Xxxxxxxxxx Komise
ze xxx 14. xxxxx 1991,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx analýzy x xxxxxxxxx xxxxxxxx mléka x xxxxxxx ošetřeného xxxxx
(91/180/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx na Xxxxxxx x xxxxxxxx Evropského xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x ohledem xx xxxxxxxx Rady 85/397/XXX xx xxx 5. xxxxx 1985 x hygienických a xxxxxxxxxxxxx otázkách xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx uvnitř Společenství [1] xxxxxxxxx pozměněnou xxxxxxxx 89/662/EHS [2], x zejména xx xx. 10 xxxx. 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxx, že xxxxx xx. 10 xxxx. 2 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx analýzy x testování, xxxxx xx mají používat xxx xxxxxxxx dodržování xxxxx xxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx mléko;
vzhledem x xxxx, že xxx xxxxxx mléko xx xxxxxxxx xxxxxxxx zejména xxxxxx pro stanovení xxxxxx mikroorganismů, xxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx x přítomnosti antibiotik;
vzhledem x xxxx, že xxx pasterované xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx nepřítomnosti patogenů, xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx mikroorganismů, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx antibiotik x xxxx mrznutí;
vzhledem x xxxx, xx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxx a XXX xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx x technických xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx, xxxxx mají xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx; xx je xxxxxxx xxxxxxxx pokračovat x xxxxxxxxxxxx podmínek, xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx metody xxxxxxx a xxxxxxxxx; xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx těchto šetření xxxxx členské xxxxx xx xx, aby xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 85/397/ES byly xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx stanovení xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx zahrnuje x xxxxxxxxx postupů xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx výsledků;
vzhledem x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx rozhodnutí xxxx x souladu se xxxxxxxxxxx Xxxxxxx veterinárního xxxxxx,
XXXXXXX TOTO ROZHODNUTÍ:
Xxxxxx 1
Referenční postupy xxxxxxx x testování xxx syrové xxxxx xxxx tyto:
- xxxxxxxxx xxxx mrznutí,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxx buněk,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Článek 2
Xxxxxxxxxx postupy xxxxxxx a testování xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx tyto:
- stanovení xxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx,
- stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 30 °X,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 21 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx koliformních xxxxxxxx – xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxx antibiotik a xxxxxxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Článek 3
Referenční postupy xxxxxxx x testování xxx UHT xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx tyto:
- stanovení xxxx mrznutí,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °C,
- xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Článek 4
Xxxxxxx referenčních xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx, stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx X.
Xxxxxx 5
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x testování xxxxxxx v xxxxxxxx 1, 2 x 3 xxxx popsány x xxxxxxx XX.
Článek 6
Xxxx xxxxxxxxxx xxxx přezkoumáno do 31. prosince 1992, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 7
Xxxx xxxxxxxxxx xx určeno členským xxxxxx.
V Xxxxxxx xxx 14. února 1991.
Xx Xxxxxx
Xxx Mac Xxxxxx
xxxx Xxxxxx
[1] Úř. xxxx. X 226, 24.8.1985, x. 13.
[2] Xx. xxxx. X 395, 30.12.1989, x. 13.
XXXXXXX X
XXXXX
X. Obecná xxxxxxxxxx
XX. Odběr vzorků xxxxxxxx a tepelně xxxxxxxxxx xxxxx
X. XXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxx
Xxxxxx ustanovení xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxx x testování. Xxxxxxxxx xxxxxx členských xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx vzorků x xxxxxxxxxx xxxxx musí xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxx
2.1.1 Pokud xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx, ředění xxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxx voda destilovaná, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx čistoty. Xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx bez xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx mikroorganismů xx xxxxxxxxx testovacích xxxxxxxx.
2.1.2 "Xxxxxxxxxxxx" xxxx "xxxxxxx" (xxx dalšího xxxxxxxxx) xx xxxxxx "xxxxxxxxxxx xx xxxx" xxxx "ředění xxxxx".
2.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx mít xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
3.1 Xxxxxx přístrojů x xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xx zvláštnímu použití x xx zvláštní xxxxxxxxxxx.
3.2 Analytické váhy
"Analytickými xxxxxx" xx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx 0,1 xx.
4. Vyjádření xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx xxxx stanoveno xxxxx, výsledek xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx musí být xxxxxxxxxxxx průměrem xxxx xxxxx, které splňují xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (5.1) xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx splněno, xxxx se xxxx xxxxxxxx, jinak je xxxxxxxx neplatný.
4.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx podílu
Pokud není xxxxxxxxx xxxxx, výsledek xx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
5. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx: opakovatelnost x reprodukovatelnost
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx takto:
5.1.1 Xxxxxxxxxxxxxx (x) xx xxxxxxx, xxx kterou se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx mezi xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testu, xxxxx byly xxxxxxx xxxxxxx postupem x xxxxxxxxxx výrobkem xx xxxxxxxx podmínek (xxxxxx xxxxxxxxx, stejný xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxxx).
5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) xx hodnota, xxx kterou xxxx xxxxxxxxx rozdíl dvou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x týmž xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx x/xxxx různé xxxx).
5.1.3 Xxxxx xxxx xxxxxxxxx jinak, xxxxxxx xxx kritéria opakovatelnosti x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx 95 % xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx XXX 5725, xxxxx vydání, 1986. Xxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxx pokusů, xxxxxxxxxxx xx spolupráci, xxxxx xx používají xxx hodnocení xxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx. X xxx případě xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1.4 Xxxxxxx xxxxx x nezbytné xxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x mezinárodními pokyny.
6. Xxxxxx o xxxxxxxxx
Xxxxxx x testování xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx výsledky. Xxxx jiné xxxx xxxxxx všechny podrobnosti xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x metodě xxxxx, nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx, které by xxxxx xxxxxxxx výsledky. Xxxxxx x testování xxxxxxxx xxxxxxx informace xxxxxxxxxx úplnou identifikaci xxxxxx.
XX. XXXXX XXXXXX XXXXXXXX X XXXXXXX XXXXXXXXXX MLÉKA
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tento xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx odběr xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxx vzorků, přeprava x xxxxxxxxxx xxxxxx xx použijí xxx xxxxxx mléko xxxxxx xxxxxxxxxx a xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx skladované xx skladovacích a xxxxxxxxxxx nádržích.
Postupy xxxxxxx x xxxxxx 2, 4.4, 5 x 6 xx xxxxxxx xxx odběr vzorků xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx.
2. Xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx obsaženého x konvích, xxxxxxxx xxxx. xxxxxxxx pověření xxxxxxxxxxx, kteří byli xxxx xxxxxxx vzorků xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx orgány nebo xxxxxxxxx laboratoř xxxxxxxx xx nezbytné, vyškolí xxxxxxxxxxx pověřené odběrem xxxxxx x metodách xxxxxx, aby bylo xxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx budou xxxxxxxxxxxxxxx x v xxxxxxx x xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx laboratoř xxxxxxxx za nezbytné, xxxxxxx zaměstnance xxxxxxxx xxxxxxx vzorků v xxxxxxxxxx vzorků, aby xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx
3.1 Obecné xxxxx
Xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx zhotoveno x xxxxxxxx xxxxx xxxx x jiného xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx materiálu, xxx musí být xxxxxxxx s xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx, odběr vzorků, xxx.). Plunžry x xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx bylo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx vzniku xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx dlouhou xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx naběračky xxxx xxx xxxxxxx 50 ml.
Vzorkovnice x xxxxx musí xxx xxxxxxxx, kovová xxxx x vhodného plastu.
Materiály xxxxxxx xxx výrobě xxxxxxxx xxx odběr xxxxxx (xxxxxx nádob x xxxxx) xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx by xxxxxxxxx výsledky xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxx xxxx xxx xxxxx, xxxxx, xxxxxx xxxxxx xxx trhlin x xxxx mít xxxxxxxxxx xxxxx.
3.2 Vybavení pro xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx vyšetření
Vybavení xxx xxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxx) musí splňovat xxxxxxxxxx xxxx 3.1 x musí xxx xxxxxxxx.
Xxxxx xx pro xx xxxx jdoucí xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xx xxxxxx xxxxxx vzorku vyčištěno x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxxxx xxxxxx vzorků
4.1 Xxxxxx údaje
Bez ohledu xx testy, xxxxx xxxx xxx provedeny, xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx buď xxxxx, xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx musí xxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxx ještě x pohybu.
Pokud se x xxxxxx odebírá xxxxxxx xxxx vzorků xxxxx pro různé xxxxx, xxxx xxxxx xxxx být odebrán xxxxxx xxx mikrobiologické xxxxxxxxx.
Xxxxx vzorku xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx nádob xxxx xxx takový, xxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxx naplněny xxxxxxx x xxx xxx xxxx možné xxxxx promíchat obsah xxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx stloukání másla xxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxx xxxxx xxxxxx
4.2.1 Xxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxx na xxxxx
X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx plunžrem ve xxxxx xxxx konvi xxxxxx x xxxx, xxxxxxx xxxx na xx, aby xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxx xx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx smetana. Vzorek, xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxx celou xxxxxxx, xx odebere xxxxxxxx xxxxx bodu 4.2.4.
4.2.2 Xxxxx x chlazených xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxxx podniku
Míchat xxxxx mechanicky xxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx dostatečné xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxx mléka neumožňuje xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxx xxxxxx z xxxxx xxx
Xx xxxxxxxx, xxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxx do misky xxx. Xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx zásilky, x xxx xx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx, odebrat xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x celé xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.4 Xxxxx xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxx
Xxxx je xxxxxxxx xxxxx, u xxxxx xx xx provést xxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxx nádob, x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx reprezentativní xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxx x xxxxx nádoby nemusí xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx těchto reprezentativních xxxxxxxx v xxxxxx x xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx, ze xxxxx xxx xxxxx ze xxxxxx odebrán. Xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxx) xxxxxx (xxxxxx) x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
4.2.5 Xxxxx xxxxxx x velkých xxxxx – xxxxxxxxxx xxxxxx, cisternové xxxxxxx, xxxxxxxxxx vagóny
4.2.5.1 Před xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx vhodným xxxxxxxx xxxxxxxx.
X promíchání obsahu xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx cisternových xxxxxx xx doporučuje xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.5.2).
Délka xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, xx kterou bylo xxxxx x xxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxx x xxxxxxxxxxxx případů xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx odebraných xxx x různých částí xxxxx, nebo x xxxxxxxxxxxx intervalech při xxxxxxxxxxxxx mléka x xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (syrového xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx mléka) xx účinný, pokud xx xxxxxx xxxxxx xxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx podmínek xxxxx xxx 0,1 %.
Xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx otvorem ve xxxxxx části xxxx x xxxxx vypouštění xxxxxx xxxx množství xxxxx, které xxx xx promíchání xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx odběr vzorků x xxxxxxxxxxx otvoru. X xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx mléka, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx možné xxxxxxx:
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx do xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx xxxx xxxxxxxxx poháněnou xxxxxxxxxxx xxxxxxx x umístěnou x xxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx,
- x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx vagónů xxxxxxxxx xxxxx v xxxxxx přepravní xxxxxx, xxxxx je napojena xx pumpu x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxx, stlačeným x xxxxxx vzduchem. Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxx a objem xxxxxxx, aby se xxxxxxxxx vniku xxxxxx xxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx odběr vzorků
Automatické x xxxxxxxxxxxxxxx vybavení xxx xxxxx vzorků xxxxxxxx mléka xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx může xxxxxx podle xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx vybavení musí xxx před a xxxxx xxxxxxxxx podrobeno xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx odpovědný xxxxx. Xxxxxxxx postupů odběru xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx s xxxxx xxxxxxxx:
- minimální xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxx xxxx být xxxxxxx vzorek,
- poměr xxxxxxxxxx xxxxxxx (který xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx),
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx vzorek x xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx poloautomatického xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx může xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
- minimální objem xxxxx, ze kterého xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx,
- minimální objem xxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx, které xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.
4.4 Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx k xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx jde x xxxxxxx ošetřené mléko xxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, vzorky xx xxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nádob. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx během xxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx místnosti xxxxxxxx xxx ošetření, x xx, xxxxx xx xx xxxxx, ihned xx zpracování (x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxx xxxxxxxxx).
X xxxxxxx druhu xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx metodou UHT x xxxxxxxxxxxxxxx) se xxxxxxx takový počet xxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx vyšetření, xxxxx xxxx být xxxxxxxxx, x to podle xxxxxx poskytnutých xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx jiného xxxxxxxxxxx xxxxxx.
5. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xx měl být xxxxxxx identifikačním kódem, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx identifikaci xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx laboratoří xxxx xxxxxxxxxxx orgánu (xxx xxx 2).
6. Xxxxxxxx x skladování xxxxxx
Xx xxxxxxxxx příslušného xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx připraví xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx se xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx x době mezi xxxxxxx vzorků xxxxxx xxxxxxxxxx, x to xx xxxxxxx xxxxx xxxxx x testování, xxxxx xx být xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx xxxx:
- xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xx třeba xxxx xx xx, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx nežádoucímu zápachu x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xx-xx xx xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx skladován xx xxx,
- vzorky syrového xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx při teplotách 0 xX xx 4 xX. Doba xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx být xx xxxxxxxxx a x xxxxxx případě xxxxx přesáhnout 36 xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, aby xxxx teplota skladování 0 xX až 6 xX, xxxx-xx xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxx 24 hodin,
- xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 0 xX až 4 xX. Doba mezi xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxx xxx co xxxxxxxxx x v xxxxxx případě nesmí xxxxxxxxxx 24 xxxxx,
- xxxx xxxxxx mléka xxx vzorky xxxxxxxx xxxxx x pasterovaného xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx laboratoře x xxxx xxxx xxxxxxx vzorku a xxxxxxxx xxxx být xx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx preventivní xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx přijmout pro xxxxxxx testy, xxxx xxxxxxx v xxxxxx xxxxxxx použitelných postupů.
PŘÍLOHA X
XXXXX
X. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx
XX. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
XXX. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X
X. Xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxx 21 °X
XX. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx – počítání kolonií xxx 30 °C
VII. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
XXXX. Detekce xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx
XX. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
X. STANOVENÍ XXXX MRZNUTÍ
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro stanovení xxxx mrznutí xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx, odstředěného, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, XXX xxxxx xxxx sterilizovaného xxxxx xxxxxx přístroje (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx), v němž xx xxxxxxxxxxx řízená xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxx dva typy xxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx maximální bod xxxxxxx na plató xxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx typ je x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx, že xx začátku xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx odečet. Vzhledem x tomu, že xx xxxxx lišit xxxxx xxxxxx bodu xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx, ale x xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx a standardních xxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxx, tento referenční xxxxxx xxxxxxxx použití xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx používat x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxx lze xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx cizí xxxx x xxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxx 0,18 g xxxxxxxx xxxxxx na 100 xx (viz xxx 7.4).
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx mléka: xxxxxxx xxxxxxxx x souladu x xxxxxxxx postupem x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx Celsia (°X).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx v xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx vhodnou teplotu x mechanickou xxxxxxx xx xxxxxx jeho xxxxxxxxxxxx, která xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx až k xxxxx, xxxxx odpovídá xxxx xxxxxxx vzorku.
Přístroj xx kalibruje takovým xxxxxxxx, aby xx xxxxxxx postupem xxxx xxx xxxxxx mléka xxxxxxx přesné xxxxxx xxx xxx standardní xxxxxxx. Xx xxxxxx xxxxxxxx plató xxxxx xxx xxxxxxx mléka xx stupních Xxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx skla
Obvyklé laboratorní xxxxxxxx, zejména:
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx chladicí xxxxx, xxxxxxxxxxxxxx snímače (xxxxxxxxxxxxxx odporového xxxxxxxxx) x xxxxxxxxxx obvodem, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xx vzorky x xxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx, jakož x xx xxxxxxxx na xxxxxx.
4.1.1 Xxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx použít xxx xxxx chladicí lázně.
4.1.1.1 Xxxxxxx xxx
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx vhodnou xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx tak, xxx teplotní xxxxxx xxxx jakýmikoli xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 0,2 °X. Teplota xxxxxxxx může kolísat xxxxxxx v xxxxxxx ± 0,5 °C xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xx důležité, xxx v xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Celá xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
4.1.1.2 Xxxxxxxxxx typ
Kolem xxxxxxxx xx xxxxxx proudí xxxxxxxxxxx proud vhodné xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx ± 0,5 °C xx nominální xxxxxxx xxxxxx výrobcem.
Vhodnou chladicí xxxxxxxxx xx 33 % (X/X) vodný xxxxxx 1,2-xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx).
4.1.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxx xx skleněné sondy x xxxxxxxxxx xxxxxxx 1,80 ± 0,2 xx a x xxxxxxx xxxxxx maximálně 0,31 xx. Xxxxxx xxxxxxxxx termistoru xxxx xxx nižší xxx 2 sekundy x xxxxxxx x (xxx xxxxxxxx) musí xxx xxxxxx. Xxxxxxxx napětí, xxxxx x konstanta xxxxxxxx musí být xxxxxx, aby při − 0,512 °X xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x 0,0005 °X. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx ± 5 %.
Xxxx xx xxxxx v xxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx se xxxx xxxxxxxx x ose xxxxxxxx xx xxxxxx x x xxxx, xxxxx je 44,6 ± 0,1 xx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxxxxx xx xxxxxx 15). Xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx polohy.
Poznámka:
β xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx podle vzorce
− xX / xX × 1 / X = β / X2
xxx:
X xx xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx
X xx xxxxx x ohmech xxx xxxxxxx X,
− dR / dT × 1 / X xxxxxxxx xxxxxxxxxx
β xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx použitém xxx xxxxxx termistoru. X xxxxx xxxxx xx doporučuje xxxxxxx xxxxx xxx 3000.
4.1.3 Xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
4.1.3.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx pracuje xx xxxxxxxx vyhledávání xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxx křivky, xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx s přesností xx ± 0,002 xX xx xxxx xxxxxxx 20 sekund.
4.1.3.2 Xxxxx obsluha
Odpor xxxxxxxxxx xx vyrovnává Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx podobným xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx odporů, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx ± 10 % x xxxxxxx teplotní xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx 2×10−5°C.
Proměnný (xxxxxxxxxxx) xxxxx xx nesmí xxxxxxxx xx linearity x celém xxxxxxx x xxxx xxx x 0,3 % xxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxx kalibrace xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx 0,001 °C.
4.1.3.3 Xxxxxxxxxxx provoz
Odečítací zařízení xxxx xxxxxxx rozlišení xx xxxxxxx 0,01 °X v xxxxxxx xx 0 °C xx –1 °C.
Stabilita xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx, xxx odchylka xxxx xx xxxx následujících xxxxxx téže xxxxxxx xxxxxx xxxxx než 0,001 °X.
Xxxxxxxxx obvodu xxxx být xxxxxx, xxx při xxxxxxx xxxxxxx přístroje xxxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxx xx – 0,400 °X xx – 0,600 °C xxxxx chyba xxx ± 0,001 °C.
4.1.4 Xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx testovacího xxxxxx xx použije xxxxxx drát o xxxxxxx 1 až 1,5 mm, xxxxx xxxxxxxxx s xxxxxx,.
Xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x umístěna xxxxxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxx konec xxx xx úrovni hrotu xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx 1,5 xx xxx xx xxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx ± 1,5 mm), xxx byla xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx stanovení. Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx nesmí v xxxxxx okamžiku xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxx.
4.1.5 Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx po xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx vyvolá mrznutí xxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx testovacího xxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx. X xxxx xxxxx lze použít xxxxxxxx; xxxxxx xxxxxxxx xx zvětšení xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx xxx sekundy xxx, xxx xx xxxxxxxx dotýkala stěny xxxxxxxx xx vzorky.
4.1.6 Xxxxxxxx xx xxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx (xxx xxxxxxx 1) jsou xxxxxxxx x 50,8 ± 0,1 xx xxxxxx; xxxxxx průměr xx 16,0 ± 0,1 xx x xxxxxxx xxxxxx je 13,5 ± 0,1 xx. Tloušťka xxxx xxxxxxxx xx nesmí xxxxx x xxxx xxx 0,1 xx.
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx od xxxxxxx xxxxxx 29,8 xx (21 mm xxx xxxx zkumavky), xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 mm.
4.1.7 Xxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx napětí xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxx kolísání nepřekračovala ± 1 % xxxxxxxxx xxxxxxx, když xxxxxx zdroj xxxxxx x ± 6 %.
4.2 Analytické xxxx
4.3 Xxxxxxx xxxxx o xxxxxx 1000 xx, xxxxx X.
4.4 Sušárna, xxxxx xxxxxxxxx, nastavitelná xx 130 ± 1 °C
nebo
Elektrická pec, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na 300 ± 25 °X.
4.5 Exsikátor
5. Činidla
5.1 Xxxx destilovaná x xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx 20 ± 2 °X, ve zkumavce xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx x.x., jemně mletý, xxxxxx 5 xxxxx xxx xxxxxxx 300 ± 25 °C x elektrické xxxx xxxx nejméně 24 xxxxx xxx xxxxxxx 130 ± 1 °X x xxxxxxx x zchlazený xx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.3 Příprava xxxxxxxxxxxx roztoků
Navážit xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (viz tabulka 1) xxxxxxx chloridu xxxxxxx (5.2) xx xxxxxxx. Rozpustit x xxxxxxxxxxx vodě (5.1), xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx odměrné xxxxx x objemu 1000 xx x xxxxxxx xx xxxxxx vodou x xxxxxxx 20 ± 2 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxx xxx 5 °C v xxxxx uzavřených xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx o xxxxxxxxxx xxxxxx 250 xx.
Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 20 °X
|
x XxXx/x |
°X |
|
6,859 |
-0,408 |
|
7,818 |
-0,464 |
|
8,149 |
-0,483 |
|
8,314 |
-0,492 |
|
8,480 |
-0,502 |
|
8,646 |
-0,512 |
|
8,811 |
-0,521 |
|
8,977 |
-0,531 |
|
9,143 |
-0,541 |
|
10,155 |
-0,600 |
Xxxx použitím xx xxxxxxxxxx roztok xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx otočením xxxxx. Nikdy neprotřepávat xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, aby xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku xx z láhve xxxxxx xx xxxxx x čisté kádinky. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx x lahví, xxxxx xxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx měsíců, xxxxx xxxxxxxxxx fungicid (xxxxxxxxx roztok xxxxxxxxxxx 10 x/x).
6. Kalibrace xxxxxxxxxxxxxx kryoskopu
Kryoskop musí xxx xxxxxxxx xxx, xxx xx okolní xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx než 1 °X od teploty, xxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxx pokojovým xxxxxxxx xxxxxx xxx 26–27 °X.
Xxxxxxx se, xx xxxxxxxx funguje xxxxx xxxxxx xxxxxxx x xx xxx zapnut xxxxxxx 12 xxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, rozkmit xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxx xxxxxxx výše), xxxxxxx bod mrznutí xx těsně xxx xxxx těsně pod xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x testování. Xxxxxx xxxx body mrznutí xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx – 0,100 °C.
(U některých xxxx x xxxxxxxx xxxx dostupných xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx obvod xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx, xx se xxxxxx xx xxxx hodnotě xxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. V xxxxxx xxxxxxxxx výběr xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx, xxxx jednoho x xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxx xxxx tuto xxxxxxx xxxxx).
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx na vzorky, xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx na vzorky xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx jako zkumavky xxxxxxxxx na xxxxxx xxxxx (xxxxxx xxxx xxxx, umyté x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx stejné xxxx xxxxxxx vzorků xxxxx.
Xxxxx xxxxxx výrobce xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, dokud xxxxxx z kryoskopu xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx standardního xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x druhým xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xx xxxxxxxx takovým xxxxxxxx, dokud xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx každý roztok xxxxxxxxxx správné hodnoty xxxx mrznutí xxxxxxx x xxxx, xxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx a xxxxx xxxxxxx bod xxxxxxx vzorku mléka, xxxx xx byla xxxxx xxxxxxxx úprava.
7. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku
7.1 Xxxxx xx je xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxx 0 °X x 5 °X.
7.2 Pokud xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx tělíska xxxx xxxx xxxxxx xxx ve xxxxxx xx xxxxx a xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx použije xxxxx, xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx x xxxx xxx účinný xx xxxxxxxxxxx teploty.
7.3 Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx při xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0 x 5 °X) xxxx xx možné xx ohřát xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx zahájením testování. Xx xxxx nezbytné xxxx na to, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x vzorky xxxxx xxxx při xxxxxxx xxxxxxx teplotu.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx mléka, xxxxx možno xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx bodu xxxxxxx. Vzorky, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 0,18 x xxxxxxxx mléčné xx 100 xx xxxxx, xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx.
7.5 UHT xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 20 xxxxx před xxxxxxxxxx x otevřené xxxxxx.
8. Xxxxxx
8.1 Předběžné xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx, xxx hladina x teplota chladicí xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx s xxxxxx xxxxxxx, případně xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx na vzorky. Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx, zda xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxx zapnut xxxxxxx 12 hodin, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx chladicí xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx jeho xxxxxxx.
8.2 Rutinní xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxx každou xxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxx sodného (xxxxxxxxx xxxxxx x bodem xxxxxxx – 0,512 °X), xxxxx xx xxxxxxx získané při xxxx po xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x více xxx 0,001 °X. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xx bodu xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx o xxxx xxx 0,002 °X, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, xxx xx popsáno v xxxx 6.
Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx kalibrace xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
8.3 Xxxxxxxxx xxxx mrznutí xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x několikerým xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx tak xxxxxx, xxx se xx xxxxxxx přimíchal xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 ml xxxxx xx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx. Ujistit xx, že xxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxx x xxxxx, xxxxx je to xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx směrem xxxxxxx xxxxxx xxxxxx, čistou x xxxxxx nepouštějící xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx kalibrovaného xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx. Mléko xx xxxxxxx x mrznutí xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx výrobcem x xxxxxxxxx xx 0,1 °X.
(X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přístrojů xx xxxxx xxxxxxx tuto xxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; u ručních xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx dosáhne xxx, xx se zajistí, xxx xxxxxxx začalo, xxxx se ručička xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx.)
Xxxxx x jakéhokoli xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx nebo xxxxxxx, xxx je xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx se xxxxxx x xxxxxxxx se x xxxxx vzorkem xxxxx. Xxxxx tento xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx před dosažením xxxxxxxxx teploty, xxxxxxxxx xxxxx vzorku se xxxxxxx xx 45 °X x 5 xxxxx xx udržuje xx xxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx.
Xxxx zchladit xxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Teplota xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx konstantní, x xxxx klesne. Xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx doby x xxxx xxxxxxx xx nutné xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, x xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx maximální teploty, xx xxxx xxxxxx xx xxxxxx a xxx vodu x xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxx xxxxxxx xxxx podstatně xxxxxx xxx xxx xxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx maximální xxxxxxx.
Xxxx xx xxxxxx uspokojivě xxxxxxxxx, xxxxxxx zkumavku, xxxxxxxxxx xx vodou x xxxxx sondu x xxxxxxxx směrem xxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx vzorku xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxx xxxx naměřenými body xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (0,004 °X), xxxxxxx druhé xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Pokud jsou xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx na 0,004 °X, xxxxxx xx x xxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
8.4 Chlazení sondy
Po xxxxxxx přístroje uložit xxxxxxxx zkumavku na xxxxxx na xxxxx xxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
(X xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx možné; v xxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxx se xxxxxxx, xxx je xxxxx xxxx začátkem xxxxxx xxxxx zchlazena, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx několika xxxxxxx xxxxxxxxx, dokud se xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.)
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Xxxxxxx
Xxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx potvrzena, xx xxxxxxxx xx považuje xxxxxx xxxx dvou xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx:
Xxx xxxxxxx (°X)
|
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx |
Xxxxxx |
|
|
-0,544 |
-0,545 |
-0,544 |
|
-0,545 |
-0,546 |
-0,546 |
9.2 Spolehlivost
9.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (r): 0,004 °X
9.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (R): 0,006 °X
Xxxxxxx 1
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx kryoskopu
4.1 (xxxxxx xxxxxxxx xx vzorky xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx)
XX. STANOVENÍ XXXXXXXX XXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tato kapitola xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení aktivity xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxxx
2.1 Aktivita xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx alkalické fosfatázy xxxxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxx množstvím xxxxxx v μx xx 1 ml xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx než 4 xx xxxxxx xx 1 ml.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx ve vzorku xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx fenol xxxxxxx x dibromchinonchlorimidem a xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxx), xxxxx se xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 610 xx. Poté xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx byl xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Tlumivý xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx barnatého
4.1.1 Xxxxxxxxx xx xxxx 50,0 x hydroxidu xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) [Ba(OH)2.8H2O] a xxxxxxx xx 1000 xx.
4.1.2 Rozpustit ve xxxx 22,0 x xxxxxxxx borité (H3BO3) x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.1.3 Xxxxxx 500 xx každého xxxxxxx xx 50 °X, xxx roztoky xxxxxxx, promíchat, rychle xxxxxxxx xxx xx 20 °C, x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xX xx 10,6 ± 0,1 xxxxxxxx xxxxxxx 4.1.1 xxxx 4.1.2. Xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4.1.4 Xxxx xxxxxxxx zředit xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxx 6,0 x xxxxxxxxxxxxx sodného (XxXX2) xxxx 12,6 x NaBO2.4H2O x 20,0 x chloridu xxxxxxx (NaCl) a xxxxxxx xx 1000 xx.
4.3 Tlumivý xxxxxx xxx xxxxxxx vzniklého xxxxxxxxx
Xxxxxx 10 ml xxxxxxxxx roztoku xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2) xxxxx xx 100 xx.
4.4 Roztok substrátu
Rozpustit 0,1 x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx bezvodý, xxxxxx xxxxxx, xx 100 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.3) xxxx 0,5 x fenylfosfátu xxxxxxxxxxx xx 4,5 ml xxxxxxxxx roztoku xxx xxxxxxxx zabarvení (4.2), xxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx XXX (4.6) x xxxxxx stát 30 xxxxx xxx xxxxxxxx teplotě. Vzniklé xxxxxxxxx extrahovat 2,5 xx x-xxxxxxxx a xxxxxx stát, xxxxx xx xxxxxxx-1 neoddělí. Xxxxxxx x odstranit xxxxxxx-1. V případě xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx dní; xxxx xxxxxxxx vyvolat xxxxxxxxx x provést xxxxx xxxxxxxx. Tlumivý xxxxxxxx xxxxxxxxx bezprostředně před xxxxxxxx, a to xxxxxxxx 1 xx xxxxxx roztoku ve 100 ml xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.3).
4.5 Xxxxxxxxx xxxxx-xxx
Xxxxxxxxx xx vodě 3,0 x xxxxxx xxxxxxxxxxx (XxXX4 · 7X2X) x 0,6 x xxxxxx měďnatého (XxXX4 · 5H2O) x xxxxxxx na 100 xx.
4.6 Xxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxx XXX)
Xxxxxxxxx x 10 ml 96 % (X/X) xxxxxxxx 40 ± 1 xx 2,6-dibromchinonchlorimidu (XXX) (C6H2Br2ClNO6).
Skladovat x xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx. Vyhodit xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxx xxxx je xxxxxx xxx xxxxx xxxxx.
4.7 Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (XX)
Xxxxxxxxx ve xxxx 0,05 g xxxxxx xxxxxxxxx (CuSO4.5H2O) a xxxxxxx na 100 xx.
4.8 Xxxxxxxxxx roztok xxxxxx
4.8.1 Navážit 200 ± 2 xx xxxxxxx bezvodého xxxxxx x přelít do xxxxxxx baňky x xxxxxx 100 ml, xxxxxx xxxx, promíchat x doplnit xx 100 xx. Xxxxx xxxxxx může xxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx měsíců.
4.8.2 Xxxxxx xxxxx 10 xx xxxxxxxxx roztoku, doplnit xx 100 xx x promíchat. 1 xx xxxxxxxx 200 μx fenolu.
5. Přístroje x pomůcky xx xxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx, jakož x xxxxx a xxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxxx vyčištěny. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx vodou xxxx čistění xxxxx.
x) Xxxxxxx typy xxxxxxxxxx xxxxx mohou způsobit xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxx.
Xxxxxxx laboratorní xxxxxxxx, xxxxxxx:
5.1 Xxxxxxxxxx xxxx
5.2 Xxxxx lázeň xxxxxxxxxxxx xx 37 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx odečty xx vlnové délce 610 nm.
5.4 Xxxxxxxx, 16 xxxx 18 × 150 mm, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx po 5 xx a 10 xx.
5.5 Pipety
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx. o xxxxxxx 5 cm.
5.7 Xxxxxxxx xxxxxx o xxxxxxx nejméně 9 xx pro xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
5.8 Xxxxxxx xxxxx pro přípravu xxxxxxxxxxxx roztoků.
6. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
x) Stopy xxxx xxxx potu mohou xxxxxxxx falešně xxxxxxxxx xxxxxxxx a je xxxxx xx jim xxxxxxx. Je xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1 Příprava xxxxxxxxxxx vzorku
6.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx ne déle xxx dva xxx.
6.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxx xx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx (5.4), xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx slepý xxxxx.
6.3 Xxxxxxxxx
6.3.1 Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxxx vodě; xxxxxxxx x xxxxxxx x vroucí vodou xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Rychle xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.2 Po xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Přidat 10 xx xxxxxxx xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxxxxx.
6.3.3 Vzorky xxxxx xxxxxxxxx 60 xxxxx xx vodní lázni (5.2) x občas (xxxxxxx čtyřikrát) xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
6.3.4 Xxxxxx xxxx v bodě 6.3.1 xxxxxxxx dvě xxxxxx ve xxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.5 Xx každé xxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxxxx xxxxx-xxx (4.5) x řádně xxxxxxxxx.
6.3.6 Xxxxxxxxxxxx xxxx suchý xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx x x případě xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx; xxxxxxxxxx 5 xx xx xxxxxxxx.
6.3.7 Xxxxxx 5 xx tlumivého roztoku xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2).
6.3.8 Přidat 0,1 xx xxxxxxx BQC (4,6), xxxxxxxxx x 30 xxxxx nechat xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.9 X xxxxxxxxx s kontrolním xxxx xxxxxx pokusem xxxxxx xxxxxxxxxx při xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.3.10 Xxxxx absorbance xxxxxxxx x bodě 6.3.9 xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku obsahujícího 20 μg fenolu xx xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.4.4, xxxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxx vzorku. Xxxxxxxxx xxxxxxx smícháním objemu xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx testovacího xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxx do xxxx, xxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.4 Sestrojení kalibrační xxxxxx
6.4.1 Na základě xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxx (4.8.2) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx zředěných standardních xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0 (xxxxxxxxx xxxx slepý xxxxx), 2, 5, 10 x 20 μx xxxxxx xx xxxxxxxx. Xx xxxxx x xxxx zkumavek xxxxxx xxxxxx xxxxxx 1 xx vody x 1 ml xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
6.4.2 Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxx síranu xxxxxxxxx (4.7), 5 xx xxxxxxxxx roztoku xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.3), 3 xx vody x 0,1 ml xxxxxxx XXX (4.6); xxxxxxxxx.
6.4.3 Xxxxxx vyvíjet zabarvení 30 minut při xxxxxxxx xxxxxxx.
6.4.4 X xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx absorbanci xxx xxxxxx délce 610 xx.
6.4.5 Xx základě xxxxxx xxxxxxxxxx (6.4.4) xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx přidaného fenolu (6.4.1) xxxxxxxxx regresní xxxxxx metodou xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7. Vyjádření xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxx x xxxxxx
7.1.1 Xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (6.3.9) vypočítat xxxxxxxx xxxxxx pomocí xxxxxxxx přímky (6.4.5).
7.1.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x μx xxxxxx xx mililitr xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxx xxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxxx xxxxxxxxx = 2,4 × X × X
xxx
X xx xxxxxxxx xxxxxx x μg získané xxxxx bodu 7.1.1;
X xx xxxxxx zředění xxx xxxxxxx provedené xxxxx bodu 6.3.10 (x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx X = 1).
2,4 je xxxxxx xxxxxxx (5/12 x 1 ml testovacího xxxxxx) – viz 6.2 xx spojitosti x 6.3.2, 6.3.5 x 6.3.6.
7.2 Xxxxxxxxxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (r) : 2 μx xxxxxx/xx.
7.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (R) : 3 (xxxxxxxxx) μx xxxxxx/xx.
7.2.3 Xxxxx se xxxxxxx xxxxxxx podle 6.3.10, xxxxxx xxxxxxx x 7.2.1 a 7.2.2 se týkají xxxxxxxx xxxxxxxxx ze xxxxxxxxx xxxxxx.
XXX. STANOVENÍ XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxxx xxxx nepřítomnosti xxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx reakce na xxxxxxxxxx:
Xxxxx je xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, do 30 xxxxxx xx xxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xx peroxidázu:
Do 30 xxxxxx xx promíchání xx neobjeví xxxxx xxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx oxiduje xxxxxxxx parafenylendiamin xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (Xxxxxxxx xxxx). Intenzita xxxxxxxxx xx xxxxx úměrná xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxx 1,4 fenylendiaminu
Rozpustit x xxxxx xxxx (50 °C) 2 x 1,4 fenylendiaminu (X6X8X2) x xxxxxxx xx 100 xx. Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx a xxxxx, x xxxxx xxxxx xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx. Během xxxxxxx xx dvou xxx xx xxxxxxxxxx roztok 1,4 fenylendiaminu xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxx odstranit.
4.2 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxx 9 xx 30 % xxxxxxxx vodíku x xxxxxxx xx 100 xx. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxxxxxxxx kyseliny xxxxxx na litr xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx asi xxxxx xxxxx, xxxxx xx skladován x xxxxxx x xxxxx, x xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, která xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x organickými xxxxxxx.
5. Xxxxxx
5.1 Xxx 5 xx xxxxxx mléka xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
5.2 Xxxxxx 5 xx xxxxxxx 1,4 xxxxxxxxxxxxxx (4.1).
5.3 Přidat 2 xxxxx roztoku peroxidu xxxxxx (4.2).
5.4 30 xxxxxx xx promíchání xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx modré zabavení xxxxxx xxxx xxx 30 xxxxxx po xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXX 30 °C
1. Xxxxxxx x xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxx mikroorganismů xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx při 30 °X. Xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxx mléko, pasterované xxxxx, XXX xxxxx xxxx sterilizované mléko, xxxxx bylo 15 xxx preinkubováno xxx 30 °C.
2. Definice
"Mikroorganismy" xx xxxxxxxx organismy, xxxxx vytvářejí počitatelné xxxxxxx po xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Princip
Smíchat xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx médiem x Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx 72 hodin xxx 30 °C. Xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx mikroorganismů xx 1 ml xxxxxxxx xxxx pasterovaného mléka xxxx xx 0,1 xx preinkubovaného xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx XXX xxxxx.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx ze xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na 170 xx 175 °C.
4.1.2 Xxxxxxxx, nastavitelný xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, schopný xxxxxxxx teplotu 30 ± 1 °X.
4.1.4 xX-xxxx se xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Zvětšovací xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Zvětšovací xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Míchačka xxxxxxx xxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxxxx ředění x 9 xx xxxxxxxx xxxxxxx a pracující xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx obsahu zkumavky.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx dalších xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Baňky x objemu 150 xx 250 ml xxxx xxxxxxxx o xxxxxx 20 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Pipety (xxxxxxxx xxxxx), skleněné xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, s xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 ml, x xxxxxxxxx xxxxxxx x průměru 1,75 xx 3 mm.
4.2.4 Xxxxxxx misky z xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, dno misek xx vnitřní xxxxxx xxx 90 xx 100 mm. Vnitřní xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx 10 xx. Xxx xxxxx mít xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx by xxxxxxx počítání xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx pomůcek xx xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx:
x) x horkovzdušné xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx teplotě 170–175 °C;
b) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °C.
Při použití xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx na xx, xxx bylo xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxx, xxxx xxxxxx by xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx by xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx ze xxxx sterilizované x xxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxx odvětráním xxxx.
Xxxxxx musí být xxxxxxxxxxxxx x horkovzdušné xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx – agar xx xxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx (+) nebo xxxxxxxx |
1,0 g |
|
Sušené xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10–15 g xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx se xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx sušeným odstředěným xxxxxx, xxxxx průkazně xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, trypton, xxxxxxx x nakonec sušené xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx x xx stálého xxxxxxx xxxxx xx xxxx, xxxxx se xxxx zcela nerozpustí, xxxx xxxxxxxx x xxxx xxx 30 xxxxx.
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, přefiltrovat xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); pokud xx je xxxxxxxx, xxxxxxx xX, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx sterilizaci byla xxxx xxxxxxx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °C.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Rozdělit médium (5.1) x xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 xx do xxxxx nebo xx 12 až 15 xx do zkumavek (4.2.2). Xxxxx x xxxxxxxx uzavřít.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx (4.1.2) při 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xx kultivační xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx xxxxxxx mezi 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx z komerčního xxxxxxxxxxxxx kultivačního xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx mléko před xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx pH xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X xxxxxxx xxxxx xxxx 5.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Xxxxxx pepton/sůl
Složení:
|
Pepton |
1,0 x |
|
Xxxxxxx sodný (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, xxxxx xx xx nutné, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xX-xxxxxx (4.1.4); pokud to xx xxxxxxxx xxxxxxx xX roztokem (nejméně 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx byla jeho xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x skladování xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) tak, xxx po xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx obsahovala 9,0 ± 0,2 xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x autoklávu (4.1.2) xxx 121 ± 1 °C.
Zkontrolovat xX xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx ihned, skladuje xx v temnu xxx xxxxxxx mezi 1 a 5 °X, avšak ne xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) xx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx dehydrovaných xxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx výrobce. Upravit xX xxxxxxx podle xxxx 6.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Před xxxxxxxxx mikrobiologického xxxxxxxxx xxxxxx rychle xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxx řádně promíchat, xxx byly xxxxxxxxxxxxxx xx nejrovnoměrněji xxxxxxxxx, x xx 25 xxxxxxxx otočeními xxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx pěnu xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx mícháním a xxxxxxx testovacího vzorku xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx minuty.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (10-1) (xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 ml xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx pasterovaného xxxxx xx 9 xx xxxxxxx (6.1), xxxxxxx xxxxxx xxxxx přijít xx kontaktu s xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx teplota xxxxxx mléka. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx toto xxxxxxxx ředění xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx se xxx xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx dalších xxxxxxxxxxx xxxxxx (syrové x xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxxxxxx ředění (7.3) do 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx xxxxxx x xxxx 7.3.
Xxxxx xx xxx xxxxxx 10−2.
X xxxxx xxxxxx další xxxxxxxxx ředění se xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx dlouho, xxxxx xxxxx xxxxxxxx přiměřené xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx misek
7.5.1 Xxxxxx xxxxx: Sterilní xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx misky (4.2.4) 1 ml xxxxxx x/xxxx vhodného xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx vhodnou xxxxx.
7.5.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx: Sterilní xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 ml vzorku x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Musí být xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxx každé xxxxxx (8.1.1) připravit xxxxx vhodnou xxxxx.
7.5.3 XXX mléko a xxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx xx 15 xxxxx xxxxxxxx xxx 30 °X – xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx X xxxxxxxx XXX bod 5):
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx misky (4.2.4) 1 ml xxxxxx mléka (7.2). Xxxxxxxxx xxx xxxxx.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx naočkované xxxxx xxxxx xxx 15 xx 18 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Ihned xxxxxxxxx xxxxxx Petriho xxxxx, aby xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx rozložení xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx přípravy xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx druhu xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx ředění s xxxxxxxxxxx médiem xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
7.7 Xxxxxxxx Petriho xxxxx
Xxxxxxx misky xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx obrácené dnem xxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxx xxxxx. Sloupky xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxx x xxxxxxxx xx stěnami a xxxxxx xxxxx inkubátoru.
Inkubovat 72 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °C.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx x Petriho xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 300 xxxxxxx.
Xxxxx vyšetřit xxx tlumeném xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) a/nebo xxxxxxxxxx počítadlo (4.1.8). Xx xxxxx dbát xx to, xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx sraženin v xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x xxxxx odlišit xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx kolonii. Pokud xxxxxxx xxxxxxx povlak xxxxxxxxx méně xxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx a xxxxxxxxx odpovídající xxxxx xxx xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx více xxx xxxxxxxx plochy xxxxx, xxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxx x vyjádření xxxxxxxx
8.1 Xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx
8.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx obsahujících 10 xx 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.1.2 Xxxxxxxxx xxxxx mikroorganismů xx 1 ml syrového xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx tohoto xxxxxx:
∑X / (x1 + 0,1x2) d
kde:
∑C ΣX xx celkový xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 8.1.1.
(x1 + 0,1 x2)x xx objem xxxxxxxxxxxx xxxxxx, kde:
n1 xx počet xxxxx xxx xxxxxx ředěním
n2 xx xxxxx xxxxx xxx xxxxxx ředění
d xx xxxxxx zředění, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
Xxxxx se xxxxxxxxxx xx dvě platné xxxxxxx. Xxxx je xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx pět, xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxx vlevo xxxx sudá.
Příklad (xxxxxxxxxxx xxxxx):
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 x 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; = 278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2
= 6290,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.1.3 Xxxxx jsou všechny xxxxx nižší xxx 10, uvést, že xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxxxxx xx "xxxxx xxx 10 x x", xxxxxxx "x" xx převrácená hodnota xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
8.1.4 Xxxxx xxxx všechny xxxxx xxxxx než 300 x xxxxxxxx xx xxxxx, xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxx převrácenou xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Výsledek xxxxxxxx jako "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xx".
8.2 XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xxxxx xxx 10 xxxxxxx na 0,1 xx se xxxxxxxx xx nevyhovující xxxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/EHS.
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx uznaných xxxxxxxxx xxxxx ještě xxxxxx x xxxxxxxxx.
X. XXXXXXXXX XXXXXX MIKROORGANISMŮ PŘI 21 °X
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx technikou xxxxxxxx kolonií při 21 °X x xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxx dní xxxxxxxxxxxxx při 6 xX x xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx psychotropními xxxxxxxxxxxxxx, které xx xxx množit xx x xxxxx xxx 6 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx organismy, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx aerobní xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx pasterované xxxxx pět dní xxx 6 °X. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx inkubovat 25 xxxxx při 21 °X. Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx sušárna, nastavitelná xx 170 xx 175 °C.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx:
x) 6 ± 0,2 °X
x) 21 ± 1 °X xx všech bodech xxxxxx.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °C.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx počítadlo
4.1.9 Xxxxxxxx xxxxxxx rozmíchat 1 xx xxxxxx mléka xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x 9 xx xxxxxxxx roztoku x xxxxxxxxx xx principu xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Pomůcky ze xxxx
4.2.1 Zkumavky s xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx k xxxxxxxxxx 10 ml xxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxx desetinných xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x objemu 150 xx 250 xx xxxx zkumavky x objemu 20 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx vatou), skleněné xxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx materiálu, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx, x výpustním xxxxxxx o xxxxxxx 1,75 až 3 xx.
4.2.4 Petriho xxxxx x xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxx má xxxxxxx xxxxxx xxx 90 xx 100 x. Vnitřní hloubka xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx 10 xx. Xxx xxxxx xxx xxxxx nerovnosti, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Sterilizace xxxxxxx ze skla:
Pomůcky xx xxxx xx xxxxxxxxxxx jedním x xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx teplotě 170–175 °X;
x) v xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx teplotě 121 ± 1 °X.
Xxx použití autoklávu xx xxxxx dbát xx xx, aby xxxx xxxxxxxxx dostatečné xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx xx xxxxxxxx sterilizuje x nádobách, tyto xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx uzavřeny, xxxxxxx nebo xxxxx xx xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx ze skla xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx xx měly xxxxxxx odvětráním xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx médium – xxxx se xxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx(+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 g |
|
Agar |
10-15 x podle xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky. Toto xx ověří srovnávacími xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, které xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx neobsahuje.
Příprava:
V tomto xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx ve vodě xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx odstředěné xxxxx. Xxxxx suspenze usnadňuje xxxxxx. Poté xxxxxx xxxx x xxxxx xx xxxx za xxxxxxx xxxxxxx, dokud xx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx zahřívat x xxxx xxx 30 minut.
Pokud xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxx pH-metru (4.1.4); xxxxx to xx xxxxxxxx, upravit pH, xxxxxxxx (nejméně 0,1 xxx/x) hydroxidu xxxxxxx xxxx kyseliny chlorovodíkové, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx jeho xxxxxxx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.2 Xxxxxxxxx, sterilizace x xxxxxxxxxx kultivačního média
Rozdělit xxxxxx (5.1) v xxxxxxxxxx od 100 xx 150 xx xx xxxxx xxxx xx 12 xx 15 xx xx xxxxxxxx (4.2.2). Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) při 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX kultivačního xxxxx.
Xxxxx se kultivační xxxxxx nepoužije xxxxx, xxxxxxxx se x xxxxx xxx teplotě xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx než 1 měsíc xx xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kultivační xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) se xxxx připravit x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Dodržet pokyny xxxxxxx, xxx přidat xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx rozpouštěním, pokud xxxx složkou produktu.
Upravit xX xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °C xxxxxxxx xxxxx bodu 5.1, xxxx rozdělit, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx kultivační xxxxxx xxxxx xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Roztok xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
8,5 g |
|
Voda |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, xxxxx xx je xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xX-xxxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxx pH xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxx hodnota 7,0 ± 0,1 při 25 °X.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx zkumavek (4.2.1) xxx, aby po xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx ředidla. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x autoklávu (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X. Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxxx.
Xxxxx xx ředidlo xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx při xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 měsíc xx xxxx xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx dehydrovaná ředidla
Ředidlo (6.1) xx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.1, xxxx rozdělit, xxxxxxxxxxxx a skladovat xxxxxxx xxxxx xxxx 6.2.
7. Postup
7.1 Rozpuštění xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx vyšetření xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média x zchladit ve xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °C.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx [4.1.3 x)] xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx, xxxxx xx xxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx vzorek x xxxxxx nejméně 100 xx xx xxxx 120 ± 2 xxxxx xxx 6 ± 0,5 °X.
7.2.2 Po xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx co xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, a xx 25 rychlými xxxxxxxxx xxxxxx xx vzorkem. Xx nutné xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx mezi mícháním x odběrem xxxxxxxxxxx xxxxxx xx neměla xxxxxxxxx xxx minuty.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx ředění (10−1)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 ml xxxxxx (7.2) syrového xxxx pasterovaného mléka xx 9 xx xxxxxxx (6.1), xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Teplota ředidla xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx jako xxxxxxx xxxxxx mléka. 5 xx 10 sekund xxxxxxx promíchávat xxxx xxxxxxxx ředění xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx dalších desetinných xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 ml xxxxxxxxxx ředění (7.3) xx 9 xx xxxxxxx (6.1) xxxxx xxxxxx v bodě 7.3.
Xxxxx se tak xxxxxx 10−2.
X xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx opakuje tak xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx přiměřené xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx misek
Sterilní xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx do xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx a/nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx. Xxx xxxxx ředění (8.1.1) připravit jednu xxxxxxx xxxxx.
7.6 Nalévání xxxxxxxxxxxx média
Do každé xxxxxxxxxx xxxxx nalít xxx 15 xx 18 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Ihned promíchat xxxxxx Petriho xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx přípravy xxxxxx xxxxx x smícháním, xxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx s kultivačním xxxxxx xxxxx překročit 15 xxxxx.
Xxxxxx stát xx vodorovném, xxxxxxxx x čistém xxxxxxx, xxxxx xxxxxx neztuhne.
7.7 Xxxxxxxx Petriho xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx na xxxx xxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, ani xxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 25 xxxxx při 21 ± 1 °C.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx kolonie x Petriho xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 300 xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx počítání xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx počítadlo (4.1.8). Xx nutné xxxx xx xx, xxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx provést xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx skla x xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx tvořící xxxxxx xx považují xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx tvořící xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx, spočítat xxxxxxx x nepostižené xxxxx misky x xxxxxxxxx odpovídající xxxxx xxx celou misku. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Xxxxxx výsledky xxxxx obsahujících 10 xx 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 a 8.1.4).
8.2 Xxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx vzorce:
∑C / (x1 + 0,1n2) x
xxx:
ΣX je xxxxxxx xxxxx kolonií podle xxxx 8.1,
(x1 + 0,1 n2)d xx xxxxx xxxxxxxxxxxx vzorku, xxx:
x1 xx počet xxxxx při xxxxxx xxxxxxx
x2 xx xxxxx xxxxx při xxxxxx xxxxxx
x xx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx počty.
Počet xx xxxxxxxxxx na xxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx číslice xxxxx byla sudá.
Příklad:
Ředění 10−2: 278 x 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 a 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; =278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2=
=629 / 0,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.3 Xxxxx xxxx xxxxxxx počty xxxxx než 10, xxxxx, xx počet xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx "nižší xxx 10 × x", xxxxxxx "x" je xxxxxxxxxx hodnota xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
8.4 Pokud xxxx xxxxxxx počty xxxxx než 300 x xxxxxxxx xx xxxxx, xxxxxxx odhad x vynásobit xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx faktoru xxxxxxx. Xxxxxxxx vyjádřit xxxx "Odhadovaný xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xx".
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx mezinárodně xxxxxxxx xxxxxxxxx testů xxxxx xxxxxx x dispozici.
VI. XXXXXXXXX OBSAHU XXXXXXXXXXXX XXXXXXXX – POČÍTÁNÍ XXXXXXX PŘI 30 °X
1. Xxxxxxx a xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx referenční postup xxx xxxxxxxxx koliformních xxxxxxxx v pasterovaném xxxxx xxxxxxxxx počítání xxxxxxx xxx 30 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxx bakteriemi" xx xxxxxxxx bakterie, xxxxx při 30 °X xxxxxxxxx charakteristické xxxxxxx nebo necharakteristické xxxxxxx, xxx jsou xx popsaných podmínek xxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxx.
3. Princip
Smíchat xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx s kultivačním xxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx x 24 xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x, pokud xx xx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx laktózu. Xxxx xxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
4. Xxxxxxxxx x pomůcky xx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx sušárna, xxxxxxxxxxxx xx 170 až 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 30 ± 1 °X.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Očkovací xxxxx xx xxxxxxx platina-iridium xxxx xxxx-xxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
4.2.1 Zkumavky x xxxxxxxx uzávěry x xxxxxxx 20 xx, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kultivační xxxxxx (5.2) a Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx selektivního xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.1).
4.2.3 Xxxxxx (utěsněné xxxxx), xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx hrotem, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 – 10 xx, s xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 až 3 xx.
4.2.4 Petriho xxxxx x čirého, xxxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx materiálu, xxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx asi 90 xx 100 x. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx měla xxx xxxxxxx 10 xx. Xxx xxxxx xxx žádné xxxxxxxxxx, xxxxx by xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx:
Xxxxxxx xx skla se xxxxxxxxxxx jedním x xxxxxx xxxxxxx:
x) v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx hodinu xxx teplotě 170 – 175 °X;
x) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx na xx, aby xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx xx xxxxxxxx sterilizuje x xxxxxxxx, tyto xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx uzavřeny, xxxxxxx xxxx víčka xx xxxx být xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx by xx xxxx vysušit xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx médium
5.1 Agar x krystalovou xxxxxxx, xxxxxxxxx červení, xxxxx x xxxxxxxx (XXXX xxxx). Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
7 g |
|
Kvasnicový extrakt |
3 x |
|
Xxxxxxx (X12X22X11.X2X) |
10 g |
|
Chlorid xxxxx (NaCl) |
5 x |
|
Xxxxxxx xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxxxx xxxxxx |
0,03 x |
|
Xxxxxxxxxx violeť |
0,002 x |
|
Xxxx |
10 xx 15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx složky xx xxxx x nechat xxxx xxxxxxx minut. Xxxx xxxxxxxx promíchat.
Zkontrolovat xX pomocí pH-metru (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxx, upravit xX xxxxxxxx (nejméně 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, aby po xxxx byla xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 při 25 °X.
Xxxxx rychle xx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx xx množstvích 100 xx 150 xx xx sterilních xxxxx (4.2.2). Kultivační xxxxxx zchladit xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
X xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média (6.4).
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx do xxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.2 Tekutý xxxx x brilantovou xxxxxx. Konfirmační xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
10 x |
|
Xxxxxxx (C12H22O11.H2O) |
10 x |
|
Xxxxxxxxxxx hovězí xxxx |
20 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxx |
0,0133 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxx x uvést xx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xX xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) hydroxidu xxxxxxx xxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx sterilizaci xxxx xxxx hodnota 7,2 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx xxxxxx xx 10 xx xx zkumavek (4.2.1) xxxxxxxxxxxx Durhamovy xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxx trubičky nesmějí xx sterilizaci obsahovat xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxx xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx přípravě.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx může xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Upravit xX, rozdělit, xxxxxxxxxxxx x skladovat kultivační xxxxxx podle bodů 5.1 x 5.2.
6. Xxxxxx
6.1 Kultivační xxxxxx
Xxxxxx xxxxxx (XXXX xxxx) xxxxxxx x xxxx 5.1.
6.2 Xxxxxxxx vzorku xxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx co xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x to 25 xxxxxxxx otočeními xxxxxx xx vzorkem. Xx nutné zabránit xxxxxx pěny xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx neměla xxxxxxxxx xxx minuty.
6.3 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) 1 ml xxxxxx xxxxx xx xxxxx xx tří xxxxx (4.2.4) x tím xxxxxxxxx 3 xx xxxxxx xxxxx (6.2).
6.4 Xxxxxxxx kultivačního xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 12 xx VRBL xxxxx (6.1)
Xxxxx po xxxxxx xxxxx promíchat xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxx x rovnoměrnému rozložení xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx vzorku xxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xx xxxxxx kontroly xxxxxxxxx xxxxxxxxx nenaočkovanou misku x 12 xx xxxxx XXXX agaru, xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxx ztuhnutí xxxxx xxxxxxx 4 xx VRBL xxxxx (6.1) xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx.
6.5 Xxxxxxxx Petriho misek
Přenést xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Xxxxx inkubovat xxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx na xxxx xxxx xxx šest xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx nesmějí vzájemně xxxxxxx, ani xxx x kontaktu se xxxxxxx a xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 24 ± 2 xxxxxx xxx 30 ± 1 °C.
6.6 Xxxxxxxx xxxxxxx
6.6.1 Xxxxxxx xxxxxxx x Xxxxxxx miskách xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 150 xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx červené xxxxxxx x xxxxxxx nejméně 0,5 xx, x xxxx bez xxxxxxxxx xxxxx, charakteristické xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.6.2 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx kolonie necharakteristický xxxx (xxxx. jinou xxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxx xxxx sraženin xxxxxxxx k xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx (6.7).
6.7 Xxxxxxxxxxx xxxx
Xxxxx xxxxx x xxxx 6.6.2 xxxxxxx xxxxxxxxxxx test u xxxxxxxx počtu (xxxx. 3 až 5) xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xx se pomocí xxxxxxxx jehly (4.1.6), xxxxxxxx zkumavky obsahující xxxxxx agar s xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.2). Xxxxxxxxx zkumavky 24 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °X.
Xx kolonie xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx kolonie, xxxxx v Durhamově xxxxxxxx tvoří xxxx.
7. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 150 kolonií.
7.2 Xxxxx xx provede xxxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx potvrzených xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 ml xxxxxxxxxxxxx mléka podle xxxxxx vzorce:
ΣC / x
xxx:
ΣX je xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (7.1 v xxxxxxxxxxx xx 7.2), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku xxxxx (6.3).
x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (6.3) x xxxxxxxxxxx (3 xx).
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxx 100 kolonií. Xxxx xx zaokrouhlovaná číslice xxx, xxxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx číslice xxxxx byla xxxx.
Xxxxx xxxx všechny počty xxxxx xxx 150 xxxxxxx, uvést výsledek xxxx "xxxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 xx".
8. Spolehlivost
Výsledky xxxxxxxxxxx uznaných kruhových xxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
XXX. XXXXXXXXX XXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX
Xxxx xxxxxxxx popisuje xxx xxxxxxxxxx postupy xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxxx metoda
B. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x syrovém xxxxx.
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxx xxx stanovení xxxxx buněk ve xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx správnosti xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx (viz B.1).
2. Xxxxxxxx
Xxx tento xxxxxx xx somatickými buňkami xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx x epitelové xxxxx, xxxxxxx xxxxx xx možné xxxxxxxx xxxxxxx methylenovou xxxxx
3. Xxxxxxx
Xxxxxx 0,01 ml xxxxx xx 1 xx2 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx vysuší x xxxxxxx. Počítání se xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx vynásobí xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xx 1 xxxxxxxx.
4. Xxxxxxx
Xxxx se xxxxxx chemikálie čistoty x.x..
Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxx xxxx |
0,6 x |
|
Xxxxxxx – 99 % |
54 xx |
|
1,1,1-xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx |
40 xx |
|
Xxxxxx kyselina xxxxxx |
6 ml |
Upozornění
Tetrachlorethan xx xxxxxxxx. Příprava x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx uskutečnit x xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx x baňce xxxxxxx x 1,1,1-trichlorethan xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxx xxxxx xx 60 xx 70 °X. Xxxxxx methylenovou xxxx, xxxxx xxxxxxxxx, 12 xx 24 xxxxx xxxxxxx x chladničce xxx 4 °C x xxxxxx ledovou xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx o xxxxxxxxx velikosti xxxx 10 xx 12 xxxxxxx x uchovat xxxxxxx roztok xx xxxxxxxxxxxx uzavřené xxxxx. X xxxxxxx vytvoření xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx přefiltrovat.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
5.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 500 × xx 1000 ×
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx umožňující xxxxxxxxx xx 0,01 xx x xxxxxxxxx xxxxxxx ± 2 %.
5.3 Xxxxxxxx sklíčko x xxxxxxx 20 xx × 5 mm xxxxxxxxxx pro tenkou xxxxxx nebo standardní xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 20 × 5 xx xxx xxxxxx xxxxxx.
5.4 Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx (30 °X až 50 °X) pro xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5 Ventilátor (xxx) pro sušení xxxxx xxxxxx.
5.6 Xxxxx xxxxx, nastavitelná na 30 xx 40 °X xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
5.7 Xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 0,01 xx.
6. Postup
6.1 Vzorek xxxxx
Xxxxxx xxxxx musí xxx testován do xxxxx xxxxx po xxxxxx xxxxxx. Během xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 6 °X. Xxxxxx xxxxx xxx zmražen.
6.2 Xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxx ve xxxxx xxxxx (5.6) na 30 xx 40 °X. Xxxx xxxxx xxxxxxxxx. Zchladit xx xxxxxxx, při které xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (5.2), například 20 °X.
6.3 Předběžné xxxxxxxx xxxxxxxxxx sklíček
Vyčistit podložní xxxxxxx (5.3) xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx nezanechává prach, xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx před xxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx (5.2) odebrat 0,01 xx mléka xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx, která xxxxxx xx xxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx podložní xxxxxxx (5.3) a xxxxxxx obkreslit xxxxx xxxxxxxxx (20 xx × 5 xx). Xxxx ji co xxxxxxxxxxxxxxx vyplnit. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx vrstvu xx xxxxxxxxxxxx vyhřívací xxxxx (5.4) xx xx xxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx.
6.5 Barvení tenkých xxxxxx
Xxxxxxx xx 10 xxxxx do xxxxxxxxx xxxxxxx (4). Sušit x, xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx ventilátorem (5.5). Xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx vody, xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx nesmyje. Xxxxx sušit x xxxxxxx xxx, xxx xxx chráněn xxxx xxxxxxx.
6.6 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (500 × xx 1000 ×) xxxxxx xxxxxx mikroskopického xxxx (5.7).
7. Xxxxxxxx x výpočet
7.1 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxxxxxx (5.1). Xxxxx počítání xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx jádra, x xx taková xxxxx, xxxxx jsou jasně xxxxxxxxxxxx x x xxxxx je v xxxxxxxxxxxxxx poli viditelná xxxxxxx xxxxxxxx. Počítat xxxx xxxx xxxx xx střední xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxx, xxxxx xxxx vybrány xxxxx x okrajových xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x tudíž i xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx nejméně xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx částí xxxxx vrstvy. Xxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx polí xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx vrstvy byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx se xxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx pod mikroskopem xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxx standardizaci xxxxxxxxxxxxx a mechanických xxxxxxx počítání, variační xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx než xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx 400000 xx 600000 buněk/ml xx xxxxx xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, které je xxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxx rozdělení xxxxxxx 400, xxx xxxx xxxxxxx kritérium opakovatelnosti.
Podle Xxxxxxxxxx rozdělení:
M = X = x2,
xxx:
X xx střední xxxxxxx
X xx xxxxxxx
x je xxxxxxxxxx odchylka.
Variační xxxxxxxxxx xx:
XX = x × 100 % / X xxxx XX = 100 % / x&xxxx;xxxx XX = 100 % / XXX
X (xxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxx), xxxxx xxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxx 400 xxx XX = 5 %).
7.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxxxx 0,01 xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx 7.3.1 xxxx 7.3.2.
7.3.1 Počítání pásů xx xxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxx, xxxxx xx xxxx počítat, je 5 xx. Xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7).
Pracovní faktor = 20 × 100 / d × x
xxx:
x xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx pole x mm, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.7)
x xxxxxxx xxxxx spočítaných xxxx.
7.3.2 Počítání xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xx střední xxxxxxx tenké xxxxxx xxxx pomocí mřížky
Pracovní xxxxxx
xxx:
x xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx pole x xx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x mikrometrickou xxxxxxxx (5.7)
x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
7.4 Xxxxxxx xxxxxx xxxxx
X xxxxx získat xxxxx xxxxx xx xx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (7.1 x 7.2) xxxxxxxx pracovním xxxxxxxx (7.3).
7.5 Přesnost
Variační xxxxxxxxxx (xxx 7.2) xxxxx xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kruhových xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx.
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxxxx kalibraci (xxx X.1) xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx počtu somatických xxxxx v syrovém xxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx konzervace.
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx postup xx xxxxxxxxxxx buňkami xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx mají x xxxxxxxx barvení xxxxxxx DNA xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxx xxxxxx (xxxxxxxxx 0,2 xx) se důkladně xxxxxxxx s tlumivým xxxxxxxx x s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx ve xxxxx xxxxx xxxxxx xx rotační disk, xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx buňka xxxxxxxxx xxxxxxxxxx impuls, xxxxx xx zesiluje x xxxxxxxxxxx. Obsah xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx v xxxxxxxx xx mililitr.
4. Xxxxxxx
Xxxxx xxxx stanoveno xxxxx, xxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x.x.. Xxxxxxx xxxx je xxxxxxxxxxx nebo deionizovaná, xxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx draselný |
51,00 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxx |
13,75 x |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx(xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 xx |
|
xX 5,7 xx 5,9. Xxxxxxx xxxxx xx 10000 xx. |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx jednotlivé xxxxxx. Skladování ve xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx nádobě xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx.
4.2 Fluorescenční xxxxxx (zásobní roztok)
Složení
|
Ethidiumbromid |
1,0 x |
Xxxxxxx vodou na 1000 xx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx. Skladování xx xxxxxxxxxxxx uzavřené xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx nemělo xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (pracovní xxxxxx)
Xxxxxxx 20 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.2) x xxxxxxxx roztokem (4.1) xxx, xxx xx získal xxxxx 1000 ml. Pracovní xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxx dní.
4.4 Xxxxxxx roztok
Složení
|
Tlumivý roztok (4.1) |
10 xx |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 xx |
|
Xxxxxxx x 25 % xxxxxxxxxx |
25 xx |
Xxxxxxx xxxxx xx 10000 ml
Příprava:
Smíchat xxxxxxxxxx xxxxxx. Skladování xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxx použitím xxxxxxxxxxx. Xxx xx xxxxxxx vztah mezi xxxxxxx částic, xxxxx xx xxxx xxxxxxx, x prahovou xxxxxxxx, xxx níž xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx obsah xxxxx xxx stanoven mikroskopickou xxxxxxx (X).
5.2 Vodní xxxxx, s xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxxx na 40 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxx, s xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx 15 xx.
6. Xxxxxx mléka
6.1 Xxxxxx xxxx xxx skladován xxx nízké xxxxxxx xx xxxxxxxx (5.3). Xxxxx xxxxxx nebyl xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx může xxxxxxx xx xx xxxxxxxx 24 xxxxx po xxxxxxxx, xxxxx obsah xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxx. Skladovací xxxxxxx nesmí xxxxxxxxx 6 °C.
6.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx se musí xxxxxxx xx 24 xxxxx. Konzervace xxxx xxx xxxxxxxxx co xxxxxxxx po odběru xxxxxx.
6.2.1 Chemická xxxxxxxxxx xxxxxx se provede xxxxxxxx jednoho x xxxxxx konzervačních xxxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
xxxxxxx koncentrace xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxx xxxxx být xxxxx xxx 0,6 x xx 100 xx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx xxxxxxx 6 xx 12 °X;
- xxxxxxxxxxx draselný:
konečná xxxxxxxxxxx dvojchromanu xxxxxxxxxx xx xxxxxx nesmí xxx xxxxx xxx 0,2 x xx 100 xx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx dalších 72 hodin xxx xxxxxxx 6 až 12 °C;
- azid xxxxx:
xxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxx azidem xxxxxx x xxxxxxx koncentraci 0,024 x/100 xx, xxxxx je vzorek xxxxxxxx na xxxxxxx 6 xx 12 °X xxxxx xx xxxx xxxxxx a xxxxxxxx do 48 xxxxx xx xxxx xxxxxx;
- xxxxxxxx:
xxxxxx může xxx konzervován bronopolem x konečné xxxxxxxxxxx 0,05 x/100 xx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx 6 xx 12 °X ihned po xxxx odběru a xxxxxxxx do 72 xxxxx po xxxx xxxxxx.
6.2.2 Xxxxxx, xxxxx xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx boritou, může xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx až 48 xxxxx dvojchromanem xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxx xxx x vzorky xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx sodným, xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx podmínky xxx xxxxxxxxxx odpadních xxx.
7. Xxxxxx
7.1 Předběžné xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx, xxxxx se xx xxxxxxxx, xx xx nadojení skladuje xxxxxxx 24 xxxxx xxx xxx 2-6 °X. Počítání xxxxxx x xxx nadojení xx xxx předběžného xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, neboť xxxxxxxx xxxxx být xxxxxx xxxxx. Pokud xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxx nejméně xxx hodiny xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxx 6.2.1).
7.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx vzorek (xxx 7.1) xxxx xxxxxxxxxx vzorek xxxxxxx xxxxx den starý xxxxxx ve xxxxx xxxxx (5.2) xx xxx 40 °C. Xxxx skladovat vzorek xxx pokojové xxxxxxx xx do počítání.
7.3 Xxxxxxxx buněk
Počítání se xxxxxxx pomocí xxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.1) xx 15 xxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxx (viz 7.2). Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx důkladně xxxxxxxxx, xxx se xxxxxxx co xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx rozdělení xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x) x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) mezinárodních xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxx, které xxxx x dispozici xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxx:
(1) xxxxx xxxxx xxxx 400 000 až 500&xxxx;000 xxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx:
xx = 20000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 5–4 %)
- směrodatná xxxxxxxx reprodukovatelnosti:
sR = 40000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 10–8 %)
9. Xxxxxxxx správnosti
Kontrola xxxxxxxxxx xx provádí xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx, který xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pod mikroskopem xx národní xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
XXXX. XXXXXXX XXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXX
XXXXXXX X XXXXXX POUŽITÍ
Tato kapitola xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx detekce xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx:
X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx umožňuje xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx jsou založeny xx použití Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx, XXXX 10149, xx xx testovacího xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx byl xxxxxx jako xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx.
X. Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx se musí xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx kvalitativního postupu, xxx xxxxxxxxxxxx penicilinu x xxxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxx.
X. Xxxxxxxxxxxx postup
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx v xxxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx [1]
|
Xxxxxxxxx xxxxx |
||
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxx |
|
|
Xxxxxxxxxxxxxxx |
0,002 |
0,006 |
|
Xxxxxxxxx |
0,002 |
0,005 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,015 |
0,035 |
|
Xxxxxxxx |
0,006 |
0,011 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,10 |
0,40 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,20 |
0,45 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxx |
0,15 |
0,50 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
7 |
15 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx |
4 |
13 |
|
Xxxxxxxx |
1 |
22 |
|
Xxxxxxxxx |
9 |
28 |
|
Xxxxxxxxxx |
0,06 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxx |
1 |
2,25 |
|
Xxxxxxxxx |
0,01 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,01 |
0,1 |
|
Xxxxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxxx) |
0,5 |
1 |
|
Xxxxxxxxxx extrakt |
2 x |
|
|
Xxxxxx |
5 x |
|
|
Xxxxxx xxxxxxx |
1 g |
|
|
Chlorid xxxxx |
5 x |
|
|
Xxxx |
10–15 x |
|
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx. Xx občasného xxxxxxx xxxxx xx xxxx. Upravit pH xxx, xxx xx xxxxxxxxxxx byla xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxxxx xxxx xx 100 xx do xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx šikmý xxxx.
Xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X.
5.1.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxx xxxxx |
2 x |
|
Xxxx |
15 x |
|
Xxxx |
1000 ml |
|
Roztok xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx (xxx 5.1.3) |
10 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx složky xx vodě, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Za občasného xxxxxxx xxxxx xx xxxx. Xxxxxx trimethoprim xxxx tetroxoprim x xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X. Upravit xX, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx jeho xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.1.3 Xxxxxx trimethoprimu xx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxxxx |
5 xx |
|
xxxx Xxxxxxxxxxx |
30 xx |
|
96 % Xxxxxxx |
5 ml/30 xx |
|
Xxxxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x ethanolu xxxxxxxxxxxx nebo tetroxoprim (5 xxxx 30 xx) x xxxxxxx xxxxx.
5.1.4 Xxxxx roztok
Složení:
|
Kvasnicový xxxxxxx |
0,75 xx |
|
Xxxxxxx |
5,0 xx |
|
Xxxxxxxxx xxxxx |
8,0 xx |
|
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx |
0,025 x |
|
Xxxx |
50 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx roztok x indikátor, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx.
5.2 Standardní xxxxxxx xxxxxxxxxx
5.2.1 Xx xxxxxxxx xxxxx s xxxxxxx xxxxxxxx připravit roztok xxxxxxxxxx o 60 μx/xx (100 XX/xx), x xx rozpuštěním xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
5.2.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx vložením 1,25 xx roztoku penicilinu (5.2.1) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx do 1000 xx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 0,075 μx penicilinu/ml (= 0,125 XX/xx).
5.2.3 Xxxxxxxxx 75 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx obsahujícího 0,004 μx penicilinu/ml (= 0,0067 XX xxxxxxxxxx/xx) přidáním 4 xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (5.2.2) xx 71 xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.3).
5.2.4 Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx bodů 5.2.1 xx 5.2.3 xx xxxx xxx xxxxxxxxxx v xxx xxxxxxxxx testu.
5.3 Xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek
Připravit xxxxxxxxx xxxxxxxx mléka xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx sušeného odstředěného xxxxx (10 % x/X) xx vodě, xxxxx xxxx předtím xxxxxxxxxx na přítomnost xxxxxxxxxxx xxxxx. Rovněž xxx použít přiměřené xxxxxxxx xxxxxxxxx mléka, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx za xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx; xxxx xxxxx xx xxxxxxx xx lahví x xxxxxxx se xxxxx xxxxxx na 100 °X, xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx x teplotou 0 °C až 6 °X xx xxxx xxxxxxx jednoho xxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx organismus
5.4.1 Xxxx testovací xxxxxxxxxx xx xxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx XXXX 10149 Kmen XXXX 10149 je xxxxxxxxx x xxxxxx X 953.
5.4.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx kulturu xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx na xxxxxx xxxxxx agaru (5.1.1). Xxxxx xxxx se x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx 48 hodin xxx 63 ± 1xX. Po xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx zásobní xxxxxxx xxxx xxx skladována xxxxxxx měsíců x xxxxxxxxxx xxx 0 xx 5 oC.
5.5 Xxxxxxxxx kultura (xxxxxxxx xxxx)
5.5.1 Asepticky xxxxxxx 20 xx živného xxxxx (5.1.1) xx xxxxxxxx Petriho xxxxx (4.2.2) x xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5.2 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) přenést 5 xx xxxxxxxx destilované xxxx xx zkumavky xx xxxxxxx kulturou (5.4.2) x vymýt xxxxxxxx xxxxxxx spóry xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xx xxxxx xxx 0 xx 5 °C x xxxxxxx se xx 36 xxxxx.
5.5.3 Xxxxxxxx pipetou (4.2.4) xxxxxxx 5 ml xxxxxxxx spór (5.5.2) xx Xxxxxxx misku (5.5.1) x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx látku xx xxxxx povrchu xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Inkubovat 16 xx 18 xxxxx xxx 63 ± 1 °X (4.1.1).
Při xxxxxxx zásobní xxxxxxx (5.4.2) xxxx xxxxxxx xxxxxx 36 xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx dvakrát x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 36 hodin.
5.5.4 Xxxxxxxx pipetou (4.2.4) xxxxxxx 10 ml xxxxxxxxxxx vody na Xxxxxxx xxxxx obsahující xxxxxxx (5.5.3) x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx z xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx spór do xxxxx (4.2.3) obsahující 250 xx sterilní xxxxxxxxxxx vody. Xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Kultury, xxxxx xxxxxx ihned xxxxxxxxxxx, xx xx xxxx xxxxxxxxx x chladničce xxx 0 xx 6 °X.
5.5.5 Xx 16xx xx 18xx xxxxxxxx xxxxxxxx při 63 ± 1 °X xx agarovém xxxxx by xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx mikroorganismů xxxx 5 x 10 xxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxx spór xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx sraženiny xxxx xxxxxxxxx, xxxx by xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (5.4.2).
5.6 Xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (5.1.2), poté xxxxxxxx xx 55 °X.
5.6.2 Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx (5.5.4) x pěti částem xxxxxxxxx xxxxx (5.6.1) xx zkumavce nebo x xxxxxxxx. Důkladně xxxxxxxxx.
5.6.3 Přenést xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx (4.2.6) 0,3 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.6.2), xxx xx xxxxxxxxx 5 mm xxxxxx, xxxx uzavřít xxxxxxxx zátkou xxxx xxxxxx nebo, v xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx ztuhnout, poté xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx 12 xxxxx xx svislé xxxxxx.
5.6.4 Zkumavky/ampule xxxxx xxx xxxxxxx týž xxx, xxx mohou xxx xxxxxx skladovány xxxxxxx xxxxxx xxx 0–6 °C, xxxxx xxxx ihned xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx 24 xxxxx xx xxxxxx, x do xx xxxx xx skladují xxx xxxxxxx 0-5 °X. Pokud xxxx xxxxx xxxxxxxxx vzorky xx 24 xxxxx, xxxx by xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (−30 °xx - 15°X), xxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.2 Xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx (5.6). Xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (4.1.3) xxxxx požadovaný xxx xxxxxx x xxxxx (5.2 a 5.3).
6.3 Xx xxxxx xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxx 50 xxxxxxxxxx xxxxxxx roztoku (5.1.4).
6.4 Xxxxxx mléka řádně xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx (4.1.4) xxxxxxx 0,1 xx vzorku xx xxxxxxxx zkumavky/ampule. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.5 Xxxxxx xxxxx bodu 6.4 xx xxxxxxx stejným xxxxxxxx za použití xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,004 μx/xx (= 0,0067 XX/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx (5.2.3).
6.6 Xxxxxxxx xxxxx bodu 6.4 xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx kontrolního xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.3) xxxxxxx vzorku xxxxx.
6.7 Xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx a xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxx na nejméně 2½ až 2¾ xxxxxx do xxxxx xxxxx s xxxxxxxx 63 ± 1 °X (4.1.2).
6.8 Vyjmout xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx x vodní xxxxx.
6.9 Xxxxxxxxx xxxxx agarového xxxxx (xxx 7).
7. Xxxxxxxxxxxx výsledků
7.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx vzorkem xxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxx antibiotik xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx koncentraci "xxxxx xxxxxxxxx" xxxxxxx x xxxxxxx na xxxxxx 39. Pokud xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (6.5) zůstane xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx citlivé.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx zbarvení xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx vzorkem xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x koncentracích xxxx xxxxxxxxxxxxx uvedenými xx xxxxxx 39.
7.3 Xxxxx zabarvení xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx vzorek xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek xxxx xxxxxx mléka xxxxxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
7.4 Xxxxx xx xxxxxxxxx zabarvení xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx kontrol, zkumavky/ampule xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx spóry x vzorky xxxx xxx podrobeny novému xxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx materiálem.
8. Xxxxxxxxx výsledků
8.1 Potvrdit xxxxxxxx xxxxx vzorků x xxxxxxxx xxxxxxxxx x 7.1 x 7.2 xxxxx metody "X".
Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx před xxxxxxxxxx skladovat, xxxx xxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X. Postup xxx xxxxxxxxxx penicilinů x xxxxxxxxx koncentrace
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxx antibiotik, xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxx (X.7.1) xxxx xxxxxxxxxx reakcí (X.7.2).
Xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx
Xxx X.1.
2. Xxxxxxxx
2.1 Xxxxxx mléka obsahuje xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx postupem xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx 2 xx xxxxx xxxxx.
2.2 Xxxxx vzorek, který xxxxxxxx antibiotika, včetně xxxxxxxxxxx (2.1), x xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx penicilináza (beta-laktamáza), xxxxxxxxx čirou xxxx xxxx vytvoří čirou xxxx menšího průměru xxx xx xxxxxx xxxx bez penicilinázy, xxxxxxxxx xxxxxx je xxx xxxxxxxxx nebo xxxx penicilinu a xxxxxx xxxxxxxxxxx včetně xxxxxxxxxxx.
2.3 Xxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx (2.2) inaktivována, xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxx může xx xxx xxxx xxxxxxxx [xxx xxxxxxxx 85/397/XXX, xxxxxxx X, xxxxxxxx XX, A.1.f) x 2x)].
Xxxxxxx polosyntetické xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx sodný, xxxxxx xxxx jsou xxxxx částečně xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx jako xxxxxxxxxx (viz 7.3).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xx vyšetřit, xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx. Normální xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxx zóna xxxxx disku xxxxxxx, xx xxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky xxx xxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx na xxxxxxxxxxx x xxxxx inhibiční xxxxx x xxxxx.
4. Xxxxxxxxx, xxxxxxx ze xxxx a xxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxx A.4.1.
4.1.2 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 80 ± 1 °X.
4.2 Pomůcky xx xxxx
Xxx X.4.2.
4.3 Xxxxxxxx xxxxx, neobsahující xxxxxxxxx látky, x xxxxxxx 9 xx 13 xx, xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx 130 xx mléka (xxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx).
5. Xxxxxxxxxx xxxxx, standardní xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx organismus xxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx se xxxxxx destilovaná xxxx xx xxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx alespoň xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx růst xxxxxxxxxxx organismu.
5.1 Xxxxxxxxxx xxxxx
5.1.1 Xxxxx xxxx (X.5.1.1)
5.1.2 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx inhibičních xxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5 x |
|
Xxxxxxx |
1 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx tetroxoprimu (X.5.1.3) |
10 xx |
|
Xxxx |
10–15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxx zahřívání x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx složky xx xxxx, xxxx přidat xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xX, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx 8,0 + 0,1 xxx 25 °X. Xxxxxxxxxxxx médium 15 minut při 121 ± 1 °X.
5.2 Standardní xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx
Xxx X.5.2.
Xxx xxxxxxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx látek (8) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek (X.5.3) x těchto xxxxxxxxxxxxx:
x) 0,004 μg/ml (0,0067 XX/xx)
x) 0,006 μx/xx (0,01 IU/ml)
c) 0,03 μx/xx (0,05 XX/xx)
x) 0,06 μg/ml (0,01 XX/xx).
5.3 Roztok xxxxxxxxxxxx
5.3.1 Rozpustit xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (beta-laktamázy) xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxx koncentraci 1000 X/xx. Tento roztok, xxxxxxx rozdělený xx xxxxx xxxxx, xx xxxxx skladovat až xxxxx xxxxx xxx 0 °X xx 5 °X.
Xxxxxxxx
Xxx penicilinázu xxxxxxxxxx xxxxxxxx mezinárodní xxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx inaktivaci 0,6 μx (= 1 XX) xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx nutné xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx nutnosti proto xxxxxxx koncentraci xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.3.2 Namísto roztoku xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx běžně xxxxxxxx xxxxx napuštěné xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx kontrolním xxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxx X.5.4.
5.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx spór)
Viz A.5.5.
5.6 Xxxxxxxx Xxxxxxx misek
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2), xxxx xxxxxxxx xx 55 oC.
5.6.2 Do xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx spór (5.5) x nezbytnému xxxxxxxx částí agarového xxxxx pro detekci xxxxxxxxxxx látek (5.1.2), x xxxxx xxxxxx xxxxxxx hustotu xxxxxxx x naočkovaném xxxxxxx xxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx Petriho misky (X.4.2.2), xxxxxx xxxxxxx xx 55 °C, xxxxxxxxxx xxxxxxx médium, xxx xx vytvořila 0,6 xx 0,8 xx vrstva. Xxx Xxxxxxx misku o xxxxxxxx průměru 140 xx xx xxxxx xxx 15 xx xxxxxxxxx média, xxx xx vytvořila 0,8 xx vrstva.
5.6.4 Umístit Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx, vodorovný xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx x nechat xxxxxxx médium xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xx dnem vzhůru, xxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx agarového xxxxx.
5.6.5 Xxxxx připravené Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxx, ale xxxxx xxx používány xxxxxxxxx xxx xxxxx, xxxxx se xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x uchovávají xx xxx 5 °X.
5.6.6 Označit xxx Xxxxxxx misek, xxx xxxx možná xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 X xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx podle "xxxxxx X" (X.7.1 x X.7.2) xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx za xxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx penicilinu.
6.1.2 Nejdříve xxxxxxxx vzorky 10 xxxxx xx 80 ± 1 °C, xxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx termolabilních xxxxxxxxxxx látek.
6.1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxx xxx 10 ml xxxxxx zahřátého xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx širokým xxxxxx. X xxxxx přidat xxx 0,4 xx xxxxxxx penicilinázy (5.3) x xxxxx promíchat.
6.2 Xxxxxxx inhibičních xxxxx
6.2.1 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx (4.3) xx vzorku xxxxx (6.1.2) xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx přebytečné xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxx. Xxxxxxxx položit xxxx xx xxxxxx Xxxxxxx misky (5.6) x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
6.2.2 Xxxxx napuštěné xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxx xx druhého xxxxxxx 20 xx x od xxxxxx xxxxxxx 10 mm.
6.2.3 Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx disky (4.3) xxxxxxxxx standardním xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.2) musí xxxxxxxx rozmístit xxxx xxxxx napuštěné vzorky xxxxx v xxxxxx xxxxxxx 2 % xxxxx disků xx xxxxxx xxxxx; xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
6.2.4 Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx všech xxxxx na xxxxxxx xxxxxx a xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx vzhůru x xxxxxx xx xxxxxxxxx 2,5 až 5 xxxxx při 63 ± 1 °X.
6.2.5 Xx inkubaci xxxxxxxx xxxxx při xxxxxxx xxxxxx světla, xxx xxxx možné xxxxxxxxx xxxx inhibiční xxxx kolem xxxxxxxxxx xxxxx. Čiré zóny xx změří.
6.2.6 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (6.2.3) xxxx kolem xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 2 xx xxxx.
6.2.7 Čiré xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx mléka, xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxx xxx velikost xxxxxxx x 6.2.6, ukazují xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.3 Identifikace a xxxxxxxxxxxx inhibičních xxxxx
6.3.1 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx zahřátého xxxxx (6.1.2) x xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (6.1.3). Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 10 xx xxxxxx mléka xx možné xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (5.3.2) a xxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxx.
6.3.2 Postup 6.2.1 xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx ze xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x 5.2 x) xx x).
6.3.3 Xxxxxxxxx průměrný xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx zón xxx xxxxxx mléka, xxxxxxxxx vzorky penicilinázy x xxx standardní xxxxxxx penicilinu.
7. Interpretace xxxxxxxx (xxx 2)
7.1 Xxxxx se xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx kontrolní xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx, xxx xxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx mléka, xxxxxx xxxxx nebo xxxxx xxx zóna xxxxx xxxxx napuštěném xxxxxxxxxxx xxxxxxxx penicilinu (5.2x)), xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx koncentraci krystalického xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxx 0,004 μx/xx.
7.2 Pokud xx xxxxxxxx hodnota xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx disku xxxxxxxxxx xxxxxxxxx penicilinázu rovná xxxxxxxx xxxxxxx průměru xxxx xxxx xxxxx xxxxx xx vzorkem xxxxx, mléko xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx inaktivovat xxxxxxxxxxx penicilinázy xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx.
7.3 Xxxxx je průměrná xxxxxxx xxxxxxx čiré xxxx xxxxx disku xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx kolem xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx podle 6.1.2, xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x antibiotika, xxxxxx xxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, který xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxx xx. Syntetické xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx penicilinázou za xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx jako inhibiční xxxxx jiné xxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx
Xxxxx xx je xxxxxxxx, inhibiční látky xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
8. Stanovení xxxxxx xxxxxxxxxx
8.1 Stanovení xxxxxx xxxxxxxxxx může xxx xxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xx základě velikostí xxx získaných se xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx (5.2 x) xx x)).
8.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx křivky
Vzhledem x tomu, xx xxxxxxxx xxxxxxxx korelace xxxx xxx10 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx zón, xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx papír xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx penicilinu xx xxxxxxxxx a xxxxxx zón xx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx na xxxxxxx průměru xxxxxxxxxx xxxxx. Průměry xxxxxxxxxxx xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx křivka.
8.3 Výpočet
Koncentrace xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx lze xxxxxxxxx xx xxxxxxx průměru xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx, avšak xxxxxxx pětkrát xxxxx xxx poloměr xxxxx.
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Výsledky xx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx než 0,004 μg/ml (xxxx xxxxxxxx stanovené xxxxxxxxxxx) xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx.
9.2 Xxxxxxxxxxxxxx (x) a reprodukovatelnost (X)
Xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx x jsou xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxxxx.
XX. DETEKCE PATOGENNÍCH XXXXXXXXXXXXXX
1. Předmět a xxxxxx xxxxxxx
X souladu x xxxxxxxxx xxxxxxxx 85/397/XXX, přílohy X, xxxxxxxx VII xxxx 2, tento xxxxxx xxxxxxxxxxx pokyny, xxxxx xxxx být dodržovány, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x pasterovaném xxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx příčinou xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx z xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx proti xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Pokud xxxx xxxxxxx normy xxxxxxxxx x xxxxxxx X, xxxxxxxx XXX xxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx jde x xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X x 21 °C, xxxxxxxxxx bakterie x xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx nezbytný xxxxx xxxxx, xxxxx existuje xxxxxxxxx, že mléko xx nějakou xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
3. Postup
Postupy a xxxxxxx xxxxxxxxx musí xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx orgán xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx, xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxx x xxxxxxxx
Xxx každý xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx mikroorganismus xxxx být výsledek xxxxxxxx xxxxx:
Xxxxx xxxxx xx xxxxxxxx, xxxx "xxxxxxxxxx" xx "nepřítomnost" x xxxxxx pasterovaného xxxxx, který xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx postup.