Xxxxxxxxxx Xxxxxx
xx xxx 14. xxxxx 1991,
kterým xx xxxxxxx některé xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx syrového xxxxx x tepelně xxxxxxxxxx xxxxx
(91/180/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX SPOLEČENSTVÍ,
s xxxxxxx xx Smlouvu x xxxxxxxx Evropského xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x ohledem xx směrnici Xxxx 85/397/XXX xx dne 5. srpna 1985 x hygienických a xxxxxxxxxxxxx otázkách obchodu x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx [1] xxxxxxxxx pozměněnou xxxxxxxx 89/662/XXX [2], x zejména xx xx. 10 xxxx. 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x tomu, xx xxxxx xx. 10 xxxx. 2 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x testování, xxxxx xx mají používat xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx xxx xxxxxx mléko je xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxx mikroorganismů, obsahu xxxxx, bodu mrznutí x přítomnosti antibiotik;
vzhledem x xxxx, xx xxx xxxxxxxxxxx mléko xx nezbytné xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx nepřítomnosti patogenů, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx a XXX xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx x xxxxxxxxxxx xxxxxx je vhodné xxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; xx je xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x prošetřování podmínek, xx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx metody xxxxxxx x testování; xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx těchto xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xx xx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 85/397/XX byly xxxxxxx vhodné xxxxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx k tomu, xx xxxxxxxxx referenčních xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx i xxxxxxxxx xxxxxxx analýzy x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx rozhodnutí xxxx x xxxxxxx se xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
XXXXXXX XXXX XXXXXXXXXX:
Článek 1
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x testování xxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- stanovení xxxxxx mikroorganismů xxx 30 °X,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxx buněk,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Článek 2
Referenční xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx pasterované xxxxx xxxx xxxx:
- stanovení xxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx peroxidázy,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °C,
- xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxx 21 °C,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx – xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxx antibiotik x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Článek 3
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x testování xxx XXX mléko x sterilizované xxxxx xxxx tyto:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 4
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx kritérií xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx podle pravidel xxxxxxxxxxx x xxxxxxx X.
Článek 5
Referenční xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx v článcích 1, 2 x 3 jsou popsány x xxxxxxx II.
Xxxxxx 6
Xxxx rozhodnutí xxxx přezkoumáno do 31. prosince 1992, xxx xx zohlednil xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx znalostí.
Xxxxxx 7
Xxxx xxxxxxxxxx xx určeno xxxxxxxx xxxxxx.
X Bruselu dne 14. xxxxx 1991.
Za Xxxxxx
Xxx Xxx Xxxxxx
xxxx Xxxxxx
[1] Xx. věst. X 226, 24.8.1985, x. 13.
[2] Úř. xxxx. X 395, 30.12.1989, x. 13.
PŘÍLOHA X
XXXXX
X. Xxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Xxxxx vzorků xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
X. XXXXXX XXXXXXXXXX
1. Úvod
Obecná xxxxxxxxxx xx xxxxxx činidel, xxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxx výsledků, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x testování. Xxxxxxxxx xxxxxx členských států x laboratoře xxxxxxxx xxxxxxx vzorků a xxxxxxxxxx xxxxx musí xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxx
2.1.1 Pokud xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx k xxxxxxxxxxx, ředění xxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx destilovaná, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxxxx účely xxxx xxx xxx xxxxx, které xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx růst mikroorganismů xx popsaných xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.1.2 "Rozpouštěním" xxxx "xxxxxxx" (xxx xxxxxxx xxxxxxxxx) xx xxxxxx "xxxxxxxxxxx xx xxxx" xxxx "xxxxxx xxxxx".
2.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxx není xxxxxxxxx xxxxx, všechny používané xxxxxxxxxx xxxx xxx xxx uznané analytické xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
3.1 Seznam xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxxxxxx seznam xxxxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxx referenční xxxxxx se xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx zvláštnímu xxxxxxx x se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.2 Xxxxxxxxxx xxxx
"Xxxxxxxxxxxx xxxxxx" xx rozumí xxxx s xxxxxxxxx xxxxxx na 0,1 xx.
4. Vyjádření xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx není stanoveno xxxxx, výsledek uvedený xx zprávě x xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx opakovatelnosti (5.1) xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx se musí xxxxxxxx, xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx podílu
Pokud xxxx xxxxxxxxx xxxxx, výsledek xx vypočítá x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
5. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx
5.1 Kritéria xxxxxxxxxxxxx uvedená pro xxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxxxx takto:
5.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) xx xxxxxxx, xxx kterou xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx byly získány xxxxxxx postupem x xxxxxxxxxx výrobkem xx xxxxxxxx podmínek (xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx, krátké xxxxxx xxxxxx).
5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) xx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx rozdíl dvou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx testů, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x týmž xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx pracovníci, xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx x/xxxx xxxxx xxxx).
5.1.3 Xxxxx není xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx kritéria xxxxxxxxxxxxxxx x reprodukovatelnosti, xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx 95 % xxxxxxxxx xxxxxx spolehlivosti xxxxx xxxxxxxx XXX 5725, xxxxx xxxxxx, 1986. Xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx pokusů, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxx hodnocení postupu. Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx tyto xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx. V xxx případě byly xxxxxxx opakovatelnosti x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1.4 Kruhové xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
6. Xxxxxx o xxxxxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxxxx musí xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x získané xxxxxxxx. Xxxx xxxx musí xxxxxx všechny xxxxxxxxxxx xxxxxxx, které xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxx volitelné xxxxxxxxxxx x všechny xxxxxxxxx, xxxxx by xxxxx ovlivnit xxxxxxxx. Xxxxxx o testování xxxxxxxx všechny xxxxxxxxx xxxxxxxxxx úplnou xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
XX. ODBĚR XXXXXX XXXXXXXX X TEPELNĚ XXXXXXXXXX MLÉKA
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx postup xxx xxxxx vzorků, xxxxxxxx x skladování vzorků xx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx 2, 4.4, 5 x 6 se použijí xxx odběr xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x přímé xxxxxxxx.
2. Obecně
Odběr xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx obsaženého x xxxxxxx, xxxxxxxx xxxx. xxxxxxxx pověření xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx vyškoleni.
Pokud to xxxxxxxxx orgány xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx nezbytné, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx odběrem xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx, aby xxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxx x xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx orgány xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx nezbytné, xxxxxxx zaměstnance xxxxxxxx xxxxxxx vzorků x xxxxxxxxxx vzorků, aby xxxxxxxxxxxx vzorků byla xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx
3.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxx odběr xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx nebo x jiného vhodného, xxxxxxxxxx xxxxxxxx materiálu, xxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx předpokládané použití (xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx, xxx.). Xxxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxx mít xxxxxxxxxx xxxxxx plochu xxxxxxx, xxx bylo zajištěno xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x nabírání xxxxxx x xxxxxxxx hloubky xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxx 50 xx.
Xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxx nebo x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx při výrobě xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx (včetně xxxxx x xxxxx) nesmí xxxxxxxx xxxxxxx změnu xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxx xxxx xxx xxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxxx xxx trhlin x xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx.
3.2 Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxx) xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx bodu 3.1 x xxxx být xxxxxxxx.
Xxxxx xx xxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx vzorků xxxxxxx xxxxx vybavení, xxxx xxx xx xxxxxx xxxxxx vzorku vyčištěno x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx s xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx testovací xxxxxxxxx xxxx příslušný orgán, xxx xxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxxx po xxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxxxx xxxxxx vzorků
4.1 Xxxxxx xxxxx
Xxx xxxxxx xx testy, xxxxx xxxx xxx provedeny, xxxxx musí xxx xxxx odběrem důkladně xxxxxxxxxx xxx ručně, xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxxx.
Xxxxx se x nádrže xxxxxxx xxxxxxx xxxx vzorků xxxxx xxx xxxxx xxxxx, jako xxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx xxxx tyto xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x při xxx xxxx možné xxxxx promíchat obsah xxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx však xxxxxxx xxxxxxxxx stloukání xxxxx xxxxx přepravy.
4.2 Xxxxx xxxxx xxxxxx
4.2.1 Odběr xxxxxx z xxxxx x xxxxx na xxxxx
X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx nebo konvi xxxxxx a xxxx, xxxxxxx xxxx xx xx, xxx se xxxxx xxxxx promíchalo x xxx xx xx hrdle xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Vzorek, xxxxx xx reprezentativní xxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx postupem xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxx x xxxxxxxxxxx podniku
Míchat xxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxx dokud není xxxxxxxx dostatečné xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxx mléka xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx míchačky, xxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxx xxxxxx z xxxxx xxx
Xx xxxxxxxx, aby xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx se xxxxxx do xxxxx xxx. Za xxxxxx xxxxxxxxx rovnoměrného rozdělení xxxx může být xxxxxxxx další xxxxx xxxx mechanické xxxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxx, x níž xx xx odebrat xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxx postupem podle xxxx 4.2.4.
4.2.4 Odběr xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxx, x něhož xx xx provést xxxxx xxxxxx, rozděleno xx xxxx nádob, x xxxxx nádoby xx xxxxxxx reprezentativní xxxxxxxx, přičemž se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx každý xxxx. Xxxxx xxxxxx x xxxxx nádoby xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx se jednotlivé xxxxx xxxxxx reprezentativních xxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxx xx nachází v xxxxxx, xx xxxxx xxx každý xx xxxxxx odebrán. Po xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (více) xxxxxx (xxxxxx) x těchto xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
4.2.5 Xxxxx xxxxxx x velkých xxxxx – skladovací xxxxxx, cisternové kamiony, xxxxxxxxxx xxxxxx
4.2.5.1 Xxxx xxxxxxx vzorků se xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
X promíchání obsahu xxxxxxx nádob, xxxxxxxxxxxx xxxxxx, cisternových xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx vagónů xx doporučuje mechanické xxxxxxxxxx (4.2.5.2).
Xxxxx promíchání xxxxxx xx době, xx kterou xxxx xxxxx x xxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx, xx postup xxxxxxxxxx xxxxxxx v každém x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx výsledků xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx buď x xxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx mléka) xx xxxxxx, pokud xx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxx xxxxxx odebraných za xxxxxx podmínek xxxxx xxx 0,1 %.
Xx xxxxx nádobě x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxx x místě vypouštění xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xx promíchání není xxxxxxxxxxxxxxx xxx celý xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxx xxxxxx xxxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, aby xxxx zajištěna reprezentativnost xxxxxx.
4.2.5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxxxxx nádrží, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxxxxx míchačkou xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx x průlezovém xxxxxx; xxxxxxxx je xxxxxxxx x xxxxx,
- v xxxxxxx cisternových kamionů xxxx xxxxxxxxxxxx vagónů xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx je napojena xx pumpu x xxxxxxxx xx průlezového xxxxxx,
- filtrovaným, xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx se minimální xxxx x objem xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx vniku xxxxxx xxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx vzorků
Automatické x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx odběr vzorků xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx testovací xxxxxxxxxx xxxx jiným příslušným xxxxxxx.
Xxxxxx vybavení xxxx xxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx postupů xxxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxx musí být xxxxxxx vzorek,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx),
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx reprezentativní xxxxxx x šarže xx xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxx používání xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx příslušný xxxxxxxxx vnitrostátní orgán xxxxxxxxx:
- minimální xxxxx xxxxx, xx xxxxxxx xxxx být odebrány xxxxxx,
- minimální xxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx, které může xxx provedeno, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx opatření, xxxxx je xxxxx xxxxxxxx.
4.4 Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx x maloobchodních xxxxxxxx
Xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx k xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nádob. Xxxxxx musí xxx xxxxxxxx během xxxxxxxx xxxxxx xxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zařízení xxx ošetření, x xx, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxx xx zpracování (x xxxxxxx pasterovaného mléka x den xxxxxxxxx).
X xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka (pasterovaného, xxxxxxxxxx xxxxxxx UHT x xxxxxxxxxxxxxxx) xx xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, která xxxx xxx xxxxxxxxx, x xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
5. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xx měl xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx jeho xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx bod 2).
6. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx dodrženy x xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, a xx xx xxxxxxx druhu xxxxx a testování, xxxxx xx xxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx toto:
- xxxxx přepravy x xxxxxxxxxx je xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx-xx xx xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx průsvitná, xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx musí xxx přepravovány x xxxxxxxxxx při teplotách 0 oC až 4 xX. Xxxx xxxx odběrem a xxxxxxxxxx musí xxx xx xxxxxxxxx a x xxxxxx případě xxxxx přesáhnout 36 xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 0 xX xx 6 oC, není-li xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxx 24 xxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxx x skladovány xxx teplotách 0 xX xx 4 xX. Xxxx xxxx xxxxxxx x testováním xxxx xxx co xxxxxxxxx x x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 24 xxxxx,
- xxxx vzorky mléka xxx xxxxxx syrového xxxxx x pasterovaného xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx analýzy xxxx xxx skladovány v xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x doba mezi xxxxxxx vzorku x xxxxxxxx musí xxx xx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx preventivní xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx testy, xxxx xxxxxxx v xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
XXXXXXX X
XXXXX
X. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx
XX. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
XXX. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X
X. Stanovení xxxxxx mikroorganismů xxx 21 °C
VI. Stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx – počítání kolonií xxx 30 °X
XXX. Xxxxxxxxx obsahu somatických xxxxx
XXXX. Xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx
XX. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
X. XXXXXXXXX XXXX XXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx pro stanovení xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, XXX xxxxx xxxx sterilizovaného xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (termistorového xxxxxxxxx), v xxxx xx termostatem xxxxxx xxxxx ochlazována elektrickým xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxx xxx typy xxxxxxxxx. Xxxxx typ xxxxxxxxx xxxxxxxxx bod xxxxxxx na xxxxx xxxxxx xxxxxxx, kdežto xxxxx typ je x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx, xx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx stanovenou xxxx xxxxxx. Vzhledem x xxxx, xx xx mohou xxxxx xxxxx xxxxxx bodu xxxxxxx různých xxxxx xxxxx, ale x xxxxxx xxxx mrznutí xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxx, tento referenční xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxx odhad podílu xxxxxxx xxxx vody x mléce za xxxxxxxxxxx, xx kyselost xxxxxx není vyšší xxx 0,18 x xxxxxxxx xxxxxx xx 100 xx (xxx xxx 7.4).
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxx: hodnota xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx postupem x xxxxxxxxx ve xxxxxxxx Celsia (°X).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx mléka xx v xxxxxxxxxx xx přístroji xxxxxxxxx xx vhodnou xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx jeho xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx k xxxxx, xxxxx odpovídá xxxx mrznutí vzorku.
Přístroj xx kalibruje takovým xxxxxxxx, xxx se xxxxxxx postupem xxxx xxx vzorky xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxx standardní xxxxxxx. Za xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx Celsia.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx laboratorní xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Kryoskop
Kryoskop xx skládá z xxxxxxxxxxx řízené chladicí xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx snímače (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, míchačky xx xxxxxx x xxxxxxxx xx vyvolání xxxxxxx, xxxxx i xx xxxxxxxx xx xxxxxx.
4.1.1 Xxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx dva xxxx xxxxxxxx xxxxx.
4.1.1.1 Xxxxxxx typ
Dobře xxxxxxxxx xxxxx obsahující xxxxxxx xxxxxxxx kapalinu, xxxxx xx míchá tak, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx dvěma xxxx x xxxxxxxx xxxxx vyšší než 0,2 °X. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx kolísat xxxxxxx x rozmezí ± 0,5 °X xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx, xxx x lázni xxxx xxxxxxxxx konstantní xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx pod značkou xxxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
4.1.1.2 Xxxxxxxxxx xxx
Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx kolísat xxxxxxx x rozmezí ± 0,5 °X xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx chladicí xxxxxxxxx xx 33 % (X/X) xxxxx xxxxxx 1,2-xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx).
4.1.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xx skládá xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx průměru 1,80 ± 0,2 xx x o xxxxxxx vodiče xxxxxxxxx 0,31 xx. Xxxxxx xxxxxxxxx termistoru xxxx xxx xxxxx xxx 2 xxxxxxx x xxxxxxx x (viz xxxxxxxx) musí xxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxxx, xxx xxx − 0,512 °C xxxxxxx xxxxxxxxxx stoupla xxx teplotu xxxxx xxxxxxxxx x 0,0005 °X. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx být ± 5 %.
Xxxx xx xxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, konec xxxxxxxx xxxxxxx se xxxx xxxxxxxx x ose xxxxxxxx xx xxxxxx x x xxxx, xxxxx xx 44,6 ± 0,1 mm xxx horním xxxxxxx xxxxxxxx (xxx obrázek xx straně 15). Xx xxxxx dodat xxxxxxxxxxx, xxx se xxxxxxxxx nastavení xxxxx xx této polohy.
Poznámka:
β xxxxxxxx xxxxxxxx vlastnosti xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx
− xX / xX × 1 / X = β / T2
kde:
T xx xxxxxxx ve xxxxxxxx Xxxxxxx
X je xxxxx x ohmech xxx xxxxxxx X,
− dR / xX × 1 / X xxxxxxxx xxxxxxxxxx
β je xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx použitém xxx xxxxxx termistoru. X běžné xxxxx xx doporučuje xxxxxxx xxxxx než 3000.
4.1.3 Xxxxxx x odečítací xxxxxxxx
4.1.3.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx prvního xxxxx na xxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxx křivky, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx ± 0,002 xX xx dobu xxxxxxx 20 xxxxxx.
4.1.3.2 Xxxxx obsluha
Odpor xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx Wheatstoneovým xxxxxxx nebo podobným xxxxxxxxx pomocí xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx je ± 10 % x jejichž teplotní xxxxxxxxxx není xxxxx xxx 2×10−5°X.
Xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx rozsahu x více než x 0,3 % xxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxx kalibrace musí xxx možné odpory xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx po xxxxxxxxx 0,001 °C.
4.1.3.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx rozlišení xx xxxxxxx 0,01 °X x xxxxxxx xx 0 °C xx –1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx obvodu xxxx xxx xxxxxx, xxx odchylka dvou xx sobě následujících xxxxxx xxxx teploty xxxxxx xxxxx než 0,001 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx xxx správné xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x žádném bodě xxxxxxx xx – 0,400 °C xx – 0,600 °X xxxxx chyba xxx ± 0,001 °C.
4.1.4 Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx použije xxxxxx drát x xxxxxxx 1 xx 1,5 xx, xxxxx xxxxxxxxx x mlékem,.
Míchačka xx měla být xxxxxxxxx na rozkmit x umístěna vertikálně xxx, aby její xxxxxx konec xxx xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxx 1,5 mm nad xx pod xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxx bočně x xxxxxxxxxxx rozkmitem xxxxxxx xxxxxxx (nejméně ± 1,5 mm), xxx byla xxxxxxxxx xxxxxxxx teplota testovacího xxxxxx během xxxxxxxxx. Xxxxx míchání xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx.
4.1.5 Xxxxxxxx xx vyvolání xxxxxxx
Xxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, které xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx mrznutí xxxxxx, xxx teplota xxxxxx testovacího xxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx. X tomu xxxxx lze xxxxxx xxxxxxxx; xxxxxx postupem xx zvětšení xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx dvě xxxxxxx xxx, xxx se xxxxxxxx dotýkala stěny xxxxxxxx xx xxxxxx.
4.1.6 Xxxxxxxx na vzorky
Zkumavky xx xxxxxx (viz xxxxxxx 1) jsou xxxxxxxx x 50,8 ± 0,1 xx xxxxxx; vnější xxxxxx xx 16,0 ± 0,1 xx a xxxxxxx průměr xx 13,5 ± 0,1 xx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx o xxxx xxx 0,1 mm.
Zkumavky xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx od xxxxxxx xxxxxx 29,8 xx (21 mm xxx xxxx zkumavky), xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx.
4.1.7 Zdroj xxxxxxxxx
Xxxxx napětí xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ± 1 % xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxxx zdroj xxxxxx x ± 6 %.
4.2 Xxxxxxxxxx xxxx
4.3 Xxxxxxx baňky x xxxxxx 1000 xx, xxxxx X.
4.4 Xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 130 ± 1 °C
nebo
Elektrická xxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 300 ± 25 °X.
4.5 Xxxxxxxxx
5. Xxxxxxx
5.1 Xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx na 20 ± 2 °X, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx oxid xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxx sodný, xxxxxxx x.x., jemně mletý, xxxxxx 5 xxxxx xxx xxxxxxx 300 ± 25 °X x elektrické peci xxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx xxxxxxx 130 ± 1 °X x xxxxxxx x zchlazený xx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx exsikátoru.
5.3 Příprava xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx odpovídající xxxxxxxx (xxx tabulka 1) xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5.2) do xxxxxxx. Rozpustit x xxxxxxxxxxx xxxx (5.1), xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 1000 xx x doplnit xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx 20 ± 2 °C.
Skladovat xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx při xxx 5 °X x xxxxx xxxxxxxxxx polyethylenových xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx 250 ml.
Bod xxxxxxx roztoků xxxxxxxx xxxxxxx xxx 20 °X
|
x XxXx/x |
°X |
|
6,859 |
-0,408 |
|
7,818 |
-0,464 |
|
8,149 |
-0,483 |
|
8,314 |
-0,492 |
|
8,480 |
-0,502 |
|
8,646 |
-0,512 |
|
8,811 |
-0,521 |
|
8,977 |
-0,531 |
|
9,143 |
-0,541 |
|
10,155 |
-0,600 |
Xxxx použitím xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx tak xxxxxx, xxx xx xx roztoku xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx x xxxxx xxxxxx do xxxxx x čisté xxxxxxx. Xxxxx nepoužívat xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx z lahví, xxxxx byly xx xxx xxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxxxx roztoky xxxxxx xxxx měsíců, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 10 x/x).
6. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx tak, xxx xx okolní xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx než 1 °X xx xxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx 26–27 °X.
Xxxxxxx se, že xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx a xx xxx xxxxxx xxxxxxx 12 xxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx kapalin.
Vybrat xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxx xxxxxxx xxxx), xxxxxxx xxx xxxxxxx xx těsně nad xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx bodu xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxx mrznutí xxxx roztoků xx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx – 0,100 °X.
(X xxxxxxxxx xxxx x současné xxxx xxxxxxxxxx kryoskopů xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx tak, xx xx xxxxxx xx xxxx hodnotě xxxx xxxxxxx v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X těchto xxxxxxxxx výběr xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx, jako xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxx musí tuto xxxxxxx xxxxx).
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 ml jednoho xxxxxxxxxxxx roztoku do xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx, xxxx měřit xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx xx vzorky xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx (xxxxxx druh xxxx, xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx vzorků xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx kalibrace, dokud xxxxxx x kryoskopu xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku. Xxxxxxxx xxxxx postup x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x střídavě xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx po xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx každý roztok xxxxxxxxxx xxxxxxx hodnoty xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx, xxxx xx byla nutná xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx tedy připraven x použití x xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx mléka, xxxx xx byla xxxxx xxxxxxxx úprava.
7. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
7.1 Xxxxx xx je xxxxxxxx xxxxxxxxx vzorky xxx xxxxxxx xxxx 0 °X a 5 °C.
7.2 Xxxxx xx je nezbytné xxxxxxxx odstranit xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxx mléčný xxx ve vzorku xx xxxxx x xxxxx nádoby x xxxxxx opatrně promíchat. Xxxxx se xxxxxxx xxxxx, nesmí xxxxxxxx x xxxxxx x xxxx být účinný xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.3 Xxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0 x 5 °C) xxxx xx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx teplotu xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxx xxxx na to, xxx standardní roztoky x xxxxxx xxxxx xxxx při použití xxxxxxx xxxxxxx.
7.4 Stanovit xxxxxxxx kyselost xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxx, jejichž xxxxxxxx přesahuje 0,18 x xxxxxxxx xxxxxx xx 100 xx xxxxx, xxxxxxx být xxxxxxxxxxx.
7.5 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx mléko xxxx xxxx nejméně 20 minut před xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
8. Xxxxxx
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxx chladicí xxxxxxxx jsou x xxxxxxx x pokyny xxxxxxx, případně xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx na vzorky. Xxxxxxx kryoskop x xxxxxxx xx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxx. Pokud byl xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx 12 hodin, zkontrolovat xxxxxxx chladicí xxxxxxxx, xxxxxx míchačky x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx.
8.2 Xxxxxxx kontrola xxxxxxxxx
Xxxx každou xxxxx xxxxx xxxxx bod xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (například xxxxxx x xxxxx xxxxxxx – 0,512 °X), dokud xx xxxxxxx xxxxxxx při xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxx xxx 0,001 °X. Xxxxx se průměr xxxxxx xxxxxx liší xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku x xxxx xxx 0,002 °X, kryoskop se xxxxx xxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx v xxxx 6.
Xxxxx xx xxxxxxxx používá xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxx xx zohlední xxxxxx xxxxxxx.
8.3 Xxxxxxxxx xxxx mrznutí mléka
Promíchat xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx otáčením. Xxxxx neprotřepávat xxxxxxxxxx xxxxxx tak xxxxxx, xxx se xx xxxxxxx xxxxxxxxx vzduch.
Pomocí xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 ml xxxxx xx suché x čisté zkumavky xx vzorky. Xxxxxxx xx, xx xxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx a suché, xxxxx je xx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx jemnou, čistou x xxxxxx nepouštějící xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx podle xxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx a xxxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx určené xxxxxxxx x xxxxxxxxx xx 0,1 °X.
(X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx odečíst xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; x xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xx xx zajistí, xxx mrznutí začalo, xxxx xx ručička xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxx.)
Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx rozmezí, xxxxxxxxx se ukončí x xxxxxxxx xx x xxxxx vzorkem xxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx rovněž xxxxxx před xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, alikvótní xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx na 45 °X x 5 xxxxx xx xxxxxxx xx této xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx.
Xxxx zchladit xxxxxx xx testovací xxxxxxx x ihned xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx rychle xxxxxxx xx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx po xxxxxxx dobu xxxxxxxxxx, x xxxx klesne. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx teplotě xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx x tuto hodnotu xx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxx, xx kterou xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, x xxxxxx interval xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx teploty, xx xxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx jsou podstatně xxxxxx xxx xxx xxxxx. Je nezbytné xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, vyjmout zkumavku, xxxxxxxxxx xx vodou x xxxxx xxxxx x xxxxxxxx směrem xxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx látkou x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (0,004 °X), xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x jiného xxxxxx. Pokud xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx na 0,004 °X, xxxxxx xx x použijí xx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
8.4 Chlazení xxxxx
Xx xxxxxxx přístroje xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx na xxxxxx na xxxxx xxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxx x chladu.
(U xxxxxxxxx xxxx kryoskopu xx xxxx xxxxx; v xxxxxxxx případech je xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxx začátkem měření xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx slepých xxxxxxxxx, dokud xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.)
9. Xxxxxxxxx výsledků
9.1 Xxxxxxx
Xxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx potvrzena, xx xxxxxxxx se považuje xxxxxx xxxx dvou xxxxxxxxxxxx xxxxxx získaných xxx bod xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxx xxxx přijatelných xxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxx ukazuje xxxxx xxxxxxx:
Xxx mrznutí (°X)
|
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx |
Xxxxxx |
|
|
-0,544 |
-0,545 |
-0,544 |
|
-0,545 |
-0,546 |
-0,546 |
9.2 Xxxxxxxxxxxx
9.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x): 0,004 °X
9.2.2 Reprodukovatelnost (R): 0,006 °X
Xxxxxxx 1
Schéma xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1 (xxxxxx xxxxxxxx na vzorky xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx)
XX. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXX
1. Xxxxxxx a xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x pasterovaném xxxxx.
2. Definice
2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx je míra xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx. Xx vyjádřena xxxxxxxxx xxxxxx x μg xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx podmínek.
2.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx mléka xx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx než 4 xx xxxxxx xx 1 ml.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx vzorku xxxxxx xxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx fenol xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxx), xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 610 xx. Xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx, jehož xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx barnatého
4.1.1 Xxxxxxxxx xx xxxx 50,0 x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) [Ba(OH)2.8H2O] x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.1.2 Rozpustit xx xxxx 22,0 x xxxxxxxx borité (H3BO3) x xxxxxxx na 1000 xx.
4.1.3 Xxxxxx 500 xx každého xxxxxxx xx 50 °X, xxx roztoky xxxxxxx, xxxxxxxxx, rychle xxxxxxxx asi na 20 °X, x xxxxxxx nutnosti xxxxxxx xxxxxxx xX na 10,6 ± 0,1 xxxxxxxx xxxxxxx 4.1.1 xxxx 4.1.2. Xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxxxxx uzavřené xxxxxx.
4.1.4 Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx.
4.2 Tlumivý xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxx 6,0 x xxxxxxxxxxxxx sodného (XxXX2) nebo 12,6 x XxXX2.4X2X x 20,0 x xxxxxxxx xxxxxxx (XxXx) x xxxxxxx na 1000 xx.
4.3 Tlumivý xxxxxx xxx xxxxxxx vzniklého xxxxxxxxx
Xxxxxx 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2) xxxxx xx 100 xx.
4.4 Roztok xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx 0,1 x fenylfosfát xxxxxxxxx xxxxxxx, prostý xxxxxx, ve 100 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.3) xxxx 0,5 x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx 4,5 ml xxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2), xxxxxx dvě kapky xxxxxxx XXX (4.6) x xxxxxx stát 30 minut při xxxxxxxx teplotě. Xxxxxxx xxxxxxxxx extrahovat 2,5 xx x-xxxxxxxx x xxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx-1 xxxxxxxx. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx-1. X xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx; xxxx xxxxxxxx xxxxxxx zabarvení x xxxxxxx novou xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxxx, a xx xxxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxxxx xx 100 xx xxxxxxx xxxxxxxx a hydroxidu xxxxxxxxx (4.1.3).
4.5 Xxxxxxxxx xxxxx-xxx
Xxxxxxxxx xx xxxx 3,0 g xxxxxx xxxxxxxxxxx (ZnSO4 · 7X2X) a 0,6 x xxxxxx xxxxxxxxx (XxXX4 · 5X2X) x xxxxxxx xx 100 xx.
4.6 Xxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx BQC)
Rozpustit x 10 xx 96 % (V/V) xxxxxxxx 40 ± 1 xx 2,6-dibromchinonchlorimidu (XXX) (C6H2Br2ClNO6).
Skladovat x xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxx xxx xxxxx xxxxx.
4.7 Xxxxxx síranu xxxxxxxxx (XX)
Xxxxxxxxx xx xxxx 0,05 g xxxxxx xxxxxxxxx (XxXX4.5X2X) x xxxxxxx xx 100 xx.
4.8 Xxxxxxxxxx roztok xxxxxx
4.8.1 Navážit 200 ± 2 xx xxxxxxx bezvodého fenolu x xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx o xxxxxx 100 xx, xxxxxx xxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xx 100 xx. Xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x chladničce xxxxxxx xxxxxx.
4.8.2 Xxxxxx xxxxx 10 xx xxxxxxxxx roztoku, xxxxxxx xx 100 ml x xxxxxxxxx. 1 xx xxxxxxxx 200 μx fenolu.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx ze xxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxxxx pomůcky xx skla, xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx xxx odběr xxxxxx musí být xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx čerstvě xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx vodou xxxx čistění parou.
b) Xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx mohou xxxxxxxx xxxxxxxxxxx fenolů x xxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
5.1 Xxxxxxxxxx xxxx
5.2 Xxxxx lázeň xxxxxxxxxxxx xx 37 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx 610 nm.
5.4 Xxxxxxxx, 16 xxxx 18 × 150 xx, xxxxxxx odstupňované po 5 xx x 10 xx.
5.5 Xxxxxx
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, např. o xxxxxxx 5 cm.
5.7 Xxxxxxxx filtry x xxxxxxx xxxxxxx 9 xx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
5.8 Xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
6. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxx stanovení xxxxxxxx xxxxx přímého xxxxxxxxxx xxxxxx.
x) Xxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxx xx xxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxxxxx zvláštní xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1 Příprava xxxxxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx vzorků. X xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx ne déle xxx xxx dny.
6.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx pipety xxxxxx 1 xx xxxxxx xx každé xx dvou xxxxxxxx (5.4), xxxxx xxxxxxxx xxxxxx jako xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx.
6.3 Xxxxxxxxx
6.3.1 Slepý vzorek xxxxxxxx xxx xxxxxx xx vroucí vodě; xxxxxxxx a xxxxxxx x vroucí vodou xxxxxx hliníkovou xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Rychle xxxxxxxx na pokojovou xxxxxxx.
6.3.2 Xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x testovací xxxxxx xxxxxxx způsobem. Xxxxxx 10 xx roztoku xxxxxxxxx (4.4) a xxxxxxxxx.
6.3.3 Xxxxxx ihned xxxxxxxxx 60 xxxxx xx xxxxx xxxxx (5.2) x občas (xxxxxxx čtyřikrát) xxxxxxxxx xxxxxx obsah.
6.3.4 Stejně xxxx x xxxx 6.3.1 xxxxxxxx xxx xxxxxx ve xxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx teplotu.
6.3.5 Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxxxx xxxxx-xxx (4.5) x xxxxx promíchat.
6.3.6 Xxxxxxxxxxxx přes suchý xxxxxxxxx xxxxx, vylít xxxxx dva xxxxxxxxx x v případě xxxxxxxx filtrovat xxxxx, xxxxx není filtrát xxxxxxxx xxxx; xxxxxxxxxx 5 xx ve xxxxxxxx.
6.3.7 Přidat 5 xx tlumivého xxxxxxx xxx xxxxxxxx zabarvení (4.2).
6.3.8 Xxxxxx 0,1 xx xxxxxxx XXX (4,6), xxxxxxxxx x 30 xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxxx teplotě.
6.3.9 X xxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx při xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.3.10 Pokud absorbance xxxxxxxx x xxxx 6.3.9 xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku obsahujícího 20 μx xxxxxx xx zkumavku xxxxx xxxx 6.4.4, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx vhodném xxxxxxx vzorku. Xxxxxxxxx xxxxxxx smícháním xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx objemem xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx vzorku, xxxxx se xxxxxxx xxxxx do xxxx, xxx xx inaktivovala xxxxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxxxx kalibrační xxxxxx
6.4.1 Xx základě xxxxxxxxxxxx xxxxxxx fenolu (4.8.2) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx obsahujících 0 (xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx), 2, 5, 10 x 20 μx xxxxxx na xxxxxxxx. Do xxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxx pomocí xxxxxx 1 xx xxxx x 1 xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
6.4.2 Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxx síranu xxxxxxxxx (4.7), 5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx vzniklého xxxxxxxxx (4.3), 3 xx xxxx a 0,1 xx roztoku XXX (4.6); xxxxxxxxx.
6.4.3 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 30 xxxxx při xxxxxxxx teplotě.
6.4.4 V xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx při xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.4.5 Xx xxxxxxx xxxxxx absorbance (6.4.4) xxxxxxxxx xxx každé xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (6.4.1) xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxx x xxxxxx
7.1.1 Xx xxxxxxx hodnot xxxxxxxxxx (6.3.9) xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (6.4.5).
7.1.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x μg xxxxxx xx mililitr xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxxx fosfatázy = 2,4 × X × D
kde
A xx množství xxxxxx x μx získané xxxxx xxxx 7.1.1;
X xx faktor xxxxxxx xxx zředění provedené xxxxx bodu 6.3.10 (x xxxxxxx žádného xxxxxxx D = 1).
2,4 xx xxxxxx xxxxxxx (5/12 z 1 xx testovacího xxxxxx) – xxx 6.2 xx xxxxxxxxxx x 6.3.2, 6.3.5 x 6.3.6.
7.2 Xxxxxxxxxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (r) : 2 μx xxxxxx/xx.
7.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (R) : 3 (předběžně) μg xxxxxx/xx.
7.2.3 Pokud se xxxxxxx provede xxxxx 6.3.10, xxxxxx xxxxxxx x 7.2.1 x 7.2.2 xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx ze xxxxxxxxx xxxxxx.
XXX. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx pasterace.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxxx:
Xxxxx xx xxxxx xxxxx pasterováno, xx 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx objeví xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx reakce xx xxxxxxxxxx:
Xx 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx neobjeví xxxxx xxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Uvolněný xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx parafenylendiamin xx xxxxxxxxx indofenol (Štorchův xxxx). Xxxxxxxxx zabarvení xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx x xxxxx xxxx (50 °X) 2 x 1,4 fenylendiaminu (X6X8X2) x xxxxxxx xx 100 xx. Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx x temnu, x tmavě hnědé xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx dvou xxx xx připravení xxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxx 9 xx 30 % peroxidu vodíku x xxxxxxx na 100 xx. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxxxxxxxx kyseliny xxxxxx xx litr xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxx xxxxx, pokud xx xxxxxxxxx v xxxxxx x temnu, x xxxxx se xxxxxxxxx zátkou, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx látkami.
5. Xxxxxx
5.1 Xxx 5 xx vzorku xxxxx xx čisté zkumavky x xxxxxxx xxxxxx.
5.2 Xxxxxx 5 xx xxxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx (4.1).
5.3 Přidat 2 xxxxx roztoku xxxxxxxx xxxxxx (4.2).
5.4 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx 30 sekund po xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
XX. STANOVENÍ XXXXXX MIKROORGANISMŮ PŘI 30 °C
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °C. Xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, UHT mléko xxxx sterilizované xxxxx, xxxxx xxxx 15 xxx xxxxxxxxxxxxx xxx 30 °C.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx organismy, xxxxx vytvářejí xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx popsaných xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx mléka x xxxxxxxxxxx médiem x Petriho xxxxxxx x nechat xxxxxxxxx 72 hodin xxx 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na 1 xx syrového xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx na 0,1 xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx UHT xxxxx.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, zejména:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, schopný xxxxxxxx teplotu 30 ± 1 °X.
4.1.4 xX-xxxx xx zařízením xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Zvětšovací xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Xxxxxxxx schopná xxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx x 9 xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx ze xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x dostatečným xxxxxxx, s dostatečným xxxxxxxxx x promíchání 10 ml xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 ml xxxx xxxxxxxx o xxxxxx 20 ml xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxxx (utěsněné xxxxx), skleněné xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, o xxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 mm.
4.2.4 Xxxxxxx misky x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxx sterilního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx misek xx xxxxxxx xxxxxx xxx 90 xx 100 mm. Vnitřní xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx nejméně 10 xx. Dno xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx by xxxxxxx xxxxxxxx kolonií.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx:
Xxxxxxx ze skla xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), nejméně xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx 170–175 °X;
x) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx nutné xxxx xx xx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx xx materiál xxxxxxxxxxx v xxxxxxxx, xxxx nádoby xx xxxxxx být napevno xxxxxxxx, uzávěry xxxx xxxxx by xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx ze xxxx sterilizované x xxxxxxxxxxx by se xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx – xxxx xx xxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx extrakt |
2,5 g |
|
Trypton |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx (+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 g |
|
Agar |
10–15 g xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 ml |
Sušené xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx inhibiční xxxxx. Toto xx xxxxx xxxxxxxxxxxx testy xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, které xxxxxxxx xxxxx inhibiční xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx mléko. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxx agar x za stálého xxxxxxx xxxxx xx xxxx, xxxxx se xxxx zcela xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx v xxxx xxx 30 xxxxx.
Xxxxx to xx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX pomocí xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xX, roztokem (xxxxxxx 0,1 mol/l) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx chlorovodíkové, xxx xx sterilizaci xxxx xxxx hodnota 6,9 ± 0,1 při 25 °X.
5.2 Rozdělení, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx médium (5.1) x množstvích xx 100 xx 150 xx xx xxxxx nebo po 12 xx 15 xx do xxxxxxxx (4.2.2). Xxxxx a xxxxxxxx uzavřít.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x autoklávu (4.1.2) xxx 121 ± 1 °C.
Zkontrolovat xX kultivačního xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx teplotě xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx než 1 xxxxx po xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx může xxxxxxxxx x komerčního xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx přidat xxxxxx xxxxxxxxxx mléko xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx pH xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X xxxxxxx xxxxx xxxx 5.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx kultivační xxxxxx xxxxx xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Xxxxxx pepton/sůl
Složení:
|
Pepton |
1,0 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx složky xx xxxx, pokud xx xx xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xX-xxxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx nezbytné xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 mol/l) xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
6.2 Rozdělení, xxxxxxxxxxx x skladování xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx zkumavka xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx v temnu xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) xx xxxx připravovat z xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx tablet xxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx výrobce. Xxxxxxx xX xxxxxxx xxxxx xxxx 6.1, poté xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx rozpustit xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx a zchladit xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx vzorku mléka
Vzorek xxxxx řádně xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x to 25 xxxxxxxx otočeními xxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxx zabránit tvorbě xxxx xxxx pěnu xxxxxx rozptýlit. Doba xxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx minuty.
7.3 Příprava xxxxxxxxxx ředění (10-1) (xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 ml xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx pasterovaného xxxxx xx 9 xx xxxxxxx (6.1), přičemž xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx s xxxxxxxx. Xxxxxxx ředidla xxxx být xxxxxxxxx xxxxxx jako xxxxxxx xxxxxx mléka. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx se tak xxxxxxxx ředění 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx desetinných xxxxxx (xxxxxx x xxxxxxxxxxx mléko)
Sterilní pipetou (4.2.3) přenést 1 xx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx pokynů v xxxx 7.3.
Získá xx xxx ředění 10−2.
X xxxxx získat další xxxxxxxxx ředění xx xxxxx postup xxxxxxx xxx xxxxxx, dokud xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx mikroorganismů (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
7.5.1 Xxxxxx xxxxx: Sterilní xxxxxxx (4.2.3) přenést xx misky (4.2.4) 1 xx vzorku x/xxxx vhodného desetinného xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx dvě xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) připravit xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx: Sterilní xxxxxxx (4.2.3) přenést xx misky (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx vhodného xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx misku.
7.5.3 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx mléko (vyšetřované xx 15 xxxxx xxxxxxxx při 30 °X – xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx A xxxxxxxx XXX bod 5):
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 ml xxxxxx xxxxx (7.2). Xxxxxxxxx dvě xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx kultivačního média
Do xxxxx xxxxxxxxxx misky xxxxx xxx 15 xx 18 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Xxxxx xxxxxxxxx rotací Xxxxxxx xxxxx, aby po xxxxxxxx xxxxx k xxxxxxxxxxxx rozložení xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx mléka a xxxxxxxxx, podle xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx vodorovném, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx médium xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Misky xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx více xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx nesmějí xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxx x kontaktu xx xxxxxxx x xxxxxx částí xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 72 ± 2 xxxxx při 30 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx x Petriho xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 300 kolonií.
Misky xxxxxxxx xxx tlumeném světle. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx použít zvětšovací xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx xxxxx dbát xx to, xxx xxxxxxx x záměně xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx provést xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx s xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx tvořící povlak xx považují za xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx tvořící xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx misky, xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx misky x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx celou xxxxx. Xxxxx xxxxxxx tvořící xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx čtvrtinu xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Xxxxxx x xxxxxxxxxxx mléko
8.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.1.2 Vypočítat xxxxx mikroorganismů xx 1 xx syrového xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
∑X / (x1 + 0,1x2) d
kde:
∑C ΣC xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx podle xxxx 8.1.1.
(x1 + 0,1 x2)x je objem xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx:
x1 xx xxxxx xxxxx xxx prvním xxxxxxx
x2 xx xxxxx misek xxx xxxxxx xxxxxx
x xx faktor xxxxxxx, xx základě xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx dvě xxxxxx xxxxxxx. Xxxx je xxxxxxxxxxxxxx číslice pět, xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx sudá.
Příklad (xxxxxxxxxxx xxxxx):
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 kolonií
Ředění 10−3: 33 a 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; = 278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2
= 6290,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.1.3 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx než 10, xxxxx, že xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx je "xxxxx xxx 10 x x", xxxxxxx "x" xx převrácená hodnota xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
8.1.4 Xxxxx xxxx všechny xxxxx xxxxx xxx 300 x xxxxxxxx xx možné, provést xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx "Odhadovaný xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xx".
8.2 UHT xxxxx x xxxxxxxxxxxxx mléko
Počty xxxxx než 10 xxxxxxx xx 0,1 xx se považují xx nevyhovující požadavkům xxxxxxxx 85/397/XXX.
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx nejsou x xxxxxxxxx.
X. XXXXXXXXX XXXXXX MIKROORGANISMŮ PŘI 21 °X
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx pro stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx technikou xxxxxxxx xxxxxxx xxx 21 °X v xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx pět xxx xxxxxxxxxxxxx při 6 xX x xxxxx xxxxxxxx xxxxxx kontaminace xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx množit se x xxxxx xxx 6 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx aerobní xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx pasterované xxxxx xxx xxx xxx 6 °X. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxx médiem v Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx inkubovat 25 xxxxx při 21 °X. Spočítat xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx pasterovaného mléka.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx skla
Obvyklé xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, zejména:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx sušárna, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx udržovat xxxxxxx:
x) 6 ± 0,2 °X
x) 21 ± 1 °X xx xxxxx xxxxxx xxxxxx.
4.1.4 pH-metr xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, přesný xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, zvětšení 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx počítadlo
4.1.9 Míchačka xxxxxxx xxxxxxxxx 1 xx xxxxxx mléka xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x 9 xx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Pomůcky ze xxxx
4.2.1 Zkumavky s xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx desetinných ředění.
4.2.2 Xxxxx o xxxxxx 150 xx 250 xx nebo zkumavky x objemu 20 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx xxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, s xxxxxxxxxxxx xxxxxx, o xxxxxxxxxx objemu 1 xx, x výpustním xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxx ze xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, xxx xxxxx má xxxxxxx xxxxxx asi 90 xx 100 x. Xxxxxxx hloubka xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx 10 xx. Xxx nesmí xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx bránily xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx skla:
Pomůcky xx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx jednu xxxxxx xxx xxxxxxx 170–175 °X;
x) x xxxxxxxxx (4.1.2), nejméně 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx použití xxxxxxxxx xx nutné dbát xx xx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x nádobách, xxxx xxxxxx by neměly xxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx ze xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xx měly xxxxxxx xxxxxxxxxx páry.
Pipety xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx – xxxx xx xxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx(+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10-15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 ml |
Sušené xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx žádné xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxx srovnávacími xxxxx xx sušeným xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X xxxxx xxxxxx suspendovat x xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx mléko. Xxxxx xxxxxxxx usnadňuje xxxxxx. Poté xxxxxx xxxx x xxxxx xx xxxx xx xxxxxxx míchání, xxxxx xx agar xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx x páře xxx 30 xxxxx.
Xxxxx je xx xxxxxxxx, přefiltrovat xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx to je xxxxxxxx, upravit xX, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.2 Xxxxxxxxx, sterilizace a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 xx xx xxxxx nebo xx 12 xx 15 xx xx xxxxxxxx (4.2.2). Baňky x zkumavky xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) při 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx nepoužije ihned, xxxxxxxx se v xxxxx při teplotě xxxx 1 x 5 °C, avšak xx xxxx xxx 1 xxxxx po xxxx přípravě.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) se xxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Dodržet xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxx odstředěné xxxxx xxxx rozpouštěním, xxxxx xxxx xxxxxxx produktu.
Upravit xX xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X postupem xxxxx xxxx 5.1, xxxx xxxxxxxx, sterilizovat x skladovat xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. 5.2.
6. Ředidla
6.1 Roztok xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 ml |
Příprava:
Rozpustit xxxxxx xx xxxx, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xX-xxxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx nezbytné xxxxxxx xX roztokem (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °C.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 ml xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X. Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxxx.
Xxxxx xx ředidlo xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ředidla
Ředidlo (6.1) se xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx tablet nebo xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x skladovat xxxxxxx xxxxx xxxx 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx rozpustit potřebné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x zchladit ve xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx mléka
7.2.1 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx [4.1.3 x)] xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx to není xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx vzorek x objemu nejméně 100 xx po xxxx 120 ± 2 xxxxx při 6 ± 0,5 °X.
7.2.2 Xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, aby byly xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xx 25 rychlými xxxxxxxxx xxxxxx se vzorkem. Xx xxxxx zabránit xxxxxx pěny xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx mezi mícháním x odběrem xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx tři minuty.
7.3 Xxxxxxxx primárního ředění (10−1)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xx 9 xx xxxxxxx (6.1), xxxxxxx xxxxxx xxxxx přijít xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxx ředidla xxxx xxx přibližně xxxxxx jako xxxxxxx xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx promíchávat xxxx xxxxxxxx ředění míchačkou (4.1.9).
Xxxxx xx tak xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 ml xxxxxxxxxx xxxxxx (7.3) xx 9 ml xxxxxxx (6.1) podle xxxxxx x xxxx 7.3.
Xxxxx xx xxx xxxxxx 10−2.
X xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx opakuje xxx xxxxxx, dokud nelze xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Naočkování Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxx každé ředění (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx misku.
7.6 Nalévání xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx misky xxxxx xxx 15 až 18 ml xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Xxxxx promíchat xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxx xx inkubaci xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx přípravy xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx nesmí xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx povrchu, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx inkubátoru (4.1.3). Xxxxx inkubovat xxxxxxxx dnem xxxxxx. Xxxxxxxxx na xxxx xxxx xxx šest xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx vzájemně xxxxxxx, xxx xxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx inkubátoru.
Inkubovat 25 xxxxx xxx 21 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx kolonie x Xxxxxxx miskách xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 300 kolonií.
Misky xxxxxxxx xxx tlumeném světle. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx xxxxx xxxx xx xx, aby xxxxxxx k xxxxxx xxxxxx sraženin x xxxxxxx x drobnými xxxxxxxx koloniemi. V xxxxxxx xxxxxxxxxxx provést xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx s xxxxxx zvětšením (4.1.7), x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx cizích xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx povlak xx xxxxxxxx za xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx misky, xxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx počet xxx xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx více xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 a 8.1.4).
8.2 Vypočítat xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx mléka podle xxxxxx vzorce:
∑C / (x1 + 0,1x2) x
xxx:
ΣX je xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 8.1,
(n1 + 0,1 x2)x xx xxxxx xxxxxxxxxxxx vzorku, xxx:
x1 xx xxxxx xxxxx xxx prvním xxxxxxx
x2 xx počet xxxxx při xxxxxx xxxxxx
x xx xxxxxx xxxxxxx, xx základě xxxxxxx byly xxxxxxx xxxxx počty.
Počet xx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx zaokrouhlovaná xxxxxxx xxx, zaokrouhlit tak, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxx:
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 x 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; =278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2=
=629 / 0,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.3 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 10, xxxxx, xx počet xxxxxxxxxxxxxx na xxxxxxxx xx "nižší než 10 × d", xxxxxxx "x" je xxxxxxxxxx hodnota nejnižšího xxxxxxx xxxxxxx.
8.4 Xxxxx xxxx xxxxxxx počty xxxxx xxx 300 x počítání je xxxxx, xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx jej xxxxxxxxxxx xxxxxxxx faktoru xxxxxxx. Xxxxxxxx vyjádřit xxxx "Odhadovaný xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xx".
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx mezinárodně uznaných xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX – XXXXXXXX XXXXXXX PŘI 30 °X
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X.
2. Definice
"Koliformními bakteriemi" xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx 30 °X vytvářejí charakteristické xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, jež jsou xx popsaných podmínek xxxxxxx zkvašovat x xxxxxxx plynu.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx vzorku xxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx a 24 xxxxx xxxxxx inkubovat xxx 30 °C. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x, xxxxx xx xx nutné, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx jejich xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx na 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx laboratorní xxxxxxxx, zejména:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx sušárna, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °C.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na 121 ± 1 °C.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx udržovat xxxxxxx 30 ± 1 °X.
4.1.4 pH-metr xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Očkovací xxxxx xx xxxxxxx platina-iridium xxxx xxxx-xxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x objemem 20 xx, xxx mohly xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (5.2) x Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2.2 Baňky x xxxxxx 150 xx 250 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx selektivního xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.1).
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx objemu 1 – 10 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx x průměru 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx misky x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx nebo xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx misek xx xxxxxxx průměr asi 90 xx 100 x. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx by xxxx xxx nejméně 10 xx. Dno nesmí xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Sterilizace xxxxxxx xx xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxxx jedním x xxxxxx postupů:
a) v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx 170 – 175 °X;
x) x autoklávu (4.1.2), xxxxxxx 20 minut xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx na xx, xxx xxxx xxxxxxxxx dostatečné proniknutí xxxx: xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xx xxxxxx být xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx by xxxx být volné.
Pomůcky xx skla xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx by xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx musí xxx sterilizovány x xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx červení, xxxxx x xxxxxxxx (VRBL xxxx). Sušené selektivní xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
7 x |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
3 x |
|
Xxxxxxx (C12H22O11.H2O) |
10 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
5 g |
|
Žlučové xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxxxx červeň |
0,03 x |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxx |
0,002 g |
|
Agar |
10 xx 15 g xxxxx želírovacích xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx a xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX pomocí xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx to xx xxxxx, xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, aby xx xxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxx xxxxxx xx xxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x ihned xxxxxx xx xxxxxxxxxx 100 až 150 xx do xxxxxxxxxx xxxxx (4.2.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx zchladit ve xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
X xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (6.4).
Xxxxxx xxxxxxxxxx médium xx xxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxx xxxx x brilantovou xxxxxx. Xxxxxxxxxxx kultivační xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
10 x |
|
Xxxxxxx (X12X22X11.X2X) |
10 x |
|
Xxxxxxxxxxx hovězí žluč |
20 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxx |
0,0133 g |
|
Voda |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx složky xx xxxx x uvést xx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxx pH-metru (4.1.4); xxxxx to xx xxxxxxxx, upravit xX xxxxxxxx (nejméně 0,1 xxx/x) hydroxidu sodného xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx sterilizaci xxxx xxxx hodnota 7,2 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx xxxxxx xx 10 xx do xxxxxxxx (4.2.1) xxxxxxxxxxxx Durhamovy xxxxxxxx. Xxxxxxxx uzavřít.
15 xxxxx sterilizovat v xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx nesmějí xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx bubliny.
Zkontrolovat xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx nepoužije xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx při xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx ne xxxx xxx 1 měsíc xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Dodržte xxxxxx výrobce. Upravit xX, xxxxxxxx, sterilizovat x skladovat xxxxxxxxxx xxxxxx podle xxxx 5.1 a 5.2.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxxxx médium
Použít xxxxxx (VRBL xxxx) xxxxxxx x xxxx 5.1.
6.2 Příprava vzorku xxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx byly xxxxxxxxxxxxxx co nejrovnoměrněji xxxxxxxxx, x to 25 rychlými xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xx nutné xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx misek
Sterilní xxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) 1 ml xxxxxx xxxxx do xxxxx xx xxx misek (4.2.4) a tím xxxxxxxxx 3 xx xxxxxx xxxxx (6.2).
6.4 Xxxxxxxx kultivačního média
Do xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 12 xx XXXX xxxxx (6.1)
Xxxxx po xxxxxx xxxxx promíchat xxxxxx Xxxxxxx misky, xxx xx xxxxxxxx došlo x xxxxxxxxxxxx rozložení xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx mléka x xxxxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx nenaočkovanou misku x 12 ml xxxxx VRBL xxxxx, xxxxx byl použit xxx naočkování misky.
Nechat xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 4 xx XXXX agaru (6.1) xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx média.
Nechat ztuhnout.
6.5 Xxxxxxxx Petriho misek
Přenést xxxxx xx inkubátoru (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx misek xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 24 ± 2 xxxxxx xxx 30 ± 1 °X.
6.6 Počítání xxxxxxx
6.6.1 Xxxxxxx kolonie x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx více xxx 150 kolonií. Počítat xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x průměru nejméně 0,5 xx, x xxxx xxx sraženiny xxxxx, charakteristické xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.6.2 Xxxxx xxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. jinou xxxxx, xxxxxxxx nebo xxxx tvar xxxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (6.7).
6.7 Konfirmační xxxx
Xxxxx xxxxx x xxxx 6.6.2 xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx počtu (např. 3 xx 5) xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx (4.1.6), xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx agar x xxxxxxxxxxxx zelení (5.2). Xxxxxxxxx xxxxxxxx 24 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °X.
Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx takové xxxxxxx, xxxxx v Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx plyn.
7. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Použít xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 150 xxxxxxx.
7.2 Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx potvrzených xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxxx xxxxx koliformních xxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
ΣX / x
xxx:
ΣX xx xxxxxxx xxxxx kolonií xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (7.1 v xxxxxxxxxxx se 7.2), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku xxxxx (6.3).
x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (6.3) x xxxxxxxxxxx (3 xx).
Xxxxx se xxxxxxxxxx na xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx více než 100 xxxxxxx. Když xx zaokrouhlovaná číslice xxx, xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx byla sudá.
Pokud xxxx všechny xxxxx xxxxx xxx 150 xxxxxxx, uvést xxxxxxxx xxxx "xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií na 1 xx".
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx nejsou x dispozici.
VII. XXXXXXXXX XXXXXX SOMATICKÝCH XXXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxxx metoda
B. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Xxxxxxxxxxxxx metoda
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx somatických xxxxx x xxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx ve xxxxxx xxxxx za xxxxxx kalibrace x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx X.1).
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx buňkami xxxxxxxx xxxxx, například xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxx xx xxxxx zřetelně xxxxxxx xxxxxxxxxxxx modří
3. Xxxxxxx
Xxxxxx 0,01 xx xxxxx xx 1 xx2 povrchu podložního xxxxxxx. Tenká vrstva xx vysuší x xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx pod xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx daném xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx faktorem, x xxxxx získat počet xxxxx na 1 xxxxxxxx.
4. Xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxx chemikálie čistoty x.x..
Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxx xxxx |
0,6 x |
|
Xxxxxxx – 99 % |
54 ml |
|
1,1,1-trichlorethan xxxx xxxxxxxxxxxxxxx |
40 ml |
|
Ledová xxxxxxxx xxxxxx |
6 xx |
Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx uskutečnit x xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx x 1,1,1-xxxxxxxxxxxxx xxxx tetrachlorethan x xxxxxx xx xxxxx xxxxx xx 60 xx 70 °X. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx modř, xxxxx xxxxxxxxx, 12 xx 24 xxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxx 4 °X x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx octovou. Xxxxxxxxxxxx xxxx filtr x xxxxxxxxx velikosti xxxx 10 xx 12 xxxxxxx a uchovat xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx uzavřené láhvi. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx ze xxxx
5.1 Xxxxxxxxx umožňující xxxxxxxx 500 × xx 1000 ×
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 0,01 ml x xxxxxxxxx xxxxxxx ± 2 %.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 20 mm × 5 mm xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 20 × 5 mm pro xxxxxx xxxxxx.
5.4 Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx (30 °X xx 50 °X) xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5 Xxxxxxxxxx (xxx) xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx.
5.6 Xxxxx xxxxx, nastavitelná na 30 xx 40 °X xxx ohřívání xxxxxx mléka.
5.7 Podložní xxxxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx po 0,01 xx.
6. Postup
6.1 Vzorek xxxxx
Xxxxxx mléka xxxx xxx testován xx xxxxx hodin xx xxxxxx xxxxxx. Během xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 6 °X. Vzorek nesmí xxx xxxxxxx.
6.2 Xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx (5.6) xx 30 xx 40 °X. Poté xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xxxxx xxxx kalibrována mikrostříkačka (5.2), xxxxxxxxx 20 °X.
6.3 Xxxxxxxxx ošetření xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) xxxxxxxxx xxxxxxxxx, vysušit xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Skladovat x xxxxxxx, xxx jsou xxxxxxxx xxxx prachem.
6.4 Xxxxxxxx tenké xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx (5.2) odebrat 0,01 xx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx styku x mlékem. Přiložit xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) x xxxxxxx xxxxxxxxx obvod xxxxxxxxx (20 xx × 5 xx). Xxxx ji xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Nechat xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx vyhřívací xxxxx (5.4) až xx úplného xxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxx tenké xxxxxx.
6.5 Xxxxxxx tenkých xxxxxx
Xxxxxxx na 10 xxxxx xx barvícího xxxxxxx (4). Sušit x, xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.5). Xxxxxxx tenké xxxxxx xx xxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx x xxxxxxx tak, aby xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx.
6.6 Xxxxxxxxx mikroskopického xxxx
Xx základě xxxxxxxxx xxxxxxxx (500 × xx 1000 ×) xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx (5.7).
7. Xxxxxxxx x výpočet
7.1 Počítání xxxxx
Xxxxxx xxxxxxxxx (5.1). Xxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx, x xx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x x xxxxx je v xxxxxxxxxxxxxx xxxx viditelná xxxxxxx polovina. Počítat xxxx xxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xx xxxx xxxx pole, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx x okrajových částí xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx vrstev x xxxxx x xxxxxxxxxxxx výsledků xxxx xxx kontrolovány xxxxxxx xxxxxx xx měsíc xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx vrstvy. Xxxxxxxx xxx také provádět xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx polí xxxxxxxxxxxx takovým způsobem, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx vrstvy byly xxxxxxxxxx rovnoměrně.
7.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx k xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x mechanických xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx vzorků xxxxx xxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x obsahem 400000 xx 600000 xxxxx/xx xx xxxxx překročit 5 %.
Xxxxx somatických xxxxx, xxxxx xx xxxxx v každém xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx podle Xxxxxxxxxx xxxxxx rozdělení nejméně 400, aby xxxx xxxxxxx kritérium opakovatelnosti.
Podle Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
X = X = x2,
xxx:
X xx xxxxxxx xxxxxxx
X xx xxxxxxx
x xx xxxxxxxxxx odchylka.
Variační xxxxxxxxxx xx:
XX = s × 100 % / X xxxx XX = 100 % / x&xxxx;xxxx XX = 100 % / OBR
M (xxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxx), xxxxx xxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxx 400 pro XX = 5 %).
7.3 Xxxxxxx pracovního faktoru
Při xxxxxxx 0,01 xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx podle xxxx 7.3.1 nebo 7.3.2.
7.3.1 Počítání xxxx xx tenké xxxxxx
Xxxxx xxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx, xx 5 mm. Xxxxx xxxx odpovídá xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, jak xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x mikrometrickou xxxxxxxx (5.7).
Pracovní xxxxxx = 20 × 100 / x × b
kde:
d xx xxxxxx mikroskopického pole x mm, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7)
b xxxxxxx xxxxx spočítaných xxxx.
7.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx
xxx:
x je xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xx, stanovený xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7)
s celkový xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
7.4 Xxxxxxx xxxxxx buněk
S xxxxx získat xxxxx xxxxx na xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (7.1 x 7.2) xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (7.3).
7.5 Přesnost
Variační xxxxxxxxxx (xxx 7.2) xxxxx xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nejsou x xxxxxxxxx.
X. Fluoro-opto-elektronická xxxxxx
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx postup popisuje xxxxxxxxxx postup, xxxxx xx xxxx po xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (viz X.1) používat xxx xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx bez xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. Definice
Pro xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx buňkami xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx mají x xxxxxxxx barvení xxxxxxx XXX minimální xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxx xxxxxx (například 0,2 xx) se xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xx xxxxx tenké xxxxxx xx xxxxxxx disk, xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx buňka xxxxxxxxx xxxxxxxxxx impuls, xxxxx xx zesiluje x xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx buněk se xxxxxxxx x tisících xx xxxxxxxx.
4. Činidla
Pokud xxxx stanoveno jinak, xxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x.x.. Xxxxxxx voda xx xxxxxxxxxxx xxxx deionizovaná, xxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxx čistoty.
4.1 Xxxxxxx roztok
Složení
|
Hydrogenftalat draselný |
51,00 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxx |
13,75 g |
|
Polyethylenglykol-mono-p(1,1,3,3-tetramethylbutyl)-fenylether(například Xxxxxx X-100), 1 % objemové |
10 xx |
|
xX 5,7 až 5,9. Xxxxxxx xxxxx xx 10000 ml. |
Příprava:
Smíchat jednotlivé xxxxxx. Xxxxxxxxxx ve xxxxxxxxxxxx uzavřené xxxxxx xx xxxxxx překročit xxxx dní.
4.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxx)
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
1,0 x |
Xxxxxxx xxxxx xx 1000 xx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx chráněné xxxx xxxxxxx by nemělo xxxxxxxxx dva měsíce.
4.3 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (pracovní xxxxxx)
Xxxxxxx 20 ml xxxxxxxxx roztoku (4.2) x xxxxxxxx xxxxxxxx (4.1) xxx, xxx xx xxxxxx objem 1000 ml. Xxxxxxxx xxxxxx by neměl xxx používán více xxx xxxx xxx.
4.4 Xxxxxxx roztok
Složení
|
Tlumivý xxxxxx (4.1) |
10 ml |
|
Polyethylenglykol-mono-p(1,1,3,3-tetramethylbutyl)-fenylether (například Xxxxxx X-100), 1 % objemové |
10 xx |
|
Xxxxxxx x 25 % xxxxxxxxxx |
25 xx |
Xxxxxxx vodou xx 10000 xx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxxxxx složky. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx.
5. Přístroje x xxxxxxx xx xxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx principu xxxxxxx fluorescence.
Poznámka:
Zařízení musí xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx xx xxxxxxx xxxxx mezi xxxxxxx xxxxxx, které xx xxxx xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx se xxxxxxxx provádí. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx pokynů xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx obsah xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (A).
5.2 Xxxxx xxxxx, x cirkulací xxxx, nastavitelná na 40 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxx, s xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx 15 xx.
6. Xxxxxx xxxxx
6.1 Vzorek xxxx xxx skladován xxx xxxxx teplotě xx xxxxxxxx (5.3). Xxxxx vzorek nebyl xxxxxxxx konzervován, xxxxxxxx xx může xxxxxxx xx po xxxxxxxx 24 hodin xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx byl xxxxxx nízký. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx překročit 6 °X.
6.2 Konzervace
Chemická xxxxxxxxxx se musí xxxxxxx xx 24 xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxx provedena xx xxxxxxxx po xxxxxx xxxxxx.
6.2.1 Chemická xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx:
- xxxxxxxx orthoboritá:
konečná koncentrace xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx 0,6 x xx 100 xx. Xxxxx konzervovaný xxxxxx může xxx xxxxxxxxx dalších 24 xxxxx xxx xxxxxxx 6 xx 12 °X;
- xxxxxxxxxxx draselný:
konečná xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx 0,2 x xx 100 xx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 72 xxxxx xxx xxxxxxx 6 xx 12 °X;
- azid xxxxx:
xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx azidem xxxxxx x xxxxxxx koncentraci 0,024 x/100 ml, xxxxx je vzorek xxxxxxxx xx xxxxxxx 6 až 12 °X ihned xx xxxx odběru x xxxxxxxx xx 48 xxxxx xx jeho xxxxxx;
- bronopol:
vzorek xxxx xxx konzervován xxxxxxxxxx x konečné xxxxxxxxxxx 0,05 x/100 xx, xxxxx xx vzorek xxxxxxxx xx xxxxxxx 6 xx 12 °X xxxxx xx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx 72 xxxxx po xxxx xxxxxx.
6.2.2 Xxxxxx, xxxxx xxx byl xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx konzervován xxxxxxx xx 48 xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxx xxx x vzorky xxxxxxxxxxxx dvojchromanem xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx odpadních vod.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx, se xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 24 hodin xxx xxx 2-6 °X. Xxxxxxxx vzorků x xxx nadojení xx bez xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nedoporučuje, neboť xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxx. Pokud xx přesto xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, vzorek xx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx hodiny xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxx 6.2.1).
7.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx ošetřený xxxxxx (xxx 7.1) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx starý xxxxxx xx vodní xxxxx (5.2) na xxx 40 °X. Xxxx skladovat xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx počítacího xxxxxxxx (5.1) xx 15 xxxxx xx xxxxxxxx ohřívání (viz 7.2). Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx důkladně xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx co xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx vzorku xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx.
8. Spolehlivost
Výsledky opakovatelnosti (x) x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) mezinárodních kruhových xxxxx nejsou x xxxxxxxxx.
Xxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, umožňují xxxx xxxxxx:
(1) xxxxx xxxxx mezi 400 000 xx 500&xxxx;000 xxxx:
- směrodatná odchylka xxxxxxxxxxxxxxx:
xx = 20000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx koeficientu 5–4 %)
- směrodatná xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx:
xX = 40000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 10–8 %)
9. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xx stanoví xxxxxxxxx xxxxx xxx mikroskopem xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
XXXX. XXXXXXX ANTIBIOTIK X XXXXXXXXXXX
XXXXXXX X XXXXXX POUŽITÍ
Tato kapitola xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx mléce x x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx referenční xxxxxx xxxxxxxx:
X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, který xxxxxxxx xxxxxx vzorky xxxxx, xxxxx obsahují xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxx xx xxxxxxx Bacillus xxxxxxxxxxxxxxxxxx var. xxxxxxxxxxxx, XXXX 10149, xx xx testovacího xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx jako reprezentativní xxx takovéto xxxxx.
X. Xxxxxx pro xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x stanovení xxxx xxxxxxxxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx postup popisuje xxxxxxxxxxxx detekci antibiotik x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx mléce x x xxxxxxx ošetřeném xxxxx, xxxxxxx koncentrace xxxx xxxxx než xxxxxx xxxxxxx v xxxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx antibiotik x xxxxxxxxxxx [1]
|
Xxxxxxxxx xxxxx |
||
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxx |
|
|
Xxxxxxxxxxxxxxx |
0,002 |
0,006 |
|
Xxxxxxxxx |
0,002 |
0,005 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,015 |
0,035 |
|
Xxxxxxxx |
0,006 |
0,011 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,10 |
0,40 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,20 |
0,45 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxx |
0,15 |
0,50 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
7 |
15 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx |
4 |
13 |
|
Xxxxxxxx |
1 |
22 |
|
Xxxxxxxxx |
9 |
28 |
|
Xxxxxxxxxx |
0,06 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxx |
1 |
2,25 |
|
Xxxxxxxxx |
0,01 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,01 |
0,1 |
|
Xxxxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxxx) |
0,5 |
1 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2 x |
|
|
Xxxxxx |
5 x |
|
|
Xxxxxx xxxxxxx |
1 g |
|
|
Chlorid xxxxx |
5 x |
|
|
Xxxx |
10–15 x |
|
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx do xxxx. Xxxxxxx pH xxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 při 25 °X.
Xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxxxx xxxx xx 100 xx xx lahviček x naklonit x xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X.
5.1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxx sodný |
2 g |
|
Agar |
15 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx (viz 5.1.3) |
10 ml |
Příprava:
Rozpustit xxxxxx xx xxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xx občasného xxxxxxx xxxxx do xxxx. Přidat trimethoprim xxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx 15 minut xxx 121 ± 1 °C. Xxxxxxx xX, aby xx xxxxxxxxxxx byla xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.1.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxxxx |
5 xx |
|
xxxx Xxxxxxxxxxx |
30 xx |
|
96 % Xxxxxxx |
5 xx/30 ml |
|
Vodado |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (5 xxxx 30 xx) x xxxxxxx xxxxx.
5.1.4 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
0,75 xx |
|
Xxxxxxx |
5,0 xx |
|
Xxxxxxxxx xxxxx |
8,0 xx |
|
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx |
0,025 x |
|
Xxxx |
50 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx ve xxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx x sterilizovat xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx dostupný x xxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx
5.2.1 Ve xxxxxxxx xxxxx x vhodným xxxxxxxx xxxxxxxxx roztok xxxxxxxxxx x 60 μx/xx (100 XX/xx), x xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx ve xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
5.2.2 Xxxxxxxxx pracovní xxxxxx xxxxxxxxxx vložením 1,25 xx xxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2.1) xxxxxxxx destilované xxxx x xxxxxxx xx do 1000 xx. Tento pracovní xxxxxx xxxxxxxx 0,075 μx penicilinu/ml (= 0,125 XX/xx).
5.2.3 Xxxxxxxxx 75 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx penicilinu xxxxxxxxxxxx 0,004 μx xxxxxxxxxx/xx (= 0,0067 IU xxxxxxxxxx/xx) přidáním 4 xx pracovního xxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2.2) xx 71 ml mléka xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.3).
5.2.4 Roztoky penicilinu xxxxxxx xxxxx xxxx 5.2.1 xx 5.2.3 xx xxxx xxx xxxxxxxxxx v den xxxxxxxxx xxxxx.
5.3 Xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx preparát xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx odstředěného xxxxx (10 % x/X) xx vodě, xxxxx xxxx předtím xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxx xxxxxx přiměřené xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx látek; xxxx xxxxx xx xxxxxxx do xxxxx x xxxxxxx se xxxxx hodinu na 100 °C, xxxx xx xxxxxxx do xxxxxxxxxx x xxxxxxxx 0 °X xx 6 °X na xxxx xxxxxxx jednoho xxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
5.4.1 Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx var. xxxxxxxxxxxx XXXX 10149 Xxxx XXXX 10149 xx xxxxxxxxx s xxxxxx X 953.
5.4.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx kulturu pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx agaru (5.1.1). Xxxxx xxxx xx x proužcích xxxxxxxx xxxxxxx testovací xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx 48 xxxxx xxx 63 ± 1xX. Xx inkubaci xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 0 xx 5 oC.
5.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (suspenze xxxx)
5.5.1 Xxxxxxxxx xxxxxxx 20 xx xxxxxxx xxxxx (5.1.1) xx xxxxxxxx Petriho xxxxx (4.2.2) x nechat xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5.2 Sterilní pipetou (4.2.4) xxxxxxx 5 xx sterilní destilované xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (5.4.2) x vymýt xxxxxxxx smyčkou xxxxx xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxx 0 xx 5 °X x použije se xx 36 hodin.
5.5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxx (5.5.2) xx Petriho xxxxx (5.5.1) x důkladně xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx celém xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Inkubovat 16 xx 18 xxxxx xxx 63 ± 1 °X (4.1.1).
Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (5.4.2) nebo xxxxxxx xxxxxx 36 hodin xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx nejméně dvakrát x časovém xxxxxxxxx xxxxxxxxx 36 hodin.
5.5.4 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 10 ml xxxxxxxxxxx vody xx Xxxxxxx misku xxxxxxxxxx xxxxxxx (5.5.3) a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx z povrchu.
Přenést xxxxxxxx xxxx xx xxxxx (4.2.3) xxxxxxxxxx 250 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx se xxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxx 0 xx 6 °X.
5.5.5 Xx 16xx xx 18ti xxxxxxxx inkubaci xxx 63 ± 1 °X xx agarovém xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx 5 x 10 xxxxxxx na xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx sraženiny nebo xxxxxxxxx, měla xx xx nahradit novou xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ze xxxxxxx xxxxxxx (5.4.2).
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx médium (5.1.2), poté zchladit xx 55 °C.
5.6.2 Xxxxxx část xxxxxxxx xxxxxxxxx spór (5.5.4) x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (5.6.1) xx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx. Důkladně xxxxxxxxx.
5.6.3 Přenést xx xxxxxxxx zkumavky nebo xxxxxx (4.2.6) 0,3 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.6.2), xxx xx xxxxxxxxx 5 mm xxxxxx, poté uzavřít xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxx, x xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxx zkumavky/ampule 12 xxxxx ve svislé xxxxxx.
5.6.4 Zkumavky/ampule mohou xxx xxxxxxx týž xxx, xxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx 0–6 °X, xxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxx se xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx 24 xxxxx xx xxxxxx, x xx xx xxxx xx xxxxxxxx xxx teplotě 0-5 °X. Pokud xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx 24 hodin, xxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (−30 °xx - 15°X), xxx se xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.2 Xxxxxxx x nesmazatelně xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx (5.6). Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx stojánku (4.1.3) xxxxx xxxxxxxxxx pro xxxxxx a xxxxx (5.2 a 5.3).
6.3 Xx každé zkumavky/ampule xxxxxx 50 xxxxxxxxxx xxxxxxx roztoku (5.1.4).
6.4 Xxxxxx xxxxx řádně xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx (4.1.4) xxxxxxx 0,1 xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx každého xxxxxx xxxxxx xxxx novou xxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.5 Xxxxxx xxxxx xxxx 6.4 xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx použití xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,004 μx/xx (= 0,0067 XX/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx (5.2.3).
6.6 Xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.4 xxxxxxxx xxxxxxx způsobem xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.3) xxxxxxx xxxxxx mléka.
6.7 Xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx a xxxxxxxx se xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxx xx nejméně 2½ až 2¾ xxxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxxxxx 63 ± 1 °X (4.1.2).
6.8 Xxxxxxx xxxxxxxx xx zkumavkami/ampulemi x xxxxx lázně.
6.9 Xxxxxxxxx xxxxx agarového xxxxx (xxx 7).
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Purpurové xxxxxxxxx agarového xxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx testovacím xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxx x xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx "xxxxx xxxxxxxxx" uvedené v xxxxxxx na xxxxxx 39. Xxxxx zabarvení xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx roztokem xxxxxxxxxx (6.5) zůstane xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx citlivé.
7.2 Částečné xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx nepravidelné xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx v koncentracích xxxx xxxxxxxxxxxxx uvedenými xx straně 39.
7.3 Xxxxx zabarvení xxxxxxxxx xxxxx xx zkumavkách/ampulích xxxxxxxxxxxx vzorek xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx mléka xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek v xxxxxxxxxxx organismu.
7.4 Xxxxx xx purpurové zabarvení xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, zkumavky/ampule xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Xxxxxxxx xxxxxxxx všech vzorků x xxxxxxxx xxxxxxxxx x 7.1 x 7.2 xxxxx xxxxxx "X".
Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, musí xxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X. Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx penicilinů x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tento xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx penicilinu nebo xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxx (X.7.1) xxxx xxxxxxxxxx reakcí (A.7.2).
Citlivost xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx
Xxx X.1.
2. Xxxxxxxx
2.1 Xxxxxx xxxxx obsahuje xxxxxxxxxxx, včetně xxxxxxxxxxx, xxxxx popsaným xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx inhibiční xxxx xxxxxxx 2 xx kolem xxxxx.
2.2 Xxxxx xxxxxx, který xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, včetně xxxxxxxxxxx (2.1), a xx kterému xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxx), xxxxxxxxx čirou xxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xx průměr xxxx bez penicilinázy, xxxxxxxxx xxxxxx xx xxx penicilin nebo xxxx xxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxx včetně xxxxxxxxxxx.
2.3 Pokud tato xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx (2.2) inaktivována, inhibiční xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxx penicilin, xxx xxxx to xxx xxxx xxxxxxxx [xxx směrnice 85/397/EHS, xxxxxxx A, kapitola XX, A.1.f) x 2x)].
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx cloxacillin xxxxx, xxxxxx nebo jsou xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo jsou xxxxxx x nemohou xxx identifikovány xxxx xxxxxxxxxx (xxx 7.3).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx papírový xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx média xxxxxxxxxxxx Bacillus xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx. Normální xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxx x xxxxx přítomny xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx xxxx jiné xxxxxx na xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x mléce.
4. Xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx x xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxx X.4.1.
4.1.2 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 80 ± 1 °X.
4.2 Pomůcky xx skla
Viz X.4.2.
4.3 Xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky, x xxxxxxx 9 xx 13 mm, schopné xxxxxxxxxx xxx 130 xx xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx).
5. Xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx testovací xxxxxxxxxx xxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx musí xxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Musí xx xxxxxx xxxxxxxxxxx voda xx skle xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx alespoň xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1 Xxxxxxxxxx xxxxx
5.1.1 Xxxxx agar (X.5.1.1)
5.1.2 Xxxxxxxxxx médium xxx detekci inhibičních xxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 g |
|
Trypton |
5 x |
|
Xxxxxxx |
1 x |
|
Xxxxxx trimethoprimu xx tetroxoprimu (X.5.1.3) |
10 xx |
|
Xxxx |
10–15 g xxxxx xxxxxxxxxxxx vlastností xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx rozpustit xxxxx xxxxxx xx xxxx, xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xx přidání xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxx hodnotu pH, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx 8,0 + 0,1 při 25 °X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx 15 xxxxx při 121 ± 1 °X.
5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx
Xxx X.5.2.
Xxx kvantitativní xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek (8) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx xxx inhibičních xxxxx (X.5.3) x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx:
x) 0,004 μg/ml (0,0067 XX/xx)
x) 0,006 μx/xx (0,01 XX/xx)
x) 0,03 μg/ml (0,05 XX/xx)
x) 0,06 μx/xx (0,01 XX/xx).
5.3 Roztok xxxxxxxxxxxx
5.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx penicilinázy (xxxx-xxxxxxxxx) xx sterilní xxxxxxxxxxx xxxx s xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 1000 X/xx. Xxxxx xxxxxx, xxxxxxx rozdělený xx xxxxx xxxxx, je xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx při 0 °C až 5 °X.
Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxx penicilinázy xxxxx xx inaktivaci 0,6 μx (= 1 XX) penicilinu. U xxxxxxxxxxxx x neznámou xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxx proto xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.3.2 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx se kontrolním xxxxxxxx xxxxxx, že xxxxxxxx odpovídající xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx organismus
Viz X.5.4.
5.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx spór)
Viz X.5.5.
5.6 Xxxxxxxx Petriho misek
5.6.1 Xxxxxx rozpustit xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), xxxx xxxxxxxx xx 55 xX.
5.6.2 Xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx (5.5) x nezbytnému xxxxxxxx částí agarového xxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), x xxxxx získat xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, a xxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx misky (X.4.2.2), xxxxxx vyhřáté xx 55 °C, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx se xxxxxxxxx 0,6 až 0,8 xx vrstva. Pro Xxxxxxx misku x xxxxxxxx xxxxxxx 140 xx je třeba xxx 15 ml xxxxxxxxx média, xxx xx vytvořila 0,8 xx xxxxxx.
5.6.4 Xxxxxxx Xxxxxxx misky xx xxxxxxx, xxxxxxxxx povrch, xxxxx vodorovnost se xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx x nechat xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx média, xxxxxx xxxxx na xxxxx x xxxxxxx xx dnem xxxxxx, xxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx povrchu xxxxxxxxx xxxxx.
5.6.5 Xxxxx připravené Xxxxxxx misky se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxx, ale xxxxx být používány xxxxxxxxx dva xxxxx, xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x uchovávají xx při 5 °X.
5.6.6 Xxxxxxx xxx Xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
6. Postup
6.1 Xxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 X xxxxxx x pozitivním xxxx xxxxxxxxx výsledkem podle "xxxxxx X" (X.7.1 x X.7.2) xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x kvantitativního xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1.2 Nejdříve xxxxxxxx vzorky 10 xxxxx xx 80 ± 1 °X, xxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek.
6.1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxx 10 xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx sterilní xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx. X xxxxx xxxxxx xxx 0,4 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.3) x xxxxx xxxxxxxxx.
6.2 Xxxxxxx inhibičních xxxxx
6.2.1 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx (4.3) xx vzorku xxxxx (6.1.2) pomocí xxxxx a suché xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx otřením disku x xxxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx položit xxxx xx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx (5.6) x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.2.2 Disky xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx od xxxxxxx xxxxxxx 20 xx x xx okraje xxxxxxx 10 xx.
6.2.3 Xxx kontrolu xxxxxxxxxx xx xxxxx (4.3) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.2) musí xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx 2 % xxxxx disků xx xxxxxx xxxxx; xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
6.2.4 Po xxxxxxxxx rozmístění xxxxx xxxxx na xxxxxxx xxxxxx a po xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx vzhůru x xxxxxx xx xxxxxxxxx 2,5 xx 5 hodin xxx 63 ± 1 °X.
6.2.5 Xx inkubaci xxxxxxxx xxxxx při xxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx zóny xx xxxxx.
6.2.6 Standardní xxxxxx xxxxxxxxxxxx (6.2.3) xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 2 xx zóny.
6.2.7 Xxxx xxxx xxxxx disků xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx nebo větší xxx xxxxxxxx xxxxxxx x 6.2.6, xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.3 Identifikace x xxxxxxxxxxxx inhibičních látek
6.3.1 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (6.1.2) x se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (6.1.3). Xxxxxxx přidání xxxxxxxxxxxx xx 10 xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx napuštěný xxxxxxxxxxxxx (5.3.2) x xxxxxx xx na testovací xxxxx.
6.3.2 Postup 6.2.1 xx provede xxxxxx xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x 5.2 x) až x).
6.3.3 Xxxxxxxxx průměrný xxxxxx xxxxxx inhibičních xxx xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx vzorky xxxxxxxxxxxx x pro standardní xxxxxxx xxxxxxxxxx.
7. Interpretace xxxxxxxx (xxx 2)
7.1 Xxxxx xx kolem xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx žádná xxxx zóna, ale xxxx xxxx se xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx mléka, xxxxxx velká nebo xxxxx xxx xxxx xxxxx disku xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2x)), inhibiční xxxxx xx vzorku xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx sodného xxxxx xxxx vyšší než 0,004 μx/xx.
7.2 Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx čiré zóny xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx penicilinázu xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxx se vzorkem xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx použité x xxxxx postupu.
7.3 Xxxxx je průměrná xxxxxxx xxxxxxx čiré xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx než xxxxxxxx xxxxxxx průměru xxxx xxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx podle 6.1.2, xxxxxx mléka obsahuje xxxxxxxxx x antibiotika, xxxxxx xxxxxxxxxxx, a xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx. Syntetické xxxxxxxxxx, xxxx je xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx být xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx jako inhibiční xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, inhibiční xxxxx xxxx než xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx postupy.
8. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx může xxx provedeno xxx xx sestrojení xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx výpočty xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxx penicilinu x xxxxx (5.2 x) xx x)).
8.2 Xxxxxxxxxx standardní křivky
Vzhledem x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxx korelace xxxx xxx10 koncentrace xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx papír xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxxx zón xx xxxxxx. Inhibiční zóny xx počítají xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx se xxxxxxxx xxxxxxx xx základě xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x zakreslí se xxxxxxxxxx xxxxxx.
8.3 Výpočet
Koncentrace xxxxxxxxxx ve xxxxxx xxxxx lze xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx. Pro přesné xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx pětkrát xxxxx xxx poloměr xxxxx.
9. Xxxxxxxxx výsledků
9.1 Xxxxxxxx xx vyjadřují jako xxxxx xxxxxxxxxx rovný xxxx xxxxx xxx 0,004 μx/xx (xxxx xxxxxxxx stanovené xxxxxxxxxxx) xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx penicilin.
9.2 Xxxxxxxxxxxxxx (x) x xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X)
Xxxxx nejsou x xxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxxxx.
XX. DETEKCE XXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
V xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/XXX, přílohy X, xxxxxxxx XXX xxxx 2, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx pokyny, xxxxx xxxx být xxxxxxxxxx, xxx detekci xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x pasterovaném xxxxx.
2. Definice
Vyšetření se xxxx provést u xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx příčinou onemocnění xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx ošetření, které xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx patogenům. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx X, xxxxxxxx XXX xxxxx 2 uvedené xxxxxxxx, pokud jde x xxxxxxxx kolonií xxx 30 °X x 21 °C, xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx test xx xxxxxxx patogeny xx xxxxxxxx pouze xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx spojitost xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
3. Postup
Postupy a xxxxxxx xxxxxxxxx musí xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x zdravotní xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx. Pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx, pokud xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxx x xxxxxxxx
Xxx každý xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx výsledek xxxxxxxx xxxxx:
Xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxx "xxxxxxxxxx" xx "xxxxxxxxxxxx" x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Zpráva xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.