Plné znění - 31999L0076

Směrnice Xxxxxx 1999/76/XX

xx xxx 23. července 1999,

xxxxxx xx stanoví xxxxxxxxxx metoda Společenství xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx

(Xxxx x významem xxx XXX)

XXXXXX EVROPSKÝCH XXXXXXXXXXXX,

x xxxxxxx xx Smlouvu x xxxxxxxx Evropského xxxxxxxxxxxx,

x xxxxxxx na xxxxxxxx Xxxx 70/373/XXX xx dne 20. xxxxxxxx 1970 o xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx x analytických xxxxx xxx úřední xxxxxxxx xxxxx, [1] xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx Rakouska, Xxxxxx x Xxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx,

xxxxxxxx k xxxxx xxxxxxx:

(1) Xxxxxxxx 70/373/XXX xxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx prověření xxxx, xxx xxxxxxx požadavky xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx předpisy xxxxxxxxxx xx jejich jakosti x xxxxxxx, xx xxxxxxx xx použití xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx x xxxxxx.

(2) Xxxxxxxx Rady 70/524/XXX ze dne 23. xxxxxxxxx 1970 x doplňkových xxxxxxx x krmivech [2], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx Xxxxxx (ES) č. 866/1999 [3], stanoví, xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx musí xxx xxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxx tyto xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx.

(3) Xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxxx metody Společenství xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx.

(4) Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx v xxxxxxx se stanoviskem Xxxxxxx výboru pro xxxxxx,

XXXXXXX TUTO SMĚRNICI:

Xxxxxx 1

Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxx úřední xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx a xxxxxxxxx se xxxxxxxxx xx xxxxxxx metod xxxxxxxxx x příloze xxxx xxxxxxxx.

Článek 2

Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx nezbytné xxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx nejpozději xx 31. xxxxx 2000. Xxxxxxxxxx o xxxx xxxxxxx Xxxxxx.

Xxxxx xxxx xxxxxxxx používat xx 1. xxxxx 2000.

Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxx takový xxxxx učiněn při xxxxxx úředním xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

Xxxxxx 3

Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx dnem xx xxxxxxxxx v Úředním xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxx 4

Tato směrnice xx určena xxxxxxxx xxxxxx.

X Xxxxxxx dne 23. xxxxxxxx 1999.

Xx Xxxxxx

Xxxxx Fischler

člen Komise

[1] Xx. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.

[2] Úř. xxxx. X 270, 14.12.1970, x. 1.

[3] Xx. xxxx. X 108, 27.4.1999, x. 20.

PŘÍLOHA

STANOVENÍ XXXXXXXXXX XXXXXXX

Xxxxx xxx xxxxxxxxxx monokarboxylové xxxxxxxx xxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx

1. Účel x xxxxxx použití

Tato metoda xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx sodného x xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx 5 xx/xx, xxxxxxx xxxxxxxxx 30 xx/xx.

2. Xxxxxxx

Xxxxxxxxx sodný je xxxxxxxxxx ze xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x stanoven vysoce xxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx (Xxxx Performance Xxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx, HPLC) xx xxxxxxxx xxxx za xxxxxxx spektrofluorometrického detektoru.

3. Xxxxxxx

3.1 Xxxxxxxxxxx dihydrogendraselný (XX₂XX₄)

3.2 Xxxxxxxx orthofosforečná, x = 85 %

3.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, ρ= 20 %

Xxxxxxxxx 23,5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2.) xx 100 ml xxxx

3.4 6-xxxxxx-2-xxxxxxxxxx (1,5-xxxxxxxxxxxxxxxxx), x = 99 %

3.5 Xxxxxxxx, XXXX xxxxxxx

3.6 Xxxxxxxx chlorovodíková, ρ₂₀ = 1,19 x/xx

3.7 Roztok fosfátového xxxxx, x = 0,01 xxx/x

Xxxxxxxxx 1.36 x XX₂XX₄ (3.1) x 500 xx xxxx (3.11), xxxxxx 3,5 xx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (3.2) a 10,0 xx 6-xxxxxx-2-xxxxxxxxxxx (3.4). Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.3) xxxxxxxx xX na 4,0 a xxxxxxxx xx 1000 ml xxxxx (3.11).

3.8 Okyselený xxxxxxxx

Xx odměrné Elenmayerovy xxxxx x xxxxxx 1000 xx přenést 5,0 ml xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.6), xxxxxxx xx značku xxxxxxxxxx (3.5) x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.

3.9 HPLC xxxxxxx xxxx, xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x methanolu 5 + 95 (xxx. + obj.)

Promíchat 5 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (3.7) x 95 xx xxxxxxxxx (3.5).

3.10 Standardní xxxxxxxxx sodný xx xxxxxxxxx xxxxxxxx, X₃₄X₅₃X₈ (xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx produkované Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx), E763

3.10.1 Xxxxxxx roztok lasalocidu xxxxxxx, 500 g/ml

S xxxxxxxxx 0,1 xx xxxxxxx 50 xx xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10.) xx 100 mililitrové xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx x okyseleném xxxxxxxxx (3.8.), xxxxxxx xx značku xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx roztok xx xxx xxx připravován xxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxxx.

3.10.2 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx sodného, 50 x/xx

Xxxxxx xxxxxxx 10,0 xx zásobního roztoku (3.10.1.) xx xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx 100 ml, xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.8.) x xxxxxxxxx. Tento xxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.

3.10.3 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xx xxxx xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx xxxxx x objemu 50 xx xxxxxxx 1,0, 2,0, 4,0, 5,0 x 10,0 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10.2). Xxxxxxx xx značku xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.8) x xxxxxxxxx. Xxxx roztoky xxxxxxxxxx 1,0, 2,0, 4,0, 5,0 a 10,0 xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xx. Xxxxxxx xx měly xxx připravovány čerstvě xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.

3.11 Xxxx, XXXX xxxxxxx

4. Xxxxxxxxx x pomůcky

4.1 Xxxxxxxxxxxx xxxxx (xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx) x xxxxxxxx regulace xxxxxxx

4.2 Xxxxxxxxxx xxxxxx, 0,45 μm

4.3 XXXX xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx schopným xxxxxxx xxxxx 20 μl

4.3.1 Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx 125 xx x 4 mm, xxxxxxxx xxxx X18, 5 μx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx

4.3.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxx x možností xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxx

5. Xxxxxx

5.1 Xxxxxx

5.1.1 Xxxxx xxxxx

Xxxx xxxxxxxxxx kontrolního xxxxx (5.1.2) je xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx lasalocid xxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx musí být xxxxxxxxx typu jako xxxxxxxxx vzorek x xxxxx v xxx xxx xxxxxxxxx lasalocid xxxxx ani xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

5.1.2 Kontrolní xxxx

Xxx xxxxxxxxxx xxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, obohaceného xxxxxxxx xxxxxxxxxx sodného x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxx xx vzorku. Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxx 100 xx/xx, xxxxx 10,0 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.10.1) xx 250 xx xxxxxxx kádinky x xxxxxxx roztok xx xxxxxxxxx 0,5 xx. Xxxxxx 50 g xxxxxxx krmiva, xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxx 10 xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx (5.2) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx x dispozici xxxxx xxxxxx podobné xxxxxx (xxx 5.1.1.), xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx adice. X xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx vzorek xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx, jehož xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx obsahu xxxxxxxxxx, xxxxx xx ve xxxxxx již xxxxxxxx. Xxxxx vzorek se xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxx xx xxxxxxxxx odečtením.

5.2 Xxxxxxxx

5.2.1 Krmiva

Navážit 5 xx 10 x xxxxxx x xxxxxxxxx 0,01 x xx 250 ml Elenmayerovy xxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx přidat 100,0 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.8). Xxxxx xxxxxxxxxx x krouživými xxxxxx xxxxxxxxx. Umístit kádinku x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1) x teplotě přibližně 40 °C xx 20 minut. Xxxx xxxxxxx x ochladit xx xxxxxxxxx teplotu. Xxxxxx xxxx xx xxxx xxxxxx jedné xxxxxx, dokud nedojde x xxxxxxx rozpuštěné xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx 0,45 x xxxxxxxxxx xxxxx (4.2) do xxxxxx xxxxxx. Xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx XXXX (5.3.).

5.2.2 Premixy

Odvážit x xxxxxxxxx 0,001 x zhruba nerozemletého 2 x xxxxxxx xx 250 mililitrové xxxxxxx xxxxx. Xxxxxx 100,0 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.8) x xxxxxxxxx xxxxxxx rozmíchat. Xxxxxxx xxxxxxx s xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1) o xxxxxxx xxxxxxxxx 40 °X xx 20 xxxxx. Xxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx značku okyseleným xxxxxxxxxx (3.8) x xxxxxxxx promíchat. Xxxxxx xxxx xx xxxx xxxxx hodiny, xxxxx xx xxxxxxxxxx hmota xxxxxxx. Poté xxxxxxxxxxx xxxxxxxx část přes 0,45 x xxxxxxxxxx xxxxx (4.2) do xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx objem xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.8), xxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx obsahující xxxxx 4 g/ml xxxxxxxxxx xxxxxxx. Přejít x xxxxxxxx pomocí XXXX (5.3).

5.3 Xxxxxxxxx xxxxxx XXXX

5.3.1 Xxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxx podmínky xxxx uvedeny xxx xxxxxxxxx; je možno xxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx rovnocenné xxxxxxxx:

Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx kolona (4.3.1): 125 xx x 4 xx, obrácená xxxx X18, balení 5 x xxxx xxxxxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxx (3.9): Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (3.7) x xxxxxxxxx (3.5), 5 + 95 (obj. + xxx.)

Xxxxxxxx xxxxxxx: 1,2 xx/xxx

Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx:

– Xxxxxxxxx: 310 nm

– Xxxxxx: 419 xx

Xxxxxxxxxxx xxxxx: 20 μx

Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx systému xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10.3), xxxxx xxxxxxx x dosažení xxxxxxxxxxxx výšek (xxxx xxxxx) x retenčních xxxx.

5.3.2 Xxxxxxxxxx xxxx

Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (3.10.3) x xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (plochy) pro xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx graf se xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxx) xx xxxxxxxxx xxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx v μg/ml xx ose xxxxxx.

5.3.3 Xxxxxx xx vzorkem

Několikrát xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx získaný v 5.2.1 xxxx 5.2.2 xx použití stejného xxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků x xxxxx střední xxxxxxx xxxxx (plochy) xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

6. Xxxxxxx xxxxxxxx

Xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx vzorkem (5.3.3) xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (x/xx) xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx grafem.

6.1 Xxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx, x (xx/xx) je xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx

x = (β · V₁)/m [xx/xx]

xxx:

β = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx (5.2.1) x μx/xx,

X₁ = X2 = xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx 5.2.1. x xx (xx. 100),

x = xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x g.

6.2 Xxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxx sodného ve xxxxxx, x (xx/xx) xx dán xxxxxxxxxxxx xxxxxxx

x = (β · X2 · x)/x [xx/xx]

xxx:

β = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx vzorku (5.2.2.) x x/xx,

X₂ = xxxxx extraktu xxxxxx xxxxx 5.2.2. x ml (x. x. 250),

x = xxxxxx naředění podle 5.2.2., x = xxxxxxxx xxxxxxxxxxx podílu x g.

7. Xxxxxxx xxxxxxxx

7.1 Shodnost

Metody xxxxxxxx xx spektrofluorometrii xxxx xxxx xxxxxxxx k xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x postupy xxxxxxxxxx xx detekci XX xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx potvrdit xxxxxxxxxxxxxxxx.

7.1.1 Xxxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxx (5.2.1 nebo 5.2.2) xx obohacen přidáním xxxxxxxx xxxxxxxx kalibračního xxxxxxx (3.10.3). Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx mělo xxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx extraktu. V xxxx odpovídající xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xx nesmí xxxxxxxxxx o xxxx xxx od xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

7.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx paralelních xxxxxxxx provedených xx xxxxxxx vzorkem xxxxx xxxxxxxxx:

- 15 % xxxxxxxxxx relativně k xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx lasalocidu xxxxxxx x rozmezí xx 30 xx/xx xx 100 mg/kg,

- 15 xx/xx pro xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx 100 xx/xx xx 200 xx/xx,

- 7,5 % xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx než 200 xx/xx.

7.3 Výtěžnost

Výtěžnost xx xxxx být xxxxxxx 80 % pro xxxxxxxxx (xxxxx) xxxxxx. Xxx obohacené xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx alespoň 90 %.

8. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxxxx xxxxxx [1] xxxx xx 12 xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 2 xxxxxxx (xxxxxx 1 a 2) a 5 xxxxx (vzorky 3-7). Xx xxxxxx vzorku xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx. Výsledky jsou xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

X = xxxxx xxxxxxxxxx

X = xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xx = standardní odchylka xxx xxxxxxxxx

XX = xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxxxxxxxxxxxx

XXx = xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, %

CVR = xxxxxxxx koeficient xxxxxxxxxxxxxxxxxxx, %

[1] Xxxxxxx, 1995, 120, 2175-2180.