Plné znění - 31981L0715

Xxxxxx xxxxxxxx Komise

ze xxx 31. xxxxxxxx 1981,

xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx kontrolu xxxxx

(81/715/XXX)

XXXXXX XXXXXXXXXX SPOLEČENSTVÍ,

s xxxxxxx xx Smlouvu x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx společenství,

s xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxx 70/373/XXX xx dne 20. xxxxxxxx 1970, xxxxxx se xxxxxx xxxxxx xxxxxx vzorků x xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx Xxxxx x xxxxxxxxxxx Xxxxx, x xxxxxxx na xxxxxx 2 xxxxxxx směrnice,

vzhledem x xxxx, že xxxxxxxx 70/373/XXX stanoví, xx úřední xxxxxxxx xxxxx za účelem xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx právních x správních xxxxxxxx xx xxxxxx a xxxxxxx xxxxx, se xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxx Společenství;

vzhledem x xxxx, xx xxxxxxxx Xxxxxx 71/250/XXX [2], 71/393/EHS [3], 72/199/XXX [4], 73/46/XXX [5], 74/203/EHS [6], 75/84/XXX [7], 76/372/XXX [8] a 78/633/XXX [9], naposledy pozměněné xxxxxxxx ze xxx 30. xxxxxxxx 1981, xxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; xx xxxx xx xx doby xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx metod;

vzhledem k xxxx, xx xxxxxxxx xxxx směrnice xxxx x souladu se xxxxxxxxxxx Stálého xxxxxx xxx xxxxxx,

XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:

Xxxxxx 1

Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx analýzy xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xx provádějí xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxxx 2

Členské xxxxx xxxxxx v účinnost xxxxxx x správní xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxx xxxxxxxx xx 1. xxxxxxxx 1981. Xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx Xxxxxx.

Xxxxxx 3

Tato směrnice xx určena xxxxxxxx xxxxxx.

X Xxxxxxx dne 31. xxxxxxxx 1981.

Za Xxxxxx

Xxxxxx Xxxxx

xxxxxxxx

[1] Xx. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.

[2] Xx. věst. X 155, 12.7.1971, x. 13.

[3] Xx. věst. X 279, 20.12.1971, x. 7.

[4] Xx. xxxx. X 123, 29.5.1972, x. 6.

[5] Xx. xxxx. X 83, 30.3.1973, x. 21.

[6] Úř. věst. X 108, 22.4.1974, x. 7.

[7] Xx. věst. X 32, 5.2.1975, x. 26.

[8] Xx. xxxx. X 102, 15.4.1976, x. 8.

[9] Xx. xxxx. X 206, 29.7.1978, x. 43.

XXXXXXX

1. STANOVENÍ XXXXXXXXXX XXXXXX X AGAROVÉM XXXXXXXXXXX XXXXX

1. XXXX X XXXXXX XXXXXXX

Xxxx xxxxxx umožňuje stanovení xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x medikovaných xxxxxxxxx. Xxxxxx hranice xxxxxxxxxxxxxxx xx 2 xx/xx (2 ppm). Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx stanovení působit xxxxxx.

2. PRINCIP

Ze xxxxx xxxxxx/xxxx/xxxxxxxx chlorovodíková xx xxxxxxxxxxx vzorek. Xxxxxxx xx odstředí. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx médiu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xx pro xxxxxx xxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx logaritmu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

3. XXXXXXXXXXXXXXX: XXXXXXXX XXXXXXXX XXXX 6633 (XXXX 8054)

3.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1) v xxxxxxx zkumavkách xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxx xx xxx 30 °X xxxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxx 4 °X x xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.

3.2. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx [1]

Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx (3.1) xx omyje 2-3 xx xxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx Rouxova xxxxx, xxxxx xxxxxxxx 300 xx kultivačního xxxxx (4.1), x po xxxx 3 až 5 xxx xx xxxxxxxx xxx 30 °X. Xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx 15 xx xxxxxxxx (4.2) x xxxxxxxxxxxxx se. Xxxx suspenze xxxx xxx uchována xxxxxxxxx 5 xxxxxx xxx 4 °X.

4. XXXXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXX

4.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx [2]

4.2 Xxxxxxx 20 %-ní (x/x): 200 xx xxxxxxxx xx zředí 800 xx xxxx.

4.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, x: 1,18–1,19.

4.4 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, 2X.

4.5 Xxxxxxxxx xxxx 0,1 X:

xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, XX₂ XX₄: 13,6 x

xxxx: 1000 xx

xX xxxxxxx xx 4,5.

4.6 Xxxx xxxxxxx/xxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (4.3): 65/32,5/2,5 (x/x/x)

4.7 Xxxxxxxxxx substance: xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx

5. XXXXXXXXXX XXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxx množství xxx 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.7) xx xxxxxxxx xx fosfátovém xxxxx (4.5) x xxxxx pufrem naředí, xxx vznikl základní xxxxxx obsahující 100 μx avoparcinu v 1 xx. Xxx xxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxx x xxx 4 °X, zůstane xxxxx roztok použitelný 7 xxx.

5.1 Xxx xxxxxxxxxx premixy

Z xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx rozřeďováním xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

5.2 Pro xxxxxx

X výchozího xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

6. XXXXXXXX EXTRAKTU X XXXXXXXXXXX ROZTOKU

6.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxx xxxxxxxx množství 10 xx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx 10-100 xx xxxxxxxxxx, se x xxxxxxx xxxxx x obsahu 100 xx xxxxxxxxxx protřepe x 60 xx xxxxx (4.6) xx xxxx 15 xxxxx. Xxxxxxx xX xx xxxxxxxxxxx x xxxxx xx třeba, xxxxxx xx xxxxxxxxx chlorovodíkovou (4.3) na hodnotu 2. Xxxxx (4.6) xx doplní xxxxx x homogenizuje xx. Xxx xx xxxxx xxxxxxxx přefiltruje xxxx xxxxxx xxxxxxxxx papír (xxxx. Xxxxxxx č. 1) a prvních 5 xx filtrátu xx sleje. Odebere xx xxxxxxx xxxx x xX xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) xxxxxx na xxxxxxx 4,5. Xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx pufrem (4.5), xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx obsahu avoparcinu 4 μg/ml ( = X₈).

X tohoto xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (1+1) xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5) připraví xxxxxxx X4 (očekávaný xxxxx: 2 μg/ml), X2 (xxxxxxxxx obsah: 1 μg/ml) x X₁ (očekávaný obsah: 0,5 μx/xx).

6.2 Xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxxxx 50 x xx xxxxx xx 100 xx xxxxx (4.6) x xx dobu 30 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx (v xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx). Poměrná xxxx xxxxxxx extraktu xx odebere (xxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxx) a xxxxxxx pH se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) xxxxxx xx 4,5. Xxxxx roztok xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4,5), aby xx xxxxxx roztok X8 (xxx. následující xxxxxxx).

X xxxxxx roztoku xx xxxxxxxxx rozřeďováním (1+1) xxxxxxxxxx pufrem (4.5) xxxxxxxx xxxxxxx X4 (xxxxxxxxx xxxxx: 1,0 μx/xx), U₂ (xxxxxxxxx xxxxx: 0,5 μx/xx) x U₁ (xxxxxxxxx xxxxx: 0,25 μx/xx).

7. POSTUP XXXXX

7.1 Naočkování xxxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxx médium (4.1) xx xxxxxxxx suspenzí xxxx (3.2) při xxxxxxx 50–60 °X. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx zkušebním xxxxxx (4.1) xx xxxxxxx xxxxxxxx inokula, xxxxx xxxxxx co xxxxx xxxxxxxx ale xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx při různých xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx avoparcinu.

7.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxx se xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X₈, X₄, S₂, X₁) a testovacího xxxxxxx (X8, X4, X2, X1).Xx každou xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx koncentrace xxxxxxxxx x extraktu. Z xxxx xxxxxx musí xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, aby xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx prostředí xxxxxxx xxx xxxxxx x průměru 10-13 xx x rozestupem xxxxxx minimálně 30 xx. Xxxx xx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx miskách, xxxxx jsou xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxx o xxxxx 20 xx x xxxxxxx 200 xx.

Xx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx množství xxxxxxxxxx média (4.1) xxxxxxxxxxxx xxxxx 7.1, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 2 xx (60 xx xx xxxxx x xxxxxxx 200 xx). Xxxx, xx xxxxxx ztuhne, vyhloubí xx xxxxxx, do xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx přesné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 ml xx otvor, xxxxx xxxxxxx xxxxxx). Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxx každý xxxx se xxxxxxxxx 32 xxxxxxxxxxx zón.

7.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx dobu 16 xx 18 xxxxx xxx 30 °X.

8. XXXXXXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xx xxxxx x xxxxxxxxx xx 0,1 mm. Xxx xxxxxx koncentraci xx xxxxxxx hodnoty xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxx papíru, xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx stejně xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, vypočítané např. xxxx xxxxxxxx způsobem.

Nejvhodnější xxx pro xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XX) xx xxxxxxx xxxxx následujícího xxxxxx:

x) XX = 7X₈ + 4S₄ + X₂ – 2S₁ / 10

Nejvhodnější xxx xxx nejvyšší xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XX) xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorce:

SH = 7X₈ + 4X₄ + X₂ – 2X₁ / 10

Xxxxxx xxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx (UL) a xxxxxxxx xxxxxx (UH) xxxxxxxx, xxxxxxx se xx výše xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx U₁, X₂, X₄ a X₈ xxxxxxx X₁, X₂, X₄ x X₈.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx XX x SH xx xxxxxxx xx stejného xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx nejvhodnější xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx. Totéž se xxxxxxx xxx hodnoty XX x XX x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, měly xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx (XX-XX) x (XX-XX) xxxxxxxxxxx více xxx x 10 % xx střední xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx nejsou rovnoběžné, xx xxxxx vyloučit xxx X₁ a X₁ nebo X₈ x X₈. Xxx xx xxxxxxx XX, XX, UL x XX xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxxx alternativní xxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx XX x XX. U xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Výsledky, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, xx xxxx xxx zaznamenány xx xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxx, vypočítá xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx aktivity (xxx A) pomocí xxxxxxx x následujících xxxxxx:

Xxx 4 xxxxxx

(x) xxx X = (X₁+ X₂+ X₄+ X₈ – S₁ – S₂ – X₄ – S₈) × 0,602 / X₄+ U₈+ S₄+ X₈ – X₁ – X₂ –

Pro 3 úrovně

(d) xxx X = (U₁+ X₂+ X₄ – X₁ – S₂ – X₄) × 0,401 / U₄+ X₄ – X₁ – X₁

xxxx

x´) xxx X = (U₂+ X₄+ X₈ – X₂ – S₄ – X₈) × 0,401 / X₈+ X₈ – U₂ – X₂

Xxxxxxxx xxxxxxxx = xxxxxxxxxxxxx aktivita х xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx aktivita xxxx xxxx xxxxxx hodnot 0,5–2,0, zkouška se xxxxxxxx při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxx xxxx. standardních xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx aktivitu x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx považovat za xxxxxxxxx, x to xx mělo být xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, zkouška xx xxxxxxxx. Pokud xx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx neuspokojivý.

9. XXXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx jedné x xxxx zkoušce xx xxxxxx xxxxxxxxxxx:

- 2 xx/xx absolutní xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx 2 až 10 xx/xx,

- 20 % xxxxx hodnoty xxxxxxxx xxx xxxxxx 10 xx 25 mg/kg,

- 5 xx/xx absolutní xxxxxxx při obsahu 25 xx 50 xx/xx,

- 10 % xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxx 50 xx/xx.

2. STANOVENÍ XXXXXXXXX XXXXXXX XXXXXX X XXXXXXXX KULTIVAČNÍM XXXXX

1. XXXX X XXXXXX XXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx premixech. Spodní xxxxxxx stanovitelnosti xx 10 xx/xx (10 xxx) [3].

2. XXXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxxxxx 90 %-xxx xxxxxxxxxx. Extrakt xx podrobí xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx obsahu xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxx antibiotická xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx v agarovém xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx subtilis. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx inhibičními zónami xxxxxxxxxxxxxx. Průměr těchto xxxxxxxxxxx xxx xx x xxxxxxx použitých xxxxxxxxxxx považován xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx antibiotika. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

3. XXXXXXXXXXXXXXX: BACILLUS XXXXXXXX XXXX 6633 (XXXX 8054)

3.1 Uchování xxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1) v xxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxx xx xxxxxxxx při 30 °X. Xxxxxxx xx uchovává x xxxxxxxxxx xxx xxx 4 °X x xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.

3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx [4]

Xxxxxxx xxxxxxx na xxxxx (3.1) x šikmé xxxxxxxx se omyje 2-3 xx xxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxxxx obsahuje 300 ml xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1), a xx xxxx 3 xx 5 dní xx inkubuje při 30 °X. Po xxxxxxxx xxxxxx spór xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx 15 xx ethanolu (4.3) a xxxxxxxxxxxxx xx. Xxxx suspenze xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 5 měsíců xxx 4 °X.

4. XXXXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXX

4.3 Xxxxxxx 20 %-ní (x/x): 200 xx ethanolu xx zředí 800 xx xxxx.

4.4 Methanol, xxxxxxx.

4.5 Xxxxxxxx 90 %-xx (x/x): 900xx xxxxxxxxx (4.4) xx xxxxx 100 xx xxxx.

4.6 Xxxxxxxx 50 %-xx (v/v): 500xx xxxxxxxxx (4.4) xx xxxxx 500 xx xxxx.

4.7 Xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx (xxxxx X, 20 xxxx; xxxxxxxxx xxxxxxx XX1: X. Xxxxxxxxx xxx Xx., xxxx xxxxxxxxxx).

4.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxxx sodný x známé xxxxxxxx (xxxx jiné získatelný x Xxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxx Boilogical Xxxxxxxxx, Xxxxxxx Veterinary Laboratory, Xxxxxxxxx, Xxxxxx XX15 3XX, Xxxxx Xxxxxxxx).

5. XXXXXXXXX

5.1 Vakuová xxxxxxx xxxxxxx s 250ml xxxxxxx xxxxxx.

5.2 Skleněná xxxxxxxx xxx chromatografii, xxxxxxx xxxxxx: 25 xx, délka: 400 xx, s xxxxxxx x xxxxxxx 2 xx xx xxxxxx xxxxx.

5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx: 11 xx, xxxxx: xxxxxxxxx 300 xx, x xxxxxxx x průměru 2 xx xx jednom xxxxx.

6. STANDARDNÍ ROZTOKY

Přesně xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 10 xx standardní xxxxxxxxx (4.8) xx xxxxxxxx v xxxxxxxxx (4.4) a xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx x obsahem xxxxxxxxx sodného 800 μx/xx. Xxx uchování x xxxxxxxx xxxxx x xxx 4 xX, xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 2 xxxxx.

X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx připraví xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6) xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

7. XXXXXXXX EXTRAKTU A XXXXXXXXXXX XXXXXXX

7.1 Xxxxxxxx

7.1.1 Xxxxxxxxxx premixy

Vzorek x xxxxxxxxx 2,0 xx xx xxxxx k 100 ml 90 %-xxxx xxxxxxxxx (4.5), xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x odstředí. Xxxxxx xx xxxxx 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6), xxx xxxx xxxxxxxx očekávané xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X₈).

7.1.2 Xxxxxx, u xxxxx podíl xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx 50 xxx

Xxxxxx o xxxxxxxxx 10 xx 20 g se xxxxx x 100 xx 90 %-ního xxxxxxxxx (4.5), 15 xxxxx protřese x xxxxx xxxxx.

Xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.2) x xx lehkého xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxx xx xxxx 75–80 xx xxxxxx xxxxxxxx (4.7).

Extrakt xx xxxxxxx na sloupec xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xx xxxxxxx. 30 ml filtrátu xx zředí 50 xx xxxx. Xxxx xxxx xx xxxxx 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6), aby xxxx xxxxxxxx očekávané xxxxxxxxxxx xxxxxxxx sodného 8 μx/xx ( = X₈).

7.1.3 Xxxxxx u xxxxx xxxxx monensinu xxxxxxxxxx 50 xxx (xxxxxx hranice 10 xxx)

Xxxxxx x hmotnosti 10 až 20 x se xxxxx x 100 xx 90 %-ního methanolu (4.5), 15 xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xx nevyčistí.

Pro xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx 20 xxx xx xxxxxxx 40 xx zbytku; xxx 10 ppm se xxxxxxx 80 ml. Xxxxxx xx odpaří xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 40 °X v xxxxxxxx xxxxxxx (5.1). Xxxxxxxx xx rozpustí x 10 ml 90 %-xxxx methanolu.

Vatová xxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx trubičky (5.3) x xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx do xxxx 75–80 xx xxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx roztok zbytku xx xxxxxxx na xxxxxxx oxidu xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx. Kolona xx xxxxxxx 10 ml 90xxxxxxxxxxx methanolu x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx xx odpaří xx xxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 40 °X x rotační xxxxxxx (5.1). Xxxxxxxx xx rozpustí x 10 xx bezvodého xxxxxxxxx (4.4) a xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xx 20 xx. Xxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxxxx xxx minimálních xxxxxxxx 4000 xx/xxx. Xxxx xxxx xx xxxxx 50 %-xxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx očekávané xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X₈).

7.2. Testovací xxxxxx

X xxxxxxx X8 se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (1 + 1) 50 %-xxx methanolem (4.6) xxxxxxxx xxxxxxx X4 (xxxxxxxxx xxxxx: 4 μx/xx), U2 (očekávaný xxxxx: 2 μx/xx), X1 (očekávaný xxxxx: 1 μx/xx).

8. XXXXXX XXXXX

8.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxx médium (4.2) xx naočkuje xxxxxxxx xxxx (3.2) při 50 xx 60 °X. Xxxxxxxxxxx pokusy xx miskách se xxxxxxxxx xxxxxx (4.2) xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx možná xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx zóny s xxxxxxx použitými koncentracemi xxxxxxxxx sodného.

8.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxx se nasadí xxxx difúzní test xx miskách po xxxxxxx koncentračních xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (S₈, X₄, X₂, S₁) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (X₈, X₄, U₂, X₁). Xx každou xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx. Z xxxx důvodu musí xxx miska takové xxxxxxx, xxx xxxx xxxxx vytvořit ve xxxxxx kultivačního xxxxx xxxxxxx osm xxxxxx x xxxxxxx 10-13 xx s xxxxxxxxxx xxxxxx minimálně 30 xx. Test by xxx být prováděn xxxxxxxxx na miskách, xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx o xxxxx 20 mm x průměru 200 xx.

Xx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxxxx xxxxx 8.1, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 2 xx (60 xx na xxxxx x xxxxxxx 200 xx). Poté xx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx, do xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 xx xx xxxxx, podle xxxxxxx xxxxxx). Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxx každý xxxx xx xxxxxxxxx 32 xxxxxxxxxxx xxx.

8.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx přibližně po xxxx 18 hodin xxx 35 až 37 °X.

9. XXXXXXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxxxxx zón se xxxxx x xxxxxxxxx xx 0,1 mm. Xxx xxxxxx koncentraci xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx semilogaritmického xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx vztahu k xxxxxxx xxxxxxxxxxx zón. Xxx standardní xxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xx zakreslí xxxxxxxxxxxxxx přímky, xxxxxxxxxx xxxx. níže xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx xxx pro xxxxxxxx úroveň xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XX) xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) XX = 7X₁ + 4X₂ + X₄ – 2X₈ / 10

Xxxxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XX) se xxxxxxx xxxxx následujícího xxxxxx:

x) XX = 7X₈ + 4X₄+ X₂ + 2X₁ / 10

Xxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx (XX) x nejvyšší xxxxxx (XX) xxxxxxxx, xxxxxxx xx xx výše xxxxxxxxx xxxxxx dosadí X₁, U₂, X₄ x X₈ xxxxxxx X₁, X₂, X₄ x X₈.

Xxxxxxxxxx hodnoty XX x XX xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx vznikne xxxxxxxxxxxx přímka xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx provede xxx xxxxxxx UL a XX x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxx.

Xxxxx se nevyskytují xxxxxx faktory, xxxx xx xxx přímky xxxxxxxxxx. Přímky xx xxxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx (XX-XX) a (XX-XX) xxxxxxxxxxx xxxx xxx x 10 % xx xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxx X1 x X1 xxxx X8 x X8. Xxx se xxxxxxx XX, SH, XX x XX určí xxxxxx následujících xxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx přímky:

a) XX = 5X₁ + 2X₂ – X₄ / 6 xxxx 5S₂ + 2X₄ – S₈ / 6

x ) XX = 5X₄ + 2X₂ − X₁ / 6 xxxx 5X₈ + 2X₄ − X₂ / 6

Totéž se xxxxxxx pro hodnoty XX x XX. X těchto xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx rovnoběžnost. Xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxx úrovní, xx xxxx být xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x analýze.

Pokud xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx A) xxxxxx jednoho x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxx 4 xxxxxx

x) xxx A = (X₁+ X₂+ X₄+ U₈ – X₁ – S₂ – X₄ – X₈) × 0,602 / X₄+ X₈+ X₄+ S₈ – X₁ – U₂ – X₁ – X₂

Xxx 3 xxxxxx

x) xxx X = (X₁+ X₂+ U₄ – S₁ – X₂ – X₄) × 0,401 / X₄+ X₄ – X₁ – X₁

xxxx

x) xxx X = (X₂+ X₄+ X₈ – X₂ – X₄ – X₈) × 0,401 / X₈+ X₈ – X₂ – X₂

Xxxxxxxx xxxxxxxx = xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx х relativní xxxxxxxx.

Xxxxx relativní xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxx 0,5–2,0, test xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Pokud xxxx xxxxx dosáhnout xxxxxxxxx xxxxxxxx v rozsahu xxxxxxxxxxxx xxxxxx, výsledek xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, a xx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx do xxxxxxxxx x analýze.

Pokud xxxx možné xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxx se zopakuje. Xxxxx xx ani xxx nedosáhne xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx výsledek xxxxxxxxx xx neuspokojivý.

10. XXXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx při jedné x xxxx zkoušce xx xxxxxx překračovat:

- 20 % vyšší xxxxxxx výsledku xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xx 25 xx/xx,

- 5 mg/kg xxxxxxxxx hodnoty xxx xxxxxx 25 až 50 mg/kg,

- 10 % vyšší xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxx 50 xx/xx.

[1] Xxxxx být použity xxxx metody, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

[2] Xxxx xxx xxxxxxx jakékoliv xxxxxxxx xxxxxxxxxx médium odpovídajícího xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx výsledky.

[3] 1 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 1000 xxxxxxxxx XX.

[4] Xxxxx xxx xxxxxxx jiné xxxxxx, xxxxx xxxxxxx odpovídající xxxxxxxx spór.

[5] Xxxx xxx použito jakékoli xxxxxxxx kultivační médium xxxxxxxxxxxxxx složení, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.