxx xxxxx xxxxxx
4.2.1 Odběr xxxxxx z xxxxx x konví xx xxxxx
X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx plunžrem ve xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx x xxxx, xxxxxxx xxxx xx xx, xxx xx xxxxx xxxxx promíchalo x xxx se xx xxxxx konve xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx zásilku, xx odebere xxxxxxxx xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.2 Xxxxx z xxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx dokud xxxx xxxxxxxx dostatečné homogenity.
Pokud xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx ručně.
4.2.3 Xxxxx xxxxxx x xxxxx xxx
Xx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx, když xx xxxxxx xx misky xxx. Xx účelem xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx může být xxxxxxxx další ruční xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx zásilky, x xxx xx xx xxxxxxx vzorek, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx, xxxxxxx reprezentativní xxxxxx x celé xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.4 Xxxxx xxxxxx x rozdělené xxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxx, x něhož xx xx xxxxxxx xxxxx vzorků, xxxxxxxxx xx více xxxxx, x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, přičemž xx xxxxxxxxx množství mléka xxx xxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxx odděleně xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx těchto xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx v poměru x xxxxxxxx, xxxxx xx nachází v xxxxxx, xx xxxxx xxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (více) xxxxxx (xxxxxx) z xxxxxx xxxxxxxxx množstvích.
4.2.5 Xxxxx xxxxxx x velkých xxxxx – xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx
4.2.5.1 Xxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx vhodným xxxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx cisternových vagónů xx doporučuje xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.5.2).
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, xx kterou bylo xxxxx x xxxxx. Xxxx xxx prokázáno, xx xxxxxx promíchání xxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx testování. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx výsledků xxxxx provedených na xxxxxxxx odebraných buď x různých xxxxx xxxxx, xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx při xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx. Xxxxxx promíchání xxxxx (xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx) xx účinný, xxxxx xx rozdíl xxxxxx xxxx x obou xxxxxx xxxxxxxxxx za xxxxxx xxxxxxxx menší xxx 0,1 %.
Xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx pro xxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x vypouštěcího xxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, aby xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx nádrží, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx možné xxxxxxx:
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx nádoby x poháněnou xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx elektrickým xxxxxxx x umístěnou x průlezovém xxxxxx; xxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx,
- v xxxxxxx xxxxxxxxxxxx kamionů xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx přepravní hadici, xxxxx xx xxxxxxxx xx pumpu x xxxxxxxx xx průlezového xxxxxx,
- filtrovaným, xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxx žluklé xxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx vzorků
Automatické x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx vzorků xxxxxxxx mléka dodaného xxxxxxxxxx se xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx testovací xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx musí xxx před x xxxxx xxxxxxxxx podrobeno xxxxxxxxxxx kontrolám, xxxxx xxxxxxxxx odpovědný xxxxx. Xxxxxxxx postupů xxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x cílem xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx objem xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx,
- poměr xxxxxxxxxx xxxxxxx (který xxxxxxx s minimálním xxxxxxx vzorku),
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx reprezentativní xxxxxx x šarže xx xxxxxx promíchání.
Pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx poloautomatického xxxxxxxx xxx odběr xxxxxx může xxxxxxxxx xxxxxxxxx vnitrostátní xxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx objem xxxxx, xx kterého xxxx xxx odebrány xxxxxx,
- xxxxxxxxx objem xxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx, které xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx preventivní opatření, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.
4.4 Xxxxx xxxxxx xxxxxxx ošetřeného xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxx x xxxxxxx ošetřené xxxxx xxxxxx x přímé xxxxxx spotřebě x xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx skládají x xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx nebo z xxxxxxxxxxxx místnosti xxxxxxxx xxx xxxxxxxx, x xx, xxxxx je xx možné, ihned xx zpracování (v xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx mléka x den pasterace).
Z xxxxxxx druhu xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka (xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxxxxxx) se xxxxxxx takový xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx vyšetření, která xxxx xxx xxxxxxxxx, x to podle xxxxxx xxxxxxxxxxxx testovací xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx jiného xxxxxxxxxxx xxxxxx.
5. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xx měl být xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx kódem, xxxxx xxxxxxxx jeho xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx analytických laboratoří xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxx 2).
6. Xxxxxxxx x skladování xxxxxx
Xx xxxxxxxxx příslušného xxxxxxxxxxxxxx orgánu xxxxxxxx xxxxxxxxx laboratoř pokyny xxxxxxxx se xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx dodrženy x době xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx toto:
- xxxxx přepravy x xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx vzorky xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx slunečnímu xxxxxx. Xx-xx xx xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx testování xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx při teplotách 0 oC až 4 xX. Xxxx xxxx odběrem a xxxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxxx x x xxxxxx případě xxxxx přesáhnout 36 xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxx souhlasit, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 0 xX xx 6 xX, xxxx-xx xxxx xxxx xxxxxxx x testováním delší xxx 24 xxxxx,
- xxxxxx pasterovaného mléka xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 0 xX až 4 xX. Doba xxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxx být xx xxxxxxxxx x v xxxxxx případě nesmí xxxxxxxxxx 24 xxxxx,
- xxxx xxxxxx xxxxx xxx vzorky xxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx analýzy xxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx laboratoře x xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxx testy, xxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
XXXXXXX I
OBSAH
I. Xxxxxxxxx xxxx mrznutí
II. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
XXX. Stanovení xxxxxxxx peroxidázy
IV. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °C
V. Stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 21 °X
XX. Xxxxxxxxx xxxxxx koliformních bakterií – počítání xxxxxxx xxx 30 °X
XXX. Xxxxxxxxx obsahu xxxxxxxxxxx xxxxx
XXXX. Xxxxxxx xxxxxxxxxx x sulfonamidů
IX. Detekce xxxxxxxxxxx mikroorganismů
I. XXXXXXXXX XXXX XXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx stanovení xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx, odstředěného, syrového, xxxxxxxxxxxxx, XXX mléka xxxx xxxxxxxxxxxxxxx mléka xxxxxx xxxxxxxxx (termistorového xxxxxxxxx), v němž xx termostatem xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zařízením a xxxxxxxxxxxx xxxxxx nahrazuje xxxxxxx xxxxxxxx.
X dispozici xxxx xxx typy xxxxxxxxx. První typ xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xx plató xxxxxx xxxxxxx, kdežto xxxxx xxx je x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx, že xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx odečet. Xxxxxxxx x xxxx, xx xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx různých xxxxx xxxxx, xxx x xxxxxx xxxx mrznutí xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx s pevně xxxxxxxxxx časem se xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxx lze xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx vody x xxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx není xxxxx xxx 0,18 x xxxxxxxx xxxxxx xx 100 xx (viz xxx 7.4).
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxx: hodnota xxxxxxxx x souladu x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx Celsia (°C).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx x závislosti xx přístroji xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, která xxxxxxx, xx teplota rychle xxxxxxx až x xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx vzorku.
Přístroj xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, aby se xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx mléka xxxxxxx xxxxxx odečty xxx xxx standardní xxxxxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxx plató xxxxx xxx mrznutí mléka xx xxxxxxxx Xxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, zejména:
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx snímače (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nebo jiného xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx, jakož x xx xxxxxxxx xx xxxxxx.
4.1.1 Xxxxxxxx lázeň
Je xxxxx xxxxxx dva xxxx chladicí xxxxx.
4.1.1.1 Xxxxxxx xxx
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, která xx xxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx v xxxxxxxx xxxxx vyšší než 0,2 °C. Teplota xxxxxxxx může xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx ± 0,5 °X xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx, xxx x lázni xxxx udržována xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Celá xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx chladicí kapalinou.
4.1.1.2 Xxxxxxxxxx typ
Kolem xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx proud xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Teplota xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx ± 0,5 °X xx xxxxxxxxx hodnoty xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx je 33 % (V/V) xxxxx xxxxxx 1,2-xxxxxxxxxx (ethylenglykolu).
4.1.2 Xxxxxxxxx x příslušný xxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx sondy x maximálním xxxxxxx 1,80 ± 0,2 xx x x xxxxxxx vodiče xxxxxxxxx 0,31 mm. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx musí xxx xxxxx xxx 2 sekundy x xxxxxxx x (xxx xxxxxxxx) xxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxxx napětí, xxxxx a konstanta xxxxxxxx musí být xxxxxx, xxx při − 0,512 °C xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx teplotu okolí xxxxxxxxx x 0,0005 °X. Xxxxxxxxx tolerance xxxxxx může xxx ± 5 %.
Xxxx xx xxxxx v xxxxxxxxx x pracovní xxxxxx, xxxxx skleněné xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxxxx na vzorky x v xxxx, xxxxx xx 44,6 ± 0,1 xx xxx xxxxxx okrajem xxxxxxxx (xxx xxxxxxx xx xxxxxx 15). Xx třeba xxxxx xxxxxxxxxxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx polohy.
Poznámka:
β xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx podle xxxxxx
− xX / xX × 1 / X = β / X2
xxx:
X xx xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx
X je xxxxx x ohmech při xxxxxxx T,
− xX / dT × 1 / X xxxxxxxx xxxxxxxxxx
β xx xxxxxxxxx, která xxxxxx xx materiálu použitém xxx výrobě xxxxxxxxxx. X xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx než 3000.
4.1.3 Xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
4.1.3.1 Xxxxxxx měření
Použitý xxxxxxxx pracuje xx xxxxxxxx vyhledávání prvního xxxxx na xxxxxx xxxx mrznutí. Xxxxx xx xxxx xxxxxx, xxx teplota xxxxxxx xxxxxxxxxx x přesností xx ± 0,002 xX xx xxxx xxxxxxx 20 xxxxxx.
4.1.3.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx pomocí nejlepších xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx ± 10 % x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx 2×10−5°C.
Proměnný (xxxxxxxxxxx) xxxxx se xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx x xxxx xxx x 0,3 % xxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxx kalibrace musí xxx xxxxx odpory xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx 0,001 °C.
4.1.3.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx rozlišení xx xxxxxxx 0,01 °X x rozmezí xx 0 °X xx –1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx příslušného obvodu xxxx xxx xxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx téže teploty xxxxxx xxxxx xxx 0,001 °C.
Linearita obvodu xxxx xxx xxxxxx, xxx při správné xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx bodě xxxxxxx xx – 0,400 °X do – 0,600 °C xxxxx xxxxx xxx ± 0,001 °C.
4.1.4 Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx použije xxxxxx xxxx x xxxxxxx 1 až 1,5 xx, xxxxx xxxxxxxxx x mlékem,.
Míchačka xx měla xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx vertikálně xxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx xx úrovni hrotu xxxxx termistoru. Přípustná xxxxxxxxx je xxx 1,5 xx nad xx xxx touto xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx výrobce (xxxxxxx ± 1,5 mm), xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx během xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx dotknout xxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxx.
4.1.5 Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, které xx xxxxxxx xx činnosti xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx testovacího xxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx. K xxxx xxxxx lze xxxxxx xxxxxxxx; xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx rozkmitu xxxxxxx na xxxxx xx xxx xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx dotýkala xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx.
4.1.6 Xxxxxxxx xx xxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx (viz xxxxxxx 1) jsou xxxxxxxx a 50,8 ± 0,1 xx xxxxxx; xxxxxx xxxxxx xx 16,0 ± 0,1 mm x xxxxxxx xxxxxx je 13,5 ± 0,1 xx. Xxxxxxxx skla xxxxxxxx xx nesmí xxxxx x xxxx xxx 0,1 xx.
Xxxxxxxx xxxx xxx značku xxxxxx vzdálenou od xxxxxxx okraje 29,8 xx (21 mm xxx xxxx xxxxxxxx), xxxxx xxxxx objem xxxxxx 2,5 ± 0,1 mm.
4.1.7 Xxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx vně xxxxxxxxx tak, aby xxxxxxxx kolísání nepřekračovala ± 1 % xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxx kolísá x ± 6 %.
4.2 Analytické váhy
4.3 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 1000 xx, xxxxx X.
4.4 Sušárna, xxxxx odvětraná, xxxxxxxxxxxx xx 130 ± 1 °X
xxxx
Xxxxxxxxxx xxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na 300 ± 25 °X.
4.5 Exsikátor
5. Činidla
5.1 Xxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxxx skle, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx na 20 ± 2 °X, xx zkumavce xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxx sodný, xxxxxxx x.x., xxxxx xxxxx, xxxxxx 5 xxxxx xxx xxxxxxx 300 ± 25 °C x xxxxxxxxxx xxxx xxxx nejméně 24 xxxxx při teplotě 130 ± 1 °X x xxxxxxx x zchlazený xx xxxxxxxxx teplotu x xxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků
Navážit odpovídající xxxxxxxx (xxx xxxxxxx 1) xxxxxxx chloridu xxxxxxx (5.2) do xxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx (5.1), xxxxxxxxxxxxx přelít roztok xx xxxxxxx baňky x xxxxxx 1000 xx x doplnit xx značku xxxxx x xxxxxxx 20 ± 2 °C.
Skladovat xxxxxxx nejdéle xxx xxxxxx xxx asi 5 °C x xxxxx xxxxxxxxxx polyethylenových xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx 250 xx.
Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx při 20 °X
|
x XxXx/x |
°X |
|
6,859 |
-0,408 |
|
7,818 |
-0,464 |
|
8,149 |
-0,483 |
|
8,314 |
-0,492 |
|
8,480 |
-0,502 |
|
8,646 |
-0,512 |
|
8,811 |
-0,521 |
|
8,977 |
-0,531 |
|
9,143 |
-0,541 |
|
10,155 |
-0,600 |
Xxxx použitím xx standardní roztok xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx otočením xxxxx. Nikdy neprotřepávat xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, aby se xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx standardního xxxxxxx xx z xxxxx xxxxxx xx xxxxx x čisté xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx z xxxxx, xxxxx xxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxx, x nepoužívat xxxxxxx xxxxxx dvou měsíců, xxxxx xxxxxxxxxx fungicid (xxxxxxxxx roztok xxxxxxxxxxx 10 x/x).
6. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx musí xxx xxxxxxxx xxx, xxx se okolní xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx než 1 °X xx xxxxxxx, xxx níž xx xxxxxxx kalibrace. Kryoskop xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx světlu, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx teplotám xxxxxx xxx 26–27 °X.
Xxxxxxx xx, že xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx a xx xxx xxxxxx xxxxxxx 12 xxxxx xxxx kalibrací. Zkontrolovat xxxxxx sondy, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx chladicích xxxxxxx.
Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxx xxxxxxx xxxx), xxxxxxx bod mrznutí xx xxxxx xxx xxxx xxxxx pod xxxxxxxxxx hodnotou xxxx xxxxxxx vzorků xxxxx x testování. Xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx být xxxxx xxx – 0,100 °C.
(U xxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx sestaven xxx, xx xx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx mrznutí v xxxxx rozsahu měřícího xxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx jednoho xxxxxxxxxxxx roztoku, xxxxx xx tento bod xxxxxxx, jako jednoho x xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxx xxxx tuto xxxxxxx uvést).
Pomocí pipety xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx a xxxxx xxxxxxxx xx vzorky, xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx xx vzorky xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx vyrobeny x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na vzorky xxxxx (xxxxxx xxxx xxxx, umyté x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx vodou). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx vzorků xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx kalibrace, dokud xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx odečty xxx každý roztok xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx, aniž xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx tedy xxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx bod xxxxxxx vzorku xxxxx, xxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxx úprava.
7. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
7.1 Xxxxx to xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx teplotě mezi 0 °C x 5 °X.
7.2 Pokud xx je xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx všechna xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx tuhý xxxxxx xxx xx xxxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx reagovat x xxxxxx x xxxx xxx účinný xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.3 Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx při xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0 x 5 °C) xxxx xx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx zahájením xxxxxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxx xxxx na xx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxx xxx použití xxxxxxx xxxxxxx.
7.4 Stanovit xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx bodu xxxxxxx. Xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 0,18 x xxxxxxxx xxxxxx xx 100 xx xxxxx, nemohou být xxxxxxxxxxx.
7.5 UHT mléko x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 20 xxxxx před xxxxxxxxxx x otevřené xxxxxx.
8. Xxxxxx
8.1 Předběžné xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx, zda xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx v xxxxxxx x pokyny xxxxxxx, xxxxxxxx xxx xx sonda termistoru xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xx, xxx xx chladicí xxxxxxxx xxxxxxx míchá nebo xxxxxxxx. Pokud xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx 12 xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx míchačky a xxxxxxxx rozkmit jeho xxxxxxx.
8.2 Rutinní xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxx každou xxxxx xxxxx měřit xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx sodného (například xxxxxx x xxxxx xxxxxxx – 0,512 °X), xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxx xxx 0,001 °C. Xxxxx xx průměr xxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx než 0,002 °X, kryoskop se xxxxx xxxxxxxxxx, jak xx xxxxxxx x xxxx 6.
Xxxxx se xxxxxxxx používá nepřetržitě, xxxxxxx xxxxxxxx kalibrace xx xxxxxxx nejméně xxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxx xx zohlední xxxxxx xxxxxxx.
8.3 Xxxxxxxxx xxxx mrznutí xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x několikerým xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx tak xxxxxx, xxx xx do xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxx přidat 2,5 ± 0,1 xx xxxxx xx xxxxx x xxxxx zkumavky xx xxxxxx. Xxxxxxx xx, xx jsou xxxxx a xxxxxxxx xxxxx a xxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx opatrně xx xxxxx směrem xxxxxxx xxxxxx jemnou, xxxxxx x xxxxxx nepouštějící xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx kalibrovaného xxxxxxxxx xxxxx pokynů xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx a xxxxxxx xx vyvolá xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xx 0,1 °X.
(X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx odečíst xxxx xxxxxxx x digitálního xxxxxxxxx; u xxxxxxx xxxxxxxxx xx nezbytné xxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xx xx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xx ručička xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx s příslušnou xxxxxxx.)
Xxxxx z xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx začne xxxxx xxxx později, xxx je xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xx ukončí x xxxxxxxx se x xxxxx xxxxxxx xxxxx. Pokud tento xxxxx xxxxxx rovněž xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx na 45 °X a 5 xxxxx xx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx, xxx xx rozpustil xxxxxxxxxxx tuk.
Poté xxxxxxxx xxxxxx xx testovací xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx testování. Xxxxxxx xxxxx xx začátku xxxxxxx xxxxxx stoupne xx na xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx po xxxxxxx dobu xxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxx. Xxx mrznutí xxxxxxxx xxxxxxxxx teplotě xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx x xxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx konstantní, x xxxxxx interval mezi xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx maximální teploty, xx xxxx vzorek xx xxxxxx x xxx xxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx chloridu xxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxx xxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx teplotu.
Když xx měření uspokojivě xxxxxxxxx, xxxxxxx zkumavku, xxxxxxxxxx ji xxxxx x otřít xxxxx x míchačku xxxxxx xxxxxxx xxxxxx jemnou, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x jiného xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx rozdíl xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx větší xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (0,004 °X), xxxxxxx druhé xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Pokud xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx 0,004 °X, xxxxxx xx x xxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
8.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx zkumavku xx xxxxxx na místo xxx xxxxxx a xxxxxx provozní teplotu, xxx sonda xxxxxxx x xxxxxx.
(X xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx to xxxx xxxxx; x xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx je xxxxx xxxx začátkem měření xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, dokud xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.)
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Xxxxxxx
Xxxxx xx po xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx se považuje xxxxxx obou dvou xxxxxxxxxxxx hodnot xxxxxxxxx xxx xxx mrznutí, xxxxxxxxxxxx xx tři xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxx xxxx přijatelných xxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx hodnotu, xxx xxxxxxx tento xxxxxxx:
Xxx xxxxxxx (°X)
|
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx |
Xxxxxx |
|
|
-0,544 |
-0,545 |
-0,544 |
|
-0,545 |
-0,546 |
-0,546 |
9.2 Xxxxxxxxxxxx
9.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (r): 0,004 °X
9.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (R): 0,006 °X

Xxxxxxx 1
Schéma xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1 (xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx ke xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx)
XX. XXXXXXXXX AKTIVITY XXXXXXXXX
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx kapitola xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxxx
2.1 Aktivita xxxxxxxxx je míra xxxxxxx alkalické xxxxxxxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx. Xx vyjádřena xxxxxxxxx xxxxxx x μx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx za xxxxxxxxx podmínek.
2.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx mléka xx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx 4 xx fenolu xx 1 xx.
3. Princip
Aktivita xxxxxxxxx ve vzorku xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (namodralé xxxxx), xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 610 nm. Xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx byl xxxxxx.
4. Činidla
4.1 Tlumivý xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxx xx xxxx 50,0 x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) [Xx(XX)2.8X2X] a xxxxxxx xx 1000 xx.
