Plné znění - 31981L0715

Xxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx

xx xxx 31. xxxxxxxx 1981,

xxxxxx se stanoví xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx

(81/715/XXX)

XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,

x xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx společenství,

s ohledem xx xxxxxxxx Rady 70/373/XXX ze dne 20. xxxxxxxx 1970, xxxxxx xx zavádí xxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx Společenství xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx Xxxxx o xxxxxxxxxxx Xxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxx 2 uvedené xxxxxxxx,

xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxx 70/373/XXX stanoví, xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, zda xxxx xxxxxxx požadavky xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx krmiv, se xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx Společenství;

vzhledem x xxxx, xx xxxxxxxx Xxxxxx 71/250/XXX [2], 71/393/EHS [3], 72/199/XXX [4], 73/46/XXX [5], 74/203/XXX [6], 75/84/XXX [7], 76/372/EHS [8] x 78/633/XXX [9], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxx 30. xxxxxxxx 1981, xxx řadu xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; xx xxxx od xx doby xxxxxxxxxxx xxxxx nyní umožňuje xxxxxxxx xxxxxx soubor xxxxxxxxxxxx metod;

vzhledem k xxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx jsou x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx,

XXXXXXX TUTO XXXXXXXX:

Xxxxxx 1

Členské xxxxx xxxxxxx, že xxxxxxx xxx úřední xxxxxxxx xxxxx xx obsah xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xx provádějí xxxxxxxx popsanými v xxxxxxx.

Xxxxxx 2

Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x účinnost xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx 1. xxxxxxxx 1981. Xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx Xxxxxx.

Xxxxxx 3

Tato xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

X Xxxxxxx xxx 31. xxxxxxxx 1981.

Xx Xxxxxx

Xxxxxx Xxxxx

xxxxxxxx

[1] Xx. věst. X 170, 3.8.1970, x. 2.

[2] Xx. věst. X 155, 12.7.1971, x. 13.

[3] Úř. xxxx. X 279, 20.12.1971, x. 7.

[4] Xx. xxxx. X 123, 29.5.1972, x. 6.

[5] Xx. xxxx. X 83, 30.3.1973, x. 21.

[6] Xx. xxxx. X 108, 22.4.1974, x. 7.

[7] Úř. věst. X 32, 5.2.1975, x. 26.

[8] Xx. věst. X 102, 15.4.1976, x. 8.

[9] Úř. xxxx. X 206, 29.7.1978, x. 43.

XXXXXXX

1. XXXXXXXXX AVOPARCINU XXXXXX V AGAROVÉM XXXXXXXXXXX XXXXX

1. ÚČEL X XXXXXX XXXXXXX

Xxxx xxxxxx umožňuje xxxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx stanovitelnosti xx 2 xx/xx (2 ppm). Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx působit xxxxxx.

2. PRINCIP

Ze xxxxx xxxxxx/xxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx aktivita xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx v agarovém xxxxxxxxxxx médiu naočkovaném xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx subtilis. Xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zónami xxxxxxxxxxxxxx. Průměr xxxxxxxxxxx xxx xx pro xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx přímo xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

3. MIKROORGANISMUS: XXXXXXXX XXXXXXXX XXXX 6633 (XXXX 8054)

3.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1) x xxxxxxx zkumavkách xx xxxxxxxx mikroorganismem Bacillus xxxxxxxx x přes xxx xx při 30 °X xxxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxxx x xxxxxxxxxx při xxx 4 °X x každý xxxxx xx znovu xxxxxxxx.

3.2. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx [1]

Xxxxxxx kultura x xxxxxxxx xxxxx (3.1) xx xxxxx 2-3 xx sterilní xxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx láhev, xxxxx xxxxxxxx 300 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1), x xx xxxx 3 xx 5 dní xx xxxxxxxx při 30 °X. Po xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx xx 15 xx xxxxxxxx (4.2) x zhomogenizuje xx. Xxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxxxxx při 4 °X.

4. KULTIVAČNÍ XXXXXX X XXXXXXX

4.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx [2]

4.2 Xxxxxxx 20 %-xx (x/x): 200 xx xxxxxxxx se xxxxx 800 ml xxxx.

4.3 Xxxxxxxx chlorovodíková, x: 1,18–1,19.

4.4 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, 2M.

4.5 Xxxxxxxxx xxxx 0,1 M:

dihydrogenfosforečnan xxxxxxxx, XX₂ XX₄: 13,6 x

xxxx: 1000 xx

xX xxxxxxx na 4,5.

4.6 Xxxx xxxxxxx/xxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (4.3): 65/32,5/2,5 (x/x/x)

4.7 Xxxxxxxxxx substance: xxxxxxxxxxxxxxx o xxxxx xxxxxxxx

5. STANDARDNÍ XXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxx množství xxx 10 xx standardní xxxxxxxxx (4.7) se xxxxxxxx ve xxxxxxxxxx xxxxx (4.5) x xxxxx pufrem xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 100 μx avoparcinu v 1 xx. Při xxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxx x při 4 °X, zůstane xxxxx xxxxxx použitelný 7 dní.

5.1 Xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx

X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx postupným rozřeďováním xxxxxxxxxx xxxxxx následující xxxxxxx:

5.2 Xxx xxxxxx

X xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx postupným xxxxxxxxxxxx fosfátovým pufrem xxxxxxxxxxx roztoky:

6. XXXXXXXX XXXXXXXX X XXXXXXXXXXX XXXXXXX

6.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxx odvážené xxxxxxxx 10 xx vzorku, xxxxx obsahuje 10-100 xx xxxxxxxxxx, xx x odměrné xxxxx x xxxxxx 100 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x 60 ml xxxxx (4.6) xx xxxx 15 xxxxx. Xxxxxxx xX xx xxxxxxxxxxx x pokud xx třeba, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (4.3) xx hodnotu 2. Xxxxx (4.6) xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xx. Xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx. Xxxxxxx x. 1) a xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx xx xxxxx. Odebere xx poměrná část x xX se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) xxxxxx na xxxxxxx 4,5. Xxxxx xxxxxx se zředí xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5), xxx xx dosáhlo xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 4 μx/xx ( = U₈).

Z xxxxxx xxxxxxx xx postupným xxxxxxxxxxxx (1+1) xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5) xxxxxxxx xxxxxxx U4 (xxxxxxxxx xxxxx: 2 μx/xx), X2 (xxxxxxxxx xxxxx: 1 μx/xx) a X₁ (očekávaný xxxxx: 0,5 μx/xx).

6.2 Xxxxxx

Xxxxxx x hmotnosti 50 x se xxxxx xx 100 ml xxxxx (4.6) a xx xxxx 30 xxxxx se mechanicky xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx). Xxxxxxx xxxx xxxxxxx extraktu xx odebere (xxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xX se xxxxxxxx hydroxidu xxxxxxx (4.4) xxxxxx na 4,5. Tento roztok xx naředí fosfátovým xxxxxx (4,5), xxx xx xxxxxx xxxxxx X8 (xxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxx).

X xxxxxx roztoku xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (1+1) fosfátovým xxxxxx (4.5) xxxxxxxx xxxxxxx X4 (xxxxxxxxx obsah: 1,0 μx/xx), U₂ (xxxxxxxxx obsah: 0,5 μx/xx) a X₁ (xxxxxxxxx xxxxx: 0,25 μx/xx).

7. XXXXXX XXXXX

7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxx médium (4.1) xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx (3.2) při xxxxxxx 50–60 °C. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx (4.1) xx xxxxxxx množství xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx ale xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx různých xxxxxxxxx koncentracích xxxxxxxxxx.

7.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xx miskách xx xxxxxxx koncentračních xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (X₈, X₄, S₂, X₁) a xxxxxxxxxxx xxxxxxx (U8, U4, X2, X1).Xx xxxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx koncentrace xxxxxxxxx x extraktu. X xxxx důvodu xxxx xxx miska takové xxxxxxx, xxx bylo xxxxx vytvořit ve xxxxxx xxxxxxxxxxxx prostředí xxxxxxx osm xxxxxx x xxxxxxx 10-13 xx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 30 xx. Xxxx xx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx o xxxxx 20 xx x xxxxxxx 200 xx.

Xx misku xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxxxx xxxxx 7.1, xxx se xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 2 xx (60 xx xx xxxxx x xxxxxxx 200 xx). Xxxx, xx xxxxxx xxxxxx, vyhloubí xx xxxxxx, do xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx přesné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a testovacího xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 ml xx otvor, xxxxx xxxxxxx otvoru). Každá xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx čtyřikrát, xxxxx xxx každý xxxx xx vyhodnotí 32 inhibičních xxx.

7.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx po xxxx 16 xx 18 xxxxx xxx 30 °X.

8. XXXXXXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx se xxxxx x xxxxxxxxx xx 0,1 xx. Xxx xxxxxx koncentraci xx xxxxxxx hodnoty xxxxxxx xx semilogaritmického xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx k průměru xxxxxxxxxxx xxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx stejně xxxx pro extrakt xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx. xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx xxx xxx nejnižší xxxxxx standardního xxxxxxx (XX) se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) XX = 7S₈ + 4S₄ + X₂ – 2S₁ / 10

Xxxxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XX) xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorce:

SH = 7X₈ + 4X₄ + S₂ – 2X₁ / 10

Xxxxxx xxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx body xxx xxxxxxxx (XX) a xxxxxxxx xxxxxx (XX) xxxxxxxx, xxxxxxx xx xx výše uvedených xxxxxx xxxxxx U₁, X₂, X₄ x X₈ xxxxxxx X₁, X₂, S₄ a X₈.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx SL x XX xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxx xxxxxxx XX a UH x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx extrakt.

Pokud xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, měly xx xxx xxxxxx rovnoběžné. Xxxxxx xx možno xxxxxxxxx xx rovnoběžné, xxxxx se xxxxxxx (XX-XX) x (XX-XX) xxxxxxxxxxx více xxx x 10 % xx xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxx U₁ a X₁ xxxx X₈ x X₈. Xxx xx xxxxxxx SL, XX, UL x XX určí xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, aby xx obdržely xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxxxx xx xxxxxxx xxx hodnoty UL x XX. X xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx přímek xx rovněž zkontroluje xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx, xxxxx xxxx stanoveny xx xxx úrovní, by xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxx xx možno xxxxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxx, vypočítá se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx X) xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxx 4 xxxxxx

(x) xxx X = (X₁+ X₂+ U₄+ X₈ – S₁ – S₂ – X₄ – S₈) × 0,602 / X₄+ X₈+ X₄+ X₈ – U₁ – U₂ –

Xxx 3 úrovně

(d) log X = (X₁+ X₂+ X₄ – X₁ – X₂ – X₄) × 0,401 / X₄+ X₄ – X₁ – X₁

xxxx

x´) xxx X = (X₂+ X₄+ X₈ – X₂ – X₄ – X₈) × 0,401 / X₈+ X₈ – X₂ – X₂

Xxxxxxxx xxxxxxxx = xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx х xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxx 0,5–2,0, xxxxxxx se xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxxxxx roztoků. Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx aktivitu x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxx, x to xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx do protokolu x xxxxxxx.

Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx považovat xx rovnoběžné, xxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxx xx ani pak xxxxxxxxx rovnoběžnosti, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.

9. XXXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxx xxxx výsledky dvou xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx a xxxx xxxxxxx xx xxxxxx překračovat:

- 2 xx/xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx 2 xx 10 xx/xx,

- 20 % xxxxx xxxxxxx výsledku xxx xxxxxx 10 xx 25 mg/kg,

- 5 xx/xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx obsahu 25 xx 50 xx/xx,

- 10 % xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx obsahu xxx 50 xx/xx.

2. XXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXX XXXXXX X XXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX

1. XXXX A XXXXXX XXXXXXX

Xxxxxx umožňuje xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Spodní xxxxxxx stanovitelnosti xx 10 xx/xx (10 xxx) [3].

2. XXXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxxxxx 90 %-xxx methanolem. Xxxxxxx xx xxxxxxx vhodnému xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxx antibiotická xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx v agarovém xxxxxxxxxxx médiu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xx x xxxxxxx použitých xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx za xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

3. XXXXXXXXXXXXXXX: XXXXXXXX XXXXXXXX XXXX 6633 (NICB 8054)

3.1 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1) v šikmých xxxxxxxxxx se naočkuje xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx noc xx xxxxxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxx xx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxx xxx 4 °C x xxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxxxx.

3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx [4]

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx (3.1) x xxxxx xxxxxxxx xx omyje 2-3 ml sterilní xxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx, která xxxxxxxx 300 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1), a xx xxxx 3 xx 5 xxx xx xxxxxxxx při 30 °X. Xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx 15 ml xxxxxxxx (4.3) a xxxxxxxxxxxxx xx. Xxxx xxxxxxxx xxxx být uchována xxxxxxxxx 5 xxxxxx xxx 4 °C.

4. XXXXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXX

4.3 Xxxxxxx 20 %-ní (x/x): 200 ml xxxxxxxx xx xxxxx 800 xx vody.

4.4 Xxxxxxxx, xxxxxxx.

4.5 Xxxxxxxx 90 %-xx (x/x): 900xx xxxxxxxxx (4.4) xx xxxxx 100 xx xxxx.

4.6 Methanol 50 %-xx (v/v): 500xx xxxxxxxxx (4.4) se xxxxx 500 xx xxxx.

4.7 Xxxx hlinitý, xxxxxxxxxxx (xxxxx X, 20 mesh; activated xxxxxxx XX1: X. Xxxxxxxxx and Xx., xxxx xxxxxxxxxx).

4.8 Standardní xxxxxxxxx: xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx (xxxx xxxx získatelný x Xxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxx, Xxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx, Xxxxxxxxx, Xxxxxx XX15 3XX, Xxxxx Xxxxxxxx).

5. XXXXXXXXX

5.1 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x 250xx xxxxxxx baňkou.

5.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx: 25 xx, xxxxx: 400 xx, x otvorem x xxxxxxx 2 xx xx jednom xxxxx.

5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx, vnitřní xxxxxx: 11 xx, xxxxx: xxxxxxxxx 300 xx, s otvorem x xxxxxxx 2 xx xx xxxxxx xxxxx.

6. XXXXXXXXXX ROZTOKY

Přesně xxxxxxxx xxxxxxxx asi 10 mg xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.8) se xxxxxxxx v xxxxxxxxx (4.4) a xxxxxx, xxx xxxxxx výchozí xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 800 μx/xx. Při xxxxxxxx x uzavřené xxxxx x při 4 xX, xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 2 xxxxx.

X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx rozřeďováním 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6) xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

7. XXXXXXXX EXTRAKTU A XXXXXXXXXXX XXXXXXX

7.1 Xxxxxxxx

7.1.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxx o xxxxxxxxx 2,0 xx xx xxxxx x 100 ml 90 %-xxxx xxxxxxxxx (4.5), xxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx a xxxxxxxx. Xxxxxx se xxxxx 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6), aby bylo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx sodného 8 μx/xx ( = X₈).

7.1.2 Xxxxxx, u xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx nižší xxx 50 ppm

Vzorek x xxxxxxxxx 10 xx 20 x xx xxxxx x 100 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx (4.5), 15 xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxx.

Xxxxxx xxxxx xx xxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx (5.2) x xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx do výše 75–80 xx xxxxxx xxxxxxxx (4.7).

Xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx se xxxxxxx. 30 xx xxxxxxxx xx zředí 50 xx xxxx. Hned xxxx xx zředí 50 %-xxx methanolem (4.6), aby bylo xxxxxxxx očekávané xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X₈).

7.1.3 Xxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 50 xxx (xxxxxx xxxxxxx 10 xxx)

Xxxxxx x hmotnosti 10 xx 20 x xx xxxxx x 100 ml 90 %-xxxx xxxxxxxxx (4.5), 15 xxxxx xxxxxxxx x odstřeďuje xxxxx xx xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx 20 xxx xx odebere 40 xx xxxxxx; pro 10 xxx xx xxxxxxx 80 xx. Xxxxxx se odpaří xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 40 °X x rotačním xxxxxxx (5.1). Xxxxxxxx xx xxxxxxxx v 10 ml 90 %-xxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx trubičky (5.3) x xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx 75–80 xx xxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxx hlinitého x filtrát se xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx 10 xx 90xxxxxxxxxxx methanolu x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx k prvnímu xxxxxxxx.

Xxxxxx se xxxxxx xx xxxxx při xxxxxxx nepřesahující 40 °X v xxxxxxx xxxxxxx (5.1). Xxxxxxxx xx rozpustí x 10 ml xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxx se xxxxxx xxxxx xx 20 xx. Xxxxxx xx xxxxxxxxxx minimálně 5 xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx 4000 xx/xxx. Xxxx xxxx xx xxxxx 50 %-xxx xxxxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X₈).

7.2. Xxxxxxxxx roztok

Z xxxxxxx X8 se xxxxxxxxx rozřeďováním (1 + 1) 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6) xxxxxxxx xxxxxxx X4 (xxxxxxxxx podíl: 4 μx/xx), U2 (xxxxxxxxx xxxxx: 2 μx/xx), X1 (očekávaný xxxxx: 1 μg/ml).

8. POSTUP XXXXX

8.1 Naočkování xxxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxx xxxxxx (4.2) xx xxxxxxxx suspenzí xxxx (3.2) při 50 xx 60 °X. Předběžnými xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx (4.2) xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, které vykáže xx xxxxx největší xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx sodného.

8.2 Příprava xxxxx

Xxxx se xxxxxx xxxx difúzní test xx miskách xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (S₈, X₄, S₂, X₁) x testovacího xxxxxxx (X₈, U₄, X₂, X₁). Na každou xxxxx musí xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx koncentrace xxxxxxxxx x xxxxxxxx. X xxxx xxxxxx xxxx xxx miska xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxxxxxx média xxxxxxx xxx otvorů x xxxxxxx 10-13 xx s rozestupem xxxxxx minimálně 30 xx. Test by xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xx skleněné xxxxx, xx xxxxx je xxxxxxx hliníkový xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx 20 xx x průměru 200 xx.

Xx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx média (4.1) xxxxxxxxxxxx xxxxx 8.1, xxx se vytvořila xxxxxx silná přibližně 2 mm (60 xx xx xxxxx x xxxxxxx 200 xx). Xxxx co xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx, do xxxxxxx xx pipetou xxxxxx přesné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x testovacího xxxxxxx (mezi 0,10 x 0,15 xx xx xxxxx, podle xxxxxxx xxxxxx). Xxxxx xxxxxxxxxxx musí xxx xxxxxxx minimálně čtyřikrát, xxxxx pro xxxxx xxxx xx xxxxxxxxx 32 inhibičních xxx.

8.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx přibližně xx xxxx 18 xxxxx xxx 35 xx 37 °X.

9. XXXXXXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxxxxx zón xx xxxxx s přesností xx 0,1 xx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx semilogaritmického xxxxxx, xxxxxxx se xxxxxx logaritmus koncentrace xx xxxxxx x xxxxxxx inhibičních xxx. Xxx xxxxxxxxxx roztok xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx. xxxx uvedeným xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxx úroveň standardního xxxxxxx (XX) xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) SL = 7X₁ + 4X₂ + X₄ – 2X₈ / 10

Xxxxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx standardního xxxxxxx (XX) se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) XX = 7S₈ + 4X₄+ X₂ + 2X₁ / 10

Xxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxx nejnižší (UL) x xxxxxxxx úroveň (XX) xxxxxxxx, přičemž xx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx X₁, X₂, X₄ x U₈ xxxxxxx X₁, S₂, S₄ x X₈.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx XX x XX xx xxxxxxx do xxxxxxxx diagramu. Xxxxxxxx xxxx xxxx vznikne xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx XX a XX k získání xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx (XX-XX) a (XX-XX) xxxxxxxxxxx více xxx o 10 % xx xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx přímky xxxxxx xxxxxxxxxx, xx možné xxxxxxxx xxx X1 x X1 xxxx X8 x X8. Xxx xx hodnoty XX, XX, XX x UH určí xxxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorců, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx přímky:

a) XX = 5X₁ + 2X₂ – X₄ / 6 xxxx 5S₂ + 2X₄ – X₈ / 6

x ) XX = 5S₄ + 2X₂ − X₁ / 6 xxxx 5X₈ + 2X₄ − X₂ / 6

Xxxxx se xxxxxxx pro xxxxxxx XX x XX. X xxxxxx alternativních xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xx tří xxxxxx, xx měly xxx xxxxxxxxxxx do xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxx přímky xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, vypočítá xx logaritmus relativní xxxxxxxx (log X) xxxxxx jednoho x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxx 4 xxxxxx

x) log X = (U₁+ X₂+ X₄+ U₈ – X₁ – X₂ – X₄ – X₈) × 0,602 / U₄+ X₈+ X₄+ X₈ – X₁ – U₂ – X₁ – X₂

Xxx 3 xxxxxx

x) xxx X = (X₁+ X₂+ U₄ – S₁ – X₂ – X₄) × 0,401 / X₄+ S₄ – X₁ – S₁

nebo

d) xxx A = (X₂+ X₄+ X₈ – X₂ – X₄ – X₈) × 0,401 / X₈+ X₈ – X₂ – S₂

Skutečná xxxxxxxx = předpokládaná xxxxxxxx х xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx relativní aktivita xxxx xxxx xxxxxx xxxxxx 0,5–2,0, xxxx xx zopakuje xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxx příp. xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx relativní xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, výsledek xx xxxxx považovat xx xxxxxxxxx, x xx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x analýze.

Pokud xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx rovnoběžné, xxxx xx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx výsledek xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.

10. XXXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxx xxxx výsledky xxxx xxxxxxx jednoho xxxxxxxxx při xxxxx x téže xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx:

- 20 % xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx sodného 10 xx 25 xx/xx,

- 5 xx/xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx 25 až 50 mg/kg,

- 10 % vyšší xxxxxxx xxxxxxxx xxx obsahu xxx 50 mg/kg.

[1] Xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

[2] Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx odpovídajícího xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.

[3] 1 xx xxxxxxxxx sodného xxxxxxxx 1000 jednotkám XX.

[4] Xxxxx xxx xxxxxxx xxxx metody, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx.

[5] Může xxx použito xxxxxxxx xxxxxxxx kultivační xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx složení, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.