Xxxxxxxx Xxxxxx 2000/45/ES
ze xxx 6. xxxxxxxx 2000,
xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx X, vitamínu X x xxxxxxxxxx x xxxxxxxx
(Xxxx x významem xxx XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx xxxxxxxx Rady 70/373/XXX ze dne 20. xxxxxxxx 1970, xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx x analýzy Společenství xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx aktem x xxxxxxxxxxx Xxxxxxxx, Finska x Švédska [2], x zejména na xxxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx k xxxx, xx:
(1) Xxxxxxxx 70/373/EHS xxxxxxx, xx úřední xxxxxxxx krmiv za xxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx splněny xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx krmiv, xxxx xxx xxxxxxxxx xx použití xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx odběr xxxxxx a xxxxxxx.
(2) Xxxxxxxx Rady 70/524/XXX xx xxx 23. xxxxxxxxx 1970 o xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx [3], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx Xxxxxx (XX) č. 2439/1999 xx xxx 17. xxxxxxxxx 1999 [4], xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx X a xxxxxxxx X musí xxx uváděn xx xxxxxxxxx, pokud jsou xxxx látky přidány xx premixů x xxxxx.
(3) Xxxxxxxx Xxxx 79/373/XXX xx xxx 2. xxxxx 1979 x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx trh [5], xxxxxxxxx pozměněná xxxxxxxx Xxxxxx 2000/16/ES [6], x xxxxxxxx Xxxx 93/74/XXX xx xxx 13. xxxx 1993 x xxxxxxxx xxxxxxxx ke xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx [7], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx 96/25/XX [8], xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx.
(4) Xxxx xxx stanoveny xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx.
(5) Xxxxxxxx xxxx směrnice xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx výboru xxx krmiva,
PŘIJALA XXXX XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxx se xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx X, xxxxxxxx X x tryptofanu x xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx metodami xxxxxxxxxxx v xxxxxxx.
Xxxxxx 2
Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx nezbytné xxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 31. srpna 2000. Xxxxxxxxxx x xxxx uvědomí Xxxxxx.
Xxxxx xxxx předpisy xxxxxxxx xx 1. září 2000.
Xxxx opatření xxxxxxx xxxxxxxxx státy musí xxxxxxxxx xxxxx na xxxx směrnici xxxx xxxx xxx takový xxxxx xxxxxx při xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx si xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
Článek 3
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 4
Tato směrnice xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X Bruselu xxx 6. července 2000.
Za Xxxxxx
Xxxxx Xxxxx
xxxx Xxxxxx
[1] Xx. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Úř. věst. X 241, 29.8.1994, x. 1.
[3] Xx. xxxx. X 270, 14.12.1970, x. 1.
[4] Xx. xxxx. X 297, 18.11.1999, x. 8.
[5] Xx. xxxx. X 86, 6.4.1979, x. 30.
[6] Xx. věst. X 105, 3.5.2000, x. 36.
[7] Xx. věst. X 237, 22.9.1993, x. 23.
[8] Xx. věst. X 125, 23.5.1996, x. 35.
XXXXXXX
XXXX A XXXXXXXXX XXXXXXXX A
1. Účel x oblast xxxxxxx
Xxxx xxxxxx xx určena xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx X (retinolu) x xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx A xxxxxxxx xxx-xxxxx-xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxx xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx A xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (XX) na xx. Jedna XX xxxxxxxx aktivitě 0,300 μx all-trans-vitamín A xxxxxxxx xxxx 0,344 μx all-trans-vitamín X xxxxxxx xxxx 0,550 μx xxx-xxxxx-xxxxxxx A xxxxxxxxx.
Xxx stanovitelnosti je 2000 XX xxxxxxxx X/xx.
2. Princip
Vzorek xx xxxxxxxxxxxx etanolovým xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx A xx xxxxxxxxxx do xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xx rozpustí x xxxxxxxx a, xxxxx xx xx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx X xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx vysoce xxxxxx kapalinové xxxxxxxxxxxxxx (XX-XXXX) za xxxxxxx XX nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx tak, xxx nedošlo x xxxxxxxx xxx-xxxxx-xxxxxxx X xxxxxxxx x jeho xxx xxxxxxx.
3. Xxxxxxx
3.1 Xxxxxx, σ = 96 %
3.2 Xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx 40 xx 60 °C
3.3 Xxxxxxx
3.4 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, β = 50 g/100 xx
3.5 Xxxxxx askorbanu xxxxxxx, β = 10 x/100 ml (viz 7.7 xxxxxxxx)
3.6 Xxxxxx xxxxx, Xx2X. x X2X (x = 7–9)
3.6.1 Roztok sulfidu xxxxxxx, x = 0,5 xxx/x x xxxxxxxxx, β = 120 g/l (xxx x = 9) (xxx 7.8 xxxxxxxx)
3.7 Xxxxxx fenolftaleinu, β = 2 x/100 xx x xxxxxxx (3.1)
3.8 2-propanol
3.9 Xxxxxxx xxxx pro HPLC: xxxx xxxxxxxx (3.3) x xxxx, např. 980 + 20 (xxxxxxxx + objemově). Xxxxxxxxx poměr xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx použité xxxxxx.
3.10 Dusík, xxxxxx xxxxxxx
3.11 Xxx-xxxxx-xxxxxxx X xxxxxx, xxxxx čistý, xxxxxxx aktivity, xxxx. 2,80 x 106 XX/x
3.11.1 Zásobní xxxxxx xxx-xxxxx-xxxxxxx X xxxxxxx: Xxxxxxx x xxxxxxxxx xx 0,1 mg 50 mg xxxxxxx xxxxxxxx A (3.11) xx 100 ml xxxxxxx baňky. Xxxxxxxxx xx 2-xxxxxxxxx (3.8) x doplňte po xxxxxx stejným xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx koncentrace tohoto xxxxxxx xx 1400 XX vitamínu X xx xx. Xxxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxx podle 5.6.3.1.
3.12 Xxx-xxxxx-xxxxxxx X xxxxxxxx, xxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx, např. 1,80 x 106 XX/x.
3.12.1 Xxxxxxx xxxxxx xxx-xxxxx-xxxxxxx X palmitátu: Odvažte x xxxxxxxxx na 0,1 xx 80 xx xxxxxxxxx xxxxxxxx X (3.12) do 100 xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx ve 2-xxxxxxxxx (3.8) a xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx 1400 XX xxxxxxxx X xx xx. Přesný xxxxx xxxx xxx stanoven xxxxx 5.6.3.2.
3.13 2,6-Xx-xxxx-xxxxx-4-xxxxxxxxxxxx (XXX) (viz 7.5 xxxxxxxx)
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
4.1 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx
4.2 Xxxxxx z xxxxxxxx xxxx
4.2.1 Baňky x plochým xxxx xxxx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx, 500 ml, xx xxxxxxxxxxx xxxxx
4.2.2 Odměrné xxxxx xx zábrusovými xxxxxxx, xxxxxxxxx, 10, 25, 100 x 500 ml
4.2.3 Xxxxxx xxxxxxx, kuželovité, 1000 xx, xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
4.2.4 Xxxxxxxxxx xxxxx, 250 xx, xx xxxxxxxxxxx hrdly
4.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, délka xxxxxxxx xxxxxx 300 xx, xx zábrusovým hrdlem, x adaptérem xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
4.4 Xxxxxxxx filtrační papír xxx oddělení xxxx, xxxxxx 185 xx (xxxx. Xxxxxxxxxx &xxx; Xxxxxxx 597 XX 1/2)
4.5 XXXX xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx systémem
4.5.1 Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, 250 xx x 4 xx, X18, velikost částic xxxxxx 5 nebo 10 μx xxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx za podmínek XXXX)
4.5.2 UV nebo xxxxxxxxxxxxx detektor x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx
4.6 Xxxxxxxxxxxxxxx x 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx
4.7 Xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.8 Xxxxxxxxx xxxxxxxx (viz xxxxxxx 1) sestávající xx:
4.8.1 Skleněný xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 1x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x zátkou
4.8.2 Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx trubice xxxx xxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx X a xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxx, aby xxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx nálevky.
5. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx X xx xxxxxxx xxxx (XX) světlu x xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xx použití xxxxxx x xxxxxxxx xxxx, nebo nádobí xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx) x xxxxxxx (vypláchněte xxxxxxx). Xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (vyhněte se xxxxxxxx občasným povolením xxxxx).
5.1 Xxxxxxxx vzorku
Rozmělněte xxxxxx tak, xxx xxxxxx xxxxx s xxxxxx 1 xx, xxxxxxx dbejte, aby xxxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xx ztrátám xxxxxxxx X.
5.2 Saponifikace
V xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx X, odvažte x xxxxxxxxx xx 0,01 x, 2 x xx 25 x xxxxxx xx 500 xx xxxxx x xxxxxxx xxxx nebo Xxxxxxxxxxxxx baňky (4.2.1). Xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx kroužení 130 xx xxxxxxx (3.1), xxxxxxxxx 100 xx XXX (3.13), 2 xx roztoku askorbanu xxxxxxx (3.5) x 2 xx roztoku xxxxxxx sodného (3.6). Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (4.3) x baňce x xxxxxxx xxxxx xx xxxxx lázně x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.7). Xxxxxxxx k xxxx x nechejte xxxxxxx xxx minut. Xxxxx xxxxxxxx 25 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.4) xxxx kondenzátor (4.3) x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 25 xxxxx za xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx kondenzátor xxxxxxxxx 20 xx xxxx x xxxxx baňky xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx.
5.3 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx dekantací xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx objemem 250 xx xxxx xx 1000 ml xxxxxx xxxxxxx (4.2.3) xxxx xx extrakčního xxxxxxxxx (4.8). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 25 ml etanolu (3.1) x 100 xx petroléteru (3.2) x převeďte xxxxxxxx xx xxxxxx nálevky xxxx xx extrakčního xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx x etanolu x xxxxxxxxxxxxx roztocích musí xxx xxxxx 2:1. Xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx a nechejte xxxxx dvě xxxxxx.
5.3.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (4.2.3)
Xxxx xx xxxxxx xxxxxxxx (xxx poznámky 7.3), xxxxxxxx xxxxxx petroléteru xx další xxxxxx xxxxxxx (4.2.3). Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx 100 xx xxxxxxxxxxx (3.2) x xxxxxxx 50 xx xxxxxxxxxxx (3.2).
Xxxxxxxx kombinované xxxxxxxx x xxxxxx nálevce xxxxxxx 100 ml xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (aby xx zabránilo xxxxxx xxxxxx) x xxxxx xxxxxxxxxx třepáním x xxxxxxx 100 ml xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxx nezůstává xxxxxxxx xx přídavku xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.7) (čtyřnásobné xxxxxxxxx je obyčejně xxxxxxxxxxx). Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxx (4.4), aby xx odstranila xxxxxxx xxxxxxxxxxxx voda xx 500 xx xxxxxxx xxxxx (4.2.2). Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx 50 xx xxxxxxxxxxx (3.2), doplňte xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.2) x xxxxx xxxxxxxxxxx.
5.3.2 Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx přístroje (4.8)
Xxxx se xxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxxxxxx 7.3), nahraďte xxxxx xxxxxxxxxx válce (4.8.1) xx xxxxxxxxxx vložku (4.8.2) x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx ve xxxxx xxxxxxx X xxxxxxxxxxxx trubice xxx, xxx xxx právě xxx xxxxxxxx rozhraní. Xx xxxxxx tlaku x rozvodu dusíku xx xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx vrchní xxxxxx xxxxxxxxxxx do 1000 xx xxxxxx nálevky (4.2.3) Xxxxxxxx 100 xx xxxxxxxxxxx (3.2) xx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxx. Nechejte vrstvy xxxxxxx se a xxxxxxxx vrchní xxxxxx xx dělící xxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 100 xx xxxxxxxxxxx (3.2), xxxxx dvakrát 50 xx dávkami xxxxxxxxxxx (3.2) a xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx dělící xxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxx je xx xxxxxxx x 5.3.1, x xxxxxxxxxx xxx je xxx xxxxxxx.
5.4 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro XXXX
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (x 5.3.1 xxxx 5.3.2) xx 250 ml baňky xx xxxxx xxxxxx (4.2.4). Xxxxxxx rozpouštědlo xxxxx xx xxxxx xx rotační vakuové xxxxxxx (4.1) xx xxxxxxxxx tlaku při xxxxxxx vodní xxxxx xxxxxxxxxxxxxx 40 °C. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx dusíku (3.10) x xxxxxxx baňku xx rotační xxxxxxx xxxxxxx. Odstraňte zbývající xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (3.10) x ihned xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx (10–100 xx) xxxxxxxx (3.3) (xxxxxxxxxxx xxxxxxxx A xx xxxx xxx x rozsahu 5 XX/xx xx 30 XX/xx).
5.5 Stanovení xxxxxx XXXX
Xxxxxxx X xx xxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx X18 (4.5.1) a xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx XX xxxxxxxxx (325 xx) xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxx: 325 xx, emise: 475 xx) (4.5.2).
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx (xxxx. 20 μx) xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x 5.4 x xxxxxxxxx mobilní xxxx (3.9). Xxxxxxxxx xxxxxxx výšku xxxx (xxxxxx) několika xxxxxxx xxxxxxx stejného xxxxxx x xxxxxxx xxxxx (xxxxxx) xxxxxxxx vstřiků xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (5.6.2).
Podmínky XXXX
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx jako xxxxxxxxxx; xxxxxxx podmínky smějí xxx použity xx xxxxxxxxxxx, xx poskytují xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx pro xxxxxxxxxxx chromatografii (4.5.1): 250 xx x 4 xx, X18, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 5 xxxx 10 μx xxxx ekvivalent
Mobilní xxxx (3.9):&xxxx;&xxxx;&xxxx;&xxxx;&xxxx; Xxxx xxxxxxxx (3.3) x xxxx, xxxx. 980 + 20 (xxxxxxxx + xxxxxxxx)
Xxxxxx xxxx:&xxxx;&xxxx; 1 – 2 xx/xxx.
Xxxxxxxx (4.5.2): XX xxxxxxxx (325 nm) xxxx xxxxxxxxxxxxx detektor (xxxxxxxx: 325 xx/xxxxx: 475 xx)
5.6 Xxxxxxxxx
5.6.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx 20 ml xxxxxxxxx roztoku xxxxxxx X acetátu (3.11.1) xxxx 20 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx X palmitátu (3.12.1) xx 500 xx xxxxx s xxxxxxx xxxx nebo Xxxxxxxxxxxxx xxxxx (4.2.1) a xxxxxxxxxxxx, xxx xx xx xxxxxxx x 5.2, ale bez xxxxxxxx XXX. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.2) xxxxx 5.3 x xxxxxxx xx 500 xx xxxxxxxxxxxx (3.2). Xxxxxxx 100 ml xxxxxx extraktu xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxx 5.4) xxxxx xx sucha, xxxxxxxxx xxxxxxxxx rozpouštědlo proudem xxxxxx (3.10) x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x 10,0 ml xxxxxxxx (3.3). Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx 560 XX xxxxxxxx X/1 xx. Xxxxxx obsah xx xxxxxxx xxxxx 5.6.3.3 Xxxxxxxxxx pracovní xxxxxx xxxx xxx čerstvě xxxxxxxxx před xxxxxxxx.
Xxxxxxxxx 2,0 xx tohoto xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx 20 xx xxxxxxx baňky, xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx (3.3) x promíchejte. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx 56 XX xxxxxxxx X xx xx.
5.6.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků x xxxxxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx 1,0, 2,0, 5,0 x 10,0 xx zředěného xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoku xx sérií 20 xx xxxxxxxxx baněk, xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx (3.3) x xxxxxxxxxxx. Nominální koncentrace xxxxxx roztoků jsou 2,8, 5,6, 14,0 x 28,0 XX xxxxxxxx X xx xx.
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx 20 μx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx píků (xxxxxx). Xx xxxxxxx xxxxxxxxx výšek xxxx (xxxxx) nyrýsujte xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx XX xxxxxxxx (5.6.3.3).
5.6.3 XX xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
5.6.3.1 Xxxxxxx roztok xxxxxxx X xxxxxxx
Xxxxxxxxx 2,0 xx xxxxxxxxx xxxxxxx vitamín X xxxxxxx (3.11.1) xx 50 xx odměrné xxxxx (4.2.2) x xxxxxxx xx značku 2-xxxxxxxxxx (3.8) Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx tohoto xxxxxxx xx 56 XX xxxxxxxx A xx xx. Xxxxxxxxx 3,0 xx tohoto zředěného xxxxxxx xxxxxxx X xxxxxxx xx 25 xx odměrné xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx 2-propanolem (3.8). Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx tohoto xxxxxxx xx 6,72 XX vitamínu X xx xx. Xxxxxx XX spektrum xxxxxx xxxxxxx xxxxx 2-propanolu (3.8) xx xxxxxxxxxxxxxxxx (4.6) xxxx 300 xx x 400 xx. Extinkční xxxxxxx xxxx xxx xxxx 325 nm a 327 xx.
Xxxxxxx obsahu xxxxxxxx X:
XX vitamínu X/xx = X326 × 19,0
X1%1xx xxx xxxxxxx X alkohol = 1 530 při 326 nm xx 2-xxxxxxxxx
5.6.3.2 Xxxxxxx roztok xxxxxxx X xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx 2,0 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx X xxxxxxxxx (3.12.1) xx 50 xx odměrné xxxxx (4.2.2) x xxxxxxx xx xxxxxx 2-xxxxxxxxxx (3.8) Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx tohoto roztoku xx 56 XX xxxxxxxx A xx xx. Xxxxxxxxx 3,0 xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx X xxxxxxxxx xx 25 xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx po xxxxxx 2-xxxxxxxxxx (3.8). Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx 6,72 XX vitamínu A xx xx. Xxxxxx XX spektrum xxxxxx xxxxxxx xxxxx 2-xxxxxxxxx (3.8) xx xxxxxxxxxxxxxxxx (4.6) xxxx 300 xx x 400 xx. Extinkční xxxxxxx xxxx xxx mezi 325 xx x 327 xx.
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx A:
IU vitamínu X/xx = E326 × 19,0
X1%1xx xxx xxxxxxx X xxxxxxx = 957 při 326 xx xx 2-xxxxxxxxx
5.6.3.3 Xxxxxxxxxx pracovní xxxxxxx xxxxxxxx A
Pipetujte 3,0 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxx X, xxxxxxxxxxxx xxxxx 5.6.1 do 50 ml xxxxxxx xxxxx (4.2.2) x xxxxxxx xx značku 2-xxxxxxxxxx (3.8). Xxxxxxxxx 5,0 xx xxxxxx xxxxxxx do 25 xx xxxxxxx xxxxx x doplňte po xxxxxx 2-xxxxxxxxxx (3.8). Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx 6,72 XX xxxxxxxx A xx xx. Xxxxxx XX xxxxxxxx tohoto xxxxxxx xxxxx 2-xxxxxxxxx (3.8) xx xxxxxxxxxxxxxxxx (4.6) xxxx 300 xx x 400 xx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx mezi 325 nm x 327 nm.
Výpočet obsahu xxxxxxxx A:
IU xxxxxxxx X/xx = X325 × 18,3
E1%1cm xxx xxxxxxx X xxxxxxx = 1 821 při 326 nm xx 2-xxxxxxxxx
6. Xxxxxxx výsledků
Ze xxxxxxx xxxxx (xxxxxx) xxxx xxx roztok xxxxxx vitamínu X xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx v XX/xx xx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx grafu (5.6.2).
Xxxxx xxxxxxxx X x x IU/kg ve xxxxxx je xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
x = 500 · β · X2 · 1 000 / X1 · m (XX=xx)
xx xxxxx:
β = xxxxxxxxxxx xxxxxxxx X x roztoku xxxxxx (5.4) x XX/xx
X1 = xxxxx roztoku xxxxxx (5.4) v xx
X2 = xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx v 5.4 x xx
x = xxxxx xxxxxxxx xxxxx v x
7. Xxxxxxxx
7.1 X vzorků x nízkou koncentrací xxxxxxxx A může xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx vsázek (xxxxxxxxxx xxxxxxx: 25 x) xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx XXXX.
7.2 Xxxxxxxx xxxx ve xxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx 2x.
7.3 Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx dělení, xxxxxxxx xxxxxxxxx 10 xx etanolu (3.1), x xxxxxxxxx xxxxxx.
7.4 X rybího tuku x xxxxxxxxx čistých xxxx xx měla xxx xxxx saponifikace xxxxxxxxxxx xx 45–60 xxxxx.
7.5 Xxxxxxx XXX xxxx xxx použit xxxxxxxxxxx.
7.6 Oddělení xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx kolony.
7.7 Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx použito přibližně 150 xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
7.8 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx sodného xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx 50 xx XXXX.
8. Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx mezi xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx x stejného xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 15 % x xxxxxxx xxxxxxxx.
9. Xxxxxxxx xxxxxxxx spolupráce [1]
L: xxxxx xxxxxxxxxx
x: xxxxx xxxxxxxxxxxx hodnot
sr: xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
xX: xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
x: xxxxxxxxxxxxxx
X: xxxxxxxxxxxxxxxxxx
XXx: xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
XXX: xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
|
Xxxxxx |
Xxxxxxxxx krmivo |
Minerální koncentrát |
Bílkovinný xxxxxxxxxx |
Xxxxxx xxx selata |
|
|
L |
13 |
12 |
13 |
12 |
13 |
|
n |
48 |
45 |
47 |
46 |
49 |
|
střed [XX/xx] |
17,02 x 106 |
1,21 x 106 |
537100 |
151800 |
18070 |
|
xx [XX/xx] |
0,51 x 106 |
0,039 x 106 |
22080 |
12280 |
682 |
|
x [IU/kg] |
1,43 x 106 |
0,109 x 106 |
61824 |
34384 |
1910 |
|
CVr [XX/xx] |
3,0 |
3,5 |
4,1 |
8,1 |
3,8 |
|
xX [XX/xx] |
1,36 x 106 |
0,069 x 106 |
46300 |
23060 |
3614 |
|
X [XX/xx] |
3,81 x 106 |
0,193 x 106 |
129640 |
64568 |
10119 |
|
XXX [%] |
8,0 |
6,2 |
8,6 |
15 |
20 |
ČÁST X
XXXXXXXXX VITAMÍNU X
1. Xxxx x oblast xxxxxxx
Xxxx metoda xx xxxxxx xxx stanovení xxxxxxxx E x xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx X xx vyjádřen xxxx xx XX-α-xxxxxxxxx acetátu xx xx. 1 xx XX-α-xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 0,91 xx XX-α-xxxxxxxxxx (xxxxxxx X).
Xxx xxxxxxxxxxxxxxx je 2 xx xxxxxxxx E/kg.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztokem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx X je xxxxxxxxxx xx petroléteru. Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx se xxxxxxxx v xxxxxxxx x, pokud xx xx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx X xx stanoví reverzní xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XX-XXXX) xx použití UV xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Xxxxxxx
3.1 Etanol, σ = 96 %
3.2 Xxxxxxxxxx, rozsah xxxx 40 xx 60 °X
3.3 Xxxxxxx
3.4 Roztok xxxxxxxxx draselného, β = 50 x/100 xx
3.5 Roztok xxxxxxxxx xxxxxxx, β = 10 x/100 xx (xxx 7.7 poznámky)
3.6 Xxxxxx xxxxx, Xx2X. x X2X (x = 7–9)
3.6.1 Xxxxxx xxxxxxx sodného, c = 0,5 mol/l x xxxxxxxxx, β = 120 x/x (xxx x = 9) (viz 7.8 xxxxxxxx)
3.7 Xxxxxx fenolftaleinu, β = 2 x/100 xx v xxxxxxx (3.1)
3.8 Xxxxxxx xxxx xxx XXXX: xxxx metanolu (3.3) x xxxx, xxxx. 980 + 20 (xxxxxxxx + objemově). Xxxxxxxxx xxxxx bude xxxxxxxx charakteristikami xxxxxxx xxxxxx.
3.9 Xxxxx, xxxxxx xxxxxxx
3.10 XX-α-xxxxxxxxx acetát, xxxxx čistý, ověřené xxxxxxxx
3.10.1 Xxxxxxx roztok XX-α-xxxxxxxxx acetátu: Odvažte x xxxxxxxxx xx 0,1 mg, 100 xx DL-α-tokoferol acetátu (3.10) xx 100 xx xxxxxxx baňky. Xxxxxxxxx v xxxxxxx (3.1) x xxxxxxx xx značku stejným xxxxxxxxxxxxx. 1 xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 1 xx XX-α-xxxxxxxxx xxxxxxx. (XX xxxxxxxx – xxx 5.6.1.3; xxxxxxxxxxx – xxx 7.4 poznámky).
3.11 XX-α-xxxxxxxxx, xxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx
3.11.1 Xxxxxxx x xxxxxxxxx xx 0,1 xx, 100 xx XX-α-xxxxxxxxxx (3.10) xx 100 xx odměrné xxxxx. Rozpusťte v xxxxxxx (3.1) x xxxxxxx po xxxxxx xxxxxxx rozpouštědlem. 1 xx tohoto xxxxxxx xxxxxxxx 1 mg XX-α-xxxxxxxxxx. (XX kontrola – xxx 5.6.2.3; xxxxxxxxxxx – xxx 7.4 poznámky).
3.12 2,6-Di-tert-butyl-4-methylphenol (XXX) (viz 7.5 xxxxxxxx)
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
4.1 Rotační vakuová xxxxxxx
4.2 Xxxxxx z xxxxxxxx skla
4.2.1 Baňky x xxxxxxx xxxx xxxx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx, 500 xx, se xxxxxxxxxxx xxxxx
4.2.2 Xxxxxxx xxxxx xx zábrusovými xxxxxxx, xxxxxxxxx, 10, 25, 100 x 500 ml
4.2.3 Dělící xxxxxxx, kuželovité, 1000 xx, xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
4.2.4 Xxxxxxxxxx xxxxx, 250 ml, xx xxxxxxxxxxx xxxxx
4.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, délka izolační xxxxxx 300 mm, xx xxxxxxxxxx xxxxxx, x adaptérem xxx xxxxxxxx trubici xxxxx
4.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx, xxxxxx 185 xx (xxxx. Xxxxxxxxxx &xxx; Xxxxxxx 597 HY 1/2)
4.5 XXXX xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
4.5.1 Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, 250 xx x 4 xx, X18, velikost xxxxxx xxxxxx 5 xxxx 10 μx nebo xxxxxxxxxx
4.5.2 XX xxxx xxxxxxxxxxxxx detektor x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx
4.6 Xxxxxxxxxxxxxxx s 10 mm xxxxxxxxxx xxxxxxxx
4.7 Vodní xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
4.8 Xxxxxxxxx přístroj (xxx xxxxxxx 1) xxxxxxxxxxx xx:
4.8.1 Skleněný odměrný xxxxx o xxxxxx 1x vybavený xxxxxxxxxx xxxxxx a zátkou
4.8.2 Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx ramenem a xxxxxxxxxxxxx trubicí xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx mít xxxxxx xxxxx ve xxxxx xxxxxxx X x xxxxxx xx opačném xxxxx tak, aby xxxxx být horní xxxxxx xxxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx nálevky.
5. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx X je citlivý xxxx (UV) xxxxxx x oxidaci. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (xx použití xxxxxx z opakního xxxx, xxxx nádobí xxxxxxxxxx hliníkovou xxxxx) x xxxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxx). Vzduch xxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxx xxxxxxxx nahrazen xxxxxxx (xxxxxxx xx xxxxxxxx občasným xxxxxxxxx xxxxx).
5.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxx sítem x xxxxxx 1 xx, xxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx k xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx bezprostředně před xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx dojít xx xxxxxxx xxxxxxxx X.
5.2 Saponifikace
V závislosti xx hmotnosti obsahu xxxxxxxx X xxxxxxx x přesností xx 0,01 x, 2 x xx 25 x xxxxxx xx 500 ml xxxxx x plochým xxxx xxxx Erlenmeyerovy xxxxx (4.2.1). Xxxxxxxx xxxxxxxx xx stálého xxxxxxxx 130 ml etanolu (3.1), xxxxxxxxx 100 xx BHT (3.12), 2 ml xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.5) x 2 xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (3.6). Xxxxxxxx kondenzátor (4.3) x xxxxx x xxxxxxx xxxxx xx xxxxx lázně x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.7). Zahřejte k xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx pět minut. Xxxxx xxxxxxxx 25 xx roztoku xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.4) přes xxxxxxxxxxx (4.3) x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 25 xxxxx xx xxxxxxx míchání xxx xxxxxxx proudem dusíku. Xxxxx vypláchněte xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 20 xx xxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx.
5.3 Extrakce
Převeďte xxxxxxxxx saponifikovaný xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 250 xx xxxx xx 1000 xx dělící nálevky (4.2.3) xxxx do xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.8). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx baňku xxxxxxxx 25 ml xxxxxxx (3.1) x 100 ml xxxxxxxxxxx (3.2) a převeďte xxxxxxxx do xxxxxx xxxxxxx nebo xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx xxx xxxxx 2:1. Xxxxxxxx xxxxx dvě xxxxxx x nechejte xxxxx xxx minuty.
5.3.1 Xxxxxxxx x použitím dělící xxxxxxx (4.2.3)
Xxxx se xxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxxxxxx 7.3), xxxxxxxx xxxxxx petroléteru xx xxxxx dělící xxxxxxx (4.2.3). Opakujte xxxx xxxxxxxx dvakrát 100 xx xxxxxxxxxxx (3.2) x xxxxxxx 50 xx xxxxxxxxxxx (3.2).
Promyjte xxxxxxxxxxx extrakty x xxxxxx nálevce dvakrát 100 ml xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx) x potom xxxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxx 100 xx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx fenolftaleinu (3.7) (čtyřnásobné promývání xx obyčejně xxxxxxxxxxx). Xxxxxxxxxxxx extrakt přes xxxxx skládaný xxxxx xxx dělení xxxx (4.4), xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xx 500 xx xxxxxxx xxxxx (4.2.2). Vypláchněte xxxxxx xxxxxxx x xxxxx 50 xx xxxxxxxxxxx (3.2), xxxxxxx po xxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.2) x xxxxx xxxxxxxxxxx.
5.3.2 Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx přístroje (4.8)
Když xx vrstvy xxxxxxxx (xxx xxxxxxxx 7.3), xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.8.1) xx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.8.2) x xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx ve xxxxx xxxxxxx X xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx, xxx xxx právě xxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxx tlaku x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx ramene, xxxxxxxx xxxxxx vrstvu petroléteru xx 1000 ml xxxxxx xxxxxxx (4.2.3) Xxxxxxxx 100 ml xxxxxxxxxxx (3.2) xx xxxxxxxxxx válce, zazátkujte x dobře xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx oddělit xx x xxxxxxxx xxxxxx vrstvu xx xxxxxx nálevky jako xxxxxxx. Opakujte xxxxxx xxxxxxxx dalšími 100 xx xxxxxxxxxxx (3.2), xxxxx dvakrát 50 xx dávkami xxxxxxxxxxx (3.2) x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx nálevky.
Promyjte kombinované xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx, xxx xx xx xxxxxxx x 5.3.1, x pokračujte jak xx xxx xxxxxxx.
5.4 Xxxxxxxx xxxxxxx vzorku xxx XXXX
Xxxxxxxxxxx alikvotní xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (x 5.3.1 xxxx 5.3.2) xx 250 xx xxxxx ve xxxxx hrušky (4.2.4). Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (4.1) xx xxxxxxxxx xxxxx při xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx 40 °X. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx tlak xxxxxxxxxxx xxxxxx (3.9) a xxxxxxx baňku od xxxxxxx vakuové xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (3.9) x xxxxx rozpusťte xxxxxx ve známém xxxxxx (10–100 xx) xxxxxxxx (3.3) (koncentrace XX-α-xxxxxxxxxx by xxxx xxx v xxxxxxx 5 μg/ml xx 30 μx/xx).
5.5 Xxxxxxxxx xxxxxx XXXX
Xxxxxxx X xx xxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx X18 (4.5.1) x xxxxxxxxxxx je xxxxxx xxxxxx fluorescenčního xxxxxxxxx (xxxxxxxx: 295 xx, xxxxx: 330 nm) xxxx XX xxxxxxxxx (292 xx) (4.5.2).
Vstříkněte xxxxxxxxx xxxx (např. 20 μx) xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x 5.4 a xxxxxxxxx xxxxxxx fází (3.8). Xxxxxxxxx xxxxxxx výšky xxxx (xxxxxx) několika xxxxxxx xxxxxxx stejného xxxxxx a xxxxxxx xxxxx (xxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxx kalibračních xxxxxxx (5.6.2).
Xxxxxxxx XXXX
Xxxxxxxxxxx podmínky xxxx xxxxxxxxxxx jako xxxxxxxxxx; ostatní podmínky xxxxx být xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxx kapalinovou chromatografii (4.5.1): 250 xx x 4 xx, X18, velikost částic xxxxxx 5 xxxx 10 μx xxxx xxxxxxx
Xxxxxxx fáze (3.8): Xxxx xxxxxxxx (3.3) x xxxx, xxxx. 980 + 20 (xxxxxxxx + xxxxxxxx)
Xxxxxx xxxx: 1–2 xx/xxx.
Xxxxxxxx (4.5.2): Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx: 295 xx/xxxxx: 330 xx) xxxx XX detektor (292 xx)
5.6 Xxxxxxxxx (XX-α-xxxxxxxxx xxxxxxx nebo XX-α-xxxxxxxxxx)
5.6.1 Xxxxxxxx DL-α-tokoferol xxxxxxx
5.6.1.1 Xxxxxxxx standardních xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx 25 xx xxxxxxxxx xxxxxxx XX-α-xxxxxxxxx xxxxxxx (3.10.1) xx 500 xx xxxxx x xxxxxxx xxxx xxxx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx (4.2.1) a xxxxxxxxxxxx, jak xx xx popsáno x 5.2. Následně xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.2) podle 5.3 a xxxxxxx xx 500 xx xxxxxxxxxxxx. Odpařte 25 xx tohoto extraktu xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxx 5.4) xxxxx xx sucha, xxxxxxxxx zbývající xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (3.9) x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x 25,0 xx xxxxxxxx (3.3). Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx je 45,5 μx XX-α-xxxxxxxxxx xx xx, xxxxxxxxxx 50 μx XX-α-xxxxxxxxx xxxxxxx xx xx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
5.6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku x xxxxxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx 1,0, 2,0, 4,0 x 10,0 xx standardního xxxxxxxxxx roztoku xx xxxxx 20 xx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx (3.3) x promíchejte. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx jsou 2,5, 5,0, 10,0 a 25,0 μg/ml DL-α-tokoferol xxxxxxx, xx. 2,28, 4,55, 9,10 x 22,8 μg/ml DL-α-tokoferolu.
Vstříkněte xxxxxxxxxx 20 μx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx (plochy). Xx použití xxxxxxxxx xxxxx xxxx (xxxxx) xxxxxxxxx kalibrační graf.
5.6.1.3 XX xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx DL-α-tokoferol acetátu (3.10.1)
Xxxxxxxx 5,0 xx xxxxxxxxx roztoku XX-α-xxxxxxxxx xxxxxxx (3.10.1) na 25,0 ml xxxxxxxx x xxxxxx XX xxxxxxxx tohoto xxxxxxx xxxxx etanolu (3.1) xx spektrofotometru (4.6) xxxx 250 xx x 320 xx.
Xxxxxxxxx xxxxxxx xx mělo xxx xxx 284 xx:
X1%1xx = 43,6 xxx 284nm v xxxxxxx
Xxx xxxxx ředění xx xxxx být xxxxxxx extinkce 0,84 xx 0,88.
5.6.2 Xxxxxxxx XX-α-xxxxxxxxxx
5.6.2.1 Xxxxxxxx standardního xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx 2,0 xx zásobního xxxxxxx XX-α-xxxxxxxxxx (3.11.1) xx 50 xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxx (3.3) x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx roztoku xx 40 μx XX-α-xxxxxxxxxx na xx, xxxxxxxxxx 44,0 μg XX-α-xxxxxxxxx xxxxxxx na xx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx připraven xxxx xxxxxxxx.
5.6.2.2 Příprava xxxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx 1,0, 2,0, 4,0 a 10,0 xx xxxxxxxxxxxx pracovního xxxxxxx do xxxxx 20 xx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx (3.3) x promíchejte. Nominální xxxxxxxxxxx těchto xxxxxxx xxxx 2,0, 4,0, 8,0 a 20,0 μx/xx DL-α-tokoferolu, xx. 2,20, 4,40, 8,79 x 22,0 μx/xx XX-α-xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxx několikrát 20 μx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku x xxxxxxxx střední xxxxx xxxx (xxxxxx). Xx xxxxxxx středních xxxxx xxxx (ploch) narýsujte xxxxxxxxxx xxxx.
5.6.2.3 UV xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx roztoku XX-α-xxxxxxxxxx (3.11.1)
Xxxxxxxx 2,0 xx xxxxxxxxx xxxxxxx XX-α-xxxxxxxxxx (3.11.1) xx 25,0 ml xxxxxxxx x xxxxxx UV xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx (3.1) xx xxxxxxxxxxxxxxxx (4.6) xxxx 250 nm x 320 nm. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxx xxx 292 xx:
X1%1xx = 75,8 při 292xx x xxxxxxx
Xxx tomto xxxxxx xx měla xxx získána xxxxxxxx 0,6.
6. Výpočet xxxxxxxx
Xx xxxxxxx výšky (xxxxxx) xxxx pro roztok xxxxxx xxxxxxxx X xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx v μx/xx (xxxxxxxx xxxx α-xxxxxxxxx xxxxxx) xx vztahu xx xxxxxxxxxxxx grafu (5.6.1.2 xxxx 5.6.2.2).
Obsah xxxxxxxx X w x mg/kg xx xxxxxx je xxx xxxxxxxxxxx rovnicí:
w = 500 · β · X2 / X1 · m [xx/xx]
xx xxxxx:
β = xxxxxxxxxxx xxxxxxxx X x xxxxxxx vzorku (5.4) x μx/xx
X1 = objem xxxxxxx xxxxxx (5.4) v xx
X2 = objem xxxxxxx odebraných v 5.4 x xx
x = xxxxx zkušební xxxxx x x
7. Xxxxxxxx
7.1 U xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx E může xxx užitečné spojit xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (hmotnostní xxxxxxx: 25 g) xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx XXXX.
7.2 Množství xxxx xx vzorku xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 2x.
7.3 Xxxxx xx neobjeví xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx 10 xx xxxxxxx (3.1), x xxxxxxxxx xxxxxx.
7.4 Xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx roztoku XX-α-xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx XX-α-xxxxxxxxxx podle 5.6.1.3 xxxx 5.6.2.3 xxxxxxxx xx xxxxxxx (3.10.1 xxxx 3.10.2) xxxxxxxxx 10 xx XXX (3.12) x xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx (xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx).
7.5 Xxxxxxx BHT může xxx použit xxxxxxxxxxx.
7.6 Xxxxxxxx α-, β-, χ- a δ xxxxxxxxxx je možné x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx.
7.7 Namísto xxxxxxxxx sodného xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx 150 xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
7.8 Namísto roztoku xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx použito xxxxxxxxx 50 mg XXXX.
8. Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx paralelních xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x stejného xxxxxx nesmí xxxxxxxxx 15 % z xxxxxxx výsledku.
9. Výsledky xxxxxxxx xxxxxxxxxx [2]
X: xxxxx xxxxxxxxxx
x: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx
xx: standardní xxxxxxxx opakovatelnosti
sR: xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
x: opakovatelnost
R: xxxxxxxxxxxxxxxxxx
XXx: koeficient xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
XXX: xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
|
Xxxxxx |
Xxxxxxxxx xxxxxx |
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
Xxxxxx xxx xxxxxx |
|
|
X |
12 |
12 |
12 |
12 |
12 |
|
x |
48 |
48 |
48 |
48 |
48 |
|
xxxxx [xx/xx] |
17 380 |
1 187 |
926 |
315 |
61,3 |
|
xx [xx/xx] |
384 |
45,3 |
25,2 |
13,0 |
2,3 |
|
x [xx/xx] |
1 075 |
126,8 |
70,6 |
36,4 |
6,4 |
|
XXx [%] |
2,2 |
3,8 |
2,7 |
4,1 |
3,8 |
|
xX [xx/xx] |
830 |
65,0 |
55,5 |
18,9 |
7,8 |
|
X [mg/kg] |
2 324 |
182,0 |
155,4 |
52,9 |
21,8 |
|
XXX [%] |
4,8 |
5,5 |
6,0 |
6,0 |
12,7 |
XXXX X
XXXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxx a xxxxxx použití
Tato xxxxxx xx určena pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx tryptofanu x xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxx X- x X- xxxxxxx.
2. Xxxxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx hydrolyzován za xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxx 110 °C xx 20 hodin. Xx xxxxxxxxx je xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
Xxx stanovení xxxxxxx tryptofanu xx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x přítomnosti xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxxx x hydrolyzátu xxxx xxxxxxxx pomocí HPLC x xxxxxxxxxxxxx detekcí.
3. Xxxxxxx
3.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx, xxxx voda xxxxxxx kvality xxxx xxx používána (vodivost &xx; 10 μX/xx)
3.2 Xxxxxxxxxx látka: tryptofan (xxxxxxx/xxxxx > 99 %), xxxxxx xxx xxxxxx přes xxxxxxxx xxxxxxx
3.3 Xxxxxxx standardní xxxxx: α-methyl-tryptofan (čistota/obsah &xx; 99 %), xxxxxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx
3.4 Xxxx-xxxxxx xxxxxxxxx barnatého (xxxx xxx xxxxx, xxx xxxxx Xx(XX)2. 8 X2X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxx xx zabránilo xxxxxx XxXX3, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx) (xxx xxxxxxxx 9.3)
3.5 Xxxxxxxx xxxxx
3.6 Kyselina xxxx-xxxxxxxxxx, x = 85 %
3.7 Kyselina xxxxxxxxxxxxxx, x20 = 1,19 x/xx
3.8 Xxxxxxx, XXXX xxxxxx
3.9 Xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx 40–60 °X
3.10 Roztok hydroxidu xxxxxxx, c = 1 mol/l:
Rozpusťte 40,0 x NaOH (3.5) xx xxxx a xxxxxxx xx 1 x xxxxx (3.1).
3.11 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, c = 6 xxx/x:
Xxxxxxx 492 xx HCL (3.7) a xxxxxxx xx 1 x xxxxx.
3.12 Kyselina xxxxxxxxxxxxxx, x = 1 xxx/x:
Xxxxxxx 82 xx XXX (3.7) x xxxxxxx xx 1 x xxxxx.
3.13 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, x = 0,1 xxx/x:
Xxxxxxx 8,2 xx HCL (3.7) x xxxxxxx xx 1 x xxxxx.
3.14 Xxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxx, x = 0,5 xxx/x:
Xxxxxxx 34 xx xxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxx (3.6) x xxxxxxx do 1 x xxxxx (3.1)
3.15 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx tryptofanu (3.2), c = 2,50 μmol/ml:
Rozpusťte 0,2553 x tryptofanu (3.2) x 500 xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.13) x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (3.13). Skladujte xxx –18 xX po xxxx xxxxxxxxx čtyř xxxxx.
3.16 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, x = 2,50 μmol/ml:
Rozpusťte 0,2728 x α-methyl-tryptofanu (3.3) v 500 xx xxxxxxx baňce x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.13) x xxxxxxx xx xxxxxx kyselinou xxxxxxxxxxxxxxx (3.13). Xxxxxxxxx xxx –18 oC xx dobu maximálně xxxx xxxxx.
3.17 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztok xxxxxxxxxx x xxxxxxx standard:
Vezměte 2,00 ml koncentrovaného xxxxxxx tryptofanu (3.15), x 2,00 ml xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx vnitřního xxxxxxxxx (α-methyl-tryptofan) (3.16). Xxxxxx vodou (3.1) x xxxxxxxxx (3.8) xx přibližně xxxxxx xxxxx x xx xxxxxxxxx xxxxxxx koncentraci xxxxxxxx (10–30 %) xxxx xxxxxxx hydrolyzát.
Tento xxxxxx musí být xxxxxxxxxxx čerstvý xxxx xxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
3.18 Kyselina octová
3.19 1,1,1-xxxxxxxxx-2-xxxxxx-2-xxxxxxxx
3.20 Ethanolamin &xx; 98 %
3.21 Roztok 1 x 1,1,1-xxxxxxxxx-2-xxxxxx-2-xxxxxxxxx (3.19) xx 100 xx xxxxxxxx (3.8).
3.22 Xxxxxxx fáze xxx XXXX: 3,00 x xxxxxxxx xxxxxx (3.18) + 900 xx xxxx (3.1) + 50,0 ml roztoku (3.21) 1,1,1-trichloro-2-methyl-2-propanolu (3.19) x xxxxxxxx (3.8) (1x/100 xx). Xxxxxxx xX xx 5 x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.20). Doplňte do 1000 xx vodou (3.1).
4. Přístroje a xxxxxxx
4.1 Xxxxxxxx xxx XXXX xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
4.2 Kolona xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, 125 xx x 4 xx, X18, velikost xxxxxx xxxxxx 3 μx nebo xxxxxxxxxx
4.3 xX metr
4.4 Polypropylenová xxxxx, objem 125 xx, se xxxxxxx xxxxxx a šroubovacím xxxxxxxx
4.5 Membránový xxxxx, 0,45 μx
4.6 Autokláv, 110 (+ 2) °X, 1,4 (+ 0,1) xxxx
4.7 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx
4.8 Xxxxxx xxxxx
5. Xxxxxx
5.1 Příprava xxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxx tak, xxx xxxxxx sítem x xxxxxx 0,5 xx. Xxxxxx, xxxxx xxxx vysokou vlhkost, xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx usušeny xxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 50 °C, xxxx xxxxxxxxx. Vzorky x xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxx mletím xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.9).
5.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx tryptofanu (xxxxxxx)
Xxxxxxx x xxxxxxxxx xx 1 xx xxxxxxxxx xxxxxxxx (1–5 x) xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx 100 ml xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, x = 0,1 xxx/x (3.13) x 5,00 xx koncentrovaného xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.16). Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx 60 xxxxx x xxxxxxxx mechanické třepačky, xxxx xxxxxxxxxxxx míchadla (4.7). Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx 10,0 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx do xxxxxxx. Xxxxxxxx 5 ml xxxxxxxx xxxx-xxxxxxxxxx, x = 0,5 xxx/x (3.14). Xxxxxxx pH xx 3,0 xx xxxxxxx xxxxxxxxx sodného, x = 1,0 xxx/x (3.10). Xxxxxxxx xxxxxxxxx metanolu (3.8), xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx 10 a 30 % xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx o xxxxxxx xxxxxx x zřeďte xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxx stejný xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (3.17)).
Před xxxxxxxxxxx xx kolony HPLC xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx přes xxxxxxxxxx xxxxx 0,45 μx (4.5). Provádějte xxxxxxxxxxxxxx xxxxx 5.4.
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxx xxxxxx slunečním xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxx analyzovat xxxxxxxx xxxxxx den, mohou xxx xxxxxxxxxx xxx 5 °X xx xxxxxxxxx xxxx xxx xxx.
5.3 Xxxxxxxxx celkového xxxxxxxxxx (hydrolyzát)
Odvažte s xxxxxxxxx na 0,2 xx xx 0,1 xx 1 x xxxxxxxxxxxx vzorku (5.1) xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx (4.4). Xxxxxxxx dávka xxxxxx by xxxx xxx obsah xxxxxx xxxxx 10 xx. Xxxxxxxx 8,4 x xxxx-xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.4) x 10 xx vody. Promíchejte xx xxxxxxx xxxxxx (4.8) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.7). Ponechejte xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxx nádoby 4 xx xxxx. Našroubujte xxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxx. Přeneste xx xxxxxxxxx (4.6) x xxxxxx vodou x xxxxx xx 30–60 xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxx 110 (+ 2) °C xx xxxx 20 xxxxx.
Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx snižte xxxxxxx xxxxx xxx 100 °X. Aby xxxxxxx xx krystalizaci Xx(XX)2. 8 X2X, xxxxxxxx xx horké xxxxx 30 ml xxxx x xxxxxxxx xxxxxxx. Mírně xxxxxxxxxxxxx, xxxx míchejte. Přidejte 2,00 xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx standardu (α-xxxxxx-xxxxxxxxx) (3.16). Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx/xxxxxx xxxxx po xxxx 15 minut.
Potom přidejte 5 ml xxxx-xxxxxxxxxx xxxxxxxx, x = 0,5 xxx/x (3.14). Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx lázni a xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, x = 6 xxx/x (3.11) xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xX xx 3,0 x použitím XXX, x = 1 xxx/x (3.12). Přidejte xxxxxxxxx metanolu, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx mezi 10 x 30 % xxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx odměrné xxxxx x xxxxxxx objemu x zřeďte vodou xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx chromatografii (xxxxxxxxx 100 xx). Xxxxxxxx metanolu by xxxxx způsobit xxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx XXXX xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx 0,45 μx (4.5). Xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx podle xxxxxxxx 5.4.
Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x hydrolyzáty xxxx přímým xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx hydrolyzáty xxxxxx den, xxxxx xxx xxxxxxxxxx při 5 °C po xxxxxxxxx dobu xxx xxx.
5.4 Xxxxxxxxx pomocí XXXX
Xxxxxxxxxxx podmínky xxx xxxxxxxxxxx vymývání xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx; xxxxxxx podmínky xxxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (viz xxxx xxxxxxxx 9.1 x 9.2):
Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (4.2): 125 xx x 4 mm, X18, xxxxxxxx částic xxxxxx 3 μx nebo xxxxxxxxxx
Xxxxxxx kolony Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxx (3.22): 3,00 x kyseliny xxxxxx (3.18) + 900 ml vody (3.1) + 50,0 xx roztoku (3.21) 1,1,1-xxxxxxxxx-2-xxxxxx-2-xxxxxxxxx (3.19) x xxxxxxxx (3.8) (1 x/100 xx). Xxxxxxx xX na 5,00 x použitím xxxxxxxxxxxx (3.20). Xxxxxxx xx 1000 xx xxxxx (3.1)
Xxxxxx xxxx:&xxxx;&xxxx; 1 xx/xxx.
Xxxxxxx xxxx xxxx: xxxxxxxxx 34 minut
Detekční xxxxxx xxxxx: xxxxxxxx: 280 xx, emise: 356 nm
Vstřikový xxxxx: 20 μx
6. Xxxxxxx xxxxxxxx
X × X × X × X × E × XX / X × X × H × 10&xxxx;000 × W = x xxxxxxxxxx xx 100x xxxxxx
X = xxxxxx xxxx xxxxxxxxx standardu, xxxxxxx xxxxxxxxxxxx standardu (3.17)
X = xxxxxx píku xxxxxxxxxx, extraktu (5.2) xxxx hydrolyzátu (5.3)
X = xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.15) (2 xx) přidaný xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.17)
X = koncentrace xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (3.15) x μxxxxxx/xx (= 2,50) xxxxxxxxx xx kalibračního xxxxxxx (3.17)
X = xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx vnitřního xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.16) x xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx (5.2) (= 5,00 xx) xxxx xx xxxxxxxxxxx (5.3) (= 2,00 xx)
X = xxxxxx xxxx xxxxxxxxx standardu, xxxxxxxx (5.2) xxxx hydrolyzátu (5.3)
X = plocha xxxx xxxxxxxxxx, kalibračního xxxxxxxxxxxx roztoku (3.17)
X = xxxxx koncentrovaného xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.16) x ml (= 2,00) xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.17)
X = xxxxxxxx xxxxxx v x (xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx x/xxxx xxxxxxxx)
XX = xxxxxxxxxx hmotnost tryptofanu (= 204,23)
7. Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx výsledky xxxx xxxxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 10 % x xxxxxxx xxxxxxxx.
8. Výsledky xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx (xxxxxx vzájemné xxxxxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx xxx, xx byly tři xxxxxx xxxxxxxxxxx ve 12 laboratořích x xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx (5) xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx vzorku. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
X: xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
x: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx zadržených eliminačních xxxxxxxxx výsledků (identifikované Xxxxxxx-Xxxxxxxxx xxxxxx)
xx: xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
xX: xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
x: opakovatelnost
R: xxxxxxxxxxxxxxxxxx
XXx: xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, %
XXX: koeficient xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx, %
|
Xxxxxx 1 Krmivo xxx xxxxxxx |
Xxxxxx 2 Xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx X-xxxxxxxxxxx |
Xxxxxx 3 Xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx |
|
|
X |
12 |
12 |
12 |
|
x |
50 |
55 |
50 |
|
xxxxx [x/xx] |
2,42 |
3,40 |
4,22 |
|
xx [x/xx] |
0,05 |
0,05 |
0,08 |
|
x [x/xx] |
0,14 |
0,14 |
0,22 |
|
XXx [%] |
1,9 |
1,6 |
1,9 |
|
xX [x/xx] |
0,15 |
0,20 |
0,09 |
|
X [x/xx] |
0,42 |
0,56 |
0,25 |
|
XXX [%] |
6,3 |
6,0 |
2,2 |
Xxxxx studijní spolupráce Xxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx) byla xxxxxxxxxx xxx, že xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx ve 13 xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx (5) xxxxxxx byly xxxxxxxxx x každého xxxxxx. Xxxxxxxx jsou xxxxxxx x následující xxxxxxx:
X: počet laboratoří xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
x: xxxxx xxxxxxxxxxxx hodnot xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx výsledků (xxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxx-Xxxxxxxxx xxxxxx)
xx: xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
xX: xxxxxxxxxx xxxxxxxx reprodukovatelnosti
r: xxxxxxxxxxxxxx
X: reprodukovatelnost
CVr: xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, %
XXX: xxxxxxxxxx variace reprodukovatelnosti, %
|
Xxxxxx 4 Xxxx xxxxxxx se xxxxx |
Xxxxxx 5 Xxxx xxxxxxx xx xxxxx (= xxxxxx 4) s xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (0,457 x/xx) |
|
|
X |
12 |
12 |
|
x |
55 |
60 |
|
xxxxx [g/kg] |
0,391 |
0,931 |
|
sr [g/kg] |
0,005 |
0,012 |
|
r [x/xx] |
0,014 |
0,034 |
|
XXx [%] |
1,34 |
1,34 |
|
xX [x/xx] |
0,018 |
0,048 |
|
X [x/xx] |
0,050 |
0,134 |
|
XXX [%] |
4,71 |
5,11 |
Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx byla xxxxxxxxxx xxx, xx xxxxx xxxxxx byly xxxxxxxxxxx až x xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx tabulce:
L: xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx výsledky
n: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx eliminačních odlehlých xxxxxxxx (identifikované Xxxxxxx-Xxxxxxxxx xxxxxx)
xx: xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
xX: standardní xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
x: opakovatelnost
R: xxxxxxxxxxxxxxxxxx
XXx: xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, %
XXX: xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx, %
|
Xxxxxx 1 Xxxxxx xxxxxx pro xxxxxxx (CRM 117) |
Xxxxxx 2 Xxxxx-xxxxx rybí xxxxxx (XXX 118) |
Vzorek 3 Sójová xxxxxx (XXX 119) |
Xxxxxx 4 Xxxxxx odstředěné xxxxx (XXX 120) |
|
|
X |
7 |
7 |
7 |
7 |
|
x |
25 |
30 |
30 |
30 |
|
xxxxx [x/xx] |
2,064 |
8,801 |
6,882 |
5,236 |
|
xx [x/xx] |
0,021 |
0,101 |
0,089 |
0,040 |
|
x [g/kg] |
0,059 |
0,283 |
0,249 |
0,112 |
|
CVr [%] |
1,04 |
1,15 |
1,30 |
0,76 |
|
xX [x/xx] |
0,031 |
0,413 |
0,283 |
0,221 |
|
X [x/xx] |
0,087 |
1,156 |
0,792 |
0,619 |
|
XXX [%] |
1,48 |
4,69 |
4,11 |
4,22 |
9. Xxxxxxxx
9.1 Xxxxxxxxxxx specielní xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx mohou xxxxxxxxxx xxxxx rozdělení xxxx xxxxxxxxxxx x α-xxxxxx-xxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx čistěním xxxxxx:
|
Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx chromatografii: |
125 xx x 4 xx, X18, xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx 5 μx xxxx xxxxxxx |
||
|
Xxxxxxx xxxxxx: |
32 °X |
||
|
Xxxxxxx xxxx: |
X: 0,01 xxx/x KH2PO4/metanol, 95 + 5 (xxxxxxxx + xxxxxxxx) X: Xxxxxxx |
||
|
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx: |
0 xxx. |
100 % X |
0 % X |
|
15 xxx. |
100 % X |
0 % X |
|
|
17 min. |
60 % X |
40 % B |
|
|
19 xxx. |
60 % X |
40 % X |
|
|
21 xxx. |
100 % A |
0 % X |
|
|
33 min. |
100 % X |
0 % X |
|
|
Xxxxxx xxxx: |
1,2 xx/xxx. |
||
|
Xxxxxxx doba xxxx: |
xxxxxxxxx 33 xxxxx |
||
9.2 Xxxxxxxxxxxxxx se bude xxxxxx podle xxxx XXXX xxxxxx x xxxxxxxxx plnícího xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx schopen xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx čáru xxxx tryptofanem x xxxxxxxx standardem. Xxxxx xx xxxxxxxx, xxx xxxx degradační xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx od xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx standardu xx xxxx být xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxx se xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx standardu pro xxxxxxxxx. Je xxxxxxxx, xxx xxxx běhu xxxx dostatečně xxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxx píky xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
X xxxxxxx xxxxxxxx, by měl xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxx x xxxxxxxxxx (normální) koncentrací xxxxxxxxx standardu x xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Je xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx XXXX/xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxx (xxxx) buď tryptofanu, x/xxxx vnitřního standardu xx (xxxx) xxxxxx xxxx (xxxx) xxxx xxxxxx vysoký (vysoké), xxxx by xxx xxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
9.3 Hydroxid xxxxxxx
Xxxxxx xx stává xxxxxxxx xxxxxxx hůře xxxxxxxxx. Xx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx roztoku xxx xxxxxxxxx xxxxxx XXXX, což xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx.
[1] Řízené xxxxxxxx skupinou xxx xxxxxx Xxxxxxx Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx- und Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (VDLUFA).
[2] Řízené xxxxxxxx skupinou pro xxxxxx Xxxxxxx Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxx- xxx Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (VDLUFA).