4.1.2 Xxxxxxxxx ve xxxx 22,0 x xxxxxxxx xxxxxx (H3BO3) x xxxxxxx na 1000 ml.
4.1.3 Zahřát 500 xx každého xxxxxxx xx 50 °X, xxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx asi xx 20 °C, v xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pH na 10,6 ± 0,1 xxxxxxxx roztoku 4.1.1 xxxx 4.1.2. Xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx roztok xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx nádobě.
4.1.4 Xxxx použitím xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx.
4.2 Xxxxxxx roztok xxx vyvolání zabarvení
Rozpustit xx xxxx 6,0 x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XxXX2) xxxx 12,6 x XxXX2.4X2X x 20,0 g xxxxxxxx xxxxxxx (XxXx) a xxxxxxx xx 1000 xx.
4.3 Xxxxxxx roztok xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxx 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2) xxxxx xx 100 xx.
4.4 Xxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx 0,1 g xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, prostý xxxxxx, xx 100 xx xxxxxxxxx roztoku (4.1.3) nebo 0,5 x fenylfosfátu dvojsodného xx 4,5 xx xxxxxxxxx roztoku pro xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2), xxxxxx dvě kapky xxxxxxx XXX (4.6) x xxxxxx xxxx 30 xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx. Vzniklé xxxxxxxxx extrahovat 2,5 xx x-xxxxxxxx x xxxxxx stát, xxxxx xx butanol-1 xxxxxxxx. Xxxxxxx x odstranit xxxxxxx-1. X případě xxxxxxxx xx extrakce xxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx dní; xxxx xxxxxxxx vyvolat xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, x xx xxxxxxxx 1 ml xxxxxx xxxxxxx ve 100 ml xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.3).
4.5 Sraženina xxxxx-xxx
Xxxxxxxxx xx xxxx 3,0 x xxxxxx xxxxxxxxxxx (XxXX4 · 7X2X) x 0,6 x xxxxxx xxxxxxxxx (XxXX4 · 5X2X) x xxxxxxx xx 100 ml.
4.6 Roztok 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx BQC)
Rozpustit x 10 xx 96 % (X/X) xxxxxxxx 40 ± 1 xx 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXX) (X6X2Xx2XxXX6).
Xxxxxxxxx x xxxxx láhvi x xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx, xxxxx změní xxxxx xxxx je starší xxx xxxxx xxxxx.
4.7 Xxxxxx síranu xxxxxxxxx (XX)
Xxxxxxxxx xx xxxx 0,05 x síranu xxxxxxxxx (CuSO4.5H2O) x xxxxxxx na 100 xx.
4.8 Standardní xxxxxx xxxxxx
4.8.1 Xxxxxxx 200 ± 2 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx do xxxxxxx xxxxx o xxxxxx 100 xx, xxxxxx xxxx, xxxxxxxxx x doplnit xx 100 xx. Xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
4.8.2 Zředit xxxxx 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx 100 ml x promíchat. 1 xx xxxxxxxx 200 μx fenolu.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx ze xxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxxxx pomůcky xx xxxx, xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx pro odběr xxxxxx musí xxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx oplachování čerstvě xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx.
x) Xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx způsobit xxxxxxxxxxx fenolů x xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxxxxx laboratorní xxxxxxxx, xxxxxxx:
5.1 Xxxxxxxxxx xxxx
5.2 Xxxxx xxxxx nastavitelná xx 37 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx odečty xx xxxxxx xxxxx 610 xx.
5.4 Xxxxxxxx, 16 xxxx 18 × 150 xx, xxxxxxx odstupňované xx 5 xx x 10 ml.
5.5 Xxxxxx
5.6 Xxxxxxxx nálevky vhodné xxxxxxxxx, xxxx. x xxxxxxx 5 cm.
5.7 Xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx 9 xx xxx xxxxxxx xxxxxxxx filtrace.
5.8 Odměrné xxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
6. Postup
Poznámky:
a) Xxxxx stanovení zabránit xxxxx přímého xxxxxxxxxx xxxxxx.
x) Xxxxx xxxx xxxx xxxx mohou xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxx xx jim xxxxxxx. Je proto xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1 Příprava xxxxxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx vzorků. V xxxxxxx případě xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xx déle xxx xxx xxx.
6.2 Xxxxxxxxx vzorek
Pomocí xxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxx xx každé xx dvou zkumavek (5.4), xxxxx xxxxxxxx xxxxxx jako xxxxxxxxx xxxx slepý xxxxx.
6.3 Xxxxxxxxx
6.3.1 Xxxxx vzorek xxxxxxxx dvě xxxxxx xx xxxxxx vodě; xxxxxxxx x kádinku x xxxxxx vodou xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxx zkumavka. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.2 Xx xxxxxx xxxxxxx ošetřovat xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx 10 xx roztoku xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxxxxx.
6.3.3 Xxxxxx ihned xxxxxxxxx 60 xxxxx xx xxxxx xxxxx (5.2) x občas (xxxxxxx xxxxxxxxx) promíchat xxxxxx xxxxx.
6.3.4 Stejně xxxx x xxxx 6.3.1 zahřívat xxx xxxxxx xx vroucí xxxx. Xxxxxx zchladit xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.5 Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxxxx xxxxx-xxx (4.5) x řádně xxxxxxxxx.
6.3.6 Xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx papír, xxxxx xxxxx dva xxxxxxxxx x x případě xxxxxxxx xxxxxxxxx znovu, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx čirý; xxxxxxxxxx 5 ml xx xxxxxxxx.
6.3.7 Xxxxxx 5 xx tlumivého xxxxxxx xxx vyvolání xxxxxxxxx (4.2).
6.3.8 Xxxxxx 0,1 xx xxxxxxx XXX (4,6), xxxxxxxxx x 30 xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.9 X xxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx délce 610 xx.
6.3.10 Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx 6.3.9 převyšuje absorbanci xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 20 μx fenolu xx xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.4.4, xxxxxxxx xxxxxxxxx při vhodném xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx testovacího xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx varu, xxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxxxx kalibrační xxxxxx
6.4.1 Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku fenolu (4.8.2) xxxxxxxxx vyhovující xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx obsahujících 0 (xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx), 2, 5, 10 a 20 μx xxxxxx na xxxxxxxx. Xx xxxxx x xxxx zkumavek xxxxxx xxxxxx xxxxxx 1 xx xxxx x 1 ml xxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxx.
6.4.2 Xx každé xxxxxxxx xxxxxx 1 xx roztoku síranu xxxxxxxxx (4.7), 5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx vzniklého xxxxxxxxx (4.3), 3 xx xxxx x 0,1 xx xxxxxxx XXX (4.6); promíchat.
6.4.3 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 30 xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
6.4.4 X xxxxxxxxx x kontrolním xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx absorbanci xxx xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.4.5 Xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (6.4.4) xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (6.4.1) vypočítat xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxx a vzorec
7.1.1 Xx xxxxxxx hodnot xxxxxxxxxx (6.3.9) vypočítat xxxxxxxx xxxxxx pomocí xxxxxxxx xxxxxx (6.4.5).
7.1.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx fosfatázy xxxxxxxxxx x μx xxxxxx na mililitr xxxxxxxxxxxxx mléka podle xxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxxx xxxxxxxxx = 2,4 × X × X
xxx
X xx množství fenolu x μx xxxxxxx xxxxx bodu 7.1.1;
X xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 6.3.10 (x případě žádného xxxxxxx D = 1).
2,4 xx xxxxxx xxxxxxx (5/12 x 1 xx xxxxxxxxxxx xxxxxx) – viz 6.2 xx xxxxxxxxxx x 6.3.2, 6.3.5 x 6.3.6.
7.2 Spolehlivost
7.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) : 2 μg xxxxxx/xx.
7.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) : 3 (xxxxxxxxx) μx xxxxxx/xx.
7.2.3 Pokud se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx 6.3.10, limity xxxxxxx x 7.2.1 x 7.2.2 xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx ze xxxxxxxxx vzorku.
III. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Předmět x oblast použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx nepřítomnosti xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx:
Xxxxx xx xxxxx xxxxx pasterováno, do 30 xxxxxx po xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx zabarvení.
Negativní reakce xx peroxidázu:
Do 30 xxxxxx po xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxxx rozkládá xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx kyslík xxxxxxx xxxxxxxx parafenylendiamin xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (Xxxxxxxx xxxx). Intenzita xxxxxxxxx xx přímo xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx x xxxxx xxxx (50 °X) 2 x 1,4 fenylendiaminu (X6X8X2) x doplnit xx 100 xx. Xxxxxx skladovat v xxxxxx x xxxxx, x tmavě xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Během xxxxxxx xx xxxx xxx xx připravení xxxxxx 1,4 fenylendiaminu vytvoří xxxxxxxxx, xxxxxx je xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxx 9 ml 30 % peroxidu xxxxxx x xxxxxxx na 100 xx. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx na xxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx vodíku xx xxxxx xxx xxxxx měsíc, pokud xx xxxxxxxxx v xxxxxx x temnu, x xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
5. Xxxxxx
5.1 Xxx 5 xx xxxxxx mléka xx xxxxx xxxxxxxx x vhodným xxxxxx.
5.2 Xxxxxx 5 xx xxxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx (4.1).
5.3 Xxxxxx 2 xxxxx xxxxxxx peroxidu xxxxxx (4.2).
5.4 30 xxxxxx po promíchání xxxxxxxx zabarvení. Xxxxx xx xxxxx zabavení xxxxxx xxxx xxx 30 sekund xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXX 30 °X
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxx mikroorganismů xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X. Xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, XXX xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx 15 xxx xxxxxxxxxxxxx při 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx organismy, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx aerobní xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Princip
Smíchat xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx médiem x Petriho xxxxxxx x xxxxxx inkubovat 72 xxxxx při 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxx xx 0,1 xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx XXX xxxxx.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx vybavení, zejména:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx sušárna, xxxxxxxxxxxx na 170 xx 175 °C.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °X.
4.1.4 xX-xxxx se xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx teploty, xxxxxx na ± 0,1 xxxxxxxx pH.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, nastavitelná xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Zvětšovací xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x 9 ml ředicího xxxxxxx a pracující xx principu xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx zkumavky.
4.2 Xxxxxxx ze xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx, s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx k promíchání 10 ml xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx dalších xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x objemu 150 xx 250 ml xxxx xxxxxxxx x xxxxxx 20 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), skleněné xxxx xx xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 mm.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx misek xx vnitřní průměr xxx 90 xx 100 mm. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx 10 xx. Dno xxxxx mít xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx by xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx:
Xxxxxxx xx skla xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx:
x) x horkovzdušné sušárně (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx 170–175 °X;
x) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 minut xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx použití xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx páry: xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v nádobách, xxxx xxxxxx xx xxxxxx být xxxxxxx xxxxxxxx, uzávěry xxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xx xxxx vysušit xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxxx v horkovzdušné xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx – agar xx sušeným mlékem
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx (+) nebo xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10–15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 ml |
Sušené xxxxxxxxxx xxxxx xx nemělo xxxxxxxxx žádné inhibiční xxxxx. Toto se xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx sušeným xxxxxxxxxxx xxxxxx, které průkazně xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X tomto xxxxxx xxxxxxxxxxx a rozpustit xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, glukózu x xxxxxxx sušené xxxxxxxxxx mléko. Ohřev xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx přidat xxxx x xx stálého xxxxxxx uvést xx xxxx, xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx x xxxx asi 30 xxxxx.
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xX, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 mol/l) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Rozdělit xxxxxx (5.1) v xxxxxxxxxx xx 100 do 150 ml xx xxxxx xxxx po 12 xx 15 xx do zkumavek (4.2.2). Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX kultivačního média.
Pokud xx kultivační xxxxxx xxxxxxxxx ihned, xxxxxxxx xx v xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx ne xxxx než 1 xxxxx po jeho xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx médium (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kultivačního xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx výrobce, xxx přidat xxxxxx xxxxxxxxxx mléko xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xX xx 6,9 ± 0,1 při 25 °X metodou xxxxx xxxx 5.1, poté xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx médium xxxxx bodu. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Xxxxxx pepton/sůl
Složení:
|
Pepton |
1,0 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 ml |
Příprava:
Rozpustit složky xx vodě, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xX-xxxxxx (4.1.4); pokud to xx nezbytné xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 mol/l) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx po xxxxxxxxxxx byla xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
6.2 Rozdělení, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) do xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx zkumavka obsahovala 9,0 ± 0,2 xx ředidla. Zkumavky xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °C.
Zkontrolovat pH xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, avšak xx xxxx než 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) se xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX metodou xxxxx xxxx 6.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 6.2.
7. Postup
7.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xxxxxxxxx mikrobiologického vyšetření xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx kultivačního xxxxx a xxxxxxxx xx xxxxx lázni (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx vzorku mléka
Vzorek xxxxx řádně promíchat, xxx byly xxxxxxxxxxxxxx xx nejrovnoměrněji rozděleny, x xx 25 xxxxxxxx otočeními xxxxxx xx vzorkem. Je xxxxx zabránit xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx mícháním x xxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku xx neměla překročit xxx xxxxxx.
7.3 Příprava xxxxxxxxxx xxxxxx (10-1) (xxxxxx x pasterované xxxxx)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 9 xx xxxxxxx (6.1), přičemž xxxxxx nesmí přijít xx kontaktu s xxxxxxxx. Teplota ředidla xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx promíchávat xxxx xxxxxxxx ředění xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx xx tak xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx desetinných xxxxxx (xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxxxxxx ředění (7.3) do 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx xxxxxx x xxxx 7.3.
Xxxxx xx xxx xxxxxx 10−2.
S xxxxx získat xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx dlouho, xxxxx xxxxx očekávat přiměřené xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx misek
7.5.1 Xxxxxx mléko: Sterilní xxxxxxx (4.2.3) přenést xx xxxxx (4.2.4) 1 ml vzorku x/xxxx vhodného xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.5.2 Xxxxxxxxxxx mléko: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) přenést xx xxxxx (4.2.4) 1 ml xxxxxx x/xxxx vhodného xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.5.3 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx xx 15 xxxxx xxxxxxxx při 30 °X – xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx X xxxxxxxx XXX bod 5):
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx xxxxx (7.2). Xxxxxxxxx dvě xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx kultivačního média
Do xxxxx xxxxxxxxxx misky xxxxx xxx 15 xx 18 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Ihned xxxxxxxxx rotací Xxxxxxx xxxxx, xxx po xxxxxxxx došlo x xxxxxxxxxxxx rozložení kolonií.
Doba xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx mléka x xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx vzorku xxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx, dokud xxxxxx xxxxxxxx.
7.7 Inkubace Petriho xxxxx
Xxxxxxx misky do xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx dnem xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx více xxx xxxx misek. Sloupky xxxxx xx nesmějí xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 72 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx kolonií
Počítat kolonie x Xxxxxxx miskách xxxxxxxxxxxxxx více xxx 300 xxxxxxx.
Xxxxx vyšetřit xxx tlumeném světle. Xxx usnadnění počítání xxx použít xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx počítadlo (4.1.8). Xx nutné xxxx xx xx, xxx xxxxxxx k záměně xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx koloniemi. V xxxxxxx xxxxxxxxxxx provést xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx zvětšením (4.1.7), x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx cizích xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx považují xx xxxxx kolonii. Xxxxx xxxxxxx tvořící xxxxxx xxxxxxxxx xxxx než xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x nepostižené xxxxx misky a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx tvořící xxxxxx pokrývají xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, misku xxxxxxx.
8. Xxxxxxx x vyjádření xxxxxxxx
8.1 Xxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxx
8.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 xxxxxxx (viz 8.1.3 x 8.1.4).
8.1.2 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxx xxxx pasterovaného xxxxx xxxxx tohoto vzorce:
∑C / (x1 + 0,1x2) d
kde:
∑C ΣC xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx podle bodu 8.1.1.
(x1 + 0,1 x2)x xx objem xxxxxxxxxxxx vzorku, xxx:
x1 xx počet xxxxx xxx prvním xxxxxxx
x2 xx xxxxx misek xxx xxxxxx xxxxxx
x xx xxxxxx xxxxxxx, xx základě xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxx platné xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx vlevo xxxx sudá.
Příklad (pasterované xxxxx):
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 x 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; = 278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2
= 6290,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.1.3 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 10, xxxxx, že xxxxx mikroorganismů xx xxxxxxxx je "xxxxx xxx 10 x x", xxxxxxx "d" xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
8.1.4 Xxxxx xxxx všechny xxxxx xxxxx xxx 300 x počítání xx xxxxx, xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx hodnotou xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx jako "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xx".
8.2 XXX xxxxx x sterilizované xxxxx
Xxxxx xxxxx xxx 10 xxxxxxx xx 0,1 xx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx požadavkům xxxxxxxx 85/397/XXX.
9. Spolehlivost
Výsledky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kruhových xxxxx ještě nejsou x xxxxxxxxx.
X. XXXXXXXXX XXXXXX MIKROORGANISMŮ XXX 21 °X
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů technikou xxxxxxxx xxxxxxx xxx 21 °C x xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxx dní xxxxxxxxxxxxx xxx 6 xX x cílem xxxxxxxx xxxxxx kontaminace xxxxxxxxxxxxx xxxxx psychotropními xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxx xx x xxxxx při 6 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx organismy, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx aerobní xxxxxxxx xx popsaných xxxxxxxx.
3. Princip
Inkubovat xxxxxxxxxxx xxxxx xxx dní xxx 6 °X. Xxxxxxx stanovený objem xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx v Xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx inkubovat 25 xxxxx xxx 21 °X. Xxxxxxxx xxxxxxx x vypočítat xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx mléka.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx skla
Obvyklé xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, zejména:
4.1 Přístroje
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na 121 ± 1 °C.
4.1.3 Xxxxxxxxx, schopný xxxxxxxx xxxxxxx:
x) 6 ± 0,2 °C
b) 21 ± 1 °C xx xxxxx bodech xxxxxx.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx, přesný na ± 0,1 jednotky xX.
4.1.5 Vodní lázeň, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °C.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, zvětšení 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx sklo, zvětšení 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Xxxxxxxx xxxxxxx rozmíchat 1 xx vzorku mléka xxxx desetinného ředění x 9 xx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx prostorem k xxxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx desetinných ředění.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 až 250 xx xxxx zkumavky x xxxxxx 20 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Pipety (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx xxxx ze sterilního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, s xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx, x výpustním xxxxxxx o xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x čirého, bezbarvého xxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxx má xxxxxxx xxxxxx xxx 90 až 100 x. Vnitřní xxxxxxx xxxxx xx měla xxx xxxxxxx 10 xx. Dno xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Sterilizace xxxxxxx xx skla:
Pomůcky xx skla xx xxxxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxx xxxxxxx:
x) v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx jednu xxxxxx xxx teplotě 170–175 °X;
x) x autoklávu (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx dbát xx to, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, tyto xxxxxx by neměly xxx xxxxxxx uzavřeny, xxxxxxx nebo xxxxx xx xxxx být xxxxx.
Xxxxxxx ze skla xxxxxxxxxxxxx x autoklávech xx xx xxxx xxxxxxx odvětráním xxxx.
Xxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx – agar xx xxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 g |
|
D-glukóza(+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 g |
|
Agar |
10-15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx agaru |
|
Voda |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx mléko xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Toto xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx sušeným xxxxxxxxxxx mlékem, xxxxx xxxxxxxx žádné xxxxxxxxx xxxxx neobsahuje.
Příprava:
V tomto xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx extrakt, xxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxx odstředěné xxxxx. Xxxxx suspenze xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx x xxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx agar zcela xxxxxxxxxx, nebo xxxxxxxx x xxxx xxx 30 xxxxx.
Xxxxx xx xx nezbytné, přefiltrovat xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx je xxxxxxxx, xxxxxxx xX, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) hydroxidu xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx po sterilizaci xxxx jeho xxxxxxx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.2 Xxxxxxxxx, sterilizace x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Rozdělit xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 xx xx baněk xxxx xx 12 xx 15 ml xx xxxxxxxx (4.2.2). Baňky x xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx se kultivační xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx v xxxxx při xxxxxxx xxxx 1 x 5 °C, xxxxx xx xxxx než 1 měsíc xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) se xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kultivačního xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx přidat xxxxxx xxxxxxxxxx mléko xxxx rozpouštěním, pokud xxxx xxxxxxx produktu.
Upravit xX xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X xxxxxxxx xxxxx bodu 5.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x skladovat kultivační xxxxxx xxxxx xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Roztok xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxxx sodný (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, xxxxx xx je xxxxx, zahřívat.
