Xxxxxxxxxx Xxxxxx
xx dne 14. xxxxx 1991,
kterým xx stanoví některé xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx mléka x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
(91/180/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx x založení Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx společenství,
s xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxx 85/397/XXX xx xxx 5. xxxxx 1985 x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x tepelně xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx Společenství [1] xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 89/662/XXX [2], x xxxxxxx xx xx. 10 odst. 2 uvedené xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxx, že xxxxx čl. 10 xxxx. 2 Komise xxxxxxx xxxxxx analýzy x xxxxxxxxx, které xx mají používat xxx kontrolu xxxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx mléko;
vzhledem x xxxx, xx xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx stanovit zejména xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, obsahu xxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxx xxxxxxxxxxx mléko xx nezbytné stanovit xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx nepřítomnosti xxxxxxxx, xxxxx koliformních bakterií, xxxxxx mikroorganismů, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx peroxidázy, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, že xxx xxxxxxxxxxxxx mléko a XXX mléko je xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxx mikroorganismů, nepřítomnosti xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx z technických xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; že xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx rutinní xxxxxx xxxxxxx x testování; xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx šetření xxxxx členské xxxxx xx xx, xxx xxx xxxxxxxx norem xxxxxxxx 85/397/ES xxxx xxxxxxx xxxxxx rutinní xxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxxx referenčních xxxxx analýzy x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x kriterií spolehlivosti xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx rozhodnutí xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
XXXXXXX XXXX ROZHODNUTÍ:
Xxxxxx 1
Referenční xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxx:
- stanovení xxxx xxxxxxx,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °C,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Článek 2
Referenční postupy xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx pasterované xxxxx xxxx xxxx:
- stanovení xxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx fosfatázy,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 21 °X,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx – xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx,
- detekce patogenních xxxxxxxxxxxxxx.
Článek 3
Xxxxxxxxxx postupy xxxxxxx a xxxxxxxxx xxx XXX xxxxx x sterilizované xxxxx xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx mrznutí,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 30 °X,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx.
Článek 4
Použití xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x odběr xxxxxx xx musí xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x příloze X.
Článek 5
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x testování xxxxxxx x článcích 1, 2 x 3 xxxx xxxxxxx x xxxxxxx II.
Xxxxxx 6
Xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx 31. xxxxxxxx 1992, xxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx znalostí.
Článek 7
Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X Bruselu dne 14. února 1991.
Xx Xxxxxx
Xxx Mac Xxxxxx
xxxx Xxxxxx
[1] Xx. xxxx. X 226, 24.8.1985, x. 13.
[2] Xx. xxxx. X 395, 30.12.1989, x. 13.
XXXXXXX I
OBSAH
I. Xxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Odběr xxxxxx xxxxxxxx x tepelně xxxxxxxxxx mléka
I. XXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxx
Xxxxxx xxxxxxxxxx xx týkají xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxx výsledků, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx členských xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx vzorků a xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx ustanovení.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxx
2.1.1 Pokud xxxx xxxxxxxxx jinak, xxxx xxxxxxx k xxxxxxxxxxx, ředění nebo xxxx xxxx xxx xxxxxxx voda xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx odpovídající xxxxxxx. Xxx mikrobiologické účely xxxx xxx bez xxxxx, které xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx růst xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.1.2 "Xxxxxxxxxxxx" xxxx "xxxxxxx" (bez xxxxxxx xxxxxxxxx) se xxxxxx "xxxxxxxxxxx ve vodě" xxxx "xxxxxx vodou".
2.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxx není stanoveno xxxxx, xxxxxxx používané xxxxxxxxxx xxxx xxx xxx xxxxxx analytické xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
3.1 Xxxxxx xxxxxxxxx x pomůcek
Příslušný seznam xxxxxxxxx a xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx týká xxxxxxxxx x pomůcek xx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.2 Analytické xxxx
"Xxxxxxxxxxxx xxxxxx" se xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx 0,1 xx.
4. Vyjádření xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, výsledek xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxx průměrem dvou xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (5.1) xxx xxxxxxxxxx metodu. Xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx není xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
5. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: opakovatelnost x reprodukovatelnost
5.1 Kritéria xxxxxxxxxxxxx uvedená pro xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx:
5.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) je xxxxxxx, xxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx dvěma xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testu, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx za xxxxxxxx podmínek (xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx přístroj, xxxxxx laboratoř, xxxxxx xxxxxx xxxxxx).
5.1.2 Reprodukovatelnost (X) je xxxxxxx, xxx kterou leží xxxxxxxxx xxxxxx dvou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx postupem x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx, různé xxxxxxxxxx a/nebo xxxxx xxxx).
5.1.3 Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx kritéria xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx 95 % xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx XXX 5725, xxxxx xxxxxx, 1986. Xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx uznaných pokusů, xxxxxxxxxxx xx spolupráci, xxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx tyto xxxxxx, xxxxxxxxx ve spolupráci, xxxxxx provedeny. X xxx xxxxxxx byly xxxxxxx opakovatelnosti a xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1.4 Kruhové xxxxx a xxxxxxxx xxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx x souladu x xxxxxxxxxxxxx pokyny.
6. Xxxxxx x xxxxxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx postup x získané xxxxxxxx. Xxxx xxxx musí xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx, nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx by xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx identifikaci xxxxxx.
XX. XXXXX XXXXXX XXXXXXXX X XXXXXXX XXXXXXXXXX MLÉKA
1. Předmět x xxxxxx použití
Tento xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx syrového a xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka. Xxxxx postup xxx xxxxx vzorků, xxxxxxxx x xxxxxxxxxx vzorků xx použijí xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx a xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx uvedené x xxxxxx 2, 4.4, 5 x 6 xx xxxxxxx xxx xxxxx vzorků xxxxxxx ošetřeného xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx.
2. Xxxxxx
Xxxxx vzorků xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xxxx. xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx byli xxxx odběrem xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx orgány xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx odběrem xxxxxx v metodách xxxxxx, aby xxxx xxxxx, že xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxx x xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx příslušné orgány xxxx xxxxxxxxx laboratoř xxxxxxxx xx nezbytné, xxxxxxx zaměstnance xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx vzorků xxxx xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx
3.1 Obecné xxxxx
Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx odolného materiálu, xxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx předpokládané xxxxxxx (xxxxxxxxxx, xxxxx vzorků, xxx.). Plunžry a xxxxxxxx xxx míchání xxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx žluklé xxxxx. Xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx dlouhou rukojetí x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx alespoň 50 ml.
Vzorkovnice x xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx x vhodného plastu.
Materiály xxxxxxx při xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx (včetně xxxxx x xxxxx) xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx změnu xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx materiál x xxxxxx xx vzorky xxxx xxx xxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx a xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx.
3.2 Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxx) xxxx splňovat xxxxxxxxxx xxxx 3.1 x xxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxx xx xxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, musí xxx po xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx x pokyny xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx příslušný orgán, xxx nedošlo k xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxxxx xxxxxx vzorků
4.1 Xxxxxx xxxxx
Xxx ohledu xx testy, xxxxx xxxx být xxxxxxxxx, xxxxx musí xxx xxxx odběrem důkladně xxxxxxxxxx xxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxx x pohybu.
Pokud xx x nádrže xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx různé xxxxx, jako první xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxx mikrobiologické xxxxxxxxx.
Xxxxx vzorku xxxx xxxxxxxxx potřebám xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx takový, xxx xxxx xxxx xxxxxx téměř naplněny xxxxxxx x xxx xxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx však hrozilo xxxxxxxxx xxxxxxxxx másla xxxxx xxxxxxxx.
4.2 Ruční xxxxx vzorků
4.2.1 Xxxxx xxxxxx x věder x xxxxx xx xxxxx
X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx ve xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx a xxxx, xxxxxxx xxxx xx xx, xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x aby se xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx, xxxxx xx reprezentativní xxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx x zemědělském podniku
Míchat xxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxx není xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx mechanické xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxx xxxxxx x xxxxx xxx
Xx xxxxxxxx, aby xxxxx bylo xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx se xxxxxx xx xxxxx xxx. Za xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx rozdělení xxxx může xxx xxxxxxxx další ruční xxxx xxxxxxxxxx míchání. Xxxxx xxxxx xxxxxxx, x xxx se xx odebrat vzorek, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.4 Xxxxx xxxxxx x rozdělené xxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxx, x něhož xx má xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx více nádob, x xxxxx nádoby xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, přičemž se xxxxxxxxx množství mléka xxx xxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx nemusí xxx xxxxxxxx testovány, xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx reprezentativních xxxxxxxx v xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxx xx nachází x xxxxxx, xx xxxxx xxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx. Po xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxx) vzorek (xxxxxx) z xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
4.2.5 Odběr xxxxxx z xxxxxxx xxxxx – xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx
4.2.5.1 Před xxxxxxx vzorků xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
X promíchání xxxxxx xxxxxxx xxxxx, skladovacích xxxxxx, xxxxxxxxxxxx kamionů xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.5.2).
Xxxxx promíchání xxxxxx xx xxxx, xx xxxxxx bylo xxxxx x klidu. Xxxx xxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxxxx případů xx vhodný xxx xxxxxxx plánovaného xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx provedených na xxxxxxxx xxxxxxxxxx buď x různých částí xxxxx, xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx mléka z xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxxx xxxx plnotučného mléka) xx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxx obsahu xxxx u obou xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx podmínek xxxxx xxx 0,1 %.
Xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx části xxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx malé množství xxxxx, které ani xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx pro celý xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxx odběru xxxxxx x vypouštěcího xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, aby xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, cisternových xxxxxxx a cisternových xxxxxx je xxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxxxxx míchačkou xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx elektrickým xxxxxxx x xxxxxxxxx x průlezovém otvoru; xxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx,
- v xxxxxxx xxxxxxxxxxxx kamionů xxxx cisternových xxxxxx xxxxxxxxx mléka x xxxxxx přepravní xxxxxx, xxxxx xx napojena xx xxxxx x xxxxxxxx do průlezového xxxxxx,
- filtrovaným, xxxxxxxxx x xxxxxx vzduchem. Xxxxxxx xx minimální xxxx a xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx žluklé xxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx odběr vzorků
Automatické x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx vzorků xxxxxxxx mléka dodaného xxxxxxxxxx xx může xxxxxx podle xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrolám, které xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx odběru xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx objem xxxxxxxxx xxxxx, z xxxxx musí xxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (který xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx),
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxx používání xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx odběr xxxxxx může xxxxxxxxx xxxxxxxxx vnitrostátní orgán xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, ze kterého xxxx být xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx objem xxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx provedeno, nebo xxxxxxxxx preventivní opatření, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.
4.4 Xxxxx xxxxxx xxxxxxx ošetřeného xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx x maloobchodních xxxxxxxx
Xxxxx jde x xxxxxxx ošetřené xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxxxxxx, zapečetěných xxxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx obchodní xxxxxx nebo z xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx, a xx, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx (v xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxxxxxx).
X xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (pasterovaného, xxxxxxxxxx metodou UHT x sterilizovaného) xx xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx vyšetření, která xxxx být xxxxxxxxx, x xx xxxxx xxxxxx poskytnutých xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx podle xxxxxx xxxxxx příslušného xxxxxx.
5. Identifikace vzorku
Vzorek xx xxx být xxxxxxx identifikačním xxxxx, xxxxx xxxxxxxx jeho xxxxxxx identifikaci podle xxxxxx analytických xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx orgánu (xxx bod 2).
6. Xxxxxxxx x skladování xxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx pokyny xxxxxxxx xx xxxxx x podmínek xxxxxxxx x skladování, xxxxx xxxx xxx dodrženy x xxxx xxxx xxxxxxx vzorků xxxxxx xxxxxxxxxx, x to xx xxxxxxx xxxxx xxxxx x testování, xxxxx xx xxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx xxxx:
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx je třeba xxxx xx xx, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zápachu x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx-xx xx xxxxxx použitá xxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxx,
- xxxxxx syrového xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx testování xxxx xxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxx teplotách 0 xX xx 4 xX. Xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxx xx nejkratší x x žádném xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 36 xxxxx. Xxxxxxxxx orgán xxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx skladování 0 xX až 6 xX, xxxx-xx xxxx xxxx odběrem x xxxxxxxxxx delší xxx 24 hodin,
- xxxxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxxx xxx mikrobiologické xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxx teplotách 0 xX až 4 xX. Doba xxxx xxxxxxx x testováním xxxx xxx xx xxxxxxxxx a v xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 24 xxxxx,
- xxxx xxxxxx mléka xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx určené xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx laboratoře x doba xxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxx xxx xx nejkratší.
Speciální xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, která je xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx v xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
XXXXXXX X
XXXXX
X. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx
XX. Xxxxxxxxx xxxxxxxx fosfatázy
III. Stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxx 30 °X
X. Stanovení xxxxxx mikroorganismů xxx 21 °X
XX. Stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií – xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °C
VII. Xxxxxxxxx xxxxxx somatických xxxxx
XXXX. Detekce xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx
XX. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
X. STANOVENÍ XXXX MRZNUTÍ
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, XXX xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (termistorového xxxxxxxxx), x xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx ochlazována xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zařízením x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxx dva xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx typ xxxxxxxxx xxxxxxxxx bod xxxxxxx na plató xxxxxx mrznutí, xxxxxx xxxxx xxx je x obchodních xxxxxx xxxxxxxx xxx, xx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxx x xxxx, xx xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx, xxx i xxxxxx bodu xxxxxxx xxxxx x standardních xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxx referenční xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx časem se xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx testování.
Bod xxxxxxx lze využít xxx xxxxx podílu xxxxxxx xxxx xxxx x mléce xx xxxxxxxxxxx, xx kyselost xxxxxx xxxx xxxxx xxx 0,18 x xxxxxxxx xxxxxx xx 100 ml (xxx xxx 7.4).
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx mléka: xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxx (°X).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx vzorek mléka xx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx vhodnou xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx až x xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxx jako xxx vzorky xxxxx xxxxxxx přesné xxxxxx xxx dva standardní xxxxxxx. Xx těchto xxxxxxxx xxxxx udává xxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx Celsia.
4. Xxxxxxxxx a pomůcky xx skla
Obvyklé xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx řízené xxxxxxxx xxxxx, termistorového xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx odporového xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nebo jiného xxxxxxxxxxx zařízení, xxxxxxxx xx xxxxxx a xxxxxxxx xx vyvolání xxxxxxx, xxxxx x xx xxxxxxxx xx xxxxxx.
4.1.1 Xxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx použít xxx xxxx xxxxxxxx xxxxx.
4.1.1.1 Xxxxxxx xxx
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx obsahující xxxxxxx xxxxxxxx kapalinu, xxxxx xx xxxxx xxx, xxx teplotní xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 0,2 °X. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx ± 0,5 °X xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xx důležité, xxx x xxxxx xxxx udržována xxxxxxxxxx xxxxxxx kapaliny. Celá xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
4.1.1.2 Xxxxxxxxxx xxx
Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx proud xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx ± 0,5 °X xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx chladicí xxxxxxxxx xx 33 % (X/X) vodný xxxxxx 1,2-ethandiolu (ethylenglykolu).
4.1.2 Xxxxxxxxx x příslušný xxxxx
Xxxxxxxxx se xxxxxx xx skleněné sondy x maximálním xxxxxxx 1,80 ± 0,2 xx x x xxxxxxx xxxxxx maximálně 0,31 xx. Xxxxxx xxxxxxxxx termistoru musí xxx xxxxx xxx 2 xxxxxxx a xxxxxxx b (viz xxxxxxxx) musí xxx xxxxxx. Pracovní xxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx při − 0,512 °X xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx teplotu xxxxx xxxxxxxxx x 0,0005 °X. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx může xxx ± 5 %.
Xxxx xx sonda x xxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xx xxxxxx x x xxxx, xxxxx je 44,6 ± 0,1 xx xxx xxxxxx okrajem xxxxxxxx (xxx xxxxxxx xx straně 15). Xx xxxxx dodat xxxxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx:
β xxxxxxxx xxxxxxxx vlastnosti xxxxxxxxxx xxxxx vzorce
− xX / xX × 1 / X = β / T2
kde:
T je xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx
X je odpor x xxxxxx xxx xxxxxxx T,
− xX / xX × 1 / X xxxxxxxx koeficient
β je xxxxxxxxx, která závisí xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx 3000.
4.1.3 Xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
4.1.3.1 Xxxxxxx měření
Použitý xxxxxxxx pracuje na xxxxxxxx xxxxxxxxxxx prvního xxxxx xx křivce xxxx mrznutí. Xxxxx xx xxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxx xx ± 0,002 xX po xxxx xxxxxxx 20 xxxxxx.
4.1.3.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx termistoru xx xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, jejichž xxxxxxxxx xxxxxxxxx je ± 10 % x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx není vyšší xxx 2×10−5°X.
Xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) xxxxx xx nesmí xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx rozsahu x xxxx xxx x 0,3 % xxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxx kalibrace xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxxx dílky xx xxxxxxxxx 0,001 °X.
4.1.3.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx zařízení xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx 0,01 °X x xxxxxxx xx 0 °C xx –1 °C.
Stabilita xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxx xx xxxx následujících xxxxxx téže xxxxxxx xxxxxx xxxxx než 0,001 °C.
Linearita obvodu xxxx xxx xxxxxx, xxx při xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx nevznikla x xxxxxx xxxx xxxxxxx od – 0,400 °C xx – 0,600 °X xxxxx xxxxx než ± 0,001 °X.
4.1.4 Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx testovacího xxxxxx se xxxxxxx xxxxxx drát o xxxxxxx 1 xx 1,5 xx, xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxx,.
Xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xx rozkmit x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx, aby xxxx xxxxxx xxxxx byl xx úrovni xxxxx xxxxx termistoru. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx 1,5 mm xxx xx xxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxx bočně x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx ± 1,5 xx), xxx xxxx zajištěna xxxxxxxx xxxxxxx testovacího xxxxxx během xxxxxxxxx. Xxxxx míchání se xxxxxxxx xxxxx v xxxxxx okamžiku xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx zkumavky.
4.1.5 Zařízení xx vyvolání xxxxxxx
Xxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku xxxxxxx x xxxx xxxxxxx. K xxxx xxxxx xxx použít xxxxxxxx; jedním postupem xx xxxxxxxx rozkmitu xxxxxxx xx xxxxx xx dvě sekundy xxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx na xxxxxx.
4.1.6 Xxxxxxxx na vzorky
Zkumavky xx xxxxxx (xxx xxxxxxx 1) jsou xxxxxxxx x 50,8 ± 0,1 mm xxxxxx; xxxxxx xxxxxx xx 16,0 ± 0,1 mm a xxxxxxx xxxxxx je 13,5 ± 0,1 xx. Tloušťka xxxx xxxxxxxx xx nesmí xxxxx x více xxx 0,1 xx.
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx 29,8 xx (21 xx xxx xxxx xxxxxxxx), xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx.
4.1.7 Xxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxx xxx stabilizován buď xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx, aby xxxxxxxx kolísání nepřekračovala ± 1 % xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxxx zdroj kolísá x ± 6 %.
4.2 Analytické váhy
4.3 Xxxxxxx baňky o xxxxxx 1000 ml, xxxxx A.
4.4 Xxxxxxx, xxxxx odvětraná, nastavitelná xx 130 ± 1 °C
nebo
Elektrická xxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 300 ± 25 °X.
4.5 Xxxxxxxxx
5. Xxxxxxx
5.1 Xxxx destilovaná v xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, převařená x xxxxxxxxx xx 20 ± 2 °X, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx uhličitý.
5.2 Xxxxxxx sodný, xxxxxxx x.x., xxxxx xxxxx, xxxxxx 5 hodin xxx xxxxxxx 300 ± 25 °X x xxxxxxxxxx xxxx xxxx nejméně 24 xxxxx xxx xxxxxxx 130 ± 1 °X v sušárně x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx teplotu x xxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků
Navážit odpovídající xxxxxxxx (xxx xxxxxxx 1) xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5.2) do xxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx (5.1), xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 1000 xx x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx x teplotě 20 ± 2 °C.
Skladovat xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxx asi 5 °C x xxxxx xxxxxxxxxx polyethylenových xxxxxxx o xxxxxxxxxx xxxxxx 250 xx.
Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 20 °X
|
x NaCl/l |
°C |
|
6,859 |
-0,408 |
|
7,818 |
-0,464 |
|
8,149 |
-0,483 |
|
8,314 |
-0,492 |
|
8,480 |
-0,502 |
|
8,646 |
-0,512 |
|
8,811 |
-0,521 |
|
8,977 |
-0,531 |
|
9,143 |
-0,541 |
|
10,155 |
-0,600 |
Před použitím xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx protřepáním x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxx neprotřepávat xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku xx x xxxxx xxxxxx do suché x xxxxx xxxxxxx. Xxxxx nepoužívat pipety.
Nepoužívat xxxxxxx x lahví, xxxxx byly ze xxx xxxxxxx xxxxxxx, x nepoužívat xxxxxxx xxxxxx dvou xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx fungicid (xxxxxxxxx xxxxxx thiomersalu 10 x/x).
6. Kalibrace xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxx nelišila x xxxx než 1 °X xx xxxxxxx, xxx níž xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Kryoskop xxxxx xxx vystaven xxxxxxxxxx světlu, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx 26–27 °X.
Xxxxxxx xx, xx xxxxxxxx funguje xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xx xxx xxxxxx xxxxxxx 12 xxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx míchačky x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxx xxxxxxx xxxx), xxxxxxx xxx xxxxxxx xx xxxxx xxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx vzorků mléka x xxxxxxxxx. Rozdíl xxxx xxxx mrznutí xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxx než – 0,100 °X.
(X xxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxx xxxx dostupných xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx, xx xx xxxxxx xx dané hodnotě xxxx xxxxxxx x xxxxx rozsahu xxxxxxxx xxxxxxxx. V těchto xxxxxxxxx výběr jednoho xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, který xx tento xxx xxxxxxx, jako jednoho x xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxxxxx xxxxxxxxxx postup; xxxxxxx musí tuto xxxxxxx xxxxx).
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx do xxxxx a čisté xxxxxxxx na xxxxxx, xxxx měřit xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx vyrobeny x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx (stejný xxxx xxxx, xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx). Xxxxxxx standardních roztoků xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx mléka.
Podle xxxxxx výrobce provádět xxxxxxxx xxxxxxxxx, dokud xxxxxx x kryoskopu xxxxxx xxxxx bodu xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx standardním xxxxxxxx x střídavě xx provádět takovým xxxxxxxx, dokud xx xxxx xxxxxxxxxxx odečty xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx správné hodnoty xxxx mrznutí xxxxxxx x xxxx, xxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx nastavení. Kryoskop xx tedy xxxxxxxxx x použití a xxxxx xxxxxxx bod xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxx úprava.
7. Xxxxxxxx testovacího vzorku
7.1 Xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxx 0 °X x 5 °C.
7.2 Pokud xx xx nezbytné xxxxxxxx xxxxxxxxx všechna xxxxxxxxx cizí xxxxxxx xxxx tuhý xxxxxx xxx ve xxxxxx xx čisté a xxxxx nádoby x xxxxxx opatrně xxxxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx x xxxx xxx účinný xx xxxxxxxxxxx teploty.
7.3 Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0 x 5 °C) xxxx je možné xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx však xxxxxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x vzorky xxxxx xxxx xxx použití xxxxxxx xxxxxxx.
7.4 Stanovit xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx možno xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx bodu xxxxxxx. Xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 0,18 x xxxxxxxx xxxxxx xx 100 xx xxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx.
7.5 XXX mléko x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx stát xxxxxxx 20 xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x otevřené xxxxxx.
8. Postup
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx, zda xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx jsou v xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxx xx xxxxx termistoru xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx se, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxx. Pokud byl xxxxxxxx zapnut xxxxxxx 12 xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx míchačky x xxxxxxxx rozkmit xxxx xxxxxxx.
8.2 Xxxxxxx kontrola xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxx xxxxx měřit xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxx s xxxxx xxxxxxx – 0,512 °X), dokud xx xxxxxxx získané při xxxx xx sobě xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx nebudou xxxxx x xxxx xxx 0,001 °X. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx liší xx xxxx mrznutí xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxx 0,002 °X, xxxxxxxx xx xxxxx kalibrujte, jak xx xxxxxxx x xxxx 6.
Pokud xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx provádí xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxx xx zohlední xxxxxx xxxxxxx.
8.3 Xxxxxxxxx xxxx mrznutí xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxx opatrným protřepáním x xxxxxxxxxxx otáčením. Xxxxx neprotřepávat standardní xxxxxx tak xxxxxx, xxx xx xx xxxxxxx přimíchal xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 ml xxxxx do xxxxx x čisté xxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx xx, xx jsou xxxxx a xxxxxxxx xxxxx x xxxxx, xxxxx xx to xxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx směrem odspoda xxxxxx jemnou, xxxxxx x chlupy xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx zkumavku xx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pokynů xxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx a mrznutí xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx výrobcem x xxxxxxxxx xx 0,1 °X.
(X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přístrojů xx xxxxx xxxxxxx tuto xxxxxxx x digitálního xxxxxxxxx; x xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx tím, xx xx xxxxxxx, xxx mrznutí začalo, xxxx se xxxxxxx xxxx nitka galvanometru xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx.)
Xxxxx z xxxxxxxxxx xxxxxx mrznutí začne xxxxx xxxx později, xxx je xxxxxxxx xxxxxxxxxxx teplotního xxxxxxx, xxxxxxxxx se xxxxxx x zopakuje xx x xxxxx xxxxxxx xxxxx. Pokud tento xxxxx xxxxxx rovněž xxxxxx xxxx dosažením xxxxxxxxx teploty, alikvótní xxxxx vzorku xx xxxxxxx xx 45 °X x 5 xxxxx xx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx.
Xxxx zchladit xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx stoupne xx xx xxxxxxx, xxxxx zůstane xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, x poté xxxxxx. Xxx mrznutí odpovídá xxxxxxxxx teplotě dosažené xxxxx xxxx xxxx x xxxx xxxxxxx xx xxxxx zaznamenat.
Poznámka:
Doba, xx xxxxxx teplota xxxxxxx xxxxxxxxxx, a xxxxxx interval xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx maximální teploty, xx liší vzorek xx vzorku x xxx vodu x xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxx xxxxxxx xxxx podstatně xxxxxx než xxx xxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, vyjmout xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxx x otřít sondu x míchačku směrem xxxxxxx xxxxxx jemnou, xxxxxx a chlupy xxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx vzorku xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxx xxxx naměřenými xxxx xxxxxxx xxxxx než xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (0,004 °X), xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx obou xxxxxxxxx xxxxxx na 0,004 °X, xxxxxx xx x xxxxxxx se xxx výpočet xxxxxxxxx xxxxxxxx.
8.4 Chlazení sondy
Po xxxxxxx přístroje uložit xxxxxxxx zkumavku xx xxxxxx na xxxxx xxx xxxxxx x xxxxxx provozní xxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
(X některých xxxx kryoskopu xx xxxx možné; x xxxxxxxx případech je xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx je xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, dokud se xxxxxxxxx shodné xxxxx.)
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Xxxxxxx
Xxxxx xx xx provedení xxxxxxx xxxxxxxx kalibrace xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx hodnot xxxxxxxxx xxx bod xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx místa.
Pokud xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx provedených xxxxxxxxxx xx liché xxxxx, xx xxxxx xxxxxx zaokrouhlit xx xxxxxxxxx sudou hodnotu, xxx xxxxxxx tento xxxxxxx:
Xxx xxxxxxx (°C)
|
Hodnoty xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx |
Xxxxxx |
|
|
-0,544 |
-0,545 |
-0,544 |
|
-0,545 |
-0,546 |
-0,546 |
9.2 Xxxxxxxxxxxx
9.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (r): 0,004 °X
9.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X): 0,006 °X
Xxxxxxx 1
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx kryoskopu
4.1 (xxxxxx xxxxxxxx xx vzorky xxxxxxxx ke skleněné xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx)
XX. XXXXXXXXX AKTIVITY XXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx stanovení aktivity xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Definice
2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx fosfatázy xxxxxxxx xx xxxxxxx. Xx vyjádřena xxxxxxxxx xxxxxx v μx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxx, xxxxx je xxxxx xxx 4 xx xxxxxx xx 1 xx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxx), xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx měří xxx 610 xx. Xxxx xx provádí xxxxxxxxx xx xxxxxxx, jehož xxxxx xxxxxxxxx byl xxxxxx.
4. Činidla
4.1 Xxxxxxx xxxxxx boritanu x xxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxx xx vodě 50,0 x hydroxidu xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) [Xx(XX)2.8X2X] x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.1.2 Xxxxxxxxx ve xxxx 22,0 x xxxxxxxx borité (X3XX3) x doplnit xx 1000 xx.
4.1.3 Xxxxxx 500 xx každého xxxxxxx xx 50 °X, xxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx, rychle xxxxxxxx xxx xx 20 °C, x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xX na 10,6 ± 0,1 xxxxxxxx xxxxxxx 4.1.1 xxxx 4.1.2. Xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx roztok xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4.1.4 Xxxx použitím zředit xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxx 6,0 x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XxXX2) xxxx 12,6 x XxXX2.4X2X x 20,0 x xxxxxxxx xxxxxxx (XxXx) x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.3 Tlumivý xxxxxx xxx xxxxxxx vzniklého xxxxxxxxx
Xxxxxx 10 ml xxxxxxxxx roztoku xxx xxxxxxxx zabarvení (4.2) xxxxx xx 100 xx.
4.4 Roztok substrátu
Rozpustit 0,1 g xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, ve 100 xx tlumivého xxxxxxx (4.1.3) xxxx 0,5 x xxxxxxxxxxxx dvojsodného xx 4,5 ml xxxxxxxxx roztoku xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2), xxxxxx dvě xxxxx xxxxxxx BQC (4.6) x xxxxxx xxxx 30 xxxxx při xxxxxxxx teplotě. Xxxxxxx xxxxxxxxx extrahovat 2,5 xx x-xxxxxxxx a xxxxxx xxxx, dokud xx xxxxxxx-1 xxxxxxxx. Xxxxxxx a odstranit xxxxxxx-1. X xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xx možné xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx; xxxx xxxxxxxx vyvolat zabarvení x provést xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxxx, a xx xxxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxxxx xx 100 xx roztoku xxxxxxxx a hydroxidu xxxxxxxxx (4.1.3).
4.5 Sraženina xxxxx-xxx
Xxxxxxxxx xx vodě 3,0 x xxxxxx xxxxxxxxxxx (ZnSO4 · 7X2X) x 0,6 x xxxxxx xxxxxxxxx (XxXX4 · 5X2X) x xxxxxxx xx 100 xx.
4.6 Xxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx XXX)
Xxxxxxxxx x 10 xx 96 % (V/V) xxxxxxxx 40 ± 1 mg 2,6-dibromchinonchlorimidu (XXX) (C6H2Br2ClNO6).
Skladovat x xxxxx láhvi x xxxxxxxxxx. Xxxxxxx roztok, xxxxx xxxxx xxxxx xxxx xx starší xxx jeden xxxxx.
4.7 Xxxxxx síranu měďnatého (XX)
Xxxxxxxxx ve xxxx 0,05 x síranu xxxxxxxxx (XxXX4.5X2X) x xxxxxxx xx 100 xx.
4.8 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx
4.8.1 Xxxxxxx 200 ± 2 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 100 xx, xxxxxx xxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xx 100 xx. Tento xxxxxx může xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
4.8.2 Xxxxxx xxxxx 10 ml xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx 100 xx x xxxxxxxxx. 1 xx obsahuje 200 μx xxxxxx.
5. Přístroje x xxxxxxx ze xxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxxxx pomůcky xx xxxx, xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx vyčištěny. Xxxxxxxxxx xx oplachování xxxxxxx xxxxxxxxxx destilovanou xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx.
x) Xxxxxxx typy plastových xxxxx xxxxx způsobit xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
5.1 Xxxxxxxxxx váhy
5.2 Xxxxx xxxxx nastavitelná xx 37 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xx vlnové xxxxx 610 xx.
5.4 Zkumavky, 16 xxxx 18 × 150 mm, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx po 5 xx x 10 xx.
5.5 Pipety
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx. o xxxxxxx 5 cm.
5.7 Xxxxxxxx filtry x xxxxxxx xxxxxxx 9 xx pro střední xxxxxxxx xxxxxxxx.
5.8 Xxxxxxx xxxxx xxx přípravu xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
6. Postup
Poznámky:
a) Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx slunečního xxxxxx.
x) Xxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx pozitivní xxxxxxxx x xx xxxxx xx xxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx pipetování.
6.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku
6.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxx ihned po xxxxxx xxxxxx. V xxxxxxx případě skladovat xxxxxx v xxxxxxxxxx, xxxxx xx déle xxx xxx dny.
6.2 Xxxxxxxxx vzorek
Pomocí pipety xxxxxx 1 ml xxxxxx xx každé xx xxxx zkumavek (5.4), xxxxx zkumavku xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx slepý pokus.
6.3 Xxxxxxxxx
6.3.1 Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx dvě minuty xx xxxxxx xxxx; xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx prohřála xxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx pokojovou xxxxxxx.
6.3.2 Xx zbytek xxxxxxx xxxxxxxxx slepý x xxxxxxxxx vzorek xxxxxxx způsobem. Xxxxxx 10 xx xxxxxxx xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxxxxx.
6.3.3 Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 60 xxxxx xx xxxxx xxxxx (5.2) x občas (xxxxxxx xxxxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxxx obsah.
6.3.4 Stejně xxxx x xxxx 6.3.1 xxxxxxxx dvě xxxxxx ve xxxxxx xxxx. Xxxxxx zchladit xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.5 Xx xxxxx zkumavky xxxxxx 1 ml xxxxxxxxx xxxxx-xxx (4.5) x xxxxx xxxxxxxxx.
6.3.6 Xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx papír, vylít xxxxx xxx xxxxxxxxx x x případě xxxxxxxx filtrovat xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx; shromáždit 5 xx xx xxxxxxxx.
6.3.7 Xxxxxx 5 xx tlumivého roztoku xxx vyvolání xxxxxxxxx (4.2).
6.3.8 Xxxxxx 0,1 xx roztoku BQC (4,6), xxxxxxxxx x 30 xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx teplotě.
6.3.9 X xxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxx slepým pokusem xxxxxx absorbanci při xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.3.10 Pokud xxxxxxxxxx xxxxxxxx x bodě 6.3.9 xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku obsahujícího 20 μx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.4.4, opakovat xxxxxxxxx xxx vhodném xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx smícháním objemu xxxxxxxxxxx vzorku s xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx xxxx, xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.4 Sestrojení kalibrační xxxxxx
6.4.1 Na xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (4.8.2) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx standardních xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0 (xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx), 2, 5, 10 x 20 μx xxxxxx na xxxxxxxx. Xx xxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx pipety 1 xx vody x 1 xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxx.
6.4.2 Do každé xxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.7), 5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx zředění vzniklého xxxxxxxxx (4.3), 3 xx vody x 0,1 xx roztoku XXX (4.6); xxxxxxxxx.
6.4.3 Xxxxxx vyvíjet zabarvení 30 xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
6.4.4 X xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx absorbanci při xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.4.5 Xx xxxxxxx xxxxxx absorbance (6.4.4) xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx přidaného fenolu (6.4.1) xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx nejmenších xxxxxxx.
7. Vyjádření xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxx x xxxxxx
7.1.1 Xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (6.3.9) vypočítat xxxxxxxx xxxxxx pomocí xxxxxxxx xxxxxx (6.4.5).
7.1.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x μx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx vzorce:
Aktivita xxxxxxxxx = 2,4 × X × D
kde
A xx xxxxxxxx fenolu x μx xxxxxxx xxxxx xxxx 7.1.1;
X xx xxxxxx zředění xxx zředění xxxxxxxxx xxxxx xxxx 6.3.10 (x případě xxxxxxx xxxxxxx D = 1).
2,4 xx xxxxxx xxxxxxx (5/12 z 1 ml xxxxxxxxxxx xxxxxx) – xxx 6.2 ve xxxxxxxxxx x 6.3.2, 6.3.5 x 6.3.6.
7.2 Spolehlivost
7.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) : 2 μx xxxxxx/xx.
7.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) : 3 (xxxxxxxxx) μx xxxxxx/xx.
7.2.3 Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx 6.3.10, limity xxxxxxx x 7.2.1 a 7.2.2 se xxxxxx xxxxxxxx získaných ze xxxxxxxxx vzorku.
III. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx nepřítomnosti xxxxxx peroxidázy x xxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx:
Xxxxx xx xxxxx xxxxx pasterováno, xx 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx objeví xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx reakce xx xxxxxxxxxx:
Xx 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxxx rozkládá xxxxxxx vodíku. Xxxxxxxx xxxxxxxx kyslík xxxxxxx xxxxxxxx parafenylendiamin xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (Xxxxxxxx xxxx). Xxxxxxxxx zabarvení xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx x xxxxx xxxx (50 °X) 2 x 1,4 xxxxxxxxxxxxxx (X6X8X2) a xxxxxxx xx 100 ml. Xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxx x temnu, x xxxxx xxxxx xxxxx xx skleněnou xxxxxx. Během jednoho xx xxxx xxx xx xxxxxxxxxx roztok 1,4 xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx je xxxxxx odstranit.
4.2 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx zředit 9 ml 30 % xxxxxxxx vodíku x xxxxxxx xx 100 xx. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx koncentrované xxxxxxxx xxxxxx xx litr xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxx xxxxx, pokud xx xxxxxxxxx v xxxxxx x xxxxx, x xxxxx xx xxxxxxxxx zátkou, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x organickými xxxxxxx.
5. Xxxxxx
5.1 Xxx 5 xx vzorku mléka xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
5.2 Xxxxxx 5 ml xxxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx (4.1).
5.3 Xxxxxx 2 xxxxx xxxxxxx peroxidu xxxxxx (4.2).
5.4 30 xxxxxx po promíchání xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx 30 sekund po xxxxxxx činidel, xxxxxx xxxx specifická.
IV. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXX 30 °X
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro stanovení xxxxxx mikroorganismů xxxxxxxxx xxxxxxxx kolonií xxx 30 °C. Xxxxxx xx použije xxx xxxxxx xxxxx, pasterované xxxxx, XXX xxxxx xxxx sterilizované xxxxx, xxxxx xxxx 15 xxx preinkubováno při 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx po aerobní xxxxxxxx xx popsaných xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx stanovený xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx médiem x Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx 72 hodin xxx 30 °C. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 ml xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxx xx 0,1 xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx XXX xxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx ze skla
Obvyklé xxxxxxxxxxx vybavení, zejména:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °X.
4.1.4 xX-xxxx se xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °C.
4.1.6 Zvětšovací xxxx, zvětšení 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, zvětšení 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 1 ml xxxxxx mléka nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx x 9 ml xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx principu excentrické xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx ze skla
4.2.1 Xxxxxxxx x vhodnými xxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxxx 10 xx primárního xxxxxx nebo dalších xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Baňky x xxxxxx 150 xx 250 xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx 20 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx xxxx xx sterilního syntetického xxxxxxxxx, x nepoškozeným xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 ml, x xxxxxxxxx otvorem x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx z xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxx xx xxxxxxx průměr xxx 90 xx 100 xx. Xxxxxxx xxxxxxx misek by xxxx xxx xxxxxxx 10 xx. Dno xxxxx xxx žádné xxxxxxxxxx, xxxxx by xxxxxxx počítání xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx pomůcek xx xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx postupů:
a) x xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx teplotě 170–175 °C;
b) v xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 minut xxx xxxxxxx 121 ± 1 °C.
Při xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx na xx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx páry: xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xx xxxxxx být xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx by měly xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx sterilizované x xxxxxxxxxxx by xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx – xxxx xx xxxxxxx mlékem
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx (+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 g |
|
Sušené odstředěné xxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10–15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxx odstředěné xxxxx xx nemělo xxxxxxxxx žádné xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxx srovnávacími xxxxx xx sušeným xxxxxxxxxxx xxxxxx, které průkazně xxxxx inhibiční xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X tomto pořadí xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx kvasnicový xxxxxxx, trypton, xxxxxxx x xxxxxxx sušené xxxxxxxxxx mléko. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx postup. Xxxx xxxxxx agar x xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx, dokud xx xxxx zcela nerozpustí, xxxx xxxxxxxx x xxxx xxx 30 xxxxx.
Xxxxx xx je xxxxxxxx, přefiltrovat xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX pomocí xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xX, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx byla xxxx xxxxxxx 6,9 ± 0,1 při 25 °X.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 ml xx xxxxx xxxx po 12 xx 15 xx do xxxxxxxx (4.2.2). Xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °C.
Zkontrolovat xX xxxxxxxxxxxx média.
Pokud xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x temnu xxx xxxxxxx xxxx 1 a 5 °X, avšak xx xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx médium (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx pokyny xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx před xxxxxxxxxxxx, xxxxx není xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xX xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X xxxxxxx xxxxx xxxx 5.1, poté xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx médium xxxxx xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Xxxxxx xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 ml |
Příprava:
Rozpustit xxxxxx xx vodě, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xX-xxxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxx xX xxxxxxxx (nejméně 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
6.2 Rozdělení, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx ředidla
Rozdělit xxxxxxx (6.1) do xxxxxxxx (4.2.1) tak, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx ředidla. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 minut sterilizovat x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxxx.
Xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x temnu xxx teplotě xxxx 1 x 5 °X, avšak xx xxxx xxx 1 xxxxx po xxxx xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) xx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx prášku. Xxxxxxx xxxxxx výrobce. Xxxxxxx xX metodou xxxxx xxxx 6.1, poté xxxxxxxx, sterilizovat x xxxxxxxxx xxxxxxx podle xxxx 6.2.
7. Postup
7.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx rozpustit xxxxxxxx xxxxxxxx kultivačního xxxxx a xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1.5) na 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx vzorku mléka
Vzorek xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xx 25 xxxxxxxx otočeními xxxxxx xx xxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx rozptýlit. Xxxx xxxx mícháním a xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx neměla xxxxxxxxx xxx minuty.
7.3 Příprava xxxxxxxxxx xxxxxx (10-1) (xxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx pasterovaného mléka xx 9 ml xxxxxxx (6.1), xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx s xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx přibližně xxxxxx jako xxxxxxx xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx promíchávat xxxx xxxxxxxx xxxxxx míchačkou (4.1.9).
Xxxxx xx tak xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx desetinných xxxxxx (syrové a xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) přenést 1 xx primárního xxxxxx (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx xxxxxx x xxxx 7.3.
Xxxxx xx xxx xxxxxx 10−2.
S xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
7.5.1 Xxxxxx xxxxx: Sterilní xxxxxxx (4.2.3) přenést xx xxxxx (4.2.4) 1 ml xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxx každé xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx misku.
7.5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) přenést xx misky (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx desetinného xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx nejméně dvě xxxxxx. Xxx každé xxxxxx (8.1.1) připravit xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.5.3 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx (vyšetřované xx 15 xxxxx xxxxxxxx xxx 30 °X – xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx A xxxxxxxx VII bod 5):
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx do xxxxx (4.2.4) 1 ml xxxxxx xxxxx (7.2). Xxxxxxxxx dvě xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx naočkované xxxxx xxxxx asi 15 xx 18 ml xxxxxxxxxxxx média (7.1).
Xxxxx xxxxxxxxx rotací Petriho xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx, xxxxx druhu xxxxx, testovacího xxxxxx xxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxx nesmí xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Petriho xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx na xxxx více xxx xxxx misek. Xxxxxxx xxxxx xx nesmějí xxxxxxxx dotýkat, xxx xxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx a xxxxxx xxxxx inkubátoru.
Inkubovat 72 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 300 kolonií.
Misky xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx počítání xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) a/nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx xxxxx xxxx xx to, xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx sraženin v xxxxxxx s drobnými xxxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx pochybností xxxxxxx xxxxxxx průzkum xxxxxx xxxxxxxxxxxx skla x xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x cílem odlišit xxxxxxx xx cizích xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Pokud xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx méně než xxxxxxxx xxxxx, spočítat xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx misky x xxxxxxxxx odpovídající počet xxx xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx čtvrtinu xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Xxxxxx x xxxxxxxxxxx mléko
8.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx misek obsahujících 10 xx 300 xxxxxxx (viz 8.1.3 x 8.1.4).
8.1.2 Vypočítat xxxxx mikroorganismů xx 1 xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxx tohoto vzorce:
∑C / (x1 + 0,1x2) x
xxx:
∑X ΣX xx celkový xxxxx xxxxxxx podle xxxx 8.1.1.
(x1 + 0,1 x2)x xx xxxxx xxxxxxxxxxxx vzorku, kde:
n1 xx počet xxxxx xxx prvním xxxxxxx
x2 xx počet xxxxx xxx druhém xxxxxx
x xx xxxxxx zředění, xx xxxxxxx kterého xxxx získány první xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx dvě xxxxxx xxxxxxx. Když xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx vlevo xxxx sudá.
Příklad (xxxxxxxxxxx xxxxx):
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 x 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; = 278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2
= 6290,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.1.3 Xxxxx jsou xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 10, xxxxx, xx xxxxx mikroorganismů xx xxxxxxxx xx "xxxxx xxx 10 x x", přičemž "d" xx převrácená xxxxxxx xxxxxxxxxx faktoru xxxxxxx.
8.1.4 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx vyšší než 300 x xxxxxxxx xx možné, xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxx převrácenou xxxxxxxx xxxxxxx zředění. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xx".
8.2 XXX xxxxx x sterilizované xxxxx
Xxxxx xxxxx xxx 10 xxxxxxx xx 0,1 xx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/EHS.
9. Spolehlivost
Výsledky xxxxxxxxxxx uznaných kruhových xxxxx xxxxx xxxxxx x dispozici.
V. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXX 21 °X
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxx mikroorganismů xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 21 °X x xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxx 6 xX x xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx mléka psychotropními xxxxxxxxxxxxxx, které se xxx xxxxxx se x mléce xxx 6 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx po xxxxxxx xxxxxxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx pasterované xxxxx xxx dní xxx 6 °C. Xxxxxxx stanovený xxxxx xxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxx médiem v Xxxxxxx miskách x xxxxxx xxxxxxxxx 25 xxxxx xxx 21 °X. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na 1 xx pasterovaného xxxxx.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx laboratorní xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Přístroje
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, nastavitelná xx 170 až 175 °C.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °C.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx:
x) 6 ± 0,2 °X
x) 21 ± 1 °X xx všech bodech xxxxxx.
4.1.4 pH-metr se xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx sklo, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Xxxxxxxx xxxxxxx rozmíchat 1 xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx ředění x 9 ml xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx principu xxxxxxxxxxx xxxxxx obsahu xxxxxxxx.
4.2 Pomůcky ze xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx o objemu 150 až 250 xx xxxx xxxxxxxx x objemu 20 xx xxx skladování xxxxxxxxxxxx média.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx xxxx ze sterilního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, s xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx, x výpustním xxxxxxx o xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Petriho misky x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx nebo ze xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, xxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx 90 xx 100 x. Xxxxxxx hloubka xxxxx xx měla xxx xxxxxxx 10 xx. Xxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx by bránily xxxxxxxx kolonií.
4.2.5 Sterilizace xxxxxxx xx xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxxx jedním z xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx hodinu xxx xxxxxxx 170–175 °X;
x) v xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx teplotě 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx autoklávu xx xxxxx dbát xx to, xxx xxxx zajištěno xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx xx materiál xxxxxxxxxxx x nádobách, xxxx xxxxxx xx neměly xxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx nebo víčka xx xxxx být xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx se xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx páry.
Pipety xxxx xxx sterilizovány x horkovzdušné sušárně (4.1.1).
5. Kultivační médium – agar xx xxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx(+) xxxx dextróza |
1,0 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10-15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx agaru |
|
Voda |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx mléko xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx ověří srovnávacími xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, které xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx neobsahuje.
Příprava:
V tomto xxxxxx suspendovat x xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx odstředěné xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Poté xxxxxx xxxx x xxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx agar zcela xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx x xxxx xxx 30 xxxxx.
Xxxxx je xx xxxxxxxx, přefiltrovat xxxx papír.
Zkontrolovat xX xxxxxx pH-metru (4.1.4); xxxxx to xx xxxxxxxx, xxxxxxx pH, xxxxxxxx (nejméně 0,1 xxx/x) hydroxidu xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx hodnota 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.2 Xxxxxxxxx, sterilizace a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Rozdělit xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 xx xx xxxxx nebo xx 12 až 15 xx do xxxxxxxx (4.2.2). Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx (4.1.2) při 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx pH kultivačního xxxxx.
Xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx nepoužije ihned, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx teplotě xxxx 1 x 5 °X, avšak xx xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx přípravě.
5.3 Komerční xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Dodržet xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxx odstředěné mléko xxxx xxxxxxxxxxxx, pokud xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xX xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X xxxxxxxx xxxxx xxxx 5.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. 5.2.
6. Ředidla
6.1 Xxxxxx xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 ml |
Příprava:
Rozpustit xxxxxx xx xxxx, xxxxx xx xx xxxxx, zahřívat.
Zkontrolovat pH xX-xxxxxx (4.1.4); xxxxx xx je nezbytné xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 mol/l) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx byla xxxx hodnota 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx ředidlo (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx zkumavka xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx ředidla. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 minut xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X. Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, skladuje se x xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °C, xxxxx ne déle xxx 1 měsíc xx xxxx přípravě.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) se může xxxxxxxxxxx x komerčních xxxxxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx bodu 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Rozpuštění xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx zahájením xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx lázni (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx
7.2.1 Inkubovat x xxxxxxxxxx [4.1.3 x)] xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx xx xxxx xxxxx, reprezentativní vzorek x objemu xxxxxxx 100 xx po xxxx 120 ± 2 hodin xxx 6 ± 0,5 °X.
7.2.2 Xx inkubaci xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xx 25 rychlými xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxx nechat rozptýlit. Xxxx xxxx xxxxxxxx x odběrem testovacího xxxxxx by xxxxxx xxxxxxxxx xxx minuty.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (10−1)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) syrového xxxx pasterovaného xxxxx xx 9 ml xxxxxxx (6.1), xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx s xxxxxxxx. Teplota xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxx jako teplota xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx promíchávat toto xxxxxxxx ředění míchačkou (4.1.9).
Xxxxx xx tak xxxxxxxx ředění 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) podle xxxxxx x xxxx 7.3.
Xxxxx se xxx xxxxxx 10−2.
X xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx xxxxxx xxxxxxx tak xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxx každé ředění (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx nalít xxx 15 xx 18 ml xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Xxxxx promíchat xxxxxx Petriho xxxxx, xxx xx inkubaci xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kolonií.
Doba xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx vodorovném, xxxxxxxx x xxxxxx povrchu, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx inkubátoru (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxx než xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, ani být x kontaktu se xxxxxxx x xxxxxx xxxxx inkubátoru.
Inkubovat 25 xxxxx xxx 21 ± 1 °C.
7.8 Xxxxxxxx kolonií
Počítat kolonie x Petriho miskách xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 300 xxxxxxx.
Xxxxx vyšetřit xxx xxxxxxxx světle. Xxx xxxxxxxxx počítání xxx použít zvětšovací xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx nutné dbát xx xx, xxx xxxxxxx k xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx průzkum xxxxxx xxxxxxxxxxxx skla x xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx od xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx považují xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx misky, xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx misky x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx počet xxx celou xxxxx. Xxxxx xxxxxxx tvořící xxxxxx pokrývají xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, misku xxxxxxx.
8. Xxxxxxx x vyjádření xxxxxxxx
8.1 Xxxxxx výsledky xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.2 Xxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxxxx na 1 xx syrového xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxx xxxxxx xxxxxx:
∑X / (x1 + 0,1n2) x
xxx:
ΣX je xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 8.1,
(n1 + 0,1 n2)d xx xxxxx naočkovaného xxxxxx, xxx:
x1 xx xxxxx xxxxx při xxxxxx xxxxxxx
x2 je počet xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx
x xx xxxxxx xxxxxxx, na základě xxxxxxx xxxx získány xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx na xxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx zaokrouhlovaná číslice xxx, zaokrouhlit xxx, xxx sousední xxxxxxx xxxxx byla xxxx.
Xxxxxxx:
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 a 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; =278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2=
=629 / 0,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.3 Pokud xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx než 10, xxxxx, xx počet xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx "xxxxx xxx 10 × d", xxxxxxx "d" je xxxxxxxxxx hodnota xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
8.4 Xxxxx xxxx všechny xxxxx xxxxx než 300 x počítání xx xxxxx, xxxxxxx odhad x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx faktoru xxxxxxx. Výsledek xxxxxxxx xxxx "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xx".
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x dispozici.
VI. XXXXXXXXX XXXXXX KOLIFORMNÍCH XXXXXXXX – POČÍTÁNÍ XXXXXXX XXX 30 °X
1. Předmět x xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup xxx stanovení koliformních xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx technikou xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxx bakteriemi" xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx při 30 °X vytvářejí xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx jsou xx xxxxxxxxx podmínek xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx objem xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx a 24 xxxxx xxxxxx inkubovat xxx 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx kolonie x, pokud to xx xxxxx, potvrdit xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx schopnosti xxxxxxxxx laktózu. Poté xxxxxxxxx xxxxx koliformních xxxxxxxx na 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
4. Xxxxxxxxx x pomůcky xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 až 175 °X.
4.1.2 Autokláv, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °X.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Vodní xxxxx, nastavitelná xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Očkovací xxxxx xx slitiny platina-iridium xxxx xxxx-xxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x objemem 20 xx, xxx mohly xxxxxxxxx konfirmační xxxxxxxxxx xxxxxx (5.2) x Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 xx xxx xxxxxxxxxx sušeného xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.1).
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 – 10 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Petriho misky x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx materiálu, xxx misek má xxxxxxx xxxxxx xxx 90 xx 100 x. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx by xxxx xxx nejméně 10 xx. Xxx xxxxx xxx xxxxx nerovnosti, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Sterilizace xxxxxxx xx skla:
Pomůcky xx xxxx xx xxxxxxxxxxx jedním x xxxxxx postupů:
a) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx teplotě 170 – 175 °X;
x) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °C.
Při xxxxxxx autoklávu xx xxxxx xxxx xx xx, xxx bylo xxxxxxxxx dostatečné xxxxxxxxxx xxxx: pokud se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xx xxxxxx být xxxxxxx uzavřeny, xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx sterilizované x xxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx (XXXX xxxx). Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
7 g |
|
Kvasnicový xxxxxxx |
3 x |
|
Xxxxxxx (C12H22O11.H2O) |
10 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (NaCl) |
5 g |
|
Žlučové xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxxxx xxxxxx |
0,03 x |
|
Xxxxxxxxxx violeť |
0,002 g |
|
Agar |
10 xx 15 g xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxx a xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx pH-metru (4.1.4); pokud xx xx xxxxx, upravit xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) hydroxidu xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, aby po xxxx xxxx jeho xxxxxxx 7,4 ± 0,1 při 25 °X.
Xxxxx xxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx po množstvích 100 xx 150 xx xx sterilních xxxxx (4.2.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °C.
V xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx sterilitu xxxxxxxxxxxx média (6.4).
Xxxxxx xxxxxxxxxx médium xx xxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.2 Tekutý xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
10 g |
|
Laktóza (X12X22X11.X2X) |
10 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx |
20 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxx |
0,0133 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx a xxxxx xx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx to je xxxxxxxx, xxxxxxx xX xxxxxxxx (nejméně 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx chlorovodíkové, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx jeho xxxxxxx 7,2 ± 0,1 xxx 25 °C.
Rozdělit xxxxxx po 10 xx xx xxxxxxxx (4.2.1) xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxx trubičky xxxxxxx xx sterilizaci xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx média.
Pokud xx xxxxxxxxxx médium nepoužije xxxxx, skladuje se x temnu při xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 měsíc xx xxxx přípravě.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx médium (5.1) xx může připravit x komerčního xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Upravit xX, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx kultivační xxxxxx xxxxx xxxx 5.1 x 5.2.
6. Xxxxxx
6.1 Kultivační xxxxxx
Xxxxxx xxxxxx (XXXX agar) xxxxxxx x bodě 5.1.
6.2 Xxxxxxxx vzorku xxxxx
Xxxxxx mléka xxxxx xxxxxxxxx, xxx byly xxxxxxxxxxxxxx co xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x to 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xx nutné zabránit xxxxxx pěny xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx mezi xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx by xxxxxx xxxxxxxxx tři minuty.
6.3 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) 1 xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxx misek (4.2.4) x xxx xxxxxxxxx 3 ml xxxxxx mléka (6.2).
6.4 Xxxxxxxx kultivačního xxxxx
Xx xxxxx naočkované xxxxx xxxxx xxx 12 xx XXXX xxxxx (6.1)
Xxxxx po nalití xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, aby xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx vzorku xxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 minut.
Za xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x 12 xx xxxxx XXXX xxxxx, xxxxx xxx použit xxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx vodorovném, xxxxxxxx x čistém xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxx ztuhnutí xxxxx xxxxxxx 4 xx XXXX agaru (6.1) na xxxxxx xxxxxxxxxxxx média.
Nechat xxxxxxxx.
6.5 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx inkubátoru (4.1.3). Xxxxx inkubovat xxxxxxxx xxxx nahoru. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxx šest xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx být x kontaktu se xxxxxxx a xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 24 ± 2 xxxxxx xxx 30 ± 1 °X.
6.6 Xxxxxxxx xxxxxxx
6.6.1 Xxxxxxx xxxxxxx x Xxxxxxx miskách xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 150 kolonií. Xxxxxxx xxxxx červené xxxxxxx x průměru xxxxxxx 0,5 xx, x xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.6.2 Xxxxx xxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxx necharakteristický xxxx (xxxx. jinou xxxxx, xxxxxxxx nebo xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (6.7).
6.7 Xxxxxxxxxxx xxxx
Xxxxx xxxxx x xxxx 6.6.2 xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxx (např. 3 xx 5) xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx kolonií tím, xx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx (4.1.6), xxxxxxxx zkumavky obsahující xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.2). Xxxxxxxxx xxxxxxxx 24 ± 2 hodin xxx 30 ± 1 °C.
Za xxxxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií xx xxxxxxxx takové kolonie, xxxxx x Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx.
7. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx obsahujících maximálně 150 xxxxxxx.
7.2 Pokud xx provede xxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx počet xxxxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií xx základě procentuálního xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx podle xxxxxx vzorce:
ΣC / x
xxx:
ΣX je xxxxxxx xxxxx kolonií koliformních xxxxxxxx (7.1 v xxxxxxxxxxx xx 7.2), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku xxxxx (6.3).
x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorku (6.3) x xxxxxxxxxxx (3 xx).
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx číslice, xxxxx xxxxxxxx xxxx než 100 kolonií. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, zaokrouhlit xxx, xxx sousední xxxxxxx xxxxx byla xxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxxx počty xxxxx xxx 150 xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx "xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx na 1 xx".
8. Spolehlivost
Výsledky xxxxxxxxxxx uznaných kruhových xxxxx ještě xxxxxx x dispozici.
VII. XXXXXXXXX XXXXXX SOMATICKÝCH XXXXX
Xxxx xxxxxxxx popisuje xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx somatických xxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Xxxxxxxxxxxxx metoda
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx postup xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup xxx xxxxxxxxx počtu somatických xxxxx x syrovém xxxxx.
Xxxxx postup xxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxx xxxxx ve xxxxxx xxxxx za xxxxxx kalibrace x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx (viz B.1).
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx postup xx somatickými xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx jádra xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx methylenovou xxxxx
3. Xxxxxxx
Xxxxxx 0,01 xx xxxxx xx 1 xx2 xxxxxxx podložního xxxxxxx. Tenká xxxxxx xx xxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx somatických xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx faktorem, x xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xx 1 xxxxxxxx.
4. Činidla
Musí xx xxxxxx chemikálie čistoty x.x..
Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxx xxxx |
0,6 x |
|
Xxxxxxx – 99 % |
54 xx |
|
1,1,1-xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxx |
40 ml |
|
Ledová kyselina xxxxxx |
6 xx |
Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx je xxxxxxxx. Příprava x xxxxxxxxx se xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx x baňce xxxxxxx x 1,1,1-trichlorethan xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xx vodní xxxxx xx 60 xx 70 °X. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx promíchat, 12 xx 24 hodin xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 4 °X x xxxxxx ledovou xxxxxxxx octovou. Xxxxxxxxxxxx xxxx filtr x xxxxxxxxx xxxxxxxxx pórů 10 až 12 xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx uzavřené láhvi. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx použitím xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx.
5. Xxxxxxxxx x pomůcky ze xxxx
5.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 500 × xx 1000 ×
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dávkování xx 0,01 xx x přesností nejméně ± 2 %.
5.3 Xxxxxxxx sklíčko x xxxxxxx 20 xx × 5 xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 20 × 5 xx pro xxxxxx xxxxxx.
5.4 Xxxxxxxxxxxx xxxxx deska (30 °X až 50 °X) xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5 Xxxxxxxxxx (xxx) pro xxxxxx xxxxx vrstvy.
5.6 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 30 xx 40 °X xxx ohřívání xxxxxx xxxxx.
5.7 Podložní xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx po 0,01 xx.
6. Xxxxxx
6.1 Vzorek xxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxx hodin xx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx nesmí teplota xxxxxx xxxxxxxxx 6 °X. Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx.
6.2 Xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxx xx vodní xxxxx (5.6) xx 30 až 40 °X. Xxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx, při xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (5.2), xxxxxxxxx 20 °X.
6.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx sklíček
Vyčistit xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx prach, xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxxxx v xxxxxxx, xxx jsou xxxxxxxx před xxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx (5.2) xxxxxxx 0,01 xx xxxxx ze xxxxxx xxxxxxxxxxxx, jak xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx očistit xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx styku x xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) a xxxxxxx obkreslit xxxxx xxxxxxxxx (20 xx × 5 mm). Xxxx ji co xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Nechat xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx horizontální xxxxxxxxx xxxxx (5.4) xx xx xxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxx vzorku xxxxx xxxxxxxxx x vyšetřit xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx.
6.5 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx na 10 xxxxx do barvícího xxxxxxx (4). Xxxxx x, pokud je xx xxxxxxxx, vysoušení xxxxxxxx ventilátorem (5.5). Xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx vody, xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx x xxxxxxx xxx, xxx xxx chráněn xxxx xxxxxxx.
6.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (500 × xx 1000 ×) xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx (5.7).
7. Xxxxxxxx x xxxxxxx
7.1 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxxxxxx (5.1). Xxxxx xxxxxxxx buněk xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx, x xx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x x xxxxx je v xxxxxxxxxxxxxx xxxx viditelná xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxx nebo xxxx xx střední třetině xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx ty pásy xxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx. Pečlivá xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxxxx výsledků xxxx xxx xxxxxxxxxxxx nejméně xxxxxx xx měsíc xxxxxxxxxx různých částí xxxxx xxxxxx. Počítání xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx mikroskopických polí xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx vrstvy xxxx xxxxxxxxxx rovnoměrně.
7.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx k xxxx, xx počítání xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx než xxxxxxxx koeficient xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx mléka x xxxxxxx 400000 xx 600000 buněk/ml xx neměl xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxx rozdělení xxxxxxx 400, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
X = X = x2,
xxx:
X xx xxxxxxx xxxxxxx
X xx xxxxxxx
x xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx koeficient xx:
XX = x × 100 % / M xxxx XX = 100 % / x&xxxx;xxxx XX = 100 % / XXX
X (xxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxx), xxxxx xxxx spočítány (xxxxxxxxx 400 pro CV = 5 %).
7.3 Xxxxxxx pracovního xxxxxxx
Xxx xxxxxxx 0,01 xx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx 7.3.1 xxxx 7.3.2.
7.3.1 Xxxxxxxx pásů xx tenké xxxxxx
Xxxxx xxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx, je 5 xx. Xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx pole, xxx xx stanoven xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7).
Xxxxxxxx faktor = 20 × 100 / x × x
xxx:
x xx xxxxxx mikroskopického xxxx x xx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx stupnicí (5.7)
x xxxxxxx počet spočítaných xxxx.
7.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx pomocí mřížky
Pracovní xxxxxx
xxx:
x xx průměr xxxxxxxxxxxxxxx xxxx v xx, xxxxxxxxx podložním xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7)
s xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx polí.
7.4 Xxxxxxx xxxxxx xxxxx
X xxxxx xxxxxx počet xxxxx xx ml xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx buněk (7.1 a 7.2) xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (7.3).
7.5 Přesnost
Variační koeficient (xxx 7.2) xxxxx xxxxxxxxx 5 %.
Výsledky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxx postup popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx, který xx xxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxx X.1) používat pro xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x syrovém xxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxx xxxxxxxx konzervace.
2. Definice
Pro xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx rozumějí xxxxxxx, které xxxx x xxxxxxxx barvení xxxxxxx DNA minimální xxxxxxxxx fluorescence.
3. Princip
Část xxxxxx (xxxxxxxxx 0,2 xx) xx důkladně xxxxxxxx x tlumivým xxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxx roztokem. Část xxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xx xxxxx tenké vrstvy xx xxxxxxx xxxx, xxxxx slouží xxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx se xxxxxxxx x zaznamenává. Xxxxx xxxxxxxxxxx buněk xx xxxxxxxx x tisících xx xxxxxxxx.
4. Xxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx jinak, xxxx xx xxxxxx xxxxxxx čistoty x.x.. Xxxxxxx voda je xxxxxxxxxxx xxxx deionizovaná, xxxx xx xx xxxx odpovídající xxxxxxx.
4.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx |
51,00 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxx |
13,75 x |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx(xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % objemové |
10 ml |
|
pH 5,7 až 5,9. Xxxxxxx xxxxx xx 10000 ml. |
Příprava:
Smíchat xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx uzavřené xxxxxx xx nemělo překročit xxxx xxx.
4.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxx)
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
1,0 x |
Xxxxxxx xxxxx na 1000 xx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx vodě. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx před xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx měsíce.
4.3 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx xxxxxx)
Xxxxxxx 20 ml xxxxxxxxx xxxxxxx (4.2) x tlumivým xxxxxxxx (4.1) xxx, xxx xx xxxxxx xxxxx 1000 ml. Pracovní xxxxxx by xxxxx xxx používán více xxx sedm dní.
4.4 Xxxxxxx roztok
Složení
|
Tlumivý xxxxxx (4.1) |
10 ml |
|
Polyethylenglykol-mono-p(1,1,3,3-tetramethylbutyl)-fenylether (například Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 xx |
|
Xxxxxxx x 25 % xxxxxxxxxx |
25 ml |
Doplnit xxxxx xx 10000 xx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxxxxx složky. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx dní.
5. Přístroje x pomůcky ze xxxx
5.1 Počítací xxxxxxxx xxxxxxxxx xx principu xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx xxxx xxx před xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx xx xxxxxxx vztah xxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx mají xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxx provádí. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx provede xxxxx xxxxxx výrobce xx xxxxxxx vzorků, xxxxxxx xxxxx buněk xxx stanoven mikroskopickou xxxxxxx (A).
5.2 Vodní xxxxx, x cirkulací xxxx, xxxxxxxxxxxx xx 40 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxx, s xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx 15 xx.
6. Xxxxxx xxxxx
6.1 Vzorek xxxx xxx skladován xxx nízké teplotě xx zkumavce (5.3). Xxxxx xxxxxx nebyl xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx může xxxxxxx xx xx uplynutí 24 xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx byl xxxxxx nízký. Xxxxxxxxxx xxxxxxx nesmí překročit 6 °X.
6.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx musí xxxxxxx do 24 xxxxx. Konzervace musí xxx provedena xx xxxxxxxx xx odběru xxxxxx.
6.2.1 Xxxxxxxx konzervace xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxx nesmí být xxxxx xxx 0,6 x na 100 xx. Takto konzervovaný xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx teplotě 6 xx 12 °X;
- xxxxxxxxxxx draselný:
konečná xxxxxxxxxxx dvojchromanu xxxxxxxxxx xx xxxxxx nesmí xxx vyšší xxx 0,2 x xx 100 xx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 72 xxxxx při xxxxxxx 6 xx 12 °C;
- xxxx xxxxx:
xxxxxx může xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx 0,024 g/100 xx, xxxxx xx vzorek xxxxxxxx xx xxxxxxx 6 až 12 °X xxxxx po xxxx xxxxxx a xxxxxxxx do 48 xxxxx xx xxxx xxxxxx;
- xxxxxxxx:
xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx bronopolem x xxxxxxx xxxxxxxxxxx 0,05 x/100 ml, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx 6 xx 12 °X xxxxx xx xxxx xxxxxx a xxxxxxxx xx 72 xxxxx xx xxxx xxxxxx.
6.2.2 Xxxxxx, který xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, může xxx ještě xxxxxxxxxxx xxxxxxx až 48 xxxxx dvojchromanem xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx sodným, xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx podmínky pro xxxxxxxxxx odpadních xxx.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxx ošetření xxxxxx
Xxxxx, které se xx vyšetřit, se xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx xxx 2-6 °X. Xxxxxxxx vzorků x den xxxxxxxx xx xxx předběžného xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, neboť xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx nízké. Xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, vzorek xx měl xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx nejméně xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxx 6.2.1).
7.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx ošetřený vzorek (xxx 7.1) xxxx xxxxxxxxxx vzorek nejméně xxxxx xxx starý xxxxxx xx xxxxx xxxxx (5.2) xx xxx 40 °X. Xxxx xxxxxxxxx vzorek xxx pokojové xxxxxxx xx do xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.1) xx 15 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 7.2). Bezprostředně před xxxxxxxxx vzorky důkladně xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx co nejlepšího xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx somatických xxxxx.
Xxxxx xxxxxx a xxxxxxxx vzorku jsou xxxxxxxxxxx provedeny x xxxxxxxx.
8. Spolehlivost
Výsledky xxxxxxxxxxxxxxx (x) x reprodukovatelnosti (X) xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nejsou x xxxxxxxxx.
Xxxxx, které xxxx x dispozici xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxx odhady:
(1) počet xxxxx xxxx 400 000 až 500&xxxx;000 xxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx:
xx = 20000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx variačnímu xxxxxxxxxxx 5–4 %)
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx:
xX = 40000 buněk/ml
(odpovídá variačnímu xxxxxxxxxxx 10–8 %)
9. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx správnosti xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xx stanoví počítáním xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
XXXX. XXXXXXX ANTIBIOTIK X SULFONAMIDŮ
PŘEDMĚT A XXXXXX POUŽITÍ
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx v xxxxxxx mléce a x xxxxxxx ošetřeném xxxxx.
Xxxxx referenční postup xxxxxxxx:
X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxx je xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorky mléka, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx je jedním x xxxxxxxx postupů, xxxxx jsou xxxxxxxx xx xxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx, XXXX 10149, xx xx xxxxxxxxxxx organismu. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx jako reprezentativní xxx xxxxxxxx xxxxx.
X. Xxxxxx xxx konfirmaci x identifikaci penicilinu
Tento xxxxxx xx musí xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx postupu, xxx identifikaci penicilinu x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx.
X. Kvalitativní xxxxxx
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx antibiotik x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx mléce a x tepelně xxxxxxxxx xxxxx, jejichž koncentrace xxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx v xxxx tabulce:
Detektovatelné xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx [1]
|
Xxxxxxxxx xxxxx |
||
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxx |
|
|
Xxxxxxxxxxxxxxx |
0,002 |
0,006 |
|
Xxxxxxxxx |
0,002 |
0,005 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,015 |
0,035 |
|
Xxxxxxxx |
0,006 |
0,011 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,10 |
0,40 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,20 |
0,45 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxx |
0,15 |
0,50 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
7 |
15 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx |
4 |
13 |
|
Xxxxxxxx |
1 |
22 |
|
Xxxxxxxxx |
9 |
28 |
|
Xxxxxxxxxx |
0,06 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxx |
1 |
2,25 |
|
Xxxxxxxxx |
0,01 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,01 |
0,1 |
|
Xxxxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxxx) |
0,5 |
1 |
|
Xxxxxxxxxx extrakt |
2 g |
|
|
Pepton |
5 x |
|
|
Xxxxxx xxxxxxx |
1 x |
|
|
Xxxxxxx xxxxx |
5 x |
|
|
Xxxx |
10–15 x |
|
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx složky xx xxxx. Za občasného xxxxxxx xxxxx do xxxx. Xxxxxxx xX xxx, aby xx xxxxxxxxxxx byla xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxxxx xxxx po 100 xx do lahviček x xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X.
5.1.2 Agarové xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxx xxxxx |
2 x |
|
Xxxx |
15 x |
|
Xxxx |
1000 ml |
|
Roztok xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx (viz 5.1.3) |
10 ml |
Příprava:
Rozpustit xxxxxx xx xxxx, x xxxxxxxx trimethoprimu xxxx xxxxxxxxxxxx. Za občasného xxxxxxx xxxxx do xxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx tetroxoprim x xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X. Upravit xX, aby xx xxxxxxxxxxx byla jeho xxxxxxx 7,0 ± 0,1 při 25 °X.
5.1.3 Roztok xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxxxx |
5 xx |
|
xxxx Xxxxxxxxxxx |
30 mg |
|
96 % Xxxxxxx |
5 xx/30 xx |
|
Xxxxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx (5 nebo 30 xx) a doplnit xxxxx.
5.1.4 Živný xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
0,75 xx |
|
Xxxxxxx |
5,0 xx |
|
Xxxxxxxxx xxxxx |
8,0 mg |
|
Bromkresolová xxxxxx |
0,025 x |
|
Xxxx |
50 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Živný roztok xx dostupný x xxxxxxxxx.
5.2 Standardní xxxxxxx xxxxxxxxxx
5.2.1 Xx sterilní xxxxx s vhodným xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x 60 μx/xx (100 IU/ml), x to rozpuštěním xxxxxxxxxxxxx benzylpenicilinu xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vodě.
5.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx roztok xxxxxxxxxx xxxxxxxx 1,25 xx roztoku penicilinu (5.2.1) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx a xxxxxxx xx xx 1000 xx. Xxxxx pracovní xxxxxx obsahuje 0,075 μx xxxxxxxxxx/xx (= 0,125 XX/xx).
5.2.3 Xxxxxxxxx 75 xx standardního xxxxxxx penicilinu obsahujícího 0,004 μx penicilinu/ml (= 0,0067 XX xxxxxxxxxx/xx) xxxxxxxx 4 xx xxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxx (5.2.2) xx 71 xx xxxxx xxx inhibičních xxxxx (5.3).
5.2.4 Xxxxxxx penicilinu xxxxxxx podle xxxx 5.2.1 až 5.2.3 xx xxxx xxx xxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxx.
5.3 Mléko xxx inhibičních xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx inhibičních xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx odstředěného xxxxx (10 % x/X) ve vodě, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx přítomnost xxxxxxxxxxx xxxxx. Rovněž xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx čerstvého xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x prohlášeno xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx; xxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx 100 °X, poté xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx s teplotou 0 °X až 6 °C na xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx organismus
5.4.1 Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx Bacillus xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx XXXX 10149 Xxxx XXXX 10149 je xxxxxxxxx x kmenem X 953.
5.4.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx kulturu xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx kultura xx xxxxxxx xx šikmém xxxxxx agaru (5.1.1). Xxxxx agar xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx kultura, xxxx se aerobně xxxxxxxx 48 xxxxx xxx 63 ± 1xX. Po xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx zátkou. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx skladována xxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx xxx 0 xx 5 xX.
5.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxx)
5.5.1 Asepticky xxxxxxx 20 ml xxxxxxx xxxxx (5.1.1) xx xxxxxxxx Petriho xxxxx (4.2.2) x nechat xxxxxxxx xx pokojovou xxxxxxx.
5.5.2 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx destilované xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (5.4.2) x vymýt xxxxxxxx smyčkou xxxxx xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx spór xx xxxxx xxx 0 xx 5 °C x xxxxxxx xx xx 36 xxxxx.
5.5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxx (5.5.2) xx Xxxxxxx xxxxx (5.5.1) a xxxxxxxx xxxxxxxxx očkovací xxxxx xx celém povrchu xxxxxx xxxxxxx skleněné xxxxxxx. Xxxxxxxxx 16 xx 18 hodin xxx 63 ± 1 °X (4.1.1).
Při xxxxxxx zásobní xxxxxxx (5.4.2) xxxx xxxxxxx xxxxxx 36 xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx dvakrát x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 36 hodin.
5.5.4 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxxx xxxx xx Xxxxxxx misku xxxxxxxxxx xxxxxxx (5.5.3) x xxxxxxxxx xxxxxxxx odstranit xxxxx z povrchu.
Přenést xxxxxxxx xxxx xx xxxxx (4.2.3) xxxxxxxxxx 250 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vody. Xxxxx xxxxxxx x důkladně xxxxxxxxx. Kultury, xxxxx xxxxxx xxxxx přeočkovány, xx xx měly xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 0 až 6 °C.
5.5.5 Po 16xx xx 18xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 63 ± 1 °X xx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx mikroorganismů xxxx 5 x 10 xxxxxxx xx xxxxxxxx. Suspenze xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, a pokud xxxxxxxx sraženiny nebo xxxxxxxxx, měla xx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (5.4.2).
5.6 Xxxxxxxx zkumavek/ampulí
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx agarové médium (5.1.2), poté zchladit xx 55 °C.
5.6.2 Xxxxxx část suspenze xxxxxxxxx spór (5.5.4) x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (5.6.1) xx zkumavce nebo x lahvičce. Xxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx (4.2.6) 0,3 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.6.2), xxx se xxxxxxxxx 5 mm xxxxxx, xxxx uzavřít xxxxxxxx zátkou xxxx xxxxxx xxxx, x xxxxxxx xxxxxx, zatavením xxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx 12 xxxxx ve xxxxxx xxxxxx.
5.6.4 Xxxxxxxx/xxxxxx mohou xxx xxxxxxx xxx xxx, xxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx 0–6 °X, pokud xxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx ochlazeny.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxx xx xx xxxxxxxx otestují, xxxxxxx xx 24 xxxxx xx odběru, x xx té xxxx xx skladují xxx xxxxxxx 0-5 °X. Pokud není xxxxx otestovat vzorky xx 24 hodin, xxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxx zmrazené (−30 °xx - 15°X), xxx xx xxxxxxx xx minimum xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.2 Xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx identifikovat xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx (5.6). Xxxxxxxxx víčko nebo xxxxx. Umístit do xxxxxxxx stojánku (4.1.3) xxxxx xxxxxxxxxx pro xxxxxx x xxxxx (5.2 a 5.3).
6.3 Xx xxxxx zkumavky/ampule xxxxxx 50 mikrolitrů xxxxxxx roztoku (5.1.4).
6.4 Xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx (4.1.4) přenést 0,1 xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx vzorku xxxxxx vždy xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.5 Postup xxxxx xxxx 6.4 xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,004 μx/xx (= 0,0067 IU/ml) xxxxxxxxxx namísto xxxxxx xxxxx (5.2.3).
6.6 Xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.4 xxxxxxxx stejným xxxxxxxx xx xxxxxxx kontrolního xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.3) xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
6.7 Xxxxxxx zkumavky/ampule x xxxxxxxx se xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx 2½ xx 2¾ xxxxxx do xxxxx xxxxx s xxxxxxxx 63 ± 1 °X (4.1.2).
6.8 Xxxxxxx xxxxxxxx se zkumavkami/ampulemi x xxxxx xxxxx.
6.9 Xxxxxxxxx barvu agarového xxxxx (xxx 7).
7. Xxxxxxxxxxxx výsledků
7.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx média xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx ukazuje xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x koncentraci xxxx xxxxxxxxx koncentraci "zcela xxxxxxxxx" xxxxxxx x xxxxxxx na straně 39. Xxxxx zabarvení xx zkumavkách/ampulích xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (6.5) xxxxxxx purpurové, xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2 Částečné xxxxxxxxx xxxxxxxx agarového xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx vzorkem xxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek xx xxxxxx x koncentracích xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx 39.
7.3 Xxxxx zabarvení xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
7.4 Xxxxx xx xxxxxxxxx zabarvení xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol, xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx spóry x vzorky xxxx xxx podrobeny xxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx materiálem.
8. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx vzorků x xxxxxxxx xxxxxxxxx x 7.1 a 7.2 xxxxx metody "X".
Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx skladovat, xxxx xxx zmraženy, aby xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X. Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxx antibiotik, jakož xxxxxx pro stanovení xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx mléka x xxxxxxxxx (X.7.1) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (A.7.2).
Citlivost xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx
Xxx X.1.
2. Definice
2.1 Xxxxxx xxxxx obsahuje xxxxxxxxxxx, xxxxxx sulfonamidů, xxxxx xxxxxxxx postupem xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx 2 xx xxxxx disku.
2.2 Xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx (2.1), a xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxx), xxxxxxxxx xxxxx zónu xxxx xxxxxxx xxxxx xxxx menšího xxxxxxx xxx je xxxxxx xxxx xxx penicilinázy, xxxxxxxxx látkou xx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxx penicilinu x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
2.3 Xxxxx tato xxxx xxxx penicilinázou (2.2) xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xx xxx jiné xxxxxxxx [xxx xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx X, xxxxxxxx XX, X.1.x) x 2x)].
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx cloxacillin sodný, xxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx a nemohou xxx xxxxxxxxxxxxxx jako xxxxxxxxxx (xxx 7.3).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx mlékem, xxxxx xx xx vyšetřit, xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx. Normální xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxx xxxxx disku xxxxxxx, xx xxxx x xxxxx xxxxxxxx látky xxxxxxxxx xxxxx pro xxxx. Velikost xxxx xxxx mimo jiné xxxxxx na xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxx.
4. Xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx x xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxx A.4.1.
4.1.2 Xxxxx lázeň, xxxxxxxxxxxx xx 80 ± 1 °X.
4.2 Pomůcky xx xxxx
Xxx A.4.2.
4.3 Xxxxxxxx xxxxx, neobsahující xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx 9 xx 13 mm, xxxxxxx xxxxxxxxxx asi 130 xx xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx).
5. Xxxxxxxxxx xxxxx, standardní xxxxxxx, roztok xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx skle nebo xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1 Xxxxxxxxxx xxxxx
5.1.1 Xxxxx agar (X.5.1.1)
5.1.2 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxx detekci inhibičních xxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5 x |
|
Xxxxxxx |
1 g |
|
Roztok xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx (X.5.1.3) |
10 xx |
|
Xxxx |
10–15 x podle xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxx zahřívání x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx ve xxxx, xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xx přidání xxxxxxxxxxxxx xxxx tetroxoprimu xxxxxxx xxxxxxx xX, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx 8,0 + 0,1 xxx 25 °X. Xxxxxxxxxxxx médium 15 minut xxx 121 ± 1 °X.
5.2 Standardní xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx
Xxx X.5.2.
Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek (8) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx v mléce xxx xxxxxxxxxxx látek (X.5.3) x těchto xxxxxxxxxxxxx:
x) 0,004 μg/ml (0,0067 XX/xx)
x) 0,006 μx/xx (0,01 XX/xx)
x) 0,03 μx/xx (0,05 XX/xx)
x) 0,06 μx/xx (0,01 XX/xx).
5.3 Roztok xxxxxxxxxxxx
5.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (beta-laktamázy) xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 1000 X/xx. Xxxxx xxxxxx, xxxxxxx rozdělený xx xxxxx xxxxx, xx xxxxx skladovat xx xxxxx týdny xxx 0 °X až 5 °C.
Poznámka
Pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx postupu xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx stačí xx inaktivaci 0,6 μx (= 1 XX) xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx tento xxxxxxxxxx platí. X xxxxxxx xxxxxxxx proto xxxxxxx koncentraci xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.3.2 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx penicilinázou, xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxx odpovídající xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxx X.5.4.
5.5 Testovací xxxxxxx (xxxxxxxx xxxx)
Xxx X.5.5.
5.6 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx agarové xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), xxxx zchladit xx 55 oC.
5.6.2 Xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx čerstvých xxxx (5.5) x xxxxxxxxxx xxxxxxxx částí agarového xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx agarové xxxxx, a důkladně xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx (X.4.2.2), xxxxxx vyhřáté xx 55 °X, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx 0,6 xx 0,8 xx vrstva. Pro Xxxxxxx misku x xxxxxxxx průměru 140 xx xx třeba xxx 15 xx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx vytvořila 0,8 xx xxxxxx.
5.6.4 Xxxxxxx Xxxxxxx xxxxx na xxxxxxx, vodorovný xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx vodováhou, sejmout xxxxx x nechat xxxxxxx médium xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx na xxxxx x obrátit xx dnem xxxxxx, xxx xx xx xxxxxxxxx kondenzaci xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
5.6.5 Xxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxx misky xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx den, xxx xxxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx, xxxxx xx ihned xx přípravě vloží xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xx při 5 °X.
5.6.6 Xxxxxxx xxx Xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx možná xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
6. Postup
6.1 Xxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 X xxxxxx x pozitivním xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx podle "xxxxxx A" (X.7.1 x X.7.2) xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx za účelem xxxxxxxxxxxx x kvantitativního xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1.2 Nejdříve xxxxxxxx xxxxxx 10 xxxxx xx 80 ± 1 °C, xxx xx vyloučil xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
6.1.3 Důkladně xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxx 10 xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx lahvičky xx širokým xxxxxx. X mléku xxxxxx xxx 0,4 ml xxxxxxx penicilinázy (5.3) x xxxxx xxxxxxxxx.
6.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
6.2.1 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx (4.3) xx xxxxxx xxxxx (6.1.2) xxxxxx xxxxx x suché xxxxxxx. Odstranit xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx na povrch Xxxxxxx misky (5.6) x xxxxx přitlačit xxxxxxxx.
6.2.2 Disky xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 20 xx x xx xxxxxx xxxxxxx 10 xx.
6.2.3 Xxx kontrolu xxxxxxxxxx xx xxxxx (4.3) xxxxxxxxx standardním xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.2) xxxx xxxxxxxx rozmístit mezi xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxxxx 2 % xxxxx xxxxx xx xxxxxx mléka; xxx xxxxxx testu xx xxxxxxx nejméně xxx xxxxxxxxxxxx disků.
6.2.4 Po xxxxxxxxx rozmístění xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x po xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxx je xxxxxxxxx 2,5 až 5 xxxxx při 63 ± 1 °X.
6.2.5 Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx při xxxxxxx zdroji xxxxxx, xxx xxxx možné xxxxxxxxx čiré xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxx xx xxxxx.
6.2.6 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (6.2.3) xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx nejméně 2 xx zóny.
6.2.7 Xxxx xxxx kolem xxxxx xxxxxxxxxxx vzorky xxxxx, xxxxxxx velkost xx xxxxxx xxxx xxxxx xxx velikost xxxxxxx x 6.2.6, xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x testovacím xxxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
6.3.1 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx zahřátého xxxxx (6.1.2) a xx xxxxxxx ošetřeným xxxxxxxxxxxxx (6.1.3). Xxxxxxx přidání xxxxxxxxxxxx xx 10 xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxx mléka ponořit xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (5.3.2) x xxxxxx xx xx testovací xxxxx.
6.3.2 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx ze xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x 5.2 x) xx d).
6.3.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx průměr xxxxxx xxxxxxxxxxx zón xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx penicilinázy x pro standardní xxxxxxx xxxxxxxxxx.
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (viz 2)
7.1 Xxxxx se xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx kontrolní xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx, ale xxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx mléka, xxxxxx velká nebo xxxxx než xxxx xxxxx xxxxx napuštěném xxxxxxxxxxx xxxxxxxx penicilinu (5.2x)), xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx krystalického xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxx 0,004 μg/ml.
7.2 Pokud xx průměrná xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx penicilinázu rovná xxxxxxxx xxxxxxx průměru xxxx zóny kolem xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx penicilinázy xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx.
7.3 Xxxxx xx průměrná xxxxxxx průměru xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx penicilinázu xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxx xx vzorkem xxxxx xxxxxxxxx xxxxx 6.1.2, xxxxxx mléka xxxxxxxx xxxxxxxxx a antibiotika, xxxxxx sulfonamidů, x xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx. Syntetické peniciliny, xxxx xx cloxacillin xxxxx, xxxxxxxx být xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx podmínek x xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx jiné xxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx
Xxxxx xx je xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx být identifikovány xxxxxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx xxxxxx penicilinu
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxx penicilinu xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxxxx standardní xxxxxx, nebo xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx získaných xx xxxxxxxxxxxx roztoky penicilinu x xxxxx (5.2 x) xx x)).
8.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx lineární korelace xxxx xxx10 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx zón, xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xx logaritmický papír xxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxxx xxx xx xxxxxx. Inhibiční xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx průměru xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx.
8.3 Výpočet
Koncentrace xxxxxxxxxx ve xxxxxx xxxxx lze xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx nebo xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx. Pro xxxxxx xxxxxxxxx xx poloměr xxxxxxxxxxx xxx nejméně xxxxxxx větší, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx větší xxx xxxxxxx disků.
9. Xxxxxxxxx výsledků
9.1 Výsledky xx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx vyšší xxx 0,004 μx/xx (xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace) xxxx jako xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx jiných xxx xxxxxxxxx.
9.2 Xxxxxxxxxxxxxx (x) a reprodukovatelnost (X)
Xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx x jsou xxxxxxxxxx x důsledku xxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxxxx.
XX. DETEKCE XXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
X xxxxxxx x požadavky xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx X, xxxxxxxx VII xxxx 2, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, které xxxx xxx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Definice
Vyšetření xx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx, které xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx onemocnění xxxxxxxxxxxxx x potravin.
Pasterace xx ošetření, které xxxxxxxxx mléko xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx patogenům. Pokud xxxx splněny normy xxxxxxxxx x xxxxxxx X, xxxxxxxx XXX xxxxx 2 uvedené xxxxxxxx, xxxxx xxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X x 21 °C, xxxxxxxxxx bakterie a xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx pouze xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx mléko xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx propuknutím otravy xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxx
Xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx vnitrostátní xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx vydávání osvědčení x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx obchod xxxxxx Xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx patogenních mikroorganismů xx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxxx úrovni.
4. Xxxxxx x xxxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxxx patogenní xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx výsledek xxxxxxxx xxxxx:
Xxxxx mléka xx xxxxxxxx, xxxx "xxxxxxxxxx" xx "nepřítomnost" x objemu xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.