Xxxxxx Xxxxxxxx Xxxxxx
xx xxx 25. července 1984,
xxxxxx xx stanoví xxxxxxxxxx xxxxxx Společenství xxx úřední kontrolu xxxxx
(84/425/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX SPOLEČENSTVÍ,
s xxxxxxx na Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx xxxxxxxx Rady 70/373/XXX ze xxx 20. xxxxxxxx 1970, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx x analýzy Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx kontrolu xxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx Aktem o xxxxxxxxxxx Xxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxx směrnice požaduje, xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx účelem xxxxxxxx dodržování xxxxxxxxx xxxxxxxxxx právních x xxxxxxxxx xxxxxxxx týkajících xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xx použití xxxxx Xxxxxxxxxxxx pro xxxxx vzorků x xxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx směrnice Xxxxxx 71/250/XXX [2], 73/46/XXX [3], 74/203/XXX [4], 75/84/XXX [5], 76/372/XXX [6] naposledy xxxxxxxxx xxxxxxxx 81/680/XXX [7], xxxxxxxx 71/393/EHS [8], 72/199/XXX [9], 78/633/EHS [10] xxxxxxxxx pozměněné xxxxxxxx 84/4/XXX [11] x xxxxxxxx 81/715/XXX [12] xxx xxxxxxxxx xxxxxx počet xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx; že xxxxxx x xxxxx xx té xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx se xxxxxxxxxxx Stálého xxxxxx xxx xxxxxx,
XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:
Článek 1
Členské xxxxx xxxxxxx, že xxxxxxx xxx úřední xxxxxxxx xxxxx, pokud xxx x xxxxxx obsah xxxxxxxxxxx, xx provádějí xxxxxxx popsanou x xxxxxxx.
Xxxxxx 2
Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx a správní xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 30. xxxxxx 1985 x xxxxxxxxxx x nich xxxxxxx Xxxxxx.
Článek 3
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X Xxxxxxx xxx 25. července 1984.
Za Xxxxxx
Xxxx Xxxxxxxx
xxxx Komise
[1] Xx. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Xx. věst. X 155, 12.7.1971, x. 13.
[3] Xx. věst. X 83, 30.3.1973, x. 21.
[4] Xx. xxxx. X 108, 22.4.1974, x. 7.
[5] Xx. xxxx. X 32, 5.2.1975, x. 26.
[6] Xx. xxxx. X 102, 15.4.1976, x. 8.
[7] Xx. věst. X 246, 29.8.1981, x. 32.
[8] Úř. xxxx. X 279, 20.12.1971, x. 7.
[9] Xx. věst. X 123, 29.5.1972, x. 6.
[10] Xx. věst. X 206, 29.7.1978, x. 43.
[11] Xx. věst. X 15, 18.1.1984, x. 28.
[12] Xx. věst. X 257, 10.9.1981, x. 38.
PŘÍLOHA
STANOVENÍ SPIRAMYCINU XXXXXX XX AGAROVÉM MÉDIU
1. Xxxx a xxxxxx
Xxxxxx xx určena xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 1 mg/kg (1 xxx) [1]
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxxxx-xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xX 8. Xxxxxxx xx dekantován xxxx odstředěn a xxxxxx. Jeho antibiotická xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx difúze xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx inhibičních xxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxx xx xxxxx úměrný xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx koncentrace nad xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxxxxxxxxx: Xxxxxxxxxxx xxxxxx XXX 9341 (XXXX 8340, NCIB 8553)
3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1) v xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx 24 xxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxx xxxxxxxxx x chladničce xxx xxxxxxx okolo 4 °X. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx.
3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx [2]
Xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx bakterie 2 xx 3 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3). Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx k naočkování 250 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx 18 xx 20 hodin xxx 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxx do 25 xx roztoku xxxxxxxx sodného (4.3) x xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx 1/10 xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3). Xxxxxxxx transmise xxxxxxxx xxxx být xxxxx 75 %, xxxxxx při 650 xx v 1 xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx chloridu sodného (4.3.). Xxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx týden při xxx 4 °C.
4. Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx [3]
|
Xxxxxx xxxxxx |
6,0 x |
|
Xxxxxxx |
4,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxxxxx |
3,0 x |
|
Xxxxxxx z xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxx |
1,0 g |
|
Agar |
10,0 xx 20,0 x |
|
Xxxx |
1000 ml |
|
PH 6,5 xx 6,6 (xx xxxxxxxxxxx). |
|
|
4.2 Xxxxxxxx xxxxxx [4] |
|
|
Trypton |
5,0 g |
|
Extrakt x kvasnic |
4,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxx |
3,0 g |
|
Agar |
10,0 xx 20,0 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
XX 8,0 (xx xxxxxxxxxxx). |
|
4.3 Roztok xxxxxxxx xxxxxxx 0,8 % (xxxxxx objemový)
Rozpusťte 8 x chloridu sodného xx xxxx x xxxxxx do 1000 xx; xxxxxxxxxxxx.
4.4 Fosfát-bikarbonátový xxxx, pH 8,0
|
Dihydrogen xxxxxxxxxxx dvou xxxxxxxx X2XXX4 |
16,7 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx XX2XX4 |
0,5 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx XxXXX3 |
20,0 x |
|
Xxxx xx |
1000 ml |
4.5 Xxxx xxxxxxx fosfát-bikarbonátový xxxx (4.4)
50/50 (xxxxxxxx).
4.6 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxxx o xxxxx xxxxxxxx (v XX).
5. Standardní roztoky
Rozpusťte xxxxxx xxxxxxxx množství xxxxxxxxxx látky (4.6.) xx směsi (4.5.) x xxxxxx stejnou xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx roztok xxxxxxxxxx 1000 IU xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxx 4 °X xx xxxxx roztok xxxxxxxx xx xxx xxx.
X tohoto xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx směsí (4.5.) xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
|
X8 |
1 |
XX/xx |
|
X4 |
0,5 |
XX/xx |
|
X2 |
0,25 |
XX/xx |
|
X1 |
0,125 |
XX/xx |
6. Xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx
6.1 Extrakce
Odvažte 20,0 x vzorku v xxxxxxx xxxxx, 1,0 xx 20,0 x x premixů. Xxxxxxxx 100 ml směsi (4.5) x xxxxxxxx 30 xxxxx. Odstřeďte xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.5), xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx 1 XX/xx (= X8).
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx 2,5 xx/xx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx provedena následovně. Xxxxxxx 20,0 x xxxxxx. Xxxxxxxx 100 xx směsi (4.5) x třepejte 30 xxxxx. Odstřeďujte xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx 50 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx na xxx 4 xx xx xxxxxxxxx xxxxx xx rotační xxxxxxx xxx xxxxxxx nepřesahující 40 °X. Zřeďte xxxxxx xxxxx (4.5), xxxxxx obdrželi xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx 1 XX/xx (= U8).
6.2 Xxxxxxxx xxxxxxx
X roztoku X8 xxxxxxxxx xxxxxxX4 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,5 XX/xx), U2 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,25 IU/ml) x X1 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,125 IU/ml) xxxxxx postupného xxxxxx (1 + 1) xxxxx (4.5).
7. Xxxxxxxx xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.2) xxxxxxxxxxx suspenzí (3.2) při asi 50 °X. Předběžnými xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx médiem (4.2) xxxxxxxx požadované xxxxxxxx bakteriální xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x nejjasnější xxxxxxxxx xxxx s různými xxxxxxxxxxxxx spiramycinu.
7.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxx koncentracemi xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X8, X4, S2, X1) x čtyřmi xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoku (X8, X4, X2, X1). Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx na každé xxxxx. Xxx tento xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx velké, aby xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx s xxxxxxxx 10 až 13 xx x xxxxxxx 30 xx xxxx xxxxxx. Pokus xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx x xxxxxx xxxx s xxxxxxxx x xxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, 200 xx x průměru x 20 xx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xx misky množství xxxxx (4.2.), xxxxxxxxxxxxx xxxx x 7.1., xxx xxxxxxxxx vrstvu xxx 2 mm xxxxxx (60 ml xx xxxxx x xxxxxxx 200 xx). Xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxx a umístěte xx nich xxxxxx xxxxxxxx objemy xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx roztoků (xxxx 0,10 a 0,15 xx xx xxxxx, xxxxx xxxxxxx). Xxxxxxxx xxxxxx koncentraci xxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xx každé xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 32 xxxxxxxxxxx xxx.
7.3 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx 16 xx 18 hodin xxx 30 ± 2 °X.
8. Vyhodnocení
Změřte průměr xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxxxx xx 0,1 xx. Zaznamenejte xxxxxxx xxxxxxx pro každou xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, při xxxx xxxxxxxxx logaritmus xxxxxxxxxxx xx vztahu x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx. Xxxxxxx nejvhodnější xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xx xxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (XX) s xxxxxxxx xxxxxxx:
x) SL = 7x1 + 4x2+ x4 – 2x8 / 10
Xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxx xxx xxxxxxxxxx nejvyšší xxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxxx:
x) XX = 7x8 + 4x4+ x2 – 2x1 / 10
Podobně xxxxxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxxx xxx xxxxxxxx úroveň xxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxx extraktu (UH) xxxxxxxxxx x1, u2, x4 x x8 xx s1, x2, x4, a x8 x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx [5]
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XX x XX na xxxxxx xxxxxxxx papír a xxxxxx je tak, xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx XX a XX x xxxxxx xx xxx, xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx pro xxxxxxx.
X xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx by xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx účely xxxxx být xxxxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx (XX — XX) x (XX — XX) xxxxxxxxxx více xxx x 10 % xx xxxxxx střední xxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx x1 x s1 xxxx x8 x x8, xxxxx xxx xxxxxxxx x SL, SH, XX x XX xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx rovnic, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx:
x) XX = 5x1 + 2x2 – x4 / 6 xxxx 5x2 + 2x4 – x8 / 6
b′) XX = 5s4 + 2x2 – x1 / 6 xxxx 5x8 + 2x4 – x2 / 6
x xxxxxxx xxx XX x XX. Měla by xxx splněna stejná xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Skutečnost, xx byl xxxxxxxx xxxxxxxxx xx tří xxxxxx, musí xxx xxxxxxxxxxx x závěrečném xxxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxx považovány xx paralelní, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx aktivity (xxx A) x xxxxxx xxxxx z xxxxxxxxxxxxx rovnic, x xxxxxxxxxx xx tom, xxxxx byly xxxxxxx xxx nebo čtyři xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxx
x) Xxx X = (x1+ x2+ u4+ x8 – x1 – s2 – x4 – s8) × 0,602 / x4+ u8+ s4+ x8 – u1 – x2 – x1 – s2
Pro xxx xxxxxx
x) Xxx X = (x1+ x2+ x4 – x1 – x2 – x4) × 0,401 / u4+ x4 – x1 – x1
xxxx
x´) Log X = (u2+ x4+ x8 – x2 – s4 – x8) × 0,401 / u8+ x8 – x2 – x2
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx = xxxxxxxx xxxxxxxxxxx standardu × X
(X8 = S8 × X)
Xxxxx byla xxxxxxxxx xxxxxxxx nalezena xxxx rozsah 0,5 xx 2,0, potom xxxxxxxx zkoušku, při xxxx xxxxxxxx vhodné xxxxxx xxxxxxxxxxx extraktu xxxx, xxxxx xxxx xxxx možné, xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx nemůže xxx xxxxxxxxx aktivita xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, musí xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx přibližný x xxxx musí xxx uvedeno x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxx jsou xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx stanovení. Pokud xxxx stále xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, stanovení musí xxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx výsledek x xxxxxxxxxxx xxxx spiramycinu xx xxxxxxxx xxxxxx.
9. Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx výsledky xxxx paralelních stanovení xxxxxxxxxxx u xxxxxxxx xxxxxx stejným analytikem xxxxx xxxxxxxxx:
- 2 xx/xx v xxxxxxxxx xxxxxxx xxx obsahy xxxx spiramycinu do 10 xx/xx,
- 20 % vzhledem k xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx 10 až 25 mg/kg,
- 5 xx/xx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxx obsahy 25 až 50 xx/xx,
- 10 % xxxxxxxx k nejvyšší xxxxxxx xxx xxxxxx xxx 50 xx/xx.
[1] 1 xx báze xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3200 mezinárodních xxxxxxxx (XX).
[2] Další metody xxxxx být použity xx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
[3] Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
[4] Může xxx použito xxxxxxxx xxxxxxxx kultivační xxxxxx xxxxxxxxx složení a xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
[5] Xxxx písmena "x" x "x" odpovídají xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx.