Desátá Směrnice Xxxxxx
xx xxx 25. xxxxxxxx 1984,
xxxxxx xx stanoví xxxxxxxxxx xxxxxx Společenství xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx
(84/425/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx směrnici Rady 70/373/XXX xx xxx 20. xxxxxxxx 1970, xxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx úřední xxxxxxxx xxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx Xxxxx o xxxxxxxxxxx Xxxxx, a xxxxxxx xx xxxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxx kontrola xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx dodržování požadavků xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx byla xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxx Xxxxxx 71/250/XXX [2], 73/46/XXX [3], 74/203/XXX [4], 75/84/XXX [5], 76/372/EHS [6] xxxxxxxxx pozměněné xxxxxxxx 81/680/XXX [7], xxxxxxxx 71/393/XXX [8], 72/199/XXX [9], 78/633/XXX [10] naposledy xxxxxxxxx xxxxxxxx 84/4/XXX [11] x směrnice 81/715/XXX [12] xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx; že xxxxxx x xxxxx xx xx doby xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx opatření xxxx xxxxxxxx jsou x xxxxxxx se xxxxxxxxxxx Xxxxxxx výboru xxx krmiva,
PŘIJALA TUTO XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, že analýzy xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx.
Xxxxxx 2
Členské xxxxx xxxxxx x účinnost xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 30. června 1985 x xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx Xxxxxx.
Xxxxxx 3
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx členským xxxxxx.
X Bruselu xxx 25. xxxxxxxx 1984.
Xx Xxxxxx
Xxxx Xxxxxxxx
xxxx Xxxxxx
[1] Úř. věst. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Xx. xxxx. X 155, 12.7.1971, x. 13.
[3] Úř. xxxx. X 83, 30.3.1973, x. 21.
[4] Xx. věst. X 108, 22.4.1974, x. 7.
[5] Xx. xxxx. X 32, 5.2.1975, x. 26.
[6] Úř. xxxx. X 102, 15.4.1976, x. 8.
[7] Xx. xxxx. X 246, 29.8.1981, x. 32.
[8] Xx. xxxx. X 279, 20.12.1971, x. 7.
[9] Xx. věst. X 123, 29.5.1972, x. 6.
[10] Úř. xxxx. X 206, 29.7.1978, x. 43.
[11] Úř. xxxx. X 15, 18.1.1984, x. 28.
[12] Xx. xxxx. X 257, 10.9.1981, x. 38.
XXXXXXX
XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXX XX AGAROVÉM MÉDIU
1. Xxxx x rozsah
Metoda xx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx/xx (1 ppm) [1]
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx metanol/fosfát-bikarbonátovým pufrem x xX 8. Xxxxxxx xx dekantován xxxx xxxxxxxxx x xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx difúze xxxxxxxxxxxx x agarovém médiu xxxxxxxxxxxx mikroorganizmem Xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxx je xxxxx xxxxxx logaritmu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nad xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxxxxxxxxx: Xxxxxxxxxxx xxxxxx XXX 9341 (XXXX 8340, XXXX 8553)
3.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1) v xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxx x inkubujte 24 hodin při 30 °X. Xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx 4 °X. Znovu xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx.
3.2 Příprava bakteriální xxxxxxxx [2]
Xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx agaru xxxxxx xxxxxxxx 2 xx 3 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3). Tuto xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx 250 xx kultivačního xxxxx (4.1) xxxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx 18 xx 20 hodin xxx 30 °X. Xxxxxxxx smyjte do 25 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3) x promíchejte. Xxxxxx xxxxxxxx xx 1/10 xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3). Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx 75 %, xxxxxx xxx 650 xx x 1 xx kyvetě proti xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3.). Tato suspenze xxxx být xxxxxxxxxx xxxxx týden při xxx 4 °X.
4. Xxxxxxxxxx média x xxxxxxx
4.1 Kultivační xxxxxx [3]
|
Xxxxxx pepton |
6,0 x |
|
Xxxxxxx |
4,0 x |
|
Xxxxxxx x kvasnic |
3,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
10,0 až 20,0 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
XX 6,5 až 6,6 (xx xxxxxxxxxxx). |
|
|
4.2 Xxxxxxxx xxxxxx [4] |
|
|
Trypton |
5,0 g |
|
Extrakt x kvasnic |
4,0 g |
|
Extrakt x xxxx |
3,0 g |
|
Agar |
10,0 xx 20,0 g |
|
Voda |
1000 xx |
|
XX 8,0 (xx xxxxxxxxxxx). |
|
4.3 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 0,8 % (xxxxxx xxxxxxxx)
Xxxxxxxxx 8 x xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx a xxxxxx xx 1000 xx; sterilizujte.
4.4 Xxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx, pH 8,0
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx X2XXX4 |
16,7 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx KH2PO4 |
0,5 x |
|
Xxxxxxxx xxxxxxxxx sodný XxXXX3 |
20,0 x |
|
Xxxx do |
1000 ml |
4.5 Xxxx xxxxxxx xxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx (4.4)
50/50 (xxxxxxxx).
4.6 Xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxxx o xxxxx xxxxxxxx (v XX).
5. Xxxxxxxxxx roztoky
Rozpusťte xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx látky (4.6.) xx xxxxx (4.5.) x zřeďte stejnou xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 1000 XX xxxxxxxxxxx xx mililitr. Skladován x xxxxxxxxxxx láhvi xxx 4 °C xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxx xxx.
X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (4.5.) xxxxxxxxxxx roztoky:
|
S8 |
1 |
IU/ml |
|
S4 |
0,5 |
IU/ml |
|
S2 |
0,25 |
IU/ml |
|
S1 |
0,125 |
IU/ml |
6. Příprava xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx
6.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxx 20,0 x xxxxxx x xxxxxxx xxxxx, 1,0 xx 20,0 x x xxxxxxx. Xxxxxxxx 100 xx xxxxx (4.5) x xxxxxxxx 30 xxxxx. Xxxxxxxxx xxxx dekantujte x xxxxxx roztok xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.5), xxxxxx xxxxxxxx očekávaný xxxxx xxxxxxxxxxx 1 XX/xx (= U8).
Pro xxxxxxxxx xxxxxx spiramycinu xxxxx xxx 2,5 mg/kg xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx provedena xxxxxxxxxx. Xxxxxxx 20,0 x xxxxxx. Přidejte 100 xx xxxxx (4.5) x xxxxxxxx 30 xxxxx. Xxxxxxxxxxx několik xxxxx, xxxxxxxx 50 xx roztoku xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxx 4 xx xx xxxxxxxxx xxxxx xx rotační xxxxxxx xxx teplotě xxxxxxxxxxxxx 40 °X. Xxxxxx xxxxxx xxxxx (4.5), xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx spiramycinu 1 XX/xx (= U8).
6.2 Xxxxxxxx xxxxxxx
X xxxxxxx X8 xxxxxxxxx xxxxxxX4 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,5 XX/xx), X2 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,25 XX/xx) x X1 (očekávaný xxxxx: 0,125 IU/ml) xxxxxx postupného xxxxxx (1 + 1) xxxxx (4.5).
7. Zkušební xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx zkušební xxxxxx (4.2) bakteriální xxxxxxxx (3.2) při xxx 50 °X. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx zkušebním médiem (4.2) stanovte xxxxxxxxxx xxxxxxxx bakteriální xxxxxxxx, xxxxx poskytne xxxxxxxx x nejjasnější xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx spiramycinu.
7.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X8, X4, S2, S1) x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoku (X8, X4, X2, X1). Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxxx na každé xxxxx. Xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx misky xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxxx 10 xx 13 xx a xxxxxxx 30 xx xxxx středy. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xx miskách xxxxxxxxxxxx xx z tabule xxxx x kroužkem x xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx, 200 mm x průměru x 20 xx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx (4.2.), xxxxxxxxxxxxx xxxx x 7.1., xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx 2 xx xxxxxx (60 ml xx xxxxx x xxxxxxx 200 ml). Xxxxxxxx xxxxx, vytvořte xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx objemy zkušebních x xxxxxxxxxxxx roztoků (xxxx 0,10 a 0,15 ml xx xxxxx, podle xxxxxxx). Xxxxxxxx xxxxxx koncentraci xxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 32 xxxxxxxxxxx zón.
7.3 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx 16 xx 18 xxxxx xxx 30 ± 2 °X.
8. Xxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx zón s xxxxxxxxx xx 0,1 xx. Zaznamenejte xxxxxxx xxxxxxx xxx každou xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx logaritmus xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx inhibičních xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx standardního xxxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xx xxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxx xxx xxxxxxxxxx nejnižší xxxxxx (XX) s xxxxxxxx xxxxxxx:
x) XX = 7x1 + 4x2+ x4 – 2x8 / 10
Xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx úroveň (XX) s použitím xxxxxxx:
x) XX = 7x8 + 4s4+ x2 – 2x1 / 10
Xxxxxxx vypočítejte "xxxxxxxxxxxx" body pro xxxxxxxx úroveň extraktu (XX) x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (XX) xxxxxxxxxx x1, x2, x4 a u8 xx x1, x2, x4, x s8 x dříve xxxxxxxxx xxxxxxxxx [5]
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XX x XX na stejný xxxxxxxx papír x xxxxxx xx tak, xxxxxx dostali "xxxxxxxxxxx" xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Podobně zaznamenejte XX x XX x spojte je xxx, xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx pro xxxxxxx.
X xxxxxxxxxxxxx jakéhokoli xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxx xxx paralelní. Xxx praktické xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx paralelní, xxxxx hodnoty (XX — XX) x (XX — XX) xxxxxxxxxx xxxx než x 10 % xx jejich xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxx křivky xxxxxxxxxxx, xxx u1 x s1 xxxx x8 a s8, xxxxx být xxxxxxxx x XX, XX, XX x UH xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx:
x) XX = 5x1 + 2x2 – x4 / 6 xxxx 5x2 + 2s4 – x8 / 6
x′) XX = 5s4 + 2x2 – x1 / 6 xxxx 5s8 + 2x4 – x2 / 6
x podobně xxx UL x XX. Xxxx xx xxx splněna xxxxxx xxxxxxxx paralelnosti. Xxxxxxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxx.
Xxxxx xxxx křivky považovány xx xxxxxxxxx, vypočtěte xxxxxxxxxx relativní xxxxxxxx (xxx A) x xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx rovnic, x xxxxxxxxxx na tom, xxxxx xxxx xxxxxxx xxx nebo čtyři xxxxxx xxx ohodnocení xxxxxxxxxxxx.
Xxx čtyři xxxxxx
x) Xxx X = (x1+ x2+ x4+ x8 – s1 – x2 – x4 – x8) × 0,602 / x4+ u8+ x4+ x8 – x1 – x2 – x1 – x2
Xxx xxx xxxxxx
x) Xxx X = (u1+ x2+ x4 – x1 – s2 – x4) × 0,401 / u4+ x4 – u1 – s1
nebo
d´) Log X = (x2+ x4+ x8 – x2 – s4 – x8) × 0,401 / x8+ x8 – x2 – x2
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx = xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx × X
(X8 = S8 × A)
Pokud xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx rozsah 0,5 xx 2,0, potom xxxxxxxx xxxxxxx, při xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx, xxxxx toto xxxx možné, xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx požadovaného xxxxxxx, xxxx být xxxxx získaný xxxxxxxx xxxxxxxxx xx přibližný x xxxx musí xxx uvedeno x xxxxxxxxxx protokolu x xxxxxxx.
Xxxxx jsou xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx stanovení. Xxxxx xxxx xxxxx docíleno xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx výsledek x xxxxxxxxxxx báze spiramycinu xx xxxxxxxx xxxxxx.
9. Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx mezi xxxxxxxx xxxx paralelních xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
- 2 xx/xx v absolutní xxxxxxx pro xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx 10 xx/xx,
- 20 % xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx 10 až 25 xx/xx,
- 5 xx/xx x absolutní xxxxxxx xxx xxxxxx 25 xx 50 xx/xx,
- 10 % xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxx 50 xx/xx.
[1] 1 mg báze xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx 3200 xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (XX).
[2] Xxxxx metody xxxxx xxx použity xx předpokladu, xx xxxx stanoveno, xx xxxxxxxxx xxxxxxx bakteriální xxxxxxxx.
[3] Může xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx médium xxxxxxxxx xxxxxxx x dávající xxxxxx xxxxxxxx.
[4] Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx médium xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
[5] Xxxx xxxxxxx "x" x "u" xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx zón.