Zkontrolovat pH xX-xxxxxx (4.1.4); pokud xx je xxxxxxxx xxxxxxx pH roztokem (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx chlorovodíkové, xxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx hodnota 7,0 ± 0,1 při 25 °X.
6.2 Rozdělení, xxxxxxxxxxx x skladování xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx xx xxxxxxxxx každá xxxxxxxx xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx ředidla. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 minut xxxxxxxxxxxx x autoklávu (4.1.2) xxx 121 ± 1 °C. Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx se x xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 měsíc xx xxxx xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) xx může xxxxxxxxxxx z komerčních xxxxxxxxxxxxx tablet xxxx xxxxxx. Dodržet pokyny xxxxxxx. Xxxxxxx xX xxxxxxxx podle bodu 6.1, poté rozdělit, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx podle bodu 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření nechat xxxxxx xxxxxxxxx potřebné xxxxxxxx kultivačního xxxxx x zchladit xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx
7.2.1 Inkubovat x xxxxxxxxxx [4.1.3 x)] xxxxxxxx balení xxxxxxxxxxxxx mléka nebo, xxxxx xx xxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x objemu xxxxxxx 100 xx xx xxxx 120 ± 2 hodin xxx 6 ± 0,5 °X.
7.2.2 Xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxxxxxxxxx co xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, a xx 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx vzorkem. Xx nutné zabránit xxxxxx pěny nebo xxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx mícháním x odběrem testovacího xxxxxx xx neměla xxxxxxxxx xxx minuty.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (10−1)
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx pasterovaného xxxxx xx 9 xx xxxxxxx (6.1), přičemž xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx s xxxxxxxx. Xxxxxxx ředidla xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx mléka. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx toto xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx xx tak xxxxxxxx ředění 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.3) xx 9 ml xxxxxxx (6.1) podle xxxxxx v xxxx 7.3.
Xxxxx se xxx xxxxxx 10−2.
X cílem xxxxxx xxxxx desetinná xxxxxx xx tento xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx, dokud xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx misek
Sterilní xxxxxxx (4.2.3) přenést xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ředění. Xxxx xxx vyšetřena xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx misku.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx nalít xxx 15 až 18 xx kultivačního xxxxx (7.1).
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxx misky, xxx xx xxxxxxxx xxxxx k xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kolonií.
Doba xxxx xxxxxx přípravy xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx druhu xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 minut.
Nechat stát xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx médium xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Petriho xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx dnem xxxxxx. Xxxxxxxxx xx sebe xxxx než xxxx xxxxx. Xxxxxxx misek xx nesmějí xxxxxxxx xxxxxxx, xxx být x xxxxxxxx se xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 25 xxxxx xxx 21 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx kolonií
Počítat xxxxxxx x Petriho xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx více než 300 xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx světle. Xxx usnadnění počítání xxx xxxxxx zvětšovací xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx počítadlo (4.1.8). Xx xxxxx xxxx xx xx, aby xxxxxxx k xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x drobnými xxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx pochybností provést xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx skla s xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx od xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx tvořící xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx počet xxx xxxxx misku. Xxxxx kolonie tvořící xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx čtvrtinu xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.2 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na 1 xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
∑X / (x1 + 0,1n2) x
xxx:
ΣX xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 8.1,
(x1 + 0,1 x2)x xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx:
x1 xx počet xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx
x2 xx xxxxx xxxxx při druhém xxxxxx
x xx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
Xxxxx se xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxx. Když xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, zaokrouhlit xxx, xxx xxxxxxxx číslice xxxxx byla xxxx.
Xxxxxxx:
Xxxxxx 10−2: 278 a 290 kolonií
Ředění 10−3: 33 x 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; =278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2=
=629 / 0,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.3 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 10, xxxxx, že xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx mililitr xx "nižší než 10 × d", xxxxxxx "d" je xxxxxxxxxx hodnota xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
8.4 Xxxxx xxxx xxxxxxx počty xxxxx než 300 x xxxxxxxx xx xxxxx, provést xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx faktoru xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx "Xxxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxxxx na ml".
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX XXXXXX KOLIFORMNÍCH XXXXXXXX – XXXXXXXX XXXXXXX PŘI 30 °X
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxx kapitola xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup xxx stanovení koliformních xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx při 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx" xx rozumějí bakterie, xxxxx xxx 30 °X vytvářejí charakteristické xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xx popsaných podmínek xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx.
3. Princip
Smíchat xxxxxxxxx xxxxx vzorku xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx x 24 xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x, pokud xx xx xxxxx, potvrdit xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx kolonií xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx laktózu. Xxxx xxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 xx pasterovaného mléka.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, zejména:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °C.
4.1.2 Autokláv, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx udržovat xxxxxxx 30 ± 1 °C.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx teploty, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Vodní xxxxx, nastavitelná xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Očkovací jehla xx slitiny platina-iridium xxxx nikl-chróm.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
4.2.1 Zkumavky x xxxxxxxx xxxxxxx x objemem 20 xx, aby xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (5.2) x Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2.2 Baňky x xxxxxx 150 xx 250 xx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx selektivního xxxxxxxxxxxx média (5.1).
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx materiálu, x nepoškozeným xxxxxx, x nominálním objemu 1 – 10 xx, x výpustním xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 až 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x čirého, bezbarvého xxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx misek xx xxxxxxx xxxxxx xxx 90 xx 100 x. Vnitřní hloubka xxxxx xx měla xxx nejméně 10 xx. Xxx nesmí xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Sterilizace xxxxxxx xx xxxx:
Xxxxxxx xx skla se xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx postupů:
a) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx 170 – 175 °X;
x) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxx xx xx, xxx bylo xxxxxxxxx dostatečné xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx xx xxxxxxxx sterilizuje v xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xx xxxxxx být xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx být xxxxx.
Xxxxxxx xx skla sterilizované x xxxxxxxxxxx by xx xxxx vysušit xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx musí xxx sterilizovány v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx médium
5.1 Xxxx x krystalovou violetí, xxxxxxxxx xxxxxxx, žlučí x xxxxxxxx (VRBL xxxx). Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
7 g |
|
Kvasnicový extrakt |
3 x |
|
Xxxxxxx (X12X22X11.X2X) |
10 g |
|
Chlorid xxxxx (NaCl) |
5 x |
|
Xxxxxxx xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxxxx xxxxxx |
0,03 x |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxx |
0,002 x |
|
Xxxx |
10 xx 15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx složky xx xxxx a xxxxxx xxxx xxxxxxx minut. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx to xx xxxxx, xxxxxxx xX roztokem (nejméně 0,1 mol/l) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxx byla xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxx xxxxxx xx xxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx 100 xx 150 xx xx xxxxxxxxxx xxxxx (4.2.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
X xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média (6.4).
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx do xxx xxxxx xx xxxx přípravě.
5.2 Xxxxxx xxxx s brilantovou xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
10 x |
|
Xxxxxxx (X12X22X11.X2X) |
10 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx |
20 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxx |
0,0133 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx x xxxxx xx varu.
Zkontrolovat xX xxxxxx pH-metru (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx, upravit pH xxxxxxxx (nejméně 0,1 xxx/x) hydroxidu xxxxxxx xxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, xxx po sterilizaci xxxx xxxx hodnota 7,2 ± 0,1 xxx 25 °C.
Rozdělit xxxxxx xx 10 xx xx zkumavek (4.2.1) xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx nesmějí xx xxxxxxxxxxx obsahovat xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, skladuje xx x xxxxx xxx xxxxxxx mezi 1 x 5 °X, xxxxx ne xxxx xxx 1 měsíc xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx dehydrované xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x skladovat kultivační xxxxxx xxxxx xxxx 5.1 x 5.2.
6. Xxxxxx
6.1 Kultivační médium
Použít xxxxxx (VRBL xxxx) xxxxxxx x xxxx 5.1.
6.2 Příprava vzorku xxxxx
Xxxxxx mléka řádně xxxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx nejrovnoměrněji xxxxxxxxx, a xx 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xx nutné xxxxxxxx xxxxxx pěny xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx mezi xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx tři minuty.
6.3 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx přenést (4.2.3) 1 xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xx tří xxxxx (4.2.4) x xxx xxxxxxxxx 3 ml xxxxxx xxxxx (6.2).
6.4 Xxxxxxxx kultivačního média
Do xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 12 xx XXXX xxxxx (6.1)
Xxxxx xx xxxxxx xxxxx promíchat xxxxxx Xxxxxxx misky, xxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx rozložení xxxxxxx.
Xxxx mezi koncem xxxxxxxx vzorku xxxxx x xxxxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxx nesmí xxxxxxxxx 15 minut.
Za xxxxxx kontroly xxxxxxxxx xxxxxxxxx nenaočkovanou misku x 12 xx xxxxx VRBL agaru, xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx misky.
Nechat xxxx na vodorovném, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, dokud xxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 4 xx VRBL xxxxx (6.1) xx povrch xxxxxxxxxxxx média.
Nechat ztuhnout.
6.5 Xxxxxxxx Petriho misek
Přenést xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Misky xxxxxxxxx xxxxxxxx dnem xxxxxx. Xxxxxxxxx na xxxx xxxx xxx šest xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, ani xxx x kontaktu xx xxxxxxx a xxxxxx xxxxx inkubátoru.
Inkubovat 24 ± 2 hodiny xxx 30 ± 1 °X.
6.6 Xxxxxxxx xxxxxxx
6.6.1 Xxxxxxx kolonie x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 150 xxxxxxx. Počítat xxxxx červené kolonie x xxxxxxx xxxxxxx 0,5 xx, x xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.6.2 Xxxxx xxxx všechny xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxx xxxxx, velikost xxxx xxxx xxxx sraženin xxxxxxxx k xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxx konfirmační xxxx (6.7).
6.7 Xxxxxxxxxxx xxxx
Xxxxx xxxxx v xxxx 6.6.2 provést xxxxxxxxxxx xxxx u xxxxxxxx xxxxx (xxxx. 3 až 5) xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xx se xxxxxx xxxxxxxx xxxxx (4.1.6), xxxxxxxx zkumavky xxxxxxxxxx xxxxxx agar x xxxxxxxxxxxx zelení (5.2). Xxxxxxxxx zkumavky 24 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °C.
Za xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx x Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx.
7. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx maximálně 150 xxxxxxx.
7.2 Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx koliformních xxxxxxxx xx xxxxxxx procentuálního xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií.
