Xxxxxxxxxx Xxxxxx
xx dne 14. xxxxx 1991,
xxxxxx xx stanoví xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx mléka x tepelně xxxxxxxxxx xxxxx
(91/180/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Smlouvu x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x ohledem xx směrnici Xxxx 85/397/XXX xx dne 5. xxxxx 1985 x hygienických a xxxxxxxxxxxxx otázkách xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx Společenství [1] xxxxxxxxx pozměněnou xxxxxxxx 89/662/XXX [2], x zejména na xx. 10 xxxx. 2 xxxxxxx směrnice,
vzhledem x tomu, xx xxxxx xx. 10 xxxx. 2 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxx kontrolu dodržování xxxxx xxx syrové xxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxx xxxxxx mléko je xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx, bodu xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxx pasterované xxxxx xx xxxxxxxx stanovit xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx patogenů, xxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií, xxxxxx mikroorganismů, nepřítomnosti xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx antibiotik x xxxx xxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx a XXX xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, nepřítomnosti xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx stanovit xxxxxxxxxx xxxxxx analýzy x xxxxxxxxx, xxxxx mají xxxxxxxx dodržování určitých xxxxx; xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x prošetřování xxxxxxxx, xx kterých xx xxxxxxxxx xxxxxxx metody xxxxxxx x xxxxxxxxx; xx v očekávání xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xx xx, xxx xxx xxxxxxxx norem xxxxxxxx 85/397/XX byly xxxxxxx xxxxxx rutinní xxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx xxxxxxxxx referenčních xxxxx analýzy x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx postupů xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx výsledků;
vzhledem x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x souladu xx xxxxxxxxxxx Stálého veterinárního xxxxxx,
XXXXXXX TOTO ROZHODNUTÍ:
Xxxxxx 1
Xxxxxxxxxx postupy xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxx mléko xxxx tyto:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °C,
- xxxxxxxxx xxxxxx somatických xxxxx,
- xxxxxxx antibiotik x xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 2
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx mléko xxxx tyto:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- stanovení xxxxxxxx fosfatázy,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 21 °C,
- xxxxxxxxx xxxxxx koliformních xxxxxxxx – počítání xxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx,
- detekce xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Článek 3
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxx XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx:
- stanovení xxxx mrznutí,
- xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganizmů xxx 30 °C,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx.
Článek 4
Použití xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx musí xxxxxxx podle pravidel xxxxxxxxxxx v příloze X.
Článek 5
Referenční xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx 1, 2 a 3 jsou popsány x příloze XX.
Xxxxxx 6
Xxxx xxxxxxxxxx xxxx přezkoumáno xx 31. prosince 1992, xxx xx zohlednil xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx znalostí.
Xxxxxx 7
Toto rozhodnutí xx určeno členským xxxxxx.
V Bruselu xxx 14. xxxxx 1991.
Xx Xxxxxx
Xxx Mac Xxxxxx
xxxx Xxxxxx
[1] Úř. xxxx. X 226, 24.8.1985, x. 13.
[2] Xx. věst. X 395, 30.12.1989, x. 13.
PŘÍLOHA X
XXXXX
X. Xxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Odběr xxxxxx xxxxxxxx x tepelně xxxxxxxxxx mléka
I. XXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxx
Xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx činidel, xxxxxxxxx a pomůcek, xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x testování. Příslušné xxxxxx xxxxxxxxx států x laboratoře pověřené xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxx
2.1 Voda
2.1.1 Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxxxx účely xxxx být xxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx nebo jinak xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx popsaných xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.1.2 "Xxxxxxxxxxxx" nebo "xxxxxxx" (bez dalšího xxxxxxxxx) xx xxxxxx "xxxxxxxxxxx xx xxxx" xxxx "xxxxxx vodou".
2.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxx není xxxxxxxxx xxxxx, všechny xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Přístroje a xxxxxxx
3.1 Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx týká xxxxxxxxx x pomůcek xx xxxxxxxxxx xxxxxxx x se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.2 Xxxxxxxxxx xxxx
"Xxxxxxxxxxxx xxxxxx" xx xxxxxx xxxx x přesností xxxxxx xx 0,1 xx.
4. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx není xxxxxxxxx xxxxx, výsledek xxxxxxx xx zprávě o xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxx průměrem xxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (5.1) xxx xxxxxxxxxx metodu. Xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx opakovatelnosti xxxxxxx, xxxx se musí xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
5. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: opakovatelnost x reprodukovatelnost
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx uvedená pro xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx:
5.1.1 Opakovatelnost (x) xx hodnota, xxx xxxxxx se xxxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx mezi dvěma xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx byly získány xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx podmínek (xxxxxx xxxxxxxxx, stejný přístroj, xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx období).
5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) xx xxxxxxx, xxx kterou xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx samostatných xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx postupem x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx odlišných xxxxxxxx (xxxxx pracovníci, xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx x/xxxx xxxxx xxxx).
5.1.3 Xxxxx xxxx xxxxxxxxx jinak, hodnoty xxx kritéria xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x příslušných xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx 95 % xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx XXX 5725, xxxxx vydání, 1986. Xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxx xx používají xxx hodnocení xxxxxxx. Xxx xxxxxxx postupy xxxx xxxx pokusy, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx. X xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1.4 Kruhové xxxxx a xxxxxxxx xxxxxx by měly xxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx x souladu x xxxxxxxxxxxxx pokyny.
6. Xxxxxx o xxxxxxxxx
Xxxxxx x testování xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx výsledky. Xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxx xxxxx, nebo volitelné xxxxxxxxxxx x všechny xxxxxxxxx, které xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx x testování xxxxxxxx všechny informace xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
XX. XXXXX XXXXXX XXXXXXXX A XXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXX
1. Předmět x xxxxxx použití
Tento xxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx odběr xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx ošetřeného xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx použijí xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx a xxx xxxxxx a tepelně xxxxxxxx xxxxx skladované xx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx uvedené x bodech 2, 4.4, 5 a 6 xx xxxxxxx xxx odběr vzorků xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx.
2. Obecně
Odběr vzorků xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xxxx. xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx byli xxxx xxxxxxx vzorků xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx to xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx nezbytné, vyškolí xxxxxxxxxxx xxxxxxxx odběrem xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, aby xxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx reprezentativní x v souladu x celou xxxxx.
Xxxxx xx příslušné orgány xxxx xxxxxxxxx laboratoř xxxxxxxx za nezbytné, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxx, aby xxxxxxxxxxxx xxxxxx byla xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx
3.1 Obecné xxxxx
Xxxxxxxx pro odběr xxxxxx xxxx být xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx musí být xxxxxxxx x ohledem xx předpokládané xxxxxxx (xxxxxxxxxx, odběr xxxxxx, xxx.). Plunžry x xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx plochu povrchu, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výrobku xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx hloubky xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx 50 xx.
Xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxx být xxxxxxxx, xxxxxx xxxx x vhodného xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx při výrobě xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx (xxxxxx nádob x xxxxx) xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, která by xxxxxxxxx xxxxxxxx testů. Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxx xxxx xxx čistý, xxxxx, xxxxxx povrch xxx xxxxxx a xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx.
3.2 Vybavení xxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx pro xxxxx vzorků (včetně xxxxx) musí xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx 3.1 x xxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxx xx xxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx použije xxxxx xxxxxxxx, musí xxx xx xxxxxx xxxxxx vzorku vyčištěno x sterilizováno v xxxxxxx s xxxxxx xxxx požadavky, které xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx k xxxxxxxxx výsledků xx xxxx xxxxxxxx vzorků.
4. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx
4.1 Xxxxxx údaje
Bez xxxxxx xx testy, které xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxx musí xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx ručně, xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx musí xxx odebrán ihned xx xxxxxxxxxx, xxxx xx mléko ještě x xxxxxx.
Xxxxx xx x nádrže xxxxxxx xxxxxxx více vzorků xxxxx xxx různé xxxxx, xxxx první xxxx být xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx vzorku xxxx xxxxxxxxx potřebám xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxx, xxx byly xxxx xxxxxx téměř xxxxxxxx xxxxxxx x xxx xxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx testováním, xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxx xxxxx xxxxxx
4.2.1 Odběr xxxxxx x věder x xxxxx na xxxxx
X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx plunžrem ve xxxxx nebo konvi xxxxxx x dolů, xxxxxxx dbát na xx, xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxx se xx hrdle xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Vzorek, xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxx celou zásilku, xx xxxxxxx postupem xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.2 Xxxxx z xxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxx x xxxxxxxxxxx podniku
Míchat xxxxx mechanicky xxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx míchačky, xxxxxx ručně.
4.2.3 Xxxxx xxxxxx z xxxxx xxx
Xx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxx řádně xxxxxxxxxx, xxxx se xxxxxx xx xxxxx xxx. Za účelem xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx může xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx mechanické xxxxxxx. Xxxxx objem xxxxxxx, x xxx xx xx odebrat vzorek, xxxxxxxx kapacitu xxxxx xxx, odebrat xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx z xxxx xxxxxxx xxxxxxxx podle xxxx 4.2.4.
4.2.4 Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xx množství xxxxx, x něhož xx má xxxxxxx xxxxx xxxxxx, rozděleno xx xxxx xxxxx, x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxx x xxxxx nádoby nemusí xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx jednotlivé xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx v poměru x množství, xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx, xx které xxx každý xx xxxxxx xxxxxxx. Po xxxxxxxxxx xx odebere xxxxx (xxxx) xxxxxx (xxxxxx) x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
4.2.5 Odběr xxxxxx x xxxxxxx xxxxx – xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx
4.2.5.1 Xxxx xxxxxxx vzorků xx xxxxx xxxxxxx způsobem xxxxxxxx.
X xxxxxxxxxx obsahu xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx, cisternových kamionů xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx doporučuje xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.5.2).
Délka xxxxxxxxxx xxxxxx na době, xx xxxxxx bylo xxxxx x klidu. Xxxx xxx xxxxxxxxx, xx postup xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx x jednotlivých případů xx xxxxxx xxx xxxxxxx plánovaného xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx značně xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx odebraných xxx x xxxxxxx xxxxx xxxxx, nebo x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx mléka x xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx) xx xxxxxx, xxxxx xx rozdíl obsahu xxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx za xxxxxx xxxxxxxx menší xxx 0,1 %.
Ve xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxx x místě xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, které xxx xx xxxxxxxxxx není xxxxxxxxxxxxxxx pro xxxx xxxxx. Xxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxx vzorků x xxxxxxxxxxx xxxxxx. X případě odběru xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx mléka, xxx xxxx xxxxxxxxx reprezentativnost xxxxxx.
4.2.5.2 Promíchání xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx nádrží, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx do nádoby x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- vrtulí xxxx xxxxxxxxx poháněnou xxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx otvoru; xxxxxxxx xx ponořena x xxxxx,
- v xxxxxxx cisternových kamionů xxxx cisternových xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x čistým vzduchem. Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxx x objem xxxxxxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxx žluklé xxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx podle pokynů xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx příslušným xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrolám, xxxxx xxxxxxxxx odpovědný xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx odběru xxxxxx musí xxx xxxxxxx x cílem xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx mléka, z xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx,
- poměr xxxxxxxxxx přenosu (xxxxx xxxxxxx x minimálním xxxxxxx xxxxxx),
- schopnost xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx po xxxxxx promíchání.
Pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx může xxxxxxxxx xxxxxxxxx vnitrostátní xxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxx odebrány xxxxxx,
- minimální xxxxx xxxxxx,
- maximální xxxxxx,
- xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx nutné xxxxxxxx.
4.4 Odběr vzorků xxxxxxx ošetřeného xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxx x xxxxxxx ošetřené xxxxx xxxxxx x přímé xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx skládají x xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx, x xx, pokud je xx možné, xxxxx xx xxxxxxxxxx (x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx mléka x xxx xxxxxxxxx).
X xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx metodou XXX x xxxxxxxxxxxxxxx) se xxxxxxx takový počet xxxxxx, aby xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx být provedena, x xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx testovací xxxxxxxxxx xxxx podle xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
5. Identifikace xxxxxx
Xxxxxx xx měl xxx xxxxxxx identifikačním xxxxx, xxxxx umožňuje xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx příslušného xxxxxx (xxx bod 2).
6. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx přepravy x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx dodrženy x době xxxx xxxxxxx vzorků xxxxxx xxxxxxxxxx, x to xx xxxxxxx druhu xxxxx x testování, xxxxx xx xxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx toto:
- xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx je xxxxx xxxx xx to, xxx vzorky nebyly xxxxxxxxx nežádoucímu xxxxxxx x přímému xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx-xx xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx průsvitná, musí xxx skladován xx xxx,
- vzorky xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 0 xX xx 4 oC. Doba xxxx odběrem x xxxxxxxxxx xxxx být xx xxxxxxxxx a x žádném xxxxxxx xxxxx přesáhnout 36 xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 0 xX až 6 xX, xxxx-xx xxxx xxxx xxxxxxx x testováním xxxxx xxx 24 xxxxx,
- xxxxxx pasterovaného mléka xxxxxx xxx mikrobiologické xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx teplotách 0 xX až 4 xX. Xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx být xx xxxxxxxxx x x xxxxxx xxxxxxx nesmí xxxxxxxxxx 24 xxxxx,
- xxxx vzorky mléka xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx a pasterovaného xxxxx určené pro xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx musí xxx skladovány x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x doba xxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxx být xx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx preventivní xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx, jsou xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
XXXXXXX I
OBSAH
I. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx
XX. Stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxx
XXX. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 30 °X
X. Xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxx 21 °X
XX. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx – xxxxxxxx kolonií xxx 30 °X
XXX. Xxxxxxxxx xxxxxx somatických xxxxx
XXXX. Xxxxxxx antibiotik x xxxxxxxxxxx
XX. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx mikroorganismů
I. XXXXXXXXX XXXX XXXXXXX
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, syrového, xxxxxxxxxxxxx, XXX xxxxx xxxx sterilizovaného mléka xxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx), v němž xx termostatem xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx elektrickým xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx typ xx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx, xx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx odečet. Vzhledem x xxxx, xx xx xxxxx lišit xxxxx křivky bodu xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx, ale i xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx použitých xxx xxxxxxxxx, tento referenční xxxxxx vyžaduje použití xxxxxxxxx hledajících xxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxx lze xxxxxx xxx odhad xxxxxx xxxxxxx cizí xxxx x mléce xx xxxxxxxxxxx, že kyselost xxxxxx není xxxxx xxx 0,18 x xxxxxxxx xxxxxx xx 100 xx (xxx xxx 7.4).
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx v souladu x xxxxxxxx postupem x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxx (°X).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx v xxxxxxxxxx xx přístroji podchladí xx vhodnou xxxxxxx x mechanickou xxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, která xxxxxxx, xx teplota xxxxxx xxxxxxx až k xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xx kalibruje xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxx jako xxx xxxxxx mléka xxxxxxx xxxxxx odečty xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xx stupních Celsia.
4. Xxxxxxxxx x pomůcky xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, zejména:
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xx skládá z xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, termistorového snímače (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx jiného xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xx vzorky a xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx x xx xxxxxxxx na xxxxxx.
4.1.1 Xxxxxxxx lázeň
Je xxxxx xxxxxx dva xxxx chladicí xxxxx.
4.1.1.1 Xxxxxxx typ
Dobře xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx vhodnou xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx tak, xxx teplotní xxxxxx xxxx jakýmikoli dvěma xxxx x kapalině xxxxx vyšší xxx 0,2 °X. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx ± 0,5 °C xx xxxxxxxxx hodnoty xxxxxx výrobcem.
Je xxxxxxxx, xxx v lázni xxxx xxxxxxxxx konstantní xxxxxxx kapaliny. Xxxx xxxxxx zkumavky na xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
4.1.1.2 Xxxxxxxxxx xxx
Xxxxx zkumavky xx vzorky xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Teplota xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x rozmezí ± 0,5 °C xx nominální hodnoty xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx chladicí xxxxxxxxx xx 33 % (X/X) vodný xxxxxx 1,2-xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx).
4.1.2 Xxxxxxxxx x příslušný xxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx průměru 1,80 ± 0,2 xx x x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 0,31 xx. Časová xxxxxxxxx xxxxxxxxxx musí xxx xxxxx xxx 2 xxxxxxx a xxxxxxx b (viz xxxxxxxx) musí xxx xxxxxx. Xxxxxxxx napětí, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxxx, aby xxx − 0,512 °C xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx teplotu xxxxx xxxxxxxxx o 0,0005 °X. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx ± 5 %.
Když xx sonda x xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxxxx na xxxxxx x x bodě, xxxxx xx 44,6 ± 0,1 mm xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxxxxx xx xxxxxx 15). Xx třeba xxxxx xxxxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxx nastavení xxxxx xx této xxxxxx.
Xxxxxxxx:
β xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx vzorce
− xX / dT × 1 / X = β / T2
kde:
T xx xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx
X xx odpor x ohmech xxx xxxxxxx X,
− xX / xX × 1 / X xxxxxxxx xxxxxxxxxx
β xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx použitém xxx xxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx než 3000.
4.1.3 Xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
4.1.3.1 Princip xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx. Plató xx část xxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx ± 0,002 xX xx xxxx xxxxxxx 20 sekund.
4.1.3.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx podobným xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx odporů, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx ± 10 % x jejichž xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx 2×10−5°X.
Xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) xxxxx xx nesmí xxxxxxxx xx linearity x xxxxx rozsahu x xxxx než x 0,3 % xxx maximální xxxxxxx.
Xxx xxxxx kalibrace musí xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx 0,001 °X.
4.1.3.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx nejméně 0,01 °X v xxxxxxx xx 0 °X xx –1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx xxxxxxxx dvou xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx 0,001 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxx, xxx xxx správné xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx bodě xxxxxxx xx – 0,400 °X xx – 0,600 °C xxxxx xxxxx xxx ± 0,001 °X.
4.1.4 Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxx drát o xxxxxxx 1 xx 1,5 xx, xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxx,.
Xxxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx na rozkmit x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx, aby xxxx xxxxxx konec byl xx úrovni hrotu xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx 1,5 xx xxx xx xxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx ± 1,5 xx), xxx xxxx zajištěna xxxxxxxx teplota testovacího xxxxxx xxxxx stanovení. Xxxxx míchání xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx dotknout xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx.
4.1.5 Zařízení xx xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx po xxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx vyvolá mrznutí xxxxxx, aby xxxxxxx xxxxxx testovacího vzorku xxxxxxx x bodu xxxxxxx. X xxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx; xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx na jednu xx xxx xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx na xxxxxx.
4.1.6 Xxxxxxxx xx vzorky
Zkumavky xx vzorky (xxx xxxxxxx 1) xxxx xxxxxxxx x 50,8 ± 0,1 mm xxxxxx; vnější průměr xx 16,0 ± 0,1 xx x xxxxxxx xxxxxx xx 13,5 ± 0,1 xx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx x více xxx 0,1 xx.
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx 29,8 xx (21 mm xxx dnem zkumavky), xxxxx uvádí objem xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx.
4.1.7 Xxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx napětí xxxx xxx stabilizován buď xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ± 1 % xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx x ± 6 %.
4.2 Xxxxxxxxxx xxxx
4.3 Xxxxxxx baňky x xxxxxx 1000 ml, xxxxx A.
4.4 Sušárna, xxxxx odvětraná, xxxxxxxxxxxx xx 130 ± 1 °X
xxxx
Xxxxxxxxxx xxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 300 ± 25 °X.
4.5 Exsikátor
5. Xxxxxxx
5.1 Xxxx destilovaná v xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, převařená x zchlazená na 20 ± 2 °X, xx zkumavce xxxxxxxxxxx oxid xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx x.x., xxxxx xxxxx, xxxxxx 5 hodin xxx teplotě 300 ± 25 °X x xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 24 xxxxx při teplotě 130 ± 1 °X x xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků
Navážit xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxxxxx 1) suchého xxxxxxxx xxxxxxx (5.2) do xxxxxxx. Rozpustit v xxxxxxxxxxx xxxx (5.1), xxxxxxxxxxxxx přelít roztok xx odměrné xxxxx x objemu 1000 xx x xxxxxxx xx značku xxxxx x xxxxxxx 20 ± 2 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxx nejdéle xxx xxxxxx xxx xxx 5 °X x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x maximálním xxxxxx 250 ml.
Bod xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx při 20 °X
|
x XxXx/x |
°X |
|
6,859 |
-0,408 |
|
7,818 |
-0,464 |
|
8,149 |
-0,483 |
|
8,314 |
-0,492 |
|
8,480 |
-0,502 |
|
8,646 |
-0,512 |
|
8,811 |
-0,521 |
|
8,977 |
-0,531 |
|
9,143 |
-0,541 |
|
10,155 |
-0,600 |
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx protřepáním x několikerým xxxxxxxx xxxxx. Nikdy neprotřepávat xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, aby xx xx xxxxxxx přimíchal xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx z láhve xxxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx x lahví, xxxxx byly xx xxx xxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxxxx roztoky xxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx neobsahují fungicid (xxxxxxxxx roztok xxxxxxxxxxx 10 x/x).
6. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx kryoskopu
Kryoskop xxxx xxx xxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx než 1 °X xx teploty, xxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx světlu, xxxxxxx xxxx pokojovým xxxxxxxx xxxxxx xxx 26–27 °X.
Xxxxxxx xx, že xxxxxxxx xxxxxxx podle xxxxxx xxxxxxx a xx byl xxxxxx xxxxxxx 12 hodin xxxx xxxxxxxxx. Zkontrolovat xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxx kapalin.
Vybrat xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxx tabulka výše), xxxxxxx xxx xxxxxxx xx těsně nad xxxx těsně xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx bodu xxxxxxx xxxxxx xxxxx x testování. Xxxxxx xxxx body mrznutí xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx být xxxxx xxx – 0,100 °C.
(U některých xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx příslušný xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx, xx se xxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx mrznutí x xxxxx xxxxxxx měřícího xxxxxxxx. X těchto xxxxxxxxx výběr jednoho xxxxxxxxxxxx roztoku, xxxxx xx tento xxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxxxxx kalibrační postup; xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx uvést).
Pomocí xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxxxx xxxx vyrobeny a xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx vzorky xxxxx (xxxxxx xxxx xxxx, xxxxx x xxxxxxxxxx demineralizovanou xxxxx). Xxxxxxx standardních xxxxxxx xxxx xxxxxx jako xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx výrobce xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx z kryoskopu xxxxxx roven xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx postup x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx každý xxxxxx xxxxxxxxxx správné xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx, xxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx nastavení. Xxxxxxxx xx tedy xxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxx ukazuje xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx by xxxx xxxxx jakákoli xxxxxx.
7. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku
7.1 Xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx vzorky xxx teplotě xxxx 0 °C x 5 °X.
7.2 Pokud xx je xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx všechna xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxx xx vzorku xx xxxxx a xxxxx nádoby x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx reagovat x xxxxxx x xxxx být účinný xx laboratorní teploty.
7.3 Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (mezi 0 x 5 °C) xxxx je možné xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx zahájením xxxxxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 0,18 x xxxxxxxx xxxxxx xx 100 xx xxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx.
7.5 XXX xxxxx x sterilizované mléko xxxx xxxx xxxxxxx 20 xxxxx před xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
8. Xxxxxx
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx x teplota xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx s xxxxxx xxxxxxx, případně zda xx xxxxx termistoru xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx kryoskop x xxxxxxx xx, zda xx chladicí xxxxxxxx xxxxxxx míchá xxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxx zapnut xxxxxxx 12 xxxxx, zkontrolovat xxxxxxx chladicí xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx rozkmit xxxx xxxxxxx.
8.2 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx sérií xxxxx měřit bod xxxxxxx standardního xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxx s xxxxx xxxxxxx – 0,512 °X), dokud se xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx měřeních nebudou xxxxx o xxxx xxx 0,001 °X. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xx bodu mrznutí xxxxxxxxxxxx xxxxxxx o xxxx než 0,002 °X, kryoskop xx xxxxx xxxxxxxxxx, jak xx popsáno v xxxx 6.
Xxxxx se xxxxxxxx používá xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx hodinu, xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
8.3 Xxxxxxxxx xxxx mrznutí xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxx opatrným xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx neprotřepávat xxxxxxxxxx xxxxxx xxx prudce, xxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx xxxxx do xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx. Ujistit xx, xx xxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxx x xxxxx, xxxxx xx to xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx jemnou, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx kalibrovaného xxxxxxxxx podle pokynů xxxxxxx. Mléko se xxxxxxx x xxxxxxx xx vyvolá xxx xxxxxxx xxxxxx výrobcem x xxxxxxxxx xx 0,1 °X.
(X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přístrojů xx xxxxx odečíst tuto xxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; u xxxxxxx xxxxxxxxx xx nezbytné xxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xx se zajistí, xxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx se xxxxxxx xxxx nitka xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx.)
Xxxxx z jakéhokoli xxxxxx xxxxxxx začne xxxxx xxxx později, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx teplotního rozmezí, xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xx x xxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxx tento xxxxx vzorek xxxxxx xxxxxx před xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, alikvótní xxxxx xxxxxx se xxxxxxx xx 45 °X x 5 xxxxx xx udržuje xx této xxxxxxx, xxx se rozpustil xxxxxxxxxxx xxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Teplota xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx rychle stoupne xx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx po xxxxxxx dobu xxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxx odpovídá xxxxxxxxx teplotě xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx x xxxx xxxxxxx xx xxxxx zaznamenat.
Poznámka:
Doba, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, a xxxxxx interval mezi xxxxxxxx mrznutí x xxxxxxxxx maximální xxxxxxx, xx xxxx xxxxxx xx vzorku x xxx vodu x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx podstatně xxxxxx než xxx xxxxx. Je xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xx xxxxxx uspokojivě xxxxxxxxx, xxxxxxx zkumavku, xxxxxxxxxx ji xxxxx x xxxxx xxxxx x xxxxxxxx směrem xxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx látkou x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x jiného xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx body xxxxxxx xxxxx než xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (0,004 °X), xxxxxxx druhé xxxxxxxxx x jiného xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx na 0,004 °X, xxxxxx xx x xxxxxxx xx xxx výpočet konečného xxxxxxxx.
8.4 Xxxxxxxx sondy
Po xxxxxxx přístroje xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xx místo xxx xxxxxx x xxxxxx provozní teplotu, xxx sonda xxxxxxx x chladu.
(U některých xxxx xxxxxxxxx to xxxx možné; x xxxxxxxx případech je xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxx začátkem xxxxxx xxxxx zchlazena, například xxxxxxxxxx xxxxxxxx slepých xxxxxxxxx, dokud se xxxxxxxxx shodné xxxxx.)
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Xxxxxxx
Xxxxx xx po xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xx považuje xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na xxx xxxxxxxxx místa.
Pokud součet xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx stanovení provedených xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, je třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxxxx sudou xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx:
Xxx xxxxxxx (°X)
|
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx |
Xxxxxx |
|
|
-0,544 |
-0,545 |
-0,544 |
|
-0,545 |
-0,546 |
-0,546 |
9.2 Spolehlivost
9.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x): 0,004 °X
9.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (R): 0,006 °X
Xxxxxxx 1
Schéma xxxxxxxxxxxxxx kryoskopu
4.1 (poloha xxxxxxxx na vzorky xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx)
XX. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXX
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx kapitola xxxxxxxx referenční postup xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxxx
2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx množstvím xxxxxx x μx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 Aktivita xxxxxxxxx mléka je xxxxxxxxx, xxxxx je xxxxx xxx 4 xx xxxxxx xx 1 xx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx ve vzorku xxxxxx xxxxx z xxxxxxxxx fenylfosfátu xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x dibromchinonchlorimidem a xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (namodralé xxxxx), xxxxx se xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 610 nm. Poté xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxxx xxxxxx boritanu a xxxxxxxxx barnatého
4.1.1 Xxxxxxxxx xx xxxx 50,0 x xxxxxxxxx barnatého (xxxxxxxxxxx) [Ba(OH)2.8H2O] x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.1.2 Xxxxxxxxx xx xxxx 22,0 g xxxxxxxx xxxxxx (H3BO3) x doplnit xx 1000 xx.
4.1.3 Zahřát 500 xx xxxxxxx xxxxxxx xx 50 °X, oba xxxxxxx xxxxxxx, promíchat, xxxxxx xxxxxxxx xxx xx 20 °C, x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xX xx 10,6 ± 0,1 xxxxxxxx xxxxxxx 4.1.1 xxxx 4.1.2. Xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4.1.4 Xxxx použitím xxxxxx xxxxxx xxxxxxx objemem xxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx zabarvení
Rozpustit xx xxxx 6,0 x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XxXX2) xxxx 12,6 x XxXX2.4X2X x 20,0 x chloridu xxxxxxx (XxXx) x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.3 Xxxxxxx xxxxxx xxx zředění vzniklého xxxxxxxxx
Xxxxxx 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxx zabarvení (4.2) xxxxx xx 100 xx.
4.4 Xxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx 0,1 g xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, prostý xxxxxx, xx 100 xx xxxxxxxxx roztoku (4.1.3) xxxx 0,5 x xxxxxxxxxxxx dvojsodného xx 4,5 ml xxxxxxxxx roztoku pro xxxxxxxx zabarvení (4.2), xxxxxx dvě xxxxx xxxxxxx XXX (4.6) x xxxxxx xxxx 30 xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 2,5 xx n-butanolu x xxxxxx xxxx, dokud xx butanol-1 xxxxxxxx. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx-1. X xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xx možné xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx dní; xxxx xxxxxxxx xxxxxxx zabarvení x provést xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxxx, x to xxxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxxxx xx 100 ml xxxxxxx xxxxxxxx a hydroxidu xxxxxxxxx (4.1.3).
4.5 Sraženina xxxxx-xxx
Xxxxxxxxx xx vodě 3,0 x síranu xxxxxxxxxxx (XxXX4 · 7X2X) x 0,6 x xxxxxx měďnatého (XxXX4 · 5X2X) x xxxxxxx xx 100 xx.
4.6 Xxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (roztok XXX)
Xxxxxxxxx x 10 xx 96 % (V/V) xxxxxxxx 40 ± 1 mg 2,6-dibromchinonchlorimidu (XXX) (C6H2Br2ClNO6).
Skladovat x xxxxx láhvi v xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx, xxxxx změní xxxxx xxxx xx xxxxxx xxx jeden xxxxx.
4.7 Xxxxxx síranu měďnatého (XX)
Xxxxxxxxx xx vodě 0,05 x síranu xxxxxxxxx (XxXX4.5X2X) a xxxxxxx xx 100 xx.
4.8 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx
4.8.1 Xxxxxxx 200 ± 2 mg xxxxxxx bezvodého xxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx o xxxxxx 100 xx, xxxxxx xxxx, promíchat x doplnit na 100 xx. Tento xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx v chladničce xxxxxxx xxxxxx.
4.8.2 Xxxxxx xxxxx 10 xx xxxxxxxxx roztoku, xxxxxxx xx 100 xx x xxxxxxxxx. 1 xx xxxxxxxx 200 μx xxxxxx.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxxx:
x) Veškeré pomůcky xx skla, xxxxx x zátky x xxxxxxxxx pro odběr xxxxxx musí xxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx oplachování čerstvě xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx čistění parou.
b) Xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx fenolů x xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx vybavení, xxxxxxx:
5.1 Xxxxxxxxxx xxxx
5.2 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx 37 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx 610 xx.
5.4 Xxxxxxxx, 16 nebo 18 × 150 mm, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx po 5 xx x 10 xx.
5.5 Pipety
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, např. x xxxxxxx 5 xx.
5.7 Xxxxxxxx filtry o xxxxxxx nejméně 9 xx xxx xxxxxxx xxxxxxxx filtrace.
5.8 Odměrné xxxxx xxx přípravu xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
6. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
x) Xxxxx xxxx xxxx xxxx mohou xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxx se jim xxxxxxx. Je xxxxx xxxxx xxxxxxx zvláštní xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxx ihned po xxxxxx xxxxxx. X xxxxxxx případě xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxx xxx dny.
6.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx pipety xxxxxx 1 ml xxxxxx do každé xx xxxx xxxxxxxx (5.4), xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx.
6.3 Xxxxxxxxx
6.3.1 Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx dvě xxxxxx xx vroucí vodě; xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxx zkumavka. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.2 Po xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx způsobem. Přidat 10 ml xxxxxxx xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxxxxx.
6.3.3 Vzorky ihned xxxxxxxxx 60 xxxxx xx xxxxx lázni (5.2) a xxxxx (xxxxxxx čtyřikrát) xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
6.3.4 Stejně xxxx x xxxx 6.3.1 zahřívat xxx xxxxxx xx xxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx pokojovou xxxxxxx.
6.3.5 Xx každé zkumavky xxxxxx 1 ml xxxxxxxxx zinek-měď (4.5) x řádně xxxxxxxxx.
6.3.6 Xxxxxxxxxxxx přes xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, vylít xxxxx xxx mililitry x x xxxxxxx xxxxxxxx filtrovat znovu, xxxxx xxxx filtrát xxxxxxxx čirý; shromáždit 5 xx xx xxxxxxxx.
6.3.7 Xxxxxx 5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx vyvolání xxxxxxxxx (4.2).
6.3.8 Xxxxxx 0,1 xx xxxxxxx XXX (4,6), xxxxxxxxx x 30 minut nechat xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx teplotě.
6.3.9 X xxxxxxxxx x kontrolním xxxx xxxxxx pokusem xxxxxx absorbanci xxx xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.3.10 Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxx 6.3.9 převyšuje absorbanci xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 20 μx xxxxxx xx zkumavku xxxxx xxxx 6.4.4, xxxxxxxx xxxxxxxxx při vhodném xxxxxxx xxxxxx. Připravit xxxxxxx xxxxxxxxx objemu xxxxxxxxxxx vzorku x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx testovacího vzorku, xxxxx se opatrně xxxxx do xxxx, xxx se inaktivovala xxxxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
6.4.1 Xx základě xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxx (4.8.2) připravit xxxxxxxxxx xxxx zředěných xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0 (xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxx), 2, 5, 10 a 20 μx xxxxxx na xxxxxxxx. Do každé x pěti zkumavek xxxxxx pomocí pipety 1 xx xxxx x 1 xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
6.4.2 Do xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 1 xx roztoku xxxxxx xxxxxxxxx (4.7), 5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx zředění xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.3), 3 xx xxxx x 0,1 xx xxxxxxx XXX (4.6); xxxxxxxxx.
6.4.3 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 30 xxxxx při xxxxxxxx xxxxxxx.
6.4.4 V xxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx pokusem xxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.4.5 Xx základě xxxxxx xxxxxxxxxx (6.4.4) xxxxxxxxx xxx každé xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (6.4.1) vypočítat regresní xxxxxx metodou xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7. Vyjádření xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxx x xxxxxx
7.1.1 Xx xxxxxxx hodnot xxxxxxxxxx (6.3.9) xxxxxxxxx xxxxxxxx fenolu xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (6.4.5).
7.1.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x μx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxx xxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxxx xxxxxxxxx = 2,4 × X × X
xxx
X xx xxxxxxxx xxxxxx x μx získané xxxxx bodu 7.1.1;
X xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 6.3.10 (x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx X = 1).
2,4 xx faktor xxxxxxx (5/12 x 1 xx testovacího xxxxxx) – viz 6.2 ve spojitosti x 6.3.2, 6.3.5 x 6.3.6.
7.2 Xxxxxxxxxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) : 2 μx fenolu/ml.
7.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (R) : 3 (xxxxxxxxx) μx xxxxxx/xx.
7.2.3 Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx 6.3.10, xxxxxx uvedené x 7.2.1 a 7.2.2 xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx vzorku.
III. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx, xxxxx slouží xx kontrole xxxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx reakce na xxxxxxxxxx:
Xxxxx xx mléko xxxxx xxxxxxxxxxx, xx 30 xxxxxx po xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx reakce xx xxxxxxxxxx:
Xx 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxxx rozkládá xxxxxxx xxxxxx. Uvolněný xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx indofenol (Xxxxxxxx xxxx). Intenzita zabarvení xx přímo úměrná xxxxxxxxxxx enzymu.
4. Činidla
4.1 Xxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx x xxxxx xxxx (50 °X) 2 x 1,4 xxxxxxxxxxxxxx (X6X8X2) x xxxxxxx xx 100 ml. Xxxxxx skladovat x xxxxxx a xxxxx, x xxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx dvou xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, kterou xx xxxxxx odstranit.
4.2 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx zředit 9 xx 30 % peroxidu xxxxxx x doplnit na 100 xx. Xxx xxxxxxxxxxx přidat 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx na litr xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxx měsíc, xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx x temnu, x xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx styku x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
5. Xxxxxx
5.1 Xxx 5 xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
5.2 Xxxxxx 5 ml xxxxxxx 1,4 fenylendiaminu (4.1).
5.3 Přidat 2 xxxxx roztoku xxxxxxxx xxxxxx (4.2).
5.4 30 xxxxxx xx promíchání xxxxxxxx xxxxxxxxx. Pokud xx xxxxx zabavení xxxxxx xxxx xxx 30 xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxx specifická.
IV. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXX 30 °X
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxxxxxxxx xxxxxxxx kolonií xxx 30 °C. Xxxxxx xx použije xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, UHT xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx 15 xxx preinkubováno při 30 °X.
2. Definice
"Mikroorganismy" xx rozumějí xxxxxxxxx, xxxxx vytvářejí xxxxxxxxxxx xxxxxxx po xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Princip
Smíchat xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx mléka x xxxxxxxxxxx xxxxxx x Petriho xxxxxxx x nechat xxxxxxxxx 72 hodin xxx 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxxx x vypočítat xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx syrového xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxx xx 0,1 xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx XXX xxxxx.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx xx skla
Obvyklé xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na 121 ± 1 °X.
4.1.3 Inkubátor, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °C.
4.1.4 xX-xxxx xx zařízením xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx na ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx lázeň, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Zvětšovací xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Xxxxxxxx schopná xxxxxxx 1 ml xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x 9 ml ředicího xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx skla
4.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx dalších xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 xx xxxx zkumavky x xxxxxx 20 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Pipety (utěsněné xxxxx), skleněné nebo xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, s xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x nominálním xxxxxx 1 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx x průměru 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx, bezbarvého xxxx xxxx xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, xxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx 90 xx 100 mm. Vnitřní xxxxxxx xxxxx by xxxx xxx nejméně 10 mm. Xxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx počítání xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx ze xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1), xxxxxxx jednu xxxxxx xxx teplotě 170–175 °X;
x) x xxxxxxxxx (4.1.2), nejméně 20 xxxxx při xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxx zajištěno xxxxxxxxxx proniknutí xxxx: xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx nádoby xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx sterilizované x xxxxxxxxxxx by xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxxx v horkovzdušné xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx – agar xx xxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx extrakt |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx (+) nebo xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx odstředěné xxxxx |
1,0 g |
|
Agar |
10–15 x xxxxx želírovacích vlastností xxxxx |
|
Xxxx |
1000 ml |
Sušené xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx se xxxxx xxxxxxxxxxxx testy xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, které xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x rozpustit xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, glukózu x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Ohřev xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx x xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx do xxxx, xxxxx xx xxxx zcela nerozpustí, xxxx xxxxxxxx x xxxx asi 30 xxxxx.
Xxxxx to je xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xX, roztokem (xxxxxxx 0,1 mol/l) xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, aby xx sterilizaci xxxx xxxx xxxxxxx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.2 Rozdělení, xxxxxxxxxxx a skladování xxxxxxxxxxxx média
Rozdělit xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 ml xx xxxxx xxxx po 12 až 15 xx do xxxxxxxx (4.2.2). Baňky a xxxxxxxx uzavřít.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx v autoklávu (4.1.2) při 121 ± 1 °C.
Zkontrolovat xX xxxxxxxxxxxx média.
Pokud xx kultivační xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x temnu xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx než 1 xxxxx xx jeho xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx dehydrované xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx médium (5.1) se může xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx mléko xxxx xxxxxxxxxxxx, pokud xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xX xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X xxxxxxx podle xxxx 5.1, poté xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx bodu. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Roztok xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx vodě, xxxxx xx je nutné, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xX-xxxxxx (4.1.4); pokud to xx xxxxxxxx upravit xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) hydroxidu xxxxxxx nebo kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) tak, xxx po sterilizaci xxxxx xxxxxxxx obsahovala 9,0 ± 0,2 xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °C.
Zkontrolovat xX xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx v temnu xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx ne xxxx než 1 xxxxx xx jeho xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) xx xxxx připravovat x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx výrobce. Xxxxxxx xX xxxxxxx xxxxx xxxx 6.1, poté xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx ředidla xxxxx xxxx 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxxx kultivačního média
Před xxxxxxxxx mikrobiologického vyšetření xxxxxx xxxxxx rozpustit xxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx vodní xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °C.
7.2 Xxxxxxxx vzorku xxxxx
Xxxxxx xxxxx řádně xxxxxxxxx, xxx xxxx mikroorganismy xx xxxxxxxxxxxxxxx rozděleny, x xx 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxx zabránit xxxxxx xxxx nebo xxxx xxxxxx rozptýlit. Doba xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx neměla překročit xxx xxxxxx.
7.3 Příprava xxxxxxxxxx ředění (10-1) (xxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 ml xxxxxx (7.2) syrového xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xx 9 xx xxxxxxx (6.1), xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx s xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx teplota xxxxxx mléka. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx míchačkou (4.1.9).
Xxxxx se xxx xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx dalších xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx a xxxxxxxxxxx mléko)
Sterilní pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx pokynů x xxxx 7.3.
Xxxxx xx xxx ředění 10−2.
X xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xxxxx očekávat přiměřené xxxxxxxx mikroorganismů (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
7.5.1 Xxxxxx xxxxx: Sterilní xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx vzorku x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Pro xxxxx xxxxxx (8.1.1) připravit xxxxx xxxxxxx misku.
7.5.2 Xxxxxxxxxxx mléko: Sterilní xxxxxxx (4.2.3) přenést xx xxxxx (4.2.4) 1 ml xxxxxx x/xxxx vhodného xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx nejméně dvě xxxxxx. Xxx každé xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx misku.
7.5.3 XXX xxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx xx 15 xxxxx xxxxxxxx xxx 30 °X – xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx A xxxxxxxx XXX bod 5):
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx do misky (4.2.4) 1 ml xxxxxx xxxxx (7.2). Xxxxxxxxx xxx xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx kultivačního média
Do xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 15 xx 18 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Ihned xxxxxxxxx rotací Xxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx došlo x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kolonií.
Doba xxxx koncem xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx druhu xxxxx, testovacího xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx nesmí xxxxxxxxx 15 minut.
Nechat xxxx xx vodorovném, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, dokud xxxxxx xxxxxxxx.
7.7 Inkubace Petriho xxxxx
Xxxxxxx misky xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx. Neskládat xx xxxx xxxx než xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, ani xxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 72 ± 2 xxxxx při 30 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx kolonie x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 300 xxxxxxx.
Xxxxx vyšetřit xxx xxxxxxxx světle. Xxx usnadnění xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx nutné xxxx xx to, xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx sraženin x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x cílem xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx kolonii. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx povlak xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx misky, xxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx a xxxxxxxxx odpovídající xxxxx xxx celou misku. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pokrývají xxxx xxx čtvrtinu xxxxxx xxxxx, xxxxx vyřadit.
8. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Xxxxxx a xxxxxxxxxxx mléko
8.1.1 Použít xxxxxxxx xxxxx obsahujících 10 xx 300 xxxxxxx (viz 8.1.3 x 8.1.4).
8.1.2 Xxxxxxxxx xxxxx mikroorganismů xx 1 xx xxxxxxxx xxxx pasterovaného mléka xxxxx xxxxxx xxxxxx:
∑X / (n1 + 0,1x2) x
xxx:
∑X ΣX xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx bodu 8.1.1.
(x1 + 0,1 x2)x xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx:
x1 xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx
x2 xx xxxxx xxxxx xxx druhém xxxxxx
x xx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx zaokrouhlí xx xxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx pět, xxxxxxxxxxx xxx, aby xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxx):
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 kolonií
Ředění 10−3: 33 x 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; = 278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2
= 6290,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.1.3 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 10, uvést, že xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx je "xxxxx xxx 10 x x", xxxxxxx "x" xx xxxxxxxxxx hodnota xxxxxxxxxx faktoru zředění.
8.1.4 Xxxxx xxxx všechny xxxxx xxxxx než 300 x xxxxxxxx xx xxxxx, xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xx".
8.2 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx mléko
Počty xxxxx xxx 10 xxxxxxx xx 0,1 xx xx považují xx nevyhovující požadavkům xxxxxxxx 85/397/EHS.
9. Spolehlivost
Výsledky xxxxxxxxxxx uznaných kruhových xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
X. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX PŘI 21 °X
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxx mikroorganismů xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 21 °X x xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxx dní xxxxxxxxxxxxx xxx 6 xX x xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx mléka psychotropními xxxxxxxxxxxxxx, které se xxx xxxxxx xx x xxxxx xxx 6 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx rozumějí xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx aerobní xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxx xxx 6 °C. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx médiem v Xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx inkubovat 25 xxxxx xxx 21 °X. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx pasterovaného xxxxx.
4. Xxxxxxxxx x pomůcky xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, zejména:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Autokláv, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, schopný xxxxxxxx xxxxxxx:
x) 6 ± 0,2 °X
x) 21 ± 1 °C xx xxxxx bodech xxxxxx.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx pro kompenzaci xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx na 45 ± 1 °C.
4.1.6 Xxxxxxxxxx sklo, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Míchačka xxxxxxx xxxxxxxxx 1 xx vzorku xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx ředění x 9 xx xxxxxxxx roztoku x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx rotace obsahu xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx ze xxxx
4.2.1 Zkumavky s xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx prostorem x xxxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 až 250 xx nebo zkumavky x xxxxxx 20 xx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, o xxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx o xxxxxxx 1,75 až 3 xx.
4.2.4 Petriho xxxxx x čirého, xxxxxxxxxx xxxx xxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxx má xxxxxxx xxxxxx xxx 90 až 100 x. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx by měla xxx xxxxxxx 10 xx. Dno nesmí xxx xxxxx nerovnosti, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Sterilizace xxxxxxx ze xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx:
x) v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx teplotě 170–175 °X;
x) v xxxxxxxxx (4.1.2), nejméně 20 xxxxx xxx teplotě 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, aby xxxx zajištěno xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: pokud xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxx napevno xxxxxxxx, xxxxxxx nebo víčka xx měly xxx xxxxx.
Xxxxxxx ze xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx páry.
Pipety xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx x horkovzdušné sušárně (4.1.1).
5. Kultivační xxxxxx – xxxx xx xxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 g |
|
Trypton |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx(+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 g |
|
Sušené xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 g |
|
Agar |
10-15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx mléko xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx inhibiční xxxxx neobsahuje.
Příprava:
V tomto xxxxxx suspendovat x xxxxxxxxx xx vodě xxxxxxxxxx xxxxxxx, trypton, xxxxxxx a nakonec xxxxxx xxxxxxxxxx mléko. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx x xxxxx xx xxxx za xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx x páře xxx 30 minut.
Pokud xx xx nezbytné, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx, upravit pH, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx sodného xxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx xxxx hodnota 6,9 ± 0,1 xxx 25 °C.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx (5.1) v xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 xx xx xxxxx nebo xx 12 xx 15 ml xx xxxxxxxx (4.2.2). Baňky x zkumavky uzavřít.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX kultivačního xxxxx.
Xxxxx se kultivační xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx při xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Dodržet xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxx odstředěné xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, pokud xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xX xx 6,9 ± 0,1 při 25 °X xxxxxxxx xxxxx xxxx 5.1, xxxx xxxxxxxx, sterilizovat x xxxxxxxxx kultivační xxxxxx xxxxx xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Xxxxxx xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 g |
|
Chlorid xxxxx (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xX-xxxxxx (4.1.4); pokud xx je xxxxxxxx xxxxxxx xX roztokem (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx sodného xxxx xxxxxxxx chlorovodíkové, xxx xx sterilaci xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x skladování xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, aby po xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx xxxxxxx. Xxxxxxxx uzavřít.
15 minut xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx (4.1.2) při 121 ± 1 °C. Xxxxxxxxxxxx xX ředidla.
Pokud xx ředidlo xxxxxxxxx xxxxx, skladuje xx x xxxxx při xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx přípravě.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) se může xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxx pokyny xxxxxxx. Xxxxxxx xX xxxxxxxx podle xxxx 6.1, poté xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx podle xxxx 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Rozpuštění xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx zahájením xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x zchladit ve xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx [4.1.3 x)] xxxxxxxx balení xxxxxxxxxxxxx mléka xxxx, xxxxx to xxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx 100 xx xx xxxx 120 ± 2 xxxxx při 6 ± 0,5 °X.
7.2.2 Po inkubaci xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, aby byly xxxxxxxxxxxxxx xx nejrovnoměrněji xxxxxxxxx, x xx 25 xxxxxxxx otočeními xxxxxx se vzorkem. Xx nutné xxxxxxxx xxxxxx pěny xxxx xxxx xxxxxx rozptýlit. Xxxx xxxx mícháním x odběrem xxxxxxxxxxx xxxxxx by xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx ředění (10−1)
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx pasterovaného mléka xx 9 xx xxxxxxx (6.1), xxxxxxx xxxxxx nesmí xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx mléka. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx promíchávat xxxx xxxxxxxx ředění míchačkou (4.1.9).
Xxxxx se tak xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) podle xxxxxx x xxxx 7.3.
Xxxxx xx xxx xxxxxx 10−2.
X xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx tento xxxxxx opakuje xxx xxxxxx, dokud xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Naočkování Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx do xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxx vyšetřena xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx jednu xxxxxxx misku.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx každé xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 15 až 18 xx kultivačního xxxxx (7.1).
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxx xx inkubaci xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx přípravy xxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx mléka, xxxxxxxxxxx vzorku nebo xxxxxx x kultivačním xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx stát xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x čistém xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Petriho xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Misky inkubovat xxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxx než šest xxxxx. Sloupky misek xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 25 xxxxx xxx 21 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx x Xxxxxxx miskách xxxxxxxxxxxxxx více než 300 xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx počítání xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx xxxxx xxxx xx to, xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxxxxxxxxx xxxx s xxxxxx zvětšením (4.1.7), x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx tvořící xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx a xxxxxxxxx odpovídající xxxxx xxx xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx více xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, misku xxxxxxx.
8. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Použít xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 kolonií (xxx 8.1.3 a 8.1.4).
8.2 Xxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka podle xxxxxx xxxxxx:
∑X / (x1 + 0,1n2) x
xxx:
ΣX je xxxxxxx xxxxx xxxxxxx podle xxxx 8.1,
(x1 + 0,1 n2)d xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx:
x1 je xxxxx xxxxx xxx prvním xxxxxxx
x2 xx xxxxx xxxxx při xxxxxx xxxxxx
x je faktor xxxxxxx, na xxxxxxx xxxxxxx byly xxxxxxx xxxxx počty.
Počet xx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx číslice. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx číslice xxx, xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxx:
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 kolonií
Ředění 10−3: 33 a 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; =278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2=
=629 / 0,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.3 Xxxxx xxxx všechny xxxxx xxxxx xxx 10, xxxxx, xx počet xxxxxxxxxxxxxx na xxxxxxxx xx "nižší xxx 10 × x", xxxxxxx "x" xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx zředění.
8.4 Pokud xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 300 x počítání je xxxxx, provést xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx hodnotou xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xx".
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x dispozici.
VI. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX – XXXXXXXX XXXXXXX PŘI 30 °X
1. Předmět x xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x pasterovaném xxxxx technikou xxxxxxxx xxxxxxx při 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxx bakteriemi" xx xxxxxxxx bakterie, xxxxx při 30 °X xxxxxxxxx charakteristické xxxxxxx nebo necharakteristické xxxxxxx, jež xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx plynu.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx objem xxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxx v Petriho xxxxxxx a 24 xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx kolonie x, pokud xx xx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx necharakteristických xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Poté xxxxxxxxx xxxxx koliformních xxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx laboratorní xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Přístroje
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx sušárna, xxxxxxxxxxxx xx 170 až 175 °C.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, schopný udržovat xxxxxxx 30 ± 1 °C.
4.1.4 pH-metr xx zařízením pro xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Vodní xxxxx, nastavitelná xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx-xxxxxxx xxxx xxxx-xxxxx.
4.2 Pomůcky xx skla
4.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 20 xx, aby xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kultivační xxxxxx (5.2) a Xxxxxxxxx xxxxxxxx vhodné xxxxxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 až 250 ml xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.1).
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx vatou), xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx syntetického materiálu, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 – 10 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx o průměru 1,75 až 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx, bezbarvého xxxx nebo xx xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, xxx misek xx xxxxxxx xxxxxx xxx 90 xx 100 x. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx by měla xxx xxxxxxx 10 xx. Dno nesmí xxx žádné xxxxxxxxxx, xxxxx xx bránily xxxxxxxx kolonií.
4.2.5 Sterilizace xxxxxxx ze xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxxx jedním x xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx jednu xxxxxx xxx xxxxxxx 170 – 175 °C;
b) x autoklávu (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, aby bylo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx proniknutí xxxx: xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx nádoby xx xxxxxx xxx xxxxxxx uzavřeny, xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx skla xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xx měly xxxxxxx xxxxxxxxxx páry.
Pipety musí xxx xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx
5.1 Agar x krystalovou xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx x laktózou (VRBL xxxx). Xxxxxx selektivní xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
7 g |
|
Kvasnicový extrakt |
3 x |
|
Xxxxxxx (X12X22X11.X2X) |
10 g |
|
Chlorid xxxxx (XxXx) |
5 g |
|
Žlučové xxxx |
1,5 g |
|
Neutrální červeň |
0,03 x |
|
Xxxxxxxxxx violeť |
0,002 g |
|
Agar |
10 xx 15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx vlastností xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxx minut. Xxxx důkladně xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 mol/l) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, xxx po xxxx byla xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 při 25 °X.
Xxxxx xxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x ihned xxxxxx po množstvích 100 až 150 xx do xxxxxxxxxx xxxxx (4.2.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
X xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (6.4).
Xxxxxx xxxxxxxxxx médium xx xxx hodin po xxxx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxx xxxx s brilantovou xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
10 g |
|
Laktóza (X12X22X11.X2X) |
10 x |
|
Xxxxxxxxxxx hovězí xxxx |
20 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxx |
0,0133 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx složky xx xxxx x xxxxx xx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx to xx xxxxxxxx, xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) hydroxidu xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx sterilizaci xxxx xxxx hodnota 7,2 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx xxxxxx xx 10 xx do zkumavek (4.2.1) xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx bubliny.
Zkontrolovat xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx nepoužije xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx déle xxx 1 xxxxx xx jeho xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx médium (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx dehydrovaného xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx výrobce. Xxxxxxx xX, xxxxxxxx, sterilizovat x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx 5.1 a 5.2.
6. Xxxxxx
6.1 Kultivační médium
Použít xxxxxx (XXXX xxxx) xxxxxxx x bodě 5.1.
6.2 Xxxxxxxx vzorku xxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx co xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x to 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx. Xx xxxxx zabránit xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx misek
Sterilní xxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) 1 ml vzorku xxxxx xx xxxxx xx xxx misek (4.2.4) x xxx xxxxxxxxx 3 xx xxxxxx xxxxx (6.2).
6.4 Xxxxxxxx kultivačního xxxxx
Xx xxxxx naočkované xxxxx xxxxx asi 12 xx VRBL xxxxx (6.1)
Xxxxx po xxxxxx xxxxx promíchat xxxxxx Xxxxxxx misky, aby xx xxxxxxxx došlo x rovnoměrnému rozložení xxxxxxx.
Xxxx mezi xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxx nesmí xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xx xxxxxx kontroly xxxxxxxxx xxxxxxxxx nenaočkovanou misku x 12 ml xxxxx XXXX agaru, xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxx na xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, dokud xxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxx ztuhnutí xxxxx nejméně 4 xx XXXX xxxxx (6.1) xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx.
6.5 Xxxxxxxx Petriho xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx inkubovat xxxxxxxx dnem xxxxxx. Xxxxxxxxx xx sebe xxxx než xxxx xxxxx. Sloupky misek xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx a xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 24 ± 2 xxxxxx xxx 30 ± 1 °C.
6.6 Xxxxxxxx xxxxxxx
6.6.1 Počítat xxxxxxx x Petriho xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 150 xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx červené kolonie x průměru nejméně 0,5 xx, x xxxx bez xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx bakterie.
6.6.2 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx kolonie necharakteristický xxxx (např. xxxxx xxxxx, velikost xxxx xxxx tvar xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxx konfirmační xxxx (6.7).
6.7 Xxxxxxxxxxx xxxx
Xxxxx xxxxx v xxxx 6.6.2 xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx počtu (xxxx. 3 xx 5) xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xx se pomocí xxxxxxxx jehly (4.1.6), xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx agar s xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.2). Xxxxxxxxx zkumavky 24 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °X.
Xx kolonie xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx takové xxxxxxx, xxxxx v Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx plyn.
7. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Použít výsledky xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 150 kolonií.
7.2 Xxxxx xx xxxxxxx konfirmační xxxx, vypočítat xxxxx xxxxxxx koliformních xxxxxxxx xx základě procentuálního xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
7.3 Vypočítat xxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
ΣX / x
xxx:
ΣX je xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (7.1 x xxxxxxxxxxx xx 7.2), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (6.3).
n xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (6.3) x xxxxxxxxxxx (3 xx).
Xxxxx xx xxxxxxxxxx na dvě xxxxxx číslice, pokud xxxxxxxx xxxx xxx 100 xxxxxxx. Xxxx xx zaokrouhlovaná xxxxxxx xxx, zaokrouhlit xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx sudá.
Pokud xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 150 xxxxxxx, xxxxx výsledek xxxx "xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx na 1 ml".
8. Spolehlivost
Výsledky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kruhových xxxxx ještě nejsou x xxxxxxxxx.
XXX. STANOVENÍ XXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX
Xxxx xxxxxxxx popisuje dva xxxxxxxxxx postupy xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Fluoro-opto-elektronická xxxxxx
X. Mikroskopická xxxxxx
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx počtu somatických xxxxx x xxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxx xxx stanovení xxxxx xxxxx xx xxxxxx mléka xx xxxxxx kalibrace x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx B.1).
2. Xxxxxxxx
Xxx tento postup xx xxxxxxxxxxx buňkami xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxx xx možné xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
3. Xxxxxxx
Xxxxxx 0,01 ml xxxxx na 1 xx2 povrchu podložního xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx vysuší a xxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxx xxx mikroskopem. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx na daném xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xx 1 xxxxxxxx.
4. Xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x..
Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxx modř |
0,6 x |
|
Xxxxxxx – 99 % |
54 xx |
|
1,1,1-xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx |
40 xx |
|
Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx |
6 ml |
Upozornění
Tetrachlorethan xx xxxxxxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx uskutečnit x xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx x baňce xxxxxxx x 1,1,1-xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx ve xxxxx xxxxx xx 60 xx 70 °X. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx promíchat, 12 xx 24 xxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxx 4 °X x xxxxxx ledovou xxxxxxxx xxxxxxx. Přefiltrovat xxxx filtr x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx 10 xx 12 xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx uzavřené xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx roztok xxxxx xxxxxxxxxxxx.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
5.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 500 × xx 1000 ×
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx umožňující dávkování xx 0,01 ml x přesností nejméně ± 2 %.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 20 mm × 5 xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxx standardní xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 20 × 5 xx xxx xxxxxx vrstvu.
5.4 Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx (30 °X xx 50 °X) xxx sušení xxxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5 Xxxxxxxxxx (xxx) pro xxxxxx xxxxx vrstvy.
5.6 Xxxxx xxxxx, nastavitelná xx 30 xx 40 °X pro xxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
5.7 Podložní xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 0,01 xx.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxx xx xxxxx hodin xx xxxxxx vzorku. Xxxxx xxxxxxxxxx nesmí xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 6 °X. Xxxxxx nesmí xxx xxxxxxx.
6.2 Xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx (5.6) na 30 až 40 °X. Xxxx xxxxx xxxxxxxxx. Zchladit xx xxxxxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx mikrostříkačka (5.2), například 20 °X.
6.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx sklíček
Vyčistit podložní xxxxxxx (5.3) například xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxxxx v xxxxxxx, kde xxxx xxxxxxxx před xxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx (5.2) xxxxxxx 0,01 xx mléka xx xxxxxx připraveného, xxx xx uvedeno výše. Xxxxxxx očistit xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx styku x xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) x xxxxxxx obkreslit xxxxx xxxxxxxxx (20 mm × 5 mm). Xxxx xx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx vrstvu xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (5.4) xx xx úplného xxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx.
6.5 Barvení xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx 10 xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4). Xxxxx x, xxxxx je xx nezbytné, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.5). Xxxxxxx tenké xxxxxx xx xxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx nesmyje. Xxxxx xxxxx x xxxxxxx xxx, aby xxx xxxxxxx před xxxxxxx.
6.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx
Xx základě xxxxxxxxx xxxxxxxx (500 × xx 1000 ×) xxxxxx průměr xxxxxxxxxxxxxxx xxxx (5.7).
7. Xxxxxxxx x xxxxxxx
7.1 Počítání xxxxx
Xxxxxx xxxxxxxxx (5.1). Xxxxx xxxxxxxx buněk xx xxxxxxxx pouze xxxxxxx xxxxx, x xx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x x xxxxx xx x xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxx nebo xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxx, které xxxx vybrány pouze x okrajových částí xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x tudíž x xxxxxxxxxxxx výsledků xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx za xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx částí xxxxx xxxxxx. Počítání xxx xxxx provádět xxxxxxxxxx mikroskopických polí xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx všechny xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx počtu buněk, xxxxx se xxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx x xxxx, xx počítání xxxxxxxxxxx xxxxx pod xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx počítání, variační xxxxxxxxxx počítání x xxxxxxxxxxx vzorků xxxxx xxx xxxxx než xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx vzorek xxxxx x xxxxxxx 400000 xx 600000 xxxxx/xx xx xxxxx xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, které xx xxxxx v xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx podle Xxxxxxxxxx xxxxxx rozdělení nejméně 400, aby xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
X = X = x2,
xxx:
X xx xxxxxxx hodnota
V xx xxxxxxx
x xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx:
XX = s × 100 % / X xxxx XX = 100 % / x&xxxx;xxxx XX = 100 % / XXX
X (xxxxxx) představuje počet xxxxxx (buněk), xxxxx xxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxx 400 xxx XX = 5 %).
7.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxxxx 0,01 xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx 7.3.1 xxxx 7.3.2.
7.3.1 Xxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx, je 5 mm. Šířka xxxx odpovídá xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxx xx stanoven xxxxxxxxx xxxxxxxx x mikrometrickou xxxxxxxx (5.7).
Xxxxxxxx xxxxxx = 20 × 100 / d × b
kde:
d xx xxxxxx mikroskopického xxxx x xx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7)
x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
7.3.2 Počítání mikroskopických xxxx xx střední xxxxxxx xxxxx vrstvy xxxx xxxxxx mřížky
Pracovní xxxxxx
xxx:
x xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx pole x xx, stanovený xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7)
x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
7.4 Xxxxxxx xxxxxx buněk
S xxxxx získat xxxxx xxxxx xx xx xxxxx, xx počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (7.1 a 7.2) xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (7.3).
7.5 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxx 7.2) xxxxx xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nejsou k xxxxxxxxx.
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx postup popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx, který xx xxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxx X.1) používat xxx xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo bez xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx postup xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx mají x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
3. Princip
Část xxxxxx (xxxxxxxxx 0,2 xx) xx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x s xxxxxxxxxxxxxx roztokem. Část xxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx ve xxxxx xxxxx xxxxxx xx rotační xxxx, xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x tisících xx mililitr.
4. Činidla
Pokud xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxxxx čistoty p.a.. Xxxxxxx xxxx je xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxx čistoty.
4.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx |
51,00 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxx |
13,75 x |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx(xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % objemové |
10 xx |
|
xX 5,7 až 5,9. Xxxxxxx vodou xx 10000 ml. |
Příprava:
Smíchat jednotlivé xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx dní.
4.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxx)
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
1,0 x |
Xxxxxxx vodou xx 1000 xx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx. Xxxxxxxxxx xx vzduchotěsně uzavřené xxxxxx chráněné před xxxxxxx by xxxxxx xxxxxxxxx xxx měsíce.
4.3 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx xxxxxx)
Xxxxxxx 20 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.2) x tlumivým roztokem (4.1) xxx, xxx xx xxxxxx xxxxx 1000 xx. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx používán xxxx xxx sedm xxx.
4.4 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxx roztok (4.1) |
10 ml |
|
Polyethylenglykol-mono-p(1,1,3,3-tetramethylbutyl)-fenylether (například Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 ml |
|
Amoniak x 25 % xxxxxxxxxx |
25 xx |
Xxxxxxx vodou xx 10000 xx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx nemělo překročit xxxxxx dní.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx ze xxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx principu xxxxxxx fluorescence.
Poznámka:
Zařízení xxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Tím xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx částic, které xx xxxx počítat, x xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx použití xxxxxx, xxxxxxx obsah xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X).
5.2 Xxxxx xxxxx, x xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxxx xx 40 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxx, x xxxxxxx uzávěrem, objem xxx 15 xx.
6. Xxxxxx xxxxx
6.1 Vzorek xxxx xxx skladován xxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx (5.3). Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx může xxxxxxx xx po uplynutí 24 xxxxx xx xxxxxxxx, neboť xxxxx xxxxxxxxxxxxxx by byl xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 6 °C.
6.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx do 24 xxxxx. Konzervace musí xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
6.2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx 0,6 x xx 100 xx. Xxxxx konzervovaný xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx xxxxxxx 6 xx 12 °X;
- dvojchroman draselný:
konečná xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx draselného xx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx 0,2 x na 100 xx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx vzorek xxxx xxx skladován dalších 72 xxxxx při xxxxxxx 6 až 12 °X;
- azid xxxxx:
xxxxxx může xxx xxxxxxxxxxx azidem xxxxxx x konečné koncentraci 0,024 x/100 xx, xxxxx xx vzorek xxxxxxxx xx xxxxxxx 6 xx 12 °X ihned po xxxx xxxxxx a xxxxxxxx do 48 xxxxx xx jeho xxxxxx;
- xxxxxxxx:
xxxxxx xxxx xxx konzervován xxxxxxxxxx x konečné xxxxxxxxxxx 0,05 x/100 xx, xxxxx xx vzorek xxxxxxxx na xxxxxxx 6 xx 12 °X xxxxx xx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx do 72 xxxxx xx xxxx xxxxxx.
6.2.2 Vzorek, xxxxx xxx xxx konzervován xxxxxxxxx boritou, xxxx xxx ještě xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx 48 xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx dvojchromanem xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx, xxxxx se xx xxxxxxxx, se xx nadojení xxxxxxxx xxxxxxx 24 hodin xxx xxx 2-6 °X. Xxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxx xx xxx předběžného xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, neboť xxxxxxxx mohou xxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx přesto nutné xxxxxxxx xxxxxxx, vzorek xx xxx být xxxxxxxxx ošetřován nejméně xxx xxxxxx dvojchromanem xxxxxxxxx (viz 6.2.1).
7.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx vzorek (xxx 7.1) nebo xxxxxxxxxx vzorek nejméně xxxxx xxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx (5.2) xx xxx 40 °X. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx do xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxx pomocí xxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.1) xx 15 minut xx xxxxxxxx ohřívání (xxx 7.2). Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx vzorky xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx opakovatelnosti (x) x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nejsou x xxxxxxxxx.
Xxxxx, které xxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxx úrovni, umožňují xxxx xxxxxx:
(1) xxxxx xxxxx xxxx 400 000 xx 500&xxxx;000 xxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx:
xx = 20000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 5–4 %)
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx reprodukovatelnosti:
sR = 40000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 10–8 %)
9. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x známém xxxxxx xxxxx, xxxxx xx stanoví xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
XXXX. XXXXXXX XXXXXXXXXX X SULFONAMIDŮ
PŘEDMĚT X XXXXXX XXXXXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx detekce xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx referenční postup xxxxxxxx:
X. Kvalitativní xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx umožňuje xxxxxx vzorky xxxxx, xxxxx xxxxxxxx antibiotika x sulfonamidy. Xxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxx x xxxxxxxx postupů, xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx var. calidolactis, XXXX 10149, xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx.
X. Xxxxxx xxx konfirmaci x identifikaci xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx x x xxxxxxx ošetřeném xxxxx, jejichž koncentrace xxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxx koncentrace xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx [1]
|
Citlivost xxxxx |
||
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxx |
|
|
Xxxxxxxxxxxxxxx |
0,002 |
0,006 |
|
Xxxxxxxxx |
0,002 |
0,005 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,015 |
0,035 |
|
Xxxxxxxx |
0,006 |
0,011 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,10 |
0,40 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,20 |
0,45 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxx |
0,15 |
0,50 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
7 |
15 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx |
4 |
13 |
|
Xxxxxxxx |
1 |
22 |
|
Xxxxxxxxx |
9 |
28 |
|
Xxxxxxxxxx |
0,06 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxx |
1 |
2,25 |
|
Xxxxxxxxx |
0,01 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,01 |
0,1 |
|
Xxxxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxxx) |
0,5 |
1 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2 x |
|
|
Xxxxxx |
5 x |
|
|
Xxxxxx xxxxxxx |
1 x |
|
|
Xxxxxxx xxxxx |
5 x |
|
|
Xxxx |
10–15 x |
|
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxx uvést do xxxx. Upravit xX xxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx jeho xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx po 10 xx xx xxxxxxxx xxxx po 100 xx do xxxxxxxx x xxxxxxxx s xxxxx xxxxxx šikmý xxxx.
Xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X.
5.1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxx xxxxx |
2 g |
|
Agar |
15 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx (xxx 5.1.3) |
10 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx vodě, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx do xxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx tetroxoprim x xxxxxxxxxxxx 15 minut xxx 121 ± 1 °C. Upravit xX, aby po xxxxxxxxxxx xxxx jeho xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.1.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx tetroxoprimu
Složení:
|
Trimethoprim |
5 xx |
|
xxxx Xxxxxxxxxxx |
30 xx |
|
96 % Xxxxxxx |
5 ml/30 xx |
|
Xxxxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x ethanolu xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (5 xxxx 30 xx) x doplnit xxxxx.
5.1.4 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
0,75 mg |
|
Glukóza |
5,0 mg |
|
Rozpustný xxxxx |
8,0 xx |
|
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx |
0,025 x |
|
Xxxx |
50 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xx je xxxxx, xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx.
5.2 Standardní xxxxxxx xxxxxxxxxx
5.2.1 Xx sterilní xxxxx x vhodným xxxxxxxx připravit xxxxxx xxxxxxxxxx o 60 μx/xx (100 IU/ml), x xx rozpuštěním xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
5.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 1,25 xx xxxxxxx penicilinu (5.2.1) sterilní destilované xxxx x doplnit xx xx 1000 xx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 0,075 μx xxxxxxxxxx/xx (= 0,125 XX/xx).
5.2.3 Připravit 75 ml xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,004 μg xxxxxxxxxx/xx (= 0,0067 XX xxxxxxxxxx/xx) xxxxxxxx 4 xx xxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxx (5.2.2) xx 71 xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.3).
5.2.4 Xxxxxxx penicilinu xxxxxxx xxxxx bodů 5.2.1 až 5.2.3 xx xxxx xxx xxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxx.
5.3 Xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek
Připravit xxxxxxxxx preparát xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (10 % x/X) xx vodě, xxxxx xxxx předtím xxxxxxxxxx na přítomnost xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxx xxxxxx přiměřené xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x prohlášeno za xxxxxx inhibičních xxxxx; xxxx xxxxx xx xxxxxxx do lahví x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx 100 °X, xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx x teplotou 0 °X xx 6 °C xx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
5.4.1 Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx var. calidolactis XXXX 10149 Kmen XXXX 10149 je xxxxxxxxx x xxxxxx X 953.
5.4.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx na xxxxxx xxxxxx xxxxx (5.1.1). Xxxxx xxxx se x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx kultura, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx 48 xxxxx xxx 63 ± 1xX. Xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx zátkou. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx kultura xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx při 0 xx 5 xX.
5.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (suspenze xxxx)
5.5.1 Asepticky xxxxxxx 20 xx živného xxxxx (5.1.1) xx xxxxxxxx Petriho xxxxx (4.2.2) x xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5.2 Sterilní pipetou (4.2.4) přenést 5 xx sterilní xxxxxxxxxxx xxxx do zkumavky xx xxxxxxx xxxxxxxx (5.4.2) x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx se xxxxx xxx 0 xx 5 °C x xxxxxxx se xx 36 xxxxx.
5.5.3 Xxxxxxxx pipetou (4.2.4) xxxxxxx 5 ml xxxxxxxx xxxx (5.5.2) xx Xxxxxxx xxxxx (5.5.1) a důkladně xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx povrchu xxxxxx zahnuté xxxxxxxx xxxxxxx. Inkubovat 16 xx 18 xxxxx xxx 63 ± 1 °X (4.1.1).
Xxx xxxxxxx xxxxxxx kultury (5.4.2) nebo kultury xxxxxx 36 hodin xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx nejméně xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 36 xxxxx.
5.5.4 Xxxxxxxx pipetou (4.2.4) xxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxxx xxxx xx Xxxxxxx misku xxxxxxxxxx xxxxxxx (5.5.3) x xxxxxxxxx tyčinkou odstranit xxxxx z xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxx (4.2.3) xxxxxxxxxx 250 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx ihned xxxxxxxxxxx, xx xx měly xxxxxxxxx x chladničce xxx 0 až 6 °C.
5.5.5 Xx 16xx xx 18xx xxxxxxxx xxxxxxxx při 63 ± 1 °X na xxxxxxxx xxxxx by xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx životaschopných mikroorganismů xxxx 5 x 10 miliony na xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx vykazovat rovnoměrné xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx sraženiny xxxx xxxxxxxxx, měla xx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx kultury (5.4.2).
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (5.1.2), poté zchladit xx 55 °C.
5.6.2 Xxxxxx část suspenze xxxxxxxxx xxxx (5.5.4) x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (5.6.1) xx xxxxxxxx xxxx x lahvičce. Xxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx (4.2.6) 0,3 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.6.2), xxx xx xxxxxxxxx 5 xx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx zátkou xxxx xxxxxx nebo, v xxxxxxx xxxxxx, zatavením xxxxx. Nechat agarové xxxxxx ztuhnout, poté xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx 12 xxxxx xx svislé xxxxxx.
5.6.4 Zkumavky/ampule xxxxx xxx xxxxxxx týž xxx, ale mohou xxx rovněž skladovány xxxxxxx měsíců při 0–6 °X, xxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Vzorky xx xx xxxxxxxx otestují, xxxxxxx xx 24 xxxxx po xxxxxx, x xx xx xxxx xx skladují xxx xxxxxxx 0-5 °X. Pokud xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx 24 hodin, xxxx by se xxxxxxx hluboko zmrazené (−30 °až - 15°X), aby se xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.2 Čitelně x nesmazatelně identifikovat xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx (5.6). Xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx stojánku (4.1.3) xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx a xxxxx (5.2 x 5.3).
6.3 Xx xxxxx xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxx 50 xxxxxxxxxx xxxxxxx roztoku (5.1.4).
6.4 Xxxxxx xxxxx řádně xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx (4.1.4) xxxxxxx 0,1 xx xxxxxx xx xxxxxxxx zkumavky/ampule. Xxx xxxxxxxxx každého xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.5 Postup xxxxx bodu 6.4 xx xxxxxxx stejným xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,004 μx/xx (= 0,0067 XX/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx (5.2.3).
6.6 Postupem xxxxx xxxx 6.4 xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.3) xxxxxxx vzorku xxxxx.
6.7 Xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxx xx nejméně 2½ xx 2¾ xxxxxx xx xxxxx xxxxx s teplotou 63 ± 1 °X (4.1.2).
6.8 Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx x vodní xxxxx.
6.9 Xxxxxxxxx xxxxx agarového xxxxx (xxx 7).
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Purpurové xxxxxxxxx xxxxxxxxx média xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx testovacím vzorkem xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx vzorku x xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx "xxxxx xxxxxxxxx" xxxxxxx v xxxxxxx xx xxxxxx 39. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx roztokem xxxxxxxxxx (6.5) zůstane purpurové, xxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx citlivé.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx zkumavkách/ampulích xx xxxxxxx mléka xxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx 39.
7.3 Xxxxx zabarvení xxxxxxxxx xxxxx ve zkumavkách/ampulích xxxxxxxxxxxx vzorek xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx na nepřítomnost xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx organismu.
7.4 Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx zkumavkách/ampulích, včetně xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxx xxx podrobeny xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx testovacím xxxxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx výsledků
8.1 Potvrdit xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x reakcemi popsanými x 7.1 x 7.2 xxxxx metody "X".
Xxxxx je xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx zmraženy, aby xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X. Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
1. Předmět x oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxx (X.7.1) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (X.7.2).
Xxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxxx
Xxx X.1.
2. Xxxxxxxx
2.1 Xxxxxx mléka obsahuje xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx popsaným xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx 2 xx kolem xxxxx.
2.2 Xxxxx vzorek, xxxxx xxxxxxxx antibiotika, xxxxxx xxxxxxxxxxx (2.1), x xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxx), xxxxxxxxx čirou xxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx látkou xx xxx xxxxxxxxx nebo xxxx penicilinu a xxxxxx antibiotika včetně xxxxxxxxxxx.
2.3 Xxxxx xxxx xxxx xxxx penicilinázou (2.2) xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx to xxx xxxx reziduum [xxx xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx X, xxxxxxxx XX, X.1.x) x 2x)].
Xxxxxxx polosyntetické peniciliny, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx sodný, xxxxxx xxxx jsou xxxxx částečně xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx (xxx 7.3).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx papírový disk xxxxxxxxx mlékem, xxxxx xx xx xxxxxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxx agarové xxxxxx. Xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx, xx jsou x xxxxx xxxxxxxx látky xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx. Velikost čiré xxxx mimo jiné xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x druhu xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx.
4. Xxxxxxxxx, xxxxxxx ze xxxx a xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxx X.4.1.
4.1.2 Xxxxx lázeň, xxxxxxxxxxxx xx 80 ± 1 °X.
4.2 Pomůcky xx xxxx
Xxx A.4.2.
4.3 Xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx 9 xx 13 mm, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx 130 xx mléka (nejlépe xxxxxxxxx x exsikátoru).
5. Xxxxxxxxxx média, xxxxxxxxxx xxxxxxx, roztok xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx organismus xxx.
Xxxxxxxx složky xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Musí xx xxxxxx destilovaná xxxx xx xxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxx obsahovat xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1 Xxxxxxxxxx xxxxx
5.1.1 Xxxxx agar (X.5.1.1)
5.1.2 Kultivační xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5 x |
|
Xxxxxxx |
1 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx (X.5.1.3) |
10 xx |
|
Xxxx |
10–15 g xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxx zahřívání a xxxxxxx zcela xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxx, xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx. Po přidání xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxx hodnotu xX, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx 8,0 + 0,1 xxx 25 °X. Sterilizovat xxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X.
5.2 Xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxxxx x mléku
Viz X.5.2.
Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (8) xxxxxxxxx standardní xxxxxxx xxxxxxxxxx x mléce xxx inhibičních xxxxx (X.5.3) x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx:
x) 0,004 μx/xx (0,0067 XX/xx)
x) 0,006 μx/xx (0,01 XX/xx)
x) 0,03 μx/xx (0,05 XX/xx)
x) 0,06 μx/xx (0,01 XX/xx).
5.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxx
5.3.1 Xxxxxxxxx dostatečné xxxxxxxx penicilinázy (xxxx-xxxxxxxxx) xx xxxxxxxx destilované xxxx x cílem xxxxxx koncentraci 1000 X/xx. Tento xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx dávky, xx xxxxx skladovat až xxxxx xxxxx xxx 0 °X xx 5 °X.
Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx účely xxxxxx postupu se xxxxxxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx stačí xx inaktivaci 0,6 μx (= 1 XX) penicilinu. U xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx, zda xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxx nutnosti xxxxx xxxxxxx koncentraci xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.3.2 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx dostupné xxxxx xxxxxxxxx penicilinázou, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxx odpovídající xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxx X.5.4.
5.5 Testovací xxxxxxx (xxxxxxxx xxxx)
Xxx A.5.5.
5.6 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
5.6.1 Xxxxxx rozpustit xxxxxxx xxxxxx xxx detekci xxxxxxxxxxx látek (5.1.2), xxxx xxxxxxxx xx 55 xX.
5.6.2 Xx xxxxx přidat xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx (5.5) k xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro detekci xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x naočkovaném xxxxxxx xxxxx, a xxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx Petriho xxxxx (X.4.2.2), xxxxxx vyhřáté xx 55 °X, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xx vytvořila 0,6 až 0,8 xx xxxxxx. Xxx Xxxxxxx misku x xxxxxxxx xxxxxxx 140 xx je xxxxx xxx 15 xx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx vytvořila 0,8 xx vrstva.
5.6.4 Xxxxxxx Xxxxxxx misky xx xxxxxxx, vodorovný xxxxxx, xxxxx vodorovnost xx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx x nechat xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xx dnem xxxxxx, xxx xx xx xxxxxxxxx kondenzaci xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
5.6.5 Xxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxx misky se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx den, xxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx dva týdny, xxxxx se xxxxx xx xxxxxxxx vloží xx xxxxxxxxxx polyethylenového xxxx a xxxxxxxxxx xx xxx 5 °X.
5.6.6 Označit dna Xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx možná xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
6. Postup
6.1 Příprava xxxxxx
6.1.1 X xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx podle "xxxxxx X" (X.7.1 x A.7.2) musí xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx 10 xxxxx na 80 ± 1 °C, xxx xx xxxxxxxx xxxx nespecifických xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
6.1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx přenést xxx 10 ml xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx hrdlem. X xxxxx přidat xxx 0,4 ml xxxxxxx penicilinázy (5.3) x xxxxx promíchat.
6.2 Xxxxxxx inhibičních xxxxx
6.2.1 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx (4.3) do xxxxxx xxxxx (6.1.2) pomocí xxxxx x suché xxxxxxx. Odstranit xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx x lahvičku xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx povrch Xxxxxxx xxxxx (5.6) x xxxxx přitlačit xxxxxxxx.
6.2.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx být vzdáleny xxxxx xx druhého xxxxxxx 20 mm x xx okraje xxxxxxx 10 mm.
6.2.3 Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx (4.3) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.2) musí xxxxxxxx rozmístit mezi xxxxx xxxxxxxxx vzorky xxxxx v xxxxxx xxxxxxx 2 % xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx; xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
6.2.4 Po xxxxxxxxx xxxxxxxxxx všech xxxxx na agarové xxxxxx x xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx dnem xxxxxx x xxxxxx je xxxxxxxxx 2,5 xx 5 xxxxx při 63 ± 1 °X.
6.2.5 Po xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx při xxxxxxx xxxxxx světla, xxx bylo možné xxxxxxxxx xxxx inhibiční xxxx kolem xxxxxxxxxx xxxxx. Čiré zóny xx xxxxx.
6.2.6 Standardní xxxxxx penicilinázy (6.2.3) xxxx xxxxx disku xxxxxxxx nejméně 2 xx xxxx.
6.2.7 Čiré xxxx xxxxx disků xxxxxxxxxxx xxxxxx mléka, xxxxxxx velkost xx xxxxxx xxxx xxxxx xxx velikost xxxxxxx x 6.2.6, ukazují xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx v testovacím xxxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek
6.3.1 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx zahřátého xxxxx (6.1.2) x xx xxxxxxx ošetřeným xxxxxxxxxxxxx (6.1.3). Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 10 xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx do xxxxxx mléka xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (5.3.2) a xxxxxx xx xx testovací xxxxx.
6.3.2 Xxxxxx 6.2.1 xx provede xxxxxx xxx každý xx xxxxxxxxxxxx roztoků penicilinu xxxxxxxxx x 5.2 x) xx x).
6.3.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx vzorky penicilinázy x xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 2)
7.1 Xxxxx xx kolem xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nevytvoří žádná xxxx xxxx, xxx xxxx xxxx xx xxxxxx kolem xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx mléka, xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx než zóna xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2x)), xxxxxxxxx látka xx xxxxxx mléka xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx rovné xxxx vyšší xxx 0,004 μx/xx.
7.2 Xxxxx xx xxxxxxxx hodnota xxxxxxx xxxx zóny xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx penicilinázu xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx zóny kolem xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx obsahuje xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx možné inaktivovat xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx použité x xxxxx xxxxxxx.
7.3 Xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx kolem xxxxx xxxxxxxxxx kontrolní xxxxxxxxxxxx xxxxx než průměrná xxxxxxx průměru xxxx xxxx kolem disku xx xxxxxxx mléka xxxxxxxxx xxxxx 6.1.2, xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx nelze xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxx xx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx je xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx být xxxxxxxxxxxx penicilinázou xx xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxx být xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx jiné xxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx
Xxxxx xx je xxxxxxxx, xxxxxxxxx látky xxxx než penicilin xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
8. Stanovení xxxxxx xxxxxxxxxx
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx může xxx provedeno buď xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx výpočty xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx získaných xx xxxxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxxxx x xxxxx (5.2 x) xx x)).
8.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx křivky
Vzhledem x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxx korelace xxxx xxx10 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a průměrem xxxxxxxxxxx xxx, xxxxxxxxxx xxxxxx lze sestrojit xx xxxxxxxxxxxx papír xxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxxx xxx xx xxxxxx. Inhibiční zóny xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx zdvojeného xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx se graficky xxxxxxx xx základě xxxxxxxxxxxx koncentrací penicilinu x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx křivka.
8.3 Výpočet
Koncentrace xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxx vypočítat xx základě průměru xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx přesné xxxxxxxxx xx poloměr xxxxxxxxxxx zón nejméně xxxxxxx větší, avšak xxxxxxx xxxxxxx větší xxx xxxxxxx xxxxx.
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Xxxxxxxx xx vyjadřují xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxx 0,004 μx/xx (xxxx xxxxxxxx stanovené koncentrace) xxxx jako obsah xxxxxxxxxxx látek xxxxxx xxx xxxxxxxxx.
9.2 Opakovatelnost (x) x xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X)
Xxxxx nejsou x xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx v důsledku xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx.
XX. DETEKCE XXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
V xxxxxxx x požadavky směrnice 85/397/XXX, přílohy X, xxxxxxxx XXX xxxx 2, tento xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx se xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x potravin.
Pasterace xx xxxxxxxx, které xxxxxxxxx mléko xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx normy xxxxxxxxx x příloze X, xxxxxxxx XXX xxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx jde x xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °C x 21 °C, xxxxxxxxxx bakterie a xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx test xx xxxxxxx xxxxxxxx xx nezbytný xxxxx xxxxx, pokud existuje xxxxxxxxx, že xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxx
Xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, který xxxxxx vydávání xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx obchod xxxxxx Společenství. Pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx, pokud xxxxxxxx, xxxxxxx kritéria x xxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxx x xxxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx mikroorganismus xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx takto:
Počet xxxxx xx xxxxxxxx, nebo "xxxxxxxxxx" či "xxxxxxxxxxxx" x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx požaduje xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.