Xxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 93/117/XX
xx dne 17. xxxxxxxx 1993,
xxxxxx se xxxxxxx analytické xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx společenství,
s ohledem xx xxxxxxxx Rady 70/373/XXX ze xxx 20. xxxxxxxx 1970, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx vzorků x xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (EHS) x. 3768/85 [2], x xxxxxxx xx xxxxxx 2 uvedené xxxxxxxx,
xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxx 70/373/XXX xxxxxxx, xx se xxxxxx kontroly xxxxx, xxxxx mají xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x kvalitě x xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xx použití xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx Společenství;
vzhledem x tomu, že xx xxxxx stanovit xxxxxxxxxx xxxxxx Společenství xxx xxxxxxxx dodržování xxxxxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx opatření této xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx stanoviskem Xxxxxxx výboru xxx xxxxxx,
XXXXXXX TUTO XXXXXXXX:
Článek 1
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxx kontrol xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx x methylbenzochátu x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 2
Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x účinnost xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx směrnicí nejpozději xx 30. xxxxxxxxx 1994. Neprodleně x xxxx uvědomí Xxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx členskými xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx na xxxx xxxxxxxx nebo musí xxx za xxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx odkazu xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
Xxxxxx 3
Tato směrnice xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx dnem po xxxxxxxxx v Úředním xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
V Xxxxxxx xxx 17. xxxxxxxx 1993.
Za Xxxxxx
Xxxx Xxxxxxxx
xxxx Komise
[1] Xx. věst. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Xx. xxxx. X 362, 31.12.1985, x. 8.
PŘÍLOHA
1. XXXXXXXXX ROBENIDINU
1,3-bis [(4-xxxxxxxxxxxxxxx) amino]guanidin xxxxxxxxxxxx
1. Xxxx x oblast xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx slouží xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 5 xx/xx.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxx x jeho xxxxxxxxx xxxx se xxxxxxxx na koloně x xxxxxx hlinitým. Xxxxxxxxx xx xxxxxx x kolony methanolem, xxxxxxxxxxx se x xx xxxxxx xxxxx xx upraví pomocí xxxxxxx fáze. Xxxxx xxxxxxxxxx xx stanoví xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) na xxxxxxxx xxxx xxxxxx XX xxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
3.1 Xxxxxxxx
3.2 Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx 500 xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx 4,0 xx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (X20x, 1,18 x/xx), xxxxxx se xx xxxxxx xxxxxxxxxx (3.1.) x xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx.
3.3 Xxxxxxxxxxx, xxx HPLC
3.4 Molekulární xxxx
Xxx 3A, 8 xx 12 xxxx (1,6–2,5 xx perličky xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx 0,3 xx).
3.5 Xxxx xxxxxxx: xxxxxx, xxxxxx aktivity I xxx xxxxxxxxx chromatografii
100 x xxxxx xxxxxxxxx xx naváží xx xxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xx 2 xx xxxx. Xxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxx xx přibližně 20 xxxxx. Xxxxxxxx xx x dobře zazátkované xxxxxxx.
3.6 Dihydrogen xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, roztok x = 0,025 xxx/x
3,4 x dihydrogen xxxxxxxxxxxx xx rozpustí xx xxxx (xxx HPLC) x 1000 xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xx xx značku x promíchá.
3.7 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx sodný, xxxxxx x = 0, 025 mol/l
3,55 x xxxxxxxxx (xxxx 4,45 x xxxxxxxxx, nebo 8,95 x dodekahydrátu) xxxxxxxx fosforečnanu sodného xx rozpustí xx xxxx (xxx HPLC) x 1000 ml xxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xx po xxxxxx x promíchá.
3.8 Xxxxxxx xxxx XXXX
Xxxxxx xx:
650 xx acetonitrilu (3.3.),
250 xx xxxx (pro XXXX),
50 xx roztoku xxxxxxxxxx fosforečnanu xxxxxxxxxx (3.6.),
50 ml roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx sodného (3.7.).
Xxxxxxxxx xx xxxxxxx 0,22 μx (4.6.) x xxxxxx xx xxxxxxxx (xxxx. ultrazvukem xx xxxx 10 xxxxx).
3.9 Xxxxxxxxxx látka
Čistý xxxxxxxxx: 1.3-xxx [(4-xxxxxxxxxxxxxxx) xxxxx] xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, X 758.
3.9.1 Xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx: 300 μx/xx:
Xxxxxx xx 30 mg standardního xxxxx robenidinu (3.9.) x xxxxxxxxx 0,1 xx. Xxxxxxxx xx x kyselém methanolu (3.2.) ve 100 xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x promíchá se. Xxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx x xxxxx.
3.9.2 Xxxxxxxxx, xxxxxxxx standardní xxxxxx: 12 μg/ml
Odměří xxx 10,0 xx xxxxxxxxxx standardního roztoku (3.9.1) xx 250 xx odměrné xxxxx, xxxxxx po xxxxxx xxxxxxx xxxx (3.8) x xxxxxxxx. Xxxxx xx obalí xxxxxxxxxxx xxxxx a uloží x xxxxx.
3.9.3 Kalibrační xxxxxxx
Xx xxxxxxx 50 xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx 5.0, 10.0, 15.0, 20.0 x 25.0 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.9.2.). Xxxxxx xx xx xxxxxx mobilní xxxx (3.8.) x xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 1.2, 2.4, 3.6, 4.8 a 6.0 μx/xx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx.
4. Přístroje x xxxxxxx
4.1 Skleněná xxxxxx
Xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xx přibližně 150 xx. Xxxxxxx xxxxxx 10 – 15 xx, xxxxx 250 xx.
4.2 Xxxxx xxxxxxxx
4.3 Xxxxxxx xxxxxxx
4.4 Xxxxxxxx xx xxxxxx účinnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (HPLC) xxxxxxxx ultrafialovým xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx vlnovou xxxxxx, anebo detektorem x diodovým polem, xxxxxxxxxx v xxxxx 250 - 400 xx
4.4.1 Xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx: 300 xx x 4 xx, X18, 10 μx xxxxxx xxxx xxxxxxx.
4.5 Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx (Xxxxxxx XX/X xxxx xxxxxxx)
4.6 Xxxxxxxxxx xxxxxx 0,22 μx
4.7 Xxxxxxxxxx xxxxxx 0,45 μm
5. Xxxxxx
Xxxx.: Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxx xxxx být při xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx nádobí z xxxxxxx xxxx.
5.1 Xxxxxx
5.1.1 Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx krmivo xxx xxxxxxxxxxx robenidinu a xxxxxx, zda xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx jiné xxxxxx xxxxx.
5.1.2 Xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx analýzou xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1.1.), xx xxxxxxx bylo přidáno xxxxxx množství xxxxxxxxxx, xxxx xx xx xxxxxx. X xxxxxxxx xxxxxx 60 mg/kg xx xx 250 xx Erlenmeyerovy baňky xxxxxxx 3 xx xxxxxxxxxx standardního xxxxxxx (3.9.1.). Xxxxxx xx xxxxxx xxx na xxxxx 0,5 xx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx 15 x modelového xxxxxx, xxxxxxxx xx x xx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxx x extrakcí (5.2.).
Pozn.: Xxx účel xxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx krmivo xxxxxxxxx typu jako xx xxxxxxxx vzorek x xxxxxx by xxxxxxxxx stanovitelné xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxx
Xx 250 xx Xxxxxxxxxxxxx baňky xx naváží xxxxxxxxx 15 x xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx 0,01 g, přidá xx 100 ml xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.2), xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx na xxxxxxxx (4.2). Roztok xx xxxxxxxxxxx xxxx filtr xx skleněných xxxxxx (4.5) x xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxx xx 150 xx Erlenmeyerovy baňky. Xxxxx xx 7,5 x xxxxxxxxxxxxx xxxx (3.4), zazátkuje x xxx xxxxx xx xxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx ze xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx (5.3).
