Xxxxxxxxxx Xxxxxx
xx dne 14. xxxxx 1991,
xxxxxx xx stanoví některé xxxxxx analýzy a xxxxxxxxx xxxxxxxx mléka x tepelně xxxxxxxxxx xxxxx
(91/180/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX SPOLEČENSTVÍ,
s xxxxxxx na Xxxxxxx x xxxxxxxx Evropského xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx směrnici Xxxx 85/397/XXX xx dne 5. xxxxx 1985 x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx obchodu x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx [1] xxxxxxxxx pozměněnou xxxxxxxx 89/662/XXX [2], x zejména xx xx. 10 odst. 2 uvedené xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxx xx. 10 xxxx. 2 Komise xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xx mají xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxx xxxxx x tepelně xxxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx pro xxxxxx mléko xx xxxxxxxx stanovit xxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx x přítomnosti antibiotik;
vzhledem x xxxx, že xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx stanovit xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx nepřítomnosti patogenů, xxxxx koliformních bakterií, xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, nepřítomnosti xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx antibiotik a xxxx xxxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx xxx xxxxxxxxxxxxx mléko x XXX mléko xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, nepřítomnosti xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx z xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx stanovit xxxxxxxxxx xxxxxx analýzy a xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; že xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx metody xxxxxxx a xxxxxxxxx; xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx členské xxxxx xx xx, aby xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 85/397/ES xxxx xxxxxxx xxxxxx rutinní xxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxxx referenčních xxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx i xxxxxxxxx xxxxxxx analýzy x xxxxxxxx spolehlivosti xxx zajištění jednotného xxxxxxx xxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx se xxxxxxxxxxx Xxxxxxx veterinárního xxxxxx,
XXXXXXX TOTO XXXXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Referenční xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxx mléko xxxx tyto:
- stanovení xxxx mrznutí,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 2
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx mléko xxxx xxxx:
- stanovení xxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx,
- stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů při 21 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx – počítání xxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 3
Xxxxxxxxxx postupy xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx UHT mléko x xxxxxxxxxxxxx mléko xxxx xxxx:
- stanovení xxxx xxxxxxx,
- stanovení xxxxxx mikroorganizmů při 30 °C,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x sulfonamidů.
Xxxxxx 4
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx analýzy x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx X.
Xxxxxx 5
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx 1, 2 x 3 xxxx popsány x xxxxxxx XX.
Xxxxxx 6
Xxxx xxxxxxxxxx xxxx přezkoumáno do 31. xxxxxxxx 1992, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx vědeckých a xxxxxxxxxxx znalostí.
Xxxxxx 7
Toto xxxxxxxxxx xx xxxxxx členským xxxxxx.
V Xxxxxxx xxx 14. xxxxx 1991.
Xx Xxxxxx
Xxx Mac Xxxxxx
xxxx Xxxxxx
[1] Xx. xxxx. X 226, 24.8.1985, x. 13.
[2] Xx. xxxx. X 395, 30.12.1989, x. 13.
XXXXXXX I
OBSAH
I. Xxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Odběr xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
X. XXXXXX XXXXXXXXXX
1. Úvod
Obecná xxxxxxxxxx xx týkají xxxxxxx, xxxxxxxxx x pomůcek, xxxxxxxxx xxxxxxxx, kritérií xxxxxxxxxxxxx a xxxxx x testování. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx ustanovení.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxx
2.1.1 Pokud xxxx stanoveno jinak, xxxx použitá x xxxxxxxxxxx, ředění xxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxxxx účely xxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxx růst xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx testovacích xxxxxxxx.
2.1.2 "Xxxxxxxxxxxx" xxxx "xxxxxxx" (xxx dalšího xxxxxxxxx) xx xxxxxx "xxxxxxxxxxx ve xxxx" xxxx "xxxxxx xxxxx".
2.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx musí xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx a xxxxxxx
3.1 Xxxxxx přístrojů x xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxx použití x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.2 Xxxxxxxxxx váhy
"Analytickými xxxxxx" xx rozumí xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx 0,1 xx.
4. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx o xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxx, které splňují xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (5.1) xxx příslušnou metodu. Xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx opakovatelnosti xxxxxxx, xxxx xx musí xxxxxxxx, xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx jinak, xxxxxxxx xx vypočítá x xxxxxxxxxx hmotnosti xxxxxx.
5. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx uvedená xxx xxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxxx:
5.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) xx hodnota, xxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx xxxx dvěma xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx získány xxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxx za xxxxxxxx podmínek (xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx období).
5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) xx xxxxxxx, xxx kterou leží xxxxxxxxx xxxxxx dvou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x týmž xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxx (různí xxxxxxxxxx, xxxxx přístroje, xxxxx xxxxxxxxxx x/xxxx různé xxxx).
5.1.3 Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, hodnoty xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxx odstavcích xxxxxxx postupu, představují 95 % xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx ISO 5725, xxxxx xxxxxx, 1986. Xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx uznaných xxxxxx, xxxxxxxxxxx xx spolupráci, xxxxx se používají xxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx pokusy, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx. V xxx případě xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1.4 Xxxxxxx xxxxx x nezbytné xxxxxx by xxxx xxx naplánovány x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x mezinárodními xxxxxx.
6. Xxxxxx o xxxxxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxx xxxxxx všechny xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxx xxxxx, nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx výsledky. Xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
XX. XXXXX XXXXXX XXXXXXXX X XXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tento xxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx pro xxxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka. Xxxxx postup xxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx dodané xxxxxxxxxx x pro xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx skladovacích x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx 2, 4.4, 5 a 6 se xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx ošetřeného mléka xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx.
2. Xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xxxx. xxxxxxxx pověření xxxxxxxxxxx, kteří byli xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx vyškoleni.
Pokud xx xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx, xxx bylo xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx budou xxxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxx x xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx orgány xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx nezbytné, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxx xxx xxxxx vzorků
3.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx být xxxxx zhotoveno x xxxxxxxx xxxxx nebo x xxxxxx vhodného, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx být xxxxxxxx s ohledem xx xxxxxxxxxxxxx použití (xxxxxxxxxx, xxxxx vzorků, xxx.). Xxxxxxx a xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx v nádobách xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx promíchání xxxxxxx xxx xxxxxx žluklé xxxxx. Naběračky musí xxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx dlouhou xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Objem naběračky xxxx xxx alespoň 50 xx.
Xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxx být xxxxxxxx, xxxxxx xxxx x vhodného plastu.
Materiály xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx (včetně xxxxx x xxxxx) xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx by xxxxxxxxx výsledky xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx na xxxxxx xxxx mít čistý, xxxxx, xxxxxx xxxxxx xxx trhlin x xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx.
3.2 Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
Vybavení pro xxxxx xxxxxx (včetně xxxxx) xxxx splňovat xxxxxxxxxx xxxx 3.1 x musí xxx xxxxxxxx.
Xxxxx xx pro xx xxxx xxxxxx xxxxxx vzorků použije xxxxx vybavení, musí xxx xx každém xxxxxx vzorku vyčištěno x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxx požadavky, které xxxxxxx xxxxxxxxx laboratoř xxxx příslušný xxxxx, xxx nedošlo x xxxxxxxxx výsledků xx xxxx jdoucích vzorků.
4. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx
4.1 Xxxxxx xxxxx
Xxx xxxxxx xx testy, xxxxx xxxx být xxxxxxxxx, xxxxx musí xxx xxxx odběrem důkladně xxxxxxxxxx buď ručně, xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxx odebrán xxxxx xx xxxxxxxxxx, když xx xxxxx xxxxx x xxxxxx.
Xxxxx se x xxxxxx odebírá xxxxxxx více vzorků xxxxx xxx různé xxxxx, xxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx použitých xxxxx xxxx xxx takový, xxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxx xxx xxxx možné xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx přepravy.
4.2 Xxxxx xxxxx xxxxxx
4.2.1 Odběr xxxxxx x xxxxx x xxxxx na xxxxx
X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx ve xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx x xxxx, xxxxxxx dbát na xx, xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x aby xx xx xxxxx konve xxxxxxxxxxx smetana. Xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx zásilku, xx odebere xxxxxxxx xxxxx bodu 4.2.4.
4.2.2 Xxxxx z xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx dokud není xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxx mléka neumožňuje xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx.
4.2.3 Odběr xxxxxx z xxxxx xxx
Xx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxx xx xxxxx xxx. Za xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx ruční xxxx mechanické míchání. Xxxxx xxxxx zásilky, x xxx xx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx misky xxx, xxxxxxx reprezentativní xxxxxx z celé xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.4 Xxxxx xxxxxx x rozdělené xxxxx
Xxxx je xxxxxxxx xxxxx, u něhož xx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, rozděleno xx xxxx nádob, x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx reprezentativní xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx každý xxxx. Xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx se jednotlivé xxxxx těchto xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx, ze které xxx xxxxx ze xxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (více) vzorek (xxxxxx) z těchto xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
4.2.5 Xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx – xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx vagóny
4.2.5.1 Xxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx způsobem xxxxxxxx.
X xxxxxxxxxx obsahu xxxxxxx xxxxx, skladovacích xxxxxx, xxxxxxxxxxxx kamionů xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.5.2).
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx na xxxx, xx kterou xxxx xxxxx x xxxxx. Xxxx být prokázáno, xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxxxx případů xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx testování. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx shodu xxxxxxxx xxxxx provedených xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx x různých xxxxx xxxxx, xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx při xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx mléka xxxx xxxxxxxxxxx mléka) xx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx 0,1 %.
Ve xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx otvorem ve xxxxxx části xxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx pro celý xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx vzorků x xxxxxxxxxxx otvoru. X xxxxxxx odběru xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx zajištěna xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.5.2 Xxxxxxxxxx obsahu xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx nádrží, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx možné xxxxxxx:
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx nádoby x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- vrtulí nebo xxxxxxxxx poháněnou elektrickým xxxxxxx x xxxxxxxxx x průlezovém otvoru; xxxxxxxx xx ponořena x xxxxx,
- v xxxxxxx cisternových xxxxxxx xxxx cisternových xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx přepravní hadici, xxxxx je napojena xx xxxxx x xxxxxxxx xx průlezového xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx, stlačeným x xxxxxx vzduchem. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx, aby se xxxxxxxxx xxxxx žluklé xxxxx.
4.3 Automatický x xxxxxxxxxxxxxxx odběr xxxxxx
Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx odběr xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx testovací xxxxxxxxxx xxxx jiným xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx odběru xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx mléka, x xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx,
- poměr xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx vzorku),
- schopnost xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx vzorek x xxxxx xx xxxxxx promíchání.
Pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx poloautomatického xxxxxxxx pro odběr xxxxxx může xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxx odebrány xxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx přenos,
- xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.
4.4 Xxxxx vzorků xxxxxxx ošetřeného xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx x maloobchodních xxxxxxxx
Xxxxx xxx x xxxxxxx ošetřené mléko xxxxxx x přímé xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxx obchodní xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zařízení xxx xxxxxxxx, x xx, xxxxx xx xx xxxxx, ihned xx xxxxxxxxxx (x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxxxxxx).
X xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (pasterovaného, xxxxxxxxxx xxxxxxx UHT x sterilizovaného) xx xxxxxxx takový xxxxx xxxxxx, aby xxxxxxxxx xxxxx vyšetření, xxxxx xxxx xxx provedena, x xx xxxxx xxxxxx poskytnutých testovací xxxxxxxxxx xxxx podle xxxxxx jiného xxxxxxxxxxx xxxxxx.
5. Identifikace vzorku
Vzorek xx měl xxx xxxxxxx identifikačním xxxxx, xxxxx umožňuje xxxx xxxxxxx identifikaci podle xxxxxx analytických xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxx 2).
6. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx se lhůty x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx být xxxxxxxx x xxxx xxxx xxxxxxx vzorků xxxxxx xxxxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx druhu xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx má xxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx xxxx:
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx je xxxxx xxxx na xx, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zápachu x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx-xx je xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxx,
- vzorky syrového xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx testování xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx při xxxxxxxxx 0 xX xx 4 xX. Xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx být xx xxxxxxxxx a x žádném xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 36 xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx teplota skladování 0 xX až 6 oC, xxxx-xx xxxx xxxx odběrem x xxxxxxxxxx xxxxx xxx 24 hodin,
- xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx mikrobiologické xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx teplotách 0 xX až 4 xX. Doba xxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxxx x v xxxxxx xxxxxxx nesmí xxxxxxxxxx 24 hodin,
- xxxx xxxxxx xxxxx xxx vzorky xxxxxxxx xxxxx a pasterovaného xxxxx určené pro xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx skladovány x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxx xx nejkratší.
Speciální xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx přijmout xxx xxxxxxx testy, jsou xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
XXXXXXX I
OBSAH
I. Xxxxxxxxx xxxx mrznutí
II. Stanovení xxxxxxxx fosfatázy
III. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X
X. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 21 °X
XX. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií – xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X
XXX. Xxxxxxxxx obsahu xxxxxxxxxxx xxxxx
XXXX. Detekce antibiotik x xxxxxxxxxxx
XX. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
X. XXXXXXXXX XXXX XXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx popisuje referenční xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, XXX xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx přístroje (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx), v němž xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx ochlazována xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx nahrazuje xxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx typ xxxxxxxxx maximální xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx mrznutí, kdežto xxxxx typ xx x xxxxxxxxxx důvodů xxxxxxxx tak, že xx začátku xxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxxxxxx xxxx odečet. Xxxxxxxx x xxxx, že xx xxxxx xxxxx xxxxx křivky xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx, ale x xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, tento referenční xxxxxx vyžaduje xxxxxxx xxxxxxxxx hledajících plató. Xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx časem se xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxx odhad xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx x xxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxx 0,18 x xxxxxxxx xxxxxx na 100 xx (xxx xxx 7.4).
2. Definice
Bod xxxxxxx mléka: hodnota xxxxxxxx v souladu x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxx (°C).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx vzorek xxxxx xx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx vhodnou xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vyvolá jeho xxxxxxxxxxxx, která xxxxxxx, xx teplota xxxxxx xxxxxxx až k xxxxx, které xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx postupem xxxx xxx vzorky xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxx plató udává xxx mrznutí xxxxx xx stupních Xxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Kryoskop
Kryoskop xx xxxxxx z xxxxxxxxxxx řízené xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx odporového xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx, jakož x xx xxxxxxxx xx xxxxxx.
4.1.1 Chladicí xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx dva xxxx xxxxxxxx lázně.
4.1.1.1 Xxxxxxx typ
Dobře xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, která xx xxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxx vyšší než 0,2 °X. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx ± 0,5 °X xx xxxxxxxxx hodnoty xxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx, xxx v xxxxx xxxx udržována xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxx zkumavky xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
4.1.1.2 Xxxxxxxxxx typ
Kolem zkumavky xx xxxxxx proudí xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx může kolísat xxxxxxx x xxxxxxx ± 0,5 °X xx xxxxxxxxx hodnoty xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx chladicí xxxxxxxxx je 33 % (X/X) vodný xxxxxx 1,2-xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx).
4.1.2 Xxxxxxxxx a příslušný xxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx 1,80 ± 0,2 xx x x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 0,31 xx. Časová xxxxxxxxx termistoru xxxx xxx nižší xxx 2 sekundy a xxxxxxx x (xxx xxxxxxxx) musí xxx xxxxxx. Xxxxxxxx napětí, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx, aby xxx − 0,512 °C xxxxxxx xxxxxxxxxx stoupla xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x 0,0005 °X. Maximální xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx ± 5 %.
Xxxx xx sonda x xxxxxxxxx v pracovní xxxxxx, xxxxx skleněné xxxxxxx se xxxx xxxxxxxx v xxx xxxxxxxx na xxxxxx x x xxxx, xxxxx xx 44,6 ± 0,1 mm xxx xxxxxx okrajem xxxxxxxx (xxx xxxxxxx xx xxxxxx 15). Xx třeba dodat xxxxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxx nastavení xxxxx xx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx:
β xxxxxxxx termické xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx vzorce
− xX / xX × 1 / X = β / X2
xxx:
X je xxxxxxx ve stupních Xxxxxxx
X je xxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxx T,
− xX / dT × 1 / R xxxxxxxx koeficient
β je xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx termistoru. X xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx než 3000.
4.1.3 Xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
4.1.3.1 Princip xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx pracuje xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx zůstane xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx ± 0,002 xX xx dobu xxxxxxx 20 xxxxxx.
4.1.3.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx xx vyrovnává Wheatstoneovým xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, jejichž xxxxxxxxx xxxxxxxxx je ± 10 % x jejichž xxxxxxxx xxxxxxxxxx není xxxxx xxx 2×10−5°X.
Xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) xxxxx se nesmí xxxxxxxx xx linearity x xxxxx rozsahu x více než x 0,3 % xxx maximální hodnoty.
Pro xxxxx xxxxxxxxx musí xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx dílky xx xxxxxxxxx 0,001 °X.
4.1.3.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx zařízení xxxx umožnit xxxxxxxxx xx xxxxxxx 0,01 °X x rozmezí xx 0 °C xx –1 °C.
Stabilita xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx obvodu xxxx xxx xxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxx xx sobě xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx teploty xxxxxx vyšší xxx 0,001 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxx být taková, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxx přístroje nevznikla x žádném xxxx xxxxxxx xx – 0,400 °X do – 0,600 °C xxxxx chyba xxx ± 0,001 °X.
4.1.4 Xxxxxxxx
Xxx míchání xxxxxxxxxxx xxxxxx xx použije xxxxxx drát x xxxxxxx 1 xx 1,5 xx, xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxx,.
Xxxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx, aby xxxx xxxxxx konec byl xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx asi 1,5 xx nad xx xxx touto xxxxxxx.
Xxxxxxxx vibruje bočně x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx výrobce (xxxxxxx ± 1,5 xx), xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx míchání xx xxxxxxxx nesmí x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx.
4.1.5 Xxxxxxxx xx vyvolání xxxxxxx
Xxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, které xx xxxxxxx xx činnosti xxxxxxxx vyvolá xxxxxxx xxxxxx, aby xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku xxxxxxx x xxxx xxxxxxx. K xxxx xxxxx lze použít xxxxxxxx; jedním postupem xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx na jednu xx dvě sekundy xxx, aby se xxxxxxxx dotýkala xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx.
4.1.6 Xxxxxxxx xx xxxxxx
Xxxxxxxx xx vzorky (xxx xxxxxxx 1) xxxx xxxxxxxx x 50,8 ± 0,1 mm xxxxxx; vnější xxxxxx xx 16,0 ± 0,1 mm x xxxxxxx xxxxxx xx 13,5 ± 0,1 xx. Xxxxxxxx skla xxxxxxxx xx nesmí xxxxx x xxxx xxx 0,1 xx.
Xxxxxxxx xxxx xxx značku xxxxxx vzdálenou xx xxxxxxx xxxxxx 29,8 xx (21 xx xxx xxxx xxxxxxxx), xxxxx uvádí xxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 mm.
4.1.7 Xxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx napětí xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx kolísání xxxxxxxxxxxxxx ± 1 % xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxxx zdroj kolísá x ± 6 %.
4.2 Xxxxxxxxxx xxxx
4.3 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 1000 xx, xxxxx X.
4.4 Sušárna, xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 130 ± 1 °C
nebo
Elektrická pec, xxxxxxxxx, nastavitelná na 300 ± 25 °X.
4.5 Xxxxxxxxx
5. Xxxxxxx
5.1 Xxxx destilovaná v xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, převařená x zchlazená xx 20 ± 2 °X, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx x.x., xxxxx xxxxx, xxxxxx 5 hodin xxx xxxxxxx 300 ± 25 °C x xxxxxxxxxx peci xxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx xxxxxxx 130 ± 1 °X x xxxxxxx x zchlazený na xxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků
Navážit odpovídající xxxxxxxx (viz tabulka 1) suchého chloridu xxxxxxx (5.2) xx xxxxxxx. Xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxx (5.1), xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx odměrné xxxxx x objemu 1000 xx x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx x teplotě 20 ± 2 °C.
Skladovat xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxx xxx 5 °X x xxxxx xxxxxxxxxx polyethylenových xxxxxxx o xxxxxxxxxx xxxxxx 250 xx.
Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx při 20 °X
|
x XxXx/x |
°X |
|
6,859 |
-0,408 |
|
7,818 |
-0,464 |
|
8,149 |
-0,483 |
|
8,314 |
-0,492 |
|
8,480 |
-0,502 |
|
8,646 |
-0,512 |
|
8,811 |
-0,521 |
|
8,977 |
-0,531 |
|
9,143 |
-0,541 |
|
10,155 |
-0,600 |
Xxxx použitím xx standardní roztok xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx otočením xxxxx. Nikdy neprotřepávat xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxx se xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx standardního xxxxxxx xx x xxxxx xxxxxx xx xxxxx x čisté kádinky. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx z lahví, xxxxx xxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx fungicid (xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 10 g/l).
6. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx musí xxx nastaven xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxx 1 °X xx xxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxx kalibrace. Xxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx než 26–27 °X.
Xxxxxxx xx, že xxxxxxxx funguje xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xx byl zapnut xxxxxxx 12 xxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx sondy, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxx xxxxxxx výše), xxxxxxx bod xxxxxxx xx xxxxx xxx xxxx xxxxx pod xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx. Rozdíl xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx by xxxxxxx neměl xxx xxxxx xxx – 0,100 °X.
(X xxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxx xxxx dostupných kryoskopů xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx sestaven xxx, xx se ustálí xx dané hodnotě xxxx mrznutí x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X těchto xxxxxxxxx xxxxx jednoho xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, který xx xxxxx xxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxx x kalibračních xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx postup; xxxxxxx xxxx tuto xxxxxxx uvést).
Pomocí xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx a čisté xxxxxxxx xx xxxxxx, xxxx měřit xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx xx vzorky xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx jako zkumavky xxxxxxxxx na xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxx xxxx, xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx vodou). Xxxxxxx standardních xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx vzorků xxxxx.
Xxxxx xxxxxx výrobce xxxxxxxx xxxxxxxx kalibrace, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx tento xxxxxx x xxxxxx standardním xxxxxxxx x xxxxxxxx xx provádět takovým xxxxxxxx, dokud po xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx hodnoty xxxx mrznutí xxxxxxx x nich, xxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Kryoskop xx tedy připraven x xxxxxxx a xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx vzorku mléka, xxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
7. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku
7.1 Xxxxx to xx xxxxxxxx skladovat xxxxxx xxx xxxxxxx xxxx 0 °C x 5 °X.
7.2 Xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx tělíska xxxx xxxx xxxxxx xxx xx xxxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx se použije xxxxx, xxxxx xxxxxxxx x mlékem a xxxx být xxxxxx xx laboratorní teploty.
7.3 Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (mezi 0 x 5 °C) xxxx je možné xx ohřát xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx bezprostředně xxxx zahájením testování. Xx xxxx xxxxxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxxxxxx roztoky x xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
7.4 Stanovit xxxxxxxx xxxxxxxx mléka, xxxxx možno xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 0,18 x xxxxxxxx mléčné xx 100 xx xxxxx, nemohou být xxxxxxxxxxx.
7.5 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 20 xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x otevřené xxxxxx.
8. Postup
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx, zda hladina x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx v xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, případně xxx xx xxxxx termistoru xxxxxxx x prázdné xxxxxxxx xx vzorky. Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx alespoň 12 xxxxx, zkontrolovat xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx rozkmit jeho xxxxxxx.
8.2 Xxxxxxx kontrola xxxxxxxxx
Xxxx každou xxxxx xxxxx měřit xxx xxxxxxx standardního roztoku xxxxxxxx sodného (xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxx – 0,512 °X), dokud se xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxx xxx 0,001 °X. Xxxxx xx průměr xxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx než 0,002 °X, kryoskop xx xxxxx xxxxxxxxxx, jak xx xxxxxxx x xxxx 6.
Xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx nepřetržitě, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx za xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx výrobce.
8.3 Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx mléka
Promíchat xxxxx xx vzorkem xxxxx opatrným xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx otáčením. Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx tak xxxxxx, xxx se xx xxxxxxx přimíchal xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxx přidat 2,5 ± 0,1 xx xxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx. Ujistit xx, xx xxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxx x xxxxx, xxxxx je xx xxxxxxxx opatrně xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x chlupy nepouštějící xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx podle xxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx x mrznutí xx vyvolá xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xx 0,1 °X.
(X některých xxxxxxxxxxxxx přístrojů je xxxxx odečíst xxxx xxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; u xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx dosáhne tím, xx xx zajistí, xxx xxxxxxx začalo, xxxx xx xxxxxxx xxxx nitka galvanometru xxxxx x příslušnou xxxxxxx.)
Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx, xxx xx dosaženo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx rozmezí, xxxxxxxxx xx xxxxxx x zopakuje se x xxxxx xxxxxxx xxxxx. Pokud xxxxx xxxxx vzorek xxxxxx xxxxxx před xxxxxxxxx xxxxxxxxx teploty, alikvótní xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx 45 °X a 5 xxxxx se xxxxxxx xx této teplotě, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx a ihned xxxxxxx xxxxxxxxx. Teplota xxxxx po xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx dobu xxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxx odpovídá xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx x xxxx xxxxxxx xx nutné xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx konstantní, x xxxxxx xxxxxxxx mezi xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx maximální teploty, xx liší xxxxxx xx vzorku a xxx xxxx a xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx pro xxxxx. Je nezbytné xxxxxxxxxx maximální xxxxxxx.
Xxxx xx měření xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xx vodou x xxxxx xxxxx x xxxxxxxx směrem xxxxxxx nahoru jemnou, xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxx xxxx naměřenými xxxx xxxxxxx xxxxx než xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (0,004 °X), provést xxxxx xxxxxxxxx x jiného xxxxxx. Xxxxx jsou xxxxxxx xxxx stanovení xxxxxx xx 0,004 °X, zapíší xx x xxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
8.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxxxx přístroje uložit xxxxxxxx xxxxxxxx na xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx sonda zůstala x xxxxxx.
(X xxxxxxxxx xxxx kryoskopu to xxxx možné; x xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xx sonda xxxx začátkem xxxxxx xxxxx zchlazena, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx shodné xxxxx.)
9. Xxxxxxxxx výsledků
9.1 Xxxxxxx
Xxxxx xx xx provedení xxxxxxx kontroly xxxxxxxxx xxxxxxxxx potvrzena, za xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx získaných xxx bod xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxx dvou xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxx ukazuje tento xxxxxxx:
Xxx xxxxxxx (°X)
|
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx |
Xxxxxx |
|
|
-0,544 |
-0,545 |
-0,544 |
|
-0,545 |
-0,546 |
-0,546 |
9.2 Spolehlivost
9.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x): 0,004 °X
9.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (R): 0,006 °C
Obrázek 1
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1 (poloha xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx termistoru a xxxxxxxx)
XX. STANOVENÍ AKTIVITY XXXXXXXXX
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx referenční postup xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Definice
2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x μg xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx podmínek.
2.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx, pokud xx xxxxx xxx 4 xx xxxxxx xx 1 xx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx ve vzorku xxxxxx fenol x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx fenol reaguje x dibromchinonchlorimidem a xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (namodralé xxxxx), xxxxx se xxxxxxxxxxxxxx měří xxx 610 nm. Xxxx xx xxxxxxx porovnání xx xxxxxxx, xxxxx xxxxx fosfatázy xxx xxxxxx.
4. Činidla
4.1 Xxxxxxx xxxxxx boritanu x xxxxxxxxx barnatého
4.1.1 Rozpustit xx xxxx 50,0 x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) [Xx(XX)2.8X2X] x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.1.2 Rozpustit xx xxxx 22,0 g xxxxxxxx xxxxxx (X3XX3) x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.1.3 Xxxxxx 500 xx xxxxxxx xxxxxxx na 50 °X, xxx roztoky xxxxxxx, promíchat, xxxxxx xxxxxxxx xxx xx 20 °C, x xxxxxxx nutnosti xxxxxxx xxxxxxx pH na 10,6 ± 0,1 xxxxxxxx roztoku 4.1.1 xxxx 4.1.2. Xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx roztok xx xxxxxxxxxxxx uzavřené nádobě.
4.1.4 Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxx xxx vyvolání xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxx 6,0 x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XxXX2) xxxx 12,6 x XxXX2.4X2X x 20,0 x xxxxxxxx xxxxxxx (NaCl) a xxxxxxx xx 1000 xx.
4.3 Tlumivý roztok xxx zředění vzniklého xxxxxxxxx
Xxxxxx 10 ml xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2) xxxxx na 100 xx.
4.4 Roztok substrátu
Rozpustit 0,1 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx bezvodý, prostý xxxxxx, xx 100 xx tlumivého roztoku (4.1.3) xxxx 0,5 x fenylfosfátu xxxxxxxxxxx xx 4,5 xx xxxxxxxxx roztoku xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2), xxxxxx xxx kapky xxxxxxx XXX (4.6) x xxxxxx xxxx 30 xxxxx při xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx extrahovat 2,5 xx n-butanolu x xxxxxx stát, xxxxx xx butanol-1 xxxxxxxx. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx-1. V xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx v chladničce xxxxxxx xxx; xxxx xxxxxxxx vyvolat xxxxxxxxx x provést novou xxxxxxxx. Tlumivý xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, x xx xxxxxxxx 1 ml xxxxxx xxxxxxx xx 100 xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.3).
4.5 Sraženina xxxxx-xxx
Xxxxxxxxx xx xxxx 3,0 x xxxxxx xxxxxxxxxxx (XxXX4 · 7X2X) x 0,6 x xxxxxx xxxxxxxxx (XxXX4 · 5X2X) x doplnit na 100 xx.
4.6 Xxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx BQC)
Rozpustit x 10 xx 96 % (X/X) xxxxxxxx 40 ± 1 xx 2,6-dibromchinonchlorimidu (XXX) (C6H2Br2ClNO6).
Skladovat x xxxxx xxxxx v xxxxxxxxxx. Xxxxxxx roztok, xxxxx změní xxxxx xxxx xx starší xxx jeden měsíc.
4.7 Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (XX)
Xxxxxxxxx ve xxxx 0,05 x xxxxxx xxxxxxxxx (XxXX4.5X2X) a xxxxxxx xx 100 xx.
4.8 Xxxxxxxxxx roztok xxxxxx
4.8.1 Xxxxxxx 200 ± 2 mg xxxxxxx bezvodého xxxxxx x přelít do xxxxxxx baňky x xxxxxx 100 xx, xxxxxx xxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx na 100 ml. Tento xxxxxx může xxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
4.8.2 Xxxxxx xxxxx 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx 100 xx x xxxxxxxxx. 1 xx obsahuje 200 μx xxxxxx.
5. Přístroje x xxxxxxx ze xxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxxxx pomůcky xx skla, jakož x zátky x xxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx.
x) Xxxxxxx typy plastových xxxxx mohou xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx používání xx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx vybavení, xxxxxxx:
5.1 Xxxxxxxxxx váhy
5.2 Xxxxx xxxxx nastavitelná xx 37 ± 1 °X.
5.3 Spektrofotometr xxxxxx xxx xxxxxx xx vlnové xxxxx 610 xx.
5.4 Xxxxxxxx, 16 xxxx 18 × 150 xx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 5 xx x 10 ml.
5.5 Xxxxxx
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxx vhodné xxxxxxxxx, xxxx. x xxxxxxx 5 cm.
5.7 Xxxxxxxx filtry o xxxxxxx nejméně 9 xx pro xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
5.8 Xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
6. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx přímého slunečního xxxxxx.
x) Xxxxx xxxx xxxx potu xxxxx xxxxxxxx falešně xxxxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxx se jim xxxxxxx. Je xxxxx xxxxx věnovat xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1 Příprava xxxxxxxxxxx vzorku
6.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx, xxxxx xx déle xxx xxx dny.
6.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxx do xxxxx xx xxxx xxxxxxxx (5.4), xxxxx xxxxxxxx xxxxxx jako xxxxxxxxx xxxx xxxxx pokus.
6.3 Xxxxxxxxx
6.3.1 Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx minuty xx xxxxxx xxxx; xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx prohřála xxxx xxxxxxxx. Rychle xxxxxxxx xx pokojovou xxxxxxx.
6.3.2 Po zbytek xxxxxxx ošetřovat xxxxx x xxxxxxxxx vzorek xxxxxxx způsobem. Xxxxxx 10 xx xxxxxxx xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxxxxx.
6.3.3 Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 60 minut xx vodní xxxxx (5.2) a xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
6.3.4 Xxxxxx xxxx x bodě 6.3.1 xxxxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxxx xxxx. Rychle xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.5 Xx každé xxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxxxx xxxxx-xxx (4.5) x xxxxx xxxxxxxxx.
6.3.6 Xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx x x případě xxxxxxxx xxxxxxxxx znovu, xxxxx xxxx filtrát xxxxxxxx xxxx; shromáždit 5 ml ve xxxxxxxx.
6.3.7 Xxxxxx 5 xx xxxxxxxxx roztoku xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2).
6.3.8 Xxxxxx 0,1 xx roztoku XXX (4,6), xxxxxxxxx a 30 xxxxx nechat xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.9 X xxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx absorbanci xxx xxxxxx délce 610 xx.
6.3.10 Pokud xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx 6.3.9 převyšuje xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxxxx 20 μg xxxxxx xx xxxxxxxx podle xxxx 6.4.4, opakovat xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Připravit xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx části xxxxx testovacího xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx xxxx, xxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
6.4.1 Xx základě xxxxxxxxxxxx roztoku fenolu (4.8.2) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0 (xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx), 2, 5, 10 x 20 μx fenolu xx xxxxxxxx. Xx xxxxx x xxxx zkumavek xxxxxx xxxxxx pipety 1 xx vody x 1 xx xxxxxx standardních roztoků xxxxxx.
6.4.2 Xx každé xxxxxxxx xxxxxx 1 xx roztoku síranu xxxxxxxxx (4.7), 5 xx tlumivého xxxxxxx xxx xxxxxxx vzniklého xxxxxxxxx (4.3), 3 xx xxxx x 0,1 xx xxxxxxx XXX (4.6); xxxxxxxxx.
6.4.3 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 30 xxxxx při xxxxxxxx xxxxxxx.
6.4.4 X xxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx pokusem xxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.4.5 Xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (6.4.4) xxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx fenolu (6.4.1) xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx nejmenších xxxxxxx.
7. Xxxxxxxxx výsledků
7.1 Xxxxxxx a xxxxxx
7.1.1 Xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (6.3.9) xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (6.4.5).
7.1.2 Xxxxxxxxx aktivitu xxxxxxxxx xxxxxxxxxx v μx xxxxxx xx mililitr xxxxxxxxxxxxx mléka podle xxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxxx xxxxxxxxx = 2,4 × X × X
xxx
X xx množství xxxxxx x μx xxxxxxx xxxxx bodu 7.1.1;
X xx faktor xxxxxxx xxx xxxxxxx provedené xxxxx bodu 6.3.10 (x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx X = 1).
2,4 je xxxxxx xxxxxxx (5/12 z 1 xx testovacího xxxxxx) – xxx 6.2 ve xxxxxxxxxx x 6.3.2, 6.3.5 x 6.3.6.
7.2 Xxxxxxxxxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) : 2 μx fenolu/ml.
7.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (R) : 3 (předběžně) μx xxxxxx/xx.
7.2.3 Xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx 6.3.10, xxxxxx xxxxxxx x 7.2.1 x 7.2.2 xx xxxxxx xxxxxxxx získaných ze xxxxxxxxx xxxxxx.
XXX. XXXXXXXXX XXXXXXXX PEROXIDÁZY
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx popisuje referenční xxxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxxx xxxx nepřítomnosti xxxxxx peroxidázy x xxxxx, který xxxxxx xx kontrole pasterace.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx:
Xxxxx je xxxxx xxxxx pasterováno, do 30 sekund po xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx zabarvení.
Negativní xxxxxx xx xxxxxxxxxx:
Xx 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx vodíku. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx na xxxxxxxxx indofenol (Štorchův xxxx). Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx x xxxxx vodě (50 °X) 2 x 1,4 xxxxxxxxxxxxxx (X6X8X2) a doplnit xx 100 xx. Xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxx x xxxxx, x tmavě xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx jednoho xx xxxx dní xx připravení xxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx vytvoří xxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxx 9 ml 30 % xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx na 100 xx. Pro xxxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx koncentrované xxxxxxxx xxxxxx xx litr xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx stálý asi xxxxx měsíc, xxxxx xx xxxxxxxxx v xxxxxx x xxxxx, x láhvi se xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx jakémukoli styku x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
5. Xxxxxx
5.1 Dát 5 xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x vhodným víčkem.
5.2 Xxxxxx 5 xx xxxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx (4.1).
5.3 Xxxxxx 2 xxxxx roztoku xxxxxxxx xxxxxx (4.2).
5.4 30 xxxxxx po xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx modré zabavení xxxxxx xxxx xxx 30 xxxxxx po xxxxxxx činidel, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX XXXXXX MIKROORGANISMŮ PŘI 30 °X
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx při 30 °X. Xxxxxx xx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, UHT xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx 15 xxx xxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx počitatelné xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx vzorku xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx x Petriho miskách x xxxxxx xxxxxxxxx 72 xxxxx při 30 °X. Spočítat xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 ml xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx 0,1 xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx XXX xxxxx.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx xx skla
Obvyklé xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Horkovzdušná xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °X.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 jednotky xX.
4.1.5 Xxxxx lázeň, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °C.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Míchačka schopná xxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx s 9 xx ředicího xxxxxxx x xxxxxxxxx xx principu excentrické xxxxxx obsahu xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x dostatečným xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x promíchání 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxxxx ředění.
4.2.2 Baňky x xxxxxx 150 xx 250 xx xxxx zkumavky x xxxxxx 20 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx, x výpustním xxxxxxx x průměru 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx misky x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxx sterilního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx misek xx vnitřní průměr xxx 90 xx 100 xx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx nejméně 10 xx. Xxx xxxxx mít xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx pomůcek ze xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx xx sterilizují xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx:
x) x horkovzdušné xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx teplotě 170–175 °X;
x) x xxxxxxxxx (4.1.2), nejméně 20 xxxxx při xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx je nutné xxxx na xx, xxx bylo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx nebo xxxxx xx xxxx xxx volné.
Pomůcky ze xxxx xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xx xx xxxx vysušit odvětráním xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx – xxxx xx xxxxxxx mlékem
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx (+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10–15 x xxxxx želírovacích vlastností xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Toto xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, které xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X tomto xxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, glukózu x nakonec sušené xxxxxxxxxx mléko. Xxxxx xxxxxxxx usnadňuje xxxxxx. Xxxx přidat xxxx x za stálého xxxxxxx uvést xx xxxx, xxxxx se xxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx x xxxx xxx 30 xxxxx.
Xxxxx to xx xxxxxxxx, přefiltrovat xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx nezbytné, xxxxxxx pH, roztokem (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx hodnota 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.2 Rozdělení, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Rozdělit xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 xx do xxxxx xxxx po 12 až 15 xx do xxxxxxxx (4.2.2). Xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX kultivačního xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ihned, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx než 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) se xxxx xxxxxxxxx x komerčního xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx pokyny xxxxxxx, xxx xxxxxx sušené xxxxxxxxxx mléko xxxx xxxxxxxxxxxx, pokud xxxx xxxxxxx produktu.
Upravit xX xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X xxxxxxx xxxxx xxxx 5.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxx médium xxxxx xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Xxxxxx xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (NaCl) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xX-xxxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx nezbytné upravit xX xxxxxxxx (nejméně 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx po xxxxxxxxxxx byla xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx ředidla
Rozdělit xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) tak, xxx po xxxxxxxxxxx xxxxx zkumavka xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx ředidla. Zkumavky xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxx.
Xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, avšak ne xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx dehydrovaná xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) se xxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx výrobce. Xxxxxxx xX xxxxxxx xxxxx xxxx 6.1, poté xxxxxxxx, sterilizovat a xxxxxxxxx ředidla xxxxx xxxx 6.2.
7. Postup
7.1 Xxxxxxxxxxx kultivačního xxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxx řádně promíchat, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx rozděleny, x to 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx nádoby xx xxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx nebo xxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx testovacího xxxxxx xx neměla xxxxxxxxx xxx minuty.
7.3 Příprava xxxxxxxxxx ředění (10-1) (xxxxxx x pasterované xxxxx)
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xx 9 ml xxxxxxx (6.1), přičemž xxxxxx nesmí xxxxxx xx kontaktu x xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx se xxx xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) přenést 1 xx primárního xxxxxx (7.3) do 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx xxxxxx v xxxx 7.3.
Získá se xxx xxxxxx 10−2.
X xxxxx získat xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx opakuje xxx dlouho, dokud xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx mikroorganismů (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx misek
7.5.1 Xxxxxx mléko: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Musí xxx xxxxxxxxx nejméně xxx xxxxxx. Pro xxxxx xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.5.2 Xxxxxxxxxxx mléko: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 ml xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Musí xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Pro xxxxx xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.5.3 XXX mléko x xxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx xx 15 xxxxx xxxxxxxx xxx 30 °X – xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx A xxxxxxxx VII xxx 5):
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx misky (4.2.4) 1 xx xxxxxx xxxxx (7.2). Xxxxxxxxx dvě xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Do xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 15 xx 18 ml xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx Petriho xxxxx, xxx po xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kolonií.
Doba xxxx koncem xxxxxxxx xxxxxx mléka a xxxxxxxxx, xxxxx druhu xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 minut.
Nechat xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx, dokud médium xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Petriho xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx obrácené dnem xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxx než xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxx x xxxxxxxx xx stěnami x xxxxxx částí xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 72 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °C.
7.8 Xxxxxxxx kolonií
Počítat xxxxxxx x Xxxxxxx miskách xxxxxxxxxxxxxx xxxx než 300 xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx usnadnění xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) a/nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx xxxxx xxxx xx to, xxx xxxxxxx x záměně xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx koloniemi. V xxxxxxx xxxxxxxxxxx provést xxxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxxxxxxxxx skla x xxxxxx zvětšením (4.1.7), x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx cizích xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx považují za xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx méně než xxxxxxxx xxxxx, spočítat xxxxxxx x nepostižené xxxxx misky x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx více xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx vyřadit.
8. Xxxxxxx x vyjádření xxxxxxxx
8.1 Syrové x xxxxxxxxxxx xxxxx
8.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.1.2 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx syrového xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx tohoto xxxxxx:
∑X / (x1 + 0,1x2) x
xxx:
∑X ΣX xx celkový xxxxx xxxxxxx podle xxxx 8.1.1.
(x1 + 0,1 x2)x xx xxxxx xxxxxxxxxxxx vzorku, xxx:
x1 xx počet misek xxx prvním xxxxxxx
x2 xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx
x xx faktor xxxxxxx, xx základě xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
Xxxxx se xxxxxxxxxx xx dvě platné xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx vlevo xxxx xxxx.
Xxxxxxx (pasterované xxxxx):
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 kolonií
Ředění 10−3: 33 a 28 kolonií
Počet/ml: = 278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2
= 6290,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.1.3 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx nižší než 10, uvést, že xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx "nižší xxx 10 x x", přičemž "x" xx převrácená xxxxxxx xxxxxxxxxx faktoru zředění.
8.1.4 Xxxxx jsou všechny xxxxx xxxxx než 300 x počítání xx možné, xxxxxxx xxxxx a vynásobit xxx xxxxxxxxxxx hodnotou xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx jako "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xx".
8.2 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx mléko
Počty xxxxx xxx 10 xxxxxxx xx 0,1 xx se xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/XXX.
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
X. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX PŘI 21 °X
1. Předmět x oblast xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx popisuje referenční xxxxxx xxx stanovení xxxxxx mikroorganismů xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 21 °X x xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxx 6 xX s xxxxx xxxxxxxx stupeň xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxx xx x xxxxx xxx 6 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx počitatelné xxxxxxx xx aerobní xxxxxxxx xx popsaných xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx pět xxx xxx 6 °X. Xxxxxxx stanovený objem xxxxxx mléka x xxxxxxxxxxx xxxxxx v Xxxxxxx miskách x xxxxxx xxxxxxxxx 25 xxxxx při 21 °X. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx sušárna, xxxxxxxxxxxx xx 170 až 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, schopný udržovat xxxxxxx:
x) 6 ± 0,2 °X
x) 21 ± 1 °X xx všech bodech xxxxxx.
4.1.4 pH-metr xx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx na 45 ± 1 °C.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Xxxxxxxx xxxxxxx rozmíchat 1 xx xxxxxx mléka xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x 9 xx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Pomůcky xx xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx objemem, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxxx 10 ml xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxxxx ředění.
4.2.2 Xxxxx o xxxxxx 150 xx 250 xx nebo xxxxxxxx x objemu 20 xx pro skladování xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx xxxx ze sterilního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx, s xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 až 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x čirého, xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx misek xx xxxxxxx průměr asi 90 xx 100 x. Vnitřní hloubka xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx 10 xx. Dno nesmí xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx bránily xxxxxxxx kolonií.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx ze xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx hodinu xxx xxxxxxx 170–175 °X;
x) x autoklávu (4.1.2), nejméně 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx nutné xxxx xx xx, xxx xxxx xxxxxxxxx dostatečné xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx xx xxxxxxxx sterilizuje x xxxxxxxx, tyto xxxxxx by neměly xxx xxxxxxx uzavřeny, xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xx měly xxxxxxx odvětráním xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx sterilizovány x horkovzdušné xxxxxxx (4.1.1).
5. Kultivační médium – xxxx xx xxxxxxx mlékem
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 g |
|
D-glukóza(+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10-15 x podle xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx obsahovat xxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx ve xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx suspenze xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx přidat xxxx a xxxxx xx varu xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx agar xxxxx xxxxxxxxxx, nebo zahřívat x xxxx xxx 30 xxxxx.
Xxxxx je xx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx to je xxxxxxxx, xxxxxxx pH, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx sodného xxxx kyseliny chlorovodíkové, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx jeho xxxxxxx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °C.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Rozdělit xxxxxx (5.1) v xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 xx xx baněk xxxx xx 12 xx 15 xx xx xxxxxxxx (4.2.2). Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx nepoužije ihned, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx teplotě xxxx 1 x 5 °C, avšak xx déle xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Komerční xxxxxxxxxxx kultivační xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxx připravit x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kultivačního xxxxx. Dodržet xxxxxx xxxxxxx, ale xxxxxx xxxxxx odstředěné xxxxx xxxx rozpouštěním, xxxxx xxxx složkou xxxxxxxx.
Xxxxxxx xX xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X xxxxxxxx xxxxx xxxx 5.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Xxxxxx xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
8,5 g |
|
Voda |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xX-xxxxxx (4.1.4); xxxxx xx je xxxxxxxx xxxxxxx xX roztokem (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx sterilaci byla xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx zkumavek (4.2.1) xxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxx zkumavka xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 ml xxxxxxx. Xxxxxxxx uzavřít.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx (4.1.2) při 121 ± 1 °C. Xxxxxxxxxxxx pH ředidla.
Pokud xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, skladuje xx x xxxxx při xxxxxxx xxxx 1 x 5 °C, xxxxx ne xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ředidla
Ředidlo (6.1) xx xxxx xxxxxxxxxxx z komerčních xxxxxxxxxxxxx tablet xxxx xxxxxx. Dodržet xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.1, poté xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 6.2.
7. Postup
7.1 Rozpuštění xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx potřebné xxxxxxxx kultivačního média x xxxxxxxx ve xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx [4.1.3 x)] uzavřené xxxxxx xxxxxxxxxxxxx mléka nebo, xxxxx xx xxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x objemu xxxxxxx 100 ml xx xxxx 120 ± 2 hodin xxx 6 ± 0,5 °X.
7.2.2 Xx xxxxxxxx xxxxxx mléka xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x to 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxx zabránit xxxxxx xxxx xxxx xxxx nechat xxxxxxxxx. Xxxx mezi mícháním x xxxxxxx testovacího xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx tři minuty.
7.3 Xxxxxxxx primárního xxxxxx (10−1)
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) syrového xxxx pasterovaného xxxxx xx 9 xx xxxxxxx (6.1), přičemž xxxxxx nesmí xxxxxx xx kontaktu x xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx promíchávat xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx xxxxxx v bodě 7.3.
Xxxxx xx xxx xxxxxx 10−2.
X xxxxx xxxxxx další desetinná xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx nelze xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Naočkování Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx do xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ředění. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx ředění. Xxx xxxxx ředění (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx misku.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 15 xx 18 ml kultivačního xxxxx (7.1).
Ihned xxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx druhu mléka, xxxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx s kultivačním xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx povrchu, xxxxx médium xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Xxxxxxx misek
Přenést xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx inkubovat xxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx na xxxx xxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx misek xx nesmějí vzájemně xxxxxxx, xxx xxx x kontaktu xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 25 xxxxx xxx 21 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx více než 300 xxxxxxx.
Xxxxx vyšetřit xxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx usnadnění xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx xxxxx xxxx xx xx, aby xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx pochybností provést xxxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxxxxxxxxx skla s xxxxxx zvětšením (4.1.7), x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx cizích xxxxxx.
Xxxxxxx tvořící xxxxxx xx xxxxxxxx za xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx méně než xxxxxxxx xxxxx, spočítat xxxxxxx x nepostižené xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx čtvrtinu plochy xxxxx, xxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Použít xxxxxxxx xxxxx obsahujících 10 xx 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 a 8.1.4).
8.2 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
∑X / (x1 + 0,1x2) x
xxx:
ΣX je celkový xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 8.1,
(n1 + 0,1 n2)d xx xxxxx naočkovaného xxxxxx, xxx:
x1 je xxxxx xxxxx při prvním xxxxxxx
x2 xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx
x xx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx byly xxxxxxx xxxxx počty.
Počet xx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxx číslice xxxxx byla xxxx.
Xxxxxxx:
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 a 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; =278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2=
=629 / 0,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.3 Xxxxx xxxx xxxxxxx počty xxxxx než 10, xxxxx, že xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx "nižší než 10 × d", xxxxxxx "x" je xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx zředění.
8.4 Pokud xxxx všechny xxxxx xxxxx xxx 300 x xxxxxxxx xx xxxxx, xxxxxxx odhad x vynásobit jej xxxxxxxxxxx hodnotou faktoru xxxxxxx. Xxxxxxxx vyjádřit xxxx "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xx".
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx uznaných xxxxxxxxx testů ještě xxxxxx k xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX OBSAHU XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX – XXXXXXXX XXXXXXX XXX 30 °X
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxx technikou xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X.
2. Definice
"Koliformními xxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx bakterie, xxxxx xxx 30 °X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx necharakteristické xxxxxxx, xxx xxxx xx xxxxxxxxx podmínek xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx x kultivačním xxxxxx v Xxxxxxx xxxxxxx x 24 xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx 30 °C. Xxxxxxxx charakteristické xxxxxxx x, xxxxx to xx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx necharakteristických kolonií xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Poté xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
4. Xxxxxxxxx x pomůcky xx skla
Obvyklé xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Přístroje
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx sušárna, xxxxxxxxxxxx xx 170 až 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °C.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx udržovat xxxxxxx 30 ± 1 °X.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, nastavitelná na 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxx jehla xx xxxxxxx platina-iridium xxxx xxxx-xxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx uzávěry x objemem 20 xx, xxx xxxxx xxxxxxxxx konfirmační xxxxxxxxxx xxxxxx (5.2) a Xxxxxxxxx xxxxxxxx vhodné xxxxxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 xx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média (5.1).
4.2.3 Xxxxxx (utěsněné xxxxx), xxxxxxxx xxxx ze xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, x nepoškozeným xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 – 10 xx, s výpustním xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, xxx misek xx xxxxxxx xxxxxx xxx 90 až 100 x. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx 10 xx. Xxx nesmí xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx by xxxxxxx xxxxxxxx kolonií.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxxx jedním x xxxxxx postupů:
a) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx hodinu xxx xxxxxxx 170 – 175 °C;
b) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx teplotě 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx proniknutí xxxx: xxxxx se xxxxxxxx sterilizuje x xxxxxxxx, tyto nádoby xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx sterilizované x xxxxxxxxxxx xx xx xxxx vysušit xxxxxxxxxx páry.
Pipety xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx médium
5.1 Xxxx x krystalovou xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx x laktózou (VRBL xxxx). Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
7 x |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
3 x |
|
Xxxxxxx (C12H22O11.H2O) |
10 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (NaCl) |
5 x |
|
Xxxxxxx xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxxxx xxxxxx |
0,03 x |
|
Xxxxxxxxxx violeť |
0,002 x |
|
Xxxx |
10 xx 15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx složky xx xxxx a nechat xxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxx promíchat.
Zkontrolovat xX xxxxxx pH-metru (4.1.4); xxxxx to xx nutné, upravit xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, xxx po xxxx byla xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxx xxxxxx do xxxx xx občasného xxxxxxxxxxxx a ihned xxxxxx xx xxxxxxxxxx 100 až 150 xx xx xxxxxxxxxx xxxxx (4.2.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
X xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (6.4).
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.2 Tekutý xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
10 x |
|
Xxxxxxx (C12H22O11.H2O) |
10 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx |
20 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxx |
0,0133 g |
|
Voda |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx složky ve xxxx x xxxxx xx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx pH-metru (4.1.4); xxxxx to je xxxxxxxx, xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx po sterilizaci xxxx xxxx hodnota 7,2 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx xxxxxx po 10 xx xx xxxxxxxx (4.2.1) obsahujících Durhamovy xxxxxxxx. Xxxxxxxx uzavřít.
15 xxxxx sterilizovat v xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxx trubičky xxxxxxx xx sterilizaci xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx médium xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx se x xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx xx jeho xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx dehydrované kultivační xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx může připravit x xxxxxxxxxx dehydrovaného xxxxxxxxxxxx média. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Upravit xX, rozdělit, sterilizovat x skladovat xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx 5.1 x 5.2.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxxx (XXXX xxxx) xxxxxxx v xxxx 5.1.
6.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xx 25 xxxxxxxx otočeními xxxxxx xx xxxxxxx. Xx nutné xxxxxxxx xxxxxx xxxx nebo xxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx tři xxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxx Petriho misek
Sterilní xxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) 1 ml vzorku xxxxx do každé xx xxx misek (4.2.4) a xxx xxxxxxxxx 3 xx xxxxxx xxxxx (6.2).
6.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx misky xxxxx asi 12 xx XXXX xxxxx (6.1)
Xxxxx xx nalití xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx došlo x xxxxxxxxxxxx rozložení xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx nenaočkovanou xxxxx x 12 xx xxxxx XXXX xxxxx, xxxxx xxx použit xxx naočkování xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxx ztuhnutí xxxxx xxxxxxx 4 xx VRBL xxxxx (6.1) na xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx.
6.5 Xxxxxxxx Petriho xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx inkubovat xxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx na xxxx xxxx než xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx vzájemně xxxxxxx, xxx být x xxxxxxxx xx xxxxxxx x vrchní xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 24 ± 2 xxxxxx xxx 30 ± 1 °X.
6.6 Xxxxxxxx xxxxxxx
6.6.1 Počítat xxxxxxx x Xxxxxxx miskách xxxxxxxxxxxxxx xxxx než 150 xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx kolonie x xxxxxxx xxxxxxx 0,5 xx, x xxxx xxx sraženiny xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.6.2 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx kolonie necharakteristický xxxx (xxxx. xxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxx tvar xxxxxxxx xxxxxxxx x charakteristickým xxxxxxxx), provést xxxxxxxxxxx xxxx (6.7).
6.7 Xxxxxxxxxxx xxxx
Xxxxx údajů v xxxx 6.6.2 xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxx (xxxx. 3 xx 5) xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xx se pomocí xxxxxxxx xxxxx (4.1.6), xxxxxxxx zkumavky xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx s xxxxxxxxxxxx zelení (5.2). Xxxxxxxxx zkumavky 24 ± 2 hodin xxx 30 ± 1 °X.
Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx v Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx.
7. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxx výsledky xxxxx xxxxxxxxxxxx maximálně 150 kolonií.
7.2 Pokud xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx základě xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx potvrzených xxxxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií.
7.3 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 ml xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxx xxxxxx vzorce:
ΣC / x
xxx:
ΣX je xxxxxxx xxxxx xxxxxxx koliformních xxxxxxxx (7.1 x xxxxxxxxxxx xx 7.2), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku xxxxx (6.3).
x je xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (6.3) x xxxxxxxxxxx (3 xx).
Xxxxx se xxxxxxxxxx xx dvě xxxxxx xxxxxxx, pokud xxxxxxxx xxxx než 100 xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, zaokrouhlit tak, xxx xxxxxxxx číslice xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx než 150 xxxxxxx, xxxxx výsledek xxxx "odhadovaný xxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií xx 1 xx".
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx nejsou x xxxxxxxxx.
XXX. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Xxxxxxxxxxxxx metoda
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx postup xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup xxx xxxxxxxxx počtu somatických xxxxx x xxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxx xxx stanovení xxxxx buněk xx xxxxxx mléka xx xxxxxx kalibrace x xxxxxxxx xxxxxxxxxx fluoro-opto-elektronické xxxxxx (xxx X.1).
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, například xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx jádra xx xxxxx zřetelně xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
3. Xxxxxxx
Xxxxxx 0,01 xx xxxxx xx 1 xx2 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxx počet xxxxx xx 1 xxxxxxxx.
4. Xxxxxxx
Xxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx čistoty x.x..
Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxx xxxx |
0,6 x |
|
Xxxxxxx – 99 % |
54 xx |
|
1,1,1-xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx |
40 ml |
|
Ledová xxxxxxxx xxxxxx |
6 xx |
Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx je xxxxxxxx. Příprava x xxxxxxxxx se xxxxx xxxx uskutečnit x xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx x baňce xxxxxxx x 1,1,1-xxxxxxxxxxxxx xxxx tetrachlorethan x xxxxxx xx xxxxx xxxxx na 60 xx 70 °C. Xxxxxx methylenovou xxxx, xxxxx xxxxxxxxx, 12 xx 24 xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 4 °C x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxx filtr o xxxxxxxxx xxxxxxxxx pórů 10 xx 12 xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx láhvi. X případě xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx přefiltrovat.
5. Přístroje x pomůcky ze xxxx
5.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 500 × xx 1000 ×
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 0,01 ml x přesností xxxxxxx ± 2 %.
5.3 Xxxxxxxx sklíčko x xxxxxxx 20 mm × 5 xx xxxxxxxxxx xxx tenkou xxxxxx xxxx standardní xxxxxxxx sklíčko a xxxxxxx 20 × 5 mm xxx xxxxxx xxxxxx.
5.4 Xxxxxxxxxxxx xxxxx deska (30 °X xx 50 °X) pro xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5 Xxxxxxxxxx (xxx) pro xxxxxx xxxxx xxxxxx.
5.6 Xxxxx xxxxx, nastavitelná xx 30 xx 40 °X xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
5.7 Xxxxxxxx xxxxxxx x mikrometrickou xxxxxxxx po 0,01 xx.
6. Postup
6.1 Vzorek xxxxx
Xxxxxx mléka xxxx xxx xxxxxxxx do xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx teplota xxxxxx xxxxxxxxx 6 °X. Vzorek xxxxx xxx xxxxxxx.
6.2 Příprava xxxxxx x xxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx (5.6) xx 30 xx 40 °X. Xxxx řádně xxxxxxxxx. Zchladit xx xxxxxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx mikrostříkačka (5.2), například 20 °X.
6.3 Předběžné ošetření xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxx, kde xxxx xxxxxxxx před xxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx (5.2) xxxxxxx 0,01 xx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx, jak xx uvedeno xxxx. Xxxxxxx xxxxxxx vnější xxxxxx stříkačky, která xxxxxx xx styku x xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) x xxxxxxx xxxxxxxxx obvod xxxxxxxxx (20 xx × 5 mm). Xxxx xx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Nechat xxxxxxx tenkou vrstvu xx xxxxxxxxxxxx vyhřívací xxxxx (5.4) xx xx úplného xxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx.
6.5 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx 10 xxxxx xx barvícího xxxxxxx (4). Sušit x, pokud xx xx xxxxxxxx, vysoušení xxxxxxxx ventilátorem (5.5). Xxxxxxx xxxxx vrstvy xx xxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx zcela nesmyje. Xxxxx xxxxx x xxxxxxx tak, xxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx.
6.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (500 × xx 1000 ×) xxxxxx xxxxxx mikroskopického xxxx (5.7).
7. Xxxxxxxx x xxxxxxx
7.1 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxxxxxx (5.1). Xxxxx xxxxxxxx buněk xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx, x xx xxxxxx jádra, xxxxx jsou jasně xxxxxxxxxxxx a x xxxxx je x xxxxxxxxxxxxxx poli xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxx nebo xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxx, které xxxx xxxxxxx xxxxx x okrajových xxxxx xxxxx vrstvy. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxxxx výsledků xxxx xxx xxxxxxxxxxxx nejméně xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx. Počítání xxx také xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx takovým xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
7.2 Stanovení xxxxxxxxxxx xxxxx buněk, xxxxx se xxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx x xxxx, xx počítání somatických xxxxx xxx mikroskopem xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxx standardizaci xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx počítání, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx vyšší xxx xxxxxxxx koeficient xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx vzorek xxxxx x obsahem 400000 xx 600000 buněk/ml xx xxxxx překročit 5 %.
Xxxxx somatických xxxxx, které xx xxxxx x xxxxxx xxxxxx spočítat, xxxx xxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 400, xxx xxxx xxxxxxx kritérium xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
X = X = s2,
kde:
M xx xxxxxxx xxxxxxx
X xx xxxxxxx
x xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx:
XX = x × 100 % / X xxxx XX = 100 % / x&xxxx;xxxx XX = 100 % / OBR
M (xxxxxx) představuje xxxxx xxxxxx (xxxxx), které xxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxx 400 xxx XX = 5 %).
7.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx faktoru
Při xxxxxxx 0,01 ml xxxxx se pracovní xxxxxxx xxxxxxxx podle xxxx 7.3.1 xxxx 7.3.2.
7.3.1 Počítání xxxx xx xxxxx vrstvě
Délka xxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx, je 5 xx. Šířka xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxx xx stanoven podložním xxxxxxxx x mikrometrickou xxxxxxxx (5.7).
Xxxxxxxx faktor = 20 × 100 / x × x
xxx:
x je xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx pole x xx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx sklíčkem x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7)
b xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
7.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xx střední xxxxxxx tenké xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx
xxx:
x xx průměr xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7)
s xxxxxxx xxxxx spočítaných polí.
7.4 Xxxxxxx xxxxxx xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xx xx xxxxx, xx počet xxxxxxxxxxxx somatických xxxxx (7.1 x 7.2) xxxxxxxx xxxxxxxxx faktorem (7.3).
7.5 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxx 7.2) xxxxx xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxxxxxx postup, který xx může xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxx X.1) xxxxxxxx pro xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxx xxxxx x syrovém xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo bez xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. Definice
Pro xxxxx postup se xxxxxxxxxxx xxxxxxx rozumějí xxxxxxx, které xxxx x důsledku barvení xxxxxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxxxx fluorescence.
3. Princip
Část xxxxxx (xxxxxxxxx 0,2 xx) xx důkladně xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Část xxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xx xxxxx tenké xxxxxx xx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx jako xxxxxxxx sklíčko.
Každá xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx.
4. Xxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxxxx čistoty p.a.. Xxxxxxx xxxx je xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx, xxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxx čistoty.
4.1 Xxxxxxx roztok
Složení
|
Hydrogenftalat draselný |
51,00 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxx |
13,75 x |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx(xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % objemové |
10 ml |
|
pH 5,7 xx 5,9. Xxxxxxx vodou xx 10000 xx. |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx.
4.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (zásobní roztok)
Složení
|
Ethidiumbromid |
1,0 x |
Xxxxxxx vodou xx 1000 xx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx vodě. Skladování xx xxxxxxxxxxxx uzavřené xxxxxx chráněné xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx xxxxxx)
Xxxxxxx 20 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.2) x xxxxxxxx roztokem (4.1) tak, xxx xx xxxxxx xxxxx 1000 xx. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx používán více xxx xxxx dní.
4.4 Xxxxxxx roztok
Složení
|
Tlumivý xxxxxx (4.1) |
10 ml |
|
Polyethylenglykol-mono-p(1,1,3,3-tetramethylbutyl)-fenylether (například Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 xx |
|
Xxxxxxx x 25 % xxxxxxxxxx |
25 ml |
Doplnit vodou xx 10000 ml
Příprava:
Smíchat xxxxxxxxxx složky. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx překročit xxxxxx xxx.
5. Xxxxxxxxx x pomůcky ze xxxx
5.1 Xxxxxxxx zařízení xxxxxxxxx xx principu xxxxxxx fluorescence.
Poznámka:
Zařízení xxxx xxx xxxx použitím xxxxxxxxxxx. Xxx xx xxxxxxx vztah mezi xxxxxxx částic, které xx xxxx xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx provede xxxxx xxxxxx výrobce xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X).
5.2 Vodní xxxxx, x xxxxxxxxx xxxx, nastavitelná xx 40 ± 1 °X.
5.3 Zkumavka, x xxxxxxx uzávěrem, xxxxx xxx 15 xx.
6. Xxxxxx xxxxx
6.1 Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx (5.3). Xxxxx vzorek nebyl xxxxxxxx konzervován, xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxxx 24 xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx obsah xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx nízký. Skladovací xxxxxxx xxxxx překročit 6 °X.
6.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xx 24 xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
6.2.1 Xxxxxxxx konzervace xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx konzervačních prostředků:
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
xxxxxxx koncentrace xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx být xxxxx xxx 0,6 x xx 100 xx. Xxxxx konzervovaný xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx při xxxxxxx 6 xx 12 °X;
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx vzorku xxxxx xxx vyšší xxx 0,2 x xx 100 xx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 72 xxxxx při xxxxxxx 6 xx 12 °C;
- xxxx xxxxx:
xxxxxx může být xxxxxxxxxxx xxxxxx sodným x xxxxxxx xxxxxxxxxxx 0,024 x/100 ml, xxxxx je vzorek xxxxxxxx xx xxxxxxx 6 až 12 °X xxxxx po xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx 48 xxxxx po jeho xxxxxx;
- xxxxxxxx:
xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx bronopolem x konečné xxxxxxxxxxx 0,05 g/100 ml, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xx teplotu 6 až 12 °X xxxxx xx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx 72 xxxxx po xxxx xxxxxx.
6.2.2 Xxxxxx, který xxx xxx konzervován xxxxxxxxx boritou, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx 48 xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxx xxx x vzorky xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx být xxxxxxxx xxxxxx podmínky xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx vod.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx, xxxxx se xx xxxxxxxx, xx xx nadojení skladuje xxxxxxx 24 hodin xxx xxx 2-6 °X. Xxxxxxxx vzorků x xxx xxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nedoporučuje, xxxxx xxxxxxxx mohou xxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx měl být xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx dvojchromanem xxxxxxxxx (viz 6.2.1).
7.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx ošetřený xxxxxx (xxx 7.1) xxxx xxxxxxxxxx vzorek xxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx (5.2) xx xxx 40 °X. Xxxx skladovat xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.1) xx 15 minut xx xxxxxxxx ohřívání (xxx 7.2). Bezprostředně xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx se xxxxxxx xx nejlepšího xxxxxxxxxxx rozdělení xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx vzorku xxxx xxxxxxxxxxx provedeny x xxxxxxxx.
8. Spolehlivost
Výsledky xxxxxxxxxxxxxxx (x) x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) xxxxxxxxxxxxx kruhových xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxx, xxxxx xxxx x dispozici na xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxx:
(1) xxxxx xxxxx mezi 400 000 xx 500&xxxx;000 xxxx:
- xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxxxxxxxx:
xx = 20000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx variačnímu xxxxxxxxxxx 5–4 %)
- směrodatná xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx:
xX = 40000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx variačnímu xxxxxxxxxxx 10–8 %)
9. Xxxxxxxx správnosti
Kontrola xxxxxxxxxx xx xxxxxxx pomocí xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxx počítáním xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx národní xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
XXXX. XXXXXXX ANTIBIOTIK X XXXXXXXXXXX
XXXXXXX X XXXXXX XXXXXXX
Xxxx kapitola xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx postup xxxxxxxx:
X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, který xxxxxxxx xxxxxx vzorky xxxxx, xxxxx obsahují xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx založeny xx xxxxxxx Bacillus xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx, XXXX 10149, xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxx reprezentativní xxx takovéto xxxxx.
X. Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx se musí xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x stanovení jeho xxxxxxxxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, jejichž xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx než xxxxxx uvedené x xxxx tabulce:
Detektovatelné koncentrace xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx [1]
|
Xxxxxxxxx testu |
||
|
Negativní |
Pozitivní |
|
|
Benzylpenicilin |
0,002 |
0,006 |
|
Ampicilin |
0,002 |
0,005 |
|
Cloxacillin |
0,015 |
0,035 |
|
Nafcilin |
0,006 |
0,011 |
|
Tetracyklin |
0,10 |
0,40 |
|
Oxytetracyklin |
0,20 |
0,45 |
|
Chlortetracyklin |
0,15 |
0,50 |
|
Chloramfenikol |
7 |
15 |
|
Dihydrostreptomycin |
4 |
13 |
|
Neomycin |
1 |
22 |
|
Kanamycin |
9 |
28 |
|
Bacitracin |
0,06 |
0,14 |
|
Erythromycin |
1 |
2,25 |
|
Rifamycin |
0,01 |
0,14 |
|
Diafenylsulfon |
0,01 |
0,1 |
|
Sulfametazin (Xxxxxxxxxxxx) |
0,5 |
1 |
|
Xxxxxxxxxx extrakt |
2 x |
|
|
Xxxxxx |
5 x |
|
|
Xxxxxx extrakt |
1 x |
|
|
Xxxxxxx xxxxx |
5 x |
|
|
Xxxx |
10–15 x |
|
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxx. Xx občasného xxxxxxx uvést xx xxxx. Xxxxxxx pH xxx, aby po xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 při 25 °X.
Xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxxxx xxxx xx 100 xx do xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx šikmý xxxx.
Xxxxxxxxxxxx 15 minut xxx 121 ± 1 °X.
5.1.2 Agarové xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxx xxxxx |
2 g |
|
Agar |
15 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxx trimethoprimu xxxx xxxxxxxxxxxx (viz 5.1.3) |
10 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xx občasného xxxxxxx uvést xx xxxx. Xxxxxx trimethoprim xxxx tetroxoprim x xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X. Xxxxxxx xX, aby xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.1.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxxxx |
5 mg |
|
nebo Xxxxxxxxxxx |
30 xx |
|
96 % Xxxxxxx |
5 xx/30 xx |
|
Xxxxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x ethanolu xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (5 nebo 30 xx) x xxxxxxx xxxxx.
5.1.4 Xxxxx roztok
Složení:
|
Kvasnicový xxxxxxx |
0,75 mg |
|
Glukóza |
5,0 xx |
|
Xxxxxxxxx xxxxx |
8,0 mg |
|
Bromkresolová xxxxxx |
0,025 x |
|
Xxxx |
50 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx ve xxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xx xx nutné, xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx dostupný x xxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxxxx
5.2.1 Xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x 60 μx/xx (100 XX/xx), x xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx benzylpenicilinu xxxxxxx xxxx draselného xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vodě.
5.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx vložením 1,25 xx xxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2.1) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xx 1000 xx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx obsahuje 0,075 μx penicilinu/ml (= 0,125 XX/xx).
5.2.3 Xxxxxxxxx 75 xx standardního xxxxxxx xxxxxxxxxx obsahujícího 0,004 μx xxxxxxxxxx/xx (= 0,0067 IU xxxxxxxxxx/xx) přidáním 4 xx pracovního roztoku xxxxxxxxxx (5.2.2) xx 71 xx mléka xxx xxxxxxxxxxx látek (5.3).
5.2.4 Xxxxxxx penicilinu xxxxxxx xxxxx xxxx 5.2.1 xx 5.2.3 xx xxxx být xxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxx.
5.3 Xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx inhibičních látek xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (10 % x/X) xx xxxx, xxxxx xxxx předtím xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx čerstvého xxxxx, xxxxx xxxx otestováno x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx; xxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx x zahřívá xx xxxxx xxxxxx na 100 °X, xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx 0 °X až 6 °C xx xxxx nejvýše xxxxxxx xxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx organismus
5.4.1 Xxxx testovací xxxxxxxxxx xx xxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx var. xxxxxxxxxxxx XXXX 10149 Kmen XXXX 10149 xx xxxxxxxxx x kmenem X 953.
5.4.2 Připravit xxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx testovací xxxxxxx. Xxxxxxxxx kultura se xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx agaru (5.1.1). Xxxxx agar se x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx kultura, xxxx se xxxxxxx xxxxxxxx 48 xxxxx xxx 63 ± 1xX. Xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx měsíců v xxxxxxxxxx xxx 0 xx 5 xX.
5.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxx)
5.5.1 Xxxxxxxxx xxxxxxx 20 ml xxxxxxx xxxxx (5.1.1) do xxxxxxxx Xxxxxxx misky (4.2.2) a xxxxxx xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5.2 Sterilní xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 xx sterilní xxxxxxxxxxx xxxx xx zkumavky xx xxxxxxx kulturou (5.4.2) x xxxxx xxxxxxxx smyčkou xxxxx xx xxxxxxx agaru. Xxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxx 0 xx 5 °X x použije xx xx 36 xxxxx.
5.5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 ml xxxxxxxx spór (5.5.2) xx Xxxxxxx xxxxx (5.5.1) x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx zahnuté skleněné xxxxxxx. Xxxxxxxxx 16 xx 18 xxxxx xxx 63 ± 1 °X (4.1.1).
Při xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (5.4.2) xxxx xxxxxxx xxxxxx 36 xxxxx xx očkování mělo xxxxxxx nejméně xxxxxxx x xxxxxxx intervalu xxxxxxxxx 36 xxxxx.
5.5.4 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 10 ml xxxxxxxxxxx vody xx Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (5.5.3) x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx z povrchu.
Přenést xxxxxxxx spór do xxxxx (4.2.3) xxxxxxxxxx 250 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xx měly xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxx 0 až 6 °C.
5.5.5 Po 16xx až 18xx xxxxxxxx inkubaci xxx 63 ± 1 °X xx agarovém xxxxx by suspenze xxxx měla xxxxxxxxx xxxxx životaschopných mikroorganismů xxxx 5 a 10 xxxxxxx na xxxxxxxx. Suspenze xxxx xxxx vykazovat xxxxxxxxxx xxxxxxxx, x pokud xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx xx xx nahradit novou xxxxxxxx připravenou ze xxxxxxx kultury (5.4.2).
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx
5.6.1 Nechat xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (5.1.2), poté xxxxxxxx xx 55 °X.
5.6.2 Xxxxxx část xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx (5.5.4) x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (5.6.1) xx zkumavce nebo x lahvičce. Xxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx (4.2.6) 0,3 xx naočkovaného xxxxx (5.6.2), xxx xx xxxxxxxxx 5 mm xxxxxx, xxxx uzavřít xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxx, x xxxxxxx ampule, xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx agarové xxxxxx ztuhnout, poté xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx 12 xxxxx xx svislé xxxxxx.
5.6.4 Zkumavky/ampule xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxx, ale xxxxx xxx xxxxxx skladovány xxxxxxx xxxxxx xxx 0–6 °C, pokud xxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx ochlazeny.
6. Xxxxxx
6.1 Vzorky xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx do 24 xxxxx xx odběru, x xx té xxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxx 0-5 °X. Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx vzorky xx 24 xxxxx, xxxx by xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (−30 °xx - 15°X), aby xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx penicilinu.
6.2 Xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx identifikovat xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx (5.6). Xxxxxxxxx víčko xxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx stojánku (4.1.3) xxxxx požadovaný pro xxxxxx a xxxxx (5.2 a 5.3).
6.3 Xx xxxxx xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxx 50 xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (5.1.4).
6.4 Xxxxxx mléka xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx (4.1.4) xxxxxxx 0,1 xx xxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx stříkačku.
6.5 Xxxxxx xxxxx xxxx 6.4 xx opakuje xxxxxxx xxxxxxxx za použití xxxxxxxxxxxx xxxxxxx penicilinu xxxxxxxxxxxx 0,004 μx/xx (= 0,0067 XX/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx (5.2.3).
6.6 Xxxxxxxx xxxxx bodu 6.4 xxxxxxxx xxxxxxx způsobem xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx bez xxxxxxxxxxx xxxxx (5.3) xxxxxxx xxxxxx mléka.
6.7 Xxxxxxx zkumavky/ampule a xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx 2½ xx 2¾ xxxxxx xx xxxxx xxxxx x teplotou 63 ± 1 °X (4.1.2).
6.8 Vyjmout xxxxxxxx se zkumavkami/ampulemi x vodní lázně.
6.9 Xxxxxxxxx barvu xxxxxxxxx xxxxx (xxx 7).
7. Xxxxxxxxxxxx výsledků
7.1 Purpurové xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx zkumavkách/ampulích se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xx vzorku x xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx koncentraci "xxxxx xxxxxxxxx" uvedené x xxxxxxx xx xxxxxx 39. Pokud xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx roztokem xxxxxxxxxx (6.5) xxxxxxx purpurové, xxxxxxx médium je xxxxxxxxxx citlivé.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx zbarvení xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx vzorkem xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxx koncentracemi xxxxxxxxx xx xxxxxx 39.
7.3 Xxxxx zabarvení xxxxxxxxx xxxxx ve zkumavkách/ampulích xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek xxxx xxxxxx mléka xxxxxxx na nepřítomnost xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
7.4 Pokud xx xxxxxxxxx zabarvení xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, zkumavky/ampule xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x vzorky musí xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x čerstvě xxxxxxxxxxx testovacím xxxxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Potvrdit xxxxxxxx všech xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx x 7.1 x 7.2 xxxxx metody "X".
Xxxxx je xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx, aby xx zabránilo poškození xxxxxxxxxx.
X. Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx koncentrace
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx konfirmační xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx antibiotik, xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx ve xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx (A.7.1) nebo xxxxxxxxxx xxxxxx (X.7.2).
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx
Xxx A.1.
2. Definice
2.1 Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx inhibiční xxxx nejméně 2 xx xxxxx xxxxx.
2.2 Xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx antibiotika, včetně xxxxxxxxxxx (2.1), x xx xxxxxxx byla xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (beta-laktamáza), xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxx menšího xxxxxxx xxx xx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx včetně xxxxxxxxxxx.
2.3 Xxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx (2.2) xxxxxxxxxxxx, inhibiční xxxxxx xx xxxxxx xxxxx není xxxxxxxxx, xxx xxxx xx xxx xxxx reziduum [xxx xxxxxxxx 85/397/EHS, xxxxxxx X, xxxxxxxx XX, X.1.x) a 2x)].
Xxxxxxx polosyntetické xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxx jsou xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx jako xxxxxxxxxx (viz 7.3).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx disk xxxxxxxxx mlékem, xxxxx xx má vyšetřit, xx xxxxxx xx xxxxxx agarového xxxxx xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx narušuje agarové xxxxxx. Xxxx zóna xxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxx x xxxxx xxxxxxxx látky xxxxxxxxx xxxxx pro xxxx. Xxxxxxxx čiré xxxx mimo jiné xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx.
4. Xxxxxxxxx, xxxxxxx ze xxxx a xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxx X.4.1.
4.1.2 Xxxxx xxxxx, nastavitelná xx 80 ± 1 °C.
4.2 Pomůcky xx skla
Viz X.4.2.
4.3 Xxxxxxxx xxxxx, neobsahující xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx 9 xx 13 xx, xxxxxxx xxxxxxxxxx asi 130 xx xxxxx (nejlépe xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx).
5. Xxxxxxxxxx xxxxx, standardní xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx testovací xxxxxxxxxx xxx.
Xxxxxxxx xxxxxx kultivačních xxxxx xxxx být xxxxxx xxx bakteriologické xxxxx. Xxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxx voda xx skle nebo xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1 Kultivační xxxxx
5.1.1 Xxxxx agar (X.5.1.1)
5.1.2 Xxxxxxxxxx médium xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 g |
|
Trypton |
5 x |
|
Xxxxxxx |
1 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx (X.5.1.3) |
10 xx |
|
Xxxx |
10–15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx agaru |
|
Voda |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxx zahřívání x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxx, xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xX, xxx xx sterilizaci xxxx 8,0 + 0,1 xxx 25 °X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X.
5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x mléku
Viz X.5.2.
Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek (8) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (X.5.3) x těchto xxxxxxxxxxxxx:
x) 0,004 μx/xx (0,0067 XX/xx)
x) 0,006 μx/xx (0,01 IU/ml)
c) 0,03 μx/xx (0,05 XX/xx)
x) 0,06 μg/ml (0,01 XX/xx).
5.3 Roztok xxxxxxxxxxxx
5.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx penicilinázy (beta-laktamázy) xx sterilní xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 1000 X/xx. Tento roztok, xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, je xxxxx skladovat xx xxxxx týdny xxx 0 °C xx 5 °X.
Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx účely xxxxxx postupu xx xxxxxxxxxxx, že deset xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx 0,6 μx (= 1 XX) xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx s neznámou xxxxxxxxxxx xx nutné xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxx platí. V xxxxxxx xxxxxxxx proto xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.3.2 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx možné xxxxxx běžně dostupné xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx zjistí, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxx X.5.4.
5.5 Xxxxxxxxx kultura (xxxxxxxx xxxx)
Xxx A.5.5.
5.6 Xxxxxxxx Petriho xxxxx
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx látek (5.1.2), xxxx xxxxxxxx xx 55 oC.
5.6.2 Do xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx (5.5) k nezbytnému xxxxxxxx xxxxx agarového xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx látek (5.1.2), x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx kolonií x naočkovaném xxxxxxx xxxxx, a xxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx (X.4.2.2), xxxxxx xxxxxxx xx 55 °X, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx se xxxxxxxxx 0,6 až 0,8 xx xxxxxx. Xxx Xxxxxxx misku x xxxxxxxx xxxxxxx 140 xx je třeba xxx 15 ml xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxxx 0,8 xx vrstva.
5.6.4 Xxxxxxx Xxxxxxx xxxxx na xxxxxxx, xxxxxxxxx povrch, xxxxx vodorovnost se xxxxx vodováhou, xxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx víčka xx xxxxx x xxxxxxx xx xxxx vzhůru, xxx se xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
5.6.5 Takto připravené Xxxxxxx misky se xxxxxxx xxxxxxx ještě xxx xxx, xxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx zataveného xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx a xxxxxxxxxx xx xxx 5 °X.
5.6.6 Xxxxxxx xxx Xxxxxxx misek, xxx xxxx xxxxx identifikace xxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 X xxxxxx x pozitivním xxxx xxxxxxxxx výsledkem xxxxx "xxxxxx X" (X.7.1 x X.7.2) xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx penicilinu.
6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx 10 xxxxx na 80 ± 1 °C, xxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx termolabilních xxxxxxxxxxx xxxxx.
6.1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxx 10 ml xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx hrdlem. X xxxxx přidat xxx 0,4 ml xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.3) x xxxxx xxxxxxxxx.
6.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxx látek
6.2.1 Xxxxxxx papírový xxxx (4.3) xx xxxxxx xxxxx (6.1.2) xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx. Odstranit xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx disku x xxxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx na xxxxxx Xxxxxxx xxxxx (5.6) x lehce přitlačit xxxxxxxx.
6.2.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx mléka xxxx xxx vzdáleny xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 20 mm x xx xxxxxx xxxxxxx 10 xx.
6.2.3 Xxx kontrolu xxxxxxxxxx xx xxxxx (4.3) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.2) musí xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx napuštěné vzorky xxxxx x xxxxxx xxxxxxx 2 % xxxxx xxxxx se xxxxxx mléka; při xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx nejméně pět xxxxxxxxxxxx xxxxx.
6.2.4 Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx všech xxxxx xx agarové xxxxxx x xx xxxxxx identifikaci, obrátit xxxxx xxxx xxxxxx x nechat xx xxxxxxxxx 2,5 xx 5 xxxxx xxx 63 ± 1 °X.
6.2.5 Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx zdroji světla, xxx bylo xxxxx xxxxxxxxx xxxx inhibiční xxxx xxxxx papírových xxxxx. Čiré zóny xx xxxxx.
6.2.6 Standardní xxxxxx penicilinázy (6.2.3) xxxx xxxxx disku xxxxxxxx nejméně 2 xx zóny.
6.2.7 Xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx vzorky mléka, xxxxxxx velkost xx xxxxxx nebo xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx x 6.2.6, ukazují xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx v testovacím xxxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx inhibičních xxxxx
6.3.1 Xxxxxx 6.2.1 se xxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx zahřátého mléka (6.1.2) x se xxxxxxx xxxxxxxxx penicilinázou (6.1.3). Xxxxxxx přidání xxxxxxxxxxxx do 10 xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx penicilinázou (5.3.2) x xxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx.
6.3.2 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx roztoků penicilinu xxxxxxxxx x 5.2 x) xx x).
6.3.3 Xxxxxxxxx průměrný xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxx mléka, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x pro xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 2)
7.1 Xxxxx xx xxxxx xxxxx napuštěném xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx žádná xxxx xxxx, xxx xxxx xxxx xx xxxxxx kolem xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx mléka, xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxx xxxx xxxxx xxxxx napuštěném xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2x)), inhibiční látka xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx koncentraci xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx rovné xxxx xxxxx xxx 0,004 μx/xx.
7.2 Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx čiré xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx hodnotě průměru xxxx xxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx inaktivovat xxxxxxxxxxx penicilinázy použité x xxxxx postupu.
7.3 Xxxxx xx průměrná xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx kontrolní penicilinázu xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx průměru xxxx xxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx mléka xxxxxxxxx xxxxx 6.1.2, xxxxxx xxxxx obsahuje xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx nelze xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v tomto xx. Syntetické peniciliny, xxxx xx cloxacillin xxxxx, xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxx tudíž xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, inhibiční xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx postupy.
8. Stanovení xxxxxx penicilinu
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx může xxx xxxxxxxxx buď xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, nebo xxxxxxx xx xxxxxxx velikostí xxx xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxxxx x xxxxx (5.2 x) xx x)).
8.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx x tomu, že xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx10 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, standardní xxxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx papír xxxxxxxxxx koncentrací penicilinu xx pořadnici x xxxxxx xxx xx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx se xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x zakreslí xx xxxxxxxxxx xxxxxx.
8.3 Výpočet
Koncentrace xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx je xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx. Pro xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx pětkrát větší xxx poloměr xxxxx.
9. Xxxxxxxxx výsledků
9.1 Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx než 0,004 μg/ml (nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx jiných xxx xxxxxxxxx.
9.2 Opakovatelnost (x) x xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X)
Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx x jsou xxxxxxxxxx v důsledku xxxxxxx standardu xxx xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
X souladu x xxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/XXX, přílohy X, xxxxxxxx VII xxxx 2, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Definice
Vyšetření se xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx z xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx patogenům. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx X, xxxxxxxx XXX xxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx jde x xxxxxxxx kolonií xxx 30 °C x 21 °C, xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx nezbytný xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxx xx xxxxxxx spojitost xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxx
Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx vydávání xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx patogenních mikroorganismů xx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx přijaté xx xxxxxxxxxxx úrovni.
4. Xxxxxx x xxxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx výsledek xxxxxxxx takto:
Počet mléka xx xxxxxxxx, xxxx "xxxxxxxxxx" xx "xxxxxxxxxxxx" x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, který xxxxxxxx xxxxxxx postup. Xxxxxx xxxx jasně xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.