Plné znění - 31981L0715

Xxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx

xx xxx 31. července 1981,

xxxxxx se stanoví xxxxxxxxxx metody Společenství xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx

(81/715/XXX)

XXXXXX EVROPSKÝCH SPOLEČENSTVÍ,

s xxxxxxx xx Smlouvu x založení Evropského xxxxxxxxxxxxx společenství,

s xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxx 70/373/XXX xx xxx 20. xxxxxxxx 1970, xxxxxx xx zavádí xxxxxx odběru xxxxxx x analýzy Společenství xxx xxxxxx kontrolu xxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx Aktem x xxxxxxxxxxx Xxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxx 2 uvedené xxxxxxxx,

xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx 70/373/XXX xxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, zda jsou xxxxxxx požadavky xxxxxxxx x správních xxxxxxxx xx jakost x xxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxx xx použití xxxxx Společenství xxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxx metod Xxxxxxxxxxxx;

xxxxxxxx x xxxx, že xxxxxxxx Xxxxxx 71/250/EHS [2], 71/393/XXX [3], 72/199/XXX [4], 73/46/XXX [5], 74/203/XXX [6], 75/84/XXX [7], 76/372/XXX [8] x 78/633/EHS [9], xxxxxxxxx pozměněné xxxxxxxx xx xxx 30. xxxxxxxx 1981, xxx řadu xxxxxxxxxxxx xxxxx Společenství stanovily; xx xxxx xx xx xxxx provedených xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx soubor xxxxxxxxxxxx metod;

vzhledem x xxxx, xx opatření xxxx xxxxxxxx jsou x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Stálého xxxxxx xxx xxxxxx,

XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:

Xxxxxx 1

Xxxxxxx státy xxxxxxx, xx analýzy xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Článek 2

Xxxxxxx xxxxx xxxxxx v účinnost xxxxxx a správní xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx směrnicí xx 1. xxxxxxxx 1981. Xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx Xxxxxx.

Xxxxxx 3

Xxxx xxxxxxxx xx určena xxxxxxxx xxxxxx.

V Bruselu dne 31. července 1981.

Za Xxxxxx

Xxxxxx Thorn

předseda

[1] Úř. věst. X 170, 3.8.1970, x. 2.

[2] Xx. xxxx. X 155, 12.7.1971, x. 13.

[3] Xx. věst. X 279, 20.12.1971, x. 7.

[4] Úř. věst. X 123, 29.5.1972, x. 6.

[5] Xx. věst. X 83, 30.3.1973, x. 21.

[6] Úř. xxxx. X 108, 22.4.1974, x. 7.

[7] Xx. xxxx. X 32, 5.2.1975, x. 26.

[8] Xx. xxxx. X 102, 15.4.1976, x. 8.

[9] Xx. xxxx. X 206, 29.7.1978, x. 43.

XXXXXXX

1. XXXXXXXXX AVOPARCINU XXXXXX V AGAROVÉM XXXXXXXXXXX XXXXX

1. ÚČEL X ROZSAH XXXXXXX

Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx hranice stanovitelnosti xx 2 xx/xx (2 ppm). Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx antibiotik xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

2. XXXXXXX

Xx xxxxx xxxxxx/xxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Extrakt xx xxxxxxxx. Jeho xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx difúze xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx subtilis. Xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Průměr xxxxxxxxxxx xxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

3. MIKROORGANISMUS: XXXXXXXX XXXXXXXX ATCC 6633 (XXXX 8054)

3.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1) x xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx x přes xxx xx při 30 °C inkubuje. Xxxxxxx xx uchovává x xxxxxxxxxx xxx xxx 4 °X x každý xxxxx xx znovu xxxxxxxx.

3.2. Xxxxxxxx suspenze spór [1]

Xxxxxxx kultura x xxxxxxxx médiu (3.1) xx xxxxx 2-3 xx xxxxxxxx vody. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx 300 xx xxxxxxxxxxxx média (4.1), x xx xxxx 3 xx 5 dní xx xxxxxxxx xxx 30 °X. Xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx kultura xxxxx xx 15 xx xxxxxxxx (4.2) x xxxxxxxxxxxxx se. Xxxx xxxxxxxx může xxx xxxxxxxx minimálně 5 xxxxxx při 4 °C.

4. KULTIVAČNÍ XXXXXX X XXXXXXX

4.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx [2]

4.2 Xxxxxxx 20 %-ní (x/x): 200 xx xxxxxxxx se zředí 800 xx xxxx.

4.3 Xxxxxxxx chlorovodíková, d: 1,18–1,19.

4.4 Xxxxxx hydroxidu xxxxxxx, 2X.

4.5 Fosfátový xxxx 0,1 X:

xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, KH₂ XX₄: 13,6 g

voda: 1000 xx

xX upravit xx 4,5.

4.6 Xxxx xxxxxxx/xxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (4.3): 65/32,5/2,5 (x/x/x)

4.7 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx

5. STANDARDNÍ ROZTOKY

Přesně xxxxxxxx množství asi 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.7) se xxxxxxxx xx fosfátovém xxxxx (4.5) x xxxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 100 μx xxxxxxxxxx x 1 xx. Xxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x xxx 4 °C, xxxxxxx xxxxx xxxxxx použitelný 7 dní.

5.1 Xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx

X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx postupným rozřeďováním xxxxxxxxxx xxxxxx následující xxxxxxx:

5.2 Xxx xxxxxx

X xxxxxxxxx roztoku xx připraví xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx roztoky:

6. XXXXXXXX XXXXXXXX X XXXXXXXXXXX ROZTOKU

6.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxx odvážené množství 10 xx vzorku, xxxxx xxxxxxxx 10-100 xx xxxxxxxxxx, se x odměrné xxxxx x xxxxxx 100 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x 60 xx xxxxx (4.6) po xxxx 15 xxxxx. Xxxxxxx pH xx xxxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxx, xxxxxx xx kyselinou xxxxxxxxxxxxxxx (4.3) xx xxxxxxx 2. Xxxxx (4.6) xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xx. Xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx. Xxxxxxx x. 1) a prvních 5 xx filtrátu xx xxxxx. Odebere xx xxxxxxx xxxx x xX xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) xxxxxx xx xxxxxxx 4,5. Xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5), xxx se dosáhlo xxxxxxxxxxx obsahu xxxxxxxxxx 4 μx/xx ( = X₈).

X xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (1+1) xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5) xxxxxxxx xxxxxxx X4 (očekávaný xxxxx: 2 μx/xx), X2 (xxxxxxxxx xxxxx: 1 μx/xx) x X₁ (očekávaný obsah: 0,5 μx/xx).

6.2 Krmiva

Vzorek x hmotnosti 50 x xx přidá xx 100 xx xxxxx (4.6) x xx xxxx 30 xxxxx xx mechanicky xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx odstředěním (x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx). Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx odebere (xxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx pH xx xxxxxxxx hydroxidu xxxxxxx (4.4) xxxxxx xx 4,5. Xxxxx xxxxxx xx naředí fosfátovým xxxxxx (4,5), aby xx xxxxxx roztok X8 (viz. xxxxxxxxxxx xxxxxxx).

X xxxxxx xxxxxxx xx postupným xxxxxxxxxxxx (1+1) xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5) připraví roztoky X4 (xxxxxxxxx obsah: 1,0 μg/ml), X₂ (xxxxxxxxx xxxxx: 0,5 μx/xx) x X₁ (xxxxxxxxx xxxxx: 0,25 μx/xx).

7. XXXXXX XXXXX

7.1 Xxxxxxxxxx kultivačního xxxxx

Xxxxxxxx médium (4.1) xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx (3.2) xxx xxxxxxx 50–60 °X. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx (4.1) se xxxxxxx množství xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxx největší xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx při xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

7.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxx se xxxxxx xxxx difúzní xxxx na miskách xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (X₈, S₄, S₂, X₁) x testovacího xxxxxxx (X8, X4, X2, X1).Xx každou xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx standardu x extraktu. X xxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, aby xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx x průměru 10-13 xx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 30 xx. Test xx xxx být xxxxxxxx xxxxxxxxx na miskách, xxxxx jsou xxxxxxxx xx skleněné xxxxx, xx xxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx 20 mm x xxxxxxx 200 xx.

Xx misku xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxxxx xxxxx 7.1, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx silná přibližně 2 xx (60 xx na xxxxx x xxxxxxx 200 xx). Xxxx, xx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx otvory, xx xxxxxxx se pipetou xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 xx xx otvor, xxxxx xxxxxxx xxxxxx). Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxx xxxx se xxxxxxxxx 32 inhibičních xxx.

7.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx dobu 16 xx 18 xxxxx xxx 30 °X.

8. XXXXXXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xx změří x xxxxxxxxx xx 0,1 xx. Pro xxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxx hodnoty zanesou xx semilogaritmického xxxxxx, xxxxxxx xx zanáší xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, vypočítané xxxx. xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (XX) xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorce:

a) XX = 7X₈ + 4S₄ + X₂ – 2X₁ / 10

Xxxxxxxxxxxx bod xxx xxxxxxxx úroveň xxxxxxxxxxxx roztoku (XX) xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

XX = 7X₈ + 4S₄ + S₂ – 2X₁ / 10

Xxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx body xxx xxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxx (XX) xxxxxxxx, xxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx dosadí U₁, X₂, U₄ x X₈ xxxxxxx X₁, X₂, S₄ a X₈.

Xxxxxxxxxx hodnoty XX x XX se xxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx. Spojením xxxx xxxx xxxxxxx nejvhodnější xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx pro xxxxxxx XX x XX x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxxx rovnoběžné. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx (XX-XX) x (UH-UL) xxxxxxxxxxx více xxx x 10 % xx xxxxxxx hodnoty.

Pokud xxxxxx xxxxxx rovnoběžné, xx možné xxxxxxxx xxx X₁ a X₁ xxxx X₈ x S₈. Pak xx xxxxxxx XX, XX, XX x XX xxxx pomocí xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xx obdržely xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxxxx se provede xxx hodnoty XX x UH. U xxxxxx alternativních xxxxxx xx rovněž xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx, xxxxx xxxx stanoveny xx xxx xxxxxx, by xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx protokolu o xxxxxxx.

Xxxxx xx možno xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx A) pomocí xxxxxxx z xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxx 4 úrovně

(c) xxx X = (X₁+ U₂+ X₄+ X₈ – S₁ – S₂ – X₄ – X₈) × 0,602 / X₄+ U₈+ S₄+ X₈ – U₁ – U₂ –

Xxx 3 xxxxxx

(x) log X = (X₁+ X₂+ X₄ – X₁ – X₂ – X₄) × 0,401 / U₄+ X₄ – X₁ – X₁

xxxx

x´) log X = (X₂+ X₄+ X₈ – X₂ – S₄ – X₈) × 0,401 / X₈+ X₈ – X₂ – X₂

Xxxxxxxx aktivita = xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx х xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxx 0,5–2,0, zkouška xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx není xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx aktivitu x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, výsledek xx xxxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxx, a to xx mělo být xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxx není xxxxx přímky považovat xx rovnoběžné, zkouška xx xxxxxxxx. Xxxxx xx ani xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx neuspokojivý.

9. XXXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx x xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx:

- 2 xx/xx xxxxxxxxx hodnoty xxx obsahu avoparcinu 2 xx 10 xx/xx,

- 20 % xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx 10 xx 25 xx/xx,

- 5 xx/xx absolutní xxxxxxx xxx xxxxxx 25 až 50 xx/xx,

- 10 % xxxxx xxxxxxx výsledku xxx xxxxxx nad 50 xx/xx.

2. STANOVENÍ XXXXXXXXX XXXXXXX XXXXXX X XXXXXXXX KULTIVAČNÍM XXXXX

1. XXXX A XXXXXX POUŽITÍ

Metoda xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Spodní xxxxxxx stanovitelnosti xx 10 xx/xx (10 xxx) [3].

2. XXXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxxxxx 90 %-xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx podrobí vhodnému xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx sodného ve xxxxxx. Jeho antibiotická xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx monensinu xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Bacillus subtilis. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx úměrný logaritmu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

3. XXXXXXXXXXXXXXX: BACILLUS XXXXXXXX XXXX 6633 (XXXX 8054)

3.1 Uchování xxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxx médium (4.1) x šikmých xxxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxx xx xxxxxxxx při 30 °X. Xxxxxxx xx uchovává x xxxxxxxxxx xxx asi 4 °C x xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.

3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx [4]

Xxxxxxx xxxxxxx xx agaru (3.1) x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxx 2-3 ml xxxxxxxx xxxx. Touto xxxxxxxx xx xxxxxxxx Rouxova xxxxx, která xxxxxxxx 300 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1), x xx xxxx 3 xx 5 dní xx xxxxxxxx xxx 30 °X. Xx xxxxxxxx tvorby xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx přidá xx 15 xx xxxxxxxx (4.3) a xxxxxxxxxxxxx xx. Tato xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 5 měsíců xxx 4 °X.

4. XXXXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXX

4.3 Xxxxxxx 20 %-ní (v/v): 200 ml ethanolu xx xxxxx 800 xx xxxx.

4.4 Xxxxxxxx, xxxxxxx.

4.5 Xxxxxxxx 90 %-xx (v/v): 900xx xxxxxxxxx (4.4) xx xxxxx 100 xx xxxx.

4.6 Xxxxxxxx 50 %-xx (x/x): 500xx xxxxxxxxx (4.4) xx xxxxx 500 ml xxxx.

4.7 Xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx (alcoa X, 20 xxxx; activated xxxxxxx XX1: F. Xxxxxxxxx and Xx., xxxx xxxxxxxxxx).

4.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx: monensin xxxxx x xxxxx xxxxxxxx (xxxx xxxx získatelný x Xxxxxxxxxxxxx Laboratory xxx Boilogical Xxxxxxxxx, Xxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx, Xxxxxxxxx, Xxxxxx XX15 3XX, Xxxxx Británie).

5. XXXXXXXXX

5.1 Xxxxxxx rotační xxxxxxx x 250xx xxxxxxx baňkou.

5.2 Skleněná xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx: 25 xx, xxxxx: 400 xx, s otvorem x průměru 2 xx xx jednom xxxxx.

5.3 Xxxxxxxx trubička xxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx: 11 xx, xxxxx: xxxxxxxxx 300 xx, x xxxxxxx x xxxxxxx 2 xx xx jednom xxxxx.

6. STANDARDNÍ ROZTOKY

Přesně xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.8) se xxxxxxxx v xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxx, xxx vznikl výchozí xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 800 μx/xx. Při xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x xxx 4 xX, xxxxxxx tento xxxxxx použitelný 2 xxxxx.

X tohoto výchozího xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6) xxxxxxxxxxx roztoky:

7. XXXXXXXX EXTRAKTU X XXXXXXXXXXX XXXXXXX

7.1 Xxxxxxxx

7.1.1 Xxxxxxxxxx premixy

Vzorek o xxxxxxxxx 2,0 xx xx xxxxx x 100 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx (4.5), xxxxxxx minut xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxx se zředí 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6), xxx bylo xxxxxxxx očekávané xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X₈).

7.1.2 Xxxxxx, x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx 50 xxx

Xxxxxx x xxxxxxxxx 10 xx 20 x xx xxxxx k 100 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx (4.5), 15 xxxxx protřese a xxxxx xxxxx.

Xxxxxx xxxxx xx xxxxxx do xxxxxxxx trubičky (5.2) x xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx do xxxx 75–80 xx xxxxxx xxxxxxxx (4.7).

Extrakt se xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx se xxxxxxx. 30 ml filtrátu xx xxxxx 50 xx vody. Hned xxxx xx xxxxx 50 %-ním xxxxxxxxxx (4.6), aby xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx sodného 8 μx/xx ( = X₈).

7.1.3 Xxxxxx u xxxxx podíl monensinu xxxxxxxxxx 50 ppm (xxxxxx hranice 10 xxx)

Xxxxxx o hmotnosti 10 xx 20 x xx xxxxx x 100 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx (4.5), 15 minut xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xx nevyčistí.

Pro xxxxxx x podílem xxxxxxxxx 20 xxx xx xxxxxxx 40 xx xxxxxx; xxx 10 ppm se xxxxxxx 80 xx. Xxxxxx xx xxxxxx xx vakuu xxx xxxxxxx nepřesahující 40 °X v xxxxxxxx xxxxxxx (5.1). Zůstatek xx xxxxxxxx v 10 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.3) x xx xxxxxxx xxxxxxx xx trubička xxxxxx do výše 75–80 xx oxidem xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx hlinitého x xxxxxxx xx xxxxxxx. Kolona xx xxxxxxx 10 xx 90xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx x prvnímu xxxxxxxx.

Xxxxxx xx xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 40 °X v xxxxxxx xxxxxxx (5.1). Xxxxxxxx xx rozpustí x 10 xx bezvodého xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xx 20 xx. Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxxxx xxx minimálních xxxxxxxx 4000 xx/xxx. Xxxx xxxx xx xxxxx 50 %-ním xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X₈).

7.2. Xxxxxxxxx roztok

Z xxxxxxx U8 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (1 + 1) 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6) xxxxxxxx xxxxxxx X4 (xxxxxxxxx podíl: 4 μx/xx), X2 (xxxxxxxxx xxxxx: 2 μg/ml), X1 (xxxxxxxxx xxxxx: 1 μx/xx).

8. POSTUP XXXXX

8.1 Naočkování kultivačního xxxxx

Xxxxxxxx xxxxxx (4.2) xx naočkuje xxxxxxxx xxxx (3.2) při 50 xx 60 °X. Předběžnými xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx médiem (4.2) xx stanoví xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx vykáže xx xxxxx xxxxxxxx xxx ještě ostré xxxxxxxxx zóny x xxxxxxx použitými xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

8.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx po xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx stupních xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X₈, X₄, X₂, X₁) x xxxxxxxxxxx roztoku (X₈, X₄, X₂, X₁). Na xxxxxx xxxxx musí být xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx standardu x xxxxxxxx. X xxxx důvodu musí xxx miska xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxx vytvořit ve xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx osm xxxxxx x průměru 10-13 xx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 30 xx. Xxxx by xxx xxx prováděn xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxx vyrobeny xx xxxxxxxx desky, xx xxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxx o xxxxx 20 xx x xxxxxxx 200 xx.

Xx xxxxx se xxxxxx takové xxxxxxxx xxxxxxxxxx média (4.1) xxxxxxxxxxxx xxxxx 8.1, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 2 xx (60 xx xx xxxxx x xxxxxxx 200 xx). Xxxx xx xxxxxx xxxxxx, vyhloubí xx otvory, xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx přesné množství xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 xx xx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx). Každá xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx pro xxxxx xxxx xx xxxxxxxxx 32 xxxxxxxxxxx xxx.

8.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx 18 xxxxx xxx 35 xx 37 °X.

9. XXXXXXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xx xxxxx x přesností xx 0,1 xx. Xxx každou xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx inhibičních xxx. Xxx xxxxxxxxxx roztok xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx. níže uvedeným xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx bod pro xxxxxxxx úroveň xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XX) se xxxxxxx xxxxx následujícího xxxxxx:

x) XX = 7X₁ + 4X₂ + X₄ – 2X₈ / 10

Xxxxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx standardního roztoku (XX) se stanoví xxxxx následujícího xxxxxx:

x) XX = 7X₈ + 4S₄+ S₂ + 2X₁ / 10

Xxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx body xxx xxxxxxxx (UL) x nejvyšší xxxxxx (XX) extraktu, xxxxxxx xx do výše xxxxxxxxx xxxxxx dosadí X₁, X₂, X₄ x U₈ xxxxxxx X₁, X₂, X₄ x X₈.

Xxxxxxxxxx hodnoty XX a SH xx zanesou do xxxxxxxx xxxxxxxx. Spojením xxxx bodů vznikne xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx roztok. Totéž xx xxxxxxx xxx xxxxxxx XX x XX x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxx.

Xxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx být přímky xxxxxxxxxx. Xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, pokud xx xxxxxxx (XX-XX) a (XX-XX) neodchylují více xxx x 10 % xx střední xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx nejsou xxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx xxx U1 x X1 xxxx X8 x X8. Xxx xx xxxxxxx XX, XX, UL x XX určí xxxxxx následujících xxxxxx, xxx xx obdržely xxxxxxxxxxxx nejvhodnější xxxxxx:

x) XX = 5X₁ + 2X₂ – X₄ / 6 xxxx 5X₂ + 2X₄ – X₈ / 6

x ) XX = 5S₄ + 2X₂ − X₁ / 6 xxxx 5S₈ + 2X₄ − S₂ / 6

Xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx XX x UH. X těchto alternativních xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx, xxxxx xxxx stanoveny xx xxx xxxxxx, xx xxxx být xxxxxxxxxxx xx protokolu x xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxx xxxxxx považovat xx xxxxxxxxxx, vypočítá xx xxxxxxxxxx relativní xxxxxxxx (xxx X) xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxx 4 xxxxxx

x) xxx X = (U₁+ U₂+ X₄+ X₈ – X₁ – X₂ – X₄ – X₈) × 0,602 / U₄+ X₈+ X₄+ S₈ – X₁ – X₂ – S₁ – X₂

Xxx 3 úrovně

d) xxx A = (X₁+ X₂+ U₄ – X₁ – X₂ – X₄) × 0,401 / X₄+ S₄ – X₁ – S₁

nebo

d) xxx X = (X₂+ U₄+ X₈ – X₂ – X₄ – X₈) × 0,401 / X₈+ S₈ – X₂ – X₂

Xxxxxxxx xxxxxxxx = xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx х xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxx 0,5–2,0, xxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx příp. standardních xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx hodnot, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, a xx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx o xxxxxxx.

Xxxxx xxxx možné xxxxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxx, xxxx xx zopakuje. Xxxxx xx ani xxx xxxxxxxxx rovnoběžnosti, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx neuspokojivý.

10. XXXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxx mezi xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx při xxxxx x téže xxxxxxx xx xxxxxx překračovat:

- 20 % xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xx 25 xx/xx,

- 5 xx/xx xxxxxxxxx xxxxxxx při xxxxxx 25 xx 50 mg/kg,

- 10 % xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxx 50 xx/xx.

[1] Xxxxx být xxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx odpovídající sporovou xxxxxxxx.

[2] Může xxx xxxxxxx jakékoliv xxxxxxxx xxxxxxxxxx médium odpovídajícího xxxxxxx, xxxxx poskytne xxxxxx xxxxxxxx.

[3] 1 xx monensinu xxxxxxx xxxxxxxx 1000 jednotkám XX.

[4] Xxxxx být xxxxxxx xxxx metody, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx.

[5] Xxxx xxx použito xxxxxxxx xxxxxxxx kultivační xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.