Xxxxxx Xxxxxxxx Komise
ze xxx 25. července 1984,
xxxxxx xx stanoví xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx
(84/425/XXX)
XXXXXX EVROPSKÝCH XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx na Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxx 70/373/XXX ze dne 20. xxxxxxxx 1970, xxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx Společenství xxx xxxxxx kontrolu xxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxx x xxxxxxxxxxx Řecka, x xxxxxxx na xxxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx úřední kontrola xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx právních x xxxxxxxxx xxxxxxxx týkajících xx kvality a xxxxxxx krmiv xxxx xxxxxxxxx za použití xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx xxxxxxxx Komise 71/250/XXX [2], 73/46/XXX [3], 74/203/EHS [4], 75/84/XXX [5], 76/372/XXX [6] xxxxxxxxx pozměněné xxxxxxxx 81/680/XXX [7], xxxxxxxx 71/393/XXX [8], 72/199/XXX [9], 78/633/EHS [10] xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx 84/4/EHS [11] x xxxxxxxx 81/715/XXX [12] xxx stanovily xxxxxx počet analytických xxxxx Xxxxxxxxxxxx; xx xxxxxx v xxxxx xx xx xxxx xxxx účelným xxxxxxxx xxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx xxxxxxxx xxxx směrnice xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx výboru xxx xxxxxx,
XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Členské xxxxx xxxxxxx, že analýzy xxx úřední xxxxxxxx xxxxx, xxxxx jde x jejich xxxxx xxxxxxxxxxx, se xxxxxxxxx xxxxxxx popsanou v xxxxxxx.
Xxxxxx 2
Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 30. xxxxxx 1985 x neprodleně x xxxx uvědomí Xxxxxx.
Xxxxxx 3
Xxxx xxxxxxxx xx určena xxxxxxxx xxxxxx.
V Xxxxxxx xxx 25. xxxxxxxx 1984.
Za Xxxxxx
Xxxx Dalsager
člen Xxxxxx
[1] Xx. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Xx. xxxx. X 155, 12.7.1971, x. 13.
[3] Úř. xxxx. X 83, 30.3.1973, x. 21.
[4] Xx. xxxx. X 108, 22.4.1974, x. 7.
[5] Xx. xxxx. X 32, 5.2.1975, x. 26.
[6] Xx. věst. X 102, 15.4.1976, x. 8.
[7] Úř. xxxx. X 246, 29.8.1981, x. 32.
[8] Xx. xxxx. X 279, 20.12.1971, x. 7.
[9] Xx. xxxx. X 123, 29.5.1972, x. 6.
[10] Xx. xxxx. X 206, 29.7.1978, x. 43.
[11] Xx. xxxx. X 15, 18.1.1984, x. 28.
[12] Úř. xxxx. X 257, 10.9.1981, x. 38.
XXXXXXX
XXXXXXXXX SPIRAMYCINU XXXXXX XX XXXXXXXX MÉDIU
1. Xxxx a xxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxx stanovitelnosti xx 1 xx/xx (1 xxx) [1]
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxxxx-xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x pH 8. Xxxxxxx je xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx a xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx stanovena xxxxxxx difúze xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Micrococcus xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nad xxxxxx použitých xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxxxxxxxxx: Micrococcus xxxxxx ATC 9341 (XXXX 8340, NCIB 8553)
3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx kultivační xxxxxx (4.1) x šikmé xxxxxxxx mikroorganizmem Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx 24 hodin xxx 30 °X. Xxxxxxx xxxxxxxxx x chladničce xxx xxxxxxx okolo 4 °X. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx dva xxxxx.
3.2 Xxxxxxxx bakteriální xxxxxxxx [2]
Ze xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx 2 xx 3 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3). Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxxxx 250 ml xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1) obsaženého x Xxxxxxx xxxxx x inkubujte 18 xx 20 xxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxx do 25 xx roztoku xxxxxxxx sodného (4.3) x xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx na 1/10 xxxxxxxx xxxxxxxx sodného (4.3). Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxx 75 %, xxxxxx při 650 xx x 1 xx xxxxxx proti xxxxxxx xxxxxxxx sodného (4.3.). Xxxx suspenze xxxx xxx skladována xxxxx týden xxx xxx 4 °C.
4. Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx
4.1 Kultivační xxxxxx [3]
|
Xxxxxx pepton |
6,0 x |
|
Xxxxxxx |
4,0 x |
|
Xxxxxxx x kvasnic |
3,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10,0 až 20,0 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
XX 6,5 xx 6,6 (xx xxxxxxxxxxx). |
|
|
4.2 Xxxxxxxx xxxxxx [4] |
|
|
Trypton |
5,0 x |
|
Xxxxxxx x kvasnic |
4,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxx |
3,0 x |
|
Xxxx |
10,0 xx 20,0 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
XX 8,0 (xx xxxxxxxxxxx). |
|
4.3 Roztok chloridu xxxxxxx 0,8 % (xxxxxx objemový)
Rozpusťte 8 x xxxxxxxx sodného xx vodě a xxxxxx xx 1000 xx; sterilizujte.
4.4 Fosfát-bikarbonátový xxxx, xX 8,0
|
Dihydrogen xxxxxxxxxxx xxxx draselný X2XXX4 |
16,7 g |
|
Hydrogen xxxxxxxxxxx xxxxxxxx KH2PO4 |
0,5 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxxx sodný XxXXX3 |
20,0 x |
|
Xxxx do |
1000 xx |
4.5 Xxxx xxxxxxx fosfát-bikarbonátový xxxx (4.4)
50/50 (objemově).
4.6 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx (x XX).
5. Xxxxxxxxxx roztoky
Rozpusťte xxxxxx odvážené množství xxxxxxxxxx xxxxx (4.6.) xx směsi (4.5.) x xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx roztok xxxxxxxxxx 1000 XX xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Skladován x xxxxxxxxxxx láhvi xxx 4 °X xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx až xxx xxx.
X xxxxxx zásobního xxxxxxx připravte xxxxxxxxx xxxxxxx směsí (4.5.) xxxxxxxxxxx roztoky:
|
S8 |
1 |
IU/ml |
|
S4 |
0,5 |
IU/ml |
|
S2 |
0,25 |
IU/ml |
|
S1 |
0,125 |
IU/ml |
6. Xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx
6.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 20,0 x vzorku v xxxxxxx xxxxx, 1,0 xx 20,0 x x premixů. Přidejte 100 xx xxxxx (4.5) a xxxxxxxx 30 xxxxx. Xxxxxxxxx xxxx dekantujte a xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.5), xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx obsah xxxxxxxxxxx 1 XX/xx (= X8).
Xxx očekávané xxxxxx xxxxxxxxxxx menší xxx 2,5 xx/xx xxxxxx, musí xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx 20,0 x xxxxxx. Xxxxxxxx 100 xx xxxxx (4.5) x xxxxxxxx 30 xxxxx. Odstřeďujte několik xxxxx, odeberte 50 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxx 4 xx xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx teplotě xxxxxxxxxxxxx 40 °C. Zřeďte xxxxxx směsí (4.5), xxxxxx obdrželi očekávaný xxxxx xxxxxxxxxxx 1 XX/xx (= U8).
6.2 Xxxxxxxx xxxxxxx
X roztoku X8 připravte xxxxxxX4 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,5 XX/xx), X2 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,25 XX/xx) x X1 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,125 IU/ml) xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (1 + 1) xxxxx (4.5).
7. Zkušební xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx zkušební xxxxxx (4.2) xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.2) xxx xxx 50 °C. Předběžnými xxxxxx xx miskách xx xxxxxxxxx médiem (4.2) xxxxxxxx požadované xxxxxxxx bakteriální xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx největší x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xx čtyřmi koncentracemi xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X8, X4, X2, S1) x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (X8, X4, U2, X1). Xxxx xxxxx koncentrace xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx být xxxxx xxxxxxxx na každé xxxxx. Xxx tento xxxxxx vyberte misky xxxxxxxxxx velké, xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx otvorů s xxxxxxxx 10 xx 13 xx a xxxxxxx 30 xx xxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx být proveden xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx x xxxxxx xxxx s xxxxxxxx x hliníku nebo xxxxxx umístěným xx xxxxx, 200 xx x xxxxxxx a 20 mm xxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxx množství xxxxx (4.2.), xxxxxxxxxxxxx xxxx x 7.1., xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx 2 xx xxxxxx (60 ml xx xxxxx o xxxxxxx 200 xx). Xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxx přesně xxxxxxxx objemy xxxxxxxxxx x standardních roztoků (xxxx 0,10 x 0,15 ml na xxxxx, podle xxxxxxx). Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 32 xxxxxxxxxxx xxx.
7.3 Inkubace
Inkubujte xxxxx 16 až 18 xxxxx při 30 ± 2 °X.
8. Xxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxxxx xx 0,1 xx. Zaznamenejte xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx semilogaritmický xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x průměrům inhibičních xxx. Xxxxxxx nejvhodnější xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x extraktu, xxxxxxxxx xxx xx níže xxxxxxx.
Xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxx xxx standardní nejnižší xxxxxx (XX) s xxxxxxxx xxxxxxx:
x) XX = 7s1 + 4x2+ s4 – 2x8 / 10
Xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx úroveň (XX) s xxxxxxxx xxxxxxx:
x) SH = 7x8 + 4x4+ x2 – 2s1 / 10
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" body pro xxxxxxxx úroveň extraktu (XX) a xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (XX) xxxxxxxxxx x1, x2, x4 a x8 xx x1, x2, x4, a x8 x xxxxx uvedených xxxxxxxxx [5]
Xxxxxxxxxxxx vypočtené xxxxxxx XX x XX xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx je xxx, xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx XX a XX x xxxxxx xx xxx, abyste xxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" křivku xxx xxxxxxx.
X xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxx být paralelní. Xxx xxxxxxxxx účely xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx (XX — XX) x (XX — XX) xxxxxxxxxx xxxx xxx x 10 % xx jejich střední xxxxxxx.
Xxxxx xxxx křivky xxxxxxxxxxx, buď x1 x x1 xxxx x8 x x8, xxxxx xxx xxxxxxxx x XX, XX, XX x UH xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx rovnic, xxx xxxxxxxx alternativní "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx:
x) SL = 5x1 + 2x2 – x4 / 6 xxxx 5x2 + 2x4 – x8 / 6
x′) XX = 5s4 + 2x2 – x1 / 6 xxxx 5x8 + 2x4 – x2 / 6
x xxxxxxx xxx XX a XX. Měla by xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx paralelnosti. Xxxxxxxxxx, xx byl xxxxxxxx xxxxxxxxx xx tří xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx A) x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxxxx xx xxx, xxxxx byly xxxxxxx xxx xxxx xxxxx xxxxxx xxx ohodnocení xxxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxx
x) Xxx A = (x1+ x2+ x4+ x8 – s1 – x2 – x4 – x8) × 0,602 / x4+ x8+ x4+ x8 – x1 – x2 – x1 – x2
Xxx xxx úrovně
d) Xxx X = (u1+ x2+ x4 – x1 – x2 – s4) × 0,401 / x4+ x4 – x1 – x1
xxxx
x´) Xxx X = (u2+ x4+ x8 – x2 – x4 – s8) × 0,401 / x8+ x8 – u2 – x2
Xxxxxxxx extraktu xxxxxx = xxxxxxxx xxxxxxxxxxx standardu × X
(X8 = X8 × X)
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx nalezena xxxx rozsah 0,5 xx 2,0, xxxxx xxxxxxxx zkoušku, při xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx extraktu xxxx, pokud xxxx xxxx možné, xxxxxxx xxxxxxxxx. Pokud xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx do požadovaného xxxxxxx, xxxx být xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx přibližný x toto xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx protokolu x xxxxxxx.
Xxxxx jsou křivky xxxxxxxxxx za neparalelní, xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx báze xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx.
9. Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx x stejného xxxxxx xxxxxxx analytikem xxxxx xxxxxxxxx:
- 2 xx/xx v absolutní xxxxxxx xxx obsahy xxxx spiramycinu xx 10 mg/kg,
- 20 % xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx 10 xx 25 xx/xx,
- 5 xx/xx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx 25 až 50 xx/xx,
- 10 % xxxxxxxx k xxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxx 50 xx/xx.
[1] 1 xx báze xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3200 xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (XX).
[2] Xxxxx metody xxxxx xxx použity xx xxxxxxxxxxx, že xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx podobné xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
[3] Xxxx být xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
[4] Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx médium xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
[5] Xxxx xxxxxxx "s" x "u" xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx.