Xxxxxxxx Xxxxxx 2000/33/XX
xx xxx 25. xxxxx 2000,
xxxxxx se xx xxxxxxx sedmé přizpůsobuje xxxxxxxxxxx pokroku xxxxxxxx Xxxx 67/548/XXX x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx týkajících xx xxxxxxxxxxx, balení x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx [1]
(Xxxx x xxxxxxxx xxx XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx na xxxxxxxx Xxxx 67/548/XXX xx xxx 27. června 1967 x sbližování xxxxxxxx x správních xxxxxxxx týkajících xx xxxxxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx látek [2], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x Xxxx 1999/33/XX [3], a xxxxxxx xx xxxxxx 28 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx:
(1) V xxxxxxx V směrnice 67/548/XXX se stanoví xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx vlastností, xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx látek x přípravků. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx pokroku.
(2) Xxxxx xx. 7 xxxx. 2 xxxxxxxx Xxxx 86/609/XXX xx xxx 24. xxxxxxxxx 1986 x sbližování xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx států xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxxxx x jiné xxxxxxx xxxxx [4] xxxxx xxx xxxxx, xxx xxxx xx xxx použito xxxxx, xxxxxxxx, je-li rozumně x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx vědecky uspokojivá xxxxxx.
(3) Komise xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx X xxxxxxxx 67/548/XXX xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, x cílem xxxxxxxxxxx xx pro xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx podle xx. 3 odst. 1 xxxxxxxx 67/548/XXX.
(4) Xxxxxxxx této směrnice xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx,
XXXXXXX XXXX SMĚRNICI:
Xxxxxx 1
Text xxxxxx X a XX xxxx xxxxxxxx se xxxxxx xx části X xxxxxxx V xxxxxxxx 67/548/XXX.
Xxxxxx 2
1. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 1. xxxxx 2001. Xxxxxxxxxx x nich xxxxxxx Xxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx státy xxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxx směrnici nebo xxxx xxx takový xxxxx učiněn při xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx odkazu xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxx xxxxx xxxxx Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx právních xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x oblasti působnosti xxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxx tabulku mezi xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ustanoveními.
Článek 3
Xxxx směrnice xxxxxxxx v platnost xxxxxx xxxx po xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx společenství.
Xxxxxx 4
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X Bruselu xxx 25. xxxxx 2000.
Xx Xxxxxx
Xxxxxx Xxxxxxxöx
xxxxxx Xxxxxx
[1] Přijato xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx.
[2] Úř. věst. 196, 16.8.1967, x. 1.
[3] Xx. věst. X 199, 30.7.1999, x. 57.
[4] Úř. věst. X 358, 18.12.1986, x. 1.
XXXXXXX X
"X.40 XXXXXXX XXXXXX XX XXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxx zkoušky xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx (XXX) x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxx Xxxxxxxxx střediskem pro xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx (XXXXX, Xxxxxxxx výzkumné xxxxxxxxx Evropské Komise) (1, 2, 3) xxxxxxxxx xxxx vědecky xxxxxx. Xxxxxxxxx studie XXXXX xxxxxxxxx, xx xxxxx zkouškami xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx. Protokol x xxxxxxx založené xx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxx umožnil xxxxxxx rozlišit xxxxxx xxxxxxxx účinků (známé xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, X 35 x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx poleptání kůže, X 34) (2). Xxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxx; xxxxx xxxxxxx, xxxxx má xxx xxxxxxx, xxxxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx uživatele.
Viz xxxx Xxxxxx xxxx, část X.
1.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxx poškození xxxx xx xxxxxxxx zkoušeného xxxxxxxxx.
1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxx body 1.5.3.4 x 1.7.2.3.
1.4 Xxxxxxxx zkušební metody — xxxxxxx XXX xx kůži potkana
Zkoušený xxxxxxxx je xx xx 24 x xxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx usmrcených xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxxxxxxxx schopností způsobit xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx funkce xxxxxxxx vrstvy (stratum xxxxxxx), xxxxx xx xxxxxx jako xxxxxxx xxxxxxxxx TER pod xxxxxxxx xxxxxx (5 xΩ) (4, 5). Xxxxxxxx x nedráždivé xxxxx nesnižují TER xxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky (definice xxx literatura (6)) xxx xxxxxxx stupeň xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx se xxxxxxx xxxxxxxx falešně xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx pro xxxx xxxxx chemických látek (2, 7).
1.5 Popis xxxxxxxx xxxxxx — xxxxxxx TER na xxxx xxxxxxx
1.5.1 Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx x mladých (20 — 23 xxxxxxx) xxxxxxx (Xxxxxx xxxx srovnatelný kmen). Xxxxxxx x boční xxxx se opatrně xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xx poté xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxxxxx, penicilin, xxxxxxxxxxxxxx x amfotericin x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx bakterií). Zvířata xx xxxxx x xxxxxx xxx xx xxxxxx omytí xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xx xx 3 dnů (x xxxxxxxx kůže xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx starší xxx 31 dnů).
1.5.2 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx usmrtí. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx opatrně odstraní xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx tuk xx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx (PTFE) xxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxxx byla x xxxxxxxx s xxxxxxxxx. Xxxx konec xxxxxxxx xx těsně přetáhne xxxxxxx O-kroužek, xxx xxxx xxxx upevněna, x xxxxxxxx xxxxx xx ořízne. Xxxxxxx xxxxxxxx x X-xxxxxxx xxxx uvedeny xx xxxxxxx 1. Pryžový X-xxxxxxx xx teflonové xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx pokryje xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx svorky xx xxxxxx do xxxxxxxxxxx komory xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx (154 mM) (xxxxxxx 2).
1.5.3 Xxxxxxxx postup
1.5.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx materiálu
Kapalná xxxxxxxx xxxxx (150 μx) xx xxxxxxxx xx epidermis uvnitř xxxxxxxx (xxx. 2). Xxx zkoušení xxxxxxx xxxxxxxxx xx použije xxxxxxxxxx množství xxx, xxx byla xxxxxxx xxxx epidermis. Poté xx xx xxxxxx xxxxx látky xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx (150 μx) x trubička xx xxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx a xxxx xx mělo xxxxx x maximálnímu xxxxx. U xxxxxxxxx xxxxx toho xxxx xxx dosaženo xxxxxxxx xx xx 30 °X, xxx se xxxxxxxx látka xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx materiál nebo xx prášek.
Ke xxxxxxx xxxxx xxxxx se xxxxxxx xxx terčíky xxxx. Zkoušená látka xx xxxxxxxx xx xxxx 24 h (xxx xxxx xxx 1.5.3.4). Zkoušená xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx x teplotě xxxxxxx 30 °X. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx x trubičce xxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xx 30 °X.
1.5.3.2 Xxxxxx XXX
XXX xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx střídavý xxxxx (např. AIM 401 xxxx 6401 xxxx xxxxxxxxxxxx). Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx kůže sníží xxxxxxxx dostatečného xxxxxx 70 % xxxxxxxx xxx, xxx byla xxxxxxxxx xxxxxxx. Po xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx odstraní xxxxxxxxxxx xxxxxxx x tkáň xx zvlhčí xxxxxxxx 3 ml xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx (154 xX). Xxxxxxxxx xxxxxx xx umístí xx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xx účelem xxxxxx odporu x xΩ/xxxxxx xxxx (obrázek 2). Rozměry xxxxxxxx x xxxxx exponovaných xxxxx xxxxxxxx pod xxxxxxxxxxxx jsou xxxxxxx xx obrázku 1. Xxxxxx xxxxxxx (silné) xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx odporu xxxxxx x horní xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx receptorové komory xxx, xxx xxxxxxxxx xx dně xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx teflonové trubičky xx xxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxx 1), xxxxx xxxx xxxxxxxxxx má xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xx xxxxx xx xxxxxxxx, že xx-xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx než 20 xΩ, xxxx xx xxx způsobeno xxxxxxx xxxxxxxx látky xx xxxxxxxxxxx straně xxxxxxx xxxx. X xxxxxxxxxx xxxx vrstvy xx xxx xxxxxxx xxxx. xxx, xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx x 10 x xx protřepává. Xxxxxx xxxxxx hořečnatého xx xxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxxx síranem hořečnatým.
Výsledky XXX (xxxxxxx hodnoty) xxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontroly xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx x přístroje xxxx doporučeny xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx rozpětí xxxxxx:
|
Xxxxxxxx |
Xxxxx |
Xxxxxxx odporu (xΩ) |
|
Xxxxxxxxx |
10X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (36 %) |
0,5–1,0 |
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxx xxxx |
10–25 |
1.5.3.3 Xxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xxxx-xx xxxxxxx XXX xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx zkoušené látky xxxxx xxxx xxxxx 5 xΩ, lze xxxxxxx na xxxxx xxxxxxxxx průniku xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx (2).
1.5.3.3.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxxxxx stranu xxxxxxx xxxxxxx kůže xxxxxxxx na 2 x 150 μx 10 % xxxxxxx xxxxxxx sulforhodaminu X x xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx kůže se xxxx přibližně 10 x xxxxxxx xxxxxxx xxxx o xxxxxxx xxxxxxxx teplotě, xxx xx xxxxxxxxxx veškeré xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx kůže se xxxxxxx xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xx do xxxxxxxx (xxxx. 20 xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx scintilační xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx deionizovanou vodu (8 xx). Lahvičky xx xxxxx 5 xxx. protřepávají, aby xx odstranilo xxxxx xxxxx barvivo. Tato xxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxx zopakuje, x xxxx xx terčíky xxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 5 xx 30 % xxxxxxx (x/X) natrium-dodecyl-sulfátu (SDS) x xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xx xxxx xxx xxx 60 °C. Xx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx kůže xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx 8 xxx. xxx 21 °C (xxxxxxxxx odstředivá xxxx ˜ 175). 1 xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx 4 xx 30 % (x/X) roztoku XXX x xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxx (X) xx měří xxx xxxxxxxxx 565 nm.
1.5.3.3.2 Xxxxxxx xxxxxx barviva
Obsah xxxxxxx sulforhodaminu X xx xxxxxx xxxx xx vypočte x xxxxxx A (xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X při 565 xx = 8,7 × 104; molekulová xxxxxxxx = 580). Xxxxx xxxxxxx sulforhodaminu X xx xxxxxxx xxx každý xxxxxx xxxx x poté xx xxxxxxx jeho xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx výsledků xxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxxx, xxxxx hodnoty xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx spadají xx xxxxxxxxxxxx rozmezí xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx x přístroje xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx doporučeny xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx obsahu xxxxxxx:
|
Xxxxxxxx |
Xxxxx |
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (μg/terčík xxxx) |
|
Xxxxxxxxx |
10X xxxxxxxx chlorovodíková (36 %) |
40-100 |
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxx voda |
15-35 |
1.5.3.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx xxx xxxxxx aplikovat xx xxxxxxx xxxx na xxxxxx dobu (xxxx. 2 xxxxxx), xxx xx identifikovaly xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx však xxxxxxx, xx xxxxxxxxx TER xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky x xxxxxxxx zkoušených xxxxxxxxxx xxxxx při xxxxxx xxxxxxxx na xxxxxx xxxx xx xxxx 2 hodin (2), xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx správnou xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx 24hodinové xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx x rozměry xxxxxxxxxx zařízení x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx postup xxxxx xxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx XXX. Práh 5 Ω pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx z údajů xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxx. Doporučuje xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx řady xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vybraných x xxxxxxxxxx látek použitých xx xxxxxxxxx xxxxxx (3).
1.6 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx — stanovení xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxxxx materiál xx xxxxxxxxx xx xx xxxx 4 hodin xx xxxxxxxxxxxx model xxxxxx kůže xxxxxxxxxxx x rekonstruované xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx účinky xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx způsobit xxx specifikované expoziční xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx xxxx. xxxxxxxx zkoušky xxxxxxx XXX) xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx je založena xx hypotéze, xx xxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx, xxx xxxx xxxxxxx proniknout xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx xxxx xxxxx) x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx x hlubších xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7 Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx — xxxxxxxxx xxxxxx modelu xxxxxx xxxx
1.7.1 Xxxxxx lidské xxxx
Xxxxxx lidské kůže xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx zdrojů, xxxx xxxx splňovat xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a vrstvu xxxxxx buněk pod xx. Bariérová xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. Xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx látkám, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Musí xx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontrolní xxxxx. xxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx např. redukcí XXX, xx. měřením xxxxxxx xxxxxxxxxx X) xx xxxxxxxx negativní xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxx xxxxx. Podobně xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx po xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxxx xxxxx (xx xxxxxxxx x životaschopností xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) xxxx xxx xx xxxxxxxxxxxxxxx mezích. Nejdůležitější xxxxxx xx, xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx validaci (2).
1.7.2 Xxxxxxxx xxxxxx
1.7.2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx materiálu
U xxxxxxxxx materiálů xxxx xxx xxxxxxxxxx dostatečné xxxxxxxx xxxxxxxx látky, xxx pokrylo xxxxxx xxxx (xxxxxxxxx 25 μx/xx2). X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx dostatečné xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, aby xxxxxxx kůži, x xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx, xxx xxx zajištěn xxxxx xxxx s xxxx; xxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxxx je použitelná xxx široké xxxxxxxx xxxxxxxxxx látek (2). Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx musí xxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx kůže opatrně xxxxxxxxx fyziologickým xxxxxxxx.
1.7.2.2 Xxxxxx životaschopnosti buněk
K xxxxxx životaschopnosti buněk xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx redukce XXX, xxx níž xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (2). Xxxxxx kůže xx xxxxxx do xxxxxxx XXX x koncentraci 0,3 xx/xx xxx xxxxxxx 20-28 °X xx xxxx 3 xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx X xxx xxxxxx xxxxx 545 xx 595 nm.
1.7.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx model xxxx x přesné zaznamenání xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx atd. budou xxx velký vliv xx výsledky xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx se, xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx model byly xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx ve validační xxxxxx XXXXX (3). Xx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx x mezinárodními xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx laboratoře x xxxx laboratořemi xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Metoda xxxx splňovat alespoň xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx vědeckou validitu (2) x výsledky xxxxxx validační studie xxxx být xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx časopise x předcházející odbornou xxxxxxx.
2. ÚDAJE
2.1 Zpracování xxxxxxxx
2.1.1 Xxxxxxx XXX xx xxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx (kΩ) pro xxxxxxxx xxxxxxxx, pozitivní x xxxxxxxxx kontrolu x xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx referenční xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx x duplicitních nebo xxxxxxxxxxx experimentech, o xxxxxxxxx xxxxxxxxx x x odvozené xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxx.
2.1.2 Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxx X x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx a pro xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx látky xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx experimentech, x xxxxxxxxx hodnotách x x odvozené xxxxxxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxx.
2.2 Xxxxxxxxx x interpretace výsledků
2.2.1 Xxxxxxx TER xx xxxx xxxxxxx
Xx-xx xxxxxxx XXX dosažená pro xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 5 xΩ, xxxx xxxxx žíravá. Xx-xx xxxxxxx TER xxxxx nebo xxxxx 5 kΩ x xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx látku xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx neutrálních xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxx XXX xxxxx xxxx xxxxx 5 xΩ, xxx provést xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xx-xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxx nebo xxxxx střednímu obsahu xxxxxxx v terčíku xxxx získanému xxxxxxxx xxx xxxxxxx 36 % HCl xxxxxxx xxxxxxxxx kontroly, xx xxxxxxx xxxxxxxx látky xxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxx xx tedy xxxxxx. Xx-xx střední xxxxx barviva v xxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx získaný xxxxxxxx xxx xxxxxxx 36 % XXx, xx xxxxxxx falešně xxxxxxxxx, x látka xxxx xxxx xxxxxx.
2.2.2 Zkouška x modelem xxxxxx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxx X xxx xxxxxxxxx kontrolu xxxxxxxxxxx 100 % xxxxxxxxxxxxxxx buněk; hodnoty xxxxxxxxxx X xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx v procentech xxxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx procentuální xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxx (nebo xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx leptavých xxxxxx), xxxx xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xx xx xxxxxx (2).
3. XXXXXX
Xxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx alespoň xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxx látka:
- identifikační xxxxx, fyzikální xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx informace xx xxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx, pokud xxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxx:
- hodnoty xxxxxx (xxxxxxx XXX) xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx (zkouška x modelem xxxxxx xxxx) xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx referenční xxxxxxxx látky xxxxxx xxxxx o duplicitních xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx hodnotách, xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
4. XXXXXXXXXX
(1) XXXXX (1998), ECVAM Xxxx &xxx; Xxxxx, XXXX 26, 275-280.
(2) Xxxxxx, X. H., Archer, X. E. X., Xxxxx, X., Botham, X. X., Curren, X. X., Xxxx, X. X., Esdaile, X. X., Xxxxxxxxxx, X-X., Xxxxxxx, X. (1998), Xxx XXXXX xxxxxxxxxxxxx validation xxxxx xx in xxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx. 2. Xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx by xxx Management Xxxx, Xxxxxxxxxx xx vitro 12, 483-524.
(3) Barratt, X. D., Xxxxxxx, X. G., Fentem, X. X., Gerner, X., Xxxxxx, X. X., Xxxxx, A. X. (1998), Xxx XXXXX xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxx xxxxx xxx xxxx corrosivity. 1. Xxxxxxxxx and xxxxxxxxxxxx xx the xxxx xxxxxxxxx, Toxicology xx xxxxx 12, 471-482.
(4) Xxxxxx, G. X. X., Xxxxxxxxx, X. X., Rhodes, X. (1986), An xx xxxxx skin xxxxxxxxxxx xxxx — xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx, Xxxx Xxxx. Toxicol. 24, 507-512.
(5) Xxxxxx, P. X., Xxxx, X. X., Xxxxxxx, X., XxXxxx, J. X., Xxxxxxxxx, D. X., Xxxxxxx, X., Cheeseman, X., Xxxxxxx, D. X., Xxxxxxx, J. (1992), Xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx: results of xx xxxxxxxxxxxxxxx trial, Xxxxxxxxxx xx vitro 6, 191-194.
(6) Worth, X. P., Xxxxxx, X. X., Balls, X., Botham, P. X., Xxxxxx, X. X., Xxxx, X. X., Xxxxxxx, D. X., Xxxxxxx, M. (1998), An xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx XXXX xxxxxxx xxxxxxxx xxx skin corrosion, XXXX 26, 709-720.
(7) Xxxxxx, X. X., Xxxxxxxxxxx, X., Xxxxxxx, X. D., Curren, X. D., Xxxxxxx, X. J., Xxxxxxx, X. R., Xxxxxx, X. X., Xxxxxxxxxx, X., Lewis, R. X., Xxxxxxx, M., Xxxxxxxx, P., Xxxxxxx, X., Xxxxx, X., Xxxxxxx, X. X., Xxxxxxxx, X., Xxxxxx, X. P., Xxxxx, X. 1995), X xxxxxxxxxxxxx xxxxx on xx vitro xxxx xxxxxxxxxxx testing. Xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xx XXXXX xxxxxxxx 6, XXXX 23, 219-255.
Xxxxxxx 1
Xxxxxxx 2"
&xxxx;
XXXXXXX II
"B.41 XXXXXXXXXXXX — XXXXXXX FOTOTOXICITY 3X3 XXX XX XXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxx určitým xxxxxxxxx xxxxxx x následné xxxxxxxx světlu nebo xxxxxxx xxxxxxxx ozářením xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx látky.
Informace xxxxxxx ze zkoušky xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx vitro slouží x xxxxxxxxxxxx fototoxického xxxxxxxxxx xxxxxxxx látky, xx. existence xxxx xxxxxxxxxxx možného xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx látky xx spojení x xxxxxxxx XX xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx světlu.
Protože xxxxx zkoušky in xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx a xx xxxxxxxx xx xxxx, x rovněž xxxxxxxxxx, xxxxx působí xx nanesení xx xxxxxxx jako fotoiritanty.
Zkouška xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx EU/COLIPA v xxxxxx 1992 — 1997 (1, 2, 3) x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx vitro x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx. X xxxx 1996 doporučila xxxxxxxx xxxxxxx OECD xxxxxxxx postupných xxxxxxx xx xxxxx pro xxxxxxxxxx fototoxicity (4).
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx byly porovnány x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx vivo x xxxxxx x x xxxxxxx a xxxxxxx xx xxxxxxx pro xxxxxxxxx těchto účinků xxxx vynikající. Xxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, které xxxxx xxxxxxx z xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx látky x xxxxxx, např. xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx látek, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx fototoxicity 3X3 XXX in vitro xxxxxxxxx xxxxxxxx. Zkouška xxxx není vyvinuta x xxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx v xxxxxxx.
1.2 Definice
Intenzita xxxxxxx: xxxxxxxxx ultrafialového xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx povrch, xxxxxx xx W/m2 xxxx xX/xx2.
Xxxxx světelného xxxxxx: xxxxxxxx (intenzita × xxx) xxxxxxxxxxxxxx (XX) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx povrch, xxxxxxxxx x joulech (X × s) xx xxxxxx povrchu, xxxx. X/x2 nebo X/xx2.
Xxxxxx xxxxx UV xxxxxx: označení xxxxxxxxxx xxxxxx XXX (Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx xx x'Xxxxxxxxx): XXX (315400 nm), XXX (280315 nm) x XXX (100280 xx). Xxxxxxxxx xx xxxxxx jiná označení: xxxx xxxxxxx xxxx XXX x UVA xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 320 nm x xxxxx XXX xxxx být xxxxxxxxx xx XX-X1 x XX-X2 x xxxxxxx xxxxx 340 nm.
Životaschopnost xxxxx: parametr, kterým xx měří xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. příjem xxxxxxxxx xxxxxxx neutrální červeně xx buněčných xxxxxxxx) x xxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx x na xxxxxxxx xxxxxxxxxx zkoušky xxxxxxxx x celkovým xxxxxx a/nebo xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx životaschopnost xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx x poměru x xxxxxxxxxx kontrolám (xxxxxxxxxxxx), xxxxx prošly xxxxx postupem xxxxxxx (x XX, xxxx xxx XX), ale xxxxxx xxxxxxxxxx zkoušeným xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxx model: xxxxxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx předpověď xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxxx xxxxxxxx lze xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx fototoxicity 3T3 XXX in vitro xx předpověď xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx XXX a xxxxxxxx XXX.
XXX (xxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxx — xxxxxxxxxxxx xxxxxx): xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx účinných xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (XX50) xxxxxxxx xxxxx, x xx xxx necytotoxickém xxxxxxx XXX/XXX xxxxxxx (+ UV) a xxx xxxx (-UV).
MPE (xxxx photo xxxxxx — xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx): xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx z matematické xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx získaných xxx xxxxxxxxxxxxxx ozáření XXX/xxx xxxxxxx (+ XX) x xxx xxxx (-XX).
Xxxxxxxxxxxx: xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, vyvolaná xx první expozici xxxx xxxxxxx chemickým xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx po systémovém xxxxxx chemické xxxxx.
Xxxxxxxxxxx: xxxxx úroveň xxxxx "xxxxxxxxxxxx", xxxxx se xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxx xx expozici chemickým xxxxxx (xxxxxxx nebo xxxxxx). Tyto xxxxxxxxxxx xxxxxx vedou xxxx x nespecifickému xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx).
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx aplikaci chemické xxxxx x xxxxxx x xxxxx vyžaduje xxxxxxxx xxxx jeden xxxx xxx xxxxx xxxx xxx, xxx xxx xxxxxx kůže xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx: genotoxická xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx je xxxxxxxx po xxxxxxxx xxxxx negenotoxické dávce XX/XXX xxxxxx a xxxxxxxxxxxxx chemické xxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx látky. Xxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xx používá x xxxxxxx, xxx xx xxxxxx tumoru xxxxxxxxxx UV zářením xxxxxxxx chemickou xxxxxx.
1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx být souběžně xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx, xx pro xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xxxxxxxxxx použít xxxx xxxxxxxxxx chemické xxxxx xxxxx z xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx předložené xxxxxx (1, 3, 13).
1.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxx byly xxxxxxxxxxx x mnoha xxxx xxxxxxxxxx xxxxx (5, 6, 7, 8). Xxxxxx jediným xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Podle prvního xxxxxx xxxxxxxxxx (Xxxxxxxxx-Xxxxxxxx xxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx by xxxx mělo xxx xxxxxxxxx XX/XXX xxxxxxxxx xxxxxxxx zkoušené chemické xxxxx (xxxx. xxxxx Xxxxxxxx OECD 101). Xx-xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx než 10 l.mol-1.cm-1, xxxxxxxx xxxxx nemá xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx vitro nebo xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (dodatek).
1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx absorpce xxxxxx (chemickým) chromoforem xxxx x fototoxické xxxxxx (7). Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU in xxxxx xx proto xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx látky xxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx dávce XXX/XXX xxxxxx a xxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xx v xxxx xxxxxxx vyjádřena xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx neutrální xxxxxxx (XX) (9) 24 xxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx látky x xxxxxxx.
Xxxxx Xxxx/x 3X3 xx 24 x xxxxxxxxx, aby xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Dvě 96xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxx 1 x xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látek. Poté xx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx exponována xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx XXX/XXX xxxxxx 5 J/cm2 XXX (+ UV xxxxxxxxxx), xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx (-UV xxxxxxxxxx). U obou xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx nahradí xxxxxxxxxxx xxxxxx x xx xxxxxxx 24 x xxxxxxxx xx xxxxxxx životaschopnost xxxxxxxxx 3xxxxxxxxx příjmem neutrální xxxxxxx (XXX). Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x procentech xxxxxxxx x neexponované xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxx xxxxxx z xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx předpověď fototoxického xxxxxxxxxx xx porovnají xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx při ozáření (+ XX) x xxx xxxxxxx (-UV), xxxxxxx při xxxxxxx XX50, xx. xxx xxxxxxxxxxx způsobující 50 % xxxxxx buněčné xxxxxxxxxxxxxxxx ve srovnání x xxxxxxxxxxxxxx kontrolami.
1.6 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx XXX, xxxxxxxxx xxxxx: citlivost xxxxx xx XXX xx xxxx být pravidelně xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxx intenzitě xxxxxxx ke xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx, příští xxx xx xxxxx xxxxxx XXX xxxxxx 1 xx 9 X/xx2 a xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx se xxxxxxx x xxx xxxxxxx xxxxxxxx XXX. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxx životaschopnost xx ozáření 5 X/xx2 xxxxx xxx 80 % životaschopnosti xxxxxxxx udržované x xxxxx. Tato xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx kontroly xx XXX xxx xxxxxxxxxx zkoušce: zkouška xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx negativní xxxxxxxx (xxxxx x XXXX (Xxxxxx fyziologický xxxxxx) x 1 % xxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx 1 % xxxxxxxxx (XxXX)) xxxx bez xxxx xxxxxxxx xxx + XXX xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx 80 % xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx buněk x xxxxxx rozpouštědle xxx souběžném experimentu x xxxxx (-XXX).
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (A540 NRU) xxxxxx x extraktu XX xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxx 1 × 104 buněk xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx zdvojnásobení (doubling xxxx). Zkouška splňuje xxxxxxxxx přijatelnosti, jestliže xxxxxxx hodnota X540 XXX xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx ≥ 0,2.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx: xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx fototoxická xxxxxxxx xxxxx. Při xxxxxxxxx xxxxxx XX/XXXXXX xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx kontrola xxxxxxxxxxxxx (XXX), a xx xxxx xxxxxxxxx. Xxx XXX xxxxxxxx podle xxxxxxxxxxxx postupu xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX in xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxx XXX xxxxxxx (+ XXX): EC50 = 0,1 až 0,2 μx/xx, xxx XXX neozářený (-UVA): XX50 = 7,0 xx 90,0 μg/ml. Xxxxxxxxxxxx faktor (XXX), xx. posun hodnoty XX50, by xxx xxx alespoň 6.
Xxxxxxx XXX xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx kontroly xxxx xxxxx fototoxické xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx typu nebo xxxxxxxxxxxx hodnocené xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx být xx xxxxxxx dosavadních xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XX50 x PIF xxxx XXX (xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx).
1.7 Xxxxx xxxxxxxx metody
1.7.1 Xxxxxxxx
1.7.1.1 Xxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx permanentní xxxx xxxxx fibroplastů — Balb/c 3T3, xxxx 31 — xxx z xxxxx XXXX, xxxx z xxxxx ECACC x xx xxxx xxxxxxxxxx. Xxxx buňky nebo xxxxxxx linie xxxxx xxx při xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxx kultivační xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, ale xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, x měly xx být použity xxxxx xxxxx, xxxx-xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx XX xxxxxxx x počtem xxxxxx, xxxx by být xxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3X3 z xxxxxx x nejnižším xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxx xxx xxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx, xxx byla xxxxxxxxx buněk Balb/c 3X3 xx XXX xxxxxxxxxx kontrolována xxxxxxxx xxxxxxxx jakosti popsaným x této xxxxxxxx.
1.7.1.2 Xxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx použita xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x inkubační podmínky. X buněk Xxxx/x 3X3 se xxxxx x DMEM (Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxxx media) xxxxxxxxx 10 % xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, 4xX glutaminem, xxxxxxxxxxx x streptomycinem x xxxxxxxx xx vlhčené xxxxxxxxx xxx 37 °X/7, 5 % XX2. Xxxxxxx xxxxxxxx xx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxx xxxxxxx cyklus xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx linie.
1.7.1.3 Xxxxxxxx kultur
Buňky xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx kultur xx nasadí xx xxxxxxxxxxxx média xx xxxxxx hustotě a xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx použitím xx zkoušce fototoxicity 3X3 NRU in xxxxx.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx buňky xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxx nedosáhly xxxxxxxxxx xx konce zkoušky, xx. do xxxxxxxx, xxx xx xx 48 x xx xxxxxxxx stanovována životaschopnost. Xxx xxxxx Xxxx/x 3X3 xxxxxxxxxxx v 96xxxxxxxxx destičkách xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 1 × 104 xxxxx xx xxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx stejným xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx 96xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx podrobeny celému xxxxxxx xxxxxxx za xxxxxxxx xxxxxxxx kromě xxxx, kdy xx xxxxx x destiček xxxxxxx (+UVA/VIS) x xxxxx xx udržována x xxxxx (-XXX/XXX).
1.7.1.4 Xxxxxxxxxxx aktivace
Zatímco xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxx zkouškách xx xxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx genotoxického x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, není x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx žádná chemická xxxxx, pro xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xx vivo xxxx xx vitro xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx xxx za xxxxxxxx xxx xx vědecky xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx systémem xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.7.1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx/xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx být čerstvě xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx-xx xxxxx k xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx se xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx. v Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx roztoku (XXXX) xxxx xx fyziologickém xxxxxxx x fosfátovým xxxxxx (PBS), který xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x pH xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx rozpustností xx vodě by xxxx být rozpuštěny xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 100násobek požadované xxxxxxx koncentrace x xxxx xx měly xxx xxxxxxx x xxxxxx 1:100 xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx se xxxxxxxxxxxx, musí xxx xxxxxxxx v konstantní xxxxxxxxxxx 1 % xxx. xx všech xxxxxxxxx, xx. v xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx zkoušené xxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx rozpouštědly xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) a xxxxxxx (XxXX). Xxxxx xxx použita xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxx), xxx xxxx xx xxx pečlivě xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx. xxxxxx xx xxxxxxxxx chemickou xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx.
Xx-xx třeba, xxxx xxx xxx xxxxxxxxx rozpouštění použito xxxxxxx a/nebo xxxxxxxxx x/xxxx zahřátí na 37 °C.
1.7.1.6 Xxxxxxx XX xxxxxxx/xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx: xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x vhodné xxxxxxxx xx kritickým xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx v xxxxx XXX x xx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx (7, 10), xxxxxxx xxxxxx x xxxxx XXX je xxxx xxxxxxxxxx x xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, přičemž jeho xxxxxxxxxxxx vzrůstá mezi 313 xx x 280 nm 1000xxxx (11). Xxxxxxxx pro xxxxx vhodného světelného xxxxxx by xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx požadavek, xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx světlo x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx látka xxxxxxxxx, x xxx xxxxx světelného xxxxxx (xxxxxxxxxxx xx přijatelnou xxxx) byla xxxxxxxxxx xxx detekci xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxx, včetně emise xxxxx (xxxxxxxxxxxx oblast), xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx testovací xxxxxx.
Xxxxxxxx slunečního xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx optimální xxxxx xxxxxx. V xxxxxxxxx simulátorech xx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx výbojka. Xxxxx z nich xx xx xxxxxx, xx xxxxxxx xxxx xxxxx x je xxxxxxxx, xxxxx její xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx významné xxxxxxxx XXX záření, xxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx, aby xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx XXX xxxxxxxxx.
Xxx zkoušku xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx by mělo xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XXX xxxxxx (XXX:XXX ˜ 20:1). Xxxxxxx spektrální xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx simulátoru xxxxxxxxx xx validační xxxxxx xxxxxxx fototoxicity 3X3 XXX in vitro xxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx (3).
Dozimetrie: intenzita xxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) xx xxxx pravidelně xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx kontrolovat xx xxxxxxx xxxxxxxx širokopásmového XX-xxxxx. XX-xxxx musí xxx xxx daný xxxxx kalibrován. Xxxxxxxxx XX-xxxxx xx měla xxx xxxxxxxxxxxx x xx xxxxx účelem xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx XX-xxxx xxxxxxxx xxxx. X xxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx záření xxxxxxxxxxxx xxxxxx světla x xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx UV-metru xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx školenými osobami.
Dávka 5 J/cm2 xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxxx xxx buňky Balb/c 3X3 x xxxxxxxxxx xxxxx k xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx 5 J/cm2 xx xxxx 50 xxx. xxxx být xxxxxxxxx ozáření xxxxxxxxx xx 1,666 XX/xx2. Xxxxxxxx xx použita xxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxx být xxxxx XXX xxxxxx xxxxx upravena, aby xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx fototoxinů. Xxxx světelné xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx:
x(xxx) = xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (X/xx2) 100 / intenzita xxxxxxx (xX/xx2) 60 (1 J =.W xxx)
1.7.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx by xxxxxx xxxxxxxxx 100 μx/xx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx; xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx pozitivních výsledků (xxxxxxxxxxxx). Hodnota pH xxxxxxxx xxxxxxxxxxx by xxxx xxx vyhovující (xX 6,5 — 7,8).
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx chemických xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx (+ XXX) x bez světla (-XXX) xx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx koncentrační řady x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxx, xxx xxxx křivky xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx podloženy xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx by xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx koncentrací (x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx).
1.7.3 Xxxxxxxx xxxxxx [1]
1.7.3.1 Xxxxx xxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx 1 × 105 xxxxx/xx x kultivačním médiu x 100 μl xxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx pouze do xxxxxxxxxx jamek 96jamkové xxxxxxxx (xxxxx xxxxx). Xx zbývajících xxxxx xx dávkuje po 100 μl xxxxxxx xxxxxxxx o hustotě 1 × 105 xxxxx/xx (1 × 104 buněk xx xxxxx). Xxx xxxxxx xxxxxxxxx chemickou látku xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx: xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (-XXX) x xxxxx xxx xxxxxxxxx fotocytotoxicity (+XXX).
Xxxxx xx inkubují 24 x (7,5 % XX2, 37 °C), xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Tato xxxxxxxxx xxxx xxxxxx regeneraci xxxxx, jejich přichycení x xxxxxxxxxxxxx růst.
1.7.3.2 Xxxxx xxx
Xx xxxxxxxx xx kultivační médium x buněk dekantuje x xxxxx jamka xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μl XXXX/XXX. Xxxxx xx 100 μx EBSS/PBS xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx rozpouštědlo (negativní xxxxxxxx). Xxxxxxxx xx 8 xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx látky. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx xx xxxx 60 xxx. (7,5 % XX2, 37 °X).
X xxxxxxxxx xxxxx zkoušky x xxxxxxxx UVA xx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 50 min. xxxxxxx xxxx xxxxx 96xxxxxxx destičky XXX xxxxxxx o intenzitě 1,7 MW/cm2 (5 X/xx2. Aby xxxxxxx xx xxxxxxxxxx vody xxx víčkem, větrá xx pomocí xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxx zkoušku xxx ozáření XXX xx xxxxxxxxx 50 xxx. (xxxx xxxxxxxx XXX) v xxxxx xxx xxxxxxxx teplotě.
Zkušební xxxxxx se odstraní x každá xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX. XXXX/XXX xx nahradí xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx se xxxx xxx (18-22 x) (7,5 % XX2, 37 °C).
1.7.3.3 Xxxxx xxx
Xxxxxxxxxxxxx hodnocení
Buňky xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx způsobené xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx látky. Xxxxxxxxxx xx provádět tuto xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx promyjí 150 μx xxxxxxxxxxxx EBSS/PBS x xxxxxxxxx roztok xx opatrně xxxxxxxx xxxxxxxx. Přidá xx 100 μl média XX x xxxxxxxx xx 3 h xxx 37 °X xx xxxxxxxx atmosféře x 7,5 % XX2.
Xx xxxxxxxx xx xxxxxx XX xxxxxxxx x buňky xx xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX. XXXX/XXX xx xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx (případně xxx xxxxxxxx odstředit x xxxxxxxx xxxxxx).
Xxxxx xx xxxxxx 150 μx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, aby xx xxxxxxxxxx NR.
Destička xx xxxxxx 10 xxx. xxxxx xx třepačce, xxxxx xx NR x buněk xxxxxxxxx x nevytvoří xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx extraktu NR xxx 540 xx, xxxxxxx se xxx xxxxxxxx použije slepý xxxxx. Údaje se xxxxx xx vhodném xxxxxxx (xxxx. XXXXX) x xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
2.1 Xxxxxxx x množství xxxxx
Xxxxx xx měly xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx získané při xxxxxxx XXX/XXX xxxx xxx xxxx. Xx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xx být xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxx nastaven xxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Vzhledem x xxxx, xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xx xx mezní xxxxxxxxxxx 100 μg/ml xxxxxx pro experiment x temnu (-XXX) xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx po xxxxxxx (+XXX), xxxx xxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx x xxxx částech experimentu xxxxxxxx, řádově lišily, xx-xx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx kvality xxxxx. Není-li x xxxx xxxxxxx experimentu (-XXX x +XXX) xxxxxxxxxxxx zjištěna, stačí xxxxxxx zkoušku x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xx nejvyšší xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxx pozitivního výsledku xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xxxxxx být dále xxxxxxxxx, xxxxxxxx byla xxxxxxxx xxxxxxxx látka xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. X xxxxxxxx případech stačí xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx zjištění rozmezí xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx hraničních xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx být pro xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx, může xxx xxxxxxxx xxx dosažení xxxxxxx xxxxxxxx změnit xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Klíčovou xxxxxxxxx této xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx chemické xxxxx. X xxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx (xxxx rozpouštědlo, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx může xxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx inkubační xxxx xxxx ozářením. Xxxxxxxx xxxx může xxx xxxxxx x chemických xxxxx xxxxxxxxx xx xxxx.
2.2 Zpracování xxxxxxxx
Xx-xx xx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx zkoušené xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 50 % xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx neutrální xxxxxxx (XX) (XX50). Xxx tak xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx regresí) xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx metod xxxxxx proložení (14). Xxxx použitím xxxxxxx XX50 xxx xxxxx xxxxxxx xx měla xxx vhodným způsobem xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx XX50 xxx popřípadě použít xxxxxx xxxxxxxxxx proložení. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx papír (xxxxxxx xxx x: xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx osy x: xxxxxxxxxxxxxxxxx), neboť x xxxxx xxxxxxxxx bude xx této xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx koncentraci téměř xxxxxxxx.
2.3 Xxxxxxxxx výsledků (xxxxxxxxxxx modely)
2.3.1 Xxxxxxxxxxx xxxxx — xxxxx 1: xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX)
Xxxxxxxx jsou x xxxx xxxxxxxxx xxx xxx ozáření (+XXX), xxx bez xxxxxxx (-XXX) získány xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX) xxxxxxxxx podle xxxxxx xxxxxx:
(x) PIF = (XX50 (-XX)) / (XX50 (+UV))
Hodnota XXX &xx; 5 předpovídá xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciálu, xxxxxxx xxxxxxx XXX ≥ 5 xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx při +XXX x není xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx -XXX, xxxxx hodnotu XXX xxxxxxxxx, xxxxxxx xxx x výsledek, xxxxx svědčí x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx "&xx; XXX", jestliže xx xxxxxxx -XX xxxxxxx xx po xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (Xxxx), x xxxx xxxxxxx xx použije pro xxxxxxx "&xx; XXX";
(x) &xx; PIF = (Xxxx (-UV)) / (XX50 (+XX))
Xxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx "&xx; XXX", předpovídá xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciálu xxxx xxxxxxx &xx; 1.
Xxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxx toho, xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx ani xxxxxxx XX50 (-XX) xxx xxxxxxx XX50 (+ UV), xxxxxx xx o xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. V xxxxxxxx případech xx xxx xxxxxxxxxxxxxx výsledku xxxxxxx formální xxxxxxx "XXX = *1";
(C) &xx; PIF = *1 = (Xxxx (-XX)) / (Cmax (+XX))
Xxx li získat xxxxx xxxxxxx "XXX = *1", je xxxx hodnota xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X xxxxxxxxx b) x x) xx měly xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x úvahu xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in xxxxx.
2.3.2 Xxxxxxxxxxx model xxxxx 2: xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (XXX)
Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx studie EU/COLIPA (15) a xxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx fototoxicity xx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx chovají xxxx XX filtry (13). Xxxxx model xxxx xxxxxxx jako xxxxx XXX x případech, xxx nelze získat xxxxxxx EC50. Xxxxx xxxxx využívá střední xxxxxxxx xxxxxx (mean xxxxx xxxxxx) (XXX), xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx na srovnání xxxxxx křivek závislosti xxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxx použití xxxxxx xxx xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (Xxxxxx) xxxxxxx xxxxxxxxx počítačový xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxx.
2.4 Interpretace xxxxxxxx
Xxxxxxxxx výsledek xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro (XXX ≥ 5 xxxx XXX ≥ 0,1) xxxxxxx, že xxxxx xx xxxxxxxxxxx potenciál. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxxxxxxxx xxx 10 μg/ml, xx xxxx pravděpodobné, xx xxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx. Xx-xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx koncentraci 100 μg/ml, mohou xxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Ty xx xxxxx xxxxx údajů x xxxxxxxxx, xxxxxxxx x možné xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx v xxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx. xx xxxxxxx modelu xxxxxx kůže xx xxxxx.
Xxxxxxxxx výsledek xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx (XXX &xx; 5 xxxx XXX &xx; 0,1) xxxxxxx, že xxxxx xxxxxx pro xxxxx xxxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxx chemickou xxxxx xx po xxxxxxxx koncentraci 100 μx/xx, znamenají xxxxxxxxx xxxxxxxx, že xxxxxxxx xxxxx xxxx fototoxický xxxxxxxxx a fototoxicitu xx vivo xxx xxxxxxxx za nepravděpodobnou. X xxxxxxxxx, kdy xxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx obdrženy xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx koncentraci (XX50 +XX x EC50 -XX), xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxx-xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (+XX x -XX) x xxxx-xx xxxxxxxxxxx omezeny rozpustností xx xxxx xx xxxxxxx xxxxx xxx 100 μx/xx, xxxx xxxxxx zkouška pro xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x mělo xx xxx zvážena xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. za xxxxxxx modelu lidské xxxx xx vitro xxxx zkouškou in xxxx).
3. ZPRÁVY
Protokol x xxxxxxx
Xxxxxxxx x zkoušce xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxx chemická látka:
- xxxxxxxxxxxxx údaje x xxxxx CAS, xx-xx xxxxx,
- xxxxxxxxx vlastnosti x čistota,
- fyzikálně-chemické xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx studie,
- xxxxxxx x fotostabilita, xxxx-xx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx zkoušené xxxxx x tomto xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx (XXXX nebo XXX).
Xxxxx:
- xxx a xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- číslo buněčné xxxxxx, xx-xx známo,
- xxxxxxxxx xxxxx xx XXX stanovená xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx zkoušce xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx
Xxxxxxxx podmínky x) — xxxxxxxx xxxx aplikací x xx ní:
- xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx,
- inkubační xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx, xxxxxxx),
- délka xxxxxxxx (xxxxxxxxxx před xxxxxxxx x xx ní).
Zkušební xxxxxxxx b) — xxxxxxxx chemické látky:
- xxxxxxxxxx výběru koncentrací xxxxxxxx xxxxxxxx látky xxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxx XX/XXX, tak xxx xxx,
- x xxxxxxx, že xxxxxxxx xxxxxxxx látka vykazuje xxxxxxxx rozpustnost x xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxx a xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (pufrovaný xxxxxxxxxxxx xxxxxx),
- xxxxx xxxxxxxx chemické xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx x) — xxxxxxx:
- xxxxxxxxxx výběru xxxxxxxxx zdroje světla,
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx ozáření xx zdroje xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxx),
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx zkoušeného xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxx XXX x xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xX/xx2,
- xxxxx xxxxxxxx XX/XXX xxxxxx,
- dávka XXX xxxxxx (intenzita × čas), xxxxxxxxx x X/xx2,
- xxxxxxx xxxxxxxxx kultur xxxxx xxxxxxxxx x teplota xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx x) — zkouška XXX:
- složení xxxxx XX,
- xxxx xxxxxxxx XX,
- inkubační xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx, xxxxxxx),
- xxxxxxxx xxxxxxxx XX (xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx XX,
- xxxxx (xxxxxxxxxx) xxxxxx xxxxx, je-li xxxxxxx,
- xxxxxxx slepého xxxxxxx xxx spektrometrii, xx-xx použit.
Výsledky:
- životaschopnost xxxxx při xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk) xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx +XXX a -XXX,
- xxxxxxx xxxxxx závislosti xxxxxx na xxxxxxxxxxx: xx-xx to možné, xxxxxxx xxxxxxx XX50 (+XXX) a XX50 (-XXX),
- srovnání xxxx xxxxxx závislosti xxxxxx xx koncentraci získaných x xxxxxxxx XXX/XXX x xxx xxxx, x to xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxx-xxxxxxxxxxx xxxxxx ) (XXX), xxxx výpočtem xxxxxxxxx světelného xxxxxx (xxxx xxxxx xxxxxx) (XXX),
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- kritéria přijatelnosti xxxxxxx a) — xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxxxx XX) xxxxxxxxx x neozářených buněk,
- xxxxxxxxx xxxxx pro xxxxxxxxx kontrolu, střední xxxxxxx a směrodatná xxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x) — xxxxxxxx xxxxxxxxx kontrola:
- xxxxxxx XX50 (+XXX), XX50 (-XXX) a XXX-xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxxx xxxxx: xxxxxxx EC50 (+XXX), EC50 (-XXX) x PIF, střední xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
4. LITERATURA
(1) Xxxxxxxxx, X., Xxxxx, X., Xöxxxx, X., Xxxxxüxxxx, X. X., Xxxxxxx, X., Klecak, X., X'Xxxxxxxxxxx, H., Xxxxxxx, X., Lovell, X. W., Maurer, X., Xxxxxxxxxxx, F., Xxxxx, X., Pape, X., Pfannbecker, X., Xxxxxxxx, X., Xx Xxxxx, X., Steiling, X., Xxxxxxxx, A. (1994), XXX/XXXXXX xxxxxxx xx in xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx: Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x Xxxx/x 3T3 xxxx xxxxxxxxxxxxx assay, Xxxxxxxxxx xx vitro 8, 793-796.
(2) Xxxx (1998), Xxxxxxxxx xx xxx scientific validity xx the 3T3 XXX PT xxxx (xx xx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx), Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx, Joint Xxxxxxxx Centre: XXXXX xxx XXXX/X/2, 3 Xxxxxxxx 1997, ATLA 26, 7-8.
(3) Xxxxxxxxx, X., Xxxxx, X., Xxxxxx, X., Xxxx, X. J. X., Xxxxxxxxxx, X., Xx Xxxxx, O., Xxxxxüxxxx, X. X., Xxxxxxxx, X., Desolle, P., Xxxxxxxxx, F., Xxxxxxx, X., Xxxxxx, X. X., Xxxxxx, X., Xxxxxxxxxxxxx, X., Xxxxxxxx, X. M., Csato, X., Xxxxxxxxx, D., Xxxxxxxx, W., Xxxxxxx, X. (1998), EU/COLIPA "Xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx", xxxxxxxxxx study, xxxxxxx xx xxxxx II (xxxxx xxxxx), xxxx 1: xxx 3X3 XXX xxxxxxxxxxxxx xxxx, Xxxxxxxxxx in Xxxxx 12, 305-327.
(4) XXXX Xxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxx, XXX/XX/XXXX/XX(96)9: Xxxxx Xxxxxx xx xxx OECD Xxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xx Validation and Xxxxxxxxxx Criteria xx Xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx Xxxx Xxxxxxx, XXXX Xxxxxxxxxxxx Xxxxxx, Xxxxx, 1996.
(5) Xxxxxx, X. W. (1993), X scheme xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx photoallergenic xxxxxxxxx, Xxxxxxxxxx in Xxxxx 7, 95-102.
(6) Xxxxxxxxxx, X., Xxxxx, X. (1972), Xxxx xx xxx photodynamic xxxxxxxxxx, Xxxxxxxx progress xx xxxxxxx, biological xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx Vol. 3 Xxxx 1, Xxxxx Xxxxxxx Xxxxxxxxxx Xx, Xxxxxxxxx, XX–XXXX.
(7) Xxxxxxxxx, H., Xxxxxx, X. X., Xöxxxx, X., Xxxxxxx, B. X., Xxxxxx, X., Xxxxxxx, X. X., Xxxx, X. X. X., Xxxxxx, X., Xxxxxxxxx, X. (1994), Xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx: Xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xx XXXXX xxxxxxxx 2, XXXX 22, 314-348.
(8) Xxxxxx, X. D. (1989), Photosensitization. X: Xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx, (K. X. Xxxxx, xx.), Xxxxxx Xxxxx, New Xxxx, 2. xxx., 79-110.
(9) Xxxxxxxxxxx, X., Xxxxxxx, X. X. (1985), Xxxxxxxx determination in xxxxx xx morphological xxxxxxxxxxx and neutral xxx xxxxxxxxxx, Xxxxxxx. Xxxx. 24, 119-124.
(10) Xxxxxxx, X. X., Xxxxxx, W. G., Xxxxxxxxxx X. (1996). X: Xxxxxx models xxx phototoxicity xxxxxxx, Xxxxxxxxxxxxxxxxx, (X. X. Xxxxxxxx, X. X. Xxxxxxx xxx.), Xxxxxx &xxx; Xxxxxxx, Washington XX, 5. xxx., 515-530.
(11) Xxxxxxx, X. X., Xxxxxx X. (1987), Xxxxxx xxxxxxx xxx human xxxx xxxxx: xxxxxxxxx xx xxx relative xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx ultraviolet xxx xxxxxx xxxxxxx xx sunlight xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, Cancer Xxx. 47, 1825-1829.
(12) XXXXX/XXXXX/XXXXXX, Standard Operating Xxxxxxxxx: Balb/c 3X3 XXX Phototoxicity Xxxx, xxxxxxxx 23. xxxxxxxx 1997 M. Xxxxxxxxx, xxxxxxxxx 6. xxxxxx 1998 xxxxx Management Xxxx of xxx XX/XXXXXX project "In Xxxxx Xxxxxxxxxxxxxxx".
(13) Xxxxxxxxx, X., Balls, X., Xxxxxx, J., Xxxx, X. X. X., Xx Silva, X., Xxxxxüxxxx, H. X., Xxxxxxxxx, F., Xxxxxxx, X., Xxxxxx, W. X., Xxxxxxxxxxxxx (1998), X Xxxxx xx xxx Phototoxic Xxxxxxxxx xx XX Xxxxxx Xxxxxxxxx xxxx Xxxxx XXX xx xxx XX Xxxxxxxxx 76/768/XXX xx xxx 3T3 XXX Xx Vitro Xxxxxxxxxxxxx Xxxx, XXXX 26, 679-708.
(14) Holzhütter, X. X., Quedenau, X. (1995), Mathematical xxxxxxxxx of cellular xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx, Xxxxxxx of Xxxxxxxxxx Systems, 3, 127-138.
(15) Xxxxxüxxxx, X. X. (1997), A xxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxx phototoxicity xxxxxxx xxxx xxxxx xx dose-response curves xxx xxx xxx xxx predicting xxx xx xxxx phototoxicity xx chemicals, XXXX 25, 445-462."
"Dodatek
[1] Další xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxxxxx (12).