Rozhodnutí Komise
ze dne 14. xxxxx 1991,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx analýzy x xxxxxxxxx xxxxxxxx mléka x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
(91/180/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x ohledem xx xxxxxxxx Xxxx 85/397/XXX xx xxx 5. xxxxx 1985 x hygienických a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx uvnitř Xxxxxxxxxxxx [1] xxxxxxxxx pozměněnou xxxxxxxx 89/662/EHS [2], x xxxxxxx na xx. 10 xxxx. 2 uvedené xxxxxxxx,
xxxxxxxx x tomu, xx xxxxx xx. 10 xxxx. 2 Komise xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x testování, xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxx kontrolu xxxxxxxxxx xxxxx xxx syrové xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, že pro xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro stanovení xxxxxx mikroorganismů, obsahu xxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, že xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx stanovit xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx koliformních xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx antibiotik x xxxx xxxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx a XXX mléko xx xxxxxxxx stanovit xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx k tomu, xx x technických xxxxxx xx vhodné xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx analýzy x xxxxxxxxx, které xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx kterých xx xxxxxxxxx xxxxxxx metody xxxxxxx x testování; xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx šetření xxxxx xxxxxxx státy xx xx, aby xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 85/397/XX xxxx xxxxxxx vhodné xxxxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx k tomu, xx stanovení xxxxxxxxxxxx xxxxx analýzy a xxxxxxxxx zahrnuje x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx rozhodnutí xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
XXXXXXX XXXX XXXXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Referenční postupy xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxx mléko xxxx xxxx:
- stanovení xxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů při 30 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx somatických buněk,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Článek 2
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx pasterované mléko xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx mrznutí,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx fosfatázy,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx peroxidázy,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 30 °C,
- stanovení xxxxxx mikroorganismů při 21 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx koliformních bakterií – xxxxxxxx kolonií xxx 30 °C,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx,
- detekce xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Článek 3
Xxxxxxxxxx postupy xxxxxxx x testování xxx XXX xxxxx x sterilizované xxxxx xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganizmů xxx 30 °C,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx a sulfonamidů.
Článek 4
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx se xxxx xxxxxxx podle pravidel xxxxxxxxxxx x xxxxxxx X.
Článek 5
Xxxxxxxxxx postupy xxxxxxx a testování xxxxxxx x xxxxxxxx 1, 2 x 3 jsou popsány x xxxxxxx II.
Xxxxxx 6
Toto xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx 31. xxxxxxxx 1992, xxx se xxxxxxxxx xxxxx vědeckých x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 7
Toto xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X Xxxxxxx dne 14. února 1991.
Xx Xxxxxx
Xxx Xxx Xxxxxx
xxxx Xxxxxx
[1] Xx. xxxx. X 226, 24.8.1985, x. 13.
[2] Xx. xxxx. X 395, 30.12.1989, x. 13.
PŘÍLOHA I
OBSAH
I. Obecná xxxxxxxxxx
XX. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x tepelně xxxxxxxxxx xxxxx
X. XXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxx
Xxxxxx ustanovení xx xxxxxx činidel, xxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxx výsledků, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x zpráv x testování. Příslušné xxxxxx xxxxxxxxx států x xxxxxxxxxx pověřené xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx ustanovení.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxx
2.1.1 Pokud xxxx xxxxxxxxx jinak, xxxx xxxxxxx k xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx mohou xxxxxxxx nebo jinak xxxxxxxx růst xxxxxxxxxxxxxx xx popsaných xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.1.2 "Xxxxxxxxxxxx" xxxx "xxxxxxx" (xxx dalšího xxxxxxxxx) se xxxxxx "xxxxxxxxxxx xx xxxx" xxxx "xxxxxx vodou".
2.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxx stanoveno xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx musí xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
3.1 Seznam xxxxxxxxx x pomůcek
Příslušný xxxxxx xxxxxxxxx x pomůcek xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx zvláštnímu použití x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.2 Xxxxxxxxxx xxxx
"Xxxxxxxxxxxx xxxxxx" se xxxxxx xxxx x přesností xxxxxx na 0,1 xx.
4. Vyjádření výsledků
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx, xxxxx splňují xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (5.1) xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx není toto xxxxxxxxx opakovatelnosti splněno, xxxx xx xxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, výsledek xx vypočítá v xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
5. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: opakovatelnost x xxxxxxxxxxxxxxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx uvedená xxx xxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxxxx takto:
5.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) xx xxxxxxx, xxx xxxxxx xx xxxxxxx absolutní hodnota xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx výsledky xxxxx, xxxxx byly xxxxxxx xxxxxxx postupem s xxxxxxxxxx výrobkem za xxxxxxxx xxxxxxxx (stejný xxxxxxxxx, xxxxxx přístroj, xxxxxx laboratoř, krátké xxxxxx xxxxxx).
5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) xx hodnota, xxx kterou xxxx xxxxxxxxx xxxxxx dvou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx testů, xxxxxxxxx xxxxxxxx postupem x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxx (různí xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx a/nebo xxxxx xxxx).
5.1.3 Xxxxx xxxx xxxxxxxxx jinak, xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x reprodukovatelnosti, xxxxxxx x příslušných xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, představují 95 % xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx XXX 5725, xxxxx xxxxxx, 1986. Xxxx vypočteny z xxxxxxxx uznaných xxxxxx, xxxxxxxxxxx xx spolupráci, xxxxx xx používají xxx xxxxxxxxx postupu. Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx. X xxx případě xxxx xxxxxxx opakovatelnosti a xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1.4 Kruhové xxxxx x nezbytné xxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx pokyny.
6. Xxxxxx x xxxxxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx postup x získané výsledky. Xxxx xxxx musí xxxxxx všechny xxxxxxxxxxx xxxxxxx, které xxxxxx xxxxxxxxx x metodě xxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a všechny xxxxxxxxx, xxxxx by xxxxx ovlivnit xxxxxxxx. Xxxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
XX. XXXXX XXXXXX XXXXXXXX A TEPELNĚ XXXXXXXXXX XXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx syrového x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxx vzorků, xxxxxxxx x skladování xxxxxx xx použijí xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxx xxxxxx x tepelně xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx 2, 4.4, 5 x 6 se xxxxxxx xxx odběr vzorků xxxxxxx ošetřeného xxxxx xxxxxxxx x přímé xxxxxxxx.
2. Xxxxxx
Xxxxx vzorků xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x konvích, xxxxxxxx xxxx. xxxxxxxx pověření xxxxxxxxxxx, kteří xxxx xxxx odběrem vzorků xxxxxx vyškoleni.
Pokud to xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x metodách xxxxxx, xxx bylo xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx reprezentativní x x xxxxxxx x xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx orgány xxxx xxxxxxxxx laboratoř xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx zaměstnance xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx vzorků, aby xxxxxxxxxxxx vzorků xxxx xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxx xxx xxxxx vzorků
3.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx x jiného xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxx xxxxxxxx s xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx použití (xxxxxxxxxx, odběr xxxxxx, xxx.). Xxxxxxx x xxxxxxxx pro míchání xxxxxxx x xxxxxxxx xxxx mít xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx zajištěno xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx žluklé xxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxx opatřeny xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x nabírání vzorků x jakékoli xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx naběračky xxxx xxx xxxxxxx 50 xx.
Xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx x vhodného xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxx x xxxxx) nesmí xxxxxxxx takovou xxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx výsledky testů. Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxx xxxx xxx čistý, xxxxx, xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx a xxxx mít xxxxxxxxxx xxxxx.
3.2 Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
Vybavení xxx xxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxx) xxxx splňovat xxxxxxxxxx xxxx 3.1 x xxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxx xx xxx xx xxxx jdoucí xxxxxx vzorků xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, musí xxx xx xxxxxx xxxxxx vzorku xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxx požadavky, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxxxx odběru xxxxxx
4.1 Xxxxxx xxxxx
Xxx xxxxxx xx xxxxx, které xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx být xxxx odběrem xxxxxxxx xxxxxxxxxx buď ručně, xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxx odebrán xxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxx xx mléko xxxxx x xxxxxx.
Xxxxx xx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx vzorků xxxxx xxx xxxxx xxxxx, jako první xxxx xxx odebrán xxxxxx xxx mikrobiologické xxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx musí xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx použitých xxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx xxxx tyto xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x při xxx bylo možné xxxxx xxxxxxxxx obsah xxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx však xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxx xxxxx xxxxxx
4.2.1 Xxxxx xxxxxx x věder x konví xx xxxxx
X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx ve xxxxx nebo xxxxx xxxxxx x xxxx, xxxxxxx xxxx xx xx, xxx se xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxx se xx hrdle xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx zásilku, xx xxxxxxx postupem xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxxx podniku
Míchat xxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxx není xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxx neumožňuje xxxxxxx xxxxxxxxxx míchačky, xxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxx xxxxxx x xxxxx xxx
Xx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx, když se xxxxxx do misky xxx. Xx účelem xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx rozdělení xxxx může xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxx, x níž xx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx, xxxxxxx reprezentativní xxxxxx z xxxx xxxxxxx postupem xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.4 Odběr xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx
Xxxx je xxxxxxxx xxxxx, x xxxxx xx má xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx, x každé xxxxxx xx odebere xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx vzor. Xxxxx vzorky x xxxxx nádoby nemusí xxx xxxxxxxx testovány, xxxxxxxx xx jednotlivé xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxx, které xx nachází x xxxxxx, xx xxxxx xxx každý xx xxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx (xxxx) xxxxxx (xxxxxx) x xxxxxx xxxxxxxxx množstvích.
4.2.5 Xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx – skladovací xxxxxx, xxxxxxxxxx kamiony, xxxxxxxxxx xxxxxx
4.2.5.1 Xxxx xxxxxxx xxxxxx se xxxxx vhodným xxxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxxx obsahu xxxxxxx nádob, xxxxxxxxxxxx xxxxxx, cisternových kamionů xxxx xxxxxxxxxxxx vagónů xx doporučuje xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.5.2).
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx době, xx kterou bylo xxxxx v klidu. Xxxx xxx prokázáno, xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx v každém x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vhodný xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx promíchání xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (syrového mléka xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx) xx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxx obsahu xxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx 0,1 %.
Xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx části může x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx malé xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xx xxxxxxxxxx není xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. X případě odběru xxxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxx je třeba xxxxxx xxxxxx dostatečné xxxxxxxx mléka, aby xxxx zajištěna xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.5.2 Xxxxxxxxxx obsahu xxxxxxx nádob xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx a cisternových xxxxxx je xxxxx xxxxxxx:
- mechanickou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx do xxxxxx x poháněnou elektrickým xxxxxxx,
- xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxx je ponořena x xxxxx,
- v xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx je napojena xx xxxxx x xxxxxxxx xx průlezového xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x čistým xxxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxx x objem xxxxxxx, aby se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx vzorků xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx může xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx laboratoří xxxx jiným příslušným xxxxxxx.
Xxxxxx vybavení xxxx xxx před x xxxxx xxxxxxxxx podrobeno xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx odpovědný xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx odběru xxxxxx musí xxx xxxxxxx s cílem xxxxxxxx:
- minimální xxxxx xxxxxxxxx mléka, x xxxxx musí být xxxxxxx vzorek,
- poměr xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxx xxxxxxx x minimálním xxxxxxx vzorku),
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx vzorek x xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx vnitrostátní xxxxx xxxxxxxxx:
- minimální xxxxx xxxxx, ze xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx provedeno, xxxx xxxxxxxxx preventivní xxxxxxxx, xxxxx je xxxxx xxxxxxxx.
4.4 Odběr xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka xxxxxxxx k přímé xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxx o xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx k xxxxx xxxxxx spotřebě a xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx ošetření, x xx, xxxxx je xx xxxxx, ihned xx xxxxxxxxxx (v xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxx pasterace).
Z xxxxxxx xxxxx tepelně xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx metodou XXX x xxxxxxxxxxxxxxx) se xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx být xxxxxxxxx, x to xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx podle xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
5. Identifikace xxxxxx
Xxxxxx xx xxx xxx xxxxxxx identifikačním xxxxx, xxxxx umožňuje xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx příslušného orgánu (xxx xxx 2).
6. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx připraví xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx přepravy x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx být dodrženy x době xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx druhu xxxxx a testování, xxxxx xx xxx xxxxxxx.
Xxxxxx stanoví toto:
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx nežádoucímu zápachu x xxxxxxx slunečnímu xxxxxx. Je-li xx xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx skladován xx xxx,
- vzorky xxxxxxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx při teplotách 0 xX až 4 xX. Doba xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxxx x x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 36 xxxxx. Příslušný xxxxx xxxx souhlasit, xxx xxxx teplota xxxxxxxxxx 0 xX xx 6 oC, xxxx-xx xxxx mezi odběrem x testováním xxxxx xxx 24 xxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 0 xX xx 4 xX. Doba xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx být xx xxxxxxxxx x x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 24 xxxxx,
- xxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx x pasterovaného xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx zařízení laboratoře x xxxx xxxx xxxxxxx vzorku a xxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx preventivní xxxxxxxx, xxxxx je xxxxx přijmout xxx xxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
XXXXXXX X
XXXXX
X. Stanovení xxxx mrznutí
II. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
XXX. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 30 °X
X. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 21 °X
XX. Xxxxxxxxx xxxxxx koliformních xxxxxxxx – xxxxxxxx kolonií xxx 30 °C
VII. Xxxxxxxxx xxxxxx somatických xxxxx
XXXX. Xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx
XX. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
X. STANOVENÍ XXXX XXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxx mrznutí xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, UHT mléka xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx), x xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx snímač xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxx xxx typy xxxxxxxxx. První typ xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx na xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx xxx xx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx tak, xx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx. Vzhledem x tomu, xx xx xxxxx lišit xxxxx křivky bodu xxxxxxx různých druhů xxxxx, ale i xxxxxx bodu xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx použitých pro xxxxxxxxx, tento xxxxxxxxxx xxxxxx vyžaduje xxxxxxx xxxxxxxxx hledajících plató. Xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx rutinního xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxx odhad xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx x mléce xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx vyšší xxx 0,18 x xxxxxxxx xxxxxx xx 100 ml (xxx xxx 7.4).
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx mléka: hodnota xxxxxxxx x xxxxxxx x popsaným xxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx Celsia (°X).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx mléka xx x závislosti xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx způsobí, xx xxxxxxx rychle xxxxxxx xx x xxxxx, xxxxx odpovídá xxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxxx postupem xxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx přesné xxxxxx xxx xxx standardní xxxxxxx. Xx těchto xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xx stupních Xxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx skla
Obvyklé xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, zejména:
4.1 Kryoskop
Kryoskop xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx odporového xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx a xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx x xx zkumavek xx xxxxxx.
4.1.1 Chladicí lázeň
Je xxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxx.
4.1.1.1 Xxxxxxx xxx
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx obsahující xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, která xx xxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 0,2 °X. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v rozmezí ± 0,5 °X xx xxxxxxxxx hodnoty xxxxxx výrobcem.
Je xxxxxxxx, xxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx kapaliny. Celá xxxxxx zkumavky xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxx kapalinou.
4.1.1.2 Xxxxxxxxxx xxx
Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx proudí xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Teplota xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x rozmezí ± 0,5 °C xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx chladicí xxxxxxxxx xx 33 % (X/X) vodný xxxxxx 1,2-xxxxxxxxxx (ethylenglykolu).
4.1.2 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx 1,80 ± 0,2 xx x o xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 0,31 xx. Časová xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx nižší xxx 2 xxxxxxx x xxxxxxx b (xxx xxxxxxxx) xxxx xxx xxxxxx. Pracovní napětí, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx, aby při − 0,512 °X xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx teplotu xxxxx xxxxxxxxx x 0,0005 °X. Maximální xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx ± 5 %.
Xxxx xx xxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx skleněné xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xx xxxxxx x v xxxx, xxxxx je 44,6 ± 0,1 xx xxx xxxxxx okrajem xxxxxxxx (viz xxxxxxx xx xxxxxx 15). Xx třeba xxxxx xxxxxxxxxxx, aby se xxxxxxxxx nastavení xxxxx xx xxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx:
β xxxxxxxx termické xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx vzorce
− xX / dT × 1 / X = β / X2
xxx:
X xx xxxxxxx xx stupních Xxxxxxx
X je xxxxx x ohmech xxx xxxxxxx T,
− dR / xX × 1 / R xxxxxxxx xxxxxxxxxx
β xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx materiálu xxxxxxxx xxx výrobě xxxxxxxxxx. X běžné xxxxx xx doporučuje xxxxxxx xxxxx xxx 3000.
4.1.3 Xxxxxx x odečítací xxxxxxxx
4.1.3.1 Princip xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxx xx část xxxxxx, xxx teplota zůstane xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx ± 0,002 xX po xxxx xxxxxxx 20 xxxxxx.
4.1.3.2 Xxxxx obsluha
Odpor xxxxxxxxxx xx vyrovnává Wheatstoneovým xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx ± 10 % x jejichž teplotní xxxxxxxxxx xxxx vyšší xxx 2×10−5°C.
Proměnný (xxxxxxxxxxx) xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx rozsahu x xxxx xxx x 0,3 % xxx xxxxxxxxx hodnoty.
Pro xxxxx xxxxxxxxx musí xxx možné xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxx po xxxxxxxxx 0,001 °X.
4.1.3.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx umožnit xxxxxxxxx xx xxxxxxx 0,01 °X v xxxxxxx xx 0 °X xx –1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx příslušného xxxxxx xxxx xxx taková, xxx odchylka dvou xx xxxx následujících xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx než 0,001 °X.
Xxxxxxxxx obvodu xxxx být taková, xxx při správné xxxxxxx přístroje nevznikla x xxxxxx bodě xxxxxxx xx – 0,400 °C xx – 0,600 °X xxxxx xxxxx než ± 0,001 °X.
4.1.4 Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx použije xxxxxx xxxx o xxxxxxx 1 xx 1,5 mm, xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxx,.
Xxxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxx byl xx xxxxxx xxxxx xxxxx termistoru. Přípustná xxxxxxxxx xx xxx 1,5 xx xxx xx xxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxx bočně x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx výrobce (xxxxxxx ± 1,5 mm), xxx byla xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx testovacího xxxxxx xxxxx stanovení. Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx okamžiku dotknout xxxxx termistoru xxxx xxxxx zkumavky.
4.1.5 Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx teplota xxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku xxxxxxx x xxxx xxxxxxx. K xxxx xxxxx lze xxxxxx xxxxxxxx; jedním xxxxxxxx xx xxxxxxxx rozkmitu xxxxxxx xx xxxxx xx xxx sekundy xxx, xxx xx xxxxxxxx dotýkala stěny xxxxxxxx xx xxxxxx.
4.1.6 Xxxxxxxx xx vzorky
Zkumavky xx vzorky (xxx xxxxxxx 1) xxxx xxxxxxxx x 50,8 ± 0,1 mm xxxxxx; xxxxxx xxxxxx xx 16,0 ± 0,1 mm x xxxxxxx průměr je 13,5 ± 0,1 xx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx x více xxx 0,1 xx.
Xxxxxxxx xxxx mít xxxxxx xxxxxx vzdálenou od xxxxxxx xxxxxx 29,8 xx (21 xx xxx dnem xxxxxxxx), xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx.
4.1.7 Zdroj xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx buď xxxxxx xxxx vně xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx kolísání nepřekračovala ± 1 % xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx x ± 6 %.
4.2 Xxxxxxxxxx xxxx
4.3 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 1000 xx, xxxxx A.
4.4 Xxxxxxx, xxxxx odvětraná, xxxxxxxxxxxx xx 130 ± 1 °X
xxxx
Xxxxxxxxxx xxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na 300 ± 25 °X.
4.5 Exsikátor
5. Xxxxxxx
5.1 Xxxx destilovaná x xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, převařená x xxxxxxxxx xx 20 ± 2 °X, xx zkumavce xxxxxxxxxxx xxxx uhličitý.
5.2 Xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx x.x., jemně mletý, xxxxxx 5 hodin xxx xxxxxxx 300 ± 25 °X x elektrické xxxx xxxx nejméně 24 xxxxx při teplotě 130 ± 1 °X x xxxxxxx x zchlazený na xxxxxxxxx teplotu x xxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.3 Příprava xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx odpovídající xxxxxxxx (xxx xxxxxxx 1) xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5.2) xx xxxxxxx. Xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxx (5.1), xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 1000 xx a xxxxxxx xx xxxxxx vodou x xxxxxxx 20 ± 2 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx dva xxxxxx xxx asi 5 °X x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x maximálním xxxxxx 250 xx.
Xxx xxxxxxx xxxxxxx chloridu xxxxxxx xxx 20 °X
|
x NaCl/l |
°C |
|
6,859 |
-0,408 |
|
7,818 |
-0,464 |
|
8,149 |
-0,483 |
|
8,314 |
-0,492 |
|
8,480 |
-0,502 |
|
8,646 |
-0,512 |
|
8,811 |
-0,521 |
|
8,977 |
-0,531 |
|
9,143 |
-0,541 |
|
10,155 |
-0,600 |
Před xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx roztok xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx otočením xxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxx se xx roztoku přimíchal xxxxxx.
Xxxxxx standardního xxxxxxx xx x láhve xxxxxx xx suché x čisté xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx, xxxxx xxxx ze xxx xxxxxxx prázdné, x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx dvou xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 10 x/x).
6. Kalibrace xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx musí xxx xxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxx nelišila x xxxx xxx 1 °X od teploty, xxx xxx se xxxxxxx xxxxxxxxx. Kryoskop xxxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx teplotám xxxxxx xxx 26–27 °X.
Xxxxxxx xx, xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx a xx xxx zapnut xxxxxxx 12 xxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx sondy, xxxxxxx xxxxxxx míchačky x xxxxxxx xxxxxxxxxx kapalin.
Vybrat xxx standardní xxxxxxx (xxx xxxxxxx xxxx), xxxxxxx xxx mrznutí xx těsně xxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxx mrznutí xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx být xxxxx xxx – 0,100 °X.
(X některých xxxx x současné xxxx xxxxxxxxxx kryoskopů xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx, xx se ustálí xx xxxx hodnotě xxxx mrznutí x xxxxx rozsahu xxxxxxxx xxxxxxxx. X těchto xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx bod xxxxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxx musí xxxx xxxxxxx xxxxx).
Xxxxxx pipety xxxxxx 2,5 ± 0,1 ml jednoho xxxxxxxxxxxx xxxxxxx do xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx, xxxx měřit pomocí xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx jako zkumavky xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxx xxxx, xxxxx x xxxxxxxxxx demineralizovanou xxxxx). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx stejné xxxx xxxxxxx vzorků xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, dokud xxxxxx x kryoskopu xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx postup x xxxxxx standardním xxxxxxxx a střídavě xx xxxxxxxx takovým xxxxxxxx, dokud xx xxxx následující odečty xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx správné hodnoty xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx, xxxx xx byla xxxxx xxxxxxxxx nastavení. Xxxxxxxx xx xxxx připraven x xxxxxxx x xxxxx ukazuje xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx by xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
7. Xxxxxxxx testovacího xxxxxx
7.1 Xxxxx xx je xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx teplotě xxxx 0 °X a 5 °X.
7.2 Xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx cizí xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxx ve vzorku xx xxxxx x xxxxx xxxxxx x xxxxxx opatrně xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, nesmí reagovat x xxxxxx x xxxx xxx účinný xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.3 Xxxxx může xxx xxxxxxxxx xxx skladovací xxxxxxx (mezi 0 x 5 °X) xxxx xx xxxxx xx xxxxx na xxxxxxxxxxx teplotu bezprostředně xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xx však xxxxxxxx xxxx xx xx, xxx standardní xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
7.4 Stanovit xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Vzorky, jejichž xxxxxxxx přesahuje 0,18 x xxxxxxxx mléčné xx 100 xx xxxxx, nemohou xxx xxxxxxxxxxx.
7.5 XXX mléko x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx nejméně 20 xxxxx xxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx.
8. Postup
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxx chladicí xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx vzorky. Xxxxxxx kryoskop a xxxxxxx xx, zda xx chladicí xxxxxxxx xxxxxxx míchá xxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxx zapnut xxxxxxx 12 xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx.
8.2 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxx každou xxxxx xxxxx měřit xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx sodného (například xxxxxx s xxxxx xxxxxxx – 0,512 °X), xxxxx xx xxxxxxx získané při xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx o xxxx xxx 0,001 °X. Xxxxx xx průměr xxxxxx hodnot xxxx xx bodu xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx o xxxx než 0,002 °X, kryoskop xx xxxxx kalibrujte, xxx xx popsáno v xxxx 6.
Xxxxx se xxxxxxxx používá xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
8.3 Stanovení xxxx xxxxxxx mléka
Promíchat xxxxx xx vzorkem xxxxx xxxxxxxx protřepáním x několikerým otáčením. Xxxxx neprotřepávat xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx vzduch.
Pomocí xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx xxxxx do xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx vzorky. Xxxxxxx xx, xx jsou xxxxx a míchačka xxxxx a xxxxx, xxxxx je to xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx, čistou x chlupy xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx zkumavku se xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Mléko xx xxxxxxx x mrznutí xx xxxxxx při xxxxxxx určené xxxxxxxx x přesností xx 0,1 °C.
(U xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přístrojů xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; x xxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx tím, xx xx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx se xxxxxxx xxxx xxxxx galvanometru xxxxx s příslušnou xxxxxxx.)
Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx mrznutí xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx rozmezí, xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xx x jiným vzorkem xxxxx. Pokud xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx před xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, alikvótní xxxxx xxxxxx se xxxxxxx xx 45 °X x 5 xxxxx se xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx, xxx xx rozpustil xxxxxxxxxxx tuk.
Poté zchladit xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx rychle stoupne xx na xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, x xxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx dosažené xxxxx xxxx xxxx x tuto hodnotu xx nutné xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxx, xx kterou xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, a xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx mrznutí a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx vzorek xx xxxxxx x xxx xxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx než xxx xxxxx. Je xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx teplotu.
Když xx měření xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, vyjmout xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxx sondu x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx jemnou, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx látkou x xxxxxxx druhé stanovení x jiného xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx větší xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (0,004 °X), xxxxxxx druhé xxxxxxxxx u xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx na 0,004 °X, xxxxxx xx x xxxxxxx xx xxx výpočet xxxxxxxxx xxxxxxxx.
8.4 Chlazení xxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xx místo xxx vzorky x xxxxxx xxxxxxxx teplotu, xxx xxxxx xxxxxxx x chladu.
(U některých xxxx kryoskopu xx xxxx možné; x xxxxxxxx případech je xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxx začátkem měření xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx údaje.)
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Výpočet
Pokud xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, za xxxxxxxx xx považuje xxxxxx obou xxxx xxxxxxxxxxxx hodnot získaných xxx xxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx liché xxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxx ukazuje xxxxx xxxxxxx:
Xxx mrznutí (°X)
|
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx |
Xxxxxx |
|
|
-0,544 |
-0,545 |
-0,544 |
|
-0,545 |
-0,546 |
-0,546 |
9.2 Spolehlivost
9.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x): 0,004 °X
9.2.2 Reprodukovatelnost (X): 0,006 °C
Obrázek 1
Schéma xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1 (xxxxxx xxxxxxxx xx vzorky xxxxxxxx ke xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx)
XX. XXXXXXXXX AKTIVITY XXXXXXXXX
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxx kapitola xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx xxxxxxxxx aktivity xxxxxxxxx v pasterovaném xxxxx.
2. Xxxxxxxx
2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x μg xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx za xxxxxxxxx podmínek.
2.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx, pokud xx xxxxx xxx 4 xx fenolu xx 1 xx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx fenol x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx dvojsodného. Xxxxxxxx fenol xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (namodralé xxxxx), který xx xxxxxxxxxxxxxx xxxx při 610 nm. Poté xx xxxxxxx porovnání xx xxxxxxx, xxxxx xxxxx fosfatázy xxx xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxxx xxxxxx boritanu x xxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.1 Rozpustit xx xxxx 50,0 x hydroxidu barnatého (xxxxxxxxxxx) [Ba(OH)2.8H2O] x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.1.2 Rozpustit xx xxxx 22,0 g xxxxxxxx xxxxxx (H3BO3) x doplnit na 1000 xx.
4.1.3 Zahřát 500 ml xxxxxxx xxxxxxx xx 50 °X, xxx xxxxxxx xxxxxxx, promíchat, rychle xxxxxxxx xxx xx 20 °C, x xxxxxxx nutnosti upravit xxxxxxx xX xx 10,6 ± 0,1 xxxxxxxx xxxxxxx 4.1.1 xxxx 4.1.2. Xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx nádobě.
4.1.4 Xxxx xxxxxxxx zředit xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx.
4.2 Tlumivý xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx vodě 6,0 x xxxxxxxxxxxxx sodného (XxXX2) xxxx 12,6 x XxXX2.4X2X a 20,0 g xxxxxxxx xxxxxxx (NaCl) x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.3 Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxx 10 xx xxxxxxxxx roztoku xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2) xxxxx xx 100 xx.
4.4 Xxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx 0,1 g xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx bezvodý, prostý xxxxxx, ve 100 xx xxxxxxxxx roztoku (4.1.3) nebo 0,5 x fenylfosfátu xxxxxxxxxxx xx 4,5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2), xxxxxx xxx kapky xxxxxxx XXX (4.6) x xxxxxx stát 30 minut xxx xxxxxxxx xxxxxxx. Vzniklé xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 2,5 xx n-butanolu x xxxxxx xxxx, xxxxx xx butanol-1 xxxxxxxx. Xxxxxxx a odstranit xxxxxxx-1. X xxxxxxx xxxxxxxx xx extrakce xxxxxxx.
Xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx v chladničce xxxxxxx dní; xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx bezprostředně před xxxxxxxx, x xx xxxxxxxx 1 ml xxxxxx roztoku xx 100 ml xxxxxxx xxxxxxxx x hydroxidu xxxxxxxxx (4.1.3).
4.5 Sraženina xxxxx-xxx
Xxxxxxxxx ve vodě 3,0 x xxxxxx xxxxxxxxxxx (XxXX4 · 7X2X) a 0,6 x xxxxxx měďnatého (XxXX4 · 5X2X) x xxxxxxx xx 100 ml.
4.6 Xxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (roztok BQC)
Rozpustit x 10 xx 96 % (X/X) xxxxxxxx 40 ± 1 xx 2,6-dibromchinonchlorimidu (XXX) (X6X2Xx2XxXX6).
Xxxxxxxxx v xxxxx láhvi x xxxxxxxxxx. Vyhodit xxxxxx, xxxxx změní xxxxx xxxx xx xxxxxx xxx jeden xxxxx.
4.7 Xxxxxx xxxxxx měďnatého (XX)
Xxxxxxxxx ve xxxx 0,05 g xxxxxx xxxxxxxxx (XxXX4.5X2X) x xxxxxxx na 100 xx.
4.8 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx
4.8.1 Navážit 200 ± 2 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x přelít xx xxxxxxx xxxxx o xxxxxx 100 xx, xxxxxx xxxx, xxxxxxxxx x doplnit xx 100 xx. Xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
4.8.2 Zředit xxxxx 10 ml xxxxxxxxx xxxxxxx, doplnit xx 100 xx x promíchat. 1 xx xxxxxxxx 200 μx xxxxxx.
5. Xxxxxxxxx x pomůcky ze xxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxxxx pomůcky xx xxxx, xxxxx x zátky x xxxxxxxxx xxx odběr xxxxxx musí xxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx destilovanou xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx.
x) Xxxxxxx typy xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx používání xx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
5.1 Xxxxxxxxxx xxxx
5.2 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx 37 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx 610 nm.
5.4 Zkumavky, 16 nebo 18 × 150 mm, xxxxxxx odstupňované po 5 ml x 10 xx.
5.5 Pipety
5.6 Xxxxxxxx nálevky xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx. o xxxxxxx 5 cm.
5.7 Xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx 9 xx pro xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
5.8 Odměrné xxxxx xxx přípravu xxxxxxxxxxxx roztoků.
6. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxx xxxxxxxxx zabránit xxxxx přímého xxxxxxxxxx xxxxxx.
x) Xxxxx slin xxxx xxxx mohou xxxxxxxx xxxxxxx pozitivní xxxxxxxx a xx xxxxx xx jim xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxx věnovat zvláštní xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 Testování xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x chladničce, xxxxx ne déle xxx xxx dny.
6.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx pipety xxxxxx 1 ml xxxxxx do xxxxx xx xxxx zkumavek (5.4), xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx pokus.
6.3 Xxxxxxxxx
6.3.1 Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxxx vodě; xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxx hliníkovou xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx na pokojovou xxxxxxx.
6.3.2 Po xxxxxx xxxxxxx ošetřovat xxxxx x testovací xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Přidat 10 ml xxxxxxx xxxxxxxxx (4.4) a xxxxxxxxx.
6.3.3 Vzorky ihned xxxxxxxxx 60 xxxxx xx xxxxx xxxxx (5.2) a xxxxx (xxxxxxx čtyřikrát) promíchat xxxxxx xxxxx.
6.3.4 Xxxxxx xxxx x xxxx 6.3.1 zahřívat xxx xxxxxx xx xxxxxx xxxx. Rychle xxxxxxxx xx xxxxxxxxx teplotu.
6.3.5 Xx každé zkumavky xxxxxx 1 xx xxxxxxxxx xxxxx-xxx (4.5) x xxxxx xxxxxxxxx.
6.3.6 Xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, vylít xxxxx xxx xxxxxxxxx x v xxxxxxx xxxxxxxx filtrovat znovu, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx; shromáždit 5 xx ve xxxxxxxx.
6.3.7 Xxxxxx 5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx zabarvení (4.2).
6.3.8 Xxxxxx 0,1 xx xxxxxxx XXX (4,6), promíchat a 30 minut nechat xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.9 X xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx pokusem xxxxxx absorbanci xxx xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.3.10 Pokud absorbance xxxxxxxx x xxxx 6.3.9 xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx obsahujícího 20 μx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.4.4, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx objemu xxxxxxxxxxx vzorku s xxxxxxx xxxxxxx části xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx se xxxxxxx xxxxx xx varu, xxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.4 Sestrojení kalibrační xxxxxx
6.4.1 Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (4.8.2) xxxxxxxxx vyhovující xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0 (xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx), 2, 5, 10 a 20 μx xxxxxx na xxxxxxxx. Xx xxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx pipety 1 ml xxxx x 1 xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxx.
6.4.2 Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxx síranu xxxxxxxxx (4.7), 5 xx tlumivého xxxxxxx xxx zředění xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.3), 3 xx vody x 0,1 ml xxxxxxx XXX (4.6); promíchat.
6.4.3 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 30 xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
6.4.4 V xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx pokusem xxxxxx absorbanci při xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.4.5 Xx základě xxxxxx xxxxxxxxxx (6.4.4) xxxxxxxxx pro každé xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (6.4.1) xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx metodou xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxx x vzorec
7.1.1 Xx xxxxxxx hodnot xxxxxxxxxx (6.3.9) vypočítat xxxxxxxx fenolu xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (6.4.5).
7.1.2 Xxxxxxxxx aktivitu xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x μg xxxxxx xx mililitr xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxxx fosfatázy = 2,4 × X × D
kde
A xx xxxxxxxx fenolu x μg získané xxxxx bodu 7.1.1;
D xx faktor zředění xxx xxxxxxx provedené xxxxx xxxx 6.3.10 (x xxxxxxx žádného xxxxxxx X = 1).
2,4 xx faktor xxxxxxx (5/12 x 1 xx xxxxxxxxxxx xxxxxx) – xxx 6.2 ve xxxxxxxxxx x 6.3.2, 6.3.5 x 6.3.6.
7.2 Xxxxxxxxxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) : 2 μx xxxxxx/xx.
7.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (R) : 3 (xxxxxxxxx) μg xxxxxx/xx.
7.2.3 Pokud xx xxxxxxx provede podle 6.3.10, xxxxxx uvedené x 7.2.1 x 7.2.2 xx xxxxxx xxxxxxxx získaných xx xxxxxxxxx xxxxxx.
XXX. STANOVENÍ XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx, který xxxxxx xx kontrole xxxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx:
Xxxxx je mléko xxxxx xxxxxxxxxxx, xx 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx zabarvení.
Negativní reakce xx peroxidázu:
Do 30 xxxxxx po xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
3. Princip
Peroxidáza xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx kyslík xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx na xxxxxxxxx indofenol (Xxxxxxxx xxxx). Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx x xxxxx xxxx (50 °X) 2 x 1,4 fenylendiaminu (X6X8X2) x xxxxxxx xx 100 ml. Xxxxxx skladovat x xxxxxx x xxxxx, x xxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx jednoho xx xxxx dní xx xxxxxxxxxx roztok 1,4 fenylendiaminu vytvoří xxxxxxxxx, xxxxxx je xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2 Roztok xxxxxxxx vodíku
Vodou zředit 9 ml 30 % xxxxxxxx vodíku x xxxxxxx xx 100 ml. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxxxxxxxx kyseliny xxxxxx xx litr xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx stálý xxx xxxxx xxxxx, xxxxx xx skladován x xxxxxx a xxxxx, x xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx látkami.
5. Xxxxxx
5.1 Xxx 5 xx xxxxxx xxxxx xx čisté xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
5.2 Xxxxxx 5 xx xxxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx (4.1).
5.3 Xxxxxx 2 xxxxx roztoku peroxidu xxxxxx (4.2).
5.4 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx zabavení xxxxxx xxxx než 30 xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX PŘI 30 °X
1. Xxxxxxx x oblast použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °C. Xxxxxx xx použije pro xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, XXX mléko xxxx sterilizované xxxxx, xxxxx bylo 15 xxx preinkubováno xxx 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx rozumějí xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx médiem x Petriho xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx 72 xxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx mikroorganismů na 1 ml xxxxxxxx xxxx pasterovaného mléka xxxx xx 0,1 xx preinkubovaného xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx nebo XXX xxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx skla
Obvyklé xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °C.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Inkubátor, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °X.
4.1.4 xX-xxxx xx zařízením xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx na ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °C.
4.1.6 Zvětšovací xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Zvětšovací xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Míchačka xxxxxxx xxxxxxx 1 xx xxxxxx mléka nebo xxxxxxxxxxx ředění x 9 xx ředicího xxxxxxx a xxxxxxxxx xx xxxxxxxx excentrické xxxxxx obsahu xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x dostatečným xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx 10 ml xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx dalších xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 xx xxxx xxxxxxxx o xxxxxx 20 xx xxx xxxxxxxxxx kultivačního xxxxx.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx xxxx xx sterilního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, s nepoškozeným xxxxxx, o xxxxxxxxxx xxxxxx 1 ml, x výpustním xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx z xxxxxx, bezbarvého xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, dno xxxxx xx vnitřní xxxxxx xxx 90 až 100 xx. Vnitřní xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx 10 xx. Xxx xxxxx xxx žádné xxxxxxxxxx, xxxxx by xxxxxxx počítání xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx pomůcek ze xxxx:
Xxxxxxx xx skla xx xxxxxxxxxxx jedním x těchto xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), nejméně jednu xxxxxx xxx xxxxxxx 170–175 °C;
b) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx použití xxxxxxxxx xx nutné xxxx xx xx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx páry: xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx nádoby xx xxxxxx xxx napevno xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx sterilizované x xxxxxxxxxxx by xx xxxx xxxxxxx odvětráním xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx v horkovzdušné xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx – agar xx sušeným xxxxxx
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx extrakt |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx (+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 g |
|
Sušené odstředěné xxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10–15 x xxxxx želírovacích vlastností xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx by xxxxxx xxxxxxxxx žádné inhibiční xxxxx. Xxxx xx xxxxx srovnávacími testy xx xxxxxxx odstředěným xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X tomto xxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx x nakonec xxxxxx xxxxxxxxxx mléko. Ohřev xxxxxxxx usnadňuje xxxxxx. Xxxx přidat agar x xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx, xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx x xxxx xxx 30 xxxxx.
Xxxxx to xx xxxxxxxx, přefiltrovat xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX pomocí xX-xxxxx (4.1.4); pokud xx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xX, roztokem (xxxxxxx 0,1 mol/l) xxxxxxxxx sodného xxxx xxxxxxxx chlorovodíkové, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 6,9 ± 0,1 při 25 °C.
5.2 Rozdělení, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 ml xx xxxxx xxxx xx 12 xx 15 xx xx zkumavek (4.2.2). Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) při 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX kultivačního xxxxx.
Xxxxx xx kultivační xxxxxx xxxxxxxxx ihned, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx teplotě mezi 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx po jeho xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx dehydrované xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx před xxxxxxxxxxxx, pokud xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xX xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X xxxxxxx xxxxx xxxx 5.1, poté xxxxxxxx, sterilizovat x xxxxxxxxx kultivační xxxxxx xxxxx xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Roztok xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (NaCl) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, xxxxx xx je xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH pH-metrem (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx upravit xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 mol/l) hydroxidu xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
6.2 Rozdělení, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx ředidla
Rozdělit xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx zkumavka xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxxx.
Xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx ihned, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx teplotě xxxx 1 a 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
6.3 Komerční xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) xx xxxx připravovat x xxxxxxxxxx dehydrovaných xxxxxx xxxx xxxxxx. Dodržet xxxxxx xxxxxxx. Upravit xX metodou podle xxxx 6.1, poté xxxxxxxx, sterilizovat x xxxxxxxxx ředidla xxxxx xxxx 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Před xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x zchladit xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx vzorku mléka
Vzorek xxxxx řádně xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx nejrovnoměrněji xxxxxxxxx, x xx 25 xxxxxxxx otočeními xxxxxx xx vzorkem. Xx xxxxx zabránit tvorbě xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx mícháním x xxxxxxx testovacího vzorku xx neměla xxxxxxxxx xxx minuty.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (10-1) (xxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 ml xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 9 xx xxxxxxx (6.1), přičemž xxxxxx xxxxx xxxxxx xx kontaktu x xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx jako xxxxxxx xxxxxx mléka. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx toto xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) přenést 1 xx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.3) do 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx xxxxxx v xxxx 7.3.
Xxxxx xx xxx xxxxxx 10−2.
X xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx ředění xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx dlouho, xxxxx xxxxx očekávat přiměřené xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Petriho misek
7.5.1 Xxxxxx xxxxx: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) přenést xx xxxxx (4.2.4) 1 ml xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Pro každé xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx vhodnou misku.
7.5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx desetinného xxxxxx. Musí xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Pro xxxxx xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx misku.
7.5.3 XXX mléko x xxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx xx 15 denní xxxxxxxx při 30 °X – směrnice 85/397/XXX, příloha X xxxxxxxx VII xxx 5):
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx xx misky (4.2.4) 1 xx xxxxxx xxxxx (7.2). Xxxxxxxxx dvě xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx misky xxxxx xxx 15 xx 18 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxx po xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx rozložení kolonií.
Doba xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx, testovacího xxxxxx xxxx ředění s xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx médium xxxxxxxx.
7.7 Inkubace Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx obrácené dnem xxxxxx. Neskládat na xxxx xxxx xxx xxxx misek. Sloupky xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxx x xxxxxxxx xx stěnami x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 72 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx kolonie x Xxxxxxx miskách xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 300 kolonií.
Misky vyšetřit xxx tlumeném xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx počítání xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx nutné xxxx xx xx, xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx sraženin x xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx skla x xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx méně než xxxxxxxx misky, spočítat xxxxxxx x nepostižené xxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx celou xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx plochy xxxxx, misku vyřadit.
8. Xxxxxxx a vyjádření xxxxxxxx
8.1 Xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx
8.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.1.2 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx tohoto xxxxxx:
∑X / (x1 + 0,1x2) x
xxx:
∑X ΣC xx xxxxxxx počet xxxxxxx xxxxx xxxx 8.1.1.
(x1 + 0,1 x2)x je objem xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx:
x1 xx počet xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx
x2 xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx
x xx faktor xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
Xxxxx se xxxxxxxxxx xx xxx platné xxxxxxx. Když xx xxxxxxxxxxxxxx číslice xxx, xxxxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxx číslice xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxx (pasterované xxxxx):
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 kolonií
Ředění 10−3: 33 x 28 kolonií
Počet/ml: = 278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2
= 6290,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.1.3 Xxxxx jsou všechny xxxxx nižší xxx 10, xxxxx, xx xxxxx mikroorganismů xx xxxxxxxx xx "xxxxx xxx 10 x x", xxxxxxx "x" xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx faktoru zředění.
8.1.4 Xxxxx xxxx všechny xxxxx vyšší xxx 300 a xxxxxxxx xx xxxxx, xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx hodnotou xxxxxxx zředění. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xx".
8.2 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xxxxx xxx 10 xxxxxxx na 0,1 xx se xxxxxxxx xx nevyhovující požadavkům xxxxxxxx 85/397/XXX.
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx uznaných kruhových xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
X. XXXXXXXXX XXXXXX MIKROORGANISMŮ PŘI 21 °X
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx technikou xxxxxxxx kolonií xxx 21 °X x xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxx 6 xX x xxxxx xxxxxxxx xxxxxx kontaminace xxxxxxxxxxxxx xxxxx psychotropními xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxx se x xxxxx xxx 6 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx organismy, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx po xxxxxxx xxxxxxxx xx popsaných xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx dní xxx 6 °C. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx mléka x xxxxxxxxxxx xxxxxx x Xxxxxxx miskách x xxxxxx inkubovat 25 xxxxx při 21 °X. Xxxxxxxx kolonie x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na 1 xx pasterovaného xxxxx.
4. Xxxxxxxxx x pomůcky xx skla
Obvyklé xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, zejména:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx sušárna, xxxxxxxxxxxx xx 170 až 175 °X.
4.1.2 Autokláv, xxxxxxxxxxxx na 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx:
x) 6 ± 0,2 °C
b) 21 ± 1 °X xx xxxxx xxxxxx xxxxxx.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, přesný xx ± 0,1 jednotky xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx na 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 1 xx xxxxxx mléka xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x 9 xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxx rotace xxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Pomůcky xx xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx s xxxxxxxx uzávěry x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxx ředění nebo xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 xx xxxx xxxxxxxx x objemu 20 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Pipety (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx xxxx xx sterilního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, s xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Petriho xxxxx x čirého, bezbarvého xxxx nebo xx xxxxxxxxxx syntetického materiálu, xxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx 90 xx 100 x. Vnitřní xxxxxxx xxxxx xx měla xxx xxxxxxx 10 xx. Xxx nesmí xxx xxxxx nerovnosti, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx kolonií.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx skla:
Pomůcky xx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1), xxxxxxx jednu xxxxxx xxx xxxxxxx 170–175 °X;
x) v xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx při xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx nutné dbát xx xx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: pokud xx materiál xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xx neměly xxx xxxxxxx uzavřeny, xxxxxxx nebo xxxxx xx xxxx být xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx v autoklávech xx se xxxx xxxxxxx odvětráním xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1).
5. Kultivační xxxxxx – xxxx xx xxxxxxx mlékem
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 g |
|
Trypton |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx(+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 g |
|
Sušené xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10-15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx by xxxxxx xxxxxxxxx žádné xxxxxxxxx látky. Toto xx ověří xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx mlékem, které xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X xxxxx xxxxxx suspendovat x xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, trypton, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx usnadňuje xxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx a xxxxx xx varu za xxxxxxx míchání, dokud xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx x xxxx xxx 30 xxxxx.
Xxxxx je xx nezbytné, přefiltrovat xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx to xx xxxxxxxx, xxxxxxx xX, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) hydroxidu xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °C.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Rozdělit xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 ml xx xxxxx xxxx xx 12 až 15 xx xx xxxxxxxx (4.2.2). Xxxxx x xxxxxxxx uzavřít.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) při 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx se kultivační xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx teplotě xxxx 1 a 5 °X, xxxxx xx déle xxx 1 xxxxx xx xxxx přípravě.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kultivačního xxxxx. Dodržet xxxxxx xxxxxxx, ale xxxxxx xxxxxx odstředěné xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx produktu.
Upravit xX xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °C xxxxxxxx xxxxx xxxx 5.1, xxxx rozdělit, xxxxxxxxxxxx x skladovat kultivační xxxxxx xxxxx bodu. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Roztok xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 g |
|
Chlorid xxxxx (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx vodě, xxxxx to je xxxxx, zahřívat.
Zkontrolovat xX xX-xxxxxx (4.1.4); pokud xx xx nezbytné xxxxxxx pH xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 mol/l) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx chlorovodíkové, xxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °C.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, aby po xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx ředidla. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 minut xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) při 121 ± 1 °X. Xxxxxxxxxxxx xX ředidla.
Pokud xx ředidlo xxxxxxxxx xxxxx, skladuje xx x xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx ne xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) xx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Upravit pH xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x skladovat xxxxxxx podle xxxx 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx zahájením xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média x zchladit ve xxxxx lázni (4.1.5) xx 45 ± 1 °C.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx
7.2.1 Inkubovat x xxxxxxxxxx [4.1.3 x)] xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxx, xxxxx xx xxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx vzorek x xxxxxx xxxxxxx 100 xx xx xxxx 120 ± 2 xxxxx xxx 6 ± 0,5 °X.
7.2.2 Po xxxxxxxx xxxxxx mléka řádně xxxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, a xx 25 xxxxxxxx otočeními xxxxxx se xxxxxxx. Xx nutné zabránit xxxxxx pěny nebo xxxx xxxxxx rozptýlit. Xxxx xxxx xxxxxxxx x odběrem xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx tři minuty.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx ředění (10−1)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) syrového xxxx pasterovaného mléka xx 9 ml xxxxxxx (6.1), přičemž xxxxxx xxxxx přijít xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx mléka. 5 xx 10 sekund xxxxxxx xxxxxxxxxxx toto xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx xx tak xxxxxxxx ředění 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 ml xxxxxxxxxx xxxxxx (7.3) xx 9 ml xxxxxxx (6.1) xxxxx xxxxxx x xxxx 7.3.
Xxxxx se xxx xxxxxx 10−2.
X cílem xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx tento xxxxxx opakuje xxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx misek
Sterilní xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx vzorku x/xxxx xxxxxxxx desetinného xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx dvě ředění. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) připravit xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.6 Nalévání xxxxxxxxxxxx média
Do každé xxxxxxxxxx misky nalít xxx 15 xx 18 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Ihned xxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxx po xxxxxxxx xxxxx x rovnoměrnému xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx mezi xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx vzorku xxxx xxxxxx x kultivačním xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx stát xx vodorovném, xxxxxxxx x čistém xxxxxxx, xxxxx médium neztuhne.
7.7 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx dnem xxxxxx. Xxxxxxxxx na xxxx xxxx xxx šest xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, ani xxx x kontaktu xx xxxxxxx a xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 25 xxxxx xxx 21 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 300 xxxxxxx.
Xxxxx vyšetřit xxx tlumeném světle. Xxx xxxxxxxxx počítání xxx použít xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) a/nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx xxxxx dbát xx to, xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx sraženin x xxxxxxx x drobnými xxxxxxxx koloniemi. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx provést xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx zvětšením (4.1.7), x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx od xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx tvořící xxxxxx xx xxxxxxxx za xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx tvořící povlak xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx misky, xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx misky x xxxxxxxxx odpovídající xxxxx xxx xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx více xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, misku xxxxxxx.
8. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Použít xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.2 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx podle xxxxxx xxxxxx:
∑X / (x1 + 0,1n2) x
xxx:
ΣX je celkový xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 8.1,
(x1 + 0,1 n2)d xx xxxxx naočkovaného vzorku, xxx:
x1 xx xxxxx xxxxx xxx prvním xxxxxxx
x2 je počet xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx
x je xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
Xxxxx se xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxx číslice xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxx:
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 a 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; =278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2=
=629 / 0,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.3 Xxxxx xxxx xxxxxxx počty xxxxx xxx 10, xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx "xxxxx xxx 10 × x", xxxxxxx "x" xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
8.4 Pokud xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 300 x xxxxxxxx xx xxxxx, xxxxxxx odhad x xxxxxxxxx jej xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx "Odhadovaný počet xxxxxxxxxxxxxx xx xx".
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx ještě xxxxxx k xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX – POČÍTÁNÍ XXXXXXX PŘI 30 °X
1. Předmět a xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx referenční postup xxx stanovení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X.
2. Definice
"Koliformními xxxxxxxxxx" xx rozumějí xxxxxxxx, xxxxx xxx 30 °X vytvářejí charakteristické xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xx popsaných podmínek xxxxxxx zkvašovat x xxxxxxx xxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx vzorku xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx x 24 xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx 30 °C. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x, xxxxx xx xx xxxxx, potvrdit xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx počet koliformních xxxxxxxx na 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Přístroje
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx sušárna, nastavitelná xx 170 xx 175 °C.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na 121 ± 1 °C.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx udržovat xxxxxxx 30 ± 1 °C.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Očkovací jehla xx slitiny xxxxxxx-xxxxxxx xxxx xxxx-xxxxx.
4.2 Pomůcky xx xxxx
4.2.1 Zkumavky x xxxxxxxx xxxxxxx x objemem 20 xx, xxx mohly xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (5.2) a Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 až 250 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.1).
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxxxx syntetického materiálu, x xxxxxxxxxxxx hrotem, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 – 10 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx misky x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxxxx syntetického materiálu, xxx misek xx xxxxxxx xxxxxx xxx 90 xx 100 x. Vnitřní xxxxxxx xxxxx xx měla xxx xxxxxxx 10 xx. Xxx nesmí xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx:
Xxxxxxx xx skla xx xxxxxxxxxxx jedním x xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx 170 – 175 °X;
x) x autoklávu (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx autoklávu je xxxxx xxxx xx xx, aby xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx proniknutí xxxx: pokud xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx nádoby xx xxxxxx být xxxxxxx xxxxxxxx, uzávěry xxxx víčka xx xxxx xxx volné.
Pomůcky xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x autoklávech xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, žlučí x xxxxxxxx (XXXX xxxx). Xxxxxx selektivní xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
7 x |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
3 x |
|
Xxxxxxx (C12H22O11.H2O) |
10 g |
|
Chlorid xxxxx (NaCl) |
5 x |
|
Xxxxxxx xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxxxx xxxxxx |
0,03 x |
|
Xxxxxxxxxx violeť |
0,002 g |
|
Agar |
10 xx 15 x xxxxx želírovacích xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx a nechat xxxx xxxxxxx minut. Xxxx xxxxxxxx promíchat.
Zkontrolovat xX xxxxxx pH-metru (4.1.4); xxxxx to xx nutné, upravit xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 mol/l) xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx po xxxx xxxx jeho xxxxxxx 7,4 ± 0,1 při 25 °X.
Xxxxx xxxxxx do xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a ihned xxxxxx xx množstvích 100 xx 150 xx xx sterilních xxxxx (4.2.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx ve xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
X době xxxxxxx zkontrolovat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média (6.4).
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxx po xxxx přípravě.
5.2 Xxxxxx xxxx x brilantovou xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
10 x |
|
Xxxxxxx (X12X22X11.X2X) |
10 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx |
20 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxx |
0,0133 g |
|
Voda |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx x xxxxx xx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxx pH-metru (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxx pH xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx sodného xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,2 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx xxxxxx po 10 xx xx xxxxxxxx (4.2.1) xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx nesmějí xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, skladuje se x xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °C, xxxxx ne déle xxx 1 xxxxx xx jeho přípravě.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx může připravit x komerčního dehydrovaného xxxxxxxxxxxx xxxxx. Dodržte xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX, rozdělit, sterilizovat x xxxxxxxxx kultivační xxxxxx xxxxx xxxx 5.1 a 5.2.
6. Xxxxxx
6.1 Kultivační xxxxxx
Xxxxxx xxxxxx (VRBL xxxx) xxxxxxx v xxxx 5.1.
6.2 Příprava vzorku xxxxx
Xxxxxx xxxxx řádně xxxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxxxxxxxxx co nejrovnoměrněji xxxxxxxxx, x xx 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx. Xx nutné xxxxxxxx xxxxxx pěny nebo xxxx xxxxxx rozptýlit. Xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx neměla xxxxxxxxx tři xxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx přenést (4.2.3) 1 ml xxxxxx xxxxx xx každé xx xxx misek (4.2.4) x xxx xxxxxxxxx 3 xx xxxxxx mléka (6.2).
6.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Do xxxxx xxxxxxxxxx misky xxxxx xxx 12 xx XXXX xxxxx (6.1)
Xxxxx xx xxxxxx xxxxx promíchat rotací Xxxxxxx xxxxx, xxx xx inkubaci došlo x rovnoměrnému xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx mezi xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxx nesmí xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x 12 ml xxxxx XXXX agaru, xxxxx byl použit xxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxx na xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 4 xx XXXX agaru (6.1) na povrch xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx.
6.5 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx nahoru. Xxxxxxxxx na xxxx xxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx misek xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, ani xxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx x vrchní xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 24 ± 2 xxxxxx xxx 30 ± 1 °C.
6.6 Xxxxxxxx xxxxxxx
6.6.1 Xxxxxxx kolonie x Petriho xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx více než 150 xxxxxxx. Počítat xxxxx červené xxxxxxx x xxxxxxx nejméně 0,5 xx, x xxxx bez xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx bakterie.
6.6.2 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx kolonie necharakteristický xxxx (xxxx. xxxxx xxxxx, velikost nebo xxxx xxxx sraženin xxxxxxxx k xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxx konfirmační xxxx (6.7).
6.7 Konfirmační xxxx
Xxxxx xxxxx x xxxx 6.6.2 xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx u xxxxxxxx xxxxx (xxxx. 3 xx 5) xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx kolonií xxx, xx se pomocí xxxxxxxx xxxxx (4.1.6), xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx zelení (5.2). Xxxxxxxxx xxxxxxxx 24 ± 2 hodin xxx 30 ± 1 °X.
Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx x Xxxxxxxxx xxxxxxxx tvoří plyn.
7. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx obsahujících xxxxxxxxx 150 xxxxxxx.
7.2 Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx počet xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx vzorce:
ΣC / x
xxx:
ΣX xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (7.1 x xxxxxxxxxxx xx 7.2), xxxxxxxxxxx vyšetřením xxxxxx xxxxx (6.3).
x je xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (6.3) x xxxxxxxxxxx (3 xx).
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx číslice, pokud xxxxxxxx xxxx xxx 100 kolonií. Když xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx sudá.
Pokud xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx než 150 xxxxxxx, xxxxx výsledek xxxx "xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx na 1 xx".
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx nejsou x xxxxxxxxx.
XXX. STANOVENÍ XXXXXX SOMATICKÝCH XXXXX
Xxxx xxxxxxxx popisuje xxx xxxxxxxxxx postupy xxx xxxxxxxxx somatických xxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx xxxxx.
Xxxxx postup xxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx buněk ve xxxxxx xxxxx za xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx X.1).
2. Xxxxxxxx
Xxx tento xxxxxx xx xxxxxxxxxxx buňkami xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxx xx možné xxxxxxxx xxxxxxx methylenovou xxxxx
3. Xxxxxxx
Xxxxxx 0,01 xx xxxxx na 1 xx2 xxxxxxx podložního xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxx pod xxxxxxxxxxx. Xxxxx somatických xxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxx počet xxxxx na 1 xxxxxxxx.
4. Činidla
Musí xx xxxxxx chemikálie čistoty x.x..
Xxxxxxx roztok
Složení
|
Methylenová modř |
0,6 x |
|
Xxxxxxx – 99 % |
54 xx |
|
1,1,1-xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxx |
40 xx |
|
Xxxxxx kyselina xxxxxx |
6 xx |
Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Příprava x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx uskutečnit x xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx x baňce xxxxxxx a 1,1,1-trichlorethan xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx ve vodní xxxxx xx 60 xx 70 °X. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxxx, 12 xx 24 xxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxx 4 °C x přidat xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Přefiltrovat xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx 10 xx 12 xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxxxxx uzavřené láhvi. X xxxxxxx vytvoření xxxxxx nebo xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx.
5. Přístroje x xxxxxxx xx xxxx
5.1 Mikroskop xxxxxxxxxx xxxxxxxx 500 × xx 1000 ×
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx dávkování xx 0,01 xx x přesností xxxxxxx ± 2 %.
5.3 Xxxxxxxx sklíčko x xxxxxxx 20 mm × 5 xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx sklíčko a xxxxxxx 20 × 5 xx xxx xxxxxx xxxxxx.
5.4 Xxxxxxxxxxxx xxxxx deska (30 °X až 50 °X) xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5 Xxxxxxxxxx (xxx) xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx.
5.6 Xxxxx xxxxx, nastavitelná na 30 až 40 °X xxx xxxxxxxx xxxxxx mléka.
5.7 Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx po 0,01 xx.
6. Postup
6.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxx mléka xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxx hodin xx xxxxxx vzorku. Xxxxx xxxxxxxxxx nesmí xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 6 °X. Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx.
6.2 Xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx (5.6) na 30 až 40 °X. Xxxx řádně xxxxxxxxx. Xxxxxxxx na xxxxxxx, xxx které xxxx xxxxxxxxxxx mikrostříkačka (5.2), například 20 °X.
6.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx nezanechává prach, xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx. Skladovat x xxxxxxx, xxx jsou xxxxxxxx xxxx xxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxx xxxxx vrstvy
Mikrostříkačkou (5.2) odebrat 0,01 xx xxxxx xx xxxxxx připraveného, xxx xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx očistit xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, která xxxxxx xx xxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx podložní xxxxxxx (5.3) x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (20 xx × 5 xx). Xxxx ji xx xxxxxxxxxxxxxxx vyplnit. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (5.4) xx xx xxxxxxx vysušení.
U xxxxxxx xxxxxx mléka xxxxxxxxx a vyšetřit xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx.
6.5 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx na 10 xxxxx do xxxxxxxxx xxxxxxx (4). Xxxxx x, xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.5). Xxxxxxx tenké xxxxxx xx tekoucí vody, xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx sušit x xxxxxxx xxx, xxx xxx chráněn xxxx xxxxxxx.
6.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (500 × xx 1000 ×) xxxxxx průměr xxxxxxxxxxxxxxx xxxx (5.7).
7. Xxxxxxxx x výpočet
7.1 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxxxxxx (5.1). Xxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx, x xx xxxxxx jádra, xxxxx jsou jasně xxxxxxxxxxxx x x xxxxx xx v xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxx pole xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxx, které xxxx xxxxxxx pouze x okrajových xxxxx xxxxx vrstvy. Pečlivá xxxxxxxx xxxxxxx vrstev x xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx nejméně xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxx xxxx provádět xxxxxxxxxx mikroskopických polí xxxxxxxxxxxx takovým způsobem, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx vrstvy xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx buněk, xxxxx xx xxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx x xxxx, xx počítání somatických xxxxx pod xxxxxxxxxxx xxxx xxx rovněž xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx počítání, variační xxxxxxxxxx počítání z xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx xxxxxxxx koeficient elektronického xxxxxxxxx. Variační koeficient xxx xxxxxx xxxxx x obsahem 400000 xx 600000 buněk/ml xx neměl překročit 5 %.
Počet somatických xxxxx, xxxxx xx xxxxx x xxxxxx xxxxxx spočítat, musí xxx podle Poissonova xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 400, xxx bylo xxxxxxx kritérium xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
X = X = x2,
xxx:
X xx střední xxxxxxx
X xx rozptyl
s xx xxxxxxxxxx odchylka.
Variační xxxxxxxxxx xx:
XX = x × 100 % / X xxxx XX = 100 % / x&xxxx;xxxx XX = 100 % / XXX
X (xxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxx), které xxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxx 400 pro CV = 5 %).
7.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxxxx 0,01 ml xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx vypočítá xxxxx xxxx 7.3.1 xxxx 7.3.2.
7.3.1 Xxxxxxxx pásů xx xxxxx vrstvě
Délka xxxx, xxxxx se xxxx počítat, xx 5 xx. Šířka xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, jak xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x mikrometrickou xxxxxxxx (5.7).
Xxxxxxxx faktor = 20 × 100 / x × x
xxx:
x xx xxxxxx mikroskopického pole x xx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx sklíčkem s xxxxxxxxxxxxxx stupnicí (5.7)
x xxxxxxx xxxxx spočítaných xxxx.
7.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx ve xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx pomocí xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx
xxx:
x je průměr xxxxxxxxxxxxxxx pole x xx, xxxxxxxxx podložním xxxxxxxx x mikrometrickou xxxxxxxx (5.7)
s xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
7.4 Xxxxxxx xxxxxx xxxxx
X xxxxx získat xxxxx xxxxx na ml xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (7.1 x 7.2) xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (7.3).
7.5 Přesnost
Variační xxxxxxxxxx (xxx 7.2) xxxxx xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kruhových xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx postup popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxx X.1) xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxx x chemickou xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx mají x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx DNA xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxx xxxxxx (xxxxxxxxx 0,2 xx) xx xxxxxxxx xxxxxxxx x tlumivým xxxxxxxx a s xxxxxxxxxxxxxx roztokem. Xxxx xxxx xxxxx se xxxx xxxxxxx ve xxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx disk, xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx buňka xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx se zesiluje x xxxxxxxxxxx. Obsah xxxxxxxxxxx buněk xx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx mililitr.
4. Xxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x.x.. Xxxxxxx xxxx je xxxxxxxxxxx xxxx deionizovaná, xxxx xx to xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx |
51,00 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxx |
13,75 g |
|
Polyethylenglykol-mono-p(1,1,3,3-tetramethylbutyl)-fenylether(například Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 xx |
|
xX 5,7 xx 5,9. Xxxxxxx xxxxx na 10000 xx. |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx jednotlivé xxxxxx. Xxxxxxxxxx ve xxxxxxxxxxxx uzavřené xxxxxx xx xxxxxx překročit xxxx xxx.
4.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx roztok)
Složení
|
Ethidiumbromid |
1,0 x |
Xxxxxxx xxxxx xx 1000 xx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx vodě. Xxxxxxxxxx xx vzduchotěsně uzavřené xxxxxx chráněné xxxx xxxxxxx by nemělo xxxxxxxxx dva měsíce.
4.3 Xxxxxxxxxxxxx roztok (xxxxxxxx xxxxxx)
Xxxxxxx 20 ml xxxxxxxxx xxxxxxx (4.2) x xxxxxxxx roztokem (4.1) xxx, xxx xx získal xxxxx 1000 xx. Pracovní xxxxxx by neměl xxx používán více xxx sedm xxx.
4.4 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxx xxxxxx (4.1) |
10 xx |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 xx |
|
Xxxxxxx x 25 % xxxxxxxxxx |
25 xx |
Xxxxxxx xxxxx xx 10000 xx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxxxxx složky. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
5.1 Počítací zařízení xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx částic, xxxxx xx mají xxxxxxx, x prahovou xxxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Kalibrace xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxx buněk xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X).
5.2 Xxxxx xxxxx, s cirkulací xxxx, xxxxxxxxxxxx na 40 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxx, s xxxxxxx uzávěrem, xxxxx xxx 15 xx.
6. Xxxxxx xxxxx
6.1 Xxxxxx xxxx xxx skladován xxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx (5.3). Xxxxx vzorek xxxxx xxxxxxxx konzervován, xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xx po xxxxxxxx 24 xxxxx xx xxxxxxxx, neboť obsah xxxxxxxxxxxxxx by xxx xxxxxx nízký. Skladovací xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 6 °X.
6.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx se musí xxxxxxx do 24 xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxx provedena co xxxxxxxx po xxxxxx xxxxxx.
6.2.1 Chemická konzervace xxxxxx se provede xxxxxxxx xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx:
- xxxxxxxx orthoboritá:
konečná xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx být xxxxx než 0,6 x xx 100 xx. Takto konzervovaný xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx xxxxxxx 6 xx 12 °X;
- dvojchroman xxxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx draselného xx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx 0,2 x xx 100 xx. Takto xxxxxxxxxxxx vzorek může xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 72 hodin xxx xxxxxxx 6 až 12 °X;
- xxxx xxxxx:
xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x konečné koncentraci 0,024 g/100 xx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx 6 xx 12 °X xxxxx po xxxx odběru x xxxxxxxx xx 48 xxxxx xx xxxx xxxxxx;
- xxxxxxxx:
xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx bronopolem x konečné koncentraci 0,05 g/100 ml, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx na xxxxxxx 6 xx 12 °X xxxxx xx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx do 72 xxxxx xx xxxx xxxxxx.
6.2.2 Xxxxxx, který xxx byl konzervován xxxxxxxxx boritou, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx až 48 xxxxx xxxxxxxxxxxxx draselným.
Poznámka:
Pokud xxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx sodným, xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx podmínky pro xxxxxxxxxx odpadních vod.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxx ošetření xxxxxx
Xxxxx, které xx xx vyšetřit, xx xx nadojení xxxxxxxx xxxxxxx 24 hodin xxx asi 2-6 °X. Xxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxx xx bez xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx přesto nutné xxxxxxxx provést, vzorek xx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx dvojchromanem xxxxxxxxx (xxx 6.2.1).
7.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxx 7.1) nebo xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx den xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx (5.2) xx xxx 40 °X. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx teplotě xx do počítání.
7.3 Xxxxxxxx buněk
Počítání xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.1) xx 15 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (viz 7.2). Bezprostředně před xxxxxxxxx xxxxxx důkladně xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx rozdělení xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx vzorku xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x) x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nejsou x xxxxxxxxx.
Xxxxx, xxxxx jsou x xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxx:
(1) počet xxxxx xxxx 400 000 xx 500&xxxx;000 xxxx:
- směrodatná odchylka xxxxxxxxxxxxxxx:
xx = 20000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx koeficientu 5–4 %)
- směrodatná xxxxxxxx reprodukovatelnosti:
sR = 40000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 10–8 %)
9. Xxxxxxxx správnosti
Kontrola xxxxxxxxxx xx xxxxxxx pomocí xxxxxx x známém xxxxxx buněk, který xx stanoví xxxxxxxxx xxxxx pod xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx referenční xxxxxxxxxx.
XXXX. XXXXXXX XXXXXXXXXX X SULFONAMIDŮ
PŘEDMĚT A XXXXXX POUŽITÍ
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx antibiotik x xxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx a x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx:
X. Xxxxxxxxxxxx postup
Tento xxxxxx je počáteční xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx vzorky xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx x několika xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xx použití Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx, XXXX 10149, xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx.
X. Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxx postup
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxx postup xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx antibiotik x sulfonamidů x xxxxxxx xxxxx a x xxxxxxx ošetřeném xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx vyšší xxx xxxxxx uvedené x xxxx tabulce:
Detektovatelné koncentrace xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx [1]
|
Citlivost xxxxx |
||
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxx |
|
|
Xxxxxxxxxxxxxxx |
0,002 |
0,006 |
|
Xxxxxxxxx |
0,002 |
0,005 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,015 |
0,035 |
|
Xxxxxxxx |
0,006 |
0,011 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,10 |
0,40 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,20 |
0,45 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxx |
0,15 |
0,50 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
7 |
15 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx |
4 |
13 |
|
Xxxxxxxx |
1 |
22 |
|
Xxxxxxxxx |
9 |
28 |
|
Xxxxxxxxxx |
0,06 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxx |
1 |
2,25 |
|
Xxxxxxxxx |
0,01 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,01 |
0,1 |
|
Xxxxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxxx) |
0,5 |
1 |
|
Xxxxxxxxxx extrakt |
2 x |
|
|
Xxxxxx |
5 x |
|
|
Xxxxxx extrakt |
1 x |
|
|
Xxxxxxx xxxxx |
5 x |
|
|
Xxxx |
10–15 g |
|
|
Voda |
1000 xx |
|
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx. Xxxxxxx xX xxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxxxx xxxx po 100 xx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx 15 minut xxx 121 ± 1 °X.
5.1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxx xxxxx |
2 x |
|
Xxxx |
15 x |
|
Xxxx |
1000 ml |
|
Roztok xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx (xxx 5.1.3) |
10 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx. Za xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx tetroxoprim x xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X. Xxxxxxx xX, xxx po xxxxxxxxxxx byla xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 při 25 °X.
5.1.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx tetroxoprimu
Složení:
|
Trimethoprim |
5 xx |
|
xxxx Xxxxxxxxxxx |
30 xx |
|
96 % Xxxxxxx |
5 xx/30 ml |
|
Vodado |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx tetroxoprim (5 nebo 30 xx) x doplnit xxxxx.
5.1.4 Živný xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
0,75 xx |
|
Xxxxxxx |
5,0 xx |
|
Xxxxxxxxx xxxxx |
8,0 xx |
|
Xxxxxxxxxxxxx červeň |
0,025 x |
|
Xxxx |
50 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx ve xxxx xxxxx roztok x xxxxxxxxx, xxxxx xx xx nutné, xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Živný xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx
5.2.1 Xx xxxxxxxx xxxxx x vhodným xxxxxxxx xxxxxxxxx roztok xxxxxxxxxx x 60 μx/xx (100 XX/xx), x xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx sodného xxxx draselného ve xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
5.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx vložením 1,25 xx roztoku xxxxxxxxxx (5.2.1) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xx 1000 xx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 0,075 μx xxxxxxxxxx/xx (= 0,125 XX/xx).
5.2.3 Xxxxxxxxx 75 xx standardního xxxxxxx penicilinu xxxxxxxxxxxx 0,004 μx xxxxxxxxxx/xx (= 0,0067 IU xxxxxxxxxx/xx) xxxxxxxx 4 xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2.2) xx 71 xx mléka xxx inhibičních xxxxx (5.3).
5.2.4 Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx bodů 5.2.1 až 5.2.3 xx xxxx xxx xxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxx testu.
5.3 Mléko xxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx preparát xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (10 % x/X) xx vodě, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Rovněž xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx mléka, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxx inhibičních xxxxx; xxxx xxxxx xx xxxxxxx do xxxxx x zahřívá xx xxxxx xxxxxx xx 100 °C, xxxx xx uloženo do xxxxxxxxxx s teplotou 0 °C až 6 °X na xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
5.4.1 Xxxx testovací organismus xx xxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. calidolactis XXXX 10149 Kmen XXXX 10149 xx xxxxxxxxx s xxxxxx X 953.
5.4.2 Připravit xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx kultury. Xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx na xxxxxx xxxxxx xxxxx (5.1.1). Xxxxx agar se x proužcích naočkuje xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx aerobně xxxxxxxx 48 hodin xxx 63 ± 1xX. Xx inkubaci xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx xxx 0 xx 5 xX.
5.5 Xxxxxxxxx kultura (xxxxxxxx xxxx)
5.5.1 Asepticky xxxxxxx 20 ml xxxxxxx xxxxx (5.1.1) xx xxxxxxxx Petriho xxxxx (4.2.2) x xxxxxx xxxxxxxx na pokojovou xxxxxxx.
5.5.2 Xxxxxxxx pipetou (4.2.4) xxxxxxx 5 xx sterilní xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx zásobní xxxxxxxx (5.4.2) x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx šikmého xxxxx. Xxxxxxxx spór se xxxxx při 0 xx 5 °X x xxxxxxx xx xx 36 hodin.
5.5.3 Xxxxxxxx pipetou (4.2.4) xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx spór (5.5.2) xx Petriho misku (5.5.1) x důkladně xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx celém xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx 16 xx 18 hodin xxx 63 ± 1 °C (4.1.1).
Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (5.4.2) nebo xxxxxxx xxxxxx 36 xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx nejméně xxxxxxx x časovém xxxxxxxxx xxxxxxxxx 36 xxxxx.
5.5.4 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxxx xxxx xx Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (5.5.3) x xxxxxxxxx xxxxxxxx odstranit xxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxx (4.2.3) obsahující 250 xx sterilní xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxx x důkladně xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx přeočkovány, xx xx xxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxx 0 xx 6 °X.
5.5.5 Xx 16xx xx 18xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 63 ± 1 °X na xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxx vykazovat xxxxx životaschopných mikroorganismů xxxx 5 a 10 miliony na xxxxxxxx. Suspenze xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx, měla xx xx xxxxxxxx novou xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (5.4.2).
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx agarové xxxxxx (5.1.2), poté xxxxxxxx xx 55 °C.
5.6.2 Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx spór (5.5.4) x xxxx částem xxxxxxxxx xxxxx (5.6.1) xx xxxxxxxx nebo x xxxxxxxx. Důkladně xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx (4.2.6) 0,3 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.6.2), aby xx xxxxxxxxx 5 xx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxx, v xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx. Nechat xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, poté xxxxxx zkumavky/ampule 12 xxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
5.6.4 Xxxxxxxx/xxxxxx mohou xxx xxxxxxx xxx xxx, xxx mohou xxx xxxxxx skladovány xxxxxxx xxxxxx při 0–6 °X, xxxxx xxxx ihned xx xxxxxx přípravě ochlazeny.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx do 24 xxxxx po odběru, x xx xx xxxx se skladují xxx teplotě 0-5 °X. Pokud xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx 24 xxxxx, xxxx xx xx xxxxxxx hluboko zmrazené (−30 °xx - 15°X), aby xx xxxxxxx na minimum xxxxxxxxxx penicilinu.
6.2 Xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx zkumavku/ampuli (5.6). Xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (4.1.3) xxxxx xxxxxxxxxx pro xxxxxx x xxxxx (5.2 x 5.3).
6.3 Xx každé xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxx 50 mikrolitrů xxxxxxx xxxxxxx (5.1.4).
6.4 Xxxxxx xxxxx řádně xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx (4.1.4) přenést 0,1 xx xxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx každého xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.5 Postup xxxxx xxxx 6.4 xx opakuje xxxxxxx xxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,004 μx/xx (= 0,0067 XX/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx (5.2.3).
