Plné znění - 31981L0715

Xxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx

xx xxx 31. července 1981,

xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Společenství xxx úřední xxxxxxxx xxxxx

(81/715/XXX)

XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,

x xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Evropského xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,

x xxxxxxx xx směrnici Xxxx 70/373/XXX ze dne 20. xxxxxxxx 1970, xxxxxx xx zavádí xxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx úřední xxxxxxxx xxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxx o xxxxxxxxxxx Xxxxx, x xxxxxxx na článek 2 uvedené xxxxxxxx,

xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxx 70/373/EHS xxxxxxx, xx xxxxxx kontroly xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx požadavky právních x xxxxxxxxx xxxxxxxx xx jakost x xxxxxxx xxxxx, se xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx Společenství;

vzhledem x xxxx, že xxxxxxxx Komise 71/250/XXX [2], 71/393/XXX [3], 72/199/XXX [4], 73/46/XXX [5], 74/203/XXX [6], 75/84/XXX [7], 76/372/XXX [8] a 78/633/EHS [9], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxx 30. července 1981, xxx xxxx analytických xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; xx xxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx devátý xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx;

xxxxxxxx k xxxx, xx opatření xxxx xxxxxxxx xxxx x souladu se xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx,

XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:

Xxxxxx 1

Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, že xxxxxxx xxx xxxxxx kontrolu xxxxx xx obsah xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Článek 2

Xxxxxxx státy xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxx směrnicí do 1. xxxxxxxx 1981. Xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx Komisi.

Článek 3

Xxxx směrnice xx xxxxxx členským xxxxxx.

X Bruselu xxx 31. xxxxxxxx 1981.

Xx Xxxxxx

Xxxxxx Thorn

předseda

[1] Xx. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.

[2] Xx. xxxx. X 155, 12.7.1971, x. 13.

[3] Xx. xxxx. X 279, 20.12.1971, x. 7.

[4] Xx. xxxx. X 123, 29.5.1972, x. 6.

[5] Xx. xxxx. X 83, 30.3.1973, x. 21.

[6] Úř. xxxx. X 108, 22.4.1974, x. 7.

[7] Xx. xxxx. X 32, 5.2.1975, x. 26.

[8] Xx. xxxx. X 102, 15.4.1976, x. 8.

[9] Úř. xxxx. X 206, 29.7.1978, x. 43.

PŘÍLOHA

1. XXXXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXXX XXXXXXXXXXX MÉDIU

1. ÚČEL X ROZSAH POUŽITÍ

Tato xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x krmivech x medikovaných xxxxxxxxx. Xxxxxx hranice xxxxxxxxxxxxxxx xx 2 xx/xx (2 xxx). Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx působit xxxxxx.

2. PRINCIP

Ze xxxxx xxxxxx/xxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx vzorek. Extrakt xx odstředí. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx měřením xxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx naočkovaném xxxxxxxxxxxxxxx Bacillus xxxxxxxx. Xxxxxx xx dokáže xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Průměr xxxxxxxxxxx xxx xx xxx xxxxxx použitých xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx za xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

3. MIKROORGANISMUS: XXXXXXXX XXXXXXXX ATCC 6633 (XXXX 8054)

3.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1) v xxxxxxx zkumavkách xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx a přes xxx xx xxx 30 °X inkubuje. Xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxx 4 °X x xxxxx měsíc xx xxxxx xxxxxxxx.

3.2. Xxxxxxxx suspenze spór [1]

Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx (3.1) xx xxxxx 2-3 xx sterilní vody. Xxxxx suspenzí xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxxxx obsahuje 300 xx kultivačního média (4.1), x xx xxxx 3 až 5 dní xx xxxxxxxx při 30 °X. Xx xxxxxxxx xxxxxx spór pod xxxxxxxxxxx xx kultura xxxxx do 15 xx xxxxxxxx (4.2) x zhomogenizuje xx. Xxxx xxxxxxxx xxxx xxx uchována xxxxxxxxx 5 xxxxxx při 4 °X.

4. XXXXXXXXXX XXXXXX X ČINIDLA

4.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx [2]

4.2 Xxxxxxx 20 %-ní (x/x): 200 xx xxxxxxxx se xxxxx 800 xx xxxx.

4.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, x: 1,18–1,19.

4.4 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, 2X.

4.5 Xxxxxxxxx xxxx 0,1 M:

dihydrogenfosforečnan xxxxxxxx, KH₂ XX₄: 13,6 g

voda: 1000 xx

xX upravit na 4,5.

4.6 Xxxx acetonu/vody/kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (4.3): 65/32,5/2,5 (x/x/x)

4.7 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx o známé xxxxxxxx

5. XXXXXXXXXX XXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxx množství asi 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.7) xx xxxxxxxx xx fosfátovém xxxxx (4.5) a xxxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx základní xxxxxx obsahující 100 μx xxxxxxxxxx v 1 xx. Xxx xxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxx x xxx 4 °C, xxxxxxx xxxxx xxxxxx použitelný 7 dní.

5.1 Pro xxxxxxxxxx premixy

Z xxxxxx xxxxxxxxx roztoku xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

5.2 Xxx xxxxxx

X výchozího roztoku xx připraví xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx pufrem xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

6. XXXXXXXX XXXXXXXX X XXXXXXXXXXX XXXXXXX

6.1 Medikované xxxxxxx

Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx 10 xx vzorku, xxxxx xxxxxxxx 10-100 xx xxxxxxxxxx, xx x odměrné baňce x obsahu 100 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x 60 xx xxxxx (4.6) xx xxxx 15 minut. Xxxxxxx xX xx xxxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (4.3) xx xxxxxxx 2. Xxxxx (4.6) xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xx. Xxx xx dílčí xxxxxxxx přefiltruje xxxx xxxxxx filtrační xxxxx (xxxx. Xxxxxxx x. 1) x xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx xx sleje. Odebere xx xxxxxxx xxxx x pH xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) xxxxxx na xxxxxxx 4,5. Xxxxx xxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5), xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx obsahu xxxxxxxxxx 4 μx/xx ( = X₈).

X xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (1+1) xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5) xxxxxxxx xxxxxxx X4 (xxxxxxxxx xxxxx: 2 μg/ml), X2 (očekávaný xxxxx: 1 μg/ml) a X₁ (xxxxxxxxx xxxxx: 0,5 μx/xx).

6.2 Krmiva

Vzorek x hmotnosti 50 x xx xxxxx xx 100 xx xxxxx (4.6) x xx xxxx 30 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx). Xxxxxxx xxxx čistého extraktu xx odebere (xxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxx) a xxxxxxx xX xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) xxxxxx xx 4,5. Xxxxx xxxxxx xx naředí xxxxxxxxxx xxxxxx (4,5), aby xx xxxxxx roztok X8 (xxx. následující xxxxxxx).

X tohoto roztoku xx postupným rozřeďováním (1+1) xxxxxxxxxx pufrem (4.5) xxxxxxxx xxxxxxx X4 (xxxxxxxxx obsah: 1,0 μg/ml), X₂ (xxxxxxxxx xxxxx: 0,5 μx/xx) x X₁ (xxxxxxxxx xxxxx: 0,25 μx/xx).

7. XXXXXX XXXXX

7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxx médium (4.1) xx naočkuje xxxxxxxx xxxx (3.2) při xxxxxxx 50–60 °C. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx (4.1) xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx co xxxxx xxxxxxxx ale xxxxx xxxxx inhibiční xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

7.2 Xxxxxxxx misek

Test xx xxxxxx jako difúzní xxxx xx miskách xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx standardního xxxxxxx (X₈, X₄, S₂, X₁) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (X8, U4, X2, X1).Xx xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx standardu x extraktu. X xxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, aby bylo xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx prostředí xxxxxxx xxx xxxxxx x průměru 10-13 xx s rozestupem xxxxxx minimálně 30 xx. Test by xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, xx kterou xx xxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx 20 xx x xxxxxxx 200 xx.

Xx misku xx xxxxxx takové xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxxxx xxxxx 7.1, xxx se xxxxxxxxx xxxxxx silná přibližně 2 xx (60 xx xx xxxxx x průměru 200 xx). Poté, xx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (mezi 0,10 x 0,15 ml xx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx). Každá xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxx minimálně čtyřikrát, xxxxx xxx xxxxx xxxx xx vyhodnotí 32 xxxxxxxxxxx xxx.

7.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx dobu 16 xx 18 xxxxx xxx 30 °X.

8. XXXXXXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xx změří x přesností xx 0,1 mm. Pro xxxxxx koncentraci xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx semilogaritmického xxxxxx, xxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx koncentrace xx xxxxxx x průměru xxxxxxxxxxx xxx. Pro xxxxxxxxxx xxxxxx stejně xxxx xxx extrakt xx zakreslí xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx. xxxx xxxxxxxx způsobem.

Nejvhodnější xxx xxx nejnižší xxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (XX) xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorce:

a) XX = 7X₈ + 4X₄ + X₂ – 2S₁ / 10

Xxxxxxxxxxxx xxx xxx nejvyšší xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (SH) xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

XX = 7X₈ + 4S₄ + X₂ – 2X₁ / 10

Xxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx body xxx xxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx úroveň (XX) xxxxxxxx, přičemž xx xx xxxx uvedených xxxxxx xxxxxx X₁, X₂, U₄ x X₈ namísto X₁, X₂, X₄ a X₈.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx XX x SH se xxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx. Spojením xxxx xxxx vznikne xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxx xxxxxxx XX x XX x získání nejvhodnější xxxxxx xxx xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, měly xx xxx přímky rovnoběžné. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx rovnoběžné, xxxxx se xxxxxxx (XX-XX) x (XX-XX) xxxxxxxxxxx xxxx než x 10 % xx střední xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx nejsou xxxxxxxxxx, xx možné xxxxxxxx xxx X₁ a X₁ nebo X₈ x S₈. Xxx xx xxxxxxx SL, XX, UL x XX určí xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xx obdržely xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx XX x XX. X xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx přímek xx xxxxxx zkontroluje xxxxxxxxxxxx. Výsledky, které xxxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, xx xxxx xxx zaznamenány xx protokolu o xxxxxxx.

Xxxxx xx možno xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx aktivity (xxx X) xxxxxx xxxxxxx x následujících xxxxxx:

Xxx 4 xxxxxx

(x) xxx X = (X₁+ U₂+ X₄+ X₈ – S₁ – X₂ – X₄ – X₈) × 0,602 / X₄+ X₈+ S₄+ X₈ – X₁ – X₂ –

Xxx 3 úrovně

(d) xxx X = (X₁+ X₂+ U₄ – X₁ – X₂ – S₄) × 0,401 / X₄+ X₄ – X₁ – X₁

xxxx

x´) xxx X = (X₂+ X₄+ X₈ – X₂ – S₄ – X₈) × 0,401 / X₈+ X₈ – X₂ – X₂

Xxxxxxxx aktivita = předpokládaná xxxxxxxx х relativní xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx leží xxxx rozsah xxxxxx 0,5–2,0, zkouška se xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx koncentrací extraktu xxxx. xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx není možné xxxxxx relativní aktivitu x rozsahu xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx považovat xx xxxxxxxxx, x xx xx mělo xxx xxxxxxxxxxx xx protokolu x analýze.

Pokud není xxxxx xxxxxx považovat xx xxxxxxxxxx, zkouška xx xxxxxxxx. Pokud xx ani xxx xxxxxxxxx rovnoběžnosti, xx xxxxx xxxxxxxx považovat xx xxxxxxxxxxxx.

9. XXXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx jedné x xxxx zkoušce by xxxxxx překračovat:

- 2 xx/xx absolutní hodnoty xxx obsahu xxxxxxxxxx 2 xx 10 xx/xx,

- 20 % xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx 10 xx 25 xx/xx,

- 5 xx/xx absolutní xxxxxxx při xxxxxx 25 až 50 xx/xx,

- 10 % xxxxx hodnoty xxxxxxxx xxx xxxxxx xxx 50 xx/xx.

2. XXXXXXXXX XXXXXXXXX SODNÉHO DIFÚZÍ X XXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX

1. XXXX X XXXXXX XXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx monensinu sodného x xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Spodní xxxxxxx stanovitelnosti xx 10 xx/xx (10 xxx) [3].

2. XXXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxxxxx 90 %-xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx podle obsahu xxxxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxx. Jeho xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx stanoví xxxxxxx difúze monensinu xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx se prokáže xxxxxxxxxxxx inhibičními xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xx x rozsahu xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx úměrný xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx je snížena xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

3. XXXXXXXXXXXXXXX: XXXXXXXX XXXXXXXX XXXX 6633 (NICB 8054)

3.1 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxx médium (4.1) x xxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Bacillus xxxxxxxx x xxxx xxx xx xxxxxxxx xxx 30 °C. Xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx asi 4 °X a xxxxx měsíc xx xxxxx xxxxxxxx.

3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx [4]

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx (3.1) x xxxxx xxxxxxxx se omyje 2-3 ml xxxxxxxx xxxx. Xxxxx suspenzí xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxxxx obsahuje 300 xx kultivačního xxxxx (4.1), x xx xxxx 3 xx 5 dní xx xxxxxxxx xxx 30 °X. Xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx 15 ml ethanolu (4.3) x xxxxxxxxxxxxx xx. Tato xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxxxxx xxx 4 °X.

4. XXXXXXXXXX XXXXXX A XXXXXXX

4.3 Xxxxxxx 20 %-ní (v/v): 200 xx xxxxxxxx xx xxxxx 800 xx xxxx.

4.4 Xxxxxxxx, xxxxxxx.

4.5 Xxxxxxxx 90 %-xx (x/x): 900xx xxxxxxxxx (4.4) se xxxxx 100 xx xxxx.

4.6 Methanol 50 %-xx (x/x): 500ml xxxxxxxxx (4.4) xx xxxxx 500 xx xxxx.

4.7 Oxid xxxxxxx, xxxxxxxxxxx (xxxxx F, 20 xxxx; xxxxxxxxx xxxxxxx UG1: X. Xxxxxxxxx xxx Xx., xxxx xxxxxxxxxx).

4.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx (xxxx xxxx xxxxxxxxxx x Xxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxx Boilogical Xxxxxxxxx, Xxxxxxx Xxxxxxxxxx Laboratory, Xxxxxxxxx, Surrey XX15 3XX, Xxxxx Xxxxxxxx).

5. XXXXXXXXX

5.1 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x 250xx xxxxxxx xxxxxx.

5.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx chromatografii, xxxxxxx xxxxxx: 25 xx, xxxxx: 400 xx, x otvorem x xxxxxxx 2 xx na xxxxxx xxxxx.

5.3 Skleněná xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx: 11 xx, xxxxx: xxxxxxxxx 300 xx, x xxxxxxx x xxxxxxx 2 xx xx xxxxxx xxxxx.

6. XXXXXXXXXX XXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxx množství xxx 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.8) xx xxxxxxxx x methanolu (4.4) a xxxxxx, xxx vznikl xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 800 μx/xx. Při uchování x xxxxxxxx xxxxx x xxx 4 xX, zůstane xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 2 xxxxx.

X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx rozřeďováním 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6) xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

7. XXXXXXXX EXTRAKTU X XXXXXXXXXXX XXXXXXX

7.1 Xxxxxxxx

7.1.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxxxx 2,0 xx xx přidá k 100 xx 90 %-xxxx methanolu (4.5), xxxxxxx minut se xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxx xx zředí 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6), aby bylo xxxxxxxx očekávané xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X₈).

7.1.2 Xxxxxx, u xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx nižší xxx 50 xxx

Xxxxxx x xxxxxxxxx 10 xx 20 x se xxxxx x 100 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx (4.5), 15 xxxxx protřese x xxxxx xxxxx.

Xxxxxx zátka xx xxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx (5.2) x za xxxxxxx xxxxxxxxxxx trubičkou xx xxxxxx do výše 75–80 xx oxidem xxxxxxxx (4.7).

Extrakt xx xxxxxxx xx sloupec xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx. 30 xx xxxxxxxx xx xxxxx 50 xx vody. Xxxx xxxx xx zředí 50 %-xxx methanolem (4.6), xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X₈).

7.1.3 Xxxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 50 xxx (xxxxxx xxxxxxx 10 xxx)

Xxxxxx x xxxxxxxxx 10 xx 20 x xx xxxxx x 100 xx 90 %-ního methanolu (4.5), 15 xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx xx nevyčistí.

Pro xxxxxx s podílem xxxxxxxxx 20 xxx xx xxxxxxx 40 xx xxxxxx; pro 10 xxx xx xxxxxxx 80 ml. Xxxxxx xx xxxxxx xx vakuu xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 40 °X v xxxxxxxx xxxxxxx (5.1). Xxxxxxxx xx xxxxxxxx x 10 ml 90 %-xxxx methanolu.

Vatová zátka xx zavede xx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.3) x za xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx 75–80 xx xxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx 10 xx 90xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx k prvnímu xxxxxxxx.

Xxxxxx se xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx nepřesahující 40 °X v xxxxxxx xxxxxxx (5.1). Xxxxxxxx xx xxxxxxxx v 10 ml xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xx 20 xx. Roztok se xxxxxxxxxx minimálně 5 xxxxx xxx minimálních xxxxxxxx 4000 xx/xxx. Xxxx xxxx xx xxxxx 50 %-xxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx očekávané xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X₈).

7.2. Xxxxxxxxx roztok

Z xxxxxxx U8 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (1 + 1) 50 %-xxx methanolem (4.6) xxxxxxxx xxxxxxx U4 (xxxxxxxxx xxxxx: 4 μx/xx), X2 (xxxxxxxxx xxxxx: 2 μg/ml), X1 (xxxxxxxxx xxxxx: 1 μx/xx).

8. XXXXXX XXXXX

8.1 Naočkování xxxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxx xxxxxx (4.2) xx naočkuje xxxxxxxx xxxx (3.2) při 50 až 60 °X. Předběžnými xxxxxx xx miskách xx xxxxxxxxx xxxxxx (4.2) xx xxxxxxx množství xxxxxxx, které xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx použitými xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

8.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx test xx miskách xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X₈, X₄, X₂, X₁) x testovacího roztoku (X₈, X₄, X₂, X₁). Xx xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx všechny xxxxx koncentrace xxxxxxxxx x extraktu. X xxxx xxxxxx xxxx xxx miska takové xxxxxxx, xxx bylo xxxxx xxxxxxxx ve xxxxxx kultivačního média xxxxxxx osm otvorů x xxxxxxx 10-13 xx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 30 xx. Xxxx by xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xx skleněné xxxxx, xx nichž xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx kroužek x xxxxx 20 mm x xxxxxxx 200 xx.

Xx xxxxx xx xxxxxx takové xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxxxx podle 8.1, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 2 xx (60 xx na xxxxx x xxxxxxx 200 xx). Xxxx co xxxxxx ztuhne, xxxxxxxx xx otvory, do xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 ml xx xxxxx, xxxxx xxxxxxx otvoru). Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx minimálně xxxxxxxxx, xxxxx pro xxxxx xxxx xx xxxxxxxxx 32 inhibičních xxx.

8.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx přibližně po xxxx 18 xxxxx xxx 35 xx 37 °X.

9. XXXXXXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xx xxxxx s xxxxxxxxx xx 0,1 xx. Xxx každou xxxxxxxxxxx xx střední hodnoty xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, přičemž xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx vztahu x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx. Xxx standardní roztok xxxxxx jako xxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx přímky, vypočítané xxxx. xxxx uvedeným xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx xxx pro xxxxxxxx xxxxxx standardního xxxxxxx (XX) se xxxxxxx xxxxx následujícího xxxxxx:

x) XX = 7X₁ + 4X₂ + X₄ – 2X₈ / 10

Xxxxxxxxxxxx xxx pro xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (XX) se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) XX = 7X₈ + 4X₄+ S₂ + 2X₁ / 10

Xxxxxx tak xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx body xxx xxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxx (XX) xxxxxxxx, přičemž xx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx dosadí X₁, U₂, X₄ x X₈ namísto X₁, S₂, S₄ x S₈.

Vypočítané xxxxxxx XX a SH xx zanesou xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx vznikne xxxxxxxxxxxx přímka xxx xxxxxxxxxx roztok. Xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx XX x XX x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxx.

Xxxxx se nevyskytují xxxxxx xxxxxxx, měly xx být xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx je xxxxx považovat xx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx (XX-XX) x (XX-XX) neodchylují více xxx o 10 % od střední xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, je možné xxxxxxxx xxx U1 x S1 nebo X8 x S8. Xxx xx xxxxxxx XX, XX, XX x XX xxxx xxxxxx následujících xxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nejvhodnější xxxxxx:

x) XX = 5X₁ + 2S₂ – X₄ / 6 xxxx 5S₂ + 2X₄ – X₈ / 6

b ) XX = 5X₄ + 2X₂ − X₁ / 6 xxxx 5X₈ + 2X₄ − X₂ / 6

Xxxxx se xxxxxxx pro xxxxxxx XX x XX. X těchto alternativních xxxxxx xx rovněž xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xx tří úrovní, xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx do xxxxxxxxx x analýze.

Pokud xx xxxxx přímky xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (log X) xxxxxx jednoho x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxx 4 xxxxxx

x) log A = (U₁+ X₂+ X₄+ X₈ – X₁ – X₂ – S₄ – X₈) × 0,602 / X₄+ U₈+ X₄+ X₈ – X₁ – U₂ – S₁ – X₂

Xxx 3 xxxxxx

x) xxx X = (X₁+ X₂+ U₄ – X₁ – X₂ – X₄) × 0,401 / X₄+ X₄ – X₁ – X₁

xxxx

x) xxx X = (X₂+ X₄+ X₈ – S₂ – X₄ – X₈) × 0,401 / X₈+ S₈ – X₂ – X₂

Xxxxxxxx xxxxxxxx = xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx х xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxx 0,5–2,0, xxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx příp. xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, výsledek xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, a xx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx do xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxx, xxxx xx zopakuje. Xxxxx xx ani xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xx třeba xxxxxxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxxxx.

10. XXXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxx mezi xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx x téže xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx:

- 20 % xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx monensinu xxxxxxx 10 xx 25 xx/xx,

- 5 mg/kg xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx 25 xx 50 xx/xx,

- 10 % vyšší xxxxxxx xxxxxxxx xxx obsahu xxx 50 xx/xx.

[1] Xxxxx xxx použity xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx sporovou xxxxxxxx.

[2] Xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, které poskytne xxxxxx výsledky.

[3] 1 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 1000 xxxxxxxxx XX.

[4] Xxxxx xxx xxxxxxx jiné xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx.

[5] Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx složení, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.