Směrnice Xxxxxx 2000/33/XX
xx xxx 25. dubna 2000,
xxxxxx se xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx směrnice Xxxx 67/548/XXX x xxxxxxxxxx právních x xxxxxxxxx xxxxxxxx týkajících xx xxxxxxxxxxx, xxxxxx x označování nebezpečných xxxxx [1]
(Xxxx s xxxxxxxx xxx XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX SPOLEČENSTVÍ,
s xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx společenství,
s xxxxxxx xx směrnici Xxxx 67/548/XXX ze xxx 27. xxxxxx 1967 x xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxxx a xxxxxxxxxx nebezpečných látek [2], naposledy pozměněnou xxxxxxxx Evropského xxxxxxxxxx x Xxxx 1999/33/XX [3], x zejména xx článek 28 xxxxxxx směrnice,
vzhledem k xxxxx xxxxxxx:
(1) X xxxxxxx X směrnice 67/548/XXX xx stanoví xxxxxx xxx stanovení xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx vlastností, xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
(2) Xxxxx xx. 7 xxxx. 2 směrnice Xxxx 86/609/EHS xx xxx 24. listopadu 1986 x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx ochrany xxxxxx používaných xxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx xxxxx [4] xxxxx být xxxxx, xxx xxxx xx xxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx, je-li rozumně x xxxxxxxxx dostupná xxxx vědecky xxxxxxxxxx xxxxxx.
(3) Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx přílohy X xxxxxxxx 67/548/XXX xxxxxx alternativní xxxxxxxx xxxxxx, při xxxxx xxxxxx používána xxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxxxxx xx pro xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx podle xx. 3 xxxx. 1 xxxxxxxx 67/548/XXX.
(4) Xxxxxxxx xxxx směrnice xxxx x souladu xx xxxxxxxxxxx Výboru xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx technických xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx,
XXXXXXX TUTO XXXXXXXX:
Článek 1
Xxxx příloh X x II xxxx směrnice se xxxxxx do xxxxx X přílohy V xxxxxxxx 67/548/XXX.
Článek 2
1. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx x touto xxxxxxxx xxxxxxxxxx do 1. xxxxx 2001. Xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx Xxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx směrnici xxxx xxxx být xxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx úředním xxxxxxxxx. Xxxxxx odkazu xx xxxxxxx členské xxxxx.
2. Xxxxxxx xxxxx xxxxx Xxxxxx znění hlavních xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx působnosti xxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx a přijatými xxxxxxxxxxxxxx ustanoveními.
Článek 3
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x Úředním xxxxxxxx Xxxxxxxxxx společenství.
Xxxxxx 4
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X Bruselu xxx 25. dubna 2000.
Xx Xxxxxx
Xxxxxx Xxxxxxxöx
xxxxxx Xxxxxx
[1] Přijato xxxx xxxxxxxxxxxxx xx dvacáté xxxxx.
[2] Xx. věst. 196, 16.8.1967, s. 1.
[3] Xx. xxxx. X 199, 30.7.1999, x. 57.
[4] Xx. xxxx. X 358, 18.12.1986, x. 1.
XXXXXXX X
"X.40 LEPTAVÉ XXXXXX NA XXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxx xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx (XXX) a zkouška x xxxxxxxx modelu xxxxxx xxxx byly Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx (XXXXX, Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx Evropské Komise) (1, 2, 3) xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx XXXXX xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx lze xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx. Protokol x xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx stupně xxxxxxxx účinků (známé xxxxx xxxxxxxxxxx těžké xxxxxxxxx, X 35 x ostatní látky xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kůže, X 34) (2). Xxxxx x postup xxxx xxxxxxx xx xxxxxx; volba xxxxxxx, xxxxx má být xxxxxxx, závisí xx xxxxxxxxxxxx požadavcích x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxx Xxxxxx xxxx, xxxx X.
1.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx kůže: xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx zkoušeného xxxxxxxxx.
1.3 Referenční látky
Nespecifikovány, xxxxx xxx body 1.5.3.4 x 1.7.2.3.
1.4 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx — xxxxxxx XXX xx xxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xx xx xx 24 x xxxxxxxxx xx epidermální xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx schopností xxxxxxxx xxxxxx normální xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx), xxxxx xx xxxxxx xxxx snížení xxxxxxxxx TER xxx xxxxxxxx úroveň (5 xΩ) (4, 5). Xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx XXX xxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xx zkušebního postupu xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (definice xxx xxxxxxxxxx (6)) xxx xxxxxxx stupeň xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, aby xx xxxxxxx množství xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx získaných xxxxx pro tyto xxxxx chemických xxxxx (2, 7).
1.5 Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx — xxxxxxx TER na xxxx xxxxxxx
1.5.1 Xxxxxxx
Xxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx z xxxxxxx (20 — 23 xxxxxxx) xxxxxxx (Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx). Xxxxxxx a xxxxx xxxx xx opatrně xxxxxxxx holicím xxxxxxxx. Xxxxxxx se xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx (obsahujícího xxxx. xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x koncentracích zastavujících xxxx bakterií). Xxxxxxx xx třetí x xxxxxx xxx po xxxxxx omytí xxxxx xxxxx roztokem xxxxxxxxxx x xxxxxxx xx xx 3 dnů (x xxxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx starší xxx 31 xxx).
1.5.2 Příprava xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx usmrtí. Z xxxxxxx xxxxxxx se xxxx opatrně odstraní xxxxxxx kůže x xxxxxxxxxx tuk xx x kůže opatrně xxxxxxxxx. Xxxx se xxxx přeloží přes xxxxx xxxxxxxxx (XXXX) xxxxxxxx xxx, aby xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx s trubičkou. Xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx X-xxxxxxx, aby xxxx kůže upevněna, x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx. Rozměry xxxxxxxx x X-xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx 1. Xxxxxxx X-xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx pokryje vrstvou xxxxxxxx. Trubička xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx do xxxxxxxxxxx komory xxxxxxxxxx xxxxxx síranu hořečnatého (154 xX) (xxxxxxx 2).
1.5.3 Xxxxxxxx xxxxxx
1.5.3.1 Xxxxxxxx zkoušeného xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx látka (150 μx) xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx uvnitř xxxxxxxx (xxx. 2). Xxx xxxxxxxx pevných xxxxxxxxx xx použije xxxxxxxxxx množství tak, xxx xxxx pokryta xxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx xx povrch xxxxx látky přidá xxxxxxxxxxxx xxxx (150 μx) x trubička xx xxxxx protřepe. Xxxx látkami x xxxx xx mělo xxxxx x maximálnímu xxxxx. U xxxxxxxxx xxxxx xxxx může xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xx 30 °X, aby se xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx rozemletím xx xxxxxx xxxxxxxx nebo xx prášek.
Ke xxxxxxx xxxxx látky xx xxxxxxx tři xxxxxxx xxxx. Zkoušená xxxxx xx aplikuje xx xxxx 24 x (xxx xxxx xxx 1.5.3.4). Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx x teplotě xxxxxxx 30 °X. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx x trubičce xxxxxx, xxx xxxxxxxx omytím xxxxxxx vody xxxxx xx 30 °X.
1.5.3.2 Xxxxxx TER
TER se xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx pro střídavý xxxxx (xxxx. XXX 401 xxxx 6401 xxxx xxxxxxxxxxxx). Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx sníží xxxxxxxx dostatečného xxxxxx 70 % ethanolu xxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Po xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx odstraní převrácením xxxxxxx a xxxx xx zvlhčí xxxxxxxx 3 ml xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx (154 xX). Xxxxxxxxx můstku xx xxxxxx na xxx strany xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx x xΩ/xxxxxx xxxx (xxxxxxx 2). Xxxxxxx elektrod x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx elektrod xxx xxxxxxxxxxxx xxxx uvedeny xx obrázku 1. Xxxxxx vnitřní (xxxxx) xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxx konec xxxxxxxxx trubičky, aby xxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Vnější (xxxxx) xxxxxxxxx je xxxxxxxx xxxxxx receptorové komory xxx, aby spočívala xx dně xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx spodkem xxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxx 1), neboť xxxx vzdálenost xx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xx xxxxx xx xxxxxxxx, xx xx-xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx než 20 xΩ, xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx látky na xxxxxxxxxxx xxxxxx terčíku xxxx. X odstranění xxxx xxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxx. xxx, xx xx xxxxxxxxx trubička xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx x 10 x xx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxxx x měření xx opakuje s xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx XXX (střední hodnoty) xxxx přijatelné, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx spadají xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxx popsanou xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxx doporučeny xxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx přijatelná xxxxxxx xxxxxx:
|
Xxxxxxxx |
Xxxxx |
Xxxxxxx xxxxxx (kΩ) |
|
Pozitivní |
10M xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (36 %) |
0,5–1,0 |
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxx voda |
10–25 |
1.5.3.3 Upravený xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xxxx-xx xxxxxxx XXX xxx xxxxxxxxx aktivní xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxx 5 xΩ, xxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx pozitivní (2).
1.5.3.3.1 Aplikace x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X
Xx xxxxxxxxx aplikaci xxxxxxxx látky xx xx epidermální xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx kůže xxxxxxxx xx 2 x 150 μl 10 % xxxxxxx xxxxxxx sulforhodaminu X x xxxxxxxxxxx vodě. Xxxxxxx xxxx se xxxx xxxxxxxxx 10 x xxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx sejmou x xxxxxxxxx trubičky x xxxxxx xx xx xxxxxxxx (např. 20 xx skleněné lahvičky xxx xxxxxxxxxxx spektrometrii) xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx (8 ml). Lahvičky xx xxxxx 5 xxx. xxxxxxxxxxxx, aby xx odstranilo xxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxx oplachování xx xxxx xxxxxxxx, a xxxx se terčíky xxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 5 xx 30 % xxxxxxx (x/X) xxxxxxx-xxxxxxx-xxxxxxx (SDS) x xxxxxxxxxxx xxxx x inkubují se xxxx xxx xxx 60 °X. Xx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx kůže xxxxxx x xxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx 8 xxx. xxx 21 °C (xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx ˜ 175). 1 xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx poté zředí 4 xx 30 % (x/X) xxxxxxx XXX x destilované xxxx. Xxxxxxxxxx (X) xx měří xxx xxxxxxxxx 565 xx.
1.5.3.3.2 Xxxxxxx obsahu xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxx sulforhodaminu B xx terčík kůže xx xxxxxxx x xxxxxx A (xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X při 565 xx = 8,7 × 104; xxxxxxxxxx xxxxxxxx = 580). Xxxxx xxxxxxx sulforhodaminu X se vypočte xxx každý terčík xxxx x poté xx vypočte xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx vázání xxxxxxx jsou xxxxxxxxxx, xxxxx hodnoty xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx spadají xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx x přístroje xxxx xxx uvedení xxxxxxxxx xxxxx doporučeny xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx obsahu barviva:
|
Kontrola |
Látka |
Rozmezí xxxxxx xxxxxxx (μx/xxxxxx xxxx) |
|
Xxxxxxxxx |
10X kyselina xxxxxxxxxxxxxx (36 %) |
40-100 |
|
Negativní |
Destilovaná voda |
15-35 |
1.5.3.4 Xxxxxxxxx informace
Látky xxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx dobu (xxxx. 2 xxxxxx), aby xx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxx jsou xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxx ukázala, xx xxxxxxxxx XXX xxxxxxxxxxxx leptavé xxxxxx x xxxxxxxx zkoušených xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xx xxxx 2 hodin (2), xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx správnou xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxx leptavých xxxxxx xxx 24xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx zařízení x xxxxxxx experimentální postup xxxxx mít xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx XXX. Práh 5 Ω pro předpověď xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx z údajů xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxx xxxx popsány x xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxxxx hodnotu xxxxxx xxxxxxxxx xxxx referenčních xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx použitých xx validační xxxxxx (3).
1.6 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx — xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx až xx xxxx 4 hodin xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx sestávající x rekonstruované xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx způsobit xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx pokles xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (stanovený např. xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx XXX) xxx definovanou xxxxxxxx xxxxxx. Podstata xxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxxx jsou xx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx rohovitou xxxxxxx (difuzí xxxx xxxxx) a xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxx buněk x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7 Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx — xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx lidské xxxx
1.7.1 Xxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxx lidské xxxx xxxxx pocházet x xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx musí xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a vrstvu xxxxxx xxxxx xxx xx. Bariérová xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx dostatečná. Xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx k xxxxxxxxxxxx látkám, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx vysoká, xxx bylo xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x negativní kontrolní xxxxx. xxxxxxxxxxxxxx buněk (xxxxxxxxx xxxx. xxxxxxx XXX, xx. měřením xxxxxxx xxxxxxxxxx X) xx xxxxxxxx negativní xxxxxxxxx xxxxx musí xxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx buněk xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (ve xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) xxxx být ve xxxxxxxxxxxxxxx mezích. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx je, xxx xxxxx odpovídal mezinárodním xxxxxxxxxx xxx validaci (2).
1.7.2 Zkušební postup
1.7.2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx materiálu
U xxxxxxxxx xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxx dostatečné xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx pokrylo xxxxxx xxxx (minimálně 25 μx/xx2). X pevných xxxxxxxxx musí být xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx xxxx, x xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx, xxx byl zajištěn xxxxx xxxx x xxxx; xxxxx xxxxx xx xxxx být xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx široké xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (2). Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx musí xxx xxxxxxxx materiál x xxxxxxx xxxx opatrně xxxxxxxxx fyziologickým xxxxxxxx.
1.7.2.2 Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx
X xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxx validovaná xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx stanovení xxxxxxx XXX, xxx xxx xx v xxxxxxx xxxxxxxxxxxx prokázalo, xx xxxxxxxxx správné x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (2). Xxxxxx xxxx xx xxxxxx xx xxxxxxx XXX o xxxxxxxxxxx 0,3 xx/xx xxx xxxxxxx 20-28 °X xx dobu 3 xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx měřením absorbance X při xxxxxx xxxxx 545 až 595 xx.
1.7.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx model xxxx x přesné xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx atd. xxxxx xxx velký xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x chemických látek xxxxxxxxx ve xxxxxxxxx xxxxxx XXXXX (3). Xx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx s mezinárodními xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx x xxxx laboratořemi xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx spektrum xxxxxxxxxx xxxxx. Metoda xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx vědeckou xxxxxxxx (2) a xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx publikovány xx vědeckém časopise x xxxxxxxxxxxxx odbornou xxxxxxx.
2. ÚDAJE
2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
2.1.1 Zkouška XXX xx xxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx (kΩ) xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx včetně xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, o xxxxxxxxx xxxxxxxxx a x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx měly být xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxx.
2.1.2 Xxxxxxx s xxxxxxx lidské xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxx X x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x procentech xxx zkoušený materiál, xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx x pro xxxxxxx standardní referenční xxxxxxxx látky xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx opakovaných xxxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx xxxxxxxxx x o xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx měly xxx uvedeny xx xxxxx xxxxxxx.
2.2 Xxxxxxxxx x interpretace xxxxxxxx
2.2.1 Xxxxxxx XXX xx xxxx xxxxxxx
Xx-xx hodnota XXX dosažená pro xxxxxxxxx látku xxxxx xxx 5 xΩ, xxxx látka xxxxxx. Xx-xx hodnota XXX xxxxx nebo xxxxx 5 kΩ x xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx látku xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx žíravá.
U xxxxxxxxx xxxxxxxxx látek xxxx xxxxxxxxxxx organických xxxxx, které dávají xxxxxxx XXX menší xxxx xxxxx 5 xΩ, lze xxxxxxx xxxxxxxxx průniku xxxxxxx. Xx-xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x terčíku xxxx větší xxxx xxxxx xxxxxxxxx obsahu xxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx použití 36 % XXx jakožto xxxxxxxxx xxxxxxxx, je xxxxxxx xxxxxxxx látky xxxxxxxx pozitivní, x xxxxx je xxxx xxxxxx. Xx-xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx kůže xxxxx xxx xxxxxxx obsah xxxxxxx x terčíku xxxx získaný xxxxxxxx xxx xxxxxxx 36 % HCl, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, x látka xxxx xxxx žíravá.
2.2.2 Xxxxxxx x modelem xxxxxx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxx X xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 % xxxxxxxxxxxxxxx buněk; hodnoty xxxxxxxxxx X xxxxxxxx xxx každý xxxxxxxx xxxxxx lze použít x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx procentuální xxxxx životaschopnosti xxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx materiálů, které xxxxxx žíravé (xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx třídy xxxxxxxxx xxxxxx), musí xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx definován xxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx, že xx xxxxxx (2).
3. XXXXXX
Xxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxx xxxxx:
- xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx fyzikálně-chemické xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx měly xxx xxxxxxx xxx referenční xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx postupu,
- popis x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx TER) nebo xxxxxxx životaschopnosti xxxxx x xxxxxxxxxx (xxxxxxx x modelem xxxxxx xxxx) xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, pozitivní a xxxxxxxxx kontroly x xxxxxxx xxxxxxxxxx referenční xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx opakovaných xxxxxxxxxxxxx x středních xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx ve xxxxx xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pozorovaných xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
4. LITERATURA
(1) XXXXX (1998), XXXXX Xxxx &xxx; Views, XXXX 26, 275-280.
(2) Fentem, X. X., Xxxxxx, X. X. B., Xxxxx, X., Botham, X. X., Xxxxxx, X. X., Earl, X. X., Xxxxxxx, X. X., Xxxxxxxxxx, X-X., Xxxxxxx, M. (1998), Xxx XXXXX xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx. 2. Xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xx xxx Xxxxxxxxxx Xxxx, Xxxxxxxxxx xx xxxxx 12, 483-524.
(3) Xxxxxxx, X. X., Xxxxxxx, X. G., Xxxxxx, X. H., Xxxxxx, X., Walker, X. X., Worth, A. X. (1998), The XXXXX xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxx xxxxx for xxxx xxxxxxxxxxx. 1. Xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xx xxx xxxx xxxxxxxxx, Xxxxxxxxxx xx xxxxx 12, 471-482.
(4) Xxxxxx, X. X. X., Xxxxxxxxx, M. X., Rhodes, C. (1986), An xx xxxxx skin xxxxxxxxxxx xxxx — xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx, Food Xxxx. Xxxxxxx. 24, 507-512.
(5) Botham, X. X., Hall, X. X., Xxxxxxx, X., XxXxxx, X. C., Xxxxxxxxx, D. X., Xxxxxxx, X., Xxxxxxxxx, X., Esdaile, X. X., Gardner, J. (1992), The skin xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx: results xx xx xxxxxxxxxxxxxxx trial, Xxxxxxxxxx xx xxxxx 6, 191-194.
(6) Worth, X. X., Xxxxxx, X. H., Balls, X., Xxxxxx, P. X., Xxxxxx, X. X., Xxxx, X. X., Xxxxxxx, X. X., Liebsch, X. (1998), Xx evaluation xx the xxxxxxxx XXXX xxxxxxx strategy xxx xxxx xxxxxxxxx, XXXX 26, 709-720.
(7) Xxxxxx, X. X., Xxxxxxxxxxx, X., Xxxxxxx, X. X., Curren, X. D., Xxxxxxx, X. J., Xxxxxxx, X. R., Xxxxxx, X. C., Hildebrand, X., Xxxxx, X. X., Xxxxxxx, X., Xxxxxxxx, P., Xxxxxxx, X., Xxxxx, X., Xxxxxxx, X. X., Xxxxxxxx, X., Xxxxxx, X. X., Xxxxx, X. 1995), X xxxxxxxxxxxxx study on xx vitro skin xxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xx XXXXX xxxxxxxx 6, XXXX 23, 219-255.
Xxxxxxx 1
Xxxxxxx 2"
&xxxx;
XXXXXXX XX
"X.41 XXXXXXXXXXXX — XXXXXXX FOTOTOXICITY 3X3 XXX XX XXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx první expozici xxxx určitým chemickým xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx systémovém xxxxxx chemické xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxxxx x identifikaci fototoxického xxxxxxxxxx xxxxxxxx látky, xx. xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xx zkoušené xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx UV xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx světlu.
Protože xxxxx xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx vyvolané kombinovaným xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx sloučeniny, xxxxx jsou fototoxické xx xxxx po xxxxxxxxxx xxxxxx a xx nanesení xx xxxx, x xxxxxx xxxxxxxxxx, které xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx jako xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 NRU xx xxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx XX/XXXXXX v xxxxxx 1992 — 1997 (1, 2, 3) s cílem xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx k xxxxxx používaným zkouškám xx xxxx. V xxxx 1996 doporučila xxxxxxxx skupina XXXX xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx fototoxicity (4).
Xxxxxxxx xx xxxxxxx fototoxicity 3X3 XXX xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx u xxxxxx x u xxxxxxx a xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx těchto xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx. Zkouška xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx jiných xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx látky x světla, xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, které xxxxxxxx tyto xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx fototoxicity 3X3 XXX in xxxxx xxxxxxxxx reagovat. Zkouška xxxx xxxx xxxxxxxx x tomu, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx stupně xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx.
1.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxx xx W/m2 xxxx xX/xx2.
Xxxxx světelného xxxxxx: xxxxxxxx (xxxxxxxxx × xxx) xxxxxxxxxxxxxx (XX) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxxxx v xxxxxxx (X × x) xx xxxxxx xxxxxxx, xxxx. X/x2 xxxx X/xx2.
Xxxxxx xxxxx XX xxxxxx: označení xxxxxxxxxx xxxxxx XXX (Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx xx x'Xxxxxxxxx): XXX (315400 nm), XXX (280315 xx) x XXX (100280 xx). Používají xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx: xxxx xxxxxxx xxxx XXX x XXX xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 320 xx x xxxxx XXX xxxx být rozděleno xx UV-A1 a XX-X2 x xxxxxxx xxxxx 340 nm.
Životaschopnost xxxxx: xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx populace (xxxx. příjem xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx lysosomů) x který v xxxxxxxxxx xx měřeném xxxx a xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x celkovým xxxxxx x/xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxx kontrolám (xxxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxx xxxxx postupem xxxxxxx (x XX, xxxx xxx XX), xxx xxxxxx exponovány xxxxxxxxx xxxxxxxxx látkám.
Předpovědní model: xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. V xxxxxxxxxx metodice xxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx XXX x veličinu XXX.
XXX (xxxxx-xxxxxxxxxx factor — fotoiritační faktor): xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx stejně účinných xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (EC50) xxxxxxxx xxxxx, x xx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX/XXX světlem (+ XX) x xxx xxxx (-UV).
MPE (xxxx xxxxx xxxxxx — xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx): xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx získaných xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX/xxx xxxxxxx (+ XX) x xxx xxxx (-XX).
Xxxxxxxxxxxx: xxxxxx xxxxxxx reakce, vyvolaná xx první xxxxxxxx xxxx xxxxxxx chemickým xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx po xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx látky.
Fotoiritace: xxxxx xxxxxx pojmu "xxxxxxxxxxxx", xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xx kůži xx xxxxxxxx chemickým xxxxxx (xxxxxxx xxxx xxxxxx). Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx vedou xxxx x xxxxxxxxxxxxxx buněčnému xxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx).
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, ke xxxxx xxxxxxxxx při xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x světla x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx jeden xxxx xxx týdny xxxx tím, xxx xxx xxxxxx kůže xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx: genotoxická odezva xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx je xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx dávce XX/XXX xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx látce.
Fotokarcinogenita: xxxxxxxxxxxxx vyvolaná opakovanou xxxxxxxx světla x xxxxxxxx xxxxx. Termín xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xx používá x případě, xxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx XX xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.3 Xxxxxxxxxx látky
Vedle xxxxxxxxx xxxxxxxxx chemické xxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxx souběžně xxxxxxx při xxxxx xxxxxxx, xx pro xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxx srovnáních xxxxxxxxxx xxxxxx (1, 3, 13).
1.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x mnoha xxxx xxxxxxxxxx látek (5, 6, 7, 8). Xxxxxx xxxxxxx společným xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx světelnou xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (Xxxxxxxxx-Xxxxxxxx xxxxx) xxxxxxxx fotoreakce xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zkoušení podle xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxx xxx xxxxxxxxx UV/VIS xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx chemické xxxxx (xxxx. xxxxx Xxxxxxxx OECD 101). Xx-xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx 10 l.mol-1.cm-1, xxxxxxxx xxxxx nemá xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx vitro nebo xxxxxxxxx jinou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx na nepříznivé xxxxxxxxxxxx xxxxxx (dodatek).
1.5 Xxxxxxxx zkušební xxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxxxxxx čtyři xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxx absorpce xxxxxx (xxxxxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxx x fototoxické xxxxxx (7). Xxxxxxx xxxxx x poškození xxxxx. Xxxxxxx fototoxicity 3X3 XXX in xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx chemické látky xxx xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx XXX/XXX xxxxxx a xxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx je v xxxx zkoušce vyjádřena xxxx xxxxxxxxxxxx závislé xxxxxxx xxxxxx vitálního xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (XX) (9) 24 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx látky x ozáření.
Buňky Xxxx/x 3X3 se 24 x xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxx 96xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx zkoušenou xxxxxxxxx xxxxx xx poté 1 x preinkubují xxxx různými xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx exponována xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx XXX/XXX xxxxxx 5 J/cm2 XXX (+ XX xxxxxxxxxx), xxxxxxx druhá xxxxxxxx xx xxxxxxx x temnu (-XX xxxxxxxxxx). X xxxx xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx médium xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xx dalších 24 x xxxxxxxx je xxxxxxx životaschopnost xxxxxxxxx 3xxxxxxxxx příjmem xxxxxxxxx xxxxxxx (XXX). Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx vzhledem x neexponované xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxx x xxxx zkušebních xxxxxxxxxxx. Xxx předpověď xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx závislé xxxxxx xxxxxxx při xxxxxxx (+ UV) a xxx xxxxxxx (-XX), xxxxxxx při xxxxxxx XX50, xx. při xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 50 % xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx kontrolami.
1.6 Xxxxxxxx jakosti
Citlivost buněk xx XXX, xxxxxxxxx xxxxx: citlivost xxxxx xx UVA xx xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx se xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx vitro, xxxxxx xxx se xxxxx xxxxxx UVA xxxxxx 1 xx 9 X/xx2 x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x den xxxxxxx xxxxxxxx XXX. Buňky xxxxxxx xxxxxxxxx jakosti, xxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx 5 X/xx2 menší než 80 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxx buněk.
Citlivost xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx UVA při xxxxxxxxxx xxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxx kritéria xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx kontroly (xxxxx x XXXX (Xxxxxx fyziologický xxxxxx) x 1 % xxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) nebo 1 % xxxxxxxxx (XxXX)) xxxx xxx xxxx xxxxxxxx xxx + UVA xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx 80 % vzhledem x xxxxxxxxxxxxxxxx neozářených xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx (-XXX).
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (X540 NRU) xxxxxx v xxxxxxxx XX xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, zda 1 × 104 xxxxx xxxxxxxxxx na xxxxx xxxxx zachovalo xxx xxxxx xxxxx dvou xxx zkoušky xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxx). Xxxxxxx splňuje xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, jestliže xxxxxxx xxxxxxx X540 XXX neexponovaných xxxxxxx xx ≥ 0,2.
Pozitivní xxxxxxxx: xxx každé xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx látka. Při xxxxxxxxx xxxxxx XX/XXXXXX xxx použit xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (XXX), a xx xxxx xxxxxxxxx. Pro XXX xxxxxxxx podle xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX in xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx zkoušky: xxx XXX ozářený (+ UVA): XX50 = 0,1 xx 0,2 μg/ml, xxx XXX xxxxxxxxx (-UVA): XX50 = 7,0 xx 90,0 μx/xx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX), xx. posun xxxxxxx XX50, by xxx xxx xxxxxxx 6.
Namísto XXX xxxxx být xxxxxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx jiné xxxxx fototoxické chemické xxxxx vhodné x xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx hodnocené zkoušené xxxxxxxx látky. X xxxxxxx případě xx xxxx být xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx údajů xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx přiměřeným způsobem xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XX50 x XXX xxxx MPE (střední xxxxxxxx xxxxxx).
1.7 Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx
1.7.1 Xxxxxxxx
1.7.1.1 Xxxxx
Xxx validační xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx fibroplastů — Xxxx/x 3X3, xxxx 31 — xxx x xxxxx XXXX, xxxx z xxxxx XXXXX x xx tedy xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxx stejném xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, že xxxx kultivační xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx potřebám xxxxx, xxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, a měly xx být xxxxxxx xxxxx xxxxx, jsou-li xxxxxxxx xxxxxx kontroly xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx XX xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx, xxxx xx být xxxxxxx buňky Xxxx/x 3X3 x xxxxxx x xxxxxxxxx dosažitelným xxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxx xxx xxx pasáže. Xx xxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3X3 na UVA xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx popsaným x xxxx xxxxxxxx.
1.7.1.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx buněčné xxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx média x xxxxxxxxx podmínky. X buněk Balb/c 3X3 xx xxxxx x XXXX (Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxx) xxxxxxxxx 10 % xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, 4xX xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x streptomycinem a xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx při 37 °X/7, 5 % XX2. Xxxxxxx xxxxxxxx xx, xxx kultivační xxxxxxxx zajistily, xxx xxx buněčný cyklus xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx použité buňky xxxx xxxxxxx xxxxx.
1.7.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx kultur xx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx jednou se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx fototoxicity 3X3 XXX in xxxxx.
Xxx zkoušce xxxxxxxxxxxx xx buňky xxxxxxxx xx kultivačního xxxxx x xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx konfluence xx konce xxxxxxx, xx. do xxxxxxxx, xxx je xx 48 x od xxxxxxxx stanovována xxxxxxxxxxxxxxx. Xxx buňky Balb/c 3X3 xxxxxxxxxxx x 96xxxxxxxxx destičkách xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 1 × 104 xxxxx xx xxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx do xxxx xxxxxxxxxx 96xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx jsou poté xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx za xxxxxxxx xxxxxxxx kromě xxxx, xxx xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx (+XXX/XXX) a xxxxx xx udržována x xxxxx (-UVA/VIS).
1.7.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx požadavkem xxx xxxxx zkouškách xx xxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx potenciálu, xxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxx xxxx toxinu xx xxxx xxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx metabolická xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxx xxx xx nezbytné xxx xx vědecky xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx zkouška provedena xx systémem xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.7.1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx/xxxxxxxx
Xxxxxxxx chemické xxxxx xxxx xxx čerstvě xxxxxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxxx, xxxxx údaje x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx skladování. Může-li xxxxx k xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, musí xx xxxxxxxx xxxxx provádět xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx roztoku, xxxx. x Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXXX) xxxx ve xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x fosfátovým xxxxxx (XXX), který xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xX xxxxxxxxxx absorbující xxxxxx, xxx nerušily při xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx rozpustností xx xxxx by xxxx být xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 100xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx by xxxx xxx zředěny x xxxxxx 1:100 xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx, xxxx být xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 1 % xxx. xx xxxxx xxxxxxxxx, tj. v xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx ve všech xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx chemické xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) x xxxxxxx (XxXX). Mohou xxx použita jiná xxxxxx méně xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx. aceton), xxx xxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx specifické xxxxxxxxxx, xxxx. xxxxxx xx xxxxxxxxx chemickou látku, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx radikálů.
Je-li třeba, xxxx být xxx xxxxxxxxx rozpouštění xxxxxxx xxxxxxx x/xxxx xxxxxxxxx x/xxxx xxxxxxx xx 37 °C.
1.7.1.6 Xxxxxxx XX xxxxxxx/xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx: xxxxx xxxxxxxx zdroje xxxxxx x vhodné xxxxxxxx je kritickým xxxxxxxx zkoušení fototoxicity. Xxxxxx v xxxxx XXX x xx xxxxxxxxxx pásmu je xxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxxxxxxxxxxx (7, 10), xxxxxxx xxxxxx x xxxxx XXX xx xxxx xxxxxxxxxx x xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, přičemž xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx mezi 313 xx x 280 nm 1000xxxx (11). Xxxxxxxx pro xxxxx vhodného světelného xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx důležitý požadavek, xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, x aby xxxxx xxxxxxxxxx záření (xxxxxxxxxxx xx přijatelnou xxxx) xxxx dostatečná xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx látek. Použité xxxxxx délky a xxxxx, xxxxxx xxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxxxx), xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx poškozovat xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx světla xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx světla. V xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx vysokotlaká xxxxxxx halogenová xxxxxxx. Xxxxx x nich xx xx xxxxxx, xx emituje méně xxxxx x xx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx všechny xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx významné xxxxxxxx XXX xxxxxx, xxxx xx být xxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx UVB xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU in xxxxx xx xxxx xxx použito xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XXX xxxxxx (XXX:XXX ˜ 20:1). Příklad spektrální xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx validační studii xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx (3).
Dozimetrie: xxxxxxxxx xxxxxx (intenzita ozáření) xx xxxx xxxxxxxxxx xxxx každou zkouškou xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx XX-xxxxx. XX-xxxx xxxx xxx pro xxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Funkčnost XX-xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx x xx xxxxx účelem xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx kalibrovaný XX-xxxx xxxxxxxx typu. X xxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxx x xxxxxxx časových odstupech xxxxxx k měření xxxxxxxxxx xxxxxxxxx záření xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx XX-xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx odbornou xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx 5 J/cm2 xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx necytotoxická xxx xxxxx Xxxx/x 3X3 a xxxxxxxxxx xxxxx x excitaci x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Pro xxxxxxxx 5 X/xx2 xx dobu 50 xxx. xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx 1,666 MW/cm2. Xxxxxxxx je použita xxxx xxxxxxx xxxxx xxxx jiný světelný xxxxx, xxxx xxx xxxxx XXX xxxxxx xxxxx upravena, xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxx dostatečná xxx xxxxxxx standardních xxxxxxxxxx. Xxxx světelné xxxxxxxx xx vypočte xxxxx xxxxxxxx:
x(xxx) = xxxxx xxxxxxxxxx záření (X/xx2) 100 / intenzita xxxxxxx (xX/xx2) 60 (1 X =.X xxx)
1.7.2 Zkušební podmínky
Maximální xxxxxxxxxxx xxxxxxxx chemické xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx 100 μx/xx, xxxxx všechny xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx; xxx vyšších xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx). Hodnota pH xxxxxxxx koncentrace xx xxxx být vyhovující (xX 6,5 — 7,8).
Xxxxxxx koncentrací xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx (+ UVA) x bez světla (-XXX) xx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx experimentech xxx xxxxxxxx rozmezí. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxx xxx, aby xxxx xxxxxx závislosti xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (s xxxxxxxxxxx faktorem ředění).
1.7.3 Xxxxxxxx postup [1]
1.7.3.1 Xxxxx den
Připraví xx xxxxxxx suspenze 1 × 105 buněk/ml x xxxxxxxxxxx xxxxx x 100 μx xxxxxxxxxxxx média se xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx jamek 96xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxx). Xx zbývajících xxxxx xx dávkuje po 100 μx buněčné xxxxxxxx x hustotě 1 × 105 xxxxx/xx (1 × 104 xxxxx xx xxxxx). Xxx každou xxxxxxxxx chemickou xxxxx xx xxxxxxxx dvě xxxxxxxx: xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (-XXX) x xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (+XXX).
Xxxxx xx inkubují 24 x (7,5 % XX2, 37 °C), xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, jejich xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx růst.
1.7.3.2 Xxxxx xxx
Xx xxxxxxxx xx kultivační médium x xxxxx dekantuje x každá xxxxx xx promyje xxxxxxx 150 μl EBSS/PBS. Xxxxx se 100 μx XXXX/XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx). Aplikuje xx 8 xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x temnu xx xxxx 60 xxx. (7,5 % XX2, 37 °C).
K xxxxxxxxx části xxxxxxx x xxxxxxxx XXX xx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 50 xxx. xxxxxxx xxxx xxxxx 96xxxxxxx xxxxxxxx UVA xxxxxxx x xxxxxxxxx 1,7 XX/xx2 (5 X/xx2. Aby xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx, větrá xx xxxxxx ventilátoru. Xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxx XXX xx xxxxxxxxx 50 xxx. (xxxx xxxxxxxx XXX) v temnu xxx xxxxxxxx teplotě.
Zkušební xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx jamka xx promyje xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX. XXXX/XXX xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx médiem x xxxxxxxx xx přes xxx (18-22 x) (7,5 % XX2, 37 °X).
1.7.3.3 Xxxxx xxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx se xxxxxxxxxx pod xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx buněk způsobené xxxxxxxxxxxx účinkem zkoušené xxxxxxxx xxxxx. Doporučuje xx xxxxxxxx tuto xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx experimentální chyby, xxxxx záznamy xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx fototoxicity xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx 150 μx xxxxxxxxxxxx EBSS/PBS x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx 100 μl xxxxx XX x inkubuje xx 3 x xxx 37 °C xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x 7,5 % XX2.
Xx xxxxxxxx se xxxxxx XX xxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX. XXXX/XXX xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx (případně lze xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx poloze).
Přidá xx xxxxxx 150 μx xxxxxxx připraveného xxxxxxx xxxxxxxx x kyseliny xxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx NR.
Destička xx xxxxxx 10 xxx. xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xx NR x buněk xxxxxxxxx x xxxxxxxxx homogenní xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx extraktu XX xxx 540 xx, xxxxxxx se xxx xxxxxxxx použije xxxxx xxxxx. Xxxxx se xxxxx ve xxxxxxx xxxxxxx (xxxx. ASCII) x xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx analýzu.
2. XXXXX
2.1 Xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx při xxxxxxx XXX/XXX xxxx xxx xxxx. Xx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxx nastaven xxx, xxx xxxx xxxxx proložit xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Vzhledem x xxxx, xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx být xx xx xxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx xxxxxx pro xxxxxxxxxx x xxxxx (-UVA) xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xx být xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx (+XXX), xxxx být xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx koncentrací, xxxxx xxxx být v xxxx částech xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx lišily, xx-xx xxx xxxxxx xxxxxxxxx uspokojivé xxxxxxx xxxxx. Xxxx-xx v xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (-XXX a +UVA) xxxxxxxxxxxx zjištěna, stačí xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx intervaly xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxxxxx koncentrace.
Ověření xxxxx pozitivního xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx. Negativní xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx, jestliže byla xxxxxxxx xxxxxxxx látka xxxxxxxx za xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. X xxxxxxxx případech stačí xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx hraničních xxxxxx xxxxxxxxxxxxx modelu by xxxx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xx-xx opakované xxxxxxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxxx, může xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Klíčovou xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. X xxxxxx důvodu xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx (xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx zkoušky. Xxxxxxxxxx xxxx být xxxxx v xxxxx xxxxxxxx inkubační xxxx xxxx ozářením. Xxxxxxxx xxxx může xxx xxxxxx u chemických xxxxx xxxxxxxxx xx xxxx.
2.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx-xx xx xxxxx, xxxxxxx xx koncentrace xxxxxxxx xxxxxxxx látky xxxxxxxxxxxx 50 % xxxxxxxx xxxxxxxxx příjmu xxxxxxxxx xxxxxxx (XX) (EC50). Xxx xxx učinit xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx Hillovou xxxxxx xxxx logistickou xxxxxxx) xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx metod xxxxxx proložení (14). Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx XX50 xxx xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx vhodným xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kvalita xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx XX50 xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxx xxx x: xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxx x: xxxxxxxxxxxxxxxxx), neboť v xxxxx xxxxxxxxx bude xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx koncentraci téměř xxxxxxxx.
2.3 Xxxxxxxxx výsledků (xxxxxxxxxxx xxxxxx)
2.3.1 Xxxxxxxxxxx xxxxx — verze 1: xxxxxxxxxxxx faktor (XXX)
Xxxxxxxx jsou v xxxx xxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxx (+XXX), xxx xxx xxxxxxx (-XXX) xxxxxxx úplné xxxxxx závislosti odezvy xx xxxxxxxxxxx, lze xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX) xxxxxxxxx xxxxx tohoto xxxxxx:
(x) XXX = (XX50 (-XX)) / (XX50 (+XX))
Xxxxxxx PIF &xx; 5 xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx XXX ≥ 5 xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciálu.
Jestliže xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx pouze při +XXX x xxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx -XXX, xxxxx xxxxxxx XXX xxxxxxxxx, xxxxxxx xxx x xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx potenciálu. X xxxxxxxx případech xxx xxxxxxxxx hodnotu "&xx; XXX", xxxxxxxx xx xxxxxxx -XX zkouška xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (Xxxx), x xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx pro xxxxxxx "&xx; XXX";
(x) &xx; XXX = (Xxxx (-XX)) / (XX50 (+XX))
Xxx xx xxxxxx xxxxx hodnotu "&xx; PIF", xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx > 1.
Xxxxxxxx nelze x xxxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx koncentrace xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxxx EC50 (-XX) xxx xxxxxxx XX50 (+ XX), svědčí xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciálu. V xxxxxxxx případech xx xxx xxxxxxxxxxxxxx výsledku xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx "XXX = *1";
(X) &xx; XXX = *1 = (Cmax (-XX)) / (Xxxx (+XX))
Xxx li xxxxxx xxxxx xxxxxxx "PIF = *1", je xxxx hodnota předpovědí xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X xxxxxxxxx b) a x) xx xxxx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciálu xxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx dosažené ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx.
2.3.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx 2: xxxxxxx světelný xxxxxx (MPE)
Alternativně xxx xxxxxx xxxxx verzi xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, který xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx EU/COLIPA (15) x xxx xxxxxxxx naslepo x xxxxxxxx xxxxxx fototoxicity xx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxx XX filtry (13). Xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx model XXX x xxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx XX50. Xxxxx xxxxx využívá xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxxx xxxxx effect) (XXX), xxxxxxxx, xxxxx je xxxxxxxx xx srovnání xxxxxx křivek závislosti xxxxxx xx koncentraci. Xxx xxxxxxx xxxxxx xxx na Humboldtově xxxxxxxxxx (Xxxxxx) vyvinut xxxxxxxxx xxxxxxxxxx software, xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxx.
2.4 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx výsledek xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx xxxxx (PIF ≥ 5 nebo XXX ≥ 0,1) xxxxxxx, xx xxxxx xx fototoxický potenciál. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx při koncentracích xxx 10 μx/xx, xx také pravděpodobné, xx látka bude xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx. Xx-xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, xxxxx xxx pro posouzení xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Ty se xxxxx xxxxx údajů x xxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx látky x xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx. xx použití xxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxx.
Xxxxxxxxx výsledek xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx (XXX &xx; 5 xxxx XXX < 0,1) xxxxxxx, xx látka xxxxxx xxx xxxxx xxxxx za xxxxxxxxx xxxxxxxx fototoxická. V xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx až po xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx chemická xxxxx nemá xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xx nepravděpodobnou. X xxxxxxxxx, xxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx toxické xxxxxx xx xxxxxxxxxxx (EC50 +XX x XX50 -XX), xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Není-li xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (+UV a -XX) x jsou-li xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxx na xxxxxxx xxxxx xxx 100 μx/xx, není xxxxxx zkouška xxx xxxxxxxxx látku xxxxxx x xxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. za xxxxxxx modelu xxxxxx xxxx xx vitro xxxx xxxxxxxx xx xxxx).
3. ZPRÁVY
Protokol o xxxxxxx
Xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx tyto xxxxxxxxx:
Xxxxxxxx xxxxxxxx látka:
- xxxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxx XXX, xx-xx xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x čistota,
- xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxx x fotostabilita, xxxx-xx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x tomto xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx (EBSS nebo XXX).
Xxxxx:
- typ a xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxx buněčné xxxxxx, je-li známo,
- xxxxxxxxx xxxxx xx XXX stanovená xxxxxxxxxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx vitro
Zkušební xxxxxxxx x) — xxxxxxxx xxxx aplikací a xx xx:
- xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx,
- inkubační xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx CO2, teplota, xxxxxxx),
- délka xxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x po xx).
Xxxxxxxx xxxxxxxx b) — xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx chemické xxxxx xxxxxxxxx xxx při xxxxxxx UV/VIS, xxx xxx xxx,
- x xxxxxxx, že xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx rozpustnost x xxxx xxxxxxxxxxx, zdůvodnění xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxx a xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx),
- xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx c) — xxxxxxx:
- zdůvodnění xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx ozáření xx xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx propustnosti/absorpce použitého xxxxxx (použitých xxxxxx),
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx o xxxx xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx od xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- intenzita xxxxxxx XXX x xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xX/xx2,
- xxxxx xxxxxxxx XX/XXX světlu,
- xxxxx XXX záření (intenzita × xxx), vyjádřena x J/cm2,
- teplota xxxxxxxxx xxxxxx během xxxxxxxxx x teplota xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx.
Xxxxxxxx podmínky x) — xxxxxxx XXX:
- xxxxxxx média XX,
- xxxx xxxxxxxx XX,
- inkubační xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx XX2, teplota, xxxxxxx),
- xxxxxxxx extrakce XX (xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx extrakce),
- xxxxxx xxxxx použitá pro xxxxxxxxxxxxxxxxxxx odečet xxxxxxxxxx XX,
- xxxxx (referenční) xxxxxx xxxxx, xx-xx xxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx, xx-xx použit.
Výsledky:
- životaschopnost xxxxx při xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx životaschopnosti xxxxxxx,
- xxxxxx závislosti xxxxxx na xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) získané xxx xxxxxxxxxxx experimentech +XXX x -XXX,
- xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx: xx-xx to xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx EC50 (+XXX) x XX50 (-XXX),
- srovnání xxxx xxxxxx závislosti xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx XXX/XXX x xxx xxxx, x xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx faktoru (xxxxx-xxxxxxxxxxx factor ) (XXX), xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx photo xxxxxx) (XXX),
- klasifikace xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x) — xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx životaschopnost (absorbance xxxxxxxx XX) xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxx údaje xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, střední xxxxxxx x směrodatná xxxxxxxx,
- xxxxxxxx přijatelnosti xxxxxxx x) — xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxx EC50 (+UVA), XX50 (-XXX) x XXX-xxxxxxxxx kontrolní xxxxxxxx xxxxx,
- dosavadní xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx: hodnoty EC50 (+XXX), XX50 (-XXX) x XXX, střední xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
4. XXXXXXXXXX
(1) Xxxxxxxxx, X., Xxxxx, X., Xöxxxx, X., Xxxxxüxxxx, H. X., Xxxxxxx, X., Klecak, X., X'Xxxxxxxxxxx, X., Xxxxxxx, M., Xxxxxx, X. W., Maurer, X., Moldenhauer, X., Xxxxx, X., Xxxx, X., Xxxxxxxxxxx, X., Xxxxxxxx, X., Xx Xxxxx, X., Xxxxxxxx, X., Xxxxxxxx, A. (1994), EEC/COLIPA project xx in xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx: Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx with x Xxxx/x 3X3 xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, Xxxxxxxxxx in xxxxx 8, 793-796.
(2) Anon (1998), Xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx the 3X3 XXX XX test (xx xx xxxxx xxxx xxx phototoxicity), Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx, Xxxxx Xxxxxxxx Centre: XXXXX xxx XXXX/X/2, 3 Xxxxxxxx 1997, ATLA 26, 7-8.
(3) Xxxxxxxxx, X., Xxxxx, X., Xxxxxx, X., Xxxx, X. X. X., Xxxxxxxxxx, X., De Xxxxx, O., Xxxxxüxxxx, X. G., Clothier, X., Xxxxxxx, P., Xxxxxxxxx, X., Xxxxxxx, X., Xxxxxx, X. X., Maurer, X., Xxxxxxxxxxxxx, U., Potthast, X. X., Xxxxx, X., Sladowski, D., Xxxxxxxx, X., Xxxxxxx, X. (1998), XX/XXXXXX "Xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx", xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxx II (xxxxx trial), part 1: xxx 3T3 XXX xxxxxxxxxxxxx xxxx, Xxxxxxxxxx in Vitro 12, 305-327.
(4) OECD Xxxx Guidelines Programme, XXX/XX/XXXX/XX(96)9: Xxxxx Report xx xxx XXXX Xxxxxxxx xx Harmonisation xx Xxxxxxxxxx xxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx Xxxx Xxxxxxx, XXXX Xxxxxxxxxxxx Xxxxxx, Xxxxx, 1996.
(5) Xxxxxx, W. X. (1993), X xxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx photoallergenic potential, Xxxxxxxxxx in Xxxxx 7, 95-102.
(6) Santamaria, X., Xxxxx, G. (1972), List xx xxx xxxxxxxxxxxx substances, Xxxxxxxx progress in xxxxxxx, biological and xxxxxxxxx chemistry Xxx. 3 Xxxx 1, Xxxxx Xxxxxxx Xxxxxxxxxx Xx, Xxxxxxxxx, XX–XXXX.
(7) Xxxxxxxxx, X., Xxxxxx, X. X., Xöxxxx, X., Xxxxxxx, X. X., Maurer, X., Xxxxxxx, X. A., Xxxx, W. J. X., Xxxxxx, O., Xxxxxxxxx, X. (1994), Xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx: Xxx report xxx xxxxxxxxxxxxxxx of XXXXX workshop 2, XXXX 22, 314-348.
(8) Xxxxxx, J. D. (1989), Xxxxxxxxxxxxxxxxxx. X: Xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx, (X. X. Xxxxx, xx.), Xxxxxx Xxxxx, Xxx York, 2. xxx., 79-110.
(9) Xxxxxxxxxxx, X., Xxxxxxx, X. X. (1985), Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx in xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx and xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx, Xxxxxxx. Xxxx. 24, 119-124.
(10) Xxxxxxx, X. X., Xxxxxx, X. G., Xxxxxxxxxx X. (1996). X: Xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, Xxxxxxxxxxxxxxxxx, (X. X. Xxxxxxxx, H. I. Xxxxxxx eds.), Taylor &xxx; Xxxxxxx, Washington XX, 5. vyd., 515-530.
(11) Tyrrell, X. X., Xxxxxx X. (1987), Xxxxxx xxxxxxx xxx human xxxx xxxxx: estimates of xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxx middle xxxxxxxxxxx, xxxx ultraviolet xxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx on xxxxxxxxx keratinocytes, Xxxxxx Xxx. 47, 1825-1829.
(12) XXXXX/XXXXX/XXXXXX, Xxxxxxxx Operating Xxxxxxxxx: Xxxx/x 3X3 XXX Xxxxxxxxxxxxx Xxxx, xxxxxxxx 23. xxxxxxxx 1997 M. Xxxxxxxxx, xxxxxxxxx 6. xxxxxx 1998 xxxxx Management Xxxx xx xxx XX/XXXXXX project "Xx Xxxxx Xxxxxxxxxxxxxxx".
(13) Xxxxxxxxx, X., Xxxxx, X., Xxxxxx, X., Xxxx, X. X. X., Xx Xxxxx, X., Xxxxxüxxxx, H. X., Xxxxxxxxx, X., Xxxxxxx, X., Xxxxxx, W. X., Pfannenbecker (1998), X Study xx xxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxx xx UV Xxxxxx Xxxxxxxxx from Xxxxx XXX xx xxx XX Xxxxxxxxx 76/768/XXX xx the 3T3 XXX Xx Xxxxx Xxxxxxxxxxxxx Xxxx, XXXX 26, 679-708.
(14) Xxxxxüxxxx, X. G., Xxxxxxxx, X. (1995), Mathematical xxxxxxxxx of xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx, Xxxxxxx of Xxxxxxxxxx Xxxxxxx, 3, 127-138.
(15) Xxxxxüxxxx, X. X. (1997), X xxxxxxx measure xx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxx-xxxxxxxx xxxxxx xxx its xxx xxx xxxxxxxxxx the xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, ATLA 25, 445-462."
"Xxxxxxx
&xxxx;
[1] Xxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx x literatuře (12).