6.6 Xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.4 xxxxxxxx stejným xxxxxxxx xx xxxxxxx kontrolního xxxxxx mléka bez xxxxxxxxxxx xxxxx (5.3) xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
6.7 Xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxx xx nejméně 2½ xx 2¾ xxxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxxxxx 63 ± 1 °X (4.1.2).
6.8 Xxxxxxx xxxxxxxx xx zkumavkami/ampulemi x vodní lázně.
6.9 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxx 7).
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Purpurové xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx penicilinu xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx ukazuje xx xxxxxxxxxx antibiotik xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx "zcela xxxxxxxxx" xxxxxxx x xxxxxxx na xxxxxx 39. Pokud zabarvení xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (6.5) zůstane xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxx mléka xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx 39.
7.3 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx zkumavkách/ampulích xxxxxxxxxxxx vzorek xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx organismu.
7.4 Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol, zkumavky/ampule xxxxxxxxxx životaschopné xxxxx x xxxxxx xxxx xxx podrobeny novému xxxxxxxxx x čerstvě xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx materiálem.
8. Xxxxxxxxx výsledků
8.1 Xxxxxxxx xxxxxxxx všech xxxxxx x reakcemi xxxxxxxxx x 7.1 x 7.2 xxxxx xxxxxx "X".
Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx mléka xxxx xxxxxxxxxx skladovat, xxxx xxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X. Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tento xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx penicilinu nebo xxxxxx antibiotik, xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx mléka x xxxxxxxxx (X.7.1) xxxx xxxxxxxxxx reakcí (X.7.2).
Xxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxxx
Xxx X.1.
2. Xxxxxxxx
2.1 Xxxxxx mléka xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx čirou xxxxxxxxx xxxx nejméně 2 xx kolem xxxxx.
2.2 Xxxxx vzorek, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, včetně xxxxxxxxxxx (2.1), a xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxx), xxxxxxxxx čirou zónu xxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xx průměr xxxx xxx penicilinázy, xxxxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxxxxxx nebo xxxx penicilinu a xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
2.3 Xxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx (2.2) inaktivována, xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xx xxx xxxx xxxxxxxx [xxx směrnice 85/397/XXX, xxxxxxx X, xxxxxxxx XX, X.1.x) x 2x)].
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxx jsou xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo jsou xxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx (xxx 7.3).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx papírový xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx má xxxxxxxx, xx umístí xx xxxxxx xxxxxxxxx média xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxx xxxxx disku xxxxxxx, xx jsou x xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky xxx xxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx na xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx v mléce.
4. Xxxxxxxxx, pomůcky xx xxxx a vybavení
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxx A.4.1.
4.1.2 Xxxxx xxxxx, nastavitelná xx 80 ± 1 °X.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
Xxx X.4.2.
4.3 Xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky, o xxxxxxx 9 xx 13 xx, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx 130 xx xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxx x exsikátoru).
5. Xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx, roztok xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx organismus xxx.
Xxxxxxxx složky xxxxxxxxxxxx xxxxx musí xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx voda alespoň xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxx obsahovat inhibiční xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx organismu.
5.1 Xxxxxxxxxx xxxxx
5.1.1 Živný agar (X.5.1.1)
5.1.2 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx inhibičních xxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 g |
|
Trypton |
5 x |
|
Xxxxxxx |
1 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx (X.5.1.3) |
10 xx |
|
Xxxx |
10–15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx vlastností xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxx, xxxx xxxxxx xxxxxx trimethoprimu xxxx xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo tetroxoprimu xxxxxxx hodnotu pH, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx 8,0 + 0,1 xxx 25 °X. Xxxxxxxxxxxx médium 15 minut při 121 ± 1 °X.
5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx
Xxx X.5.2.
Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (8) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek (X.5.3) x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx:
x) 0,004 μx/xx (0,0067 IU/ml)
b) 0,006 μx/xx (0,01 XX/xx)
x) 0,03 μx/xx (0,05 XX/xx)
x) 0,06 μx/xx (0,01 XX/xx).
5.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxx
5.3.1 Xxxxxxxxx dostatečné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (beta-laktamázy) xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 1000 X/xx. Xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx dávky, xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxx 0 °X xx 5 °X.
Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx 0,6 μx (= 1 XX) penicilinu. X xxxxxxxxxxxx s neznámou xxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx tento xxxxxxxxxx platí. X xxxxxxx nutnosti xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.3.2 Namísto xxxxxxx xxxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx napuštěné penicilinázou, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxx odpovídající množství xxxxxxxxxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx organismus
Viz X.5.4.
5.5 Testovací xxxxxxx (xxxxxxxx spór)
Viz X.5.5.
5.6 Xxxxxxxx Petriho misek
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx agarové xxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), xxxx zchladit xx 55 oC.
5.6.2 Xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx čerstvých xxxx (5.5) x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, a xxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx (X.4.2.2), předem xxxxxxx xx 55 °C, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx 0,6 xx 0,8 xx vrstva. Xxx Xxxxxxx misku x xxxxxxxx xxxxxxx 140 xx je xxxxx xxx 15 ml xxxxxxxxx média, xxx xx xxxxxxxxx 0,8 xx xxxxxx.
5.6.4 Umístit Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx povrch, xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx médium xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx média, xxxxxx xxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xx dnem xxxxxx, xxx xx xx xxxxxxxxx kondenzaci xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
5.6.5 Xxxxx připravené Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxx, ale xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx dva týdny, xxxxx se xxxxx xx xxxxxxxx vloží xx zataveného polyethylenového xxxx a xxxxxxxxxx xx xxx 5 °X.
5.6.6 Xxxxxxx dna Xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxx identifikace xxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 X xxxxxx x xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx výsledkem xxxxx "xxxxxx X" (X.7.1 x A.7.2) xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx penicilinu.
6.1.2 Nejdříve xxxxxxxx xxxxxx 10 xxxxx xx 80 ± 1 °X, xxx xx xxxxxxxx xxxx nespecifických xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
6.1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxx 10 xx xxxxxx zahřátého xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx hrdlem. X xxxxx xxxxxx xxx 0,4 xx xxxxxxx penicilinázy (5.3) x xxxxx promíchat.
6.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
6.2.1 Xxxxxxx xxxxxxxx disk (4.3) xx xxxxxx xxxxx (6.1.2) xxxxxx xxxxx a xxxxx xxxxxxx. Odstranit xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx. Naplocho xxxxxxx xxxx xx povrch Xxxxxxx misky (5.6) x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.2.2 Xxxxx napuštěné xxxxxxx vzorky mléka xxxx xxx vzdáleny xxxxx od xxxxxxx xxxxxxx 20 xx x xx xxxxxx xxxxxxx 10 mm.
6.2.3 Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx disky (4.3) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.2) musí xxxxxxxx rozmístit mezi xxxxx napuštěné vzorky xxxxx x xxxxxx xxxxxxx 2 % xxxxx disků se xxxxxx xxxxx; xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
6.2.4 Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx na xxxxxxx xxxxxx a po xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx dnem xxxxxx x xxxxxx je xxxxxxxxx 2,5 xx 5 xxxxx xxx 63 ± 1 °X.
6.2.5 Po xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx při xxxxxxx xxxxxx světla, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx kolem papírových xxxxx. Čiré zóny xx změří.
6.2.6 Xxxxxxxxxx xxxxxx penicilinázy (6.2.3) xxxx kolem xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 2 xx xxxx.
6.2.7 Čiré xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx mléka, xxxxxxx velkost xx xxxxxx xxxx větší xxx xxxxxxxx xxxxxxx x 6.2.6, xxxxxxx xx přítomnost xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek
6.3.1 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx dvojmo xx xxxxxxx zahřátého xxxxx (6.1.2) a xx xxxxxxx ošetřeným xxxxxxxxxxxxx (6.1.3). Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 10 xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx do xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx penicilinázou (5.3.2) x uložit xx na xxxxxxxxx xxxxx.
6.3.2 Xxxxxx 6.2.1 xx provede xxxxxx xxx každý ze xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx v 5.2 x) xx d).
6.3.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx průměr xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxx mléka, xxxxxxxxx xxxxxx penicilinázy x xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (viz 2)
7.1 Xxxxx se xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx kontrolní xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx, ale xxxx zóna xx xxxxxx kolem xxxxx xxxxxxxxxx vzorkem mléka, xxxxxx xxxxx nebo xxxxx xxx xxxx xxxxx disku xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx roztokem xxxxxxxxxx (5.2x)), xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx mléka xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx sodného rovné xxxx xxxxx než 0,004 μx/xx.
7.2 Xxxxx xx xxxxxxxx hodnota xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx disku nepuštěném xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx rovná xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx zóny xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx použité x xxxxx xxxxxxx.
7.3 Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx průměru xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx penicilinázu xxxxx než xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx mléka xxxxxxxxx xxxxx 6.1.2, xxxxxx xxxxx obsahuje xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx, xxxxxx sulfonamidů, a xxxxxxxxx nebo polosyntetický xxxxxxxxx, který xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx penicilinázy xxxxxxx x xxxxx xx. Syntetické peniciliny, xxxx xx cloxacillin xxxxx, nemusejí xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx za xxxxxxxxx podmínek a xxxxx xxx tudíž xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx jiné xxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx
Xxxxx to je xxxxxxxx, inhibiční xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxx identifikovány xxxxxxxx postupy.
8. Xxxxxxxxx xxxxxx penicilinu
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxxxx standardní xxxxxx, xxxx xxxxxxx xx základě xxxxxxxxx xxx získaných xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x mléce (5.2 x) xx x)).
8.2 Xxxxxxxxxx standardní xxxxxx
Xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx lineární xxxxxxxx xxxx log10 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, standardní xxxxxx xxx sestrojit xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxx zón xx xxxxxx. Inhibiční xxxx xx počítají xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx.
8.3 Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx ve xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx průměru xxx vzorků xxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xx standardní xxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx větší, xxxxx xxxxxxx pětkrát větší xxx poloměr xxxxx.
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx rovný xxxx xxxxx xxx 0,004 μx/xx (xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx) xxxx jako xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx.
9.2 Xxxxxxxxxxxxxx (x) a xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X)
Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx a jsou xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxxxx.
XX. DETEKCE PATOGENNÍCH XXXXXXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
X xxxxxxx x požadavky směrnice 85/397/XXX, přílohy X, xxxxxxxx XXX xxxx 2, xxxxx postup xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx být dodržovány, xxx xxxxxxx patogenních xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx se xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx příčinou onemocnění xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx proti xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx normy xxxxxxxxx x příloze X, xxxxxxxx XXX xxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °C x 21 °C, xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, že xxxxx xx xxxxxxx spojitost xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
3. Postup
Postupy x xxxxxxx xxxxxxxxx musí xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, který xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx nezávadnosti xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx pro xxxxxx xxxxxx Společenství. Xxx xxxxxxx patogenních xxxxxxxxxxxxxx xx, pokud xxxxxxxx, xxxxxxx kritéria a xxxxxxx přijaté xx xxxxxxxxxxx úrovni.
4. Xxxxxx x xxxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxxx patogenní xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx výsledek xxxxxxxx xxxxx:
Xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxx "xxxxxxxxxx" xx "xxxxxxxxxxxx" x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx postup.