Xxxxxx Xxxxxxxx Komise
ze xxx 25. července 1984,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx kontrolu xxxxx
(84/425/XXX)
XXXXXX EVROPSKÝCH XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Smlouvu x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx směrnici Xxxx 70/373/XXX ze dne 20. xxxxxxxx 1970, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx odběru vzorků x xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxx x xxxxxxxxxxx Řecka, x xxxxxxx na xxxxxx 2 uvedené směrnice,
vzhledem x xxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxx požaduje, xxx úřední xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx požadavků xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx předpisů xxxxxxxxxx xx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxx byla xxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx vzorků x xxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx Xxxxxx 71/250/XXX [2], 73/46/XXX [3], 74/203/XXX [4], 75/84/XXX [5], 76/372/EHS [6] naposledy xxxxxxxxx xxxxxxxx 81/680/XXX [7], xxxxxxxx 71/393/XXX [8], 72/199/XXX [9], 78/633/EHS [10] naposledy pozměněné xxxxxxxx 84/4/EHS [11] x xxxxxxxx 81/715/XXX [12] xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx Společenství; xx xxxxxx x xxxxx xx té xxxx xxxx xxxxxxx přijmout xxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx x souladu xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx výboru xxx xxxxxx,
XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:
Článek 1
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx analýzy xxx xxxxxx kontrolu xxxxx, pokud xxx x xxxxxx obsah xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxx popsanou x xxxxxxx.
Xxxxxx 2
Členské státy xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx souladu s xxxxx xxxxxxxx nejpozději xx 30. xxxxxx 1985 x xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx Xxxxxx.
Xxxxxx 3
Tato xxxxxxxx xx určena xxxxxxxx xxxxxx.
X Xxxxxxx xxx 25. xxxxxxxx 1984.
Xx Xxxxxx
Xxxx Xxxxxxxx
xxxx Xxxxxx
[1] Xx. věst. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Úř. věst. X 155, 12.7.1971, x. 13.
[3] Xx. xxxx. X 83, 30.3.1973, x. 21.
[4] Xx. xxxx. X 108, 22.4.1974, x. 7.
[5] Xx. věst. X 32, 5.2.1975, x. 26.
[6] Úř. xxxx. X 102, 15.4.1976, x. 8.
[7] Xx. věst. X 246, 29.8.1981, x. 32.
[8] Úř. xxxx. X 279, 20.12.1971, x. 7.
[9] Xx. xxxx. X 123, 29.5.1972, x. 6.
[10] Úř. věst. X 206, 29.7.1978, x. 43.
[11] Xx. věst. X 15, 18.1.1984, x. 28.
[12] Xx. věst. X 257, 10.9.1981, x. 38.
XXXXXXX
XXXXXXXXX SPIRAMYCINU DIFÚZÍ XX XXXXXXXX XXXXX
1. Xxxx x xxxxxx
Xxxxxx xx určena xxx xxxxxxxxx spiramycinu v xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx mez stanovitelnosti xx 1 mg/kg (1 ppm) [1]
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx extrahuje xxxxx metanol/fosfát-bikarbonátovým pufrem x xX 8. Xxxxxxx je dekantován xxxx xxxxxxxxx x xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x agarovém xxxxx xxxxxxxxxxxx mikroorganizmem Xxxxxxxxxxx xxxxxx. Difúze se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx. Průměr xxxxxx xxx je xxxxx úměrný logaritmu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxxxxxxxxx: Micrococcus xxxxxx ATC 9341 (XXXX 8340, XXXX 8553)
3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1) x šikmé xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Micrococcus xxxxxx a inkubujte 24 xxxxx při 30 °X. Kulturu xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx 4 °X. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx.
3.2 Xxxxxxxx bakteriální xxxxxxxx [2]
Ze xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx 2 xx 3 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3). Xxxx suspenzi xxxxxxxx k xxxxxxxxxx 250 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx 18 xx 20 xxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxx do 25 ml xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3) x xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx na 1/10 xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3). Xxxxxxxx transmise xxxxxxxx musí xxx xxxxx 75 %, xxxxxx xxx 650 xx x 1 xx kyvetě proti xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3.). Xxxx suspenze xxxx xxx skladována xxxxx xxxxx xxx xxx 4 °X.
4. Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxxx médium [3]
|
Xxxxxx xxxxxx |
6,0 x |
|
Xxxxxxx |
4,0 x |
|
Xxxxxxx x kvasnic |
3,0 x |
|
Xxxxxxx z xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10,0 až 20,0 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
XX 6,5 xx 6,6 (xx xxxxxxxxxxx). |
|
|
4.2 Zkušební xxxxxx [4] |
|
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxxxxx |
4,0 g |
|
Extrakt x xxxx |
3,0 g |
|
Agar |
10,0 xx 20,0 g |
|
Voda |
1000 xx |
|
XX 8,0 (xx xxxxxxxxxxx). |
|
4.3 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 0,8 % (xxxxxx objemový)
Rozpusťte 8 x chloridu xxxxxxx xx vodě x xxxxxx do 1000 xx; xxxxxxxxxxxx.
4.4 Xxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx, pH 8,0
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx X2XXX4 |
16,7 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx XX2XX4 |
0,5 g |
|
Hydrogen xxxxxxxxx xxxxx NaHCO3 |
20,0 x |
|
Xxxx xx |
1000 ml |
4.5 Xxxx metanol fosfát-bikarbonátový xxxx (4.4)
50/50 (xxxxxxxx).
4.6 Xxxxxxxxxx látka
Spiramycin x xxxxx aktivitě (x XX).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx odvážené množství xxxxxxxxxx xxxxx (4.6.) xx směsi (4.5.) x xxxxxx stejnou xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx roztok obsahující 1000 XX xxxxxxxxxxx xx mililitr. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx láhvi xxx 4 °X xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx až xxx xxx.
X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx postupným xxxxxxx směsí (4.5.) xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
|
X8 |
1 |
XX/xx |
|
X4 |
0,5 |
XX/xx |
|
X2 |
0,25 |
XX/xx |
|
X1 |
0,125 |
XX/xx |
6. Příprava xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx
6.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 20,0 x xxxxxx x xxxxxxx xxxxx, 1,0 xx 20,0 g x premixů. Xxxxxxxx 100 ml xxxxx (4.5) x xxxxxxxx 30 xxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.5), abyste xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx 1 IU/ml (= U8).
Pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx menší xxx 2,5 mg/kg xxxxxx, xxxx být xxxxxxxx provedena následovně. Xxxxxxx 20,0 x xxxxxx. Xxxxxxxx 100 xx xxxxx (4.5) x třepejte 30 xxxxx. Xxxxxxxxxxx několik xxxxx, odeberte 50 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxx 4 ml xx sníženého xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx teplotě nepřesahující 40 °C. Xxxxxx xxxxxx směsí (4.5), xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx spiramycinu 1 XX/xx (= X8).
6.2 Xxxxxxxx xxxxxxx
X xxxxxxx X8 xxxxxxxxx xxxxxxX4 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,5 XX/xx), X2 (očekávaný xxxxx: 0,25 IU/ml) x X1 (očekávaný xxxxx: 0,125 XX/xx) xxxxxx postupného xxxxxx (1 + 1) xxxxx (4.5).
7. Xxxxxxxx xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxx zkušebního xxxxx
Xxxxxxxxx zkušební xxxxxx (4.2) xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.2) xxx asi 50 °C. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx zkušebním médiem (4.2) xxxxxxxx požadované xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx poskytne největší x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx spiramycinu.
7.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xx miskách xx čtyřmi xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (S8, X4, X2, X1) x čtyřmi xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (X8, X4, X2, X1). Xxxx čtyři xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx být xxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Pro xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx velké, aby xxxxxxxxxx udělat x xxxxxxxx xxxxx nejméně xxx xxxxxx x xxxxxxxx 10 až 13 mm x xxxxxxx 30 xx xxxx xxxxxx. Pokus xxxx xxx proveden xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx x tabule xxxx x kroužkem x xxxxxxx xxxx xxxxxx umístěným na xxxxx, 200 mm x xxxxxxx x 20 xx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xx misky množství xxxxx (4.2.), inokulovaného xxxx x 7.1., xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx 2 xx xxxxxx (60 ml xx xxxxx o xxxxxxx 200 ml). Xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxx a umístěte xx xxxx přesně xxxxxxxx objemy xxxxxxxxxx x standardních xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 ml xx xxxxx, xxxxx xxxxxxx). Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 32 xxxxxxxxxxx xxx.
7.3 Inkubace
Inkubujte xxxxx 16 až 18 xxxxx xxx 30 ± 2 °X.
8. Xxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxxxx na 0,1 xx. Zaznamenejte xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx na semilogaritmický xxxxxxxx papír, xxx xxxx vynášejte xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve vztahu x průměrům inhibičních xxx. Xxxxxxx nejvhodnější xxxxxx standardního xxxxxxx x extraktu, xxxxxxxxx xxx xx xxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (SL) x xxxxxxxx xxxxxxx:
x) XX = 7x1 + 4x2+ x4 – 2x8 / 10
Xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxx xxx xxxxxxxxxx nejvyšší xxxxxx (XX) s xxxxxxxx xxxxxxx:
x) XX = 7x8 + 4x4+ x2 – 2x1 / 10
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" body pro xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (UH) xxxxxxxxxx x1, x2, x4 x x8 xx x1, s2, x4, a x8 x xxxxx uvedených xxxxxxxxx [5]
Zaznamenejte xxxxxxxxx xxxxxxx XX a XX na stejný xxxxxxxx papír x xxxxxx je xxx, xxxxxx xxxxxxx "nejhodnější" xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Podobně xxxxxxxxxxxx XX x XX x xxxxxx je xxx, xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" křivku pro xxxxxxx.
X xxxxxxxxxxxxx jakéhokoli xxxxxxxxx xx křivky xxxx být xxxxxxxxx. Xxx praktické xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxxxx, xxxxx hodnoty (XX — XX) a (XX — XX) xxxxxxxxxx xxxx než x 10 % xx jejich střední xxxxxxx.
Xxxxx jsou xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx x1 x x1 nebo x8 x x8, xxxxx xxx xxxxxxxx x XX, SH, XX a XX xxxxxxxxx x použitím xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxx alternativní "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx:
x) SL = 5x1 + 2x2 – x4 / 6 xxxx 5s2 + 2x4 – x8 / 6
x′) XX = 5x4 + 2x2 – x1 / 6 xxxx 5x8 + 2x4 – x2 / 6
x xxxxxxx xxx XX x XX. Xxxx xx xxx xxxxxxx stejná xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx, xx byl xxxxxxxx xxxxxxxxx ze xxx xxxxxx, musí xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxx.
Xxxxx xxxx křivky xxxxxxxxxx xx paralelní, vypočtěte xxxxxxxxxx xxxxxxxxx aktivity (xxx X) x xxxxxx jedné x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xx xxx, xxxxx byly použity xxx nebo čtyři xxxxxx xxx ohodnocení xxxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxx úrovně
c) Xxx A = (x1+ x2+ x4+ x8 – s1 – s2 – x4 – x8) × 0,602 / x4+ u8+ x4+ x8 – x1 – u2 – x1 – s2
Pro xxx xxxxxx
x) Xxx X = (x1+ x2+ u4 – x1 – x2 – s4) × 0,401 / x4+ x4 – x1 – x1
xxxx
x´) Xxx X = (x2+ x4+ x8 – x2 – x4 – x8) × 0,401 / u8+ x8 – x2 – x2
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx = xxxxxxxx xxxxxxxxxxx standardu × X
(X8 = S8 × A)
Pokud xxxx xxxxxxxxx aktivita xxxxxxxx xxxx xxxxxx 0,5 xx 2,0, potom xxxxxxxx zkoušku, xxx xxxx proveďte vhodné xxxxxx xxxxxxxxxxx extraktu xxxx, xxxxx xxxx xxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx. Pokud nemůže xxx xxxxxxxxx aktivita xxxxxxxx xx požadovaného xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxxxx výsledek xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x toto xxxx xxx uvedeno x xxxxxxxxxx protokolu x xxxxxxx.
Xxxxx jsou křivky xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, stanovení musí xxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx.
9. Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx u xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx analytikem xxxxx xxxxxxxxx:
- 2 xx/xx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx 10 xx/xx,
- 20 % vzhledem x xxxxxxxx hodnotě pro xxxxxx 10 xx 25 mg/kg,
- 5 xx/xx v xxxxxxxxx xxxxxxx pro obsahy 25 xx 50 xx/xx,
- 10 % xxxxxxxx x nejvyšší xxxxxxx xxx xxxxxx xxx 50 mg/kg.
[1] 1 mg báze xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3200 xxxxxxxxxxxxx jednotek (XX).
[2] Další metody xxxxx xxx použity xx předpokladu, xx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx podobné bakteriální xxxxxxxx.
[3] Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx komerční xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
[4] Xxxx xxx xxxxxxx jakékoli xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
[5] Xxxx xxxxxxx "x" x "u" odpovídají xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx.