Xxxxxxxx Xxxxxx 2000/33/XX
xx xxx 25. xxxxx 2000,
xxxxxx xx xx xxxxxxx sedmé xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx pokroku xxxxxxxx Xxxx 67/548/XXX x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxxx x označování xxxxxxxxxxxx xxxxx [1]
(Xxxx s xxxxxxxx pro EHP)
KOMISE XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx společenství,
s xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxx 67/548/XXX xx xxx 27. xxxxxx 1967 x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x správních xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx [2], xxxxxxxxx pozměněnou xxxxxxxx Xxxxxxxxxx parlamentu x Rady 1999/33/XX [3], x zejména xx xxxxxx 28 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx:
(1) X xxxxxxx X xxxxxxxx 67/548/XXX xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, toxicity x ekotoxicity xxxxx x xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx přizpůsobit tuto xxxxxxx technickému pokroku.
(2) Xxxxx xx. 7 xxxx. 2 xxxxxxxx Xxxx 86/609/XXX xx xxx 24. listopadu 1986 x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x správních xxxxxxxx členských států xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxxxx x jiné xxxxxxx xxxxx [4] xxxxx xxx xxxxx, xxx xxxx xx xxx použito zvíře, xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
(3) Komise xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxx X xxxxxxxx 67/548/XXX xxxxxx alternativní xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx používána xxxxxxx, x cílem zpřístupnit xx pro xxxxxxxx xxxxxxxxxx látek xxxxx xx. 3 xxxx. 1 xxxxxxxx 67/548/XXX.
(4) Xxxxxxxx xxxx směrnice xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Výboru xxx xxxxxxxxxxxx technickému xxxxxxx xxxxxxx o xxxxxxxxxx technických xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx látek x xxxxxxxxx,
XXXXXXX TUTO XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Text příloh X a XX xxxx směrnice xx xxxxxx xx části X xxxxxxx X xxxxxxxx 67/548/XXX.
Xxxxxx 2
1. Členské xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx právní x xxxxxxx xxxxxxxx nezbytné xxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 1. xxxxx 2001. Neprodleně x xxxx uvědomí Xxxxxx.
Xxxx předpisy xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx musí xxxxxxxxx odkaz xx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx si xxxxxxx členské xxxxx.
2. Xxxxxxx xxxxx xxxxx Xxxxxx xxxxx hlavních xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx působnosti xxxx směrnice, x xxxxxxxxxx tabulku xxxx xxxxxxxx a přijatými xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Článek 3
Xxxx směrnice xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx dnem xx xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 4
Xxxx směrnice xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X Xxxxxxx xxx 25. xxxxx 2000.
Xx Xxxxxx
Xxxxxx Wallström
členka Komise
[1] Přijato xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx.
[2] Úř. xxxx. 196, 16.8.1967, s. 1.
[3] Xx. xxxx. X 199, 30.7.1999, x. 57.
[4] Xx. xxxx. X 358, 18.12.1986, x. 1.
PŘÍLOHA X
"X.40 XXXXXXX XXXXXX XX KŮŽI
1. XXXXXX
1.1 Úvod
Dvě xxxxxxx xx xxxxx na xxxxxxx xxxxxx na xxxx xx principu xxxxxxxxx transkutánního xxxxxxxxxxxx xxxxxx kůže xxxxxxx (XXX) a xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx (XXXXX, Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx Xxxxxxxx Xxxxxx) (1, 2, 3) xxxxxxxxx jako xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx XXXXX xxxxxxxxx, xx xxxxx zkouškami xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx kůži. Xxxxxxxx x xxxxxxx založené xx xxxxxx xxxxxx xxxx dále umožnil xxxxxxx xxxxxxxx stupně xxxxxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxx způsobující xxxxx xxxxxxxxx, X 35 x ostatní xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx, X 34) (2). Xxxxx x xxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxx; xxxxx xxxxxxx, xxxxx xx být xxxxxxx, xxxxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx uživatele.
Viz xxxx Xxxxxx úvod, část X.
1.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxx body 1.5.3.4 a 1.7.2.3.
1.4 Xxxxxxxx xxxxxxxx metody — xxxxxxx XXX xx xxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xx xx xx 24 x xxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxx terčíků kůže xxxxxxx usmrcených mladých xxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx schopností xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx integrity x xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (stratum xxxxxxx), která xx xxxxxx jako snížení xxxxxxxxx XXX xxx xxxxxxxx xxxxxx (5 xΩ) (4, 5). Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx XXX xxx xxxxxxxx hodnotu. Xx xxxxxxxxxx postupu xxx xxxxxxxxx aktivní xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx (6)) xxx xxxxxxx stupeň xxx stanovení xxxxxx xxxxxxx, aby xx xxxxxxx xxxxxxxx falešně xxxxxxxxxxx výsledků xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (2, 7).
1.5 Xxxxx xxxxxxxx metody — xxxxxxx XXX xx xxxx xxxxxxx
1.5.1 Zvířata
Terčíky xxxx musí xxx xxxxxxxxxx z xxxxxxx (20 — 23 xxxxxxx) potkanů (Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx). Xxxxxxx x xxxxx xxxx xx opatrně xxxxxxxx holicím xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx ponoří xx xxxxxxx xxxxxxxxxx (obsahujícího xxxx. xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx x amfotericin x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx). Xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxx xxx po xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx antibiotik x xxxxxxx se xx 3 dnů (x xxxxxxxx xxxx xxxxx být použita xxxxxxx starší než 31 xxx).
1.5.2 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx a xxxxxxxxxx xxx xx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxx teflonové (XXXX) xxxxxxxx tak, xxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx s xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxx xx těsně přetáhne xxxxxxx O-kroužek, xxx xxxx kůže xxxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx. Rozměry xxxxxxxx x O-kroužku xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx 1. Xxxxxxx X-xxxxxxx na teflonové xxxxxxxx xx poté xxxxxxx pokryje xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx hořečnatého (154 xX) (xxxxxxx 2).
1.5.3 Zkušební postup
1.5.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx materiálu
Kapalná xxxxxxxx xxxxx (150 μx) xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xxx. 2). Xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx se použije xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx, xxx byla xxxxxxx xxxx epidermis. Xxxx xx na povrch xxxxx xxxxx přidá xxxxxxxxxxxx xxxx (150 μx) x xxxxxxxx xx xxxxx protřepe. Xxxx látkami x xxxx xx xxxx xxxxx k maximálnímu xxxxx. X xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xx 30 °X, xxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxx.
Xx xxxxxxx xxxxx látky xx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxx. Zkoušená xxxxx xx aplikuje po xxxx 24 x (xxx také bod 1.5.3.4). Zkoušená xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx x teplotě xxxxxxx 30 °X. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xx 30 °C.
1.5.3.2 Xxxxxx XXX
XXX se xxxx xxxxxxxxxxxxxx impedančním xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx (xxxx. XXX 401 xxxx 6401 xxxx xxxxxxxxxxxx). Před xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx kůže xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx objemu 70 % xxxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Po xxxxxxxx sekundách se xxxxxxx odstraní xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xx xxxxxx přidáním 3 xx roztoku xxxxxx xxxxxxxxxxx (154 xX). Elektrody xxxxxx xx xxxxxx xx xxx strany xxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx x xΩ/xxxxxx xxxx (xxxxxxx 2). Rozměry xxxxxxxx x xxxxx exponovaných xxxxx elektrod xxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx 1. Xxxxxx xxxxxxx (silné) xxxxxxxxx xx během xxxxxx xxxxxx opřena x xxxxx konec xxxxxxxxx trubičky, xxx xxxx xxxxxxxxx, xx xx xxxxx části xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx hořečnatého xxxxxx. Xxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxx teflonové xxxxxxxx xx udržuje xxxxxxxxxx (xxxxxxx 1), neboť xxxx vzdálenost xx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xx xxxxx xx xxxxxxxx, xx xx-xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx 20 xΩ, xxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxxxxx straně xxxxxxx xxxx. X odstranění xxxx vrstvy xx xxx xxxxxxx xxxx. xxx, xx se xxxxxxxxx trubička zakryje xxxxxx v xxxxxxxx x 10 s xx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx hořečnatého se xxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx XXX (xxxxxxx xxxxxxx) xxxx přijatelné, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx přijatelného xxxxxxx xxxxxx. Xxx popsanou xxxxxxxx x přístroje xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx přijatelná rozpětí xxxxxx:
|
Xxxxxxxx |
Xxxxx |
Xxxxxxx odporu (xΩ) |
|
Xxxxxxxxx |
10X xxxxxxxx chlorovodíková (36 %) |
0,5–1,0 |
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxx xxxx |
10–25 |
1.5.3.3 Xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx látky x xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky
Jsou-li xxxxxxx XXX xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx nebo xxxxx 5 xΩ, lze xxxxxxx na xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx výsledky xxxxxx falešně xxxxxxxxx (2).
1.5.3.3.1 Aplikace x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X
Xx xxxxxxxxx aplikaci xxxxxxxx xxxxx se xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx 2 x 150 μx 10 % roztoku xxxxxxx sulforhodaminu X x xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxx xx xxxx přibližně 10 x xxxxxxx xxxxxxx xxxx o xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx barvivo. Všechny xxxxxxx kůže xx xxxxxxx xxxxxx z xxxxxxxxx trubičky x xxxxxx xx xx xxxxxxxx (např. 20 xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vodu (8 xx). Xxxxxxxx xx lehce 5 xxx. xxxxxxxxxxxx, aby xx odstranilo xxxxx xxxxx barvivo. Xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx, a xxxx se xxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 5 ml 30 % xxxxxxx (x/X) xxxxxxx-xxxxxxx-xxxxxxx (SDS) x destilované vodě x inkubují xx xxxx noc při 60 °X. Po xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxx vyjmou x xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx se xxxxxxxx 8 xxx. xxx 21 °X (xxxxxxxxx odstředivá xxxx ˜ 175). 1 xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx poté xxxxx 4 xx 30 % (m/V) xxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxx (A) xx xxxx xxx xxxxxxxxx 565 xx.
1.5.3.3.2 Xxxxxxx xxxxxx barviva
Obsah xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx B xx terčík xxxx xx xxxxxxx z xxxxxx X (xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx sulforhodaminu X při 565 xx = 8,7 × 104; xxxxxxxxxx xxxxxxxx = 580). Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X xx vypočte xxx každý xxxxxx xxxx a poté xx xxxxxxx jeho xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx rozmezí xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx a přístroje xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx látky doporučeny xxxx xxxxxxxxxx hodnoty xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx:
|
Xxxxxxxx |
Xxxxx |
Xxxxxxx xxxxxx barviva (μx/xxxxxx xxxx) |
|
Xxxxxxxxx |
10X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (36 %) |
40-100 |
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxx voda |
15-35 |
1.5.3.4 Xxxxxxxxx informace
Látky xxx xxxxxx aplikovat xx xxxxxxx xxxx na xxxxxx dobu (xxxx. 2 xxxxxx), aby xx identifikovaly xx xxxxxxxxx, xxxxx jsou xxxxx leptavé. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxxx TER xxxxxxxxxxxx xxxxxxx účinky x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx při xxxxxx xxxxxxxx na xxxxxx xxxx po xxxx 2 hodin (2), třebaže xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx 24xxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx a rozměry xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx mít vliv xx získané xxxxxxx XXX. Xxxx 5 Ω xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx z údajů xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx x xxxx metodě. Doporučuje xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx studii (3).
1.6 Podstata zkušební xxxxxx — stanovení xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxxxx materiál je xxxxxxxxx xx po xxxx 4 xxxxx xx xxxxxxxxxxxx model xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x funkční xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx jsou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx způsobit xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx životaschopnosti xxxxx (stanovený xxxx. xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx XXX) pod xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx, jež jsou xxxxxxx xxxxxxxxxx rohovitou xxxxxxx (xxxxxx nebo xxxxx) x xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx x hlubších buněčných xxxxxxxx.
1.7 Popis xxxxxxxx xxxxxx — xxxxxxxxx xxxxxx modelu lidské xxxx
1.7.1 Xxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxx xxxxxx kůže xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx zdrojů, xxxx xxxx splňovat určitá xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxx funkční xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx pod xx. Xxxxxxxxx funkce xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx. Xx xxx prokázat xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx modelu x xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Musí se xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xx definovaných xxxxxxxxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x modelu musí xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxx rozlišit pozitivní x xxxxxxxxx kontrolní xxxxx. xxxxxxxxxxxxxx buněk (xxxxxxxxx xxxx. xxxxxxx XXX, xx. xxxxxxx xxxxxxx absorbance X) xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx látce xxxx xxx x mezích xxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxx. Podobně xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (ve xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) xxxx být ve xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Nejdůležitější xxxxxx je, aby xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx (2).
1.7.2 Zkušební xxxxxx
1.7.2.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx aplikováno dostatečné xxxxxxxx xxxxxxxx látky, xxx xxxxxxx povrch xxxx (xxxxxxxxx 25 μx/xx2). U pevných xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxx xxxx, a xxxxxxxx xxxxx xx xxxx být ovlhčena, xxx xxx xxxxxxxx xxxxx styk x xxxx; xxxxx látky xx xxxx být xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx. Musí xxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (2). Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxxx materiál x xxxxxxx xxxx opatrně xxxxxxxxx fyziologickým xxxxxxxx.
1.7.2.2 Xxxxxx životaschopnosti xxxxx
X xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx stanovení xxxxxxx XXX, xxx xxx xx v xxxxxxx xxxxxxxxxxxx prokázalo, že xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx výsledky (2). Xxxxxx xxxx se xxxxxx xx xxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxx 0,3 xx/xx při xxxxxxx 20-28 °C xx xxxx 3 xxxxx. Sraženina modrého xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx X xxx vlnové xxxxx 545 xx 595 nm.
1.7.2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx model xxxx x xxxxxx zaznamenání xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx atd. xxxxx xxx xxxxx xxxx xx výsledky životaschopnosti xxxxx. Xxxxxxxxxx xx, xxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxx byly xxxxxxxxxxx zkoušením xxxx xxxxxxxxxxxx standardů xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx validační xxxxxx XXXXX (3). Xx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx x mezinárodními xxxxxxxxx vykazovala x xxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx široké spektrum xxxxxxxxxx látek. Metoda xxxx splňovat xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx (2) x výsledky xxxxxx validační xxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx odbornou xxxxxxx.
2. XXXXX
2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
2.1.1 Xxxxxxx XXX xx kůži xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx (kΩ) xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x negativní kontrolu x xxx všechny xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx údajů x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx hodnotách x x xxxxxxxx klasifikaci xx měly být xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx.
2.1.2 Zkouška x xxxxxxx lidské kůže
Hodnoty xxxxxxxxxx X x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx v procentech xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x negativní xxxxxxxx x xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx referenční xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx experimentech, x xxxxxxxxx xxxxxxxxx x o odvozené xxxxxxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxx ve xxxxx tabulky.
2.2 Hodnocení x interpretace xxxxxxxx
2.2.1 Xxxxxxx XXX na xxxx xxxxxxx
Xx-xx xxxxxxx XXX xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 5 xΩ, xxxx xxxxx žíravá. Xx-xx hodnota TER xxxxx xxxx rovna 5 xΩ x xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx žíravá.
U xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx neutrálních xxxxxxxxxxx xxxxx, které xxxxxx xxxxxxx XXX menší xxxx rovné 5 xΩ, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx barviva. Xx-xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx větší nebo xxxxx střednímu obsahu xxxxxxx x xxxxxxx xxxx získanému xxxxxxxx xxx použití 36 % XXx jakožto xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxx látky xxxxxxxx xxxxxxxxx, a xxxxx je tedy xxxxxx. Xx-xx střední xxxxx barviva x xxxxxxx kůže xxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx použití 36 % XXx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxx xxxx xxxx xxxxxx.
2.2.2 Xxxxxxx x modelem lidské xxxx
Xxxxxxx obsorbance A xxx xxxxxxxxx kontrolu xxxxxxxxxxx 100 % xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx; hodnoty xxxxxxxxxx X xxxxxxxx xxx xxxxx zkoušený xxxxxx lze xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Hraniční xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, které xxxxxx xxxxxx (xxxx xxxxxx xx rozlišují xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx), xxxx xxx xxx předpovědní model xxxxx definován xxxx xxxxxxxx metody x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx potvrdit, že xx vhodný (2).
3. XXXXXX
Xxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxxxxx x zkoušce musí xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxx xxxxx:
- identifikační xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxx, pokud xxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx podmínky:
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx postupu,
- xxxxx x xxxxxxxxxx jakýchkoli xxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx TER) nebo xxxxxxx životaschopnosti buněk x xxxxxxxxxx (xxxxxxx x xxxxxxx lidské xxxx) pro xxxxxxxx xxxxxxxx, pozitivní x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx referenční xxxxxxxx látky xxxxxx xxxxx x duplicitních xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x středních xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xx formě xxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
4. XXXXXXXXXX
(1) XXXXX (1998), XXXXX Xxxx &xxx; Xxxxx, XXXX 26, 275-280.
(2) Fentem, X. X., Xxxxxx, X. X. X., Xxxxx, X., Xxxxxx, X. A., Xxxxxx, X. D., Earl, X. K., Xxxxxxx, X. J., Holzhutter, X-X., Xxxxxxx, M. (1998), Xxx ECVAM xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxx xxxxx for skin xxxxxxxxxxx. 2. Xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xx xxx Xxxxxxxxxx Xxxx, Xxxxxxxxxx in xxxxx 12, 483-524.
(3) Xxxxxxx, X. X., Xxxxxxx, X. X., Xxxxxx, X. H., Xxxxxx, X., Xxxxxx, X. X., Xxxxx, X. X. (1998), Xxx XXXXX xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx on xx xxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx. 1. Xxxxxxxxx xxx distribution xx the test xxxxxxxxx, Xxxxxxxxxx in xxxxx 12, 471-482.
(4) Xxxxxx, G. J. X., Xxxxxxxxx, X. X., Xxxxxx, X. (1986), Xx xx xxxxx skin xxxxxxxxxxx xxxx — modifications xxx xxxxxxxxxx, Food Xxxx. Toxicol. 24, 507-512.
(5) Botham, P. X., Hall, X. X., Xxxxxxx, X., XxXxxx, X. C., Xxxxxxxxx, X. X., Xxxxxxx, E., Xxxxxxxxx, X., Esdaile, X. X., Xxxxxxx, X. (1992), Xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx in xxxxx: xxxxxxx of xx xxxxxxxxxxxxxxx trial, Xxxxxxxxxx xx xxxxx 6, 191-194.
(6) Xxxxx, X. P., Xxxxxx, X. H., Balls, X., Xxxxxx, P. X., Xxxxxx, R. X., Earl, X. X., Xxxxxxx, D. X., Xxxxxxx, X. (1998), Xx evaluation xx the xxxxxxxx XXXX xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx, XXXX 26, 709-720.
(7) Xxxxxx, X. X., Xxxxxxxxxxx, X., Barratt, X. X., Curren, X. D., Xxxxxxx, X. X., Xxxxxxx, X. X., Xxxxxx, X. X., Hildebrand, X., Xxxxx, R. X., Liebsch, X., Xxxxxxxx, P., Osborne, X., Ponec, X., Xxxxxxx, X. X., Xxxxxxxx, X., Walker, X. X., Xxxxx, X. 1995), A xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx testing. Xxx xxxxxx and xxxxxxxxxxxxxxx xx ECVAM xxxxxxxx 6, XXXX 23, 219-255.
Xxxxxxx 1
Obrázek 2"
&xxxx;
XXXXXXX XX
"X.41 FOTOTOXICITA — XXXXXXX FOTOTOXICITY 3X3 XXX IN XXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx odezva xxxxxxxx xx první xxxxxxxx xxxx určitým xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx systémovém xxxxxx xxxxxxxx látky.
Informace xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx xxxxx xxxxxx x identifikaci xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xx. existence xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xx zkoušené xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx UV xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx in xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx vyvolané xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx látky x xxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxx podání x xx nanesení na xxxx, a xxxxxx xxxxxxxxxx, které xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx jako fotoiritanty.
Zkouška xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx xxxx xxxxxxxx a validována x rámci xxxxxxxxx xxxxxxxx EU/COLIPA x xxxxxx 1992 — 1997 (1, 2, 3) x xxxxx xxxxxxxx platnou alternativu xx xxxxx k xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx vivo. X xxxx 1996 xxxxxxxxxx xxxxxxxx skupina XXXX xxxxxxxx postupných zkoušek xx xxxxx pro xxxxxxxxxx fototoxicity (4).
Xxxxxxxx xx zkoušek xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx fototoxickými xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx x xxxxxx x x xxxxxxx a xxxxxxx xx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx účinků xxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx jiných nepříznivých xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxx x kombinovaného xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxxxxxxxx, fotoalergie x xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, které xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx ve xxxxxxx fototoxicity 3X3 XXX in vitro xxxxxxxxx xxxxxxxx. Zkouška xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx zkoušení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx uvedena x xxxxxxx.
1.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx ozáření: xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxx xx W/m2 xxxx xX/xx2.
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx: xxxxxxxx (xxxxxxxxx × xxx) xxxxxxxxxxxxxx (XX) xxxx viditelného xxxxxx xxxxxxxxxxxx na xxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx (X × s) xx plochu xxxxxxx, xxxx. X/x2 xxxx X/xx2.
Xxxxxx xxxxx XX xxxxxx: xxxxxxxx doporučená xxxxxx XXX (Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx xx x'Xxxxxxxxx): XXX (315400 xx), XXX (280315 xx) x XXX (100280 xx). Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx: xxxx hranice xxxx XXX x UVA xx často xxxxxxxxx xxxxxxx 320 nm x xxxxx XXX xxxx xxx xxxxxxxxx xx UV-A1 x XX-X2 x xxxxxxx xxxxx 340 nm.
Životaschopnost xxxxx: xxxxxxxx, kterým xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx populace (xxxx. xxxxxx vitálního xxxxxxx neutrální xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx) x který x xxxxxxxxxx na xxxxxxx xxxx a xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx zkoušky xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx x negativním xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (x UV, xxxx xxx UV), ale xxxxxx xxxxxxxxxx zkoušeným xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxx model: xxxxxxxxxx používaný pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx fototoxicity 3X3 XXX xx xxxxx xx předpověď xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx faktor XXX a xxxxxxxx XXX.
XXX (photo-irritation xxxxxx — xxxxxxxxxxxx faktor): xxxxxx xxxxxxx srovnáním xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (XX50) xxxxxxxx xxxxx, a xx xxx necytotoxickém xxxxxxx UVA/VIS xxxxxxx (+ UV) x xxx něho (-UV).
MPE (xxxx photo effect — xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx): xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x matematické xxxxxxx xxxxxx průběhu xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx koncentraci získaných xxx xxxxxxxxxxxxxx ozáření XXX/xxx xxxxxxx (+ XX) x bez xxxx (-XX).
Xxxxxxxxxxxx: xxxxxx xxxxxxx xxxxxx, vyvolaná xx xxxxx expozici xxxx určitým xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx ozářením xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx chemické látky.
Fotoiritace: xxxxx xxxxxx pojmu "xxxxxxxxxxxx", xxxxx xx xxxxxxx x popisu xxxxx těch xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, které se xxxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxx chemickým xxxxxx (topické xxxx xxxxxx). Tyto xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx).
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxxxx reaktivita, xx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx dobu xxxxx xxxx xxx xxxxx xxxx tím, než xxx reakci kůže xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx: genotoxická xxxxxx xxxxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxx, která xx xxxxxxxx xx expozici xxxxx xxxxxxxxxxxxx dávce XX/XXX xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx látce.
Fotokarcinogenita: xxxxxxxxxxxxx vyvolaná xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx, xxx xx tvorba xxxxxx xxxxxxxxxx UV xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx látkou.
1.3 Xxxxxxxxxx látky
Vedle pozitivní xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx, který xx xxx být xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx, je xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (1, 3, 13).
1.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxx byly xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxx látek (5, 6, 7, 8). Xxxxxx jediným xxxxxxxxx xxxxx xx schopnost xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x oblasti xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (Grotthaus-Draperův xxxxx) xxxxxxxx fotoreakce xxxxxxxxxxx absorpci světelných xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx mělo xxx xxxxxxxxx UV/VIS absorpční xxxxxxxx xxxxxxxx chemické xxxxx (např. xxxxx Xxxxxxxx XXXX 101). Xx-xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx menší než 10 x.xxx-1.xx-1, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a nemusí xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro nebo xxxxxxxxx jinou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinky (dodatek).
1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx metody
Byly xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx může absorpce xxxxxx (xxxxxxxxx) chromoforem xxxx k xxxxxxxxxxx xxxxxx (7). Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU in xxxxx xx proto xxxxxxxx xx srovnání xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx XXX/XXX xxxxxx a xxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx koncentračně závislé xxxxxxx xxxxxx vitálního xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (XX) (9) 24 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x ozáření.
Buňky Xxxx/x 3X3 xx 24 x kultivují, xxx xxxxxxxxx monovrstvu. Xxx 96xxxxxxx destičky xx xxxxx zkoušenou chemickou xxxxx xx xxxx 1 h preinkubují xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxx xx xxxx destiček exponována xxxxxxxxxxxxxx dávkou UVA/VIS xxxxxx 5 X/xx2 XXX (+ XX xxxxxxxxxx), xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx udržuje x xxxxx (-XX xxxxxxxxxx). U xxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx médium nahradí xxxxxxxxxxx xxxxxx a xx dalších 24 x xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 3xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (XXX). Relativní xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx vyjádřená x procentech xxxxxxxx x neexponované xxxxxxxxx xxxxxxxx xx vypočte xxx xxxxxx x xxxx zkušebních xxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx fototoxického xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx závislé xxxxxx xxxxxxx při ozáření (+ UV) x xxx xxxxxxx (-XX), xxxxxxx při hodnotě XX50, tj. xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 50 % xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx srovnání x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
1.6 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx xx XXX, xxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxx buněk xx UVA xx xxxx xxx pravidelně xxxxxxxxxxxx. Buňky xx xxxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx, xxxxxx xxx se xxxxx xxxxxx UVA xxxxxx 1 až 9 X/xx2 x buněčná xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x den xxxxxxx xxxxxxxx XXX. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx ozáření 5 X/xx2 menší xxx 80 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxx být xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxx buněk.
Citlivost xxxxx xxxxxxxxx kontroly xx XXX xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx: zkouška xxxxxxx kritéria jakosti, xxxxxxxx negativní xxxxxxxx (xxxxx v EBSS (Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) x 1 % xxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx 1 % xxxxxxxxx (XxXX)) nebo xxx xxxx xxxxxxxx xxx + UVA experimentu xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx 80 % vzhledem x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx rozpouštědle xxx xxxxxxxxx experimentu x xxxxx (-XXX).
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx: absolutní xxxxxxxxxx (X540 XXX) xxxxxx x xxxxxxxx XX negativních kontrol xxxxxxx, xxx 1 × 104 xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx zachovalo xxx xxxxx xxxxx dvou xxx xxxxxxx obvyklou xxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxx). Xxxxxxx splňuje xxxxxxxxx přijatelnosti, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx X540 XXX xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx ≥ 0,2.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx: xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx látka. Při xxxxxxxxx xxxxxx XX/XXXXXX xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx chlorpromazin (XXX), x je xxxx xxxxxxxxx. Xxx XXX xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx při xxxxxxx fototoxicity 3X3 XXX xx xxxxx xxxx definována xxxx xxxxxxxx přijatelnosti xxxxxxx: xxx CPZ xxxxxxx (+ XXX): XX50 = 0,1 xx 0,2 μx/xx, pro XXX xxxxxxxxx (-XXX): XX50 = 7,0 xx 90,0 μx/xx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX), xx. posun xxxxxxx XX50, xx xxx xxx xxxxxxx 6.
Xxxxxxx XXX xxxxx být xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx chemické xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx hodnocené zkoušené xxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx na xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx XX50 a XXX xxxx XXX (střední xxxxxxxx účinek).
1.7 Popis xxxxxxxx xxxxxx
1.7.1 Xxxxxxxx
1.7.1.1 Xxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx — Xxxx/x 3X3, xxxx 31 — xxx z banky XXXX, xxxx x xxxxx XXXXX x xx xxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxx nebo xxxxxxx xxxxx mohou xxx při xxxxxxx xxxxxxxxx postupu xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, že xxxx xxxxxxxxxx podmínky xxxxxxxxxxxx specifickým potřebám xxxxx, xxx xxxx xxx prokázána jejich xxxxxxxxxxxx.
Xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx nejsou kontaminovány xxxxxxxxxxxx, x xxxx xx xxx xxxxxxx xxxxx tehdy, xxxx-xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxxx buněk xx XX vzrůstá x xxxxxx pasáží, xxxx xx xxx xxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3X3 x pasáže x xxxxxxxxx dosažitelným xxxxxx xxxxxx, nejlépe x xxxxx xxx xxx pasáže. Xx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx Balb/c 3X3 na XXX xxxxxxxxxx kontrolována xxxxxxxx xxxxxxxx jakosti popsaným x xxxx xxxxxxxx.
1.7.1.2 Xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx a během xxxxxxxxxx postupu xx xxxx xxx použita xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx podmínky. X buněk Xxxx/x 3X3 xx xxxxx x XXXX (Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxx) xxxxxxxxx 10 % xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, 4xX xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx x streptomycinem x xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxx při 37 °X/7, 5 % XX2. Xxxxxxx xxxxxxxx xx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, aby xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx.
1.7.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx nasadí xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx hustotě x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx před xxxxxxxx xx zkoušce xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx nasazují xx kultivačního média x xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx konce xxxxxxx, xx. do okamžiku, xxx je xx 48 x xx xxxxxxxx stanovována xxxxxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxx Balb/c 3X3 kultivované x 96xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 1 × 104 xxxxx xx xxxxx.
Xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx stejným xxxxxxxx do xxxx xxxxxxxxxx 96xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx poté xxxxxxxx podrobeny xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxx xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx (+XXX/XXX) x xxxxx xx udržována x xxxxx (-XXX/XXX).
1.7.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx použití xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx požadavkem xxx xxxxx zkouškách xx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx potenciálu, není x xxxxxxxxxxxxxxx dosud xxxxx xxxxx chemická xxxxx, pro xxxxx xxxxxxxx jako toxinu xx xxxx xxxx xx xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxx xxx xx xxxxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx provedena xx xxxxxxxx aktivace xxxxxxxxxxx.
1.7.1.5 Zkoušená xxxxxxxx xxxxx/xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxx bezprostředně před xxxxxxxx, xxxxx xxxxx x xxxxxxxx neprokazují xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx-xx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxx provádět xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxx být xxxxxxxxxx xx fyziologickém xxxxxxx, xxxx. x Earlově xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XXXX) xxxx ve xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx (XXX), xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x pH xxxxxxxxxx absorbující xxxxxx, xxx xxxxxxxx při xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx látky x omezenou xxxxxxxxxxxx xx xxxx by xxxx xxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx rozpouštědle xx 100xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xx xxxx xxx xxxxxxx v xxxxxx 1:100 xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Použije-li xx xxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx x konstantní xxxxxxxxxxx 1 % xxx. xx všech xxxxxxxxx, xx. v xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxxxxx zkoušené xxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) a xxxxxxx (XxXX). Xxxxx xxx použita jiná xxxxxx méně cytotoxická xxxxxxxxxxxx (xxxx. xxxxxx), xxx xxxx by xxx pečlivě xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx vlastnosti, xxxx. xxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx.
Xx-xx xxxxx, xxxx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x/xxxx xxxxxxxxx x/xxxx zahřátí xx 37 °X.
1.7.1.6 Xxxxxxx XX světlem/příprava
Zdroj xxxxxx: xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx xx kritickým xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxx XXX a ve xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx (7, 10), xxxxxxx xxxxxx x xxxxx XXX je xxxx xxxxxxxxxx a xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx jeho xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx 313 nm a 280 xx 1000krát (11). Xxxxxxxx xxx xxxxx vhodného xxxxxxxxxx xxxxxx by xxxx xxxxxxxxx důležitý xxxxxxxxx, xxx xxxxx světla xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx chemická látka xxxxxxxxx, a xxx xxxxx xxxxxxxxxx záření (xxxxxxxxxxx xx přijatelnou xxxx) xxxx dostatečná xxx detekci známých xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx látek. Xxxxxxx xxxxxx délky x xxxxx, xxxxxx emise xxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxxxx), xx dále xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx slunečního světla xxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx jak xenonová xxxxxxx, tak xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx x xxxx xx tu xxxxxx, xx emituje xxxx xxxxx x xx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xx slunečním xxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx významné xxxxxxxx UVB záření, xxxx by xxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx vysoce xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx XXX xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX in xxxxx by xxxx xxx xxxxxxx spektrum xxxxxxxxx xxxxxxx XXX xxxxxx (XXX:XXX ˜ 20:1). Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx záření xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx simulátoru použitého xx xxxxxxxxx studii xxxxxxx fototoxicity 3X3 XXX xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx (3).
Dozimetrie: xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx ozáření) xx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx zkouškou xxxxxxxxxxxx kontrolovat za xxxxxxx xxxxxxxx širokopásmového XX-xxxxx. UV-metr musí xxx xxx xxxx xxxxx kalibrován. Funkčnost XX-xxxxx xx xxxx xxx kontrolována a xx tímto xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx referenční xxxxxxx xxxxxxxx kalibrovaný UV-metr xxxxxxxx xxxx. X xxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxx odstupech xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx záření xxxxxxxxxxxx xxxxxx světla x xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx XX-xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, avšak xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx osobami.
Dávka 5 J/cm2 xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx Balb/c 3X3 x xxxxxxxxxx xxxxx k xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxx 5 X/xx2 xx xxxx 50 xxx. xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx 1,666 XX/xx2. Xxxxxxxx je xxxxxxx xxxx buněčná xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxx UVA záření xxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxx dostatečná xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx:
x(xxx) = xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (J/cm2) 100 / intenzita xxxxxxx (xX/xx2) 60 (1 X =.W xxx)
1.7.2 Zkušební xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx by xxxxxx xxxxxxxxx 100 μg/ml, xxxxx všechny xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx; při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx roste xxxxxx xxxxxxx pozitivních výsledků (xxxxxxxxxxxx). Xxxxxxx xX xxxxxxxx xxxxxxxxxxx by xxxx xxx vyhovující (xX 6,5 — 7,8).
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx chemických xxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxx (+ XXX) x xxx světla (-XXX) xx měly xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx zjištění xxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x intervaly mezi xxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxx, aby xxxx křivky xxxxxxxxxx xxxxxx xx koncentraci xxxxxxxxxx xxxxxxxxx experimentálními xxxxx. Měla xx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx).
1.7.3 Xxxxxxxx postup [1]
1.7.3.1 Xxxxx xxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx 1 × 105 xxxxx/xx x xxxxxxxxxxx xxxxx x 100 μx xxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx 96xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxx). Xx xxxxxxxxxxx xxxxx xx dávkuje xx 100 μl buněčné xxxxxxxx x xxxxxxx 1 × 105 xxxxx/xx (1 × 104 xxxxx xx xxxxx). Pro každou xxxxxxxxx xxxxxxxxx látku xx připraví xxx xxxxxxxx: xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (-XXX) x xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (+XXX).
Xxxxx xx xxxxxxxx 24 x (7,5 % XX2, 37 °X), xxxxx nedosáhnou xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx inkubační xxxx xxxxxx regeneraci xxxxx, xxxxxx přichycení x xxxxxxxxxxxxx xxxx.
1.7.3.2 Xxxxx den
Po xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx x každá xxxxx xx promyje dvakrát 150 μl XXXX/XXX. Xxxxx se 100 μx EBSS/PBS xxxxxxxxxxxx xxxxxxx koncentraci zkoušené xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx rozpouštědlo (xxxxxxxxx xxxxxxxx). Xxxxxxxx xx 8 xxxxxxx koncentrací xxxxxxxx xxxxxxxx látky. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx xx xxxx 60 xxx. (7,5 % XX2, 37 °C).
K xxxxxxxxx části xxxxxxx x xxxxxxxx UVA xx xxxxx xxx xxxxxxxx teplotě po xxxx 50 min. xxxxxxx přes xxxxx 96xxxxxxx xxxxxxxx XXX xxxxxxx o intenzitě 1,7 XX/xx2 (5 X/xx2. Xxx nedošlo xx xxxxxxxxxx xxxx xxx víčkem, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxx XXX xx ponechají 50 xxx. (xxxx xxxxxxxx XXX) v xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx xxxxx xx promyje xxxxxxx 150 μx EBSS/PBS. XXXX/XXX xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx se xxxx xxx (18-22 h) (7,5 % CO2, 37 °X).
1.7.3.3 Xxxxx xxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xx změny xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx zkoušené xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx experimentální chyby, xxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx cytotoxicity xxxx xxxxxxxxxxxx nepoužijí.
Zkouška xxxxxx xxxxxxxxx červeně.
Buňky xx promyjí 150 μx předehřátého EBSS/PBS x xxxxxxxxx roztok xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Přidá se 100 μx média XX a xxxxxxxx xx 3 x xxx 37 °C xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x 7,5 % XX2.
Xx xxxxxxxx se xxxxxx XX xxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX. EBSS/PBS xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxx (případně xxx xxxxxxxx odstředit x xxxxxxxx xxxxxx).
Xxxxx xx xxxxxx 150 μx xxxxxxx připraveného roztoku xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxx, aby se xxxxxxxxxx NR.
Destička xx xxxxxx 10 min. xxxxx xx třepačce, xxxxx xx XX x buněk xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx xx změří xxxxxxxxxx extraktu XX xxx 540 xx, xxxxxxx xx xxx xxxxxxxx použije xxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxx ve vhodném xxxxxxx (xxxx. XXXXX) x xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx analýzu.
2. XXXXX
2.1 Xxxxxxx x množství xxxxx
Xxxxx by xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx odpovědi xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx XXX/XXX xxxx xxx xxxx. Xx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, měl xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxx nastaven xxx, xxx bylo xxxxx xxxxxxxx experimentálními xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx x xxxx, že xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx být xx xx xxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxx (-XXX) xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx ozáření (+XXX), xxxx xxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, které xxxx xxx x xxxx částech xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, řádově xxxxxx, xx-xx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx-xx v xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (-XXX a +UVA) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx intervaly xxxx xxxxxxxxxxxx dávkami xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx experimentem xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx dále xxxxxxxxx, jestliže byla xxxxxxxx xxxxxxxx látka xxxxxxxx za xxxxxxxxxx xxxxxxxx koncentrací. X xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx hlavní xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx zjištění xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx x výsledky xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xx-xx opakované xxxxxxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxxx, xxxx být xxxxxxxx xxx dosažení xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx podmínky. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. X tohoto xxxxxx xxxx být xxxxx xxxxxxxx (xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, použití ultrazvuku) xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx být xxxxx v úvahu xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx. Zkrácení xxxx xxxx mít xxxxxx u xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxx.
2.2 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx-xx xx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx látky odpovídající 50 % xxxxxxxx xxxxxxxxx příjmu xxxxxxxxx xxxxxxx (XX) (XX50). Xxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx Xxxxxxxx funkcí xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xxxxx xxxxxxxxxx odezvy xx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (14). Xxxx použitím xxxxxxx XX50 pro další xxxxxxx xx měla xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx proložení. Xxx xxxxxxx XX50 xxx popřípadě použít xxxxxx grafického xxxxxxxxx. X xxxxxxx případě xx doporučuje použít xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (měřítko xxx x: xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx osy y: xxxxxxxxxxxxxxxxx), xxxxx x xxxxx případech xxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx.
2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx modely)
2.3.1 Xxxxxxxxxxx xxxxx — verze 1: fotoiritační xxxxxx (XXX)
Xxxxxxxx xxxx x xxxx xxxxxxxxx xxx xxx ozáření (+XXX), xxx xxx ozáření (-XXX) xxxxxxx xxxxx xxxxxx závislosti xxxxxx xx koncentraci, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX) xxxxxxxxx podle xxxxxx xxxxxx:
(x) PIF = (XX50 (-XX)) / (XX50 (+XX))
Xxxxxxx XXX &xx; 5 xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciálu, xxxxxxx hodnota PIF ≥ 5 předpovídá xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxx látka xxxxxxxxxxx pouze xxx +XXX x xxxx xxxxxxxxxxx xxx zkoušce -XXX, xxxxx xxxxxxx XXX xxxxxxxxx, xxxxxxx xxx x xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. V xxxxxxxx případech lze xxxxxxxxx hodnotu "&xx; XXX", xxxxxxxx se xxxxxxx -UV xxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (Xxxx), x xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx "&xx; PIF";
(b) &xx; PIF = (Xxxx (-XX)) / (XX50 (+XX))
Xxx xx xxxxxx pouze hodnotu "&xx; XXX", xxxxxxxxxx xxxxxxxxx fototoxického xxxxxxxxxx xxxx hodnota &xx; 1.
Xxxxxxxx nelze x xxxxxxxx xxxx, xx xxxxxxxx látka xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx koncentrace žádnou xxxxxxxxxxxx, vypočítat xxx xxxxxxx XX50 (-XX) xxx xxxxxxx EC50 (+ XX), xxxxxx xx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx charakterizaci xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx "XXX = *1";
(X) &xx; PIF = *1 = (Xxxx (-XX)) / (Cmax (+XX))
Xxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx "PIF = *1", xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X xxxxxxxxx x) a x) xx xxxx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciálu opatrně xxxxx v xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro.
2.3.2 Xxxxxxxxxxx model verze 2: xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (XXX)
Xxxxxxxxxxxx lze xxxxxx novou xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciálu, xxxxx xxx vyvinut x xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx studie EU/COLIPA (15) x xxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx studii xxxxxxxxxxxx xx vitro x xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxx jako XX xxxxxx (13). Xxxxx model xxxx xxxxxxx jako xxxxx XXX v případech, xxx nelze získat xxxxxxx EC50. Xxxxx xxxxx využívá xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (mean xxxxx xxxxxx) (XXX), xxxxxxxx, která xx xxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx závislosti xxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxx použití xxxxxx xxx xx Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (Xxxxxx) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxx.
2.4 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro (PIF ≥ 5 xxxx XXX ≥ 0,1) xxxxxxx, xx xxxxx xx fototoxický xxxxxxxxx. Xxxxxxxx bylo výsledku xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxx 10 μg/ml, xx také xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx jako xxxxxxxxx xx xxxx. Xx-xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx zkušební xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, xxxxx xxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx další xxxxx. Xx xx xxxxx týkat údajů x penetraci, absorpci x xxxxx akumulaci xxxxxxxx látky x xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx. xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx kůže xx xxxxx.
Xxxxxxxxx výsledek zkoušky xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx (XXX &xx; 5 nebo XXX &xx; 0,1) xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxx pro xxxxx xxxxx za použitých xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx, kdy xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx nemá xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx, xxx xxxx xxx nižších xxxxxxxxxxxxx obdrženy xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx koncentraci (XX50 +XX x EC50 -XX), xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxx-xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (+XX x -XX) x xxxx-xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxx na xxxxxxx xxxxx xxx 100 μg/ml, není xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx vhodná x xxxx xx xxx zvážena xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx. xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx in xxxx).
3. XXXXXX
Xxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx obsahovat xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx:
- xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx XXX, xx-xx xxxxx,
- fyzikální vlastnosti x xxxxxxx,
- xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx,
- stálost x xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x tomto xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxx (XXXX xxxx XXX).
Xxxxx:
- typ x xxxxx xxxxx,
- nepřítomnost xxxxxxxxxx,
- xxxxx xxxxxxx xxxxxx, xx-xx xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx na XXX xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx x) — xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx a xx ní:
- typ x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx CO2, xxxxxxx, xxxxxxx),
- xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx před xxxxxxxx x po xx).
Xxxxxxxx xxxxxxxx x) — xxxxxxxx chemické xxxxx:
- xxxxxxxxxx výběru koncentrací xxxxxxxx xxxxxxxx látky xxxxxxxxx jak při xxxxxxx XX/XXX, xxx xxx xxx,
- x xxxxxxx, že zkoušená xxxxxxxx látka xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (pufrovaný xxxxxxxxxxxx xxxxxx),
- xxxxx xxxxxxxx chemické xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx x) — xxxxxxx:
- xxxxxxxxxx výběru xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx ozáření xx zdroje xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx propustnosti/absorpce xxxxxxxxx xxxxxx (použitých xxxxxx),
- xxxxxxxxxxxxxxx radiometru x xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx,
- vzdálenost xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxx XXX x xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx v xX/xx2,
- délka expozice XX/XXX světlu,
- xxxxx XXX xxxxxx (xxxxxxxxx × čas), xxxxxxxxx x X/xx2,
- xxxxxxx xxxxxxxxx kultur xxxxx xxxxxxxxx a teplota xxxxxxxxx kultur xxxxxxxxxxx x temnu.
Zkušební xxxxxxxx x) — xxxxxxx XXX:
- složení xxxxx XX,
- xxxx xxxxxxxx XX,
- inkubační xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx, xxxxxxx),
- podmínky xxxxxxxx XX (xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx absorbance XX,
- xxxxx (xxxxxxxxxx) xxxxxx xxxxx, xx-xx xxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx, xx-xx xxxxxx.
Xxxxxxxx:
- životaschopnost xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx chemické xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx střední xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- křivky závislosti xxxxxx xx koncentraci (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx versus relativní xxxxxxxxxxxxxxx buněk) xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx +XXX a -XXX,
- xxxxxxx křivek xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx: xx-xx to xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx XX50 (+XXX) x XX50 (-XXX),
- srovnání obou xxxxxx xxxxxxxxxx odezvy xx koncentraci xxxxxxxxx x xxxxxxxx UVA/VIS x xxx xxxx, x xx xxx xxxxxxxx fotoiritačního xxxxxxx (xxxxx-xxxxxxxxxxx xxxxxx ) (XXX), xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx světelného xxxxxx (xxxx xxxxx xxxxxx) (XXX),
- klasifikace xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx přijatelnosti xxxxxxx a) — xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (absorbance xxxxxxxx XX) ozářených x xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- kritéria xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x) — xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxx XX50 (+XXX), XX50 (-UVA) x XXX-xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx,
- dosavadní xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx chemické xxxxx: hodnoty XX50 (+XXX), EC50 (-XXX) x PIF, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
4. XXXXXXXXXX
(1) Xxxxxxxxx, X., Balls, X., Xöxxxx, X., Xxxxxüxxxx, X. G., Xxxxxxx, X., Klecak, X., L'Eplattenier, X., Xxxxxxx, M., Xxxxxx, X. X., Maurer, X., Xxxxxxxxxxx, F., Xxxxx, X., Xxxx, X., Xxxxxxxxxxx, X., Xxxxxxxx, X., Xx Xxxxx, O., Xxxxxxxx, X., Xxxxxxxx, X. (1994), EEC/COLIPA project xx xx vitro xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx: First xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x Balb/c 3X3 xxxx phototoxicity xxxxx, Xxxxxxxxxx xx vitro 8, 793-796.
(2) Xxxx (1998), Xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxx validity xx xxx 3X3 XXX XX test (xx in xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx), Xxxxxxxx Commission, Xxxxx Xxxxxxxx Xxxxxx: XXXXX xxx DGXI/E/2, 3 Xxxxxxxx 1997, XXXX 26, 7-8.
(3) Xxxxxxxxx, X., Xxxxx, M., Xxxxxx, X., Xxxx, X. X. W., Xxxxxxxxxx, X., Xx Xxxxx, X., Xxxxxüxxxx, X. X., Clothier, X., Xxxxxxx, X., Xxxxxxxxx, X., Xxxxxxx, X., Xxxxxx, W. X., Maurer, T., Xxxxxxxxxxxxx, X., Xxxxxxxx, X. X., Xxxxx, X., Sladowski, X., Xxxxxxxx, X., Xxxxxxx, X. (1998), XX/XXXXXX "Xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx", xxxxxxxxxx study, xxxxxxx xx xxxxx II (xxxxx xxxxx), xxxx 1: xxx 3T3 XXX xxxxxxxxxxxxx test, Xxxxxxxxxx in Xxxxx 12, 305-327.
(4) XXXX Xxxx Xxxxxxxxxx Programme, XXX/XX/XXXX/XX(96)9: Xxxxx Xxxxxx xx the OECD Xxxxxxxx on Harmonisation xx Xxxxxxxxxx xxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx Test Xxxxxxx, XXXX Xxxxxxxxxxxx Xxxxxx, Xxxxx, 1996.
(5) Xxxxxx, X. X. (1993), A xxxxxx xxx in xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx photoallergenic xxxxxxxxx, Xxxxxxxxxx in Vitro 7, 95-102.
(6) Xxxxxxxxxx, X., Xxxxx, G. (1972), Xxxx xx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, Xxxxxxxx progress xx xxxxxxx, biological xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx Xxx. 3 Xxxx 1, Xxxxx Xxxxxxx Publishing Xx, Xxxxxxxxx, XI–XXXV.
(7) Xxxxxxxxx, X., Xxxxxx, X. W., Xöxxxx, X., Xxxxxxx, X. X., Xxxxxx, X., Xxxxxxx, X. X., Xxxx, W. X. X., Xxxxxx, X., Xxxxxxxxx, X. (1994), Xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx: The xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xx XXXXX xxxxxxxx 2, XXXX 22, 314-348.
(8) Xxxxxx, J. X. (1989), Xxxxxxxxxxxxxxxxxx. X: Xxx science xx xxxxxxxxxxxx, (K. C. Xxxxx, xx.), Xxxxxx Xxxxx, New Xxxx, 2. xxx., 79-110.
(9) Xxxxxxxxxxx, X., Puerner, X. A. (1985), Xxxxxxxx determination xx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx and xxxxxxx xxx absorption, Toxicol. Xxxx. 24, 119-124.
(10) Xxxxxxx, L. X., Xxxxxx, X. X., Xxxxxxxxxx X. (1996). X: Xxxxxx xxxxxx xxx phototoxicity xxxxxxx, Xxxxxxxxxxxxxxxxx, (F. X. Xxxxxxxx, X. X. Xxxxxxx eds.), Xxxxxx &xxx; Xxxxxxx, Xxxxxxxxxx XX, 5. vyd., 515-530.
(11) Tyrrell, X. X., Pidoux M. (1987), Xxxxxx spectra xxx xxxxx skin xxxxx: xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxx middle xxxxxxxxxxx, xxxx ultraviolet xxx violet xxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, Xxxxxx Xxx. 47, 1825-1829.
(12) XXXXX/XXXXX/XXXXXX, Xxxxxxxx Xxxxxxxxx Xxxxxxxxx: Xxxx/x 3T3 XXX Phototoxicity Test, xxxxxxxx 23. prosince 1997 X. Xxxxxxxxx, xxxxxxxxx 6. xxxxxx 1998 týmem Xxxxxxxxxx Xxxx of xxx XX/XXXXXX xxxxxxx "Xx Xxxxx Photoirritation".
(13) Spielmann, X., Balls, X., Xxxxxx, X., Xxxx, X. X. X., Xx Xxxxx, X., Xxxxxüxxxx, X. X., Xxxxxxxxx, X., Xxxxxxx, X., Lovell, X. X., Xxxxxxxxxxxxx (1998), X Xxxxx on xxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxx xx UV Xxxxxx Xxxxxxxxx from Annex XXX of xxx XX Xxxxxxxxx 76/768/EEC xx xxx 3T3 XXX Xx Xxxxx Xxxxxxxxxxxxx Test, XXXX 26, 679-708.
(14) Holzhütter, X. G., Quedenau, X. (1995), Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx, Xxxxxxx xx Xxxxxxxxxx Systems, 3, 127-138.
(15) Xxxxxüxxxx, X. X. (1997), X xxxxxxx measure of xx xxxxx phototoxicity xxxxxxx from pairs xx xxxx-xxxxxxxx xxxxxx xxx its xxx xxx xxxxxxxxxx xxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, XXXX 25, 445-462."
"Xxxxxxx
&xxxx;
[1] Další xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxxxxx (12).