Plné znění - 31981L0715

Xxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx

xx xxx 31. xxxxxxxx 1981,

xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx

(81/715/XXX)

XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,

x xxxxxxx na Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx společenství,

s ohledem xx xxxxxxxx Rady 70/373/XXX ze xxx 20. xxxxxxxx 1970, xxxxxx se xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx x analýzy Xxxxxxxxxxxx xxx úřední xxxxxxxx xxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx Aktem x xxxxxxxxxxx Xxxxx, a xxxxxxx xx článek 2 uvedené xxxxxxxx,

xxxxxxxx x xxxx, že xxxxxxxx 70/373/EHS stanoví, xx úřední kontroly xxxxx za xxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx předpisů xx xxxxxx x xxxxxxx krmiv, xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx pro xxxxx vzorků a xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx;

xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx Xxxxxx 71/250/EHS [2], 71/393/EHS [3], 72/199/XXX [4], 73/46/EHS [5], 74/203/XXX [6], 75/84/XXX [7], 76/372/EHS [8] x 78/633/EHS [9], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx ze xxx 30. xxxxxxxx 1981, xxx řadu xxxxxxxxxxxx xxxxx Společenství xxxxxxxxx; xx xxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx nyní xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx metod;

vzhledem x xxxx, xx xxxxxxxx xxxx směrnice xxxx x souladu xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx xxx krmiva,

PŘIJALA XXXX XXXXXXXX:

Článek 1

Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxx xxxxxx kontrolu xxxxx na obsah xxxxxxxxxx a monensinu xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx popsanými x xxxxxxx.

Článek 2

Xxxxxxx xxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx nezbytné xxx xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxx směrnicí xx 1. prosince 1981. Xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx Xxxxxx.

Xxxxxx 3

Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

X Xxxxxxx dne 31. xxxxxxxx 1981.

Xx Xxxxxx

Xxxxxx Xxxxx

xxxxxxxx

[1] Xx. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.

[2] Úř. věst. X 155, 12.7.1971, x. 13.

[3] Xx. xxxx. X 279, 20.12.1971, x. 7.

[4] Xx. xxxx. X 123, 29.5.1972, x. 6.

[5] Xx. věst. X 83, 30.3.1973, x. 21.

[6] Xx. xxxx. X 108, 22.4.1974, x. 7.

[7] Úř. věst. X 32, 5.2.1975, x. 26.

[8] Xx. věst. X 102, 15.4.1976, x. 8.

[9] Xx. xxxx. X 206, 29.7.1978, x. 43.

PŘÍLOHA

1. XXXXXXXXX AVOPARCINU XXXXXX V AGAROVÉM XXXXXXXXXXX XXXXX

1. XXXX X XXXXXX XXXXXXX

Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 2 xx/xx (2 xxx). Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

2. XXXXXXX

Xx xxxxx xxxxxx/xxxx/xxxxxxxx chlorovodíková se xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx médiu naočkovaném xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx inhibičními zónami xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx inhibičních xxx xx pro xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx za xxxxx xxxxxx logaritmu koncentrace xxxxxxxxxxx.

3. XXXXXXXXXXXXXXX: XXXXXXXX XXXXXXXX XXXX 6633 (XXXX 8054)

3.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1) x xxxxxxx zkumavkách xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Bacillus xxxxxxxx x přes xxx se xxx 30 °X xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxx 4 °C x xxxxx xxxxx xx znovu xxxxxxxx.

3.2. Xxxxxxxx suspenze xxxx [1]

Xxxxxxx kultura x xxxxxxxx xxxxx (3.1) xx xxxxx 2-3 xx sterilní vody. Xxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx Xxxxxxx láhev, xxxxx xxxxxxxx 300 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1), x po xxxx 3 xx 5 xxx xx xxxxxxxx xxx 30 °X. Xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx do 15 xx ethanolu (4.2) x zhomogenizuje xx. Xxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx minimálně 5 xxxxxx xxx 4 °X.

4. XXXXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXX

4.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx [2]

4.2 Xxxxxxx 20 %-ní (x/x): 200 xx xxxxxxxx xx zředí 800 ml xxxx.

4.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, d: 1,18–1,19.

4.4 Roztok hydroxidu xxxxxxx, 2M.

4.5 Xxxxxxxxx xxxx 0,1 X:

xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, XX₂ XX₄: 13,6 x

xxxx: 1000 xx

xX upravit xx 4,5.

4.6 Xxxx acetonu/vody/kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (4.3): 65/32,5/2,5 (x/x/x)

4.7 Standardní xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx

5. XXXXXXXXXX XXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.7) xx xxxxxxxx ve xxxxxxxxxx xxxxx (4.5) a xxxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx základní xxxxxx obsahující 100 μx xxxxxxxxxx x 1 xx. Xxx xxxxxxxx v uzavřené xxxxx x xxx 4 °X, xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 7 xxx.

5.1 Xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx

X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx rozřeďováním xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

5.2 Xxx xxxxxx

X výchozího xxxxxxx xx xxxxxxxx postupným xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx roztoky:

6. XXXXXXXX EXTRAKTU X XXXXXXXXXXX XXXXXXX

6.1 Medikované xxxxxxx

Xxxxxx xxxxxxxx množství 10 xx vzorku, xxxxx xxxxxxxx 10-100 xx avoparcinu, se x odměrné xxxxx x xxxxxx 100 xx xxxxxxxxxx protřepe x 60 xx xxxxx (4.6) xx xxxx 15 xxxxx. Xxxxxxx xX se xxxxxxxxxxx x pokud xx xxxxx, upraví xx xxxxxxxxx chlorovodíkovou (4.3) xx xxxxxxx 2. Xxxxx (4.6) xx xxxxxx xxxxx x homogenizuje se. Xxx se dílčí xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx. Xxxxxxx x. 1) x prvních 5 ml xxxxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx x xX xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) xxxxxx xx xxxxxxx 4,5. Xxxxx xxxxxx xx zředí xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5), xxx se dosáhlo xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 4 μx/xx ( = X₈).

X xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (1+1) fosfátovým xxxxxx (4.5) připraví xxxxxxx X4 (xxxxxxxxx xxxxx: 2 μx/xx), X2 (xxxxxxxxx xxxxx: 1 μx/xx) x X₁ (očekávaný obsah: 0,5 μg/ml).

6.2 Xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxxxx 50 x xx xxxxx xx 100 xx xxxxx (4.6) a xx dobu 30 xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Extrakt xx xxxxx odstředěním (x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx). Xxxxxxx xxxx čistého xxxxxxxx xx odebere (xxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xX se xxxxxxxx hydroxidu sodného (4.4) xxxxxx xx 4,5. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4,5), xxx xx získal roztok X8 (xxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxx).

X tohoto xxxxxxx xx postupným rozřeďováním (1+1) xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5) xxxxxxxx roztoky X4 (xxxxxxxxx xxxxx: 1,0 μx/xx), U₂ (xxxxxxxxx xxxxx: 0,5 μx/xx) x X₁ (xxxxxxxxx xxxxx: 0,25 μx/xx).

7. XXXXXX XXXXX

7.1 Naočkování kultivačního xxxxx

Xxxxxxxx xxxxxx (4.1) xx naočkuje xxxxxxxx xxxx (3.2) při xxxxxxx 50–60 °X. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx (4.1) xx xxxxxxx množství inokula, xxxxx vykáže co xxxxx xxxxxxxx ale xxxxx ostré inhibiční xxxx při různých xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

7.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx koncentračních xxxxxxxx standardního xxxxxxx (X₈, X₄, X₂, X₁) a testovacího xxxxxxx (U8, U4, X2, X1).Xx xxxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx koncentrace xxxxxxxxx x xxxxxxxx. X xxxx xxxxxx musí xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, aby xxxx xxxxx vytvořit ve xxxxxx xxxxxxxxxxxx prostředí xxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxx 10-13 xx s xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 30 xx. Test xx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxx hliníkové nebo xxxxxxxx kroužky x xxxxx 20 xx x xxxxxxx 200 xx.

Xx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx množství xxxxxxxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxxxx xxxxx 7.1, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 2 xx (60 xx xx xxxxx x xxxxxxx 200 xx). Xxxx, co xxxxxx xxxxxx, vyhloubí xx xxxxxx, xx xxxxxxx xx pipetou xxxxxx přesné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx (mezi 0,10 x 0,15 ml xx otvor, podle xxxxxxx otvoru). Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxx minimálně xxxxxxxxx, xxxxx pro xxxxx xxxx xx xxxxxxxxx 32 xxxxxxxxxxx xxx.

7.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx dobu 16 xx 18 xxxxx xxx 30 °X.

8. XXXXXXXXXXX

Xxxxxx inhibičních xxx xx změří x xxxxxxxxx xx 0,1 xx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx hodnoty zanesou xx semilogaritmického xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx k průměru xxxxxxxxxxx xxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx. xxxx xxxxxxxx způsobem.

Nejvhodnější xxx xxx nejnižší xxxxxx standardního xxxxxxx (XX) xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorce:

a) XX = 7S₈ + 4S₄ + X₂ – 2X₁ / 10

Nejvhodnější xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XX) xx stanoví podle xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

XX = 7X₈ + 4S₄ + S₂ – 2X₁ / 10

Stejně xxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx pro xxxxxxxx (XX) a xxxxxxxx xxxxxx (UH) xxxxxxxx, xxxxxxx xx xx výše xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx X₁, X₂, X₄ x X₈ xxxxxxx S₁, X₂, X₄ x X₈.

Xxxxxxxxxx hodnoty SL x XX xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Spojením xxxx xxxx vznikne xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxx hodnoty XX x UH x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxx.

Xxxxx xx nevyskytují rušivé xxxxxxx, měly by xxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx (XX-XX) x (UH-UL) xxxxxxxxxxx xxxx xxx x 10 % xx xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx nejsou xxxxxxxxxx, xx možné xxxxxxxx xxx X₁ x X₁ xxxx X₈ x S₈. Xxx xx xxxxxxx XX, XX, XX a XX xxxx pomocí xxxxxxxxxxxxx vzorců, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxxxx se provede xxx hodnoty XX x UH. X xxxxxx alternativních xxxxxx xx xxxxxx zkontroluje xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx, které xxxx stanoveny xx xxx xxxxxx, by xxxx být xxxxxxxxxxx xx protokolu x xxxxxxx.

Xxxxx je možno xxxxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxx, vypočítá xx xxxxxxxxxx relativní xxxxxxxx (xxx A) pomocí xxxxxxx z xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxx 4 úrovně

(c) xxx X = (X₁+ X₂+ X₄+ X₈ – X₁ – X₂ – X₄ – X₈) × 0,602 / X₄+ U₈+ S₄+ X₈ – U₁ – X₂ –

Pro 3 úrovně

(d) xxx X = (X₁+ X₂+ X₄ – X₁ – X₂ – X₄) × 0,401 / X₄+ X₄ – U₁ – X₁

xxxx

x´) xxx X = (X₂+ X₄+ X₈ – X₂ – X₄ – X₈) × 0,401 / X₈+ X₈ – X₂ – X₂

Xxxxxxxx aktivita = xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx х relativní xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx leží xxxx xxxxxx xxxxxx 0,5–2,0, xxxxxxx xx xxxxxxxx při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxx xxxx. standardních xxxxxxx. Xxxxx není možné xxxxxx relativní xxxxxxxx x xxxxxxx požadovaných xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, x to xx xxxx být xxxxxxxxxxx xx protokolu x xxxxxxx.

Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxx. Pokud xx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.

9. OPAKOVATELNOST

Rozdíly xxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx x xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx:

- 2 xx/xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx avoparcinu 2 xx 10 xx/xx,

- 20 % xxxxx hodnoty xxxxxxxx xxx xxxxxx 10 xx 25 xx/xx,

- 5 mg/kg xxxxxxxxx xxxxxxx při obsahu 25 xx 50 xx/xx,

- 10 % xxxxx xxxxxxx výsledku xxx xxxxxx xxx 50 xx/xx.

2. XXXXXXXXX XXXXXXXXX SODNÉHO XXXXXX X XXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX

1. XXXX X XXXXXX XXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx sodného x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx je 10 xx/xx (10 xxx) [3].

2. PRINCIP

Vzorek xx xxxxxxxxx 90 %-xxx xxxxxxxxxx. Extrakt xx podrobí vhodnému xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx monensinu xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx médiu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx subtilis. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Průměr těchto xxxxxxxxxxx xxx je x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx považován xx xxxxx úměrný xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx iontů.

3. XXXXXXXXXXXXXXX: XXXXXXXX XXXXXXXX XXXX 6633 (NICB 8054)

3.1 Xxxxxxxx kmenové xxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxx médium (4.1) v xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx noc xx xxxxxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxx 4 °C a xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.

3.2 Příprava xxxxxxxx xxxx [4]

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx (3.1) x šikmé xxxxxxxx xx xxxxx 2-3 xx xxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx naočkuje Xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx 300 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1), x xx dobu 3 xx 5 dní xx inkubuje xxx 30 °X. Xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx 15 xx ethanolu (4.3) a xxxxxxxxxxxxx xx. Xxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxxxxx xxx 4 °X.

4. XXXXXXXXXX XXXXXX A XXXXXXX

4.3 Xxxxxxx 20 %-xx (x/x): 200 ml ethanolu xx zředí 800 xx xxxx.

4.4 Methanol, xxxxxxx.

4.5 Xxxxxxxx 90 %-xx (x/x): 900xx xxxxxxxxx (4.4) xx xxxxx 100 ml xxxx.

4.6 Methanol 50 %-xx (x/x): 500xx xxxxxxxxx (4.4) xx xxxxx 500 xx xxxx.

4.7 Xxxx hlinitý, xxxxxxxxxxx (xxxxx X, 20 xxxx; xxxxxxxxx xxxxxxx XX1: X. Xxxxxxxxx xxx Co., xxxx rovnocenný).

4.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxxx xxxxx x známé xxxxxxxx (xxxx xxxx xxxxxxxxxx x International Xxxxxxxxxx xxx Boilogical Xxxxxxxxx, Xxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx, Xxxxxxxxx, Xxxxxx XX15 3XX, Velká Británie).

5. XXXXXXXXX

5.1 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx s 250xx xxxxxxx xxxxxx.

5.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx: 25 xx, délka: 400 xx, x xxxxxxx x xxxxxxx 2 xx na xxxxxx xxxxx.

5.3 Skleněná xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx: 11 xx, xxxxx: xxxxxxxxx 300 xx, s otvorem x průměru 2 xx na xxxxxx xxxxx.

6. XXXXXXXXXX ROZTOKY

Přesně xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 10 xx standardní xxxxxxxxx (4.8) se xxxxxxxx v xxxxxxxxx (4.4) x naředí, xxx vznikl xxxxxxx xxxxxx x obsahem xxxxxxxxx xxxxxxx 800 μx/xx. Při xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x při 4 xX, xxxxxxx xxxxx xxxxxx použitelný 2 xxxxx.

X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx rozřeďováním 50 %-xxx methanolem (4.6) xxxxxxxxxxx roztoky:

7. XXXXXXXX XXXXXXXX A XXXXXXXXXXX XXXXXXX

7.1 Extrakce

7.1.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxxxx 2,0 xx xx přidá k 100 ml 90 %-xxxx xxxxxxxxx (4.5), xxxxxxx minut xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx 50 %-xxx methanolem (4.6), xxx xxxx xxxxxxxx očekávané xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X₈).

7.1.2 Xxxxxx, x xxxxx podíl xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx 50 xxx

Xxxxxx x xxxxxxxxx 10 až 20 x xx xxxxx k 100 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx (4.5), 15 xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxx.

Xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.2) x xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxx xx výše 75–80 xx oxidem xxxxxxxx (4.7).

Extrakt xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx. 30 xx filtrátu xx xxxxx 50 xx xxxx. Hned xxxx xx xxxxx 50 %-ním methanolem (4.6), xxx bylo xxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X₈).

7.1.3 Xxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 50 xxx (xxxxxx hranice 10 xxx)

Xxxxxx o hmotnosti 10 xx 20 x xx přidá x 100 xx 90 %-xxxx methanolu (4.5), 15 minut xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxx s podílem xxxxxxxxx 20 xxx xx odebere 40 xx zbytku; pro 10 xxx xx xxxxxxx 80 ml. Xxxxxx xx xxxxxx xx vakuu xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 40 °X x rotačním xxxxxxx (5.1). Xxxxxxxx xx xxxxxxxx x 10 xx 90 %-xxxx methanolu.

Vatová zátka xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.3) x xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx do xxxx 75–80 xx oxidem xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx zbytku xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x filtrát xx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx 10 ml 90xxxxxxxxxxx methanolu x xxxxxxx filtrát xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx xx xxxxxx xx xxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 40 °X x xxxxxxx xxxxxxx (5.1). Xxxxxxxx xx xxxxxxxx v 10 ml bezvodého xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxx se xxxxxx xxxxx xx 20 xx. Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxxxx xxx minimálních xxxxxxxx 4000 xx/xxx. Xxxx xxxx se xxxxx 50 %-ním xxxxxxxxxx, aby bylo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx sodného 8 μx/xx ( = X₈).

7.2. Testovací xxxxxx

X xxxxxxx X8 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (1 + 1) 50 %-xxx methanolem (4.6) xxxxxxxx xxxxxxx U4 (xxxxxxxxx xxxxx: 4 μx/xx), X2 (očekávaný xxxxx: 2 μg/ml), X1 (xxxxxxxxx xxxxx: 1 μg/ml).

8. XXXXXX XXXXX

8.1 Xxxxxxxxxx kultivačního xxxxx

Xxxxxxxx xxxxxx (4.2) xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx (3.2) xxx 50 xx 60 °X. Předběžnými xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx (4.2) xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx ostré xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx koncentracemi xxxxxxxxx xxxxxxx.

8.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxx se xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xx miskách xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx stupních xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (S₈, X₄, S₂, S₁) x xxxxxxxxxxx roztoku (X₈, X₄, X₂, X₁). Xx xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx standardu x xxxxxxxx. Z xxxx xxxxxx xxxx xxx miska xxxxxx xxxxxxx, aby xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx osm xxxxxx x xxxxxxx 10-13 xx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 30 xx. Test by xxx xxx prováděn xxxxxxxxx xx miskách, xxxxx xxxx vyrobeny xx skleněné xxxxx, xx nichž xx xxxxxxx hliníkový xxxx xxxxxxxx kroužek x xxxxx 20 xx x xxxxxxx 200 xx.

Xx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx množství xxxxxxxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxxxx podle 8.1, xxx se xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 2 xx (60 xx xx xxxxx x průměru 200 xx). Xxxx co xxxxxx ztuhne, xxxxxxxx xx xxxxxx, xx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx přesné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx (mezi 0,10 x 0,15 ml xx otvor, xxxxx xxxxxxx xxxxxx). Xxxxx xxxxxxxxxxx musí xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxx každý xxxx xx xxxxxxxxx 32 xxxxxxxxxxx xxx.

8.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx 18 xxxxx xxx 35 až 37 °X.

9. VYHODNOCENÍ

Průměr xxxxxxxxxxx xxx xx xxxxx s xxxxxxxxx xx 0,1 xx. Xxx xxxxxx koncentraci xx xxxxxxx hodnoty xxxxxxx do xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx vztahu x xxxxxxx inhibičních zón. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, vypočítané xxxx. níže uvedeným xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx xxx pro xxxxxxxx úroveň standardního xxxxxxx (XX) xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) XX = 7X₁ + 4X₂ + S₄ – 2X₈ / 10

Xxxxxxxxxxxx xxx pro xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XX) xx stanoví xxxxx následujícího xxxxxx:

x) XX = 7S₈ + 4X₄+ X₂ + 2S₁ / 10

Xxxxxx xxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx body xxx xxxxxxxx (XX) x nejvyšší xxxxxx (XX) xxxxxxxx, xxxxxxx xx xx výše xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx X₁, U₂, X₄ x X₈ xxxxxxx X₁, S₂, X₄ x S₈.

Vypočítané xxxxxxx XX x XX xx zanesou xx xxxxxxxx diagramu. Spojením xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx roztok. Xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx UL x XX x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx přímky xxx xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx faktory, xxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Přímky xx xxxxx považovat xx xxxxxxxxxx, pokud xx xxxxxxx (XX-XX) a (XX-XX) xxxxxxxxxxx xxxx xxx o 10 % xx xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx buď X1 x S1 xxxx X8 x X8. Xxx se xxxxxxx XX, XX, UL x XX xxxx xxxxxx následujících vzorců, xxx se obdržely xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) XX = 5X₁ + 2X₂ – X₄ / 6 xxxx 5S₂ + 2X₄ – X₈ / 6

b ) XX = 5S₄ + 2X₂ − X₁ / 6 xxxx 5X₈ + 2X₄ − X₂ / 6

Totéž se xxxxxxx pro xxxxxxx XX x XX. X těchto alternativních xxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxx rovnoběžnost. Xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxx úrovní, xx měly xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x analýze.

Pokud xx xxxxx xxxxxx považovat xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx relativní xxxxxxxx (xxx A) xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxx 4 xxxxxx

x) xxx X = (X₁+ U₂+ X₄+ X₈ – X₁ – X₂ – X₄ – X₈) × 0,602 / U₄+ U₈+ X₄+ S₈ – X₁ – X₂ – X₁ – X₂

Xxx 3 xxxxxx

x) xxx X = (X₁+ X₂+ U₄ – X₁ – X₂ – X₄) × 0,401 / X₄+ S₄ – X₁ – X₁

xxxx

x) xxx X = (X₂+ U₄+ X₈ – X₂ – X₄ – S₈) × 0,401 / X₈+ X₈ – X₂ – S₂

Skutečná xxxxxxxx = xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx х xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx relativní xxxxxxxx xxxx xxxx rozsah xxxxxx 0,5–2,0, xxxx xx zopakuje xxx xxxxxxxxxxxxx přizpůsobení xxxxxxxxxxx xxxxxxxx příp. xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Pokud není xxxxx xxxxxxxxx relativní xxxxxxxx v rozsahu xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, x xx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxx xxxx možné xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxx se xxxxxxxx. Xxxxx xx ani xxx nedosáhne xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx výsledek xxxxxxxxx za xxxxxxxxxxxx.

10. XXXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx jedné x xxxx zkoušce xx xxxxxx xxxxxxxxxxx:

- 20 % xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xx 25 xx/xx,

- 5 xx/xx xxxxxxxxx hodnoty xxx xxxxxx 25 až 50 xx/xx,

- 10 % xxxxx hodnoty xxxxxxxx při obsahu xxx 50 xx/xx.

[1] Xxxxx být xxxxxxx xxxx metody, xxxxx xxxxxxxxx odpovídající sporovou xxxxxxxx.

[2] Xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx komerční xxxxxxxxxx médium xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, které poskytne xxxxxx xxxxxxxx.

[3] 1 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 1000 jednotkám XX.

[4] Mohou být xxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx.

[5] Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx kultivační xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx složení, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx výsledky.