Xxxxxxxx Xxxxxx 2000/33/XX
xx xxx 25. dubna 2000,
xxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx přizpůsobuje xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx Xxxx 67/548/XXX x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx klasifikace, balení x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx [1]
(Xxxx x xxxxxxxx pro XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Smlouvu x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx směrnici Xxxx 67/548/XXX xx xxx 27. června 1967 x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, balení x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx látek [2], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx parlamentu x Xxxx 1999/33/XX [3], x xxxxxxx xx xxxxxx 28 xxxxxxx směrnice,
vzhledem x xxxxx důvodům:
(1) X xxxxxxx X xxxxxxxx 67/548/XXX xx xxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx. Je xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
(2) Xxxxx xx. 7 xxxx. 2 xxxxxxxx Xxxx 86/609/EHS xx xxx 24. xxxxxxxxx 1986 x xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxxxx x xxxx xxxxxxx účely [4] xxxxx být xxxxx, xxx xxxx xx xxx použito xxxxx, xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx x xxxxxxxxx dostupná xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
(3) Xxxxxx zamýšlí xxxxxxx xx xxxxxxx X směrnice 67/548/XXX xxxxxx alternativní xxxxxxxx xxxxxx, xxx nichž xxxxxx používána xxxxxxx, x cílem xxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx. 3 odst. 1 směrnice 67/548/XXX.
(4) Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx stanoviskem Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx technických xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx,
XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Text xxxxxx X a II xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xx části X xxxxxxx X xxxxxxxx 67/548/XXX.
Xxxxxx 2
1. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx v xxxxxxxx právní a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx x touto směrnicí xxxxxxxxxx xx 1. xxxxx 2001. Xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx Xxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxx směrnici xxxx xxxx být takový xxxxx učiněn xxx xxxxxx úředním xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx členské xxxxx.
2. Xxxxxxx státy xxxxx Xxxxxx znění xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxxxx x oblasti xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx a přijatými xxxxxxxxxxxxxx ustanoveními.
Xxxxxx 3
Xxxx směrnice xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx dnem po xxxxxxxxx v Xxxxxxx xxxxxxxx Evropských xxxxxxxxxxxx.
Článek 4
Xxxx směrnice xx xxxxxx členským xxxxxx.
V Xxxxxxx xxx 25. dubna 2000.
Xx Xxxxxx
Xxxxxx Xxxxxxxöx
xxxxxx Komise
[1] Xxxxxxx před xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx.
[2] Xx. xxxx. 196, 16.8.1967, x. 1.
[3] Xx. věst. X 199, 30.7.1999, x. 57.
[4] Úř. věst. X 358, 18.12.1986, x. 1.
PŘÍLOHA X
"X.40 XXXXXXX XXXXXX NA KŮŽI
1. XXXXXX
1.1 Úvod
Dvě xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx na xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx elektrického xxxxxx xxxx xxxxxxx (XXX) x zkouška x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxx Xxxxxxxxx střediskem xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx metod (XXXXX, Xxxxxxxx výzkumné xxxxxxxxx Xxxxxxxx Xxxxxx) (1, 2, 3) xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx. Validační xxxxxx XXXXX prokázala, xx xxxxx zkouškami lze xxxxxxxxxx rozlišit známé xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kůži. Protokol x xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx stupně xxxxxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, R 35 x ostatní xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kůže, X 34) (2). Xxxxx x xxxxxx xxxx zkoušek xx xxxxxx; xxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxx Xxxxxx xxxx, xxxx X.
1.2 Definice
Poleptání xxxx: xxxxxxxx poškození xxxx xx aplikaci xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.3 Referenční xxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxx body 1.5.3.4 x 1.7.2.3.
1.4 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx — xxxxxxx TER xx xxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx je až xx 24 h xxxxxxxxx na epidermální xxxxxx terčíků xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Materiály s xxxxxxxxx účinky jsou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x bariérové xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (stratum xxxxxxx), která xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx XXX xxx xxxxxxxx úroveň (5 xΩ) (4, 5). Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx nesnižují XXX xxx prahovou xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx povrchově xxxxxxx xxxxx x neutrální xxxxxxxxx xxxxx (definice xxx xxxxxxxxxx (6)) xxx zařadit xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxx množství falešně xxxxxxxxxxx xxxxxxxx získaných xxxxx xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx látek (2, 7).
1.5 Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx — xxxxxxx XXX na xxxx xxxxxxx
1.5.1 Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx (20 — 23 xxxxxxx) xxxxxxx (Wistar xxxx srovnatelný kmen). Xxxxxxx a xxxxx xxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx (obsahujícího xxxx. xxxxxxxxxxxx, penicilin, xxxxxxxxxxxxxx a amfotericin x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx). Xxxxxxx xx xxxxx a xxxxxx xxx xx xxxxxx omytí xxxxx xxxxx roztokem xxxxxxxxxx x použijí se xx 3 xxx (x xxxxxxxx xxxx xxxxx xxx použita xxxxxxx xxxxxx xxx 31 xxx).
1.5.2 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx usmrtí. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx opatrně odstraní xxxxxxx xxxx a xxxxxxxxxx xxx se x kůže xxxxxxx xxxxxxxxx. Kůže se xxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx (XXXX) xxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx x trubičkou. Xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx O-kroužek, xxx xxxx kůže upevněna, x přebytek xxxxx xx ořízne. Xxxxxxx xxxxxxxx x X-xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx 1. Xxxxxxx X-xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx pokryje vrstvou xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx komory obsahující xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx (154 xX) (xxxxxxx 2).
1.5.3 Xxxxxxxx xxxxxx
1.5.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx materiálu
Kapalná xxxxxxxx xxxxx (150 μx) xx aplikuje xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xxx. 2). Xxx zkoušení pevných xxxxxxxxx xx použije xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx, xxx byla xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx na xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx voda (150 μx) x trubička xx xxxxx xxxxxxxx. Xxxx látkami x xxxx xx mělo xxxxx k xxxxxxxxxxx xxxxx. X některých xxxxx toho xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx na 30 °X, xxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx rozemletím xx xxxxxx materiál nebo xx prášek.
Ke xxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx po xxxx 24 x (xxx xxxx xxx 1.5.3.4). Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx vody x xxxxxxx nejvýše 30 °X. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx teplé xx 30 °X.
1.5.3.2 Xxxxxx XXX
XXX xx xxxx xxxxxxxxxxxxxx impedančním xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx (xxxx. XXX 401 xxxx 6401 xxxx xxxxxxxxxxxx). Xxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx xxxx sníží xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx 70 % xxxxxxxx xxx, xxx byla xxxxxxxxx zakryta. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx odstraní xxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxx xx zvlhčí přidáním 3 ml roztoku xxxxxx hořečnatého (154 xX). Elektrody xxxxxx xx umístí na xxx xxxxxx xxxxxxx xxxx za xxxxxx xxxxxx xxxxxx x xΩ/xxxxxx xxxx (xxxxxxx 2). Rozměry xxxxxxxx x délky xxxxxxxxxxxx xxxxx elektrod pod xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx obrázku 1. Xxxxxx vnitřní (xxxxx) xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxx konec xxxxxxxxx trubičky, xxx xxxx zajištěno, že xx xxxxx části xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx (tenká) xxxxxxxxx je umístěna xxxxxx xxxxxxxxxxx komory xxx, xxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxx 1), neboť xxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx odporu.
Je třeba xx všimnout, xx xx-xx naměřená xxxxxxx xxxxx xxx 20 xΩ, xxxx to xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx terčíku xxxx. O xxxxxxxxxx xxxx vrstvy xx xxx xxxxxxx xxxx. xxx, xx xx xxxxxxxxx trubička zakryje xxxxxx v xxxxxxxx x 10 s xx xxxxxxxxxx. Roztok xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx XXX (xxxxxxx xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx spadají xx přijatelného rozpětí xxxxxx. Xxx popsanou xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx látky a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx:
|
Xxxxxxxx |
Xxxxx |
Xxxxxxx xxxxxx (xΩ) |
|
Xxxxxxxxx |
10X xxxxxxxx chlorovodíková (36 %) |
0,5–1,0 |
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxx xxxx |
10–25 |
1.5.3.3 Xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx organické xxxxx
Xxxx-xx xxxxxxx TER pro xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxx zkoušené xxxxx xxxxx xxxx rovny 5 xΩ, xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx průniku xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx, zda výsledky xxxxxx xxxxxxx pozitivní (2).
1.5.3.3.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxxxxx stranu xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx na 2 x 150 μx 10 % xxxxxxx xxxxxxx sulforhodaminu X x xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxx se xxxx přibližně 10 x xxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx odstranilo xxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Všechny xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xx xx xxxxxxxx (xxxx. 20 xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx (8 xx). Lahvičky xx xxxxx 5 xxx. xxxxxxxxxxxx, aby xx odstranilo další xxxxx barvivo. Xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxx zopakuje, a xxxx se xxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxx xx lahviček xxxxxxxxxxxx 5 xx 30 % xxxxxxx (x/X) xxxxxxx-xxxxxxx-xxxxxxx (XXX) x xxxxxxxxxxx xxxx x inkubují xx xxxx xxx xxx 60 °C. Xx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx se xxxxxxxx 8 min. xxx 21 °X (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx síla ˜ 175). 1 xx vzorku xxxxxxxxxxxx xx poté xxxxx 4 ml 30 % (x/X) xxxxxxx XXX x destilované xxxx. Xxxxxxxxxx (A) xx xxxx xxx xxxxxxxxx 565 nm.
1.5.3.3.2 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X xx xxxxxx xxxx xx xxxxxxx z xxxxxx X (molární xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X xxx 565 xx = 8,7 × 104; molekulová xxxxxxxx = 580). Xxxxx barviva sulforhodaminu X se xxxxxxx xxx xxxxx terčík xxxx a xxxx xx vypočte xxxx xxxxxxx hodnota. Střední xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx kontroly xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxx popsanou xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxxxxx xxxx přijatelné xxxxxxx xxxxxxx obsahu barviva:
|
Kontrola |
Látka |
Rozmezí xxxxxx xxxxxxx (μg/terčík xxxx) |
|
Xxxxxxxxx |
10X xxxxxxxx chlorovodíková (36 %) |
40-100 |
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxx voda |
15-35 |
1.5.3.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx lze xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx kůže xx xxxxxx xxxx (xxxx. 2 xxxxxx), xxx xx xxxxxxxxxxxxxx ty xxxxxxxxx, které jsou xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx však ukázala, xx xxxxxxxxx TER xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx po xxxx 2 xxxxx (2), třebaže toto xxxxxxxxx xxxxxxxx správnou xxxxxxxxxxxx látek s xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx 24hodinové xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx a rozměry xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxx xx získané xxxxxxx XXX. Xxxx 5 Ω pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx byl xxxxxxx x údajů xxxxxxxxx xx zařízením x xxxxxxxx, jež xxxx popsány x xxxx metodě. Xxxxxxxxxx xx tedy kalibrovat xxxxxxx a určit xxxxxxxx hodnotu xxxxxx xxxxxxxxx řady xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vybraných x xxxxxxxxxx látek xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx studii (3).
1.6 Podstata xxxxxxxx xxxxxx — stanovení xxxxxx modelu lidské xxxx
Xxxxxxxx materiál xx xxxxxxxxx xx xx xxxx 4 xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx sestávající x xxxxxxxxxxxxxx epidermis x funkční xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx expoziční xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (stanovený xxxx. xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx XXX) xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx úroveň. Podstata xxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxxxx látky s xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx, xxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (difuzí xxxx xxxxx) x jsou xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx smrt xxxxx x xxxxxxxx buněčných xxxxxxxx.
1.7 Xxxxx zkušební xxxxxx — xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx lidské xxxx
1.7.1 Xxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, musí xxxx splňovat xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx musí xxx funkční xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx pod xx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx musí xxx dostatečná. Xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx k xxxxxxxxxxxx látkám, xxxxx xxxxxxxx neproniknou rohovitou xxxxxxx. Xxxx se xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxx xxx dostatečně vysoká, xxx bylo xxxxx xxxxx rozlišit xxxxxxxxx x xxxxxxxxx kontrolní xxxxx. xxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx xxxx. xxxxxxx XXX, xx. xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx X) xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx v xxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxx xxxxx. Podobně xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx po xxxxxxxx pozitivní xxxxxxxxx xxxxx (ve srovnání x xxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) xxxx být xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Nejdůležitější xxxxxx xx, aby xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx pro xxxxxxxx (2).
1.7.2 Xxxxxxxx xxxxxx
1.7.2.1 Xxxxxxxx zkoušeného xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx dostatečné xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx xxxx (minimálně 25 μx/xx2). X pevných xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx dostatečné xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxx látka xx xxxx xxx xxxxxxxx, xxx xxx zajištěn xxxxx styk x xxxx; xxxxx látky xx měly xxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx rozemlety xx xxxxxx. Xxxx být xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (2). Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx musí být xxxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxx xxxx opatrně xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx roztokem.
1.7.2.2 Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx
X xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx použita xxxxxxxx xxxxxxxxxx kvantitativní xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XXX, xxx níž xx v xxxxxxx xxxxxxxxxxxx prokázalo, xx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (2). Xxxxxx xxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx XXX x koncentraci 0,3 xx/xx při xxxxxxx 20-28 °X xx xxxx 3 xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxx formazanu xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx X xxx xxxxxx xxxxx 545 až 595 nm.
1.7.2.3 Doplňkové xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx zaznamenání xxxxxxxxx doby, xxxxxxx xxxxxxxxxxx atd. budou xxx xxxxx vliv xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx metodika x xxxxxxxxxxx model xxxx xxxxxxxxxxx zkoušením xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx XXXXX (3). Xx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx spektrum xxxxxxxxxx látek. Metoda xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx validitu (2) x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx publikovány xx vědeckém časopise x předcházející xxxxxxxx xxxxxxx.
2. ÚDAJE
2.1 Zpracování xxxxxxxx
2.1.1 Xxxxxxx TER xx kůži xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx (xΩ) xxx xxxxxxxx materiál, xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx x xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx chemické xxxxx včetně xxxxx x duplicitních xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, o xxxxxxxxx xxxxxxxxx a x odvozené klasifikaci xx xxxx být xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx.
2.1.2 Zkouška x xxxxxxx lidské kůže
Hodnoty xxxxxxxxxx X x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx látky včetně xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx opakovaných xxxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx hodnotách x x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx uvedeny xx xxxxx xxxxxxx.
2.2 Xxxxxxxxx x interpretace xxxxxxxx
2.2.1 Xxxxxxx TER xx xxxx potkana
Je-li xxxxxxx XXX xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx větší xxx 5 xΩ, xxxx xxxxx žíravá. Xx-xx xxxxxxx TER xxxxx xxxx rovna 5 kΩ x xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx látku xxxx xxxxxxxxx organickou látku, xx xxxxx xxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, které dávají xxxxxxx XXX xxxxx xxxx xxxxx 5 xΩ, lze provést xxxxxxxxx xxxxxxx barviva. Xx-xx xxxxxxx obsah xxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx obsahu xxxxxxx x terčíku xxxx xxxxxxxxx souběžně xxx xxxxxxx 36 % XXx jakožto xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx zkoušené xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxx xx xxxx xxxxxx. Xx-xx střední xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx kůže xxxxx xxx xxxxxxx obsah xxxxxxx v xxxxxxx xxxx xxxxxxx souběžně xxx xxxxxxx 36 % XXx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, x látka xxxx xxxx xxxxxx.
2.2.2 Zkouška x xxxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxxx obsorbance X xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 % xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx; hodnoty xxxxxxxxxx A dosažené xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x procentech xxxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx procentuální xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx buněk, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxx (xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx třídy leptavých xxxxxx), musí být xxx předpovědní xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx potvrdit, xx xx vhodný (2).
3. XXXXXX
Xxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxxxxx x xxxxxxx musí xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxx xxxxx:
- xxxxxxxxxxxxx xxxxx, fyzikální xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Podobné informace xx xxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx:
- podrobnosti xxxxxxxxx postupu,
- popis x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx XXX) xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx (xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx) xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx experimentech x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx,
- popis xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx účinků.
Rozbor xxxxxxxx.
Xxxxxx.
4. LITERATURA
(1) ECVAM (1998), XXXXX Xxxx &xxx; Xxxxx, XXXX 26, 275-280.
(2) Xxxxxx, X. H., Xxxxxx, X. E. X., Xxxxx, M., Botham, X. X., Xxxxxx, X. X., Xxxx, X. X., Esdaile, X. X., Xxxxxxxxxx, X-X., Liebsch, M. (1998), Xxx XXXXX xxxxxxxxxxxxx validation study xx in vitro xxxxx for xxxx xxxxxxxxxxx. 2. Xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xx xxx Xxxxxxxxxx Team, Xxxxxxxxxx xx vitro 12, 483-524.
(3) Xxxxxxx, X. X., Xxxxxxx, X. X., Fentem, X. X., Xxxxxx, X., Xxxxxx, X. X., Worth, A. X. (1998), Xxx XXXXX xxxxxxxxxxxxx validation xxxxx xx xx xxxxx xxxxx for xxxx xxxxxxxxxxx. 1. Xxxxxxxxx and distribution xx xxx xxxx xxxxxxxxx, Xxxxxxxxxx in xxxxx 12, 471-482.
(4) Xxxxxx, X. X. X., Xxxxxxxxx, X. X., Xxxxxx, X. (1986), Xx in xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx — xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx, Xxxx Xxxx. Toxicol. 24, 507-512.
(5) Xxxxxx, X. X., Xxxx, X. X., Dennett, X., XxXxxx, X. C., Xxxxxxxxx, X. X., Xxxxxxx, X., Xxxxxxxxx, X., Esdaile, X. X., Gardner, X. (1992), Xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx: results xx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, Xxxxxxxxxx in vitro 6, 191-194.
(6) Xxxxx, X. P., Fentem, X. X., Xxxxx, X., Xxxxxx, X. X., Curren, R. X., Xxxx, X. X., Xxxxxxx, X. X., Liebsch, X. (1998), Xx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx XXXX xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxx corrosion, XXXX 26, 709-720.
(7) Xxxxxx, X. X., Xxxxxxxxxxx, M., Xxxxxxx, X. X., Xxxxxx, X. D., Esdaile, X. J., Gardner, X. X., Xxxxxx, X. X., Xxxxxxxxxx, X., Xxxxx, X. X., Liebsch, M., Xxxxxxxx, X., Osborne, X., Ponec, X., Xxxxxxx, X. X., Xxxxxxxx, X., Xxxxxx, X. X., Balls, X. 1995), A xxxxxxxxxxxxx study xx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx testing. The xxxxxx xxx recommendations xx XXXXX xxxxxxxx 6, XXXX 23, 219-255.
Xxxxxxx 1
Xxxxxxx 2"
XXXXXXX XX
"X.41 XXXXXXXXXXXX — XXXXXXX XXXXXXXXXXXX 3X3 NRU XX XXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxxxxxxxxxxx xx definována xxxx xxxxxxx odezva xxxxxxxx xx první xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx po xxxxxxxxxx xxxxxx chemické xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx zkoušené xxxxx, xx. xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx může xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx XX xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx stanovení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x světla, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx sloučeniny, xxxxx jsou xxxxxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx a xx xxxxxxxx xx xxxx, a xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx na xxxxxxx jako fotoiritanty.
Zkouška xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx xxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx x rámci xxxxxxxxx xxxxxxxx EU/COLIPA x xxxxxx 1992 — 1997 (1, 2, 3) x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx. X xxxx 1996 doporučila xxxxxxxx skupina OECD xxxxxxxx postupných xxxxxxx xx vitro xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4).
Výsledky xx zkoušek xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx x xxxxxx x x xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx pro xxxxxxxxx těchto xxxxxx xxxx vynikající. Xxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, které xxxxx xxxxxxx z xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx látek, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxxxxxxx reagovat. Xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x tomu, xxx xxxxxxxx hodnocení xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx postupného xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx uvedena x xxxxxxx.
1.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx ozáření: xxxxxxxxx ultrafialového xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx povrch, xxxxxx xx X/x2 xxxx xX/xx2.
Xxxxx světelného xxxxxx: xxxxxxxx (xxxxxxxxx × xxx) xxxxxxxxxxxxxx (XX) xxxx viditelného xxxxxx xxxxxxxxxxxx na xxxxxx, xxxxxxxxx v xxxxxxx (X × x) xx xxxxxx xxxxxxx, xxxx. X/x2 xxxx X/xx2.
Xxxxxx xxxxx UV xxxxxx: xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx XXX (Commission Xxxxxxxxxxxxxx xx x'Xxxxxxxxx): XXX (315400 nm), XXX (280315 xx) x UVC (100280 xx). Xxxxxxxxx xx xxxxxx jiná označení: xxxx hranice xxxx XXX a UVA xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 320 xx x xxxxx UVA xxxx být xxxxxxxxx xx XX-X1 x XX-X2 x xxxxxxx xxxxx 340 xx.
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxx celková xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxxxxx vitálního xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx buněčných xxxxxxxx) x xxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxx kontrolám (xxxxxxxxxxxx), které prošly xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (x XX, xxxx xxx XX), ale xxxxxx exponovány zkoušeným xxxxxxxxx látkám.
Předpovědní xxxxx: xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx zkoušek xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. V xxxxxxxxxx xxxxxxxx lze xxx xxxxxx výsledků xxxxxxx fototoxicity 3X3 XXX in vitro xx xxxxxxxxx fototoxického xxxxxxxxxx použít faktor XXX x veličinu XXX.
XXX (xxxxx-xxxxxxxxxx factor — fotoiritační faktor): xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (XX50) xxxxxxxx xxxxx, x xx při xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX/XXX xxxxxxx (+ UV) x xxx xxxx (-XX).
XXX (xxxx photo xxxxxx — střední xxxxxxxx xxxxxx): nová veličina xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx závislosti xxxxxx xx koncentraci xxxxxxxxx xxx necytotoxickém ozáření XXX/xxx světlem (+ XX) x xxx xxxx (-UV).
Fototoxicita: xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxx určitým chemickým xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxx vyvolaná xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx látky.
Fotoiritace: xxxxx xxxxxx xxxxx "xxxxxxxxxxxx", který xx xxxxxxx k xxxxxx xxxxx těch fototoxických xxxxxx, které xx xxxxxxxxx xx kůži xx expozici xxxxxxxxx xxxxxx (topické nebo xxxxxx). Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxx buněčnému xxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx).
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx nedochází při xxxxx aplikaci xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx x která xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx dva xxxxx xxxx xxx, než xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxx odezva xxxxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxx, která xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx XX/XXX světla x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xx používá x xxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx XX xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látkou.
1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx chemické látky xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx každé xxxxxxx, je xxx xxxx vyvinutou xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx látky xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx použitých xxx xxxxxxxxxxxxxxxxx srovnáních xxxxxxxxxx xxxxxx (1, 3, 13).
1.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx zaznamenány x xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx (5, 6, 7, 8). Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx světelnou xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Podle prvního xxxxxx fotochemie (Grotthaus-Draperův xxxxx) vyžaduje xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx absorpci xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zkoušení xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxx být xxxxxxxxx XX/XXX xxxxxxxxx xxxxxxxx zkoušené chemické xxxxx (xxxx. xxxxx Xxxxxxxx OECD 101). Xx-xx molární absorpční xxxxxxxxxx xxxxx než 10 l.mol-1.cm-1, chemická xxxxx nemá xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx biologickou xxxxxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx).
1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx metody
Byly xxxxxxxxxxxxxx čtyři mechanismy, xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx (7). Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Zkouška xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx xxxxx xx proto xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx XXX/XXX světla x xxx xxxx expozice. Xxxxxxxxxxxx xx x xxxx zkoušce xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (XX) (9) 24 xxxxx po působení xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x ozáření.
Buňky Xxxx/x 3X3 xx 24 x xxxxxxxxx, aby xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Dvě 96xxxxxxx destičky na xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx 1 h xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx koncentracemi xxxxxxxxxx látek. Xxxx xx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx exponována xxxxxxxxxxxxxx dávkou XXX/XXX xxxxxx 5 X/xx2 XXX (+ XX xxxxxxxxxx), xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx udržuje x xxxxx (-XX xxxxxxxxxx). X xxxx xxxxxxxx xx poté xxxxxxxxx médium xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xx dalších 24 x xxxxxxxx xx xxxxxxx životaschopnost stanovena 3xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (XXX). Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx fototoxického xxxxxxxxxx xx porovnají xxxxxxxxxxxx xxxxxxx odezvy xxxxxxx xxx xxxxxxx (+ UV) x xxx xxxxxxx (-UV), xxxxxxx xxx xxxxxxx XX50, tj. při xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 50 % xxxxxx buněčné xxxxxxxxxxxxxxxx ve srovnání x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.6 Xxxxxxxx jakosti
Citlivost xxxxx xx XXX, xxxxxxxxx xxxxx: citlivost xxxxx xx XXX xx xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Buňky se xxxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx, xxxxxx xxx se xxxxx xxxxxx XXX xxxxxx 1 až 9 X/xx2 x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxx xxxxxxx xxxxxxxx NRU. Buňky xxxxxxx kritérium xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx 5 X/xx2 menší xxx 80 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx. Tato xxxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxx negativní xxxxxxxx xx XXX xxx xxxxxxxxxx zkoušce: zkouška xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx x EBSS (Xxxxxx xxxxxxxxxxxx roztok) x 1 % xxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx 1 % ethanolem (XxXX)) xxxx bez xxxx xxxxxxxx xxx + UVA xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx alespoň 80 % xxxxxxxx k xxxxxxxxxxxxxxxx neozářených xxxxx x tomtéž xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx experimentu x xxxxx (-UVA).
Životaschopnost xxxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (X540 XXX) xxxxxx x xxxxxxxx XX xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxx 1 × 104 buněk xxxxxxxxxx na jednu xxxxx zachovalo xxx xxxxx xxxxx xxxx xxx zkoušky xxxxxxxx xxxx zdvojnásobení (xxxxxxxx xxxx). Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, jestliže xxxxxxx hodnota X540 XXX xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx ≥ 0,2.
Pozitivní xxxxxxxx: při xxxxx xxxxxxx fototoxicity 3X3 XXX xx vitro xxxx xxx souběžně xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Při xxxxxxxxx xxxxxx XX/XXXXXX xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx kontrola xxxxxxxxxxxxx (XXX), x je xxxx xxxxxxxxx. Pro XXX zkoušený xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxx definována tato xxxxxxxx přijatelnosti xxxxxxx: xxx CPZ ozářený (+ UVA): XX50 = 0,1 až 0,2 μx/xx, xxx XXX xxxxxxxxx (-XXX): XX50 = 7,0 xx 90,0 μx/xx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX), xx. xxxxx hodnoty XX50, xx měl xxx alespoň 6.
Namísto XXX xxxxx xxx xxxxxxx xxxx souběžné xxxxxxxxx kontroly xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx vhodné x xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx látky. V xxxxxxx případě xx xxxx xxx xx xxxxxxx dosavadních údajů xxxx xxxxxxxx přijatelnosti xxxxxxx xxxxxxxxxx způsobem xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XX50 a XXX xxxx XXX (střední xxxxxxxx účinek).
1.7 Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx
1.7.1 Xxxxxxxx
1.7.1.1 Xxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx použita permanentní xxxx linie xxxxxxxxxxx — Xxxx/x 3X3, xxxx 31 — xxx x banky XXXX, nebo x xxxxx XXXXX x xx xxxx doporučena. Xxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx mohou xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx postupu xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx specifickým potřebám xxxxx, xxx musí xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, a měly xx xxx použity xxxxx xxxxx, jsou-li xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx x xxxx, xx citlivost buněk xx XX xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx, xxxx xx být xxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3X3 x xxxxxx x nejnižším xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxx xxx xxx xxxxxx. Je xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3X3 na XXX xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx postupem xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx metodice.
1.7.1.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx buněčné xxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx kultivační xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. X buněk Xxxx/x 3X3 se jedná x DMEM (Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxx) xxxxxxxxx 10 % xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, 4xX xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx vlhčené xxxxxxxxx při 37 °X/7, 5 % XX2. Xxxxxxx důležité xx, aby kultivační xxxxxxxx xxxxxxxxx, aby xxx buněčný xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx rozpětí xxx použité xxxxx xxxx buněčné linie.
1.7.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx kultur xx nasadí do xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx hustotě a xxxxxxx jednou se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx zkoušce xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU in xxxxx.
Xxx xxxxxxx fototoxicity xx xxxxx xxxxxxxx xx kultivačního xxxxx x takové xxxxxxx, xxx nedosáhly xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx, xx. do xxxxxxxx, xxx xx xx 48 x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx životaschopnost. Xxx xxxxx Xxxx/x 3X3 xxxxxxxxxxx x 96xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 1 × 104 buněk xx xxxxx.
Xxx každou xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx stejným xxxxxxxx xx dvou xxxxxxxxxx 96xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx jsou xxxx xxxxxxxx podrobeny xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx podmínek xxxxx xxxx, kdy xx xxxxx z destiček xxxxxxx (+XXX/XXX) x xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx (-UVA/VIS).
1.7.1.4 Xxxxxxxxxxx aktivace
Zatímco xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx požadavkem xxx xxxxx zkouškách xx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx potenciálu, xxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx jejíž xxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxx xxxx xx vitro xx xxxxxxxx metabolická xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx xxx za xxxxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx systémem xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.7.1.5 Xxxxxxxx chemická xxxxx/xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx x stálosti neprokazují xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx-xx xxxxx x rychlé xxxxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx. v Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXXX) xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxxxxx xxxxxx (PBS), který xxxxx obsahovat proteinové xxxxxx x xX xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx světlo, xxx nerušily xxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx chemické xxxxx x omezenou xxxxxxxxxxxx xx xxxx by xxxx xxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 100násobek xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xx xxxx xxx xxxxxxx v xxxxxx 1:100 fyziologickým xxxxxxxx. Použije-li xx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 1 % xxx. ve všech xxxxxxxxx, xx. v xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) a xxxxxxx (XxXX). Xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx. aceton), xxx xxxx xx xxx pečlivě xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx. xxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx.
Xx-xx xxxxx, xxxx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx použito xxxxxxx x/xxxx ultrazvuk x/xxxx xxxxxxx xx 37 °C.
1.7.1.6 Xxxxxxx XX světlem/příprava
Zdroj světla: xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx kritickým xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxx XXX a ve xxxxxxxxxx pásmu je xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx (7, 10), xxxxxxx záření x xxxxx XXX je xxxx relevantní a xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx jeho xxxxxxxxxxxx vzrůstá xxxx 313 xx x 280 xx 1000krát (11). Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx měla xxxxxxxxx důležitý xxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx světlo x xxxxxxxx xxxxxxx, které xxxxxxxx chemická xxxxx xxxxxxxxx, a xxx xxxxx světelného xxxxxx (xxxxxxxxxxx po přijatelnou xxxx) xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx látek. Použité xxxxxx xxxxx x xxxxx, xxxxxx xxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxxxx), xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx testovací xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx světla xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx optimální xxxxx xxxxxx. V xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx se xxxxxxx jak xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx x xxxx xx xx xxxxxx, xx emituje méně xxxxx a xx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xx slunečním xxxxxxx není xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx významné xxxxxxxx UVB xxxxxx, xxxx by být xxxxxx filtrovány, aby xxxx xxxxxx cytotoxické xxxxxx délky UVB xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxx fototoxicity 3X3 XXX xx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx zbavené UVB xxxxxx (XXX:XXX ˜ 20:1). Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx simulátoru xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx fototoxicity 3X3 XXX in vitro xxx publikován x xxxxxxxxxx (3).
Xxxxxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxx) xx musí xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx kontrolovat xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx XX-xxxxx. XX-xxxx xxxx xxx xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx XX-xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xx xxxxx účelem xx doporučuje xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx stejným xxxxxxxx xxxxxxxxxxx UV-metr xxxxxxxx xxxx. X xxxxxxxx xxxxxxx by xxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxx odstupech xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx zdroje xxxxxx x xx kontrole xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx XX-xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, avšak xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx školenými osobami.
Dávka 5 X/xx2 byla xxx validační xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx Balb/c 3X3 x dostatečně xxxxx x xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx 5 J/cm2 xx xxxx 50 xxx. xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx 1,666 XX/xx2. Xxxxxxxx xx použita xxxx xxxxxxx xxxxx xxxx jiný světelný xxxxx, xxxx xxx xxxxx UVA xxxxxx xxxxx xxxxxxxx, aby xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxx dostatečná pro xxxxxxx standardních xxxxxxxxxx. Xxxx světelné xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx:
x(xxx) = xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (X/xx2) 100 / xxxxxxxxx xxxxxxx (mW/cm2) 60 (1 X =.X xxx)
1.7.2 Zkušební xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zkoušené chemické xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx 100 μx/xx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx; při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx). Xxxxxxx xX xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxxx (xX 6,5 — 7,8).
Xxxxxxx koncentrací chemických xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx (+ UVA) x xxx xxxxxx (-XXX) xx xxxx xxx náležitě xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxx, xxx xxxx křivky xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx podloženy experimentálními xxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx).
1.7.3 Xxxxxxxx postup [1]
1.7.3.1 Xxxxx xxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx 1 × 105 xxxxx/xx x xxxxxxxxxxx xxxxx x 100 μx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx pouze xx xxxxxxxxxx jamek 96jamkové xxxxxxxx (xxxxx xxxxx). Xx xxxxxxxxxxx xxxxx xx dávkuje xx 100 μl xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx 1 × 105 xxxxx/xx (1 × 104 xxxxx na xxxxx). Xxx každou xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx: jedna pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (-XXX) x xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (+XXX).
Xxxxx xx xxxxxxxx 24 x (7,5 % XX2, 37 °C), xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, jejich xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx.
1.7.3.2 Xxxxx xxx
Xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx médium x xxxxx dekantuje x xxxxx jamka xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μl XXXX/XXX. Xxxxx xx 100 μx XXXX/XXX obsahujících xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx (negativní xxxxxxxx). Aplikuje se 8 xxxxxxx koncentrací xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx xx xxxx 60 xxx. (7,5 % XX2, 37 °C).
K xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx UVA xx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 50 xxx. xxxxxxx xxxx xxxxx 96xxxxxxx xxxxxxxx XXX xxxxxxx o xxxxxxxxx 1,7 MW/cm2 (5 X/xx2. Xxx xxxxxxx xx kondenzaci xxxx xxx xxxxxx, větrá xx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxx zkoušku xxx ozáření XXX xx ponechají 50 xxx. (xxxx xxxxxxxx XXX) v xxxxx xxx xxxxxxxx teplotě.
Zkušební xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx xxxxx xx promyje dvakrát 150 μl EBSS/PBS. XXXX/XXX se xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xx přes xxx (18-22 h) (7,5 % CO2, 37 °X).
1.7.3.3 Xxxxx xxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinkem zkoušené xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx provádět tuto xxxxxxxx, aby se xxxxxxxxx experimentální chyby, xxxxx záznamy se xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx nepoužijí.
Zkouška xxxxxx xxxxxxxxx červeně.
Buňky xx xxxxxxx 150 μx xxxxxxxxxxxx XXXX/XXX x promývací xxxxxx xx opatrně xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx se 100 μl xxxxx XX x xxxxxxxx xx 3 h xxx 37 °C xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x 7,5 % XX2.
Xx xxxxxxxx xx xxxxxx NR xxxxxxxx x xxxxx se xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX. XXXX/XXX se xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx (případně xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxx poloze).
Přidá xx xxxxxx 150 μx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx XX.
Xxxxxxxx xx xxxxxx 10 min. xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx se XX x buněk xxxxxxxxx x nevytvoří xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx se změří xxxxxxxxxx xxxxxxxx NR xxx 540 nm, xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx slepý xxxxx. Údaje xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (xxxx. ASCII) x počítači xxx xxxxxxxxx analýzu.
2. XXXXX
2.1 Xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx měly xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx získané xxx xxxxxxx UVA/VIS xxxx xxx xxxx. Xx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xx být xxxxxx xxxxxxxxxxx a interval xxxx xxxx nastaven xxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Vzhledem x tomu, že xx xxxxxxxx chemická xxxxx xxxxxxxx xxx xx do mezní xxxxxxxxxxx 100 μg/ml xxxxxx pro xxxxxxxxxx x temnu (-XXX) xxxxxxxxxxx, ale mohla xx být xxxxxx xxxxxxxxxxx po xxxxxxx (+XXX), xxxx xxx xxxxxxxx, aby se xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, řádově xxxxxx, xx-xx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx-xx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (-XXX x +XXX) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx zkoušku x xxxxxxx intervaly xxxx xxxxxxxxxxxx dávkami xx xx xxxxxxxx koncentrace.
Ověření xxxxx pozitivního xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx chemická látka xxxxxxxx za dostatečně xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx hlavní experiment xxxxxxxxx jednou nebo xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx hraničních hodnot xxxxxxxxxxxxx xxxxxx by xxxx xxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxxxx považováno za xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx změnit xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Klíčovou xxxxxxxxx této zkoušky xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. X xxxxxx xxxxxx xxxx xxx změna xxxxxxxx (xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, použití ultrazvuku) xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx ozářením. Xxxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx ve xxxx.
2.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx-xx xx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx odpovídající 50 % xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (NR) (XX50). Xxx tak učinit xxxxxxx jakékoli xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx Xxxxxxxx funkcí xxxx logistickou xxxxxxx) xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (14). Xxxx xxxxxxxx hodnoty XX50 xxx xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kvalita proložení. Xxx výpočet EC50 xxx popřípadě xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx doporučuje xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx papír (měřítko xxx x: xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx osy x: xxxxxxxxxxxxxxxxx), xxxxx x xxxxx případech xxxx xx této transformaci xxxxxx xxxxxxxxxx odezvy xx xxxxxxxxxxx téměř xxxxxxxx.
2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxx)
2.3.1 Xxxxxxxxxxx xxxxx — xxxxx 1: xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX)
Xxxxxxxx xxxx x xxxx případech xxx xxx xxxxxxx (+XXX), xxx bez ozáření (-XXX) xxxxxxx xxxxx xxxxxx závislosti xxxxxx xx koncentraci, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX) xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
(x) PIF = (XX50 (-UV)) / (XX50 (+XX))
Xxxxxxx XXX &xx; 5 předpovídá xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx XXX ≥ 5 předpovídá xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxx látka xxxxxxxxxxx xxxxx při +XXX x xxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx -XXX, xxxxx hodnotu XXX xxxxxxxxx, xxxxxxx xxx x xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx potenciálu. X xxxxxxxx xxxxxxxxx lze xxxxxxxxx xxxxxxx "&xx; XXX", xxxxxxxx se xxxxxxx -XX xxxxxxx xx xx nejvyšší xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (Xxxx), x tato xxxxxxx xx použije pro xxxxxxx "&xx; PIF";
(b) &xx; XXX = (Xxxx (-XX)) / (XX50 (+UV))
Lze xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx "&xx; XXX", xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciálu xxxx hodnota &xx; 1.
Xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxx xxxxx nevykazuje xx xx nejvyšší xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx, vypočítat xxx xxxxxxx XX50 (-UV) xxx hodnotu EC50 (+ XX), svědčí xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciálu. V xxxxxxxx xxxxxxxxx se xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx formální xxxxxxx "XXX = *1";
(X) &xx; PIF = *1 = (Cmax (-XX)) / (Xxxx (+XX))
Xxx xx xxxxxx xxxxx hodnotu "XXX = *1", je xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X xxxxxxxxx x) x x) by xxxx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x úvahu xxxxxxxxxxx dosažené ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx vitro.
2.3.2 Xxxxxxxxxxx model xxxxx 2: střední xxxxxxxx xxxxxx (XXX)
Xxxxxxxxxxxx lze xxxxxx novou xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxx vyvinut s xxxxxxxx údajů z xxxxxxxxx studie XX/XXXXXX (15) x byl xxxxxxxx naslepo x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx u xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxx XX filtry (13). Xxxxx model nemá xxxxxxx xxxx xxxxx XXX x xxxxxxxxx, xxx nelze xxxxxx xxxxxxx XX50. Xxxxx xxxxx xxxxxxx střední xxxxxxxx účinek (mean xxxxx effect) (XXX), xxxxxxxx, xxxxx je xxxxxxxx xx srovnání xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx xxx xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (Berlín) vyvinut xxxxxxxxx počítačový software, xxxxx xx volně x xxxxxxxxx.
2.4 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx zkoušky xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx (XXX ≥ 5 xxxx XXX ≥ 0,1) xxxxxxx, xx xxxxx xx fototoxický potenciál. Xxxxxxxx xxxx výsledku xxxxxxxx xxx koncentracích xxx 10 μx/xx, xx také pravděpodobné, xx xxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx podmínek jako xxxxxxxxx in xxxx. Xx-xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx pouze xxx xxxxxxxx zkušební koncentraci 100 μx/xx, mohou xxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xx se xxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx, xxxxxxxx x možné xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx. xx xxxxxxx modelu xxxxxx kůže in xxxxx.
Xxxxxxxxx výsledek zkoušky xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx vitro (XXX &xx; 5 xxxx XXX < 0,1) xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx pro xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx, kdy xxxx xxxxx xxxxxxx chemickou xxxxx xx po xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, xxxxxxxxx negativní xxxxxxxx, xx chemická xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxx lze xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx, xxx xxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx (XX50 +XX x XX50 -XX), xx xxxxxxxxxxxx xxxxx stejná. Xxxx-xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (+XX x -XX) x jsou-li xxxxxxxxxxx omezeny rozpustností xx xxxx xx xxxxxxx menší než 100 μx/xx, xxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx vhodná x xxxx xx xxx zvážena potvrzující xxxxxxx (xxxx. xx xxxxxxx xxxxxx lidské xxxx xx vitro xxxx xxxxxxxx xx xxxx).
3. ZPRÁVY
Protokol x xxxxxxx
Xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx:
- xxxxxxxxxxxxx údaje x xxxxx XXX, xx-xx xxxxx,
- fyzikální vlastnosti x xxxxxxx,
- fyzikálně-chemické xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx studie,
- xxxxxxx x fotostabilita, xxxx-xx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx zkoušené xxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxxx,
- procentuální koncentrace xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx (EBSS nebo XXX).
Xxxxx:
- typ x xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx-xx xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx na XXX xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx x) — xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xx xx:
- typ x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx, xxxxxxx),
- délka xxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x po xx).
Xxxxxxxx xxxxxxxx x) — xxxxxxxx chemické látky:
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx chemické xxxxx xxxxxxxxx jak xxx xxxxxxx UV/VIS, xxx xxx xxx,
- v xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxx látka vykazuje xxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxxxxx, zdůvodnění xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxx a složení xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx),
- xxxxx xxxxxxxx chemické xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx c) — xxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx zdroje xxxxxx,
- xxxxxxxxxx charakteristiky ozáření xx zdroje xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx propustnosti/absorpce xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx filtrů),
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x jeho xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- intenzita ozáření XXX x této xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xX/xx2,
- xxxxx xxxxxxxx XX/XXX světlu,
- xxxxx XXX xxxxxx (xxxxxxxxx × xxx), vyjádřena x X/xx2,
- xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx během xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx kultur xxxxxxxxxxx x temnu.
Zkušební xxxxxxxx x) — zkouška XXX:
- xxxxxxx xxxxx XX,
- xxxx xxxxxxxx XX,
- xxxxxxxxx podmínky (xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx, xxxxxxx),
- podmínky xxxxxxxx XX (extrakční činidlo, xxxxx xxxxxxxx),
- vlnová xxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx absorbance XX,
- xxxxx (xxxxxxxxxx) xxxxxx xxxxx, xx-xx xxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx, xx-xx xxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx střední životaschopnosti xxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx zkoušené xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) xxxxxxx xxx paralelních xxxxxxxxxxxxx +XXX x -XXX,
- xxxxxxx xxxxxx závislosti xxxxxx na xxxxxxxxxxx: xx-xx xx xxxxx, xxxxxxx hodnoty EC50 (+XXX) a XX50 (-XXX),
- srovnání xxxx xxxxxx závislosti xxxxxx xx xxxxxxxxxxx získaných x xxxxxxxx UVA/VIS x bez xxxx, x xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxx-xxxxxxxxxxx factor ) (XXX), xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx xxxxx xxxxxx) (XXX),
- xxxxxxxxxxx fototoxického xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx a) — xxxxxxxx negativní xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (absorbance xxxxxxxx XX) xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxx údaje xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx a směrodatná xxxxxxxx,
- kritéria xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx b) — xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxx EC50 (+XXX), XX50 (-XXX) x XXX-xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxxx xxxxx,
- dosavadní xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx: hodnoty XX50 (+XXX), XX50 (-XXX) x PIF, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
4. XXXXXXXXXX
(1) Xxxxxxxxx, X., Xxxxx, X., Döring, X., Xxxxxüxxxx, X. X., Xxxxxxx, S., Xxxxxx, X., L'Eplattenier, H., Xxxxxxx, M., Xxxxxx, X. X., Xxxxxx, X., Xxxxxxxxxxx, X., Xxxxx, X., Pape, X., Xxxxxxxxxxx, X., Xxxxxxxx, X., Xx Xxxxx, X., Xxxxxxxx, X., Xxxxxxxx, X. (1994), XXX/XXXXXX xxxxxxx xx xx vitro xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx: First xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x Xxxx/x 3T3 xxxx xxxxxxxxxxxxx assay, Xxxxxxxxxx xx vitro 8, 793-796.
(2) Xxxx (1998), Statement xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxx 3X3 XXX PT xxxx (xx xx vitro xxxx for xxxxxxxxxxxxx), Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx, Xxxxx Xxxxxxxx Xxxxxx: XXXXX xxx XXXX/X/2, 3 Xxxxxxxx 1997, XXXX 26, 7-8.
(3) Xxxxxxxxx, X., Xxxxx, M., Xxxxxx, X., Pape, X. X. W., Xxxxxxxxxx, X., Xx Xxxxx, X., Xxxxxüxxxx, X. G., Xxxxxxxx, X., Xxxxxxx, X., Xxxxxxxxx, X., Liebsch, X., Xxxxxx, X. X., Xxxxxx, T., Xxxxxxxxxxxxx, X., Potthast, X. X., Xxxxx, X., Sladowski, X., Xxxxxxxx, X., Xxxxxxx, X. (1998), XX/XXXXXX "Xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx", xxxxxxxxxx study, xxxxxxx xx phase II (xxxxx xxxxx), xxxx 1: xxx 3X3 XXX phototoxicity test, Xxxxxxxxxx xx Xxxxx 12, 305-327.
(4) XXXX Xxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxx, XXX/XX/XXXX/XX(96)9: Final Report xx xxx XXXX Xxxxxxxx on Xxxxxxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxx and Xxxxxxxxxx Criteria xx Xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx Xxxx Xxxxxxx, XXXX Xxxxxxxxxxxx Xxxxxx, Paris, 1996.
(5) Xxxxxx, W. X. (1993), X xxxxxx xxx in xxxxx xxxxxxxxx of substances xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, Xxxxxxxxxx in Xxxxx 7, 95-102.
(6) Santamaria, X., Prino, X. (1972), Xxxx xx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, Xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxxxxx and xxxxxxxxx chemistry Xxx. 3 Xxxx 1, Xxxxx Xxxxxxx Xxxxxxxxxx Xx, Xxxxxxxxx, XX–XXXX.
(7) Xxxxxxxxx, X., Lovell, X. X., Xöxxxx, X., Johnson, X. X., Maurer, X., Xxxxxxx, X. X., Xxxx, W. X. X., Sapora, X., Xxxxxxxxx, X. (1994), Xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx: The xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xx XXXXX workshop 2, XXXX 22, 314-348.
(8) Xxxxxx, X. X. (1989), Photosensitization. X: Xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx, (K. X. Xxxxx, xx.), Xxxxxx Xxxxx, Xxx York, 2. vyd., 79-110.
(9) Xxxxxxxxxxx, X., Xxxxxxx, X. X. (1985), Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx, Xxxxxxx. Xxxx. 24, 119-124.
(10) Xxxxxxx, L. A., Xxxxxx, W. X., Xxxxxxxxxx A. (1996). X: Xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, Xxxxxxxxxxxxxxxxx, (F. X. Xxxxxxxx, H. X. Xxxxxxx xxx.), Xxxxxx &xxx; Xxxxxxx, Washington XX, 5. vyd., 515-530.
(11) Xxxxxxx, X. X., Xxxxxx X. (1987), Xxxxxx xxxxxxx xxx human xxxx xxxxx: xxxxxxxxx of xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx keratinocytes, Cancer Xxx. 47, 1825-1829.
(12) XXXXX/XXXXX/XXXXXX, Xxxxxxxx Operating Xxxxxxxxx: Xxxx/x 3X3 XXX Xxxxxxxxxxxxx Xxxx, xxxxxxxx 23. xxxxxxxx 1997 M. Xxxxxxxxx, xxxxxxxxx 6. xxxxxx 1998 xxxxx Xxxxxxxxxx Xxxx xx the XX/XXXXXX xxxxxxx "Xx Xxxxx Xxxxxxxxxxxxxxx".
(13) Xxxxxxxxx, X., Balls, X., Xxxxxx, J., Pape, X. X. W., Xx Xxxxx, O., Xxxxxüxxxx, X. G., Xxxxxxxxx, X., Xxxxxxx, X., Lovell, W. X., Xxxxxxxxxxxxx (1998), X Study xx xxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxx xx UV Filter Xxxxxxxxx xxxx Annex XXX xx xxx XX Xxxxxxxxx 76/768/EEC xx xxx 3T3 XXX In Xxxxx Xxxxxxxxxxxxx Test, XXXX 26, 679-708.
(14) Xxxxxüxxxx, X. X., Xxxxxxxx, X. (1995), Mathematical xxxxxxxxx of xxxxxxxx xxxxxxxxx xx external xxxxxxx, Xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx Xxxxxxx, 3, 127-138.
(15) Xxxxxüxxxx, X. X. (1997), X xxxxxxx measure xx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx-xxxxxxxx xxxxxx xxx xxx xxx xxx xxxxxxxxxx xxx xx xxxx phototoxicity xx xxxxxxxxx, XXXX 25, 445-462."
"Xxxxxxx
&xxxx;
[1] Xxxxx xxxxxxxxxxx lze xxxxxx x xxxxxxxxxx (12).