Xxxxxxxx Xxxxxx 2000/45/ES
ze xxx 6. xxxxxxxx 2000,
xxxxxx xx stanoví xxxxxxxxxx xxxxxx Společenství xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx X, xxxxxxxx E x tryptofanu x xxxxxxxx
(Xxxx x xxxxxxxx xxx XXX)
XXXXXX EVROPSKÝCH XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx směrnici Rady 70/373/XXX xx xxx 20. července 1970, xxxxxx se xxxxxx xxxxxx xxxxxx vzorků x xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx Xxxxxxxx, Xxxxxx x Xxxxxxx [2], x zejména xx xxxxxx 2 uvedené xxxxxxxx,
xxxxxxxx x tomu, xx:
(1) Xxxxxxxx 70/373/EHS xxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx za xxxxxx zjištění, xxx xxxx xxxxxxx požadavky xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx na xxxxxx x složení xxxxx, xxxx xxx prováděny xx xxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx odběr xxxxxx x analýzy.
(2) Xxxxxxxx Xxxx 70/524/XXX xx dne 23. xxxxxxxxx 1970 x xxxxxxxxxxx látkách x xxxxxxxx [3], xxxxxxxxx xxxxxxxxx nařízením Xxxxxx (XX) x. 2439/1999 xx xxx 17. xxxxxxxxx 1999 [4], xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx A x xxxxxxxx E xxxx xxx xxxxxx na xxxxxxxxx, pokud xxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx a xxxxx.
(3) Směrnice Xxxx 79/373/XXX xx xxx 2. xxxxx 1979 x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx na trh [5], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 2000/16/ES [6], a xxxxxxxx Xxxx 93/74/EHS ze xxx 13. xxxx 1993 x krmivech xxxxxxxx ke xxxxxxxxx xxxxxx výživy [7], xxxxxxxxx xxxxxxxxx směrnicí 96/25/XX [8], stanoví, xx aminokyseliny musí xxx uváděny xx xxxxxxxxx krmiv.
(4) Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx látek.
(5) Xxxxxxxx xxxx směrnice xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx xxx krmiva,
PŘIJALA TUTO XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Xxxxxxx státy xxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx X, vitamínu X x xxxxxxxxxx x xxxxxxxx a xxxxxxxxx prováděly xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx.
Článek 2
Xxxxxxx státy xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x správní xxxxxxxx nezbytné xxx xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 31. xxxxx 2000. Neprodleně x xxxx uvědomí Xxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxxxx používat xx 1. xxxx 2000.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx státy xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxx být takový xxxxx učiněn xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx si xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx 3
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx x platnost xxxxxxxx xxxx po xxxxxxxxx v Xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 4
Tato xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X Xxxxxxx xxx 6. července 2000.
Xx Xxxxxx
Xxxxx Byrne
člen Xxxxxx
[1] Úř. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Xx. věst. X 241, 29.8.1994, x. 1.
[3] Xx. xxxx. X 270, 14.12.1970, x. 1.
[4] Xx. věst. X 297, 18.11.1999, x. 8.
[5] Úř. xxxx. X 86, 6.4.1979, x. 30.
[6] Xx. věst. X 105, 3.5.2000, x. 36.
[7] Xx. xxxx. X 237, 22.9.1993, x. 23.
[8] Úř. xxxx. X 125, 23.5.1996, x. 35.
PŘÍLOHA
ČÁST X XXXXXXXXX XXXXXXXX X
1. Xxxx x xxxxxx použití
Tato xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx X (retinolu) v xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx X xxxxxxxx xxx-xxxxx-xxxxxxx alkohol x xxxx xxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxx metodou. Obsah xxxxxxxx X xx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (IU) xx xx. Xxxxx XX xxxxxxxx xxxxxxxx 0,300 μx xxx-xxxxx-xxxxxxx X xxxxxxxx xxxx 0,344 μx xxx-xxxxx-xxxxxxx X xxxxxxx xxxx 0,550 μx xxx-xxxxx-xxxxxxx X xxxxxxxxx.
Xxx stanovitelnosti je 2000 IU vitamínu X/xx.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx X xx xxxxxxxxxx do xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx je odstraněno xxxxxxxxx x zbytek xx rozpustí x xxxxxxxx x, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Obsah vitamínu X se xxxxxxx xxxxxxxx xxxx vysoce xxxxxx kapalinové chromatografie (XX-XXXX) xx xxxxxxx XX nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxx parametry xxxx vybírány xxx, xxx xxxxxxx k xxxxxxxx xxx-xxxxx-xxxxxxx A xxxxxxxx x xxxx xxx xxxxxxx.
3. Xxxxxxx
3.1 Xxxxxx, σ = 96 %
3.2 Xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx 40 xx 60 °X
3.3 Xxxxxxx
3.4 Roztok xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, β = 50 x/100 xx
3.5 Xxxxxx xxxxxxxxx sodného, β = 10 x/100 ml (viz 7.7 poznámky)
3.6 Sulfid xxxxx, Xx2X. x X2X (x = 7–9)
3.6.1 Xxxxxx sulfidu xxxxxxx, x = 0,5 mol/l x xxxxxxxxx, β = 120 x/x (xxx x = 9) (xxx 7.8 poznámky)
3.7 Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx, β = 2 x/100 xx v xxxxxxx (3.1)
3.8 2-xxxxxxxx
3.9 Xxxxxxx xxxx xxx XXXX: xxxx xxxxxxxx (3.3) x vody, xxxx. 980 + 20 (xxxxxxxx + xxxxxxxx). Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx charakteristikami xxxxxxx xxxxxx.
3.10 Dusík, prostý xxxxxxx
3.11 Xxx-xxxxx-xxxxxxx A xxxxxx, extra xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx, např. 2,80 x 106 XX/x
3.11.1 Xxxxxxx roztok xxx-xxxxx-xxxxxxx A xxxxxxx: Xxxxxxx x přesností xx 0,1 xx 50 xx acetátu xxxxxxxx X (3.11) xx 100 xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx 2-xxxxxxxxx (3.8) x xxxxxxx po xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx tohoto xxxxxxx je 1400 XX xxxxxxxx X xx xx. Xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx 5.6.3.1.
3.12 Xxx-xxxxx-xxxxxxx X palmitát, xxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx. 1,80 x 106 XX/x.
3.12.1 Xxxxxxx xxxxxx xxx-xxxxx-xxxxxxx X xxxxxxxxx: Xxxxxxx x xxxxxxxxx na 0,1 xx 80 xx xxxxxxxxx xxxxxxxx X (3.12) do 100 ml odměrné xxxxx. Xxxxxxxxx xx 2-xxxxxxxxx (3.8) x xxxxxxx po xxxxxx xxxxxxx rozpouštědlem. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx 1400 IU xxxxxxxx X na xx. Xxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxx 5.6.3.2.
3.13 2,6-Xx-xxxx-xxxxx-4-xxxxxxxxxxxx (XXX) (viz 7.5 xxxxxxxx)
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx
4.1 Xxxxxxx vakuová xxxxxxx
4.2 Xxxxxx x xxxxxxxx skla
4.2.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxx xxxx Erlenmeyerovy xxxxx, 500 xx, xx xxxxxxxxxxx xxxxx
4.2.2 Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx, 10, 25, 100 a 500 xx
4.2.3 Xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx, 1000 xx, xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
4.2.4 Xxxxxxxxxx baňky, 250 ml, se xxxxxxxxxxx xxxxx
4.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, délka xxxxxxxx xxxxxx 300 xx, xx xxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx plynu.
4.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx fáze, xxxxxx 185 xx (xxxx. Schleicher & Xxxxxxx 597 XX 1/2)
4.5 HPLC výbava xx xxxxxxxxxxxx systémem
4.5.1 Xxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, 250 xx x 4 xx, X18, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 5 xxxx 10 μx nebo xxxxxxx (xxxxxxxxxxx parametry: xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx podmínek XXXX)
4.5.2 XX nebo xxxxxxxxxxxxx detektor x xxxxxxxxxxx nastavením xxxxxx xxxxx
4.6 Xxxxxxxxxxxxxxx s 10 mm křemennými xxxxxxxx
4.7 Xxxxx xxxxx x magnetickým xxxxxxxxx
4.8 Xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxxxxx 1) xxxxxxxxxxx xx:
4.8.1 Skleněný odměrný xxxxx o objemu 1x xxxxxxxx zábrusovým xxxxxx a xxxxxx
4.8.2 Xxxxxxxxx xxxxxx vybavená xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxxx trubicí xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Nastavitelná trubice xxxx xxx xxxxxx xxxxx xx tvaru xxxxxxx X a xxxxxx na xxxxxxx xxxxx tak, xxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxx kapaliny ve xxxxx převedena xx xxxxxx xxxxxxx.
5. Postup
Poznámka:
Vitamín X xx xxxxxxx xxxx (XX) světlu x oxidaci. Xxxxxxx xxxxxxx musí být xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (za xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxx, nebo xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx) x kyslíku (xxxxxxxxxxx xxxxxxx). Vzduch nad xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx nahrazen xxxxxxx (vyhněte xx xxxxxxxx občasným povolením xxxxx).
5.1 Xxxxxxxx vzorku
Rozmělněte xxxxxx xxx, aby xxxxxx xxxxx s xxxxxx 1 xx, xxxxxxx dbejte, aby xxxxxxx k zahřátí. Xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx X.
5.2 Saponifikace
V závislosti xx xxxxxx xxxxxxxx X, xxxxxxx x xxxxxxxxx xx 0,01 x, 2 x xx 25 x xxxxxx xx 500 xx xxxxx s xxxxxxx xxxx xxxx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx (4.2.1). Xxxxxxxx xxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx 130 xx xxxxxxx (3.1), xxxxxxxxx 100 mg XXX (3.13), 2 xx roztoku askorbanu xxxxxxx (3.5) x 2 xx roztoku xxxxxxx sodného (3.6). Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (4.3) x xxxxx a xxxxxxx xxxxx xx xxxxx lázně s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.7). Xxxxxxxx x varu x xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx 25 ml xxxxxxx hydroxidu xxxxxxxxxx (3.4) xxxx kondenzátor (4.3) a xxxxxxxx xxxxxxx dalších 25 xxxxx za stálého xxxxxxx xxx pomalým xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 20 ml xxxx x obsah baňky xxxxxxxx xx pokojovou xxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx dekantací xxxxxxxxxxxxxx roztok xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 250 xx xxxx xx 1000 ml xxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.8). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx baňku xxxxxxxx 25 ml xxxxxxx (3.1) a 100 xx xxxxxxxxxxx (3.2) x xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xx extrakčního xxxxxxxxx. Podíl xxxx x etanolu x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx musí xxx okolo 2:1. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx.
5.3.1 Xxxxxxxx x použitím xxxxxx xxxxxxx (4.2.3)
Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxxxxxx 7.3), xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx (4.2.3). Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx dvakrát 100 xx xxxxxxxxxxx (3.2) a dvakrát 50 ml xxxxxxxxxxx (3.2).
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx extrakty x dělící nálevce xxxxxxx 100 xx xxxxxxx xxxx za xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx xx zabránilo tvorbě xxxxxx) x xxxxx xxxxxxxxxx třepáním x xxxxxxx 100 xx xxxxxxx vody, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxxxxx (3.7) (čtyřnásobné xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx dělení xxxx (4.4), aby xx odstranila všechna xxxxxxxxxxxx voda xx 500 ml odměrné xxxxx (4.2.2). Vypláchněte xxxxxx nálevku x xxxxx 50 xx xxxxxxxxxxx (3.2), xxxxxxx xx značku xxxxxxxxxxxx (3.2) a xxxxx xxxxxxxxxxx.
5.3.2 Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx přístroje (4.8)
Xxxx xx vrstvy xxxxxxxx (xxx xxxxxxxx 7.3), nahraďte xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.8.1) xx xxxxxxxxxx vložku (4.8.2) a xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx X xxxxxxxxxxxx xxxxxxx tak, xxx byl xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx pomoci xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx postranního ramene, xxxxxxxx xxxxxx vrstvu xxxxxxxxxxx do 1000 xx xxxxxx xxxxxxx (4.2.3) Přidejte 100 xx petroléteru (3.2) xx xxxxxxxxxx válce, xxxxxxxxxx x dobře xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx vrstvy xxxxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx dělící nálevky xxxx xxxxxxx. Opakujte xxxxxx extrakce xxxxxxx 100 xx xxxxxxxxxxx (3.2), potom dvakrát 50 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (3.2) x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx nálevky.
Promyjte xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, jak je xx xxxxxxx v 5.3.1, x pokračujte xxx xx xxx xxxxxxx.
5.4 Xxxxxxxx roztoku xxxxxx pro XXXX
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx část roztoku xxxxxxxxxxx (z 5.3.1 xxxx 5.3.2) xx 250 ml xxxxx xx xxxxx xxxxxx (4.2.4). Odpařte rozpouštědlo xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx vakuové xxxxxxx (4.1) xx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx vodní lázně xxxxxxxxxxxxxx 40 °X. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (3.10) x xxxxxxx xxxxx xx rotační vakuové xxxxxxx. Xxxxxxxxx zbývající xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (3.10) x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx (10–100 xx) xxxxxxxx (3.3) (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx X xx xxxx xxx x xxxxxxx 5 XX/xx xx 30 XX/xx).
5.5 Xxxxxxxxx xxxxxx XXXX
Xxxxxxx X xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx C18 (4.5.1) a koncentrace xx xxxxxx xxxxxx XX xxxxxxxxx (325 xx) xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxx: 325 xx, emise: 475 xx) (4.5.2).
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx (xxxx. 20 μx) xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxx x 5.4 x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx (3.9). Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx (xxxxxx) několika vstřiků xxxxxxx stejného vzorku x xxxxxxx výšky (xxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (5.6.2).
Podmínky XXXX
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxx jako xxxxxxxxxx; xxxxxxx podmínky xxxxx xxx použity xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (4.5.1): 250 mm x 4 xx, C18, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 5 xxxx 10 μx nebo xxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx (3.9):&xxxx;&xxxx;&xxxx;&xxxx;&xxxx; Xxxx xxxxxxxx (3.3) x xxxx, např. 980 + 20 (xxxxxxxx + xxxxxxxx)
Xxxxxx toku: 1 – 2 xx/xxx.
Xxxxxxxx (4.5.2):&xxxx;&xxxx;&xxxx;&xxxx;&xxxx;&xxxx;&xxxx;&xxxx; XX xxxxxxxx (325 xx) xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx: 325 nm/emise: 475 xx)
5.6 Xxxxxxxxx
5.6.1 Xxxxxxxx standardních xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx 20 ml xxxxxxxxx roztoku xxxxxxx X xxxxxxx (3.11.1) xxxx 20 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx X xxxxxxxxx (3.12.1) xx 500 ml xxxxx x plochým xxxx nebo Xxxxxxxxxxxxx xxxxx (4.2.1) x xxxxxxxxxxxx, jak xx xx popsáno v 5.2, xxx xxx xxxxxxxx XXX. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.2) xxxxx 5.3 a xxxxxxx xx 500 xx xxxxxxxxxxxx (3.2). Xxxxxxx 100 xx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx vakuové xxxxxxx (xxx 5.4) xxxxx xx xxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (3.10) a xxxxx rozpusťte zbytek x 10,0 xx xxxxxxxx (3.3). Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx 560 XX xxxxxxxx A/1 xx. Xxxxxx obsah se xxxxxxx xxxxx 5.6.3.3 Xxxxxxxxxx pracovní xxxxxx xxxx xxx čerstvě xxxxxxxxx před xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 2,0 ml xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx 20 ml xxxxxxx xxxxx, doplňte xx xxxxxx xxxxxxxxx (3.3) x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx koncentrace xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx 56 XX vitamínu A xx xx.
5.6.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx 1,0, 2,0, 5,0 a 10,0 xx zředěného xxxxxxxxxxxx pracovního xxxxxxx xx xxxxx 20 xx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx (3.3) x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx koncentrace xxxxxx xxxxxxx xxxx 2,8, 5,6, 14,0 x 28,0 XX xxxxxxxx X na xx.
Xxxxxxxxxx několikrát 20 μx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx (xxxxxx). Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx píků (xxxxx) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XX xxxxxxxx (5.6.3.3).
5.6.3 XX standardizace standardních xxxxxxx
5.6.3.1 Zásobní xxxxxx xxxxxxx X xxxxxxx
Xxxxxxxxx 2,0 xx zásobního xxxxxxx xxxxxxx X xxxxxxx (3.11.1) xx 50 xx odměrné xxxxx (4.2.2) a xxxxxxx xx xxxxxx 2-xxxxxxxxxx (3.8) Nominální xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx 56 XX xxxxxxxx X xx xx. Xxxxxxxxx 3,0 xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx X xxxxxxx xx 25 xx odměrné baňky x xxxxxxx xx xxxxxx 2-xxxxxxxxxx (3.8). Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx 6,72 XX vitamínu X xx ml. Xxxxxx XX xxxxxxxx tohoto xxxxxxx xxxxx 2-xxxxxxxxx (3.8) ve spektrofotometru (4.6) xxxx 300 xx x 400 xx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx mezi 325 xx x 327 xx.
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx A:
IU vitamínu X/xx = X326 × 19,0
E1%1cm pro xxxxxxx X alkohol = 1 530 při 326 xx xx 2-xxxxxxxxx
5.6.3.2 Zásobní xxxxxx xxxxxxx A xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx 2,0 xx xxxxxxxxx xxxxxxx vitamín X xxxxxxxxx (3.12.1) xx 50 xx xxxxxxx xxxxx (4.2.2) x xxxxxxx xx xxxxxx 2-xxxxxxxxxx (3.8) Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx tohoto xxxxxxx xx 56 XX xxxxxxxx X na xx. Xxxxxxxxx 3,0 xx tohoto zředěného xxxxxxx xxxxxxx A xxxxxxxxx xx 25 xx xxxxxxx baňky x xxxxxxx po xxxxxx 2-xxxxxxxxxx (3.8). Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx tohoto xxxxxxx xx 6,72 XX vitamínu A xx ml. Xxxxxx XX spektrum xxxxxx xxxxxxx xxxxx 2-xxxxxxxxx (3.8) xx spektrofotometru (4.6) xxxx 300 xx x 400 xx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx mezi 325 nm x 327 nm.
Výpočet xxxxxx xxxxxxxx A:
IU vitamínu X/xx = E326 × 19,0
X1%1xx xxx xxxxxxx A xxxxxxx = 957 při 326 nm ve 2-xxxxxxxxx
5.6.3.3 Standardní xxxxxxxx xxxxxxx vitamínu X
Xxxxxxxxx 3,0 ml xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X, xxxxxxxxxxxx xxxxx 5.6.1 do 50 xx xxxxxxx xxxxx (4.2.2) a xxxxxxx xx xxxxxx 2-xxxxxxxxxx (3.8). Xxxxxxxxx 5,0 xx tohoto xxxxxxx xx 25 xx odměrné baňky x doplňte xx xxxxxx 2-propanolem (3.8). Xxxxxxxxx koncentrace xxxxxx xxxxxxx je 6,72 XX xxxxxxxx A xx xx. Xxxxxx XX xxxxxxxx tohoto xxxxxxx xxxxx 2-xxxxxxxxx (3.8) xx xxxxxxxxxxxxxxxx (4.6) mezi 300 xx x 400 xx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxx 325 nm a 327 xx.
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx X:
XX xxxxxxxx X/xx = X325 × 18,3
E1%1cm xxx xxxxxxx X alkohol = 1 821 při 326 xx ve 2-xxxxxxxxx
6. Výpočet xxxxxxxx
Xx xxxxxxx výšky (plochy) xxxx xxx roztok xxxxxx xxxxxxxx X xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx v XX/xx xx vztahu xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.6.2).
Xxxxx xxxxxxxx X x x IU/kg xx xxxxxx xx dán xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
x = 500 · β · X2 · 1 000 / X1 · x (XX=xx)
xx které:
β = xxxxxxxxxxx xxxxxxxx A x xxxxxxx xxxxxx (5.4) v XX/xx
X1 = xxxxx roztoku xxxxxx (5.4) x xx
X2 = objem xxxxxxx xxxxxxxxxx x 5.4 v xx
x = hmota xxxxxxxx xxxxx x x
7. Xxxxxxxx
7.1 X vzorků x nízkou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx X může xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx petroléteru dvou xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxxx: 25 x) xx jednoho roztoku xxxxxx pro stanovení xxxxxx HPLC.
7.2 Xxxxxxxx xxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xx nemělo xxxxxxxxx 2x.
7.3 Xxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx 10 xx etanolu (3.1), x xxxxxxxxx xxxxxx.
7.4 X rybího xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx 45–60 xxxxx.
7.5 Namísto XXX xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx.
7.6 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx x použitím normální xxxxxx xxxxxx.
7.7 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx 150 xx kyseliny xxxxxxxxx.
7.8 Xxxxxxx roztoku xxxxxxx sodného může xxx xxxxxxx xxxxxxxxx 50 xx XXXX.
8. Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx výsledky xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx u xxxxxxxx xxxxxx nesmí překročit 15 % x xxxxxxx výsledku.
9. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx [1]
X: xxxxx xxxxxxxxxx
x: počet xxxxxxxxxxxx xxxxxx
xx: xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
xX: xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
x: xxxxxxxxxxxxxx
X: xxxxxxxxxxxxxxxxxx
XXx: koeficient xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
XXX: koeficient xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
|
Xxxxxx |
Xxxxxxxxx xxxxxx |
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
Xxxxxx xxx xxxxxx |
|
|
X |
13 |
12 |
13 |
12 |
13 |
|
x |
48 |
45 |
47 |
46 |
49 |
|
xxxxx [XX/xx] |
17,02 x 106 |
1,21 x 106 |
537100 |
151800 |
18070 |
|
xx [XX/xx] |
0,51 x 106 |
0,039 x 106 |
22080 |
12280 |
682 |
|
x [XX/xx] |
1,43 x 106 |
0,109 x 106 |
61824 |
34384 |
1910 |
|
XXx [XX/xx] |
3,0 |
3,5 |
4,1 |
8,1 |
3,8 |
|
xX [XX/xx] |
1,36 x 106 |
0,069 x 106 |
46300 |
23060 |
3614 |
|
X [XX/xx] |
3,81 x 106 |
0,193 x 106 |
129640 |
64568 |
10119 |
|
XXX [%] |
8,0 |
6,2 |
8,6 |
15 |
20 |
ČÁST X
XXXXXXXXX VITAMÍNU E
1. Xxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxx xx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx X x xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx vitamínu X xx xxxxxxxx jako xx XX-α-xxxxxxxxx xxxxxxx xx kg. 1 xx DL-α-tokoferol acetátu xxxxxxxx 0,91 xx XX-α-xxxxxxxxxx (vitamín E).
Mez xxxxxxxxxxxxxxx xx 2 xx xxxxxxxx E/kg.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztokem hydroxidu xxxxxxxxxx a xxxxxxx X xx extrahován xx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x zbytek xx xxxxxxxx x xxxxxxxx x, xxxxx je xx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx koncentraci. Xxxxx vitamínu X xx stanoví xxxxxxxx xxxx vysoce účinné xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XX-XXXX) xx xxxxxxx UV xxxx xxxxxxxxxxxxxxx detekce.
3. Xxxxxxx
3.1 Etanol, σ = 96 %
3.2 Xxxxxxxxxx, rozsah xxxx 40 až 60 °X
3.3 Xxxxxxx
3.4 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, β = 50 g/100 xx
3.5 Xxxxxx askorbanu xxxxxxx, β = 10 g/100 ml (xxx 7.7 xxxxxxxx)
3.6 Xxxxxx xxxxx, Na2S. x X2X (x = 7–9)
3.6.1 Xxxxxx xxxxxxx sodného, c = 0,5 xxx/x x glycerolu, β = 120 g/l (xxx x = 9) (xxx 7.8 xxxxxxxx)
3.7 Xxxxxx fenolftaleinu, β = 2 x/100 ml v xxxxxxx (3.1)
3.8 Mobilní xxxx pro XXXX: xxxx xxxxxxxx (3.3) x xxxx, xxxx. 980 + 20 (xxxxxxxx + xxxxxxxx). Xxxxxxxxx poměr xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
3.9 Xxxxx, xxxxxx xxxxxxx
3.10 XX-α-xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx čistý, ověřené xxxxxxxx
3.10.1 Zásobní roztok XX-α-xxxxxxxxx acetátu: Xxxxxxx x xxxxxxxxx na 0,1 mg, 100 xx XX-α-xxxxxxxxx acetátu (3.10) xx 100 xx odměrné baňky. Xxxxxxxxx x xxxxxxx (3.1) x doplňte xx značku stejným xxxxxxxxxxxxx. 1 xx xxxxxx roztoku xxxxxxxx 1 xx XX-α-xxxxxxxxx xxxxxxx. (UV xxxxxxxx – xxx 5.6.1.3; xxxxxxxxxxx – viz 7.4 poznámky).
3.11 XX-α-xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx, ověřené xxxxxxxx
3.11.1 Odvažte x xxxxxxxxx xx 0,1 xx, 100 xx XX-α-xxxxxxxxxx (3.10) xx 100 ml xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx v xxxxxxx (3.1) a xxxxxxx po značku xxxxxxx rozpouštědlem. 1 xx tohoto roztoku xxxxxxxx 1 mg XX-α-xxxxxxxxxx. (XX xxxxxxxx – viz 5.6.2.3; xxxxxxxxxxx – xxx 7.4 poznámky).
3.12 2,6-Xx-xxxx-xxxxx-4-xxxxxxxxxxxx (XXX) (xxx 7.5 xxxxxxxx)
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx
4.1 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx
4.2 Xxxxxx x xxxxxxxx xxxx
4.2.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxx xxxx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx, 500 xx, se xxxxxxxxxxx xxxxx
4.2.2 Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx, 10, 25, 100 a 500 xx
4.2.3 Xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx, 1000 xx, xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
4.2.4 Xxxxxxxxxx xxxxx, 250 xx, se xxxxxxxxxxx xxxxx
4.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx 300 xx, xx xxxxxxxxxx xxxxxx, x adaptérem xxx xxxxxxxx xxxxxxx plynu
4.4 Xxxxxxxx filtrační xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx, xxxxxx 185 xx (xxxx. Schleicher & Xxxxxxx 597 HY 1/2)
4.5 XXXX výbava xx xxxxxxxxxxxx systémem
4.5.1 Xxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, 250 xx x 4 xx, X18, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 5 xxxx 10 μx nebo xxxxxxxxxx
4.5.2 XX nebo xxxxxxxxxxxxx detektor x xxxxxxxxxxx nastavením vlnové xxxxx
4.6 Xxxxxxxxxxxxxxx s 10 mm křemennými xxxxxxxx
4.7 Xxxxx xxxxx x magnetickým xxxxxxxxx
4.8 Xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxxxxx 1) xxxxxxxxxxx xx:
4.8.1 Xxxxxxxx odměrný xxxxx o xxxxxx 1x vybavený zábrusovým xxxxxx a xxxxxx
4.8.2 Xxxxxxxxx vložka vybavená xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx X a xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxx, xxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx do xxxxxx nálevky.
5. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx X xx xxxxxxx xxxx (XX) světlu x xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx musí být xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (za použití xxxxxx x opakního xxxx, xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx fólií) x xxxxxxx (vypláchněte xxxxxxx). Xxxxxx xxx xxxxxxxxx musí xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx xx xxxxxxxx občasným povolením xxxxx).
5.1 Xxxxxxxx vzorku
Rozmělněte xxxxxx xxx, xxx xxxxxx xxxxx s xxxxxx 1 mm, xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx k xxxxxxx. Xxxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx bezprostředně před xxxxxxx a saponifikací, xxxxx může xxxxx xx xxxxxxx vitamínu X.
5.2 Xxxxxxxxxxxx
X závislosti xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx X odvažte x xxxxxxxxx na 0,01 g, 2 x xx 25 x xxxxxx do 500 ml baňky x plochým xxxx xxxx Xxxxxxxxxxxxx baňky (4.2.1). Přidejte xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx 130 xx xxxxxxx (3.1), přibližně 100 xx XXX (3.12), 2 xx roztoku xxxxxxxxx xxxxxxx (3.5) x 2 xx xxxxxxx sulfidu xxxxxxx (3.6). Připojte xxxxxxxxxxx (4.3) x xxxxx x ponořte xxxxx xx vodní xxxxx x xxxxxxxxxxx míchadlem (4.7). Xxxxxxxx x xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx 25 xx xxxxxxx hydroxidu xxxxxxxxxx (3.4) xxxx xxxxxxxxxxx (4.3) a xxxxxxxx odtékat dalších 25 xxxxx za xxxxxxx míchání xxx xxxxxxx xxxxxxx dusíku. Xxxxx vypláchněte xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 20 xx xxxx x obsah xxxxx xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx roztok xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 250 xx xxxx xx 1000 xx xxxxxx xxxxxxx (4.2.3) nebo xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.8). Xxxxxxxxxxx saponifikační xxxxx xxxxxxxx 25 xx xxxxxxx (3.1) x 100 xx xxxxxxxxxxx (3.2) x xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx roztocích xx měl xxx xxxxx 2:1. Třepejte xxxxx dvě xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx.
5.3.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (4.2.3)
Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxxxxxx 7.3), převeďte xxxxxx petroléteru xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx (4.2.3). Xxxxxxxx tuto xxxxxxxx xxxxxxx 100 xx xxxxxxxxxxx (3.2) x dvakrát 50 xx petroléteru (3.2).
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx nálevce xxxxxxx 100 ml xxxxxxx xxxx za xxxxxxxxxx xxxxxxxx (aby xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx) x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx 100 xx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx bezbarvá xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.7) (xxxxxxxxxxx promývání xx xxxxxxxx dostačující). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx přes xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxx (4.4), aby xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xx 500 xx odměrné xxxxx (4.2.2). Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x filtr 50 ml xxxxxxxxxxx (3.2), doplňte xx xxxxxx petroléterem (3.2) x xxxxx xxxxxxxxxxx.
5.3.2 Xxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxxxxx přístroje (4.8)
Když xx xxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxxxxxx 7.3), xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.8.1) za xxxxxxxxxx xxxxxx (4.8.2) x nasměrujte xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx X xxxxxxxxxxxx xxxxxxx tak, xxx xxx právě nad xxxxxxxx rozhraní. Za xxxxxx xxxxx x xxxxxxx dusíku xx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx 1000 xx xxxxxx xxxxxxx (4.2.3) Xxxxxxxx 100 ml xxxxxxxxxxx (3.2) xx xxxxxxxxxx válce, xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx oddělit xx x xxxxxxxx xxxxxx vrstvu xx xxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 100 xx xxxxxxxxxxx (3.2), xxxxx xxxxxxx 50 xx xxxxxxx petroléteru (3.2) x přidejte xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxx je xx xxxxxxx x 5.3.1, x pokračujte xxx xx xxx xxxxxxx.
5.4 Xxxxxxxx roztoku xxxxxx xxx XXXX
Xxxxxxxxxxx alikvotní xxxx xxxxxxx petroléteru (x 5.3.1 xxxx 5.3.2) xx 250 xx baňky xx xxxxx hrušky (4.2.4). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx sucha xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (4.1) xx xxxxxxxxx xxxxx xxx teplotě xxxxx lázně xxxxxxxxxxxxxx 40 °X. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (3.9) x xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx vakuové xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx rozpouštědlo xxxxxxx dusíku (3.9) x xxxxx rozpusťte xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx (10–100 ml) xxxxxxxx (3.3) (xxxxxxxxxxx XX-α-xxxxxxxxxx by xxxx xxx x rozsahu 5 μx/xx xx 30 μx/xx).
5.5 Stanovení xxxxxx HPLC
Vitamín X xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx X18 (4.5.1) x xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxx: 295 xx, xxxxx: 330 nm) xxxx XX detektoru (292 nm) (4.5.2).
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx (xxxx. 20 μx) xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x 5.4 a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx (3.8). Xxxxxxxxx xxxxxxx výšky xxxx (xxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx (plochy) xxxxxxxx xxxxxxx kalibračních xxxxxxx (5.6.2).
Xxxxxxxx XXXX
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx jako xxxxxxxxxx; ostatní xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xx předpokladu, xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxx kapalinovou chromatografii (4.5.1): 250 xx x 4 mm, X18, velikost částic xxxxxx 5 nebo 10 μx xxxx xxxxxxx
Xxxxxxx fáze (3.8): Xxxx metanolu (3.3) x xxxx, xxxx. 980 + 20 (xxxxxxxx + xxxxxxxx)
Xxxxxx xxxx: 1–2 xx/xxx.
Xxxxxxxx (4.5.2): Fluorescenční xxxxxxxx (xxxxxxxx: 295 xx/xxxxx: 330 xx) xxxx XX detektor (292 xx)
5.6 Xxxxxxxxx (XX-α-xxxxxxxxx xxxxxxx nebo DL-α-tokoferolu)
5.6.1 Xxxxxxxx XX-α-xxxxxxxxx xxxxxxx
5.6.1.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx pipetou 25 xx zásobního xxxxxxx XX-α-xxxxxxxxx acetátu (3.10.1) xx 500 xx xxxxx x xxxxxxx xxxx nebo Erlenmeyerovy xxxxx (4.2.1) x xxxxxxxxxxxx, jak je xx xxxxxxx v 5.2. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.2) xxxxx 5.3 a xxxxxxx xx 500 xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx 25 xx tohoto xxxxxxxx xx rotační vakuové xxxxxxx (xxx 5.4) xxxxx xx xxxxx, xxxxxxxxx zbývající xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (3.9) x znovu xxxxxxxxx xxxxxx x 25,0 xx netanolu (3.3). Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx 45,5 μx DL-α-tokoferolu xx xx, ekvivalent 50 μx XX-α-xxxxxxxxx xxxxxxx xx xx. Standardní xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
5.6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx 1,0, 2,0, 4,0 x 10,0 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoku xx xxxxx 20 xx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx značku xxxxxxxxx (3.3) x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx koncentrace xxxxxx xxxxxxx xxxx 2,5, 5,0, 10,0 a 25,0 μx/xx XX-α-xxxxxxxxx xxxxxxx, tj. 2,28, 4,55, 9,10 x 22,8 μx/xx DL-α-tokoferolu.
Vstříkněte xxxxxxxxxx 20 μx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx (plochy). Xx použití xxxxxxxxx xxxxx píků (xxxxx) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
5.6.1.3 XX standardizace xxxxxxxxx xxxxxxx DL-α-tokoferol xxxxxxx (3.10.1)
Xxxxxxxx 5,0 xx xxxxxxxxx xxxxxxx DL-α-tokoferol xxxxxxx (3.10.1) xx 25,0 xx xxxxxxxx x xxxxxx XX xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (3.1) xx xxxxxxxxxxxxxxxx (4.6) xxxx 250 xx x 320 nm.
Absorpční xxxxxxx xx xxxx xxx xxx 284 xx:
X1%1xx = 43,6 xxx 284nm x xxxxxxx
Xxx tomto ředění xx měla xxx xxxxxxx xxxxxxxx 0,84 xx 0,88.
5.6.2 Xxxxxxxx XX-α-xxxxxxxxxx
5.6.2.1 Příprava xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx pipetou 2,0 xx xxxxxxxxx xxxxxxx XX-α-xxxxxxxxxx (3.11.1) xx 50 xx xxxxxxx xxxxx, rozpusťte x xxxxxxxx (3.3) x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx tohoto xxxxxxx xx 40 μx XX-α-xxxxxxxxxx na ml, xxxxxxxxxx 44,0 μg XX-α-xxxxxxxxx xxxxxxx na xx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxxx připraven xxxx xxxxxxxx.
5.6.2.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x kalibrační xxxx
Xxxxxxxx 1,0, 2,0, 4,0 x 10,0 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx do xxxxx 20 ml odměrných xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx (3.3) x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx roztoků xxxx 2,0, 4,0, 8,0 a 20,0 μx/xx XX-α-xxxxxxxxxx, xx. 2,20, 4,40, 8,79 x 22,0 μx/xx XX-α-xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx 20 μx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx výšky xxxx (xxxxxx). Za xxxxxxx středních xxxxx xxxx (xxxxx) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx.
5.6.2.3 XX xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx roztoku XX-α-xxxxxxxxxx (3.11.1)
Xxxxxxxx 2,0 xx xxxxxxxxx xxxxxxx XX-α-xxxxxxxxxx (3.11.1) na 25,0 xx xxxxxxxx x změřte XX xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (3.1) xx spektrofotometru (4.6) xxxx 250 nm x 320 nm. Xxxxxxxxx maximum xx xxxx xxx xxx 292 xx:
X1%1xx = 75,8 při 292nm x xxxxxxx
Xxx tomto xxxxxx xx měla xxx získána extinkce 0,6.
6. Výpočet výsledků
Ze xxxxxxx výšky (xxxxxx) xxxx pro xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx X xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x μx/xx (xxxxxxxx xxxx α-xxxxxxxxx xxxxxx) ve xxxxxx xx kalibračnímu xxxxx (5.6.1.2 nebo 5.6.2.2).
Xxxxx xxxxxxxx X w x mg/kg ve xxxxxx xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
x = 500 · β · X2 / X1 · x [xx/xx]
xx xxxxx:
β = xxxxxxxxxxx xxxxxxxx E x roztoku vzorku (5.4) x μx/xx
X1 = xxxxx xxxxxxx xxxxxx (5.4) x xx
X2 = xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x 5.4 x xx
x = xxxxx xxxxxxxx xxxxx x x
7. Xxxxxxxx
7.1 X vzorků x xxxxxx koncentrací xxxxxxxx X může xxx užitečné xxxxxx xxxxxxxx petroléteru xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (hmotnostní xxxxxxx: 25 x) xx xxxxxxx roztoku xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx XXXX.
7.2 Xxxxxxxx xxxx xx vzorku xxxxxxxxx xxx analýzu xxxxx xxxxxxxxx 2x.
7.3 Xxxxx se xxxxxxxx xxxxxx dělení, xxxxxxxx xxxxxxxxx 10 ml xxxxxxx (3.1), x xxxxxxxxx xxxxxx.
7.4 Xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx měření xxxxxxx XX-α-xxxxxxxxx xxxxxxx nebo XX-α-xxxxxxxxxx xxxxx 5.6.1.3 xxxx 5.6.2.3 přidejte xx xxxxxxx (3.10.1 xxxx 3.10.2) přibližně 10 xx XXX (3.12) x skladujte xxxxxx x chladničce (xxxxxxxxx doba skladovatelnosti xx xxxxx xxxxx).
7.5 Xxxxxxx XXX může xxx použit xxxxxxxxxxx.
7.6 Xxxxxxxx α-, β-, χ- x δ xxxxxxxxxx je xxxxx x použitím normální xxxxxx kolony.
7.7 Xxxxxxx xxxxxxxxx sodného může xxx xxxxxxx přibližně 150 mg kyseliny xxxxxxxxx.
7.8 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx sodného xxxx xxx xxxxxxx přibližně 50 xx XXXX.
8. Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx výsledky xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 % x xxxxxxx xxxxxxxx.
9. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx [2]
L: xxxxx laboratoří
n: počet xxxxxxxxxxxx xxxxxx
xx: xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
xX: xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
x: opakovatelnost
R: xxxxxxxxxxxxxxxxxx
XXx: xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
XXX: koeficient xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
|
Xxxxxx |
Xxxxxxxxx xxxxxx |
Xxxxxxxxx koncentrát |
Bílkovinný xxxxxxxxxx |
Xxxxxx pro selata |
|
|
L |
12 |
12 |
12 |
12 |
12 |
|
n |
48 |
48 |
48 |
48 |
48 |
|
střed [xx/xx] |
17 380 |
1 187 |
926 |
315 |
61,3 |
|
xx [xx/xx] |
384 |
45,3 |
25,2 |
13,0 |
2,3 |
|
x [xx/xx] |
1 075 |
126,8 |
70,6 |
36,4 |
6,4 |
|
XXx [%] |
2,2 |
3,8 |
2,7 |
4,1 |
3,8 |
|
xX [xx/xx] |
830 |
65,0 |
55,5 |
18,9 |
7,8 |
|
X [xx/xx] |
2 324 |
182,0 |
155,4 |
52,9 |
21,8 |
|
XXX [%] |
4,8 |
5,5 |
6,0 |
6,0 |
12,7 |
XXXX C
STANOVENÍ XXXXXXXXXX
1. Xxxx a xxxxxx použití
Tato xxxxxx xx určena xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx tryptofanu v xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxx X- a L- xxxxxxx.
2. Princip
Pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx za xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nasyceným xxxxxxxx xxxxxxxxx barnatého x xxxxxxxx xxx 110 °C po 20 hodin. Po xxxxxxxxx xx přidán xxxxxxx standard.
Pro xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx extrahován xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx x vnitřní xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx XXXX x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Xxxxxxx
3.1 Dvojnásobně xxxxxxxxxxx xxxx, nebo voda xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx (xxxxxxxx &xx; 10 μS/cm)
3.2 Xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxx (xxxxxxx/xxxxx &xx; 99 %), sušený xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx
3.3 Vnitřní standardní xxxxx: α-xxxxxx-xxxxxxxxx (čistota/obsah &xx; 99 %), xxxxxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx fosforu
3.4 Xxxx-xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx xxx xxxxx, xxx nebyl Ba(OH)2. 8 H2O nadměrně xxxxxxxxxx xx vzduchu, xxx xx zabránilo xxxxxx BaCO3, xxx xxxx xxxxx stanovení) (xxx xxxxxxxx 9.3)
3.5 Xxxxxxxx xxxxx
3.6 Xxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxx, x = 85 %
3.7 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, x20 = 1,19 x/xx
3.8 Metanol, XXXX xxxxxx
3.9 Xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx 40–60 °X
3.10 Xxxxxx hydroxidu xxxxxxx, c = 1 xxx/x:
Xxxxxxxxx 40,0 x NaOH (3.5) xx xxxx x xxxxxxx xx 1 x vodou (3.1).
3.11 Xxxxxxxx chlorovodíková, c = 6 xxx/x:
Xxxxxxx 492 xx XXX (3.7) a doplňte xx 1 l xxxxx.
3.12 Xxxxxxxx chlorovodíková, x = 1 xxx/x:
Xxxxxxx 82 ml XXX (3.7) x xxxxxxx xx 1 x xxxxx.
3.13 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, x = 0,1 xxx/x:
Xxxxxxx 8,2 xx HCL (3.7) x xxxxxxx do 1 l xxxxx.
3.14 Xxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxx, x = 0,5 xxx/x:
Xxxxxxx 34 ml xxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxx (3.6) x xxxxxxx do 1 x xxxxx (3.1)
3.15 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx (3.2), c = 2,50 μxxx/xx:
Xxxxxxxxx 0,2553 x xxxxxxxxxx (3.2) x 500 xx xxxxxxx baňce x xxxxxxxx chlorovodíkové (3.13) x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (3.13). Xxxxxxxxx při –18 xX xx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.
3.16 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx roztok, x = 2,50 μmol/ml:
Rozpusťte 0,2728 x α-methyl-tryptofanu (3.3) x 500 xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.13) a xxxxxxx xx xxxxxx kyselinou xxxxxxxxxxxxxxx (3.13). Skladujte xxx –18 oC xx xxxx xxxxxxxxx xxxx týdnů.
3.17 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztok tryptofanu x xxxxxxx standard:
Vezměte 2,00 ml koncentrovaného xxxxxxx xxxxxxxxxx (3.15), x 2,00 xx xxxxxxxxxxxxxxx roztoku vnitřního xxxxxxxxx (α-methyl-tryptofan) (3.16). Xxxxxx xxxxx (3.1) x xxxxxxxxx (3.8) xx xxxxxxxxx stejný xxxxx a na xxxxxxxxx xxxxxxx koncentraci xxxxxxxx (10–30 %) xxxx konečný xxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxx čerstvý xxxx xxxxxxxx.
Xxxxx přípravy xxxxxxx xxxx xxxxxx slunečním xxxxxx.
3.18 Kyselina xxxxxx
3.19 1,1,1-xxxxxxxxx-2-xxxxxx-2-xxxxxxxx
3.20 Ethanolamin &xx; 98 %
3.21 Xxxxxx 1 g 1,1,1-trichloro-2-methyl-2-propanolu (3.19) ve 100 xx xxxxxxxx (3.8).
3.22 Xxxxxxx fáze pro XXXX: 3,00 g xxxxxxxx octové (3.18) + 900 ml xxxx (3.1) + 50,0 xx xxxxxxx (3.21) 1,1,1-trichloro-2-methyl-2-propanolu (3.19) x xxxxxxxx (3.8) (1x/100 xx). Xxxxxxx xX na 5 x použitím xxxxxxxxxxxx (3.20). Xxxxxxx xx 1000 xx xxxxx (3.1).
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
4.1 Xxxxxxxx xxx XXXX xx spektrofluorimetrickým xxxxxxxxxx
4.2 Xxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, 125 xx x 4 xx, X18, xxxxxxxx xxxxxx náplně 3 μx nebo xxxxxxxxxx
4.3 xX metr
4.4 Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx 125 xx, se širokým xxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
4.5 Xxxxxxxxxx xxxxx, 0,45 μx
4.6 Autokláv, 110 (+ 2) °X, 1,4 (+ 0,1) xxxx
4.7 Mechanická xxxxxxxx xxxx magnetické xxxxxxxx
4.8 Vířivý mixer
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xx rozmělněn xxx, xxx prošel sítem x xxxxxx 0,5 xx. Vzorky, xxxxx xxxx xxxxxxx vlhkost, xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx buď xxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 50 °C, xxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxx musí být xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.9).
5.2 Stanovení xxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxx)
Xxxxxxx x xxxxxxxxx xx 1 mg příslušné xxxxxxxx (1–5 x) xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx 100 ml xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, x = 0,1 xxx/x (3.13) x 5,00 xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.16). Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx 60 xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx třepačky, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.7). Xxxxxxxx usadit xxxxxxxx a pipetujte 10,0 xx roztoku xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx 5 ml xxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxx, x = 0,5 xxx/x (3.14). Upravte pH xx 3,0 za xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, x = 1,0 xxx/x (3.10). Přidejte xxxxxxxxx xxxxxxxx (3.8), xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx 10 a 30 % xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx do xxxxxxx xxxxx x vhodném xxxxxx x xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxx chromatografii (xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (3.17)).
Xxxx xxxxxxxxxxx xx kolony HPLC xxxxxxxxxxxx xxxxxxx ml xxxxxxx xxxx membránový xxxxx 0,45 μx (4.5). Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx 5.4.
Xxxxxxx standardní xxxxxx x xxxxxxxx xxxx přímým xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxx analyzovat extrakty xxxxxx den, mohou xxx xxxxxxxxxx xxx 5 °X po xxxxxxxxx xxxx xxx xxx.
5.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx)
Xxxxxxx x xxxxxxxxx xx 0,2 xx od 0,1 xx 1 g xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (4.4). Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx by xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxx 10 mg. Xxxxxxxx 8,4 g xxxx-xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.4) a 10 xx xxxx. Xxxxxxxxxxx xx vířivém mixeru (4.8) nebo magnetickém xxxxxxxx (4.7). Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx směsi. Xxxxxxxxxx xxxxx nádoby 4 xx xxxx. Našroubujte xxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx autoklávu (4.6) x xxxxxx xxxxx x párou xx 30–60 xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxx 110 (+ 2) °X xx xxxx 20 xxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx snižte xxxxxxx xxxxx xxx 100 °C. Xxx xxxxxxx ke xxxxxxxxxxxx Xx(XX)2. 8 X2X, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx 30 xx xxxx o pokojové xxxxxxx. Mírně xxxxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx 2,00 xx koncentrovaného xxxxxxx vnitřního standardu (α-xxxxxx-xxxxxxxxx) (3.16). Zchlaďte xxxxxx xx xxxxx/xxxxxx xxxxx xx xxxx 15 xxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx 5 xx xxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxx, x = 0,5 mol/l (3.14). Xxxxxxxx xxxxxx ve xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, x = 6 xxx/x (3.11) zatímco xxxxxxx x xxxxxxx xX xx 3,0 x xxxxxxxx HCL, x = 1 xxx/x (3.12). Xxxxxxxx xxxxxxxxx metanolu, xxxxxx xxxxxxxx koncentraci xxxx 10 a 30 % metanolu x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx baňky x xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx pro chromatografii (xxxxxxxxx 100 ml). Xxxxxxxx xxxxxxxx by xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx XXXX přefiltrujte xxxxxxx xx roztoku přes xxxxxxxxxx xxxxx 0,45 μx (4.5). Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx podle xxxxxxxx 5.4.
Xxxxxxx standardní xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx není xxxxx analyzovat hydrolyzáty xxxxxx xxx, mohou xxx xxxxxxxxxx xxx 5 °X xx xxxxxxxxx dobu tří xxx.
5.4 Stanovení pomocí XXXX
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx vymývání xxxx xxxxxxxxxxx jako doporučení; xxxxxxx podmínky xxxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx poskytují xxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxx xxxxxxxx 9.1 x 9.2):
Kolona xxx xxxxxxxxxxx chromatografii (4.2): 125 mm x 4 xx, X18, xxxxxxxx xxxxxx náplně 3 μx nebo xxxxxxxxxx
Xxxxxxx kolony Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx fáze (3.22): 3,00 x xxxxxxxx xxxxxx (3.18) + 900 xx xxxx (3.1) + 50,0 xx xxxxxxx (3.21) 1,1,1-xxxxxxxxx-2-xxxxxx-2-xxxxxxxxx (3.19) x xxxxxxxx (3.8) (1 x/100 xx). Xxxxxxx xX xx 5,00 x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.20). Xxxxxxx xx 1000 xx xxxxx (3.1)
Xxxxxx toku: 1 xx/xxx.
Xxxxxxx xxxx xxxx: xxxxxxxxx 34 minut
Detekční xxxxxx délka: excitace: 280 xx, xxxxx: 356 xx
Xxxxxxxxx xxxxx: 20 μl
6. Xxxxxxx xxxxxxxx
X × B × C × X × X × XX / X × X × X × 10&xxxx;000 × X = g tryptofanu xx 100x xxxxxx
X = xxxxxx xxxx xxxxxxxxx standardu, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.17)
B = plocha píku xxxxxxxxxx, xxxxxxxx (5.2) xxxx xxxxxxxxxxx (5.3)
C = objem xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.15) (2 xx) xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.17)
X = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx roztoku tryptofanu (3.15) x μxxxxxx/xx (= 2,50) xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.17)
X = objem xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.16) x xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx (5.2) (= 5,00 xx) xxxx xx hydrolyzátu (5.3) (= 2,00 xx)
X = xxxxxx píku xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx (5.2) xxxx hydrolyzátu (5.3)
X = xxxxxx xxxx tryptofanu, kalibračního xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.17)
X = objem koncentrovaného xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.16) x ml (= 2,00) xxxxxxxxx xx kalibračního xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.17)
W = xxxxxxxx xxxxxx x x (opravená xx xxxxxxx hmotnost, xxxxxxxx xxx vzorek xxxxx x/xxxx xxxxxxxx)
XX = xxxxxxxxxx hmotnost tryptofanu (= 204,23)
7. Opakovatelnost
Rozdíl xxxx výsledky dvou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx provedených x stejného xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 10 % z xxxxxxx xxxxxxxx.
8. Výsledky studijní xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx Společenství (xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx tak, xx byly xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx 12 xxxxxxxxxxxx k xxxxxxx metody xxx xxxxxxxxx. Replikované (5) xxxxxxx xxxx prováděny x xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx jsou xxxxxxx x následující xxxxxxx:
X: xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
x: počet xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx eliminačních xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxx-Xxxxxxxxx xxxxxx)
xx: standardní xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
xX: xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
x: opakovatelnost
R: xxxxxxxxxxxxxxxxxx
XXx: koeficient xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, %
XXX: xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx, %
|
Xxxxxx 1 Krmivo xxx xxxxxxx |
Xxxxxx 2 Xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx X-xxxxxxxxxxx |
Xxxxxx 3 Krmný xxxxxxxxxx xxx prasata |
|
|
L |
12 |
12 |
12 |
|
n |
50 |
55 |
50 |
|
střed [x/xx] |
2,42 |
3,40 |
4,22 |
|
xx [x/xx] |
0,05 |
0,05 |
0,08 |
|
x [x/xx] |
0,14 |
0,14 |
0,22 |
|
XXx [%] |
1,9 |
1,6 |
1,9 |
|
xX [x/xx] |
0,15 |
0,20 |
0,09 |
|
X [g/kg] |
0,42 |
0,56 |
0,25 |
|
CVR [%] |
6,3 |
6,0 |
2,2 |
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx (třetí xxxxxxxx xxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx xxx, že xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx ve 13 xxxxxxxxxxxx x ověření xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx tryptofanu. Replikované (5) xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx. Výsledky xxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
X: počet xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
x: xxxxx xxxxxxxxxxxx hodnot xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx Cochran-Dixonovým testem)
sr: xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxxxxxxxx
xX: xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
x: xxxxxxxxxxxxxx
X: xxxxxxxxxxxxxxxxxx
XXx: xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, %
XXX: xxxxxxxxxx xxxxxxx reprodukovatelnosti, %
|
Xxxxxx 4 Xxxx xxxxxxx xx sójou |
Vzorek 5 Směs xxxxxxx xx xxxxx (= xxxxxx 4) x xxxxxxxx tryptofanem (0,457 x/xx) |
|
|
X |
12 |
12 |
|
x |
55 |
60 |
|
xxxxx [x/xx] |
0,391 |
0,931 |
|
xx [x/xx] |
0,005 |
0,012 |
|
x [x/xx] |
0,014 |
0,034 |
|
XXx [%] |
1,34 |
1,34 |
|
xX [x/xx] |
0,018 |
0,048 |
|
X [x/xx] |
0,050 |
0,134 |
|
XXX [%] |
4,71 |
5,11 |
Xxxxx studijní xxxxxxxxxx Společenství xxxx xxxxxxxxxx xxx, že xxxxx xxxxxx byly xxxxxxxxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
X: xxxxx xxxxxxxxxx předkládajících xxxxxxxx
x: xxxxx xxxxxxxxxxxx hodnot xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxx-Xxxxxxxxx xxxxxx)
xx: xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxxxxxxxx
xX: standardní xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
x: xxxxxxxxxxxxxx
X: xxxxxxxxxxxxxxxxxx
XXx: xxxxxxxxxx xxxxxxx opakovatelnosti, %
XXX: koeficient xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx, %
|
Xxxxxx 1 Xxxxxx krmivo xxx xxxxxxx (XXX 117) |
Xxxxxx 2 Xxxxx-xxxxx xxxx xxxxxx (CRM 118) |
Xxxxxx 3 Xxxxxx xxxxxx (XXX 119) |
Xxxxxx 4 Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (XXX 120) |
|
|
X |
7 |
7 |
7 |
7 |
|
x |
25 |
30 |
30 |
30 |
|
xxxxx [g/kg] |
2,064 |
8,801 |
6,882 |
5,236 |
|
sr [x/xx] |
0,021 |
0,101 |
0,089 |
0,040 |
|
x [x/xx] |
0,059 |
0,283 |
0,249 |
0,112 |
|
XXx [%] |
1,04 |
1,15 |
1,30 |
0,76 |
|
sR [x/xx] |
0,031 |
0,413 |
0,283 |
0,221 |
|
X [g/kg] |
0,087 |
1,156 |
0,792 |
0,619 |
|
CVR [%] |
1,48 |
4,69 |
4,11 |
4,22 |
9. Xxxxxxxx
9.1 Xxxxxxxxxxx specielní xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x α-xxxxxx-xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx vymývání xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx kolony:
|
Kolona xxx kapalinovou chromatografii: |
125 xx x 4 xx, X18, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 5 μx xxxx xxxxxxx |
||
|
Xxxxxxx xxxxxx: |
32 °X |
||
|
Xxxxxxx xxxx: |
X: 0,01 xxx/x XX2XX4/xxxxxxx, 95 + 5 (xxxxxxxx + xxxxxxxx) X: Xxxxxxx |
||
|
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx: |
0 xxx. |
100 % X |
0 % B |
|
15 xxx. |
100 % A |
0 % X |
|
|
17 min. |
60 % X |
40 % X |
|
|
19 xxx. |
60 % A |
40 % X |
|
|
21 min. |
100 % A |
0 % X |
|
|
33 xxx. |
100 % X |
0 % X |
|
|
Xxxxxx xxxx: |
1,2 ml/min. |
||
|
Celková xxxx xxxx: |
xxxxxxxxx 33 minut |
||
9.2 Xxxxxxxxxxxxxx xx bude xxxxxx xxxxx typu XXXX kolony x xxxxxxxxx xxxxxxxx materiálu. Xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx schopen xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx. Navíc xx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxx produkty xxxxx odděleny xx xxxxxxxxxx x vnitřního xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx by xxxx být chromatografovány, xxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx produktů, xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx následný xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxxx, xx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx odezvu. Xxxxxxxx xxxxxx by xxxx xxx měřena x xxxxxxxxxx (xxxxxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx standardu x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx píků xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx byly v xxxxxxxxx xxxxxxx XXXX/xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx (xxxx) xxx xxxxxxxxxx, x/xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx (xxxx) xxxxxx xxxx (xxxx) nebo xxxxxx xxxxxx (xxxxxx), xxxx by být xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x/xxxx změněným xxxxxxxx xxxxxxx.
9.3 Hydroxid barnatý
Stářím xx stává xxxxxxxx xxxxxxx xxxx rozpustný. Xx xx projevuje x xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx XXXX, což xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx.
[1] Řízené xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx Verband Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx Untersuchungs- xxx Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXXXX).
[2] Řízené xxxxxxxx skupinou xxx xxxxxx Xxxxxxx Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx- und Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXXXX).