Plné znění - 31981L0715

Devátá xxxxxxxx Xxxxxx

xx xxx 31. xxxxxxxx 1981,

xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx

(81/715/XXX)

XXXXXX EVROPSKÝCH XXXXXXXXXXXX,

x xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,

x xxxxxxx xx směrnici Xxxx 70/373/XXX ze dne 20. července 1970, xxxxxx se zavádí xxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx kontrolu xxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxx x xxxxxxxxxxx Řecka, a xxxxxxx xx xxxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx,

xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx 70/373/EHS xxxxxxx, xx xxxxxx kontroly xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx požadavky právních x xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxx xx použití xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx;

xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxx Xxxxxx 71/250/EHS [2], 71/393/EHS [3], 72/199/XXX [4], 73/46/XXX [5], 74/203/XXX [6], 75/84/XXX [7], 76/372/EHS [8] a 78/633/XXX [9], xxxxxxxxx pozměněné xxxxxxxx ze dne 30. xxxxxxxx 1981, xxx řadu xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; xx stav xx xx doby xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx;

xxxxxxxx x xxxx, že opatření xxxx xxxxxxxx jsou x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Stálého xxxxxx xxx xxxxxx,

XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:

Xxxxxx 1

Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxx úřední kontrolu xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx popsanými v xxxxxxx.

Xxxxxx 2

Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x účinnost xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx nezbytné xxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx do 1. xxxxxxxx 1981. Xxxxxxxxxx o xxxx xxxxxxx Xxxxxx.

Článek 3

Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx členským xxxxxx.

X Xxxxxxx xxx 31. xxxxxxxx 1981.

Xx Xxxxxx

Xxxxxx Xxxxx

xxxxxxxx

[1] Xx. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.

[2] Úř. xxxx. X 155, 12.7.1971, x. 13.

[3] Xx. xxxx. X 279, 20.12.1971, x. 7.

[4] Xx. xxxx. X 123, 29.5.1972, x. 6.

[5] Xx. věst. X 83, 30.3.1973, x. 21.

[6] Úř. xxxx. X 108, 22.4.1974, x. 7.

[7] Xx. xxxx. X 32, 5.2.1975, x. 26.

[8] Xx. xxxx. X 102, 15.4.1976, x. 8.

[9] Xx. xxxx. X 206, 29.7.1978, x. 43.

XXXXXXX

1. STANOVENÍ XXXXXXXXXX XXXXXX X AGAROVÉM XXXXXXXXXXX MÉDIU

1. ÚČEL X ROZSAH XXXXXXX

Xxxx xxxxxx umožňuje xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx premixech. Xxxxxx hranice stanovitelnosti xx 2 mg/kg (2 xxx). Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx antibiotik xxxx xx xxxxxxxxx působit xxxxxx.

2. XXXXXXX

Xx směsi xxxxxx/xxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx odstředí. Jeho xxxxxxxxxxxx aktivita xx xxxxxxx měřením xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx naočkovaném xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx se dokáže xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zónami xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xx pro xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx logaritmu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

3. MIKROORGANISMUS: BACILLUS XXXXXXXX XXXX 6633 (XXXX 8054)

3.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx kultury

Agarové xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1) x xxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxx mikroorganismem Xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxx xxx xx xxx 30 °X xxxxxxxx. Xxxxxxx xx uchovává x chladničce xxx xxx 4 °C x xxxxx xxxxx xx znovu xxxxxxxx.

3.2. Xxxxxxxx xxxxxxxx spór [1]

Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx (3.1) xx xxxxx 2-3 xx sterilní xxxx. Xxxxx suspenzí xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx 300 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1), x xx xxxx 3 xx 5 xxx xx xxxxxxxx xxx 30 °X. Xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx pod xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx xx 15 xx xxxxxxxx (4.2) x xxxxxxxxxxxxx xx. Xxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxxxxx xxx 4 °X.

4. KULTIVAČNÍ XXXXXX X XXXXXXX

4.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx [2]

4.2 Xxxxxxx 20 %-ní (x/x): 200 xx xxxxxxxx xx xxxxx 800 ml xxxx.

4.3 Xxxxxxxx chlorovodíková, x: 1,18–1,19.

4.4 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, 2X.

4.5 Xxxxxxxxx xxxx 0,1 M:

dihydrogenfosforečnan xxxxxxxx, XX₂ PO₄: 13,6 g

voda: 1000 xx

xX xxxxxxx xx 4,5.

4.6 Xxxx xxxxxxx/xxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (4.3): 65/32,5/2,5 (x/x/x)

4.7 Xxxxxxxxxx substance: xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx

5. STANDARDNÍ ROZTOKY

Přesně xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.7) xx xxxxxxxx ve xxxxxxxxxx xxxxx (4.5) x xxxxx xxxxxx naředí, xxx xxxxxx základní xxxxxx xxxxxxxxxx 100 μx avoparcinu x 1 ml. Xxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx a při 4 °X, zůstane xxxxx xxxxxx použitelný 7 dní.

5.1 Pro xxxxxxxxxx premixy

Z xxxxxx xxxxxxxxx roztoku xx xxxxxxxx postupným xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx následující xxxxxxx:

5.2 Pro xxxxxx

X xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx postupným xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

6. XXXXXXXX XXXXXXXX A XXXXXXXXXXX XXXXXXX

6.1 Medikované xxxxxxx

Xxxxxx odvážené xxxxxxxx 10 mg xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx 10-100 xx xxxxxxxxxx, xx x xxxxxxx baňce x obsahu 100 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x 60 xx xxxxx (4.6) po xxxx 15 minut. Xxxxxxx xX se xxxxxxxxxxx x pokud xx xxxxx, xxxxxx xx kyselinou xxxxxxxxxxxxxxx (4.3) xx xxxxxxx 2. Xxxxx (4.6) xx xxxxxx xxxxx x homogenizuje se. Xxx xx xxxxx xxxxxxxx přefiltruje xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx. Xxxxxxx č. 1) x xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx část x xX xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) xxxxxx xx xxxxxxx 4,5. Xxxxx xxxxxx xx zředí xxxxxxxxxx pufrem (4.5), xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 4 μg/ml ( = X₈).

X xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (1+1) fosfátovým xxxxxx (4.5) xxxxxxxx xxxxxxx U4 (xxxxxxxxx xxxxx: 2 μx/xx), X2 (xxxxxxxxx xxxxx: 1 μx/xx) x X₁ (očekávaný obsah: 0,5 μx/xx).

6.2 Xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxxxx 50 x xx xxxxx xx 100 xx xxxxx (4.6) a xx xxxx 30 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Extrakt se xxxxx odstředěním (x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx). Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx odebere (viz. xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xX xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) upraví xx 4,5. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4,5), xxx xx xxxxxx xxxxxx X8 (xxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxx).

X tohoto xxxxxxx xx xxxxxxxxx rozřeďováním (1+1) xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5) xxxxxxxx roztoky X4 (xxxxxxxxx obsah: 1,0 μx/xx), X₂ (xxxxxxxxx obsah: 0,5 μx/xx) a X₁ (xxxxxxxxx xxxxx: 0,25 μx/xx).

7. XXXXXX XXXXX

7.1 Naočkování xxxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxx médium (4.1) xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx (3.2) při xxxxxxx 50–60 °X. Xxxxxxxxxxx pokusy xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx (4.1) xx xxxxxxx množství inokula, xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx inhibiční xxxx xxx různých xxxxxxxxx koncentracích xxxxxxxxxx.

7.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxx se xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xx miskách xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx standardního xxxxxxx (X₈, S₄, X₂, X₁) x testovacího xxxxxxx (U8, X4, X2, X1).Xx xxxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx. X xxxx důvodu xxxx xxx miska xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxx vytvořit ve xxxxxx kultivačního xxxxxxxxx xxxxxxx osm otvorů x průměru 10-13 xx x rozestupem xxxxxx xxxxxxxxx 30 xx. Xxxx xx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx jsou vyrobeny xx xxxxxxxx xxxxx, xx kterou xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx o xxxxx 20 xx x xxxxxxx 200 xx.

Xx misku xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx média (4.1) xxxxxxxxxxxx xxxxx 7.1, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx přibližně 2 mm (60 xx xx xxxxx x xxxxxxx 200 xx). Poté, xx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx otvory, xx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx přesné množství xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 xx xx otvor, podle xxxxxxx xxxxxx). Každá xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx čtyřikrát, xxxxx xxx každý xxxx se xxxxxxxxx 32 xxxxxxxxxxx xxx.

7.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx xxxx 16 až 18 xxxxx xxx 30 °X.

8. XXXXXXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xx změří x přesností xx 0,1 xx. Pro xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx semilogaritmického xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx koncentrace xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx zón. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx stejně xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, vypočítané xxxx. xxxx uvedeným způsobem.

Nejvhodnější xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx standardního roztoku (XX) se stanoví xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) XX = 7S₈ + 4X₄ + X₂ – 2X₁ / 10

Xxxxxxxxxxxx xxx xxx nejvyšší úroveň xxxxxxxxxxxx roztoku (SH) xx stanoví xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

XX = 7X₈ + 4X₄ + X₂ – 2X₁ / 10

Xxxxxx xxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx pro xxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxx (XX) xxxxxxxx, xxxxxxx xx xx xxxx uvedených xxxxxx xxxxxx X₁, X₂, X₄ x X₈ namísto X₁, X₂, X₄ a X₈.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx XX x XX xx xxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx obou xxxx xxxxxxx nejvhodnější xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx. Totéž xx xxxxxxx xxx xxxxxxx XX x XX x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxxxxx rušivé xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx (XX-XX) a (XX-XX) xxxxxxxxxxx xxxx než x 10 % xx xxxxxxx hodnoty.

Pokud xxxxxx nejsou rovnoběžné, xx xxxxx xxxxxxxx xxx U₁ a X₁ nebo X₈ x X₈. Xxx xx xxxxxxx XX, XX, XX x XX xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorců, aby xx obdržely xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxxxx xx provede xxx xxxxxxx XX x XX. U xxxxxx alternativních xxxxxx xx rovněž xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx, které xxxx stanoveny xx xxx úrovní, xx xxxx být xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx o xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx aktivity (xxx A) pomocí xxxxxxx x následujících xxxxxx:

Xxx 4 xxxxxx

(x) xxx A = (X₁+ U₂+ X₄+ X₈ – X₁ – X₂ – X₄ – X₈) × 0,602 / X₄+ X₈+ X₄+ X₈ – X₁ – X₂ –

Xxx 3 úrovně

(d) xxx X = (X₁+ X₂+ U₄ – X₁ – X₂ – S₄) × 0,401 / X₄+ X₄ – X₁ – X₁

xxxx

x´) xxx X = (X₂+ X₄+ X₈ – X₂ – X₄ – S₈) × 0,401 / U₈+ X₈ – X₂ – S₂

Skutečná xxxxxxxx = předpokládaná aktivita х xxxxxxxxx aktivita.

Pokud xxxxxxxxx xxxxxxxx leží xxxx xxxxxx hodnot 0,5–2,0, xxxxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx. standardních xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx požadovaných xxxxxx, výsledek xx xxxxx považovat xx xxxxxxxxx, x xx xx xxxx být xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x analýze.

Pokud není xxxxx přímky považovat xx rovnoběžné, xxxxxxx xx xxxxxxxx. Pokud xx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx výsledek xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.

9. XXXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx a xxxx xxxxxxx by xxxxxx xxxxxxxxxxx:

- 2 xx/xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx avoparcinu 2 xx 10 xx/xx,

- 20 % xxxxx hodnoty xxxxxxxx xxx xxxxxx 10 xx 25 mg/kg,

- 5 mg/kg xxxxxxxxx xxxxxxx při obsahu 25 až 50 xx/xx,

- 10 % xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx obsahu xxx 50 xx/xx.

2. XXXXXXXXX XXXXXXXXX SODNÉHO XXXXXX X XXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX

1. ÚČEL A XXXXXX POUŽITÍ

Metoda xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x krmivech x xxxxxxxxxxxx premixech. Xxxxxx xxxxxxx stanovitelnosti je 10 xx/xx (10 xxx) [3].

2. PRINCIP

Vzorek xx xxxxxxxxx 90 %-xxx methanolem. Extrakt xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx podle xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxx. Xxxx antibiotická xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx difúze xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zónami xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx těchto xxxxxxxxxxx xxx xx x xxxxxxx použitých xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx za xxxxx xxxxxx logaritmu xxxxxxxxxxx antibiotika. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx snížena xxxxxxxxxxx xxxxxxx iontů.

3. XXXXXXXXXXXXXXX: BACILLUS XXXXXXXX XXXX 6633 (XXXX 8054)

3.1 Xxxxxxxx kmenové xxxxxxx

Xxxxxxx kultivační médium (4.1) x šikmých xxxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Bacillus subtilis x xxxx noc xx xxxxxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxx xx uchovává x xxxxxxxxxx při asi 4 °X x xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.

3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx [4]

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx (3.1) x xxxxx xxxxxxxx xx omyje 2-3 ml xxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx Rouxova xxxxx, která xxxxxxxx 300 ml kultivačního xxxxx (4.1), x xx xxxx 3 xx 5 xxx xx inkubuje při 30 °X. Xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx do 15 ml ethanolu (4.3) x xxxxxxxxxxxxx xx. Xxxx xxxxxxxx xxxx xxx uchována xxxxxxxxx 5 xxxxxx xxx 4 °X.

4. XXXXXXXXXX MÉDIUM X XXXXXXX

4.3 Xxxxxxx 20 %-xx (x/x): 200 xx ethanolu xx xxxxx 800 xx xxxx.

4.4 Xxxxxxxx, xxxxxxx.

4.5 Methanol 90 %-xx (x/x): 900xx xxxxxxxxx (4.4) se xxxxx 100 xx xxxx.

4.6 Methanol 50 %-xx (x/x): 500ml xxxxxxxxx (4.4) xx xxxxx 500 xx xxxx.

4.7 Oxid hlinitý, xxxxxxxxxxx (xxxxx X, 20 xxxx; xxxxxxxxx xxxxxxx XX1: X. Xxxxxxxxx and Xx., xxxx rovnocenný).

4.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx: monensin sodný x xxxxx xxxxxxxx (xxxx xxxx získatelný x Xxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxx, Xxxxxxx Xxxxxxxxxx Laboratory, Xxxxxxxxx, Xxxxxx XX15 3XX, Velká Xxxxxxxx).

5. XXXXXXXXX

5.1 Vakuová xxxxxxx xxxxxxx x 250xx xxxxxxx baňkou.

5.2 Skleněná xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx průměr: 25 xx, xxxxx: 400 xx, x xxxxxxx x xxxxxxx 2 xx xx jednom xxxxx.

5.3 Skleněná xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx: 11 xx, xxxxx: xxxxxxxxx 300 xx, x xxxxxxx x xxxxxxx 2 xx xx jednom xxxxx.

6. STANDARDNÍ XXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 10 xx standardní xxxxxxxxx (4.8) se xxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxx, xxx vznikl xxxxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 800 μx/xx. Při xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x xxx 4 xX, xxxxxxx tento xxxxxx použitelný 2 xxxxx.

X xxxxxx výchozího xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6) xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

7. XXXXXXXX XXXXXXXX X XXXXXXXXXXX XXXXXXX

7.1 Xxxxxxxx

7.1.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxx o xxxxxxxxx 2,0 mg xx přidá k 100 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx (4.5), xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxx se zředí 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6), aby bylo xxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxx sodného 8 μx/xx ( = X₈).

7.1.2 Krmiva, x xxxxx podíl xxxxxxxxx xxxx nižší xxx 50 ppm

Vzorek x xxxxxxxxx 10 až 20 x xx xxxxx x 100 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx (4.5), 15 xxxxx protřese x xxxxx xxxxx.

Xxxxxx xxxxx xx xxxxxx do xxxxxxxx trubičky (5.2) x xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxx 75–80 mm xxxxxx xxxxxxxx (4.7).

Extrakt xx xxxxxxx na sloupec xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx se xxxxxxx. 30 ml xxxxxxxx xx xxxxx 50 xx xxxx. Xxxx xxxx se xxxxx 50 %-xxx methanolem (4.6), xxx xxxx xxxxxxxx očekávané xxxxxxxxxxx xxxxxxxx sodného 8 μx/xx ( = X₈).

7.1.3 Xxxxxx x xxxxx podíl xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 50 xxx (xxxxxx xxxxxxx 10 xxx)

Xxxxxx x xxxxxxxxx 10 xx 20 x xx xxxxx x 100 xx 90 %-ního xxxxxxxxx (4.5), 15 xxxxx xxxxxxxx x odstřeďuje xxxxx xx xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxx x podílem xxxxxxxxx 20 xxx xx odebere 40 xx xxxxxx; pro 10 xxx xx xxxxxxx 80 xx. Xxxxxx se xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 40 °X x xxxxxxxx xxxxxxx (5.1). Zůstatek xx xxxxxxxx x 10 ml 90 %-xxxx methanolu.

Vatová xxxxx xx zavede xx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.3) x xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx 75–80 mm oxidem xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx roztok xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx. Kolona xx xxxxxxx 10 xx 90xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx xx odpaří xx xxxxx xxx xxxxxxx nepřesahující 40 °X v xxxxxxx xxxxxxx (5.1). Xxxxxxxx xx xxxxxxxx x 10 xx bezvodého xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xx 20 xx. Roztok se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxxxx při minimálních xxxxxxxx 4000 ot/min. Xxxx xxxx se xxxxx 50 %-xxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx očekávané xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X₈).

7.2. Xxxxxxxxx xxxxxx

X xxxxxxx X8 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (1 + 1) 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6) xxxxxxxx xxxxxxx X4 (xxxxxxxxx podíl: 4 μx/xx), X2 (xxxxxxxxx xxxxx: 2 μg/ml), X1 (xxxxxxxxx xxxxx: 1 μg/ml).

8. XXXXXX XXXXX

8.1 Naočkování xxxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxx médium (4.2) xx naočkuje xxxxxxxx xxxx (3.2) xxx 50 xx 60 °X. Předběžnými xxxxxx xx miskách xx xxxxxxxxx xxxxxx (4.2) xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, které xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx s xxxxxxx použitými xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx sodného.

8.2 Příprava xxxxx

Xxxx xx xxxxxx xxxx difúzní xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (S₈, X₄, X₂, X₁) x testovacího xxxxxxx (X₈, X₄, X₂, X₁). Xx xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx. X xxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx bylo xxxxx vytvořit xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx osm xxxxxx x průměru 10-13 xx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 30 xx. Xxxx xx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, xx nichž xx xxxxxxx hliníkový xxxx xxxxxxxx xxxxxxx o xxxxx 20 xx x průměru 200 xx.

Xx xxxxx xx xxxxxx takové množství xxxxxxxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxxxx xxxxx 8.1, xxx se vytvořila xxxxxx silná xxxxxxxxx 2 xx (60 xx na xxxxx x xxxxxxx 200 xx). Xxxx xx xxxxxx xxxxxx, vyhloubí xx otvory, xx xxxxxxx xx pipetou xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 xx xx otvor, podle xxxxxxx xxxxxx). Každá xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx minimálně čtyřikrát, xxxxx pro xxxxx xxxx xx xxxxxxxxx 32 inhibičních zón.

8.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx přibližně po xxxx 18 xxxxx xxx 35 xx 37 °C.

9. XXXXXXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxxxxx zón xx xxxxx s přesností xx 0,1 mm. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx střední hodnoty xxxxxxx xx semilogaritmického xxxxxx, přičemž xx xxxxxx logaritmus xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx zón. Xxx standardní roztok xxxxxx jako xxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx. xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx bod xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (SL) xx xxxxxxx xxxxx následujícího xxxxxx:

x) SL = 7X₁ + 4X₂ + X₄ – 2X₈ / 10

Xxxxxxxxxxxx xxx pro xxxxxxxx xxxxxx standardního roztoku (XX) se stanoví xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) XX = 7X₈ + 4X₄+ X₂ + 2X₁ / 10

Xxxxxx xxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx body xxx xxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxx (XX) extraktu, xxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx X₁, X₂, X₄ x U₈ xxxxxxx X₁, X₂, X₄ x X₈.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx XX x SH xx xxxxxxx xx xxxxxxxx diagramu. Xxxxxxxx xxxx bodů xxxxxxx xxxxxxxxxxxx přímka xxx xxxxxxxxxx roztok. Totéž xx provede xxx xxxxxxx XX a XX x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx přímky xxx xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, měly xx být přímky xxxxxxxxxx. Xxxxxx je xxxxx považovat za xxxxxxxxxx, pokud xx xxxxxxx (XX-XX) x (XX-XX) neodchylují xxxx xxx x 10 % xx střední xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx nejsou xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxx X1 x X1 xxxx X8 x X8. Xxx se hodnoty XX, SH, XX x XX xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xx obdržely xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx přímky:

a) XX = 5X₁ + 2X₂ – X₄ / 6 xxxx 5S₂ + 2X₄ – S₈ / 6

x ) XX = 5X₄ + 2S₂ − X₁ / 6 xxxx 5X₈ + 2X₄ − X₂ / 6

Totéž xx xxxxxxx xxx xxxxxxx XX x UH. X xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxx úrovní, xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx do xxxxxxxxx x analýze.

Pokud xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, vypočítá xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx X) xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxx 4 xxxxxx

x) log X = (X₁+ X₂+ X₄+ U₈ – X₁ – X₂ – X₄ – X₈) × 0,602 / X₄+ X₈+ X₄+ X₈ – X₁ – X₂ – S₁ – X₂

Xxx 3 xxxxxx

x) xxx A = (X₁+ X₂+ X₄ – S₁ – X₂ – S₄) × 0,401 / X₄+ S₄ – X₁ – S₁

nebo

d) xxx X = (X₂+ X₄+ X₈ – X₂ – X₄ – S₈) × 0,401 / X₈+ X₈ – X₂ – X₂

Xxxxxxxx xxxxxxxx = předpokládaná xxxxxxxx х relativní xxxxxxxx.

Xxxxx relativní xxxxxxxx xxxx xxxx rozsah xxxxxx 0,5–2,0, xxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx přizpůsobení koncentrací xxxxxxxx příp. xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx relativní xxxxxxxx v rozsahu xxxxxxxxxxxx hodnot, xxxxxxxx xx třeba považovat xx přibližný, x xx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx o xxxxxxx.

Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx. Xxxxx se ani xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxxxx.

10. XXXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxx mezi xxxxxxxx xxxx xxxxxxx jednoho xxxxxxxxx xxx xxxxx x téže zkoušce xx neměly xxxxxxxxxxx:

- 20 % xxxxx xxxxxxx výsledku xxx xxxxxx xxxxxxxxx sodného 10 xx 25 xx/xx,

- 5 mg/kg xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx 25 xx 50 mg/kg,

- 10 % vyšší hodnoty xxxxxxxx při obsahu xxx 50 mg/kg.

[1] Xxxxx xxx použity xxxx metody, které xxxxxxxxx odpovídající xxxxxxxx xxxxxxxx.

[2] Může xxx xxxxxxx jakékoliv xxxxxxxx xxxxxxxxxx médium odpovídajícího xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.

[3] 1 xx xxxxxxxxx sodného xxxxxxxx 1000 xxxxxxxxx XX.

[4] Xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx vytvoří xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx.

[5] Může xxx xxxxxxx jakékoli xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, které xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.