Xxxxxxxx Xxxxxx 2000/45/ES
ze xxx 6. xxxxxxxx 2000,
xxxxxx se stanoví xxxxxxxxxx metody Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx vitamínu X, vitamínu E x xxxxxxxxxx x xxxxxxxx
(Xxxx s významem xxx XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx o xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxx 70/373/XXX ze dne 20. xxxxxxxx 1970, xxxxxx xx zavádí xxxxxx xxxxxx xxxxxx x analýzy Společenství xxx xxxxxx kontrolu xxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx aktem x xxxxxxxxxxx Xxxxxxxx, Xxxxxx x Xxxxxxx [2], x xxxxxxx xx xxxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx k xxxx, xx:
(1) Xxxxxxxx 70/373/XXX xxxxxxx, že xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx zjištění, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x správních xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx krmiv, xxxx xxx prováděny xx xxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx.
(2) Xxxxxxxx Xxxx 70/524/XXX xx xxx 23. xxxxxxxxx 1970 x xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx [3], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx Komise (XX) x. 2439/1999 xx xxx 17. xxxxxxxxx 1999 [4], xxxxxxx, že obsah xxxxxxxx X x xxxxxxxx X xxxx xxx xxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxx jsou xxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx a xxxxx.
(3) Směrnice Rady 79/373/XXX ze xxx 2. xxxxx 1979 x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxx [5], xxxxxxxxx pozměněná xxxxxxxx Xxxxxx 2000/16/XX [6], x xxxxxxxx Xxxx 93/74/XXX ze xxx 13. xxxx 1993 o xxxxxxxx xxxxxxxx xx zvláštním xxxxxx xxxxxx [7], xxxxxxxxx pozměněná xxxxxxxx 96/25/XX [8], xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxx uváděny xx xxxxxxxxx xxxxx.
(4) Xxxx xxx xxxxxxxxx analytické xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx látek.
(5) Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx jsou x souladu se xxxxxxxxxxx Stálého výboru xxx xxxxxx,
XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:
Článek 1
Xxxxxxx státy xxxxxxx, aby xx xxxxxx xxxxxxxx obsahu xxxxxxxx X, xxxxxxxx X x xxxxxxxxxx x xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxx metodami xxxxxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxx 2
Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx nezbytné pro xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 31. xxxxx 2000. Xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx Komisi.
Budou xxxx xxxxxxxx používat xx 1. xxxx 2000.
Xxxx xxxxxxxx přijatá xxxxxxxxx státy xxxx xxxxxxxxx odkaz na xxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxx takový xxxxx xxxxxx při xxxxxx xxxxxxx vyhlášení. Xxxxxx odkazu xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx 3
Xxxx směrnice xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx dnem po xxxxxxxxx x Úředním xxxxxxxx Evropských xxxxxxxxxxxx.
Článek 4
Xxxx xxxxxxxx xx určena xxxxxxxx xxxxxx.
X Xxxxxxx xxx 6. xxxxxxxx 2000.
Xx Xxxxxx
Xxxxx Xxxxx
xxxx Komise
[1] Xx. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Úř. věst. X 241, 29.8.1994, x. 1.
[3] Xx. věst. X 270, 14.12.1970, x. 1.
[4] Xx. xxxx. X 297, 18.11.1999, x. 8.
[5] Xx. věst. X 86, 6.4.1979, x. 30.
[6] Xx. xxxx. X 105, 3.5.2000, x. 36.
[7] Úř. xxxx. X 237, 22.9.1993, x. 23.
[8] Úř. xxxx. X 125, 23.5.1996, x. 35.
XXXXXXX
XXXX X STANOVENÍ XXXXXXXX A
1. Účel x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx X (xxxxxxxx) x xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx A xxxxxxxx xxx-xxxxx-xxxxxxx alkohol x xxxx xxx izomery, xxxxx xx xxxxxxx xxxxx metodou. Xxxxx xxxxxxxx X xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (IU) na xx. Xxxxx XX xxxxxxxx xxxxxxxx 0,300 μx all-trans-vitamín X xxxxxxxx xxxx 0,344 μx all-trans-vitamín X xxxxxxx nebo 0,550 μx xxx-xxxxx-xxxxxxx X xxxxxxxxx.
Xxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 2000 XX vitamínu X/xx.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx je xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztokem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx X xx xxxxxxxxxx xx petroléteru. Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xx rozpustí x xxxxxxxx x, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxx xx požadovanou xxxxxxxxxxx. Obsah vitamínu X xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx vysoce xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XX-XXXX) xx xxxxxxx XX xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx tak, xxx xxxxxxx k xxxxxxxx all-trans-vitamín X xxxxxxxx x xxxx xxx xxxxxxx.
3. Xxxxxxx
3.1 Xxxxxx, σ = 96 %
3.2 Petroléter, xxxxxx xxxx 40 xx 60 °X
3.3 Xxxxxxx
3.4 Xxxxxx hydroxidu xxxxxxxxxx, β = 50 x/100 xx
3.5 Xxxxxx xxxxxxxxx sodného, β = 10 x/100 xx (xxx 7.7 poznámky)
3.6 Sulfid xxxxx, Xx2X. x X2X (x = 7–9)
3.6.1 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, c = 0,5 xxx/x x xxxxxxxxx, β = 120 g/l (pro x = 9) (xxx 7.8 xxxxxxxx)
3.7 Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, β = 2 x/100 xx v etanolu (3.1)
3.8 2-propanol
3.9 Xxxxxxx xxxx xxx XXXX: xxxx xxxxxxxx (3.3) x vody, xxxx. 980 + 20 (xxxxxxxx + objemově). Xxxxxxxxx poměr xxxx xxxxxxxx charakteristikami použité xxxxxx.
3.10 Xxxxx, xxxxxx xxxxxxx
3.11 All-trans-vitamín X xxxxxx, xxxxx čistý, xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx. 2,80 x 106 XX/x
3.11.1 Xxxxxxx roztok xxx-xxxxx-xxxxxxx X xxxxxxx: Xxxxxxx s přesností xx 0,1 mg 50 xx xxxxxxx xxxxxxxx X (3.11) xx 100 ml xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx 2-xxxxxxxxx (3.8) x xxxxxxx po xxxxxx xxxxxxx rozpouštědlem. Xxxxxxxxx koncentrace xxxxxx xxxxxxx xx 1400 XX xxxxxxxx X xx xx. Přesný xxxxx musí xxx xxxxxxxx xxxxx 5.6.3.1.
3.12 Xxx-xxxxx-xxxxxxx X xxxxxxxx, xxxxx čistý, xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx. 1,80 x 106 XX/x.
3.12.1 Xxxxxxx xxxxxx xxx-xxxxx-xxxxxxx X xxxxxxxxx: Xxxxxxx x xxxxxxxxx na 0,1 xx 80 xx xxxxxxxxx vitamínu X (3.12) xx 100 xx xxxxxxx xxxxx. Rozpusťte xx 2-xxxxxxxxx (3.8) x xxxxxxx po xxxxxx xxxxxxx rozpouštědlem. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx tohoto roztoku xx 1400 IU xxxxxxxx X xx xx. Xxxxxx obsah xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx 5.6.3.2.
3.13 2,6-Di-tert-butyl-4-methylphenol (XXX) (xxx 7.5 xxxxxxxx)
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
4.1 Xxxxxxx vakuová xxxxxxx
4.2 Nádobí z xxxxxxxx xxxx
4.2.1 Baňky x xxxxxxx xxxx xxxx Erlenmeyerovy baňky, 500 xx, xx xxxxxxxxxxx xxxxx
4.2.2 Xxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx, 10, 25, 100 x 500 ml
4.2.3 Xxxxxx xxxxxxx, kuželovité, 1000 xx, se xxxxxxxxxxx xxxxxxx
4.2.4 Hruškovité baňky, 250 xx, se xxxxxxxxxxx hrdly
4.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, délka xxxxxxxx xxxxxx 300 xx, xx xxxxxxxxxx xxxxxx, x adaptérem xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
4.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx fáze, xxxxxx 185 mm (xxxx. Xxxxxxxxxx &xxx; Xxxxxxx 597 XX 1/2)
4.5 HPLC xxxxxx xx vstřikovacím xxxxxxxx
4.5.1 Xxxxxx xxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx, 250 mm x 4 mm, X18, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 5 xxxx 10 μx xxxx xxxxxxx (výkonnostní parametry: xxxxx xxxxxxxxxx pík xxx xxxxxxx izomery xxxxxxxx xx podmínek XXXX)
4.5.2 XX xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx
4.6 Xxxxxxxxxxxxxxx x 10 mm xxxxxxxxxx xxxxxxxx
4.7 Xxxxx lázeň x magnetickým xxxxxxxxx
4.8 Xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxxxxx 1) sestávající xx:
4.8.1 Xxxxxxxx odměrný xxxxx o xxxxxx 1x vybavený xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxx
4.8.2 Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx procházející xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx trubice xxxx xxx xxxxxx xxxxx xx tvaru xxxxxxx X x xxxxxx na opačném xxxxx tak, xxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx ve xxxxx převedena xx xxxxxx xxxxxxx.
5. Postup
Poznámka:
Vitamín X xx citlivý xxxx (XX) xxxxxx x xxxxxxx. Všechny xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (za použití xxxxxx x xxxxxxxx xxxx, nebo nádobí xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx fólií) x kyslíku (xxxxxxxxxxx xxxxxxx). Vzduch xxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (vyhněte xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx).
5.1 Příprava xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx tak, xxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx 1 mm, xxxxxxx dbejte, xxx xxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx a saponifikací, xxxxx xxxx xxxxx xx ztrátám xxxxxxxx X.
5.2 Xxxxxxxxxxxx
X závislosti xx obsahu vitamínu X, xxxxxxx x xxxxxxxxx xx 0,01 x, 2 x xx 25 x xxxxxx do 500 xx xxxxx x xxxxxxx dnem xxxx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx (4.2.1). Xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx 130 xx xxxxxxx (3.1), xxxxxxxxx 100 xx XXX (3.13), 2 xx roztoku askorbanu xxxxxxx (3.5) x 2 xx roztoku xxxxxxx xxxxxxx (3.6). Xxxxxxxx kondenzátor (4.3) x xxxxx x xxxxxxx baňku do xxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.7). Xxxxxxxx k xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxx minut. Xxxxx xxxxxxxx 25 ml xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.4) přes xxxxxxxxxxx (4.3) a xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 25 xxxxx xx stálého xxxxxxx xxx pomalým xxxxxxx xxxxxx. Potom xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 20 ml xxxx x xxxxx baňky xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
5.3 Extrakce
Převeďte dekantací xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx objemem 250 xx vody xx 1000 ml xxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.8). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx postupně 25 xx xxxxxxx (3.1) x 100 xx petroléteru (3.2) x xxxxxxxx xxxxxxxx xx dělící xxxxxxx xxxx xx extrakčního xxxxxxxxx. Xxxxx vody x etanolu x xxxxxxxxxxxxx roztocích musí xxx xxxxx 2:1. Xxxxxxxx silně xxx xxxxxx x nechejte xxxxx xxx xxxxxx.
5.3.1 Xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (4.2.3)
Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxxxxxx 7.3), xxxxxxxx xxxxxx petroléteru xx další dělící xxxxxxx (4.2.3). Xxxxxxxx xxxx extrakci dvakrát 100 ml petroléteru (3.2) x xxxxxxx 50 xx xxxxxxxxxxx (3.2).
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x dělící nálevce xxxxxxx 100 xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (aby xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx) x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx 100 xx xxxxxxx vody, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx přídavku xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.7) (čtyřnásobné xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Xxxxxxxxxxxx extrakt xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx pro dělení xxxx (4.4), xxx xx odstranila všechna xxxxxxxxxxxx xxxx xx 500 xx xxxxxxx xxxxx (4.2.2). Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx 50 ml xxxxxxxxxxx (3.2), xxxxxxx xx značku petroléterem (3.2) x xxxxx xxxxxxxxxxx.
5.3.2 Extrakce xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.8)
Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxxxxxx 7.3), xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx válce (4.8.1) xx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.8.2) x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx ve xxxxx písmene X xxxxxxxxxxxx trubice tak, xxx byl xxxxx xxx xxxxxxxx rozhraní. Xx pomoci xxxxx x xxxxxxx dusíku xx postranního ramene, xxxxxxxx xxxxxx vrstvu xxxxxxxxxxx xx 1000 xx dělící nálevky (4.2.3) Přidejte 100 xx xxxxxxxxxxx (3.2) xx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx a dobře xxxxxxxxxxx. Nechejte vrstvy xxxxxxx se x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx. Opakujte xxxxxx extrakce xxxxxxx 100 ml xxxxxxxxxxx (3.2), xxxxx dvakrát 50 ml xxxxxxx xxxxxxxxxxx (3.2) x xxxxxxxx vrstvy xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxx je xx xxxxxxx v 5.3.1, x pokračujte xxx je xxx xxxxxxx.
5.4 Xxxxxxxx roztoku xxxxxx pro HPLC
Odpipetujte xxxxxxxxx část xxxxxxx xxxxxxxxxxx (z 5.3.1 xxxx 5.3.2) xx 250 ml xxxxx xx xxxxx hrušky (4.2.4). Odpařte xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx vakuové xxxxxxx (4.1) za xxxxxxxxx xxxxx při xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx 40 °X. Xxxxxxx atmosférický xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (3.10) x odpojte xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Odstraňte xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx dusíku (3.10) x ihned xxxxxxxxx zbytek ve xxxxxx xxxxxx (10–100 xx) metanolu (3.3) (xxxxxxxxxxx vitamínu A xx xxxx být x rozsahu 5 XX/xx až 30 XX/xx).
5.5 Xxxxxxxxx xxxxxx XXXX
Xxxxxxx X xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx X18 (4.5.1) a xxxxxxxxxxx xx měřena pomocí XX xxxxxxxxx (325 xx) xxxx fluorescenčního xxxxxxxxx (excitace: 325 xx, emise: 475 xx) (4.5.2).
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx (xxxx. 20 μx) xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x 5.4 x vymývejte mobilní xxxx (3.9). Vypočtěte xxxxxxx xxxxx xxxx (xxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx stejného vzorku x xxxxxxx výšky (xxxxxx) několika xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků (5.6.2).
Xxxxxxxx XXXX
Xxxxxxxxxxx podmínky xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx; xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (4.5.1):&xxxx;&xxxx;&xxxx;&xxxx;&xxxx;&xxxx; 250 mm x 4 mm, X18, xxxxxxxx částic náplně 5 xxxx 10 μx xxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx (3.9):&xxxx;&xxxx;&xxxx;&xxxx;&xxxx; Xxxx xxxxxxxx (3.3) a xxxx, např. 980 + 20 (xxxxxxxx + xxxxxxxx)
Xxxxxx xxxx:&xxxx;&xxxx; 1 – 2 xx/xxx.
Xxxxxxxx (4.5.2):&xxxx;&xxxx;&xxxx;&xxxx;&xxxx;&xxxx;&xxxx;&xxxx; XX xxxxxxxx (325 xx) xxxx xxxxxxxxxxxxx detektor (xxxxxxxx: 325 xx/xxxxx: 475 nm)
5.6 Xxxxxxxxx
5.6.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx 20 xx xxxxxxxxx roztoku vitamín X acetátu (3.11.1) xxxx 20 xx xxxxxxxxx xxxxxxx vitamín X xxxxxxxxx (3.12.1) xx 500 ml xxxxx x xxxxxxx xxxx xxxx Erlenmeyerovy xxxxx (4.2.1) x xxxxxxxxxxxx, jak je xx xxxxxxx x 5.2, ale xxx xxxxxxxx BHT. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.2) xxxxx 5.3 x xxxxxxx xx 500 xx xxxxxxxxxxxx (3.2). Xxxxxxx 100 ml xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxx 5.4) xxxxx xx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx rozpouštědlo xxxxxxx xxxxxx (3.10) a xxxxx rozpusťte xxxxxx x 10,0 xx xxxxxxxx (3.3). Nominální xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx 560 XX xxxxxxxx X/1 ml. Xxxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxx 5.6.3.3 Xxxxxxxxxx pracovní roztok xxxx xxx čerstvě xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 2,0 xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoku xx 20 xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx značku xxxxxxxxx (3.3) a promíchejte. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx standardního pracovního xxxxxxx xx 56 XX xxxxxxxx X xx ml.
5.6.2 Příprava xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx 1,0, 2,0, 5,0 x 10,0 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx sérií 20 xx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx (3.3) x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx 2,8, 5,6, 14,0 x 28,0 XX xxxxxxxx A xx xx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx 20 μx každého xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx výšky xxxx (xxxxxx). Xx použití xxxxxxxxx výšek xxxx (xxxxx) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XX kontroly (5.6.3.3).
5.6.3 XX xxxxxxxxxxxxx standardních xxxxxxx
5.6.3.1 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx X xxxxxxx
Xxxxxxxxx 2,0 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx X xxxxxxx (3.11.1) do 50 ml odměrné xxxxx (4.2.2) x xxxxxxx xx xxxxxx 2-xxxxxxxxxx (3.8) Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx 56 XX xxxxxxxx A na xx. Xxxxxxxxx 3,0 xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx X xxxxxxx do 25 xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx 2-propanolem (3.8). Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx je 6,72 XX xxxxxxxx X xx xx. Změřte XX xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx 2-xxxxxxxxx (3.8) ve spektrofotometru (4.6) mezi 300 xx a 400 xx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx mezi 325 xx a 327 xx.
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx X:
XX xxxxxxxx X/xx = X326 × 19,0
X1%1xx pro xxxxxxx A alkohol = 1&xxxx;530 xxx 326 xx xx 2-xxxxxxxxx
5.6.3.2 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx X palmitátu
Pipetujte 2,0 ml zásobního xxxxxxx xxxxxxx X xxxxxxxxx (3.12.1) xx 50 xx xxxxxxx xxxxx (4.2.2) x xxxxxxx xx xxxxxx 2-xxxxxxxxxx (3.8) Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx tohoto xxxxxxx xx 56 IU xxxxxxxx A xx xx. Xxxxxxxxx 3,0 xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx vitamín X xxxxxxxxx xx 25 xx xxxxxxx baňky x xxxxxxx xx xxxxxx 2-xxxxxxxxxx (3.8). Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx je 6,72 XX vitamínu X xx xx. Xxxxxx XX xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx proti 2-propanolu (3.8) ve xxxxxxxxxxxxxxxx (4.6) xxxx 300 xx x 400 xx. Extinkční xxxxxxx xxxx xxx xxxx 325 nm x 327 xx.
Xxxxxxx obsahu xxxxxxxx A:
IU xxxxxxxx X/xx = X326 × 19,0
E1%1cm xxx xxxxxxx X xxxxxxx = 957 při 326 nm xx 2-xxxxxxxxx
5.6.3.3 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X
Xxxxxxxxx 3,0 ml xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx pracovního roztoku xxxxxxxx A, xxxxxxxxxxxx xxxxx 5.6.1 do 50 xx odměrné xxxxx (4.2.2) x xxxxxxx xx xxxxxx 2-xxxxxxxxxx (3.8). Xxxxxxxxx 5,0 xx xxxxxx xxxxxxx do 25 xx odměrné xxxxx x doplňte xx xxxxxx 2-xxxxxxxxxx (3.8). Xxxxxxxxx koncentrace tohoto xxxxxxx xx 6,72 XX vitamínu X xx xx. Změřte XX xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx proti 2-propanolu (3.8) ve spektrofotometru (4.6) mezi 300 xx x 400 xx. Xxxxxxxxx maximum xxxx xxx xxxx 325 nm x 327 nm.
Výpočet obsahu xxxxxxxx A:
IU xxxxxxxx X/xx = E325 × 18,3
X1%1xx pro xxxxxxx A xxxxxxx = 1&xxxx;821 xxx 326 nm xx 2-xxxxxxxxx
6. Výpočet výsledků
Ze xxxxxxx výšky (xxxxxx) xxxx pro roztok xxxxxx xxxxxxxx X xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x XX/xx xx vztahu xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.6.2).
Obsah xxxxxxxx X x x XX/xx xx xxxxxx je dán xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
x = 500 · β · X2 · 1 000 / X1 · m (XX=xx)
xx xxxxx:
β = xxxxxxxxxxx vitamínu X x xxxxxxx vzorku (5.4) x IU/ml
V1 = objem roztoku xxxxxx (5.4) x xx
X2 = xxxxx xxxxxxx odebraných x 5.4 x xx
x = hmota zkušební xxxxx x x
7. Xxxxxxxx
7.1 U xxxxxx x nízkou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx X xxxx xxx xxxxxxxx spojit xxxxxxxx petroléteru dvou xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (hmotnostní xxxxxxx: 25 x) xx xxxxxxx roztoku xxxxxx pro stanovení xxxxxx XXXX.
7.2 Xxxxxxxx xxxx xx vzorku xxxxxxxxx pro xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx 2x.
7.3 Pokud xx xxxxxxxx fázové xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx 10 xx xxxxxxx (3.1), x rozrušení emulze.
7.4 X rybího xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx 45–60 xxxxx.
7.5 Xxxxxxx XXX xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
7.6 Oddělení xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
7.7 Namísto xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx přibližně 150 xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
7.8 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx použito xxxxxxxxx 50 xx XXXX.
8. Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx mezi výsledky xxxx paralelních xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx překročit 15 % x xxxxxxx xxxxxxxx.
9. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx [1]
L: xxxxx laboratoří
n: xxxxx xxxxxxxxxxxx hodnot
sr: xxxxxxxxxx xxxxxxxx opakovatelnosti
sR: xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
x: xxxxxxxxxxxxxx
X: xxxxxxxxxxxxxxxxxx
XXx: xxxxxxxxxx variace xxxxxxxxxxxxxxx
XXX: koeficient xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
|
Xxxxxx |
Xxxxxxxxx xxxxxx |
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
Xxxxxx pro xxxxxx |
|
|
X |
13 |
12 |
13 |
12 |
13 |
|
x |
48 |
45 |
47 |
46 |
49 |
|
xxxxx [XX/xx] |
17,02 x 106 |
1,21 x 106 |
537100 |
151800 |
18070 |
|
xx [IU/kg] |
0,51 x 106 |
0,039 x 106 |
22080 |
12280 |
682 |
|
x [XX/xx] |
1,43 x 106 |
0,109 x 106 |
61824 |
34384 |
1910 |
|
XXx [XX/xx] |
3,0 |
3,5 |
4,1 |
8,1 |
3,8 |
|
xX [IU/kg] |
1,36 x 106 |
0,069 x 106 |
46300 |
23060 |
3614 |
|
X [XX/xx] |
3,81 x 106 |
0,193 x 106 |
129640 |
64568 |
10119 |
|
CVR [%] |
8,0 |
6,2 |
8,6 |
15 |
20 |
ČÁST X
XXXXXXXXX XXXXXXXX E
1. Xxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxx stanovení xxxxxxxx E x xxxxxxxx x premixech. Xxxxx xxxxxxxx X xx xxxxxxxx xxxx xx DL-α-tokoferol acetátu xx xx. 1 xx DL-α-tokoferol xxxxxxx xxxxxxxx 0,91 xx XX-α-xxxxxxxxxx (vitamín X).
Xxx xxxxxxxxxxxxxxx je 2 xx xxxxxxxx X/xx.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx hydrolyzován xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x vitamín X je extrahován xx petroléteru. Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx odpařením x xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx x, xxxxx je xx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx vitamínu E xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx vysoce xxxxxx xxxxxxxxxx chromatografie (RP-HPLC) xx použití XX xxxx fluorescenčního detekce.
3. Xxxxxxx
3.1 Xxxxxx, σ = 96 %
3.2 Xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx 40 xx 60 °X
3.3 Metanol
3.4 Roztok xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, β = 50 x/100 xx
3.5 Xxxxxx askorbanu xxxxxxx, β = 10 g/100 xx (xxx 7.7 poznámky)
3.6 Xxxxxx sodný, Xx2X. x X2X (x = 7–9)
3.6.1 Xxxxxx xxxxxxx sodného, x = 0,5 xxx/x x xxxxxxxxx, β = 120 x/x (xxx x = 9) (xxx 7.8 xxxxxxxx)
3.7 Roztok fenolftaleinu, β = 2 x/100 xx v xxxxxxx (3.1)
3.8 Xxxxxxx xxxx xxx XXXX: xxxx xxxxxxxx (3.3) x xxxx, např. 980 + 20 (xxxxxxxx + objemově). Xxxxxxxxx poměr bude xxxxxxxx charakteristikami použité xxxxxx.
3.9 Dusík, xxxxxx xxxxxxx
3.10 XX-α-xxxxxxxxx acetát, xxxxx čistý, xxxxxxx xxxxxxxx
3.10.1 Xxxxxxx xxxxxx XX-α-xxxxxxxxx xxxxxxx: Odvažte x xxxxxxxxx xx 0,1 mg, 100 xx DL-α-tokoferol xxxxxxx (3.10) xx 100 xx odměrné xxxxx. Xxxxxxxxx v xxxxxxx (3.1) x xxxxxxx xx značku stejným xxxxxxxxxxxxx. 1 xx xxxxxx roztoku xxxxxxxx 1 xx DL-α-tokoferol xxxxxxx. (XX kontrola – viz 5.6.1.3; xxxxxxxxxxx – xxx 7.4 xxxxxxxx).
3.11 XX-α-xxxxxxxxx, xxxxx čistý, xxxxxxx xxxxxxxx
3.11.1 Xxxxxxx x xxxxxxxxx xx 0,1 xx, 100 xx XX-α-xxxxxxxxxx (3.10) xx 100 xx xxxxxxx xxxxx. Rozpusťte x xxxxxxx (3.1) x xxxxxxx po xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. 1 xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 1 xx XX-α-xxxxxxxxxx. (XX xxxxxxxx – xxx 5.6.2.3; xxxxxxxxxxx – viz 7.4 xxxxxxxx).
3.12 2,6-Xx-xxxx-xxxxx-4-xxxxxxxxxxxx (XXX) (viz 7.5 xxxxxxxx)
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
4.1 Rotační vakuová xxxxxxx
4.2 Xxxxxx x xxxxxxxx skla
4.2.1 Xxxxx x xxxxxxx dnem xxxx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx, 500 ml, se xxxxxxxxxxx hrdly
4.2.2 Odměrné xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx, 10, 25, 100 x 500 ml
4.2.3 Xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx, 1000 xx, xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
4.2.4 Hruškovité baňky, 250 ml, xx xxxxxxxxxxx hrdly
4.3 Allihnův xxxxxxxxxxx, délka izolační xxxxxx 300 xx, xx zábrusovým xxxxxx, x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx
4.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxx papír xxx xxxxxxxx xxxx, xxxxxx 185 mm (xxxx. Xxxxxxxxxx & Xxxxxxx 597 XX 1/2)
4.5 HPLC xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
4.5.1 Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, 250 xx x 4 xx, X18, velikost částic xxxxxx 5 nebo 10 μm nebo xxxxxxxxxx
4.5.2 XX xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vlnové xxxxx
4.6 Xxxxxxxxxxxxxxx s 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx
4.7 Xxxxx lázeň x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.8 Xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxxxxx 1) sestávající xx:
4.8.1 Xxxxxxxx odměrný xxxxx o xxxxxx 1x vybavený xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxx
4.8.2 Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx trubicí xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Nastavitelná trubice xxxx mít spodní xxxxx xx xxxxx xxxxxxx X x xxxxxx na xxxxxxx xxxxx xxx, xxx xxxxx xxx horní xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx.
5. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx X xx xxxxxxx xxxx (XX) světlu x oxidaci. Všechny xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xx xxxxxxx xxxxxx x opakního xxxx, nebo nádobí xxxxxxxxxx hliníkovou xxxxx) x kyslíku (xxxxxxxxxxx xxxxxxx). Xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx se xxxxxxxx občasným povolením xxxxx).
5.1 Xxxxxxxx vzorku
Rozmělněte xxxxxx tak, xxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx 1 mm, xxxxxxx dbejte, xxx xxxxxxx k zahřátí. Xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, xxxxx může xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx X.
5.2 Saponifikace
V xxxxxxxxxx xx hmotnosti xxxxxx xxxxxxxx E xxxxxxx x přesností na 0,01 g, 2 x až 25 x xxxxxx xx 500 xx xxxxx x plochým xxxx xxxx Erlenmeyerovy baňky (4.2.1). Přidejte postupně xx stálého kroužení 130 xx xxxxxxx (3.1), xxxxxxxxx 100 xx XXX (3.12), 2 ml xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.5) x 2 ml xxxxxxx xxxxxxx sodného (3.6). Připojte xxxxxxxxxxx (4.3) k xxxxx x ponořte xxxxx xx xxxxx xxxxx x magnetickým míchadlem (4.7). Xxxxxxxx x xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx pět xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx 25 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.4) xxxx xxxxxxxxxxx (4.3) x xxxxxxxx odtékat xxxxxxx 25 xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx proudem xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx kondenzátor xxxxxxxxx 20 xx xxxx x obsah xxxxx xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx vypláchnutím xxxxxxxx xxxxxxx 250 xx xxxx xx 1000 xx dělící xxxxxxx (4.2.3) xxxx do xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.8). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 25 ml xxxxxxx (3.1) x 100 xx xxxxxxxxxxx (3.2) a xxxxxxxx xxxxxxxx xx dělící xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx měl být xxxxx 2:1. Xxxxxxxx xxxxx dvě xxxxxx x nechejte xxxxx xxx xxxxxx.
5.3.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx dělící xxxxxxx (4.2.3)
Xxxx xx xxxxxx oddělily (xxx xxxxxxxx 7.3), převeďte xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx nálevky (4.2.3). Opakujte tuto xxxxxxxx xxxxxxx 100 xx xxxxxxxxxxx (3.2) x xxxxxxx 50 xx petroléteru (3.2).
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 100 xx xxxxxxx xxxx za xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx se xxxxxxxxx xxxxxx emulzí) x potom opakovaným xxxxxxxx s xxxxxxx 100 xx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.7) (čtyřnásobné promývání xx obyčejně dostačující). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx skládaný xxxxx xxx xxxxxx fází (4.4), xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx do 500 xx odměrné baňky (4.2.2). Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx 50 ml xxxxxxxxxxx (3.2), doplňte xx xxxxxx petroléterem (3.2) x xxxxx promíchejte.
5.3.2 Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.8)
Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxxxxxx 7.3), xxxxxxxx xxxxx skleněného xxxxx (4.8.1) xx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.8.2) x nasměrujte xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx U nastavitelné xxxxxxx xxx, xxx xxx xxxxx xxx xxxxxxxx rozhraní. Za xxxxxx xxxxx x xxxxxxx dusíku do xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx 1000 xx xxxxxx xxxxxxx (4.2.3) Xxxxxxxx 100 ml xxxxxxxxxxx (3.2) do xxxxxxxxxx válce, zazátkujte x xxxxx protřepejte. Xxxxxxxx vrstvy xxxxxxx xx a xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx do xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx postup xxxxxxxx xxxxxxx 100 xx xxxxxxxxxxx (3.2), xxxxx xxxxxxx 50 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (3.2) x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx do xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx kombinované xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxx xx to xxxxxxx x 5.3.1, x xxxxxxxxxx xxx xx tam xxxxxxx.
5.4 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx XXXX
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (x 5.3.1 xxxx 5.3.2) xx 250 xx baňky xx xxxxx hrušky (4.2.4). Xxxxxxx rozpouštědlo xxxxx xx sucha xx xxxxxxx xxxxxxx odparce (4.1) xx xxxxxxxxx xxxxx při xxxxxxx xxxxx xxxxx nepřekračující 40 °X. Obnovte xxxxxxxxxxxx tlak xxxxxxxxxxx xxxxxx (3.9) x xxxxxxx baňku od xxxxxxx vakuové odparky. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (3.9) x xxxxx rozpusťte xxxxxx xx známém xxxxxx (10–100 xx) xxxxxxxx (3.3) (xxxxxxxxxxx XX-α-xxxxxxxxxx xx měla xxx v rozsahu 5 μx/xx až 30 μx/xx).
5.5 Xxxxxxxxx xxxxxx XXXX
Xxxxxxx E xx oddělen na xxxxxxxx xxxxxx koloně X18 (4.5.1) x xxxxxxxxxxx je měřena xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx detektoru (xxxxxxxx: 295 nm, xxxxx: 330 nm) xxxx XX xxxxxxxxx (292 xx) (4.5.2).
Vstříkněte xxxxxxxxx část (xxxx. 20 μx) xxxxxxxxxxxx xxxxxxx získaného x 5.4 a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx (3.8). Xxxxxxxxx střední xxxxx xxxx (xxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxx roztoku stejného xxxxxx x střední xxxxx (plochy) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků (5.6.2).
Xxxxxxxx HPLC
Následující podmínky xxxx xxxxxxxxxxx jako xxxxxxxxxx; xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xx předpokladu, xx xxxxxxxxx xxxxxx výsledky.
Kolona xxx kapalinovou chromatografii (4.5.1): 250 xx x 4 mm, X18, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 5 xxxx 10 μx xxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxx (3.8): Xxxx xxxxxxxx (3.3) x vody, xxxx. 980 + 20 (xxxxxxxx + objemově)
Úroveň xxxx: 1–2 ml/min.
Detektor (4.5.2): Fluorescenční xxxxxxxx (xxxxxxxx: 295 nm/emise: 330 xx) xxxx XX xxxxxxxx (292 xx)
5.6 Kalibrace (XX-α-xxxxxxxxx xxxxxxx nebo DL-α-tokoferolu)
5.6.1 Xxxxxxxx XX-α-xxxxxxxxx xxxxxxx
5.6.1.1 Xxxxxxxx standardních xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx 25 xx xxxxxxxxx xxxxxxx XX-α-xxxxxxxxx acetátu (3.10.1) xx 500 xx xxxxx x plochým xxxx xxxx Erlenmeyerovy xxxxx (4.2.1) a xxxxxxxxxxxx, jak xx xx xxxxxxx x 5.2. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.2) xxxxx 5.3 x xxxxxxx xx 500 xx xxxxxxxxxxxx. Odpařte 25 xx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxx 5.4) xxxxx xx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx dusíku (3.9) x xxxxx rozpusťte xxxxxx x 25,0 xx netanolu (3.3). Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx tohoto xxxxxxx xx 45,5 μx DL-α-tokoferolu xx xx, ekvivalent 50 μx DL-α-tokoferol xxxxxxx xx xx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx roztok musí xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
5.6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx graf
Převeďte 1,0, 2,0, 4,0 a 10,0 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx 20 xx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx značku xxxxxxxxx (3.3) a xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx koncentrace těchto xxxxxxx xxxx 2,5, 5,0, 10,0 x 25,0 μg/ml XX-α-xxxxxxxxx xxxxxxx, xx. 2,28, 4,55, 9,10 x 22,8 μx/xx DL-α-tokoferolu.
Vstříkněte xxxxxxxxxx 20 μx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx střední xxxxx xxxx (plochy). Xx xxxxxxx středních xxxxx xxxx (xxxxx) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
5.6.1.3 XX xxxxxxxxxxxxx zásobního xxxxxxx XX-α-xxxxxxxxx acetátu (3.10.1)
Xxxxxxxx 5,0 xx xxxxxxxxx xxxxxxx XX-α-xxxxxxxxx xxxxxxx (3.10.1) xx 25,0 xx etanolem x xxxxxx UV xxxxxxxx tohoto xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (3.1) xx spektrofotometru (4.6) xxxx 250 xx x 320 nm.
Absorpční xxxxxxx by xxxx xxx při 284 xx:
X1%1xx = 43,6 xxx 284xx x xxxxxxx
Xxx xxxxx ředění xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx 0,84 xx 0,88.
5.6.2 Xxxxxxxx XX-α-xxxxxxxxxx
5.6.2.1 Příprava xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx 2,0 ml zásobního xxxxxxx XX-α-xxxxxxxxxx (3.11.1) xx 50 ml xxxxxxx baňky, xxxxxxxxx x metanolu (3.3) x doplňte xx xxxxxx metanolem. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx 40 μx XX-α-xxxxxxxxxx na xx, xxxxxxxxxx 44,0 μx XX-α-xxxxxxxxx acetátu xx xx. Standardní xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx připraven xxxx xxxxxxxx.
5.6.2.2 Xxxxxxxx kalibračního xxxxxxx x kalibrační xxxx
Xxxxxxxx 1,0, 2,0, 4,0 x 10,0 xx standardního pracovního xxxxxxx xx xxxxx 20 xx odměrných xxxxx, xxxxxxx po xxxxxx xxxxxxxxx (3.3) x promíchejte. Nominální xxxxxxxxxxx xxxxxx roztoků xxxx 2,0, 4,0, 8,0 a 20,0 μx/xx XX-α-xxxxxxxxxx, xx. 2,20, 4,40, 8,79 x 22,0 μx/xx XX-α-xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx 20 μx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx (xxxxxx). Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx (xxxxx) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
5.6.2.3 XX xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx roztoku XX-α-xxxxxxxxxx (3.11.1)
Rozřeďte 2,0 xx zásobního roztoku XX-α-xxxxxxxxxx (3.11.1) xx 25,0 xx etanolem x změřte XX xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (3.1) xx xxxxxxxxxxxxxxxx (4.6) xxxx 250 xx x 320 xx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx být xxx 292 xx:
X1%1xx = 75,8 xxx 292xx x xxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx 0,6.
6. Xxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx (xxxxxx) xxxx pro xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx X xxxxxxxx koncentraci xxxxxxx xxxxxx x μg/ml (xxxxxxxx xxxx α-xxxxxxxxx xxxxxx) ve xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.6.1.2 nebo 5.6.2.2).
Xxxxx xxxxxxxx X x x xx/xx ve xxxxxx xx dán xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
x = 500 · β · V2 / X1 · x [xx/xx]
xx xxxxx:
β = xxxxxxxxxxx xxxxxxxx X x roztoku vzorku (5.4) x μg/ml
V1 = xxxxx xxxxxxx xxxxxx (5.4) v xx
X2 = xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x 5.4 x xx
x = xxxxx zkušební xxxxx x g
7. Xxxxxxxx
7.1 X xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx X xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx petroléteru xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxxx: 25 x) xx jednoho roztoku xxxxxx xxx stanovení xxxxxx XXXX.
7.2 Xxxxxxxx xxxx ve xxxxxx xxxxxxxxx xxx analýzu xxxxx xxxxxxxxx 2x.
7.3 Xxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx 10 xx xxxxxxx (3.1), x xxxxxxxxx xxxxxx.
7.4 Po xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx XX-α-xxxxxxxxx acetátu xxxx XX-α-xxxxxxxxxx podle 5.6.1.3 xxxx 5.6.2.3 xxxxxxxx xx roztoku (3.10.1 xxxx 3.10.2) xxxxxxxxx 10 xx XXX (3.12) x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx čtyři xxxxx).
7.5 Xxxxxxx BHT může xxx xxxxxx hydrochinon.
7.6 Xxxxxxxx α-, β-, χ- x δ xxxxxxxxxx je xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx kolony.
7.7 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx přibližně 150 xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
7.8 Namísto xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx použito přibližně 50 xx XXXX.
8. Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx výsledky xxxx paralelních xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx nesmí xxxxxxxxx 15 % z xxxxxxx výsledku.
9. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx [2]
X: xxxxx laboratoří
n: počet xxxxxxxxxxxx xxxxxx
xx: xxxxxxxxxx xxxxxxxx opakovatelnosti
sR: xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
x: xxxxxxxxxxxxxx
X: xxxxxxxxxxxxxxxxxx
XXx: xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
XXX: xxxxxxxxxx variace xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
|
Xxxxxx |
Xxxxxxxxx krmivo |
Minerální koncentrát |
Bílkovinný xxxxxxxxxx |
Xxxxxx xxx xxxxxx |
|
|
X |
12 |
12 |
12 |
12 |
12 |
|
x |
48 |
48 |
48 |
48 |
48 |
|
xxxxx [xx/xx] |
17 380 |
1 187 |
926 |
315 |
61,3 |
|
xx [xx/xx] |
384 |
45,3 |
25,2 |
13,0 |
2,3 |
|
x [xx/xx] |
1 075 |
126,8 |
70,6 |
36,4 |
6,4 |
|
CVr [%] |
2,2 |
3,8 |
2,7 |
4,1 |
3,8 |
|
xX [xx/xx] |
830 |
65,0 |
55,5 |
18,9 |
7,8 |
|
X [mg/kg] |
2 324 |
182,0 |
155,4 |
52,9 |
21,8 |
|
XXX [%] |
4,8 |
5,5 |
6,0 |
6,0 |
12,7 |
XXXX C
STANOVENÍ XXXXXXXXXX
1. Xxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxx xx určena xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxx X- x X- xxxxxxx.
2. Xxxxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx tryptofanu je xxxxxx hydrolyzován za xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx barnatého x zahříván xxx 110 °C xx 20 xxxxx. Po xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxx stanovení xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx extrahován za xxxxx kyselých podmínek x přítomnosti xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx x vnitřní xxxxxxxx xxxx stanoveny x xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx pomocí XXXX x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Xxxxxxx
3.1 Dvojnásobně xxxxxxxxxxx xxxx, nebo voda xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx používána (xxxxxxxx &xx; 10 μX/xx)
3.2 Xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxx (xxxxxxx/xxxxx > 99 %), xxxxxx pod xxxxxx xxxx pentoxid xxxxxxx
3.3 Vnitřní standardní xxxxx: α-xxxxxx-xxxxxxxxx (xxxxxxx/xxxxx &xx; 99 %), xxxxxx xxx vakuem xxxx xxxxxxxx fosforu
3.4 Xxxx-xxxxxx hydroxidu xxxxxxxxx (xxxx xxx xxxxx, xxx nebyl Xx(XX)2. 8 H2O nadměrně xxxxxxxxxx xx vzduchu, xxx se xxxxxxxxx xxxxxx XxXX3, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx) (xxx xxxxxxxx 9.3)
3.5 Xxxxxxxx xxxxx
3.6 Xxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxx, x = 85 %
3.7 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, x20 = 1,19 g/ml
3.8 Xxxxxxx, XXXX xxxxxx
3.9 Xxxxxxxxxx, xxxxxx varu 40–60 °X
3.10 Roztok xxxxxxxxx xxxxxxx, x = 1 xxx/x:
Xxxxxxxxx 40,0 x NaOH (3.5) xx vodě a xxxxxxx xx 1 x xxxxx (3.1).
3.11 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, c = 6 xxx/x:
Xxxxxxx 492 ml XXX (3.7) x doplňte xx 1 x xxxxx.
3.12 Kyselina chlorovodíková, x = 1 xxx/x:
Xxxxxxx 82 xx XXX (3.7) x xxxxxxx xx 1 x xxxxx.
3.13 Kyselina xxxxxxxxxxxxxx, c = 0,1 xxx/x:
Xxxxxxx 8,2 xx XXX (3.7) x xxxxxxx xx 1 x vodou.
3.14 Xxxxxxxx orto-fosforečná, x = 0,5 xxx/x:
Xxxxxxx 34 xx xxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxx (3.6) a xxxxxxx xx 1 x xxxxx (3.1)
3.15 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx tryptofanu (3.2), x = 2,50 μxxx/xx:
Xxxxxxxxx 0,2553 x tryptofanu (3.2) x 500 xx xxxxxxx baňce x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.13) x xxxxxxx xx xxxxxx kyselinou chlorovodíkovou (3.13). Skladujte xxx –18 xX xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
3.16 Koncentrovaný xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, x = 2,50 μxxx/xx:
Xxxxxxxxx 0,2728 x α-xxxxxx-xxxxxxxxxx (3.3) v 500 xx xxxxxxx baňce x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.13) a xxxxxxx xx značku xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (3.13). Skladujte xxx –18 oC xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
3.17 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx tryptofanu x xxxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxxxx 2,00 ml xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (3.15), x 2,00 xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx vnitřního xxxxxxxxx (α-xxxxxx-xxxxxxxxx) (3.16). Xxxxxx xxxxx (3.1) x metanolem (3.8) xx přibližně xxxxxx xxxxx x na xxxxxxxxx stejnou koncentraci xxxxxxxx (10–30 %) xxxx xxxxxxx hydrolyzát.
Tento xxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx chraňte xxxx xxxxxx slunečním xxxxxx.
3.18 Kyselina octová
3.19 1,1,1-xxxxxxxxx-2-xxxxxx-2-xxxxxxxx
3.20 Xxxxxxxxxxx > 98 %
3.21 Roztok 1 x 1,1,1-xxxxxxxxx-2-xxxxxx-2-xxxxxxxxx (3.19) xx 100 xx metanolu (3.8).
3.22 Xxxxxxx fáze xxx XXXX: 3,00 x xxxxxxxx xxxxxx (3.18) + 900 ml xxxx (3.1) + 50,0 xx roztoku (3.21) 1,1,1-xxxxxxxxx-2-xxxxxx-2-xxxxxxxxx (3.19) x xxxxxxxx (3.8) (1x/100 ml). Xxxxxxx xX xx 5 x použitím xxxxxxxxxxxx (3.20). Xxxxxxx xx 1000 xx xxxxx (3.1).
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
4.1 Xxxxxxxx xxx XXXX se spektrofluorimetrickým xxxxxxxxxx
4.2 Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, 125 xx x 4 xx, C18, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 3 μx nebo ekvivalent
4.3 xX metr
4.4 Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx 125 xx, xx xxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
4.5 Xxxxxxxxxx xxxxx, 0,45 μx
4.6 Xxxxxxxx, 110 (+ 2) °X, 1,4 (+ 0,1) xxxx
4.7 Mechanická xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx
4.8 Xxxxxx xxxxx
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxx, xxx prošel xxxxx x otvory 0,5 xx. Xxxxxx, xxxxx xxxx vysokou xxxxxxx, xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx buď xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 50 °X, xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxx mletím extrahovány xxxxxxxxxxxx (3.9).
5.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxx)
Xxxxxxx x přesností na 1 xx xxxxxxxxx xxxxxxxx (1–5 x) xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx 100 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, x = 0,1 mol/l (3.13) x 5,00 xx koncentrovaného xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.16). Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx 60 xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.7). Nechejte xxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx 10,0 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx kádinky. Xxxxxxxx 5 ml xxxxxxxx orto-fosforečné, x = 0,5 mol/l (3.14). Xxxxxxx xX xx 3,0 za xxxxxxx xxxxxxxxx sodného, x = 1,0 xxx/x (3.10). Přidejte xxxxxxxxx xxxxxxxx (3.8), xxxxxx xxxxxxxx koncentraci xxxx 10 a 30 % xxxxxxxx x konečném xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx o xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx kalibrační xxxxxxxxxx xxxxxx (3.17)).
Xxxx vstříknutím xx xxxxxx XXXX xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx 0,45 μx (4.5). Provádějte chromatografii xxxxx 5.4.
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxx slunečním xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx, mohou xxx xxxxxxxxxx xxx 5 °X po xxxxxxxxx xxxx xxx xxx.
5.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (hydrolyzát)
Odvažte s xxxxxxxxx xx 0,2 xx xx 0,1 xx 1 g xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx polypropylénové xxxxx (4.4). Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxx dusíku xxxxx 10 xx. Xxxxxxxx 8,4 g xxxx-xxxxxxx xxxxxxxxx barnatého (3.4) x 10 xx vody. Promíchejte xx vířivém xxxxxx (4.8) xxxx magnetickém xxxxxxxx (4.7). Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx 4 xx xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxx uzavřete. Přeneste xx xxxxxxxxx (4.6) x vroucí xxxxx x párou na 30–60 xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxx 110 (+ 2) °C xx xxxx 20 xxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx autoklávu snižte xxxxxxx xxxxx xxx 100 °X. Xxx xxxxxxx xx krystalizaci Xx(XX)2. 8 H2O, xxxxxxxx do xxxxx xxxxx 30 ml xxxx o pokojové xxxxxxx. Xxxxx protřepávejte, xxxx xxxxxxxx. Přidejte 2,00 ml koncentrovaného xxxxxxx vnitřního xxxxxxxxx (α-xxxxxx-xxxxxxxxx) (3.16). Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx/xxxxxx xxxxx po dobu 15 minut.
Potom přidejte 5 ml orto-fosforečné xxxxxxxx, c = 0,5 xxx/x (3.14). Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, x = 6 xxx/x (3.11) zatímco xxxxxxx x xxxxxxx xX xx 3,0 x xxxxxxxx XXX, x = 1 xxx/x (3.12). Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, abyste xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx 10 a 30 % metanolu x xxxxxxxx objemu. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x vhodném xxxxxx x xxxxxx xxxxx xx definovaný objem xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx 100 xx). Xxxxxxxx xxxxxxxx by xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxxxx do xxxxxx XXXX xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx 0,45 μx (4.5). Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 5.4.
Chraňte xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx přímým xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxx analyzovat hydrolyzáty xxxxxx xxx, mohou xxx xxxxxxxxxx xxx 5 °X xx xxxxxxxxx xxxx xxx xxx.
5.4 Xxxxxxxxx pomocí XXXX
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx; xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxx xxxxxxxx 9.1 x 9.2):
Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (4.2): 125 xx x 4 mm, C18, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 3 μx nebo xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxx (3.22): 3,00 x kyseliny xxxxxx (3.18) + 900 ml vody (3.1) + 50,0 xx roztoku (3.21) 1,1,1-xxxxxxxxx-2-xxxxxx-2-xxxxxxxxx (3.19) x xxxxxxxx (3.8) (1 x/100 xx). Upravte xX xx 5,00 x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.20). Xxxxxxx do 1000 xx xxxxx (3.1)
Xxxxxx xxxx:&xxxx;&xxxx; 1 xx/xxx.
Xxxxxxx xxxx xxxx: xxxxxxxxx 34 minut
Detekční xxxxxx xxxxx: xxxxxxxx: 280 nm, xxxxx: 356 xx
Xxxxxxxxx xxxxx: 20 μl
6. Xxxxxxx xxxxxxxx
X × X × C × X × X × XX / X × G × H × 10&xxxx;000 × X = x xxxxxxxxxx xx 100x xxxxxx
X = plocha xxxx xxxxxxxxx standardu, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.17)
X = xxxxxx píku xxxxxxxxxx, xxxxxxxx (5.2) xxxx xxxxxxxxxxx (5.3)
X = objem roztoku xxxxxxxxxxxxxxx tryptofanu (3.15) (2 xx) přidaný xx kalibračního roztoku (3.17)
X = koncentrace xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (3.15) x μmolech/ml (= 2,50) xxxxxxxxx xx kalibračního xxxxxxx (3.17)
X = xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.16) x xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx (5.2) (= 5,00 xx) xxxx xx xxxxxxxxxxx (5.3) (= 2,00 xx)
X = xxxxxx xxxx xxxxxxxxx standardu, xxxxxxxx (5.2) xxxx hydrolyzátu (5.3)
X = xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, kalibračního xxxxxxxxxxxx roztoku (3.17)
X = xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx standardního roztoku (3.16) x xx (= 2,00) xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx standardního xxxxxxx (3.17)
X = xxxxxxxx vzorku x x (xxxxxxxx na xxxxxxx hmotnost, jestliže xxx vzorek sušen x/xxxx odtučněn)
MW = xxxxxxxxxx hmotnost xxxxxxxxxx (= 204,23)
7. Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx překročit 10 % z xxxxxxx xxxxxxxx.
8. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx spolupráce Xxxxxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx tak, xx byly xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx 12 xxxxxxxxxxxx k xxxxxxx metody xxx xxxxxxxxx. Replikované (5) xxxxxxx byly prováděny x xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x následující tabulce:
L: xxxxx laboratoří xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
x: počet jednotlivých xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx výsledků (identifikované Xxxxxxx-Xxxxxxxxx xxxxxx)
xx: xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
xX: xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
x: opakovatelnost
R: xxxxxxxxxxxxxxxxxx
XXx: xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, %
CVR: xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx, %
|
Xxxxxx 1 Xxxxxx xxx xxxxxxx |
Xxxxxx 2 Krmivo xxx prasata xxxxxxxx X-xxxxxxxxxxx |
Xxxxxx 3 Xxxxx xxxxxxxxxx pro prasata |
|
|
L |
12 |
12 |
12 |
|
n |
50 |
55 |
50 |
|
střed [x/xx] |
2,42 |
3,40 |
4,22 |
|
xx [x/xx] |
0,05 |
0,05 |
0,08 |
|
x [x/xx] |
0,14 |
0,14 |
0,22 |
|
XXx [%] |
1,9 |
1,6 |
1,9 |
|
xX [x/xx] |
0,15 |
0,20 |
0,09 |
|
X [x/xx] |
0,42 |
0,56 |
0,25 |
|
XXX [%] |
6,3 |
6,0 |
2,2 |
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx xxx, že xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx ve 13 xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx (5) xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx jsou xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
X: xxxxx laboratoří xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
x: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx zadržených xxxxxxxxxxxx odlehlých xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx Cochran-Dixonovým xxxxxx)
xx: xxxxxxxxxx xxxxxxxx opakovatelnosti
sR: xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
x: xxxxxxxxxxxxxx
X: xxxxxxxxxxxxxxxxxx
XXx: xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, %
XXX: xxxxxxxxxx xxxxxxx reprodukovatelnosti, %
|
Xxxxxx 4 Xxxx xxxxxxx se sójou |
Vzorek 5 Xxxx xxxxxxx xx xxxxx (= xxxxxx 4) s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (0,457 x/xx) |
|
|
X |
12 |
12 |
|
x |
55 |
60 |
|
xxxxx [g/kg] |
0,391 |
0,931 |
|
sr [x/xx] |
0,005 |
0,012 |
|
x [x/xx] |
0,014 |
0,034 |
|
XXx [%] |
1,34 |
1,34 |
|
xX [x/xx] |
0,018 |
0,048 |
|
X [x/xx] |
0,050 |
0,134 |
|
XXX [%] |
4,71 |
5,11 |
Další xxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxx, xx xxxxx xxxxxx byly xxxxxxxxxxx až x xxxxx laboratořích s xxxxx potvrzení xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
X: xxxxx xxxxxxxxxx předkládajících výsledky
n: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxx-Xxxxxxxxx xxxxxx)
xx: xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
xX: xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
x: xxxxxxxxxxxxxx
X: reprodukovatelnost
CVr: xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, %
XXX: xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx, %
|
Xxxxxx 1 Xxxxxx xxxxxx pro xxxxxxx (CRM 117) |
Vzorek 2 Xxxxx-xxxxx xxxx xxxxxx (XXX 118) |
Xxxxxx 3 Xxxxxx xxxxxx (XXX 119) |
Xxxxxx 4 Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (XXX 120) |
|
|
X |
7 |
7 |
7 |
7 |
|
x |
25 |
30 |
30 |
30 |
|
xxxxx [x/xx] |
2,064 |
8,801 |
6,882 |
5,236 |
|
xx [x/xx] |
0,021 |
0,101 |
0,089 |
0,040 |
|
x [g/kg] |
0,059 |
0,283 |
0,249 |
0,112 |
|
CVr [%] |
1,04 |
1,15 |
1,30 |
0,76 |
|
xX [x/xx] |
0,031 |
0,413 |
0,283 |
0,221 |
|
X [x/xx] |
0,087 |
1,156 |
0,792 |
0,619 |
|
XXX [%] |
1,48 |
4,69 |
4,11 |
4,22 |
9. Xxxxxxxx
9.1 Xxxxxxxxxxx specielní xxxxxxxxxxxxxxxx podmínky xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x α-xxxxxx-xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx následované xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx kolony:
|
Kolona xxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx: |
125 xx x 4 xx, X18, xxxxxxxx xxxxxx náplně 5 μx nebo xxxxxxx |
||
|
Xxxxxxx xxxxxx: |
32 °X |
||
|
Xxxxxxx xxxx: |
X: 0,01 xxx/x XX2XX4/xxxxxxx, 95 + 5 (xxxxxxxx + xxxxxxxx) X: Xxxxxxx |
||
|
Xxxxxxxxxxx program: |
0 xxx. |
100 % X |
0 % B |
|
15 xxx. |
100 % X |
0 % X |
|
|
17 xxx. |
60 % X |
40 % X |
|
|
19 xxx. |
60 % A |
40 % X |
|
|
21 min. |
100 % X |
0 % X |
|
|
33 xxx. |
100 % X |
0 % X |
|
|
Xxxxxx xxxx: |
1,2 xx/xxx. |
||
|
Xxxxxxx doba xxxx: |
xxxxxxxxx 33 minut |
||
9.2 Xxxxxxxxxxxxxx se xxxx xxxxxx xxxxx typu XXXX kolony x xxxxxxxxx plnícího materiálu. Xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx schopen xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx standardem. Xxxxx xx důležité, aby xxxx xxxxxxxxxx produkty xxxxx xxxxxxxx od xxxxxxxxxx a vnitřního xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx bez xxxxxxxxx standardu by xxxx být xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxx xx překontrolovala xxxxxxxxx čára xx xxxxxxxxx standardu pro xxxxxxxxx. Je důležité, xxx xxxx xxxx xxxx dostatečně dlouhá xxx vymytí všech xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx následný xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxxx, xx měl xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx dát xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx měřena s xxxxxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xx důležité, xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx byly x xxxxxxxxx rozsahu HPLC/flourescenčního xxxxxxx. Xxxxx pík (xxxx) xxx tryptofanu, x/xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx (xxxx) xxxxxx xxxx (xxxx) xxxx xxxxxx xxxxxx (vysoké), xxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx velikosti x/xxxx xxxxxxxx konečným xxxxxxx.
9.3 Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx xx stává xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx. Xx se xxxxxxxxx x nečirém xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx XXXX, xxx může x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx.
[1] Xxxxxx xxxxxxxx skupinou pro xxxxxx Xxxxxxx Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx- xxx Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXXXX).
[2] Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx Xxxxxxx Deutscher Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx- und Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (VDLUFA).