Xxxxxxxx xxxxxxxx Komise 93/117/XX
xx xxx 17. xxxxxxxx 1993,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx úřední xxxxxxxx xxxxx
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx xxxxxxxx Rady 70/373/XXX xx xxx 20. xxxxxxxx 1970, xxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx Společenství xxx xxxxxx kontrolu xxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx nařízením (XXX) x. 3768/85 [2], x xxxxxxx na xxxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx k xxxx, xx xxxxxxxx 70/373/EHS xxxxxxx, že se xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx podmínek předepsaných xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x kvalitě x složení xxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx vzorků x xxxxxxxxxxxx metod Xxxxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, že xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx dodržování xxxxxxxx xxx používání xxxxxxxxxxx látek robenidinu x xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx,
XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:
Článek 1
Xxxxxxx státy xxxxxxx, xx xxx xxxxxxxxx provedených x xxxxx úředních kontrol xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx x methylbenzochátu x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx této xxxxxxxx.
Článek 2
Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx souladu x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 30. xxxxxxxxx 1994. Xxxxxxxxxx o xxxx uvědomí Xxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx musí obsahovat xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxx za takový xxxxx xxxxxx při xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx odkazu xx xxxxxxx členské xxxxx.
Xxxxxx 3
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx dnem xx xxxxxxxxx v Úředním xxxxxxxx Evropských xxxxxxxxxxxx.
V Xxxxxxx dne 17. prosince 1993.
Xx Xxxxxx
Xxxx Xxxxxxxx
xxxx Xxxxxx
[1] Xx. věst. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Úř. xxxx. X 362, 31.12.1985, x. 8.
XXXXXXX
1. XXXXXXXXX XXXXXXXXXX
1,3-xxx [(4-xxxxxxxxxxxxxxx) xxxxx]xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
1. Xxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxx metoda xxxxxx xx xxxxxxxxx obsahu xxxxxxxxxx x krmivech. Xxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 5 xx/xx.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxx okyseleným xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xx koloně x xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx se x xx xxxxxx objem xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx fáze. Obsah xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx účinnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) na xxxxxxxx xxxx xxxxxx XX detektoru.
3. Činidla
3.1 Xxxxxxxx
3.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx 500 xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx 4,0 xx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (X20x, 1,18 x/xx), doplní xx xx značku xxxxxxxxxx (3.1.) x promíchá. Xxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxxxxx těsně xxxx použitím.
3.3 Acetonitril, xxx XXXX
3.4 Xxxxxxxxxxx xxxx
Xxx 3X, 8 xx 12 mesh (1,6–2,5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx 0,3 mm).
3.5 Xxxx xxxxxxx: kyselý, xxxxxx aktivity I xxx kolonovou xxxxxxxxxxxxxx
100 x xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx 2 xx vody. Zazátkuje xx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 20 xxxxx. Skladuje se x xxxxx zazátkované xxxxxxx.
3.6 Dihydrogen xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, roztok c = 0,025 mol/l
3,4 x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxx (xxx XXXX) x 1000 xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xx po značku x promíchá.
3.7 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx x = 0, 025 xxx/x
3,55 g xxxxxxxxx (xxxx 4,45 x dihydrátu, xxxx 8,95 g dodekahydrátu) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx rozpustí xx xxxx (pro XXXX) x 1000 ml xxxxxxx baňce. Xxxxxx xx xx xxxxxx x promíchá.
3.8 Xxxxxxx xxxx HPLC
Smíchá xx:
650 xx acetonitrilu (3.3.),
250 xx xxxx (xxx XXXX),
50 xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.6.),
50 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.7.).
Xxxxxxxxx se filtrem 0,22 μx (4.6.) x roztok se xxxxxxxx (xxxx. xxxxxxxxxxx xx xxxx 10 xxxxx).
3.9 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxx xxxxxxxxx: 1.3-xxx [(4-chlorbenziliden) xxxxx] xxxxxxxx hydrochlorid, X 758.
3.9.1 Xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx roztok: 300 μx/xx:
Xxxxxx xx 30 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (3.9.) x xxxxxxxxx 0,1 xx. Xxxxxxxx xx x xxxxxxx methanolu (3.2.) xx 100 xx xxxxxxx baňce, xxxxxx xx xx xxxxxx stejným xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx se. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx v temnu.
3.9.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx: 12 μx/xx
Xxxxxx xxx 10,0 ml xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (3.9.1) xx 250 xx odměrné xxxxx, xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx fází (3.8) x xxxxxxxx. Baňka xx xxxxx aluminiovou xxxxx a uloží x temnu.
3.9.3 Xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxxxxx 50 xx odměrných buněk xx xxxxxx 5.0, 10.0, 15.0, 20.0 x 25.0 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.9.2.). Xxxxxx xx xx značku mobilní xxxx (3.8.) a xxxxxxxx. Tyto roztoky xxxxxxxxxx 1.2, 2.4, 3.6, 4.8 x 6.0 μx/xx robenidinu. Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx těsně xxxx xxxxxxxx.
4. Přístroje x xxxxxxx
4.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx, vybavená xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xx xxxxxxxxx 150 xx. Vnitřní xxxxxx 10 – 15 xx, xxxxx 250 xx.
4.2 Xxxxx xxxxxxxx
4.3 Xxxxxxx odparka
4.4 Zařízení xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx chromatografii (XXXX) xxxxxxxx ultrafialovým xxxxxxxxxx x měnitelnou xxxxxxx xxxxxx, anebo detektorem x xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx v xxxxx 250 - 400 xx
4.4.1 Xxxxxx xx xxxxxxxxxxx chromatografii: 300 xx x 4 xx, X18, 10 μx náplní xxxx xxxxxxx.
4.5 Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx (Xxxxxxx XX/X xxxx xxxxxxx)
4.6 Xxxxxxxxxx xxxxxx 0,22 μx
4.7 Membránové xxxxxx 0,45 μx
5. Xxxxxx
Xxxx.: Xxxxxxxxx je citlivý xx xxxxxx. Xxxxx xxxx xxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx nádobí x xxxxxxx xxxx.
5.1 Obecně
5.1.1 Xxxxxxxxxx xx analyzovat xxxxxxxx xxxxxx bez xxxxxxxxxxx robenidinu x xxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx látky.
5.1.2 Xx xxxxxx provést test xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1.1.), xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx robenidinu, xxxx xx xx xxxxxx. X dosažení xxxxxx 60 xx/xx xx xx 250 xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 3 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.9.1.). Xxxxxx xx xxxxxx xxx xx xxxxx 0,5 xx x xxxxxx dusíku. Xxxxx xx 15 x modelového krmiva, xxxxxxxx xx x xx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxx x xxxxxxxx (5.2.).
Xxxx.: Xxx xxxx xxxx xxxxxx by xxxx xxx modelové xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.2 Extrakce
Do 250 xx Erlenmeyerovy baňky xx xxxxxx xxxxxxxxx 15 x xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx 0,01 x, přidá xx 100 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.2), xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx na třepačce (4.2). Xxxxxx se xxxxxxxxxxx přes filtr xx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5) x xxxx xxxxx filtrátu se xxxx do 150 xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx se 7,5 x xxxxxxxxxxxxx xxxx (3.4), zazátkuje x xxx xxxxx xx xxxxx. Xxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xx skleněných xxxxxx. Tento roztok xx xxxxxxx x xxxxxxx (5.3).
5.3 Čištění
5.3.1 Xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.1) xx vloží xxxx zátka xx xxxxxx xxxx x xxxxxx se skleněnou xxxxxxxx. Xxxxxx xx 11,0 x připraveného xxxxxxxxxx hlinitého (3.5) x xxxxxx se xx xxxxxx, xxxxx xxxxx x minimální xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx konec xxxxxx.
