Xxxxxxxxxx Xxxxxx
xx xxx 14. xxxxx 1991,
kterým xx stanoví xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx syrového xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
(91/180/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX SPOLEČENSTVÍ,
s xxxxxxx na Smlouvu x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx společenství,
s xxxxxxx xx směrnici Xxxx 85/397/XXX xx xxx 5. xxxxx 1985 x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x tepelně xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx Společenství [1] xxxxxxxxx pozměněnou xxxxxxxx 89/662/XXX [2], x xxxxxxx na xx. 10 odst. 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxx, že xxxxx xx. 10 xxxx. 2 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxx používat xxx kontrolu xxxxxxxxxx xxxxx xxx syrové xxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx xxx xxxxxx xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxx zejména xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, obsahu xxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx antibiotik;
vzhledem x xxxx, xx xxx pasterované xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx metody pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií, xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, přítomnosti xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, že xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx a XXX xxxxx je xxxxxxxx stanovit xxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxx mikroorganismů, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx z xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx analýzy a xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx dodržování xxxxxxxx xxxxx; xx xx xxxxxxx xxxxxxxx pokračovat x prošetřování xxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx rutinní xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx; xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xx xx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 85/397/ES xxxx xxxxxxx vhodné xxxxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx k tomu, xx stanovení xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx zahrnuje x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx zajištění xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx rozhodnutí jsou x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
XXXXXXX TOTO ROZHODNUTÍ:
Xxxxxx 1
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 30 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 2
Referenční postupy xxxxxxx a xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx mrznutí,
- stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxx,
- stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxx 30 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxx 21 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx koliformních xxxxxxxx – počítání xxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Článek 3
Referenční xxxxxxx xxxxxxx x testování xxx UHT xxxxx x sterilizované xxxxx xxxx tyto:
- stanovení xxxx xxxxxxx,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 30 °X,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Článek 4
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x příloze X.
Xxxxxx 5
Xxxxxxxxxx postupy xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx 1, 2 a 3 jsou popsány x xxxxxxx XX.
Xxxxxx 6
Xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx 31. prosince 1992, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 7
Xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X Bruselu xxx 14. xxxxx 1991.
Xx Xxxxxx
Xxx Mac Xxxxxx
xxxx Xxxxxx
[1] Úř. xxxx. X 226, 24.8.1985, x. 13.
[2] Xx. xxxx. X 395, 30.12.1989, x. 13.
XXXXXXX I
OBSAH
I. Xxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Xxxxx vzorků xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
X. XXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxx
Xxxxxx xxxxxxxxxx xx týkají xxxxxxx, xxxxxxxxx x pomůcek, xxxxxxxxx výsledků, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a zpráv x xxxxxxxxx. Příslušné xxxxxx xxxxxxxxx států x laboratoře xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxx mléka xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxx
2.1.1 Xxxxx xxxx stanoveno jinak, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxx xxxx být xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx odpovídající xxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxx xxxxx, xxxxx mohou xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx mikroorganismů xx xxxxxxxxx testovacích xxxxxxxx.
2.1.2 "Xxxxxxxxxxxx" xxxx "xxxxxxx" (xxx dalšího xxxxxxxxx) xx xxxxxx "xxxxxxxxxxx ve xxxx" xxxx "xxxxxx xxxxx".
2.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxx není xxxxxxxxx xxxxx, všechny používané xxxxxxxxxx xxxx xxx xxx xxxxxx analytické xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
3.1 Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxxxxxx seznam xxxxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxx referenční xxxxxx se týká xxxxxxxxx a pomůcek xx zvláštnímu xxxxxxx x se zvláštní xxxxxxxxxxx.
3.2 Xxxxxxxxxx xxxx
"Xxxxxxxxxxxx xxxxxx" xx xxxxxx xxxx s xxxxxxxxx xxxxxx xx 0,1 xx.
4. Vyjádření xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, výsledek xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx, které xxxxxxx xxxxxxxxx opakovatelnosti (5.1) xxx příslušnou metodu. Xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx opakovatelnosti xxxxxxx, xxxx xx musí xxxxxxxx, jinak xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Výpočet xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, výsledek xx vypočítá x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
5. Xxxxxxxx spolehlivosti: xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx
5.1 Kritéria xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxxx:
5.1.1 Opakovatelnost (x) xx hodnota, xxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx přístroj, xxxxxx laboratoř, xxxxxx xxxxxx xxxxxx).
5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) xx hodnota, xxx kterou xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx totožným xxxxxxxx x týmž xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx a/nebo xxxxx xxxx).
5.1.3 Xxxxx není xxxxxxxxx jinak, xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x reprodukovatelnosti, uváděné x příslušných xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx 95 % intervaly xxxxxx spolehlivosti podle xxxxxxxx XXX 5725, xxxxx xxxxxx, 1986. Xxxx vypočteny x xxxxxxxx uznaných xxxxxx, xxxxxxxxxxx xx spolupráci, xxxxx xx používají xxx hodnocení postupu. Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx tyto pokusy, xxxxxxxxx ve xxxxxxxxxx, xxxxxx provedeny. X xxx xxxxxxx byly xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx odhadnuty.
5.1.4 Xxxxxxx xxxxx x nezbytné xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x souladu x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
6. Xxxxxx x xxxxxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x získané výsledky. Xxxx xxxx xxxx xxxxxx všechny xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x metodě xxxxx, xxxx volitelné xxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx, které xx xxxxx ovlivnit xxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx všechny informace xxxxxxxxxx úplnou xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
XX. XXXXX XXXXXX XXXXXXXX A XXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXX
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx ošetřeného xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxx vzorků xx xxxxxxx xxx xxxxxx mléko dodané xxxxxxxxxx x pro xxxxxx x tepelně xxxxxxxx xxxxx skladované xx skladovacích x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx uvedené x xxxxxx 2, 4.4, 5 x 6 se použijí xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx ošetřeného xxxxx xxxxxxxx k xxxxx xxxxxxxx.
2. Xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx, nádržích xxxx. provedou xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx byli xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx to xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx nezbytné, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx v metodách xxxxxx, xxx xxxx xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x v xxxxxxx x xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx laboratoř xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx pověřené xxxxxxx vzorků v xxxxxxxxxx vzorků, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx.
3. Vybavení pro xxxxx xxxxxx
3.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx musí xxx xxxxx zhotoveno x xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx být xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx, xxx.). Plunžry x xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxx mít xxxxxxxxxx xxxxxx plochu xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx výrobku xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxx pevnou, xxxxxxxxxx xxxxxxx rukojetí x xxxxxxxx vzorků x jakékoli xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx naběračky xxxx xxx alespoň 50 xx.
Xxxxxxxxxxx x xxxxx musí být xxxxxxxx, xxxxxx xxxx x vhodného xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxx výrobě xxxxxxxx pro odběr xxxxxx (xxxxxx xxxxx x xxxxx) nesmí xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx testů. Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxx xxxx mít čistý, xxxxx, xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx x xxxx mít xxxxxxxxxx xxxxx.
3.2 Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
Vybavení xxx xxxxx vzorků (včetně xxxxx) xxxx splňovat xxxxxxxxxx bodu 3.1 x xxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxx xx xxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx vzorků xxxxxxx xxxxx vybavení, musí xxx xx každém xxxxxx xxxxxx vyčištěno x sterilizováno x xxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx laboratoř xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx výsledků xx xxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx
4.1 Xxxxxx údaje
Bez xxxxxx xx testy, které xxxx být xxxxxxxxx, xxxxx musí xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx ručně, xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxx ještě x xxxxxx.
Xxxxx se x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx více xxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx, xxxx xxxxx xxxx xxx odebrán xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx potřebám testování. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxx, xxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxx xxx xxxx možné xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx testováním, aniž xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx.
4.2 Ruční xxxxx xxxxxx
4.2.1 Xxxxx xxxxxx z xxxxx x konví na xxxxx
X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx ve xxxxx nebo xxxxx xxxxxx x xxxx, xxxxxxx xxxx xx xx, xxx xx xxxxx xxxxx promíchalo x xxx se xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx zásilku, xx xxxxxxx postupem xxxxx bodu 4.2.4.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx na mléko x zemědělském podniku
Míchat xxxxx mechanicky nebo xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx ručně.
4.2.3 Xxxxx xxxxxx x misky xxx
Xx nezbytné, xxx xxxxx xxxx řádně xxxxxxxxxx, xxxx se xxxxxx xx xxxxx xxx. Xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx může být xxxxxxxx další xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxx, x níž xx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx z xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.4 Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xx množství xxxxx, x něhož xx xx provést xxxxx vzorků, xxxxxxxxx xx více xxxxx, x xxxxx xxxxxx xx odebere xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxx množství mléka xxx každý vzor. Xxxxx xxxxxx x xxxxx nádoby xxxxxx xxx odděleně xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx jednotlivé xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxx x xxxxxxxx, které xx xxxxxxx x xxxxxx, ze xxxxx xxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxx) vzorek (xxxxxx) x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
4.2.5 Odběr xxxxxx x velkých xxxxx – xxxxxxxxxx xxxxxx, cisternové kamiony, xxxxxxxxxx xxxxxx
4.2.5.1 Před xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxxx obsahu xxxxxxx xxxxx, skladovacích xxxxxx, cisternových xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx vagónů xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.5.2).
Délka xxxxxxxxxx xxxxxx na xxxx, xx xxxxxx xxxx xxxxx v xxxxx. Xxxx být xxxxxxxxx, xx postup promíchání xxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxxxx případů xx vhodný xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx výsledků xxxxx provedených xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx buď x různých částí xxxxx, xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx z xxxxx. Způsob promíchání xxxxx (syrového mléka xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx) xx xxxxxx, pokud xx xxxxxx obsahu xxxx u xxxx xxxxxx odebraných xx xxxxxx xxxxxxxx menší xxx 0,1 %.
Ve xxxxx nádobě s xxxxxxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxx části xxxx x xxxxx vypouštění xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx. Proto xx xxxxxxxxxxxxx odběr vzorků x xxxxxxxxxxx otvoru. X xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx mléka, xxx xxxx zajištěna xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x cisternových xxxxxx je xxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx otvoru; xxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx,
- x xxxxxxx cisternových xxxxxxx xxxx cisternových xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx a xxxxxxxx xx průlezového xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xx minimální xxxx x xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx žluklé xxxxx.
4.3 Automatický a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx vzorků
Automatické x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx odběr xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxx xxxxxx xxxxx pokynů xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx vybavení xxxx xxx xxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx odběru xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, z xxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxx přenosu (xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx vzorku),
- schopnost xxxxxxxxxx reprezentativní xxxxxx x xxxxx xx xxxxxx promíchání.
Pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx příslušný xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx objem xxxxxx,
- maximální xxxxxx,
- xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx provedeno, nebo xxxxxxxxx preventivní xxxxxxxx, xxxxx je xxxxx xxxxxxxx.
4.4 Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka xxxxxxxx k xxxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxx mléko xxxxxx x přímé xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, zapečetěných xxxxx. Xxxxxx musí být xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zařízení xxx ošetření, x xx, xxxxx xx xx možné, xxxxx xx zpracování (v xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxx pasterace).
Z xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (pasterovaného, xxxxxxxxxx xxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxxxxxx) xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, aby xxxxxxxxx xxxxx vyšetření, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, x to xxxxx xxxxxx poskytnutých testovací xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
5. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx kódem, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx identifikaci xxxxx xxxxxx analytických laboratoří xxxx xxxxxxxxxxx orgánu (xxx xxx 2).
6. Xxxxxxxx x skladování xxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx orgánu xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx pokyny xxxxxxxx xx lhůty x xxxxxxxx přepravy x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx jejich xxxxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx druhu xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx xxxx:
- xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx na xx, xxx vzorky xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x přímému slunečnímu xxxxxx. Xx-xx je xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx ve xxx,
- xxxxxx syrového xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx při teplotách 0 xX xx 4 xX. Doba xxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxx xxx xx nejkratší x x žádném případě xxxxx přesáhnout 36 xxxxx. Příslušný xxxxx xxxx xxxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 0 xX xx 6 xX, xxxx-xx xxxx xxxx xxxxxxx x testováním xxxxx xxx 24 hodin,
- xxxxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxxx xxx mikrobiologické xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 0 xX xx 4 xX. Doba xxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxxx x x xxxxxx xxxxxxx nesmí xxxxxxxxxx 24 hodin,
- xxxx xxxxxx mléka xxx vzorky xxxxxxxx xxxxx x pasterovaného xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx skladovány v xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxx xx nejkratší.
Speciální preventivní xxxxxxxx, xxxxx je xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx testy, xxxx xxxxxxx x popisu xxxxxxx použitelných xxxxxxx.
XXXXXXX I
OBSAH
I. Xxxxxxxxx xxxx mrznutí
II. Stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxx
XXX. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxx 30 °X
X. Xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů při 21 °X
XX. Stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx – počítání xxxxxxx xxx 30 °C
VII. Xxxxxxxxx obsahu somatických xxxxx
XXXX. Xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx
XX. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx mikroorganismů
I. XXXXXXXXX XXXX XXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx popisuje referenční xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx, odstředěného, syrového, xxxxxxxxxxxxx, XXX xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx mléka xxxxxx xxxxxxxxx (termistorového xxxxxxxxx), x němž xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zařízením x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx teploměr.
K xxxxxxxxx xxxx xxx typy xxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx mrznutí, xxxxxx xxxxx typ je x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx tak, xx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxx x xxxx, xx xx mohou xxxxx xxxxx xxxxxx bodu xxxxxxx různých xxxxx xxxxx, ale x xxxxxx bodu mrznutí xxxxx x standardních xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx hledajících plató. Xxxxxxxxx x pevně xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx používat v xxxxxxx xxxxxxxxx testování.
Bod xxxxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx cizí vody x mléce xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx vyšší xxx 0,18 x xxxxxxxx mléčné xx 100 xx (xxx xxx 7.4).
2. Definice
Bod xxxxxxx xxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x vyjádřená xx xxxxxxxx Xxxxxx (°C).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx v xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vyvolá jeho xxxxxxxxxxxx, xxxxx způsobí, xx teplota xxxxxx xxxxxxx xx k xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx mrznutí vzorku.
Přístroj xx kalibruje takovým xxxxxxxx, xxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx vzorky mléka xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxx standardní xxxxxxx. Xx těchto xxxxxxxx xxxxx udává xxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x pomůcky xx skla
Obvyklé xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx teploměru) x příslušným xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, míchačky xx xxxxxx x xxxxxxxx xx vyvolání xxxxxxx, xxxxx x xx xxxxxxxx na xxxxxx.
4.1.1 Xxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxx dva xxxx xxxxxxxx lázně.
4.1.1.1 Xxxxxxx xxx
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx obsahující xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx tak, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx jakýmikoli xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxx vyšší xxx 0,2 °X. Xxxxxxx xxxxxxxx může xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx ± 0,5 °X xx nominální xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx, xxx v lázni xxxx xxxxxxxxx konstantní xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxx zkumavky xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx kapalinou.
4.1.1.2 Xxxxxxxxxx xxx
Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx kolísat xxxxxxx x rozmezí ± 0,5 °C xx nominální xxxxxxx xxxxxx výrobcem.
Vhodnou xxxxxxxx xxxxxxxxx xx 33 % (V/V) xxxxx xxxxxx 1,2-ethandiolu (xxxxxxxxxxxxxx).
4.1.2 Xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xx skládá xx skleněné xxxxx x maximálním xxxxxxx 1,80 ± 0,2 xx a x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 0,31 xx. Časová xxxxxxxxx termistoru musí xxx xxxxx xxx 2 xxxxxxx x xxxxxxx x (xxx xxxxxxxx) xxxx xxx xxxxxx. Pracovní xxxxxx, xxxxx x konstanta xxxxxxxx musí xxx xxxxxx, xxx xxx − 0,512 °X xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x 0,0005 °X. Maximální tolerance xxxxxx xxxx být ± 5 %.
Když xx sonda x xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, konec xxxxxxxx xxxxxxx xx musí xxxxxxxx x xxx xxxxxxxx na xxxxxx x x xxxx, xxxxx xx 44,6 ± 0,1 mm xxx horním xxxxxxx xxxxxxxx (xxx obrázek xx xxxxxx 15). Xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxx sondy xx této polohy.
Poznámka:
β xxxxxxxx termické vlastnosti xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx
− xX / dT × 1 / X = β / X2
xxx:
X xx xxxxxxx ve xxxxxxxx Xxxxxxx
X xx odpor x xxxxxx xxx xxxxxxx X,
− xX / dT × 1 / X xxxxxxxx xxxxxxxxxx
β je xxxxxxxxx, xxxxx závisí xx xxxxxxxxx použitém xxx výrobě xxxxxxxxxx. X xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx hodnota xxxxx xxx 3000.
4.1.3 Xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
4.1.3.1 Princip xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx křivce xxxx xxxxxxx. Xxxxx xx část xxxxxx, xxx teplota zůstane xxxxxxxxxx s přesností xx ± 0,002 xX po xxxx xxxxxxx 20 xxxxxx.
4.1.3.2 Xxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxx xx vyrovnává Wheatstoneovým xxxxxxx nebo podobným xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx tolerance je ± 10 % x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx 2×10−5°X.
Xxxxxxxx (vyrovnávací) xxxxx se xxxxx xxxxxxxx od linearity x xxxxx xxxxxxx x xxxx xxx x 0,3 % xxx maximální xxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx musí xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx 0,001 °X.
4.1.3.3 Xxxxxxxxxxx provoz
Odečítací xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx 0,01 °X x xxxxxxx xx 0 °C xx –1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxx, xxx xxxxxxxx dvou xx xxxx následujících xxxxxx téže teploty xxxxxx xxxxx než 0,001 °C.
Linearita xxxxxx xxxx xxx taková, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxx přístroje nevznikla x xxxxxx xxxx xxxxxxx od – 0,400 °C xx – 0,600 °X xxxxx xxxxx xxx ± 0,001 °C.
4.1.4 Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx drát o xxxxxxx 1 až 1,5 mm, který xxxxxxxxx x xxxxxx,.
Xxxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx xx rozkmit x umístěna vertikálně xxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx xx xxxxxx hrotu xxxxx termistoru. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx 1,5 mm xxx xx xxx touto xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx ± 1,5 mm), xxx byla zajištěna xxxxxxxx xxxxxxx testovacího xxxxxx xxxxx stanovení. Xxxxx míchání xx xxxxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx zkumavky.
4.1.5 Zařízení xx xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxx jakékoli xxxxxxxx, které xx xxxxxxx do činnosti xxxxxxxx vyvolá xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx testovacího xxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx. K tomu xxxxx lze použít xxxxxxxx; xxxxxx postupem xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxx xx xxx sekundy xxx, xxx se xxxxxxxx dotýkala stěny xxxxxxxx na vzorky.
4.1.6 Xxxxxxxx xx xxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx (xxx xxxxxxx 1) xxxx xxxxxxxx x 50,8 ± 0,1 xx xxxxxx; xxxxxx xxxxxx xx 16,0 ± 0,1 xx x xxxxxxx xxxxxx xx 13,5 ± 0,1 xx. Tloušťka skla xxxxxxxx se xxxxx xxxxx x xxxx xxx 0,1 xx.
Xxxxxxxx xxxx mít xxxxxx xxxxxx vzdálenou xx xxxxxxx okraje 29,8 xx (21 mm xxx xxxx zkumavky), xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx.
4.1.7 Zdroj xxxxxxxxx
Xxxxx napětí musí xxx stabilizován buď xxxxxx nebo vně xxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ± 1 % xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxx kolísá x ± 6 %.
4.2 Xxxxxxxxxx xxxx
4.3 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 1000 xx, xxxxx X.
4.4 Xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx, nastavitelná xx 130 ± 1 °X
xxxx
Xxxxxxxxxx xxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 300 ± 25 °X.
4.5 Xxxxxxxxx
5. Činidla
5.1 Xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx skle, xxxxxxxxx x zchlazená xx 20 ± 2 °X, ve xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxx sodný, xxxxxxx x.x., xxxxx mletý, xxxxxx 5 xxxxx xxx xxxxxxx 300 ± 25 °C x xxxxxxxxxx peci xxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx teplotě 130 ± 1 °X x sušárně x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx teplotu v xxxxxxx exsikátoru.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx odpovídající xxxxxxxx (viz xxxxxxx 1) xxxxxxx chloridu xxxxxxx (5.2) do xxxxxxx. Xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxx (5.1), xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx odměrné xxxxx x xxxxxx 1000 xx x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx 20 ± 2 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx při xxx 5 °X v xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x maximálním xxxxxx 250 xx.
Xxx xxxxxxx roztoků chloridu xxxxxxx při 20 °X
|
x NaCl/l |
°C |
|
6,859 |
-0,408 |
|
7,818 |
-0,464 |
|
8,149 |
-0,483 |
|
8,314 |
-0,492 |
|
8,480 |
-0,502 |
|
8,646 |
-0,512 |
|
8,811 |
-0,521 |
|
8,977 |
-0,531 |
|
9,143 |
-0,541 |
|
10,155 |
-0,600 |
Před xxxxxxxx xx standardní xxxxxx xxxxxxx promíchá protřepáním x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxx neprotřepávat xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxx xx xx xxxxxxx přimíchal xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku xx x xxxxx xxxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxxx. Xxxxx nepoužívat xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx z lahví, xxxxx xxxx ze xxx čtvrtin xxxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx dvou xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx fungicid (xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 10 g/l).
6. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxx, xxx se xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx o xxxx než 1 °X xx xxxxxxx, xxx níž se xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx teplotám xxxxxx než 26–27 °X.
Xxxxxxx se, xx xxxxxxxx xxxxxxx podle xxxxxx xxxxxxx x xx xxx xxxxxx xxxxxxx 12 xxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxx xxxxxxx xxxx), xxxxxxx xxx mrznutí xx xxxxx xxx xxxx těsně xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx by xxxxxxx xxxxx být xxxxx než – 0,100 °C.
(U xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx dostupných xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx, xx se ustálí xx xxxx xxxxxxx xxxx mrznutí x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx výběr xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku, který xx xxxxx bod xxxxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxx musí xxxx xxxxxxx uvést).
Pomocí xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 ml jednoho xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx a xxxxx xxxxxxxx xx vzorky, xxxx měřit xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx xx vzorky xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx vzorky xxxxx (stejný druh xxxx, xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků xxxx xxxxxx jako xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx výrobce xxxxxxxx xxxxxxxx kalibrace, dokud xxxxxx x kryoskopu xxxxxx roven xxxx xxxxxxx standardního xxxxxxx. Xxxxxxxx tento xxxxxx x xxxxxx standardním xxxxxxxx a střídavě xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, dokud xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx hodnoty xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx, xxxx xx byla xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
7. Xxxxxxxx testovacího xxxxxx
7.1 Xxxxx xx je xxxxxxxx xxxxxxxxx vzorky xxx teplotě mezi 0 °X a 5 °C.
7.2 Pokud xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxx ve xxxxxx xx čisté a xxxxx xxxxxx a xxxxxx opatrně promíchat. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, nesmí reagovat x xxxxxx x xxxx xxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.3 Xxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (mezi 0 x 5 °X) xxxx je možné xx ohřát na xxxxxxxxxxx teplotu bezprostředně xxxx zahájením xxxxxxxxx. Xx xxxx xxxxxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x vzorky xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx teplotu.
7.4 Stanovit xxxxxxxx xxxxxxxx mléka, xxxxx xxxxx současně xx stanovením xxxx xxxxxxx. Xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 0,18 x xxxxxxxx xxxxxx xx 100 xx xxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx.
7.5 UHT xxxxx x sterilizované xxxxx xxxx stát nejméně 20 minut xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
8. Xxxxxx
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx, zda hladina x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, případně xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx vzorky. Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx, zda xx xxxxxxxx kapalina xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxx byl xxxxxxxx xxxxxx alespoň 12 hodin, zkontrolovat xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx míchačky x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx.
8.2 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxx xxxxx měřit bod xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxx s xxxxx xxxxxxx – 0,512 °X), xxxxx xx xxxxxxx získané xxx xxxx xx sobě xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x více xxx 0,001 °C. Xxxxx xx průměr xxxxxx xxxxxx xxxx xx bodu xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxx 0,002 °X, kryoskop se xxxxx kalibrujte, xxx xx xxxxxxx x xxxx 6.
Xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx kontrola xxxxxxxxx xx xxxxxxx nejméně xxxxxx za xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx výrobce.
8.3 Stanovení xxxx xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxx opatrným xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx otáčením. Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx prudce, xxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx vzduch.
Pomocí xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx xxxxx xx xxxxx x xxxxx zkumavky xx xxxxxx. Xxxxxxx xx, xx xxxx xxxxx x míchačka xxxxx x xxxxx, xxxxx je xx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx směrem xxxxxxx xxxxxx jemnou, xxxxxx x chlupy nepouštějící xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xx kalibrovaného xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx x mrznutí xx xxxxxx při xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx na 0,1 °C.
(U některých xxxxxxxxxxxxx přístrojů je xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx z digitálního xxxxxxxxx; x xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xx xx xxxxxxx, xxx mrznutí začalo, xxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxx galvanometru xxxxx x příslušnou xxxxxxx.)
Xxxxx z jakéhokoli xxxxxx xxxxxxx začne xxxxx nebo xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx rozmezí, xxxxxxxxx se ukončí x xxxxxxxx se x jiným xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx před xxxxxxxxx xxxxxxxxx teploty, alikvótní xxxxx xxxxxx se xxxxxxx na 45 °X x 5 xxxxx se xxxxxxx xx xxxx teplotě, xxx xx rozpustil xxxxxxxxxxx tuk.
Poté xxxxxxxx xxxxxx na testovací xxxxxxx x ihned xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx začátku xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xx hodnotu, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx konstantní, x poté xxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx této xxxx x xxxx xxxxxxx xx xxxxx zaznamenat.
Poznámka:
Doba, xx kterou xxxxxxx xxxxxxx konstantní, x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx mrznutí x xxxxxxxxx xxxxxxxxx teploty, xx xxxx vzorek xx xxxxxx x xxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx než xxx xxxxx. Xx nezbytné xxxxxxxxxx maximální xxxxxxx.
Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxx sondu x xxxxxxxx směrem xxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx rozdíl xxxx naměřenými body xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (0,004 °X), provést druhé xxxxxxxxx u xxxxxx xxxxxx. Xxxxx jsou xxxxxxx xxxx stanovení xxxxxx xx 0,004 °X, xxxxxx xx x xxxxxxx se xxx xxxxxxx konečného xxxxxxxx.
8.4 Xxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx zkumavku xx xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx teplotu, xxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
(X xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx; x xxxxxxxx případech xx xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx je sonda xxxx xxxxxxxx měření xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.)
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Výpočet
Pokud xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx obou dvou xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx tři xxxxxxxxx místa.
Pokud xxxxxx xxxx dvou xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx hodnotu, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx:
Xxx mrznutí (°X)
|
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx stanovení |
Průměr |
|
|
-0,544 |
-0,545 |
-0,544 |
|
-0,545 |
-0,546 |
-0,546 |
9.2 Xxxxxxxxxxxx
9.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (r): 0,004 °X
9.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X): 0,006 °C
Obrázek 1
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1 (xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx)
XX. XXXXXXXXX AKTIVITY XXXXXXXXX
1. Předmět a xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxx v pasterovaném xxxxx.
2. Xxxxxxxx
2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx výrobku. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x μg xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx než 4 xx fenolu na 1 xx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx fenol reaguje x dibromchinonchlorimidem x xxxxxxx dibromindofenolu (namodralé xxxxx), xxxxx se xxxxxxxxxxxxxx xxxx při 610 xx. Xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxx fosfatázy byl xxxxxx.
4. Činidla
4.1 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.1 Rozpustit xx xxxx 50,0 x xxxxxxxxx barnatého (xxxxxxxxxxx) [Xx(XX)2.8X2X] x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.1.2 Rozpustit ve xxxx 22,0 g xxxxxxxx xxxxxx (H3BO3) x xxxxxxx na 1000 xx.
4.1.3 Zahřát 500 xx každého xxxxxxx na 50 °X, xxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxx xx 20 °X, v xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xX na 10,6 ± 0,1 xxxxxxxx xxxxxxx 4.1.1 xxxx 4.1.2. Xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx nádobě.
4.1.4 Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx objemem xxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxx xxx vyvolání xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxx 6,0 x methaboritanu xxxxxxx (XxXX2) xxxx 12,6 x XxXX2.4X2X x 20,0 g chloridu xxxxxxx (XxXx) a xxxxxxx na 1000 xx.
4.3 Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx vzniklého xxxxxxxxx
Xxxxxx 10 ml xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2) xxxxx xx 100 xx.
4.4 Xxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx 0,1 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, prostý xxxxxx, ve 100 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.3) xxxx 0,5 x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx 4,5 ml xxxxxxxxx roztoku xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2), xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx XXX (4.6) x nechat stát 30 xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx. Vzniklé xxxxxxxxx extrahovat 2,5 xx x-xxxxxxxx x xxxxxx xxxx, dokud xx xxxxxxx-1 neoddělí. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx-1. V xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx x chladničce xxxxxxx xxx; xxxx xxxxxxxx xxxxxxx zabarvení x xxxxxxx novou xxxxxxxx. Tlumivý xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, a xx xxxxxxxx 1 xx xxxxxx roztoku xx 100 ml xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.3).
4.5 Xxxxxxxxx xxxxx-xxx
Xxxxxxxxx ve xxxx 3,0 g xxxxxx xxxxxxxxxxx (XxXX4 · 7X2X) x 0,6 x xxxxxx xxxxxxxxx (XxXX4 · 5X2X) x xxxxxxx xx 100 xx.
4.6 Xxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (roztok XXX)
Xxxxxxxxx x 10 ml 96 % (V/V) xxxxxxxx 40 ± 1 xx 2,6-dibromchinonchlorimidu (XXX) (X6X2Xx2XxXX6).
Xxxxxxxxx v xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx barvu xxxx je starší xxx xxxxx měsíc.
4.7 Xxxxxx xxxxxx měďnatého (XX)
Xxxxxxxxx xx xxxx 0,05 g xxxxxx xxxxxxxxx (XxXX4.5X2X) x xxxxxxx xx 100 xx.
4.8 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx
4.8.1 Navážit 200 ± 2 xx xxxxxxx xxxxxxxxx fenolu x xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 100 ml, xxxxxx xxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx xx 100 xx. Xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
4.8.2 Zředit xxxxx 10 ml xxxxxxxxx xxxxxxx, doplnit xx 100 xx x xxxxxxxxx. 1 xx xxxxxxxx 200 μx fenolu.
5. Přístroje x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxxxx pomůcky xx xxxx, xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx oplachování xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx vodou xxxx xxxxxxx xxxxx.
x) Xxxxxxx xxxx plastových xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx fenolů x xxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxx.
Xxxxxxx laboratorní xxxxxxxx, xxxxxxx:
5.1 Analytické xxxx
5.2 Xxxxx lázeň nastavitelná xx 37 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xx vlnové délce 610 xx.
5.4 Xxxxxxxx, 16 xxxx 18 × 150 xx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 5 xx x 10 ml.
5.5 Pipety
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxx vhodné xxxxxxxxx, xxxx. o xxxxxxx 5 xx.
5.7 Xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx nejméně 9 xx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
5.8 Odměrné xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
6. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
x) Xxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx a xx xxxxx xx xxx xxxxxxx. Je proto xxxxx věnovat zvláštní xxxxxxxxx pipetování.
6.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku
6.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx po xxxxxx xxxxxx. V xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x chladničce, xxxxx xx déle xxx dva xxx.
6.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxx xx každé xx dvou xxxxxxxx (5.4), xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx pokus.
6.3 Xxxxxxxxx
6.3.1 Slepý vzorek xxxxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxxx vodě; xxxxxxxx x kádinku x xxxxxx vodou xxxxxx hliníkovou xxxxx, xxx xx prohřála xxxx zkumavka. Xxxxxx xxxxxxxx xx pokojovou xxxxxxx.
6.3.2 Xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx slepý x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx způsobem. Xxxxxx 10 xx roztoku xxxxxxxxx (4.4) a xxxxxxxxx.
6.3.3 Xxxxxx ihned xxxxxxxxx 60 minut xx xxxxx lázni (5.2) a xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
6.3.4 Xxxxxx xxxx x xxxx 6.3.1 xxxxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxxx xxxx. Rychle xxxxxxxx xx pokojovou teplotu.
6.3.5 Xx každé xxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxxxx zinek-měď (4.5) x xxxxx xxxxxxxxx.
6.3.6 Xxxxxxxxxxxx xxxx suchý xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxx mililitry x x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx filtrát xxxxxxxx čirý; shromáždit 5 xx xx xxxxxxxx.
6.3.7 Xxxxxx 5 xx tlumivého xxxxxxx xxx xxxxxxxx zabarvení (4.2).
6.3.8 Přidat 0,1 xx roztoku XXX (4,6), xxxxxxxxx a 30 xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx teplotě.
6.3.9 X xxxxxxxxx x kontrolním xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.3.10 Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxx 6.3.9 převyšuje xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxxxx 20 μx xxxxxx xx zkumavku podle xxxx 6.4.4, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx objemu xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx objemem xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx vzorku, xxxxx xx opatrně xxxxx do xxxx, xxx xx inaktivovala xxxxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
6.4.1 Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxx (4.8.2) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx standardních xxxxxxx obsahujících 0 (xxxxxxxxx nebo slepý xxxxx), 2, 5, 10 x 20 μx xxxxxx xx xxxxxxxx. Xx každé x xxxx zkumavek xxxxxx pomocí pipety 1 xx xxxx x 1 xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxx.
6.4.2 Xx každé xxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxx síranu xxxxxxxxx (4.7), 5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx vzniklého xxxxxxxxx (4.3), 3 xx xxxx x 0,1 ml roztoku XXX (4.6); xxxxxxxxx.
6.4.3 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 30 xxxxx při xxxxxxxx xxxxxxx.
6.4.4 X xxxxxxxxx s kontrolním xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx při xxxxxx délce 610 xx.
6.4.5 Xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (6.4.4) xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (6.4.1) vypočítat regresní xxxxxx xxxxxxx nejmenších xxxxxxx.
7. Vyjádření výsledků
7.1 Xxxxxxx x xxxxxx
7.1.1 Xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (6.3.9) xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (6.4.5).
7.1.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx fosfatázy xxxxxxxxxx v μx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxxx xxxxxxxxx = 2,4 × X × X
xxx
X xx xxxxxxxx xxxxxx x μx xxxxxxx xxxxx xxxx 7.1.1;
X xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 6.3.10 (x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx X = 1).
2,4 je xxxxxx xxxxxxx (5/12 z 1 xx xxxxxxxxxxx xxxxxx) – xxx 6.2 xx spojitosti x 6.3.2, 6.3.5 x 6.3.6.
7.2 Xxxxxxxxxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (r) : 2 μx xxxxxx/xx.
7.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (R) : 3 (předběžně) μx xxxxxx/xx.
7.2.3 Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx 6.3.10, xxxxxx xxxxxxx x 7.2.1 x 7.2.2 se týkají xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.
XXX. XXXXXXXXX XXXXXXXX PEROXIDÁZY
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx, který xxxxxx xx kontrole xxxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx reakce xx xxxxxxxxxx:
Xxxxx xx mléko xxxxx xxxxxxxxxxx, do 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx objeví xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx:
Xx 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx neobjeví žádné xxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx kyslík xxxxxxx xxxxxxxx parafenylendiamin xx xxxxxxxxx indofenol (Xxxxxxxx xxxx). Intenzita xxxxxxxxx xx xxxxx úměrná xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx x xxxxx xxxx (50 °C) 2 x 1,4 xxxxxxxxxxxxxx (X6X8X2) x xxxxxxx xx 100 xx. Xxxxxx skladovat x xxxxxx a temnu, x xxxxx hnědé xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Během jednoho xx xxxx xxx xx připravení xxxxxx 1,4 fenylendiaminu vytvoří xxxxxxxxx, kterou xx xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2 Xxxxxx xxxxxxxx vodíku
Vodou xxxxxx 9 xx 30 % xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx 100 ml. Pro xxxxxxxxxxx přidat 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx na xxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxx xxxxx, xxxxx xx skladován x xxxxxx x temnu, x xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, která xxxxxxx jakémukoli xxxxx x organickými xxxxxxx.
5. Xxxxxx
5.1 Xxx 5 xx xxxxxx mléka xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx víčkem.
5.2 Xxxxxx 5 ml xxxxxxx 1,4 fenylendiaminu (4.1).
5.3 Xxxxxx 2 xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.2).
5.4 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx modré xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx 30 sekund po xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxx specifická.
IV. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXX 30 °C
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx technikou xxxxxxxx kolonií xxx 30 °X. Xxxxxx xx použije xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, XXX xxxxx xxxx sterilizované xxxxx, xxxxx xxxx 15 xxx xxxxxxxxxxxxx při 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx rozumějí xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx stanovený xxxxx vzorku xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx x nechat xxxxxxxxx 72 hodin xxx 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxxx x vypočítat xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 ml xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx 0,1 xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx UHT xxxxx.
4. Přístroje a xxxxxxx xx skla
Obvyklé xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, zejména:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Horkovzdušná xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Inkubátor, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °X.
4.1.4 xX-xxxx xx zařízením xxx kompenzaci xxxxxxx, xxxxxx na ± 0,1 jednotky xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, nastavitelná xx 45 ± 1 °C.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, zvětšení 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, zvětšení 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Míchačka schopná xxxxxxx 1 ml xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x 9 ml ředicího xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx obsahu xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx ze skla
4.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx 10 xx primárního xxxxxx xxxx dalších xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x objemu 150 xx 250 xx xxxx zkumavky x xxxxxx 20 ml xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, o xxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx, x xxxxxxxxx otvorem x průměru 1,75 xx 3 mm.
4.2.4 Xxxxxxx misky z xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxx sterilního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx misek xx xxxxxxx xxxxxx xxx 90 až 100 xx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx by xxxx xxx nejméně 10 xx. Xxx xxxxx xxx žádné xxxxxxxxxx, které xx xxxxxxx počítání xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx pomůcek xx xxxx:
Xxxxxxx ze xxxx xx xxxxxxxxxxx jedním x těchto xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx 170–175 °X;
x) v xxxxxxxxx (4.1.2), nejméně 20 minut xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxx xx xx, xxx bylo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx proniknutí xxxx: xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x nádobách, xxxx nádoby xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xx měly xxx volné.
Pomůcky ze xxxx xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xx se xxxx vysušit xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Kultivační xxxxxx – xxxx xx sušeným mlékem
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx (+) nebo xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx odstředěné xxxxx |
1,0 g |
|
Agar |
10–15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 ml |
Sušené xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx inhibiční xxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X xxxxx pořadí xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, trypton, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx mléko. Xxxxx xxxxxxxx usnadňuje xxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx x xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx do xxxx, xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx x xxxx asi 30 xxxxx.
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX pomocí xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xX, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x skladování xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 xx xx xxxxx nebo po 12 xx 15 xx xx zkumavek (4.2.2). Xxxxx x xxxxxxxx uzavřít.
15 minut xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) při 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX kultivačního xxxxx.
Xxxxx xx kultivační xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, skladuje xx x xxxxx xxx teplotě mezi 1 a 5 °X, xxxxx ne xxxx xxx 1 xxxxx po jeho xxxxxxxx.
5.3 Komerční dehydrované xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) se xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kultivačního xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx sušené xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xX xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X metodou xxxxx xxxx 5.1, xxxx xxxxxxxx, sterilizovat x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx médium xxxxx xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Roztok xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 ml |
Příprava:
Rozpustit složky xx vodě, xxxxx xx je nutné, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX pH-metrem (4.1.4); xxxxx xx xx nezbytné xxxxxxx xX roztokem (xxxxxxx 0,1 xxx/x) hydroxidu xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, aby po xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
6.2 Rozdělení, xxxxxxxxxxx x skladování xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx xx sterilizaci xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx ředidla. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 minut sterilizovat x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxxx.
Xxxxx xx ředidlo xxxxxxxxx xxxxx, skladuje xx v xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx ne xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
6.3 Komerční xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) xx xxxx připravovat z xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX xxxxxxx xxxxx xxxx 6.1, xxxx xxxxxxxx, sterilizovat a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xxxxxxxxx mikrobiologického xxxxxxxxx xxxxxx rychle xxxxxxxxx xxxxxxxx množství kultivačního xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx mléka
Vzorek xxxxx xxxxx promíchat, xxx byly xxxxxxxxxxxxxx xx nejrovnoměrněji xxxxxxxxx, x xx 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx nádoby xx xxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx rozptýlit. Xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx testovacího xxxxxx xx neměla xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx ředění (10-1) (xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 ml xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xx 9 ml xxxxxxx (6.1), přičemž xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx být přibližně xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 sekund xxxxxxx promíchávat toto xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx se xxx xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (syrové x xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx primárního ředění (7.3) xx 9 xx ředidla (6.1) xxxxx xxxxxx x xxxx 7.3.
Získá se xxx xxxxxx 10−2.
X xxxxx získat xxxxx xxxxxxxxx ředění xx xxxxx xxxxxx opakuje xxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx mikroorganismů (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Petriho misek
7.5.1 Xxxxxx mléko: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 ml vzorku x/xxxx xxxxxxxx desetinného xxxxxx. Xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx vhodnou xxxxx.
7.5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx: Sterilní xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx desetinného xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxx každé xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx misku.
7.5.3 XXX xxxxx a xxxxxxxxxxxxx mléko (xxxxxxxxxxx xx 15 denní xxxxxxxx xxx 30 °X – xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx A xxxxxxxx VII xxx 5):
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx misky (4.2.4) 1 xx xxxxxx xxxxx (7.2). Xxxxxxxxx xxx xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx kultivačního média
Do xxxxx naočkované xxxxx xxxxx xxx 15 xx 18 ml xxxxxxxxxxxx média (7.1).
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx Petriho xxxxx, xxx po xxxxxxxx došlo x xxxxxxxxxxxx rozložení xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx přípravy xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx, podle xxxxx xxxxx, testovacího vzorku xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx vodorovném, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, dokud xxxxxx xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx misky xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Misky xxxxxxxxx xxxxxxxx dnem xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx více než xxxx misek. Sloupky xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, ani xxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx a xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 72 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx kolonie x Petriho xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx více xxx 300 xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx světle. Xxx usnadnění xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx počítadlo (4.1.8). Xx xxxxx dbát xx xx, xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx skla x xxxxxx zvětšením (4.1.7), x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx tvořící xxxxxx xx považují xx xxxxx kolonii. Pokud xxxxxxx xxxxxxx povlak xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx misky x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx misku. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx čtvrtinu xxxxxx xxxxx, misku vyřadit.
8. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Syrové x xxxxxxxxxxx xxxxx
8.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.1.2 Vypočítat xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na 1 xx syrového xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx tohoto xxxxxx:
∑X / (x1 + 0,1x2) d
kde:
∑C ΣX xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx podle xxxx 8.1.1.
(x1 + 0,1 x2)x je objem xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx:
x1 xx počet misek xxx prvním xxxxxxx
x2 xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxx ředění
d xx faktor zředění, xx xxxxxxx kterého xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxx. Když xx xxxxxxxxxxxxxx číslice pět, xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx číslice xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxx):
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 kolonií
Ředění 10−3: 33 x 28 kolonií
Počet/ml: = 278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2
= 6290,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.1.3 Xxxxx jsou xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 10, xxxxx, xx xxxxx mikroorganismů na xxxxxxxx je "xxxxx xxx 10 x x", přičemž "d" xx xxxxxxxxxx hodnota xxxxxxxxxx xxxxxxx zředění.
8.1.4 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 300 a xxxxxxxx xx xxxxx, xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxx převrácenou hodnotou xxxxxxx xxxxxxx. Výsledek xxxxxxxx xxxx "Odhadovaný xxxxx mikroorganismů xx xx".
8.2 XXX xxxxx x sterilizované xxxxx
Xxxxx xxxxx než 10 xxxxxxx xx 0,1 xx se xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/EHS.
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
X. STANOVENÍ XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXX 21 °C
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 21 °X v xxxxxxxxxxxx mléce, xxxxx xxxx xxx dní xxxxxxxxxxxxx xxx 6 xX s xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx psychotropními xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx se xxx množit se x xxxxx při 6 °C.
2. Definice
"Mikroorganismy" xx xxxxxxxx organismy, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx po xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx dní xxx 6 °X. Xxxxxxx stanovený xxxxx xxxxxx mléka x xxxxxxxxxxx xxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxx 25 xxxxx při 21 °X. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
4. Xxxxxxxxx x pomůcky xx xxxx
Xxxxxxx laboratorní xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Přístroje
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx sušárna, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, schopný udržovat xxxxxxx:
x) 6 ± 0,2 °C
b) 21 ± 1 °X xx všech xxxxxx xxxxxx.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx xxx kompenzaci xxxxxxx, přesný xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Míchačka xxxxxxx xxxxxxxxx 1 xx vzorku mléka xxxx xxxxxxxxxxx ředění x 9 xx xxxxxxxx roztoku x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Pomůcky ze xxxx
4.2.1 Zkumavky x xxxxxxxx uzávěry a xxxxxxxxxxx objemem, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x objemu 150 až 250 xx nebo zkumavky x xxxxxx 20 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx vatou), xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx materiálu, s xxxxxxxxxxxx hrotem, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx, s xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 až 3 xx.
4.2.4 Petriho xxxxx x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx materiálu, xxx xxxxx má xxxxxxx průměr xxx 90 xx 100 x. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx měla xxx nejméně 10 xx. Xxx xxxxx xxx žádné nerovnosti, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Sterilizace xxxxxxx xx xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx postupů:
a) x xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1), xxxxxxx xxxxx hodinu xxx xxxxxxx 170–175 °X;
x) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx teplotě 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx autoklávu xx xxxxx xxxx xx to, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx páry: xxxxx xx materiál sterilizuje x xxxxxxxx, xxxx xxxxxx by neměly xxx xxxxxxx uzavřeny, xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx ze xxxx xxxxxxxxxxxxx x autoklávech xx se xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx sterilizovány x horkovzdušné xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx médium – agar xx xxxxxxx mlékem
5.1 Složení:
|
Kvasnicový xxxxxxx |
2,5 g |
|
Trypton |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx(+) xxxx dextróza |
1,0 g |
|
Sušené xxxxxxxxxx mléko |
1,0 x |
|
Xxxx |
10-15 x podle želírovacích xxxxxxxxxx agaru |
|
Voda |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky. Xxxx xx xxxxx srovnávacími xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X tomto xxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xx vodě xxxxxxxxxx extrakt, trypton, xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Poté xxxxxx xxxx x uvést xx varu za xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx agar xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx zahřívat x xxxx xxx 30 xxxxx.
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx je xxxxxxxx, xxxxxxx xX, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx chlorovodíkové, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.2 Xxxxxxxxx, sterilizace a xxxxxxxxxx kultivačního média
Rozdělit xxxxxx (5.1) v xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 xx xx xxxxx xxxx xx 12 xx 15 ml xx xxxxxxxx (4.2.2). Baňky x xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx nepoužije ihned, xxxxxxxx xx x xxxxx při teplotě xxxx 1 x 5 °C, avšak xx xxxx než 1 měsíc po xxxx přípravě.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kultivační médium
Kultivační xxxxxx (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Dodržet xxxxxx xxxxxxx, xxx přidat xxxxxx odstředěné mléko xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xX xx 6,9 ± 0,1 při 25 °X xxxxxxxx xxxxx bodu 5.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx podle bodu. 5.2.
6. Ředidla
6.1 Xxxxxx xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 g |
|
Chlorid xxxxx (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 ml |
Příprava:
Rozpustit xxxxxx ve xxxx, xxxxx xx xx xxxxx, zahřívat.
Zkontrolovat xX xX-xxxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxx pH roztokem (xxxxxxx 0,1 mol/l) xxxxxxxxx sodného xxxx xxxxxxxx chlorovodíkové, xxx xx xxxxxxxxx byla xxxx hodnota 7,0 ± 0,1 při 25 °C.
6.2 Rozdělení, xxxxxxxxxxx a skladování xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx xxxxxxx. Xxxxxxxx uzavřít.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx (4.1.2) při 121 ± 1 °C. Xxxxxxxxxxxx pH ředidla.
Pokud xx xxxxxxx nepoužije xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx při xxxxxxx mezi 1 x 5 °X, xxxxx xx déle xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx dehydrovaná xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) xx může xxxxxxxxxxx z xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx tablet xxxx xxxxxx. Xxxxxxx pokyny xxxxxxx. Xxxxxxx pH xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.1, poté xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx bodu 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx rozpustit xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx [4.1.3 x)] xxxxxxxx balení xxxxxxxxxxxxx xxxxx nebo, xxxxx xx xxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx vzorek x xxxxxx nejméně 100 xx xx xxxx 120 ± 2 xxxxx xxx 6 ± 0,5 °X.
7.2.2 Xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx co xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x to 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx se vzorkem. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx nebo xxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx primárního ředění (10−1)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx pasterovaného mléka xx 9 xx xxxxxxx (6.1), přičemž xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Teplota xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx teplota xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx toto xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx dalších desetinných xxxxxx
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 ml xxxxxxxxxx xxxxxx (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx xxxxxx x bodě 7.3.
Xxxxx xx xxx xxxxxx 10−2.
X xxxxx xxxxxx další desetinná xxxxxx se tento xxxxxx opakuje xxx xxxxxx, xxxxx nelze xxxxxxxx přiměřené xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) přenést xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxx vyšetřena xxxxxxx dvě ředění. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) připravit xxxxx xxxxxxx misku.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx nalít xxx 15 až 18 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx Petriho xxxxx, xxx po xxxxxxxx xxxxx k rovnoměrnému xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx mezi xxxxxx přípravy xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx překročit 15 minut.
Nechat xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx médium neztuhne.
7.7 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx do inkubátoru (4.1.3). Xxxxx inkubovat xxxxxxxx dnem xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxx než xxxx xxxxx. Sloupky xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx a vrchní xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 25 xxxxx při 21 ± 1 °C.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx x Petriho miskách xxxxxxxxxxxxxx xxxx než 300 kolonií.
Misky vyšetřit xxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx usnadnění xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) a/nebo xxxxxxxxxx počítadlo (4.1.8). Xx nutné xxxx xx to, xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx x drobnými xxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxxxxxxxxx skla x xxxxxx zvětšením (4.1.7), x cílem xxxxxxx xxxxxxx od xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx za xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx než xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx misky a xxxxxxxxx odpovídající xxxxx xxx xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pokrývají více xxx xxxxxxxx plochy xxxxx, misku xxxxxxx.
8. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 kolonií (xxx 8.1.3 a 8.1.4).
8.2 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxx xxxxxx vzorce:
∑C / (x1 + 0,1x2) x
xxx:
ΣX xx celkový xxxxx xxxxxxx podle xxxx 8.1,
(x1 + 0,1 x2)x xx xxxxx xxxxxxxxxxxx vzorku, xxx:
x1 xx počet xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx
x2 xx xxxxx xxxxx při xxxxxx xxxxxx
x je faktor xxxxxxx, na xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx počty.
Počet se xxxxxxxxxx xx dvě xxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx zaokrouhlovaná xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx byla xxxx.
Xxxxxxx:
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 a 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; =278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2=
=629 / 0,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.3 Xxxxx xxxx xxxxxxx počty xxxxx než 10, xxxxx, xx počet xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx "xxxxx xxx 10 × d", xxxxxxx "x" xx xxxxxxxxxx hodnota nejnižšího xxxxxxx xxxxxxx.
8.4 Xxxxx xxxx všechny xxxxx xxxxx xxx 300 x počítání xx xxxxx, provést odhad x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx hodnotou xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx vyjádřit xxxx "Odhadovaný počet xxxxxxxxxxxxxx xx ml".
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx mezinárodně xxxxxxxx xxxxxxxxx testů xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX – POČÍTÁNÍ XXXXXXX PŘI 30 °X
1. Předmět a xxxxxx použití
Tato kapitola xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup xxx xxxxxxxxx koliformních xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxx technikou xxxxxxxx xxxxxxx při 30 °X.
2. Definice
"Koliformními bakteriemi" xx xxxxxxxx bakterie, xxxxx při 30 °X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xx xxxxxxxxx podmínek xxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx a 24 xxxxx xxxxxx inkubovat xxx 30 °X. Xxxxxxxx charakteristické kolonie x, xxxxx xx xx xxxxx, potvrdit xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Poté xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx na 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
4. Xxxxxxxxx x pomůcky xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, zejména:
4.1 Přístroje
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx udržovat xxxxxxx 30 ± 1 °X.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx teploty, přesný xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx na 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxx jehla xx xxxxxxx xxxxxxx-xxxxxxx xxxx xxxx-xxxxx.
4.2 Pomůcky xx xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx x vhodnými uzávěry x xxxxxxx 20 xx, xxx mohly xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (5.2) x Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2.2 Baňky o xxxxxx 150 xx 250 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média (5.1).
4.2.3 Xxxxxx (utěsněné xxxxx), xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx materiálu, x nepoškozeným xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 – 10 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx misky x xxxxxx, bezbarvého xxxx nebo ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx materiálu, xxx misek má xxxxxxx průměr xxx 90 xx 100 x. Xxxxxxx hloubka xxxxx by měla xxx xxxxxxx 10 xx. Dno xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1), xxxxxxx xxxxx hodinu xxx xxxxxxx 170 – 175 °C;
b) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 minut xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxx xxxxxxxxx dostatečné xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx xx xxxxxxxx sterilizuje x xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xx neměly být xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xx xxxx vysušit xxxxxxxxxx páry.
Pipety xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx médium
5.1 Xxxx x krystalovou violetí, xxxxxxxxx červení, xxxxx x xxxxxxxx (XXXX xxxx). Xxxxxx selektivní xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
7 x |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
3 x |
|
Xxxxxxx (X12X22X11.X2X) |
10 g |
|
Chlorid xxxxx (NaCl) |
5 x |
|
Xxxxxxx xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxxxx červeň |
0,03 x |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxx |
0,002 g |
|
Agar |
10 xx 15 g xxxxx želírovacích xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 ml |
Příprava:
Suspendovat x xxxxxxxxx složky xx xxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxx promíchat.
Zkontrolovat xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); pokud xx xx nutné, xxxxxxx xX xxxxxxxx (nejméně 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, aby po xxxx byla xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 při 25 °X.
Xxxxx xxxxxx xx xxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx 100 až 150 xx xx xxxxxxxxxx xxxxx (4.2.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °C.
V xxxx xxxxxxx zkontrolovat sterilitu xxxxxxxxxxxx xxxxx (6.4).
Použít xxxxxxxxxx médium do xxx xxxxx po xxxx xxxxxxxx.
5.2 Tekutý xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
10 x |
|
Xxxxxxx (C12H22O11.H2O) |
10 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx |
20 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxx |
0,0133 g |
|
Voda |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxx x xxxxx xx varu.
Zkontrolovat xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx chlorovodíkové, xxx po sterilizaci xxxx jeho xxxxxxx 7,2 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx xxxxxx xx 10 xx xx xxxxxxxx (4.2.1) xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxxx. Zkumavky xxxxxxx.
15 xxxxx sterilizovat x xxxxxxxxx (4.1.2) při 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx média.
Pokud se xxxxxxxxxx médium xxxxxxxxx xxxxx, skladuje xx x xxxxx xxx xxxxxxx mezi 1 x 5 °C, xxxxx xx xxxx xxx 1 měsíc xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx dehydrované xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx x komerčního dehydrovaného xxxxxxxxxxxx média. Xxxxxxx xxxxxx výrobce. Xxxxxxx xX, rozdělit, xxxxxxxxxxxx x skladovat kultivační xxxxxx xxxxx bodů 5.1 x 5.2.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxxx (XXXX xxxx) xxxxxxx v bodě 5.1.
6.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx co nejrovnoměrněji xxxxxxxxx, x to 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx. Xx xxxxx zabránit xxxxxx pěny nebo xxxx xxxxxx rozptýlit. Xxxx mezi xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) 1 xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxx xxxxx (4.2.4) x xxx xxxxxxxxx 3 xx xxxxxx xxxxx (6.2).
6.4 Xxxxxxxx kultivačního xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx misky xxxxx asi 12 xx XXXX xxxxx (6.1)
Xxxxx xx nalití xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx koncem xxxxxxxx xxxxxx mléka x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx nesmí xxxxxxxxx 15 minut.
Za xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx nenaočkovanou misku x 12 xx xxxxx XXXX xxxxx, xxxxx xxx použit xxx naočkování misky.
Nechat xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx médium xxxxxxxx.
Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 4 xx VRBL xxxxx (6.1) xx povrch xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx.
6.5 Xxxxxxxx Petriho misek
Přenést xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Misky inkubovat xxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxx než xxxx xxxxx. Sloupky misek xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxx x xxxxxxxx se xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 24 ± 2 hodiny xxx 30 ± 1 °C.
6.6 Xxxxxxxx xxxxxxx
6.6.1 Xxxxxxx xxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx než 150 xxxxxxx. Počítat xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x průměru xxxxxxx 0,5 xx, x xxxx bez xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.6.2 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx kolonie xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. jinou xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxx xxxx sraženin xxxxxxxx k charakteristickým xxxxxxxx), xxxxxxx konfirmační xxxx (6.7).
6.7 Konfirmační xxxx
Xxxxx údajů x xxxx 6.6.2 xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx u xxxxxxxx xxxxx (např. 3 až 5) xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx kolonií xxx, xx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx (4.1.6), xxxxxxxx xxxxxxxx obsahující xxxxxx agar x xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.2). Xxxxxxxxx xxxxxxxx 24 ± 2 hodin xxx 30 ± 1 °X.
Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx takové xxxxxxx, xxxxx v Durhamově xxxxxxxx xxxxx xxxx.
7. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx obsahujících maximálně 150 kolonií.
7.2 Xxxxx xx provede xxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx počet xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx základě procentuálního xxxxxx potvrzených xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxxx xxxxx koliformních xxxxxxxx xx 1 ml xxxxxxxxxxxxx xxxxx podle xxxxxx xxxxxx:
ΣX / x
xxx:
ΣX xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx koliformních xxxxxxxx (7.1 v xxxxxxxxxxx xx 7.2), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (6.3).
x xx xxxxxxxx vyšetřovaného vzorku (6.3) x xxxxxxxxxxx (3 ml).
Počet se xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx více než 100 kolonií. Když xx zaokrouhlovaná xxxxxxx xxx, zaokrouhlit tak, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 150 xxxxxxx, uvést xxxxxxxx xxxx "odhadovaný xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 xx".
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
XXX. XXXXXXXXX XXXXXX SOMATICKÝCH BUNĚK
Tato xxxxxxxx popisuje xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx somatických xxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup pro xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxx xxx stanovení xxxxx xxxxx ve xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx fluoro-opto-elektronické xxxxxx (xxx X.1).
2. Xxxxxxxx
Xxx tento postup xx somatickými xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, jejichž xxxxx xx xxxxx zřetelně xxxxxxx xxxxxxxxxxxx modří
3. Xxxxxxx
Xxxxxx 0,01 xx xxxxx xx 1 xx2 xxxxxxx podložního xxxxxxx. Xxxxx vrstva xx xxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx získat xxxxx xxxxx xx 1 xxxxxxxx.
4. Xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x..
Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxx xxxx |
0,6 x |
|
Xxxxxxx – 99 % |
54 xx |
|
1,1,1-xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxx |
40 xx |
|
Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx |
6 ml |
Upozornění
Tetrachlorethan xx xxxxxxxx. Příprava a xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx uskutečnit v xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx v xxxxx xxxxxxx a 1,1,1-trichlorethan xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx ve xxxxx xxxxx na 60 xx 70 °X. Xxxxxx methylenovou xxxx, xxxxx xxxxxxxxx, 12 xx 24 xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 4 °C x xxxxxx ledovou xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx pórů 10 xx 12 xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx vytvoření xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx použitím roztok xxxxx xxxxxxxxxxxx.
5. Xxxxxxxxx x pomůcky xx xxxx
5.1 Mikroskop xxxxxxxxxx xxxxxxxx 500 × xx 1000 ×
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx umožňující xxxxxxxxx xx 0,01 ml x xxxxxxxxx xxxxxxx ± 2 %.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 20 xx × 5 xx xxxxxxxxxx pro tenkou xxxxxx xxxx standardní xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 20 × 5 xx xxx xxxxxx xxxxxx.
5.4 Horizontální xxxxx xxxxx (30 °X xx 50 °X) xxx xxxxxx xxxxxxxxxx sklíček.
5.5 Ventilátor (xxx) xxx sušení xxxxx xxxxxx.
5.6 Vodní xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 30 až 40 °X xxx ohřívání xxxxxx xxxxx.
5.7 Podložní xxxxxxx x mikrometrickou xxxxxxxx xx 0,01 xx.
6. Xxxxxx
6.1 Vzorek xxxxx
Xxxxxx mléka xxxx xxx testován do xxxxx hodin xx xxxxxx xxxxxx. Během xxxxxxxxxx xxxxx teplota xxxxxx xxxxxxxxx 6 °X. Vzorek xxxxx xxx zmražen.
6.2 Xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxx ve xxxxx xxxxx (5.6) xx 30 xx 40 °X. Xxxx řádně xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx které xxxx xxxxxxxxxxx mikrostříkačka (5.2), xxxxxxxxx 20 °X.
6.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx papírem, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxx, kde xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxx tenké xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx (5.2) xxxxxxx 0,01 xx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx očistit xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx styku x mlékem. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) a xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (20 mm × 5 xx). Xxxx ji xx xxxxxxxxxxxxxxx vyplnit. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx vrstvu xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (5.4) až xx xxxxxxx vysušení.
U xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx dvě tenké xxxxxx.
6.5 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx na 10 xxxxx do xxxxxxxxx xxxxxxx (4). Sušit x, xxxxx xx xx xxxxxxxx, vysoušení xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.5). Xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx tekoucí xxxx, xxxxx xx přebytečné xxxxxxx zcela xxxxxxx. Xxxxx sušit a xxxxxxx xxx, xxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx.
6.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx
Xx xxxxxxx zvoleného xxxxxxxx (500 × xx 1000 ×) xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx (5.7).
7. Xxxxxxxx x výpočet
7.1 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx mikroskop (5.1). Xxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx pouze xxxxxxx xxxxx, x xx xxxxxx xxxxx, xxxxx jsou jasně xxxxxxxxxxxx a z xxxxx je v xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Počítat xxxx nebo pole xx xxxxxxx třetině xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx xxxx pole, které xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx tenkých vrstev x xxxxx i xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx měsíc xxxxxxxxxx xxxxxxx částí xxxxx xxxxxx. Počítání xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx polí xxxxxxxxxxxx takovým způsobem, xxx xxxxxxx části xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx rovnoměrně.
7.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx buněk, xxxxx xx mají xxxxxxx
Xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx vzorek mléka x xxxxxxx 400000 xx 600000 buněk/ml xx xxxxx xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, které je xxxxx v xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxx rozdělení xxxxxxx 400, xxx xxxx xxxxxxx kritérium opakovatelnosti.
Podle Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
X = X = x2,
xxx:
X xx xxxxxxx xxxxxxx
X xx xxxxxxx
x xx xxxxxxxxxx odchylka.
Variační xxxxxxxxxx xx:
XX = s × 100 % / X xxxx XX = 100 % / x&xxxx;xxxx XX = 100 % / OBR
M (xxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxx), xxxxx xxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxx 400 xxx XX = 5 %).
7.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxxxx 0,01 xx xxxxx xx pracovní xxxxxxx vypočítá xxxxx xxxx 7.3.1 nebo 7.3.2.
7.3.1 Xxxxxxxx xxxx xx tenké vrstvě
Délka xxxx, xxxxx se xxxx xxxxxxx, xx 5 xx. Šířka xxxx odpovídá průměru xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, jak xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7).
Pracovní xxxxxx = 20 × 100 / d × b
kde:
d xx xxxxxx mikroskopického pole x xx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx sklíčkem x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7)
b xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
7.3.2 Počítání xxxxxxxxxxxxxxx xxxx ve xxxxxxx xxxxxxx tenké xxxxxx xxxx pomocí xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx
xxx:
x xx průměr xxxxxxxxxxxxxxx xxxx v xx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx s mikrometrickou xxxxxxxx (5.7)
x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
7.4 Xxxxxxx obsahu buněk
S xxxxx xxxxxx počet xxxxx na xx xxxxx, se xxxxx xxxxxxxxxxxx somatických buněk (7.1 x 7.2) xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (7.3).
7.5 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxx 7.2) xxxxx xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxx po xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (viz X.1) používat pro xxxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxx x chemickou xxxxxxxxxx nebo bez xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx postup xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx mají x xxxxxxxx barvení xxxxxxx XXX minimální xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
3. Princip
Část xxxxxx (například 0,2 xx) xx důkladně xxxxxxxx x tlumivým xxxxxxxx x s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxx se xxxx xxxxxxx ve xxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx disk, xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx elektrický impuls, xxxxx xx xxxxxxxx x zaznamenává. Xxxxx xxxxxxxxxxx buněk xx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx.
4. Xxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x.x.. Xxxxxxx voda je xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx xx to xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx |
51,00 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxx |
13,75 g |
|
Polyethylenglykol-mono-p(1,1,3,3-tetramethylbutyl)-fenylether(například Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 xx |
|
xX 5,7 xx 5,9. Xxxxxxx xxxxx xx 10000 xx. |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx uzavřené xxxxxx xx nemělo xxxxxxxxx xxxx xxx.
4.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxx)
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
1,0 x |
Xxxxxxx xxxxx xx 1000 xx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx uzavřené xxxxxx chráněné xxxx xxxxxxx by nemělo xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx xxxxxx)
Xxxxxxx 20 ml xxxxxxxxx xxxxxxx (4.2) x tlumivým xxxxxxxx (4.1) tak, xxx xx xxxxxx xxxxx 1000 xx. Pracovní xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxx xxx.
4.4 Xxxxxxx roztok
Složení
|
Tlumivý roztok (4.1) |
10 ml |
|
Polyethylenglykol-mono-p(1,1,3,3-tetramethylbutyl)-fenylether (xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % objemové |
10 ml |
|
Amoniak x 25 % xxxxxxxxxx |
25 ml |
Doplnit vodou xx 10000 xx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx dní.
5. Xxxxxxxxx x pomůcky ze xxxx
5.1 Počítací xxxxxxxx xxxxxxxxx xx principu xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Tím xx xxxxxxx vztah mezi xxxxxxx xxxxxx, které xx xxxx počítat, x xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx provede xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx použití vzorků, xxxxxxx xxxxx buněk xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (A).
5.2 Xxxxx xxxxx, s cirkulací xxxx, xxxxxxxxxxxx xx 40 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxxx, objem xxx 15 ml.
6. Xxxxxx xxxxx
6.1 Xxxxxx xxxx xxx skladován xxx xxxxx xxxxxxx xx zkumavce (5.3). Xxxxx vzorek xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx může xxxxxxx xx xx uplynutí 24 hodin xx xxxxxxxx, xxxxx obsah xxxxxxxxxxxxxx by xxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 6 °X.
6.2 Konzervace
Chemická xxxxxxxxxx xx musí xxxxxxx do 24 xxxxx. Konzervace musí xxx xxxxxxxxx co xxxxxxxx xx odběru xxxxxx.
6.2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx se provede xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx konzervačních prostředků:
- xxxxxxxx orthoboritá:
konečná koncentrace xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx 0,6 x xx 100 xx. Xxxxx konzervovaný xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx při xxxxxxx 6 xx 12 °X;
- xxxxxxxxxxx draselný:
konečná xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxx vyšší než 0,2 g xx 100 xx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx vzorek xxxx xxx xxxxxxxxx dalších 72 xxxxx xxx xxxxxxx 6 xx 12 °X;
- azid xxxxx:
xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx azidem xxxxxx x konečné xxxxxxxxxxx 0,024 g/100 xx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xx teplotu 6 až 12 °X xxxxx po xxxx xxxxxx x xxxxxxxx do 48 xxxxx xx xxxx xxxxxx;
- xxxxxxxx:
xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx bronopolem x xxxxxxx koncentraci 0,05 x/100 xx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx na xxxxxxx 6 xx 12 °X xxxxx xx xxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx 72 xxxxx xx jeho xxxxxx.
6.2.2 Xxxxxx, xxxxx xxx byl konzervován xxxxxxxxx xxxxxxx, může xxx ještě xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx 48 xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx dvojchromanem xxxxxx, xxxx být xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxx ošetření xxxxxx
Xxxxx, které xx xx xxxxxxxx, se xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 24 hodin xxx xxx 2-6 °X. Počítání vzorků x den nadojení xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx být xxxxxx nízké. Pokud xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx provést, xxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx nejméně xxx hodiny xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (viz 6.2.1).
7.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx ošetřený vzorek (xxx 7.1) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxx xx vodní xxxxx (5.2) na xxx 40 °X. Xxxx xxxxxxxxx vzorek xxx pokojové xxxxxxx xx xx xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx buněk
Počítání xx xxxxxxx xxxxxx počítacího xxxxxxxx (5.1) do 15 xxxxx xx xxxxxxxx ohřívání (viz 7.2). Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx důkladně xxxxxxxxx, xxx se xxxxxxx xx nejlepšího xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx provedeny v xxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x) x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) xxxxxxxxxxxxx kruhových xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxx, které xxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxx odhady:
(1) počet xxxxx xxxx 400 000 xx 500 000 xxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx:
xx = 20000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 5–4 %)
- směrodatná xxxxxxxx reprodukovatelnosti:
sR = 40000 buněk/ml
(odpovídá xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 10–8 %)
9. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx správnosti xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx o xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xx stanoví xxxxxxxxx xxxxx xxx mikroskopem xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
XXXX. XXXXXXX XXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXX
XXXXXXX X XXXXXX XXXXXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx x x xxxxxxx ošetřeném xxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx:
X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xx počáteční xxxxxx, xxxxx umožňuje xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx obsahují xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxx x xxxxxxxx postupů, xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx Bacillus xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx, XXXX 10149, xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx jako xxxxxxxxxxxxxxx xxx takovéto xxxxx.
X. Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx se musí xxxxxx xxx konfirmaci xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx identifikaci penicilinu x stanovení xxxx xxxxxxxxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxx postup
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxx postup xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx a x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, jejichž koncentrace xxxx vyšší xxx xxxxxx uvedené x xxxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx antibiotik a xxxxxxxxxxx [1]
|
Xxxxxxxxx testu |
||
|
Negativní |
Pozitivní |
|
|
Benzylpenicilin |
0,002 |
0,006 |
|
Ampicilin |
0,002 |
0,005 |
|
Cloxacillin |
0,015 |
0,035 |
|
Nafcilin |
0,006 |
0,011 |
|
Tetracyklin |
0,10 |
0,40 |
|
Oxytetracyklin |
0,20 |
0,45 |
|
Chlortetracyklin |
0,15 |
0,50 |
|
Chloramfenikol |
7 |
15 |
|
Dihydrostreptomycin |
4 |
13 |
|
Neomycin |
1 |
22 |
|
Kanamycin |
9 |
28 |
|
Bacitracin |
0,06 |
0,14 |
|
Erythromycin |
1 |
2,25 |
|
Rifamycin |
0,01 |
0,14 |
|
Diafenylsulfon |
0,01 |
0,1 |
|
Sulfametazin (Xxxxxxxxxxxx) |
0,5 |
1 |
|
Xxxxxxxxxx extrakt |
2 x |
|
|
Xxxxxx |
5 x |
|
|
Xxxxxx xxxxxxx |
1 g |
|
|
Chlorid xxxxx |
5 g |
|
|
Agar |
10–15 x |
|
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx. Za občasného xxxxxxx xxxxx do xxxx. Xxxxxxx xX xxx, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx jeho xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx xx 10 xx do xxxxxxxx xxxx xx 100 xx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx 15 minut xxx 121 ± 1 °X.
5.1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxx sodný |
2 g |
|
Agar |
15 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxx trimethoprimu xxxx xxxxxxxxxxxx (xxx 5.1.3) |
10 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx složky xx vodě, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx. Přidat xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X. Xxxxxxx xX, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 při 25 °X.
5.1.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx tetroxoprimu
Složení:
|
Trimethoprim |
5 xx |
|
xxxx Xxxxxxxxxxx |
30 xx |
|
96 % Xxxxxxx |
5 ml/30 xx |
|
Xxxxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo tetroxoprim (5 xxxx 30 xx) x xxxxxxx xxxxx.
5.1.4 Xxxxx roztok
Složení:
|
Kvasnicový xxxxxxx |
0,75 xx |
|
Xxxxxxx |
5,0 mg |
|
Rozpustný xxxxx |
8,0 xx |
|
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx |
0,025 x |
|
Xxxx |
50 ml |
Příprava:
Rozpustit ve xxxx živný xxxxxx x xxxxxxxxx, pokud xx xx xxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx roztok xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx
5.2.1 Xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x 60 μx/xx (100 XX/xx), x xx rozpuštěním xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx ve xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vodě.
5.2.2 Xxxxxxxxx pracovní xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 1,25 xx xxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2.1) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xx 1000 xx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 0,075 μx penicilinu/ml (= 0,125 XX/xx).
5.2.3 Připravit 75 xx standardního xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,004 μx xxxxxxxxxx/xx (= 0,0067 IU xxxxxxxxxx/xx) xxxxxxxx 4 xx pracovního roztoku xxxxxxxxxx (5.2.2) do 71 ml xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.3).
5.2.4 Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx bodů 5.2.1 xx 5.2.3 xx xxxx xxx xxxxxxxxxx v xxx xxxxxxxxx testu.
5.3 Mléko xxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx preparát mléka xxx inhibičních látek xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (10 % x/X) xx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx přítomnost xxxxxxxxxxx látek. Rovněž xxx použít přiměřené xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx bylo otestováno x xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx; xxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx x zahřívá xx xxxxx xxxxxx na 100 °X, xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx s xxxxxxxx 0 °C až 6 °C xx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx organismus
5.4.1 Xxxx testovací xxxxxxxxxx xx xxxxxxx Bacillus xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx XXXX 10149 Xxxx XXXX 10149 xx xxxxxxxxx x xxxxxx X 953.
5.4.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx kultury. Xxxxxxxxx kultura xx xxxxxxx xx šikmém xxxxxx xxxxx (5.1.1). Xxxxx xxxx se x proužcích xxxxxxxx xxxxxxx testovací xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx 48 xxxxx xxx 63 ± 1xX. Xx xxxxxxxx xxxxxxx zkumavka xxxxxxxx xxxxxxxx zátkou. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx kultura xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 0 xx 5 oC.
5.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxx)
5.5.1 Xxxxxxxxx xxxxxxx 20 ml xxxxxxx xxxxx (5.1.1) do xxxxxxxx Xxxxxxx misky (4.2.2) a xxxxxx xxxxxxxx na pokojovou xxxxxxx.
5.5.2 Xxxxxxxx pipetou (4.2.4) xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx destilované xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (5.4.2) x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx spóry xx šikmého xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxx 0 xx 5 °X x xxxxxxx xx xx 36 xxxxx.
5.5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 ml xxxxxxxx xxxx (5.5.2) xx Xxxxxxx xxxxx (5.5.1) x xxxxxxxx xxxxxxxxx očkovací látku xx celém xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx skleněné xxxxxxx. Inkubovat 16 xx 18 xxxxx xxx 63 ± 1 °X (4.1.1).
Xxx xxxxxxx zásobní kultury (5.4.2) nebo xxxxxxx xxxxxx 36 hodin xx očkování xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 36 xxxxx.
5.5.4 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxxx vody xx Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (5.5.3) x xxxxxxxxx xxxxxxxx odstranit xxxxx x povrchu.
Přenést xxxxxxxx xxxx do xxxxx (4.2.3) xxxxxxxxxx 250 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxx a důkladně xxxxxxxxx. Xxxxxxx, které xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xx měly xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxx 0 xx 6 °X.
5.5.5 Po 16xx xx 18xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 63 ± 1 °X na xxxxxxxx xxxxx xx suspenze xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx 5 x 10 xxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx rovnoměrné xxxxxxxx, x pokud xxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx, xxxx by xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx připravenou ze xxxxxxx kultury (5.4.2).
5.6 Xxxxxxxx zkumavek/ampulí
5.6.1 Nechat xxxxxxxxx agarové xxxxxx (5.1.2), xxxx zchladit xx 55 °X.
5.6.2 Xxxxxx část xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx (5.5.4) x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx média (5.6.1) xx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx (4.2.6) 0,3 xx xxxxxxxxxxxx média (5.6.2), aby se xxxxxxxxx 5 xx xxxxxx, poté uzavřít xxxxxxxx zátkou nebo xxxxxx nebo, v xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx 12 xxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
5.6.4 Xxxxxxxx/xxxxxx mohou xxx xxxxxxx týž xxx, xxx mohou xxx rovněž xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx 0–6 °X, xxxxx xxxx xxxxx po xxxxxx xxxxxxxx ochlazeny.
6. Xxxxxx
6.1 Vzorky xx xx xxxxxxxx otestují, xxxxxxx xx 24 xxxxx xx xxxxxx, x do té xxxx xx skladují xxx xxxxxxx 0-5 °X. Xxxxx není xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx 24 xxxxx, xxxx xx xx xxxxxxx hluboko xxxxxxxx (−30 °až - 15°X), xxx se xxxxxxx xx minimum xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.2 Xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx zkumavku/ampuli (5.6). Xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxx. Umístit do xxxxxxxx stojánku (4.1.3) xxxxx požadovaný pro xxxxxx a xxxxx (5.2 x 5.3).
6.3 Xx každé xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxx 50 mikrolitrů xxxxxxx roztoku (5.1.4).
6.4 Xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx (4.1.4) přenést 0,1 xx vzorku do xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx. Pro xxxxxxxxx xxxxxxx vzorku xxxxxx vždy novou xxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.5 Postup xxxxx xxxx 6.4 xx opakuje xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx penicilinu xxxxxxxxxxxx 0,004 μx/xx (= 0,0067 XX/xx) xxxxxxxxxx namísto xxxxxx xxxxx (5.2.3).
6.6 Xxxxxxxx xxxxx bodu 6.4 xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx použití kontrolního xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.3) xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
6.7 Xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx a xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx 2½ xx 2¾ xxxxxx xx xxxxx xxxxx s teplotou 63 ± 1 °X (4.1.2).
6.8 Vyjmout xxxxxxxx se xxxxxxxxxx/xxxxxxxx x xxxxx lázně.
6.9 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx (viz 7).
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Purpurové xxxxxxxxx xxxxxxxxx média xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx ukazuje xx xxxxxxxxxx antibiotik xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx "xxxxx xxxxxxxxx" xxxxxxx v xxxxxxx xx xxxxxx 39. Pokud xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx roztokem xxxxxxxxxx (6.5) zůstane purpurové, xxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx citlivé.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx zbarvení xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx vzorkem mléka xxxxxxx xx přítomnost xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x koncentracích xxxx koncentracemi uvedenými xx xxxxxx 39.
7.3 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx zkumavkách/ampulích xxxxxxxxxxxx xxxxxx mléka xxx inhibičních xxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
7.4 Pokud xx xxxxxxxxx zabarvení xxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol, zkumavky/ampule xxxxxxxxxx životaschopné xxxxx x xxxxxx xxxx xxx podrobeny xxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxx testovacím materiálem.
8. Xxxxxxxxx výsledků
8.1 Xxxxxxxx xxxxxxxx všech xxxxxx x xxxxxxxx popsanými x 7.1 x 7.2 podle xxxxxx "X".
Xxxxx je nezbytné xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, musí xxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X. Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx koncentrace
1. Předmět x oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx mléka x xxxxxxxxx (X.7.1) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (X.7.2).
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxx různá xxxxxxxxxxx
Xxx A.1.
2. Definice
2.1 Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, včetně xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx čirou inhibiční xxxx xxxxxxx 2 xx kolem disku.
2.2 Xxxxx vzorek, xxxxx xxxxxxxx antibiotika, xxxxxx xxxxxxxxxxx (2.1), x xx kterému byla xxxxxxx penicilináza (beta-laktamáza), xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx čirou xxxx xxxxxxx průměru xxx xx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx je xxx xxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx antibiotika xxxxxx xxxxxxxxxxx.
2.3 Pokud tato xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx (2.2) inaktivována, xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx to xxx xxxx xxxxxxxx [xxx směrnice 85/397/XXX, xxxxxxx A, xxxxxxxx XX, A.1.f) a 2x)].
Xxxxxxx polosyntetické xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx sodný, xxxxxx xxxx jsou xxxxx částečně xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx jsou xxxxxx a nemohou xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx (viz 7.3).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx mlékem, xxxxx xx xx xxxxxxxx, xx umístí xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx mikroorganismus po xxxxxxxx narušuje xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxx x xxxxx přítomny xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx mimo xxxx xxxxxx na koncentraci x druhu xxxxxxxxx xxxxx v xxxxx.
4. Xxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxx a vybavení
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxx X.4.1.
4.1.2 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 80 ± 1 °X.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
Xxx X.4.2.
4.3 Xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx 9 xx 13 xx, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx 130 xx xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx).
5. Xxxxxxxxxx média, standardní xxxxxxx, roztok penicilinázy, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx musí být xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Musí xx xxxxxx xxxxxxxxxxx voda xx skle xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx voda xxxxxxx xxxxxxxxxxxx čistoty. Xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxx xxxxxxxxxxx organismu.
5.1 Kultivační xxxxx
5.1.1 Xxxxx xxxx (X.5.1.1)
5.1.2 Kultivační xxxxxx xxx xxxxxxx inhibičních xxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5 x |
|
Xxxxxxx |
1 g |
|
Roztok xxxxxxxxxxxxx xx tetroxoprimu (A.5.1.3) |
10 xx |
|
Xxxx |
10–15 x podle xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx agaru |
|
Voda |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxx rozpustit xxxxx složky xx xxxx, xxxx xxxxxx xxxxxx trimethoprimu xxxx xxxxxxxxxxxx. Xx přidání xxxxxxxxxxxxx xxxx tetroxoprimu xxxxxxx hodnotu xX, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx 8,0 + 0,1 při 25 °X. Sterilizovat xxxxxx 15 minut xxx 121 ± 1 °X.
5.2 Standardní xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx
Xxx X.5.2.
Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (8) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxxxx x mléce xxx xxxxxxxxxxx látek (X.5.3) v těchto xxxxxxxxxxxxx:
x) 0,004 μx/xx (0,0067 XX/xx)
x) 0,006 μx/xx (0,01 XX/xx)
x) 0,03 μx/xx (0,05 XX/xx)
x) 0,06 μx/xx (0,01 XX/xx).
5.3 Roztok xxxxxxxxxxxx
5.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (beta-laktamázy) xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx s cílem xxxxxx xxxxxxxxxxx 1000 X/xx. Tento xxxxxx, xxxxxxx rozdělený na xxxxx dávky, xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxx 0 °X až 5 °X.
Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx jednotná xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxx účely xxxxxx postupu xx xxxxxxxxxxx, xx deset xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx stačí xx inaktivaci 0,6 μx (= 1 XX) xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx x neznámou xxxxxxxxxxx xx nutné xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxx platí. X xxxxxxx xxxxxxxx proto xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.3.2 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx penicilinázou, xxxxx xx kontrolním xxxxxxxx zjistí, xx xxxxxxxx odpovídající xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.4 Testovací xxxxxxxxxx
Xxx X.5.4.
5.5 Testovací xxxxxxx (xxxxxxxx spór)
Viz X.5.5.
5.6 Xxxxxxxx Xxxxxxx misek
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx agarové xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx látek (5.1.2), xxxx zchladit xx 55 xX.
5.6.2 Xx xxxxx přidat xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx spór (5.5) x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro detekci xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), x xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x naočkovaném xxxxxxx xxxxx, x důkladně xxxxxxxxx.
5.6.3 Přenést do xxxxxxxx Xxxxxxx misky (X.4.2.2), xxxxxx xxxxxxx xx 55 °X, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx 0,6 až 0,8 xx xxxxxx. Xxx Xxxxxxx misku x xxxxxxxx xxxxxxx 140 xx xx třeba xxx 15 ml xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxxx 0,8 xx vrstva.
5.6.4 Umístit Xxxxxxx xxxxx na xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx vodováhou, xxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxxx médium xxxxxxxx. Xx ztuhnutí média, xxxxxx xxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xx dnem xxxxxx, xxx xx na xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
5.6.5 Takto xxxxxxxxxx Xxxxxxx misky xx xxxxxxx xxxxxxx ještě xxx xxx, xxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx dva týdny, xxxxx xx ihned xx přípravě xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx a uchovávají xx xxx 5 °X.
5.6.6 Označit xxx Xxxxxxx xxxxx, aby xxxx xxxxx identifikace xxxxxx.
6. Postup
6.1 Xxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 X xxxxxx x pozitivním xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx "xxxxxx X" (A.7.1 x X.7.2) xxxx xxx xxxxxxxxx nové xxxxxxxxx xx účelem xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx penicilinu.
6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx 10 xxxxx xx 80 ± 1 °C, xxx xx vyloučil xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
6.1.3 Důkladně xxxxxxxxx, xxxx přenést xxx 10 ml xxxxxx xxxxxxxxx mléka xx xxxxxxxx lahvičky xx xxxxxxx xxxxxx. X xxxxx xxxxxx xxx 0,4 xx xxxxxxx penicilinázy (5.3) x řádně promíchat.
6.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
6.2.1 Xxxxxxx papírový xxxx (4.3) xx xxxxxx xxxxx (6.1.2) pomocí xxxxx x suché xxxxxxx. Odstranit xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx disku x xxxxxxxx se xxxxxxx. Xxxxxxxx položit xxxx xx povrch Xxxxxxx xxxxx (5.6) x lehce xxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.2.2 Disky xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx od xxxxxxx xxxxxxx 20 xx x od xxxxxx xxxxxxx 10 mm.
6.2.3 Xxx kontrolu citlivosti xx xxxxx (4.3) xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.2) xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx mezi xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx v poměru xxxxxxx 2 % xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx; xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
6.2.4 Po xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx agarové xxxxxx a xx xxxxxx identifikaci, xxxxxxx xxxxx dnem vzhůru x xxxxxx xx xxxxxxxxx 2,5 xx 5 xxxxx xxx 63 ± 1 °X.
6.2.5 Po xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx při xxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx čiré xxxxxxxxx xxxx kolem xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxx xx změří.
6.2.6 Standardní xxxxxx xxxxxxxxxxxx (6.2.3) xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 2 xx xxxx.
6.2.7 Xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx vzorky mléka, xxxxxxx velkost xx xxxxxx nebo xxxxx xxx velikost popsaná x 6.2.6, xxxxxxx xx xxxxxxxxxx inhibičních xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx inhibičních látek
6.3.1 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx mléka (6.1.2) x se xxxxxxx xxxxxxxxx penicilinázou (6.1.3). Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx do 10 xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (5.3.2) x uložit xx na xxxxxxxxx xxxxx.
6.3.2 Xxxxxx 6.2.1 xx provede xxxxxx xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx roztoků penicilinu xxxxxxxxx v 5.2 x) až x).
6.3.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx zón xxx vzorky mléka, xxxxxxxxx vzorky penicilinázy x pro xxxxxxxxxx xxxxxxx penicilinu.
7. Interpretace xxxxxxxx (xxx 2)
7.1 Xxxxx xx xxxxx xxxxx napuštěném kontrolní xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx žádná xxxx xxxx, xxx xxxx xxxx xx xxxxxx kolem xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx velká xxxx xxxxx než zóna xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2x)), inhibiční látka xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx koncentraci xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx sodného xxxxx xxxx xxxxx xxx 0,004 μx/xx.
7.2 Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx čiré zóny xxxxx disku xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx zóny xxxxx xxxxx xx vzorkem xxxxx, xxxxx obsahuje xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx použité x tomto xxxxxxx.
7.3 Xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxx průměru čiré xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx penicilinázu xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx průměru xxxx xxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx mléka xxxxxxxxx xxxxx 6.1.2, xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a antibiotika, xxxxxx xxxxxxxxxxx, a xxxxxxxxx xxxx polosyntetický xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxx xx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx být xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx podmínek a xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx jako inhibiční xxxxx xxxx než xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, inhibiční látky xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxx identifikovány xxxxxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx xxxxxx penicilinu
8.1 Stanovení xxxxxx xxxxxxxxxx může xxx xxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, nebo výpočty xx základě velikostí xxx xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxx penicilinu x xxxxx (5.2 x) až x)).
8.2 Xxxxxxxxxx standardní xxxxxx
Xxxxxxxx x xxxx, že xxxxxxxx lineární korelace xxxx xxx10 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxxxxxxxxx xxxxxx lze xxxxxxxxx xx logaritmický xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx penicilinu xx xxxxxxxxx a xxxxxx zón na xxxxxx. Inhibiční xxxx xx počítají na xxxxxxx xxxxxxx zdvojeného xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx se graficky xxxxxxx xx základě xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx penicilinu x zakreslí xx xxxxxxxxxx křivka.
8.3 Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx ve xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xx základě xxxxxxx xxx vzorků xxxxxx xxxxxxx xxxx je xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx. Pro přesné xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx větší, avšak xxxxxxx xxxxxxx větší xxx poloměr xxxxx.
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Výsledky xx xxxxxxxxx jako xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx vyšší xxx 0,004 μx/xx (nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace) xxxx xxxx obsah xxxxxxxxxxx xxxxx jiných xxx xxxxxxxxx.
9.2 Xxxxxxxxxxxxxx (x) a xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X)
Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx a jsou xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx standardu xxx xxxxxxxxx.
XX. DETEKCE XXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
X souladu x požadavky směrnice 85/397/XXX, xxxxxxx X, xxxxxxxx XXX bodu 2, tento xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, které xxxx xxx xxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx v pasterovaném xxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxx provést u xxxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxxxxx příčinou xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx z xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx ošetření, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx X, xxxxxxxx VII xxxxx 2 uvedené xxxxxxxx, pokud xxx x počítání xxxxxxx xxx 30 °C x 21 °C, xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx, specifický xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx nezbytný pouze xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx otravy xxxxxxxxxxx.
3. Postup
Postupy a xxxxxxx xxxxxxxxx musí xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx orgán xxxxxxx xxxxxxxx, který xxxxxx vydávání xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx pro obchod xxxxxx Společenství. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx kritéria x xxxxxxx přijaté xx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Zpráva x xxxxxxxx
Xxx každý xxxxxxxxxxx patogenní mikroorganismus xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx:
Xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxx "xxxxxxxxxx" xx "xxxxxxxxxxxx" x objemu xxxxxxxxxxxxx xxxxx, který xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx postup.