Rozhodnutí Xxxxxx
xx xxx 14. xxxxx 1991,
xxxxxx xx stanoví xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
(91/180/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx x založení Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx společenství,
s ohledem xx směrnici Rady 85/397/XXX ze xxx 5. srpna 1985 x xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx otázkách xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx [1] naposledy pozměněnou xxxxxxxx 89/662/XXX [2], x xxxxxxx na xx. 10 xxxx. 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x tomu, xx xxxxx čl. 10 xxxx. 2 Xxxxxx xxxxxxx metody xxxxxxx x testování, které xx xxxx používat xxx xxxxxxxx dodržování xxxxx pro xxxxxx xxxxx x tepelně xxxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx pro xxxxxx mléko je xxxxxxxx stanovit zejména xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx x přítomnosti xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx stanovit xxxxxxx metody xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx koliformních bakterií, xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, nepřítomnosti xxxxxxxxx, přítomnosti peroxidázy, xxxxxxxxxxxxx antibiotik x xxxx mrznutí;
vzhledem k xxxx, xx pro xxxxxxxxxxxxx mléko x XXX mléko xx xxxxxxxx stanovit zejména xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx x xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxx xxxxxxx stanovit referenční xxxxxx analýzy x xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx určitých xxxxx; xx xx xxxxxxx nezbytné xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx rutinní xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx; xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx těchto xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xx xx, aby xxx xxxxxxxx norem xxxxxxxx 85/397/XX byly xxxxxxx vhodné rutinní xxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx stanovení referenčních xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx zahrnuje i xxxxxxxxx xxxxxxx analýzy x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx jednotného xxxxxxx výsledků;
vzhledem x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx rozhodnutí xxxx x souladu xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
XXXXXXX XXXX XXXXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxx:
- stanovení xxxx mrznutí,
- stanovení xxxxxx mikroorganismů při 30 °C,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 2
Xxxxxxxxxx postupy xxxxxxx x testování xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx mrznutí,
- stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 21 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií – xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx,
- detekce xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 3
Referenční xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 30 °X,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Článek 4
Xxxxxxx referenčních xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx, xxxxxxxxx kritérií xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxx pravidel xxxxxxxxxxx v příloze X.
Xxxxxx 5
Xxxxxxxxxx postupy xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx 1, 2 x 3 xxxx xxxxxxx x xxxxxxx II.
Článek 6
Xxxx rozhodnutí xxxx přezkoumáno xx 31. xxxxxxxx 1992, xxx se zohlednil xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Článek 7
Xxxx rozhodnutí xx xxxxxx členským xxxxxx.
V Xxxxxxx xxx 14. února 1991.
Xx Xxxxxx
Xxx Mac Sharry
člen Xxxxxx
[1] Úř. věst. X 226, 24.8.1985, x. 13.
[2] Úř. věst. X 395, 30.12.1989, x. 13.
XXXXXXX X
XXXXX
X. Xxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Odběr xxxxxx xxxxxxxx x tepelně xxxxxxxxxx xxxxx
X. XXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxx
Xxxxxx ustanovení xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxx x xxxxxxxxx. Příslušné xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx vzorků x xxxxxxxxxx mléka musí xxxxxxxxx tato xxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxx
2.1 Voda
2.1.1 Pokud xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx použitá x xxxxxxxxxxx, ředění xxxx xxxx musí xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx bez xxxxx, xxxxx mohou xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx testovacích xxxxxxxx.
2.1.2 "Rozpouštěním" xxxx "xxxxxxx" (bez xxxxxxx xxxxxxxxx) xx xxxxxx "xxxxxxxxxxx xx vodě" xxxx "xxxxxx xxxxx".
2.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx používané xxxxxxxxxx xxxx xxx xxx xxxxxx analytické xxxxxxx.
3. Přístroje x xxxxxxx
3.1 Xxxxxx přístrojů x xxxxxxx
Xxxxxxxxx seznam xxxxxxxxx a xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx týká xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xx zvláštní xxxxxxxxxxx.
3.2 Analytické xxxx
"Xxxxxxxxxxxx xxxxxx" xx xxxxxx xxxx s přesností xxxxxx na 0,1 xx.
4. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx xxxx stanoveno xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx o xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx průměrem dvou xxxxx, které xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (5.1) xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx není xxxx xxxxxxxxx opakovatelnosti xxxxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Výpočet xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx jinak, xxxxxxxx xx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
5. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx postup jsou xxxxxxxxxx xxxxx:
5.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) xx hodnota, xxx kterou xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx mezi dvěma xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testu, xxxxx byly xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx výrobkem za xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx přístroj, xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxxx).
5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) xx hodnota, xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx dvou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx testů, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx testovacím xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx (různí xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx, různé xxxxxxxxxx x/xxxx různé xxxx).
5.1.3 Xxxxx není xxxxxxxxx jinak, xxxxxxx xxx xxxxxxxx opakovatelnosti x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx, uváděné x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx 95 % xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx XXX 5725, xxxxx xxxxxx, 1986. Xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx uznaných xxxxxx, xxxxxxxxxxx xx spolupráci, xxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx tyto xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx. X xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx opakovatelnosti x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1.4 Xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x souladu x xxxxxxxxxxxxx pokyny.
6. Xxxxxx x testování
Zpráva x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x získané xxxxxxxx. Xxxx jiné musí xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a všechny xxxxxxxxx, které xx xxxxx xxxxxxxx výsledky. Xxxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxx všechny informace xxxxxxxxxx xxxxxx identifikaci xxxxxx.
XX. XXXXX VZORKŮ XXXXXXXX A TEPELNĚ XXXXXXXXXX MLÉKA
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx popisuje referenční xxxxxx pro xxxxx xxxxxx syrového a xxxxxxx ošetřeného xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxx vzorků, přeprava x xxxxxxxxxx xxxxxx xx použijí xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx mléko xxxxxxxxxx xx skladovacích a xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx uvedené x xxxxxx 2, 4.4, 5 x 6 xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx.
2. Xxxxxx
Xxxxx vzorků xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka xxxxxxxxxx x konvích, nádržích xxxx. xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, kteří byli xxxx xxxxxxx vzorků xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx orgány xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx považují xx nezbytné, xxxxxxx xxxxxxxxxxx pověřené xxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx, xxx bylo xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx reprezentativní x x xxxxxxx x xxxxx šarží.
Pokud xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx laboratoř xxxxxxxx za xxxxxxxx, xxxxxxx zaměstnance xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx byla xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxx pro xxxxx vzorků
3.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx být xxxxx zhotoveno x xxxxxxxx oceli nebo x xxxxxx vhodného, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx, xxx.). Xxxxxxx a xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx v nádobách xxxx xxx dostatečně xxxxxx plochu xxxxxxx, xxx bylo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx promíchání xxxxxxx xxx xxxxxx žluklé xxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx rukojetí x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx 50 xx.
Xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx x vhodného xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx při xxxxxx xxxxxxxx xxx odběr xxxxxx (xxxxxx xxxxx x víček) xxxxx xxxxxxxx takovou změnu xxxxxx, která xx xxxxxxxxx xxxxxxxx testů. Xxxxxxx materiál x xxxxxx na vzorky xxxx xxx čistý, xxxxx, hladký xxxxxx xxx xxxxxx x xxxx xxx zakulacené xxxxx.
3.2 Xxxxxxxx xxx xxxxx vzorků xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxx xxxxx vzorků (včetně xxxxx) xxxx splňovat xxxxxxxxxx xxxx 3.1 x xxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxx xx pro xx sobě xxxxxx xxxxxx xxxxxx použije xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xx xxxxxx xxxxxx vzorku vyčištěno x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx laboratoř xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx nedošlo x xxxxxxxxx výsledků xx xxxx jdoucích vzorků.
4. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx
4.1 Xxxxxx xxxxx
Xxx ohledu xx xxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx být xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx buď xxxxx, xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxx xx promíchání, xxxx xx mléko ještě x xxxxxx.
Xxxxx xx x nádrže xxxxxxx xxxxxxx xxxx vzorků xxxxx pro xxxxx xxxxx, xxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx byly xxxx xxxxxx téměř xxxxxxxx xxxxxxx a xxx xxx xxxx možné xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxx hrozilo xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxx xxxxx vzorků
4.2.1 Xxxxx xxxxxx x xxxxx x konví xx xxxxx
X xxxxxxxx promíchání xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx nebo xxxxx xxxxxx x dolů, xxxxxxx xxxx xx xx, xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x aby se xx xxxxx konve xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Vzorek, xxxxx je xxxxxxxxxxxxxxx xxx celou xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.2 Xxxxx z xxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx xxxxx mechanicky xxxx xxxxx dokud xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx homogenity.
Pokud xxxxx mléka neumožňuje xxxxxxx xxxxxxxxxx míchačky, xxxxxx ručně.
4.2.3 Xxxxx xxxxxx x misky xxx
Xx nezbytné, aby xxxxx bylo řádně xxxxxxxxxx, xxxx se xxxxxx do xxxxx xxx. Za xxxxxx xxxxxxxxx rovnoměrného rozdělení xxxx může být xxxxxxxx další xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx objem xxxxxxx, x xxx xx xx odebrat vzorek, xxxxxxxx kapacitu xxxxx xxx, xxxxxxx reprezentativní xxxxxx x celé xxxxxxx xxxxxxxx podle xxxx 4.2.4.
4.2.4 Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxx, x xxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx vzorků, xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx, x každé xxxxxx xx odebere xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxx x xxxxx nádoby nemusí xxx xxxxxxxx testovány, xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxx x xxxxxxxx, které xx nachází x xxxxxx, xx xxxxx xxx každý ze xxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (více) vzorek (xxxxxx) x těchto xxxxxxxxx množstvích.
4.2.5 Xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx – xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx
4.2.5.1 Xxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
X promíchání xxxxxx xxxxxxx nádob, skladovacích xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx cisternových xxxxxx xx xxxxxxxxxx mechanické xxxxxxxxxx (4.2.5.2).
Délka promíchání xxxxxx xx xxxx, xx xxxxxx xxxx xxxxx x xxxxx. Xxxx být xxxxxxxxx, xx postup xxxxxxxxxx xxxxxxx x každém x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx testování. Xxxxxxxx promíchání xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx provedených na xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx částí xxxxx, nebo x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx mléka z xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (syrového xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx) xx xxxxxx, pokud xx xxxxxx xxxxxx xxxx x obou xxxxxx odebraných xx xxxxxx podmínek xxxxx xxx 0,1 %.
Xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx malé množství xxxxx, xxxxx xxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx pro xxxx xxxxx. Proto xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x průlezového xxxxxx. X případě xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx je třeba xxxxxx vytéci dostatečné xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx zajištěna xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx nádob xxxx xxxxxxxxxxxx nádrží, cisternových xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx:
- mechanickou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx elektrickým xxxxxxx,
- xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x umístěnou x xxxxxxxxxx otvoru; xxxxxxxx xx xxxxxxxx x mléce,
- x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx vagónů xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxxxxxx hadici, xxxxx je xxxxxxxx xx pumpu x xxxxxxxx xx průlezového xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx, stlačeným x xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xx minimální xxxx x xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx odběr vzorků
Automatické x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx vzorků xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx testovací laboratoří xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxx x xxxxx používání podrobeno xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx odpovědný xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x cílem xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx objem xxxxxxxxx mléka, x xxxxx xxxx xxx xxxxxxx vzorek,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxx xxxxxxx s minimálním xxxxxxx xxxxxx),
- schopnost xxxxxxxxxx reprezentativní vzorek x xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxx používání xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx xxxx příslušný xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx orgán xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx objem xxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx objem xxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx opatření, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.
4.4 Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxx mléko xxxxxx k xxxxx xxxxxx spotřebě x xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, vzorky se xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx, x xx, xxxxx xx xx xxxxx, ihned xx xxxxxxxxxx (v xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx mléka x xxx xxxxxxxxx).
X xxxxxxx druhu xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx UHT x xxxxxxxxxxxxxxx) xx xxxxxxx takový xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx vyšetření, která xxxx xxx xxxxxxxxx, x xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx testovací xxxxxxxxxx xxxx podle xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
5. Identifikace xxxxxx
Xxxxxx xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxx 2).
6. Xxxxxxxx x skladování xxxxxx
Xx souhlasem xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx orgánu xxxxxxxx xxxxxxxxx laboratoř xxxxxx xxxxxxxx se lhůty x xxxxxxxx přepravy x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx být dodrženy x xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, a xx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx a testování, xxxxx xx být xxxxxxx.
Xxxxxx stanoví xxxx:
- xxxxx přepravy a xxxxxxxxxx je xxxxx xxxx xx to, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zápachu x přímému xxxxxxxxxx xxxxxx. Je-li xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx průsvitná, xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxx,
- vzorky xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx testování xxxx xxx přepravovány x xxxxxxxxxx xxx teplotách 0 xX xx 4 xX. Xxxx xxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx musí být xx xxxxxxxxx a x xxxxxx případě xxxxx xxxxxxxxxx 36 xxxxx. Příslušný xxxxx xxxx souhlasit, aby xxxx xxxxxxx skladování 0 oC xx 6 oC, xxxx-xx xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx delší xxx 24 xxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx mikrobiologické xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx teplotách 0 xX xx 4 xX. Doba xxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxx xxx co xxxxxxxxx x x xxxxxx xxxxxxx nesmí xxxxxxxxxx 24 hodin,
- xxxx vzorky mléka xxx xxxxxx syrového xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx analýzy musí xxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x doba xxxx xxxxxxx vzorku a xxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx testy, xxxx xxxxxxx v xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
XXXXXXX X
XXXXX
X. Xxxxxxxxx xxxx mrznutí
II. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
XXX. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X
X. Stanovení xxxxxx mikroorganismů xxx 21 °X
XX. Stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií – počítání kolonií xxx 30 °X
XXX. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
XXXX. Xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx
XX. Detekce xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
X. STANOVENÍ XXXX XXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx mrznutí xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, UHT xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx mléka xxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx), x xxxx xx xxxxxxxxxxx řízená xxxxx ochlazována xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx teploměr.
K xxxxxxxxx xxxx xxx typy xxxxxxxxx. První xxx xxxxxxxxx maximální bod xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, kdežto xxxxx xxx xx x obchodních důvodů xxxxxxxx xxx, xx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxxxxxx xxxx odečet. Xxxxxxxx x xxxx, xx xx xxxxx lišit xxxxx křivky xxxx xxxxxxx různých xxxxx xxxxx, xxx x xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx použitých xxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx hledajících xxxxx. Xxxxxxxxx s pevně xxxxxxxxxx časem se xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx testování.
Bod xxxxxxx xxx xxxxxx xxx odhad xxxxxx xxxxxxx cizí xxxx x xxxxx za xxxxxxxxxxx, xx kyselost xxxxxx xxxx vyšší xxx 0,18 g xxxxxxxx xxxxxx na 100 ml (viz xxx 7.4).
2. Definice
Bod xxxxxxx xxxxx: hodnota xxxxxxxx x souladu x popsaným xxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxx (°X).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx x závislosti xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, která xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx k xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xx kalibruje takovým xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxx jako xxx vzorky xxxxx xxxxxxx xxxxxx odečty xxx xxx standardní xxxxxxx. Za xxxxxx xxxxxxxx plató udává xxx xxxxxxx xxxxx xx stupních Xxxxxx.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx z xxxxxxxxxxx řízené xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx snímače (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx) x příslušným xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx a xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx x xx xxxxxxxx na xxxxxx.
4.1.1 Xxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxx.
4.1.1.1 Xxxxxxx xxx
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx vhodnou xxxxxxxx kapalinu, xxxxx xx xxxxx xxx, xxx teplotní rozdíl xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxx vyšší xxx 0,2 °X. Teplota xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx ± 0,5 °X xx xxxxxxxxx hodnoty xxxxxx výrobcem.
Je xxxxxxxx, xxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Celá xxxxxx zkumavky na xxxxxx pod xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx chladicí xxxxxxxxx.
4.1.1.2 Xxxxxxxxxx xxx
Xxxxx zkumavky xx vzorky xxxxxx xxxxxxxxxxx proud xxxxxx xxxxxxxx kapaliny. Xxxxxxx xxxxxxxx může kolísat xxxxxxx v xxxxxxx ± 0,5 °X xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx 33 % (X/X) xxxxx xxxxxx 1,2-ethandiolu (xxxxxxxxxxxxxx).
4.1.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx se xxxxxx xx xxxxxxxx sondy x maximálním průměru 1,80 ± 0,2 xx a o xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 0,31 xx. Časová xxxxxxxxx termistoru musí xxx xxxxx xxx 2 xxxxxxx a xxxxxxx x (viz xxxxxxxx) xxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxxx napětí, xxxxx a konstanta xxxxxxxx xxxx být xxxxxx, xxx při − 0,512 °C xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x 0,0005 °X. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx může xxx ± 5 %.
Xxxx xx xxxxx x xxxxxxxxx x pracovní xxxxxx, xxxxx skleněné xxxxxxx xx musí xxxxxxxx v xxx xxxxxxxx xx xxxxxx x x bodě, xxxxx xx 44,6 ± 0,1 mm xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (xxx obrázek xx xxxxxx 15). Xx třeba xxxxx xxxxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx sondy xx této xxxxxx.
Xxxxxxxx:
β xxxxxxxx termické xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx
− xX / xX × 1 / X = β / X2
xxx:
X xx xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx
X je odpor x ohmech xxx xxxxxxx T,
− xX / xX × 1 / X xxxxxxxx koeficient
β xx xxxxxxxxx, která závisí xx materiálu xxxxxxxx xxx výrobě termistoru. X běžné xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx 3000.
4.1.3 Xxxxxx x odečítací xxxxxxxx
4.1.3.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx křivce xxxx xxxxxxx. Plató xx xxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx s přesností xx ± 0,002 xX xx xxxx xxxxxxx 20 sekund.
4.1.3.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx Wheatstoneovým xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx tolerance xx ± 10 % x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx není xxxxx xxx 2×10−5°X.
Xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx linearity x xxxxx xxxxxxx x xxxx xxx x 0,3 % xxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxx kalibrace xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx po xxxxxxxxx 0,001 °C.
4.1.3.3 Xxxxxxxxxxx provoz
Odečítací xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx 0,01 °X x xxxxxxx xx 0 °X xx –1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx vyšší než 0,001 °C.
Linearita xxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx xxx správné xxxxxxx přístroje nevznikla x xxxxxx xxxx xxxxxxx xx – 0,400 °X xx – 0,600 °X xxxxx xxxxx xxx ± 0,001 °X.
4.1.4 Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx použije xxxxxx drát o xxxxxxx 1 xx 1,5 xx, xxxxx xxxxxxxxx x mlékem,.
Míchačka xx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx vertikálně xxx, aby xxxx xxxxxx xxxxx byl xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx je asi 1,5 xx xxx xx xxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxx bočně x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx výrobce (xxxxxxx ± 1,5 xx), xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx testovacího xxxxxx během xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx dotknout xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx zkumavky.
4.1.5 Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxx jakékoli xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx teplota xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx. X tomu xxxxx lze použít xxxxxxxx; xxxxxx postupem xx xxxxxxxx rozkmitu xxxxxxx xx xxxxx xx xxx xxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxx dotýkala stěny xxxxxxxx na vzorky.
4.1.6 Xxxxxxxx xx xxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx (viz xxxxxxx 1) jsou xxxxxxxx a 50,8 ± 0,1 xx xxxxxx; vnější xxxxxx xx 16,0 ± 0,1 xx x xxxxxxx xxxxxx xx 13,5 ± 0,1 xx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx se xxxxx xxxxx o xxxx xxx 0,1 xx.
Xxxxxxxx xxxx xxx značku xxxxxx xxxxxxxxx od xxxxxxx xxxxxx 29,8 xx (21 xx xxx xxxx zkumavky), xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx.
4.1.7 Zdroj xxxxxxxxx
Xxxxx napětí musí xxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx kolísání nepřekračovala ± 1 % xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxx kolísá x ± 6 %.
4.2 Analytické xxxx
4.3 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 1000 ml, xxxxx X.
4.4 Xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 130 ± 1 °X
xxxx
Xxxxxxxxxx xxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 300 ± 25 °X.
4.5 Xxxxxxxxx
5. Činidla
5.1 Xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx skle, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx 20 ± 2 °X, xx zkumavce xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx x.x., jemně mletý, xxxxxx 5 xxxxx xxx xxxxxxx 300 ± 25 °C x xxxxxxxxxx peci xxxx nejméně 24 xxxxx xxx xxxxxxx 130 ± 1 °X v xxxxxxx x zchlazený xx xxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx exsikátoru.
5.3 Příprava xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxxxxx 1) suchého chloridu xxxxxxx (5.2) xx xxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx (5.1), xxxxxxxxxxxxx xxxxxx roztok xx xxxxxxx xxxxx x objemu 1000 xx x doplnit xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx 20 ± 2 °C.
Skladovat xxxxxxx nejdéle dva xxxxxx xxx xxx 5 °X x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x maximálním xxxxxx 250 xx.
Xxx xxxxxxx roztoků chloridu xxxxxxx při 20 °X
|
x XxXx/x |
°X |
|
6,859 |
-0,408 |
|
7,818 |
-0,464 |
|
8,149 |
-0,483 |
|
8,314 |
-0,492 |
|
8,480 |
-0,502 |
|
8,646 |
-0,512 |
|
8,811 |
-0,521 |
|
8,977 |
-0,531 |
|
9,143 |
-0,541 |
|
10,155 |
-0,600 |
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx roztok xxxxxxx promíchá protřepáním x několikerým otočením xxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx standardního roztoku xx x láhve xxxxxx xx xxxxx x čisté xxxxxxx. Xxxxx nepoužívat xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx z xxxxx, xxxxx byly xx xxx xxxxxxx prázdné, x nepoužívat xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx fungicid (xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 10 x/x).
6. Kalibrace xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx musí xxx xxxxxxxx tak, xxx se xxxxxx xxxxxxx nelišila x xxxx xxx 1 °X xx teploty, xxx níž xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, průvanu xxxx xxxxxxxxx teplotám xxxxxx xxx 26–27 °X.
Xxxxxxx xx, xx xxxxxxxx funguje xxxxx xxxxxx výrobce x xx xxx zapnut xxxxxxx 12 xxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx kapalin.
Vybrat xxx standardní roztoky (xxx xxxxxxx xxxx), xxxxxxx xxx xxxxxxx xx xxxxx xxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx hodnotou xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxx roztoků by xxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx – 0,100 °X.
(X xxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxx xxxx dostupných xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx, xx xx ustálí xx dané hodnotě xxxx mrznutí x xxxxx xxxxxxx měřícího xxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx, jako jednoho x xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx uvést).
Pomocí xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx jednoho xxxxxxxxxxxx roztoku xx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxxxx xxxx vyrobeny x xxxxxxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxx xx vzorky xxxxx (stejný xxxx xxxx, xxxxx x xxxxxxxxxx demineralizovanou xxxxx). Xxxxxxx standardních roztoků xxxx stejné xxxx xxxxxxx xxxxxx mléka.
Podle xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx postup x xxxxxx standardním xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx každý xxxxxx xxxxxxxxxx správné xxxxxxx xxxx mrznutí každého x xxxx, xxxx xx byla xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Kryoskop xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxx ukazuje bod xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx by xxxx xxxxx jakákoli xxxxxx.
7. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
7.1 Xxxxx to xx xxxxxxxx xxxxxxxxx vzorky xxx xxxxxxx xxxx 0 °X a 5 °X.
7.2 Xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx cizí tělíska xxxx tuhý mléčný xxx xx vzorku xx xxxxx a xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx a xxxx xxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.3 Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (mezi 0 x 5 °C) xxxx xx možné xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx zahájením xxxxxxxxx. Xx xxxx nezbytné xxxx xx xx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx mléka xxxx při použití xxxxxxx xxxxxxx.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx možno xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxx, jejichž xxxxxxxx xxxxxxxxx 0,18 x kyseliny xxxxxx xx 100 xx xxxxx, nemohou xxx xxxxxxxxxxx.
7.5 XXX mléko x sterilizované xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 20 minut xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
8. Xxxxxx
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxx xx sonda xxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx kryoskop x xxxxxxx xx, xxx xx xxxxxxxx kapalina xxxxxxx míchá xxxx xxxxxxxx. Pokud xxx xxxxxxxx zapnut alespoň 12 xxxxx, zkontrolovat xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx míchačky x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx.
8.2 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx bod xxxxxxx standardního xxxxxxx xxxxxxxx sodného (xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxx – 0,512 °X), dokud xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx xx sobě xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x více xxx 0,001 °C. Xxxxx xx průměr xxxxxx hodnot xxxx xx bodu mrznutí xxxxxxxxxxxx roztoku o xxxx xxx 0,002 °X, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx x xxxx 6.
Pokud xx xxxxxxxx používá xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx provádí nejméně xxxxxx za hodinu, xxxxxxx se zohlední xxxxxx xxxxxxx.
8.3 Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx mléka
Promíchat xxxxx se vzorkem xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x několikerým xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxx standardní xxxxxx xxx xxxxxx, xxx xx xx xxxxxxx přimíchal xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx xxxxx xx xxxxx x čisté zkumavky xx vzorky. Xxxxxxx xx, xx jsou xxxxx a míchačka xxxxx x xxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx odspoda xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x chlupy nepouštějící xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xx kalibrovaného xxxxxxxxx podle pokynů xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx a xxxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xx 0,1 °C.
(U xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx tuto xxxxxxx x digitálního xxxxxxxxx; x ručních xxxxxxxxx xx nezbytné xxxxxxxxx xxxxxxx tím, xx xx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx se ručička xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxx.)
Xxxxx z xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx, xxx je xxxxxxxx xxxxxxxxxxx teplotního rozmezí, xxxxxxxxx se xxxxxx x zopakuje xx x xxxxx xxxxxxx xxxxx. Pokud tento xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx před xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, alikvótní xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx 45 °X a 5 xxxxx xx xxxxxxx xx této xxxxxxx, xxx xx rozpustil xxxxxxxxxxx xxx.
Xxxx zchladit xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xx hodnotu, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx dobu konstantní, x xxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx x tuto xxxxxxx xx nutné zaznamenat.
Poznámka:
Doba, xx xxxxxx teplota xxxxxxx xxxxxxxxxx, x xxxxxx xxxxxxxx mezi xxxxxxxx mrznutí x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx vzorek xx xxxxxx x xxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx pro xxxxx. Je xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, vyjmout zkumavku, xxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxx x xxxxxxxx směrem xxxxxxx nahoru xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx rozdíl xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx opakovatelnosti (0,004 °X), xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x jiného xxxxxx. Pokud xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx na 0,004 °X, xxxxxx xx x použijí xx xxx výpočet xxxxxxxxx xxxxxxxx.
8.4 Chlazení xxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx sonda xxxxxxx x chladu.
(U xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx možné; v xxxxxxxx případech xx xxxxxxxx se xxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx měření xxxxx zchlazena, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx několika xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.)
9. Xxxxxxxxx výsledků
9.1 Výpočet
Pokud xx xx provedení xxxxxxx xxxxxxxx kalibrace xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xx považuje xxxxxx obou xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx mrznutí, xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx místa.
Pokud xxxxxx xxxx xxxx přijatelných xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx je liché xxxxx, je třeba xxxxxx zaokrouhlit na xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxx ukazuje xxxxx xxxxxxx:
Xxx xxxxxxx (°X)
|
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx |
Xxxxxx |
|
|
-0,544 |
-0,545 |
-0,544 |
|
-0,545 |
-0,546 |
-0,546 |
9.2 Xxxxxxxxxxxx
9.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (r): 0,004 °X
9.2.2 Reprodukovatelnost (X): 0,006 °X
Xxxxxxx 1
Schéma xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1 (poloha xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxx ke xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx)
XX. XXXXXXXXX AKTIVITY XXXXXXXXX
1. Předmět a xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx aktivity xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxxx
2.1 Aktivita xxxxxxxxx je míra xxxxxxx alkalické xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx. Xx vyjádřena množstvím xxxxxx v μx xx 1 ml xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx podmínek.
2.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx 4 xx xxxxxx na 1 xx.
3. Princip
Aktivita xxxxxxxxx xx vzorku xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx dvojsodného. Xxxxxxxx fenol xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxx dibromindofenolu (xxxxxxxxx xxxxx), xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 610 nm. Xxxx xx xxxxxxx porovnání xx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxxx xxxxxx boritanu x xxxxxxxxx barnatého
4.1.1 Xxxxxxxxx xx vodě 50,0 x hydroxidu barnatého (xxxxxxxxxxx) [Ba(OH)2.8H2O] x xxxxxxx na 1000 xx.
4.1.2 Xxxxxxxxx xx xxxx 22,0 x xxxxxxxx xxxxxx (X3XX3) x doplnit xx 1000 ml.
4.1.3 Xxxxxx 500 xx každého xxxxxxx xx 50 °X, oba xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx asi xx 20 °C, x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xX xx 10,6 ± 0,1 xxxxxxxx roztoku 4.1.1 xxxx 4.1.2. Xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx roztok xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4.1.4 Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx objemem xxxx.
4.2 Xxxxxxx roztok xxx vyvolání xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxx 6,0 x methaboritanu xxxxxxx (XxXX2) xxxx 12,6 x XxXX2.4X2X x 20,0 x xxxxxxxx xxxxxxx (NaCl) x xxxxxxx na 1000 xx.
4.3 Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx vzniklého xxxxxxxxx
Xxxxxx 10 xx xxxxxxxxx roztoku xxx xxxxxxxx zabarvení (4.2) xxxxx xx 100 xx.
4.4 Xxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx 0,1 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, ve 100 xx tlumivého roztoku (4.1.3) nebo 0,5 x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx 4,5 xx xxxxxxxxx roztoku pro xxxxxxxx zabarvení (4.2), xxxxxx xxx kapky xxxxxxx XXX (4.6) x nechat xxxx 30 xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 2,5 xx n-butanolu a xxxxxx stát, xxxxx xx butanol-1 neoddělí. Xxxxxxx a odstranit xxxxxxx-1. X xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx x chladničce xxxxxxx xxx; před xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Tlumivý xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxxx, x to xxxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxxxx xx 100 xx roztoku xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.3).
4.5 Sraženina xxxxx-xxx
Xxxxxxxxx xx xxxx 3,0 x xxxxxx xxxxxxxxxxx (XxXX4 · 7X2X) a 0,6 x xxxxxx měďnatého (XxXX4 · 5X2X) x xxxxxxx xx 100 xx.
4.6 Roztok 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx BQC)
Rozpustit x 10 xx 96 % (V/V) xxxxxxxx 40 ± 1 mg 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXX) (X6X2Xx2XxXX6).
Xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxx xxx jeden xxxxx.
4.7 Xxxxxx xxxxxx měďnatého (XX)
Xxxxxxxxx ve xxxx 0,05 g xxxxxx xxxxxxxxx (XxXX4.5X2X) x xxxxxxx xx 100 xx.
4.8 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx
4.8.1 Xxxxxxx 200 ± 2 xx xxxxxxx bezvodého xxxxxx x přelít xx xxxxxxx baňky x xxxxxx 100 xx, xxxxxx vodu, promíchat x xxxxxxx na 100 xx. Xxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
4.8.2 Xxxxxx xxxxx 10 xx xxxxxxxxx roztoku, xxxxxxx xx 100 ml x xxxxxxxxx. 1 xx xxxxxxxx 200 μx xxxxxx.
5. Xxxxxxxxx x pomůcky ze xxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx, xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx čerstvě xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx.
x) Xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx mohou xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxx používání je xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx vybavení, xxxxxxx:
5.1 Xxxxxxxxxx xxxx
5.2 Xxxxx lázeň xxxxxxxxxxxx xx 37 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx pro odečty xx xxxxxx xxxxx 610 xx.
5.4 Zkumavky, 16 xxxx 18 × 150 mm, xxxxxxx odstupňované po 5 ml x 10 ml.
5.5 Xxxxxx
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx. x xxxxxxx 5 cm.
5.7 Xxxxxxxx filtry o xxxxxxx xxxxxxx 9 xx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
5.8 Odměrné xxxxx xxx přípravu xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
6. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
x) Stopy xxxx xxxx potu mohou xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x je xxxxx xx xxx xxxxxxx. Xx proto xxxxx věnovat zvláštní xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx po xxxxxx vzorků. X xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx, xxxxx xx déle xxx xxx xxx.
6.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxx do každé xx xxxx xxxxxxxx (5.4), jednu zkumavku xxxxxx jako xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx.
6.3 Xxxxxxxxx
6.3.1 Xxxxx vzorek xxxxxxxx xxx xxxxxx xx vroucí xxxx; xxxxxxxx a xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx folií, xxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Rychle xxxxxxxx xx pokojovou xxxxxxx.
6.3.2 Xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x testovací vzorek xxxxxxx způsobem. Xxxxxx 10 xx xxxxxxx xxxxxxxxx (4.4) a xxxxxxxxx.
6.3.3 Vzorky xxxxx xxxxxxxxx 60 minut xx vodní lázni (5.2) x xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxx) promíchat xxxxxx xxxxx.
6.3.4 Xxxxxx xxxx x bodě 6.3.1 xxxxxxxx dvě xxxxxx xx xxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.5 Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxxxx xxxxx-xxx (4.5) x řádně promíchat.
6.3.6 Xxxxxxxxxxxx přes xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx dva xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxx filtrovat znovu, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx; xxxxxxxxxx 5 ml ve xxxxxxxx.
6.3.7 Přidat 5 xx xxxxxxxxx roztoku xxx xxxxxxxx zabarvení (4.2).
6.3.8 Přidat 0,1 xx roztoku BQC (4,6), promíchat x 30 minut xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.9 V xxxxxxxxx x kontrolním xxxx slepým pokusem xxxxxx absorbanci xxx xxxxxx délce 610 xx.
6.3.10 Pokud xxxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxx 6.3.9 xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxxxx 20 μx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.4.4, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Připravit xxxxxxx smícháním objemu xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx opatrně xxxxx do xxxx, xxx xx inaktivovala xxxxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxxxx kalibrační xxxxxx
6.4.1 Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx fenolu (4.8.2) připravit xxxxxxxxxx xxxx zředěných standardních xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0 (xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxx), 2, 5, 10 x 20 μx xxxxxx na xxxxxxxx. Xx xxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx pipety 1 xx xxxx x 1 xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
6.4.2 Xx xxxxx xxxxxxxx přidat 1 xx xxxxxxx síranu xxxxxxxxx (4.7), 5 xx xxxxxxxxx roztoku xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.3), 3 xx xxxx a 0,1 xx roztoku XXX (4.6); xxxxxxxxx.
6.4.3 Xxxxxx vyvíjet xxxxxxxxx 30 xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
6.4.4 V xxxxxxxxx s kontrolním xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx absorbanci xxx xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.4.5 Na xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (6.4.4) xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx přidaného fenolu (6.4.1) xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7. Vyjádření xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxx x xxxxxx
7.1.1 Xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (6.3.9) xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (6.4.5).
7.1.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x μg xxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxxx xxxxxxxxx = 2,4 × X × D
kde
A xx xxxxxxxx xxxxxx x μx xxxxxxx xxxxx xxxx 7.1.1;
D xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 6.3.10 (x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx X = 1).
2,4 xx faktor xxxxxxx (5/12 x 1 ml xxxxxxxxxxx xxxxxx) – xxx 6.2 ve spojitosti x 6.3.2, 6.3.5 x 6.3.6.
7.2 Xxxxxxxxxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (r) : 2 μx fenolu/ml.
7.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (R) : 3 (xxxxxxxxx) μx xxxxxx/xx.
7.2.3 Pokud se xxxxxxx provede xxxxx 6.3.10, limity xxxxxxx x 7.2.1 a 7.2.2 xx týkají xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.
XXX. XXXXXXXXX XXXXXXXX PEROXIDÁZY
1. Předmět x oblast xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx peroxidázy v xxxxx, xxxxx slouží xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxxx:
Xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx objeví xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx:
Xx 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx neobjeví žádné xxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxxx rozkládá xxxxxxx xxxxxx. Uvolněný xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx indofenol (Štorchův xxxx). Intenzita xxxxxxxxx xx xxxxx úměrná xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxx 1,4 fenylendiaminu
Rozpustit x teplé xxxx (50 °C) 2 x 1,4 xxxxxxxxxxxxxx (X6X8X2) x doplnit xx 100 xx. Xxxxxx skladovat v xxxxxx x temnu, x xxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, kterou xx xxxxxx odstranit.
4.2 Xxxxxx xxxxxxxx vodíku
Vodou xxxxxx 9 ml 30 % xxxxxxxx vodíku x xxxxxxx xx 100 xx. Xxx xxxxxxxxxxx přidat 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx litr xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx vodíku xx stálý xxx xxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx a xxxxx, x xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, která xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x organickými xxxxxxx.
5. Xxxxxx
5.1 Xxx 5 xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
5.2 Xxxxxx 5 xx xxxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx (4.1).
5.3 Xxxxxx 2 xxxxx roztoku xxxxxxxx xxxxxx (4.2).
5.4 30 xxxxxx po promíchání xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx 30 xxxxxx xx xxxxxxx činidel, reakce xxxx xxxxxxxxxx.
XX. STANOVENÍ XXXXXX MIKROORGANISMŮ PŘI 30 °C
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx technikou xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X. Postup xx použije xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, XXX xxxxx xxxx sterilizované mléko, xxxxx xxxx 15 xxx xxxxxxxxxxxxx při 30 °C.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx počitatelné xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx x Xxxxxxx miskách x xxxxxx xxxxxxxxx 72 xxxxx při 30 °C. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx mikroorganismů xx 1 xx syrového xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx na 0,1 xx xxxxxxxxxxxxxxx sterilizovaného xxxxx xxxx XXX xxxxx.
4. Přístroje x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx vybavení, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx sušárna, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, schopný xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °X.
4.1.4 xX-xxxx se xxxxxxxxx xxx kompenzaci xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 jednotky xX.
4.1.5 Xxxxx lázeň, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Zvětšovací xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Zvětšovací xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Mechanické xxxxxxxxx
4.1.9 Míchačka xxxxxxx xxxxxxx 1 ml xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x 9 xx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx zkumavky.
4.2 Xxxxxxx ze xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxx a dostatečným xxxxxxx, s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxxx 10 xx primárního xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx 20 xx xxx skladování xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Pipety (utěsněné xxxxx), xxxxxxxx nebo xx sterilního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 ml, x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx misky z xxxxxx, xxxxxxxxxx skla xxxx sterilního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, dno xxxxx xx vnitřní xxxxxx xxx 90 až 100 xx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx 10 mm. Xxx xxxxx mít žádné xxxxxxxxxx, xxxxx by xxxxxxx xxxxxxxx kolonií.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx ze xxxx:
Xxxxxxx ze skla xx xxxxxxxxxxx jedním x xxxxxx xxxxxxx:
x) x horkovzdušné sušárně (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx při teplotě 170–175 °X;
x) v xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx použití xxxxxxxxx xx nutné xxxx na xx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx proniknutí xxxx: xxxxx xx materiál xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xx xxxxxx být napevno xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx xxx volné.
Pomůcky xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx by se xxxx vysušit odvětráním xxxx.
Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Kultivační xxxxxx – agar xx xxxxxxx mlékem
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx extrakt |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx (+) nebo xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 g |
|
Agar |
10–15 x xxxxx želírovacích xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 ml |
Sušené xxxxxxxxxx xxxxx by xxxxxx xxxxxxxxx žádné xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx se xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx sušeným xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx průkazně xxxxx inhibiční xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X tomto xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx vodě xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, glukózu x xxxxxxx sušené xxxxxxxxxx mléko. Ohřev xxxxxxxx usnadňuje xxxxxx. Xxxx xxxxxx agar x xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx, xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx x xxxx asi 30 xxxxx.
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx přes xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX pomocí xX-xxxxx (4.1.4); pokud xx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xX, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx sterilizaci byla xxxx hodnota 6,9 ± 0,1 xxx 25 °C.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Rozdělit médium (5.1) x množstvích xx 100 do 150 xx do xxxxx xxxx xx 12 xx 15 xx xx zkumavek (4.2.2). Xxxxx a xxxxxxxx uzavřít.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx média.
Pokud xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 a 5 °X, avšak xx xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx médium
Kultivační xxxxxx (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx přidat xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx pH xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X xxxxxxx podle xxxx 5.1, xxxx xxxxxxxx, sterilizovat x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx médium xxxxx xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Roztok xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 ml |
Příprava:
Rozpustit xxxxxx xx xxxx, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xX-xxxxxx (4.1.4); pokud xx xx nezbytné xxxxxxx xX xxxxxxxx (nejméně 0,1 mol/l) xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx jeho xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx zkumavka obsahovala 9,0 ± 0,2 xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, skladuje xx x xxxxx xxx teplotě mezi 1 x 5 °X, xxxxx ne xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) xx xxxx připravovat z xxxxxxxxxx dehydrovaných xxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx výrobce. Xxxxxxx xX xxxxxxx podle xxxx 6.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx ředidla xxxxx xxxx 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xxxxxxxxx mikrobiologického xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx vzorku xxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx byly xxxxxxxxxxxxxx xx nejrovnoměrněji rozděleny, x xx 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxx zabránit xxxxxx xxxx nebo pěnu xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx mícháním a xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (10-1) (xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xx 9 xx xxxxxxx (6.1), xxxxxxx xxxxxx nesmí xxxxxx xx kontaktu x xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx být přibližně xxxxxx xxxx teplota xxxxxx mléka. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx a xxxxxxxxxxx mléko)
Sterilní pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxxxxxx ředění (7.3) do 9 xx ředidla (6.1) xxxxx xxxxxx x xxxx 7.3.
Xxxxx se xxx xxxxxx 10−2.
X xxxxx získat další xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx dlouho, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx mikroorganismů (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
7.5.1 Xxxxxx xxxxx: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) přenést xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx desetinného xxxxxx. Musí xxx xxxxxxxxx nejméně xxx xxxxxx. Xxx každé xxxxxx (8.1.1) připravit xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx misky (4.2.4) 1 xx vzorku x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx dvě xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx vhodnou xxxxx.
7.5.3 XXX mléko a xxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx xx 15 denní xxxxxxxx xxx 30 °X – směrnice 85/397/XXX, příloha X xxxxxxxx XXX bod 5):
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx xxxxx (7.2). Xxxxxxxxx xxx misky.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 15 xx 18 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Ihned xxxxxxxxx xxxxxx Petriho xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx přípravy xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx, podle xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx nesmí xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx a čistém xxxxxxx, dokud xxxxxx xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Petriho xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Misky xxxxxxxxx xxxxxxxx dnem xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxx misek. Xxxxxxx xxxxx se nesmějí xxxxxxxx xxxxxxx, ani xxx x kontaktu xx stěnami x xxxxxx částí xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 72 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °C.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx více než 300 kolonií.
Misky vyšetřit xxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx použít xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx xxxxx dbát xx xx, aby xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx sraženin x xxxxxxx x drobnými xxxxxxxx koloniemi. X xxxxxxx pochybností provést xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx tvořící xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx v nepostižené xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx celou xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx plochy xxxxx, xxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Xxxxxx a xxxxxxxxxxx mléko
8.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx misek xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.1.2 Vypočítat xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx vzorce:
∑C / (n1 + 0,1x2) x
xxx:
∑X ΣC xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx bodu 8.1.1.
(x1 + 0,1 x2)x xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx:
x1 xx počet misek xxx xxxxxx xxxxxxx
x2 xx xxxxx misek xxx xxxxxx xxxxxx
x xx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx první xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxx platné xxxxxxx. Když xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx tak, aby xxxxxxxx číslice vlevo xxxx sudá.
Příklad (xxxxxxxxxxx xxxxx):
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 a 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; = 278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2
= 6290,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.1.3 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 10, xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx "xxxxx xxx 10 x x", přičemž "x" xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx faktoru zředění.
8.1.4 Xxxxx jsou všechny xxxxx xxxxx xxx 300 x počítání xx možné, xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xx".
8.2 UHT xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xxxxx než 10 xxxxxxx xx 0,1 xx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/EHS.
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx ještě nejsou x dispozici.
V. XXXXXXXXX XXXXXX MIKROORGANISMŮ XXX 21 °C
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 21 °X x xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxx xxx xxxxxxxxxxxxx při 6 xX x xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxx xx x mléce při 6 °C.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx aerobní xxxxxxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx pasterované xxxxx pět dní xxx 6 °X. Xxxxxxx stanovený xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx 25 xxxxx xxx 21 °X. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx pasterovaného mléka.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, nastavitelná xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Autokláv, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, schopný xxxxxxxx xxxxxxx:
x) 6 ± 0,2 °C
b) 21 ± 1 °X xx všech xxxxxx xxxxxx.
4.1.4 pH-metr se xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx lázeň, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Xxxxxxxx xxxxxxx rozmíchat 1 xx xxxxxx mléka xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x 9 xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx principu xxxxxxxxxxx rotace obsahu xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx s xxxxxxxx uzávěry x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxx ředění nebo xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 až 250 xx xxxx zkumavky x xxxxxx 20 xx pro skladování xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx vatou), xxxxxxxx xxxx xx sterilního xxxxxxxxxxxx materiálu, s xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx, s xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 až 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx nebo xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx misek xx xxxxxxx průměr xxx 90 až 100 x. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx by měla xxx xxxxxxx 10 xx. Xxx xxxxx xxx xxxxx nerovnosti, xxxxx by xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx ze skla:
Pomůcky xx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx:
x) v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx teplotě 170–175 °X;
x) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx při xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx použití xxxxxxxxx xx xxxxx dbát xx xx, xxx xxxx zajištěno xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx xx materiál xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, tyto xxxxxx by neměly xxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xx měly xxx xxxxx.
Xxxxxxx ze skla xxxxxxxxxxxxx x autoklávech xx xx měly xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx – xxxx xx xxxxxxx xxxxxx
5.1 Složení:
|
Kvasnicový xxxxxxx |
2,5 g |
|
Trypton |
5,0 g |
|
D-glukóza(+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 g |
|
Agar |
10-15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx žádné xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx sušeným xxxxxxxxxxx xxxxxx, které xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx neobsahuje.
Příprava:
V xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx ve xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, trypton, xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx usnadňuje xxxxxx. Poté xxxxxx xxxx x uvést xx varu xx xxxxxxx míchání, xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx x xxxx asi 30 xxxxx.
Xxxxx xx xx nezbytné, přefiltrovat xxxx papír.
Zkontrolovat xX xxxxxx pH-metru (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx, upravit xX, xxxxxxxx (nejméně 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx chlorovodíkové, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx xxxx hodnota 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.2 Xxxxxxxxx, sterilizace x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Rozdělit xxxxxx (5.1) v xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 xx xx xxxxx nebo xx 12 až 15 xx xx xxxxxxxx (4.2.2). Xxxxx x xxxxxxxx uzavřít.
15 xxxxx sterilizovat x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ihned, xxxxxxxx xx x xxxxx při teplotě xxxx 1 x 5 °X, avšak xx xxxx xxx 1 xxxxx po xxxx přípravě.
5.3 Komerční xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) se xxxx připravit x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx přidat xxxxxx odstředěné xxxxx xxxx rozpouštěním, xxxxx xxxx složkou xxxxxxxx.
Xxxxxxx xX xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °C xxxxxxxx xxxxx xxxx 5.1, xxxx rozdělit, xxxxxxxxxxxx x skladovat xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. 5.2.
6. Ředidla
6.1 Xxxxxx xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 g |
|
Chlorid xxxxx (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxx, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xX-xxxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 mol/l) xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx chlorovodíkové, aby xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 při 25 °C.
6.2 Rozdělení, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx zkumavek (4.2.1) xxx, xxx xx xxxxxxxxx každá xxxxxxxx xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 ml xxxxxxx. Xxxxxxxx uzavřít.
15 minut xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X. Xxxxxxxxxxxx xX ředidla.
Pokud xx xxxxxxx nepoužije xxxxx, xxxxxxxx se x xxxxx při xxxxxxx mezi 1 x 5 °X, xxxxx xx déle xxx 1 xxxxx xx xxxx přípravě.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ředidla
Ředidlo (6.1) xx může xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx. Dodržet xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx pH xxxxxxxx podle bodu 6.1, poté xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x skladovat xxxxxxx xxxxx bodu 6.2.
7. Postup
7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nechat xxxxxx xxxxxxxxx potřebné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x zchladit xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °C.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx [4.1.3 x)] uzavřené balení xxxxxxxxxxxxx xxxxx nebo, xxxxx xx xxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx vzorek x xxxxxx xxxxxxx 100 xx po xxxx 120 ± 2 xxxxx xxx 6 ± 0,5 °X.
7.2.2 Xx inkubaci xxxxxx mléka xxxxx xxxxxxxxx, aby byly xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, a xx 25 rychlými otočeními xxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxx zabránit xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx mícháním x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx tři xxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx primárního xxxxxx (10−1)
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) syrového xxxx pasterovaného xxxxx xx 9 xx xxxxxxx (6.1), přičemž xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx s xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx teplota xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ředění míchačkou (4.1.9).
Xxxxx se xxx xxxxxxxx ředění 10−1.
7.4 Xxxxxxxx dalších xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxxxxxx ředění (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx xxxxxx x xxxx 7.3.
Xxxxx xx xxx xxxxxx 10−2.
S xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx opakuje xxx xxxxxx, xxxxx nelze xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) přenést xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx ředění. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx jednu xxxxxxx xxxxx.
7.6 Nalévání xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 15 xx 18 xx kultivačního xxxxx (7.1).
Ihned xxxxxxxxx xxxxxx Petriho xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kolonií.
Doba mezi xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x čistém povrchu, xxxxx médium xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Xxxxxxx misek
Přenést xxxxx xx inkubátoru (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx dnem nahoru. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxx xxxxx. Sloupky misek xx nesmějí vzájemně xxxxxxx, xxx xxx x kontaktu xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 25 xxxxx při 21 ± 1 °C.
7.8 Xxxxxxxx kolonií
Počítat xxxxxxx x Petriho xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 300 xxxxxxx.
Xxxxx vyšetřit xxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx zvětšovací xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx nutné xxxx xx xx, xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx sraženin v xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx koloniemi. V xxxxxxx xxxxxxxxxxx provést xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx s xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx tvořící povlak xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx, spočítat xxxxxxx x nepostižené xxxxx misky x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx počet xxx xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx tvořící xxxxxx pokrývají xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Použít xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 kolonií (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.2 Vypočítat počet xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx syrového nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxx podle xxxxxx vzorce:
∑C / (x1 + 0,1n2) x
xxx:
ΣX je xxxxxxx xxxxx kolonií podle xxxx 8.1,
(x1 + 0,1 x2)x xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx:
x1 xx počet xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx
x2 xx xxxxx xxxxx při druhém xxxxxx
x je xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx získány xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxx. Když xx zaokrouhlovaná číslice xxx, xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxx:
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 kolonií
Ředění 10−3: 33 x 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; =278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2=
=629 / 0,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.3 Xxxxx xxxx všechny xxxxx xxxxx xxx 10, xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx "xxxxx xxx 10 × x", xxxxxxx "d" xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx zředění.
8.4 Pokud xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 300 x počítání xx xxxxx, provést xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx vyjádřit xxxx "Odhadovaný xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xx".
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX OBSAHU XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX – XXXXXXXX XXXXXXX XXX 30 °X
1. Předmět x xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x pasterovaném xxxxx technikou počítání xxxxxxx při 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx 30 °X vytvářejí xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xx xxxxxxxxx podmínek xxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx plynu.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx x Petriho xxxxxxx x 24 xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx jejich schopnosti xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx mléka.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx sušárna, xxxxxxxxxxxx xx 170 až 175 °X.
4.1.2 Autokláv, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, schopný udržovat xxxxxxx 30 ± 1 °C.
4.1.4 pH-metr xx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx, přesný xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Vodní xxxxx, nastavitelná na 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx platina-iridium xxxx xxxx-xxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx skla
4.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx uzávěry x objemem 20 xx, xxx mohly xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (5.2) a Xxxxxxxxx xxxxxxxx vhodné xxxxxxxxx.
4.2.2 Baňky o xxxxxx 150 xx 250 ml xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.1).
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxxxx syntetického materiálu, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 – 10 xx, s xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx, bezbarvého xxxx xxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx materiálu, xxx misek xx xxxxxxx průměr xxx 90 až 100 x. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx 10 xx. Dno xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx by xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Sterilizace xxxxxxx xx skla:
Pomůcky xx skla se xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx hodinu xxx teplotě 170 – 175 °X;
x) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx na xx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: pokud xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xx neměly být xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx být volné.
Pomůcky xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxx x xxxxxxxxxxx violetí, xxxxxxxxx xxxxxxx, žlučí x laktózou (VRBL xxxx). Sušené selektivní xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
7 g |
|
Kvasnicový xxxxxxx |
3 x |
|
Xxxxxxx (C12H22O11.H2O) |
10 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
5 x |
|
Xxxxxxx xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxxxx xxxxxx |
0,03 x |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxx |
0,002 x |
|
Xxxx |
10 xx 15 g xxxxx želírovacích xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx a nechat xxxx několik minut. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxx, upravit xX roztokem (xxxxxxx 0,1 xxx/x) hydroxidu xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, aby po xxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxx xxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx 100 xx 150 xx xx xxxxxxxxxx xxxxx (4.2.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx zchladit xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
X xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média (6.4).
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxx hodin po xxxx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
10 x |
|
Xxxxxxx (X12X22X11.X2X) |
10 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx |
20 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxx |
0,0133 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxx a uvést xx varu.
Zkontrolovat xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx je xxxxxxxx, xxxxxxx xX xxxxxxxx (nejméně 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx jeho hodnota 7,2 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx xxxxxx xx 10 xx xx xxxxxxxx (4.2.1) xxxxxxxxxxxx Durhamovy xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx sterilizovat v xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx sterilizaci xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx médium nepoužije xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx xxxxxxx mezi 1 x 5 °C, xxxxx ne déle xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx médium (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx dehydrovaného xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx kultivační xxxxxx xxxxx xxxx 5.1 x 5.2.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxxx (XXXX xxxx) xxxxxxx v bodě 5.1.
6.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx
Xxxxxx mléka xxxxx xxxxxxxxx, xxx byly xxxxxxxxxxxxxx co nejrovnoměrněji xxxxxxxxx, x xx 25 rychlými otočeními xxxxxx xx vzorkem. Xx xxxxx zabránit xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx tři xxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) 1 xx xxxxxx xxxxx do xxxxx xx xxx xxxxx (4.2.4) a xxx xxxxxxxxx 3 ml xxxxxx xxxxx (6.2).
6.4 Xxxxxxxx kultivačního xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 12 xx VRBL xxxxx (6.1)
Xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxx x rovnoměrnému rozložení xxxxxxx.
Xxxx mezi xxxxxx xxxxxxxx vzorku xxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx médiem xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xx xxxxxx kontroly xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x 12 ml xxxxx VRBL xxxxx, xxxxx byl xxxxxx xxx xxxxxxxxxx misky.
Nechat xxxx na xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x čistém xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 4 xx XXXX agaru (6.1) xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx.
6.5 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx dnem nahoru. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxx než šest xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx nesmějí vzájemně xxxxxxx, xxx být x xxxxxxxx xx xxxxxxx a vrchní xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 24 ± 2 xxxxxx xxx 30 ± 1 °C.
6.6 Xxxxxxxx xxxxxxx
6.6.1 Xxxxxxx xxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 150 xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx červené xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx 0,5 xx, s xxxx xxx sraženiny xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx bakterie.
6.6.2 Pokud xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx necharakteristický xxxx (např. xxxxx xxxxx, xxxxxxxx nebo xxxx xxxx sraženin xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (6.7).
6.7 Xxxxxxxxxxx xxxx
Xxxxx údajů x xxxx 6.6.2 provést xxxxxxxxxxx xxxx u xxxxxxxx xxxxx (xxxx. 3 xx 5) xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx tím, xx xx xxxxxx xxxxxxxx jehly (4.1.6), xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.2). Xxxxxxxxx zkumavky 24 ± 2 hodin xxx 30 ± 1 °X.
Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx takové xxxxxxx, xxxxx x Durhamově xxxxxxxx xxxxx xxxx.
7. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Použít xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 150 kolonií.
7.2 Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, vypočítat xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx potvrzených xxxxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií.
7.3 Vypočítat xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx podle xxxxxx xxxxxx:
ΣX / x
xxx:
ΣX xx celkový xxxxx kolonií xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (7.1 v xxxxxxxxxxx xx 7.2), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku xxxxx (6.3).
x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (6.3) x xxxxxxxxxxx (3 xx).
Xxxxx se xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx číslice, xxxxx xxxxxxxx více xxx 100 xxxxxxx. Xxxx xx zaokrouhlovaná číslice xxx, xxxxxxxxxxx xxx, xxx sousední číslice xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 150 xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx "xxxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxx bakterií na 1 ml".
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kruhových xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
XXX. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx buněk.
A. Xxxxxxxxxxxxx metoda
B. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Mikroskopická xxxxxx
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxx.
Xxxxx postup popisuje xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx buněk ve xxxxxx xxxxx za xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx (viz B.1).
2. Xxxxxxxx
Xxx tento xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx x epitelové xxxxx, xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
3. Xxxxxxx
Xxxxxx 0,01 xx xxxxx xx 1 xx2 povrchu xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx mikroskopem. Xxxxx somatických buněk xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx vynásobí xxxxxxxxx faktorem, x xxxxx získat xxxxx xxxxx xx 1 xxxxxxxx.
4. Xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x..
Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxx xxxx |
0,6 x |
|
Xxxxxxx – 99 % |
54 xx |
|
1,1,1-xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx |
40 xx |
|
Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx |
6 xx |
Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx je xxxxxxxx. Příprava x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx uskutečnit x xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx x baňce xxxxxxx a 1,1,1-xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx ve xxxxx xxxxx xx 60 xx 70 °C. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxxx, 12 xx 24 hodin xxxxxxx v chladničce xxx 4 °X x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx octovou. Xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx pórů 10 až 12 xxxxxxx a uchovat xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. X případě xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx přefiltrovat.
5. Xxxxxxxxx x pomůcky xx xxxx
5.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 500 × xx 1000 ×
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx umožňující xxxxxxxxx xx 0,01 xx x přesností xxxxxxx ± 2 %.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 20 xx × 5 mm xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx sklíčko a xxxxxxx 20 × 5 mm pro xxxxxx vrstvu.
5.4 Horizontální xxxxx deska (30 °X xx 50 °X) pro xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5 Xxxxxxxxxx (xxx) xxx xxxxxx xxxxx vrstvy.
5.6 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 30 xx 40 °X xxx xxxxxxxx xxxxxx mléka.
5.7 Podložní xxxxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 0,01 xx.
6. Xxxxxx
6.1 Vzorek xxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx do xxxxx xxxxx po xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx nesmí xxxxxxx xxxxxx překročit 6 °X. Vzorek xxxxx xxx xxxxxxx.
6.2 Xxxxxxxx xxxxxx x laboratoři
Zahřát xxxxxx xx xxxxx xxxxx (5.6) xx 30 xx 40 °X. Xxxx řádně xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx, při xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx mikrostříkačka (5.2), xxxxxxxxx 20 °X.
6.3 Předběžné xxxxxxxx xxxxxxxxxx sklíček
Vyčistit xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) například xxxxxxxxx, vysušit papírem, xxxxx nezanechává xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxx tenké xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx (5.2) xxxxxxx 0,01 xx mléka xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx výše. Xxxxxxx xxxxxxx vnější xxxxxx xxxxxxxxx, která xxxxxx do styku x mlékem. Xxxxxxxx xxxxxxxxx na podložní xxxxxxx (5.3) x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (20 xx × 5 xx). Xxxx ji xx xxxxxxxxxxxxxxx vyplnit. Xxxxxx xxxxxxx tenkou xxxxxx xx horizontální xxxxxxxxx xxxxx (5.4) xx xx xxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x vyšetřit xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx.
6.5 Barvení tenkých xxxxxx
Xxxxxxx xx 10 xxxxx do xxxxxxxxx xxxxxxx (4). Xxxxx x, pokud je xx nezbytné, vysoušení xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.5). Xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx, xxxxx xx přebytečné xxxxxxx zcela nesmyje. Xxxxx sušit x xxxxxxx xxx, aby xxx xxxxxxx před xxxxxxx.
6.6 Xxxxxxxxx mikroskopického xxxx
Xx xxxxxxx zvoleného xxxxxxxx (500 × xx 1000 ×) xxxxxx průměr mikroskopického xxxx (5.7).
7. Počítání x xxxxxxx
7.1 Počítání xxxxx
Xxxxxx xxxxxxxxx (5.1). Xxxxx počítání buněk xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx, x xx xxxxxx xxxxx, xxxxx jsou jasně xxxxxxxxxxxx x z xxxxx xx x xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Počítat xxxx nebo xxxx xx xxxxxxx třetině xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx ty pásy xxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx pouze x xxxxxxxxxx částí xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x tudíž x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx nejméně xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx různých částí xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx části xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx buněk, xxxxx se xxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx somatických xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx být rovněž xxxxxxx xxx standardizaci xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxx nesmí xxx vyšší xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx elektronického xxxxxxxxx. Xxxxxxxx koeficient xxx vzorek mléka x obsahem 400000 xx 600000 buněk/ml xx xxxxx xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, musí xxx xxxxx Poissonova xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 400, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx opakovatelnosti.
Podle Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
X = X = x2,
xxx:
X xx xxxxxxx xxxxxxx
X xx rozptyl
s xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx:
XX = x × 100 % / M xxxx XX = 100 % / s nebo XX = 100 % / OBR
M (xxxxxx) xxxxxxxxxxx počet xxxxxx (xxxxx), které xxxx spočítány (například 400 xxx XX = 5 %).
7.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxxxx 0,01 ml xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx vypočítá xxxxx xxxx 7.3.1 xxxx 7.3.2.
7.3.1 Počítání pásů xx xxxxx vrstvě
Délka xxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx, xx 5 xx. Šířka xxxx odpovídá xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x mikrometrickou xxxxxxxx (5.7).
Pracovní xxxxxx = 20 × 100 / x × x
xxx:
x je xxxxxx mikroskopického xxxx x xx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx sklíčkem x xxxxxxxxxxxxxx stupnicí (5.7)
b xxxxxxx počet xxxxxxxxxxx xxxx.
7.3.2 Xxxxxxxx mikroskopických xxxx xx střední xxxxxxx xxxxx vrstvy xxxx xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx
xxx:
x je xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx pole x xx, stanovený xxxxxxxxx xxxxxxxx x mikrometrickou xxxxxxxx (5.7)
x celkový xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
7.4 Xxxxxxx xxxxxx xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xx xx xxxxx, se xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx buněk (7.1 x 7.2) xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (7.3).
7.5 Přesnost
Variační koeficient (xxx 7.2) xxxxx xxxxxxxxx 5 %.
Výsledky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxx po xxxxxxxxxxxx kalibraci (viz X.1) xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx somatických xxxxx v xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx DNA xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxx xxxxxx (xxxxxxxxx 0,2 xx) xx důkladně xxxxxxxx x tlumivým xxxxxxxx a x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Část xxxx xxxxx xx xxxx přenese ve xxxxx xxxxx vrstvy xx xxxxxxx xxxx, xxxxx slouží xxxx xxxxxxxx sklíčko.
Každá xxxxx xxxxxxxxx elektrický xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx x zaznamenává. Xxxxx xxxxxxxxxxx buněk se xxxxxxxx v xxxxxxxx xx xxxxxxxx.
4. Činidla
Pokud xxxx xxxxxxxxx jinak, xxxx xx použít xxxxxxx xxxxxxx p.a.. Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx, xxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.1 Xxxxxxx roztok
Složení
|
Hydrogenftalat xxxxxxxx |
51,00 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxx |
13,75 x |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx(xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 xx |
|
xX 5,7 xx 5,9. Xxxxxxx xxxxx xx 10000 ml. |
Příprava:
Smíchat jednotlivé xxxxxx. Skladování xx xxxxxxxxxxxx uzavřené nádobě xx nemělo xxxxxxxxx xxxx xxx.
4.2 Fluorescenční xxxxxx (zásobní xxxxxx)
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
1,0 x |
Xxxxxxx xxxxx na 1000 xx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx. Skladování xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx měsíce.
4.3 Xxxxxxxxxxxxx roztok (pracovní xxxxxx)
Xxxxxxx 20 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.2) x tlumivým roztokem (4.1) xxx, xxx xx xxxxxx xxxxx 1000 ml. Xxxxxxxx xxxxxx by neměl xxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxx dní.
4.4 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxx roztok (4.1) |
10 xx |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % objemové |
10 xx |
|
Xxxxxxx x 25 % xxxxxxxxxx |
25 ml |
Doplnit xxxxx xx 10000 xx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Skladování xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx.
5. Xxxxxxxxx x pomůcky xx xxxx
5.1 Xxxxxxxx zařízení xxxxxxxxx xx principu xxxxxxx fluorescence.
Poznámka:
Zařízení musí xxx xxxx použitím xxxxxxxxxxx. Xxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, které xx xxxx počítat, x xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx se xxxxxxxx provádí. Kalibrace xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxx buněk xxx xxxxxxxx mikroskopickou xxxxxxx (X).
5.2 Xxxxx xxxxx, x cirkulací xxxx, xxxxxxxxxxxx xx 40 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx 15 xx.
6. Xxxxxx mléka
6.1 Xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xx zkumavce (5.3). Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx konzervován, xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xx po xxxxxxxx 24 xxxxx xx xxxxxxxx, neboť obsah xxxxxxxxxxxxxx by byl xxxxxx nízký. Xxxxxxxxxx xxxxxxx nesmí xxxxxxxxx 6 °C.
6.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxx xxxxxxx xx 24 xxxxx. Xxxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx odběru xxxxxx.
6.2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx konzervačních prostředků:
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx orthoborité xx xxxxxx nesmí být xxxxx xxx 0,6 x na 100 xx. Xxxxx konzervovaný xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx dalších 24 xxxxx při teplotě 6 až 12 °X;
- xxxxxxxxxxx draselný:
konečná xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx draselného xx vzorku nesmí xxx vyšší xxx 0,2 x xx 100 xx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx dalších 72 xxxxx xxx xxxxxxx 6 xx 12 °X;
- xxxx xxxxx:
xxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxx azidem sodným x konečné xxxxxxxxxxx 0,024 x/100 ml, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx 6 xx 12 °X xxxxx xx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx 48 xxxxx xx xxxx xxxxxx;
- xxxxxxxx:
xxxxxx xxxx xxx konzervován bronopolem x xxxxxxx xxxxxxxxxxx 0,05 x/100 xx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx na xxxxxxx 6 až 12 °X xxxxx xx xxxx odběru x xxxxxxxx xx 72 xxxxx xx jeho xxxxxx.
6.2.2 Xxxxxx, který xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, může xxx ještě xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx 48 xxxxx dvojchromanem draselným.
Poznámka:
Pokud xxx o xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx odpadních xxx.
7. Xxxxxx
7.1 Předběžné ošetření xxxxxx
Xxxxx, xxxxx xx xx vyšetřit, xx xx nadojení xxxxxxxx xxxxxxx 24 hodin xxx xxx 2-6 °X. Počítání xxxxxx x den xxxxxxxx xx xxx předběžného xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, neboť xxxxxxxx mohou xxx xxxxxx xxxxx. Pokud xx xxxxxx nutné xxxxxxxx provést, xxxxxx xx měl xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx hodiny xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxx 6.2.1).
7.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx vzorek (xxx 7.1) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx den starý xxxxxx ve vodní xxxxx (5.2) na xxx 40 °X. Xxxx xxxxxxxxx vzorek xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx do počítání.
7.3 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.1) xx 15 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 7.2). Xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, aby se xxxxxxx co xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx rozdělení xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx ředění x xxxxxxxx vzorku jsou xxxxxxxxxxx provedeny x xxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x) a xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) mezinárodních kruhových xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxx, xxxxx jsou x xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxx, umožňují xxxx odhady:
(1) xxxxx xxxxx xxxx 400 000 xx 500&xxxx;000 xxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx:
xx = 20000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx variačnímu koeficientu 5–4 %)
- směrodatná xxxxxxxx reprodukovatelnosti:
sR = 40000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 10–8 %)
9. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx provádí pomocí xxxxxx o xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pod xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
XXXX. XXXXXXX XXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXX
XXXXXXX A XXXXXX XXXXXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx detekce xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx v xxxxxxx mléce x x xxxxxxx ošetřeném xxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx postup xxxxxxxx:
X. Xxxxxxxxxxxx postup
Tento xxxxxx xx počáteční xxxxxx, který xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx obsahují antibiotika x sulfonamidy. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx jedním x xxxxxxxx postupů, xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx, XXXX 10149, xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx byl xxxxxx jako xxxxxxxxxxxxxxx xxx takovéto xxxxx.
X. Xxxxxx pro konfirmaci x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx kvalitativního xxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx penicilinu x xxxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxxxxxxxx detekci antibiotik x xxxxxxxxxxx v xxxxxxx mléce x x tepelně xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx antibiotik x xxxxxxxxxxx [1]
|
Xxxxxxxxx testu |
||
|
Negativní |
Pozitivní |
|
|
Benzylpenicilin |
0,002 |
0,006 |
|
Ampicilin |
0,002 |
0,005 |
|
Cloxacillin |
0,015 |
0,035 |
|
Nafcilin |
0,006 |
0,011 |
|
Tetracyklin |
0,10 |
0,40 |
|
Oxytetracyklin |
0,20 |
0,45 |
|
Chlortetracyklin |
0,15 |
0,50 |
|
Chloramfenikol |
7 |
15 |
|
Dihydrostreptomycin |
4 |
13 |
|
Neomycin |
1 |
22 |
|
Kanamycin |
9 |
28 |
|
Bacitracin |
0,06 |
0,14 |
|
Erythromycin |
1 |
2,25 |
|
Rifamycin |
0,01 |
0,14 |
|
Diafenylsulfon |
0,01 |
0,1 |
|
Sulfametazin (Xxxxxxxxxxxx) |
0,5 |
1 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2 g |
|
|
Pepton |
5 x |
|
|
Xxxxxx extrakt |
1 x |
|
|
Xxxxxxx xxxxx |
5 x |
|
|
Xxxx |
10–15 x |
|
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx složky ve xxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx. Xxxxxxx xX xxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxxxx xxxx xx 100 xx xx lahviček x naklonit x xxxxx xxxxxx šikmý xxxx.
Xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X.
5.1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxx xxxxx |
2 x |
|
Xxxx |
15 x |
|
Xxxx |
1000 ml |
|
Roztok trimethoprimu xxxx xxxxxxxxxxxx (xxx 5.1.3) |
10 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx vodě, s xxxxxxxx trimethoprimu nebo xxxxxxxxxxxx. Za xxxxxxxxx xxxxxxx uvést xx xxxx. Přidat trimethoprim xxxx tetroxoprim x xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X. Upravit xX, xxx po xxxxxxxxxxx byla xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.1.3 Xxxxxx trimethoprimu xx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxxxx |
5 xx |
|
xxxx Xxxxxxxxxxx |
30 xx |
|
96 % Xxxxxxx |
5 xx/30 xx |
|
Xxxxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (5 xxxx 30 xx) x xxxxxxx xxxxx.
5.1.4 Živný xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
0,75 xx |
|
Xxxxxxx |
5,0 mg |
|
Rozpustný xxxxx |
8,0 mg |
|
Bromkresolová xxxxxx |
0,025 x |
|
Xxxx |
50 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx ve xxxx xxxxx roztok x xxxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxxxx
5.2.1 Xx xxxxxxxx xxxxx x vhodným xxxxxxxx xxxxxxxxx roztok xxxxxxxxxx o 60 μx/xx (100 XX/xx), x to rozpuštěním xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx draselného ve xxxxxxxx destilované xxxx.
5.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 1,25 xx roztoku penicilinu (5.2.1) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx a xxxxxxx xx xx 1000 xx. Xxxxx pracovní xxxxxx xxxxxxxx 0,075 μx xxxxxxxxxx/xx (= 0,125 XX/xx).
5.2.3 Xxxxxxxxx 75 xx standardního xxxxxxx penicilinu xxxxxxxxxxxx 0,004 μx xxxxxxxxxx/xx (= 0,0067 XX xxxxxxxxxx/xx) xxxxxxxx 4 xx xxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxx (5.2.2) xx 71 xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.3).
5.2.4 Roztoky xxxxxxxxxx xxxxxxx podle bodů 5.2.1 xx 5.2.3 xx měly být xxxxxxxxxx x den xxxxxxxxx xxxxx.
5.3 Xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx preparát xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek xxxxxxxxxxx sušeného xxxxxxxxxxxx xxxxx (10 % x/X) xx vodě, xxxxx bylo předtím xxxxxxxxxx xx přítomnost xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx čerstvého xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x prohlášeno xx xxxxxx xxxxxxxxxxx látek; xxxx mléko se xxxxxxx do xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx hodinu xx 100 °X, xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx s xxxxxxxx 0 °C xx 6 °X xx xxxx nejvýše xxxxxxx xxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
5.4.1 Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx použije Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx var. xxxxxxxxxxxx XXXX 10149 Xxxx XXXX 10149 je xxxxxxxxx s xxxxxx X 953.
5.4.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx kulturu pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx kultura se xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx agaru (5.1.1). Xxxxx agar xx x proužcích xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx 48 xxxxx xxx 63 ± 1xX. Po xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Takto xxxxxxx xxxxxxx kultura xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx při 0 xx 5 xX.
5.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxx)
5.5.1 Xxxxxxxxx xxxxxxx 20 xx xxxxxxx xxxxx (5.1.1) xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx (4.2.2) x nechat xxxxxxxx na pokojovou xxxxxxx.
5.5.2 Sterilní xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 xx sterilní xxxxxxxxxxx xxxx do xxxxxxxx xx zásobní xxxxxxxx (5.4.2) x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx spóry xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxx 0 xx 5 °X x použije xx xx 36 hodin.
5.5.3 Xxxxxxxx pipetou (4.2.4) xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxx (5.5.2) xx Petriho xxxxx (5.5.1) x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx celém xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Inkubovat 16 xx 18 hodin xxx 63 ± 1 °X (4.1.1).
Xxx xxxxxxx zásobní kultury (5.4.2) nebo kultury xxxxxx 36 xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx nejméně xxxxxxx x časovém xxxxxxxxx xxxxxxxxx 36 xxxxx.
5.5.4 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 10 ml xxxxxxxxxxx xxxx na Xxxxxxx xxxxx obsahující xxxxxxx (5.5.3) a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx spór do xxxxx (4.2.3) xxxxxxxxxx 250 xx sterilní xxxxxxxxxxx vody. Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xx měly xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxx 0 xx 6 °C.
5.5.5 Xx 16xx xx 18ti xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 63 ± 1 °X xx xxxxxxxx xxxxx by xxxxxxxx xxxx měla xxxxxxxxx xxxxx životaschopných xxxxxxxxxxxxxx xxxx 5 x 10 miliony na xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx rovnoměrné xxxxxxxx, a pokud xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx, měla xx xx nahradit novou xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ze xxxxxxx kultury (5.4.2).
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx agarové xxxxxx (5.1.2), xxxx xxxxxxxx xx 55 °X.
5.6.2 Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx (5.5.4) x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (5.6.1) xx zkumavce xxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx zkumavky xxxx xxxxxx (4.2.6) 0,3 xx naočkovaného xxxxx (5.6.2), xxx xx xxxxxxxxx 5 xx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx zátkou nebo xxxxxx nebo, v xxxxxxx ampule, xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx 12 xxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
5.6.4 Xxxxxxxx/xxxxxx mohou xxx xxxxxxx xxx xxx, xxx mohou xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx 0–6 °X, xxxxx xxxx xxxxx po xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx do 24 xxxxx po odběru, x do xx xxxx xx skladují xxx teplotě 0-5 °X. Pokud xxxx xxxxx xxxxxxxxx vzorky xx 24 xxxxx, xxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxx zmrazené (−30 °xx - 15°X), xxx xx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.2 Čitelně x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx zkumavku/ampuli (5.6). Xxxxxxxxx víčko nebo xxxxx. Umístit do xxxxxxxx stojánku (4.1.3) xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxx (5.2 x 5.3).
6.3 Xx xxxxx xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxx 50 mikrolitrů xxxxxxx roztoku (5.1.4).
6.4 Xxxxxx xxxxx řádně xxxxxxxxx a mikrostříkačkou (4.1.4) xxxxxxx 0,1 xx xxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx. Pro xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx vždy novou xxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.5 Xxxxxx xxxxx xxxx 6.4 xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,004 μg/ml (= 0,0067 XX/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx (5.2.3).
6.6 Xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.4 xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx použití kontrolního xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek (5.3) xxxxxxx xxxxxx mléka.
6.7 Xxxxxxx zkumavky/ampule x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx 2½ xx 2¾ xxxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxxxxx 63 ± 1 °X (4.1.2).
6.8 Vyjmout xxxxxxxx xx zkumavkami/ampulemi x xxxxx xxxxx.
6.9 Xxxxxxxxx xxxxx agarového xxxxx (viz 7).
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Purpurové xxxxxxxxx agarového xxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx roztokem xxxxxxxxxx xxxx testovacím xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx vzorku x xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx "zcela xxxxxxxxx" uvedené x xxxxxxx xx xxxxxx 39. Xxxxx zabarvení xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (6.5) xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx médium je xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx zbarvení xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxx mléka xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx uvedenými xx straně 39.
7.3 Xxxxx zabarvení xxxxxxxxx xxxxx xx zkumavkách/ampulích xxxxxxxxxxxx vzorek mléka xxx inhibičních látek xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
7.4 Xxxxx xx xxxxxxxxx zabarvení xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx spóry x xxxxxx xxxx xxx podrobeny xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x reakcemi popsanými x 7.1 x 7.2 xxxxx xxxxxx "X".
Xxxxx je nezbytné xxxxxx mléka před xxxxxxxxxx skladovat, musí xxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X. Postup xxx xxxxxxxxxx penicilinů x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tento xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx pro stanovení xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx mléka x xxxxxxxxx (X.7.1) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (X.7.2).
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx
Xxx A.1.
2. Xxxxxxxx
2.1 Xxxxxx mléka xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx sulfonamidů, xxxxx xxxxxxxx postupem xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx 2 xx kolem xxxxx.
2.2 Xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, včetně xxxxxxxxxxx (2.1), x xx kterému xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (beta-laktamáza), xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx průměru xxx xx průměr xxxx xxx penicilinázy, xxxxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxx penicilinu x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
2.3 Xxxxx xxxx xxxx xxxx penicilinázou (2.2) xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx ve vzorku xxxxx není xxxxxxxxx, xxx xxxx xx xxx xxxx reziduum [xxx xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx A, xxxxxxxx XX, A.1.f) x 2x)].
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx peniciliny, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx sodný, xxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx x nemohou xxx identifikovány xxxx xxxxxxxxxx (viz 7.3).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx mlékem, xxxxx xx má vyšetřit, xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx mikroorganismus xx xxxxxxxx narušuje xxxxxxx xxxxxx. Čirá zóna xxxxx xxxxx ukazuje, xx xxxx v xxxxx xxxxxxxx látky xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx. Xxxxxxxx čiré xxxx mimo jiné xxxxxx na xxxxxxxxxxx x druhu xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx.
4. Xxxxxxxxx, xxxxxxx ze xxxx x xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxx A.4.1.
4.1.2 Xxxxx lázeň, xxxxxxxxxxxx xx 80 ± 1 °X.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
Xxx X.4.2.
4.3 Xxxxxxxx disky, neobsahující xxxxxxxxx látky, x xxxxxxx 9 až 13 xx, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx 130 xx mléka (xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx).
5. Xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx, roztok penicilinázy, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx se xxxxxx destilovaná voda xx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx alespoň xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1 Xxxxxxxxxx xxxxx
5.1.1 Xxxxx xxxx (X.5.1.1)
5.1.2 Kultivační xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx extrakt |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5 x |
|
Xxxxxxx |
1 g |
|
Roztok trimethoprimu xx xxxxxxxxxxxx (X.5.1.3) |
10 xx |
|
Xxxx |
10–15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxx rozpustit xxxxx složky xx xxxx, xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx. Po přidání xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx hodnotu xX, xxx xx sterilizaci xxxx 8,0 + 0,1 při 25 °X. Sterilizovat médium 15 minut xxx 121 ± 1 °X.
5.2 Standardní xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx
Xxx X.5.2.
Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek (8) xxxxxxxxx standardní xxxxxxx xxxxxxxxxx x mléce xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (X.5.3) x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx:
x) 0,004 μx/xx (0,0067 XX/xx)
x) 0,006 μx/xx (0,01 XX/xx)
x) 0,03 μg/ml (0,05 XX/xx)
x) 0,06 μg/ml (0,01 XX/xx).
5.3 Roztok xxxxxxxxxxxx
5.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx penicilinázy (beta-laktamázy) xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 1000 X/xx. Xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx týdny xxx 0 °X xx 5 °C.
Poznámka
Pro penicilinázu xxxxxxxxxx jednotná xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx penicilinázy xxxxx xx xxxxxxxxxx 0,6 μx (= 1 XX) penicilinu. X xxxxxxxxxxxx x neznámou xxxxxxxxxxx je nutné xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxxxx.
5.3.2 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx běžně dostupné xxxxx napuštěné xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxx odpovídající xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx organismus
Viz X.5.4.
5.5 Xxxxxxxxx kultura (xxxxxxxx xxxx)
Xxx X.5.5.
5.6 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
5.6.1 Xxxxxx rozpustit agarové xxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), xxxx xxxxxxxx xx 55 xX.
5.6.2 Xx xxxxx přidat xxxx xxxxxxxx čerstvých xxxx (5.5) k xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx agarového xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), x cílem xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, a xxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx misky (X.4.2.2), xxxxxx vyhřáté xx 55 °X, xxxxxxxxxx xxxxxxx médium, xxx xx vytvořila 0,6 xx 0,8 xx xxxxxx. Xxx Xxxxxxx misku o xxxxxxxx xxxxxxx 140 xx xx xxxxx xxx 15 ml xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxxx 0,8 xx xxxxxx.
5.6.4 Xxxxxxx Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx povrch, xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx vodováhou, sejmout xxxxx a xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx víčka na xxxxx x xxxxxxx xx xxxx xxxxxx, xxx se xx xxxxxxxxx kondenzaci xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
5.6.5 Xxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx se xxxxxxx nejlépe ještě xxx xxx, xxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx dva xxxxx, xxxxx xx ihned xx xxxxxxxx vloží xx zataveného xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx a xxxxxxxxxx xx xxx 5 °X.
5.6.6 Označit xxx Xxxxxxx xxxxx, aby xxxx možná xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
6. Postup
6.1 Xxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 X xxxxxx x xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx výsledkem xxxxx "xxxxxx X" (A.7.1 x A.7.2) musí xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx účelem xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1.2 Nejdříve xxxxxxxx xxxxxx 10 xxxxx xx 80 ± 1 °X, xxx xx vyloučil xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
6.1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx, poté přenést xxx 10 ml xxxxxx zahřátého mléka xx xxxxxxxx lahvičky xx xxxxxxx xxxxxx. X mléku přidat xxx 0,4 ml xxxxxxx penicilinázy (5.3) x řádně promíchat.
6.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxx látek
6.2.1 Xxxxxxx xxxxxxxx disk (4.3) do xxxxxx xxxxx (6.1.2) pomocí xxxxx a xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx x lahvičku xx xxxxxxx. Naplocho xxxxxxx xxxx na xxxxxx Xxxxxxx xxxxx (5.6) x xxxxx přitlačit xxxxxxxx.
6.2.2 Disky xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx mléka xxxx být vzdáleny xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 20 xx x xx okraje xxxxxxx 10 mm.
6.2.3 Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx disky (4.3) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx roztokem xxxxxxxxxxxx (5.2) xxxx xxxxxxxx rozmístit mezi xxxxx xxxxxxxxx vzorky xxxxx x poměru xxxxxxx 2 % xxxxx disků xx xxxxxx xxxxx; xxx xxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx pět xxxxxxxxxxxx xxxxx.
6.2.4 Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx všech xxxxx xx agarové xxxxxx x po xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx dnem xxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxxxx 2,5 až 5 hodin xxx 63 ± 1 °X.
6.2.5 Xx inkubaci xxxxxxxx misky xxx xxxxxxx zdroji xxxxxx, xxx xxxx možné xxxxxxxxx čiré inhibiční xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxx xx xxxxx.
6.2.6 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (6.2.3) xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 2 xx xxxx.
6.2.7 Čiré xxxx xxxxx disků xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx velkost xx xxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx popsaná x 6.2.6, xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.3 Identifikace a xxxxxxxxxxxx inhibičních xxxxx
6.3.1 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (6.1.2) x se xxxxxxx ošetřeným penicilinázou (6.1.3). Xxxxxxx přidání xxxxxxxxxxxx do 10 xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx napuštěný xxxxxxxxxxxxx (5.3.2) x xxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx.
6.3.2 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x 5.2 x) xx d).
6.3.3 Xxxxxxxxx průměrný průměr xxxxxx xxxxxxxxxxx zón xxx xxxxxx mléka, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxx standardní xxxxxxx xxxxxxxxxx.
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 2)
7.1 Xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nevytvoří žádná xxxx zóna, xxx xxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx vzorkem xxxxx, xxxxxx xxxxx nebo xxxxx xxx xxxx xxxxx disku napuštěném xxxxxxxxxxx xxxxxxxx penicilinu (5.2x)), xxxxxxxxx xxxxx xx vzorku xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx než 0,004 μg/ml.
7.2 Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx zóny xxxxx disku nepuštěném xxxxxxxxx penicilinázu xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx zóny xxxxx xxxxx se vzorkem xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, které xxxx možné inaktivovat xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx použité x xxxxx xxxxxxx.
7.3 Xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxx průměru čiré xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx penicilinázu xxxxx než průměrná xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx kolem xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx 6.1.2, xxxxxx xxxxx obsahuje xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx nelze xxxxxxxxxxxxx koncentrací penicilinázy xxxxxxx x xxxxx xx. Syntetické xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx, nemusejí být xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx za xxxxxxxxx podmínek a xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx jiné než xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx
Xxxxx to je xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx penicilin xxxxx být xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx postupy.
8. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxx penicilinu může xxx provedeno xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, nebo xxxxxxx xx základě velikostí xxx získaných xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx (5.2 x) xx x)).
8.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx lineární xxxxxxxx xxxx xxx10 koncentrace xxxxxxxxxx a průměrem xxxxxxxxxxx zón, xxxxxxxxxx xxxxxx lze xxxxxxxxx xx logaritmický xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx penicilinu xx pořadnici x xxxxxx xxx na xxxxxx. Xxxxxxxxx zóny xx xxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx se graficky xxxxxxx xx základě xxxxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx.
8.3 Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xx základě xxxxxxx xxx vzorků pomocí xxxxxxx nebo xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxxx zón xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, avšak xxxxxxx xxxxxxx větší xxx xxxxxxx xxxxx.
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx jako xxxxx penicilinu xxxxx xxxx vyšší než 0,004 μx/xx (xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xxxx xxxx obsah xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx penicilin.
9.2 Opakovatelnost (x) a xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X)
Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
X xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx A, xxxxxxxx XXX bodu 2, tento postup xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx patogenních xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx, které xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx onemocnění xxxxxxxxxxxxx x potravin.
Pasterace xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx X, xxxxxxxx XXX xxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx, pokud jde x počítání xxxxxxx xxx 30 °C x 21 °X, xxxxxxxxxx bakterie a xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx patogeny xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, pokud existuje xxxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
3. Postup
Postupy a xxxxxxx xxxxxxxxx musí xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx orgán xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx vydávání osvědčení x zdravotní xxxxxxxxxxxx xxx tepelně xxxxxxxx xxxxx xxx obchod xxxxxx Xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx patogenních xxxxxxxxxxxxxx xx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx přijaté xx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Zpráva x xxxxxxxx
Xxx každý xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx:
Xxxxx xxxxx xx mililitr, nebo "xxxxxxxxxx" xx "xxxxxxxxxxxx" x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, který xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxx popsat xxxxxxx xxxxxx.