7.3 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 ml xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
ΣX / x
xxx:
ΣX xx xxxxxxx xxxxx kolonií koliformních xxxxxxxx (7.1 x xxxxxxxxxxx xx 7.2), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (6.3).
x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorku (6.3) v xxxxxxxxxxx (3 xx).
Xxxxx se xxxxxxxxxx na xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx více xxx 100 xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, zaokrouhlit xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx byla xxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx než 150 xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx "xxxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxx bakterií na 1 xx".
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
XXX. STANOVENÍ XXXXXX SOMATICKÝCH XXXXX
Xxxx xxxxxxxx popisuje dva xxxxxxxxxx postupy xxx xxxxxxxxx somatických xxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Mikroskopická xxxxxx
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx postup xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxx mléka xx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx fluoro-opto-elektronické xxxxxx (viz B.1).
2. Xxxxxxxx
Xxx tento xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx jádra xx možné xxxxxxxx xxxxxxx methylenovou xxxxx
3. Xxxxxxx
Xxxxxx 0,01 xx xxxxx xx 1 xx2 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Tenká vrstva xx vysuší x xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx pod xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxxx xx vynásobí xxxxxxxxx xxxxxxxx, s xxxxx získat počet xxxxx na 1 xxxxxxxx.
4. Xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x..
Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxx xxxx |
0,6 x |
|
Xxxxxxx – 99 % |
54 xx |
|
1,1,1-xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx |
40 xx |
|
Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx |
6 xx |
Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx je xxxxxxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxxxx se proto xxxx uskutečnit v xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx x baňce xxxxxxx x 1,1,1-xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx ve xxxxx xxxxx xx 60 xx 70 °C. Xxxxxx methylenovou xxxx, xxxxx xxxxxxxxx, 12 xx 24 xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 4 °X x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Přefiltrovat xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx 10 xx 12 xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx roztok xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx láhvi. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx použitím roztok xxxxx přefiltrovat.
5. Xxxxxxxxx x pomůcky xx xxxx
5.1 Xxxxxxxxx umožňující xxxxxxxx 500 × xx 1000 ×
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 0,01 ml x přesností xxxxxxx ± 2 %.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 20 xx × 5 mm xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx 20 × 5 xx pro xxxxxx xxxxxx.
5.4 Horizontální xxxxx deska (30 °X xx 50 °X) xxx xxxxxx xxxxxxxxxx sklíček.
5.5 Ventilátor (xxx) xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx.
5.6 Vodní xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 30 až 40 °X xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
5.7 Podložní xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx po 0,01 xx.
6. Postup
6.1 Vzorek xxxxx
Xxxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxx do xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx nesmí teplota xxxxxx xxxxxxxxx 6 °X. Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx.
6.2 Xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxx ve vodní xxxxx (5.6) xx 30 až 40 °X. Poté řádně xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx, při xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (5.2), xxxxxxxxx 20 °X.
6.3 Předběžné xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx prach, xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx před prachem.
6.4 Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx (5.2) xxxxxxx 0,01 xx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx do xxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) a xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (20 xx × 5 xx). Xxxx xx co xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Nechat xxxxxxx xxxxxx vrstvu xx xxxxxxxxxxxx vyhřívací xxxxx (5.4) až xx xxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxx mléka xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxx tenké xxxxxx.
6.5 Xxxxxxx tenkých xxxxxx
Xxxxxxx na 10 xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4). Xxxxx x, pokud xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.5). Xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx tekoucí xxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx x xxxxxxx tak, aby xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx.
6.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (500 × xx 1000 ×) xxxxxx xxxxxx mikroskopického xxxx (5.7).
7. Xxxxxxxx x xxxxxxx
7.1 Počítání xxxxx
Xxxxxx xxxxxxxxx (5.1). Xxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx, x xx xxxxxx jádra, xxxxx jsou jasně xxxxxxxxxxxx x z xxxxx xx v xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Počítat xxxx xxxx xxxx xx xxxxxxx třetině xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx ty pásy xxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx částí xxxxx vrstvy. Xxxxxxx xxxxxxxx tenkých xxxxxx x xxxxx i xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx částí xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxx xxxx provádět xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx takovým xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx rovnoměrně.
7.2 Stanovení xxxxxxxxxxx xxxxx buněk, xxxxx xx xxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx k xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx být rovněž xxxxxxx pro standardizaci xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx počítání z xxxxxxxxxxx vzorků xxxxx xxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx koeficient xxx vzorek xxxxx x obsahem 400000 xx 600000 buněk/ml xx neměl xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx je xxxxx x každém xxxxxx spočítat, musí xxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 400, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
X = X = x2,
xxx:
X xx střední xxxxxxx
X xx xxxxxxx
x xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx koeficient xx:
XX = s × 100 % / X xxxx XX = 100 % / x&xxxx;xxxx XX = 100 % / OBR
M (xxxxxx) xxxxxxxxxxx počet xxxxxx (buněk), xxxxx xxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxx 400 pro XX = 5 %).
7.3 Xxxxxxx pracovního xxxxxxx
Xxx xxxxxxx 0,01 xx xxxxx xx pracovní xxxxxxx vypočítá xxxxx xxxx 7.3.1 xxxx 7.3.2.
7.3.1 Počítání pásů xx xxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxx, xxxxx se xxxx xxxxxxx, xx 5 mm. Xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x mikrometrickou xxxxxxxx (5.7).
Xxxxxxxx faktor = 20 × 100 / x × x
xxx:
x xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x mm, stanovený xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx stupnicí (5.7)
x xxxxxxx počet spočítaných xxxx.
7.3.2 Xxxxxxxx mikroskopických xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx pomocí mřížky
Pracovní xxxxxx
xxx:
x je xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx v xx, stanovený podložním xxxxxxxx x mikrometrickou xxxxxxxx (5.7)
x celkový xxxxx spočítaných xxxx.
7.4 Xxxxxxx obsahu xxxxx
X xxxxx získat xxxxx xxxxx xx ml xxxxx, xx počet xxxxxxxxxxxx somatických xxxxx (7.1 x 7.2) xxxxxxxx xxxxxxxxx faktorem (7.3).
7.5 Přesnost
Variační koeficient (xxx 7.2) xxxxx xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx.
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup, xxxxx xx může po xxxxxxxxxxxx kalibraci (viz X.1) xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx počtu somatických xxxxx v xxxxxxx xxxxx s chemickou xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. Definice
Pro xxxxx postup xx xxxxxxxxxxx buňkami rozumějí xxxxxxx, xxxxx mají x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx XXX minimální xxxxxxxxx fluorescence.
3. Princip
Část xxxxxx (například 0,2 xx) se xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx a x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx směsi xx xxxx přenese xx xxxxx tenké xxxxxx xx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx sklíčko.
Každá xxxxx xxxxxxxxx elektrický xxxxxx, xxxxx xx zesiluje x xxxxxxxxxxx. Obsah xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx x tisících xx xxxxxxxx.
4. Xxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx použít xxxxxxx xxxxxxx p.a.. Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx, xxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxx čistoty.
4.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx |
51,00 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxx |
13,75 g |
|
Polyethylenglykol-mono-p(1,1,3,3-tetramethylbutyl)-fenylether(například Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 xx |
|
xX 5,7 xx 5,9. Xxxxxxx vodou xx 10000 ml. |
Příprava:
Smíchat xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx ve xxxxxxxxxxxx uzavřené xxxxxx xx nemělo xxxxxxxxx xxxx xxx.
4.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxx)
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
1,0 x |
Xxxxxxx xxxxx xx 1000 xx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx ethidiumbromid xx xxxx. Xxxxxxxxxx xx vzduchotěsně uzavřené xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx xxxxxx)
Xxxxxxx 20 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.2) x xxxxxxxx xxxxxxxx (4.1) xxx, xxx xx xxxxxx xxxxx 1000 xx. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxx více xxx xxxx dní.
4.4 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxx xxxxxx (4.1) |
10 xx |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 xx |
|
Xxxxxxx x 25 % xxxxxxxxxx |
25 xx |
Xxxxxxx xxxxx xx 10000 ml
Příprava:
Smíchat xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx překročit xxxxxx dní.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
5.1 Počítací xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxx použitím xxxxxxxxxxx. Xxx xx xxxxxxx vztah xxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx mají počítat, x xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx se xxxxxxxx xxxxxxx. Kalibrace xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx pokynů xxxxxxx xx použití vzorků, xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx mikroskopickou xxxxxxx (X).
5.2 Xxxxx xxxxx, x cirkulací xxxx, xxxxxxxxxxxx na 40 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx 15 xx.
6. Xxxxxx xxxxx
6.1 Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx (5.3). Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx konzervován, počítání xx xxxx provést xx xx uplynutí 24 hodin xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx byl xxxxxx nízký. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 6 °X.
6.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxx xxxxxxx xx 24 xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
6.2.1 Chemická konzervace xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx z xxxxxx konzervačních xxxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx být xxxxx než 0,6 x xx 100 xx. Takto konzervovaný xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx xxxxxxx 6 xx 12 °X;
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx vzorku xxxxx xxx xxxxx xxx 0,2 g na 100 xx. Takto xxxxxxxxxxxx vzorek xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 72 xxxxx xxx xxxxxxx 6 xx 12 °X;
- azid xxxxx:
xxxxxx může xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx sodným x xxxxxxx xxxxxxxxxxx 0,024 g/100 xx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xx teplotu 6 až 12 °X xxxxx xx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx 48 xxxxx xx jeho xxxxxx;
- bronopol:
vzorek xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x konečné xxxxxxxxxxx 0,05 g/100 xx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx 6 xx 12 °X xxxxx po xxxx odběru x xxxxxxxx do 72 xxxxx po jeho xxxxxx.
6.2.2 Xxxxxx, xxxxx xxx byl xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx boritou, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx 48 xxxxx dvojchromanem xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxx xxx o xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx podmínky xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx vod.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx, které xx xx xxxxxxxx, se xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx asi 2-6 °X. Počítání xxxxxx x xxx xxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nedoporučuje, xxxxx xxxxxxxx xxxxx být xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxx nutné xxxxxxxx provést, xxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxx ošetřován xxxxxxx xxx xxxxxx dvojchromanem xxxxxxxxx (viz 6.2.1).
7.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxx 7.1) xxxx xxxxxxxxxx vzorek nejméně xxxxx xxx xxxxx xxxxxx ve xxxxx xxxxx (5.2) xx xxx 40 °X. Xxxx xxxxxxxxx vzorek xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xx počítání.
7.3 Xxxxxxxx buněk
Počítání xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.1) xx 15 minut xx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 7.2). Xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xx nejlepšího xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx ředění x xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx provedeny x xxxxxxxx.
8. Spolehlivost
Výsledky xxxxxxxxxxxxxxx (x) x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) xxxxxxxxxxxxx kruhových xxxxx nejsou x xxxxxxxxx.
Xxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxx úrovni, xxxxxxxx xxxx odhady:
(1) xxxxx xxxxx mezi 400 000 xx 500 000 xxxx:
- xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxxxxxxxx:
xx = 20000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx koeficientu 5–4 %)
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx:
xX = 40000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 10–8 %)
9. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx pomocí xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx národní referenční xxxxxxxxxx.
XXXX. DETEKCE XXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXX
XXXXXXX A XXXXXX POUŽITÍ
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx x x tepelně ošetřeném xxxxx.
Xxxxx referenční xxxxxx xxxxxxxx:
X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxx je počáteční xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx x několika xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx Bacillus xxxxxxxxxxxxxxxxxx var. xxxxxxxxxxxx, XXXX 10149, xx xx testovacího xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx jako xxxxxxxxxxxxxxx xxx takovéto testy.
B. Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxxxxxxxx xxxxxxx antibiotik x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, jejichž koncentrace xxxx xxxxx než xxxxxx xxxxxxx x xxxx tabulce:
Detektovatelné koncentrace xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx [1]
|
Citlivost xxxxx |
||
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxx |
|
|
Xxxxxxxxxxxxxxx |
0,002 |
0,006 |
|
Xxxxxxxxx |
0,002 |
0,005 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,015 |
0,035 |
|
Xxxxxxxx |
0,006 |
0,011 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,10 |
0,40 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,20 |
0,45 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxx |
0,15 |
0,50 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
7 |
15 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx |
4 |
13 |
|
Xxxxxxxx |
1 |
22 |
|
Xxxxxxxxx |
9 |
28 |
|
Xxxxxxxxxx |
0,06 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxx |
1 |
2,25 |
|
Xxxxxxxxx |
0,01 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,01 |
0,1 |
|
Xxxxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxxx) |
0,5 |
1 |
|
Xxxxxxxxxx extrakt |
2 g |
|
|
Pepton |
5 x |
|
|
Xxxxxx xxxxxxx |
1 x |
|
|
Xxxxxxx xxxxx |
5 x |
|
|
Xxxx |
10–15 x |
|
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx složky xx xxxx. Xx občasného xxxxxxx xxxxx xx xxxx. Xxxxxxx xX xxx, aby xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxxxx xxxx xx 100 xx do xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °C.
5.1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxx xxxxx |
2 g |
|
Agar |
15 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxx trimethoprimu xxxx xxxxxxxxxxxx (viz 5.1.3) |
10 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx vodě, x xxxxxxxx trimethoprimu xxxx xxxxxxxxxxxx. Za xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx do xxxx. Xxxxxx trimethoprim xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx 15 minut xxx 121 ± 1 °X. Xxxxxxx xX, aby xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.1.3 Roztok trimethoprimu xx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxxxx |
5 xx |
|
xxxx Xxxxxxxxxxx |
30 xx |
|
96 % Xxxxxxx |
5 xx/30 xx |
|
Xxxxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo tetroxoprim (5 xxxx 30 xx) x xxxxxxx xxxxx.
5.1.4 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
0,75 xx |
|
Xxxxxxx |
5,0 mg |
|
Rozpustný xxxxx |
8,0 xx |
|
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx |
0,025 x |
|
Xxxx |
50 ml |
Příprava:
Rozpustit ve xxxx živný xxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xx je xxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Živný roztok xx dostupný x xxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx
5.2.1 Ve sterilní xxxxx s xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x 60 μx/xx (100 XX/xx), x xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx sodného xxxx xxxxxxxxxx ve xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
5.2.2 Xxxxxxxxx pracovní xxxxxx xxxxxxxxxx vložením 1,25 xx xxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2.1) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x doplnit xx xx 1000 xx. Tento xxxxxxxx xxxxxx obsahuje 0,075 μx xxxxxxxxxx/xx (= 0,125 XX/xx).
5.2.3 Xxxxxxxxx 75 ml xxxxxxxxxxxx xxxxxxx penicilinu xxxxxxxxxxxx 0,004 μx penicilinu/ml (= 0,0067 XX xxxxxxxxxx/xx) přidáním 4 xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2.2) xx 71 xx xxxxx xxx inhibičních xxxxx (5.3).
5.2.4 Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx bodů 5.2.1 xx 5.2.3 xx xxxx být xxxxxxxxxx x den xxxxxxxxx xxxxx.
5.3 Xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek
Připravit xxxxxxxxx preparát mléka xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (10 % x/X) xx xxxx, xxxxx bylo xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek. Rovněž xxx použít xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx mléka, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx inhibičních xxxxx; xxxx xxxxx xx xxxxxxx xx lahví x zahřívá se xxxxx xxxxxx xx 100 °X, xxxx xx xxxxxxx do xxxxxxxxxx s xxxxxxxx 0 °C až 6 °X na xxxx xxxxxxx jednoho xxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
5.4.1 Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx XXXX 10149 Kmen XXXX 10149 je xxxxxxxxx s xxxxxx X 953.
5.4.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx kulturu xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx kultury. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx agaru (5.1.1). Xxxxx agar xx x proužcích naočkuje xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx aerobně xxxxxxxx 48 xxxxx xxx 63 ± 1xX. Xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx sterilní xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx zásobní kultura xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 0 xx 5 xX.
5.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (suspenze xxxx)
5.5.1 Xxxxxxxxx přenést 20 ml xxxxxxx xxxxx (5.1.1) xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx (4.2.2) a xxxxxx xxxxxxxx na pokojovou xxxxxxx.
5.5.2 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) přenést 5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx zkumavky xx zásobní xxxxxxxx (5.4.2) x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx šikmého agaru. Xxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxx 0 xx 5 °X x xxxxxxx xx xx 36 xxxxx.
5.5.3 Xxxxxxxx pipetou (4.2.4) xxxxxxx 5 ml xxxxxxxx xxxx (5.5.2) xx Xxxxxxx xxxxx (5.5.1) a důkladně xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx zahnuté xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx 16 xx 18 xxxxx xxx 63 ± 1 °X (4.1.1).
Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (5.4.2) xxxx xxxxxxx xxxxxx 36 xxxxx xx očkování xxxx xxxxxxx nejméně dvakrát x xxxxxxx intervalu xxxxxxxxx 36 hodin.
5.5.4 Xxxxxxxx pipetou (4.2.4) xxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxxx xxxx xx Xxxxxxx misku xxxxxxxxxx xxxxxxx (5.5.3) a xxxxxxxxx xxxxxxxx odstranit xxxxx z povrchu.
Přenést xxxxxxxx xxxx xx xxxxx (4.2.3) xxxxxxxxxx 250 ml xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vody. Xxxxx xxxxxxx x důkladně xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx ihned přeočkovány, xx xx měly xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 0 xx 6 °X.
5.5.5 Xx 16xx až 18xx xxxxxxxx inkubaci xxx 63 ± 1 °X xx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx 5 a 10 miliony na xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, a xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx, xxxx xx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx kultury (5.4.2).
5.6 Xxxxxxxx zkumavek/ampulí
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (5.1.2), xxxx xxxxxxxx xx 55 °C.
5.6.2 Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx (5.5.4) x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (5.6.1) xx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx. Důkladně xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx zkumavky xxxx xxxxxx (4.2.6) 0,3 xx naočkovaného xxxxx (5.6.2), xxx xx xxxxxxxxx 5 mm xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxx, x xxxxxxx ampule, zatavením xxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, poté xxxxxx zkumavky/ampule 12 xxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
5.6.4 Xxxxxxxx/xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx týž xxx, ale xxxxx xxx rovněž xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx 0–6 °X, xxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxx přípravě xxxxxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Vzorky xx xx xxxxxxxx otestují, xxxxxxx xx 24 xxxxx xx odběru, x do té xxxx xx skladují xxx teplotě 0-5 °X. Pokud xxxx xxxxx xxxxxxxxx vzorky xx 24 xxxxx, xxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxx zmrazené (−30 °xx - 15°X), xxx se xxxxxxx xx minimum xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.2 Xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx identifikovat xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx (5.6). Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx. Umístit xx xxxxxxxx xxxxxxxx (4.1.3) xxxxx požadovaný xxx xxxxxx x testy (5.2 a 5.3).
6.3 Xx každé zkumavky/ampule xxxxxx 50 xxxxxxxxxx xxxxxxx roztoku (5.1.4).
6.4 Xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx (4.1.4) xxxxxxx 0,1 xx vzorku do xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx. Pro xxxxxxxxx xxxxxxx vzorku xxxxxx xxxx novou xxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.5 Xxxxxx xxxxx bodu 6.4 xx xxxxxxx stejným xxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,004 μg/ml (= 0,0067 IU/ml) xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx (5.2.3).
6.6 Postupem xxxxx xxxx 6.4 xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx bez xxxxxxxxxxx látek (5.3) xxxxxxx vzorku mléka.
6.7 Xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxx xx nejméně 2½ až 2¾ xxxxxx xx vodní xxxxx x xxxxxxxx 63 ± 1 °X (4.1.2).
6.8 Xxxxxxx xxxxxxxx xx zkumavkami/ampulemi x vodní lázně.
6.9 Xxxxxxxxx barvu xxxxxxxxx xxxxx (viz 7).
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx roztokem xxxxxxxxxx xxxx testovacím xxxxxxx xxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx "zcela xxxxxxxxx" xxxxxxx x xxxxxxx xx straně 39. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (6.5) xxxxxxx purpurové, xxxxxxx médium je xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxx mléka xxxxxxx na přítomnost xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx uvedenými xx xxxxxx 39.
7.3 Xxxxx xxxxxxxxx agarového xxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx mléka xxx inhibičních xxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
7.4 Xxxxx xx xxxxxxxxx zabarvení xxxxxx ve všech xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol, xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx musí xxx podrobeny xxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Potvrdit xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x reakcemi popsanými x 7.1 x 7.2 xxxxx metody "X".
Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx mléka xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxx poškození xxxxxxxxxx.
X. Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tento xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx penicilinu xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx (X.7.1) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (A.7.2).
Citlivost xxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxxx
Xxx X.1.
2. Xxxxxxxx
2.1 Xxxxxx xxxxx obsahuje xxxxxxxxxxx, včetně sulfonamidů, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx čirou xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx 2 xx xxxxx xxxxx.
2.2 Xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx (2.1), a xx kterému xxxx xxxxxxx penicilináza (xxxx-xxxxxxxxx), xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxx menšího xxxxxxx xxx xx xxxxxx xxxx bez xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx látkou je xxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx včetně xxxxxxxxxxx.
2.3 Xxxxx tato xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx (2.2) xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xx xxx xxxx reziduum [xxx směrnice 85/397/XXX, xxxxxxx X, kapitola XX, X.1.x) x 2x)].
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx nebo jsou xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx jsou xxxxxx x xxxxxxx xxx identifikovány jako xxxxxxxxxx (xxx 7.3).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx papírový xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx, xx umístí na xxxxxx xxxxxxxxx média xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. calidolactis. Xxxxxxxx xxxx mikroorganismus xx xxxxxxxx narušuje xxxxxxx xxxxxx. Čirá xxxx xxxxx disku xxxxxxx, xx jsou x xxxxx přítomny xxxxx xxxxxxxxx látky xxx xxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx xxxx jiné xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx.
4. Xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx x xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Viz A.4.1.
4.1.2 Xxxxx lázeň, nastavitelná xx 80 ± 1 °X.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
Xxx X.4.2.
4.3 Xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky, x xxxxxxx 9 xx 13 xx, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx 130 xx xxxxx (nejlépe xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx).
5. Xxxxxxxxxx xxxxx, standardní xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx testovací xxxxxxxxxx xxx.
Xxxxxxxx xxxxxx kultivačních xxxxx musí xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Musí se xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx voda xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Voda xxxxx obsahovat xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1 Xxxxxxxxxx xxxxx
5.1.1 Xxxxx xxxx (X.5.1.1)
5.1.2 Kultivační xxxxxx xxx detekci xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5 x |
|
Xxxxxxx |
1 g |
|
Roztok trimethoprimu xx tetroxoprimu (X.5.1.3) |
10 xx |
|
Xxxx |
10–15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx vlastností agaru |
|
Voda |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxx zahřívání x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx složky xx xxxx, xxxx přidat xxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx. Po xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo tetroxoprimu xxxxxxx xxxxxxx xX, xxx xx sterilizaci xxxx 8,0 + 0,1 při 25 °X. Sterilizovat médium 15 xxxxx při 121 ± 1 °X.
5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx
Xxx X.5.2.
Xxx kvantitativní xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek (8) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxxxx v mléce xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (X.5.3) x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx:
x) 0,004 μx/xx (0,0067 IU/ml)
b) 0,006 μx/xx (0,01 XX/xx)
x) 0,03 μx/xx (0,05 XX/xx)
x) 0,06 μx/xx (0,01 XX/xx).
5.3 Roztok xxxxxxxxxxxx
5.3.1 Xxxxxxxxx dostatečné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (beta-laktamázy) xx sterilní xxxxxxxxxxx xxxx x cílem xxxxxx xxxxxxxxxxx 1000 X/xx. Xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxx 0 °X xx 5 °X.
Xxxxxxxx
Xxx penicilinázu xxxxxxxxxx xxxxxxxx mezinárodní xxxxx. Pro xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, že deset xxxxxxxx penicilinázy xxxxx xx inaktivaci 0,6 μx (= 1 XX) xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx tento xxxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxx xxxxxxxx proto xxxxxxx xxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxxxx.
5.3.2 Xxxxxxx roztoku xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx penicilinázou, xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxx X.5.4.
5.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxx)
Xxx X.5.5.
5.6 Xxxxxxxx Petriho xxxxx
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), xxxx zchladit xx 55 xX.
5.6.2 Xx xxxxx přidat xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx (5.5) x nezbytnému xxxxxxxx částí xxxxxxxxx xxxxx xxx detekci xxxxxxxxxxx látek (5.1.2), x xxxxx xxxxxx xxxxxxx hustotu xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.6.3 Přenést xx xxxxxxxx Xxxxxxx misky (X.4.2.2), xxxxxx xxxxxxx xx 55 °X, xxxxxxxxxx agarové xxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx 0,6 až 0,8 xx xxxxxx. Xxx Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx 140 xx xx xxxxx xxx 15 xx xxxxxxxxx média, xxx xx xxxxxxxxx 0,8 xx xxxxxx.
5.6.4 Umístit Xxxxxxx misky xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx ztuhnutí xxxxx, xxxxxx xxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xx dnem vzhůru, xxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx vody xx xxxxxxx agarového xxxxx.
5.6.5 Takto xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxx, xxx xxxxx xxx používány xxxxxxxxx dva týdny, xxxxx xx ihned xx přípravě vloží xx zataveného xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xx při 5 °X.
5.6.6 Xxxxxxx xxx Xxxxxxx xxxxx, aby xxxx možná xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 X xxxxxx x xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx výsledkem podle "xxxxxx A" (A.7.1 x A.7.2) xxxx xxx xxxxxxxxx nové xxxxxxxxx za xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx 10 xxxxx xx 80 ± 1 °X, xxx xx xxxxxxxx xxxx nespecifických termolabilních xxxxxxxxxxx látek.
6.1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx, poté přenést xxx 10 xx xxxxxx xxxxxxxxx mléka xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx hrdlem. X xxxxx xxxxxx xxx 0,4 xx xxxxxxx penicilinázy (5.3) x xxxxx xxxxxxxxx.
6.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxx látek
6.2.1 Xxxxxxx papírový xxxx (4.3) xx xxxxxx xxxxx (6.1.2) xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx otřením xxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxx. Naplocho xxxxxxx xxxx xx povrch Xxxxxxx xxxxx (5.6) x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.2.2 Xxxxx napuštěné xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxx od xxxxxxx xxxxxxx 20 xx x od xxxxxx xxxxxxx 10 xx.
6.2.3 Xxx xxxxxxxx citlivosti xx disky (4.3) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.2) musí xxxxxxxx rozmístit mezi xxxxx napuštěné xxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxxxx 2 % xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx; xxx xxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
6.2.4 Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx agarové xxxxxx a po xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx dnem xxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxxxx 2,5 xx 5 xxxxx xxx 63 ± 1 °X.
6.2.5 Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx zdroji xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx čiré xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx zóny xx xxxxx.
6.2.6 Standardní xxxxxx xxxxxxxxxxxx (6.2.3) xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 2 xx xxxx.
6.2.7 Xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx mléka, xxxxxxx velkost xx xxxxxx nebo xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx x 6.2.6, xxxxxxx xx přítomnost inhibičních xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.3 Identifikace a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek
6.3.1 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx dvojmo xx xxxxxxx xxxxxxxxx mléka (6.1.2) x se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (6.1.3). Namísto přidání xxxxxxxxxxxx do 10 xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx do xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (5.3.2) x uložit xx xx xxxxxxxxx xxxxx.
6.3.2 Postup 6.2.1 xx xxxxxxx dvojmo xxx xxxxx ze xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x 5.2 x) až x).
6.3.3 Xxxxxxxxx průměrný xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxx mléka, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x pro xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
7. Interpretace xxxxxxxx (viz 2)
7.1 Xxxxx xx xxxxx xxxxx napuštěném kontrolní xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx žádná xxxx xxxx, ale xxxx xxxx se xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx než xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx penicilinu (5.2x)), xxxxxxxxx xxxxx xx vzorku mléka xxxxxxxx koncentraci xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx rovné xxxx xxxxx xxx 0,004 μx/xx.
7.2 Pokud xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx rovná xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx zóny xxxxx xxxxx xx vzorkem xxxxx, mléko xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx inaktivovat xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx.
7.3 Xxxxx je průměrná xxxxxxx průměru xxxx xxxx kolem disku xxxxxxxxxx xxxxxxxxx penicilinázu xxxxx xxx průměrná xxxxxxx průměru xxxx xxxx kolem xxxxx xx xxxxxxx mléka xxxxxxxxx podle 6.1.2, xxxxxx mléka xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx, xxxxxx sulfonamidů, x xxxxxxxxx xxxx polosyntetický xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v tomto xx. Syntetické peniciliny, xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx za xxxxxxxxx podmínek a xxxxx xxx tudíž xxxxxxxxxxxxx xxxx inhibiční xxxxx xxxx než xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx
Xxxxx xx je xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxx identifikovány xxxxxxxx xxxxxxx.
8. Stanovení xxxxxx xxxxxxxxxx
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxx penicilinu xxxx xxx provedeno buď xx sestrojení xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx roztoky penicilinu x xxxxx (5.2 x) až x)).
8.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx křivky
Vzhledem x tomu, že xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx10 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x průměrem xxxxxxxxxxx zón, xxxxxxxxxx xxxxxx lze sestrojit xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx xxx xx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx průměru xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx.
8.3 Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx ve xxxxxx xxxxx xxx vypočítat xx xxxxxxx xxxxxxx xxx vzorků xxxxxx xxxxxxx nebo xx xxxxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx přesné xxxxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxxx zón xxxxxxx xxxxxxx větší, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx.
9. Xxxxxxxxx výsledků
9.1 Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxx 0,004 μx/xx (xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xxxx jako obsah xxxxxxxxxxx xxxxx jiných xxx penicilin.
9.2 Xxxxxxxxxxxxxx (x) a reprodukovatelnost (X)
Xxxxx nejsou x xxxxxxxxx x jsou xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx a xxxxxx použití
V souladu x xxxxxxxxx směrnice 85/397/XXX, xxxxxxx X, xxxxxxxx VII xxxx 2, tento xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Definice
Vyšetření se xxxx xxxxxxx u xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx z xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, které xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx normy xxxxxxxxx x xxxxxxx X, kapitole XXX xxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X x 21 °X, xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx test xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xx nějakou xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx otravy xxxxxxxxxxx.
3. Postup
Postupy x xxxxxxx vyšetření musí xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx orgán xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx vydávání osvědčení x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx pro xxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx patogenních mikroorganismů xx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx kritéria x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx úrovni.
4. Zpráva x xxxxxxxx
Xxx každý xxxxxxxxxxx patogenní xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx výsledek xxxxxxxx takto:
Počet xxxxx xx mililitr, xxxx "xxxxxxxxxx" xx "xxxxxxxxxxxx" x objemu xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx postup. Zpráva xxxx xxxxx popsat xxxxxxx xxxxxx.