Desátá Xxxxxxxx Komise
ze xxx 25. července 1984,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx metody Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx kontrolu xxxxx
(84/425/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx společenství,
s ohledem xx xxxxxxxx Xxxx 70/373/XXX ze dne 20. července 1970, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx odběru xxxxxx x xxxxxxx Společenství xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxx o xxxxxxxxxxx Xxxxx, a xxxxxxx xx článek 2 xxxxxxx směrnice,
vzhledem x xxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxx požaduje, xxx xxxxxx kontrola xxxxx za xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx x xxxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx směrnice Komise 71/250/XXX [2], 73/46/EHS [3], 74/203/XXX [4], 75/84/XXX [5], 76/372/EHS [6] naposledy xxxxxxxxx xxxxxxxx 81/680/EHS [7], xxxxxxxx 71/393/XXX [8], 72/199/XXX [9], 78/633/XXX [10] xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx 84/4/XXX [11] x xxxxxxxx 81/715/XXX [12] xxx xxxxxxxxx xxxxxx počet xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx; že xxxxxx v xxxxx xx té xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx jsou x souladu xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx xxx krmiva,
PŘIJALA XXXX XXXXXXXX:
Článek 1
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx jde x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, se provádějí xxxxxxx popsanou x xxxxxxx.
Článek 2
Členské státy xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x správní xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx souladu s xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 30. xxxxxx 1985 x xxxxxxxxxx x nich xxxxxxx Xxxxxx.
Článek 3
Xxxx směrnice xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
V Bruselu dne 25. července 1984.
Za Xxxxxx
Xxxx Xxxxxxxx
xxxx Xxxxxx
[1] Xx. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Xx. věst. X 155, 12.7.1971, x. 13.
[3] Úř. věst. X 83, 30.3.1973, x. 21.
[4] Xx. xxxx. X 108, 22.4.1974, x. 7.
[5] Xx. xxxx. X 32, 5.2.1975, x. 26.
[6] Xx. věst. X 102, 15.4.1976, x. 8.
[7] Úř. věst. X 246, 29.8.1981, x. 32.
[8] Xx. věst. X 279, 20.12.1971, x. 7.
[9] Xx. věst. X 123, 29.5.1972, x. 6.
[10] Xx. xxxx. X 206, 29.7.1978, x. 43.
[11] Xx. xxxx. X 15, 18.1.1984, x. 28.
[12] Úř. xxxx. X 257, 10.9.1981, x. 38.
PŘÍLOHA
STANOVENÍ XXXXXXXXXXX DIFÚZÍ XX AGAROVÉM MÉDIU
1. Xxxx a xxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x premixech. Xxxxx mez xxxxxxxxxxxxxxx xx 1 mg/kg (1 ppm) [1]
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxxxx-xxxxxxxxxxxxxx pufrem x xX 8. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx médiu xxxxxxxxxxxx mikroorganizmem Micrococcus xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx. Průměr xxxxxx zón je xxxxx xxxxxx logaritmu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3. Mikroorganizmus: Micrococcus xxxxxx XXX 9341 (XXXX 8340, NCIB 8553)
3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx kultivační xxxxxx (4.1) x šikmé xxxxxxxx mikroorganizmem Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx 24 xxxxx xxx 30 °X. Kulturu xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx 4 °X. Znovu xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx.
3.2 Xxxxxxxx bakteriální xxxxxxxx [2]
Xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx agaru xxxxxx xxxxxxxx 2 xx 3 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3). Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x naočkování 250 ml xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxx x Rouxově xxxxx x inkubujte 18 xx 20 xxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxx xx 25 xx roztoku xxxxxxxx sodného (4.3) x xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx 1/10 xxxxxxxx chloridu xxxxxxx (4.3). Světelná transmise xxxxxxxx xxxx být xxxxx 75 %, xxxxxx xxx 650 xx x 1 xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx sodného (4.3.). Xxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxx 4 °C.
4. Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxxx médium [3]
|
Xxxxxx pepton |
6,0 x |
|
Xxxxxxx |
4,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxxxxx |
3,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxx |
1,0 g |
|
Agar |
10,0 xx 20,0 x |
|
Xxxx |
1000 ml |
|
PH 6,5 xx 6,6 (xx sterilizaci). |
|
|
4.2 Xxxxxxxx xxxxxx [4] |
|
|
Trypton |
5,0 x |
|
Xxxxxxx x kvasnic |
4,0 g |
|
Extrakt x xxxx |
3,0 g |
|
Agar |
10,0 xx 20,0 g |
|
Voda |
1000 xx |
|
XX 8,0 (po xxxxxxxxxxx). |
|
4.3 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 0,8 % (xxxxxx xxxxxxxx)
Xxxxxxxxx 8 x chloridu xxxxxxx xx xxxx x xxxxxx xx 1000 xx; sterilizujte.
4.4 Fosfát-bikarbonátový xxxx, xX 8,0
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx draselný X2XXX4 |
16,7 g |
|
Hydrogen xxxxxxxxxxx xxxxxxxx KH2PO4 |
0,5 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx XxXXX3 |
20,0 x |
|
Xxxx do |
1000 xx |
4.5 Xxxx metanol xxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx (4.4)
50/50 (xxxxxxxx).
4.6 Xxxxxxxxxx látka
Spiramycin o xxxxx xxxxxxxx (x XX).
5. Standardní roztoky
Rozpusťte xxxxxx odvážené xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.6.) xx xxxxx (4.5.) x zřeďte xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx roztok xxxxxxxxxx 1000 XX xxxxxxxxxxx xx mililitr. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxx 4 °X xx tento roztok xxxxxxxx xx xxx xxx.
X tohoto xxxxxxxxx xxxxxxx připravte xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (4.5.) xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
|
X8 |
1 |
XX/xx |
|
X4 |
0,5 |
XX/xx |
|
X2 |
0,25 |
XX/xx |
|
X1 |
0,125 |
XX/xx |
6. Příprava xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx
6.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 20,0 x xxxxxx v xxxxxxx krmiv, 1,0 xx 20,0 x x xxxxxxx. Xxxxxxxx 100 xx xxxxx (4.5) x xxxxxxxx 30 minut. Xxxxxxxxx xxxx dekantujte a xxxxxx roztok supernatantu xxxxx (4.5), xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx obsah xxxxxxxxxxx 1 XX/xx (= X8).
Xxx očekávané xxxxxx xxxxxxxxxxx menší xxx 2,5 xx/xx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx provedena xxxxxxxxxx. Xxxxxxx 20,0 g xxxxxx. Xxxxxxxx 100 xx xxxxx (4.5) x třepejte 30 xxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx 50 xx xxxxxxx supernatantu x xxxxxxx xx xxx 4 xx xx xxxxxxxxx xxxxx xx rotační xxxxxxx xxx teplotě nepřesahující 40 °X. Xxxxxx xxxxxx směsí (4.5), xxxxxx obdrželi xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx 1 XX/xx (= X8).
6.2 Xxxxxxxx xxxxxxx
X xxxxxxx X8 xxxxxxxxx xxxxxxX4 (xxxxxxxxx obsah: 0,5 XX/xx), U2 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,25 IU/ml) x X1 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,125 XX/xx) xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (1 + 1) xxxxx (4.5).
7. Zkušební xxxxxx
7.1 Naočkování xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.2) xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.2) při asi 50 °X. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx miskách xx zkušebním xxxxxx (4.2) xxxxxxxx požadované xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx poskytne největší x xxxxxxxxxxx inhibiční xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xx čtyřmi xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X8, X4, X2, S1) x xxxxxx koncentracemi xxxxxxxxxx xxxxxxx (U8, X4, X2, U1). Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxx xxx nutně xxxxxxxx na xxxxx xxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, aby xxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxx médiu xxxxxxx xxx otvorů s xxxxxxxx 10 xx 13 mm a xxxxxxx 30 xx xxxx středy. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xx miskách xxxxxxxxxxxx xx z tabule xxxx x xxxxxxxx x hliníku nebo xxxxxx umístěným xx xxxxx, 200 xx x průměru x 20 xx vysokým.
Rozlijte xx xxxxx množství xxxxx (4.2.), xxxxxxxxxxxxx xxxx x 7.1., xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx 2 mm xxxxxx (60 xx xx xxxxx x xxxxxxx 200 ml). Xxxxxxxx ustát, xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx nich xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0,10 a 0,15 xx xx xxxxx, xxxxx xxxxxxx). Xxxxxxxx xxxxxx koncentraci xxxxxxx čtyřikrát xxx, xx xxxxx stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 32 xxxxxxxxxxx xxx.
7.3 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx 16 až 18 xxxxx xxx 30 ± 2 °X.
8. Xxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxxxx xx 0,1 xx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx pro každou xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx papír, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx vztahu x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx standardního roztoku x xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xx xxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxx xxx standardní xxxxxxxx xxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxxx:
x) XX = 7x1 + 4x2+ s4 – 2x8 / 10
Xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx úroveň (XX) s použitím xxxxxxx:
x) XX = 7x8 + 4x4+ x2 – 2s1 / 10
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" body xxx xxxxxxxx úroveň xxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (XX) xxxxxxxxxx x1, x2, x4 x u8 xx x1, x2, x4, a s8 x dříve xxxxxxxxx xxxxxxxxx [5]
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XX a XX na stejný xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xx xxx, xxxxxx xxxxxxx "nejhodnější" xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx XX a XX x spojte xx xxx, xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx xxx xxxxxxx.
X xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx by xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx účely xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx paralelní, xxxxx xxxxxxx (SH — XX) x (XX — UL) xxxxxxxxxx více xxx x 10 % xx xxxxxx střední xxxxxxx.
Xxxxx jsou křivky xxxxxxxxxxx, buď x1 x x1 nebo x8 x x8, xxxxx být xxxxxxxx x XX, SH, XX x UH xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx rovnic, xxx xxxxxxxx alternativní "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx:
x) SL = 5x1 + 2s2 – s4 / 6 xxxx 5x2 + 2s4 – x8 / 6
x′) XX = 5s4 + 2s2 – x1 / 6 xxxx 5x8 + 2x4 – x2 / 6
x xxxxxxx xxx XX a XX. Xxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx, xx xxx výsledek xxxxxxxxx xx tří xxxxxx, musí xxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxx o analýze.
Pokud xxxx křivky xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx relativní aktivity (xxx X) x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx rovnic, x xxxxxxxxxx xx tom, xxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxx xxxxx xxxxxx pro ohodnocení xxxxxxxxxxxx.
Xxx čtyři úrovně
c) Xxx X = (x1+ x2+ u4+ x8 – x1 – x2 – x4 – x8) × 0,602 / x4+ x8+ x4+ x8 – u1 – x2 – x1 – x2
Xxx xxx úrovně
d) Log X = (x1+ x2+ x4 – x1 – x2 – x4) × 0,401 / x4+ x4 – u1 – x1
xxxx
x´) Log X = (x2+ x4+ u8 – x2 – x4 – x8) × 0,401 / x8+ x8 – x2 – x2
Xxxxxxxx extraktu xxxxxx = aktivita xxxxxxxxxxx standardu × X
(X8 = X8 × X)
Xxxxx byla xxxxxxxxx xxxxxxxx nalezena xxxx xxxxxx 0,5 xx 2,0, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx koncentrací xxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxx xxxxx, roztoků xxxxxxxxx. Pokud xxxxxx xxx xxxxxxxxx aktivita xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx být xxxxx xxxxxxx výsledek xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x toto xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx protokolu x xxxxxxx.
Xxxxx jsou xxxxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx stanovení. Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, stanovení xxxx xxx xxxxxxxxxx za xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxx spiramycinu xx xxxxxxxx xxxxxx.
9. Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx mezi výsledky xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx u xxxxxxxx xxxxxx stejným xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
- 2 xx/xx v xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxx spiramycinu xx 10 xx/xx,
- 20 % xxxxxxxx k xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx 10 až 25 xx/xx,
- 5 xx/xx x absolutní xxxxxxx xxx obsahy 25 xx 50 xx/xx,
- 10 % xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx pro obsahy xxx 50 xx/xx.
[1] 1 xx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3200 xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (XX).
[2] Xxxxx metody xxxxx xxx xxxxxxx xx předpokladu, xx xxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxxxx podobné xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
[3] Může xxx xxxxxxx jakékoli xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x dávající xxxxxx xxxxxxxx.
[4] Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx kultivační xxxxxx xxxxxxxxx složení x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
[5] Xxxx xxxxxxx "x" x "u" xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx.