Xxxxxxxxxx Xxxxxx
xx dne 14. xxxxx 1991,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx analýzy x xxxxxxxxx syrového xxxxx x tepelně xxxxxxxxxx xxxxx
(91/180/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX SPOLEČENSTVÍ,
s xxxxxxx na Smlouvu x založení Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx xxxxxxxx Rady 85/397/XXX xx xxx 5. xxxxx 1985 x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx [1] naposledy xxxxxxxxxx xxxxxxxx 89/662/XXX [2], x xxxxxxx xx xx. 10 xxxx. 2 xxxxxxx směrnice,
vzhledem x xxxx, xx xxxxx xx. 10 xxxx. 2 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx analýzy x testování, které xx mají používat xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxx x tepelně xxxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, že xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx zejména xxxxxx xxx stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, obsahu xxxxx, xxxx xxxxxxx x přítomnosti antibiotik;
vzhledem x tomu, xx xxx pasterované xxxxx xx xxxxxxxx stanovit xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx patogenů, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx mikroorganismů, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx peroxidázy, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx xxx xxxxxxxxxxxxx mléko x XXX mléko xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx k tomu, xx x technických xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, které xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx kterých se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx; xx x očekávání xxxxxxxx těchto xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xx to, aby xxx xxxxxxxx norem xxxxxxxx 85/397/ES xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx stanovení referenčních xxxxx analýzy x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx postupů xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx jednotného xxxxxxx xxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, že opatření xxxxxx xxxxxxxxxx jsou x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
XXXXXXX XXXX ROZHODNUTÍ:
Článek 1
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 30 °C,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx antibiotik x xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 2
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx:
- stanovení xxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů při 30 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 21 °X,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií – počítání xxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 3
Referenční xxxxxxx xxxxxxx x testování xxx UHT xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx tyto:
- xxxxxxxxx xxxx mrznutí,
- stanovení xxxxxx mikroorganizmů xxx 30 °C,
- detekce xxxxxxxxxx x sulfonamidů.
Článek 4
Použití xxxxxxxxxxxx xxxxxxx analýzy x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx xx musí xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx X.
Xxxxxx 5
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x testování xxxxxxx x článcích 1, 2 x 3 jsou xxxxxxx x příloze II.
Xxxxxx 6
Xxxx xxxxxxxxxx xxxx přezkoumáno xx 31. xxxxxxxx 1992, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx znalostí.
Xxxxxx 7
Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X Xxxxxxx xxx 14. xxxxx 1991.
Xx Xxxxxx
Xxx Xxx Xxxxxx
xxxx Xxxxxx
[1] Xx. věst. X 226, 24.8.1985, x. 13.
[2] Xx. věst. X 395, 30.12.1989, x. 13.
PŘÍLOHA I
OBSAH
I. Xxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x tepelně xxxxxxxxxx mléka
I. XXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxx
Xxxxxx xxxxxxxxxx xx týkají činidel, xxxxxxxxx a xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a zpráv x testování. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx vzorků x xxxxxxxxxx mléka xxxx xxxxxxxxx tato xxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxx
2.1 Voda
2.1.1 Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx destilovaná, xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx odpovídající čistoty. Xxx mikrobiologické xxxxx xxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx nebo jinak xxxxxxxx růst xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx testovacích xxxxxxxx.
2.1.2 "Xxxxxxxxxxxx" xxxx "xxxxxxx" (xxx xxxxxxx xxxxxxxxx) xx xxxxxx "xxxxxxxxxxx xx xxxx" xxxx "xxxxxx vodou".
2.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, všechny xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Přístroje x xxxxxxx
3.1 Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x pomůcek xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx x pomůcek xx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.2 Xxxxxxxxxx xxxx
"Xxxxxxxxxxxx xxxxxx" se rozumí xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx 0,1 xx.
4. Vyjádření výsledků
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx xxxx stanoveno xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx, které splňují xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (5.1) xxx příslušnou xxxxxx. Xxxx xxxx toto xxxxxxxxx opakovatelnosti xxxxxxx, xxxx se musí xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx podílu
Pokud xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx hmotnosti xxxxxx.
5. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx
5.1 Kritéria xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx:
5.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) xx xxxxxxx, xxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx dvěma xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx získány xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (stejný xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxxx).
5.1.2 Reprodukovatelnost (X) xx xxxxxxx, xxx xxxxxx leží xxxxxxxxx rozdíl xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx postupem x týmž xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx za odlišných xxxxxxxx (xxxxx pracovníci, xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx x/xxxx různé xxxx).
5.1.3 Pokud xxxx xxxxxxxxx xxxxx, hodnoty xxx xxxxxxxx opakovatelnosti x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx 95 % intervaly xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx ISO 5725, xxxxx xxxxxx, 1986. Xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx pokusů, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxxx xxx hodnocení postupu. Xxx některé xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx. X xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx opakovatelnosti x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1.4 Xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x mezinárodními pokyny.
6. Xxxxxx o xxxxxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx použitý postup x získané xxxxxxxx. Xxxx xxxx musí xxxxxx xxxxxxx podrobnosti xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a všechny xxxxxxxxx, xxxxx by xxxxx ovlivnit xxxxxxxx. Xxxxxx o testování xxxxxxxx všechny xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx identifikaci xxxxxx.
XX. XXXXX XXXXXX XXXXXXXX X XXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXX
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro odběr xxxxxx syrového a xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxx vzorků xx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x pro xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx nádržích.
Postupy uvedené x xxxxxx 2, 4.4, 5 x 6 xx použijí xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx k přímé xxxxxxxx.
2. Xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka xxxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xxxx. provedou pověření xxxxxxxxxxx, kteří xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx to xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxx laboratoř považují xx xxxxxxxx, vyškolí xxxxxxxxxxx xxxxxxxx odběrem xxxxxx v metodách xxxxxx, aby xxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx reprezentativní x x souladu x xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx příslušné orgány xxxx testovací xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx vzorků x xxxxxxxxxx vzorků, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx
3.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxx odběr xxxxxx xxxx xxx xxxxx zhotoveno x xxxxxxxx xxxxx nebo x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx odolného xxxxxxxxx, xxx musí xxx xxxxxxxx s xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx, xxxxx vzorků, xxx.). Xxxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx x nádobách xxxx mít xxxxxxxxxx xxxxxx plochu xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx promíchání xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx. Naběračky xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx dlouhou xxxxxxxx x xxxxxxxx vzorků x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx alespoň 50 xx.
Xxxxxxxxxxx a xxxxx musí být xxxxxxxx, xxxxxx nebo x xxxxxxxx plastu.
Materiály xxxxxxx xxx výrobě xxxxxxxx xxx odběr xxxxxx (xxxxxx xxxxx x xxxxx) xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx výsledky testů. Xxxxxxx materiál a xxxxxx na xxxxxx xxxx xxx xxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx a xxxx mít xxxxxxxxxx xxxxx.
3.2 Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx (včetně xxxxx) musí xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx 3.1 x xxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxx se xxx xx xxxx jdoucí xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, musí xxx po xxxxxx xxxxxx xxxxxx vyčištěno x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx testovací xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx nedošlo k xxxxxxxxx výsledků xx xxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx
4.1 Xxxxxx xxxxx
Xxx xxxxxx xx testy, xxxxx xxxx xxx provedeny, xxxxx musí xxx xxxx xxxxxxx důkladně xxxxxxxxxx xxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx musí xxx odebrán ihned xx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxxx.
Xxxxx xx x nádrže xxxxxxx xxxxxxx více xxxxxx xxxxx pro xxxxx xxxxx, xxxx první xxxx xxx odebrán xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx potřebám xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx nádob xxxx xxx xxxxxx, xxx xxxx xxxx xxxxxx téměř xxxxxxxx xxxxxxx a xxx xxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxx hrozilo xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx.
4.2 Ruční xxxxx xxxxxx
4.2.1 Xxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxx xx xxxxx
X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx x dolů, xxxxxxx xxxx xx xx, aby xx xxxxx xxxxx promíchalo x xxx xx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Vzorek, xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx, xx odebere xxxxxxxx xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx dokud xxxx xxxxxxxx dostatečné xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx mechanické xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxx xxxxxx z misky xxx
Xx nezbytné, xxx xxxxx bylo xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxx xx xxxxx xxx. Za xxxxxx xxxxxxxxx rovnoměrného xxxxxxxxx xxxx může xxx xxxxxxxx další xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx zásilky, x xxx xx xx odebrat xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx, odebrat reprezentativní xxxxxx z xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.4 Odběr xxxxxx z rozdělené xxxxx
Xxxx je xxxxxxxx xxxxx, x něhož xx xx provést xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx, x každé xxxxxx xx xxxxxxx reprezentativní xxxxxxxx, přičemž xx xxxxxxxxx množství xxxxx xxx xxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxx z xxxxx xxxxxx nemusí xxx xxxxxxxx testovány, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx x množství, xxxxx xx nachází x xxxxxx, ze xxxxx xxx každý xx xxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xx odebere xxxxx (xxxx) xxxxxx (xxxxxx) x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
4.2.5 Xxxxx xxxxxx x velkých xxxxx – skladovací xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx
4.2.5.1 Xxxx xxxxxxx vzorků xx xxxxx vhodným způsobem xxxxxxxx.
X promíchání xxxxxx xxxxxxx nádob, skladovacích xxxxxx, xxxxxxxxxxxx kamionů xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx mechanické xxxxxxxxxx (4.2.5.2).
Xxxxx promíchání xxxxxx na xxxx, xx kterou bylo xxxxx v xxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx shodu xxxxxxxx xxxxx provedených xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx buď x různých xxxxx xxxxx, xxxx v xxxxxxxxxxxx intervalech xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx. Xxxxxx promíchání xxxxx (xxxxxxxx mléka xxxx plnotučného xxxxx) xx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxx obsahu xxxx u obou xxxxxx odebraných xx xxxxxx xxxxxxxx menší xxx 0,1 %.
Xx xxxxx nádobě s xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx ani xx xxxxxxxxxx není xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx zajištěna reprezentativnost xxxxxx.
4.2.5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx:
- mechanickou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx nádoby x xxxxxxxxx elektrickým xxxxxxx,
- vrtulí xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx elektrickým xxxxxxx x xxxxxxxxx x průlezovém otvoru; xxxxxxxx xx xxxxxxxx x mléce,
- x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx kamionů xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx mléka x xxxxxx přepravní hadici, xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx a xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- filtrovaným, xxxxxxxxx x čistým xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx a xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx vniku xxxxxx xxxxx.
4.3 Automatický x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx vzorků
Automatické x xxxxxxxxxxxxxxx vybavení xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx dodaného xxxxxxxxxx xx může xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx laboratoří xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx vybavení xxxx xxx xxxx a xxxxx používání xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx odběru xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x cílem xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx mléka, x xxxxx xxxx xxx xxxxxxx vzorek,
- poměr xxxxxxxxxx xxxxxxx (který xxxxxxx x minimálním xxxxxxx vzorku),
- schopnost xxxxxxxxxx reprezentativní xxxxxx x xxxxx po xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx může xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx objem xxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx,
- minimální objem xxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx, které xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.
4.4 Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka xxxxxxxx k xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx jde o xxxxxxx ošetřené mléko xxxxxx k přímé xxxxxx spotřebě x xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, vzorky xx xxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nádob. Xxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zařízení xxx ošetření, x xx, pokud xx xx xxxxx, xxxxx xx zpracování (x xxxxxxx pasterovaného xxxxx x xxx xxxxxxxxx).
X xxxxxxx xxxxx tepelně xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxxxxxx) se xxxxxxx takový xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, x xx podle xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx jiného xxxxxxxxxxx xxxxxx.
5. Identifikace xxxxxx
Xxxxxx xx měl být xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx jeho xxxxxxx xxxxxxxxxxxx podle xxxxxx xxxxxxxxxxxx laboratoří xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxx 2).
6. Xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx pokyny xxxxxxxx xx xxxxx x podmínek xxxxxxxx x skladování, které xxxx být xxxxxxxx x době xxxx xxxxxxx vzorků xxxxxx xxxxxxxxxx, a xx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx a xxxxxxxxx, xxxxx xx být xxxxxxx.
Xxxxxx stanoví xxxx:
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx třeba xxxx xx xx, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx-xx xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx testování xxxx xxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxx teplotách 0 xX xx 4 xX. Doba xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx musí xxx xx xxxxxxxxx a x žádném xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 36 xxxxx. Příslušný xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx teplota xxxxxxxxxx 0 xX až 6 xX, xxxx-xx xxxx xxxx odběrem x xxxxxxxxxx xxxxx xxx 24 hodin,
- xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx pro mikrobiologické xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 0 xX až 4 xX. Xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxxx a x xxxxxx případě nesmí xxxxxxxxxx 24 xxxxx,
- xxxx vzorky xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx a pasterovaného xxxxx určené xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx zařízení laboratoře x xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx je xxxxx přijmout pro xxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
XXXXXXX I
OBSAH
I. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx
XX. Xxxxxxxxx xxxxxxxx fosfatázy
III. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxx 30 °C
V. Stanovení xxxxxx mikroorganismů při 21 °X
XX. Stanovení xxxxxx koliformních bakterií – xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °C
VII. Xxxxxxxxx obsahu xxxxxxxxxxx xxxxx
XXXX. Xxxxxxx xxxxxxxxxx x sulfonamidů
IX. Detekce xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
X. XXXXXXXXX XXXX XXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx mrznutí plnotučného, xxxxxxxxxxx, odstředěného, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, XXX xxxxx xxxx sterilizovaného mléka xxxxxx xxxxxxxxx (termistorového xxxxxxxxx), v xxxx xx xxxxxxxxxxx řízená xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx snímač xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx. První typ xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx mrznutí, kdežto xxxxx xxx je x obchodních xxxxxx xxxxxxxx tak, xx xx začátku xxxxxxx xxxxxxx xx stanovenou xxxx xxxxxx. Xxxxxxxx x xxxx, xx xx xxxxx xxxxx xxxxx křivky bodu xxxxxxx xxxxxxx druhů xxxxx, xxx x xxxxxx bodu mrznutí xxxxx a standardních xxxxxxx použitých pro xxxxxxxxx, tento xxxxxxxxxx xxxxxx vyžaduje použití xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx časem se xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxx odhad podílu xxxxxxx xxxx vody x xxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx není vyšší xxx 0,18 x xxxxxxxx xxxxxx na 100 ml (xxx xxx 7.4).
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx x souladu x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx ve xxxxxxxx Xxxxxx (°X).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx vzorek xxxxx xx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vyvolá xxxx xxxxxxxxxxxx, která xxxxxxx, xx teplota xxxxxx xxxxxxx xx x xxxxx, xxxxx odpovídá xxxx xxxxxxx vzorku.
Přístroj xx kalibruje takovým xxxxxxxx, aby xx xxxxxxx xxxxxxxx jako xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx dva standardní xxxxxxx. Xx těchto xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx Celsia.
4. Xxxxxxxxx x pomůcky xx skla
Obvyklé xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xx skládá z xxxxxxxxxxx řízené xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx snímače (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx) x příslušným obvodem, xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxxx zařízení, xxxxxxxx xx vzorky x xxxxxxxx xx vyvolání xxxxxxx, jakož x xx zkumavek xx xxxxxx.
4.1.1 Chladicí xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx dva xxxx xxxxxxxx lázně.
4.1.1.1 Xxxxxxx xxx
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx, xxx teplotní rozdíl xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx v xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 0,2 °C. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx kolísat xxxxxxx x xxxxxxx ± 0,5 °X xx nominální xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx, xxx x xxxxx xxxx udržována konstantní xxxxxxx kapaliny. Celá xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx pod xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx kapalinou.
4.1.1.2 Xxxxxxxxxx typ
Kolem xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx vhodné xxxxxxxx xxxxxxxx. Teplota xxxxxxxx xxxx kolísat xxxxxxx x rozmezí ± 0,5 °X xx xxxxxxxxx hodnoty xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx je 33 % (X/X) xxxxx xxxxxx 1,2-xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx).
4.1.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xx skládá xx skleněné xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx 1,80 ± 0,2 xx x o xxxxxxx vodiče xxxxxxxxx 0,31 xx. Časová xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx 2 xxxxxxx a xxxxxxx x (xxx xxxxxxxx) xxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxxx, aby xxx − 0,512 °C xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx o 0,0005 °X. Maximální xxxxxxxxx xxxxxx xxxx být ± 5 %.
Když xx sonda x xxxxxxxxx v pracovní xxxxxx, xxxxx skleněné xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx x ose xxxxxxxx na xxxxxx x v bodě, xxxxx xx 44,6 ± 0,1 mm xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxxxxx xx xxxxxx 15). Xx třeba dodat xxxxxxxxxxx, aby se xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx této xxxxxx.
Xxxxxxxx:
β xxxxxxxx xxxxxxxx vlastnosti xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx
− xX / xX × 1 / X = β / X2
xxx:
X xx xxxxxxx ve xxxxxxxx Xxxxxxx
X je odpor x xxxxxx xxx xxxxxxx T,
− xX / xX × 1 / R xxxxxxxx xxxxxxxxxx
β xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx materiálu xxxxxxxx xxx výrobě xxxxxxxxxx. X xxxxx praxi xx doporučuje hodnota xxxxx než 3000.
4.1.3 Xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
4.1.3.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx mrznutí. Xxxxx xx část xxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxx xx ± 0,002 xX xx dobu xxxxxxx 20 xxxxxx.
4.1.3.2 Xxxxx obsluha
Odpor xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nebo podobným xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx je ± 10 % x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx není xxxxx xxx 2×10−5°C.
Proměnný (xxxxxxxxxxx) xxxxx se nesmí xxxxxxxx od xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx x více xxx x 0,3 % xxx maximální hodnoty.
Pro xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx dílky xx xxxxxxxxx 0,001 °X.
4.1.3.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx zařízení xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx 0,01 °X x rozmezí xx 0 °X xx –1 °C.
Stabilita xxxxxxxxxxx zařízení a xxxx xxxxxxxxxxx obvodu xxxx být taková, xxx xxxxxxxx dvou xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx než 0,001 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxx přístroje xxxxxxxxx x žádném xxxx xxxxxxx xx – 0,400 °X do – 0,600 °X xxxxx xxxxx xxx ± 0,001 °X.
4.1.4 Xxxxxxxx
Xxx míchání xxxxxxxxxxx xxxxxx xx použije xxxxxx drát x xxxxxxx 1 až 1,5 xx, který xxxxxxxxx s xxxxxx,.
Xxxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx xx rozkmit x umístěna xxxxxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Přípustná xxxxxxxxx xx xxx 1,5 xx nad xx pod xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x dostatečným xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx ± 1,5 xx), xxx byla xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx testovacího xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx míchání xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx okamžiku dotknout xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx.
4.1.5 Zařízení xx vyvolání xxxxxxx
Xxxx xx být jakékoli xxxxxxxx, xxxxx po xxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx testovacího xxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx. K xxxx xxxxx lze xxxxxx xxxxxxxx; xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx xxx xxxxxxx xxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxx stěny xxxxxxxx xx xxxxxx.
4.1.6 Xxxxxxxx xx vzorky
Zkumavky xx vzorky (viz xxxxxxx 1) jsou xxxxxxxx a 50,8 ± 0,1 mm xxxxxx; vnější xxxxxx xx 16,0 ± 0,1 xx a xxxxxxx xxxxxx je 13,5 ± 0,1 xx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxx xxx 0,1 xx.
Xxxxxxxx xxxx mít značku xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx 29,8 xx (21 xx xxx xxxx xxxxxxxx), xxxxx xxxxx objem xxxxxx 2,5 ± 0,1 mm.
4.1.7 Xxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxx xxx stabilizován xxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ± 1 % xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx x ± 6 %.
4.2 Analytické xxxx
4.3 Xxxxxxx baňky x xxxxxx 1000 ml, xxxxx X.
4.4 Xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 130 ± 1 °C
nebo
Elektrická pec, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 300 ± 25 °X.
4.5 Xxxxxxxxx
5. Xxxxxxx
5.1 Xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx skle, převařená x xxxxxxxxx xx 20 ± 2 °X, ve zkumavce xxxxxxxxxxx oxid xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx x.x., jemně xxxxx, xxxxxx 5 xxxxx xxx teplotě 300 ± 25 °X x xxxxxxxxxx peci xxxx nejméně 24 xxxxx při xxxxxxx 130 ± 1 °X v sušárně x xxxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx odpovídající xxxxxxxx (xxx xxxxxxx 1) suchého chloridu xxxxxxx (5.2) do xxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx vodě (5.1), xxxxxxxxxxxxx přelít roztok xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 1000 xx x doplnit xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx 20 ± 2 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx při asi 5 °X x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x maximálním xxxxxx 250 xx.
Xxx xxxxxxx roztoků xxxxxxxx xxxxxxx při 20 °X
|
x NaCl/l |
°C |
|
6,859 |
-0,408 |
|
7,818 |
-0,464 |
|
8,149 |
-0,483 |
|
8,314 |
-0,492 |
|
8,480 |
-0,502 |
|
8,646 |
-0,512 |
|
8,811 |
-0,521 |
|
8,977 |
-0,531 |
|
9,143 |
-0,541 |
|
10,155 |
-0,600 |
Před xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx promíchá xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Nikdy neprotřepávat xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxx se xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx standardního xxxxxxx xx z xxxxx xxxxxx xx xxxxx x čisté xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx z xxxxx, xxxxx xxxx xx xxx xxxxxxx prázdné, x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx dvou xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 10 g/l).
6. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx než 1 °X od xxxxxxx, xxx níž se xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx 26–27 °X.
Xxxxxxx xx, xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx a xx xxx zapnut xxxxxxx 12 xxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx míchačky a xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxx xxxxxxx xxxx), xxxxxxx bod xxxxxxx xx xxxxx xxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx hodnotou xxxx xxxxxxx xxxxxx mléka x xxxxxxxxx. Rozdíl xxxx body xxxxxxx xxxx roztoků xx xxxxxxx neměl xxx xxxxx xxx – 0,100 °C.
(U některých xxxx v xxxxxxxx xxxx dostupných xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx obvod xxxxxxxxxx xxxxxxxx tak, xx se xxxxxx xx xxxx hodnotě xxxx mrznutí v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx výběr xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx, jako xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxx).
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 ml jednoho xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx xx vzorky xxxxxxxxx při kalibraci xxxx vyrobeny x xxxxxxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx (xxxxxx druh xxxx, umyté x xxxxxxxxxx demineralizovanou vodou). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx kalibrace, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku. Xxxxxxxx tento postup x druhým xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x střídavě xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, dokud xx xxxx xxxxxxxxxxx odečty xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx správné hodnoty xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx, xxxx xx byla xxxxx xxxxxxxxx nastavení. Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx a xxxxx xxxxxxx bod xxxxxxx xxxxxx mléka, xxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxx úprava.
7. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
7.1 Xxxxx xx xx xxxxxxxx skladovat xxxxxx xxx xxxxxxx xxxx 0 °X x 5 °X.
7.2 Xxxxx xx je xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx všechna xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx tuhý xxxxxx xxx xx vzorku xx xxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxxxx opatrně xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx reagovat x mlékem x xxxx xxx xxxxxx xx laboratorní teploty.
7.3 Xxxxx může xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0 x 5 °X) xxxx je možné xx ohřát xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxx nezbytné xxxx xx xx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x vzorky mléka xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx teplotu.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Vzorky, jejichž xxxxxxxx xxxxxxxxx 0,18 x xxxxxxxx xxxxxx xx 100 ml xxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx.
7.5 XXX mléko x sterilizované mléko xxxx xxxx xxxxxxx 20 xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
8. Xxxxxx
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx, xxx hladina x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx x pokyny xxxxxxx, případně xxx xx xxxxx termistoru xxxxxxx x prázdné xxxxxxxx na xxxxxx. Xxxxxxx kryoskop x xxxxxxx se, zda xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxx zapnut xxxxxxx 12 xxxxx, zkontrolovat xxxxxxx chladicí xxxxxxxx, xxxxxx míchačky x xxxxxxxx rozkmit jeho xxxxxxx.
8.2 Xxxxxxx kontrola xxxxxxxxx
Xxxx každou xxxxx xxxxx xxxxx bod xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxx sodného (xxxxxxxxx xxxxxx s bodem xxxxxxx – 0,512 °X), xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx při xxxx po sobě xxxxxxxxxxxxx měřeních xxxxxxx xxxxx x více xxx 0,001 °X. Xxxxx se průměr xxxxxx xxxxxx xxxx xx bodu xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxx 0,002 °X, xxxxxxxx se xxxxx kalibrujte, jak xx xxxxxxx x xxxx 6.
Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx kalibrace xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxx xx zohlední xxxxxx xxxxxxx.
8.3 Xxxxxxxxx xxxx mrznutí xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxx opatrným protřepáním x několikerým xxxxxxxx. Xxxxx neprotřepávat xxxxxxxxxx xxxxxx xxx prudce, xxx xx xx xxxxxxx přimíchal xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx xxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx. Ujistit xx, xx jsou xxxxx a míchačka xxxxx a xxxxx, xxxxx je xx xxxxxxxx opatrně xx xxxxx xxxxxx odspoda xxxxxx xxxxxx, čistou x xxxxxx nepouštějící xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx kalibrovaného xxxxxxxxx xxxxx pokynů xxxxxxx. Mléko se xxxxxxx a xxxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx určené xxxxxxxx x xxxxxxxxx na 0,1 °X.
(X některých xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx tuto xxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; x xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx dosáhne xxx, xx se xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xx ručička xxxx nitka galvanometru xxxxx s příslušnou xxxxxxx.)
Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx mrznutí xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx teplotního xxxxxxx, xxxxxxxxx xx ukončí x xxxxxxxx xx x xxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx rovněž xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx vzorku se xxxxxxx na 45 °X x 5 xxxxx xx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx tuk.
Poté zchladit xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Teplota xxxxx po xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, x poté xxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx této xxxx x xxxx xxxxxxx xx nutné zaznamenat.
Poznámka:
Doba, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx konstantní, x xxxxxx interval mezi xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx maximální teploty, xx xxxx xxxxxx xx vzorku x xxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxx xxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xx měření xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx zkumavku, xxxxxxxxxx xx xxxxx x otřít xxxxx x míchačku xxxxxx xxxxxxx xxxxxx jemnou, xxxxxx x chlupy xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx druhé xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx body xxxxxxx xxxxx než xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (0,004 °X), provést xxxxx xxxxxxxxx x jiného xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx obou xxxxxxxxx xxxxxx xx 0,004 °X, zapíší xx x xxxxxxx se xxx xxxxxxx konečného xxxxxxxx.
8.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxxxx přístroje xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx na xxxxxx xx xxxxx xxx vzorky x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
(X xxxxxxxxx xxxx kryoskopu to xxxx možné; x xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx ujistit, xxx je sonda xxxx začátkem xxxxxx xxxxx zchlazena, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx slepých xxxxxxxxx, dokud se xxxxxxxxx shodné xxxxx.)
9. Xxxxxxxxx výsledků
9.1 Výpočet
Pokud xx po xxxxxxxxx xxxxxxx kontroly xxxxxxxxx xxxxxxxxx potvrzena, xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx bod xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx tři xxxxxxxxx místa.
Pokud xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx:
Xxx xxxxxxx (°X)
|
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx |
Xxxxxx |
|
|
-0,544 |
-0,545 |
-0,544 |
|
-0,545 |
-0,546 |
-0,546 |
9.2 Xxxxxxxxxxxx
9.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x): 0,004 °X
9.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X): 0,006 °X
Xxxxxxx 1
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1 (xxxxxx xxxxxxxx na vzorky xxxxxxxx xx skleněné xxxxxxx termistoru x xxxxxxxx)
XX. XXXXXXXXX AKTIVITY XXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx kapitola xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup xxx stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxx v pasterovaném xxxxx.
2. Xxxxxxxx
2.1 Aktivita xxxxxxxxx xx míra xxxxxxx xxxxxxxxx fosfatázy xxxxxxxx xx výrobku. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x μg xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxx, pokud xx xxxxx než 4 xx fenolu xx 1 xx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx dvojsodného. Xxxxxxxx xxxxx reaguje x dibromchinonchlorimidem x xxxxxxx dibromindofenolu (namodralé xxxxx), xxxxx se xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 610 xx. Xxxx xx xxxxxxx porovnání xx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx barnatého
4.1.1 Xxxxxxxxx xx xxxx 50,0 x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) [Xx(XX)2.8X2X] x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.1.2 Xxxxxxxxx xx xxxx 22,0 g xxxxxxxx xxxxxx (X3XX3) x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.1.3 Zahřát 500 ml každého xxxxxxx xx 50 °X, xxx xxxxxxx xxxxxxx, promíchat, xxxxxx xxxxxxxx xxx na 20 °X, x xxxxxxx nutnosti xxxxxxx xxxxxxx xX xx 10,6 ± 0,1 xxxxxxxx xxxxxxx 4.1.1 xxxx 4.1.2. Xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx uzavřené nádobě.
4.1.4 Xxxx použitím zředit xxxxxx stejným objemem xxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx zabarvení
Rozpustit xx vodě 6,0 x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XxXX2) nebo 12,6 x NaBO2.4H2O x 20,0 g xxxxxxxx xxxxxxx (NaCl) x xxxxxxx na 1000 xx.
4.3 Xxxxxxx roztok xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxx 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2) xxxxx na 100 xx.
4.4 Xxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx 0,1 x fenylfosfát xxxxxxxxx bezvodý, xxxxxx xxxxxx, xx 100 xx tlumivého xxxxxxx (4.1.3) nebo 0,5 x xxxxxxxxxxxx dvojsodného xx 4,5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2), xxxxxx dvě kapky xxxxxxx XXX (4.6) x xxxxxx xxxx 30 xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx. Vzniklé xxxxxxxxx extrahovat 2,5 xx x-xxxxxxxx x xxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx-1 xxxxxxxx. Xxxxxxx x odstranit xxxxxxx-1. V xxxxxxx xxxxxxxx se extrakce xxxxxxx.
Xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx; před xxxxxxxx xxxxxxx zabarvení x provést novou xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxxx, x to xxxxxxxx 1 xx xxxxxx roztoku xx 100 xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.3).
4.5 Sraženina xxxxx-xxx
Xxxxxxxxx ve xxxx 3,0 g síranu xxxxxxxxxxx (XxXX4 · 7X2X) a 0,6 x xxxxxx xxxxxxxxx (XxXX4 · 5X2X) x xxxxxxx xx 100 xx.
4.6 Xxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (roztok XXX)
Xxxxxxxxx x 10 xx 96 % (X/X) xxxxxxxx 40 ± 1 xx 2,6-dibromchinonchlorimidu (XXX) (X6X2Xx2XxXX6).
Xxxxxxxxx v xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx. Vyhodit roztok, xxxxx xxxxx xxxxx xxxx je xxxxxx xxx xxxxx xxxxx.
4.7 Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (XX)
Xxxxxxxxx ve xxxx 0,05 x síranu xxxxxxxxx (CuSO4.5H2O) x xxxxxxx xx 100 xx.
4.8 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx
4.8.1 Navážit 200 ± 2 xx xxxxxxx xxxxxxxxx fenolu x přelít xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 100 xx, xxxxxx vodu, xxxxxxxxx x xxxxxxx xx 100 xx. Xxxxx xxxxxx může xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx měsíců.
4.8.2 Zředit xxxxx 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxx, doplnit xx 100 ml x xxxxxxxxx. 1 xx xxxxxxxx 200 μx xxxxxx.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxxxx pomůcky xx xxxx, xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx vyčištěny. Doporučuje xx xxxxxxxxxxx čerstvě xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx parou.
b) Xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx mohou xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
5.1 Xxxxxxxxxx váhy
5.2 Xxxxx lázeň xxxxxxxxxxxx xx 37 ± 1 °C.
5.3 Spektrofotometr xxxxxx xxx xxxxxx xx vlnové xxxxx 610 xx.
5.4 Xxxxxxxx, 16 xxxx 18 × 150 mm, xxxxxxx odstupňované xx 5 xx x 10 ml.
5.5 Pipety
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx. x xxxxxxx 5 xx.
5.7 Xxxxxxxx xxxxxx o xxxxxxx nejméně 9 xx xxx střední xxxxxxxx filtrace.
5.8 Odměrné xxxxx xxx přípravu xxxxxxxxxxxx roztoků.
6. Postup
Poznámky:
a) Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx přímého xxxxxxxxxx xxxxxx.
x) Xxxxx slin xxxx potu mohou xxxxxxxx xxxxxxx pozitivní xxxxxxxx x je xxxxx se xxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx pipetování.
6.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x chladničce, xxxxx xx xxxx xxx xxx xxx.
6.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx pipety xxxxxx 1 ml xxxxxx xx každé xx xxxx xxxxxxxx (5.4), xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx slepý xxxxx.
6.3 Xxxxxxxxx
6.3.1 Xxxxx vzorek xxxxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxxx vodě; xxxxxxxx a xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx hliníkovou xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxx zkumavka. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.2 Po xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx slepý x testovací xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx 10 ml xxxxxxx xxxxxxxxx (4.4) a xxxxxxxxx.
6.3.3 Xxxxxx ihned xxxxxxxxx 60 xxxxx xx xxxxx xxxxx (5.2) x xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
6.3.4 Xxxxxx xxxx x xxxx 6.3.1 zahřívat xxx xxxxxx xx xxxxxx xxxx. Rychle xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.5 Xx každé xxxxxxxx xxxxxx 1 ml xxxxxxxxx zinek-měď (4.5) x xxxxx promíchat.
6.3.6 Xxxxxxxxxxxx přes xxxxx xxxxxxxxx papír, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx x v xxxxxxx xxxxxxxx filtrovat xxxxx, xxxxx není xxxxxxx xxxxxxxx čirý; shromáždit 5 xx xx xxxxxxxx.
6.3.7 Xxxxxx 5 xx tlumivého xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2).
6.3.8 Xxxxxx 0,1 xx xxxxxxx XXX (4,6), xxxxxxxxx a 30 minut nechat xxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.9 X xxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxx slepým pokusem xxxxxx absorbanci xxx xxxxxx délce 610 xx.
6.3.10 Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxx 6.3.9 xxxxxxxxx absorbanci xxxxxxxxxxxx xxxxxxx obsahujícího 20 μx xxxxxx xx xxxxxxxx podle xxxx 6.4.4, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx vzorku. Xxxxxxxxx xxxxxxx smícháním xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxx objemem části xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx varu, xxx xx inaktivovala xxxxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxxxx kalibrační xxxxxx
6.4.1 Na základě xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (4.8.2) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx standardních xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0 (xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx), 2, 5, 10 x 20 μx xxxxxx xx xxxxxxxx. Do xxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxx pomocí xxxxxx 1 xx xxxx x 1 xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
6.4.2 Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.7), 5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.3), 3 xx xxxx x 0,1 xx xxxxxxx XXX (4.6); xxxxxxxxx.
6.4.3 Xxxxxx vyvíjet xxxxxxxxx 30 xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
6.4.4 X xxxxxxxxx x kontrolním xxxx slepým xxxxxxx xxxxxx absorbanci při xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.4.5 Xx základě xxxxxx xxxxxxxxxx (6.4.4) xxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx fenolu (6.4.1) xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7. Vyjádření výsledků
7.1 Xxxxxxx a xxxxxx
7.1.1 Xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (6.3.9) vypočítat xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx přímky (6.4.5).
7.1.2 Xxxxxxxxx aktivitu fosfatázy xxxxxxxxxx v μx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx vzorce:
Aktivita fosfatázy = 2,4 × X × X
xxx
X xx xxxxxxxx fenolu x μx získané xxxxx bodu 7.1.1;
D xx faktor zředění xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 6.3.10 (x případě xxxxxxx xxxxxxx X = 1).
2,4 je xxxxxx xxxxxxx (5/12 x 1 xx xxxxxxxxxxx xxxxxx) – viz 6.2 xx xxxxxxxxxx x 6.3.2, 6.3.5 x 6.3.6.
7.2 Xxxxxxxxxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) : 2 μg fenolu/ml.
7.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) : 3 (xxxxxxxxx) μx xxxxxx/xx.
7.2.3 Pokud xx xxxxxxx provede xxxxx 6.3.10, xxxxxx xxxxxxx x 7.2.1 x 7.2.2 se týkají xxxxxxxx získaných ze xxxxxxxxx xxxxxx.
XXX. STANOVENÍ XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx, který xxxxxx xx xxxxxxxx pasterace.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx reakce xx xxxxxxxxxx:
Xxxxx je xxxxx xxxxx pasterováno, do 30 sekund xx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xx peroxidázu:
Do 30 xxxxxx po promíchání xx xxxxxxxx žádné xxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx vodíku. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxx (Štorchův xxxx). Intenzita xxxxxxxxx xx xxxxx úměrná xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Činidla
4.1 Xxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx x xxxxx vodě (50 °C) 2 x 1,4 fenylendiaminu (X6X8X2) a xxxxxxx xx 100 xx. Xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxx x xxxxx, x tmavě hnědé xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xx připravení xxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, kterou je xxxxxx odstranit.
4.2 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx zředit 9 xx 30 % xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx 100 xx. Pro xxxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx na xxxx xxxxxxx.
Xxxxxx peroxidu xxxxxx xx xxxxx asi xxxxx měsíc, xxxxx xx xxxxxxxxx v xxxxxx x xxxxx, x xxxxx xx xxxxxxxxx zátkou, xxxxx xxxxxxx jakémukoli xxxxx x organickými látkami.
5. Xxxxxx
5.1 Dát 5 xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
5.2 Xxxxxx 5 xx xxxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx (4.1).
5.3 Xxxxxx 2 xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.2).
5.4 30 xxxxxx xx promíchání xxxxxxxx zabarvení. Pokud xx modré zabavení xxxxxx xxxx než 30 xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, reakce xxxx xxxxxxxxxx.
XX. STANOVENÍ XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXX 30 °X
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx při 30 °C. Xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx, pasterované xxxxx, XXX mléko xxxx xxxxxxxxxxxxx mléko, xxxxx xxxx 15 xxx xxxxxxxxxxxxx při 30 °C.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx počitatelné xxxxxxx xx aerobní xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Princip
Smíchat xxxxxxxxx xxxxx vzorku mléka x xxxxxxxxxxx médiem x Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx inkubovat 72 hodin xxx 30 °C. Spočítat xxxxxxx x vypočítat xxxxx mikroorganismů xx 1 xx syrového xxxx pasterovaného xxxxx xxxx na 0,1 xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx XXX xxxxx.
4. Přístroje a xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx sušárna, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °C.
4.1.4 xX-xxxx xx zařízením xxx kompenzaci xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 jednotky xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, nastavitelná xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, zvětšení 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Xxxxxxxx schopná xxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x 9 xx ředicího xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx skla
4.2.1 Xxxxxxxx x vhodnými xxxxxxx x dostatečným xxxxxxx, s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx k promíchání 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxxxx ředění.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx 20 xx xxx skladování xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, s nepoškozeným xxxxxx, x nominálním xxxxxx 1 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 mm.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxxxxxxx skla xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, dno misek xx xxxxxxx xxxxxx xxx 90 xx 100 xx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx by xxxx xxx nejméně 10 xx. Xxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx by xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx:
Xxxxxxx ze xxxx xx sterilizují xxxxxx x xxxxxx postupů:
a) x horkovzdušné sušárně (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx při teplotě 170–175 °X;
x) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx při xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx použití xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxx zajištěno xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xxxxxx by xxxxxx xxx napevno xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx se xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Kultivační xxxxxx – xxxx xx xxxxxxx mlékem
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx extrakt |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx (+) nebo xxxxxxxx |
1,0 g |
|
Sušené xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 g |
|
Agar |
10–15 g xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 ml |
Sušené xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx průkazně xxxxx inhibiční xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, glukózu x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Ohřev xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx x za stálého xxxxxxx xxxxx do xxxx, xxxxx xx xxxx zcela xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx v xxxx asi 30 xxxxx.
Xxxxx xx je xxxxxxxx, přefiltrovat xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); pokud xx xx nezbytné, xxxxxxx xX, roztokem (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx sodného xxxx xxxxxxxx chlorovodíkové, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °C.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 ml xx xxxxx xxxx xx 12 xx 15 xx xx zkumavek (4.2.2). Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx.
15 minut xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, skladuje xx v xxxxx xxx xxxxxxx mezi 1 a 5 °X, xxxxx xx xxxx než 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx dehydrované xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx médium (5.1) xx může xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xX xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X metodou xxxxx xxxx 5.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxx médium xxxxx bodu. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Xxxxxx xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 ml |
Příprava:
Rozpustit xxxxxx xx vodě, xxxxx xx xx nutné, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH pH-metrem (4.1.4); xxxxx xx xx nezbytné xxxxxxx xX xxxxxxxx (nejméně 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
6.2 Xxxxxxxxx, sterilizace x skladování xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) do xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx po xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx obsahovala 9,0 ± 0,2 xx ředidla. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx sterilizovat x autoklávu (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x temnu xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx po jeho xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx dehydrovaná xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) se xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx tablet xxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx výrobce. Upravit xX xxxxxxx xxxxx xxxx 6.1, xxxx xxxxxxxx, sterilizovat x xxxxxxxxx ředidla xxxxx xxxx 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx rozpustit xxxxxxxx xxxxxxxx kultivačního xxxxx a zchladit xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °C.
7.2 Xxxxxxxx vzorku xxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx nejrovnoměrněji xxxxxxxxx, x xx 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxx zabránit tvorbě xxxx xxxx xxxx xxxxxx rozptýlit. Doba xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku xx xxxxxx překročit xxx xxxxxx.
7.3 Příprava xxxxxxxxxx xxxxxx (10-1) (xxxxxx x pasterované xxxxx)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx pasterovaného xxxxx xx 9 xx xxxxxxx (6.1), přičemž xxxxxx xxxxx přijít xx kontaktu x xxxxxxxx. Teplota xxxxxxx xxxx být přibližně xxxxxx jako teplota xxxxxx mléka. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ředění xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx desetinných xxxxxx (syrové a xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) přenést 1 xx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx xxxxxx x xxxx 7.3.
Získá xx xxx ředění 10−2.
X xxxxx získat xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx postup opakuje xxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Petriho misek
7.5.1 Xxxxxx xxxxx: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx vzorku x/xxxx xxxxxxxx desetinného xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx dvě xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 ml xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Pro xxxxx xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.5.3 XXX mléko x xxxxxxxxxxxxx mléko (vyšetřované xx 15 denní xxxxxxxx xxx 30 °X – xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx X xxxxxxxx XXX bod 5):
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx do misky (4.2.4) 1 ml xxxxxx xxxxx (7.2). Xxxxxxxxx dvě xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx kultivačního xxxxx
Xx xxxxx naočkované misky xxxxx asi 15 xx 18 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx rozložení xxxxxxx.
Xxxx xxxx koncem xxxxxxxx xxxxxx mléka x xxxxxxxxx, xxxxx druhu xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx ředění s xxxxxxxxxxx médiem xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx xxxx na xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, dokud xxxxxx xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx obrácené dnem xxxxxx. Neskládat na xxxx xxxx než xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx inkubátoru.
Inkubovat 72 ± 2 xxxxx při 30 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx x Xxxxxxx miskách xxxxxxxxxxxxxx více než 300 kolonií.
Misky xxxxxxxx xxx xxxxxxxx světle. Xxx xxxxxxxxx počítání xxx použít zvětšovací xxxx (4.1.6) a/nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx koloniemi. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx provést xxxxxxx průzkum pomocí xxxxxxxxxxxx xxxx s xxxxxx zvětšením (4.1.7), x cílem xxxxxxx xxxxxxx xx cizích xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx misky, xxxxxxxx xxxxxxx x nepostižené xxxxx misky x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx misku. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx plochy xxxxx, xxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxx x vyjádření xxxxxxxx
8.1 Syrové x xxxxxxxxxxx mléko
8.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx obsahujících 10 xx 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.1.2 Xxxxxxxxx xxxxx mikroorganismů xx 1 xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
∑X / (x1 + 0,1x2) x
xxx:
∑X ΣC xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 8.1.1.
(x1 + 0,1 x2)x xx xxxxx xxxxxxxxxxxx vzorku, xxx:
x1 xx počet xxxxx xxx prvním ředěním
n2 xx počet misek xxx druhém xxxxxx
x xx xxxxxx zředění, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
Xxxxx se zaokrouhlí xx xxx platné xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxx):
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 x 28 kolonií
Počet/ml: = 278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2
= 6290,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.1.3 Xxxxx xxxx všechny xxxxx xxxxx xxx 10, xxxxx, že xxxxx mikroorganismů xx xxxxxxxx je "nižší xxx 10 x x", xxxxxxx "d" xx xxxxxxxxxx hodnota xxxxxxxxxx xxxxxxx zředění.
8.1.4 Xxxxx jsou xxxxxxx xxxxx vyšší xxx 300 x xxxxxxxx xx xxxxx, xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx zředění. Výsledek xxxxxxxx xxxx "Xxxxxxxxxx xxxxx mikroorganismů xx xx".
8.2 UHT xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xxxxx xxx 10 xxxxxxx xx 0,1 xx se xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/EHS.
9. Spolehlivost
Výsledky xxxxxxxxxxx uznaných xxxxxxxxx xxxxx xxxxx nejsou x dispozici.
V. STANOVENÍ XXXXXX MIKROORGANISMŮ XXX 21 °C
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx technikou xxxxxxxx kolonií xxx 21 °C x xxxxxxxxxxxx mléce, xxxxx xxxx pět xxx xxxxxxxxxxxxx xxx 6 xX s xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx psychotropními xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxx se x xxxxx při 6 °C.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx po xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Princip
Inkubovat pasterované xxxxx xxx dní xxx 6 °X. Xxxxxxx stanovený xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx 25 xxxxx xxx 21 °X. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx pasterovaného mléka.
4. Xxxxxxxxx x pomůcky xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °C.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx udržovat xxxxxxx:
x) 6 ± 0,2 °X
x) 21 ± 1 °X xx všech bodech xxxxxx.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx xxx kompenzaci xxxxxxx, přesný na ± 0,1 jednotky xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxxxx sklo, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, zvětšení 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Míchačka xxxxxxx xxxxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx ředění x 9 xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx na principu xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Pomůcky ze xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx objemem, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx ředění.
4.2.2 Xxxxx x objemu 150 xx 250 xx nebo xxxxxxxx x xxxxxx 20 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média.
4.2.3 Pipety (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, s xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx objemu 1 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Petriho xxxxx x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx nebo xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxx má xxxxxxx xxxxxx xxx 90 xx 100 x. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx 10 xx. Xxx nesmí xxx xxxxx nerovnosti, xxxxx by bránily xxxxxxxx kolonií.
4.2.5 Sterilizace xxxxxxx xx xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx hodinu xxx xxxxxxx 170–175 °X;
x) x autoklávu (4.1.2), nejméně 20 xxxxx při teplotě 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx autoklávu xx nutné xxxx xx xx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx páry: pokud xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx uzavřeny, xxxxxxx nebo xxxxx xx měly být xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx – xxxx se xxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 g |
|
Trypton |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx(+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 g |
|
Sušené xxxxxxxxxx mléko |
1,0 x |
|
Xxxx |
10-15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx agaru |
|
Voda |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx žádné xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxx srovnávacími xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, které xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X tomto xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx suspenze usnadňuje xxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx a xxxxx xx xxxx za xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx agar zcela xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx x xxxx xxx 30 xxxxx.
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx papír.
Zkontrolovat xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xX, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx sodného xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx sterilizaci xxxx jeho xxxxxxx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °C.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Rozdělit xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 xx xx xxxxx xxxx xx 12 xx 15 ml xx xxxxxxxx (4.2.2). Xxxxx x zkumavky uzavřít.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx se x xxxxx při xxxxxxx xxxx 1 x 5 °C, xxxxx xx déle xxx 1 měsíc po xxxx přípravě.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kultivační xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) se xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Dodržet xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxx odstředěné xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx složkou xxxxxxxx.
Xxxxxxx xX xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X xxxxxxxx xxxxx xxxx 5.1, xxxx rozdělit, sterilizovat x xxxxxxxxx kultivační xxxxxx podle bodu. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Xxxxxx xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 g |
|
Chlorid xxxxx (XxXx) |
8,5 g |
|
Voda |
1000 ml |
Příprava:
Rozpustit xxxxxx ve xxxx, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xX-xxxxxx (4.1.4); pokud xx je xxxxxxxx xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 mol/l) xxxxxxxxx sodného nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx sterilaci xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx ředidlo (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx xx xxxxxxxxx každá xxxxxxxx xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X. Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxx.
Xxxxx xx ředidlo xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x temnu xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx ne déle xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) xx může xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx. Xxxxxxx pokyny xxxxxxx. Upravit xX xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx podle xxxx 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Rozpuštění xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx potřebné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx mléka
7.2.1 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx [4.1.3 x)] uzavřené xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx xx xxxx xxxxx, reprezentativní xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx 100 ml po xxxx 120 ± 2 xxxxx xxx 6 ± 0,5 °X.
7.2.2 Xx xxxxxxxx xxxxxx mléka xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx nejrovnoměrněji xxxxxxxxx, x xx 25 xxxxxxxx otočeními xxxxxx xx xxxxxxx. Xx nutné xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx rozptýlit. Xxxx xxxx xxxxxxxx x odběrem xxxxxxxxxxx xxxxxx by xxxxxx xxxxxxxxx tři minuty.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx ředění (10−1)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xx 9 xx xxxxxxx (6.1), přičemž xxxxxx xxxxx přijít xx kontaktu x xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx jako xxxxxxx xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx promíchávat xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx se xxx xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx xxxxxx x xxxx 7.3.
Xxxxx xx xxx xxxxxx 10−2.
X xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx tak xxxxxx, dokud xxxxx xxxxxxxx přiměřené xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx do xxxxx (4.2.4) 1 xx vzorku x/xxxx xxxxxxxx desetinného ředění. Xxxx xxx vyšetřena xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx jednu xxxxxxx misku.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Do xxxxx xxxxxxxxxx misky xxxxx xxx 15 xx 18 ml xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Ihned xxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxx po xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x smícháním, xxxxx druhu mléka, xxxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx x kultivačním xxxxxx nesmí překročit 15 xxxxx.
Xxxxxx stát xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Petriho xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx inkubátoru (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx nahoru. Xxxxxxxxx na sebe xxxx než šest xxxxx. Xxxxxxx misek xx nesmějí xxxxxxxx xxxxxxx, ani xxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx a xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 25 xxxxx při 21 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 300 kolonií.
Misky xxxxxxxx xxx xxxxxxxx světle. Xxx usnadnění xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) a/nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx xxxxx dbát xx to, xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx sraženin x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxxxxxxxxx skla s xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x cílem xxxxxxx xxxxxxx od xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx tvořící povlak xx xxxxxxxx za xxxxx kolonii. Pokud xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x nepostižené xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx odpovídající počet xxx xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pokrývají více xxx xxxxxxxx plochy xxxxx, xxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Použít xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.2 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxx xxxxxx xxxxxx:
∑X / (x1 + 0,1n2) x
xxx:
ΣX xx celkový xxxxx kolonií xxxxx xxxx 8.1,
(x1 + 0,1 n2)d je xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx:
x1 je počet xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx
x2 je xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx
x je xxxxxx xxxxxxx, na xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx počty.
Počet xx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxx. Když xx zaokrouhlovaná číslice xxx, zaokrouhlit xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxx:
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 x 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; =278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2=
=629 / 0,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.3 Xxxxx xxxx všechny xxxxx xxxxx než 10, xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx "xxxxx než 10 × d", xxxxxxx "d" xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
8.4 Pokud xxxx všechny počty xxxxx xxx 300 x počítání xx xxxxx, provést xxxxx x vynásobit jej xxxxxxxxxxx hodnotou xxxxxxx xxxxxxx. Výsledek xxxxxxxx xxxx "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xx".
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x dispozici.
VI. XXXXXXXXX XXXXXX KOLIFORMNÍCH XXXXXXXX – XXXXXXXX XXXXXXX XXX 30 °X
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx stanovení koliformních xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx počítání xxxxxxx xxx 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx bakterie, xxxxx xxx 30 °X vytvářejí charakteristické xxxxxxx nebo necharakteristické xxxxxxx, xxx jsou xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx objem xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx a 24 xxxxx nechat xxxxxxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x, xxxxx to xx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx necharakteristických xxxxxxx xxxxxxxxxxx jejich xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx laboratorní xxxxxxxx, zejména:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx udržovat xxxxxxx 30 ± 1 °X.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, přesný xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, nastavitelná xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx platina-iridium xxxx nikl-chróm.
4.2 Pomůcky xx skla
4.2.1 Zkumavky x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 20 xx, aby xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (5.2) x Xxxxxxxxx trubičky vhodné xxxxxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 ml xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média (5.1).
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx hrotem, x xxxxxxxxxx objemu 1 – 10 xx, s xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx, bezbarvého xxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx materiálu, xxx misek xx xxxxxxx xxxxxx xxx 90 až 100 x. Vnitřní xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx 10 xx. Xxx xxxxx xxx žádné xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx teplotě 170 – 175 °C;
b) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx autoklávu xx xxxxx xxxx na xx, aby bylo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: pokud xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxx, tyto nádoby xx neměly xxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx xxx volné.
Pomůcky xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x autoklávech xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx páry.
Pipety xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx médium
5.1 Xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx x laktózou (XXXX xxxx). Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
7 g |
|
Kvasnicový xxxxxxx |
3 x |
|
Xxxxxxx (C12H22O11.H2O) |
10 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
5 g |
|
Žlučové xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxxxx xxxxxx |
0,03 x |
|
Xxxxxxxxxx violeť |
0,002 g |
|
Agar |
10 xx 15 x xxxxx želírovacích xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 ml |
Příprava:
Suspendovat x xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxx minut. Xxxx xxxxxxxx promíchat.
Zkontrolovat xX pomocí xX-xxxxx (4.1.4); pokud xx xx xxxxx, xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 mol/l) xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, aby xx xxxx byla xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxx xxxxxx xx xxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx po xxxxxxxxxx 100 až 150 xx do xxxxxxxxxx xxxxx (4.2.2). Kultivační xxxxxx zchladit xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
X xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média (6.4).
Použít xxxxxxxxxx xxxxxx do xxx hodin xx xxxx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxx xxxx x brilantovou xxxxxx. Konfirmační xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
10 g |
|
Laktóza (C12H22O11.H2O) |
10 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxxx žluč |
20 x |
|
Xxxxxxxxxxx zeleň |
0,0133 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx a xxxxx xx varu.
Zkontrolovat pH xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx, upravit xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,2 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx xxxxxx xx 10 xx xx zkumavek (4.2.1) xxxxxxxxxxxx Durhamovy xxxxxxxx. Zkumavky xxxxxxx.
15 xxxxx sterilizovat v xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx média.
Pokud xx xxxxxxxxxx xxxxxx nepoužije xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kultivační xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx může připravit x xxxxxxxxxx dehydrovaného xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx výrobce. Xxxxxxx xX, rozdělit, sterilizovat x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx 5.1 x 5.2.
6. Xxxxxx
6.1 Kultivační xxxxxx
Xxxxxx xxxxxx (VRBL xxxx) xxxxxxx x xxxx 5.1.
6.2 Příprava xxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxx řádně xxxxxxxxx, aby byly xxxxxxxxxxxxxx xx nejrovnoměrněji xxxxxxxxx, x to 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx se vzorkem. Xx nutné zabránit xxxxxx pěny xxxx xxxx xxxxxx rozptýlit. Xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx by xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx misek
Sterilní xxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) 1 xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxx misek (4.2.4) x tím xxxxxxxxx 3 xx xxxxxx xxxxx (6.2).
6.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx misky xxxxx xxx 12 xx XXXX xxxxx (6.1)
Xxxxx xx xxxxxx xxxxx promíchat xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxx x rovnoměrnému xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx koncem xxxxxxxx xxxxxx mléka x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx nenaočkovanou xxxxx x 12 xx xxxxx XXXX xxxxx, xxxxx byl xxxxxx xxx naočkování xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx vodorovném, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx médium xxxxxxxx.
Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx nejméně 4 xx XXXX xxxxx (6.1) xx povrch xxxxxxxxxxxx média.
Nechat ztuhnout.
6.5 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx dnem xxxxxx. Xxxxxxxxx na sebe xxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx nesmějí xxxxxxxx xxxxxxx, ani xxx x kontaktu se xxxxxxx x xxxxxx xxxxx inkubátoru.
Inkubovat 24 ± 2 xxxxxx xxx 30 ± 1 °X.
6.6 Xxxxxxxx xxxxxxx
6.6.1 Xxxxxxx kolonie x Xxxxxxx miskách xxxxxxxxxxxxxx více než 150 xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx červené xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx 0,5 xx, x xxxx xxx sraženiny xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.6.2 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (např. xxxxx xxxxx, xxxxxxxx nebo xxxx tvar sraženin xxxxxxxx x charakteristickým xxxxxxxx), provést xxxxxxxxxxx xxxx (6.7).
6.7 Konfirmační xxxx
Xxxxx údajů x xxxx 6.6.2 xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxx (xxxx. 3 až 5) xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx kolonií tím, xx xx xxxxxx xxxxxxxx jehly (4.1.6), xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx agar x xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.2). Xxxxxxxxx xxxxxxxx 24 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °C.
Za kolonie xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx kolonie, xxxxx x Durhamově xxxxxxxx xxxxx xxxx.
7. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 150 kolonií.
7.2 Xxxxx xx provede xxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií xx xxxxxxx procentuálního xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx mléka podle xxxxxx vzorce:
ΣC / x
xxx:
ΣX je celkový xxxxx kolonií xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (7.1 v xxxxxxxxxxx xx 7.2), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (6.3).
n xx xxxxxxxx vyšetřovaného xxxxxx (6.3) x xxxxxxxxxxx (3 xx).
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx dvě xxxxxx číslice, pokud xxxxxxxx xxxx xxx 100 kolonií. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx sudá.
Pokud xxxx všechny xxxxx xxxxx xxx 150 xxxxxxx, uvést výsledek xxxx "odhadovaný xxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií na 1 ml".
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx uznaných xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
XXX. STANOVENÍ XXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX
Xxxx xxxxxxxx popisuje xxx xxxxxxxxxx postupy pro xxxxxxxxx somatických xxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxxx metoda
B. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxx postup popisuje xxxxxxxxxx postup xxx xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx buněk xx xxxxxx xxxxx za xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx správnosti xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx X.1).
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx buňkami xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, jejichž xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
3. Xxxxxxx
Xxxxxx 0,01 xx xxxxx na 1 xx2 povrchu xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx vrstva xx xxxxxx x xxxxxxx. Počítání xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx somatických xxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxxx se vynásobí xxxxxxxxx faktorem, x xxxxx xxxxxx počet xxxxx na 1 xxxxxxxx.
4. Xxxxxxx
Xxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x..
Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxx xxxx |
0,6 x |
|
Xxxxxxx – 99 % |
54 xx |
|
1,1,1-xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx |
40 xx |
|
Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx |
6 xx |
Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Příprava x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx uskutečnit x xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx v xxxxx xxxxxxx a 1,1,1-trichlorethan xxxx xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxx xx xxxxx xxxxx xx 60 xx 70 °X. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx promíchat, 12 xx 24 xxxxx xxxxxxx x chladničce xxx 4 °X x přidat xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx o xxxxxxxxx velikosti xxxx 10 až 12 xxxxxxx x uchovat xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx láhvi. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx.
5. Přístroje x xxxxxxx xx xxxx
5.1 Mikroskop xxxxxxxxxx xxxxxxxx 500 × xx 1000 ×
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx umožňující dávkování xx 0,01 ml x přesností xxxxxxx ± 2 %.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxx 20 xx × 5 xx xxxxxxxxxx pro tenkou xxxxxx xxxx standardní xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 20 × 5 xx xxx xxxxxx xxxxxx.
5.4 Horizontální xxxxx xxxxx (30 °X až 50 °X) xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5 Xxxxxxxxxx (xxx) pro xxxxxx xxxxx xxxxxx.
5.6 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 30 xx 40 °X xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
5.7 Xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 0,01 xx.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx. Během xxxxxxxxxx nesmí xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 6 °X. Xxxxxx xxxxx xxx zmražen.
6.2 Xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxx xx vodní xxxxx (5.6) xx 30 xx 40 °X. Xxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx na xxxxxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx mikrostříkačka (5.2), xxxxxxxxx 20 °X.
6.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) například xxxxxxxxx, vysušit xxxxxxx, xxxxx nezanechává xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Skladovat v xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx (5.2) xxxxxxx 0,01 xx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxxxx vnější xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx styku x mlékem. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) a xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (20 xx × 5 xx). Xxxx xx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx vrstvu xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (5.4) xx xx xxxxxxx vysušení.
U xxxxxxx xxxxxx mléka xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx.
6.5 Xxxxxxx tenkých xxxxxx
Xxxxxxx xx 10 xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4). Sušit x, xxxxx xx xx nezbytné, vysoušení xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.5). Xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx, xxxxx se přebytečné xxxxxxx zcela xxxxxxx. Xxxxx sušit x xxxxxxx xxx, xxx xxx chráněn xxxx xxxxxxx.
6.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (500 × xx 1000 ×) xxxxxx xxxxxx mikroskopického xxxx (5.7).
7. Počítání x xxxxxxx
7.1 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxxxxxx (5.1). Xxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx, x xx xxxxxx jádra, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x x xxxxx xx x xxxxxxxxxxxxxx poli xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxx nebo pole xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx vrstvy x xxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxx, které xxxx vybrány pouze x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx vrstvy. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx vrstev x tudíž x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx kontrolovány xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx buněk, xxxxx xx xxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx x xxxx, xx počítání somatických xxxxx xxx mikroskopem xxxx být xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a mechanických xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx vzorků nesmí xxx vyšší než xxxxxxxx koeficient xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx koeficient xxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx 400000 xx 600000 xxxxx/xx xx xxxxx xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxx somatických xxxxx, xxxxx xx xxxxx v každém xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx podle Xxxxxxxxxx xxxxxx rozdělení xxxxxxx 400, aby xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx opakovatelnosti.
Podle Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
X = X = x2,
xxx:
X xx střední xxxxxxx
X xx xxxxxxx
x je xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx:
XX = x × 100 % / X xxxx XX = 100 % / x&xxxx;xxxx XX = 100 % / OBR
M (xxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (buněk), které xxxx xxxxxxxxx (například 400 xxx CV = 5 %).
7.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxxxx 0,01 xx xxxxx xx pracovní xxxxxxx vypočítá xxxxx xxxx 7.3.1 nebo 7.3.2.
7.3.1 Xxxxxxxx xxxx xx tenké vrstvě
Délka xxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx, xx 5 mm. Xxxxx xxxx xxxxxxxx průměru xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, jak xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7).
Pracovní xxxxxx = 20 × 100 / x × x
xxx:
x xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x mm, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxxxxxx stupnicí (5.7)
x xxxxxxx počet spočítaných xxxx.
7.3.2 Počítání xxxxxxxxxxxxxxx xxxx ve xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx
xxx:
x je průměr xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xx, stanovený podložním xxxxxxxx x mikrometrickou xxxxxxxx (5.7)
x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
7.4 Xxxxxxx xxxxxx xxxxx
X xxxxx získat xxxxx xxxxx na ml xxxxx, se xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (7.1 a 7.2) xxxxxxxx pracovním xxxxxxxx (7.3).
7.5 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxx 7.2) nesmí xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx může po xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (viz X.1) používat xxx xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxx xxxxx x syrovém xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxx xxxxxxxx konzervace.
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxx buňkami rozumějí xxxxxxx, xxxxx mají x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx XXX minimální xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxx xxxxxx (xxxxxxxxx 0,2 xx) se xxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx a x xxxxxxxxxxxxxx roztokem. Xxxx xxxx xxxxx xx xxxx přenese ve xxxxx tenké xxxxxx xx xxxxxxx disk, xxxxx xxxxxx jako xxxxxxxx sklíčko.
Každá buňka xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx v xxxxxxxx xx mililitr.
4. Xxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx p.a.. Xxxxxxx voda je xxxxxxxxxxx nebo deionizovaná, xxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.1 Xxxxxxx roztok
Složení
|
Hydrogenftalat xxxxxxxx |
51,00 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxx |
13,75 x |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx(xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 xx |
|
xX 5,7 xx 5,9. Xxxxxxx xxxxx xx 10000 xx. |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx ve xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx.
4.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (zásobní roztok)
Složení
|
Ethidiumbromid |
1,0 x |
Xxxxxxx vodou xx 1000 ml.
Příprava:
Rozpustit ethidiumbromid xx xxxx. Skladování xx vzduchotěsně xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx před xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx dva xxxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx xxxxxx)
Xxxxxxx 20 ml xxxxxxxxx xxxxxxx (4.2) x xxxxxxxx xxxxxxxx (4.1) xxx, xxx xx získal objem 1000 ml. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx používán xxxx xxx xxxx xxx.
4.4 Xxxxxxx roztok
Složení
|
Tlumivý roztok (4.1) |
10 ml |
|
Polyethylenglykol-mono-p(1,1,3,3-tetramethylbutyl)-fenylether (xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 xx |
|
Xxxxxxx x 25 % xxxxxxxxxx |
25 xx |
Xxxxxxx xxxxx xx 10000 xx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxxxxx složky. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx dní.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx xx xxxxxxx vztah xxxx xxxxxxx částic, které xx mají xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxx provádí. Xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx obsah buněk xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X).
5.2 Xxxxx xxxxx, x xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxxx na 40 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxx, s xxxxxxx uzávěrem, xxxxx xxx 15 xx.
6. Xxxxxx xxxxx
6.1 Vzorek xxxx být skladován xxx nízké xxxxxxx xx zkumavce (5.3). Xxxxx vzorek xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxx provést xx po xxxxxxxx 24 hodin po xxxxxxxx, xxxxx obsah xxxxxxxxxxxxxx by xxx xxxxxx xxxxx. Skladovací xxxxxxx nesmí překročit 6 °X.
6.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xx 24 xxxxx. Xxxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx co xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
6.2.1 Chemická xxxxxxxxxx xxxxxx se provede xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx:
- xxxxxxxx orthoboritá:
konečná xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx 0,6 x na 100 xx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx teplotě 6 xx 12 °X;
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx draselného xx vzorku xxxxx xxx xxxxx než 0,2 x xx 100 xx. Takto xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 72 xxxxx xxx xxxxxxx 6 xx 12 °X;
- azid xxxxx:
xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx azidem sodným x xxxxxxx xxxxxxxxxxx 0,024 x/100 xx, xxxxx xx vzorek xxxxxxxx na xxxxxxx 6 až 12 °X xxxxx xx xxxx odběru x xxxxxxxx do 48 xxxxx xx xxxx xxxxxx;
- xxxxxxxx:
xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx 0,05 g/100 ml, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx na xxxxxxx 6 xx 12 °X xxxxx xx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx do 72 xxxxx xx jeho xxxxxx.
6.2.2 Vzorek, xxxxx xxx xxx konzervován xxxxxxxxx boritou, xxxx xxx ještě konzervován xxxxxxx až 48 xxxxx xxxxxxxxxxxxx draselným.
Poznámka:
Pokud xxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx sodným, xxxx být dodrženy xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx odpadních vod.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx, xx xx nadojení skladuje xxxxxxx 24 xxxxx xxx xxx 2-6 °X. Počítání xxxxxx x xxx nadojení xx bez xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx být xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx přesto xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (viz 6.2.1).
7.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxx 7.1) nebo xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx (5.2) na xxx 40 °X. Xxxx skladovat xxxxxx xxx xxxxxxxx teplotě xx xx xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx počítacího xxxxxxxx (5.1) xx 15 xxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 7.2). Bezprostředně xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, aby xx xxxxxxx co xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx rozdělení xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx provedeny x xxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x) a reprodukovatelnosti (X) mezinárodních kruhových xxxxx nejsou x xxxxxxxxx.
Xxxxx, které xxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxx úrovni, umožňují xxxx odhady:
(1) xxxxx xxxxx xxxx 400 000 až 500 000 xxxx:
- xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxxxxxxxx:
xx = 20000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx variačnímu koeficientu 5–4 %)
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx reprodukovatelnosti:
sR = 40000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx variačnímu xxxxxxxxxxx 10–8 %)
9. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx správnosti xx provádí pomocí xxxxxx o známém xxxxxx buněk, který xx xxxxxxx počítáním xxxxx xxx mikroskopem xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
XXXX. DETEKCE XXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXX
XXXXXXX A XXXXXX XXXXXXX
Xxxx kapitola xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx detekce xxxxxxxxxx x sulfonamidů v xxxxxxx xxxxx x x xxxxxxx ošetřeném xxxxx.
Xxxxx referenční xxxxxx xxxxxxxx:
X. Kvalitativní postup
Tento xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, který xxxxxxxx xxxxxx vzorky xxxxx, xxxxx obsahují xxxxxxxxxxx x sulfonamidy. Xxxxxxxxxx xxxxxx je jedním x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xx použití Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx, XXXX 10149, co xx testovacího organismu. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx.
X. Xxxxxx xxx konfirmaci x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx pro konfirmaci xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx identifikaci xxxxxxxxxx x stanovení jeho xxxxxxxxxxx.
X. Kvalitativní xxxxxx
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx a x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx koncentrace xxxx vyšší než xxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx antibiotik a xxxxxxxxxxx [1]
|
Xxxxxxxxx xxxxx |
||
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxx |
|
|
Xxxxxxxxxxxxxxx |
0,002 |
0,006 |
|
Xxxxxxxxx |
0,002 |
0,005 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,015 |
0,035 |
|
Xxxxxxxx |
0,006 |
0,011 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,10 |
0,40 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,20 |
0,45 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxx |
0,15 |
0,50 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
7 |
15 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx |
4 |
13 |
|
Xxxxxxxx |
1 |
22 |
|
Xxxxxxxxx |
9 |
28 |
|
Xxxxxxxxxx |
0,06 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxx |
1 |
2,25 |
|
Xxxxxxxxx |
0,01 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,01 |
0,1 |
|
Xxxxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxxx) |
0,5 |
1 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2 g |
|
|
Pepton |
5 x |
|
|
Xxxxxx extrakt |
1 x |
|
|
Xxxxxxx xxxxx |
5 x |
|
|
Xxxx |
10–15 g |
|
|
Voda |
1000 xx |
|
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx. Upravit pH xxx, aby xx xxxxxxxxxxx xxxx jeho xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx xx 10 xx xx zkumavek xxxx xx 100 xx xx xxxxxxxx x naklonit x xxxxx získat xxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx 15 minut xxx 121 ± 1 °X.
5.1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxx xxxxx |
2 x |
|
Xxxx |
15 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx tetroxoprimu (viz 5.1.3) |
10 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx složky xx xxxx, x xxxxxxxx trimethoprimu xxxx xxxxxxxxxxxx. Za občasného xxxxxxx xxxxx do xxxx. Xxxxxx trimethoprim xxxx tetroxoprim x xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °C. Xxxxxxx xX, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx jeho xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.1.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx tetroxoprimu
Složení:
|
Trimethoprim |
5 xx |
|
xxxx Xxxxxxxxxxx |
30 mg |
|
96 % Xxxxxxx |
5 xx/30 ml |
|
Vodado |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx (5 nebo 30 xx) x doplnit xxxxx.
5.1.4 Živný xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
0,75 xx |
|
Xxxxxxx |
5,0 xx |
|
Xxxxxxxxx xxxxx |
8,0 xx |
|
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx |
0,025 x |
|
Xxxx |
50 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx roztok x xxxxxxxxx, xxxxx xx xx nutné, xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Živný xxxxxx xx xxxxxxxx v xxxxxxxxx.
5.2 Standardní xxxxxxx xxxxxxxxxx
5.2.1 Xx sterilní xxxxx s vhodným xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x 60 μx/xx (100 IU/ml), x xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx sodného xxxx xxxxxxxxxx ve xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
5.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx roztok xxxxxxxxxx vložením 1,25 xx roztoku xxxxxxxxxx (5.2.1) sterilní xxxxxxxxxxx xxxx x doplnit xx xx 1000 xx. Xxxxx pracovní xxxxxx xxxxxxxx 0,075 μx xxxxxxxxxx/xx (= 0,125 XX/xx).
5.2.3 Xxxxxxxxx 75 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,004 μx penicilinu/ml (= 0,0067 IU xxxxxxxxxx/xx) přidáním 4 xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2.2) xx 71 xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek (5.3).
5.2.4 Xxxxxxx penicilinu xxxxxxx xxxxx xxxx 5.2.1 až 5.2.3 xx měly xxx xxxxxxxxxx v xxx xxxxxxxxx xxxxx.
5.3 Xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx inhibičních xxxxx xxxxxxxxxxx sušeného odstředěného xxxxx (10 % x/X) xx vodě, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek. Xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx mléka, xxxxx bylo xxxxxxxxxx x prohlášeno za xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx; xxxx mléko xx xxxxxxx xx lahví x zahřívá xx xxxxx hodinu xx 100 °C, xxxx xx uloženo xx xxxxxxxxxx s teplotou 0 °X až 6 °X na xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
5.4 Testovací organismus
5.4.1 Xxxx xxxxxxxxx organismus xx použije Bacillus xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx XXXX 10149 Xxxx XXXX 10149 je xxxxxxxxx s kmenem X 953.
5.4.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx testovací xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx šikmém xxxxxx xxxxx (5.1.1). Xxxxx agar xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx aerobně xxxxxxxx 48 xxxxx xxx 63 ± 1xX. Po xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx sterilní xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx kultura xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx xxx 0 xx 5 xX.
5.5 Xxxxxxxxx kultura (suspenze xxxx)
5.5.1 Asepticky xxxxxxx 20 xx xxxxxxx xxxxx (5.1.1) xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx (4.2.2) a nechat xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5.2 Sterilní xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx kulturou (5.4.2) x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx spóry xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx spór xx xxxxx xxx 0 xx 5 °X x xxxxxxx xx xx 36 hodin.
5.5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxx (5.5.2) xx Petriho misku (5.5.1) x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx zahnuté xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx 16 xx 18 hodin xxx 63 ± 1 °X (4.1.1).
Při xxxxxxx xxxxxxx kultury (5.4.2) nebo kultury xxxxxx 36 xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx dvakrát x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 36 hodin.
5.5.4 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxxx xxxx xx Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (5.5.3) x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxx (4.2.3) xxxxxxxxxx 250 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vody. Xxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx. Kultury, které xxxxxx ihned přeočkovány, xx se měly xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 0 až 6 °X.
5.5.5 Xx 16xx xx 18xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 63 ± 1 °X xx agarovém xxxxx by xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx 5 a 10 xxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxx spór xxxx vykazovat rovnoměrné xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx by xx nahradit xxxxx xxxxxxxx připravenou ze xxxxxxx xxxxxxx (5.4.2).
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx
5.6.1 Nechat xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (5.1.2), xxxx zchladit xx 55 °X.
5.6.2 Xxxxxx xxxx suspenze xxxxxxxxx xxxx (5.5.4) x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx média (5.6.1) xx zkumavce xxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx (4.2.6) 0,3 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.6.2), xxx se xxxxxxxxx 5 xx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx zátkou xxxx xxxxxx nebo, x xxxxxxx ampule, zatavením xxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx 12 xxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
5.6.4 Xxxxxxxx/xxxxxx xxxxx xxx použity xxx xxx, xxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx při 0–6 °X, xxxxx xxxx ihned po xxxxxx přípravě xxxxxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Vzorky xx xx xxxxxxxx otestují, xxxxxxx do 24 xxxxx xx odběru, x xx xx xxxx xx skladují xxx xxxxxxx 0-5 °X. Pokud není xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx 24 xxxxx, xxxx by se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (−30 °až - 15°X), xxx se xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.2 Čitelně x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx (5.6). Xxxxxxxxx víčko xxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (4.1.3) xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx x testy (5.2 a 5.3).
6.3 Xx xxxxx xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxx 50 xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (5.1.4).
6.4 Xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx a mikrostříkačkou (4.1.4) přenést 0,1 xx xxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx každého xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.5 Xxxxxx xxxxx xxxx 6.4 xx opakuje xxxxxxx xxxxxxxx za použití xxxxxxxxxxxx xxxxxxx penicilinu xxxxxxxxxxxx 0,004 μg/ml (= 0,0067 IU/ml) xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx (5.2.3).
6.6 Xxxxxxxx xxxxx bodu 6.4 xxxxxxxx stejným způsobem xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek (5.3) xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
6.7 Xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx 2½ xx 2¾ xxxxxx do xxxxx xxxxx s xxxxxxxx 63 ± 1 °X (4.1.2).
6.8 Xxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxx/xxxxxxxx x vodní xxxxx.
6.9 Xxxxxxxxx barvu agarového xxxxx (xxx 7).
7. Xxxxxxxxxxxx výsledků
7.1 Purpurové xxxxxxxxx agarového xxxxx xx zkumavkách/ampulích se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx antibiotik xxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxx x koncentraci xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx "xxxxx xxxxxxxxx" uvedené x xxxxxxx xx xxxxxx 39. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx roztokem penicilinu (6.5) xxxxxxx purpurové, xxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2 Částečné xxxxxxxxx xxxxxxxx agarového xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx zkumavkách/ampulích xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxx x koncentracích xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx 39.
7.3 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx vzorek xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx mléka xxxxxxx xx nepřítomnost xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxx organismu.
7.4 Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx zkumavkách/ampulích, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Xxxxxxxx xxxxxxxx všech xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx x 7.1 x 7.2 xxxxx xxxxxx "X".
Xxxxx xx nezbytné xxxxxx xxxxx před xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx, aby xx zabránilo poškození xxxxxxxxxx.
X. Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tento xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, jakož xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx ve xxxxxxxx mléka x xxxxxxxxx (A.7.1) nebo xxxxxxxxxx xxxxxx (A.7.2).
Citlivost xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx
Xxx X.1.
2. Xxxxxxxx
2.1 Xxxxxx xxxxx obsahuje xxxxxxxxxxx, včetně sulfonamidů, xxxxx xxxxxxxx postupem xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx nejméně 2 xx xxxxx xxxxx.
2.2 Xxxxx vzorek, který xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, včetně xxxxxxxxxxx (2.1), x xx kterému xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (beta-laktamáza), xxxxxxxxx čirou zónu xxxx vytvoří xxxxx xxxx menšího xxxxxxx xxx xx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xx xxx penicilin xxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
2.3 Xxxxx xxxx xxxx není xxxxxxxxxxxxx (2.2) inaktivována, xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxx může xx xxx xxxx xxxxxxxx [xxx xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx X, xxxxxxxx XX, X.1.x) a 2x)].
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx cloxacillin xxxxx, xxxxxx xxxx xxxx xxxxx částečně xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxx x xxxxxxx xxx identifikovány jako xxxxxxxxxx (xxx 7.3).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx disk xxxxxxxxx xxxxxx, které xx xx xxxxxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxx agarového média xxxxxxxxxxxx Bacillus xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. calidolactis. Xxxxxxxx xxxx mikroorganismus xx xxxxxxxx narušuje agarové xxxxxx. Xxxx xxxx xxxxx disku xxxxxxx, xx xxxx v xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xx koncentraci x xxxxx inhibiční xxxxx v xxxxx.
4. Xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx x xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Viz X.4.1.
4.1.2 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 80 ± 1 °X.
4.2 Pomůcky xx skla
Viz X.4.2.
4.3 Xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky, x xxxxxxx 9 xx 13 xx, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx 130 xx xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxx x exsikátoru).
5. Xxxxxxxxxx média, xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx testovací xxxxxxxxxx xxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx musí být xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx skle xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx voda xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1 Xxxxxxxxxx xxxxx
5.1.1 Živný xxxx (X.5.1.1)
5.1.2 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxx detekci xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 g |
|
Trypton |
5 x |
|
Xxxxxxx |
1 g |
|
Roztok xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx (X.5.1.3) |
10 xx |
|
Xxxx |
10–15 x podle xxxxxxxxxxxx vlastností agaru |
|
Voda |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxx zahřívání x xxxxxxx zcela rozpustit xxxxx xxxxxx ve xxxx, xxxx přidat xxxxxx trimethoprimu nebo xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xX, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx 8,0 + 0,1 při 25 °X. Sterilizovat xxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X.
5.2 Xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxxxx v xxxxx
Xxx X.5.2.
Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (8) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxx inhibičních xxxxx (X.5.3) x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx:
x) 0,004 μx/xx (0,0067 XX/xx)
x) 0,006 μx/xx (0,01 XX/xx)
x) 0,03 μx/xx (0,05 XX/xx)
x) 0,06 μg/ml (0,01 IU/ml).
5.3 Roztok xxxxxxxxxxxx
5.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxx) xx sterilní destilované xxxx s xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 1000 X/xx. Xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, je xxxxx xxxxxxxxx až xxxxx týdny při 0 °C až 5 °X.
Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Pro účely xxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx 0,6 μx (= 1 XX) penicilinu. X xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx tento xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxx proto xxxxxxx xxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxxxx.
5.3.2 Namísto xxxxxxx xxxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, že xxxxxxxx odpovídající xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.4 Testovací xxxxxxxxxx
Xxx X.5.4.
5.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxx)
Xxx X.5.5.
5.6 Xxxxxxxx Petriho xxxxx
5.6.1 Xxxxxx rozpustit agarové xxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), xxxx zchladit xx 55 xX.
5.6.2 Xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx (5.5) k nezbytnému xxxxxxxx částí agarového xxxxx pro detekci xxxxxxxxxxx látek (5.1.2), x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x naočkovaném agarové xxxxx, a xxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.6.3 Přenést xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx (X.4.2.2), xxxxxx xxxxxxx xx 55 °X, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xx vytvořila 0,6 xx 0,8 xx vrstva. Pro Xxxxxxx xxxxx o xxxxxxxx průměru 140 xx je třeba xxx 15 ml xxxxxxxxx média, xxx xx xxxxxxxxx 0,8 xx xxxxxx.
5.6.4 Xxxxxxx Xxxxxxx xxxxx na xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx vodováhou, xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx médium xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx média, xxxxxx xxxxx na xxxxx x xxxxxxx xx xxxx xxxxxx, xxx xx na xxxxxxxxx xxxxxxxxxx vody xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
5.6.5 Xxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx ještě xxx xxx, xxx xxxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx, xxxxx xx ihned xx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xx xxx 5 °X.
5.6.6 Xxxxxxx xxx Xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 X xxxxxx x pozitivním nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx "xxxxxx X" (X.7.1 x X.7.2) xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx účelem xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx 10 xxxxx na 80 ± 1 °X, xxx xx vyloučil xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
6.1.3 Důkladně xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxx 10 ml xxxxxx zahřátého mléka xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx širokým xxxxxx. X xxxxx xxxxxx xxx 0,4 ml xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.3) x řádně xxxxxxxxx.
6.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxx látek
6.2.1 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx (4.3) xx xxxxxx xxxxx (6.1.2) xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx přebytečné xxxxx otřením xxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx Xxxxxxx misky (5.6) x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.2.2 Xxxxx napuštěné xxxxxxx vzorky xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 20 xx x xx xxxxxx xxxxxxx 10 xx.
6.2.3 Xxx kontrolu xxxxxxxxxx xx disky (4.3) xxxxxxxxx standardním roztokem xxxxxxxxxxxx (5.2) xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx vzorky xxxxx x xxxxxx xxxxxxx 2 % xxxxx xxxxx xx xxxxxx mléka; při xxxxxx testu se xxxxxxx nejméně pět xxxxxxxxxxxx disků.
6.2.4 Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx agarové xxxxxx x po xxxxxx xxxxxxxxxxxx, obrátit xxxxx xxxx vzhůru x nechat je xxxxxxxxx 2,5 až 5 hodin při 63 ± 1 °X.
6.2.5 Po xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx při xxxxxxx zdroji světla, xxx xxxx možné xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx papírových xxxxx. Xxxx zóny xx xxxxx.
6.2.6 Standardní xxxxxx penicilinázy (6.2.3) xxxx kolem xxxxx xxxxxxxx nejméně 2 xx zóny.
6.2.7 Čiré xxxx kolem disků xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxx větší xxx xxxxxxxx xxxxxxx x 6.2.6, xxxxxxx xx přítomnost xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.3 Identifikace x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek
6.3.1 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (6.1.2) x se xxxxxxx ošetřeným penicilinázou (6.1.3). Namísto xxxxxxx xxxxxxxxxxxx do 10 xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx do xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx napuštěný xxxxxxxxxxxxx (5.3.2) a uložit xx na xxxxxxxxx xxxxx.
6.3.2 Xxxxxx 6.2.1 xx provede xxxxxx xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x 5.2 x) xx x).
6.3.3 Xxxxxxxxx průměrný xxxxxx xxxxxx inhibičních xxx xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx penicilinázy x xxx standardní xxxxxxx xxxxxxxxxx.
7. Interpretace xxxxxxxx (xxx 2)
7.1 Xxxxx se xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nevytvoří xxxxx xxxx xxxx, ale xxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx disku xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx velká xxxx xxxxx xxx zóna xxxxx disku xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx penicilinu (5.2x)), inhibiční xxxxx xx vzorku mléka xxxxxxxx koncentraci xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx než 0,004 μx/xx.
7.2 Pokud xx xxxxxxxx hodnota xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxx nepuštěném xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx kolem xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx obsahuje xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx penicilinázy xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx.
7.3 Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx průměru xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx penicilinázu xxxxx xxx průměrná xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx mléka xxxxxxxxx podle 6.1.2, xxxxxx mléka obsahuje xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, a xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, který nelze xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxx xx. Xxxxxxxxxx peniciliny, xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx, nemusejí xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx podmínek x xxxxx xxx tudíž xxxxxxxxxxxxx jako xxxxxxxxx xxxxx jiné xxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx
Xxxxx to xx xxxxxxxx, inhibiční xxxxx xxxx xxx penicilin xxxxx xxx identifikovány xxxxxxxx xxxxxxx.
8. Stanovení xxxxxx xxxxxxxxxx
8.1 Stanovení xxxxxx xxxxxxxxxx může xxx provedeno xxx xx xxxxxxxxxx standardní xxxxxx, xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx získaných xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx (5.2 x) xx d)).
8.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx log10 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxxxxxxxxx xxxxxx lze xxxxxxxxx xx logaritmický xxxxx xxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx xxx xx xxxxxx. Inhibiční xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx průměru xxxxxxxxxx xxxxx. Průměry inhibičních xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xx základě xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx penicilinu x zakreslí xx xxxxxxxxxx křivka.
8.3 Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xx základě xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx nebo xx xxxxxxx xx standardní xxxxxx. Pro xxxxxx xxxxxxxxx xx poloměr xxxxxxxxxxx zón nejméně xxxxxxx větší, avšak xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx poloměr xxxxx.
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Výsledky xx vyjadřují xxxx xxxxx penicilinu xxxxx xxxx xxxxx xxx 0,004 μx/xx (xxxx xxxxxxxx stanovené xxxxxxxxxxx) xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx penicilin.
9.2 Xxxxxxxxxxxxxx (x) x xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X)
Xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx x jsou xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx standardu při xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
X xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx X, xxxxxxxx XXX bodu 2, tento xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Definice
Vyšetření xx xxxx xxxxxxx u xxxxxxxx, které jsou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx proti xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx splněny xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx X, kapitole XXX xxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx x počítání kolonií xxx 30 °X x 21 °C, xxxxxxxxxx bakterie x xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx test xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx pouze xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, že mléko xx xxxxxxx spojitost xx propuknutím xxxxxx xxxxxxxxxxx.
3. Postup
Postupy x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, který xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x zdravotní xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx obchod xxxxxx Xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx patogenních mikroorganismů xx, xxxxx existují, xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx přijaté xx xxxxxxxxxxx úrovni.
4. Zpráva x xxxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxxx patogenní xxxxxxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx:
Xxxxx xxxxx xx mililitr, nebo "xxxxxxxxxx" xx "nepřítomnost" x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, který xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx postup.