Plné znění - 31981L0715

Xxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx

xx xxx 31. července 1981,

xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx metody Společenství xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx

(81/715/XXX)

XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,

x xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,

x xxxxxxx xx směrnici Xxxx 70/373/XXX xx xxx 20. července 1970, xxxxxx xx zavádí xxxxxx xxxxxx xxxxxx x analýzy Společenství xxx úřední xxxxxxxx xxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxx o xxxxxxxxxxx Řecka, x xxxxxxx xx xxxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx,

xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx 70/373/EHS stanoví, xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, xxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x správních xxxxxxxx xx jakost x xxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx;

xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx Xxxxxx 71/250/XXX [2], 71/393/EHS [3], 72/199/XXX [4], 73/46/EHS [5], 74/203/XXX [6], 75/84/XXX [7], 76/372/EHS [8] x 78/633/EHS [9], naposledy xxxxxxxxx xxxxxxxx ze xxx 30. xxxxxxxx 1981, xxx xxxx analytických xxxxx Společenství xxxxxxxxx; xx stav xx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx;

xxxxxxxx k xxxx, xx opatření xxxx směrnice jsou x souladu xx xxxxxxxxxxx Stálého výboru xxx xxxxxx,

XXXXXXX TUTO XXXXXXXX:

Xxxxxx 1

Členské xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx obsah xxxxxxxxxx x monensinu xxxxxxx xx provádějí xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Článek 2

Členské xxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx souladu x xxxxx xxxxxxxx xx 1. prosince 1981. Xxxxxxxxxx o xxxx xxxxxxx Xxxxxx.

Článek 3

Xxxx xxxxxxxx xx určena xxxxxxxx xxxxxx.

X Xxxxxxx xxx 31. xxxxxxxx 1981.

Za Xxxxxx

Xxxxxx Xxxxx

xxxxxxxx

[1] Xx. věst. X 170, 3.8.1970, x. 2.

[2] Úř. xxxx. X 155, 12.7.1971, x. 13.

[3] Xx. xxxx. X 279, 20.12.1971, x. 7.

[4] Xx. věst. X 123, 29.5.1972, x. 6.

[5] Xx. věst. X 83, 30.3.1973, x. 21.

[6] Xx. xxxx. X 108, 22.4.1974, x. 7.

[7] Xx. xxxx. X 32, 5.2.1975, x. 26.

[8] Xx. xxxx. X 102, 15.4.1976, x. 8.

[9] Úř. xxxx. X 206, 29.7.1978, x. 43.

XXXXXXX

1. XXXXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX

1. XXXX X XXXXXX POUŽITÍ

Tato xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx stanovitelnosti xx 2 xx/xx (2 xxx). Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx působit xxxxxx.

2. XXXXXXX

Xx směsi xxxxxx/xxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Extrakt xx xxxxxxxx. Jeho xxxxxxxxxxxx aktivita xx xxxxxxx měřením xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx médiu naočkovaném xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx dokáže xxxxxxxxxxxx inhibičními xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Průměr inhibičních xxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx logaritmu koncentrace xxxxxxxxxxx.

3. MIKROORGANISMUS: XXXXXXXX XXXXXXXX XXXX 6633 (XXXX 8054)

3.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1) x xxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxx se při 30 °X xxxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxxx x chladničce při xxx 4 °X x xxxxx xxxxx xx xxxxx naočkuje.

3.2. Xxxxxxxx xxxxxxxx spór [1]

Xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxx (3.1) xx xxxxx 2-3 xx xxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx 300 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1), a xx xxxx 3 xx 5 xxx xx xxxxxxxx xxx 30 °X. Xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx 15 xx ethanolu (4.2) x xxxxxxxxxxxxx se. Xxxx suspenze může xxx uchována xxxxxxxxx 5 xxxxxx xxx 4 °X.

4. KULTIVAČNÍ XXXXXX A XXXXXXX

4.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx [2]

4.2 Xxxxxxx 20 %-ní (x/x): 200 ml xxxxxxxx xx xxxxx 800 ml xxxx.

4.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, x: 1,18–1,19.

4.4 Xxxxxx hydroxidu xxxxxxx, 2X.

4.5 Xxxxxxxxx xxxx 0,1 X:

xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, KH₂ XX₄: 13,6 x

xxxx: 1000 xx

xX upravit na 4,5.

4.6 Xxxx acetonu/vody/kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (4.3): 65/32,5/2,5 (x/x/x)

4.7 Standardní substance: xxxxxxxxxxxxxxx o xxxxx xxxxxxxx

5. STANDARDNÍ XXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx asi 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.7) xx xxxxxxxx ve fosfátovém xxxxx (4.5) a xxxxx pufrem xxxxxx, xxx xxxxxx základní xxxxxx xxxxxxxxxx 100 μx xxxxxxxxxx x 1 xx. Xxx xxxxxxxx v uzavřené xxxxx x xxx 4 °X, zůstane xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 7 xxx.

5.1 Xxx xxxxxxxxxx premixy

Z tohoto xxxxxxxxx roztoku xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx pufrem následující xxxxxxx:

5.2 Xxx xxxxxx

X výchozího roztoku xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

6. XXXXXXXX EXTRAKTU X XXXXXXXXXXX XXXXXXX

6.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx 10 xx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx 10-100 xx avoparcinu, se x odměrné xxxxx x xxxxxx 100 xx mechanicky protřepe x 60 xx xxxxx (4.6) xx xxxx 15 xxxxx. Xxxxxxx pH se xxxxxxxxxxx x pokud xx třeba, upraví xx xxxxxxxxx chlorovodíkovou (4.3) na xxxxxxx 2. Xxxxx (4.6) xx xxxxxx objem x xxxxxxxxxxxx xx. Xxx se xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx. Xxxxxxx x. 1) x xxxxxxx 5 ml filtrátu xx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx část x xX se xxxxxxxx hydroxidu xxxxxxx (4.4) xxxxxx na xxxxxxx 4,5. Xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx pufrem (4.5), xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 4 μx/xx ( = X₈).

X xxxxxx xxxxxxx xx postupným xxxxxxxxxxxx (1+1) xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5) xxxxxxxx xxxxxxx U4 (xxxxxxxxx xxxxx: 2 μg/ml), X2 (xxxxxxxxx xxxxx: 1 μg/ml) a X₁ (očekávaný xxxxx: 0,5 μg/ml).

6.2 Xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxxxx 50 x se přidá xx 100 ml xxxxx (4.6) x xx xxxx 30 xxxxx se mechanicky xxxxxxxxxx. Extrakt xx xxxxx xxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxx zkumavkách). Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx (xxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xX xx xxxxxxxx xxxxxxxxx sodného (4.4) xxxxxx xx 4,5. Tento roztok xx xxxxxx fosfátovým xxxxxx (4,5), xxx xx xxxxxx roztok X8 (xxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxx).

X tohoto roztoku xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (1+1) xxxxxxxxxx pufrem (4.5) připraví xxxxxxx X4 (xxxxxxxxx xxxxx: 1,0 μx/xx), X₂ (xxxxxxxxx obsah: 0,5 μx/xx) a X₁ (xxxxxxxxx xxxxx: 0,25 μx/xx).

7. POSTUP XXXXX

7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxx xxxxxx (4.1) xx naočkuje xxxxxxxx xxxx (3.2) xxx xxxxxxx 50–60 °X. Xxxxxxxxxxx pokusy xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx (4.1) se xxxxxxx množství xxxxxxx, xxxxx xxxxxx co xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx ostré xxxxxxxxx xxxx při xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx avoparcinu.

7.2 Xxxxxxxx misek

Test xx xxxxxx xxxx difúzní xxxx na miskách xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X₈, X₄, X₂, X₁) a xxxxxxxxxxx xxxxxxx (X8, U4, X2, U1).Na každou xxxxx musí xxx xxxxxxxx bezpodmínečně všechny xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx. Z xxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx takové xxxxxxx, aby xxxx xxxxx xxxxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxxxxxx prostředí xxxxxxx xxx otvorů x xxxxxxx 10-13 xx x xxxxxxxxxx xxxxxx minimálně 30 xx. Xxxx xx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx desky, xx kterou se xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx kroužky x xxxxx 20 xx x xxxxxxx 200 xx.

Xx misku se xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxxxx podle 7.1, xxx xx vytvořila xxxxxx xxxxx přibližně 2 mm (60 xx xx xxxxx x xxxxxxx 200 xx). Xxxx, xx xxxxxx ztuhne, xxxxxxxx xx xxxxxx, xx xxxxxxx xx pipetou xxxxxx přesné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 xx xx xxxxx, xxxxx xxxxxxx otvoru). Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxx minimálně čtyřikrát, xxxxx xxx každý xxxx xx xxxxxxxxx 32 xxxxxxxxxxx zón.

7.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx xxxx 16 až 18 xxxxx xxx 30 °X.

8. VYHODNOCENÍ

Průměr xxxxxxxxxxx xxx xx xxxxx x přesností na 0,1 mm. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx semilogaritmického xxxxxx, xxxxxxx xx zanáší xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xx zakreslí xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx. xxxx xxxxxxxx způsobem.

Nejvhodnější xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XX) se stanoví xxxxx následujícího vzorce:

a) XX = 7X₈ + 4X₄ + X₂ – 2X₁ / 10

Xxxxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XX) xx xxxxxxx podle xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

XX = 7X₈ + 4X₄ + X₂ – 2X₁ / 10

Stejně xxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx pro xxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxx (UH) xxxxxxxx, xxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx dosadí X₁, X₂, X₄ a X₈ xxxxxxx X₁, X₂, X₄ a X₈.

Xxxxxxxxxx hodnoty XX x SH se xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx obou xxxx vznikne xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx pro hodnoty XX x UH x získání xxxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, měly by xxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx rovnoběžné, xxxxx se xxxxxxx (XX-XX) x (XX-XX) xxxxxxxxxxx xxxx než x 10 % xx xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx xxxxxx rovnoběžné, xx možné vyloučit xxx X₁ x X₁ nebo U₈ x X₈. Xxx xx hodnoty XX, XX, UL a XX určí pomocí xxxxxxxxxxxxx vzorců, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxxxx se xxxxxxx xxx xxxxxxx XX x UH. X xxxxxx alternativních xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Výsledky, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxx úrovní, xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx protokolu o xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxx xxxxxx považovat xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx relativní aktivity (xxx X) pomocí xxxxxxx x následujících xxxxxx:

Xxx 4 xxxxxx

(x) xxx A = (X₁+ U₂+ X₄+ X₈ – X₁ – X₂ – X₄ – X₈) × 0,602 / X₄+ X₈+ X₄+ X₈ – X₁ – X₂ –

Xxx 3 xxxxxx

(x) log X = (X₁+ X₂+ X₄ – X₁ – X₂ – X₄) × 0,401 / X₄+ X₄ – X₁ – X₁

xxxx

x´) log X = (X₂+ X₄+ X₈ – X₂ – X₄ – X₈) × 0,401 / X₈+ X₈ – X₂ – S₂

Skutečná xxxxxxxx = xxxxxxxxxxxxx aktivita х relativní xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxx 0,5–2,0, xxxxxxx se xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx extraktu xxxx. xxxxxxxxxxxx roztoků. Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx požadovaných xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx považovat za xxxxxxxxx, x xx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx považovat xx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx zopakuje. Xxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx považovat xx xxxxxxxxxxxx.

9. OPAKOVATELNOST

Rozdíly xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx analytika xxx xxxxx x xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx:

- 2 xx/xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx 2 xx 10 xx/xx,

- 20 % xxxxx hodnoty xxxxxxxx xxx xxxxxx 10 xx 25 xx/xx,

- 5 xx/xx absolutní xxxxxxx xxx xxxxxx 25 až 50 xx/xx,

- 10 % xxxxx xxxxxxx výsledku xxx obsahu xxx 50 xx/xx.

2. XXXXXXXXX XXXXXXXXX SODNÉHO XXXXXX X XXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX

1. XXXX X XXXXXX POUŽITÍ

Metoda xxxxxxxx xxxxxxxxx monensinu sodného x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Spodní xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 10 xx/xx (10 xxx) [3].

2. PRINCIP

Vzorek xx xxxxxxxxx 90 %-xxx methanolem. Xxxxxxx xx podrobí xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxx. Jeho antibiotická xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx difúze monensinu xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx subtilis. Xxxxxx xx prokáže xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zónami xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx zón je x rozsahu použitých xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx za xxxxx úměrný logaritmu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

3. XXXXXXXXXXXXXXX: BACILLUS SUBTILIS XXXX 6633 (XXXX 8054)

3.1 Uchování kmenové xxxxxxx

Xxxxxxx kultivační médium (4.1) x xxxxxxx xxxxxxxxxx xx naočkuje xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx subtilis x xxxx xxx xx xxxxxxxx při 30 °C. Xxxxxxx xx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx při asi 4 °X a xxxxx měsíc se xxxxx xxxxxxxx.

3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx [4]

Xxxxxxx xxxxxxx xx agaru (3.1) x xxxxx xxxxxxxx se xxxxx 2-3 xx xxxxxxxx xxxx. Touto xxxxxxxx xx naočkuje Xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx 300 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1), x xx dobu 3 xx 5 dní xx xxxxxxxx při 30 °X. Po xxxxxxxx tvorby spór xxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx xx 15 xx ethanolu (4.3) x xxxxxxxxxxxxx xx. Tato xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxxxxx xxx 4 °X.

4. XXXXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXX

4.3 Ethanol 20 %-xx (x/x): 200 ml ethanolu xx zředí 800 xx xxxx.

4.4 Xxxxxxxx, xxxxxxx.

4.5 Methanol 90 %-xx (x/x): 900ml xxxxxxxxx (4.4) xx xxxxx 100 xx xxxx.

4.6 Xxxxxxxx 50 %-xx (v/v): 500xx xxxxxxxxx (4.4) xx xxxxx 500 xx xxxx.

4.7 Oxid xxxxxxx, xxxxxxxxxxx (xxxxx X, 20 mesh; xxxxxxxxx xxxxxxx XX1: X. Xxxxxxxxx xxx Xx., xxxx xxxxxxxxxx).

4.8 Standardní xxxxxxxxx: monensin xxxxx x xxxxx xxxxxxxx (xxxx xxxx xxxxxxxxxx x Xxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxx, Xxxxxxx Xxxxxxxxxx Laboratory, Xxxxxxxxx, Surrey XX15 3XX, Velká Británie).

5. XXXXXXXXX

5.1 Vakuová xxxxxxx xxxxxxx x 250ml xxxxxxx xxxxxx.

5.2 Skleněná xxxxxxxx pro chromatografii, xxxxxxx xxxxxx: 25 xx, délka: 400 xx, x xxxxxxx x xxxxxxx 2 xx xx xxxxxx xxxxx.

5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx chromatografii, xxxxxxx xxxxxx: 11 xx, xxxxx: xxxxxxxxx 300 xx, x xxxxxxx x xxxxxxx 2 xx xx jednom xxxxx.

6. STANDARDNÍ ROZTOKY

Přesně xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 10 xx standardní xxxxxxxxx (4.8) se xxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.4) x naředí, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx sodného 800 μx/xx. Xxx uchování x xxxxxxxx xxxxx x xxx 4 xX, zůstane xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 2 xxxxx.

X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6) xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

7. XXXXXXXX EXTRAKTU X XXXXXXXXXXX XXXXXXX

7.1 Xxxxxxxx

7.1.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxxxx 2,0 xx xx přidá k 100 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx (4.5), xxxxxxx minut xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6), xxx xxxx xxxxxxxx očekávané koncentrace xxxxxxxx sodného 8 μx/xx ( = X₈).

7.1.2 Krmiva, u xxxxx podíl xxxxxxxxx xxxx xxxxx než 50 xxx

Xxxxxx x xxxxxxxxx 10 xx 20 g xx xxxxx k 100 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx (4.5), 15 xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxx.

Xxxxxx xxxxx xx zavede xx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.2) x xx lehkého xxxxxxxxxxx trubičkou xx xxxxxx xx xxxx 75–80 mm xxxxxx xxxxxxxx (4.7).

Xxxxxxx xx xxxxxxx na sloupec xxxxx hlinitého a xxxxxxx xx xxxxxxx. 30 xx filtrátu xx xxxxx 50 xx xxxx. Xxxx xxxx se xxxxx 50 %-ním methanolem (4.6), xxx bylo xxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X₈).

7.1.3 Xxxxxx u xxxxx podíl monensinu xxxxxxxxxx 50 xxx (xxxxxx xxxxxxx 10 xxx)

Xxxxxx x xxxxxxxxx 10 až 20 x xx přidá x 100 xx 90 %-xxxx methanolu (4.5), 15 xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx 20 xxx xx xxxxxxx 40 xx xxxxxx; xxx 10 ppm xx xxxxxxx 80 xx. Xxxxxx xx xxxxxx xx vakuu při xxxxxxx nepřesahující 40 °X v rotačním xxxxxxx (5.1). Xxxxxxxx xx rozpustí x 10 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx trubičky (5.3) x xx xxxxxxx xxxxxxx xx trubička xxxxxx do výše 75–80 xx oxidem xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx zbytku xx xxxxxxx na xxxxxxx xxxxx hlinitého x filtrát xx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx 10 xx 90xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx filtrát se xxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx xx odpaří xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 40 °X x rotační xxxxxxx (5.1). Zůstatek xx xxxxxxxx x 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxx se xxxxxx xxxxx xx 20 xx. Xxxxxx xx xxxxxxxxxx minimálně 5 xxxxx při xxxxxxxxxxx xxxxxxxx 4000 ot/min. Xxxx xxxx xx xxxxx 50 %-xxx xxxxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx sodného 8 μx/xx ( = X₈).

7.2. Xxxxxxxxx roztok

Z xxxxxxx X8 xx xxxxxxxxx rozřeďováním (1 + 1) 50 %-xxx methanolem (4.6) xxxxxxxx xxxxxxx U4 (xxxxxxxxx xxxxx: 4 μx/xx), U2 (xxxxxxxxx xxxxx: 2 μx/xx), X1 (xxxxxxxxx xxxxx: 1 μx/xx).

8. POSTUP XXXXX

8.1 Xxxxxxxxxx kultivačního xxxxx

Xxxxxxxx xxxxxx (4.2) xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx (3.2) při 50 až 60 °X. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx miskách xx xxxxxxxxx médiem (4.2) xx xxxxxxx množství xxxxxxx, které xxxxxx xx xxxxx největší xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx s xxxxxxx použitými xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx sodného.

8.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxx se xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (S₈, X₄, X₂, X₁) x testovacího roztoku (X₈, U₄, X₂, X₁). Na každou xxxxx musí být xxxxxxxx bezpodmínečně všechny xxxxx koncentrace xxxxxxxxx x extraktu. X xxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx bylo xxxxx vytvořit ve xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx x průměru 10-13 xx s xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 30 xx. Xxxx by xxx být xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxx vyrobeny xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx 20 xx x xxxxxxx 200 xx.

Xx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx média (4.1) xxxxxxxxxxxx podle 8.1, xxx xx vytvořila xxxxxx silná xxxxxxxxx 2 xx (60 xx xx xxxxx x průměru 200 xx). Xxxx co xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx otvory, do xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx přesné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x testovacího xxxxxxx (mezi 0,10 x 0,15 ml xx xxxxx, xxxxx xxxxxxx otvoru). Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxx xxxx xx vyhodnotí 32 xxxxxxxxxxx zón.

8.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx 18 xxxxx xxx 35 xx 37 °X.

9. VYHODNOCENÍ

Průměr xxxxxxxxxxx xxx se xxxxx x xxxxxxxxx xx 0,1 mm. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx střední hodnoty xxxxxxx do xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx vztahu x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx. Xxx standardní xxxxxx xxxxxx xxxx pro xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx přímky, xxxxxxxxxx xxxx. níže xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XX) se xxxxxxx xxxxx následujícího xxxxxx:

x) XX = 7X₁ + 4X₂ + S₄ – 2X₈ / 10

Xxxxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx standardního roztoku (XX) se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorce:

b) XX = 7X₈ + 4S₄+ X₂ + 2S₁ / 10

Xxxxxx xxx xx xxxxxxx nejvhodnější xxxx xxx nejnižší (UL) x xxxxxxxx xxxxxx (XX) xxxxxxxx, xxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx dosadí X₁, U₂, X₄ x U₈ namísto X₁, S₂, S₄ x X₈.

Xxxxxxxxxx hodnoty XX x XX xx zanesou xx xxxxxxxx diagramu. Xxxxxxxx xxxx bodů vznikne xxxxxxxxxxxx přímka pro xxxxxxxxxx roztok. Xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx XX a XX k získání xxxxxxxxxxxx přímky xxx xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx faktory, měly xx xxx přímky xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx (XX-XX) x (XX-XX) xxxxxxxxxxx více xxx x 10 % od střední xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx nejsou xxxxxxxxxx, je možné xxxxxxxx xxx X1 x S1 nebo X8 x X8. Xxx xx hodnoty XX, XX, XX x XX určí xxxxxx následujících vzorců, xxx se obdržely xxxxxxxxxxxx nejvhodnější xxxxxx:

x) XX = 5S₁ + 2X₂ – X₄ / 6 xxxx 5S₂ + 2X₄ – S₈ / 6

x ) XX = 5S₄ + 2X₂ − X₁ / 6 xxxx 5S₈ + 2X₄ − X₂ / 6

Totéž se xxxxxxx pro xxxxxxx XX x XX. X těchto xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx se rovněž xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx, xxxxx xxxx stanoveny xx xxx úrovní, xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx protokolu x xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxx přímky xxxxxxxxx xx rovnoběžné, vypočítá xx xxxxxxxxxx relativní xxxxxxxx (xxx A) xxxxxx jednoho x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxx 4 xxxxxx

x) xxx X = (X₁+ U₂+ X₄+ U₈ – X₁ – X₂ – S₄ – X₈) × 0,602 / X₄+ U₈+ X₄+ X₈ – X₁ – U₂ – S₁ – X₂

Xxx 3 úrovně

d) xxx X = (X₁+ X₂+ U₄ – X₁ – X₂ – S₄) × 0,401 / X₄+ S₄ – X₁ – X₁

xxxx

x) xxx A = (X₂+ X₄+ U₈ – X₂ – X₄ – S₈) × 0,401 / X₈+ S₈ – X₂ – X₂

Xxxxxxxx xxxxxxxx = předpokládaná xxxxxxxx х relativní xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx mimo rozsah xxxxxx 0,5–2,0, xxxx xx xxxxxxxx při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx hodnot, xxxxxxxx xx třeba považovat xx xxxxxxxxx, x xx xx xxxx xxx zaznamenáno xx xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxx xxxx xxxxx přímky xxxxxxxxx za xxxxxxxxxx, xxxx xx zopakuje. Xxxxx xx ani xxx nedosáhne rovnoběžnosti, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx za neuspokojivý.

10. XXXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx rozborů xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx x xxxx zkoušce xx neměly xxxxxxxxxxx:

- 20 % xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xx 25 xx/xx,

- 5 xx/xx xxxxxxxxx hodnoty xxx xxxxxx 25 xx 50 xx/xx,

- 10 % xxxxx hodnoty xxxxxxxx xxx obsahu xxx 50 xx/xx.

[1] Xxxxx xxx použity xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx odpovídající xxxxxxxx xxxxxxxx.

[2] Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.

[3] 1 xx xxxxxxxxx sodného xxxxxxxx 1000 xxxxxxxxx XX.

[4] Mohou být xxxxxxx jiné metody, xxxxx xxxxxxx odpovídající xxxxxxxx spór.

[5] Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx médium xxxxxxxxxxxxxx složení, které xxxxxxxxx stejné xxxxxxxx.