Plné znění - 31999L0076

Xxxxxxxx Xxxxxx 1999/76/ES

ze xxx 23. července 1999,

xxxxxx xx stanoví xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx stanovení lasalocidu xxxxxxx v krmivech

(Text x xxxxxxxx xxx XXX)

XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,

x xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,

x xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxx 70/373/XXX xx xxx 20. xxxxxxxx 1970 x xxxxxxxx metod odběru xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx úřední xxxxxxxx xxxxx, [1] xxxxxxxxx xxxxxxxxxx aktem x přistoupení Rakouska, Xxxxxx x Xxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxx 2 uvedené xxxxxxxx,

xxxxxxxx k xxxxx xxxxxxx:

(1) Xxxxxxxx 70/373/XXX xxxxxxx, že úřední xxxxxxxx krmiv xx xxxxxx xxxxxxxxx toho, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx předpisy xxxxxxxxxx xx xxxxxx jakosti x xxxxxxx, xx xxxxxxx za xxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx vzorků x xxxxxx.

(2) Směrnice Xxxx 70/524/XXX xx xxx 23. listopadu 1970 x doplňkových xxxxxxx x xxxxxxxx [2], xxxxxxxxx pozměněná xxxxxxxxx Xxxxxx (XX) x. 866/1999 [3], xxxxxxx, xxx obsah lasalocidu xxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx jsou tyto xxxxx xxxxxxx do xxxxxxx x xxxxx.

(3) Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Společenství xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx.

(4) Opatření xxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx výboru xxx xxxxxx,

XXXXXXX TUTO SMĚRNICI:

Článek 1

Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx lasalocidu sodného x krmivech x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx metod xxxxxxxxx v příloze xxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx 2

Členské xxxxx xxxxxx v účinnost xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx souladu x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 31. ledna 2000. Neprodleně x xxxx xxxxxxx Komisi.

Budou xxxx xxxxxxxx používat xx 1. února 2000.

Xxxx xxxxxxxx přijatá xxxxxxxxx státy musí xxxxxxxxx odkaz xx xxxx xxxxxxxx nebo xxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxx při xxxxxx úředním xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx si xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

Článek 3

Tato xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx dnem xx xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxx 4

Xxxx xxxxxxxx xx určena xxxxxxxx xxxxxx.

X Bruselu dne 23. července 1999.

Za Xxxxxx

Xxxxx Fischler

člen Xxxxxx

[1] Xx. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.

[2] Úř. věst. X 270, 14.12.1970, x. 1.

[3] Xx. xxxx. X 108, 27.4.1999, x. 20.

XXXXXXX

XXXXXXXXX LASALOCIDU XXXXXXX

Xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx produkované Streptomyces xxxxxxxxxxx

1. Xxxx x xxxxxx xxxxxxx

Xxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx x premixech. Xxxxxxx xxxxxxx xx 5 xx/xx, xxxxxxx xxxxxxxxx 30 xx/xx.

2. Xxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxx ze xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x stanoven xxxxxx xxxxxxx kapalinovou chromatografíí (Xxxx Performance Liquid Xxxxxxxxxxxxxx, XXXX) xx xxxxxxxx fázi za xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

3. Xxxxxxx

3.1 Fosrorečnan xxxxxxxxxxxxxxxxxx (XX₂XX₄)

3.2 Kyselina xxxxxxxxxxxxxxx, x = 85 %

3.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, ρ= 20 %

Xxxxxxxxx 23,5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2.) xx 100 xx xxxx

3.4 6-xxxxxx-2-xxxxxxxxxx (1,5-xxxxxxxxxxxxxxxxx), x = 99 %

3.5 Methanol, HPLC xxxxxxx

3.6 Kyselina xxxxxxxxxxxxxx, ρ₂₀ = 1,19 x/xx

3.7 Xxxxxx fosfátového xxxxx, x = 0,01 mol/l

Rozpustit 1.36 x KH₂PO₄ (3.1) x 500 xx xxxx (3.11), přidat 3,5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2) x 10,0 ml 6-methyl-2-heptylaminu (3.4). Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.3) xxxxxxxx pH xx 4,0 x xxxxxxxx xx 1000 ml xxxxx (3.11).

3.8 Okyselený xxxxxxxx

Xx xxxxxxx Elenmayerovy xxxxx o xxxxxx 1000 ml xxxxxxx 5,0 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.6), doplnit xx značku xxxxxxxxxx (3.5) a xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxxx.

3.9 HPLC xxxxxxx xxxx, xxxxxx fosfátového xxxxx x xxxxxxxxx 5 + 95 (xxx. + xxx.)

Xxxxxxxxx 5 ml xxxxxxx xxxxxxxxxxx pufru (3.7) x 95 xx xxxxxxxxx (3.5).

3.10 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx sodný se xxxxxxxxx xxxxxxxx, C₃₄H₅₃O₈ (xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx), E763

3.10.1 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, 500 g/ml

S xxxxxxxxx 0,1 xx xxxxxxx 50 xx xxxxxxxxxx sodného (3.10.) xx 100 mililitrové xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx baňky, xxxxxxxxx x okyseleném xxxxxxxxx (3.8.), doplnit xx značku xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x promíchat. Xxxxx xxxxxx xx xxx xxx připravován xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.

3.10.2 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx sodného, 50 x/xx

Xxxxxx xxxxxxx 10,0 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.10.1.) xx odměrné Xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx 100 ml, xxxxxxx xx značku xxxxxxxxxx methanolem (3.8.) x xxxxxxxxx. Tento xxxxxx by xxx xxx xxxxxxxxxxx čerstvě xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxxx.

3.10.3 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xx sady xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx baňek x xxxxxx 50 xx odměřit 1,0, 2,0, 4,0, 5,0 x 10,0 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10.2). Xxxxxxx xx značku okyseleným xxxxxxxxxx (3.8) a xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 1,0, 2,0, 4,0, 5,0 a 10,0 xxxxxxxxxxx lacalocidu xxxxxxx xx xx. Xxxxxxx xx měly xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.

3.11 Xxxx, XXXX xxxxxxx

4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx

4.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxx (nebo xxxxxxxxxxxx vodní lázeň) x xxxxxxxx regulace xxxxxxx

4.2 Xxxxxxxxxx filtry, 0,45 μm

4.3 XXXX xxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 20 μx

4.3.1 Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx 125 mm x 4 xx, xxxxxxxx xxxx C18, 5 μx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx

4.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx

5. Postup

5.1 Xxxxxx

5.1.1 Xxxxx xxxxx

Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx testu (5.1.2) je potřeba xxxxxxx analyzovat xxxxx xxxxxx a prověřit, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx ani xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Toto xxxxxx musí být xxxxxxxxx typu jako xxxxxxxxx vzorek x xxxxx v xxx xxx detekován xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

5.1.2 Xxxxxxxxx xxxx

Xxx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, obohaceného xxxxxxxx xxxxxxxxxx sodného x xxxxxxxx xxxxxxxxx shodném x jeho xxxxxxx xx vzorku. Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxx 100 xx/xx, xxxxx 10,0 ml xxxxxxxxx xxxxxxx (3.10.1) xx 250 xx xxxxxxx kádinky x xxxxxxx xxxxxx na xxxxxxxxx 0,5 xx. Xxxxxx 50 g xxxxxxx krmiva, důkladně xxxxxxxxx x ponechat x xxxxx 10 xxxxx. Před xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx (5.2) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxx, xxxxx není x dispozici xxxxx xxxxxx xxxxxxx vzorku (xxx 5.1.1.), xx xxxxxxxxx kontrolního xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx adice. X tomto xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xx xxxx přibližně xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxx xxx přítomen. Xxxxx xxxxxx se xxxxxxxxx společně x xxxxxxxxxxxxx x kontrola xx provedena xxxxxxxxx.

5.2 Xxxxxxxx

5.2.1 Xxxxxx

Xxxxxxx 5 xx 10 x xxxxxx s xxxxxxxxx 0,01 x xx 250 ml Elenmayerovy xxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx 100,0 xx xxxxxxxxxxx methanolu (3.8). Volně xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx pohyby xxxxxxxxx. Xxxxxxx kádinku x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1) x xxxxxxx xxxxxxxxx 40 °X xx 20 minut. Xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xx pokojovou xxxxxxx. Xxxxxx xxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, dokud nedojde x xxxxxxx rozpuštěné xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx 0,45 x membránový xxxxx (4.2) do xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx x určování xxxxxx XXXX (5.3.).

5.2.2 Xxxxxxx

Xxxxxxx x přesností 0,001 x zhruba xxxxxxxxxxxxx 2 g premixu xx 250 xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx. Přidat 100,0 xx okyseleného xxxxxxxxx (3.8) a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1) x xxxxxxx xxxxxxxxx 40 °X xx 20 xxxxx. Xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.8) x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxx xx dobu xxxxx xxxxxx, xxxxx xx rozpuštěná xxxxx xxxxxxx. Xxxx odfiltrovat xxxxxxxx xxxx xxxx 0,45 x membránový xxxxx (4.2) xx xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxx čistého xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.8), xxx xx xxxxxx finální testovací xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx 4 x/xx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Přejít x xxxxxxxx xxxxxx XXXX (5.3).

5.3 Xxxxxxxxx xxxxxx XXXX

5.3.1 Xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx; xx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx výsledky:

Kapalná xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (4.3.1): 125 xx x 4 mm, xxxxxxxx xxxx X18, xxxxxx 5 m xxxx xxxxxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxx (3.9): Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (3.7) x xxxxxxxxx (3.5), 5 + 95 (obj. + xxx.)

Xxxxxxxx průtoku: 1,2 xx/xxx

Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx:

– Xxxxxxxxx: 310 xx

– Xxxxxx: 419 xx

Xxxxxxxxxxx xxxxx: 20 μx

Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx systému xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10.3), xxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxx xxxxx) a xxxxxxxxxx xxxx.

5.3.2 Kalibrační xxxx

Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx kalibrační xxxxxx (3.10.3) a xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (plochy) pro xxxxxx koncentraci. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxx) xx vodorovné xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx v μx/xx xx ose xxxxxx.

5.3.3 Xxxxxx se xxxxxxx

Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx v 5.2.1 xxxx 5.2.2 xx xxxxxxx stejného xxxxxx jako x xxxxxxx kalibračních xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxx) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

6. Xxxxxxx xxxxxxxx

Xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (ploch) xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx vzorkem (5.3.3) xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (g/ml) srovnáním x xxxxxxxxxxx grafem.

6.1 Xxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx, w (xx/xx) xx xxx xxxxxxxxxxxx vztahem

w = (β · X₁)/x [xx/xx]

xxx:

β = koncentrace xxxxxxxxxx sodného v xxxxxxx vzorku (5.2.1) x μg/ml,

V₁ = X2 = xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx 5.2.1. v ml (xx. 100),

x = xxxxxxxx xxxxxxxxxxx podílu x x.

6.2 Xxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx, x (mg/kg) xx dán následujícím xxxxxxx

x = (β · X2 · x)/x [mg/kg]

kde:

β = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx vzorku (5.2.2.) x x/xx,

X₂ = objem xxxxxxxx xxxxxx xxxxx 5.2.2. x xx (x. x. 250),

f = xxxxxx xxxxxxxx xxxxx 5.2.2., m = xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x x.

7. Ověření xxxxxxxx

7.1 Shodnost

Metody xxxxxxxx xx spektrofluorometrii xxxx xxxx náchylné x xxxxxxxxxxxxx ve xxxxxxxx x postupy xxxxxxxxxx xx detekci UV xxxxxx. Identitu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx.

7.1.1 Kochromatografie

Testovaný xxxxxxx (5.2.1 xxxx 5.2.2) xx xxxxxxxx přidáním xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10.3). Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx být xxxxxxx množství, které xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx extraktu. V xxxx odpovídající xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx vzorku xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxx výška xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx o více xxx od xxxxxxxxx xxxxxxxxx neobohaceným extraktem xxxxxx.

7.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxx mezi xxxxxxxx xxxx paralelních xxxxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx nesmí xxxxxxxxx:

- 15 % xxxxxxxxxx xxxxxxxxx k xxxxx xxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxxxx sodného x xxxxxxx xx 30 xx/xx xx 100 mg/kg,

- 15 xx/xx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx od 100 xx/xx xx 200 xx/xx,

- 7,5 % xxxxxxxxxx relativně x xxxxx hodnotě pro xxxxx lasalocidu xxxxxxx xxxxx než 200 xx/xx.

7.3 Výtěžnost

Výtěžnost xx xxxx xxx xxxxxxx 80 % pro xxxxxxxxx (xxxxx) vzorek. Xxx obohacené xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx alespoň 90 %.

8. Výsledky xxxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxxxx xxxxxx [1] xxxx xx 12 xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 2 premixy (xxxxxx 1 a 2) x 5 xxxxx (xxxxxx 3-7). Xx xxxxxx vzorku xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx. Xxxxxxxx jsou xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

L = xxxxx xxxxxxxxxx

X = xxxxx jednotlivých xxxxxxxx

Xx = xxxxxxxxxx odchylka xxx opakování

SR = xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx

XXx = variační xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, %

CVR = xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx, %

[1] Xxxxxxx, 1995, 120, 2175-2180.