Xxxxxx Směrnice Xxxxxx
xx xxx 25. xxxxxxxx 1984,
xxxxxx xx stanoví xxxxxxxxxx xxxxxx Společenství xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx
(84/425/XXX)
XXXXXX EVROPSKÝCH SPOLEČENSTVÍ,
s xxxxxxx na Smlouvu x založení Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx xxxxxxxx Rady 70/373/XXX xx dne 20. xxxxxxxx 1970, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx vzorků x xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx kontrolu xxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx Xxxxx o xxxxxxxxxxx Xxxxx, x xxxxxxx na článek 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxx směrnice požaduje, xxx xxxxxx kontrola xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx dodržování xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx za použití xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx vzorků a xxxxxxx;
xxxxxxxx k tomu, xx směrnice Xxxxxx 71/250/XXX [2], 73/46/EHS [3], 74/203/XXX [4], 75/84/XXX [5], 76/372/EHS [6] naposledy xxxxxxxxx xxxxxxxx 81/680/EHS [7], xxxxxxxx 71/393/EHS [8], 72/199/XXX [9], 78/633/XXX [10] xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx 84/4/XXX [11] x směrnice 81/715/EHS [12] již xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx analytických xxxxx Xxxxxxxxxxxx; xx xxxxxx x xxxxx xx xx xxxx xxxx xxxxxxx přijmout xxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx opatření xxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx,
XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Členské xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx x xxxxxx obsah xxxxxxxxxxx, se provádějí xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxx 2
Členské státy xxxxxx x účinnost xxxxxx a správní xxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx směrnicí xxxxxxxxxx xx 30. června 1985 x neprodleně x xxxx uvědomí Xxxxxx.
Xxxxxx 3
Xxxx směrnice xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X Xxxxxxx xxx 25. xxxxxxxx 1984.
Xx Xxxxxx
Xxxx Dalsager
člen Xxxxxx
[1] Xx. věst. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Úř. věst. X 155, 12.7.1971, x. 13.
[3] Xx. xxxx. X 83, 30.3.1973, x. 21.
[4] Xx. xxxx. X 108, 22.4.1974, x. 7.
[5] Úř. xxxx. X 32, 5.2.1975, x. 26.
[6] Úř. věst. X 102, 15.4.1976, x. 8.
[7] Úř. věst. X 246, 29.8.1981, x. 32.
[8] Xx. věst. X 279, 20.12.1971, x. 7.
[9] Xx. xxxx. X 123, 29.5.1972, x. 6.
[10] Xx. xxxx. X 206, 29.7.1978, x. 43.
[11] Xx. xxxx. X 15, 18.1.1984, x. 28.
[12] Xx. xxxx. X 257, 10.9.1981, x. 38.
XXXXXXX
XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX DIFÚZÍ XX XXXXXXXX MÉDIU
1. Xxxx a xxxxxx
Xxxxxx xx určena xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxx stanovitelnosti xx 1 xx/xx (1 ppm) [1]
2. Xxxxxxx
Xxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxxxx-xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xX 8. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx spiramyscinu x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxx. Difúze xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx zón je xxxxx xxxxxx logaritmu xxxxxxxxxxxx koncentrace xxx xxxxxx použitých antibiotických xxxxxxxxxxx.
3. Mikroorganizmus: Micrococcus xxxxxx XXX 9341 (XXXX 8340, XXXX 8553)
3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx kultivační xxxxxx (4.1) x xxxxx xxxxxxxx mikroorganizmem Xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx 24 hodin xxx 30 °C. Xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx 4 °X. Znovu xxxxxxxxx každé dva xxxxx.
3.2 Příprava bakteriální xxxxxxxx [2]
Xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx bakterie 2 xx 3 ml xxxxxxx xxxxxxxx sodného (4.3). Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxxxx 250 ml kultivačního xxxxx (4.1) obsaženého x Xxxxxxx xxxxx x inkubujte 18 xx 20 hodin xxx 30 °C. Xxxxxxxx xxxxxx xx 25 ml xxxxxxx xxxxxxxx sodného (4.3) x promíchejte. Xxxxxx xxxxxxxx xx 1/10 xxxxxxxx xxxxxxxx sodného (4.3). Světelná xxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxx 75 %, xxxxxx xxx 650 xx x 1 xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx chloridu sodného (4.3.). Tato xxxxxxxx xxxx být skladována xxxxx týden xxx xxx 4 °C.
4. Xxxxxxxxxx média a xxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxxx médium [3]
|
Xxxxxx xxxxxx |
6,0 g |
|
Trypton |
4,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxxxxx |
3,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxx |
1,0 g |
|
Agar |
10,0 xx 20,0 g |
|
Voda |
1000 xx |
|
XX 6,5 až 6,6 (xx xxxxxxxxxxx). |
|
|
4.2 Zkušební xxxxxx [4] |
|
|
Xxxxxxx |
5,0 x |
|
Xxxxxxx x kvasnic |
4,0 g |
|
Extrakt x xxxx |
3,0 x |
|
Xxxx |
10,0 xx 20,0 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
XX 8,0 (xx xxxxxxxxxxx). |
|
4.3 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 0,8 % (xxxxxx xxxxxxxx)
Xxxxxxxxx 8 x chloridu xxxxxxx xx xxxx x xxxxxx xx 1000 xx; xxxxxxxxxxxx.
4.4 Xxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx, pH 8,0
|
Dihydrogen xxxxxxxxxxx xxxx draselný X2XXX4 |
16,7 x |
|
Xxxxxxxx fosforečnan xxxxxxxx XX2XX4 |
0,5 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx NaHCO3 |
20,0 x |
|
Xxxx xx |
1000 xx |
4.5 Xxxx xxxxxxx fosfát-bikarbonátový xxxx (4.4)
50/50 (xxxxxxxx).
4.6 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxxx o xxxxx xxxxxxxx (x XX).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx látky (4.6.) xx směsi (4.5.) x zřeďte xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 1000 XX xxxxxxxxxxx xx mililitr. Skladován x zazátkované xxxxx xxx 4 °X xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx až xxx xxx.
X xxxxxx zásobního xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (4.5.) xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
|
X8 |
1 |
XX/xx |
|
X4 |
0,5 |
XX/xx |
|
X2 |
0,25 |
XX/xx |
|
X1 |
0,125 |
XX/xx |
6. Xxxxxxxx xxxxxxxx x zkušebních xxxxxxx
6.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 20,0 x vzorku x xxxxxxx xxxxx, 1,0 xx 20,0 x x xxxxxxx. Přidejte 100 xx xxxxx (4.5) a xxxxxxxx 30 xxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.5), abyste xxxxxxxx xxxxxxxxx obsah xxxxxxxxxxx 1 XX/xx (= X8).
Xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx menší xxx 2,5 xx/xx xxxxxx, musí xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx 20,0 x xxxxxx. Xxxxxxxx 100 xx xxxxx (4.5) x xxxxxxxx 30 xxxxx. Odstřeďujte xxxxxxx xxxxx, odeberte 50 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx na xxx 4 xx xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 40 °X. Xxxxxx xxxxxx xxxxx (4.5), xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx 1 XX/xx (= X8).
6.2 Xxxxxxxx xxxxxxx
X xxxxxxx X8 xxxxxxxxx xxxxxxX4 (xxxxxxxxx obsah: 0,5 XX/xx), U2 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,25 XX/xx) x U1 (očekávaný xxxxx: 0,125 XX/xx) xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (1 + 1) xxxxx (4.5).
7. Zkušební xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx zkušební xxxxxx (4.2) xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.2) xxx xxx 50 °C. Xxxxxxxxxxx xxxxxx na miskách xx zkušebním xxxxxx (4.2) xxxxxxxx požadované xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx poskytne xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx inhibiční xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (X8, X4, S2, X1) x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (X8, X4, U2, X1). Xxxx čtyři xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xx každé xxxxx. Pro tento xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxxx udělat v xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx s xxxxxxxx 10 až 13 mm a xxxxxxx 30 xx xxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx skládajících xx x xxxxxx xxxx x xxxxxxxx x hliníku xxxx xxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx, 200 mm x xxxxxxx x 20 mm xxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx (4.2.), inokulovaného xxxx x 7.1., xxx vytvořilo xxxxxx xxx 2 xx xxxxxx (60 xx xx xxxxx o xxxxxxx 200 ml). Xxxxxxxx ustát, xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx zkušebních x standardních xxxxxxx (xxxx 0,10 a 0,15 ml xx xxxxx, xxxxx xxxxxxx). Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 32 xxxxxxxxxxx xxx.
7.3 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx 16 až 18 xxxxx xxx 30 ± 2 °X.
8. Vyhodnocení
Změřte xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx s xxxxxxxxx xx 0,1 xx. Zaznamenejte střední xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx semilogaritmický xxxxxxxx xxxxx, při xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx vztahu x průměrům xxxxxxxxxxx xxx. Xxxxxxx nejvhodnější xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xx xxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxxx:
x) XX = 7x1 + 4x2+ x4 – 2x8 / 10
Xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx úroveň (XX) x xxxxxxxx xxxxxxx:
x) XX = 7x8 + 4s4+ x2 – 2s1 / 10
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" body xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxx extraktu (UH) xxxxxxxxxx u1, u2, x4 x x8 xx x1, s2, x4, x x8 x dříve xxxxxxxxx xxxxxxxxx [5]
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XX x XX xx xxxxxx xxxxxxxx papír x xxxxxx xx tak, xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxx" xxxxxx xxx standardní xxxxxx. Podobně zaznamenejte XX x UH x xxxxxx je xxx, abyste xxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx xxx xxxxxxx.
X nepřítomnosti jakéhokoli xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx paralelní, xxxxx xxxxxxx (XX — XX) x (XX — XX) xxxxxxxxxx xxxx xxx x 10 % xx jejich střední xxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx x1 x x1 xxxx x8 x s8, xxxxx xxx xxxxxxxx x XX, SH, XX x UH xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx rovnic, aby xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx:
x) SL = 5x1 + 2s2 – s4 / 6 xxxx 5x2 + 2x4 – x8 / 6
b′) XX = 5s4 + 2x2 – x1 / 6 xxxx 5s8 + 2x4 – x2 / 6
a xxxxxxx xxx UL x XX. Xxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx, xx xxx výsledek xxxxxxxxx ze xxx xxxxxx, musí xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx relativní xxxxxxxx (xxx X) x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx rovnic, x xxxxxxxxxx xx xxx, xxxxx xxxx použity xxx xxxx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxx
x) Xxx X = (x1+ u2+ x4+ x8 – s1 – x2 – x4 – s8) × 0,602 / x4+ x8+ x4+ x8 – u1 – x2 – x1 – x2
Xxx xxx xxxxxx
x) Xxx X = (x1+ x2+ x4 – x1 – x2 – s4) × 0,401 / u4+ x4 – u1 – x1
xxxx
x´) Xxx X = (x2+ x4+ u8 – x2 – x4 – x8) × 0,401 / x8+ x8 – x2 – s2
Aktivita xxxxxxxx xxxxxx = xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx × X
(X8 = X8 × X)
Xxxxx byla xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx rozsah 0,5 xx 2,0, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx vhodné xxxxxx xxxxxxxxxxx extraktu xxxx, xxxxx xxxx xxxx možné, roztoků xxxxxxxxx. Pokud nemůže xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x toto musí xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx za neparalelní, xxxxxxxx xxxxxxxxx. Pokud xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxx považováno xx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx výsledek v xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx.
9. Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx paralelních xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
- 2 xx/xx x xxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxx spiramycinu do 10 xx/xx,
- 20 % xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx 10 xx 25 xx/xx,
- 5 xx/xx v absolutní xxxxxxx xxx xxxxxx 25 xx 50 xx/xx,
- 10 % xxxxxxxx x nejvyšší xxxxxxx pro xxxxxx xxx 50 xx/xx.
[1] 1 mg báze xxxxxxxxxxx je xxxxxxxxxxxx 3200 xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (XX).
[2] Xxxxx metody xxxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
[3] Může xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x dávající xxxxxx xxxxxxxx.
[4] Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx médium xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
[5] Xxxx písmena "s" x "x" odpovídají xxxxxxxx inhibičních zón.