Xxxxxx Xxxxxxxx Xxxxxx
xx xxx 25. xxxxxxxx 1984,
xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx metody Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx kontrolu xxxxx
(84/425/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX SPOLEČENSTVÍ,
s xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x ohledem xx xxxxxxxx Xxxx 70/373/XXX xx xxx 20. xxxxxxxx 1970, xxxxxx xx zavádějí xxxxxx xxxxxx vzorků x analýzy Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx Xxxxx o xxxxxxxxxxx Řecka, x xxxxxxx xx xxxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx dodržování xxxxxxxxx xxxxxxxxxx právních a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx kvality x xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xx použití xxxxx Společenství pro xxxxx xxxxxx x xxxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxx Xxxxxx 71/250/XXX [2], 73/46/XXX [3], 74/203/XXX [4], 75/84/XXX [5], 76/372/XXX [6] xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx 81/680/XXX [7], xxxxxxxx 71/393/XXX [8], 72/199/XXX [9], 78/633/XXX [10] xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx 84/4/XXX [11] x xxxxxxxx 81/715/XXX [12] xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx analytických xxxxx Xxxxxxxxxxxx; xx xxxxxx v xxxxx xx xx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxx směrnice xxxx x xxxxxxx se xxxxxxxxxxx Stálého xxxxxx xxx xxxxxx,
XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Členské xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxx úřední kontrolu xxxxx, xxxxx xxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx.
Článek 2
Členské xxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx nezbytné xxx xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxx xxxxxxxx nejpozději xx 30. června 1985 a xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx Xxxxxx.
Xxxxxx 3
Xxxx xxxxxxxx xx určena xxxxxxxx xxxxxx.
V Xxxxxxx xxx 25. xxxxxxxx 1984.
Xx Xxxxxx
Xxxx Xxxxxxxx
xxxx Xxxxxx
[1] Xx. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Xx. xxxx. X 155, 12.7.1971, x. 13.
[3] Úř. xxxx. X 83, 30.3.1973, x. 21.
[4] Xx. věst. X 108, 22.4.1974, x. 7.
[5] Xx. xxxx. X 32, 5.2.1975, x. 26.
[6] Xx. xxxx. X 102, 15.4.1976, x. 8.
[7] Úř. xxxx. X 246, 29.8.1981, x. 32.
[8] Xx. xxxx. X 279, 20.12.1971, x. 7.
[9] Xx. xxxx. X 123, 29.5.1972, x. 6.
[10] Xx. xxxx. X 206, 29.7.1978, x. 43.
[11] Úř. xxxx. X 15, 18.1.1984, x. 28.
[12] Úř. xxxx. X 257, 10.9.1981, x. 38.
PŘÍLOHA
STANOVENÍ XXXXXXXXXXX XXXXXX XX AGAROVÉM XXXXX
1. Xxxx x xxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxx pro xxxxxxxxx spiramycinu x xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx/xx (1 xxx) [1]
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx metanol/fosfát-bikarbonátovým pufrem x pH 8. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx odstředěn x xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx stanovena xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx mikroorganizmem Xxxxxxxxxxx xxxxxx. Difúze xx xxxxxxxxx tvorbou xxxxxxxxxxx xxx mikroorganizmu. Xxxxxx xxxxxx xxx xx xxxxx úměrný xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nad xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3. Mikroorganizmus: Micrococcus xxxxxx XXX 9341 (XXXX 8340, XXXX 8553)
3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1) x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx 24 xxxxx při 30 °X. Xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx okolo 4 °C. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx.
3.2 Příprava bakteriální xxxxxxxx [2]
Ze xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx bakterie 2 xx 3 xx xxxxxxx xxxxxxxx sodného (4.3). Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx k xxxxxxxxxx 250 ml xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxx x Xxxxxxx baňce x inkubujte 18 xx 20 hodin xxx 30 °X. Xxxxxxxx xxxxxx do 25 xx roztoku xxxxxxxx xxxxxxx (4.3) x promíchejte. Xxxxxx xxxxxxxx na 1/10 xxxxxxxx chloridu xxxxxxx (4.3). Xxxxxxxx transmise xxxxxxxx musí být xxxxx 75 %, xxxxxx xxx 650 xx x 1 xx kyvetě proti xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3.). Xxxx xxxxxxxx xxxx xxx skladována xxxxx týden při xxx 4 °X.
4. Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx [3]
|
Xxxxxx xxxxxx |
6,0 x |
|
Xxxxxxx |
4,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxxxxx |
3,0 x |
|
Xxxxxxx x masa |
1,5 x |
|
Xxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10,0 xx 20,0 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
XX 6,5 xx 6,6 (xx xxxxxxxxxxx). |
|
|
4.2 Xxxxxxxx xxxxxx [4] |
|
|
Xxxxxxx |
5,0 g |
|
Extrakt x kvasnic |
4,0 g |
|
Extrakt x xxxx |
3,0 x |
|
Xxxx |
10,0 xx 20,0 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
XX 8,0 (po xxxxxxxxxxx). |
|
4.3 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 0,8 % (xxxxxx xxxxxxxx)
Xxxxxxxxx 8 x xxxxxxxx xxxxxxx xx vodě x xxxxxx do 1000 xx; xxxxxxxxxxxx.
4.4 Xxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx, xX 8,0
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx draselný X2XXX4 |
16,7 g |
|
Hydrogen xxxxxxxxxxx xxxxxxxx XX2XX4 |
0,5 g |
|
Hydrogen xxxxxxxxx xxxxx NaHCO3 |
20,0 x |
|
Xxxx do |
1000 xx |
4.5 Xxxx xxxxxxx xxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx (4.4)
50/50 (xxxxxxxx).
4.6 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx (x XX).
5. Standardní roztoky
Rozpusťte xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.6.) xx xxxxx (4.5.) x xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx roztok obsahující 1000 XX spiramycinu xx mililitr. Skladován x xxxxxxxxxxx xxxxx xxx 4 °X xx tento xxxxxx xxxxxxxx xx xxx xxx.
X xxxxxx zásobního xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (4.5.) xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
|
X8 |
1 |
XX/xx |
|
X4 |
0,5 |
XX/xx |
|
X2 |
0,25 |
XX/xx |
|
X1 |
0,125 |
XX/xx |
6. Příprava xxxxxxxx x zkušebních xxxxxxx
6.1 Extrakce
Odvažte 20,0 x xxxxxx v xxxxxxx xxxxx, 1,0 xx 20,0 x x premixů. Xxxxxxxx 100 xx xxxxx (4.5) x xxxxxxxx 30 xxxxx. Odstřeďte xxxx xxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.5), xxxxxx xxxxxxxx očekávaný obsah xxxxxxxxxxx 1 XX/xx (= U8).
Pro xxxxxxxxx xxxxxx spiramycinu xxxxx xxx 2,5 xx/xx xxxxxx, xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx 20,0 g xxxxxx. Xxxxxxxx 100 xx xxxxx (4.5) x xxxxxxxx 30 xxxxx. Xxxxxxxxxxx několik xxxxx, xxxxxxxx 50 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxx 4 xx xx xxxxxxxxx tlaku xx xxxxxxx xxxxxxx xxx teplotě xxxxxxxxxxxxx 40 °X. Zřeďte xxxxxx xxxxx (4.5), xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx 1 XX/xx (= X8).
6.2 Xxxxxxxx roztoky
Z xxxxxxx X8 xxxxxxxxx xxxxxxX4 (xxxxxxxxx obsah: 0,5 XX/xx), U2 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,25 XX/xx) x U1 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,125 XX/xx) xxxxxx postupného ředění (1 + 1) xxxxx (4.5).
7. Zkušební xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxx zkušebního xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx médium (4.2) xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.2) xxx xxx 50 °X. Předběžnými xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx (4.2) xxxxxxxx požadované xxxxxxxx bakteriální xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx agarem xx xxxxxxx xx miskách xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X8, X4, X2, S1) x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (U8, X4, U2, X1). Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a standardu xxxx být xxxxx xxxxxxxx xx každé xxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxxx udělat x xxxxxxxx médiu xxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxxx 10 xx 13 mm x xxxxxxx 30 xx xxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx z tabule xxxx x kroužkem x hliníku xxxx xxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx, 200 xx x xxxxxxx x 20 xx vysokým.
Rozlijte xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx (4.2.), inokulovaného xxxx v 7.1., xxx vytvořilo xxxxxx xxx 2 xx xxxxxx (60 xx xx xxxxx o xxxxxxx 200 xx). Xxxxxxxx ustát, xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 ml na xxxxx, podle průměru). Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xx každé xxxxxxxxx xxxxxxxx vyhodnocení 32 xxxxxxxxxxx zón.
7.3 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx 16 xx 18 xxxxx při 30 ± 2 °X.
8. Vyhodnocení
Změřte xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx s xxxxxxxxx xx 0,1 xx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx semilogaritmický xxxxxxxx papír, při xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx vztahu x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x extraktu, xxxxxxxxx xxx je níže xxxxxxx.
Xxxxxxxx "nejvhodnější" xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (SL) x xxxxxxxx xxxxxxx:
x) XX = 7s1 + 4x2+ x4 – 2x8 / 10
Stanovte "xxxxxxxxxxxx" xxx pro xxxxxxxxxx nejvyšší úroveň (XX) s xxxxxxxx xxxxxxx:
x) XX = 7x8 + 4x4+ x2 – 2x1 / 10
Podobně xxxxxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxxx pro xxxxxxxx úroveň xxxxxxxx (XX) a xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (XX) xxxxxxxxxx x1, u2, x4 x x8 xx x1, x2, x4, a x8 x dříve uvedených xxxxxxxxx [5]
Zaznamenejte vypočtené xxxxxxx SL x XX na xxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx je xxx, xxxxxx dostali "xxxxxxxxxxx" xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx XX a UH x xxxxxx je xxx, xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx xxx xxxxxxx.
X xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx účely xxxxx xxx křivky xxxxxxxxxx za xxxxxxxxx, xxxxx hodnoty (SH — SL) x (XX — UL) xxxxxxxxxx xxxx xxx x 10 % xx jejich xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxx křivky xxxxxxxxxxx, buď u1 x x1 xxxx x8 x x8, xxxxx xxx xxxxxxxx x XX, SH, XX x XX xxxxxxxxx x použitím xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx:
x) XX = 5x1 + 2x2 – x4 / 6 xxxx 5x2 + 2x4 – x8 / 6
b′) XX = 5x4 + 2x2 – x1 / 6 xxxx 5s8 + 2x4 – x2 / 6
a podobně xxx XX x XX. Měla xx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx paralelnosti. Skutečnost, xx xxx výsledek xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxx xxxx křivky xxxxxxxxxx xx paralelní, vypočtěte xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx X) s xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, v xxxxxxxxxx xx xxx, xxxxx byly xxxxxxx xxx xxxx xxxxx xxxxxx xxx ohodnocení xxxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxx úrovně
c) Xxx X = (x1+ x2+ x4+ x8 – s1 – s2 – x4 – x8) × 0,602 / x4+ u8+ x4+ x8 – x1 – u2 – x1 – s2
Pro xxx xxxxxx
x) Xxx X = (x1+ x2+ x4 – x1 – s2 – x4) × 0,401 / x4+ x4 – x1 – s1
nebo
d´) Xxx X = (x2+ x4+ u8 – x2 – x4 – x8) × 0,401 / x8+ x8 – x2 – s2
Aktivita xxxxxxxx xxxxxx = xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx × X
(X8 = X8 × X)
Xxxxx xxxx xxxxxxxxx aktivita xxxxxxxx xxxx xxxxxx 0,5 xx 2,0, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx koncentrací xxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxx xxxxx, roztoků xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx aktivita xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx být xxxxx získaný xxxxxxxx xxxxxxxxx xx přibližný x xxxx xxxx xxx uvedeno x xxxxxxxxxx protokolu x xxxxxxx.
Xxxxx jsou křivky xxxxxxxxxx xx neparalelní, xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx stále docíleno xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxx považováno xx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx výsledek x xxxxxxxxxxx báze xxxxxxxxxxx xx kilogram xxxxxx.
9. Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx paralelních xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x stejného xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
- 2 xx/xx v xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxx spiramycinu xx 10 xx/xx,
- 20 % vzhledem k xxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx 10 xx 25 xx/xx,
- 5 xx/xx x absolutní xxxxxxx xxx xxxxxx 25 až 50 xx/xx,
- 10 % xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx pro obsahy xxx 50 mg/kg.
[1] 1 mg xxxx xxxxxxxxxxx je ekvivalentem 3200 mezinárodních xxxxxxxx (XX).
[2] Další metody xxxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
[3] Může xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx médium xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx výsledky.
[4] Xxxx xxx použito jakékoli xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx výsledky.
[5] Xxxx xxxxxxx "x" x "x" xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx.