Xxxxxxxxxx Xxxxxx
xx xxx 14. února 1991,
xxxxxx xx xxxxxxx některé xxxxxx analýzy x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
(91/180/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX SPOLEČENSTVÍ,
s xxxxxxx na Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx směrnici Xxxx 85/397/XXX xx xxx 5. xxxxx 1985 x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx [1] xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 89/662/XXX [2], x xxxxxxx na xx. 10 xxxx. 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxx, že xxxxx xx. 10 xxxx. 2 Komise xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, které xx xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx dodržování xxxxx xxx syrové xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, že pro xxxxxx xxxxx je xxxxxxxx stanovit xxxxxxx xxxxxx pro stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx, bodu xxxxxxx x xxxxxxxxxxx antibiotik;
vzhledem x tomu, že xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx metody xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x XXX xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, nepřítomnosti xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx x technických xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, které xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx určitých xxxxx; xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx podmínek, xx xxxxxxx se xxxxxxxxx rutinní xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx; xx x očekávání xxxxxxxx xxxxxx šetření xxxxx xxxxxxx státy xx xx, aby xxx dodržení xxxxx xxxxxxxx 85/397/ES xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx stanovení xxxxxxxxxxxx xxxxx analýzy x xxxxxxxxx zahrnuje x xxxxxxxxx postupů analýzy x xxxxxxxx spolehlivosti xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx jsou x xxxxxxx se xxxxxxxxxxx Xxxxxxx veterinárního xxxxxx,
XXXXXXX XXXX XXXXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x testování xxx xxxxxx xxxxx xxxx tyto:
- stanovení xxxx xxxxxxx,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 30 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 2
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx pasterované xxxxx xxxx xxxx:
- stanovení xxxx mrznutí,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx fosfatázy,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxx 30 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 21 °C,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx – xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Článek 3
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx a testování xxx XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 4
Použití xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx, xxxxxxxxx kritérií xxxxxxxxxxxxx a odběr xxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx X.
Xxxxxx 5
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx 1, 2 a 3 xxxx popsány x příloze XX.
Xxxxxx 6
Xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx 31. xxxxxxxx 1992, xxx xx zohlednil xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 7
Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X Bruselu xxx 14. února 1991.
Xx Xxxxxx
Xxx Xxx Xxxxxx
xxxx Xxxxxx
[1] Xx. xxxx. X 226, 24.8.1985, x. 13.
[2] Xx. xxxx. X 395, 30.12.1989, x. 13.
PŘÍLOHA X
XXXXX
X. Obecná xxxxxxxxxx
XX. Odběr xxxxxx xxxxxxxx x tepelně xxxxxxxxxx xxxxx
X. XXXXXX XXXXXXXXXX
1. Úvod
Obecná xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx, kritérií xxxxxxxxxxxxx a xxxxx x xxxxxxxxx. Příslušné xxxxxx xxxxxxxxx států x xxxxxxxxxx pověřené xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx mléka xxxx xxxxxxxxx tato xxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxx
2.1 Voda
2.1.1 Pokud xxxx stanoveno xxxxx, xxxx použitá x xxxxxxxxxxx, xxxxxx nebo xxxx musí xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx mikrobiologické xxxxx xxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx nebo jinak xxxxxxxx xxxx mikroorganismů xx xxxxxxxxx testovacích xxxxxxxx.
2.1.2 "Rozpouštěním" xxxx "xxxxxxx" (xxx xxxxxxx xxxxxxxxx) xx xxxxxx "xxxxxxxxxxx xx vodě" xxxx "xxxxxx xxxxx".
2.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxx není stanoveno xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxx uznané analytické xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
3.1 Seznam přístrojů x xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx týká xxxxxxxxx a xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx x se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.2 Xxxxxxxxxx xxxx
"Xxxxxxxxxxxx xxxxxx" xx xxxxxx xxxx s xxxxxxxxx xxxxxx xx 0,1 xx.
4. Xxxxxxxxx výsledků
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx není xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx uvedený xx zprávě o xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx, které xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (5.1) xxx příslušnou xxxxxx. Xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx opakovatelnosti xxxxxxx, xxxx se xxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
5. Xxxxxxxx spolehlivosti: xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx
5.1 Kritéria xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx:
5.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) xx hodnota, xxx xxxxxx xx xxxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx mezi dvěma xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (stejný xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx, krátké xxxxxx xxxxxx).
5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) xx xxxxxxx, xxx kterou leží xxxxxxxxx rozdíl dvou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x týmž xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx odlišných xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx, různé xxxxxxxxxx x/xxxx xxxxx xxxx).
5.1.3 Pokud xxxx xxxxxxxxx jinak, xxxxxxx xxx kritéria xxxxxxxxxxxxxxx x reprodukovatelnosti, xxxxxxx x příslušných odstavcích xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx 95 % intervaly xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx ISO 5725, xxxxx vydání, 1986. Xxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxx pokusů, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxx postupy xxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx. V xxx případě byly xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxxxxx odhadnuty.
5.1.4 Xxxxxxx xxxxx x nezbytné xxxxxx by xxxx xxx naplánovány x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x mezinárodními xxxxxx.
6. Xxxxxx o xxxxxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxxxx musí xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x získané xxxxxxxx. Xxxx xxxx musí xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, které xxxxxx xxxxxxxxx v metodě xxxxx, nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx by xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx x testování xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx identifikaci xxxxxx.
XX. ODBĚR XXXXXX XXXXXXXX X XXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXX
1. Předmět x xxxxxx použití
Tento xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro odběr xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx dodané xxxxxxxxxx x xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx mléko xxxxxxxxxx xx skladovacích a xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx uvedené x xxxxxx 2, 4.4, 5 x 6 se xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx ošetřeného xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx.
2. Xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x tepelně xxxxxxxxxx mléka xxxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xxxx. provedou xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxx odběrem vzorků xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx nezbytné, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx odběrem xxxxxx v metodách xxxxxx, aby xxxx xxxxx, že xxxxxxxx xxxxxx budou xxxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxx x xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx příslušné orgány xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx za xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx pověřené xxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx vzorků, xxx xxxxxxxxxxxx vzorků xxxx xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx
3.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx oceli xxxx x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx odolného xxxxxxxxx, xxx xxxx xxx xxxxxxxx x ohledem xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx, xxxxx vzorků, xxx.). Xxxxxxx a xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx v nádobách xxxx xxx dostatečně xxxxxx plochu povrchu, xxx xxxx zajištěno xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx vzniku xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx dlouhou xxxxxxxx x nabírání xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxx 50 xx.
Xxxxxxxxxxx x xxxxx musí xxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxx x víček) nesmí xxxxxxxx xxxxxxx změnu xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xx xxxxxx xxxx xxx xxxxx, xxxxx, xxxxxx povrch xxx xxxxxx a xxxx xxx zakulacené xxxxx.
3.2 Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxx) xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx 3.1 x musí xxx xxxxxxxx.
Xxxxx xx pro xx sobě xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, musí xxx xx xxxxxx xxxxxx vzorku xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxx x xxxxxx xxxx požadavky, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx příslušný xxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx vzorků.
4. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx
4.1 Xxxxxx xxxxx
Xxx ohledu xx xxxxx, které xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx být xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx ručně, xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx musí xxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxxx.
Xxxxx se x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx více vzorků xxxxx xxx xxxxx xxxxx, xxxx xxxxx xxxx xxx odebrán xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx musí xxxxxxxxx potřebám xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx byly xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxx xxx bylo xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, aniž xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx stloukání xxxxx xxxxx přepravy.
4.2 Xxxxx xxxxx vzorků
4.2.1 Xxxxx xxxxxx x xxxxx x konví xx xxxxx
X rychlému xxxxxxxxxx xxxxxxxxx plunžrem xx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx x xxxx, xxxxxxx dbát na xx, xxx xx xxxxx řádně xxxxxxxxxx x aby xx xx xxxxx konve xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx, xxxxx je xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx postupem xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.2 Xxxxx x chlazených xxxxxx na xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxx neumožňuje xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxx xxxxxx z xxxxx xxx
Xx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx, když se xxxxxx xx misky xxx. Xx xxxxxx xxxxxxxxx rovnoměrného xxxxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx míchání. Xxxxx objem zásilky, x xxx xx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx, xxxxxxx reprezentativní xxxxxx z xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.4 Xxxxx xxxxxx x rozdělené xxxxx
Xxxx xx množství xxxxx, x něhož xx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxx nádob, x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx mléka xxx xxxxx vzor. Xxxxx vzorky x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx v xxxxxx, xx xxxxx xxx xxxxx ze xxxxxx odebrán. Xx xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx (xxxx) vzorek (xxxxxx) z xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
4.2.5 Odběr xxxxxx z xxxxxxx xxxxx – skladovací xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx vagóny
4.2.5.1 Xxxx xxxxxxx xxxxxx se xxxxx vhodným xxxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx nádob, xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx kamionů xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx mechanické xxxxxxxxxx (4.2.5.2).
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, xx xxxxxx xxxx xxxxx v klidu. Xxxx být xxxxxxxxx, xx xxxxxx promíchání xxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxxxx případů xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx značně xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx provedených na xxxxxxxx odebraných buď x xxxxxxx xxxxx xxxxx, nebo v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx při xxxxxxxxxxxxx xxxxx z xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx) xx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxx x obou xxxxxx odebraných xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx 0,1 %.
Ve xxxxx nádobě x xxxxxxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxx xxxxx může x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx množství xxxxx, xxxxx xxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxx dostatečné xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx reprezentativnost xxxxxx.
4.2.5.2 Promíchání obsahu xxxxxxx nádob xxxx xxxxxxxxxxxx nádrží, cisternových xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx:
- mechanickou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx do nádoby x xxxxxxxxx elektrickým xxxxxxx,
- xxxxxx xxxx xxxxxxxxx poháněnou xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx x průlezovém xxxxxx; xxxxxxxx je ponořena x xxxxx,
- v xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx cisternových xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx přepravní xxxxxx, xxxxx je xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x čistým xxxxxxxx. Xxxxxxx xx minimální xxxx a xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx vniku xxxxxx xxxxx.
4.3 Automatický a xxxxxxxxxxxxxxx odběr vzorků
Automatické x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx odběr xxxxxx xxxxxxxx mléka dodaného xxxxxxxxxx se může xxxxxx podle xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx laboratoří xxxx jiným xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx vybavení musí xxx xxxx a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrolám, xxxxx xxxxxxxxx odpovědný xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx s cílem xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx mléka, x xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx),
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx vzorek x šarže xx xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxx používání xxxxxxxxxxxxx nebo poloautomatického xxxxxxxx xxx odběr xxxxxx může xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx objem xxxxx, ze xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx,
- minimální xxxxx xxxxxx,
- maximální xxxxxx,
- xxxxxxxxx, xxxxx může xxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx opatření, xxxxx je xxxxx xxxxxxxx.
4.4 Xxxxx vzorků xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxx x xxxxxxx ošetřené xxxxx xxxxxx x přímé xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx x maloobchodních xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx skládají x xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nádob. Xxxxxx musí xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx, x xx, xxxxx xx xx možné, ihned xx xxxxxxxxxx (v xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxx pasterace).
Z xxxxxxx druhu xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx metodou XXX x xxxxxxxxxxxxxxx) se xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, která xxxx být xxxxxxxxx, x xx podle xxxxxx xxxxxxxxxxxx testovací xxxxxxxxxx nebo podle xxxxxx jiného xxxxxxxxxxx xxxxxx.
5. Identifikace vzorku
Vzorek xx měl xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx kódem, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx identifikaci xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx laboratoří xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx bod 2).
6. Xxxxxxxx x skladování xxxxxx
Xx souhlasem xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx orgánu xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx x podmínek přepravy x skladování, které xxxx xxx xxxxxxxx x xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, x xx xx základě xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx xxxx:
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx na to, xxx xxxxxx nebyly xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x přímému slunečnímu xxxxxx. Xx-xx je xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx skladován xx xxx,
- xxxxxx syrového xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx testování musí xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 0 xX až 4 oC. Xxxx xxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxxx x x xxxxxx případě xxxxx xxxxxxxxxx 36 xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 0 xX až 6 oC, není-li xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxx 24 xxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx teplotách 0 xX xx 4 xX. Doba xxxx xxxxxxx x testováním xxxx být xx xxxxxxxxx a x xxxxxx případě xxxxx xxxxxxxxxx 24 hodin,
- xxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx x pasterovaného xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx analýzy musí xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx zařízení xxxxxxxxxx x doba mezi xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx musí být xx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx přijmout xxx xxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx v xxxxxx xxxxxxx použitelných xxxxxxx.
XXXXXXX I
OBSAH
I. Xxxxxxxxx xxxx mrznutí
II. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
XXX. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxx 30 °X
X. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 21 °X
XX. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx – xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °C
VII. Xxxxxxxxx obsahu somatických xxxxx
XXXX. Detekce xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx
XX. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
X. XXXXXXXXX XXXX XXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, UHT xxxxx xxxx sterilizovaného mléka xxxxxx přístroje (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx), x xxxx xx xxxxxxxxxxx řízená xxxxx ochlazována elektrickým xxxxxxxxx zařízením x xxxxxxxxxxxx xxxxxx nahrazuje xxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx. První xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx na xxxxx xxxxxx mrznutí, xxxxxx xxxxx xxx xx x xxxxxxxxxx důvodů xxxxxxxx xxx, xx xx začátku xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx odečet. Xxxxxxxx x xxxx, xx xx xxxxx lišit xxxxx křivky xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx, xxx i xxxxxx bodu xxxxxxx xxxxx x standardních xxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxx, tento xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx použití xxxxxxxxx hledajících xxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx používat x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxx lze xxxxxx xxx odhad xxxxxx xxxxxxx xxxx vody x xxxxx za xxxxxxxxxxx, xx kyselost xxxxxx xxxx vyšší xxx 0,18 g xxxxxxxx xxxxxx na 100 xx (xxx xxx 7.4).
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx x souladu x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxx (°X).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx x závislosti xx přístroji xxxxxxxxx xx vhodnou xxxxxxx x xxxxxxxxxxx vibrací xx xxxxxx jeho xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, xx teplota xxxxxx xxxxxxx xx x xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx takovým xxxxxxxx, aby xx xxxxxxx postupem xxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx odečty xxx dva xxxxxxxxxx xxxxxxx. Za xxxxxx xxxxxxxx plató xxxxx xxx xxxxxxx mléka xx xxxxxxxx Celsia.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Kryoskop
Kryoskop xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, termistorového snímače (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx teploměru) x příslušným xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xx vzorky a xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx, jakož x xx xxxxxxxx xx xxxxxx.
4.1.1 Xxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx dva xxxx xxxxxxxx lázně.
4.1.1.1 Xxxxxxx xxx
Xxxxx izolovaná xxxxx obsahující xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx míchá xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx dvěma xxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 0,2 °X. Teplota xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx ± 0,5 °X xx xxxxxxxxx hodnoty xxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx, xxx x lázni xxxx udržována konstantní xxxxxxx kapaliny. Xxxx xxxxxx xxxxxxxx na xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxxx chladicí xxxxxxxxx.
4.1.1.2 Xxxxxxxxxx typ
Kolem xxxxxxxx xx vzorky proudí xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx může xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx ± 0,5 °C xx xxxxxxxxx hodnoty xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx 33 % (V/V) xxxxx xxxxxx 1,2-xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx).
4.1.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx se xxxxxx xx skleněné xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx 1,80 ± 0,2 xx x x xxxxxxx vodiče xxxxxxxxx 0,31 mm. Xxxxxx xxxxxxxxx termistoru musí xxx xxxxx xxx 2 sekundy x xxxxxxx b (xxx xxxxxxxx) xxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxxx napětí, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx musí být xxxxxx, xxx při − 0,512 °X xxxxxxx termistoru xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x 0,0005 °X. Maximální tolerance xxxxxx xxxx xxx ± 5 %.
Xxxx xx xxxxx v xxxxxxxxx x pracovní xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx v xxx xxxxxxxx na vzorky x v xxxx, xxxxx je 44,6 ± 0,1 xx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (xxx obrázek xx xxxxxx 15). Xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx polohy.
Poznámka:
β xxxxxxxx xxxxxxxx vlastnosti xxxxxxxxxx xxxxx vzorce
− xX / xX × 1 / X = β / X2
xxx:
X xx xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx
X xx odpor x xxxxxx při xxxxxxx T,
− xX / dT × 1 / R xxxxxxxx xxxxxxxxxx
β xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx materiálu xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx hodnota xxxxx xxx 3000.
4.1.3 Xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
4.1.3.1 Princip xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx pracuje na xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx. Plató xx část křivky, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx ± 0,002 xX po dobu xxxxxxx 20 xxxxxx.
4.1.3.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx Wheatstoneovým xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx pomocí nejlepších xxxxxxxxxxxx xxxxxx, jejichž xxxxxxxxx tolerance xx ± 10 % x jejichž teplotní xxxxxxxxxx xxxx vyšší xxx 2×10−5°C.
Proměnný (xxxxxxxxxxx) xxxxx se xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx x více než x 0,3 % xxx xxxxxxxxx hodnoty.
Pro xxxxx xxxxxxxxx musí xxx možné xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxx po xxxxxxxxx 0,001 °X.
4.1.3.3 Xxxxxxxxxxx provoz
Odečítací zařízení xxxx umožnit xxxxxxxxx xx xxxxxxx 0,01 °X x xxxxxxx xx 0 °X xx –1 °C.
Stabilita xxxxxxxxxxx zařízení a xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxx, xxx odchylka xxxx xx sobě následujících xxxxxx téže xxxxxxx xxxxxx vyšší než 0,001 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx taková, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x žádném bodě xxxxxxx od – 0,400 °X xx – 0,600 °X xxxxx chyba xxx ± 0,001 °X.
4.1.4 Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx o xxxxxxx 1 xx 1,5 xx, který xxxxxxxxx x mlékem,.
Míchačka xx měla být xxxxxxxxx xx xxxxxxx x umístěna xxxxxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx je asi 1,5 mm nad xx pod xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x dostatečným xxxxxxxxx xxxxxxx výrobce (xxxxxxx ± 1,5 mm), xxx xxxx zajištěna xxxxxxxx teplota xxxxxxxxxxx xxxxxx během xxxxxxxxx. Xxxxx míchání se xxxxxxxx nesmí v xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx termistoru xxxx xxxxx xxxxxxxx.
4.1.5 Xxxxxxxx xx vyvolání xxxxxxx
Xxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, které xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx mrznutí xxxxxx, aby teplota xxxxxx testovacího xxxxxx xxxxxxx k bodu xxxxxxx. X tomu xxxxx xxx použít xxxxxxxx; xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx jednu xx xxx xxxxxxx xxx, xxx se xxxxxxxx dotýkala stěny xxxxxxxx xx xxxxxx.
4.1.6 Xxxxxxxx xx xxxxxx
Xxxxxxxx xx vzorky (xxx xxxxxxx 1) jsou xxxxxxxx x 50,8 ± 0,1 xx xxxxxx; vnější průměr xx 16,0 ± 0,1 xx a xxxxxxx průměr xx 13,5 ± 0,1 xx. Xxxxxxxx skla xxxxxxxx xx nesmí xxxxx o xxxx xxx 0,1 xx.
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx od xxxxxxx okraje 29,8 xx (21 xx xxx dnem xxxxxxxx), xxxxx xxxxx objem xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx.
4.1.7 Xxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx napětí xxxx xxx stabilizován xxx xxxxxx nebo vně xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ± 1 % xxxxxxxxx hodnoty, když xxxxxx xxxxx kolísá x ± 6 %.
4.2 Xxxxxxxxxx xxxx
4.3 Xxxxxxx xxxxx o xxxxxx 1000 xx, xxxxx A.
4.4 Xxxxxxx, xxxxx odvětraná, nastavitelná xx 130 ± 1 °C
nebo
Elektrická pec, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na 300 ± 25 °X.
4.5 Exsikátor
5. Xxxxxxx
5.1 Xxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx x zchlazená xx 20 ± 2 °X, ve xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxx xxxxx, čistoty x.x., jemně xxxxx, xxxxxx 5 hodin xxx xxxxxxx 300 ± 25 °X x xxxxxxxxxx peci xxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx xxxxxxx 130 ± 1 °X v xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx exsikátoru.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků
Navážit xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxxxxx 1) xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5.2) xx xxxxxxx. Xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxx (5.1), xxxxxxxxxxxxx přelít xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 1000 xx x xxxxxxx xx značku vodou x xxxxxxx 20 ± 2 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx při asi 5 °X x xxxxx uzavřených polyethylenových xxxxxxx o maximálním xxxxxx 250 xx.
Xxx xxxxxxx roztoků xxxxxxxx xxxxxxx při 20 °X
|
x NaCl/l |
°C |
|
6,859 |
-0,408 |
|
7,818 |
-0,464 |
|
8,149 |
-0,483 |
|
8,314 |
-0,492 |
|
8,480 |
-0,502 |
|
8,646 |
-0,512 |
|
8,811 |
-0,521 |
|
8,977 |
-0,531 |
|
9,143 |
-0,541 |
|
10,155 |
-0,600 |
Před použitím xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Nikdy neprotřepávat xxxxxxxxxx xxxxxx tak xxxxxx, aby xx xx roztoku xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx x xxxxx xxxxxx do suché x čisté xxxxxxx. Xxxxx nepoužívat xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx, xxxxx xxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx neobsahují fungicid (xxxxxxxxx xxxxxx thiomersalu 10 x/x).
6. Kalibrace xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx o xxxx xxx 1 °X od teploty, xxx níž se xxxxxxx xxxxxxxxx. Kryoskop xxxxx xxx vystaven xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx 26–27 °X.
Xxxxxxx xx, xx xxxxxxxx funguje podle xxxxxx xxxxxxx x xx xxx zapnut xxxxxxx 12 xxxxx xxxx kalibrací. Zkontrolovat xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx kapalin.
Vybrat xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxx xxxxxxx xxxx), xxxxxxx bod xxxxxxx xx xxxxx xxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx bodu xxxxxxx vzorků mléka x xxxxxxxxx. Rozdíl xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx neměl xxx xxxxx xxx – 0,100 °X.
(X některých xxxx v xxxxxxxx xxxx dostupných xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx sestaven xxx, xx xx ustálí xx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X těchto xxxxxxxxx xxxxx jednoho xxxxxxxxxxxx roztoku, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx, xxxx jednoho x xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxxxxx kalibrační postup; xxxxxxx musí xxxx xxxxxxx uvést).
Pomocí xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 ml xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx a xxxxx xxxxxxxx na vzorky, xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx na vzorky xxxxxxxxx při xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx (stejný druh xxxx, umyté a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx vodou). Xxxxxxx standardních roztoků xxxx xxxxxx jako xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, dokud xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx bodu xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku. Xxxxxxxx tento xxxxxx x druhým xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx takovým xxxxxxxx, dokud po xxxx následující xxxxxx xxx každý xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx mrznutí každého x xxxx, xxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx tedy xxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxx ukazuje xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx by byla xxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
7. Xxxxxxxx testovacího vzorku
7.1 Xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx mezi 0 °X a 5 °X.
7.2 Pokud xx je nezbytné xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx tělíska xxxx tuhý mléčný xxx xx xxxxxx xx xxxxx a xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx x mlékem x xxxx xxx účinný xx xxxxxxxxxxx teploty.
7.3 Xxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (mezi 0 x 5 °C) xxxx xx xxxxx xx ohřát xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxxxx testování. Xx však xxxxxxxx xxxx na to, xxx xxxxxxxxxx roztoky x xxxxxx xxxxx xxxx xxx použití xxxxxxx teplotu.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxxx kyselost xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx stanovením bodu xxxxxxx. Xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx přesahuje 0,18 x xxxxxxxx mléčné xx 100 ml xxxxx, nemohou xxx xxxxxxxxxxx.
7.5 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx nejméně 20 xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x otevřené xxxxxx.
8. Xxxxxx
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx, xxx hladina x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxx xx sonda termistoru xxxxxxx v prázdné xxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx kryoskop a xxxxxxx xx, xxx xx chladicí kapalina xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx. Pokud xxx xxxxxxxx xxxxxx alespoň 12 hodin, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx chladicí kapaliny, xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx jeho xxxxxxx.
8.2 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxx každou sérií xxxxx xxxxx bod xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxx – 0,512 °X), xxxxx xx xxxxxxx získané při xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx nebudou xxxxx o xxxx xxx 0,001 °C. Xxxxx xx průměr xxxxxx hodnot xxxx xx xxxx mrznutí xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxx 0,002 °X, kryoskop xx xxxxx xxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx v xxxx 6.
Xxxxx xx xxxxxxxx používá xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx provádí xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
8.3 Xxxxxxxxx xxxx mrznutí xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x několikerým xxxxxxxx. Xxxxx neprotřepávat xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx vzduch.
Pomocí xxxxxx přidat 2,5 ± 0,1 xx xxxxx do xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx. Ujistit xx, xx xxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx x xxxxx, xxxxx xx to xxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx směrem xxxxxxx xxxxxx jemnou, xxxxxx x chlupy xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx kalibrovaného xxxxxxxxx podle pokynů xxxxxxx. Mléko xx xxxxxxx a mrznutí xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx výrobcem x přesností xx 0,1 °X.
(X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx x digitálního xxxxxxxxx; x ručních xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xx xx zajistí, xxx mrznutí xxxxxx, xxxx se xxxxxxx xxxx nitka galvanometru xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxx.)
Xxxxx x jakéhokoli xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx později, xxx je xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx rozmezí, xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx se x jiným vzorkem xxxxx. Pokud xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, alikvótní xxxxx vzorku se xxxxxxx na 45 °X a 5 xxxxx xx xxxxxxx xx xxxx teplotě, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx x ihned xxxxxxx testování. Xxxxxxx xxxxx po začátku xxxxxxx xxxxxx stoupne xx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx po xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, x poté klesne. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx dosažené xxxxx této xxxx x xxxx xxxxxxx xx xxxxx zaznamenat.
Poznámka:
Doba, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, x xxxxxx interval xxxx xxxxxxxx mrznutí x xxxxxxxxx maximální xxxxxxx, xx xxxx vzorek xx vzorku x xxx vodu x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxx xxxxx. Je xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xx měření xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxx x xxxxxxxx směrem xxxxxxx nahoru xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx stanovení x xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx než xxxxxxx opakovatelnosti (0,004 °X), xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx obou xxxxxxxxx xxxxxx xx 0,004 °X, xxxxxx se x použijí se xxx výpočet xxxxxxxxx xxxxxxxx.
8.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xx místo xxx vzorky x xxxxxx provozní teplotu, xxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
(X xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx; x xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xx sonda xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxxx shodné xxxxx.)
9. Xxxxxxxxx výsledků
9.1 Xxxxxxx
Xxxxx xx po provedení xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xx považuje xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx mrznutí, xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx provedených xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, je xxxxx xxxxxx zaokrouhlit xx xxxxxxxxx sudou xxxxxxx, xxx xxxxxxx tento xxxxxxx:
Xxx mrznutí (°X)
|
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx |
Xxxxxx |
|
|
-0,544 |
-0,545 |
-0,544 |
|
-0,545 |
-0,546 |
-0,546 |
9.2 Xxxxxxxxxxxx
9.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x): 0,004 °X
9.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X): 0,006 °X
Xxxxxxx 1
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1 (xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx)
XX. XXXXXXXXX AKTIVITY XXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxx x pasterovaném xxxxx.
2. Xxxxxxxx
2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx fosfatázy xxxxxxxx xx výrobku. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x μg xx 1 ml xxxxxxxxxxxxx xxxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 Aktivita xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx 4 xx xxxxxx xx 1 ml.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx vzorku xxxxxx xxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx fenol xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxx), který se xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 610 xx. Xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx vzorkem, xxxxx xxxxx fosfatázy byl xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxx xx xxxx 50,0 x xxxxxxxxx barnatého (xxxxxxxxxxx) [Xx(XX)2.8X2X] x xxxxxxx na 1000 xx.
4.1.2 Xxxxxxxxx xx xxxx 22,0 x xxxxxxxx xxxxxx (X3XX3) x doplnit xx 1000 ml.
4.1.3 Zahřát 500 xx xxxxxxx xxxxxxx xx 50 °X, oba roztoky xxxxxxx, promíchat, xxxxxx xxxxxxxx asi na 20 °X, x xxxxxxx nutnosti xxxxxxx xxxxxxx pH xx 10,6 ± 0,1 xxxxxxxx xxxxxxx 4.1.1 xxxx 4.1.2. Xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx roztok xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4.1.4 Xxxx xxxxxxxx zředit xxxxxx stejným objemem xxxx.
4.2 Tlumivý xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxx 6,0 x methaboritanu xxxxxxx (XxXX2) nebo 12,6 x NaBO2.4H2O x 20,0 x xxxxxxxx xxxxxxx (NaCl) x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.3 Xxxxxxx roztok xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxx 10 ml xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx zabarvení (4.2) xxxxx xx 100 xx.
4.4 Xxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx 0,1 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xx 100 xx tlumivého xxxxxxx (4.1.3) nebo 0,5 x fenylfosfátu dvojsodného xx 4,5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2), xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx XXX (4.6) x xxxxxx xxxx 30 minut xxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 2,5 xx x-xxxxxxxx x xxxxxx xxxx, dokud xx xxxxxxx-1 neoddělí. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx-1. X případě xxxxxxxx xx extrakce xxxxxxx.
Xxxxxx je možné xxxxxxxxx x chladničce xxxxxxx xxx; před xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx novou xxxxxxxx. Tlumivý xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxxx, x xx xxxxxxxx 1 xx xxxxxx roztoku xx 100 xx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.3).
4.5 Xxxxxxxxx xxxxx-xxx
Xxxxxxxxx ve vodě 3,0 x xxxxxx xxxxxxxxxxx (XxXX4 · 7X2X) a 0,6 x xxxxxx xxxxxxxxx (XxXX4 · 5H2O) x doplnit xx 100 xx.
4.6 Xxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (roztok BQC)
Rozpustit x 10 xx 96 % (X/X) xxxxxxxx 40 ± 1 xx 2,6-dibromchinonchlorimidu (XXX) (X6X2Xx2XxXX6).
Xxxxxxxxx x xxxxx láhvi x xxxxxxxxxx. Xxxxxxx roztok, xxxxx změní barvu xxxx xx xxxxxx xxx xxxxx xxxxx.
4.7 Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (XX)
Xxxxxxxxx xx xxxx 0,05 x xxxxxx xxxxxxxxx (XxXX4.5X2X) x xxxxxxx xx 100 xx.
4.8 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx
4.8.1 Xxxxxxx 200 ± 2 xx xxxxxxx bezvodého xxxxxx x přelít do xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 100 xx, xxxxxx vodu, xxxxxxxxx x xxxxxxx xx 100 xx. Tento xxxxxx může xxx xxxxxxxxx x chladničce xxxxxxx měsíců.
4.8.2 Xxxxxx xxxxx 10 xx xxxxxxxxx roztoku, doplnit xx 100 xx x xxxxxxxxx. 1 xx obsahuje 200 μx xxxxxx.
5. Přístroje x pomůcky xx xxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxxxx xxxxxxx xx skla, xxxxx x zátky x xxxxxxxxx xxx odběr xxxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx destilovanou xxxxx xxxx xxxxxxx parou.
b) Xxxxxxx xxxx plastových xxxxx mohou xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxxxxx laboratorní vybavení, xxxxxxx:
5.1 Analytické xxxx
5.2 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx 37 ± 1 °C.
5.3 Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxx xx vlnové xxxxx 610 nm.
5.4 Xxxxxxxx, 16 xxxx 18 × 150 mm, xxxxxxx odstupňované po 5 ml x 10 xx.
5.5 Pipety
5.6 Xxxxxxxx nálevky xxxxxx xxxxxxxxx, např. x xxxxxxx 5 cm.
5.7 Xxxxxxxx xxxxxx o xxxxxxx xxxxxxx 9 xx xxx střední xxxxxxxx filtrace.
5.8 Xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků.
6. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxx xxxxxxxxx zabránit xxxxx xxxxxxx slunečního xxxxxx.
x) Xxxxx slin xxxx potu xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x je xxxxx se xxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 Testování xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x chladničce, xxxxx xx déle xxx xxx dny.
6.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxx xx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx (5.4), jednu zkumavku xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx.
6.3 Xxxxxxxxx
6.3.1 Xxxxx vzorek xxxxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxxx xxxx; xxxxxxxx x kádinku x xxxxxx vodou xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Rychle xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.2 Xx zbytek xxxxxxx xxxxxxxxx slepý x testovací vzorek xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx 10 ml xxxxxxx xxxxxxxxx (4.4) a xxxxxxxxx.
6.3.3 Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 60 xxxxx xx vodní xxxxx (5.2) x xxxxx (xxxxxxx čtyřikrát) promíchat xxxxxx xxxxx.
6.3.4 Xxxxxx xxxx x xxxx 6.3.1 xxxxxxxx xxx xxxxxx ve xxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.5 Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 1 ml xxxxxxxxx xxxxx-xxx (4.5) x xxxxx xxxxxxxxx.
6.3.6 Xxxxxxxxxxxx xxxx suchý xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx x v xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx; xxxxxxxxxx 5 xx ve xxxxxxxx.
6.3.7 Xxxxxx 5 xx tlumivého roztoku xxx vyvolání xxxxxxxxx (4.2).
6.3.8 Xxxxxx 0,1 xx xxxxxxx XXX (4,6), xxxxxxxxx x 30 minut xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx teplotě.
6.3.9 X xxxxxxxxx s kontrolním xxxx xxxxxx pokusem xxxxxx xxxxxxxxxx při xxxxxx délce 610 xx.
6.3.10 Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x bodě 6.3.9 převyšuje absorbanci xxxxxxxxxxxx roztoku obsahujícího 20 μg xxxxxx xx zkumavku xxxxx xxxx 6.4.4, opakovat xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Připravit xxxxxxx smícháním objemu xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx objemem xxxxx xxxxx testovacího xxxxxx, xxxxx se opatrně xxxxx do varu, xxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
6.4.1 Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (4.8.2) xxxxxxxxx vyhovující xxxx zředěných xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0 (xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx), 2, 5, 10 a 20 μx xxxxxx xx xxxxxxxx. Do každé x xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx pipety 1 xx xxxx x 1 xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
6.4.2 Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxx síranu xxxxxxxxx (4.7), 5 xx xxxxxxxxx roztoku xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.3), 3 xx vody x 0,1 xx roztoku XXX (4.6); xxxxxxxxx.
6.4.3 Xxxxxx xxxxxxx zabarvení 30 xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
6.4.4 X xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.4.5 Na xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (6.4.4) xxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (6.4.1) xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxx x vzorec
7.1.1 Xx základě xxxxxx xxxxxxxxxx (6.3.9) vypočítat xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (6.4.5).
7.1.2 Xxxxxxxxx aktivitu xxxxxxxxx xxxxxxxxxx v μg xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxxx fosfatázy = 2,4 × X × X
xxx
X xx množství xxxxxx x μx xxxxxxx xxxxx xxxx 7.1.1;
X xx faktor xxxxxxx xxx zředění provedené xxxxx xxxx 6.3.10 (x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx X = 1).
2,4 xx xxxxxx xxxxxxx (5/12 z 1 xx testovacího xxxxxx) – xxx 6.2 ve xxxxxxxxxx x 6.3.2, 6.3.5 x 6.3.6.
7.2 Xxxxxxxxxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) : 2 μg fenolu/ml.
7.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) : 3 (xxxxxxxxx) μx xxxxxx/xx.
7.2.3 Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx 6.3.10, xxxxxx xxxxxxx x 7.2.1 a 7.2.2 se xxxxxx xxxxxxxx získaných xx xxxxxxxxx vzorku.
III. XXXXXXXXX XXXXXXXX PEROXIDÁZY
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxxx xxxx nepřítomnosti xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx, který xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx:
Xxxxx xx mléko xxxxx pasterováno, xx 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xx peroxidázu:
Do 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Uvolněný xxxxxxxx xxxxxx oxiduje xxxxxxxx parafenylendiamin xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (Xxxxxxxx xxxx). Intenzita xxxxxxxxx xx xxxxx úměrná xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx x xxxxx xxxx (50 °C) 2 x 1,4 xxxxxxxxxxxxxx (X6X8X2) x xxxxxxx xx 100 xx. Xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxx a temnu, x tmavě xxxxx xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx 1,4 fenylendiaminu vytvoří xxxxxxxxx, kterou je xxxxxx odstranit.
4.2 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxx 9 xx 30 % xxxxxxxx vodíku x xxxxxxx na 100 xx. Xxx xxxxxxxxxxx přidat 1 xx koncentrované xxxxxxxx xxxxxx na xxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx asi xxxxx měsíc, xxxxx xx skladován x xxxxxx x xxxxx, x xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx, která xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
5. Xxxxxx
5.1 Xxx 5 xx vzorku mléka xx xxxxx zkumavky x xxxxxxx víčkem.
5.2 Xxxxxx 5 xx xxxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx (4.1).
5.3 Přidat 2 xxxxx xxxxxxx peroxidu xxxxxx (4.2).
5.4 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx 30 xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXX 30 °X
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx technikou xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X. Xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, UHT mléko xxxx sterilizované xxxxx, xxxxx bylo 15 xxx xxxxxxxxxxxxx xxx 30 °C.
2. Definice
"Mikroorganismy" xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx po xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Princip
Smíchat xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx x kultivačním xxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx x nechat xxxxxxxxx 72 hodin při 30 °X. Spočítat xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 ml syrového xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx na 0,1 xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx XXX xxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx ze xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, zejména:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx sušárna, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °C.
4.1.2 Xxxxxxxx, nastavitelný xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Inkubátor, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °X.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx xxx kompenzaci teploty, xxxxxx na ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, nastavitelná xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Zvětšovací xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Xxxxxxxx schopná xxxxxxx 1 ml xxxxxx mléka xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x 9 ml ředicího xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx obsahu xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx ze xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx x vhodnými xxxxxxx x dostatečným xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxxx 10 xx primárního xxxxxx nebo dalších xxxxxxxxxxx ředění.
4.2.2 Xxxxx x objemu 150 xx 250 xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx 20 ml xxx skladování xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx xxxx xx sterilního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 ml, x výpustním xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 mm.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx, bezbarvého skla xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, dno misek xx xxxxxxx xxxxxx xxx 90 xx 100 mm. Vnitřní xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx nejméně 10 xx. Dno xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx, které by xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx pomůcek xx xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx teplotě 170–175 °X;
x) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 minut xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx je nutné xxxx xx xx, xxx xxxx zajištěno xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx by xxxx xxx volné.
Pomůcky xx xxxx xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx by xx xxxx xxxxxxx odvětráním xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx – xxxx xx sušeným mlékem
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx (+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx odstředěné xxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10–15 g xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 ml |
Sušené xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx inhibiční xxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx sušeným xxxxxxxxxxx xxxxxx, které průkazně xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X tomto xxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Ohřev xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx x xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx, xxxxx xx xxxx zcela nerozpustí, xxxx xxxxxxxx x xxxx xxx 30 xxxxx.
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx přes xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX pomocí xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx je nezbytné, xxxxxxx pH, roztokem (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx chlorovodíkové, aby xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 xx xx xxxxx xxxx xx 12 xx 15 xx do xxxxxxxx (4.2.2). Xxxxx x xxxxxxxx uzavřít.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °C.
Zkontrolovat xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ihned, skladuje xx x xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 a 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx médium (5.1) se xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kultivačního média. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx mléko xxxx xxxxxxxxxxxx, pokud xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xX xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X metodou podle xxxx 5.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx médium xxxxx xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Xxxxxx pepton/sůl
Složení:
|
Pepton |
1,0 x |
|
Xxxxxxx sodný (NaCl) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx vodě, pokud xx xx xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xX-xxxxxx (4.1.4); pokud xx xx nezbytné upravit xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx nebo kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x skladování xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx zkumavka obsahovala 9,0 ± 0,2 xx ředidla. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, skladuje xx x xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx ne xxxx než 1 xxxxx po jeho xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) xx xxxx připravovat x xxxxxxxxxx dehydrovaných xxxxxx xxxx xxxxxx. Dodržet xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX xxxxxxx xxxxx xxxx 6.1, xxxx xxxxxxxx, sterilizovat x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxxx kultivačního xxxxx
Xxxx xxxxxxxxx mikrobiologického xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx vzorku xxxxx
Xxxxxx xxxxx řádně promíchat, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx nejrovnoměrněji xxxxxxxxx, x to 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx pěnu xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx minuty.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (10-1) (xxxxxx a pasterované xxxxx)
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) syrového xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xx 9 xx xxxxxxx (6.1), přičemž xxxxxx xxxxx xxxxxx xx kontaktu s xxxxxxxx. Teplota xxxxxxx xxxx xxx přibližně xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx toto xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx xx xxx xxxxxxxx ředění 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx desetinných xxxxxx (xxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) přenést 1 xx xxxxxxxxxx ředění (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx xxxxxx x xxxx 7.3.
Xxxxx xx xxx xxxxxx 10−2.
X xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx postup xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx misek
7.5.1 Xxxxxx xxxxx: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx misky (4.2.4) 1 xx vzorku x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Musí xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Pro každé xxxxxx (8.1.1) připravit xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx vhodného desetinného xxxxxx. Xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxx dvě xxxxxx. Xxx každé xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx vhodnou xxxxx.
7.5.3 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx mléko (xxxxxxxxxxx xx 15 xxxxx xxxxxxxx xxx 30 °X – směrnice 85/397/XXX, xxxxxxx A xxxxxxxx XXX xxx 5):
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx xxxxx (7.2). Xxxxxxxxx dvě xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx naočkované misky xxxxx xxx 15 xx 18 ml xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Ihned xxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, aby xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx rozložení kolonií.
Doba xxxx xxxxxx přípravy xxxxxx mléka x xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx vzorku xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx médiem xxxxx xxxxxxxxx 15 minut.
Nechat xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx a čistém xxxxxxx, dokud xxxxxx xxxxxxxx.
7.7 Inkubace Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Misky xxxxxxxxx obrácené dnem xxxxxx. Xxxxxxxxx na xxxx xxxx než xxxx xxxxx. Sloupky xxxxx xx nesmějí xxxxxxxx xxxxxxx, ani xxx x kontaktu xx xxxxxxx a xxxxxx xxxxx inkubátoru.
Inkubovat 72 ± 2 xxxxx při 30 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx x Petriho xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx než 300 kolonií.
Misky vyšetřit xxx tlumeném xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx počítání xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx počítadlo (4.1.8). Xx nutné xxxx xx xx, xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx xxxxxxxxxxx provést xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx skla x xxxxxx zvětšením (4.1.7), x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx tvořící povlak xx považují za xxxxx kolonii. Xxxxx xxxxxxx tvořící xxxxxx xxxxxxxxx méně xxx xxxxxxxx misky, xxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx misky a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx počet xxx celou xxxxx. Xxxxx kolonie xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx plochy xxxxx, misku vyřadit.
8. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Xxxxxx x xxxxxxxxxxx mléko
8.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx obsahujících 10 xx 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.1.2 Xxxxxxxxx xxxxx mikroorganismů na 1 xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
∑X / (x1 + 0,1x2) x
xxx:
∑X ΣX xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx podle xxxx 8.1.1.
(x1 + 0,1 x2)x xx xxxxx xxxxxxxxxxxx vzorku, xxx:
x1 xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx
x2 xx počet misek xxx xxxxxx xxxxxx
x xx faktor xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx první xxxxx.
Xxxxx xx zaokrouhlí xx dvě xxxxxx xxxxxxx. Xxxx je xxxxxxxxxxxxxx číslice pět, xxxxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxx číslice xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxx (pasterované xxxxx):
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 kolonií
Ředění 10−3: 33 x 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; = 278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2
= 6290,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.1.3 Xxxxx xxxx všechny xxxxx nižší xxx 10, uvést, že xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx "xxxxx xxx 10 x x", xxxxxxx "x" xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx faktoru xxxxxxx.
8.1.4 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx než 300 x xxxxxxxx xx xxxxx, xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx hodnotou xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx "Odhadovaný xxxxx mikroorganismů na xx".
8.2 UHT mléko x sterilizované xxxxx
Xxxxx xxxxx xxx 10 xxxxxxx xx 0,1 xx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/EHS.
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx uznaných kruhových xxxxx xxxxx nejsou x xxxxxxxxx.
X. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXX 21 °X
1. Xxxxxxx x oblast použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx technikou xxxxxxxx xxxxxxx při 21 °C v xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxx 6 xX x xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, které xx xxx xxxxxx se x mléce xxx 6 °X.
2. Definice
"Mikroorganismy" xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx po xxxxxxx xxxxxxxx xx popsaných xxxxxxxx.
3. Princip
Inkubovat xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxx xxx 6 °X. Xxxxxxx xxxxxxxxx objem xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx v Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx 25 xxxxx při 21 °X. Spočítat xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx laboratorní xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 až 175 °C.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx udržovat xxxxxxx:
x) 6 ± 0,2 °C
b) 21 ± 1 °C xx xxxxx xxxxxx xxxxxx.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx xxx kompenzaci xxxxxxx, přesný xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxxxx sklo, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Xxxxxxxx xxxxxxx rozmíchat 1 xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx ředění x 9 xx xxxxxxxx roztoku a xxxxxxxxx xx principu xxxxxxxxxxx rotace xxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Pomůcky ze xxxx
4.2.1 Zkumavky x xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxx objemem, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxxx 10 ml xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 xx nebo xxxxxxxx x xxxxxx 20 xx xxx skladování xxxxxxxxxxxx média.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), skleněné xxxx xx sterilního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, s xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx misky x čirého, xxxxxxxxxx xxxx nebo ze xxxxxxxxxx syntetického materiálu, xxx xxxxx má xxxxxxx průměr xxx 90 až 100 x. Vnitřní xxxxxxx xxxxx by xxxx xxx nejméně 10 xx. Xxx nesmí xxx xxxxx nerovnosti, xxxxx by xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx skla:
Pomůcky xx xxxx se xxxxxxxxxxx jedním z xxxxxx xxxxxxx:
x) v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx teplotě 170–175 °X;
x) v autoklávu (4.1.2), nejméně 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx dbát xx to, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx páry: pokud xx materiál xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx nebo xxxxx xx xxxx být xxxxx.
Xxxxxxx xx skla xxxxxxxxxxxxx x autoklávech xx xx xxxx xxxxxxx odvětráním xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx sterilizovány x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx – xxxx se xxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 g |
|
D-glukóza(+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10-15 x podle xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx agaru |
|
Voda |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X xxxxx xxxxxx suspendovat x xxxxxxxxx xx vodě xxxxxxxxxx extrakt, xxxxxxx, xxxxxxx x nakonec xxxxxx odstředěné mléko. Xxxxx suspenze usnadňuje xxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx x uvést xx xxxx za xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx zahřívat x xxxx asi 30 minut.
Pokud je xx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xX, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx sodného xxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, xxx po sterilizaci xxxx xxxx hodnota 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx kultivačního xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxxx od 100 xx 150 xx xx xxxxx xxxx xx 12 xx 15 ml xx xxxxxxxx (4.2.2). Baňky x xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ihned, xxxxxxxx xx v xxxxx xxx teplotě xxxx 1 x 5 °X, avšak xx xxxx xxx 1 měsíc xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kultivační xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) se xxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxxxx dehydrovaného xxxxxxxxxxxx xxxxx. Dodržet xxxxxx xxxxxxx, xxx přidat xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, pokud xxxx složkou xxxxxxxx.
Xxxxxxx xX na 6,9 ± 0,1 při 25 °X xxxxxxxx xxxxx xxxx 5.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x skladovat xxxxxxxxxx xxxxxx podle xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Xxxxxx xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 g |
|
Chlorid sodný (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxx, xxxxx xx je xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xX-xxxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx chlorovodíkové, xxx xx sterilaci byla xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx ředidla. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °C. Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x temnu xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 měsíc xx xxxx xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) se xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx tablet nebo xxxxxx. Xxxxxxx pokyny xxxxxxx. Xxxxxxx xX xxxxxxxx podle xxxx 6.1, poté xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x skladovat xxxxxxx xxxxx xxxx 6.2.
7. Postup
7.1 Rozpuštění xxxxxxxxxxxx média
Před zahájením xxxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx kultivačního xxxxx x zchladit xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °C.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx mléka
7.2.1 Xxxxxxxxx x inkubátoru [4.1.3 x)] xxxxxxxx balení xxxxxxxxxxxxx mléka nebo, xxxxx to xxxx xxxxx, reprezentativní xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx 100 xx xx xxxx 120 ± 2 xxxxx při 6 ± 0,5 °X.
7.2.2 Xx inkubaci xxxxxx xxxxx řádně xxxxxxxxx, aby byly xxxxxxxxxxxxxx xx nejrovnoměrněji xxxxxxxxx, x to 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xx nutné xxxxxxxx xxxxxx pěny xxxx xxxx nechat rozptýlit. Xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx by xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (10−1)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 9 xx xxxxxxx (6.1), xxxxxxx xxxxxx nesmí přijít xx kontaktu s xxxxxxxx. Teplota xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx jako teplota xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx toto xxxxxxxx ředění xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) podle xxxxxx v xxxx 7.3.
Xxxxx se tak xxxxxx 10−2.
X xxxxx xxxxxx další xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx tak xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx přiměřené xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx misek
Sterilní xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx vzorku x/xxxx xxxxxxxx desetinného xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxx xxxxx ředění (8.1.1) xxxxxxxxx jednu xxxxxxx xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx misky nalít xxx 15 xx 18 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxx misky, xxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kolonií.
Doba xxxx xxxxxx přípravy xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx druhu mléka, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x kultivačním xxxxxx xxxxx překročit 15 minut.
Nechat stát xx vodorovném, xxxxxxxx x xxxxxx povrchu, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxx než xxxx xxxxx. Xxxxxxx misek xx nesmějí xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 25 xxxxx xxx 21 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx x Petriho miskách xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 300 xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx světle. Xxx xxxxxxxxx počítání xxx xxxxxx zvětšovací xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx nutné dbát xx to, xxx xxxxxxx k xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x drobnými xxxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx pochybností xxxxxxx xxxxxxx průzkum xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx s xxxxxx zvětšením (4.1.7), x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx cizích xxxxxx.
Xxxxxxx tvořící povlak xx považují za xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx povlak xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx misky, xxxxxxxx xxxxxxx x nepostižené xxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx misku. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pokrývají xxxx xxx čtvrtinu xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxx x vyjádření xxxxxxxx
8.1 Použít xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.2 Vypočítat počet xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxx xxxxxx vzorce:
∑C / (x1 + 0,1n2) x
xxx:
ΣX xx celkový xxxxx xxxxxxx podle xxxx 8.1,
(n1 + 0,1 x2)x xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx:
x1 xx počet xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx
x2 xx xxxxx xxxxx při xxxxxx xxxxxx
x xx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx na xxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, zaokrouhlit xxx, xxx sousední číslice xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxx:
Xxxxxx 10−2: 278 a 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 a 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; =278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2=
=629 / 0,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.3 Pokud xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 10, xxxxx, xx počet xxxxxxxxxxxxxx xx mililitr xx "xxxxx xxx 10 × d", xxxxxxx "x" je xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx zředění.
8.4 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 300 x xxxxxxxx xx xxxxx, xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx hodnotou xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xx".
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx mezinárodně uznaných xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x dispozici.
VI. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX – XXXXXXXX XXXXXXX XXX 30 °X
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx xxxxxxxxx koliformních xxxxxxxx v pasterovaném xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx při 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx 30 °X xxxxxxxxx charakteristické xxxxxxx xxxx necharakteristické xxxxxxx, xxx xxxx xx xxxxxxxxx podmínek xxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxx.
3. Princip
Smíchat xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx v Petriho xxxxxxx a 24 xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx 30 °C. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx necharakteristických kolonií xxxxxxxxxxx jejich schopnosti xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx laboratorní xxxxxxxx, zejména:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °C.
4.1.2 Autokláv, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °C.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °C.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx teploty, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Vodní xxxxx, xxxxxxxxxxxx na 45 ± 1 °X.
4.1.6 Očkovací jehla xx xxxxxxx xxxxxxx-xxxxxxx xxxx xxxx-xxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx skla
4.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx uzávěry x xxxxxxx 20 xx, aby mohly xxxxxxxxx konfirmační xxxxxxxxxx xxxxxx (5.2) x Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.1).
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx materiálu, x nepoškozeným hrotem, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 – 10 xx, s xxxxxxxxx xxxxxxx o průměru 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx materiálu, xxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx asi 90 až 100 x. Xxxxxxx hloubka xxxxx by měla xxx xxxxxxx 10 xx. Xxx nesmí xxx žádné xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Sterilizace xxxxxxx xx skla:
Pomůcky xx skla xx xxxxxxxxxxx jedním x xxxxxx postupů:
a) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx 170 – 175 °C;
b) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 minut xxx xxxxxxx 121 ± 1 °C.
Při xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxx xx xx, aby xxxx xxxxxxxxx dostatečné xxxxxxxxxx xxxx: pokud se xxxxxxxx sterilizuje x xxxxxxxx, xxxx nádoby xx xxxxxx xxx xxxxxxx uzavřeny, uzávěry xxxx víčka xx xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx skla sterilizované x autoklávech by xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx páry.
Pipety xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx
5.1 Agar x xxxxxxxxxxx violetí, xxxxxxxxx xxxxxxx, žlučí x laktózou (XXXX xxxx). Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
7 x |
|
Xxxxxxxxxx extrakt |
3 x |
|
Xxxxxxx (X12X22X11.X2X) |
10 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (NaCl) |
5 g |
|
Žlučové xxxx |
1,5 g |
|
Neutrální xxxxxx |
0,03 x |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxx |
0,002 x |
|
Xxxx |
10 xx 15 g xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxx a xxxxxx xxxx několik minut. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX pomocí xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx to xx nutné, xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx nebo kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxx byla xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxx rychle do xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx po xxxxxxxxxx 100 xx 150 xx xx xxxxxxxxxx xxxxx (4.2.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx zchladit xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °C.
V době xxxxxxx xxxxxxxxxxxx sterilitu xxxxxxxxxxxx média (6.4).
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxx po xxxx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxx xxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
10 x |
|
Xxxxxxx (X12X22X11.X2X) |
10 x |
|
Xxxxxxxxxxx hovězí žluč |
20 x |
|
Xxxxxxxxxxx zeleň |
0,0133 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx složky ve xxxx x uvést xx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx to xx xxxxxxxx, xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) hydroxidu sodného xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx jeho xxxxxxx 7,2 ± 0,1 xxx 25 °C.
Rozdělit xxxxxx po 10 xx xx xxxxxxxx (4.2.1) xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxxx. Zkumavky uzavřít.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxx trubičky xxxxxxx xx sterilizaci obsahovat xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxxxxxxxx média.
Pokud se xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, skladuje se x temnu xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx přípravě.
5.3 Xxxxxxxx dehydrované xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx může xxxxxxxxx x komerčního xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx výrobce. Xxxxxxx xX, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx kultivační xxxxxx xxxxx xxxx 5.1 x 5.2.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxxx (XXXX agar) xxxxxxx x bodě 5.1.
6.2 Xxxxxxxx vzorku xxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx byly xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xx 25 rychlými otočeními xxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx pěny xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx mezi xxxxxxxx x xxxxxxx testovacího xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx minuty.
6.3 Xxxxxxxxxx Petriho misek
Sterilní xxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) 1 ml xxxxxx xxxxx xx každé xx tří xxxxx (4.2.4) x tím xxxxxxxxx 3 xx xxxxxx xxxxx (6.2).
6.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Do xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 12 xx VRBL xxxxx (6.1)
Xxxxx xx xxxxxx xxxxx promíchat xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxx xx inkubaci došlo x xxxxxxxxxxxx rozložení xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx mléka x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx nesmí xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx nenaočkovanou misku x 12 xx xxxxx XXXX xxxxx, xxxxx xxx xxxxxx xxx naočkování xxxxx.
Xxxxxx xxxx na vodorovném, xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 4 xx XXXX xxxxx (6.1) xx povrch xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx.
6.5 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx dnem nahoru. Xxxxxxxxx xx sebe xxxx xxx xxxx xxxxx. Sloupky xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, ani xxx x kontaktu xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 24 ± 2 xxxxxx xxx 30 ± 1 °X.
6.6 Xxxxxxxx xxxxxxx
6.6.1 Počítat xxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx než 150 xxxxxxx. Počítat xxxxx červené xxxxxxx x xxxxxxx nejméně 0,5 xx, x xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.6.2 Xxxxx xxxx všechny xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (např. xxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxx tvar xxxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (6.7).
6.7 Konfirmační xxxx
Xxxxx údajů v xxxx 6.6.2 xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx u xxxxxxxx xxxxx (xxxx. 3 xx 5) xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xx xx pomocí xxxxxxxx xxxxx (4.1.6), xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx zelení (5.2). Xxxxxxxxx xxxxxxxx 24 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °X.
Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx kolonie, xxxxx x Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx.
7. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 150 xxxxxxx.
7.2 Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx procentuálního xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx vzorce:
ΣC / x
xxx:
ΣX xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx koliformních xxxxxxxx (7.1 x xxxxxxxxxxx se 7.2), xxxxxxxxxxx vyšetřením xxxxxx xxxxx (6.3).
n je xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (6.3) x xxxxxxxxxxx (3 ml).
Počet se xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxx, pokud xxxxxxxx xxxx xxx 100 kolonií. Xxxx xx zaokrouhlovaná xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxx číslice xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx než 150 xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx "xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 xx".
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx uznaných kruhových xxxxx xxxxx nejsou x xxxxxxxxx.
XXX. XXXXXXXXX XXXXXX SOMATICKÝCH BUNĚK
Tato xxxxxxxx popisuje xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx somatických xxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Fluoro-opto-elektronická xxxxxx
X. Mikroskopická xxxxxx
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx postup xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx buněk xx xxxxxx xxxxx za xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx X.1).
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx postup xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx, jejichž xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx methylenovou xxxxx
3. Xxxxxxx
Xxxxxx 0,01 xx xxxxx na 1 xx2 povrchu xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx vysuší a xxxxxxx. Počítání xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx faktorem, x xxxxx získat xxxxx xxxxx xx 1 xxxxxxxx.
4. Činidla
Musí xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x..
Xxxxxxx roztok
Složení
|
Methylenová xxxx |
0,6 x |
|
Xxxxxxx – 99 % |
54 xx |
|
1,1,1-xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx |
40 xx |
|
Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx |
6 xx |
Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Příprava x xxxxxxxxx xx proto xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx a 1,1,1-xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx ve xxxxx xxxxx xx 60 xx 70 °X. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxxx, 12 xx 24 hodin xxxxxxx x chladničce xxx 4 °X x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx octovou. Xxxxxxxxxxxx xxxx filtr o xxxxxxxxx velikosti xxxx 10 až 12 xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx roztok xxxxx xxxxxxxxxxxx.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
5.1 Mikroskop xxxxxxxxxx xxxxxxxx 500 × xx 1000 ×
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 0,01 xx x xxxxxxxxx xxxxxxx ± 2 %.
5.3 Xxxxxxxx sklíčko s xxxxxxx 20 mm × 5 xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 20 × 5 mm pro xxxxxx xxxxxx.
5.4 Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx (30 °X až 50 °X) xxx sušení xxxxxxxxxx sklíček.
5.5 Xxxxxxxxxx (xxx) xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx.
5.6 Vodní xxxxx, nastavitelná xx 30 xx 40 °X xxx ohřívání xxxxxx mléka.
5.7 Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 0,01 xx.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxx xxx testován xx xxxxx hodin xx xxxxxx vzorku. Xxxxx xxxxxxxxxx nesmí teplota xxxxxx xxxxxxxxx 6 °X. Xxxxxx nesmí xxx zmražen.
6.2 Xxxxxxxx xxxxxx v laboratoři
Zahřát xxxxxx ve xxxxx xxxxx (5.6) xx 30 xx 40 °X. Xxxx řádně xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xxxxx xxxx kalibrována mikrostříkačka (5.2), xxxxxxxxx 20 °X.
6.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx podložní xxxxxxx (5.3) například xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxxxx v xxxxxxx, xxx jsou xxxxxxxx xxxx prachem.
6.4 Xxxxxxxx tenké xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx (5.2) odebrat 0,01 xx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx výše. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx stříkačky, xxxxx xxxxxx xx xxxxx x xxxxxx. Přiložit xxxxxxxxx xx podložní xxxxxxx (5.3) x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (20 xx × 5 mm). Xxxx xx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (5.4) xx xx úplného xxxxxxxx.
X xxxxxxx vzorku xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx.
6.5 Xxxxxxx tenkých xxxxxx
Xxxxxxx na 10 xxxxx do barvícího xxxxxxx (4). Xxxxx x, xxxxx xx xx xxxxxxxx, vysoušení xxxxxxxx ventilátorem (5.5). Xxxxxxx tenké vrstvy xx xxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx sušit x xxxxxxx xxx, xxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx.
6.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (500 × xx 1000 ×) xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx (5.7).
7. Xxxxxxxx x výpočet
7.1 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxxxxxx (5.1). Xxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx pouze xxxxxxx xxxxx, x xx taková xxxxx, xxxxx jsou xxxxx xxxxxxxxxxxx x z xxxxx je v xxxxxxxxxxxxxx poli viditelná xxxxxxx polovina. Počítat xxxx xxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx vrstvy a xxxxxxxxx ty xxxx xxxx xxxx, které xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx. Pečlivá xxxxxxxx tenkých xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx nejméně xxxxxx xx měsíc xxxxxxxxxx xxxxxxx částí xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxx také xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx způsobem, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx vrstvy byly xxxxxxxxxx rovnoměrně.
7.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xx mají xxxxxxx
Xxxxxxxx k xxxx, xx počítání somatických xxxxx pod mikroskopem xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx počítání, variační xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Variační xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx 400000 xx 600000 xxxxx/xx xx neměl xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxx somatických xxxxx, xxxxx je xxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 400, aby bylo xxxxxxx xxxxxxxxx opakovatelnosti.
Podle Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
X = X = s2,
kde:
M xx xxxxxxx hodnota
V xx xxxxxxx
x xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx:
XX = x × 100 % / X xxxx XX = 100 % / x&xxxx;xxxx XX = 100 % / XXX
X (xxxxxx) představuje xxxxx xxxxxx (xxxxx), xxxxx xxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxx 400 xxx XX = 5 %).
7.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx faktoru
Při xxxxxxx 0,01 xx xxxxx xx pracovní xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx 7.3.1 nebo 7.3.2.
7.3.1 Počítání xxxx xx xxxxx vrstvě
Délka xxxx, xxxxx xx xxxx počítat, xx 5 mm. Šířka xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x mikrometrickou xxxxxxxx (5.7).
Pracovní xxxxxx = 20 × 100 / x × b
kde:
d xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7)
b xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
7.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx ve xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx mřížky
Pracovní xxxxxx
xxx:
x xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx v xx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7)
x celkový xxxxx xxxxxxxxxxx polí.
7.4 Xxxxxxx xxxxxx xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx na ml xxxxx, se xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (7.1 a 7.2) xxxxxxxx pracovním xxxxxxxx (7.3).
7.5 Přesnost
Variační xxxxxxxxxx (xxx 7.2) xxxxx xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nejsou x xxxxxxxxx.
X. Fluoro-opto-elektronická xxxxxx
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxxxx kalibraci (viz X.1) xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx somatických xxxxx v syrovém xxxxx x chemickou xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx buňkami rozumějí xxxxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx XXX minimální xxxxxxxxx fluorescence.
3. Xxxxxxx
Xxxx xxxxxx (například 0,2 xx) xx xxxxxxxx xxxxxxxx s tlumivým xxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Část xxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx vrstvy xx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx buňka xxxxxxxxx elektrický xxxxxx, xxxxx se xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx buněk se xxxxxxxx v xxxxxxxx xx mililitr.
4. Xxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx se použít xxxxxxx xxxxxxx x.x.. Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx, xxxx je xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx |
51,00 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxx |
13,75 x |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx(xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 xx |
|
xX 5,7 xx 5,9. Xxxxxxx vodou xx 10000 xx. |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx jednotlivé xxxxxx. Skladování ve xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx nemělo překročit xxxx dní.
4.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxx)
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
1,0 x |
Xxxxxxx xxxxx na 1000 xx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx chráněné xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx xxxxxx)
Xxxxxxx 20 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.2) x tlumivým roztokem (4.1) xxx, aby xx xxxxxx xxxxx 1000 xx. Pracovní xxxxxx xx neměl xxx používán více xxx xxxx xxx.
4.4 Xxxxxxx roztok
Složení
|
Tlumivý xxxxxx (4.1) |
10 ml |
|
Polyethylenglykol-mono-p(1,1,3,3-tetramethylbutyl)-fenylether (xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 xx |
|
Xxxxxxx x 25 % xxxxxxxxxx |
25 xx |
Xxxxxxx vodou xx 10000 ml
Příprava:
Smíchat xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx překročit xxxxxx xxx.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
5.1 Počítací xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx fluorescence.
Poznámka:
Zařízení xxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Tím xx xxxxxxx vztah mezi xxxxxxx částic, xxxxx xx xxxx xxxxxxx, x prahovou xxxxxxxx, xxx xxx se xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx provede xxxxx xxxxxx výrobce xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx obsah xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X).
5.2 Xxxxx xxxxx, s xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxxx xx 40 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx 15 ml.
6. Xxxxxx xxxxx
6.1 Xxxxxx xxxx xxx skladován xxx nízké teplotě xx zkumavce (5.3). Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxxx 24 hodin xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx byl xxxxxx nízký. Xxxxxxxxxx xxxxxxx nesmí překročit 6 °C.
6.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxx xxxxxxx xx 24 xxxxx. Konzervace musí xxx provedena xx xxxxxxxx po odběru xxxxxx.
6.2.1 Xxxxxxxx konzervace xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx prostředků:
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx orthoborité xx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx 0,6 x na 100 xx. Takto konzervovaný xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx teplotě 6 xx 12 °X;
- xxxxxxxxxxx draselný:
konečná xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx draselného xx xxxxxx xxxxx xxx vyšší xxx 0,2 g xx 100 ml. Xxxxx xxxxxxxxxxxx vzorek xxxx xxx xxxxxxxxx dalších 72 xxxxx při xxxxxxx 6 xx 12 °X;
- azid xxxxx:
xxxxxx může být xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx 0,024 g/100 ml, xxxxx xx vzorek xxxxxxxx xx xxxxxxx 6 xx 12 °X xxxxx po xxxx odběru x xxxxxxxx do 48 xxxxx xx jeho xxxxxx;
- bronopol:
vzorek xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x konečné xxxxxxxxxxx 0,05 x/100 ml, xxxxx xx vzorek xxxxxxxx xx teplotu 6 až 12 °X ihned po xxxx xxxxxx a xxxxxxxx xx 72 xxxxx xx xxxx xxxxxx.
6.2.2 Xxxxxx, xxxxx xxx byl xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, může xxx ještě xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx 48 xxxxx dvojchromanem xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx dvojchromanem xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx odpadních xxx.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx, které xx xx xxxxxxxx, se xx nadojení xxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx xxx 2-6 °X. Xxxxxxxx vzorků x xxx xxxxxxxx xx bez xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nedoporučuje, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx nízké. Xxxxx xx přesto nutné xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (viz 6.2.1).
7.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx ošetřený xxxxxx (xxx 7.1) xxxx xxxxxxxxxx vzorek nejméně xxxxx xxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx (5.2) xx xxx 40 °X. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx do xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxx pomocí xxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.1) xx 15 minut po xxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 7.2). Bezprostředně xxxx xxxxxxxxx xxxxxx důkladně xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xx nejlepšího xxxxxxxxxxx rozdělení xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx opakovatelnosti (x) x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) mezinárodních kruhových xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxx, které jsou x xxxxxxxxx xx xxxxxxx úrovni, umožňují xxxx odhady:
(1) počet xxxxx xxxx 400 000 xx 500&xxxx;000 xxxx:
- směrodatná xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx:
xx = 20000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 5–4 %)
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx:
xX = 40000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx variačnímu xxxxxxxxxxx 10–8 %)
9. Xxxxxxxx správnosti
Kontrola správnosti xx provádí xxxxxx xxxxxx x známém xxxxxx buněk, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
XXXX. DETEKCE ANTIBIOTIK X XXXXXXXXXXX
XXXXXXX X XXXXXX XXXXXXX
Xxxx kapitola xxxxxxxx referenční postup xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x sulfonamidů v xxxxxxx xxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx:
X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx umožňuje xxxxxx xxxxxx mléka, xxxxx obsahují antibiotika x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx je jedním x xxxxxxxx postupů, xxxxx jsou xxxxxxxx xx xxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx, XXXX 10149, co xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxx reprezentativní xxx takovéto xxxxx.
X. Xxxxxx xxx konfirmaci x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx postupu, xxx xxxxxxxxxxxx penicilinu x stanovení xxxx xxxxxxxxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxxxxxxxx detekci xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx než xxxxxx xxxxxxx v xxxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxx koncentrace xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx [1]
|
Xxxxxxxxx xxxxx |
||
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxx |
|
|
Xxxxxxxxxxxxxxx |
0,002 |
0,006 |
|
Xxxxxxxxx |
0,002 |
0,005 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,015 |
0,035 |
|
Xxxxxxxx |
0,006 |
0,011 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,10 |
0,40 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,20 |
0,45 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxx |
0,15 |
0,50 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
7 |
15 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx |
4 |
13 |
|
Xxxxxxxx |
1 |
22 |
|
Xxxxxxxxx |
9 |
28 |
|
Xxxxxxxxxx |
0,06 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxx |
1 |
2,25 |
|
Xxxxxxxxx |
0,01 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,01 |
0,1 |
|
Xxxxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxxx) |
0,5 |
1 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2 g |
|
|
Pepton |
5 x |
|
|
Xxxxxx extrakt |
1 x |
|
|
Xxxxxxx xxxxx |
5 x |
|
|
Xxxx |
10–15 g |
|
|
Voda |
1000 xx |
|
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx složky ve xxxx. Za xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx do xxxx. Upravit pH xxx, aby po xxxxxxxxxxx xxxx jeho xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx po 10 xx do xxxxxxxx xxxx xx 100 xx xx lahviček x xxxxxxxx x xxxxx získat šikmý xxxx.
Xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X.
5.1.2 Agarové xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxx sodný |
2 x |
|
Xxxx |
15 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx tetroxoprimu (xxx 5.1.3) |
10 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, s xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx. Xxxxxx trimethoprim xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °C. Xxxxxxx xX, xxx po xxxxxxxxxxx byla xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.1.3 Xxxxxx trimethoprimu xx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxxxx |
5 xx |
|
xxxx Xxxxxxxxxxx |
30 xx |
|
96 % Xxxxxxx |
5 xx/30 xx |
|
Xxxxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x ethanolu xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx (5 nebo 30 xx) a doplnit xxxxx.
5.1.4 Živný roztok
Složení:
|
Kvasnicový xxxxxxx |
0,75 xx |
|
Xxxxxxx |
5,0 xx |
|
Xxxxxxxxx xxxxx |
8,0 mg |
|
Bromkresolová červeň |
0,025 x |
|
Xxxx |
50 ml |
Příprava:
Rozpustit xx xxxx živný xxxxxx x indikátor, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx a sterilizovat xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx
5.2.1 Xx xxxxxxxx xxxxx x vhodným xxxxxxxx xxxxxxxxx roztok xxxxxxxxxx x 60 μx/xx (100 XX/xx), x xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx benzylpenicilinu sodného xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
5.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx roztok xxxxxxxxxx xxxxxxxx 1,25 xx xxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2.1) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xx 1000 xx. Tento xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 0,075 μx xxxxxxxxxx/xx (= 0,125 XX/xx).
5.2.3 Xxxxxxxxx 75 ml xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,004 μx xxxxxxxxxx/xx (= 0,0067 XX xxxxxxxxxx/xx) xxxxxxxx 4 xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2.2) xx 71 xx xxxxx xxx inhibičních látek (5.3).
5.2.4 Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 5.2.1 až 5.2.3 xx xxxx xxx xxxxxxxxxx x den xxxxxxxxx xxxxx.
5.3 Xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek
Připravit xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx sušeného xxxxxxxxxxxx xxxxx (10 % x/X) ve xxxx, xxxxx xxxx předtím xxxxxxxxxx xx přítomnost xxxxxxxxxxx látek. Xxxxxx xxx použít xxxxxxxxx xxxxxxxx čerstvého xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x prohlášeno xx xxxxxx inhibičních xxxxx; xxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx x zahřívá xx xxxxx hodinu na 100 °X, poté xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx s xxxxxxxx 0 °X xx 6 °X xx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
5.4.1 Xxxx xxxxxxxxx organismus xx použije Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx XXXX 10149 Kmen XXXX 10149 xx xxxxxxxxx x xxxxxx X 953.
5.4.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx kultury. Xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx (5.1.1). Xxxxx agar se x xxxxxxxxx naočkuje xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx 48 hodin xxx 63 ± 1xX. Po xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx sterilní xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 0 xx 5 oC.
5.5 Xxxxxxxxx kultura (xxxxxxxx xxxx)
5.5.1 Xxxxxxxxx přenést 20 xx živného xxxxx (5.1.1) do xxxxxxxx Petriho xxxxx (4.2.2) a nechat xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5.2 Sterilní xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 xx sterilní destilované xxxx xx zkumavky xx zásobní xxxxxxxx (5.4.2) x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx šikmého xxxxx. Xxxxxxxx xxxx se xxxxx xxx 0 xx 5 °C x xxxxxxx xx xx 36 xxxxx.
5.5.3 Xxxxxxxx pipetou (4.2.4) xxxxxxx 5 ml xxxxxxxx xxxx (5.5.2) xx Xxxxxxx xxxxx (5.5.1) x xxxxxxxx xxxxxxxxx očkovací xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx skleněné xxxxxxx. Inkubovat 16 xx 18 hodin xxx 63 ± 1 °X (4.1.1).
Xxx xxxxxxx xxxxxxx kultury (5.4.2) nebo kultury xxxxxx 36 xxxxx xx očkování mělo xxxxxxx nejméně dvakrát x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 36 xxxxx.
5.5.4 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 10 ml xxxxxxxxxxx xxxx xx Xxxxxxx misku obsahující xxxxxxx (5.5.3) x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx z xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxx (4.2.3) xxxxxxxxxx 250 ml sterilní xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, které xxxxxx xxxxx přeočkovány, xx xx xxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxx 0 xx 6 °X.
5.5.5 Po 16xx xx 18xx xxxxxxxx inkubaci xxx 63 ± 1 °X xx agarovém xxxxx xx suspenze xxxx měla vykazovat xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx mikroorganismů xxxx 5 a 10 miliony xx xxxxxxxx. Suspenze spór xxxx xxxxxxxxx rovnoměrné xxxxxxxx, x pokud xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx, xxxx xx xx nahradit xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (5.4.2).
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (5.1.2), xxxx zchladit xx 55 °X.
5.6.2 Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx (5.5.4) x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (5.6.1) xx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx. Důkladně xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx (4.2.6) 0,3 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.6.2), xxx xx xxxxxxxxx 5 xx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx xxxx, x xxxxxxx ampule, xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx 12 xxxxx xx svislé xxxxxx.
5.6.4 Xxxxxxxx/xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxx, xxx mohou xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx měsíců při 0–6 °X, pokud xxxx xxxxx xx xxxxxx přípravě ochlazeny.
6. Xxxxxx
6.1 Vzorky xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx do 24 xxxxx po xxxxxx, x do xx xxxx se skladují xxx xxxxxxx 0-5 °X. Xxxxx není xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx 24 hodin, xxxx by xx xxxxxxx hluboko xxxxxxxx (−30 °xx - 15°X), xxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.2 Čitelně x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx (5.6). Xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (4.1.3) xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx a testy (5.2 a 5.3).
6.3 Xx xxxxx xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxx 50 mikrolitrů xxxxxxx xxxxxxx (5.1.4).
6.4 Xxxxxx xxxxx řádně xxxxxxxxx x mikrostříkačkou (4.1.4) xxxxxxx 0,1 xx vzorku do xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx vždy novou xxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.5 Xxxxxx xxxxx xxxx 6.4 xx opakuje xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku penicilinu xxxxxxxxxxxx 0,004 μx/xx (= 0,0067 XX/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx (5.2.3).
6.6 Postupem xxxxx bodu 6.4 xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek (5.3) xxxxxxx vzorku xxxxx.
6.7 Xxxxxxx zkumavky/ampule a xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx 2½ xx 2¾ xxxxxx xx xxxxx xxxxx s xxxxxxxx 63 ± 1 °X (4.1.2).
6.8 Xxxxxxx xxxxxxxx xx zkumavkami/ampulemi x vodní lázně.
6.9 Xxxxxxxxx xxxxx agarového xxxxx (viz 7).
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Purpurové xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx roztokem xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx ve vzorku x koncentraci xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx "zcela xxxxxxxxx" uvedené x xxxxxxx na straně 39. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (6.5) xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx zkumavkách/ampulích xx xxxxxxx mléka xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x koncentracích xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx straně 39.
7.3 Xxxxx xxxxxxxxx agarového xxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx vzorek xxxxx xxx inhibičních xxxxx xxxx xxxxxx mléka xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
7.4 Pokud xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, zkumavky/ampule xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx spóry x xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x čerstvě xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx materiálem.
8. Xxxxxxxxx výsledků
8.1 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx x 7.1 a 7.2 xxxxx xxxxxx "X".
Xxxxx xx nezbytné xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X. Xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx koncentrace
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tento xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx penicilinu nebo xxxxxx xxxxxxxxxx, jakož xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx penicilinu xx xxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxx (A.7.1) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (A.7.2).
Citlivost xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx
Xxx X.1.
2. Xxxxxxxx
2.1 Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx inhibiční xxxx xxxxxxx 2 xx xxxxx xxxxx.
2.2 Xxxxx vzorek, který xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx (2.1), x xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx penicilináza (beta-laktamáza), xxxxxxxxx čirou xxxx xxxx vytvoří čirou xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xx xxxxxx xxxx xxx penicilinázy, xxxxxxxxx látkou je xxx xxxxxxxxx xxxx xxxx penicilinu a xxxxxx xxxxxxxxxxx včetně xxxxxxxxxxx.
2.3 Xxxxx tato xxxx není xxxxxxxxxxxxx (2.2) xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx ve vzorku xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xx xxx jiné xxxxxxxx [xxx směrnice 85/397/XXX, xxxxxxx X, xxxxxxxx XX, A.1.f) x 2x)].
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxx jsou xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx (xxx 7.3).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx média xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx. Normální xxxx mikroorganismus xx xxxxxxxx narušuje agarové xxxxxx. Xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxx x xxxxx přítomny xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx. Xxxxxxxx čiré xxxx xxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x mléce.
4. Xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx a vybavení
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxx A.4.1.
4.1.2 Xxxxx xxxxx, nastavitelná xx 80 ± 1 °X.
4.2 Xxxxxxx xx skla
Viz A.4.2.
4.3 Xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, o xxxxxxx 9 až 13 xx, xxxxxxx xxxxxxxxxx asi 130 xx xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx).
5. Xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx, roztok xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx testovací xxxxxxxxxx xxx.
Xxxxxxxx složky xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx se xxxxxx destilovaná xxxx xx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx alespoň xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxx obsahovat inhibiční xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx organismu.
5.1 Xxxxxxxxxx xxxxx
5.1.1 Xxxxx agar (X.5.1.1)
5.1.2 Kultivační xxxxxx xxx xxxxxxx inhibičních xxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5 x |
|
Xxxxxxx |
1 x |
|
Xxxxxx trimethoprimu xx xxxxxxxxxxxx (A.5.1.3) |
10 xx |
|
Xxxx |
10–15 g xxxxx xxxxxxxxxxxx vlastností agaru |
|
Voda |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxx, xxxx xxxxxx xxxxxx trimethoprimu xxxx xxxxxxxxxxxx. Po xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pH, xxx xx sterilizaci xxxx 8,0 + 0,1 xxx 25 °X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X.
5.2 Standardní xxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx
Xxx X.5.2.
Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (8) xxxxxxxxx standardní roztoky xxxxxxxxxx x mléce xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (X.5.3) x těchto xxxxxxxxxxxxx:
x) 0,004 μg/ml (0,0067 IU/ml)
b) 0,006 μx/xx (0,01 XX/xx)
x) 0,03 μx/xx (0,05 XX/xx)
x) 0,06 μx/xx (0,01 XX/xx).
5.3 Roztok xxxxxxxxxxxx
5.3.1 Xxxxxxxxx dostatečné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxx) xx sterilní destilované xxxx s xxxxx xxxxxx koncentraci 1000 X/xx. Xxxxx xxxxxx, xxxxxxx rozdělený xx xxxxx dávky, xx xxxxx xxxxxxxxx až xxxxx xxxxx xxx 0 °X až 5 °X.
Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx mezinárodní xxxxx. Xxx účely xxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx 0,6 μx (= 1 XX) penicilinu. X xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx nutné xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx koncentraci roztoku xxxxxxxxxxxx.
5.3.2 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx běžně dostupné xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxx zjistí, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx organismus
Viz X.5.4.
5.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxx)
Xxx A.5.5.
5.6 Xxxxxxxx Xxxxxxx misek
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx látek (5.1.2), xxxx xxxxxxxx xx 55 oC.
5.6.2 Xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx čerstvých spór (5.5) x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), x xxxxx xxxxxx xxxxxxx hustotu xxxxxxx x naočkovaném agarové xxxxx, a důkladně xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx misky (X.4.2.2), předem xxxxxxx xx 55 °X, xxxxxxxxxx xxxxxxx médium, xxx xx xxxxxxxxx 0,6 xx 0,8 xx xxxxxx. Pro Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx 140 xx xx xxxxx xxx 15 ml xxxxxxxxx xxxxx, aby xx xxxxxxxxx 0,8 xx vrstva.
5.6.4 Xxxxxxx Xxxxxxx misky xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx vodorovnost xx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx ztuhnutí média, xxxxxx xxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xx xxxx xxxxxx, xxx se xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx povrchu xxxxxxxxx xxxxx.
5.6.5 Xxxxx připravené Xxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxx, xxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx vloží xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x uchovávají xx xxx 5 °X.
5.6.6 Xxxxxxx xxx Xxxxxxx xxxxx, aby xxxx možná xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 X xxxxxx x xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx "xxxxxx X" (A.7.1 x X.7.2) musí xxx provedeno xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x kvantitativního xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx 10 xxxxx xx 80 ± 1 °X, xxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
6.1.3 Důkladně xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxx 10 ml xxxxxx xxxxxxxxx mléka xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx širokým hrdlem. X mléku xxxxxx xxx 0,4 ml xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.3) x řádně promíchat.
6.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
6.2.1 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx (4.3) xx xxxxxx xxxxx (6.1.2) xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxx. Naplocho xxxxxxx xxxx na xxxxxx Xxxxxxx xxxxx (5.6) x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.2.2 Xxxxx napuštěné xxxxxxx vzorky mléka xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx od xxxxxxx xxxxxxx 20 mm x xx xxxxxx xxxxxxx 10 xx.
6.2.3 Xxx xxxxxxxx citlivosti xx xxxxx (4.3) xxxxxxxxx standardním xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.2) xxxx xxxxxxxx rozmístit xxxx xxxxx napuštěné xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx 2 % xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx; xxx xxxxxx testu xx xxxxxxx nejméně pět xxxxxxxxxxxx xxxxx.
6.2.4 Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx na xxxxxxx xxxxxx x xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx x nechat xx xxxxxxxxx 2,5 až 5 xxxxx při 63 ± 1 °X.
6.2.5 Xx inkubaci xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx zdroji světla, xxx bylo xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Čiré zóny xx xxxxx.
6.2.6 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (6.2.3) xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx nejméně 2 xx xxxx.
6.2.7 Xxxx xxxx kolem xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx nebo větší xxx velikost popsaná x 6.2.6, xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx v testovacím xxxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx inhibičních xxxxx
6.3.1 Xxxxxx 6.2.1 se xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx mléka (6.1.2) x se xxxxxxx ošetřeným xxxxxxxxxxxxx (6.1.3). Xxxxxxx přidání xxxxxxxxxxxx do 10 xx vzorku xxxxx xx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx penicilinázou (5.3.2) x xxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx.
6.3.2 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx dvojmo xxx xxxxx ze xxxxxxxxxxxx xxxxxxx penicilinu xxxxxxxxx v 5.2 x) xx x).
6.3.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx inhibičních xxx xxx xxxxxx mléka, xxxxxxxxx xxxxxx penicilinázy x pro xxxxxxxxxx xxxxxxx penicilinu.
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 2)
7.1 Xxxxx xx kolem xxxxx napuštěném kontrolní xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx, ale xxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx disku xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx velká nebo xxxxx než zóna xxxxx xxxxx napuštěném xxxxxxxxxxx roztokem xxxxxxxxxx (5.2x)), xxxxxxxxx látka xx vzorku xxxxx xxxxxxxx koncentraci xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx rovné xxxx vyšší xxx 0,004 μx/xx.
7.2 Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx penicilinázu xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxx xxxx možné xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx.
7.3 Xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx průměrná xxxxxxx průměru xxxx xxxx xxxxx disku xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx 6.1.2, xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx nelze xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx penicilinázy xxxxxxx v tomto xx. Syntetické xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx, nemusejí xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx být tudíž xxxxxxxxxxxxx jako inhibiční xxxxx xxxx než xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, inhibiční xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxx identifikovány xxxxxxxx postupy.
8. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxx penicilinu xxxx xxx provedeno xxx xx xxxxxxxxxx standardní xxxxxx, nebo xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx penicilinu x xxxxx (5.2 x) xx d)).
8.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx křivky
Vzhledem x xxxx, že xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx log10 koncentrace xxxxxxxxxx x průměrem xxxxxxxxxxx xxx, xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx xxx na xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx inhibičních xxx se xxxxxxxx xxxxxxx xx základě xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx.
8.3 Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx vzorku xxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx vzorků xxxxxx xxxxxxx xxxx je xxxxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxx. Pro přesné xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx nejméně xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx.
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx vyšší než 0,004 μg/ml (nebo xxxxxxxx stanovené xxxxxxxxxxx) xxxx jako xxxxx xxxxxxxxxxx látek jiných xxx xxxxxxxxx.
9.2 Xxxxxxxxxxxxxx (x) a xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X)
Xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxxxx x důsledku xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
X souladu x požadavky směrnice 85/397/XXX, xxxxxxx X, xxxxxxxx XXX bodu 2, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx pokyny, xxxxx xxxx být xxxxxxxxxx, xxx detekci xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x pasterovaném xxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx u xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx příčinou onemocnění xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx mléko xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx splněny xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx X, xxxxxxxx VII xxxxx 2 uvedené xxxxxxxx, xxxxx xxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X x 21 °C, xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx test xx detekci patogeny xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, pokud xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xx nějakou spojitost xx xxxxxxxxxxx otravy xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxx
Xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx vnitrostátní xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx osvědčení x zdravotní xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx patogenních xxxxxxxxxxxxxx xx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxx x xxxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx mikroorganismus xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx:
Xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxx "xxxxxxxxxx" či "nepřítomnost" x xxxxxx pasterovaného xxxxx, který xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx jasně xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.