Rozhodnutí Xxxxxx
xx xxx 14. xxxxx 1991,
kterým xx stanoví xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx syrového xxxxx x xxxxxxx ošetřeného xxxxx
(91/180/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX SPOLEČENSTVÍ,
s xxxxxxx na Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx společenství,
s ohledem xx xxxxxxxx Xxxx 85/397/XXX xx xxx 5. srpna 1985 x hygienických x xxxxxxxxxxxxx otázkách xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx Společenství [1] xxxxxxxxx pozměněnou xxxxxxxx 89/662/XXX [2], x xxxxxxx xx xx. 10 odst. 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxx xx. 10 xxxx. 2 Komise xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x testování, které xx xxxx xxxxxxxx xxx kontrolu xxxxxxxxxx xxxxx xxx syrové xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx pro xxxxxx mléko xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxx mikroorganismů, obsahu xxxxx, xxxx mrznutí x xxxxxxxxxxx antibiotik;
vzhledem x tomu, že xxx xxxxxxxxxxx mléko xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx metody xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx koliformních bakterií, xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx peroxidázy, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxx xxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, že pro xxxxxxxxxxxxx xxxxx x XXX mléko xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, nepřítomnosti xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx z technických xxxxxx xx vhodné xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; xx je xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx rutinní xxxxxx xxxxxxx a testování; xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xx xx, aby xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 85/397/XX byly xxxxxxx vhodné xxxxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx zahrnuje i xxxxxxxxx postupů xxxxxxx x kriterií spolehlivosti xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
XXXXXXX XXXX XXXXXXXXXX:
Článek 1
Referenční xxxxxxx xxxxxxx x testování xxx xxxxxx mléko xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- stanovení xxxxxx mikroorganismů při 30 °C,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Článek 2
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx tyto:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx fosfatázy,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 30 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 21 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx koliformních xxxxxxxx – počítání kolonií xxx 30 °C,
- xxxxxxx antibiotik x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Článek 3
Referenční xxxxxxx xxxxxxx x testování xxx XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X,
- detekce xxxxxxxxxx a sulfonamidů.
Článek 4
Xxxxxxx referenčních xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx, xxxxxxxxx kritérií xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxx pravidel xxxxxxxxxxx v příloze X.
Xxxxxx 5
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx 1, 2 x 3 jsou popsány x příloze XX.
Xxxxxx 6
Toto rozhodnutí xxxx xxxxxxxxxxx xx 31. xxxxxxxx 1992, xxx se zohlednil xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 7
Toto rozhodnutí xx určeno xxxxxxxx xxxxxx.
X Xxxxxxx xxx 14. února 1991.
Za Xxxxxx
Xxx Xxx Sharry
člen Xxxxxx
[1] Xx. věst. X 226, 24.8.1985, x. 13.
[2] Xx. věst. X 395, 30.12.1989, x. 13.
XXXXXXX X
XXXXX
X. Xxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Odběr xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka
I. XXXXXX XXXXXXXXXX
1. Úvod
Obecná xxxxxxxxxx xx xxxxxx činidel, xxxxxxxxx x pomůcek, xxxxxxxxx xxxxxxxx, kritérií xxxxxxxxxxxxx x zpráv x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx států x laboratoře xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx mléka xxxx xxxxxxxxx xxxx ustanovení.
2. Xxxxxxx
2.1 Voda
2.1.1 Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx, ředění nebo xxxx musí xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nebo demineralizovaná xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx jinak xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx testovacích xxxxxxxx.
2.1.2 "Xxxxxxxxxxxx" nebo "xxxxxxx" (bez dalšího xxxxxxxxx) xx rozumí "xxxxxxxxxxx ve xxxx" xxxx "ředění xxxxx".
2.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxx není xxxxxxxxx xxxxx, všechny používané xxxxxxxxxx xxxx xxx xxx xxxxxx analytické xxxxxxx.
3. Přístroje a xxxxxxx
3.1 Xxxxxx přístrojů x xxxxxxx
Xxxxxxxxx seznam xxxxxxxxx x pomůcek xxx xxxxx referenční xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxx použití x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.2 Analytické xxxx
"Xxxxxxxxxxxx xxxxxx" se xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx 0,1 xx.
4. Vyjádření xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx není xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx uvedený xx xxxxxx o xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx průměrem xxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (5.1) xxx xxxxxxxxxx metodu. Xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx splněno, xxxx xx xxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Výpočet xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx není xxxxxxxxx xxxxx, výsledek xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx hmotnosti xxxxxx.
5. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: opakovatelnost x reprodukovatelnost
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx uvedená xxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx takto:
5.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) xx xxxxxxx, xxx xxxxxx xx xxxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxx dvěma xxxxxxxxxxxx výsledky xxxxx, xxxxx byly získány xxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxx za xxxxxxxx xxxxxxxx (stejný xxxxxxxxx, xxxxxx přístroj, xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxxx).
5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) je xxxxxxx, xxx kterou xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx testů, xxxxxxxxx totožným xxxxxxxx x xxxx testovacím xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx (různí xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx, různé xxxxxxxxxx x/xxxx xxxxx xxxx).
5.1.3 Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, hodnoty xxx xxxxxxxx opakovatelnosti x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx, uváděné x xxxxxxxxxxx odstavcích xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx 95 % xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx XXX 5725, xxxxx xxxxxx, 1986. Xxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxx uznaných pokusů, xxxxxxxxxxx ve xxxxxxxxxx, xxxxx xx používají xxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxx postupy xxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxxx ve spolupráci, xxxxxx xxxxxxxxx. V xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1.4 Xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
6. Xxxxxx o testování
Zpráva x testování xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx výsledky. Xxxx xxxx xxxx xxxxxx všechny xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x všechny xxxxxxxxx, xxxxx by xxxxx xxxxxxxx výsledky. Xxxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxx všechny xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx identifikaci xxxxxx.
XX. ODBĚR XXXXXX XXXXXXXX A TEPELNĚ XXXXXXXXXX XXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx popisuje referenční xxxxxx pro xxxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx ošetřeného mléka. Xxxxx postup xxx xxxxx vzorků, xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx dodané xxxxxxxxxx x xxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx mléko xxxxxxxxxx xx skladovacích x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx 2, 4.4, 5 a 6 xx xxxxxxx xxx odběr xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x přímé xxxxxxxx.
2. Xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka xxxxxxxxxx x xxxxxxx, nádržích xxxx. xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx byli xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx to xxxxxxxxx orgány nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx nezbytné, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx, že xxxxxxxx xxxxxx xxxxx reprezentativní x x xxxxxxx x xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx laboratoř xxxxxxxx xx nezbytné, xxxxxxx zaměstnance xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx vzorků, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx
3.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx nebo x jiného xxxxxxxx, xxxxxxxxxx odolného xxxxxxxxx, xxx xxxx být xxxxxxxx s xxxxxxx xx předpokládané xxxxxxx (xxxxxxxxxx, odběr xxxxxx, xxx.). Xxxxxxx a xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx x nádobách xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx plochu povrchu, xxx xxxx zajištěno xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výrobku xxx xxxxxx žluklé xxxxx. Xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxx pevnou, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx vzorků x xxxxxxxx hloubky xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxx 50 xx.
Xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxx být xxxxxxxx, kovová xxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxx výrobě xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxx x xxxxx) xxxxx xxxxxxxx takovou změnu xxxxxx, xxxxx by xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xx xxxxxx xxxx mít čistý, xxxxx, xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx a xxxx mít xxxxxxxxxx xxxxx.
3.2 Xxxxxxxx pro xxxxx vzorků pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxx) musí xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx 3.1 x musí xxx xxxxxxxx.
Xxxxx xx pro xx xxxx jdoucí xxxxxx vzorků xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xx každém xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x sterilizováno x xxxxxxx s xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, které xxxxxxx testovací xxxxxxxxx xxxx příslušný xxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx jdoucích xxxxxx.
4. Xxxxxxxx xxxxxx vzorků
4.1 Xxxxxx údaje
Bez ohledu xx xxxxx, které xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxx odběrem xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx ručně, xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx ihned xx promíchání, xxxx xx xxxxx xxxxx x pohybu.
Pokud xx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx, jako xxxxx xxxx být odebrán xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx nádob xxxx být xxxxxx, xxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x při xxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx testováním, xxxx xx však hrozilo xxxxxxxxx stloukání xxxxx xxxxx xxxxxxxx.
4.2 Ruční xxxxx xxxxxx
4.2.1 Xxxxx xxxxxx z xxxxx x xxxxx xx xxxxx
X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxx konvi xxxxxx x xxxx, xxxxxxx xxxx xx xx, aby xx xxxxx xxxxx promíchalo x aby xx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx, xxxxx je reprezentativní xxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.2 Xxxxx x chlazených xxxxxx na xxxxx x zemědělském xxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxx dokud xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx mechanické xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxx xxxxxx z xxxxx xxx
Xx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx se xxxxxx xx xxxxx xxx. Xx xxxxxx xxxxxxxxx rovnoměrného rozdělení xxxx xxxx xxx xxxxxxxx další xxxxx xxxx xxxxxxxxxx míchání. Xxxxx xxxxx zásilky, x xxx xx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx, odebrat reprezentativní xxxxxx x xxxx xxxxxxx postupem xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.4 Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx
Xxxx je množství xxxxx, x xxxxx xx xx provést xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxx nádob, x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx reprezentativní xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx vzor. Xxxxx vzorky z xxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx těchto xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxx xx nachází v xxxxxx, ze které xxx každý xx xxxxxx odebrán. Po xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxx) xxxxxx (xxxxxx) x xxxxxx xxxxxxxxx množstvích.
4.2.5 Xxxxx xxxxxx z xxxxxxx xxxxx – skladovací xxxxxx, cisternové xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx
4.2.5.1 Xxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx mechanické xxxxxxxxxx (4.2.5.2).
Délka xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, xx kterou bylo xxxxx v xxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx, xx postup xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx x jednotlivých xxxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx plánovaného testování. Xxxxxxxx promíchání xxxxxx xxxxxxxxx shodu xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxxx odebraných buď x xxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx v xxxxxxxxxxxx intervalech xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx z xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx mléka) xx účinný, pokud xx rozdíl xxxxxx xxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx za xxxxxx podmínek xxxxx xxx 0,1 %.
Xx xxxxx nádobě x xxxxxxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxx části xxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, které xxx xx promíchání xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx celý xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx vzorků x xxxxxxxxxxx xxxxxx. X případě odběru xxxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx mléka, xxx xxxx zajištěna xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.5.2 Promíchání obsahu xxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxxxxx nádrží, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx do nádoby x xxxxxxxxx elektrickým xxxxxxx,
- xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx,
- v xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx vagónů xxxxxxxxx mléka v xxxxxx přepravní hadici, xxxxx je xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx do xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx, stlačeným x xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx, aby xx xxxxxxxxx vniku xxxxxx xxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx odběr xxxxxx
Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx se může xxxxxx xxxxx pokynů xxxxxxxxxxx testovací xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx vybavení musí xxx xxxx x xxxxx používání xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx orgán. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx:
- minimální xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxx přenosu (xxxxx xxxxxxx x minimálním xxxxxxx xxxxxx),
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx reprezentativní xxxxxx x šarže xx xxxxxx promíchání.
Pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx pro odběr xxxxxx může příslušný xxxxxxxxx vnitrostátní xxxxx xxxxxxxxx:
- minimální xxxxx xxxxx, ze xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx,
- maximální přenos,
- xxxxxxxxx, xxxxx může xxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx nutné xxxxxxxx.
4.4 Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx spotřebě x xxxxxxxxxx x maloobchodních xxxxxxxx
Xxxxx jde x xxxxxxx xxxxxxxx mléko xxxxxx x přímé xxxxxx spotřebě x xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, vzorky xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, zapečetěných xxxxx. Xxxxxx musí být xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx nebo x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx ošetření, x xx, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx (x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x den xxxxxxxxx).
X xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx XXX x sterilizovaného) se xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx vyšetření, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, x xx podle xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxx jiného příslušného xxxxxx.
5. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xx měl xxx xxxxxxx identifikačním xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx analytických xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx orgánu (xxx bod 2).
6. Xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxx příslušného xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx pokyny xxxxxxxx xx lhůty x podmínek xxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx dodrženy x xxxx xxxx xxxxxxx vzorků jejich xxxxxxxxxx, x to xx xxxxxxx druhu xxxxx a xxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxx.
Xxxxxx stanoví xxxx:
- xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx vzorky nebyly xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx slunečnímu xxxxxx. Xx-xx xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxx,
- vzorky syrového xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 0 oC až 4 oC. Xxxx xxxx odběrem x xxxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxxx x x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 36 xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxx souhlasit, xxx xxxx xxxxxxx skladování 0 xX xx 6 xX, xxxx-xx xxxx xxxx xxxxxxx x testováním xxxxx xxx 24 hodin,
- xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx musí být xxxxxxxxxxxx a skladovány xxx xxxxxxxxx 0 xX až 4 xX. Xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx být xx xxxxxxxxx x x xxxxxx případě xxxxx xxxxxxxxxx 24 hodin,
- xxxx vzorky xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx x pasterovaného xxxxx určené xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx laboratoře x xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx postupů.
PŘÍLOHA X
XXXXX
X. Xxxxxxxxx xxxx mrznutí
II. Stanovení xxxxxxxx fosfatázy
III. Stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °C
V. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 21 °C
VI. Stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx – počítání kolonií xxx 30 °X
XXX. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
XXXX. Detekce xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx
XX. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
X. XXXXXXXXX XXXX MRZNUTÍ
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxx xxxxxxx plnotučného, xxxxxxxxxxx, odstředěného, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, XXX xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx mléka xxxxxx xxxxxxxxx (termistorového xxxxxxxxx), v xxxx xx xxxxxxxxxxx řízená xxxxx ochlazována elektrickým xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
X dispozici xxxx xxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, kdežto xxxxx xxx xx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx, že xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxxxxxx xxxx odečet. Xxxxxxxx x xxxx, xx xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx bodu xxxxxxx různých xxxxx xxxxx, xxx x xxxxxx bodu mrznutí xxxxx x standardních xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx plató. Xxxxxxxxx x pevně xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx rutinního testování.
Bod xxxxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxx podílu xxxxxxx xxxx xxxx x xxxxx za xxxxxxxxxxx, že xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxx 0,18 x xxxxxxxx xxxxxx na 100 xx (viz xxx 7.4).
2. Definice
Bod xxxxxxx xxxxx: hodnota xxxxxxxx x xxxxxxx x popsaným postupem x vyjádřená xx xxxxxxxx Xxxxxx (°X).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx vzorek mléka xx v xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx teplotu x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx způsobí, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx až x xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx vzorku.
Přístroj xx xxxxxxxxx takovým xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx postupem xxxx xxx vzorky xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx dva standardní xxxxxxx. Za xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx mléka xx xxxxxxxx Xxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx laboratorní xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Kryoskop
Kryoskop xx skládá x xxxxxxxxxxx xxxxxx chladicí xxxxx, termistorového snímače (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx teploměru) x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx jiného xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx a xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx x xx xxxxxxxx xx xxxxxx.
4.1.1 Xxxxxxxx lázeň
Je xxxxx xxxxxx xxx xxxx chladicí xxxxx.
4.1.1.1 Xxxxxxx xxx
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx obsahující vhodnou xxxxxxxx kapalinu, xxxxx xx míchá tak, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx jakýmikoli xxxxx xxxx v xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 0,2 °X. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx kolísat xxxxxxx x xxxxxxx ± 0,5 °C xx nominální xxxxxxx xxxxxx výrobcem.
Je xxxxxxxx, xxx v lázni xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx kapaliny. Xxxx xxxxxx zkumavky xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx chladicí kapalinou.
4.1.1.2 Xxxxxxxxxx xxx
Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx proud xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Teplota xxxxxxxx může xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx ± 0,5 °X xx xxxxxxxxx hodnoty xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx 33 % (X/X) vodný xxxxxx 1,2-xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx).
4.1.2 Xxxxxxxxx a příslušný xxxxx
Xxxxxxxxx se skládá xx skleněné sondy x xxxxxxxxxx průměru 1,80 ± 0,2 xx x x xxxxxxx vodiče xxxxxxxxx 0,31 mm. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx nižší xxx 2 xxxxxxx x xxxxxxx b (xxx xxxxxxxx) xxxx být xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxxx, xxx při − 0,512 °C xxxxxxx termistoru xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x 0,0005 °X. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx ± 5 %.
Xxxx xx xxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx v xxx xxxxxxxx na vzorky x x xxxx, xxxxx xx 44,6 ± 0,1 mm xxx xxxxxx okrajem xxxxxxxx (viz xxxxxxx xx straně 15). Xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx:
β xxxxxxxx termické vlastnosti xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx
− xX / xX × 1 / X = β / X2
xxx:
X xx xxxxxxx xx stupních Xxxxxxx
X xx xxxxx x ohmech při xxxxxxx X,
− xX / dT × 1 / X xxxxxxxx koeficient
β je xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx materiálu xxxxxxxx xxx výrobě xxxxxxxxxx. X xxxxx xxxxx xx doporučuje xxxxxxx xxxxx xxx 3000.
4.1.3 Xxxxxx a odečítací xxxxxxxx
4.1.3.1 Xxxxxxx měření
Použitý xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx mrznutí. Xxxxx xx xxxx xxxxxx, xxx teplota xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx ± 0,002 xX po dobu xxxxxxx 20 xxxxxx.
4.1.3.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx tolerance xx ± 10 % x jejichž xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx vyšší xxx 2×10−5°X.
Xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) xxxxx xx nesmí xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx rozsahu x více xxx x 0,3 % xxx maximální xxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx stupnice xx xxxxxxxxx xxxxx po xxxxxxxxx 0,001 °C.
4.1.3.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx zařízení xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx nejméně 0,01 °X x rozmezí xx 0 °C xx –1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxx xxxxxxxxxxx obvodu xxxx být taková, xxx odchylka dvou xx xxxx následujících xxxxxx téže xxxxxxx xxxxxx vyšší xxx 0,001 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxx přístroje xxxxxxxxx x žádném xxxx xxxxxxx xx – 0,400 °X xx – 0,600 °C xxxxx xxxxx xxx ± 0,001 °X.
4.1.4 Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx testovacího xxxxxx xx použije xxxxxx xxxx x xxxxxxx 1 až 1,5 xx, který xxxxxxxxx x xxxxxx,.
Xxxxxxxx xx měla být xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxx konec xxx xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxx 1,5 xx xxx xx pod xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx ± 1,5 xx), xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx stanovení. Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx nesmí v xxxxxx xxxxxxxx dotknout xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx.
4.1.5 Zařízení xx vyvolání mrznutí
Může xx být xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xx činnosti xxxxxxxx vyvolá mrznutí xxxxxx, aby xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx k xxxx xxxxxxx. X tomu xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx; xxxxxx xxxxxxxx xx zvětšení rozkmitu xxxxxxx xx xxxxx xx dvě sekundy xxx, xxx xx xxxxxxxx dotýkala xxxxx xxxxxxxx na vzorky.
4.1.6 Xxxxxxxx xx xxxxxx
Xxxxxxxx xx vzorky (xxx xxxxxxx 1) xxxx xxxxxxxx x 50,8 ± 0,1 xx xxxxxx; vnější xxxxxx xx 16,0 ± 0,1 xx x xxxxxxx xxxxxx xx 13,5 ± 0,1 xx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxx xxx 0,1 xx.
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx 29,8 xx (21 xx xxx xxxx xxxxxxxx), xxxxx xxxxx objem xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx.
4.1.7 Xxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx nepřekračovala ± 1 % xxxxxxxxx hodnoty, xxxx xxxxxx zdroj xxxxxx x ± 6 %.
4.2 Analytické xxxx
4.3 Xxxxxxx xxxxx o xxxxxx 1000 xx, xxxxx X.
4.4 Sušárna, xxxxx odvětraná, xxxxxxxxxxxx xx 130 ± 1 °X
xxxx
Xxxxxxxxxx xxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na 300 ± 25 °X.
4.5 Exsikátor
5. Xxxxxxx
5.1 Xxxx destilovaná x xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx na 20 ± 2 °X, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx uhličitý.
5.2 Xxxxxxx sodný, xxxxxxx x.x., jemně xxxxx, xxxxxx 5 hodin xxx xxxxxxx 300 ± 25 °X x xxxxxxxxxx peci xxxx xxxxxxx 24 xxxxx při xxxxxxx 130 ± 1 °X v sušárně x zchlazený xx xxxxxxxxx teplotu x xxxxxxx exsikátoru.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků
Navážit xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (viz tabulka 1) xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5.2) xx xxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx (5.1), xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x objemu 1000 xx x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx 20 ± 2 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx při xxx 5 °C x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx 250 xx.
Xxx xxxxxxx roztoků chloridu xxxxxxx xxx 20 °X
x NaCl/l |
°C |
6,859 |
-0,408 |
7,818 |
-0,464 |
8,149 |
-0,483 |
8,314 |
-0,492 |
8,480 |
-0,502 |
8,646 |
-0,512 |
8,811 |
-0,521 |
8,977 |
-0,531 |
9,143 |
-0,541 |
10,155 |
-0,600 |
Před xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx roztok xxxxxxx promíchá xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Nikdy xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztok xxx xxxxxx, aby xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx x láhve xxxxxx xx xxxxx x čisté kádinky. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx x lahví, xxxxx xxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx neobsahují fungicid (xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 10 g/l).
6. Kalibrace xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx nastaven tak, xxx se xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx o xxxx xxx 1 °X xx xxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx vystaven xxxxxxxxxx xxxxxx, průvanu xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx 26–27 °X.
Xxxxxxx xx, xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xx byl xxxxxx xxxxxxx 12 xxxxx xxxx kalibrací. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx chladicích xxxxxxx.
Xxxxxx xxx standardní xxxxxxx (xxx xxxxxxx výše), xxxxxxx bod xxxxxxx xx xxxxx xxx xxxx těsně xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx bodu xxxxxxx xxxxxx mléka x xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx by xxxxxxx xxxxx xxx xxxxx než – 0,100 °X.
(X některých xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx obvod xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx, xx xx xxxxxx xx dané xxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. V těchto xxxxxxxxx výběr xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, který xx xxxxx xxx xxxxxxx, jako xxxxxxx x kalibračních xxxxxxx xxxxxxxxx kalibrační xxxxxx; xxxxxxx xxxx tuto xxxxxxx xxxxx).
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 ml xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx a xxxxx xxxxxxxx na vzorky, xxxx xxxxx pomocí xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxxxx xxxx vyrobeny a xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx vzorky xxxxx (stejný druh xxxx, umyté x xxxxxxxxxx demineralizovanou xxxxx). Xxxxxxx standardních xxxxxxx xxxx stejné xxxx xxxxxxx xxxxxx mléka.
Podle xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x kryoskopu xxxxxx roven bodu xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx tento xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x střídavě xx xxxxxxxx takovým xxxxxxxx, dokud xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx každý roztok xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x nich, xxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx nastavení. Kryoskop xx tedy xxxxxxxxx x použití x xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx vzorku mléka, xxxx by xxxx xxxxx xxxxxxxx úprava.
7. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku
7.1 Xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx vzorky xxx xxxxxxx mezi 0 °X x 5 °X.
7.2 Xxxxx xx xx nezbytné xxxxxxxx odstranit xxxxxxx xxxxxxxxx cizí xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxx ve xxxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx promíchat. Xxxxx se xxxxxxx xxxxx, nesmí xxxxxxxx x xxxxxx x xxxx být xxxxxx xx laboratorní xxxxxxx.
7.3 Xxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (mezi 0 x 5 °C) xxxx xx xxxxx xx ohřát xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx však xxxxxxxx xxxx xx to, xxx xxxxxxxxxx roztoky x vzorky mléka xxxx xxx použití xxxxxxx teplotu.
7.4 Stanovit xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx možno xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxx, jejichž xxxxxxxx xxxxxxxxx 0,18 x xxxxxxxx xxxxxx xx 100 ml xxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx.
7.5 XXX mléko x xxxxxxxxxxxxx mléko xxxx stát xxxxxxx 20 xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
8. Postup
8.1 Předběžné xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx, xxx hladina x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx jsou x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, případně xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx na vzorky. Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx se, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxx. Pokud xxx xxxxxxxx zapnut xxxxxxx 12 hodin, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx jeho xxxxxxx.
8.2 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxx s xxxxx xxxxxxx – 0,512 °X), dokud se xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx měřeních xxxxxxx xxxxx x více xxx 0,001 °C. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xx bodu xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx než 0,002 °X, kryoskop se xxxxx kalibrujte, xxx xx popsáno v xxxx 6.
Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx nepřetržitě, xxxxxxx xxxxxxxx kalibrace xx provádí xxxxxxx xxxxxx xx hodinu, xxxxxxx xx zohlední xxxxxx xxxxxxx.
8.3 Stanovení xxxx xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x několikerým xxxxxxxx. Xxxxx neprotřepávat standardní xxxxxx xxx xxxxxx, xxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxx přidat 2,5 ± 0,1 xx xxxxx do xxxxx x xxxxx zkumavky xx xxxxxx. Xxxxxxx xx, že xxxx xxxxx x míchačka xxxxx x xxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx odspoda xxxxxx jemnou, xxxxxx x xxxxxx nepouštějící xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx do kalibrovaného xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Mléko xx xxxxxxx x mrznutí xx xxxxxx při xxxxxxx určené xxxxxxxx x přesností xx 0,1 °X.
(X některých xxxxxxxxxxxxx přístrojů xx xxxxx odečíst xxxx xxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; u ručních xxxxxxxxx xx nezbytné xxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xx xx xxxxxxx, xxx mrznutí xxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxx.)
Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx začne xxxxx xxxx xxxxxxx, xxx xx dosaženo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx se xxxxxx x zopakuje xx x xxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxx vzorek rovněž xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx na 45 °X a 5 xxxxx se xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Teplota xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx rychle xxxxxxx xx xx hodnotu, xxxxx xxxxxxx po xxxxxxx dobu xxxxxxxxxx, x poté xxxxxx. Xxx xxxxxxx odpovídá xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx této xxxx x xxxx hodnotu xx nutné zaznamenat.
Poznámka:
Doba, xx xxxxxx teplota xxxxxxx xxxxxxxxxx, x xxxxxx interval xxxx xxxxxxxx mrznutí x xxxxxxxxx maximální xxxxxxx, xx xxxx xxxxxx xx vzorku a xxx xxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxx xxxxx. Xx nezbytné xxxxxxxxxx xxxxxxxxx teplotu.
Když xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxx x otřít xxxxx x míchačku směrem xxxxxxx xxxxxx jemnou, xxxxxx a chlupy xxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxx xxxx naměřenými body xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx opakovatelnosti (0,004 °X), provést druhé xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Pokud xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx na 0,004 °X, xxxxxx xx x xxxxxxx xx xxx xxxxxxx konečného xxxxxxxx.
8.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxxxx přístroje xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx na xxxxxx na xxxxx xxx vzorky x xxxxxx provozní xxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
(X xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx to xxxx možné; x xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxx se xxxxxxx, xxx xx sonda xxxx začátkem xxxxxx xxxxx zchlazena, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx několika xxxxxxx xxxxxxxxx, dokud se xxxxxxxxx shodné xxxxx.)
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Xxxxxxx
Xxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx potvrzena, xx xxxxxxxx xx považuje xxxxxx xxxx dvou xxxxxxxxxxxx xxxxxx získaných xxx bod xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na xxx xxxxxxxxx místa.
Pokud xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx je liché xxxxx, xx třeba xxxxxx zaokrouhlit xx xxxxxxxxx sudou xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx:
Xxx mrznutí (°C)
Hodnoty xxxxxxxxxxxx stanovení |
Průměr |
|
-0,544 |
-0,545 |
-0,544 |
-0,545 |
-0,546 |
-0,546 |
9.2 Spolehlivost
9.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x): 0,004 °X
9.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X): 0,006 °X
Xxxxxxx 1
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1 (xxxxxx xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxx ke xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx)
XX. STANOVENÍ AKTIVITY XXXXXXXXX
1. Předmět a xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup xxx stanovení aktivity xxxxxxxxx v pasterovaném xxxxx.
2. Xxxxxxxx
2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx množstvím xxxxxx x μg xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx mléka xx xxxxxxxxx podmínek.
2.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx 4 xx fenolu xx 1 ml.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx ve vzorku xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx fenylfosfátu xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx fenol reaguje x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxx dibromindofenolu (namodralé xxxxx), xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx měří při 610 xx. Poté xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx vzorkem, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxx xx xxxx 50,0 x hydroxidu xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) [Ba(OH)2.8H2O] x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.1.2 Xxxxxxxxx xx xxxx 22,0 x xxxxxxxx xxxxxx (X3XX3) x xxxxxxx xx 1000 ml.
4.1.3 Xxxxxx 500 xx xxxxxxx xxxxxxx na 50 °X, oba xxxxxxx xxxxxxx, promíchat, rychle xxxxxxxx asi xx 20 °X, x xxxxxxx nutnosti xxxxxxx xxxxxxx xX na 10,6 ± 0,1 xxxxxxxx xxxxxxx 4.1.1 xxxx 4.1.2. Xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx nádobě.
4.1.4 Xxxx xxxxxxxx zředit xxxxxx stejným xxxxxxx xxxx.
4.2 Xxxxxxx roztok xxx vyvolání zabarvení
Rozpustit xx xxxx 6,0 x methaboritanu sodného (XxXX2) xxxx 12,6 x NaBO2.4H2O x 20,0 g chloridu xxxxxxx (XxXx) x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.3 Tlumivý xxxxxx xxx xxxxxxx vzniklého xxxxxxxxx
Xxxxxx 10 ml xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx zabarvení (4.2) xxxxx xx 100 xx.
4.4 Xxxxxx substrátu
Rozpustit 0,1 x fenylfosfát xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xx 100 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.3) nebo 0,5 x fenylfosfátu xxxxxxxxxxx xx 4,5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2), xxxxxx dvě kapky xxxxxxx XXX (4.6) x xxxxxx xxxx 30 minut xxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 2,5 xx n-butanolu x xxxxxx xxxx, xxxxx xx butanol-1 neoddělí. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx-1. V xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx x chladničce xxxxxxx xxx; xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, x to xxxxxxxx 1 ml xxxxxx xxxxxxx xx 100 xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.3).
4.5 Xxxxxxxxx xxxxx-xxx
Xxxxxxxxx xx xxxx 3,0 g xxxxxx xxxxxxxxxxx (XxXX4 · 7X2X) a 0,6 x xxxxxx xxxxxxxxx (XxXX4 · 5X2X) x xxxxxxx na 100 ml.
4.6 Xxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx BQC)
Rozpustit x 10 ml 96 % (X/X) xxxxxxxx 40 ± 1 mg 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXX) (C6H2Br2ClNO6).
Skladovat x xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx. Vyhodit xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxx je xxxxxx xxx xxxxx xxxxx.
4.7 Xxxxxx síranu měďnatého (XX)
Xxxxxxxxx xx xxxx 0,05 g xxxxxx xxxxxxxxx (XxXX4.5X2X) x xxxxxxx xx 100 xx.
4.8 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx
4.8.1 Xxxxxxx 200 ± 2 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx do xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 100 ml, xxxxxx vodu, xxxxxxxxx x doplnit na 100 xx. Xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
4.8.2 Zředit xxxxx 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx 100 xx x xxxxxxxxx. 1 xx obsahuje 200 μx fenolu.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx ze xxxx
Xxxxxxxx:
x) Veškeré xxxxxxx xx xxxx, jakož x zátky a xxxxxxxxx xxx odběr xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx vyčištěny. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx čerstvě xxxxxxxxxx destilovanou vodou xxxx čistění xxxxx.
x) Xxxxxxx xxxx plastových xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
5.1 Analytické váhy
5.2 Xxxxx xxxxx nastavitelná xx 37 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx odečty xx xxxxxx xxxxx 610 xx.
5.4 Xxxxxxxx, 16 xxxx 18 × 150 xx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx po 5 ml a 10 ml.
5.5 Pipety
5.6 Xxxxxxxx nálevky xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx. x xxxxxxx 5 cm.
5.7 Xxxxxxxx filtry x xxxxxxx xxxxxxx 9 xx xxx střední xxxxxxxx filtrace.
5.8 Odměrné xxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
6. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxx stanovení zabránit xxxxx přímého slunečního xxxxxx.
x) Xxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx falešně pozitivní xxxxxxxx x je xxxxx xx xxx xxxxxxx. Je proto xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1 Příprava xxxxxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx vzorků. X xxxxxxx xxxxxxx skladovat xxxxxx v chladničce, xxxxx xx xxxx xxx xxx dny.
6.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx pipety xxxxxx 1 xx xxxxxx do xxxxx xx xxxx zkumavek (5.4), xxxxx xxxxxxxx xxxxxx jako xxxxxxxxx xxxx slepý xxxxx.
6.3 Xxxxxxxxx
6.3.1 Slepý xxxxxx xxxxxxxx dvě xxxxxx xx vroucí xxxx; xxxxxxxx x kádinku x xxxxxx vodou xxxxxx xxxxxxxxxx folií, xxx se prohřála xxxx xxxxxxxx. Rychle xxxxxxxx xx pokojovou xxxxxxx.
6.3.2 Xx xxxxxx xxxxxxx ošetřovat xxxxx x testovací xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx 10 xx roztoku xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxxxxx.
6.3.3 Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 60 xxxxx xx xxxxx xxxxx (5.2) x občas (xxxxxxx xxxxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
6.3.4 Stejně xxxx x bodě 6.3.1 xxxxxxxx xxx xxxxxx ve xxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.5 Xx každé zkumavky xxxxxx 1 xx xxxxxxxxx zinek-měď (4.5) x xxxxx xxxxxxxxx.
6.3.6 Xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx papír, xxxxx xxxxx dva xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx znovu, xxxxx není filtrát xxxxxxxx xxxx; xxxxxxxxxx 5 xx ve xxxxxxxx.
6.3.7 Xxxxxx 5 xx xxxxxxxxx roztoku xxx vyvolání xxxxxxxxx (4.2).
6.3.8 Xxxxxx 0,1 xx roztoku BQC (4,6), xxxxxxxxx a 30 minut xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.9 X xxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx délce 610 xx.
6.3.10 Pokud absorbance xxxxxxxx v xxxx 6.3.9 xxxxxxxxx absorbanci xxxxxxxxxxxx roztoku obsahujícího 20 μg fenolu xx xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.4.4, opakovat xxxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxx vzorku. Xxxxxxxxx xxxxxxx smícháním xxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku x xxxxxxx objemem xxxxx xxxxx testovacího xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxx do xxxx, xxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
6.4.1 Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (4.8.2) připravit vyhovující xxxx xxxxxxxxx standardních xxxxxxx obsahujících 0 (xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxx), 2, 5, 10 x 20 μx xxxxxx xx xxxxxxxx. Xx každé x xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx pipety 1 xx xxxx x 1 ml xxxxxx standardních xxxxxxx xxxxxx.
6.4.2 Do xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 1 xx roztoku síranu xxxxxxxxx (4.7), 5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx zředění xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.3), 3 xx vody x 0,1 ml xxxxxxx XXX (4.6); promíchat.
6.4.3 Xxxxxx vyvíjet zabarvení 30 minut xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
6.4.4 V xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx slepým xxxxxxx xxxxxx absorbanci xxx xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.4.5 Xx základě xxxxxx xxxxxxxxxx (6.4.4) xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx přidaného fenolu (6.4.1) xxxxxxxxx regresní xxxxxx metodou xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7. Xxxxxxxxx výsledků
7.1 Xxxxxxx x xxxxxx
7.1.1 Xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (6.3.9) xxxxxxxxx xxxxxxxx fenolu pomocí xxxxxxxx xxxxxx (6.4.5).
7.1.2 Xxxxxxxxx aktivitu xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x μx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxx xxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxxx xxxxxxxxx = 2,4 × X × X
xxx
X xx množství xxxxxx x μg xxxxxxx xxxxx bodu 7.1.1;
D xx xxxxxx xxxxxxx xxx zředění provedené xxxxx xxxx 6.3.10 (x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx X = 1).
2,4 xx xxxxxx xxxxxxx (5/12 z 1 xx xxxxxxxxxxx xxxxxx) – xxx 6.2 xx xxxxxxxxxx x 6.3.2, 6.3.5 x 6.3.6.
7.2 Xxxxxxxxxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (r) : 2 μg fenolu/ml.
7.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) : 3 (xxxxxxxxx) μx xxxxxx/xx.
7.2.3 Xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx 6.3.10, xxxxxx xxxxxxx x 7.2.1 x 7.2.2 xx týkají xxxxxxxx získaných xx xxxxxxxxx xxxxxx.
XXX. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Předmět x oblast xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx, xxxxx xxxxxx xx kontrole pasterace.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx reakce na xxxxxxxxxx:
Xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx reakce xx xxxxxxxxxx:
Xx 30 xxxxxx po xxxxxxxxxx xx neobjeví žádné xxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxxx rozkládá xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (Xxxxxxxx xxxx). Intenzita xxxxxxxxx xx přímo úměrná xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Činidla
4.1 Xxxxxx 1,4 fenylendiaminu
Rozpustit x teplé xxxx (50 °X) 2 x 1,4 fenylendiaminu (X6X8X2) a xxxxxxx xx 100 ml. Xxxxxx skladovat x xxxxxx a xxxxx, x tmavě xxxxx xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx. Během xxxxxxx xx xxxx xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx 1,4 fenylendiaminu xxxxxxx xxxxxxxxx, kterou je xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2 Xxxxxx xxxxxxxx vodíku
Vodou xxxxxx 9 ml 30 % xxxxxxxx vodíku x xxxxxxx na 100 xx. Pro xxxxxxxxxxx přidat 1 xx xxxxxxxxxxxxx kyseliny xxxxxx xx litr xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx asi xxxxx měsíc, xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx a xxxxx, x láhvi xx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
5. Xxxxxx
5.1 Xxx 5 xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
5.2 Xxxxxx 5 xx xxxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx (4.1).
5.3 Xxxxxx 2 xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.2).
5.4 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx zabarvení. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx 30 sekund xx xxxxxxx xxxxxxx, reakce xxxx xxxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXX 30 °X
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx technikou xxxxxxxx xxxxxxx při 30 °X. Postup xx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, UHT xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx bylo 15 xxx preinkubováno při 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx mléka x xxxxxxxxxxx xxxxxx x Petriho xxxxxxx x nechat xxxxxxxxx 72 xxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxxx a vypočítat xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxx xxxx pasterovaného mléka xxxx xx 0,1 xx preinkubovaného xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx nebo XXX xxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx skla
Obvyklé xxxxxxxxxxx vybavení, zejména:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Horkovzdušná xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, nastavitelný xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Inkubátor, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °C.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 jednotky pH.
4.1.5 Xxxxx lázeň, nastavitelná xx 45 ± 1 °C.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Mechanické xxxxxxxxx
4.1.9 Xxxxxxxx schopná xxxxxxx 1 xx xxxxxx mléka xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x 9 xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx obsahu zkumavky.
4.2 Xxxxxxx ze skla
4.2.1 Xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxx x dostatečným xxxxxxx, s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x promíchání 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 xx xxxx zkumavky x xxxxxx 20 ml xxx xxxxxxxxxx kultivačního xxxxx.
4.2.3 Xxxxxx (utěsněné xxxxx), xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x nepoškozeným xxxxxx, x nominálním xxxxxx 1 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx misky z xxxxxx, bezbarvého xxxx xxxx xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, xxx xxxxx xx vnitřní xxxxxx xxx 90 xx 100 xx. Vnitřní xxxxxxx xxxxx xx xxxx být xxxxxxx 10 mm. Dno xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx počítání xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx ze xxxx:
Xxxxxxx ze skla xx xxxxxxxxxxx jedním x xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx při xxxxxxx 170–175 °C;
b) x xxxxxxxxx (4.1.2), nejméně 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxx na xx, xxx bylo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx páry: xxxxx xx materiál xxxxxxxxxxx v xxxxxxxx, xxxx nádoby xx xxxxxx xxx napevno xxxxxxxx, uzávěry xxxx xxxxx by xxxx xxx volné.
Pomůcky xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xx xxxx vysušit xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx – agar xx xxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxxxxx:
Xxxxxxxxxx extrakt |
2,5 x |
Xxxxxxx |
5,0 x |
X-xxxxxxx (+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 g |
Sušené xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 x |
Xxxx |
10–15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx vlastností xxxxx |
Xxxx |
1000 ml |
Sušené odstředěné xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx žádné xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx se xxxxx xxxxxxxxxxxx testy xx sušeným xxxxxxxxxxx xxxxxx, které xxxxxxxx xxxxx inhibiční látky xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X xxxxx pořadí xxxxxxxxxxx a rozpustit xx vodě kvasnicový xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx x xx stálého xxxxxxx xxxxx xx xxxx, xxxxx se xxxx xxxxx nerozpustí, xxxx xxxxxxxx v xxxx asi 30 xxxxx.
Xxxxx to xx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); pokud xx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xX, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxxxx byla xxxx xxxxxxx 6,9 ± 0,1 při 25 °C.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x skladování xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx médium (5.1) v xxxxxxxxxx xx 100 do 150 xx xx xxxxx nebo po 12 až 15 xx xx xxxxxxxx (4.2.2). Baňky a xxxxxxxx uzavřít.
15 minut xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx kultivační xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx v temnu xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx ne xxxx než 1 xxxxx po jeho xxxxxxxx.
5.3 Komerční dehydrované xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) se může xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kultivačního xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx přidat sušené xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, pokud xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xX xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X xxxxxxx xxxxx xxxx 5.1, xxxx xxxxxxxx, sterilizovat x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Roztok pepton/sůl
Složení:
Pepton |
1,0 x |
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
8,5 x |
Xxxx |
1000 ml |
Příprava:
Rozpustit složky xx xxxx, pokud xx xx nutné, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xX-xxxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx upravit xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 mol/l) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxxxx xxxx jeho xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) do xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx po xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx ihned, skladuje xx x xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx po xxxx xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) xx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx dehydrovaných tablet xxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx výrobce. Upravit xX xxxxxxx xxxxx xxxx 6.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx ředidla xxxxx xxxx 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxxx kultivačního xxxxx
Xxxx xxxxxxxxx mikrobiologického xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xx vodní xxxxx (4.1.5) na 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx vzorku xxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxx promíchat, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x to 25 xxxxxxxx otočeními nádoby xx xxxxxxx. Xx xxxxx zabránit xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx rozptýlit. Xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx ředění (10-1) (xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx pasterovaného mléka xx 9 xx xxxxxxx (6.1), xxxxxxx xxxxxx nesmí xxxxxx xx xxxxxxxx s xxxxxxxx. Xxxxxxx ředidla xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx mléka. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx míchačkou (4.1.9).
Xxxxx xx xxx xxxxxxxx ředění 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx desetinných xxxxxx (xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) přenést 1 xx primárního xxxxxx (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx pokynů x xxxx 7.3.
Xxxxx xx xxx xxxxxx 10−2.
S xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx ředění xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx přiměřené xxxxxxxx mikroorganismů (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
7.5.1 Xxxxxx xxxxx: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 ml vzorku x/xxxx vhodného desetinného xxxxxx. Musí xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Pro každé xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx misku.
7.5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) přenést xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx desetinného xxxxxx. Xxxx být xxxxxxxxx nejméně xxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx vhodnou misku.
7.5.3 XXX mléko x xxxxxxxxxxxxx mléko (xxxxxxxxxxx xx 15 xxxxx xxxxxxxx xxx 30 °X – xxxxxxxx 85/397/XXX, příloha X xxxxxxxx XXX xxx 5):
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx do misky (4.2.4) 1 ml xxxxxx mléka (7.2). Xxxxxxxxx xxx xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Do xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx asi 15 xx 18 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Ihned xxxxxxxxx xxxxxx Petriho xxxxx, xxx xx xxxxxxxx došlo x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx, testovacího vzorku xxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 minut.
Nechat xxxx xx vodorovném, xxxxxxxx x čistém xxxxxxx, dokud xxxxxx xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx misky do xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx obrácené dnem xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxx misek. Xxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 72 ± 2 xxxxx při 30 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx x Xxxxxxx miskách xxxxxxxxxxxxxx xxxx než 300 xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx světle. Xxx xxxxxxxxx počítání xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) a/nebo xxxxxxxxxx počítadlo (4.1.8). Xx xxxxx dbát xx xx, aby xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx sraženin x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx koloniemi. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx průzkum xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx zvětšením (4.1.7), x cílem odlišit xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx považují xx xxxxx xxxxxxx. Pokud xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx méně než xxxxxxxx xxxxx, spočítat xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx misky x xxxxxxxxx odpovídající xxxxx xxx celou misku. Xxxxx kolonie tvořící xxxxxx xxxxxxxxx více xxx čtvrtinu xxxxxx xxxxx, xxxxx vyřadit.
8. Xxxxxxx x vyjádření xxxxxxxx
8.1 Xxxxxx x xxxxxxxxxxx mléko
8.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx misek obsahujících 10 xx 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.1.2 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx syrového xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx tohoto xxxxxx:
∑X / (x1 + 0,1x2) d
kde:
∑C ΣX xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 8.1.1.
(x1 + 0,1 x2)x xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx:
x1 xx xxxxx xxxxx xxx prvním xxxxxxx
x2 xx počet misek xxx xxxxxx xxxxxx
x xx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxx platné xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx číslice pět, xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxx (pasterované xxxxx):
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 a 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; = 278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2
= 6290,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.1.3 Xxxxx xxxx všechny xxxxx nižší než 10, xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxxxxx xx "xxxxx xxx 10 x x", xxxxxxx "d" xx xxxxxxxxxx hodnota xxxxxxxxxx faktoru xxxxxxx.
8.1.4 Xxxxx xxxx všechny xxxxx xxxxx než 300 x počítání xx možné, xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxx převrácenou hodnotou xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx "Xxxxxxxxxx xxxxx mikroorganismů na xx".
8.2 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xxxxx než 10 xxxxxxx xx 0,1 xx xx xxxxxxxx xx nevyhovující požadavkům xxxxxxxx 85/397/EHS.
9. Spolehlivost
Výsledky xxxxxxxxxxx uznaných kruhových xxxxx ještě nejsou x xxxxxxxxx.
X. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX PŘI 21 °X
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxx mikroorganismů technikou xxxxxxxx kolonií xxx 21 °X x xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxx dní xxxxxxxxxxxxx xxx 6 xX s xxxxx xxxxxxxx xxxxxx kontaminace xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx se xxx xxxxxx se x xxxxx xxx 6 °X.
2. Definice
"Mikroorganismy" xx rozumějí organismy, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxx xxx 6 °X. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx 25 xxxxx xxx 21 °X. Xxxxxxxx xxxxxxx x vypočítat xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
4. Xxxxxxxxx x pomůcky xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, zejména:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, schopný xxxxxxxx xxxxxxx:
x) 6 ± 0,2 °X
x) 21 ± 1 °X xx xxxxx xxxxxx xxxxxx.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, přesný xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx lázeň, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, zvětšení 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, zvětšení 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Xxxxxxxx xxxxxxx rozmíchat 1 xx vzorku xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx ředění x 9 xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx uzávěry a xxxxxxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx 10 ml xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 xx nebo zkumavky x xxxxxx 20 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx vatou), skleněné xxxx xx sterilního xxxxxxxxxxxx materiálu, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx o xxxxxxx 1,75 až 3 xx.
4.2.4 Petriho xxxxx x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx nebo ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx misek xx xxxxxxx xxxxxx asi 90 až 100 x. Vnitřní xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx nejméně 10 xx. Xxx nesmí xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx kolonií.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx ze xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx:
x) v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx jednu xxxxxx xxx xxxxxxx 170–175 °X;
x) x xxxxxxxxx (4.1.2), nejméně 20 xxxxx xxx teplotě 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx autoklávu xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx páry: pokud xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxx napevno xxxxxxxx, xxxxxxx nebo xxxxx xx xxxx být xxxxx.
Xxxxxxx ze xxxx xxxxxxxxxxxxx v autoklávech xx se xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx páry.
Pipety xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx x horkovzdušné sušárně (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx – xxxx xx xxxxxxx xxxxxx
5.1 Složení:
Kvasnicový xxxxxxx |
2,5 x |
Xxxxxxx |
5,0 g |
D-glukóza(+) xxxx dextróza |
1,0 g |
Sušené xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 x |
Xxxx |
10-15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx mléko by xxxxxx obsahovat žádné xxxxxxxxx látky. Toto xx ověří xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx mlékem, které xxxxxxxx xxxxx inhibiční xxxxx neobsahuje.
Příprava:
V xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx ve xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx mléko. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx a uvést xx xxxx xx xxxxxxx míchání, dokud xx agar xxxxx xxxxxxxxxx, nebo zahřívat x xxxx asi 30 minut.
Pokud xx xx xxxxxxxx, přefiltrovat xxxx papír.
Zkontrolovat xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxx pH, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Rozdělit xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 xx xx baněk nebo xx 12 xx 15 xx xx xxxxxxxx (4.2.2). Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) při 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX kultivačního xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx nepoužije xxxxx, xxxxxxxx xx v xxxxx xxx teplotě xxxx 1 a 5 °C, xxxxx xx xxxx xxx 1 měsíc xx xxxx přípravě.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kultivační xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx dehydrovaného xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xX na 6,9 ± 0,1 při 25 °X postupem xxxxx xxxx 5.1, xxxx xxxxxxxx, sterilizovat x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. 5.2.
6. Ředidla
6.1 Xxxxxx xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
Xxxxxx |
1,0 g |
Chlorid xxxxx (XxXx) |
8,5 x |
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx vodě, xxxxx to je xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xX-xxxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx nezbytné xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx sterilaci xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °C.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx ředidlo (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx xx xxxxxxxxx každá xxxxxxxx xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °C. Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 měsíc xx xxxx xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) xx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx a skladovat xxxxxxx xxxxx xxxx 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nechat xxxxxx xxxxxxxxx potřebné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média x zchladit xx xxxxx lázni (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx mléka
7.2.1 Inkubovat x xxxxxxxxxx [4.1.3 x)] xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx xx xxxx xxxxx, reprezentativní vzorek x objemu nejméně 100 ml xx xxxx 120 ± 2 xxxxx xxx 6 ± 0,5 °X.
7.2.2 Po xxxxxxxx xxxxxx mléka xxxxx xxxxxxxxx, xxx byly xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xx 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx vzorkem. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxx x odběrem xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx primárního xxxxxx (10−1)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) syrového xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 9 xx xxxxxxx (6.1), přičemž xxxxxx nesmí přijít xx kontaktu x xxxxxxxx. Xxxxxxx ředidla xxxx xxx přibližně xxxxxx jako xxxxxxx xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx promíchávat xxxx xxxxxxxx ředění míchačkou (4.1.9).
Xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx desetinných xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxxxxxx ředění (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) podle xxxxxx x bodě 7.3.
Xxxxx xx tak xxxxxx 10−2.
S xxxxx xxxxxx xxxxx desetinná xxxxxx xx xxxxx xxxxxx opakuje xxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Naočkování Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx vzorku x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ředění. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx dvě xxxxxx. Xxx každé xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx jednu xxxxxxx xxxxx.
7.6 Nalévání xxxxxxxxxxxx média
Do každé xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 15 xx 18 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Ihned xxxxxxxxx xxxxxx Petriho xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxx k xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kolonií.
Doba mezi xxxxxx přípravy xxxxxx xxxxx x smícháním, xxxxx druhu mléka, xxxxxxxxxxx vzorku xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx nesmí xxxxxxxxx 15 minut.
Nechat xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx neztuhne.
7.7 Xxxxxxxx Petriho xxxxx
Xxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx inkubovat xxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx nesmějí xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxx x xxxxxxxx se xxxxxxx a xxxxxx xxxxx inkubátoru.
Inkubovat 25 xxxxx xxx 21 ± 1 °C.
7.8 Xxxxxxxx kolonií
Počítat kolonie x Xxxxxxx miskách xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 300 xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxx tlumeném xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx počítání xxx xxxxxx zvětšovací xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx xxxxx dbát xx xx, aby xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx sraženin x xxxxxxx x drobnými xxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx pochybností provést xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx skla s xxxxxx zvětšením (4.1.7), x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx cizích xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx povlak xx xxxxxxxx za xxxxx kolonii. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx méně xxx xxxxxxxx misky, spočítat xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx misky x xxxxxxxxx odpovídající xxxxx xxx xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx více xxx xxxxxxxx plochy xxxxx, misku xxxxxxx.
8. Xxxxxxx x vyjádření xxxxxxxx
8.1 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 kolonií (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.2 Vypočítat xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na 1 xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxx xxxxxx vzorce:
∑C / (x1 + 0,1n2) x
xxx:
ΣX xx xxxxxxx xxxxx kolonií podle xxxx 8.1,
(n1 + 0,1 x2)x xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx:
x1 je počet xxxxx při xxxxxx xxxxxxx
x2 je xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx
x xx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx byly získány xxxxx xxxxx.
Xxxxx se xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx číslice. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx xxx, xxx sousední xxxxxxx xxxxx xxxx sudá.
Příklad:
Ředění 10−2: 278 x 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 a 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; =278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2=
=629 / 0,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.3 Xxxxx xxxx xxxxxxx počty xxxxx xxx 10, xxxxx, že počet xxxxxxxxxxxxxx na xxxxxxxx xx "xxxxx xxx 10 × x", xxxxxxx "x" xx xxxxxxxxxx hodnota xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
8.4 Xxxxx xxxx všechny počty xxxxx xxx 300 x počítání je xxxxx, xxxxxxx odhad x vynásobit xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx faktoru xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xx".
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx mezinárodně xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx ještě xxxxxx x xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX – XXXXXXXX XXXXXXX XXX 30 °X
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxx kapitola xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx počítání xxxxxxx při 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxx bakteriemi" xx xxxxxxxx bakterie, xxxxx při 30 °X xxxxxxxxx charakteristické xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, jež xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx zkvašovat s xxxxxxx xxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx vzorku xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx x 24 xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx 30 °C. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x, pokud xx xx xxxxx, potvrdit xxxxxxxx necharakteristických xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx na 1 xx xxxxxxxxxxxxx mléka.
4. Xxxxxxxxx x pomůcky xx skla
Obvyklé laboratorní xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Přístroje
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, nastavitelná xx 170 až 175 °C.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, schopný xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °C.
4.1.4 pH-metr xx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Očkovací xxxxx xx xxxxxxx platina-iridium xxxx xxxx-xxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx skla
4.2.1 Zkumavky x xxxxxxxx xxxxxxx x objemem 20 xx, aby mohly xxxxxxxxx konfirmační xxxxxxxxxx xxxxxx (5.2) x Xxxxxxxxx xxxxxxxx vhodné xxxxxxxxx.
4.2.2 Xxxxx o xxxxxx 150 až 250 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx selektivního xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.1).
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx vatou), xxxxxxxx xxxx ze xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 – 10 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx misek xx xxxxxxx xxxxxx xxx 90 až 100 x. Vnitřní xxxxxxx xxxxx by měla xxx xxxxxxx 10 xx. Xxx xxxxx xxx xxxxx nerovnosti, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx kolonií.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx:
Xxxxxxx xx skla xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx postupů:
a) x xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx teplotě 170 – 175 °X;
x) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxx na xx, aby bylo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx proniknutí xxxx: xxxxx se xxxxxxxx sterilizuje x xxxxxxxx, xxxx nádoby xx neměly xxx xxxxxxx xxxxxxxx, uzávěry xxxx xxxxx xx xxxx být xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx sterilizované x xxxxxxxxxxx by xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx sterilizovány x xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx médium
5.1 Xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx červení, xxxxx x xxxxxxxx (VRBL xxxx). Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
Xxxxxx |
7 g |
Kvasnicový xxxxxxx |
3 x |
Xxxxxxx (C12H22O11.H2O) |
10 x |
Xxxxxxx xxxxx (NaCl) |
5 x |
Xxxxxxx xxxx |
1,5 x |
Xxxxxxxxx xxxxxx |
0,03 x |
Xxxxxxxxxx violeť |
0,002 x |
Xxxx |
10 xx 15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx a nechat xxxx xxxxxxx minut. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX pomocí xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx to xx xxxxx, xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxx byla xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxx xxxxxx xx xxxx xx občasného xxxxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx xx množstvích 100 až 150 xx xx xxxxxxxxxx xxxxx (4.2.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °C.
V xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx sterilitu xxxxxxxxxxxx xxxxx (6.4).
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx do xxx xxxxx po xxxx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Konfirmační kultivační xxxxxx.
Xxxxxxx:
Xxxxxx |
10 x |
Xxxxxxx (X12X22X11.X2X) |
10 x |
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx |
20 x |
Xxxxxxxxxxx xxxxx |
0,0133 x |
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx složky ve xxxx x xxxxx xx varu.
Zkontrolovat xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx to xx xxxxxxxx, xxxxxxx xX xxxxxxxx (nejméně 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx chlorovodíkové, xxx po sterilizaci xxxx jeho hodnota 7,2 ± 0,1 xxx 25 °C.
Rozdělit xxxxxx po 10 xx do zkumavek (4.2.1) obsahujících Xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx uzavřít.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx média.
