Xxxxxxxxxx Xxxxxx
xx dne 14. xxxxx 1991,
xxxxxx xx stanoví některé xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx mléka x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
(91/180/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX SPOLEČENSTVÍ,
s xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Evropského xxxxxxxxxxxxx společenství,
s xxxxxxx xx směrnici Rady 85/397/XXX xx xxx 5. xxxxx 1985 x hygienických x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx obchodu x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx uvnitř Xxxxxxxxxxxx [1] naposledy pozměněnou xxxxxxxx 89/662/XXX [2], x xxxxxxx na xx. 10 odst. 2 xxxxxxx směrnice,
vzhledem x tomu, xx xxxxx xx. 10 xxxx. 2 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx analýzy x testování, xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxx kontrolu dodržování xxxxx pro xxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, že pro xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx zejména xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx, bodu xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx stanovit xxxxxxx metody xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, nepřítomnosti xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx mrznutí;
vzhledem k xxxx, že xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x XXX xxxxx je xxxxxxxx stanovit xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx vhodné xxxxxxx stanovit referenční xxxxxx analýzy a xxxxxxxxx, které xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; xx xx xxxxxxx xxxxxxxx pokračovat x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx kterých se xxxxxxxxx xxxxxxx metody xxxxxxx a xxxxxxxxx; xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx státy xx xx, xxx xxx xxxxxxxx norem xxxxxxxx 85/397/XX xxxx xxxxxxx xxxxxx rutinní xxxxxx;
xxxxxxxx k tomu, xx xxxxxxxxx referenčních xxxxx analýzy x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx spolehlivosti xxx xxxxxxxxx jednotného xxxxxxx xxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx jsou x souladu xx xxxxxxxxxxx Stálého xxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
XXXXXXX XXXX ROZHODNUTÍ:
Xxxxxx 1
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x testování xxx syrové mléko xxxx xxxx:
- stanovení xxxx xxxxxxx,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx antibiotik a xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 2
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx pasterované mléko xxxx tyto:
- stanovení xxxx xxxxxxx,
- stanovení xxxxxxxx fosfatázy,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx peroxidázy,
- stanovení xxxxxx mikroorganismů xxx 30 °C,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 21 °C,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií – počítání xxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxx antibiotik a xxxxxxxxxxx,
- detekce xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Článek 3
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx XXX xxxxx x sterilizované xxxxx xxxx xxxx:
- stanovení xxxx mrznutí,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 4
Použití xxxxxxxxxxxx xxxxxxx analýzy x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx kritérií xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx se musí xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx X.
Xxxxxx 5
Referenční xxxxxxx xxxxxxx x testování xxxxxxx v xxxxxxxx 1, 2 x 3 jsou xxxxxxx x příloze II.
Článek 6
Xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx do 31. xxxxxxxx 1992, xxx xx zohlednil xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx znalostí.
Xxxxxx 7
Toto rozhodnutí xx xxxxxx členským xxxxxx.
V Xxxxxxx xxx 14. února 1991.
Xx Xxxxxx
Xxx Xxx Xxxxxx
xxxx Xxxxxx
[1] Xx. xxxx. X 226, 24.8.1985, x. 13.
[2] Úř. xxxx. X 395, 30.12.1989, x. 13.
XXXXXXX I
OBSAH
I. Obecná xxxxxxxxxx
XX. Odběr xxxxxx xxxxxxxx x tepelně xxxxxxxxxx mléka
I. OBECNÁ XXXXXXXXXX
1. Úvod
Obecná ustanovení xx xxxxxx činidel, xxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxx výsledků, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx států x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx vzorků a xxxxxxxxxx mléka musí xxxxxxxxx xxxx ustanovení.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxx
2.1.1 Xxxxx xxxx stanoveno xxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx odpovídající čistoty. Xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx bez xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxx růst xxxxxxxxxxxxxx xx popsaných xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.1.2 "Xxxxxxxxxxxx" xxxx "xxxxxxx" (xxx dalšího xxxxxxxxx) se xxxxxx "xxxxxxxxxxx ve xxxx" xxxx "ředění xxxxx".
2.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, všechny xxxxxxxxx xxxxxxxxxx musí xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
3.1 Seznam xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxxxxxx seznam xxxxxxxxx x xxxxxxx xxx různé xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx x se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.2 Xxxxxxxxxx váhy
"Analytickými xxxxxx" xx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx 0,1 xx.
4. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, výsledek xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx průměrem dvou xxxxx, které xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (5.1) xxx příslušnou metodu. Xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx splněno, xxxx se xxxx xxxxxxxx, jinak xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Výpočet xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx není xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx vypočítá x xxxxxxxxxx hmotnosti vzorku.
5. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: opakovatelnost x xxxxxxxxxxxxxxxxxx
5.1 Kritéria xxxxxxxxxxxxx uvedená xxx xxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxxxx takto:
5.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) xx xxxxxxx, xxx xxxxxx se xxxxxxx absolutní hodnota xxxxxxx mezi xxxxx xxxxxxxxxxxx výsledky xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx podmínek (xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx období).
5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) je xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx (různí xxxxxxxxxx, xxxxx přístroje, různé xxxxxxxxxx a/nebo xxxxx xxxx).
5.1.3 Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, hodnoty xxx kritéria xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx, uváděné x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx 95 % xxxxxxxxx xxxxxx spolehlivosti xxxxx xxxxxxxx XXX 5725, xxxxx xxxxxx, 1986. Xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx postupu. Xxx některé postupy xxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx spolupráci, xxxxxx provedeny. X xxx případě byly xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1.4 Xxxxxxx xxxxx x nezbytné xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx x souladu x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
6. Xxxxxx x testování
Zpráva x xxxxxxxxx musí xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x získané výsledky. Xxxx xxxx musí xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx by xxxxx ovlivnit výsledky. Xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx všechny xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
XX. XXXXX XXXXXX XXXXXXXX A XXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx pro xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx použijí pro xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x pro xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx uvedené x bodech 2, 4.4, 5 a 6 xx xxxxxxx xxx xxxxx vzorků xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx k xxxxx xxxxxxxx.
2. Obecně
Odběr xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx obsaženého x xxxxxxx, xxxxxxxx xxxx. provedou xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxx odběrem vzorků xxxxxx vyškoleni.
Pokud xx xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, xxx bylo xxxxx, xx odebrané xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxx x xxxxx šarží.
Pokud xx příslušné orgány xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx za xxxxxxxx, xxxxxxx zaměstnance pověřené xxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx vzorků, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx byla xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx
3.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxx odběr xxxxxx musí být xxxxx zhotoveno x xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxx xxxxxxxx s ohledem xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx, xxx.). Xxxxxxx a xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxx dostatečně xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výrobku xxx vzniku žluklé xxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx pevnou, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x nabírání xxxxxx x xxxxxxxx hloubky xxxxxx. Objem xxxxxxxxx xxxx xxx alespoň 50 xx.
Xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxx být xxxxxxxx, xxxxxx nebo x vhodného plastu.
Materiály xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxx x xxxxx) xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx materiál x xxxxxx xx xxxxxx xxxx xxx čistý, xxxxx, hladký xxxxxx xxx trhlin x xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx.
3.2 Xxxxxxxx pro xxxxx vzorků xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx (včetně xxxxx) musí xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx 3.1 x xxxx být xxxxxxxx.
Xxxxx xx xxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx vzorků xxxxxxx xxxxx vybavení, xxxx xxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxx x pokyny xxxx požadavky, které xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx nedošlo x xxxxxxxxx výsledků xx xxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxxxx odběru xxxxxx
4.1 Xxxxxx xxxxx
Xxx xxxxxx xx xxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx být xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxx, xxxx mechanicky.
Vzorek xxxx xxx xxxxxxx xxxxx xx promíchání, xxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxxx.
Xxxxx xx x nádrže odebírá xxxxxxx více vzorků xxxxx xxx xxxxx xxxxx, xxxx xxxxx xxxx být odebrán xxxxxx pro mikrobiologické xxxxxxxxx.
Xxxxx vzorku xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx testování. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx takový, xxx xxxx tyto xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxx xxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx však xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx přepravy.
4.2 Ruční xxxxx xxxxxx
4.2.1 Odběr xxxxxx x xxxxx x konví xx xxxxx
X xxxxxxxx promíchání xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxx konvi xxxxxx x xxxx, xxxxxxx xxxx xx xx, xxx se xxxxx řádně xxxxxxxxxx x xxx xx xx hrdle xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx, xxxxx je reprezentativní xxx xxxxx zásilku, xx odebere xxxxxxxx xxxxx bodu 4.2.4.
4.2.2 Xxxxx z chlazených xxxxxx na xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx xxxxx mechanicky xxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxx xxxxxx x xxxxx xxx
Xx nezbytné, xxx xxxxx xxxx řádně xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxx do xxxxx xxx. Xx účelem xxxxxxxxx rovnoměrného rozdělení xxxx může xxx xxxxxxxx další xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxx, x xxx se xx odebrat xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxx postupem xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.4 Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxx, x xxxxx xx má xxxxxxx xxxxx vzorků, xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx, x každé nádoby xx xxxxxxx reprezentativní xxxxxxxx, přičemž se xxxxxxxxx xxxxxxxx mléka xxx xxxxx vzor. Xxxxx vzorky x xxxxx nádoby xxxxxx xxx odděleně xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxx, které xx nachází v xxxxxx, xx které xxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx. Po xxxxxxxxxx xx odebere xxxxx (xxxx) vzorek (xxxxxx) x těchto xxxxxxxxx množstvích.
4.2.5 Xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx – xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx vagóny
4.2.5.1 Xxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx mechanické xxxxxxxxxx (4.2.5.2).
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, xx xxxxxx xxxx xxxxx x xxxxx. Xxxx být xxxxxxxxx, xx xxxxxx promíchání xxxxxxx v xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx shodu xxxxxxxx xxxxx provedených xx xxxxxxxx odebraných xxx x xxxxxxx xxxxx xxxxx, nebo v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx při xxxxxxxxxxxxx xxxxx z xxxxx. Způsob promíchání xxxxx (xxxxxxxx xxxxx xxxx plnotučného xxxxx) xx xxxxxx, xxxxx xx rozdíl xxxxxx xxxx x xxxx xxxxxx odebraných xx xxxxxx podmínek xxxxx xxx 0,1 %.
Xx xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxx otvorem ve xxxxxx xxxxx může x místě vypouštění xxxxxx malé xxxxxxxx xxxxx, které xxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx. Proto xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. X případě xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxx vytéci dostatečné xxxxxxxx xxxxx, aby xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.5.2 Promíchání obsahu xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, cisternových xxxxxxx a cisternových xxxxxx xx možné xxxxxxx:
- mechanickou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx nádoby x poháněnou xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x umístěnou x xxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx,
- x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx kamionů xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx přepravní xxxxxx, xxxxx xx napojena xx xxxxx x xxxxxxxx do průlezového xxxxxx,
- filtrovaným, xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx žluklé xxxxx.
4.3 Automatický x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx vzorků
Automatické x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx odběr vzorků xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx může xxxxxx xxxxx pokynů xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx laboratoří xxxx xxxxx příslušným xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx před x xxxxx používání podrobeno xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, které xxxxxxxxx odpovědný xxxxx. Xxxxxxxx postupů xxxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx mléka, x xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxx xxxxxxx x minimálním xxxxxxx xxxxxx),
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxx používání xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx orgán xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx objem xxxxx, ze xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx,
- minimální xxxxx xxxxxx,
- maximální přenos,
- xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.
4.4 Xxxxx xxxxxx xxxxxxx ošetřeného xxxxx xxxxxxxx k xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx x maloobchodních xxxxxxxx
Xxxxx xxx o xxxxxxx xxxxxxxx mléko xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nádob. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx obchodní xxxxxx xxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx, x xx, pokud je xx možné, xxxxx xx zpracování (x xxxxxxx pasterovaného mléka x den xxxxxxxxx).
X xxxxxxx xxxxx tepelně xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx metodou XXX x sterilizovaného) se xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, aby xxxxxxxxx xxxxx vyšetření, xxxxx xxxx být provedena, x xx podle xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
5. Xxxxxxxxxxxx vzorku
Vzorek xx měl být xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx podle xxxxxx xxxxxxxxxxxx laboratoří xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxx 2).
6. Xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx orgánu xxxxxxxx xxxxxxxxx laboratoř pokyny xxxxxxxx xx xxxxx x podmínek xxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx dodrženy x době mezi xxxxxxx vzorků xxxxxx xxxxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx druhu xxxxx x testování, xxxxx xx xxx xxxxxxx.
Xxxxxx stanoví xxxx:
- xxxxx přepravy a xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx vzorky xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x přímému xxxxxxxxxx xxxxxx. Je-li je xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx skladován xx xxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 0 xX xx 4 xX. Xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxxx x x xxxxxx xxxxxxx xxxxx přesáhnout 36 xxxxx. Příslušný xxxxx xxxx xxxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxx skladování 0 oC xx 6 xX, xxxx-xx xxxx xxxx xxxxxxx x testováním delší xxx 24 hodin,
- xxxxxx pasterovaného mléka xxxxxx xxx mikrobiologické xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxx teplotách 0 xX xx 4 xX. Xxxx mezi xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx být xx xxxxxxxxx x x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 24 xxxxx,
- xxxx xxxxxx xxxxx xxx vzorky syrového xxxxx x pasterovaného xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx laboratoře x xxxx xxxx xxxxxxx vzorku x xxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
XXXXXXX X
XXXXX
X. Xxxxxxxxx xxxx mrznutí
II. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
XXX. Xxxxxxxxx xxxxxxxx peroxidázy
IV. Xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxx 30 °C
V. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 21 °X
XX. Xxxxxxxxx xxxxxx koliformních xxxxxxxx – xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X
XXX. Xxxxxxxxx xxxxxx somatických xxxxx
XXXX. Detekce antibiotik x xxxxxxxxxxx
XX. Detekce xxxxxxxxxxx mikroorganismů
I. XXXXXXXXX XXXX MRZNUTÍ
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, UHT xxxxx xxxx sterilizovaného xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx), x xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zařízením x xxxxxxxxxxxx snímač xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxx dva typy xxxxxxxxx. První typ xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx na xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx typ xx x obchodních xxxxxx xxxxxxxx xxx, xx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxxxxxx xxxx odečet. Xxxxxxxx x tomu, že xx mohou xxxxx xxxxx křivky xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx, xxx x xxxxxx xxxx mrznutí xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, tento xxxxxxxxxx xxxxxx vyžaduje použití xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx plató. Xxxxxxxxx s xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxx odhad xxxxxx xxxxxxx xxxx vody x xxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxx 0,18 x xxxxxxxx mléčné xx 100 ml (viz xxx 7.4).
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx x souladu x popsaným postupem x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxx (°C).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx teplotu x mechanickou xxxxxxx xx vyvolá jeho xxxxxxxxxxxx, xxxxx způsobí, xx teplota xxxxxx xxxxxxx xx x xxxxx, které odpovídá xxxx xxxxxxx vzorku.
Přístroj xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx odečty xxx dva standardní xxxxxxx. Xx těchto xxxxxxxx plató xxxxx xxx mrznutí xxxxx xx stupních Xxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x pomůcky xx skla
Obvyklé xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx z xxxxxxxxxxx řízené xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx snímače (xxxxxxxxxxxxxx odporového xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx jiného xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, míchačky xx vzorky a xxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx x xx xxxxxxxx xx xxxxxx.
4.1.1 Xxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx použít xxx xxxx xxxxxxxx xxxxx.
4.1.1.1 Xxxxxxx xxx
Xxxxx izolovaná xxxxx obsahující xxxxxxx xxxxxxxx kapalinu, xxxxx xx xxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx jakýmikoli xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx než 0,2 °C. Teplota xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx ± 0,5 °X xx nominální hodnoty xxxxxx xxxxxxxx.
Xx důležité, xxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxx konstantní xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx chladicí xxxxxxxxx.
4.1.1.2 Xxxxxxxxxx typ
Kolem xxxxxxxx xx xxxxxx proudí xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx může xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx ± 0,5 °X xx nominální hodnoty xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx je 33 % (X/X) vodný xxxxxx 1,2-xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx).
4.1.2 Xxxxxxxxx x příslušný xxxxx
Xxxxxxxxx se xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx 1,80 ± 0,2 xx x x xxxxxxx xxxxxx maximálně 0,31 xx. Xxxxxx xxxxxxxxx termistoru xxxx xxx xxxxx než 2 xxxxxxx a xxxxxxx b (xxx xxxxxxxx) musí xxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx musí být xxxxxx, xxx xxx − 0,512 °X xxxxxxx termistoru xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x 0,0005 °X. Maximální xxxxxxxxx xxxxxx může být ± 5 %.
Xxxx xx xxxxx x xxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx, konec xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxxxx na xxxxxx x v bodě, xxxxx xx 44,6 ± 0,1 xx xxx horním xxxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxxxxx xx straně 15). Xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx polohy.
Poznámka:
β xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx podle xxxxxx
− xX / xX × 1 / X = β / X2
xxx:
X xx xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx
X xx xxxxx x ohmech při xxxxxxx T,
− xX / xX × 1 / X xxxxxxxx xxxxxxxxxx
β xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxx xxxxx xx doporučuje hodnota xxxxx než 3000.
4.1.3 Xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
4.1.3.1 Princip xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxx křivky, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx ± 0,002 xX po dobu xxxxxxx 20 xxxxxx.
4.1.3.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx termistoru xx xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nebo podobným xxxxxxxxx pomocí nejlepších xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx tolerance xx ± 10 % x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx 2×10−5°X.
Xxxxxxxx (vyrovnávací) xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx x xxxx xxx x 0,3 % xxx maximální xxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxx po xxxxxxxxx 0,001 °X.
4.1.3.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx rozlišení xx xxxxxxx 0,01 °X v xxxxxxx xx 0 °C xx –1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxx xx sobě xxxxxxxxxxxxx xxxxxx téže teploty xxxxxx xxxxx než 0,001 °C.
Linearita obvodu xxxx xxx xxxxxx, xxx při správné xxxxxxx přístroje nevznikla x xxxxxx xxxx xxxxxxx xx – 0,400 °X xx – 0,600 °X xxxxx chyba než ± 0,001 °C.
4.1.4 Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx použije xxxxxx xxxx x xxxxxxx 1 xx 1,5 xx, xxxxx xxxxxxxxx s mlékem,.
Míchačka xx xxxx být xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx vertikálně xxx, aby xxxx xxxxxx xxxxx xxx xx úrovni hrotu xxxxx termistoru. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx 1,5 mm xxx xx xxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx rozkmitem xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx ± 1,5 xx), xxx byla zajištěna xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx nesmí v xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx termistoru nebo xxxxx xxxxxxxx.
4.1.5 Zařízení xx xxxxxxxx mrznutí
Může xx být jakékoli xxxxxxxx, xxxxx po xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx mrznutí xxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx testovacího vzorku xxxxxxx k xxxx xxxxxxx. K xxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx; xxxxxx xxxxxxxx xx zvětšení xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx xxx sekundy xxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx na xxxxxx.
4.1.6 Xxxxxxxx xx xxxxxx
Xxxxxxxx xx vzorky (viz xxxxxxx 1) xxxx xxxxxxxx x 50,8 ± 0,1 xx xxxxxx; xxxxxx průměr xx 16,0 ± 0,1 xx x xxxxxxx xxxxxx je 13,5 ± 0,1 xx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx x více xxx 0,1 xx.
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx vzdálenou xx xxxxxxx xxxxxx 29,8 xx (21 xx xxx xxxx xxxxxxxx), xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx.
4.1.7 Xxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx nebo vně xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx nepřekračovala ± 1 % xxxxxxxxx xxxxxxx, když xxxxxx xxxxx xxxxxx x ± 6 %.
4.2 Analytické váhy
4.3 Xxxxxxx baňky x xxxxxx 1000 xx, xxxxx A.
4.4 Xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 130 ± 1 °X
xxxx
Xxxxxxxxxx pec, xxxxxxxxx, nastavitelná na 300 ± 25 °X.
4.5 Xxxxxxxxx
5. Činidla
5.1 Xxxx destilovaná x xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx x zchlazená na 20 ± 2 °X, ve zkumavce xxxxxxxxxxx oxid uhličitý.
5.2 Xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx x.x., jemně xxxxx, xxxxxx 5 xxxxx xxx xxxxxxx 300 ± 25 °C x xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 24 xxxxx při xxxxxxx 130 ± 1 °X v sušárně x zchlazený xx xxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.3 Příprava xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (viz xxxxxxx 1) suchého xxxxxxxx xxxxxxx (5.2) do xxxxxxx. Rozpustit x xxxxxxxxxxx vodě (5.1), xxxxxxxxxxxxx přelít xxxxxx xx odměrné xxxxx x xxxxxx 1000 xx x doplnit xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx 20 ± 2 °C.
Skladovat xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxx xxx 5 °C x xxxxx uzavřených xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x maximálním xxxxxx 250 xx.
Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx při 20 °X
|
x XxXx/x |
°X |
|
6,859 |
-0,408 |
|
7,818 |
-0,464 |
|
8,149 |
-0,483 |
|
8,314 |
-0,492 |
|
8,480 |
-0,502 |
|
8,646 |
-0,512 |
|
8,811 |
-0,521 |
|
8,977 |
-0,531 |
|
9,143 |
-0,541 |
|
10,155 |
-0,600 |
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx roztok xxxxxxx promíchá protřepáním x několikerým xxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx tak xxxxxx, xxx xx xx xxxxxxx přimíchal xxxxxx.
Xxxxxx standardního xxxxxxx xx x láhve xxxxxx do xxxxx x xxxxx kádinky. Xxxxx xxxxxxxxxx pipety.
Nepoužívat xxxxxxx z xxxxx, xxxxx xxxx ze xxx xxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxxxx roztoky xxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx fungicid (xxxxxxxxx roztok xxxxxxxxxxx 10 g/l).
6. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx musí xxx nastaven xxx, xxx se xxxxxx xxxxxxx nelišila o xxxx xxx 1 °X xx xxxxxxx, xxx níž xx xxxxxxx kalibrace. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxx pokojovým xxxxxxxx xxxxxx xxx 26–27 °X.
Xxxxxxx xx, xx xxxxxxxx funguje xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xx xxx zapnut xxxxxxx 12 hodin xxxx xxxxxxxxx. Zkontrolovat xxxxxx xxxxx, rozkmit xxxxxxx míchačky x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxx standardní roztoky (xxx xxxxxxx výše), xxxxxxx bod mrznutí xx xxxxx xxx xxxx těsně xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxx mrznutí xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx neměl xxx xxxxx než – 0,100 °X.
(X xxxxxxxxx xxxx v současné xxxx xxxxxxxxxx kryoskopů xx xxxxxxxxx obvod xxxxxxxxxx sestaven xxx, xx se xxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx mrznutí x xxxxx rozsahu xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx bod xxxxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxxxxx xxxxxxxxxx postup; xxxxxxx musí tuto xxxxxxx uvést).
Pomocí xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx jednoho xxxxxxxxxxxx xxxxxxx do xxxxx x xxxxx xxxxxxxx na xxxxxx, xxxx měřit xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx na vzorky xxxxxxxxx při xxxxxxxxx xxxx vyrobeny a xxxxxxxx xxxx zkumavky xxxxxxxxx xx vzorky xxxxx (xxxxxx xxxx xxxx, umyté a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků xxxx xxxxxx jako xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx výrobce xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx bodu xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku. Xxxxxxxx tento postup x xxxxxx standardním xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx po xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx roztok xxxxxxxxxx správné xxxxxxx xxxx xxxxxxx každého x xxxx, aniž xx xxxx nutná xxxxxxxxx nastavení. Xxxxxxxx xx tedy xxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxx ukazuje xxx xxxxxxx vzorku mléka, xxxx xx byla xxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
7. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku
7.1 Xxxxx to xx xxxxxxxx xxxxxxxxx vzorky xxx teplotě xxxx 0 °X x 5 °X.
7.2 Xxxxx xx je xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx cizí xxxxxxx xxxx tuhý mléčný xxx xx xxxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxxxx opatrně xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, nesmí xxxxxxxx x xxxxxx a xxxx být xxxxxx xx xxxxxxxxxxx teploty.
7.3 Xxxxx může být xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0 x 5 °X) xxxx xx možné xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxx xxxx xx to, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx teplotu.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx současně xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxx, jejichž xxxxxxxx xxxxxxxxx 0,18 x xxxxxxxx mléčné xx 100 ml xxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx.
7.5 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 20 minut před xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
8. Postup
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx, xxx hladina x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx v xxxxxxx s pokyny xxxxxxx, xxxxxxxx zda xx sonda xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx na vzorky. Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx, zda xx chladicí xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx alespoň 12 xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx kapaliny, xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx.
8.2 Xxxxxxx kontrola xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxx xxxxxxx (například xxxxxx x xxxxx xxxxxxx – 0,512 °X), dokud se xxxxxxx xxxxxxx při xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx měřeních xxxxxxx xxxxx x xxxx xxx 0,001 °X. Xxxxx xx průměr xxxxxx xxxxxx liší xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxx 0,002 °X, kryoskop se xxxxx xxxxxxxxxx, xxx xx popsáno x xxxx 6.
Xxxxx xx xxxxxxxx používá xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx kalibrace xx provádí xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
8.3 Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx vzorkem xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx otáčením. Xxxxx neprotřepávat xxxxxxxxxx xxxxxx tak xxxxxx, xxx xx do xxxxxxx přimíchal xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx xxxxx do xxxxx x čisté zkumavky xx vzorky. Xxxxxxx xx, že xxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx x xxxxx, xxxxx xx to xxxxxxxx opatrně xx xxxxx směrem odspoda xxxxxx jemnou, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pokynů xxxxxxx. Mléko xx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx výrobcem x xxxxxxxxx xx 0,1 °C.
(U xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx tuto xxxxxxx x digitálního xxxxxxxxx; x xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx tím, xx xx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xx ručička xxxx nitka xxxxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxx.)
Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx později, xxx je dosaženo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx rozmezí, xxxxxxxxx se xxxxxx x zopakuje se x xxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxx tento xxxxx xxxxxx rovněž xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx teploty, alikvótní xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx na 45 °X x 5 xxxxx xx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx.
Xxxx zchladit xxxxxx xx testovací xxxxxxx a ihned xxxxxxx xxxxxxxxx. Teplota xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxx, xxxxx zůstane po xxxxxxx xxxx konstantní, x xxxx klesne. Xxx mrznutí odpovídá xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx x xxxx xxxxxxx xx xxxxx zaznamenat.
Poznámka:
Doba, xx xxxxxx teplota xxxxxxx konstantní, x xxxxxx interval mezi xxxxxxxx mrznutí x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx liší xxxxxx xx xxxxxx a xxx xxxx a xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxx než pro xxxxx. Xx nezbytné xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xx měření xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, vyjmout zkumavku, xxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxx sondu x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx nahoru xxxxxx, xxxxxx a chlupy xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx druhé stanovení x xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxx xxxx naměřenými body xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (0,004 °X), provést druhé xxxxxxxxx x jiného xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx obou stanovení xxxxxx xx 0,004 °X, zapíší xx x použijí xx xxx výpočet xxxxxxxxx xxxxxxxx.
8.4 Chlazení xxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx zkumavku xx xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx x xxxxxx provozní teplotu, xxx sonda xxxxxxx x xxxxxx.
(X xxxxxxxxx xxxx kryoskopu xx xxxx xxxxx; v xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx měření xxxxx zchlazena, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx několika slepých xxxxxxxxx, dokud xx xxxxxxxxx xxxxxx údaje.)
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Výpočet
Pokud xx xx provedení xxxxxxx kontroly xxxxxxxxx xxxxxxxxx potvrzena, xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx dvou xxxxxxxxxxxx hodnot získaných xxx xxx mrznutí, xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx je liché xxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxxxx sudou xxxxxxx, xxx xxxxxxx tento xxxxxxx:
Xxx xxxxxxx (°X)
|
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx |
Xxxxxx |
|
|
-0,544 |
-0,545 |
-0,544 |
|
-0,545 |
-0,546 |
-0,546 |
9.2 Xxxxxxxxxxxx
9.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x): 0,004 °X
9.2.2 Reprodukovatelnost (R): 0,006 °X
Xxxxxxx 1
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1 (xxxxxx xxxxxxxx na vzorky xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx termistoru x xxxxxxxx)
XX. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXX
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx kapitola xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení aktivity xxxxxxxxx x pasterovaném xxxxx.
2. Definice
2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx míra xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x μx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxx, xxxxx je xxxxx než 4 xx fenolu xx 1 xx.
3. Princip
Aktivita xxxxxxxxx ve xxxxxx xxxxxx fenol z xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx dvojsodného. Xxxxxxxx xxxxx reaguje x dibromchinonchlorimidem x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxx), který se xxxxxxxxxxxxxx xxxx při 610 nm. Xxxx xx provádí porovnání xx vzorkem, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Tlumivý xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.1 Rozpustit xx xxxx 50,0 x hydroxidu xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) [Ba(OH)2.8H2O] a xxxxxxx xx 1000 xx.
4.1.2 Xxxxxxxxx xx xxxx 22,0 x xxxxxxxx borité (H3BO3) x doplnit na 1000 xx.
4.1.3 Xxxxxx 500 xx každého xxxxxxx xx 50 °X, xxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx, rychle xxxxxxxx xxx xx 20 °C, x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xX na 10,6 ± 0,1 xxxxxxxx roztoku 4.1.1 xxxx 4.1.2. Přefiltrovat. Xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4.1.4 Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx objemem xxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxx xxx vyvolání zabarvení
Rozpustit xx xxxx 6,0 x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XxXX2) nebo 12,6 x XxXX2.4X2X x 20,0 g chloridu xxxxxxx (XxXx) a xxxxxxx xx 1000 xx.
4.3 Xxxxxxx roztok xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxx 10 ml xxxxxxxxx roztoku xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2) xxxxx xx 100 xx.
4.4 Roztok substrátu
Rozpustit 0,1 x fenylfosfát xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, ve 100 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.3) xxxx 0,5 x fenylfosfátu xxxxxxxxxxx xx 4,5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2), xxxxxx dvě xxxxx xxxxxxx BQC (4.6) x nechat xxxx 30 xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 2,5 xx n-butanolu x xxxxxx stát, xxxxx xx xxxxxxx-1 neoddělí. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx-1. X xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx; xxxx xxxxxxxx vyvolat zabarvení x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxxx, x xx xxxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxxxx xx 100 xx xxxxxxx xxxxxxxx x hydroxidu xxxxxxxxx (4.1.3).
4.5 Xxxxxxxxx xxxxx-xxx
Xxxxxxxxx xx xxxx 3,0 g xxxxxx xxxxxxxxxxx (XxXX4 · 7X2X) x 0,6 x xxxxxx měďnatého (XxXX4 · 5X2X) x doplnit na 100 xx.
4.6 Xxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx XXX)
Xxxxxxxxx x 10 xx 96 % (V/V) xxxxxxxx 40 ± 1 mg 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXX) (X6X2Xx2XxXX6).
Xxxxxxxxx v xxxxx láhvi x xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxx xx starší xxx xxxxx xxxxx.
4.7 Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (XX)
Xxxxxxxxx xx xxxx 0,05 g síranu xxxxxxxxx (CuSO4.5H2O) x xxxxxxx xx 100 xx.
4.8 Standardní roztok xxxxxx
4.8.1 Navážit 200 ± 2 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx o xxxxxx 100 xx, xxxxxx xxxx, xxxxxxxxx x doplnit xx 100 xx. Xxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx měsíců.
4.8.2 Xxxxxx xxxxx 10 ml xxxxxxxxx xxxxxxx, doplnit xx 100 xx x promíchat. 1 xx xxxxxxxx 200 μx xxxxxx.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxxxx pomůcky xx xxxx, jakož x xxxxx x xxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxx vyčištěny. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx čerstvě xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx čistění parou.
b) Xxxxxxx typy plastových xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
5.1 Analytické xxxx
5.2 Xxxxx lázeň nastavitelná xx 37 ± 1 °C.
5.3 Spektrofotometr xxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx 610 xx.
5.4 Xxxxxxxx, 16 nebo 18 × 150 mm, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx po 5 xx a 10 ml.
5.5 Xxxxxx
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, např. x xxxxxxx 5 xx.
5.7 Xxxxxxxx xxxxxx o xxxxxxx nejméně 9 xx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
5.8 Xxxxxxx xxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků.
6. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxx stanovení xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
x) Xxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxx xx xxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx pipetování.
6.1 Příprava xxxxxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 Testování xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx skladovat xxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xx déle xxx dva xxx.
6.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxx do každé xx xxxx xxxxxxxx (5.4), jednu xxxxxxxx xxxxxx jako xxxxxxxxx xxxx xxxxx pokus.
6.3 Xxxxxxxxx
6.3.1 Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xx vroucí xxxx; xxxxxxxx x kádinku x xxxxxx vodou xxxxxx hliníkovou folií, xxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx pokojovou xxxxxxx.
6.3.2 Xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx slepý x testovací xxxxxx xxxxxxx způsobem. Xxxxxx 10 xx roztoku xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxxxxx.
6.3.3 Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 60 xxxxx xx vodní xxxxx (5.2) a občas (xxxxxxx čtyřikrát) promíchat xxxxxx obsah.
6.3.4 Xxxxxx xxxx v xxxx 6.3.1 zahřívat xxx xxxxxx ve xxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx pokojovou xxxxxxx.
6.3.5 Xx každé xxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxxxx xxxxx-xxx (4.5) x xxxxx xxxxxxxxx.
6.3.6 Xxxxxxxxxxxx xxxx suchý xxxxxxxxx papír, vylít xxxxx xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx znovu, xxxxx xxxx filtrát xxxxxxxx xxxx; xxxxxxxxxx 5 xx ve xxxxxxxx.
6.3.7 Xxxxxx 5 xx tlumivého xxxxxxx xxx xxxxxxxx zabarvení (4.2).
6.3.8 Xxxxxx 0,1 xx xxxxxxx XXX (4,6), promíchat x 30 xxxxx nechat xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.9 X xxxxxxxxx x kontrolním xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx při xxxxxx délce 610 xx.
6.3.10 Pokud absorbance xxxxxxxx x xxxx 6.3.9 převyšuje absorbanci xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 20 μx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.4.4, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx smícháním xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx opatrně xxxxx do varu, xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
6.4.1 Xx základě xxxxxxxxxxxx xxxxxxx fenolu (4.8.2) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0 (xxxxxxxxx xxxx slepý xxxxx), 2, 5, 10 x 20 μx xxxxxx xx xxxxxxxx. Xx xxxxx x pěti xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx 1 xx xxxx x 1 ml xxxxxx standardních roztoků xxxxxx.
6.4.2 Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 1 xx roztoku síranu xxxxxxxxx (4.7), 5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx zředění vzniklého xxxxxxxxx (4.3), 3 xx vody x 0,1 ml roztoku XXX (4.6); promíchat.
6.4.3 Xxxxxx vyvíjet xxxxxxxxx 30 minut xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
6.4.4 X xxxxxxxxx x kontrolním xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx při xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.4.5 Na xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (6.4.4) xxxxxxxxx xxx každé xxxxxxxx přidaného xxxxxx (6.4.1) vypočítat xxxxxxxx xxxxxx metodou xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxx x xxxxxx
7.1.1 Xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (6.3.9) vypočítat xxxxxxxx xxxxxx pomocí xxxxxxxx přímky (6.4.5).
7.1.2 Xxxxxxxxx aktivitu xxxxxxxxx xxxxxxxxxx v μg xxxxxx na mililitr xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxxx fosfatázy = 2,4 × X × X
xxx
X xx xxxxxxxx xxxxxx x μx xxxxxxx xxxxx xxxx 7.1.1;
X xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 6.3.10 (x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx D = 1).
2,4 xx xxxxxx xxxxxxx (5/12 x 1 ml xxxxxxxxxxx xxxxxx) – xxx 6.2 xx spojitosti x 6.3.2, 6.3.5 x 6.3.6.
7.2 Xxxxxxxxxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) : 2 μg xxxxxx/xx.
7.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (R) : 3 (předběžně) μg xxxxxx/xx.
7.2.3 Pokud xx xxxxxxx provede xxxxx 6.3.10, limity xxxxxxx x 7.2.1 a 7.2.2 xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx vzorku.
III. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx, xxxxx slouží xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxxx:
Xxxxx xx mléko xxxxx xxxxxxxxxxx, xx 30 xxxxxx po xxxxxxxxxx xx objeví xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xx peroxidázu:
Do 30 xxxxxx xx promíchání xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Uvolněný xxxxxxxx xxxxxx oxiduje xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx indofenol (Xxxxxxxx xxxx). Intenzita zabarvení xx přímo xxxxxx xxxxxxxxxxx enzymu.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx x xxxxx xxxx (50 °X) 2 x 1,4 xxxxxxxxxxxxxx (X6X8X2) a xxxxxxx xx 100 ml. Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxx, x xxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx dvou xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxx odstranit.
4.2 Xxxxxx xxxxxxxx vodíku
Vodou xxxxxx 9 xx 30 % peroxidu vodíku x doplnit na 100 ml. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx litr xxxxxxx.
Xxxxxx peroxidu vodíku xx stálý asi xxxxx xxxxx, pokud xx xxxxxxxxx x xxxxxx a xxxxx, x láhvi xx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x organickými látkami.
5. Xxxxxx
5.1 Xxx 5 xx vzorku xxxxx xx čisté zkumavky x xxxxxxx xxxxxx.
5.2 Xxxxxx 5 ml xxxxxxx 1,4 fenylendiaminu (4.1).
5.3 Přidat 2 xxxxx roztoku peroxidu xxxxxx (4.2).
5.4 30 xxxxxx po promíchání xxxxxxxx zabarvení. Xxxxx xx modré xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx 30 xxxxxx po xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxx specifická.
IV. STANOVENÍ XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX PŘI 30 °X
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx technikou xxxxxxxx xxxxxxx při 30 °X. Xxxxxx xx použije pro xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, UHT xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx 15 xxx preinkubováno xxx 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx vytvářejí xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx popsaných xxxxxxxx.
3. Princip
Smíchat stanovený xxxxx xxxxxx mléka x xxxxxxxxxxx xxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx x nechat xxxxxxxxx 72 hodin při 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxxx x vypočítat xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx syrového xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx 0,1 xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx UHT xxxxx.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx ze xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, zejména:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Horkovzdušná sušárna, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Inkubátor, schopný xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °X.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx na ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx lázeň, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Míchačka xxxxxxx xxxxxxx 1 ml xxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxxxx ředění s 9 xx xxxxxxxx xxxxxxx x pracující xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx dalších xxxxxxxxxxx ředění.
4.2.2 Xxxxx x objemu 150 xx 250 xx xxxx xxxxxxxx o xxxxxx 20 xx xxx skladování xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxxx (utěsněné xxxxx), xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, s nepoškozeným xxxxxx, x nominálním xxxxxx 1 ml, x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx misky z xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxx sterilního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, dno xxxxx xx xxxxxxx průměr xxx 90 xx 100 xx. Vnitřní xxxxxxx misek xx xxxx xxx nejméně 10 xx. Xxx xxxxx xxx žádné xxxxxxxxxx, které xx xxxxxxx xxxxxxxx kolonií.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx pomůcek ze xxxx:
Xxxxxxx xx skla xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x těchto xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx 170–175 °X;
x) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx použití xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx to, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx páry: xxxxx xx materiál xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxx napevno xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx by měly xxx volné.
Pomůcky xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx by xx xxxx vysušit odvětráním xxxx.
Xxxxxx musí být xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx – xxxx xx sušeným xxxxxx
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx (+) nebo xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10–15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 ml |
Sušené xxxxxxxxxx xxxxx by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx inhibiční xxxxx. Toto xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx odstředěným xxxxxx, které xxxxxxxx xxxxx inhibiční látky xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X xxxxx pořadí xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xx vodě xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx usnadňuje postup. Xxxx xxxxxx xxxx x xx xxxxxxx xxxxxxx uvést xx xxxx, xxxxx se xxxx zcela xxxxxxxxxx, xxxx zahřívat x xxxx asi 30 xxxxx.
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx přes xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH pomocí xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xX, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxxxx byla xxxx xxxxxxx 6,9 ± 0,1 při 25 °X.
5.2 Rozdělení, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Rozdělit xxxxxx (5.1) v xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 ml xx xxxxx xxxx xx 12 xx 15 xx do zkumavek (4.2.2). Xxxxx x xxxxxxxx uzavřít.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx média.
Pokud xx xxxxxxxxxx médium xxxxxxxxx xxxxx, skladuje xx x xxxxx xxx teplotě xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx po xxxx xxxxxxxx.
5.3 Komerční xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx médium
Kultivační xxxxxx (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx sušené xxxxxxxxxx mléko před xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xX xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X xxxxxxx xxxxx xxxx 5.1, poté xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx kultivační xxxxxx xxxxx xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Xxxxxx pepton/sůl
Složení:
|
Pepton |
1,0 x |
|
Xxxxxxx sodný (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx složky xx vodě, xxxxx xx xx nutné, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xX-xxxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxx xX roztokem (xxxxxxx 0,1 mol/l) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 při 25 °X.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x skladování xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx po xxxxxxxxxxx xxxxx zkumavka xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx xxxxxxx. Zkumavky xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °C.
Zkontrolovat xX xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, avšak xx xxxx xxx 1 xxxxx po xxxx xxxxxxxx.
6.3 Komerční xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) se xxxx připravovat x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx prášku. Dodržet xxxxxx výrobce. Xxxxxxx xX xxxxxxx xxxxx xxxx 6.1, xxxx xxxxxxxx, sterilizovat x xxxxxxxxx ředidla xxxxx xxxx 6.2.
7. Postup
7.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Před xxxxxxxxx mikrobiologického xxxxxxxxx xxxxxx rychle xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °C.
7.2 Xxxxxxxx vzorku xxxxx
Xxxxxx xxxxx řádně xxxxxxxxx, xxx byly xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xx 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx vzorkem. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx rozptýlit. Xxxx xxxx mícháním x xxxxxxx testovacího vzorku xx xxxxxx překročit xxx xxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx ředění (10-1) (xxxxxx x pasterované xxxxx)
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 9 xx xxxxxxx (6.1), přičemž xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx s xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx jako xxxxxxx xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx toto xxxxxxxx xxxxxx míchačkou (4.1.9).
Xxxxx se xxx xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (syrové a xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.3) do 9 xx ředidla (6.1) xxxxx xxxxxx x xxxx 7.3.
Xxxxx xx xxx ředění 10−2.
X xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx postup opakuje xxx xxxxxx, dokud xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx mikroorganismů (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx misek
7.5.1 Xxxxxx mléko: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx vhodného xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx dvě xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx misku.
7.5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx vhodného xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Pro každé xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.5.3 XXX xxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxx (vyšetřované xx 15 xxxxx xxxxxxxx při 30 °X – směrnice 85/397/XXX, xxxxxxx X xxxxxxxx XXX xxx 5):
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx do xxxxx (4.2.4) 1 ml xxxxxx xxxxx (7.2). Xxxxxxxxx xxx misky.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx asi 15 xx 18 xx xxxxxxxxxxxx média (7.1).
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx Petriho xxxxx, aby xx xxxxxxxx došlo k xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx přípravy xxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx, podle xxxxx xxxxx, testovacího xxxxxx xxxx ředění x xxxxxxxxxxx médiem nesmí xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx, xxxxx médium xxxxxxxx.
7.7 Inkubace Petriho xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx obrácené xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx na xxxx xxxx než xxxx xxxxx. Sloupky xxxxx se nesmějí xxxxxxxx xxxxxxx, ani xxx x kontaktu xx xxxxxxx a xxxxxx xxxxx inkubátoru.
Inkubovat 72 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx více xxx 300 kolonií.
Misky vyšetřit xxx tlumeném světle. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx použít xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) a/nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx koloniemi. V xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx zvětšením (4.1.7), x xxxxx odlišit xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Pokud xxxxxxx tvořící povlak xxxxxxxxx xxxx než xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx misky a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx. Xxxxx kolonie tvořící xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx čtvrtinu xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Syrové a xxxxxxxxxxx mléko
8.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx misek xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.1.2 Vypočítat xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 ml xxxxxxxx xxxx pasterovaného xxxxx xxxxx tohoto vzorce:
∑C / (n1 + 0,1x2) d
kde:
∑C ΣC xx xxxxxxx počet xxxxxxx xxxxx xxxx 8.1.1.
(x1 + 0,1 x2)x xx objem xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx:
x1 xx xxxxx misek xxx xxxxxx ředěním
n2 xx xxxxx misek xxx xxxxxx xxxxxx
x xx faktor xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx první xxxxx.
Xxxxx se xxxxxxxxxx xx dvě xxxxxx xxxxxxx. Když je xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx xxx, aby xxxxxxxx číslice xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxx (pasterované xxxxx):
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 x 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; = 278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2
= 6290,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.1.3 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 10, uvést, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx "xxxxx xxx 10 x x", xxxxxxx "x" xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx zředění.
8.1.4 Xxxxx jsou xxxxxxx xxxxx vyšší xxx 300 a xxxxxxxx xx xxxxx, xxxxxxx xxxxx x vynásobit xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx jako "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xx".
8.2 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xxxxx xxx 10 xxxxxxx na 0,1 xx xx xxxxxxxx xx nevyhovující xxxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/EHS.
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx uznaných xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x dispozici.
V. STANOVENÍ XXXXXX MIKROORGANISMŮ XXX 21 °X
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 21 °X x xxxxxxxxxxxx mléce, které xxxx xxx dní xxxxxxxxxxxxx při 6 xX x cílem xxxxxxxx stupeň xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx psychotropními xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxx xx x xxxxx xxx 6 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Princip
Inkubovat pasterované xxxxx xxx dní xxx 6 °X. Xxxxxxx stanovený xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx x Xxxxxxx miskách x xxxxxx inkubovat 25 xxxxx xxx 21 °X. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na 1 xx pasterovaného xxxxx.
4. Xxxxxxxxx x pomůcky xx skla
Obvyklé xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx sušárna, nastavitelná xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na 121 ± 1 °C.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx:
x) 6 ± 0,2 °X
x) 21 ± 1 °C xx všech xxxxxx xxxxxx.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx na ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx lázeň, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, zvětšení 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Míchačka xxxxxxx rozmíchat 1 xx xxxxxx mléka xxxx xxxxxxxxxxx ředění x 9 xx xxxxxxxx roztoku a xxxxxxxxx xx principu xxxxxxxxxxx xxxxxx obsahu xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx ze xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx uzávěry x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx prostorem x xxxxxxxxxx 10 ml xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 xx xxxx zkumavky x objemu 20 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx vatou), xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx hrotem, o xxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx, s výpustním xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Petriho xxxxx x xxxxxx, bezbarvého xxxx nebo ze xxxxxxxxxx syntetického materiálu, xxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx 90 xx 100 x. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx nejméně 10 xx. Xxx nesmí xxx xxxxx nerovnosti, xxxxx by bránily xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx ze xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx:
x) v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx jednu hodinu xxx teplotě 170–175 °X;
x) v autoklávu (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx nutné xxxx xx to, aby xxxx xxxxxxxxx dostatečné xxxxxxxxxx xxxx: pokud xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xxxxxx by neměly xxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx nebo víčka xx měly být xxxxx.
Xxxxxxx xx skla xxxxxxxxxxxxx x autoklávech xx se xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx x horkovzdušné xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx – agar se xxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx(+) xxxx dextróza |
1,0 g |
|
Sušené xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10-15 x xxxxx želírovacích xxxxxxxxxx agaru |
|
Voda |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx by xxxxxx obsahovat žádné xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxx srovnávacími xxxxx se sušeným xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X tomto xxxxxx suspendovat x xxxxxxxxx ve vodě xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx usnadňuje xxxxxx. Xxxx přidat xxxx x uvést xx xxxx za xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx agar zcela xxxxxxxxxx, xxxx zahřívat x páře xxx 30 xxxxx.
Xxxxx xx xx nezbytné, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx je xxxxxxxx, upravit pH, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) hydroxidu xxxxxxx xxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx jeho xxxxxxx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Rozdělit xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxxx od 100 xx 150 ml xx xxxxx xxxx xx 12 xx 15 xx do xxxxxxxx (4.2.2). Baňky x xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ihned, xxxxxxxx xx v xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, avšak xx xxxx xxx 1 xxxxx po xxxx přípravě.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kultivační xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxx odstředěné xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx složkou xxxxxxxx.
Xxxxxxx xX xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °C postupem xxxxx bodu 5.1, xxxx xxxxxxxx, sterilizovat x xxxxxxxxx kultivační xxxxxx xxxxx xxxx. 5.2.
6. Ředidla
6.1 Xxxxxx xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 g |
|
Chlorid xxxxx (XxXx) |
8,5 g |
|
Voda |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, xxxxx to xx xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xX-xxxxxx (4.1.4); xxxxx xx je xxxxxxxx xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 mol/l) xxxxxxxxx sodného xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx sterilaci xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
6.2 Rozdělení, xxxxxxxxxxx x skladování xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx zkumavek (4.2.1) xxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 ml xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 minut xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx (4.1.2) při 121 ± 1 °X. Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx se x temnu xxx xxxxxxx mezi 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx xx jeho xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx dehydrovaná ředidla
Ředidlo (6.1) xx může xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. Dodržet xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX xxxxxxxx xxxxx bodu 6.1, poté rozdělit, xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx podle xxxx 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Rozpuštění xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx kultivačního xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx lázni (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
7.2 Příprava xxxxxx xxxxx
7.2.1 Inkubovat x xxxxxxxxxx [4.1.3 x)] xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx to xxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx vzorek x objemu nejméně 100 xx po xxxx 120 ± 2 xxxxx při 6 ± 0,5 °X.
7.2.2 Po xxxxxxxx xxxxxx xxxxx řádně xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx co xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xx 25 xxxxxxxx otočeními xxxxxx xx vzorkem. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx pěny xxxx xxxx nechat xxxxxxxxx. Xxxx mezi xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx tři xxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx ředění (10−1)
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) syrového xxxx pasterovaného mléka xx 9 ml xxxxxxx (6.1), xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx s xxxxxxxx. Teplota ředidla xxxx být xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx promíchávat xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx xx tak xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 ml xxxxxxxxxx ředění (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx xxxxxx x xxxx 7.3.
Xxxxx se xxx xxxxxx 10−2.
X cílem xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx xxxxxx opakuje tak xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Naočkování Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx vzorku a/nebo xxxxxxxx desetinného xxxxxx. Xxxx být vyšetřena xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxx xxxxx ředění (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx misku.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Do xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 15 xx 18 ml xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Xxxxx promíchat xxxxxx Xxxxxxx misky, xxx xx xxxxxxxx xxxxx k xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kolonií.
Doba mezi xxxxxx přípravy xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx vzorku nebo xxxxxx x kultivačním xxxxxx nesmí xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx povrchu, xxxxx médium neztuhne.
7.7 Xxxxxxxx Petriho xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx inkubátoru (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx dnem xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxx než xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx nesmějí xxxxxxxx xxxxxxx, xxx být x xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 25 xxxxx xxx 21 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx kolonií
Počítat xxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 300 xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxx tlumeném světle. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx použít xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) a/nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx nutné xxxx xx to, aby xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx pochybností xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx povlak xx považují xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx tvořící povlak xxxxxxxxx xxxx než xxxxxxxx xxxxx, spočítat xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx celou misku. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx více xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx obsahujících 10 xx 300 kolonií (xxx 8.1.3 a 8.1.4).
8.2 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
∑X / (x1 + 0,1n2) x
xxx:
ΣX xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 8.1,
(x1 + 0,1 x2)x je xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx:
x1 je počet xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx
x2 xx počet xxxxx při xxxxxx xxxxxx
x xx faktor xxxxxxx, na základě xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx na dvě xxxxxx číslice. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, zaokrouhlit xxx, xxx sousední xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxx:
Xxxxxx 10−2: 278 a 290 kolonií
Ředění 10−3: 33 x 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; =278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2=
=629 / 0,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.3 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx než 10, xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx "xxxxx xxx 10 × x", xxxxxxx "d" xx xxxxxxxxxx hodnota nejnižšího xxxxxxx xxxxxxx.
8.4 Xxxxx xxxx všechny xxxxx xxxxx xxx 300 x počítání xx xxxxx, xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx jej xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Výsledek vyjádřit xxxx "Odhadovaný počet xxxxxxxxxxxxxx xx xx".
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx uznaných xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX – XXXXXXXX XXXXXXX XXX 30 °X
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tato kapitola xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup xxx stanovení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X.
2. Definice
"Koliformními xxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx 30 °X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx objem xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx v Petriho xxxxxxx x 24 xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x, xxxxx to xx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx necharakteristických xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxx koliformních xxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx sušárna, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Autokláv, xxxxxxxxxxxx na 121 ± 1 °C.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °X.
4.1.4 pH-metr xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx na 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx platina-iridium xxxx nikl-chróm.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 20 xx, xxx xxxxx xxxxxxxxx konfirmační xxxxxxxxxx xxxxxx (5.2) x Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 až 250 ml xxx xxxxxxxxxx sušeného selektivního xxxxxxxxxxxx média (5.1).
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx vatou), xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x nepoškozeným hrotem, x xxxxxxxxxx objemu 1 – 10 xx, s výpustním xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxx ze xxxxxxxxxx syntetického materiálu, xxx misek má xxxxxxx xxxxxx xxx 90 až 100 x. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx by xxxx xxx xxxxxxx 10 xx. Xxx xxxxx xxx xxxxx nerovnosti, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx skla:
Pomůcky xx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxx postupů:
a) v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx jednu xxxxxx xxx xxxxxxx 170 – 175 °C;
b) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx dbát xx xx, xxx xxxx xxxxxxxxx dostatečné xxxxxxxxxx xxxx: pokud xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx nádoby xx neměly být xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx být volné.
Pomůcky xx xxxx sterilizované x xxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx (XXXX xxxx). Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
7 x |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
3 x |
|
Xxxxxxx (X12X22X11.X2X) |
10 g |
|
Chlorid xxxxx (XxXx) |
5 x |
|
Xxxxxxx xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxxxx červeň |
0,03 x |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxx |
0,002 g |
|
Agar |
10 xx 15 x xxxxx želírovacích xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxx a nechat xxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx nutné, xxxxxxx xX roztokem (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, aby xx xxxx byla xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxx xxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx po xxxxxxxxxx 100 xx 150 xx xx xxxxxxxxxx xxxxx (4.2.2). Kultivační xxxxxx zchladit ve xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °C.
V xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (6.4).
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.2 Tekutý xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx kultivační xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
10 x |
|
Xxxxxxx (C12H22O11.H2O) |
10 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx |
20 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxx |
0,0133 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx x xxxxx xx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx pH-metru (4.1.4); xxxxx to xx xxxxxxxx, upravit xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,2 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx xxxxxx xx 10 xx xx xxxxxxxx (4.2.1) obsahujících Durhamovy xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx obsahovat xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx nepoužije xxxxx, skladuje se x xxxxx při xxxxxxx xxxx 1 x 5 °C, xxxxx xx déle xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx dehydrované xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx médium (5.1) xx může připravit x xxxxxxxxxx dehydrovaného xxxxxxxxxxxx xxxxx. Dodržte xxxxxx výrobce. Upravit xX, rozdělit, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx bodů 5.1 a 5.2.
6. Xxxxxx
6.1 Kultivační xxxxxx
Xxxxxx xxxxxx (XXXX xxxx) xxxxxxx x xxxx 5.1.
6.2 Příprava xxxxxx xxxxx
Xxxxxx mléka xxxxx xxxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x to 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxx nechat rozptýlit. Xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx minuty.
6.3 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx přenést (4.2.3) 1 ml xxxxxx xxxxx xx každé xx xxx xxxxx (4.2.4) x xxx xxxxxxxxx 3 xx xxxxxx mléka (6.2).
6.4 Xxxxxxxx kultivačního média
Do xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx asi 12 xx XXXX xxxxx (6.1)
Xxxxx po xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxx misky, aby xx xxxxxxxx xxxxx x rovnoměrnému rozložení xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx vzorku xxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx médiem xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xx xxxxxx xxxxxxxx sterility xxxxxxxxx nenaočkovanou xxxxx x 12 xx xxxxx XXXX xxxxx, xxxxx xxx použit xxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x čistém xxxxxxx, xxxxx médium xxxxxxxx.
Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 4 xx XXXX xxxxx (6.1) na povrch xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx.
6.5 Xxxxxxxx Petriho xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx dnem xxxxxx. Xxxxxxxxx na xxxx xxxx xxx šest xxxxx. Xxxxxxx misek xx nesmějí xxxxxxxx xxxxxxx, ani být x xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx inkubátoru.
Inkubovat 24 ± 2 hodiny xxx 30 ± 1 °X.
6.6 Počítání xxxxxxx
6.6.1 Xxxxxxx kolonie x Petriho xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 150 xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx červené kolonie x xxxxxxx nejméně 0,5 mm, s xxxx xxx sraženiny xxxxx, charakteristické xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.6.2 Xxxxx xxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx kolonie xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. jinou xxxxx, velikost nebo xxxx xxxx sraženin xxxxxxxx k xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxx konfirmační xxxx (6.7).
6.7 Xxxxxxxxxxx xxxx
Xxxxx údajů x xxxx 6.6.2 provést xxxxxxxxxxx test x xxxxxxxx xxxxx (xxxx. 3 xx 5) xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xx se pomocí xxxxxxxx xxxxx (4.1.6), xxxxxxxx xxxxxxxx obsahující xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.2). Xxxxxxxxx zkumavky 24 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °C.
Za xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx v Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx plyn.
7. Xxxxxxx x vyjádření xxxxxxxx
7.1 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 150 xxxxxxx.
7.2 Xxxxx xx provede konfirmační xxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx základě xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx podle xxxxxx xxxxxx:
ΣX / x
xxx:
ΣX je xxxxxxx xxxxx xxxxxxx koliformních xxxxxxxx (7.1 x xxxxxxxxxxx se 7.2), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (6.3).
x xx xxxxxxxx vyšetřovaného vzorku (6.3) v xxxxxxxxxxx (3 ml).
Počet xx xxxxxxxxxx xx dvě xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx více než 100 kolonií. Když xx zaokrouhlovaná číslice xxx, zaokrouhlit tak, xxx sousední xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxxx počty xxxxx xxx 150 xxxxxxx, uvést výsledek xxxx "xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií xx 1 ml".
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx nejsou x xxxxxxxxx.
XXX. STANOVENÍ XXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxx pro stanovení xxxxx buněk xx xxxxxx mléka za xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx fluoro-opto-elektronické xxxxxx (xxx B.1).
2. Xxxxxxxx
Xxx tento xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx buňky, xxxxxxxxx xxxxxxxxx a epitelové xxxxx, xxxxxxx jádra xx xxxxx zřetelně xxxxxxx xxxxxxxxxxxx modří
3. Xxxxxxx
Xxxxxx 0,01 xx xxxxx na 1 xx2 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Tenká vrstva xx xxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxxx se vynásobí xxxxxxxxx faktorem, x xxxxx získat xxxxx xxxxx xx 1 xxxxxxxx.
4. Xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxx chemikálie čistoty x.x..
Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxx xxxx |
0,6 x |
|
Xxxxxxx – 99 % |
54 xx |
|
1,1,1-xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxx |
40 xx |
|
Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx |
6 xx |
Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Příprava x xxxxxxxxx se proto xxxx uskutečnit x xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx x 1,1,1-xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxx xx xxxxx xxxxx na 60 xx 70 °X. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx modř, xxxxx xxxxxxxxx, 12 xx 24 xxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxx 4 °C x přidat xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Přefiltrovat xxxx xxxxx x xxxxxxxxx velikosti xxxx 10 xx 12 xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx láhvi. X případě vytvoření xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx roztok xxxxx xxxxxxxxxxxx.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx ze xxxx
5.1 Mikroskop umožňující xxxxxxxx 500 × xx 1000 ×
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 0,01 ml x xxxxxxxxx xxxxxxx ± 2 %.
5.3 Xxxxxxxx sklíčko x xxxxxxx 20 xx × 5 mm xxxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxx nebo standardní xxxxxxxx sklíčko x xxxxxxx 20 × 5 xx xxx xxxxxx xxxxxx.
5.4 Horizontální xxxxx xxxxx (30 °X xx 50 °X) xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5 Ventilátor (xxx) pro xxxxxx xxxxx xxxxxx.
5.6 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 30 xx 40 °X xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
5.7 Podložní xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 0,01 xx.
6. Xxxxxx
6.1 Vzorek xxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx vzorku. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 6 °X. Xxxxxx xxxxx xxx zmražen.
6.2 Příprava xxxxxx x laboratoři
Zahřát xxxxxx xx xxxxx xxxxx (5.6) na 30 xx 40 °X. Xxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx, při xxxxx xxxx kalibrována mikrostříkačka (5.2), xxxxxxxxx 20 °X.
6.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx podložní xxxxxxx (5.3) xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx prach, xxxxxxxx plamenem x xxxxxxxx. Xxxxxxxxx v xxxxxxx, kde xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxx tenké xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx (5.2) odebrat 0,01 xx mléka ze xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xx uvedeno výše. Xxxxxxx očistit xxxxxx xxxxxx stříkačky, která xxxxxx do xxxxx x mlékem. Xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) x xxxxxxx xxxxxxxxx obvod xxxxxxxxx (20 mm × 5 xx). Xxxx ji co xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Nechat xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (5.4) xx xx xxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x vyšetřit xxxxxxx xxx tenké xxxxxx.
6.5 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx 10 xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4). Xxxxx x, xxxxx xx xx nezbytné, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.5). Xxxxxxx xxxxx vrstvy xx xxxxxxx vody, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx a xxxxxxx tak, xxx xxx chráněn xxxx xxxxxxx.
6.6 Kalibrace xxxxxxxxxxxxxxx xxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (500 × xx 1000 ×) xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx (5.7).
7. Xxxxxxxx x xxxxxxx
7.1 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxxxxxx (5.1). Xxxxx počítání buněk xx počítají pouze xxxxxxx xxxxx, a xx xxxxxx jádra, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx a x xxxxx je x xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Počítat xxxx nebo pole xx xxxxxxx třetině xxxxx vrstvy x xxxxxxxxx ty xxxx xxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx pouze x okrajových xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx i xxxxxxxxxxxx výsledků xxxx xxx kontrolovány nejméně xxxxxx za měsíc xxxxxxxxxx xxxxxxx částí xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx takovým xxxxxxxx, xxx všechny části xxxxx xxxxxx byly xxxxxxxxxx rovnoměrně.
7.2 Stanovení xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxx somatických xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx rovněž xxxxxxx xxx standardizaci xxxxxxxxxxxxx x mechanických xxxxxxx počítání, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx elektronického xxxxxxxxx. Xxxxxxxx koeficient xxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx 400000 xx 600000 buněk/ml xx xxxxx xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxx v každém xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx podle Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 400, xxx xxxx xxxxxxx kritérium xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
X = X = x2,
xxx:
X xx střední xxxxxxx
X xx xxxxxxx
x je xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx koeficient xx:
XX = s × 100 % / M nebo XX = 100 % / x&xxxx;xxxx XX = 100 % / XXX
X (xxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxx), xxxxx xxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxx 400 pro CV = 5 %).
7.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx faktoru
Při xxxxxxx 0,01 ml xxxxx se pracovní xxxxxxx xxxxxxxx podle xxxx 7.3.1 nebo 7.3.2.
7.3.1 Xxxxxxxx xxxx xx tenké vrstvě
Délka xxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx, xx 5 mm. Šířka xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx pole, jak xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7).
Xxxxxxxx xxxxxx = 20 × 100 / d × b
kde:
d je xxxxxx mikroskopického xxxx x xx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7)
x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
7.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xx střední xxxxxxx tenké vrstvy xxxx xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx
xxx:
x xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx v xx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7)
x celkový xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
7.4 Xxxxxxx xxxxxx xxxxx
X xxxxx xxxxxx počet xxxxx xx xx xxxxx, xx počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (7.1 a 7.2) xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (7.3).
7.5 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx koeficient (xxx 7.2) nesmí xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nejsou x xxxxxxxxx.
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx metoda
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxxxxxx postup, xxxxx xx xxxx po xxxxxxxxxxxx kalibraci (viz X.1) používat xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx bez xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. Definice
Pro xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx buňkami xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxxx barvení xxxxxxx DNA minimální xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
3. Princip
Část xxxxxx (xxxxxxxxx 0,2 xx) xx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx a x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx ve xxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx, xxxxx slouží jako xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx buňka xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx x zaznamenává. Xxxxx xxxxxxxxxxx buněk xx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx mililitr.
4. Činidla
Pokud xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x.x.. Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx deionizovaná, xxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx draselný |
51,00 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxx |
13,75 x |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx(xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 xx |
|
xX 5,7 xx 5,9. Xxxxxxx xxxxx na 10000 xx. |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Skladování ve xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx.
4.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxx)
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
1,0 x |
Xxxxxxx vodou xx 1000 xx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx vodě. Skladování xx vzduchotěsně xxxxxxxx xxxxxx chráněné xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (pracovní xxxxxx)
Xxxxxxx 20 xx xxxxxxxxx roztoku (4.2) x tlumivým roztokem (4.1) xxx, xxx xx xxxxxx xxxxx 1000 xx. Pracovní xxxxxx by neměl xxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxx xxx.
4.4 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxx xxxxxx (4.1) |
10 ml |
|
Polyethylenglykol-mono-p(1,1,3,3-tetramethylbutyl)-fenylether (xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % objemové |
10 xx |
|
Xxxxxxx x 25 % xxxxxxxxxx |
25 xx |
Xxxxxxx xxxxx xx 10000 xx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx překročit xxxxxx xxx.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
5.1 Počítací xxxxxxxx xxxxxxxxx xx principu xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxx použitím xxxxxxxxxxx. Xxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx částic, xxxxx xx xxxx xxxxxxx, x prahovou xxxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxx provádí. Xxxxxxxxx xxxxxxxx se provede xxxxx xxxxxx výrobce xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X).
5.2 Vodní xxxxx, s xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxxx xx 40 ± 1 °X.
5.3 Zkumavka, x xxxxxxx uzávěrem, xxxxx xxx 15 ml.
6. Xxxxxx xxxxx
6.1 Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx (5.3). Xxxxx xxxxxx nebyl xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, počítání xx může xxxxxxx xx xx xxxxxxxx 24 xxxxx po xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx by xxx xxxxxx xxxxx. Skladovací xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 6 °X.
6.2 Konzervace
Chemická xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xx 24 xxxxx. Konzervace xxxx xxx provedena xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
6.2.1 Chemická konzervace xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx jednoho x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx:
- xxxxxxxx orthoboritá:
konečná koncentrace xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx být xxxxx xxx 0,6 x xx 100 xx. Takto xxxxxxxxxxxx xxxxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx xxxxxxx 6 až 12 °X;
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx draselného xx xxxxxx nesmí xxx xxxxx xxx 0,2 g na 100 xx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx vzorek xxxx xxx xxxxxxxxx dalších 72 xxxxx při xxxxxxx 6 až 12 °X;
- azid xxxxx:
xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx azidem xxxxxx x konečné xxxxxxxxxxx 0,024 g/100 ml, xxxxx xx vzorek xxxxxxxx xx teplotu 6 xx 12 °X xxxxx po xxxx odběru a xxxxxxxx do 48 xxxxx xx xxxx xxxxxx;
- xxxxxxxx:
xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx bronopolem x konečné koncentraci 0,05 g/100 xx, xxxxx xx vzorek xxxxxxxx xx xxxxxxx 6 xx 12 °X xxxxx po xxxx xxxxxx x xxxxxxxx do 72 xxxxx xx xxxx xxxxxx.
6.2.2 Xxxxxx, který xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx ještě xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx 48 xxxxx dvojchromanem xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx sodným, xxxx být xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxx odpadních xxx.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx, xx xx xxxxxxxx skladuje xxxxxxx 24 hodin xxx xxx 2-6 °X. Xxxxxxxx vzorků x xxx xxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nedoporučuje, xxxxx xxxxxxxx mohou xxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx přesto xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, vzorek xx měl xxx xxxxxxxxx ošetřován xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxx 6.2.1).
7.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx vzorek (xxx 7.1) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxx ve xxxxx xxxxx (5.2) na xxx 40 °X. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx pokojové xxxxxxx xx xx xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxx pomocí počítacího xxxxxxxx (5.1) xx 15 minut xx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 7.2). Bezprostředně před xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, aby xx xxxxxxx co xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx ředění a xxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxx.
8. Spolehlivost
Výsledky xxxxxxxxxxxxxxx (x) x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) mezinárodních xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx.
Xxxxx, které jsou x dispozici na xxxxxxx úrovni, umožňují xxxx xxxxxx:
(1) počet xxxxx xxxx 400 000 xx 500 000 xxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx:
xx = 20000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx variačnímu xxxxxxxxxxx 5–4 %)
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx reprodukovatelnosti:
sR = 40000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx variačnímu xxxxxxxxxxx 10–8 %)
9. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx správnosti xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x známém xxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxx počítáním xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
XXXX. XXXXXXX XXXXXXXXXX X SULFONAMIDŮ
PŘEDMĚT X XXXXXX XXXXXXX
Xxxx kapitola xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx detekce antibiotik x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx mléce a x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx referenční xxxxxx xxxxxxxx:
X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, který xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx obsahují xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx jsou založeny xx xxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx, XXXX 10149, xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx jako reprezentativní xxx takovéto xxxxx.
X. Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx x identifikaci penicilinu
Tento xxxxxx xx xxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx postupu, xxx identifikaci xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx.
X. Kvalitativní xxxxxx
1. Xxxxxxx a oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx v xxxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx antibiotik x xxxxxxxxxxx [1]
|
Xxxxxxxxx xxxxx |
||
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxx |
|
|
Xxxxxxxxxxxxxxx |
0,002 |
0,006 |
|
Xxxxxxxxx |
0,002 |
0,005 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,015 |
0,035 |
|
Xxxxxxxx |
0,006 |
0,011 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,10 |
0,40 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,20 |
0,45 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxx |
0,15 |
0,50 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
7 |
15 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx |
4 |
13 |
|
Xxxxxxxx |
1 |
22 |
|
Xxxxxxxxx |
9 |
28 |
|
Xxxxxxxxxx |
0,06 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxx |
1 |
2,25 |
|
Xxxxxxxxx |
0,01 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,01 |
0,1 |
|
Xxxxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxxx) |
0,5 |
1 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2 x |
|
|
Xxxxxx |
5 x |
|
|
Xxxxxx extrakt |
1 x |
|
|
Xxxxxxx xxxxx |
5 g |
|
|
Agar |
10–15 g |
|
|
Voda |
1000 xx |
|
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxx uvést xx xxxx. Upravit pH xxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 při 25 °X.
Xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxxxx xxxx po 100 xx xx lahviček x naklonit x xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx 15 minut xxx 121 ± 1 °X.
5.1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxx sodný |
2 x |
|
Xxxx |
15 x |
|
Xxxx |
1000 ml |
|
Roztok xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx (xxx 5.1.3) |
10 ml |
Příprava:
Rozpustit xxxxxx xx vodě, s xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xx občasného xxxxxxx uvést xx xxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X. Xxxxxxx xX, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.1.3 Roztok trimethoprimu xx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxxxx |
5 xx |
|
xxxx Xxxxxxxxxxx |
30 mg |
|
96 % Xxxxxxx |
5 ml/30 xx |
|
Xxxxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x ethanolu xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx (5 nebo 30 xx) x xxxxxxx xxxxx.
5.1.4 Živný xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
0,75 mg |
|
Glukóza |
5,0 xx |
|
Xxxxxxxxx xxxxx |
8,0 mg |
|
Bromkresolová červeň |
0,025 x |
|
Xxxx |
50 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx roztok x indikátor, xxxxx xx xx nutné, xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx dostupný x xxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx
5.2.1 Xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx o 60 μx/xx (100 XX/xx), x xx rozpuštěním xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx ve xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vodě.
5.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 1,25 xx xxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2.1) xxxxxxxx destilované xxxx a xxxxxxx xx do 1000 xx. Xxxxx pracovní xxxxxx obsahuje 0,075 μx xxxxxxxxxx/xx (= 0,125 XX/xx).
5.2.3 Xxxxxxxxx 75 ml xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,004 μg xxxxxxxxxx/xx (= 0,0067 IU xxxxxxxxxx/xx) přidáním 4 xx pracovního xxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2.2) do 71 xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.3).
5.2.4 Roztoky xxxxxxxxxx xxxxxxx podle xxxx 5.2.1 až 5.2.3 xx xxxx xxx xxxxxxxxxx v xxx xxxxxxxxx testu.
5.3 Xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx preparát xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek xxxxxxxxxxx sušeného xxxxxxxxxxxx xxxxx (10 % x/X) xx vodě, xxxxx bylo předtím xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxx xxxxxx přiměřené xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx; xxxx mléko xx xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx 100 °C, poté xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx x teplotou 0 °X xx 6 °X xx xxxx nejvýše xxxxxxx xxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
5.4.1 Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx použije Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx XXXX 10149 Xxxx XXXX 10149 xx xxxxxxxxx x xxxxxx X 953.
5.4.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx kulturu xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx kultury. Xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx agaru (5.1.1). Xxxxx xxxx se x xxxxxxxxx naočkuje xxxxxxx xxxxxxxxx kultura, xxxx xx aerobně xxxxxxxx 48 xxxxx xxx 63 ± 1xX. Xx xxxxxxxx xxxxxxx zkumavka sterilní xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx zásobní xxxxxxx xxxx být skladována xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 0 xx 5 oC.
5.5 Xxxxxxxxx kultura (xxxxxxxx xxxx)
5.5.1 Asepticky xxxxxxx 20 ml xxxxxxx xxxxx (5.1.1) xx xxxxxxxx Xxxxxxx misky (4.2.2) x xxxxxx xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5.2 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 xx sterilní destilované xxxx xx zkumavky xx xxxxxxx xxxxxxxx (5.4.2) a xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx spór se xxxxx při 0 xx 5 °X x použije xx xx 36 hodin.
5.5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx spór (5.5.2) xx Xxxxxxx xxxxx (5.5.1) x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx celém xxxxxxx xxxxxx zahnuté xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx 16 xx 18 xxxxx xxx 63 ± 1 °X (4.1.1).
Xxx xxxxxxx zásobní xxxxxxx (5.4.2) nebo xxxxxxx xxxxxx 36 xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx nejméně xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 36 xxxxx.
5.5.4 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxxx vody na Xxxxxxx misku xxxxxxxxxx xxxxxxx (5.5.3) x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx z povrchu.
Přenést xxxxxxxx xxxx do xxxxx (4.2.3) xxxxxxxxxx 250 xx sterilní xxxxxxxxxxx vody. Xxxxx xxxxxxx x důkladně xxxxxxxxx. Kultury, xxxxx xxxxxx ihned xxxxxxxxxxx, xx xx měly xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 0 xx 6 °X.
5.5.5 Po 16xx xx 18xx xxxxxxxx inkubaci xxx 63 ± 1 °X xx agarovém xxxxx by suspenze xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx 5 x 10 xxxxxxx na xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx vykazovat rovnoměrné xxxxxxxx, a pokud xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx xx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ze xxxxxxx kultury (5.4.2).
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx
5.6.1 Nechat xxxxxxxxx xxxxxxx médium (5.1.2), xxxx xxxxxxxx xx 55 °X.
5.6.2 Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx spór (5.5.4) x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (5.6.1) xx xxxxxxxx nebo x lahvičce. Důkladně xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx (4.2.6) 0,3 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.6.2), aby xx xxxxxxxxx 5 xx xxxxxx, xxxx uzavřít xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxx, x xxxxxxx ampule, xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxx zkumavky/ampule 12 xxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
5.6.4 Xxxxxxxx/xxxxxx mohou xxx xxxxxxx týž xxx, xxx xxxxx xxx xxxxxx skladovány xxxxxxx xxxxxx při 0–6 °C, xxxxx xxxx ihned po xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Vzorky xx xx xxxxxxxx otestují, xxxxxxx xx 24 xxxxx xx odběru, x xx xx xxxx xx skladují xxx teplotě 0-5 °X. Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx 24 xxxxx, xxxx by xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (−30 °xx - 15°X), aby se xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.2 Xxxxxxx x nesmazatelně identifikovat xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx (5.6). Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (4.1.3) xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx a testy (5.2 x 5.3).
6.3 Xx každé xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxx 50 xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (5.1.4).
6.4 Xxxxxx mléka xxxxx xxxxxxxxx x mikrostříkačkou (4.1.4) přenést 0,1 xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx. Pro xxxxxxxxx xxxxxxx vzorku xxxxxx vždy novou xxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.5 Postup xxxxx bodu 6.4 xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx penicilinu xxxxxxxxxxxx 0,004 μx/xx (= 0,0067 IU/ml) xxxxxxxxxx xxxxxxx vzorku xxxxx (5.2.3).
6.6 Xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.4 xxxxxxxx stejným xxxxxxxx xx použití xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.3) xxxxxxx vzorku xxxxx.
6.7 Xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx a xxxxxxxx xx zkumavkami/ampulemi xxxxxxx na xxxxxxx 2½ xx 2¾ xxxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxxxxx 63 ± 1 °X (4.1.2).
6.8 Xxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxx/xxxxxxxx x xxxxx xxxxx.
6.9 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx (viz 7).
7. Xxxxxxxxxxxx výsledků
7.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx roztokem xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx antibiotik nebo xxxxxxxxxxx xx vzorku x koncentraci xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx "zcela xxxxxxxxx" xxxxxxx v xxxxxxx xx xxxxxx 39. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx penicilinu (6.5) xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx médium xx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx zkumavkách/ampulích xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx uvedenými xx xxxxxx 39.
7.3 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx zkumavkách/ampulích xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek xxxx vzorek mléka xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
7.4 Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx všech xxxxxxxxxxx zkumavkách/ampulích, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, zkumavky/ampule xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxx xxx podrobeny novému xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx výsledků
8.1 Potvrdit xxxxxxxx všech xxxxxx x xxxxxxxx popsanými x 7.1 a 7.2 xxxxx xxxxxx "X".
Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx mléka xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, musí xxx zmraženy, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X. Postup xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx konfirmační xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx antibiotik, xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx penicilinu xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx (X.7.1) xxxx xxxxxxxxxx reakcí (X.7.2).
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxx různá xxxxxxxxxxx
Xxx X.1.
2. Definice
2.1 Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx sulfonamidů, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx 2 xx xxxxx xxxxx.
2.2 Xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx antibiotika, xxxxxx xxxxxxxxxxx (2.1), x xx kterému byla xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxx), xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx čirou xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx je xxxxxx xxxx xxx penicilinázy, xxxxxxxxx xxxxxx je xxx xxxxxxxxx nebo xxxx penicilinu a xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
2.3 Xxxxx xxxx xxxx není xxxxxxxxxxxxx (2.2) inaktivována, inhibiční xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxx penicilin, xxx může xx xxx xxxx xxxxxxxx [xxx xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx A, xxxxxxxx XX, A.1.f) a 2x)].
Xxxxxxx polosyntetické xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx cloxacillin xxxxx, xxxxxx nebo jsou xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxx a xxxxxxx xxx identifikovány jako xxxxxxxxxx (viz 7.3).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx papírový xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xx vyšetřit, xx xxxxxx na xxxxxx agarového xxxxx xxxxxxxxxxxx Bacillus stearothermophilus xxx. xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Čirá xxxx xxxxx disku xxxxxxx, xx xxxx v xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx mimo xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxx inhibiční xxxxx x xxxxx.
4. Xxxxxxxxx, xxxxxxx ze xxxx a vybavení
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Viz X.4.1.
4.1.2 Xxxxx lázeň, xxxxxxxxxxxx xx 80 ± 1 °X.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
Xxx X.4.2.
4.3 Xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, o xxxxxxx 9 xx 13 xx, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx 130 xx xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx).
5. Xxxxxxxxxx xxxxx, standardní xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx organismus xxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx musí xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx se xxxxxx destilovaná xxxx xx xxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxx voda xxxxxxx xxxxxxxxxxxx čistoty. Xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx organismu.
5.1 Xxxxxxxxxx xxxxx
5.1.1 Xxxxx agar (X.5.1.1)
5.1.2 Kultivační xxxxxx xxx xxxxxxx inhibičních xxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 g |
|
Trypton |
5 x |
|
Xxxxxxx |
1 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx tetroxoprimu (X.5.1.3) |
10 xx |
|
Xxxx |
10–15 x podle xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxx zahřívání a xxxxxxx zcela rozpustit xxxxx xxxxxx xx xxxx, poté xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx hodnotu xX, xxx po sterilizaci xxxx 8,0 + 0,1 při 25 °X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X.
5.2 Standardní xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx
Xxx X.5.2.
Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek (8) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (X.5.3) v xxxxxx xxxxxxxxxxxxx:
x) 0,004 μx/xx (0,0067 IU/ml)
b) 0,006 μx/xx (0,01 XX/xx)
x) 0,03 μg/ml (0,05 XX/xx)
x) 0,06 μg/ml (0,01 XX/xx).
5.3 Roztok xxxxxxxxxxxx
5.3.1 Rozpustit xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxx) xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx s xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 1000 X/xx. Tento roztok, xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx dávky, xx xxxxx xxxxxxxxx až xxxxx xxxxx xxx 0 °X až 5 °X.
Xxxxxxxx
Xxx penicilinázu xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Pro xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx inaktivaci 0,6 μx (= 1 XX) xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxxx, zda xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.3.2 Namísto roztoku xxxxxxxxxxxx xx možné xxxxxx xxxxx dostupné xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, že xxxxxxxx odpovídající xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx organismus
Viz X.5.4.
5.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxx)
Xxx X.5.5.
5.6 Xxxxxxxx Petriho xxxxx
5.6.1 Xxxxxx rozpustit agarové xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), xxxx xxxxxxxx xx 55 oC.
5.6.2 Xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx spór (5.5) x nezbytnému xxxxxxxx částí xxxxxxxxx xxxxx xxx detekci xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), x xxxxx získat xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx agarové xxxxx, a důkladně xxxxxxxxx.
5.6.3 Přenést xx xxxxxxxx Xxxxxxx misky (X.4.2.2), předem vyhřáté xx 55 °X, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx se vytvořila 0,6 xx 0,8 xx xxxxxx. Pro Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx 140 xx xx třeba xxx 15 xx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxxx 0,8 xx xxxxxx.
5.6.4 Umístit Xxxxxxx misky xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx vodorovnost xx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx média, xxxxxx xxxxx xx xxxxx a obrátit xx dnem xxxxxx, xxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx povrchu xxxxxxxxx xxxxx.
5.6.5 Xxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx nejlépe xxxxx xxx xxx, xxx xxxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx polyethylenového xxxx x uchovávají xx xxx 5 °X.
5.6.6 Xxxxxxx xxx Xxxxxxx xxxxx, aby xxxx xxxxx identifikace xxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 X xxxxxx x pozitivním xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx podle "xxxxxx X" (X.7.1 x X.7.2) xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx účelem xxxxxxxxxxxx x kvantitativního xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx 10 xxxxx xx 80 ± 1 °X, xxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek.
6.1.3 Důkladně xxxxxxxxx, poté xxxxxxx xxx 10 xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx lahvičky xx xxxxxxx xxxxxx. X xxxxx přidat xxx 0,4 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.3) x řádně promíchat.
6.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
6.2.1 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx (4.3) do xxxxxx xxxxx (6.1.2) xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx. Odstranit xxxxxxxxxx xxxxx otřením disku x xxxxxxxx xx xxxxxxx. Naplocho xxxxxxx xxxx xx xxxxxx Xxxxxxx misky (5.6) x xxxxx přitlačit xxxxxxxx.
6.2.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx mléka xxxx xxx vzdáleny xxxxx od druhého xxxxxxx 20 mm x od xxxxxx xxxxxxx 10 mm.
6.2.3 Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx disky (4.3) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.2) xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx napuštěné vzorky xxxxx x poměru xxxxxxx 2 % xxxxx disků se xxxxxx xxxxx; při xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx pět xxxxxxxxxxxx disků.
6.2.4 Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx na agarové xxxxxx x xx xxxxxx identifikaci, xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxx je xxxxxxxxx 2,5 xx 5 xxxxx xxx 63 ± 1 °X.
6.2.5 Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Čiré xxxx xx změří.
6.2.6 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (6.2.3) xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx nejméně 2 xx zóny.
6.2.7 Xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx velkost xx xxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx x 6.2.6, xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
6.3.1 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx dvojmo xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (6.1.2) x se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (6.1.3). Xxxxxxx přidání xxxxxxxxxxxx do 10 xx xxxxxx xxxxx xx možné xx xxxxxx xxxxx ponořit xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (5.3.2) x uložit xx xx xxxxxxxxx xxxxx.
6.3.2 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxxxxxx xxxxxxxxx v 5.2 x) xx x).
6.3.3 Xxxxxxxxx průměrný průměr xxxxxx inhibičních zón xxx vzorky xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx penicilinázy x xxx standardní xxxxxxx xxxxxxxxxx.
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 2)
7.1 Xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx zóna, xxx xxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx vzorkem mléka, xxxxxx xxxxx nebo xxxxx xxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx penicilinu (5.2x)), xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx krystalického xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx rovné xxxx vyšší xxx 0,004 μx/xx.
7.2 Xxxxx xx průměrná hodnota xxxxxxx čiré xxxx xxxxx disku xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx rovná xxxxxxxx hodnotě xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxx, mléko xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, které xxxx možné xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx postupu.
7.3 Xxxxx xx průměrná xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx kolem xxxxx xxxxxxxxxx kontrolní xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx průměrná xxxxxxx xxxxxxx čiré xxxx xxxxx disku xx xxxxxxx mléka xxxxxxxxx xxxxx 6.1.2, xxxxxx mléka obsahuje xxxxxxxxx x antibiotika, xxxxxx sulfonamidů, x xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx nelze xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx. Syntetické peniciliny, xxxx xx cloxacillin xxxxx, nemusejí být xxxxxxxxxxxx penicilinázou za xxxxxxxxx podmínek x xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx jiné xxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx
Xxxxx xx je xxxxxxxx, inhibiční xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxx identifikovány xxxxxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx provedeno xxx xx xxxxxxxxxx standardní xxxxxx, xxxx výpočty xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx (5.2 x) xx x)).
8.2 Xxxxxxxxxx standardní křivky
Vzhledem x xxxx, že xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx10 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x průměrem xxxxxxxxxxx xxx, standardní xxxxxx xxx sestrojit xx logaritmický xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx xxx xx xxxxxx. Inhibiční xxxx xx xxxxxxxx na xxxxxxx průměru xxxxxxxxxx xxxxx. Průměry xxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx penicilinu x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx křivka.
8.3 Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xx základě průměru xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xx standardní xxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxx xx poloměr xxxxxxxxxxx zón xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, avšak xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx disků.
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx než 0,004 μx/xx (xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xxxx xxxx obsah xxxxxxxxxxx látek jiných xxx xxxxxxxxx.
9.2 Xxxxxxxxxxxxxx (x) a reprodukovatelnost (X)
Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx x jsou xxxxxxxxxx x důsledku xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx.
XX. DETEKCE PATOGENNÍCH XXXXXXXXXXXXXX
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
X xxxxxxx x požadavky xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx X, xxxxxxxx XXX bodu 2, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, které xxxx xxx xxxxxxxxxx, xxx detekci xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxx provést x xxxxxxxx, které xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx onemocnění xxxxxxxxxxxxx z xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, které xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx normy xxxxxxxxx x xxxxxxx X, xxxxxxxx VII xxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X x 21 °X, xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xx detekci xxxxxxxx xx xxxxxxxx pouze xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx propuknutím xxxxxx xxxxxxxxxxx.
3. Postup
Postupy a xxxxxxx vyšetření xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx způsobem, xxxxx xxxxxx vydávání osvědčení x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx ošetřené xxxxx pro xxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx kritéria a xxxxxxx přijaté xx xxxxxxxxxxx úrovni.
4. Xxxxxx x xxxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxxx patogenní xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx výsledek xxxxxxxx xxxxx:
Xxxxx mléka xx xxxxxxxx, xxxx "xxxxxxxxxx" xx "xxxxxxxxxxxx" x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx požaduje xxxxxxx postup. Zpráva xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.