5.3 Xxxxxxx
5.3.1 Xxxxxxxx xxxxxx s xxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.1) xx xxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx a xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Naváží xx 11,0 x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx hlinitého (3.5) x xxxxxx xx xx xxxxxx, xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxx prostředí. Oxid xxxxxxx xx x xxxxxxxx koloně setřese xxxxxx xxxxxxxx na xxxxx xxxxx xxxxxx.
5.3.2 Xxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx 5,0 ml připraveného xxxxxxxx xxxxxx (5.2). Xxxxxx pipety xx xxxx o xxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx oxidem hlinitým. Xxxxxxxxx xx x xxxxxx eluuje pomocí 100 xx xxxxxxxxx (3.1) xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 2 – 3 xx za xxxxxx a eluát xx xxxx do 250 xx xxxxx x xxxxxxx dnem. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx x při xxxxxxx 40xX odpaří do xxxxx v xxxxxxx xxxxxxx (4.3). Xxxxxxx xx znovu xxxxxxxx xx 3 – 4 xx xxxxxxx xxxx (3.8.) x xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx 10 ml xxxxxxx baňky. Baňka xx několikrát vypláchne 1 – 2 xx xxxxxxx xxxx x tyto xxxxxxx xx přidají xx xxxxxxx xxxxx. Baňka xx xxxxxx xx xxxxxx mobilní fází x xxxxxxxx xx. Xxxxxxxxx xxxx zfiltruje xxxx 0,45 μm xxxxx (4.7). Tento xxxxxx xx xxxxxxx xxx vlastní XXXX xxxxxxxxx (5.4).
5.4 Stanovení xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (HPLC)
5.4.1 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx být xxxxxxx i xxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx:
Xxxxxx pro xxxxxxxxxxx chromatografii (4.4.1),
mobilní xxxx (3.8),
průtoková rychlost: 1,5–2 xx/xxxxxx,
xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx: 317 xx,
xxxxx xxxxxxxx: 20–50 μx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx opakovaným nástřikem xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.9.3), xxxxx xxxxxxxx 3,6 μx/xx, až xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxx.
5.4.2 Xxxxxxxxxx xxxx
Xxx xxxxx kalibrační xxxxxx (3.9.3) xx xxxxxxx xxxxxxx nástřiků x xxxxx xx xxxxx (xxxxxx) píků pro xxxxxx koncentraci. Xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx xxxxxxxxx průměrných xxxxxx xxxxx xxxx ploch xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků x μx/xx.
5.4.3 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx objem xxxxxxxx xxxxxx, jako xxx xxxxxxxxx x xxxx xx xxxxxxxx hodnota xxxxx (xxxxxx) xxxx xxxxxxxxxx.
6. Xxxxxxx x xxxxxxxxx výsledků
Z xxxxxxxxxx xxxxxx výšek (xxxxx) xxxxxxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxx xxxxxx xx xxxx koncentrace xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x μx/xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx grafu (5.4.2).
x = (x × 200)/x,
xx xxxxxx xx
x = koncentrace xxxxxxxxxx x roztoku xxxxxx x μx/xx,
x = xxxxxxxx navážky xxxxxx v gramech.
7. Xxxxxxx výsledků
7.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx opakovaným xxxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x diodovým xxxxx, xxxxx xxxxxxxx porovnání xxxxxxx extraktu xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.9.3) xxxxxxxxxxx 6 μx/xx xxxxxxxxxx.
7.1.1 Opakované xxxxxxxxx s xxxxxxxxx
X xxxxxxxx vzorku xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.9.3). Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx být xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx v extraktu xxxxxx.
Xxxx xx xx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxx robenidinu podle xxxxxxxx xxxxxxxxx robenidinu x xxxxxx xxxxxxxxxx x naředěném extraktu. Xxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx maximální xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx 10 % xxxxxxx xxxx.
7.1.2 Detektor xxxxxxxxx pole
Výsledky jsou xxxxxxxxxxxxx podle následujících xxxxxxxx:
x) při vlnové xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx na xxxxxxxxxxxxx stejný x xxxxxxxxxxx danou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx systému. Xxx detektor s xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx plus/minus 2 xx;
x) xxx xxxxxx xxxxx mezi 220 x 350 xx xx xxxxx záznam xxxxxxx zkoušeného xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx od xxxxxxxxx částí xxxxxxx x xxxxxxx 10 xx 100 % xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxx, xxxxxxxx jsou vykázána xxxxxx maxima x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx dvěma xxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 % xxxxxxxxxx standardního xxxxxxx.
x) xxx xxxxxx délce xxxx 220 x 350 xx se xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxx x rozsahu 10 až 100 % xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx kritéria je xxxxxxxx, xxxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx nikde 15 % absorbance xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx některého x xxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx.
7.2. Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx provedených na xxxxxxx vzorku xxxxx xxxxxxxxxx 10 % xxxxx. xxxxxxxxxx výsledku xxx xxxxxx robenidinu xxx 15 xx/xx.
7.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxx fortifikovaný xxxxxx musí xxx xxxxxxx 85 %
8. Xxxxxxxx kruhového xxxxx
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xx xxxxxx dvanáct xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx čtyři xxxxxx xxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxx, xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx. Xxxxx ze xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxx jsou xxxxxxx v této xxxxxxx:
|
Xxxxxx |
xxxxxxx |
|||
|
Xxxxx krmivo |
Pelety |
Sypké xxxxxx |
Xxxxxx |
|
|
Xxxxxx (xx/xx) |
27,00 |
27,99 |
43,6 |
40,1 |
|
Xx (xx/xx) |
1,46 |
1,26 |
1,44 |
1,66 |
|
XXx (%) |
5,4 |
4,5 |
3,3 |
4,1 |
|
XX (xx/xx) |
4,36 |
3,36 |
4,61 |
3,91 |
|
XXX (%) |
16,1 |
12,0 |
10,6 |
9,7 |
|
Xxxxxxxxx (%) |
90,0 |
93,3 |
87,2 |
80,2 |
Sr = xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
XXx = variační xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
XX = xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
XXX = variační xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
2. XXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXXX
(2-xxxxxx-7-xxxxxx-xxx-6-xxxxx-1,4-xxxxxxx-4-xxxxxxxxxxx-3-xxxxxxxxxx)
1. Xxxx x oblast xxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx methylbenzochátu v xxxxxxxx. Xxxxx mez xxxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx/xx.
2. Xxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx methanolového xxxxxxx xxxxxxxx methansulfonové. Xxxxxxx xx přečištěn dichlormethanem, xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, a xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx. Obsah xxxxxxxxxxxxxxxx xx stanoví xx xxxxxxxx xxxx vysoce xxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) pomocí XX xxxxxxxxx.
3. Činidla
3.1 Xxxxxxxxxxxxx
3.2 Xxxxxxxx, xxx XXXX
3.3 Xxxxxxx xxxx HPLC
Směs xxxxxxxxx (3.2.) x xxxx (xxx HPLC) 75 + 25 (xxx.).
Xxxxxxxxxxx se xxxx 0,22 μm filtr (4.5.) x odplyní (xxxx. ultrazvukem po xxxx 10 xxxxx).
3.4 Xxxxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxxx σ = 2 %
20 xx kyseliny xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x 1000 ml xxxxxxxxx (3.2.).
3.5 Roztok xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx σ = 10 %
100 xx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (X20 x. 1,18x/xx) xx rozředí x 1000 ml xxxx.
3.6 Xxxxx XX-120 (Xx), 100 – 200 xxxx
Xxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxx xxxxx: 100 x iontoměniče xx xxxxxxxx x 500 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3,5) x xx xxxxxxx xxxxxxx xx zahřívá x xxxx xx xxxxx xxxxx. Po xxxxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx papírový xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx vždy 500 xx vody x xxxxx 250 ml xxxxxxxxx (3.2). Xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx 250 xx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx přes filtrační xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xx uskladňuje v xxxxxxxxxxx xxxxx.
3.7 Xxxxxxxxxx xxxxx: čistý xxxxxxxxxxxxxxx (2-xxxxxx-7-xxxxxx-xxx-6-xxxxx-1,4-xxxxxxx-4-xxxxxxxxxxx-3-xxxxxxxxxx)
3.7.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, 500 μx/xx
Xxxxxx se 50 xx xxxxxxxxxx látky (3.7) x xxxxxxxxx 0,1 xx, xxxxxxxx xx xx 100 xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxxx (3.4), xxxxxx xx značku a xxxxxxxx.
3.7.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx 50μg/ml
Do 50 xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx 5 xx základního xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (3.7.1), xxxxxx xx xxxxxxxxxx (3.2) xx xxxxxx x xxxxxxxx.
3.7.3 Xxxxxxxxxx roztoky
Do série 25 xx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxx 1, 2, 3, 4 x 5 xx pracovního xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (3.7.2). Xxxxxx se xx xxxxxx xxxxxxx xxxx (3.3) a xxxxxxx. Xxxx roztoky mají xxxxxxxxxxx 2, 4, 6, 8 a 10 μx/xx xxxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx roztoky se xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x pomůcky
4.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
4.2 Xxxxxxx xxxxxxx
4.3 Xxxxxxxx xxxxxx (250 x 15 xx) xxxxxxxx uzavíracím xxxxxxxxx a xxxxxxxx x xxxxxxxxx 200 xx
4.4 HPLC xxxxxxxx xxxxxxxx XX xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx
4.4.1 Xxxxxx xxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx: 300 xx x 4 mm, X – 18, 10μx xxxx xxxxxx podobná
4.5 Xxxxxxxxxx xxxxxx 0,22 μx
4.5 Xxxxxxxxxx filtry 0,45μx
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxx
5.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx zda x xxx není xxxxxxxx xxx methylbenzochát xxx xxxx xxxxxx xxxxx.
5.1.2 Xxxx se xxxxxxx xxxx výtěžnosti xxxxxxxx xxxxxxxxxx krmiva, fortifkovaného xxxxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx ve vzorku. X xxxxxxxxxxx na xxxxxx 1,5 xx/xx xx přidá xx 20 g xxxxxxxxxx xxxxxx 600 μx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.7.1), xxxxxxxx xx x xx 10 xxxxx se započne x extrakcí (5.2).
Xxxx.: Xxxxxxxx krmivo xxx xxxxx účel by xxxx být xxxxxxxxx xxxx, xxxx xx xxxxxx, x xxx xxxx analýze xx xxxxx být zjištěn xxxxxxxxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxx
Xx 250 xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx naváží přibližně 20 x připraveného xxxxxx x xxxxxxxxx 0,01 g. Xxxxx xx 100 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (3.4) x xxxxxxxxxx xx třepe (4.1) xx xxxx 30 xxxxx. Xxxxxx se xxxxxxxxx přes papírový xxxxx x filtrát xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxx (5.3).
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxx
Xx 500 xx xxxxxx xxxxxxx, obsahující 100 xx xxxxxxx xxxxxxxx chlorovodíkové (3.5) xx xxxxx 25 xx filtrátu, který xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx (5.2). Dále se xx nálevky xxxxx 100 xx dichlormethanu (3.1) x xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x spodní xxxxxx (xxxxxxxxxxxxxx) xx odpustí xx 500 ml xxxxx s kulatým xxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx se xxxxxxx xx xxxxx dalšími 40 xx dávkami xxxxxxxxxxxxxx x xxxx xx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx s xxxxxxx xxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx odpaří do xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (4.2) xxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx 40 oC. Xxxxxxx se xxxxxxxx x 20–25 xx xxxxxxxxx (3.2), xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxx extrakt xx xxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx (5.4).
5.4 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx
5.4.1 Příprava ionexové xxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.3) xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxx x 5 x xxxxxxxxxx xxxxxx x x 50 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.5). Xxxx xxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx odpustí xx xxxxx nad hladinu xxxxxxxxxxx x xxxxxx xx promývá vodou xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx papír. Xxxxx xx xx xxxxxx xx xxxxxx 50 xx xxxxxxxxx (3.2) x xxxxx se xxxxx xx x xxxxxxx xxxxxx.
5.4.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xx xxxxxx se xxxxxxx napipetuje xxxxxxx xxxxxxx (5.3). Baňka x xxxxxxx dnem xx vypláchne dvěma xxxxxxx 5 xx 10 ml xxxxxxxxx (3.2) a xxxxxxx xx xxxx převede xx xxxxxx. Extrakt xx xxxxx xxxxx xx x povrchu xxxxxx. Kolona se xxxxxxx 50 xx xxxxxxxxx xxx, aby xxxxxx xxxxxxxxxxxx 5 xx za minutu. Xxxxxxxx kapalina se xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx se xxxxxx x xxxxxx 150xx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (3.4) a xxxxx xx jímá xx 250 ml Xxxxxxxxxxxxx baňky.
5.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx-xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxx (5.4.2) xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx dělící nálevky. Xxxxxxxxxxxxx baňka xx xxxxxxxxxx 5 až 10 xx methanolu (3.2) x výplach xx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx. Dále xx xx xxxxxx xxxxxxx přidá 300 xx xxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (3.5) a 130 xx xxxxxxxxxxxxxx (3.1). Xxxxx xx xx dobu xxxxx xxxxxx x potom xx nechají xxxx xxxxxxxxxxx. Nižší (xxxxxxxxxxxxxxxx) xxxxxx xx xxxxxxx xx 500 xx xxxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxx se opakuje xx xxxxx xxxxxxx 70 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xx xxxxx x prvním extraktem x baňce x xxxxxxx xxxx.
Xxxxxxx dichlormethanu xx xxxxxx xx xxxxx x rotační xxxxxxx (4.2) xxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx 40 °X. Xxxxxxx v baňce xx rozpustí x xxxxxxxxx 5 xx xxxxxxxxx (3.2) a xxxxx roztok xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx do 10 xx xxxxxxx xxxxx. Baňka x xxxxxxx xxxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx 1 xx 2 ml xxxxxxxxx x xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx. Baňka se xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.6). Tento xxxxxx se xxxxxxx xxx analýzu XXXX (5.6).
5.6 Xxxxxxx pomocí XXXX
5.6.1 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx uvedeny indikativně. Xxxxx xxx použity xxxx parametry xxxxx xxxxxxx ke stejným xxxxxxxxx:
- kolona xxx xxxxxxxxxxx chromatografii (4.4.1),
- xxxxxxx xxxx: xxxx xxxxxxxxx x vody,
- xxxxxxxxx xxxxxxxx: 1–1,5 xx/xxxxxx,
- xxxxxx délka xxxxxxxxx: 265 nm,
- xxxxx xxxxxxxx: 20 xx 50μl.
Stabilita xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx kontroluje xxxxxxxxxx xxxxxxxxx kalibračního xxxxxxx (3.7.3) xxxxxxxxxxxx 4μx/xx, xx do xxxxxxxx konstantních výšek xxxx xxxxx píků x xxxxxxxxxx časů.
5.6.2 Xxxxxxxxxx graf
Pro xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (3.7.3) xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x změří xxxxx (plochy) xxxx xxx každou xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxx vynesením průměrných xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx píků xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x μx/xx.
5.6.3 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (5.5.) x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxx xxx xxxxxx xxx kalibrační xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxx) x xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx.
6. Výpočet xxxxxxxx
X xxxxxxxx xxxxxxx výšky (xxxxxx) xxxx methylbenzochátu x roztoku vzorku xx xxxx koncentrace x xxxxxxx vzorku x μx/xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.6.2.).
Obsah xxxxxxxxxxxxxxxx x (mg/kg) xx vzorku xx xxxxxxx podle xxxxxx xxxxxx
x =(c x 40)/x,
xx kterém xx
x = koncentrace xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x μg/ml,
m = xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx.
7. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Identita
Identita xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx opakovaným xxxxxxxxxx x přídavkem xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.7.3.), xxxxxxxxxxx 10 μx/xx xxxxxxxxxxxxxxxx.
7.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x přídavkem
Extrakt xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.7.2.). Xxxxxxxx xxxxxxxxx methylbenzochátu xx xxx xxxxxxx xxxx xx předpokládaný xxxxx methylbenzochátu x xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxx xx xxxxx pouze xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx množství xxxxxxxxxxxxxxx ve xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxx x polovině xxxxxxxxx xxxxx musí xxx xx přibližně 10 % xxxxxxx šíře.
7.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
x) xxx xxxxxx xxxxx maximální xxxxxxxx xxxxxx i xxxxxxxxx xxxx být xxxxxx xxxxxxx zaznamenaný xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx danou xxxxxxxxxxx schopností xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxx x xxxxxxxx polem xx xxxxx xxxx/xxxxx 2 nm;
b) xxx xxxxxx délce xxxx 220 a 350 xx se xxxxx xxxxxx spektra xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx vrcholu xxxx chromatogramu xxxxx xx ostatních xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx 10 xx 100 % relativní xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x jestliže xxxxx xxxxxxxx mezi xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 % absorbance xxxxxxxxxxxx xxxxxxx;
x) při xxxxxx xxxxx mezi 220 x 350 xx xx xxxxx spektrum xxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx píku zkoušeného xxxxxx lišit xx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx spektra v xxxxxxx 10 xx 100 % xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Tohoto xxxxxxxx xx xxxxxxxx, jestliže xxxx vykázána xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx nepřesahuje xxxxx 15 % xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxx xxxx dosaženo xxxxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxx, přítomnost analytu xxxx xxxxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx výsledky xxxx xxxxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx vzorku xxxxx přesáhnout 10 % vzhledem x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx methylbenzochátu xxxx 4 a 20 xx/xx.
7.3 Výtěžnost
Výtěžnost xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxxx 90 %.
8. Výsledky xxxxxxxxx xxxxx
X deseti xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx pět xxxxxx. U každého xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxx analýzy.
Výsledky
|
Modelové xxxxxx |
Xxxxx xxxxxx |
Xxxxxx |
Xxxxx xxxxxx |
Xxxxxx |
|
|
Xxxxxx (xx/xx) |
Xxxxxxxxxx |
4,50 |
4,50 |
8,90 |
8,70 |
|
Xx (xx/xx) |
— |
0,30 |
0,20 |
0,60 |
0,50 |
|
XXx (%) |
— |
6,70 |
4,40 |
6,70 |
5,70 |
|
XX (mg/kg) |
— |
0,40 |
0,50 |
0,90 |
1,00 |
|
CVR |
— |
8,90 |
11,10 |
10,10 |
11,50 |
|
Výtěžnost (%) |
— |
92,00 |
93,00 |
92,00 |
89,00 |
Xx = xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
XXx = xxxxxxxx koeficient xxxxxxxxxxxxxx
XX = xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
XXX = xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx