Plné znění - 31981L0715

Xxxxxx směrnice Xxxxxx

xx xxx 31. července 1981,

xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx metody Společenství xxx xxxxxx kontrolu xxxxx

(81/715/XXX)

XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,

x xxxxxxx xx Smlouvu x založení Evropského xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,

x xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxx 70/373/XXX xx xxx 20. xxxxxxxx 1970, xxxxxx xx zavádí xxxxxx xxxxxx xxxxxx x analýzy Společenství xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx Xxxxx o xxxxxxxxxxx Xxxxx, x xxxxxxx na xxxxxx 2 xxxxxxx směrnice,

vzhledem x xxxx, xx xxxxxxxx 70/373/EHS xxxxxxx, xx úřední xxxxxxxx xxxxx za xxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx právních x xxxxxxxxx předpisů xx jakost x xxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx vzorků x xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx;

xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx Komise 71/250/EHS [2], 71/393/XXX [3], 72/199/XXX [4], 73/46/EHS [5], 74/203/XXX [6], 75/84/XXX [7], 76/372/XXX [8] x 78/633/EHS [9], xxxxxxxxx pozměněné xxxxxxxx ze dne 30. xxxxxxxx 1981, xxx xxxx analytických xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; xx stav od xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx devátý soubor xxxxxxxxxxxx xxxxx;

xxxxxxxx x xxxx, že xxxxxxxx xxxx směrnice xxxx x xxxxxxx se xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx,

XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:

Článek 1

Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxx xxxxxx kontrolu xxxxx xx obsah xxxxxxxxxx x monensinu xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx popsanými x xxxxxxx.

Článek 2

Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx nezbytné pro xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx směrnicí do 1. xxxxxxxx 1981. Xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx Xxxxxx.

Článek 3

Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

X Xxxxxxx xxx 31. xxxxxxxx 1981.

Za Xxxxxx

Xxxxxx Xxxxx

xxxxxxxx

[1] Xx. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.

[2] Xx. xxxx. X 155, 12.7.1971, x. 13.

[3] Úř. věst. X 279, 20.12.1971, x. 7.

[4] Úř. věst. X 123, 29.5.1972, x. 6.

[5] Úř. xxxx. X 83, 30.3.1973, x. 21.

[6] Úř. xxxx. X 108, 22.4.1974, x. 7.

[7] Úř. xxxx. X 32, 5.2.1975, x. 26.

[8] Xx. xxxx. X 102, 15.4.1976, x. 8.

[9] Xx. xxxx. X 206, 29.7.1978, x. 43.

XXXXXXX

1. XXXXXXXXX AVOPARCINU XXXXXX X XXXXXXXX XXXXXXXXXXX MÉDIU

1. ÚČEL X ROZSAH XXXXXXX

Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx v krmivech x xxxxxxxxxxxx premixech. Xxxxxx xxxxxxx stanovitelnosti xx 2 mg/kg (2 ppm). Přítomnost xxxxxxxxxxxxxxx antibiotik může xx xxxxxxxxx působit xxxxxx.

2. XXXXXXX

Xx směsi xxxxxx/xxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxx vzorek. Xxxxxxx xx xxxxxxxx. Jeho xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx měřením xxxxxx xxxxxxxxxx x agarovém xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx dokáže xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Průměr xxxxxxxxxxx xxx je xxx xxxxxx použitých xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx logaritmu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

3. XXXXXXXXXXXXXXX: BACILLUS XXXXXXXX XXXX 6633 (XXXX 8054)

3.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx kultivační xxxxxx (4.1) x xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Bacillus xxxxxxxx x xxxx xxx xx xxx 30 °C inkubuje. Xxxxxxx xx xxxxxxxx x chladničce xxx xxx 4 °C x xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.

3.2. Xxxxxxxx xxxxxxxx spór [1]

Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx (3.1) xx xxxxx 2-3 xx xxxxxxxx vody. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx láhev, xxxxx xxxxxxxx 300 xx xxxxxxxxxxxx média (4.1), a xx xxxx 3 xx 5 dní xx xxxxxxxx xxx 30 °X. Po xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx do 15 xx ethanolu (4.2) x xxxxxxxxxxxxx xx. Xxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxxxxx xxx 4 °X.

4. XXXXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXX

4.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx [2]

4.2 Xxxxxxx 20 %-ní (x/x): 200 ml xxxxxxxx xx xxxxx 800 ml xxxx.

4.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, x: 1,18–1,19.

4.4 Roztok xxxxxxxxx xxxxxxx, 2M.

4.5 Fosfátový xxxx 0,1 X:

xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, KH₂ XX₄: 13,6 x

xxxx: 1000 xx

xX xxxxxxx xx 4,5.

4.6 Směs xxxxxxx/xxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (4.3): 65/32,5/2,5 (x/x/x)

4.7 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx o xxxxx xxxxxxxx

5. STANDARDNÍ XXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 10 mg standardní xxxxxxxxx (4.7) se xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx (4.5) x xxxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 100 μx xxxxxxxxxx x 1 ml. Xxx xxxxxxxx x uzavřené xxxxx x při 4 °C, xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 7 dní.

5.1 Pro xxxxxxxxxx xxxxxxx

X tohoto xxxxxxxxx roztoku xx xxxxxxxx postupným rozřeďováním xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

5.2 Xxx xxxxxx

X výchozího xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx pufrem xxxxxxxxxxx roztoky:

6. XXXXXXXX XXXXXXXX X XXXXXXXXXXX XXXXXXX

6.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxx odvážené xxxxxxxx 10 xx vzorku, xxxxx obsahuje 10-100 xx xxxxxxxxxx, se x xxxxxxx xxxxx x obsahu 100 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x 60 ml xxxxx (4.6) po xxxx 15 minut. Xxxxxxx pH se xxxxxxxxxxx a pokud xx třeba, upraví xx kyselinou chlorovodíkovou (4.3) na xxxxxxx 2. Xxxxx (4.6) xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xx. Xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx přes xxxxxx filtrační xxxxx (xxxx. Whatman x. 1) x xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx xx sleje. Odebere xx poměrná xxxx x pH xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) upraví xx xxxxxxx 4,5. Xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5), xxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxx obsahu avoparcinu 4 μx/xx ( = X₈).

X xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (1+1) fosfátovým xxxxxx (4.5) xxxxxxxx xxxxxxx X4 (xxxxxxxxx xxxxx: 2 μg/ml), X2 (xxxxxxxxx xxxxx: 1 μg/ml) a X₁ (očekávaný xxxxx: 0,5 μg/ml).

6.2 Xxxxxx

Xxxxxx x hmotnosti 50 x se xxxxx xx 100 xx xxxxx (4.6) x xx xxxx 30 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Extrakt xx xxxxx xxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx). Xxxxxxx xxxx čistého xxxxxxxx xx odebere (xxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxx) a xxxxxxx xX xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) xxxxxx xx 4,5. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxx fosfátovým xxxxxx (4,5), xxx xx xxxxxx xxxxxx X8 (viz. xxxxxxxxxxx xxxxxxx).

X xxxxxx roztoku xx postupným xxxxxxxxxxxx (1+1) xxxxxxxxxx pufrem (4.5) xxxxxxxx roztoky X4 (xxxxxxxxx xxxxx: 1,0 μg/ml), U₂ (xxxxxxxxx xxxxx: 0,5 μx/xx) a U₁ (xxxxxxxxx xxxxx: 0,25 μx/xx).

7. POSTUP XXXXX

7.1 Naočkování xxxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxx xxxxxx (4.1) xx xxxxxxxx suspenzí xxxx (3.2) xxx xxxxxxx 50–60 °C. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx (4.1) xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxx největší xxx xxxxx xxxxx inhibiční xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx koncentracích xxxxxxxxxx.

7.2 Xxxxxxxx misek

Test se xxxxxx jako xxxxxxx xxxx na xxxxxxx xx xxxxxxx koncentračních xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (X₈, S₄, X₂, X₁) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (U8, U4, X2, X1).Xx xxxxxx xxxxx musí být xxxxxxxx bezpodmínečně všechny xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx. X xxxx xxxxxx musí xxx xxxxx takové xxxxxxx, aby bylo xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxx 10-13 xx s xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 30 xx. Test xx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx miskách, xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx desky, xx xxxxxx xx xxxxxx hliníkové xxxx xxxxxxxx kroužky o xxxxx 20 mm x průměru 200 xx.

Xx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx množství xxxxxxxxxx média (4.1) xxxxxxxxxxxx podle 7.1, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx přibližně 2 mm (60 xx na xxxxx x xxxxxxx 200 xx). Xxxx, xx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx, do xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx přesné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (mezi 0,10 x 0,15 ml xx xxxxx, podle xxxxxxx xxxxxx). Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx minimálně čtyřikrát, xxxxx xxx xxxxx xxxx xx vyhodnotí 32 xxxxxxxxxxx zón.

7.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx xxxx 16 až 18 xxxxx při 30 °X.

8. XXXXXXXXXXX

Xxxxxx inhibičních xxx se xxxxx x xxxxxxxxx na 0,1 xx. Pro xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx zanáší xxxxxxxxxx koncentrace ve xxxxxx x průměru xxxxxxxxxxx xxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx např. xxxx uvedeným xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx standardního xxxxxxx (XX) xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) XX = 7X₈ + 4S₄ + X₂ – 2X₁ / 10

Xxxxxxxxxxxx bod xxx nejvyšší xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XX) xx stanoví xxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorce:

SH = 7X₈ + 4X₄ + S₂ – 2X₁ / 10

Xxxxxx xxx se stanoví xxxxxxxxxxxx xxxx pro xxxxxxxx (UL) a xxxxxxxx úroveň (UH) xxxxxxxx, přičemž se xx výše xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx X₁, X₂, X₄ x X₈ xxxxxxx X₁, X₂, X₄ a X₈.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx XX x XX xx xxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx XX a XX x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx pro extrakt.

Pokud xx xxxxxxxxxxx rušivé xxxxxxx, xxxx by xxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx možno xxxxxxxxx za xxxxxxxxxx, xxxxx xx hodnoty (XX-XX) a (XX-XX) xxxxxxxxxxx více xxx x 10 % xx xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx vyloučit xxx X₁ x X₁ nebo X₈ x X₈. Xxx xx xxxxxxx SL, XX, XX a XX xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, aby xx xxxxxxxx alternativní xxxxxxxxxxxx přímky:

Xxxxx xx provede xxx xxxxxxx XX x XX. X xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Výsledky, xxxxx xxxx stanoveny ze xxx xxxxxx, by xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx protokolu x xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, vypočítá se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx X) pomocí xxxxxxx z následujících xxxxxx:

Xxx 4 xxxxxx

(x) xxx X = (X₁+ X₂+ X₄+ X₈ – X₁ – X₂ – X₄ – S₈) × 0,602 / X₄+ X₈+ X₄+ X₈ – X₁ – U₂ –

Xxx 3 xxxxxx

(x) xxx X = (X₁+ X₂+ U₄ – X₁ – S₂ – X₄) × 0,401 / X₄+ X₄ – U₁ – S₁

nebo

d´) xxx X = (X₂+ X₄+ X₈ – X₂ – X₄ – X₈) × 0,401 / X₈+ X₈ – U₂ – S₂

Skutečná xxxxxxxx = předpokládaná xxxxxxxx х relativní xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx aktivita leží xxxx rozsah xxxxxx 0,5–2,0, xxxxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx požadovaných xxxxxx, xxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxx, x to xx xxxx být xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x analýze.

Pokud xxxx xxxxx přímky xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, zkouška xx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx považovat xx xxxxxxxxxxxx.

9. XXXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxx xxxx výsledky xxxx xxxxxxxxx jednoho xxxxxxxxx xxx xxxxx x xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx:

- 2 xx/xx absolutní hodnoty xxx xxxxxx avoparcinu 2 xx 10 xx/xx,

- 20 % xxxxx xxxxxxx výsledku xxx xxxxxx 10 xx 25 xx/xx,

- 5 mg/kg xxxxxxxxx xxxxxxx při obsahu 25 až 50 xx/xx,

- 10 % xxxxx xxxxxxx výsledku xxx xxxxxx xxx 50 xx/xx.

2. STANOVENÍ XXXXXXXXX XXXXXXX DIFÚZÍ X AGAROVÉM XXXXXXXXXXX XXXXX

1. XXXX X XXXXXX POUŽITÍ

Metoda xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx sodného x krmivech a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx je 10 xx/xx (10 xxx) [3].

2. PRINCIP

Vzorek xx xxxxxxxxx 90 %-xxx methanolem. Xxxxxxx xx podrobí xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx sodného xx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx naočkovaném xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx inhibičními xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Průměr xxxxxx xxxxxxxxxxx zón xx x rozsahu xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx antibiotika. Xxxxxxxxx xxxxxxx je snížena xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

3. XXXXXXXXXXXXXXX: BACILLUS XXXXXXXX XXXX 6633 (XXXX 8054)

3.1 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx kultivační xxxxxx (4.1) x xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx subtilis x přes noc xx xxxxxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxx 4 °C x xxxxx měsíc se xxxxx naočkuje.

3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx [4]

Xxxxxxx xxxxxxx xx agaru (3.1) x xxxxx xxxxxxxx xx omyje 2-3 xx xxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx Rouxova xxxxx, xxxxx xxxxxxxx 300 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1), x xx dobu 3 xx 5 xxx xx xxxxxxxx xxx 30 °C. Xx xxxxxxxx tvorby xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx do 15 xx xxxxxxxx (4.3) x xxxxxxxxxxxxx xx. Xxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxxxxx xxx 4 °X.

4. XXXXXXXXXX MÉDIUM X XXXXXXX

4.3 Xxxxxxx 20 %-ní (x/x): 200 xx xxxxxxxx xx xxxxx 800 xx vody.

4.4 Xxxxxxxx, xxxxxxx.

4.5 Xxxxxxxx 90 %-xx (x/x): 900ml xxxxxxxxx (4.4) xx xxxxx 100 xx xxxx.

4.6 Xxxxxxxx 50 %-xx (v/v): 500xx xxxxxxxxx (4.4) xx xxxxx 500 xx xxxx.

4.7 Xxxx hlinitý, xxxxxxxxxxx (alcoa X, 20 xxxx; activated xxxxxxx XX1: F. Xxxxxxxxx xxx Co., xxxx xxxxxxxxxx).

4.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx: monensin xxxxx x známé xxxxxxxx (xxxx xxxx xxxxxxxxxx x Xxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxx, Xxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx, Xxxxxxxxx, Xxxxxx XX15 3XX, Velká Británie).

5. XXXXXXXXX

5.1 Vakuová xxxxxxx xxxxxxx s 250ml xxxxxxx xxxxxx.

5.2 Skleněná xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx: 25 xx, xxxxx: 400 xx, x otvorem x xxxxxxx 2 xx xx jednom xxxxx.

5.3 Skleněná xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx: 11 xx, xxxxx: xxxxxxxxx 300 xx, x xxxxxxx x xxxxxxx 2 xx xx jednom xxxxx.

6. STANDARDNÍ XXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxx množství asi 10 mg xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.8) xx xxxxxxxx v xxxxxxxxx (4.4) a naředí, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx s obsahem xxxxxxxxx sodného 800 μx/xx. Při xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x xxx 4 xX, xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 2 xxxxx.

X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 50 %-xxx methanolem (4.6) xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

7. XXXXXXXX EXTRAKTU A XXXXXXXXXXX XXXXXXX

7.1 Xxxxxxxx

7.1.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxxxx 2,0 xx xx xxxxx k 100 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx (4.5), xxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx a odstředí. Xxxxxx xx zředí 50 %-xxx methanolem (4.6), xxx bylo xxxxxxxx očekávané xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X₈).

7.1.2 Krmiva, u xxxxx xxxxx monensinu xxxx xxxxx xxx 50 xxx

Xxxxxx x xxxxxxxxx 10 xx 20 x se xxxxx k 100 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx (4.5), 15 xxxxx xxxxxxxx x xxxxx ustát.

Vatová zátka xx zavede xx xxxxxxxx trubičky (5.2) x xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx trubičkou xx xxxxxx xx xxxx 75–80 xx xxxxxx xxxxxxxx (4.7).

Xxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xx filtrát. 30 xx filtrátu xx zředí 50 xx xxxx. Hned xxxx xx xxxxx 50 %-ním xxxxxxxxxx (4.6), aby bylo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X₈).

7.1.3 Xxxxxx x xxxxx xxxxx monensinu xxxxxxxxxx 50 xxx (xxxxxx xxxxxxx 10 xxx)

Xxxxxx x hmotnosti 10 xx 20 x xx xxxxx x 100 xx 90 %-ního xxxxxxxxx (4.5), 15 xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx 20 ppm xx xxxxxxx 40 xx xxxxxx; xxx 10 xxx xx xxxxxxx 80 xx. Xxxxxx xx odpaří xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 40 °X x xxxxxxxx xxxxxxx (5.1). Zůstatek xx xxxxxxxx v 10 ml 90 %-xxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxx xxxxx xx xxxxxx do xxxxxxxx trubičky (5.3) x za xxxxxxx xxxxxxx xx trubička xxxxxx xx xxxx 75–80 xx xxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx převede xx xxxxxxx xxxxx hlinitého x xxxxxxx se xxxxxxx. Kolona xx xxxxxxx 10 xx 90xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx filtrát xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx se xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 40 °X v xxxxxxx xxxxxxx (5.1). Xxxxxxxx xx rozpustí x 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xx 20 xx. Roztok se xxxxxxxxxx minimálně 5 xxxxx xxx minimálních xxxxxxxx 4000 xx/xxx. Xxxx xxxx xx xxxxx 50 %-ním xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx očekávané xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X₈).

7.2. Xxxxxxxxx roztok

Z xxxxxxx X8 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (1 + 1) 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6) xxxxxxxx xxxxxxx X4 (xxxxxxxxx xxxxx: 4 μx/xx), X2 (očekávaný xxxxx: 2 μx/xx), X1 (xxxxxxxxx podíl: 1 μx/xx).

8. XXXXXX XXXXX

8.1 Naočkování xxxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxx xxxxxx (4.2) xx naočkuje xxxxxxxx xxxx (3.2) xxx 50 xx 60 °X. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx (4.2) xx stanoví xxxxxxxx xxxxxxx, které xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxx ještě xxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx sodného.

8.2 Příprava xxxxx

Xxxx xx nasadí xxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx po xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X₈, X₄, X₂, S₁) x testovacího xxxxxxx (X₈, X₄, X₂, X₁). Na každou xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx všechny xxxxx xxxxxxxxxxx standardu x xxxxxxxx. X xxxx xxxxxx xxxx xxx miska xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxx vytvořit xx xxxxxx kultivačního xxxxx xxxxxxx xxx otvorů x xxxxxxx 10-13 xx x xxxxxxxxxx xxxxxx minimálně 30 xx. Test xx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx jsou vyrobeny xx skleněné xxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx hliníkový nebo xxxxxxxx kroužek x xxxxx 20 xx x xxxxxxx 200 xx.

Xx misku xx xxxxxx takové xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxxxx xxxxx 8.1, xxx se xxxxxxxxx xxxxxx silná xxxxxxxxx 2 xx (60 xx xx misku x průměru 200 xx). Poté xx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx, xx xxxxxxx xx pipetou xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a testovacího xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 ml xx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx). Každá xxxxxxxxxxx musí být xxxxxxx minimálně xxxxxxxxx, xxxxx pro každý xxxx xx vyhodnotí 32 xxxxxxxxxxx xxx.

8.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx přibližně xx xxxx 18 hodin xxx 35 xx 37 °C.

9. VYHODNOCENÍ

Průměr xxxxxxxxxxx xxx xx xxxxx s xxxxxxxxx xx 0,1 xx. Xxx každou xxxxxxxxxxx xx střední hodnoty xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxx logaritmus xxxxxxxxxxx xx xxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx pro xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx přímky, xxxxxxxxxx xxxx. níže xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XX) xx xxxxxxx podle xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) SL = 7X₁ + 4X₂ + S₄ – 2X₈ / 10

Xxxxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XX) xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorce:

b) XX = 7X₈ + 4S₄+ S₂ + 2S₁ / 10

Xxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx (UL) x xxxxxxxx xxxxxx (XX) xxxxxxxx, xxxxxxx xx do xxxx xxxxxxxxx xxxxxx dosadí X₁, U₂, X₄ x U₈ namísto X₁, X₂, X₄ x S₈.

Vypočítané xxxxxxx XX a SH xx zanesou do xxxxxxxx diagramu. Spojením xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx přímka pro xxxxxxxxxx roztok. Xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx UL x XX x získání xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, měly xx xxx přímky xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx považovat xx xxxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx (SH-SL) x (XX-XX) xxxxxxxxxxx více xxx x 10 % xx střední xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxx X1 x S1 nebo X8 x S8. Xxx xx xxxxxxx XX, XX, XX x XX určí xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) XX = 5X₁ + 2X₂ – X₄ / 6 xxxx 5X₂ + 2X₄ – S₈ / 6

b ) XX = 5X₄ + 2X₂ − X₁ / 6 xxxx 5S₈ + 2X₄ − S₂ / 6

Xxxxx se xxxxxxx xxx xxxxxxx XX a XX. X xxxxxx alternativních xxxxxx se rovněž xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Výsledky, xxxxx xxxx stanoveny xx xxx úrovní, xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx do protokolu x xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxx přímky považovat xx xxxxxxxxxx, vypočítá xx xxxxxxxxxx relativní xxxxxxxx (log A) xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxx 4 xxxxxx

x) log A = (U₁+ X₂+ X₄+ X₈ – X₁ – S₂ – S₄ – X₈) × 0,602 / X₄+ X₈+ X₄+ X₈ – X₁ – U₂ – S₁ – X₂

Xxx 3 xxxxxx

x) xxx X = (X₁+ U₂+ X₄ – X₁ – X₂ – X₄) × 0,401 / X₄+ X₄ – X₁ – X₁

xxxx

x) xxx X = (X₂+ X₄+ X₈ – X₂ – X₄ – X₈) × 0,401 / X₈+ S₈ – X₂ – S₂

Skutečná xxxxxxxx = xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx х xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx mimo xxxxxx xxxxxx 0,5–2,0, xxxx xx zopakuje xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx není xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx hodnot, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx přibližný, a xx xx xxxx xxx zaznamenáno do xxxxxxxxx x analýze.

Pokud xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx rovnoběžné, xxxx xx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx za neuspokojivý.

10. XXXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxx mezi xxxxxxxx xxxx xxxxxxx jednoho xxxxxxxxx xxx xxxxx x xxxx zkoušce xx xxxxxx xxxxxxxxxxx:

- 20 % xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx sodného 10 až 25 xx/xx,

- 5 xx/xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx 25 xx 50 xx/xx,

- 10 % xxxxx hodnoty xxxxxxxx xxx xxxxxx xxx 50 xx/xx.

[1] Xxxxx být použity xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx sporovou xxxxxxxx.

[2] Xxxx xxx xxxxxxx jakékoliv komerční xxxxxxxxxx xxxxxx odpovídajícího xxxxxxx, které xxxxxxxx xxxxxx výsledky.

[3] 1 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 1000 xxxxxxxxx XX.

[4] Xxxxx být xxxxxxx jiné xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx.

[5] Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx složení, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.