Plné znění - 31981L0715

Xxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx

xx xxx 31. xxxxxxxx 1981,

xxxxxx se stanoví xxxxxxxxxx metody Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx kontrolu xxxxx

(81/715/XXX)

XXXXXX EVROPSKÝCH XXXXXXXXXXXX,

x xxxxxxx na Xxxxxxx x založení Evropského xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,

x xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxx 70/373/XXX xx dne 20. xxxxxxxx 1970, xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxx x xxxxxxxxxxx Xxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx,

xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxx 70/373/EHS xxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx za účelem xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx právních x xxxxxxxxx předpisů xx xxxxxx a xxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx Společenství xxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx;

xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx Xxxxxx 71/250/EHS [2], 71/393/XXX [3], 72/199/XXX [4], 73/46/XXX [5], 74/203/XXX [6], 75/84/XXX [7], 76/372/XXX [8] x 78/633/XXX [9], xxxxxxxxx pozměněné xxxxxxxx xx xxx 30. xxxxxxxx 1981, xxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; xx xxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx nyní xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx metod;

vzhledem x xxxx, že xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx se xxxxxxxxxxx Xxxxxxx výboru xxx xxxxxx,

XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:

Xxxxxx 1

Xxxxxxx státy xxxxxxx, že xxxxxxx xxx úřední xxxxxxxx xxxxx na xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxxx 2

Xxxxxxx státy xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx nezbytné pro xxxxxxxx souladu x xxxxx xxxxxxxx do 1. xxxxxxxx 1981. Xxxxxxxxxx o nich xxxxxxx Xxxxxx.

Xxxxxx 3

Xxxx směrnice xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

V Xxxxxxx dne 31. xxxxxxxx 1981.

Xx Xxxxxx

Xxxxxx Xxxxx

xxxxxxxx

[1] Úř. věst. X 170, 3.8.1970, x. 2.

[2] Xx. věst. X 155, 12.7.1971, x. 13.

[3] Úř. xxxx. X 279, 20.12.1971, x. 7.

[4] Úř. xxxx. X 123, 29.5.1972, x. 6.

[5] Xx. xxxx. X 83, 30.3.1973, x. 21.

[6] Xx. xxxx. X 108, 22.4.1974, x. 7.

[7] Xx. xxxx. X 32, 5.2.1975, x. 26.

[8] Xx. věst. X 102, 15.4.1976, x. 8.

[9] Xx. věst. X 206, 29.7.1978, x. 43.

XXXXXXX

1. XXXXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXX X AGAROVÉM XXXXXXXXXXX XXXXX

1. XXXX X ROZSAH POUŽITÍ

Tato xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx premixech. Xxxxxx hranice xxxxxxxxxxxxxxx xx 2 xx/xx (2 xxx). Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx antibiotik xxxx xx xxxxxxxxx působit xxxxxx.

2. XXXXXXX

Xx xxxxx xxxxxx/xxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx odstředí. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx měřením xxxxxx xxxxxxxxxx x agarovém xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Bacillus xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx inhibičních xxx xx pro xxxxxx xxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxxxx.

3. MIKROORGANISMUS: XXXXXXXX XXXXXXXX XXXX 6633 (XXXX 8054)

3.1 Uchovávání xxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx kultivační xxxxxx (4.1) v xxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx x přes xxx xx xxx 30 °X inkubuje. Xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx při xxx 4 °X x xxxxx xxxxx xx xxxxx naočkuje.

3.2. Xxxxxxxx suspenze xxxx [1]

Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx (3.1) xx xxxxx 2-3 xx xxxxxxxx xxxx. Xxxxx suspenzí se xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx 300 xx xxxxxxxxxxxx média (4.1), x xx xxxx 3 xx 5 dní xx xxxxxxxx xxx 30 °X. Xx kontrole xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx se kultura xxxxx xx 15 xx xxxxxxxx (4.2) x zhomogenizuje xx. Xxxx xxxxxxxx může xxx uchována minimálně 5 měsíců při 4 °X.

4. KULTIVAČNÍ XXXXXX X ČINIDLA

4.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx [2]

4.2 Xxxxxxx 20 %-xx (x/x): 200 xx xxxxxxxx xx zředí 800 xx vody.

4.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, x: 1,18–1,19.

4.4 Xxxxxx hydroxidu xxxxxxx, 2X.

4.5 Xxxxxxxxx xxxx 0,1 X:

xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, XX₂ XX₄: 13,6 g

voda: 1000 xx

xX xxxxxxx xx 4,5.

4.6 Směs xxxxxxx/xxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (4.3): 65/32,5/2,5 (x/x/x)

4.7 Standardní xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx

5. STANDARDNÍ XXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxx množství asi 10 mg standardní xxxxxxxxx (4.7) xx xxxxxxxx xx fosfátovém xxxxx (4.5) x xxxxx pufrem naředí, xxx vznikl základní xxxxxx obsahující 100 μx xxxxxxxxxx x 1 ml. Xxx xxxxxxxx x uzavřené xxxxx a xxx 4 °X, xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 7 xxx.

5.1 Xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx

X xxxxxx xxxxxxxxx roztoku xx xxxxxxxx postupným rozřeďováním xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

5.2 Pro xxxxxx

X xxxxxxxxx roztoku xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx fosfátovým xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

6. XXXXXXXX EXTRAKTU A XXXXXXXXXXX XXXXXXX

6.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx 10 xx vzorku, xxxxx xxxxxxxx 10-100 xx avoparcinu, xx x odměrné baňce x xxxxxx 100 xx mechanicky xxxxxxxx x 60 xx xxxxx (4.6) po xxxx 15 xxxxx. Xxxxxxx xX se xxxxxxxxxxx x pokud xx třeba, xxxxxx xx kyselinou xxxxxxxxxxxxxxx (4.3) xx xxxxxxx 2. Xxxxx (4.6) xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xx. Xxx xx dílčí xxxxxxxx přefiltruje přes xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx. Xxxxxxx č. 1) a xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx xx sleje. Odebere xx xxxxxxx xxxx x xX xx xxxxxxxx xxxxxxxxx sodného (4.4) xxxxxx xx xxxxxxx 4,5. Xxxxx xxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5), xxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 4 μg/ml ( = U₈).

Z tohoto xxxxxxx se postupným xxxxxxxxxxxx (1+1) xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5) xxxxxxxx xxxxxxx U4 (xxxxxxxxx xxxxx: 2 μg/ml), X2 (xxxxxxxxx obsah: 1 μx/xx) a X₁ (xxxxxxxxx xxxxx: 0,5 μx/xx).

6.2 Xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxxxx 50 x xx xxxxx xx 100 xx xxxxx (4.6) x xx xxxx 30 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Extrakt se xxxxx xxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxx zkumavkách). Xxxxxxx xxxx čistého extraktu xx odebere (xxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xX xx xxxxxxxx xxxxxxxxx sodného (4.4) upraví xx 4,5. Xxxxx roztok xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4,5), aby xx získal roztok X8 (xxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxx).

X xxxxxx xxxxxxx xx postupným xxxxxxxxxxxx (1+1) xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5) xxxxxxxx roztoky X4 (očekávaný xxxxx: 1,0 μx/xx), X₂ (xxxxxxxxx obsah: 0,5 μx/xx) x U₁ (xxxxxxxxx xxxxx: 0,25 μx/xx).

7. XXXXXX XXXXX

7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxx xxxxxx (4.1) xx xxxxxxxx suspenzí xxxx (3.2) při xxxxxxx 50–60 °C. Xxxxxxxxxxx pokusy na xxxxxxx xx zkušebním xxxxxx (4.1) xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx vykáže xx xxxxx xxxxxxxx ale xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx při xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

7.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx na xxxxxxx xx xxxxxxx koncentračních xxxxxxxx standardního xxxxxxx (X₈, X₄, S₂, X₁) a xxxxxxxxxxx xxxxxxx (X8, U4, X2, X1).Xx xxxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx. Z xxxx důvodu xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, aby bylo xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx otvorů x průměru 10-13 xx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 30 xx. Xxxx xx xxx xxx prováděn xxxxxxxxx xx miskách, xxxxx xxxx vyrobeny xx xxxxxxxx desky, xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx 20 xx x průměru 200 xx.

Xx misku xx xxxxxx takové xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxxxx xxxxx 7.1, xxx se xxxxxxxxx xxxxxx silná přibližně 2 xx (60 xx xx xxxxx x xxxxxxx 200 xx). Xxxx, xx xxxxxx ztuhne, vyhloubí xx xxxxxx, do xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (mezi 0,10 x 0,15 ml xx xxxxx, podle xxxxxxx otvoru). Každá xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx čtyřikrát, xxxxx pro xxxxx xxxx se xxxxxxxxx 32 xxxxxxxxxxx xxx.

7.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx xxxx 16 xx 18 xxxxx xxx 30 °X.

8. VYHODNOCENÍ

Průměr xxxxxxxxxxx xxx se xxxxx x přesností xx 0,1 mm. Xxx xxxxxx koncentraci se xxxxxxx hodnoty zanesou xx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx se zanáší xxxxxxxxxx koncentrace ve xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx pro extrakt xx xxxxxxxx nejpříhodnější xxxxxx, xxxxxxxxxx např. xxxx xxxxxxxx způsobem.

Nejvhodnější xxx xxx nejnižší xxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (XX) xx stanoví xxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorce:

a) XX = 7X₈ + 4X₄ + X₂ – 2X₁ / 10

Xxxxxxxxxxxx bod xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XX) xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

XX = 7X₈ + 4X₄ + X₂ – 2X₁ / 10

Xxxxxx xxx xx stanoví xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxx (XX) xxxxxxxx, přičemž se xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx dosadí X₁, X₂, U₄ a X₈ namísto X₁, X₂, S₄ x X₈.

Xxxxxxxxxx hodnoty XX x XX se xxxxxxx xx stejného xxxxxxxx. Xxxxxxxx obou xxxx vznikne xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx standardní xxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxx hodnoty XX x UH x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxxxxx rušivé xxxxxxx, xxxx by xxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxx xx hodnoty (XX-XX) a (UH-UL) xxxxxxxxxxx xxxx xxx x 10 % xx xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx nejsou xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxx X₁ x X₁ nebo X₈ x X₈. Xxx xx xxxxxxx XX, XX, XX x XX xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorců, xxx xx obdržely alternativní xxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxxxx se xxxxxxx xxx xxxxxxx UL x UH. X xxxxxx alternativních xxxxxx xx xxxxxx zkontroluje xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxx úrovní, xx xxxx být zaznamenány xx xxxxxxxxx o xxxxxxx.

Xxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx aktivity (xxx X) xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxx 4 xxxxxx

(x) xxx A = (X₁+ X₂+ X₄+ X₈ – X₁ – S₂ – X₄ – X₈) × 0,602 / X₄+ X₈+ X₄+ X₈ – X₁ – X₂ –

Pro 3 xxxxxx

(x) log X = (X₁+ X₂+ U₄ – X₁ – X₂ – X₄) × 0,401 / X₄+ X₄ – X₁ – S₁

nebo

d´) xxx X = (U₂+ X₄+ X₈ – X₂ – X₄ – X₈) × 0,401 / U₈+ X₈ – X₂ – X₂

Xxxxxxxx aktivita = xxxxxxxxxxxxx aktivita х relativní xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx aktivita xxxx xxxx xxxxxx xxxxxx 0,5–2,0, zkouška se xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx koncentrací extraktu xxxx. xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx možné xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx požadovaných xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx považovat xx xxxxxxxxx, a xx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x analýze.

Pokud xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxx. Pokud xx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx výsledek xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.

9. OPAKOVATELNOST

Rozdíly xxxx výsledky xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx analytika xxx jedné x xxxx zkoušce xx xxxxxx xxxxxxxxxxx:

- 2 xx/xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx obsahu xxxxxxxxxx 2 xx 10 xx/xx,

- 20 % xxxxx hodnoty xxxxxxxx xxx xxxxxx 10 xx 25 xx/xx,

- 5 xx/xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx 25 až 50 xx/xx,

- 10 % xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxx 50 mg/kg.

2. XXXXXXXXX XXXXXXXXX SODNÉHO DIFÚZÍ X AGAROVÉM KULTIVAČNÍM XXXXX

1. ÚČEL X XXXXXX XXXXXXX

Xxxxxx umožňuje xxxxxxxxx monensinu xxxxxxx x krmivech x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 10 xx/xx (10 xxx) [3].

2. XXXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxxxxx 90 %-xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx sodného xx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx stanoví xxxxxxx xxxxxx monensinu xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx naočkovaném xxxxxxxxxxxxxxx Bacillus subtilis. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx inhibičními zónami xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx je x rozsahu xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx považován xx xxxxx úměrný logaritmu xxxxxxxxxxx antibiotika. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

3. XXXXXXXXXXXXXXX: XXXXXXXX XXXXXXXX XXXX 6633 (XXXX 8054)

3.1 Xxxxxxxx kmenové xxxxxxx

Xxxxxxx kultivační xxxxxx (4.1) x xxxxxxx xxxxxxxxxx xx naočkuje xxxxxxxxxxxxxxx Bacillus subtilis x přes xxx xx xxxxxxxx při 30 °X. Xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxx 4 °X x xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.

3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx spór [4]

Čerstvá xxxxxxx na xxxxx (3.1) x xxxxx xxxxxxxx xx omyje 2-3 ml xxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx 300 xx kultivačního xxxxx (4.1), a xx xxxx 3 xx 5 xxx xx xxxxxxxx xxx 30 °X. Po xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx mikroskopem se xxxxxxx xxxxx xx 15 xx xxxxxxxx (4.3) x zhomogenizuje xx. Xxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 5 měsíců xxx 4 °X.

4. XXXXXXXXXX MÉDIUM A XXXXXXX

4.3 Xxxxxxx 20 %-xx (x/x): 200 xx ethanolu xx xxxxx 800 xx xxxx.

4.4 Xxxxxxxx, xxxxxxx.

4.5 Xxxxxxxx 90 %-xx (v/v): 900xx xxxxxxxxx (4.4) xx xxxxx 100 xx xxxx.

4.6 Methanol 50 %-xx (v/v): 500xx xxxxxxxxx (4.4) se xxxxx 500 xx xxxx.

4.7 Xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx (xxxxx X, 20 xxxx; xxxxxxxxx xxxxxxx UG1: X. Xxxxxxxxx xxx Xx., xxxx xxxxxxxxxx).

4.8 Standardní xxxxxxxxx: monensin xxxxx x známé xxxxxxxx (xxxx xxxx získatelný x International Xxxxxxxxxx xxx Xxxxxxxxxx Standards, Xxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx, Xxxxxxxxx, Surrey XX15 3XX, Xxxxx Xxxxxxxx).

5. XXXXXXXXX

5.1 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx s 250xx xxxxxxx xxxxxx.

5.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx: 25 xx, xxxxx: 400 xx, x otvorem x xxxxxxx 2 xx xx jednom xxxxx.

5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx: 11 xx, xxxxx: přibližně 300 xx, s xxxxxxx x xxxxxxx 2 xx xx xxxxxx xxxxx.

6. STANDARDNÍ ROZTOKY

Přesně xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 10 mg standardní xxxxxxxxx (4.8) se xxxxxxxx x methanolu (4.4) x naředí, xxx xxxxxx výchozí xxxxxx x obsahem xxxxxxxxx xxxxxxx 800 μx/xx. Xxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x při 4 xX, xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 2 xxxxx.

X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx se připraví xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 50 %-xxx methanolem (4.6) xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

7. XXXXXXXX XXXXXXXX X XXXXXXXXXXX XXXXXXX

7.1 Extrakce

7.1.1 Xxxxxxxxxx premixy

Vzorek x xxxxxxxxx 2,0 mg xx přidá x 100 ml 90 %-xxxx xxxxxxxxx (4.5), xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6), xxx bylo xxxxxxxx očekávané xxxxxxxxxxx xxxxxxxx sodného 8 μx/xx ( = X₈).

7.1.2 Xxxxxx, x xxxxx podíl xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx 50 xxx

Xxxxxx o xxxxxxxxx 10 xx 20 x se xxxxx x 100 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx (4.5), 15 xxxxx xxxxxxxx x xxxxx ustát.

Vatová xxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.2) x xx lehkého xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx výše 75–80 xx xxxxxx xxxxxxxx (4.7).

Extrakt xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx filtrát. 30 ml xxxxxxxx xx zředí 50 xx xxxx. Hned xxxx se zředí 50 %-ním xxxxxxxxxx (4.6), xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X₈).

7.1.3 Krmiva u xxxxx xxxxx monensinu xxxxxxxxxx 50 xxx (xxxxxx hranice 10 xxx)

Xxxxxx o hmotnosti 10 xx 20 x xx přidá x 100 xx 90 %-xxxx methanolu (4.5), 15 xxxxx xxxxxxxx x odstřeďuje xxxxx se xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxx s podílem xxxxxxxxx 20 ppm xx xxxxxxx 40 xx zbytku; xxx 10 xxx xx xxxxxxx 80 xx. Xxxxxx xx xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 40 °X x rotačním xxxxxxx (5.1). Xxxxxxxx xx rozpustí v 10 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxx xxxxx xx xxxxxx do xxxxxxxx trubičky (5.3) x xx xxxxxxx xxxxxxx se trubička xxxxxx xx xxxx 75–80 mm xxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x filtrát xx xxxxxxx. Kolona se xxxxxxx 10 xx 90xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx filtrát se xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx xx odpaří xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 40 °X x xxxxxxx xxxxxxx (5.1). Zůstatek xx rozpustí x 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xx 20 xx. Roztok xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx 4000 xx/xxx. Xxxx poté xx xxxxx 50 %-ním xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx sodného 8 μx/xx ( = X₈).

7.2. Xxxxxxxxx xxxxxx

X xxxxxxx X8 se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (1 + 1) 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6) xxxxxxxx roztoky X4 (xxxxxxxxx podíl: 4 μx/xx), X2 (xxxxxxxxx xxxxx: 2 μg/ml), X1 (xxxxxxxxx xxxxx: 1 μg/ml).

8. XXXXXX XXXXX

8.1 Xxxxxxxxxx kultivačního xxxxx

Xxxxxxxx médium (4.2) xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx (3.2) xxx 50 až 60 °X. Xxxxxxxxxxx pokusy xx miskách xx xxxxxxxxx médiem (4.2) xx stanoví množství xxxxxxx, xxxxx vykáže xx xxxxx xxxxxxxx xxx ještě xxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx koncentracemi xxxxxxxxx sodného.

8.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxx se xxxxxx xxxx difúzní xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (X₈, X₄, S₂, S₁) x xxxxxxxxxxx roztoku (X₈, X₄, X₂, X₁). Xx xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx standardu x xxxxxxxx. Z xxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx bylo xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx média xxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxx 10-13 xx s xxxxxxxxxx xxxxxx minimálně 30 xx. Test by xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx, xxxxx xxxx vyrobeny xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx je xxxxxxx hliníkový nebo xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx 20 mm x xxxxxxx 200 xx.

Xx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx množství xxxxxxxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxxxx xxxxx 8.1, xxx xx vytvořila xxxxxx silná přibližně 2 xx (60 xx xx xxxxx x xxxxxxx 200 xx). Xxxx xx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx otvory, xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx množství xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 xx xx xxxxx, podle xxxxxxx xxxxxx). Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx čtyřikrát, xxxxx xxx xxxxx xxxx xx vyhodnotí 32 xxxxxxxxxxx xxx.

8.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx 18 xxxxx xxx 35 až 37 °C.

9. XXXXXXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxxxxx zón se xxxxx x xxxxxxxxx xx 0,1 mm. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxx logaritmus xxxxxxxxxxx xx vztahu x xxxxxxx xxxxxxxxxxx zón. Xxx xxxxxxxxxx roztok xxxxxx jako pro xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx přímky, vypočítané xxxx. níže xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx bod xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (SL) xx xxxxxxx podle následujícího xxxxxx:

x) SL = 7X₁ + 4X₂ + S₄ – 2X₈ / 10

Xxxxxxxxxxxx xxx xxx nejvyšší xxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (XX) xx stanoví xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) XX = 7S₈ + 4S₄+ S₂ + 2S₁ / 10

Xxxxxx xxx xx xxxxxxx nejvhodnější xxxx xxx xxxxxxxx (UL) x nejvyšší xxxxxx (XX) xxxxxxxx, přičemž xx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx X₁, U₂, X₄ x X₈ xxxxxxx X₁, X₂, S₄ x S₈.

Vypočítané xxxxxxx XX a XX xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxx roztok. Xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx XX a XX x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx faktory, xxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx (XX-XX) x (XX-XX) xxxxxxxxxxx xxxx xxx o 10 % xx střední xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx buď U1 x S1 nebo X8 x X8. Xxx se xxxxxxx XX, SH, XX x XX určí xxxxxx následujících vzorců, xxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) XX = 5X₁ + 2X₂ – X₄ / 6 xxxx 5X₂ + 2X₄ – X₈ / 6

x ) XX = 5S₄ + 2X₂ − X₁ / 6 xxxx 5X₈ + 2X₄ − X₂ / 6

Totéž se xxxxxxx xxx xxxxxxx XX x XX. X těchto xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Výsledky, xxxxx xxxx stanoveny xx tří úrovní, xx měly xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxx přímky xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx logaritmus xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx X) xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx vzorců:

Pro 4 xxxxxx

x) xxx X = (U₁+ X₂+ X₄+ X₈ – X₁ – X₂ – X₄ – X₈) × 0,602 / U₄+ X₈+ X₄+ X₈ – X₁ – U₂ – X₁ – X₂

Xxx 3 xxxxxx

x) xxx X = (X₁+ U₂+ X₄ – S₁ – X₂ – X₄) × 0,401 / X₄+ S₄ – X₁ – S₁

nebo

d) xxx X = (X₂+ X₄+ X₈ – X₂ – X₄ – S₈) × 0,401 / X₈+ X₈ – X₂ – X₂

Xxxxxxxx xxxxxxxx = xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx х xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx relativní xxxxxxxx xxxx xxxx rozsah xxxxxx 0,5–2,0, xxxx xx xxxxxxxx při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx není xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxxxx hodnot, výsledek xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, x xx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx do xxxxxxxxx o analýze.

Pokud xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxx se xxxxxxxx. Xxxxx se ani xxx xxxxxxxxx rovnoběžnosti, xx xxxxx výsledek xxxxxxxxx xx neuspokojivý.

10. XXXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxx mezi výsledky xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx jedné x xxxx zkoušce xx xxxxxx xxxxxxxxxxx:

- 20 % vyšší xxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxx monensinu sodného 10 až 25 xx/xx,

- 5 xx/xx xxxxxxxxx xxxxxxx při xxxxxx 25 až 50 mg/kg,

- 10 % xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxx 50 xx/xx.

[1] Xxxxx být xxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

[2] Může xxx xxxxxxx jakékoliv komerční xxxxxxxxxx médium xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, které xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.

[3] 1 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 1000 xxxxxxxxx XX.

[4] Xxxxx xxx xxxxxxx jiné xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx.

[5] Může xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx stejné xxxxxxxx.