Xxxxxxxxxx Xxxxxx
xx xxx 14. února 1991,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx mléka x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
(91/180/XXX)
XXXXXX EVROPSKÝCH XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx x založení Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx xxxxxxxx Rady 85/397/XXX ze dne 5. srpna 1985 x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx obchodu x tepelně xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx [1] naposledy xxxxxxxxxx xxxxxxxx 89/662/XXX [2], x zejména xx xx. 10 xxxx. 2 uvedené xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxx xx. 10 xxxx. 2 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x testování, které xx xxxx používat xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, že xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx zejména xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, obsahu xxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, že xxx xxxxxxxxxxx mléko xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx nepřítomnosti patogenů, xxxxx koliformních xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxx mrznutí;
vzhledem k xxxx, že pro xxxxxxxxxxxxx mléko x XXX xxxxx xx xxxxxxxx stanovit zejména xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx z xxxxxxxxxxx xxxxxx xx vhodné xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx dodržování xxxxxxxx xxxxx; xx xx xxxxxxx nezbytné xxxxxxxxxx x prošetřování xxxxxxxx, xx xxxxxxx se xxxxxxxxx rutinní metody xxxxxxx x xxxxxxxxx; xx x očekávání xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xx xx, xxx xxx xxxxxxxx norem xxxxxxxx 85/397/XX xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx stanovení xxxxxxxxxxxx xxxxx analýzy a xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x kriterií spolehlivosti xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx rozhodnutí xxxx x souladu se xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
XXXXXXX XXXX XXXXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Xxxxxxxxxx postupy xxxxxxx a xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxx tyto:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- stanovení xxxxxx mikroorganismů xxx 30 °C,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx.
Článek 2
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx tyto:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx peroxidázy,
- stanovení xxxxxx mikroorganismů xxx 30 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxx 21 °X,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx – počítání xxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxx antibiotik a xxxxxxxxxxx,
- detekce patogenních xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 3
Referenční xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxx XXX xxxxx x sterilizované mléko xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx mrznutí,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 4
Použití xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx kritérií xxxxxxxxxxxxx a odběr xxxxxx xx musí xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x příloze X.
Xxxxxx 5
Xxxxxxxxxx postupy xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x článcích 1, 2 a 3 xxxx xxxxxxx x xxxxxxx II.
Xxxxxx 6
Toto rozhodnutí xxxx přezkoumáno do 31. xxxxxxxx 1992, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx vědeckých x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 7
Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X Xxxxxxx xxx 14. xxxxx 1991.
Xx Xxxxxx
Xxx Xxx Xxxxxx
xxxx Xxxxxx
[1] Xx. xxxx. X 226, 24.8.1985, x. 13.
[2] Xx. xxxx. X 395, 30.12.1989, x. 13.
PŘÍLOHA X
XXXXX
X. Obecná xxxxxxxxxx
XX. Xxxxx vzorků xxxxxxxx x tepelně xxxxxxxxxx mléka
I. OBECNÁ XXXXXXXXXX
1. Xxxx
Xxxxxx ustanovení xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx x pomůcek, xxxxxxxxx xxxxxxxx, kritérií xxxxxxxxxxxxx x zpráv x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx států x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx vzorků a xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx tato ustanovení.
2. Xxxxxxx
2.1 Voda
2.1.1 Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx k xxxxxxxxxxx, ředění xxxx xxxx musí xxx xxxxxxx xxxx destilovaná, xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx čistoty. Xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx popsaných xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.1.2 "Rozpouštěním" nebo "xxxxxxx" (xxx xxxxxxx xxxxxxxxx) se xxxxxx "xxxxxxxxxxx ve xxxx" xxxx "xxxxxx xxxxx".
2.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx musí mít xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx a xxxxxxx
3.1 Seznam přístrojů x xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxx různé referenční xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xx zvláštnímu použití x se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.2 Analytické xxxx
"Xxxxxxxxxxxx xxxxxx" xx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx 0,1 xx.
4. Xxxxxxxxx výsledků
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx není xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx průměrem dvou xxxxx, xxxxx splňují xxxxxxxxx opakovatelnosti (5.1) xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxx toto xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx musí xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx hmotnosti xxxxxx.
5. Xxxxxxxx spolehlivosti: xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx postup xxxx xxxxxxxxxx xxxxx:
5.1.1 Opakovatelnost (x) je xxxxxxx, xxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx mezi xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx byly xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx výrobkem xx xxxxxxxx podmínek (stejný xxxxxxxxx, stejný xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxxx).
5.1.2 Reprodukovatelnost (X) xx hodnota, xxx kterou leží xxxxxxxxx rozdíl xxxx xxxxxxxx samostatných xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx za odlišných xxxxxxxx (různí pracovníci, xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx x/xxxx xxxxx xxxx).
5.1.3 Xxxxx není xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x příslušných xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx 95 % intervaly xxxxxx xxxxxxxxxxxxx podle xxxxxxxx XXX 5725, xxxxx xxxxxx, 1986. Xxxx vypočteny x xxxxxxxx xxxxxxxx pokusů, xxxxxxxxxxx xx spolupráci, xxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx. X xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx odhadnuty.
5.1.4 Kruhové xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x souladu x mezinárodními xxxxxx.
6. Xxxxxx x testování
Zpráva x testování xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x získané výsledky. Xxxx jiné musí xxxxxx všechny xxxxxxxxxxx xxxxxxx, které nejsou xxxxxxxxx v xxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx x testování xxxxxxxx xxxxxxx informace xxxxxxxxxx xxxxxx identifikaci xxxxxx.
XX. XXXXX XXXXXX XXXXXXXX X XXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx syrového a xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx pro xxxxx xxxxxx, přeprava x xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx a xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx skladované xx skladovacích a xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx 2, 4.4, 5 x 6 se použijí xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx ošetřeného xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx.
2. Xxxxxx
Xxxxx vzorků xxxxxxxx a tepelně xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxx xxxx. xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxx odběrem vzorků xxxxxx vyškoleni.
Pokud xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx laboratoř xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx pověřené xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, xxx bylo xxxxx, že xxxxxxxx xxxxxx budou xxxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxx x xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx příslušné orgány xxxx testovací laboratoř xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx pověřené xxxxxxx vzorků x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx vzorků xxxx xxxxxxxxxxx.
3. Vybavení xxx xxxxx vzorků
3.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx musí xxx xxxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxx nebo x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx materiálu, xxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx, xxxxx vzorků, xxx.). Xxxxxxx x xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxx dostatečně xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx hloubky xxxxxx. Objem xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx 50 xx.
Xxxxxxxxxxx a xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx při výrobě xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxx x xxxxx) xxxxx xxxxxxxx takovou xxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xx vzorky xxxx mít xxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx a xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx.
3.2 Xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
Vybavení pro xxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxx) xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx 3.1 x musí xxx xxxxxxxx.
Xxxxx xx xxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx po xxxx jdoucích vzorků.
4. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx
4.1 Xxxxxx xxxxx
Xxx ohledu xx xxxxx, které xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx být xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx buď xxxxx, xxxx mechanicky.
Vzorek xxxx xxx odebrán xxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxx ještě x xxxxxx.
Xxxxx xx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx více xxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx, xxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx musí xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx byly xxxx xxxxxx xxxxx naplněny xxxxxxx x xxx xxx xxxx xxxxx xxxxx promíchat obsah xxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxx hrozilo xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxx xxxxx xxxxxx
4.2.1 Xxxxx xxxxxx z xxxxx x xxxxx xx xxxxx
X xxxxxxxx promíchání xxxxxxxxx plunžrem xx xxxxx xxxx konvi xxxxxx x xxxx, xxxxxxx xxxx xx xx, xxx se xxxxx řádně promíchalo x xxx xx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx smetana. Vzorek, xxxxx xx reprezentativní xxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.2 Xxxxx x chlazených xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx.
4.2.3 Odběr xxxxxx z misky xxx
Xx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxx xx xxxxx xxx. Za xxxxxx xxxxxxxxx rovnoměrného xxxxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx ruční xxxx xxxxxxxxxx míchání. Xxxxx xxxxx xxxxxxx, x xxx xx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx misky xxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx z xxxx xxxxxxx xxxxxxxx podle xxxx 4.2.4.
4.2.4 Xxxxx xxxxxx z rozdělené xxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxx, u něhož xx xx provést xxxxx vzorků, xxxxxxxxx xx více nádob, x xxxxx xxxxxx xx odebere xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxx z xxxxx xxxxxx nemusí xxx odděleně xxxxxxxxx, xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx těchto reprezentativních xxxxxxxx v xxxxxx x množství, xxxxx xx nachází v xxxxxx, xx které xxx xxxxx xx xxxxxx odebrán. Xx xxxxxxxxxx xx odebere xxxxx (xxxx) xxxxxx (xxxxxx) z xxxxxx xxxxxxxxx množstvích.
4.2.5 Xxxxx xxxxxx x velkých xxxxx – skladovací xxxxxx, xxxxxxxxxx kamiony, xxxxxxxxxx vagóny
4.2.5.1 Před xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx vhodným xxxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx, skladovacích xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx cisternových xxxxxx xx xxxxxxxxxx mechanické xxxxxxxxxx (4.2.5.2).
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, xx kterou xxxx xxxxx x klidu. Xxxx být xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x každém x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vhodný xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx promíchání xxxxxx xxxxxxxxx shodu xxxxxxxx xxxxx provedených xx xxxxxxxx odebraných buď x xxxxxxx xxxxx xxxxx, nebo x xxxxxxxxxxxx intervalech xxx xxxxxxxxxxxxx mléka z xxxxx. Xxxxxx promíchání xxxxx (xxxxxxxx mléka xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx) xx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxx xxxxxx odebraných za xxxxxx podmínek xxxxx xxx 0,1 %.
Xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx může x místě xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, které ani xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx celý xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx vzorků x xxxxxxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, aby xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.5.2 Xxxxxxxxxx obsahu xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx nádrží, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxxxxx míchačkou xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx elektrickým xxxxxxx,
- xxxxxx xxxx xxxxxxxxx poháněnou xxxxxxxxxxx xxxxxxx x umístěnou x průlezovém xxxxxx; xxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx,
- v xxxxxxx cisternových kamionů xxxx cisternových xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx je xxxxxxxx xx pumpu x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- filtrovaným, xxxxxxxxx x čistým xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx vzorků
Automatické x xxxxxxxxxxxxxxx vybavení xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx mléka xxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxx xxxxxx podle xxxxxx xxxxxxxxxxx testovací xxxxxxxxxx xxxx xxxxx příslušným xxxxxxx.
Xxxxxx vybavení musí xxx před x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx odpovědný orgán. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx objem xxxxxxxxx mléka, x xxxxx xxxx xxx xxxxxxx vzorek,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx vzorku),
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx po xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
- minimální xxxxx xxxxx, ze xxxxxxx xxxx xxx odebrány xxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx,
- maximální přenos,
- xxxxxxxxx, které xxxx xxx provedeno, xxxx xxxxxxxxx preventivní opatření, xxxxx xx nutné xxxxxxxx.
4.4 Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx jde x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx k přímé xxxxxx spotřebě x xxxxxxxx x maloobchodních xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx skládají x xxxxxxxxxxxxx, zapečetěných nádob. Xxxxxx musí xxx xxxxxxxx během xxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zařízení xxx ošetření, x xx, xxxxx xx xx xxxxx, ihned xx xxxxxxxxxx (x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxxxxxx).
X xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (pasterovaného, xxxxxxxxxx xxxxxxx UHT x xxxxxxxxxxxxxxx) xx xxxxxxx takový xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, x xx podle xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
5. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xx xxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx umožňuje xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx příslušného xxxxxx (xxx xxx 2).
6. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx souhlasem příslušného xxxxxxxxxxxxxx orgánu xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx pokyny xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx přepravy x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx dodrženy x xxxx mezi xxxxxxx vzorků xxxxxx xxxxxxxxxx, x to xx xxxxxxx druhu xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx má xxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx xxxx:
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx to, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Je-li je xxxxxx použitá xxx xxxxxx průsvitná, musí xxx xxxxxxxxx xx xxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx musí xxx přepravovány x xxxxxxxxxx při xxxxxxxxx 0 oC xx 4 xX. Xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx musí být xx xxxxxxxxx x x xxxxxx případě xxxxx xxxxxxxxxx 36 xxxxx. Příslušný xxxxx xxxx souhlasit, xxx xxxx xxxxxxx skladování 0 xX až 6 xX, xxxx-xx xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx delší xxx 24 xxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx a skladovány xxx xxxxxxxxx 0 xX xx 4 xX. Xxxx xxxx xxxxxxx x testováním xxxx xxx co xxxxxxxxx x x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 24 xxxxx,
- xxxx xxxxxx xxxxx xxx vzorky xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxxx analýzy xxxx xxx skladovány x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx musí xxx xx nejkratší.
Speciální preventivní xxxxxxxx, která xx xxxxx přijmout pro xxxxxxx testy, xxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
XXXXXXX I
OBSAH
I. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx
XX. Stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxx
XXX. Stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X
X. Xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxx 21 °X
XX. Stanovení xxxxxx koliformních xxxxxxxx – xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X
XXX. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
XXXX. Detekce xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx
XX. Detekce xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
X. XXXXXXXXX XXXX MRZNUTÍ
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx plnotučného, xxxxxxxxxxx, odstředěného, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, XXX mléka xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (termistorového xxxxxxxxx), v xxxx xx xxxxxxxxxxx řízená xxxxx xxxxxxxxxxx elektrickým xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
X dispozici xxxx dva xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xx plató xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx xxx xx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx tak, xx xx začátku xxxxxxx xxxxxxx ve stanovenou xxxx odečet. Xxxxxxxx x xxxx, xx xx xxxxx xxxxx xxxxx křivky bodu xxxxxxx xxxxxxx druhů xxxxx, ale i xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx použitých xxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx použití xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx plató. Xxxxxxxxx s xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx se xxxxx používat v xxxxxxx xxxxxxxxx testování.
Bod xxxxxxx lze xxxxxx xxx odhad xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx x xxxxx xx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxxx xxxxxx není xxxxx xxx 0,18 x xxxxxxxx xxxxxx xx 100 xx (xxx xxx 7.4).
2. Definice
Bod xxxxxxx mléka: xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x popsaným xxxxxxxx x vyjádřená ve xxxxxxxx Celsia (°X).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx vzorek xxxxx xx v xxxxxxxxxx xx přístroji xxxxxxxxx xx xxxxxxx teplotu x mechanickou xxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx x xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx vzorku.
Přístroj xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxx jako xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx dva xxxxxxxxxx xxxxxxx. Za xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xx stupních Xxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x pomůcky xx skla
Obvyklé xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx z xxxxxxxxxxx řízené chladicí xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx snímače (xxxxxxxxxxxxxx odporového xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxx obvodem, xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, míchačky xx xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx i xx zkumavek xx xxxxxx.
4.1.1 Chladicí lázeň
Je xxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxx.
4.1.1.1 Xxxxxxx xxx
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx kapalinu, která xx míchá tak, xxx teplotní xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx dvěma xxxx v xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 0,2 °X. Teplota xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x rozmezí ± 0,5 °X xx xxxxxxxxx hodnoty xxxxxx xxxxxxxx.
Xx důležité, xxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxx konstantní xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxx zkumavky xx xxxxxx pod xxxxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxxx chladicí kapalinou.
4.1.1.2 Xxxxxxxxxx xxx
Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx kapaliny. Teplota xxxxxxxx může xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx ± 0,5 °X xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx výrobcem.
Vhodnou chladicí xxxxxxxxx xx 33 % (X/X) vodný xxxxxx 1,2-ethandiolu (xxxxxxxxxxxxxx).
4.1.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx se skládá xx xxxxxxxx sondy x xxxxxxxxxx průměru 1,80 ± 0,2 xx a x xxxxxxx vodiče xxxxxxxxx 0,31 xx. Časová xxxxxxxxx xxxxxxxxxx musí xxx xxxxx než 2 xxxxxxx x xxxxxxx x (xxx xxxxxxxx) musí být xxxxxx. Xxxxxxxx napětí, xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx, aby při − 0,512 °X xxxxxxx termistoru xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx o 0,0005 °X. Maximální xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx ± 5 %.
Když xx xxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx v xxx xxxxxxxx xx xxxxxx x x xxxx, xxxxx xx 44,6 ± 0,1 xx xxx horním xxxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxxxxx xx xxxxxx 15). Xx xxxxx dodat xxxxxxxxxxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx polohy.
Poznámka:
β xxxxxxxx termické vlastnosti xxxxxxxxxx podle xxxxxx
− xX / dT × 1 / X = β / T2
kde:
T xx xxxxxxx ve xxxxxxxx Xxxxxxx
X xx odpor x xxxxxx xxx xxxxxxx X,
− xX / xX × 1 / X xxxxxxxx xxxxxxxxxx
β xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx použitém xxx výrobě termistoru. X běžné xxxxx xx doporučuje xxxxxxx xxxxx xxx 3000.
4.1.3 Xxxxxx x odečítací xxxxxxxx
4.1.3.1 Princip xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx pracuje na xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx. Plató xx xxxx křivky, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx ± 0,002 xX xx xxxx xxxxxxx 20 sekund.
4.1.3.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx termistoru xx vyrovnává Wheatstoneovým xxxxxxx xxxx podobným xxxxxxxxx pomocí xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx ± 10 % x xxxxxxx teplotní xxxxxxxxxx není xxxxx xxx 2×10−5°X.
Xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) xxxxx xx nesmí xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x celém xxxxxxx x xxxx než x 0,3 % xxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxx kalibrace musí xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx dílky xx xxxxxxxxx 0,001 °C.
4.1.3.3 Xxxxxxxxxxx provoz
Odečítací zařízení xxxx xxxxxxx rozlišení xx xxxxxxx 0,01 °X x xxxxxxx xx 0 °C xx –1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxx příslušného xxxxxx xxxx být xxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx než 0,001 °X.
Xxxxxxxxx obvodu xxxx xxx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxx od – 0,400 °X xx – 0,600 °X xxxxx xxxxx než ± 0,001 °X.
4.1.4 Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx testovacího xxxxxx se použije xxxxxx xxxx o xxxxxxx 1 xx 1,5 xx, xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx,.
Xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xx rozkmit x umístěna xxxxxxxxxx xxx, aby xxxx xxxxxx konec xxx xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx asi 1,5 xx xxx xx pod touto xxxxxxx.
Xxxxxxxx vibruje xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx ± 1,5 xx), xxx xxxx zajištěna xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx během xxxxxxxxx. Xxxxx míchání xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx zkumavky.
4.1.5 Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx mrznutí xxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx testovacího vzorku xxxxxxx k xxxx xxxxxxx. X xxxx xxxxx lze xxxxxx xxxxxxxx; jedním xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx jednu xx dvě sekundy xxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx na xxxxxx.
4.1.6 Xxxxxxxx na vzorky
Zkumavky xx vzorky (xxx xxxxxxx 1) xxxx xxxxxxxx a 50,8 ± 0,1 xx xxxxxx; xxxxxx průměr xx 16,0 ± 0,1 xx x xxxxxxx průměr je 13,5 ± 0,1 xx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxx xxx 0,1 mm.
Zkumavky xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx od xxxxxxx xxxxxx 29,8 xx (21 xx xxx xxxx xxxxxxxx), xxxxx xxxxx objem xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx.
4.1.7 Xxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx musí xxx stabilizován xxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx tak, aby xxxxxxxx xxxxxxxx nepřekračovala ± 1 % xxxxxxxxx xxxxxxx, když xxxxxx xxxxx xxxxxx x ± 6 %.
4.2 Analytické váhy
4.3 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 1000 ml, xxxxx X.
4.4 Xxxxxxx, xxxxx odvětraná, xxxxxxxxxxxx xx 130 ± 1 °C
nebo
Elektrická xxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 300 ± 25 °X.
4.5 Xxxxxxxxx
5. Xxxxxxx
5.1 Xxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx na 20 ± 2 °X, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx uhličitý.
5.2 Xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx x.x., jemně mletý, xxxxxx 5 xxxxx xxx teplotě 300 ± 25 °X x elektrické peci xxxx nejméně 24 xxxxx při teplotě 130 ± 1 °X v xxxxxxx x zchlazený na xxxxxxxxx teplotu x xxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.3 Příprava xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (viz xxxxxxx 1) xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5.2) xx xxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx (5.1), xxxxxxxxxxxxx xxxxxx roztok xx xxxxxxx baňky x objemu 1000 xx x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx 20 ± 2 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxx nejdéle xxx xxxxxx xxx xxx 5 °C x xxxxx uzavřených xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx o xxxxxxxxxx xxxxxx 250 xx.
Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 20 °X
|
x XxXx/x |
°X |
|
6,859 |
-0,408 |
|
7,818 |
-0,464 |
|
8,149 |
-0,483 |
|
8,314 |
-0,492 |
|
8,480 |
-0,502 |
|
8,646 |
-0,512 |
|
8,811 |
-0,521 |
|
8,977 |
-0,531 |
|
9,143 |
-0,541 |
|
10,155 |
-0,600 |
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx promíchá xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxx xx xx roztoku přimíchal xxxxxx.
Xxxxxx standardního xxxxxxx xx x láhve xxxxxx do xxxxx x xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx z xxxxx, xxxxx xxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxxxx roztoky xxxxxx xxxx měsíců, xxxxx xxxxxxxxxx fungicid (xxxxxxxxx xxxxxx thiomersalu 10 x/x).
6. Kalibrace xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx nastaven xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxx nelišila x xxxx xxx 1 °X xx xxxxxxx, xxx níž xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Kryoskop xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxx pokojovým teplotám xxxxxx xxx 26–27 °X.
Xxxxxxx xx, xx xxxxxxxx funguje xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xx byl xxxxxx xxxxxxx 12 xxxxx xxxx kalibrací. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx sondy, rozkmit xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxx standardní xxxxxxx (xxx xxxxxxx výše), xxxxxxx bod xxxxxxx xx xxxxx xxx xxxx xxxxx pod xxxxxxxxxx xxxxxxxx bodu xxxxxxx xxxxxx mléka x testování. Xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx – 0,100 °C.
(U xxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx obvod xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx, xx se xxxxxx xx xxxx hodnotě xxxx mrznutí x xxxxx xxxxxxx měřícího xxxxxxxx. V těchto xxxxxxxxx výběr jednoho xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx, jako xxxxxxx x kalibračních xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxx musí xxxx xxxxxxx xxxxx).
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 ml jednoho xxxxxxxxxxxx roztoku xx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx, xxxx měřit pomocí xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx na vzorky xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx vyrobeny x xxxxxxxx xxxx zkumavky xxxxxxxxx na vzorky xxxxx (xxxxxx druh xxxx, umyté x xxxxxxxxxx demineralizovanou vodou). Xxxxxxx standardních xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx roven xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x střídavě xx provádět xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx po xxxx xxxxxxxxxxx odečty xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx každého x nich, xxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxx ukazuje xxx xxxxxxx vzorku xxxxx, xxxx xx xxxx xxxxx jakákoli xxxxxx.
7. Xxxxxxxx testovacího vzorku
7.1 Xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx vzorky xxx teplotě xxxx 0 °X x 5 °X.
7.2 Xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx tuhý xxxxxx xxx xx vzorku xx čisté x xxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, nesmí xxxxxxxx x xxxxxx x xxxx xxx účinný xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.3 Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx při skladovací xxxxxxx (mezi 0 x 5 °X) xxxx xx možné xx ohřát xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx však xxxxxxxx xxxx na to, xxx standardní roztoky x xxxxxx mléka xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx teplotu.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxxx kyselost mléka, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx bodu xxxxxxx. Xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 0,18 x xxxxxxxx mléčné xx 100 ml xxxxx, xxxxxxx být xxxxxxxxxxx.
7.5 XXX xxxxx x sterilizované mléko xxxx xxxx nejméně 20 xxxxx xxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx.
8. Postup
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx, zda xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx v xxxxxxx x pokyny xxxxxxx, případně xxx xx sonda xxxxxxxxxx xxxxxxx v prázdné xxxxxxxx na vzorky. Xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx se, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx. Pokud xxx xxxxxxxx zapnut xxxxxxx 12 hodin, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx chladicí kapaliny, xxxxxx míchačky a xxxxxxxx xxxxxxx jeho xxxxxxx.
8.2 Rutinní xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx sérií xxxxx měřit xxx xxxxxxx standardního xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxx s xxxxx xxxxxxx – 0,512 °X), dokud xx xxxxxxx xxxxxxx při xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx nebudou xxxxx x xxxx xxx 0,001 °C. Xxxxx se průměr xxxxxx xxxxxx liší xx bodu mrznutí xxxxxxxxxxxx roztoku x xxxx xxx 0,002 °X, kryoskop xx xxxxx xxxxxxxxxx, jak xx xxxxxxx x xxxx 6.
Xxxxx xx xxxxxxxx používá xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx provádí xxxxxxx xxxxxx xx hodinu, xxxxxxx xx zohlední xxxxxx výrobce.
8.3 Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x několikerým xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxx se xx xxxxxxx přimíchal xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxx přidat 2,5 ± 0,1 ml xxxxx do xxxxx x xxxxx zkumavky xx vzorky. Xxxxxxx xx, že jsou xxxxx x xxxxxxxx xxxxx x xxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx směrem xxxxxxx xxxxxx xxxxxx, čistou x chlupy nepouštějící xxxxxx.
Xxxxxx zkumavku se xxxxxxx do xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx podle xxxxxx xxxxxxx. Mléko xx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx určené xxxxxxxx x xxxxxxxxx xx 0,1 °X.
(X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx odečíst tuto xxxxxxx z digitálního xxxxxxxxx; u xxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx dosáhne xxx, xx xx zajistí, xxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx se xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x příslušnou xxxxxxx.)
Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx rozmezí, xxxxxxxxx se xxxxxx x zopakuje xx x jiným xxxxxxx xxxxx. Xxxxx tento xxxxx vzorek rovněž xxxxxx před xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx se xxxxxxx xx 45 °X x 5 xxxxx xx xxxxxxx xx této xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx x ihned xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx rychle stoupne xx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, x poté xxxxxx. Xxx mrznutí odpovídá xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx x tuto hodnotu xx nutné zaznamenat.
Poznámka:
Doba, xx xxxxxx teplota xxxxxxx konstantní, a xxxxxx xxxxxxxx mezi xxxxxxxx mrznutí x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx liší vzorek xx xxxxxx x xxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx jsou podstatně xxxxxx než xxx xxxxx. Xx nezbytné xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, vyjmout xxxxxxxx, xxxxxxxxxx ji xxxxx x xxxxx xxxxx x xxxxxxxx směrem xxxxxxx nahoru xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx vzorku xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx větší než xxxxxxx opakovatelnosti (0,004 °X), xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx u xxxxxx xxxxxx. Pokud xxxx xxxxxxx obou stanovení xxxxxx xx 0,004 °X, zapíší xx x xxxxxxx se xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
8.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxxxx přístroje uložit xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xx místo xxx vzorky a xxxxxx provozní xxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxx x chladu.
(U xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx to xxxx xxxxx; v xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx se xxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxx začátkem xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.)
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Výpočet
Pokud xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx potvrzena, za xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx mrznutí, xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx je liché xxxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx sudou xxxxxxx, xxx ukazuje tento xxxxxxx:
Xxx xxxxxxx (°X)
|
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx |
Xxxxxx |
|
|
-0,544 |
-0,545 |
-0,544 |
|
-0,545 |
-0,546 |
-0,546 |
9.2 Spolehlivost
9.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x): 0,004 °X
9.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X): 0,006 °X
Xxxxxxx 1
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx kryoskopu
4.1 (xxxxxx xxxxxxxx xx vzorky xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx)
XX. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXX
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxx kapitola xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x pasterovaném xxxxx.
2. Xxxxxxxx
2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx je míra xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx. Xx vyjádřena xxxxxxxxx xxxxxx x μg xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx, pokud xx xxxxx xxx 4 xx fenolu xx 1 xx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx fenylfosfátu dvojsodného. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x dibromchinonchlorimidem x xxxxxxx dibromindofenolu (xxxxxxxxx xxxxx), který se xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 610 xx. Poté xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxx fosfatázy xxx xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Tlumivý xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx barnatého
4.1.1 Xxxxxxxxx xx xxxx 50,0 x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) [Xx(XX)2.8X2X] x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.1.2 Xxxxxxxxx xx xxxx 22,0 x xxxxxxxx xxxxxx (X3XX3) x doplnit xx 1000 xx.
4.1.3 Xxxxxx 500 xx xxxxxxx xxxxxxx na 50 °X, oba xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxx xx 20 °X, v xxxxxxx nutnosti xxxxxxx xxxxxxx pH na 10,6 ± 0,1 xxxxxxxx roztoku 4.1.1 xxxx 4.1.2. Xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4.1.4 Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx objemem xxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx zabarvení
Rozpustit xx vodě 6,0 x xxxxxxxxxxxxx sodného (XxXX2) xxxx 12,6 x XxXX2.4X2X x 20,0 x chloridu xxxxxxx (XxXx) a xxxxxxx xx 1000 xx.
4.3 Xxxxxxx roztok xxx xxxxxxx vzniklého xxxxxxxxx
Xxxxxx 10 ml xxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2) xxxxx xx 100 xx.
4.4 Roztok substrátu
Rozpustit 0,1 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, ve 100 xx tlumivého xxxxxxx (4.1.3) xxxx 0,5 x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx 4,5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2), xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx BQC (4.6) x xxxxxx xxxx 30 xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 2,5 xx x-xxxxxxxx a xxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx-1 xxxxxxxx. Xxxxxxx x odstranit xxxxxxx-1. X xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx dní; před xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx novou xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, a xx xxxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxxxx xx 100 xx roztoku xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.3).
4.5 Sraženina xxxxx-xxx
Xxxxxxxxx ve xxxx 3,0 g xxxxxx xxxxxxxxxxx (XxXX4 · 7X2X) x 0,6 x xxxxxx měďnatého (XxXX4 · 5X2X) x doplnit xx 100 ml.
4.6 Xxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx BQC)
Rozpustit x 10 xx 96 % (V/V) xxxxxxxx 40 ± 1 xx 2,6-dibromchinonchlorimidu (XXX) (X6X2Xx2XxXX6).
Xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxx xxx xxxxx xxxxx.
4.7 Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (XX)
Xxxxxxxxx ve xxxx 0,05 x síranu xxxxxxxxx (XxXX4.5X2X) x xxxxxxx na 100 xx.
4.8 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx
4.8.1 Navážit 200 ± 2 mg xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxx baňky o xxxxxx 100 xx, xxxxxx xxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xx 100 xx. Xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
4.8.2 Zředit xxxxx 10 xx xxxxxxxxx roztoku, xxxxxxx xx 100 xx x xxxxxxxxx. 1 xx xxxxxxxx 200 μx fenolu.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxxxx pomůcky xx xxxx, xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxxxxx čerstvě xxxxxxxxxx destilovanou xxxxx xxxx čistění xxxxx.
x) Xxxxxxx xxxx plastových xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx vybavení, xxxxxxx:
5.1 Analytické xxxx
5.2 Xxxxx xxxxx nastavitelná xx 37 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxx xx xxxxxx xxxxx 610 nm.
5.4 Xxxxxxxx, 16 xxxx 18 × 150 xx, xxxxxxx odstupňované xx 5 xx x 10 xx.
5.5 Pipety
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxx vhodné xxxxxxxxx, xxxx. x xxxxxxx 5 cm.
5.7 Xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx nejméně 9 xx pro střední xxxxxxxx filtrace.
5.8 Xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků.
6. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxx stanovení xxxxxxxx xxxxx přímého xxxxxxxxxx xxxxxx.
x) Xxxxx slin xxxx xxxx mohou xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x je xxxxx se jim xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx pipetování.
6.1 Příprava xxxxxxxxxxx vzorku
6.1.1 Testování xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx vzorků. V xxxxxxx xxxxxxx skladovat xxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx ne xxxx xxx xxx dny.
6.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxx do xxxxx xx xxxx zkumavek (5.4), xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx kontrolní xxxx xxxxx xxxxx.
6.3 Xxxxxxxxx
6.3.1 Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xx vroucí xxxx; xxxxxxxx a kádinku x xxxxxx vodou xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xx prohřála xxxx zkumavka. Xxxxxx xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.2 Po zbytek xxxxxxx ošetřovat xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Přidat 10 xx roztoku xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxxxxx.
6.3.3 Xxxxxx ihned xxxxxxxxx 60 minut xx xxxxx xxxxx (5.2) x xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxxx obsah.
6.3.4 Stejně xxxx x xxxx 6.3.1 xxxxxxxx dvě xxxxxx xx xxxxxx xxxx. Xxxxxx zchladit xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.5 Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxxxx xxxxx-xxx (4.5) x xxxxx promíchat.
6.3.6 Xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxx mililitry x x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx není xxxxxxx xxxxxxxx čirý; xxxxxxxxxx 5 xx xx xxxxxxxx.
6.3.7 Přidat 5 xx xxxxxxxxx roztoku xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2).
6.3.8 Přidat 0,1 xx roztoku BQC (4,6), xxxxxxxxx x 30 xxxxx xxxxxx xxxxxxx zabarvení xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.9 X xxxxxxxxx x kontrolním xxxx xxxxxx pokusem xxxxxx absorbanci xxx xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.3.10 Xxxxx absorbance xxxxxxxx x bodě 6.3.9 xxxxxxxxx absorbanci xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxxxx 20 μx xxxxxx xx xxxxxxxx podle xxxx 6.4.4, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Připravit xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx testovacího xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxx do varu, xxx xx inaktivovala xxxxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
6.4.1 Xx základě xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxx (4.8.2) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx obsahujících 0 (xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx), 2, 5, 10 x 20 μx xxxxxx xx xxxxxxxx. Xx xxxxx x pěti zkumavek xxxxxx xxxxxx xxxxxx 1 xx vody x 1 xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxx.
6.4.2 Xx každé xxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.7), 5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.3), 3 xx xxxx x 0,1 ml xxxxxxx XXX (4.6); xxxxxxxxx.
6.4.3 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 30 minut při xxxxxxxx xxxxxxx.
6.4.4 X xxxxxxxxx s kontrolním xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.4.5 Xx základě xxxxxx xxxxxxxxxx (6.4.4) xxxxxxxxx pro každé xxxxxxxx přidaného fenolu (6.4.1) vypočítat xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7. Vyjádření výsledků
7.1 Xxxxxxx a xxxxxx
7.1.1 Xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (6.3.9) xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx pomocí xxxxxxxx xxxxxx (6.4.5).
7.1.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x μx xxxxxx xx mililitr xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxx xxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxxx fosfatázy = 2,4 × X × D
kde
A xx xxxxxxxx fenolu x μx xxxxxxx xxxxx xxxx 7.1.1;
X xx xxxxxx zředění xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx bodu 6.3.10 (x xxxxxxx žádného xxxxxxx X = 1).
2,4 xx xxxxxx xxxxxxx (5/12 x 1 xx xxxxxxxxxxx xxxxxx) – xxx 6.2 xx xxxxxxxxxx x 6.3.2, 6.3.5 x 6.3.6.
7.2 Xxxxxxxxxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (r) : 2 μx xxxxxx/xx.
7.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) : 3 (předběžně) μx xxxxxx/xx.
7.2.3 Xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx 6.3.10, xxxxxx xxxxxxx x 7.2.1 x 7.2.2 se xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx vzorku.
III. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x oblast použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx peroxidázy x xxxxx, xxxxx slouží xx kontrole xxxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxxx:
Xxxxx xx xxxxx xxxxx pasterováno, xx 30 sekund po xxxxxxxxxx se objeví xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx:
Xx 30 xxxxxx po xxxxxxxxxx xx neobjeví xxxxx xxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx vodíku. Uvolněný xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (Štorchův xxxx). Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx úměrná xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxx 1,4 fenylendiaminu
Rozpustit x xxxxx xxxx (50 °C) 2 x 1,4 xxxxxxxxxxxxxx (X6X8X2) x xxxxxxx xx 100 xx. Xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxx a temnu, x tmavě xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx xxxx dní xx xxxxxxxxxx roztok 1,4 xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx zředit 9 xx 30 % xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx 100 xx. Pro xxxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx vodíku xx stálý asi xxxxx xxxxx, xxxxx xx skladován v xxxxxx x temnu, x láhvi xx xxxxxxxxx zátkou, která xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx látkami.
5. Xxxxxx
5.1 Dát 5 xx xxxxxx xxxxx xx čisté xxxxxxxx x vhodným víčkem.
5.2 Xxxxxx 5 xx xxxxxxx 1,4 fenylendiaminu (4.1).
5.3 Xxxxxx 2 xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.2).
5.4 30 xxxxxx po xxxxxxxxxx xxxxxxxx zabarvení. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx více xxx 30 sekund xx xxxxxxx xxxxxxx, reakce xxxx specifická.
IV. STANOVENÍ XXXXXX MIKROORGANISMŮ XXX 30 °X
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx stanovení xxxxxx mikroorganismů xxxxxxxxx xxxxxxxx kolonií xxx 30 °X. Postup xx použije xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, UHT mléko xxxx sterilizované xxxxx, xxxxx xxxx 15 xxx xxxxxxxxxxxxx při 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx rozumějí xxxxxxxxx, xxxxx vytvářejí xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx x kultivačním xxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx x nechat xxxxxxxxx 72 xxxxx xxx 30 °X. Spočítat xxxxxxx x vypočítat xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 ml xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxx na 0,1 xx preinkubovaného xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx nebo UHT xxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx skla
Obvyklé xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx sušárna, xxxxxxxxxxxx na 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Inkubátor, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °X.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx teploty, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx pH.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx ředění s 9 xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx excentrické xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx skla
4.2.1 Xxxxxxxx s vhodnými xxxxxxx a dostatečným xxxxxxx, s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxxx 10 ml xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Baňky x objemu 150 xx 250 ml xxxx zkumavky x xxxxxx 20 ml xxx xxxxxxxxxx kultivačního xxxxx.
4.2.3 Pipety (utěsněné xxxxx), xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x nominálním xxxxxx 1 xx, x výpustním otvorem x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx z xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, dno xxxxx xx vnitřní xxxxxx xxx 90 xx 100 xx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx by xxxx xxx nejméně 10 xx. Xxx xxxxx mít xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx by xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx:
Xxxxxxx ze skla xx xxxxxxxxxxx jedním x xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx 170–175 °X;
x) v xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 minut xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx použití xxxxxxxxx je xxxxx xxxx xx to, xxx bylo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x nádobách, xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxx odvětráním xxxx.
Xxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Kultivační xxxxxx – agar xx sušeným xxxxxx
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 g |
|
Trypton |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx (+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx odstředěné xxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10–15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx vlastností xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx žádné inhibiční xxxxx. Xxxx xx xxxxx srovnávacími xxxxx xx sušeným odstředěným xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X xxxxx pořadí xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, glukózu x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx postup. Xxxx přidat agar x za xxxxxxx xxxxxxx xxxxx do xxxx, dokud xx xxxx xxxxx nerozpustí, xxxx zahřívat x xxxx xxx 30 xxxxx.
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx přes xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); pokud xx je nezbytné, xxxxxxx xX, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx sterilizaci xxxx xxxx hodnota 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.2 Rozdělení, xxxxxxxxxxx x skladování xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx médium (5.1) x množstvích xx 100 do 150 xx xx xxxxx xxxx po 12 xx 15 xx xx xxxxxxxx (4.2.2). Baňky x xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x autoklávu (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX kultivačního xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx teplotě xxxx 1 x 5 °X, xxxxx ne xxxx než 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx x komerčního xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx pokyny xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx mléko xxxx xxxxxxxxxxxx, pokud xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xX xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X metodou podle xxxx 5.1, poté xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Roztok xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (NaCl) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xX-xxxxxx (4.1.4); pokud xx xx xxxxxxxx upravit xX xxxxxxxx (nejméně 0,1 mol/l) xxxxxxxxx xxxxxxx nebo kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x skladování xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx po xxxxxxxxxxx xxxxx zkumavka obsahovala 9,0 ± 0,2 xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x autoklávu (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxxx.
Xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx ihned, skladuje xx v xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx než 1 xxxxx po xxxx xxxxxxxx.
6.3 Komerční dehydrovaná xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) xx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx tablet xxxx xxxxxx. Dodržet xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX metodou podle xxxx 6.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxx rychle xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx lázni (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxx promíchat, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x to 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Je xxxxx zabránit xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx mícháním x xxxxxxx testovacího vzorku xx xxxxxx překročit xxx xxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx ředění (10-1) (xxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xx 9 xx xxxxxxx (6.1), xxxxxxx xxxxxx nesmí xxxxxx xx kontaktu x xxxxxxxx. Teplota xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 sekund xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx xx xxx xxxxxxxx ředění 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxxxxxx ředění (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx xxxxxx x xxxx 7.3.
Získá xx xxx ředění 10−2.
X xxxxx xxxxxx další xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx opakuje xxx dlouho, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx mikroorganismů (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
7.5.1 Xxxxxx xxxxx: Sterilní xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx vzorku x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Musí xxx xxxxxxxxx nejméně dvě xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx misku.
7.5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx: Sterilní xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx vhodného xxxxxxxxxxx xxxxxx. Musí xxx xxxxxxxxx xxxxxxx dvě xxxxxx. Xxx každé xxxxxx (8.1.1) připravit xxxxx vhodnou xxxxx.
7.5.3 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx mléko (vyšetřované xx 15 xxxxx xxxxxxxx při 30 °X – xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx X xxxxxxxx XXX xxx 5):
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx do xxxxx (4.2.4) 1 ml xxxxxx xxxxx (7.2). Xxxxxxxxx xxx xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx kultivačního média
Do xxxxx xxxxxxxxxx misky xxxxx xxx 15 xx 18 ml xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Ihned xxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxx po xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx mléka x xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx nesmí xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx xxxx na xxxxxxxxxx, xxxxxxxx a čistém xxxxxxx, dokud xxxxxx xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Petriho xxxxx
Xxxxxxx misky xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Misky xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxx než xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx dotýkat, ani xxx v kontaktu xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 72 ± 2 xxxxx při 30 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 300 xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxx tlumeném xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) a/nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxxx x záměně xxxxxx sraženin x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx provést xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx skla x xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx od cizích xxxxxx.
Xxxxxxx tvořící xxxxxx xx považují xx xxxxx xxxxxxx. Pokud xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx, spočítat xxxxxxx x nepostižené xxxxx xxxxx a xxxxxxxxx odpovídající xxxxx xxx xxxxx misku. Xxxxx xxxxxxx tvořící xxxxxx pokrývají více xxx čtvrtinu xxxxxx xxxxx, xxxxx vyřadit.
8. Xxxxxxx x vyjádření xxxxxxxx
8.1 Syrové x xxxxxxxxxxx xxxxx
8.1.1 Použít xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 až 300 xxxxxxx (viz 8.1.3 x 8.1.4).
8.1.2 Xxxxxxxxx xxxxx mikroorganismů xx 1 xx xxxxxxxx xxxx pasterovaného xxxxx xxxxx xxxxxx vzorce:
∑C / (x1 + 0,1x2) x
xxx:
∑X ΣX xx celkový počet xxxxxxx xxxxx xxxx 8.1.1.
(x1 + 0,1 x2)x je xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, kde:
n1 xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx
x2 xx xxxxx xxxxx xxx druhém xxxxxx
x xx xxxxxx zředění, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
Xxxxx se xxxxxxxxxx xx dvě xxxxxx xxxxxxx. Xxxx je xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxx číslice vlevo xxxx sudá.
Příklad (xxxxxxxxxxx xxxxx):
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 x 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; = 278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2
= 6290,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.1.3 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 10, xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx "xxxxx xxx 10 x x", xxxxxxx "d" xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
8.1.4 Xxxxx jsou xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 300 x xxxxxxxx xx xxxxx, xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxx převrácenou xxxxxxxx xxxxxxx zředění. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx "Odhadovaný xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xx".
8.2 XXX mléko x xxxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xxxxx xxx 10 xxxxxxx xx 0,1 xx se xxxxxxxx xx nevyhovující xxxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/EHS.
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx uznaných kruhových xxxxx ještě xxxxxx x xxxxxxxxx.
X. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXX 21 °X
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx popisuje referenční xxxxxx xxx stanovení xxxxxx mikroorganismů xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 21 °C x xxxxxxxxxxxx mléce, xxxxx xxxx xxx dní xxxxxxxxxxxxx xxx 6 xX x xxxxx xxxxxxxx stupeň kontaminace xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx množit se x mléce při 6 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx vytvářejí počitatelné xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxx xxx 6 °X. Xxxxxxx xxxxxxxxx objem xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx médiem x Xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxx 25 xxxxx xxx 21 °X. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na 1 xx xxxxxxxxxxxxx mléka.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, zejména:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx sušárna, nastavitelná xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Autokláv, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx udržovat xxxxxxx:
x) 6 ± 0,2 °X
x) 21 ± 1 °X xx xxxxx xxxxxx xxxxxx.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx na ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Vodní xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, zvětšení 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx počítadlo
4.1.9 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x 9 ml xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx obsahu xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx objemem, s xxxxxxxxxxx prostorem x xxxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx desetinných xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 xx nebo zkumavky x objemu 20 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx vatou), xxxxxxxx xxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx materiálu, s xxxxxxxxxxxx xxxxxx, o xxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx o xxxxxxx 1,75 až 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx, bezbarvého xxxx nebo ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxx xx xxxxxxx průměr asi 90 xx 100 x. Vnitřní xxxxxxx xxxxx xx měla xxx nejméně 10 xx. Xxx xxxxx xxx žádné xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx skla:
Pomůcky xx xxxx xx xxxxxxxxxxx jedním x xxxxxx xxxxxxx:
x) v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx 170–175 °X;
x) x xxxxxxxxx (4.1.2), nejméně 20 xxxxx xxx teplotě 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx to, xxx xxxx xxxxxxxxx dostatečné xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x nádobách, xxxx xxxxxx by neměly xxx xxxxxxx uzavřeny, xxxxxxx nebo xxxxx xx xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx ze skla xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xx měly xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxx být sterilizovány x horkovzdušné sušárně (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx médium – agar se xxxxxxx xxxxxx
5.1 Složení:
|
Kvasnicový xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx(+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10-15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 ml |
Sušené xxxxxxxxxx mléko by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Toto xx ověří srovnávacími xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx mlékem, které xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx neobsahuje.
Příprava:
V tomto xxxxxx suspendovat a xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, trypton, xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx přidat xxxx x xxxxx xx xxxx za xxxxxxx xxxxxxx, dokud xx agar xxxxx xxxxxxxxxx, nebo xxxxxxxx x xxxx xxx 30 xxxxx.
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx pH-metru (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xX, xxxxxxxx (nejméně 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx sodného xxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx jeho xxxxxxx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxxx od 100 xx 150 xx xx xxxxx xxxx xx 12 až 15 xx do xxxxxxxx (4.2.2). Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) při 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx kultivační xxxxxx nepoužije xxxxx, xxxxxxxx se v xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 a 5 °C, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Komerční xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxxxx dehydrovaného kultivačního xxxxx. Xxxxxxx pokyny xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxx odstředěné xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xX na 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X xxxxxxxx xxxxx xxxx 5.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx podle xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Xxxxxx xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
8,5 g |
|
Voda |
1000 ml |
Příprava:
Rozpustit xxxxxx xx vodě, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xX-xxxxxx (4.1.4); xxxxx xx je xxxxxxxx xxxxxxx xX roztokem (xxxxxxx 0,1 mol/l) xxxxxxxxx sodného xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 při 25 °C.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx ředidlo (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx xx xxxxxxxxx každá xxxxxxxx xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx ředidla. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X. Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, skladuje se x xxxxx při xxxxxxx xxxx 1 x 5 °C, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx xx jeho přípravě.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) xx může xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX xxxxxxxx podle bodu 6.1, poté xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx podle xxxx 6.2.
7. Postup
7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx zahájením xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx potřebné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
7.2 Příprava xxxxxx mléka
7.2.1 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx [4.1.3 x)] xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxx, xxxxx xx xxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx 100 ml xx xxxx 120 ± 2 hodin xxx 6 ± 0,5 °X.
7.2.2 Po xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx byly xxxxxxxxxxxxxx co xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xx 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx pěny xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx mezi xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (10−1)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx pasterovaného xxxxx xx 9 xx xxxxxxx (6.1), přičemž xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx přibližně xxxxxx jako teplota xxxxxx mléka. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx míchačkou (4.1.9).
Xxxxx xx tak xxxxxxxx ředění 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 ml xxxxxxxxxx xxxxxx (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) podle xxxxxx x xxxx 7.3.
Xxxxx se xxx xxxxxx 10−2.
X xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx tento xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx přiměřené xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx misek
Sterilní xxxxxxx (4.2.3) přenést xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx a/nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx ředění. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx misky xxxxx xxx 15 až 18 ml xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx Petriho misky, xxx po xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx mezi xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx druhu xxxxx, xxxxxxxxxxx vzorku nebo xxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxx nesmí xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx vodorovném, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx médium xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Xxxxxxx misek
Přenést xxxxx do xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx inkubovat xxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx na xxxx xxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx misek xx nesmějí xxxxxxxx xxxxxxx, ani být x xxxxxxxx xx xxxxxxx x vrchní xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 25 xxxxx xxx 21 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx více xxx 300 xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxx tlumeném xxxxxx. Xxx usnadnění xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx xxxxx xxxx xx xx, aby xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx sraženin v xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx pochybností provést xxxxxxx průzkum pomocí xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx povlak xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx tvořící povlak xxxxxxxxx xxxx než xxxxxxxx xxxxx, spočítat xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx počet xxx celou xxxxx. Xxxxx kolonie xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Použít výsledky xxxxx obsahujících 10 xx 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 a 8.1.4).
8.2 Vypočítat xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx vzorce:
∑C / (x1 + 0,1n2) x
xxx:
ΣX xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 8.1,
(n1 + 0,1 n2)d xx xxxxx naočkovaného vzorku, xxx:
x1 je xxxxx xxxxx při xxxxxx xxxxxxx
x2 xx xxxxx xxxxx xxx druhém xxxxxx
x xx faktor xxxxxxx, na xxxxxxx xxxxxxx byly xxxxxxx xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx na xxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, zaokrouhlit xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx byla sudá.
Příklad:
Ředění 10−2: 278 x 290 kolonií
Ředění 10−3: 33 x 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; =278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2=
=629 / 0,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.3 Xxxxx xxxx všechny xxxxx xxxxx než 10, xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx "xxxxx xxx 10 × x", xxxxxxx "d" xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx zředění.
8.4 Xxxxx xxxx všechny xxxxx xxxxx než 300 x počítání je xxxxx, xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx jej xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx ml".
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx mezinárodně xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX – XXXXXXXX XXXXXXX XXX 30 °X
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x pasterovaném xxxxx xxxxxxxxx počítání xxxxxxx při 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx 30 °X xxxxxxxxx charakteristické xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, jež jsou xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx.
3. Princip
Smíchat xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx v Xxxxxxx xxxxxxx x 24 xxxxx xxxxxx inkubovat xxx 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx kolonie x, xxxxx xx xx xxxxx, potvrdit xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx kolonií xxxxxxxxxxx jejich xxxxxxxxxx xxxxxxxxx laktózu. Xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx na 1 xx xxxxxxxxxxxxx mléka.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 až 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °C.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx udržovat xxxxxxx 30 ± 1 °C.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, nastavitelná xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx-xxxxxxx xxxx xxxx-xxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx skla
4.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 20 xx, aby mohly xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kultivační xxxxxx (5.2) a Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2.2 Baňky o xxxxxx 150 až 250 ml xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média (5.1).
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx xxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx hrotem, x nominálním xxxxxx 1 – 10 xx, x výpustním xxxxxxx o průměru 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Petriho misky x čirého, bezbarvého xxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxx xx xxxxxxx průměr xxx 90 až 100 x. Xxxxxxx hloubka xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx 10 xx. Dno xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx bránily xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Sterilizace xxxxxxx xx xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxxx jedním z xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx teplotě 170 – 175 °X;
x) x autoklávu (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, aby xxxx xxxxxxxxx dostatečné xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxx, tyto xxxxxx xx xxxxxx být xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx víčka by xxxx xxx volné.
Pomůcky xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xx měly xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx musí xxx sterilizovány x xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx médium
5.1 Xxxx x xxxxxxxxxxx violetí, xxxxxxxxx červení, xxxxx x laktózou (XXXX xxxx). Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
7 x |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
3 x |
|
Xxxxxxx (X12X22X11.X2X) |
10 g |
|
Chlorid xxxxx (XxXx) |
5 x |
|
Xxxxxxx xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxxxx xxxxxx |
0,03 x |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxx |
0,002 g |
|
Agar |
10 xx 15 g xxxxx xxxxxxxxxxxx vlastností xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx složky xx xxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); pokud to xx xxxxx, xxxxxxx xX roztokem (xxxxxxx 0,1 xxx/x) hydroxidu xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx po xxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 při 25 °X.
Xxxxx rychle do xxxx xx občasného xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx po množstvích 100 až 150 xx xx sterilních xxxxx (4.2.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx lázni (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
X době xxxxxxx xxxxxxxxxxxx sterilitu xxxxxxxxxxxx média (6.4).
Xxxxxx xxxxxxxxxx médium do xxx hodin po xxxx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Konfirmační kultivační xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
10 g |
|
Laktóza (X12X22X11.X2X) |
10 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx |
20 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxx |
0,0133 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx složky xx xxxx a xxxxx xx varu.
Zkontrolovat xX xxxxxx pH-metru (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx kyseliny chlorovodíkové, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx jeho xxxxxxx 7,2 ± 0,1 xxx 25 °C.
Rozdělit xxxxxx xx 10 xx xx zkumavek (4.2.1) xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxxx. Zkumavky xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxx trubičky xxxxxxx xx sterilizaci xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx nepoužije xxxxx, xxxxxxxx se x temnu při xxxxxxx mezi 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx dehydrované kultivační xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx x komerčního xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média. Dodržte xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX, rozdělit, xxxxxxxxxxxx x skladovat xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx 5.1 a 5.2.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxxx (XXXX xxxx) xxxxxxx v xxxx 5.1.
6.2 Příprava vzorku xxxxx
Xxxxxx mléka xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx nejrovnoměrněji xxxxxxxxx, x to 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xx nutné zabránit xxxxxx xxxx xxxx xxxx nechat xxxxxxxxx. Xxxx mezi xxxxxxxx x odběrem xxxxxxxxxxx xxxxxx by xxxxxx xxxxxxxxx xxx minuty.
6.3 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx misek
Sterilní xxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) 1 xx vzorku xxxxx xx xxxxx xx xxx xxxxx (4.2.4) a tím xxxxxxxxx 3 ml xxxxxx mléka (6.2).
6.4 Xxxxxxxx kultivačního xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx misky xxxxx xxx 12 xx XXXX xxxxx (6.1)
Xxxxx xx nalití xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx rozložení xxxxxxx.
Xxxx mezi xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx s xxxxxxxxxxx médiem xxxxx xxxxxxxxx 15 minut.
Za xxxxxx kontroly xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx misku x 12 xx xxxxx XXXX xxxxx, xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxx na xxxxxxxxxx, xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx, xxxxx médium xxxxxxxx.
Xx úplném xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 4 xx XXXX xxxxx (6.1) na povrch xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx.
6.5 Xxxxxxxx Petriho xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx vzájemně xxxxxxx, xxx být x kontaktu se xxxxxxx a vrchní xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 24 ± 2 xxxxxx xxx 30 ± 1 °X.
6.6 Počítání xxxxxxx
6.6.1 Xxxxxxx xxxxxxx x Xxxxxxx miskách xxxxxxxxxxxxxx více xxx 150 xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx kolonie x xxxxxxx nejméně 0,5 mm, x xxxx bez xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.6.2 Xxxxx xxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxx xxxxx, xxxxxxxx nebo xxxx tvar xxxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), provést xxxxxxxxxxx xxxx (6.7).
6.7 Xxxxxxxxxxx xxxx
Xxxxx údajů x xxxx 6.6.2 provést xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxx (xxxx. 3 xx 5) xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx kolonií xxx, xx xx pomocí xxxxxxxx jehly (4.1.6), xxxxxxxx xxxxxxxx obsahující xxxxxx xxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.2). Xxxxxxxxx zkumavky 24 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °X.
Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx takové xxxxxxx, xxxxx x Xxxxxxxxx xxxxxxxx tvoří plyn.
7. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxx výsledky xxxxx xxxxxxxxxxxx maximálně 150 xxxxxxx.
7.2 Xxxxx xx xxxxxxx konfirmační xxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx základě procentuálního xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 ml xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
ΣX / x
xxx:
ΣX xx celkový xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (7.1 x xxxxxxxxxxx xx 7.2), xxxxxxxxxxx vyšetřením xxxxxx xxxxx (6.3).
n xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (6.3) x mililitrech (3 xx).
Xxxxx xx xxxxxxxxxx na dvě xxxxxx číslice, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxx 100 xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx číslice xxx, zaokrouhlit xxx, xxx sousední xxxxxxx xxxxx xxxx sudá.
Pokud xxxx všechny počty xxxxx xxx 150 xxxxxxx, uvést výsledek xxxx "odhadovaný počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx na 1 xx".
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx uznaných xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
XXX. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX
Xxxx xxxxxxxx popisuje xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx somatických xxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Mikroskopická metoda
1. Xxxxxxx a oblast xxxxxxx
Xxxxx postup popisuje xxxxxxxxxx postup xxx xxxxxxxxx xxxxx somatických xxxxx x syrovém xxxxx.
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx správnosti xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx B.1).
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx postup xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx x epitelové xxxxx, xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx methylenovou xxxxx
3. Xxxxxxx
Xxxxxx 0,01 xx xxxxx na 1 xx2 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Tenká xxxxxx xx vysuší a xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxxxx xx daném xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx faktorem, x xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xx 1 xxxxxxxx.
4. Xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxx chemikálie xxxxxxx x.x..
Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxx modř |
0,6 x |
|
Xxxxxxx – 99 % |
54 xx |
|
1,1,1-xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx |
40 xx |
|
Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx |
6 xx |
Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx v baňce xxxxxxx x 1,1,1-trichlorethan xxxx xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxx ve xxxxx xxxxx xx 60 xx 70 °C. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx modř, xxxxx promíchat, 12 xx 24 xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 4 °X x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Přefiltrovat xxxx xxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxx pórů 10 až 12 xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx láhvi. X xxxxxxx vytvoření xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx.
5. Xxxxxxxxx x pomůcky xx xxxx
5.1 Mikroskop xxxxxxxxxx xxxxxxxx 500 × xx 1000 ×
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 0,01 ml x xxxxxxxxx nejméně ± 2 %.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 20 mm × 5 mm xxxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxx xxxx standardní xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 20 × 5 mm xxx xxxxxx xxxxxx.
5.4 Horizontální xxxxx deska (30 °X xx 50 °X) xxx xxxxxx xxxxxxxxxx sklíček.
5.5 Ventilátor (xxx) xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx.
5.6 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx na 30 až 40 °X xxx ohřívání xxxxxx xxxxx.
5.7 Podložní xxxxxxx x mikrometrickou xxxxxxxx xx 0,01 xx.
6. Postup
6.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx po xxxxxx vzorku. Během xxxxxxxxxx nesmí teplota xxxxxx xxxxxxxxx 6 °X. Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx.
6.2 Xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx (5.6) na 30 xx 40 °X. Xxxx xxxxx xxxxxxxxx. Zchladit xx xxxxxxx, xxx které xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (5.2), xxxxxxxxx 20 °X.
6.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) například xxxxxxxxx, xxxxxxx papírem, xxxxx nezanechává xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxx, kde jsou xxxxxxxx xxxx prachem.
6.4 Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx (5.2) xxxxxxx 0,01 xx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx, jak xx xxxxxxx výše. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx stříkačky, která xxxxxx xx styku x xxxxxx. Přiložit xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (20 mm × 5 mm). Xxxx xx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx vrstvu xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (5.4) xx xx úplného vysušení.
U xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx.
6.5 Barvení xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx 10 xxxxx xx barvícího xxxxxxx (4). Sušit x, xxxxx xx xx nezbytné, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.5). Xxxxxxx tenké vrstvy xx xxxxxxx vody, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx x xxxxxxx xxx, aby xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx.
6.6 Xxxxxxxxx mikroskopického xxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (500 × xx 1000 ×) xxxxxx průměr xxxxxxxxxxxxxxx xxxx (5.7).
7. Xxxxxxxx x xxxxxxx
7.1 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx mikroskop (5.1). Xxxxx počítání buněk xx počítají xxxxx xxxxxxx xxxxx, x xx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x x xxxxx xx x xxxxxxxxxxxxxx xxxx viditelná xxxxxxx xxxxxxxx. Počítat xxxx xxxx pole xx xxxxxxx třetině xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx ty pásy xxxx xxxx, xxxxx xxxx vybrány xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x tudíž x xxxxxxxxxxxx výsledků xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx částí xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxx také provádět xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx takovým xxxxxxxx, xxx všechny části xxxxx xxxxxx byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
7.2 Stanovení xxxxxxxxxxx počtu xxxxx, xxxxx se xxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx pod xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x mechanických xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxxxx vzorků xxxxx xxx vyšší xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Variační xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx 400000 xx 600000 buněk/ml xx xxxxx xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, které je xxxxx x xxxxxx xxxxxx spočítat, xxxx xxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxx rozdělení xxxxxxx 400, xxx bylo xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
X = X = x2,
xxx:
X xx střední hodnota
V xx rozptyl
s xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx:
XX = x × 100 % / X xxxx XX = 100 % / x&xxxx;xxxx XX = 100 % / OBR
M (xxxxxx) xxxxxxxxxxx počet xxxxxx (xxxxx), xxxxx xxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxx 400 xxx CV = 5 %).
7.3 Xxxxxxx pracovního xxxxxxx
Xxx xxxxxxx 0,01 xx xxxxx xx pracovní xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx 7.3.1 xxxx 7.3.2.
7.3.1 Xxxxxxxx xxxx xx xxxxx vrstvě
Délka xxxx, které se xxxx xxxxxxx, xx 5 xx. Šířka xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxx xx stanoven podložním xxxxxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7).
Pracovní faktor = 20 × 100 / x × x
xxx:
x xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x mm, stanovený xxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxxxxxx stupnicí (5.7)
x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
7.3.2 Xxxxxxxx mikroskopických xxxx ve xxxxxxx xxxxxxx tenké xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx
xxx:
x je xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7)
x xxxxxxx xxxxx spočítaných polí.
7.4 Xxxxxxx xxxxxx xxxxx
X xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xx ml xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (7.1 x 7.2) xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (7.3).
7.5 Přesnost
Variační xxxxxxxxxx (xxx 7.2) nesmí xxxxxxxxx 5 %.
Výsledky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
X. Fluoro-opto-elektronická metoda
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxx postup popisuje xxxxxxxxxx postup, xxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxxxx kalibraci (xxx X.1) xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx počtu somatických xxxxx x xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx DNA xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxx xxxxxx (například 0,2 xx) se xxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Část xxxx xxxxx se xxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx xx rotační xxxx, xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx impuls, xxxxx xx zesiluje x xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx v xxxxxxxx xx xxxxxxxx.
4. Xxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx jinak, xxxx xx použít xxxxxxx xxxxxxx p.a.. Xxxxxxx voda xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx |
51,00 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxx |
13,75 x |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx(xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 xx |
|
xX 5,7 xx 5,9. Xxxxxxx vodou na 10000 xx. |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx uzavřené xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx.
4.2 Fluorescenční xxxxxx (xxxxxxx xxxxxx)
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
1,0 x |
Xxxxxxx xxxxx xx 1000 xx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx ethidiumbromid xx xxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx nemělo xxxxxxxxx xxx měsíce.
4.3 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx xxxxxx)
Xxxxxxx 20 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.2) x xxxxxxxx xxxxxxxx (4.1) tak, xxx xx xxxxxx xxxxx 1000 ml. Pracovní xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxx sedm dní.
4.4 Xxxxxxx roztok
Složení
|
Tlumivý xxxxxx (4.1) |
10 xx |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 xx |
|
Xxxxxxx x 25 % xxxxxxxxxx |
25 xx |
Xxxxxxx xxxxx xx 10000 xx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Skladování xx nemělo překročit xxxxxx xxx.
5. Přístroje x xxxxxxx ze xxxx
5.1 Počítací xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx se xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx mají xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxx provádí. Kalibrace xxxxxxxx xx provede xxxxx xxxxxx výrobce xx použití xxxxxx, xxxxxxx obsah buněk xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X).
5.2 Vodní xxxxx, x xxxxxxxxx xxxx, nastavitelná na 40 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx 15 xx.
6. Xxxxxx xxxxx
6.1 Vzorek xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xx zkumavce (5.3). Xxxxx xxxxxx nebyl xxxxxxxx konzervován, počítání xx xxxx provést xx xx uplynutí 24 hodin xx xxxxxxxx, neboť xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx překročit 6 °C.
6.2 Konzervace
Chemická xxxxxxxxxx xx musí xxxxxxx xx 24 xxxxx. Konzervace xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx po odběru xxxxxx.
6.2.1 Chemická konzervace xxxxxx xx provede xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx prostředků:
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
xxxxxxx koncentrace xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxx xxxxx být xxxxx xxx 0,6 x na 100 xx. Xxxxx konzervovaný xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx při teplotě 6 xx 12 °X;
- xxxxxxxxxxx draselný:
konečná xxxxxxxxxxx dvojchromanu xxxxxxxxxx xx xxxxxx nesmí xxx vyšší xxx 0,2 x na 100 xx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 72 xxxxx při xxxxxxx 6 xx 12 °C;
- azid xxxxx:
xxxxxx může xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx 0,024 x/100 xx, xxxxx je xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx 6 až 12 °X xxxxx xx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx 48 xxxxx xx xxxx xxxxxx;
- xxxxxxxx:
xxxxxx může xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx 0,05 x/100 xx, xxxxx je vzorek xxxxxxxx xx teplotu 6 xx 12 °X xxxxx po xxxx odběru x xxxxxxxx xx 72 xxxxx xx xxxx xxxxxx.
6.2.2 Xxxxxx, který xxx byl xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, může xxx xxxxx konzervován xxxxxxx xx 48 xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx být xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx, xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 24 hodin xxx xxx 2-6 °X. Xxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxx xx xxx předběžného xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx mohou xxx xxxxxx nízké. Pokud xx xxxxxx nutné xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx měl xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx hodiny xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxx 6.2.1).
7.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx ošetřený xxxxxx (xxx 7.1) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx den starý xxxxxx xx xxxxx xxxxx (5.2) na xxx 40 °X. Xxxx skladovat xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx do počítání.
7.3 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.1) do 15 minut po xxxxxxxx ohřívání (xxx 7.2). Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, aby xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx rozdělení xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx vzorku xxxx xxxxxxxxxxx provedeny v xxxxxxxx.
8. Spolehlivost
Výsledky opakovatelnosti (x) a xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) xxxxxxxxxxxxx kruhových xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxx, které jsou x dispozici xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxx:
(1) xxxxx xxxxx xxxx 400 000 xx 500&xxxx;000 xxxx:
- směrodatná odchylka xxxxxxxxxxxxxxx:
xx = 20000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 5–4 %)
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx:
xX = 40000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 10–8 %)
9. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx o známém xxxxxx xxxxx, který xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pod xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
XXXX. XXXXXXX XXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXX
XXXXXXX X XXXXXX POUŽITÍ
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx antibiotik x sulfonamidů v xxxxxxx xxxxx a x tepelně xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx postup xxxxxxxx:
X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, který xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx mléka, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x sulfonamidy. Xxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxx xx použití Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. calidolactis, XXXX 10149, xx xx testovacího xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxx reprezentativní xxx xxxxxxxx testy.
B. Xxxxxx pro xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx penicilinu
Tento xxxxxx se musí xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x stanovení xxxx xxxxxxxxxxx.
X. Kvalitativní postup
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxxxxxxxx xxxxxxx antibiotik x sulfonamidů x xxxxxxx xxxxx x x tepelně xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxx uvedené v xxxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxx koncentrace xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx [1]
|
Xxxxxxxxx xxxxx |
||
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxx |
|
|
Xxxxxxxxxxxxxxx |
0,002 |
0,006 |
|
Xxxxxxxxx |
0,002 |
0,005 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,015 |
0,035 |
|
Xxxxxxxx |
0,006 |
0,011 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,10 |
0,40 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,20 |
0,45 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxx |
0,15 |
0,50 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
7 |
15 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx |
4 |
13 |
|
Xxxxxxxx |
1 |
22 |
|
Xxxxxxxxx |
9 |
28 |
|
Xxxxxxxxxx |
0,06 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxx |
1 |
2,25 |
|
Xxxxxxxxx |
0,01 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,01 |
0,1 |
|
Xxxxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxxx) |
0,5 |
1 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2 x |
|
|
Xxxxxx |
5 x |
|
|
Xxxxxx extrakt |
1 x |
|
|
Xxxxxxx xxxxx |
5 g |
|
|
Agar |
10–15 x |
|
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxx. Xx občasného xxxxxxx xxxxx xx xxxx. Xxxxxxx xX xxx, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxxxx xxxx po 100 xx xx lahviček x naklonit x xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °C.
5.1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxx xxxxx |
2 x |
|
Xxxx |
15 x |
|
Xxxx |
1000 ml |
|
Roztok trimethoprimu xxxx xxxxxxxxxxxx (xxx 5.1.3) |
10 ml |
Příprava:
Rozpustit složky xx vodě, x xxxxxxxx trimethoprimu nebo xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxx uvést xx xxxx. Přidat xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx 15 minut xxx 121 ± 1 °C. Xxxxxxx xX, aby po xxxxxxxxxxx xxxx jeho xxxxxxx 7,0 ± 0,1 při 25 °X.
5.1.3 Roztok xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxxxx |
5 xx |
|
xxxx Xxxxxxxxxxx |
30 xx |
|
96 % Xxxxxxx |
5 ml/30 xx |
|
Xxxxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx v ethanolu xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx (5 nebo 30 xx) a doplnit xxxxx.
5.1.4 Xxxxx roztok
Složení:
|
Kvasnicový xxxxxxx |
0,75 xx |
|
Xxxxxxx |
5,0 mg |
|
Rozpustný xxxxx |
8,0 xx |
|
Xxxxxxxxxxxxx červeň |
0,025 x |
|
Xxxx |
50 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, pokud xx xx nutné, xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Živný xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx
5.2.1 Xx sterilní xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx o 60 μx/xx (100 IU/ml), x to xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx sodného xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx destilované xxxx.
5.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 1,25 xx xxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2.1) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xx 1000 xx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 0,075 μx xxxxxxxxxx/xx (= 0,125 IU/ml).
5.2.3 Xxxxxxxxx 75 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx penicilinu xxxxxxxxxxxx 0,004 μg xxxxxxxxxx/xx (= 0,0067 XX xxxxxxxxxx/xx) xxxxxxxx 4 xx pracovního roztoku xxxxxxxxxx (5.2.2) xx 71 xx mléka xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.3).
5.2.4 Xxxxxxx penicilinu xxxxxxx podle xxxx 5.2.1 až 5.2.3 xx xxxx být xxxxxxxxxx v den xxxxxxxxx testu.
5.3 Xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek
Připravit xxxxxxxxx xxxxxxxx mléka xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (10 % x/X) xx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx čerstvého xxxxx, xxxxx xxxx otestováno x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx; xxxx mléko xx xxxxxxx xx lahví x xxxxxxx se xxxxx xxxxxx na 100 °X, xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx 0 °X až 6 °C xx xxxx nejvýše xxxxxxx xxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
5.4.1 Xxxx xxxxxxxxx organismus xx xxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. calidolactis XXXX 10149 Xxxx XXXX 10149 je xxxxxxxxx x kmenem X 953.
5.4.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx testovací xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx na šikmém xxxxxx xxxxx (5.1.1). Xxxxx agar xx x proužcích xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx kultura, xxxx se xxxxxxx xxxxxxxx 48 xxxxx xxx 63 ± 1xX. Xx xxxxxxxx xxxxxxx zkumavka xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxxx měsíců v xxxxxxxxxx xxx 0 xx 5 oC.
5.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxx)
5.5.1 Xxxxxxxxx xxxxxxx 20 ml xxxxxxx xxxxx (5.1.1) xx xxxxxxxx Petriho xxxxx (4.2.2) x xxxxxx xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5.2 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx do zkumavky xx xxxxxxx xxxxxxxx (5.4.2) x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx spóry xx šikmého agaru. Xxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxx 0 xx 5 °X x použije se xx 36 xxxxx.
5.5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx spór (5.5.2) xx Petriho xxxxx (5.5.1) x důkladně xxxxxxxxx xxxxxxxx látku xx xxxxx povrchu xxxxxx xxxxxxx skleněné xxxxxxx. Xxxxxxxxx 16 xx 18 xxxxx xxx 63 ± 1 °X (4.1.1).
Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (5.4.2) xxxx kultury xxxxxx 36 xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x časovém xxxxxxxxx xxxxxxxxx 36 xxxxx.
5.5.4 Xxxxxxxx pipetou (4.2.4) xxxxxxx 10 ml xxxxxxxxxxx vody xx Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (5.5.3) x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx spór do xxxxx (4.2.3) obsahující 250 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vody. Xxxxx xxxxxxx a důkladně xxxxxxxxx. Kultury, xxxxx xxxxxx xxxxx přeočkovány, xx xx xxxx xxxxxxxxx x chladničce xxx 0 xx 6 °X.
5.5.5 Xx 16xx xx 18xx xxxxxxxx inkubaci xxx 63 ± 1 °X xx agarovém xxxxx by suspenze xxxx měla xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx mikroorganismů xxxx 5 a 10 xxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxx spór xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, a xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx, měla xx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx kultury (5.4.2).
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx médium (5.1.2), poté xxxxxxxx xx 55 °X.
5.6.2 Xxxxxx část xxxxxxxx xxxxxxxxx spór (5.5.4) x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (5.6.1) xx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx. Důkladně xxxxxxxxx.
5.6.3 Přenést do xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx (4.2.6) 0,3 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.6.2), xxx se xxxxxxxxx 5 mm xxxxxx, xxxx uzavřít xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx nebo, x xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, poté xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx 12 xxxxx ve xxxxxx xxxxxx.
5.6.4 Xxxxxxxx/xxxxxx xxxxx xxx použity týž xxx, xxx xxxxx xxx rovněž skladovány xxxxxxx xxxxxx xxx 0–6 °X, xxxxx xxxx xxxxx po xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx do 24 xxxxx po xxxxxx, x do xx xxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxx 0-5 °X. Xxxxx xxxx xxxxx otestovat xxxxxx xx 24 xxxxx, xxxx xx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (−30 °až - 15°X), aby xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.2 Čitelně x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx (5.6). Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx. Umístit xx xxxxxxxx stojánku (4.1.3) xxxxx xxxxxxxxxx pro xxxxxx a xxxxx (5.2 x 5.3).
6.3 Xx xxxxx zkumavky/ampule xxxxxx 50 xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (5.1.4).
6.4 Xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx (4.1.4) přenést 0,1 xx xxxxxx do xxxxxxxx zkumavky/ampule. Xxx xxxxxxxxx každého vzorku xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx stříkačku.
6.5 Postup xxxxx xxxx 6.4 xx opakuje xxxxxxx xxxxxxxx za použití xxxxxxxxxxxx xxxxxxx penicilinu xxxxxxxxxxxx 0,004 μg/ml (= 0,0067 IU/ml) xxxxxxxxxx xxxxxxx vzorku xxxxx (5.2.3).
6.6 Xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.4 xxxxxxxx stejným způsobem xx použití xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.3) xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
6.7 Xxxxxxx zkumavky/ampule x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx 2½ až 2¾ xxxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxxxxx 63 ± 1 °X (4.1.2).
6.8 Xxxxxxx xxxxxxxx xx zkumavkami/ampulemi x vodní xxxxx.
6.9 Xxxxxxxxx xxxxx agarového xxxxx (viz 7).
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx média xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx roztokem xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx "xxxxx xxxxxxxxx" xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx 39. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (6.5) xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx citlivé.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx agarového xxxxx nebo nepravidelné xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxx mléka xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx 39.
7.3 Xxxxx zabarvení xxxxxxxxx xxxxx xx zkumavkách/ampulích xxxxxxxxxxxx xxxxxx mléka xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx mléka xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
7.4 Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx zkumavkách/ampulích, včetně xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx spóry x xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx s čerstvě xxxxxxxxxxx testovacím xxxxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Potvrdit xxxxxxxx xxxxx vzorků x reakcemi xxxxxxxxx x 7.1 x 7.2 podle metody "X".
Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx mléka xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X. Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
1. Předmět x oblast použití
Tento xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx penicilinu nebo xxxxxx xxxxxxxxxx, jakož xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx (X.7.1) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (X.7.2).
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxx různá xxxxxxxxxxx
Xxx X.1.
2. Xxxxxxxx
2.1 Xxxxxx mléka xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx inhibiční xxxx xxxxxxx 2 xx xxxxx disku.
2.2 Xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx (2.1), x xx xxxxxxx byla xxxxxxx penicilináza (xxxx-xxxxxxxxx), xxxxxxxxx čirou xxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx látkou je xxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
2.3 Xxxxx tato xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx (2.2) xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xx xxx jiné reziduum [xxx xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx X, kapitola XX, A.1.f) x 2x)].
Xxxxxxx polosyntetické xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx cloxacillin xxxxx, xxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx xxx identifikovány xxxx xxxxxxxxxx (xxx 7.3).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, které xx xx vyšetřit, xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. calidolactis. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Čirá zóna xxxxx disku ukazuje, xx jsou x xxxxx xxxxxxxx látky xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx. Velikost xxxx xxxx mimo jiné xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxx inhibiční xxxxx x xxxxx.
4. Xxxxxxxxx, xxxxxxx ze xxxx x vybavení
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxx X.4.1.
4.1.2 Xxxxx lázeň, nastavitelná xx 80 ± 1 °C.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
Xxx X.4.2.
4.3 Xxxxxxxx xxxxx, neobsahující xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx 9 až 13 xx, xxxxxxx xxxxxxxxxx asi 130 xx xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxx x exsikátoru).
5. Xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx.
Xxxxxxxx složky kultivačních xxxxx xxxx xxx xxxxxx xxx bakteriologické xxxxx. Musí xx xxxxxx xxxxxxxxxxx voda xx skle xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx čistoty. Voda xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1 Xxxxxxxxxx xxxxx
5.1.1 Xxxxx agar (X.5.1.1)
5.1.2 Xxxxxxxxxx médium xxx xxxxxxx inhibičních xxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5 x |
|
Xxxxxxx |
1 x |
|
Xxxxxx trimethoprimu xx tetroxoprimu (X.5.1.3) |
10 xx |
|
Xxxx |
10–15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx vlastností xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx ve xxxx, poté xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo tetroxoprimu xxxxxxx hodnotu xX, xxx po sterilizaci xxxx 8,0 + 0,1 při 25 °X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X.
5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx
Xxx X.5.2.
Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (8) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek (X.5.3) v xxxxxx xxxxxxxxxxxxx:
x) 0,004 μx/xx (0,0067 IU/ml)
b) 0,006 μx/xx (0,01 IU/ml)
c) 0,03 μx/xx (0,05 XX/xx)
x) 0,06 μx/xx (0,01 IU/ml).
5.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxx
5.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx penicilinázy (xxxx-xxxxxxxxx) xx sterilní xxxxxxxxxxx xxxx s xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 1000 X/xx. Xxxxx roztok, xxxxxxx rozdělený xx xxxxx dávky, je xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxx 0 °C xx 5 °C.
Poznámka
Pro penicilinázu xxxxxxxxxx jednotná mezinárodní xxxxx. Xxx účely xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx deset xxxxxxxx penicilinázy stačí xx inaktivaci 0,6 μx (= 1 XX) penicilinu. X xxxxxxxxxxxx x neznámou xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxx proto xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.3.2 Xxxxxxx roztoku xxxxxxxxxxxx xx možné xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx penicilinázou, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx organismus
Viz X.5.4.
5.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxx)
Xxx X.5.5.
5.6 Xxxxxxxx Xxxxxxx misek
5.6.1 Xxxxxx rozpustit xxxxxxx xxxxxx xxx detekci xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), xxxx zchladit na 55 xX.
5.6.2 Xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx spór (5.5) x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx detekci xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, a xxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx (X.4.2.2), xxxxxx xxxxxxx xx 55 °X, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xx vytvořila 0,6 xx 0,8 xx xxxxxx. Pro Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx 140 xx xx xxxxx xxx 15 xx xxxxxxxxx xxxxx, aby xx vytvořila 0,8 xx xxxxxx.
5.6.4 Umístit Xxxxxxx xxxxx na xxxxxxx, vodorovný xxxxxx, xxxxx vodorovnost xx xxxxx xxxxxxxxx, sejmout xxxxx x nechat xxxxxxx xxxxxx ztuhnout. Xx ztuhnutí xxxxx, xxxxxx xxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xx xxxx xxxxxx, xxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx povrchu xxxxxxxxx xxxxx.
5.6.5 Xxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxx misky se xxxxxxx nejlépe xxxxx xxx xxx, xxx xxxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx týdny, xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx polyethylenového xxxx x xxxxxxxxxx xx při 5 °X.
5.6.6 Xxxxxxx xxx Xxxxxxx misek, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
6. Postup
6.1 Xxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 U vzorků x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx "xxxxxx X" (X.7.1 x X.7.2) xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx penicilinu.
6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx vzorky 10 xxxxx xx 80 ± 1 °X, xxx xx vyloučil xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
6.1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx přenést xxx 10 ml xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx. X xxxxx xxxxxx xxx 0,4 ml xxxxxxx penicilinázy (5.3) x xxxxx xxxxxxxxx.
6.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxx látek
6.2.1 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx (4.3) xx xxxxxx xxxxx (6.1.2) pomocí xxxxx x suché xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxx. Naplocho položit xxxx xx povrch Xxxxxxx misky (5.6) x xxxxx přitlačit xxxxxxxx.
6.2.2 Disky xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx být vzdáleny xxxxx od xxxxxxx xxxxxxx 20 xx x od xxxxxx xxxxxxx 10 mm.
6.2.3 Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx disky (4.3) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.2) xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx 2 % xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx; při xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
6.2.4 Xx xxxxxxxxx rozmístění xxxxx xxxxx na xxxxxxx xxxxxx x xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx vzhůru x xxxxxx xx xxxxxxxxx 2,5 až 5 xxxxx xxx 63 ± 1 °X.
6.2.5 Xx inkubaci xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx zdroji xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx čiré inhibiční xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx zóny xx změří.
6.2.6 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (6.2.3) xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx nejméně 2 xx xxxx.
6.2.7 Čiré xxxx kolem xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx velkost xx xxxxxx xxxx větší xxx xxxxxxxx popsaná x 6.2.6, xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x testovacím xxxxxxxxx.
6.3 Identifikace x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
6.3.1 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (6.1.2) x se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (6.1.3). Namísto xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 10 xx vzorku xxxxx xx xxxxx xx xxxxxx xxxxx ponořit xxxx napuštěný penicilinázou (5.3.2) a xxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx.
6.3.2 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x 5.2 x) xx x).
6.3.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx inhibičních xxx xxx xxxxxx mléka, xxxxxxxxx xxxxxx penicilinázy x pro xxxxxxxxxx xxxxxxx penicilinu.
7. Interpretace xxxxxxxx (viz 2)
7.1 Xxxxx xx kolem xxxxx napuštěném xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nevytvoří xxxxx xxxx xxxx, ale xxxx xxxx se xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx vzorkem xxxxx, xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx roztokem xxxxxxxxxx (5.2x)), inhibiční xxxxx xx vzorku xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx krystalického xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx vyšší xxx 0,004 μx/xx.
7.2 Xxxxx xx xxxxxxxx hodnota xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx disku xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx průměru xxxx zóny xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx penicilinázy použité x xxxxx xxxxxxx.
7.3 Xxxxx je průměrná xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx průměru xxxx xxxx xxxxx xxxxx xx vzorkem xxxxx xxxxxxxxx xxxxx 6.1.2, xxxxxx xxxxx obsahuje xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx, xxxxxx sulfonamidů, a xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx nelze xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx. Xxxxxxxxxx peniciliny, xxxx je xxxxxxxxxxx xxxxx, nemusejí být xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxx tudíž xxxxxxxxxxxxx xxxx inhibiční xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, inhibiční látky xxxx xxx penicilin xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx xxxxxx penicilinu
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx provedeno buď xx sestrojení xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx penicilinu x mléce (5.2 x) xx d)).
8.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx lineární xxxxxxxx xxxx xxx10 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x průměrem xxxxxxxxxxx xxx, standardní xxxxxx xxx sestrojit xx xxxxxxxxxxxx papír xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx penicilinu xx xxxxxxxxx x xxxxxx xxx na xxxxxx. Xxxxxxxxx zóny xx xxxxxxxx xx xxxxxxx průměru zdvojeného xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x zakreslí xx xxxxxxxxxx xxxxxx.
8.3 Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx pomocí xxxxxxx nebo je xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxx je poloměr xxxxxxxxxxx zón xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, avšak xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx disků.
9. Xxxxxxxxx výsledků
9.1 Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx než 0,004 μx/xx (xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx penicilin.
9.2 Xxxxxxxxxxxxxx (x) x xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X)
Xxxxx nejsou x xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXX PATOGENNÍCH XXXXXXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
V xxxxxxx x požadavky směrnice 85/397/XXX, xxxxxxx X, xxxxxxxx XXX xxxx 2, xxxxx postup xxxxxxxxxxx xxxxxx, které xxxx být xxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx v pasterovaném xxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx, které jsou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x potravin.
Pasterace xx xxxxxxxx, které xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxx X, xxxxxxxx XXX xxxxx 2 uvedené xxxxxxxx, pokud jde x počítání kolonií xxx 30 °X x 21 °X, xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xx detekci xxxxxxxx xx nezbytný xxxxx xxxxx, pokud existuje xxxxxxxxx, že xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx propuknutím otravy xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxx
Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx musí xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x zdravotní xxxxxxxxxxxx xxx tepelně xxxxxxxx xxxxx pro xxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx patogenních xxxxxxxxxxxxxx xx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx úrovni.
4. Zpráva x výsledku
Pro xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx být výsledek xxxxxxxx takto:
Počet mléka xx xxxxxxxx, xxxx "xxxxxxxxxx" či "nepřítomnost" x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, který xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Zpráva xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.