Xxxxxx Směrnice Komise
ze xxx 25. července 1984,
xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx
(84/425/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX SPOLEČENSTVÍ,
s xxxxxxx na Smlouvu x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx směrnici Xxxx 70/373/XXX xx dne 20. xxxxxxxx 1970, xxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx odběru xxxxxx x xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxx x xxxxxxxxxxx Xxxxx, a xxxxxxx na článek 2 xxxxxxx směrnice,
vzhledem x tomu, xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx úřední xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx požadavků xxxxxxxxxx právních a xxxxxxxxx xxxxxxxx týkajících xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx Komise 71/250/XXX [2], 73/46/EHS [3], 74/203/XXX [4], 75/84/XXX [5], 76/372/XXX [6] naposledy pozměněné xxxxxxxx 81/680/EHS [7], xxxxxxxx 71/393/XXX [8], 72/199/XXX [9], 78/633/EHS [10] xxxxxxxxx pozměněné xxxxxxxx 84/4/XXX [11] x směrnice 81/715/XXX [12] již xxxxxxxxx xxxxxx počet xxxxxxxxxxxx xxxxx Společenství; xx xxxxxx x práci xx té xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx se xxxxxxxxxxx Xxxxxxx výboru xxx xxxxxx,
XXXXXXX TUTO XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Členské státy xxxxxxx, xx analýzy xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx jde x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx provádějí xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx.
Článek 2
Členské xxxxx xxxxxx v účinnost xxxxxx a správní xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx souladu x xxxxx směrnicí xxxxxxxxxx xx 30. června 1985 x xxxxxxxxxx x xxxx uvědomí Xxxxxx.
Xxxxxx 3
Tato směrnice xx určena xxxxxxxx xxxxxx.
V Xxxxxxx xxx 25. xxxxxxxx 1984.
Xx Xxxxxx
Xxxx Dalsager
člen Xxxxxx
[1] Xx. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Xx. xxxx. X 155, 12.7.1971, x. 13.
[3] Xx. věst. X 83, 30.3.1973, x. 21.
[4] Úř. xxxx. X 108, 22.4.1974, x. 7.
[5] Xx. xxxx. X 32, 5.2.1975, x. 26.
[6] Xx. xxxx. X 102, 15.4.1976, x. 8.
[7] Xx. věst. X 246, 29.8.1981, x. 32.
[8] Xx. věst. X 279, 20.12.1971, x. 7.
[9] Xx. věst. X 123, 29.5.1972, x. 6.
[10] Úř. xxxx. X 206, 29.7.1978, x. 43.
[11] Xx. xxxx. X 15, 18.1.1984, x. 28.
[12] Xx. věst. X 257, 10.9.1981, x. 38.
XXXXXXX
XXXXXXXXX SPIRAMYCINU DIFÚZÍ XX XXXXXXXX XXXXX
1. Xxxx x xxxxxx
Xxxxxx xx určena pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x premixech. Xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx/xx (1 xxx) [1]
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx extrahuje xxxxx metanol/fosfát-bikarbonátovým pufrem x xX 8. Xxxxxxx xx dekantován xxxx xxxxxxxxx x xxxxxx. Xxxx antibiotická xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx difúze xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx médiu xxxxxxxxxxxx mikroorganizmem Xxxxxxxxxxx xxxxxx. Difúze se xxxxxxxxx xxxxxxx inhibičních xxx xxxxxxxxxxxxxx. Průměr xxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxx logaritmu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxxxxxxxxx: Xxxxxxxxxxx xxxxxx XXX 9341 (XXXX 8340, XXXX 8553)
3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1) v xxxxx xxxxxxxx mikroorganizmem Xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx 24 xxxxx xxx 30 °X. Kulturu xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx okolo 4 °X. Xxxxx xxxxxxxxx každé xxx xxxxx.
3.2 Příprava xxxxxxxxxxx xxxxxxxx [2]
Ze xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx agaru xxxxxx bakterie 2 xx 3 xx xxxxxxx chloridu xxxxxxx (4.3). Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx 250 ml kultivačního xxxxx (4.1) xxxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxx x inkubujte 18 xx 20 hodin xxx 30 °X. Xxxxxxxx smyjte xx 25 ml xxxxxxx xxxxxxxx sodného (4.3) x xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx 1/10 xxxxxxxx chloridu sodného (4.3). Xxxxxxxx transmise xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx 75 %, xxxxxx xxx 650 xx x 1 xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx sodného (4.3.). Tato xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxx 4 °X.
4. Xxxxxxxxxx média x xxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxxx médium [3]
|
Xxxxxx xxxxxx |
6,0 g |
|
Trypton |
4,0 x |
|
Xxxxxxx z xxxxxxx |
3,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10,0 xx 20,0 x |
|
Xxxx |
1000 ml |
|
PH 6,5 až 6,6 (xx xxxxxxxxxxx). |
|
|
4.2 Xxxxxxxx xxxxxx [4] |
|
|
Xxxxxxx |
5,0 g |
|
Extrakt x xxxxxxx |
4,0 g |
|
Extrakt x xxxx |
3,0 g |
|
Agar |
10,0 xx 20,0 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
XX 8,0 (po xxxxxxxxxxx). |
|
4.3 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 0,8 % (xxxxxx xxxxxxxx)
Xxxxxxxxx 8 x chloridu xxxxxxx xx xxxx x xxxxxx xx 1000 xx; xxxxxxxxxxxx.
4.4 Xxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx, pH 8,0
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx dvou xxxxxxxx X2XXX4 |
16,7 x |
|
Xxxxxxxx fosforečnan xxxxxxxx XX2XX4 |
0,5 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxxx sodný XxXXX3 |
20,0 x |
|
Xxxx do |
1000 ml |
4.5 Xxxx xxxxxxx fosfát-bikarbonátový xxxx (4.4)
50/50 (xxxxxxxx).
4.6 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx (v XX).
5. Standardní xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.6.) xx xxxxx (4.5.) x xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx obsahující 1000 XX xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxx 4 °X xx xxxxx roztok xxxxxxxx xx xxx xxx.
X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx postupným xxxxxxx směsí (4.5.) xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
|
X8 |
1 |
XX/xx |
|
X4 |
0,5 |
XX/xx |
|
X2 |
0,25 |
XX/xx |
|
X1 |
0,125 |
XX/xx |
6. Příprava xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx
6.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 20,0 x vzorku v xxxxxxx xxxxx, 1,0 xx 20,0 x x xxxxxxx. Přidejte 100 xx směsi (4.5) x třepejte 30 minut. Odstřeďte xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.5), xxxxxx xxxxxxxx očekávaný xxxxx xxxxxxxxxxx 1 XX/xx (= X8).
Xxx očekávané xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx 2,5 xx/xx xxxxxx, musí být xxxxxxxx provedena xxxxxxxxxx. Xxxxxxx 20,0 x xxxxxx. Xxxxxxxx 100 xx xxxxx (4.5) x xxxxxxxx 30 xxxxx. Odstřeďujte xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx 50 xx roztoku supernatantu x xxxxxxx na xxx 4 ml xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 40 °C. Xxxxxx xxxxxx xxxxx (4.5), xxxxxx obdrželi xxxxxxxxx xxxxx spiramycinu 1 XX/xx (= X8).
6.2 Xxxxxxxx xxxxxxx
X roztoku X8 xxxxxxxxx roztokU4 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,5 XX/xx), X2 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,25 XX/xx) x X1 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,125 XX/xx) xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (1 + 1) xxxxx (4.5).
7. Xxxxxxxx xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.2) bakteriální xxxxxxxx (3.2) při xxx 50 °C. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx (4.2) xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x nejjasnější inhibiční xxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx miskách xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (X8, X4, X2, X1) x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoku (X8, X4, U2, X1). Xxxx čtyři koncentrace xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx být nutně xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Pro xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxxx udělat x xxxxxxxx médiu xxxxxxx xxx otvorů x xxxxxxxx 10 xx 13 mm x xxxxxxx 30 xx xxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx být xxxxxxxx xx xxxxxxx skládajících xx x xxxxxx xxxx x xxxxxxxx x hliníku xxxx xxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx, 200 xx x xxxxxxx x 20 xx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xx misky množství xxxxx (4.2.), xxxxxxxxxxxxx xxxx x 7.1., xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx 2 xx xxxxxx (60 ml xx desku x xxxxxxx 200 xx). Xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxx x umístěte xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx objemy zkušebních x standardních xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 ml xx xxxxx, xxxxx průměru). Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx čtyřikrát tak, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vyhodnocení 32 xxxxxxxxxxx xxx.
7.3 Inkubace
Inkubujte xxxxx 16 xx 18 xxxxx xxx 30 ± 2 °X.
8. Vyhodnocení
Změřte xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx s xxxxxxxxx na 0,1 xx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pro každou xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, při xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve vztahu x průměrům xxxxxxxxxxx xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx standardního xxxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xx níže xxxxxxx.
Xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" bod xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (XX) x xxxxxxxx rovnice:
a) XX = 7x1 + 4x2+ x4 – 2x8 / 10
Stanovte "xxxxxxxxxxxx" bod xxx xxxxxxxxxx nejvyšší xxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxxx:
x) SH = 7x8 + 4x4+ x2 – 2x1 / 10
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxxx xxx xxxxxxxx úroveň xxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxx extraktu (XX) xxxxxxxxxx x1, u2, x4 a x8 xx x1, x2, x4, x x8 x dříve uvedených xxxxxxxxx [5]
Zaznamenejte xxxxxxxxx xxxxxxx XX x XX na xxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xx xxx, xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx zaznamenejte XX a UH x xxxxxx je xxx, xxxxxx dostali "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx xxx xxxxxxx.
X xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx. Xxx praktické xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx (XX — SL) x (XX — XX) xxxxxxxxxx xxxx než x 10 % xx xxxxxx střední xxxxxxx.
Xxxxx jsou křivky xxxxxxxxxxx, buď x1 x x1 xxxx x8 a x8, xxxxx xxx xxxxxxxx x XX, SH, XX x XX xxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxx alternativní "nejvhodnější" xxxxxx:
x) SL = 5x1 + 2x2 – x4 / 6 xxxx 5x2 + 2s4 – x8 / 6
x′) XX = 5s4 + 2x2 – x1 / 6 xxxx 5x8 + 2x4 – s2 / 6
x podobně xxx XX x XX. Xxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx ze xxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxxxx x závěrečném xxxxxxxxx o xxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx paralelní, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx A) x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx na xxx, xxxxx xxxx použity xxx xxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxx
x) Xxx A = (x1+ x2+ x4+ x8 – x1 – x2 – x4 – s8) × 0,602 / x4+ x8+ s4+ x8 – u1 – u2 – x1 – x2
Xxx xxx úrovně
d) Log X = (x1+ x2+ x4 – x1 – x2 – x4) × 0,401 / x4+ x4 – u1 – s1
nebo
d´) Log X = (u2+ x4+ u8 – x2 – x4 – x8) × 0,401 / u8+ x8 – x2 – x2
Xxxxxxxx extraktu xxxxxx = xxxxxxxx xxxxxxxxxxx standardu × X
(X8 = S8 × X)
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx 0,5 xx 2,0, potom xxxxxxxx zkoušku, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx extraktu xxxx, pokud xxxx xxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx. Pokud xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx požadovaného xxxxxxx, musí být xxxxx získaný výsledek xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxx musí xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx stanovení. Xxxxx xxxx xxxxx docíleno xxxxxxxxxxxx, stanovení musí xxx považováno xx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx výsledek x xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx.
9. Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx mezi xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx stejným xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
- 2 xx/xx x absolutní xxxxxxx xxx obsahy xxxx spiramycinu xx 10 xx/xx,
- 20 % xxxxxxxx x xxxxxxxx hodnotě xxx xxxxxx 10 xx 25 xx/xx,
- 5 xx/xx v absolutní xxxxxxx pro obsahy 25 xx 50 xx/xx,
- 10 % xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxx obsahy xxx 50 xx/xx.
[1] 1 mg xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3200 xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (XX).
[2] Xxxxx xxxxxx xxxxx být použity xx xxxxxxxxxxx, xx xxxx stanoveno, že xxxxxxxxx podobné xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
[3] Může xxx xxxxxxx xxxxxxxx komerční xxxxxxxxxx xxxxxx podobného xxxxxxx x dávající xxxxxx výsledky.
[4] Může xxx použito xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
[5] Xxxx xxxxxxx "x" x "x" odpovídají xxxxxxxx xxxxxxxxxxx zón.