Plné znění - 31999L0076

Xxxxxxxx Xxxxxx 1999/76/XX

xx xxx 23. xxxxxxxx 1999,

xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx lasalocidu xxxxxxx x xxxxxxxx

(Xxxx x xxxxxxxx xxx XXX)

XXXXXX EVROPSKÝCH XXXXXXXXXXXX,

x xxxxxxx xx Smlouvu x založení Evropského xxxxxxxxxxxx,

x xxxxxxx xx xxxxxxxx Rady 70/373/XXX xx xxx 20. xxxxxxxx 1970 x xxxxxxxx xxxxx odběru xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, [1] xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x přistoupení Xxxxxxxx, Xxxxxx x Xxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx,

xxxxxxxx k xxxxx xxxxxxx:

(1) Směrnice 70/373/EHS xxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx za xxxxxx prověření xxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx předpisy xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx, se xxxxxxx za použití xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx.

(2) Směrnice Rady 70/524/XXX xx xxx 23. xxxxxxxxx 1970 x xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx [2], xxxxxxxxx xxxxxxxxx nařízením Xxxxxx (XX) č. 866/1999 [3], xxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx musí být xxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxx xxxxx přidány xx xxxxxxx a xxxxx.

(3) Xxxx být stanoveny xxxxxxxxxx metody Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx těchto xxxxx.

(4) Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx se stanoviskem Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx,

XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:

Xxxxxx 1

Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, že xxxxxxx xxx úřední xxxxxxxx xxxxxx lasalocidu xxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx směrnice.

Xxxxxx 2

Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x účinnost xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx nejpozději xx 31. xxxxx 2000. Neprodleně o xxxx xxxxxxx Xxxxxx.

Xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx 1. xxxxx 2000.

Xxxx xxxxxxxx přijatá xxxxxxxxx xxxxx musí xxxxxxxxx xxxxx na xxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxx takový xxxxx učiněn xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx si xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

Xxxxxx 3

Tato xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx po xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxx Evropských xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxx 4

Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

X Xxxxxxx xxx 23. července 1999.

Za Xxxxxx

Xxxxx Xxxxxxxx

xxxx Xxxxxx

[1] Xx. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.

[2] Úř. věst. X 270, 14.12.1970, x. 1.

[3] Xx. xxxx. X 108, 27.4.1999, x. 20.

PŘÍLOHA

STANOVENÍ LASALOCIDU XXXXXXX

Xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx Streptomyces xxxxxxxxxxx

1. Xxxx x xxxxxx xxxxxxx

Xxxx xxxxxx xxxxxx ke stanovení xxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx x premixech. Xxxxxxx detekce xx 5 xx/xx, hranice xxxxxxxxx 30 mg/kg.

2. Xxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxxxxx ze vzorku xx okyseleného methanolu x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx chromatografíí (Xxxx Xxxxxxxxxxx Liquid Xxxxxxxxxxxxxx, XXXX) xx xxxxxxxx xxxx za xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

3. Xxxxxxx

3.1 Xxxxxxxxxxx dihydrogendraselný (XX₂XX₄)

3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, x = 85 %

3.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, ρ= 20 %

Xxxxxxxxx 23,5 xx xxxxxxxx ortofosforečné (3.2.) xx 100 xx xxxx

3.4 6-xxxxxx-2-xxxxxxxxxx (1,5-dimethylhexylamin), x = 99 %

3.5 Xxxxxxxx, XXXX xxxxxxx

3.6 Xxxxxxxx chlorovodíková, ρ₂₀ = 1,19 x/xx

3.7 Xxxxxx fosfátového xxxxx, x = 0,01 mol/l

Rozpustit 1.36 x XX₂XX₄ (3.1) x 500 xx xxxx (3.11), přidat 3,5 xx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (3.2) x 10,0 xx 6-xxxxxx-2-xxxxxxxxxxx (3.4). Pomocí roztoku xxxxxxxx ortofosforečné (3.3) xxxxxxxx xX xx 4,0 x xxxxxxxx xx 1000 ml xxxxx (3.11).

3.8 Okyselený xxxxxxxx

Xx xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxxxx x objemu 1000 ml xxxxxxx 5,0 xx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (3.6), xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx (3.5) x promíchat. Xxxxx roztok by xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxxx.

3.9 XXXX xxxxxxx xxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx 5 + 95 (xxx. + xxx.)

Xxxxxxxxx 5 xx roztoku xxxxxxxxxxx pufru (3.7) x 95 ml xxxxxxxxx (3.5).

3.10 Standardní xxxxxxxxx sodný se xxxxxxxxx xxxxxxxx, X₃₄X₅₃X₈ (xxxxx sůl xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx lasaliensis), E763

3.10.1 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, 500 x/xx

X xxxxxxxxx 0,1 xx xxxxxxx 50 mg xxxxxxxxxx sodného (3.10.) xx 100 xxxxxxxxxxx xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx baňky, xxxxxxxxx x okyseleném xxxxxxxxx (3.8.), xxxxxxx xx značku xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxxx.

3.10.2 Střední roztok xxxxxxxxxx xxxxxxx, 50 x/xx

Xxxxxx xxxxxxx 10,0 xx zásobního xxxxxxx (3.10.1.) xx odměrné Xxxxxxxxxxxx baňky x xxxxxx 100 ml, xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.8.) x promíchat. Tento xxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxxx.

3.10.3 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xx xxxx xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx 50 xx odměřit 1,0, 2,0, 4,0, 5,0 x 10,0 ml xxxxxxxxx xxxxxxx lacalocidu xxxxxxx (3.10.2). Xxxxxxx xx xxxxxx okyseleným xxxxxxxxxx (3.8) a xxxxxxxxx. Xxxx roztoky xxxxxxxxxx 1,0, 2,0, 4,0, 5,0 a 10,0 xxxxxxxxxxx lacalocidu xxxxxxx na xx. Xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx použitím.

3.11 Xxxx, XXXX xxxxxxx

4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx

4.1 Xxxxxxxxxxxx lázeň (xxxx xxxxxxxxxxxx vodní xxxxx) x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx

4.2 Xxxxxxxxxx xxxxxx, 0,45 μx

4.3 HPLC xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx 20 μl

4.3.1 Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx 125 xx x 4 mm, xxxxxxxx xxxx X18, 5 μm xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx

4.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxx x možností nastavení xxxxxxxxx i xxxxxx xxxxxx délky

5. Xxxxxx

5.1 Xxxxxx

5.1.1 Xxxxx pokus

Před xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (5.1.2) xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx čisté xxxxxx x xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx jiné xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Toto xxxxxx musí xxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx x xxx xxx detekován xxxxxxxxx xxxxx ani jiné xxxxxxxxxxxxx substance.

5.1.2 Xxxxxxxxx xxxx

Xxx xxxxxxxxxx testu xx měla být xxxxxxxxx analýza xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx obsahem xx vzorku. Xxx xxxxxxxx obohacení xx xxxxxx 100 xx/xx, xxxxx 10,0 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.10.1) xx 250 xx xxxxxxx kádinky a xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx 0,5 xx. Xxxxxx 50 x xxxxxxx xxxxxx, důkladně xxxxxxxxx x ponechat x xxxxx 10 xxxxx. Xxxx pokračováním x xxxxxxxx (5.2) xxxx xxxxxxxxxx promíchat.

Jinou xxxxxxxx, xxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx (xxx 5.1.1.), je xxxxxxxxx kontrolního xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. X tomto případě xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx o lasalocid xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx obsahu xxxxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxx již xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx společně x xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

5.2 Xxxxxxxx

5.2.1 Krmiva

Navážit 5 xx 10 g xxxxxx x xxxxxxxxx 0,01 x xx 250 xx Elenmayerovy xxxxx xx zátkou. Xxxxxxx xxxxxx 100,0 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.8). Xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx pohyby xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1) x teplotě xxxxxxxxx 40 °X xx 20 xxxxx. Poté xxxxxxx x xxxxxxxx xx pokojovou xxxxxxx. Xxxxxx xxxx xx xxxx zhruba xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Poté xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx 0,45 x membránový xxxxx (4.2) xx xxxxxx xxxxxx. Přejít x xxxxxxxx xxxxxx XXXX (5.3.).

5.2.2 Xxxxxxx

Xxxxxxx x přesností 0,001 x xxxxxx nerozemletého 2 x premixu xx 250 mililitrové xxxxxxx xxxxx. Xxxxxx 100,0 ml xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.8) x xxxxxxxxx pohybem xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1) x xxxxxxx xxxxxxxxx 40 °X na 20 xxxxx. Xxxx vyjmout x ochladit xx xxxxxxxxx teplotu. Doplnit xx značku xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.8) x xxxxxxxx promíchat. Xxxxxx xxxx xx xxxx xxxxx xxxxxx, dokud xx rozpuštěná hmota xxxxxxx. Poté xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx 0,45 x membránový xxxxx (4.2) do xxxxxx xxxxxx. Naředit xxxxxx xxxxx čistého xxxxxxxx okyseleným methanolem (3.8), xxx se xxxxxx finální xxxxxxxxx xxxxxx obsahující xxxxx 4 x/xx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxx x xxxxxxxx pomocí XXXX (5.3).

5.3 Stanovení pomocí XXXX

5.3.1 Xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx uvedeny xxx xxxxxxxxx; xx xxxxx xxxxxx xxxx, pokud xxxxxx xxxxxxxxxx výsledky:

Kapalná xxxxxxxxxxxxxxxx kolona (4.3.1): 125 xx x 4 xx, obrácená xxxx C18, xxxxxx 5 x xxxx xxxxxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxx (3.9): Xxxx xxxxxxxxxxx pufru (3.7) x xxxxxxxxx (3.5), 5 + 95 (xxx. + xxx.)

Xxxxxxxx průtoku: 1,2 xx/xxx

Xxxxxxxx vlnové délky:

– Xxxxxxxxx: 310 xx

– Xxxxxx: 419 xx

Xxxxxxxxxxx xxxxx: 20 μx

Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10.3), xxxxx xxxxxxx k xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxx xxxxx) x retenčních xxxx.

5.3.2 Xxxxxxxxxx graf

Injektovat xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (3.10.3) x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (plochy) xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx se xxxxxxxxx hodnotami výšek (xxxxx) xx xxxxxxxxx xxx x odpovídajícími xxxxxxxxxxxxx x μx/xx xx xxx xxxxxx.

5.3.3 Xxxxxx se xxxxxxx

Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztok xx xxxxxxx xxxxxxx x 5.2.1 xxxx 5.2.2 xx xxxxxxx stejného xxxxxx xxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx střední xxxxxxx xxxxx (xxxxxx) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

6. Xxxxxxx xxxxxxxx

Xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxx) xxxxxxxxxxx injekcí xxxxxxx xx xxxxxxx (5.3.3) xxxxx koncentraci xxxxxxxxxx xxxxxxx (g/ml) srovnáním x kalibračním xxxxxx.

6.1 Xxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxx sodného xx xxxxxx, x (xx/xx) je dán xxxxxxxxxxxx xxxxxxx

x = (β · X₁)/x [xx/xx]

xxx:

β = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx vzorku (5.2.1) x μx/xx,

X₁ = X2 = xxxxx xxxxxxxx vzorku xxxxx 5.2.1. v xx (xx. 100),

x = xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x x.

6.2 Xxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx, x (xx/xx) xx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx

x = (β · X2 · x)/x [xx/xx]

xxx:

β = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx vzorku (5.2.2.) v g/ml,

V₂ = objem extraktu xxxxxx podle 5.2.2. x xx (x. x. 250),

x = xxxxxx xxxxxxxx xxxxx 5.2.2., x = xxxxxxxx testovaného xxxxxx x x.

7. Xxxxxxx xxxxxxxx

7.1 Xxxxxxxx

Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxx založenými xx xxxxxxx UV xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx lze xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx.

7.1.1 Xxxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxx (5.2.1 nebo 5.2.2) xx obohacen xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10.3). Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx sodného xx mělo xxx xxxxxxx množství, které xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx extraktu. V xxxx odpovídající množství xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx být xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx x více xxx od xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

7.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxx mezi xxxxxxxx dvou xxxxxxxxxxx xxxxxxxx provedených xx xxxxxxx vzorkem xxxxx xxxxxxxxx:

- 15 % xxxxxxxxxx relativně k xxxxx hodnotě pro xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x rozmezí xx 30 xx/xx do 100 xx/xx,

- 15 xx/xx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx od 100 xx/xx do 200 xx/xx,

- 7,5 % xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx lasalocidu xxxxxxx xxxxx než 200 xx/xx.

7.3 Výtěžnost

Výtěžnost by xxxx xxx xxxxxxx 80 % pro xxxxxxxxx (xxxxx) xxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx výtěžek xxx xxxxxxxxx alespoň 90 %.

8. Výsledky xxxxxxxx xxxxxx

Xx společné xxxxxx [1] xxxx xx 12 xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 2 xxxxxxx (xxxxxx 1 a 2) a 5 xxxxx (vzorky 3-7). Xx xxxxxx vzorku xxxx provedeny dvě xxxxxxx. Výsledky xxxx xxxxxxx x následující xxxxxxx:

X = xxxxx laboratoří

N = xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xx = xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx opakování

SR = xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx

XXx = xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx opakování, %

CVR = xxxxxxxx koeficient xxxxxxxxxxxxxxxxxxx, %

[1] Analyst, 1995, 120, 2175-2180.