Plné znění - 31999L0076

Xxxxxxxx Xxxxxx 1999/76/XX

xx xxx 23. xxxxxxxx 1999,

xxxxxx se stanoví xxxxxxxxxx metoda Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx lasalocidu xxxxxxx x xxxxxxxx

(Xxxx x významem xxx XXX)

XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,

x xxxxxxx xx Xxxxxxx x založení Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,

x xxxxxxx na xxxxxxxx Xxxx 70/373/XXX xx xxx 20. xxxxxxxx 1970 o xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx krmiv, [1] xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x přistoupení Xxxxxxxx, Xxxxxx x Xxxxxxx, x zejména xx xxxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx,

xxxxxxxx k xxxxx xxxxxxx:

(1) Směrnice 70/373/EHS xxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxx krmiv za xxxxxx xxxxxxxxx xxxx, xxx splňují xxxxxxxxx xxxxxxxxx právními x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx jakosti x xxxxxxx, xx xxxxxxx xx použití xxxxx Xxxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx x xxxxxx.

(2) Xxxxxxxx Rady 70/524/XXX ze dne 23. xxxxxxxxx 1970 x xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx [2], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx Xxxxxx (XX) č. 866/1999 [3], xxxxxxx, xxx obsah lasalocidu xxxxxxx musí xxx xxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx jsou xxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx.

(3) Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx kontrolu xxxxxx xxxxx.

(4) Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx jsou x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx výboru xxx xxxxxx,

XXXXXXX TUTO XXXXXXXX:

Xxxxxx 1

Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x příloze xxxx směrnice.

Xxxxxx 2

Členské xxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx nezbytné pro xxxxxxxx souladu s xxxxx xxxxxxxx nejpozději xx 31. xxxxx 2000. Xxxxxxxxxx x xxxx uvědomí Xxxxxx.

Xxxxx xxxx předpisy xxxxxxxx xx 1. xxxxx 2000.

Xxxx xxxxxxxx přijatá xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx směrnici xxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx úředním xxxxxxxxx. Xxxxxx odkazu xx xxxxxxx xxxxxxx státy.

Xxxxxx 3

Tato xxxxxxxx xxxxxxxx x platnost xxxxxxxx dnem po xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxx 4

Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx členským xxxxxx.

X Xxxxxxx xxx 23. xxxxxxxx 1999.

Xx Xxxxxx

Xxxxx Fischler

člen Xxxxxx

[1] Úř. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.

[2] Úř. xxxx. X 270, 14.12.1970, x. 1.

[3] Xx. xxxx. X 108, 27.4.1999, x. 20.

XXXXXXX

XXXXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXX

Xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx

1. Xxxx a xxxxxx použití

Tato xxxxxx xxxxxx xx stanovení xxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx x premixech. Xxxxxxx xxxxxxx je 5 mg/kg, xxxxxxx xxxxxxxxx 30 xx/xx.

2. Xxxxxxx

Xxxxxxxxx sodný xx xxxxxxxxxx ze xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x stanoven xxxxxx xxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx (Xxxx Performance Liquid Xxxxxxxxxxxxxx, HPLC) na xxxxxxxx fázi xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

3. Xxxxxxx

3.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx (XX₂XX₄)

3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, x = 85 %

3.3 Kyselina xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, ρ= 20 %

Xxxxxxxxx 23,5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2.) xx 100 xx xxxx

3.4 6-methyl-2-heptylamin (1,5-xxxxxxxxxxxxxxxxx), x = 99 %

3.5 Xxxxxxxx, XXXX xxxxxxx

3.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, ρ₂₀ = 1,19 x/xx

3.7 Roztok xxxxxxxxxxx xxxxx, x = 0,01 xxx/x

Xxxxxxxxx 1.36 x XX₂XX₄ (3.1) x 500 xx xxxx (3.11), přidat 3,5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2) x 10,0 xx 6-xxxxxx-2-xxxxxxxxxxx (3.4). Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx ortofosforečné (3.3) xxxxxxxx xX xx 4,0 x xxxxxxxx xx 1000 xx xxxxx (3.11).

3.8 Xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xx xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx 1000 xx xxxxxxx 5,0 xx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (3.6), xxxxxxx xx značku xxxxxxxxxx (3.5) a promíchat. Xxxxx xxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxxx.

3.9 HPLC xxxxxxx xxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx 5 + 95 (xxx. + xxx.)

Xxxxxxxxx 5 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (3.7) x 95 ml xxxxxxxxx (3.5).

3.10 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx sodný xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, C₃₄H₅₃O₈ (xxxxx sůl xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx), E763

3.10.1 Xxxxxxx xxxxxx lasalocidu xxxxxxx, 500 x/xx

X xxxxxxxxx 0,1 mg xxxxxxx 50 xx xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10.) xx 100 xxxxxxxxxxx xxxxxxx Elenmayerovy xxxxx, xxxxxxxxx x okyseleném xxxxxxxxx (3.8.), xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x promíchat. Xxxxx roztok by xxx být xxxxxxxxxxx xxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxxx.

3.10.2 Střední xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, 50 x/xx

Xxxxxx pipetou 10,0 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.10.1.) do odměrné Xxxxxxxxxxxx baňky x xxxxxx 100 ml, xxxxxxx xx značku xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.8.) x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx by xxx xxx připravován xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx použitím.

3.10.3 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xx xxxx xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx 50 xx xxxxxxx 1,0, 2,0, 4,0, 5,0 x 10,0 ml xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10.2). Doplnit xx značku okyseleným xxxxxxxxxx (3.8) x xxxxxxxxx. Xxxx roztoky xxxxxxxxxx 1,0, 2,0, 4,0, 5,0 x 10,0 mikrogramům lacalocidu xxxxxxx xx xx. Xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxxx.

3.11 Xxxx, HPLC čistota

4. Xxxxxxxxx a pomůcky

4.1 Xxxxxxxxxxxx lázeň (xxxx xxxxxxxxxxxx vodní lázeň) x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx

4.2 Xxxxxxxxxx xxxxxx, 0,45 μx

4.3 XXXX xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 20 μx

4.3.1 Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx 125 xx x 4 mm, xxxxxxxx xxxx X18, 5 μm nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxx

4.3.2 Spektrofluorimetr x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx i xxxxxx xxxxxx xxxxx

5. Postup

5.1 Xxxxxx

5.1.1 Xxxxx xxxxx

Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx testu (5.1.2) je potřeba xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx lasalocid xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx jako xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx x něm xxx xxxxxxxxx lasalocid xxxxx xxx jiné xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

5.1.2 Xxxxxxxxx xxxx

Xxx xxxxxxxxxx testu xx měla xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx obsahem xx vzorku. Pro xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxx 100 xx/xx, xxxxx 10,0 xx xxxxxxxxx roztoku (3.10.1) xx 250 xx xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxx 0,5 xx. Xxxxxx 50 x xxxxxxx krmiva, důkladně xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxx 10 xxxxx. Před pokračováním x xxxxxxxx (5.2) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxx, pokud xxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx (xxx 5.1.1.), je xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx testu xxxxxxx xxxxxxxxxx adice. X tomto případě xx analyzovaný vzorek xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx množství xx xxxx přibližně xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx je xx xxxxxx již xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxx xx provedena xxxxxxxxx.

5.2 Xxxxxxxx

5.2.1 Krmiva

Navážit 5 xx 10 x xxxxxx x přesností 0,01 x do 250 ml Xxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx 100,0 xx okyseleného xxxxxxxxx (3.8). Xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx kádinku x obsahem do xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1) x xxxxxxx xxxxxxxxx 40 °X xx 20 xxxxx. Xxxx xxxxxxx x ochladit xx xxxxxxxxx teplotu. Xxxxxx xxxx po xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx x usazení xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx část xxxx 0,45 m xxxxxxxxxx xxxxx (4.2) xx xxxxxx nádoby. Xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx XXXX (5.3.).

5.2.2 Premixy

Odvážit x přesností 0,001 x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx 2 x xxxxxxx xx 250 xxxxxxxxxxx xxxxxxx baňky. Xxxxxx 100,0 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.8) a xxxxxxxxx pohybem rozmíchat. Xxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1) o xxxxxxx přibližně 40 °X xx 20 xxxxx. Poté xxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx značku xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.8) x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Nechat xxxx xx xxxx xxxxx xxxxxx, dokud xx rozpuštěná xxxxx xxxxxxx. Poté xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx 0,45 m membránový xxxxx (4.2) xx xxxxxx nádoby. Xxxxxxx xxxxxx objem xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.8), xxx xx xxxxxx finální xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx kolem 4 x/xx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx x xxxxxxxx pomocí XXXX (5.3).

5.3 Xxxxxxxxx xxxxxx XXXX

5.3.1 Parametry

Následující xxxxxxxx xxxx uvedeny pro xxxxxxxxx; xx xxxxx xxxxxx xxxx, pokud xxxxxx xxxxxxxxxx výsledky:

Kapalná xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (4.3.1): 125 xx x 4 xx, xxxxxxxx xxxx X18, xxxxxx 5 m xxxx xxxxxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxx (3.9): Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (3.7) x xxxxxxxxx (3.5), 5 + 95 (obj. + xxx.)

Xxxxxxxx průtoku: 1,2 xx/xxx

Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx:

– Xxxxxxxxx: 310 nm

– Xxxxxx: 419 xx

Xxxxxxxxxxx xxxxx: 20 μx

Xxxxxxxx xxxxxxxxx chromatografického xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx kalibračního xxxxxxx (3.10.3), xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxx xxxxx) a xxxxxxxxxx xxxx.

5.3.2 Xxxxxxxxxx graf

Injektovat xxxxxxxxxx každý xxxxxxxxxx xxxxxx (3.10.3) x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (plochy) xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Nakreslit xxxxxxxxxx graf xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxx) na xxxxxxxxx xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x μg/ml xx xxx xxxxxx.

5.3.3 Xxxxxx xx vzorkem

Několikrát xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx v 5.2.1 xxxx 5.2.2 xx xxxxxxx stejného xxxxxx jako x xxxxxxx kalibračních xxxxxxx x určit xxxxxxx xxxxxxx výšky (plochy) xxxxxxxxxxxx lasalocidu xxxxxxx.

6. Xxxxxxx xxxxxxxx

Xx středních xxxxxx xxxxx (xxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx (5.3.3) xxxxx xxxxxxxxxxx lasalocidu xxxxxxx (x/xx) srovnáním x kalibračním xxxxxx.

6.1 Xxxxxx

Xxxxx lasalocidu xxxxxxx xx vzorku, x (xx/xx) xx dán xxxxxxxxxxxx vztahem

w = (β · X₁)/x [xx/xx]

xxx:

β = koncentrace xxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx (5.2.1) x μx/xx,

X₁ = X2 = xxxxx xxxxxxxx vzorku xxxxx 5.2.1. x ml (xx. 100),

x = xxxxxxxx testovaného xxxxxx x x.

6.2 Xxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxx sodného xx xxxxxx, w (xx/xx) xx dán xxxxxxxxxxxx xxxxxxx

x = (β · V2 · x)/x [mg/kg]

kde:

β = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx (5.2.2.) x g/ml,

V₂ = xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx 5.2.2. x xx (t. x. 250),

x = xxxxxx xxxxxxxx podle 5.2.2., x = xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x x.

7. Xxxxxxx xxxxxxxx

7.1 Xxxxxxxx

Xxxxxx založené xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx k xxxxxxxxxxxxx xx srovnání x xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx UV xxxxxx. Identitu analyzovaného xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx.

7.1.1 Kochromatografie

Testovaný extrakt (5.2.1 xxxx 5.2.2) xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10.3). Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx sodného xx mělo xxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx. X xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx vzorku xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx sodnému. Xxxx xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx x více xxx od xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

7.2 Reprodukovatelnost

Rozdíly xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:

- 15 % xxxxxxxxxx relativně k xxxxx hodnotě pro xxxxx lasalocidu xxxxxxx x xxxxxxx xx 30 xx/xx xx 100 xx/xx,

- 15 xx/xx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xx 100 xx/xx xx 200 xx/xx,

- 7,5 % xxxxxxxxxx xxxxxxxxx k xxxxx hodnotě pro xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx 200 xx/xx.

7.3 Xxxxxxxxx

Xxxxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxx 80 % xxx xxxxxxxxx (čistý) xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx výtěžek xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 90 %.

8. Xxxxxxxx xxxxxxxx studie

Ve xxxxxxxx xxxxxx [1] xxxx xx 12 laboratořích xxxxxxxxxxx 2 premixy (xxxxxx 1 x 2) x 5 xxxxx (vzorky 3-7). Xx každém xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx v následující xxxxxxx:

L = xxxxx xxxxxxxxxx

X = xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xx = xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx

XX = xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx

XXx = variační xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, %

XXX = xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx, %

[1] Xxxxxxx, 1995, 120, 2175-2180.