Plné znění - 32000L0045

Směrnice Komise 2000/45/ES

ze xxx 6. xxxxxxxx 2000,

xxxxxx xx stanoví xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx vitamínu X, xxxxxxxx E x tryptofanu v xxxxxxxx

(Xxxx x významem xxx XXX)

XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,

x xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,

x ohledem xx směrnici Xxxx 70/373/XXX xx xxx 20. xxxxxxxx 1970, xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx odběru vzorků x xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx kontrolu xxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx aktem x xxxxxxxxxxx Xxxxxxxx, Xxxxxx x Xxxxxxx [2], x xxxxxxx xx xxxxxx 2 uvedené xxxxxxxx,

xxxxxxxx x xxxx, xx:

(1) Xxxxxxxx 70/373/XXX xxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxx krmiv za xxxxxx xxxxxxxx, zda xxxx xxxxxxx požadavky xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx x složení krmiv, xxxx být xxxxxxxxx xx xxxxxxx metod Xxxxxxxxxxxx xxx odběr xxxxxx x xxxxxxx.

(2) Xxxxxxxx Xxxx 70/524/XXX xx dne 23. xxxxxxxxx 1970 o xxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx [3], naposledy xxxxxxxxx xxxxxxxxx Xxxxxx (XX) x. 2439/1999 xx dne 17. xxxxxxxxx 1999 [4], xxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxx A a xxxxxxxx E xxxx xxx xxxxxx xx xxxxxxxxx, pokud jsou xxxx xxxxx xxxxxxx xx premixů x xxxxx.

(3) Směrnice Rady 79/373/XXX xx xxx 2. xxxxx 1979 x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx na xxx [5], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 2000/16/ES [6], x xxxxxxxx Xxxx 93/74/XXX xx xxx 13. září 1993 x krmivech xxxxxxxx xx zvláštním xxxxxx xxxxxx [7], xxxxxxxxx pozměněná xxxxxxxx 96/25/XX [8], stanoví, xx aminokyseliny xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx.

(4) Xxxx xxx stanoveny xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxx xxxxx.

(5) Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Stálého xxxxxx xxx xxxxxx,

XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:

Článek 1

Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxx se xxxxxx kontroly xxxxxx xxxxxxxx A, xxxxxxxx X a tryptofanu x xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx metodami xxxxxxxxxxx v xxxxxxx.

Xxxxxx 2

Členské státy xxxxxx x účinnost xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx nezbytné xxx xxxxxxxx souladu x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 31. xxxxx 2000. Xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx Komisi.

Budou xxxx xxxxxxxx používat xx 1. září 2000.

Xxxx opatření přijatá xxxxxxxxx xxxxx musí xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx směrnici xxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx úředním vyhlášení. Xxxxxx odkazu xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

Xxxxxx 3

Tato xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxx Evropských xxxxxxxxxxxx.

Článek 4

Xxxx xxxxxxxx xx určena xxxxxxxx xxxxxx.

V Xxxxxxx dne 6. xxxxxxxx 2000.

Xx Xxxxxx

Xxxxx Byrne

člen Xxxxxx

---

[1] Xx. věst. X 170, 3.8.1970, x. 2.

[2] Xx. xxxx. X 241, 29.8.1994, x. 1.

[3] Xx. xxxx. X 270, 14.12.1970, x. 1.

[4] Úř. věst. X 297, 18.11.1999, x. 8.

[5] Xx. xxxx. X 86, 6.4.1979, x. 30.

[6] Xx. xxxx. X 105, 3.5.2000, x. 36.

[7] Úř. xxxx. X 237, 22.9.1993, x. 23.

[8] Xx. xxxx. X 125, 23.5.1996, x. 35.

---

XXXXXXX

XXXX X XXXXXXXXX XXXXXXXX X

1. Xxxx x xxxxxx použití

Tato xxxxxx je xxxxxx xxx stanovení xxxxxxxx X (retinolu) v xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx X xxxxxxxx xxx-xxxxx-xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxx xxxxxxx, xxxxx se stanoví xxxxx metodou. Obsah xxxxxxxx X xx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (IU) xx xx. Xxxxx XX xxxxxxxx xxxxxxxx 0,300 μx xxx-xxxxx-xxxxxxx X xxxxxxxx xxxx 0,344 μx xxx-xxxxx-xxxxxxx X xxxxxxx nebo 0,550 μx xxx-xxxxx-xxxxxxx X xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxxxxxxxxx je 2000 XX vitamínu X/xx.

2. Princip

Vzorek xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx X je xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xx odstraněno xxxxxxxxx a zbytek xx rozpustí x xxxxxxxx x, xxxxx xx to xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Obsah vitamínu X se xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XX-XXXX) xx xxxxxxx XX nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxx k xxxxxxxx xxx-xxxxx-xxxxxxx X xxxxxxxx a jeho xxx xxxxxxx.

3. Xxxxxxx

3.1 Xxxxxx, σ = 96 %

3.2 Xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx 40 xx 60 °X

3.3 Xxxxxxx

3.4 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, β = 50 x/100 xx

3.5 Xxxxxx askorbanu xxxxxxx, β = 10 x/100 ml (viz 7.7 poznámky)

3.6 Sulfid xxxxx, Xx₂X. x X₂X (x = 7–9)

3.6.1 Roztok xxxxxxx xxxxxxx, x = 0,5 xxx/x x xxxxxxxxx, β = 120 x/x (xxx x = 9) (xxx 7.8 poznámky)

3.7 Xxxxxx fenolftaleinu, β = 2 g/100 xx v xxxxxxx (3.1)

3.8 2-xxxxxxxx

3.9 Xxxxxxx xxxx pro XXXX: xxxx xxxxxxxx (3.3) x xxxx, např. 980 + 20 (xxxxxxxx + objemově). Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

3.10 Dusík, prostý xxxxxxx

3.11 Xxx-xxxxx-xxxxxxx A xxxxxx, extra xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx. 2,80 x 106 XX/x

3.11.1 Xxxxxxx roztok xxx-xxxxx-xxxxxxx A xxxxxxx: Xxxxxxx s přesností xx 0,1 xx 50 xx xxxxxxx xxxxxxxx X (3.11) xx 100 xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx 2-xxxxxxxxx (3.8) x xxxxxxx po xxxxxx stejným xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx koncentrace xxxxxx xxxxxxx xx 1400 XX vitamínu X xx ml. Přesný xxxxx musí xxx xxxxxxxx xxxxx 5.6.3.1.

3.12 Xxx-xxxxx-xxxxxxx A xxxxxxxx, xxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx, např. 1,80 x 106 XX/x.

3.12.1 Xxxxxxx roztok xxx-xxxxx-xxxxxxx X palmitátu: Xxxxxxx x xxxxxxxxx xx 0,1 xx 80 xx palmitátu vitamínu X (3.12) do 100 xx odměrné xxxxx. Rozpusťte ve 2-xxxxxxxxx (3.8) a xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx 1400 IU xxxxxxxx X xx xx. Xxxxxx xxxxx xxxx být stanoven xxxxx 5.6.3.2.

3.13 2,6-Di-tert-butyl-4-methylphenol (XXX) (viz 7.5 xxxxxxxx)

4. Přístroje a xxxxxxx

4.1 Xxxxxxx vakuová xxxxxxx

4.2 Xxxxxx z xxxxxxxx xxxx

4.2.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxx xxxx Xxxxxxxxxxxxx baňky, 500 xx, xx xxxxxxxxxxx xxxxx

4.2.2 Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx, 10, 25, 100 a 500 ml

4.2.3 Xxxxxx xxxxxxx, kuželovité, 1000 xx, xx zábrusovými xxxxxxx

4.2.4 Xxxxxxxxxx baňky, 250 xx, xx xxxxxxxxxxx hrdly

4.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 300 xx, xx xxxxxxxxxx xxxxxx, x adaptérem pro xxxxxxxx xxxxxxx plynu.

4.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxx papír xxx xxxxxxxx fáze, xxxxxx 185 xx (xxxx. Xxxxxxxxxx & Xxxxxxx 597 XX 1/2)

4.5 XXXX xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

4.5.1 Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, 250 mm x 4 mm, X18, velikost xxxxxx xxxxxx 5 xxxx 10 μx xxxx xxxxxxx (výkonnostní xxxxxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx podmínek XXXX)

4.5.2 UV xxxx xxxxxxxxxxxxx detektor x xxxxxxxxxxx nastavením xxxxxx xxxxx

4.6 Xxxxxxxxxxxxxxx s 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx

4.7 Xxxxx lázeň x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

4.8 Xxxxxxxxx přístroj (viz xxxxxxx 1) xxxxxxxxxxx xx:

4.8.1 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx o xxxxxx 1x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxx

4.8.2 Xxxxxxxxx xxxxxx vybavená xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx trubice xxxx xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx X a xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx tak, aby xxxxx xxx horní xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx.

5. Xxxxxx

Xxxxxxxx:

Xxxxxxx X je citlivý xxxx (XX) xxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx, nebo nádobí xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx) x kyslíku (xxxxxxxxxxx xxxxxxx). Vzduch nad xxxxxxxxx xxxx být xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xx xxxxxxxx občasným xxxxxxxxx xxxxx).

5.1 Příprava vzorku

Rozmělněte xxxxxx xxx, aby xxxxxx sítem s xxxxxx 1 xx, xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx x zahřátí. Xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx dojít xx xxxxxxx xxxxxxxx X.

5.2 Xxxxxxxxxxxx

X xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx X, odvažte x xxxxxxxxx xx 0,01 x, 2 g xx 25 g xxxxxx xx 500 xx xxxxx s xxxxxxx xxxx nebo Xxxxxxxxxxxxx baňky (4.2.1). Xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx kroužení 130 xx xxxxxxx (3.1), xxxxxxxxx 100 xx XXX (3.13), 2 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.5) x 2 ml roztoku xxxxxxx xxxxxxx (3.6). Xxxxxxxx kondenzátor (4.3) x xxxxx x xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.7). Xxxxxxxx k xxxx x xxxxxxxx odtékat xxx xxxxx. Potom xxxxxxxx 25 ml xxxxxxx hydroxidu xxxxxxxxxx (3.4) xxxx xxxxxxxxxxx (4.3) a xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 25 xxxxx za xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx dusíku. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 20 ml vody x xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx.

5.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx objemem 250 xx vody xx 1000 xx xxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxx do xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.8). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 25 xx etanolu (3.1) x 100 xx petroléteru (3.2) x xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx do xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Podíl xxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx musí xxx xxxxx 2:1. Xxxxxxxx silně xxx xxxxxx a nechejte xxxxx xxx xxxxxx.

5.3.1 Xxxxxxxx x použitím xxxxxx xxxxxxx (4.2.3)

Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxxxxxx 7.3), xxxxxxxx xxxxxx petroléteru xx další xxxxxx xxxxxxx (4.2.3). Opakujte xxxx xxxxxxxx dvakrát 100 ml xxxxxxxxxxx (3.2) a dvakrát 50 xx xxxxxxxxxxx (3.2).

Xxxxxxxx kombinované xxxxxxxx x dělící nálevce xxxxxxx 100 xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx xx zabránilo xxxxxx xxxxxx) a potom xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx 100 xx xxxxxxx vody, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.7) (xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Přefiltrujte xxxxxxx xxxx xxxxx skládaný xxxxx xxx dělení xxxx (4.4), xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xx 500 ml odměrné xxxxx (4.2.2). Xxxxxxxxxxx xxxxxx nálevku x xxxxx 50 xx xxxxxxxxxxx (3.2), xxxxxxx xx značku xxxxxxxxxxxx (3.2) x dobře xxxxxxxxxxx.

5.3.2 Extrakce xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx přístroje (4.8)

Xxxx se xxxxxx xxxxxxxx (viz poznámky 7.3), xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx válce (4.8.1) xx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.8.2) a xxxxxxxxxx xxxxx konec xx xxxxx xxxxxxx X xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxx byl právě xxx xxxxxxxx rozhraní. Xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx dusíku xx xxxxxxxxxxx ramene, xxxxxxxx xxxxxx vrstvu xxxxxxxxxxx xx 1000 xx xxxxxx xxxxxxx (4.2.3) Přidejte 100 xx petroléteru (3.2) xx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx vrstvy xxxxxxx xx x xxxxxxxx vrchní xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 100 xx xxxxxxxxxxx (3.2), xxxxx xxxxxxx 50 ml xxxxxxx xxxxxxxxxxx (3.2) x xxxxxxxx xxxxxx petroléteru xx xxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, jak xx xx xxxxxxx v 5.3.1, x xxxxxxxxxx xxx je xxx xxxxxxx.

5.4 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx XXXX

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx část xxxxxxx xxxxxxxxxxx (x 5.3.1 xxxx 5.3.2) xx 250 xx baňky xx xxxxx xxxxxx (4.2.4). Odpařte xxxxxxxxxxxx xxxxx xx sucha xx rotační xxxxxxx xxxxxxx (4.1) xx xxxxxxxxx tlaku při xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx 40 °C. Xxxxxxx atmosférický xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (3.10) x xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx zbývající xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (3.10) x ihned xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxx xxxxxx (10–100 xx) xxxxxxxx (3.3) (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx X xx xxxx být x xxxxxxx 5 XX/xx xx 30 XX/xx).

5.5 Xxxxxxxxx pomocí XXXX

Xxxxxxx A xx xxxxxxx na reverzní xxxxxx xxxxxx X18 (4.5.1) a xxxxxxxxxxx xx xxxxxx pomocí XX xxxxxxxxx (325 xx) xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxx: 325 xx, xxxxx: 475 xx) (4.5.2).

Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx (xxxx. 20 μx) xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x 5.4 x vymývejte xxxxxxx xxxx (3.9). Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx (xxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx vzorku x xxxxxxx xxxxx (xxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (5.6.2).

Podmínky XXXX

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx doporučení; xxxxxxx podmínky smějí xxx použity za xxxxxxxxxxx, xx poskytují xxxxxx výsledky.

Kolona xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (4.5.1):&xxxx;&xxxx;&xxxx;&xxxx;&xxxx;&xxxx; 250 xx x 4 mm, C18, xxxxxxxx částic xxxxxx 5 xxxx 10 μx xxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxx (3.9):&xxxx;&xxxx;&xxxx;&xxxx;&xxxx; Směs xxxxxxxx (3.3) x xxxx, např. 980 + 20 (objemově + xxxxxxxx)

Xxxxxx xxxx:&xxxx;&xxxx; 1 – 2 xx/xxx.

Xxxxxxxx (4.5.2):         XX xxxxxxxx (325 xx) xxxx xxxxxxxxxxxxx detektor (xxxxxxxx: 325 xx/xxxxx: 475 xx)

5.6 Xxxxxxxxx

5.6.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxxxx 20 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx X acetátu (3.11.1) xxxx 20 xx xxxxxxxxx roztoku xxxxxxx X palmitátu (3.12.1) xx 500 xx xxxxx x xxxxxxx xxxx nebo Erlenmeyerovy xxxxx (4.2.1) a xxxxxxxxxxxx, jak xx xx popsáno x 5.2, xxx xxx xxxxxxxx XXX. Následně xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.2) xxxxx 5.3 x xxxxxxx xx 500 xx petroléterem (3.2). Xxxxxxx 100 xx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxx 5.4) xxxxx xx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (3.10) a xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x 10,0 xx xxxxxxxx (3.3). Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx 560 XX xxxxxxxx A/1 xx. Xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx podle 5.6.3.3 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxx 2,0 ml xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx 20 xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx (3.3) x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx koncentrace xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx pracovního xxxxxxx je 56 XX xxxxxxxx A xx xx.

5.6.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx 1,0, 2,0, 5,0 x 10,0 xx zředěného xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoku xx xxxxx 20 xx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx po xxxxxx xxxxxxxxx (3.3) x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx koncentrace xxxxxx roztoků jsou 2,8, 5,6, 14,0 x 28,0 IU xxxxxxxx A na xx.

Xxxxxxxxxx několikrát 20 μx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx píků (xxxxxx). Xx xxxxxxx xxxxxxxxx výšek xxxx (xxxxx) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx výsledkům XX kontroly (5.6.3.3).

5.6.3 XX xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx

5.6.3.1 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx X acetátu

Pipetujte 2,0 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx X xxxxxxx (3.11.1) do 50 ml odměrné xxxxx (4.2.2) x xxxxxxx po xxxxxx 2-xxxxxxxxxx (3.8) Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx roztoku xx 56 XX xxxxxxxx X xx xx. Pipetujte 3,0 xx xxxxxx zředěného xxxxxxx xxxxxxx X xxxxxxx xx 25 xx xxxxxxx baňky x doplňte po xxxxxx 2-xxxxxxxxxx (3.8). Xxxxxxxxx koncentrace xxxxxx xxxxxxx je 6,72 XX xxxxxxxx X xx xx. Změřte XX spektrum xxxxxx xxxxxxx xxxxx 2-xxxxxxxxx (3.8) xx spektrofotometru (4.6) xxxx 300 xx x 400 xx. Extinkční xxxxxxx xxxx být xxxx 325 xx x 327 xx.

Xxxxxxx obsahu xxxxxxxx X:

XX vitamínu X/xx = X₃₂₆ × 19,0

X^1%_1xx pro xxxxxxx A xxxxxxx = 1&xxxx;530 xxx 326 xx xx 2-xxxxxxxxx

5.6.3.2 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx A palmitátu

Pipetujte 2,0 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx X xxxxxxxxx (3.12.1) xx 50 ml xxxxxxx xxxxx (4.2.2) a xxxxxxx xx značku 2-xxxxxxxxxx (3.8) Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx 56 XX xxxxxxxx X xx xx. Xxxxxxxxx 3,0 xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx vitamín A xxxxxxxxx xx 25 xx xxxxxxx baňky x doplňte xx xxxxxx 2-propanolem (3.8). Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx 6,72 XX xxxxxxxx X xx xx. Xxxxxx XX xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx 2-xxxxxxxxx (3.8) ve xxxxxxxxxxxxxxxx (4.6) mezi 300 xx a 400 xx. Extinkční maximum xxxx být mezi 325 xx a 327 xx.

Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx X:

XX vitamínu X/xx = E₃₂₆ × 19,0

X^1%_1xx pro xxxxxxx X xxxxxxx = 957 xxx 326 xx xx 2-xxxxxxxxx

5.6.3.3 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx vitamínu X

Xxxxxxxxx 3,0 ml nezředěného xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx A, připraveného xxxxx 5.6.1 xx 50 xx xxxxxxx xxxxx (4.2.2) a xxxxxxx xx xxxxxx 2-xxxxxxxxxx (3.8). Xxxxxxxxx 5,0 xx xxxxxx xxxxxxx xx 25 xx xxxxxxx baňky x xxxxxxx xx xxxxxx 2-xxxxxxxxxx (3.8). Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx tohoto xxxxxxx je 6,72 XX xxxxxxxx X xx xx. Xxxxxx XX xxxxxxxx tohoto xxxxxxx xxxxx 2-propanolu (3.8) ve xxxxxxxxxxxxxxxx (4.6) xxxx 300 xx x 400 xx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxx 325 xx a 327 xx.

Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx X:

XX xxxxxxxx X/xx = X₃₂₅ × 18,3

X^1%_1xx pro xxxxxxx X alkohol = 1 821 při 326 xx xx 2-xxxxxxxxx

6. Xxxxxxx xxxxxxxx

Xx xxxxxxx výšky (xxxxxx) xxxx xxx xxxxxx xxxxxx vitamínu X xxxxxxxx koncentraci xxxxxxx xxxxxx v IU/ml xx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.6.2).

Xxxxx xxxxxxxx X w x IU/kg xx xxxxxx xx xxx xxxxxxxxxxx rovnicí:

w = 500 · β · V₂ · 1 000 / X₁ · m (XX=xx)

xx které:

β = xxxxxxxxxxx xxxxxxxx X x xxxxxxx xxxxxx (5.4) x XX/xx

X₁ = xxxxx xxxxxxx xxxxxx (5.4) x xx

X₂ = xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx v 5.4 x ml

m = xxxxx xxxxxxxx xxxxx x x

7. Xxxxxxxx

7.1 U vzorků x xxxxxx koncentrací xxxxxxxx X xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx dvou xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxxx: 25 x) xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro stanovení xxxxxx HPLC.

7.2 Xxxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx 2x.

7.3 Xxxxx xx xxxxxxxx fázové xxxxxx, xxxxxxxx přibližně 10 xx etanolu (3.1), x xxxxxxxxx emulze.

7.4 X xxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx měla xxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx 45–60 xxxxx.

7.5 Xxxxxxx XXX xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.

7.6 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx možné x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.

7.7 Xxxxxxx xxxxxxxxx sodného xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx 150 xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

7.8 Xxxxxxx roztoku xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx použito přibližně 50 xx EDTA.

8. Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx x stejného xxxxxx nesmí překročit 15 % x xxxxxxx xxxxxxxx.

9. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx [1]

X: xxxxx xxxxxxxxxx

x: xxxxx xxxxxxxxxxxx hodnot

s_r: xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx

x_X: standardní xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx

x: xxxxxxxxxxxxxx

X: xxxxxxxxxxxxxxxxxx

XX_x: xxxxxxxxxx variace xxxxxxxxxxxxxxx

XX_X: xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx

ČÁST X

XXXXXXXXX XXXXXXXX X

1. Xxxx a xxxxxx xxxxxxx

Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx X v xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx vitamínu E xx xxxxxxxx xxxx xx DL-α-tokoferol xxxxxxx xx xx. 1 xx XX-α-xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 0,91 xx XX-α-xxxxxxxxxx (xxxxxxx E).

Mez xxxxxxxxxxxxxxx xx 2 xx vitamínu X/xx.

2. Xxxxxxx

Xxxxxx xx hydrolyzován xxxxxxxxxx roztokem hydroxidu xxxxxxxxxx x vitamín X xx xxxxxxxxxx xx petroléteru. Rozpouštědlo xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx se xxxxxxxx x metanolu x, xxxxx xx xx xxxxx, zředí xx požadovanou xxxxxxxxxxx. Xxxxx vitamínu X xx xxxxxxx reverzní xxxx xxxxxx účinné xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XX-XXXX) xx použití UV xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

3. Xxxxxxx

3.1 Xxxxxx, σ = 96 %

3.2 Xxxxxxxxxx, rozsah xxxx 40 xx 60 °X

3.3 Xxxxxxx

3.4 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, β = 50 g/100 xx

3.5 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, β = 10 x/100 ml (xxx 7.7 xxxxxxxx)

3.6 Xxxxxx sodný, Xx₂X. x X₂X (x = 7–9)

3.6.1 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, x = 0,5 xxx/x x xxxxxxxxx, β = 120 x/x (xxx x = 9) (xxx 7.8 xxxxxxxx)

3.7 Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, β = 2 x/100 xx x xxxxxxx (3.1)

3.8 Mobilní xxxx xxx XXXX: xxxx metanolu (3.3) x vody, xxxx. 980 + 20 (xxxxxxxx + xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx použité xxxxxx.

3.9 Xxxxx, prostý xxxxxxx

3.10 XX-α-xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx čistý, xxxxxxx xxxxxxxx

3.10.1 Zásobní xxxxxx XX-α-xxxxxxxxx xxxxxxx: Xxxxxxx x přesností na 0,1 mg, 100 xx XX-α-xxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) xx 100 xx xxxxxxx baňky. Xxxxxxxxx x xxxxxxx (3.1) a doplňte xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. 1 xx xxxxxx xxxxxxx obsahuje 1 xx DL-α-tokoferol xxxxxxx. (XX xxxxxxxx – xxx 5.6.1.3; xxxxxxxxxxx – xxx 7.4 poznámky).

3.11 DL-α-tokoferol, xxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx

3.11.1 Xxxxxxx x xxxxxxxxx xx 0,1 xx, 100 mg XX-α-xxxxxxxxxx (3.10) xx 100 ml xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx v xxxxxxx (3.1) a xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx rozpouštědlem. 1 xx tohoto xxxxxxx xxxxxxxx 1 xx XX-α-xxxxxxxxxx. (XX kontrola – viz 5.6.2.3; xxxxxxxxxxx – xxx 7.4 xxxxxxxx).

3.12 2,6-Xx-xxxx-xxxxx-4-xxxxxxxxxxxx (XXX) (xxx 7.5 xxxxxxxx)

4. Přístroje x xxxxxxx

4.1 Xxxxxxx vakuová xxxxxxx

4.2 Xxxxxx z xxxxxxxx xxxx

4.2.1 Baňky x plochým xxxx xxxx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx, 500 xx, xx xxxxxxxxxxx xxxxx

4.2.2 Xxxxxxx xxxxx xx zábrusovými xxxxxxx, úzkohrdlé, 10, 25, 100 a 500 xx

4.2.3 Xxxxxx xxxxxxx, kuželovité, 1000 xx, xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx

4.2.4 Hruškovité xxxxx, 250 xx, se xxxxxxxxxxx xxxxx

4.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, délka xxxxxxxx xxxxxx 300 xx, xx xxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx

4.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx oddělení xxxx, xxxxxx 185 xx (xxxx. Schleicher &xxx; Xxxxxxx 597 HY 1/2)

4.5 XXXX xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

4.5.1 Xxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, 250 mm x 4 xx, X18, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 5 xxxx 10 μx xxxx xxxxxxxxxx

4.5.2 XX xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx

4.6 Xxxxxxxxxxxxxxx s 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx

4.7 Xxxxx lázeň x magnetickým xxxxxxxxx

4.8 Xxxxxxxxx přístroj (xxx xxxxxxx 1) xxxxxxxxxxx xx:

4.8.1 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x objemu 1x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx

4.8.2 Xxxxxxxxx vložka xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx procházející xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx mít xxxxxx xxxxx ve xxxxx xxxxxxx U a xxxxxx na xxxxxxx xxxxx tak, aby xxxxx být xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx převedena do xxxxxx xxxxxxx.

5. Xxxxxx

Xxxxxxxx:

Xxxxxxx X xx xxxxxxx xxxx (XX) světlu x xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx) x xxxxxxx (vypláchněte xxxxxxx). Xxxxxx xxx xxxxxxxxx musí xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (vyhněte xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx).

5.1 Xxxxxxxx vzorku

Rozmělněte xxxxxx tak, xxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx 1 mm, xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxx x saponifikací, xxxxx xxxx dojít xx xxxxxxx xxxxxxxx X.

5.2 Xxxxxxxxxxxx

X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx X xxxxxxx x xxxxxxxxx xx 0,01 g, 2 x xx 25 x xxxxxx xx 500 xx xxxxx x plochým dnem xxxx Xxxxxxxxxxxxx baňky (4.2.1). Xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx 130 ml xxxxxxx (3.1), xxxxxxxxx 100 xx XXX (3.12), 2 ml roztoku xxxxxxxxx xxxxxxx (3.5) x 2 xx xxxxxxx sulfidu sodného (3.6). Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (4.3) x baňce x ponořte baňku xx xxxxx lázně x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.7). Zahřejte x xxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxx minut. Xxxxx přidejte 25 xx roztoku xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.4) xxxx xxxxxxxxxxx (4.3) x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 25 xxxxx za xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx vypláchněte xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 20 xx xxxx x xxxxx xxxxx ochlaďte xx xxxxxxxxx teplotu.

5.3 Extrakce

Převeďte xxxxxxxxx saponifikovaný xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx celkovým xxxxxxx 250 xx xxxx do 1000 xx xxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxx do xxxxxxxxxxx přístroje (4.8). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 25 xx xxxxxxx (3.1) a 100 xx xxxxxxxxxxx (3.2) x xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Podíl xxxx a xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx xxx xxxxx 2:1. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx x nechejte xxxxx xxx minuty.

5.3.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (4.2.3)

Xxxx se xxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxxxxxx 7.3), xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx nálevky (4.2.3). Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx 100 xx xxxxxxxxxxx (3.2) x xxxxxxx 50 xx xxxxxxxxxxx (3.2).

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 100 ml dávkami xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx) x xxxxx opakovaným xxxxxxxx x dalšími 100 xx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx bezbarvá za xxxxxxxx xxxxxxx fenolftaleinu (3.7) (xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx filtr xxx dělení fází (4.4), xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx suspendovaná xxxx do 500 xx xxxxxxx xxxxx (4.2.2). Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x filtr 50 xx petroléteru (3.2), xxxxxxx xx xxxxxx petroléterem (3.2) x xxxxx promíchejte.

5.3.2 Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx přístroje (4.8)

Xxxx xx vrstvy xxxxxxxx (xxx xxxxxxxx 7.3), xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.8.1) za xxxxxxxxxx xxxxxx (4.8.2) x xxxxxxxxxx dolní xxxxx ve xxxxx xxxxxxx X xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxx xxx xxxxx xxx xxxxxxxx rozhraní. Za xxxxxx tlaku x xxxxxxx dusíku xx xxxxxxxxxxx xxxxxx, převeďte xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx 1000 xx xxxxxx xxxxxxx (4.2.3) Xxxxxxxx 100 xx xxxxxxxxxxx (3.2) xx xxxxxxxxxx válce, xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx oddělit xx a xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx do xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx. Opakujte xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 100 xx xxxxxxxxxxx (3.2), xxxxx xxxxxxx 50 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (3.2) a xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx nálevky.

Promyjte xxxxxxxxxxx xxxxxxxx petroléteru xxx, xxx je xx xxxxxxx v 5.3.1, x xxxxxxxxxx xxx xx tam xxxxxxx.

5.4 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx XXXX

Xxxxxxxxxxx alikvotní xxxx roztoku petroléteru (x 5.3.1 xxxx 5.3.2) xx 250 xx xxxxx ve xxxxx xxxxxx (4.2.4). Xxxxxxx rozpouštědlo xxxxx xx sucha xx xxxxxxx vakuové odparce (4.1) xx xxxxxxxxx xxxxx xxx teplotě xxxxx lázně xxxxxxxxxxxxxx 40 °C. Obnovte xxxxxxxxxxxx tlak xxxxxxxxxxx xxxxxx (3.9) a xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx odparky. Xxxxxxxxx zbývající xxxxxxxxxxxx xxxxxxx dusíku (3.9) x xxxxx rozpusťte xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx (10–100 ml) xxxxxxxx (3.3) (xxxxxxxxxxx XX-α-xxxxxxxxxx xx xxxx xxx x xxxxxxx 5 μg/ml xx 30 μg/ml).

5.5 Stanovení xxxxxx XXXX

Xxxxxxx E xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx koloně X18 (4.5.1) a xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx fluorescenčního xxxxxxxxx (xxxxxxxx: 295 xx, xxxxx: 330 nm) xxxx XX detektoru (292 nm) (4.5.2).

Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx (xxxx. 20 μl) xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x 5.4 x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx (3.8). Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx (xxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x střední xxxxx (xxxxxx) několika xxxxxxx kalibračních roztoků (5.6.2).

Xxxxxxxx XXXX

Xxxxxxxxxxx podmínky xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx; xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxxxx shodné xxxxxxxx.

Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx chromatografii (4.5.1): 250 mm x 4 mm, X18, xxxxxxxx částic xxxxxx 5 xxxx 10 μm nebo xxxxxxx

Xxxxxxx xxxx (3.8): Xxxx metanolu (3.3) x vody, xxxx. 980 + 20 (xxxxxxxx + xxxxxxxx)

Xxxxxx xxxx: 1–2 xx/xxx.

Xxxxxxxx (4.5.2): Fluorescenční xxxxxxxx (xxxxxxxx: 295 xx/xxxxx: 330 xx) xxxx XX xxxxxxxx (292 xx)

5.6 Xxxxxxxxx (XX-α-xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx XX-α-xxxxxxxxxx)

5.6.1 Xxxxxxxx XX-α-xxxxxxxxx xxxxxxx

5.6.1.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxx 25 xx xxxxxxxxx xxxxxxx XX-α-xxxxxxxxx xxxxxxx (3.10.1) xx 500 ml xxxxx x plochým xxxx xxxx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx (4.2.1) a xxxxxxxxxxxx, xxx xx xx xxxxxxx x 5.2. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.2) xxxxx 5.3 a doplňte xx 500 xx xxxxxxxxxxxx. Odpařte 25 xx tohoto xxxxxxxx xx rotační xxxxxxx xxxxxxx (viz 5.4) xxxxx xx xxxxx, xxxxxxxxx zbývající xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (3.9) x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v 25,0 xx xxxxxxxx (3.3). Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx je 45,5 μx XX-α-xxxxxxxxxx na xx, xxxxxxxxxx 50 μx DL-α-tokoferol xxxxxxx xx xx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx roztok xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.

5.6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx 1,0, 2,0, 4,0 x 10,0 ml xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx 20 xx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx (3.3) x promíchejte. Xxxxxxxxx koncentrace xxxxxx xxxxxxx xxxx 2,5, 5,0, 10,0 a 25,0 μx/xx XX-α-xxxxxxxxx xxxxxxx, xx. 2,28, 4,55, 9,10 a 22,8 μx/xx XX-α-xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx 20 μx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x stanovte xxxxxxx xxxxx xxxx (xxxxxx). Xx xxxxxxx středních xxxxx píků (xxxxx) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.

5.6.1.3 XX xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XX-α-xxxxxxxxx xxxxxxx (3.10.1)

Xxxxxxxx 5,0 ml xxxxxxxxx roztoku XX-α-xxxxxxxxx xxxxxxx (3.10.1) na 25,0 ml xxxxxxxx x xxxxxx XX xxxxxxxx tohoto roztoku xxxxx xxxxxxx (3.1) xx spektrofotometru (4.6) xxxx 250 xx x 320 xx.

Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxx 284 xx:

X^1%_1xx = 43,6 xxx 284xx v xxxxxxx

Xxx xxxxx xxxxxx xx měla xxx xxxxxxx xxxxxxxx 0,84 xx 0,88.

5.6.2 Xxxxxxxx XX-α-xxxxxxxxxx

5.6.2.1 Xxxxxxxx standardního xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxx pipetou 2,0 xx xxxxxxxxx xxxxxxx XX-α-xxxxxxxxxx (3.11.1) xx 50 xx xxxxxxx xxxxx, rozpusťte x xxxxxxxx (3.3) x xxxxxxx xx xxxxxx metanolem. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx tohoto roztoku xx 40 μx XX-α-xxxxxxxxxx xx xx, xxxxxxxxxx 44,0 μx XX-α-xxxxxxxxx xxxxxxx na xx. Xxxxxxxxxx pracovní xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.

5.6.2.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx 1,0, 2,0, 4,0 a 10,0 xx xxxxxxxxxxxx pracovního xxxxxxx do xxxxx 20 ml xxxxxxxxx xxxxx, doplňte xx xxxxxx metanolem (3.3) x promíchejte. Nominální xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx 2,0, 4,0, 8,0 x 20,0 μx/xx XX-α-xxxxxxxxxx, xx. 2,20, 4,40, 8,79 x 22,0 μx/xx XX-α-xxxxxxxxx acetátu.

Vstříkněte několikrát 20 μl xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku x xxxxxxxx střední xxxxx xxxx (xxxxxx). Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx (xxxxx) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.

5.6.2.3 UV xxxxxxxxxxxxx zásobního xxxxxxx XX-α-xxxxxxxxxx (3.11.1)

Xxxxxxxx 2,0 xx zásobního roztoku XX-α-xxxxxxxxxx (3.11.1) xx 25,0 xx xxxxxxxx x xxxxxx XX xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx etanolu (3.1) xx spektrofotometru (4.6) xxxx 250 xx x 320 xx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxx 292 nm:

E^1%_1cm = 75,8 při 292xx x xxxxxxx

Xxx tomto xxxxxx by měla xxx získána extinkce 0,6.

6. Xxxxxxx xxxxxxxx

Xx xxxxxxx xxxxx (xxxxxx) xxxx pro xxxxxx xxxxxx vitamínu X xxxxxxxx koncentraci roztoku xxxxxx v μx/xx (xxxxxxxx xxxx α-xxxxxxxxx xxxxxx) xx vztahu xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.6.1.2 xxxx 5.6.2.2).

Xxxxx xxxxxxxx X x x xx/xx xx xxxxxx xx xxx xxxxxxxxxxx rovnicí:

w = 500 · β · V₂ / X₁ · m [xx/xx]

xx xxxxx:

β = xxxxxxxxxxx xxxxxxxx X x xxxxxxx xxxxxx (5.4) v μg/ml

V₁ = objem xxxxxxx xxxxxx (5.4) v xx

X₂ = objem xxxxxxx odebraných x 5.4 v xx

x = hmota xxxxxxxx xxxxx x g

7. Xxxxxxxx

7.1 U xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx X xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxxx: 25 x) xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx XXXX.

7.2 Xxxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 2x.

7.3 Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx 10 xx xxxxxxx (3.1), x xxxxxxxxx xxxxxx.

7.4 Xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx XX-α-xxxxxxxxx xxxxxxx nebo XX-α-xxxxxxxxxx xxxxx 5.6.1.3 xxxx 5.6.2.3 xxxxxxxx xx xxxxxxx (3.10.1 xxxx 3.10.2) xxxxxxxxx 10 xx BHT (3.12) x xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx doba xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx týdny).

7.5 Xxxxxxx BHT xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.

7.6 Xxxxxxxx α-, β-, χ- x δ xxxxxxxxxx xx xxxxx x použitím xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.

7.7 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx 150 mg kyseliny xxxxxxxxx.

7.8 Namísto roztoku xxxxxxx sodného xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx 50 xx EDTA.

8. Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x stejného xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 % x xxxxxxx výsledku.

9. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx [2]

X: xxxxx laboratoří

n: xxxxx xxxxxxxxxxxx hodnot

s_r: xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx

x_X: standardní xxxxxxxx reprodukovatelnosti

r: opakovatelnost

R: xxxxxxxxxxxxxxxxxx

XX_x: koeficient xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx

XX_X: koeficient variace xxxxxxxxxxxxxxxxxxx

XXXX C

STANOVENÍ XXXXXXXXXX

1. Účel x xxxxxx xxxxxxx

Xxxx metoda xx xxxxxx pro xxxxxxxxx celkového a xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx. Nerozlišuje xxxx X- x L- xxxxxxx.

2. Xxxxxxx

Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nasyceným xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx při 110 °X po 20 hodin. Xx xxxxxxxxx je xxxxxx xxxxxxx standard.

Pro xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx je xxxxxx extrahován za xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxxx x hydrolyzátu xxxx xxxxxxxx xxxxxx XXXX x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

3. Xxxxxxx

3.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, nebo xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx používána (vodivost &xx; 10 μX/xx)

3.2 Xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxx (xxxxxxx/xxxxx &xx; 99 %), xxxxxx pod xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx

3.3 Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx: α-xxxxxx-xxxxxxxxx (čistota/obsah &xx; 99 %), xxxxxx pod vakuem xxxx pentoxid fosforu

3.4 Xxxx-xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx xxx dbáno, xxx xxxxx Xx(XX)2. 8 H2O xxxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxx, xxx xx zabránilo xxxxxx XxXX3, jež xxxx rušit xxxxxxxxx) (xxx xxxxxxxx 9.3)

3.5 Xxxxxxxx sodný

3.6 Xxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxx, x = 85 %

3.7 Kyselina xxxxxxxxxxxxxx, p20 = 1,19 x/xx

3.8 Xxxxxxx, XXXX stupeň

3.9 Xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx 40–60 °X

3.10 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, c = 1 xxx/x:

Xxxxxxxxx 40,0 x XxXX (3.5) xx xxxx a xxxxxxx xx 1 x vodou (3.1).

3.11 Xxxxxxxx chlorovodíková, x = 6 xxx/x:

Xxxxxxx 492 xx XXX (3.7) x doplňte xx 1 l xxxxx.

3.12 Xxxxxxxx chlorovodíková, x = 1 xxx/x:

Xxxxxxx 82 xx XXX (3.7) x xxxxxxx do 1 x xxxxx.

3.13 Kyselina xxxxxxxxxxxxxx, x = 0,1 xxx/x:

Xxxxxxx 8,2 xx XXX (3.7) x xxxxxxx xx 1 l xxxxx.

3.14 Xxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxx, x = 0,5 mol/l:

Vezměte 34 xx xxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxx (3.6) x xxxxxxx xx 1 x vodou (3.1)

3.15 Xxxxxxxxxxxxx roztok xxxxxxxxxx (3.2), x = 2,50 μxxx/xx:

Xxxxxxxxx 0,2553 x xxxxxxxxxx (3.2) x 500 xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.13) x xxxxxxx po xxxxxx kyselinou chlorovodíkovou (3.13). Skladujte xxx –18 xX xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.

3.16 Xxxxxxxxxxxxx vnitřní xxxxxxxxxx roztok, c = 2,50 μxxx/xx:

Xxxxxxxxx 0,2728 x α-xxxxxx-xxxxxxxxxx (3.3) v 500 xx odměrné baňce x kyselině chlorovodíkové (3.13) x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (3.13). Xxxxxxxxx xxx –18 oC xx dobu maximálně xxxx xxxxx.

3.17 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx:

Xxxxxxx 2,00 xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (3.15), x 2,00 xx xxxxxxxxxxxxxxx roztoku vnitřního xxxxxxxxx (α-xxxxxx-xxxxxxxxx) (3.16). Xxxxxx vodou (3.1) x xxxxxxxxx (3.8) xx xxxxxxxxx stejný xxxxx x xx xxxxxxxxx xxxxxxx koncentraci xxxxxxxx (10–30 %) xxxx xxxxxxx hydrolyzát.

Tento xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

3.18 Kyselina octová

3.19 1,1,1-xxxxxxxxx-2-xxxxxx-2-xxxxxxxx

3.20 Xxxxxxxxxxx &xx; 98 %

3.21 Xxxxxx 1 g 1,1,1-trichloro-2-methyl-2-propanolu (3.19) xx 100 xx xxxxxxxx (3.8).

3.22 Xxxxxxx xxxx pro XXXX: 3,00 x xxxxxxxx xxxxxx (3.18) + 900 xx xxxx (3.1) + 50,0 ml xxxxxxx (3.21) 1,1,1-xxxxxxxxx-2-xxxxxx-2-xxxxxxxxx (3.19) x xxxxxxxx (3.8) (1x/100 ml). Xxxxxxx xX xx 5 x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.20). Xxxxxxx xx 1000 xx xxxxx (3.1).

4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx

4.1 Vybavení xxx XXXX se xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx

4.2 Xxxxxx pro xxxxxxxxxxx chromatografii, 125 xx x 4 xx, X18, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 3 μx xxxx xxxxxxxxxx

4.3 xX xxxx

4.4 Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx 125 xx, xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx

4.5 Xxxxxxxxxx xxxxx, 0,45 μx

4.6 Xxxxxxxx, 110 (+ 2) °X, 1,4 (+ 0,1) baru

4.7 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx

4.8 Vířivý xxxxx

5. Xxxxxx

5.1 Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx xx xxxxxxxxx tak, xxx xxxxxx sítem x xxxxxx 0,5 xx. Xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx, xxxx být xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 50 °X, xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx x vysokým xxxxxxx xxxx xxxx být xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.9).

5.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxx)

Xxxxxxx x xxxxxxxxx na 1 mg příslušné xxxxxxxx (1–5 x) xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx 100 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, x = 0,1 mol/l (3.13) x 5,00 xx koncentrovaného xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.16). Xxxxxxxx nebo xxxxxxx 60 xxxxx x xxxxxxxx mechanické třepačky, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.7). Xxxxxxxx usadit xxxxxxxx a xxxxxxxxx 10,0 xx roztoku xxxxxxxxxxxx xx kádinky. Xxxxxxxx 5 ml xxxxxxxx orto-fosforečné, c = 0,5 xxx/x (3.14). Xxxxxxx xX xx 3,0 za xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, x = 1,0 xxx/x (3.10). Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (3.8), xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx 10 x 30 % xxxxxxxx x xxxxxxxx objemu. Xxxxxxxx xx odměrné xxxxx o vhodném xxxxxx a zřeďte xxxxx na objem xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxx objem xxxx kalibrační xxxxxxxxxx xxxxxx (3.17)).

Xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx XXXX xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx membránový xxxxx 0,45 μx (4.5). Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx 5.4.

Chraňte xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxx slunečním xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx, xxxxx xxx skladovány xxx 5 °C xx xxxxxxxxx xxxx xxx xxx.

5.3 Stanovení xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (hydrolyzát)

Odvažte x xxxxxxxxx xx 0,2 xx xx 0,1 xx 1 x xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxxxxxxxxxxxxx láhve (4.4). Odvážená dávka xxxxxx by xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxx 10 xx. Xxxxxxxx 8,4 x xxxx-xxxxxxx xxxxxxxxx barnatého (3.4) a 10 xx xxxx. Promíchejte xx xxxxxxx xxxxxx (4.8) nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.7). Xxxxxxxxxx xxxxxxxx potažený xxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx 4 xx vody. Našroubujte xxxxxx x láhev xxxxx xxxxxxxx. Přeneste xx xxxxxxxxx (4.6) x xxxxxx vodou x xxxxx xx 30–60 minut. Xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxx 110 (+ 2) °X xx xxxx 20 hodin.

Před xxxxxxxxx xxxxxxxxx snižte xxxxxxx xxxxx xxx 100 °C. Xxx xxxxxxx xx krystalizaci Xx(XX)2. 8 X2X, xxxxxxxx do xxxxx xxxxx 30 ml xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx protřepávejte, xxxx míchejte. Přidejte 2,00 xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (α-xxxxxx-xxxxxxxxx) (3.16). Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx/xxxxxx xxxxx xx dobu 15 minut.

Potom xxxxxxxx 5 xx xxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxx, c = 0,5 xxx/x (3.14). Xxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, x = 6 xxx/x (3.11) xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xX na 3,0 x použitím XXX, x = 1 xxx/x (3.12). Přidejte xxxxxxxxx metanolu, xxxxxx xxxxxxxx koncentraci mezi 10 a 30 % metanolu x xxxxxxxx objemu. Xxxxxxxx xx xxxxxxx baňky x xxxxxxx objemu x xxxxxx xxxxx xx definovaný xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx 100 xx). Xxxxxxxx metanolu xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxx xxxxxxxxxxx xx kolony XXXX přefiltrujte xxxxxxx xx xxxxxxx přes xxxxxxxxxx filtr 0,45 μx (4.5). Pokračujte x xxxxxxxxxxxxxx podle xxxxxxxx 5.4.

Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Pokud není xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxx, mohou xxx xxxxxxxxxx při 5 °X po xxxxxxxxx xxxx xxx xxx.

5.4 Xxxxxxxxx xxxxxx XXXX

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx vymývání xxxx xxxxxxxxxxx jako doporučení; xxxxxxx podmínky smějí xxx použity xx xxxxxxxxxxx, xx poskytují xxxxxx výsledky (xxx xxxx poznámky 9.1 x 9.2):

Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx chromatografii (4.2): 125 mm x 4 xx, X18, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 3 μm xxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxx kolony Xxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xxxx (3.22): 3,00 x xxxxxxxx xxxxxx (3.18) + 900 xx xxxx (3.1) + 50,0 xx roztoku (3.21) 1,1,1-xxxxxxxxx-2-xxxxxx-2-xxxxxxxxx (3.19) v xxxxxxxx (3.8) (1 x/100 ml). Upravte xX xx 5,00 x xxxxxxxx ethanolaminu (3.20). Doplňte xx 1000 xx xxxxx (3.1)

Xxxxxx toku:   1 xx/xxx.

Xxxxxxx xxxx xxxx: xxxxxxxxx 34 xxxxx

Xxxxxxxx xxxxxx délka: xxxxxxxx: 280 xx, xxxxx: 356 nm

Vstřikový objem: 20 μx

6. Xxxxxxx xxxxxxxx

X × X × X × X × X × MW / X × X × X × 10&xxxx;000 × W = g tryptofanu xx 100x vzorku

A = xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, roztoku xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.17)

B = xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx (5.2) xxxx xxxxxxxxxxx (5.3)

X = objem xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.15) (2 xx) xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx roztoku (3.17)

X = koncentrace xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (3.15) x μxxxxxx/xx (= 2,50) xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx roztoku (3.17)

X = xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx standardního xxxxxxx (3.16) x xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx (5.2) (= 5,00 ml) xxxx xx xxxxxxxxxxx (5.3) (= 2,00 ml)

F = xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx (5.2) nebo xxxxxxxxxxx (5.3)

X = xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (3.17)

H = xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.16) x xx (= 2,00) xxxxxxxxx xx kalibračního xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.17)

W = xxxxxxxx vzorku v x (xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxx vzorek xxxxx x/xxxx odtučněn)

MW = xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (= 204,23)

7. Opakovatelnost

Rozdíl xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 10 % z xxxxxxx xxxxxxxx.

8. Xxxxxxxx studijní xxxxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx) xxxx uspořádána tak, xx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx 12 xxxxxxxxxxxx k xxxxxxx metody xxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx (5) xxxxxxx byly xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x následující xxxxxxx:

X: xxxxx laboratoří xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

x: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx eliminačních xxxxxxxxx xxxxxxxx (identifikované Xxxxxxx-Xxxxxxxxx testem)

s_r: standardní xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx

x_X: standardní xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx

x: opakovatelnost

R: xxxxxxxxxxxxxxxxxx

XX_x: koeficient xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, %

XX_X: xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx, %

Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx (xxxxx vzájemné xxxxxxxxx) xxxx uspořádána xxx, že dva xxxxxx xxxx analyzovány xx ve 13 xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx (5) xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Výsledky xxxx xxxxxxx v následující xxxxxxx:

X: xxxxx laboratoří xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

x: xxxxx xxxxxxxxxxxx hodnot zadržených xxxxxxxxxxxx odlehlých xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx Cochran-Dixonovým xxxxxx)

x_x: xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx

x_X: xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx

x: xxxxxxxxxxxxxx

X: reprodukovatelnost

CV_r: koeficient xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, %

XX_X: xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx, %

Další xxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx byla xxxxxxxxxx tak, xx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx v xxxxx laboratořích x xxxxx xxxxxxxxx tryptofanu xxx hydrolýzy. Xxxxxxxx xxxx uvedeny x xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

X: xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

x: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx eliminačních xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxx-Xxxxxxxxx xxxxxx)

x_x: xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxxxxxxxx

x_X: xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxxxxxxxxxxxx

x: xxxxxxxxxxxxxx

X: reprodukovatelnost

CV_r: xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, %

XX_X: xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx, %

9. Xxxxxxxx

9.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx mohou xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx tryptofanem a α-xxxxxx-xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx vymývání xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx:

9.2 Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxx XXXX xxxxxx x xxxxxxxxx plnícího xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx schopen xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Navíc xx xxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx x vnitřního xxxxxxxxx. Hydrolyzáty bez xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx chromatografovány, xxx se xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx čára xx xxxxxxxxx standardu pro xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx, xxx xxxx běhu xxxx dostatečně xxxxxx xxx xxxxxx všech xxxxxxxxxxxx produktů, jinak xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx ovlivňovat následný xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.

X xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx odezvu. Lineární xxxxxx xx xxxx xxx měřena x xxxxxxxxxx (xxxxxxxx) koncentrací xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xx koncentracemi xxxxxxxxxx. Je xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx píků xxxxxxxxxx a vnitřního xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx XXXX/xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx pík (xxxx) xxx xxxxxxxxxx, x/xxxx vnitřního standardu xx (xxxx) příliš xxxx (malé) xxxx xxxxxx xxxxxx (xxxxxx), xxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx jiné xxxxxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.

9.3 Hydroxid xxxxxxx

Xxxxxx xx stává xxxxxxxx xxxxxxx hůře rozpustný. Xx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx pomocí XXXX, což může x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx.

---

[1] Řízené xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx Verband Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx- xxx Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXXXX).

[2] Řízené xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx Verband Deutscher Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx Untersuchungs- xxx Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXXXX).

---