Xxxxxxxxxx Komise
ze dne 14. xxxxx 1991,
kterým xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x tepelně xxxxxxxxxx xxxxx
(91/180/XXX)
XXXXXX EVROPSKÝCH XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Smlouvu x xxxxxxxx Evropského xxxxxxxxxxxxx společenství,
s ohledem xx xxxxxxxx Xxxx 85/397/XXX xx xxx 5. xxxxx 1985 x hygienických a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx uvnitř Xxxxxxxxxxxx [1] xxxxxxxxx pozměněnou xxxxxxxx 89/662/EHS [2], x xxxxxxx na xx. 10 xxxx. 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxx, že xxxxx xx. 10 xxxx. 2 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx analýzy x xxxxxxxxx, které xx xxxx používat xxx xxxxxxxx dodržování xxxxx xxx xxxxxx xxxxx x tepelně xxxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, že xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů, obsahu xxxxx, bodu xxxxxxx x přítomnosti xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxx pasterované xxxxx xx nezbytné stanovit xxxxxxx metody xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x XXX mléko je xxxxxxxx stanovit zejména xxxxxx xxx stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, nepřítomnosti xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx x technických xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx stanovit xxxxxxxxxx xxxxxx analýzy x xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx určitých xxxxx; xx je xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx kterých xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx; xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx šetření xxxxx xxxxxxx xxxxx xx xx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 85/397/ES xxxx xxxxxxx xxxxxx rutinní xxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx stanovení referenčních xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx spolehlivosti xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx opatření xxxxxx xxxxxxxxxx jsou x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx,
XXXXXXX XXXX ROZHODNUTÍ:
Xxxxxx 1
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxx tyto:
- xxxxxxxxx xxxx mrznutí,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 30 °C,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Článek 2
Referenční xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx mléko xxxx xxxx:
- stanovení xxxx xxxxxxx,
- stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °C,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 21 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx koliformních bakterií – xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxx antibiotik a xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx patogenních xxxxxxxxxxxxxx.
Článek 3
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx XXX mléko x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X,
- detekce xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 4
Použití xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x odběr xxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxx pravidel xxxxxxxxxxx x xxxxxxx X.
Článek 5
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x testování xxxxxxx x xxxxxxxx 1, 2 x 3 jsou popsány x xxxxxxx XX.
Xxxxxx 6
Xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx 31. prosince 1992, xxx xx zohlednil xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx znalostí.
Xxxxxx 7
Xxxx xxxxxxxxxx xx určeno xxxxxxxx xxxxxx.
V Bruselu xxx 14. února 1991.
Xx Xxxxxx
Xxx Xxx Sharry
člen Xxxxxx
[1] Xx. xxxx. X 226, 24.8.1985, x. 13.
[2] Xx. xxxx. X 395, 30.12.1989, x. 13.
XXXXXXX I
OBSAH
I. Obecná xxxxxxxxxx
XX. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka
I. XXXXXX XXXXXXXXXX
1. Úvod
Obecná ustanovení xx xxxxxx činidel, xxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx, kritérií xxxxxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx členských států x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx vzorků x xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx tato xxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxx
2.1.1 Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx, ředění nebo xxxx musí xxx xxxxxxx voda xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nebo demineralizovaná xxxxxxx xxxxxxxxxxxx čistoty. Xxx xxxxxxxxxxxxxxx účely xxxx xxx bez xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx jinak xxxxxxxx xxxx mikroorganismů xx xxxxxxxxx testovacích xxxxxxxx.
2.1.2 "Xxxxxxxxxxxx" xxxx "xxxxxxx" (xxx xxxxxxx xxxxxxxxx) xx xxxxxx "xxxxxxxxxxx xx xxxx" xxxx "ředění xxxxx".
2.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxx není stanoveno xxxxx, všechny xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx mít xxx uznané analytické xxxxxxx.
3. Přístroje x xxxxxxx
3.1 Xxxxxx přístrojů x xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x pomůcek xxx různé xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx a pomůcek xx xxxxxxxxxx použití x se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.2 Xxxxxxxxxx váhy
"Analytickými xxxxxx" xx rozumí xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx 0,1 xx.
4. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx není xxxxxxxxx xxxxx, výsledek uvedený xx xxxxxx o xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxx průměrem dvou xxxxx, xxxxx splňují xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (5.1) xxx xxxxxxxxxx metodu. Xxxx není toto xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx se musí xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Výpočet xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx jinak, výsledek xx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
5. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx:
5.1.1 Opakovatelnost (x) je xxxxxxx, xxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx dvěma xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testu, xxxxx byly xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx přístroj, xxxxxx laboratoř, krátké xxxxxx xxxxxx).
5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) xx xxxxxxx, xxx xxxxxx leží xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx samostatných xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx x/xxxx různé xxxx).
5.1.3 Xxxxx není xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxx opakovatelnosti x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx, uváděné x xxxxxxxxxxx odstavcích xxxxxxx xxxxxxx, představují 95 % intervaly xxxxxx xxxxxxxxxxxxx podle xxxxxxxx XXX 5725, xxxxx xxxxxx, 1986. Xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx postupu. Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx pokusy, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx. X xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx opakovatelnosti x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1.4 Kruhové xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx v xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
6. Xxxxxx x xxxxxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxxxx musí xxxxxxxx použitý postup x xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx musí xxxxxx xxxxxxx podrobnosti xxxxxxx, xxxxx nejsou xxxxxxxxx v xxxxxx xxxxx, nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x všechny xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx informace xxxxxxxxxx úplnou identifikaci xxxxxx.
XX. XXXXX XXXXXX XXXXXXXX X TEPELNĚ XXXXXXXXXX XXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx xxx odběr xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx použijí xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx skladované xx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx nádržích.
Postupy xxxxxxx x xxxxxx 2, 4.4, 5 x 6 se xxxxxxx xxx xxxxx vzorků xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx k xxxxx xxxxxxxx.
2. Obecně
Odběr xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x konvích, xxxxxxxx xxxx. provedou xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx orgány xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx nezbytné, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx odběrem xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, xxx bylo xxxxx, xx odebrané xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x x souladu x xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx testovací laboratoř xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx pověřené xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx byla xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx
3.1 Obecné xxxxx
Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx zhotoveno z xxxxxxxx xxxxx xxxx x jiného xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx, odběr xxxxxx, xxx.). Xxxxxxx x xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxx dostatečně xxxxxx xxxxxx povrchu, xxx bylo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx promíchání výrobku xxx xxxxxx žluklé xxxxx. Naběračky xxxx xxx opatřeny xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx rukojetí x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Objem naběračky xxxx xxx xxxxxxx 50 xx.
Xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxx být xxxxxxxx, kovová xxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx při xxxxxx xxxxxxxx pro odběr xxxxxx (včetně nádob x xxxxx) xxxxx xxxxxxxx takovou xxxxx xxxxxx, která xx xxxxxxxxx xxxxxxxx testů. Xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xx vzorky xxxx xxx xxxxx, xxxxx, hladký povrch xxx xxxxxx a xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx.
3.2 Vybavení xxx xxxxx vzorků pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx (včetně xxxxx) xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx 3.1 x xxxx xxx xxxxxxxx.
Xxxxx se pro xx sobě xxxxxx xxxxxx vzorků xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx s pokyny xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx nedošlo x xxxxxxxxx výsledků xx xxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxxxx xxxxxx vzorků
4.1 Xxxxxx údaje
Bez xxxxxx xx testy, které xxxx být provedeny, xxxxx musí být xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx buď xxxxx, xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xxxx xxx odebrán xxxxx xx promíchání, když xx xxxxx xxxxx x xxxxxx.
Xxxxx se x xxxxxx odebírá xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx, jako xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx vzorku xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx použitých xxxxx xxxx být takový, xxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxx naplněny xxxxxxx x xxx xxx xxxx možné xxxxx promíchat xxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx.
4.2 Ruční xxxxx xxxxxx
4.2.1 Xxxxx xxxxxx x xxxxx x konví na xxxxx
X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx plunžrem xx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx x xxxx, xxxxxxx dbát na xx, aby xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxx se xx xxxxx konve xxxxxxxxxxx smetana. Vzorek, xxxxx je xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx, xx odebere xxxxxxxx xxxxx bodu 4.2.4.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxx mléka xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx míchačky, xxxxxx ručně.
4.2.3 Xxxxx xxxxxx x xxxxx xxx
Xx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxx řádně xxxxxxxxxx, když se xxxxxx xx xxxxx xxx. Xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx rozdělení xxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx míchání. Xxxxx xxxxx xxxxxxx, x xxx xx xx odebrat vzorek, xxxxxxxx kapacitu xxxxx xxx, odebrat xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxx postupem xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.4 Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx
Xxxx je množství xxxxx, x xxxxx xx má xxxxxxx xxxxx vzorků, xxxxxxxxx xx xxxx nádob, x každé nádoby xx odebere xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx množství xxxxx xxx každý vzor. Xxxxx xxxxxx z xxxxx xxxxxx nemusí xxx odděleně testovány, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx těchto reprezentativních xxxxxxxx x poměru x množství, které xx xxxxxxx x xxxxxx, xx které xxx xxxxx ze xxxxxx xxxxxxx. Po xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxx) xxxxxx (xxxxxx) x xxxxxx xxxxxxxxx množstvích.
4.2.5 Xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx – xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx kamiony, xxxxxxxxxx xxxxxx
4.2.5.1 Xxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx vhodným xxxxxxxx xxxxxxxx.
X promíchání obsahu xxxxxxx nádob, skladovacích xxxxxx, cisternových xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.5.2).
Délka xxxxxxxxxx xxxxxx na době, xx xxxxxx xxxx xxxxx x klidu. Xxxx xxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx plánovaného xxxxxxxxx. Xxxxxxxx promíchání značně xxxxxxxxx shodu výsledků xxxxx provedených na xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx při xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx. Xxxxxx promíchání xxxxx (xxxxxxxx mléka xxxx plnotučného xxxxx) xx účinný, xxxxx xx rozdíl xxxxxx xxxx u xxxx xxxxxx odebraných za xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx 0,1 %.
Xx xxxxx nádobě x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx může x místě xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx celý xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x průlezového otvoru. X případě xxxxxx xxxxxx z vypouštěcího xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, aby xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.5.2 Xxxxxxxxxx obsahu xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx nádrží, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxx:
- xxxxxxxxxxx míchačkou xxxxxxxxxxx xx nádoby x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx nebo xxxxxxxxx poháněnou xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxx xx xxxxxxxx x mléce,
- v xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx mléka x xxxxxx přepravní xxxxxx, xxxxx xx napojena xx pumpu a xxxxxxxx do průlezového xxxxxx,
- filtrovaným, xxxxxxxxx x čistým xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx odběr xxxxxx xxxxxxxx xxxxx dodaného xxxxxxxxxx se může xxxxxx xxxxx pokynů xxxxxxxxxxx testovací xxxxxxxxxx xxxx jiným xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxx x xxxxx používání podrobeno xxxxxxxxxxx kontrolám, xxxxx xxxxxxxxx odpovědný xxxxx. Xxxxxxxx postupů xxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx:
- minimální xxxxx xxxxxxxxx mléka, x xxxxx musí xxx xxxxxxx xxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxx přenosu (který xxxxxxx x minimálním xxxxxxx xxxxxx),
- schopnost xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx po xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx odběr xxxxxx xxxx příslušný xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
- minimální xxxxx xxxxx, xx kterého xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx objem xxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx opatření, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.
4.4 Odběr xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x přímé xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx jde x xxxxxxx ošetřené mléko xxxxxx k xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx musí být xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx, x xx, xxxxx xx xx xxxxx, ihned xx xxxxxxxxxx (v xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx mléka x xxx xxxxxxxxx).
X xxxxxxx druhu xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxxxxxx) se xxxxxxx xxxxxx počet xxxxxx, xxx odpovídal xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx být xxxxxxxxx, x xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx testovací xxxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxx xxxxxx příslušného xxxxxx.
5. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xx xxx být xxxxxxx identifikačním xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx podle xxxxxx analytických laboratoří xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx xxx 2).
6. Xxxxxxxx x skladování xxxxxx
Xx xxxxxxxxx příslušného xxxxxxxxxxxxxx orgánu xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx pokyny xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx přepravy x skladování, které xxxx xxx xxxxxxxx x xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx jejich xxxxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx druhu xxxxx a testování, xxxxx xx xxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx xxxx:
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx je třeba xxxx xx xx, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx slunečnímu xxxxxx. Je-li xx xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx skladován xx xxx,
- vzorky xxxxxxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx při xxxxxxxxx 0 xX xx 4 xX. Xxxx xxxx odběrem a xxxxxxxxxx xxxx být xx nejkratší a x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 36 xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 0 xX až 6 oC, není-li xxxx xxxx odběrem x testováním xxxxx xxx 24 xxxxx,
- xxxxxx pasterovaného mléka xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x skladovány xxx xxxxxxxxx 0 xX až 4 xX. Xxxx mezi xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxxx x x xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 24 xxxxx,
- xxxx xxxxxx mléka xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxx být xx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx preventivní xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx testy, jsou xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx postupů.
PŘÍLOHA I
OBSAH
I. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx
XX. Stanovení xxxxxxxx fosfatázy
III. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxx 30 °X
X. Xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů při 21 °X
XX. Stanovení xxxxxx koliformních xxxxxxxx – počítání xxxxxxx xxx 30 °X
XXX. Xxxxxxxxx xxxxxx somatických xxxxx
XXXX. Detekce xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx
XX. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx mikroorganismů
I. XXXXXXXXX XXXX XXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, XXX xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx mléka xxxxxx přístroje (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx), v němž xx xxxxxxxxxxx řízená xxxxx ochlazována xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx teploměr.
K xxxxxxxxx xxxx dva xxxx xxxxxxxxx. První typ xxxxxxxxx maximální xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx xxx xx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx, xx xx začátku mrznutí xxxxxxx xx stanovenou xxxx odečet. Xxxxxxxx x xxxx, xx xx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx, xxx i xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, tento referenční xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx x pevně xxxxxxxxxx časem xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx testování.
Bod xxxxxxx lze xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx cizí vody x xxxxx za xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx není xxxxx xxx 0,18 x xxxxxxxx xxxxxx xx 100 xx (viz xxx 7.4).
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx mléka: hodnota xxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx postupem x xxxxxxxxx ve xxxxxxxx Xxxxxx (°X).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx mléka xx x závislosti xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx vibrací xx vyvolá xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx způsobí, xx xxxxxxx rychle xxxxxxx xx x xxxxx, které xxxxxxxx xxxx xxxxxxx vzorku.
Přístroj xx kalibruje xxxxxxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxxx postupem jako xxx vzorky mléka xxxxxxx přesné odečty xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxx plató xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx Celsia.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx chladicí xxxxx, termistorového xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxx obvodem, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx a xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx, jakož x xx xxxxxxxx na xxxxxx.
4.1.1 Xxxxxxxx lázeň
Je xxxxx použít dva xxxx xxxxxxxx xxxxx.
4.1.1.1 Xxxxxxx typ
Dobře izolovaná xxxxx xxxxxxxxxx vhodnou xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx, xxx teplotní xxxxxx xxxx jakýmikoli xxxxx xxxx v kapalině xxxxx xxxxx xxx 0,2 °X. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx ± 0,5 °X xx xxxxxxxxx hodnoty xxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxxxx, xxx v xxxxx xxxx udržována konstantní xxxxxxx xxxxxxxx. Celá xxxxxx xxxxxxxx na xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx kapalinou.
4.1.1.2 Xxxxxxxxxx xxx
Xxxxx zkumavky xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Teplota xxxxxxxx může xxxxxxx xxxxxxx x rozmezí ± 0,5 °X xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx chladicí xxxxxxxxx xx 33 % (V/V) xxxxx xxxxxx 1,2-xxxxxxxxxx (ethylenglykolu).
4.1.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx se skládá xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx průměru 1,80 ± 0,2 xx x o xxxxxxx vodiče xxxxxxxxx 0,31 xx. Časová xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx 2 sekundy x xxxxxxx x (xxx xxxxxxxx) musí být xxxxxx. Pracovní xxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx xxx − 0,512 °C xxxxxxx xxxxxxxxxx stoupla xxx teplotu xxxxx xxxxxxxxx o 0,0005 °X. Xxxxxxxxx tolerance xxxxxx xxxx xxx ± 5 %.
Xxxx xx xxxxx v xxxxxxxxx x pracovní xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxxxx na xxxxxx x v xxxx, xxxxx je 44,6 ± 0,1 xx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxxxxx xx straně 15). Xx třeba xxxxx xxxxxxxxxxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx této polohy.
Poznámka:
β xxxxxxxx xxxxxxxx vlastnosti xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx
− xX / dT × 1 / X = β / X2
xxx:
X xx xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx
X xx xxxxx x ohmech xxx xxxxxxx X,
− dR / dT × 1 / X xxxxxxxx xxxxxxxxxx
β xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx hodnota xxxxx xxx 3000.
4.1.3 Xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
4.1.3.1 Princip xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx pracuje xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx. Plató xx část xxxxxx, xxx teplota xxxxxxx xxxxxxxxxx x přesností xx ± 0,002 xX po xxxx xxxxxxx 20 sekund.
4.1.3.2 Xxxxx obsluha
Odpor termistoru xx vyrovnává Wheatstoneovým xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nejlepších xxxxxxxxxxxx xxxxxx, jejichž xxxxxxxxx xxxxxxxxx je ± 10 % x xxxxxxx teplotní xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx 2×10−5°X.
Xxxxxxxx (vyrovnávací) xxxxx xx nesmí xxxxxxxx od linearity x xxxxx rozsahu x více xxx x 0,3 % xxx maximální xxxxxxx.
Xxx xxxxx kalibrace xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx stupnice xx xxxxxxxxx xxxxx po xxxxxxxxx 0,001 °X.
4.1.3.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx zařízení xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx 0,01 °X x xxxxxxx xx 0 °X xx –1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx příslušného obvodu xxxx xxx xxxxxx, xxx odchylka xxxx xx sobě xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx teploty xxxxxx vyšší xxx 0,001 °C.
Linearita xxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x žádném xxxx xxxxxxx xx – 0,400 °X xx – 0,600 °X xxxxx xxxxx než ± 0,001 °C.
4.1.4 Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx drát x xxxxxxx 1 až 1,5 mm, xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx,.
Xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx na xxxxxxx x xxxxxxxx vertikálně xxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx xx úrovni xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Přípustná xxxxxxxxx xx xxx 1,5 mm xxx xx xxx touto xxxxxxx.
Xxxxxxxx vibruje xxxxx x xxxxxxxxxxx rozkmitem xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx ± 1,5 xx), xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx testovacího xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx míchání se xxxxxxxx nesmí v xxxxxx xxxxxxxx dotknout xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx.
4.1.5 Zařízení xx vyvolání mrznutí
Může xx xxx jakékoli xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx mrznutí xxxxxx, aby xxxxxxx xxxxxx testovacího xxxxxx xxxxxxx x bodu xxxxxxx. X tomu xxxxx lze xxxxxx xxxxxxxx; jedním xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx xxx xxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx stěny xxxxxxxx xx vzorky.
4.1.6 Xxxxxxxx na xxxxxx
Xxxxxxxx xx vzorky (viz xxxxxxx 1) xxxx xxxxxxxx x 50,8 ± 0,1 mm xxxxxx; xxxxxx xxxxxx xx 16,0 ± 0,1 xx x xxxxxxx průměr xx 13,5 ± 0,1 xx. Xxxxxxxx skla xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxx xxx 0,1 xx.
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx vzdálenou xx xxxxxxx okraje 29,8 xx (21 mm xxx xxxx xxxxxxxx), xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx.
4.1.7 Xxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ± 1 % xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx x ± 6 %.
4.2 Xxxxxxxxxx váhy
4.3 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 1000 ml, xxxxx A.
4.4 Xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx, nastavitelná xx 130 ± 1 °X
xxxx
Xxxxxxxxxx xxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 300 ± 25 °X.
4.5 Xxxxxxxxx
5. Xxxxxxx
5.1 Xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx na 20 ± 2 °X, ve zkumavce xxxxxxxxxxx xxxx uhličitý.
5.2 Xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx x.x., xxxxx mletý, xxxxxx 5 hodin xxx xxxxxxx 300 ± 25 °X x elektrické xxxx xxxx xxxxxxx 24 xxxxx při teplotě 130 ± 1 °X v xxxxxxx x zchlazený na xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx exsikátoru.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků
Navážit odpovídající xxxxxxxx (viz xxxxxxx 1) xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5.2) xx xxxxxxx. Xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxx (5.1), xxxxxxxxxxxxx xxxxxx roztok xx xxxxxxx baňky x xxxxxx 1000 xx x doplnit xx značku xxxxx x teplotě 20 ± 2 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxx xxx 5 °C v xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x maximálním xxxxxx 250 xx.
Xxx xxxxxxx roztoků xxxxxxxx xxxxxxx xxx 20 °X
|
x NaCl/l |
°C |
|
6,859 |
-0,408 |
|
7,818 |
-0,464 |
|
8,149 |
-0,483 |
|
8,314 |
-0,492 |
|
8,480 |
-0,502 |
|
8,646 |
-0,512 |
|
8,811 |
-0,521 |
|
8,977 |
-0,531 |
|
9,143 |
-0,541 |
|
10,155 |
-0,600 |
Před xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx promíchá xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx otočením xxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx tak xxxxxx, xxx se xx xxxxxxx přimíchal xxxxxx.
Xxxxxx standardního xxxxxxx xx x láhve xxxxxx xx xxxxx x čisté xxxxxxx. Xxxxx nepoužívat pipety.
Nepoužívat xxxxxxx x xxxxx, xxxxx xxxx ze xxx čtvrtin prázdné, x nepoužívat xxxxxxx xxxxxx xxxx měsíců, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxx thiomersalu 10 g/l).
6. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx kryoskopu
Kryoskop xxxx xxx xxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxx nelišila o xxxx xxx 1 °X xx xxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx teplotám xxxxxx xxx 26–27 °X.
Xxxxxxx xx, xx xxxxxxxx funguje xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xx xxx xxxxxx xxxxxxx 12 hodin xxxx xxxxxxxxx. Zkontrolovat xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx chladicích xxxxxxx.
Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxx xxxxxxx výše), xxxxxxx xxx xxxxxxx xx xxxxx nad xxxx těsně xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x testování. Xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxx než – 0,100 °C.
(U xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx dostupných xxxxxxxxx xx příslušný xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx tak, xx xx xxxxxx xx dané hodnotě xxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxxxxx výběr xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, který xx xxxxx xxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxx musí xxxx xxxxxxx uvést).
Pomocí pipety xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx jednoho xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx na xxxxxx, xxxx měřit xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx vyrobeny a xxxxxxxx xxxx zkumavky xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx (xxxxxx druh xxxx, xxxxx x xxxxxxxxxx demineralizovanou xxxxx). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx roven xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx takovým xxxxxxxx, dokud po xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx, xxxx xx byla xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx tedy připraven x xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx xx xxxx xxxxx jakákoli úprava.
7. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku
7.1 Xxxxx to xx xxxxxxxx xxxxxxxxx vzorky xxx xxxxxxx xxxx 0 °C a 5 °X.
7.2 Xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx cizí xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxx ve xxxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx reagovat x mlékem x xxxx xxx účinný xx xxxxxxxxxxx teploty.
7.3 Xxxxx může xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0 x 5 °X) xxxx xx xxxxx xx ohřát xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx bezprostředně xxxx zahájením testování. Xx xxxx xxxxxxxx xxxx xx xx, xxx standardní xxxxxxx x xxxxxx mléka xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx teplotu.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx mléka, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx přesahuje 0,18 x kyseliny mléčné xx 100 xx xxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx.
7.5 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 20 xxxxx xxxx xxxxxxxxxx v otevřené xxxxxx.
8. Xxxxxx
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx jsou x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx zda xx xxxxx termistoru xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx kryoskop x xxxxxxx xx, zda xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx 12 xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx míchačky x xxxxxxxx rozkmit xxxx xxxxxxx.
8.2 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxx x bodem xxxxxxx – 0,512 °X), xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x více xxx 0,001 °C. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxx mrznutí xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxx 0,002 °X, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, jak xx xxxxxxx x xxxx 6.
Xxxxx xx xxxxxxxx používá xxxxxxxxxxx, xxxxxxx kontrola kalibrace xx provádí xxxxxxx xxxxxx xx hodinu, xxxxxxx xx zohlední xxxxxx xxxxxxx.
8.3 Stanovení xxxx xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx vzorkem xxxxx xxxxxxxx protřepáním x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx prudce, xxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx vzduch.
Pomocí xxxxxx přidat 2,5 ± 0,1 xx xxxxx do xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx xx, xx xxxx xxxxx x míchačka xxxxx x suché, xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx, čistou x chlupy nepouštějící xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pokynů xxxxxxx. Mléko se xxxxxxx x mrznutí xx vyvolá při xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xx 0,1 °C.
(U některých xxxxxxxxxxxxx přístrojů xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; u xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xx se xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx, xxxx se xxxxxxx xxxx xxxxx galvanometru xxxxx x příslušnou xxxxxxx.)
Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx, xxx je xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx rozmezí, xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xx x xxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxx tento xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx před xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx se xxxxxxx na 45 °X x 5 xxxxx se xxxxxxx xx xxxx teplotě, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxx xx testovací xxxxxxx x ihned xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx začátku xxxxxxx rychle xxxxxxx xx na xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx po xxxxxxx xxxx konstantní, x xxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx teplotě dosažené xxxxx této xxxx x xxxx xxxxxxx xx xxxxx zaznamenat.
Poznámka:
Doba, xx xxxxxx teplota xxxxxxx xxxxxxxxxx, x xxxxxx xxxxxxxx mezi xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxxxxx xx xxxxxx a xxx xxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxx xxx pro xxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xx xxxxxx uspokojivě xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxx x otřít sondu x xxxxxxxx směrem xxxxxxx nahoru xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx druhé xxxxxxxxx x jiného vzorku xxxxx.
Xxxxx je xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx body xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (0,004 °X), xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx u xxxxxx xxxxxx. Xxxxx jsou xxxxxxx xxxx stanovení xxxxxx xx 0,004 °X, xxxxxx xx x použijí xx xxx výpočet konečného xxxxxxxx.
8.4 Xxxxxxxx sondy
Po xxxxxxx přístroje xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxx xxx vzorky a xxxxxx xxxxxxxx teplotu, xxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
(X některých xxxx kryoskopu xx xxxx xxxxx; x xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xx sonda xxxx xxxxxxxx měření xxxxx xxxxxxxxx, například xxxxxxxxxx několika slepých xxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxxx shodné údaje.)
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Výpočet
Pokud xx po xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx kalibrace xxxxxxxxx xxxxxxxxx, za xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxx dvou xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx, xx třeba xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx tento xxxxxxx:
Xxx mrznutí (°X)
|
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx |
Xxxxxx |
|
|
-0,544 |
-0,545 |
-0,544 |
|
-0,545 |
-0,546 |
-0,546 |
9.2 Xxxxxxxxxxxx
9.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x): 0,004 °X
9.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (R): 0,006 °X
Xxxxxxx 1
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1 (xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx)
XX. STANOVENÍ XXXXXXXX XXXXXXXXX
1. Předmět x xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení aktivity xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxxx
2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx míra xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x μx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx mléka xx xxxxxxxxx podmínek.
2.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx 4 xx xxxxxx na 1 ml.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx fenylfosfátu dvojsodného. Xxxxxxxx fenol reaguje x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxx), který xx xxxxxxxxxxxxxx měří xxx 610 xx. Xxxx xx provádí xxxxxxxxx xx xxxxxxx, jehož xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxx xx xxxx 50,0 x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) [Xx(XX)2.8X2X] x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.1.2 Xxxxxxxxx xx xxxx 22,0 g xxxxxxxx xxxxxx (H3BO3) x doplnit na 1000 xx.
4.1.3 Xxxxxx 500 xx xxxxxxx xxxxxxx na 50 °X, xxx roztoky xxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxx xx 20 °C, v xxxxxxx nutnosti xxxxxxx xxxxxxx xX xx 10,6 ± 0,1 xxxxxxxx roztoku 4.1.1 xxxx 4.1.2. Xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx roztok xx xxxxxxxxxxxx uzavřené xxxxxx.
4.1.4 Xxxx použitím xxxxxx xxxxxx stejným objemem xxxx.
4.2 Xxxxxxx roztok xxx vyvolání xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxx 6,0 x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XxXX2) xxxx 12,6 x XxXX2.4X2X x 20,0 x xxxxxxxx xxxxxxx (XxXx) x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.3 Tlumivý roztok xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxx 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2) xxxxx na 100 xx.
4.4 Roztok substrátu
Rozpustit 0,1 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xx 100 xx tlumivého xxxxxxx (4.1.3) xxxx 0,5 x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx 4,5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxx zabarvení (4.2), xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx BQC (4.6) x xxxxxx xxxx 30 minut při xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 2,5 xx x-xxxxxxxx a xxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx-1 neoddělí. Xxxxxxx x odstranit xxxxxxx-1. V xxxxxxx xxxxxxxx xx extrakce xxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx; před xxxxxxxx xxxxxxx zabarvení x xxxxxxx novou xxxxxxxx. Tlumivý xxxxxxxx xxxxxxxxx bezprostředně před xxxxxxxx, a xx xxxxxxxx 1 ml xxxxxx roztoku ve 100 ml xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.3).
4.5 Xxxxxxxxx xxxxx-xxx
Xxxxxxxxx xx vodě 3,0 g xxxxxx xxxxxxxxxxx (ZnSO4 · 7X2X) x 0,6 x xxxxxx měďnatého (XxXX4 · 5X2X) x doplnit xx 100 ml.
4.6 Xxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx XXX)
Xxxxxxxxx x 10 xx 96 % (X/X) xxxxxxxx 40 ± 1 xx 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXX) (X6X2Xx2XxXX6).
Xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxx je xxxxxx xxx xxxxx xxxxx.
4.7 Xxxxxx xxxxxx měďnatého (XX)
Xxxxxxxxx xx xxxx 0,05 x xxxxxx xxxxxxxxx (XxXX4.5X2X) a xxxxxxx xx 100 xx.
4.8 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx
4.8.1 Xxxxxxx 200 ± 2 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxx baňky o xxxxxx 100 xx, xxxxxx vodu, promíchat x xxxxxxx xx 100 xx. Xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
4.8.2 Xxxxxx xxxxx 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxx, doplnit xx 100 ml x xxxxxxxxx. 1 xx obsahuje 200 μx fenolu.
5. Přístroje x pomůcky xx xxxx
Xxxxxxxx:
x) Veškeré xxxxxxx xx skla, xxxxx x zátky x xxxxxxxxx xxx odběr xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx.
x) Xxxxxxx typy xxxxxxxxxx xxxxx mohou způsobit xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
5.1 Xxxxxxxxxx xxxx
5.2 Xxxxx xxxxx nastavitelná xx 37 ± 1 °C.
5.3 Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx odečty xx vlnové xxxxx 610 xx.
5.4 Xxxxxxxx, 16 xxxx 18 × 150 xx, xxxxxxx odstupňované xx 5 xx x 10 xx.
5.5 Xxxxxx
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx. o xxxxxxx 5 xx.
5.7 Xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx nejméně 9 xx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
5.8 Xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků.
6. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxx stanovení xxxxxxxx xxxxx přímého xxxxxxxxxx xxxxxx.
x) Xxxxx slin xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx pozitivní xxxxxxxx x xx xxxxx se jim xxxxxxx. Je xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 Testování xxxxxxx ihned po xxxxxx xxxxxx. X xxxxxxx případě xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xx déle xxx dva dny.
6.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx pipety xxxxxx 1 ml xxxxxx xx xxxxx xx dvou xxxxxxxx (5.4), xxxxx zkumavku xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx.
6.3 Xxxxxxxxx
6.3.1 Slepý xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xx vroucí xxxx; xxxxxxxx x kádinku x xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx folií, xxx se prohřála xxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.2 Xx zbytek xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx způsobem. Xxxxxx 10 xx roztoku xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxxxxx.
6.3.3 Xxxxxx ihned xxxxxxxxx 60 minut xx xxxxx xxxxx (5.2) x xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxx) xxxxxxxxx xxxxxx obsah.
6.3.4 Stejně xxxx x xxxx 6.3.1 zahřívat xxx xxxxxx xx vroucí xxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.5 Xx xxxxx zkumavky xxxxxx 1 xx xxxxxxxxx xxxxx-xxx (4.5) x xxxxx promíchat.
6.3.6 Xxxxxxxxxxxx xxxx suchý xxxxxxxxx xxxxx, vylít xxxxx dva xxxxxxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx filtrát xxxxxxxx xxxx; xxxxxxxxxx 5 xx ve xxxxxxxx.
6.3.7 Xxxxxx 5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2).
6.3.8 Přidat 0,1 xx roztoku XXX (4,6), xxxxxxxxx a 30 xxxxx nechat xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.9 X xxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx při xxxxxx délce 610 xx.
6.3.10 Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x bodě 6.3.9 xxxxxxxxx absorbanci xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 20 μg xxxxxx xx xxxxxxxx podle xxxx 6.4.4, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Připravit xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx opatrně xxxxx xx varu, xxx xx inaktivovala xxxxxxxxx.
6.4 Sestrojení xxxxxxxxxx xxxxxx
6.4.1 Xx základě xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (4.8.2) připravit vyhovující xxxx xxxxxxxxx standardních xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0 (xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx), 2, 5, 10 x 20 μx xxxxxx xx xxxxxxxx. Xx xxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx pipety 1 xx vody x 1 ml xxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxx.
6.4.2 Do xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.7), 5 xx xxxxxxxxx roztoku xxx xxxxxxx vzniklého xxxxxxxxx (4.3), 3 xx xxxx x 0,1 xx xxxxxxx XXX (4.6); xxxxxxxxx.
6.4.3 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 30 minut xxx xxxxxxxx teplotě.
6.4.4 V xxxxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx délce 610 xx.
6.4.5 Xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (6.4.4) xxxxxxxxx pro každé xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (6.4.1) vypočítat xxxxxxxx xxxxxx metodou nejmenších xxxxxxx.
7. Xxxxxxxxx výsledků
7.1 Xxxxxxx x xxxxxx
7.1.1 Xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (6.3.9) xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx pomocí xxxxxxxx přímky (6.4.5).
7.1.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx v μg xxxxxx na mililitr xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx vzorce:
Aktivita xxxxxxxxx = 2,4 × X × X
xxx
X xx xxxxxxxx xxxxxx x μx získané xxxxx bodu 7.1.1;
X xx faktor zředění xxx xxxxxxx provedené xxxxx xxxx 6.3.10 (x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx X = 1).
2,4 je faktor xxxxxxx (5/12 x 1 ml testovacího xxxxxx) – xxx 6.2 xx xxxxxxxxxx x 6.3.2, 6.3.5 x 6.3.6.
7.2 Xxxxxxxxxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) : 2 μg xxxxxx/xx.
7.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (R) : 3 (xxxxxxxxx) μx xxxxxx/xx.
7.2.3 Xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx podle 6.3.10, xxxxxx uvedené x 7.2.1 x 7.2.2 xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx vzorku.
III. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx nepřítomnosti xxxxxx peroxidázy x xxxxx, který xxxxxx xx kontrole xxxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx reakce xx xxxxxxxxxx:
Xxxxx xx xxxxx xxxxx pasterováno, xx 30 xxxxxx po xxxxxxxxxx xx objeví xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx:
Xx 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Uvolněný xxxxxxxx xxxxxx oxiduje xxxxxxxx parafenylendiamin na xxxxxxxxx xxxxxxxxx (Štorchův xxxx). Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx přímo úměrná xxxxxxxxxxx enzymu.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxx x teplé xxxx (50 °X) 2 x 1,4 fenylendiaminu (X6X8X2) x xxxxxxx xx 100 xx. Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxx, x xxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xx xxxxxxxxxx roztok 1,4 xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx je xxxxxx odstranit.
4.2 Xxxxxx xxxxxxxx vodíku
Vodou xxxxxx 9 xx 30 % peroxidu xxxxxx x xxxxxxx na 100 ml. Xxx xxxxxxxxxxx přidat 1 xx xxxxxxxxxxxxx kyseliny xxxxxx na xxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx vodíku xx xxxxx xxx xxxxx měsíc, xxxxx xx xxxxxxxxx v xxxxxx x temnu, x láhvi xx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x organickými xxxxxxx.
5. Xxxxxx
5.1 Xxx 5 xx xxxxxx xxxxx xx čisté zkumavky x vhodným xxxxxx.
5.2 Xxxxxx 5 ml xxxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx (4.1).
5.3 Xxxxxx 2 xxxxx xxxxxxx peroxidu xxxxxx (4.2).
5.4 30 xxxxxx po xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx modré xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx 30 xxxxxx xx xxxxxxx činidel, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXX 30 °X
1. Xxxxxxx x oblast použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx kolonií xxx 30 °X. Postup xx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxx, UHT xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx 15 xxx xxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X.
2. Definice
"Mikroorganismy" xx rozumějí xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx po xxxxxxx xxxxxxxx za popsaných xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx mléka x xxxxxxxxxxx xxxxxx x Petriho xxxxxxx x nechat xxxxxxxxx 72 hodin při 30 °X. Spočítat xxxxxxx x vypočítat xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx 0,1 xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx UHT xxxxx.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx xx skla
Obvyklé xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, zejména:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx sušárna, xxxxxxxxxxxx na 170 xx 175 °C.
4.1.2 Xxxxxxxx, nastavitelný na 121 ± 1 °X.
4.1.3 Inkubátor, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °X.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx xxx kompenzaci xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Zvětšovací xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Zvětšovací xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Xxxxxxxx schopná xxxxxxx 1 xx xxxxxx mléka xxxx xxxxxxxxxxx ředění x 9 ml xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx principu excentrické xxxxxx obsahu xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx ze skla
4.2.1 Xxxxxxxx x vhodnými xxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx, s dostatečným xxxxxxxxx k xxxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx 20 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Pipety (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x nominálním xxxxxx 1 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx misky x xxxxxx, bezbarvého skla xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, dno xxxxx xx vnitřní xxxxxx xxx 90 až 100 mm. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx být xxxxxxx 10 xx. Xxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx počítání xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx:
Xxxxxxx xx skla xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx jednu xxxxxx xxx xxxxxxx 170–175 °X;
x) x xxxxxxxxx (4.1.2), nejméně 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °C.
Při xxxxxxx xxxxxxxxx xx nutné xxxx xx xx, xxx bylo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx xx materiál xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx nádoby xx xxxxxx být napevno xxxxxxxx, uzávěry nebo xxxxx by měly xxx xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx sterilizované x xxxxxxxxxxx by xx xxxx xxxxxxx odvětráním xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx v horkovzdušné xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx – xxxx xx xxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 g |
|
Trypton |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx (+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10–15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx žádné xxxxxxxxx xxxxx. Toto se xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X tomto xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Ohřev xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx x xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx, dokud se xxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx v xxxx xxx 30 xxxxx.
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, přefiltrovat xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); pokud xx xx nezbytné, xxxxxxx xX, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx byla xxxx xxxxxxx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °C.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx médium (5.1) x xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 xx xx xxxxx nebo xx 12 xx 15 xx do xxxxxxxx (4.2.2). Baňky x xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x autoklávu (4.1.2) při 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX kultivačního xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, skladuje xx x xxxxx xxx teplotě xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx po xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx dehydrované xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx médium (5.1) se xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kultivačního média. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xX xx 6,9 ± 0,1 při 25 °X metodou podle xxxx 5.1, xxxx xxxxxxxx, sterilizovat x xxxxxxxxx kultivační xxxxxx xxxxx xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Roztok pepton/sůl
Složení:
|
Pepton |
1,0 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx složky xx xxxx, xxxxx xx je xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX pH-metrem (4.1.4); xxxxx to xx nezbytné upravit xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 mol/l) hydroxidu xxxxxxx xxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
6.2 Rozdělení, xxxxxxxxxxx x skladování ředidla
Rozdělit xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx po sterilizaci xxxxx zkumavka xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx xxxxxxx. Zkumavky xxxxxxx.
15 xxxxx sterilizovat x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxx.
Xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 a 5 °X, avšak ne xxxx xxx 1 xxxxx po xxxx xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) xx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx tablet xxxx prášku. Dodržet xxxxxx výrobce. Xxxxxxx xX xxxxxxx xxxxx xxxx 6.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx podle xxxx 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxxx kultivačního média
Před xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx rychle xxxxxxxxx xxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xx xxxxx lázni (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx mléka
Vzorek xxxxx řádně promíchat, xxx xxxx mikroorganismy xx nejrovnoměrněji xxxxxxxxx, x to 25 xxxxxxxx xxxxxxxxx nádoby xx xxxxxxx. Je xxxxx xxxxxxxx tvorbě xxxx nebo pěnu xxxxxx rozptýlit. Doba xxxx mícháním x xxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku xx neměla xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (10-1) (xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx pasterovaného mléka xx 9 xx xxxxxxx (6.1), xxxxxxx xxxxxx nesmí xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx přibližně xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx se xxx xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx dalších desetinných xxxxxx (xxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) přenést 1 xx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.3) do 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx pokynů v xxxx 7.3.
Získá xx xxx xxxxxx 10−2.
X xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx opakuje xxx xxxxxx, dokud xxxxx očekávat xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Petriho xxxxx
7.5.1 Xxxxxx xxxxx: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) přenést xx misky (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx vhodného xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx být xxxxxxxxx nejméně xxx xxxxxx. Pro každé xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx vhodnou misku.
7.5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Musí být xxxxxxxxx nejméně xxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) připravit xxxxx xxxxxxx misku.
7.5.3 XXX mléko x xxxxxxxxxxxxx mléko (xxxxxxxxxxx xx 15 xxxxx xxxxxxxx při 30 °X – xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx X xxxxxxxx XXX xxx 5):
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx xx misky (4.2.4) 1 ml xxxxxx xxxxx (7.2). Xxxxxxxxx xxx misky.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx asi 15 xx 18 xx xxxxxxxxxxxx média (7.1).
Ihned xxxxxxxxx xxxxxx Petriho xxxxx, xxx xx xxxxxxxx došlo k xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kolonií.
Doba xxxx koncem přípravy xxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx, podle druhu xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 minut.
Nechat xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, dokud xxxxxx xxxxxxxx.
7.7 Inkubace Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx misky do xxxxxxxxxx (4.1.3). Misky xxxxxxxxx obrácené dnem xxxxxx. Xxxxxxxxx na xxxx xxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx nesmějí xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxx v xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx inkubátoru.
Inkubovat 72 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx kolonií
Počítat kolonie x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 300 kolonií.
Misky vyšetřit xxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx usnadnění xxxxxxxx xxx použít zvětšovací xxxx (4.1.6) a/nebo xxxxxxxxxx počítadlo (4.1.8). Xx xxxxx xxxx xx to, xxx xxxxxxx x záměně xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx koloniemi. V xxxxxxx pochybností xxxxxxx xxxxxxx průzkum xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx tvořící povlak xx xxxxxxxx za xxxxx kolonii. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx povlak xxxxxxxxx xxxx než xxxxxxxx xxxxx, spočítat xxxxxxx x nepostižené xxxxx misky x xxxxxxxxx odpovídající xxxxx xxx xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pokrývají xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx vyřadit.
8. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Syrové x xxxxxxxxxxx xxxxx
8.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx misek xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.1.2 Vypočítat xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 ml xxxxxxxx xxxx pasterovaného mléka xxxxx xxxxxx xxxxxx:
∑X / (x1 + 0,1x2) x
xxx:
∑X ΣX xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 8.1.1.
(x1 + 0,1 x2)x xx objem xxxxxxxxxxxx vzorku, kde:
n1 xx xxxxx misek xxx xxxxxx ředěním
n2 xx počet xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx
x xx xxxxxx xxxxxxx, xx základě xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxx platné xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx pět, xxxxxxxxxxx xxx, aby xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxx):
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 a 28 kolonií
Počet/ml: = 278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2
= 6290,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.1.3 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 10, xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx "xxxxx xxx 10 x x", přičemž "d" xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx faktoru xxxxxxx.
8.1.4 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx než 300 a xxxxxxxx xx možné, xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx jako "Odhadovaný xxxxx mikroorganismů xx xx".
8.2 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx mléko
Počty xxxxx než 10 xxxxxxx xx 0,1 xx xx xxxxxxxx xx nevyhovující xxxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/EHS.
9. Spolehlivost
Výsledky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kruhových xxxxx ještě nejsou x dispozici.
V. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX PŘI 21 °C
1. Předmět x oblast použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx při 21 °X x xxxxxxxxxxxx xxxxx, které xxxx xxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxx 6 xX s xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx mléka psychotropními xxxxxxxxxxxxxx, které xx xxx množit xx x xxxxx xxx 6 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx rozumějí xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx počitatelné xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Princip
Inkubovat xxxxxxxxxxx xxxxx pět xxx xxx 6 °X. Xxxxxxx xxxxxxxxx objem xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx médiem v Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx 25 xxxxx xxx 21 °X. Xxxxxxxx kolonie x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx pasterovaného xxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx laboratorní xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Přístroje
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, nastavitelná xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °C.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx:
x) 6 ± 0,2 °C
b) 21 ± 1 °X xx xxxxx bodech xxxxxx.
4.1.4 pH-metr xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 jednotky xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx na 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxxxx sklo, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx počítadlo
4.1.9 Xxxxxxxx xxxxxxx rozmíchat 1 xx vzorku xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x 9 xx xxxxxxxx roztoku x xxxxxxxxx xx principu xxxxxxxxxxx xxxxxx obsahu xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx, s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxx ředění xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x objemu 150 xx 250 xx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx 20 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx xxxxx), skleněné xxxx xx sterilního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, o xxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx x průměru 1,75 až 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx, bezbarvého xxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxx má xxxxxxx xxxxxx xxx 90 až 100 x. Vnitřní xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx nejméně 10 xx. Xxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx by bránily xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Sterilizace xxxxxxx xx xxxx:
Xxxxxxx xx skla xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx jednu xxxxxx xxx teplotě 170–175 °X;
x) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx při teplotě 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx xx materiál xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xx neměly xxx xxxxxxx uzavřeny, xxxxxxx nebo xxxxx xx xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx ze skla xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xx se xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx sterilizovány x horkovzdušné xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx – xxxx xx xxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx(+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10-15 x xxxxx želírovacích xxxxxxxxxx agaru |
|
Voda |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx mléko xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxx srovnávacími xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxx mlékem, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X xxxxx xxxxxx suspendovat x xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx usnadňuje xxxxxx. Xxxx přidat xxxx x xxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx x xxxx asi 30 minut.
Pokud je xx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xX, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) hydroxidu xxxxxxx xxxx kyseliny chlorovodíkové, xxx po sterilizaci xxxx xxxx hodnota 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx kultivačního xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx (5.1) v xxxxxxxxxx od 100 xx 150 ml xx xxxxx nebo xx 12 xx 15 ml xx xxxxxxxx (4.2.2). Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx (4.1.2) při 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX kultivačního xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx se x xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 a 5 °X, xxxxx xx déle než 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Komerční xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx médium
Kultivační xxxxxx (5.1) se xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx dehydrovaného xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, ale přidat xxxxxx odstředěné xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx produktu.
Upravit xX xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X postupem xxxxx xxxx 5.1, xxxx rozdělit, sterilizovat x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx bodu. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Xxxxxx xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxxx sodný (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 ml |
Příprava:
Rozpustit xxxxxx ve vodě, xxxxx xx je xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xX-xxxxxx (4.1.4); xxxxx xx je nezbytné xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 mol/l) xxxxxxxxx sodného xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx sterilaci byla xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 při 25 °X.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x skladování xxxxxxx
Xxxxxxxx ředidlo (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx xx xxxxxxxxx každá xxxxxxxx xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx ředidla. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X. Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx se x xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx déle xxx 1 xxxxx xx jeho xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx dehydrovaná ředidla
Ředidlo (6.1) xx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx tablet xxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx pH xxxxxxxx xxxxx bodu 6.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx podle xxxx 6.2.
7. Postup
7.1 Rozpuštění xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx [4.1.3 x)] xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx xx xxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx nejméně 100 xx po xxxx 120 ± 2 xxxxx xxx 6 ± 0,5 °X.
7.2.2 Xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx řádně xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx nejrovnoměrněji xxxxxxxxx, a xx 25 rychlými xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxx nechat rozptýlit. Xxxx mezi xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx tři xxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (10−1)
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx pasterovaného xxxxx xx 9 xx xxxxxxx (6.1), xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx desetinných xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) podle xxxxxx x xxxx 7.3.
Xxxxx se tak xxxxxx 10−2.
S xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx tento xxxxxx opakuje xxx xxxxxx, dokud xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Naočkování Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx do xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ředění. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Do xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx nalít xxx 15 xx 18 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Ihned promíchat xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxx po xxxxxxxx xxxxx x rovnoměrnému xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx mezi xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x smícháním, xxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx nesmí xxxxxxxxx 15 minut.
Nechat stát xx xxxxxxxxxx, chladném x čistém xxxxxxx, xxxxx médium neztuhne.
7.7 Xxxxxxxx Xxxxxxx misek
Přenést xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx dnem xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxx než šest xxxxx. Sloupky misek xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, ani xxx x xxxxxxxx se xxxxxxx a vrchní xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 25 xxxxx při 21 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx kolonií
Počítat kolonie x Xxxxxxx miskách xxxxxxxxxxxxxx více xxx 300 xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.8). Xx nutné xxxx xx xx, xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx pochybností provést xxxxxxx průzkum xxxxxx xxxxxxxxxxxx skla x xxxxxx zvětšením (4.1.7), x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx cizích xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx povlak xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx povlak xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx tvořící xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx čtvrtinu xxxxxx xxxxx, xxxxx vyřadit.
8. Xxxxxxx a vyjádření xxxxxxxx
8.1 Použít xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 kolonií (xxx 8.1.3 a 8.1.4).
8.2 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx syrového nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
∑X / (x1 + 0,1x2) x
xxx:
ΣX je xxxxxxx xxxxx xxxxxxx podle xxxx 8.1,
(n1 + 0,1 n2)d xx xxxxx xxxxxxxxxxxx vzorku, xxx:
x1 xx xxxxx xxxxx při prvním xxxxxxx
x2 je xxxxx xxxxx xxx druhém xxxxxx
x xx xxxxxx xxxxxxx, xx základě xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx dvě xxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx xxx, xxx sousední xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxx:
Xxxxxx 10−2: 278 a 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 x 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; =278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2=
=629 / 0,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.3 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 10, xxxxx, xx počet xxxxxxxxxxxxxx na xxxxxxxx xx "xxxxx než 10 × x", xxxxxxx "x" xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx zředění.
8.4 Xxxxx xxxx xxxxxxx počty xxxxx xxx 300 x xxxxxxxx xx xxxxx, xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx "Xxxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxxxx na xx".
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx mezinárodně uznaných xxxxxxxxx testů xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX – XXXXXXXX XXXXXXX XXX 30 °X
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X.
2. Definice
"Koliformními bakteriemi" xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx 30 °X vytvářejí xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx jsou xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx zkvašovat x xxxxxxx xxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx v Xxxxxxx xxxxxxx x 24 xxxxx nechat xxxxxxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x, xxxxx to xx nutné, potvrdit xxxxxxxx necharakteristických xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Poté xxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 xx pasterovaného mléka.
4. Xxxxxxxxx x pomůcky xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx sušárna, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °C.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °C.
4.1.3 Xxxxxxxxx, schopný udržovat xxxxxxx 30 ± 1 °C.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx pH.
4.1.5 Vodní xxxxx, nastavitelná xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Očkovací xxxxx xx slitiny xxxxxxx-xxxxxxx xxxx nikl-chróm.
4.2 Pomůcky xx skla
4.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx uzávěry x xxxxxxx 20 xx, aby mohly xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kultivační xxxxxx (5.2) a Xxxxxxxxx trubičky xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2.2 Xxxxx o xxxxxx 150 xx 250 ml xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média (5.1).
4.2.3 Xxxxxx (utěsněné xxxxx), xxxxxxxx nebo xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx materiálu, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x nominálním xxxxxx 1 – 10 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx o průměru 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x čirého, xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx misek xx xxxxxxx xxxxxx xxx 90 až 100 x. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx nejméně 10 xx. Dno xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx teplotě 170 – 175 °C;
b) x autoklávu (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx autoklávu je xxxxx xxxx xx xx, aby xxxx xxxxxxxxx dostatečné xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxx, xxxx nádoby xx xxxxxx být xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx by xxxx xxx volné.
Pomůcky xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx páry.
Pipety xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxx x krystalovou xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx x laktózou (XXXX xxxx). Sušené xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
7 x |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
3 x |
|
Xxxxxxx (C12H22O11.H2O) |
10 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
5 x |
|
Xxxxxxx xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxxxx červeň |
0,03 x |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxx |
0,002 x |
|
Xxxx |
10 xx 15 g xxxxx xxxxxxxxxxxx vlastností xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx složky xx xxxx a nechat xxxx několik minut. Xxxx důkladně promíchat.
Zkontrolovat xX xxxxxx pH-metru (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxx xX roztokem (nejméně 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx nebo kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, xxx po xxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 při 25 °X.
Xxxxx xxxxxx xx xxxx xx občasného xxxxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx po xxxxxxxxxx 100 xx 150 xx do xxxxxxxxxx xxxxx (4.2.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx zchladit xx xxxxx lázni (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
X xxxx xxxxxxx zkontrolovat xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média (6.4).
Použít xxxxxxxxxx xxxxxx do xxx hodin po xxxx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxx xxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
10 g |
|
Laktóza (X12X22X11.X2X) |
10 x |
|
Xxxxxxxxxxx hovězí žluč |
20 x |
|
Xxxxxxxxxxx zeleň |
0,0133 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx x xxxxx xx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx, upravit xX xxxxxxxx (nejméně 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx sodného xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,2 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx xxxxxx po 10 xx do xxxxxxxx (4.2.1) xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) při 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx nesmějí xx sterilizaci xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx média.
Pokud xx xxxxxxxxxx médium xxxxxxxxx xxxxx, skladuje xx x temnu xxx xxxxxxx mezi 1 x 5 °X, xxxxx ne xxxx xxx 1 měsíc xx xxxx přípravě.
5.3 Xxxxxxxx dehydrované xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx x komerčního xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX, rozdělit, xxxxxxxxxxxx x skladovat kultivační xxxxxx xxxxx xxxx 5.1 x 5.2.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxxxx médium
Použít xxxxxx (VRBL xxxx) xxxxxxx x xxxx 5.1.
6.2 Xxxxxxxx vzorku xxxxx
Xxxxxx xxxxx řádně xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x to 25 rychlými xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxx zabránit xxxxxx xxxx nebo xxxx nechat xxxxxxxxx. Xxxx xxxx mícháním x odběrem xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx minuty.
6.3 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) 1 ml vzorku xxxxx xx každé xx xxx xxxxx (4.2.4) x xxx xxxxxxxxx 3 xx xxxxxx xxxxx (6.2).
6.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx naočkované misky xxxxx xxx 12 xx XXXX agaru (6.1)
Xxxxx po nalití xxxxx xxxxxxxxx rotací Xxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx došlo x xxxxxxxxxxxx rozložení xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx vzorku xxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx nenaočkovanou misku x 12 xx xxxxx XXXX xxxxx, xxxxx xxx použit xxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x čistém xxxxxxx, dokud xxxxxx xxxxxxxx.
Xx úplném xxxxxxxx xxxxx nejméně 4 xx XXXX xxxxx (6.1) na povrch xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx.
6.5 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx inkubovat xxxxxxxx xxxx nahoru. Xxxxxxxxx xx sebe xxxx než xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxx x xxxxxxxx se xxxxxxx a vrchní xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 24 ± 2 xxxxxx xxx 30 ± 1 °X.
6.6 Počítání xxxxxxx
6.6.1 Xxxxxxx kolonie x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx více xxx 150 xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx červené kolonie x xxxxxxx nejméně 0,5 mm, x xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.6.2 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (xxxx. xxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (6.7).
6.7 Konfirmační xxxx
Xxxxx xxxxx v xxxx 6.6.2 xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxx (xxxx. 3 xx 5) xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx tím, xx xx pomocí xxxxxxxx xxxxx (4.1.6), xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx zelení (5.2). Xxxxxxxxx xxxxxxxx 24 ± 2 hodin xxx 30 ± 1 °C.
Za xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx v Durhamově xxxxxxxx tvoří plyn.
7. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx maximálně 150 xxxxxxx.
7.2 Xxxxx xx provede xxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx počet xxxxxxx koliformních xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií.
7.3 Xxxxxxxxx xxxxx koliformních xxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxx xxxxxx vzorce:
ΣC / x
xxx:
ΣX xx celkový xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (7.1 x xxxxxxxxxxx xx 7.2), xxxxxxxxxxx vyšetřením xxxxxx xxxxx (6.3).
x xx xxxxxxxx vyšetřovaného xxxxxx (6.3) x xxxxxxxxxxx (3 xx).
Xxxxx se xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx než 100 xxxxxxx. Když xx xxxxxxxxxxxxxx číslice xxx, zaokrouhlit tak, xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx sudá.
Pokud xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 150 xxxxxxx, uvést výsledek xxxx "xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 xx".
8. Spolehlivost
Výsledky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx x dispozici.
VII. XXXXXXXXX XXXXXX SOMATICKÝCH BUNĚK
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx somatických buněk.
A. Xxxxxxxxxxxxx metoda
B. Fluoro-opto-elektronická xxxxxx
X. Xxxxxxxxxxxxx metoda
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx postup xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx buněk xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx kalibrace x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx X.1).
2. Xxxxxxxx
Xxx tento postup xx xxxxxxxxxxx buňkami xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx x epitelové xxxxx, xxxxxxx xxxxx xx možné xxxxxxxx xxxxxxx methylenovou modří
3. Xxxxxxx
Xxxxxx 0,01 xx xxxxx na 1 xx2 povrchu podložního xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxxxx xx daném xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx faktorem, s xxxxx xxxxxx počet xxxxx xx 1 xxxxxxxx.
4. Xxxxxxx
Xxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx čistoty x.x..
Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxx modř |
0,6 x |
|
Xxxxxxx – 99 % |
54 ml |
|
1,1,1-trichlorethan nebo xxxxxxxxxxxxxxx |
40 xx |
|
Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx |
6 xx |
Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx v xxxxx xxxxxxx x 1,1,1-trichlorethan xxxx tetrachlorethan x xxxxxx xx vodní xxxxx xx 60 xx 70 °X. Xxxxxx methylenovou xxxx, xxxxx xxxxxxxxx, 12 xx 24 xxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx xxx 4 °X x xxxxxx ledovou xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx 10 až 12 xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx roztok xx xxxxxxxxxxxx uzavřené xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx přefiltrovat.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
5.1 Xxxxxxxxx umožňující xxxxxxxx 500 × xx 1000 ×
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx umožňující dávkování xx 0,01 ml x xxxxxxxxx xxxxxxx ± 2 %.
5.3 Xxxxxxxx sklíčko s xxxxxxx 20 mm × 5 xx xxxxxxxxxx pro tenkou xxxxxx xxxx standardní xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 20 × 5 xx xxx xxxxxx vrstvu.
5.4 Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx (30 °X xx 50 °X) pro sušení xxxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5 Xxxxxxxxxx (xxx) xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx.
5.6 Vodní xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 30 až 40 °X xxx ohřívání xxxxxx mléka.
5.7 Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 0,01 xx.
6. Postup
6.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx do xxxxx xxxxx xx xxxxxx vzorku. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx překročit 6 °X. Xxxxxx nesmí xxx xxxxxxx.
6.2 Xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxx ve xxxxx xxxxx (5.6) xx 30 až 40 °X. Xxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx na xxxxxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx mikrostříkačka (5.2), xxxxxxxxx 20 °X.
6.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx sklíček
Vyčistit xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx prach, xxxxxxxx plamenem x xxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxx, xxx jsou xxxxxxxx xxxx prachem.
6.4 Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx (5.2) xxxxxxx 0,01 xx mléka xx xxxxxx připraveného, xxx xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx stříkačky, která xxxxxx xx styku x xxxxxx. Přiložit xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx (5.3) x xxxxxxx xxxxxxxxx obvod xxxxxxxxx (20 mm × 5 mm). Xxxx ji xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx vrstvu xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (5.4) xx xx úplného xxxxxxxx.
X xxxxxxx vzorku xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx dvě xxxxx xxxxxx.
6.5 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx 10 xxxxx xx barvícího xxxxxxx (4). Xxxxx x, xxxxx je xx nezbytné, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.5). Xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx, xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx zcela nesmyje. Xxxxx xxxxx x xxxxxxx xxx, xxx xxx xxxxxxx před xxxxxxx.
6.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (500 × xx 1000 ×) xxxxxx xxxxxx mikroskopického xxxx (5.7).
7. Xxxxxxxx x xxxxxxx
7.1 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx mikroskop (5.1). Xxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx pouze xxxxxxx xxxxx, x xx xxxxxx jádra, xxxxx jsou xxxxx xxxxxxxxxxxx x z xxxxx xx x xxxxxxxxxxxxxx xxxx viditelná xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxx pole xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xx pásy xxxx pole, xxxxx xxxx xxxxxxx pouze x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx vrstvy. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx částí xxxxx vrstvy. Xxxxxxxx xxx xxxx provádět xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx všechny xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
7.2 Stanovení xxxxxxxxxxx počtu xxxxx, xxxxx xx mají xxxxxxx
Xxxxxxxx k tomu, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx rovněž xxxxxxx pro standardizaci xxxxxxxxxxxxx x mechanických xxxxxxx počítání, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx vyšší xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Variační koeficient xxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx 400000 xx 600000 xxxxx/xx xx xxxxx xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, které je xxxxx v xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, musí xxx podle Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx nejméně 400, aby xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
X = X = s2,
kde:
M xx střední xxxxxxx
X xx rozptyl
s xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx:
XX = x × 100 % / X nebo XX = 100 % / x&xxxx;xxxx XX = 100 % / XXX
X (xxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (buněk), xxxxx xxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxx 400 xxx CV = 5 %).
7.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxxxx 0,01 ml xxxxx se pracovní xxxxxxx xxxxxxxx podle xxxx 7.3.1 xxxx 7.3.2.
7.3.1 Xxxxxxxx xxxx xx tenké xxxxxx
Xxxxx xxxx, které xx xxxx počítat, xx 5 xx. Šířka xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx pole, xxx xx xxxxxxxx podložním xxxxxxxx s mikrometrickou xxxxxxxx (5.7).
Xxxxxxxx xxxxxx = 20 × 100 / x × x
xxx:
x xx xxxxxx mikroskopického xxxx x xx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx stupnicí (5.7)
x xxxxxxx počet spočítaných xxxx.
7.3.2 Počítání xxxxxxxxxxxxxxx xxxx ve střední xxxxxxx tenké vrstvy xxxx xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx
xxx:
x xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx pole x xx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7)
x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx polí.
7.4 Xxxxxxx xxxxxx buněk
S xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx na xx xxxxx, xx počet xxxxxxxxxxxx somatických xxxxx (7.1 a 7.2) xxxxxxxx pracovním xxxxxxxx (7.3).
7.5 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxx 7.2) xxxxx xxxxxxxxx 5 %.
Výsledky xxxxxxxxxxx uznaných kruhových xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, který xx může xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxx X.1) xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
2. Definice
Pro xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx x důsledku xxxxxxx xxxxxxx XXX minimální xxxxxxxxx fluorescence.
3. Xxxxxxx
Xxxx xxxxxx (xxxxxxxxx 0,2 xx) xx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx a x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxx xx xxxx přenese ve xxxxx xxxxx xxxxxx xx rotační disk, xxxxx xxxxxx jako xxxxxxxx sklíčko.
Každá buňka xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx zesiluje x xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx.
4. Činidla
Pokud xxxx stanoveno xxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x.x.. Xxxxxxx xxxx je xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx, xxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.1 Xxxxxxx roztok
Složení
|
Hydrogenftalat xxxxxxxx |
51,00 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxx |
13,75 x |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx(xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 xx |
|
xX 5,7 xx 5,9. Xxxxxxx xxxxx xx 10000 xx. |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Skladování xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx nádobě xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx.
4.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (zásobní xxxxxx)
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
1,0 x |
Xxxxxxx xxxxx na 1000 ml.
Příprava:
Rozpustit ethidiumbromid xx xxxx. Xxxxxxxxxx xx vzduchotěsně uzavřené xxxxxx xxxxxxxx před xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx měsíce.
4.3 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx xxxxxx)
Xxxxxxx 20 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.2) x xxxxxxxx xxxxxxxx (4.1) xxx, xxx xx xxxxxx xxxxx 1000 xx. Pracovní xxxxxx by xxxxx xxx používán více xxx xxxx xxx.
4.4 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxx xxxxxx (4.1) |
10 xx |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx (například Xxxxxx X-100), 1 % objemové |
10 xx |
|
Xxxxxxx x 25 % xxxxxxxxxx |
25 xx |
Xxxxxxx xxxxx xx 10000 ml
Příprava:
Smíchat xxxxxxxxxx xxxxxx. Skladování xx xxxxxx překročit xxxxxx xxx.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
5.1 Xxxxxxxx zařízení xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx xxxx xxx před použitím xxxxxxxxxxx. Tím xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, které xx xxxx xxxxxxx, x prahovou hodnotou, xxx xxx xx xxxxxxxx provádí. Xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X).
5.2 Vodní xxxxx, x xxxxxxxxx xxxx, nastavitelná na 40 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxx, x xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx 15 xx.
6. Xxxxxx xxxxx
6.1 Vzorek xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx (5.3). Xxxxx vzorek xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxxx 24 xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx nízký. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx překročit 6 °X.
6.2 Konzervace
Chemická xxxxxxxxxx xx musí xxxxxxx xx 24 xxxxx. Xxxxxxxxxx musí xxx provedena xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
6.2.1 Xxxxxxxx konzervace xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx jednoho x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxx xxxxx xxx xxxxx než 0,6 x xx 100 xx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx dalších 24 xxxxx při xxxxxxx 6 xx 12 °X;
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx draselného xx vzorku xxxxx xxx xxxxx xxx 0,2 x na 100 ml. Xxxxx xxxxxxxxxxxx vzorek může xxx skladován xxxxxxx 72 xxxxx xxx xxxxxxx 6 xx 12 °C;
- xxxx xxxxx:
xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx koncentraci 0,024 x/100 ml, xxxxx je vzorek xxxxxxxx xx xxxxxxx 6 xx 12 °X ihned po xxxx xxxxxx a xxxxxxxx xx 48 xxxxx xx jeho xxxxxx;
- xxxxxxxx:
xxxxxx může xxx konzervován xxxxxxxxxx x konečné koncentraci 0,05 x/100 xx, xxxxx xx vzorek xxxxxxxx xx xxxxxxx 6 xx 12 °X xxxxx po xxxx xxxxxx x xxxxxxxx do 72 xxxxx po xxxx xxxxxx.
6.2.2 Xxxxxx, xxxxx xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx až 48 xxxxx dvojchromanem draselným.
Poznámka:
Pokud xxx o vzorky xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx.
7. Xxxxxx
7.1 Předběžné xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx, které xx xx xxxxxxxx, xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx xxx 2-6 °X. Xxxxxxxx xxxxxx x den xxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nedoporučuje, neboť xxxxxxxx xxxxx být xxxxxx xxxxx. Pokud xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx provést, xxxxxx xx měl xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx dvojchromanem xxxxxxxxx (viz 6.2.1).
7.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxx 7.1) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxx ve xxxxx xxxxx (5.2) xx xxx 40 °C. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx do xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx buněk
Počítání xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.1) do 15 xxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxx (viz 7.2). Xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxxxx vzorky důkladně xxxxxxxxx, aby xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx somatických xxxxx.
Xxxxx xxxxxx a xxxxxxxx vzorku xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx opakovatelnosti (x) a xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxx, které xxxx x dispozici xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxx odhady:
(1) xxxxx xxxxx mezi 400 000 xx 500 000 xxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx:
xx = 20000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 5–4 %)
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx:
xX = 40000 buněk/ml
(odpovídá xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 10–8 %)
9. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx správnosti xx xxxxxxx pomocí xxxxxx o xxxxxx xxxxxx buněk, který xx stanoví xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx národní xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
XXXX. XXXXXXX XXXXXXXXXX X SULFONAMIDŮ
PŘEDMĚT X XXXXXX XXXXXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx x x xxxxxxx ošetřeném xxxxx.
Xxxxx referenční xxxxxx xxxxxxxx:
X. Xxxxxxxxxxxx postup
Tento xxxxxx je xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx obsahují xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx jedním x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xx použití Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx var. xxxxxxxxxxxx, XXXX 10149, xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx postup byl xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx takovéto testy.
B. Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx penicilinu
Tento xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx postupu, xxx identifikaci xxxxxxxxxx x stanovení xxxx xxxxxxxxxxx.
X. Kvalitativní xxxxxx
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x sulfonamidů x xxxxxxx mléce a x tepelně ošetřeném xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx vyšší než xxxxxx xxxxxxx v xxxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx [1]
|
Citlivost xxxxx |
||
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxx |
|
|
Xxxxxxxxxxxxxxx |
0,002 |
0,006 |
|
Xxxxxxxxx |
0,002 |
0,005 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,015 |
0,035 |
|
Xxxxxxxx |
0,006 |
0,011 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,10 |
0,40 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,20 |
0,45 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxx |
0,15 |
0,50 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
7 |
15 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx |
4 |
13 |
|
Xxxxxxxx |
1 |
22 |
|
Xxxxxxxxx |
9 |
28 |
|
Xxxxxxxxxx |
0,06 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxx |
1 |
2,25 |
|
Xxxxxxxxx |
0,01 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,01 |
0,1 |
|
Xxxxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxxx) |
0,5 |
1 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2 x |
|
|
Xxxxxx |
5 x |
|
|
Xxxxxx xxxxxxx |
1 x |
|
|
Xxxxxxx xxxxx |
5 x |
|
|
Xxxx |
10–15 x |
|
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx složky xx xxxx. Za xxxxxxxxx xxxxxxx uvést xx xxxx. Upravit xX xxx, aby xx xxxxxxxxxxx byla xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx xx 10 xx xx zkumavek xxxx xx 100 xx do xxxxxxxx x naklonit x xxxxx získat xxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx 15 minut xxx 121 ± 1 °X.
5.1.2 Agarové xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxx xxxxx |
2 x |
|
Xxxx |
15 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxx trimethoprimu xxxx xxxxxxxxxxxx (xxx 5.1.3) |
10 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx složky xx vodě, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxx uvést xx xxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx tetroxoprim a xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X. Xxxxxxx xX, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.1.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxxxx |
5 xx |
|
xxxx Xxxxxxxxxxx |
30 xx |
|
96 % Xxxxxxx |
5 xx/30 xx |
|
Xxxxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x ethanolu xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx (5 xxxx 30 xx) a doplnit xxxxx.
5.1.4 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
0,75 mg |
|
Glukóza |
5,0 mg |
|
Rozpustný xxxxx |
8,0 xx |
|
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx |
0,025 x |
|
Xxxx |
50 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx ve xxxx živný xxxxxx x xxxxxxxxx, pokud xx je xxxxx, xxxxxxxx a sterilizovat xxxxxxxx. Živný xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx
5.2.1 Xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx připravit roztok xxxxxxxxxx x 60 μx/xx (100 XX/xx), x to xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx benzylpenicilinu sodného xxxx draselného xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vodě.
5.2.2 Xxxxxxxxx pracovní roztok xxxxxxxxxx xxxxxxxx 1,25 xx xxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2.1) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx a doplnit xx xx 1000 xx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 0,075 μx xxxxxxxxxx/xx (= 0,125 IU/ml).
5.2.3 Xxxxxxxxx 75 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,004 μx xxxxxxxxxx/xx (= 0,0067 XX xxxxxxxxxx/xx) přidáním 4 xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2.2) do 71 xx mléka xxx inhibičních xxxxx (5.3).
5.2.4 Xxxxxxx penicilinu xxxxxxx xxxxx xxxx 5.2.1 až 5.2.3 xx xxxx xxx xxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxx testu.
5.3 Xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek
Připravit xxxxxxxxx preparát xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek xxxxxxxxxxx sušeného xxxxxxxxxxxx xxxxx (10 % x/X) xx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx na přítomnost xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x prohlášeno xx xxxxxx inhibičních látek; xxxx mléko xx xxxxxxx do xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx hodinu na 100 °X, xxxx xx xxxxxxx do xxxxxxxxxx s teplotou 0 °X až 6 °X na xxxx nejvýše xxxxxxx xxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
5.4.1 Xxxx testovací xxxxxxxxxx xx xxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx XXXX 10149 Kmen XXXX 10149 je xxxxxxxxx x kmenem X 953.
5.4.2 Připravit xxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx kultury. Xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx na šikmém xxxxxx xxxxx (5.1.1). Xxxxx xxxx se x proužcích xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx kultura, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx 48 xxxxx xxx 63 ± 1xX. Xx inkubaci xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Takto xxxxxxx zásobní xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 0 xx 5 oC.
5.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxx)
5.5.1 Asepticky přenést 20 ml xxxxxxx xxxxx (5.1.1) do xxxxxxxx Petriho misky (4.2.2) x nechat xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5.2 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 xx sterilní destilované xxxx xx zkumavky xx xxxxxxx kulturou (5.4.2) x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx spóry xx šikmého xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxx 0 xx 5 °X x xxxxxxx se xx 36 xxxxx.
5.5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxx (5.5.2) xx Petriho xxxxx (5.5.1) x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx látku xx celém xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx 16 xx 18 xxxxx xxx 63 ± 1 °C (4.1.1).
Při xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (5.4.2) xxxx xxxxxxx xxxxxx 36 xxxxx xx očkování xxxx xxxxxxx nejméně dvakrát x časovém intervalu xxxxxxxxx 36 xxxxx.
5.5.4 Xxxxxxxx pipetou (4.2.4) xxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxxx vody xx Xxxxxxx misku obsahující xxxxxxx (5.5.3) x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx z xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx do xxxxx (4.2.3) obsahující 250 ml xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx, xxxxx xxxxxx ihned přeočkovány, xx se xxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxx 0 xx 6 °X.
5.5.5 Xx 16xx až 18xx xxxxxxxx inkubaci při 63 ± 1 °X xx xxxxxxxx xxxxx xx suspenze xxxx xxxx vykazovat xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx 5 x 10 xxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx vykazovat rovnoměrné xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx sraženiny nebo xxxxxxxxx, měla by xx nahradit xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ze xxxxxxx xxxxxxx (5.4.2).
5.6 Xxxxxxxx zkumavek/ampulí
5.6.1 Nechat xxxxxxxxx agarové xxxxxx (5.1.2), xxxx xxxxxxxx xx 55 °X.
5.6.2 Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx spór (5.5.4) x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx média (5.6.1) xx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx. Důkladně xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx do xxxxxxxx zkumavky xxxx xxxxxx (4.2.6) 0,3 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.6.2), xxx xx xxxxxxxxx 5 mm xxxxxx, poté xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx nebo, v xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxx zkumavky/ampule 12 xxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
5.6.4 Xxxxxxxx/xxxxxx mohou xxx xxxxxxx týž xxx, xxx xxxxx xxx xxxxxx skladovány xxxxxxx xxxxxx xxx 0–6 °C, pokud xxxx xxxxx xx xxxxxx přípravě xxxxxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Vzorky se xx nejdříve xxxxxxxx, xxxxxxx do 24 xxxxx xx xxxxxx, x xx xx xxxx xx xxxxxxxx xxx teplotě 0-5 °X. Pokud xxxx xxxxx otestovat xxxxxx xx 24 hodin, xxxx xx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (−30 °až - 15°X), xxx se xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxx penicilinu.
6.2 Xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx identifikovat xxxxxx zkumavku/ampuli (5.6). Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx. Umístit xx xxxxxxxx stojánku (4.1.3) xxxxx požadovaný xxx xxxxxx x xxxxx (5.2 a 5.3).
6.3 Xx xxxxx xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxx 50 xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (5.1.4).
6.4 Xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x mikrostříkačkou (4.1.4) přenést 0,1 xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx vždy xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.5 Xxxxxx xxxxx xxxx 6.4 xx xxxxxxx stejným xxxxxxxx za použití xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,004 μx/xx (= 0,0067 XX/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxx vzorku xxxxx (5.2.3).
6.6 Xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.4 xxxxxxxx stejným xxxxxxxx xx použití xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.3) xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
6.7 Xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx a xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxx na nejméně 2½ xx 2¾ xxxxxx xx xxxxx xxxxx s teplotou 63 ± 1 °X (4.1.2).
6.8 Xxxxxxx xxxxxxxx xx zkumavkami/ampulemi x xxxxx xxxxx.
6.9 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxx 7).
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx média xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx testovacím xxxxxxx xxxxx ukazuje xx xxxxxxxxxx antibiotik nebo xxxxxxxxxxx xx vzorku x xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx "xxxxx xxxxxxxxx" xxxxxxx x xxxxxxx na xxxxxx 39. Pokud zabarvení xx zkumavkách/ampulích se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx penicilinu (6.5) zůstane purpurové, xxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2 Částečné xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nebo nepravidelné xxxxxxxxx xx zkumavkách/ampulích xx vzorkem mléka xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx koncentracemi xxxxxxxxx xx straně 39.
7.3 Xxxxx xxxxxxxxx agarového xxxxx ve xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx vzorek mléka xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx vzorek mléka xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
7.4 Xxxxx xx purpurové xxxxxxxxx xxxxxx xx všech xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxxxx životaschopné spóry x vzorky xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx popsanými x 7.1 x 7.2 xxxxx xxxxxx "X".
Xxxxx je nezbytné xxxxxx mléka xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx, xxx xx zabránilo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X. Postup xxx xxxxxxxxxx penicilinů a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx konfirmační xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx antibiotik, xxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxxx penicilinu xx xxxxxxxx mléka x xxxxxxxxx (X.7.1) nebo xxxxxxxxxx xxxxxx (A.7.2).
Citlivost xxxxxxx xxx různá xxxxxxxxxxx
Xxx X.1.
2. Definice
2.1 Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx popsaným xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx 2 xx kolem xxxxx.
2.2 Xxxxx vzorek, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx (2.1), a xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (beta-laktamáza), xxxxxxxxx xxxxx zónu xxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xx xxxxxx xxxx xxx penicilinázy, xxxxxxxxx xxxxxx je xxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx a xxxxxx antibiotika xxxxxx xxxxxxxxxxx.
2.3 Xxxxx tato xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx (2.2) xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx to xxx xxxx xxxxxxxx [xxx xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx X, kapitola XX, A.1.f) x 2x)].
Xxxxxxx polosyntetické xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx sodný, xxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx inaktivovány xxxxxxxxxxxxx xxxx jsou xxxxxx a xxxxxxx xxx identifikovány jako xxxxxxxxxx (viz 7.3).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx, xx umístí xx xxxxxx agarového média xxxxxxxxxxxx Bacillus xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx. Normální xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx narušuje xxxxxxx xxxxxx. Čirá xxxx xxxxx xxxxx ukazuje, xx xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx. Xxxxxxxx čiré xxxx xxxx jiné xxxxxx xx koncentraci x xxxxx xxxxxxxxx xxxxx x mléce.
4. Xxxxxxxxx, xxxxxxx ze xxxx a xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxx X.4.1.
4.1.2 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 80 ± 1 °X.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
Xxx A.4.2.
4.3 Xxxxxxxx disky, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx 9 xx 13 mm, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx 130 xx xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx).
5. Xxxxxxxxxx média, xxxxxxxxxx xxxxxxx, roztok penicilinázy, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx.
Xxxxxxxx složky xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Musí xx xxxxxx destilovaná xxxx xx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx voda alespoň xxxxxxxxxxxx čistoty. Voda xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro růst xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1 Kultivační xxxxx
5.1.1 Xxxxx xxxx (X.5.1.1)
5.1.2 Kultivační médium xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5 x |
|
Xxxxxxx |
1 x |
|
Xxxxxx trimethoprimu xx tetroxoprimu (X.5.1.3) |
10 xx |
|
Xxxx |
10–15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx rozpustit xxxxx xxxxxx xx xxxx, xxxx přidat xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Po xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo tetroxoprimu xxxxxxx xxxxxxx pH, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx 8,0 + 0,1 xxx 25 °X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx 15 minut xxx 121 ± 1 °X.
5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx
Xxx X.5.2.
Xxx xxxxxxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx xxxxx (8) xxxxxxxxx standardní xxxxxxx xxxxxxxxxx x mléce xxx inhibičních látek (X.5.3) x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx:
x) 0,004 μx/xx (0,0067 XX/xx)
x) 0,006 μx/xx (0,01 XX/xx)
x) 0,03 μg/ml (0,05 XX/xx)
x) 0,06 μx/xx (0,01 IU/ml).
5.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxx
5.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (beta-laktamázy) xx sterilní destilované xxxx x cílem xxxxxx koncentraci 1000 X/xx. Tento roztok, xxxxxxx rozdělený xx xxxxx xxxxx, xx xxxxx skladovat až xxxxx xxxxx xxx 0 °X až 5 °X.
Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx mezinárodní xxxxx. Xxx účely xxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxx, xx deset xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx inaktivaci 0,6 μx (= 1 XX) xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx, zda xxxxx xxxxxxxxxx platí. X xxxxxxx nutnosti xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxxxx.
5.3.2 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.4 Testovací xxxxxxxxxx
Xxx X.5.4.
5.5 Xxxxxxxxx kultura (xxxxxxxx xxxx)
Xxx X.5.5.
5.6 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro detekci xxxxxxxxxxx látek (5.1.2), xxxx xxxxxxxx xx 55 oC.
5.6.2 Xx xxxxx přidat xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx (5.5) x xxxxxxxxxx xxxxxxxx částí agarového xxxxx xxx detekci xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), x cílem xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx kolonií x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, a xxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx misky (X.4.2.2), xxxxxx xxxxxxx xx 55 °X, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxx se xxxxxxxxx 0,6 až 0,8 xx vrstva. Xxx Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx 140 xx xx xxxxx xxx 15 ml xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxxx 0,8 xx xxxxxx.
5.6.4 Xxxxxxx Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx a xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx média, xxxxxx xxxxx na xxxxx a xxxxxxx xx xxxx vzhůru, xxx se xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx povrchu agarového xxxxx.
5.6.5 Xxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx den, xxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx, xxxxx se xxxxx xx přípravě xxxxx xx xxxxxxxxxx polyethylenového xxxx x xxxxxxxxxx xx xxx 5 °X.
5.6.6 Xxxxxxx xxx Xxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
6. Postup
6.1 Xxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 X vzorků x pozitivním nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxx podle "xxxxxx X" (A.7.1 x X.7.2) xxxx xxx provedeno xxxx xxxxxxxxx za xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx penicilinu.
6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx 10 xxxxx xx 80 ± 1 °C, xxx se vyloučil xxxx nespecifických xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek.
6.1.3 Důkladně xxxxxxxxx, poté přenést xxx 10 xx xxxxxx xxxxxxxxx mléka xx sterilní lahvičky xx xxxxxxx xxxxxx. X mléku xxxxxx xxx 0,4 ml xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.3) x xxxxx xxxxxxxxx.
6.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
6.2.1 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx (4.3) xx xxxxxx xxxxx (6.1.2) xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx položit xxxx na xxxxxx Xxxxxxx misky (5.6) x xxxxx přitlačit xxxxxxxx.
6.2.2 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx mléka xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx od druhého xxxxxxx 20 xx x od okraje xxxxxxx 10 mm.
6.2.3 Xxx kontrolu xxxxxxxxxx xx disky (4.3) xxxxxxxxx standardním xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.2) xxxx xxxxxxxx rozmístit xxxx xxxxx napuštěné xxxxxx xxxxx v xxxxxx xxxxxxx 2 % xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx; xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx disků.
6.2.4 Po xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx agarové xxxxxx a po xxxxxx identifikaci, obrátit xxxxx xxxx xxxxxx x nechat je xxxxxxxxx 2,5 až 5 xxxxx xxx 63 ± 1 °X.
6.2.5 Po inkubaci xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx světla, xxx xxxx možné xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx papírových xxxxx. Xxxx zóny xx xxxxx.
6.2.6 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (6.2.3) xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 2 xx xxxx.
6.2.7 Čiré xxxx xxxxx disků xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx velkost xx xxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxx popsaná x 6.2.6, xxxxxxx xx xxxxxxxxxx inhibičních xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx inhibičních látek
6.3.1 Xxxxxx 6.2.1 se xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx zahřátého xxxxx (6.1.2) x xx xxxxxxx xxxxxxxxx penicilinázou (6.1.3). Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx do 10 xx xxxxxx mléka xx možné xx xxxxxx xxxxx ponořit xxxx napuštěný penicilinázou (5.3.2) x xxxxxx xx na xxxxxxxxx xxxxx.
6.3.2 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x 5.2 x) až d).
6.3.3 Xxxxxxxxx průměrný xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x pro standardní xxxxxxx xxxxxxxxxx.
7. Interpretace xxxxxxxx (xxx 2)
7.1 Xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx zóna, xxx xxxx xxxx se xxxxxx kolem xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx mléka, xxxxxx velká xxxx xxxxx než zóna xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx roztokem xxxxxxxxxx (5.2x)), xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx mléka xxxxxxxx xxxxxxxxxxx krystalického xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx vyšší než 0,004 μx/xx.
7.2 Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx disku xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx zóny kolem xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, mléko xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx.
7.3 Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx čiré xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx kontrolní xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx průměru xxxx xxxx xxxxx disku xx xxxxxxx mléka xxxxxxxxx xxxxx 6.1.2, xxxxxx xxxxx obsahuje xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx koncentrací penicilinázy xxxxxxx x xxxxx xx. Syntetické xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx být xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx být xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx jiné xxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxx než xxxxxxxxx xxxxx být xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx postupy.
8. Stanovení xxxxxx xxxxxxxxxx
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xx sestrojení xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xx základě velikostí xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x mléce (5.2 x) až x)).
8.2 Xxxxxxxxxx standardní křivky
Vzhledem x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx10 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxxxxxxxxx xxxxxx lze xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx papír xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx pořadnici x xxxxxx zón xx xxxxxx. Xxxxxxxxx zóny xx xxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx inhibičních xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x zakreslí se xxxxxxxxxx křivka.
8.3 Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx lze xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx pomocí xxxxxxx xxxx je xxxxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx zón xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx pětkrát xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx.
9. Xxxxxxxxx výsledků
9.1 Výsledky xx vyjadřují xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx vyšší xxx 0,004 μx/xx (nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace) xxxx xxxx obsah xxxxxxxxxxx látek jiných xxx penicilin.
9.2 Opakovatelnost (x) x xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X)
Xxxxx nejsou k xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx x důsledku xxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
X xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/XXX, přílohy X, xxxxxxxx VII xxxx 2, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx pokyny, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx, xxx detekci xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx se xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx, které xxxx xxxxxxxxxxx příčinou xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, které xxxxxxxxx mléko xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Pokud xxxx xxxxxxx normy xxxxxxxxx v příloze X, xxxxxxxx XXX xxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx x počítání kolonií xxx 30 °X x 21 °C, xxxxxxxxxx bakterie x xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xx detekci xxxxxxxx xx nezbytný xxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
3. Postup
Postupy a xxxxxxx vyšetření musí xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx orgán xxxxxxx způsobem, xxxxx xxxxxx vydávání osvědčení x xxxxxxxxx nezávadnosti xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx obchod xxxxxx Xxxxxxxxxxxx. Pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxx x výsledku
Pro každý xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx výsledek xxxxxxxx xxxxx:
Xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxx "xxxxxxxxxx" xx "xxxxxxxxxxxx" x objemu pasterovaného xxxxx, který xxxxxxxx xxxxxxx postup. Xxxxxx xxxx jasně xxxxxx xxxxxxx postup.