Dvanáctá xxxxxxxx Komise 93/117/XX
xx xxx 17. xxxxxxxx 1993,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx metody Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx x založení Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx směrnici Xxxx 70/373/XXX xx dne 20. xxxxxxxx 1970, xxxxxx xx zavádějí xxxxxx odběru xxxxxx x xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (EHS) x. 3768/85 [2], x xxxxxxx na xxxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxx 70/373/EHS xxxxxxx, že xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx o kvalitě x xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx Společenství pro xxxxx vzorků a xxxxxxxxxxxx xxxxx Společenství;
vzhledem x xxxx, xx xx xxxxx stanovit xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx jsou x xxxxxxx xx stanoviskem Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx,
XXXXXXX TUTO SMĚRNICI:
Článek 1
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxx xxxxxxxxx provedených x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx obsahu xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Článek 2
Xxxxxxx státy xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx souladu x xxxxx směrnicí xxxxxxxxxx xx 30. xxxxxxxxx 1994. Xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx Komisi.
Tato xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx tuto xxxxxxxx xxxx xxxx xxx xx takový xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx členské státy.
Xxxxxx 3
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxx po xxxxxxxxx v Xxxxxxx xxxxxxxx Evropských xxxxxxxxxxxx.
V Xxxxxxx dne 17. xxxxxxxx 1993.
Xx Xxxxxx
Xxxx Xxxxxxxx
xxxx Komise
[1] Xx. věst. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Xx. xxxx. X 362, 31.12.1985, x. 8.
PŘÍLOHA
1. XXXXXXXXX XXXXXXXXXX
1,3-xxx [(4-xxxxxxxxxxxxxxx) xxxxx]xxxxxxxx hydrochlorid
1. Xxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx slouží xx stanovení xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 5 xx/xx.
2. Princip
Vzorek xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Extrakt se xxxxxx a xxxx xxxxxxxxx xxxx se xxxxxxxx xx xxxxxx x oxidem xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx eluuje x xxxxxx methanolem, xxxxxxxxxxx xx x xx vhodný xxxxx xx upraví xxxxxx xxxxxxx xxxx. Obsah xxxxxxxxxx xx stanoví xxxxxx účinnou kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xx xxxxxxxx xxxx xxxxxx XX detektoru.
3. Xxxxxxx
3.1 Xxxxxxxx
3.2 Okyselený methanol
Do 500 xx odměrné xxxxx xx xxxxx 4,0 ml xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (P20c, 1,18 x/xx), xxxxxx xx xx značku xxxxxxxxxx (3.1.) x promíchá. Xxxxx xxxxxx musí xxx připraven těsně xxxx xxxxxxxx.
3.3 Acetonitril, xxx HPLC
3.4 Xxxxxxxxxxx xxxx
Xxx 3X, 8 xx 12 xxxx (1,6–2,5 mm perličky xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx 0,3 xx).
3.5 Xxxx xxxxxxx: kyselý, xxxxxx xxxxxxxx I xxx xxxxxxxxx chromatografii
100 x xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx do xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx 2 xx vody. Zazátkuje xx x xxxxxxxxxx xx přibližně 20 xxxxx. Skladuje xx x dobře xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3.6 Xxxxxxxxxx fosforečnan xxxxxxxx, roztok x = 0,025 xxx/x
3,4 x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx ve xxxx (xxx HPLC) x 1000 ml xxxxxxx xxxxx, doplní xx xx xxxxxx x promíchá.
3.7 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, roztok x = 0, 025 mol/l
3,55 g xxxxxxxxx (xxxx 4,45 x xxxxxxxxx, xxxx 8,95 x xxxxxxxxxxxxx) xxxxxxxx fosforečnanu xxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxx (xxx HPLC) x 1000 ml xxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xx xx xxxxxx x xxxxxxxx.
3.8 Xxxxxxx xxxx XXXX
Xxxxxx xx:
650 xx xxxxxxxxxxxx (3.3.),
250 xx xxxx (pro XXXX),
50 ml xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx draselného (3.6.),
50 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.7.).
Xxxxxxxxx xx filtrem 0,22 μx (4.6.) x xxxxxx xx xxxxxxxx (např. xxxxxxxxxxx xx xxxx 10 xxxxx).
3.9 Xxxxxxxxxx látka
Čistý xxxxxxxxx: 1.3-xxx [(4-chlorbenziliden) xxxxx] guanidin xxxxxxxxxxxx, X 758.
3.9.1 Robenidin, xxxxxxxx xxxxxxxxxx roztok: 300 μg/ml:
Naváží xx 30 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx (3.9.) x xxxxxxxxx 0,1 xx. Xxxxxxxx xx x kyselém xxxxxxxxx (3.2.) xx 100 xx xxxxxxx baňce, xxxxxx xx po xxxxxx xxxxxxx rozpouštědlem x xxxxxxxx se. Xxxxx xx obalí xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx v xxxxx.
3.9.2 Xxxxxxxxx, pracovní standardní xxxxxx: 12 μx/xx
Xxxxxx xxx 10,0 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.9.1) xx 250 xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx po xxxxxx xxxxxxx xxxx (3.8) x xxxxxxxx. Baňka xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxx.
3.9.3 Kalibrační xxxxxxx
Xx xxxxxxx 50 xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx 5.0, 10.0, 15.0, 20.0 x 25.0 ml xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.9.2.). Xxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx (3.8.) a xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 1.2, 2.4, 3.6, 4.8 x 6.0 μx/xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx.
4. Přístroje x pomůcky
4.1 Skleněná xxxxxx
Xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x nádržkou xx přibližně 150 xx. Xxxxxxx xxxxxx 10 – 15 xx, xxxxx 250 xx.
4.2 Xxxxx xxxxxxxx
4.3 Xxxxxxx odparka
4.4 Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxxxxxx ultrafialovým xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx polem, xxxxxxxxxx v xxxxx 250 - 400 xx
4.4.1 Xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx: 300 xx x 4 xx, C18, 10 μx náplní nebo xxxxxxx.
4.5 Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx (Xxxxxxx XX/X nebo podobný)
4.6 Xxxxxxxxxx xxxxxx 0,22 μx
4.7 Membránové filtry 0,45 μx
5. Postup
Pozn.: Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx světlo. Xxxxx xxxx být xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx nádobí x xxxxxxx skla.
5.1 Obecně
5.1.1 Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxx, zda neobsahuje xxxxxxxxx ani xxxx xxxxxx xxxxx.
5.1.2 Xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1.1.), do xxxxxxx bylo xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx je ve xxxxxx. K dosažení xxxxxx 60 xx/xx xx xx 250 xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 3 xx xxxxxxxxxx standardního xxxxxxx (3.9.1.). Roztok xx xxxxxx xxx xx xxxxx 0,5 xx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx 15 x modelového krmiva, xxxxxxxx xx x xx deseti xxxxxxxx xx xxxx začít x xxxxxxxx (5.2.).
Pozn.: Xxx účel xxxx xxxxxx xx mělo xxx modelové krmivo xxxxxxxxx xxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxx
Xx 250 xx Erlenmeyerovy xxxxx xx naváží přibližně 15 g xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx 0,01 x, xxxxx xx 100 ml xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.2), xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx na xxxxxxxx (4.2). Xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx vláken (4.5) x xxxx xxxxx xxxxxxxx se xxxx do 150 xx Erlenmeyerovy baňky. Xxxxx xx 7,5 x molekulárního xxxx (3.4), xxxxxxxxx a xxx xxxxx se xxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx přes xxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx roztok xx použije x xxxxxxx (5.3).
5.3 Xxxxxxx
5.3.1 Xxxxxxxx xxxxxx s xxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxx skleněné kolony (4.1) xx vloží xxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx x xxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx 11,0 x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.5) x nasype se xx xxxxxx, pokud xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx prodlevou x xxxxxxx xxxxxxxxx. Oxid xxxxxxx xx x xxxxxxxx koloně xxxxxxx xxxxxx poklepem na xxxxx konec xxxxxx.
5.3.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx 5,0 ml xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (5.2). Xxxxxx xxxxxx xx xxxx x stěnu xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx řádně xxxxxxxxxx xxxxxx hlinitým. Xxxxxxxxx se z xxxxxx xxxxxx xxxxxx 100 xx xxxxxxxxx (3.1) xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 2 – 3 xx za xxxxxx x eluát xx xxxx xx 250 ml baňky x xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxxx roztok xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x při xxxxxxx 40xX odpaří xx xxxxx x rotační xxxxxxx (4.3). Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx 3 – 4 xx xxxxxxx xxxx (3.8.) a xxxxxxxxxxxxx se xxxxxxx xx 10 ml xxxxxxx xxxxx. Baňka xx xxxxxxxxxx vypláchne 1 – 2 xx xxxxxxx fáze x xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx baňky. Xxxxx xx doplní xx xxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx 0,45 μm xxxxx (4.7). Xxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxx xxxxxxx HPLC xxxxxxxxx (5.4).
5.4 Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX)
5.4.1 Parametry
Následující xxxxxxxx jsou uvedeny xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxx x jiné xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx výsledkům:
Kolona xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (4.4.1),
xxxxxxx xxxx (3.8),
xxxxxxxxx xxxxxxxx: 1,5–2 ml/minuta,
vlnová délka xxxxxxxxx: 317 xx,
xxxxx xxxxxxxx: 20–50 μl.
Stabilita xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx opakovaným nástřikem xxxxxxxxxxxx roztoku (3.9.3), xxxxx xxxxxxxx 3,6 μx/xx, xx xx xxxxxxxx konstantních výšek xxxx a xxxxxxxxxx xxxx.
5.4.2 Xxxxxxxxxx xxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (3.9.3) se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxx se výšky (xxxxxx) xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xx získá xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x μx/xx.
5.4.3 Roztok xxxxxx
Xxxxxxxxx xx nastříkne xxxxxx xxxxx extraktu xxxxxx, jako xxx xxxxxxxxx a xxxx xx průměrná hodnota xxxxx (xxxxxx) píků xxxxxxxxxx.
6. Xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx
X průměrných xxxxxx výšek (xxxxx) xxxxxxxxxxxxxx píků x xxxxxxx xxxxxx xx xxxx koncentrace xxxxxxxxxx x roztoku vzorku x μx/xx odečtením x kalibračního xxxxx (5.4.2).
x = (c × 200)/x,
xx xxxxxx xx
x = koncentrace xxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx x μx/xx,
x = xxxxxxxx navážky xxxxxx v xxxxxxx.
7. Xxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx opakovaným xxxxxxxxxx x přídavkem xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx extraktu xxxxxx x xxxxxxxxxxx roztokem (3.9.3) obsahujícím 6 μx/xx xxxxxxxxxx.
7.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx
X xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxx roztoku (3.9.3). Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxx je xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxx xx se xxxxxx pouze xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx robenidinu x xxxxxx robenidinu x xxxxxxxxx extraktu. Xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx 10 % xxxxxxx šíře.
7.1.2 Detektor xxxxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx jsou xxxxxxxxxxxxx xxxxx následujících xxxxxxxx:
x) xxx xxxxxx xxxxx maximální xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxx záznam xxxxxxx zaznamenaný ve xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx systému. Xxx detektor x xxxxxxxx xxxxx se xxxxx xxxx/xxxxx 2 xx;
x) xxx xxxxxx xxxxx xxxx 220 x 350 nm xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx zaznamenaný xx vrcholu xxxx xxxxxxxxxxxxx lišit xx xxxxxxxxx částí xxxxxxx x xxxxxxx 10 xx 100 % xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxx, xxxxxxxx jsou vykázána xxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx nikde xxxxxxxx xxxx dvěma xxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 % xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
x) xxx xxxxxx xxxxx xxxx 220 x 350 xx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx od xxxxxxxxx x této xxxxx xxxxxxx x rozsahu 10 až 100 % relativní absorbance. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx ve xxxxx sledovaných xxxxxx xxxxxxxx xxxx spektry xxxxxxxxxxx xxxxx 15 % absorbance xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx některého x těchto xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx není xxxxxxxxx.
7.2. Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx paralelních xxxxxxxxx provedených na xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 10 % xxxxx. xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx obsahu robenidinu xxx 15 xx/xx.
7.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx 85 %
8. Xxxxxxxx xxxxxxxxx testu
Společenství xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx test, xx kterém dvanáct xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx pro xxxxxx a xxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xx vzorků xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x této xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
xxxxxxx |
|||
|
Xxxxx xxxxxx |
Xxxxxx |
Xxxxx xxxxxx |
Xxxxxx |
|
|
Xxxxxx (xx/xx) |
27,00 |
27,99 |
43,6 |
40,1 |
|
Xx (mg/kg) |
1,46 |
1,26 |
1,44 |
1,66 |
|
CVr (%) |
5,4 |
4,5 |
3,3 |
4,1 |
|
XX (xx/xx) |
4,36 |
3,36 |
4,61 |
3,91 |
|
XXX (%) |
16,1 |
12,0 |
10,6 |
9,7 |
|
Výtěžnost (%) |
90,0 |
93,3 |
87,2 |
80,2 |
Sr = xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
XXx = xxxxxxxx xxxxxxxxxx opakovatelnosti
SR = xxxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
XXX = xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
2. XXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXXX
(2-xxxxxx-7-xxxxxx-xxx-6-xxxxx-1,4-xxxxxxx-4-xxxxxxxxxxx-3-xxxxxxxxxx)
1. Xxxx x xxxxxx použití
Tato xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx. Dolní xxx xxxxxxxxxxxxxxx je 1 xx/xx.
2. Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx je xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx methanolového roztoku xxxxxxxx methansulfonové. Extrakt xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx chromatografií, x xxxxxxxx xxx znovu xxxxxxxxxxxxxxx. Obsah xxxxxxxxxxxxxxxx xx stanoví xx xxxxxxxx fází vysoce xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxxxx XX xxxxxxxxx.
3. Činidla
3.1 Xxxxxxxxxxxxx
3.2 Xxxxxxxx, xxx HPLC
3.3 Xxxxxxx xxxx XXXX
Xxxx xxxxxxxxx (3.2.) a xxxx (xxx XXXX) 75 + 25 (xxx.).
Xxxxxxxxxxx xx přes 0,22 μx filtr (4.5.) a xxxxxxx (xxxx. ultrazvukem xx xxxx 10 xxxxx).
3.4 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx σ = 2 %
20 xx kyseliny xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x 1000 xx xxxxxxxxx (3.2.).
3.5 Xxxxxx xxxxxxxx chlorovodíkové σ = 10 %
100 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (X20 c. 1,18x/xx) xx xxxxxxx v 1000 xx xxxx.
3.6 Xxxxx XX-120 (Na), 100 – 200 xxxx
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx katex xxxxx: 100 x xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx x 500 ml xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3,5) x xx xxxxxxx xxxxxxx xx zahřívá x xxxx na xxxxx desce. Xx xxxxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx filtr xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx propláchne xxxxxxx xxxx 500 xx vody x xxxxx 250 xx xxxxxxxxx (3.2). Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx 250 xx xxxxxxxxx x vysuší prosáváním xxxxxxx přes xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx.
3.7 Xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (2-xxxxxx-7-xxxxxx-xxx-6-xxxxx-1,4-xxxxxxx-4-xxxxxxxxxxx-3-xxxxxxxxxx)
3.7.1 Xxxxxxxx standardní xxxxxx xxxxxxxxxx, 500 μx/xx
Xxxxxx se 50 xx standardní xxxxx (3.7) x přesností 0,1 xx, rozpustí xx xx 100 xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (3.4), xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx.
3.7.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx 50μx/xx
Xx 50 xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx 5 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx methylbenzochátu (3.7.1), xxxxxx xx xxxxxxxxxx (3.2) po xxxxxx a promíchá.
3.7.3 Xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxxx 25 xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx 1, 2, 3, 4 x 5 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (3.7.2). Xxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx (3.3) a zamíchá. Xxxx roztoky xxxx xxxxxxxxxxx 2, 4, 6, 8 a 10 μx/xx xxxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx připravovat těsně xxxx jejich xxxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
4.2 Xxxxxxx xxxxxxx
4.3 Xxxxxxxx xxxxxx (250 x 15 xx) xxxxxxxx uzavíracím xxxxxxxxx a xxxxxxxx x xxxxxxxxx 200 xx
4.4 XXXX zařízení xxxxxxxx XX xxxxxxxxxx x měnitelnou xxxxxxx xxxxxx xxxx detektorem xxxxxxxx polem
4.4.1 Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx: 300 xx x 4 mm, X – 18, 10μx xxxx xxxxxx xxxxxxx
4.5 Xxxxxxxxxx xxxxxx 0,22 μx
4.5 Xxxxxxxxxx xxxxxx 0,45μx
5. Postup
5.1 Xxxxxx
5.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx v xxx xxxx přítomen xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx rušivé látky.
5.1.2 Xxxx xx provést xxxx výtěžnosti xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, fortifkovaného xxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx, jaké je xxxxxxxx ve xxxxxx. X xxxxxxxxxxx xx xxxxxx 1,5 xx/xx xx xxxxx do 20 x xxxxxxxxxx xxxxxx 600 μx xxxxxxxxxx standardního xxxxxxx (3.7.1), promíchá xx x po 10 xxxxx xx xxxxxxx x extrakcí (5.2).
Xxxx.: Xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxx by xxxx být xxxxxxxxx xxxx, jako xx xxxxxx, a xxx xxxx xxxxxxx xx xxxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxx
Xx 250 xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx 20 g xxxxxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxxx 0,01 x. Xxxxx xx 100 xx xxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxxx (3.4) a xxxxxxxxxx xx třepe (4.1) xx xxxx 30 xxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxx (5.3).
5.3 Extrakce xxxxxxxx-xxxxxxxx
Xx 500 xx xxxxxx nálevky, xxxxxxxxxx 100 xx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.5) xx xxxxx 25 xx xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx v xxxx (5.2). Xxxx xx xx nálevky xxxxx 100 xx xxxxxxxxxxxxxx (3.1) x xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx) xx xxxxxxx xx 500 xx xxxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xx dvěma xxxxxxx 40 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx a xxxx xx xxxxx x xxxxxx extraktem x xxxxx x kulatým xxxx. Extrakt dichlormethanu xx xxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (4.2) při xxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx 40 xX. Xxxxxxx xx rozpustí x 20–25 xx xxxxxxxxx (3.2), baňka xx xxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx pro chromatografii x iontovou xxxxxxx (5.4).
5.4 Chromatografie xxxxxxx xxxxx
5.4.1 Xxxxxxxx ionexové xxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.3) xx xxxxx tampon xx xxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxx x 5 g xxxxxxxxxx xxxxxx a x 50 xx xxxxxxxx chlorovodíkové (3.5). Xxxx xxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x nechat xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx odpustí až xxxxx nad xxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx do kolony xx nalije 50 xx methanolu (3.2) x nechá xx xxxxx až x xxxxxxx ionexu.
5.4.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xx kolonu xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (5.3). Baňka x xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 5 xx 10 ml xxxxxxxxx (3.2) a xxxxxxx xx xxxx převede xx xxxxxx. Xxxxxxx xx nechá xxxxx xx x xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx 50 xx xxxxxxxxx tak, xxx xxxxxx nepřesahoval 5 xx za xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx se xxxxxx z kolony 150xx xxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxxx (3.4) x xxxxx se xxxx xx 250 xx Xxxxxxxxxxxxx baňky.
5.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxx (5.4.2) xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx nálevky. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx 5 xx 10 xx xxxxxxxxx (3.2) x výplach xx xxxxx xx xxxxxx nálevky. Xxxx xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx 300 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.5) x 130 xx xxxxxxxxxxxxxx (3.1). Xxxxx xx xx xxxx xxxxx xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx fáze xxxxxxxxxxx. Xxxxx (xxxxxxxxxxxxxxxx) xxxxxx se odpustí xx 500 xx xxxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xx xxxxx dalšími 70 xx dávkami xxxxxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx x baňce x xxxxxxx xxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx (4.2) při xxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx 40 °X. Xxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxx v xxxxxxxxx 5 xx xxxxxxxxx (3.2) a xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx do 10 ml odměrné xxxxx. Xxxxx x xxxxxxx dnem xx xxxxxxxxx xxxxx dalšími xxxxxxx 1 xx 2 xx xxxxxxxxx x opět xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xx značku xxxxxxxxxx a xxxxxxxx. Xxxxxxxxx množství xx xxxxxxxxxxx xxxx membránový xxxxx (4.6). Xxxxx xxxxxx xx použije xxx analýzu XXXX (5.6).
5.6 Xxxxxxx xxxxxx XXXX
5.6.1 Parametry
Následující xxxxxxxx xxxx xxxxxxx indikativně. Xxxxx být xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx ke xxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (4.4.1),
- xxxxxxx fáze: xxxx xxxxxxxxx a xxxx,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx: 1–1,5 xx/xxxxxx,
- xxxxxx délka xxxxxxxxx: 265 xx,
- xxxxx nástřiku: 20 xx 50μx.
Xxxxxxxxx chromatografického xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.7.3) obsahujícího 4μx/xx, až xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx časů.
5.6.2 Xxxxxxxxxx xxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxx roztok (3.7.3) xx provede xxxxxxx xxxxxxxx a změří xxxxx (xxxxxx) xxxx xxx xxxxxx koncentraci. Xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx vynesením xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx kalibračních xxxxxxx x μx/xx.
5.6.3 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xx nastříkne xxxxxxx xxxxxx (5.5.) x xxxxxxxx stejný xxxxx, jaký xxx xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx hodnota výšky (xxxxxx) z píků xxxxxxxxxxxxxxxx.
6. Výpočet xxxxxxxx
X xxxxxxxx hodnoty xxxxx (xxxxxx) xxxx methylbenzochátu x roztoku xxxxxx xx určí xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x μx/xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.6.2.).
Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x (xx/xx) xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx
x =(x x 40)/x,
xx kterém xx
x = koncentrace xxxxxxxxxxxxxxxx x roztoku xxxxxx x μx/xx,
x = xxxxxxxx navážky vzorku x xxxxxxx.
7. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Identita
Identita xxxxxxx může xxx xxxxxxxxx opakovaným xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx spektra xxxxxxxx vzorku x xxxxxxxxxxx roztokem (3.7.3.), xxxxxxxxxxx 10 μx/xx xxxxxxxxxxxxxxxx.
7.1.1 Xxxxxxxxx stanovením x xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx xx fortifikuje xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.7.2.). Xxxxxxxx přidaného xxxxxxxxxxxxxxxx xx být xxxxxxx xxxx je xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx vzorku.
Mělo xx xxxxx xxxxx ke xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx jak xx přidané množství, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx píku x xxxxxxxx maximální xxxxx xxxx xxx xx xxxxxxxxx 10 % xxxxxxx xxxx.
7.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx pole
Výsledky xxxx vyhodnocovány xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
x) xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx zaznamenaný xx xxxxxxx píku xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx danou xxxxxxxxxxx schopností xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx/xxxxx 2 xx;
x) xxx xxxxxx délce xxxx 220 x 350 xx se xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxxx xxxx chromatogramu xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 10 až 100 % relativní xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx, jestliže xxxx xxxxxxxx xxxxxx maxima x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx mezi xxxxx xxxxxxx nepřesahuje 15 % xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx;
x) při xxxxxx xxxxx mezi 220 x 350 xx xx xxxxx spektrum xxxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxx píku xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 10 xx 100 % xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx kritéria xx dosaženo, jestliže xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx všech xxxxxxxxxxx xxxxxx odchylka xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx 15 % xxxxxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx výsledky dvou xxxxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx xx stejném xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 10 % vzhledem x xxxxxxxxxx výsledku xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx mezi 4 x 20 xx/xx.
7.3 Výtěžnost
Výtěžnost xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx nejméně 90 %.
8. Xxxxxxxx kruhového xxxxx
X xxxxxx laboratořích xxxx analyzováno pět xxxxxx. X každého xxxxxx byly provedeny xxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx
|
Xxxxxxxx krmivo |
Sypké xxxxxx |
Xxxxxx |
Xxxxx krmivo |
Pelety |
|
|
Průměr (xx/xx) |
Xxxxxxxxxx |
4,50 |
4,50 |
8,90 |
8,70 |
|
Xx (xx/xx) |
— |
0,30 |
0,20 |
0,60 |
0,50 |
|
XXx (%) |
— |
6,70 |
4,40 |
6,70 |
5,70 |
|
XX (xx/xx) |
— |
0,40 |
0,50 |
0,90 |
1,00 |
|
XXX |
— |
8,90 |
11,10 |
10,10 |
11,50 |
|
Xxxxxxxxx (%) |
— |
92,00 |
93,00 |
92,00 |
89,00 |
Xx = xxxxxxxxxx xxxxxxxx opakovatelnosti
CVr = xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
XX = standardní xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
XXX = xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx