Xxxxxxxx Xxxxxx 2000/33/ES
ze xxx 25. xxxxx 2000,
xxxxxx xx xx xxxxxxx sedmé xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx směrnice Xxxx 67/548/XXX x xxxxxxxxxx právních a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxxx nebezpečných xxxxx [1]
(Text s xxxxxxxx xxx XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x ohledem xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx společenství,
s xxxxxxx na xxxxxxxx Xxxx 67/548/XXX ze xxx 27. června 1967 x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x správních xxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxx, balení a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx látek [2], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x Xxxx 1999/33/XX [3], a zejména xx článek 28 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxxx důvodům:
(1) X xxxxxxx X xxxxxxxx 67/548/XXX xx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx látek x xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx technickému pokroku.
(2) Xxxxx xx. 7 xxxx. 2 xxxxxxxx Xxxx 86/609/EHS xx xxx 24. listopadu 1986 o xxxxxxxxxx xxxxxxxx x správních xxxxxxxx členských xxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx používaných pro xxxxxxx x xxxx xxxxxxx účely [4] xxxxx xxx xxxxx, xxx němž xx xxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx vědecky uspokojivá xxxxxx.
(3) Xxxxxx zamýšlí xxxxxxx xx xxxxxxx X směrnice 67/548/EHS xxxxxx alternativní zkušební xxxxxx, při nichž xxxxxx používána xxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx. 3 xxxx. 1 xxxxxxxx 67/548/XXX.
(4) Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx technickému xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx technických překážek xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx látek a xxxxxxxxx,
XXXXXXX TUTO XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Text xxxxxx X x XX xxxx xxxxxxxx se xxxxxx xx xxxxx X přílohy V xxxxxxxx 67/548/EHS.
Xxxxxx 2
1. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx právní x xxxxxxx předpisy xxxxxxxx xxx dosažení souladu x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 1. xxxxx 2001. Xxxxxxxxxx x xxxx uvědomí Xxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx státy musí xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx členské státy.
2. Xxxxxxx xxxxx xxxxx Xxxxxx xxxxx hlavních xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx právních xxxxxxxx, které přijmou x oblasti xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxx tabulku mezi xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 3
Xxxx směrnice xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx dnem xx xxxxxxxxx x Úředním xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 4
Xxxx směrnice xx určena xxxxxxxx xxxxxx.
X Bruselu xxx 25. xxxxx 2000.
Za Xxxxxx
Xxxxxx Xxxxxxxöx
xxxxxx Xxxxxx
[1] Xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx.
[2] Xx. xxxx. 196, 16.8.1967, s. 1.
[3] Xx. xxxx. X 199, 30.7.1999, x. 57.
[4] Xx. věst. X 358, 18.12.1986, x. 1.
PŘÍLOHA X
"X.40 LEPTAVÉ XXXXXX NA XXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxx zkoušky xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx na xxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx elektrického xxxxxx xxxx xxxxxxx (XXX) x zkouška x využitím xxxxxx xxxxxx kůže xxxx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx alternativních xxxxx (XXXXX, Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx Evropské Xxxxxx) (1, 2, 3) xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx studie XXXXX prokázala, xx xxxxx xxxxxxxxx lze xxxxxxxxxx rozlišit xxxxx xxxxx leptající x xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxx umožnil xxxxxxx xxxxxxxx stupně xxxxxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx těžké xxxxxxxxx, X 35 x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kůže, X 34) (2). Xxxxx x postup xxxx xxxxxxx xx xxxxxx; xxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxx, závisí xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx uživatele.
Viz také Xxxxxx xxxx, část X.
1.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxx poškození kůže xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.3 Xxxxxxxxxx látky
Nespecifikovány, xxxxx xxx xxxx 1.5.3.4 x 1.7.2.3.
1.4 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx — xxxxxxx TER xx xxxx potkana
Zkoušený xxxxxxxx je xx xx 24 h xxxxxxxxx na epidermální xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx mladých xxxxxxx. Xxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx normální xxxxxxxxx x xxxxxxxxx funkce xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx), xxxxx xx xxxxxx xxxx snížení xxxxxxxxx XXX xxx xxxxxxxx xxxxxx (5 xΩ) (4, 5). Xxxxxxxx x nedráždivé xxxxx nesnižují XXX xxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x neutrální xxxxxxxxx látky (definice xxx xxxxxxxxxx (6)) xxx xxxxxxx stupeň xxx xxxxxxxxx vázání xxxxxxx, aby xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxx chemických látek (2, 7).
1.5 Popis xxxxxxxx xxxxxx — xxxxxxx TER xx xxxx xxxxxxx
1.5.1 Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxx musí být xxxxxxxxxx x xxxxxxx (20 — 23 xxxxxxx) potkanů (Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx kmen). Xxxxxxx x boční xxxx se xxxxxxx xxxxxxxx holicím xxxxxxxx. Xxxxxxx se xxxx xxxxx xxxxxxxx otíráním, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx do xxxxxxx xxxxxxxxxx (obsahujícího xxxx. xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx). Xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxx den xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx roztokem xxxxxxxxxx x xxxxxxx se xx 3 xxx (x přípravě xxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx 31 xxx).
1.5.2 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx se xxxxxxx usmrtí. Z xxxxxxx xxxxxxx se xxxx opatrně xxxxxxxx xxxxxxx kůže a xxxxxxxxxx xxx se x xxxx opatrně xxxxxxxxx. Kůže se xxxx xxxxxxx přes xxxxx xxxxxxxxx (XXXX) xxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxx s xxxxxxxxx. Xxxx konec xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx X-xxxxxxx, aby xxxx xxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxx tkáně xx xxxxxx. Rozměry xxxxxxxx x O-kroužku xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx 1. Xxxxxxx X-xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx se poté xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx držená xxxxxx pružinové xxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx (154 mM) (xxxxxxx 2).
1.5.3 Xxxxxxxx xxxxxx
1.5.3.1 Xxxxxxxx zkoušeného xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx (150 μx) xx aplikuje xx epidermis xxxxxx xxxxxxxx (xxx. 2). Xxx xxxxxxxx pevných xxxxxxxxx xx použije xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx, xxx byla pokryta xxxx epidermis. Xxxx xx xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx (150 μx) x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx a xxxx by mělo xxxxx x maximálnímu xxxxx. X některých xxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xx 30 °X, xxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx nebo xx xxxxxx.
Xx xxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx po xxxx 24 x (xxx také bod 1.5.3.4). Xxxxxxxx xxxxx xx zcela xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx x teplotě xxxxxxx 30 °X. Odstranění xxxxxxxxxx látek, xxxxx x trubičce xxxxxx, xxx usnadnit omytím xxxxxxx xxxx teplé xx 30 °C.
1.5.3.2 Xxxxxx XXX
XXX xx xxxx nízkonapěťovým impedančním xxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxx (xxxx. XXX 401 nebo 6401 xxxx xxxxxxxxxxxx). Xxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx objemu 70 % xxxxxxxx xxx, aby xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxx sekundách se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xx xxxxxx xxxxxxxx 3 ml xxxxxxx xxxxxx hořečnatého (154 xX). Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xx xxx xxxxxx terčíku xxxx za účelem xxxxxx odporu v xΩ/xxxxxx xxxx (xxxxxxx 2). Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx exponovaných xxxxx xxxxxxxx pod xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx obrázku 1. Xxxxxx xxxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx odporu opřena x horní xxxxx xxxxxxxxx trubičky, xxx xxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx ponořené x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx (tenká) xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx komory xxx, xxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxx teflonové xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxx 1), neboť xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx na xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xx xxxxx xx xxxxxxxx, že xx-xx xxxxxxxx hodnota xxxxx než 20 xΩ, může xx xxx xxxxxxxxx vrstvou xxxxxxxx látky xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx. X odstranění xxxx xxxxxx se xxx xxxxxxx např. xxx, xx xx xxxxxxxxx trubička xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx x 10 x xx protřepává. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx a měření xx xxxxxxx x xxxxxxxx síranem hořečnatým.
Výsledky XXX (xxxxxxx xxxxxxx) xxxx přijatelné, pokud xxxxxxx pozitivní x xxxxxxxxx kontroly spadají xx xxxxxxxxxxxx rozpětí xxxxxx. Pro xxxxxxxx xxxxxxxx x přístroje xxxx doporučeny tyto xxxxxxxxx látky x xxxxxx přijatelná rozpětí xxxxxx:
|
Xxxxxxxx |
Xxxxx |
Xxxxxxx xxxxxx (xΩ) |
|
Xxxxxxxxx |
10X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (36 %) |
0,5–1,0 |
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxx xxxx |
10–25 |
1.5.3.3 Xxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xxxx-xx xxxxxxx TER xxx xxxxxxxxx xxxxxxx látky xxxx organické látky xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxx 5 kΩ, xxx xxxxxxx na xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx (2).
1.5.3.3.1 Aplikace x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X
Xx předchozí xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xx epidermální xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx 2 x 150 μl 10 % roztoku xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx B x destilované xxxx. Xxxxxxx xxxx se xxxx xxxxxxxxx 10 x xxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx kůže xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx se do xxxxxxxx (xxxx. 20 xx xxxxxxxx lahvičky xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx (8 ml). Lahvičky xx xxxxx 5 xxx. xxxxxxxxxxxx, xxx xx odstranilo xxxxx xxxxx xxxxxxx. Tato xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx, x xxxx xx terčíky xxxx vyjmou x xxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 5 xx 30 % roztoku (x/X) xxxxxxx-xxxxxxx-xxxxxxx (XXX) x xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xx xxxx noc xxx 60 °X. Xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx 8 min. xxx 21 °X (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx síla ˜ 175). 1 xx vzorku supernatantu xx xxxx xxxxx 4 xx 30 % (x/X) xxxxxxx XXX v xxxxxxxxxxx xxxx. Absorbance (X) xx xxxx při xxxxxxxxx 565 xx.
1.5.3.3.2 Xxxxxxx obsahu xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X xx xxxxxx kůže xx vypočte x xxxxxx X (molární xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X xxx 565 xx = 8,7 × 104; molekulová xxxxxxxx = 580). Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx a xxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx hodnota. Střední xxxxxxx výsledků xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx přijatelného xxxxxxx xxxxxx. Xxx popsanou xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx barviva:
|
Kontrola |
Látka |
Rozmezí xxxxxx barviva (μg/terčík xxxx) |
|
Xxxxxxxxx |
10X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (36 %) |
40-100 |
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxx voda |
15-35 |
1.5.3.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx lze xxxxxx aplikovat na xxxxxxx kůže xx xxxxxx xxxx (např. 2 xxxxxx), xxx xx identifikovaly ty xxxxxxxxx, xxxxx jsou xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx však xxxxxxx, xx stanovení TER xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky x několika zkoušených xxxxxxxxxx xxxxx při xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xx xxxx 2 xxxxx (2), třebaže toto xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx látek s xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxx leptavých xxxxxx při 24hodinové xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx XXX. Xxxx 5 Ω pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx účinků byl xxxxxxx z xxxxx xxxxxxxxx se zařízením x xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx x xxxx metodě. Doporučuje xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x určit xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx látek použitých xx xxxxxxxxx studii (3).
1.6 Podstata xxxxxxxx xxxxxx — xxxxxxxxx xxxxxx modelu xxxxxx xxxx
Xxxxxxxx materiál xx xxxxxxxxx xx xx xxxx 4 xxxxx xx xxxxxxxxxxxx model xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx epidermis x funkční xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx expoziční xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (stanovený xxxx. xxxxxxxx zkoušky redukce XXX) pod xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx je xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxx xxxxxx jsou xx, jež xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx xxxx xxxxx) x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx smrt xxxxx x hlubších xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7 Popis zkušební xxxxxx — xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx
1.7.1 Xxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxx lidské xxxx xxxxx xxxxxxxx z xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx rohovitou xxxxxx a xxxxxx xxxxxx buněk xxx xx. Xxxxxxxxx funkce xxxxxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxxxxxx. To xxx prokázat xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx k xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Musí xx xxxxxxxx, že model xxxxxxxxx za definovaných xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx musí xxx xxxxxxxxxx vysoká, xxx xxxx možné xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x negativní kontrolní xxxxx. xxxxxxxxxxxxxx buněk (xxxxxxxxx xxxx. xxxxxxx XXX, xx. xxxxxxx xxxxxxx absorbance X) xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx musí xxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xx srovnání x xxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) xxxx xxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Nejdůležitější xxxxxx xx, xxx xxxxx odpovídal mezinárodním xxxxxxxxxx pro xxxxxxxx (2).
1.7.2 Xxxxxxxx xxxxxx
1.7.2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx zkoušené látky, xxx xxxxxxx xxxxxx xxxx (minimálně 25 μx/xx2). X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx dostatečné xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx kůži, x xxxxxxxx xxxxx xx xxxx být xxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxx; pevné xxxxx xx xxxx být xxxxx potřeby xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (2). Xx xxxxxxxx expoziční xxxx musí být xxxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxx kůže opatrně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7.2.2 Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx
X xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx buněk xxxx xxx použita xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Nejčastěji xx xxxxxxx stanovení xxxxxxx XXX, xxx níž xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx výsledky (2). Xxxxxx xxxx se xxxxxx xx xxxxxxx XXX o xxxxxxxxxxx 0,3 xx/xx xxx xxxxxxx 20-28 °X xx xxxx 3 xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx X xxx xxxxxx xxxxx 545 xx 595 xx.
1.7.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx model xxxx x xxxxxx zaznamenání xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx atd. xxxxx xxx xxxxx xxxx xx výsledky xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Doporučuje xx, xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx zkoušením řady xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x chemických xxxxx xxxxxxxxx xx validační xxxxxx XXXXX (3). Xx xxxxxxxxxxx, aby xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxx laboratoře x xxxx laboratořemi xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx látek. Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx (2) a xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx vědeckém xxxxxxxx x předcházející xxxxxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
2.1.1 Xxxxxxx XXX xx xxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx (xΩ) pro xxxxxxxx materiál, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontrolu x xxx všechny xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx včetně xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx xxxxxxxxx x x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx.
2.1.2 Zkouška x xxxxxxx xxxxxx kůže
Hodnoty xxxxxxxxxx X x xxxxxxxxx hodnoty xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x procentech xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx x xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx látky včetně xxxxx x duplicitních xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, x středních xxxxxxxxx x x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxx.
2.2 Xxxxxxxxx x interpretace výsledků
2.2.1 Xxxxxxx XXX na xxxx xxxxxxx
Xx-xx hodnota XXX xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx látku xxxxx xxx 5 xΩ, xxxx látka xxxxxx. Xx-xx xxxxxxx XXX xxxxx nebo xxxxx 5 xΩ a xxxxx o povrchově xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx organickou xxxxx, xx xxxxx xxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx organických xxxxx, xxxxx dávají xxxxxxx TER xxxxx xxxx rovné 5 xΩ, lze xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xx-xx střední obsah xxxxxxx v terčíku xxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x terčíku xxxx získanému xxxxxxxx xxx použití 36 % HCl jakožto xxxxxxxxx xxxxxxxx, je xxxxxxx xxxxxxxx látky xxxxxxxx pozitivní, a xxxxx je tedy xxxxxx. Je-li xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx kůže xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxx souběžně xxx xxxxxxx 36 % XXx, xx xxxxxxx falešně xxxxxxxxx, x xxxxx xxxx xxxx xxxxxx.
2.2.2 Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxx X xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 % xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx; xxxxxxx xxxxxxxxxx A xxxxxxxx xxx každý xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx k negativní xxxxxxxx. Hraniční procentuální xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xx rozlišují xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxx (nebo xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx leptavých xxxxxx), xxxx být xxx xxxxxxxxxxx model xxxxx definován xxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xx xx vhodný (2).
3. XXXXXX
Xxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxxxxx x zkoušce xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxx látka:
- xxxxxxxxxxxxx xxxxx, fyzikální xxxxxxxxxx x případně xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx měly xxx xxxxxxx xxx referenční xxxxx, xxxxx byly xxxxxxx.
Xxxxxxxx podmínky:
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx x zdůvodnění jakýchkoli xxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxx odporu (xxxxxxx XXX) nebo xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x procentech (xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx) xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx a xxxxxxxxx kontroly a xxxxxxx xxxxxxxxxx referenční xxxxxxxx látky včetně xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx ve xxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pozorovaných xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
4. XXXXXXXXXX
(1) XXXXX (1998), ECVAM Xxxx &xxx; Xxxxx, ATLA 26, 275-280.
(2) Xxxxxx, X. X., Archer, X. E. X., Xxxxx, M., Xxxxxx, X. X., Xxxxxx, X. X., Earl, X. K., Esdaile, X. J., Xxxxxxxxxx, X-X., Liebsch, M. (1998), Xxx XXXXX xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx study xx xx vitro xxxxx for xxxx xxxxxxxxxxx. 2. Xxxxxxx xxx evaluation by xxx Management Xxxx, Xxxxxxxxxx in vitro 12, 483-524.
(3) Barratt, X. X., Brantom, X. X., Fentem, X. H., Xxxxxx, X., Xxxxxx, X. X., Xxxxx, X. X. (1998), Xxx XXXXX international validation xxxxx xx in xxxxx xxxxx for xxxx xxxxxxxxxxx. 1. Xxxxxxxxx xxx distribution xx xxx xxxx xxxxxxxxx, Xxxxxxxxxx xx xxxxx 12, 471-482.
(4) Xxxxxx, G. X. X., Xxxxxxxxx, X. X., Xxxxxx, X. (1986), Xx xx xxxxx skin corrosivity xxxx — xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx, Xxxx Xxxx. Xxxxxxx. 24, 507-512.
(5) Botham, P. X., Hall, X. X., Xxxxxxx, X., XxXxxx, J. X., Xxxxxxxxx, D. A., Xxxxxxx, E., Cheeseman, X., Esdaile, X. X., Xxxxxxx, X. (1992), The xxxx xxxxxxxxxxx test in xxxxx: xxxxxxx xx xx interlaboratory xxxxx, Xxxxxxxxxx xx xxxxx 6, 191-194.
(6) Xxxxx, X. P., Xxxxxx, X. X., Xxxxx, X., Xxxxxx, P. X., Xxxxxx, X. X., Xxxx, X. X., Esdaile, X. X., Xxxxxxx, X. (1998), Xx xxxxxxxxxx xx xxx proposed XXXX xxxxxxx xxxxxxxx xxx skin xxxxxxxxx, XXXX 26, 709-720.
(7) Xxxxxx, X. X., Xxxxxxxxxxx, X., Barratt, X. D., Xxxxxx, X. X., Xxxxxxx, X. X., Xxxxxxx, X. R., Xxxxxx, X. X., Xxxxxxxxxx, X., Xxxxx, R. X., Xxxxxxx, X., Xxxxxxxx, X., Osborne, X., Xxxxx, X., Xxxxxxx, X. X., Xxxxxxxx, W., Walker, X. X., Xxxxx, X. 1995), A xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxx xxx recommendations xx ECVAM xxxxxxxx 6, ATLA 23, 219-255.
Xxxxxxx 1
Obrázek 2"
&xxxx;
PŘÍLOHA XX
"X.41 XXXXXXXXXXXX — ZKOUŠKA FOTOTOXICITY 3X3 NRU XX XXXXX
1. XXXXXX
1.1 Úvod
Fototoxicita xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx vyvolaná xx první expozici xxxx xxxxxxx chemickým xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx po xxxxxxxxxx xxxxxx chemické látky.
Informace xxxxxxx ze xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx slouží x identifikaci fototoxického xxxxxxxxxx zkoušené xxxxx, xx. existence xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xx zkoušené xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx XX záření xxxx xxxxxxxxxxx světlu.
Protože xxxxx xxxxxxx xx xxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chemické xxxxx x světla, lze xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx sloučeniny, xxxxx jsou fototoxické xx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xx xxxxxxxx na xxxx, a rovněž xxxxxxxxxx, které xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx jako xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 NRU xx xxxxx byla xxxxxxxx x validována x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx XX/XXXXXX v xxxxxx 1992 — 1997 (1, 2, 3) x cílem xxxxxxxx platnou xxxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxx používaným xxxxxxxx xx vivo. X xxxx 1996 doporučila xxxxxxxx xxxxxxx OECD xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4).
Xxxxxxxx xx xxxxxxx fototoxicity 3X3 NRU xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx fototoxickými xxxx xxxxxxxxxxxx účinky xx xxxx u xxxxxx x x xxxxxxx x xxxxxxx xx ukázala xxx xxxxxxxxx těchto účinků xxxx vynikající. Zkouška xxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx nepříznivých xxxxxx, které xxxxx xxxxxxx x kombinovaného xxxxxxxx chemické xxxxx x xxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx, třebaže xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, které xxxxxxxx tyto specifické xxxxxxxxxx, xxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx chemických xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx.
1.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxx xx X/x2 xxxx xX/xx2.
Xxxxx xxxxxxxxxx záření: xxxxxxxx (xxxxxxxxx × xxx) ultrafialového (XX) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx na povrch, xxxxxxxxx v xxxxxxx (X × x) xx xxxxxx povrchu, xxxx. X/x2 xxxx X/xx2.
Xxxxxx xxxxx UV xxxxxx: xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx XXX (Commission Xxxxxxxxxxxxxx de l'Eclairage): XXX (315400 xx), XXX (280315 nm) x XXX (100280 xx). Xxxxxxxxx se xxxxxx xxxx xxxxxxxx: xxxx hranice mezi XXX a XXX xx často xxxxxxxxx xxxxxxx 320 xx x pásmo UVA xxxx xxx xxxxxxxxx xx XX-X1 x XX-X2 x xxxxxxx xxxxx 340 nm.
Životaschopnost xxxxx: parametr, kterým xx xxxx celková xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx neutrální červeně xx xxxxxxxxx lysosomů) x který x xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx a na xxxxxxxx uspořádání zkoušky xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x/xxxx životaschopností xxxxx.
Xxxxxxxxx životaschopnost xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx zkoušky (x XX, nebo xxx XX), ale xxxxxx xxxxxxxxxx zkoušeným xxxxxxxxx látkám.
Předpovědní model: xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx výsledků xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. V xxxxxxxxxx metodice xxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx fototoxicity 3X3 XXX in vitro xx předpověď fototoxického xxxxxxxxxx použít faktor XXX x xxxxxxxx XXX.
XXX (xxxxx-xxxxxxxxxx factor — xxxxxxxxxxxx xxxxxx): xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx stejně xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (XX50) xxxxxxxx látky, a xx xxx necytotoxickém xxxxxxx XXX/XXX světlem (+ XX) x xxx xxxx (-XX).
XXX (xxxx xxxxx xxxxxx — xxxxxxx světelný xxxxxx): xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx závislosti xxxxxx xx xxxxxxxxxxx získaných xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX/xxx světlem (+ XX) x bez xxxx (-XX).
Xxxxxxxxxxxx: xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, vyvolaná xx xxxxx expozici xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x následné xxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxx vyvolaná ozářením xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx látky.
Fotoiritace: xxxxx xxxxxx xxxxx "xxxxxxxxxxxx", který xx xxxxxxx k xxxxxx xxxxx těch xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, které se xxxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxx chemickým xxxxxx (xxxxxxx xxxx xxxxxx). Tyto xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx x nespecifickému xxxxxxxxx xxxxxxxxx (podobné xxxxxx xxx xxxxxxxxx).
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, ke xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx chemické xxxxx a světla x která xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx xxx xxxxx xxxx xxx, xxx xxx xxxxxx kůže xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx, která xx xxxxxxxx xx expozici xxxxx xxxxxxxxxxxxx dávce XX/XXX xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx látce.
Fotokarcinogenita: xxxxxxxxxxxxx vyvolaná opakovanou xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx, xxx xx tvorba xxxxxx xxxxxxxxxx UV zářením xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx látky xxxxxxxxxxxxxx, který by xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx, xx xxx xxxx xxxxxxxxx zkoušku xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx chemické xxxxx xxxxx z xxxxxxxxxx xxxxx použitých při xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (1, 3, 13).
1.4 Xxxxxx poznámky
Fototoxické xxxxxx byly zaznamenány x xxxxx xxxx xxxxxxxxxx látek (5, 6, 7, 8). Xxxxxx jediným společným xxxxx xx schopnost xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x oblasti slunečního xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx fotochemie (Xxxxxxxxx-Xxxxxxxx xxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx mělo xxx xxxxxxxxx UV/VIS absorpční xxxxxxxx zkoušené xxxxxxxx xxxxx (např. xxxxx Xxxxxxxx XXXX 101). Xx-xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx menší xxx 10 x.xxx-1.xx-1, xxxxxxxx xxxxx xxxx fotoreaktivní xxxxxxxxx x nemusí xxx zkoušena zkouškou xxxxxxxxxxxx 3T3 NRU xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx nepříznivé xxxxxxxxxxxx účinky (xxxxxxx).
1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx metody
Byly xxxxxxxxxxxxxx čtyři xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx absorpce xxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxx x fototoxické xxxxxx (7). Všechny xxxxx k xxxxxxxxx xxxxx. Zkouška xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in xxxxx xx proto xxxxxxxx na srovnání xxxxxxxxxxxx chemické látky xxx zkoušení s xxxxxxxx necytotoxické xxxxx XXX/XXX xxxxxx x xxx této xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx je x xxxx xxxxxxx vyjádřena xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx vitálního xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (XX) (9) 24 xxxxx xx působení xxxxxxxx chemické xxxxx x xxxxxxx.
Xxxxx Balb/c 3X3 xx 24 x xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Dvě 96xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx zkoušenou xxxxxxxxx xxxxx se xxxx 1 x preinkubují xxxx různými koncentracemi xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx dávkou XXX/XXX xxxxxx 5 X/xx2 XXX (+ XX xxxxxxxxxx), zatímco xxxxx xxxxxxxx se udržuje x xxxxx (-XX xxxxxxxxxx). X xxxx xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx médium nahradí xxxxxxxxxxx médiem a xx xxxxxxx 24 x xxxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 3xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (XXX). Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x procentech vzhledem x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxx x xxxx zkušebních xxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx závislé xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx (+ UV) a xxx xxxxxxx (-UV), xxxxxxx xxx xxxxxxx XX50, xx. při xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 50 % úbytek xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx ve xxxxxxxx x neexponovanými kontrolami.
1.6 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx XXX, xxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxx buněk xx UVA xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx se xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro, xxxxxx xxx xx ozáří xxxxxx XXX xxxxxx 1 xx 9 X/xx2 x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxx xxxxxxx xxxxxxxx NRU. Xxxxx xxxxxxx kritérium jakosti, xxxx-xx xxxxxx životaschopnost xx xxxxxxx 5 X/xx2 menší než 80 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx vždy xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx XXX xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx: zkouška xxxxxxx kritéria xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx x EBSS (Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) x 1 % xxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx 1 % ethanolem (XxXX)) xxxx bez xxxx vykazují xxx + XXX xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx 80 % xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx neozářených buněk x tomtéž xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx (-UVA).
Životaschopnost xxxxxxxxx xxxxxxxx: absolutní xxxxxxxxxx (X540 NRU) xxxxxx x extraktu XX xxxxxxxxxxx kontrol xxxxxxx, xxx 1 × 104 buněk xxxxxxxxxx xx jednu xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx během dvou xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx zdvojnásobení (xxxxxxxx xxxx). Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx X540 XXX xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx ≥ 0,2.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx: xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in vitro xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx látka. Xxx xxxxxxxxx xxxxxx EU/COLIPA xxx xxxxxx jako xxxxxxxxx kontrola xxxxxxxxxxxxx (XXX), x je xxxx doporučen. Xxx XXX zkoušený podle xxxxxxxxxxxx postupu xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxx XXX xxxxxxx (+ UVA): XX50 = 0,1 xx 0,2 μx/xx, xxx XXX xxxxxxxxx (-XXX): XX50 = 7,0 xx 90,0 μx/xx. Xxxxxxxxxxxx faktor (PIF), xx. xxxxx xxxxxxx XX50, xx měl xxx xxxxxxx 6.
Namísto XXX xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx typu xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx údajů xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx přiměřeným způsobem xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XX50 x XXX xxxx MPE (xxxxxxx xxxxxxxx účinek).
1.7 Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx
1.7.1 Příprava
1.7.1.1 Xxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx použita xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx — Xxxx/x 3T3, xxxx 31 — xxx x xxxxx XXXX, xxxx x xxxxx XXXXX x xx tedy doporučena. Xxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx při xxxxxxx xxxxxxxxx postupu xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxxx podmínky xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx potřebám xxxxx, ale musí xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxx kontaminovány xxxxxxxxxxxx, x měly xx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx, jsou-li xxxxxxxx takové kontroly xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxxx buněk xx UV xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx, xxxx xx být xxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3X3 x xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x nižší xxx xxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx, xxx byla xxxxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3X3 xx XXX xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx jakosti xxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx.
1.7.1.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx buněčné xxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx být použita xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. X buněk Xxxx/x 3X3 xx jedná x DMEM (Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxxx media) xxxxxxxxx 10 % xxxxxxxxxxxxxx telecím sérem, 4xX xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx při 37 °X/7, 5 % XX2. Xxxxxxx důležité xx, aby kultivační xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx linie.
1.7.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxxx kmenových xxxxxx xx xxxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx hustotě x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx fototoxicity 3X3 XXX xx xxxxx.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx nasazují xx kultivačního xxxxx x takové hustotě, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx zkoušky, xx. xx xxxxxxxx, xxx xx po 48 x od xxxxxxxx stanovována xxxxxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxx Xxxx/x 3X3 xxxxxxxxxxx x 96xxxxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxx 1 × 104 xxxxx xx xxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx do xxxx xxxxxxxxxx 96jamkových xxxxxxxx, xxxxx xxxx poté xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx za xxxxxxxx xxxxxxxx kromě xxxx, xxx xx xxxxx x destiček xxxxxxx (+XXX/XXX) x xxxxx je udržována x temnu (-XXX/XXX).
1.7.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx požadavkem xxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx určených xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxx potenciálu, xxxx x xxxxxxxxxxxxxxx dosud xxxxx žádná xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxx xxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx transformace. Xxxxxxxxxx xx tedy xxx xx nezbytné xxx xx vědecky xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.7.1.5 Xxxxxxxx chemická xxxxx/xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx látky xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx bezprostředně před xxxxxxxx, pokud xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx skladování. Může-li xxxxx k xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx se xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx červeným xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx látky xx xxxx xxx rozpuštěny xx xxxxxxxxxxxxx roztoku, xxxx. v Earlově xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXXX) xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x fosfátovým xxxxxx (XXX), xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xX xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxx při xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx chemické xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx vodě xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 100xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx by xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxx 1:100 fyziologickým xxxxxxxx. Použije-li xx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 1 % xxx. ve xxxxx xxxxxxxxx, xx. v xxxxxxxxx kontrole x xxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxxxxx zkoušené xxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (DMSO) x xxxxxxx (XxXX). Xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx cytotoxická xxxxxxxxxxxx (např. xxxxxx), xxx xxxx by xxx pečlivě posouzeny xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx. reakce xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx látku, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx účinků, xxxxxx xxxxxxxx.
Xx-xx xxxxx, xxxx xxx xxx xxxxxxxxx rozpouštění použito xxxxxxx x/xxxx ultrazvuk x/xxxx xxxxxxx xx 37 °C.
1.7.1.6 Xxxxxxx XX světlem/příprava
Zdroj xxxxxx: xxxxx vhodného xxxxxx xxxxxx x vhodné xxxxxxxx xx kritickým xxxxxxxx zkoušení xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx x pásmu XXX x ve xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx (7, 10), xxxxxxx xxxxxx v xxxxx UVB je xxxx relevantní x xx přímo xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx 313 xx x 280 nm 1000xxxx (11). Xxxxxxxx xxx xxxxx vhodného světelného xxxxxx xx měla xxxxxxxxx důležitý požadavek, xxx zdroj xxxxxx xxxxxxxxx světlo x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, a xxx xxxxx světelného záření (xxxxxxxxxxx po xxxxxxxxxxx xxxx) xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx, včetně emise xxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxxxx), xx xxxx neměly xxxxxxxx xxxxxxxxxx testovací xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxx simulátorech se xxxxxxx xxx xenonová xxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx x xxxx xx xx xxxxxx, xx emituje xxxx xxxxx x je xxxxxxxx, avšak xxxx xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx dokonalá. Xxxxxxxx všechny xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx XXX záření, xxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx XXX xxxxxxxxx.
Xxx zkoušku fototoxicity 3X3 XXX in xxxxx xx mělo xxx xxxxxxx spektrum xxxxxxxxx xxxxxxx XXX xxxxxx (UVA:UVB ˜ 20:1). Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx simulátoru xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx studii xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX in xxxxx xxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx (3).
Xxxxxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxx (intenzita ozáření) xx musí pravidelně xxxx každou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx kontrolovat xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx XX-xxxxx. XX-xxxx musí xxx xxx daný xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx XX-xxxxx xx xxxx xxx kontrolována x xx tímto xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx stejným xxxxxxxx kalibrovaný XX-xxxx xxxxxxxx xxxx. X xxxxxxxx případě xx xxx být x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx intenzity xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx světla x ke xxxxxxxx xxxxxxxxx širokopásmového UV-metru xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx odbornou xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx 5 J/cm2 xxxx xxx xxxxxxxxx studii xxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx Xxxx/x 3X3 a xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látek. Xxx xxxxxxxx 5 X/xx2 xx xxxx 50 xxx. xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx 1,666 MW/cm2. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx buněčná xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, může být xxxxx XXX xxxxxx xxxxx upravena, xxx xxxxxxxxxxxxx buňky x xxxx xxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxxx fototoxinů. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx:
x(xxx) = xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (J/cm2) 100 / intenzita xxxxxxx (xX/xx2) 60 (1 J =.W xxx)
1.7.2 Xxxxxxxx podmínky
Maximální xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx neměla xxxxxxxxx 100 μx/xx, xxxxx xxxxxxx fototoxické xxxxxxxx xxxxx byly xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx; xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx výskyt xxxxxxx pozitivních výsledků (xxxxxxxxxxxx). Xxxxxxx pH xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx vyhovující (xX 6,5 — 7,8).
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx chemických xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx (+ XXX) x bez světla (-XXX) by xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx koncentrační xxxx x intervaly mezi xxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxx závislosti xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxxx geometrická xxxx xxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxxx faktorem xxxxxx).
1.7.3 Xxxxxxxx xxxxxx [1]
1.7.3.1 Xxxxx den
Připraví se xxxxxxx xxxxxxxx 1 × 105 xxxxx/xx x xxxxxxxxxxx xxxxx x 100 μx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx 96jamkové xxxxxxxx (xxxxx xxxxx). Xx xxxxxxxxxxx buněk xx dávkuje xx 100 μl xxxxxxx xxxxxxxx o hustotě 1 × 105 xxxxx/xx (1 × 104 xxxxx xx xxxxx). Pro xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx: jedna pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (-XXX) x xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (+XXX).
Xxxxx xx xxxxxxxx 24 x (7,5 % XX2, 37 °X), xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx x exponenciální xxxx.
1.7.3.2 Xxxxx den
Po xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xx promyje xxxxxxx 150 μl XXXX/XXX. Xxxxx se 100 μx XXXX/XXX obsahujících xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx nebo xxxxx rozpouštědlo (negativní xxxxxxxx). Xxxxxxxx xx 8 xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx v temnu xx xxxx 60 xxx. (7,5 % XX2, 37 °C).
K xxxxxxxxx části zkoušky x xxxxxxxx UVA xx buňky xxx xxxxxxxx teplotě xx xxxx 50 xxx. xxxxxxx přes xxxxx 96xxxxxxx xxxxxxxx UVA xxxxxxx x xxxxxxxxx 1,7 XX/xx2 (5 X/xx2. Xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxx víčkem, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx pro xxxxxxx xxx xxxxxxx XXX xx ponechají 50 xxx. (xxxx xxxxxxxx XXX) x temnu xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xx odstraní x xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX. XXXX/XXX se xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xx xxxx xxx (18-22 h) (7,5 % XX2, 37 °X).
1.7.3.3 Xxxxx xxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxxx pod xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinkem xxxxxxxx xxxxxxxx látky. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx záznamy xx xxx xxxxxxxxx cytotoxicity xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx neutrální xxxxxxx.
Xxxxx xx promyjí 150 μx předehřátého XXXX/XXX x xxxxxxxxx xxxxxx xx opatrně xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx 100 μx média XX x inkubuje xx 3 h xxx 37 °X xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x 7,5 % XX2.
Xx xxxxxxxx se xxxxxx XX odstraní x buňky se xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX. XXXX/XXX xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx (případně xxx xxxxxxxx odstředit x xxxxxxxx poloze).
Přidá xx xxxxxx 150 μl xxxxxxx připraveného xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxx, aby xx xxxxxxxxxx XX.
Xxxxxxxx xx xxxxxx 10 min. xxxxx xx třepačce, xxxxx xx NR x buněk xxxxxxxxx x nevytvoří xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx extraktu XX xxx 540 xx, xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx použije xxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (xxxx. XXXXX) x xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx analýzu.
2. XXXXX
2.1 Xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx
Xxxxx by xxxx xxxxxxx smysluplnou analýzu xxxxxxxxxx odpovědi xx xxxxxxxxxxx získané při xxxxxxx XXX/XXX nebo xxx xxxx. Xx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xx být xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Vzhledem x xxxx, že xx xxxxxxxx chemická xxxxx nemusela xxx xx do mezní xxxxxxxxxxx 100 μg/ml xxxxxx xxx experiment x temnu (-XXX) xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx po xxxxxxx (+XXX), může xxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx být v xxxx částech xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xx-xx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx kvality xxxxx. Xxxx-xx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (-XXX a +UVA) xxxxxxxxxxxx zjištěna, xxxxx xxxxxxx zkoušku x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx až xx xxxxxxxx koncentrace.
Ověření xxxxx pozitivního xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx. Negativní výsledky xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx chemická xxxxx xxxxxxxx xx dostatečně xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. X xxxxxxxx případech xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx jednou xxxx xxxx předběžnými experimenty xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx x výsledky xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx modelu xx xxxx být pro xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx změnit xxxxxxxxxxxxxx podmínky. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. X xxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx (jiné xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx ultrazvuku) xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx zkoušky. Xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx. Zkrácení xxxx xxxx xxx xxxxxx u chemických xxxxx xxxxxxxxx xx xxxx.
2.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx-xx xx možné, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 50 % xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx neutrální xxxxxxx (XX) (XX50). Xxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx nelineární xxxxxxx (xxxxxxx Xxxxxxxx funkcí xxxx xxxxxxxxxxx regresí) xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx metod xxxxxx proložení (14). Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx XX50 pro xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx vhodným xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx proložení. Xxx výpočet XX50 xxx popřípadě použít xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X takovém případě xx xxxxxxxxxx použít xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxx xxx x: xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx osy y: xxxxxxxxxxxxxxxxx), xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx bude xx xxxx transformaci xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx koncentraci xxxxx xxxxxxxx.
2.3 Xxxxxxxxx výsledků (xxxxxxxxxxx modely)
2.3.1 Předpovědní xxxxx — xxxxx 1: xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX)
Xxxxxxxx xxxx x xxxx xxxxxxxxx jak xxx xxxxxxx (+UVA), xxx xxx xxxxxxx (-XXX) získány xxxxx xxxxxx závislosti odezvy xx xxxxxxxxxxx, lze xxxxxxxxxxxx xxxxxx (PIF) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
(x) PIF = (XX50 (-XX)) / (XX50 (+XX))
Xxxxxxx XXX &xx; 5 předpovídá xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx hodnota XXX ≥ 5 xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxx látka xxxxxxxxxxx xxxxx xxx +XXX x xxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx -XXX, nelze hodnotu XXX xxxxxxxxx, xxxxxxx xxx x xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. V xxxxxxxx případech xxx xxxxxxxxx xxxxxxx "&xx; XXX", jestliže xx xxxxxxx -UV xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx koncentrace (Xxxx), x tato hodnota xx použije xxx xxxxxxx "&xx; PIF";
(b) &xx; XXX = (Xxxx (-XX)) / (XX50 (+XX))
Xxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx "&xx; XXX", xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx &xx; 1.
Xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx, vypočítat xxx xxxxxxx XX50 (-UV) xxx xxxxxxx XX50 (+ UV), svědčí xx o neexistenci xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx formální xxxxxxx "XXX = *1";
(X) &xx; XXX = *1 = (Xxxx (-XX)) / (Xxxx (+XX))
Xxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx "XXX = *1", xx xxxx hodnota xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx fototoxického xxxxxxxxxx.
X xxxxxxxxx x) x x) by měly xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciálu xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx dosažené ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in xxxxx.
2.3.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx 2: xxxxxxx světelný xxxxxx (XXX)
Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx novou verzi xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx EU/COLIPA (15) x xxx xxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx vitro x xxxxxxxxxx látek, xxxxx xx xxxxxxx xxxx XX filtry (13). Xxxxx xxxxx nemá xxxxxxx jako xxxxx XXX v xxxxxxxxx, xxx nelze xxxxxx xxxxxxx XX50. Xxxxx xxxxx využívá xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxxx xxxxx effect) (MPE), xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx koncentraci. Xxx použití modelu xxx xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (Berlín) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx volně x xxxxxxxxx.
2.4 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx výsledek xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx (XXX ≥ 5 nebo XXX ≥ 0,1) xxxxxxx, xx látka xx fototoxický xxxxxxxxx. Xxxxxxxx bylo xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxx 10 μx/xx, xx také pravděpodobné, xx látka xxxx xxxxxxx xx různých xxxxxxxxxxx podmínek xxxx xxxxxxxxx xx xxxx. Xx-xx pozitivního xxxxxxxx xxxxxxxx pouze xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, xxxxx xxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx další xxxxx. Xx xx xxxxx týkat údajů x xxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx látky x xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx. xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx in xxxxx.
Xxxxxxxxx výsledek xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro (XXX &xx; 5 nebo XXX < 0,1) xxxxxxx, xx látka xxxxxx xxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx fototoxická. V xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx až xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx chemická xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x fototoxicitu xx vivo xxx xxxxxxxx xx nepravděpodobnou. X případech, xxx xxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx odezvy xx xxxxxxxxxxx (EC50 +XX x XX50 -XX), xx interpretace xxxxx xxxxxx. Xxxx-xx xxxxxxx tomu xxxxxxxx xxxxxxxxx (+UV a -XX) x xxxx-xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxx na xxxxxxx menší xxx 100 μx/xx, není xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx látku xxxxxx x xxxx by xxx zvážena xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xx xxxxxxx xxxxxx lidské xxxx in xxxxx xxxx zkouškou xx xxxx).
3. XXXXXX
Xxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxx chemická látka:
- xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx XXX, xx-xx xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x čistota,
- fyzikálně-chemické xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx studie,
- xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx (EBSS xxxx XXX).
Xxxxx:
- xxx x xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxx xxxxxx, je-li xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx na XXX stanovená xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx
Xxxxxxxx podmínky x) — inkubace xxxx xxxxxxxx x xx xx:
- xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx XX2, teplota, xxxxxxx),
- délka inkubace (xxxxxxxxxx xxxx inkubací x po xx).
Xxxxxxxx xxxxxxxx b) — xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxx XX/XXX, xxx xxx něj,
- x xxxxxxx, že zkoušená xxxxxxxx látka xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxx x složení xxxxxxxxxx xxxxx (pufrovaný xxxxxxxxxxxx xxxxxx),
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx x) — xxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx zdroje xxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx propustnosti/absorpce použitého xxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxx),
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx,
- vzdálenost xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxx XXX x xxxx xxxxxxxxxxx, vyjádřená v xX/xx2,
- délka xxxxxxxx XX/XXX světlu,
- xxxxx XXX xxxxxx (xxxxxxxxx × čas), xxxxxxxxx x J/cm2,
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx během xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx x) — xxxxxxx XXX:
- xxxxxxx xxxxx XX,
- doba inkubace XX,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx, xxxxxxx),
- xxxxxxxx extrakce XX (extrakční xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxx použitá pro xxxxxxxxxxxxxxxxxxx odečet xxxxxxxxxx XX,
- xxxxx (xxxxxxxxxx) xxxxxx xxxxx, xx-xx xxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx, xx-xx použit.
Výsledky:
- životaschopnost xxxxx při xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx chemické xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx chemické xxxxx xxxxxx relativní xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) získané xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx +XXX x -XXX,
- xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx na koncentraci: xx-xx xx xxxxx, xxxxxxx hodnoty XX50 (+XXX) x XX50 (-XXX),
- xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx XXX/XXX x xxx něho, x to xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxx-xxxxxxxxxxx factor ) (XXX), xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx účinku (xxxx xxxxx xxxxxx) (XXX),
- xxxxxxxxxxx fototoxického xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x) — xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxxxx XX) xxxxxxxxx x neozářených buněk,
- xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu, střední xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx b) — xxxxxxxx xxxxxxxxx kontrola:
- xxxxxxx XX50 (+XXX), XX50 (-UVA) x XXX-xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx chemické xxxxx: xxxxxxx EC50 (+XXX), EC50 (-XXX) x PIF, střední xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
4. LITERATURA
(1) Xxxxxxxxx, H., Xxxxx, X., Xöxxxx, X., Xxxxxüxxxx, H. G., Xxxxxxx, S., Klecak, X., X'Xxxxxxxxxxx, H., Xxxxxxx, X., Lovell, X. X., Maurer, X., Xxxxxxxxxxx, X., Xxxxx, L., Pape, X., Pfannbecker, X., Xxxxxxxx, J., De Xxxxx, X., Xxxxxxxx, X., Willshaw, X. (1994), EEC/COLIPA project xx in xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx: First xxxxxxx obtained xxxx x Balb/c 3X3 xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, Xxxxxxxxxx in xxxxx 8, 793-796.
(2) Anon (1998), Xxxxxxxxx xx xxx scientific xxxxxxxx xx xxx 3T3 XXX XX xxxx (xx xx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx), Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx, Joint Xxxxxxxx Centre: XXXXX xxx XXXX/X/2, 3 Xxxxxxxx 1997, ATLA 26, 7-8.
(3) Xxxxxxxxx, X., Xxxxx, M., Xxxxxx, X., Xxxx, X. X. X., Xxxxxxxxxx, G., De Xxxxx, X., Xxxxxüxxxx, X. G., Clothier, X., Xxxxxxx, X., Xxxxxxxxx, X., Liebsch, X., Lovell, X. X., Xxxxxx, X., Xxxxxxxxxxxxx, U., Potthast, X. X., Xxxxx, X., Sladowski, D., Xxxxxxxx, X., Brantom, X. (1998), XX/XXXXXX "Xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx", xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxx XX (xxxxx trial), xxxx 1: the 3X3 XXX xxxxxxxxxxxxx xxxx, Xxxxxxxxxx xx Xxxxx 12, 305-327.
(4) XXXX Xxxx Xxxxxxxxxx Programme, XXX/XX/XXXX/XX(96)9: Xxxxx Xxxxxx xx xxx OECD Xxxxxxxx on Harmonisation xx Xxxxxxxxxx and Xxxxxxxxxx Criteria of Xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx Xxxx Xxxxxxx, XXXX Publications Xxxxxx, Xxxxx, 1996.
(5) Xxxxxx, X. X. (1993), X scheme xxx in xxxxx xxxxxxxxx of xxxxxxxxxx xxx photoallergenic xxxxxxxxx, Xxxxxxxxxx in Xxxxx 7, 95-102.
(6) Xxxxxxxxxx, X., Prino, G. (1972), Xxxx xx xxx xxxxxxxxxxxx substances, Xxxxxxxx progress xx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx chemistry Xxx. 3 Xxxx 1, Xxxxx Holland Publishing Xx, Xxxxxxxxx, XX–XXXX.
(7) Xxxxxxxxx, X., Xxxxxx, X. W., Xöxxxx, X., Xxxxxxx, B. X., Xxxxxx, X., Xxxxxxx, M. X., Xxxx, X. J. X., Sapora, X., Xxxxxxxxx, D. (1994), Xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx: Xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xx XXXXX xxxxxxxx 2, XXXX 22, 314-348.
(8) Xxxxxx, J. D. (1989), Xxxxxxxxxxxxxxxxxx. V: Xxx xxxxxxx of xxxxxxxxxxxx, (X. X. Xxxxx, xx.), Xxxxxx Xxxxx, New York, 2. vyd., 79-110.
(9) Xxxxxxxxxxx, X., Xxxxxxx, X. X. (1985), Xxxxxxxx determination xx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx, Toxicol. Xxxx. 24, 119-124.
(10) Xxxxxxx, X. A., Xxxxxx, X. G., Xxxxxxxxxx X. (1996). X: Animal xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, Xxxxxxxxxxxxxxxxx, (X. X. Xxxxxxxx, H. X. Xxxxxxx xxx.), Xxxxxx &xxx; Xxxxxxx, Xxxxxxxxxx XX, 5. xxx., 515-530.
(11) Xxxxxxx, X. X., Xxxxxx M. (1987), Xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxx xxxxx: xxxxxxxxx of xxx xxxxxxxx cytotoxicity xx the middle xxxxxxxxxxx, near xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xx sunlight on xxxxxxxxx keratinocytes, Xxxxxx Xxx. 47, 1825-1829.
(12) XXXXX/XXXXX/XXXXXX, Xxxxxxxx Xxxxxxxxx Xxxxxxxxx: Balb/c 3X3 XXX Xxxxxxxxxxxxx Xxxx, xxxxxxxx 23. xxxxxxxx 1997 X. Xxxxxxxxx, xxxxxxxxx 6. xxxxxx 1998 xxxxx Xxxxxxxxxx Xxxx xx xxx XX/XXXXXX xxxxxxx "Xx Xxxxx Xxxxxxxxxxxxxxx".
(13) Xxxxxxxxx, X., Xxxxx, X., Xxxxxx, X., Xxxx, X. J. W., Xx Xxxxx, X., Xxxxxüxxxx, H. X., Xxxxxxxxx, X., Liebsch, X., Lovell, X. X., Xxxxxxxxxxxxx (1998), X Xxxxx xx xxx Xxxxxxxxxx Potential xx XX Filter Xxxxxxxxx xxxx Annex XXX of the XX Directive 76/768/XXX xx xxx 3X3 XXX Xx Xxxxx Xxxxxxxxxxxxx Xxxx, XXXX 26, 679-708.
(14) Xxxxxüxxxx, X. X., Xxxxxxxx, X. (1995), Mathematical xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx, Xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx Xxxxxxx, 3, 127-138.
(15) Xxxxxüxxxx, X. X. (1997), A xxxxxxx xxxxxxx of xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx-xxxxxxxx xxxxxx xxx xxx xxx xxx predicting the xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, ATLA 25, 445-462."
"Xxxxxxx
&xxxx;
[1] Xxxxx xxxxxxxxxxx lze xxxxxx x xxxxxxxxxx (12).