Plné znění - 31981L0715

Devátá xxxxxxxx Xxxxxx

xx xxx 31. července 1981,

xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx metody Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx

(81/715/XXX)

XXXXXX EVROPSKÝCH XXXXXXXXXXXX,

x xxxxxxx na Smlouvu x xxxxxxxx Evropského xxxxxxxxxxxxx společenství,

s xxxxxxx xx směrnici Rady 70/373/XXX xx xxx 20. července 1970, xxxxxx se xxxxxx xxxxxx odběru xxxxxx x xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx Xxxxx x xxxxxxxxxxx Xxxxx, x xxxxxxx xx článek 2 uvedené xxxxxxxx,

xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxx 70/373/XXX xxxxxxx, xx xxxxxx kontroly xxxxx za xxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxx za použití xxxxx Xxxxxxxxxxxx pro xxxxx vzorků a xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx;

xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxx Xxxxxx 71/250/EHS [2], 71/393/XXX [3], 72/199/XXX [4], 73/46/EHS [5], 74/203/XXX [6], 75/84/XXX [7], 76/372/XXX [8] x 78/633/XXX [9], naposledy xxxxxxxxx xxxxxxxx ze dne 30. xxxxxxxx 1981, xxx xxxx analytických xxxxx Společenství xxxxxxxxx; xx stav od xx doby xxxxxxxxxxx xxxxx nyní umožňuje xxxxxxxx devátý xxxxxx xxxxxxxxxxxx metod;

vzhledem x xxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx výboru xxx xxxxxx,

XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:

Článek 1

Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx analýzy xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx na xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xx provádějí xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxxx 2

Xxxxxxx státy xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xx 1. prosince 1981. Xxxxxxxxxx x nich xxxxxxx Xxxxxx.

Článek 3

Tato xxxxxxxx xx určena xxxxxxxx xxxxxx.

V Xxxxxxx dne 31. července 1981.

Za Xxxxxx

Xxxxxx Xxxxx

xxxxxxxx

[1] Úř. věst. X 170, 3.8.1970, x. 2.

[2] Úř. věst. X 155, 12.7.1971, x. 13.

[3] Xx. xxxx. X 279, 20.12.1971, x. 7.

[4] Xx. věst. X 123, 29.5.1972, x. 6.

[5] Xx. věst. X 83, 30.3.1973, x. 21.

[6] Úř. xxxx. X 108, 22.4.1974, x. 7.

[7] Xx. věst. X 32, 5.2.1975, x. 26.

[8] Xx. xxxx. X 102, 15.4.1976, x. 8.

[9] Úř. xxxx. X 206, 29.7.1978, x. 43.

XXXXXXX

1. STANOVENÍ XXXXXXXXXX XXXXXX V XXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX

1. XXXX X XXXXXX XXXXXXX

Xxxx xxxxxx xxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxx v krmivech x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx hranice xxxxxxxxxxxxxxx xx 2 xx/xx (2 xxx). Přítomnost xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

2. XXXXXXX

Xx směsi xxxxxx/xxxx/xxxxxxxx chlorovodíková xx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx aktivita xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx médiu naočkovaném xxxxxxxxxxxxxxx Bacillus xxxxxxxx. Xxxxxx xx dokáže xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xx xxx xxxxxx použitých xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx logaritmu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

3. MIKROORGANISMUS: XXXXXXXX XXXXXXXX XXXX 6633 (XXXX 8054)

3.1 Uchovávání xxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx kultivační xxxxxx (4.1) x xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx mikroorganismem Xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxx xx xxx 30 °C xxxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxx 4 °X x každý měsíc xx xxxxx xxxxxxxx.

3.2. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx [1]

Xxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx médiu (3.1) xx omyje 2-3 xx xxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx Rouxova xxxxx, xxxxx xxxxxxxx 300 xx xxxxxxxxxxxx média (4.1), x xx xxxx 3 xx 5 xxx xx xxxxxxxx xxx 30 °X. Po xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx 15 xx ethanolu (4.2) x xxxxxxxxxxxxx xx. Xxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxxxxx při 4 °X.

4. XXXXXXXXXX XXXXXX X ČINIDLA

4.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx [2]

4.2 Xxxxxxx 20 %-ní (x/x): 200 xx xxxxxxxx se zředí 800 xx xxxx.

4.3 Xxxxxxxx chlorovodíková, d: 1,18–1,19.

4.4 Roztok xxxxxxxxx xxxxxxx, 2X.

4.5 Fosfátový xxxx 0,1 X:

xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, XX₂ XX₄: 13,6 x

xxxx: 1000 xx

xX upravit xx 4,5.

4.6 Směs acetonu/vody/kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (4.3): 65/32,5/2,5 (x/x/x)

4.7 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx o známé xxxxxxxx

5. XXXXXXXXXX ROZTOKY

Přesně xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 10 xx standardní xxxxxxxxx (4.7) xx xxxxxxxx ve xxxxxxxxxx xxxxx (4.5) x xxxxx pufrem naředí, xxx vznikl xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 100 μx avoparcinu x 1 xx. Xxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx a xxx 4 °X, xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 7 xxx.

5.1 Xxx xxxxxxxxxx premixy

Z xxxxxx xxxxxxxxx roztoku se xxxxxxxx postupným xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

5.2 Pro xxxxxx

X xxxxxxxxx roztoku xx xxxxxxxx postupným xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

6. XXXXXXXX XXXXXXXX A XXXXXXXXXXX XXXXXXX

6.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx 10 xx vzorku, xxxxx xxxxxxxx 10-100 xx xxxxxxxxxx, se x xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 100 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x 60 xx xxxxx (4.6) xx xxxx 15 xxxxx. Xxxxxxx xX xx xxxxxxxxxxx a pokud xx xxxxx, upraví xx xxxxxxxxx chlorovodíkovou (4.3) xx xxxxxxx 2. Xxxxx (4.6) xx xxxxxx xxxxx x homogenizuje xx. Xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx přes xxxxxx filtrační xxxxx (xxxx. Xxxxxxx č. 1) x xxxxxxx 5 xx filtrátu xx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx část x xX se xxxxxxxx hydroxidu sodného (4.4) xxxxxx na xxxxxxx 4,5. Xxxxx xxxxxx se zředí xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5), xxx xx dosáhlo xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 4 μg/ml ( = U₈).

Z tohoto xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (1+1) xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5) připraví xxxxxxx X4 (xxxxxxxxx xxxxx: 2 μx/xx), X2 (xxxxxxxxx xxxxx: 1 μx/xx) x X₁ (očekávaný xxxxx: 0,5 μg/ml).

6.2 Xxxxxx

Xxxxxx x hmotnosti 50 x se xxxxx xx 100 ml xxxxx (4.6) x xx xxxx 30 xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxx odstředěním (x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx). Poměrná xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx (xxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx pH se xxxxxxxx hydroxidu xxxxxxx (4.4) upraví xx 4,5. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4,5), xxx xx xxxxxx xxxxxx X8 (viz. xxxxxxxxxxx xxxxxxx).

X tohoto xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (1+1) xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5) xxxxxxxx roztoky X4 (očekávaný obsah: 1,0 μg/ml), U₂ (xxxxxxxxx xxxxx: 0,5 μx/xx) x X₁ (xxxxxxxxx obsah: 0,25 μx/xx).

7. XXXXXX XXXXX

7.1 Naočkování xxxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxx médium (4.1) xx naočkuje xxxxxxxx xxxx (3.2) xxx xxxxxxx 50–60 °C. Xxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx (4.1) xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx koncentracích xxxxxxxxxx.

7.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxx se xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (X₈, X₄, X₂, X₁) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (X8, X4, X2, U1).Na xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx standardu x xxxxxxxx. Z xxxx důvodu musí xxx xxxxx takové xxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx prostředí xxxxxxx osm xxxxxx x xxxxxxx 10-13 xx s xxxxxxxxxx xxxxxx minimálně 30 xx. Xxxx by xxx xxx prováděn xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxx hliníkové nebo xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx 20 xx x průměru 200 xx.

Xx xxxxx xx xxxxxx takové xxxxxxxx xxxxxxxxxx média (4.1) xxxxxxxxxxxx xxxxx 7.1, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx silná přibližně 2 xx (60 xx na xxxxx x xxxxxxx 200 xx). Xxxx, xx xxxxxx ztuhne, xxxxxxxx xx xxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx přesné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a testovacího xxxxxxx (mezi 0,10 x 0,15 ml xx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx). Každá xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx čtyřikrát, xxxxx xxx každý xxxx se xxxxxxxxx 32 xxxxxxxxxxx xxx.

7.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx xxxx 16 xx 18 xxxxx při 30 °X.

8. VYHODNOCENÍ

Průměr inhibičních xxx xx xxxxx x xxxxxxxxx xx 0,1 xx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx zanesou xx semilogaritmického xxxxxx, xxxxxxx xx zanáší xxxxxxxxxx koncentrace ve xxxxxx k průměru xxxxxxxxxxx zón. Pro xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx pro xxxxxxx xx xxxxxxxx nejpříhodnější xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx. xxxx xxxxxxxx způsobem.

Nejvhodnější xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx standardního roztoku (XX) xx stanoví xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) XX = 7X₈ + 4X₄ + X₂ – 2S₁ / 10

Xxxxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (SH) xx stanoví xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

XX = 7X₈ + 4X₄ + X₂ – 2X₁ / 10

Stejně xxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx pro xxxxxxxx (XX) a xxxxxxxx xxxxxx (XX) xxxxxxxx, xxxxxxx se xx výše uvedených xxxxxx xxxxxx X₁, X₂, X₄ x X₈ namísto X₁, X₂, X₄ a X₈.

Xxxxxxxxxx hodnoty SL x XX xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx obou xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx pro xxxxxxx XX x XX x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxxxxx rušivé xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx možno xxxxxxxxx za xxxxxxxxxx, xxxxx xx hodnoty (XX-XX) x (UH-UL) xxxxxxxxxxx xxxx xxx x 10 % xx xxxxxxx hodnoty.

Pokud xxxxxx nejsou xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxx X₁ a X₁ xxxx X₈ x X₈. Xxx xx hodnoty SL, XX, XX x XX xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxxx alternativní xxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx XX x XX. X xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx přímek xx rovněž xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Výsledky, které xxxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx protokolu o xxxxxxx.

Xxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx X) pomocí xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxx 4 úrovně

(c) xxx X = (X₁+ X₂+ X₄+ X₈ – X₁ – X₂ – X₄ – X₈) × 0,602 / X₄+ U₈+ X₄+ X₈ – X₁ – X₂ –

Xxx 3 xxxxxx

(x) xxx X = (U₁+ X₂+ X₄ – X₁ – S₂ – S₄) × 0,401 / X₄+ X₄ – X₁ – S₁

nebo

d´) xxx X = (X₂+ X₄+ X₈ – X₂ – S₄ – X₈) × 0,401 / X₈+ X₈ – X₂ – X₂

Xxxxxxxx xxxxxxxx = předpokládaná aktivita х relativní xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx aktivita xxxx xxxx xxxxxx hodnot 0,5–2,0, xxxxxxx xx xxxxxxxx při odpovídajícím xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxxxxx roztoků. Xxxxx xxxx možné xxxxxx relativní aktivitu x rozsahu požadovaných xxxxxx, výsledek je xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, a xx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxx není xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx zopakuje. Xxxxx xx xxx pak xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, je xxxxx výsledek xxxxxxxxx xx neuspokojivý.

9. XXXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxx xxxx výsledky xxxx xxxxxxxxx jednoho analytika xxx xxxxx x xxxx zkoušce by xxxxxx xxxxxxxxxxx:

- 2 xx/xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx avoparcinu 2 až 10 xx/xx,

- 20 % xxxxx xxxxxxx výsledku xxx xxxxxx 10 xx 25 xx/xx,

- 5 xx/xx absolutní xxxxxxx xxx obsahu 25 xx 50 xx/xx,

- 10 % xxxxx xxxxxxx výsledku xxx obsahu nad 50 xx/xx.

2. XXXXXXXXX XXXXXXXXX SODNÉHO XXXXXX X XXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX

1. ÚČEL X XXXXXX POUŽITÍ

Metoda umožňuje xxxxxxxxx xxxxxxxxx sodného x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx premixech. Xxxxxx xxxxxxx stanovitelnosti xx 10 xx/xx (10 xxx) [3].

2. XXXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxxxxx 90 %-xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx vhodnému xxxxxxx xxxxx obsahu xxxxxxxxx sodného xx xxxxxx. Jeho xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx difúze xxxxxxxxx xxxxxxx x agarovém xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx subtilis. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zónami xxxxxxxxxxxxxx. Průměr xxxxxx xxxxxxxxxxx zón xx x rozsahu xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx považován xx xxxxx xxxxxx logaritmu xxxxxxxxxxx antibiotika. Xxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

3. XXXXXXXXXXXXXXX: BACILLUS XXXXXXXX XXXX 6633 (NICB 8054)

3.1 Uchování kmenové xxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxx médium (4.1) x šikmých xxxxxxxxxx xx naočkuje xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx x přes xxx xx inkubuje xxx 30 °C. Xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx při xxx 4 °C x xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.

3.2 Příprava xxxxxxxx spór [4]

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx (3.1) x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxx 2-3 xx xxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx, která xxxxxxxx 300 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1), x xx xxxx 3 xx 5 xxx xx xxxxxxxx xxx 30 °X. Xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx mikroskopem xx xxxxxxx xxxxx xx 15 ml ethanolu (4.3) a zhomogenizuje xx. Tato xxxxxxxx xxxx xxx uchována xxxxxxxxx 5 měsíců xxx 4 °X.

4. XXXXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXX

4.3 Xxxxxxx 20 %-xx (x/x): 200 xx xxxxxxxx xx zředí 800 xx xxxx.

4.4 Xxxxxxxx, xxxxxxx.

4.5 Xxxxxxxx 90 %-xx (x/x): 900ml xxxxxxxxx (4.4) se xxxxx 100 xx xxxx.

4.6 Xxxxxxxx 50 %-xx (x/x): 500ml xxxxxxxxx (4.4) xx xxxxx 500 xx xxxx.

4.7 Oxid xxxxxxx, xxxxxxxxxxx (xxxxx X, 20 xxxx; xxxxxxxxx xxxxxxx UG1: F. Xxxxxxxxx xxx Xx., xxxx rovnocenný).

4.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx: monensin xxxxx x xxxxx xxxxxxxx (xxxx xxxx získatelný x Xxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxx, Xxxxxxx Veterinary Xxxxxxxxxx, Xxxxxxxxx, Xxxxxx XX15 3XX, Xxxxx Xxxxxxxx).

5. XXXXXXXXX

5.1 Xxxxxxx rotační xxxxxxx x 250xx xxxxxxx baňkou.

5.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx: 25 xx, xxxxx: 400 xx, s xxxxxxx x průměru 2 xx na xxxxxx xxxxx.

5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx, vnitřní xxxxxx: 11 mm, xxxxx: xxxxxxxxx 300 xx, s xxxxxxx x xxxxxxx 2 xx xx xxxxxx xxxxx.

6. XXXXXXXXXX XXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxx množství asi 10 xx standardní xxxxxxxxx (4.8) xx xxxxxxxx v xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxx sodného 800 μx/xx. Při uchování x xxxxxxxx láhvi x při 4 xX, xxxxxxx tento xxxxxx xxxxxxxxxx 2 xxxxx.

X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx připraví xxxxxxxxx rozřeďováním 50 %-xxx methanolem (4.6) xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

7. XXXXXXXX XXXXXXXX X XXXXXXXXXXX ROZTOKU

7.1 Xxxxxxxx

7.1.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxxxx 2,0 mg xx xxxxx k 100 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx (4.5), xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6), xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X₈).

7.1.2 Xxxxxx, u xxxxx xxxxx monensinu xxxx xxxxx xxx 50 xxx

Xxxxxx o xxxxxxxxx 10 xx 20 g xx xxxxx x 100 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx (4.5), 15 xxxxx protřese a xxxxx ustát.

Vatová zátka xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.2) x za xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxx 75–80 xx xxxxxx xxxxxxxx (4.7).

Xxxxxxx xx xxxxxxx xx sloupec xxxxx hlinitého x xxxxxxx xx xxxxxxx. 30 xx filtrátu xx xxxxx 50 xx xxxx. Xxxx xxxx xx xxxxx 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6), aby bylo xxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X₈).

7.1.3 Xxxxxx x xxxxx podíl xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 50 xxx (xxxxxx xxxxxxx 10 xxx)

Xxxxxx o hmotnosti 10 xx 20 x xx přidá x 100 ml 90 %-xxxx xxxxxxxxx (4.5), 15 xxxxx xxxxxxxx x odstřeďuje xxxxx se xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx 20 xxx xx xxxxxxx 40 xx zbytku; xxx 10 xxx se xxxxxxx 80 ml. Xxxxxx se xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 40 °X x xxxxxxxx xxxxxxx (5.1). Zůstatek xx rozpustí x 10 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxx xxxxx xx zavede xx xxxxxxxx trubičky (5.3) x za xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx do xxxx 75–80 xx oxidem xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx roztok xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx hlinitého x filtrát xx xxxxxxx. Xxxxxx se xxxxxxx 10 ml 90xxxxxxxxxxx methanolu a xxxxxxx xxxxxxx se xxxxx k prvnímu xxxxxxxx.

Xxxxxx se xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 40 °X x rotační xxxxxxx (5.1). Xxxxxxxx xx xxxxxxxx x 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxx xx xxxxxx xxxxx na 20 xx. Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxxxx při minimálních xxxxxxxx 4000 xx/xxx. Xxxx xxxx se xxxxx 50 %-xxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx očekávané xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X₈).

7.2. Xxxxxxxxx roztok

Z xxxxxxx U8 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (1 + 1) 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6) xxxxxxxx xxxxxxx X4 (xxxxxxxxx xxxxx: 4 μx/xx), X2 (xxxxxxxxx xxxxx: 2 μg/ml), X1 (xxxxxxxxx xxxxx: 1 μx/xx).

8. POSTUP XXXXX

8.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxx médium (4.2) xx naočkuje xxxxxxxx xxxx (3.2) při 50 xx 60 °X. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx se xxxxxxxxx médiem (4.2) xx stanoví xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx xxxxx největší xxx ještě ostré xxxxxxxxx zóny x xxxxxxx xxxxxxxxx koncentracemi xxxxxxxxx sodného.

8.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxx se xxxxxx xxxx xxxxxxx test xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (X₈, X₄, X₂, S₁) x xxxxxxxxxxx roztoku (X₈, U₄, X₂, X₁). Xx každou xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx všechny xxxxx xxxxxxxxxxx standardu x extraktu. X xxxx důvodu musí xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx ve xxxxxx kultivačního xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxx 10-13 xx x xxxxxxxxxx xxxxxx minimálně 30 xx. Xxxx xx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx miskách, xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx desky, xx nichž xx xxxxxxx hliníkový xxxx xxxxxxxx kroužek x xxxxx 20 xx x průměru 200 xx.

Xx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxxxx xxxxx 8.1, xxx se vytvořila xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 2 xx (60 xx na xxxxx x xxxxxxx 200 xx). Poté xx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx, do xxxxxxx se pipetou xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 xx xx otvor, xxxxx xxxxxxx xxxxxx). Každá xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxx xxxx xx vyhodnotí 32 xxxxxxxxxxx xxx.

8.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx přibližně po xxxx 18 hodin xxx 35 až 37 °X.

9. VYHODNOCENÍ

Průměr xxxxxxxxxxx zón se xxxxx s xxxxxxxxx xx 0,1 xx. Xxx xxxxxx koncentraci xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx se xxxxxx logaritmus koncentrace xx xxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx. Xxx xxxxxxxxxx roztok xxxxxx jako pro xxxxxxx se zakreslí xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx. xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxx úroveň xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XX) xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) XX = 7X₁ + 4S₂ + S₄ – 2X₈ / 10

Xxxxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (XX) xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) XX = 7X₈ + 4S₄+ S₂ + 2X₁ / 10

Xxxxxx xxx xx xxxxxxx nejvhodnější xxxx xxx xxxxxxxx (UL) x xxxxxxxx xxxxxx (XX) xxxxxxxx, xxxxxxx xx do výše xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx X₁, U₂, X₄ x X₈ xxxxxxx X₁, S₂, S₄ x S₈.

Vypočítané xxxxxxx XX x SH xx zanesou xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx vznikne xxxxxxxxxxxx přímka xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Totéž xx provede xxx xxxxxxx XX x XX x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx přímky xxx xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Přímky je xxxxx považovat za xxxxxxxxxx, pokud se xxxxxxx (SH-SL) a (XX-XX) neodchylují více xxx x 10 % xx střední xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxx X1 x S1 nebo X8 x S8. Xxx se hodnoty XX, XX, XX x UH xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xx obdržely xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) XX = 5X₁ + 2X₂ – X₄ / 6 xxxx 5X₂ + 2X₄ – X₈ / 6

b ) XX = 5X₄ + 2S₂ − X₁ / 6 xxxx 5S₈ + 2X₄ − S₂ / 6

Xxxxx xx xxxxxxx pro xxxxxxx XX x UH. X těchto alternativních xxxxxx xx rovněž xxxxxxxxxxx rovnoběžnost. Xxxxxxxx, xxxxx byly xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, xx xxxx být xxxxxxxxxxx do xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx X) xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxx 4 xxxxxx

x) xxx X = (U₁+ U₂+ X₄+ X₈ – X₁ – S₂ – S₄ – X₈) × 0,602 / X₄+ X₈+ X₄+ X₈ – X₁ – X₂ – X₁ – X₂

Xxx 3 úrovně

d) xxx X = (X₁+ X₂+ X₄ – X₁ – X₂ – X₄) × 0,401 / X₄+ X₄ – X₁ – S₁

nebo

d) xxx A = (X₂+ X₄+ U₈ – X₂ – X₄ – X₈) × 0,401 / X₈+ X₈ – X₂ – X₂

Xxxxxxxx xxxxxxxx = předpokládaná xxxxxxxx х xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxx 0,5–2,0, xxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx přibližný, a xx xx mělo xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx o xxxxxxx.

Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxx se zopakuje. Xxxxx xx ani xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxxxx.

10. XXXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxx xxxx výsledky xxxx xxxxxxx jednoho xxxxxxxxx xxx jedné x xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx:

- 20 % xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx sodného 10 až 25 xx/xx,

- 5 mg/kg xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx 25 xx 50 xx/xx,

- 10 % xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx obsahu xxx 50 xx/xx.

[1] Xxxxx xxx xxxxxxx xxxx metody, které xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

[2] Může být xxxxxxx xxxxxxxxx komerční xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.

[3] 1 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 1000 jednotkám XX.

[4] Xxxxx být xxxxxxx jiné metody, xxxxx vytvoří xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx spór.

[5] Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx výsledky.