Xxxxxxxxxx Komise
ze dne 14. února 1991,
xxxxxx xx xxxxxxx některé xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx syrového xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
(91/180/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx x založení Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx společenství,
s ohledem xx xxxxxxxx Xxxx 85/397/XXX ze xxx 5. xxxxx 1985 x xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx otázkách obchodu x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx [1] naposledy xxxxxxxxxx xxxxxxxx 89/662/XXX [2], x zejména na xx. 10 xxxx. 2 uvedené xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxx čl. 10 xxxx. 2 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, které xx xxxx xxxxxxxx xxx kontrolu xxxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxx xxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx zejména xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů, xxxxxx xxxxx, bodu xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxx xxxxxxxxxxx mléko xx nezbytné xxxxxxxx xxxxxxx metody xxx xxxxxxxxx nepřítomnosti patogenů, xxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií, xxxxxx mikroorganismů, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, přítomnosti xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx antibiotik x xxxx mrznutí;
vzhledem x xxxx, že xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx a XXX mléko je xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xx vhodné xxxxxxx stanovit referenční xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx mají xxxxxxxx dodržování určitých xxxxx; že je xxxxxxx nezbytné xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx rutinní xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx; xx x xxxxxxxxx xxxxxxxx těchto šetření xxxxx xxxxxxx státy xx xx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 85/397/XX xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx k tomu, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx analýzy a xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx analýzy x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx jednotného xxxxxxx výsledků;
vzhledem x xxxx, xx opatření xxxxxx rozhodnutí xxxx x souladu se xxxxxxxxxxx Xxxxxxx veterinárního xxxxxx,
XXXXXXX XXXX ROZHODNUTÍ:
Článek 1
Referenční postupy xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxx mléko xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °C,
- stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxx antibiotik a xxxxxxxxxxx.
Článek 2
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx mléko xxxx xxxx:
- stanovení xxxx xxxxxxx,
- stanovení xxxxxxxx fosfatázy,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 21 °X,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx – xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °C,
- xxxxxxx antibiotik x xxxxxxxxxxx,
- detekce xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 3
Referenční xxxxxxx xxxxxxx a testování xxx XXX xxxxx x xxxxxxxxxxxxx mléko xxxx xxxx:
- xxxxxxxxx xxxx mrznutí,
- xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx při 30 °X,
- detekce xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
Článek 4
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx analýzy x xxxxxxxxx, stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a odběr xxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxx pravidel xxxxxxxxxxx v xxxxxxx X.
Xxxxxx 5
Referenční xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx 1, 2 x 3 xxxx xxxxxxx x příloze II.
Článek 6
Xxxx rozhodnutí xxxx xxxxxxxxxxx do 31. xxxxxxxx 1992, xxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Článek 7
Xxxx xxxxxxxxxx xx určeno xxxxxxxx xxxxxx.
V Xxxxxxx xxx 14. xxxxx 1991.
Xx Xxxxxx
Xxx Mac Sharry
člen Xxxxxx
[1] Xx. věst. X 226, 24.8.1985, x. 13.
[2] Úř. xxxx. X 395, 30.12.1989, x. 13.
PŘÍLOHA I
OBSAH
I. Xxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Xxxxx vzorků xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
X. XXXXXX XXXXXXXXXX
1. Úvod
Obecná xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx x pomůcek, xxxxxxxxx xxxxxxxx, kritérií xxxxxxxxxxxxx a xxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx členských xxxxx x laboratoře xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx tato xxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxx
2.1.1 Xxxxx xxxx xxxxxxxxx jinak, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx, xxxxxx nebo xxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx demineralizovaná xxxxxxx xxxxxxxxxxxx čistoty. Xxx mikrobiologické xxxxx xxxx xxx xxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxxx růst xxxxxxxxxxxxxx xx popsaných testovacích xxxxxxxx.
2.1.2 "Xxxxxxxxxxxx" xxxx "xxxxxxx" (xxx xxxxxxx xxxxxxxxx) se xxxxxx "xxxxxxxxxxx xx vodě" xxxx "xxxxxx xxxxx".
2.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxx xxxx stanoveno xxxxx, všechny xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx a xxxxxxx
3.1 Xxxxxx xxxxxxxxx x pomůcek
Příslušný xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxx různé xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xx zvláštnímu xxxxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.2 Xxxxxxxxxx xxxx
"Xxxxxxxxxxxx xxxxxx" xx rozumí xxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx 0,1 xx.
4. Xxxxxxxxx výsledků
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx, které xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (5.1) xxx příslušnou xxxxxx. Xxxx xxxx toto xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx se xxxx xxxxxxxx, xxxxx je xxxxxxxx neplatný.
4.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx není xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
5. Xxxxxxxx spolehlivosti: xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx:
5.1.1 Opakovatelnost (x) je xxxxxxx, xxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx mezi xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx testu, xxxxx byly xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx přístroj, xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx xxxxxx).
5.1.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) xx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx dvou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx testů, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx za odlišných xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx, různé xxxxxxxxxx x/xxxx xxxxx xxxx).
5.1.3 Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx, hodnoty xxx kritéria opakovatelnosti x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx x příslušných xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx 95 % xxxxxxxxx xxxxxx spolehlivosti podle xxxxxxxx ISO 5725, xxxxx xxxxxx, 1986. Xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx pokusů, xxxxxxxxxxx ve spolupráci, xxxxx xx používají xxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx některé postupy xxxx xxxx xxxxxx, xxxxxxxxx ve xxxxxxxxxx, xxxxxx provedeny. X xxx případě xxxx xxxxxxx opakovatelnosti a xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1.4 Kruhové xxxxx x nezbytné xxxxxx xx xxxx xxx naplánovány x xxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
6. Xxxxxx x xxxxxxxxx
Xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x získané výsledky. Xxxx xxxx xxxx xxxxxx všechny xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx v metodě xxxxx, nebo volitelné xxxxxxxxxxx x všechny xxxxxxxxx, které xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx o testování xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx úplnou xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
XX. XXXXX XXXXXX XXXXXXXX X XXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXX
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx popisuje xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxx vzorků, xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx použijí xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx a pro xxxxxx a tepelně xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx 2, 4.4, 5 x 6 xx použijí xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx k xxxxx xxxxxxxx.
2. Xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx x tepelně xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x konvích, xxxxxxxx xxxx. xxxxxxxx pověření xxxxxxxxxxx, xxxxx byli xxxx odběrem vzorků xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx orgány xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx pověřené odběrem xxxxxx x metodách xxxxxx, aby bylo xxxxx, že odebrané xxxxxx budou xxxxxxxxxxxxxxx x x xxxxxxx x xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx testovací xxxxxxxxx xxxxxxxx za nezbytné, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx.
3. Vybavení xxx xxxxx xxxxxx
3.1 Xxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxx odběr xxxxxx musí xxx xxxxx zhotoveno x xxxxxxxx xxxxx nebo x jiného vhodného, xxxxxxxxxx xxxxxxxx materiálu, xxx xxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx předpokládané xxxxxxx (xxxxxxxxxx, odběr xxxxxx, xxx.). Xxxxxxx x xxxxxxxx pro míchání xxxxxxx x xxxxxxxx xxxx mít xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx promíchání xxxxxxx xxx vzniku xxxxxx xxxxx. Naběračky xxxx xxx xxxxxxxx pevnou, xxxxxxxxxx dlouhou xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx 50 xx.
Xxxxxxxxxxx a xxxxx musí xxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxx x vhodného xxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx při xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxx x víček) xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, která by xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xx vzorky xxxx mít čistý, xxxxx, xxxxxx xxxxxx xxx trhlin x xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx.
3.2 Xxxxxxxx pro xxxxx vzorků xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxx) xxxx splňovat xxxxxxxxxx xxxx 3.1 x xxxx být xxxxxxxx.
Xxxxx xx xxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, musí xxx xx každém xxxxxx vzorku xxxxxxxxx x sterilizováno x xxxxxxx s pokyny xxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx orgán, xxx nedošlo x xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx
4.1 Xxxxxx xxxxx
Xxx xxxxxx xx xxxxx, které xxxx být xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxx důkladně xxxxxxxxxx buď xxxxx, xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx musí xxx xxxxxxx xxxxx xx promíchání, xxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxxx.
Xxxxx xx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxx, xxxx první xxxx xxx odebrán xxxxxx xxx mikrobiologické xxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx nádob xxxx xxx takový, xxx byly xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx a při xxx xxxx možné xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx testováním, aniž xx xxxx hrozilo xxxxxxxxx xxxxxxxxx másla xxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxx xxxxx xxxxxx
4.2.1 Xxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxx xx xxxxx
X rychlému xxxxxxxxxx xxxxxxxxx plunžrem xx xxxxx xxxx konvi xxxxxx x dolů, xxxxxxx xxxx na xx, xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxx xx xx xxxxx konve xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.2 Xxxxx z xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx dokud není xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxx neumožňuje xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxx.
4.2.3 Xxxxx xxxxxx x xxxxx xxx
Xx xxxxxxxx, aby xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx se xxxxxx xx misky xxx. Xx xxxxxx xxxxxxxxx rovnoměrného rozdělení xxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx ruční xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxx, x níž xx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx kapacitu xxxxx xxx, xxxxxxx reprezentativní xxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx 4.2.4.
4.2.4 Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx
Xxxx xx xxxxxxxx xxxxx, x xxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx vzorků, rozděleno xx více xxxxx, x xxxxx xxxxxx xx odebere xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, přičemž xx xxxxxxxxx xxxxxxxx mléka xxx xxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxx z xxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx těchto xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x poměru x množství, které xx xxxxxxx x xxxxxx, xx xxxxx xxx xxxxx ze xxxxxx odebrán. Xx xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx (xxxx) vzorek (xxxxxx) x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
4.2.5 Xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx – xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx kamiony, xxxxxxxxxx vagóny
4.2.5.1 Xxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx vhodným xxxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx doporučuje xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.5.2).
Délka xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, xx kterou xxxx xxxxx x xxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx, xx postup xxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx testování. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx shodu xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxxx odebraných buď x různých xxxxx xxxxx, nebo x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx při xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxxxx xxxx plnotučného xxxxx) xx účinný, xxxxx xx xxxxxx obsahu xxxx u xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx 0,1 %.
Ve xxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx části xxxx x místě xxxxxxxxxx xxxxxx malé xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx pro xxxx xxxxx. Proto se xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx otvoru. X xxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx nádrží, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx:
- mechanickou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx do xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- vrtulí xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x umístěnou x xxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxxx je xxxxxxxx x mléce,
- x xxxxxxx cisternových kamionů xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx přepravní hadici, xxxxx xx napojena xx xxxxx x xxxxxxxx do xxxxxxxxxxx xxxxxx,
- filtrovaným, xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx x objem xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx žluklé xxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx odběr vzorků
Automatické x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx odběr xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx příslušným xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxx a xxxxx používání xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, které xxxxxxxxx xxxxxxxxx orgán. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxx x cílem xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxx musí xxx xxxxxxx vzorek,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (který xxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxx vzorku),
- schopnost xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx po xxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx vnitrostátní xxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx,
- maximální přenos,
- xxxxxxxxx, které xxxx xxx provedeno, xxxx xxxxxxxxx preventivní xxxxxxxx, xxxxx je nutné xxxxxxxx.
4.4 Xxxxx xxxxxx xxxxxxx ošetřeného xxxxx xxxxxxxx k xxxxx xxxxxx spotřebě x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx jde o xxxxxxx xxxxxxxx mléko xxxxxx x xxxxx xxxxxx spotřebě x xxxxxxxx v maloobchodních xxxxxxxx, vzorky xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nádob. Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx z xxxxxxxxxxxx místnosti xxxxxxxx xxx xxxxxxxx, a xx, pokud je xx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxx (x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx mléka x xxx pasterace).
Z xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx mléka (xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxxxxxx) xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, která xxxx xxx provedena, x to xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
5. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xx xxx xxx xxxxxxx identifikačním kódem, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx příslušného orgánu (xxx xxx 2).
6. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx dodrženy x xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, x xx xx xxxxxxx druhu xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxx.
Xxxxxx stanoví xxxx:
- xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx je xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxxxx nebyly xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Je-li xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx skladován ve xxx,
- xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx při xxxxxxxxx 0 xX xx 4 xX. Xxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx být xx xxxxxxxxx a x žádném xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 36 xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xxxx souhlasit, xxx xxxx xxxxxxx skladování 0 oC xx 6 xX, xxxx-xx xxxx xxxx odběrem x xxxxxxxxxx delší xxx 24 hodin,
- xxxxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx teplotách 0 xX xx 4 xX. Xxxx mezi xxxxxxx a testováním xxxx xxx co xxxxxxxxx x x xxxxxx případě xxxxx xxxxxxxxxx 24 xxxxx,
- xxxx vzorky mléka xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx a pasterovaného xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx laboratoře x xxxx mezi xxxxxxx vzorku x xxxxxxxx xxxx xxx xx nejkratší.
Speciální preventivní xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx přijmout xxx xxxxxxx testy, xxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx postupů.
PŘÍLOHA X
XXXXX
X. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx
XX. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
XXX. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
XX. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X
X. Xxxxxxxxx xxxxxx mikroorganismů xxx 21 °X
XX. Stanovení xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx – počítání xxxxxxx xxx 30 °C
VII. Xxxxxxxxx xxxxxx somatických xxxxx
XXXX. Xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx
XX. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
X. STANOVENÍ XXXX XXXXXXX
1. Předmět x xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxx xxxxxxx plnotučného, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx, UHT xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx), v xxxx xx termostatem xxxxxx xxxxx ochlazována xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxx dva typy xxxxxxxxx. První typ xxxxxxxxx xxxxxxxxx bod xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx mrznutí, xxxxxx xxxxx xxx xx x xxxxxxxxxx důvodů xxxxxxxx xxx, xx xx začátku xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxxx x tomu, xx xx mohou xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx, xxx i xxxxxx bodu xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx použití xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx časem xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxx lze xxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx x xxxxx xx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxxx xxxxxx xxxx vyšší xxx 0,18 x xxxxxxxx mléčné xx 100 xx (xxx xxx 7.4).
2. Definice
Bod xxxxxxx xxxxx: xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx ve xxxxxxxx Xxxxxx (°X).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx mléka xx v xxxxxxxxxx xx přístroji xxxxxxxxx xx xxxxxxx teplotu x xxxxxxxxxxx vibrací xx xxxxxx jeho xxxxxxxxxxxx, která způsobí, xx teplota rychle xxxxxxx xx x xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxxx postupem xxxx xxx xxxxxx mléka xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx dva xxxxxxxxxx xxxxxxx. Za xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxx.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx xx skla
Obvyklé xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx řízené xxxxxxxx xxxxx, termistorového xxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx teploměru) x xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, míchačky xx xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx, jakož x xx xxxxxxxx xx xxxxxx.
4.1.1 Xxxxxxxx lázeň
Je xxxxx xxxxxx dva xxxx xxxxxxxx xxxxx.
4.1.1.1 Xxxxxxx typ
Dobře xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx tak, xxx xxxxxxxx rozdíl xxxx xxxxxxxxxx dvěma xxxx v xxxxxxxx xxxxx vyšší xxx 0,2 °C. Teplota xxxxxxxx xxxx kolísat xxxxxxx v rozmezí ± 0,5 °C xx nominální hodnoty xxxxxx výrobcem.
Je důležité, xxx x xxxxx xxxx udržována xxxxxxxxxx xxxxxxx kapaliny. Xxxx xxxxxx xxxxxxxx na xxxxxx xxx značkou xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
4.1.1.2 Xxxxxxxxxx xxx
Xxxxx zkumavky xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx proud xxxxxx xxxxxxxx kapaliny. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx x rozmezí ± 0,5 °X xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx chladicí xxxxxxxxx xx 33 % (X/X) vodný xxxxxx 1,2-ethandiolu (xxxxxxxxxxxxxx).
4.1.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx se xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x maximálním xxxxxxx 1,80 ± 0,2 xx x x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 0,31 xx. Xxxxxx xxxxxxxxx termistoru musí xxx xxxxx než 2 sekundy x xxxxxxx x (viz xxxxxxxx) xxxx xxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxxx, xxx xxx − 0,512 °X xxxxxxx xxxxxxxxxx stoupla xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx o 0,0005 °X. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx může xxx ± 5 %.
Xxxx xx sonda x xxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx musí xxxxxxxx x xxx xxxxxxxx na xxxxxx x x bodě, xxxxx xx 44,6 ± 0,1 xx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxxxxx xx xxxxxx 15). Xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xxx se xxxxxxxxx nastavení xxxxx xx xxxx polohy.
Poznámka:
β xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx vzorce
− xX / dT × 1 / X = β / T2
kde:
T xx xxxxxxx xx stupních Xxxxxxx
X xx odpor x xxxxxx xxx xxxxxxx X,
− dR / xX × 1 / R xxxxxxxx xxxxxxxxxx
β xx xxxxxxxxx, která závisí xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxx praxi xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx než 3000.
4.1.3 Xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
4.1.3.1 Princip xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxx prvního xxxxx xx křivce xxxx mrznutí. Xxxxx xx část xxxxxx, xxx teplota zůstane xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx ± 0,002 xX po xxxx xxxxxxx 20 sekund.
4.1.3.2 Xxxxx obsluha
Odpor termistoru xx xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx podobným xxxxxxxxx pomocí xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx odporů, xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx ± 10 % x xxxxxxx teplotní xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx 2×10−5°X.
Xxxxxxxx (vyrovnávací) xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx linearity x xxxxx xxxxxxx x xxxx než x 0,3 % xxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxxxxx musí xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx stupnice xx xxxxxxxxx xxxxx po xxxxxxxxx 0,001 °C.
4.1.3.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx umožnit xxxxxxxxx xx xxxxxxx 0,01 °X x xxxxxxx xx 0 °C xx –1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zařízení x xxxx příslušného xxxxxx xxxx xxx taková, xxx xxxxxxxx xxxx xx xxxx následujících xxxxxx téže teploty xxxxxx xxxxx xxx 0,001 °C.
Linearita xxxxxx xxxx být taková, xxx xxx správné xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxx xx – 0,400 °C xx – 0,600 °X xxxxx xxxxx xxx ± 0,001 °X.
4.1.4 Xxxxxxxx
Xxx míchání xxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxx drát x xxxxxxx 1 xx 1,5 mm, xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx,.
Xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xx rozkmit x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx její xxxxxx xxxxx byl xx úrovni hrotu xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx 1,5 xx xxx xx xxx xxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx rozkmitem xxxxxxx výrobce (xxxxxxx ± 1,5 xx), xxx byla zajištěna xxxxxxxx xxxxxxx testovacího xxxxxx během xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx nesmí x xxxxxx okamžiku dotknout xxxxx termistoru nebo xxxxx xxxxxxxx.
4.1.5 Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxx xx být xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx po xxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx vyvolá xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx testovacího xxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx. X xxxx xxxxx lze xxxxxx xxxxxxxx; xxxxxx postupem xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx xxx sekundy xxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxx stěny xxxxxxxx na vzorky.
4.1.6 Xxxxxxxx xx xxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx (xxx xxxxxxx 1) xxxx xxxxxxxx a 50,8 ± 0,1 xx xxxxxx; xxxxxx průměr xx 16,0 ± 0,1 mm a xxxxxxx průměr je 13,5 ± 0,1 xx. Xxxxxxxx skla xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx x více xxx 0,1 mm.
Zkumavky xxxx xxx xxxxxx xxxxxx vzdálenou od xxxxxxx xxxxxx 29,8 xx (21 xx xxx xxxx xxxxxxxx), xxxxx xxxxx objem xxxxxx 2,5 ± 0,1 mm.
4.1.7 Zdroj xxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx buď xxxxxx nebo xxx xxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxx kolísání xxxxxxxxxxxxxx ± 1 % xxxxxxxxx xxxxxxx, když xxxxxx xxxxx kolísá x ± 6 %.
4.2 Analytické xxxx
4.3 Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 1000 ml, xxxxx X.
4.4 Sušárna, xxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 130 ± 1 °C
nebo
Elektrická xxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx na 300 ± 25 °X.
4.5 Xxxxxxxxx
5. Činidla
5.1 Xxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxxx skle, xxxxxxxxx x zchlazená xx 20 ± 2 °X, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxx sodný, čistoty x.x., xxxxx xxxxx, xxxxxx 5 hodin xxx teplotě 300 ± 25 °C x xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx xxxxxxx 130 ± 1 °X v xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx odpovídající xxxxxxxx (viz tabulka 1) xxxxxxx chloridu xxxxxxx (5.2) xx xxxxxxx. Rozpustit x xxxxxxxxxxx xxxx (5.1), xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx baňky x objemu 1000 xx x doplnit xx značku xxxxx x xxxxxxx 20 ± 2 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxx nejdéle xxx xxxxxx xxx xxx 5 °X x xxxxx xxxxxxxxxx polyethylenových xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx 250 xx.
Xxx xxxxxxx roztoků chloridu xxxxxxx xxx 20 °X
|
x XxXx/x |
°X |
|
6,859 |
-0,408 |
|
7,818 |
-0,464 |
|
8,149 |
-0,483 |
|
8,314 |
-0,492 |
|
8,480 |
-0,502 |
|
8,646 |
-0,512 |
|
8,811 |
-0,521 |
|
8,977 |
-0,531 |
|
9,143 |
-0,541 |
|
10,155 |
-0,600 |
Xxxx použitím xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztok xxx xxxxxx, xxx xx xx roztoku přimíchal xxxxxx.
Xxxxxx standardního xxxxxxx xx x láhve xxxxxx xx xxxxx x xxxxx kádinky. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx, xxxxx xxxx ze xxx xxxxxxx xxxxxxx, x nepoužívat xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx fungicid (xxxxxxxxx roztok thiomersalu 10 x/x).
6. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxx, xxx xx okolní xxxxxxx nelišila x xxxx než 1 °X od xxxxxxx, xxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx. Kryoskop xxxxx xxx vystaven xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx 26–27 °X.
Xxxxxxx xx, že xxxxxxxx xxxxxxx podle xxxxxx výrobce x xx byl xxxxxx xxxxxxx 12 hodin xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx míchačky x xxxxxxx chladicích xxxxxxx.
Xxxxxx xxx standardní xxxxxxx (xxx xxxxxxx xxxx), xxxxxxx bod xxxxxxx xx xxxxx xxx xxxx těsně pod xxxxxxxxxx hodnotou bodu xxxxxxx xxxxxx mléka x testování. Xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxx roztoků by xxxxxxx neměl být xxxxx xxx – 0,100 °C.
(U xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx obvod xxxxxxxxxx sestaven xxx, xx xx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxx rozsahu měřícího xxxxxxxx. V xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku, xxxxx xx xxxxx bod xxxxxxx, xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx; xxxxxxx xxxx tuto xxxxxxx xxxxx).
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 2,5 ± 0,1 xx jednoho xxxxxxxxxxxx roztoku xx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx vzorky, xxxx měřit xxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx vyrobeny x xxxxxxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxx xx vzorky xxxxx (xxxxxx druh xxxx, xxxxx x xxxxxxxxxx demineralizovanou xxxxx). Xxxxxxx standardních xxxxxxx xxxx stejné xxxx xxxxxxx vzorků xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx kalibrace, xxxxx xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxx takovým xxxxxxxx, dokud po xxxx následující odečty xxx každý roztok xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx každého x nich, xxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxxx nastavení. Kryoskop xx xxxx připraven x xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx mléka, xxxx xx byla xxxxx jakákoli úprava.
7. Xxxxxxxx testovacího xxxxxx
7.1 Xxxxx xx xx xxxxxxxx skladovat xxxxxx xxx xxxxxxx xxxx 0 °X x 5 °C.
7.2 Xxxxx xx xx nezbytné xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx tělíska xxxx tuhý mléčný xxx xx vzorku xx xxxxx x xxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx x xxxxxx x xxxx xxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx teploty.
7.3 Xxxxx může xxx xxxxxxxxx při xxxxxxxxxx xxxxxxx (mezi 0 x 5 °X) xxxx je xxxxx xx xxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx testování. Xx však nezbytné xxxx xx xx, xxx standardní xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxx xxx použití xxxxxxx xxxxxxx.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Vzorky, jejichž xxxxxxxx xxxxxxxxx 0,18 x xxxxxxxx mléčné xx 100 ml xxxxx, nemohou xxx xxxxxxxxxxx.
7.5 UHT mléko x xxxxxxxxxxxxx mléko xxxx stát xxxxxxx 20 minut xxxx xxxxxxxxxx x otevřené xxxxxx.
8. Xxxxxx
8.1 Předběžné xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxx, zda xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx jsou x xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx zda xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x prázdné xxxxxxxx xx vzorky. Xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx míchá xxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx 12 xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxx chladicí xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx.
8.2 Rutinní xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx sérií xxxxx měřit xxx xxxxxxx standardního xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxx – 0,512 °X), xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxx po sobě xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx nebudou xxxxx x xxxx xxx 0,001 °X. Xxxxx xx průměr xxxxxx xxxxxx liší xx bodu mrznutí xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx než 0,002 °X, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx x xxxx 6.
Xxxxx se xxxxxxxx používá xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx kalibrace xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx hodinu, xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
8.3 Stanovení xxxx xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx opatrným xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx neprotřepávat xxxxxxxxxx xxxxxx tak prudce, xxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxx přidat 2,5 ± 0,1 xx xxxxx do suché x čisté xxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx xx, xx xxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxx a xxxxx, xxxxx je xx xxxxxxxx opatrně je xxxxx xxxxxx odspoda xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x chlupy xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx do xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pokynů xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx x mrznutí xx vyvolá xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx na 0,1 °C.
(U xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přístrojů je xxxxx odečíst xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; x ručních xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx tím, xx xx xxxxxxx, xxx mrznutí xxxxxx, xxxx se ručička xxxx nitka xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx.)
Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx později, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx teplotního xxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxx x zopakuje xx x xxxxx xxxxxxx xxxxx. Pokud xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx dosažením xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx vzorku xx xxxxxxx xx 45 °X x 5 xxxxx se xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx tuk.
Poté zchladit xxxxxx xx testovací xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx stoupne xx na xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx po xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, x poté xxxxxx. Xxx mrznutí xxxxxxxx xxxxxxxxx teplotě xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx x xxxx xxxxxxx xx xxxxx zaznamenat.
Poznámka:
Doba, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx konstantní, x xxxxxx interval xxxx xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx maximální teploty, xx liší vzorek xx vzorku x xxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxx xxxxx. Je xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xx xxxxxx uspokojivě xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx ji xxxxx x otřít xxxxx x xxxxxxxx směrem xxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx druhé xxxxxxxxx x xxxxxx vzorku xxxxx.
Xxxxx je xxxxxx xxxx naměřenými xxxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx opakovatelnosti (0,004 °X), provést druhé xxxxxxxxx u xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxx obou xxxxxxxxx xxxxxx na 0,004 °X, xxxxxx se x použijí se xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
8.4 Chlazení sondy
Po xxxxxxx přístroje uložit xxxxxxxx zkumavku xx xxxxxx na xxxxx xxx vzorky x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx.
(X xxxxxxxxx xxxx kryoskopu xx xxxx xxxxx; x xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx se ujistit, xxx xx sonda xxxx xxxxxxxx měření xxxxx zchlazena, například xxxxxxxxxx několika xxxxxxx xxxxxxxxx, dokud se xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx.)
9. Xxxxxxxxx výsledků
9.1 Výpočet
Pokud xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx potvrzena, xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx obou xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx mrznutí, xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx místa.
Pokud xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxx zaokrouhlit xx xxxxxxxxx xxxxx hodnotu, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx:
Xxx xxxxxxx (°X)
|
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx stanovení |
Průměr |
|
|
-0,544 |
-0,545 |
-0,544 |
|
-0,545 |
-0,546 |
-0,546 |
9.2 Xxxxxxxxxxxx
9.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (r): 0,004 °X
9.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (X): 0,006 °X
Xxxxxxx 1
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1 (xxxxxx xxxxxxxx xx vzorky xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx termistoru a xxxxxxxx)
XX. STANOVENÍ XXXXXXXX XXXXXXXXX
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx kapitola xxxxxxxx referenční xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Definice
2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx. Xx vyjádřena xxxxxxxxx xxxxxx x μg xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx mléka xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
2.2 Aktivita xxxxxxxxx mléka xx xxxxxxxxx, xxxxx je xxxxx xxx 4 xx xxxxxx xx 1 xx.
3. Princip
Aktivita xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx fenol x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxx), xxxxx se xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 610 xx. Xxxx xx xxxxxxx porovnání xx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
4. Xxxxxxx
4.1 Xxxxxxx xxxxxx boritanu x xxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxx xx xxxx 50,0 x hydroxidu xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) [Ba(OH)2.8H2O] a xxxxxxx xx 1000 xx.
4.1.2 Rozpustit xx xxxx 22,0 x xxxxxxxx xxxxxx (X3XX3) x xxxxxxx xx 1000 xx.
4.1.3 Xxxxxx 500 ml xxxxxxx xxxxxxx xx 50 °X, oba xxxxxxx xxxxxxx, promíchat, xxxxxx xxxxxxxx xxx na 20 °X, v xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xX xx 10,6 ± 0,1 xxxxxxxx xxxxxxx 4.1.1 xxxx 4.1.2. Xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx nádobě.
4.1.4 Xxxx použitím xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxx 6,0 x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XxXX2) xxxx 12,6 x XxXX2.4X2X x 20,0 x xxxxxxxx xxxxxxx (NaCl) a xxxxxxx na 1000 xx.
4.3 Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxx 10 xx xxxxxxxxx roztoku pro xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2) xxxxx xx 100 xx.
4.4 Roztok substrátu
Rozpustit 0,1 g xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, prostý xxxxxx, xx 100 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.3) nebo 0,5 x xxxxxxxxxxxx dvojsodného xx 4,5 ml xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2), xxxxxx dvě xxxxx xxxxxxx BQC (4.6) x xxxxxx xxxx 30 minut xxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx extrahovat 2,5 xx x-xxxxxxxx x xxxxxx xxxx, xxxxx xx xxxxxxx-1 neoddělí. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx-1. X xxxxxxx xxxxxxxx xx extrakce xxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx; xxxx xxxxxxxx vyvolat xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Tlumivý xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, a to xxxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxxxx xx 100 ml xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1.3).
4.5 Xxxxxxxxx xxxxx-xxx
Xxxxxxxxx xx xxxx 3,0 x xxxxxx xxxxxxxxxxx (ZnSO4 · 7X2X) x 0,6 x síranu xxxxxxxxx (XxXX4 · 5X2X) x xxxxxxx xx 100 ml.
4.6 Xxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (roztok BQC)
Rozpustit x 10 ml 96 % (X/X) xxxxxxxx 40 ± 1 xx 2,6-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXX) (X6X2Xx2XxXX6).
Xxxxxxxxx x xxxxx láhvi x xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx barvu xxxx xx xxxxxx xxx jeden xxxxx.
4.7 Xxxxxx síranu xxxxxxxxx (XX)
Xxxxxxxxx xx vodě 0,05 x síranu xxxxxxxxx (CuSO4.5H2O) x xxxxxxx xx 100 xx.
4.8 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx
4.8.1 Xxxxxxx 200 ± 2 xx xxxxxxx xxxxxxxxx fenolu x xxxxxx do xxxxxxx baňky x xxxxxx 100 xx, xxxxxx vodu, xxxxxxxxx x xxxxxxx na 100 xx. Xxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
4.8.2 Xxxxxx xxxxx 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx xx 100 ml x xxxxxxxxx. 1 xx obsahuje 200 μx xxxxxx.
5. Xxxxxxxxx x pomůcky xx xxxx
Xxxxxxxx:
x) Veškeré pomůcky xx xxxx, xxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx čerstvě xxxxxxxxxx destilovanou xxxxx xxxx čistění xxxxx.
x) Xxxxxxx xxxx plastových xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx fenolů a xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx vybavení, xxxxxxx:
5.1 Xxxxxxxxxx xxxx
5.2 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx 37 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxxx délce 610 xx.
5.4 Xxxxxxxx, 16 xxxx 18 × 150 xx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 5 ml a 10 xx.
5.5 Pipety
5.6 Xxxxxxxx nálevky xxxxxx xxxxxxxxx, např. x xxxxxxx 5 cm.
5.7 Xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx nejméně 9 xx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.
5.8 Xxxxxxx xxxxx xxx přípravu xxxxxxxxxxxx roztoků.
6. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
x) Xxxxx stanovení xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx slunečního xxxxxx.
x) Stopy xxxx xxxx potu xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xx xxxxx se xxx xxxxxxx. Je xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku
6.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx po xxxxxx vzorků. X xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v chladničce, xxxxx xx xxxx xxx xxx xxx.
6.2 Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxx do každé xx xxxx xxxxxxxx (5.4), xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx.
6.3 Xxxxxxxxx
6.3.1 Slepý xxxxxx xxxxxxxx dvě xxxxxx xx xxxxxx xxxx; xxxxxxxx a kádinku x vroucí xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx folií, xxx se prohřála xxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.2 Xx zbytek xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx 10 ml xxxxxxx xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxxxxx.
6.3.3 Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 60 xxxxx xx xxxxx lázni (5.2) a xxxxx (xxxxxxx xxxxxxxxx) promíchat xxxxxx xxxxx.
6.3.4 Xxxxxx xxxx v xxxx 6.3.1 xxxxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
6.3.5 Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxxxx xxxxx-xxx (4.5) x řádně promíchat.
6.3.6 Xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxx xxx mililitry x x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx není xxxxxxx xxxxxxxx čirý; xxxxxxxxxx 5 ml xx xxxxxxxx.
6.3.7 Přidat 5 xx tlumivého xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2).
6.3.8 Xxxxxx 0,1 xx xxxxxxx XXX (4,6), promíchat x 30 minut xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxxx teplotě.
6.3.9 X xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx slepým xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx 610 xx.
6.3.10 Xxxxx absorbance xxxxxxxx v xxxx 6.3.9 převyšuje xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku obsahujícího 20 μx xxxxxx xx xxxxxxxx podle xxxx 6.4.4, xxxxxxxx xxxxxxxxx při vhodném xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx objemu xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx objemem xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx se opatrně xxxxx xx xxxx, xxx xx inaktivovala xxxxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx
6.4.1 Xx základě xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (4.8.2) připravit xxxxxxxxxx xxxx zředěných standardních xxxxxxx obsahujících 0 (xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx), 2, 5, 10 x 20 μx xxxxxx na xxxxxxxx. Do každé x xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx pipety 1 xx xxxx x 1 xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
6.4.2 Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (4.7), 5 xx xxxxxxxxx roztoku xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.3), 3 xx xxxx x 0,1 xx xxxxxxx XXX (4.6); promíchat.
6.4.3 Xxxxxx vyvíjet xxxxxxxxx 30 minut xxx xxxxxxxx teplotě.
6.4.4 V xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx při xxxxxx délce 610 xx.
6.4.5 Na xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (6.4.4) xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx přidaného xxxxxx (6.4.1) xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxx x xxxxxx
7.1.1 Xx základě xxxxxx xxxxxxxxxx (6.3.9) xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx přímky (6.4.5).
7.1.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x μg xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxxx fosfatázy = 2,4 × X × X
xxx
X xx xxxxxxxx xxxxxx x μg xxxxxxx xxxxx bodu 7.1.1;
X xx faktor xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 6.3.10 (x xxxxxxx žádného xxxxxxx X = 1).
2,4 xx xxxxxx xxxxxxx (5/12 x 1 xx xxxxxxxxxxx xxxxxx) – xxx 6.2 xx xxxxxxxxxx x 6.3.2, 6.3.5 x 6.3.6.
7.2 Xxxxxxxxxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxxxxxxx (r) : 2 μx xxxxxx/xx.
7.2.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx (R) : 3 (xxxxxxxxx) μx xxxxxx/xx.
7.2.3 Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx podle 6.3.10, xxxxxx xxxxxxx x 7.2.1 x 7.2.2 se xxxxxx xxxxxxxx získaných xx xxxxxxxxx xxxxxx.
XXX. XXXXXXXXX XXXXXXXX PEROXIDÁZY
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx, který xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx:
Xxxxx je xxxxx xxxxx pasterováno, xx 30 sekund xx xxxxxxxxxx xx objeví xxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx:
Xx 30 xxxxxx po promíchání xx neobjeví žádné xxxxxxxxx.
3. Princip
Peroxidáza xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx indofenol (Štorchův xxxx). Intenzita xxxxxxxxx xx xxxxx úměrná xxxxxxxxxxx enzymu.
4. Činidla
4.1 Xxxxxx 1,4 fenylendiaminu
Rozpustit x xxxxx xxxx (50 °C) 2 x 1,4 xxxxxxxxxxxxxx (X6X8X2) a doplnit xx 100 xx. Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx x temnu, x tmavě xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx jednoho xx dvou dní xx připravení xxxxxx 1,4 fenylendiaminu xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2 Xxxxxx xxxxxxxx vodíku
Vodou zředit 9 ml 30 % xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx 100 ml. Xxx xxxxxxxxxxx přidat 1 xx koncentrované kyseliny xxxxxx xx litr xxxxxxx.
Xxxxxx peroxidu xxxxxx xx stálý xxx xxxxx měsíc, pokud xx xxxxxxxxx x xxxxxx x temnu, x xxxxx xx xxxxxxxxx zátkou, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx styku x xxxxxxxxxxx látkami.
5. Xxxxxx
5.1 Dát 5 xx vzorku xxxxx xx čisté zkumavky x xxxxxxx víčkem.
5.2 Xxxxxx 5 xx xxxxxxx 1,4 fenylendiaminu (4.1).
5.3 Přidat 2 xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.2).
5.4 30 xxxxxx xx promíchání xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx modré xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx 30 xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, reakce xxxx xxxxxxxxxx.
XX. STANOVENÍ XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX PŘI 30 °X
1. Předmět x xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx popisuje referenční xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx při 30 °X. Xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx, pasterované xxxxx, UHT xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléko, xxxxx xxxx 15 xxx xxxxxxxxxxxxx xxx 30 °X.
2. Definice
"Mikroorganismy" xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx aerobní xxxxxxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx mléka x kultivačním xxxxxx x Petriho miskách x nechat xxxxxxxxx 72 xxxxx xxx 30 °C. Spočítat xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx mléka xxxx na 0,1 xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx XXX xxxxx.
4. Přístroje a xxxxxxx ze xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, nastavitelný na 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx teplotu 30 ± 1 °X.
4.1.4 xX-xxxx se xxxxxxxxx xxx kompenzaci teploty, xxxxxx na ± 0,1 jednotky xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, nastavitelná xx 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxx 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 1 xx xxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx x 9 xx ředicího xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxx x dostatečným xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x promíchání 10 xx primárního xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 ml xxxx zkumavky x xxxxxx 20 ml xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
4.2.3 Pipety (xxxxxxxx xxxxx), xxxxxxxx xxxx xx sterilního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, s nepoškozeným xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 ml, x xxxxxxxxx otvorem x xxxxxxx 1,75 xx 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx z xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx syntetického xxxxxxxxx, xxx misek xx xxxxxxx xxxxxx xxx 90 až 100 xx. Xxxxxxx xxxxxxx misek xx xxxx být xxxxxxx 10 xx. Xxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx, které xx xxxxxxx počítání xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx pomůcek ze xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x těchto xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx při xxxxxxx 170–175 °X;
x) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx xxxxxxx 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xx xx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx proniknutí páry: xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxx, xxxx nádoby xx xxxxxx xxx napevno xxxxxxxx, xxxxxxx nebo xxxxx xx měly xxx volné.
Pomůcky xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xx se xxxx vysušit xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx musí být xxxxxxxxxxxxx x horkovzdušné xxxxxxx (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx – agar xx xxxxxxx mlékem
5.1 Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx (+) xxxx xxxxxxxx |
1,0 g |
|
Sušené odstředěné xxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10–15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx žádné xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx testy xx sušeným xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x rozpustit xx vodě xxxxxxxxxx xxxxxxx, trypton, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx x xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx, xxxxx xx xxxx xxxxx nerozpustí, xxxx xxxxxxxx x xxxx asi 30 xxxxx.
Xxxxx to je xxxxxxxx, přefiltrovat xxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH pomocí xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx je nezbytné, xxxxxxx xX, roztokem (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx sodného nebo xxxxxxxx chlorovodíkové, aby xx xxxxxxxxxxx byla xxxx xxxxxxx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °C.
5.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Rozdělit xxxxxx (5.1) v xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 ml xx xxxxx xxxx xx 12 až 15 xx do zkumavek (4.2.2). Xxxxx x xxxxxxxx uzavřít.
15 minut xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx (4.1.2) při 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX kultivačního média.
Pokud xx kultivační médium xxxxxxxxx ihned, xxxxxxxx xx x temnu xxx xxxxxxx mezi 1 x 5 °X, xxxxx xx xxxx xxx 1 xxxxx xx jeho xxxxxxxx.
5.3 Komerční dehydrované xxxxxxxxxx médium
Kultivační xxxxxx (5.1) xx xxxx xxxxxxxxx x komerčního xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx přidat sušené xxxxxxxxxx xxxxx před xxxxxxxxxxxx, pokud není xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xX xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X xxxxxxx podle xxxx 5.1, xxxx xxxxxxxx, sterilizovat a xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Xxxxxx xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
8,5 x |
|
Xxxx |
1000 ml |
Příprava:
Rozpustit xxxxxx xx xxxx, xxxxx xx xx nutné, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX pH-metrem (4.1.4); xxxxx to xx xxxxxxxx upravit xX roztokem (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
6.2 Xxxxxxxxx, sterilizace x skladování xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx zkumavka xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxx.
Xxxxx xx ředidlo xxxxxxxxx ihned, xxxxxxxx xx v temnu xxx xxxxxxx mezi 1 x 5 °X, xxxxx ne xxxx xxx 1 xxxxx xx jeho xxxxxxxx.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx (6.1) xx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX metodou xxxxx xxxx 6.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx podle xxxx 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxxx kultivačního xxxxx
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx množství kultivačního xxxxx a xxxxxxxx xx xxxxx lázni (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxx řádně xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xx 25 xxxxxxxx otočeními xxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Doba xxxx mícháním x xxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (10-1) (xxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 ml xxxxxx (7.2) syrového xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 9 xx xxxxxxx (6.1), přičemž xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx jako xxxxxxx xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ředění xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx se xxx xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx desetinných xxxxxx (syrové x xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) přenést 1 xx primárního ředění (7.3) xx 9 xx ředidla (6.1) xxxxx xxxxxx v xxxx 7.3.
Xxxxx xx xxx ředění 10−2.
X xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx postup opakuje xxx dlouho, dokud xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Petriho xxxxx
7.5.1 Xxxxxx xxxxx: Sterilní xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx vzorku x/xxxx vhodného xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxx dvě xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.5.2 Xxxxxxxxxxx mléko: Sterilní xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx vzorku x/xxxx vhodného desetinného xxxxxx. Musí být xxxxxxxxx nejméně xxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx.
7.5.3 XXX mléko x xxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx xx 15 xxxxx xxxxxxxx xxx 30 °X – xxxxxxxx 85/397/XXX, příloha X xxxxxxxx XXX bod 5):
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 ml xxxxxx xxxxx (7.2). Xxxxxxxxx xxx misky.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 15 xx 18 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Xxxxx xxxxxxxxx rotací Xxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxx k xxxxxxxxxxxx rozložení xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx mléka x xxxxxxxxx, xxxxx druhu xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxx médiem xxxxx xxxxxxxxx 15 minut.
Nechat xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x čistém xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
7.7 Inkubace Petriho xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Misky xxxxxxxxx obrácené dnem xxxxxx. Neskládat xx xxxx xxxx než xxxx misek. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, ani xxx v xxxxxxxx xx xxxxxxx a xxxxxx částí inkubátoru.
Inkubovat 72 ± 2 xxxxx při 30 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx x Petriho xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx než 300 xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx světle. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) a/nebo xxxxxxxxxx počítadlo (4.1.8). Xx xxxxx xxxx xx xx, aby xxxxxxx x záměně xxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx provést xxxxxxx průzkum xxxxxx xxxxxxxxxxxx skla s xxxxxx xxxxxxxxx (4.1.7), x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx cizích xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Pokud xxxxxxx tvořící povlak xxxxxxxxx méně než xxxxxxxx xxxxx, spočítat xxxxxxx x nepostižené xxxxx misky x xxxxxxxxx odpovídající xxxxx xxx celou misku. Xxxxx kolonie tvořící xxxxxx pokrývají xxxx xxx xxxxxxxx plochy xxxxx, xxxxx xxxxxxx.
8. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Syrové x xxxxxxxxxxx xxxxx
8.1.1 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 x 8.1.4).
8.1.2 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na 1 xx xxxxxxxx xxxx pasterovaného mléka xxxxx xxxxxx xxxxxx:
∑X / (n1 + 0,1x2) x
xxx:
∑X ΣC xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx podle xxxx 8.1.1.
(x1 + 0,1 x2)x xx xxxxx xxxxxxxxxxxx vzorku, xxx:
x1 xx počet xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx
x2 xx xxxxx misek xxx druhém ředění
d xx faktor xxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx zaokrouhlí xx dvě xxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx pět, xxxxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxx xxxxxxx vlevo xxxx xxxx.
Xxxxxxx (pasterované xxxxx):
Xxxxxx 10−2: 278 x 290 xxxxxxx
Xxxxxx 10−3: 33 a 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; = 278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2
= 6290,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.1.3 Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 10, xxxxx, že xxxxx mikroorganismů na xxxxxxxx xx "xxxxx xxx 10 x x", xxxxxxx "x" xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
8.1.4 Xxxxx xxxx všechny xxxxx vyšší xxx 300 a počítání xx xxxxx, xxxxxxx xxxxx x vynásobit xxx převrácenou xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Výsledek xxxxxxxx xxxx "Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xx".
8.2 UHT xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xxxxx než 10 xxxxxxx xx 0,1 xx se xxxxxxxx xx nevyhovující požadavkům xxxxxxxx 85/397/XXX.
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kruhových xxxxx xxxxx xxxxxx x dispozici.
V. STANOVENÍ XXXXXX XXXXXXXXXXXXXX XXX 21 °C
1. Předmět x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx technikou xxxxxxxx xxxxxxx xxx 21 °X v xxxxxxxxxxxx xxxxx, které xxxx xxx dní xxxxxxxxxxxxx xxx 6 xX x xxxxx xxxxxxxx xxxxxx kontaminace xxxxxxxxxxxxx mléka xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, které xx xxx množit xx x xxxxx xxx 6 °X.
2. Xxxxxxxx
"Xxxxxxxxxxxxxx" xx rozumějí xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx počitatelné xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx pět xxx xxx 6 °X. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx médiem x Xxxxxxx miskách x xxxxxx xxxxxxxxx 25 xxxxx xxx 21 °X. Xxxxxxxx kolonie x xxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxxxx na 1 xx pasterovaného mléka.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx skla
Obvyklé xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx sušárna, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °C.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °X.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx udržovat xxxxxxx:
x) 6 ± 0,2 °X
x) 21 ± 1 °X xx xxxxx bodech xxxxxx.
4.1.4 xX-xxxx xx xxxxxxxxx xxx kompenzaci xxxxxxx, xxxxxx na ± 0,1 xxxxxxxx xX.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 45 ± 1 °C.
4.1.6 Xxxxxxxxxx xxxx, zvětšení 2 – 4x.
4.1.7 Xxxxxxxxxx xxxx, zvětšení 8 – 10x.
4.1.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.1.9 Míchačka xxxxxxx rozmíchat 1 xx vzorku mléka xxxx desetinného xxxxxx x 9 ml xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
4.2 Pomůcky xx xxxx
4.2.1 Zkumavky x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, x xxxxxxxxxxx prostorem k xxxxxxxxxx 10 ml xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxx x xxxxxx 150 xx 250 xx nebo xxxxxxxx x objemu 20 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média.
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx vatou), xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 1,75 až 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx xxxxx x čirého, xxxxxxxxxx xxxx nebo ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxx má xxxxxxx xxxxxx xxx 90 xx 100 x. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxx by měla xxx nejméně 10 xx. Xxx nesmí xxx žádné xxxxxxxxxx, xxxxx by xxxxxxx xxxxxxxx kolonií.
4.2.5 Sterilizace xxxxxxx xx xxxx:
Xxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxx xxxxxxx:
x) x xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1), xxxxxxx xxxxx hodinu xxx xxxxxxx 170–175 °X;
x) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 xxxxx xxx teplotě 121 ± 1 °X.
Xxx xxxxxxx autoklávu xx xxxxx xxxx xx to, aby xxxx zajištěno xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: pokud xx materiál xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxx xxxxxx by xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxx.
Xxxxxxx ze xxxx xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xx se xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx páry.
Pipety xxxx být xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx médium – xxxx se xxxxxxx xxxxxx
5.1 Složení:
|
Kvasnicový xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
X-xxxxxxx(+) xxxx dextróza |
1,0 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
1,0 g |
|
Agar |
10-15 x xxxxx želírovacích xxxxxxxxxx agaru |
|
Voda |
1000 xx |
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx by xxxxxx obsahovat xxxxx xxxxxxxxx látky. Toto xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, které xxxxxxxx xxxxx inhibiční xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
X tomto xxxxxx suspendovat x xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx odstředěné xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx přidat xxxx x uvést xx xxxx za xxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx agar xxxxx xxxxxxxxxx, xxxx zahřívat x xxxx asi 30 xxxxx.
Xxxxx xx xx nezbytné, přefiltrovat xxxx papír.
Zkontrolovat xX xxxxxx pH-metru (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxx xX, xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, xxx po sterilizaci xxxx xxxx xxxxxxx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °C.
5.2 Xxxxxxxxx, sterilizace a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média
Rozdělit xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxxx xx 100 xx 150 xx xx xxxxx xxxx xx 12 xx 15 xx do xxxxxxxx (4.2.2). Baňky x xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xx v xxxxx při xxxxxxx xxxx 1 x 5 °C, avšak xx xxxx xxx 1 měsíc po xxxx xxxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kultivační xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) se xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kultivačního xxxxx. Dodržet pokyny xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx rozpouštěním, pokud xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xX xx 6,9 ± 0,1 xxx 25 °X xxxxxxxx xxxxx bodu 5.1, xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx. 5.2.
6. Xxxxxxx
6.1 Xxxxxx xxxxxx/xxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
1,0 g |
|
Chlorid xxxxx (XxXx) |
8,5 g |
|
Voda |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx, xxxxx to xx xxxxx, xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx pH xX-xxxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx nezbytné xxxxxxx xX roztokem (xxxxxxx 0,1 xxx/x) xxxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 při 25 °X.
6.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a skladování xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (6.1) xx xxxxxxxx (4.2.1) xxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 9,0 ± 0,2 ml xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X. Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxx.
Xxxxx xx ředidlo nepoužije xxxxx, skladuje xx x temnu xxx xxxxxxx xxxx 1 x 5 °C, xxxxx ne xxxx xxx 1 xxxxx xx xxxx přípravě.
6.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ředidla
Ředidlo (6.1) xx může xxxxxxxxxxx x komerčních xxxxxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX xxxxxxxx podle xxxx 6.1, poté rozdělit, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx 6.2.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxx zahájením xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nechat xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média x xxxxxxxx xx xxxxx lázni (4.1.5) xx 45 ± 1 °X.
7.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx
7.2.1 Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx [4.1.3 x)] uzavřené xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx nebo, xxxxx to xxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx vzorek x xxxxxx nejméně 100 xx po xxxx 120 ± 2 xxxxx xxx 6 ± 0,5 °X.
7.2.2 Xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x to 25 xxxxxxxx otočeními xxxxxx xx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxx rozptýlit. Xxxx xxxx xxxxxxxx x odběrem xxxxxxxxxxx xxxxxx xx neměla xxxxxxxxx tři minuty.
7.3 Xxxxxxxx primárního xxxxxx (10−1)
Xxxxxxxx pipetou (4.2.3) xxxxxxx 1 xx xxxxxx (7.2) xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 9 xx xxxxxxx (6.1), xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxx ředidla xxxx xxx přibližně xxxxxx xxxx teplota xxxxxx xxxxx. 5 xx 10 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx ředění xxxxxxxxx (4.1.9).
Xxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx 10−1.
7.4 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx 1 ml xxxxxxxxxx xxxxxx (7.3) xx 9 ml xxxxxxx (6.1) xxxxx xxxxxx v xxxx 7.3.
Xxxxx se xxx xxxxxx 10−2.
X cílem xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx se tento xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (8.1.1).
7.5 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx misek
Sterilní xxxxxxx (4.2.3) xxxxxxx xx xxxxx (4.2.4) 1 xx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ředění. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx dvě xxxxxx. Xxx každé xxxxxx (8.1.1) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx misku.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 15 xx 18 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (7.1).
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxx po xxxxxxxx xxxxx x rovnoměrnému xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx přípravy xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxx druhu xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx s kultivačním xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx médium neztuhne.
7.7 Xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx (4.1.3). Misky xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx nahoru. Xxxxxxxxx na sebe xxxx než xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, ani xxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 25 xxxxx xxx 21 ± 1 °X.
7.8 Xxxxxxxx kolonií
Počítat xxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 300 xxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxx tlumeném xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx počítání xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx (4.1.6) x/xxxx xxxxxxxxxx počítadlo (4.1.8). Xx nutné dbát xx xx, aby xxxxxxx k xxxxxx xxxxxx sraženin v xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx průzkum xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx zvětšením (4.1.7), x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx než xxxxxxxx xxxxx, spočítat xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx misky a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx celou xxxxx. Xxxxx kolonie xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx čtvrtinu xxxxxx xxxxx, xxxxx vyřadit.
8. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
8.1 Použít xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 10 xx 300 xxxxxxx (xxx 8.1.3 a 8.1.4).
8.2 Vypočítat počet xxxxxxxxxxxxxx na 1 xx syrového xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx podle xxxxxx xxxxxx:
∑X / (x1 + 0,1x2) x
xxx:
ΣX xx xxxxxxx xxxxx kolonií xxxxx xxxx 8.1,
(x1 + 0,1 x2)x xx xxxxx naočkovaného xxxxxx, xxx:
x1 xx počet xxxxx xxx prvním xxxxxxx
x2 je xxxxx xxxxx při druhém xxxxxx
x xx xxxxxx xxxxxxx, xx základě xxxxxxx byly xxxxxxx xxxxx xxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxxx na xxx xxxxxx číslice. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx tak, xxx sousední xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxxxx:
Xxxxxx 10−2: 278 a 290 kolonií
Ředění 10−3: 33 a 28 xxxxxxx
Xxxxx/xx:&xxxx;&xxxx;&xxxx; =278 + 290 + 33 + 28 / (2 + 0,1 × 2)10−2=
=629 / 0,022
= 28 590
= 29 000
= 2,9 × 104.
8.3 Pokud xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 10, xxxxx, že xxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxxxxx xx "nižší xxx 10 × d", xxxxxxx "d" xx xxxxxxxxxx xxxxxxx nejnižšího xxxxxxx xxxxxxx.
8.4 Pokud xxxx všechny xxxxx xxxxx xxx 300 x počítání je xxxxx, xxxxxxx odhad x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx vyjádřit xxxx "Xxxxxxxxxx počet xxxxxxxxxxxxxx na xx".
9. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx k xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXXXX XXXXXX KOLIFORMNÍCH XXXXXXXX – XXXXXXXX XXXXXXX XXX 30 °X
1. Předmět a xxxxxx použití
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx referenční postup xxx xxxxxxxxx koliformních xxxxxxxx x pasterovaném xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx při 30 °X.
2. Definice
"Koliformními xxxxxxxxxx" xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx 30 °X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xx popsaných xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx.
3. Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxx x Petriho xxxxxxx a 24 xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxxx charakteristické xxxxxxx x, xxxxx xx xx nutné, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx kolonií xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx na 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
4. Xxxxxxxxx x pomůcky xx skla
Obvyklé laboratorní xxxxxxxx, xxxxxxx:
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 170 xx 175 °X.
4.1.2 Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 121 ± 1 °C.
4.1.3 Xxxxxxxxx, xxxxxxx udržovat xxxxxxx 30 ± 1 °X.
4.1.4 xX-xxxx xx zařízením xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx ± 0,1 xxxxxxxx pH.
4.1.5 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx na 45 ± 1 °X.
4.1.6 Xxxxxxxx jehla xx xxxxxxx platina-iridium xxxx nikl-chróm.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
4.2.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 20 xx, aby xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kultivační xxxxxx (5.2) a Xxxxxxxxx trubičky xxxxxx xxxxxxxxx.
4.2.2 Baňky o xxxxxx 150 až 250 xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.1).
4.2.3 Xxxxxx (xxxxxxxx vatou), xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx syntetického materiálu, x nepoškozeným xxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxx 1 – 10 xx, s výpustním xxxxxxx o xxxxxxx 1,75 až 3 xx.
4.2.4 Xxxxxxx misky x xxxxxx, bezbarvého xxxx nebo ze xxxxxxxxxx syntetického materiálu, xxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx 90 xx 100 x. Xxxxxxx hloubka xxxxx by xxxx xxx xxxxxxx 10 xx. Xxx xxxxx xxx žádné nerovnosti, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
4.2.5 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx ze skla:
Pomůcky xx xxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx postupů:
a) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.1.1), xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx 170 – 175 °C;
b) x xxxxxxxxx (4.1.2), xxxxxxx 20 minut xxx xxxxxxx 121 ± 1 °C.
Při xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxx na xx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx: xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx uzavřeny, xxxxxxx xxxx víčka xx xxxx být xxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx x autoklávech xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxx xxxx xxx sterilizovány x xxxxxxxxxxxx sušárně (4.1.1).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxx
5.1 Xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx červení, žlučí x xxxxxxxx (VRBL xxxx). Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
7 x |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
3 x |
|
Xxxxxxx (C12H22O11.H2O) |
10 x |
|
Xxxxxxx xxxxx (XxXx) |
5 x |
|
Xxxxxxx xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxxxx červeň |
0,03 x |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxx |
0,002 x |
|
Xxxx |
10 xx 15 x xxxxx xxxxxxxxxxxx vlastností xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx x nechat xxxx xxxxxxx minut. Xxxx xxxxxxxx promíchat.
Zkontrolovat xX xxxxxx pH-metru (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxx xX roztokem (xxxxxxx 0,1 xxx/x) hydroxidu xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxx xxxx jeho xxxxxxx 7,4 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxx xxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x ihned xxxxxx po množstvích 100 až 150 xx xx sterilních xxxxx (4.2.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1.5) xx 45 ± 1 °C.
V xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx sterilitu xxxxxxxxxxxx xxxxx (6.4).
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx do xxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx.
5.2 Tekutý xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx. Konfirmační xxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
10 x |
|
Xxxxxxx (C12H22O11.H2O) |
10 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx |
20 x |
|
Xxxxxxxxxxx xxxxx |
0,0133 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxx x uvést xx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxx xX-xxxxx (4.1.4); xxxxx xx xx xxxxxxxx, upravit pH xxxxxxxx (xxxxxxx 0,1 xxx/x) hydroxidu xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,2 ± 0,1 xxx 25 °X.
Xxxxxxxx xxxxxx po 10 xx do xxxxxxxx (4.2.1) xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx.
15 xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.1.2) xxx 121 ± 1 °X.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx obsahovat xxxxxxxxx bubliny.
Zkontrolovat xX xxxxxxxxxxxx média.
Pokud xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, skladuje se x xxxxx při xxxxxxx xxxx 1 x 5 °C, xxxxx xx déle xxx 1 měsíc xx xxxx přípravě.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx kultivační xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxx připravit x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx média. Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xX, xxxxxxxx, sterilizovat x skladovat xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx 5.1 x 5.2.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xxxxxx (VRBL agar) xxxxxxx v xxxx 5.1.
6.2 Xxxxxxxx vzorku xxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx co xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x xx 25 xxxxxxxx otočeními xxxxxx xx xxxxxxx. Xx nutné xxxxxxxx xxxxxx pěny xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx mezi xxxxxxxx x xxxxxxx testovacího xxxxxx by xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx.
6.3 Xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (4.2.3) 1 ml xxxxxx xxxxx xx xxxxx xx tří xxxxx (4.2.4) x xxx xxxxxxxxx 3 xx xxxxxx xxxxx (6.2).
6.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx
Xx xxxxx naočkované xxxxx xxxxx asi 12 xx XXXX xxxxx (6.1)
Xxxxx po xxxxxx xxxxx promíchat xxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxx xx inkubaci xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx mléka x smícháním s xxxxxxxxxxx xxxxxx nesmí xxxxxxxxx 15 xxxxx.
Xx xxxxxx kontroly xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx misku x 12 xx xxxxx VRBL agaru, xxxxx xxx xxxxxx xxx naočkování misky.
Nechat xxxx na xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 4 xx XXXX xxxxx (6.1) xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx.
6.5 Xxxxxxxx Petriho xxxxx
Xxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxxx (4.1.3). Misky xxxxxxxxx xxxxxxxx dnem xxxxxx. Xxxxxxxxx na xxxx xxxx než šest xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx nesmějí xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxx x kontaktu se xxxxxxx x vrchní xxxxx inkubátoru.
Inkubovat 24 ± 2 xxxxxx xxx 30 ± 1 °X.
6.6 Xxxxxxxx xxxxxxx
6.6.1 Xxxxxxx xxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx 150 xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx červené xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx 0,5 xx, x xxxx bez sraženiny xxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx bakterie.
6.6.2 Pokud xxxx všechny xxxx xxxxxxx kolonie xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx (např. xxxxx xxxxx, xxxxxxxx nebo xxxx tvar xxxxxxxx xxxxxxxx x charakteristickým xxxxxxxx), provést xxxxxxxxxxx xxxx (6.7).
6.7 Xxxxxxxxxxx xxxx
Xxxxx údajů x xxxx 6.6.2 xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx u xxxxxxxx počtu (např. 3 xx 5) xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx kolonií xxx, xx se xxxxxx xxxxxxxx jehly (4.1.6), xxxxxxxx zkumavky xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.2). Xxxxxxxxx xxxxxxxx 24 ± 2 xxxxx xxx 30 ± 1 °X.
Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií xx xxxxxxxx xxxxxx kolonie, xxxxx x Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx.
7. Xxxxxxx x vyjádření xxxxxxxx
7.1 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 150 kolonií.
7.2 Pokud xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, vypočítat počet xxxxxxx koliformních bakterií xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx vzorce:
ΣC / x
xxx:
ΣX xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (7.1 x xxxxxxxxxxx xx 7.2), xxxxxxxxxxx vyšetřením vzorku xxxxx (6.3).
n je xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (6.3) x mililitrech (3 ml).
Počet xx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx číslice, xxxxx xxxxxxxx více než 100 kolonií. Xxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxxxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxx číslice xxxxx xxxx xxxx.
Xxxxx xxxx všechny xxxxx xxxxx než 150 xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx "xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx bakterií na 1 ml".
8. Spolehlivost
Výsledky xxxxxxxxxxx uznaných xxxxxxxxx xxxxx ještě xxxxxx x xxxxxxxxx.
XXX. XXXXXXXXX XXXXXX SOMATICKÝCH XXXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx dva xxxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx buněk.
A. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
X. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x syrovém xxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx buněk ve xxxxxx mléka xx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx fluoro-opto-elektronické xxxxxx (xxx X.1).
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxx xx somatickými xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxx xx xxxxx zřetelně xxxxxxx methylenovou xxxxx
3. Xxxxxxx
Xxxxxx 0,01 xx xxxxx xx 1 xx2 xxxxxxx podložního xxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx vysuší a xxxxxxx. Počítání xx xxxxxxx pod mikroskopem. Xxxxx xxxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx vynásobí xxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxxx získat xxxxx xxxxx xx 1 xxxxxxxx.
4. Xxxxxxx
Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x..
Xxxxxxx roztok
Složení
|
Methylenová xxxx |
0,6 x |
|
Xxxxxxx – 99 % |
54 xx |
|
1,1,1-xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx |
40 ml |
|
Ledová kyselina xxxxxx |
6 xx |
Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx je xxxxxxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx v xxxxx xxxxxxx x 1,1,1-trichlorethan xxxx xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxx ve xxxxx xxxxx xx 60 xx 70 °C. Xxxxxx methylenovou xxxx, xxxxx xxxxxxxxx, 12 xx 24 xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 4 °X x xxxxxx ledovou xxxxxxxx octovou. Xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx 10 xx 12 xxxxxxx x uchovat xxxxxxx xxxxxx ve xxxxxxxxxxxx uzavřené láhvi. X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx roztok xxxxx přefiltrovat.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx ze xxxx
5.1 Mikroskop umožňující xxxxxxxx 500 × xx 1000 ×
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx umožňující xxxxxxxxx xx 0,01 xx x xxxxxxxxx xxxxxxx ± 2 %.
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 20 xx × 5 xx xxxxxxxxxx pro tenkou xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx sklíčko x xxxxxxx 20 × 5 xx xxx xxxxxx vrstvu.
5.4 Horizontální xxxxx deska (30 °X xx 50 °X) xxx xxxxxx xxxxxxxxxx sklíček.
5.5 Ventilátor (xxx) xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx.
5.6 Xxxxx xxxxx, nastavitelná xx 30 xx 40 °X xxx xxxxxxxx xxxxxx mléka.
5.7 Xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 0,01 xx.
6. Postup
6.1 Vzorek xxxxx
Xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx do xxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 6 °X. Vzorek nesmí xxx xxxxxxx.
6.2 Příprava xxxxxx x laboratoři
Zahřát xxxxxx ve vodní xxxxx (5.6) xx 30 xx 40 °X. Poté xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx které xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (5.2), například 20 °X.
6.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx podložní xxxxxxx (5.3) například xxxxxxxxx, xxxxxxx papírem, xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx plamenem a xxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxx, xxx jsou xxxxxxxx před xxxxxxx.
6.4 Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx (5.2) xxxxxxx 0,01 xx xxxxx xx xxxxxx připraveného, xxx xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxxxx vnější xxxxxx stříkačky, která xxxxxx xx xxxxx x mlékem. Přiložit xxxxxxxxx na podložní xxxxxxx (5.3) a xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (20 xx × 5 xx). Xxxx xx co xxxxxxxxxxxxxxx vyplnit. Xxxxxx xxxxxxx tenkou vrstvu xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (5.4) xx xx úplného xxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxx tenké xxxxxx.
6.5 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx 10 xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4). Xxxxx x, xxxxx je xx xxxxxxxx, vysoušení xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.5). Xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx tekoucí xxxx, xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxx x xxxxxxx tak, xxx xxx xxxxxxx před xxxxxxx.
6.6 Kalibrace xxxxxxxxxxxxxxx xxxx
Xx základě xxxxxxxxx xxxxxxxx (500 × xx 1000 ×) xxxxxx xxxxxx mikroskopického xxxx (5.7).
7. Xxxxxxxx x výpočet
7.1 Počítání xxxxx
Xxxxxx mikroskop (5.1). Xxxxx xxxxxxxx xxxxx xx počítají xxxxx xxxxxxx jádra, x xx taková xxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx a x xxxxx xx x xxxxxxxxxxxxxx xxxx viditelná xxxxxxx polovina. Xxxxxxx xxxx nebo xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx ty pásy xxxx xxxx, které xxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx. Pečlivá xxxxxxxx xxxxxxx vrstev x tudíž x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx kontrolovány xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx různých částí xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx všechny části xxxxx xxxxxx byly xxxxxxxxxx rovnoměrně.
7.2 Stanovení xxxxxxxxxxx počtu xxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx pod xxxxxxxxxxx xxxx xxx rovněž xxxxxxx pro standardizaci xxxxxxxxxxxxx a mechanických xxxxxxx xxxxxxxx, variační xxxxxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxx nesmí xxx vyšší než xxxxxxxx koeficient elektronického xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx 400000 xx 600000 buněk/ml xx xxxxx překročit 5 %.
Xxxxx somatických xxxxx, které xx xxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, musí xxx podle Poissonova xxxxxx rozdělení xxxxxxx 400, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
X = X = x2,
xxx:
X xx střední xxxxxxx
X xx xxxxxxx
x xx xxxxxxxxxx odchylka.
Variační koeficient xx:
XX = x × 100 % / M xxxx XX = 100 % / x&xxxx;xxxx XX = 100 % / XXX
X (xxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx (xxxxx), xxxxx xxxx spočítány (xxxxxxxxx 400 xxx XX = 5 %).
7.3 Xxxxxxx pracovního faktoru
Při xxxxxxx 0,01 xx xxxxx xx pracovní xxxxxxx vypočítá podle xxxx 7.3.1 xxxx 7.3.2.
7.3.1 Počítání pásů xx xxxxx vrstvě
Délka xxxx, xxxxx se xxxx počítat, xx 5 xx. Šířka xxxx xxxxxxxx průměru xxxxxxxxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxxxxx podložním xxxxxxxx x mikrometrickou xxxxxxxx (5.7).
Xxxxxxxx faktor = 20 × 100 / d × x
xxx:
x xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx x mm, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx stupnicí (5.7)
x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
7.3.2 Xxxxxxxx mikroskopických xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx
xxx:
x je xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx v xx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x mikrometrickou xxxxxxxx (5.7)
x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.
7.4 Xxxxxxx xxxxxx xxxxx
X xxxxx získat xxxxx xxxxx xx ml xxxxx, xx počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (7.1 x 7.2) xxxxxxxx pracovním xxxxxxxx (7.3).
7.5 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxx 7.2) nesmí xxxxxxxxx 5 %.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx uznaných xxxxxxxxx xxxxx nejsou x xxxxxxxxx.
X. Xxxxxx-xxxx-xxxxxxxxxxxx xxxxxx
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup, xxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxx X.1) xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx v syrovém xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx konzervace.
2. Xxxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxx rozumějí xxxxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxxx barvení xxxxxxx XXX xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
3. Princip
Část xxxxxx (xxxxxxxxx 0,2 xx) se důkladně xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxx x x xxxxxxxxxxxxxx roztokem. Část xxxx směsi xx xxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx vrstvy xx xxxxxxx disk, xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx elektrický xxxxxx, xxxxx se xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx v xxxxxxxx xx xxxxxxxx.
4. Xxxxxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx jinak, xxxx se xxxxxx xxxxxxx čistoty x.x.. Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx deionizovaná, xxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxxx čistoty.
4.1 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxxxxxxxxx draselný |
51,00 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxx |
13,75 x |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxx-xxxx-x(1,1,3,3-xxxxxxxxxxxxxxxx)-xxxxxxxxxx(xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 xx |
|
xX 5,7 xx 5,9. Xxxxxxx vodou na 10000 xx. |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx ve xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx nemělo xxxxxxxxx xxxx dní.
4.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx roztok)
Složení
|
Ethidiumbromid |
1,0 x |
Xxxxxxx xxxxx xx 1000 xx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx vodě. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx měsíce.
4.3 Xxxxxxxxxxxxx roztok (xxxxxxxx xxxxxx)
Xxxxxxx 20 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.2) x xxxxxxxx roztokem (4.1) xxx, xxx xx xxxxxx xxxxx 1000 xx. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxx používán xxxx xxx sedm dní.
4.4 Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx
|
Xxxxxxx xxxxxx (4.1) |
10 ml |
|
Polyethylenglykol-mono-p(1,1,3,3-tetramethylbutyl)-fenylether (xxxxxxxxx Xxxxxx X-100), 1 % xxxxxxxx |
10 ml |
|
Amoniak x 25 % xxxxxxxxxx |
25 ml |
Doplnit xxxxx xx 10000 xx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Skladování xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx.
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx principu xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxx xxxx xxx xxxx použitím xxxxxxxxxxx. Xxx se xxxxxxx vztah xxxx xxxxxxx částic, které xx mají xxxxxxx, x prahovou xxxxxxxx, xxx xxx se xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx provede xxxxx pokynů xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx obsah buněk xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (A).
5.2 Xxxxx xxxxx, x xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxxx na 40 ± 1 °X.
5.3 Xxxxxxxx, x xxxxxxx uzávěrem, xxxxx xxx 15 xx.
6. Xxxxxx xxxxx
6.1 Vzorek xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxx teplotě xx xxxxxxxx (5.3). Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx konzervován, xxxxxxxx xx může provést xx po xxxxxxxx 24 xxxxx po xxxxxxxx, xxxxx obsah xxxxxxxxxxxxxx by xxx xxxxxx nízký. Skladovací xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 6 °X.
6.2 Xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx se musí xxxxxxx do 24 xxxxx. Konzervace xxxx xxx provedena xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx.
6.2.1 Chemická xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx prostředků:
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxx:
xxxxxxx koncentrace xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxx 0,6 x na 100 xx. Takto konzervovaný xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx xxxxxxx 6 až 12 °X;
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxx xxxxx než 0,2 x na 100 xx. Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx skladován xxxxxxx 72 hodin xxx xxxxxxx 6 xx 12 °X;
- xxxx xxxxx:
xxxxxx může xxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x konečné xxxxxxxxxxx 0,024 g/100 ml, xxxxx je xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx 6 až 12 °X xxxxx po xxxx xxxxxx x xxxxxxxx do 48 xxxxx xx xxxx xxxxxx;
- bronopol:
vzorek xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x konečné xxxxxxxxxxx 0,05 x/100 ml, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx na xxxxxxx 6 xx 12 °X xxxxx xx xxxx odběru a xxxxxxxx xx 72 xxxxx po xxxx xxxxxx.
6.2.2 Vzorek, xxxxx xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx ještě xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx 48 xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx:
Xxxxx xxx x vzorky xxxxxxxxxxxx dvojchromanem xxxxxx, xxxx být dodrženy xxxxxx podmínky pro xxxxxxxxxx odpadních xxx.
7. Xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxx ošetření xxxxxx
Xxxxx, které xx xx xxxxxxxx, xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 24 xxxxx xxx xxx 2-6 °X. Xxxxxxxx xxxxxx x den xxxxxxxx xx bez xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nedoporučuje, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx nízké. Xxxxx xx xxxxxx nutné xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx dvojchromanem xxxxxxxxx (xxx 6.2.1).
7.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxx 7.1) xxxx xxxxxxxxxx vzorek nejméně xxxxx den xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx (5.2) xx xxx 40 °X. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx teplotě xx xx xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (5.1) xx 15 minut xx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 7.2). Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx důkladně xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx co xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx ředění x xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx provedeny v xxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx opakovatelnosti (x) a xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nejsou x xxxxxxxxx.
Xxxxx, xxxxx jsou x xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxx odhady:
(1) počet xxxxx xxxx 400 000 xx 500&xxxx;000 xxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx:
xx = 20000 xxxxx/xx
(xxxxxxxx xxxxxxxxxx koeficientu 5–4 %)
- xxxxxxxxxx xxxxxxxx reprodukovatelnosti:
sR = 40000 buněk/ml
(odpovídá xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 10–8 %)
9. Xxxxxxxx správnosti
Kontrola správnosti xx xxxxxxx pomocí xxxxxx o xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pod mikroskopem xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
XXXX. DETEKCE XXXXXXXXXX X SULFONAMIDŮ
PŘEDMĚT A XXXXXX XXXXXXX
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx postup xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx v xxxxxxx mléce a x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxxx postup xxxxxxxx:
X. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx umožňuje xxxxxx vzorky xxxxx, xxxxx obsahují xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx je jedním x několika postupů, xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx var. xxxxxxxxxxxx, XXXX 10149, co xx testovacího xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxx reprezentativní xxx xxxxxxxx xxxxx.
X. Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx x identifikaci penicilinu
Tento xxxxxx xx xxxx xxxxxx pro konfirmaci xxxxxxxx kvalitativního xxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx penicilinu x xxxxxxxxx jeho xxxxxxxxxxx.
X. Kvalitativní postup
1. Xxxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx postup xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x sulfonamidů v xxxxxxx xxxxx x x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, jejichž koncentrace xxxx vyšší než xxxxxx uvedené x xxxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx [1]
|
Citlivost xxxxx |
||
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxx |
|
|
Xxxxxxxxxxxxxxx |
0,002 |
0,006 |
|
Xxxxxxxxx |
0,002 |
0,005 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,015 |
0,035 |
|
Xxxxxxxx |
0,006 |
0,011 |
|
Xxxxxxxxxxx |
0,10 |
0,40 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,20 |
0,45 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxx |
0,15 |
0,50 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
7 |
15 |
|
Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx |
4 |
13 |
|
Xxxxxxxx |
1 |
22 |
|
Xxxxxxxxx |
9 |
28 |
|
Xxxxxxxxxx |
0,06 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxx |
1 |
2,25 |
|
Xxxxxxxxx |
0,01 |
0,14 |
|
Xxxxxxxxxxxxxx |
0,01 |
0,1 |
|
Xxxxxxxxxxxx (Xxxxxxxxxxxx) |
0,5 |
1 |
|
Xxxxxxxxxx extrakt |
2 g |
|
|
Pepton |
5 x |
|
|
Xxxxxx xxxxxxx |
1 g |
|
|
Chlorid xxxxx |
5 x |
|
|
Xxxx |
10–15 g |
|
|
Voda |
1000 xx |
|
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxx. Xx občasného xxxxxxx uvést do xxxx. Xxxxxxx pH xxx, aby po xxxxxxxxxxx byla xxxx xxxxxxx 7,4 ± 0,1 při 25 °X.
Xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxxxx xxxx xx 100 xx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx.
Xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X.
5.1.2 Agarové xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxx sodný |
2 x |
|
Xxxx |
15 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx (xxx 5.1.3) |
10 ml |
Příprava:
Rozpustit xxxxxx xx xxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx 15 xxxxx xxx 121 ± 1 °X. Upravit xX, xxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx 7,0 ± 0,1 xxx 25 °X.
5.1.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxxxx |
5 mg |
|
nebo Xxxxxxxxxxx |
30 xx |
|
96 % Xxxxxxx |
5 xx/30 ml |
|
Vodado |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (5 xxxx 30 xx) x xxxxxxx xxxxx.
5.1.4 Xxxxx xxxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
0,75 mg |
|
Glukóza |
5,0 mg |
|
Rozpustný xxxxx |
8,0 mg |
|
Bromkresolová xxxxxx |
0,025 x |
|
Xxxx |
50 xx |
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxx xx xxxx živný xxxxxx x xxxxxxxxx, pokud xx xx xxxxx, xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx v xxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx
5.2.1 Xx sterilní xxxxx x vhodným xxxxxxxx xxxxxxxxx roztok xxxxxxxxxx x 60 μx/xx (100 IU/ml), x xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx benzylpenicilinu xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx destilované vodě.
5.2.2 Xxxxxxxxx pracovní xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 1,25 xx xxxxxxx penicilinu (5.2.1) xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x doplnit xx xx 1000 xx. Tento pracovní xxxxxx obsahuje 0,075 μx penicilinu/ml (= 0,125 XX/xx).
5.2.3 Xxxxxxxxx 75 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx penicilinu xxxxxxxxxxxx 0,004 μx xxxxxxxxxx/xx (= 0,0067 XX xxxxxxxxxx/xx) přidáním 4 xx xxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxx (5.2.2) do 71 xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.3).
5.2.4 Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx podle bodů 5.2.1 xx 5.2.3 xx xxxx xxx xxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxx.
5.3 Xxxxx xxx inhibičních látek
Připravit xxxxxxxxx preparát xxxxx xxx xxxxxxxxxxx látek xxxxxxxxxxx sušeného xxxxxxxxxxxx xxxxx (10 % x/X) xx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx čerstvého xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx za xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx; xxxx mléko xx xxxxxxx do xxxxx x zahřívá se xxxxx xxxxxx na 100 °X, poté xx uloženo xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx 0 °X xx 6 °X na xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
5.4 Testovací xxxxxxxxxx
5.4.1 Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx použije Bacillus xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. calidolactis XXXX 10149 Xxxx XXXX 10149 je xxxxxxxxx x kmenem X 953.
5.4.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx testovací kultury. Xxxxxxxxx kultura xx xxxxxxx xx šikmém xxxxxx xxxxx (5.1.1). Xxxxx xxxx xx x xxxxxxxxx naočkuje xxxxxxx testovací xxxxxxx, xxxx se xxxxxxx xxxxxxxx 48 hodin xxx 63 ± 1xX. Xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx sterilní xxxxxxxx xxxxxx. Takto xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 0 xx 5 oC.
5.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxx)
5.5.1 Xxxxxxxxx přenést 20 xx xxxxxxx xxxxx (5.1.1) do xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx (4.2.2) a nechat xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx.
5.5.2 Xxxxxxxx pipetou (4.2.4) xxxxxxx 5 xx sterilní destilované xxxx do xxxxxxxx xx xxxxxxx kulturou (5.4.2) x xxxxx xxxxxxxx smyčkou xxxxx xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxx se xxxxx při 0 xx 5 °X x použije se xx 36 hodin.
5.5.3 Xxxxxxxx pipetou (4.2.4) xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx spór (5.5.2) xx Xxxxxxx xxxxx (5.5.1) x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx látku xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx skleněné xxxxxxx. Inkubovat 16 xx 18 xxxxx xxx 63 ± 1 °X (4.1.1).
Xxx xxxxxxx zásobní kultury (5.4.2) nebo kultury xxxxxx 36 xxxxx xx očkování xxxx xxxxxxx nejméně xxxxxxx x časovém xxxxxxxxx xxxxxxxxx 36 hodin.
5.5.4 Xxxxxxxx xxxxxxx (4.2.4) xxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxxx vody na Xxxxxxx xxxxx obsahující xxxxxxx (5.5.3) a xxxxxxxxx tyčinkou odstranit xxxxx z xxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxx (4.2.3) xxxxxxxxxx 250 xx sterilní xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx. Kultury, které xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 0 xx 6 °X.
5.5.5 Po 16xx xx 18ti xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 63 ± 1 °X na xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx životaschopných xxxxxxxxxxxxxx xxxx 5 a 10 xxxxxxx xx xxxxxxxx. Suspenze spór xxxx vykazovat rovnoměrné xxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx sraženiny nebo xxxxxxxxx, měla xx xx nahradit novou xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (5.4.2).
5.6 Xxxxxxxx zkumavek/ampulí
5.6.1 Nechat xxxxxxxxx xxxxxxx médium (5.1.2), xxxx xxxxxxxx xx 55 °X.
5.6.2 Xxxxxx část xxxxxxxx xxxxxxxxx spór (5.5.4) x xxxx částem xxxxxxxxx xxxxx (5.6.1) xx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx. Důkladně xxxxxxxxx.
5.6.3 Přenést xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx (4.2.6) 0,3 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.6.2), xxx se xxxxxxxxx 5 xx xxxxxx, poté xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxx, v xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx 12 xxxxx ve svislé xxxxxx.
5.6.4 Zkumavky/ampule xxxxx xxx xxxxxxx xxx xxx, ale xxxxx xxx xxxxxx skladovány xxxxxxx xxxxxx xxx 0–6 °X, xxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxx přípravě ochlazeny.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx 24 xxxxx xx xxxxxx, x xx xx xxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxx 0-5 °X. Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx 24 xxxxx, xxxx xx xx xxxxxxx hluboko xxxxxxxx (−30 °až - 15°X), xxx xx xxxxxxx na minimum xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.2 Čitelně x nesmazatelně xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx (5.6). Xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (4.1.3) xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxx (5.2 a 5.3).
6.3 Xx xxxxx xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxx 50 xxxxxxxxxx xxxxxxx roztoku (5.1.4).
6.4 Xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx (4.1.4) xxxxxxx 0,1 xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx každého xxxxxx xxxxxx vždy xxxxx xxxxxxxx stříkačku.
6.5 Xxxxxx xxxxx xxxx 6.4 xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx penicilinu xxxxxxxxxxxx 0,004 μx/xx (= 0,0067 IU/ml) xxxxxxxxxx xxxxxxx vzorku xxxxx (5.2.3).
6.6 Xxxxxxxx xxxxx xxxx 6.4 xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx použití xxxxxxxxxxx xxxxxx mléka bez xxxxxxxxxxx látek (5.3) xxxxxxx xxxxxx xxxxx.
6.7 Xxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxx x xxxxxxxx xx zkumavkami/ampulemi xxxxxxx xx xxxxxxx 2½ xx 2¾ xxxxxx do xxxxx xxxxx s xxxxxxxx 63 ± 1 °X (4.1.2).
6.8 Vyjmout xxxxxxxx xx zkumavkami/ampulemi x vodní xxxxx.
6.9 Xxxxxxxxx barvu agarového xxxxx (viz 7).
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx roztokem xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx ve xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx koncentraci "xxxxx xxxxxxxxx" xxxxxxx v xxxxxxx xx straně 39. Xxxxx xxxxxxxxx xx zkumavkách/ampulích se xxxxxxxxxxx roztokem xxxxxxxxxx (6.5) zůstane xxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2 Částečné xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxx mléka xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x koncentracích xxxx xxxxxxxxxxxxx uvedenými xx straně 39.
7.3 Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx mléka xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
7.4 Pokud xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx všech xxxxxxxxxxx zkumavkách/ampulích, včetně xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx spóry x xxxxxx musí xxx podrobeny xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
8. Xxxxxxxxx výsledků
8.1 Potvrdit xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx x 7.1 x 7.2 xxxxx xxxxxx "X".
Xxxxx je nezbytné xxxxxx mléka před xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxx poškození xxxxxxxxxx.
X. Xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx koncentrace
1. Xxxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx penicilinu xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx (X.7.1) xxxx xxxxxxxxxx reakcí (A.7.2).
Citlivost xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx
Xxx X.1.
2. Xxxxxxxx
2.1 Xxxxxx mléka obsahuje xxxxxxxxxxx, včetně xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx 2 xx kolem xxxxx.
2.2 Xxxxx vzorek, který xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx (2.1), x xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx-xxxxxxxxx), xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx vytvoří čirou xxxx xxxxxxx průměru xxx je průměr xxxx bez penicilinázy, xxxxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxx penicilinu a xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
2.3 Xxxxx xxxx xxxx xxxx penicilinázou (2.2) xxxxxxxxxxxx, inhibiční xxxxxx ve vzorku xxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxx může xx xxx jiné xxxxxxxx [xxx xxxxxxxx 85/397/EHS, xxxxxxx A, xxxxxxxx XX, X.1.x) a 2x)].
Xxxxxxx polosyntetické peniciliny, xxxxxxxxx cloxacillin xxxxx, xxxxxx xxxx xxxx xxxxx částečně inaktivovány xxxxxxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxx x xxxxxxx xxx identifikovány xxxx xxxxxxxxxx (xxx 7.3).
3. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxxx, xx umístí xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx. xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxx xxxxx xxxxx ukazuje, xx jsou v xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx mimo xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxx inhibiční xxxxx x xxxxx.
4. Xxxxxxxxx, pomůcky xx xxxx x vybavení
4.1 Xxxxxxxxx
4.1.1 Viz A.4.1.
4.1.2 Xxxxx lázeň, nastavitelná xx 80 ± 1 °X.
4.2 Xxxxxxx xx xxxx
Xxx X.4.2.
4.3 Xxxxxxxx xxxxx, neobsahující xxxxxxxxx xxxxx, x xxxxxxx 9 xx 13 xx, xxxxxxx xxxxxxxxxx asi 130 xx xxxxx (nejlépe xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx).
5. Xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx, roztok penicilinázy, xxxxxxx xxxxxxxxx organismus xxx.
Xxxxxxxx xxxxxx kultivačních xxxxx xxxx xxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Musí xx xxxxxx xxxxxxxxxxx voda xx skle nebo xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxx obsahovat xxxxxxxxx xxxxx xxx růst xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
5.1 Kultivační xxxxx
5.1.1 Xxxxx xxxx (X.5.1.1)
5.1.2 Kultivační médium xxx xxxxxxx inhibičních xxxxx
Xxxxxxx:
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
2,5 x |
|
Xxxxxxx |
5 x |
|
Xxxxxxx |
1 x |
|
Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx (X.5.1.3) |
10 xx |
|
Xxxx |
10–15 g podle xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx |
|
Xxxx |
1000 xx |
Xxxxxxxx:
Xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx zcela xxxxxxxxx xxxxx složky xx xxxx, xxxx xxxxxx xxxxxx trimethoprimu xxxx xxxxxxxxxxxx. Po přidání xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xX, xxx po xxxxxxxxxxx xxxx 8,0 + 0,1 xxx 25 °X. Sterilizovat médium 15 minut při 121 ± 1 °X.
5.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx
Xxx X.5.2.
Xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (8) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x mléce xxx xxxxxxxxxxx xxxxx (X.5.3) x těchto xxxxxxxxxxxxx:
x) 0,004 μg/ml (0,0067 IU/ml)
b) 0,006 μx/xx (0,01 XX/xx)
x) 0,03 μx/xx (0,05 XX/xx)
x) 0,06 μx/xx (0,01 XX/xx).
5.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxx
5.3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx penicilinázy (xxxx-xxxxxxxxx) xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxx koncentraci 1000 X/xx. Xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx, je xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx týdny xxx 0 °C xx 5 °C.
Poznámka
Pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Pro účely xxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx inaktivaci 0,6 μx (= 1 XX) xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx, zda xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxxxx.
5.3.2 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx je možné xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, že xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
5.4 Testovací xxxxxxxxxx
Xxx X.5.4.
5.5 Testovací xxxxxxx (xxxxxxxx spór)
Viz X.5.5.
5.6 Xxxxxxxx Petriho xxxxx
5.6.1 Xxxxxx xxxxxxxxx agarové xxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx látek (5.1.2), xxxx xxxxxxxx na 55 xX.
5.6.2 Xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx čerstvých xxxx (5.5) k xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx látek (5.1.2), x cílem získat xxxxxxx xxxxxxx kolonií x naočkovaném xxxxxxx xxxxx, x důkladně xxxxxxxxx.
5.6.3 Xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx (X.4.2.2), xxxxxx xxxxxxx xx 55 °X, xxxxxxxxxx xxxxxxx médium, xxx xx xxxxxxxxx 0,6 xx 0,8 xx xxxxxx. Xxx Xxxxxxx xxxxx o xxxxxxxx průměru 140 xx je třeba xxx 15 xx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxxx 0,8 xx xxxxxx.
5.6.4 Xxxxxxx Xxxxxxx misky xx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx vodorovnost se xxxxx vodováhou, sejmout xxxxx x nechat xxxxxxx xxxxxx ztuhnout. Xx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx xx xxxxx x obrátit xx dnem xxxxxx, xxx xx xx xxxxxxxxx kondenzaci vody xx xxxxxxx agarového xxxxx.
5.6.5 Takto xxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx se xxxxxxx nejlépe xxxxx xxx xxx, xxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx, xxxxx xx xxxxx xx přípravě xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx a uchovávají xx xxx 5 °X.
5.6.6 Xxxxxxx dna Xxxxxxx xxxxx, aby xxxx xxxxx identifikace xxxxxx.
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 U xxxxxx x xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx "xxxxxx X" (X.7.1 x A.7.2) musí xxx provedeno xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x kvantitativního xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx 10 xxxxx xx 80 ± 1 °C, xxx se xxxxxxxx xxxx nespecifických xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek.
6.1.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxx, poté xxxxxxx xxx 10 ml xxxxxx zahřátého xxxxx xx sterilní xxxxxxxx xx širokým xxxxxx. X xxxxx xxxxxx xxx 0,4 ml xxxxxxx penicilinázy (5.3) x řádně xxxxxxxxx.
6.2 Xxxxxxx inhibičních xxxxx
6.2.1 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx (4.3) xx vzorku xxxxx (6.1.2) xxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxx. Naplocho položit xxxx xx xxxxxx Xxxxxxx xxxxx (5.6) x xxxxx přitlačit xxxxxxxx.
6.2.2 Disky xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxx od xxxxxxx xxxxxxx 20 xx x xx xxxxxx xxxxxxx 10 mm.
6.2.3 Xxx xxxxxxxx citlivosti xx disky (4.3) xxxxxxxxx standardním xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.2) xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx napuštěné xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx 2 % xxxxx xxxxx xx xxxxxx mléka; xxx xxxxxx testu xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxx.
6.2.4 Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxx vzhůru x xxxxxx xx xxxxxxxxx 2,5 xx 5 xxxxx při 63 ± 1 °X.
6.2.5 Xx xxxxxxxx xxxxxxxx misky xxx xxxxxxx zdroji xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Čiré xxxx xx xxxxx.
6.2.6 Standardní xxxxxx xxxxxxxxxxxx (6.2.3) xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 2 xx xxxx.
6.2.7 Xxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx mléka, xxxxxxx velkost xx xxxxxx nebo větší xxx xxxxxxxx popsaná x 6.2.6, xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
6.3 Identifikace x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx
6.3.1 Xxxxxx 6.2.1 se xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (6.1.2) x xx xxxxxxx ošetřeným penicilinázou (6.1.3). Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 10 xx xxxxxx mléka xx možné do xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx penicilinázou (5.3.2) a xxxxxx xx na testovací xxxxx.
6.3.2 Xxxxxx 6.2.1 xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx ze xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x 5.2 x) až x).
6.3.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx zón xxx xxxxxx mléka, xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x pro standardní xxxxxxx penicilinu.
7. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 2)
7.1 Xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nevytvoří xxxxx xxxx zóna, xxx xxxx xxxx xx xxxxxx xxxxx disku xxxxxxxxxx vzorkem mléka, xxxxxx velká nebo xxxxx xxx xxxx xxxxx xxxxx napuštěném xxxxxxxxxxx xxxxxxxx penicilinu (5.2x)), xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx než 0,004 μg/ml.
7.2 Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx zóny xxxxx xxxxx nepuštěném xxxxxxxxx penicilinázu xxxxx xxxxxxxx hodnotě xxxxxxx xxxx zóny xxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxx, xxxxx obsahuje xxxxxxxxx xxxxx, které xxxx xxxxx inaktivovat xxxxxxxxxxx penicilinázy použité x xxxxx postupu.
7.3 Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx kolem disku xxxxxxxxxx xxxxxxxxx penicilinázu xxxxx než xxxxxxxx xxxxxxx průměru xxxx xxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx mléka xxxxxxxxx xxxxx 6.1.2, xxxxxx mléka xxxxxxxx xxxxxxxxx x antibiotika, xxxxxx xxxxxxxxxxx, a xxxxxxxxx nebo polosyntetický xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x tomto xx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx je cloxacillin xxxxx, xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx podmínek x xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx jako xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx
Xxxxx xx xx xxxxxxxx, xxxxxxxxx látky xxxx než penicilin xxxxx xxx identifikovány xxxxxxxx xxxxxxx.
8. Stanovení xxxxxx penicilinu
8.1 Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xx sestrojení xxxxxxxxxx xxxxxx, nebo xxxxxxx xx základě xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx (5.2 x) xx x)).
8.2 Xxxxxxxxxx standardní xxxxxx
Xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx10 koncentrace xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxxxxxxxxx xxxxxx xxx sestrojit xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxxx xx pořadnici x xxxxxx xxx xx xxxxxx. Xxxxxxxxx zóny xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx zdvojeného xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx se graficky xxxxxxx xx základě xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx.
8.3 Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx ve xxxxxx xxxxx xxx vypočítat xx xxxxxxx xxxxxxx xxx vzorků pomocí xxxxxxx nebo je xxxxxxx xx standardní xxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx nejméně xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx pětkrát xxxxx xxx poloměr disků.
9. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
9.1 Xxxxxxxx xx vyjadřují jako xxxxx penicilinu rovný xxxx xxxxx xxx 0,004 μx/xx (xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace) xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx.
9.2 Xxxxxxxxxxxxxx (x) x reprodukovatelnost (X)
Xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx standardu xxx xxxxxxxxx.
XX. XXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX
1. Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
X souladu x požadavky xxxxxxxx 85/397/XXX, přílohy X, xxxxxxxx VII xxxx 2, tento postup xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxx dodržovány, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx u xxxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Pokud xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx X, xxxxxxxx XXX xxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxx 30 °X x 21 °X, xxxxxxxxxx bakterie a xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx test xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxx existuje xxxxxxxxx, xx xxxxx xx nějakou xxxxxxxxx xx propuknutím otravy xxxxxxxxxxx.
3. Postup
Postupy a xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx vnitrostátní xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxx osvědčení x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx patogenních xxxxxxxxxxxxxx xx, pokud existují, xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx přijaté na xxxxxxxxxxx xxxxxx.
4. Xxxxxx x xxxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxxx patogenní mikroorganismus xxxx být výsledek xxxxxxxx takto:
Počet xxxxx xx mililitr, xxxx "xxxxxxxxxx" xx "xxxxxxxxxxxx" x objemu xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxx popsat xxxxxxx xxxxxx.