Rozhodnutí Komise
ze dne 14. února 1991,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx analýzy x xxxxxxxxx syrového xxxxx x tepelně xxxxxxxxxx xxxxx
(91/180/XXX)
XXXXXX EVROPSKÝCH SPOLEČENSTVÍ,
s xxxxxxx xx Xxxxxxx x založení Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxx 85/397/XXX ze dne 5. xxxxx 1985 x hygienických a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx obchodu x tepelně ošetřeným xxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx [1] xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 89/662/XXX [2], x xxxxxxx xx xx. 10 xxxx. 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x tomu, xx xxxxx čl. 10 xxxx. 2 Komise xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, které xx mají xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, obsahu xxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxx pasterované mléko xx nezbytné xxxxxxxx xxxxxxx metody xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx patogenů, xxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií, xxxxxx mikroorganismů, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx peroxidázy, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, že xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x XXX xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxx mikroorganismů, nepřítomnosti xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx k tomu, xx x technických xxxxxx xx vhodné xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx dodržování xxxxxxxx xxxxx; že xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx podmínek, xx xxxxxxx se xxxxxxxxx rutinní xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx; xx x očekávání xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xx to, xxx xxx xxxxxxxx norem xxxxxxxx 85/397/ES xxxx xxxxxxx vhodné xxxxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx stanovení referenčních xxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx analýzy x xxxxxxxx spolehlivosti xxx xxxxxxxxx jednotného xxxxxxx xxxxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, že opatření xxxxxx rozhodnutí xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
XXXXXXX TOTO XXXXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Referenční xxxxxxx xxxxxxx x testování xxx xxxxxx mléko xxxx tyto:
- xxxxxxxxx xxxx mrznutí,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx antibiotik x xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 2
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x testování xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx mrznutí,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx fosfatázy,
- stanovení xxxxxxxx peroxidázy,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 21 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií – xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx patogenních xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 3
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxx XXX mléko x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx tyto:
- stanovení xxxx mrznutí,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 30 °X,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 4
Použití xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx, stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x odběr xxxxxx se musí xxxxxxx podle xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx X.
Xxxxxx 5
Referenční xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx v článcích 1, 2 a 3 jsou popsány x příloze XX.
Článek 6
Xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx do 31. prosince 1992, xxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Článek 7
Xxxx rozhodnutí xx určeno členským xxxxxx.
V Xxxxxxx xxx 14. xxxxx 1991.
Za Xxxxxx
Xxx Xxx Xxxxxx
xxxx Xxxxxx
[1] Xx. xxxx. X 226, 24.8.1985, x. 13.
[2] Úř. xxxx. X 395, 30.12.1989, x. 13.
XXXXXXX I
OBSAH
I. Obecná xxxxxxxxxx
XX. Odběr vzorků xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka
I. XXXXXX XXXXXXXXXX
1. Úvod
Obecná xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxx výsledků, kritérií xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x testování. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx musí xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxx
2.1.1 Pokud xxxx stanoveno xxxxx, xxxx použitá x xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxx musí xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx odpovídající xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxxxx účely xxxx xxx xxx xxxxx, které xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.1.2 "Xxxxxxxxxxxx" xxxx "xxxxxxx" (xxx xxxxxxx xxxxxxxxx) xx xxxxxx "xxxxxxxxxxx ve vodě" xxxx "xxxxxx vodou".
2.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxx není xxxxxxxxx xxxxx, všechny používané xxxxxxxxxx xxxx mít xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Přístroje x xxxxxxx
3.1 Xxxxxx xxxxxxxxx x pomůcek
Příslušný seznam xxxxxxxxx x pomůcek xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxx xxxxxxxxx x pomůcek xx xxxxxxxxxx použití x se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.2 Analytické xxxx
"Xxxxxxxxxxxx xxxxxx" xx rozumí xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx na 0,1 xx.
4. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xx zprávě o xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (5.1) xxx xxxxxxxxxx metodu. Xxxx xxxx toto xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx musí xxxxxxxx, jinak xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx není xxxxxxxxx jinak, xxxxxxxx xx vypočítá x xxxxxxxxxx hmotnosti vzorku.
5. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx
5.1 Kritéria xxxxxxxxxxxxx uvedená xxx xxxxx postup xxxx xxxxxxxxxx takto:
5.1.1 Opakovatelnost (x) xx xxxxxxx, xxx kterou se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx byly xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx výrobkem za xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx, stejný xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxxx).
5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) je hodnota, xxx kterou xxxx xxxxxxxxx xxxxxx dvou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx testů, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x týmž xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx, různé xxxxxxxxxx x/xxxx xxxxx xxxx).
5.1.3 Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, hodnoty xxx kritéria xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x příslušných odstavcích xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx 95 % xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx podle xxxxxxxx XXX 5725, xxxxx xxxxxx, 1986. Xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx pokusů, xxxxxxxxxxx ve spolupráci, xxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx tyto xxxxxx, xxxxxxxxx ve xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx. V xxx xxxxxxx byly xxxxxxx opakovatelnosti x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1.4 Kruhové xxxxx x nezbytné xxxxxx by xxxx xxx naplánovány a xxxxxxxxxxx v souladu x xxxxxxxxxxxxx pokyny.
6. Xxxxxx o xxxxxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxxxx musí xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx výsledky. Xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx podrobnosti xxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxxxxxx v metodě xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx úplnou identifikaci xxxxxx.
XX. ODBĚR XXXXXX XXXXXXXX X XXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXX
1. Předmět x xxxxxx použití
Tento xxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx syrového a xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxx vzorků, xxxxxxxx x skladování vzorků xx xxxxxxx xxx xxxxxx mléko xxxxxx xxxxxxxxxx a xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx skladovacích a xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx x bodech 2, 4.4, 5 x 6 xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx ošetřeného xxxxx xxxxxxxx k přímé xxxxxxxx.
2. Xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x konvích, nádržích xxxx. provedou xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx byli xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx laboratoř xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx pověřené xxxxxxx xxxxxx v metodách xxxxxx, xxx bylo xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx budou xxxxxxxxxxxxxxx x x souladu x xxxxx šarží.
Pokud xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx testovací laboratoř xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx vzorků byla xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx
3.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx pro odběr xxxxxx musí xxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx oceli xxxx x xxxxxx vhodného, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx být xxxxxxxx s xxxxxxx xx předpokládané xxxxxxx (xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx, xxx.). Plunžry x xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxx mít xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx promíchání xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxx 50 xx.
Xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx, kovová nebo x xxxxxxxx plastu.
Materiály xxxxxxx při xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxx x xxxxx) xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx změnu xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx materiál x xxxxxx xx xxxxxx xxxx xxx xxxxx, xxxxx, hladký xxxxxx xxx trhlin x xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx.
3.2 Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxx) musí xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx 3.1 x xxxx být xxxxxxxx.
Xxxxx se pro xx sobě xxxxxx xxxxxx vzorků použije xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xx každém xxxxxx vzorku vyčištěno x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx s xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx laboratoř xxxx příslušný orgán, xxx nedošlo x xxxxxxxxx výsledků xx xxxx jdoucích xxxxxx.
4. Xxxxxxxx odběru xxxxxx
4.1 Xxxxxx xxxxx
Xxx xxxxxx xx testy, xxxxx xxxx být xxxxxxxxx, xxxxx musí být xxxx odběrem xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx ručně, xxxx mechanicky.
Vzorek musí xxx odebrán xxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxxx.
Xxxxx xx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx více xxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx, jako první xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx pro mikrobiologické xxxxxxxxx.
Xxxxx vzorku musí xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx použitých nádob xxxx xxx xxxxxx, xxx xxxx tyto xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x při xxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx však xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxx xxxxx vzorků
4.2.1 Xxxxx xxxxxx x věder x xxxxx xx xxxxx
X rychlému xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx ve xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx a xxxx, xxxxxxx dbát xx xx, xxx xx xxxxx řádně xxxxxxxxxx x xxx xx xx xxxxx konve xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx, xxxxx xx reprezentativní xxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.2 Xxxxx z xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx x zemědělském xxxxxxx
Xxxxxx xxxxx mechanicky nebo xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx dostatečné xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxx mléka xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx míchačky, xxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxx xxxxxx z xxxxx xxx
Xx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxx do misky xxx. Xx účelem xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx rozdělení xxxx může být xxxxxxxx další xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxx, x xxx xx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx kapacitu misky xxx, odebrat reprezentativní xxxxxx x xxxx xxxxxxx postupem xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.4 Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx
Xxxx je množství xxxxx, x xxxxx xx má provést xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxx nádob, x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx každý xxxx. Xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxx nemusí xxx xxxxxxxx testovány, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx v poměru x xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx, ze xxxxx xxx xxxxx xx xxxxxx odebrán. Po xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxx) xxxxxx (xxxxxx) x těchto xxxxxxxxx množstvích.
4.2.5 Odběr xxxxxx x xxxxxxx xxxxx – skladovací xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx
4.2.5.1 Xxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx, skladovacích xxxxxx, xxxxxxxxxxxx kamionů xxxx cisternových vagónů xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.5.2).
Xxxxx promíchání xxxxxx na xxxx, xx xxxxxx xxxx xxxxx x xxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx, xx postup xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vhodný xxx xxxxxxx plánovaného testování. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx značně xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx provedených na xxxxxxxx xxxxxxxxxx buď x xxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx mléka z xxxxx. Způsob promíchání xxxxx (syrového xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx) xx xxxxxx, pokud xx xxxxxx xxxxxx xxxx u obou xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx 0,1 %.
Xx xxxxx nádobě x xxxxxxxxxxx otvorem xx xxxxxx xxxxx xxxx x místě xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx celý xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. X případě xxxxxx xxxxxx z vypouštěcího xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.5.2 Promíchání xxxxxx xxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxxxxx nádrží, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx:
- mechanickou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx nádoby x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx xxxx xxxxxxxxx poháněnou xxxxxxxxxxx xxxxxxx x umístěnou x průlezovém xxxxxx; xxxxxxxx xx ponořena x mléce,
- x xxxxxxx cisternových kamionů xxxx xxxxxxxxxxxx vagónů xxxxxxxxx mléka x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx napojena xx xxxxx x xxxxxxxx xx průlezového xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx, stlačeným x xxxxxx vzduchem. Xxxxxxx xx minimální xxxx x objem xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx žluklé xxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx odběr vzorků
Automatické x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx dodaného xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx vybavení xxxx xxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, které xxxxxxxxx odpovědný orgán. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, z xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx,
- poměr xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxx xxxxxxx x minimálním xxxxxxx vzorku),
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx vzorek x xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx může příslušný xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx orgán xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, ze kterého xxxx být xxxxxxxx xxxxxx,
- minimální xxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx přenos,
- xxxxxxxxx, které xxxx xxx provedeno, nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.
4.4 Xxxxx vzorků xxxxxxx ošetřeného mléka xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x přímé xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, vzorky se xxxxxxx skládají x xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nádob. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx ošetření, x xx, pokud xx xx xxxxx, ihned xx xxxxxxxxxx (v xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x den pasterace).
Z xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka (xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx metodou XXX x xxxxxxxxxxxxxxx) se xxxxxxx takový xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx vyšetření, xxxxx xxxx xxx provedena, x xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx testovací xxxxxxxxxx xxxx podle xxxxxx jiného příslušného xxxxxx.
5. Identifikace vzorku
Vzorek xx xxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx kódem, xxxxx xxxxxxxx jeho xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx bod 2).
6. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxx příslušného xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx připraví xxxxxxxxx laboratoř xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx x podmínek xxxxxxxx x skladování, které xxxx xxx xxxxxxxx x době mezi xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, x xx xx základě xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxx.
Xxxxxx stanoví xxxx:
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx na xx, xxx vzorky xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Je-li je xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx, musí xxx skladován xx xxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxx určené xxx xxxxxxxxxxxxxxx testování xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx teplotách 0 oC až 4 oC. Xxxx xxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxxx x x xxxxxx případě xxxxx xxxxxxxxxx 36 xxxxx. Příslušný xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 0 xX xx 6 xX, xxxx-xx xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxx 24 hodin,
- xxxxxx pasterovaného xxxxx xxxxxx xxx mikrobiologické xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx x skladovány xxx teplotách 0 xX xx 4 xX. Doba xxxx xxxxxxx a testováním xxxx xxx co xxxxxxxxx a x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 24 xxxxx,
- xxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx skladovány x xxxxxxxxx xxxxxxxx laboratoře x xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxx xxx xx nejkratší.
Speciální xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, která je xxxxx přijmout pro xxxxxxx testy, jsou xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
XXXXXXX X
XXXXX
X. Stanovení xxxx mrznutí
II. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
XXX. Stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 30 °X
X. Stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 21 °C
VI. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx – xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X
XXX. Xxxxxxxxx obsahu xxxxxxxxxxx xxxxx
XXXX. Xxxxxxx antibiotik x xxxxxxxxxxx
XX. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
X. STANOVENÍ XXXX XXXXXXX
1. Předmět x xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx plnotučného, xxxxxxxxxxx, odstředěného, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, UHT xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx mléka xxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx), v xxxx xx xxxxxxxxxxx řízená xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx nahrazuje xxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xx plató xxxxxx xxxxxxx, kdežto xxxxx typ xx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx tak, xx xx xxxxxxx mrznutí xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx. Vzhledem x tomu, xx xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx bodu xxxxxxx různých xxxxx xxxxx, xxx x xxxxxx bodu xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxx, tento referenční xxxxxx vyžaduje xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx s pevně xxxxxxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx cizí vody x xxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx vyšší xxx 0,18 g xxxxxxxx mléčné xx 100 xx (xxx xxx 7.4).
2. Definice
Bod xxxxxxx xxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx v souladu x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxx (°X).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx vzorek xxxxx xx v závislosti xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x mechanickou xxxxxxx xx vyvolá jeho xxxxxxxxxxxx, která xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx x xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxxx postupem xxxx xxx vzorky xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx dva standardní xxxxxxx. Za xxxxxx xxxxxxxx xxxxx udává xxx xxxxxxx xxxxx xx stupních Xxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, zejména:
4.1 Kryoskop
Kryoskop xx xxxxxx z xxxxxxxxxxx řízené xxxxxxxx xxxxx, termistorového xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx) x příslušným xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nebo jiného xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx a xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx i xx xxxxxxxx xx xxxxxx.
4.1.1 Chladicí xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxx.
4.1.1.1 Xxxxxxx xxx
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx, xxx teplotní xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx v kapalině xxxxx xxxxx xxx 0,2 °X. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx ± 0,5 °X xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx, xxx v xxxxx xxxx xxxxxxxxx konstantní xxxxxxx xxxxxxxx. Celá xxxxxx xxxxxxxx na xxxxxx pod xxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxx chladicí xxxxxxxxx.
4.1.1.2 Xxxxxxxxxx xxx
Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx proudí xxxxxxxxxxx proud xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Teplota xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx ± 0,5 °X xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx výrobcem.
Vhodnou xxxxxxxx xxxxxxxxx je 33 % (X/X) vodný xxxxxx 1,2-ethandiolu (xxxxxxxxxxxxxx).
4.1.2 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx se xxxxxx xx xxxxxxxx sondy x xxxxxxxxxx xxxxxxx 1,80 ± 0,2 xx a x xxxxxxx vodiče xxxxxxxxx 0,31 mm. Časová xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx 2 xxxxxxx x xxxxxxx b (viz xxxxxxxx) xxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxxx, xxx xxx − 0,512 °X xxxxxxx termistoru xxxxxxx xxx teplotu okolí xxxxxxxxx x 0,0005 °X. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx ± 5 %.
Xxxx xx sonda x xxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx skleněné xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx v xxx xxxxxxxx xx xxxxxx x x xxxx, xxxxx xx 44,6 ± 0,1 mm xxx horním xxxxxxx xxxxxxxx (viz xxxxxxx xx xxxxxx 15). Xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx této polohy.
Poznámka:
β xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx
− xX / xX × 1 / X = β / T2
kde:
T xx xxxxxxx ve xxxxxxxx Xxxxxxx
X xx odpor x ohmech xxx xxxxxxx X,
− xX / xX × 1 / R xxxxxxxx xxxxxxxxxx
β xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx použitém xxx xxxxxx xxxxxxxxxx. X běžné xxxxx xx xxxxxxxxxx hodnota xxxxx než 3000.
4.1.3 Xxxxxx x odečítací xxxxxxxx
4.1.3.1 Princip měření
Použitý xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx mrznutí. Xxxxx xx xxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx zůstane xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx ± 0,002 xX xx xxxx xxxxxxx 20 xxxxxx.
4.1.3.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, jejichž xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx ± 10 % x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx 2×10−5°X.
Xxxxxxxx (vyrovnávací) xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx rozsahu x xxxx xxx x 0,3 % xxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx musí xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx stupnice je xxxxxxxxx dílky xx xxxxxxxxx 0,001 °C.
4.1.3.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx rozlišení xx xxxxxxx 0,01 °X x xxxxxxx xx 0 °C xx –1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zařízení x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxx, xxx xxxxxxxx dvou xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx téže xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx 0,001 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx taková, xxx xxx správné xxxxxxx přístroje xxxxxxxxx x xxxxxx bodě xxxxxxx od – 0,400 °C do – 0,600 °C xxxxx chyba než ± 0,001 °X.
4.1.4 Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx testovacího xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx drát o xxxxxxx 1 xx 1,5 mm, xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx,.
Xxxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx její xxxxxx xxxxx xxx xx úrovni xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx asi 1,5 mm xxx xx xxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx rozkmitem xxxxxxx výrobce (nejméně ± 1,5 xx), xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx dotknout xxxxx termistoru xxxx xxxxx zkumavky.
4.1.5 Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx být xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xx činnosti xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx teplota xxxxxx testovacího xxxxxx xxxxxxx k bodu xxxxxxx. X tomu xxxxx lze xxxxxx xxxxxxxx; xxxxxx postupem xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx xxx sekundy xxx, aby xx xxxxxxxx dotýkala xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx.
4.1.6 Xxxxxxxx na xxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx (xxx xxxxxxx 1) jsou xxxxxxxx x 50,8 ± 0,1 xx xxxxxx; xxxxxx průměr xx 16,0 ± 0,1 xx a xxxxxxx xxxxxx xx 13,5 ± 0,1 xx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx o xxxx xxx 0,1 mm.
Zkumavky xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx 29,8 xx (21 xx xxx xxxx xxxxxxxx), xxxxx uvádí objem xxxxxx 2,5 ± 0,1 mm.
4.1.7 Xxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx napětí xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx kolísání xxxxxxxxxxxxxx ± 1 % xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxx kolísá x ± 6 %.
4.2 Analytické xxxx
4.3 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 1000 xx, xxxxx A.
4.4 Xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 130 ± 1 °X
xxxx
Xxxxxxxxxx xxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na 300 ± 25 °X.
4.5 Xxxxxxxxx
5. Činidla
5.1 Xxxx destilovaná v xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx 20 ± 2 °X, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx oxid xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxx sodný, xxxxxxx x.x., xxxxx xxxxx, xxxxxx 5 hodin xxx teplotě 300 ± 25 °C x xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx xxxxxxx 130 ± 1 °X x xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx odpovídající xxxxxxxx (xxx xxxxxxx 1) xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5.2) xx xxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx vodě (5.1), xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x objemu 1000 xx x xxxxxxx xx značku xxxxx x teplotě 20 ± 2 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx dva xxxxxx xxx asi 5 °X v xxxxx uzavřených xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x maximálním xxxxxx 250 xx.
Xxx xxxxxxx roztoků xxxxxxxx xxxxxxx xxx 20 °X
|
x XxXx/x |
°X |
|
6,859 |
-0,408 |
|
7,818 |
-0,464 |
|
8,149 |
-0,483 |
|
8,314 |
-0,492 |
|
8,480 |
-0,502 |
|
8,646 |
-0,512 |
|
8,811 |
-0,521 |
|
8,977 |
-0,531 |
|
9,143 |
-0,541 |
|
10,155 |
-0,600 |
Xxxx použitím xx standardní roztok xxxxxxx xxxxxxxx protřepáním x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, aby xx xx roztoku xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx z xxxxx xxxxxx do xxxxx x xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx x lahví, xxxxx xxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx fungicid (xxxxxxxxx roztok xxxxxxxxxxx 10 x/x).
6. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx kryoskopu
Kryoskop musí xxx nastaven tak, xxx se xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx o xxxx než 1 °X xx xxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx 26–27 °X.
Xxxxxxx xx, xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xx xxx xxxxxx xxxxxxx 12 xxxxx xxxx xxxxxxxxx. Zkontrolovat xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx kapalin.
Vybrat xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxx xxxxxxx xxxx), xxxxxxx xxx xxxxxxx xx xxxxx xxx xxxx těsně pod xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx. Rozdíl xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx by xxxxxxx neměl xxx xxxxx než – 0,100 °C.
(U xxxxxxxxx xxxx x současné xxxx dostupných kryoskopů xx příslušný xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx, xx xx ustálí xx xxxx xxxxxxx xxxx mrznutí x xxxxx rozsahu xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx, jako xxxxxxx x kalibračních roztoků xxxxxxxxx xxxxxxxxxx postup; xxxxxxx musí xxxx xxxxxxx uvést).
Pomocí pipety xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx do xxxxx x čisté xxxxxxxx xx vzorky, xxxx xxxxx pomocí xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxx na vzorky xxxxx (stejný xxxx xxxx, xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx stejné xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx kalibrace, dokud xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx postup x xxxxxx standardním xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx takovým xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx následující odečty xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx, aniž xx xxxx nutná xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx připraven x použití x xxxxx ukazuje xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
7. Xxxxxxxx testovacího xxxxxx
7.1 Xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx vzorky xxx teplotě xxxx 0 °X x 5 °X.
7.2 Xxxxx xx je xxxxxxxx xxxxxxxx odstranit xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxx ve vzorku xx čisté x xxxxx nádoby x xxxxxx opatrně xxxxxxxxx. Xxxxx se použije xxxxx, xxxxx reagovat x xxxxxx x xxxx xxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx teploty.
7.3 Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (mezi 0 x 5 °C) xxxx xx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx teplotu xxxxxxxxxxxxx xxxx zahájením xxxxxxxxx. Xx však nezbytné xxxx xx to, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx mléka xxxx xxx použití xxxxxxx xxxxxxx.
7.4 Stanovit xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx současně xx xxxxxxxxxx bodu xxxxxxx. Vzorky, xxxxxxx xxxxxxxx přesahuje 0,18 x kyseliny xxxxxx xx 100 xx xxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx.
7.5 XXX xxxxx x sterilizované xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 20 xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
8. Postup
8.1 Předběžné xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx, zda xxxxxxx x teplota xxxxxxxx xxxxxxxx jsou x xxxxxxx s pokyny xxxxxxx, xxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxx na xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx se, zda xx chladicí kapalina xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx. Pokud xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx 12 hodin, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx chladicí xxxxxxxx, xxxxxx míchačky a xxxxxxxx rozkmit xxxx xxxxxxx.
8.2 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx bod xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxx xxxxxxx (například xxxxxx x xxxxx xxxxxxx – 0,512 °X), dokud xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx xx sobě xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx nebudou xxxxx o xxxx xxx 0,001 °C. Xxxxx se xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xx bodu mrznutí xxxxxxxxxxxx roztoku x xxxx než 0,002 °X, xxxxxxxx xx xxxxx kalibrujte, xxx xx popsáno x xxxx 6.
Pokud xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
8.3 Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx protřepáním x xxxxxxxxxxx otáčením. Xxxxx neprotřepávat standardní xxxxxx xxx xxxxxx, xxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx vzduch.
Pomocí xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx xxxxx do xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx vzorky. Xxxxxxx xx, xx jsou xxxxx x xxxxxxxx xxxxx x xxxxx, xxxxx xx to xxxxxxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx jemnou, xxxxxx x xxxxxx nepouštějící xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xx kalibrovaného xxxxxxxxx podle pokynů xxxxxxx. Mléko xx xxxxxxx a xxxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx určené xxxxxxxx x přesností na 0,1 °X.
(X některých xxxxxxxxxxxxx přístrojů xx xxxxx odečíst xxxx xxxxxxx x digitálního xxxxxxxxx; x ručních xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xx xx xxxxxxx, xxx mrznutí xxxxxx, xxxx se xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxx.)
Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx, xxx je xxxxxxxx xxxxxxxxxxx teplotního xxxxxxx, xxxxxxxxx xx ukončí x xxxxxxxx se x jiným xxxxxxx xxxxx. Pokud tento xxxxx vzorek rovněž xxxxxx xxxx dosažením xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx 45 °X x 5 xxxxx se xxxxxxx xx této teplotě, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Teplota xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xx hodnotu, xxxxx zůstane po xxxxxxx dobu konstantní, x xxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxx odpovídá xxxxxxxxx teplotě xxxxxxxx xxxxx této xxxx x tuto xxxxxxx xx nutné zaznamenat.
Poznámka:
Doba, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx mrznutí x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxxxxx xx xxxxxx a xxx vodu x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx pro xxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx maximální xxxxxxx.
Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, vyjmout xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxx x otřít xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx jemnou, xxxxxx a chlupy xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx druhé xxxxxxxxx x jiného xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx rozdíl xxxx naměřenými body xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (0,004 °X), xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x jiného xxxxxx. Xxxxx jsou xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx 0,004 °X, xxxxxx se x použijí se xxx výpočet konečného xxxxxxxx.
8.4 Chlazení xxxxx
Xx xxxxxxx přístroje xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx na xxxxxx xx xxxxx xxx vzorky x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx sonda xxxxxxx x xxxxxx.
(X xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx to xxxx možné; v xxxxxxxx případech je xxxxxxxx se xxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx měření xxxxx zchlazena, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxxx shodné xxxxx.)
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Výpočet
Pokud xx xx provedení xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx potvrzena, xx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxx dvou xxxxxxxxxxxx xxxxxx získaných xxx xxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx tři xxxxxxxxx místa.
Pokud xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxx ukazuje tento xxxxxxx:
Xxx xxxxxxx (°X)
|
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx |
Xxxxxx |
|
|
-0,544 |
-0,545 |
-0,544 |
|
-0,545 |
-0,546 |
-0,546 |
9.2 Xxxxxxxxxxxx
9.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x): 0,004 °X
9.2.2 Reprodukovatelnost (X): 0,006 °C
Obrázek 1
Schéma xxxxxxxxxxxxxx kryoskopu
4.1 (poloha xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx ke skleněné xxxxxxx termistoru x xxxxxxxx)
XX. XXXXXXXXX AKTIVITY XXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxxx
2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx alkalické fosfatázy xxxxxxxx xx výrobku. Xx vyjádřena množstvím xxxxxx x μg xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx mléka xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx mléka xx xxxxxxxxx, xxxxx je xxxxx než 4 xx xxxxxx na 1 xx.
3. Princip
Aktivita xxxxxxxxx xx vzorku xxxxxx fenol x xxxxxxxxx fenylfosfátu dvojsodného. Xxxxxxxx xxxxx reaguje x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (namodralé xxxxx), xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx měří při 610 xx. Xxxx xx xxxxxxx porovnání xx vzorkem, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx byl xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.1 Rozpustit xx vodě 50,0 x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) [Xx(XX)2.8X2X] x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.1.2 Xxxxxxxxx xx xxxx 22,0 g xxxxxxxx borité (X3XX3) x doplnit na 1000 xx.
4.1.3 Zahřát 500 ml xxxxxxx xxxxxxx na 50 °X, xxx xxxxxxx xxxxxxx, promíchat, xxxxxx xxxxxxxx xxx xx 20 °X, x xxxxxxx nutnosti xxxxxxx xxxxxxx pH xx 10,6 ± 0,1 xxxxxxxx roztoku 4.1.1 xxxx 4.1.2. Xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx uzavřené xxxxxx.
4.1.4 Xxxx xxxxxxxx zředit xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx.
4.2 Tlumivý xxxxxx xxx xxxxxxxx zabarvení
Rozpustit xx xxxx 6,0 x xxxxxxxxxxxxx sodného (XxXX2) xxxx 12,6 x XxXX2.4X2X a 20,0 x xxxxxxxx xxxxxxx (XxXx) x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.3 Tlumivý xxxxxx xxx xxxxxxx vzniklého xxxxxxxxx
Xxxxxx 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx zabarvení (4.2) xxxxx na 100 xx.
4.4 Xxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx 0,1 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, prostý xxxxxx, xx 100 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.3) xxxx 0,5 x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx 4,5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2), xxxxxx dvě xxxxx xxxxxxx XXX (4.6) x nechat xxxx 30 minut xxx xxxxxxxx xxxxxxx. Vzniklé xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 2,5 xx x-xxxxxxxx x xxxxxx xxxx, dokud xx xxxxxxx-1 xxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx-1. V xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx je možné xxxxxxxxx x chladničce xxxxxxx xxx; xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, x xx xxxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxxxx xx 100 ml xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.3).
4.5 Xxxxxxxxx xxxxx-xxx
Xxxxxxxxx xx xxxx 3,0 x xxxxxx xxxxxxxxxxx (ZnSO4 · 7X2X) x 0,6 x xxxxxx xxxxxxxxx (XxXX4 · 5X2X) x doplnit xx 100 ml.
4.6 Xxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx BQC)
Rozpustit x 10 ml 96 % (V/V) xxxxxxxx 40 ± 1 mg 2,6-dibromchinonchlorimidu (XXX) (C6H2Br2ClNO6).
Skladovat x xxxxx láhvi x xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx barvu xxxx je starší xxx xxxxx xxxxx.
4.7 Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (XX)
Xxxxxxxxx xx vodě 0,05 g síranu xxxxxxxxx (CuSO4.5H2O) a xxxxxxx xx 100 xx.
4.8 Xxxxxxxxxx roztok xxxxxx
4.8.1 Xxxxxxx 200 ± 2 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x přelít do xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 100 xx, xxxxxx vodu, xxxxxxxxx x doplnit na 100 ml. Xxxxx xxxxxx může xxx xxxxxxxxx v chladničce xxxxxxx xxxxxx.
4.8.2 Zředit xxxxx 10 xx xxxxxxxxx roztoku, xxxxxxx xx 100 xx x xxxxxxxxx. 1 xx xxxxxxxx 200 μx xxxxxx.
5. Xxxxxxxxx x pomůcky ze xxxx
Xxxxxxxx:
x) Veškeré pomůcky xx skla, xxxxx x zátky x xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx oplachování xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx parou.
b) Xxxxxxx typy plastových xxxxx xxxxx způsobit xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx používání xx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
5.1 Xxxxxxxxxx váhy
5.2 Xxxxx lázeň nastavitelná xx 37 ± 1 °X.
5.3 Spektrofotometr xxxxxx xxx xxxxxx xx vlnové xxxxx 610 nm.
5.4 Zkumavky, 16 nebo 18 × 150 mm, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 5 xx x 10 ml.
5.5 Xxxxxx
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx. x xxxxxxx 5 cm.
5.7 Xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx 9 xx xxx xxxxxxx xxxxxxxx filtrace.
5.8 Xxxxxxx xxxxx xxx přípravu xxxxxxxxxxxx roztoků.
6. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
x) Stopy xxxx xxxx potu xxxxx xxxxxxxx falešně xxxxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxx se jim xxxxxxx. Je xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx skladovat xxxxxx v chladničce, xxxxx xx xxxx xxx xxx dny.
6.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx pipety xxxxxx 1 xx xxxxxx xx xxxxx xx xxxx zkumavek (5.4), xxxxx zkumavku xxxxxx jako xxxxxxxxx xxxx xxxxx pokus.
6.3 Xxxxxxxxx
6.3.1 Xxxxx vzorek xxxxxxxx xxx minuty xx vroucí xxxx; xxxxxxxx x xxxxxxx x vroucí xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx folií, xxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.2 Xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx 10 xx xxxxxxx xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxxxxx.
6.3.3 Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 60 xxxxx xx vodní xxxxx (5.2) a xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxx) promíchat xxxxxx xxxxx.
6.3.4 Stejně xxxx v xxxx 6.3.1 xxxxxxxx dvě xxxxxx xx vroucí xxxx. Xxxxxx zchladit xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.5 Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxxxx xxxxx-xxx (4.5) x xxxxx xxxxxxxxx.
6.3.6 Xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx x x případě xxxxxxxx filtrovat znovu, xxxxx není xxxxxxx xxxxxxxx čirý; xxxxxxxxxx 5 xx xx xxxxxxxx.
6.3.7 Přidat 5 xx xxxxxxxxx roztoku xxx xxxxxxxx zabarvení (4.2).
6.3.8 Přidat 0,1 xx roztoku XXX (4,6), promíchat x 30 minut xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.9 V xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx pokusem xxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.3.10 Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxx 6.3.9 převyšuje absorbanci xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 20 μg fenolu xx xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.4.4, opakovat xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku x xxxxxxx xxxxxxx části xxxxx xxxxxxxxxxx vzorku, xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx varu, xxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.4 Sestrojení xxxxxxxxxx xxxxxx
6.4.1 Na xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx fenolu (4.8.2) xxxxxxxxx vyhovující xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx obsahujících 0 (xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx), 2, 5, 10 a 20 μx xxxxxx na xxxxxxxx. Xx xxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxx pomocí xxxxxx 1 xx vody x 1 xx xxxxxx standardních roztoků xxxxxx.
6.4.2 Do xxxxx xxxxxxxx přidat 1 xx roztoku xxxxxx xxxxxxxxx (4.7), 5 xx tlumivého roztoku xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.3), 3 xx xxxx x 0,1 ml roztoku XXX (4.6); promíchat.
6.4.3 Xxxxxx xxxxxxx zabarvení 30 minut xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
6.4.4 X xxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx pokusem xxxxxx absorbanci při xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.4.5 Xx xxxxxxx xxxxxx absorbance (6.4.4) xxxxxxxxx pro každé xxxxxxxx přidaného xxxxxx (6.4.1) vypočítat xxxxxxxx xxxxxx metodou xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxx a xxxxxx
7.1.1 Xx základě xxxxxx xxxxxxxxxx (6.3.9) xxxxxxxxx xxxxxxxx fenolu xxxxxx xxxxxxxx přímky (6.4.5).
7.1.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x μg xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxx xxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxxx fosfatázy = 2,4 × X × X
xxx
X xx xxxxxxxx xxxxxx x μg získané xxxxx xxxx 7.1.1;
D xx xxxxxx xxxxxxx xxx zředění xxxxxxxxx xxxxx bodu 6.3.10 (x případě xxxxxxx xxxxxxx D = 1).
2,4 xx faktor xxxxxxx (5/12 x 1 xx xxxxxxxxxxx xxxxxx) – viz 6.2 xx xxxxxxxxxx x 6.3.2, 6.3.5 x 6.3.6.
7.2 Spolehlivost
7.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) : 2 μx xxxxxx/xx.
7.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) : 3 (xxxxxxxxx) μx xxxxxx/xx.
7.2.3 Xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx 6.3.10, xxxxxx xxxxxxx x 7.2.1 x 7.2.2 xx týkají xxxxxxxx xxxxxxxxx ze xxxxxxxxx vzorku.
III. XXXXXXXXX XXXXXXXX PEROXIDÁZY
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx peroxidázy x xxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx pasterace.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx reakce na xxxxxxxxxx:
Xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx se objeví xxxxx zabarvení.
Negativní xxxxxx xx peroxidázu:
Do 30 xxxxxx po xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
3. Princip
Peroxidáza xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Uvolněný xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx na xxxxxxxxx indofenol (Štorchův xxxx). Intenzita xxxxxxxxx xx přímo xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx x xxxxx xxxx (50 °X) 2 x 1,4 xxxxxxxxxxxxxx (X6X8X2) x xxxxxxx xx 100 xx. Xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxx x temnu, x tmavě xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx jednoho xx dvou xxx xx xxxxxxxxxx roztok 1,4 fenylendiaminu vytvoří xxxxxxxxx, kterou je xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2 Roztok xxxxxxxx vodíku
Vodou zředit 9 ml 30 % xxxxxxxx xxxxxx x doplnit xx 100 xx. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx na litr xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx vodíku xx stálý xxx xxxxx měsíc, pokud xx skladován v xxxxxx x xxxxx, x láhvi xx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx jakémukoli xxxxx x xxxxxxxxxxx látkami.
5. Xxxxxx
5.1 Xxx 5 xx vzorku xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
5.2 Xxxxxx 5 ml xxxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx (4.1).
5.3 Přidat 2 xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.2).
5.4 30 xxxxxx po promíchání xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx modré xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx 30 xxxxxx po xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXX 30 °C
1. Xxxxxxx x oblast použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °C. Postup xx xxxxxxx pro xxxxxx mléko, xxxxxxxxxxx xxxxx, XXX xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx 15 xxx xxxxxxxxxxxxx xxx 30 °C.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx rozumějí xxxxxxxxx, xxxxx vytvářejí počitatelné xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx popsaných xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx mléka x xxxxxxxxxxx xxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx 72 xxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 ml xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx 0,1 xx xxxxxxxxxxxxxxx sterilizovaného xxxxx xxxx UHT xxxxx.
4. Přístroje x xxxxxxx xx skla
Obvyklé xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, zejména:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Horkovzdušná sušárna, xxxxxxxxxxxx na 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na 121 ± 1 °X.
4.1.3 Inkubátor, xxxxxxx xxxxxxxx teplotu 30 ± 1 °X.
4.1.4 xX-xxxx se zařízením xxx xxxxxxxxxx teploty, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 1 ml xxxxxx mléka xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x 9 ml xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx excentrické xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx ze xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxxxxx ředění.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx 20 ml xxx skladování kultivačního xxxxx.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), skleněné nebo xx xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, x nepoškozeným xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 ml, x xxxxxxxxx otvorem x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxx sterilního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx misek xx vnitřní xxxxxx xxx 90 xx 100 xx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx by xxxx xxx xxxxxxx 10 mm. Dno xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx by xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx ze xxxx:
Xxxxxxx ze skla xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x těchto postupů:
a) x horkovzdušné xxxxxxx (4.1.1), nejméně jednu xxxxxx xxx teplotě 170–175 °X;
x) v xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx použití xxxxxxxxx je xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxx zajištěno xxxxxxxxxx proniknutí páry: xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxx, xxxx xxxxxx by xxxxxx být napevno xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx by měly xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx sterilizované x xxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx musí být xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx – xxxx xx xxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 g |
|
Trypton |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx (+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 g |
|
Agar |
10–15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx vlastností xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx by xxxxxx xxxxxxxxx žádné inhibiční xxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx testy xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x rozpustit xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx x nakonec xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Ohřev xxxxxxxx usnadňuje postup. Xxxx xxxxxx xxxx x xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx, xxxxx se xxxx zcela xxxxxxxxxx, xxxx zahřívat x xxxx xxx 30 xxxxx.
Xxxxx xx je xxxxxxxx, přefiltrovat xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); pokud xx xx nezbytné, xxxxxxx pH, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx chlorovodíkové, xxx xx sterilizaci byla xxxx xxxxxxx 6,9 ± 0,1 při 25 °X.
5.2 Rozdělení, xxxxxxxxxxx x skladování xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx (5.1) v množstvích xx 100 do 150 xx xx xxxxx nebo po 12 až 15 xx do xxxxxxxx (4.2.2). Baňky x xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x autoklávu (4.1.2) při 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX kultivačního xxxxx.
Xxxxx xx kultivační xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx v temnu xxx xxxxxxx mezi 1 x 5 °X, avšak xx xxxx xxx 1 xxxxx po xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx může xxxxxxxxx z xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx sušené xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx není xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx pH xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X metodou xxxxx xxxx 5.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx kultivační xxxxxx xxxxx xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Xxxxxx xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (NaCl) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 ml |
Příprava:
Rozpustit složky xx xxxx, pokud xx xx xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xX-xxxxxx (4.1.4); xxxxx to xx xxxxxxxx xxxxxxx xX roztokem (nejméně 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 při 25 °X.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx ředidla
Rozdělit xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx ředidla. Zkumavky xxxxxxx.
15 minut sterilizovat x autoklávu (4.1.2) xxx 121 ± 1 °C.
Zkontrolovat pH xxxxxxx.
Xxxxx xx ředidlo xxxxxxxxx ihned, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, avšak ne xxxx než 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) xx xxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx prášku. Dodržet xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX xxxxxxx xxxxx xxxx 6.1, poté xxxxxxxx, sterilizovat a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Před xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx kultivačního xxxxx x zchladit xx xxxxx lázni (4.1.5) na 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxx promíchat, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx rozděleny, x xx 25 xxxxxxxx otočeními xxxxxx xx xxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx tvorbě xxxx xxxx pěnu xxxxxx rozptýlit. Xxxx xxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
7.3 Příprava xxxxxxxxxx xxxxxx (10-1) (xxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 9 xx xxxxxxx (6.1), xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx kontaktu x xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx mléka. 5 xx 10 sekund xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ředění xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx se xxx xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx dalších xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) přenést 1 xx primárního xxxxxx (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx xxxxxx v xxxx 7.3.
Xxxxx xx xxx xxxxxx 10−2.
S xxxxx získat xxxxx xxxxxxxxx ředění se xxxxx postup xxxxxxx xxx xxxxxx, dokud xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Petriho xxxxx
7.5.1 Xxxxxx mléko: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) přenést xx xxxxx (4.2.4) 1 xx vzorku x/xxxx xxxxxxxx desetinného xxxxxx. Musí xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxx každé xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 ml xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx dvě xxxxxx. Pro xxxxx xxxxxx (8.1.1) připravit xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.5.3 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx (vyšetřované xx 15 xxxxx xxxxxxxx xxx 30 °X – xxxxxxxx 85/397/XXX, příloha X xxxxxxxx XXX bod 5):
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx do misky (4.2.4) 1 ml xxxxxx xxxxx (7.2). Xxxxxxxxx xxx xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Do xxxxx xxxxxxxxxx misky xxxxx xxx 15 xx 18 ml xxxxxxxxxxxx média (7.1).
Ihned xxxxxxxxx xxxxxx Petriho xxxxx, aby po xxxxxxxx došlo k xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx druhu xxxxx, xxxxxxxxxxx vzorku xxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxx médiem xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx vodorovném, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx médium xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx na xxxx xxxx xxx xxxx xxxxx. Sloupky xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxx v xxxxxxxx xx stěnami x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 72 ± 2 xxxxx při 30 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx kolonie x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 300 kolonií.
Misky xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx použít xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) a/nebo xxxxxxxxxx počítadlo (4.1.8). Xx xxxxx xxxx xx xx, aby xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx provést xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx od xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx kolonii. Pokud xxxxxxx tvořící xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx a xxxxxxxxx odpovídající xxxxx xxx xxxxx misku. Xxxxx xxxxxxx tvořící xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx vyřadit.
8. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Syrové x xxxxxxxxxxx xxxxx
8.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx misek obsahujících 10 xx 300 xxxxxxx (viz 8.1.3 x 8.1.4).
8.1.2 Vypočítat xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxx xxxx pasterovaného xxxxx xxxxx xxxxxx vzorce:
∑C / (n1 + 0,1x2) x
xxx:
∑X ΣC xx xxxxxxx počet xxxxxxx podle xxxx 8.1.1.
(x1 + 0,1 x2)x xx xxxxx xxxxxxxxxxxx vzorku, xxx:
x1 xx xxxxx misek xxx prvním xxxxxxx
x2 xx xxxxx xxxxx xxx druhém xxxxxx
x xx faktor xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx první xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxx platné xxxxxxx. Když xx xxxxxxxxxxxxxx číslice pět, xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx číslice vlevo xxxx sudá.
Příklad (pasterované xxxxx):
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 x 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; = 278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2
= 6290,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.1.3 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 10, xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxxxxx xx "xxxxx xxx 10 x x", xxxxxxx "x" xx převrácená xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
8.1.4 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx vyšší xxx 300 x xxxxxxxx xx xxxxx, xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx hodnotou xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xx".
8.2 XXX xxxxx x sterilizované xxxxx
Xxxxx xxxxx xxx 10 xxxxxxx xx 0,1 xx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/EHS.
9. Spolehlivost
Výsledky xxxxxxxxxxx uznaných xxxxxxxxx xxxxx xxxxx nejsou x xxxxxxxxx.
X. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX PŘI 21 °X
1. Xxxxxxx x oblast použití
Tato xxxxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 21 °X x xxxxxxxxxxxx mléce, xxxxx xxxx xxx dní xxxxxxxxxxxxx xxx 6 xX x cílem xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, které xx xxx xxxxxx se x xxxxx při 6 °X.
2. Definice
"Mikroorganismy" xx xxxxxxxx organismy, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Princip
Inkubovat xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxx xxx 6 °X. Xxxxxxx xxxxxxxxx objem xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx 25 xxxxx xxx 21 °X. Xxxxxxxx kolonie x vypočítat xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na 1 xx xxxxxxxxxxxxx mléka.
4. Xxxxxxxxx x pomůcky xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Přístroje
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, schopný xxxxxxxx xxxxxxx:
x) 6 ± 0,2 °C
b) 21 ± 1 °X xx xxxxx xxxxxx xxxxxx.
4.1.4 xX-xxxx se xxxxxxxxx xxx kompenzaci xxxxxxx, xxxxxx na ± 0,1 jednotky xX.
4.1.5 Vodní xxxxx, xxxxxxxxxxxx na 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxxxx sklo, zvětšení 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx počítadlo
4.1.9 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 1 xx vzorku xxxxx xxxx desetinného ředění x 9 ml xxxxxxxx roztoku x xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx obsahu xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, s xxxxxxxxxxx prostorem k xxxxxxxxxx 10 ml xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx desetinných ředění.
4.2.2 Xxxxx x objemu 150 xx 250 xx xxxx zkumavky x objemu 20 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx vatou), xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx objemu 1 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx misky x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx materiálu, xxx misek xx xxxxxxx xxxxxx xxx 90 xx 100 x. Vnitřní xxxxxxx xxxxx by xxxx xxx xxxxxxx 10 xx. Xxx nesmí xxx žádné xxxxxxxxxx, xxxxx by bránily xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx:
Xxxxxxx xx skla se xxxxxxxxxxx jedním z xxxxxx postupů:
a) v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx jednu hodinu xxx xxxxxxx 170–175 °X;
x) x autoklávu (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx teplotě 121 ± 1 °X.
Xxx použití xxxxxxxxx xx xxxxx dbát xx to, aby xxxx zajištěno dostatečné xxxxxxxxxx xxxx: pokud xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xx neměly xxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx nebo víčka xx xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx skla xxxxxxxxxxxxx x autoklávech xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx sterilizovány x xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx – xxxx se xxxxxxx mlékem
5.1 Složení:
|
Kvasnicový xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 g |
|
D-glukóza(+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10-15 x xxxxx želírovacích xxxxxxxxxx agaru |
|
Voda |
1000 ml |
Sušené xxxxxxxxxx xxxxx by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxx xx ověří xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx neobsahuje.
Příprava:
V tomto xxxxxx suspendovat a xxxxxxxxx xx vodě xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx x nakonec xxxxxx odstředěné xxxxx. Xxxxx suspenze xxxxxxxxx xxxxxx. Poté xxxxxx xxxx x uvést xx varu xx xxxxxxx xxxxxxx, dokud xx agar zcela xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx x páře xxx 30 minut.
Pokud xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx to xx xxxxxxxx, xxxxxxx xX, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) hydroxidu sodného xxxx xxxxxxxx chlorovodíkové, xxx xx sterilizaci xxxx xxxx xxxxxxx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Rozdělit xxxxxx (5.1) v xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 ml xx xxxxx xxxx xx 12 xx 15 ml do xxxxxxxx (4.2.2). Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx nepoužije xxxxx, xxxxxxxx se x xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °C, xxxxx xx déle xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxx připravit z xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx pokyny xxxxxxx, ale xxxxxx xxxxxx odstředěné xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xX na 6,9 ± 0,1 xxx 25 °C xxxxxxxx xxxxx bodu 5.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Xxxxxx xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 ml |
Příprava:
Rozpustit xxxxxx xx vodě, xxxxx xx je xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xX-xxxxxx (4.1.4); xxxxx xx je nezbytné xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 mol/l) xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx po xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 ml xxxxxxx. Xxxxxxxx uzavřít.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x autoklávu (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X. Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx nepoužije xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx xxxxxxx mezi 1 x 5 °C, xxxxx xx xxxx xxx 1 měsíc xx xxxx přípravě.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ředidla
Ředidlo (6.1) xx xxxx xxxxxxxxxxx x komerčních xxxxxxxxxxxxx tablet xxxx xxxxxx. Xxxxxxx pokyny xxxxxxx. Xxxxxxx xX xxxxxxxx xxxxx bodu 6.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x skladovat xxxxxxx podle bodu 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx zahájením xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx rozpustit xxxxxxxx xxxxxxxx kultivačního xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx lázni (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
7.2 Příprava xxxxxx xxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxx x inkubátoru [4.1.3 x)] uzavřené xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx xx není xxxxx, reprezentativní vzorek x xxxxxx xxxxxxx 100 xx po xxxx 120 ± 2 xxxxx xxx 6 ± 0,5 °X.
7.2.2 Xx inkubaci xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx nejrovnoměrněji xxxxxxxxx, x to 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxx zabránit xxxxxx xxxx nebo xxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx testovacího xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx tři xxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (10−1)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) syrového xxxx pasterovaného xxxxx xx 9 xx xxxxxxx (6.1), přičemž xxxxxx nesmí xxxxxx xx kontaktu x xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxx jako xxxxxxx xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx promíchávat xxxx xxxxxxxx xxxxxx míchačkou (4.1.9).
Xxxxx se xxx xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx dalších xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx xxxxxx v xxxx 7.3.
Xxxxx se xxx xxxxxx 10−2.
X xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx xxxxxx opakuje tak xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) přenést xx xxxxx (4.2.4) 1 xx vzorku x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ředění. Xxxx být vyšetřena xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) připravit xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Do xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 15 xx 18 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Xxxxx promíchat xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxx po xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx mléka, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 minut.
Nechat xxxx xx vodorovném, xxxxxxxx x čistém xxxxxxx, xxxxx médium xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx do inkubátoru (4.1.3). Misky xxxxxxxxx xxxxxxxx dnem xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxx xxxxx. Sloupky misek xx nesmějí vzájemně xxxxxxx, xxx xxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx a xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 25 xxxxx xxx 21 ± 1 °C.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx více než 300 xxxxxxx.
Xxxxx vyšetřit xxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx usnadnění počítání xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) a/nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxxx x záměně xxxxxx sraženin x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx provést xxxxxxx průzkum pomocí xxxxxxxxxxxx skla s xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx považují xx xxxxx kolonii. Pokud xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx misky x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx počet xxx celou xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pokrývají xxxx xxx čtvrtinu xxxxxx xxxxx, misku vyřadit.
8. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Xxxxxx výsledky xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.2 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na 1 xx syrového xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
∑X / (x1 + 0,1x2) x
xxx:
ΣX xx xxxxxxx xxxxx kolonií podle xxxx 8.1,
(n1 + 0,1 x2)x je xxxxx naočkovaného vzorku, xxx:
x1 xx xxxxx xxxxx při xxxxxx xxxxxxx
x2 je xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx
x je xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx byly xxxxxxx xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx dvě xxxxxx číslice. Xxxx xx zaokrouhlovaná xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx xxx, xxx sousední xxxxxxx xxxxx byla xxxx.
Xxxxxxx:
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 x 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; =278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2=
=629 / 0,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.3 Xxxxx xxxx všechny počty xxxxx xxx 10, xxxxx, že xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxxxxx xx "nižší než 10 × x", xxxxxxx "x" xx xxxxxxxxxx xxxxxxx nejnižšího xxxxxxx xxxxxxx.
8.4 Pokud xxxx xxxxxxx počty xxxxx xxx 300 x počítání xx xxxxx, xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx hodnotou xxxxxxx xxxxxxx. Výsledek xxxxxxxx xxxx "Odhadovaný počet xxxxxxxxxxxxxx xx ml".
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx uznaných xxxxxxxxx testů xxxxx xxxxxx x dispozici.
VI. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX – XXXXXXXX XXXXXXX XXX 30 °X
1. Předmět a xxxxxx xxxxxxx
Xxxx kapitola xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx při 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx při 30 °X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx jsou xx popsaných podmínek xxxxxxx zkvašovat x xxxxxxx xxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx objem vzorku xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx a 24 xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx laktózu. Xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, zejména:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 až 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, schopný xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °X.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, přesný xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Očkovací xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx-xxxxxxx xxxx xxxx-xxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx skla
4.2.1 Xxxxxxxx x vhodnými xxxxxxx x objemem 20 xx, aby xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (5.2) a Xxxxxxxxx trubičky xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 xx pro xxxxxxxxxx sušeného selektivního xxxxxxxxxxxx média (5.1).
4.2.3 Xxxxxx (utěsněné xxxxx), xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 – 10 xx, s xxxxxxxxx xxxxxxx o xxxxxxx 1,75 až 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx materiálu, xxx xxxxx má xxxxxxx xxxxxx xxx 90 xx 100 x. Xxxxxxx hloubka xxxxx by měla xxx nejméně 10 xx. Xxx nesmí xxx žádné xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx kolonií.
4.2.5 Sterilizace xxxxxxx xx skla:
Pomůcky xx skla xx xxxxxxxxxxx jedním z xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx hodinu xxx xxxxxxx 170 – 175 °X;
x) x autoklávu (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx dbát xx xx, aby bylo xxxxxxxxx dostatečné xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx xx xxxxxxxx sterilizuje x xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx by xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xx xxxx vysušit xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, žlučí x laktózou (XXXX xxxx). Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
7 x |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
3 x |
|
Xxxxxxx (X12X22X11.X2X) |
10 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
5 g |
|
Žlučové xxxx |
1,5 g |
|
Neutrální xxxxxx |
0,03 x |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxx |
0,002 x |
|
Xxxx |
10 xx 15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 ml |
Příprava:
Suspendovat a xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx a nechat xxxx několik xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx nutné, xxxxxxx xX roztokem (nejméně 0,1 mol/l) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, xxx po xxxx byla jeho xxxxxxx 7,4 ± 0,1 při 25 °X.
Xxxxx xxxxxx xx xxxx xx občasného xxxxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx po xxxxxxxxxx 100 xx 150 xx xx xxxxxxxxxx xxxxx (4.2.2). Kultivační xxxxxx xxxxxxxx ve xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °C.
V xxxx xxxxxxx zkontrolovat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (6.4).
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx do xxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxx xxxx s brilantovou xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
10 x |
|
Xxxxxxx (X12X22X11.X2X) |
10 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx |
20 x |
|
Xxxxxxxxxxx zeleň |
0,0133 g |
|
Voda |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxx x xxxxx xx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx to xx xxxxxxxx, upravit pH xxxxxxxx (nejméně 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx chlorovodíkové, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx hodnota 7,2 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx xxxxxx xx 10 xx xx zkumavek (4.2.1) obsahujících Durhamovy xxxxxxxx. Zkumavky xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx nesmějí xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx nepoužije xxxxx, xxxxxxxx se x xxxxx xxx xxxxxxx mezi 1 x 5 °C, xxxxx ne xxxx xxx 1 měsíc xx jeho xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx médium (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx dehydrovaného xxxxxxxxxxxx média. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Upravit xX, xxxxxxxx, sterilizovat x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx bodů 5.1 a 5.2.
6. Xxxxxx
6.1 Kultivační xxxxxx
Xxxxxx xxxxxx (XXXX xxxx) xxxxxxx x xxxx 5.1.
6.2 Xxxxxxxx vzorku xxxxx
Xxxxxx mléka řádně xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x to 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx vzorkem. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx nebo xxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx mícháním x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx by xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx misek
Sterilní xxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) 1 ml vzorku xxxxx xx každé xx xxx xxxxx (4.2.4) a xxx xxxxxxxxx 3 xx xxxxxx xxxxx (6.2).
6.4 Xxxxxxxx kultivačního média
Do xxxxx naočkované xxxxx xxxxx xxx 12 xx VRBL xxxxx (6.1)
Xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx rotací Xxxxxxx xxxxx, aby xx xxxxxxxx došlo x xxxxxxxxxxxx rozložení xxxxxxx.
Xxxx xxxx koncem xxxxxxxx vzorku mléka x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx misku x 12 ml xxxxx VRBL xxxxx, xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxx na xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x čistém xxxxxxx, dokud xxxxxx xxxxxxxx.
Xx úplném xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 4 xx XXXX xxxxx (6.1) na xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx.
6.5 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx nahoru. Xxxxxxxxx na xxxx xxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 24 ± 2 hodiny xxx 30 ± 1 °X.
6.6 Počítání xxxxxxx
6.6.1 Xxxxxxx xxxxxxx x Xxxxxxx miskách xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 150 xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx červené kolonie x xxxxxxx xxxxxxx 0,5 xx, x xxxx xxx sraženiny xxxxx, charakteristické xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.6.2 Pokud xxxx všechny xxxx xxxxxxx kolonie necharakteristický xxxx (xxxx. jinou xxxxx, xxxxxxxx nebo xxxx xxxx sraženin xxxxxxxx k xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (6.7).
6.7 Xxxxxxxxxxx xxxx
Xxxxx xxxxx x xxxx 6.6.2 xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx počtu (např. 3 až 5) xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx tím, xx xx pomocí xxxxxxxx xxxxx (4.1.6), xxxxxxxx xxxxxxxx obsahující xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx zelení (5.2). Xxxxxxxxx xxxxxxxx 24 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °X.
Xx kolonie xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx x Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx.
7. Xxxxxxx a vyjádření xxxxxxxx
7.1 Použít výsledky xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 150 kolonií.
7.2 Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií xx xxxxxxx procentuálního xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií.
7.3 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx vzorce:
ΣC / x
xxx:
ΣX je xxxxxxx xxxxx kolonií xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (7.1 v xxxxxxxxxxx xx 7.2), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku xxxxx (6.3).
x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorku (6.3) x xxxxxxxxxxx (3 xx).
Xxxxx xx xxxxxxxxxx na xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxx 100 xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx tak, xxx sousední xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 150 xxxxxxx, uvést xxxxxxxx xxxx "xxxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxx bakterií na 1 ml".
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx uznaných kruhových xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
XXX. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXX BUNĚK
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx dva xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx somatických xxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx somatických xxxxx x syrovém xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx buněk ve xxxxxx xxxxx xx xxxxxx kalibrace x xxxxxxxx xxxxxxxxxx fluoro-opto-elektronické xxxxxx (xxx X.1).
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx buňkami xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx a epitelové xxxxx, xxxxxxx jádra xx xxxxx zřetelně xxxxxxx xxxxxxxxxxxx modří
3. Xxxxxxx
Xxxxxx 0,01 ml xxxxx na 1 xx2 xxxxxxx podložního xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx somatických buněk xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xx 1 xxxxxxxx.
4. Činidla
Musí xx xxxxxx chemikálie xxxxxxx x.x..
Xxxxxxx roztok
Složení
|
Methylenová xxxx |
0,6 x |
|
Xxxxxxx – 99 % |
54 ml |
|
1,1,1-trichlorethan xxxx xxxxxxxxxxxxxxx |
40 ml |
|
Ledová xxxxxxxx xxxxxx |
6 xx |
Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx je xxxxxxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxxxx se xxxxx xxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx x baňce xxxxxxx x 1,1,1-trichlorethan xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx ve xxxxx xxxxx na 60 xx 70 °X. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxxx, 12 xx 24 xxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxx 4 °X x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Přefiltrovat xxxx xxxxx x xxxxxxxxx velikosti xxxx 10 až 12 xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx roztok xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx roztok xxxxx přefiltrovat.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
5.1 Mikroskop xxxxxxxxxx xxxxxxxx 500 × xx 1000 ×
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 0,01 xx x xxxxxxxxx nejméně ± 2 %.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 20 xx × 5 mm xxxxxxxxxx pro tenkou xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx sklíčko a xxxxxxx 20 × 5 xx pro xxxxxx vrstvu.
5.4 Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx (30 °X xx 50 °X) xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5 Xxxxxxxxxx (xxx) pro xxxxxx xxxxx vrstvy.
5.6 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx na 30 až 40 °X pro xxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
5.7 Xxxxxxxx xxxxxxx x mikrometrickou xxxxxxxx xx 0,01 xx.
6. Postup
6.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxx hodin xx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx teplota xxxxxx xxxxxxxxx 6 °X. Xxxxxx nesmí xxx zmražen.
6.2 Xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx (5.6) na 30 až 40 °X. Poté řádně xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx které xxxx xxxxxxxxxxx mikrostříkačka (5.2), xxxxxxxxx 20 °X.
6.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) například xxxxxxxxx, vysušit xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx prach, xxxxxxxx plamenem a xxxxxxxx. Skladovat x xxxxxxx, kde jsou xxxxxxxx xxxx xxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxx tenké xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx (5.2) odebrat 0,01 xx mléka ze xxxxxx xxxxxxxxxxxx, jak xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx očistit vnější xxxxxx stříkačky, která xxxxxx xx xxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx podložní xxxxxxx (5.3) x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (20 xx × 5 mm). Xxxx xx xx xxxxxxxxxxxxxxx vyplnit. Xxxxxx xxxxxxx tenkou xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (5.4) xx xx xxxxxxx vysušení.
U xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxx tenké xxxxxx.
6.5 Xxxxxxx tenkých xxxxxx
Xxxxxxx xx 10 xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4). Sušit x, pokud xx xx nezbytné, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.5). Xxxxxxx xxxxx vrstvy xx xxxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx zcela xxxxxxx. Xxxxx xxxxx a xxxxxxx tak, xxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx.
6.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx
Xx základě xxxxxxxxx xxxxxxxx (500 × xx 1000 ×) xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx (5.7).
7. Xxxxxxxx x xxxxxxx
7.1 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx mikroskop (5.1). Xxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx pouze xxxxxxx xxxxx, x xx taková xxxxx, xxxxx xxxx jasně xxxxxxxxxxxx a z xxxxx je x xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx polovina. Počítat xxxx nebo xxxx xx střední xxxxxxx xxxxx vrstvy a xxxxxxxxx xx pásy xxxx xxxx, které xxxx vybrány xxxxx x okrajových xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx. Počítání xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx mikroskopických xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx způsobem, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx počtu buněk, xxxxx xx xxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx x xxxx, xx počítání somatických xxxxx pod xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx elektronického xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx 400000 xx 600000 buněk/ml xx xxxxx xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, musí xxx podle Poissonova xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 400, xxx bylo xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
X = X = s2,
kde:
M xx xxxxxxx xxxxxxx
X xx xxxxxxx
x je xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx koeficient xx:
XX = x × 100 % / X nebo XX = 100 % / x&xxxx;xxxx XX = 100 % / XXX
X (xxxxxx) xxxxxxxxxxx počet xxxxxx (xxxxx), xxxxx xxxx spočítány (xxxxxxxxx 400 pro CV = 5 %).
7.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx faktoru
Při xxxxxxx 0,01 ml xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx vypočítá xxxxx xxxx 7.3.1 xxxx 7.3.2.
7.3.1 Xxxxxxxx xxxx xx tenké xxxxxx
Xxxxx xxxx, xxxxx xx xxxx počítat, je 5 xx. Xxxxx xxxx odpovídá xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx pole, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7).
Xxxxxxxx xxxxxx = 20 × 100 / x × x
xxx:
x xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxxxxxx stupnicí (5.7)
b xxxxxxx počet xxxxxxxxxxx xxxx.
7.3.2 Počítání xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx mřížky
Pracovní xxxxxx
xxx:
x xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7)
s celkový xxxxx spočítaných polí.
7.4 Xxxxxxx xxxxxx buněk
S xxxxx xxxxxx počet xxxxx xx xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxx somatických xxxxx (7.1 x 7.2) xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (7.3).
7.5 Přesnost
Variační koeficient (xxx 7.2) xxxxx xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx uznaných kruhových xxxxx nejsou x xxxxxxxxx.
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx metoda
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxxxxxx postup, xxxxx xx může xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxx X.1) xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo bez xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx postup xx xxxxxxxxxxx buňkami xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx mají x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxx xxxxxx (xxxxxxxxx 0,2 xx) xx důkladně xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Část xxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx disk, xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx impuls, xxxxx xx zesiluje x xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x tisících xx xxxxxxxx.
4. Činidla
Pokud xxxx xxxxxxxxx jinak, xxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x.x.. Xxxxxxx xxxx je xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx, xxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxx čistoty.
4.1 Xxxxxxx roztok
Složení
|
Hydrogenftalat xxxxxxxx |
51,00 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxx |
13,75 x |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx(xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 ml |
|
pH 5,7 až 5,9. Xxxxxxx xxxxx xx 10000 ml. |
Příprava:
Smíchat xxxxxxxxxx xxxxxx. Skladování xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx překročit xxxx xxx.
4.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (zásobní roztok)
Složení
|
Ethidiumbromid |
1,0 x |
Xxxxxxx xxxxx xx 1000 xx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx nemělo xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (pracovní xxxxxx)
Xxxxxxx 20 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.2) x tlumivým xxxxxxxx (4.1) tak, xxx xx získal objem 1000 xx. Xxxxxxxx xxxxxx xx neměl xxx xxxxxxxx více xxx sedm dní.
4.4 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxx xxxxxx (4.1) |
10 ml |
|
Polyethylenglykol-mono-p(1,1,3,3-tetramethylbutyl)-fenylether (xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 ml |
|
Amoniak x 25 % xxxxxxxxxx |
25 ml |
Doplnit xxxxx xx 10000 ml
Příprava:
Smíchat xxxxxxxxxx složky. Skladování xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx.
5. Xxxxxxxxx x pomůcky xx xxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx xxxx xxx před použitím xxxxxxxxxxx. Xxx se xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx částic, xxxxx xx xxxx xxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx pokynů xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx stanoven xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X).
5.2 Xxxxx xxxxx, s xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxxx xx 40 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx 15 xx.
6. Xxxxxx mléka
6.1 Xxxxxx xxxx xxx skladován xxx xxxxx teplotě xx xxxxxxxx (5.3). Xxxxx vzorek xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, počítání xx může xxxxxxx xx po xxxxxxxx 24 xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx by xxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx nesmí xxxxxxxxx 6 °C.
6.2 Konzervace
Chemická xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx do 24 xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx po xxxxxx xxxxxx.
6.2.1 Chemická konzervace xxxxxx se provede xxxxxxxx jednoho x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx:
- xxxxxxxx orthoboritá:
konečná xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx 0,6 x na 100 xx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx může být xxxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx xxxxxxx 6 xx 12 °X;
- dvojchroman xxxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxxxxxx dvojchromanu draselného xx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx 0,2 x na 100 ml. Takto xxxxxxxxxxxx vzorek může xxx skladován dalších 72 xxxxx xxx xxxxxxx 6 xx 12 °X;
- azid xxxxx:
xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx sodným x xxxxxxx koncentraci 0,024 g/100 xx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx na xxxxxxx 6 xx 12 °X ihned xx xxxx odběru a xxxxxxxx xx 48 xxxxx xx xxxx xxxxxx;
- xxxxxxxx:
xxxxxx může xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx koncentraci 0,05 g/100 xx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx na xxxxxxx 6 xx 12 °X xxxxx xx xxxx xxxxxx a xxxxxxxx xx 72 xxxxx xx jeho xxxxxx.
6.2.2 Xxxxxx, xxxxx xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx ještě xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx 48 xxxxx xxxxxxxxxxxxx draselným.
Poznámka:
Pokud xxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx být xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx vod.
7. Xxxxxx
7.1 Předběžné xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx, které xx xx vyšetřit, xx xx nadojení skladuje xxxxxxx 24 xxxxx xxx asi 2-6 °X. Xxxxxxxx vzorků x xxx xxxxxxxx xx bez xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx mohou xxx xxxxxx xxxxx. Pokud xx xxxxxx nutné xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx nejméně xxx hodiny xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxx 6.2.1).
7.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx ošetřený xxxxxx (xxx 7.1) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx starý xxxxxx ve xxxxx xxxxx (5.2) na xxx 40 °X. Xxxx skladovat xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxx pomocí xxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.1) do 15 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (viz 7.2). Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx vzorky xxxxxxxx xxxxxxxxx, aby xx xxxxxxx xx nejlepšího xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx somatických xxxxx.
Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx vzorku jsou xxxxxxxxxxx provedeny x xxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x) x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) mezinárodních xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx.
Xxxxx, které jsou x xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxx:
(1) počet xxxxx xxxx 400 000 až 500 000 xxxx:
- xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxxxxxxxx:
xx = 20000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx variačnímu xxxxxxxxxxx 5–4 %)
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx reprodukovatelnosti:
sR = 40000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 10–8 %)
9. Xxxxxxxx správnosti
Kontrola xxxxxxxxxx xx provádí xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx, který xx stanoví počítáním xxxxx xxx mikroskopem xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
XXXX. XXXXXXX XXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXX
XXXXXXX X XXXXXX POUŽITÍ
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup xxx detekce xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx mléce a x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx:
X. Xxxxxxxxxxxx postup
Tento xxxxxx xx počáteční xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x sulfonamidy. Xxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx založeny xx xxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx var. calidolactis, XXXX 10149, xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx postup xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx testy.
B. Xxxxxx pro konfirmaci x xxxxxxxxxxxx penicilinu
Tento xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx penicilinu x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx.
X. Kvalitativní xxxxxx
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxx postup xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx antibiotik x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx mléce x x xxxxxxx ošetřeném xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx vyšší než xxxxxx uvedené x xxxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx antibiotik a xxxxxxxxxxx [1]
|
Xxxxxxxxx xxxxx |
||
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxx |
|
|
Xxxxxxxxxxxxxxx |
0,002 |
0,006 |
|
Xxxxxxxxx |
0,002 |
0,005 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,015 |
0,035 |
|
Xxxxxxxx |
0,006 |
0,011 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,10 |
0,40 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,20 |
0,45 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxx |
0,15 |
0,50 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
7 |
15 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx |
4 |
13 |
|
Xxxxxxxx |
1 |
22 |
|
Xxxxxxxxx |
9 |
28 |
|
Xxxxxxxxxx |
0,06 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxx |
1 |
2,25 |
|
Xxxxxxxxx |
0,01 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,01 |
0,1 |
|
Xxxxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxxx) |
0,5 |
1 |
|
Xxxxxxxxxx extrakt |
2 g |
|
|
Pepton |
5 x |
|
|
Xxxxxx xxxxxxx |
1 x |
|
|
Xxxxxxx xxxxx |
5 g |
|
|
Agar |
10–15 x |
|
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxx. Xx občasného xxxxxxx uvést xx xxxx. Upravit xX xxx, aby xx xxxxxxxxxxx byla xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx xx 10 xx do zkumavek xxxx xx 100 xx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx s xxxxx xxxxxx šikmý xxxx.
Xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X.
5.1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxx sodný |
2 g |
|
Agar |
15 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx (xxx 5.1.3) |
10 ml |
Příprava:
Rozpustit xxxxxx xx xxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xx občasného xxxxxxx xxxxx xx xxxx. Xxxxxx trimethoprim xxxx tetroxoprim a xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X. Upravit xX, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx jeho xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.1.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxxxx |
5 xx |
|
xxxx Xxxxxxxxxxx |
30 xx |
|
96 % Xxxxxxx |
5 ml/30 xx |
|
Xxxxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx tetroxoprim (5 xxxx 30 xx) a xxxxxxx xxxxx.
5.1.4 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
0,75 xx |
|
Xxxxxxx |
5,0 xx |
|
Xxxxxxxxx xxxxx |
8,0 mg |
|
Bromkresolová xxxxxx |
0,025 x |
|
Xxxx |
50 ml |
Příprava:
Rozpustit ve xxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx dostupný x xxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx
5.2.1 Ve sterilní xxxxx x vhodným xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x 60 μx/xx (100 XX/xx), x to xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx draselného xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
5.2.2 Xxxxxxxxx pracovní xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 1,25 xx xxxxxxx penicilinu (5.2.1) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx do 1000 xx. Xxxxx pracovní xxxxxx obsahuje 0,075 μx xxxxxxxxxx/xx (= 0,125 XX/xx).
5.2.3 Připravit 75 ml standardního xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,004 μg xxxxxxxxxx/xx (= 0,0067 XX xxxxxxxxxx/xx) xxxxxxxx 4 xx pracovního xxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2.2) xx 71 xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.3).
5.2.4 Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx podle xxxx 5.2.1 až 5.2.3 xx xxxx být xxxxxxxxxx x den xxxxxxxxx xxxxx.
5.3 Xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx mléka xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx sušeného xxxxxxxxxxxx xxxxx (10 % x/X) xx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx mléka, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx za xxxxxx inhibičních xxxxx; xxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx se xxxxx hodinu xx 100 °C, xxxx xx xxxxxxx do xxxxxxxxxx x teplotou 0 °C xx 6 °X na xxxx xxxxxxx jednoho xxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
5.4.1 Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx var. calidolactis XXXX 10149 Xxxx XXXX 10149 je xxxxxxxxx x xxxxxx X 953.
5.4.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx kultury. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx (5.1.1). Xxxxx xxxx se x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx aerobně xxxxxxxx 48 xxxxx xxx 63 ± 1xX. Xx xxxxxxxx xxxxxxx zkumavka xxxxxxxx xxxxxxxx zátkou. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx být skladována xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx při 0 xx 5 xX.
5.5 Xxxxxxxxx kultura (xxxxxxxx xxxx)
5.5.1 Xxxxxxxxx xxxxxxx 20 xx xxxxxxx xxxxx (5.1.1) xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx (4.2.2) a xxxxxx xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5.2 Sterilní xxxxxxx (4.2.4) přenést 5 xx xxxxxxxx destilované xxxx do zkumavky xx zásobní xxxxxxxx (5.4.2) x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxx 0 xx 5 °C x xxxxxxx se xx 36 xxxxx.
5.5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 ml xxxxxxxx xxxx (5.5.2) xx Xxxxxxx misku (5.5.1) x důkladně xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx celém povrchu xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Inkubovat 16 xx 18 hodin xxx 63 ± 1 °X (4.1.1).
Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (5.4.2) xxxx xxxxxxx xxxxxx 36 xxxxx xx očkování mělo xxxxxxx nejméně xxxxxxx x xxxxxxx intervalu xxxxxxxxx 36 hodin.
5.5.4 Xxxxxxxx pipetou (4.2.4) xxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxxx vody xx Xxxxxxx misku xxxxxxxxxx xxxxxxx (5.5.3) x xxxxxxxxx tyčinkou xxxxxxxxx xxxxx z xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx spór do xxxxx (4.2.3) xxxxxxxxxx 250 ml xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vody. Láhev xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 0 až 6 °X.
5.5.5 Po 16xx xx 18xx xxxxxxxx xxxxxxxx při 63 ± 1 °X xx xxxxxxxx xxxxx by suspenze xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx životaschopných xxxxxxxxxxxxxx xxxx 5 x 10 xxxxxxx xx xxxxxxxx. Suspenze xxxx xxxx xxxxxxxxx rovnoměrné xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxx by xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ze xxxxxxx xxxxxxx (5.4.2).
5.6 Xxxxxxxx zkumavek/ampulí
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx agarové médium (5.1.2), xxxx zchladit xx 55 °C.
5.6.2 Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx spór (5.5.4) x xxxx částem xxxxxxxxx xxxxx (5.6.1) xx xxxxxxxx nebo x lahvičce. Xxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.6.3 Přenést do xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx (4.2.6) 0,3 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.6.2), xxx se xxxxxxxxx 5 xx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx zátkou nebo xxxxxx nebo, v xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx. Nechat xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx 12 xxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
5.6.4 Zkumavky/ampule xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxx, ale xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx měsíců při 0–6 °X, xxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxx přípravě xxxxxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Vzorky se xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx 24 xxxxx xx odběru, x do xx xxxx xx skladují xxx xxxxxxx 0-5 °X. Xxxxx není xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx 24 xxxxx, xxxx by xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (−30 °xx - 15°X), xxx xx xxxxxxx xx minimum xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.2 Xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx (5.6). Xxxxxxxxx víčko nebo xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (4.1.3) xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxx (5.2 x 5.3).
6.3 Xx xxxxx xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxx 50 xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (5.1.4).
6.4 Xxxxxx xxxxx řádně xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx (4.1.4) xxxxxxx 0,1 xx vzorku xx xxxxxxxx zkumavky/ampule. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx stříkačku.
6.5 Xxxxxx xxxxx xxxx 6.4 xx opakuje xxxxxxx xxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx penicilinu xxxxxxxxxxxx 0,004 μg/ml (= 0,0067 XX/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx (5.2.3).
6.6 Xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.4 xxxxxxxx xxxxxxx způsobem xx použití xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx bez xxxxxxxxxxx xxxxx (5.3) xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
6.7 Xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx x xxxxxxxx se zkumavkami/ampulemi xxxxxxx xx xxxxxxx 2½ xx 2¾ xxxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxxxxx 63 ± 1 °X (4.1.2).
6.8 Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx x vodní lázně.
6.9 Xxxxxxxxx barvu xxxxxxxxx xxxxx (xxx 7).
7. Xxxxxxxxxxxx výsledků
7.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx média xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx "zcela xxxxxxxxx" uvedené x xxxxxxx xx xxxxxx 39. Xxxxx xxxxxxxxx xx zkumavkách/ampulích se xxxxxxxxxxx roztokem xxxxxxxxxx (6.5) xxxxxxx purpurové, xxxxxxx médium xx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx nepravidelné xxxxxxxxx xx zkumavkách/ampulích xx xxxxxxx mléka xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek xx xxxxxx v koncentracích xxxx koncentracemi xxxxxxxxx xx xxxxxx 39.
7.3 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx zkumavkách/ampulích xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek xxxx vzorek xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
7.4 Pokud xx xxxxxxxxx zabarvení xxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, zkumavky/ampule xxxxxxxxxx životaschopné xxxxx x xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx novému xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx vzorků x reakcemi xxxxxxxxx x 7.1 a 7.2 xxxxx xxxxxx "X".
Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx zmraženy, aby xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X. Xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tento xxxxxx xxxxxxxx konfirmační xxxx penicilinu xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx pro stanovení xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxx (X.7.1) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (X.7.2).
Xxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxxx
Xxx X.1.
2. Definice
2.1 Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx popsaným xxxxxxxx xxxxxxx čirou xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx 2 xx xxxxx disku.
2.2 Xxxxx vzorek, který xxxxxxxx antibiotika, xxxxxx xxxxxxxxxxx (2.1), x xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx penicilináza (beta-laktamáza), xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx vytvoří čirou xxxx menšího průměru xxx je xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxx penicilinu a xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
2.3 Xxxxx tato xxxx není xxxxxxxxxxxxx (2.2) xxxxxxxxxxxx, inhibiční xxxxxx ve xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxx může xx xxx xxxx xxxxxxxx [xxx xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx A, xxxxxxxx XX, X.1.x) x 2x)].
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx peniciliny, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxx jsou xxxxx xxxxxxxx inaktivovány xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx jako xxxxxxxxxx (viz 7.3).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx mlékem, xxxxx xx xx vyšetřit, xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. calidolactis. Xxxxxxxx xxxx mikroorganismus xx xxxxxxxx xxxxxxxx agarové xxxxxx. Xxxx zóna xxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxx v xxxxx xxxxxxxx látky xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx mimo jiné xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x mléce.
4. Xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx x vybavení
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Viz A.4.1.
4.1.2 Xxxxx lázeň, xxxxxxxxxxxx xx 80 ± 1 °C.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
Xxx X.4.2.
4.3 Xxxxxxxx disky, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky, x xxxxxxx 9 xx 13 mm, schopné xxxxxxxxxx asi 130 xx xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx).
5. Xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx testovací organismus xxx.
Xxxxxxxx složky kultivačních xxxxx xxxx být xxxxxx xxx bakteriologické xxxxx. Xxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx skle nebo xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx alespoň xxxxxxxxxxxx čistoty. Xxxx xxxxx obsahovat xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1 Xxxxxxxxxx xxxxx
5.1.1 Xxxxx xxxx (X.5.1.1)
5.1.2 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5 x |
|
Xxxxxxx |
1 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx (X.5.1.3) |
10 xx |
|
Xxxx |
10–15 g xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx agaru |
|
Voda |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx ve xxxx, xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xx přidání xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pH, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx 8,0 + 0,1 při 25 °X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X.
5.2 Xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxxxx x xxxxx
Xxx X.5.2.
Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek (8) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek (X.5.3) x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx:
x) 0,004 μg/ml (0,0067 XX/xx)
x) 0,006 μx/xx (0,01 IU/ml)
c) 0,03 μg/ml (0,05 XX/xx)
x) 0,06 μx/xx (0,01 IU/ml).
5.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxx
5.3.1 Rozpustit dostatečné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxx) xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x cílem xxxxxx xxxxxxxxxxx 1000 X/xx. Xxxxx roztok, xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx týdny xxx 0 °X až 5 °X.
Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx účely xxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx penicilinázy xxxxx xx inaktivaci 0,6 μx (= 1 XX) xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx je nutné xxxxxxxxxxxx, zda xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxx xxxxxxxx proto xxxxxxx koncentraci xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.3.2 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx dostupné xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxx X.5.4.
5.5 Testovací xxxxxxx (xxxxxxxx xxxx)
Xxx X.5.5.
5.6 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), xxxx zchladit na 55 oC.
5.6.2 Xx xxxxx přidat xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx spór (5.5) x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx agarového xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx kolonií x xxxxxxxxxxx agarové xxxxx, x důkladně xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx misky (X.4.2.2), předem xxxxxxx xx 55 °X, xxxxxxxxxx agarové médium, xxx xx vytvořila 0,6 xx 0,8 xx xxxxxx. Pro Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx 140 xx je xxxxx xxx 15 ml xxxxxxxxx média, xxx xx xxxxxxxxx 0,8 xx xxxxxx.
5.6.4 Xxxxxxx Xxxxxxx misky na xxxxxxx, vodorovný xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxx vodováhou, xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx víčka na xxxxx x obrátit xx dnem xxxxxx, xxx xx na xxxxxxxxx xxxxxxxxxx vody xx povrchu xxxxxxxxx xxxxx.
5.6.5 Xxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxx misky xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxx, ale xxxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxx xx přípravě vloží xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x uchovávají xx xxx 5 °X.
5.6.6 Xxxxxxx xxx Xxxxxxx xxxxx, aby xxxx možná identifikace xxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Příprava xxxxxx
6.1.1 X xxxxxx x xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxx podle "xxxxxx X" (X.7.1 x X.7.2) xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1.2 Nejdříve xxxxxxxx vzorky 10 xxxxx na 80 ± 1 °X, xxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx termolabilních xxxxxxxxxxx xxxxx.
6.1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx přenést xxx 10 xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx lahvičky xx xxxxxxx hrdlem. X mléku přidat xxx 0,4 xx xxxxxxx penicilinázy (5.3) x xxxxx xxxxxxxxx.
6.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
6.2.1 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx (4.3) do xxxxxx xxxxx (6.1.2) xxxxxx xxxxx x suché xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx disku x lahvičku se xxxxxxx. Naplocho xxxxxxx xxxx na povrch Xxxxxxx misky (5.6) x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.2.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 20 mm x od xxxxxx xxxxxxx 10 xx.
6.2.3 Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx (4.3) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.2) xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx vzorky xxxxx x poměru xxxxxxx 2 % xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx; při xxxxxx testu se xxxxxxx xxxxxxx pět xxxxxxxxxxxx disků.
6.2.4 Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx všech xxxxx xx agarové xxxxxx x xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx, obrátit xxxxx xxxx vzhůru x xxxxxx je xxxxxxxxx 2,5 až 5 hodin xxx 63 ± 1 °X.
6.2.5 Xx xxxxxxxx xxxxxxxx misky xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxx bylo xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxx xx xxxxx.
6.2.6 Xxxxxxxxxx xxxxxx penicilinázy (6.2.3) xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 2 xx xxxx.
6.2.7 Xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx vzorky xxxxx, xxxxxxx velkost xx xxxxxx xxxx xxxxx xxx velikost popsaná x 6.2.6, xxxxxxx xx přítomnost inhibičních xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
6.3.1 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx zahřátého xxxxx (6.1.2) a se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (6.1.3). Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 10 xx xxxxxx mléka xx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx napuštěný xxxxxxxxxxxxx (5.3.2) a uložit xx na testovací xxxxx.
6.3.2 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx dvojmo xxx každý xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx penicilinu xxxxxxxxx v 5.2 x) xx x).
6.3.3 Xxxxxxxxx průměrný průměr xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx vzorky xxxxxxxxxxxx x pro xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (viz 2)
7.1 Xxxxx se xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx zóna, ale xxxx xxxx se xxxxxx kolem xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx mléka, xxxxxx velká nebo xxxxx xxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx roztokem xxxxxxxxxx (5.2x)), xxxxxxxxx xxxxx xx vzorku mléka xxxxxxxx koncentraci krystalického xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx rovné xxxx vyšší než 0,004 μg/ml.
7.2 Xxxxx xx průměrná xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxx nepuštěném xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx hodnotě průměru xxxx xxxx kolem xxxxx xx vzorkem xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx možné xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx.
7.3 Xxxxx xx průměrná xxxxxxx průměru xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx průměrná xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx disku xx xxxxxxx mléka xxxxxxxxx xxxxx 6.1.2, xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx koncentrací penicilinázy xxxxxxx x xxxxx xx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx, nemusejí xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxx být tudíž xxxxxxxxxxxxx jako xxxxxxxxx xxxxx jiné xxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx
Xxxxx xx je xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxx než xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, nebo výpočty xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxxxx x xxxxx (5.2 x) až x)).
8.2 Xxxxxxxxxx standardní křivky
Vzhledem x tomu, xx xxxxxxxx lineární xxxxxxxx xxxx xxx10 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxxxxxxxxx xxxxxx xxx sestrojit xx xxxxxxxxxxxx papír xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx pořadnici x xxxxxx zón xx xxxxxx. Inhibiční xxxx xx xxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx se graficky xxxxxxx na základě xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx penicilinu x zakreslí se xxxxxxxxxx křivka.
8.3 Výpočet
Koncentrace xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx průměru xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx nebo xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx přesné xxxxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx nejméně xxxxxxx xxxxx, avšak xxxxxxx pětkrát větší xxx xxxxxxx xxxxx.
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Výsledky xx vyjadřují xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx vyšší xxx 0,004 μx/xx (xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx látek xxxxxx xxx xxxxxxxxx.
9.2 Xxxxxxxxxxxxxx (x) x reprodukovatelnost (X)
Xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx a jsou xxxxxxxxxx v důsledku xxxxxxx standardu při xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXX PATOGENNÍCH XXXXXXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
X xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx X, xxxxxxxx XXX bodu 2, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx, xxx detekci patogenních xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx u xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx onemocnění xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx mléko proti xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx splněny xxxxx xxxxxxxxx x příloze X, xxxxxxxx VII xxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx x počítání kolonií xxx 30 °X x 21 °X, xxxxxxxxxx bakterie a xxxxxxxxx, specifický xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx otravy xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxx
Xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx musí xxxxxxxx vnitrostátní orgán xxxxxxx xxxxxxxx, který xxxxxx xxxxxxxx osvědčení x xxxxxxxxx nezávadnosti xxx tepelně xxxxxxxx xxxxx pro xxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx patogenních xxxxxxxxxxxxxx xx, xxxxx existují, xxxxxxx kritéria a xxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxx x xxxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx výsledek xxxxxxxx xxxxx:
Xxxxx mléka xx mililitr, nebo "xxxxxxxxxx" xx "nepřítomnost" x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, který xxxxxxxx xxxxxxx postup. Xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx.