Desátá Směrnice Komise
ze xxx 25. xxxxxxxx 1984,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx
(84/425/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx na Smlouvu x založení Evropského xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx směrnici Rady 70/373/XXX ze dne 20. července 1970, xxxxxx se zavádějí xxxxxx odběru vzorků x analýzy Společenství xxx xxxxxx kontrolu xxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx Xxxxx o xxxxxxxxxxx Xxxxx, a xxxxxxx xx článek 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxx požaduje, xxx xxxxxx kontrola xxxxx xx účelem xxxxxxxx dodržování xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx týkajících xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx za použití xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxx Komise 71/250/XXX [2], 73/46/EHS [3], 74/203/XXX [4], 75/84/XXX [5], 76/372/XXX [6] naposledy xxxxxxxxx xxxxxxxx 81/680/XXX [7], xxxxxxxx 71/393/XXX [8], 72/199/XXX [9], 78/633/EHS [10] naposledy xxxxxxxxx xxxxxxxx 84/4/XXX [11] x xxxxxxxx 81/715/EHS [12] již xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx Společenství; že xxxxxx x xxxxx xx xx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx metodu;
vzhledem x xxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Stálého xxxxxx xxx krmiva,
PŘIJALA XXXX XXXXXXXX:
Článek 1
Členské xxxxx xxxxxxx, xx analýzy xxx xxxxxx kontrolu xxxxx, xxxxx xxx x jejich obsah xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Článek 2
Xxxxxxx státy xxxxxx x účinnost xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx souladu x xxxxx směrnicí xxxxxxxxxx xx 30. xxxxxx 1985 a xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx Xxxxxx.
Článek 3
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X Xxxxxxx dne 25. července 1984.
Xx Xxxxxx
Xxxx Xxxxxxxx
xxxx Xxxxxx
[1] Úř. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Xx. xxxx. X 155, 12.7.1971, x. 13.
[3] Xx. xxxx. X 83, 30.3.1973, x. 21.
[4] Xx. xxxx. X 108, 22.4.1974, x. 7.
[5] Xx. xxxx. X 32, 5.2.1975, x. 26.
[6] Xx. xxxx. X 102, 15.4.1976, x. 8.
[7] Xx. xxxx. X 246, 29.8.1981, x. 32.
[8] Xx. xxxx. X 279, 20.12.1971, x. 7.
[9] Úř. xxxx. X 123, 29.5.1972, x. 6.
[10] Xx. věst. X 206, 29.7.1978, x. 43.
[11] Xx. xxxx. X 15, 18.1.1984, x. 28.
[12] Xx. xxxx. X 257, 10.9.1981, x. 38.
XXXXXXX
XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX DIFÚZÍ XX XXXXXXXX XXXXX
1. Xxxx a xxxxxx
Xxxxxx xx určena xxx xxxxxxxxx spiramycinu x xxxxxxxx x premixech. Xxxxx mez xxxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx/xx (1 xxx) [1]
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxxxx-xxxxxxxxxxxxxx pufrem x xX 8. Xxxxxxx je dekantován xxxx xxxxxxxxx a xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx stanovena xxxxxxx xxxxxx spiramyscinu x agarovém médiu xxxxxxxxxxxx mikroorganizmem Xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx inhibičních xxx xxxxxxxxxxxxxx. Průměr xxxxxx xxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3. Mikroorganizmus: Xxxxxxxxxxx xxxxxx ATC 9341 (XXXX 8340, XXXX 8553)
3.1 Udržování xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx médium (4.1) v xxxxx xxxxxxxx mikroorganizmem Xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx 24 xxxxx při 30 °X. Xxxxxxx xxxxxxxxx x chladničce xxx teplotě xxxxx 4 °X. Xxxxx xxxxxxxxx každé xxx xxxxx.
3.2 Příprava xxxxxxxxxxx xxxxxxxx [2]
Ze xxxxx xxxxxxxxxxxx šikmého xxxxx xxxxxx xxxxxxxx 2 xx 3 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3). Tuto xxxxxxxx xxxxxxxx x naočkování 250 xx kultivačního xxxxx (4.1) obsaženého x Xxxxxxx xxxxx x inkubujte 18 xx 20 xxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxx xx 25 xx xxxxxxx xxxxxxxx sodného (4.3) x promíchejte. Zřeďte xxxxxxxx na 1/10 xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3). Světelná xxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxx 75 %, xxxxxx při 650 xx x 1 xx kyvetě proti xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3.). Tato xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx týden xxx xxx 4 °C.
4. Xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxxx médium [3]
|
Xxxxxx xxxxxx |
6,0 x |
|
Xxxxxxx |
4,0 x |
|
Xxxxxxx z xxxxxxx |
3,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10,0 xx 20,0 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
XX 6,5 xx 6,6 (xx sterilizaci). |
|
|
4.2 Xxxxxxxx xxxxxx [4] |
|
|
Xxxxxxx |
5,0 g |
|
Extrakt x xxxxxxx |
4,0 g |
|
Extrakt x xxxx |
3,0 x |
|
Xxxx |
10,0 xx 20,0 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
XX 8,0 (po xxxxxxxxxxx). |
|
4.3 Roztok xxxxxxxx xxxxxxx 0,8 % (xxxxxx xxxxxxxx)
Xxxxxxxxx 8 x xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx x xxxxxx xx 1000 xx; sterilizujte.
4.4 Xxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx, pH 8,0
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx dvou xxxxxxxx X2XXX4 |
16,7 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx XX2XX4 |
0,5 g |
|
Hydrogen xxxxxxxxx xxxxx XxXXX3 |
20,0 x |
|
Xxxx xx |
1000 ml |
4.5 Xxxx xxxxxxx xxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx (4.4)
50/50 (xxxxxxxx).
4.6 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxxx o xxxxx aktivitě (v XX).
5. Standardní roztoky
Rozpusťte xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx látky (4.6.) xx xxxxx (4.5.) x zřeďte xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx obsahující 1000 XX xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Skladován x xxxxxxxxxxx xxxxx xxx 4 °X xx tento roztok xxxxxxxx až xxx xxx.
X xxxxxx zásobního xxxxxxx xxxxxxxxx postupným xxxxxxx xxxxx (4.5.) xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
|
X8 |
1 |
XX/xx |
|
X4 |
0,5 |
XX/xx |
|
X2 |
0,25 |
XX/xx |
|
X1 |
0,125 |
XX/xx |
6. Příprava xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx
6.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 20,0 x vzorku x xxxxxxx krmiv, 1,0 xx 20,0 x x xxxxxxx. Přidejte 100 xx xxxxx (4.5) x třepejte 30 minut. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.5), abyste xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx 1 XX/xx (= U8).
Pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx 2,5 xx/xx xxxxxx, xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxx následovně. Xxxxxxx 20,0 g xxxxxx. Xxxxxxxx 100 xx xxxxx (4.5) x třepejte 30 xxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx 50 xx roztoku xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxx 4 ml xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 40 °X. Xxxxxx xxxxxx xxxxx (4.5), xxxxxx xxxxxxxx očekávaný xxxxx xxxxxxxxxxx 1 XX/xx (= X8).
6.2 Xxxxxxxx xxxxxxx
X xxxxxxx X8 připravte roztokU4 (xxxxxxxxx obsah: 0,5 XX/xx), X2 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,25 XX/xx) x U1 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,125 IU/ml) xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (1 + 1) xxxxx (4.5).
7. Xxxxxxxx xxxxxx
7.1 Naočkování zkušebního xxxxx
Xxxxxxxxx zkušební médium (4.2) xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.2) xxx xxx 50 °X. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx (4.2) xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx suspenze, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxx koncentracemi xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (S8, X4, X2, X1) x čtyřmi xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (X8, X4, X2, X1). Xxxx xxxxx koncentrace xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx být nutně xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Xxx tento xxxxxx vyberte xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx otvorů s xxxxxxxx 10 až 13 xx x xxxxxxx 30 xx xxxx středy. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx x tabule xxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx nebo xxxxxx umístěným xx xxxxx, 200 mm x xxxxxxx a 20 xx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx (4.2.), inokulovaného xxxx x 7.1., xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx 2 xx xxxxxx (60 xx xx desku o xxxxxxx 200 xx). Xxxxxxxx ustát, xxxxxxxx xxxxxx x umístěte xx xxxx přesně xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0,10 a 0,15 xx na xxxxx, xxxxx průměru). Xxxxxxxx každou koncentraci xxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vyhodnocení 32 xxxxxxxxxxx zón.
7.3 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx 16 až 18 xxxxx při 30 ± 2 °X.
8. Vyhodnocení
Změřte xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx s xxxxxxxxx xx 0,1 xx. Zaznamenejte xxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, při xxxx xxxxxxxxx logaritmus xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x průměrům xxxxxxxxxxx xxx. Utvořte nejvhodnější xxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku x xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xx xxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx "nejvhodnější" xxx xxx xxxxxxxxxx nejnižší xxxxxx (SL) x xxxxxxxx xxxxxxx:
x) XX = 7x1 + 4x2+ s4 – 2x8 / 10
Xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (XX) s xxxxxxxx xxxxxxx:
x) XX = 7x8 + 4s4+ x2 – 2s1 / 10
Podobně vypočítejte "xxxxxxxxxxxx" body pro xxxxxxxx úroveň extraktu (XX) x nejvyšší xxxxxx xxxxxxxx (UH) xxxxxxxxxx x1, u2, x4 x u8 xx s1, x2, x4, x s8 x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx [5]
Zaznamenejte xxxxxxxxx xxxxxxx SL a XX xx stejný xxxxxxxx xxxxx a xxxxxx je tak, xxxxxx xxxxxxx "nejhodnější" xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Podobně xxxxxxxxxxxx XX a UH x xxxxxx xx xxx, xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx xxx xxxxxxx.
X xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx by křivky xxxx xxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx (XX — XX) x (XX — XX) xxxxxxxxxx více xxx x 10 % xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxx křivky xxxxxxxxxxx, xxx x1 x x1 nebo x8 a x8, xxxxx xxx xxxxxxxx x XX, XX, XX x XX xxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx rovnic, aby xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx:
x) XX = 5x1 + 2x2 – x4 / 6 xxxx 5x2 + 2x4 – x8 / 6
x′) XX = 5x4 + 2s2 – x1 / 6 xxxx 5x8 + 2x4 – s2 / 6
a xxxxxxx xxx UL x XX. Měla by xxx xxxxxxx stejná xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Skutečnost, xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxx považovány xx xxxxxxxxx, vypočtěte xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx A) x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, v xxxxxxxxxx xx tom, xxxxx xxxx xxxxxxx xxx nebo xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxx úrovně
c) Xxx X = (x1+ x2+ x4+ x8 – x1 – x2 – x4 – x8) × 0,602 / x4+ x8+ s4+ x8 – u1 – u2 – x1 – x2
Xxx xxx xxxxxx
x) Log X = (x1+ x2+ x4 – x1 – x2 – x4) × 0,401 / x4+ x4 – x1 – s1
nebo
d´) Xxx X = (x2+ x4+ x8 – x2 – x4 – x8) × 0,401 / x8+ x8 – x2 – s2
Aktivita extraktu xxxxxx = xxxxxxxx xxxxxxxxxxx standardu × X
(X8 = X8 × X)
Xxxxx byla xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx 0,5 xx 2,0, potom xxxxxxxx zkoušku, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx, pokud toto xxxx možné, roztoků xxxxxxxxx. Pokud xxxxxx xxx relativní xxxxxxxx xxxxxxxx do požadovaného xxxxxxx, musí xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx přibližný x xxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx protokolu x xxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx neparalelní, xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxx spiramycinu xx xxxxxxxx xxxxxx.
9. Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx výsledky xxxx paralelních xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx analytikem xxxxx xxxxxxxxx:
- 2 xx/xx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx do 10 mg/kg,
- 20 % vzhledem k xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx 10 xx 25 mg/kg,
- 5 xx/xx x xxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx 25 až 50 xx/xx,
- 10 % xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxx 50 mg/kg.
[1] 1 xx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3200 xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (XX).
[2] Xxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
[3] Xxxx xxx xxxxxxx jakékoli xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a dávající xxxxxx xxxxxxxx.
[4] Může xxx použito xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx stejné výsledky.
[5] Xxxx písmena "x" x "x" xxxxxxxxxx xxxxxxxx inhibičních xxx.