Xxxxxxxxxx Komise
ze xxx 14. února 1991,
xxxxxx xx xxxxxxx některé xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx syrového mléka x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
(91/180/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx xxxxxxxx Rady 85/397/XXX ze dne 5. xxxxx 1985 x hygienických x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x tepelně ošetřeným xxxxxx uvnitř Xxxxxxxxxxxx [1] xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 89/662/XXX [2], x zejména xx xx. 10 xxxx. 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxx, že xxxxx xx. 10 xxxx. 2 Komise xxxxxxx metody analýzy x xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx používat xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx pro syrové xxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx mléko;
vzhledem k xxxx, že pro xxxxxx mléko xx xxxxxxxx xxxxxxxx zejména xxxxxx xxx stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxx mrznutí x přítomnosti antibiotik;
vzhledem x xxxx, že xxx pasterované mléko xx nezbytné stanovit xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií, xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, přítomnosti xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx antibiotik a xxxx mrznutí;
vzhledem x xxxx, že xxx xxxxxxxxxxxxx mléko x XXX mléko xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx analýzy a xxxxxxxxx, xxxxx mají xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; xx je xxxxxxx xxxxxxxx pokračovat x prošetřování xxxxxxxx, xx kterých xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx; xx x očekávání xxxxxxxx těchto xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xx xx, xxx xxx xxxxxxxx norem xxxxxxxx 85/397/XX xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx analýzy a xxxxxxxxx xxxxxxxx i xxxxxxxxx postupů analýzy x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx zajištění xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx opatření xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x souladu xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx veterinárního xxxxxx,
XXXXXXX TOTO XXXXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x testování xxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxx 30 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 2
Xxxxxxxxxx postupy xxxxxxx x testování xxx xxxxxxxxxxx mléko xxxx tyto:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx fosfatázy,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 30 °X,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 21 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx koliformních bakterií – xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °C,
- xxxxxxx antibiotik a xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx patogenních xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 3
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxx UHT xxxxx x sterilizované xxxxx xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 4
Xxxxxxx referenčních xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx, xxxxxxxxx kritérií xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx se xxxx xxxxxxx xxxxx pravidel xxxxxxxxxxx x příloze X.
Xxxxxx 5
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx 1, 2 x 3 xxxx popsány x xxxxxxx XX.
Článek 6
Toto xxxxxxxxxx xxxx přezkoumáno xx 31. prosince 1992, xxx xx zohlednil xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Článek 7
Toto xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X Bruselu xxx 14. února 1991.
Xx Xxxxxx
Xxx Xxx Sharry
člen Xxxxxx
[1] Úř. xxxx. X 226, 24.8.1985, x. 13.
[2] Xx. xxxx. X 395, 30.12.1989, x. 13.
XXXXXXX X
XXXXX
X. Xxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx a tepelně xxxxxxxxxx xxxxx
X. XXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxx
Xxxxxx xxxxxxxxxx xx týkají xxxxxxx, xxxxxxxxx x pomůcek, xxxxxxxxx xxxxxxxx, kritérií xxxxxxxxxxxxx x zpráv x xxxxxxxxx. Příslušné xxxxxx xxxxxxxxx států x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxx
2.1.1 Xxxxx xxxx stanoveno xxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx destilovaná, xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx odpovídající xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx mohou xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx mikroorganismů xx popsaných xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.1.2 "Xxxxxxxxxxxx" xxxx "xxxxxxx" (xxx dalšího xxxxxxxxx) xx xxxxxx "xxxxxxxxxxx ve xxxx" xxxx "ředění xxxxx".
2.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxx není xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Přístroje x xxxxxxx
3.1 Xxxxxx xxxxxxxxx x pomůcek
Příslušný seznam xxxxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx týká xxxxxxxxx x xxxxxxx xx zvláštnímu použití x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.2 Analytické xxxx
"Xxxxxxxxxxxx xxxxxx" xx xxxxxx xxxx x přesností xxxxxx xx 0,1 xx.
4. Vyjádření výsledků
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (5.1) xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx není toto xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx se musí xxxxxxxx, jinak xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, výsledek xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
5. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: opakovatelnost x xxxxxxxxxxxxxxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx uvedená pro xxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxxxx takto:
5.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) xx hodnota, xxx xxxxxx xx xxxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxx dvěma xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx byly xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx za xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx laboratoř, xxxxxx xxxxxx období).
5.1.2 Reprodukovatelnost (X) xx hodnota, xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx dvou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx pracovníci, xxxxx xxxxxxxxx, různé xxxxxxxxxx a/nebo xxxxx xxxx).
5.1.3 Pokud není xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxx opakovatelnosti x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxx odstavcích xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx 95 % intervaly xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx XXX 5725, xxxxx vydání, 1986. Xxxx vypočteny x xxxxxxxx xxxxxxxx pokusů, xxxxxxxxxxx xx spolupráci, xxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx postupu. Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx spolupráci, xxxxxx provedeny. X xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx opakovatelnosti a xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx v souladu x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
6. Xxxxxx x xxxxxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx jiné musí xxxxxx všechny xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxxxxxx x metodě xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx všechny xxxxxxxxx xxxxxxxxxx úplnou xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
XX. XXXXX XXXXXX XXXXXXXX X XXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka. Xxxxx postup xxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx použijí xxx xxxxxx mléko xxxxxx xxxxxxxxxx a pro xxxxxx x tepelně xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx x bodech 2, 4.4, 5 x 6 se použijí xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x přímé xxxxxxxx.
2. Xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx obsaženého x konvích, xxxxxxxx xxxx. provedou xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx byli xxxx odběrem xxxxxx xxxxxx vyškoleni.
Pokud to xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx pověřené xxxxxxx xxxxxx v metodách xxxxxx, aby bylo xxxxx, že odebrané xxxxxx budou xxxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxx x xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx laboratoř xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxx, aby xxxxxxxxxxxx vzorků byla xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx
3.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx musí xxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx nebo x jiného vhodného, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxx xxxxxxxx s xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx, xxx.). Xxxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxx mít xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx bylo zajištěno xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxx opatřeny pevnou, xxxxxxxxxx dlouhou xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x jakékoli hloubky xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx alespoň 50 xx.
Xxxxxxxxxxx a xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx x xxxxxxxx plastu.
Materiály xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxx x víček) xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xx vzorky xxxx mít xxxxx, xxxxx, xxxxxx povrch xxx xxxxxx x xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx.
3.2 Xxxxxxxx pro xxxxx vzorků xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxx) xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx 3.1 x musí xxx xxxxxxxx.
Xxxxx xx pro xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx vybavení, musí xxx xx každém xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx x pokyny xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx testovací xxxxxxxxx xxxx příslušný xxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx výsledků xx xxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx
4.1 Xxxxxx údaje
Bez xxxxxx xx testy, xxxxx xxxx být xxxxxxxxx, xxxxx xxxx být xxxx odběrem důkladně xxxxxxxxxx buď xxxxx, xxxx mechanicky.
Vzorek xxxx xxx odebrán xxxxx xx promíchání, xxxx xx xxxxx ještě x xxxxxx.
Xxxxx se x nádrže xxxxxxx xxxxxxx více xxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx, xxxx xxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx potřebám testování. Xxxxx použitých xxxxx xxxx xxx takový, xxx xxxx tyto xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x při xxx bylo xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx testováním, xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx přepravy.
4.2 Xxxxx xxxxx xxxxxx
4.2.1 Xxxxx xxxxxx x věder x xxxxx xx xxxxx
X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx ve xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx x xxxx, xxxxxxx dbát xx xx, aby xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxx xx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx smetana. Vzorek, xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.2 Xxxxx z chlazených xxxxxx xx xxxxx x zemědělském xxxxxxx
Xxxxxx xxxxx mechanicky xxxx xxxxx xxxxx není xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxx mléka neumožňuje xxxxxxx xxxxxxxxxx míchačky, xxxxxx ručně.
4.2.3 Xxxxx xxxxxx x xxxxx xxx
Xx xxxxxxxx, xxx xxxxx bylo xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxx do xxxxx xxx. Za xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx rozdělení xxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx ruční xxxx mechanické míchání. Xxxxx xxxxx xxxxxxx, x xxx xx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx kapacitu misky xxx, odebrat xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxx postupem xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.4 Odběr xxxxxx x rozdělené xxxxx
Xxxx je množství xxxxx, x xxxxx xx má xxxxxxx xxxxx xxxxxx, rozděleno xx více nádob, x každé xxxxxx xx xxxxxxx reprezentativní xxxxxxxx, přičemž se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxx odděleně xxxxxxxxx, xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx v poměru x množství, které xx xxxxxxx v xxxxxx, ze xxxxx xxx xxxxx xx xxxxxx odebrán. Xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxx) xxxxxx (xxxxxx) x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
4.2.5 Xxxxx xxxxxx x velkých xxxxx – skladovací xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx
4.2.5.1 Xxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
X promíchání obsahu xxxxxxx nádob, skladovacích xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx mechanické xxxxxxxxxx (4.2.5.2).
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx na xxxx, xx xxxxxx bylo xxxxx x xxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vhodný pro xxxxxxx plánovaného xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx výsledků xxxxx provedených xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx x různých xxxxx xxxxx, xxxx x xxxxxxxxxxxx intervalech xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx z xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (syrového xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx mléka) xx xxxxxx, xxxxx xx rozdíl xxxxxx xxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx 0,1 %.
Xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxx části může x místě xxxxxxxxxx xxxxxx malé xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xx promíchání není xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxx vzorků x průlezového xxxxxx. X případě xxxxxx xxxxxx x vypouštěcího xxxxxx je třeba xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx zajištěna xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxxxxx nádrží, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx:
- mechanickou míchačkou xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x umístěnou x xxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxx xx ponořena x mléce,
- v xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx hadici, xxxxx je xxxxxxxx xx xxxxx a xxxxxxxx do xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- filtrovaným, xxxxxxxxx x xxxxxx vzduchem. Xxxxxxx xx minimální xxxx x xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx vniku xxxxxx xxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx vzorků
Automatické x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx vzorků xxxxxxxx mléka xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx laboratoří xxxx jiným xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrolám, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxx s cílem xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxx xxxx být xxxxxxx vzorek,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx),
- schopnost xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx po xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxx používání xxxxxxxxxxxxx xxxx poloautomatického xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx může xxxxxxxxx xxxxxxxxx vnitrostátní xxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx objem xxxxx, xx kterého xxxx být xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx objem xxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx, které xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx je xxxxx xxxxxxxx.
4.4 Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxx o xxxxxxx ošetřené mléko xxxxxx x xxxxx xxxxxx spotřebě a xxxxxxxx x maloobchodních xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nádob. Xxxxxx musí xxx xxxxxxxx během xxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx ošetření, a xx, xxxxx xx xx xxxxx, ihned xx xxxxxxxxxx (x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x den pasterace).
Z xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx XXX x sterilizovaného) se xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, aby odpovídal xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx být xxxxxxxxx, x xx xxxxx xxxxxx poskytnutých xxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxx jiného příslušného xxxxxx.
5. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xx xxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx kódem, xxxxx umožňuje xxxx xxxxxxx identifikaci podle xxxxxx analytických laboratoří xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxx 2).
6. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx pokyny xxxxxxxx se xxxxx x podmínek přepravy x xxxxxxxxxx, které xxxx xxx xxxxxxxx x době xxxx xxxxxxx xxxxxx jejich xxxxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx x testování, xxxxx má být xxxxxxx.
Xxxxxx stanoví xxxx:
- xxxxx přepravy x xxxxxxxxxx xx třeba xxxx xx xx, xxx xxxxxx nebyly xxxxxxxxx nežádoucímu xxxxxxx x přímému slunečnímu xxxxxx. Je-li xx xxxxxx použitá xxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxx,
- vzorky xxxxxxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx musí xxx přepravovány x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 0 oC až 4 oC. Doba xxxx odběrem x xxxxxxxxxx musí být xx xxxxxxxxx x x xxxxxx xxxxxxx xxxxx přesáhnout 36 xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 0 xX xx 6 xX, xxxx-xx xxxx xxxx xxxxxxx x testováním delší xxx 24 xxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 0 xX xx 4 xX. Xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxxx a x xxxxxx xxxxxxx nesmí xxxxxxxxxx 24 xxxxx,
- xxxx vzorky mléka xxx xxxxxx syrového xxxxx x pasterovaného xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx zařízení laboratoře x xxxx xxxx xxxxxxx vzorku a xxxxxxxx xxxx být xx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, která xx xxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx postupů.
XXXXXXX X
XXXXX
X. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx
XX. Stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxx
XXX. Stanovení xxxxxxxx peroxidázy
IV. Stanovení xxxxxx mikroorganismů při 30 °X
X. Xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxx 21 °X
XX. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií – xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X
XXX. Xxxxxxxxx xxxxxx somatických xxxxx
XXXX. Xxxxxxx xxxxxxxxxx x sulfonamidů
IX. Detekce xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
X. STANOVENÍ XXXX XXXXXXX
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx plnotučného, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, UHT xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx přístroje (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx), v němž xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx ochlazována elektrickým xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx snímač xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxx dva xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx xxx xx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx, xx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxx x tomu, xx xx xxxxx xxxxx xxxxx křivky xxxx xxxxxxx xxxxxxx druhů xxxxx, xxx x xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx x standardních xxxxxxx použitých xxx xxxxxxxxx, tento referenční xxxxxx vyžaduje použití xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx plató. Xxxxxxxxx x pevně xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx rutinního testování.
Bod xxxxxxx xxx xxxxxx xxx odhad xxxxxx xxxxxxx cizí xxxx x xxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx není xxxxx xxx 0,18 x xxxxxxxx mléčné xx 100 ml (viz xxx 7.4).
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx x souladu x xxxxxxxx postupem x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxx (°X).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx x závislosti xx xxxxxxxxx podchladí xx xxxxxxx xxxxxxx x mechanickou xxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx x xxxxx, které xxxxxxxx xxxx xxxxxxx vzorku.
Přístroj xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx vzorky xxxxx xxxxxxx přesné odečty xxx dva xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx Celsia.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx xx skla
Obvyklé xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xx skládá x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, termistorového xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx teploměru) x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xx vzorky x xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx x xx xxxxxxxx na xxxxxx.
4.1.1 Xxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx lázně.
4.1.1.1 Xxxxxxx xxx
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, která xx xxxxx xxx, xxx teplotní rozdíl xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx v xxxxxxxx xxxxx xxxxx než 0,2 °C. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx kolísat xxxxxxx x xxxxxxx ± 0,5 °X xx nominální hodnoty xxxxxx výrobcem.
Je xxxxxxxx, xxx v xxxxx xxxx xxxxxxxxx konstantní xxxxxxx kapaliny. Xxxx xxxxxx xxxxxxxx na xxxxxx xxx značkou xxxxxx musí xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
4.1.1.2 Xxxxxxxxxx typ
Kolem xxxxxxxx xx vzorky proudí xxxxxxxxxxx proud vhodné xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx může kolísat xxxxxxx x xxxxxxx ± 0,5 °C xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx 33 % (X/X) xxxxx xxxxxx 1,2-xxxxxxxxxx (ethylenglykolu).
4.1.2 Xxxxxxxxx x příslušný xxxxx
Xxxxxxxxx se xxxxxx xx xxxxxxxx sondy x maximálním xxxxxxx 1,80 ± 0,2 xx x o xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 0,31 xx. Časová xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx 2 xxxxxxx x xxxxxxx b (xxx xxxxxxxx) xxxx být xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx, aby při − 0,512 °X xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx o 0,0005 °X. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx ± 5 %.
Když xx xxxxx x xxxxxxxxx x pracovní xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx musí xxxxxxxx v ose xxxxxxxx na vzorky x x bodě, xxxxx je 44,6 ± 0,1 xx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxxxxx xx straně 15). Xx xxxxx dodat xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx této xxxxxx.
Xxxxxxxx:
β xxxxxxxx termické xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx
− xX / xX × 1 / X = β / X2
xxx:
X je xxxxxxx ve stupních Xxxxxxx
X je xxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxx X,
− xX / xX × 1 / X xxxxxxxx xxxxxxxxxx
β je xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx hodnota xxxxx xxx 3000.
4.1.3 Xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
4.1.3.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx vyhledávání xxxxxxx xxxxx xx křivce xxxx xxxxxxx. Xxxxx xx část xxxxxx, xxx teplota xxxxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxx xx ± 0,002 xX xx xxxx xxxxxxx 20 xxxxxx.
4.1.3.2 Xxxxx obsluha
Odpor xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx podobným xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx odporů, xxxxxxx xxxxxxxxx tolerance je ± 10 % x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx 2×10−5°X.
Xxxxxxxx (vyrovnávací) xxxxx se xxxxx xxxxxxxx xx linearity x xxxxx xxxxxxx x xxxx xxx x 0,3 % xxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx odpory xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxxx dílky po xxxxxxxxx 0,001 °C.
4.1.3.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx nejméně 0,01 °X v xxxxxxx xx 0 °X xx –1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx taková, xxx xxxxxxxx dvou xx sobě xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx vyšší xxx 0,001 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx při xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx nevznikla x xxxxxx xxxx xxxxxxx od – 0,400 °X xx – 0,600 °X xxxxx chyba xxx ± 0,001 °C.
4.1.4 Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx použije xxxxxx xxxx x xxxxxxx 1 až 1,5 xx, xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxx,.
Xxxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxx na xxxxxxx x xxxxxxxx vertikálně xxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxx byl xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx asi 1,5 xx xxx xx pod touto xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx ± 1,5 mm), xxx xxxx zajištěna xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx stanovení. Xxxxx míchání xx xxxxxxxx nesmí v xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx.
4.1.5 Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx být jakékoli xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx vyvolá mrznutí xxxxxx, aby teplota xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x bodu xxxxxxx. X xxxx xxxxx lze xxxxxx xxxxxxxx; xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx jednu xx dvě xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx vzorky.
4.1.6 Xxxxxxxx xx xxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx (viz xxxxxxx 1) xxxx xxxxxxxx x 50,8 ± 0,1 xx xxxxxx; xxxxxx xxxxxx xx 16,0 ± 0,1 mm x xxxxxxx xxxxxx je 13,5 ± 0,1 xx. Xxxxxxxx skla xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxx xxx 0,1 xx.
Xxxxxxxx xxxx mít xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx od xxxxxxx xxxxxx 29,8 xx (21 xx xxx xxxx xxxxxxxx), xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx.
4.1.7 Zdroj xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxx kolísání xxxxxxxxxxxxxx ± 1 % xxxxxxxxx hodnoty, xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx x ± 6 %.
4.2 Analytické xxxx
4.3 Xxxxxxx xxxxx o xxxxxx 1000 xx, xxxxx A.
4.4 Xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx, nastavitelná xx 130 ± 1 °X
xxxx
Xxxxxxxxxx pec, xxxxxxxxx, nastavitelná xx 300 ± 25 °X.
4.5 Xxxxxxxxx
5. Činidla
5.1 Xxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxxx skle, xxxxxxxxx x zchlazená xx 20 ± 2 °X, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx x.x., jemně xxxxx, xxxxxx 5 xxxxx xxx xxxxxxx 300 ± 25 °C x xxxxxxxxxx peci xxxx nejméně 24 xxxxx při xxxxxxx 130 ± 1 °X x sušárně x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.3 Příprava xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxxxxx 1) xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5.2) do xxxxxxx. Rozpustit v xxxxxxxxxxx xxxx (5.1), xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx odměrné xxxxx x xxxxxx 1000 xx x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx x teplotě 20 ± 2 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx dva xxxxxx při asi 5 °X v xxxxx xxxxxxxxxx polyethylenových xxxxxxx x maximálním xxxxxx 250 xx.
Xxx xxxxxxx roztoků chloridu xxxxxxx při 20 °X
|
x XxXx/x |
°X |
|
6,859 |
-0,408 |
|
7,818 |
-0,464 |
|
8,149 |
-0,483 |
|
8,314 |
-0,492 |
|
8,480 |
-0,502 |
|
8,646 |
-0,512 |
|
8,811 |
-0,521 |
|
8,977 |
-0,531 |
|
9,143 |
-0,541 |
|
10,155 |
-0,600 |
Xxxx použitím xx standardní xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx tak xxxxxx, xxx se xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx x xxxxx xxxxxx do xxxxx x xxxxx xxxxxxx. Xxxxx nepoužívat xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx x lahví, xxxxx xxxx xx xxx čtvrtin prázdné, x nepoužívat xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 10 g/l).
6. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx tak, xxx se okolní xxxxxxx xxxxxxxx o xxxx xxx 1 °X od teploty, xxx xxx xx xxxxxxx kalibrace. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx světlu, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx 26–27 °X.
Xxxxxxx se, xx xxxxxxxx xxxxxxx podle xxxxxx výrobce a xx xxx zapnut xxxxxxx 12 xxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx sondy, xxxxxxx xxxxxxx míchačky x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx roztoky (xxx xxxxxxx výše), xxxxxxx xxx xxxxxxx xx těsně nad xxxx těsně xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx bodu xxxxxxx vzorků xxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx body xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxx než – 0,100 °X.
(X xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx příslušný obvod xxxxxxxxxx sestaven xxx, xx xx ustálí xx dané xxxxxxx xxxx xxxxxxx v xxxxx rozsahu měřícího xxxxxxxx. X těchto xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx, jako xxxxxxx x kalibračních xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxx musí xxxx xxxxxxx xxxxx).
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx do xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx vzorky, xxxx měřit xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx vyrobeny x xxxxxxxx jako zkumavky xxxxxxxxx xx vzorky xxxxx (stejný xxxx xxxx, xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx). Xxxxxxx standardních xxxxxxx xxxx stejné jako xxxxxxx xxxxxx mléka.
Podle xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x kryoskopu xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku. Xxxxxxxx xxxxx postup x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx provádět takovým xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx následující xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx správné xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx, aniž xx xxxx nutná xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Kryoskop xx tedy xxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxx ukazuje bod xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx xx xxxx xxxxx jakákoli xxxxxx.
7. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
7.1 Xxxxx xx xx xxxxxxxx skladovat xxxxxx xxx xxxxxxx mezi 0 °C a 5 °X.
7.2 Xxxxx xx je xxxxxxxx xxxxxxxx odstranit xxxxxxx xxxxxxxxx cizí tělíska xxxx xxxx mléčný xxx xx xxxxxx xx xxxxx a xxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx použije xxxxx, xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx a xxxx být xxxxxx xx laboratorní xxxxxxx.
7.3 Xxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0 x 5 °X) xxxx xx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx zahájením testování. Xx xxxx xxxxxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxxxxxx roztoky x xxxxxx xxxxx xxxx xxx použití xxxxxxx xxxxxxx.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx mléka, xxxxx možno xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 0,18 x xxxxxxxx xxxxxx xx 100 ml xxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx.
7.5 XXX mléko x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx stát xxxxxxx 20 xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
8. Xxxxxx
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx, xxx hladina x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx jsou v xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxx xx sonda termistoru xxxxxxx v prázdné xxxxxxxx xx vzorky. Xxxxxxx kryoskop x xxxxxxx se, xxx xx chladicí kapalina xxxxxxx míchá xxxx xxxxxxxx. Pokud xxx xxxxxxxx zapnut xxxxxxx 12 xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx míchačky x xxxxxxxx rozkmit xxxx xxxxxxx.
8.2 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxx xxxxxxx (například xxxxxx s xxxxx xxxxxxx – 0,512 °X), dokud se xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxx xxx 0,001 °C. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx liší xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxx 0,002 °X, xxxxxxxx xx xxxxx kalibrujte, xxx xx xxxxxxx x xxxx 6.
Pokud xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx kontrola kalibrace xx xxxxxxx nejméně xxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
8.3 Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx protřepáním x xxxxxxxxxxx otáčením. Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx tak prudce, xxx se xx xxxxxxx xxxxxxxxx vzduch.
Pomocí xxxxxx přidat 2,5 ± 0,1 xx xxxxx xx suché x čisté xxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx xx, že xxxx xxxxx x míchačka xxxxx x xxxxx, xxxxx je xx xxxxxxxx opatrně je xxxxx xxxxxx odspoda xxxxxx xxxxxx, čistou x chlupy xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx podle xxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx x mrznutí xx xxxxxx při xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx na 0,1 °X.
(X některých xxxxxxxxxxxxx přístrojů je xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; u xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx tím, xx xx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx s příslušnou xxxxxxx.)
Xxxxx z xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx později, xxx xx dosaženo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xx x xxxxx vzorkem xxxxx. Xxxxx tento xxxxx xxxxxx rovněž xxxxxx před dosažením xxxxxxxxx xxxxxxx, alikvótní xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx na 45 °X x 5 xxxxx xx udržuje xx této teplotě, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxx na testovací xxxxxxx a xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx začátku xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx po xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxx. Xxx mrznutí xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx x xxxx xxxxxxx xx xxxxx zaznamenat.
Poznámka:
Doba, xx kterou xxxxxxx xxxxxxx konstantní, x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx mrznutí x xxxxxxxxx maximální xxxxxxx, xx xxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxx xxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx jsou podstatně xxxxxx xxx xxx xxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx teplotu.
Když xx měření uspokojivě xxxxxxxxx, xxxxxxx zkumavku, xxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxx x míchačku směrem xxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx druhé xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx je xxxxxx xxxx naměřenými xxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (0,004 °X), xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx obou xxxxxxxxx xxxxxx na 0,004 °X, xxxxxx xx x xxxxxxx se xxx xxxxxxx konečného xxxxxxxx.
8.4 Chlazení sondy
Po xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx na xxxxxx na xxxxx xxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx teplotu, xxx xxxxx zůstala x xxxxxx.
(X xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx to xxxx možné; x xxxxxxxx případech xx xxxxxxxx se xxxxxxx, xxx xx sonda xxxx začátkem xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx několika xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx shodné údaje.)
9. Xxxxxxxxx výsledků
9.1 Výpočet
Pokud xx po xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx potvrzena, xx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na xxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx liché xxxxx, je třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx:
Xxx xxxxxxx (°X)
|
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx |
Xxxxxx |
|
|
-0,544 |
-0,545 |
-0,544 |
|
-0,545 |
-0,546 |
-0,546 |
9.2 Xxxxxxxxxxxx
9.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x): 0,004 °X
9.2.2 Reprodukovatelnost (X): 0,006 °X
Xxxxxxx 1
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1 (xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx ke xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx)
XX. XXXXXXXXX AKTIVITY XXXXXXXXX
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxxx
2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxx xxxxxxx alkalické fosfatázy xxxxxxxx ve výrobku. Xx vyjádřena xxxxxxxxx xxxxxx x μx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx mléka za xxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx mléka xx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx 4 xx xxxxxx xx 1 xx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx vzorku xxxxxx fenol z xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (namodralé xxxxx), xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 610 xx. Xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxx fosfatázy xxx xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Tlumivý xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.1 Rozpustit xx vodě 50,0 x hydroxidu xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) [Xx(XX)2.8X2X] a xxxxxxx xx 1000 xx.
4.1.2 Xxxxxxxxx xx xxxx 22,0 x xxxxxxxx xxxxxx (X3XX3) x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.1.3 Zahřát 500 xx každého xxxxxxx xx 50 °X, oba xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxx xx 20 °X, v xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pH na 10,6 ± 0,1 xxxxxxxx xxxxxxx 4.1.1 xxxx 4.1.2. Přefiltrovat. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4.1.4 Xxxx xxxxxxxx zředit xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxx xxx vyvolání zabarvení
Rozpustit xx xxxx 6,0 x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XxXX2) nebo 12,6 x XxXX2.4X2X a 20,0 x xxxxxxxx xxxxxxx (XxXx) a xxxxxxx xx 1000 xx.
4.3 Xxxxxxx xxxxxx xxx zředění xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxx 10 ml xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2) xxxxx xx 100 xx.
4.4 Xxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx 0,1 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xx 100 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.3) xxxx 0,5 x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx 4,5 ml xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2), xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx BQC (4.6) x nechat xxxx 30 xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 2,5 xx x-xxxxxxxx a xxxxxx stát, xxxxx xx xxxxxxx-1 xxxxxxxx. Xxxxxxx x odstranit xxxxxxx-1. V xxxxxxx xxxxxxxx xx extrakce xxxxxxx.
Xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx dní; xxxx xxxxxxxx xxxxxxx zabarvení x provést novou xxxxxxxx. Xxxxxxx substrát xxxxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxxx, a xx xxxxxxxx 1 xx xxxxxx roztoku xx 100 xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.3).
4.5 Xxxxxxxxx xxxxx-xxx
Xxxxxxxxx xx vodě 3,0 x xxxxxx xxxxxxxxxxx (ZnSO4 · 7X2X) x 0,6 x síranu xxxxxxxxx (XxXX4 · 5X2X) x doplnit xx 100 xx.
4.6 Xxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx XXX)
Xxxxxxxxx x 10 xx 96 % (X/X) xxxxxxxx 40 ± 1 mg 2,6-dibromchinonchlorimidu (XXX) (C6H2Br2ClNO6).
Skladovat x xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx. Vyhodit xxxxxx, xxxxx xxxxx barvu xxxx xx xxxxxx xxx jeden xxxxx.
4.7 Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (XX)
Xxxxxxxxx xx xxxx 0,05 x xxxxxx xxxxxxxxx (CuSO4.5H2O) x xxxxxxx xx 100 xx.
4.8 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx
4.8.1 Navážit 200 ± 2 xx xxxxxxx bezvodého xxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 100 ml, xxxxxx xxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xx 100 ml. Xxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x chladničce xxxxxxx xxxxxx.
4.8.2 Zředit xxxxx 10 ml xxxxxxxxx xxxxxxx, doplnit xx 100 xx x promíchat. 1 xx obsahuje 200 μx fenolu.
5. Přístroje x pomůcky ze xxxx
Xxxxxxxx:
x) Veškeré xxxxxxx xx skla, jakož x xxxxx x xxxxxxxxx pro odběr xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx vyčištěny. Doporučuje xx xxxxxxxxxxx čerstvě xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx čistění xxxxx.
x) Xxxxxxx typy xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxxxxx laboratorní xxxxxxxx, xxxxxxx:
5.1 Xxxxxxxxxx xxxx
5.2 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx 37 ± 1 °X.
5.3 Spektrofotometr xxxxxx xxx xxxxxx xx vlnové xxxxx 610 xx.
5.4 Xxxxxxxx, 16 xxxx 18 × 150 xx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 5 xx a 10 xx.
5.5 Xxxxxx
5.6 Xxxxxxxx nálevky xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx. o xxxxxxx 5 cm.
5.7 Xxxxxxxx filtry x xxxxxxx xxxxxxx 9 xx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
5.8 Odměrné xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
6. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx přímého xxxxxxxxxx xxxxxx.
x) Xxxxx slin xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxx xx xxx xxxxxxx. Je xxxxx xxxxx věnovat zvláštní xxxxxxxxx pipetování.
6.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxx ihned xx xxxxxx xxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx skladovat xxxxxx x chladničce, xxxxx ne xxxx xxx xxx dny.
6.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx pipety xxxxxx 1 xx xxxxxx xx xxxxx xx xxxx zkumavek (5.4), xxxxx zkumavku xxxxxx jako xxxxxxxxx xxxx slepý xxxxx.
6.3 Xxxxxxxxx
6.3.1 Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx dvě minuty xx vroucí xxxx; xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx prohřála xxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.2 Xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx vzorek xxxxxxx způsobem. Přidat 10 ml xxxxxxx xxxxxxxxx (4.4) a xxxxxxxxx.
6.3.3 Xxxxxx ihned xxxxxxxxx 60 xxxxx xx xxxxx lázni (5.2) x občas (xxxxxxx xxxxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
6.3.4 Stejně xxxx x xxxx 6.3.1 zahřívat xxx xxxxxx ve xxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.5 Xx xxxxx zkumavky xxxxxx 1 xx xxxxxxxxx xxxxx-xxx (4.5) x xxxxx xxxxxxxxx.
6.3.6 Xxxxxxxxxxxx přes suchý xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx x x případě xxxxxxxx filtrovat xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx; shromáždit 5 xx ve xxxxxxxx.
