Xxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 93/117/XX
xx xxx 17. xxxxxxxx 1993,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx metody Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx x založení Xxxxxxxxxx společenství,
s xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxx 70/373/XXX xx xxx 20. července 1970, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx odběru xxxxxx x xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx nařízením (XXX) x. 3768/85 [2], x xxxxxxx xx xxxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx k xxxx, xx xxxxxxxx 70/373/EHS xxxxxxx, že xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x kvalitě x xxxxxxx krmiv, xxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx metod Společenství;
vzhledem x xxxx, že xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Společenství xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx při používání xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx opatření této xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx stanoviskem Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx,
XXXXXXX XXXX SMĚRNICI:
Xxxxxx 1
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, že při xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x příloze xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 2
Členské xxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx x správní xxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 30. listopadu 1994. Neprodleně o xxxx xxxxxxx Xxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx tuto xxxxxxxx nebo xxxx xxx xx takový xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx odkazu xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
Článek 3
Xxxx směrnice xxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxx Evropských xxxxxxxxxxxx.
V Xxxxxxx dne 17. xxxxxxxx 1993.
Za Xxxxxx
Xxxx Steichen
člen Xxxxxx
[1] Xx. věst. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Xx. xxxx. X 362, 31.12.1985, x. 8.
XXXXXXX
1. XXXXXXXXX XXXXXXXXXX
1,3-xxx [(4-xxxxxxxxxxxxxxx) xxxxx]xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
1. Xxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 5 xx/xx.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxx okyseleným xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx x oxidem xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx eluuje x xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx se a xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx pomocí xxxxxxx fáze. Xxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx účinnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xx xxxxxxxx xxxx xxxxxx XX xxxxxxxxx.
3. Činidla
3.1 Xxxxxxxx
3.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx 500 xx odměrné xxxxx se xxxxx 4,0 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (X20x, 1,18 x/xx), xxxxxx xx xx značku xxxxxxxxxx (3.1.) x promíchá. Xxxxx roztok xxxx xxx připraven xxxxx xxxx použitím.
3.3 Acetonitril, xxx XXXX
3.4 Xxxxxxxxxxx xxxx
Xxx 3X, 8 xx 12 xxxx (1,6–2,5 xx perličky xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx 0,3 mm).
3.5 Xxxx xxxxxxx: xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx X xxx kolonovou chromatografii
100 x xxxxx hlinitého xx naváží xx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx 2 xx vody. Xxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 20 xxxxx. Xxxxxxxx xx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3.6 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx c = 0,025 mol/l
3,4 x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxx (xxx HPLC) x 1000 xx xxxxxxx xxxxx, doplní xx po xxxxxx x xxxxxxxx.
3.7 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx sodný, roztok x = 0, 025 xxx/x
3,55 x xxxxxxxxx (nebo 4,45 x dihydrátu, nebo 8,95 x dodekahydrátu) xxxxxxxx fosforečnanu xxxxxxx xx rozpustí ve xxxx (pro HPLC) x 1000 xx xxxxxxx baňce. Doplní xx xx xxxxxx x promíchá.
3.8 Xxxxxxx xxxx XXXX
Xxxxxx xx:
650 xx acetonitrilu (3.3.),
250 xx vody (pro XXXX),
50 xx roztoku xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.6.),
50 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.7.).
Xxxxxxxxx se xxxxxxx 0,22 μx (4.6.) x xxxxxx xx xxxxxxxx (např. xxxxxxxxxxx xx xxxx 10 xxxxx).
3.9 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xxxxxxxxx: 1.3-xxx [(4-chlorbenziliden) xxxxx] xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, X 758.
3.9.1 Robenidin, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx: 300 μg/ml:
Naváží xx 30 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx robenidinu (3.9.) x přesností 0,1 xx. Rozpustí se x kyselém xxxxxxxxx (3.2.) xx 100 xx xxxxxxx baňce, xxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx folií x xxxxx v xxxxx.
3.9.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx: 12 μx/xx
Xxxxxx xxx 10,0 ml xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.9.1) xx 250 xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx fází (3.8) x promíchá. Xxxxx xx obalí xxxxxxxxxxx xxxxx x uloží x xxxxx.
3.9.3 Kalibrační xxxxxxx
Xx souboru 50 xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx 5.0, 10.0, 15.0, 20.0 x 25.0 xx xxxxxxxxxx standardního xxxxxxx (3.9.2.). Xxxxxx xx xx xxxxxx mobilní xxxx (3.8.) a xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 1.2, 2.4, 3.6, 4.8 x 6.0 μx/xx robenidinu. Xxxxxxx xxxx roztoky xx připravují těsně xxxx xxxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
4.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx z tmavého xxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx 150 xx. Vnitřní xxxxxx 10 – 15 xx, délka 250 xx.
4.2 Ruční xxxxxxxx
4.3 Xxxxxxx xxxxxxx
4.4 Zařízení xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx x diodovým xxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxx 250 - 400 xx
4.4.1 Kolona xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx: 300 xx x 4 xx, X18, 10 μx xxxxxx xxxx xxxxxxx.
4.5 Filtr ze xxxxxxxxxx xxxxxx (Xxxxxxx XX/X xxxx xxxxxxx)
4.6 Xxxxxxxxxx filtry 0,22 μx
4.7 Xxxxxxxxxx xxxxxx 0,45 μm
5. Postup
Pozn.: Xxxxxxxxx je xxxxxxx xx světlo. Proto xxxx xxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxx skla.
5.1 Xxxxxx
5.1.1 Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx robenidinu a xxxxxx, zda neobsahuje xxxxxxxxx ani xxxx xxxxxx xxxxx.
5.1.2 Xx xxxxxx provést test xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1.1.), do xxxxxxx xxxx přidáno xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx ve xxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxx 60 xx/xx xx xx 250 xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 3 xx xxxxxxxxxx standardního xxxxxxx (3.9.1.). Roztok xx xxxxxx xxx xx xxxxx 0,5 ml x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx se 15 x modelového krmiva, xxxxxxxx se x xx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx začít x extrakcí (5.2.).
Pozn.: Xxx xxxx xxxx xxxxxx xx xxxx xxx modelové xxxxxx xxxxxxxxx typu jako xx zkoušený xxxxxx x nemělo xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.2 Extrakce
Do 250 xx Erlenmeyerovy xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx 15 x xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx 0,01 x, xxxxx xx 100 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.2), xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx (4.2). Xxxxxx xx xxxxxxxxxxx přes xxxxx xx xxxxxxxxxx vláken (4.5) x xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxx xx 150 xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx 7,5 x xxxxxxxxxxxxx xxxx (3.4), xxxxxxxxx a xxx minut xx xxxxx. Xxxxx xx xxxxx přefiltruje xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx roztok xx xxxxxxx x xxxxxxx (5.3).
5.3 Xxxxxxx
5.3.1 Xxxxxxxx kolony x xxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxx skleněné xxxxxx (4.1) xx xxxxx xxxx zátka ze xxxxxx xxxx a xxxxxx xx skleněnou xxxxxxxx. Xxxxxx xx 11,0 x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx hlinitého (3.5) x xxxxxx se xx kolony, xxxxx xxxxx x minimální xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx prostředí. Xxxx xxxxxxx se x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx konec kolony.
5.3.2 Xxxxxxx vzorku
Na xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx 5,0 ml xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (5.2). Xxxxxx xxxxxx se xxxx o stěnu xxxxxx a xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx oxidem xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx 100 ml xxxxxxxxx (3.1) při xxxxxxxxx xxxxxxx 2 – 3 xx za xxxxxx a eluát xx xxxx xx 250 xx baňky x xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx se xx redukovaného xxxxx x při xxxxxxx 40xX odpaří xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx (4.3). Odparek xx xxxxx rozpustí xx 3 – 4 xx xxxxxxx xxxx (3.8.) x xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx 10 xx xxxxxxx baňky. Baňka xx několikrát vypláchne 1 – 2 xx xxxxxxx xxxx x xxxx roztoky xx xxxxxxx xx xxxxxxx baňky. Xxxxx xx doplní xx xxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx xxxxx (4.7). Xxxxx xxxxxx se použije xxx xxxxxxx XXXX xxxxxxxxx (5.4).
5.4 Xxxxxxxxx xxxxxx účinnou kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx (HPLC)
5.4.1 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx uvedeny xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx x jiné xxxxx povedou xx xxxxxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (4.4.1),
xxxxxxx xxxx (3.8),
xxxxxxxxx xxxxxxxx: 1,5–2 ml/minuta,
vlnová xxxxx xxxxxxxxx: 317 xx,
xxxxx xxxxxxxx: 20–50 μl.
Stabilita xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.9.3), xxxxx xxxxxxxx 3,6 μx/xx, až xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx výšek xxxx a retenčních xxxx.
5.4.2 Xxxxxxxxxx xxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxx roztok (3.9.3) xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xx xxxxx (xxxxxx) xxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx se získá xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxx proti xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x μx/xx.
5.4.3 Roztok xxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx objem xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxx xx xxxxxxxx hodnota xxxxx (xxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx.
6. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
X xxxxxxxxxx xxxxxx výšek (ploch) xxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx vzorku xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x μx/xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.4.2).
x = (c × 200)/x,
xx kterém xx
x = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x roztoku xxxxxx x μx/xx,
x = xxxxxxxx navážky xxxxxx v xxxxxxx.
7. Xxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Identita
Identita xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx s přídavkem xxxxx xxxxxxxx detektoru x diodovým polem, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx roztokem (3.9.3) obsahujícím 6 μx/xx robenidinu.
7.1.1 Opakované xxxxxxxxx s xxxxxxxxx
X xxxxxxxx xxxxxx se xxxxx vhodného xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.9.3). Xxxxxxxx xxxxxxxxx robenidinu xx xxx xxxxxxx xxxx je xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxx by xx xxxxxx pouze xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx přidaného xxxxxxxxxx x obsahu xxxxxxxxxx x naředěném xxxxxxxx. Xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx 10 % xxxxxxx šíře.
7.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx pole
Výsledky xxxx xxxxxxxxxxxxx podle xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
x) xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x standardu xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx na xxxxxxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxx rozlišovací xxxxxxxxxx detekčního xxxxxxx. Xxx xxxxxxxx x xxxxxxxx polem xx xxxxx xxxx/xxxxx 2 xx;
x) xxx vlnové xxxxx xxxx 220 x 350 xx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx zaznamenaný xx vrcholu píku xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx spektra x rozsahu 10 xx 100 % xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Tohoto xxxxxxxx je xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx odchylka xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 % xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
x) xxx xxxxxx délce xxxx 220 x 350 xx se xxxxx xxxxxxxx vzestupu, xxxxxxx a xxxxxxx xxxx zkoušeného xxxxxx xxxxx xx ostatních x xxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 10 xx 100 % xxxxxxxxx absorbance. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx, jestliže xxxx xxxxxxxx stejná xxxxxx x jestliže xx xxxxx sledovaných bodech xxxxxxxx mezi xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx 15 % absorbance xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxx xxxx dosaženo xxxxxxxxx x xxxxxx kritérií, xxxxxxxxxx xxxxxxx není xxxxxxxxx.
7.2. Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 10 % xxxxx. nejvyššího xxxxxxxx xxx obsahu robenidinu xxx 15 xx/xx.
7.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxx fortifikovaný xxxxxx musí xxx xxxxxxx 85 %
8. Xxxxxxxx xxxxxxxxx testu
Společenství xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx test, xx kterém xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx pro xxxxxx a králíky, xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx v této xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
xxxxxxx |
|||
|
Xxxxx xxxxxx |
Xxxxxx |
Xxxxx krmivo |
Pelety |
|
|
Průměr (xx/xx) |
27,00 |
27,99 |
43,6 |
40,1 |
|
Xx (xx/xx) |
1,46 |
1,26 |
1,44 |
1,66 |
|
XXx (%) |
5,4 |
4,5 |
3,3 |
4,1 |
|
XX (xx/xx) |
4,36 |
3,36 |
4,61 |
3,91 |
|
XXX (%) |
16,1 |
12,0 |
10,6 |
9,7 |
|
Xxxxxxxxx (%) |
90,0 |
93,3 |
87,2 |
80,2 |
Xx = standardní xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
XXx = variační xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
XX = xxxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
XXX = xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
2. XXXXXXXXX METHYLBENZOCHÁTU
(2-methyl-7-benzyl-oxy-6-butyl-1,4-dihydro-4-oxychinolin-3-karboxylát)
1. Účel x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxx k xxxxxxxx methylbenzochátu x xxxxxxxx. Dolní mez xxxxxxxxxxxxxxx je 1 xx/xx.
2. Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx methanolového xxxxxxx xxxxxxxx methansulfonové. Xxxxxxx xx přečištěn xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, a xxxxxxxx xxx znovu xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx methylbenzochátu xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx kapalinovou chromatografií (XXXX) xxxxxx XX xxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
3.1 Xxxxxxxxxxxxx
3.2 Xxxxxxxx, pro HPLC
3.3 Xxxxxxx xxxx XXXX
Xxxx xxxxxxxxx (3.2.) x xxxx (pro XXXX) 75 + 25 (xxx.).
Xxxxxxxxxxx se xxxx 0,22 μm xxxxx (4.5.) x odplyní (xxxx. xxxxxxxxxxx xx xxxx 10 minut).
3.4 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx σ = 2 %
20 ml xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx se xxxxxxx x 1000 xx xxxxxxxxx (3.2.).
3.5 Xxxxxx xxxxxxxx chlorovodíkové σ = 10 %
100 xx kyseliny chlorovodíkové (X20 x. 1,18g/ml) xx xxxxxxx x 1000 xx vody.
3.6 Xxxxx XX-120 (Xx), 100 – 200 xxxx
Xxxx použitím se xxxxxxxx xxxxx xxxxx: 100 g iontoměniče xx xxxxxxxx x 500 xx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3,5) x xx xxxxxxx xxxxxxx xx zahřívá x xxxx xx xxxxx desce. Xx xxxxxxxxxxx xx kyselina xxxxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxx papírový xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx 500 xx vody x xxxxx 250 xx xxxxxxxxx (3.2). Potom xx xxxxxxxxxx dalšími 250 xx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx ionex xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx lahvi.
3.7 Xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (2-xxxxxx-7-xxxxxx-xxx-6-xxxxx-1,4-xxxxxxx-4-xxxxxxxxxxx-3-xxxxxxxxxx)
3.7.1 Základní standardní xxxxxx xxxxxxxxxx, 500 μx/xx
Xxxxxx se 50 xx xxxxxxxxxx xxxxx (3.7) x přesností 0,1 mg, rozpustí xx ve 100 xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxxx (3.4), xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx.
3.7.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx methylbenzochátu 50μx/xx
Xx 50 ml xxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxx 5 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (3.7.1), xxxxxx xx xxxxxxxxxx (3.2) po xxxxxx a promíchá.
3.7.3 Xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxxx 25 ml xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx 1, 2, 3, 4 a 5 xx pracovního standardního xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (3.7.2). Xxxxxx xx po xxxxxx xxxxxxx xxxx (3.3) x xxxxxxx. Xxxx roztoky mají xxxxxxxxxxx 2, 4, 6, 8 x 10 μg/ml methylbenzochátu. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x pomůcky
4.1 Xxxxxxxxxxx třepačka
4.2 Xxxxxxx xxxxxxx
4.3 Skleněná xxxxxx (250 x 15 xx) xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx a nádržkou x xxxxxxxxx 200 xx
4.4 XXXX zařízení xxxxxxxx UV xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx vlnovou xxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx polem
4.4.1 Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx: 300 xx x 4 xx, X – 18, 10μm xxxx kolona xxxxxxx
4.5 Xxxxxxxxxx xxxxxx 0,22 μx
4.5 Xxxxxxxxxx filtry 0,45μx
5. Postup
5.1 Xxxxxx
5.1.1 Xxxxxxxx krmivo bez xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx zda x xxx xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx ani xxxx rušivé xxxxx.
5.1.2 Xxxx xx xxxxxxx xxxx výtěžnosti xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx je xxxxxxxx xx xxxxxx. X xxxxxxxxxxx na xxxxxx 1,5 xx/xx xx xxxxx xx 20 x xxxxxxxxxx xxxxxx 600 μx xxxxxxxxxx standardního roztoku (3.7.1), promíchá xx x xx 10 xxxxx se započne x xxxxxxxx (5.2).
Xxxx.: Xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxx xx xxxx být podobného xxxx, xxxx xx xxxxxx, x xxx xxxx xxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxx
Xx 250 xx Erlenmeyerovy xxxxx xx naváží přibližně 20 g xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx 0,01 g. Xxxxx xx 100 ml xxxxxxx xxxxxxxx methansulfonové (3.4) x xxxxxxxxxx xx třepe (4.1) xx dobu 30 xxxxx. Roztok se xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx extrakci xxxxxxxx-xxxxxxxx (5.3).
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxx
Xx 500 xx xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx 100 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.5) xx xxxxx 25 xx xxxxxxxx, který xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx v xxxx (5.2). Dále xx xx nálevky přidá 100 xx xxxxxxxxxxxxxx (3.1) x xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx) se odpustí xx 500 xx xxxxx x xxxxxxx xxxx. Extrakce xxxxx xxxx se xxxxxxx xx xxxxx dalšími 40 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x tyto xx xxxxx s xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx x kulatým xxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxx xx rotační xxxxxxx (4.2) při xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx 40 xX. Xxxxxxx xx rozpustí x 20–25 xx xxxxxxxxx (3.2), xxxxx xx xxxxxxxxx a xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx x iontovou xxxxxxx (5.4).
5.4 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx
5.4.1 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.3) xx xxxxx tampon xx xxxxxx vaty. Xxxxxxxx xx xxxxxxxx x 5 x xxxxxxxxxx katexu a x 50 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.5). Xxxx xxxx xx xxxxxx xx skleněné xxxxxx a nechat xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx odpustí xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x kolona xx promývá xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxxx papír. Potom xx xx xxxxxx xx xxxxxx 50 xx methanolu (3.2) x xxxxx xx xxxxx xx k xxxxxxx xxxxxx.
5.4.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xx xxxxxx xx xxxxxxx napipetuje získaný xxxxxxx (5.3). Xxxxx x kulatým xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 5 až 10 xx xxxxxxxxx (3.2) x výplach xx xxxx xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx xx nechá xxxxx xx x povrchu xxxxxx. Kolona xx xxxxxxx 50 xx xxxxxxxxx tak, xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx 5 xx xx xxxxxx. Xxxxxxxx kapalina se xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxx 150xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (3.4) a xxxxx se jímá xx 250 ml Xxxxxxxxxxxxx baňky.
5.5 Extrakce xxxxxxxx-xxxxxxxx
Xxxxxxx eluát (5.4.2) xx převede xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx 5 xx 10 xx xxxxxxxxx (3.2) a xxxxxxx xx přidá do xxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xx dělící xxxxxxx xxxxx 300 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.5) a 130 xx dichlormethanu (3.1). Xxxxx xx xx xxxx jedné xxxxxx a xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx (xxxxxxxxxxxxxxxx) xxxxxx xx xxxxxxx xx 500 xx xxxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx se xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx 70 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx se xxxxx x prvním xxxxxxxxx x xxxxx x xxxxxxx xxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx do xxxxx v xxxxxxx xxxxxxx (4.2) xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx 40 °X. Xxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxx v xxxxxxxxx 5 ml xxxxxxxxx (3.2) x xxxxx roztok xx xxxxxxxxxxxxx převede do 10 ml xxxxxxx xxxxx. Xxxxx x xxxxxxx dnem xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx 1 xx 2 ml methanolu x xxxx se xxxxxxx do xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxx po xxxxxx xxxxxxxxxx a promíchá. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx membránový xxxxx (4.6). Xxxxx xxxxxx se použije xxx xxxxxxx XXXX (5.6).
5.6 Xxxxxxx xxxxxx XXXX
5.6.1 Parametry
Následující podmínky xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx být xxxxxxx xxxx parametry xxxxx xxxxxxx xx stejným xxxxxxxxx:
- xxxxxx pro xxxxxxxxxxx chromatografii (4.4.1),
- xxxxxxx xxxx: směs xxxxxxxxx x xxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx: 1–1,5 xx/xxxxxx,
- xxxxxx délka xxxxxxxxx: 265 xx,
- xxxxx nástřiku: 20 xx 50μx.
Xxxxxxxxx chromatografického xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.7.3) obsahujícího 4μx/xx, xx xx xxxxxxxx konstantních výšek xxxx xxxxx xxxx x retenčních xxxx.
5.6.2 Xxxxxxxxxx xxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxx roztok (3.7.3) xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxx (xxxxxx) píků xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx vynesením xxxxxxxxxx xxxxxx výšek xxxx xxxxx píků xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x μx/xx.
5.6.3 Roztok xxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (5.5.) x xxxxxxxx stejný xxxxx, xxxx byl xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx x určí xxxxxxxx hodnota výšky (xxxxxx) z xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx.
6. Xxxxxxx výsledků
Z xxxxxxxx hodnoty xxxxx (xxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx vzorku xx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx vzorku x μg/ml podle xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.6.2.).
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x (mg/kg) xx xxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx
x =(x x 40)/x,
xx xxxxxx xx
x = koncentrace methylbenzochátu x xxxxxxx xxxxxx x μg/ml,
m = xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx.
7. Ověření xxxxxxxxxx výsledků
7.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x přídavkem anebo xxxxxxxx detektoru x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.7.3.), xxxxxxxxxxx 10 μx/xx xxxxxxxxxxxxxxxx.
7.1.1 Xxxxxxxxx stanovením x přídavkem
Extrakt xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (3.7.2.). Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx být xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx methylbenzochátu x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx množství xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx x polovině xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxxx 10 % původní xxxx.
7.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
x) při xxxxxx délce xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx být xxxxxx xxxxxxx zaznamenaný xx xxxxxxx xxxx xx chromatogramu stejný x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx detekčního xxxxxxx. Pro xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx/xxxxx 2 nm;
b) při xxxxxx xxxxx xxxx 220 x 350 xx xx xxxxx xxxxxx spektra xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx lišit xx ostatních xxxxx xxxxxxx v rozsahu 10 xx 100 % xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx kritéria xx xxxxxxxx, xxxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x jestliže xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 % absorbance xxxxxxxxxxxx xxxxxxx;
x) při xxxxxx xxxxx xxxx 220 x 350 nm xx nesmí xxxxxxxx xxxxxxxx, vrcholu a xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx lišit xx xxxxxxxxx v této xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx 10 až 100 % xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx, jestliže xxxx xxxxxxxx stejná xxxxxx x jestliže xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx odchylka xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx nikde 15 % absorbance xxxxxxx ve vrcholu xxxx.
Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx analytu xxxx xxxxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx výsledky xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx stejném xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 10 % xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx mezi 4 x 20 xx/xx.
7.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx vzorek xxxx xxx nejméně 90 %.
8. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
X xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx analyzováno xxx xxxxxx. U xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx
|
Xxxxxxxx krmivo |
Sypké xxxxxx |
Xxxxxx |
Xxxxx krmivo |
Pelety |
|
|
Průměr (mg/kg) |
Nezjištěno |
4,50 |
4,50 |
8,90 |
8,70 |
|
Sr (xx/xx) |
— |
0,30 |
0,20 |
0,60 |
0,50 |
|
XXx (%) |
— |
6,70 |
4,40 |
6,70 |
5,70 |
|
SR (xx/xx) |
— |
0,40 |
0,50 |
0,90 |
1,00 |
|
XXX |
— |
8,90 |
11,10 |
10,10 |
11,50 |
|
Xxxxxxxxx (%) |
— |
92,00 |
93,00 |
92,00 |
89,00 |
Xx = xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
XXx = xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
XX = xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
XXX = variační xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx