Plné znění - 31981L0715

Xxxxxx směrnice Xxxxxx

xx xxx 31. xxxxxxxx 1981,

xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx

(81/715/XXX)

XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,

x xxxxxxx na Smlouvu x založení Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx společenství,

s ohledem xx směrnici Xxxx 70/373/XXX xx dne 20. července 1970, xxxxxx xx zavádí xxxxxx odběru vzorků x xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx úřední kontrolu xxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx Aktem x xxxxxxxxxxx Xxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxx 2 xxxxxxx směrnice,

vzhledem x tomu, že xxxxxxxx 70/373/EHS xxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx za xxxxxx xxxxxxxx, zda xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xx jakost x xxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx pro xxxxx vzorků x xxxxxxxxxxxx metod Společenství;

vzhledem x tomu, že xxxxxxxx Xxxxxx 71/250/XXX [2], 71/393/EHS [3], 72/199/XXX [4], 73/46/EHS [5], 74/203/EHS [6], 75/84/XXX [7], 76/372/XXX [8] a 78/633/XXX [9], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx dne 30. xxxxxxxx 1981, xxx řadu xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx stanovily; xx stav od xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx umožňuje xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx metod;

vzhledem k xxxx, že xxxxxxxx xxxx směrnice jsou x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Stálého výboru xxx krmiva,

PŘIJALA XXXX XXXXXXXX:

Xxxxxx 1

Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx obsah xxxxxxxxxx x monensinu xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxx.

Článek 2

Xxxxxxx xxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx směrnicí do 1. xxxxxxxx 1981. Xxxxxxxxxx o xxxx xxxxxxx Xxxxxx.

Xxxxxx 3

Xxxx xxxxxxxx xx určena členským xxxxxx.

X Xxxxxxx xxx 31. července 1981.

Xx Xxxxxx

Xxxxxx Thorn

předseda

[1] Úř. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.

[2] Xx. věst. X 155, 12.7.1971, x. 13.

[3] Úř. xxxx. X 279, 20.12.1971, x. 7.

[4] Úř. věst. X 123, 29.5.1972, x. 6.

[5] Xx. věst. X 83, 30.3.1973, x. 21.

[6] Xx. xxxx. X 108, 22.4.1974, x. 7.

[7] Úř. xxxx. X 32, 5.2.1975, x. 26.

[8] Úř. věst. X 102, 15.4.1976, x. 8.

[9] Úř. xxxx. X 206, 29.7.1978, x. 43.

XXXXXXX

1. XXXXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXX X AGAROVÉM XXXXXXXXXXX XXXXX

1. XXXX X XXXXXX XXXXXXX

Xxxx xxxxxx xxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 2 xx/xx (2 ppm). Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx antibiotik xxxx xx stanovení působit xxxxxx.

2. XXXXXXX

Xx xxxxx xxxxxx/xxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxx vzorek. Xxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx aktivita se xxxxxxx měřením xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx médiu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Bacillus xxxxxxxx. Xxxxxx xx dokáže xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Průměr xxxxxxxxxxx xxx je xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx za xxxxx xxxxxx logaritmu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

3. XXXXXXXXXXXXXXX: XXXXXXXX XXXXXXXX ATCC 6633 (XXXX 8054)

3.1 Uchovávání xxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx kultivační xxxxxx (4.1) v xxxxxxx zkumavkách xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx x přes xxx xx při 30 °X xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx při xxx 4 °X x xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.

3.2. Xxxxxxxx xxxxxxxx spór [1]

Xxxxxxx kultura x xxxxxxxx médiu (3.1) xx xxxxx 2-3 xx xxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx Xxxxxxx láhev, xxxxx xxxxxxxx 300 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1), a xx xxxx 3 xx 5 xxx xx xxxxxxxx xxx 30 °X. Xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx xx 15 xx xxxxxxxx (4.2) x xxxxxxxxxxxxx se. Xxxx xxxxxxxx může xxx uchována xxxxxxxxx 5 xxxxxx xxx 4 °X.

4. XXXXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXX

4.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx [2]

4.2 Xxxxxxx 20 %-ní (x/x): 200 xx xxxxxxxx se xxxxx 800 xx vody.

4.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, x: 1,18–1,19.

4.4 Roztok xxxxxxxxx xxxxxxx, 2X.

4.5 Xxxxxxxxx xxxx 0,1 X:

xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, KH₂ PO₄: 13,6 x

xxxx: 1000 xx

xX xxxxxxx xx 4,5.

4.6 Směs xxxxxxx/xxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (4.3): 65/32,5/2,5 (x/x/x)

4.7 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx

5. XXXXXXXXXX ROZTOKY

Přesně xxxxxxxx množství xxx 10 xx standardní xxxxxxxxx (4.7) xx xxxxxxxx ve fosfátovém xxxxx (4.5) x xxxxx xxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxx základní xxxxxx xxxxxxxxxx 100 μx avoparcinu x 1 xx. Při xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x při 4 °X, xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 7 dní.

5.1 Pro xxxxxxxxxx xxxxxxx

X tohoto xxxxxxxxx roztoku se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx pufrem xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

5.2 Xxx xxxxxx

X xxxxxxxxx roztoku xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

6. XXXXXXXX XXXXXXXX X XXXXXXXXXXX ROZTOKU

6.1 Medikované xxxxxxx

Xxxxxx xxxxxxxx množství 10 xx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx 10-100 xx xxxxxxxxxx, se x odměrné xxxxx x xxxxxx 100 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x 60 xx xxxxx (4.6) xx xxxx 15 xxxxx. Xxxxxxx xX xx xxxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxx, xxxxxx xx kyselinou chlorovodíkovou (4.3) xx xxxxxxx 2. Xxxxx (4.6) xx xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx se. Xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx filtrační xxxxx (xxxx. Xxxxxxx č. 1) x xxxxxxx 5 ml xxxxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx část x xX se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) xxxxxx xx xxxxxxx 4,5. Xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5), xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 4 μx/xx ( = X₈).

X xxxxxx xxxxxxx xx postupným xxxxxxxxxxxx (1+1) xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5) xxxxxxxx xxxxxxx X4 (xxxxxxxxx xxxxx: 2 μx/xx), X2 (očekávaný obsah: 1 μx/xx) x X₁ (očekávaný xxxxx: 0,5 μx/xx).

6.2 Xxxxxx

Xxxxxx x hmotnosti 50 x xx xxxxx xx 100 xx xxxxx (4.6) x xx dobu 30 xxxxx se mechanicky xxxxxxxxxx. Extrakt se xxxxx odstředěním (v xxxxxxxxxx zkumavkách). Poměrná xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx odebere (xxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxx) x xxxxxxx xX xx xxxxxxxx xxxxxxxxx sodného (4.4) xxxxxx na 4,5. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4,5), xxx xx xxxxxx xxxxxx X8 (xxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxx).

X tohoto xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (1+1) fosfátovým pufrem (4.5) xxxxxxxx xxxxxxx X4 (očekávaný obsah: 1,0 μg/ml), X₂ (xxxxxxxxx xxxxx: 0,5 μx/xx) a X₁ (xxxxxxxxx xxxxx: 0,25 μx/xx).

7. XXXXXX XXXXX

7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxx xxxxxx (4.1) xx xxxxxxxx suspenzí xxxx (3.2) při xxxxxxx 50–60 °X. Xxxxxxxxxxx pokusy xx xxxxxxx se zkušebním xxxxxx (4.1) se xxxxxxx množství xxxxxxx, xxxxx vykáže co xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx koncentracích avoparcinu.

7.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxx xx xxxxxx jako difúzní xxxx na miskách xx xxxxxxx koncentračních xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X₈, X₄, X₂, X₁) x testovacího xxxxxxx (X8, X4, X2, X1).Xx každou xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx standardu x extraktu. Z xxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx takové xxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx kultivačního xxxxxxxxx xxxxxxx xxx otvorů x xxxxxxx 10-13 xx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 30 xx. Test by xxx být prováděn xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxx vyrobeny xx xxxxxxxx xxxxx, xx kterou xx xxxxxx hliníkové xxxx xxxxxxxx xxxxxxx o xxxxx 20 xx x průměru 200 xx.

Xx xxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx média (4.1) xxxxxxxxxxxx xxxxx 7.1, xxx se xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 2 mm (60 xx xx xxxxx x průměru 200 xx). Xxxx, xx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx otvory, xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 xx xx xxxxx, xxxxx xxxxxxx otvoru). Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx pro xxxxx xxxx xx xxxxxxxxx 32 xxxxxxxxxxx zón.

7.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx dobu 16 až 18 xxxxx při 30 °X.

8. XXXXXXXXXXX

Xxxxxx inhibičních xxx xx xxxxx x xxxxxxxxx xx 0,1 xx. Pro xxxxxx koncentraci xx xxxxxxx hodnoty zanesou xx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx zanáší xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx. Pro xxxxxxxxxx roztok xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx. xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx xxx pro nejnižší xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XX) se xxxxxxx xxxxx následujícího vzorce:

a) XX = 7X₈ + 4X₄ + X₂ – 2S₁ / 10

Xxxxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XX) xx stanoví podle xxxxxxxxxxxxx vzorce:

SH = 7X₈ + 4S₄ + S₂ – 2X₁ / 10

Stejně xxx se stanoví xxxxxxxxxxxx xxxx pro xxxxxxxx (XX) a xxxxxxxx úroveň (XX) xxxxxxxx, přičemž xx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx X₁, X₂, X₄ x X₈ namísto X₁, X₂, X₄ a X₈.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx SL x XX xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx nejvhodnější xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx pro xxxxxxx XX x XX x získání xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx extrakt.

Pokud xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, měly by xxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx možno xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx (XX-XX) x (XX-XX) xxxxxxxxxxx xxxx xxx x 10 % xx střední hodnoty.

Pokud xxxxxx nejsou xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxx U₁ x X₁ xxxx X₈ x X₈. Pak xx xxxxxxx XX, XX, XX a XX xxxx pomocí xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, aby xx xxxxxxxx alternativní xxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx UL x UH. X xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx přímek xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx ze xxx úrovní, xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx protokolu x xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxx, vypočítá xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx X) xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxx 4 xxxxxx

(x) xxx A = (X₁+ X₂+ X₄+ X₈ – S₁ – X₂ – X₄ – X₈) × 0,602 / X₄+ X₈+ X₄+ X₈ – U₁ – X₂ –

Xxx 3 úrovně

(d) log X = (U₁+ X₂+ X₄ – X₁ – S₂ – S₄) × 0,401 / X₄+ X₄ – X₁ – X₁

xxxx

x´) log X = (X₂+ X₄+ X₈ – X₂ – X₄ – X₈) × 0,401 / U₈+ X₈ – X₂ – X₂

Xxxxxxxx xxxxxxxx = předpokládaná aktivita х xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx aktivita xxxx xxxx rozsah xxxxxx 0,5–2,0, xxxxxxx xx xxxxxxxx xxx odpovídajícím xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxxxxx roztoků. Xxxxx není xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx aktivitu x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, a xx xx mělo být xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x analýze.

Pokud není xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx rovnoběžné, xxxxxxx xx xxxxxxxx. Pokud xx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx výsledek považovat xx neuspokojivý.

9. XXXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx jednoho analytika xxx xxxxx x xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx:

- 2 xx/xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx 2 xx 10 xx/xx,

- 20 % xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx 10 xx 25 xx/xx,

- 5 xx/xx absolutní xxxxxxx při obsahu 25 až 50 xx/xx,

- 10 % xxxxx hodnoty výsledku xxx xxxxxx xxx 50 mg/kg.

2. XXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXX DIFÚZÍ X XXXXXXXX KULTIVAČNÍM XXXXX

1. XXXX X XXXXXX XXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx monensinu xxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx je 10 xx/xx (10 xxx) [3].

2. PRINCIP

Vzorek xx xxxxxxxxx 90 %-xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx obsahu xxxxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxx. Jeho xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se stanoví xxxxxxx difúze monensinu xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Bacillus xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx inhibičními xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx těchto xxxxxxxxxxx zón xx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx za xxxxx úměrný xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

3. XXXXXXXXXXXXXXX: BACILLUS XXXXXXXX XXXX 6633 (XXXX 8054)

3.1 Xxxxxxxx kmenové xxxxxxx

Xxxxxxx kultivační xxxxxx (4.1) v šikmých xxxxxxxxxx xx naočkuje xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxx xx xxxxxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxx xx uchovává x xxxxxxxxxx při asi 4 °C x xxxxx měsíc xx xxxxx naočkuje.

3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx [4]

Xxxxxxx xxxxxxx na xxxxx (3.1) x xxxxx xxxxxxxx se xxxxx 2-3 ml xxxxxxxx xxxx. Touto xxxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxxxx obsahuje 300 xx kultivačního xxxxx (4.1), x xx dobu 3 xx 5 xxx xx xxxxxxxx xxx 30 °X. Xx xxxxxxxx tvorby xxxx xxx mikroskopem se xxxxxxx xxxxx xx 15 xx ethanolu (4.3) x zhomogenizuje xx. Tato suspenze xxxx být uchována xxxxxxxxx 5 měsíců xxx 4 °X.

4. XXXXXXXXXX XXXXXX A XXXXXXX

4.3 Ethanol 20 %-xx (x/x): 200 xx ethanolu xx zředí 800 xx xxxx.

4.4 Methanol, xxxxxxx.

4.5 Xxxxxxxx 90 %-xx (x/x): 900ml xxxxxxxxx (4.4) se xxxxx 100 xx xxxx.

4.6 Xxxxxxxx 50 %-xx (x/x): 500ml xxxxxxxxx (4.4) se xxxxx 500 xx xxxx.

4.7 Xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx (xxxxx X, 20 xxxx; activated xxxxxxx XX1: X. Xxxxxxxxx xxx Xx., xxxx rovnocenný).

4.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxxx xxxxx x xxxxx xxxxxxxx (xxxx xxxx xxxxxxxxxx x Xxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxx, Xxxxxxx Veterinary Xxxxxxxxxx, Xxxxxxxxx, Surrey XX15 3XX, Velká Xxxxxxxx).

5. XXXXXXXXX

5.1 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx s 250ml xxxxxxx baňkou.

5.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx průměr: 25 xx, xxxxx: 400 xx, x xxxxxxx x xxxxxxx 2 xx xx xxxxxx xxxxx.

5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx chromatografii, xxxxxxx xxxxxx: 11 xx, xxxxx: xxxxxxxxx 300 xx, s xxxxxxx x xxxxxxx 2 xx na xxxxxx xxxxx.

6. STANDARDNÍ XXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx asi 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.8) xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxx sodného 800 μx/xx. Při xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x při 4 xX, zůstane xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 2 xxxxx.

X tohoto výchozího xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx rozřeďováním 50 %-xxx methanolem (4.6) xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

7. XXXXXXXX XXXXXXXX A XXXXXXXXXXX ROZTOKU

7.1 Xxxxxxxx

7.1.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxxxx 2,0 mg xx xxxxx k 100 ml 90 %-xxxx methanolu (4.5), xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx 50 %-xxx methanolem (4.6), aby bylo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx sodného 8 μx/xx ( = X₈).

7.1.2 Xxxxxx, x xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx nižší než 50 xxx

Xxxxxx x xxxxxxxxx 10 xx 20 x se xxxxx k 100 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx (4.5), 15 xxxxx xxxxxxxx x xxxxx ustát.

Vatová xxxxx xx zavede xx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.2) x xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxx 75–80 mm xxxxxx xxxxxxxx (4.7).

Xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx hlinitého a xxxxxxx xx xxxxxxx. 30 xx xxxxxxxx xx zředí 50 xx xxxx. Xxxx xxxx xx xxxxx 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6), xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X₈).

7.1.3 Xxxxxx u xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 50 xxx (xxxxxx xxxxxxx 10 xxx)

Xxxxxx o hmotnosti 10 xx 20 x se přidá x 100 xx 90 %-ního xxxxxxxxx (4.5), 15 xxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxx xx nevyčistí.

Pro xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx 20 xxx xx odebere 40 xx zbytku; pro 10 xxx se xxxxxxx 80 ml. Xxxxxx xx xxxxxx xx vakuu xxx xxxxxxx nepřesahující 40 °X v xxxxxxxx xxxxxxx (5.1). Xxxxxxxx xx xxxxxxxx v 10 xx 90 %-xxxx methanolu.

Vatová xxxxx xx xxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx (5.3) x xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx 75–80 xx xxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx roztok xxxxxx xx převede xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x filtrát xx xxxxxxx. Xxxxxx se xxxxxxx 10 ml 90xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx se xxxxx k prvnímu xxxxxxxx.

Xxxxxx xx xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 40 °X x xxxxxxx xxxxxxx (5.1). Zůstatek xx rozpustí x 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxx xx xxxxxx xxxxx na 20 xx. Xxxxxx xx xxxxxxxxxx minimálně 5 xxxxx při xxxxxxxxxxx xxxxxxxx 4000 xx/xxx. Xxxx xxxx se xxxxx 50 %-ním xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx sodného 8 μx/xx ( = X₈).

7.2. Xxxxxxxxx xxxxxx

X xxxxxxx X8 xx xxxxxxxxx rozřeďováním (1 + 1) 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6) xxxxxxxx xxxxxxx U4 (xxxxxxxxx podíl: 4 μx/xx), U2 (xxxxxxxxx xxxxx: 2 μg/ml), X1 (očekávaný xxxxx: 1 μg/ml).

8. XXXXXX XXXXX

8.1 Xxxxxxxxxx kultivačního xxxxx

Xxxxxxxx médium (4.2) xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx (3.2) při 50 xx 60 °X. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx miskách xx xxxxxxxxx médiem (4.2) xx xxxxxxx množství xxxxxxx, xxxxx vykáže xx xxxxx xxxxxxxx xxx ještě xxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx použitými xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.

8.2 Příprava xxxxx

Xxxx se xxxxxx xxxx xxxxxxx test xx miskách po xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (S₈, X₄, X₂, X₁) x testovacího roztoku (X₈, X₄, X₂, X₁). Na xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx bezpodmínečně xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx. X xxxx xxxxxx xxxx xxx miska xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx kultivačního xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxx 10-13 xx x rozestupem xxxxxx xxxxxxxxx 30 xx. Xxxx by xxx být prováděn xxxxxxxxx xx miskách, xxxxx jsou xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, xx nichž xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx 20 mm x průměru 200 xx.

Xx xxxxx xx xxxxxx takové xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxxxx podle 8.1, xxx se xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 2 xx (60 xx xx xxxxx x xxxxxxx 200 xx). Xxxx xx xxxxxx ztuhne, xxxxxxxx xx otvory, xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx přesné množství xxxxxxxxxxxx a testovacího xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 xx xx otvor, podle xxxxxxx xxxxxx). Každá xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx pro xxxxx xxxx xx vyhodnotí 32 inhibičních xxx.

8.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx přibližně xx xxxx 18 hodin xxx 35 xx 37 °C.

9. XXXXXXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx se xxxxx x xxxxxxxxx xx 0,1 xx. Xxx každou xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx hodnoty xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, přičemž xx xxxxxx xxxxxxxxxx koncentrace xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx zón. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx. xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx bod pro xxxxxxxx xxxxxx standardního xxxxxxx (SL) se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) SL = 7X₁ + 4X₂ + X₄ – 2X₈ / 10

Xxxxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (XX) xx stanoví xxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorce:

b) XX = 7S₈ + 4X₄+ X₂ + 2X₁ / 10

Xxxxxx tak se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxx nejnižší (XX) x xxxxxxxx xxxxxx (XX) extraktu, přičemž xx xx xxxx xxxxxxxxx vzorců xxxxxx X₁, X₂, X₄ x X₈ xxxxxxx X₁, X₂, X₄ x X₈.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx XX x XX xx xxxxxxx xx xxxxxxxx diagramu. Spojením xxxx bodů vznikne xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx UL x XX x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, měly xx být xxxxxx xxxxxxxxxx. Přímky xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx (XX-XX) x (XX-XX) xxxxxxxxxxx xxxx xxx x 10 % od střední xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, je možné xxxxxxxx buď X1 x X1 xxxx X8 a S8. Xxx xx xxxxxxx XX, XX, XX x XX určí xxxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorců, xxx xx obdržely xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) XX = 5S₁ + 2X₂ – X₄ / 6 xxxx 5S₂ + 2X₄ – X₈ / 6

x ) XX = 5X₄ + 2X₂ − X₁ / 6 xxxx 5S₈ + 2X₄ − X₂ / 6

Xxxxx se xxxxxxx pro xxxxxxx XX a XX. X xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, xx xxxx být xxxxxxxxxxx do xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx rovnoběžné, vypočítá xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx A) xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxx 4 xxxxxx

x) xxx A = (X₁+ X₂+ X₄+ X₈ – X₁ – X₂ – X₄ – X₈) × 0,602 / X₄+ U₈+ X₄+ X₈ – X₁ – X₂ – X₁ – X₂

Xxx 3 xxxxxx

x) xxx X = (X₁+ U₂+ X₄ – S₁ – X₂ – X₄) × 0,401 / X₄+ X₄ – X₁ – X₁

xxxx

x) xxx A = (X₂+ X₄+ X₈ – X₂ – X₄ – X₈) × 0,401 / X₈+ S₈ – X₂ – X₂

Xxxxxxxx xxxxxxxx = xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx х xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx aktivita xxxx xxxx rozsah xxxxxx 0,5–2,0, xxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxx příp. xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx v rozsahu xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx považovat xx přibližný, x xx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxx xxxx xxxxx přímky xxxxxxxxx xx rovnoběžné, xxxx xx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxx xxx nedosáhne rovnoběžnosti, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.

10. XXXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxx mezi xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx x xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx:

- 20 % xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx sodného 10 xx 25 xx/xx,

- 5 xx/xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx 25 xx 50 xx/xx,

- 10 % xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxx xxx 50 mg/kg.

[1] Xxxxx být použity xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx odpovídající sporovou xxxxxxxx.

[2] Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx komerční xxxxxxxxxx médium odpovídajícího xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.

[3] 1 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 1000 jednotkám XX.

[4] Xxxxx xxx xxxxxxx xxxx metody, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx.

[5] Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, které xxxxxxxxx stejné výsledky.