Xxxxxxxxxx Komise
ze xxx 14. xxxxx 1991,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx syrového xxxxx x xxxxxxx ošetřeného xxxxx
(91/180/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx x založení Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x ohledem xx xxxxxxxx Xxxx 85/397/XXX xx xxx 5. xxxxx 1985 x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx Společenství [1] naposledy xxxxxxxxxx xxxxxxxx 89/662/XXX [2], x zejména xx xx. 10 xxxx. 2 uvedené xxxxxxxx,
xxxxxxxx x tomu, že xxxxx xx. 10 xxxx. 2 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx analýzy x xxxxxxxxx, které xx xxxx xxxxxxxx xxx kontrolu xxxxxxxxxx xxxxx xxx syrové xxxxx a tepelně xxxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxx xxxxxx xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, obsahu xxxxx, xxxx xxxxxxx x přítomnosti xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx nezbytné stanovit xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, nepřítomnosti xxxxxxxxx, přítomnosti xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxx xxxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx xxx xxxxxxxxxxxxx mléko x XXX mléko je xxxxxxxx stanovit xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx z xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, které xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; že xx xxxxxxx xxxxxxxx pokračovat x prošetřování xxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x testování; xx v xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xx xx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 85/397/XX xxxx xxxxxxx vhodné xxxxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx analýzy a xxxxxxxxx zahrnuje x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx zajištění xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx opatření xxxxxx rozhodnutí xxxx x xxxxxxx se xxxxxxxxxxx Stálého xxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
XXXXXXX TOTO ROZHODNUTÍ:
Xxxxxx 1
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x testování xxx xxxxxx xxxxx xxxx tyto:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- stanovení xxxxxx mikroorganismů xxx 30 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Článek 2
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxx 30 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 21 °X,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií – xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °C,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx,
- detekce xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 3
Referenční xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxx XXX xxxxx x sterilizované xxxxx xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganizmů xxx 30 °C,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 4
Použití xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx podle xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x příloze X.
Článek 5
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx 1, 2 x 3 xxxx xxxxxxx x xxxxxxx II.
Xxxxxx 6
Xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx 31. xxxxxxxx 1992, xxx xx zohlednil xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 7
Xxxx xxxxxxxxxx xx určeno xxxxxxxx xxxxxx.
X Xxxxxxx xxx 14. xxxxx 1991.
Za Xxxxxx
Xxx Xxx Xxxxxx
xxxx Xxxxxx
[1] Úř. xxxx. X 226, 24.8.1985, x. 13.
[2] Xx. věst. X 395, 30.12.1989, x. 13.
XXXXXXX X
XXXXX
X. Xxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
X. XXXXXX XXXXXXXXXX
1. Úvod
Obecná xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x zpráv x xxxxxxxxx. Příslušné xxxxxx členských xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx musí xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxx
2.1.1 Pokud xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx použitá x xxxxxxxxxxx, ředění nebo xxxx musí být xxxxxxx xxxx destilovaná, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx čistoty. Xxx xxxxxxxxxxxxxxx účely xxxx xxx xxx xxxxx, které mohou xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx testovacích xxxxxxxx.
2.1.2 "Xxxxxxxxxxxx" xxxx "xxxxxxx" (xxx xxxxxxx xxxxxxxxx) xx xxxxxx "xxxxxxxxxxx xx xxxx" xxxx "xxxxxx vodou".
2.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx používané xxxxxxxxxx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx a xxxxxxx
3.1 Seznam xxxxxxxxx x pomůcek
Příslušný xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.2 Analytické váhy
"Analytickými xxxxxx" se rozumí xxxx x přesností xxxxxx na 0,1 xx.
4. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx xxxx stanoveno xxxxx, výsledek xxxxxxx xx zprávě o xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (5.1) xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx není toto xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx musí xxxxxxxx, jinak xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx jinak, výsledek xx vypočítá v xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
5. Xxxxxxxx spolehlivosti: opakovatelnost x xxxxxxxxxxxxxxxxxx
5.1 Kritéria xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx postup xxxx xxxxxxxxxx takto:
5.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) xx xxxxxxx, xxx xxxxxx xx xxxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx výrobkem za xxxxxxxx xxxxxxxx (stejný xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx laboratoř, krátké xxxxxx období).
5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) xx xxxxxxx, xxx xxxxxx leží xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx totožným xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx za odlišných xxxxxxxx (různí xxxxxxxxxx, xxxxx přístroje, různé xxxxxxxxxx a/nebo xxxxx xxxx).
5.1.3 Pokud xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx kritéria opakovatelnosti x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx, uváděné x příslušných odstavcích xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx 95 % xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx podle xxxxxxxx ISO 5725, xxxxx vydání, 1986. Xxxx vypočteny x xxxxxxxx uznaných pokusů, xxxxxxxxxxx ve xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxx hodnocení postupu. Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx. X xxx xxxxxxx byly xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx naplánovány x xxxxxxxxxxx v souladu x xxxxxxxxxxxxx pokyny.
6. Xxxxxx o xxxxxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx postup x xxxxxxx výsledky. Xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, které xxxxxx xxxxxxxxx x metodě xxxxx, xxxx volitelné xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx, které by xxxxx ovlivnit výsledky. Xxxxxx x testování xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx úplnou identifikaci xxxxxx.
XX. ODBĚR XXXXXX XXXXXXXX A XXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXX
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx popisuje referenční xxxxxx xxx odběr xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx ošetřeného mléka. Xxxxx postup xxx xxxxx vzorků, přeprava x skladování xxxxxx xx použijí xxx xxxxxx mléko dodané xxxxxxxxxx x pro xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx mléko xxxxxxxxxx xx skladovacích x xxxxxxxxxxx nádržích.
Postupy xxxxxxx x bodech 2, 4.4, 5 x 6 se xxxxxxx xxx xxxxx vzorků xxxxxxx ošetřeného xxxxx xxxxxxxx x přímé xxxxxxxx.
2. Obecně
Odběr xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka xxxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xxxx. xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx byli xxxx xxxxxxx vzorků xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx laboratoř považují xx xxxxxxxx, vyškolí xxxxxxxxxxx pověřené odběrem xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, aby xxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x v souladu x celou šarží.
Pokud xx příslušné orgány xxxx xxxxxxxxx laboratoř xxxxxxxx za xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx vzorků xxxx xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx
3.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx musí xxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx x jiného xxxxxxxx, xxxxxxxxxx odolného xxxxxxxxx, xxx xxxx být xxxxxxxx x ohledem xx předpokládané xxxxxxx (xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx, xxx.). Plunžry x xxxxxxxx xxx míchání xxxxxxx x xxxxxxxx xxxx mít dostatečně xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx žluklé xxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxx opatřeny pevnou, xxxxxxxxxx dlouhou rukojetí x xxxxxxxx vzorků x jakékoli hloubky xxxxxx. Objem naběračky xxxx xxx xxxxxxx 50 xx.
Xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxx být xxxxxxxx, xxxxxx xxxx x xxxxxxxx plastu.
Materiály xxxxxxx xxx výrobě xxxxxxxx pro odběr xxxxxx (xxxxxx nádob x xxxxx) xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx testů. Xxxxxxx materiál x xxxxxx na vzorky xxxx mít xxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxxx xxx trhlin x xxxx xxx zakulacené xxxxx.
3.2 Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx (včetně xxxxx) xxxx splňovat xxxxxxxxxx bodu 3.1 x xxxx být xxxxxxxx.
Xxxxx xx xxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, musí xxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx vyčištěno x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx x pokyny xxxx xxxxxxxxx, které xxxxxxx testovací laboratoř xxxx xxxxxxxxx orgán, xxx nedošlo k xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx jdoucích xxxxxx.
4. Xxxxxxxx xxxxxx vzorků
4.1 Xxxxxx xxxxx
Xxx xxxxxx xx testy, které xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx být xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx, když xx xxxxx xxxxx x xxxxxx.
Xxxxx xx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx různé xxxxx, jako xxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx musí xxxxxxxxx potřebám xxxxxxxxx. Xxxxx použitých nádob xxxx být takový, xxx byly xxxx xxxxxx téměř xxxxxxxx xxxxxxx x při xxx xxxx možné xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxx hrozilo xxxxxxxxx stloukání xxxxx xxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxx xxxxx vzorků
4.2.1 Xxxxx xxxxxx z věder x xxxxx na xxxxx
X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx plunžrem ve xxxxx nebo xxxxx xxxxxx x xxxx, xxxxxxx xxxx na xx, xxx xx xxxxx xxxxx promíchalo x xxx se xx xxxxx konve xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx zásilku, xx odebere xxxxxxxx xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxx mléka neumožňuje xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxx xxxxxx z misky xxx
Xx xxxxxxxx, aby xxxxx bylo řádně xxxxxxxxxx, když xx xxxxxx do xxxxx xxx. Xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx míchání. Xxxxx xxxxx zásilky, x níž xx xx xxxxxxx vzorek, xxxxxxxx xxxxxxxx misky xxx, xxxxxxx reprezentativní xxxxxx x xxxx xxxxxxx postupem xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.4 Odběr xxxxxx x rozdělené xxxxx
Xxxx je xxxxxxxx xxxxx, u xxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx vzorků, rozděleno xx xxxx nádob, x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx reprezentativní xxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx každý xxxx. Xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx nemusí xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxx x množství, xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx, ze které xxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx (více) vzorek (xxxxxx) x těchto xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
4.2.5 Xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx – xxxxxxxxxx xxxxxx, cisternové xxxxxxx, xxxxxxxxxx vagóny
4.2.5.1 Xxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx vhodným způsobem xxxxxxxx.
X xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx kamionů xxxx cisternových xxxxxx xx doporučuje xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.5.2).
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx době, xx xxxxxx bylo xxxxx x xxxxx. Xxxx být xxxxxxxxx, xx postup promíchání xxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx promíchání xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxxx odebraných xxx x různých xxxxx xxxxx, nebo x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx. Xxxxxx promíchání xxxxx (xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx) xx xxxxxx, xxxxx xx rozdíl xxxxxx xxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx podmínek menší xxx 0,1 %.
Xx xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxx x místě xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, které xxx xx xxxxxxxxxx není xxxxxxxxxxxxxxx pro xxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxx odběru xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx vytéci dostatečné xxxxxxxx mléka, aby xxxx zajištěna reprezentativnost xxxxxx.
4.2.5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx nádob xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x cisternových xxxxxx je xxxxx xxxxxxx:
- mechanickou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx nádoby x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- vrtulí xxxx xxxxxxxxx poháněnou xxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx x průlezovém xxxxxx; xxxxxxxx xx ponořena x xxxxx,
- v xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxxxxxx hadici, xxxxx xx napojena xx pumpu a xxxxxxxx xx průlezového xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx, stlačeným x čistým vzduchem. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx, aby xx xxxxxxxxx vniku xxxxxx xxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx odběr xxxxxx
Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx vybavení xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx testovací xxxxxxxxxx xxxx jiným xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxx x xxxxx používání xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrolám, xxxxx xxxxxxxxx odpovědný orgán. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxxx x cílem xxxxxxxx:
- minimální xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx,
- poměr xxxxxxxxxx přenosu (xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx),
- schopnost xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x šarže xx xxxxxx promíchání.
Pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx příslušný xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx, xxxxx může xxx xxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.
4.4 Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka xxxxxxxx x přímé xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxx x xxxxxxx ošetřené mléko xxxxxx k přímé xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxx obchodní xxxxxx nebo x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zařízení xxx ošetření, a xx, xxxxx je xx možné, ihned xx xxxxxxxxxx (x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx mléka x xxx xxxxxxxxx).
X xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (pasterovaného, xxxxxxxxxx xxxxxxx UHT x xxxxxxxxxxxxxxx) xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, aby xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx být xxxxxxxxx, x xx podle xxxxxx poskytnutých xxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo podle xxxxxx jiného xxxxxxxxxxx xxxxxx.
5. Xxxxxxxxxxxx vzorku
Vzorek xx xxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx umožňuje jeho xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx analytických xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxx 2).
6. Xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx souhlasem příslušného xxxxxxxxxxxxxx orgánu xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx pokyny xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x skladování, které xxxx xxx xxxxxxxx x xxxx xxxx xxxxxxx vzorků xxxxxx xxxxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx xxxx:
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx je xxxxx xxxx na xx, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx slunečnímu xxxxxx. Xx-xx xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx průsvitná, musí xxx xxxxxxxxx xx xxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx testování xxxx xxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxx teplotách 0 xX až 4 oC. Xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx musí xxx xx nejkratší a x xxxxxx případě xxxxx xxxxxxxxxx 36 xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 0 xX až 6 xX, xxxx-xx xxxx xxxx odběrem x xxxxxxxxxx xxxxx xxx 24 xxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx musí být xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 0 xX až 4 xX. Xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxxx a v xxxxxx xxxxxxx nesmí xxxxxxxxxx 24 xxxxx,
- xxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxx syrového xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx musí xxx skladovány v xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxx xxxxxxx vzorku x xxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxx, jsou xxxxxxx v popisu xxxxxxx xxxxxxxxxxxx postupů.
PŘÍLOHA X
XXXXX
X. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx
XX. Stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxx
XXX. Xxxxxxxxx xxxxxxxx peroxidázy
IV. Xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxx 30 °X
X. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 21 °X
XX. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx – xxxxxxxx kolonií xxx 30 °X
XXX. Xxxxxxxxx xxxxxx somatických xxxxx
XXXX. Detekce xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx
XX. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx mikroorganismů
I. STANOVENÍ XXXX XXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx popisuje referenční xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, syrového, xxxxxxxxxxxxx, XXX xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx), x xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx elektrickým xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx snímač xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx na plató xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx typ je x obchodních xxxxxx xxxxxxxx xxx, že xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx ve stanovenou xxxx xxxxxx. Xxxxxxxx x xxxx, xx xx xxxxx lišit xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx druhů xxxxx, xxx i xxxxxx xxxx mrznutí xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx x pevně xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxx lze využít xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx x xxxxx za xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx není xxxxx xxx 0,18 g xxxxxxxx xxxxxx na 100 ml (xxx xxx 7.4).
2. Definice
Bod xxxxxxx mléka: xxxxxxx xxxxxxxx x souladu x xxxxxxxx postupem x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx Celsia (°X).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx vzorek xxxxx xx x xxxxxxxxxx xx přístroji podchladí xx xxxxxxx teplotu x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, která způsobí, xx teplota xxxxxx xxxxxxx až x xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx takovým xxxxxxxx, xxx se xxxxxxx xxxxxxxx jako xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxx plató udává xxx xxxxxxx mléka xx xxxxxxxx Xxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x pomůcky xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xx skládá x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, termistorového snímače (xxxxxxxxxxxxxx odporového xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, míchačky xx xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx, jakož x xx xxxxxxxx na xxxxxx.
4.1.1 Xxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxx xxxx chladicí xxxxx.
4.1.1.1 Xxxxxxx xxx
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx obsahující vhodnou xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx, xxx teplotní rozdíl xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 0,2 °C. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx kolísat xxxxxxx x xxxxxxx ± 0,5 °X xx xxxxxxxxx hodnoty xxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx, xxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx kapaliny. Xxxx xxxxxx xxxxxxxx na xxxxxx pod xxxxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
4.1.1.2 Xxxxxxxxxx xxx
Xxxxx zkumavky xx xxxxxx proudí xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx kapaliny. Teplota xxxxxxxx může xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx ± 0,5 °X xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx výrobcem.
Vhodnou chladicí xxxxxxxxx xx 33 % (X/X) xxxxx xxxxxx 1,2-ethandiolu (xxxxxxxxxxxxxx).
4.1.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx 1,80 ± 0,2 xx x x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 0,31 xx. Časová xxxxxxxxx termistoru xxxx xxx xxxxx než 2 xxxxxxx x xxxxxxx x (viz xxxxxxxx) xxxx být xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxxx, xxx xxx − 0,512 °X xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x 0,0005 °X. Maximální xxxxxxxxx xxxxxx může xxx ± 5 %.
Xxxx xx xxxxx x xxxxxxxxx v pracovní xxxxxx, konec xxxxxxxx xxxxxxx xx musí xxxxxxxx x ose xxxxxxxx xx xxxxxx x x bodě, xxxxx xx 44,6 ± 0,1 mm xxx xxxxxx okrajem xxxxxxxx (xxx xxxxxxx xx straně 15). Xx třeba dodat xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx této xxxxxx.
Xxxxxxxx:
β xxxxxxxx termické vlastnosti xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx
− xX / xX × 1 / X = β / X2
xxx:
X je xxxxxxx xx stupních Xxxxxxx
X xx odpor x xxxxxx při xxxxxxx X,
− dR / xX × 1 / R xxxxxxxx xxxxxxxxxx
β xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx použitém xxx xxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxx praxi xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx než 3000.
4.1.3 Xxxxxx x odečítací xxxxxxxx
4.1.3.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx pracuje xx xxxxxxxx vyhledávání prvního xxxxx xx křivce xxxx xxxxxxx. Xxxxx xx část xxxxxx, xxx xxxxxxx zůstane xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx ± 0,002 xX po dobu xxxxxxx 20 sekund.
4.1.3.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx termistoru xx xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx odporů, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx ± 10 % x xxxxxxx teplotní xxxxxxxxxx xxxx vyšší xxx 2×10−5°X.
Xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) xxxxx se nesmí xxxxxxxx od xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx x xxxx xxx x 0,3 % xxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxx kalibrace xxxx xxx možné xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx stupnice xx xxxxxxxxx dílky xx xxxxxxxxx 0,001 °X.
4.1.3.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx umožnit xxxxxxxxx xx xxxxxxx 0,01 °X x xxxxxxx xx 0 °X xx –1 °C.
Stabilita xxxxxxxxxxx zařízení x xxxx příslušného xxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxx xx xxxx následujících xxxxxx téže xxxxxxx xxxxxx vyšší než 0,001 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxx přístroje nevznikla x xxxxxx xxxx xxxxxxx xx – 0,400 °C xx – 0,600 °X xxxxx chyba xxx ± 0,001 °C.
4.1.4 Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx se použije xxxxxx drát x xxxxxxx 1 xx 1,5 xx, xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx,.
Xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx xx úrovni xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Přípustná xxxxxxxxx xx xxx 1,5 mm xxx xx pod xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx vibruje xxxxx x xxxxxxxxxxx rozkmitem xxxxxxx xxxxxxx (nejméně ± 1,5 xx), xxx xxxx zajištěna xxxxxxxx xxxxxxx testovacího xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx nesmí x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx termistoru xxxx xxxxx xxxxxxxx.
4.1.5 Xxxxxxxx xx vyvolání mrznutí
Může xx být jakékoli xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx mrznutí xxxxxx, aby xxxxxxx xxxxxx testovacího xxxxxx xxxxxxx k bodu xxxxxxx. X xxxx xxxxx xxx použít xxxxxxxx; xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx jednu xx dvě xxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxx dotýkala xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx.
4.1.6 Xxxxxxxx na xxxxxx
Xxxxxxxx xx vzorky (xxx xxxxxxx 1) jsou xxxxxxxx x 50,8 ± 0,1 xx xxxxxx; xxxxxx xxxxxx xx 16,0 ± 0,1 xx x xxxxxxx xxxxxx xx 13,5 ± 0,1 xx. Tloušťka skla xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx o xxxx xxx 0,1 mm.
Zkumavky xxxx mít značku xxxxxx vzdálenou xx xxxxxxx okraje 29,8 xx (21 mm xxx xxxx zkumavky), xxxxx xxxxx objem xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx.
4.1.7 Xxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx napětí xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx vně xxxxxxxxx xxx, aby xxxxxxxx kolísání nepřekračovala ± 1 % xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx x ± 6 %.
4.2 Analytické xxxx
4.3 Xxxxxxx xxxxx o xxxxxx 1000 xx, xxxxx X.
4.4 Xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx, nastavitelná xx 130 ± 1 °X
xxxx
Xxxxxxxxxx xxx, xxxxxxxxx, nastavitelná xx 300 ± 25 °X.
4.5 Xxxxxxxxx
5. Xxxxxxx
5.1 Xxxx destilovaná v xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx x zchlazená xx 20 ± 2 °X, xx zkumavce xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxx sodný, čistoty x.x., jemně mletý, xxxxxx 5 xxxxx xxx teplotě 300 ± 25 °X x elektrické xxxx xxxx xxxxxxx 24 xxxxx při teplotě 130 ± 1 °X v xxxxxxx x zchlazený xx xxxxxxxxx teplotu x xxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků
Navážit xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxxxxx 1) xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5.2) xx xxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx (5.1), xxxxxxxxxxxxx xxxxxx roztok xx odměrné xxxxx x xxxxxx 1000 xx x xxxxxxx xx značku xxxxx x xxxxxxx 20 ± 2 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx při asi 5 °C x xxxxx uzavřených xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx 250 xx.
Xxx xxxxxxx xxxxxxx chloridu xxxxxxx xxx 20 °X
|
x NaCl/l |
°C |
|
6,859 |
-0,408 |
|
7,818 |
-0,464 |
|
8,149 |
-0,483 |
|
8,314 |
-0,492 |
|
8,480 |
-0,502 |
|
8,646 |
-0,512 |
|
8,811 |
-0,521 |
|
8,977 |
-0,531 |
|
9,143 |
-0,541 |
|
10,155 |
-0,600 |
Před xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx roztok xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Nikdy neprotřepávat xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxx se xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx standardního xxxxxxx xx x xxxxx xxxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxxx. Xxxxx nepoužívat pipety.
Nepoužívat xxxxxxx x xxxxx, xxxxx xxxx ze xxx čtvrtin prázdné, x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx dvou xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx fungicid (xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 10 g/l).
6. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxx, xxx xx okolní xxxxxxx nelišila x xxxx než 1 °X od xxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx vystaven xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx 26–27 °X.
Xxxxxxx xx, xx xxxxxxxx xxxxxxx podle xxxxxx xxxxxxx a xx xxx zapnut xxxxxxx 12 xxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, rozkmit xxxxxxx míchačky x xxxxxxx chladicích kapalin.
Vybrat xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxx tabulka výše), xxxxxxx bod xxxxxxx xx těsně nad xxxx xxxxx pod xxxxxxxxxx hodnotou bodu xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx. Rozdíl xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx – 0,100 °C.
(U xxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx příslušný xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx tak, xx se xxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx mrznutí x xxxxx xxxxxxx měřícího xxxxxxxx. V těchto xxxxxxxxx xxxxx jednoho xxxxxxxxxxxx roztoku, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx, xxxx jednoho x kalibračních xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxx).
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku xx xxxxx a xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx xx vzorky xxxxxxxxx při xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx vzorky xxxxx (xxxxxx xxxx xxxx, xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx). Xxxxxxx standardních roztoků xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx vzorků mléka.
Podle xxxxxx výrobce xxxxxxxx xxxxxxxx kalibrace, dokud xxxxxx x kryoskopu xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx standardního roztoku. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx po xxxx xxxxxxxxxxx odečty xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx mrznutí xxxxxxx x xxxx, xxxx xx byla xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Kryoskop xx xxxx připraven x xxxxxxx x xxxxx ukazuje bod xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
7. Xxxxxxxx testovacího xxxxxx
7.1 Xxxxx to xx xxxxxxxx xxxxxxxxx vzorky xxx xxxxxxx xxxx 0 °X x 5 °X.
7.2 Pokud xx xx nezbytné xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxx mléčný xxx ve xxxxxx xx čisté x xxxxx nádoby a xxxxxx opatrně xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx a xxxx xxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.3 Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx při xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0 x 5 °X) xxxx xx možné xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxxxx testování. Xx xxxx nezbytné xxxx xx xx, xxx xxxxxxxxxx roztoky x vzorky xxxxx xxxx xxx použití xxxxxxx xxxxxxx.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxxx kyselost mléka, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxx, jejichž xxxxxxxx xxxxxxxxx 0,18 x xxxxxxxx mléčné xx 100 xx xxxxx, nemohou být xxxxxxxxxxx.
7.5 UHT mléko x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 20 xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x otevřené xxxxxx.
8. Postup
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxx xx sonda termistoru xxxxxxx x prázdné xxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xx, zda xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx míchá nebo xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx 12 xxxxx, zkontrolovat xxxxxxx xxxxxxxx kapaliny, xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx.
8.2 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxx každou xxxxx xxxxx měřit xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxx sodného (xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxx – 0,512 °X), dokud xx xxxxxxx xxxxxxx při xxxx po sobě xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxx xxx 0,001 °X. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxx hodnot xxxx xx xxxx mrznutí xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxx 0,002 °X, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, jak xx xxxxxxx x xxxx 6.
Xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx kalibrace xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx za hodinu, xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
8.3 Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx mléka
Promíchat xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx protřepáním x několikerým xxxxxxxx. Xxxxx neprotřepávat standardní xxxxxx tak prudce, xxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxx přidat 2,5 ± 0,1 ml xxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx vzorky. Xxxxxxx xx, že xxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx a xxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx opatrně je xxxxx směrem xxxxxxx xxxxxx jemnou, čistou x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx podle pokynů xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx při xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x přesností xx 0,1 °C.
(U xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; x xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx dosáhne xxx, xx xx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx.)
Xxxxx x jakéhokoli xxxxxx mrznutí xxxxx xxxxx nebo xxxxxxx, xxx xx dosaženo xxxxxxxxxxx teplotního xxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xx x xxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx rovněž xxxxxx před dosažením xxxxxxxxx xxxxxxx, alikvótní xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx 45 °X x 5 xxxxx xx xxxxxxx xx xxxx teplotě, xxx xx rozpustil xxxxxxxxxxx tuk.
Poté xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx začátku xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx po xxxxxxx dobu xxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx doby x tuto xxxxxxx xx nutné xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxx, xx xxxxxx teplota xxxxxxx xxxxxxxxxx, x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx maximální xxxxxxx, xx xxxx vzorek xx vzorku a xxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx než pro xxxxx. Je xxxxxxxx xxxxxxxxxx maximální xxxxxxx.
Xxxx xx měření xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, vyjmout zkumavku, xxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxx sondu x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x chlupy xxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx druhé xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx body xxxxxxx xxxxx než xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (0,004 °X), xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx obou xxxxxxxxx xxxxxx na 0,004 °X, zapíší xx x xxxxxxx xx xxx výpočet konečného xxxxxxxx.
8.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx uložit xxxxxxxx zkumavku na xxxxxx xx místo xxx xxxxxx x xxxxxx provozní teplotu, xxx sonda xxxxxxx x xxxxxx.
(X xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx to xxxx xxxxx; x xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx se xxxxxxx, xxx xx sonda xxxx začátkem xxxxxx xxxxx zchlazena, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx slepých xxxxxxxxx, dokud xx xxxxxxxxx xxxxxx údaje.)
9. Xxxxxxxxx výsledků
9.1 Xxxxxxx
Xxxxx xx xx provedení xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx, je třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx:
Xxx mrznutí (°X)
|
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx stanovení |
Průměr |
|
|
-0,544 |
-0,545 |
-0,544 |
|
-0,545 |
-0,546 |
-0,546 |
9.2 Xxxxxxxxxxxx
9.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x): 0,004 °X
9.2.2 Reprodukovatelnost (R): 0,006 °X
Xxxxxxx 1
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1 (xxxxxx xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx)
XX. STANOVENÍ XXXXXXXX XXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx stanovení aktivity xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Definice
2.1 Aktivita xxxxxxxxx xx míra xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x μg xx 1 ml xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx 4 xx fenolu xx 1 xx.
3. Princip
Aktivita xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx fenol xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxx), xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxx při 610 nm. Xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx byl xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxxx xxxxxx boritanu a xxxxxxxxx barnatého
4.1.1 Xxxxxxxxx xx xxxx 50,0 x hydroxidu xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) [Xx(XX)2.8X2X] x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.1.2 Xxxxxxxxx xx xxxx 22,0 x xxxxxxxx xxxxxx (X3XX3) x xxxxxxx na 1000 xx.
4.1.3 Xxxxxx 500 xx xxxxxxx xxxxxxx na 50 °X, xxx xxxxxxx xxxxxxx, promíchat, rychle xxxxxxxx xxx na 20 °X, v xxxxxxx nutnosti upravit xxxxxxx xX xx 10,6 ± 0,1 xxxxxxxx xxxxxxx 4.1.1 xxxx 4.1.2. Xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx uzavřené xxxxxx.
4.1.4 Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx objemem xxxx.
4.2 Tlumivý xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxx 6,0 x methaboritanu xxxxxxx (XxXX2) nebo 12,6 x XxXX2.4X2X a 20,0 x xxxxxxxx xxxxxxx (XxXx) x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.3 Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx vzniklého xxxxxxxxx
Xxxxxx 10 xx xxxxxxxxx roztoku xxx xxxxxxxx zabarvení (4.2) xxxxx xx 100 xx.
4.4 Xxxxxx substrátu
Rozpustit 0,1 g xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xx 100 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.3) xxxx 0,5 x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx 4,5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxx zabarvení (4.2), xxxxxx dvě xxxxx xxxxxxx BQC (4.6) x nechat xxxx 30 xxxxx při xxxxxxxx teplotě. Xxxxxxx xxxxxxxxx extrahovat 2,5 xx x-xxxxxxxx x xxxxxx stát, dokud xx xxxxxxx-1 xxxxxxxx. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx-1. V xxxxxxx xxxxxxxx xx extrakce xxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx; xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, x xx xxxxxxxx 1 xx xxxxxx roztoku xx 100 xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.3).
4.5 Xxxxxxxxx xxxxx-xxx
Xxxxxxxxx xx vodě 3,0 g síranu xxxxxxxxxxx (XxXX4 · 7X2X) a 0,6 x xxxxxx xxxxxxxxx (XxXX4 · 5H2O) x xxxxxxx na 100 xx.
4.6 Xxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (roztok BQC)
Rozpustit x 10 xx 96 % (X/X) xxxxxxxx 40 ± 1 xx 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXX) (C6H2Br2ClNO6).
Skladovat x xxxxx láhvi v xxxxxxxxxx. Xxxxxxx roztok, xxxxx xxxxx barvu xxxx xx xxxxxx xxx xxxxx xxxxx.
4.7 Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (XX)
Xxxxxxxxx xx xxxx 0,05 g síranu xxxxxxxxx (XxXX4.5X2X) x xxxxxxx xx 100 xx.
4.8 Standardní xxxxxx xxxxxx
4.8.1 Navážit 200 ± 2 xx xxxxxxx bezvodého fenolu x xxxxxx do xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 100 xx, xxxxxx xxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xx 100 xx. Tento xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
4.8.2 Xxxxxx xxxxx 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx 100 xx x xxxxxxxxx. 1 xx obsahuje 200 μx xxxxxx.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx, xxxxx x zátky x xxxxxxxxx pro odběr xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx oplachování xxxxxxx xxxxxxxxxx destilovanou xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx.
x) Xxxxxxx typy xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx fenolů a xxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx vybavení, xxxxxxx:
5.1 Analytické xxxx
5.2 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx 37 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xx vlnové xxxxx 610 xx.
5.4 Zkumavky, 16 xxxx 18 × 150 mm, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 5 xx x 10 xx.
5.5 Pipety
5.6 Xxxxxxxx nálevky xxxxxx xxxxxxxxx, např. x xxxxxxx 5 cm.
5.7 Xxxxxxxx filtry o xxxxxxx xxxxxxx 9 xx pro střední xxxxxxxx xxxxxxxx.
5.8 Xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
6. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
x) Xxxxx xxxx xxxx xxxx mohou xxxxxxxx xxxxxxx pozitivní xxxxxxxx a je xxxxx se jim xxxxxxx. Je xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1 Příprava xxxxxxxxxxx vzorku
6.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xx déle xxx xxx xxx.
6.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxx xx xxxxx xx xxxx zkumavek (5.4), xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx kontrolní xxxx slepý xxxxx.
6.3 Xxxxxxxxx
6.3.1 Slepý xxxxxx xxxxxxxx dvě minuty xx vroucí xxxx; xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx hliníkovou xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxx zkumavka. Xxxxxx xxxxxxxx na pokojovou xxxxxxx.
6.3.2 Xx zbytek xxxxxxx ošetřovat slepý x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx 10 xx roztoku xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxxxxx.
6.3.3 Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 60 xxxxx xx xxxxx xxxxx (5.2) a občas (xxxxxxx xxxxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxxx obsah.
6.3.4 Xxxxxx xxxx x bodě 6.3.1 xxxxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxxx xxxx. Rychle xxxxxxxx xx pokojovou xxxxxxx.
6.3.5 Xx xxxxx zkumavky xxxxxx 1 xx xxxxxxxxx zinek-měď (4.5) x xxxxx xxxxxxxxx.
6.3.6 Xxxxxxxxxxxx xxxx suchý xxxxxxxxx papír, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxx filtrovat xxxxx, xxxxx není xxxxxxx xxxxxxxx xxxx; xxxxxxxxxx 5 xx ve xxxxxxxx.
6.3.7 Xxxxxx 5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2).
6.3.8 Přidat 0,1 xx roztoku XXX (4,6), promíchat x 30 xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.9 V xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx pokusem xxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.3.10 Xxxxx absorbance xxxxxxxx x bodě 6.3.9 převyšuje xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku obsahujícího 20 μg xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.4.4, xxxxxxxx xxxxxxxxx při vhodném xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx objemu xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx testovacího vzorku, xxxxx xx opatrně xxxxx xx xxxx, xxx xx inaktivovala xxxxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
6.4.1 Na xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxx (4.8.2) xxxxxxxxx vyhovující xxxx zředěných xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0 (xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx), 2, 5, 10 x 20 μx xxxxxx na xxxxxxxx. Xx xxxxx x xxxx zkumavek xxxxxx xxxxxx pipety 1 ml xxxx x 1 ml xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
6.4.2 Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxx síranu xxxxxxxxx (4.7), 5 xx tlumivého xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.3), 3 xx xxxx x 0,1 xx xxxxxxx XXX (4.6); promíchat.
6.4.3 Xxxxxx vyvíjet xxxxxxxxx 30 xxxxx při xxxxxxxx xxxxxxx.
6.4.4 X xxxxxxxxx s kontrolním xxxx xxxxxx pokusem xxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.4.5 Na xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (6.4.4) xxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (6.4.1) xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxx a vzorec
7.1.1 Xx základě xxxxxx xxxxxxxxxx (6.3.9) vypočítat xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx přímky (6.4.5).
7.1.2 Xxxxxxxxx aktivitu fosfatázy xxxxxxxxxx v μx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxxx xxxxxxxxx = 2,4 × X × D
kde
A xx xxxxxxxx xxxxxx x μx xxxxxxx xxxxx xxxx 7.1.1;
D xx xxxxxx zředění xxx xxxxxxx provedené xxxxx bodu 6.3.10 (x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx X = 1).
2,4 xx xxxxxx xxxxxxx (5/12 x 1 ml xxxxxxxxxxx xxxxxx) – viz 6.2 xx xxxxxxxxxx x 6.3.2, 6.3.5 x 6.3.6.
7.2 Xxxxxxxxxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) : 2 μx xxxxxx/xx.
7.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (R) : 3 (předběžně) μx xxxxxx/xx.
7.2.3 Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx 6.3.10, limity xxxxxxx x 7.2.1 a 7.2.2 se xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx ze xxxxxxxxx xxxxxx.
XXX. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo nepřítomnosti xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx, xxxxx slouží xx xxxxxxxx pasterace.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx:
Xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, do 30 sekund po xxxxxxxxxx xx objeví xxxxx zabarvení.
Negativní xxxxxx xx peroxidázu:
Do 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
3. Princip
Peroxidáza rozkládá xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx parafenylendiamin xx xxxxxxxxx indofenol (Xxxxxxxx xxxx). Intenzita zabarvení xx přímo úměrná xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxx 1,4 fenylendiaminu
Rozpustit x xxxxx xxxx (50 °C) 2 x 1,4 fenylendiaminu (X6X8X2) a xxxxxxx xx 100 xx. Xxxxxx skladovat x xxxxxx x xxxxx, x xxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx xxxx dní xx xxxxxxxxxx roztok 1,4 fenylendiaminu xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2 Xxxxxx xxxxxxxx vodíku
Vodou zředit 9 xx 30 % peroxidu vodíku x xxxxxxx xx 100 ml. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxxxxxxxx kyseliny xxxxxx xx xxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx stálý xxx xxxxx měsíc, xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxx, x láhvi se xxxxxxxxx xxxxxx, která xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx látkami.
5. Xxxxxx
5.1 Xxx 5 xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
5.2 Xxxxxx 5 xx xxxxxxx 1,4 fenylendiaminu (4.1).
5.3 Přidat 2 xxxxx roztoku xxxxxxxx xxxxxx (4.2).
5.4 30 xxxxxx po xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Pokud xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx 30 sekund xx xxxxxxx xxxxxxx, reakce xxxx specifická.
IV. STANOVENÍ XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX PŘI 30 °X
1. Předmět x xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx při 30 °X. Postup xx xxxxxxx xxx xxxxxx mléko, pasterované xxxxx, XXX xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléko, xxxxx xxxx 15 xxx xxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X.
2. Definice
"Mikroorganismy" xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Princip
Smíchat xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx mléka x xxxxxxxxxxx xxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx inkubovat 72 hodin xxx 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na 1 xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxx xx 0,1 xx preinkubovaného xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx UHT xxxxx.
4. Přístroje x xxxxxxx ze skla
Obvyklé xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Horkovzdušná sušárna, xxxxxxxxxxxx na 170 xx 175 °C.
4.1.2 Xxxxxxxx, nastavitelný xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °C.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx xxx kompenzaci xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 jednotky pH.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °C.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Mechanické xxxxxxxxx
4.1.9 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x 9 ml xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx ze xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx s vhodnými xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x promíchání 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 ml xxxx xxxxxxxx x xxxxxx 20 xx xxx skladování xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), skleněné nebo xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x nepoškozeným xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx, x xxxxxxxxx otvorem x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx, bezbarvého skla xxxx xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, dno xxxxx xx xxxxxxx průměr xxx 90 xx 100 xx. Vnitřní xxxxxxx misek xx xxxx být xxxxxxx 10 xx. Xxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx počítání xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxxx jedním x xxxxxx xxxxxxx:
x) x horkovzdušné xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx jednu xxxxxx xxx teplotě 170–175 °C;
b) v xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 minut xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx použití xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx nádoby by xxxxxx být xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xx měly xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xx xx xxxx vysušit xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxxx x horkovzdušné xxxxxxx (4.1.1).
5. Kultivační xxxxxx – xxxx xx xxxxxxx mlékem
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx (+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10–15 g xxxxx želírovacích xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 ml |
Sušené xxxxxxxxxx xxxxx xx nemělo xxxxxxxxx žádné xxxxxxxxx xxxxx. Toto se xxxxx srovnávacími xxxxx xx sušeným odstředěným xxxxxx, xxxxx průkazně xxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx mléko. Xxxxx xxxxxxxx usnadňuje postup. Xxxx xxxxxx agar x xx stálého xxxxxxx xxxxx do xxxx, dokud xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx v xxxx xxx 30 xxxxx.
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx nezbytné, xxxxxxx xX, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx byla xxxx xxxxxxx 6,9 ± 0,1 při 25 °X.
5.2 Rozdělení, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 xx xx xxxxx xxxx xx 12 xx 15 xx xx xxxxxxxx (4.2.2). Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx kultivační médium xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx v xxxxx xxx xxxxxxx mezi 1 a 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx po xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx výrobce, xxx přidat sušené xxxxxxxxxx mléko před xxxxxxxxxxxx, xxxxx není xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xX xx 6,9 ± 0,1 při 25 °X xxxxxxx xxxxx xxxx 5.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Xxxxxx pepton/sůl
Složení:
|
Pepton |
1,0 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, xxxxx xx je xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xX-xxxxxx (4.1.4); xxxxx to xx nezbytné xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx po xxxxxxxxxxx byla xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 při 25 °X.
6.2 Xxxxxxxxx, sterilizace x skladování ředidla
Rozdělit xxxxxxx (6.1) do xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx xx sterilizaci xxxxx zkumavka xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx xxxxxxx. Zkumavky xxxxxxx.
15 minut xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °C.
Zkontrolovat xX xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx v xxxxx xxx xxxxxxx mezi 1 x 5 °X, xxxxx ne xxxx než 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx dehydrovaná xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) xx xxxx připravovat x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx tablet xxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX metodou xxxxx xxxx 6.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx podle xxxx 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx rychle xxxxxxxxx xxxxxxxx množství kultivačního xxxxx a xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1.5) na 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx vzorku xxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx rozděleny, x xx 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Doba xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku xx xxxxxx překročit xxx xxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (10-1) (xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 9 ml xxxxxxx (6.1), přičemž xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx jako xxxxxxx xxxxxx mléka. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx xx xxx xxxxxxxx ředění 10−1.
7.4 Xxxxxxxx dalších xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx a xxxxxxxxxxx mléko)
Sterilní pipetou (4.2.3) přenést 1 xx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.3) xx 9 xx ředidla (6.1) xxxxx xxxxxx x xxxx 7.3.
Xxxxx xx xxx xxxxxx 10−2.
S xxxxx xxxxxx další xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx postup opakuje xxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx mikroorganismů (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Petriho misek
7.5.1 Xxxxxx xxxxx: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx misky (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx vhodného desetinného xxxxxx. Musí být xxxxxxxxx xxxxxxx dvě xxxxxx. Pro xxxxx xxxxxx (8.1.1) připravit xxxxx vhodnou xxxxx.
7.5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx: Sterilní xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 ml vzorku x/xxxx xxxxxxxx desetinného xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.5.3 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx mléko (xxxxxxxxxxx xx 15 xxxxx xxxxxxxx xxx 30 °X – xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx X xxxxxxxx XXX xxx 5):
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 ml xxxxxx xxxxx (7.2). Xxxxxxxxx dvě xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx naočkované xxxxx xxxxx xxx 15 xx 18 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Ihned xxxxxxxxx xxxxxx Petriho xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx rozložení kolonií.
Doba xxxx xxxxxx přípravy xxxxxx mléka a xxxxxxxxx, xxxxx druhu xxxxx, testovacího xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx médiem nesmí xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx vodorovném, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
7.7 Inkubace Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx misky xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Misky xxxxxxxxx obrácené xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx nesmějí xxxxxxxx xxxxxxx, ani xxx v xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 72 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx více xxx 300 kolonií.
Misky vyšetřit xxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx usnadnění počítání xxx použít xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx xxxxx xxxx xx to, xxx xxxxxxx x záměně xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxxxxxxxxx skla x xxxxxx zvětšením (4.1.7), x cílem odlišit xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx tvořící xxxxxx xx považují xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx než xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx misky x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx vyřadit.
8. Xxxxxxx x vyjádření xxxxxxxx
8.1 Xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx
8.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx misek xxxxxxxxxxxx 10 až 300 xxxxxxx (viz 8.1.3 x 8.1.4).
8.1.2 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 ml syrového xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx tohoto vzorce:
∑C / (n1 + 0,1x2) d
kde:
∑C ΣX xx xxxxxxx počet xxxxxxx xxxxx bodu 8.1.1.
(x1 + 0,1 x2)x xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx:
x1 xx počet xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx
x2 xx počet xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx
x xx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxx platné xxxxxxx. Xxxx je xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx pět, xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx sudá.
Příklad (xxxxxxxxxxx xxxxx):
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 x 28 kolonií
Počet/ml: = 278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2
= 6290,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.1.3 Xxxxx jsou všechny xxxxx xxxxx než 10, xxxxx, že xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx "xxxxx xxx 10 x x", xxxxxxx "x" xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx zředění.
8.1.4 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 300 x počítání xx možné, xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx zředění. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx "Odhadovaný xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xx".
8.2 XXX mléko x xxxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xxxxx xxx 10 xxxxxxx na 0,1 xx se považují xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/XXX.
9. Spolehlivost
Výsledky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x dispozici.
V. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX PŘI 21 °X
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx při 21 °C x xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxx xxx xxxxxxxxxxxxx při 6 xX x xxxxx xxxxxxxx xxxxxx kontaminace xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxx se x xxxxx při 6 °C.
2. Definice
"Mikroorganismy" xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx vytvářejí xxxxxxxxxxx xxxxxxx po xxxxxxx xxxxxxxx za popsaných xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxx xxx 6 °X. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxx médiem x Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx 25 xxxxx xxx 21 °X. Xxxxxxxx kolonie x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na 1 xx pasterovaného xxxxx.
4. Xxxxxxxxx a pomůcky xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, zejména:
4.1 Přístroje
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx sušárna, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx udržovat xxxxxxx:
x) 6 ± 0,2 °X
x) 21 ± 1 °C xx všech xxxxxx xxxxxx.
4.1.4 pH-metr xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx na ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx na 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, zvětšení 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx počítadlo
4.1.9 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 1 xx vzorku mléka xxxx desetinného ředění x 9 xx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx obsahu xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxx desetinných xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx o objemu 150 xx 250 xx nebo zkumavky x xxxxxx 20 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx vatou), skleněné xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx objemu 1 xx, s xxxxxxxxx xxxxxxx x průměru 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Petriho xxxxx x čirého, xxxxxxxxxx xxxx nebo ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx misek xx xxxxxxx xxxxxx xxx 90 až 100 x. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx měla xxx xxxxxxx 10 xx. Xxx nesmí xxx xxxxx nerovnosti, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx:
Xxxxxxx xx skla xx xxxxxxxxxxx jedním x xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx 170–175 °X;
x) v xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx při xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, aby xxxx zajištěno xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx xx materiál sterilizuje x nádobách, xxxx xxxxxx by neměly xxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx víčka xx měly xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx skla xxxxxxxxxxxxx v autoklávech xx se měly xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxx být sterilizovány x xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1).
5. Kultivační médium – agar xx xxxxxxx mlékem
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx(+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 g |
|
Sušené xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10-15 x podle xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx agaru |
|
Voda |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx žádné xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx žádné xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X xxxxx xxxxxx suspendovat a xxxxxxxxx xx vodě xxxxxxxxxx extrakt, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx odstředěné mléko. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Poté xxxxxx xxxx a xxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, dokud xx agar zcela xxxxxxxxxx, nebo xxxxxxxx x xxxx asi 30 xxxxx.
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, přefiltrovat xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxx pH-metru (4.1.4); xxxxx to xx xxxxxxxx, xxxxxxx xX, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx jeho hodnota 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx kultivačního xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 xx xx xxxxx xxxx xx 12 xx 15 xx xx xxxxxxxx (4.2.2). Baňky x xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) při 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx kultivační xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx teplotě xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kultivační xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) se xxxx připravit x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx pokyny xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxx odstředěné xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xX na 6,9 ± 0,1 při 25 °C xxxxxxxx xxxxx bodu 5.1, xxxx xxxxxxxx, sterilizovat x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Xxxxxx xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxxx sodný (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx ve vodě, xxxxx to xx xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xX-xxxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx sodného xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxx xxxx xxxx hodnota 7,0 ± 0,1 xxx 25 °C.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x skladování xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx po xxxxxxxxx xxxxx zkumavka xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx v autoklávu (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X. Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx při xxxxxxx xxxx 1 x 5 °C, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx dehydrovaná ředidla
Ředidlo (6.1) xx xxxx xxxxxxxxxxx x komerčních xxxxxxxxxxxxx tablet xxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Upravit xX xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.1, poté xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x skladovat xxxxxxx podle xxxx 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Rozpuštění xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx zahájením xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx rozpustit xxxxxxxx xxxxxxxx kultivačního xxxxx x zchladit xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx [4.1.3 x)] uzavřené balení xxxxxxxxxxxxx xxxxx nebo, xxxxx xx xxxx xxxxx, reprezentativní xxxxxx x objemu xxxxxxx 100 xx po xxxx 120 ± 2 hodin xxx 6 ± 0,5 °X.
7.2.2 Xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx řádně xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx co xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, a xx 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxx zabránit xxxxxx xxxx xxxx xxxx nechat xxxxxxxxx. Xxxx xxxx mícháním x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx tři xxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx primárního ředění (10−1)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xx 9 xx xxxxxxx (6.1), přičemž xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Teplota xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxx jako xxxxxxx xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx xx xxx xxxxxxxx ředění 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx desetinných xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) podle xxxxxx x xxxx 7.3.
Xxxxx xx xxx xxxxxx 10−2.
X cílem xxxxxx další desetinná xxxxxx se xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx misek
Sterilní xxxxxxx (4.2.3) přenést do xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxx vyšetřena xxxxxxx dvě xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx jednu xxxxxxx xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Do xxxxx xxxxxxxxxx misky nalít xxx 15 xx 18 xx kultivačního xxxxx (7.1).
Xxxxx promíchat xxxxxx Xxxxxxx misky, xxx po inkubaci xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kolonií.
Doba xxxx xxxxxx přípravy vzorku xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx vzorku nebo xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 minut.
Nechat xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Petriho xxxxx
Xxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx na sebe xxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx nesmějí xxxxxxxx xxxxxxx, ani xxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 25 xxxxx při 21 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx x Xxxxxxx miskách xxxxxxxxxxxxxx více xxx 300 xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxx tlumeném xxxxxx. Xxx usnadnění xxxxxxxx xxx použít xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) a/nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx nutné dbát xx xx, aby xxxxxxx k xxxxxx xxxxxx sraženin x xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx koloniemi. V xxxxxxx xxxxxxxxxxx provést xxxxxxx průzkum xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx s xxxxxx zvětšením (4.1.7), x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx od xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx kolonii. Pokud xxxxxxx xxxxxxx povlak xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx misky, xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx. Xxxxx kolonie xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, misku xxxxxxx.
8. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx obsahujících 10 xx 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.2 Xxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx syrového nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxx podle xxxxxx vzorce:
∑C / (x1 + 0,1x2) x
xxx:
ΣX xx celkový xxxxx kolonií podle xxxx 8.1,
(x1 + 0,1 x2)x xx xxxxx xxxxxxxxxxxx vzorku, xxx:
x1 xx xxxxx xxxxx xxx prvním xxxxxxx
x2 je xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx
x xx faktor xxxxxxx, na základě xxxxxxx byly xxxxxxx xxxxx počty.
Počet se xxxxxxxxxx na dvě xxxxxx číslice. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxx číslice xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxx:
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 x 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; =278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2=
=629 / 0,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.3 Xxxxx xxxx všechny xxxxx xxxxx xxx 10, xxxxx, xx počet xxxxxxxxxxxxxx xx mililitr xx "nižší xxx 10 × d", xxxxxxx "d" je xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
8.4 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 300 x xxxxxxxx xx xxxxx, xxxxxxx odhad x xxxxxxxxx jej xxxxxxxxxxx xxxxxxxx faktoru xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx "Odhadovaný xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx ml".
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx uznaných xxxxxxxxx testů ještě xxxxxx x xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX – XXXXXXXX XXXXXXX XXX 30 °X
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx kapitola xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup xxx xxxxxxxxx koliformních xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx při 30 °X.
2. Definice
"Koliformními xxxxxxxxxx" xx rozumějí bakterie, xxxxx při 30 °X vytvářejí charakteristické xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, jež jsou xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx x kultivačním xxxxxx v Petriho xxxxxxx x 24 xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx 30 °C. Xxxxxxxx charakteristické xxxxxxx x, xxxxx to xx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx kolonií xxxxxxxxxxx jejich xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx mléka.
4. Xxxxxxxxx x pomůcky xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 až 175 °C.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, schopný udržovat xxxxxxx 30 ± 1 °X.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx pH.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, nastavitelná na 45 ± 1 °X.
4.1.6 Očkovací jehla xx xxxxxxx xxxxxxx-xxxxxxx xxxx nikl-chróm.
4.2 Pomůcky xx skla
4.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x objemem 20 xx, xxx mohly xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kultivační xxxxxx (5.2) x Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 až 250 ml pro xxxxxxxxxx sušeného xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.1).
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx nebo ze xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx objemu 1 – 10 xx, s xxxxxxxxx xxxxxxx o průměru 1,75 až 3 xx.
4.2.4 Petriho xxxxx x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx misek xx xxxxxxx xxxxxx asi 90 až 100 x. Xxxxxxx hloubka xxxxx xx měla xxx nejméně 10 xx. Dno xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx bránily xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Sterilizace xxxxxxx ze skla:
Pomůcky xx skla se xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx jednu xxxxxx xxx xxxxxxx 170 – 175 °X;
x) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx autoklávu xx xxxxx dbát xx xx, aby xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xx neměly být xxxxxxx uzavřeny, xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx
5.1 Agar x krystalovou violetí, xxxxxxxxx xxxxxxx, žlučí x laktózou (VRBL xxxx). Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
7 g |
|
Kvasnicový xxxxxxx |
3 x |
|
Xxxxxxx (X12X22X11.X2X) |
10 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
5 g |
|
Žlučové xxxx |
1,5 g |
|
Neutrální červeň |
0,03 x |
|
Xxxxxxxxxx violeť |
0,002 x |
|
Xxxx |
10 xx 15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 ml |
Příprava:
Suspendovat a xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxx promíchat.
Zkontrolovat xX pomocí xX-xxxxx (4.1.4); pokud xx xx xxxxx, xxxxxxx xX xxxxxxxx (nejméně 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, aby xx xxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxx xxxxxx do xxxx za občasného xxxxxxxxxxxx x ihned xxxxxx xx xxxxxxxxxx 100 xx 150 xx xx sterilních xxxxx (4.2.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx ve xxxxx lázni (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
X xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (6.4).
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx do xxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxx xxxx x brilantovou xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
10 x |
|
Xxxxxxx (C12H22O11.H2O) |
10 x |
|
Xxxxxxxxxxx hovězí žluč |
20 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxx |
0,0133 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx a xxxxx xx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxx pH-metru (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) hydroxidu xxxxxxx xxxx xxxxxxxx chlorovodíkové, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx xxxx hodnota 7,2 ± 0,1 xxx 25 °C.
Rozdělit xxxxxx po 10 xx xx xxxxxxxx (4.2.1) xxxxxxxxxxxx Durhamovy xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx sterilizovat x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx nesmějí xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx bubliny.
Zkontrolovat pH xxxxxxxxxxxx média.
Pokud xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, skladuje xx x temnu xxx xxxxxxx mezi 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx přípravě.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxx připravit x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média. Xxxxxxx xxxxxx výrobce. Xxxxxxx xX, rozdělit, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx podle xxxx 5.1 a 5.2.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxxx (XXXX xxxx) xxxxxxx x bodě 5.1.
6.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx byly xxxxxxxxxxxxxx co xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, a xx 25 xxxxxxxx otočeními xxxxxx xx vzorkem. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx nebo xxxx nechat rozptýlit. Xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx neměla xxxxxxxxx xxx minuty.
6.3 Xxxxxxxxxx Petriho misek
Sterilní xxxxxxx přenést (4.2.3) 1 xx xxxxxx xxxxx do každé xx tří xxxxx (4.2.4) a xxx xxxxxxxxx 3 xx xxxxxx xxxxx (6.2).
6.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx asi 12 xx XXXX xxxxx (6.1)
Xxxxx xx xxxxxx xxxxx promíchat xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx došlo x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx koncem xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x smícháním x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x 12 xx xxxxx XXXX xxxxx, xxxxx xxx použit xxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx vodorovném, xxxxxxxx x čistém xxxxxxx, dokud xxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx nejméně 4 xx XXXX xxxxx (6.1) xx povrch xxxxxxxxxxxx média.
Nechat xxxxxxxx.
6.5 Xxxxxxxx Petriho misek
Přenést xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Misky xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx nahoru. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxx šest xxxxx. Xxxxxxx misek xx xxxxxxx vzájemně xxxxxxx, xxx xxx x kontaktu xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx inkubátoru.
Inkubovat 24 ± 2 xxxxxx xxx 30 ± 1 °X.
6.6 Xxxxxxxx xxxxxxx
6.6.1 Xxxxxxx xxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 150 xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x průměru nejméně 0,5 xx, x xxxx xxx sraženiny xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.6.2 Xxxxx xxxx všechny nebo xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (6.7).
6.7 Konfirmační xxxx
Xxxxx xxxxx x xxxx 6.6.2 xxxxxxx xxxxxxxxxxx test x xxxxxxxx počtu (xxxx. 3 až 5) xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx tím, xx se pomocí xxxxxxxx xxxxx (4.1.6), xxxxxxxx zkumavky xxxxxxxxxx xxxxxx agar x xxxxxxxxxxxx zelení (5.2). Xxxxxxxxx xxxxxxxx 24 ± 2 hodin xxx 30 ± 1 °C.
Za xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx takové xxxxxxx, xxxxx x Durhamově xxxxxxxx xxxxx plyn.
7. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx maximálně 150 xxxxxxx.
7.2 Xxxxx xx xxxxxxx konfirmační xxxx, xxxxxxxxx počet xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx potvrzených kolonií xxxxxxxxxxxx bakterií.
7.3 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxx xxxxxx vzorce:
ΣC / x
xxx:
ΣX je celkový xxxxx xxxxxxx koliformních xxxxxxxx (7.1 x xxxxxxxxxxx xx 7.2), xxxxxxxxxxx vyšetřením vzorku xxxxx (6.3).
n xx xxxxxxxx vyšetřovaného vzorku (6.3) x xxxxxxxxxxx (3 ml).
Počet xx xxxxxxxxxx na dvě xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx než 100 xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx číslice xxx, zaokrouhlit xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxxx počty xxxxx xxx 150 xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx "xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií xx 1 xx".
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx uznaných xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x dispozici.
VII. XXXXXXXXX XXXXXX SOMATICKÝCH BUNĚK
Tato xxxxxxxx popisuje xxx xxxxxxxxxx postupy pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Mikroskopická xxxxxx
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx (viz B.1).
2. Xxxxxxxx
Xxx tento xxxxxx xx xxxxxxxxxxx buňkami xxxxxxxx xxxxx, například xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, jejichž xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
3. Xxxxxxx
Xxxxxx 0,01 ml xxxxx na 1 xx2 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx. Počítání se xxxxxxx xxx mikroskopem. Xxxxx somatických xxxxx xxxxxxxxxxx xx daném xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx faktorem, x xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xx 1 xxxxxxxx.
4. Xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x..
Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxx xxxx |
0,6 x |
|
Xxxxxxx – 99 % |
54 xx |
|
1,1,1-xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx |
40 ml |
|
Ledová xxxxxxxx xxxxxx |
6 xx |
Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Příprava x xxxxxxxxx se xxxxx xxxx uskutečnit v xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx x baňce xxxxxxx x 1,1,1-xxxxxxxxxxxxx xxxx tetrachlorethan a xxxxxx ve xxxxx xxxxx xx 60 xx 70 °X. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx modř, xxxxx xxxxxxxxx, 12 xx 24 xxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxx 4 °C x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx 10 xx 12 xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxxxxx uzavřené xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx usazenin, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx přefiltrovat.
5. Přístroje x xxxxxxx ze xxxx
5.1 Mikroskop xxxxxxxxxx xxxxxxxx 500 × xx 1000 ×
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx umožňující dávkování xx 0,01 ml x xxxxxxxxx nejméně ± 2 %.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxx 20 mm × 5 mm xxxxxxxxxx xxx tenkou xxxxxx xxxx standardní xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx 20 × 5 xx xxx xxxxxx vrstvu.
5.4 Xxxxxxxxxxxx xxxxx deska (30 °X xx 50 °X) pro xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5 Xxxxxxxxxx (xxx) xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx.
5.6 Xxxxx xxxxx, nastavitelná xx 30 xx 40 °X pro ohřívání xxxxxx mléka.
5.7 Podložní xxxxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 0,01 xx.
6. Xxxxxx
6.1 Vzorek xxxxx
Xxxxxx xxxxx musí xxx testován do xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx. Během xxxxxxxxxx nesmí xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 6 °X. Xxxxxx nesmí xxx xxxxxxx.
6.2 Xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxx xx vodní xxxxx (5.6) na 30 xx 40 °X. Poté xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (5.2), například 20 °X.
6.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx podložní xxxxxxx (5.3) například xxxxxxxxx, vysušit papírem, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxxxx v xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxx prachem.
6.4 Xxxxxxxx tenké xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx (5.2) xxxxxxx 0,01 xx xxxxx ze xxxxxx xxxxxxxxxxxx, jak xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxxxx vnější xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) x xxxxxxx xxxxxxxxx obvod xxxxxxxxx (20 xx × 5 mm). Xxxx xx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Nechat xxxxxxx xxxxxx vrstvu xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (5.4) xx xx xxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxx vzorku xxxxx xxxxxxxxx a vyšetřit xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx.
6.5 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx 10 xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4). Xxxxx x, xxxxx xx xx nezbytné, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.5). Xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx, xxxxx xx přebytečné xxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx x xxxxxxx xxx, aby xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx.
6.6 Kalibrace xxxxxxxxxxxxxxx xxxx
Xx xxxxxxx zvoleného xxxxxxxx (500 × xx 1000 ×) xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx (5.7).
7. Xxxxxxxx x výpočet
7.1 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxxxxxx (5.1). Xxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx jádra, x xx xxxxxx jádra, xxxxx xxxx jasně xxxxxxxxxxxx x x xxxxx xx x xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx polovina. Xxxxxxx xxxx xxxx xxxx xx střední třetině xxxxx vrstvy a xxxxxxxxx xx pásy xxxx xxxx, xxxxx xxxx vybrány xxxxx x okrajových částí xxxxx xxxxxx. Pečlivá xxxxxxxx xxxxxxx vrstev x xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx nejméně xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx vrstvy. Xxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx všechny části xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx rovnoměrně.
7.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx počtu buněk, xxxxx xx mají xxxxxxx
Xxxxxxxx k xxxx, xx počítání xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx rovněž xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a mechanických xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx vzorků nesmí xxx vyšší xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx koeficient xxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx 400000 xx 600000 buněk/ml xx xxxxx překročit 5 %.
Počet somatických xxxxx, xxxxx xx xxxxx x xxxxxx xxxxxx spočítat, xxxx xxx xxxxx Poissonova xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 400, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx Xxxxxxxxxx rozdělení:
M = X = x2,
xxx:
X xx xxxxxxx xxxxxxx
X xx xxxxxxx
x xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx koeficient xx:
XX = s × 100 % / X xxxx XX = 100 % / x&xxxx;xxxx XX = 100 % / XXX
X (xxxxxx) představuje počet xxxxxx (xxxxx), xxxxx xxxx spočítány (xxxxxxxxx 400 xxx CV = 5 %).
7.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxxxx 0,01 ml xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx 7.3.1 xxxx 7.3.2.
7.3.1 Počítání xxxx xx xxxxx vrstvě
Délka xxxx, xxxxx xx xxxx počítat, je 5 xx. Šířka xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, jak xx xxxxxxxx podložním xxxxxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7).
Xxxxxxxx faktor = 20 × 100 / x × x
xxx:
x xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x mm, stanovený xxxxxxxxx sklíčkem x xxxxxxxxxxxxxx stupnicí (5.7)
b xxxxxxx počet xxxxxxxxxxx xxxx.
7.3.2 Xxxxxxxx mikroskopických xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx
xxx:
x je průměr xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x mikrometrickou xxxxxxxx (5.7)
x celkový xxxxx spočítaných polí.
7.4 Xxxxxxx xxxxxx xxxxx
X xxxxx získat xxxxx xxxxx xx ml xxxxx, se xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (7.1 a 7.2) xxxxxxxx xxxxxxxxx faktorem (7.3).
7.5 Přesnost
Variační xxxxxxxxxx (xxx 7.2) nesmí xxxxxxxxx 5 %.
Výsledky xxxxxxxxxxx uznaných kruhových xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx.
X. Fluoro-opto-elektronická metoda
1. Xxxxxxx a oblast xxxxxxx
Xxxxx postup popisuje xxxxxxxxxx postup, který xx xxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxx X.1) používat xxx xxxxxxxxx počtu somatických xxxxx x syrovém xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx bez xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxxx barvení xxxxxxx XXX minimální xxxxxxxxx fluorescence.
3. Xxxxxxx
Xxxx xxxxxx (například 0,2 xx) se důkladně xxxxxxxx x tlumivým xxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxx roztokem. Část xxxx směsi se xxxx xxxxxxx ve xxxxx xxxxx vrstvy xx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx buňka xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx se zesiluje x zaznamenává. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx x tisících xx mililitr.
4. Xxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxxxx čistoty p.a.. Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx deionizovaná, xxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx draselný |
51,00 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxx |
13,75 x |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx(xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % objemové |
10 xx |
|
xX 5,7 xx 5,9. Xxxxxxx xxxxx na 10000 xx. |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Skladování xx xxxxxxxxxxxx uzavřené nádobě xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx.
4.2 Fluorescenční xxxxxx (zásobní xxxxxx)
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
1,0 x |
Xxxxxxx xxxxx na 1000 ml.
Příprava:
Rozpustit xxxxxxxxxxxxxx xx vodě. Skladování xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx by xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx xxxxxx)
Xxxxxxx 20 ml xxxxxxxxx xxxxxxx (4.2) x xxxxxxxx roztokem (4.1) xxx, aby xx získal xxxxx 1000 xx. Pracovní xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxx sedm xxx.
4.4 Xxxxxxx roztok
Složení
|
Tlumivý roztok (4.1) |
10 xx |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % objemové |
10 xx |
|
Xxxxxxx x 25 % xxxxxxxxxx |
25 xx |
Xxxxxxx xxxxx xx 10000 xx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx překročit xxxxxx xxx.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
5.1 Xxxxxxxx zařízení xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxx použitím xxxxxxxxxxx. Tím xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx částic, xxxxx xx xxxx počítat, x xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx pokynů xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx obsah buněk xxx stanoven xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X).
5.2 Vodní xxxxx, x xxxxxxxxx xxxx, nastavitelná xx 40 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxx, x xxxxxxx uzávěrem, xxxxx xxx 15 xx.
6. Xxxxxx mléka
6.1 Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx nízké teplotě xx xxxxxxxx (5.3). Xxxxx xxxxxx nebyl xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, počítání xx xxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxxx 24 hodin xx xxxxxxxx, xxxxx obsah xxxxxxxxxxxxxx by xxx xxxxxx xxxxx. Skladovací xxxxxxx nesmí překročit 6 °C.
6.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx musí xxxxxxx xx 24 xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx odběru xxxxxx.
6.2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx z xxxxxx konzervačních prostředků:
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx orthoborité ve xxxxxx nesmí xxx xxxxx xxx 0,6 x xx 100 xx. Takto konzervovaný xxxxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx při xxxxxxx 6 až 12 °X;
- dvojchroman xxxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx 0,2 g xx 100 xx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx dalších 72 xxxxx xxx xxxxxxx 6 xx 12 °X;
- xxxx xxxxx:
xxxxxx může být xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx koncentraci 0,024 x/100 ml, xxxxx xx vzorek xxxxxxxx na xxxxxxx 6 až 12 °X ihned xx xxxx xxxxxx a xxxxxxxx xx 48 xxxxx xx xxxx xxxxxx;
- bronopol:
vzorek xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx 0,05 x/100 xx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx na teplotu 6 xx 12 °X xxxxx xx xxxx odběru x xxxxxxxx do 72 xxxxx po xxxx xxxxxx.
6.2.2 Vzorek, xxxxx xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx boritou, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx 48 xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxx xxx o xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx odpadních xxx.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx, xxxxx se xx xxxxxxxx, xx xx xxxxxxxx skladuje xxxxxxx 24 xxxxx xxx xxx 2-6 °X. Xxxxxxxx vzorků x xxx nadojení xx bez xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx přesto nutné xxxxxxxx provést, xxxxxx xx xxx být xxxxxxxxx ošetřován xxxxxxx xxx xxxxxx dvojchromanem xxxxxxxxx (viz 6.2.1).
7.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx vzorek (xxx 7.1) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx starý xxxxxx xx xxxxx xxxxx (5.2) xx xxx 40 °X. Xxxx xxxxxxxxx vzorek xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xx počítání.
7.3 Xxxxxxxx buněk
Počítání xx xxxxxxx xxxxxx počítacího xxxxxxxx (5.1) xx 15 minut po xxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 7.2). Bezprostředně před xxxxxxxxx xxxxxx důkladně xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx somatických xxxxx.
Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x) x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx.
Xxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxx odhady:
(1) xxxxx xxxxx mezi 400 000 až 500&xxxx;000 xxxx:
- xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxxxxxxxx:
xx = 20000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx koeficientu 5–4 %)
- směrodatná xxxxxxxx reprodukovatelnosti:
sR = 40000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx variačnímu xxxxxxxxxxx 10–8 %)
9. Xxxxxxxx správnosti
Kontrola xxxxxxxxxx xx xxxxxxx pomocí xxxxxx x známém xxxxxx xxxxx, xxxxx xx stanoví počítáním xxxxx pod xxxxxxxxxxx xx národní xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
XXXX. XXXXXXX XXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXX
XXXXXXX A XXXXXX XXXXXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx mléce x x tepelně xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx:
X. Xxxxxxxxxxxx postup
Tento xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x sulfonamidy. Xxxxxxxxxx xxxxxx je jedním x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx Bacillus xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx, XXXX 10149, xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx postup byl xxxxxx jako reprezentativní xxx xxxxxxxx testy.
B. Xxxxxx pro xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx penicilinu
Tento xxxxxx se xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx postupu, xxx identifikaci penicilinu x xxxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxx.
X. Kvalitativní postup
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx postup xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx detekci antibiotik x sulfonamidů v xxxxxxx xxxxx a x tepelně xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxx koncentrace xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx [1]
|
Xxxxxxxxx testu |
||
|
Negativní |
Pozitivní |
|
|
Benzylpenicilin |
0,002 |
0,006 |
|
Ampicilin |
0,002 |
0,005 |
|
Cloxacillin |
0,015 |
0,035 |
|
Nafcilin |
0,006 |
0,011 |
|
Tetracyklin |
0,10 |
0,40 |
|
Oxytetracyklin |
0,20 |
0,45 |
|
Chlortetracyklin |
0,15 |
0,50 |
|
Chloramfenikol |
7 |
15 |
|
Dihydrostreptomycin |
4 |
13 |
|
Neomycin |
1 |
22 |
|
Kanamycin |
9 |
28 |
|
Bacitracin |
0,06 |
0,14 |
|
Erythromycin |
1 |
2,25 |
|
Rifamycin |
0,01 |
0,14 |
|
Diafenylsulfon |
0,01 |
0,1 |
|
Sulfametazin (Xxxxxxxxxxxx) |
0,5 |
1 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2 x |
|
|
Xxxxxx |
5 x |
|
|
Xxxxxx xxxxxxx |
1 x |
|
|
Xxxxxxx xxxxx |
5 x |
|
|
Xxxx |
10–15 g |
|
|
Voda |
1000 xx |
|
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx. Za xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx. Xxxxxxx pH xxx, aby xx xxxxxxxxxxx byla jeho xxxxxxx 7,4 ± 0,1 při 25 °X.
Xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxxxx xxxx po 100 xx xx xxxxxxxx x naklonit x xxxxx xxxxxx šikmý xxxx.
Xxxxxxxxxxxx 15 minut xxx 121 ± 1 °X.
5.1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxx xxxxx |
2 g |
|
Agar |
15 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx tetroxoprimu (viz 5.1.3) |
10 ml |
Příprava:
Rozpustit složky xx xxxx, s xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xx občasného xxxxxxx xxxxx xx xxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx tetroxoprim x xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X. Xxxxxxx xX, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx jeho xxxxxxx 7,0 ± 0,1 při 25 °X.
5.1.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxxxx |
5 xx |
|
xxxx Xxxxxxxxxxx |
30 xx |
|
96 % Xxxxxxx |
5 xx/30 ml |
|
Vodado |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x ethanolu xxxxxxxxxxxx nebo tetroxoprim (5 nebo 30 xx) a doplnit xxxxx.
5.1.4 Živný xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
0,75 xx |
|
Xxxxxxx |
5,0 mg |
|
Rozpustný xxxxx |
8,0 xx |
|
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx |
0,025 x |
|
Xxxx |
50 ml |
Příprava:
Rozpustit xx xxxx živný roztok x xxxxxxxxx, xxxxx xx je xxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Živný xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx.
5.2 Standardní roztoky xxxxxxxxxx
5.2.1 Ve sterilní xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx roztok xxxxxxxxxx x 60 μx/xx (100 XX/xx), x xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx destilované xxxx.
5.2.2 Xxxxxxxxx pracovní xxxxxx xxxxxxxxxx vložením 1,25 xx roztoku penicilinu (5.2.1) sterilní xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xx 1000 xx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 0,075 μx penicilinu/ml (= 0,125 XX/xx).
5.2.3 Xxxxxxxxx 75 ml xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx obsahujícího 0,004 μg penicilinu/ml (= 0,0067 XX xxxxxxxxxx/xx) xxxxxxxx 4 xx xxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxx (5.2.2) xx 71 xx mléka xxx inhibičních látek (5.3).
5.2.4 Roztoky penicilinu xxxxxxx xxxxx bodů 5.2.1 xx 5.2.3 xx xxxx xxx xxxxxxxxxx v den xxxxxxxxx xxxxx.
5.3 Xxxxx xxx inhibičních látek
Připravit xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (10 % x/X) xx xxxx, xxxxx xxxx předtím xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxx xxxxxx přiměřené xxxxxxxx čerstvého xxxxx, xxxxx bylo otestováno x xxxxxxxxxx za xxxxxx xxxxxxxxxxx látek; xxxx xxxxx xx xxxxxxx xx lahví x zahřívá se xxxxx xxxxxx na 100 °X, xxxx xx uloženo do xxxxxxxxxx x xxxxxxxx 0 °C xx 6 °X na xxxx nejvýše jednoho xxxxx.
5.4 Testovací xxxxxxxxxx
5.4.1 Xxxx xxxxxxxxx organismus xx použije Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. calidolactis XXXX 10149 Xxxx XXXX 10149 xx xxxxxxxxx x xxxxxx X 953.
5.4.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx kultura xx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx agaru (5.1.1). Xxxxx xxxx xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx kultura, xxxx se xxxxxxx xxxxxxxx 48 hodin xxx 63 ± 1xX. Xx inkubaci xxxxxxx xxxxxxxx sterilní xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx při 0 xx 5 xX.
5.5 Xxxxxxxxx kultura (xxxxxxxx xxxx)
5.5.1 Xxxxxxxxx xxxxxxx 20 ml živného xxxxx (5.1.1) xx xxxxxxxx Petriho xxxxx (4.2.2) x xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5.2 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) přenést 5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx zkumavky xx xxxxxxx xxxxxxxx (5.4.2) x vymýt xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx spór xx xxxxx xxx 0 xx 5 °X x xxxxxxx xx xx 36 xxxxx.
5.5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxx (5.5.2) xx Xxxxxxx xxxxx (5.5.1) x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx 16 xx 18 xxxxx xxx 63 ± 1 °X (4.1.1).
Xxx xxxxxxx zásobní xxxxxxx (5.4.2) xxxx xxxxxxx xxxxxx 36 xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx dvakrát x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 36 xxxxx.
5.5.4 Xxxxxxxx pipetou (4.2.4) xxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxxx xxxx xx Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (5.5.3) x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx spór xx xxxxx (4.2.3) xxxxxxxxxx 250 ml sterilní xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx ihned xxxxxxxxxxx, xx se měly xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 0 xx 6 °X.
5.5.5 Xx 16xx xx 18ti xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 63 ± 1 °X na agarovém xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx 5 x 10 miliony na xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, x pokud xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx xx xx xxxxxxxx novou xxxxxxxx připravenou xx xxxxxxx xxxxxxx (5.4.2).
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx
5.6.1 Nechat xxxxxxxxx xxxxxxx médium (5.1.2), xxxx xxxxxxxx xx 55 °C.
5.6.2 Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx spór (5.5.4) x pěti xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (5.6.1) xx zkumavce nebo x xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxx (4.2.6) 0,3 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.6.2), xxx xx xxxxxxxxx 5 mm xxxxxx, poté uzavřít xxxxxxxx zátkou xxxx xxxxxx xxxx, x xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx agarové xxxxxx ztuhnout, xxxx xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx 12 xxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
5.6.4 Zkumavky/ampule xxxxx xxx xxxxxxx týž xxx, ale xxxxx xxx rovněž xxxxxxxxxx xxxxxxx měsíců xxx 0–6 °X, pokud xxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx 24 xxxxx xx xxxxxx, x xx xx xxxx se xxxxxxxx xxx xxxxxxx 0-5 °X. Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx vzorky xx 24 xxxxx, xxxx by se xxxxxxx xxxxxxx zmrazené (−30 °xx - 15°X), aby se xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.2 Čitelně x nesmazatelně identifikovat xxxxxx zkumavku/ampuli (5.6). Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx (4.1.3) xxxxx xxxxxxxxxx pro xxxxxx a xxxxx (5.2 a 5.3).
6.3 Xx xxxxx zkumavky/ampule xxxxxx 50 mikrolitrů xxxxxxx xxxxxxx (5.1.4).
6.4 Xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx (4.1.4) xxxxxxx 0,1 xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.5 Postup xxxxx xxxx 6.4 xx opakuje xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,004 μg/ml (= 0,0067 IU/ml) xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx (5.2.3).
6.6 Postupem xxxxx bodu 6.4 xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx kontrolního xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek (5.3) xxxxxxx vzorku mléka.
6.7 Xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx a xxxxxxxx se zkumavkami/ampulemi xxxxxxx na xxxxxxx 2½ až 2¾ xxxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxxxxx 63 ± 1 °X (4.1.2).
6.8 Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx x xxxxx xxxxx.
6.9 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxx 7).
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx vzorkem xxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x koncentraci nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx "zcela xxxxxxxxx" uvedené x xxxxxxx xx xxxxxx 39. Pokud zabarvení xx zkumavkách/ampulích xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (6.5) zůstane purpurové, xxxxxxx médium xx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x koncentracích xxxx koncentracemi uvedenými xx straně 39.
7.3 Xxxxx zabarvení agarového xxxxx ve zkumavkách/ampulích xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx inhibičních xxxxx xxxx xxxxxx mléka xxxxxxx xx nepřítomnost xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
7.4 Xxxxx xx purpurové xxxxxxxxx xxxxxx ve všech xxxxxxxxxxx zkumavkách/ampulích, včetně xxxxxxxxxxx xxxxxxx, zkumavky/ampule xxxxxxxxxx životaschopné xxxxx x xxxxxx musí xxx podrobeny novému xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Xxxxxxxx xxxxxxxx všech vzorků x xxxxxxxx xxxxxxxxx x 7.1 x 7.2 xxxxx xxxxxx "X".
Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx před xxxxxxxxxx skladovat, musí xxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X. Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx penicilinů x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx popisuje konfirmační xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx penicilinu xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx (A.7.1) nebo xxxxxxxxxx xxxxxx (X.7.2).
Xxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxxx
Xxx A.1.
2. Xxxxxxxx
2.1 Xxxxxx mléka xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx popsaným xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx inhibiční xxxx xxxxxxx 2 xx kolem disku.
2.2 Xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx antibiotika, včetně xxxxxxxxxxx (2.1), a xx xxxxxxx byla xxxxxxx penicilináza (xxxx-xxxxxxxxx), xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx čirou xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx je průměr xxxx bez xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xx xxx penicilin xxxx xxxx penicilinu x xxxxxx antibiotika včetně xxxxxxxxxxx.
2.3 Pokud xxxx xxxx xxxx penicilinázou (2.2) xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xx vzorku xxxxx xxxx penicilin, xxx může xx xxx xxxx xxxxxxxx [xxx xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx X, kapitola XX, A.1.f) x 2x)].
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx inaktivovány xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx a xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx (xxx 7.3).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx disk xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx, xx umístí na xxxxxx agarového xxxxx xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx stearothermophilus xxx. xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx po xxxxxxxx narušuje xxxxxxx xxxxxx. Čirá zóna xxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxx v xxxxx xxxxxxxx látky xxxxxxxxx xxxxx pro xxxx. Xxxxxxxx čiré xxxx mimo xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x druhu inhibiční xxxxx v mléce.
4. Xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx x xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxx X.4.1.
4.1.2 Xxxxx xxxxx, nastavitelná xx 80 ± 1 °X.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
Xxx X.4.2.
4.3 Xxxxxxxx xxxxx, neobsahující xxxxxxxxx xxxxx, o xxxxxxx 9 xx 13 xx, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx 130 xx mléka (nejlépe xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx).
5. Xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx organismus xxx.
Xxxxxxxx složky kultivačních xxxxx xxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxx destilovaná xxxx xx xxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Voda xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxx xxxxxxxxxxx organismu.
5.1 Xxxxxxxxxx xxxxx
5.1.1 Živný agar (X.5.1.1)
5.1.2 Kultivační xxxxxx xxx detekci inhibičních xxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5 x |
|
Xxxxxxx |
1 x |
|
Xxxxxx trimethoprimu xx xxxxxxxxxxxx (X.5.1.3) |
10 xx |
|
Xxxx |
10–15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxx rozpustit xxxxx složky ve xxxx, poté xxxxxx xxxxxx trimethoprimu xxxx xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx hodnotu xX, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx 8,0 + 0,1 při 25 °X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx 15 xxxxx při 121 ± 1 °X.
5.2 Standardní xxxxxxx xxxxxxxxxx v mléku
Viz X.5.2.
Xxx xxxxxxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx xxxxx (8) xxxxxxxxx standardní xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxx inhibičních látek (X.5.3) v xxxxxx xxxxxxxxxxxxx:
x) 0,004 μg/ml (0,0067 XX/xx)
x) 0,006 μx/xx (0,01 IU/ml)
c) 0,03 μx/xx (0,05 XX/xx)
x) 0,06 μg/ml (0,01 IU/ml).
5.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxx
5.3.1 Rozpustit xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxx) xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx s xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 1000 X/xx. Xxxxx roztok, xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx dávky, je xxxxx skladovat až xxxxx týdny xxx 0 °X xx 5 °X.
Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx postupu xx xxxxxxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxx penicilinázy xxxxx xx xxxxxxxxxx 0,6 μx (= 1 XX) xxxxxxxxxx. U xxxxxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx nutné xxxxxxxxxxxx, zda xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.3.2 Namísto roztoku xxxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxx dostupné xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxx zjistí, že xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxx X.5.4.
5.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxx)
Xxx X.5.5.
5.6 Xxxxxxxx Petriho xxxxx
5.6.1 Xxxxxx rozpustit agarové xxxxxx xxx detekci xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), xxxx xxxxxxxx na 55 oC.
5.6.2 Do xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx (5.5) x nezbytnému xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), x cílem xxxxxx xxxxxxx hustotu xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.6.3 Přenést xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx (X.4.2.2), xxxxxx xxxxxxx xx 55 °X, xxxxxxxxxx agarové xxxxxx, xxx se vytvořila 0,6 xx 0,8 xx xxxxxx. Xxx Xxxxxxx xxxxx o xxxxxxxx průměru 140 xx xx xxxxx xxx 15 xx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxxx 0,8 xx xxxxxx.
5.6.4 Xxxxxxx Xxxxxxx xxxxx na xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx vodorovnost se xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xx xxxx xxxxxx, xxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx vody xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
5.6.5 Takto xxxxxxxxxx Xxxxxxx misky xx xxxxxxx xxxxxxx ještě xxx xxx, xxx xxxxx xxx používány xxxxxxxxx xxx týdny, xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx vloží xx zataveného xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx a uchovávají xx při 5 °X.
5.6.6 Xxxxxxx xxx Xxxxxxx xxxxx, aby xxxx xxxxx identifikace xxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Příprava xxxxxx
6.1.1 X xxxxxx x xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx výsledkem xxxxx "xxxxxx A" (A.7.1 x A.7.2) xxxx xxx provedeno xxxx xxxxxxxxx za xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx 10 xxxxx na 80 ± 1 °C, xxx xx vyloučil xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
6.1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxx 10 xx xxxxxx zahřátého xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx hrdlem. X xxxxx přidat xxx 0,4 xx xxxxxxx penicilinázy (5.3) x xxxxx xxxxxxxxx.
6.2 Xxxxxxx inhibičních látek
6.2.1 Xxxxxxx papírový xxxx (4.3) xx xxxxxx xxxxx (6.1.2) xxxxxx xxxxx x suché xxxxxxx. Odstranit přebytečné xxxxx otřením xxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxx. Xxxxxxxx položit xxxx na xxxxxx Xxxxxxx xxxxx (5.6) x lehce přitlačit xxxxxxxx.
6.2.2 Xxxxx napuštěné xxxxxxx xxxxxx mléka xxxx být vzdáleny xxxxx od druhého xxxxxxx 20 xx x xx okraje xxxxxxx 10 mm.
6.2.3 Xxx kontrolu xxxxxxxxxx xx xxxxx (4.3) xxxxxxxxx standardním roztokem xxxxxxxxxxxx (5.2) musí xxxxxxxx xxxxxxxxx mezi xxxxx napuštěné vzorky xxxxx x xxxxxx xxxxxxx 2 % xxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxx; xxx xxxxxx testu se xxxxxxx nejméně xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
6.2.4 Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx všech xxxxx xx agarové xxxxxx a po xxxxxx identifikaci, xxxxxxx xxxxx dnem xxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxxxx 2,5 xx 5 hodin xxx 63 ± 1 °X.
6.2.5 Xx inkubaci xxxxxxxx misky při xxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx čiré xxxxxxxxx xxxx kolem xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx zóny xx xxxxx.
6.2.6 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (6.2.3) xxxx kolem xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 2 xx zóny.
6.2.7 Čiré xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx vzorky mléka, xxxxxxx velkost xx xxxxxx nebo xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx x 6.2.6, ukazují xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.3 Identifikace x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
6.3.1 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx dvojmo xx xxxxxxx xxxxxxxxx mléka (6.1.2) x se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (6.1.3). Namísto přidání xxxxxxxxxxxx xx 10 xx xxxxxx mléka xx xxxxx xx xxxxxx xxxxx ponořit xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (5.3.2) a xxxxxx xx na testovací xxxxx.
6.3.2 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x 5.2 x) xx x).
6.3.3 Xxxxxxxxx průměrný průměr xxxxxx inhibičních xxx xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx vzorky penicilinázy x xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx penicilinu.
7. Interpretace xxxxxxxx (xxx 2)
7.1 Xxxxx xx xxxxx xxxxx napuštěném kontrolní xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx, xxx xxxx zóna se xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx vzorkem mléka, xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx penicilinu (5.2x)), xxxxxxxxx látka xx xxxxxx mléka xxxxxxxx koncentraci xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx sodného xxxxx xxxx xxxxx než 0,004 μg/ml.
7.2 Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx disku nepuštěném xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx zóny xxxxx xxxxx se vzorkem xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx postupu.
7.3 Xxxxx xx průměrná xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx kolem xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxx xx vzorkem xxxxx xxxxxxxxx podle 6.1.2, xxxxxx xxxxx obsahuje xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v tomto xx. Syntetické xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx jako xxxxxxxxx xxxxx jiné xxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, inhibiční xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx postupy.
8. Stanovení xxxxxx xxxxxxxxxx
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxx penicilinu xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xx sestrojení xxxxxxxxxx xxxxxx, nebo xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x mléce (5.2 x) xx x)).
8.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx x xxxx, že xxxxxxxx xxxxxxxx korelace xxxx xxx10 koncentrace xxxxxxxxxx a průměrem xxxxxxxxxxx xxx, standardní xxxxxx xxx sestrojit xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx pořadnici x xxxxxx zón na xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Průměry inhibičních xxx se xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x zakreslí se xxxxxxxxxx xxxxxx.
8.3 Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx lze xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxxx zón nejméně xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx větší xxx xxxxxxx xxxxx.
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Xxxxxxxx xx vyjadřují xxxx xxxxx penicilinu rovný xxxx vyšší než 0,004 μg/ml (xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xxxx xxxx obsah xxxxxxxxxxx látek jiných xxx xxxxxxxxx.
9.2 Xxxxxxxxxxxxxx (x) a xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X)
Xxxxx nejsou k xxxxxxxxx a jsou xxxxxxxxxx x důsledku xxxxxxx standardu xxx xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
X souladu x xxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/XXX, přílohy X, xxxxxxxx XXX xxxx 2, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx, xxx detekci xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x pasterovaném xxxxx.
2. Definice
Vyšetření xx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx příčinou xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx splněny xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx X, xxxxxxxx VII xxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx, pokud jde x xxxxxxxx kolonií xxx 30 °C x 21 °X, xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx test xx xxxxxxx patogeny xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, pokud xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx mléko xx nějakou spojitost xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
3. Postup
Postupy x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx vnitrostátní xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, který xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x zdravotní nezávadnosti xxx tepelně xxxxxxxx xxxxx pro xxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx patogenních xxxxxxxxxxxxxx xx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Zpráva x xxxxxxxx
Xxx každý xxxxxxxxxxx patogenní mikroorganismus xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx:
Xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxx "xxxxxxxxxx" či "xxxxxxxxxxxx" x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx požaduje xxxxxxx postup. Xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx postup.