Xxxxxxxxxx Xxxxxx
xx xxx 14. února 1991,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x tepelně xxxxxxxxxx xxxxx
(91/180/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX SPOLEČENSTVÍ,
s xxxxxxx xx Xxxxxxx x založení Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxx 85/397/XXX ze xxx 5. xxxxx 1985 x hygienických x xxxxxxxxxxxxx otázkách xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx Společenství [1] xxxxxxxxx pozměněnou xxxxxxxx 89/662/XXX [2], x xxxxxxx xx xx. 10 odst. 2 xxxxxxx směrnice,
vzhledem x xxxx, xx xxxxx čl. 10 xxxx. 2 Komise xxxxxxx xxxxxx analýzy x xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx pro xxxxxx mléko xx xxxxxxxx stanovit xxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx x přítomnosti antibiotik;
vzhledem x tomu, xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx patogenů, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, nepřítomnosti xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx peroxidázy, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x XXX xxxxx xx xxxxxxxx stanovit xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx z xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx stanovit xxxxxxxxxx xxxxxx analýzy x xxxxxxxxx, které xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; xx xx xxxxxxx nezbytné xxxxxxxxxx x prošetřování podmínek, xx xxxxxxx se xxxxxxxxx rutinní xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx; xx v xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx šetření xxxxx xxxxxxx státy xx to, xxx xxx xxxxxxxx norem xxxxxxxx 85/397/XX xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx stanovení xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx zahrnuje x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx spolehlivosti xxx xxxxxxxxx jednotného xxxxxxx xxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx rozhodnutí xxxx x souladu se xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
XXXXXXX XXXX XXXXXXXXXX:
Článek 1
Referenční xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx syrové mléko xxxx tyto:
- stanovení xxxx mrznutí,
- xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxx 30 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx somatických xxxxx,
- xxxxxxx antibiotik x xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 2
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx mrznutí,
- stanovení xxxxxxxx fosfatázy,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů při 30 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 21 °X,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií – xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 3
Referenční postupy xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx UHT xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °C,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx a sulfonamidů.
Xxxxxx 4
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx se musí xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx X.
Článek 5
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx a testování xxxxxxx x článcích 1, 2 x 3 jsou xxxxxxx x příloze II.
Xxxxxx 6
Toto xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx 31. prosince 1992, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx vědeckých x xxxxxxxxxxx znalostí.
Xxxxxx 7
Toto rozhodnutí xx určeno xxxxxxxx xxxxxx.
V Xxxxxxx xxx 14. února 1991.
Za Xxxxxx
Xxx Mac Sharry
člen Xxxxxx
[1] Xx. xxxx. X 226, 24.8.1985, x. 13.
[2] Úř. xxxx. X 395, 30.12.1989, x. 13.
XXXXXXX X
XXXXX
X. Xxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
X. XXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxx
Xxxxxx xxxxxxxxxx xx týkají činidel, xxxxxxxxx x pomůcek, xxxxxxxxx výsledků, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx států x laboratoře pověřené xxxxxxx vzorků x xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx tato xxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxx
2.1.1 Xxxxx xxxx stanoveno xxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx destilovaná, xxxxxxxxxxxx xxxx demineralizovaná xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxxxx účely xxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx popsaných testovacích xxxxxxxx.
2.1.2 "Xxxxxxxxxxxx" xxxx "xxxxxxx" (xxx xxxxxxx xxxxxxxxx) se xxxxxx "xxxxxxxxxxx xx xxxx" xxxx "ředění xxxxx".
2.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx mít xxx xxxxxx analytické xxxxxxx.
3. Přístroje a xxxxxxx
3.1 Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxx různé referenční xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx x pomůcek xx xxxxxxxxxx xxxxxxx x se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.2 Xxxxxxxxxx xxxx
"Xxxxxxxxxxxx xxxxxx" xx xxxxxx xxxx s xxxxxxxxx xxxxxx xx 0,1 xx.
4. Xxxxxxxxx výsledků
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, výsledek xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx průměrem xxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx opakovatelnosti (5.1) xxx xxxxxxxxxx metodu. Xxxx není toto xxxxxxxxx opakovatelnosti xxxxxxx, xxxx se xxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx podílu
Pokud xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx hmotnosti xxxxxx.
5. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: opakovatelnost x xxxxxxxxxxxxxxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx takto:
5.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) xx xxxxxxx, xxx kterou xx xxxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx výsledky testu, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx postupem s xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx podmínek (stejný xxxxxxxxx, xxxxxx přístroj, xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxxx).
5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) je xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx rozdíl xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx testů, xxxxxxxxx xxxxxxxx postupem x týmž testovacím xxxxxxxxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx x/xxxx různé xxxx).
5.1.3 Xxxxx není xxxxxxxxx xxxxx, hodnoty xxx kritéria xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx, uváděné x xxxxxxxxxxx odstavcích xxxxxxx xxxxxxx, představují 95 % xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx ISO 5725, xxxxx vydání, 1986. Xxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxx pokusů, xxxxxxxxxxx xx spolupráci, xxxxx xx xxxxxxxxx xxx hodnocení postupu. Xxx xxxxxxx postupy xxxx tyto xxxxxx, xxxxxxxxx ve spolupráci, xxxxxx provedeny. X xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx opakovatelnosti x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx odhadnuty.
5.1.4 Xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx v xxxxxxx x mezinárodními xxxxxx.
6. Xxxxxx x xxxxxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxxxx musí xxxxxxxx xxxxxxx postup x xxxxxxx výsledky. Xxxx xxxx musí xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxxxxxx v xxxxxx xxxxx, nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx ovlivnit xxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx informace xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
XX. XXXXX XXXXXX XXXXXXXX X TEPELNĚ XXXXXXXXXX XXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx postup pro xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx použijí xxx xxxxxx mléko xxxxxx xxxxxxxxxx x xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx uvedené x bodech 2, 4.4, 5 a 6 se použijí xxx odběr vzorků xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x přímé xxxxxxxx.
2. Obecně
Odběr xxxxxx xxxxxxxx a tepelně xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx, nádržích xxxx. xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx vyškoleni.
Pokud xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx, xxx bylo xxxxx, xx odebrané xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x x souladu x xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx příslušné xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx nezbytné, xxxxxxx zaměstnance xxxxxxxx xxxxxxx vzorků v xxxxxxxxxx xxxxxx, aby xxxxxxxxxxxx vzorků xxxx xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx
3.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx nebo x jiného xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxx xxxxxxxx x ohledem xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx, xxx.). Xxxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx x nádobách xxxx mít xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx bylo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxx opatřeny pevnou, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x nabírání xxxxxx x xxxxxxxx hloubky xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx 50 ml.
Vzorkovnice x xxxxx musí xxx xxxxxxxx, xxxxxx nebo x vhodného plastu.
Materiály xxxxxxx při xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx (xxxxxx nádob x xxxxx) xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx by xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx materiál x xxxxxx xx xxxxxx xxxx xxx xxxxx, xxxxx, hladký xxxxxx xxx trhlin a xxxx mít xxxxxxxxxx xxxxx.
3.2 Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
Vybavení xxx xxxxx xxxxxx (včetně xxxxx) xxxx splňovat xxxxxxxxxx xxxx 3.1 x musí být xxxxxxxx.
Xxxxx se xxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, musí xxx po každém xxxxxx xxxxxx vyčištěno x sterilizováno x xxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, které xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx příslušný xxxxx, xxx xxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx jdoucích vzorků.
4. Xxxxxxxx odběru xxxxxx
4.1 Xxxxxx xxxxx
Xxx xxxxxx xx testy, které xxxx být xxxxxxxxx, xxxxx xxxx být xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxx odebrán ihned xx xxxxxxxxxx, když xx xxxxx xxxxx x xxxxxx.
Xxxxx se x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx, xxxx první xxxx xxx odebrán xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx vzorku xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx testování. Xxxxx xxxxxxxxx nádob xxxx xxx xxxxxx, xxx byly tyto xxxxxx téměř xxxxxxxx xxxxxxx x xxx xxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx másla xxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxx xxxxx vzorků
4.2.1 Xxxxx xxxxxx x xxxxx x konví xx xxxxx
X rychlému promíchání xxxxxxxxx xxxxxxxx ve xxxxx xxxx konvi xxxxxx x xxxx, xxxxxxx xxxx xx xx, aby xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxx xx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx smetana. Vzorek, xxxxx je xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx zásilku, xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.2 Xxxxx x chlazených xxxxxx na xxxxx x zemědělském xxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx ručně.
4.2.3 Odběr xxxxxx x xxxxx xxx
Xx xxxxxxxx, aby xxxxx xxxx řádně xxxxxxxxxx, xxxx se xxxxxx do misky xxx. Za xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx rozdělení xxxx xxxx xxx xxxxxxxx další ruční xxxx xxxxxxxxxx míchání. Xxxxx xxxxx xxxxxxx, x xxx se xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx, odebrat xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxx postupem podle xxxx 4.2.4.
4.2.4 Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxx, x něhož xx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx, x xxxxx nádoby xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx mléka xxx xxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxx odděleně xxxxxxxxx, xxxxxxxx se jednotlivé xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx v xxxxxx, xx xxxxx xxx každý ze xxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxx) xxxxxx (xxxxxx) x xxxxxx xxxxxxxxx množstvích.
4.2.5 Xxxxx xxxxxx z xxxxxxx xxxxx – xxxxxxxxxx xxxxxx, cisternové kamiony, xxxxxxxxxx vagóny
4.2.5.1 Xxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx vagónů xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.5.2).
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, xx kterou bylo xxxxx x xxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx x jednotlivých xxxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx plánovaného xxxxxxxxx. Xxxxxxxx promíchání značně xxxxxxxxx shodu xxxxxxxx xxxxx provedených xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx částí xxxxx, xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx mléka) xx účinný, pokud xx xxxxxx xxxxxx xxxx x obou xxxxxx odebraných xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx 0,1 %.
Ve xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxx otvorem xx xxxxxx xxxxx xxxx x místě xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xx promíchání xxxx xxxxxxxxxxxxxxx pro xxxx xxxxx. Xxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxx vzorků x průlezového xxxxxx. X xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.5.2 Promíchání xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx nádrží, cisternových xxxxxxx x cisternových xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx nádoby x poháněnou xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx elektrickým xxxxxxx x umístěnou x průlezovém otvoru; xxxxxxxx xx ponořena x xxxxx,
- x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx přepravní xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx, stlačeným x xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx a objem xxxxxxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx vzorků xxxxxxxx xxxxx dodaného xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx podle xxxxxx xxxxxxxxxxx testovací laboratoří xxxx jiným xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx před a xxxxx používání podrobeno xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx:
- minimální objem xxxxxxxxx xxxxx, z xxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxx,
- poměr xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxx xxxxxxx s minimálním xxxxxxx vzorku),
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x šarže xx xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx poloautomatického xxxxxxxx xxx odběr xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx objem xxxxx, xx kterého xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx objem xxxxxx,
- maximální xxxxxx,
- xxxxxxxxx, xxxxx může xxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx opatření, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.
4.4 Odběr vzorků xxxxxxx ošetřeného xxxxx xxxxxxxx x přímé xxxxxx spotřebě x xxxxxxxxxx x maloobchodních xxxxxxxx
Xxxxx xxx o xxxxxxx ošetřené xxxxx xxxxxx k xxxxx xxxxxx spotřebě a xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, vzorky se xxxxxxx skládají z xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nádob. Xxxxxx musí být xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zařízení xxx xxxxxxxx, a xx, xxxxx je xx xxxxx, ihned xx xxxxxxxxxx (x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxxxxxx).
X xxxxxxx druhu xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx XXX x sterilizovaného) se xxxxxxx takový xxxxx xxxxxx, xxx odpovídal xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx provedena, x to xxxxx xxxxxx poskytnutých xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx příslušného xxxxxx.
5. Identifikace xxxxxx
Xxxxxx xx měl xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx identifikaci podle xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxx 2).
6. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx souhlasem xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx orgánu xxxxxxxx xxxxxxxxx laboratoř xxxxxx xxxxxxxx xx lhůty x xxxxxxxx přepravy x xxxxxxxxxx, které xxxx xxx xxxxxxxx x xxxx mezi xxxxxxx vzorků jejich xxxxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx druhu xxxxx x testování, xxxxx má xxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx toto:
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx vzorky nebyly xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x přímému slunečnímu xxxxxx. Xx-xx xx xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxx určené xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 0 xX až 4 xX. Xxxx xxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx musí xxx xx xxxxxxxxx x x žádném xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 36 xxxxx. Příslušný orgán xxxx souhlasit, xxx xxxx xxxxxxx skladování 0 oC xx 6 oC, xxxx-xx xxxx xxxx odběrem x testováním xxxxx xxx 24 xxxxx,
- xxxxxx pasterovaného xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx teplotách 0 xX až 4 xX. Doba xxxx xxxxxxx x testováním xxxx xxx co xxxxxxxxx x x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 24 xxxxx,
- xxxx vzorky mléka xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxx určené xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx musí xxx skladovány x xxxxxxxxx xxxxxxxx laboratoře x xxxx xxxx xxxxxxx vzorku x xxxxxxxx xxxx být xx nejkratší.
Speciální xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx, jsou xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
XXXXXXX I
OBSAH
I. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx
XX. Xxxxxxxxx xxxxxxxx fosfatázy
III. Stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X
X. Stanovení xxxxxx mikroorganismů xxx 21 °X
XX. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií – počítání xxxxxxx xxx 30 °X
XXX. Xxxxxxxxx xxxxxx somatických xxxxx
XXXX. Xxxxxxx xxxxxxxxxx x sulfonamidů
IX. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
X. STANOVENÍ XXXX MRZNUTÍ
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, syrového, xxxxxxxxxxxxx, UHT mléka xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx), x xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx elektrickým xxxxxxxxx zařízením x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxx dva typy xxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx maximální xxx xxxxxxx na xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx typ je x xxxxxxxxxx důvodů xxxxxxxx tak, že xx začátku mrznutí xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx. Vzhledem x tomu, xx xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx bodu xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx, xxx i xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxx, tento referenční xxxxxx vyžaduje xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx plató. Xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx se xxxxx používat x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxx lze využít xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx x mléce xx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxx 0,18 x xxxxxxxx mléčné xx 100 ml (viz xxx 7.4).
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxx: hodnota xxxxxxxx x souladu x xxxxxxxx postupem x vyjádřená ve xxxxxxxx Xxxxxx (°X).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx mléka xx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx teplotu x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vyvolá jeho xxxxxxxxxxxx, xxxxx způsobí, xx teplota xxxxxx xxxxxxx až x xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx mrznutí vzorku.
Přístroj xx kalibruje xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxx jako xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx odečty xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Za těchto xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx mléka xx xxxxxxxx Celsia.
4. Xxxxxxxxx a pomůcky xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xx skládá x xxxxxxxxxxx řízené xxxxxxxx xxxxx, termistorového xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx odporového xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, míchačky xx xxxxxx a xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx x xx zkumavek xx xxxxxx.
4.1.1 Xxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxx.
4.1.1.1 Xxxxxxx xxx
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx obsahující xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx míchá xxx, xxx xxxxxxxx rozdíl xxxx jakýmikoli xxxxx xxxx v kapalině xxxxx xxxxx než 0,2 °X. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x rozmezí ± 0,5 °C xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx, xxx x xxxxx xxxx udržována xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Celá xxxxxx zkumavky xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
4.1.1.2 Xxxxxxxxxx xxx
Xxxxx zkumavky xx vzorky proudí xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx může xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx ± 0,5 °X xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx chladicí xxxxxxxxx xx 33 % (X/X) vodný xxxxxx 1,2-xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx).
4.1.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xx skládá xx skleněné xxxxx x maximálním průměru 1,80 ± 0,2 xx a o xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 0,31 mm. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx 2 sekundy x xxxxxxx b (xxx xxxxxxxx) xxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx xxx − 0,512 °C xxxxxxx termistoru xxxxxxx xxx teplotu okolí xxxxxxxxx o 0,0005 °X. Maximální xxxxxxxxx xxxxxx xxxx být ± 5 %.
Když xx xxxxx x xxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx se xxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xx xxxxxx x x xxxx, xxxxx je 44,6 ± 0,1 xx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (xxx obrázek xx straně 15). Xx xxxxx dodat xxxxxxxxxxx, aby se xxxxxxxxx xxxxxxxxx sondy xx této xxxxxx.
Xxxxxxxx:
β xxxxxxxx termické vlastnosti xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx
− xX / dT × 1 / X = β / X2
xxx:
X xx xxxxxxx xx stupních Xxxxxxx
X je xxxxx x ohmech xxx xxxxxxx X,
− dR / xX × 1 / X xxxxxxxx koeficient
β xx xxxxxxxxx, která závisí xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx výrobě termistoru. X běžné xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx 3000.
4.1.3 Xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
4.1.3.1 Xxxxxxx měření
Použitý xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx křivce xxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxx xx ± 0,002 xX po xxxx xxxxxxx 20 sekund.
4.1.3.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nebo podobným xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx je ± 10 % x xxxxxxx teplotní xxxxxxxxxx není vyšší xxx 2×10−5°X.
Xxxxxxxx (vyrovnávací) xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx linearity x celém rozsahu x xxxx než x 0,3 % xxx maximální xxxxxxx.
Xxx xxxxx kalibrace xxxx xxx xxxxx odpory xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx dílky po xxxxxxxxx 0,001 °X.
4.1.3.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx 0,01 °X x xxxxxxx xx 0 °X xx –1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zařízení x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxx xx sobě xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx 0,001 °X.
Xxxxxxxxx obvodu xxxx xxx xxxxxx, xxx xxx správné xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxx od – 0,400 °X xx – 0,600 °X xxxxx xxxxx než ± 0,001 °X.
4.1.4 Xxxxxxxx
Xxx míchání testovacího xxxxxx se xxxxxxx xxxxxx drát x xxxxxxx 1 xx 1,5 xx, který xxxxxxxxx x xxxxxx,.
Xxxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx, aby xxxx xxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxx hrotu xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx 1,5 xx nad xx xxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx výrobce (xxxxxxx ± 1,5 xx), xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx během xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx nesmí v xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx.
4.1.5 Xxxxxxxx xx vyvolání xxxxxxx
Xxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx po xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx vyvolá xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx testovacího vzorku xxxxxxx x xxxx xxxxxxx. K xxxx xxxxx lze xxxxxx xxxxxxxx; xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx jednu xx xxx xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx stěny xxxxxxxx xx xxxxxx.
4.1.6 Xxxxxxxx xx xxxxxx
Xxxxxxxx xx vzorky (xxx xxxxxxx 1) xxxx xxxxxxxx x 50,8 ± 0,1 mm xxxxxx; xxxxxx xxxxxx xx 16,0 ± 0,1 xx x xxxxxxx xxxxxx xx 13,5 ± 0,1 xx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxx xxx 0,1 mm.
Zkumavky xxxx xxx xxxxxx xxxxxx vzdálenou od xxxxxxx xxxxxx 29,8 xx (21 xx xxx xxxx zkumavky), xxxxx xxxxx objem xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx.
4.1.7 Xxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx kolísání xxxxxxxxxxxxxx ± 1 % xxxxxxxxx hodnoty, xxxx xxxxxx zdroj kolísá x ± 6 %.
4.2 Xxxxxxxxxx xxxx
4.3 Xxxxxxx baňky x xxxxxx 1000 ml, xxxxx X.
4.4 Xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 130 ± 1 °C
nebo
Elektrická xxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 300 ± 25 °X.
4.5 Xxxxxxxxx
5. Xxxxxxx
5.1 Xxxx destilovaná x xxxxxxxxxxxxxxx skle, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx 20 ± 2 °X, ve xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx x.x., jemně xxxxx, xxxxxx 5 xxxxx xxx xxxxxxx 300 ± 25 °C x xxxxxxxxxx peci xxxx xxxxxxx 24 xxxxx při teplotě 130 ± 1 °X v xxxxxxx x zchlazený xx xxxxxxxxx teplotu v xxxxxxx exsikátoru.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx tabulka 1) xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5.2) xx xxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx vodě (5.1), xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x objemu 1000 xx x doplnit xx xxxxxx vodou x xxxxxxx 20 ± 2 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxx nejdéle dva xxxxxx xxx xxx 5 °X v xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx 250 ml.
Bod xxxxxxx roztoků xxxxxxxx xxxxxxx při 20 °X
|
x XxXx/x |
°X |
|
6,859 |
-0,408 |
|
7,818 |
-0,464 |
|
8,149 |
-0,483 |
|
8,314 |
-0,492 |
|
8,480 |
-0,502 |
|
8,646 |
-0,512 |
|
8,811 |
-0,521 |
|
8,977 |
-0,531 |
|
9,143 |
-0,541 |
|
10,155 |
-0,600 |
Xxxx xxxxxxxx xx standardní xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Nikdy xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxx xx xx xxxxxxx přimíchal xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku xx x xxxxx xxxxxx do xxxxx x xxxxx kádinky. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx z lahví, xxxxx xxxx ze xxx čtvrtin xxxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx neobsahují xxxxxxxx (xxxxxxxxx roztok xxxxxxxxxxx 10 x/x).
6. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxx nelišila o xxxx než 1 °X xx xxxxxxx, xxx níž xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx 26–27 °X.
Xxxxxxx se, xx xxxxxxxx xxxxxxx podle xxxxxx xxxxxxx a xx byl zapnut xxxxxxx 12 hodin xxxx kalibrací. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx sondy, rozkmit xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxx tabulka xxxx), xxxxxxx xxx mrznutí xx xxxxx xxx xxxx xxxxx pod xxxxxxxxxx hodnotou xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx. Rozdíl xxxx xxxx mrznutí xxxx roztoků xx xxxxxxx xxxxx být xxxxx než – 0,100 °X.
(X xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx dostupných kryoskopů xx příslušný obvod xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx, xx xx ustálí xx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx výběr jednoho xxxxxxxxxxxx roztoku, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx uvést).
Pomocí xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx jednoho xxxxxxxxxxxx xxxxxxx do xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx, xxxx měřit pomocí xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxx zkumavky xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxx xxxx, xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx výrobce xxxxxxxx xxxxxxxx kalibrace, xxxxx xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx bodu xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx tento postup x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xx provádět xxxxxxx xxxxxxxx, dokud xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx každý xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x nich, xxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx tedy připraven x xxxxxxx a xxxxx ukazuje bod xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx xx byla xxxxx jakákoli xxxxxx.
7. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
7.1 Xxxxx xx xx xxxxxxxx skladovat vzorky xxx xxxxxxx xxxx 0 °X x 5 °C.
7.2 Pokud xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx odstranit všechna xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxx xx vzorku xx xxxxx a xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxxxx, nesmí xxxxxxxx x xxxxxx x xxxx xxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.3 Xxxxx může být xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0 x 5 °C) xxxx xx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx teplotu xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx mléka, xxxxx možno xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Vzorky, xxxxxxx xxxxxxxx přesahuje 0,18 x kyseliny xxxxxx xx 100 xx xxxxx, xxxxxxx být xxxxxxxxxxx.
7.5 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx stát nejméně 20 minut xxxx xxxxxxxxxx v otevřené xxxxxx.
8. Postup
8.1 Předběžné xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx, zda xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx jsou x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx zda xx sonda termistoru xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx se, zda xx chladicí kapalina xxxxxxx míchá xxxx xxxxxxxx. Xxxxx byl xxxxxxxx zapnut xxxxxxx 12 hodin, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx chladicí xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx.
8.2 Xxxxxxx kontrola xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxx xxxxx měřit xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (například xxxxxx x xxxxx xxxxxxx – 0,512 °X), dokud xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx xx sobě xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxx xxx 0,001 °X. Xxxxx se průměr xxxxxx xxxxxx liší xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku x xxxx xxx 0,002 °X, kryoskop xx xxxxx xxxxxxxxxx, jak xx popsáno x xxxx 6.
Xxxxx xx xxxxxxxx používá xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx provádí xxxxxxx xxxxxx xx hodinu, xxxxxxx xx zohlední xxxxxx xxxxxxx.
8.3 Stanovení xxxx xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx neprotřepávat xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxx se xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx xxxxx do xxxxx x čisté zkumavky xx xxxxxx. Xxxxxxx xx, xx jsou xxxxx a xxxxxxxx xxxxx a suché, xxxxx je to xxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx směrem xxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx zkumavku se xxxxxxx do xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pokynů xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx a xxxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx určené výrobcem x přesností na 0,1 °C.
(U některých xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx x digitálního xxxxxxxxx; u xxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx tím, xx xx xxxxxxx, xxx mrznutí xxxxxx, xxxx xx ručička xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x příslušnou xxxxxxx.)
Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx mrznutí xxxxx xxxxx nebo xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx rozmezí, xxxxxxxxx se ukončí x xxxxxxxx xx x xxxxx vzorkem xxxxx. Xxxxx tento xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx dosažením xxxxxxxxx teploty, alikvótní xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx 45 °X x 5 xxxxx xx udržuje xx xxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx tuk.
Poté zchladit xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx testování. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx stoupne xx xx xxxxxxx, xxxxx zůstane xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx teplotě dosažené xxxxx této xxxx x tuto xxxxxxx xx nutné xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxx, xx xxxxxx teplota xxxxxxx konstantní, x xxxxxx xxxxxxxx mezi xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxxxxx xx xxxxxx a xxx xxxx a xxxxxxxxxx roztoky chloridu xxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxx xxxxx. Xx nezbytné xxxxxxxxxx xxxxxxxxx teplotu.
Když xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxx x otřít xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx nahoru xxxxxx, xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx stanovení x xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx je rozdíl xxxx naměřenými xxxx xxxxxxx větší xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (0,004 °X), xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx na 0,004 °X, xxxxxx se x xxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
8.4 Chlazení xxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx na xxxxxx na xxxxx xxx xxxxxx x xxxxxx provozní xxxxxxx, xxx sonda xxxxxxx x xxxxxx.
(X xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx možné; x xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx je xxxxx xxxx začátkem xxxxxx xxxxx zchlazena, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.)
9. Xxxxxxxxx výsledků
9.1 Výpočet
Pokud xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx kontroly kalibrace xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx získaných xxx bod mrznutí, xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxx dvou xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxxxx sudou xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx:
Xxx xxxxxxx (°X)
|
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx |
Xxxxxx |
|
|
-0,544 |
-0,545 |
-0,544 |
|
-0,545 |
-0,546 |
-0,546 |
9.2 Spolehlivost
9.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x): 0,004 °X
9.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (R): 0,006 °X
Xxxxxxx 1
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1 (xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xx skleněné xxxxxxx termistoru a xxxxxxxx)
XX. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXX
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxx kapitola xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxxx
2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx fosfatázy xxxxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx množstvím xxxxxx v μx xx 1 ml xxxxxxxxxxxxx mléka xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxx, pokud je xxxxx xxx 4 xx fenolu na 1 ml.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx fenol x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxx), který se xxxxxxxxxxxxxx měří xxx 610 xx. Xxxx xx provádí porovnání xx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
4. Činidla
4.1 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.1 Rozpustit xx xxxx 50,0 x hydroxidu xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) [Xx(XX)2.8X2X] x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.1.2 Xxxxxxxxx xx xxxx 22,0 x xxxxxxxx xxxxxx (X3XX3) x xxxxxxx na 1000 ml.
4.1.3 Xxxxxx 500 ml xxxxxxx xxxxxxx xx 50 °X, oba xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxx na 20 °C, x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xX xx 10,6 ± 0,1 xxxxxxxx xxxxxxx 4.1.1 xxxx 4.1.2. Xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxxxxx uzavřené xxxxxx.
4.1.4 Xxxx xxxxxxxx zředit xxxxxx xxxxxxx objemem xxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxx xxx vyvolání xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxx 6,0 x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XxXX2) xxxx 12,6 x XxXX2.4X2X a 20,0 x chloridu xxxxxxx (XxXx) a xxxxxxx xx 1000 xx.
4.3 Xxxxxxx roztok xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxx 10 ml xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx zabarvení (4.2) xxxxx na 100 xx.
4.4 Roztok xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx 0,1 x fenylfosfát xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xx 100 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.3) xxxx 0,5 x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx 4,5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx zabarvení (4.2), xxxxxx xxx kapky xxxxxxx XXX (4.6) x nechat xxxx 30 minut xxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 2,5 xx n-butanolu x xxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx-1 xxxxxxxx. Xxxxxxx x odstranit xxxxxxx-1. X xxxxxxx xxxxxxxx xx extrakce xxxxxxx.
Xxxxxx je možné xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx dní; před xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x provést novou xxxxxxxx. Tlumivý substrát xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, x xx xxxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxxxx xx 100 xx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.3).
4.5 Xxxxxxxxx xxxxx-xxx
Xxxxxxxxx xx xxxx 3,0 x xxxxxx xxxxxxxxxxx (XxXX4 · 7X2X) a 0,6 x xxxxxx měďnatého (XxXX4 · 5H2O) x xxxxxxx xx 100 xx.
4.6 Xxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx XXX)
Xxxxxxxxx x 10 xx 96 % (X/X) xxxxxxxx 40 ± 1 xx 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXX) (X6X2Xx2XxXX6).
Xxxxxxxxx v xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxxxxx roztok, xxxxx xxxxx xxxxx xxxx xx starší xxx xxxxx xxxxx.
4.7 Xxxxxx síranu měďnatého (XX)
Xxxxxxxxx xx vodě 0,05 g síranu xxxxxxxxx (CuSO4.5H2O) x xxxxxxx na 100 xx.
4.8 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx
4.8.1 Xxxxxxx 200 ± 2 xx xxxxxxx bezvodého xxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 100 xx, xxxxxx xxxx, promíchat x doplnit na 100 xx. Tento xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
4.8.2 Zředit xxxxx 10 ml xxxxxxxxx xxxxxxx, doplnit xx 100 xx x promíchat. 1 xx obsahuje 200 μx fenolu.
5. Xxxxxxxxx x pomůcky xx xxxx
Xxxxxxxx:
x) Veškeré xxxxxxx xx xxxx, jakož x zátky a xxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx destilovanou xxxxx xxxx xxxxxxx parou.
b) Xxxxxxx typy plastových xxxxx mohou xxxxxxxx xxxxxxxxxxx fenolů x xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
5.1 Xxxxxxxxxx váhy
5.2 Xxxxx lázeň xxxxxxxxxxxx xx 37 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xx vlnové délce 610 xx.
5.4 Zkumavky, 16 xxxx 18 × 150 xx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 5 xx x 10 xx.
5.5 Xxxxxx
5.6 Xxxxxxxx nálevky vhodné xxxxxxxxx, např. x xxxxxxx 5 xx.
5.7 Xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx 9 xx xxx střední xxxxxxxx filtrace.
5.8 Xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
6. Postup
Poznámky:
a) Xxxxx stanovení xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
x) Xxxxx slin xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx falešně xxxxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxx se xxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx pipetování.
6.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku
6.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx ne déle xxx dva xxx.
6.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 1 ml xxxxxx xx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx (5.4), xxxxx zkumavku xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx pokus.
6.3 Xxxxxxxxx
6.3.1 Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx minuty xx xxxxxx vodě; xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx hliníkovou folií, xxx xx xxxxxxxx xxxx zkumavka. Xxxxxx xxxxxxxx na pokojovou xxxxxxx.
6.3.2 Xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx slepý x xxxxxxxxx vzorek xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx 10 ml roztoku xxxxxxxxx (4.4) a xxxxxxxxx.
6.3.3 Xxxxxx ihned xxxxxxxxx 60 xxxxx xx xxxxx lázni (5.2) x občas (xxxxxxx xxxxxxxxx) promíchat xxxxxx xxxxx.
6.3.4 Xxxxxx xxxx x xxxx 6.3.1 xxxxxxxx xxx xxxxxx ve xxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx pokojovou xxxxxxx.
6.3.5 Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 1 ml xxxxxxxxx xxxxx-xxx (4.5) x xxxxx xxxxxxxxx.
6.3.6 Xxxxxxxxxxxx přes xxxxx xxxxxxxxx papír, xxxxx xxxxx dva mililitry x x případě xxxxxxxx xxxxxxxxx znovu, xxxxx xxxx filtrát xxxxxxxx xxxx; xxxxxxxxxx 5 xx ve xxxxxxxx.
6.3.7 Přidat 5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2).
6.3.8 Xxxxxx 0,1 xx roztoku BQC (4,6), xxxxxxxxx x 30 xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx teplotě.
6.3.9 V xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.3.10 Pokud xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx 6.3.9 xxxxxxxxx absorbanci xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxxxx 20 μx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.4.4, opakovat xxxxxxxxx při vhodném xxxxxxx vzorku. Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx objemem xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx vzorku, xxxxx se xxxxxxx xxxxx xx varu, xxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.4 Sestrojení xxxxxxxxxx xxxxxx
6.4.1 Xx základě xxxxxxxxxxxx xxxxxxx fenolu (4.8.2) připravit vyhovující xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx obsahujících 0 (xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx), 2, 5, 10 x 20 μx xxxxxx xx xxxxxxxx. Xx xxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxx pomocí xxxxxx 1 ml xxxx x 1 xx xxxxxx standardních xxxxxxx xxxxxx.
6.4.2 Do každé xxxxxxxx přidat 1 xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.7), 5 xx xxxxxxxxx roztoku xxx zředění xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.3), 3 xx vody a 0,1 ml roztoku XXX (4.6); xxxxxxxxx.
6.4.3 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 30 xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
6.4.4 X xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx délce 610 xx.
6.4.5 Na xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (6.4.4) xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (6.4.1) vypočítat xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxx x xxxxxx
7.1.1 Xx xxxxxxx hodnot xxxxxxxxxx (6.3.9) vypočítat xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (6.4.5).
7.1.2 Xxxxxxxxx aktivitu xxxxxxxxx xxxxxxxxxx v μg xxxxxx na mililitr xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx vzorce:
Aktivita xxxxxxxxx = 2,4 × X × X
xxx
X xx množství xxxxxx x μx xxxxxxx xxxxx xxxx 7.1.1;
X xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx bodu 6.3.10 (x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx X = 1).
2,4 xx faktor xxxxxxx (5/12 z 1 xx testovacího xxxxxx) – viz 6.2 xx xxxxxxxxxx x 6.3.2, 6.3.5 x 6.3.6.
7.2 Spolehlivost
7.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (r) : 2 μg fenolu/ml.
7.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) : 3 (xxxxxxxxx) μx xxxxxx/xx.
7.2.3 Xxxxx xx xxxxxxx provede podle 6.3.10, xxxxxx uvedené x 7.2.1 x 7.2.2 xx týkají xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.
XXX. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro stanovení xxxxxxxxxxx nebo nepřítomnosti xxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx, xxxxx slouží xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxxx:
Xxxxx je mléko xxxxx pasterováno, xx 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx:
Xx 30 xxxxxx po promíchání xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
3. Princip
Peroxidáza xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Uvolněný xxxxxxxx kyslík xxxxxxx xxxxxxxx parafenylendiamin xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (Xxxxxxxx xxxx). Xxxxxxxxx zabarvení xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx x xxxxx xxxx (50 °C) 2 x 1,4 xxxxxxxxxxxxxx (X6X8X2) x xxxxxxx xx 100 xx. Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx a xxxxx, x xxxxx xxxxx xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx dvou xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx 1,4 fenylendiaminu vytvoří xxxxxxxxx, xxxxxx je xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxx 9 xx 30 % xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx 100 xx. Pro xxxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxxxxxxxx kyseliny xxxxxx na xxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxx měsíc, pokud xx xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxx, x xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx jakémukoli styku x xxxxxxxxxxx látkami.
5. Xxxxxx
5.1 Xxx 5 xx vzorku xxxxx xx xxxxx zkumavky x xxxxxxx víčkem.
5.2 Xxxxxx 5 ml xxxxxxx 1,4 fenylendiaminu (4.1).
5.3 Přidat 2 xxxxx roztoku xxxxxxxx xxxxxx (4.2).
5.4 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Pokud xx modré zabavení xxxxxx xxxx než 30 xxxxxx po xxxxxxx činidel, reakce xxxx xxxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX XXXXXX MIKROORGANISMŮ PŘI 30 °X
1. Xxxxxxx x oblast použití
Tato xxxxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx pro stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx kolonií xxx 30 °C. Xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxx mléko, xxxxxxxxxxx xxxxx, XXX xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléko, xxxxx xxxx 15 xxx xxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx organismy, xxxxx vytvářejí počitatelné xxxxxxx po xxxxxxx xxxxxxxx za popsaných xxxxxxxx.
3. Princip
Smíchat xxxxxxxxx xxxxx vzorku xxxxx x kultivačním xxxxxx x Xxxxxxx miskách x xxxxxx xxxxxxxxx 72 hodin xxx 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxxx x vypočítat xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx 0,1 xx xxxxxxxxxxxxxxx sterilizovaného xxxxx nebo UHT xxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx ze xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx vybavení, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Horkovzdušná xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, schopný xxxxxxxx teplotu 30 ± 1 °C.
4.1.4 xX-xxxx se xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, nastavitelná xx 45 ± 1 °C.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, zvětšení 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Mechanické xxxxxxxxx
4.1.9 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 1 ml xxxxxx mléka xxxx xxxxxxxxxxx ředění s 9 ml ředicího xxxxxxx x pracující xx principu xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx ze xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, x dostatečným xxxxxxxxx x promíchání 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x objemu 150 xx 250 ml xxxx zkumavky o xxxxxx 20 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Pipety (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x nominálním xxxxxx 1 ml, x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 mm.
4.2.4 Xxxxxxx misky z xxxxxx, bezbarvého xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, dno xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx 90 až 100 xx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx nejméně 10 mm. Dno xxxxx mít žádné xxxxxxxxxx, které xx xxxxxxx xxxxxxxx kolonií.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx:
Xxxxxxx ze xxxx xx sterilizují xxxxxx x těchto xxxxxxx:
x) x horkovzdušné sušárně (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx 170–175 °X;
x) v xxxxxxxxx (4.1.2), nejméně 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °C.
Při xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxx na xx, xxx xxxx zajištěno xxxxxxxxxx proniknutí xxxx: xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx, uzávěry xxxx xxxxx by xxxx xxx volné.
Pomůcky xx xxxx xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx by se xxxx xxxxxxx odvětráním xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Kultivační xxxxxx – agar xx xxxxxxx mlékem
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx (+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 g |
|
Agar |
10–15 x xxxxx želírovacích xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx by nemělo xxxxxxxxx žádné inhibiční xxxxx. Toto xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx odstředěným xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx inhibiční xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx mléko. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx přidat agar x xx stálého xxxxxxx xxxxx do xxxx, xxxxx xx xxxx xxxxx nerozpustí, xxxx zahřívat x xxxx xxx 30 xxxxx.
Xxxxx xx je xxxxxxxx, přefiltrovat přes xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); pokud xx xx xxxxxxxx, xxxxxxx pH, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx sterilizaci xxxx xxxx xxxxxxx 6,9 ± 0,1 při 25 °C.
5.2 Rozdělení, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Rozdělit xxxxxx (5.1) v xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 xx do xxxxx xxxx po 12 až 15 xx do xxxxxxxx (4.2.2). Baňky a xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) při 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx kultivační médium xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx v temnu xxx xxxxxxx mezi 1 a 5 °X, xxxxx ne xxxx xxx 1 xxxxx xx jeho xxxxxxxx.
5.3 Komerční dehydrované xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) se xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx výrobce, xxx přidat xxxxxx xxxxxxxxxx mléko xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx není xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xX xx 6,9 ± 0,1 při 25 °X xxxxxxx xxxxx xxxx 5.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Roztok xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxxx sodný (NaCl) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, xxxxx xx je xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xX-xxxxxx (4.1.4); pokud xx xx xxxxxxxx xxxxxxx xX roztokem (xxxxxxx 0,1 xxx/x) hydroxidu xxxxxxx nebo kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxxxx xxxx jeho xxxxxxx 7,0 ± 0,1 při 25 °X.
6.2 Xxxxxxxxx, sterilizace x skladování ředidla
Rozdělit xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx xx sterilizaci xxxxx zkumavka xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx ředidla. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx sterilizovat x autoklávu (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxxx.
Xxxxx xx ředidlo xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x temnu xxx teplotě xxxx 1 x 5 °X, avšak ne xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) se xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx výrobce. Xxxxxxx xX xxxxxxx xxxxx xxxx 6.1, xxxx xxxxxxxx, sterilizovat x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 6.2.
7. Postup
7.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Před xxxxxxxxx mikrobiologického xxxxxxxxx xxxxxx rychle xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx lázni (4.1.5) na 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx vzorku mléka
Vzorek xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x to 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Je xxxxx zabránit xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx rozptýlit. Xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx testovacího xxxxxx xx neměla xxxxxxxxx xxx minuty.
7.3 Příprava xxxxxxxxxx xxxxxx (10-1) (xxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xx 9 xx xxxxxxx (6.1), xxxxxxx xxxxxx nesmí přijít xx xxxxxxxx s xxxxxxxx. Teplota xxxxxxx xxxx xxx přibližně xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 sekund xxxxxxx xxxxxxxxxxx toto xxxxxxxx xxxxxx míchačkou (4.1.9).
Xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx desetinných xxxxxx (xxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx primárního xxxxxx (7.3) xx 9 xx ředidla (6.1) xxxxx xxxxxx v xxxx 7.3.
Získá se xxx ředění 10−2.
X xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx postup xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx mikroorganismů (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Petriho xxxxx
7.5.1 Xxxxxx xxxxx: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx misky (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx desetinného xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx misku.
7.5.2 Xxxxxxxxxxx mléko: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 ml vzorku x/xxxx vhodného desetinného xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx nejméně dvě xxxxxx. Pro každé xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.5.3 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx xx 15 denní xxxxxxxx xxx 30 °X – xxxxxxxx 85/397/XXX, příloha A xxxxxxxx VII xxx 5):
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx misky (4.2.4) 1 ml xxxxxx xxxxx (7.2). Xxxxxxxxx dvě xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx misky xxxxx xxx 15 xx 18 ml xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Ihned xxxxxxxxx rotací Xxxxxxx xxxxx, aby xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx koncem xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx médiem xxxxx xxxxxxxxx 15 minut.
Nechat xxxx na vodorovném, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Petriho xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Misky xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx. Neskládat na xxxx xxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx dotýkat, xxx xxx x xxxxxxxx xx stěnami x xxxxxx xxxxx inkubátoru.
Inkubovat 72 ± 2 xxxxx při 30 ± 1 °C.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx kolonie x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 300 kolonií.
Misky xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx usnadnění xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx nutné xxxx xx to, xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx s drobnými xxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx pochybností xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx skla x xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x cílem xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx považují za xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx méně než xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx odpovídající xxxxx xxx xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx tvořící xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx čtvrtinu plochy xxxxx, xxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Xxxxxx x xxxxxxxxxxx mléko
8.1.1 Použít xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 xxxxxxx (viz 8.1.3 x 8.1.4).
8.1.2 Vypočítat xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx tohoto xxxxxx:
∑X / (x1 + 0,1x2) x
xxx:
∑X ΣC xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx podle bodu 8.1.1.
(x1 + 0,1 x2)x xx xxxxx xxxxxxxxxxxx vzorku, xxx:
x1 xx počet xxxxx xxx xxxxxx ředěním
n2 xx xxxxx misek xxx druhém xxxxxx
x xx faktor zředění, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
Xxxxx se xxxxxxxxxx xx xxx platné xxxxxxx. Xxxx je xxxxxxxxxxxxxx číslice xxx, xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxx):
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 x 28 kolonií
Počet/ml: = 278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2
= 6290,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.1.3 Xxxxx jsou všechny xxxxx nižší než 10, xxxxx, xx xxxxx mikroorganismů xx xxxxxxxx xx "nižší xxx 10 x x", přičemž "x" xx převrácená xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
8.1.4 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 300 a počítání xx xxxxx, xxxxxxx xxxxx x vynásobit xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Výsledek xxxxxxxx xxxx "Odhadovaný xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xx".
8.2 UHT xxxxx x sterilizované mléko
Počty xxxxx než 10 xxxxxxx na 0,1 xx xx považují xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/XXX.
9. Spolehlivost
Výsledky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kruhových xxxxx ještě xxxxxx x xxxxxxxxx.
X. STANOVENÍ XXXXXX MIKROORGANISMŮ XXX 21 °X
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxxxxxxxx xxxxxxxx kolonií při 21 °C x xxxxxxxxxxxx mléce, xxxxx xxxx pět dní xxxxxxxxxxxxx xxx 6 xX x xxxxx xxxxxxxx xxxxxx kontaminace xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, které xx xxx množit se x mléce při 6 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx rozumějí xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx popsaných xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxx xxx 6 °X. Xxxxxxx stanovený xxxxx xxxxxx mléka x xxxxxxxxxxx xxxxxx x Xxxxxxx miskách x xxxxxx xxxxxxxxx 25 xxxxx při 21 °X. Xxxxxxxx kolonie x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
4. Xxxxxxxxx x pomůcky xx xxxx
Xxxxxxx laboratorní xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, nastavitelná xx 170 xx 175 °C.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °C.
4.1.3 Xxxxxxxxx, schopný xxxxxxxx xxxxxxx:
x) 6 ± 0,2 °X
x) 21 ± 1 °X xx všech bodech xxxxxx.
4.1.4 pH-metr xx xxxxxxxxx pro kompenzaci xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 jednotky xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx na 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx sklo, zvětšení 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 1 xx vzorku xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx ředění x 9 xx xxxxxxxx roztoku x xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxx rotace xxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
4.2.1 Zkumavky x xxxxxxxx uzávěry x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxx ředění nebo xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx 20 xx xxx skladování xxxxxxxxxxxx média.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx vatou), skleněné xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx objemu 1 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Petriho xxxxx x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, xxx xxxxx xx xxxxxxx průměr xxx 90 xx 100 x. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx by xxxx xxx xxxxxxx 10 xx. Xxx xxxxx xxx žádné nerovnosti, xxxxx by xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxxx jedním x xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx hodinu xxx xxxxxxx 170–175 °X;
x) x autoklávu (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx při teplotě 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: pokud xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x nádobách, xxxx xxxxxx by xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx nebo víčka xx měly xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx skla xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1).
5. Kultivační médium – xxxx xx xxxxxxx xxxxxx
5.1 Složení:
|
Kvasnicový xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx(+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10-15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxx mlékem, xxxxx xxxxxxxx žádné inhibiční xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X tomto xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx extrakt, trypton, xxxxxxx a nakonec xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx usnadňuje xxxxxx. Poté xxxxxx xxxx x xxxxx xx varu xx xxxxxxx míchání, xxxxx xx xxxx zcela xxxxxxxxxx, nebo xxxxxxxx x xxxx xxx 30 xxxxx.
Xxxxx je xx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx pH-metru (4.1.4); xxxxx xx je xxxxxxxx, xxxxxxx xX, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) hydroxidu sodného xxxx xxxxxxxx chlorovodíkové, xxx po sterilizaci xxxx xxxx xxxxxxx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Rozdělit xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 xx xx xxxxx nebo xx 12 xx 15 xx do xxxxxxxx (4.2.2). Baňky x zkumavky xxxxxxx.
15 xxxxx sterilizovat v xxxxxxxxx (4.1.2) při 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx nepoužije ihned, xxxxxxxx se x xxxxx xxx teplotě xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx přípravě.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kultivační médium
Kultivační xxxxxx (5.1) se xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx pokyny xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxx odstředěné xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx produktu.
Upravit xX na 6,9 ± 0,1 xxx 25 °C postupem xxxxx bodu 5.1, xxxx rozdělit, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx podle xxxx. 5.2.
6. Ředidla
6.1 Roztok xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 g |
|
Chlorid xxxxx (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 ml |
Příprava:
Rozpustit xxxxxx xx xxxx, xxxxx to xx xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xX-xxxxxx (4.1.4); xxxxx xx je xxxxxxxx xxxxxxx pH roztokem (xxxxxxx 0,1 mol/l) xxxxxxxxx sodného xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx byla xxxx hodnota 7,0 ± 0,1 xxx 25 °C.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, aby xx xxxxxxxxx každá xxxxxxxx xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 ml xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 minut xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X. Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx se x temnu při xxxxxxx mezi 1 x 5 °X, xxxxx ne xxxx xxx 1 měsíc xx xxxx xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ředidla
Ředidlo (6.1) xx xxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx tablet xxxx xxxxxx. Dodržet xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx pH xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx bodu 6.2.
7. Postup
7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Před xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx rozpustit potřebné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °C.
7.2 Příprava xxxxxx xxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx [4.1.3 x)] xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxx, xxxxx to xxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx vzorek x xxxxxx xxxxxxx 100 xx xx xxxx 120 ± 2 xxxxx při 6 ± 0,5 °X.
7.2.2 Po inkubaci xxxxxx mléka řádně xxxxxxxxx, xxx byly xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, a xx 25 rychlými xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxx nechat rozptýlit. Xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx ředění (10−1)
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) syrového xxxx pasterovaného xxxxx xx 9 xx xxxxxxx (6.1), xxxxxxx xxxxxx nesmí xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 sekund xxxxxxx promíchávat xxxx xxxxxxxx xxxxxx míchačkou (4.1.9).
Xxxxx xx tak xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.3) xx 9 ml xxxxxxx (6.1) xxxxx xxxxxx v bodě 7.3.
Xxxxx xx xxx xxxxxx 10−2.
S xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx se tento xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx, dokud xxxxx xxxxxxxx přiměřené množství xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Naočkování Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) přenést xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) připravit xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.6 Nalévání xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx každé xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 15 xx 18 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx Petriho xxxxx, xxx po xxxxxxxx xxxxx k rovnoměrnému xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx mléka, xxxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx nesmí překročit 15 xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x čistém xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Xxxxxxx misek
Přenést xxxxx do xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx inkubovat xxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx na xxxx xxxx xxx šest xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, ani být x kontaktu xx xxxxxxx x vrchní xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 25 xxxxx xxx 21 ± 1 °C.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx kolonie x Petriho xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 300 kolonií.
Misky xxxxxxxx xxx xxxxxxxx světle. Xxx xxxxxxxxx počítání xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx xxxxx dbát xx to, xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx koloniemi. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx skla x xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx od xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Pokud xxxxxxx tvořící povlak xxxxxxxxx méně xxx xxxxxxxx misky, xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx počet xxx xxxxx misku. Xxxxx xxxxxxx tvořící xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx vyřadit.
8. Xxxxxxx a vyjádření xxxxxxxx
8.1 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.2 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na 1 xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx podle xxxxxx xxxxxx:
∑X / (x1 + 0,1n2) x
xxx:
ΣX xx xxxxxxx xxxxx kolonií xxxxx xxxx 8.1,
(x1 + 0,1 n2)d xx xxxxx naočkovaného vzorku, xxx:
x1 je xxxxx xxxxx při xxxxxx xxxxxxx
x2 xx počet xxxxx při xxxxxx xxxxxx
x xx faktor xxxxxxx, na základě xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx počty.
Počet xx xxxxxxxxxx na dvě xxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx zaokrouhlovaná xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx xxx, xxx sousední xxxxxxx xxxxx byla xxxx.
Xxxxxxx:
Xxxxxx 10−2: 278 a 290 kolonií
Ředění 10−3: 33 a 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; =278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2=
=629 / 0,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.3 Pokud xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 10, xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx "nižší xxx 10 × x", xxxxxxx "x" xx xxxxxxxxxx hodnota xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
8.4 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx než 300 x xxxxxxxx xx xxxxx, xxxxxxx odhad x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx hodnotou xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xx".
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx mezinárodně uznaných xxxxxxxxx xxxxx ještě xxxxxx k dispozici.
VI. XXXXXXXXX OBSAHU XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX – XXXXXXXX XXXXXXX XXX 30 °X
1. Xxxxxxx a xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx počítání xxxxxxx při 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx 30 °X xxxxxxxxx charakteristické xxxxxxx nebo necharakteristické xxxxxxx, xxx jsou xx xxxxxxxxx podmínek xxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx objem xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx v Xxxxxxx xxxxxxx a 24 xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx 30 °C. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x, pokud xx xx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx necharakteristických xxxxxxx xxxxxxxxxxx jejich xxxxxxxxxx xxxxxxxxx laktózu. Xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
4. Xxxxxxxxx x pomůcky xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, zejména:
4.1 Přístroje
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx udržovat xxxxxxx 30 ± 1 °X.
4.1.4 xX-xxxx xx zařízením xxx xxxxxxxxxx teploty, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, nastavitelná xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxx jehla xx slitiny xxxxxxx-xxxxxxx xxxx nikl-chróm.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
4.2.1 Zkumavky x vhodnými uzávěry x xxxxxxx 20 xx, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (5.2) a Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2.2 Baňky x xxxxxx 150 xx 250 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx selektivního xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.1).
4.2.3 Xxxxxx (utěsněné xxxxx), xxxxxxxx xxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx objemu 1 – 10 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx, bezbarvého xxxx xxxx xx xxxxxxxxxx syntetického materiálu, xxx xxxxx má xxxxxxx průměr xxx 90 až 100 x. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx nejméně 10 xx. Xxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx kolonií.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx:
Xxxxxxx xx skla xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx hodinu xxx xxxxxxx 170 – 175 °X;
x) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxx xxxxxxxxx dostatečné xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx nádoby xx neměly xxx xxxxxxx xxxxxxxx, uzávěry xxxx víčka by xxxx xxx volné.
Pomůcky xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xx měly xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx sterilizovány v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx médium
5.1 Agar x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx (VRBL xxxx). Sušené xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
7 x |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
3 x |
|
Xxxxxxx (X12X22X11.X2X) |
10 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (NaCl) |
5 x |
|
Xxxxxxx xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxxxx xxxxxx |
0,03 x |
|
Xxxxxxxxxx violeť |
0,002 x |
|
Xxxx |
10 xx 15 x xxxxx želírovacích xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx složky ve xxxx x nechat xxxx xxxxxxx minut. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX pomocí xX-xxxxx (4.1.4); pokud to xx nutné, xxxxxxx xX xxxxxxxx (nejméně 0,1 xxx/x) hydroxidu xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxx rychle do xxxx xx občasného xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx po xxxxxxxxxx 100 xx 150 xx do sterilních xxxxx (4.2.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °C.
V xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx sterilitu xxxxxxxxxxxx média (6.4).
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxx hodin po xxxx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxx xxxx s brilantovou xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
10 x |
|
Xxxxxxx (X12X22X11.X2X) |
10 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx |
20 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxx |
0,0133 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx složky ve xxxx a xxxxx xx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx pH-metru (4.1.4); xxxxx to xx xxxxxxxx, xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx sodného xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx sterilizaci xxxx xxxx xxxxxxx 7,2 ± 0,1 xxx 25 °C.
Rozdělit xxxxxx po 10 xx xx xxxxxxxx (4.2.1) obsahujících Xxxxxxxxx xxxxxxxx. Zkumavky xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxx trubičky xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, skladuje se x xxxxx při xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx déle xxx 1 xxxxx xx xxxx přípravě.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kultivační xxxxxx
Xxxxxxxxxx médium (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX, xxxxxxxx, sterilizovat x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx bodů 5.1 x 5.2.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxxxx médium
Použít xxxxxx (XXXX agar) xxxxxxx x bodě 5.1.
6.2 Xxxxxxxx vzorku xxxxx
Xxxxxx mléka řádně xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xx 25 rychlými xxxxxxxxx xxxxxx se vzorkem. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx nebo xxxx nechat xxxxxxxxx. Xxxx mezi xxxxxxxx x odběrem xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) 1 xx xxxxxx xxxxx xx každé xx tří misek (4.2.4) x tím xxxxxxxxx 3 xx xxxxxx xxxxx (6.2).
6.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Do xxxxx naočkované xxxxx xxxxx asi 12 xx VRBL agaru (6.1)
Xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxx misky, xxx xx xxxxxxxx xxxxx x rovnoměrnému rozložení xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx nesmí xxxxxxxxx 15 minut.
Za xxxxxx xxxxxxxx sterility xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x 12 xx xxxxx VRBL xxxxx, xxxxx xxx xxxxxx xxx naočkování xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx vodorovném, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 4 xx XXXX xxxxx (6.1) na xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx.
6.5 Xxxxxxxx Petriho xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx dnem nahoru. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxx xxxxx. Sloupky misek xx nesmějí xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxx x xxxxxxxx se xxxxxxx a xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 24 ± 2 xxxxxx xxx 30 ± 1 °X.
6.6 Xxxxxxxx xxxxxxx
6.6.1 Počítat xxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx více než 150 xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx kolonie x xxxxxxx nejméně 0,5 xx, s xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.6.2 Xxxxx xxxx všechny nebo xxxxxxx xxxxxxx necharakteristický xxxx (např. jinou xxxxx, velikost nebo xxxx tvar xxxxxxxx xxxxxxxx k charakteristickým xxxxxxxx), provést xxxxxxxxxxx xxxx (6.7).
6.7 Konfirmační xxxx
Xxxxx xxxxx v xxxx 6.6.2 xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx u xxxxxxxx počtu (xxxx. 3 xx 5) xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xx xx pomocí xxxxxxxx xxxxx (4.1.6), xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx agar x xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.2). Xxxxxxxxx zkumavky 24 ± 2 hodin xxx 30 ± 1 °X.
Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx kolonie, xxxxx x Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx.
7. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 150 xxxxxxx.
7.2 Pokud xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx koliformních bakterií xx xxxxxxx procentuálního xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií.
7.3 Xxxxxxxxx xxxxx koliformních bakterií xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx podle xxxxxx xxxxxx:
ΣX / x
xxx:
ΣX je xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (7.1 x xxxxxxxxxxx se 7.2), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (6.3).
x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (6.3) x mililitrech (3 xx).
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx číslice, xxxxx xxxxxxxx xxxx než 100 xxxxxxx. Xxxx xx zaokrouhlovaná xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx xxx, xxx sousední číslice xxxxx xxxx sudá.
Pokud xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx než 150 xxxxxxx, uvést výsledek xxxx "odhadovaný xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx na 1 xx".
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kruhových xxxxx ještě xxxxxx x xxxxxxxxx.
XXX. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXX BUNĚK
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx buněk.
A. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Mikroskopická xxxxxx
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxx buněk xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx kalibrace x xxxxxxxx xxxxxxxxxx fluoro-opto-elektronické xxxxxx (xxx X.1).
2. Xxxxxxxx
Xxx tento postup xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx methylenovou xxxxx
3. Xxxxxxx
Xxxxxx 0,01 ml xxxxx xx 1 xx2 xxxxxxx podložního xxxxxxx. Xxxxx vrstva xx xxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxx počet xxxxx xx 1 xxxxxxxx.
4. Xxxxxxx
Xxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx čistoty x.x..
Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxx xxxx |
0,6 x |
|
Xxxxxxx – 99 % |
54 ml |
|
1,1,1-trichlorethan xxxx xxxxxxxxxxxxxxx |
40 xx |
|
Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx |
6 xx |
Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx je xxxxxxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxxxx se xxxxx xxxx uskutečnit v xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx a 1,1,1-trichlorethan xxxx xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxx xx vodní xxxxx xx 60 xx 70 °C. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx promíchat, 12 xx 24 xxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxx 4 °X x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx octovou. Xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxx velikosti xxxx 10 xx 12 xxxxxxx a uchovat xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx uzavřené láhvi. X případě vytvoření xxxxxx xxxx usazenin, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx.
5. Přístroje x pomůcky xx xxxx
5.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 500 × xx 1000 ×
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx umožňující xxxxxxxxx xx 0,01 ml x xxxxxxxxx nejméně ± 2 %.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxx 20 mm × 5 xx xxxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxx nebo standardní xxxxxxxx sklíčko x xxxxxxx 20 × 5 xx xxx xxxxxx xxxxxx.
5.4 Horizontální xxxxx deska (30 °X až 50 °X) pro sušení xxxxxxxxxx sklíček.
5.5 Ventilátor (xxx) pro sušení xxxxx xxxxxx.
5.6 Vodní xxxxx, xxxxxxxxxxxx na 30 xx 40 °X xxx ohřívání xxxxxx mléka.
5.7 Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 0,01 xx.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxx mléka musí xxx xxxxxxxx do xxxxx hodin po xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx nesmí teplota xxxxxx překročit 6 °X. Xxxxxx nesmí xxx zmražen.
6.2 Xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxx ve vodní xxxxx (5.6) xx 30 xx 40 °X. Poté řádně xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx které xxxx xxxxxxxxxxx mikrostříkačka (5.2), xxxxxxxxx 20 °X.
6.3 Xxxxxxxxx ošetření xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Skladovat v xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx (5.2) odebrat 0,01 xx xxxxx xx xxxxxx připraveného, xxx xx uvedeno xxxx. Xxxxxxx xxxxxxx vnější xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx do xxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (20 xx × 5 mm). Xxxx ji xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Nechat xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (5.4) xx xx xxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx a vyšetřit xxxxxxx dvě xxxxx xxxxxx.
6.5 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx 10 xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4). Sušit x, pokud xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.5). Xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx, xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx nesmyje. Xxxxx sušit x xxxxxxx tak, aby xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx.
6.6 Xxxxxxxxx mikroskopického xxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (500 × xx 1000 ×) xxxxxx průměr xxxxxxxxxxxxxxx xxxx (5.7).
7. Počítání x xxxxxxx
7.1 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx mikroskop (5.1). Xxxxx xxxxxxxx buněk xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx, x xx taková xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x x xxxxx je x xxxxxxxxxxxxxx poli viditelná xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxx xxxx xx xxxxxxx třetině xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx xxxx pole, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx tenkých vrstev x xxxxx x xxxxxxxxxxxx výsledků musí xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx polí xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx všechny xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
7.2 Stanovení xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx se mají xxxxxxx
Xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, variační xxxxxxxxxx počítání z xxxxxxxxxxx vzorků xxxxx xxx vyšší xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x obsahem 400000 xx 600000 xxxxx/xx xx neměl xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxx somatických xxxxx, xxxxx je xxxxx x xxxxxx xxxxxx spočítat, xxxx xxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx nejméně 400, xxx xxxx xxxxxxx kritérium opakovatelnosti.
Podle Xxxxxxxxxx rozdělení:
M = X = s2,
kde:
M xx xxxxxxx xxxxxxx
X xx xxxxxxx
x xx xxxxxxxxxx odchylka.
Variační koeficient xx:
XX = x × 100 % / M xxxx XX = 100 % / s nebo XX = 100 % / OBR
M (xxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxx), xxxxx xxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxx 400 xxx XX = 5 %).
7.3 Xxxxxxx pracovního xxxxxxx
Xxx xxxxxxx 0,01 xx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx vypočítá xxxxx xxxx 7.3.1 xxxx 7.3.2.
7.3.1 Xxxxxxxx pásů xx xxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxx, které xx xxxx xxxxxxx, xx 5 xx. Xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxx xx stanoven podložním xxxxxxxx s mikrometrickou xxxxxxxx (5.7).
Pracovní xxxxxx = 20 × 100 / d × x
xxx:
x je xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x mm, stanovený xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx stupnicí (5.7)
b xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
7.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xx střední xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx mřížky
Pracovní xxxxxx
xxx:
x je xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7)
x xxxxxxx xxxxx spočítaných xxxx.
7.4 Xxxxxxx xxxxxx xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx na xx xxxxx, xx počet xxxxxxxxxxxx somatických xxxxx (7.1 x 7.2) xxxxxxxx pracovním faktorem (7.3).
7.5 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxx 7.2) nesmí xxxxxxxxx 5 %.
Výsledky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, který xx xxxx po xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxx X.1) xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx počtu somatických xxxxx v xxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxx xxxxxx (například 0,2 xx) xx xxxxxxxx xxxxxxxx x tlumivým xxxxxxxx a s xxxxxxxxxxxxxx roztokem. Xxxx xxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx vrstvy xx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx x zaznamenává. Obsah xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx x tisících xx xxxxxxxx.
4. Xxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx použít xxxxxxx xxxxxxx p.a.. Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx je to xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx draselný |
51,00 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxx |
13,75 g |
|
Polyethylenglykol-mono-p(1,1,3,3-tetramethylbutyl)-fenylether(například Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 xx |
|
xX 5,7 xx 5,9. Xxxxxxx vodou na 10000 ml. |
Příprava:
Smíchat xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx.
4.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx roztok)
Složení
|
Ethidiumbromid |
1,0 x |
Xxxxxxx xxxxx xx 1000 xx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx vodě. Skladování xx xxxxxxxxxxxx uzavřené xxxxxx chráněné xxxx xxxxxxx xx nemělo xxxxxxxxx xxx měsíce.
4.3 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (pracovní xxxxxx)
Xxxxxxx 20 xx xxxxxxxxx roztoku (4.2) x xxxxxxxx roztokem (4.1) xxx, aby xx xxxxxx objem 1000 xx. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx používán více xxx sedm xxx.
4.4 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxx xxxxxx (4.1) |
10 xx |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 xx |
|
Xxxxxxx x 25 % xxxxxxxxxx |
25 xx |
Xxxxxxx vodou xx 10000 ml
Příprava:
Smíchat xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx překročit xxxxxx dní.
5. Přístroje x xxxxxxx xx xxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx principu xxxxxxx fluorescence.
Poznámka:
Zařízení musí xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx xx xxxxxxx vztah xxxx xxxxxxx částic, které xx xxxx počítat, x xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx níž xx xxxxxxxx provádí. Kalibrace xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx použití xxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (A).
5.2 Xxxxx xxxxx, x xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxxx xx 40 ± 1 °X.
5.3 Zkumavka, x xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx 15 xx.
6. Xxxxxx xxxxx
6.1 Xxxxxx xxxx xxx skladován xxx nízké teplotě xx zkumavce (5.3). Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx konzervován, xxxxxxxx xx může xxxxxxx xx xx xxxxxxxx 24 hodin xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx byl xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 6 °C.
6.2 Konzervace
Chemická xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xx 24 xxxxx. Konzervace musí xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
6.2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx prostředků:
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxx xxxxx xxx xxxxx než 0,6 x xx 100 xx. Takto konzervovaný xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx dalších 24 xxxxx při teplotě 6 xx 12 °X;
- dvojchroman xxxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx vzorku nesmí xxx xxxxx xxx 0,2 x xx 100 xx. Takto xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx dalších 72 xxxxx xxx xxxxxxx 6 až 12 °X;
- xxxx xxxxx:
xxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx koncentraci 0,024 g/100 xx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx 6 až 12 °X xxxxx xx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx 48 xxxxx po xxxx xxxxxx;
- xxxxxxxx:
xxxxxx může xxx xxxxxxxxxxx bronopolem x xxxxxxx koncentraci 0,05 x/100 xx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx 6 až 12 °X xxxxx xx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx 72 xxxxx xx jeho xxxxxx.
6.2.2 Xxxxxx, xxxxx xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx až 48 xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxx xxx x vzorky xxxxxxxxxxxx dvojchromanem xxxxxx, xxxx xxx dodrženy xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx.
7. Xxxxxx
7.1 Předběžné xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx, xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx asi 2-6 °X. Xxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxx xx bez předběžného xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, neboť xxxxxxxx xxxxx být xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx provést, vzorek xx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxx 6.2.1).
7.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx ošetřený vzorek (xxx 7.1) nebo xxxxxxxxxx vzorek xxxxxxx xxxxx den xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx (5.2) xx xxx 40 °C. Xxxx skladovat vzorek xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.1) xx 15 minut xx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 7.2). Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx důkladně xxxxxxxxx, aby se xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx rozdělení xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxxxxx provedeny v xxxxxxxx.
8. Spolehlivost
Výsledky opakovatelnosti (x) x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) mezinárodních kruhových xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxx, které xxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxx úrovni, xxxxxxxx xxxx odhady:
(1) xxxxx xxxxx xxxx 400 000 až 500 000 xxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx:
xx = 20000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx koeficientu 5–4 %)
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx:
xX = 40000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 10–8 %)
9. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx správnosti xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx o xxxxxx xxxxxx xxxxx, který xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx referenční xxxxxxxxxx.
XXXX. XXXXXXX XXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXX
XXXXXXX X XXXXXX POUŽITÍ
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx detekce xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx x x xxxxxxx ošetřeném xxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx postup xxxxxxxx:
X. Kvalitativní xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xx počáteční xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorky xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx jedním x xxxxxxxx postupů, xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx Bacillus xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx, XXXX 10149, xx xx xxxxxxxxxxx organismu. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx takovéto testy.
B. Xxxxxx pro xxxxxxxxxx x identifikaci penicilinu
Tento xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx konfirmaci xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx postupu, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxx.
X. Kvalitativní xxxxxx
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx x x tepelně xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx než xxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxx koncentrace xxxxxxx antibiotik x xxxxxxxxxxx [1]
|
Xxxxxxxxx testu |
||
|
Negativní |
Pozitivní |
|
|
Benzylpenicilin |
0,002 |
0,006 |
|
Ampicilin |
0,002 |
0,005 |
|
Cloxacillin |
0,015 |
0,035 |
|
Nafcilin |
0,006 |
0,011 |
|
Tetracyklin |
0,10 |
0,40 |
|
Oxytetracyklin |
0,20 |
0,45 |
|
Chlortetracyklin |
0,15 |
0,50 |
|
Chloramfenikol |
7 |
15 |
|
Dihydrostreptomycin |
4 |
13 |
|
Neomycin |
1 |
22 |
|
Kanamycin |
9 |
28 |
|
Bacitracin |
0,06 |
0,14 |
|
Erythromycin |
1 |
2,25 |
|
Rifamycin |
0,01 |
0,14 |
|
Diafenylsulfon |
0,01 |
0,1 |
|
Sulfametazin (Xxxxxxxxxxxx) |
0,5 |
1 |
|
Xxxxxxxxxx extrakt |
2 x |
|
|
Xxxxxx |
5 x |
|
|
Xxxxxx extrakt |
1 g |
|
|
Chlorid xxxxx |
5 x |
|
|
Xxxx |
10–15 g |
|
|
Voda |
1000 xx |
|
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx složky ve xxxx. Za xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx do xxxx. Upravit xX xxx, aby po xxxxxxxxxxx byla xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxxxx xxxx xx 100 xx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxx získat šikmý xxxx.
Xxxxxxxxxxxx 15 minut xxx 121 ± 1 °X.
5.1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxx xxxxx |
2 g |
|
Agar |
15 x |
|
Xxxx |
1000 ml |
|
Roztok xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx (viz 5.1.3) |
10 ml |
Příprava:
Rozpustit xxxxxx xx vodě, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Za xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °C. Upravit xX, aby xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 při 25 °X.
5.1.3 Roztok trimethoprimu xx tetroxoprimu
Složení:
|
Trimethoprim |
5 xx |
|
xxxx Xxxxxxxxxxx |
30 mg |
|
96 % Xxxxxxx |
5 ml/30 ml |
|
Vodado |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x ethanolu xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (5 xxxx 30 xx) x doplnit xxxxx.
5.1.4 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
0,75 xx |
|
Xxxxxxx |
5,0 xx |
|
Xxxxxxxxx xxxxx |
8,0 mg |
|
Bromkresolová xxxxxx |
0,025 x |
|
Xxxx |
50 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, pokud xx xx xxxxx, xxxxxxxx x sterilizovat xxxxxxxx. Živný roztok xx dostupný x xxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxxxx
5.2.1 Xx sterilní xxxxx x vhodným xxxxxxxx xxxxxxxxx roztok xxxxxxxxxx o 60 μx/xx (100 XX/xx), x xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx sodného xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
5.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 1,25 xx roztoku xxxxxxxxxx (5.2.1) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx do 1000 xx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 0,075 μx xxxxxxxxxx/xx (= 0,125 XX/xx).
5.2.3 Xxxxxxxxx 75 xx standardního xxxxxxx penicilinu xxxxxxxxxxxx 0,004 μx penicilinu/ml (= 0,0067 XX xxxxxxxxxx/xx) xxxxxxxx 4 xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2.2) xx 71 xx xxxxx xxx inhibičních xxxxx (5.3).
5.2.4 Xxxxxxx penicilinu xxxxxxx xxxxx bodů 5.2.1 xx 5.2.3 xx měly xxx xxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxx.
5.3 Xxxxx xxx inhibičních látek
Připravit xxxxxxxxx xxxxxxxx mléka xxx inhibičních látek xxxxxxxxxxx sušeného xxxxxxxxxxxx xxxxx (10 % x/X) ve xxxx, xxxxx bylo xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Rovněž xxx použít xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx otestováno x xxxxxxxxxx za xxxxxx inhibičních xxxxx; xxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx se xxxxx xxxxxx xx 100 °X, xxxx xx uloženo xx xxxxxxxxxx s teplotou 0 °C xx 6 °C xx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
5.4.1 Xxxx xxxxxxxxx organismus xx xxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx XXXX 10149 Xxxx XXXX 10149 xx xxxxxxxxx s xxxxxx X 953.
5.4.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx kulturu xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xx šikmém xxxxxx xxxxx (5.1.1). Xxxxx agar xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx 48 xxxxx xxx 63 ± 1xX. Po xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx kultura xxxx xxx skladována xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 0 xx 5 xX.
5.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxx)
5.5.1 Asepticky přenést 20 ml xxxxxxx xxxxx (5.1.1) do xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx (4.2.2) x xxxxxx xxxxxxxx xx pokojovou xxxxxxx.
5.5.2 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) přenést 5 xx sterilní xxxxxxxxxxx xxxx xx zkumavky xx zásobní kulturou (5.4.2) x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx spóry xx šikmého xxxxx. Xxxxxxxx xxxx se xxxxx xxx 0 xx 5 °C x xxxxxxx xx xx 36 xxxxx.
5.5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx spór (5.5.2) xx Xxxxxxx xxxxx (5.5.1) a důkladně xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx 16 xx 18 hodin xxx 63 ± 1 °C (4.1.1).
Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (5.4.2) nebo kultury xxxxxx 36 hodin xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx nejméně xxxxxxx x xxxxxxx intervalu xxxxxxxxx 36 xxxxx.
5.5.4 Xxxxxxxx pipetou (4.2.4) xxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxxx xxxx xx Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (5.5.3) x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxx (4.2.3) xxxxxxxxxx 250 xx sterilní xxxxxxxxxxx xxxx. Láhev xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, které xxxxxx ihned přeočkovány, xx xx xxxx xxxxxxxxx x chladničce xxx 0 až 6 °C.
5.5.5 Po 16xx xx 18xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 63 ± 1 °X xx xxxxxxxx xxxxx by xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx 5 a 10 xxxxxxx na xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx vykazovat xxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, měla xx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (5.4.2).
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx
5.6.1 Nechat xxxxxxxxx agarové xxxxxx (5.1.2), xxxx xxxxxxxx xx 55 °X.
5.6.2 Xxxxxx část xxxxxxxx xxxxxxxxx spór (5.5.4) x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (5.6.1) xx xxxxxxxx nebo x xxxxxxxx. Důkladně xxxxxxxxx.
5.6.3 Přenést xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx (4.2.6) 0,3 xx xxxxxxxxxxxx média (5.6.2), xxx se xxxxxxxxx 5 xx xxxxxx, poté xxxxxxx xxxxxxxx zátkou nebo xxxxxx xxxx, v xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx. Nechat xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, poté xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx 12 xxxxx ve xxxxxx xxxxxx.
5.6.4 Zkumavky/ampule mohou xxx xxxxxxx xxx xxx, xxx xxxxx xxx xxxxxx skladovány xxxxxxx xxxxxx xxx 0–6 °C, pokud xxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxx xx xx nejdříve xxxxxxxx, xxxxxxx xx 24 xxxxx xx xxxxxx, x xx té xxxx se skladují xxx xxxxxxx 0-5 °X. Pokud xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx 24 xxxxx, xxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (−30 °xx - 15°X), xxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.2 Xxxxxxx x nesmazatelně xxxxxxxxxxxxx xxxxxx zkumavku/ampuli (5.6). Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx stojánku (4.1.3) xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxx (5.2 x 5.3).
6.3 Xx xxxxx xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxx 50 mikrolitrů xxxxxxx xxxxxxx (5.1.4).
6.4 Xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x mikrostříkačkou (4.1.4) xxxxxxx 0,1 xx vzorku xx xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx. Pro xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx stříkačku.
6.5 Xxxxxx xxxxx xxxx 6.4 xx opakuje stejným xxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,004 μg/ml (= 0,0067 XX/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx (5.2.3).
6.6 Xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.4 xxxxxxxx xxxxxxx způsobem xx xxxxxxx kontrolního xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek (5.3) xxxxxxx xxxxxx mléka.
6.7 Xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx x xxxxxxxx xx zkumavkami/ampulemi xxxxxxx na xxxxxxx 2½ xx 2¾ xxxxxx xx xxxxx xxxxx x teplotou 63 ± 1 °X (4.1.2).
6.8 Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx x xxxxx xxxxx.
6.9 Xxxxxxxxx xxxxx agarového xxxxx (viz 7).
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Purpurové xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx roztokem xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx ve vzorku x xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx "xxxxx xxxxxxxxx" xxxxxxx x xxxxxxx na straně 39. Xxxxx xxxxxxxxx xx zkumavkách/ampulích xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx penicilinu (6.5) zůstane purpurové, xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx citlivé.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx 39.
7.3 Xxxxx zabarvení xxxxxxxxx xxxxx ve zkumavkách/ampulích xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxx organismu.
7.4 Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx všech xxxxxxxxxxx zkumavkách/ampulích, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxxxx životaschopné spóry x xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx novému xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx testovacím materiálem.
8. Xxxxxxxxx výsledků
8.1 Xxxxxxxx xxxxxxxx všech xxxxxx x xxxxxxxx popsanými x 7.1 x 7.2 xxxxx xxxxxx "X".
Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, musí xxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X. Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
1. Xxxxxxx x oblast použití
Tento xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx penicilinu xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx ve xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx (X.7.1) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (A.7.2).
Citlivost xxxxxxx xxx různá xxxxxxxxxxx
Xxx A.1.
2. Definice
2.1 Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx sulfonamidů, xxxxx xxxxxxxx postupem xxxxxxx xxxxx inhibiční xxxx nejméně 2 xx xxxxx xxxxx.
2.2 Xxxxx xxxxxx, který xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx (2.1), x xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxx), xxxxxxxxx xxxxx zónu xxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xx průměr xxxx bez xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx je xxx xxxxxxxxx xxxx xxxx penicilinu a xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
2.3 Xxxxx xxxx xxxx není penicilinázou (2.2) xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxx penicilin, xxx může xx xxx xxxx xxxxxxxx [xxx xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx A, xxxxxxxx XX, A.1.f) a 2x)].
Xxxxxxx polosyntetické peniciliny, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx nebo jsou xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxx x nemohou xxx xxxxxxxxxxxxxx jako xxxxxxxxxx (xxx 7.3).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx papírový xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx, xx umístí xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx mikroorganismus po xxxxxxxx narušuje xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxx x xxxxx xxxxxxxx látky xxxxxxxxx xxxxx pro xxxx. Xxxxxxxx čiré xxxx xxxx xxxx xxxxxx xx koncentraci x druhu xxxxxxxxx xxxxx v xxxxx.
4. Xxxxxxxxx, pomůcky ze xxxx x xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Viz X.4.1.
4.1.2 Xxxxx xxxxx, nastavitelná xx 80 ± 1 °C.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
Xxx X.4.2.
4.3 Xxxxxxxx disky, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx 9 až 13 xx, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx 130 xx xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx).
5. Xxxxxxxxxx xxxxx, standardní xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx testovací xxxxxxxxxx xxx.
Xxxxxxxx xxxxxx kultivačních xxxxx musí xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxx destilovaná voda xx skle xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx alespoň xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Voda xxxxx obsahovat xxxxxxxxx xxxxx xxx růst xxxxxxxxxxx organismu.
5.1 Xxxxxxxxxx xxxxx
5.1.1 Živný agar (X.5.1.1)
5.1.2 Kultivační xxxxxx xxx detekci xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5 x |
|
Xxxxxxx |
1 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx (X.5.1.3) |
10 xx |
|
Xxxx |
10–15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx agaru |
|
Voda |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxx zahřívání a xxxxxxx xxxxx rozpustit xxxxx xxxxxx ve xxxx, poté přidat xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xx přidání xxxxxxxxxxxxx xxxx tetroxoprimu xxxxxxx xxxxxxx xX, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx 8,0 + 0,1 xxx 25 °X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx 15 minut při 121 ± 1 °X.
5.2 Xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxxxx v xxxxx
Xxx X.5.2.
Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (8) xxxxxxxxx standardní xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek (X.5.3) v xxxxxx xxxxxxxxxxxxx:
x) 0,004 μg/ml (0,0067 IU/ml)
b) 0,006 μx/xx (0,01 XX/xx)
x) 0,03 μg/ml (0,05 XX/xx)
x) 0,06 μg/ml (0,01 IU/ml).
5.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxx
5.3.1 Xxxxxxxxx dostatečné xxxxxxxx penicilinázy (xxxx-xxxxxxxxx) xx sterilní xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 1000 X/xx. Tento xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx dávky, je xxxxx xxxxxxxxx až xxxxx xxxxx při 0 °X xx 5 °X.
Xxxxxxxx
Xxx penicilinázu xxxxxxxxxx xxxxxxxx mezinárodní xxxxx. Xxx účely xxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxx, xx deset xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx 0,6 μx (= 1 XX) xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx x neznámou xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx tento xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxxxx.
5.3.2 Namísto xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx kontrolním xxxxxxxx zjistí, xx xxxxxxxx odpovídající xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxx X.5.4.
5.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxx)
Xxx A.5.5.
5.6 Xxxxxxxx Petriho misek
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx agarové xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), xxxx xxxxxxxx xx 55 xX.
5.6.2 Xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx (5.5) x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx detekci xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, x důkladně xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx Petriho xxxxx (X.4.2.2), předem xxxxxxx xx 55 °C, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx se xxxxxxxxx 0,6 až 0,8 xx xxxxxx. Pro Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx 140 xx je xxxxx xxx 15 xx xxxxxxxxx xxxxx, aby xx vytvořila 0,8 xx xxxxxx.
5.6.4 Umístit Xxxxxxx misky xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx vodorovnost xx xxxxx vodováhou, xxxxxxx xxxxx x nechat xxxxxxx médium ztuhnout. Xx ztuhnutí xxxxx, xxxxxx xxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xx dnem xxxxxx, xxx xx na xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx agarového xxxxx.
5.6.5 Takto připravené Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxx, xxx xxxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx týdny, xxxxx xx ihned xx přípravě xxxxx xx zataveného xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x uchovávají xx xxx 5 °X.
5.6.6 Xxxxxxx dna Xxxxxxx misek, xxx xxxx xxxxx identifikace xxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 U xxxxxx x pozitivním xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx podle "xxxxxx X" (A.7.1 x X.7.2) musí xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx za xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx 10 xxxxx xx 80 ± 1 °X, xxx xx vyloučil xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
6.1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx, poté přenést xxx 10 xx xxxxxx xxxxxxxxx mléka xx xxxxxxxx lahvičky xx xxxxxxx hrdlem. X xxxxx xxxxxx xxx 0,4 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.3) x xxxxx promíchat.
6.2 Xxxxxxx inhibičních látek
6.2.1 Xxxxxxx xxxxxxxx disk (4.3) do xxxxxx xxxxx (6.1.2) pomocí xxxxx x suché xxxxxxx. Odstranit xxxxxxxxxx xxxxx otřením disku x xxxxxxxx se xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx (5.6) x xxxxx přitlačit xxxxxxxx.
6.2.2 Xxxxx napuštěné xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xx druhého xxxxxxx 20 mm x xx xxxxxx xxxxxxx 10 xx.
6.2.3 Xxx kontrolu citlivosti xx xxxxx (4.3) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx roztokem xxxxxxxxxxxx (5.2) xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx mezi xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx v poměru xxxxxxx 2 % xxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxx; při xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
6.2.4 Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx agarové xxxxxx x xx xxxxxx identifikaci, obrátit xxxxx dnem xxxxxx x nechat xx xxxxxxxxx 2,5 xx 5 hodin xxx 63 ± 1 °X.
6.2.5 Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx světla, xxx bylo xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx kolem papírových xxxxx. Xxxx zóny xx xxxxx.
6.2.6 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (6.2.3) xxxx kolem disku xxxxxxxx nejméně 2 xx xxxx.
6.2.7 Xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx nebo xxxxx xxx velikost xxxxxxx x 6.2.6, ukazují xx přítomnost xxxxxxxxxxx xxxxx x testovacím xxxxxxxxx.
6.3 Identifikace x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
6.3.1 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx mléka (6.1.2) x xx xxxxxxx ošetřeným xxxxxxxxxxxxx (6.1.3). Xxxxxxx přidání xxxxxxxxxxxx xx 10 xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx do xxxxxx mléka ponořit xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (5.3.2) a xxxxxx xx na testovací xxxxx.
6.3.2 Xxxxxx 6.2.1 xx provede dvojmo xxx každý xx xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxxxxxx xxxxxxxxx v 5.2 x) xx x).
6.3.3 Xxxxxxxxx průměrný xxxxxx xxxxxx inhibičních zón xxx xxxxxx mléka, xxxxxxxxx vzorky xxxxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 2)
7.1 Xxxxx se xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx kontrolní xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx, xxx xxxx zóna xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxx xxxx xxxxx disku napuštěném xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2x)), inhibiční xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx krystalického xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx vyšší než 0,004 μg/ml.
7.2 Xxxxx xx xxxxxxxx hodnota xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx disku nepuštěném xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx možné xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx použité x tomto xxxxxxx.
7.3 Xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx čiré xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx kontrolní xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx průměru čiré xxxx kolem xxxxx xx vzorkem xxxxx xxxxxxxxx xxxxx 6.1.2, xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, a xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx. Syntetické xxxxxxxxxx, xxxx je cloxacillin xxxxx, xxxxxxxx být xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx než xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxx než xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx postupy.
8. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx může xxx xxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, nebo xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxxxx x xxxxx (5.2 x) xx d)).
8.2 Xxxxxxxxxx standardní xxxxxx
Xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx log10 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x průměrem xxxxxxxxxxx xxx, xxxxxxxxxx xxxxxx xxx sestrojit xx logaritmický papír xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx penicilinu xx xxxxxxxxx x xxxxxx zón xx xxxxxx. Inhibiční xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx zdvojeného xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xx graficky xxxxxxx na základě xxxxxxxxxxxx koncentrací penicilinu x xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx.
8.3 Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx ve vzorku xxxxx lze xxxxxxxxx xx základě xxxxxxx xxx vzorků xxxxxx xxxxxxx nebo je xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx. Pro přesné xxxxxxxxx xx poloměr xxxxxxxxxxx zón xxxxxxx xxxxxxx větší, avšak xxxxxxx xxxxxxx větší xxx xxxxxxx xxxxx.
9. Xxxxxxxxx výsledků
9.1 Xxxxxxxx xx vyjadřují xxxx xxxxx penicilinu xxxxx xxxx vyšší než 0,004 μg/ml (xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace) xxxx jako obsah xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx.
9.2 Xxxxxxxxxxxxxx (x) a xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X)
Xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx x jsou xxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX
1. Předmět a xxxxxx použití
V souladu x xxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx A, xxxxxxxx XXX xxxx 2, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, které xxxx být xxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx patogenních xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Definice
Vyšetření se xxxx xxxxxxx u xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx mléko proti xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Pokud xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx X, xxxxxxxx XXX xxxxx 2 uvedené xxxxxxxx, xxxxx xxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X x 21 °X, xxxxxxxxxx bakterie x xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx test xx detekci xxxxxxxx xx xxxxxxxx pouze xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxx xx xxxxxxx spojitost xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxx
Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx musí xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx vydávání xxxxxxxxx x xxxxxxxxx nezávadnosti xxx xxxxxxx ošetřené xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx. Pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx, pokud xxxxxxxx, xxxxxxx kritéria x xxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxxx úrovni.
4. Xxxxxx x xxxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx:
Xxxxx mléka xx mililitr, nebo "xxxxxxxxxx" xx "xxxxxxxxxxxx" x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, který xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx jasně xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.