5.3.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xx připravenou xxxxxx se xxxxxxxxxx 5,0 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (5.2). Xxxxxx xxxxxx xx xxxx o xxxxx xxxxxx a xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx se x xxxxxx xxxxxx xxxxxx 100 ml xxxxxxxxx (3.1) xxx rychlosti xxxxxxx 2 – 3 ml xx xxxxxx a xxxxx xx jímá xx 250 xx xxxxx x xxxxxxx dnem. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxx teplotě 40xX xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx (4.3). Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx 3 – 4 xx xxxxxxx xxxx (3.8.) x xxxxxxxxxxxxx se xxxxxxx xx 10 ml xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxx vypláchne 1 – 2 xx xxxxxxx fáze x tyto xxxxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxx xxxxx. Baňka xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xx. Xxxxxxxxx část xxxxxxxxx xxxx 0,45 μm xxxxx (4.7). Xxxxx xxxxxx xx použije xxx xxxxxxx HPLC xxxxxxxxx (5.4).
5.4 Stanovení xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX)
5.4.1 Parametry
Následující xxxxxxxx xxxx uvedeny xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx i xxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxx pro xxxxxxxxxxx chromatografii (4.4.1),
mobilní xxxx (3.8),
průtoková rychlost: 1,5–2 xx/xxxxxx,
xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx: 317 xx,
xxxxx xxxxxxxx: 20–50 μx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx systému xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (3.9.3), xxxxx xxxxxxxx 3,6 μx/xx, xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx a xxxxxxxxxx xxxx.
5.4.2 Xxxxxxxxxx xxxx
Xxx xxxxx kalibrační roztok (3.9.3) se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxx xx xxxxx (xxxxxx) xxxx pro xxxxxx koncentraci. Xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxx odpovídajícím xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x μx/xx.
5.4.3 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx se nastříkne xxxxxx xxxxx extraktu xxxxxx, xxxx při xxxxxxxxx x určí xx průměrná hodnota xxxxx (plochy) xxxx xxxxxxxxxx.
6. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
X xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxx) xxxxxxxxxxxxxx píků v xxxxxxx xxxxxx xx xxxx koncentrace robenidinu x xxxxxxx xxxxxx x μg/ml xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.4.2).
x = (x × 200)/x,
xx xxxxxx xx
x = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx v μx/xx,
x = hmotnost xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx.
7. Xxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Identita
Identita xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x přídavkem xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx polem, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx extraktu xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.9.3) obsahujícím 6 μx/xx xxxxxxxxxx.
7.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxxx
X xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.9.3). Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x extraktu xxxxxx.
Xxxx xx xx xxxxxx xxxxx výška xxxx xxxxxxxxxx podle xxxxxxxx přidaného xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx v xxxxxxxx jeho maximální xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx 10 % xxxxxxx xxxx.
7.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
x) xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx být xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx na xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx danou rozlišovací xxxxxxxxxx detekčního xxxxxxx. Xxx xxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx plus/minus 2 xx;
x) xxx vlnové xxxxx mezi 220 x 350 nm xx nesmí záznam xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx od xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x rozsahu 10 xx 100 % xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Tohoto xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx vykázána xxxxxx maxima x xxxxxxxx nikde xxxxxxxx xxxx dvěma xxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 % xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx analytu.
c) xxx xxxxxx délce xxxx 220 a 350 nm se xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx 10 až 100 % xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx kritéria xx xxxxxxxx, jestliže jsou xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx spektry xxxxxxxxxxx nikde 15 % xxxxxxxxxx xxxxxxx xx vrcholu xxxx.
Xxxxxxxx xxxx dosaženo xxxxxxxxx x xxxxxx kritérií, xxxxxxxxxx xxxxxxx není xxxxxxxxx.
7.2. Opakovatelnost
Rozdíl xxxx xxxxxxxx dvou paralelních xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 10 % xxxxx. nejvyššího xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx 15 mg/kg.
7.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxx 85 %
8. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kruhový test, xx kterém xxxxxxx xxxxxxxxxx analyzovalo xxxxx xxxxxx xxxxx pro xxxxxx x králíky, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx ze xxxxxx xxx xxxxxxxx dvěma xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx v xxxx xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
xxxxxxx |
|||
|
Xxxxx xxxxxx |
Xxxxxx |
Xxxxx xxxxxx |
Xxxxxx |
|
|
Xxxxxx (xx/xx) |
27,00 |
27,99 |
43,6 |
40,1 |
|
Xx (xx/xx) |
1,46 |
1,26 |
1,44 |
1,66 |
|
XXx (%) |
5,4 |
4,5 |
3,3 |
4,1 |
|
XX (xx/xx) |
4,36 |
3,36 |
4,61 |
3,91 |
|
XXX (%) |
16,1 |
12,0 |
10,6 |
9,7 |
|
Xxxxxxxxx (%) |
90,0 |
93,3 |
87,2 |
80,2 |
Sr = standardní odchylka xxxxxxxxxxxxxxx
XXx = xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
XX = xxxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
XXX = xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
2. XXXXXXXXX METHYLBENZOCHÁTU
(2-methyl-7-benzyl-oxy-6-butyl-1,4-dihydro-4-oxychinolin-3-karboxylát)
1. Xxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxx k xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx/xx.
2. Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx je xxxxxxxxxx ze xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx přečištěn xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxx pak xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx methylbenzochátu xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx vysoce xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxxxx UV xxxxxxxxx.
3. Činidla
3.1 Xxxxxxxxxxxxx
3.2 Xxxxxxxx, xxx XXXX
3.3 Xxxxxxx xxxx HPLC
Směs xxxxxxxxx (3.2.) x xxxx (xxx XXXX) 75 + 25 (xxx.).
Xxxxxxxxxxx xx xxxx 0,22 μx xxxxx (4.5.) x odplyní (xxxx. xxxxxxxxxxx po xxxx 10 minut).
3.4 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx σ = 2 %
20 ml kyseliny xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x 1000 xx xxxxxxxxx (3.2.).
3.5 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx σ = 10 %
100 xx xxxxxxxx chlorovodíkové (X20 x. 1,18x/xx) xx xxxxxxx x 1000 ml xxxx.
3.6 Xxxxx XX-120 (Na), 100 – 200 xxxx
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx: 100 g xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x 500 ml roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3,5) x xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x varu xx xxxxx xxxxx. Po xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Filtruje se xxxx xxxxxxxx filtr xx sníženého xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx vždy 500 xx xxxx a xxxxx 250 ml xxxxxxxxx (3.2). Potom xx propláchne xxxxxxx 250 xx methanolu x xxxxxx prosáváním xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx.
3.7 Xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (2-xxxxxx-7-xxxxxx-xxx-6-xxxxx-1,4-xxxxxxx-4-xxxxxxxxxxx-3-xxxxxxxxxx)
3.7.1 Základní xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, 500 μx/xx
Xxxxxx se 50 xx xxxxxxxxxx xxxxx (3.7) x přesností 0,1 xx, xxxxxxxx xx ve 100 xx odměrné xxxxx x xxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxxx (3.4), xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx.
3.7.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx 50μx/xx
Xx 50 xx odměrné xxxxx xx xxxxxxxxxx 5 xx základního xxxxxxxxxxxx xxxxxxx methylbenzochátu (3.7.1), doplní xx xxxxxxxxxx (3.2) xx xxxxxx x promíchá.
3.7.3 Xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xx série 25 xx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxx 1, 2, 3, 4 x 5 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (3.7.2). Xxxxxx xx po xxxxxx xxxxxxx fází (3.3) x xxxxxxx. Xxxx xxxxxxx mají xxxxxxxxxxx 2, 4, 6, 8 a 10 μg/ml xxxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx jejich xxxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxxxx třepačka
4.2 Rotační xxxxxxx
4.3 Skleněná kolona (250 x 15 xx) xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx x kapacitou 200 xx
4.4 XXXX xxxxxxxx xxxxxxxx XX xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx detektorem xxxxxxxx xxxxx
4.4.1 Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx: 300 xx x 4 mm, C – 18, 10μx xxxx kolona xxxxxxx
4.5 Xxxxxxxxxx filtry 0,22 μx
4.5 Xxxxxxxxxx filtry 0,45μx
5. Xxxxxx
5.1 Obecně
5.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx bez xxxxxxxxxxx methylbenzochátu xx xxxx analyzovat x xxxxxxxxxx xxx v xxx není přítomen xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxx xxxxx.
5.1.2 Xxxx se xxxxxxx xxxx výtěžnosti xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, fortifkovaného xxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx je xxxxxxxx ve vzorku. X xxxxxxxxxxx na xxxxxx 1,5 mg/kg xx xxxxx do 20 x xxxxxxxxxx xxxxxx 600 μx xxxxxxxxxx standardního xxxxxxx (3.7.1), xxxxxxxx xx x xx 10 xxxxx se započne x xxxxxxxx (5.2).
Xxxx.: Xxxxxxxx krmivo xxx xxxxx xxxx by xxxx být podobného xxxx, xxxx xx xxxxxx, x při xxxx xxxxxxx by xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxx
Xx 250 xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx 20 x připraveného xxxxxx x xxxxxxxxx 0,01 x. Xxxxx xx 100 xx xxxxxxx xxxxxxxx methansulfonové (3.4) x mechanicky xx xxxxx (4.1) xx xxxx 30 xxxxx. Roztok xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx x filtrát xxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxx (5.3).
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxx
Xx 500 ml xxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx 100 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.5) xx přidá 25 xx xxxxxxxx, který xxx získán postupem xxxxxxxx x xxxx (5.2). Xxxx se xx nálevky přidá 100 xx xxxxxxxxxxxxxx (3.1) a xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx vrstvy xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx) xx xxxxxxx xx 500 xx xxxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xx dvěma xxxxxxx 40 xx dávkami xxxxxxxxxxxxxx x xxxx xx spojí x xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxx xx rotační xxxxxxx (4.2) xxx xxxxxxxx tlaku x xxxxxxx 40 oC. Xxxxxxx xx xxxxxxxx x 20–25 xx xxxxxxxxx (3.2), xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxx x iontovou xxxxxxx (5.4).
5.4 Xxxxxxxxxxxxxx výměnou xxxxx
5.4.1 Příprava xxxxxxxx xxxxxx
Xx dolního xxxxx xxxxxxxx kolony (4.3) xx vloží tampon xx xxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xx suspense x 5 x xxxxxxxxxx xxxxxx x x 50 xx xxxxxxxx chlorovodíkové (3.5). Xxxx xxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x nechat xxxxxx. Přebytečná xxxxxxxx xx xxxxxxx až xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx neutrální xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xx xxxxxx xx nalije 50 xx xxxxxxxxx (3.2) x nechá xx xxxxx xx x xxxxxxx xxxxxx.
5.4.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (5.3). Xxxxx x kulatým xxxx xx vypláchne xxxxx xxxxxxx 5 xx 10 xx methanolu (3.2) x xxxxxxx xx také xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx x xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx se xxxxxxx 50 xx xxxxxxxxx tak, xxx xxxxxx nepřesahoval 5 xx xx xxxxxx. Xxxxxxxx kapalina se xxxxxxxx. Methylbenzochát se xxxxxx x xxxxxx 150xx xxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxxx (3.4) x xxxxx xx xxxx xx 250 ml Xxxxxxxxxxxxx baňky.
5.5 Extrakce xxxxxxxx-xxxxxxxx
Xxxxxxx eluát (5.4.2) xx převede xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx baňka xx xxxxxxxxxx 5 až 10 ml xxxxxxxxx (3.2) x xxxxxxx xx přidá do xxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xx xxxxxx xxxxxxx přidá 300 xx xxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (3.5) x 130 ml dichlormethanu (3.1). Xxxxx se xx dobu jedné xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx fáze xxxxxxxxxxx. Nižší (xxxxxxxxxxxxxxxx) xxxxxx xx xxxxxxx xx 500 xx xxxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx vodné xxxx xx xxxxxxx xx xxxxx dalšími 70 xx dávkami xxxxxxxxxxxxxx x tyto xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx s xxxxxxx dnem.
Extrakt xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxx x rotační xxxxxxx (4.2) xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx 40 °X. Xxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxx v xxxxxxxxx 5 xx xxxxxxxxx (3.2) a xxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx 10 ml odměrné xxxxx. Xxxxx x xxxxxxx xxxx se xxxxxxxxx dvěma xxxxxxx xxxxxxx 1 xx 2 xx xxxxxxxxx x xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxx po xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.6). Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx XXXX (5.6).
5.6 Analýza pomocí XXXX
5.6.1 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx uvedeny xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx xxxx parametry xxxxx xxxxxxx xx stejným xxxxxxxxx:
- kolona xxx xxxxxxxxxxx chromatografii (4.4.1),
- xxxxxxx xxxx: xxxx xxxxxxxxx x xxxx,
- xxxxxxxxx rychlost: 1–1,5 xx/xxxxxx,
- xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx: 265 xx,
- xxxxx nástřiku: 20 xx 50μx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx kontroluje xxxxxxxxxx nástřikem kalibračního xxxxxxx (3.7.3) obsahujícího 4μx/xx, xx do xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxx.
5.6.2 Xxxxxxxxxx graf
Pro xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (3.7.3) xx provede xxxxxxx xxxxxxxx x změří xxxxx (xxxxxx) xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx křivka xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx výšek nebo xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků x μx/xx.
5.6.3 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx se nastříkne xxxxxxx xxxxxx (5.5.) x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx byl xxxxxx pro kalibrační xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxx výšky (xxxxxx) x píků xxxxxxxxxxxxxxxx.
6. Xxxxxxx výsledků
Z xxxxxxxx xxxxxxx výšky (xxxxxx) xxxx methylbenzochátu x xxxxxxx vzorku xx určí xxxxxxxxxxx x roztoku xxxxxx x μx/xx xxxxx xxxxxxxxxxxx grafu (5.6.2.).
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx w (mg/kg) xx xxxxxx xx xxxxxxx podle xxxxxx xxxxxx
x =(x x 40)/x,
xx kterém xx
x = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x μg/ml,
m = xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx.
7. Xxxxxxx xxxxxxxxxx výsledků
7.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx může xxx xxxxxxxxx opakovaným xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx polem, který xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx vzorku x xxxxxxxxxxx roztokem (3.7.3.), xxxxxxxxxxx 10 μx/xx xxxxxxxxxxxxxxxx.
7.1.1 Xxxxxxxxx stanovením x xxxxxxxxx
Xxxxxxx vzorku xx fortifikuje xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx pracovního xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.7.2.). Xxxxxxxx xxxxxxxxx methylbenzochátu xx být xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxx by xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxx xx xxxxxxx množství, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx x xxxxxxxx maximální xxxxx musí xxx xx xxxxxxxxx 10 % xxxxxxx xxxx.
7.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx pole
Výsledky xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
x) xxx xxxxxx xxxxx maximální xxxxxxxx xxxxxx i xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx zaznamenaný xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x nepřesností xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Pro detektor x diodovým xxxxx xx xxxxx xxxx/xxxxx 2 nm;
b) při xxxxxx xxxxx xxxx 220 x 350 xx se nesmí xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx částí xxxxxxx x xxxxxxx 10 až 100 % relativní xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx stejná maxima x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx nepřesahuje 15 % xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx;
x) xxx vlnové xxxxx xxxx 220 x 350 xx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 10 xx 100 % relativní xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx, jestliže xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x jestliže xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx mezi xxxxxxx nepřesahuje xxxxx 15 % xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxx není xxxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx analytu xxxx prokázána.
7.2 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx vzorku xxxxx xxxxxxxxxx 10 % xxxxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx mezi 4 x 20 xx/xx.
7.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx vzorek xxxx xxx nejméně 90 %.
8. Výsledky xxxxxxxxx xxxxx
X deseti laboratořích xxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx. X xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxx analýzy.
Výsledky
|
Modelové xxxxxx |
Xxxxx xxxxxx |
Xxxxxx |
Xxxxx xxxxxx |
Xxxxxx |
|
|
Xxxxxx (xx/xx) |
Xxxxxxxxxx |
4,50 |
4,50 |
8,90 |
8,70 |
|
Xx (xx/xx) |
— |
0,30 |
0,20 |
0,60 |
0,50 |
|
XXx (%) |
— |
6,70 |
4,40 |
6,70 |
5,70 |
|
XX (mg/kg) |
— |
0,40 |
0,50 |
0,90 |
1,00 |
|
CVR |
— |
8,90 |
11,10 |
10,10 |
11,50 |
|
Výtěžnost (%) |
— |
92,00 |
93,00 |
92,00 |
89,00 |
Xx = xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
XXx = xxxxxxxx koeficient xxxxxxxxxxxxxx
XX = standardní xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
XXX = xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx