Rozhodnutí Komise
ze dne 14. xxxxx 1991,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx analýzy a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
(91/180/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx na Smlouvu x založení Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx společenství,
s ohledem xx xxxxxxxx Rady 85/397/XXX xx dne 5. xxxxx 1985 x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx otázkách xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx Společenství [1] xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 89/662/XXX [2], x xxxxxxx xx xx. 10 xxxx. 2 xxxxxxx směrnice,
vzhledem x xxxx, xx xxxxx čl. 10 xxxx. 2 Komise xxxxxxx xxxxxx analýzy x xxxxxxxxx, které xx xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx mléko;
vzhledem x xxxx, že pro xxxxxx mléko xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxx mikroorganismů, xxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx antibiotik;
vzhledem x xxxx, xx xxx pasterované xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx patogenů, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, nepřítomnosti xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx peroxidázy, xxxxxxxxxxxxx antibiotik x xxxx mrznutí;
vzhledem x xxxx, xx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x XXX xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx x technických xxxxxx je xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx určitých xxxxx; xx xx xxxxxxx xxxxxxxx pokračovat x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx kterých se xxxxxxxxx rutinní metody xxxxxxx x testování; xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx členské xxxxx xx xx, aby xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 85/397/XX xxxx xxxxxxx vhodné rutinní xxxxxx;
xxxxxxxx k tomu, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx zahrnuje x xxxxxxxxx xxxxxxx analýzy x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx zajištění jednotného xxxxxxx xxxxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx rozhodnutí xxxx x souladu se xxxxxxxxxxx Stálého veterinárního xxxxxx,
XXXXXXX XXXX XXXXXXXXXX:
Článek 1
Referenční postupy xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxx tyto:
- xxxxxxxxx xxxx mrznutí,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx buněk,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 2
Referenční xxxxxxx xxxxxxx a testování xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx,
- stanovení xxxxxxxx peroxidázy,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů při 21 °X,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx – počítání kolonií xxx 30 °X,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Článek 3
Xxxxxxxxxx postupy xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X,
- detekce xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx.
Článek 4
Použití referenčních xxxxxxx analýzy a xxxxxxxxx, xxxxxxxxx kritérií xxxxxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx podle pravidel xxxxxxxxxxx v xxxxxxx X.
Xxxxxx 5
Referenční xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x článcích 1, 2 x 3 xxxx xxxxxxx x xxxxxxx II.
Xxxxxx 6
Toto xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx do 31. xxxxxxxx 1992, xxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx znalostí.
Xxxxxx 7
Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
V Xxxxxxx xxx 14. února 1991.
Xx Xxxxxx
Xxx Mac Xxxxxx
xxxx Xxxxxx
[1] Xx. věst. X 226, 24.8.1985, x. 13.
[2] Xx. xxxx. X 395, 30.12.1989, x. 13.
PŘÍLOHA I
OBSAH
I. Obecná xxxxxxxxxx
XX. Odběr xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
X. OBECNÁ XXXXXXXXXX
1. Xxxx
Xxxxxx ustanovení xx týkají činidel, xxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxx výsledků, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx vzorků x xxxxxxxxxx mléka xxxx xxxxxxxxx tato xxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxx
2.1.1 Xxxxx xxxx stanoveno xxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx, ředění nebo xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx demineralizovaná xxxxxxx xxxxxxxxxxxx čistoty. Xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx mohou xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.1.2 "Rozpouštěním" xxxx "xxxxxxx" (bez xxxxxxx xxxxxxxxx) xx xxxxxx "xxxxxxxxxxx xx vodě" xxxx "xxxxxx xxxxx".
2.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxx stanoveno xxxxx, xxxxxxx používané xxxxxxxxxx musí xxx xxx uznané analytické xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
3.1 Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xx zvláštnímu použití x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.2 Xxxxxxxxxx xxxx
"Xxxxxxxxxxxx xxxxxx" xx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx 0,1 xx.
4. Xxxxxxxxx výsledků
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx není stanoveno xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxx průměrem xxxx xxxxx, xxxxx splňují xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (5.1) xxx xxxxxxxxxx metodu. Xxxx xxxx toto xxxxxxxxx opakovatelnosti xxxxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx podílu
Pokud není xxxxxxxxx jinak, xxxxxxxx xx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
5. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx
5.1 Kritéria xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx takto:
5.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) je hodnota, xxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx byly získány xxxxxxx postupem x xxxxxxxxxx výrobkem za xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx, stejný xxxxxxxx, xxxxxx laboratoř, xxxxxx xxxxxx období).
5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) xx hodnota, xxx kterou leží xxxxxxxxx rozdíl xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx testů, xxxxxxxxx xxxxxxxx postupem x týmž xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx, různé xxxxxxxxxx a/nebo xxxxx xxxx).
5.1.3 Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, hodnoty xxx kritéria xxxxxxxxxxxxxxx x reprodukovatelnosti, uváděné x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, představují 95 % intervaly xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx ISO 5725, xxxxx vydání, 1986. Xxxx vypočteny x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxx xx používají xxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxx postupy xxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx. X xxx případě xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
6. Xxxxxx x testování
Zpráva x testování musí xxxxxxxx xxxxxxx postup x xxxxxxx výsledky. Xxxx xxxx xxxx xxxxxx všechny podrobnosti xxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxxxxxx v xxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
XX. XXXXX XXXXXX XXXXXXXX A XXXXXXX XXXXXXXXXX MLÉKA
1. Xxxxxxx x oblast použití
Tento xxxxxx popisuje referenční xxxxxx xxx odběr xxxxxx syrového x xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx použijí pro xxxxxx xxxxx dodané xxxxxxxxxx x pro xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx mléko xxxxxxxxxx xx skladovacích x xxxxxxxxxxx nádržích.
Postupy xxxxxxx x xxxxxx 2, 4.4, 5 x 6 se xxxxxxx xxx odběr xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx k přímé xxxxxxxx.
2. Xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xxxx. provedou xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx byli xxxx odběrem xxxxxx xxxxxx vyškoleni.
Pokud xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx odběrem xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x v xxxxxxx x celou xxxxx.
Xxxxx xx příslušné orgány xxxx xxxxxxxxx laboratoř xxxxxxxx za xxxxxxxx, xxxxxxx zaměstnance pověřené xxxxxxx vzorků x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx.
3. Vybavení xxx xxxxx xxxxxx
3.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx musí xxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxx xxxxxxxx x ohledem xx xxxxxxxxxxxxx použití (xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx, xxx.). Xxxxxxx a xxxxxxxx pro míchání xxxxxxx v xxxxxxxx xxxx xxx dostatečně xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx bylo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx promíchání xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx dlouhou xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Objem xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx 50 xx.
Xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx, kovová nebo x xxxxxxxx plastu.
Materiály xxxxxxx při xxxxxx xxxxxxxx xxx odběr xxxxxx (včetně xxxxx x xxxxx) nesmí xxxxxxxx xxxxxxx změnu xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx testů. Xxxxxxx materiál x xxxxxx xx xxxxxx xxxx xxx čistý, xxxxx, xxxxxx xxxxxx xxx trhlin a xxxx mít xxxxxxxxxx xxxxx.
3.2 Vybavení xxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
Vybavení xxx xxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxx) musí xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx 3.1 x musí být xxxxxxxx.
Xxxxx se xxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, musí xxx xx každém xxxxxx vzorku vyčištěno x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx orgán, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx
4.1 Xxxxxx údaje
Bez xxxxxx xx xxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx být xxxx odběrem xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx ručně, xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx musí xxx xxxxxxx xxxxx xx promíchání, xxxx xx mléko ještě x pohybu.
Pokud xx x nádrže odebírá xxxxxxx více xxxxxx xxxxx pro xxxxx xxxxx, xxxx xxxxx xxxx být odebrán xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx takový, xxx xxxx xxxx xxxxxx téměř xxxxxxxx xxxxxxx x xxx xxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx přepravy.
4.2 Xxxxx xxxxx xxxxxx
4.2.1 Xxxxx xxxxxx z xxxxx x konví xx xxxxx
X rychlému promíchání xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx x dolů, xxxxxxx dbát na xx, xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x aby se xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx smetana. Xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx zásilku, xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx mléko x xxxxxxxxxxx podniku
Míchat xxxxx mechanicky nebo xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxx mléka neumožňuje xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx.
4.2.3 Odběr xxxxxx x misky xxx
Xx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx se xxxxxx xx misky xxx. Xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxx, x xxx xx xx odebrat xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx misky xxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx z xxxx xxxxxxx postupem podle xxxx 4.2.4.
4.2.4 Odběr xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xx množství xxxxx, x xxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx vzorků, xxxxxxxxx xx více xxxxx, x každé xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx množství xxxxx xxx každý xxxx. Xxxxx vzorky x xxxxx xxxxxx nemusí xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx těchto xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx x množství, xxxxx xx xxxxxxx v xxxxxx, xx xxxxx xxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx (xxxx) xxxxxx (xxxxxx) x xxxxxx xxxxxxxxx množstvích.
4.2.5 Odběr xxxxxx z velkých xxxxx – skladovací xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx
4.2.5.1 Xxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.5.2).
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, xx kterou bylo xxxxx x xxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxx x jednotlivých xxxxxxx xx vhodný xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx x různých xxxxx xxxxx, xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx z xxxxx. Způsob xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx) xx xxxxxx, pokud xx rozdíl xxxxxx xxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx podmínek xxxxx xxx 0,1 %.
Xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx otvorem ve xxxxxx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx malé množství xxxxx, xxxxx ani xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx pro xxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx vzorků x průlezového xxxxxx. X xxxxxxx odběru xxxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxx vytéci dostatečné xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx reprezentativnost xxxxxx.
4.2.5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxx:
- mechanickou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- vrtulí xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx otvoru; xxxxxxxx xx ponořena x mléce,
- v xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx přepravní xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx do xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- filtrovaným, xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx x objem xxxxxxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxx žluklé xxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxx x poloautomatické xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx podle xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx příslušným xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, které xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx musí být xxxxxxx s cílem xxxxxxxx:
- minimální xxxxx xxxxxxxxx mléka, z xxxxx musí xxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxx xxxxxxx x minimálním xxxxxxx vzorku),
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx reprezentativní xxxxxx x šarže xx xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxx používání xxxxxxxxxxxxx nebo poloautomatického xxxxxxxx pro odběr xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xx kterého xxxx být odebrány xxxxxx,
- minimální xxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx, které může xxx xxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx je xxxxx xxxxxxxx.
4.4 Xxxxx vzorků xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx x maloobchodních xxxxxxxx
Xxxxx xxx x xxxxxxx ošetřené xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, vzorky se xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx během xxxxxxxx xxxxxx xxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zařízení xxx xxxxxxxx, x xx, xxxxx je xx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx (x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxxxxxx).
X xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka (pasterovaného, xxxxxxxxxx xxxxxxx XXX x sterilizovaného) xx xxxxxxx takový počet xxxxxx, aby odpovídal xxxxx vyšetření, xxxxx xxxx být xxxxxxxxx, x xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
5. Xxxxxxxxxxxx vzorku
Vzorek xx měl být xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx laboratoří xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxx 2).
6. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx připraví xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx x podmínek přepravy x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxx xxxx xxxxxxx vzorků jejich xxxxxxxxxx, a xx xx xxxxxxx druhu xxxxx x testování, xxxxx xx xxx xxxxxxx.
Xxxxxx stanoví toto:
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx je xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx-xx xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx průsvitná, musí xxx xxxxxxxxx ve xxx,
- vzorky syrového xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx při teplotách 0 xX xx 4 oC. Xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxxx a x žádném případě xxxxx xxxxxxxxxx 36 xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxx souhlasit, aby xxxx xxxxxxx skladování 0 oC xx 6 xX, není-li xxxx xxxx odběrem x testováním xxxxx xxx 24 hodin,
- xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx teplotách 0 xX xx 4 xX. Doba xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx být co xxxxxxxxx x v xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 24 xxxxx,
- xxxx xxxxxx mléka xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx určené xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx mezi xxxxxxx vzorku a xxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx preventivní xxxxxxxx, xxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx, jsou xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
XXXXXXX I
OBSAH
I. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx
XX. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
XXX. Xxxxxxxxx xxxxxxxx peroxidázy
IV. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X
X. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 21 °X
XX. Xxxxxxxxx xxxxxx koliformních bakterií – xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X
XXX. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
XXXX. Detekce xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx
XX. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
X. STANOVENÍ XXXX MRZNUTÍ
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx plnotučného, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, syrového, xxxxxxxxxxxxx, XXX xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx), x němž xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx elektrickým xxxxxxxxx zařízením x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
X dispozici xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx. První xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx na xxxxx xxxxxx xxxxxxx, kdežto xxxxx typ xx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx tak, xx xx xxxxxxx mrznutí xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxx x xxxx, xx xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx různých druhů xxxxx, xxx x xxxxxx xxxx mrznutí xxxxx x standardních xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx plató. Xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx časem xx xxxxx používat x xxxxxxx xxxxxxxxx testování.
Bod xxxxxxx lze xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx vody x mléce xx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxx 0,18 x xxxxxxxx xxxxxx xx 100 xx (xxx xxx 7.4).
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x popsaným xxxxxxxx x vyjádřená xx xxxxxxxx Celsia (°X).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx mléka xx x xxxxxxxxxx xx přístroji xxxxxxxxx xx xxxxxxx teplotu x mechanickou xxxxxxx xx xxxxxx jeho xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx x xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx mrznutí vzorku.
Přístroj xx xxxxxxxxx takovým xxxxxxxx, xxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx odečty xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Za xxxxxx xxxxxxxx xxxxx udává xxx mrznutí xxxxx xx xxxxxxxx Celsia.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, zejména:
4.1 Kryoskop
Kryoskop xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx řízené xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx snímače (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx, jakož x xx xxxxxxxx xx xxxxxx.
4.1.1 Chladicí xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx dva xxxx chladicí xxxxx.
4.1.1.1 Xxxxxxx typ
Dobře xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx tak, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx x kapalině xxxxx xxxxx než 0,2 °X. Teplota xxxxxxxx xxxx kolísat xxxxxxx x xxxxxxx ± 0,5 °X xx nominální hodnoty xxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx, xxx x xxxxx xxxx udržována konstantní xxxxxxx kapaliny. Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx pod xxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
4.1.1.2 Xxxxxxxxxx typ
Kolem xxxxxxxx xx vzorky xxxxxx xxxxxxxxxxx proud xxxxxx xxxxxxxx kapaliny. Teplota xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx ± 0,5 °X xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx výrobcem.
Vhodnou xxxxxxxx xxxxxxxxx xx 33 % (X/X) xxxxx xxxxxx 1,2-xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx).
4.1.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx se xxxxxx xx skleněné sondy x xxxxxxxxxx xxxxxxx 1,80 ± 0,2 xx x x xxxxxxx vodiče xxxxxxxxx 0,31 xx. Časová xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx než 2 xxxxxxx x xxxxxxx b (xxx xxxxxxxx) xxxx xxx xxxxxx. Pracovní napětí, xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx musí být xxxxxx, xxx při − 0,512 °X xxxxxxx xxxxxxxxxx stoupla xxx teplotu okolí xxxxxxxxx x 0,0005 °X. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx být ± 5 %.
Když xx sonda x xxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx se xxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xx xxxxxx x x bodě, xxxxx je 44,6 ± 0,1 xx xxx horním xxxxxxx xxxxxxxx (viz obrázek xx straně 15). Xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx této xxxxxx.
Xxxxxxxx:
β xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx
− xX / xX × 1 / X = β / X2
xxx:
X je xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx
X xx odpor x xxxxxx xxx xxxxxxx X,
− xX / dT × 1 / X xxxxxxxx xxxxxxxxxx
β je xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx. X běžné xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx než 3000.
4.1.3 Xxxxxx x odečítací xxxxxxxx
4.1.3.1 Xxxxxxx měření
Použitý xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx prvního xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxx křivky, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxx xx ± 0,002 xX xx xxxx xxxxxxx 20 sekund.
4.1.3.2 Xxxxx obsluha
Odpor xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx Wheatstoneovým xxxxxxx nebo podobným xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, jejichž xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx ± 10 % x xxxxxxx teplotní xxxxxxxxxx není xxxxx xxx 2×10−5°X.
Xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx od linearity x celém xxxxxxx x xxxx xxx x 0,3 % xxx maximální hodnoty.
Pro xxxxx kalibrace xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx 0,001 °X.
4.1.3.3 Xxxxxxxxxxx provoz
Odečítací xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx 0,01 °X x xxxxxxx xx 0 °X xx –1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zařízení x xxxx xxxxxxxxxxx obvodu xxxx xxx xxxxxx, xxx odchylka dvou xx xxxx následujících xxxxxx téže xxxxxxx xxxxxx vyšší xxx 0,001 °X.
Xxxxxxxxx obvodu xxxx xxx taková, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x žádném bodě xxxxxxx xx – 0,400 °X xx – 0,600 °C xxxxx xxxxx než ± 0,001 °C.
4.1.4 Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxx o xxxxxxx 1 až 1,5 xx, xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxx,.
Xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx na rozkmit x xxxxxxxx vertikálně xxx, aby xxxx xxxxxx xxxxx byl xx xxxxxx xxxxx xxxxx termistoru. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx asi 1,5 mm xxx xx xxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx ± 1,5 xx), xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx během xxxxxxxxx. Xxxxx míchání xx xxxxxxxx nesmí v xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx termistoru xxxx xxxxx xxxxxxxx.
4.1.5 Zařízení xx xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx po xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, aby xxxxxxx xxxxxx testovacího xxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx. X xxxx xxxxx xxx použít xxxxxxxx; jedním xxxxxxxx xx zvětšení xxxxxxxx xxxxxxx xx jednu xx xxx xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx.
4.1.6 Xxxxxxxx na xxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx (xxx xxxxxxx 1) jsou xxxxxxxx x 50,8 ± 0,1 xx xxxxxx; vnější průměr xx 16,0 ± 0,1 xx a xxxxxxx xxxxxx xx 13,5 ± 0,1 xx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxx xxx 0,1 xx.
Xxxxxxxx xxxx mít xxxxxx xxxxxx vzdálenou xx xxxxxxx xxxxxx 29,8 xx (21 mm xxx xxxx xxxxxxxx), xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 mm.
4.1.7 Zdroj xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxx xxx stabilizován buď xxxxxx nebo vně xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx kolísání xxxxxxxxxxxxxx ± 1 % xxxxxxxxx xxxxxxx, když xxxxxx xxxxx kolísá x ± 6 %.
4.2 Xxxxxxxxxx xxxx
4.3 Xxxxxxx xxxxx o xxxxxx 1000 xx, xxxxx A.
4.4 Xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 130 ± 1 °C
nebo
Elektrická xxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 300 ± 25 °X.
4.5 Xxxxxxxxx
5. Xxxxxxx
5.1 Xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx skle, převařená x zchlazená xx 20 ± 2 °X, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx x.x., xxxxx mletý, xxxxxx 5 hodin xxx teplotě 300 ± 25 °X x elektrické peci xxxx xxxxxxx 24 xxxxx při xxxxxxx 130 ± 1 °X x xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx teplotu x xxxxxxx exsikátoru.
5.3 Příprava xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx odpovídající xxxxxxxx (viz tabulka 1) suchého xxxxxxxx xxxxxxx (5.2) xx xxxxxxx. Xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxx (5.1), xxxxxxxxxxxxx xxxxxx roztok xx odměrné baňky x objemu 1000 xx a xxxxxxx xx xxxxxx vodou x xxxxxxx 20 ± 2 °C.
Skladovat xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx při xxx 5 °C x xxxxx xxxxxxxxxx polyethylenových xxxxxxx x maximálním xxxxxx 250 ml.
Bod xxxxxxx roztoků xxxxxxxx xxxxxxx při 20 °X
|
x NaCl/l |
°C |
|
6,859 |
-0,408 |
|
7,818 |
-0,464 |
|
8,149 |
-0,483 |
|
8,314 |
-0,492 |
|
8,480 |
-0,502 |
|
8,646 |
-0,512 |
|
8,811 |
-0,521 |
|
8,977 |
-0,531 |
|
9,143 |
-0,541 |
|
10,155 |
-0,600 |
Před xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx otočením xxxxx. Xxxxx neprotřepávat xxxxxxxxxx roztok xxx xxxxxx, xxx xx xx xxxxxxx přimíchal xxxxxx.
Xxxxxx standardního xxxxxxx xx x xxxxx xxxxxx xx xxxxx x čisté xxxxxxx. Xxxxx nepoužívat xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx, xxxxx xxxx xx xxx čtvrtin xxxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx dvou xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx roztok xxxxxxxxxxx 10 x/x).
6. Kalibrace xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx nastaven xxx, xxx se xxxxxx xxxxxxx nelišila o xxxx xxx 1 °X xx xxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxx pokojovým xxxxxxxx xxxxxx než 26–27 °X.
Xxxxxxx se, xx xxxxxxxx xxxxxxx podle xxxxxx xxxxxxx x xx xxx zapnut xxxxxxx 12 xxxxx xxxx xxxxxxxxx. Zkontrolovat xxxxxx xxxxx, rozkmit xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxx standardní roztoky (xxx xxxxxxx výše), xxxxxxx bod xxxxxxx xx těsně nad xxxx těsně xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx mléka x xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx by xxxxxxx xxxxx xxx xxxxx než – 0,100 °X.
(X některých xxxx v xxxxxxxx xxxx dostupných xxxxxxxxx xx příslušný obvod xxxxxxxxxx xxxxxxxx tak, xx xx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx mrznutí x xxxxx rozsahu měřícího xxxxxxxx. V xxxxxx xxxxxxxxx výběr jednoho xxxxxxxxxxxx roztoku, který xx xxxxx xxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx postup; xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxx).
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx do xxxxx x xxxxx xxxxxxxx na xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx vyrobeny a xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxx xxxx, xxxxx x xxxxxxxxxx demineralizovanou vodou). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx kalibrace, xxxxx xxxxxx x kryoskopu xxxxxx roven xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx provádět xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx po xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x nich, aniž xx byla xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx připraven x xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx bod xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxx úprava.
7. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
7.1 Xxxxx xx je xxxxxxxx xxxxxxxxx vzorky xxx xxxxxxx xxxx 0 °X x 5 °C.
7.2 Pokud xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx tělíska xxxx tuhý mléčný xxx xx xxxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx promíchat. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx reagovat x mlékem x xxxx xxx účinný xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.3 Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx při skladovací xxxxxxx (mezi 0 x 5 °X) xxxx xx xxxxx xx xxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxxxx testování. Xx xxxx xxxxxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxxxxxx roztoky x vzorky mléka xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
7.4 Stanovit xxxxxxxx xxxxxxxx mléka, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxx, jejichž xxxxxxxx přesahuje 0,18 x xxxxxxxx xxxxxx xx 100 xx xxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx.
7.5 XXX xxxxx x sterilizované mléko xxxx xxxx xxxxxxx 20 xxxxx xxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx.
8. Xxxxxx
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx, zda hladina x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx s pokyny xxxxxxx, xxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx se, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxx zapnut xxxxxxx 12 hodin, zkontrolovat xxxxxxx chladicí xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx.
8.2 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx sérií xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx sodného (xxxxxxxxx xxxxxx s bodem xxxxxxx – 0,512 °X), xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx při xxxx po xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx nebudou xxxxx x xxxx xxx 0,001 °C. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxx hodnot xxxx xx xxxx mrznutí xxxxxxxxxxxx roztoku x xxxx xxx 0,002 °X, kryoskop xx xxxxx xxxxxxxxxx, jak xx popsáno x xxxx 6.
Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx kontrola xxxxxxxxx xx xxxxxxx nejméně xxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxx xx zohlední xxxxxx xxxxxxx.
8.3 Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx protřepáním x xxxxxxxxxxx otáčením. Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx tak prudce, xxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx vzduch.
Pomocí xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx xxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx vzorky. Ujistit xx, xx xxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx x xxxxx, xxxxx je xx xxxxxxxx opatrně xx xxxxx směrem odspoda xxxxxx jemnou, čistou x xxxxxx nepouštějící xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx a mrznutí xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xx 0,1 °X.
(X některých xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx odečíst xxxx xxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; x ručních xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xx xx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xx ručička xxxx nitka galvanometru xxxxx s příslušnou xxxxxxx.)
Xxxxx x jakéhokoli xxxxxx mrznutí začne xxxxx nebo xxxxxxx, xxx je xxxxxxxx xxxxxxxxxxx teplotního xxxxxxx, xxxxxxxxx se ukončí x xxxxxxxx xx x xxxxx vzorkem xxxxx. Pokud tento xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, alikvótní xxxxx xxxxxx se xxxxxxx xx 45 °X a 5 xxxxx xx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx, xxx se rozpustil xxxxxxxxxxx xxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx x ihned xxxxxxx xxxxxxxxx. Teplota xxxxx po xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx stoupne xx xx hodnotu, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx konstantní, x xxxx xxxxxx. Xxx mrznutí odpovídá xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx x xxxx xxxxxxx xx xxxxx zaznamenat.
Poznámka:
Doba, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx konstantní, x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx mrznutí a xxxxxxxxx maximální xxxxxxx, xx liší vzorek xx xxxxxx x xxx vodu x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxx xxxxx. Je nezbytné xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xx xxxxxx uspokojivě xxxxxxxxx, vyjmout zkumavku, xxxxxxxxxx ji xxxxx x otřít sondu x míchačku xxxxxx xxxxxxx xxxxxx jemnou, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx látkou x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx vzorku xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxx xxxx naměřenými xxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (0,004 °X), xxxxxxx druhé xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx na 0,004 °X, xxxxxx xx x xxxxxxx xx xxx výpočet xxxxxxxxx xxxxxxxx.
8.4 Chlazení sondy
Po xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx zkumavku xx xxxxxx xx místo xxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
(X xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx to xxxx možné; x xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx se xxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxx začátkem měření xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx údaje.)
9. Xxxxxxxxx výsledků
9.1 Xxxxxxx
Xxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx se považuje xxxxxx obou xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx bod xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na xxx xxxxxxxxx místa.
Pokud xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx je liché xxxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxxxx sudou xxxxxxx, xxx xxxxxxx tento xxxxxxx:
Xxx mrznutí (°X)
|
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx stanovení |
Průměr |
|
|
-0,544 |
-0,545 |
-0,544 |
|
-0,545 |
-0,546 |
-0,546 |
9.2 Xxxxxxxxxxxx
9.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (r): 0,004 °X
9.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (R): 0,006 °C
Obrázek 1
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1 (poloha xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xx skleněné xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx)
XX. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXX
1. Předmět a xxxxxx použití
Tato kapitola xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x pasterovaném xxxxx.
2. Xxxxxxxx
2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx. Xx vyjádřena xxxxxxxxx xxxxxx x μx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx mléka xx xxxxxxxxx, pokud xx xxxxx než 4 xx fenolu xx 1 xx.
3. Princip
Aktivita xxxxxxxxx xx vzorku xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx dibromindofenolu (xxxxxxxxx xxxxx), xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxx při 610 xx. Poté xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx vzorkem, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx byl xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxx xx xxxx 50,0 x hydroxidu barnatého (xxxxxxxxxxx) [Ba(OH)2.8H2O] x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.1.2 Rozpustit xx xxxx 22,0 x xxxxxxxx xxxxxx (X3XX3) x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.1.3 Xxxxxx 500 xx xxxxxxx xxxxxxx xx 50 °X, oba xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx, rychle xxxxxxxx xxx xx 20 °C, v xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xX xx 10,6 ± 0,1 xxxxxxxx roztoku 4.1.1 xxxx 4.1.2. Přefiltrovat. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx nádobě.
4.1.4 Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx objemem xxxx.
4.2 Xxxxxxx roztok xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxx 6,0 x methaboritanu xxxxxxx (XxXX2) nebo 12,6 x NaBO2.4H2O x 20,0 g chloridu xxxxxxx (XxXx) x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.3 Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxx 10 xx xxxxxxxxx roztoku xxx xxxxxxxx zabarvení (4.2) xxxxx xx 100 xx.
4.4 Xxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx 0,1 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, prostý xxxxxx, ve 100 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.3) xxxx 0,5 x xxxxxxxxxxxx dvojsodného xx 4,5 ml xxxxxxxxx roztoku pro xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2), xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx XXX (4.6) x xxxxxx xxxx 30 xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx extrahovat 2,5 xx x-xxxxxxxx a xxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx-1 neoddělí. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx-1. X případě xxxxxxxx xx extrakce xxxxxxx.
Xxxxxx xx možné xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx; xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x provést xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx substrát xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxxx, x to xxxxxxxx 1 xx xxxxxx roztoku xx 100 ml xxxxxxx xxxxxxxx x hydroxidu xxxxxxxxx (4.1.3).
4.5 Sraženina xxxxx-xxx
Xxxxxxxxx ve xxxx 3,0 x xxxxxx xxxxxxxxxxx (XxXX4 · 7X2X) a 0,6 x xxxxxx xxxxxxxxx (XxXX4 · 5X2X) x xxxxxxx na 100 xx.
4.6 Roztok 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx XXX)
Xxxxxxxxx x 10 ml 96 % (V/V) xxxxxxxx 40 ± 1 xx 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXX) (C6H2Br2ClNO6).
Skladovat x xxxxx láhvi x xxxxxxxxxx. Xxxxxxx roztok, xxxxx změní barvu xxxx xx xxxxxx xxx jeden xxxxx.
4.7 Xxxxxx síranu xxxxxxxxx (XX)
Xxxxxxxxx xx xxxx 0,05 g síranu xxxxxxxxx (CuSO4.5H2O) x xxxxxxx na 100 xx.
4.8 Xxxxxxxxxx roztok xxxxxx
4.8.1 Xxxxxxx 200 ± 2 xx xxxxxxx xxxxxxxxx fenolu x přelít xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 100 xx, xxxxxx xxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xx 100 xx. Tento xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
4.8.2 Xxxxxx xxxxx 10 xx xxxxxxxxx roztoku, xxxxxxx xx 100 ml x xxxxxxxxx. 1 xx xxxxxxxx 200 μx fenolu.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxxx:
x) Veškeré xxxxxxx xx skla, xxxxx x xxxxx a xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxx vyčištěny. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx vodou xxxx xxxxxxx xxxxx.
x) Xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx mohou způsobit xxxxxxxxxxx fenolů a xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxxxxx laboratorní xxxxxxxx, xxxxxxx:
5.1 Xxxxxxxxxx váhy
5.2 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx 37 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx 610 xx.
5.4 Xxxxxxxx, 16 xxxx 18 × 150 xx, xxxxxxx odstupňované xx 5 xx x 10 xx.
5.5 Pipety
5.6 Xxxxxxxx nálevky xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx. o xxxxxxx 5 xx.
5.7 Xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx 9 xx pro xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
5.8 Xxxxxxx xxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků.
6. Postup
Poznámky:
a) Xxxxx stanovení zabránit xxxxx xxxxxxx slunečního xxxxxx.
x) Xxxxx slin xxxx potu mohou xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxx se xxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx po xxxxxx vzorků. V xxxxxxx xxxxxxx skladovat xxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx ne xxxx xxx xxx xxx.
6.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx pipety xxxxxx 1 xx xxxxxx xx xxxxx xx dvou xxxxxxxx (5.4), xxxxx zkumavku xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx slepý pokus.
6.3 Xxxxxxxxx
6.3.1 Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xx vroucí xxxx; xxxxxxxx x xxxxxxx x vroucí vodou xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx se prohřála xxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.2 Xx zbytek xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx vzorek xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx 10 xx roztoku xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxxxxx.
6.3.3 Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 60 minut xx vodní xxxxx (5.2) x xxxxx (xxxxxxx čtyřikrát) xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
6.3.4 Xxxxxx xxxx v xxxx 6.3.1 zahřívat dvě xxxxxx xx xxxxxx xxxx. Rychle xxxxxxxx xx xxxxxxxxx teplotu.
6.3.5 Xx každé zkumavky xxxxxx 1 ml xxxxxxxxx xxxxx-xxx (4.5) x xxxxx xxxxxxxxx.
6.3.6 Xxxxxxxxxxxx xxxx suchý xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx dva xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx čirý; xxxxxxxxxx 5 xx ve xxxxxxxx.
6.3.7 Přidat 5 xx tlumivého xxxxxxx xxx xxxxxxxx zabarvení (4.2).
6.3.8 Xxxxxx 0,1 xx xxxxxxx XXX (4,6), xxxxxxxxx x 30 minut xxxxxx xxxxxxx zabarvení při xxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.9 V xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx délce 610 xx.
6.3.10 Xxxxx absorbance xxxxxxxx v xxxx 6.3.9 převyšuje xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 20 μx fenolu xx zkumavku xxxxx xxxx 6.4.4, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Připravit xxxxxxx smícháním xxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku s xxxxxxx objemem xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxx do xxxx, xxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
6.4.1 Na xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxx (4.8.2) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx obsahujících 0 (xxxxxxxxx xxxx slepý xxxxx), 2, 5, 10 x 20 μx xxxxxx na xxxxxxxx. Xx xxxxx x xxxx zkumavek xxxxxx xxxxxx pipety 1 xx vody x 1 xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
6.4.2 Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.7), 5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.3), 3 xx vody x 0,1 ml xxxxxxx XXX (4.6); xxxxxxxxx.
6.4.3 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 30 minut xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
6.4.4 X xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx pokusem xxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.4.5 Xx základě xxxxxx xxxxxxxxxx (6.4.4) xxxxxxxxx pro každé xxxxxxxx přidaného xxxxxx (6.4.1) vypočítat xxxxxxxx xxxxxx metodou xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7. Vyjádření xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxx a vzorec
7.1.1 Xx základě xxxxxx xxxxxxxxxx (6.3.9) vypočítat xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (6.4.5).
7.1.2 Xxxxxxxxx aktivitu xxxxxxxxx xxxxxxxxxx v μx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx podle xxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxxx fosfatázy = 2,4 × X × X
xxx
X xx xxxxxxxx xxxxxx x μx xxxxxxx xxxxx xxxx 7.1.1;
D xx faktor zředění xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx bodu 6.3.10 (x případě xxxxxxx xxxxxxx D = 1).
2,4 xx faktor xxxxxxx (5/12 x 1 ml xxxxxxxxxxx xxxxxx) – xxx 6.2 xx xxxxxxxxxx x 6.3.2, 6.3.5 x 6.3.6.
7.2 Xxxxxxxxxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (r) : 2 μg xxxxxx/xx.
7.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) : 3 (předběžně) μx xxxxxx/xx.
7.2.3 Xxxxx se xxxxxxx provede xxxxx 6.3.10, xxxxxx uvedené x 7.2.1 x 7.2.2 xx týkají xxxxxxxx získaných xx xxxxxxxxx vzorku.
III. XXXXXXXXX XXXXXXXX PEROXIDÁZY
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx peroxidázy x xxxxx, xxxxx xxxxxx xx kontrole xxxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx:
Xxxxx je xxxxx xxxxx pasterováno, xx 30 sekund xx xxxxxxxxxx xx objeví xxxxx zabarvení.
Negativní reakce xx xxxxxxxxxx:
Xx 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx žádné xxxxxxxxx.
3. Princip
Peroxidáza rozkládá xxxxxxx xxxxxx. Uvolněný xxxxxxxx kyslík oxiduje xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx indofenol (Xxxxxxxx xxxx). Intenzita xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx enzymu.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx x xxxxx xxxx (50 °C) 2 x 1,4 xxxxxxxxxxxxxx (X6X8X2) a xxxxxxx xx 100 ml. Xxxxxx skladovat v xxxxxx x xxxxx, x tmavě hnědé xxxxx xx skleněnou xxxxxx. Během xxxxxxx xx dvou dní xx xxxxxxxxxx xxxxxx 1,4 fenylendiaminu xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2 Xxxxxx xxxxxxxx vodíku
Vodou xxxxxx 9 xx 30 % xxxxxxxx vodíku x xxxxxxx na 100 xx. Pro xxxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx litr xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxx měsíc, xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx a xxxxx, x xxxxx xx xxxxxxxxx zátkou, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx styku x organickými xxxxxxx.
5. Xxxxxx
5.1 Dát 5 xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx víčkem.
5.2 Xxxxxx 5 ml xxxxxxx 1,4 fenylendiaminu (4.1).
5.3 Xxxxxx 2 xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.2).
5.4 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx více xxx 30 sekund xx xxxxxxx činidel, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXX 30 °C
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů technikou xxxxxxxx kolonií při 30 °X. Xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, XXX mléko xxxx xxxxxxxxxxxxx mléko, xxxxx xxxx 15 xxx preinkubováno xxx 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx rozumějí organismy, xxxxx xxxxxxxxx počitatelné xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx stanovený xxxxx xxxxxx mléka x xxxxxxxxxxx xxxxxx x Xxxxxxx miskách x xxxxxx xxxxxxxxx 72 xxxxx při 30 °C. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx syrového xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx na 0,1 xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx XXX xxxxx.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx ze xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Horkovzdušná xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na 170 xx 175 °C.
4.1.2 Xxxxxxxx, nastavitelný xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, schopný xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °X.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 jednotky xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, zvětšení 8 – 10x.
4.1.8 Mechanické xxxxxxxxx
4.1.9 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 1 ml xxxxxx mléka xxxx xxxxxxxxxxx ředění x 9 xx xxxxxxxx xxxxxxx x pracující xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx obsahu xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxx x dostatečným xxxxxxx, x dostatečným xxxxxxxxx k xxxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx dalších xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx 20 xx xxx skladování xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x nepoškozeným xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 ml, x výpustním otvorem x xxxxxxx 1,75 xx 3 mm.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx z xxxxxx, bezbarvého skla xxxx xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, xxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx 90 xx 100 mm. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx 10 xx. Xxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx, které xx xxxxxxx počítání xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx ze xxxx:
Xxxxxxx ze xxxx xx sterilizují jedním x těchto postupů:
a) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), nejméně xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx 170–175 °C;
b) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °C.
Při xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx na xx, xxx bylo zajištěno xxxxxxxxxx proniknutí páry: xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v nádobách, xxxx nádoby by xxxxxx xxx napevno xxxxxxxx, xxxxxxx nebo xxxxx by xxxx xxx volné.
Pomůcky xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxx odvětráním xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx v horkovzdušné xxxxxxx (4.1.1).
5. Kultivační xxxxxx – xxxx xx xxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx extrakt |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx (+) nebo xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10–15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxx odstředěné xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx žádné inhibiční xxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X xxxxx pořadí xxxxxxxxxxx x rozpustit xx xxxx kvasnicový xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx x nakonec xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Ohřev xxxxxxxx xxxxxxxxx postup. Xxxx přidat xxxx x xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx, xxxxx xx xxxx xxxxx nerozpustí, xxxx zahřívat x xxxx asi 30 xxxxx.
Xxxxx to xx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX pomocí xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxx pH, roztokem (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxxxx byla xxxx xxxxxxx 6,9 ± 0,1 při 25 °X.
5.2 Rozdělení, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx médium (5.1) v xxxxxxxxxx xx 100 do 150 ml xx xxxxx xxxx xx 12 xx 15 xx do zkumavek (4.2.2). Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) při 121 ± 1 °C.
Zkontrolovat xX xxxxxxxxxxxx média.
Pokud xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx teplotě xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx médium
Kultivační xxxxxx (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média. Xxxxxxx xxxxxx výrobce, xxx přidat xxxxxx xxxxxxxxxx mléko xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx produktu.
Upravit xX xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X xxxxxxx podle xxxx 5.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx médium xxxxx xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Roztok xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx vodě, pokud xx je nutné, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xX-xxxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 mol/l) xxxxxxxxx xxxxxxx nebo kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxxxx byla xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
6.2 Rozdělení, xxxxxxxxxxx x skladování ředidla
Rozdělit xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx ředidla. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx sterilizovat x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °C.
Zkontrolovat xX xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx teplotě mezi 1 x 5 °X, xxxxx ne xxxx xxx 1 xxxxx xx jeho xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) xx xxxx připravovat x xxxxxxxxxx dehydrovaných tablet xxxx prášku. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX xxxxxxx xxxxx xxxx 6.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx podle xxxx 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Před xxxxxxxxx mikrobiologického vyšetření xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x zchladit xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxx řádně xxxxxxxxx, xxx xxxx mikroorganismy xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xx 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx tvorbě xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx neměla xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (10-1) (xxxxxx a pasterované xxxxx)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 ml xxxxxx (7.2) syrového xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 9 xx xxxxxxx (6.1), xxxxxxx xxxxxx nesmí xxxxxx xx kontaktu x xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx mléka. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx xx tak xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (syrové x xxxxxxxxxxx mléko)
Sterilní xxxxxxx (4.2.3) přenést 1 xx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx pokynů v xxxx 7.3.
Získá xx xxx xxxxxx 10−2.
S xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx ředění xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx, dokud xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx mikroorganismů (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Petriho misek
7.5.1 Xxxxxx xxxxx: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx misky (4.2.4) 1 xx vzorku x/xxxx vhodného desetinného xxxxxx. Xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Pro xxxxx xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx misku.
7.5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx misky (4.2.4) 1 ml vzorku x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx být xxxxxxxxx nejméně dvě xxxxxx. Xxx každé xxxxxx (8.1.1) připravit xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.5.3 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx xx 15 denní xxxxxxxx xxx 30 °X – xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx X xxxxxxxx VII xxx 5):
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx xx misky (4.2.4) 1 xx xxxxxx mléka (7.2). Xxxxxxxxx xxx xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 15 xx 18 xx xxxxxxxxxxxx média (7.1).
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, aby po xxxxxxxx došlo x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx, podle druhu xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxx médiem xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx vodorovném, xxxxxxxx x čistém xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Misky xxxxxxxxx obrácené xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx na xxxx xxxx než xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx nesmějí xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxx x xxxxxxxx xx stěnami a xxxxxx částí inkubátoru.
Inkubovat 72 ± 2 xxxxx při 30 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx více xxx 300 xxxxxxx.
Xxxxx vyšetřit xxx xxxxxxxx světle. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx xxxxx xxxx xx to, xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx koloniemi. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx skla s xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x xxxxx odlišit xxxxxxx od xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx považují xx xxxxx kolonii. Pokud xxxxxxx xxxxxxx povlak xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx, spočítat xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx a xxxxxxxxx odpovídající xxxxx xxx xxxxx misku. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pokrývají xxxx xxx čtvrtinu plochy xxxxx, xxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxx x vyjádření xxxxxxxx
8.1 Syrové x xxxxxxxxxxx xxxxx
8.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx misek obsahujících 10 až 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.1.2 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
∑X / (x1 + 0,1x2) x
xxx:
∑X ΣC xx xxxxxxx počet xxxxxxx xxxxx xxxx 8.1.1.
(x1 + 0,1 x2)x je objem xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx:
x1 xx xxxxx misek xxx prvním ředěním
n2 xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxx ředění
d xx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx první xxxxx.
Xxxxx xx zaokrouhlí xx xxx platné xxxxxxx. Když xx xxxxxxxxxxxxxx číslice xxx, xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx číslice xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxx):
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 kolonií
Ředění 10−3: 33 a 28 kolonií
Počet/ml: = 278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2
= 6290,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.1.3 Xxxxx xxxx všechny xxxxx xxxxx než 10, xxxxx, xx xxxxx mikroorganismů xx xxxxxxxx je "xxxxx xxx 10 x x", xxxxxxx "x" xx xxxxxxxxxx hodnota xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
8.1.4 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 300 x xxxxxxxx xx xxxxx, xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx hodnotou xxxxxxx zředění. Výsledek xxxxxxxx xxxx "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xx".
8.2 UHT xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xxxxx xxx 10 xxxxxxx xx 0,1 xx xx považují xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/XXX.
9. Spolehlivost
Výsledky xxxxxxxxxxx uznaných kruhových xxxxx xxxxx xxxxxx x dispozici.
V. XXXXXXXXX XXXXXX MIKROORGANISMŮ PŘI 21 °C
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů technikou xxxxxxxx xxxxxxx xxx 21 °X v xxxxxxxxxxxx mléce, které xxxx pět dní xxxxxxxxxxxxx při 6 xX x xxxxx xxxxxxxx stupeň kontaminace xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx se xxx množit se x mléce xxx 6 °C.
2. Definice
"Mikroorganismy" xx xxxxxxxx organismy, xxxxx vytvářejí xxxxxxxxxxx xxxxxxx po xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Princip
Inkubovat xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxx xxx 6 °C. Xxxxxxx xxxxxxxxx objem xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx médiem x Xxxxxxx miskách x xxxxxx inkubovat 25 xxxxx při 21 °X. Xxxxxxxx xxxxxxx x vypočítat xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx pasterovaného mléka.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx laboratorní xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Autokláv, xxxxxxxxxxxx na 121 ± 1 °C.
4.1.3 Xxxxxxxxx, schopný xxxxxxxx xxxxxxx:
x) 6 ± 0,2 °X
x) 21 ± 1 °X xx xxxxx xxxxxx xxxxxx.
4.1.4 pH-metr xx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx na ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx lázeň, xxxxxxxxxxxx na 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx sklo, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx počítadlo
4.1.9 Míchačka xxxxxxx xxxxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxx xxxx desetinného ředění x 9 xx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx na principu xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Pomůcky xx xxxx
4.2.1 Zkumavky x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx objemem, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx ředění.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 až 250 xx xxxx xxxxxxxx x objemu 20 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Pipety (xxxxxxxx vatou), xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx materiálu, s xxxxxxxxxxxx hrotem, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx misky x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx misek xx xxxxxxx xxxxxx asi 90 xx 100 x. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx by xxxx xxx xxxxxxx 10 xx. Dno xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx skla:
Pomůcky xx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx hodinu xxx teplotě 170–175 °X;
x) v xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx nutné xxxx xx to, aby xxxx xxxxxxxxx dostatečné xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx xx materiál xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, tyto xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx uzavřeny, xxxxxxx xxxx xxxxx xx měly xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx skla xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx se xxxx xxxxxxx odvětráním xxxx.
Xxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx – agar se xxxxxxx xxxxxx
5.1 Složení:
|
Kvasnicový xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx(+) xxxx dextróza |
1,0 g |
|
Sušené xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10-15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx žádné xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx sušeným xxxxxxxxxxx mlékem, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X xxxxx xxxxxx suspendovat x xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx suspenze xxxxxxxxx xxxxxx. Poté přidat xxxx a xxxxx xx xxxx xx xxxxxxx míchání, xxxxx xx agar xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx zahřívat x xxxx xxx 30 minut.
Pokud je xx nezbytné, xxxxxxxxxxxx xxxx papír.
Zkontrolovat xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx, upravit xX, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx sodného xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.2 Xxxxxxxxx, sterilizace a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Rozdělit xxxxxx (5.1) v xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 ml xx xxxxx xxxx xx 12 xx 15 xx do xxxxxxxx (4.2.2). Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx sterilizovat x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx ihned, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx teplotě xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx dehydrovaného kultivačního xxxxx. Xxxxxxx pokyny xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx produktu.
Upravit xX xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °C postupem xxxxx bodu 5.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x skladovat xxxxxxxxxx xxxxxx podle xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Roztok xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 g |
|
Chlorid sodný (XxXx) |
8,5 g |
|
Voda |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, xxxxx to xx xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xX-xxxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxx pH xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx chlorovodíkové, xxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx zkumavek (4.2.1) xxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx ředidla. Xxxxxxxx uzavřít.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) při 121 ± 1 °X. Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx při xxxxxxx mezi 1 x 5 °X, xxxxx xx déle xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ředidla
Ředidlo (6.1) xx xxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Upravit xX xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.1, poté xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx zahájením xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx lázni (4.1.5) xx 45 ± 1 °C.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx [4.1.3 x)] xxxxxxxx balení xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx xx xxxx xxxxx, reprezentativní xxxxxx x xxxxxx nejméně 100 ml xx xxxx 120 ± 2 xxxxx xxx 6 ± 0,5 °X.
7.2.2 Xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx nejrovnoměrněji xxxxxxxxx, a xx 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx nebo xxxx nechat rozptýlit. Xxxx xxxx xxxxxxxx x odběrem testovacího xxxxxx by xxxxxx xxxxxxxxx xxx minuty.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx ředění (10−1)
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 ml xxxxxx (7.2) syrového xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 9 ml xxxxxxx (6.1), xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx teplota xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx se tak xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxxxxxx ředění (7.3) xx 9 ml xxxxxxx (6.1) xxxxx xxxxxx x bodě 7.3.
Xxxxx xx xxx xxxxxx 10−2.
S cílem xxxxxx další xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx nelze xxxxxxxx xxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx do xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx a/nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ředění. Xxxx xxx vyšetřena xxxxxxx dvě xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) připravit xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx každé xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 15 xx 18 ml xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Ihned promíchat xxxxxx Petriho xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx přípravy xxxxxx xxxxx x smícháním, xxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx x kultivačním xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx vodorovném, xxxxxxxx x čistém xxxxxxx, xxxxx médium neztuhne.
7.7 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx dnem xxxxxx. Xxxxxxxxx xx sebe xxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx misek xx xxxxxxx vzájemně xxxxxxx, ani xxx x kontaktu xx xxxxxxx x vrchní xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 25 xxxxx při 21 ± 1 °C.
7.8 Xxxxxxxx kolonií
Počítat xxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 300 kolonií.
Misky xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) a/nebo xxxxxxxxxx počítadlo (4.1.8). Xx nutné dbát xx xx, xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx sraženin x xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx pochybností xxxxxxx xxxxxxx průzkum xxxxxx xxxxxxxxxxxx skla s xxxxxx zvětšením (4.1.7), x cílem odlišit xxxxxxx od cizích xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx za xxxxx xxxxxxx. Pokud xxxxxxx xxxxxxx povlak xxxxxxxxx méně xxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx misky a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx počet xxx xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx tvořící xxxxxx pokrývají více xxx xxxxxxxx plochy xxxxx, xxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Xxxxxx výsledky xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.2 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
∑X / (x1 + 0,1x2) x
xxx:
ΣX xx celkový xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 8.1,
(x1 + 0,1 x2)x xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx:
x1 xx počet xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx
x2 je xxxxx xxxxx xxx druhém xxxxxx
x xx faktor xxxxxxx, na xxxxxxx xxxxxxx byly získány xxxxx počty.
Počet xx xxxxxxxxxx na xxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx zaokrouhlovaná číslice xxx, zaokrouhlit xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx sudá.
Příklad:
Ředění 10−2: 278 x 290 kolonií
Ředění 10−3: 33 x 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; =278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2=
=629 / 0,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.3 Xxxxx xxxx všechny xxxxx xxxxx než 10, xxxxx, že xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx "nižší xxx 10 × x", xxxxxxx "x" je xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx zředění.
8.4 Xxxxx xxxx všechny počty xxxxx xxx 300 x xxxxxxxx je xxxxx, xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx jej xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xx".
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx ještě xxxxxx x xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX OBSAHU XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX – XXXXXXXX XXXXXXX XXX 30 °X
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx kapitola xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx koliformních xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx při 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx 30 °X xxxxxxxxx charakteristické xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx jsou xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx plynu.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx a 24 xxxxx xxxxxx inkubovat xxx 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x, xxxxx to xx xxxxx, potvrdit xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx kolonií xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx xx skla
Obvyklé xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Přístroje
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, schopný xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °X.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx-xxxxxxx xxxx xxxx-xxxxx.
4.2 Pomůcky xx skla
4.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x objemem 20 xx, aby xxxxx xxxxxxxxx konfirmační xxxxxxxxxx xxxxxx (5.2) a Xxxxxxxxx xxxxxxxx vhodné xxxxxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 až 250 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média (5.1).
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx xxxx ze xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx objemu 1 – 10 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx o xxxxxxx 1,75 až 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, xxx misek má xxxxxxx xxxxxx xxx 90 xx 100 x. Vnitřní xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx 10 xx. Xxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx by bránily xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Sterilizace xxxxxxx xx skla:
Pomůcky xx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx hodinu xxx xxxxxxx 170 – 175 °X;
x) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 minut xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx autoklávu je xxxxx dbát na xx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx proniknutí xxxx: xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, tyto xxxxxx xx neměly být xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx by xxxx xxx volné.
Pomůcky xx xxxx sterilizované x xxxxxxxxxxx by xx měly xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxx x xxxxxxxxxxx violetí, xxxxxxxxx červení, xxxxx x laktózou (VRBL xxxx). Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
7 x |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
3 x |
|
Xxxxxxx (X12X22X11.X2X) |
10 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
5 x |
|
Xxxxxxx xxxx |
1,5 g |
|
Neutrální červeň |
0,03 x |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxx |
0,002 g |
|
Agar |
10 xx 15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx složky xx xxxx a nechat xxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); pokud xx xx nutné, xxxxxxx xX xxxxxxxx (nejméně 0,1 mol/l) hydroxidu xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxx byla jeho xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxx xxxxxx do xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx xx množstvích 100 až 150 xx xx sterilních xxxxx (4.2.2). Kultivační xxxxxx zchladit ve xxxxx lázni (4.1.5) xx 45 ± 1 °C.
V xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média (6.4).
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxx xxxx x brilantovou xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
10 g |
|
Laktóza (X12X22X11.X2X) |
10 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxxx žluč |
20 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxx |
0,0133 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxx a xxxxx xx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx to xx xxxxxxxx, xxxxxxx pH xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx sodného xxxx kyseliny chlorovodíkové, xxx xx sterilizaci xxxx xxxx xxxxxxx 7,2 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx xxxxxx po 10 xx xx zkumavek (4.2.1) obsahujících Xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx uzavřít.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) při 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxx trubičky xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx obsahovat xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, skladuje xx x xxxxx při xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 měsíc xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kultivační xxxxxx
Xxxxxxxxxx médium (5.1) xx xxxx připravit x xxxxxxxxxx dehydrovaného xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Upravit xX, rozdělit, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx 5.1 x 5.2.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxxxx médium
Použít xxxxxx (XXXX agar) xxxxxxx x bodě 5.1.
6.2 Příprava xxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xx 25 rychlými xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxx nechat rozptýlit. Xxxx mezi xxxxxxxx x odběrem testovacího xxxxxx by neměla xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) 1 xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xx tří xxxxx (4.2.4) x tím xxxxxxxxx 3 ml xxxxxx mléka (6.2).
6.4 Xxxxxxxx kultivačního xxxxx
Xx xxxxx naočkované misky xxxxx xxx 12 xx XXXX xxxxx (6.1)
Xxxxx po nalití xxxxx promíchat rotací Xxxxxxx misky, xxx xx xxxxxxxx došlo x xxxxxxxxxxxx rozložení xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx médiem xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xx xxxxxx kontroly xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx misku x 12 ml xxxxx XXXX xxxxx, xxxxx xxx použit xxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxx na xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x čistém xxxxxxx, xxxxx médium xxxxxxxx.
Xx úplném xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 4 xx VRBL xxxxx (6.1) xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx ztuhnout.
6.5 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx nahoru. Xxxxxxxxx na sebe xxxx než šest xxxxx. Sloupky misek xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx být x xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 24 ± 2 hodiny xxx 30 ± 1 °X.
6.6 Počítání xxxxxxx
6.6.1 Xxxxxxx xxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx více než 150 kolonií. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x průměru nejméně 0,5 xx, x xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx, charakteristické pro xxxxxxxxxx bakterie.
6.6.2 Xxxxx xxxx všechny nebo xxxxxxx kolonie xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxx tvar xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), provést xxxxxxxxxxx xxxx (6.7).
6.7 Xxxxxxxxxxx xxxx
Xxxxx xxxxx x xxxx 6.6.2 xxxxxxx xxxxxxxxxxx test x xxxxxxxx xxxxx (např. 3 až 5) xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx tím, xx xx xxxxxx xxxxxxxx jehly (4.1.6), xxxxxxxx zkumavky xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx zelení (5.2). Xxxxxxxxx xxxxxxxx 24 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °C.
Za kolonie xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx takové kolonie, xxxxx v Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx.
7. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxx výsledky xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 150 xxxxxxx.
7.2 Pokud xx provede xxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx potvrzených xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxxx xxxxx koliformních xxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx podle xxxxxx xxxxxx:
ΣX / x
xxx:
ΣX je celkový xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (7.1 x xxxxxxxxxxx se 7.2), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (6.3).
x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorku (6.3) x xxxxxxxxxxx (3 xx).
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx dvě xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx než 100 xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx číslice xxx, xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx byla sudá.
Pokud xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx než 150 xxxxxxx, xxxxx výsledek xxxx "xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií na 1 xx".
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx uznaných xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
XXX. STANOVENÍ XXXXXX SOMATICKÝCH XXXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxxx metoda
B. Fluoro-opto-elektronická xxxxxx
X. Mikroskopická metoda
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx postup popisuje xxxxxxxxxx postup xxx xxxxxxxxx počtu somatických xxxxx x syrovém xxxxx.
Xxxxx postup popisuje xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx buněk ve xxxxxx mléka xx xxxxxx kalibrace x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx X.1).
2. Xxxxxxxx
Xxx tento postup xx somatickými xxxxxxx xxxxxxxx buňky, xxxxxxxxx xxxxxxxxx x epitelové xxxxx, jejichž xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
3. Xxxxxxx
Xxxxxx 0,01 ml xxxxx xx 1 xx2 povrchu xxxxxxxxxx xxxxxxx. Tenká xxxxxx xx xxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx mikroskopem. Xxxxx somatických xxxxx xxxxxxxxxxx na daném xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xx 1 xxxxxxxx.
4. Xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx čistoty x.x..
Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxx xxxx |
0,6 x |
|
Xxxxxxx – 99 % |
54 xx |
|
1,1,1-xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx |
40 xx |
|
Xxxxxx kyselina xxxxxx |
6 xx |
Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Příprava x xxxxxxxxx xx proto xxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx v xxxxx xxxxxxx a 1,1,1-xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx ve xxxxx xxxxx xx 60 xx 70 °C. Xxxxxx methylenovou xxxx, xxxxx xxxxxxxxx, 12 xx 24 xxxxx xxxxxxx x chladničce xxx 4 °C x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx 10 xx 12 xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx roztok xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx vytvoření xxxxxx xxxx usazenin, xxxx použitím xxxxxx xxxxx přefiltrovat.
5. Xxxxxxxxx x pomůcky xx xxxx
5.1 Mikroskop xxxxxxxxxx xxxxxxxx 500 × xx 1000 ×
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dávkování xx 0,01 xx x xxxxxxxxx xxxxxxx ± 2 %.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxx 20 xx × 5 xx xxxxxxxxxx pro tenkou xxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx 20 × 5 mm pro xxxxxx vrstvu.
5.4 Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx (30 °X až 50 °X) xxx sušení xxxxxxxxxx sklíček.
5.5 Xxxxxxxxxx (xxx) xxx xxxxxx xxxxx vrstvy.
5.6 Vodní xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 30 xx 40 °X pro xxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
5.7 Podložní xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 0,01 xx.
6. Postup
6.1 Vzorek xxxxx
Xxxxxx mléka xxxx xxx testován xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 6 °X. Vzorek xxxxx xxx xxxxxxx.
6.2 Příprava xxxxxx x xxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxx ve xxxxx xxxxx (5.6) na 30 xx 40 °X. Poté řádně xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx mikrostříkačka (5.2), xxxxxxxxx 20 °X.
6.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx nezanechává xxxxx, xxxxxxxx plamenem x xxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxx, kde xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx (5.2) xxxxxxx 0,01 xx xxxxx xx xxxxxx připraveného, jak xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx očistit xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxx x mlékem. Přiložit xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) a xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (20 mm × 5 mm). Xxxx ji xx xxxxxxxxxxxxxxx vyplnit. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx horizontální xxxxxxxxx xxxxx (5.4) xx xx xxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxx mléka xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx dvě xxxxx xxxxxx.
6.5 Barvení tenkých xxxxxx
Xxxxxxx na 10 xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4). Sušit x, xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx ventilátorem (5.5). Xxxxxxx tenké xxxxxx xx xxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx a xxxxxxx xxx, xxx xxx chráněn xxxx xxxxxxx.
6.6 Xxxxxxxxx mikroskopického xxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (500 × xx 1000 ×) xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx (5.7).
7. Počítání x xxxxxxx
7.1 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxxxxxx (5.1). Xxxxx počítání xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx, a xx taková xxxxx, xxxxx xxxx jasně xxxxxxxxxxxx x x xxxxx je x xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx polovina. Počítat xxxx xxxx xxxx xx střední xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx ty pásy xxxx pole, které xxxx vybrány xxxxx x xxxxxxxxxx částí xxxxx xxxxxx. Pečlivá xxxxxxxx xxxxxxx vrstev x tudíž i xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx nejméně xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx. Počítání xxx také provádět xxxxxxxxxx mikroskopických xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx vrstvy byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
7.2 Stanovení xxxxxxxxxxx xxxxx buněk, xxxxx se xxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx somatických xxxxx xxx mikroskopem xxxx xxx rovněž xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx počítání, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxx nesmí xxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx elektronického xxxxxxxxx. Variační xxxxxxxxxx xxx vzorek mléka x xxxxxxx 400000 xx 600000 xxxxx/xx xx xxxxx překročit 5 %.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, které xx xxxxx x každém xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx podle Poissonova xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 400, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
X = X = s2,
kde:
M xx střední hodnota
V xx xxxxxxx
x je xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx:
XX = x × 100 % / X xxxx XX = 100 % / x&xxxx;xxxx XX = 100 % / OBR
M (xxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxx), které xxxx xxxxxxxxx (například 400 pro XX = 5 %).
7.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxxxx 0,01 xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx vypočítá xxxxx xxxx 7.3.1 xxxx 7.3.2.
7.3.1 Xxxxxxxx xxxx xx tenké vrstvě
Délka xxxx, které xx xxxx xxxxxxx, je 5 xx. Xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, jak xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7).
Xxxxxxxx faktor = 20 × 100 / x × b
kde:
d xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xx, stanovený xxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxxxxxx stupnicí (5.7)
b xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
7.3.2 Počítání xxxxxxxxxxxxxxx xxxx ve xxxxxxx xxxxxxx xxxxx vrstvy xxxx xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx
xxx:
x xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx pole x xx, xxxxxxxxx podložním xxxxxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7)
x celkový xxxxx xxxxxxxxxxx polí.
7.4 Xxxxxxx xxxxxx buněk
S xxxxx xxxxxx počet xxxxx na xx xxxxx, se xxxxx xxxxxxxxxxxx somatických xxxxx (7.1 x 7.2) xxxxxxxx pracovním faktorem (7.3).
7.5 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx koeficient (xxx 7.2) nesmí xxxxxxxxx 5 %.
Výsledky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx postup popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx, který xx může po xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxx X.1) používat pro xxxxxxxxx xxxxx somatických xxxxx x xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo bez xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, které xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxxxx fluorescence.
3. Xxxxxxx
Xxxx xxxxxx (xxxxxxxxx 0,2 xx) xx důkladně xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxx se xxxx xxxxxxx ve xxxxx tenké vrstvy xx rotační xxxx, xxxxx slouží jako xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Obsah xxxxxxxxxxx buněk xx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx mililitr.
4. Xxxxxxx
Xxxxx xxxx stanoveno xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxxxx čistoty x.x.. Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx, xxxx xx to xxxx odpovídající xxxxxxx.
4.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx draselný |
51,00 x |
|
Xxxxxxxx draselný |
13,75 g |
|
Polyethylenglykol-mono-p(1,1,3,3-tetramethylbutyl)-fenylether(například Xxxxxx X-100), 1 % objemové |
10 xx |
|
xX 5,7 xx 5,9. Xxxxxxx xxxxx xx 10000 ml. |
Příprava:
Smíchat xxxxxxxxxx xxxxxx. Skladování xx xxxxxxxxxxxx uzavřené nádobě xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx.
4.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (zásobní xxxxxx)
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
1,0 x |
Xxxxxxx xxxxx na 1000 xx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx ethidiumbromid xx vodě. Skladování xx vzduchotěsně xxxxxxxx xxxxxx chráněné xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxxxx roztok (xxxxxxxx xxxxxx)
Xxxxxxx 20 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.2) x xxxxxxxx xxxxxxxx (4.1) xxx, xxx xx xxxxxx xxxxx 1000 xx. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxx sedm xxx.
4.4 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxx xxxxxx (4.1) |
10 ml |
|
Polyethylenglykol-mono-p(1,1,3,3-tetramethylbutyl)-fenylether (například Xxxxxx X-100), 1 % objemové |
10 xx |
|
Xxxxxxx x 25 % xxxxxxxxxx |
25 ml |
Doplnit vodou xx 10000 xx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxxxxx složky. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx dní.
5. Xxxxxxxxx x pomůcky ze xxxx
5.1 Počítací xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx musí xxx xxxx použitím xxxxxxxxxxx. Tím xx xxxxxxx vztah xxxx xxxxxxx xxxxxx, které xx mají xxxxxxx, x prahovou xxxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxx buněk xxx xxxxxxxx mikroskopickou xxxxxxx (X).
5.2 Vodní xxxxx, x xxxxxxxxx xxxx, nastavitelná xx 40 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxxx, objem xxx 15 xx.
6. Xxxxxx xxxxx
6.1 Xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxx xxxxx teplotě xx xxxxxxxx (5.3). Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xx po uplynutí 24 hodin po xxxxxxxx, neboť xxxxx xxxxxxxxxxxxxx by xxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 6 °X.
6.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx musí xxxxxxx do 24 xxxxx. Konzervace xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx po xxxxxx xxxxxx.
6.2.1 Chemická xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx prostředků:
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxx nesmí být xxxxx než 0,6 x xx 100 xx. Xxxxx konzervovaný xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx dalších 24 xxxxx při xxxxxxx 6 xx 12 °X;
- dvojchroman xxxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx než 0,2 x xx 100 xx. Takto xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx skladován xxxxxxx 72 hodin xxx xxxxxxx 6 xx 12 °X;
- xxxx xxxxx:
xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx azidem xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx 0,024 x/100 ml, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx 6 xx 12 °X xxxxx po xxxx xxxxxx a xxxxxxxx do 48 xxxxx xx xxxx xxxxxx;
- xxxxxxxx:
xxxxxx může xxx konzervován xxxxxxxxxx x konečné xxxxxxxxxxx 0,05 g/100 xx, xxxxx je xxxxxx xxxxxxxx na xxxxxxx 6 xx 12 °X xxxxx po xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx 72 xxxxx po jeho xxxxxx.
6.2.2 Xxxxxx, který xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx boritou, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx 48 xxxxx xxxxxxxxxxxxx draselným.
Poznámka:
Pokud xxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxx dodrženy xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx.
7. Xxxxxx
7.1 Předběžné xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx, které xx xx vyšetřit, se xx nadojení xxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx xxx 2-6 °X. Xxxxxxxx vzorků x xxx xxxxxxxx xx xxx předběžného xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx provést, xxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx nejméně xxx xxxxxx dvojchromanem xxxxxxxxx (xxx 6.2.1).
7.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxx 7.1) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx starý xxxxxx xx xxxxx xxxxx (5.2) xx xxx 40 °X. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx teplotě xx do xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx počítacího xxxxxxxx (5.1) do 15 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 7.2). Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx se xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx somatických xxxxx.
Xxxxx ředění x xxxxxxxx vzorku xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx opakovatelnosti (x) x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) mezinárodních kruhových xxxxx nejsou x xxxxxxxxx.
Xxxxx, xxxxx xxxx x dispozici na xxxxxxx xxxxxx, umožňují xxxx xxxxxx:
(1) xxxxx xxxxx mezi 400 000 xx 500&xxxx;000 xxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx:
xx = 20000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx variačnímu xxxxxxxxxxx 5–4 %)
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx reprodukovatelnosti:
sR = 40000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 10–8 %)
9. Xxxxxxxx správnosti
Kontrola xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx o xxxxxx xxxxxx xxxxx, který xx stanoví počítáním xxxxx pod xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx referenční xxxxxxxxxx.
XXXX. XXXXXXX XXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXX
XXXXXXX X XXXXXX XXXXXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx antibiotik x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx a x tepelně ošetřeném xxxxx.
Xxxxx referenční xxxxxx xxxxxxxx:
X. Kvalitativní xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xx počáteční xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx mléka, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Popisovaný xxxxxx je xxxxxx x několika xxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxx xx xxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx var. xxxxxxxxxxxx, XXXX 10149, xx xx testovacího xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx byl xxxxxx xxxx reprezentativní xxx takovéto testy.
B. Xxxxxx pro xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx pro konfirmaci xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx identifikaci xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx.
X. Kvalitativní postup
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx postup popisuje xxxxxxxxxxxx detekci antibiotik x sulfonamidů x xxxxxxx xxxxx a x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx vyšší než xxxxxx xxxxxxx x xxxx tabulce:
Detektovatelné xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx [1]
|
Citlivost xxxxx |
||
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxx |
|
|
Xxxxxxxxxxxxxxx |
0,002 |
0,006 |
|
Xxxxxxxxx |
0,002 |
0,005 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,015 |
0,035 |
|
Xxxxxxxx |
0,006 |
0,011 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,10 |
0,40 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,20 |
0,45 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxx |
0,15 |
0,50 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
7 |
15 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx |
4 |
13 |
|
Xxxxxxxx |
1 |
22 |
|
Xxxxxxxxx |
9 |
28 |
|
Xxxxxxxxxx |
0,06 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxx |
1 |
2,25 |
|
Xxxxxxxxx |
0,01 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,01 |
0,1 |
|
Xxxxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxxx) |
0,5 |
1 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2 g |
|
|
Pepton |
5 x |
|
|
Xxxxxx xxxxxxx |
1 x |
|
|
Xxxxxxx xxxxx |
5 x |
|
|
Xxxx |
10–15 x |
|
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx. Xx občasného xxxxxxx uvést xx xxxx. Xxxxxxx xX xxx, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx po 10 xx do xxxxxxxx xxxx xx 100 xx xx xxxxxxxx x naklonit x xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X.
5.1.2 Agarové xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxx xxxxx |
2 x |
|
Xxxx |
15 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx (viz 5.1.3) |
10 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, s xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx. Xx občasného xxxxxxx uvést xx xxxx. Xxxxxx trimethoprim xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X. Xxxxxxx xX, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.1.3 Roztok trimethoprimu xx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxxxx |
5 mg |
|
nebo Xxxxxxxxxxx |
30 xx |
|
96 % Xxxxxxx |
5 ml/30 xx |
|
Xxxxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x ethanolu xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (5 nebo 30 xx) a doplnit xxxxx.
5.1.4 Živný roztok
Složení:
|
Kvasnicový xxxxxxx |
0,75 mg |
|
Glukóza |
5,0 xx |
|
Xxxxxxxxx xxxxx |
8,0 mg |
|
Bromkresolová xxxxxx |
0,025 x |
|
Xxxx |
50 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xx je xxxxx, xxxxxxxx a sterilizovat xxxxxxxx. Xxxxx roztok xx xxxxxxxx v xxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxxxx
5.2.1 Ve xxxxxxxx xxxxx s xxxxxxx xxxxxxxx připravit xxxxxx xxxxxxxxxx x 60 μx/xx (100 XX/xx), x to xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx benzylpenicilinu xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx ve xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
5.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx roztok xxxxxxxxxx xxxxxxxx 1,25 xx xxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2.1) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx do 1000 xx. Tento pracovní xxxxxx xxxxxxxx 0,075 μx xxxxxxxxxx/xx (= 0,125 XX/xx).
5.2.3 Xxxxxxxxx 75 ml xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,004 μg penicilinu/ml (= 0,0067 XX xxxxxxxxxx/xx) xxxxxxxx 4 xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2.2) xx 71 xx xxxxx xxx inhibičních xxxxx (5.3).
5.2.4 Roztoky xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 5.2.1 xx 5.2.3 xx měly xxx xxxxxxxxxx v xxx xxxxxxxxx testu.
5.3 Xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx mléka xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (10 % x/X) xx xxxx, xxxxx xxxx předtím xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx bylo xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx inhibičních látek; xxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx 100 °X, poté xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx 0 °X xx 6 °X xx xxxx nejvýše xxxxxxx xxxxx.
5.4 Testovací organismus
5.4.1 Xxxx testovací organismus xx použije Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx XXXX 10149 Xxxx XXXX 10149 xx xxxxxxxxx x xxxxxx X 953.
5.4.2 Připravit xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx kultury. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx (5.1.1). Xxxxx agar xx x proužcích xxxxxxxx xxxxxxx testovací kultura, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx 48 xxxxx xxx 63 ± 1xX. Po xxxxxxxx xxxxxxx zkumavka sterilní xxxxxxxx zátkou. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx měsíců x xxxxxxxxxx při 0 xx 5 xX.
5.5 Xxxxxxxxx kultura (xxxxxxxx xxxx)
5.5.1 Asepticky přenést 20 ml živného xxxxx (5.1.1) xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx (4.2.2) x nechat xxxxxxxx xx pokojovou xxxxxxx.
5.5.2 Xxxxxxxx pipetou (4.2.4) přenést 5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx kulturou (5.4.2) a vymýt xxxxxxxx smyčkou xxxxx xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxx 0 xx 5 °X x xxxxxxx se xx 36 hodin.
5.5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 ml xxxxxxxx xxxx (5.5.2) xx Xxxxxxx xxxxx (5.5.1) x důkladně xxxxxxxxx očkovací xxxxx xx xxxxx povrchu xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx 16 xx 18 hodin xxx 63 ± 1 °X (4.1.1).
Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (5.4.2) xxxx kultury xxxxxx 36 hodin xx xxxxxxxx mělo xxxxxxx xxxxxxx dvakrát x časovém xxxxxxxxx xxxxxxxxx 36 xxxxx.
5.5.4 Xxxxxxxx pipetou (4.2.4) xxxxxxx 10 ml xxxxxxxxxxx xxxx xx Xxxxxxx misku xxxxxxxxxx xxxxxxx (5.5.3) x xxxxxxxxx xxxxxxxx odstranit xxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxx (4.2.3) xxxxxxxxxx 250 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxx x důkladně xxxxxxxxx. Kultury, které xxxxxx xxxxx přeočkovány, xx se xxxx xxxxxxxxx v chladničce xxx 0 xx 6 °C.
5.5.5 Xx 16xx xx 18xx xxxxxxxx inkubaci xxx 63 ± 1 °X xx xxxxxxxx xxxxx by suspenze xxxx měla xxxxxxxxx xxxxx životaschopných xxxxxxxxxxxxxx xxxx 5 x 10 miliony xx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx rovnoměrné xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx, měla by xx xxxxxxxx novou xxxxxxxx připravenou xx xxxxxxx xxxxxxx (5.4.2).
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx agarové médium (5.1.2), poté xxxxxxxx xx 55 °X.
5.6.2 Xxxxxx xxxx suspenze xxxxxxxxx spór (5.5.4) x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (5.6.1) xx xxxxxxxx xxxx x lahvičce. Důkladně xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx zkumavky xxxx xxxxxx (4.2.6) 0,3 xx naočkovaného xxxxx (5.6.2), xxx xx xxxxxxxxx 5 xx xxxxxx, xxxx uzavřít xxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx nebo, x xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx. Nechat xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxx zkumavky/ampule 12 xxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
5.6.4 Xxxxxxxx/xxxxxx xxxxx xxx použity týž xxx, xxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx 0–6 °X, xxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx ochlazeny.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxx se xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx do 24 xxxxx xx xxxxxx, x xx xx xxxx xx xxxxxxxx xxx teplotě 0-5 °X. Xxxxx není xxxxx xxxxxxxxx vzorky xx 24 xxxxx, xxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (−30 °xx - 15°X), xxx se xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.2 Čitelně x nesmazatelně xxxxxxxxxxxxx xxxxxx zkumavku/ampuli (5.6). Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx (4.1.3) xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx x testy (5.2 x 5.3).
6.3 Xx xxxxx zkumavky/ampule xxxxxx 50 xxxxxxxxxx xxxxxxx roztoku (5.1.4).
6.4 Xxxxxx mléka xxxxx xxxxxxxxx a mikrostříkačkou (4.1.4) přenést 0,1 xx vzorku xx xxxxxxxx zkumavky/ampule. Pro xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.5 Postup xxxxx xxxx 6.4 xx opakuje xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,004 μx/xx (= 0,0067 XX/xx) xxxxxxxxxx namísto vzorku xxxxx (5.2.3).
6.6 Xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.4 xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx použití xxxxxxxxxxx xxxxxx mléka xxx xxxxxxxxxxx látek (5.3) xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
6.7 Xxxxxxx zkumavky/ampule a xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxx xx nejméně 2½ xx 2¾ xxxxxx do xxxxx xxxxx x xxxxxxxx 63 ± 1 °X (4.1.2).
6.8 Xxxxxxx xxxxxxxx xx zkumavkami/ampulemi x xxxxx xxxxx.
6.9 Xxxxxxxxx xxxxx agarového xxxxx (viz 7).
7. Xxxxxxxxxxxx výsledků
7.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx zkumavkách/ampulích se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx testovacím xxxxxxx xxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx koncentraci "xxxxx xxxxxxxxx" uvedené x xxxxxxx na straně 39. Xxxxx zabarvení xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (6.5) zůstane xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2 Částečné xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxx mléka xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx koncentracemi uvedenými xx xxxxxx 39.
7.3 Xxxxx zabarvení xxxxxxxxx xxxxx ve zkumavkách/ampulích xxxxxxxxxxxx xxxxxx mléka xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx vzorek xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
7.4 Xxxxx xx purpurové xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx zkumavkách/ampulích, xxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol, zkumavky/ampule xxxxxxxxxx životaschopné xxxxx x vzorky xxxx xxx podrobeny xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx výsledků
8.1 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx popsanými x 7.1 x 7.2 xxxxx xxxxxx "X".
Xxxxx je xxxxxxxx xxxxxx xxxxx před xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, musí xxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X. Postup xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx koncentrace
1. Xxxxxxx x oblast použití
Tento xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx pro stanovení xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx (X.7.1) xxxx xxxxxxxxxx reakcí (A.7.2).
Citlivost xxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxxx
Xxx X.1.
2. Xxxxxxxx
2.1 Xxxxxx mléka xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx postupem xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx 2 xx xxxxx xxxxx.
2.2 Xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx antibiotika, xxxxxx xxxxxxxxxxx (2.1), x xx xxxxxxx byla xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxx), xxxxxxxxx čirou xxxx xxxx xxxxxxx čirou xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xx xxxxxx xxxx xxx penicilinázy, xxxxxxxxx látkou xx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
2.3 Pokud tato xxxx není xxxxxxxxxxxxx (2.2) xxxxxxxxxxxx, inhibiční xxxxxx ve xxxxxx xxxxx není xxxxxxxxx, xxx xxxx to xxx jiné reziduum [xxx xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx A, xxxxxxxx XX, A.1.f) x 2x)].
Xxxxxxx polosyntetické xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx nebo xxxx xxxxx částečně xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx xxx identifikovány jako xxxxxxxxxx (xxx 7.3).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx disk xxxxxxxxx xxxxxx, které xx xx vyšetřit, xx xxxxxx na xxxxxx agarového média xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx stearothermophilus xxx. calidolactis. Normální xxxx mikroorganismus xx xxxxxxxx narušuje xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxx x xxxxx xxxxxxxx látky xxxxxxxxx látky pro xxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx xxxx jiné xxxxxx xx koncentraci x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxx.
4. Xxxxxxxxx, pomůcky xx xxxx a vybavení
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Viz X.4.1.
4.1.2 Xxxxx lázeň, xxxxxxxxxxxx xx 80 ± 1 °X.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
Xxx X.4.2.
4.3 Xxxxxxxx xxxxx, neobsahující xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx 9 xx 13 mm, schopné xxxxxxxxxx xxx 130 xx mléka (xxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx).
5. Xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx, roztok xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx organismus xxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx musí xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Musí xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Voda xxxxx obsahovat inhibiční xxxxx xxx růst xxxxxxxxxxx organismu.
5.1 Xxxxxxxxxx xxxxx
5.1.1 Xxxxx agar (X.5.1.1)
5.1.2 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx inhibičních xxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx extrakt |
2,5 g |
|
Trypton |
5 x |
|
Xxxxxxx |
1 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx tetroxoprimu (X.5.1.3) |
10 xx |
|
Xxxx |
10–15 g xxxxx xxxxxxxxxxxx vlastností xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxx zahřívání x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxx, xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo tetroxoprimu xxxxxxx hodnotu xX, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx 8,0 + 0,1 xxx 25 °X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X.
5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx
Xxx X.5.2.
Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (8) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx v mléce xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (X.5.3) v xxxxxx xxxxxxxxxxxxx:
x) 0,004 μx/xx (0,0067 XX/xx)
x) 0,006 μx/xx (0,01 XX/xx)
x) 0,03 μg/ml (0,05 XX/xx)
x) 0,06 μx/xx (0,01 XX/xx).
5.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxx
5.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxx) xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 1000 X/xx. Xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx xxxxx, je xxxxx xxxxxxxxx až xxxxx týdny při 0 °X xx 5 °X.
Xxxxxxxx
Xxx penicilinázu xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx postupu xx xxxxxxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxx penicilinázy stačí xx inaktivaci 0,6 μx (= 1 XX) xxxxxxxxxx. U xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx nutné xxxxxxxxxxxx, zda xxxxx xxxxxxxxxx platí. X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.3.2 Xxxxxxx roztoku xxxxxxxxxxxx xx možné xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxx odpovídající xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx organismus
Viz X.5.4.
5.5 Testovací xxxxxxx (xxxxxxxx xxxx)
Xxx X.5.5.
5.6 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
5.6.1 Xxxxxx rozpustit xxxxxxx xxxxxx xxx detekci xxxxxxxxxxx látek (5.1.2), xxxx xxxxxxxx xx 55 xX.
5.6.2 Do xxxxx xxxxxx část xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx (5.5) x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x naočkovaném xxxxxxx xxxxx, x důkladně xxxxxxxxx.
5.6.3 Přenést xx xxxxxxxx Petriho misky (X.4.2.2), předem xxxxxxx xx 55 °C, xxxxxxxxxx xxxxxxx médium, xxx xx xxxxxxxxx 0,6 až 0,8 xx vrstva. Xxx Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx průměru 140 xx xx xxxxx xxx 15 xx xxxxxxxxx média, xxx xx vytvořila 0,8 xx xxxxxx.
5.6.4 Umístit Xxxxxxx misky xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx ztuhnout. Xx xxxxxxxx média, xxxxxx xxxxx na xxxxx x obrátit xx xxxx vzhůru, xxx xx xx xxxxxxxxx kondenzaci vody xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
5.6.5 Takto připravené Xxxxxxx misky se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx den, ale xxxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx, xxxxx se ihned xx xxxxxxxx vloží xx zataveného xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x uchovávají xx xxx 5 °X.
5.6.6 Označit xxx Xxxxxxx xxxxx, aby xxxx xxxxx identifikace xxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Příprava xxxxxx
6.1.1 U vzorků x xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx "xxxxxx X" (X.7.1 x X.7.2) musí xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx účelem xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx penicilinu.
6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx 10 xxxxx xx 80 ± 1 °C, xxx se vyloučil xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
6.1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx, poté přenést xxx 10 ml xxxxxx zahřátého xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx širokým hrdlem. X mléku xxxxxx xxx 0,4 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.3) x xxxxx xxxxxxxxx.
6.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
6.2.1 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx (4.3) xx vzorku xxxxx (6.1.2) pomocí xxxxx a xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx přebytečné xxxxx xxxxxxx xxxxx x lahvičku xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx (5.6) x lehce xxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.2.2 Disky napuštěné xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxx od druhého xxxxxxx 20 xx x xx okraje xxxxxxx 10 xx.
6.2.3 Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx disky (4.3) xxxxxxxxx standardním xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.2) xxxx xxxxxxxx rozmístit xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx 2 % xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx; při xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
6.2.4 Xx xxxxxxxxx rozmístění xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx, obrátit xxxxx dnem vzhůru x xxxxxx je xxxxxxxxx 2,5 xx 5 xxxxx při 63 ± 1 °X.
6.2.5 Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxx možné xxxxxxxxx čiré inhibiční xxxx xxxxx papírových xxxxx. Xxxx xxxx xx xxxxx.
6.2.6 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (6.2.3) xxxx xxxxx disku xxxxxxxx xxxxxxx 2 xx xxxx.
6.2.7 Xxxx xxxx xxxxx disků xxxxxxxxxxx vzorky mléka, xxxxxxx xxxxxxx je xxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx x 6.2.6, xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x testovacím xxxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
6.3.1 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx zahřátého xxxxx (6.1.2) a se xxxxxxx ošetřeným xxxxxxxxxxxxx (6.1.3). Namísto přidání xxxxxxxxxxxx xx 10 xx vzorku xxxxx xx xxxxx do xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (5.3.2) x xxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx.
6.3.2 Xxxxxx 6.2.1 xx provede xxxxxx xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x 5.2 x) xx x).
6.3.3 Xxxxxxxxx průměrný xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x pro standardní xxxxxxx penicilinu.
7. Interpretace xxxxxxxx (xxx 2)
7.1 Xxxxx xx kolem xxxxx napuštěném xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nevytvoří žádná xxxx xxxx, xxx xxxx xxxx xx xxxxxx kolem disku xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx penicilinu (5.2x)), xxxxxxxxx látka xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx krystalického xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx rovné xxxx xxxxx než 0,004 μx/xx.
7.2 Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx čiré xxxx xxxxx xxxxx nepuštěném xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx zóny kolem xxxxx se vzorkem xxxxx, xxxxx obsahuje xxxxxxxxx látky, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx penicilinázy použité x xxxxx xxxxxxx.
7.3 Xxxxx xx průměrná xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx penicilinázu xxxxx než xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx čiré xxxx kolem xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx podle 6.1.2, xxxxxx mléka xxxxxxxx xxxxxxxxx a antibiotika, xxxxxx xxxxxxxxxxx, a xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx penicilinázy xxxxxxx x xxxxx xx. Xxxxxxxxxx peniciliny, xxxx xx cloxacillin xxxxx, xxxxxxxx být xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx podmínek x xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx jako inhibiční xxxxx jiné xxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, inhibiční xxxxx xxxx než penicilin xxxxx xxx identifikovány xxxxxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx provedeno xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xx základě xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x mléce (5.2 x) xx x)).
8.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx log10 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxxxxxxxxx xxxxxx xxx sestrojit xx logaritmický papír xxxxxxxxxx koncentrací penicilinu xx pořadnici a xxxxxx xxx xx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx průměru xxxxxxxxxx xxxxx. Průměry xxxxxxxxxxx xxx se xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxxxx koncentrací penicilinu x xxxxxxxx se xxxxxxxxxx křivka.
8.3 Výpočet
Koncentrace xxxxxxxxxx xx vzorku xxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx vzorků xxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxx je poloměr xxxxxxxxxxx zón xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, avšak xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx poloměr disků.
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx vyšší než 0,004 μx/xx (nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace) xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx penicilin.
9.2 Opakovatelnost (x) x reprodukovatelnost (X)
Xxxxx nejsou x xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx v důsledku xxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
X souladu x požadavky xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx A, xxxxxxxx XXX xxxx 2, tento xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x pasterovaném xxxxx.
2. Definice
Vyšetření se xxxx xxxxxxx u xxxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx onemocnění xxxxxxxxxxxxx z xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx ošetření, které xxxxxxxxx xxxxx proti xxxxxxxxxxxxxxxxxxx patogenům. Xxxxx xxxx xxxxxxx normy xxxxxxxxx v xxxxxxx X, xxxxxxxx VII xxxxx 2 uvedené xxxxxxxx, xxxxx jde x počítání xxxxxxx xxx 30 °X x 21 °X, xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, specifický xxxx xx detekci patogeny xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx existuje xxxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx otravy xxxxxxxxxxx.
3. Postup
Postupy x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx vnitrostátní orgán xxxxxxx xxxxxxxx, který xxxxxx vydávání xxxxxxxxx x zdravotní nezávadnosti xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx Společenství. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx mikroorganismů xx, xxxxx existují, xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxxx úrovni.
4. Zpráva x xxxxxxxx
Xxx každý xxxxxxxxxxx patogenní xxxxxxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx:
Xxxxx xxxxx xx mililitr, xxxx "xxxxxxxxxx" xx "xxxxxxxxxxxx" x objemu xxxxxxxxxxxxx xxxxx, který xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx postup.