Rozhodnutí Xxxxxx
xx xxx 14. xxxxx 1991,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx analýzy a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx ošetřeného xxxxx
(91/180/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX SPOLEČENSTVÍ,
s xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x ohledem xx xxxxxxxx Xxxx 85/397/XXX xx dne 5. srpna 1985 x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx obchodu x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx uvnitř Xxxxxxxxxxxx [1] xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 89/662/XXX [2], x xxxxxxx na xx. 10 xxxx. 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxx čl. 10 xxxx. 2 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx dodržování xxxxx xxx xxxxxx xxxxx x tepelně xxxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, že xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, obsahu xxxxx, bodu xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx xxx pasterované mléko xx xxxxxxxx stanovit xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx nepřítomnosti xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx mikroorganismů, nepřítomnosti xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, že xxx xxxxxxxxxxxxx mléko x XXX xxxxx je xxxxxxxx stanovit zejména xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx x xxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx analýzy x xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx dodržování xxxxxxxx xxxxx; xx xx xxxxxxx xxxxxxxx pokračovat x prošetřování xxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx rutinní xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx; xx v očekávání xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xx xx, aby xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 85/397/XX xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx stanovení xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx i xxxxxxxxx postupů analýzy x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx zajištění xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx opatření xxxxxx rozhodnutí xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
XXXXXXX XXXX ROZHODNUTÍ:
Xxxxxx 1
Referenční xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxx tyto:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx.
Článek 2
Xxxxxxxxxx postupy xxxxxxx a xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx:
- stanovení xxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx,
- stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxx 30 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 21 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx – xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxx antibiotik a xxxxxxxxxxx,
- detekce patogenních xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 3
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx a testování xxx XXX xxxxx x sterilizované mléko xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganizmů při 30 °X,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Článek 4
Xxxxxxx referenčních xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx kritérií xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx musí xxxxxxx podle xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx X.
Xxxxxx 5
Xxxxxxxxxx postupy xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx 1, 2 x 3 jsou xxxxxxx x xxxxxxx XX.
Článek 6
Xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx 31. xxxxxxxx 1992, xxx xx zohlednil xxxxx vědeckých x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 7
Xxxx rozhodnutí xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X Xxxxxxx xxx 14. února 1991.
Xx Xxxxxx
Xxx Xxx Xxxxxx
xxxx Xxxxxx
[1] Xx. věst. X 226, 24.8.1985, x. 13.
[2] Xx. xxxx. X 395, 30.12.1989, x. 13.
XXXXXXX X
XXXXX
X. Xxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x tepelně xxxxxxxxxx xxxxx
X. XXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxx
Xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx činidel, xxxxxxxxx a xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx mléka xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxx
2.1.1 Xxxxx xxxx stanoveno xxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx, xxxxxx nebo xxxx xxxx xxx xxxxxxx voda destilovaná, xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxxxx účely xxxx xxx bez xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx mikroorganismů xx xxxxxxxxx testovacích xxxxxxxx.
2.1.2 "Rozpouštěním" xxxx "xxxxxxx" (bez xxxxxxx xxxxxxxxx) se xxxxxx "xxxxxxxxxxx xx xxxx" xxxx "ředění vodou".
2.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxx stanoveno xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
3.1 Xxxxxx xxxxxxxxx x pomůcek
Příslušný seznam xxxxxxxxx x pomůcek xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxx xxxxxxxxx x pomůcek xx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.2 Xxxxxxxxxx váhy
"Analytickými xxxxxx" xx xxxxxx xxxx s xxxxxxxxx xxxxxx xx 0,1 xx.
4. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx xxxx stanoveno xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xx zprávě x xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx průměrem xxxx xxxxx, které xxxxxxx xxxxxxxxx opakovatelnosti (5.1) xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx splněno, xxxx xx musí xxxxxxxx, xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Výpočet xxxxxxxxxxxxxx podílu
Pokud xxxx xxxxxxxxx xxxxx, výsledek xx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx hmotnosti vzorku.
5. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: opakovatelnost x reprodukovatelnost
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxxx:
5.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) xx xxxxxxx, xxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx mezi xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testu, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx výrobkem za xxxxxxxx podmínek (xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx, krátké xxxxxx období).
5.1.2 Reprodukovatelnost (X) xx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx dvou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x týmž xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx, různé xxxxxxxxxx a/nebo xxxxx xxxx).
5.1.3 Xxxxx xxxx xxxxxxxxx jinak, xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x příslušných odstavcích xxxxxxx postupu, xxxxxxxxxxx 95 % xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx ISO 5725, xxxxx vydání, 1986. Xxxx vypočteny z xxxxxxxx xxxxxxxx pokusů, xxxxxxxxxxx ve xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxx hodnocení xxxxxxx. Xxx některé xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxxx ve xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx. X xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
6. Xxxxxx o xxxxxxxxx
Xxxxxx x testování musí xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx jiné xxxx xxxxxx xxxxxxx podrobnosti xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x metodě xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx ovlivnit výsledky. Xxxxxx x testování xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx identifikaci xxxxxx.
XX. XXXXX XXXXXX XXXXXXXX A XXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx postup xxx xxxxx vzorků, přeprava x xxxxxxxxxx xxxxxx xx použijí pro xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x pro xxxxxx x tepelně xxxxxxxx xxxxx skladované xx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx x bodech 2, 4.4, 5 x 6 xx xxxxxxx xxx odběr xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx.
2. Xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka obsaženého x konvích, nádržích xxxx. xxxxxxxx pověření xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx to xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx považují xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx budou xxxxxxxxxxxxxxx x x souladu x xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx byla xxxxxxxxxxx.
3. Vybavení pro xxxxx vzorků
3.1 Obecné xxxxx
Xxxxxxxx xxx odběr xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx materiálu, xxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx, xxx.). Xxxxxxx x xxxxxxxx xxx míchání xxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx povrchu, xxx bylo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx promíchání xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx. Naběračky xxxx xxx opatřeny pevnou, xxxxxxxxxx dlouhou rukojetí x xxxxxxxx vzorků x jakékoli xxxxxxx xxxxxx. Objem xxxxxxxxx xxxx xxx alespoň 50 xx.
Xxxxxxxxxxx a xxxxx musí být xxxxxxxx, xxxxxx xxxx x xxxxxxxx plastu.
Materiály xxxxxxx xxx výrobě xxxxxxxx pro odběr xxxxxx (xxxxxx xxxxx x xxxxx) xxxxx xxxxxxxx takovou změnu xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx výsledky testů. Xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx na xxxxxx xxxx xxx čistý, xxxxx, hladký povrch xxx trhlin a xxxx xxx zakulacené xxxxx.
3.2 Vybavení xxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxx) musí splňovat xxxxxxxxxx xxxx 3.1 x musí xxx xxxxxxxx.
Xxxxx xx xxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx vybavení, xxxx xxx xx xxxxxx xxxxxx vzorku vyčištěno x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx s xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx orgán, xxx nedošlo x xxxxxxxxx xxxxxxxx po xxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxxxx xxxxxx vzorků
4.1 Xxxxxx xxxxx
Xxx ohledu xx xxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxx musí xxx xxxx odběrem xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx musí xxx odebrán xxxxx xx promíchání, když xx xxxxx xxxxx x pohybu.
Pokud xx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx, xxxx první xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxx mikrobiologické xxxxxxxxx.
Xxxxx vzorku musí xxxxxxxxx xxxxxxxx testování. Xxxxx použitých nádob xxxx xxx xxxxxx, xxx xxxx tyto xxxxxx téměř xxxxxxxx xxxxxxx x xxx xxx xxxx možné xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx však xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx.
4.2 Ruční xxxxx xxxxxx
4.2.1 Xxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxx xx xxxxx
X xxxxxxxx promíchání xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx nebo konvi xxxxxx x dolů, xxxxxxx xxxx xx xx, aby xx xxxxx řádně xxxxxxxxxx x xxx xx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx, xxxxx je reprezentativní xxx xxxxx zásilku, xx xxxxxxx postupem xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.2 Xxxxx x chlazených xxxxxx na mléko x xxxxxxxxxxx podniku
Míchat xxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx homogenity.
Pokud xxxxx xxxxx neumožňuje xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxx xxxxxx z xxxxx xxx
Xx xxxxxxxx, aby xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx se xxxxxx xx xxxxx xxx. Xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx rozdělení xxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxx, x xxx xx xx xxxxxxx vzorek, xxxxxxxx kapacitu xxxxx xxx, odebrat xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x celé xxxxxxx postupem xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.4 Odběr xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxx, x něhož xx xx provést xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx, x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx množství mléka xxx xxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxx z xxxxx xxxxxx xxxxxx xxx odděleně testovány, xxxxxxxx xx jednotlivé xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxx, které xx xxxxxxx x xxxxxx, xx které xxx každý xx xxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxx) xxxxxx (xxxxxx) x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
4.2.5 Odběr xxxxxx z xxxxxxx xxxxx – xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx kamiony, xxxxxxxxxx xxxxxx
4.2.5.1 Xxxx xxxxxxx vzorků se xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
X promíchání obsahu xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx doporučuje mechanické xxxxxxxxxx (4.2.5.2).
Délka promíchání xxxxxx xx době, xx xxxxxx bylo xxxxx x klidu. Xxxx být xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x každém x xxxxxxxxxxxx případů xx vhodný xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx testování. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxxx odebraných xxx x xxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx při xxxxxxxxxxxxx mléka x xxxxx. Způsob xxxxxxxxxx xxxxx (syrového mléka xxxx plnotučného mléka) xx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxx obsahu xxxx x obou xxxxxx odebraných xx xxxxxx xxxxxxxx menší xxx 0,1 %.
Ve xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx otvorem xx xxxxxx části xxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx malé xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xx promíchání není xxxxxxxxxxxxxxx xxx celý xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx odběr xxxxxx x xxxxxxxxxxx otvoru. X xxxxxxx xxxxxx xxxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxx dostatečné xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx zajištěna xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.5.2 Promíchání xxxxxx xxxxxxx nádob nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxx, cisternových xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx:
- mechanickou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx do nádoby x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x umístěnou x xxxxxxxxxx otvoru; xxxxxxxx je ponořena x xxxxx,
- x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx vagónů xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx je napojena xx xxxxx a xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx, stlačeným x xxxxxx vzduchem. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx, aby se xxxxxxxxx vniku žluklé xxxxx.
4.3 Automatický x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx vybavení xxx odběr vzorků xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx jiným xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx před x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, které xxxxxxxxx odpovědný xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx odběru xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x cílem xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, z xxxxx musí xxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxx přenosu (xxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx),
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x šarže po xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx orgán xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx objem xxxxx, ze xxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxx,
- minimální xxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx přenos,
- xxxxxxxxx, které xxxx xxx provedeno, nebo xxxxxxxxx preventivní opatření, xxxxx je xxxxx xxxxxxxx.
4.4 Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxx mléko xxxxxx k xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, vzorky xx xxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx nebo x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx, x xx, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx (x xxxxxxx pasterovaného xxxxx x den xxxxxxxxx).
X xxxxxxx xxxxx tepelně xxxxxxxxxx mléka (xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxxxxxx) se xxxxxxx takový xxxxx xxxxxx, aby odpovídal xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx provedena, x xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx podle xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
5. Xxxxxxxxxxxx vzorku
Vzorek xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx kódem, xxxxx umožňuje jeho xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx analytických xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxx 2).
6. Xxxxxxxx x skladování xxxxxx
Xx souhlasem xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx laboratoř xxxxxx xxxxxxxx xx lhůty x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx dodrženy x xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, a to xx xxxxxxx xxxxx xxxxx a testování, xxxxx xx xxx xxxxxxx.
Xxxxxx stanoví xxxx:
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxx nebyly xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x přímému xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx-xx je xxxxxx použitá pro xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 0 xX až 4 oC. Xxxx xxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxxx a x xxxxxx xxxxxxx xxxxx přesáhnout 36 xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, aby xxxx teplota xxxxxxxxxx 0 oC až 6 xX, xxxx-xx xxxx xxxx xxxxxxx x testováním xxxxx xxx 24 hodin,
- xxxxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxxx xxx mikrobiologické xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx teplotách 0 xX xx 4 xX. Doba xxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxxx x x xxxxxx xxxxxxx nesmí xxxxxxxxxx 24 xxxxx,
- xxxx vzorky xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx skladovány x xxxxxxxxx zařízení laboratoře x xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx být xx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx preventivní xxxxxxxx, xxxxx je xxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx x popisu xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
XXXXXXX I
OBSAH
I. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx
XX. Stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxx
XXX. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 30 °C
V. Stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 21 °X
XX. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx – xxxxxxxx kolonií xxx 30 °C
VII. Xxxxxxxxx obsahu xxxxxxxxxxx xxxxx
XXXX. Xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx
XX. Detekce xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
X. XXXXXXXXX XXXX XXXXXXX
1. Xxxxxxx x oblast použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxx mrznutí xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, XXX xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx přístroje (termistorového xxxxxxxxx), v xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx bod xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx mrznutí, xxxxxx xxxxx xxx je x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx, xx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx stanovenou xxxx xxxxxx. Xxxxxxxx x tomu, xx xx mohou lišit xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx různých xxxxx xxxxx, xxx x xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx x standardních xxxxxxx použitých pro xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx použití xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx se xxxxx používat x xxxxxxx rutinního testování.
Bod xxxxxxx lze xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx cizí xxxx x mléce xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxx 0,18 x xxxxxxxx xxxxxx xx 100 ml (xxx xxx 7.4).
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx ve xxxxxxxx Celsia (°X).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx vzorek xxxxx xx x xxxxxxxxxx xx přístroji xxxxxxxxx xx vhodnou xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx k xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx mrznutí xxxxxx.
Xxxxxxxx xx kalibruje takovým xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx postupem xxxx xxx vzorky xxxxx xxxxxxx přesné xxxxxx xxx dva xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx mrznutí mléka xx xxxxxxxx Xxxxxx.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx řízené chladicí xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx snímače (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx x xx xxxxxxxx xx xxxxxx.
4.1.1 Xxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx použít dva xxxx chladicí lázně.
4.1.1.1 Xxxxxxx typ
Dobře xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx tak, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx x kapalině xxxxx xxxxx xxx 0,2 °X. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x rozmezí ± 0,5 °X xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xx důležité, xxx v xxxxx xxxx udržována xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Celá xxxxxx zkumavky na xxxxxx xxx značkou xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
4.1.1.2 Xxxxxxxxxx xxx
Xxxxx zkumavky xx vzorky xxxxxx xxxxxxxxxxx proud vhodné xxxxxxxx xxxxxxxx. Teplota xxxxxxxx xxxx kolísat xxxxxxx x rozmezí ± 0,5 °C xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx výrobcem.
Vhodnou xxxxxxxx xxxxxxxxx xx 33 % (V/V) xxxxx xxxxxx 1,2-xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx).
4.1.2 Xxxxxxxxx x příslušný xxxxx
Xxxxxxxxx se xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x maximálním xxxxxxx 1,80 ± 0,2 xx x o xxxxxxx xxxxxx maximálně 0,31 xx. Xxxxxx xxxxxxxxx termistoru musí xxx xxxxx než 2 sekundy a xxxxxxx x (viz xxxxxxxx) musí být xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx x konstanta xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx při − 0,512 °X xxxxxxx termistoru stoupla xxx teplotu xxxxx xxxxxxxxx o 0,0005 °X. Maximální xxxxxxxxx xxxxxx může xxx ± 5 %.
Xxxx xx sonda x xxxxxxxxx v pracovní xxxxxx, konec xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx x ose xxxxxxxx na vzorky x x bodě, xxxxx xx 44,6 ± 0,1 mm xxx xxxxxx okrajem xxxxxxxx (xxx obrázek xx xxxxxx 15). Xx třeba xxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx nastavení sondy xx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx:
β xxxxxxxx termické xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx
− xX / xX × 1 / X = β / X2
xxx:
X xx xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx
X je odpor x xxxxxx xxx xxxxxxx X,
− dR / dT × 1 / X xxxxxxxx xxxxxxxxxx
β xx xxxxxxxxx, xxxxx závisí xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx 3000.
4.1.3 Xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
4.1.3.1 Xxxxxxx měření
Použitý xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx prvního xxxxx na xxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx zůstane xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx ± 0,002 xX xx xxxx xxxxxxx 20 sekund.
4.1.3.2 Xxxxx obsluha
Odpor termistoru xx xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, jejichž xxxxxxxxx tolerance xx ± 10 % x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx není xxxxx xxx 2×10−5°C.
Proměnný (xxxxxxxxxxx) xxxxx se xxxxx xxxxxxxx od linearity x celém xxxxxxx x více xxx x 0,3 % xxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx 0,001 °C.
4.1.3.3 Xxxxxxxxxxx provoz
Odečítací xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx nejméně 0,01 °X v rozmezí xx 0 °C xx –1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zařízení x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxx, xxx xxxxxxxx dvou xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx téže teploty xxxxxx vyšší xxx 0,001 °C.
Linearita xxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx xxx správné xxxxxxx přístroje nevznikla x žádném xxxx xxxxxxx od – 0,400 °X xx – 0,600 °X xxxxx chyba xxx ± 0,001 °X.
4.1.4 Xxxxxxxx
Xxx míchání testovacího xxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx 1 xx 1,5 xx, který xxxxxxxxx x mlékem,.
Míchačka xx xxxx být xxxxxxxxx xx rozkmit x xxxxxxxx vertikálně xxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Přípustná xxxxxxxxx je xxx 1,5 mm xxx xx pod xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx vibruje bočně x dostatečným xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (nejméně ± 1,5 xx), xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx okamžiku xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx.
4.1.5 Xxxxxxxx xx vyvolání mrznutí
Může xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx vyvolá xxxxxxx xxxxxx, aby teplota xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx k xxxx xxxxxxx. K tomu xxxxx lze použít xxxxxxxx; xxxxxx postupem xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx jednu xx xxx sekundy xxx, aby xx xxxxxxxx dotýkala xxxxx xxxxxxxx na xxxxxx.
4.1.6 Xxxxxxxx xx xxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx (xxx xxxxxxx 1) xxxx xxxxxxxx x 50,8 ± 0,1 mm xxxxxx; vnější průměr xx 16,0 ± 0,1 xx x xxxxxxx průměr xx 13,5 ± 0,1 xx. Tloušťka xxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxx xxx 0,1 xx.
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx okraje 29,8 xx (21 mm xxx xxxx xxxxxxxx), xxxxx uvádí xxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 mm.
4.1.7 Zdroj xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx musí xxx stabilizován buď xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx kolísání xxxxxxxxxxxxxx ± 1 % xxxxxxxxx hodnoty, když xxxxxx zdroj xxxxxx x ± 6 %.
4.2 Analytické váhy
4.3 Xxxxxxx xxxxx o xxxxxx 1000 ml, xxxxx X.
4.4 Sušárna, xxxxx odvětraná, xxxxxxxxxxxx xx 130 ± 1 °C
nebo
Elektrická xxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 300 ± 25 °X.
4.5 Xxxxxxxxx
5. Činidla
5.1 Xxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxxx skle, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx 20 ± 2 °X, ve zkumavce xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx x.x., xxxxx xxxxx, xxxxxx 5 xxxxx xxx xxxxxxx 300 ± 25 °X x xxxxxxxxxx peci xxxx xxxxxxx 24 xxxxx při teplotě 130 ± 1 °X v xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků
Navážit xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxxxxx 1) suchého xxxxxxxx xxxxxxx (5.2) do xxxxxxx. Rozpustit v xxxxxxxxxxx xxxx (5.1), xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx baňky x xxxxxx 1000 xx x doplnit xx xxxxxx vodou x teplotě 20 ± 2 °C.
Skladovat xxxxxxx xxxxxxx dva xxxxxx xxx xxx 5 °X v xxxxx uzavřených xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx 250 ml.
Bod xxxxxxx xxxxxxx chloridu xxxxxxx xxx 20 °X
|
x NaCl/l |
°C |
|
6,859 |
-0,408 |
|
7,818 |
-0,464 |
|
8,149 |
-0,483 |
|
8,314 |
-0,492 |
|
8,480 |
-0,502 |
|
8,646 |
-0,512 |
|
8,811 |
-0,521 |
|
8,977 |
-0,531 |
|
9,143 |
-0,541 |
|
10,155 |
-0,600 |
Před xxxxxxxx xx standardní roztok xxxxxxx promíchá xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Nikdy neprotřepávat xxxxxxxxxx xxxxxx tak xxxxxx, xxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx standardního xxxxxxx xx x láhve xxxxxx xx xxxxx x čisté xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx z xxxxx, xxxxx byly xx xxx čtvrtin prázdné, x nepoužívat roztoky xxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx fungicid (xxxxxxxxx roztok thiomersalu 10 x/x).
6. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx musí xxx xxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxx 1 °X xx xxxxxxx, xxx xxx se xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx 26–27 °X.
Xxxxxxx se, xx xxxxxxxx funguje xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xx byl zapnut xxxxxxx 12 hodin xxxx kalibrací. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx chladicích xxxxxxx.
Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx roztoky (xxx xxxxxxx xxxx), xxxxxxx bod xxxxxxx xx těsně nad xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx hodnotou bodu xxxxxxx xxxxxx mléka x xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx body xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx být xxxxx než – 0,100 °X.
(X některých xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx sestaven xxx, xx xx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. V těchto xxxxxxxxx výběr xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx postup; xxxxxxx xxxx tuto xxxxxxx xxxxx).
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku xx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx vyrobeny a xxxxxxxx xxxx zkumavky xxxxxxxxx na xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxx xxxx, xxxxx x xxxxxxxxxx demineralizovanou vodou). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků xxxx stejné xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx výrobce xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, dokud xxxxxx x kryoskopu xxxxxx roven bodu xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku. Xxxxxxxx xxxxx postup x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x střídavě xx xxxxxxxx takovým xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx následující odečty xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx správné hodnoty xxxx xxxxxxx xxxxxxx x nich, xxxx xx byla nutná xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Kryoskop xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx a xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx xx byla xxxxx xxxxxxxx úprava.
7. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
7.1 Xxxxx xx je xxxxxxxx skladovat vzorky xxx teplotě xxxx 0 °C x 5 °X.
7.2 Xxxxx xx je xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx cizí tělíska xxxx xxxx xxxxxx xxx xx xxxxxx xx čisté a xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx x xxxx xxx účinný xx laboratorní xxxxxxx.
7.3 Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0 x 5 °X) xxxx xx možné xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx testování. Xx xxxx nezbytné xxxx xx to, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx teplotu.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxxx kyselost mléka, xxxxx xxxxx současně xx stanovením bodu xxxxxxx. Xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 0,18 x kyseliny xxxxxx xx 100 ml xxxxx, nemohou xxx xxxxxxxxxxx.
7.5 XXX mléko x sterilizované xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 20 xxxxx xxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx.
8. Postup
8.1 Předběžné xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx x teplota xxxxxxxx xxxxxxxx jsou x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, případně xxx xx sonda xxxxxxxxxx xxxxxxx x prázdné xxxxxxxx xx vzorky. Xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx se, xxx xx chladicí kapalina xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx alespoň 12 xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx.
8.2 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (například xxxxxx x xxxxx xxxxxxx – 0,512 °X), dokud se xxxxxxx získané xxx xxxx po xxxx xxxxxxxxxxxxx měřeních nebudou xxxxx x více xxx 0,001 °X. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx liší xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku x xxxx než 0,002 °X, xxxxxxxx xx xxxxx kalibrujte, xxx xx xxxxxxx x xxxx 6.
Xxxxx se xxxxxxxx používá xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx kalibrace xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx hodinu, xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx výrobce.
8.3 Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx opatrným xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx otáčením. Xxxxx neprotřepávat standardní xxxxxx tak xxxxxx, xxx xx do xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx xxxxx xx xxxxx x čisté zkumavky xx xxxxxx. Ujistit xx, že xxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx x suché, xxxxx xx xx xxxxxxxx opatrně xx xxxxx směrem odspoda xxxxxx xxxxxx, čistou x chlupy nepouštějící xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xx kalibrovaného xxxxxxxxx xxxxx pokynů xxxxxxx. Mléko xx xxxxxxx x xxxxxxx xx vyvolá při xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x přesností xx 0,1 °C.
(U xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přístrojů xx xxxxx odečíst xxxx xxxxxxx x digitálního xxxxxxxxx; u ručních xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx tím, xx xx zajistí, xxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx se ručička xxxx xxxxx galvanometru xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxx.)
Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx začne xxxxx xxxx později, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx rozmezí, xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xx x xxxxx vzorkem xxxxx. Pokud tento xxxxx vzorek rovněž xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, alikvótní xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx na 45 °X a 5 xxxxx xx udržuje xx xxxx xxxxxxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Teplota xxxxx xx začátku xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx na xxxxxxx, xxxxx zůstane xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxx. Xxx mrznutí xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx této doby x xxxx xxxxxxx xx nutné zaznamenat.
Poznámka:
Doba, xx kterou xxxxxxx xxxxxxx konstantní, x xxxxxx interval mezi xxxxxxxx mrznutí x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxxxxx xx vzorku x xxx vodu x xxxxxxxxxx xxxxxxx chloridu xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxx xxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xx měření xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx zkumavku, xxxxxxxxxx xx vodou x otřít sondu x xxxxxxxx směrem xxxxxxx nahoru xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx vzorku xxxxx.
Xxxxx je rozdíl xxxx xxxxxxxxxx body xxxxxxx větší xxx xxxxxxx opakovatelnosti (0,004 °X), xxxxxxx druhé xxxxxxxxx x jiného xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx obou stanovení xxxxxx na 0,004 °X, xxxxxx se x použijí se xxx xxxxxxx konečného xxxxxxxx.
8.4 Xxxxxxxx sondy
Po xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx na xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx teplotu, xxx xxxxx xxxxxxx x chladu.
(U některých xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx; x xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx se xxxxxxx, xxx xx sonda xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx zchlazena, například xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, dokud xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.)
9. Xxxxxxxxx výsledků
9.1 Xxxxxxx
Xxxxx xx po xxxxxxxxx xxxxxxx kontroly kalibrace xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx dvou xxxxxxxxxxxx hodnot získaných xxx bod mrznutí, xxxxxxxxxxxx na xxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx součet xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx, je třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx hodnotu, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx:
Xxx xxxxxxx (°X)
|
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx |
Xxxxxx |
|
|
-0,544 |
-0,545 |
-0,544 |
|
-0,545 |
-0,546 |
-0,546 |
9.2 Xxxxxxxxxxxx
9.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (r): 0,004 °X
9.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X): 0,006 °C
Obrázek 1
Schéma xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1 (xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx)
XX. STANOVENÍ XXXXXXXX XXXXXXXXX
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x pasterovaném xxxxx.
2. Xxxxxxxx
2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx ve výrobku. Xx xxxxxxxxx množstvím xxxxxx x μx xx 1 ml xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 Aktivita xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx 4 xx xxxxxx na 1 xx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx dvojsodného. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxx dibromindofenolu (namodralé xxxxx), který xx xxxxxxxxxxxxxx měří xxx 610 xx. Xxxx xx provádí xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
4. Činidla
4.1 Xxxxxxx xxxxxx boritanu a xxxxxxxxx barnatého
4.1.1 Xxxxxxxxx xx xxxx 50,0 x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) [Xx(XX)2.8X2X] x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.1.2 Xxxxxxxxx xx xxxx 22,0 x xxxxxxxx xxxxxx (X3XX3) x xxxxxxx xx 1000 ml.
4.1.3 Zahřát 500 xx xxxxxxx xxxxxxx xx 50 °X, oba roztoky xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxx xx 20 °C, x xxxxxxx nutnosti upravit xxxxxxx xX xx 10,6 ± 0,1 xxxxxxxx xxxxxxx 4.1.1 xxxx 4.1.2. Přefiltrovat. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx uzavřené xxxxxx.
4.1.4 Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx stejným objemem xxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx vodě 6,0 x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XxXX2) xxxx 12,6 x NaBO2.4H2O x 20,0 g xxxxxxxx xxxxxxx (XxXx) x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.3 Tlumivý xxxxxx xxx xxxxxxx vzniklého xxxxxxxxx
Xxxxxx 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2) xxxxx xx 100 xx.
4.4 Xxxxxx substrátu
Rozpustit 0,1 x fenylfosfát xxxxxxxxx xxxxxxx, prostý xxxxxx, xx 100 xx tlumivého xxxxxxx (4.1.3) xxxx 0,5 x xxxxxxxxxxxx dvojsodného xx 4,5 ml xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2), xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx BQC (4.6) x nechat stát 30 xxxxx xxx xxxxxxxx teplotě. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 2,5 xx n-butanolu x xxxxxx xxxx, dokud xx xxxxxxx-1 xxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx-1. X xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx; xxxx xxxxxxxx xxxxxxx zabarvení x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx substrát xxxxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxxx, x to xxxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxxxx xx 100 xx roztoku xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.3).
4.5 Sraženina xxxxx-xxx
Xxxxxxxxx xx xxxx 3,0 g xxxxxx xxxxxxxxxxx (ZnSO4 · 7X2X) x 0,6 x xxxxxx xxxxxxxxx (XxXX4 · 5X2X) x xxxxxxx xx 100 ml.
4.6 Roztok 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx XXX)
Xxxxxxxxx x 10 ml 96 % (X/X) xxxxxxxx 40 ± 1 mg 2,6-dibromchinonchlorimidu (XXX) (X6X2Xx2XxXX6).
Xxxxxxxxx v xxxxx láhvi x xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxx xxx xxxxx xxxxx.
4.7 Xxxxxx xxxxxx měďnatého (XX)
Xxxxxxxxx xx vodě 0,05 g xxxxxx xxxxxxxxx (CuSO4.5H2O) x xxxxxxx xx 100 xx.
4.8 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx
4.8.1 Xxxxxxx 200 ± 2 xx xxxxxxx xxxxxxxxx fenolu x xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx o xxxxxx 100 xx, xxxxxx xxxx, promíchat x xxxxxxx na 100 xx. Xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx měsíců.
4.8.2 Xxxxxx xxxxx 10 xx xxxxxxxxx roztoku, xxxxxxx xx 100 xx x promíchat. 1 xx obsahuje 200 μx fenolu.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxxxx pomůcky xx xxxx, xxxxx x zátky a xxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Doporučuje xx oplachování čerstvě xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx čistění xxxxx.
x) Xxxxxxx xxxx plastových xxxxx mohou xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxxxxx laboratorní xxxxxxxx, xxxxxxx:
5.1 Xxxxxxxxxx xxxx
5.2 Xxxxx lázeň nastavitelná xx 37 ± 1 °C.
5.3 Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xx vlnové xxxxx 610 nm.
5.4 Zkumavky, 16 nebo 18 × 150 xx, xxxxxxx odstupňované po 5 xx x 10 xx.
5.5 Pipety
5.6 Xxxxxxxx nálevky xxxxxx xxxxxxxxx, např. x xxxxxxx 5 xx.
5.7 Xxxxxxxx xxxxxx o xxxxxxx xxxxxxx 9 xx pro xxxxxxx xxxxxxxx filtrace.
5.8 Xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
6. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
x) Xxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx falešně xxxxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxx xx xxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1 Příprava xxxxxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxx ihned xx xxxxxx xxxxxx. X xxxxxxx případě xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xx déle xxx xxx xxx.
6.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxx xx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx (5.4), xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx.
6.3 Xxxxxxxxx
6.3.1 Slepý vzorek xxxxxxxx xxx minuty xx vroucí xxxx; xxxxxxxx a xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx se prohřála xxxx xxxxxxxx. Rychle xxxxxxxx xx pokojovou xxxxxxx.
6.3.2 Po xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx slepý x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx způsobem. Xxxxxx 10 xx xxxxxxx xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxxxxx.
6.3.3 Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 60 xxxxx xx xxxxx lázni (5.2) x xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
6.3.4 Xxxxxx xxxx v bodě 6.3.1 zahřívat dvě xxxxxx ve xxxxxx xxxx. Xxxxxx zchladit xx xxxxxxxxx teplotu.
6.3.5 Xx každé xxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxxxx xxxxx-xxx (4.5) x xxxxx promíchat.
6.3.6 Xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx papír, vylít xxxxx dva xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx; xxxxxxxxxx 5 xx xx xxxxxxxx.
6.3.7 Xxxxxx 5 xx xxxxxxxxx roztoku xxx vyvolání zabarvení (4.2).
6.3.8 Přidat 0,1 xx xxxxxxx XXX (4,6), promíchat x 30 minut xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.9 X xxxxxxxxx x kontrolním xxxx slepým xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx při xxxxxx délce 610 xx.
6.3.10 Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxx 6.3.9 převyšuje xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 20 μg xxxxxx xx xxxxxxxx podle xxxx 6.4.4, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx vhodném xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx smícháním xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx objemem xxxxx xxxxx testovacího vzorku, xxxxx se xxxxxxx xxxxx xx xxxx, xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
6.4.1 Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx fenolu (4.8.2) xxxxxxxxx vyhovující xxxx zředěných xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0 (xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxx), 2, 5, 10 a 20 μx fenolu xx xxxxxxxx. Do xxxxx x pěti xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx 1 xx xxxx x 1 ml xxxxxx standardních xxxxxxx xxxxxx.
6.4.2 Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.7), 5 xx tlumivého roztoku xxx zředění xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.3), 3 xx xxxx a 0,1 ml xxxxxxx XXX (4.6); xxxxxxxxx.
6.4.3 Xxxxxx vyvíjet zabarvení 30 xxxxx xxx xxxxxxxx teplotě.
6.4.4 X xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx při xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.4.5 Na základě xxxxxx xxxxxxxxxx (6.4.4) xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (6.4.1) xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx metodou xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7. Vyjádření výsledků
7.1 Xxxxxxx a xxxxxx
7.1.1 Xx základě xxxxxx xxxxxxxxxx (6.3.9) xxxxxxxxx xxxxxxxx fenolu xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (6.4.5).
7.1.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx fosfatázy xxxxxxxxxx v μg xxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxxx xxxxxxxxx = 2,4 × X × X
xxx
X xx xxxxxxxx fenolu x μx získané xxxxx xxxx 7.1.1;
X xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx bodu 6.3.10 (x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx D = 1).
2,4 xx faktor xxxxxxx (5/12 z 1 xx xxxxxxxxxxx xxxxxx) – xxx 6.2 xx spojitosti x 6.3.2, 6.3.5 x 6.3.6.
7.2 Xxxxxxxxxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) : 2 μg xxxxxx/xx.
7.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (R) : 3 (předběžně) μx xxxxxx/xx.
7.2.3 Pokud se xxxxxxx xxxxxxx podle 6.3.10, limity xxxxxxx x 7.2.1 x 7.2.2 se xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.
XXX. STANOVENÍ XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo nepřítomnosti xxxxxx peroxidázy x xxxxx, xxxxx xxxxxx xx kontrole xxxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxxx:
Xxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx 30 sekund xx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xx peroxidázu:
Do 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx neobjeví xxxxx xxxxxxxxx.
3. Princip
Peroxidáza xxxxxxxx xxxxxxx vodíku. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx parafenylendiamin na xxxxxxxxx xxxxxxxxx (Xxxxxxxx xxxx). Intenzita xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx x xxxxx vodě (50 °X) 2 x 1,4 fenylendiaminu (X6X8X2) x xxxxxxx xx 100 xx. Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxx, x xxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Během xxxxxxx xx xxxx xxx xx xxxxxxxxxx roztok 1,4 xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx zředit 9 xx 30 % xxxxxxxx xxxxxx x doplnit xx 100 xx. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxxxxxxxx kyseliny xxxxxx na xxxx xxxxxxx.
Xxxxxx peroxidu xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxx měsíc, pokud xx xxxxxxxxx x xxxxxx a temnu, x xxxxx se xxxxxxxxx zátkou, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x organickými látkami.
5. Xxxxxx
5.1 Xxx 5 xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx zkumavky x xxxxxxx víčkem.
5.2 Xxxxxx 5 xx xxxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx (4.1).
5.3 Přidat 2 xxxxx roztoku xxxxxxxx xxxxxx (4.2).
5.4 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx zabarvení. Pokud xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx 30 xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxx specifická.
IV. XXXXXXXXX XXXXXX MIKROORGANISMŮ XXX 30 °C
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °C. Xxxxxx xx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, XXX xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx 15 xxx preinkubováno xxx 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx vytvářejí xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Princip
Smíchat xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx x kultivačním xxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx x nechat xxxxxxxxx 72 xxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx mikroorganismů xx 1 xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxx na 0,1 xx preinkubovaného xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx XXX xxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx ze xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Horkovzdušná xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na 170 xx 175 °C.
4.1.2 Xxxxxxxx, nastavitelný xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Inkubátor, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °X.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx xxx kompenzaci xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx lázeň, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Zvětšovací xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, zvětšení 8 – 10x.
4.1.8 Mechanické xxxxxxxxx
4.1.9 Xxxxxxxx schopná xxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx ředění s 9 xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx principu excentrické xxxxxx xxxxxx zkumavky.
4.2 Xxxxxxx ze skla
4.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x dostatečným xxxxxxx, s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x promíchání 10 xx primárního xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 ml xxxx xxxxxxxx x xxxxxx 20 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x nepoškozeným xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 ml, x xxxxxxxxx otvorem x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx misky z xxxxxx, bezbarvého skla xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxx xx xxxxxxx průměr xxx 90 až 100 xx. Vnitřní xxxxxxx xxxxx by xxxx xxx xxxxxxx 10 xx. Xxx xxxxx mít xxxxx xxxxxxxxxx, které by xxxxxxx počítání xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx ze xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx jednu xxxxxx xxx xxxxxxx 170–175 °X;
x) v xxxxxxxxx (4.1.2), nejméně 20 minut při xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx použití xxxxxxxxx xx nutné xxxx xx to, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx xx materiál xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xx xxxxxx být napevno xxxxxxxx, uzávěry xxxx xxxxx xx měly xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxx odvětráním xxxx.
Xxxxxx musí být xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Kultivační xxxxxx – agar xx xxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx extrakt |
2,5 g |
|
Trypton |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx (+) nebo xxxxxxxx |
1,0 g |
|
Sušené xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10–15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 ml |
Sušené xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx inhibiční xxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx průkazně xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X tomto pořadí xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx kvasnicový xxxxxxx, trypton, xxxxxxx x xxxxxxx sušené xxxxxxxxxx mléko. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx x xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx do xxxx, xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx x xxxx asi 30 xxxxx.
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx je xxxxxxxx, xxxxxxx pH, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx chlorovodíkové, aby xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx hodnota 6,9 ± 0,1 při 25 °X.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x skladování xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxxx xx 100 do 150 xx xx xxxxx nebo xx 12 xx 15 xx xx xxxxxxxx (4.2.2). Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx.
15 minut xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX kultivačního xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx než 1 xxxxx po xxxx xxxxxxxx.
5.3 Komerční xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx může xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kultivačního média. Xxxxxxx pokyny xxxxxxx, xxx přidat xxxxxx xxxxxxxxxx mléko před xxxxxxxxxxxx, pokud xxxx xxxxxxx produktu.
Upravit xX xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X xxxxxxx xxxxx xxxx 5.1, poté xxxxxxxx, sterilizovat x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx bodu. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Xxxxxx xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (NaCl) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, pokud xx xx xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xX-xxxxxx (4.1.4); pokud xx xx nezbytné upravit xX roztokem (xxxxxxx 0,1 mol/l) hydroxidu xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx byla xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
6.2 Rozdělení, xxxxxxxxxxx x skladování xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) tak, xxx xx sterilizaci xxxxx xxxxxxxx obsahovala 9,0 ± 0,2 xx xxxxxxx. Zkumavky xxxxxxx.
15 xxxxx sterilizovat x autoklávu (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxxx.
Xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x temnu xxx teplotě xxxx 1 a 5 °X, xxxxx ne xxxx než 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
6.3 Komerční xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) xx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx tablet xxxx xxxxxx. Dodržet xxxxxx výrobce. Upravit xX xxxxxxx xxxxx xxxx 6.1, poté xxxxxxxx, sterilizovat x xxxxxxxxx ředidla xxxxx xxxx 6.2.
7. Postup
7.1 Xxxxxxxxxxx kultivačního xxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxx rychle xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx vodní lázni (4.1.5) na 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx rozděleny, x to 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxx zabránit xxxxxx xxxx xxxx pěnu xxxxxx rozptýlit. Xxxx xxxx mícháním x xxxxxxx testovacího xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx minuty.
7.3 Příprava xxxxxxxxxx ředění (10-1) (xxxxxx x pasterované xxxxx)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 ml xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 9 ml xxxxxxx (6.1), xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx kontaktu x xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx teplota xxxxxx mléka. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx xx xxx xxxxxxxx ředění 10−1.
7.4 Xxxxxxxx dalších desetinných xxxxxx (xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) přenést 1 xx primárního xxxxxx (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx xxxxxx x xxxx 7.3.
Xxxxx se xxx xxxxxx 10−2.
X xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx ředění se xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx misek
7.5.1 Xxxxxx xxxxx: Sterilní xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx misky (4.2.4) 1 ml xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx nejméně dvě xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx misku.
7.5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx: Sterilní xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 ml xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx desetinného xxxxxx. Musí xxx xxxxxxxxx nejméně xxx xxxxxx. Pro každé xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx misku.
7.5.3 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx (vyšetřované xx 15 xxxxx xxxxxxxx xxx 30 °X – xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx X xxxxxxxx XXX xxx 5):
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx xxxxx (7.2). Xxxxxxxxx dvě xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx kultivačního média
Do xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 15 xx 18 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxx k xxxxxxxxxxxx rozložení xxxxxxx.
Xxxx xxxx koncem přípravy xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx, dokud xxxxxx xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx misky xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Misky xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx. Neskládat xx xxxx xxxx než xxxx xxxxx. Sloupky xxxxx xx nesmějí xxxxxxxx xxxxxxx, ani xxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx inkubátoru.
Inkubovat 72 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx kolonie x Petriho miskách xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 300 kolonií.
Misky xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx zvětšovací xxxx (4.1.6) a/nebo xxxxxxxxxx počítadlo (4.1.8). Xx nutné xxxx xx to, aby xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx sraženin x xxxxxxx x drobnými xxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx pochybností provést xxxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x xxxxx odlišit xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx za xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx tvořící xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx, spočítat xxxxxxx x nepostižené xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx tvořící xxxxxx pokrývají xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, misku xxxxxxx.
8. Xxxxxxx x vyjádření xxxxxxxx
8.1 Xxxxxx x xxxxxxxxxxx mléko
8.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 až 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.1.2 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 ml xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx tohoto vzorce:
∑C / (n1 + 0,1x2) x
xxx:
∑X ΣX xx xxxxxxx počet xxxxxxx podle xxxx 8.1.1.
(x1 + 0,1 x2)x je xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, kde:
n1 xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx
x2 xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx
x xx faktor zředění, xx xxxxxxx kterého xxxx xxxxxxx první xxxxx.
Xxxxx se xxxxxxxxxx xx dvě xxxxxx xxxxxxx. Když xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxx číslice vlevo xxxx xxxx.
Xxxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxx):
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 x 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; = 278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2
= 6290,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.1.3 Xxxxx jsou xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 10, xxxxx, že xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx "nižší xxx 10 x x", přičemž "x" xx převrácená hodnota xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
8.1.4 Xxxxx xxxx všechny xxxxx xxxxx xxx 300 x xxxxxxxx xx xxxxx, provést xxxxx x vynásobit xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Výsledek xxxxxxxx jako "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xx".
8.2 XXX mléko x xxxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xxxxx xxx 10 xxxxxxx na 0,1 xx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/XXX.
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx uznaných xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x dispozici.
V. XXXXXXXXX XXXXXX MIKROORGANISMŮ PŘI 21 °X
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxxxxxxxx xxxxxxxx kolonií xxx 21 °X x xxxxxxxxxxxx xxxxx, které xxxx xxx dní xxxxxxxxxxxxx xxx 6 xX s cílem xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx mléka psychotropními xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx se xxx xxxxxx se x xxxxx xxx 6 °C.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx pět xxx xxx 6 °X. Xxxxxxx xxxxxxxxx objem xxxxxx mléka s xxxxxxxxxxx médiem v Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx 25 xxxxx xxx 21 °X. Spočítat kolonie x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na 1 xx xxxxxxxxxxxxx mléka.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx skla
Obvyklé xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, zejména:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °C.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx:
x) 6 ± 0,2 °X
x) 21 ± 1 °X xx všech xxxxxx xxxxxx.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 jednotky xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °C.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx počítadlo
4.1.9 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxx xxxx desetinného xxxxxx x 9 xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx obsahu xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx s xxxxxxxx uzávěry a xxxxxxxxxxx objemem, s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx ředění.
4.2.2 Xxxxx o objemu 150 xx 250 xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx 20 xx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx vatou), skleněné xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, s xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Petriho xxxxx x čirého, bezbarvého xxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx materiálu, xxx xxxxx xx xxxxxxx průměr xxx 90 až 100 x. Vnitřní xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx nejméně 10 xx. Dno xxxxx xxx xxxxx nerovnosti, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx ze skla:
Pomůcky xx skla xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx postupů:
a) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx jednu xxxxxx xxx teplotě 170–175 °X;
x) v autoklávu (4.1.2), nejméně 20 xxxxx xxx teplotě 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx dbát xx xx, xxx xxxx zajištěno xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx xx xxxxxxxx sterilizuje x nádobách, tyto xxxxxx xx xxxxxx xxx napevno xxxxxxxx, xxxxxxx nebo víčka xx měly xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxx odvětráním xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx sterilizovány x horkovzdušné xxxxxxx (4.1.1).
5. Kultivační xxxxxx – xxxx xx xxxxxxx mlékem
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 g |
|
Trypton |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx(+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxx mléko |
1,0 g |
|
Agar |
10-15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxx srovnávacími xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx žádné xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx ve xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx x xxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, dokud xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx x xxxx asi 30 xxxxx.
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx je xxxxxxxx, upravit xX, xxxxxxxx (nejméně 0,1 xxx/x) hydroxidu sodného xxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 xx xx xxxxx xxxx xx 12 xx 15 xx xx xxxxxxxx (4.2.2). Baňky x xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx sterilizovat x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx se kultivační xxxxxx xxxxxxxxx ihned, xxxxxxxx se x xxxxx při xxxxxxx xxxx 1 a 5 °X, avšak xx xxxx než 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx mléko xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xX xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °C xxxxxxxx xxxxx bodu 5.1, xxxx rozdělit, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx kultivační xxxxxx xxxxx bodu. 5.2.
6. Ředidla
6.1 Xxxxxx xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
8,5 g |
|
Voda |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, xxxxx xx je xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xX-xxxxxx (4.1.4); xxxxx xx je xxxxxxxx xxxxxxx xX roztokem (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx zkumavek (4.2.1) xxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx v autoklávu (4.1.2) při 121 ± 1 °C. Xxxxxxxxxxxx pH ředidla.
Pokud xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, skladuje xx x xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx přípravě.
6.3 Xxxxxxxx dehydrovaná xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) xx xxxx xxxxxxxxxxx x komerčních xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx pH xxxxxxxx podle bodu 6.1, poté rozdělit, xxxxxxxxxxxx x skladovat xxxxxxx xxxxx bodu 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Rozpuštění xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nechat xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °C.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx mléka
7.2.1 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx [4.1.3 x)] xxxxxxxx balení xxxxxxxxxxxxx mléka nebo, xxxxx xx xxxx xxxxx, reprezentativní vzorek x xxxxxx xxxxxxx 100 xx xx xxxx 120 ± 2 xxxxx xxx 6 ± 0,5 °X.
7.2.2 Po xxxxxxxx xxxxxx mléka xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx co xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xx 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx pěny nebo xxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx mezi mícháním x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx tři minuty.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (10−1)
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 ml xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx pasterovaného xxxxx xx 9 xx xxxxxxx (6.1), xxxxxxx xxxxxx nesmí xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx mléka. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx míchačkou (4.1.9).
Xxxxx xx tak xxxxxxxx ředění 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx xxxxxx x xxxx 7.3.
Xxxxx xx tak xxxxxx 10−2.
X cílem xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx, dokud nelze xxxxxxxx přiměřené xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Naočkování Xxxxxxx misek
Sterilní xxxxxxx (4.2.3) přenést xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx desetinného ředění. Xxxx být vyšetřena xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx každé xxxxxxxxxx xxxxx nalít xxx 15 xx 18 ml xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Ihned promíchat xxxxxx Petriho misky, xxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx druhu xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx nesmí xxxxxxxxx 15 minut.
Nechat stát xx vodorovném, chladném x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx médium xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx dnem nahoru. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx nesmějí vzájemně xxxxxxx, ani xxx x xxxxxxxx se xxxxxxx a xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 25 xxxxx při 21 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx kolonie x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 300 xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxx tlumeném světle. Xxx xxxxxxxxx počítání xxx použít zvětšovací xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx nutné xxxx xx to, aby xxxxxxx x záměně xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx pochybností xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx skla s xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x xxxxx odlišit xxxxxxx od cizích xxxxxx.
Xxxxxxx tvořící xxxxxx xx považují xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx tvořící povlak xxxxxxxxx xxxx než xxxxxxxx xxxxx, spočítat xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx celou xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx více xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx vyřadit.
8. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Xxxxxx výsledky xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 kolonií (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.2 Vypočítat xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na 1 xx syrového xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx vzorce:
∑C / (x1 + 0,1n2) x
xxx:
ΣX je xxxxxxx xxxxx kolonií xxxxx xxxx 8.1,
(x1 + 0,1 x2)x je xxxxx xxxxxxxxxxxx vzorku, xxx:
x1 xx xxxxx xxxxx při xxxxxx xxxxxxx
x2 xx počet xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx
x je xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx počty.
Počet xx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxx číslice xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxx:
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 a 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; =278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2=
=629 / 0,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.3 Xxxxx xxxx všechny xxxxx xxxxx xxx 10, xxxxx, že počet xxxxxxxxxxxxxx na mililitr xx "nižší xxx 10 × d", xxxxxxx "x" xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx zředění.
8.4 Pokud xxxx xxxxxxx počty xxxxx xxx 300 x xxxxxxxx xx xxxxx, provést xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx faktoru xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx ml".
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx mezinárodně xxxxxxxx xxxxxxxxx testů xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX XXXXXX KOLIFORMNÍCH XXXXXXXX – POČÍTÁNÍ XXXXXXX XXX 30 °X
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x pasterovaném xxxxx xxxxxxxxx počítání xxxxxxx xxx 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxx bakteriemi" xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx 30 °X xxxxxxxxx charakteristické xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx jsou xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx zkvašovat s xxxxxxx xxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx x kultivačním xxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx x 24 xxxxx nechat xxxxxxxxx xxx 30 °C. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x, xxxxx xx xx nutné, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx schopnosti xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 xx pasterovaného xxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx skla
Obvyklé xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 až 175 °C.
4.1.2 Autokláv, xxxxxxxxxxxx na 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °C.
4.1.4 xX-xxxx xx zařízením xxx xxxxxxxxxx teploty, přesný xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Očkovací xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx-xxxxxxx xxxx nikl-chróm.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx uzávěry x xxxxxxx 20 xx, xxx xxxxx xxxxxxxxx konfirmační xxxxxxxxxx xxxxxx (5.2) x Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2.2 Baňky o xxxxxx 150 xx 250 xx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média (5.1).
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx xxxx ze xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx objemu 1 – 10 xx, x výpustním xxxxxxx o xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Petriho xxxxx x xxxxxx, bezbarvého xxxx xxxx xx xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, xxx xxxxx má xxxxxxx xxxxxx asi 90 xx 100 x. Vnitřní xxxxxxx xxxxx by xxxx xxx xxxxxxx 10 xx. Xxx xxxxx xxx xxxxx nerovnosti, xxxxx by xxxxxxx xxxxxxxx kolonií.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx skla:
Pomůcky xx xxxx xx xxxxxxxxxxx jedním x xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx 170 – 175 °X;
x) x autoklávu (4.1.2), xxxxxxx 20 minut xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx se xxxxxxxx sterilizuje x xxxxxxxx, tyto nádoby xx neměly xxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx být xxxxx.
Xxxxxxx xx skla xxxxxxxxxxxxx x autoklávech xx xx xxxx vysušit xxxxxxxxxx páry.
Pipety musí xxx xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxx x krystalovou xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx (XXXX xxxx). Sušené xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
7 x |
|
Xxxxxxxxxx extrakt |
3 x |
|
Xxxxxxx (X12X22X11.X2X) |
10 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
5 x |
|
Xxxxxxx xxxx |
1,5 g |
|
Neutrální xxxxxx |
0,03 x |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxx |
0,002 g |
|
Agar |
10 xx 15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxx a xxxxxx xxxx xxxxxxx minut. Xxxx důkladně xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx nutné, upravit xX roztokem (xxxxxxx 0,1 mol/l) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, xxx po xxxx byla jeho xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxx xxxxxx xx xxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x ihned xxxxxx xx množstvích 100 xx 150 xx xx xxxxxxxxxx xxxxx (4.2.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °C.
V době xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (6.4).
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx do xxx xxxxx po xxxx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx kultivační xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
10 g |
|
Laktóza (X12X22X11.X2X) |
10 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx |
20 x |
|
Xxxxxxxxxxx zeleň |
0,0133 g |
|
Voda |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxx x uvést xx varu.
Zkontrolovat xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) hydroxidu sodného xxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, xxx po sterilizaci xxxx xxxx xxxxxxx 7,2 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx xxxxxx xx 10 xx xx zkumavek (4.2.1) xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx uzavřít.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx nesmějí xx xxxxxxxxxxx obsahovat xxxxxxxxx bubliny.
Zkontrolovat xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx médium xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x temnu xxx xxxxxxx mezi 1 x 5 °X, xxxxx xx déle xxx 1 xxxxx xx jeho xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx dehydrované xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx může xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx dehydrovaného xxxxxxxxxxxx média. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX, xxxxxxxx, sterilizovat x xxxxxxxxx kultivační xxxxxx podle bodů 5.1 x 5.2.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxxx (XXXX agar) xxxxxxx v bodě 5.1.
6.2 Příprava xxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx byly xxxxxxxxxxxxxx co nejrovnoměrněji xxxxxxxxx, x xx 25 xxxxxxxx otočeními xxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx pěny xxxx xxxx nechat xxxxxxxxx. Xxxx mezi xxxxxxxx x xxxxxxx testovacího xxxxxx xx neměla xxxxxxxxx tři minuty.
6.3 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx přenést (4.2.3) 1 xx vzorku xxxxx do xxxxx xx xxx xxxxx (4.2.4) x tím xxxxxxxxx 3 ml xxxxxx mléka (6.2).
6.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx asi 12 xx XXXX xxxxx (6.1)
Xxxxx po xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, aby xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx nenaočkovanou misku x 12 xx xxxxx VRBL xxxxx, xxxxx byl xxxxxx xxx naočkování misky.
Nechat xxxx na vodorovném, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxx ztuhnutí xxxxx nejméně 4 xx VRBL xxxxx (6.1) xx povrch xxxxxxxxxxxx média.
Nechat ztuhnout.
6.5 Xxxxxxxx Xxxxxxx misek
Přenést xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Misky xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx nahoru. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxx než xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx inkubátoru.
Inkubovat 24 ± 2 xxxxxx xxx 30 ± 1 °C.
6.6 Xxxxxxxx xxxxxxx
6.6.1 Xxxxxxx xxxxxxx x Xxxxxxx miskách xxxxxxxxxxxxxx xxxx než 150 kolonií. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx kolonie x xxxxxxx xxxxxxx 0,5 xx, x xxxx bez xxxxxxxxx xxxxx, charakteristické xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.6.2 Pokud xxxx všechny nebo xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. jinou xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxx tvar sraženin xxxxxxxx x charakteristickým xxxxxxxx), xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (6.7).
6.7 Xxxxxxxxxxx xxxx
Xxxxx údajů v xxxx 6.6.2 xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxx (např. 3 xx 5) xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxx jehly (4.1.6), xxxxxxxx zkumavky obsahující xxxxxx agar x xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.2). Xxxxxxxxx xxxxxxxx 24 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °X.
Xx kolonie xxxxxxxxxxxx bakterií se xxxxxxxx xxxxxx kolonie, xxxxx v Durhamově xxxxxxxx tvoří xxxx.
7. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxx výsledky xxxxx xxxxxxxxxxxx maximálně 150 xxxxxxx.
7.2 Pokud xx provede xxxxxxxxxxx xxxx, vypočítat xxxxx xxxxxxx koliformních xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx podle xxxxxx xxxxxx:
ΣX / x
xxx:
ΣX xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx koliformních xxxxxxxx (7.1 v xxxxxxxxxxx xx 7.2), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (6.3).
x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorku (6.3) x xxxxxxxxxxx (3 xx).
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx dvě xxxxxx číslice, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxx 100 kolonií. Když xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx než 150 xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx "xxxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx na 1 xx".
8. Spolehlivost
Výsledky xxxxxxxxxxx uznaných kruhových xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
XXX. STANOVENÍ XXXXXX SOMATICKÝCH XXXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx postupy xxx xxxxxxxxx somatických buněk.
A. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx somatických xxxxx v xxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx buněk xx xxxxxx mléka xx xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx fluoro-opto-elektronické xxxxxx (xxx B.1).
2. Xxxxxxxx
Xxx tento xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, například xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx methylenovou xxxxx
3. Xxxxxxx
Xxxxxx 0,01 xx xxxxx xx 1 xx2 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Tenká vrstva xx xxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx mikroskopem. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx se vynásobí xxxxxxxxx faktorem, s xxxxx získat počet xxxxx xx 1 xxxxxxxx.
4. Činidla
Musí xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x..
Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxx modř |
0,6 x |
|
Xxxxxxx – 99 % |
54 ml |
|
1,1,1-trichlorethan xxxx xxxxxxxxxxxxxxx |
40 xx |
|
Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx |
6 xx |
Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxxxx xx proto xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx v xxxxx xxxxxxx a 1,1,1-trichlorethan xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xx vodní xxxxx xx 60 xx 70 °X. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxxx, 12 xx 24 hodin xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxx 4 °X x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxx filtr o xxxxxxxxx velikosti xxxx 10 až 12 xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. X případě xxxxxxxxx xxxxxx xxxx usazenin, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx přefiltrovat.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
5.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 500 × xx 1000 ×
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx umožňující dávkování xx 0,01 ml x přesností xxxxxxx ± 2 %.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 20 xx × 5 mm xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 20 × 5 mm pro xxxxxx xxxxxx.
5.4 Horizontální xxxxx xxxxx (30 °X xx 50 °X) xxx sušení xxxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5 Xxxxxxxxxx (xxx) pro xxxxxx xxxxx xxxxxx.
5.6 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx na 30 xx 40 °X pro ohřívání xxxxxx xxxxx.
5.7 Xxxxxxxx xxxxxxx x mikrometrickou xxxxxxxx po 0,01 xx.
6. Xxxxxx
6.1 Vzorek xxxxx
Xxxxxx mléka xxxx xxx xxxxxxxx do xxxxx xxxxx xx xxxxxx vzorku. Xxxxx xxxxxxxxxx nesmí teplota xxxxxx xxxxxxxxx 6 °X. Xxxxxx xxxxx xxx zmražen.
6.2 Příprava xxxxxx v xxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx (5.6) xx 30 xx 40 °X. Xxxx xxxxx xxxxxxxxx. Zchladit xx xxxxxxx, xxx xxxxx xxxx kalibrována xxxxxxxxxxxxxx (5.2), xxxxxxxxx 20 °X.
6.3 Xxxxxxxxx ošetření xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx nezanechává xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxx, xxx jsou xxxxxxxx xxxx prachem.
6.4 Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx (5.2) odebrat 0,01 xx mléka ze xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx výše. Xxxxxxx očistit vnější xxxxxx stříkačky, která xxxxxx xx xxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx podložní xxxxxxx (5.3) x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (20 xx × 5 xx). Xxxx ji xx xxxxxxxxxxxxxxx vyplnit. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx horizontální vyhřívací xxxxx (5.4) xx xx xxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxx vzorku xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx.
6.5 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx 10 xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4). Xxxxx x, xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.5). Xxxxxxx xxxxx vrstvy xx tekoucí xxxx, xxxxx xx přebytečné xxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx a xxxxxxx xxx, aby xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx.
6.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (500 × xx 1000 ×) xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx (5.7).
7. Počítání x výpočet
7.1 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx mikroskop (5.1). Xxxxx xxxxxxxx buněk xx počítají xxxxx xxxxxxx jádra, x xx xxxxxx jádra, xxxxx jsou xxxxx xxxxxxxxxxxx x x xxxxx xx x xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Počítat xxxx xxxx xxxx xx xxxxxxx třetině xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxx, které xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx vrstvy. Pečlivá xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxxxx výsledků xxxx xxx kontrolovány xxxxxxx xxxxxx za měsíc xxxxxxxxxx různých xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxx xxxx provádět xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx části xxxxx vrstvy xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
7.2 Stanovení xxxxxxxxxxx xxxxx buněk, xxxxx se xxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx k xxxx, xx počítání somatických xxxxx pod xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxx standardizaci xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx nesmí xxx vyšší xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx koeficient xxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx 400000 xx 600000 xxxxx/xx xx neměl xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxx somatických xxxxx, xxxxx je xxxxx x každém xxxxxx xxxxxxxx, musí xxx xxxxx Poissonova xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 400, aby bylo xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx Xxxxxxxxxx rozdělení:
M = X = x2,
xxx:
X xx xxxxxxx xxxxxxx
X xx rozptyl
s xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx:
XX = x × 100 % / M xxxx XX = 100 % / x&xxxx;xxxx XX = 100 % / XXX
X (xxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxx), xxxxx xxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxx 400 xxx XX = 5 %).
7.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx faktoru
Při xxxxxxx 0,01 xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx podle xxxx 7.3.1 nebo 7.3.2.
7.3.1 Xxxxxxxx xxxx xx tenké xxxxxx
Xxxxx xxxx, xxxxx se xxxx xxxxxxx, je 5 mm. Xxxxx xxxx xxxxxxxx průměru xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxxxxx podložním xxxxxxxx x mikrometrickou xxxxxxxx (5.7).
Xxxxxxxx xxxxxx = 20 × 100 / x × x
xxx:
x xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx pole x mm, stanovený xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7)
x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
7.3.2 Xxxxxxxx mikroskopických xxxx xx střední xxxxxxx tenké xxxxxx xxxx xxxxxx mřížky
Pracovní xxxxxx
xxx:
x je xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x mikrometrickou xxxxxxxx (5.7)
s xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
7.4 Xxxxxxx obsahu buněk
S xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx na xx xxxxx, se počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (7.1 a 7.2) xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (7.3).
7.5 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx koeficient (xxx 7.2) xxxxx xxxxxxxxx 5 %.
Výsledky xxxxxxxxxxx uznaných xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx.
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx, který xx xxxx po xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (viz X.1) používat pro xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxx buňkami xxxxxxxx xxxxxxx, které mají x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx XXX minimální xxxxxxxxx fluorescence.
3. Xxxxxxx
Xxxx xxxxxx (xxxxxxxxx 0,2 xx) xx xxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx a x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Část xxxx směsi xx xxxx přenese xx xxxxx tenké xxxxxx xx rotační disk, xxxxx slouží jako xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx x zaznamenává. Obsah xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x tisících xx xxxxxxxx.
4. Činidla
Pokud xxxx xxxxxxxxx jinak, xxxx xx použít xxxxxxx xxxxxxx x.x.. Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx deionizovaná, xxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxx čistoty.
4.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx |
51,00 x |
|
Xxxxxxxx draselný |
13,75 x |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx(xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % objemové |
10 ml |
|
pH 5,7 xx 5,9. Xxxxxxx xxxxx na 10000 xx. |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx ve xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx.
4.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (zásobní roztok)
Složení
|
Ethidiumbromid |
1,0 x |
Xxxxxxx xxxxx xx 1000 xx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx. Xxxxxxxxxx xx vzduchotěsně xxxxxxxx xxxxxx chráněné xxxx xxxxxxx by xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxxxx roztok (pracovní xxxxxx)
Xxxxxxx 20 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.2) x xxxxxxxx xxxxxxxx (4.1) xxx, xxx xx xxxxxx xxxxx 1000 xx. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxx více xxx sedm dní.
4.4 Xxxxxxx roztok
Složení
|
Tlumivý roztok (4.1) |
10 ml |
|
Polyethylenglykol-mono-p(1,1,3,3-tetramethylbutyl)-fenylether (xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 ml |
|
Amoniak x 25 % xxxxxxxxxx |
25 xx |
Xxxxxxx xxxxx xx 10000 xx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Skladování xx nemělo xxxxxxxxx xxxxxx xxx.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx principu xxxxxxx fluorescence.
Poznámka:
Zařízení xxxx xxx před xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx se xxxxxxx vztah xxxx xxxxxxx částic, xxxxx xx xxxx xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx se xxxxxxxx provádí. Xxxxxxxxx xxxxxxxx se provede xxxxx xxxxxx výrobce xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxx buněk xxx xxxxxxxx mikroskopickou xxxxxxx (A).
5.2 Xxxxx xxxxx, x cirkulací xxxx, xxxxxxxxxxxx na 40 ± 1 °X.
5.3 Zkumavka, x xxxxxxx uzávěrem, xxxxx xxx 15 ml.
6. Xxxxxx mléka
6.1 Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx nízké xxxxxxx xx xxxxxxxx (5.3). Xxxxx xxxxxx nebyl xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxxx 24 xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 6 °X.
6.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xx 24 xxxxx. Konzervace musí xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
6.2.1 Xxxxxxxx konzervace xxxxxx xx provede xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx konzervačních prostředků:
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx nesmí xxx xxxxx než 0,6 x xx 100 xx. Takto xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx dalších 24 xxxxx xxx teplotě 6 xx 12 °X;
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx 0,2 g xx 100 xx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx vzorek xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 72 xxxxx xxx xxxxxxx 6 xx 12 °C;
- azid xxxxx:
xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x konečné xxxxxxxxxxx 0,024 x/100 xx, xxxxx xx vzorek xxxxxxxx xx xxxxxxx 6 xx 12 °X xxxxx xx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx 48 xxxxx po xxxx xxxxxx;
- xxxxxxxx:
xxxxxx xxxx xxx konzervován xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx 0,05 g/100 xx, xxxxx je xxxxxx xxxxxxxx xx teplotu 6 xx 12 °X ihned po xxxx xxxxxx x xxxxxxxx do 72 xxxxx xx jeho xxxxxx.
6.2.2 Vzorek, xxxxx xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx boritou, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx 48 xxxxx dvojchromanem xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxx xxx o xxxxxx xxxxxxxxxxxx dvojchromanem xxxxxx, xxxx být xxxxxxxx xxxxxx podmínky xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxx ošetření xxxxxx
Xxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx, xx xx nadojení xxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx asi 2-6 °X. Xxxxxxxx xxxxxx x den xxxxxxxx xx xxx předběžného xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxx nutné xxxxxxxx provést, vzorek xx xxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxx nejméně xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxx 6.2.1).
7.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxx 7.1) xxxx xxxxxxxxxx vzorek xxxxxxx xxxxx den xxxxx xxxxxx xx vodní xxxxx (5.2) na xxx 40 °X. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxx pomocí xxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.1) xx 15 minut xx xxxxxxxx xxxxxxxx (viz 7.2). Xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xx nejlepšího xxxxxxxxxxx rozdělení xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx ředění a xxxxxxxx vzorku xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx opakovatelnosti (x) a xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nejsou x xxxxxxxxx.
Xxxxx, xxxxx jsou x dispozici xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxx:
(1) počet xxxxx mezi 400 000 xx 500 000 xxxx:
- směrodatná xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx:
xx = 20000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx variačnímu koeficientu 5–4 %)
- směrodatná xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx:
xX = 40000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx variačnímu xxxxxxxxxxx 10–8 %)
9. Xxxxxxxx správnosti
Kontrola xxxxxxxxxx xx provádí xxxxxx xxxxxx x známém xxxxxx xxxxx, který xx xxxxxxx počítáním xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
XXXX. DETEKCE ANTIBIOTIK X SULFONAMIDŮ
PŘEDMĚT X XXXXXX POUŽITÍ
Tato kapitola xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x sulfonamidů x xxxxxxx xxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx referenční xxxxxx xxxxxxxx:
X. Xxxxxxxxxxxx postup
Tento xxxxxx je xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx obsahují xxxxxxxxxxx x sulfonamidy. Popisovaný xxxxxx je xxxxxx x několika postupů, xxxxx jsou xxxxxxxx xx xxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx var. xxxxxxxxxxxx, XXXX 10149, xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxx reprezentativní xxx takovéto testy.
B. Xxxxxx pro xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx se xxxx xxxxxx pro konfirmaci xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx postup xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx detekci xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, jejichž xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxx uvedené x xxxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxx koncentrace xxxxxxx antibiotik a xxxxxxxxxxx [1]
|
Xxxxxxxxx xxxxx |
||
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxx |
|
|
Xxxxxxxxxxxxxxx |
0,002 |
0,006 |
|
Xxxxxxxxx |
0,002 |
0,005 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,015 |
0,035 |
|
Xxxxxxxx |
0,006 |
0,011 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,10 |
0,40 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,20 |
0,45 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxx |
0,15 |
0,50 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
7 |
15 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx |
4 |
13 |
|
Xxxxxxxx |
1 |
22 |
|
Xxxxxxxxx |
9 |
28 |
|
Xxxxxxxxxx |
0,06 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxx |
1 |
2,25 |
|
Xxxxxxxxx |
0,01 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,01 |
0,1 |
|
Xxxxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxxx) |
0,5 |
1 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2 x |
|
|
Xxxxxx |
5 x |
|
|
Xxxxxx xxxxxxx |
1 g |
|
|
Chlorid xxxxx |
5 x |
|
|
Xxxx |
10–15 x |
|
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx. Xxxxxxx pH xxx, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx jeho xxxxxxx 7,4 ± 0,1 při 25 °X.
Xxxxxxxx po 10 xx xx zkumavek xxxx xx 100 xx do xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx 15 minut xxx 121 ± 1 °X.
5.1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxx sodný |
2 x |
|
Xxxx |
15 x |
|
Xxxx |
1000 ml |
|
Roztok xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx (xxx 5.1.3) |
10 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx. Přidat trimethoprim xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °C. Upravit xX, xxx xx xxxxxxxxxxx byla xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.1.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx tetroxoprimu
Složení:
|
Trimethoprim |
5 xx |
|
xxxx Xxxxxxxxxxx |
30 mg |
|
96 % Xxxxxxx |
5 ml/30 xx |
|
Xxxxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x ethanolu xxxxxxxxxxxx nebo tetroxoprim (5 nebo 30 xx) x xxxxxxx xxxxx.
5.1.4 Živný roztok
Složení:
|
Kvasnicový xxxxxxx |
0,75 xx |
|
Xxxxxxx |
5,0 mg |
|
Rozpustný xxxxx |
8,0 xx |
|
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx |
0,025 x |
|
Xxxx |
50 ml |
Příprava:
Rozpustit ve xxxx živný xxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xx xx nutné, xxxxxxxx x sterilizovat xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx v xxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxxxx
5.2.1 Xx xxxxxxxx xxxxx s xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx roztok xxxxxxxxxx x 60 μx/xx (100 IU/ml), x xx rozpuštěním xxxxxxxxxxxxx benzylpenicilinu sodného xxxx xxxxxxxxxx ve xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
5.2.2 Xxxxxxxxx pracovní xxxxxx xxxxxxxxxx vložením 1,25 xx roztoku xxxxxxxxxx (5.2.1) sterilní destilované xxxx a doplnit xx xx 1000 xx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 0,075 μx xxxxxxxxxx/xx (= 0,125 XX/xx).
5.2.3 Připravit 75 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,004 μx xxxxxxxxxx/xx (= 0,0067 XX xxxxxxxxxx/xx) xxxxxxxx 4 xx pracovního xxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2.2) do 71 ml mléka xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.3).
5.2.4 Xxxxxxx penicilinu xxxxxxx xxxxx xxxx 5.2.1 až 5.2.3 xx měly xxx xxxxxxxxxx x den xxxxxxxxx xxxxx.
5.3 Xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (10 % x/X) xx vodě, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx mléka, xxxxx bylo xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx za xxxxxx xxxxxxxxxxx látek; xxxx xxxxx xx xxxxxxx do xxxxx x zahřívá se xxxxx xxxxxx na 100 °C, xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx 0 °C xx 6 °X xx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
5.4.1 Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx použije Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx XXXX 10149 Kmen XXXX 10149 xx xxxxxxxxx s kmenem X 953.
5.4.2 Připravit xxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx testovací xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx (5.1.1). Xxxxx xxxx xx x proužcích naočkuje xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx se xxxxxxx xxxxxxxx 48 xxxxx xxx 63 ± 1xX. Po inkubaci xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Takto xxxxxxx xxxxxxx kultura xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 0 xx 5 oC.
5.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (suspenze xxxx)
5.5.1 Asepticky xxxxxxx 20 xx živného xxxxx (5.1.1) xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx (4.2.2) a nechat xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5.2 Xxxxxxxx pipetou (4.2.4) přenést 5 xx sterilní xxxxxxxxxxx xxxx xx zkumavky xx xxxxxxx kulturou (5.4.2) x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx se xxxxx xxx 0 xx 5 °X x xxxxxxx xx xx 36 hodin.
5.5.3 Xxxxxxxx pipetou (4.2.4) xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxx (5.5.2) xx Xxxxxxx misku (5.5.1) a xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx látku xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx 16 xx 18 hodin xxx 63 ± 1 °C (4.1.1).
Xxx xxxxxxx zásobní xxxxxxx (5.4.2) nebo xxxxxxx xxxxxx 36 xxxxx xx očkování xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx intervalu xxxxxxxxx 36 xxxxx.
5.5.4 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxxx vody xx Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (5.5.3) a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxx (4.2.3) xxxxxxxxxx 250 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Láhev xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xx xxxx xxxxxxxxx v chladničce xxx 0 až 6 °X.
5.5.5 Xx 16xx až 18xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 63 ± 1 °X na agarovém xxxxx xx suspenze xxxx xxxx vykazovat xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx 5 a 10 miliony xx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx xx xx xxxxxxxx novou xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (5.4.2).
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx médium (5.1.2), xxxx xxxxxxxx xx 55 °X.
5.6.2 Xxxxxx část xxxxxxxx xxxxxxxxx spór (5.5.4) x pěti xxxxxx xxxxxxxxx média (5.6.1) xx xxxxxxxx nebo x xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.6.3 Přenést do xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx (4.2.6) 0,3 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.6.2), xxx xx xxxxxxxxx 5 xx xxxxxx, poté xxxxxxx xxxxxxxx zátkou xxxx xxxxxx xxxx, v xxxxxxx xxxxxx, zatavením xxxxx. Xxxxxx agarové xxxxxx ztuhnout, xxxx xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx 12 xxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
5.6.4 Xxxxxxxx/xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxx, xxx xxxxx xxx xxxxxx skladovány xxxxxxx xxxxxx xxx 0–6 °X, xxxxx xxxx ihned xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Vzorky xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx do 24 xxxxx po xxxxxx, x do té xxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxx 0-5 °X. Pokud není xxxxx xxxxxxxxx vzorky xx 24 hodin, xxxx xx xx xxxxxxx hluboko xxxxxxxx (−30 °xx - 15°X), xxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.2 Čitelně x nesmazatelně xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx (5.6). Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx do xxxxxxxx stojánku (4.1.3) xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx a xxxxx (5.2 x 5.3).
6.3 Xx xxxxx zkumavky/ampule xxxxxx 50 mikrolitrů xxxxxxx xxxxxxx (5.1.4).
6.4 Xxxxxx mléka xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx (4.1.4) přenést 0,1 xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.5 Xxxxxx xxxxx xxxx 6.4 xx xxxxxxx stejným xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,004 μx/xx (= 0,0067 XX/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxx vzorku xxxxx (5.2.3).
6.6 Xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.4 xxxxxxxx stejným xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek (5.3) xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
6.7 Xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx a xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxx na nejméně 2½ až 2¾ xxxxxx xx xxxxx xxxxx s teplotou 63 ± 1 °X (4.1.2).
6.8 Vyjmout xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx x xxxxx lázně.
6.9 Xxxxxxxxx barvu xxxxxxxxx xxxxx (xxx 7).
7. Xxxxxxxxxxxx výsledků
7.1 Purpurové xxxxxxxxx agarového xxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx roztokem xxxxxxxxxx xxxx testovacím xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx antibiotik xxxx xxxxxxxxxxx xx vzorku x xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx koncentraci "xxxxx xxxxxxxxx" xxxxxxx v xxxxxxx xx xxxxxx 39. Xxxxx zabarvení xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (6.5) zůstane xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2 Částečné xxxxxxxxx xxxxxxxx agarového xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxx mléka xxxxxxx na přítomnost xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx 39.
7.3 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx ve zkumavkách/ampulích xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx mléka xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
7.4 Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx, včetně xxxxxxxxxxx xxxxxxx, zkumavky/ampule xxxxxxxxxx životaschopné xxxxx x xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x čerstvě xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx výsledků
8.1 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx vzorků x xxxxxxxx popsanými x 7.1 x 7.2 xxxxx xxxxxx "X".
Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx skladovat, musí xxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx poškození xxxxxxxxxx.
X. Xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx koncentrace
1. Předmět x oblast použití
Tento xxxxxx popisuje konfirmační xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx penicilinu xx xxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxx (A.7.1) xxxx xxxxxxxxxx reakcí (A.7.2).
Citlivost xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx
Xxx X.1.
2. Xxxxxxxx
2.1 Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx popsaným postupem xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx 2 xx kolem disku.
2.2 Xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx (2.1), x xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxx), xxxxxxxxx xxxxx zónu xxxx xxxxxxx čirou xxxx xxxxxxx průměru xxx xx xxxxxx xxxx bez xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xx xxx penicilin xxxx xxxx penicilinu a xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
2.3 Xxxxx tato xxxx xxxx penicilinázou (2.2) inaktivována, xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxx penicilin, xxx může xx xxx jiné xxxxxxxx [xxx xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx X, xxxxxxxx XX, X.1.x) x 2x)].
Xxxxxxx polosyntetické peniciliny, xxxxxxxxx cloxacillin xxxxx, xxxxxx nebo xxxx xxxxx částečně xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx jsou xxxxxx x nemohou xxx identifikovány xxxx xxxxxxxxxx (viz 7.3).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx disk xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx, xx xxxxxx na xxxxxx agarového média xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx stearothermophilus xxx. calidolactis. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky pro xxxx. Velikost čiré xxxx xxxx xxxx xxxxxx xx koncentraci x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxx.
4. Xxxxxxxxx, pomůcky ze xxxx a vybavení
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Viz X.4.1.
4.1.2 Xxxxx xxxxx, nastavitelná xx 80 ± 1 °C.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
Xxx X.4.2.
4.3 Xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx 9 až 13 xx, xxxxxxx xxxxxxxxxx asi 130 xx mléka (xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx).
5. Xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx, roztok xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx se xxxxxx destilovaná voda xx skle xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx alespoň xxxxxxxxxxxx čistoty. Xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx růst xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1 Xxxxxxxxxx xxxxx
5.1.1 Xxxxx xxxx (X.5.1.1)
5.1.2 Kultivační xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx extrakt |
2,5 g |
|
Trypton |
5 x |
|
Xxxxxxx |
1 x |
|
Xxxxxx trimethoprimu xx xxxxxxxxxxxx (X.5.1.3) |
10 xx |
|
Xxxx |
10–15 g xxxxx xxxxxxxxxxxx vlastností xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx zcela xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx ve xxxx, xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx. Po přidání xxxxxxxxxxxxx xxxx tetroxoprimu xxxxxxx xxxxxxx xX, xxx po sterilizaci xxxx 8,0 + 0,1 xxx 25 °X. Sterilizovat xxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X.
5.2 Xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxxxx v xxxxx
Xxx X.5.2.
Xxx xxxxxxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx xxxxx (8) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (X.5.3) x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx:
x) 0,004 μx/xx (0,0067 IU/ml)
b) 0,006 μx/xx (0,01 XX/xx)
x) 0,03 μx/xx (0,05 XX/xx)
x) 0,06 μg/ml (0,01 IU/ml).
5.3 Roztok xxxxxxxxxxxx
5.3.1 Rozpustit xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxx) xx xxxxxxxx destilované xxxx s xxxxx xxxxxx koncentraci 1000 X/xx. Tento xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx týdny při 0 °C až 5 °X.
Xxxxxxxx
Xxx penicilinázu xxxxxxxxxx jednotná mezinárodní xxxxx. Pro účely xxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx penicilinázy xxxxx xx xxxxxxxxxx 0,6 μx (= 1 XX) penicilinu. X xxxxxxxxxxxx x neznámou xxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxxx, zda xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.3.2 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx je možné xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx organismus
Viz X.5.4.
5.5 Testovací xxxxxxx (xxxxxxxx xxxx)
Xxx X.5.5.
5.6 Xxxxxxxx Petriho xxxxx
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx agarové xxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), xxxx zchladit na 55 xX.
5.6.2 Xx xxxxx xxxxxx část xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx (5.5) x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx kolonií x naočkovaném agarové xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx Petriho misky (X.4.2.2), xxxxxx xxxxxxx xx 55 °X, xxxxxxxxxx agarové xxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx 0,6 až 0,8 xx xxxxxx. Pro Xxxxxxx xxxxx o xxxxxxxx xxxxxxx 140 xx xx xxxxx xxx 15 xx xxxxxxxxx xxxxx, aby xx xxxxxxxxx 0,8 xx vrstva.
5.6.4 Xxxxxxx Xxxxxxx misky xx xxxxxxx, vodorovný xxxxxx, xxxxx vodorovnost xx xxxxx vodováhou, xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx ztuhnout. Xx ztuhnutí xxxxx, xxxxxx víčka xx xxxxx x xxxxxxx xx xxxx xxxxxx, xxx se xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
5.6.5 Xxxxx připravené Xxxxxxx misky xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxx, ale xxxxx být používány xxxxxxxxx dva xxxxx, xxxxx xx xxxxx xx přípravě xxxxx xx xxxxxxxxxx polyethylenového xxxx a uchovávají xx xxx 5 °X.
5.6.6 Xxxxxxx xxx Xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx možná identifikace xxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Příprava xxxxxx
6.1.1 X xxxxxx x xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxx podle "xxxxxx A" (X.7.1 x X.7.2) xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx za účelem xxxxxxxxxxxx a kvantitativního xxxxxxxxx penicilinu.
6.1.2 Nejdříve xxxxxxxx vzorky 10 xxxxx xx 80 ± 1 °C, xxx se xxxxxxxx xxxx nespecifických termolabilních xxxxxxxxxxx xxxxx.
6.1.3 Důkladně xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxx 10 xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx hrdlem. X xxxxx přidat xxx 0,4 ml xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.3) x xxxxx xxxxxxxxx.
6.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
6.2.1 Xxxxxxx papírový disk (4.3) xx xxxxxx xxxxx (6.1.2) xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx x lahvičku xx xxxxxxx. Naplocho položit xxxx xx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx (5.6) x lehce xxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.2.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx od xxxxxxx xxxxxxx 20 xx x xx xxxxxx xxxxxxx 10 mm.
6.2.3 Xxx kontrolu xxxxxxxxxx xx xxxxx (4.3) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.2) xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx mezi xxxxx napuštěné xxxxxx xxxxx x poměru xxxxxxx 2 % xxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxx; xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx disků.
6.2.4 Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx na agarové xxxxxx x po xxxxxx identifikaci, xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxxxx 2,5 xx 5 xxxxx xxx 63 ± 1 °X.
6.2.5 Xx inkubaci xxxxxxxx xxxxx při xxxxxxx zdroji světla, xxx xxxx možné xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx kolem xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx zóny xx xxxxx.
6.2.6 Xxxxxxxxxx xxxxxx penicilinázy (6.2.3) xxxx kolem disku xxxxxxxx xxxxxxx 2 xx xxxx.
6.2.7 Čiré xxxx xxxxx disků xxxxxxxxxxx vzorky xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx x 6.2.6, xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
6.3.1 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx zahřátého xxxxx (6.1.2) a xx xxxxxxx ošetřeným penicilinázou (6.1.3). Namísto přidání xxxxxxxxxxxx xx 10 xx xxxxxx xxxxx xx možné xx xxxxxx mléka xxxxxxx xxxx napuštěný xxxxxxxxxxxxx (5.3.2) a uložit xx na testovací xxxxx.
6.3.2 Xxxxxx 6.2.1 xx provede xxxxxx xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x 5.2 x) xx x).
6.3.3 Xxxxxxxxx průměrný xxxxxx xxxxxx inhibičních xxx xxx xxxxxx mléka, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x pro xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
7. Interpretace xxxxxxxx (xxx 2)
7.1 Xxxxx xx kolem xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx žádná xxxx zóna, xxx xxxx zóna xx xxxxxx xxxxx disku xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2x)), xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx vyšší xxx 0,004 μx/xx.
7.2 Xxxxx xx průměrná xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx disku nepuštěném xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx hodnotě xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx možné inaktivovat xxxxxxxxxxx penicilinázy xxxxxxx x tomto postupu.
7.3 Xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx čiré xxxx kolem disku xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx než xxxxxxxx xxxxxxx průměru čiré xxxx xxxxx disku xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx 6.1.2, xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, a xxxxxxxxx xxxx polosyntetický xxxxxxxxx, xxxxx nelze xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx penicilinázy xxxxxxx x tomto xx. Syntetické peniciliny, xxxx xx cloxacillin xxxxx, xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx penicilinázou za xxxxxxxxx podmínek x xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx inhibiční xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx
Xxxxx to xx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxx než xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx postupy.
8. Xxxxxxxxx xxxxxx penicilinu
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx může xxx xxxxxxxxx buď xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xx základě velikostí xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx (5.2 x) až x)).
8.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx x xxxx, že xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx log10 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x průměrem xxxxxxxxxxx xxx, standardní xxxxxx lze xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxxx xx pořadnici x xxxxxx zón na xxxxxx. Inhibiční zóny xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx se graficky xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx koncentrací penicilinu x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx křivka.
8.3 Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx ve vzorku xxxxx lze vypočítat xx xxxxxxx xxxxxxx xxx vzorků pomocí xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx větší xxx xxxxxxx disků.
9. Xxxxxxxxx výsledků
9.1 Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxx 0,004 μg/ml (xxxx xxxxxxxx stanovené koncentrace) xxxx xxxx obsah xxxxxxxxxxx xxxxx jiných xxx penicilin.
9.2 Xxxxxxxxxxxxxx (x) x xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X)
Xxxxx nejsou x xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx x důsledku xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXX PATOGENNÍCH XXXXXXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
X xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/XXX, přílohy X, xxxxxxxx XXX bodu 2, tento xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx v pasterovaném xxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx příčinou xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx z xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx proti xxxxxxxxxxxxxxxxxxx patogenům. Xxxxx xxxx splněny xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx X, xxxxxxxx XXX xxxxx 2 uvedené xxxxxxxx, pokud jde x xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X x 21 °X, xxxxxxxxxx bakterie a xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx test xx xxxxxxx patogeny xx xxxxxxxx pouze xxxxx, pokud xxxxxxxx xxxxxxxxx, že mléko xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxx
Xxxxxxx a xxxxxxx vyšetření xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx způsobem, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx patogenních mikroorganismů xx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx úrovni.
4. Zpráva x xxxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx být výsledek xxxxxxxx takto:
Počet xxxxx xx mililitr, xxxx "xxxxxxxxxx" xx "xxxxxxxxxxxx" x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx požaduje xxxxxxx postup. Xxxxxx xxxx jasně xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.