Xxxxxx Směrnice Xxxxxx
xx xxx 25. xxxxxxxx 1984,
xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx metody Společenství xxx úřední xxxxxxxx xxxxx
(84/425/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Smlouvu x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx xxxxxxxx Rady 70/373/XXX xx dne 20. xxxxxxxx 1970, xxxxxx xx zavádějí xxxxxx xxxxxx vzorků x analýzy Xxxxxxxxxxxx xxx úřední xxxxxxxx xxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx Aktem x xxxxxxxxxxx Xxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxx 2 xxxxxxx směrnice,
vzhledem x xxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxx požaduje, xxx úřední xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx právních x xxxxxxxxx předpisů xxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx krmiv xxxx xxxxxxxxx xx použití xxxxx Společenství pro xxxxx xxxxxx a xxxxxxx;
xxxxxxxx k tomu, xx xxxxxxxx Xxxxxx 71/250/XXX [2], 73/46/EHS [3], 74/203/XXX [4], 75/84/XXX [5], 76/372/XXX [6] xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx 81/680/XXX [7], xxxxxxxx 71/393/EHS [8], 72/199/XXX [9], 78/633/EHS [10] naposledy pozměněné xxxxxxxx 84/4/XXX [11] x xxxxxxxx 81/715/XXX [12] již xxxxxxxxx xxxxxx počet xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx; že xxxxxx x xxxxx xx té xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx metodu;
vzhledem x xxxx, xx opatření xxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx,
XXXXXXX TUTO XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxx úřední xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxx popsanou x xxxxxxx.
Xxxxxx 2
Členské xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x správní xxxxxxxx nezbytné xxx xxxxxxxx souladu s xxxxx směrnicí nejpozději xx 30. xxxxxx 1985 x neprodleně x nich xxxxxxx Xxxxxx.
Xxxxxx 3
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx členským xxxxxx.
V Xxxxxxx dne 25. xxxxxxxx 1984.
Xx Xxxxxx
Xxxx Xxxxxxxx
xxxx Xxxxxx
[1] Xx. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Xx. xxxx. X 155, 12.7.1971, x. 13.
[3] Úř. věst. X 83, 30.3.1973, x. 21.
[4] Xx. xxxx. X 108, 22.4.1974, x. 7.
[5] Xx. věst. X 32, 5.2.1975, x. 26.
[6] Xx. xxxx. X 102, 15.4.1976, x. 8.
[7] Úř. xxxx. X 246, 29.8.1981, x. 32.
[8] Úř. xxxx. X 279, 20.12.1971, x. 7.
[9] Úř. xxxx. X 123, 29.5.1972, x. 6.
[10] Xx. xxxx. X 206, 29.7.1978, x. 43.
[11] Xx. věst. X 15, 18.1.1984, x. 28.
[12] Xx. věst. X 257, 10.9.1981, x. 38.
PŘÍLOHA
STANOVENÍ XXXXXXXXXXX XXXXXX XX XXXXXXXX MÉDIU
1. Xxxx a xxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx mez stanovitelnosti xx 1 xx/xx (1 ppm) [1]
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxxxx-xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xX 8. Xxxxxxx je xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxx. Jeho xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx je stanovena xxxxxxx xxxxxx spiramyscinu x agarovém xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx mikroorganizmu. Xxxxxx xxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxx logaritmu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3. Mikroorganizmus: Micrococcus xxxxxx XXX 9341 (XXXX 8340, XXXX 8553)
3.1 Udržování základní xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1) x šikmé xxxxxxxx mikroorganizmem Micrococcus xxxxxx a xxxxxxxxx 24 xxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx 4 °C. Xxxxx xxxxxxxxx každé xxx xxxxx.
3.2 Příprava xxxxxxxxxxx xxxxxxxx [2]
Xx dříve xxxxxxxxxxxx šikmého xxxxx xxxxxx bakterie 2 xx 3 ml xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3). Tuto suspenzi xxxxxxxx k xxxxxxxxxx 250 ml xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxx x Xxxxxxx baňce x xxxxxxxxx 18 xx 20 hodin xxx 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxx xx 25 ml xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3) x xxxxxxxxxxx. Zřeďte xxxxxxxx xx 1/10 xxxxxxxx chloridu xxxxxxx (4.3). Xxxxxxxx transmise xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx 75 %, xxxxxx xxx 650 xx x 1 xx kyvetě xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx sodného (4.3.). Xxxx xxxxxxxx xxxx xxx skladována xxxxx xxxxx při xxx 4 °X.
4. Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx [3]
|
Xxxxxx xxxxxx |
6,0 x |
|
Xxxxxxx |
4,0 x |
|
Xxxxxxx x kvasnic |
3,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10,0 xx 20,0 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
XX 6,5 až 6,6 (xx xxxxxxxxxxx). |
|
|
4.2 Xxxxxxxx xxxxxx [4] |
|
|
Trypton |
5,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxxxxx |
4,0 g |
|
Extrakt x masa |
3,0 x |
|
Xxxx |
10,0 xx 20,0 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
XX 8,0 (xx xxxxxxxxxxx). |
|
4.3 Roztok chloridu xxxxxxx 0,8 % (xxxxxx xxxxxxxx)
Xxxxxxxxx 8 x xxxxxxxx sodného xx xxxx x xxxxxx xx 1000 xx; xxxxxxxxxxxx.
4.4 Xxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx, xX 8,0
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx X2XXX4 |
16,7 x |
|
Xxxxxxxx fosforečnan xxxxxxxx KH2PO4 |
0,5 g |
|
Hydrogen xxxxxxxxx xxxxx NaHCO3 |
20,0 x |
|
Xxxx xx |
1000 ml |
4.5 Xxxx xxxxxxx xxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx (4.4)
50/50 (objemově).
4.6 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx (v XX).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx odvážené xxxxxxxx xxxxxxxxxx látky (4.6.) xx xxxxx (4.5.) x xxxxxx xxxxxxx xxxxx, abyste xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 1000 XX spiramycinu xx mililitr. Xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxx 4 °X xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx až xxx xxx.
X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx postupným xxxxxxx směsí (4.5.) xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
|
X8 |
1 |
XX/xx |
|
X4 |
0,5 |
XX/xx |
|
X2 |
0,25 |
XX/xx |
|
X1 |
0,125 |
XX/xx |
6. Xxxxxxxx xxxxxxxx x zkušebních xxxxxxx
6.1 Extrakce
Odvažte 20,0 x xxxxxx v xxxxxxx xxxxx, 1,0 xx 20,0 x x xxxxxxx. Xxxxxxxx 100 xx xxxxx (4.5) a xxxxxxxx 30 minut. Xxxxxxxxx xxxx dekantujte x xxxxxx xxxxxx supernatantu xxxxx (4.5), xxxxxx xxxxxxxx očekávaný xxxxx xxxxxxxxxxx 1 XX/xx (= X8).
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx spiramycinu xxxxx xxx 2,5 xx/xx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx 20,0 x xxxxxx. Xxxxxxxx 100 xx směsi (4.5) x xxxxxxxx 30 xxxxx. Odstřeďujte xxxxxxx xxxxx, odeberte 50 xx xxxxxxx supernatantu x odpařte xx xxx 4 xx xx sníženého xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 40 °X. Xxxxxx xxxxxx xxxxx (4.5), xxxxxx xxxxxxxx očekávaný xxxxx xxxxxxxxxxx 1 XX/xx (= U8).
6.2 Xxxxxxxx xxxxxxx
X xxxxxxx X8 připravte xxxxxxX4 (xxxxxxxxx obsah: 0,5 XX/xx), X2 (očekávaný xxxxx: 0,25 XX/xx) x X1 (očekávaný xxxxx: 0,125 IU/ml) xxxxxx postupného xxxxxx (1 + 1) xxxxx (4.5).
7. Xxxxxxxx xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxx zkušebního xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx médium (4.2) bakteriální xxxxxxxx (3.2) při xxx 50 °X. Předběžnými xxxxxx na xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx (4.2) xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx bakteriální suspenze, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx spiramycinu.
7.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxxx se xxxxxxx na xxxxxxx xx čtyřmi koncentracemi xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (S8, X4, S2, S1) x xxxxxx koncentracemi xxxxxxxxxx roztoku (X8, X4, X2, X1). Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxx nutně xxxxxxxx xx každé xxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx vyberte xxxxx xxxxxxxxxx velké, xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx nejméně xxx xxxxxx s xxxxxxxx 10 xx 13 xx x xxxxxxx 30 xx xxxx xxxxxx. Pokus xxxx být xxxxxxxx xx miskách skládajících xx z xxxxxx xxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx, 200 xx x průměru x 20 xx vysokým.
Rozlijte xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx (4.2.), xxxxxxxxxxxxx xxxx v 7.1., xxx vytvořilo vrstvu xxx 2 xx xxxxxx (60 ml xx xxxxx x xxxxxxx 200 ml). Xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxx a umístěte xx nich xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx zkušebních x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 ml xx xxxxx, xxxxx xxxxxxx). Xxxxxxxx xxxxxx koncentraci xxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xx každé stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 32 xxxxxxxxxxx zón.
7.3 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx 16 až 18 xxxxx xxx 30 ± 2 °X.
8. Vyhodnocení
Změřte xxxxxx xxxxxxxxxxx zón s xxxxxxxxx xx 0,1 xx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx vztahu x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx. Xxxxxxx nejvhodnější xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xx xxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" bod xxx standardní xxxxxxxx xxxxxx (SL) x xxxxxxxx xxxxxxx:
x) SL = 7x1 + 4x2+ x4 – 2x8 / 10
Xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxxx:
x) XX = 7x8 + 4x4+ x2 – 2x1 / 10
Podobně xxxxxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxxx pro xxxxxxxx xxxxxx extraktu (XX) a xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (XX) xxxxxxxxxx x1, u2, x4 x x8 xx x1, s2, x4, x s8 x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx [5]
Zaznamenejte xxxxxxxxx xxxxxxx XX a XX na xxxxxx xxxxxxxx papír x xxxxxx xx xxx, xxxxxx dostali "nejhodnější" xxxxxx xxx standardní xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx XX a XX x spojte xx xxx, xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx pro xxxxxxx.
X nepřítomnosti xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx. Xxx praktické xxxxx xxxxx být křivky xxxxxxxxxx xx paralelní, xxxxx xxxxxxx (SH — SL) a (XX — XX) xxxxxxxxxx xxxx xxx x 10 % xx jejich xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx jsou křivky xxxxxxxxxxx, xxx u1 x x1 nebo x8 x s8, xxxxx být vyřazeny x XX, SH, XX x XX xxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxx alternativní "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx:
x) XX = 5x1 + 2x2 – x4 / 6 nebo 5x2 + 2s4 – x8 / 6
x′) XX = 5x4 + 2s2 – x1 / 6 xxxx 5x8 + 2x4 – s2 / 6
x xxxxxxx xxx XX x XX. Xxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxx.
Xxxxx xxxx křivky xxxxxxxxxx xx paralelní, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx A) s xxxxxx xxxxx z xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xx xxx, xxxxx xxxx použity xxx nebo xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxx čtyři úrovně
c) Xxx A = (x1+ x2+ u4+ x8 – s1 – x2 – x4 – x8) × 0,602 / x4+ x8+ x4+ x8 – x1 – x2 – x1 – s2
Pro xxx xxxxxx
x) Log X = (x1+ x2+ u4 – x1 – x2 – x4) × 0,401 / x4+ x4 – x1 – x1
xxxx
x´) Log X = (u2+ x4+ u8 – x2 – s4 – s8) × 0,401 / x8+ x8 – x2 – x2
Xxxxxxxx extraktu xxxxxx = aktivita xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx × X
(X8 = X8 × X)
Xxxxx byla xxxxxxxxx aktivita nalezena xxxx xxxxxx 0,5 xx 2,0, potom xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx koncentrací xxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxx možné, roztoků xxxxxxxxx. Pokud xxxxxx xxx relativní aktivita xxxxxxxx xx požadovaného xxxxxxx, xxxx být xxxxx získaný xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxx musí xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxx.
Xxxxx xxxx křivky xxxxxxxxxx xx neparalelní, xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx stále docíleno xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx výsledek x xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx krmiva.
9. Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx u xxxxxxxx xxxxxx stejným xxxxxxxxxx xxxxx překročit:
- 2 xx/xx v xxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx 10 mg/kg,
- 20 % vzhledem x xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx 10 xx 25 mg/kg,
- 5 xx/xx v xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx 25 xx 50 xx/xx,
- 10 % xxxxxxxx k xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxx 50 xx/xx.
[1] 1 xx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3200 xxxxxxxxxxxxx jednotek (XX).
[2] Xxxxx xxxxxx xxxxx xxx použity xx předpokladu, že xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx podobné xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
[3] Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx podobného xxxxxxx x dávající xxxxxx xxxxxxxx.
[4] Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx kultivační xxxxxx xxxxxxxxx složení a xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
[5] Xxxx xxxxxxx "s" x "x" xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx zón.