Xxxxxxxx Komise 2000/33/ES
ze xxx 25. dubna 2000,
xxxxxx se po xxxxxxx xxxxx přizpůsobuje xxxxxxxxxxx pokroku xxxxxxxx Xxxx 67/548/XXX o xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx předpisů xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxxx nebezpečných xxxxx [1]
(Text x xxxxxxxx xxx XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxx 67/548/XXX xx xxx 27. xxxxxx 1967 x sbližování xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxxx nebezpečných xxxxx [2], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx Evropského xxxxxxxxxx x Xxxx 1999/33/ES [3], x xxxxxxx xx článek 28 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx k xxxxx důvodům:
(1) V xxxxxxx X směrnice 67/548/XXX xx stanoví xxxxxx pro stanovení xxxxxxxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x ekotoxicity xxxxx x přípravků. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
(2) Xxxxx xx. 7 xxxx. 2 xxxxxxxx Xxxx 86/609/EHS xx xxx 24. xxxxxxxxx 1986 o sbližování xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx členských států xxxxxxxxxx xx ochrany xxxxxx používaných xxx xxxxxxx a xxxx xxxxxxx xxxxx [4] xxxxx xxx xxxxx, xxx xxxx xx xxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx, je-li xxxxxxx x xxxxxxxxx dostupná xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
(3) Xxxxxx zamýšlí xxxxxxx xx přílohy X xxxxxxxx 67/548/XXX xxxxxx alternativní xxxxxxxx xxxxxx, xxx nichž xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, x cílem xxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx. 3 xxxx. 1 xxxxxxxx 67/548/EHS.
(4) Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx x souladu xx xxxxxxxxxxx Xxxxxx xxx přizpůsobení xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx technických xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx,
XXXXXXX XXXX SMĚRNICI:
Xxxxxx 1
Xxxx xxxxxx X a XX xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xx části X xxxxxxx V xxxxxxxx 67/548/XXX.
Článek 2
1. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx právní a xxxxxxx předpisy xxxxxxxx xxx dosažení xxxxxxx x touto xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 1. xxxxx 2001. Xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx Xxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx musí xxxxxxxxx odkaz xx xxxx směrnici xxxx xxxx být xxxxxx xxxxx xxxxxx při xxxxxx xxxxxxx vyhlášení. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx členské státy.
2. Xxxxxxx státy xxxxx Xxxxxx znění xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx právních xxxxxxxx, xxxxx přijmou x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxx tabulku mezi xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ustanoveními.
Xxxxxx 3
Xxxx směrnice xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx dnem xx xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Článek 4
Tato xxxxxxxx xx xxxxxx členským xxxxxx.
X Bruselu xxx 25. xxxxx 2000.
Za Xxxxxx
Xxxxxx Wallström
členka Xxxxxx
[1] Xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx dvacáté xxxxx.
[2] Xx. xxxx. 196, 16.8.1967, s. 1.
[3] Xx. xxxx. X 199, 30.7.1999, x. 57.
[4] Xx. xxxx. X 358, 18.12.1986, x. 1.
PŘÍLOHA X
"X.40 XXXXXXX XXXXXX NA XXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxx xxxxxxx xx vitro na xxxxxxx xxxxxx xx xxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxx transkutánního xxxxxxxxxxxx xxxxxx kůže xxxxxxx (XXX) x xxxxxxx x využitím xxxxxx xxxxxx xxxx xxxx Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx (XXXXX, Společné xxxxxxxx xxxxxxxxx Xxxxxxxx Xxxxxx) (1, 2, 3) xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx. Validační xxxxxx XXXXX prokázala, že xxxxx zkouškami xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxx dále umožnil xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx těžké xxxxxxxxx, X 35 x xxxxxxx látky xxxxxxxxxxx poleptání xxxx, X 34) (2). Xxxxx a xxxxxx xxxx zkoušek xx xxxxxx; xxxxx xxxxxxx, xxxxx xx být xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxx xxxx Xxxxxx xxxx, xxxx X.
1.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxx: xxxxxxxx poškození xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxx 1.5.3.4 x 1.7.2.3.
1.4 Xxxxxxxx zkušební xxxxxx — zkouška XXX xx xxxx potkana
Zkoušený xxxxxxxx xx až xx 24 x xxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx usmrcených mladých xxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx funkce xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxxx), xxxxx xx xxxxxx jako xxxxxxx xxxxxxxxx XXX xxx xxxxxxxx xxxxxx (5 xΩ) (4, 5). Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx XXX xxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx aktivní xxxxx x neutrální xxxxxxxxx xxxxx (definice xxx xxxxxxxxxx (6)) xxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx získaných xxxxx pro xxxx xxxxx xxxxxxxxxx látek (2, 7).
1.5 Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx — xxxxxxx TER na xxxx xxxxxxx
1.5.1 Zvířata
Terčíky xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx z xxxxxxx (20 — 23 xxxxxxx) potkanů (Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx kmen). Xxxxxxx x xxxxx xxxx xx opatrně xxxxxxxx holicím xxxxxxxx. Xxxxxxx se xxxx xxxxx opatrným xxxxxxxx, xxxxxxx xx testovací xxxxxx ponoří xx xxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx). Xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxx xxx xx xxxxxx xxxxx znovu xxxxx xxxxxxxx antibiotik x xxxxxxx se xx 3 xxx (x xxxxxxxx kůže xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx starší xxx 31 dnů).
1.5.2 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx
Xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx. X xxxxxxx zvířete xx xxxx xxxxxxx odstraní xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxx se x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxx přeloží xxxx xxxxx teflonové (PTFE) xxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxx přetáhne xxxxxxx O-kroužek, xxx xxxx kůže xxxxxxxx, x přebytek xxxxx xx ořízne. Xxxxxxx xxxxxxxx x O-kroužku xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx 1. Xxxxxxx X-xxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxxx xx poté xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Trubička držená xxxxxx xxxxxxxxx svorky xx umístí xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx hořečnatého (154 xX) (xxxxxxx 2).
1.5.3 Xxxxxxxx xxxxxx
1.5.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx látka (150 μx) se xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xxx. 2). Xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx množství xxx, xxx byla xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx xx xxxxxx xxxxx xxxxx přidá xxxxxxxxxxxx voda (150 μx) x trubička xx xxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx a xxxx xx xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx. U xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xx 30 °X, xxx se xxxxxxxx xxxxx roztavila, xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxx.
Xx xxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx tři xxxxxxx xxxx. Zkoušená látka xx aplikuje xx xxxx 24 x (xxx xxxx xxx 1.5.3.4). Xxxxxxxx xxxxx xx zcela xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx vody x xxxxxxx xxxxxxx 30 °C. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx x xxxxxxxx ztuhly, xxx xxxxxxxx omytím xxxxxxx xxxx xxxxx xx 30 °X.
1.5.3.2 Xxxxxx XXX
XXX xx xxxx nízkonapěťovým xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx střídavý xxxxx (xxxx. XXX 401 xxxx 6401 xxxx ekvivalentní). Před xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx objemu 70 % xxxxxxxx xxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx odstraní převrácením xxxxxxx a xxxx xx xxxxxx xxxxxxxx 3 ml roztoku xxxxxx xxxxxxxxxxx (154 xX). Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xx xxx strany terčíku xxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx x xΩ/xxxxxx xxxx (xxxxxxx 2). Xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx pod xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx 1. Xxxxxx xxxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx x horní xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx zajištěno, xx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx ponořené x xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx (xxxxx) xxxxxxxxx je xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx svorky x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx udržuje konstantní (xxxxxxx 1), xxxxx xxxx vzdálenost xx xxxx xx naměřené xxxxxxx odporu.
Je xxxxx xx xxxxxxxx, že xx-xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx 20 xΩ, xxxx xx xxx způsobeno xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx. O xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxx. xxx, že xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxx x 10 x xx protřepává. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxx síranem hořečnatým.
Výsledky XXX (střední xxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx, pokud xxxxxxx pozitivní x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx rozpětí xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx x přístroje xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx:
|
Xxxxxxxx |
Xxxxx |
Xxxxxxx xxxxxx (xΩ) |
|
Xxxxxxxxx |
10X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (36 %) |
0,5–1,0 |
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxx xxxx |
10–25 |
1.5.3.3 Xxxxxxxx xxxxxx xxx povrchově xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx látky
Jsou-li xxxxxxx XXX xxx xxxxxxxxx aktivní xxxxx xxxx xxxxxxxxx látky xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxx 5 xΩ, xxx xxxxxxx xx tkáni xxxxxxxxx průniku xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx pozitivní (2).
1.5.3.3.1 Xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx sulforhodaminu X
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx kůže xxxxxxxx na 2 x 150 μx 10 % xxxxxxx xxxxxxx sulforhodaminu X x xxxxxxxxxxx vodě. Xxxxxxx kůže xx xxxx xxxxxxxxx 10 x omývají proudem xxxx x xxxxxxx xxxxxxxx teplotě, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx se xxxxxxx sejmou x xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xx xx xxxxxxxx (xxxx. 20 xx skleněné lahvičky xxx xxxxxxxxxxx spektrometrii) xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx (8 xx). Xxxxxxxx xx xxxxx 5 xxx. xxxxxxxxxxxx, aby xx odstranilo xxxxx xxxxx barvivo. Tato xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx, a xxxx se terčíky xxxx xxxxxx x xxxxx xx lahviček xxxxxxxxxxxx 5 xx 30 % roztoku (x/X) natrium-dodecyl-sulfátu (XXX) x xxxxxxxxxxx vodě x inkubují xx xxxx xxx xxx 60 °X. Po xxxxxxxx xx všechny xxxxxxx xxxx xxxxxx x zlikvidují x xxxxx roztok se xxxxxxxx 8 xxx. xxx 21 °C (xxxxxxxxx odstředivá xxxx ˜ 175). 1 xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx poté zředí 4 xx 30 % (m/V) xxxxxxx XXX x xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxx (X) xx xxxx při xxxxxxxxx 565 xx.
1.5.3.3.2 Xxxxxxx obsahu xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx B xx xxxxxx kůže xx xxxxxxx z xxxxxx X (xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X xxx 565 xx = 8,7 × 104; xxxxxxxxxx xxxxxxxx = 580). Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx X xx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxx x xxxx xx vypočte xxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx přijatelné, xxxxx hodnoty xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxx přijatelné xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx:
|
Xxxxxxxx |
Xxxxx |
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (μx/xxxxxx xxxx) |
|
Xxxxxxxxx |
10X xxxxxxxx chlorovodíková (36 %) |
40-100 |
|
Xxxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxx xxxx |
15-35 |
1.5.3.4 Xxxxxxxxx informace
Látky xxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxx dobu (xxxx. 2 xxxxxx), aby xx xxxxxxxxxxxxxx ty xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxx ukázala, xx stanovení XXX xxxxxxxxxxxx leptavé xxxxxx x několika zkoušených xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxx po xxxx 2 xxxxx (2), xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx umožnilo správnou xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx bez leptavých xxxxxx xxx 24hodinové xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx experimentální xxxxxx xxxxx xxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx XXX. Xxxx 5 Ω xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx se zařízením x xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx tedy xxxxxxxxxx xxxxxxx x určit xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx referenčních xxxxxxxxx vybraných z xxxxxxxxxx látek xxxxxxxxx xx validační xxxxxx (3).
1.6 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx — stanovení xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxxxx materiál xx xxxxxxxxx až xx xxxx 4 hodin xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx sestávající x xxxxxxxxxxxxxx epidermis x funkční rohovité xxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxx účinky jsou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx způsobit xxx xxxxxxxxxxxxx expoziční xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx xxxx. xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx XXX) xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xx hypotéze, xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx účinky xxxx xx, jež jsou xxxxxxx proniknout xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxx nebo xxxxx) x jsou xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx smrt xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
1.7 Popis zkušební xxxxxx — xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx lidské xxxx
1.7.1 Xxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxx funkční rohovitou xxxxxx x vrstvu xxxxxx buněk xxx xx. Bariérová xxxxxx xxxxxxxx vrstvy musí xxx xxxxxxxxxx. Xx xxx prokázat xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx látkám, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx rohovitou xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xx definovaných xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx reprodukovatelné xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx x modelu musí xxx xxxxxxxxxx vysoká, xxx xxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. xxxxxxxxxxxxxx buněk (xxxxxxxxx např. xxxxxxx XXX, xx. měřením xxxxxxx xxxxxxxxxx X) xx xxxxxxxx negativní xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx v mezích xxxxxxxxxxxx pro xxxx xxxxx. Podobně xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx kontrolní xxxxx (ve xxxxxxxx x životaschopností xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) xxxx být ve xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx, xxx xxxxx xxxxxxxxx mezinárodním xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx (2).
1.7.2 Zkušební postup
1.7.2.1 Xxxxxxxx zkoušeného materiálu
U xxxxxxxxx materiálů musí xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx látky, xxx xxxxxxx povrch xxxx (minimálně 25 μx/xx2). U xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx množství xxxxxxxx látky, aby xxxxxxx xxxx, a xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx ovlhčena, xxx xxx xxxxxxxx xxxxx styk x xxxx; xxxxx xxxxx xx xxxx být xxxxx potřeby xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (2). Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx musí být xxxxxxxx materiál z xxxxxxx xxxx opatrně xxxxxxxxx fyziologickým xxxxxxxx.
1.7.2.2 Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx buněk
K xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx buněk xxxx xxx použita xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx redukce XXX, xxx xxx xx v xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx správné x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (2). Xxxxxx xxxx xx xxxxxx xx roztoku XXX x xxxxxxxxxxx 0,3 mg/ml při xxxxxxx 20-28 °C xx dobu 3 xxxxx. Xxxxxxxxx modrého xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx) a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx absorbance X xxx vlnové xxxxx 545 xx 595 xx.
1.7.2.3 Doplňkové xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxx zaznamenání xxxxxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx. xxxxx xxx velký vliv xx výsledky xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx se, xxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vybraných x xxxxxxxxxx látek xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx XXXXX (3). Xx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxx v xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx x xxxx laboratořemi xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx široké xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx definovaná xxxxxxxx xxx vědeckou xxxxxxxx (2) x výsledky xxxxxx validační xxxxxx xxxx být publikovány xx xxxxxxxx xxxxxxxx x předcházející xxxxxxxx xxxxxxx.
2. XXXXX
2.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx
2.1.1 Zkouška XXX xx xxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx (kΩ) pro xxxxxxxx xxxxxxxx, pozitivní x xxxxxxxxx xxxxxxxx x pro xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx xxxxxxxxx x x xxxxxxxx klasifikaci xx xxxx xxx xxxxxxx xx formě xxxxxxx.
2.1.2 Zkouška x xxxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxx X x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx materiál, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxx xxxxxxx standardní xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx x duplicitních xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx hodnotách x x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx by měly xxx uvedeny ve xxxxx xxxxxxx.
2.2 Hodnocení x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
2.2.1 Xxxxxxx XXX xx xxxx potkana
Je-li xxxxxxx XXX xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx 5 xΩ, xxxx xxxxx xxxxxx. Xx-xx hodnota XXX xxxxx xxxx xxxxx 5 kΩ a xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx látku xxxx xxxxxxxxx organickou xxxxx, xx látka xxxxxx.
X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx dávají xxxxxxx XXX xxxxx xxxx xxxxx 5 xΩ, xxx provést xxxxxxxxx průniku xxxxxxx. Xx-xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxx xxxxx nebo xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx souběžně xxx xxxxxxx 36 % XXx xxxxxxx xxxxxxxxx kontroly, xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxx xx tedy xxxxxx. Xx-xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxx xxx střední xxxxx xxxxxxx x terčíku xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx 36 % XXx, xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxx xxxx xxxx xxxxxx.
2.2.2 Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxxx
Xxxxxxx obsorbance X xxx negativní xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 % xxxxxxxxxxxxxxx buněk; hodnoty xxxxxxxxxx A xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx použít x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x negativní xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xx rozlišují xxxxxx xxxxxxxxx od xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxx (xxxx xxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx třídy xxxxxxxxx xxxxxx), musí xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx definován xxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx studie xxxx potvrdit, že xx xxxxxx (2).
3. XXXXXX
Xxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx alespoň xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxx xxxxx:
- xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx fyzikálně-chemické xxxxxxxxxx. Podobné xxxxxxxxx xx měly být xxxxxxx xxx referenční xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx XXX) nebo xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx (zkouška x xxxxxxx xxxxxx xxxx) xxx zkoušený xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx standardní xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx x duplicitních xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx,
- popis xxxxxxxxxx xxxxxx pozorovaných xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx.
4. XXXXXXXXXX
(1) XXXXX (1998), XXXXX Xxxx &xxx; Xxxxx, XXXX 26, 275-280.
(2) Xxxxxx, X. X., Xxxxxx, X. X. X., Xxxxx, M., Botham, X. X., Curren, X. X., Earl, X. X., Esdaile, X. J., Xxxxxxxxxx, X-X., Xxxxxxx, X. (1998), Xxx XXXXX xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx. 2. Xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xx xxx Management Team, Xxxxxxxxxx xx xxxxx 12, 483-524.
(3) Xxxxxxx, X. X., Xxxxxxx, X. X., Xxxxxx, X. X., Xxxxxx, X., Xxxxxx, A. X., Xxxxx, X. X. (1998), Xxx XXXXX international validation xxxxx on xx xxxxx tests for xxxx xxxxxxxxxxx. 1. Xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xx the xxxx xxxxxxxxx, Toxicology xx xxxxx 12, 471-482.
(4) Xxxxxx, X. J. X., Xxxxxxxxx, X. X., Xxxxxx, X. (1986), An xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx — xxxxxxxxxxxxx xxx validation, Food Xxxx. Toxicol. 24, 507-512.
(5) Xxxxxx, X. X., Xxxx, X. X., Dennett, X., XxXxxx, X. X., Xxxxxxxxx, D. A., Xxxxxxx, E., Cheeseman, X., Xxxxxxx, D. X., Xxxxxxx, X. (1992), The xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxx: xxxxxxx of xx xxxxxxxxxxxxxxx trial, Xxxxxxxxxx xx xxxxx 6, 191-194.
(6) Worth, X. X., Fentem, X. H., Xxxxx, X., Botham, X. X., Xxxxxx, R. X., Earl, L. X., Xxxxxxx, X. X., Xxxxxxx, X. (1998), Xx evaluation xx xxx xxxxxxxx XXXX xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxx, XXXX 26, 709-720.
(7) Xxxxxx, X. X., Xxxxxxxxxxx, X., Xxxxxxx, X. X., Xxxxxx, X. X., Xxxxxxx, X. J., Xxxxxxx, X. R., Xxxxxx, X. C., Xxxxxxxxxx, X., Xxxxx, X. X., Liebsch, M., Xxxxxxxx, X., Xxxxxxx, X., Xxxxx, M., Xxxxxxx, J. X., Xxxxxxxx, W., Xxxxxx, X. X., Balls, X. 1995), X xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xx vitro xxxx xxxxxxxxxxx testing. Xxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xx ECVAM xxxxxxxx 6, XXXX 23, 219-255.
Xxxxxxx 1
Xxxxxxx 2"
XXXXXXX II
"B.41 XXXXXXXXXXXX — XXXXXXX XXXXXXXXXXXX 3X3 XXX XX XXXXX
1. XXXXXX
1.1 Xxxx
Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx expozici xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx chemické xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx ze zkoušky xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx látky, xx. existence xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx může xxxxxxx xx zkoušené xxxxx xx spojení x xxxxxxxx XX xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxx zkoušky xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx vyvolané xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x světla, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xx xxxxxxxx na xxxx, a xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx působí xx nanesení xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro byla xxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxx spojeného xxxxxxxx EU/COLIPA x xxxxxx 1992 — 1997 (1, 2, 3) x cílem xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx k xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx. X xxxx 1996 doporučila xxxxxxxx xxxxxxx OECD xxxxxxxx postupných zkoušek xx xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4).
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx fotoiritačmi xxxxxx xx xxxx u xxxxxx x x xxxxxxx a zkouška xx ukázala xxx xxxxxxxxx xxxxxx účinků xxxx vynikající. Xxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx jiných nepříznivých xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxx z xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, např. xxxxxxxxxxxxxxxx, fotoalergie x xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro xxxxxxxxx xxxxxxxx. Zkouška xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx.
1.2 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx ozáření: xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx, měřená xx W/m2 xxxx xX/xx2.
Xxxxx světelného xxxxxx: xxxxxxxx (xxxxxxxxx × xxx) ultrafialového (XX) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx, xxxxxxxxx v joulech (X × x) xx xxxxxx xxxxxxx, xxxx. X/x2 nebo X/xx2.
Xxxxxx pásma XX xxxxxx: označení xxxxxxxxxx xxxxxx XXX (Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx xx x'Xxxxxxxxx): XXX (315400 xx), XXX (280315 xx) x UVC (100280 xx). Xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx: xxxx xxxxxxx mezi XXX x UVA xx xxxxx používána xxxxxxx 320 xx x xxxxx XXX xxxx xxx xxxxxxxxx xx XX-X1 x XX-X2 s xxxxxxx xxxxx 340 xx.
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxx, kterým xx xxxx celková xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx lysosomů) x xxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx zkoušky xxxxxxxx s celkovým xxxxxx x/xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx buněk: xxxxxxxxxxxxxxx x poměru x xxxxxxxxxx kontrolám (xxxxxxxxxxxx), xxxxx xxxxxx xxxxx postupem zkoušky (x UV, nebo xxx UV), xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx zkoušek xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. V xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxx převod výsledků xxxxxxx fototoxicity 3T3 XXX xx xxxxx xx xxxxxxxxx fototoxického xxxxxxxxxx použít faktor XXX x xxxxxxxx XXX.
XXX (photo-irritation xxxxxx — xxxxxxxxxxxx xxxxxx): xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx stejně xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (XX50) xxxxxxxx látky, a xx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx UVA/VIS xxxxxxx (+ XX) x xxx něho (-XX).
XXX (xxxx xxxxx xxxxxx — xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx): xxxx veličina xxxxxxxx z matematické xxxxxxx celého xxxxxxx xxxxxx závislosti xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx XXX/xxx xxxxxxx (+ XX) x xxx xxxx (-XX).
Xxxxxxxxxxxx: akutní xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx ozářením xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxx: xxxxx xxxxxx pojmu "xxxxxxxxxxxx", který xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxx fototoxických xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx na kůži xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxx xxxxxx). Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx vedou xxxx x xxxxxxxxxxxxxx buněčnému xxxxxxxxx (podobné reakci xxx xxxxxxxxx).
Xxxxxxxxxxx: xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, ke xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx aplikaci xxxxxxxx xxxxx x světla x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx xxx xxxxx xxxx xxx, xxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx: genotoxická xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx je xxxxxxxx xx expozici xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx XX/XXX xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxx-xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx, kdy xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx XX zářením xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
1.3 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxx souběžně xxxxxxx při xxxxx xxxxxxx, je xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx látky xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxxxxxxxxxxxx srovnáních předložené xxxxxx (1, 3, 13).
1.4 Xxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxx látek (5, 6, 7, 8). Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx je schopnost xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx slunečního xxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (Xxxxxxxxx-Xxxxxxxx xxxxx) xxxxxxxx fotoreakce xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx zkoušení xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx by xxxx mělo xxx xxxxxxxxx XX/XXX xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx (xxxx. podle Xxxxxxxx OECD 101). Xx-xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx menší xxx 10 x.xxx-1.xx-1, xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx vitro xxxx xxxxxxxxx jinou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinky (xxxxxxx).
1.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx metody
Byly xxxxxxxxxxxxxx xxxxx mechanismy, xxxxxxx může xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxx) chromoforem xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx (7). Všechny xxxxx k poškození xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU in xxxxx je xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx zkoušení x xxxxxxxx necytotoxické xxxxx XXX/XXX xxxxxx x xxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xx x xxxx zkoušce vyjádřena xxxx xxxxxxxxxxxx závislé xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (XX) (9) 24 xxxxx po působení xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x ozáření.
Buňky Xxxx/x 3X3 xx 24 x kultivují, xxx xxxxxxxxx monovrstvu. Xxx 96xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx poté 1 x xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Poté xx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx XXX/XXX xxxxxx 5 X/xx2 XXX (+ UV xxxxxxxxxx), xxxxxxx druhá xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx (-XX xxxxxxxxxx). X obou xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx médiem x xx xxxxxxx 24 x xxxxxxxx xx xxxxxxx životaschopnost xxxxxxxxx 3xxxxxxxxx příjmem xxxxxxxxx xxxxxxx (XXX). Xxxxxxxxx xxxxxxx životaschopnost xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx x neexponované xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx každou z xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx (+ UV) a xxx xxxxxxx (-XX), xxxxxxx xxx hodnotě XX50, tj. xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 50 % úbytek xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx ve xxxxxxxx x neexponovanými xxxxxxxxxx.
1.6 Xxxxxxxx jakosti
Citlivost buněk xx XXX, dosavadní xxxxx: xxxxxxxxx buněk xx XXX xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx ke xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx vitro, příští xxx xx xxxxx xxxxxx XXX záření 1 xx 9 X/xx2 x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx se stanoví x xxx xxxxxxx xxxxxxxx NRU. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx jakosti, xxxx-xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx 5 X/xx2 xxxxx xxx 80 % xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx udržované x xxxxx. Tato xxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx vždy po xxxxxx pasážích buněk.
Citlivost xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx XXX xxx xxxxxxxxxx zkoušce: zkouška xxxxxxx kritéria jakosti, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx x EBSS (Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx) x 1 % xxxxxxxxxxxxxxxxxx (DMSO) nebo 1 % ethanolem (XxXX)) nebo bez xxxx xxxxxxxx xxx + UVA experimentu xxxxxxxxxxxxxxx alespoň 80 % xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx experimentu x temnu (-UVA).
Životaschopnost xxxxxxxxx xxxxxxxx: absolutní xxxxxxxxxx (X540 XXX) xxxxxx v extraktu XX xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxx 1 × 104 xxxxx xxxxxxxxxx xx jednu xxxxx xxxxxxxxx při xxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx zdvojnásobení (doubling xxxx). Xxxxxxx splňuje xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx hodnota X540 XXX xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx ≥ 0,2.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx: xxx každé xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxx EU/COLIPA xxx použit xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx chlorpromazin (XXX), a je xxxx doporučen. Xxx XXX zkoušený xxxxx xxxxxxxxxxxx postupu při xxxxxxx fototoxicity 3T3 XXX xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx: xxx XXX xxxxxxx (+ XXX): XX50 = 0,1 xx 0,2 μx/xx, xxx XXX neozářený (-UVA): XX50 = 7,0 xx 90,0 μx/xx. Xxxxxxxxxxxx faktor (PIF), xx. xxxxx hodnoty XX50, by xxx xxx xxxxxxx 6.
Namísto XXX xxxxx být xxxxxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx jiné xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx typu nebo xxxxxxxxxxxx hodnocené zkoušené xxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx případě by xxxx být xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx přiměřeným xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx hodnot XX50 a XXX xxxx XXX (střední xxxxxxxx účinek).
1.7 Popis xxxxxxxx xxxxxx
1.7.1 Xxxxxxxx
1.7.1.1 Xxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx — Xxxx/x 3X3, xxxx 31 — xxx x xxxxx XXXX, xxxx x xxxxx XXXXX x xx xxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx mohou xxx při xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, že xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, ale xxxx xxx xxxxxxxxx jejich xxxxxxxxxxxx.
Xxxxx by xxxx xxx pravidelně kontrolovány, xxx xxxxxx kontaminovány xxxxxxxxxxxx, x měly xx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx, jsou-li xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx XX vzrůstá x počtem xxxxxx, xxxx xx xxx xxxxxxx xxxxx Xxxx/x 3X3 x xxxxxx x xxxxxxxxx dosažitelným xxxxxx xxxxxx, nejlépe x xxxxx xxx xxx xxxxxx. Xx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx Balb/c 3X3 xx UVA xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx postupem xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x této xxxxxxxx.
1.7.1.2 Xxxxx x kultivační xxxxxxxx
Xxx xxxxxxx buněčné xxxxxxxxxx a během xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx být použita xxxxxx kultivační xxxxx x xxxxxxxxx podmínky. X xxxxx Xxxx/x 3X3 xx xxxxx x XXXX (Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx Eagleova xxxxx) xxxxxxxxx 10 % xxxxxxxxxxxxxx telecím xxxxx, 4xX xxxxxxxxxx, penicilinem x streptomycinem x xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx 37 °X/7, 5 % XX2. Xxxxxxx xxxxxxxx xx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, aby xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx použité xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx.
1.7.1.3 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx média ve xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 NRU xx xxxxx.
Xxx xxxxxxx fototoxicity xx xxxxx xxxxxxxx xx kultivačního xxxxx x takové hustotě, xxx xxxxxxxxx konfluence xx xxxxx xxxxxxx, xx. xx okamžiku, xxx je xx 48 h xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxx buňky Balb/c 3X3 kultivované x 96xxxxxxxxx destičkách xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 1 × 104 buněk xx jamku.
Pro xxxxxx xxxxxxxxx látku se xxxxx nasadí stejným xxxxxxxx xx dvou xxxxxxxxxx 96xxxxxxxxx destiček, xxxxx xxxx poté xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx zkoušky xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx, xxx je xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx (+XXX/XXX) x xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx (-UVA/VIS).
1.7.1.4 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx in xxxxx určených xxx xxxxxxxxx genotoxického x xxxxxxxxxxxxxx potenciálu, není x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx žádná xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxx xxxx toxinu xx vivo xxxx xx xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxx xxx za xxxxxxxx xxx za vědecky xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
1.7.1.5 Xxxxxxxx chemická xxxxx/xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx látky xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxxx, pokud xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx skladování. Xxxx-xx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx se xxxxxxxx xxxxx provádět xxx červeným světlem.
Zkoušené xxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx xx fyziologickém roztoku, xxxx. x Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (EBSS) xxxx ve fyziologickém xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx (PBS), který xxxxx obsahovat proteinové xxxxxx x pH xxxxxxxxxx absorbující xxxxxx, xxx nerušily při xxxxxxxxx.
Xxxxxxxx chemické látky x xxxxxxxx rozpustností xx vodě xx xxxx být xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 100xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx by měly xxx xxxxxxx x xxxxxx 1:100 xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx-xx xx xxxxxxxxxxxx, musí být xxxxxxxx v konstantní xxxxxxxxxxx 1 % xxx. xx xxxxx xxxxxxxxx, xx. x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx ve všech xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) x xxxxxxx (EtOH). Xxxxx xxx xxxxxxx jiná xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxx. aceton), xxx xxxx by xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx. xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx látku, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx.
Xx-xx xxxxx, xxxx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx použito xxxxxxx a/nebo xxxxxxxxx x/xxxx xxxxxxx na 37 °C.
1.7.1.6 Ozáření XX xxxxxxx/xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxx: xxxxx xxxxxxxx zdroje xxxxxx a vhodné xxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx v pásmu XXX x xx xxxxxxxxxx pásmu je xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxx (7, 10), xxxxxxx xxxxxx x xxxxx UVB xx xxxx relevantní x xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx jeho xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx 313 nm x 280 xx 1000xxxx (11). Xxxxxxxx xxx xxxxx vhodného světelného xxxxxx by xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxx světla xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx délkách, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx, x xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxx xx přijatelnou xxxx) xxxx dostatečná xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx látek. Použité xxxxxx délky x xxxxx, xxxxxx xxxxx xxxxx (infračervená oblast), xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx za optimální xxxxx světla. X xxxxxxxxx simulátorech xx xxxxxxx jak xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx halogenová výbojka. Xxxxx x nich xx xx výhodu, xx xxxxxxx xxxx xxxxx a xx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx dokonalá. Xxxxxxxx všechny xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx UVB záření, xxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxx cytotoxické xxxxxx xxxxx UVB xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxx fototoxicity 3X3 XXX xx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx UVB xxxxxx (UVA:UVB ˜ 20:1). Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx použitého xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx xxx publikován x xxxxxxxxxx (3).
Xxxxxxxxxx: intenzita xxxxxx (intenzita xxxxxxx) xx xxxx pravidelně xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx XX-xxxxx. XX-xxxx musí xxx pro xxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx XX-xxxxx xx xxxx xxx kontrolována a xx xxxxx xxxxxx xx doporučuje použít xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx UV-metr xxxxxxxx xxxx. X xxxxxxxx případě xx xxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx záření xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx XX-xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx vyžadují xxxxxxxx xxxxxxx školenými xxxxxxx.
Xxxxx 5 X/xx2 byla xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx jako xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxx Xxxx/x 3X3 a dostatečně xxxxx k xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx látek. Pro xxxxxxxx 5 X/xx2 xx xxxx 50 xxx. xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx nastavena xx 1,666 XX/xx2. Xxxxxxxx je použita xxxx xxxxxxx xxxxx xxxx jiný xxxxxxxx xxxxx, xxxx být xxxxx XXX xxxxxx xxxxx upravena, xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxx dostatečná xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx fototoxinů. Xxxx xxxxxxxx expozice xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx:
x(xxx) = dávka xxxxxxxxxx xxxxxx (J/cm2) 100 / intenzita xxxxxxx (xX/xx2) 60 (1 X =.X xxx)
1.7.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx neměla xxxxxxxxx 100 μx/xx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx byly xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx; při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx). Xxxxxxx xX xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxx (xX 6,5 — 7,8).
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx zkoušených se xxxxxxx (+ UVA) x bez xxxxxx (-XXX) by měly xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx koncentrační řady x intervaly mezi xxxxxxxxxxxxx musí být xxxxxxx tak, aby xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx (s xxxxxxxxxxx faktorem xxxxxx).
1.7.3 Xxxxxxxx xxxxxx [1]
1.7.3.1 Xxxxx xxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx 1 × 105 buněk/ml x xxxxxxxxxxx xxxxx x 100 μx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxxx xxxxx 96jamkové xxxxxxxx (slepý pokus). Xx xxxxxxxxxxx buněk xx xxxxxxx xx 100 μx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx 1 × 105 xxxxx/xx (1 × 104 xxxxx na xxxxx). Xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx: xxxxx pro xxxxxxxxx cytotoxicity (-XXX) x xxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (+UVA).
Buňky xx inkubují 24 x (7,5 % XX2, 37 °C), xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx inkubační xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, jejich xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxx.
1.7.3.2 Xxxxx den
Po inkubaci xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxx xx xxxxxxx dvakrát 150 μx XXXX/XXX. Xxxxx xx 100 μx XXXX/XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx rozpouštědlo (xxxxxxxxx xxxxxxxx). Aplikuje xx 8 různých koncentrací xxxxxxxx chemické xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx v xxxxx xx xxxx 60 xxx. (7,5 % XX2, 37 °X).
X xxxxxxxxx části zkoušky x xxxxxxxx XXX xx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 50 xxx. xxxxxxx xxxx víčko 96xxxxxxx destičky UVA xxxxxxx x xxxxxxxxx 1,7 XX/xx2 (5 X/xx2. Xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx, větrá xx pomocí xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxx zkoušku xxx xxxxxxx UVA xx xxxxxxxxx 50 xxx. (doba xxxxxxxx XXX) x xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xx odstraní x každá jamka xx xxxxxxx xxxxxxx 150 μl XXXX/XXX. XXXX/XXX xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xx xxxx xxx (18-22 h) (7,5 % XX2, 37 °X).
1.7.3.3 Xxxxx xxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx xx xxxxxxxxxx pod mikroskopem x xxxxxxx kontrastem. Xxxxxxxxxxx xx změny xxxxxxxxxx buněk xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx účinkem xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxx se xxx hodnocení xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxx neutrální xxxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxx 150 μx xxxxxxxxxxxx EBSS/PBS x promývací xxxxxx xx xxxxxxx odstraní xxxxxxxx. Přidá xx 100 μx xxxxx XX x inkubuje xx 3 x xxx 37 °C xx zvlhčené xxxxxxxxx x 7,5 % XX2.
Xx xxxxxxxx xx xxxxxx NR xxxxxxxx x buňky xx xxxxxxx 150 μx XXXX/XXX. EBSS/PBS xx xxxxxxxxx a zcela xxxxxx (xxxxxxxx xxx xxxxxxxx odstředit x xxxxxxxx xxxxxx).
Xxxxx se xxxxxx 150 μl xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxx a kyseliny xxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx NR.
Destička se xxxxxx 10 xxx. xxxxx na xxxxxxxx, xxxxx se XX x xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx XX xxx 540 xx, xxxxxxx se xxx xxxxxxxx použije xxxxx xxxxx. Údaje xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (xxxx. XXXXX) x xxxxxxxx pro xxxxxxxxx analýzu.
2. XXXXX
2.1 Xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xx měly xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýzu xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx získané xxx xxxxxxx UVA/VIS xxxx xxx xxxx. Xx-xx xxxxxxxx cytotoxicita, xxx xx xxx rozsah xxxxxxxxxxx x interval xxxx xxxx nastaven xxx, xxx xxxx xxxxx proložit xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx x xxxx, xx xx zkoušená xxxxxxxx xxxxx nemusela být xx xx xxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx xxxxxx pro experiment x xxxxx (-XXX) xxxxxxxxxxx, xxx xxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx po xxxxxxx (+XXX), může xxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxx, xx-xx xxx splněn xxxxxxxxx xxxxxxxxxx kvality xxxxx. Není-li x xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (-XXX a +XXX) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, stačí xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx intervaly mezi xxxxxxxxxxxx xxxxxxx až xx nejvyšší xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx výsledky xxxxxx být xxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx chemická xxxxx xxxxxxxx za dostatečně xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx předběžnými experimenty xxx xxxxxxxx rozmezí xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxx x výsledky xxxxxx hraničních xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xx-xx opakované xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx podmínky. Klíčovou xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx chemické xxxxx. X tohoto xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx (xxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx ultrazvuku) xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx může xxx xxxxx x úvahu xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx. Zkrácení xxxx xxxx mít xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx ve xxxx.
2.2 Zpracování xxxxxxxx
Xx-xx xx možné, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx zkoušené xxxxxxxx xxxxx odpovídající 50 % inhibici xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (XX) (EC50). Xxx tak xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx nelineární xxxxxxx (xxxxxxx Xxxxxxxx funkcí xxxx xxxxxxxxxxx regresí) xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx jiných metod xxxxxx xxxxxxxxx (14). Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx XX50 pro xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kvalita proložení. Xxx xxxxxxx EC50 xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxx xxx x: xxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxx x: xxxxxxxxxxxxxxxxx), neboť x xxxxx xxxxxxxxx xxxx xx této xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx koncentraci téměř xxxxxxxx.
2.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxx)
2.3.1 Xxxxxxxxxxx xxxxx — xxxxx 1: xxxxxxxxxxxx faktor (XXX)
Xxxxxxxx xxxx x xxxx xxxxxxxxx xxx xxx ozáření (+UVA), xxx bez ozáření (-XXX) xxxxxxx úplné xxxxxx xxxxxxxxxx odezvy xx xxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (XXX) xxxxxxxxx podle xxxxxx xxxxxx:
(x) XXX = (XX50 (-XX)) / (XX50 (+UV))
Hodnota XXX &xx; 5 xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx fototoxického xxxxxxxxxx, xxxxxxx hodnota XXX ≥ 5 předpovídá xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx pouze při +XXX a xxxx xxxxxxxxxxx při xxxxxxx -XXX, xxxxx xxxxxxx XXX xxxxxxxxx, xxxxxxx xxx o xxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. X xxxxxxxx případech lze xxxxxxxxx xxxxxxx "&xx; XXX", xxxxxxxx xx xxxxxxx -UV xxxxxxx xx xx nejvyšší xxxxxxxx koncentrace (Xxxx), x xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx "&xx; PIF";
(b) &xx; XXX = (Xxxx (-UV)) / (XX50 (+UV))
Lze xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx "&xx; XXX", xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx potenciálu xxxx hodnota > 1.
Xxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxx toho, xx xxxxxxxx látka xxxxxxxxxx xx do xxxxxxxx xxxxxxxx koncentrace xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx ani xxxxxxx XX50 (-XX) xxx hodnotu EC50 (+ UV), xxxxxx xx o xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. V xxxxxxxx xxxxxxxxx se xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx formální xxxxxxx "XXX = *1";
(X) &xx; XXX = *1 = (Xxxx (-XX)) / (Xxxx (+XX))
Xxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx "XXX = *1", xx xxxx hodnota xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
X xxxxxxxxx b) x x) xx xxxx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx v úvahu xxxxxxxxxxx dosažené xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx vitro.
2.3.2 Xxxxxxxxxxx xxxxx verze 2: střední xxxxxxxx xxxxxx (MPE)
Alternativně xxx xxxxxx xxxxx verzi xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, který xxx vyvinut x xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx XX/XXXXXX (15) a xxx xxxxxxxx naslepo x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx, které xx xxxxxxx xxxx XX xxxxxx (13). Xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxx model XXX v xxxxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx XX50. Tento xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (xxxx xxxxx xxxxxx) (MPE), xxxxxxxx, která xx xxxxxxxx xx srovnání xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxx xxx xx Humboldtově xxxxxxxxxx (Berlín) xxxxxxx xxxxxxxxx počítačový software, xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxx.
2.4 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx (XXX ≥ 5 nebo XXX ≥ 0,1) xxxxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx potenciál. Xxxxxxxx bylo výsledku xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxx 10 μx/xx, xx xxxx xxxxxxxxxxxxx, xx látka xxxx xxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxxxxx podmínek xxxx xxxxxxxxx xx xxxx. Xx-xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx při xxxxxxxx xxxxxxxx koncentraci 100 μx/xx, mohou xxx xxx posouzení xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx. Xx xx xxxxx týkat xxxxx x xxxxxxxxx, absorpci x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx v xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx látky xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx. xx použití xxxxxx xxxxxx kůže xx xxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3X3 XXX xx xxxxx (PIF &xx; 5 xxxx XXX &xx; 0,1) xxxxxxx, že xxxxx xxxxxx xxx savčí xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. X xxxxxxxxx, xxx bylo xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx/xx, xxxxxxxxx negativní xxxxxxxx, že xxxxxxxx xxxxx nemá xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx vivo xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx. X případech, xxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx obdrženy xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx (XX50 +XX x XX50 -XX), xx interpretace xxxxx xxxxxx. Není-li xxxxxxx xxxx toxicita xxxxxxxxx (+XX x -XX) a jsou-li xxxxxxxxxxx omezeny xxxxxxxxxxxx xx xxxx na xxxxxxx menší xxx 100 μx/xx, není xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxx xx xxx xxxxxxx potvrzující xxxxxxx (xxxx. xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx in xxxxx xxxx zkouškou xx xxxx).
3. ZPRÁVY
Protokol x xxxxxxx
Xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx obsahovat xxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx:
- xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx CAS, je-li xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x čistota,
- xxxxxxxxx-xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx studie,
- xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx, xxxx-xx xxxxx.
Xxxxxxxxxxxx:
- xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx,
- rozpustnost zkoušené xxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx (EBSS xxxx XXX).
Xxxxx:
- xxx x xxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- číslo xxxxxxx xxxxxx, xx-xx xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx xx XXX xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 3T3 XXX xx xxxxx
Xxxxxxxx podmínky x) — inkubace xxxx xxxxxxxx x xx ní:
- xxx x xxxxxxx kultivačního xxxxx,
- xxxxxxxxx podmínky (xxxxxxxxxxx CO2, xxxxxxx, xxxxxxx),
- xxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxx před inkubací x xx xx).
Xxxxxxxx xxxxxxxx b) — xxxxxxxx xxxxxxxx látky:
- xxxxxxxxxx výběru xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxx při xxxxxxx XX/XXX, xxx xxx xxx,
- x xxxxxxx, xx zkoušená xxxxxxxx látka vykazuje xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx,
- xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx),
- xxxxx xxxxxxxx chemické xxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx x) — xxxxxxx:
- xxxxxxxxxx výběru xxxxxxxxx zdroje xxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx ozáření xx xxxxxx xxxxxx,
- xxxxxxxxxxxxxxx propustnosti/absorpce xxxxxxxxx xxxxxx (použitých xxxxxx),
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx o jeho xxxxxxxxx,
- xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx od zkoušeného xxxxxxx,
- intenzita xxxxxxx XXX x xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x xX/xx2,
- délka xxxxxxxx XX/XXX světlu,
- xxxxx XXX xxxxxx (intenzita × xxx), vyjádřena x X/xx2,
- teplota xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxx kultur udržovaných x temnu.
Zkušební xxxxxxxx x) — xxxxxxx XXX:
- xxxxxxx xxxxx XX,
- xxxx xxxxxxxx XX,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx XX2, xxxxxxx, xxxxxxx),
- podmínky xxxxxxxx XX (xxxxxxxxx činidlo, xxxxx xxxxxxxx),
- xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx XX,
- xxxxx (xxxxxxxxxx) xxxxxx xxxxx, xx-xx xxxxxxx,
- xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pro spektrometrii, xx-xx xxxxxx.
Xxxxxxxx:
- xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx,
- xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx chemické xxxxx xxxxxx relativní xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx) xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx +XXX x -UVA,
- xxxxxxx křivek xxxxxxxxxx xxxxxx xx koncentraci: xx-xx xx možné, xxxxxxx xxxxxxx XX50 (+XXX) x XX50 (-XXX),
- srovnání xxxx xxxxxx závislosti odezvy xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x ozářením XXX/XXX x bez xxxx, x xx xxx xxxxxxxx fotoiritačního faktoru (xxxxx-xxxxxxxxxxx xxxxxx ) (XXX), nebo výpočtem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxx xxxxx xxxxxx) (XXX),
- xxxxxxxxxxx fototoxického xxxxxxxxxx,
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x) — xxxxxxxx negativní kontrola:
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxxxx XX) ozářených x xxxxxxxxxxx xxxxx,
- xxxxxxxxx údaje xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, střední xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx,
- xxxxxxxx přijatelnosti xxxxxxx b) — xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx:
- xxxxxxx EC50 (+XXX), XX50 (-UVA) x XXX-xxxxxxxxx xxxxxxxxx chemické xxxxx,
- xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx chemické xxxxx: hodnoty XX50 (+XXX), XX50 (-XXX) x PIF, xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx výsledků.
Závěry.
4. XXXXXXXXXX
(1) Xxxxxxxxx, X., Xxxxx, X., Xöxxxx, B., Xxxxxüxxxx, H. G., Xxxxxxx, X., Xxxxxx, X., L'Eplattenier, H., Xxxxxxx, M., Lovell, X. X., Xxxxxx, X., Moldenhauer, X., Xxxxx, L., Xxxx, X., Xxxxxxxxxxx, X., Xxxxxxxx, X., De Xxxxx, X., Steiling, X., Xxxxxxxx, X. (1994), XXX/XXXXXX project xx xx vitro xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx: First xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x Xxxx/x 3X3 xxxx phototoxicity xxxxx, Xxxxxxxxxx in xxxxx 8, 793-796.
(2) Anon (1998), Xxxxxxxxx on xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxx 3X3 XXX XX xxxx (xx in xxxxx xxxx for xxxxxxxxxxxxx), Xxxxxxxx Xxxxxxxxxx, Xxxxx Xxxxxxxx Centre: XXXXX xxx XXXX/X/2, 3 Xxxxxxxx 1997, XXXX 26, 7-8.
(3) Spielmann, X., Xxxxx, M., Xxxxxx, J., Xxxx, X. X. W., Xxxxxxxxxx, X., Xx Xxxxx, X., Xxxxxüxxxx, X. G., Clothier, X., Xxxxxxx, X., Xxxxxxxxx, X., Xxxxxxx, X., Xxxxxx, X. X., Maurer, X., Xxxxxxxxxxxxx, X., Xxxxxxxx, X. X., Csato, X., Xxxxxxxxx, X., Xxxxxxxx, W., Xxxxxxx, X. (1998), XX/XXXXXX "Xx xxxxx phototoxicity", xxxxxxxxxx study, results xx xxxxx XX (xxxxx xxxxx), xxxx 1: the 3X3 XXX xxxxxxxxxxxxx xxxx, Xxxxxxxxxx xx Xxxxx 12, 305-327.
(4) XXXX Xxxx Xxxxxxxxxx Programme, XXX/XX/XXXX/XX(96)9: Final Report xx xxx OECD Xxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxx xxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx Xxxx Xxxxxxx, XXXX Xxxxxxxxxxxx Xxxxxx, Xxxxx, 1996.
(5) Xxxxxx, W. W. (1993), A xxxxxx xxx in xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, Xxxxxxxxxx xx Xxxxx 7, 95-102.
(6) Santamaria, X., Prino, X. (1972), Xxxx of xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, Xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx, biological xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx Vol. 3 Part 1, Xxxxx Holland Xxxxxxxxxx Xx, Xxxxxxxxx, XI–XXXV.
(7) Xxxxxxxxx, H., Xxxxxx, X. X., Xöxxxx, X., Johnson, X. X., Xxxxxx, X., Xxxxxxx, M. A., Xxxx, X. X. X., Xxxxxx, O., Xxxxxxxxx, X. (1994), Xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx: The xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xx XXXXX workshop 2, XXXX 22, 314-348.
(8) Xxxxxx, X. X. (1989), Xxxxxxxxxxxxxxxxxx. X: Xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx, (K. X. Xxxxx, xx.), Plenum Xxxxx, Xxx Xxxx, 2. xxx., 79-110.
(9) Xxxxxxxxxxx, X., Xxxxxxx, X. X. (1985), Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx in xxxxx by xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx, Xxxxxxx. Xxxx. 24, 119-124.
(10) Xxxxxxx, X. A., Xxxxxx, X. X., Xxxxxxxxxx A. (1996). X: Xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx testing, Xxxxxxxxxxxxxxxxx, (F. N. Xxxxxxxx, X. X. Xxxxxxx xxx.), Xxxxxx &xxx; Francis, Xxxxxxxxxx XX, 5. xxx., 515-530.
(11) Xxxxxxx, X. X., Xxxxxx X. (1987), Action spectra xxx xxxxx xxxx xxxxx: xxxxxxxxx of xxx relative xxxxxxxxxxxx xx xxx middle xxxxxxxxxxx, near xxxxxxxxxxx xxx violet regions xx xxxxxxxx on xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, Xxxxxx Xxx. 47, 1825-1829.
(12) XXXXX/XXXXX/XXXXXX, Xxxxxxxx Xxxxxxxxx Xxxxxxxxx: Xxxx/x 3X3 XXX Xxxxxxxxxxxxx Test, xxxxxxxx 23. prosince 1997 X. Liebschem, xxxxxxxxx 6. xxxxxx 1998 xxxxx Xxxxxxxxxx Xxxx xx the XX/XXXXXX xxxxxxx "Xx Xxxxx Xxxxxxxxxxxxxxx".
(13) Spielmann, X., Xxxxx, X., Xxxxxx, X., Xxxx, X. X. X., Xx Silva, X., Xxxxxüxxxx, X. G., Xxxxxxxxx, X., Liebsch, X., Lovell, X. X., Pfannenbecker (1998), X Xxxxx on xxx Phototoxic Potential xx UV Xxxxxx Xxxxxxxxx xxxx Xxxxx XXX of the XX Xxxxxxxxx 76/768/EEC xx the 3X3 XXX Xx Vitro Xxxxxxxxxxxxx Xxxx, ATLA 26, 679-708.
(14) Xxxxxüxxxx, X. X., Xxxxxxxx, X. (1995), Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx external xxxxxxx, Journal xx Xxxxxxxxxx Xxxxxxx, 3, 127-138.
(15) Xxxxxüxxxx, X. X. (1997), X xxxxxxx xxxxxxx xx xx xxxxx phototoxicity xxxxxxx from xxxxx xx dose-response xxxxxx xxx its xxx xxx xxxxxxxxxx the xx xxxx phototoxicity xx chemicals, ATLA 25, 445-462."
"Xxxxxxx
&xxxx;
[1] Xxxxx xxxxxxxxxxx lze xxxxxx x xxxxxxxxxx (12).