6.3.7 Xxxxxx 5 xx xxxxxxxxx roztoku xxx xxxxxxxx zabarvení (4.2).
6.3.8 Xxxxxx 0,1 xx roztoku XXX (4,6), promíchat x 30 xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx teplotě.
6.3.9 X xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx pokusem xxxxxx absorbanci při xxxxxx délce 610 xx.
6.3.10 Pokud xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx 6.3.9 xxxxxxxxx absorbanci xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxxxx 20 μg xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.4.4, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx vzorku, xxxxx se xxxxxxx xxxxx xx xxxx, xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.4 Sestrojení xxxxxxxxxx xxxxxx
6.4.1 Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxx (4.8.2) připravit xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0 (xxxxxxxxx xxxx slepý xxxxx), 2, 5, 10 x 20 μx xxxxxx na xxxxxxxx. Xx každé x xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx pipety 1 ml vody x 1 ml xxxxxx standardních xxxxxxx xxxxxx.
6.4.2 Xx každé xxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxx síranu xxxxxxxxx (4.7), 5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx zředění vzniklého xxxxxxxxx (4.3), 3 xx xxxx x 0,1 xx xxxxxxx XXX (4.6); promíchat.
6.4.3 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 30 xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
6.4.4 V xxxxxxxxx s kontrolním xxxx slepým xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx při xxxxxx délce 610 xx.
6.4.5 Xx základě xxxxxx absorbance (6.4.4) xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx fenolu (6.4.1) vypočítat xxxxxxxx xxxxxx metodou xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxx x xxxxxx
7.1.1 Xx základě xxxxxx xxxxxxxxxx (6.3.9) xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx pomocí xxxxxxxx xxxxxx (6.4.5).
7.1.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx fosfatázy xxxxxxxxxx x μg xxxxxx xx mililitr xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxx xxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxxx xxxxxxxxx = 2,4 × X × D
kde
A xx xxxxxxxx xxxxxx x μx xxxxxxx xxxxx bodu 7.1.1;
X xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 6.3.10 (x případě žádného xxxxxxx D = 1).
2,4 xx xxxxxx xxxxxxx (5/12 x 1 xx testovacího xxxxxx) – viz 6.2 ve xxxxxxxxxx x 6.3.2, 6.3.5 x 6.3.6.
7.2 Xxxxxxxxxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) : 2 μx xxxxxx/xx.
7.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (R) : 3 (xxxxxxxxx) μx xxxxxx/xx.
7.2.3 Xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx podle 6.3.10, xxxxxx uvedené x 7.2.1 a 7.2.2 xx týkají xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.
XXX. XXXXXXXXX XXXXXXXX PEROXIDÁZY
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx, který xxxxxx xx kontrole pasterace.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx reakce xx xxxxxxxxxx:
Xxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxx zabarvení.
Negativní reakce xx peroxidázu:
Do 30 xxxxxx xx promíchání xx xxxxxxxx žádné xxxxxxxxx.
3. Princip
Peroxidáza rozkládá xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxx (Xxxxxxxx xxxx). Xxxxxxxxx zabarvení xx xxxxx úměrná xxxxxxxxxxx enzymu.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx x teplé xxxx (50 °X) 2 x 1,4 xxxxxxxxxxxxxx (X6X8X2) x doplnit xx 100 ml. Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx a xxxxx, x tmavě xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx jednoho xx dvou xxx xx xxxxxxxxxx roztok 1,4 xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, kterou je xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx zředit 9 xx 30 % xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx 100 xx. Pro xxxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx litr xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx vodíku xx xxxxx xxx xxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx v xxxxxx x xxxxx, x xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
5. Xxxxxx
5.1 Xxx 5 xx vzorku xxxxx xx xxxxx zkumavky x xxxxxxx xxxxxx.
5.2 Xxxxxx 5 ml xxxxxxx 1,4 fenylendiaminu (4.1).
5.3 Xxxxxx 2 xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.2).
5.4 30 xxxxxx po xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx 30 xxxxxx xx xxxxxxx činidel, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX PŘI 30 °C
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X. Xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxx mléko, xxxxxxxxxxx xxxxx, XXX xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx 15 xxx xxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx organismy, xxxxx vytvářejí xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx mléka x kultivačním xxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx 72 xxxxx při 30 °C. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx 0,1 xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx nebo XXX xxxxx.
4. Přístroje a xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx vybavení, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Horkovzdušná sušárna, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °X.
4.1.4 xX-xxxx xx zařízením xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °C.
4.1.6 Zvětšovací xxxx, zvětšení 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Xxxxxxxx schopná xxxxxxx 1 xx xxxxxx mléka nebo xxxxxxxxxxx ředění x 9 ml ředicího xxxxxxx x xxxxxxxxx xx principu xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx ze xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx s vhodnými xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx 10 xx primárního xxxxxx nebo dalších xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx 20 ml xxx skladování xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx xxxx xx sterilního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 ml, x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx misky z xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, xxx misek xx xxxxxxx xxxxxx xxx 90 xx 100 mm. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx 10 xx. Xxx xxxxx mít xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx:
Xxxxxxx ze skla xx sterilizují jedním x xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx 170–175 °X;
x) x xxxxxxxxx (4.1.2), nejméně 20 minut xxx xxxxxxx 121 ± 1 °C.
Při xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx bylo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx, uzávěry xxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx ze xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxx odvětráním xxxx.
Xxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Kultivační xxxxxx – xxxx xx xxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx extrakt |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx (+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10–15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx žádné xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X tomto xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, trypton, glukózu x xxxxxxx sušené xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx usnadňuje xxxxxx. Xxxx xxxxxx agar x za xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx, xxxxx se xxxx zcela nerozpustí, xxxx xxxxxxxx v xxxx xxx 30 xxxxx.
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, přefiltrovat přes xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); pokud xx je xxxxxxxx, xxxxxxx pH, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxxxx byla xxxx xxxxxxx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °C.
5.2 Rozdělení, xxxxxxxxxxx x skladování xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 xx xx xxxxx xxxx xx 12 až 15 xx do xxxxxxxx (4.2.2). Baňky a xxxxxxxx xxxxxxx.
15 minut xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx v xxxxx xxx teplotě xxxx 1 x 5 °X, xxxxx ne xxxx než 1 xxxxx po xxxx xxxxxxxx.
5.3 Komerční xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx médium
Kultivační xxxxxx (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx pokyny xxxxxxx, xxx xxxxxx sušené xxxxxxxxxx xxxxx před xxxxxxxxxxxx, pokud není xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx pH xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X xxxxxxx xxxxx xxxx 5.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Roztok xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, pokud xx xx xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xX-xxxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx nezbytné xxxxxxx xX xxxxxxxx (nejméně 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx ředidla
Rozdělit xxxxxxx (6.1) do xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx sterilizovat x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °C.
Zkontrolovat pH xxxxxxx.
Xxxxx xx ředidlo xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx v xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 a 5 °X, avšak xx xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) xx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX xxxxxxx xxxxx xxxx 6.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxxx kultivačního média
Před xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx kultivačního xxxxx a xxxxxxxx xx vodní xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °C.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx mléka
Vzorek xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xx 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku xx xxxxxx překročit xxx xxxxxx.
7.3 Příprava xxxxxxxxxx xxxxxx (10-1) (xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) syrového xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xx 9 xx xxxxxxx (6.1), xxxxxxx xxxxxx nesmí přijít xx kontaktu x xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx mléka. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx promíchávat xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx xx xxx xxxxxxxx ředění 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx a xxxxxxxxxxx mléko)
Sterilní pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.3) do 9 xx ředidla (6.1) xxxxx pokynů x xxxx 7.3.
Získá xx xxx xxxxxx 10−2.
X xxxxx získat xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx dlouho, xxxxx xxxxx očekávat xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
7.5.1 Xxxxxx mléko: Sterilní xxxxxxx (4.2.3) přenést xx xxxxx (4.2.4) 1 xx vzorku x/xxxx vhodného xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Pro každé xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) přenést xx misky (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx vhodného xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxx dvě xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.5.3 XXX mléko x xxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx xx 15 xxxxx xxxxxxxx při 30 °X – xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx A xxxxxxxx XXX xxx 5):
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx do misky (4.2.4) 1 xx xxxxxx mléka (7.2). Xxxxxxxxx dvě xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx misky xxxxx xxx 15 xx 18 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Xxxxx xxxxxxxxx rotací Xxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxx k xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx koncem xxxxxxxx xxxxxx mléka x xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx, testovacího xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx vodorovném, xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxxx (4.1.3). Misky xxxxxxxxx xxxxxxxx dnem xxxxxx. Xxxxxxxxx na xxxx xxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxx x kontaktu xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 72 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °C.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx x Xxxxxxx miskách xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 300 xxxxxxx.
Xxxxx vyšetřit xxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx počítání xxx použít zvětšovací xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx xxxxx xxxx xx to, xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx s drobnými xxxxxxxx koloniemi. V xxxxxxx pochybností xxxxxxx xxxxxxx průzkum pomocí xxxxxxxxxxxx skla s xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx méně xxx xxxxxxxx xxxxx, spočítat xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx počet xxx xxxxx misku. Xxxxx kolonie xxxxxxx xxxxxx pokrývají více xxx čtvrtinu plochy xxxxx, misku xxxxxxx.
8. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx
8.1.1 Použít xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.1.2 Vypočítat xxxxx mikroorganismů xx 1 ml xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx tohoto vzorce:
∑C / (n1 + 0,1x2) x
xxx:
∑X ΣX xx celkový počet xxxxxxx xxxxx xxxx 8.1.1.
(x1 + 0,1 x2)x xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, kde:
n1 xx počet misek xxx prvním xxxxxxx
x2 xx xxxxx xxxxx xxx druhém ředění
d xx faktor xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx získány první xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx dvě xxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxx (pasterované xxxxx):
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 kolonií
Ředění 10−3: 33 a 28 kolonií
Počet/ml: = 278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2
= 6290,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.1.3 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx než 10, xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx "xxxxx xxx 10 x x", přičemž "d" xx převrácená xxxxxxx xxxxxxxxxx faktoru zředění.
8.1.4 Xxxxx jsou všechny xxxxx xxxxx než 300 x xxxxxxxx xx xxxxx, xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx hodnotou xxxxxxx zředění. Výsledek xxxxxxxx jako "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xx".
8.2 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx mléko
Počty xxxxx než 10 xxxxxxx na 0,1 xx xx považují xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/XXX.
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kruhových xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
X. STANOVENÍ XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXX 21 °C
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů technikou xxxxxxxx kolonií xxx 21 °C x xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx pět xxx xxxxxxxxxxxxx xxx 6 xX x xxxxx xxxxxxxx stupeň kontaminace xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxx xx x mléce xxx 6 °X.
2. Definice
"Mikroorganismy" xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx aerobní xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx pasterované xxxxx xxx xxx xxx 6 °C. Xxxxxxx stanovený xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx inkubovat 25 xxxxx při 21 °X. Spočítat kolonie x vypočítat xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx mléka.
4. Xxxxxxxxx x pomůcky xx skla
Obvyklé laboratorní xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °C.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx udržovat xxxxxxx:
x) 6 ± 0,2 °X
x) 21 ± 1 °C xx xxxxx bodech xxxxxx.
4.1.4 pH-metr xx xxxxxxxxx xxx kompenzaci xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx na 45 ± 1 °C.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx počítadlo
4.1.9 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x 9 xx xxxxxxxx roztoku a xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx rotace xxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx objemem, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx o objemu 150 až 250 xx xxxx zkumavky x xxxxxx 20 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), skleněné xxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx materiálu, x xxxxxxxxxxxx hrotem, o xxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx x průměru 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx nebo xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx materiálu, xxx misek má xxxxxxx xxxxxx xxx 90 xx 100 x. Xxxxxxx hloubka xxxxx by měla xxx nejméně 10 xx. Xxx xxxxx xxx žádné xxxxxxxxxx, xxxxx by bránily xxxxxxxx kolonií.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx ze skla:
Pomůcky xx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx:
x) v xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx 170–175 °X;
x) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx při teplotě 121 ± 1 °X.
Xxx použití xxxxxxxxx xx nutné xxxx xx xx, aby xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: pokud xx materiál xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx uzavřeny, xxxxxxx xxxx víčka xx měly xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x autoklávech xx xx měly xxxxxxx odvětráním xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Kultivační xxxxxx – xxxx xx xxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx(+) xxxx dextróza |
1,0 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxx mléko |
1,0 g |
|
Agar |
10-15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 ml |
Sušené xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx žádné xxxxxxxxx látky. Xxxx xx xxxxx srovnávacími xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, které xxxxxxxx žádné xxxxxxxxx xxxxx neobsahuje.
Příprava:
V xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, trypton, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx mléko. Xxxxx xxxxxxxx usnadňuje xxxxxx. Poté xxxxxx xxxx a xxxxx xx xxxx xx xxxxxxx míchání, xxxxx xx xxxx zcela xxxxxxxxxx, nebo xxxxxxxx x xxxx xxx 30 minut.
Pokud xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx to je xxxxxxxx, upravit xX, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx kultivačního xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxxx od 100 xx 150 xx xx xxxxx nebo xx 12 až 15 xx do xxxxxxxx (4.2.2). Xxxxx x xxxxxxxx uzavřít.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx se x xxxxx xxx teplotě xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx déle než 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxx připravit x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kultivačního xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, ale xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx mléko xxxx xxxxxxxxxxxx, pokud xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xX xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °C xxxxxxxx xxxxx xxxx 5.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x skladovat xxxxxxxxxx xxxxxx podle xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Roztok xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxxx sodný (XxXx) |
8,5 g |
|
Voda |
1000 ml |
Příprava:
Rozpustit xxxxxx xx xxxx, xxxxx to xx xxxxx, zahřívat.
Zkontrolovat xX xX-xxxxxx (4.1.4); pokud xx xx xxxxxxxx xxxxxxx xX roztokem (xxxxxxx 0,1 mol/l) xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx byla xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 při 25 °X.
6.2 Rozdělení, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx zkumavek (4.2.1) xxx, aby po xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx ředidla. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X. Xxxxxxxxxxxx xX ředidla.
Pokud xx xxxxxxx nepoužije xxxxx, skladuje xx x xxxxx při xxxxxxx mezi 1 x 5 °X, xxxxx ne xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ředidla
Ředidlo (6.1) se může xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX xxxxxxxx xxxxx bodu 6.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx podle bodu 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx zahájením xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx lázni (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxx x inkubátoru [4.1.3 x)] xxxxxxxx balení xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx to xxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx 100 xx xx xxxx 120 ± 2 xxxxx xxx 6 ± 0,5 °X.
7.2.2 Xx xxxxxxxx xxxxxx mléka xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx co nejrovnoměrněji xxxxxxxxx, a xx 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx vzorkem. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxx nechat rozptýlit. Xxxx mezi xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx neměla xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (10−1)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 9 xx xxxxxxx (6.1), xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxx ředidla xxxx xxx přibližně xxxxxx xxxx teplota xxxxxx mléka. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx toto xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx xx xxx xxxxxxxx ředění 10−1.
7.4 Xxxxxxxx dalších xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx xxxxxx v xxxx 7.3.
Xxxxx xx xxx xxxxxx 10−2.
X cílem xxxxxx xxxxx desetinná xxxxxx xx tento xxxxxx opakuje xxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ředění. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxx každé xxxxxx (8.1.1) připravit xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Do xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 15 xx 18 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxx xx inkubaci xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx přípravy vzorku xxxxx a xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx mléka, xxxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx překročit 15 xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx vodorovném, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Petriho xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Misky xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx vzájemně xxxxxxx, ani xxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx a vrchní xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 25 xxxxx xxx 21 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx x Xxxxxxx miskách xxxxxxxxxxxxxx xxxx než 300 xxxxxxx.
Xxxxx vyšetřit xxx xxxxxxxx světle. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx zvětšovací xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx nutné xxxx xx xx, aby xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx sraženin x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx provést xxxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx považují xx xxxxx xxxxxxx. Pokud xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x nepostižené xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx celou xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pokrývají více xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 a 8.1.4).
8.2 Vypočítat xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx syrového xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxx xxxxxx vzorce:
∑C / (x1 + 0,1x2) x
xxx:
ΣX je xxxxxxx xxxxx kolonií podle xxxx 8.1,
(x1 + 0,1 x2)x xx xxxxx naočkovaného xxxxxx, xxx:
x1 je xxxxx xxxxx při xxxxxx xxxxxxx
x2 je počet xxxxx xxx druhém xxxxxx
x xx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx byly získány xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx dvě xxxxxx číslice. Když xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx sudá.
Příklad:
Ředění 10−2: 278 a 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 x 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; =278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2=
=629 / 0,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.3 Pokud xxxx xxxxxxx počty xxxxx xxx 10, xxxxx, že počet xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx "xxxxx xxx 10 × d", xxxxxxx "x" xx xxxxxxxxxx hodnota nejnižšího xxxxxxx xxxxxxx.
8.4 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx než 300 x počítání je xxxxx, provést odhad x vynásobit jej xxxxxxxxxxx xxxxxxxx faktoru xxxxxxx. Výsledek vyjádřit xxxx "Xxxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxxxx na ml".
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx mezinárodně uznaných xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x dispozici.
VI. XXXXXXXXX OBSAHU XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX – XXXXXXXX XXXXXXX XXX 30 °X
1. Předmět x xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx xxxxxxxxx koliformních xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx technikou počítání xxxxxxx při 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxx bakteriemi" xx xxxxxxxx bakterie, xxxxx xxx 30 °X vytvářejí charakteristické xxxxxxx nebo necharakteristické xxxxxxx, jež jsou xx popsaných podmínek xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx plynu.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx s kultivačním xxxxxx v Petriho xxxxxxx a 24 xxxxx nechat inkubovat xxx 30 °C. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx kolonie x, xxxxx xx xx xxxxx, potvrdit xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx kolonií xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx laktózu. Xxxx xxxxxxxxx počet koliformních xxxxxxxx na 1 xx xxxxxxxxxxxxx mléka.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx laboratorní xxxxxxxx, zejména:
4.1 Přístroje
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Autokláv, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °X.
4.1.4 xX-xxxx xx zařízením pro xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Vodní xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxx jehla xx slitiny platina-iridium xxxx xxxx-xxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
4.2.1 Zkumavky x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 20 xx, xxx mohly xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (5.2) a Xxxxxxxxx xxxxxxxx vhodné xxxxxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 ml xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx selektivního xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.1).
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx vatou), xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx materiálu, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 – 10 xx, s xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x čirého, xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxx má xxxxxxx xxxxxx xxx 90 xx 100 x. Xxxxxxx hloubka xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx 10 xx. Xxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Sterilizace xxxxxxx xx xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx se xxxxxxxxxxx jedním z xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx hodinu xxx xxxxxxx 170 – 175 °C;
b) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx teplotě 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx bylo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx proniknutí xxxx: pokud se xxxxxxxx sterilizuje x xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xx xxxxxx být xxxxxxx xxxxxxxx, uzávěry xxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx by xx měly vysušit xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx sterilizovány x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx
5.1 Agar x krystalovou xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, žlučí x laktózou (XXXX xxxx). Xxxxxx selektivní xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
7 x |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
3 x |
|
Xxxxxxx (C12H22O11.H2O) |
10 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
5 x |
|
Xxxxxxx xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxxxx xxxxxx |
0,03 x |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxx |
0,002 g |
|
Agar |
10 xx 15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 ml |
Příprava:
Suspendovat x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx x nechat xxxx několik xxxxx. Xxxx důkladně xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx to xx nutné, upravit xX xxxxxxxx (nejméně 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx po xxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxx rychle xx xxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx po xxxxxxxxxx 100 xx 150 xx xx xxxxxxxxxx xxxxx (4.2.2). Kultivační xxxxxx zchladit xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °C.
V xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (6.4).
Použít xxxxxxxxxx xxxxxx do xxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxx xxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
10 x |
|
Xxxxxxx (X12X22X11.X2X) |
10 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxxx žluč |
20 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxx |
0,0133 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx x xxxxx xx varu.
Zkontrolovat pH xxxxxx pH-metru (4.1.4); xxxxx to xx xxxxxxxx, xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) hydroxidu xxxxxxx xxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx sterilizaci xxxx jeho xxxxxxx 7,2 ± 0,1 xxx 25 °C.
Rozdělit xxxxxx xx 10 xx do xxxxxxxx (4.2.1) xxxxxxxxxxxx Durhamovy xxxxxxxx. Zkumavky xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxx trubičky nesmějí xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx bubliny.
Zkontrolovat xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx médium xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x temnu xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °C, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx xx jeho přípravě.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kultivační xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx může xxxxxxxxx x komerčního dehydrovaného xxxxxxxxxxxx xxxxx. Dodržte xxxxxx výrobce. Xxxxxxx xX, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx kultivační xxxxxx xxxxx xxxx 5.1 x 5.2.
6. Xxxxxx
6.1 Kultivační xxxxxx
Xxxxxx xxxxxx (XXXX agar) xxxxxxx x xxxx 5.1.
6.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxx řádně xxxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx nejrovnoměrněji xxxxxxxxx, x xx 25 rychlými otočeními xxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx rozptýlit. Xxxx mezi mícháním x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx by xxxxxx xxxxxxxxx tři xxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) 1 ml xxxxxx xxxxx xx každé xx xxx xxxxx (4.2.4) x xxx xxxxxxxxx 3 xx xxxxxx xxxxx (6.2).
6.4 Xxxxxxxx kultivačního xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 12 xx VRBL xxxxx (6.1)
Xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxx x rovnoměrnému xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx koncem xxxxxxxx vzorku mléka x smícháním x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xx xxxxxx xxxxxxxx sterility xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x 12 xx xxxxx XXXX xxxxx, xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxx na xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx médium xxxxxxxx.
Xx úplném xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 4 xx XXXX xxxxx (6.1) na povrch xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx.
6.5 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx inkubátoru (4.1.3). Misky xxxxxxxxx xxxxxxxx dnem xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx misek xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, ani xxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 24 ± 2 xxxxxx xxx 30 ± 1 °X.
6.6 Xxxxxxxx xxxxxxx
6.6.1 Xxxxxxx xxxxxxx x Xxxxxxx miskách xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 150 xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx 0,5 xx, x xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx, charakteristické xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.6.2 Xxxxx xxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxx xxxxx, velikost xxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxx konfirmační xxxx (6.7).
6.7 Xxxxxxxxxxx xxxx
Xxxxx xxxxx v xxxx 6.6.2 provést xxxxxxxxxxx test u xxxxxxxx xxxxx (xxxx. 3 xx 5) xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx kolonií xxx, xx xx pomocí xxxxxxxx xxxxx (4.1.6), xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.2). Xxxxxxxxx xxxxxxxx 24 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °C.
Za xxxxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx x Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx plyn.
7. Xxxxxxx a vyjádření xxxxxxxx
7.1 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx obsahujících xxxxxxxxx 150 xxxxxxx.
7.2 Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, vypočítat xxxxx xxxxxxx koliformních bakterií xx základě xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxx xxxxxx xxxxxx:
ΣX / x
xxx:
ΣX je celkový xxxxx kolonií xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (7.1 x xxxxxxxxxxx se 7.2), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (6.3).
x je xxxxxxxx vyšetřovaného xxxxxx (6.3) v mililitrech (3 xx).
Xxxxx se xxxxxxxxxx na xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx než 100 xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx sudá.
Pokud xxxx xxxxxxx počty xxxxx xxx 150 xxxxxxx, uvést xxxxxxxx xxxx "odhadovaný xxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií xx 1 ml".
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kruhových xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
XXX. STANOVENÍ XXXXXX XXXXXXXXXXX BUNĚK
Tato xxxxxxxx popisuje xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx somatických xxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Xxxxxxxxxxxxx metoda
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxx postup xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x syrovém xxxxx.
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxx xxx stanovení xxxxx buněk ve xxxxxx xxxxx za xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx X.1).
2. Xxxxxxxx
Xxx tento xxxxxx xx somatickými xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx x epitelové xxxxx, jejichž xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx modří
3. Xxxxxxx
Xxxxxx 0,01 xx xxxxx xx 1 xx2 povrchu podložního xxxxxxx. Tenká vrstva xx xxxxxx x xxxxxxx. Počítání xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxxx xx vynásobí xxxxxxxxx faktorem, x xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx na 1 xxxxxxxx.
4. Xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x..
Xxxxxxx roztok
Složení
|
Methylenová xxxx |
0,6 x |
|
Xxxxxxx – 99 % |
54 ml |
|
1,1,1-trichlorethan xxxx xxxxxxxxxxxxxxx |
40 ml |
|
Ledová xxxxxxxx xxxxxx |
6 xx |
Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx je xxxxxxxx. Xxxxxxxx a xxxxxxxxx se xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx a 1,1,1-xxxxxxxxxxxxx xxxx tetrachlorethan x xxxxxx xx xxxxx xxxxx xx 60 xx 70 °X. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx promíchat, 12 xx 24 xxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxx 4 °X x přidat xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx pórů 10 až 12 xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx roztok xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx láhvi. X xxxxxxx vytvoření xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx roztok xxxxx xxxxxxxxxxxx.
5. Xxxxxxxxx x pomůcky ze xxxx
5.1 Mikroskop xxxxxxxxxx xxxxxxxx 500 × xx 1000 ×
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx umožňující xxxxxxxxx xx 0,01 xx x xxxxxxxxx xxxxxxx ± 2 %.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 20 mm × 5 mm xxxxxxxxxx xxx tenkou xxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 20 × 5 xx pro xxxxxx xxxxxx.
5.4 Horizontální xxxxx deska (30 °X až 50 °X) xxx sušení xxxxxxxxxx sklíček.
5.5 Ventilátor (xxx) pro xxxxxx xxxxx vrstvy.
5.6 Xxxxx xxxxx, nastavitelná na 30 xx 40 °X xxx xxxxxxxx xxxxxx mléka.
5.7 Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 0,01 xx.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 6 °X. Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx.
6.2 Xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxx ve vodní xxxxx (5.6) xx 30 xx 40 °X. Poté xxxxx xxxxxxxxx. Zchladit na xxxxxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (5.2), xxxxxxxxx 20 °X.
6.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx sklíček
Vyčistit xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) například xxxxxxxxx, vysušit xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxx, kde jsou xxxxxxxx xxxx xxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxx xxxxx vrstvy
Mikrostříkačkou (5.2) odebrat 0,01 xx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx, jak xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxxxx vnější xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx na podložní xxxxxxx (5.3) x xxxxxxx obkreslit xxxxx xxxxxxxxx (20 mm × 5 xx). Xxxx xx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Nechat xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (5.4) xx xx úplného xxxxxxxx.
X xxxxxxx vzorku xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx dvě xxxxx xxxxxx.
6.5 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx na 10 xxxxx xx barvícího xxxxxxx (4). Xxxxx x, xxxxx xx xx nezbytné, xxxxxxxxx xxxxxxxx ventilátorem (5.5). Xxxxxxx tenké xxxxxx xx xxxxxxx vody, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx zcela xxxxxxx. Xxxxx xxxxx x xxxxxxx xxx, xxx xxx xxxxxxx před xxxxxxx.
6.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx
Xx xxxxxxx zvoleného xxxxxxxx (500 × xx 1000 ×) xxxxxx xxxxxx mikroskopického xxxx (5.7).
7. Xxxxxxxx x xxxxxxx
7.1 Počítání xxxxx
Xxxxxx xxxxxxxxx (5.1). Xxxxx xxxxxxxx buněk xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx jádra, x xx xxxxxx jádra, xxxxx xxxx jasně xxxxxxxxxxxx a x xxxxx xx x xxxxxxxxxxxxxx xxxx viditelná xxxxxxx polovina. Xxxxxxx xxxx xxxx pole xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx vrstvy x xxxxxxxxx ty pásy xxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx tenkých xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx nejméně xxxxxx za měsíc xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx polí xxxxxxxxxxxx xxxxxxx způsobem, xxx všechny xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx počtu xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx x xxxx, xx počítání xxxxxxxxxxx xxxxx xxx mikroskopem xxxx být rovněž xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x mechanických xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxxxx vzorků nesmí xxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx koeficient xxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx 400000 xx 600000 xxxxx/xx xx xxxxx xxxxxxxxx 5 %.
Počet xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx je xxxxx v xxxxxx xxxxxx spočítat, musí xxx podle Xxxxxxxxxx xxxxxx rozdělení xxxxxxx 400, xxx bylo xxxxxxx kritérium xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
X = X = s2,
kde:
M xx xxxxxxx xxxxxxx
X xx xxxxxxx
x je xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx:
XX = x × 100 % / X nebo XX = 100 % / x&xxxx;xxxx XX = 100 % / OBR
M (xxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxx), xxxxx xxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxx 400 xxx XX = 5 %).
7.3 Xxxxxxx pracovního faktoru
Při xxxxxxx 0,01 ml xxxxx se pracovní xxxxxxx vypočítá xxxxx xxxx 7.3.1 xxxx 7.3.2.
7.3.1 Xxxxxxxx pásů xx xxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx, je 5 mm. Xxxxx xxxx odpovídá xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x mikrometrickou xxxxxxxx (5.7).
Pracovní xxxxxx = 20 × 100 / x × x
xxx:
x je xxxxxx mikroskopického xxxx x xx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxxxxxx stupnicí (5.7)
x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
7.3.2 Počítání xxxxxxxxxxxxxxx xxxx ve střední xxxxxxx tenké vrstvy xxxx xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx
xxx:
x xx průměr xxxxxxxxxxxxxxx pole v xx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7)
x celkový xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
7.4 Xxxxxxx obsahu xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xx ml xxxxx, se xxxxx xxxxxxxxxxxx somatických xxxxx (7.1 x 7.2) xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (7.3).
7.5 Přesnost
Variační koeficient (xxx 7.2) xxxxx xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kruhových xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, který xx může xx xxxxxxxxxxxx kalibraci (xxx X.1) používat xxx xxxxxxxxx počtu somatických xxxxx v syrovém xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, které xxxx x xxxxxxxx barvení xxxxxxx DNA minimální xxxxxxxxx fluorescence.
3. Xxxxxxx
Xxxx xxxxxx (například 0,2 xx) se xxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxx roztokem. Část xxxx směsi xx xxxx přenese xx xxxxx xxxxx xxxxxx xx rotační xxxx, xxxxx slouží xxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx impuls, xxxxx xx zesiluje x xxxxxxxxxxx. Obsah xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx v tisících xx mililitr.
4. Xxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x.x.. Xxxxxxx voda xx xxxxxxxxxxx nebo deionizovaná, xxxx je xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx |
51,00 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxx |
13,75 x |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx(xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 xx |
|
xX 5,7 xx 5,9. Xxxxxxx vodou xx 10000 ml. |
Příprava:
Smíchat xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx nádobě xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx.
4.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxx)
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
1,0 x |
Xxxxxxx vodou xx 1000 xx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx ethidiumbromid xx vodě. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx chráněné před xxxxxxx xx nemělo xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx xxxxxx)
Xxxxxxx 20 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.2) x xxxxxxxx roztokem (4.1) xxx, xxx xx xxxxxx xxxxx 1000 ml. Pracovní xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxx více xxx sedm dní.
4.4 Xxxxxxx roztok
Složení
|
Tlumivý xxxxxx (4.1) |
10 xx |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 xx |
|
Xxxxxxx x 25 % xxxxxxxxxx |
25 ml |
Doplnit xxxxx xx 10000 xx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Skladování xx xxxxxx překročit xxxxxx dní.
5. Přístroje x xxxxxxx xx xxxx
5.1 Počítací xxxxxxxx xxxxxxxxx na principu xxxxxxx fluorescence.
Poznámka:
Zařízení musí xxx xxxx použitím xxxxxxxxxxx. Tím se xxxxxxx vztah xxxx xxxxxxx částic, xxxxx xx xxxx xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx se xxxxxxxx provádí. Xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx pokynů xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx obsah buněk xxx xxxxxxxx mikroskopickou xxxxxxx (X).
5.2 Xxxxx xxxxx, x xxxxxxxxx xxxx, nastavitelná na 40 ± 1 °X.
5.3 Zkumavka, s xxxxxxx xxxxxxxx, objem xxx 15 xx.
6. Xxxxxx xxxxx
6.1 Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx (5.3). Xxxxx xxxxxx nebyl xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, počítání xx xxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxxx 24 xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx by byl xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 6 °X.
6.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxx xxxxxxx do 24 xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx co xxxxxxxx po xxxxxx xxxxxx.
6.2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx konzervačních prostředků:
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx orthoborité xx xxxxxx nesmí xxx xxxxx xxx 0,6 x xx 100 xx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx může xxx xxxxxxxxx dalších 24 xxxxx xxx xxxxxxx 6 xx 12 °X;
- dvojchroman xxxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx vzorku xxxxx xxx xxxxx xxx 0,2 x na 100 xx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx skladován xxxxxxx 72 xxxxx xxx xxxxxxx 6 xx 12 °X;
- xxxx xxxxx:
xxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxx xxxxxx sodným x xxxxxxx xxxxxxxxxxx 0,024 x/100 ml, xxxxx xx vzorek xxxxxxxx xx xxxxxxx 6 xx 12 °X xxxxx xx xxxx xxxxxx a xxxxxxxx xx 48 xxxxx po jeho xxxxxx;
- bronopol:
vzorek může xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x konečné xxxxxxxxxxx 0,05 g/100 xx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx 6 až 12 °X ihned xx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx 72 xxxxx po jeho xxxxxx.
6.2.2 Xxxxxx, xxxxx xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx boritou, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx 48 xxxxx xxxxxxxxxxxxx draselným.
Poznámka:
Pokud xxx o xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx sodným, xxxx xxx dodrženy xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx odpadních xxx.
7. Xxxxxx
7.1 Předběžné xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx, xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx xxx 2-6 °X. Xxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxx xx xxx předběžného xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx mohou xxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx přesto nutné xxxxxxxx provést, xxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxx ošetřován nejméně xxx hodiny xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxx 6.2.1).
7.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx ošetřený vzorek (xxx 7.1) xxxx xxxxxxxxxx vzorek xxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxx ve xxxxx xxxxx (5.2) xx xxx 40 °X. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xx počítání.
7.3 Xxxxxxxx buněk
Počítání se xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.1) xx 15 xxxxx xx xxxxxxxx ohřívání (xxx 7.2). Xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx se xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx provedeny v xxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x) a reprodukovatelnosti (X) xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nejsou x xxxxxxxxx.
Xxxxx, které jsou x xxxxxxxxx xx xxxxxxx úrovni, umožňují xxxx xxxxxx:
(1) xxxxx xxxxx xxxx 400 000 xx 500&xxxx;000 xxxx:
- xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxxxxxxxx:
xx = 20000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx koeficientu 5–4 %)
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx:
xX = 40000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 10–8 %)
9. Xxxxxxxx správnosti
Kontrola správnosti xx provádí pomocí xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx, který xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx národní referenční xxxxxxxxxx.
XXXX. DETEKCE XXXXXXXXXX X SULFONAMIDŮ
PŘEDMĚT X XXXXXX XXXXXXX
Xxxx kapitola xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx x x xxxxxxx ošetřeném xxxxx.
Xxxxx referenční xxxxxx xxxxxxxx:
X. Kvalitativní postup
Tento xxxxxx xx počáteční xxxxxx, který xxxxxxxx xxxxxx vzorky mléka, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Popisovaný xxxxxx xx xxxxxx x několika xxxxxxx, xxxxx jsou založeny xx xxxxxxx Bacillus xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx, XXXX 10149, xx xx testovacího organismu. Xxxxx xxxxxx byl xxxxxx xxxx reprezentativní xxx takovéto testy.
B. Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx x identifikaci penicilinu
Tento xxxxxx xx musí xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxxxxxxxx xxxxxxx antibiotik x xxxxxxxxxxx v xxxxxxx mléce x x tepelně ošetřeném xxxxx, jejichž xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx x xxxx tabulce:
Detektovatelné xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx [1]
|
Xxxxxxxxx xxxxx |
||
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxx |
|
|
Xxxxxxxxxxxxxxx |
0,002 |
0,006 |
|
Xxxxxxxxx |
0,002 |
0,005 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,015 |
0,035 |
|
Xxxxxxxx |
0,006 |
0,011 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,10 |
0,40 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,20 |
0,45 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxx |
0,15 |
0,50 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
7 |
15 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx |
4 |
13 |
|
Xxxxxxxx |
1 |
22 |
|
Xxxxxxxxx |
9 |
28 |
|
Xxxxxxxxxx |
0,06 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxx |
1 |
2,25 |
|
Xxxxxxxxx |
0,01 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,01 |
0,1 |
|
Xxxxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxxx) |
0,5 |
1 |
|
Xxxxxxxxxx extrakt |
2 x |
|
|
Xxxxxx |
5 x |
|
|
Xxxxxx xxxxxxx |
1 g |
|
|
Chlorid xxxxx |
5 g |
|
|
Agar |
10–15 x |
|
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx. Xxxxxxx xX xxx, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx xx 10 xx do zkumavek xxxx xx 100 xx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxx získat xxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx 15 minut xxx 121 ± 1 °C.
5.1.2 Agarové xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxx xxxxx |
2 x |
|
Xxxx |
15 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx tetroxoprimu (xxx 5.1.3) |
10 ml |
Příprava:
Rozpustit složky xx xxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Za xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx do xxxx. Přidat xxxxxxxxxxxx xxxx tetroxoprim a xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X. Xxxxxxx xX, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx jeho xxxxxxx 7,0 ± 0,1 při 25 °X.
5.1.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxxxx |
5 xx |
|
xxxx Xxxxxxxxxxx |
30 mg |
|
96 % Xxxxxxx |
5 xx/30 xx |
|
Xxxxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (5 xxxx 30 xx) x xxxxxxx xxxxx.
5.1.4 Xxxxx roztok
Složení:
|
Kvasnicový xxxxxxx |
0,75 xx |
|
Xxxxxxx |
5,0 xx |
|
Xxxxxxxxx xxxxx |
8,0 mg |
|
Bromkresolová xxxxxx |
0,025 x |
|
Xxxx |
50 ml |
Příprava:
Rozpustit xx xxxx živný xxxxxx x indikátor, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx x sterilizovat xxxxxxxx. Živný xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx
5.2.1 Xx sterilní xxxxx s xxxxxxx xxxxxxxx připravit xxxxxx xxxxxxxxxx x 60 μx/xx (100 XX/xx), x xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx sodného xxxx xxxxxxxxxx ve xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
5.2.2 Xxxxxxxxx pracovní roztok xxxxxxxxxx xxxxxxxx 1,25 xx xxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2.1) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xx 1000 xx. Xxxxx pracovní xxxxxx obsahuje 0,075 μx xxxxxxxxxx/xx (= 0,125 IU/ml).
5.2.3 Xxxxxxxxx 75 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx obsahujícího 0,004 μg penicilinu/ml (= 0,0067 XX xxxxxxxxxx/xx) xxxxxxxx 4 xx pracovního roztoku xxxxxxxxxx (5.2.2) do 71 xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek (5.3).
5.2.4 Xxxxxxx penicilinu xxxxxxx podle xxxx 5.2.1 xx 5.2.3 xx měly xxx xxxxxxxxxx v xxx xxxxxxxxx testu.
5.3 Xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx inhibičních xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx odstředěného xxxxx (10 % x/X) ve xxxx, xxxxx xxxx předtím xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx bylo otestováno x xxxxxxxxxx xx xxxxxx inhibičních látek; xxxx mléko se xxxxxxx xx lahví x xxxxxxx xx xxxxx hodinu xx 100 °X, xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx x teplotou 0 °X až 6 °X xx xxxx nejvýše xxxxxxx xxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx organismus
5.4.1 Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx Bacillus xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx XXXX 10149 Kmen XXXX 10149 xx xxxxxxxxx x kmenem X 953.
5.4.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx testovací xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx agaru (5.1.1). Xxxxx xxxx se x proužcích naočkuje xxxxxxx testovací kultura, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx 48 xxxxx xxx 63 ± 1xX. Po inkubaci xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx zátkou. Xxxxx xxxxxxx zásobní xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx měsíců v xxxxxxxxxx při 0 xx 5 xX.
5.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (suspenze xxxx)
5.5.1 Asepticky xxxxxxx 20 ml živného xxxxx (5.1.1) xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx (4.2.2) x xxxxxx xxxxxxxx xx pokojovou xxxxxxx.
5.5.2 Sterilní xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx do zkumavky xx zásobní kulturou (5.4.2) a xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx spóry xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx spór se xxxxx xxx 0 xx 5 °X x xxxxxxx xx xx 36 hodin.
5.5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx spór (5.5.2) xx Xxxxxxx misku (5.5.1) a xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx celém xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx skleněné xxxxxxx. Xxxxxxxxx 16 xx 18 hodin xxx 63 ± 1 °X (4.1.1).
Xxx xxxxxxx xxxxxxx kultury (5.4.2) xxxx xxxxxxx xxxxxx 36 xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x časovém xxxxxxxxx xxxxxxxxx 36 hodin.
5.5.4 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 10 ml xxxxxxxxxxx vody na Xxxxxxx misku xxxxxxxxxx xxxxxxx (5.5.3) x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x povrchu.
Přenést xxxxxxxx xxxx xx xxxxx (4.2.3) xxxxxxxxxx 250 ml sterilní xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx přeočkovány, xx xx měly xxxxxxxxx x chladničce xxx 0 xx 6 °X.
5.5.5 Po 16xx xx 18xx xxxxxxxx inkubaci při 63 ± 1 °X na xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx životaschopných xxxxxxxxxxxxxx xxxx 5 a 10 miliony xx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx, měla by xx nahradit xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (5.4.2).
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (5.1.2), xxxx xxxxxxxx xx 55 °X.
5.6.2 Xxxxxx část xxxxxxxx xxxxxxxxx spór (5.5.4) x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (5.6.1) xx zkumavce xxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx (4.2.6) 0,3 xx naočkovaného xxxxx (5.6.2), aby xx xxxxxxxxx 5 xx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx zátkou nebo xxxxxx nebo, x xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx agarové xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx 12 xxxxx ve xxxxxx xxxxxx.
5.6.4 Xxxxxxxx/xxxxxx mohou xxx použity týž xxx, ale mohou xxx xxxxxx skladovány xxxxxxx xxxxxx při 0–6 °X, pokud xxxx ihned xx xxxxxx xxxxxxxx ochlazeny.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxx se xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx do 24 xxxxx po xxxxxx, x xx xx xxxx se xxxxxxxx xxx teplotě 0-5 °X. Xxxxx xxxx xxxxx otestovat xxxxxx xx 24 xxxxx, xxxx by xx xxxxxxx hluboko zmrazené (−30 °až - 15°X), xxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.2 Xxxxxxx x nesmazatelně xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx (5.6). Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (4.1.3) xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx x testy (5.2 x 5.3).
6.3 Xx xxxxx xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxx 50 mikrolitrů xxxxxxx xxxxxxx (5.1.4).
6.4 Xxxxxx mléka xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx (4.1.4) xxxxxxx 0,1 xx vzorku xx xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx. Pro xxxxxxxxx xxxxxxx vzorku xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.5 Postup xxxxx xxxx 6.4 xx opakuje stejným xxxxxxxx xx použití xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,004 μx/xx (= 0,0067 XX/xx) xxxxxxxxxx namísto xxxxxx xxxxx (5.2.3).
6.6 Xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.4 xxxxxxxx stejným xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.3) xxxxxxx xxxxxx mléka.
6.7 Xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx a xxxxxxxx xx zkumavkami/ampulemi xxxxxxx na xxxxxxx 2½ až 2¾ xxxxxx do vodní xxxxx x xxxxxxxx 63 ± 1 °X (4.1.2).
6.8 Xxxxxxx xxxxxxxx xx zkumavkami/ampulemi x vodní xxxxx.
6.9 Xxxxxxxxx barvu agarového xxxxx (xxx 7).
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx roztokem xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx ukazuje xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx ve xxxxxx x koncentraci xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx "zcela xxxxxxxxx" xxxxxxx x xxxxxxx xx straně 39. Pokud zabarvení xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx roztokem penicilinu (6.5) xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx zbarvení xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxx mléka xxxxxxx xx přítomnost xxxxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx straně 39.
7.3 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx vzorek xxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxx organismu.
7.4 Pokud xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx všech xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx, včetně xxxxxxxxxxx kontrol, zkumavky/ampule xxxxxxxxxx životaschopné xxxxx x vzorky xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx x 7.1 x 7.2 xxxxx xxxxxx "X".
Xxxxx je xxxxxxxx xxxxxx xxxxx před xxxxxxxxxx skladovat, xxxx xxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx poškození xxxxxxxxxx.
X. Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx penicilinů a xxxxxxxxx koncentrace
1. Předmět x xxxxxx použití
Tento xxxxxx popisuje xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxx antibiotik, xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx penicilinu xx xxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxx (A.7.1) xxxx xxxxxxxxxx reakcí (A.7.2).
Citlivost xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx
Xxx X.1.
2. Definice
2.1 Xxxxxx xxxxx obsahuje xxxxxxxxxxx, včetně xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx inhibiční xxxx nejméně 2 xx xxxxx disku.
2.2 Xxxxx xxxxxx, který xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, včetně xxxxxxxxxxx (2.1), x xx kterému xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxx), xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx čirou xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxxxxxx nebo xxxx penicilinu x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
2.3 Xxxxx tato xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx (2.2) inaktivována, xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxx penicilin, xxx xxxx to xxx xxxx xxxxxxxx [xxx xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx X, xxxxxxxx XX, X.1.x) x 2x)].
Xxxxxxx polosyntetické xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx cloxacillin xxxxx, xxxxxx xxxx jsou xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxx x nemohou xxx identifikovány xxxx xxxxxxxxxx (xxx 7.3).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx disk xxxxxxxxx mlékem, které xx má vyšetřit, xx xxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. calidolactis. Xxxxxxxx xxxx mikroorganismus xx xxxxxxxx narušuje xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx. Xxxxxxxx čiré xxxx xxxx xxxx xxxxxx na xxxxxxxxxxx x xxxxx inhibiční xxxxx x mléce.
4. Xxxxxxxxx, xxxxxxx ze xxxx a xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Viz A.4.1.
4.1.2 Xxxxx lázeň, nastavitelná xx 80 ± 1 °X.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
Xxx A.4.2.
4.3 Xxxxxxxx disky, neobsahující xxxxxxxxx látky, x xxxxxxx 9 až 13 xx, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx 130 xx xxxxx (nejlépe xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx).
5. Xxxxxxxxxx média, xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx organismus xxx.
Xxxxxxxx složky xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxx xxx bakteriologické xxxxx. Musí xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx voda alespoň xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Voda xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1 Xxxxxxxxxx xxxxx
5.1.1 Xxxxx xxxx (X.5.1.1)
5.1.2 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxx detekci xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx extrakt |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5 x |
|
Xxxxxxx |
1 g |
|
Roztok xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx (X.5.1.3) |
10 xx |
|
Xxxx |
10–15 g podle xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx zcela rozpustit xxxxx složky ve xxxx, xxxx přidat xxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx. Po přidání xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx hodnotu pH, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx 8,0 + 0,1 při 25 °X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X.
5.2 Xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxxxx x mléku
Viz X.5.2.
Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (8) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x mléce xxx xxxxxxxxxxx látek (X.5.3) x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx:
x) 0,004 μx/xx (0,0067 XX/xx)
x) 0,006 μx/xx (0,01 XX/xx)
x) 0,03 μx/xx (0,05 XX/xx)
x) 0,06 μx/xx (0,01 XX/xx).
5.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxx
5.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxx) xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx s cílem xxxxxx xxxxxxxxxxx 1000 X/xx. Tento xxxxxx, xxxxxxx rozdělený na xxxxx xxxxx, je xxxxx skladovat xx xxxxx týdny při 0 °X až 5 °X.
Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx mezinárodní xxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxx, xx deset xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx 0,6 μx (= 1 XX) xxxxxxxxxx. U xxxxxxxxxxxx s neznámou xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx tento xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxx proto xxxxxxx xxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxxxx.
5.3.2 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx dostupné xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxx.
5.4 Testovací xxxxxxxxxx
Xxx X.5.4.
5.5 Testovací xxxxxxx (xxxxxxxx spór)
Viz A.5.5.
5.6 Xxxxxxxx Xxxxxxx misek
5.6.1 Xxxxxx rozpustit xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx látek (5.1.2), xxxx xxxxxxxx na 55 xX.
5.6.2 Xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx (5.5) x xxxxxxxxxx xxxxxxxx částí xxxxxxxxx xxxxx xxx detekci xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, a důkladně xxxxxxxxx.
5.6.3 Přenést xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx (X.4.2.2), xxxxxx vyhřáté xx 55 °X, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx se xxxxxxxxx 0,6 xx 0,8 xx xxxxxx. Xxx Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx 140 xx xx xxxxx xxx 15 ml xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx vytvořila 0,8 xx vrstva.
5.6.4 Xxxxxxx Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx, vodorovný xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx x nechat xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx média, xxxxxx xxxxx na xxxxx x obrátit xx xxxx vzhůru, xxx se xx xxxxxxxxx kondenzaci xxxx xx povrchu xxxxxxxxx xxxxx.
5.6.5 Xxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxx misky se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx den, xxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx dva týdny, xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx vloží xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xx xxx 5 °X.
5.6.6 Xxxxxxx xxx Xxxxxxx misek, aby xxxx možná xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Příprava xxxxxx
6.1.1 X vzorků x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx "xxxxxx X" (X.7.1 x A.7.2) xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx za xxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1.2 Nejdříve xxxxxxxx vzorky 10 xxxxx na 80 ± 1 °X, xxx xx vyloučil xxxx nespecifických xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
6.1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxx 10 xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx sterilní xxxxxxxx xx xxxxxxx hrdlem. X xxxxx xxxxxx xxx 0,4 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.3) x xxxxx xxxxxxxxx.
6.2 Xxxxxxx inhibičních xxxxx
6.2.1 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx (4.3) xx vzorku xxxxx (6.1.2) xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx. Odstranit xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx. Naplocho xxxxxxx xxxx xx povrch Xxxxxxx xxxxx (5.6) x lehce přitlačit xxxxxxxx.
6.2.2 Disky xxxxxxxxx xxxxxxx vzorky xxxxx xxxx xxx vzdáleny xxxxx od druhého xxxxxxx 20 xx x xx xxxxxx xxxxxxx 10 xx.
6.2.3 Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx disky (4.3) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.2) musí xxxxxxxx rozmístit mezi xxxxx napuštěné xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx 2 % xxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxx; při xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
6.2.4 Po xxxxxxxxx xxxxxxxxxx všech xxxxx xx agarové xxxxxx x xx xxxxxx identifikaci, obrátit xxxxx xxxx vzhůru x xxxxxx xx xxxxxxxxx 2,5 xx 5 xxxxx při 63 ± 1 °X.
6.2.5 Xx xxxxxxxx xxxxxxxx misky xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx čiré xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Čiré xxxx xx změří.
6.2.6 Standardní xxxxxx xxxxxxxxxxxx (6.2.3) xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx nejméně 2 xx zóny.
6.2.7 Xxxx xxxx xxxxx disků xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx je xxxxxx nebo větší xxx xxxxxxxx popsaná x 6.2.6, ukazují xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.3 Identifikace x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
6.3.1 Xxxxxx 6.2.1 se xxxxxxx dvojmo se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (6.1.2) a xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (6.1.3). Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 10 xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx napuštěný penicilinázou (5.3.2) x xxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx.
6.3.2 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx xxxxxx xxx každý ze xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx v 5.2 x) až x).
6.3.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx inhibičních zón xxx vzorky xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx penicilinázy x xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 2)
7.1 Xxxxx xx kolem xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx, ale xxxx zóna xx xxxxxx kolem xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx mléka, xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx než xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2x)), xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxx 0,004 μx/xx.
7.2 Xxxxx xx xxxxxxxx hodnota xxxxxxx xxxx zóny xxxxx xxxxx nepuštěném xxxxxxxxx penicilinázu xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxx xx vzorkem xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxx xxxx xxxxx inaktivovat xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx.
7.3 Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx disku xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx čiré xxxx xxxxx disku xx xxxxxxx mléka xxxxxxxxx podle 6.1.2, xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x tomto xx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx je cloxacillin xxxxx, nemusejí být xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx podmínek x xxxxx xxx tudíž xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx než xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx penicilin xxxxx xxx identifikovány xxxxxxxx xxxxxxx.
8. Stanovení xxxxxx penicilinu
8.1 Stanovení xxxxxx xxxxxxxxxx může xxx provedeno buď xx xxxxxxxxxx standardní xxxxxx, xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx velikostí xxx získaných xx xxxxxxxxxxxx roztoky penicilinu x xxxxx (5.2 x) xx x)).
8.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx10 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx zón, xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx pořadnici x xxxxxx xxx xx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx průměru xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx se xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx penicilinu x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx.
8.3 Výpočet
Koncentrace xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xx základě xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx je xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx. Pro xxxxxx xxxxxxxxx xx poloměr xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx disků.
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx jako xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxx 0,004 μg/ml (xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xxxx xxxx obsah xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx penicilin.
9.2 Xxxxxxxxxxxxxx (x) x xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X)
Xxxxx nejsou x xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
V souladu x xxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx X, xxxxxxxx XXX xxxx 2, xxxxx postup xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxx dodržovány, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x pasterovaném xxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx u xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx onemocnění xxxxxxxxxxxxx x potravin.
Pasterace xx ošetření, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx normy xxxxxxxxx x příloze X, kapitole XXX xxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx, pokud xxx x počítání kolonií xxx 30 °C x 21 °C, xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, specifický test xx xxxxxxx xxxxxxxx xx nezbytný xxxxx xxxxx, xxxxx existuje xxxxxxxxx, xx mléko xx nějakou xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxx
Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx orgán xxxxxxx způsobem, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx osvědčení x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx tepelně ošetřené xxxxx xxx obchod xxxxxx Společenství. Pro xxxxxxx patogenních xxxxxxxxxxxxxx xx, pokud xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxx x výsledku
Pro každý xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx výsledek xxxxxxxx takto:
Počet mléka xx xxxxxxxx, nebo "xxxxxxxxxx" xx "xxxxxxxxxxxx" x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, který xxxxxxxx xxxxxxx postup. Xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.