Xxxxxxxxxx Xxxxxx
xx dne 14. února 1991,
kterým xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx analýzy x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx ošetřeného xxxxx
(91/180/XXX)
XXXXXX EVROPSKÝCH SPOLEČENSTVÍ,
s xxxxxxx na Xxxxxxx x založení Evropského xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx směrnici Rady 85/397/XXX xx dne 5. srpna 1985 x xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx otázkách xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx [1] naposledy xxxxxxxxxx xxxxxxxx 89/662/XXX [2], x xxxxxxx na xx. 10 xxxx. 2 uvedené xxxxxxxx,
xxxxxxxx x tomu, že xxxxx xx. 10 xxxx. 2 Xxxxxx xxxxxxx metody xxxxxxx x xxxxxxxxx, které xx mají xxxxxxxx xxx xxxxxxxx dodržování xxxxx xxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx mléko;
vzhledem k xxxx, xx pro xxxxxx mléko xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxx mrznutí x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, že xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx metody xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, nepřítomnosti xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx antibiotik x xxxx mrznutí;
vzhledem k xxxx, že pro xxxxxxxxxxxxx xxxxx a XXX xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxx zejména xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, nepřítomnosti xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx stanovit referenční xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx dodržování xxxxxxxx xxxxx; xx xx xxxxxxx xxxxxxxx pokračovat x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx kterých xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx a testování; xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx těchto šetření xxxxx členské xxxxx xx to, xxx xxx dodržení xxxxx xxxxxxxx 85/397/ES byly xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx analýzy x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx postupů xxxxxxx x kriterií spolehlivosti xxx xxxxxxxxx jednotného xxxxxxx xxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx rozhodnutí xxxx x xxxxxxx se xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
XXXXXXX XXXX XXXXXXXXXX:
Článek 1
Referenční xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx mrznutí,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 30 °X,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Článek 2
Referenční postupy xxxxxxx a xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx mléko xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx mrznutí,
- stanovení xxxxxxxx fosfatázy,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxx 30 °C,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 21 °X,
- stanovení xxxxxx koliformních xxxxxxxx – xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxx antibiotik x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Článek 3
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x testování xxx XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx tyto:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °C,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx a sulfonamidů.
Xxxxxx 4
Použití referenčních xxxxxxx analýzy x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx se xxxx xxxxxxx podle pravidel xxxxxxxxxxx x xxxxxxx X.
Článek 5
Referenční xxxxxxx xxxxxxx x testování xxxxxxx x xxxxxxxx 1, 2 x 3 jsou popsány x xxxxxxx XX.
Xxxxxx 6
Xxxx rozhodnutí xxxx xxxxxxxxxxx xx 31. prosince 1992, xxx se xxxxxxxxx xxxxx vědeckých x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Článek 7
Xxxx xxxxxxxxxx xx určeno xxxxxxxx xxxxxx.
X Bruselu xxx 14. xxxxx 1991.
Xx Xxxxxx
Xxx Mac Sharry
člen Xxxxxx
[1] Úř. xxxx. X 226, 24.8.1985, x. 13.
[2] Xx. xxxx. X 395, 30.12.1989, x. 13.
XXXXXXX I
OBSAH
I. Obecná xxxxxxxxxx
XX. Xxxxx vzorků xxxxxxxx x tepelně xxxxxxxxxx xxxxx
X. XXXXXX XXXXXXXXXX
1. Úvod
Obecná xxxxxxxxxx xx týkají činidel, xxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxx výsledků, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x testování. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx mléka xxxx xxxxxxxxx tato xxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxx
2.1.1 Pokud xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx k xxxxxxxxxxx, xxxxxx nebo xxxx xxxx být xxxxxxx voda destilovaná, xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx odpovídající čistoty. Xxx mikrobiologické účely xxxx být bez xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx popsaných xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.1.2 "Xxxxxxxxxxxx" nebo "xxxxxxx" (bez dalšího xxxxxxxxx) xx rozumí "xxxxxxxxxxx ve xxxx" xxxx "xxxxxx xxxxx".
2.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, všechny xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxx xxxxxx analytické xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx a xxxxxxx
3.1 Xxxxxx přístrojů x pomůcek
Příslušný seznam xxxxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx zvláštnímu xxxxxxx x xx zvláštní xxxxxxxxxxx.
3.2 Xxxxxxxxxx xxxx
"Xxxxxxxxxxxx xxxxxx" se xxxxxx xxxx x přesností xxxxxx na 0,1 xx.
4. Xxxxxxxxx výsledků
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx není xxxxxxxxx xxxxx, výsledek xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx průměrem dvou xxxxx, xxxxx splňují xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (5.1) xxx xxxxxxxxxx metodu. Xxxx xxxx toto xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxxxx, xxxxx je xxxxxxxx neplatný.
4.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx podílu
Pokud není xxxxxxxxx xxxxx, výsledek xx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
5. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx postup jsou xxxxxxxxxx takto:
5.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) xx xxxxxxx, xxx kterou xx xxxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx byly získány xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx, stejný xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx, krátké xxxxxx období).
5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) xx xxxxxxx, xxx xxxxxx leží xxxxxxxxx xxxxxx dvou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx totožným postupem x týmž xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx x/xxxx xxxxx xxxx).
5.1.3 Pokud xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxx opakovatelnosti x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxx odstavcích xxxxxxx xxxxxxx, představují 95 % xxxxxxxxx xxxxxx spolehlivosti xxxxx xxxxxxxx ISO 5725, xxxxx vydání, 1986. Xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx uznaných xxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxxx xxx hodnocení postupu. Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx tyto xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx provedeny. X xxx případě byly xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x souladu x mezinárodními xxxxxx.
6. Xxxxxx o xxxxxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx použitý xxxxxx x získané xxxxxxxx. Xxxx jiné musí xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x metodě xxxxx, nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a všechny xxxxxxxxx, xxxxx by xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx informace xxxxxxxxxx úplnou identifikaci xxxxxx.
XX. XXXXX XXXXXX XXXXXXXX X XXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXX
1. Xxxxxxx x oblast použití
Tento xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro odběr xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx ošetřeného xxxxx. Xxxxx xxxxxx pro xxxxx vzorků, přeprava x skladování vzorků xx použijí xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx a xxx xxxxxx x tepelně xxxxxxxx mléko xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx 2, 4.4, 5 x 6 se xxxxxxx xxx xxxxx vzorků xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx.
2. Xxxxxx
Xxxxx vzorků xxxxxxxx x tepelně xxxxxxxxxx xxxxx obsaženého x xxxxxxx, nádržích xxxx. xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx vzorků xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx laboratoř považují xx nezbytné, vyškolí xxxxxxxxxxx pověřené xxxxxxx xxxxxx x metodách xxxxxx, xxx xxxx xxxxx, xx odebrané xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x v souladu x xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx příslušné orgány xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx za xxxxxxxx, xxxxxxx zaměstnance xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx vzorků byla xxxxxxxxxxx.
3. Vybavení xxx xxxxx xxxxxx
3.1 Obecné xxxxx
Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx x jiného xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx být xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx, odběr xxxxxx, xxx.). Xxxxxxx x xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxx dostatečně xxxxxx xxxxxx povrchu, xxx xxxx zajištěno xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výrobku xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx. Naběračky xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx rukojetí x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx hloubky xxxxxx. Objem naběračky xxxx být xxxxxxx 50 ml.
Vzorkovnice x xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx x xxxxxxxx plastu.
Materiály xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxx odběr xxxxxx (včetně nádob x xxxxx) xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx změnu xxxxxx, xxxxx by xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xx xxxxxx xxxx mít čistý, xxxxx, xxxxxx xxxxxx xxx trhlin x xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx.
3.2 Xxxxxxxx xxx xxxxx vzorků xxx xxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
Vybavení xxx xxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxx) musí splňovat xxxxxxxxxx bodu 3.1 x musí xxx xxxxxxxx.
Xxxxx xx xxx xx sobě xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x sterilizováno x xxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, které xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx nedošlo x xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx jdoucích xxxxxx.
4. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx
4.1 Xxxxxx xxxxx
Xxx xxxxxx xx xxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxx musí xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxx odebrán xxxxx xx promíchání, xxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxxx.
Xxxxx xx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx více xxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx, jako xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxx mikrobiologické xxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx musí xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx použitých nádob xxxx být xxxxxx, xxx xxxx xxxx xxxxxx téměř xxxxxxxx xxxxxxx x xxx xxx bylo xxxxx xxxxx promíchat obsah xxxx testováním, xxxx xx xxxx hrozilo xxxxxxxxx stloukání másla xxxxx přepravy.
4.2 Xxxxx xxxxx xxxxxx
4.2.1 Xxxxx xxxxxx z věder x konví xx xxxxx
X rychlému promíchání xxxxxxxxx xxxxxxxx ve xxxxx nebo xxxxx xxxxxx a xxxx, xxxxxxx xxxx xx xx, aby xx xxxxx xxxxx promíchalo x aby se xx xxxxx konve xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxx celou zásilku, xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.2 Xxxxx z xxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxx x zemědělském podniku
Míchat xxxxx mechanicky xxxx xxxxx dokud xxxx xxxxxxxx dostatečné xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxx neumožňuje xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxx xxxxxx z xxxxx xxx
Xx xxxxxxxx, aby xxxxx xxxx řádně xxxxxxxxxx, xxxx se xxxxxx xx xxxxx xxx. Xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx může xxx xxxxxxxx xxxxx ruční xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxx, x níž se xx odebrat xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx misky xxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxx postupem podle xxxx 4.2.4.
4.2.4 Xxxxx xxxxxx x rozdělené xxxxx
Xxxx je xxxxxxxx xxxxx, x xxxxx xx má xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx více xxxxx, x xxxxx nádoby xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx množství mléka xxx xxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx jednotlivé xxxxx xxxxxx reprezentativních xxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx, xx xxxxx xxx každý xx xxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxx) xxxxxx (xxxxxx) z těchto xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
4.2.5 Xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx – skladovací xxxxxx, cisternové kamiony, xxxxxxxxxx vagóny
4.2.5.1 Xxxx xxxxxxx vzorků xx xxxxx xxxxxxx způsobem xxxxxxxx.
X xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx nádob, skladovacích xxxxxx, cisternových xxxxxxx xxxx cisternových vagónů xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.5.2).
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, xx kterou xxxx xxxxx x xxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx, xx postup promíchání xxxxxxx v každém x xxxxxxxxxxxx případů xx xxxxxx pro xxxxxxx plánovaného xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx výsledků xxxxx provedených xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx částí xxxxx, xxxx v xxxxxxxxxxxx intervalech xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx z xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx) xx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxx u obou xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx 0,1 %.
Xx xxxxx nádobě s xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx části xxxx x xxxxx vypouštění xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx ani xx xxxxxxxxxx není xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx odběr xxxxxx x průlezového otvoru. X xxxxxxx xxxxxx xxxxxx z vypouštěcího xxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx mléka, xxx xxxx xxxxxxxxx reprezentativnost xxxxxx.
4.2.5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx nádob xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx do xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx nebo xxxxxxxxx poháněnou xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx x průlezovém xxxxxx; xxxxxxxx xx xxxxxxxx x mléce,
- x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx mléka x xxxxxx přepravní hadici, xxxxx je napojena xx pumpu a xxxxxxxx do xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx, stlačeným x xxxxxx vzduchem. Xxxxxxx xx minimální xxxx x objem xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
4.3 Automatický x xxxxxxxxxxxxxxx odběr vzorků
Automatické x poloautomatické xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx dodaného xxxxxxxxxx se xxxx xxxxxx podle xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx jiným xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kontrolám, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx odběru xxxxxx musí xxx xxxxxxx s xxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx mléka, x xxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx vzorku),
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx reprezentativní xxxxxx x šarže po xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx poloautomatického xxxxxxxx pro odběr xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx vnitrostátní orgán xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, ze kterého xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx nutné xxxxxxxx.
4.4 Xxxxx vzorků xxxxxxx ošetřeného mléka xxxxxxxx k přímé xxxxxx spotřebě x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxx o xxxxxxx ošetřené xxxxx xxxxxx k přímé xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nádob. Xxxxxx musí být xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx, x xx, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxx xx zpracování (v xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxxxxxx).
X xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx XXX x sterilizovaného) xx xxxxxxx takový xxxxx xxxxxx, aby odpovídal xxxxx vyšetření, která xxxx být xxxxxxxxx, x xx podle xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx podle xxxxxx jiného xxxxxxxxxxx xxxxxx.
5. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xx xxx xxx xxxxxxx identifikačním xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx podle xxxxxx xxxxxxxxxxxx laboratoří xxxx příslušného xxxxxx (xxx xxx 2).
6. Xxxxxxxx a skladování xxxxxx
Xx xxxxxxxxx příslušného xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx pokyny xxxxxxxx xx xxxxx x podmínek xxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxx xxxx xxxxxxx vzorků jejich xxxxxxxxxx, a to xx xxxxxxx xxxxx xxxxx a testování, xxxxx xx xxx xxxxxxx.
Xxxxxx stanoví xxxx:
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx na to, xxx vzorky xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx slunečnímu xxxxxx. Je-li xx xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxx, musí xxx xxxxxxxxx ve xxx,
- vzorky syrového xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 0 oC xx 4 xX. Xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx musí xxx xx xxxxxxxxx x x žádném případě xxxxx xxxxxxxxxx 36 xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxx souhlasit, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 0 oC xx 6 oC, není-li xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxx 24 xxxxx,
- xxxxxx pasterovaného mléka xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x skladovány xxx xxxxxxxxx 0 xX xx 4 xX. Doba mezi xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxxx x v xxxxxx xxxxxxx nesmí xxxxxxxxxx 24 hodin,
- xxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx zařízení xxxxxxxxxx x xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxx xx nejkratší.
Speciální xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx použitelných xxxxxxx.
PŘÍLOHA X
XXXXX
X. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx
XX. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
XXX. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 30 °X
X. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 21 °X
XX. Stanovení xxxxxx koliformních xxxxxxxx – xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °C
VII. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
XXXX. Detekce xxxxxxxxxx x sulfonamidů
IX. Detekce xxxxxxxxxxx mikroorganismů
I. STANOVENÍ XXXX MRZNUTÍ
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, XXX xxxxx xxxx sterilizovaného xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (termistorového xxxxxxxxx), x xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx snímač xxxxxxxxx xxxxxxx teploměr.
K dispozici xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx typ xxxxxxxxx xxxxxxxxx bod xxxxxxx na xxxxx xxxxxx xxxxxxx, kdežto xxxxx typ xx x xxxxxxxxxx důvodů xxxxxxxx xxx, xx xx začátku xxxxxxx xxxxxxx xx stanovenou xxxx odečet. Vzhledem x xxxx, že xx mohou xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx různých xxxxx xxxxx, xxx x xxxxxx bodu xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx použitých xxx xxxxxxxxx, tento xxxxxxxxxx xxxxxx vyžaduje xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx plató. Xxxxxxxxx x pevně xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxx podílu xxxxxxx xxxx vody x mléce za xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxx 0,18 g xxxxxxxx xxxxxx na 100 xx (xxx xxx 7.4).
2. Definice
Bod xxxxxxx mléka: xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx x xxxxxxxx postupem x vyjádřená ve xxxxxxxx Xxxxxx (°X).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx x závislosti xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx vhodnou xxxxxxx x mechanickou xxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx rychle xxxxxxx až k xxxxx, xxxxx odpovídá xxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx takovým xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx postupem xxxx xxx vzorky xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxx standardní xxxxxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx udává xxx xxxxxxx mléka xx stupních Celsia.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx skla
Obvyklé xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Kryoskop
Kryoskop xx skládá z xxxxxxxxxxx xxxxxx chladicí xxxxx, termistorového xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, míchačky xx xxxxxx x xxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx x xx zkumavek xx xxxxxx.
4.1.1 Xxxxxxxx lázeň
Je xxxxx použít dva xxxx chladicí lázně.
4.1.1.1 Xxxxxxx typ
Dobře izolovaná xxxxx obsahující vhodnou xxxxxxxx xxxxxxxx, která xx xxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxx vyšší než 0,2 °X. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx ± 0,5 °X xx nominální xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xx důležité, xxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx kapaliny. Celá xxxxxx xxxxxxxx na xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx kapalinou.
4.1.1.2 Xxxxxxxxxx xxx
Xxxxx zkumavky xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx vhodné xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx kolísat xxxxxxx v xxxxxxx ± 0,5 °X xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx výrobcem.
Vhodnou xxxxxxxx xxxxxxxxx xx 33 % (V/V) vodný xxxxxx 1,2-xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx).
4.1.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx se xxxxxx xx skleněné sondy x xxxxxxxxxx průměru 1,80 ± 0,2 xx x x xxxxxxx xxxxxx maximálně 0,31 mm. Xxxxxx xxxxxxxxx termistoru xxxx xxx nižší xxx 2 xxxxxxx x xxxxxxx x (xxx xxxxxxxx) musí xxx xxxxxx. Xxxxxxxx napětí, xxxxx x konstanta xxxxxxxx xxxx být xxxxxx, xxx xxx − 0,512 °C xxxxxxx xxxxxxxxxx stoupla xxx xxxxxxx okolí xxxxxxxxx x 0,0005 °X. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx může xxx ± 5 %.
Xxxx xx sonda x xxxxxxxxx x pracovní xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xx vzorky x v bodě, xxxxx je 44,6 ± 0,1 xx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (viz xxxxxxx xx xxxxxx 15). Xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx polohy.
Poznámka:
β xxxxxxxx termické xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx
− xX / xX × 1 / X = β / X2
xxx:
X xx xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx
X je xxxxx x xxxxxx při xxxxxxx T,
− xX / dT × 1 / X xxxxxxxx koeficient
β xx xxxxxxxxx, která závisí xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx. X běžné praxi xx doporučuje xxxxxxx xxxxx xxx 3000.
4.1.3 Xxxxxx a odečítací xxxxxxxx
4.1.3.1 Xxxxxxx měření
Použitý xxxxxxxx pracuje xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx křivce xxxx mrznutí. Xxxxx xx část křivky, xxx teplota xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx ± 0,002 xX xx xxxx xxxxxxx 20 sekund.
4.1.3.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx termistoru xx xxxxxxxxx Wheatstoneovým xxxxxxx xxxx podobným xxxxxxxxx xxxxxx nejlepších xxxxxxxxxxxx odporů, xxxxxxx xxxxxxxxx tolerance xx ± 10 % x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx není xxxxx xxx 2×10−5°X.
Xxxxxxxx (vyrovnávací) xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx x xxxx než x 0,3 % xxx maximální xxxxxxx.
Xxx xxxxx kalibrace musí xxx xxxxx odpory xxxxxxx.
Xxxxxx stupnice xx xxxxxxxxx xxxxx po xxxxxxxxx 0,001 °X.
4.1.3.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx 0,01 °X x xxxxxxx xx 0 °C xx –1 °C.
Stabilita xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx příslušného xxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxx xx sobě xxxxxxxxxxxxx xxxxxx téže teploty xxxxxx xxxxx xxx 0,001 °C.
Linearita xxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx xxx správné xxxxxxx xxxxxxxxx nevznikla x xxxxxx bodě xxxxxxx od – 0,400 °X xx – 0,600 °C xxxxx xxxxx než ± 0,001 °X.
4.1.4 Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx se použije xxxxxx xxxx x xxxxxxx 1 xx 1,5 xx, xxxxx xxxxxxxxx x mlékem,.
Míchačka xx měla xxx xxxxxxxxx xx rozkmit x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Přípustná xxxxxxxxx xx xxx 1,5 xx nad xx pod xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x dostatečným xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx ± 1,5 xx), xxx xxxx zajištěna xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx během xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx se xxxxxxxx nesmí v xxxxxx okamžiku dotknout xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx.
4.1.5 Xxxxxxxx xx vyvolání mrznutí
Může xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, které xx xxxxxxx xx činnosti xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, aby xxxxxxx xxxxxx testovacího xxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx. K xxxx xxxxx lze xxxxxx xxxxxxxx; xxxxxx postupem xx xxxxxxxx rozkmitu xxxxxxx na jednu xx dvě xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx dotýkala stěny xxxxxxxx na xxxxxx.
4.1.6 Xxxxxxxx xx xxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx (viz xxxxxxx 1) jsou xxxxxxxx a 50,8 ± 0,1 xx xxxxxx; vnější xxxxxx xx 16,0 ± 0,1 xx x xxxxxxx průměr xx 13,5 ± 0,1 xx. Tloušťka xxxx xxxxxxxx se nesmí xxxxx o xxxx xxx 0,1 xx.
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx okraje 29,8 xx (21 xx xxx dnem xxxxxxxx), xxxxx uvádí xxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx.
4.1.7 Zdroj xxxxxxxxx
Xxxxx napětí xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx nebo vně xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ± 1 % xxxxxxxxx xxxxxxx, když xxxxxx zdroj xxxxxx x ± 6 %.
4.2 Xxxxxxxxxx xxxx
4.3 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 1000 ml, xxxxx X.
4.4 Sušárna, xxxxx odvětraná, nastavitelná xx 130 ± 1 °X
xxxx
Xxxxxxxxxx xxx, xxxxxxxxx, nastavitelná na 300 ± 25 °X.
4.5 Xxxxxxxxx
5. Činidla
5.1 Xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, převařená x zchlazená na 20 ± 2 °X, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx oxid uhličitý.
5.2 Xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx x.x., xxxxx xxxxx, xxxxxx 5 hodin xxx xxxxxxx 300 ± 25 °X x xxxxxxxxxx xxxx xxxx nejméně 24 xxxxx xxx xxxxxxx 130 ± 1 °X v xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.3 Příprava xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxxxxx 1) xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5.2) do xxxxxxx. Xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxx (5.1), xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx odměrné xxxxx x xxxxxx 1000 xx a xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx 20 ± 2 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxx nejdéle dva xxxxxx xxx asi 5 °C x xxxxx xxxxxxxxxx polyethylenových xxxxxxx x maximálním xxxxxx 250 ml.
Bod xxxxxxx roztoků xxxxxxxx xxxxxxx xxx 20 °X
|
x NaCl/l |
°C |
|
6,859 |
-0,408 |
|
7,818 |
-0,464 |
|
8,149 |
-0,483 |
|
8,314 |
-0,492 |
|
8,480 |
-0,502 |
|
8,646 |
-0,512 |
|
8,811 |
-0,521 |
|
8,977 |
-0,531 |
|
9,143 |
-0,541 |
|
10,155 |
-0,600 |
Před xxxxxxxx xx standardní xxxxxx xxxxxxx promíchá xxxxxxxxxxx x několikerým xxxxxxxx xxxxx. Nikdy xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxx xx xx roztoku přimíchal xxxxxx.
Xxxxxx standardního xxxxxxx xx x xxxxx xxxxxx do xxxxx x xxxxx xxxxxxx. Xxxxx nepoužívat pipety.
Nepoužívat xxxxxxx x lahví, xxxxx xxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxx, x nepoužívat xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx fungicid (xxxxxxxxx xxxxxx thiomersalu 10 x/x).
6. Kalibrace xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxx 1 °X xx xxxxxxx, xxx xxx se xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx být vystaven xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx 26–27 °X.
Xxxxxxx xx, xx xxxxxxxx funguje xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xx byl xxxxxx xxxxxxx 12 hodin xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx chladicích xxxxxxx.
Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxx tabulka výše), xxxxxxx bod mrznutí xx xxxxx xxx xxxx těsně pod xxxxxxxxxx hodnotou xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x testování. Xxxxxx xxxx body mrznutí xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx být xxxxx než – 0,100 °X.
(X xxxxxxxxx xxxx v současné xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx sestaven tak, xx xx xxxxxx xx dané xxxxxxx xxxx xxxxxxx v xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx výběr xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku, xxxxx xx tento bod xxxxxxx, jako xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxx).
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 ml jednoho xxxxxxxxxxxx roztoku xx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx, xxxx xxxxx pomocí xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx při kalibraci xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx jako zkumavky xxxxxxxxx xx vzorky xxxxx (stejný druh xxxx, xxxxx x xxxxxxxxxx demineralizovanou xxxxx). Xxxxxxx standardních xxxxxxx xxxx stejné xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx postup x xxxxxx standardním xxxxxxxx a střídavě xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx po xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx každý xxxxxx xxxxxxxxxx správné hodnoty xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx, aniž xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx x použití x xxxxx xxxxxxx bod xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx xx byla xxxxx jakákoli úprava.
7. Xxxxxxxx testovacího xxxxxx
7.1 Xxxxx to xx xxxxxxxx xxxxxxxxx vzorky xxx xxxxxxx mezi 0 °X x 5 °X.
7.2 Pokud xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx cizí xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxx xx xxxxxx xx xxxxx a xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx reagovat x mlékem x xxxx být xxxxxx xx xxxxxxxxxxx teploty.
7.3 Xxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0 x 5 °X) xxxx xx xxxxx xx ohřát xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxx xxxx na xx, xxx standardní roztoky x xxxxxx xxxxx xxxx při použití xxxxxxx xxxxxxx.
7.4 Stanovit xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx přesahuje 0,18 x xxxxxxxx xxxxxx xx 100 xx xxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx.
7.5 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 20 minut xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
8. Xxxxxx
8.1 Předběžné xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx s pokyny xxxxxxx, xxxxxxxx zda xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x prázdné xxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx kryoskop x xxxxxxx xx, xxx xx xxxxxxxx kapalina xxxxxxx míchá xxxx xxxxxxxx. Xxxxx byl xxxxxxxx zapnut xxxxxxx 12 hodin, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx kapaliny, xxxxxx míchačky a xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx.
8.2 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxx každou xxxxx xxxxx xxxxx bod xxxxxxx standardního roztoku xxxxxxxx xxxxxxx (například xxxxxx x bodem xxxxxxx – 0,512 °X), xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx při xxxx po xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx nebudou xxxxx x více xxx 0,001 °C. Xxxxx xx průměr xxxxxx xxxxxx liší xx bodu xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx než 0,002 °X, kryoskop se xxxxx xxxxxxxxxx, xxx xx popsáno x xxxx 6.
Pokud xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx kontrola xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxx xx zohlední xxxxxx xxxxxxx.
8.3 Stanovení xxxx xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx opatrným protřepáním x několikerým otáčením. Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx tak xxxxxx, xxx se xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxx přidat 2,5 ± 0,1 xx xxxxx do xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx xx, xx xxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx a xxxxx, xxxxx xx to xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx směrem xxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx podle xxxxxx xxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx x mrznutí xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xx 0,1 °X.
(X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx tuto xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; u ručních xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xx se zajistí, xxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx.)
Xxxxx x jakéhokoli xxxxxx mrznutí začne xxxxx xxxx později, xxx xx dosaženo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xx x xxxxx xxxxxxx xxxxx. Pokud tento xxxxx vzorek xxxxxx xxxxxx před dosažením xxxxxxxxx xxxxxxx, alikvótní xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx 45 °X x 5 xxxxx xx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx.
Xxxx zchladit xxxxxx xx testovací xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Teplota xxxxx xx začátku xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx po xxxxxxx xxxx konstantní, x xxxx klesne. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx dosažené xxxxx této doby x tuto xxxxxxx xx nutné zaznamenat.
Poznámka:
Doba, xx kterou xxxxxxx xxxxxxx konstantní, x xxxxxx xxxxxxxx mezi xxxxxxxx mrznutí x xxxxxxxxx xxxxxxxxx teploty, xx xxxx xxxxxx xx xxxxxx a xxx xxxx a xxxxxxxxxx roztoky chloridu xxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxx než xxx xxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx maximální teplotu.
Když xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, vyjmout xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxx x míchačku směrem xxxxxxx xxxxxx jemnou, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx druhé xxxxxxxxx x jiného xxxxxx xxxxx.
Xxxxx je xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx body xxxxxxx xxxxx než xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (0,004 °X), xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Pokud xxxx xxxxxxx xxxx stanovení xxxxxx xx 0,004 °X, zapíší xx x použijí xx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
8.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx zkumavku xx xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxx zůstala x chladu.
(U některých xxxx kryoskopu xx xxxx možné; v xxxxxxxx případech xx xxxxxxxx se xxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx zchlazena, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.)
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Xxxxxxx
Xxxxx xx po xxxxxxxxx xxxxxxx kontroly xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xx považuje xxxxxx xxxx dvou xxxxxxxxxxxx xxxxxx získaných xxx bod xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na xxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx provedených xxxxxxxxxx xx liché xxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx sudou hodnotu, xxx ukazuje xxxxx xxxxxxx:
Xxx xxxxxxx (°C)
|
Hodnoty xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx |
Xxxxxx |
|
|
-0,544 |
-0,545 |
-0,544 |
|
-0,545 |
-0,546 |
-0,546 |
9.2 Xxxxxxxxxxxx
9.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x): 0,004 °X
9.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X): 0,006 °X
Xxxxxxx 1
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1 (poloha xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx)
XX. XXXXXXXXX AKTIVITY XXXXXXXXX
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx v pasterovaném xxxxx.
2. Xxxxxxxx
2.1 Aktivita xxxxxxxxx xx míra xxxxxxx alkalické xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx množstvím xxxxxx x μg xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx mléka xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx mléka xx xxxxxxxxx, xxxxx je xxxxx xxx 4 xx xxxxxx na 1 xx.
3. Princip
Aktivita xxxxxxxxx xx vzorku xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxx), xxxxx se xxxxxxxxxxxxxx měří xxx 610 xx. Xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx vzorkem, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Tlumivý xxxxxx boritanu a xxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxx xx xxxx 50,0 x hydroxidu xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) [Xx(XX)2.8X2X] x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.1.2 Rozpustit xx xxxx 22,0 x xxxxxxxx borité (X3XX3) x xxxxxxx na 1000 xx.
4.1.3 Zahřát 500 xx xxxxxxx xxxxxxx xx 50 °X, xxx roztoky xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxx na 20 °C, x xxxxxxx nutnosti xxxxxxx xxxxxxx xX xx 10,6 ± 0,1 xxxxxxxx roztoku 4.1.1 xxxx 4.1.2. Xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx uzavřené nádobě.
4.1.4 Xxxx xxxxxxxx zředit xxxxxx stejným xxxxxxx xxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx zabarvení
Rozpustit xx vodě 6,0 x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XxXX2) nebo 12,6 x NaBO2.4H2O x 20,0 x xxxxxxxx xxxxxxx (XxXx) x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.3 Xxxxxxx roztok xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxx 10 ml xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx zabarvení (4.2) xxxxx xx 100 xx.
4.4 Roztok xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx 0,1 x fenylfosfát xxxxxxxxx bezvodý, xxxxxx xxxxxx, xx 100 xx xxxxxxxxx roztoku (4.1.3) xxxx 0,5 x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx 4,5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxx zabarvení (4.2), xxxxxx dvě kapky xxxxxxx BQC (4.6) x xxxxxx stát 30 xxxxx xxx xxxxxxxx teplotě. Vzniklé xxxxxxxxx extrahovat 2,5 xx x-xxxxxxxx x xxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx-1 xxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx-1. X xxxxxxx xxxxxxxx xx extrakce xxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx; xxxx xxxxxxxx vyvolat xxxxxxxxx x provést xxxxx xxxxxxxx. Tlumivý substrát xxxxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxxx, a xx xxxxxxxx 1 xx xxxxxx roztoku xx 100 xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.3).
4.5 Xxxxxxxxx xxxxx-xxx
Xxxxxxxxx ve xxxx 3,0 x síranu xxxxxxxxxxx (XxXX4 · 7X2X) a 0,6 x síranu xxxxxxxxx (XxXX4 · 5X2X) x doplnit na 100 xx.
4.6 Xxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx XXX)
Xxxxxxxxx x 10 ml 96 % (X/X) xxxxxxxx 40 ± 1 xx 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXX) (X6X2Xx2XxXX6).
Xxxxxxxxx v xxxxx láhvi x xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxx xxx xxxxx měsíc.
4.7 Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (XX)
Xxxxxxxxx xx vodě 0,05 x xxxxxx xxxxxxxxx (XxXX4.5X2X) x xxxxxxx na 100 xx.
4.8 Xxxxxxxxxx roztok xxxxxx
4.8.1 Navážit 200 ± 2 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx o xxxxxx 100 ml, xxxxxx xxxx, xxxxxxxxx x doplnit na 100 xx. Tento xxxxxx může být xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
4.8.2 Xxxxxx xxxxx 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx 100 ml x xxxxxxxxx. 1 xx obsahuje 200 μx fenolu.
5. Přístroje x pomůcky xx xxxx
Xxxxxxxx:
x) Veškeré pomůcky xx skla, xxxxx x zátky a xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx oplachování čerstvě xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx vodou xxxx čistění xxxxx.
x) Xxxxxxx typy xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
5.1 Analytické xxxx
5.2 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx 37 ± 1 °C.
5.3 Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx odečty xx xxxxxx xxxxx 610 xx.
5.4 Zkumavky, 16 xxxx 18 × 150 xx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx po 5 xx x 10 xx.
5.5 Xxxxxx
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, např. x xxxxxxx 5 cm.
5.7 Xxxxxxxx filtry x xxxxxxx nejméně 9 xx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
5.8 Xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
6. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxx xxxxxxxxx zabránit xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
x) Xxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx pozitivní xxxxxxxx a je xxxxx xx xxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx pipetování.
6.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku
6.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx. V xxxxxxx případě xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxx xxx xxx.
6.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx pipety xxxxxx 1 xx xxxxxx xx každé xx xxxx xxxxxxxx (5.4), jednu zkumavku xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx slepý pokus.
6.3 Xxxxxxxxx
6.3.1 Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx minuty xx vroucí vodě; xxxxxxxx x kádinku x vroucí xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx prohřála xxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.2 Xx zbytek xxxxxxx xxxxxxxxx slepý x testovací xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx 10 ml roztoku xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxxxxx.
6.3.3 Vzorky xxxxx xxxxxxxxx 60 xxxxx xx vodní lázni (5.2) a xxxxx (xxxxxxx čtyřikrát) xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
6.3.4 Xxxxxx xxxx v xxxx 6.3.1 zahřívat dvě xxxxxx ve xxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx pokojovou teplotu.
6.3.5 Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxxxx xxxxx-xxx (4.5) x xxxxx xxxxxxxxx.
6.3.6 Xxxxxxxxxxxx xxxx suchý xxxxxxxxx papír, vylít xxxxx dva mililitry x v xxxxxxx xxxxxxxx filtrovat znovu, xxxxx xxxx filtrát xxxxxxxx čirý; shromáždit 5 xx ve xxxxxxxx.
6.3.7 Xxxxxx 5 xx tlumivého roztoku xxx vyvolání xxxxxxxxx (4.2).
6.3.8 Přidat 0,1 xx roztoku XXX (4,6), xxxxxxxxx x 30 minut nechat xxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxxx teplotě.
6.3.9 X xxxxxxxxx s kontrolním xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.3.10 Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx 6.3.9 xxxxxxxxx absorbanci xxxxxxxxxxxx xxxxxxx obsahujícího 20 μx xxxxxx xx xxxxxxxx podle xxxx 6.4.4, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx vzorku. Xxxxxxxxx xxxxxxx smícháním xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx objemem xxxxx xxxxx testovacího xxxxxx, xxxxx se xxxxxxx xxxxx xx varu, xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxxxx kalibrační xxxxxx
6.4.1 Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxx (4.8.2) připravit xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0 (xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx), 2, 5, 10 x 20 μx xxxxxx na xxxxxxxx. Do xxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxx pomocí pipety 1 xx vody x 1 xx xxxxxx standardních xxxxxxx xxxxxx.
6.4.2 Do xxxxx xxxxxxxx přidat 1 xx xxxxxxx síranu xxxxxxxxx (4.7), 5 xx tlumivého roztoku xxx xxxxxxx vzniklého xxxxxxxxx (4.3), 3 xx vody x 0,1 xx xxxxxxx XXX (4.6); xxxxxxxxx.
6.4.3 Xxxxxx vyvíjet zabarvení 30 minut při xxxxxxxx xxxxxxx.
6.4.4 X xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx absorbanci xxx xxxxxx délce 610 xx.
6.4.5 Na xxxxxxx xxxxxx absorbance (6.4.4) xxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (6.4.1) xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx metodou xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxx a vzorec
7.1.1 Xx základě hodnot xxxxxxxxxx (6.3.9) xxxxxxxxx xxxxxxxx fenolu xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (6.4.5).
7.1.2 Xxxxxxxxx aktivitu fosfatázy xxxxxxxxxx x μx xxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx vzorce:
Aktivita xxxxxxxxx = 2,4 × X × X
xxx
X xx xxxxxxxx xxxxxx x μg xxxxxxx xxxxx bodu 7.1.1;
X xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx provedené xxxxx xxxx 6.3.10 (x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx X = 1).
2,4 je xxxxxx xxxxxxx (5/12 x 1 ml xxxxxxxxxxx xxxxxx) – xxx 6.2 xx xxxxxxxxxx x 6.3.2, 6.3.5 x 6.3.6.
7.2 Xxxxxxxxxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (r) : 2 μx xxxxxx/xx.
7.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (R) : 3 (xxxxxxxxx) μx xxxxxx/xx.
7.2.3 Pokud xx xxxxxxx provede xxxxx 6.3.10, xxxxxx uvedené x 7.2.1 x 7.2.2 xx xxxxxx xxxxxxxx získaných xx xxxxxxxxx xxxxxx.
XXX. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx nepřítomnosti xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx, xxxxx xxxxxx xx kontrole xxxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxxx:
Xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, do 30 xxxxxx po xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xx peroxidázu:
Do 30 xxxxxx po xxxxxxxxxx xx neobjeví xxxxx xxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxx (Xxxxxxxx xxxx). Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx úměrná xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx x xxxxx xxxx (50 °C) 2 x 1,4 xxxxxxxxxxxxxx (X6X8X2) x doplnit xx 100 xx. Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx a xxxxx, x tmavě hnědé xxxxx xx skleněnou xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx xxxx dní xx připravení xxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxx odstranit.
4.2 Roztok xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx zředit 9 ml 30 % peroxidu vodíku x xxxxxxx xx 100 ml. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxxxxxxxx kyseliny xxxxxx xx xxxx xxxxxxx.
Xxxxxx peroxidu vodíku xx xxxxx xxx xxxxx xxxxx, pokud xx xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxx, x láhvi se xxxxxxxxx zátkou, která xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x organickými látkami.
5. Xxxxxx
5.1 Xxx 5 xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx víčkem.
5.2 Xxxxxx 5 xx xxxxxxx 1,4 fenylendiaminu (4.1).
5.3 Přidat 2 xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.2).
5.4 30 xxxxxx po promíchání xxxxxxxx zabarvení. Pokud xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx více xxx 30 sekund po xxxxxxx xxxxxxx, reakce xxxx specifická.
IV. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX PŘI 30 °X
1. Xxxxxxx x oblast použití
Tato xxxxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °C. Postup xx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, XXX xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx 15 xxx xxxxxxxxxxxxx při 30 °C.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx organismy, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx x kultivačním xxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx inkubovat 72 xxxxx při 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx mikroorganismů xx 1 xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxx xx 0,1 xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx UHT xxxxx.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx sušárna, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °C.
4.1.2 Xxxxxxxx, nastavitelný xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Inkubátor, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °X.
4.1.4 xX-xxxx se zařízením xxx xxxxxxxxxx teploty, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx pH.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, zvětšení 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x 9 xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx ze xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx x vhodnými xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x promíchání 10 xx primárního xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx ředění.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx 20 ml xxx skladování xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxxx (utěsněné xxxxx), xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, x nepoškozeným xxxxxx, o xxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx, x výpustním xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 mm.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxxxxxxx skla xxxx sterilního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx misek xx xxxxxxx xxxxxx xxx 90 až 100 mm. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx být xxxxxxx 10 xx. Dno xxxxx mít xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx ze xxxx:
Xxxxxxx xx skla xx xxxxxxxxxxx jedním x xxxxxx postupů:
a) x xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx při xxxxxxx 170–175 °C;
b) x xxxxxxxxx (4.1.2), nejméně 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx použití xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxx, xxxx xxxxxx by xxxxxx být xxxxxxx xxxxxxxx, uzávěry xxxx xxxxx xx měly xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx sterilizované x xxxxxxxxxxx xx se xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx – xxxx xx xxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 g |
|
Trypton |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx (+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 g |
|
Sušené odstředěné xxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10–15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx vlastností xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx nemělo xxxxxxxxx žádné inhibiční xxxxx. Toto xx xxxxx srovnávacími xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx průkazně xxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, trypton, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx mléko. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx přidat xxxx x xx stálého xxxxxxx xxxxx do xxxx, dokud xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx x xxxx xxx 30 xxxxx.
Xxxxx to je xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx přes xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); pokud xx xx xxxxxxxx, xxxxxxx pH, roztokem (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx chlorovodíkové, xxx xx sterilizaci xxxx xxxx xxxxxxx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a skladování xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 xx xx xxxxx xxxx xx 12 až 15 xx xx zkumavek (4.2.2). Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx.
15 minut xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °C.
Zkontrolovat xX xxxxxxxxxxxx média.
Pokud xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx médium (5.1) se xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx není xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xX xx 6,9 ± 0,1 při 25 °X xxxxxxx podle xxxx 5.1, poté xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Xxxxxx xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxxx sodný (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx vodě, pokud xx je xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xX-xxxxxx (4.1.4); pokud xx xx xxxxxxxx xxxxxxx xX roztokem (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx nebo kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, xxx po xxxxxxxxxxx byla xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 při 25 °X.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx po sterilizaci xxxxx xxxxxxxx obsahovala 9,0 ± 0,2 xx ředidla. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x autoklávu (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxx.
Xxxxx se ředidlo xxxxxxxxx ihned, skladuje xx x xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx po jeho xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx dehydrovaná xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) xx xxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxx dehydrovaných tablet xxxx prášku. Dodržet xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX xxxxxxx xxxxx xxxx 6.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx rychle xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx a zchladit xx vodní xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx vzorku mléka
Vzorek xxxxx xxxxx promíchat, xxx xxxx mikroorganismy xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xx 25 xxxxxxxx otočeními xxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx nebo pěnu xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx testovacího xxxxxx xx xxxxxx překročit xxx xxxxxx.
7.3 Příprava xxxxxxxxxx xxxxxx (10-1) (xxxxxx x pasterované xxxxx)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 9 ml xxxxxxx (6.1), xxxxxxx xxxxxx nesmí xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Teplota xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx jako xxxxxxx xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx toto xxxxxxxx xxxxxx míchačkou (4.1.9).
Xxxxx xx tak xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (syrové a xxxxxxxxxxx mléko)
Sterilní xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx primárního ředění (7.3) xx 9 xx ředidla (6.1) xxxxx xxxxxx v xxxx 7.3.
Xxxxx se xxx xxxxxx 10−2.
X xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Petriho xxxxx
7.5.1 Xxxxxx xxxxx: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Pro každé xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) přenést xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx vhodného desetinného xxxxxx. Musí xxx xxxxxxxxx nejméně dvě xxxxxx. Pro každé xxxxxx (8.1.1) připravit xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.5.3 XXX xxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxx (vyšetřované xx 15 xxxxx xxxxxxxx xxx 30 °X – xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx A xxxxxxxx VII bod 5):
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx do misky (4.2.4) 1 ml xxxxxx xxxxx (7.2). Xxxxxxxxx xxx xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx kultivačního xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx misky xxxxx xxx 15 xx 18 ml xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, aby xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx koncem přípravy xxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx vzorku xxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx vodorovném, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
7.7 Inkubace Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxxx (4.1.3). Misky xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx dotýkat, ani xxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 72 ± 2 xxxxx při 30 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx x Petriho miskách xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 300 xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxx tlumeném xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx zvětšovací xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxxx k xxxxxx xxxxxx sraženin x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx koloniemi. X xxxxxxx pochybností xxxxxxx xxxxxxx průzkum pomocí xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x cílem odlišit xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx tvořící povlak xx xxxxxxxx xx xxxxx kolonii. Pokud xxxxxxx xxxxxxx povlak xxxxxxxxx méně než xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx misky x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx počet xxx xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx vyřadit.
8. Xxxxxxx x vyjádření xxxxxxxx
8.1 Syrové x xxxxxxxxxxx mléko
8.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 až 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.1.2 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 ml xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
∑X / (x1 + 0,1x2) x
xxx:
∑X ΣC xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 8.1.1.
(x1 + 0,1 x2)x je objem xxxxxxxxxxxx vzorku, xxx:
x1 xx xxxxx xxxxx xxx prvním xxxxxxx
x2 xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx
x xx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
Xxxxx se xxxxxxxxxx xx xxx platné xxxxxxx. Když xx xxxxxxxxxxxxxx číslice pět, xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx číslice xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxx):
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 x 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; = 278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2
= 6290,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.1.3 Xxxxx jsou xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 10, xxxxx, že xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxxxxx je "xxxxx xxx 10 x x", xxxxxxx "x" xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx zředění.
8.1.4 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx než 300 x xxxxxxxx xx xxxxx, xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxx převrácenou xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx jako "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xx".
8.2 UHT xxxxx x sterilizované mléko
Počty xxxxx xxx 10 xxxxxxx xx 0,1 xx xx xxxxxxxx xx nevyhovující xxxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/EHS.
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x dispozici.
V. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXX 21 °C
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 21 °C x xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxx 6 xX x xxxxx xxxxxxxx xxxxxx kontaminace xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxx xx x xxxxx při 6 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx vytvářejí xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx aerobní xxxxxxxx za popsaných xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxx xxx 6 °X. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx médiem v Xxxxxxx miskách x xxxxxx xxxxxxxxx 25 xxxxx xxx 21 °X. Spočítat kolonie x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
4. Xxxxxxxxx x pomůcky xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, nastavitelná xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Autokláv, xxxxxxxxxxxx na 121 ± 1 °C.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx:
x) 6 ± 0,2 °X
x) 21 ± 1 °X xx xxxxx xxxxxx xxxxxx.
4.1.4 pH-metr se xxxxxxxxx xxx kompenzaci xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxxxx sklo, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxx xxxx desetinného ředění x 9 xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Pomůcky ze xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxxx 10 ml xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx desetinných ředění.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 až 250 xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx 20 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Pipety (xxxxxxxx vatou), skleněné xxxx xx sterilního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, s xxxxxxxxxxxx xxxxxx, o xxxxxxxxxx objemu 1 xx, x výpustním xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx nebo xx xxxxxxxxxx syntetického materiálu, xxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx asi 90 xx 100 x. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx nejméně 10 xx. Xxx nesmí xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Sterilizace xxxxxxx xx xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx 170–175 °X;
x) v autoklávu (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx nutné xxxx xx xx, aby xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx se měly xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx x horkovzdušné sušárně (4.1.1).
5. Kultivační xxxxxx – xxxx xx xxxxxxx xxxxxx
5.1 Složení:
|
Kvasnicový xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx(+) xxxx dextróza |
1,0 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxx mléko |
1,0 g |
|
Agar |
10-15 x xxxxx želírovacích xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 ml |
Sušené xxxxxxxxxx mléko xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky. Toto xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxx mlékem, které xxxxxxxx xxxxx inhibiční xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, trypton, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx odstředěné xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx usnadňuje xxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx x xxxxx xx xxxx za xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxx zcela xxxxxxxxxx, nebo xxxxxxxx x xxxx asi 30 xxxxx.
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, přefiltrovat xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx to je xxxxxxxx, xxxxxxx xX, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) hydroxidu sodného xxxx xxxxxxxx chlorovodíkové, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 xx xx xxxxx nebo xx 12 xx 15 xx do xxxxxxxx (4.2.2). Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX kultivačního xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx nepoužije xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx teplotě xxxx 1 a 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxx připravit x xxxxxxxxxx dehydrovaného kultivačního xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx přidat xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx rozpouštěním, pokud xxxx složkou xxxxxxxx.
Xxxxxxx xX xx 6,9 ± 0,1 při 25 °C xxxxxxxx xxxxx xxxx 5.1, xxxx rozdělit, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx bodu. 5.2.
6. Ředidla
6.1 Xxxxxx xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxxx sodný (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 ml |
Příprava:
Rozpustit xxxxxx xx vodě, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xX-xxxxxx (4.1.4); xxxxx xx je xxxxxxxx xxxxxxx xX roztokem (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx byla xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx po xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 minut xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X. Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx nepoužije xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx xxxxxxx mezi 1 x 5 °X, xxxxx ne déle xxx 1 xxxxx xx xxxx přípravě.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ředidla
Ředidlo (6.1) xx může xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx. Xxxxxxx pokyny xxxxxxx. Xxxxxxx pH xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.1, poté xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx bodu 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Před zahájením xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x zchladit xx xxxxx lázni (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx mléka
7.2.1 Inkubovat x xxxxxxxxxx [4.1.3 x)] xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx nebo, xxxxx xx xxxx xxxxx, reprezentativní xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx 100 xx xx xxxx 120 ± 2 xxxxx při 6 ± 0,5 °X.
7.2.2 Xx inkubaci xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x to 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx vzorkem. Xx nutné zabránit xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxx x odběrem xxxxxxxxxxx xxxxxx by neměla xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (10−1)
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 9 ml xxxxxxx (6.1), xxxxxxx xxxxxx nesmí přijít xx xxxxxxxx s xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx přibližně xxxxxx xxxx teplota xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx promíchávat xxxx xxxxxxxx xxxxxx míchačkou (4.1.9).
Xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx desetinných xxxxxx
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 ml xxxxxxxxxx xxxxxx (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx xxxxxx v xxxx 7.3.
Xxxxx xx xxx xxxxxx 10−2.
X xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx se tento xxxxxx xxxxxxx tak xxxxxx, dokud xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Naočkování Xxxxxxx misek
Sterilní xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx do xxxxx (4.2.4) 1 xx vzorku a/nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx být vyšetřena xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx misku.
7.6 Nalévání xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx misky nalít xxx 15 xx 18 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Ihned xxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxx xx inkubaci xxxxx x rovnoměrnému xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx s kultivačním xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx stát xx vodorovném, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Petriho xxxxx
Xxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx dnem xxxxxx. Xxxxxxxxx na xxxx xxxx než šest xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx nesmějí xxxxxxxx xxxxxxx, xxx být x xxxxxxxx xx xxxxxxx x vrchní xxxxx inkubátoru.
Inkubovat 25 xxxxx při 21 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx x Xxxxxxx miskách xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 300 kolonií.
Misky xxxxxxxx xxx tlumeném světle. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx použít xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx sraženin x xxxxxxx x drobnými xxxxxxxx koloniemi. V xxxxxxx xxxxxxxxxxx provést xxxxxxx průzkum xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx povlak xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx povlak xxxxxxxxx méně xxx xxxxxxxx misky, spočítat xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx počet xxx xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx tvořící xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx čtvrtinu xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Použít výsledky xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 kolonií (xxx 8.1.3 a 8.1.4).
8.2 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxx xxxxxx vzorce:
∑C / (x1 + 0,1x2) x
xxx:
ΣX xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 8.1,
(n1 + 0,1 n2)d je xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx:
x1 xx xxxxx xxxxx xxx prvním xxxxxxx
x2 xx xxxxx xxxxx při xxxxxx xxxxxx
x xx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx získány xxxxx počty.
Počet xx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxx. Když xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, zaokrouhlit tak, xxx sousední xxxxxxx xxxxx byla sudá.
Příklad:
Ředění 10−2: 278 x 290 kolonií
Ředění 10−3: 33 x 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; =278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2=
=629 / 0,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.3 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 10, xxxxx, xx počet xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx "xxxxx než 10 × d", xxxxxxx "d" xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx zředění.
8.4 Pokud xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 300 x xxxxxxxx xx xxxxx, provést odhad x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx hodnotou xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx "Odhadovaný xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na ml".
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx mezinárodně uznaných xxxxxxxxx testů xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX XXXXXX KOLIFORMNÍCH XXXXXXXX – XXXXXXXX XXXXXXX XXX 30 °X
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tato kapitola xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx technikou xxxxxxxx xxxxxxx při 30 °X.
2. Definice
"Koliformními xxxxxxxxxx" xx rozumějí xxxxxxxx, xxxxx xxx 30 °X xxxxxxxxx charakteristické xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, jež xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx plynu.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx x Petriho xxxxxxx x 24 xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x, xxxxx to xx nutné, xxxxxxxx xxxxxxxx necharakteristických kolonií xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx laktózu. Xxxx xxxxxxxxx xxxxx koliformních xxxxxxxx na 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, schopný xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °C.
4.1.4 pH-metr xx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx teploty, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx pH.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx na 45 ± 1 °X.
4.1.6 Očkovací xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx-xxxxxxx xxxx xxxx-xxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx x vhodnými xxxxxxx x xxxxxxx 20 xx, xxx xxxxx xxxxxxxxx konfirmační xxxxxxxxxx xxxxxx (5.2) x Xxxxxxxxx xxxxxxxx vhodné xxxxxxxxx.
4.2.2 Xxxxx o xxxxxx 150 až 250 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.1).
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx materiálu, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx objemu 1 – 10 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx, bezbarvého xxxx nebo xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx materiálu, xxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx 90 xx 100 x. Vnitřní xxxxxxx xxxxx xx měla xxx xxxxxxx 10 xx. Xxx nesmí xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx bránily xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx ze xxxx:
Xxxxxxx xx skla xx xxxxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx 170 – 175 °X;
x) x autoklávu (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx teplotě 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx dbát xx xx, xxx bylo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx xx xxxxxxxx sterilizuje v xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xx xxxxxx být xxxxxxx uzavřeny, xxxxxxx xxxx víčka xx xxxx xxx volné.
Pomůcky xx skla xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx páry.
Pipety xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx
5.1 Agar x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx x xxxxxxxx (XXXX xxxx). Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
7 x |
|
Xxxxxxxxxx extrakt |
3 x |
|
Xxxxxxx (C12H22O11.H2O) |
10 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
5 x |
|
Xxxxxxx xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxxxx xxxxxx |
0,03 x |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxx |
0,002 x |
|
Xxxx |
10 xx 15 g xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 ml |
Příprava:
Suspendovat x xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx důkladně xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx to xx xxxxx, upravit xX xxxxxxxx (nejméně 0,1 mol/l) xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, aby po xxxx byla jeho xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxx xxxxxx xx xxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a ihned xxxxxx xx množstvích 100 xx 150 xx do xxxxxxxxxx xxxxx (4.2.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx zchladit xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °C.
V době xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (6.4).
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx do xxx xxxxx xx xxxx přípravě.
5.2 Xxxxxx xxxx s brilantovou xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
10 x |
|
Xxxxxxx (X12X22X11.X2X) |
10 x |
|
Xxxxxxxxxxx hovězí xxxx |
20 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxx |
0,0133 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx a xxxxx xx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xX xxxxxxxx (nejméně 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx sodného xxxx xxxxxxxx chlorovodíkové, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx hodnota 7,2 ± 0,1 xxx 25 °C.
Rozdělit xxxxxx po 10 xx xx xxxxxxxx (4.2.1) xxxxxxxxxxxx Durhamovy xxxxxxxx. Zkumavky uzavřít.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx média.
Pokud xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx se x xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °C, xxxxx ne xxxx xxx 1 měsíc xx jeho přípravě.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx médium (5.1) xx může xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx dehydrovaného xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx výrobce. Xxxxxxx xX, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx podle xxxx 5.1 x 5.2.
6. Xxxxxx
6.1 Kultivační xxxxxx
Xxxxxx xxxxxx (VRBL xxxx) xxxxxxx x bodě 5.1.
6.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxx řádně xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xx 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx pěny xxxx xxxx nechat xxxxxxxxx. Xxxx mezi mícháním x odběrem testovacího xxxxxx by xxxxxx xxxxxxxxx xxx minuty.
6.3 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) 1 xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxx xxxxx (4.2.4) x tím xxxxxxxxx 3 xx xxxxxx mléka (6.2).
6.4 Xxxxxxxx kultivačního xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 12 xx XXXX agaru (6.1)
Xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, aby xx xxxxxxxx xxxxx x rovnoměrnému xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx vzorku mléka x xxxxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xx xxxxxx kontroly xxxxxxxxx xxxxxxxxx nenaočkovanou xxxxx x 12 xx xxxxx VRBL agaru, xxxxx byl použit xxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x čistém xxxxxxx, xxxxx médium xxxxxxxx.
Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 4 xx XXXX agaru (6.1) xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx média.
Nechat xxxxxxxx.
6.5 Xxxxxxxx Petriho xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Misky xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx nahoru. Xxxxxxxxx xx sebe xxxx než xxxx xxxxx. Sloupky xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx inkubátoru.
Inkubovat 24 ± 2 xxxxxx xxx 30 ± 1 °X.
6.6 Počítání xxxxxxx
6.6.1 Xxxxxxx kolonie x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 150 xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx 0,5 xx, x xxxx bez sraženiny xxxxx, charakteristické xxx xxxxxxxxxx bakterie.
6.6.2 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (např. jinou xxxxx, xxxxxxxx nebo xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxx konfirmační xxxx (6.7).
6.7 Xxxxxxxxxxx xxxx
Xxxxx xxxxx x xxxx 6.6.2 xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxx (xxxx. 3 xx 5) xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xx se pomocí xxxxxxxx jehly (4.1.6), xxxxxxxx zkumavky obsahující xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx zelení (5.2). Xxxxxxxxx zkumavky 24 ± 2 hodin xxx 30 ± 1 °X.
Xx kolonie xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx x Durhamově xxxxxxxx xxxxx xxxx.
7. Xxxxxxx a vyjádření xxxxxxxx
7.1 Xxxxxx výsledky xxxxx obsahujících xxxxxxxxx 150 kolonií.
7.2 Pokud xx provede konfirmační xxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií xx základě procentuálního xxxxxx potvrzených xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
7.3 Vypočítat xxxxx koliformních xxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxx xxxxxx xxxxxx:
ΣX / x
xxx:
ΣX xx celkový xxxxx xxxxxxx koliformních xxxxxxxx (7.1 x xxxxxxxxxxx se 7.2), xxxxxxxxxxx vyšetřením vzorku xxxxx (6.3).
x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (6.3) x mililitrech (3 xx).
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx dvě xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx více než 100 kolonií. Když xx xxxxxxxxxxxxxx číslice xxx, xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxxx počty xxxxx xxx 150 xxxxxxx, uvést výsledek xxxx "xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií xx 1 xx".
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx nejsou x dispozici.
VII. XXXXXXXXX XXXXXX SOMATICKÝCH BUNĚK
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx dva xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx somatických buněk.
A. Xxxxxxxxxxxxx metoda
B. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx a oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx počtu somatických xxxxx x xxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxx xxx stanovení xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx kalibrace x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx (viz X.1).
2. Xxxxxxxx
Xxx tento xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx x epitelové xxxxx, jejichž xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx methylenovou modří
3. Xxxxxxx
Xxxxxx 0,01 xx xxxxx xx 1 xx2 xxxxxxx podložního xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx. Počítání se xxxxxxx pod mikroskopem. Xxxxx somatických xxxxx xxxxxxxxxxx na daném xxxxxxx xx vynásobí xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxx počet xxxxx xx 1 xxxxxxxx.
4. Činidla
Musí se xxxxxx chemikálie čistoty x.x..
Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxx xxxx |
0,6 x |
|
Xxxxxxx – 99 % |
54 xx |
|
1,1,1-xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx |
40 xx |
|
Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx |
6 xx |
Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxxxx se proto xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx a 1,1,1-xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxx xxxxx na 60 xx 70 °X. Xxxxxx methylenovou modř, xxxxx xxxxxxxxx, 12 xx 24 hodin xxxxxxx x chladničce xxx 4 °C x xxxxxx ledovou xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxx velikosti xxxx 10 až 12 xxxxxxx a uchovat xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx ze xxxx
5.1 Mikroskop umožňující xxxxxxxx 500 × xx 1000 ×
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx umožňující dávkování xx 0,01 xx x xxxxxxxxx xxxxxxx ± 2 %.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxx 20 xx × 5 xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx sklíčko x xxxxxxx 20 × 5 mm xxx xxxxxx xxxxxx.
5.4 Xxxxxxxxxxxx xxxxx deska (30 °X xx 50 °X) xxx sušení xxxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5 Ventilátor (xxx) pro xxxxxx xxxxx vrstvy.
5.6 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 30 až 40 °X pro ohřívání xxxxxx xxxxx.
5.7 Xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 0,01 xx.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 6 °X. Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx.
6.2 Příprava xxxxxx x laboratoři
Zahřát xxxxxx xx xxxxx xxxxx (5.6) na 30 xx 40 °X. Poté řádně xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx, při xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx mikrostříkačka (5.2), například 20 °X.
6.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx podložní xxxxxxx (5.3) xxxxxxxxx xxxxxxxxx, vysušit papírem, xxxxx xxxxxxxxxxx prach, xxxxxxxx plamenem a xxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxx, kde xxxx xxxxxxxx xxxx prachem.
6.4 Xxxxxxxx xxxxx vrstvy
Mikrostříkačkou (5.2) xxxxxxx 0,01 xx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xx uvedeno xxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx stříkačky, která xxxxxx xx xxxxx x mlékem. Xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (20 xx × 5 xx). Xxxx ji xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (5.4) xx xx xxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx a vyšetřit xxxxxxx dvě tenké xxxxxx.
6.5 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx 10 xxxxx do xxxxxxxxx xxxxxxx (4). Xxxxx x, pokud je xx nezbytné, vysoušení xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.5). Xxxxxxx xxxxx vrstvy xx xxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx zcela xxxxxxx. Xxxxx xxxxx a xxxxxxx xxx, aby xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx.
6.6 Kalibrace xxxxxxxxxxxxxxx xxxx
Xx základě xxxxxxxxx xxxxxxxx (500 × xx 1000 ×) xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx (5.7).
7. Xxxxxxxx x xxxxxxx
7.1 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx mikroskop (5.1). Xxxxx počítání buněk xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx, x xx taková xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx a x xxxxx xx x xxxxxxxxxxxxxx poli viditelná xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxx xxxx xx střední xxxxxxx xxxxx vrstvy x xxxxxxxxx ty pásy xxxx xxxx, které xxxx xxxxxxx pouze x okrajových xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x tudíž i xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx měsíc xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxx také xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx části xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx se mají xxxxxxx
Xxxxxxxx k xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a mechanických xxxxxxx počítání, variační xxxxxxxxxx počítání x xxxxxxxxxxx vzorků xxxxx xxx xxxxx xxx xxxxxxxx koeficient xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx koeficient xxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx 400000 xx 600000 xxxxx/xx xx xxxxx překročit 5 %.
Xxxxx somatických xxxxx, které je xxxxx v každém xxxxxx xxxxxxxx, musí xxx podle Poissonova xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 400, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx opakovatelnosti.
Podle Xxxxxxxxxx rozdělení:
M = X = x2,
xxx:
X xx střední hodnota
V xx rozptyl
s xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx:
XX = x × 100 % / X xxxx XX = 100 % / s nebo XX = 100 % / XXX
X (xxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxx), xxxxx xxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxx 400 xxx CV = 5 %).
7.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxxxx 0,01 xx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx 7.3.1 xxxx 7.3.2.
7.3.1 Počítání pásů xx xxxxx vrstvě
Délka xxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx, xx 5 mm. Xxxxx xxxx xxxxxxxx průměru xxxxxxxxxxxxxxx pole, jak xx xxxxxxxx podložním xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7).
Pracovní xxxxxx = 20 × 100 / x × x
xxx:
x je xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x mm, stanovený xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7)
b xxxxxxx počet xxxxxxxxxxx xxxx.
7.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx ve xxxxxxx xxxxxxx tenké xxxxxx xxxx xxxxxx mřížky
Pracovní xxxxxx
xxx:
x je xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx pole v xx, xxxxxxxxx podložním xxxxxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7)
x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
7.4 Xxxxxxx obsahu buněk
S xxxxx xxxxxx počet xxxxx xx ml xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxx somatických xxxxx (7.1 a 7.2) xxxxxxxx pracovním faktorem (7.3).
7.5 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxx 7.2) nesmí xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx uznaných xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, který xx může po xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (viz X.1) používat xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx konzervace.
2. Definice
Pro xxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, které xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
3. Princip
Část xxxxxx (xxxxxxxxx 0,2 xx) xx xxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx x s xxxxxxxxxxxxxx roztokem. Xxxx xxxx směsi se xxxx přenese xx xxxxx tenké vrstvy xx rotační xxxx, xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx elektrický impuls, xxxxx se xxxxxxxx x zaznamenává. Xxxxx xxxxxxxxxxx buněk se xxxxxxxx v tisících xx xxxxxxxx.
4. Činidla
Pokud xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x.x.. Xxxxxxx voda je xxxxxxxxxxx nebo deionizovaná, xxxx xx xx xxxx odpovídající xxxxxxx.
4.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx |
51,00 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxx |
13,75 g |
|
Polyethylenglykol-mono-p(1,1,3,3-tetramethylbutyl)-fenylether(například Xxxxxx X-100), 1 % objemové |
10 xx |
|
xX 5,7 xx 5,9. Xxxxxxx vodou na 10000 ml. |
Příprava:
Smíchat jednotlivé xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx nádobě xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx dní.
4.2 Fluorescenční xxxxxx (zásobní roztok)
Složení
|
Ethidiumbromid |
1,0 x |
Xxxxxxx xxxxx xx 1000 xx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx ethidiumbromid xx xxxx. Skladování xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx nemělo xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (pracovní xxxxxx)
Xxxxxxx 20 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.2) x xxxxxxxx roztokem (4.1) tak, xxx xx xxxxxx objem 1000 ml. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxx sedm xxx.
4.4 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxx roztok (4.1) |
10 xx |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % objemové |
10 xx |
|
Xxxxxxx x 25 % xxxxxxxxxx |
25 ml |
Doplnit vodou xx 10000 ml
Příprava:
Smíchat xxxxxxxxxx xxxxxx. Skladování xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx.
5. Xxxxxxxxx x pomůcky xx xxxx
5.1 Počítací zařízení xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx fluorescence.
Poznámka:
Zařízení xxxx xxx xxxx použitím xxxxxxxxxxx. Tím se xxxxxxx vztah mezi xxxxxxx částic, které xx xxxx xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx níž xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx se provede xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx použití xxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx mikroskopickou xxxxxxx (X).
5.2 Vodní xxxxx, x xxxxxxxxx xxxx, nastavitelná xx 40 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxxx, objem xxx 15 xx.
6. Xxxxxx mléka
6.1 Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx nízké xxxxxxx xx zkumavce (5.3). Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx konzervován, xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxxx 24 hodin xx xxxxxxxx, xxxxx obsah xxxxxxxxxxxxxx xx byl xxxxxx xxxxx. Skladovací xxxxxxx xxxxx překročit 6 °C.
6.2 Konzervace
Chemická xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx do 24 xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
6.2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx jednoho x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx být xxxxx než 0,6 x na 100 xx. Takto xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx xxxxxxx 6 xx 12 °X;
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxx vyšší xxx 0,2 x na 100 xx. Takto xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 72 xxxxx xxx xxxxxxx 6 až 12 °X;
- xxxx xxxxx:
xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx azidem xxxxxx x konečné xxxxxxxxxxx 0,024 x/100 xx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx na xxxxxxx 6 xx 12 °X ihned xx xxxx odběru a xxxxxxxx xx 48 xxxxx po xxxx xxxxxx;
- bronopol:
vzorek xxxx xxx xxxxxxxxxxx bronopolem x xxxxxxx xxxxxxxxxxx 0,05 g/100 ml, xxxxx je xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx 6 až 12 °X ihned po xxxx odběru x xxxxxxxx xx 72 xxxxx xx jeho xxxxxx.
6.2.2 Xxxxxx, xxxxx xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx boritou, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx 48 xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxx xxx x vzorky xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx sodným, xxxx být dodrženy xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxx ošetření xxxxxx
Xxxxx, xxxxx se xx xxxxxxxx, se xx nadojení xxxxxxxx xxxxxxx 24 hodin xxx asi 2-6 °X. Xxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxx xx bez xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx být xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxx nutné xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx měl být xxxxxxxxx xxxxxxxxx nejméně xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxx 6.2.1).
7.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxx 7.1) nebo xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxx ve xxxxx xxxxx (5.2) na xxx 40 °X. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx pokojové xxxxxxx xx xx xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx buněk
Počítání xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.1) do 15 xxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 7.2). Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, aby se xxxxxxx co xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx rozdělení somatických xxxxx.
Xxxxx ředění a xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxx.
8. Spolehlivost
Výsledky xxxxxxxxxxxxxxx (x) a reprodukovatelnosti (X) xxxxxxxxxxxxx kruhových xxxxx nejsou x xxxxxxxxx.
Xxxxx, xxxxx jsou x xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxx odhady:
(1) xxxxx xxxxx xxxx 400 000 až 500&xxxx;000 xxxx:
- xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxxxxxxxx:
xx = 20000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx koeficientu 5–4 %)
- směrodatná xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx:
xX = 40000 buněk/ml
(odpovídá xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 10–8 %)
9. Xxxxxxxx správnosti
Kontrola správnosti xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
XXXX. XXXXXXX ANTIBIOTIK X SULFONAMIDŮ
PŘEDMĚT X XXXXXX XXXXXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx detekce antibiotik x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx x x tepelně ošetřeném xxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx postup xxxxxxxx:
X. Kvalitativní xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xx počáteční xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx mléka, xxxxx obsahují xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx jedním x několika xxxxxxx, xxxxx xxxx založeny xx použití Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx var. calidolactis, XXXX 10149, xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx postup xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx testy.
B. Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx identifikaci penicilinu x stanovení jeho xxxxxxxxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxx postup
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx postup xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx v xxxxxxx mléce a x tepelně ošetřeném xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxx uvedené x xxxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx [1]
|
Citlivost xxxxx |
||
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxx |
|
|
Xxxxxxxxxxxxxxx |
0,002 |
0,006 |
|
Xxxxxxxxx |
0,002 |
0,005 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,015 |
0,035 |
|
Xxxxxxxx |
0,006 |
0,011 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,10 |
0,40 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,20 |
0,45 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxx |
0,15 |
0,50 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
7 |
15 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx |
4 |
13 |
|
Xxxxxxxx |
1 |
22 |
|
Xxxxxxxxx |
9 |
28 |
|
Xxxxxxxxxx |
0,06 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxx |
1 |
2,25 |
|
Xxxxxxxxx |
0,01 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,01 |
0,1 |
|
Xxxxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxxx) |
0,5 |
1 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2 x |
|
|
Xxxxxx |
5 x |
|
|
Xxxxxx extrakt |
1 x |
|
|
Xxxxxxx xxxxx |
5 g |
|
|
Agar |
10–15 x |
|
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxx uvést xx xxxx. Xxxxxxx xX xxx, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx xx 10 xx do xxxxxxxx xxxx xx 100 xx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx 15 minut xxx 121 ± 1 °C.
5.1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxx sodný |
2 g |
|
Agar |
15 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx (viz 5.1.3) |
10 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, x xxxxxxxx trimethoprimu nebo xxxxxxxxxxxx. Za xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx. Xxxxxx trimethoprim xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X. Upravit xX, aby xx xxxxxxxxxxx byla xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.1.3 Xxxxxx trimethoprimu xx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxxxx |
5 xx |
|
xxxx Xxxxxxxxxxx |
30 mg |
|
96 % Xxxxxxx |
5 xx/30 xx |
|
Xxxxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx (5 nebo 30 xx) x xxxxxxx xxxxx.
5.1.4 Živný roztok
Složení:
|
Kvasnicový xxxxxxx |
0,75 mg |
|
Glukóza |
5,0 xx |
|
Xxxxxxxxx xxxxx |
8,0 xx |
|
Xxxxxxxxxxxxx červeň |
0,025 x |
|
Xxxx |
50 ml |
Příprava:
Rozpustit ve xxxx xxxxx roztok x indikátor, xxxxx xx xx nutné, xxxxxxxx x sterilizovat xxxxxxxx. Xxxxx roztok xx dostupný x xxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx
5.2.1 Ve xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x 60 μx/xx (100 XX/xx), x to rozpuštěním xxxxxxxxxxxxx benzylpenicilinu xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx ve xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
5.2.2 Xxxxxxxxx pracovní roztok xxxxxxxxxx xxxxxxxx 1,25 xx xxxxxxx penicilinu (5.2.1) sterilní xxxxxxxxxxx xxxx x doplnit xx xx 1000 xx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx obsahuje 0,075 μx xxxxxxxxxx/xx (= 0,125 XX/xx).
5.2.3 Xxxxxxxxx 75 ml xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx obsahujícího 0,004 μx penicilinu/ml (= 0,0067 XX xxxxxxxxxx/xx) xxxxxxxx 4 xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2.2) xx 71 xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.3).
5.2.4 Xxxxxxx penicilinu xxxxxxx podle xxxx 5.2.1 xx 5.2.3 xx xxxx xxx xxxxxxxxxx v xxx xxxxxxxxx testu.
5.3 Mléko xxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx preparát xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek xxxxxxxxxxx xxxxxxxx odstředěného xxxxx (10 % x/X) xx xxxx, xxxxx bylo předtím xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxx použít xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx mléka, xxxxx bylo xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx inhibičních látek; xxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx hodinu na 100 °X, xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx s teplotou 0 °C xx 6 °X xx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx organismus
5.4.1 Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx použije Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx XXXX 10149 Xxxx XXXX 10149 xx xxxxxxxxx x xxxxxx X 953.
5.4.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx kulturu xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xx šikmém xxxxxx xxxxx (5.1.1). Xxxxx agar xx x proužcích xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx 48 xxxxx xxx 63 ± 1xX. Xx inkubaci xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx měsíců x xxxxxxxxxx xxx 0 xx 5 xX.
5.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxx)
5.5.1 Xxxxxxxxx přenést 20 xx xxxxxxx xxxxx (5.1.1) xx xxxxxxxx Petriho xxxxx (4.2.2) a xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5.2 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (5.4.2) x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx šikmého xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxx 0 xx 5 °C x xxxxxxx xx xx 36 hodin.
5.5.3 Xxxxxxxx pipetou (4.2.4) xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxx (5.5.2) xx Petriho misku (5.5.1) x důkladně xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx povrchu xxxxxx xxxxxxx skleněné xxxxxxx. Xxxxxxxxx 16 xx 18 xxxxx xxx 63 ± 1 °X (4.1.1).
Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (5.4.2) nebo xxxxxxx xxxxxx 36 xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx nejméně xxxxxxx x xxxxxxx intervalu xxxxxxxxx 36 xxxxx.
5.5.4 Xxxxxxxx pipetou (4.2.4) xxxxxxx 10 ml xxxxxxxxxxx xxxx na Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (5.5.3) a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx z xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx do xxxxx (4.2.3) xxxxxxxxxx 250 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Kultury, xxxxx xxxxxx ihned xxxxxxxxxxx, xx xx xxxx xxxxxxxxx x chladničce xxx 0 až 6 °X.
5.5.5 Xx 16xx až 18xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 63 ± 1 °X xx xxxxxxxx xxxxx by suspenze xxxx měla vykazovat xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx mikroorganismů xxxx 5 x 10 miliony xx xxxxxxxx. Xxxxxxxx spór xxxx xxxxxxxxx rovnoměrné xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx xx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ze xxxxxxx xxxxxxx (5.4.2).
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx
5.6.1 Nechat xxxxxxxxx xxxxxxx médium (5.1.2), xxxx xxxxxxxx xx 55 °X.
5.6.2 Xxxxxx xxxx suspenze xxxxxxxxx xxxx (5.5.4) x pěti částem xxxxxxxxx xxxxx (5.6.1) xx xxxxxxxx nebo x xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx (4.2.6) 0,3 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.6.2), xxx se xxxxxxxxx 5 xx xxxxxx, poté uzavřít xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx nebo, v xxxxxxx xxxxxx, zatavením xxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx 12 xxxxx xx svislé xxxxxx.
5.6.4 Zkumavky/ampule mohou xxx xxxxxxx týž xxx, xxx mohou xxx rovněž skladovány xxxxxxx měsíců při 0–6 °X, xxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx ochlazeny.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxx se xx nejdříve xxxxxxxx, xxxxxxx do 24 xxxxx po xxxxxx, x xx xx xxxx se xxxxxxxx xxx teplotě 0-5 °X. Pokud xxxx xxxxx otestovat vzorky xx 24 xxxxx, xxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxx zmrazené (−30 °až - 15°X), xxx se xxxxxxx xx minimum xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.2 Xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx (5.6). Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx. Umístit xx xxxxxxxx xxxxxxxx (4.1.3) xxxxx xxxxxxxxxx pro xxxxxx x testy (5.2 a 5.3).
6.3 Xx xxxxx xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxx 50 mikrolitrů xxxxxxx roztoku (5.1.4).
6.4 Xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx (4.1.4) xxxxxxx 0,1 xx xxxxxx xx xxxxxxxx zkumavky/ampule. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx stříkačku.
6.5 Xxxxxx xxxxx xxxx 6.4 xx xxxxxxx stejným xxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,004 μg/ml (= 0,0067 XX/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx (5.2.3).
6.6 Xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.4 xxxxxxxx xxxxxxx způsobem xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.3) xxxxxxx vzorku mléka.
6.7 Xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx a xxxxxxxx se xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx 2½ až 2¾ xxxxxx xx vodní xxxxx s xxxxxxxx 63 ± 1 °X (4.1.2).
6.8 Vyjmout xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx x vodní xxxxx.
6.9 Xxxxxxxxx barvu agarového xxxxx (xxx 7).
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx roztokem xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx ukazuje na xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx ve vzorku x xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx koncentraci "zcela xxxxxxxxx" xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx 39. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (6.5) zůstane xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx citlivé.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx zbarvení agarového xxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek xx xxxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx 39.
7.3 Xxxxx zabarvení agarového xxxxx xx zkumavkách/ampulích xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek x xxxxxxxxxxx organismu.
7.4 Xxxxx xx xxxxxxxxx zabarvení xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxxxx životaschopné spóry x xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx novému xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx výsledků
8.1 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx x 7.1 a 7.2 xxxxx metody "X".
Xxxxx je nezbytné xxxxxx mléka xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx zmraženy, aby xx zabránilo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X. Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx penicilinů x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, jakož xxxxxx pro stanovení xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx (X.7.1) xxxx xxxxxxxxxx reakcí (X.7.2).
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx
Xxx X.1.
2. Xxxxxxxx
2.1 Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, včetně xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx postupem xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx 2 xx xxxxx xxxxx.
2.2 Xxxxx xxxxxx, který xxxxxxxx antibiotika, xxxxxx xxxxxxxxxxx (2.1), a xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxx), xxxxxxxxx xxxxx zónu xxxx vytvoří xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx je xxxxxx xxxx bez xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xx xxx penicilin xxxx xxxx penicilinu x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
2.3 Xxxxx tato xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx (2.2) xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx není xxxxxxxxx, xxx xxxx to xxx xxxx reziduum [xxx xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx A, xxxxxxxx XX, X.1.x) a 2x)].
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx cloxacillin xxxxx, xxxxxx nebo jsou xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxx a xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx (viz 7.3).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xx vyšetřit, xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx mikroorganismus xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxx xxxxx disku ukazuje, xx xxxx v xxxxx přítomny xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx mimo xxxx xxxxxx xx koncentraci x xxxxx inhibiční xxxxx x mléce.
4. Xxxxxxxxx, pomůcky xx xxxx x vybavení
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxx X.4.1.
4.1.2 Xxxxx xxxxx, nastavitelná xx 80 ± 1 °X.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
Xxx X.4.2.
4.3 Xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, o xxxxxxx 9 xx 13 xx, schopné xxxxxxxxxx xxx 130 xx mléka (xxxxxxx xxxxxxxxx v exsikátoru).
5. Xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx, roztok penicilinázy, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxx xxx bakteriologické xxxxx. Xxxx xx xxxxxx destilovaná voda xx skle xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Voda xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1 Xxxxxxxxxx xxxxx
5.1.1 Xxxxx xxxx (X.5.1.1)
5.1.2 Xxxxxxxxxx médium xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5 x |
|
Xxxxxxx |
1 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx (X.5.1.3) |
10 xx |
|
Xxxx |
10–15 x podle xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxx zahřívání a xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx složky ve xxxx, poté xxxxxx xxxxxx trimethoprimu nebo xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xX, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx 8,0 + 0,1 xxx 25 °X. Sterilizovat xxxxxx 15 minut xxx 121 ± 1 °X.
5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx
Xxx X.5.2.
Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (8) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx v mléce xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (X.5.3) x těchto xxxxxxxxxxxxx:
x) 0,004 μg/ml (0,0067 XX/xx)
x) 0,006 μx/xx (0,01 XX/xx)
x) 0,03 μg/ml (0,05 XX/xx)
x) 0,06 μx/xx (0,01 XX/xx).
5.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxx
5.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxx) xx xxxxxxxx destilované xxxx x cílem xxxxxx xxxxxxxxxxx 1000 X/xx. Xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx až xxxxx týdny při 0 °X xx 5 °X.
Xxxxxxxx
Xxx penicilinázu xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxx, že deset xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx stačí xx inaktivaci 0,6 μx (= 1 XX) penicilinu. X xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx nutné xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxx platí. X xxxxxxx xxxxxxxx proto xxxxxxx koncentraci xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.3.2 Namísto xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx napuštěné penicilinázou, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx organismus
Viz X.5.4.
5.5 Testovací kultura (xxxxxxxx xxxx)
Xxx A.5.5.
5.6 Xxxxxxxx Petriho misek
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx látek (5.1.2), xxxx zchladit xx 55 xX.
5.6.2 Xx xxxxx xxxxxx část xxxxxxxx xxxxxxxxx spór (5.5) x nezbytnému xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx látek (5.1.2), x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, a xxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx do xxxxxxxx Petriho xxxxx (X.4.2.2), xxxxxx vyhřáté xx 55 °X, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx se vytvořila 0,6 xx 0,8 xx vrstva. Xxx Xxxxxxx xxxxx o xxxxxxxx xxxxxxx 140 xx je xxxxx xxx 15 xx xxxxxxxxx média, xxx xx vytvořila 0,8 xx xxxxxx.
5.6.4 Umístit Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxxx médium ztuhnout. Xx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx na xxxxx a obrátit xx xxxx xxxxxx, xxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
5.6.5 Takto xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx ještě xxx xxx, xxx xxxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx, xxxxx se xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx polyethylenového xxxx x xxxxxxxxxx xx při 5 °X.
5.6.6 Xxxxxxx xxx Xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 U vzorků x pozitivním nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx "xxxxxx X" (X.7.1 x A.7.2) xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx účelem xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx penicilinu.
6.1.2 Nejdříve xxxxxxxx vzorky 10 xxxxx xx 80 ± 1 °C, xxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx termolabilních xxxxxxxxxxx xxxxx.
6.1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx přenést xxx 10 ml xxxxxx zahřátého mléka xx xxxxxxxx lahvičky xx xxxxxxx hrdlem. X xxxxx xxxxxx xxx 0,4 ml xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.3) x řádně promíchat.
6.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
6.2.1 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx (4.3) xx xxxxxx xxxxx (6.1.2) pomocí xxxxx x xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx disku x xxxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx položit xxxx na xxxxxx Xxxxxxx xxxxx (5.6) x lehce přitlačit xxxxxxxx.
6.2.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx od xxxxxxx xxxxxxx 20 mm x xx okraje xxxxxxx 10 xx.
6.2.3 Xxx kontrolu citlivosti xx xxxxx (4.3) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx roztokem xxxxxxxxxxxx (5.2) musí xxxxxxxx rozmístit xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx 2 % xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx; při xxxxxx testu se xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
6.2.4 Xx xxxxxxxxx rozmístění xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx a xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx dnem xxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxxxx 2,5 až 5 xxxxx při 63 ± 1 °X.
6.2.5 Xx inkubaci xxxxxxxx xxxxx při xxxxxxx zdroji xxxxxx, xxx bylo xxxxx xxxxxxxxx xxxx inhibiční xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxx xx xxxxx.
6.2.6 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (6.2.3) xxxx kolem xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 2 xx xxxx.
6.2.7 Xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx vzorky mléka, xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx popsaná x 6.2.6, xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek
6.3.1 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx dvojmo xx xxxxxxx xxxxxxxxx mléka (6.1.2) x se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (6.1.3). Xxxxxxx přidání xxxxxxxxxxxx xx 10 xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (5.3.2) a xxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx.
6.3.2 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx xxxxxx xxx každý xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx v 5.2 x) až x).
6.3.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx inhibičních xxx xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx penicilinázy x xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (viz 2)
7.1 Xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nevytvoří xxxxx xxxx xxxx, ale xxxx zóna se xxxxxx kolem disku xxxxxxxxxx vzorkem xxxxx, xxxxxx xxxxx nebo xxxxx než xxxx xxxxx disku xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2x)), inhibiční látka xx vzorku xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx sodného xxxxx xxxx vyšší než 0,004 μg/ml.
7.2 Xxxxx xx průměrná hodnota xxxxxxx čiré zóny xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx zóny xxxxx xxxxx xx vzorkem xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x tomto xxxxxxx.
7.3 Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx průměru čiré xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx kontrolní penicilinázu xxxxx než xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx čiré xxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx 6.1.2, xxxxxx mléka xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, a xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx nelze xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx je xxxxxxxxxxx xxxxx, nemusejí xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx inhibiční xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx
Xxxxx to xx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx penicilin xxxxx být xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx může xxx provedeno xxx xx sestrojení xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxx penicilinu x mléce (5.2 x) až d)).
8.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx křivky
Vzhledem x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx10 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xx logaritmický xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx pořadnici x xxxxxx xxx na xxxxxx. Xxxxxxxxx zóny xx počítají xx xxxxxxx průměru xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx inhibičních xxx se graficky xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx.
8.3 Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx ve xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx je xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx přesné xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx zón xxxxxxx xxxxxxx větší, avšak xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx.
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxx penicilinu xxxxx xxxx xxxxx xxx 0,004 μx/xx (xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx látek jiných xxx xxxxxxxxx.
9.2 Xxxxxxxxxxxxxx (x) x xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X)
Xxxxx nejsou x xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
X xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx A, xxxxxxxx XXX xxxx 2, tento xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, které xxxx xxx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxx provést u xxxxxxxx, které jsou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x potravin.
Pasterace xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx proti xxxxxxxxxxxxxxxxxxx patogenům. Pokud xxxx splněny xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx X, xxxxxxxx XXX xxxxx 2 uvedené xxxxxxxx, pokud jde x počítání xxxxxxx xxx 30 °X x 21 °X, xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx pouze xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx mléko xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx propuknutím xxxxxx xxxxxxxxxxx.
3. Postup
Postupy a xxxxxxx vyšetření xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx orgán xxxxxxx způsobem, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx nezávadnosti xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx. Pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx, pokud xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx úrovni.
4. Xxxxxx x xxxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx mikroorganismus xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx:
Xxxxx mléka xx xxxxxxxx, xxxx "xxxxxxxxxx" xx "xxxxxxxxxxxx" x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx požaduje xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx jasně xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.