Xxxxxx Směrnice Xxxxxx
xx xxx 25. xxxxxxxx 1984,
xxxxxx xx stanoví xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx
(84/425/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX SPOLEČENSTVÍ,
s xxxxxxx xx Xxxxxxx x založení Evropského xxxxxxxxxxxxx společenství,
s ohledem xx směrnici Xxxx 70/373/XXX xx xxx 20. xxxxxxxx 1970, xxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx odběru xxxxxx x xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx kontrolu xxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxx x xxxxxxxxxxx Xxxxx, a xxxxxxx xx článek 2 xxxxxxx směrnice,
vzhledem x tomu, xx xxxxxxx xxxxxxxx požaduje, xxx úřední kontrola xxxxx za xxxxxx xxxxxxxx dodržování xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx vzorků a xxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx Xxxxxx 71/250/XXX [2], 73/46/XXX [3], 74/203/XXX [4], 75/84/XXX [5], 76/372/XXX [6] xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx 81/680/XXX [7], xxxxxxxx 71/393/EHS [8], 72/199/XXX [9], 78/633/XXX [10] xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx 84/4/XXX [11] x xxxxxxxx 81/715/EHS [12] již xxxxxxxxx xxxxxx počet xxxxxxxxxxxx xxxxx Společenství; že xxxxxx x xxxxx xx té xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx metodu;
vzhledem k xxxx, xx xxxxxxxx xxxx směrnice jsou x souladu xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx výboru xxx xxxxxx,
XXXXXXX TUTO XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Xxxxxxx státy xxxxxxx, že analýzy xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, pokud xxx x jejich xxxxx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxx popsanou x xxxxxxx.
Článek 2
Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx nezbytné xxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 30. xxxxxx 1985 a neprodleně x nich xxxxxxx Xxxxxx.
Článek 3
Tato xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X Xxxxxxx dne 25. xxxxxxxx 1984.
Xx Xxxxxx
Xxxx Xxxxxxxx
xxxx Komise
[1] Úř. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Úř. xxxx. X 155, 12.7.1971, x. 13.
[3] Xx. věst. X 83, 30.3.1973, x. 21.
[4] Úř. věst. X 108, 22.4.1974, x. 7.
[5] Xx. xxxx. X 32, 5.2.1975, x. 26.
[6] Úř. věst. X 102, 15.4.1976, x. 8.
[7] Xx. xxxx. X 246, 29.8.1981, x. 32.
[8] Úř. xxxx. X 279, 20.12.1971, x. 7.
[9] Xx. xxxx. X 123, 29.5.1972, x. 6.
[10] Úř. věst. X 206, 29.7.1978, x. 43.
[11] Xx. xxxx. X 15, 18.1.1984, x. 28.
[12] Úř. věst. X 257, 10.9.1981, x. 38.
XXXXXXX
XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXX XX AGAROVÉM XXXXX
1. Xxxx a rozsah
Metoda xx xxxxxx pro xxxxxxxxx spiramycinu x xxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx/xx (1 xxx) [1]
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxxxx-xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x pH 8. Xxxxxxx je xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx spiramyscinu x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx mikroorganizmem Micrococcus xxxxxx. Xxxxxx se xxxxxxxxx tvorbou xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx. Průměr xxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxxxxxxxxx: Xxxxxxxxxxx xxxxxx XXX 9341 (XXXX 8340, XXXX 8553)
3.1 Xxxxxxxxx základní xxxxxxx
Xxxxxxxxx kultivační xxxxxx (4.1) x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx 24 xxxxx při 30 °C. Xxxxxxx xxxxxxxxx x chladničce xxx teplotě okolo 4 °X. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx.
3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx [2]
Xx dříve xxxxxxxxxxxx šikmého xxxxx xxxxxx xxxxxxxx 2 xx 3 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3). Tuto xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx 250 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx 18 xx 20 xxxxx xxx 30 °C. Xxxxxxxx smyjte xx 25 ml roztoku xxxxxxxx xxxxxxx (4.3) x xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx 1/10 xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3). Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxx 75 %, xxxxxx xxx 650 xx v 1 xx kyvetě proti xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3.). Xxxx suspenze xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxx týden xxx xxx 4 °C.
4. Xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx [3]
|
Xxxxxx xxxxxx |
6,0 g |
|
Trypton |
4,0 x |
|
Xxxxxxx z xxxxxxx |
3,0 x |
|
Xxxxxxx z xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxx |
1,0 g |
|
Agar |
10,0 až 20,0 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
XX 6,5 xx 6,6 (xx xxxxxxxxxxx). |
|
|
4.2 Xxxxxxxx xxxxxx [4] |
|
|
Xxxxxxx |
5,0 g |
|
Extrakt x kvasnic |
4,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxx |
3,0 x |
|
Xxxx |
10,0 xx 20,0 g |
|
Voda |
1000 xx |
|
XX 8,0 (xx xxxxxxxxxxx). |
|
4.3 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 0,8 % (xxxxxx xxxxxxxx)
Xxxxxxxxx 8 x xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx x xxxxxx do 1000 xx; xxxxxxxxxxxx.
4.4 Xxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx, pH 8,0
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx dvou xxxxxxxx X2XXX4 |
16,7 g |
|
Hydrogen xxxxxxxxxxx xxxxxxxx XX2XX4 |
0,5 g |
|
Hydrogen xxxxxxxxx xxxxx XxXXX3 |
20,0 x |
|
Xxxx xx |
1000 xx |
4.5 Xxxx xxxxxxx xxxxxx-xxxxxxxxxxxxx xxxx (4.4)
50/50 (xxxxxxxx).
4.6 Xxxxxxxxxx látka
Spiramycin x xxxxx xxxxxxxx (x XX).
5. Xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx odvážené xxxxxxxx xxxxxxxxxx látky (4.6.) xx xxxxx (4.5.) x zřeďte stejnou xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx obsahující 1000 XX xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Skladován x xxxxxxxxxxx xxxxx xxx 4 °X xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxx xxx.
X xxxxxx zásobního xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx (4.5.) xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
|
X8 |
1 |
XX/xx |
|
X4 |
0,5 |
XX/xx |
|
X2 |
0,25 |
XX/xx |
|
X1 |
0,125 |
XX/xx |
6. Xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx
6.1 Extrakce
Odvažte 20,0 x vzorku v xxxxxxx krmiv, 1,0 xx 20,0 g x xxxxxxx. Xxxxxxxx 100 xx xxxxx (4.5) x xxxxxxxx 30 minut. Odstřeďte xxxx xxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.5), xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx obsah xxxxxxxxxxx 1 IU/ml (= X8).
Xxx očekávané xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxx 2,5 mg/kg xxxxxx, musí xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx 20,0 x xxxxxx. Přidejte 100 xx směsi (4.5) x xxxxxxxx 30 xxxxx. Odstřeďujte xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx 50 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x odpařte xx xxx 4 xx xx sníženého xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 40 °X. Xxxxxx xxxxxx xxxxx (4.5), xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx spiramycinu 1 XX/xx (= X8).
6.2 Xxxxxxxx roztoky
Z roztoku X8 xxxxxxxxx xxxxxxX4 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,5 XX/xx), X2 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,25 IU/ml) x U1 (očekávaný xxxxx: 0,125 XX/xx) xxxxxx postupného xxxxxx (1 + 1) xxxxx (4.5).
7. Xxxxxxxx xxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxxxx zkušební xxxxxx (4.2) xxxxxxxxxxx suspenzí (3.2) xxx xxx 50 °X. Xxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx (4.2) xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx inhibiční xxxx x různými xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx agarem se xxxxxxx na xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (X8, X4, S2, X1) x čtyřmi xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (X8, X4, U2, X1). Xxxx xxxxx koncentrace xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxx být xxxxx xxxxxxxx na xxxxx xxxxx. Xxx tento xxxxxx xxxxxxx misky xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx s xxxxxxxx 10 xx 13 mm x xxxxxxx 30 xx xxxx středy. Pokus xxxx být xxxxxxxx xx xxxxxxx skládajících xx x tabule xxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx na xxxxx, 200 xx x xxxxxxx x 20 mm vysokým.
Rozlijte xx misky xxxxxxxx xxxxx (4.2.), xxxxxxxxxxxxx xxxx x 7.1., xxx xxxxxxxxx vrstvu xxx 2 xx xxxxxx (60 xx xx xxxxx x xxxxxxx 200 ml). Xxxxxxxx xxxxx, vytvořte xxxxxx x umístěte xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx objemy zkušebních x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 ml xx xxxxx, xxxxx průměru). Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx 32 xxxxxxxxxxx xxx.
7.3 Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxx 16 xx 18 xxxxx při 30 ± 2 °X.
8. Vyhodnocení
Změřte xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx s xxxxxxxxx na 0,1 xx. Zaznamenejte xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx semilogaritmický xxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx vynášejte xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxx x průměrům xxxxxxxxxxx xxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxx je níže xxxxxxx.
Xxxxxxxx "nejvhodnější" xxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxxx:
x) SL = 7s1 + 4x2+ x4 – 2x8 / 10
Xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" bod xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxxx:
x) SH = 7x8 + 4s4+ x2 – 2s1 / 10
Xxxxxxx vypočítejte "xxxxxxxxxxxx" body pro xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxx extraktu (XX) xxxxxxxxxx u1, u2, x4 a x8 xx s1, x2, x4, x x8 x dříve uvedených xxxxxxxxx [5]
Zaznamenejte xxxxxxxxx xxxxxxx XX a XX na xxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xx xxx, xxxxxx dostali "nejhodnější" xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Podobně xxxxxxxxxxxx XX x XX x xxxxxx xx xxx, xxxxxx xxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx xxx xxxxxxx.
X nepřítomnosti xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx křivky xxxxxxxxxx xx paralelní, xxxxx xxxxxxx (XX — SL) x (XX — XX) xxxxxxxxxx xxxx xxx x 10 % xx jejich xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx u1 x s1 xxxx x8 x x8, xxxxx být xxxxxxxx x SL, XX, XX x XX xxxxxxxxx x použitím xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, aby xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx "nejvhodnější" xxxxxx:
x) SL = 5x1 + 2x2 – x4 / 6 xxxx 5x2 + 2x4 – x8 / 6
b′) XX = 5s4 + 2s2 – x1 / 6 xxxx 5x8 + 2x4 – x2 / 6
a xxxxxxx xxx XX x XX. Xxxx xx xxx xxxxxxx stejná xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, musí xxx xxxxxxxxxxx x závěrečném xxxxxxxxx o xxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxx považovány xx paralelní, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx aktivity (xxx A) x xxxxxx xxxxx z xxxxxxxxxxxxx rovnic, x xxxxxxxxxx xx xxx, xxxxx xxxx xxxxxxx xxx nebo xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxx xxxxx úrovně
c) Xxx X = (x1+ u2+ x4+ x8 – x1 – x2 – x4 – x8) × 0,602 / x4+ u8+ s4+ x8 – u1 – x2 – x1 – s2
Pro xxx xxxxxx
x) Xxx X = (u1+ x2+ x4 – x1 – x2 – x4) × 0,401 / x4+ x4 – u1 – x1
xxxx
x´) Xxx X = (x2+ x4+ x8 – x2 – x4 – x8) × 0,401 / x8+ x8 – u2 – x2
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx = aktivita xxxxxxxxxxx standardu × X
(X8 = X8 × A)
Pokud xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx rozsah 0,5 xx 2,0, potom xxxxxxxx xxxxxxx, při xxxx xxxxxxxx vhodné xxxxxx xxxxxxxxxxx extraktu xxxx, xxxxx toto xxxx xxxxx, roztoků xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx požadovaného xxxxxxx, musí být xxxxx získaný xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxx musí xxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx protokolu x xxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx neparalelní, xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxx docíleno xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxx považováno xx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx spiramycinu xx xxxxxxxx xxxxxx.
9. Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx u xxxxxxxx xxxxxx stejným xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
- 2 xx/xx x xxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxx spiramycinu do 10 xx/xx,
- 20 % xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx 10 až 25 xx/xx,
- 5 xx/xx x xxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx 25 až 50 xx/xx,
- 10 % xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx pro obsahy xxx 50 mg/kg.
[1] 1 xx xxxx xxxxxxxxxxx xx ekvivalentem 3200 xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (XX).
[2] Xxxxx metody xxxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxx bakteriální xxxxxxxx.
[3] Může být xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx médium xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
[4] Může xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx stejné xxxxxxxx.
[5] Xxxx xxxxxxx "x" x "x" xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx.