Plné znění - 31981L0715

Xxxxxx směrnice Komise

ze xxx 31. července 1981,

xxxxxx xx stanoví xxxxxxxxxx metody Společenství xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx

(81/715/XXX)

XXXXXX EVROPSKÝCH XXXXXXXXXXXX,

x xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx společenství,

s xxxxxxx xx směrnici Xxxx 70/373/XXX ze dne 20. července 1970, xxxxxx xx zavádí xxxxxx xxxxxx vzorků x analýzy Společenství xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxx x xxxxxxxxxxx Xxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxx 2 uvedené směrnice,

vzhledem x tomu, xx xxxxxxxx 70/373/EHS stanoví, xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, zda xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx předpisů xx xxxxxx a xxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxx Společenství xxx xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx;

xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx Komise 71/250/EHS [2], 71/393/XXX [3], 72/199/XXX [4], 73/46/XXX [5], 74/203/EHS [6], 75/84/XXX [7], 76/372/XXX [8] x 78/633/XXX [9], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxx 30. xxxxxxxx 1981, xxx xxxx analytických xxxxx Společenství stanovily; xx xxxx xx xx xxxx provedených xxxxx xxxx umožňuje xxxxxxxx devátý soubor xxxxxxxxxxxx metod;

vzhledem x xxxx, xx opatření xxxx xxxxxxxx xxxx x souladu xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx výboru xxx xxxxxx,

XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:

Článek 1

Členské xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxx xxxxxx kontrolu xxxxx na obsah xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx se provádějí xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxxx 2

Členské xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx nezbytné xxx xxxxxxxx souladu s xxxxx směrnicí xx 1. prosince 1981. Xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx Xxxxxx.

Xxxxxx 3

Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx členským xxxxxx.

X Xxxxxxx dne 31. xxxxxxxx 1981.

Za Xxxxxx

Xxxxxx Thorn

předseda

[1] Úř. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.

[2] Xx. xxxx. X 155, 12.7.1971, x. 13.

[3] Xx. xxxx. X 279, 20.12.1971, x. 7.

[4] Úř. věst. X 123, 29.5.1972, x. 6.

[5] Úř. xxxx. X 83, 30.3.1973, x. 21.

[6] Xx. xxxx. X 108, 22.4.1974, x. 7.

[7] Úř. xxxx. X 32, 5.2.1975, x. 26.

[8] Xx. xxxx. X 102, 15.4.1976, x. 8.

[9] Xx. xxxx. X 206, 29.7.1978, x. 43.

PŘÍLOHA

1. XXXXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXX X AGAROVÉM XXXXXXXXXXX XXXXX

1. XXXX X XXXXXX XXXXXXX

Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 2 mg/kg (2 xxx). Přítomnost xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx stanovení působit xxxxxx.

2. XXXXXXX

Xx xxxxx xxxxxx/xxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Extrakt xx odstředí. Jeho xxxxxxxxxxxx aktivita xx xxxxxxx měřením xxxxxx xxxxxxxxxx v agarovém xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Bacillus xxxxxxxx. Xxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxxx inhibičními xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx je xxx xxxxxx použitých xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxxxx.

3. XXXXXXXXXXXXXXX: XXXXXXXX XXXXXXXX ATCC 6633 (XXXX 8054)

3.1 Uchovávání xxxxxxxx kultury

Agarové xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1) x xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx mikroorganismem Xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxx xxx se při 30 °C xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxx 4 °X x xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.

3.2. Xxxxxxxx xxxxxxxx spór [1]

Xxxxxxx kultura x xxxxxxxx médiu (3.1) xx xxxxx 2-3 xx xxxxxxxx vody. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx 300 xx kultivačního xxxxx (4.1), a xx xxxx 3 xx 5 xxx xx xxxxxxxx xxx 30 °X. Po xxxxxxxx xxxxxx spór pod xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx 15 xx ethanolu (4.2) x xxxxxxxxxxxxx se. Xxxx xxxxxxxx může xxx uchována minimálně 5 xxxxxx xxx 4 °C.

4. KULTIVAČNÍ XXXXXX X ČINIDLA

4.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx [2]

4.2 Xxxxxxx 20 %-xx (x/x): 200 ml xxxxxxxx se xxxxx 800 ml xxxx.

4.3 Xxxxxxxx chlorovodíková, d: 1,18–1,19.

4.4 Roztok xxxxxxxxx xxxxxxx, 2X.

4.5 Xxxxxxxxx xxxx 0,1 X:

xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, KH₂ XX₄: 13,6 x

xxxx: 1000 xx

xX xxxxxxx na 4,5.

4.6 Xxxx xxxxxxx/xxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (4.3): 65/32,5/2,5 (x/x/x)

4.7 Standardní xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx o xxxxx xxxxxxxx

5. STANDARDNÍ XXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx asi 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.7) se xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx (4.5) x xxxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx základní xxxxxx obsahující 100 μx xxxxxxxxxx x 1 xx. Xxx xxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxx a při 4 °C, xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 7 xxx.

5.1 Xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx

X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

5.2 Xxx xxxxxx

X výchozího xxxxxxx xx připraví xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

6. XXXXXXXX XXXXXXXX X XXXXXXXXXXX XXXXXXX

6.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxx xxxxxxxx množství 10 xx xxxxxx, xxxxx obsahuje 10-100 xx xxxxxxxxxx, xx x odměrné xxxxx x obsahu 100 xx mechanicky xxxxxxxx x 60 ml xxxxx (4.6) xx xxxx 15 minut. Xxxxxxx xX xx xxxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (4.3) xx xxxxxxx 2. Směsí (4.6) xx doplní objem x homogenizuje xx. Xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx. Xxxxxxx x. 1) x xxxxxxx 5 xx filtrátu xx xxxxx. Odebere xx poměrná xxxx x xX xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) xxxxxx xx xxxxxxx 4,5. Tento xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx pufrem (4.5), xxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxx obsahu xxxxxxxxxx 4 μx/xx ( = X₈).

X xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (1+1) xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5) připraví xxxxxxx X4 (očekávaný xxxxx: 2 μx/xx), X2 (xxxxxxxxx xxxxx: 1 μx/xx) x X₁ (xxxxxxxxx xxxxx: 0,5 μg/ml).

6.2 Xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxxxx 50 x se xxxxx xx 100 xx xxxxx (4.6) a xx dobu 30 xxxxx xx mechanicky xxxxxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxx odstředěním (x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx). Poměrná xxxx xxxxxxx extraktu xx xxxxxxx (viz. xxxxxxxxxxx xxxxxxx) a xxxxxxx pH se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) upraví na 4,5. Xxxxx roztok xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4,5), xxx xx xxxxxx xxxxxx X8 (xxx. následující xxxxxxx).

X xxxxxx xxxxxxx xx postupným xxxxxxxxxxxx (1+1) xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5) xxxxxxxx roztoky X4 (očekávaný xxxxx: 1,0 μg/ml), X₂ (xxxxxxxxx xxxxx: 0,5 μx/xx) x X₁ (xxxxxxxxx xxxxx: 0,25 μx/xx).

7. XXXXXX XXXXX

7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxx médium (4.1) xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx (3.2) při xxxxxxx 50–60 °X. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx zkušebním xxxxxx (4.1) se xxxxxxx množství xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx ostré inhibiční xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

7.2 Xxxxxxxx misek

Test xx xxxxxx jako difúzní xxxx na xxxxxxx xx čtyřech xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx standardního xxxxxxx (X₈, X₄, X₂, X₁) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (X8, U4, X2, U1).Na každou xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx všechny xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx. X xxxx xxxxxx xxxx xxx miska xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxx vytvořit ve xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxx 10-13 xx s xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 30 xx. Xxxx xx xxx být xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxx hliníkové xxxx xxxxxxxx xxxxxxx o xxxxx 20 xx x xxxxxxx 200 xx.

Xx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx množství xxxxxxxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxxxx podle 7.1, xxx se xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 2 xx (60 xx xx misku x xxxxxxx 200 xx). Poté, xx xxxxxx ztuhne, xxxxxxxx xx otvory, xx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 xx xx xxxxx, podle xxxxxxx otvoru). Každá xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxx xxxx xx vyhodnotí 32 xxxxxxxxxxx xxx.

7.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx dobu 16 xx 18 xxxxx xxx 30 °X.

8. XXXXXXXXXXX

Xxxxxx inhibičních xxx xx změří x přesností xx 0,1 xx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx hodnoty xxxxxxx xx semilogaritmického xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx. Pro xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx pro xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, vypočítané např. xxxx xxxxxxxx způsobem.

Nejvhodnější xxx xxx nejnižší xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XX) xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) XX = 7X₈ + 4X₄ + X₂ – 2X₁ / 10

Nejvhodnější xxx xxx nejvyšší xxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (XX) xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

XX = 7X₈ + 4X₄ + X₂ – 2X₁ / 10

Xxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx body pro xxxxxxxx (UL) a xxxxxxxx xxxxxx (XX) xxxxxxxx, xxxxxxx xx xx xxxx uvedených xxxxxx dosadí X₁, X₂, X₄ x X₈ xxxxxxx S₁, X₂, S₄ x X₈.

Xxxxxxxxxx hodnoty SL x XX se xxxxxxx xx stejného xxxxxxxx. Xxxxxxxx obou xxxx vznikne xxxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx pro xxxxxxx XX x XX x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxxxxx rušivé xxxxxxx, xxxx xx xxx přímky xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx za rovnoběžné, xxxxx xx hodnoty (XX-XX) x (UH-UL) xxxxxxxxxxx více xxx x 10 % xx střední xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx vyloučit xxx U₁ x X₁ xxxx U₈ x X₈. Pak xx hodnoty SL, XX, XX x XX xxxx pomocí xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxxxx se provede xxx hodnoty UL x UH. X xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx zkontroluje xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx, xxxxx xxxx stanoveny xx xxx xxxxxx, xx xxxx být xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx A) xxxxxx xxxxxxx x následujících xxxxxx:

Xxx 4 xxxxxx

(x) xxx X = (X₁+ X₂+ X₄+ X₈ – X₁ – S₂ – X₄ – S₈) × 0,602 / X₄+ U₈+ S₄+ X₈ – X₁ – U₂ –

Xxx 3 xxxxxx

(x) log X = (X₁+ X₂+ X₄ – X₁ – X₂ – X₄) × 0,401 / U₄+ X₄ – U₁ – X₁

xxxx

x´) log X = (X₂+ X₄+ X₈ – X₂ – X₄ – X₈) × 0,401 / X₈+ X₈ – U₂ – X₂

Xxxxxxxx xxxxxxxx = xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx х xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxx 0,5–2,0, xxxxxxx se xxxxxxxx xxx odpovídajícím xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx není možné xxxxxx xxxxxxxxx aktivitu x rozsahu xxxxxxxxxxxx xxxxxx, výsledek xx xxxxx považovat za xxxxxxxxx, x xx xx mělo xxx xxxxxxxxxxx do protokolu x xxxxxxx.

Xxxxx není xxxxx přímky xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx považovat xx xxxxxxxxxxxx.

9. XXXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxx xxxx výsledky xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx jedné a xxxx zkoušce by xxxxxx překračovat:

- 2 xx/xx absolutní xxxxxxx xxx xxxxxx avoparcinu 2 xx 10 xx/xx,

- 20 % xxxxx xxxxxxx výsledku xxx xxxxxx 10 xx 25 mg/kg,

- 5 xx/xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx 25 až 50 xx/xx,

- 10 % xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx obsahu xxx 50 xx/xx.

2. XXXXXXXXX XXXXXXXXX SODNÉHO XXXXXX X AGAROVÉM KULTIVAČNÍM XXXXX

1. XXXX X XXXXXX XXXXXXX

Xxxxxx umožňuje xxxxxxxxx monensinu xxxxxxx x xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx stanovitelnosti xx 10 xx/xx (10 xxx) [3].

2. XXXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxxxxx 90 %-xxx methanolem. Extrakt xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se stanoví xxxxxxx difúze monensinu xxxxxxx x agarovém xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx těchto xxxxxxxxxxx xxx xx x xxxxxxx použitých xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

3. XXXXXXXXXXXXXXX: XXXXXXXX XXXXXXXX XXXX 6633 (XXXX 8054)

3.1 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1) x šikmých xxxxxxxxxx se naočkuje xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxx xx xxxxxxxx xxx 30 °C. Xxxxxxx xx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx při asi 4 °X x xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.

3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx [4]

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx (3.1) x šikmé xxxxxxxx xx xxxxx 2-3 xx sterilní xxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx 300 ml xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1), x xx xxxx 3 xx 5 xxx xx xxxxxxxx při 30 °X. Xx xxxxxxxx xxxxxx spór xxx mikroskopem se xxxxxxx xxxxx do 15 ml xxxxxxxx (4.3) x zhomogenizuje xx. Xxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxxxxx xxx 4 °X.

4. XXXXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXX

4.3 Ethanol 20 %-xx (x/x): 200 xx xxxxxxxx xx xxxxx 800 xx xxxx.

4.4 Methanol, xxxxxxx.

4.5 Methanol 90 %-xx (v/v): 900xx xxxxxxxxx (4.4) se xxxxx 100 xx xxxx.

4.6 Xxxxxxxx 50 %-xx (x/x): 500xx xxxxxxxxx (4.4) xx xxxxx 500 ml xxxx.

4.7 Oxid hlinitý, xxxxxxxxxxx (xxxxx X, 20 xxxx; activated xxxxxxx XX1: F. Xxxxxxxxx xxx Co., xxxx xxxxxxxxxx).

4.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxxx xxxxx x známé aktivitě (xxxx xxxx xxxxxxxxxx x Xxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxx Boilogical Xxxxxxxxx, Xxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx, Xxxxxxxxx, Xxxxxx XX15 3XX, Xxxxx Xxxxxxxx).

5. XXXXXXXXX

5.1 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx s 250ml xxxxxxx xxxxxx.

5.2 Skleněná xxxxxxxx xxx chromatografii, xxxxxxx xxxxxx: 25 xx, xxxxx: 400 xx, x otvorem x průměru 2 xx xx xxxxxx xxxxx.

5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx chromatografii, xxxxxxx xxxxxx: 11 xx, xxxxx: xxxxxxxxx 300 xx, x otvorem x xxxxxxx 2 xx xx xxxxxx xxxxx.

6. XXXXXXXXXX ROZTOKY

Přesně xxxxxxxx množství xxx 10 mg xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.8) xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxx, xxx xxxxxx výchozí xxxxxx s obsahem xxxxxxxxx xxxxxxx 800 μx/xx. Při xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x xxx 4 xX, zůstane tento xxxxxx xxxxxxxxxx 2 xxxxx.

X tohoto výchozího xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6) xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

7. XXXXXXXX XXXXXXXX X XXXXXXXXXXX XXXXXXX

7.1 Xxxxxxxx

7.1.1 Xxxxxxxxxx premixy

Vzorek o xxxxxxxxx 2,0 mg xx přidá k 100 ml 90 %-xxxx xxxxxxxxx (4.5), xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxx se xxxxx 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6), xxx xxxx xxxxxxxx očekávané xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X₈).

7.1.2 Krmiva, u xxxxx xxxxx monensinu xxxx nižší xxx 50 xxx

Xxxxxx x xxxxxxxxx 10 xx 20 x se xxxxx x 100 xx 90 %-ního xxxxxxxxx (4.5), 15 xxxxx xxxxxxxx a xxxxx ustát.

Vatová xxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.2) x xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx trubičkou se xxxxxx xx výše 75–80 xx xxxxxx xxxxxxxx (4.7).

Xxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xx filtrát. 30 ml xxxxxxxx xx zředí 50 xx vody. Xxxx xxxx xx xxxxx 50 %-xxx methanolem (4.6), xxx xxxx xxxxxxxx očekávané xxxxxxxxxxx xxxxxxxx sodného 8 μx/xx ( = X₈).

7.1.3 Xxxxxx x xxxxx podíl xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 50 xxx (xxxxxx xxxxxxx 10 xxx)

Xxxxxx x hmotnosti 10 xx 20 x xx přidá x 100 ml 90 %-xxxx xxxxxxxxx (4.5), 15 xxxxx xxxxxxxx a odstřeďuje xxxxx xx xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx 20 ppm xx xxxxxxx 40 xx zbytku; pro 10 xxx se xxxxxxx 80 xx. Xxxxxx xx xxxxxx xx xxxxx při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 40 °X x rotačním xxxxxxx (5.1). Xxxxxxxx xx xxxxxxxx x 10 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxx zátka xx zavede xx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.3) x xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx 75–80 xx xxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx 10 xx 90xxxxxxxxxxx methanolu x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx xx xxxxxx xx vakuu xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 40 °X v xxxxxxx xxxxxxx (5.1). Xxxxxxxx xx xxxxxxxx v 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xx 20 xx. Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxxxx při xxxxxxxxxxx xxxxxxxx 4000 xx/xxx. Xxxx xxxx xx xxxxx 50 %-xxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx očekávané xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X₈).

7.2. Xxxxxxxxx xxxxxx

X xxxxxxx U8 se xxxxxxxxx rozřeďováním (1 + 1) 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6) xxxxxxxx xxxxxxx X4 (xxxxxxxxx podíl: 4 μx/xx), X2 (očekávaný xxxxx: 2 μx/xx), X1 (očekávaný xxxxx: 1 μx/xx).

8. POSTUP XXXXX

8.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxx médium (4.2) xx naočkuje suspenzí xxxx (3.2) při 50 xx 60 °X. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx miskách se xxxxxxxxx xxxxxx (4.2) xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx vykáže xx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx zóny s xxxxxxx použitými koncentracemi xxxxxxxxx xxxxxxx.

8.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxx se xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx po xxxxxxx koncentračních xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X₈, X₄, X₂, S₁) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (X₈, X₄, X₂, X₁). Na xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx. Z xxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx osm xxxxxx x xxxxxxx 10-13 xx x rozestupem xxxxxx xxxxxxxxx 30 xx. Xxxx by xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xx skleněné xxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxx kroužek x xxxxx 20 xx x xxxxxxx 200 xx.

Xx xxxxx xx xxxxxx takové xxxxxxxx xxxxxxxxxx média (4.1) xxxxxxxxxxxx xxxxx 8.1, xxx xx vytvořila xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 2 xx (60 xx na xxxxx x xxxxxxx 200 xx). Xxxx xx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx otvory, xx xxxxxxx xx pipetou xxxxxx přesné množství xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 ml xx xxxxx, podle xxxxxxx otvoru). Xxxxx xxxxxxxxxxx musí xxx xxxxxxx minimálně xxxxxxxxx, xxxxx pro xxxxx xxxx xx xxxxxxxxx 32 inhibičních xxx.

8.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx přibližně xx xxxx 18 xxxxx xxx 35 xx 37 °X.

9. XXXXXXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx se xxxxx x přesností xx 0,1 xx. Xxx každou xxxxxxxxxxx xx střední xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx. xxxx uvedeným xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XX) se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) XX = 7X₁ + 4S₂ + X₄ – 2X₈ / 10

Xxxxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (XX) se stanoví xxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorce:

b) XX = 7X₈ + 4X₄+ X₂ + 2S₁ / 10

Xxxxxx xxx xx xxxxxxx nejvhodnější body xxx xxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx úroveň (XX) extraktu, xxxxxxx xx do výše xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx X₁, U₂, U₄ x U₈ namísto X₁, S₂, S₄ x X₈.

Xxxxxxxxxx hodnoty XX a XX xx xxxxxxx xx xxxxxxxx diagramu. Spojením xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx provede pro xxxxxxx XX x XX k xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx.

Xxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, měly xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx (XX-XX) x (XX-XX) neodchylují více xxx x 10 % xx střední xxxxxxx.

Xxxxx přímky nejsou xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxx U1 x X1 xxxx X8 x S8. Xxx se xxxxxxx XX, XX, XX x XX xxxx xxxxxx následujících xxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx přímky:

a) XX = 5X₁ + 2S₂ – X₄ / 6 xxxx 5X₂ + 2X₄ – X₈ / 6

x ) XX = 5X₄ + 2S₂ − X₁ / 6 xxxx 5X₈ + 2X₄ − X₂ / 6

Totéž xx xxxxxxx pro xxxxxxx XX a UH. X xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx rovněž xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx, xxxxx byly xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, xx měly xxx xxxxxxxxxxx xx protokolu x xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxx přímky xxxxxxxxx xx rovnoběžné, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx A) xxxxxx xxxxxxx z xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxx 4 xxxxxx

x) xxx X = (U₁+ X₂+ X₄+ X₈ – X₁ – X₂ – S₄ – X₈) × 0,602 / U₄+ X₈+ X₄+ S₈ – X₁ – X₂ – X₁ – X₂

Xxx 3 xxxxxx

x) xxx A = (X₁+ X₂+ X₄ – X₁ – X₂ – X₄) × 0,401 / X₄+ X₄ – X₁ – X₁

xxxx

x) xxx X = (X₂+ X₄+ U₈ – X₂ – X₄ – X₈) × 0,401 / X₈+ X₈ – X₂ – S₂

Skutečná xxxxxxxx = xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx х xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx aktivita xxxx xxxx xxxxxx xxxxxx 0,5–2,0, test xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx přizpůsobení koncentrací xxxxxxxx xxxx. standardních xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxx dosáhnout relativní xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, x xx xx xxxx xxx zaznamenáno xx xxxxxxxxx x analýze.

Pokud xxxx možné xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.

10. XXXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx rozborů xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx x xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx:

- 20 % xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxx xxxxxxxxx sodného 10 xx 25 xx/xx,

- 5 mg/kg xxxxxxxxx xxxxxxx při xxxxxx 25 až 50 mg/kg,

- 10 % xxxxx hodnoty xxxxxxxx xxx obsahu xxx 50 mg/kg.

[1] Xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx sporovou xxxxxxxx.

[2] Xxxx xxx xxxxxxx jakékoliv xxxxxxxx xxxxxxxxxx médium xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.

[3] 1 xx xxxxxxxxx sodného xxxxxxxx 1000 xxxxxxxxx XX.

[4] Xxxxx xxx xxxxxxx jiné metody, xxxxx vytvoří odpovídající xxxxxxxx xxxx.

[5] Xxxx xxx použito jakékoli xxxxxxxx xxxxxxxxxx médium xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx stejné výsledky.