Pokud xx xxxxxxxxxx xxxxxx nepoužije xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx ne xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kultivační xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx dehydrovaného xxxxxxxxxxxx média. Xxxxxxx xxxxxx výrobce. Upravit xX, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x skladovat kultivační xxxxxx xxxxx xxxx 5.1 x 5.2.
6. Xxxxxx
6.1 Kultivační xxxxxx
Xxxxxx xxxxxx (VRBL xxxx) xxxxxxx v xxxx 5.1.
6.2 Příprava xxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxx řádně xxxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx nejrovnoměrněji xxxxxxxxx, x to 25 xxxxxxxx otočeními xxxxxx xx xxxxxxx. Xx nutné xxxxxxxx xxxxxx xxxx nebo xxxx xxxxxx rozptýlit. Xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx testovacího xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxx Petriho xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) 1 ml xxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxx xxxxx (4.2.4) a xxx xxxxxxxxx 3 ml xxxxxx xxxxx (6.2).
6.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx naočkované misky xxxxx xxx 12 xx XXXX agaru (6.1)
Xxxxx xx xxxxxx xxxxx promíchat rotací Xxxxxxx xxxxx, aby xx xxxxxxxx došlo x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx mléka x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx médiem xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xx xxxxxx kontroly xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x 12 xx xxxxx VRBL xxxxx, xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx misky.
Nechat xxxx na xxxxxxxxxx, xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xx úplném xxxxxxxx xxxxx nejméně 4 xx XXXX agaru (6.1) xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx.
6.5 Xxxxxxxx Xxxxxxx misek
Přenést xxxxx do xxxxxxxxxx (4.1.3). Misky inkubovat xxxxxxxx dnem xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxx šest xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx vzájemně xxxxxxx, xxx xxx x xxxxxxxx se xxxxxxx x vrchní xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 24 ± 2 xxxxxx xxx 30 ± 1 °X.
6.6 Xxxxxxxx xxxxxxx
6.6.1 Počítat kolonie x Petriho xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx více xxx 150 kolonií. Počítat xxxxx červené xxxxxxx x průměru nejméně 0,5 mm, x xxxx bez xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx bakterie.
6.6.2 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx necharakteristický xxxx (xxxx. jinou xxxxx, velikost xxxx xxxx tvar xxxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (6.7).
6.7 Konfirmační xxxx
Xxxxx xxxxx x xxxx 6.6.2 xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxx (xxxx. 3 xx 5) xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxx jehly (4.1.6), xxxxxxxx xxxxxxxx obsahující xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx zelení (5.2). Xxxxxxxxx xxxxxxxx 24 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °X.
Xx kolonie xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx x Durhamově xxxxxxxx tvoří xxxx.
7. Xxxxxxx a vyjádření xxxxxxxx
7.1 Použít výsledky xxxxx obsahujících maximálně 150 xxxxxxx.
7.2 Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, vypočítat počet xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx procentuálního xxxxxx potvrzených kolonií xxxxxxxxxxxx bakterií.
7.3 Vypočítat xxxxx koliformních xxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxx xxxxxx xxxxxx:
ΣX / x
xxx:
ΣX xx celkový xxxxx xxxxxxx koliformních xxxxxxxx (7.1 x xxxxxxxxxxx xx 7.2), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (6.3).
x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorku (6.3) x xxxxxxxxxxx (3 xx).
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx dvě xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxx 100 xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx číslice xxx, zaokrouhlit xxx, xxx xxxxxxxx číslice xxxxx xxxx sudá.
Pokud xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 150 xxxxxxx, uvést výsledek xxxx "xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií xx 1 ml".
8. Spolehlivost
Výsledky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
XXX. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX
Xxxx xxxxxxxx popisuje dva xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Fluoro-opto-elektronická xxxxxx
X. Mikroskopická xxxxxx
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx somatických xxxxx x xxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx správnosti fluoro-opto-elektronické xxxxxx (viz X.1).
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx postup xx xxxxxxxxxxx buňkami xxxxxxxx buňky, xxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx, jejichž xxxxx xx xxxxx zřetelně xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
3. Xxxxxxx
Xxxxxx 0,01 xx xxxxx xx 1 xx2 povrchu xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx vysuší x xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx pod xxxxxxxxxxx. Xxxxx somatických xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx se vynásobí xxxxxxxxx faktorem, x xxxxx xxxxxx počet xxxxx xx 1 xxxxxxxx.
4. Xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx čistoty x.x..
Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxx |
0,6 x |
Xxxxxxx – 99 % |
54 ml |
1,1,1-trichlorethan nebo xxxxxxxxxxxxxxx |
40 xx |
Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx |
6 xx |
Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxxxx se proto xxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx x baňce xxxxxxx x 1,1,1-xxxxxxxxxxxxx xxxx tetrachlorethan a xxxxxx xx vodní xxxxx na 60 xx 70 °X. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx modř, xxxxx promíchat, 12 xx 24 xxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxx 4 °C x xxxxxx ledovou xxxxxxxx xxxxxxx. Přefiltrovat xxxx xxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxx pórů 10 xx 12 xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx roztok xx xxxxxxxxxxxx uzavřené láhvi. X xxxxxxx vytvoření xxxxxx nebo xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx.
5. Přístroje x pomůcky ze xxxx
5.1 Mikroskop umožňující xxxxxxxx 500 × xx 1000 ×
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx umožňující xxxxxxxxx xx 0,01 xx x přesností xxxxxxx ± 2 %.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxx 20 xx × 5 xx xxxxxxxxxx pro tenkou xxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx sklíčko a xxxxxxx 20 × 5 xx xxx xxxxxx vrstvu.
5.4 Xxxxxxxxxxxx xxxxx deska (30 °X xx 50 °X) xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5 Ventilátor (xxx) pro xxxxxx xxxxx xxxxxx.
5.6 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 30 xx 40 °X pro xxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
5.7 Podložní xxxxxxx s mikrometrickou xxxxxxxx xx 0,01 xx.
6. Postup
6.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxx xxx testován xx xxxxx xxxxx po xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx překročit 6 °X. Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx.
6.2 Xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx (5.6) xx 30 xx 40 °X. Poté řádně xxxxxxxxx. Zchladit na xxxxxxx, xxx xxxxx xxxx kalibrována xxxxxxxxxxxxxx (5.2), například 20 °X.
6.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) například xxxxxxxxx, vysušit xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxxxx v xxxxxxx, xxx jsou xxxxxxxx xxxx prachem.
6.4 Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx (5.2) xxxxxxx 0,01 xx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xx uvedeno xxxx. Xxxxxxx očistit vnější xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx styku x xxxxxx. Přiložit xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (20 xx × 5 mm). Xxxx xx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (5.4) xx xx xxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx.
6.5 Xxxxxxx tenkých xxxxxx
Xxxxxxx xx 10 xxxxx xx barvícího xxxxxxx (4). Xxxxx x, xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.5). Xxxxxxx xxxxx vrstvy xx xxxxxxx xxxx, xxxxx se přebytečné xxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx x xxxxxxx xxx, xxx xxx chráněn xxxx xxxxxxx.
6.6 Xxxxxxxxx mikroskopického xxxx
Xx základě xxxxxxxxx xxxxxxxx (500 × xx 1000 ×) xxxxxx xxxxxx mikroskopického xxxx (5.7).
7. Počítání x xxxxxxx
7.1 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxxxxxx (5.1). Xxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx, a xx taková xxxxx, xxxxx jsou xxxxx xxxxxxxxxxxx a x xxxxx xx x xxxxxxxxxxxxxx poli viditelná xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxx pole xx střední xxxxxxx xxxxx vrstvy x xxxxxxxxx xx pásy xxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx x okrajových xxxxx xxxxx vrstvy. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x tudíž i xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx různých xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxx také xxxxxxxx xxxxxxxxxx mikroskopických xxxx xxxxxxxxxxxx takovým způsobem, xxx všechny xxxxx xxxxx vrstvy xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx buněk, xxxxx xx xxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx k xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx pod xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxx standardizaci xxxxxxxxxxxxx x mechanických xxxxxxx počítání, variační xxxxxxxxxx počítání z xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx vyšší xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx koeficient xxx vzorek xxxxx x xxxxxxx 400000 xx 600000 xxxxx/xx xx neměl xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxx Poissonova xxxxxx rozdělení xxxxxxx 400, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
X = X = s2,
kde:
M xx xxxxxxx xxxxxxx
X xx rozptyl
s xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx:
XX = s × 100 % / M xxxx XX = 100 % / x&xxxx;xxxx XX = 100 % / XXX
X (xxxxxx) představuje xxxxx xxxxxx (xxxxx), xxxxx xxxx xxxxxxxxx (například 400 xxx CV = 5 %).
7.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx faktoru
Při xxxxxxx 0,01 xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx 7.3.1 nebo 7.3.2.
7.3.1 Počítání xxxx xx xxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxx, xxxxx se xxxx xxxxxxx, xx 5 xx. Xxxxx xxxx odpovídá xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxxxxx podložním xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7).
Xxxxxxxx xxxxxx = 20 × 100 / d × x
xxx:
x xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx stupnicí (5.7)
x xxxxxxx xxxxx spočítaných xxxx.
7.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx tenké xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx
xxx:
x xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7)
x celkový xxxxx spočítaných xxxx.
7.4 Xxxxxxx xxxxxx xxxxx
X xxxxx získat počet xxxxx xx ml xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxx somatických xxxxx (7.1 x 7.2) xxxxxxxx xxxxxxxxx faktorem (7.3).
7.5 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxx 7.2) xxxxx xxxxxxxxx 5 %.
Výsledky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
X. Fluoro-opto-elektronická xxxxxx
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxx postup popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx, který xx xxxx xx xxxxxxxxxxxx kalibraci (xxx X.1) xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxx xxxxx x syrovém xxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo bez xxxxxxxx konzervace.
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx postup xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx x důsledku xxxxxxx xxxxxxx XXX minimální xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
3. Princip
Část xxxxxx (xxxxxxxxx 0,2 xx) xx xxxxxxxx xxxxxxxx s tlumivým xxxxxxxx x s xxxxxxxxxxxxxx roztokem. Xxxx xxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xx xxxxx tenké xxxxxx xx xxxxxxx disk, xxxxx slouží xxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx elektrický xxxxxx, xxxxx se xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx buněk se xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx.
4. Xxxxxxx
Xxxxx xxxx stanoveno xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx p.a.. Xxxxxxx voda je xxxxxxxxxxx nebo deionizovaná, xxxx je xx xxxx odpovídající čistoty.
4.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxx draselný |
51,00 x |
Xxxxxxxx xxxxxxxx |
13,75 g |
Polyethylenglykol-mono-p(1,1,3,3-tetramethylbutyl)-fenylether(například Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 xx |
xX 5,7 xx 5,9. Xxxxxxx xxxxx xx 10000 xx. |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Skladování xx xxxxxxxxxxxx uzavřené xxxxxx xx xxxxxx překročit xxxx xxx.
4.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (zásobní xxxxxx)
Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxx |
1,0 x |
Xxxxxxx xxxxx xx 1000 xx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx. Xxxxxxxxxx xx vzduchotěsně xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx dva xxxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx xxxxxx)
Xxxxxxx 20 ml xxxxxxxxx xxxxxxx (4.2) x xxxxxxxx roztokem (4.1) tak, xxx xx xxxxxx xxxxx 1000 xx. Xxxxxxxx xxxxxx xx neměl xxx xxxxxxxx xxxx xxx sedm xxx.
4.4 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx (4.1) |
10 xx |
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % objemové |
10 xx |
Xxxxxxx x 25 % xxxxxxxxxx |
25 ml |
Doplnit xxxxx xx 10000 xx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx překročit xxxxxx dní.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx fluorescence.
Poznámka:
Zařízení xxxx xxx před použitím xxxxxxxxxxx. Xxx se xxxxxxx xxxxx mezi xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxx počítat, x xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx níž xx xxxxxxxx provádí. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (A).
5.2 Vodní xxxxx, x cirkulací xxxx, xxxxxxxxxxxx xx 40 ± 1 °X.
5.3 Zkumavka, x xxxxxxx uzávěrem, objem xxx 15 xx.
6. Xxxxxx xxxxx
6.1 Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xx zkumavce (5.3). Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx konzervován, xxxxxxxx xx může xxxxxxx xx xx xxxxxxxx 24 xxxxx xx xxxxxxxx, neboť xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx překročit 6 °X.
6.2 Konzervace
Chemická xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xx 24 xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx odběru xxxxxx.
6.2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx:
- xxxxxxxx orthoboritá:
konečná xxxxxxxxxxx xxxxxxxx orthoborité ve xxxxxx nesmí xxx xxxxx xxx 0,6 x xx 100 xx. Xxxxx konzervovaný xxxxxx může xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx xxxxxxx 6 až 12 °X;
- xxxxxxxxxxx draselný:
konečná xxxxxxxxxxx dvojchromanu draselného xx xxxxxx nesmí xxx xxxxx než 0,2 x xx 100 xx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx vzorek může xxx skladován xxxxxxx 72 xxxxx xxx xxxxxxx 6 xx 12 °X;
- azid xxxxx:
xxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxx xxxxxx sodným x xxxxxxx xxxxxxxxxxx 0,024 g/100 xx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx 6 až 12 °X ihned xx xxxx xxxxxx a xxxxxxxx xx 48 xxxxx po xxxx xxxxxx;
- xxxxxxxx:
xxxxxx může xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx 0,05 x/100 xx, xxxxx je xxxxxx xxxxxxxx na xxxxxxx 6 až 12 °X xxxxx xx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx do 72 xxxxx xx xxxx xxxxxx.
6.2.2 Vzorek, xxxxx xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx boritou, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx až 48 xxxxx xxxxxxxxxxxxx draselným.
Poznámka:
Pokud xxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx být xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx odpadních xxx.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxx ošetření xxxxxx
Xxxxx, které se xx vyšetřit, se xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx xxx 2-6 °X. Xxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxx xx xxx předběžného xxxxxxxx nedoporučuje, xxxxx xxxxxxxx mohou být xxxxxx nízké. Pokud xx xxxxxx nutné xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxx ošetřován xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (viz 6.2.1).
7.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx ošetřený xxxxxx (xxx 7.1) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx nejméně xxxxx xxx starý xxxxxx xx xxxxx xxxxx (5.2) xx xxx 40 °X. Xxxx xxxxxxxxx vzorek xxx xxxxxxxx teplotě xx do počítání.
7.3 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.1) xx 15 minut xx xxxxxxxx ohřívání (xxx 7.2). Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx se xxxxxxx co xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx somatických xxxxx.
Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx opakovatelnosti (x) x reprodukovatelnosti (X) xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nejsou x xxxxxxxxx.
Xxxxx, xxxxx jsou x dispozici na xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxx:
(1) xxxxx xxxxx mezi 400 000 xx 500&xxxx;000 xxxx:
- směrodatná xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx:
xx = 20000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx koeficientu 5–4 %)
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx:
xX = 40000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 10–8 %)
9. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx o známém xxxxxx buněk, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx mikroskopem xx národní referenční xxxxxxxxxx.
XXXX. XXXXXXX XXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXX
XXXXXXX A XXXXXX POUŽITÍ
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup xxx detekce xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx v xxxxxxx mléce x x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx:
X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx obsahují xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx jedním x několika xxxxxxx, xxxxx jsou založeny xx xxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx, XXXX 10149, xx xx testovacího xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx jako xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx testy.
B. Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx penicilinu
Tento xxxxxx se musí xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx penicilinu x xxxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx detekci antibiotik x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx mléce x x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, jejichž koncentrace xxxx xxxxx než xxxxxx uvedené v xxxx tabulce:
Detektovatelné xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx [1]
Citlivost xxxxx |
||
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxx |
|
Xxxxxxxxxxxxxxx |
0,002 |
0,006 |
Xxxxxxxxx |
0,002 |
0,005 |
Xxxxxxxxxxx |
0,015 |
0,035 |
Xxxxxxxx |
0,006 |
0,011 |
Xxxxxxxxxxx |
0,10 |
0,40 |
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,20 |
0,45 |
Xxxxxxxxxxxxxxxx |
0,15 |
0,50 |
Xxxxxxxxxxxxxx |
7 |
15 |
Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx |
4 |
13 |
Xxxxxxxx |
1 |
22 |
Xxxxxxxxx |
9 |
28 |
Xxxxxxxxxx |
0,06 |
0,14 |
Xxxxxxxxxxxx |
1 |
2,25 |
Xxxxxxxxx |
0,01 |
0,14 |
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,01 |
0,1 |
Xxxxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxxx) |
0,5 |
1 |
Xxxxxxxxxx extrakt |
2 x |
|
Xxxxxx |
5 x |
|
Xxxxxx xxxxxxx |
1 x |
|
Xxxxxxx xxxxx |
5 x |
|
Xxxx |
10–15 g |
|
Voda |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx. Za xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx. Xxxxxxx xX xxx, xxx xx xxxxxxxxxxx byla xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx po 10 xx xx xxxxxxxx xxxx po 100 xx do lahviček x naklonit x xxxxx xxxxxx šikmý xxxx.
Xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °C.
5.1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx:
Xxxxxxx sodný |
2 x |
Xxxx |
15 x |
Xxxx |
1000 ml |
Roztok xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx (xxx 5.1.3) |
10 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx. Přidat xxxxxxxxxxxx xxxx tetroxoprim x xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X. Xxxxxxx xX, aby po xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.1.3 Roztok xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxx |
5 xx |
xxxx Xxxxxxxxxxx |
30 xx |
96 % Xxxxxxx |
5 xx/30 ml |
Vodado |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx (5 xxxx 30 xx) a xxxxxxx xxxxx.
5.1.4 Živný roztok
Složení:
Kvasnicový xxxxxxx |
0,75 mg |
Glukóza |
5,0 xx |
Xxxxxxxxx xxxxx |
8,0 xx |
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx |
0,025 x |
Xxxx |
50 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx ve xxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Živný xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx.
5.2 Standardní roztoky xxxxxxxxxx
5.2.1 Ve xxxxxxxx xxxxx x vhodným xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x 60 μx/xx (100 XX/xx), x to xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx benzylpenicilinu xxxxxxx xxxx draselného xx xxxxxxxx destilované xxxx.
5.2.2 Xxxxxxxxx pracovní roztok xxxxxxxxxx vložením 1,25 xx roztoku xxxxxxxxxx (5.2.1) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x doplnit xx xx 1000 xx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx obsahuje 0,075 μx xxxxxxxxxx/xx (= 0,125 IU/ml).
5.2.3 Připravit 75 ml xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,004 μg xxxxxxxxxx/xx (= 0,0067 XX xxxxxxxxxx/xx) xxxxxxxx 4 xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2.2) do 71 xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.3).
5.2.4 Roztoky xxxxxxxxxx xxxxxxx podle xxxx 5.2.1 xx 5.2.3 xx xxxx xxx xxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxx testu.
5.3 Mléko xxx inhibičních xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx preparát xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (10 % x/X) xx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx přítomnost xxxxxxxxxxx xxxxx. Rovněž xxx xxxxxx přiměřené xxxxxxxx xxxxxxxxx mléka, xxxxx bylo otestováno x xxxxxxxxxx za xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx; xxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx 100 °X, xxxx xx xxxxxxx do xxxxxxxxxx x teplotou 0 °X až 6 °X xx xxxx xxxxxxx jednoho xxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx organismus
5.4.1 Xxxx testovací organismus xx xxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx var. calidolactis XXXX 10149 Xxxx XXXX 10149 je xxxxxxxxx x xxxxxx X 953.
5.4.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx kulturu pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx kultury. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx na xxxxxx xxxxxx agaru (5.1.1). Xxxxx xxxx xx x proužcích xxxxxxxx xxxxxxx testovací xxxxxxx, xxxx se aerobně xxxxxxxx 48 hodin xxx 63 ± 1xX. Po inkubaci xxxxxxx zkumavka xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Takto xxxxxxx xxxxxxx kultura xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx při 0 xx 5 oC.
5.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (suspenze xxxx)
5.5.1 Xxxxxxxxx xxxxxxx 20 xx xxxxxxx xxxxx (5.1.1) xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx (4.2.2) x xxxxxx xxxxxxxx na pokojovou xxxxxxx.
5.5.2 Xxxxxxxx pipetou (4.2.4) přenést 5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx zkumavky xx xxxxxxx xxxxxxxx (5.4.2) x vymýt xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx agaru. Xxxxxxxx xxxx xx xxxxx při 0 xx 5 °X x použije xx xx 36 hodin.
5.5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx spór (5.5.2) xx Xxxxxxx misku (5.5.1) x důkladně xxxxxxxxx xxxxxxxx látku xx celém povrchu xxxxxx zahnuté xxxxxxxx xxxxxxx. Inkubovat 16 xx 18 xxxxx xxx 63 ± 1 °X (4.1.1).
Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (5.4.2) nebo xxxxxxx xxxxxx 36 hodin xx očkování xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x časovém intervalu xxxxxxxxx 36 hodin.
5.5.4 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxxx xxxx xx Xxxxxxx misku xxxxxxxxxx xxxxxxx (5.5.3) a xxxxxxxxx xxxxxxxx odstranit xxxxx x povrchu.
Přenést xxxxxxxx xxxx xx xxxxx (4.2.3) xxxxxxxxxx 250 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Láhev xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx se xxxx xxxxxxxxx x chladničce xxx 0 xx 6 °C.
5.5.5 Po 16xx xx 18xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 63 ± 1 °X na xxxxxxxx xxxxx xx suspenze xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx 5 x 10 miliony xx xxxxxxxx. Suspenze xxxx xxxx xxxxxxxxx rovnoměrné xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, měla xx xx xxxxxxxx novou xxxxxxxx připravenou xx xxxxxxx xxxxxxx (5.4.2).
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx agarové xxxxxx (5.1.2), xxxx xxxxxxxx xx 55 °C.
5.6.2 Xxxxxx část xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx (5.5.4) x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (5.6.1) xx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx (4.2.6) 0,3 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.6.2), xxx xx xxxxxxxxx 5 xx xxxxxx, poté xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx nebo, v xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, poté xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx 12 xxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
5.6.4 Xxxxxxxx/xxxxxx mohou xxx xxxxxxx týž xxx, ale xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx při 0–6 °X, pokud xxxx xxxxx po xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxx se xx nejdříve xxxxxxxx, xxxxxxx xx 24 xxxxx po xxxxxx, x xx xx xxxx xx xxxxxxxx xxx teplotě 0-5 °X. Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx vzorky xx 24 hodin, xxxx xx xx xxxxxxx hluboko xxxxxxxx (−30 °až - 15°X), xxx xx xxxxxxx xx minimum xxxxxxxxxx penicilinu.
6.2 Xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx identifikovat xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx (5.6). Xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx stojánku (4.1.3) xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx x testy (5.2 x 5.3).
6.3 Xx xxxxx zkumavky/ampule xxxxxx 50 mikrolitrů xxxxxxx xxxxxxx (5.1.4).
6.4 Xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx (4.1.4) přenést 0,1 xx vzorku xx xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx novou xxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.5 Xxxxxx xxxxx xxxx 6.4 xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx penicilinu xxxxxxxxxxxx 0,004 μx/xx (= 0,0067 XX/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxx vzorku xxxxx (5.2.3).
6.6 Postupem xxxxx xxxx 6.4 xxxxxxxx xxxxxxx způsobem xx použití xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek (5.3) xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
6.7 Xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx 2½ xx 2¾ xxxxxx xx vodní xxxxx x xxxxxxxx 63 ± 1 °X (4.1.2).
6.8 Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx x vodní lázně.
6.9 Xxxxxxxxx barvu agarového xxxxx (xxx 7).
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Purpurové xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx roztokem penicilinu xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx ve vzorku x koncentraci xxxx xxxxxxxxx koncentraci "zcela xxxxxxxxx" xxxxxxx v xxxxxxx xx xxxxxx 39. Xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx penicilinu (6.5) xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx médium je xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2 Částečné xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx ve zkumavkách/ampulích xx vzorkem xxxxx xxxxxxx na přítomnost xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx v koncentracích xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx straně 39.
7.3 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx vzorek xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek xxxx xxxxxx mléka xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
7.4 Pokud xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol, xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx spóry x xxxxxx xxxx xxx podrobeny xxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxx testovacím xxxxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx výsledků
8.1 Potvrdit xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx x 7.1 a 7.2 xxxxx xxxxxx "X".
Xxxxx xx nezbytné xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx zmraženy, xxx xx xxxxxxxxx poškození xxxxxxxxxx.
X. Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx (A.7.1) nebo xxxxxxxxxx xxxxxx (X.7.2).
Xxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxxx
Xxx A.1.
2. Xxxxxxxx
2.1 Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx sulfonamidů, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx nejméně 2 xx kolem disku.
2.2 Xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx antibiotika, včetně xxxxxxxxxxx (2.1), a xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx penicilináza (xxxx-xxxxxxxxx), xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx čirou xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xx xxxxxx xxxx xxx penicilinázy, xxxxxxxxx xxxxxx xx xxx penicilin nebo xxxx penicilinu a xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
2.3 Xxxxx xxxx xxxx xxxx penicilinázou (2.2) xxxxxxxxxxxx, inhibiční xxxxxx ve xxxxxx xxxxx není xxxxxxxxx, xxx xxxx xx xxx xxxx xxxxxxxx [xxx xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx A, kapitola XX, X.1.x) x 2x)].
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx nebo jsou xxxxx xxxxxxxx inaktivovány xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx x nemohou xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx (viz 7.3).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx mlékem, které xx má xxxxxxxx, xx umístí xx xxxxxx agarového xxxxx xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. calidolactis. Normální xxxx xxxxxxxxxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Čirá xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky xxx xxxx. Velikost čiré xxxx xxxx xxxx xxxxxx na xxxxxxxxxxx x druhu xxxxxxxxx xxxxx v mléce.
4. Xxxxxxxxx, pomůcky xx xxxx x xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxx A.4.1.
4.1.2 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 80 ± 1 °X.
4.2 Pomůcky xx xxxx
Xxx X.4.2.
4.3 Xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx 9 xx 13 xx, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx 130 xx xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxx x exsikátoru).
5. Xxxxxxxxxx média, xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx.
Xxxxxxxx složky kultivačních xxxxx xxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Musí xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx skle nebo xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1 Xxxxxxxxxx xxxxx
5.1.1 Xxxxx xxxx (X.5.1.1)
5.1.2 Kultivační médium xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx:
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 g |
Trypton |
5 x |
Xxxxxxx |
1 x |
Xxxxxx trimethoprimu xx xxxxxxxxxxxx (X.5.1.3) |
10 xx |
Xxxx |
10–15 g podle xxxxxxxxxxxx vlastností xxxxx |
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxx zahřívání a xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxx, xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx. Po xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx hodnotu xX, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx 8,0 + 0,1 xxx 25 °X. Xxxxxxxxxxxx médium 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X.
5.2 Standardní xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx
Xxx X.5.2.
Xxx xxxxxxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx látek (8) xxxxxxxxx standardní xxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx xxx inhibičních xxxxx (X.5.3) x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx:
x) 0,004 μg/ml (0,0067 XX/xx)
x) 0,006 μx/xx (0,01 XX/xx)
x) 0,03 μg/ml (0,05 XX/xx)
x) 0,06 μx/xx (0,01 XX/xx).
5.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxx
5.3.1 Rozpustit xxxxxxxxxx xxxxxxxx penicilinázy (beta-laktamázy) xx sterilní destilované xxxx x cílem xxxxxx xxxxxxxxxxx 1000 X/xx. Xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx dávky, je xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx týdny xxx 0 °X xx 5 °C.
Poznámka
Pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx mezinárodní xxxxx. Pro xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx stačí xx xxxxxxxxxx 0,6 μx (= 1 XX) penicilinu. U xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx nutné xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.3.2 Namísto roztoku xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxx X.5.4.
5.5 Testovací xxxxxxx (xxxxxxxx spór)
Viz X.5.5.
5.6 Xxxxxxxx Petriho xxxxx
5.6.1 Xxxxxx rozpustit xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), xxxx zchladit na 55 xX.
5.6.2 Xx xxxxx xxxxxx část xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx (5.5) x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx agarového xxxxx xxx detekci xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), x cílem xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx Petriho xxxxx (X.4.2.2), xxxxxx xxxxxxx xx 55 °X, xxxxxxxxxx xxxxxxx médium, xxx se xxxxxxxxx 0,6 xx 0,8 xx xxxxxx. Xxx Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx průměru 140 xx xx xxxxx xxx 15 xx xxxxxxxxx média, xxx xx xxxxxxxxx 0,8 xx xxxxxx.
5.6.4 Xxxxxxx Xxxxxxx xxxxx na xxxxxxx, vodorovný xxxxxx, xxxxx vodorovnost se xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx a nechat xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx ztuhnutí xxxxx, xxxxxx xxxxx xx xxxxx a xxxxxxx xx xxxx vzhůru, xxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx vody xx xxxxxxx agarového xxxxx.
5.6.5 Xxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx nejlépe xxxxx xxx xxx, xxx xxxxx xxx používány xxxxxxxxx dva týdny, xxxxx xx ihned xx xxxxxxxx vloží xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x uchovávají xx xxx 5 °X.
5.6.6 Označit dna Xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxx identifikace xxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 X xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx "xxxxxx X" (X.7.1 x X.7.2) xxxx xxx provedeno xxxx xxxxxxxxx za účelem xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx 10 xxxxx na 80 ± 1 °C, xxx se xxxxxxxx xxxx nespecifických xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek.
6.1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx přenést xxx 10 ml xxxxxx zahřátého mléka xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx. X xxxxx xxxxxx xxx 0,4 xx xxxxxxx penicilinázy (5.3) x řádně xxxxxxxxx.
6.2 Xxxxxxx inhibičních látek
6.2.1 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx (4.3) xx xxxxxx xxxxx (6.1.2) xxxxxx xxxxx x suché xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx otřením xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx na xxxxxx Xxxxxxx misky (5.6) x lehce přitlačit xxxxxxxx.
6.2.2 Disky xxxxxxxxx xxxxxxx vzorky xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 20 xx x xx xxxxxx xxxxxxx 10 xx.
6.2.3 Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx (4.3) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.2) xxxx xxxxxxxx rozmístit mezi xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx 2 % xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx; xxx xxxxxx testu se xxxxxxx nejméně pět xxxxxxxxxxxx xxxxx.
6.2.4 Xx xxxxxxxxx rozmístění všech xxxxx na xxxxxxx xxxxxx x po xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx vzhůru x nechat xx xxxxxxxxx 2,5 xx 5 hodin xxx 63 ± 1 °X.
6.2.5 Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxx bylo xxxxx xxxxxxxxx čiré inhibiční xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Čiré xxxx xx xxxxx.
6.2.6 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (6.2.3) xxxx xxxxx disku xxxxxxxx xxxxxxx 2 xx xxxx.
6.2.7 Xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx vzorky xxxxx, xxxxxxx velkost je xxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx x 6.2.6, xxxxxxx xx přítomnost xxxxxxxxxxx xxxxx v testovacím xxxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
6.3.1 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx dvojmo xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (6.1.2) a xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (6.1.3). Namísto xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 10 xx xxxxxx xxxxx xx možné xx xxxxxx xxxxx ponořit xxxx napuštěný xxxxxxxxxxxxx (5.3.2) x xxxxxx xx na xxxxxxxxx xxxxx.
6.3.2 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx xxxxxx xxx každý xx xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x 5.2 x) až x).
6.3.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx zón xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx vzorky xxxxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 2)
7.1 Xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nevytvoří xxxxx xxxx xxxx, xxx xxxx zóna xx xxxxxx xxxxx disku xxxxxxxxxx xxxxxxx mléka, xxxxxx xxxxx nebo xxxxx než xxxx xxxxx xxxxx napuštěném xxxxxxxxxxx xxxxxxxx penicilinu (5.2x)), inhibiční xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx koncentraci xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx sodného xxxxx xxxx vyšší než 0,004 μg/ml.
7.2 Xxxxx xx xxxxxxxx hodnota xxxxxxx čiré zóny xxxxx disku xxxxxxxxxx xxxxxxxxx penicilinázu rovná xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx zóny kolem xxxxx se xxxxxxx xxxxx, mléko xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx možné xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx penicilinázy xxxxxxx x tomto postupu.
7.3 Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx kolem disku xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx průměru xxxx xxxx kolem xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx 6.1.2, xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, a xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx nelze xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxx xx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx inhibiční xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxx než xxxxxxxxx xxxxx být identifikovány xxxxxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx xxxxxx penicilinu
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx může xxx xxxxxxxxx buď xx sestrojení xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx velikostí xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x mléce (5.2 x) až x)).
8.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx křivky
Vzhledem x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx10 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, standardní xxxxxx xxx xxxxxxxxx xx logaritmický xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx xxx na xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Průměry inhibičních xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx.
8.3 Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx ve xxxxxx xxxxx xxx vypočítat xx základě xxxxxxx xxx vzorků xxxxxx xxxxxxx nebo je xxxxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxx xx poloměr xxxxxxxxxxx zón nejméně xxxxxxx větší, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx větší xxx poloměr xxxxx.
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Výsledky xx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxx 0,004 μg/ml (xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace) xxxx xxxx obsah xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx.
9.2 Opakovatelnost (x) x xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X)
Xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx x jsou xxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxx standardu xxx xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
X xxxxxxx x požadavky xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx X, xxxxxxxx VII xxxx 2, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx, xxx detekci xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Definice
Vyšetření xx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx, které xxxx xxxxxxxxxxx příčinou xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx ošetření, xxxxx xxxxxxxxx mléko proti xxxxxxxxxxxxxxxxxxx patogenům. Pokud xxxx xxxxxxx normy xxxxxxxxx v příloze X, xxxxxxxx VII xxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx, pokud jde x xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °C x 21 °X, xxxxxxxxxx bakterie x xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx existuje xxxxxxxxx, xx xxxxx xx nějakou spojitost xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxx
Xxxxxxx x xxxxxxx vyšetření xxxx xxxxxxxx vnitrostátní xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx osvědčení x zdravotní xxxxxxxxxxxx xxx tepelně xxxxxxxx xxxxx pro xxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Zpráva x xxxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxxx patogenní xxxxxxxxxxxxxxx xxxx být výsledek xxxxxxxx takto:
Počet xxxxx xx xxxxxxxx, xxxx "xxxxxxxxxx" xx "xxxxxxxxxxxx" x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, který xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Zpráva xxxx xxxxx popsat xxxxxxx xxxxxx.