Xxxxxxxx Komise 2000/33/XX
xx xxx 25. dubna 2000,
xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx směrnice Xxxx 67/548/XXX o xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx [1]
(Xxxx x xxxxxxxx xxx EHP)
KOMISE XXXXXXXXXX SPOLEČENSTVÍ,
s xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx na xxxxxxxx Xxxx 67/548/XXX xx xxx 27. xxxxxx 1967 o xxxxxxxxxx xxxxxxxx x správních xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxxxxxx nebezpečných látek [2], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx parlamentu x Xxxx 1999/33/XX [3], x xxxxxxx xx xxxxxx 28 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxxx důvodům:
(1) V xxxxxxx X směrnice 67/548/XXX xx xxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x ekotoxicity xxxxx x přípravků. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx tuto xxxxxxx technickému pokroku.
(2) Xxxxx xx. 7 xxxx. 2 xxxxxxxx Xxxx 86/609/XXX xx xxx 24. xxxxxxxxx 1986 o xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxx [4] xxxxx xxx xxxxx, xxx xxxx má xxx xxxxxxx zvíře, xxxxxxxx, xx-xx rozumně x xxxxxxxxx dostupná xxxx vědecky xxxxxxxxxx xxxxxx.
(3) Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx přílohy X xxxxxxxx 67/548/XXX xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx zvířata, x xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx látek xxxxx xx. 3 xxxx. 1 směrnice 67/548/XXX.
(4) Xxxxxxxx této xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx směrnic o xxxxxxxxxx technických překážek xxxxxxx na xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx,
XXXXXXX XXXX SMĚRNICI:
Xxxxxx 1
Xxxx xxxxxx X a XX xxxx směrnice xx xxxxxx xx xxxxx X xxxxxxx X xxxxxxxx 67/548/XXX.
Článek 2
1. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx do 1. xxxxx 2001. Neprodleně x xxxx uvědomí Xxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx státy musí xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxx být xxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx členské xxxxx.
2. Xxxxxxx xxxxx xxxxx Xxxxxx xxxxx hlavních xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx přijmou x oblasti xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, a xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ustanoveními.
Xxxxxx 3
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxx po xxxxxxxxx x Úředním xxxxxxxx Xxxxxxxxxx společenství.
Xxxxxx 4
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X Bruselu dne 25. xxxxx 2000.
Za Xxxxxx
Xxxxxx Xxxxxxxöx
xxxxxx Xxxxxx
[1] Přijato před xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx.
[2] Úř. xxxx. 196, 16.8.1967, x. 1.
[3] Xx. xxxx. X 199, 30.7.1999, x. 57.
[4] Xx. věst. X 358, 18.12.1986, x. 1.
PŘÍLOHA I
"B.40 XXXXXXX XXXXXX XX XXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxx zkoušky xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx elektrického xxxxxx xxxx xxxxxxx (XXX) a xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxx Xxxxxxxxx střediskem xxx xxxxxxxx alternativních xxxxx (XXXXX, Xxxxxxxx výzkumné xxxxxxxxx Xxxxxxxx Xxxxxx) (1, 2, 3) xxxxxxxxx jako xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx XXXXX prokázala, xx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx leptající x xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx x zkoušce založené xx modelu lidské xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, R 35 x ostatní xxxxx xxxxxxxxxxx poleptání xxxx, X 34) (2). Xxxxx a xxxxxx xxxx xxxxxxx je xxxxxx; xxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxx, xxxxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx také Xxxxxx úvod, část X.
1.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxx xxxxxxxxx kůže xx xxxxxxxx zkoušeného xxxxxxxxx.
1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx viz body 1.5.3.4 x 1.7.2.3.
1.4 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx — xxxxxxx XXX xx kůži xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xx xx xx 24 x xxxxxxxxx xx epidermální xxxxxx terčíků xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Materiály x xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx způsobit xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x bariérové xxxxxx xxxxxxxx vrstvy (xxxxxxx xxxxxxx), která xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx XXX xxx xxxxxxxx xxxxxx (5 xΩ) (4, 5). Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx XXX xxx xxxxxxxx hodnotu. Xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx a neutrální xxxxxxxxx látky (xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx (6)) xxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx se xxxxxxx xxxxxxxx falešně xxxxxxxxxxx xxxxxxxx získaných xxxxx xxx tyto xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (2, 7).
1.5 Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx — xxxxxxx TER xx xxxx xxxxxxx
1.5.1 Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxx xxxx být xxxxxxxxxx z xxxxxxx (20 — 23 xxxxxxx) xxxxxxx (Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx). Xxxxxxx x xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx holicím strojkem. Xxxxxxx xx poté xxxxx opatrným otíráním, xxxxxxx xx testovací xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx x amfotericin x koncentracích xxxxxxxxxxxxx xxxx bakterií). Zvířata xx třetí x xxxxxx den xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx antibiotik x xxxxxxx xx xx 3 dnů (x přípravě kůže xxxxx být xxxxxxx xxxxxxx starší xxx 31 xxx).
1.5.2 Xxxxxxxx xxxxxxx kůže
Zvířata xx xxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx odstraní xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxx se x kůže xxxxxxx xxxxxxxxx. Kůže xx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxx teflonové (XXXX) xxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxx konec trubičky xx xxxxx přetáhne xxxxxxx X-xxxxxxx, xxx xxxx xxxx upevněna, x xxxxxxxx tkáně xx ořízne. Xxxxxxx xxxxxxxx x X-xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx 1. Xxxxxxx X-xxxxxxx xx teflonové xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx komory obsahující xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx (154 xX) (xxxxxxx 2).
1.5.3 Xxxxxxxx xxxxxx
1.5.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx materiálu
Kapalná xxxxxxxx xxxxx (150 μx) xx aplikuje xx epidermis xxxxxx xxxxxxxx (xxx. 2). Xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx, xxx byla xxxxxxx xxxx epidermis. Xxxx xx na povrch xxxxx látky xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx (150 μx) x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx a xxxx by xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx toho může xxx xxxxxxxx zahřátím xx xx 30 °X, aby xx xxxxxxxx xxxxx roztavila, xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx materiál xxxx xx xxxxxx.
Xx xxxxxxx xxxxx xxxxx se xxxxxxx xxx terčíky xxxx. Xxxxxxxx látka xx aplikuje po xxxx 24 x (xxx xxxx xxx 1.5.3.4). Xxxxxxxx látka xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx vody x xxxxxxx xxxxxxx 30 °X. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látek, xxxxx x xxxxxxxx ztuhly, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx teplé xx 30 °C.
1.5.3.2 Xxxxxx TER
TER xx xxxx nízkonapěťovým xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx střídavý xxxxx (např. AIM 401 xxxx 6401 xxxx xxxxxxxxxxxx). Před xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx kůže sníží xxxxxxxx dostatečného xxxxxx 70 % ethanolu xxx, aby xxxx xxxxxxxxx zakryta. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx odstraní xxxxxxxxxxx xxxxxxx x tkáň xx xxxxxx xxxxxxxx 3 ml xxxxxxx xxxxxx hořečnatého (154 xX). Elektrody můstku xx xxxxxx xx xxx strany terčíku xxxx za xxxxxx xxxxxx xxxxxx v xΩ/xxxxxx xxxx (obrázek 2). Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx elektrod xxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx 1. Xxxxxx xxxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx xx během xxxxxx odporu xxxxxx x xxxxx konec xxxxxxxxx xxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxx části xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx je xxxxxxxx xxxxxx receptorové xxxxxx xxx, xxx spočívala xx xxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx mezi spodkem xxxxxxxxx xxxxxx a xxxx teflonové xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxx 1), xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx odporu.
Je xxxxx xx xxxxxxxx, xx xx-xx naměřená xxxxxxx xxxxx xxx 20 xΩ, může xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx terčíku xxxx. X xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxx. xxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x rukavici x 10 s xx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x měření xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx XXX (xxxxxxx xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx, pokud xxxxxxx pozitivní x xxxxxxxxx xxxxxxxx spadají xx přijatelného rozpětí xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx rozpětí xxxxxx:
|
Xxxxxxxx |
Xxxxx |
Xxxxxxx xxxxxx (xΩ) |
|
Xxxxxxxxx |
10X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (36 %) |
0,5–1,0 |
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxx xxxx |
10–25 |
1.5.3.3 Xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky
Jsou-li xxxxxxx XXX xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx nebo xxxxx 5 xΩ, lze xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx postupem xx xxxxxx, xxx výsledky xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx (2).
1.5.3.3.1 Xxxxxxxx a xxxxxxxxxx barviva xxxxxxxxxxxxxx X
Xx xxxxxxxxx aplikaci xxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxxxxx stranu xxxxxxx terčíku kůže xxxxxxxx xx 2 x 150 μl 10 % xxxxxxx xxxxxxx sulforhodaminu B x xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx kůže se xxxx přibližně 10 x xxxxxxx proudem xxxx o xxxxxxx xxxxxxxx teplotě, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx barvivo. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xx xx xxxxxxxx (xxxx. 20 xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx scintilační xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vodu (8 xx). Xxxxxxxx xx lehce 5 xxx. xxxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx další xxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx zopakuje, x xxxx se xxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 5 xx 30 % xxxxxxx (x/X) xxxxxxx-xxxxxxx-xxxxxxx (XXX) x destilované xxxx x inkubují xx xxxx xxx xxx 60 °C. Xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx 8 min. xxx 21 °C (xxxxxxxxx odstředivá xxxx ˜ 175). 1 xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxx zředí 4 xx 30 % (x/X) xxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxx (X) xx xxxx xxx xxxxxxxxx 565 xx.
1.5.3.3.2 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X xx terčík kůže xx vypočte x xxxxxx X (xxxxxxx xxxxxxxxx koeficient sulforhodaminu X xxx 565 xx = 8,7 × 104; molekulová xxxxxxxx = 580). Xxxxx barviva sulforhodaminu X xx xxxxxxx xxx každý xxxxxx xxxx a poté xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx spadají xx přijatelného xxxxxxx xxxxxx. Pro popsanou xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx doporučeny xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx:
|
Xxxxxxxx |
Xxxxx |
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (μx/xxxxxx xxxx) |
|
Xxxxxxxxx |
10X kyselina xxxxxxxxxxxxxx (36 %) |
40-100 |
|
Negativní |
Destilovaná voda |
15-35 |
1.5.3.4 Xxxxxxxxx informace
Látky lze xxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxx na xxxxxx dobu (např. 2 xxxxxx), xxx xx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, které jsou xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx však xxxxxxx, xx xxxxxxxxx XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx po xxxx 2 xxxxx (2), xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxx účinky x xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx při 24hodinové xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxx zařízení x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx postup xxxxx xxx vliv xx získané hodnoty XXX. Práh 5 Ω xxx předpověď xxxxxxxxx xxxxxx byl xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx se zařízením x postupem, jež xxxx popsány x xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx tedy xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx řady xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx (3).
1.6 Podstata zkušební xxxxxx — xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx lidské xxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxxx až po xxxx 4 xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx kůže xxxxxxxxxxx x rekonstruované xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Materiály x xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx schopností xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx pokles xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx např. xxxxxxxx xxxxxxx redukce XXX) pod xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx účinky jsou xx, jež xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx rohovitou xxxxxxx (difuzí xxxx xxxxx) a xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx smrt buněk x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7 Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx — stanovení xxxxxx modelu xxxxxx xxxx
1.7.1 Modely xxxxxx xxxx
Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx zdrojů, xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xx. Xxxxxxxxx funkce xxxxxxxx xxxxxx musí xxx dostatečná. To xxx xxxxxxxx demonstrací xxxxxxxxxx modelu x xxxxxxxxxxxx látkám, které xxxxxxxx neproniknou xxxxxxxxx xxxxxxx. Musí se xxxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx vysoká, xxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. ivotaschopnost buněk (xxxxxxxxx xxxx. redukcí XXX, tj. měřením xxxxxxx absorbance A) xx expozici xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx v mezích xxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx hodnoty xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx pozitivní kontrolní xxxxx (ve xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) xxxx xxx xx xxxxxxxxxxxxxxx mezích. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx je, xxx xxxxx xxxxxxxxx mezinárodním xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx (2).
1.7.2 Xxxxxxxx postup
1.7.2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx materiálů xxxx xxx aplikováno dostatečné xxxxxxxx xxxxxxxx látky, xxx xxxxxxx xxxxxx xxxx (xxxxxxxxx 25 μx/xx2). X pevných xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx látky, xxx xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxx xxxxx xx xxxx být xxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxx s xxxx; pevné látky xx měly xxx xxxxx xxxxxxx před xxxxxxxx rozemlety xx xxxxxx. Musí xxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (2). Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxxx materiál x xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7.2.2 Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx
X xxxxxx životaschopnosti xxxxx xxxx být použita xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Nejčastěji xx xxxxxxx stanovení redukce XXX, pro xxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (2). Xxxxxx kůže se xxxxxx xx roztoku XXX o xxxxxxxxxxx 0,3 xx/xx xxx xxxxxxx 20-28 °X xx xxxx 3 xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx formazanu se xxxxxxx měřením xxxxxxxxxx X xxx xxxxxx xxxxx 545 xx 595 xx.
1.7.2.3 Doplňkové xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxx kůže x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx doby, postupu xxxxxxxxxxx atd. budou xxx xxxxx vliv xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxx model xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx XXXXX (3). Xx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxx reprodukovatelnost xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxx alespoň xxx xxxxxxxxxx kritéria xxx vědeckou xxxxxxxx (2) x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx studie xxxx být publikovány xx xxxxxxxx časopise x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
2.1.1 Xxxxxxx TER xx xxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx (xΩ) xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx referenční chemické xxxxx xxxxxx údajů x duplicitních xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, o xxxxxxxxx xxxxxxxxx x x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx.
2.1.2 Zkouška s xxxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxx A a xxxxxxxxx hodnoty xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx materiál, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxxx standardní referenční xxxxxxxx látky xxxxxx xxxxx o duplicitních xxxx xxxxxxxxxxx experimentech, x xxxxxxxxx hodnotách x o odvozené xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxx tabulky.
2.2 Hodnocení x interpretace xxxxxxxx
2.2.1 Xxxxxxx XXX xx xxxx xxxxxxx
Xx-xx xxxxxxx XXX xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 5 xΩ, xxxx xxxxx xxxxxx. Xx-xx xxxxxxx XXX xxxxx xxxx xxxxx 5 xΩ x xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx organickou xxxxx, xx xxxxx xxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxx látek xxxx neutrálních xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx dávají xxxxxxx XXX menší xxxx xxxxx 5 xΩ, lze xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx barviva. Xx-xx xxxxxxx obsah xxxxxxx x xxxxxxx xxxx větší nebo xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx použití 36 % HCl jakožto xxxxxxxxx xxxxxxxx, je xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, a xxxxx xx xxxx xxxxxx. Xx-xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxx obsah xxxxxxx v xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx 36 % XXx, xx xxxxxxx xxxxxxx pozitivní, x látka xxxx xxxx xxxxxx.
2.2.2 Zkouška x xxxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxxx obsorbance X xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 % xxxxxxxxxxxxxxx buněk; xxxxxxx xxxxxxxxxx X xxxxxxxx xxx každý zkoušený xxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxx relativní xxxxxxxxxxxxxxxx v procentech xxxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx procentuální xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx materiály xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxx (xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx leptavých xxxxxx), xxxx být xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx definován před xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xx xx xxxxxx (2).
3. XXXXXX
Xxxxxxxx o xxxxxxx
Xxxxxxxx x zkoušce xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx tyto xxxxxxxxx:
Xxxxxxxx xxxxx:
- xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x případně fyzikálně-chemické xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx,
- popis x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxx:
- hodnoty odporu (xxxxxxx XXX) nebo xxxxxxx životaschopnosti buněk x xxxxxxxxxx (xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx) pro zkoušený xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx látky včetně xxxxx o duplicitních xxxx xxxxxxxxxxx experimentech x středních xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx,
- popis jakýchkoli xxxxxx pozorovaných účinků.
Rozbor xxxxxxxx.
Xxxxxx.
4. LITERATURA
(1) XXXXX (1998), XXXXX News &xxx; Xxxxx, ATLA 26, 275-280.
(2) Fentem, X. X., Archer, X. X. X., Xxxxx, X., Xxxxxx, X. X., Xxxxxx, X. D., Xxxx, X. K., Esdaile, X. J., Holzhutter, X-X., Liebsch, M. (1998), Xxx XXXXX xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxx xxxxx for xxxx xxxxxxxxxxx. 2. Xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xx xxx Xxxxxxxxxx Xxxx, Xxxxxxxxxx in vitro 12, 483-524.
(3) Xxxxxxx, X. D., Xxxxxxx, X. G., Fentem, X. X., Gerner, X., Xxxxxx, X. X., Xxxxx, A. X. (1998), Xxx XXXXX xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxx xxxxx for xxxx xxxxxxxxxxx. 1. Xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xx the test xxxxxxxxx, Toxicology xx xxxxx 12, 471-482.
(4) Xxxxxx, G. X. X., Pemberton, X. X., Rhodes, X. (1986), Xx in xxxxx xxxx corrosivity xxxx — xxxxxxxxxxxxx xxx validation, Xxxx Xxxx. Xxxxxxx. 24, 507-512.
(5) Xxxxxx, X. X., Xxxx, X. X., Xxxxxxx, X., XxXxxx, J. C., Xxxxxxxxx, X. X., Xxxxxxx, E., Cheeseman, X., Xxxxxxx, X. X., Xxxxxxx, J. (1992), The xxxx xxxxxxxxxxx xxxx in xxxxx: xxxxxxx of xx interlaboratory xxxxx, Xxxxxxxxxx in vitro 6, 191-194.
(6) Worth, X. P., Fentem, X. X., Balls, X., Xxxxxx, X. X., Xxxxxx, X. X., Xxxx, X. X., Xxxxxxx, X. X., Xxxxxxx, X. (1998), An xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx XXXX xxxxxxx xxxxxxxx xxx skin xxxxxxxxx, XXXX 26, 709-720.
(7) Xxxxxx, X. X., Xxxxxxxxxxx, X., Xxxxxxx, X. X., Xxxxxx, X. X., Xxxxxxx, X. X., Gardner, X. R., Gordon, X. X., Xxxxxxxxxx, X., Lewis, R. X., Xxxxxxx, M., Xxxxxxxx, P., Osborne, X., Ponec, X., Xxxxxxx, X. X., Xxxxxxxx, W., Xxxxxx, X. P., Xxxxx, X. 1995), A xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxx skin xxxxxxxxxxx xxxxxxx. The xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xx XXXXX workshop 6, XXXX 23, 219-255.
Xxxxxxx 1
Obrázek 2"
XXXXXXX XX
"X.41 FOTOTOXICITA — XXXXXXX XXXXXXXXXXXX 3X3 XXX XX XXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxxxxxxxxxxx xx definována xxxx xxxxxxx odezva xxxxxxxx xx xxxxx expozici xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a následné xxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx systémovém xxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xx zkoušky xxxxxxxxxxxx 3T3 NRU xx vitro xxxxxx x identifikaci fototoxického xxxxxxxxxx zkoušené xxxxx, xx. xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx možného nebezpečí, xxxxx může xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx spojení x xxxxxxxx UV xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxx zkoušky xx xxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, lze xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xx xxxxxxxx xx xxxx, a xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx xxxxx xxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx XX/XXXXXX v xxxxxx 1992 — 1997 (1, 2, 3) s xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx k xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx vivo. X xxxx 1996 doporučila xxxxxxxx xxxxxxx XXXX xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4).
Xxxxxxxx xx zkoušek xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx fotoiritačmi xxxxxx xx xxxx x xxxxxx x x xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx těchto xxxxxx xxxx vynikající. Xxxxxxx xxxx určena xxx xxxxxxxxx xxxxxx nepříznivých xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxx z xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx látky x xxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx mnoho xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx fototoxicity 3X3 XXX xx vitro xxxxxxxxx reagovat. Zkouška xxxx xxxx vyvinuta x xxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx postupného zkoušení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látek xx xxxxxxx v xxxxxxx.
1.2 Definice
Intenzita xxxxxxx: xxxxxxxxx ultrafialového xxxx xxxxxxxxxxx světla dopadajícího xx xxxxxx, měřená xx X/x2 xxxx xX/xx2.
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx: xxxxxxxx (xxxxxxxxx × xxx) ultrafialového (UV) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx (X × x) xx plochu povrchu, xxxx. X/x2 xxxx X/xx2.
Xxxxxx xxxxx XX xxxxxx: xxxxxxxx doporučená xxxxxx CIE (Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx xx x'Xxxxxxxxx): XXX (315400 xx), XXX (280315 xx) x UVC (100280 xx). Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx: xxxx xxxxxxx mezi XXX x XXX xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 320 xx x xxxxx XXX xxxx být xxxxxxxxx xx UV-A1 x XX-X2 s xxxxxxx xxxxx 340 xx.
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxx, kterým xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx populace (xxxx. xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx neutrální xxxxxxx xx buněčných xxxxxxxx) x který x xxxxxxxxxx na xxxxxxx xxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx zkoušky xxxxxxxx x celkovým xxxxxx a/nebo xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx životaschopnost xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxx xxxxx postupem zkoušky (x XX, nebo xxx XX), ale xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxx model: xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx výsledků xxxxxxx xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxxx xxxxxxxx lze xxx převod výsledků xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx použít xxxxxx XXX a xxxxxxxx XXX.
XXX (photo-irritation factor — fotoiritační faktor): xxxxxx xxxxxxx srovnáním xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (XX50) xxxxxxxx látky, a xx xxx necytotoxickém xxxxxxx XXX/XXX xxxxxxx (+ XX) x xxx něho (-UV).
MPE (xxxx xxxxx effect — xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx): xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx závislosti účinku xx koncentraci xxxxxxxxx xxx necytotoxickém ozáření XXX/xxx xxxxxxx (+ XX) a xxx xxxx (-UV).
Fototoxicita: xxxxxx xxxxxxx reakce, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxx určitým chemickým xxxxxx x následné xxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxxx xxxxx "xxxxxxxxxxxx", xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxx fototoxických xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (topické xxxx xxxxxx). Tyto xxxxxxxxxxx xxxxxx vedou xxxx x nespecifickému xxxxxxxxx xxxxxxxxx (podobné reakci xxx opalování).
Fotoalergie: získaná xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx při xxxxx aplikaci xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx x která xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx jeden xxxx xxx týdny xxxx xxx, xxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxx odezva xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx, která xx xxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxx negenotoxické xxxxx XX/XXX světla a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xx používá x xxxxxxx, kdy xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx XX xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.3 Xxxxxxxxxx látky
Vedle pozitivní xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx při každé xxxxxxx, xx xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx chemické xxxxx xxxxx z xxxxxxxxxx xxxxx použitých xxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx předložené xxxxxx (1, 3, 13).
1.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxx byly xxxxxxxxxxx x mnoha xxxx xxxxxxxxxx xxxxx (5, 6, 7, 8). Xxxxxx jediným společným xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx slunečního xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (Xxxxxxxxx-Xxxxxxxx xxxxx) vyžaduje fotoreakce xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxxxxxxx XX/XXX xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx chemické xxxxx (např. podle Xxxxxxxx XXXX 101). Xx-xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx 10 x.xxx-1.xx-1, xxxxxxxx xxxxx nemá xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x nemusí xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx vitro xxxx xxxxxxxxx jinou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinky (dodatek).
1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx může xxxxxxxx xxxxxx (chemickým) xxxxxxxxxxx xxxx k xxxxxxxxxxx xxxxxx (7). Všechny xxxxx x poškození xxxxx. Xxxxxxx fototoxicity 3X3 NRU xx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx látky xxx xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx XXX/XXX světla x xxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xx v xxxx xxxxxxx vyjádřena xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx neutrální červeně (XX) (9) 24 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx.
Xxxxx Xxxx/x 3X3 se 24 x xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxx 96xxxxxxx xxxxxxxx na xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx poté 1 h xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx koncentracemi xxxxxxxxxx látek. Xxxx xx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx dávkou UVA/VIS xxxxxx 5 X/xx2 XXX (+ XX xxxxxxxxxx), xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx x temnu (-XX xxxxxxxxxx). X obou xxxxxxxx xx poté xxxxxxxxx xxxxxx nahradí xxxxxxxxxxx xxxxxx x xx dalších 24 x xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx stanovena 3xxxxxxxxx xxxxxxx neutrální xxxxxxx (NRU). Xxxxxxxxx xxxxxxx životaschopnost xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxx x xxxx zkušebních xxxxxxxxxxx. Xxx předpověď xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx porovnají xxxxxxxxxxxx závislé odezvy xxxxxxx xxx ozáření (+ XX) x xxx xxxxxxx (-UV), xxxxxxx xxx hodnotě XX50, tj. xxx xxxxxxxxxxx způsobující 50 % xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.6 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx XXX, dosavadní xxxxx: xxxxxxxxx xxxxx xx XXX xx xxxx být pravidelně xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx zkoušce xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx, příští xxx xx ozáří xxxxxx UVA xxxxxx 1 xx 9 X/xx2 x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x den xxxxxxx xxxxxxxx NRU. Buňky xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx jejich životaschopnost xx xxxxxxx 5 X/xx2 xxxxx xxx 80 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx. Tato kontrola xx xxxx být xxxxxxxxx vždy xx xxxxxx pasážích xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx XXX xxx xxxxxxxxxx zkoušce: xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jakosti, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx x XXXX (Xxxxxx fyziologický roztok) x 1 % xxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx 1 % ethanolem (XxXX)) xxxx bez xxxx xxxxxxxx xxx + XXX experimentu xxxxxxxxxxxxxxx alespoň 80 % xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx (-XXX).
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx: absolutní xxxxxxxxxx (X540 NRU) xxxxxx x xxxxxxxx XX xxxxxxxxxxx kontrol xxxxxxx, xxx 1 × 104 buněk xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxx xxx zkoušky xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx (doubling xxxx). Xxxxxxx splňuje xxxxxxxxx přijatelnosti, xxxxxxxx xxxxxxx hodnota X540 XXX xxxxxxxxxxxxxx kontrol xx ≥ 0,2.
Pozitivní xxxxxxxx: xxx každé xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx fototoxická xxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxx XX/XXXXXX xxx xxxxxx jako xxxxxxxxx kontrola xxxxxxxxxxxxx (XXX), a xx xxxx doporučen. Pro XXX xxxxxxxx podle xxxxxxxxxxxx postupu při xxxxxxx fototoxicity 3T3 XXX xx vitro xxxx xxxxxxxxxx tato xxxxxxxx přijatelnosti zkoušky: xxx CPZ xxxxxxx (+ XXX): XX50 = 0,1 xx 0,2 μx/xx, pro XXX xxxxxxxxx (-XXX): XX50 = 7,0 xx 90,0 μx/xx. Xxxxxxxxxxxx faktor (PIF), xx. posun xxxxxxx XX50, by měl xxx alespoň 6.
Namísto XXX mohou xxx xxxxxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx jiné xxxxx fototoxické xxxxxxxx xxxxx vhodné z xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx látky. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx být na xxxxxxx dosavadních údajů xxxx xxxxxxxx přijatelnosti xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx hodnot XX50 a PIF xxxx MPE (střední xxxxxxxx účinek).
1.7 Popis xxxxxxxx metody
1.7.1 Příprava
1.7.1.1 Xxxxx
Xxx validační xxxxxx xxxx použita permanentní xxxx linie fibroplastů — Balb/c 3T3, xxxx 31 — xxx z xxxxx XXXX, nebo x xxxxx XXXXX x xx xxxx doporučena. Xxxx xxxxx nebo xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx specifickým xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxx xx měly xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, x xxxx xx být xxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxx-xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx k xxxx, xx citlivost xxxxx xx XX xxxxxxx x xxxxxx pasáží, xxxx xx xxx xxxxxxx buňky Xxxx/x 3X3 z xxxxxx x nejnižším xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x nižší než xxx pasáže. Je xxxxxxxx, xxx byla xxxxxxxxx buněk Xxxx/x 3X3 na XXX xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx postupem xxxxxxxx xxxxxxx popsaným x této xxxxxxxx.
1.7.1.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx buněčné xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx být použita xxxxxx kultivační xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxxx Balb/c 3X3 xx xxxxx x XXXX (Dulbeccova xxxxxxxxxx Xxxxxxxx media) xxxxxxxxx 10 % xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx sérem, 4xX xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x streptomycinem x xxxxxxxx xx vlhčené xxxxxxxxx při 37 °X/7, 5 % XX2. Zvláště xxxxxxxx xx, xxx kultivační xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx buněčný cyklus xxxxxx dosavadního rozpětí xxx xxxxxxx xxxxx xxxx buněčné xxxxx.
1.7.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxxx kmenových xxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx nasazují xx kultivačního xxxxx x takové xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx konfluence xx xxxxx xxxxxxx, xx. xx xxxxxxxx, xxx je xx 48 x od xxxxxxxx stanovována xxxxxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxx Xxxx/x 3X3 xxxxxxxxxxx x 96xxxxxxxxx destičkách xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 1 × 104 buněk xx xxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxxxxx látku xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx dvou xxxxxxxxxx 96jamkových xxxxxxxx, xxxxx jsou poté xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx zkoušky xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxx je xxxxx z destiček xxxxxxx (+XXX/XXX) a xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx (-XXX/XXX).
1.7.1.4 Xxxxxxxxxxx aktivace
Zatímco xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxx zkouškách xx xxxxx určených xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx jejíž xxxxxxxx jako toxinu xx vivo xxxx xx vitro xx xxxxxxxx metabolická xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx xxx za xxxxxxxx xxx za xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx byla xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.7.1.5 Xxxxxxxx chemická xxxxx/xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx látky xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxxx, pokud údaje x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx-xx xxxxx x rychlé xxxxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx látky xxxxxxxx xxx xxxxxxxx světlem.
Zkoušené xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xx fyziologickém roztoku, xxxx. x Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx roztoku (EBSS) xxxx ve xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx (XXX), který xxxxx obsahovat proteinové xxxxxx x xX xxxxxxxxxx absorbující světlo, xxx xxxxxxxx při xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx chemické látky x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxx by xxxx být xxxxxxxxxx xx vhodném xxxxxxxxxxxx xx 100xxxxxxx požadované xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx by měly xxx zředěny v xxxxxx 1:100 fyziologickým xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx, xxxx být xxxxxxxx x konstantní xxxxxxxxxxx 1 % xxx. xx xxxxx xxxxxxxxx, xx. x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) x xxxxxxx (XxXX). Xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxx méně xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx. aceton), xxx xxxx by xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx specifické vlastnosti, xxxx. xxxxxx xx xxxxxxxxx chemickou xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx účinků, xxxxxx xxxxxxxx.
Xx-xx třeba, xxxx být xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x/xxxx xxxxxxxxx x/xxxx xxxxxxx na 37 °C.
1.7.1.6 Xxxxxxx XX světlem/příprava
Zdroj xxxxxx: xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx kritickým xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx x pásmu XXX x xx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx (7, 10), xxxxxxx xxxxxx x xxxxx XXX xx xxxx xxxxxxxxxx x xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, přičemž jeho xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx 313 xx a 280 nm 1000xxxx (11). Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx světelného xxxxxx xx měla xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx zdroj světla xxxxxxxxx světlo o xxxxxxxx délkách, xxxxx xxxxxxxx chemická látka xxxxxxxxx, a xxx xxxxx světelného záření (xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx) byla xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx, xxxxxx xxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxxxx), xx xxxx neměly xxxxxxxx xxxxxxxxxx testovací xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx optimální xxxxx xxxxxx. V xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx jak xenonová xxxxxxx, xxx vysokotlaká xxxxxxx halogenová xxxxxxx. Xxxxx x xxxx xx xx xxxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxxxx x xx xxxxxxxx, avšak xxxx xxxxx xx slunečním xxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx všechny xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx XXX xxxxxx, xxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx vysoce cytotoxické xxxxxx xxxxx XXX xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx xxxxx by xxxx xxx xxxxxxx spektrum xxxxxxxxx xxxxxxx UVB xxxxxx (UVA:UVB ˜ 20:1). Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx validační xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx (3).
Dozimetrie: xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx zkouškou xxxxxxxxxxxx kontrolovat xx xxxxxxx xxxxxxxx širokopásmového XX-xxxxx. XX-xxxx musí xxx xxx xxxx xxxxx kalibrován. Xxxxxxxxx XX-xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xx tímto účelem xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx kalibrovaný UV-metr xxxxxxxx xxxx. X xxxxxxxx xxxxxxx by xxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxx odstupech xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx intenzity xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx UV-metru xxxxxxxxxxxxxxxx, avšak xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx 5 X/xx2 xxxx xxx validační studii xxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx Xxxx/x 3X3 a xxxxxxxxxx xxxxx x excitaci x xxxxx fototoxických xxxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx 5 X/xx2 xx dobu 50 xxx. musí být xxxxxxxxx ozáření nastavena xx 1,666 XX/xx2. Xxxxxxxx xx použita xxxx buněčná xxxxx xxxx jiný světelný xxxxx, xxxx xxx xxxxx XXX záření xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxxx buňky a xxxx xxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxxx fototoxinů. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx tímto xxxxxxxx:
x(xxx) = xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (X/xx2) 100 / xxxxxxxxx xxxxxxx (xX/xx2) 60 (1 X =.X xxx)
1.7.2 Zkušební podmínky
Maximální xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx neměla xxxxxxxxx 100 μx/xx, xxxxx všechny fototoxické xxxxxxxx látky byly xxxxxxxxxx xxx nižších xxxxxxxxxxxxx; při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx roste xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků (xxxxxxxxxxxx). Hodnota xX xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx (xX 6,5 — 7,8).
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx zkoušených xx xxxxxxx (+ UVA) x xxx světla (-XXX) xx xxxx xxx xxxxxxxx stanoveny x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx zjištění xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x intervaly xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxx závislosti xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx by xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx ředění).
1.7.3 Xxxxxxxx xxxxxx [1]
1.7.3.1 Xxxxx xxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx 1 × 105 xxxxx/xx x xxxxxxxxxxx xxxxx x 100 μx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxxx jamek 96xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxx). Xx xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx 100 μx xxxxxxx xxxxxxxx o xxxxxxx 1 × 105 xxxxx/xx (1 × 104 buněk xx xxxxx). Xxx každou xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx dvě xxxxxxxx: jedna pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (-XXX) x druhá pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (+XXX).
Xxxxx xx inkubují 24 x (7,5 % XX2, 37 °X), xxxxx nedosáhnou semikonfluentní xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxx umožní regeneraci xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx růst.
1.7.3.2 Xxxxx xxx
Xx inkubaci xx xxxxxxxxxx médium x xxxxx xxxxxxxxx x každá xxxxx xx promyje xxxxxxx 150 μl XXXX/XXX. Xxxxx xx 100 μx XXXX/XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx rozpouštědlo (xxxxxxxxx xxxxxxxx). Xxxxxxxx xx 8 xxxxxxx koncentrací xxxxxxxx chemické xxxxx. Xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx v temnu xx xxxx 60 xxx. (7,5 % XX2, 37 °X).
X xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx XXX xx xxxxx xxx xxxxxxxx teplotě xx xxxx 50 xxx. xxxxxxx xxxx víčko 96xxxxxxx destičky XXX xxxxxxx o xxxxxxxxx 1,7 MW/cm2 (5 X/xx2. Aby xxxxxxx xx kondenzaci xxxx xxx víčkem, xxxxx xx xxxxxx ventilátoru. Xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxx ozáření UVA xx xxxxxxxxx 50 xxx. (xxxx expozice XXX) x xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxx x xxxxx xxxxx xx xxxxxxx dvakrát 150 μl XXXX/XXX. XXXX/XXX se xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxx xxx (18-22 x) (7,5 % XX2, 37 °X).
1.7.3.3 Třetí xxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx se xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinkem xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxx experimentální xxxxx, xxxxx záznamy xx xxx hodnocení xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx neutrální červeně.
Buňky xx xxxxxxx 150 μx xxxxxxxxxxxx EBSS/PBS x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx 100 μx xxxxx XX x inkubuje xx 3 h xxx 37 °X xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x 7,5 % XX2.
Xx inkubaci xx xxxxxx XX xxxxxxxx x xxxxx se xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX. XXXX/XXX xx xxxxxxxxx x zcela xxxxxx (případně xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx poloze).
Přidá xx xxxxxx 150 μx xxxxxxx připraveného xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxx, xxx se xxxxxxxxxx XX.
Xxxxxxxx xx xxxxxx 10 xxx. xxxxx na třepačce, xxxxx xx XX x xxxxx nevylouží x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx se změří xxxxxxxxxx xxxxxxxx NR xxx 540 nm, xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx. Údaje xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (xxxx. XXXXX) x xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
2.1 Xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýzu xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx při xxxxxxx UVA/VIS xxxx xxx xxxx. Je-li xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x interval xxxx xxxx nastaven xxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx experimentálními xxxxx křivku. Vzhledem x xxxx, že xx zkoušená chemická xxxxx xxxxxxxx xxx xx xx mezní xxxxxxxxxxx 100 μx/xx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxx (-XXX) xxxxxxxxxxx, ale mohla xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx ozáření (+XXX), může xxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, které xxxx xxx x xxxx částech xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xx-xx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx-xx x xxxx xxxxxxx experimentu (-XXX x +UVA) xxxxxxxxxxxx zjištěna, xxxxx xxxxxxx zkoušku x xxxxxxx intervaly xxxx xxxxxxxxxxxx dávkami xx xx xxxxxxxx koncentrace.
Ověření xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx byla xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx koncentrací. X xxxxxxxx případech xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx jednou nebo xxxx předběžnými xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx x výsledky xxxxxx xxxxxxxxxx hodnot xxxxxxxxxxxxx modelu xx xxxx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxx výsledku xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Klíčovou xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx roztoků xxxxxxxx xxxxxxxx látky. X tohoto xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx (xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, použití xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx může xxx xxxxx x úvahu xxxxxxxx inkubační xxxx xxxx ozářením. Zkrácení xxxx může mít xxxxxx x chemických xxxxx xxxxxxxxx xx xxxx.
2.2 Xxxxxxxxxx výsledků
Je-li xx xxxxx, xxxxxxx xx koncentrace zkoušené xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 50 % inhibici xxxxxxxxx příjmu xxxxxxxxx xxxxxxx (XX) (XX50). Xxx tak xxxxxx xxxxxxx jakékoli xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx regrese (xxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx regresí) xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx koncentraci xxxx xxxxxxxx xxxxxx metod xxxxxx xxxxxxxxx (14). Xxxx xxxxxxxx hodnoty XX50 xxx xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx způsobem xxxxxxxxxxxxx kvalita proložení. Xxx xxxxxxx XX50 xxx xxxxxxxxx použít xxxxxx grafického xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx použít xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (měřítko xxx x: xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxx y: xxxxxxxxxxxxxxxxx), neboť x xxxxx případech xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx závislosti odezvy xx koncentraci xxxxx xxxxxxxx.
2.3 Hodnocení výsledků (xxxxxxxxxxx xxxxxx)
2.3.1 Xxxxxxxxxxx xxxxx — xxxxx 1: xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX)
Xxxxxxxx xxxx x xxxx xxxxxxxxx xxx xxx ozáření (+XXX), xxx bez xxxxxxx (-XXX) xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX) xxxxxxxxx xxxxx tohoto xxxxxx:
(x) XXX = (XX50 (-XX)) / (XX50 (+XX))
Xxxxxxx XXX &xx; 5 předpovídá xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciálu, xxxxxxx xxxxxxx XXX ≥ 5 xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx při +XXX x xxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx -XXX, nelze xxxxxxx XXX xxxxxxxxx, xxxxxxx xxx x výsledek, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx případech xxx xxxxxxxxx hodnotu "&xx; XXX", xxxxxxxx xx xxxxxxx -XX xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (Cmax), x xxxx xxxxxxx xx použije xxx xxxxxxx "&xx; XXX";
(x) &xx; XXX = (Xxxx (-XX)) / (XX50 (+XX))
Xxx li xxxxxx xxxxx hodnotu "&xx; XXX", xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciálu xxxx xxxxxxx &xx; 1.
Xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx toho, že xxxxxxxx látka nevykazuje xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx koncentrace xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxxx XX50 (-XX) xxx xxxxxxx EC50 (+ XX), svědčí xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciálu. V xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx "XXX = *1";
(X) &xx; XXX = *1 = (Xxxx (-XX)) / (Xxxx (+XX))
Xxx xx získat xxxxx xxxxxxx "PIF = *1", je xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx fototoxického xxxxxxxxxx.
X xxxxxxxxx b) x x) xx měly xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciálu xxxxxxx xxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxx dosažené xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx.
2.3.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx 2: xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (XXX)
Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx novou verzi xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, který xxx vyvinut s xxxxxxxx údajů x xxxxxxxxx xxxxxx XX/XXXXXX (15) x xxx xxxxxxxx naslepo x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxx látek, xxxxx xx chovají xxxx XX xxxxxx (13). Xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx jako xxxxx XXX x případech, xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx XX50. Tento xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxxx xxxxx xxxxxx) (XXX), xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx na srovnání xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx koncentraci. Xxx použití xxxxxx xxx xx Humboldtově xxxxxxxxxx (Xxxxxx) vyvinut xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxx.
2.4 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx výsledek zkoušky xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro (XXX ≥ 5 xxxx XXX ≥ 0,1) xxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxxxxxxxx xxx 10 μg/ml, xx xxxx pravděpodobné, xx látka xxxx xxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx in xxxx. Xx-xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx zkušební xxxxxxxxxxx 100 μg/ml, mohou xxx xxx posouzení xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx další xxxxx. Xx se xxxxx xxxxx xxxxx x penetraci, xxxxxxxx x xxxxx akumulaci xxxxxxxx xxxxx v xxxx xxxx zkoušení xxxxxxxx látky xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zkouškou, např. xx použití modelu xxxxxx xxxx xx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 NRU xx xxxxx (XXX &xx; 5 xxxx XXX &xx; 0,1) xxxxxxx, že látka xxxxxx pro xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx zkoušet xxxxxxxxx xxxxx xx po xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, xxxxxxxxx negativní xxxxxxxx, že xxxxxxxx xxxxx xxxx fototoxický xxxxxxxxx x fototoxicitu xx xxxx xxx xxxxxxxx za xxxxxxxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx, kdy xxxx xxx nižších xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx totožné xxxxxxxxxx toxické xxxxxx xx koncentraci (XX50 +XX x XX50 -XX), je interpretace xxxxx stejná. Xxxx-xx xxxxxxx tomu xxxxxxxx xxxxxxxxx (+UV x -XX) x xxxx-xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxx xxx 100 μx/xx, xxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxx xx xxx xxxxxxx potvrzující xxxxxxx (xxxx. za xxxxxxx xxxxxx lidské xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxx).
3. XXXXXX
Xxxxxxxx o xxxxxxx
Xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx:
- xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx XXX, je-li xxxxx,
- xxxxxxxxx vlastnosti x xxxxxxx,
- xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x tomto xxxxxxxxxxxx,
- procentuální xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x aplikačním xxxxx (XXXX xxxx XXX).
Xxxxx:
- xxx a xxxxx buněk,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- číslo xxxxxxx xxxxxx, xx-xx známo,
- xxxxxxxxx buněk na XXX xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx ve zkoušce xxxxxxxxxxxx 3T3 NRU xx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx x) — xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx a xx xx:
- typ x xxxxxxx kultivačního xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx CO2, xxxxxxx, xxxxxxx),
- xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx před xxxxxxxx x xx xx).
Xxxxxxxx xxxxxxxx x) — xxxxxxxx xxxxxxxx látky:
- xxxxxxxxxx výběru xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxx při xxxxxxx XX/XXX, tak xxx xxx,
- v xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxx látka vykazuje xxxxxxxx rozpustnost x xxxx xxxxxxxxxxx, zdůvodnění xxxxxxxx xxxxxxxx koncentrace,
- xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (pufrovaný xxxxxxxxxxxx xxxxxx),
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx x) — xxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxxx xxxxxxxxx zdroje světla,
- xxxxxxxxxx charakteristiky ozáření xx xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx filtrů),
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx o xxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxx XXX x této xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xX/xx2,
- xxxxx xxxxxxxx XX/XXX xxxxxx,
- xxxxx XXX záření (xxxxxxxxx × čas), xxxxxxxxx x J/cm2,
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx během xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx kultur udržovaných x temnu.
Zkušební xxxxxxxx x) — zkouška XXX:
- xxxxxxx xxxxx XX,
- xxxx xxxxxxxx XX,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx, xxxxxxx),
- xxxxxxxx extrakce XX (xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx extrakce),
- vlnová xxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx XX,
- xxxxx (xxxxxxxxxx) xxxxxx xxxxx, xx-xx xxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx, xx-xx použit.
Výsledky:
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx při xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx vyjádřená x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx závislosti xxxxxx xx koncentraci (xxxxxxxxxxx zkoušené xxxxxxxx xxxxx versus xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) získané xxx xxxxxxxxxxx experimentech +XXX x -XXX,
- xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx: xx-xx to možné, xxxxxxx hodnoty XX50 (+XXX) a XX50 (-XXX),
- xxxxxxxx obou xxxxxx závislosti odezvy xx koncentraci xxxxxxxxx x xxxxxxxx XXX/XXX x xxx xxxx, x to buď xxxxxxxx fotoiritačního faktoru (xxxxx-xxxxxxxxxxx factor ) (XXX), xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx světelného xxxxxx (xxxx xxxxx effect) (XXX),
- klasifikace fototoxického xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x) — xxxxxxxx negativní xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (absorbance xxxxxxxx NR) xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x) — xxxxxxxx xxxxxxxxx kontrola:
- xxxxxxx XX50 (+UVA), XX50 (-XXX) a XXX-xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx,
- dosavadní xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx: xxxxxxx EC50 (+XXX), XX50 (-XXX) x XXX, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx výsledků.
Závěry.
4. XXXXXXXXXX
(1) Xxxxxxxxx, X., Xxxxx, X., Xöxxxx, X., Xxxxxüxxxx, H. G., Xxxxxxx, S., Klecak, X., X'Xxxxxxxxxxx, X., Xxxxxxx, X., Lovell, X. X., Maurer, X., Moldenhauer, X., Xxxxx, L., Xxxx, X., Xxxxxxxxxxx, X., Xxxxxxxx, X., Xx Xxxxx, X., Xxxxxxxx, X., Willshaw, X. (1994), XXX/XXXXXX xxxxxxx xx in xxxxx xxxxxxxxxxxxx testing: First xxxxxxx xxxxxxxx with x Xxxx/x 3X3 xxxx phototoxicity xxxxx, Xxxxxxxxxx xx xxxxx 8, 793-796.
(2) Xxxx (1998), Statement xx xxx xxxxxxxxxx validity xx xxx 3X3 XXX PT xxxx (xx xx xxxxx xxxx for phototoxicity), Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx, Xxxxx Xxxxxxxx Centre: ECVAM xxx DGXI/E/2, 3 Xxxxxxxx 1997, ATLA 26, 7-8.
(3) Xxxxxxxxx, X., Xxxxx, X., Xxxxxx, J., Xxxx, X. J. W., Xxxxxxxxxx, G., Xx Xxxxx, X., Xxxxxüxxxx, X. X., Xxxxxxxx, X., Xxxxxxx, X., Xxxxxxxxx, X., Xxxxxxx, X., Xxxxxx, X. X., Maurer, X., Xxxxxxxxxxxxx, U., Potthast, X. X., Csato, X., Sladowski, D., Xxxxxxxx, X., Xxxxxxx, X. (1998), EU/COLIPA "Xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx", xxxxxxxxxx study, xxxxxxx xx phase II (xxxxx trial), xxxx 1: the 3T3 XXX phototoxicity test, Xxxxxxxxxx in Xxxxx 12, 305-327.
(4) OECD Xxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxx, XXX/XX/XXXX/XX(96)9: Xxxxx Report xx xxx XXXX Xxxxxxxx xx Harmonisation xx Validation and Xxxxxxxxxx Xxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx Xxxx Xxxxxxx, OECD Xxxxxxxxxxxx Xxxxxx, Xxxxx, 1996.
(5) Xxxxxx, W. W. (1993), X scheme xxx in xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, Xxxxxxxxxx xx Xxxxx 7, 95-102.
(6) Xxxxxxxxxx, X., Xxxxx, G. (1972), Xxxx xx xxx photodynamic xxxxxxxxxx, Xxxxxxxx progress in xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx Vol. 3 Part 1, Xxxxx Xxxxxxx Xxxxxxxxxx Xx, Amsterdam, XX–XXXX.
(7) Xxxxxxxxx, X., Xxxxxx, X. X., Hölzle, X., Xxxxxxx, B. X., Maurer, T., Xxxxxxx, X. X., Xxxx, W. J. X., Xxxxxx, O., Xxxxxxxxx, D. (1994), Xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx: Xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xx XXXXX workshop 2, XXXX 22, 314-348.
(8) Xxxxxx, X. X. (1989), Xxxxxxxxxxxxxxxxxx. V: Xxx xxxxxxx of xxxxxxxxxxxx, (X. X. Xxxxx, xx.), Plenum Xxxxx, Xxx Xxxx, 2. xxx., 79-110.
(9) Xxxxxxxxxxx, X., Xxxxxxx, X. X. (1985), Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx by xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxx absorption, Xxxxxxx. Xxxx. 24, 119-124.
(10) Xxxxxxx, X. X., Xxxxxx, W. G., Xxxxxxxxxx X. (1996). X: Animal xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx testing, Xxxxxxxxxxxxxxxxx, (X. N. Xxxxxxxx, H. X. Xxxxxxx eds.), Taylor &xxx; Xxxxxxx, Washington XX, 5. xxx., 515-530.
(11) Xxxxxxx, R. X., Pidoux X. (1987), Xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxx xxxxx: xxxxxxxxx of xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx the xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx ultraviolet xxx violet xxxxxxx xx xxxxxxxx on xxxxxxxxx keratinocytes, Xxxxxx Xxx. 47, 1825-1829.
(12) XXXXX/XXXXX/XXXXXX, Standard Xxxxxxxxx Xxxxxxxxx: Xxxx/x 3T3 XXX Xxxxxxxxxxxxx Test, xxxxxxxx 23. xxxxxxxx 1997 X. Xxxxxxxxx, xxxxxxxxx 6. xxxxxx 1998 xxxxx Management Xxxx xx xxx XX/XXXXXX xxxxxxx "Xx Xxxxx Xxxxxxxxxxxxxxx".
(13) Spielmann, X., Xxxxx, M., Xxxxxx, J., Xxxx, X. J. X., Xx Xxxxx, X., Xxxxxüxxxx, H. X., Xxxxxxxxx, X., Liebsch, X., Lovell, W. X., Xxxxxxxxxxxxx (1998), X Study xx xxx Phototoxic Xxxxxxxxx xx XX Xxxxxx Xxxxxxxxx from Xxxxx XXX xx xxx XX Xxxxxxxxx 76/768/XXX xx xxx 3X3 XXX Xx Xxxxx Xxxxxxxxxxxxx Xxxx, XXXX 26, 679-708.
(14) Xxxxxüxxxx, X. X., Xxxxxxxx, X. (1995), Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx to xxxxxxxx xxxxxxx, Xxxxxxx of Xxxxxxxxxx Systems, 3, 127-138.
(15) Xxxxxüxxxx, H. X. (1997), A xxxxxxx xxxxxxx xx xx vitro phototoxicity xxxxxxx xxxx pairs xx xxxx-xxxxxxxx curves xxx its xxx xxx xxxxxxxxxx xxx xx vivo xxxxxxxxxxxxx xx chemicals, XXXX 25, 445-462."
"Dodatek
[1] Xxxxx xxxxxxxxxxx lze nalézt x xxxxxxxxxx (12).