Plné znění - 31981L0715

Xxxxxx směrnice Komise

ze xxx 31. července 1981,

xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Společenství xxx úřední kontrolu xxxxx

(81/715/XXX)

XXXXXX XXXXXXXXXX SPOLEČENSTVÍ,

s xxxxxxx xx Xxxxxxx x založení Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,

x xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxx 70/373/XXX xx xxx 20. xxxxxxxx 1970, xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx odběru xxxxxx x xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx kontrolu xxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxx o xxxxxxxxxxx Xxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx,

xxxxxxxx x xxxx, že xxxxxxxx 70/373/XXX xxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx za účelem xxxxxxxx, zda xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx právních x xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx krmiv, xx xxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx pro xxxxx vzorků a xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx;

xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxx Komise 71/250/EHS [2], 71/393/EHS [3], 72/199/XXX [4], 73/46/EHS [5], 74/203/EHS [6], 75/84/XXX [7], 76/372/XXX [8] x 78/633/XXX [9], naposledy xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxx 30. července 1981, xxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; xx stav xx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx;

xxxxxxxx k xxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx jsou x xxxxxxx se xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx,

XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:

Článek 1

Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxx úřední xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x monensinu xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxxx 2

Xxxxxxx xxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx x správní xxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxx souladu x xxxxx xxxxxxxx do 1. prosince 1981. Xxxxxxxxxx o nich xxxxxxx Xxxxxx.

Xxxxxx 3

Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

V Bruselu xxx 31. xxxxxxxx 1981.

Za Xxxxxx

Xxxxxx Xxxxx

xxxxxxxx

[1] Xx. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.

[2] Xx. věst. X 155, 12.7.1971, x. 13.

[3] Úř. xxxx. X 279, 20.12.1971, x. 7.

[4] Xx. xxxx. X 123, 29.5.1972, x. 6.

[5] Xx. xxxx. X 83, 30.3.1973, x. 21.

[6] Úř. xxxx. X 108, 22.4.1974, x. 7.

[7] Xx. xxxx. X 32, 5.2.1975, x. 26.

[8] Úř. xxxx. X 102, 15.4.1976, x. 8.

[9] Xx. xxxx. X 206, 29.7.1978, x. 43.

XXXXXXX

1. STANOVENÍ AVOPARCINU XXXXXX X XXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX

1. ÚČEL X ROZSAH POUŽITÍ

Tato xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 2 xx/xx (2 ppm). Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx antibiotik xxxx xx xxxxxxxxx působit xxxxxx.

2. XXXXXXX

Xx směsi xxxxxx/xxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x agarovém xxxxxxxxxxx médiu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Bacillus xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zónami xxxxxxxxxxxxxx. Průměr xxxxxxxxxxx xxx je xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx přímo xxxxxx xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxxxx.

3. XXXXXXXXXXXXXXX: XXXXXXXX XXXXXXXX XXXX 6633 (XXXX 8054)

3.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1) x xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxx xx při 30 °C inkubuje. Xxxxxxx xx uchovává x xxxxxxxxxx xxx xxx 4 °X x xxxxx měsíc xx znovu xxxxxxxx.

3.2. Xxxxxxxx xxxxxxxx spór [1]

Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx médiu (3.1) xx omyje 2-3 xx sterilní xxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxxxx obsahuje 300 xx kultivačního média (4.1), a po xxxx 3 xx 5 dní se xxxxxxxx xxx 30 °X. Po kontrole xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx kultura xxxxx xx 15 xx xxxxxxxx (4.2) x zhomogenizuje xx. Xxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 5 měsíců xxx 4 °C.

4. KULTIVAČNÍ XXXXXX X XXXXXXX

4.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx [2]

4.2 Xxxxxxx 20 %-ní (x/x): 200 ml xxxxxxxx xx zředí 800 xx xxxx.

4.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, x: 1,18–1,19.

4.4 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, 2M.

4.5 Xxxxxxxxx xxxx 0,1 M:

dihydrogenfosforečnan xxxxxxxx, XX₂ XX₄: 13,6 x

xxxx: 1000 xx

xX xxxxxxx xx 4,5.

4.6 Xxxx xxxxxxx/xxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (4.3): 65/32,5/2,5 (x/x/x)

4.7 Standardní substance: xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx

5. XXXXXXXXXX XXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 10 mg standardní xxxxxxxxx (4.7) xx xxxxxxxx xx fosfátovém xxxxx (4.5) a xxxxx pufrem xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx obsahující 100 μx xxxxxxxxxx x 1 xx. Xxx xxxxxxxx x uzavřené xxxxx x při 4 °C, xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 7 xxx.

5.1 Xxx xxxxxxxxxx premixy

Z xxxxxx xxxxxxxxx roztoku xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

5.2 Pro xxxxxx

X výchozího xxxxxxx xx xxxxxxxx postupným xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx pufrem xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

6. XXXXXXXX EXTRAKTU X XXXXXXXXXXX XXXXXXX

6.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx 10 mg xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx 10-100 xx xxxxxxxxxx, xx x xxxxxxx baňce x obsahu 100 xx mechanicky xxxxxxxx x 60 xx xxxxx (4.6) po xxxx 15 xxxxx. Xxxxxxx xX xx xxxxxxxxxxx x pokud xx třeba, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (4.3) na hodnotu 2. Xxxxx (4.6) xx xxxxxx objem x xxxxxxxxxxxx xx. Xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx papír (xxxx. Whatman x. 1) a xxxxxxx 5 xx xxxxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxx xx poměrná část x xX se xxxxxxxx hydroxidu sodného (4.4) xxxxxx xx xxxxxxx 4,5. Tento xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5), xxx se dosáhlo xxxxxxxxxxx xxxxxx avoparcinu 4 μx/xx ( = X₈).

X xxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (1+1) fosfátovým xxxxxx (4.5) xxxxxxxx xxxxxxx X4 (očekávaný xxxxx: 2 μx/xx), X2 (xxxxxxxxx xxxxx: 1 μx/xx) x X₁ (xxxxxxxxx obsah: 0,5 μx/xx).

6.2 Xxxxxx

Xxxxxx x hmotnosti 50 x se xxxxx xx 100 ml xxxxx (4.6) x xx xxxx 30 xxxxx xx mechanicky xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx odstředěním (v xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx). Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx (xxx. xxxxxxxxxxx tabulka) a xxxxxxx xX xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) xxxxxx xx 4,5. Tento roztok xx naředí xxxxxxxxxx xxxxxx (4,5), xxx xx xxxxxx xxxxxx X8 (xxx. následující xxxxxxx).

X xxxxxx xxxxxxx xx postupným rozřeďováním (1+1) fosfátovým xxxxxx (4.5) připraví xxxxxxx X4 (očekávaný obsah: 1,0 μg/ml), X₂ (xxxxxxxxx xxxxx: 0,5 μx/xx) a X₁ (xxxxxxxxx obsah: 0,25 μx/xx).

7. XXXXXX XXXXX

7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxx xxxxxx (4.1) xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx (3.2) xxx xxxxxxx 50–60 °X. Xxxxxxxxxxx pokusy xx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx (4.1) se xxxxxxx xxxxxxxx inokula, xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

7.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xx čtyřech xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X₈, S₄, X₂, X₁) a testovacího xxxxxxx (X8, U4, X2, X1).Xx xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx. X xxxx důvodu xxxx xxx xxxxx takové xxxxxxx, aby bylo xxxxx xxxxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx otvorů x průměru 10-13 xx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 30 xx. Test xx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxx xx xxxxxxxx desky, xx xxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx 20 mm x xxxxxxx 200 xx.

Xx xxxxx se xxxxxx takové xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxxxx podle 7.1, xxx xx vytvořila xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 2 xx (60 xx xx misku x xxxxxxx 200 xx). Xxxx, xx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 ml xx xxxxx, podle xxxxxxx xxxxxx). Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxx xxxx xx vyhodnotí 32 inhibičních xxx.

7.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx xxxx 16 až 18 xxxxx xxx 30 °X.

8. XXXXXXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xx změří x přesností xx 0,1 xx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxx hodnoty zanesou xx xxxxxxxxxxxxxxxxxx papíru, xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxxxx zón. Pro xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx pro extrakt xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx. xxxx uvedeným xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx xxx xxx nejnižší xxxxxx standardního roztoku (XX) se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) XX = 7X₈ + 4X₄ + X₂ – 2S₁ / 10

Xxxxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxx úroveň xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (SH) xx stanoví xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

XX = 7X₈ + 4S₄ + X₂ – 2X₁ / 10

Stejně xxx xx stanoví xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx (XX) a xxxxxxxx úroveň (UH) xxxxxxxx, přičemž xx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx U₁, X₂, U₄ x X₈ xxxxxxx S₁, X₂, S₄ x X₈.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx XX x XX se xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx XX a XX x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, měly xx xxx xxxxxx rovnoběžné. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxx, xxxxx se hodnoty (XX-XX) a (XX-XX) xxxxxxxxxxx více xxx x 10 % xx střední xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xx možné xxxxxxxx xxx X₁ a X₁ xxxx X₈ x S₈. Xxx xx xxxxxxx SL, XX, XX x XX určí xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, aby xx xxxxxxxx alternativní xxxxxxxxxxxx přímky:

Xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx XX x XX. X xxxxxx alternativních přímek xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Výsledky, xxxxx xxxx xxxxxxxxx ze xxx xxxxxx, xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx o xxxxxxx.

Xxxxx xx možno xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx A) xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxx 4 úrovně

(c) xxx X = (X₁+ U₂+ X₄+ X₈ – X₁ – S₂ – X₄ – X₈) × 0,602 / X₄+ X₈+ X₄+ X₈ – X₁ – U₂ –

Pro 3 xxxxxx

(x) log X = (U₁+ X₂+ X₄ – X₁ – X₂ – X₄) × 0,401 / X₄+ X₄ – X₁ – X₁

xxxx

x´) log X = (U₂+ X₄+ U₈ – X₂ – X₄ – X₈) × 0,401 / U₈+ X₈ – X₂ – X₂

Xxxxxxxx xxxxxxxx = předpokládaná xxxxxxxx х xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx hodnot 0,5–2,0, zkouška se xxxxxxxx při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx možné xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx je xxxxx považovat xx xxxxxxxxx, x xx xx xxxx být xxxxxxxxxxx xx protokolu x xxxxxxx.

Xxxxx xxxx xxxxx přímky xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxx pak xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx považovat xx xxxxxxxxxxxx.

9. XXXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxx a xxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx:

- 2 xx/xx xxxxxxxxx hodnoty xxx obsahu xxxxxxxxxx 2 xx 10 xx/xx,

- 20 % xxxxx hodnoty xxxxxxxx xxx obsahu 10 xx 25 xx/xx,

- 5 xx/xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx obsahu 25 xx 50 xx/xx,

- 10 % xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx obsahu xxx 50 xx/xx.

2. STANOVENÍ XXXXXXXXX SODNÉHO XXXXXX X XXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX

1. ÚČEL X XXXXXX POUŽITÍ

Metoda xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx sodného x krmivech x xxxxxxxxxxxx premixech. Xxxxxx xxxxxxx stanovitelnosti je 10 xx/xx (10 xxx) [3].

2. PRINCIP

Vzorek xx xxxxxxxxx 90 %-xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx vhodnému xxxxxxx xxxxx obsahu xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx difúze xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx naočkovaném xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx inhibičními zónami xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx za xxxxx úměrný logaritmu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

3. XXXXXXXXXXXXXXX: BACILLUS XXXXXXXX XXXX 6633 (NICB 8054)

3.1 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx kultivační xxxxxx (4.1) v xxxxxxx xxxxxxxxxx xx naočkuje xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx noc xx xxxxxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx při xxx 4 °X x xxxxx měsíc xx xxxxx naočkuje.

3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx [4]

Xxxxxxx xxxxxxx xx agaru (3.1) v xxxxx xxxxxxxx se xxxxx 2-3 ml xxxxxxxx xxxx. Xxxxx suspenzí xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxxxx obsahuje 300 ml kultivačního xxxxx (4.1), a xx xxxx 3 xx 5 xxx xx xxxxxxxx xxx 30 °C. Xx xxxxxxxx xxxxxx spór xxx mikroskopem xx xxxxxxx xxxxx xx 15 xx ethanolu (4.3) a xxxxxxxxxxxxx xx. Xxxx suspenze xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxxxxx xxx 4 °C.

4. XXXXXXXXXX XXXXXX A XXXXXXX

4.3 Ethanol 20 %-xx (x/x): 200 xx xxxxxxxx xx xxxxx 800 xx xxxx.

4.4 Xxxxxxxx, xxxxxxx.

4.5 Xxxxxxxx 90 %-xx (x/x): 900xx xxxxxxxxx (4.4) xx xxxxx 100 ml xxxx.

4.6 Xxxxxxxx 50 %-xx (x/x): 500xx xxxxxxxxx (4.4) se xxxxx 500 xx xxxx.

4.7 Xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx (xxxxx F, 20 xxxx; xxxxxxxxx xxxxxxx XX1: F. Xxxxxxxxx xxx Co., xxxx xxxxxxxxxx).

4.8 Standardní xxxxxxxxx: monensin xxxxx x xxxxx aktivitě (xxxx xxxx xxxxxxxxxx x International Xxxxxxxxxx xxx Boilogical Standards, Xxxxxxx Xxxxxxxxxx Laboratory, Xxxxxxxxx, Surrey KT15 3XX, Xxxxx Xxxxxxxx).

5. XXXXXXXXX

5.1 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x 250xx xxxxxxx xxxxxx.

5.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx: 25 xx, xxxxx: 400 xx, x xxxxxxx x xxxxxxx 2 xx na jednom xxxxx.

5.3 Xxxxxxxx trubička xxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx: 11 mm, xxxxx: xxxxxxxxx 300 xx, x otvorem x xxxxxxx 2 xx na jednom xxxxx.

6. XXXXXXXXXX XXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.8) xx xxxxxxxx v methanolu (4.4) x xxxxxx, xxx xxxxxx výchozí xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 800 μx/xx. Xxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx x při 4 xX, xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 2 xxxxx.

X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 50 %-xxx methanolem (4.6) xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

7. XXXXXXXX EXTRAKTU A XXXXXXXXXXX ROZTOKU

7.1 Xxxxxxxx

7.1.1 Xxxxxxxxxx premixy

Vzorek x xxxxxxxxx 2,0 xx xx xxxxx k 100 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx (4.5), xxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx a xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx 50 %-xxx methanolem (4.6), xxx bylo xxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X₈).

7.1.2 Xxxxxx, x xxxxx podíl monensinu xxxx xxxxx než 50 xxx

Xxxxxx o xxxxxxxxx 10 xx 20 g xx xxxxx x 100 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx (4.5), 15 xxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxx.

Xxxxxx xxxxx xx zavede xx xxxxxxxx trubičky (5.2) x xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx trubičkou se xxxxxx xx výše 75–80 xx xxxxxx xxxxxxxx (4.7).

Xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xx xxxxxxx. 30 xx xxxxxxxx xx xxxxx 50 xx xxxx. Xxxx xxxx se zředí 50 %-ním methanolem (4.6), xxx xxxx xxxxxxxx očekávané xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X₈).

7.1.3 Xxxxxx x xxxxx xxxxx monensinu xxxxxxxxxx 50 xxx (xxxxxx xxxxxxx 10 xxx)

Xxxxxx o xxxxxxxxx 10 až 20 x se xxxxx x 100 xx 90 %-xxxx methanolu (4.5), 15 minut xxxxxxxx x odstřeďuje xxxxx se xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxx x podílem xxxxxxxxx 20 xxx xx xxxxxxx 40 xx xxxxxx; pro 10 ppm se xxxxxxx 80 ml. Xxxxxx xx xxxxxx xx vakuu xxx xxxxxxx nepřesahující 40 °X x rotačním xxxxxxx (5.1). Zůstatek xx rozpustí v 10 ml 90 %-xxxx methanolu.

Vatová zátka xx xxxxxx do xxxxxxxx trubičky (5.3) x xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx do xxxx 75–80 xx xxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx zbytku xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx 10 xx 90xxxxxxxxxxx methanolu x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx xx odpaří xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 40 °X x xxxxxxx xxxxxxx (5.1). Xxxxxxxx xx rozpustí x 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.4) a xxxxxx se doplní xxxxx xx 20 xx. Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx 4000 ot/min. Xxxx poté se xxxxx 50 %-xxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx očekávané koncentrace xxxxxxxx sodného 8 μx/xx ( = X₈).

7.2. Xxxxxxxxx xxxxxx

X xxxxxxx X8 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (1 + 1) 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6) xxxxxxxx xxxxxxx X4 (xxxxxxxxx xxxxx: 4 μx/xx), X2 (xxxxxxxxx xxxxx: 2 μx/xx), X1 (xxxxxxxxx podíl: 1 μx/xx).

8. XXXXXX XXXXX

8.1 Naočkování xxxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxx médium (4.2) xx xxxxxxxx suspenzí xxxx (3.2) xxx 50 až 60 °X. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx médiem (4.2) xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, které xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx s xxxxxxx použitými xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx sodného.

8.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxx se nasadí xxxx xxxxxxx test xx xxxxxxx po xxxxxxx koncentračních xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (S₈, X₄, X₂, X₁) x testovacího xxxxxxx (X₈, X₄, X₂, X₁). Xx každou xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx všechny xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx. Z xxxx důvodu xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx bylo xxxxx xxxxxxxx ve xxxxxx kultivačního xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxx 10-13 xx x rozestupem xxxxxx xxxxxxxxx 30 xx. Xxxx xx xxx být xxxxxxxx xxxxxxxxx xx miskách, xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx 20 mm x xxxxxxx 200 xx.

Xx xxxxx se xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx média (4.1) xxxxxxxxxxxx xxxxx 8.1, xxx se xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 2 mm (60 xx na misku x xxxxxxx 200 xx). Xxxx xx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx, do xxxxxxx se pipetou xxxxxx přesné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxx (mezi 0,10 x 0,15 xx xx xxxxx, podle xxxxxxx xxxxxx). Xxxxx xxxxxxxxxxx musí být xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxx xxxx se xxxxxxxxx 32 inhibičních xxx.

8.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxxx po xxxx 18 xxxxx xxx 35 xx 37 °C.

9. XXXXXXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xx xxxxx x xxxxxxxxx xx 0,1 xx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx střední xxxxxxx xxxxxxx do semilogaritmického xxxxxx, xxxxxxx se xxxxxx logaritmus xxxxxxxxxxx xx vztahu k xxxxxxx inhibičních zón. Xxx standardní roztok xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx. xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx bod xxx xxxxxxxx úroveň xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XX) xx xxxxxxx xxxxx následujícího xxxxxx:

x) XX = 7X₁ + 4S₂ + X₄ – 2X₈ / 10

Xxxxxxxxxxxx xxx pro xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (XX) xx stanoví xxxxx následujícího xxxxxx:

x) XX = 7S₈ + 4S₄+ X₂ + 2S₁ / 10

Xxxxxx tak xx xxxxxxx nejvhodnější body xxx nejnižší (XX) x xxxxxxxx úroveň (XX) extraktu, xxxxxxx xx do xxxx xxxxxxxxx vzorců xxxxxx X₁, X₂, X₄ x X₈ xxxxxxx X₁, S₂, X₄ x X₈.

Xxxxxxxxxx hodnoty XX x XX xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxx roztok. Totéž xx provede xxx xxxxxxx XX x XX k xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx.

Xxxxx xx nevyskytují xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx být xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx považovat za xxxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx (XX-XX) x (XX-XX) xxxxxxxxxxx více xxx x 10 % xx střední xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xx možné xxxxxxxx buď X1 x X1 nebo X8 a X8. Xxx xx xxxxxxx XX, XX, UL x UH určí xxxxxx následujících xxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx přímky:

a) XX = 5S₁ + 2X₂ – X₄ / 6 xxxx 5S₂ + 2X₄ – X₈ / 6

x ) XX = 5S₄ + 2X₂ − X₁ / 6 xxxx 5X₈ + 2X₄ − X₂ / 6

Xxxxx se xxxxxxx xxx xxxxxxx XX x XX. X těchto xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx rovněž xxxxxxxxxxx rovnoběžnost. Výsledky, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxx úrovní, xx xxxx být xxxxxxxxxxx xx protokolu x analýze.

Pokud xx xxxxx přímky považovat xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (log X) xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxx 4 xxxxxx

x) log A = (X₁+ U₂+ X₄+ X₈ – X₁ – X₂ – X₄ – X₈) × 0,602 / U₄+ U₈+ X₄+ S₈ – X₁ – X₂ – S₁ – X₂

Xxx 3 xxxxxx

x) xxx A = (X₁+ U₂+ X₄ – S₁ – X₂ – X₄) × 0,401 / X₄+ X₄ – X₁ – X₁

xxxx

x) xxx X = (X₂+ X₄+ U₈ – X₂ – X₄ – S₈) × 0,401 / X₈+ S₈ – X₂ – X₂

Xxxxxxxx xxxxxxxx = xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx х xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx mimo rozsah xxxxxx 0,5–2,0, test xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx relativní xxxxxxxx v rozsahu xxxxxxxxxxxx hodnot, výsledek xx xxxxx xxxxxxxxx xx přibližný, x xx xx mělo xxx zaznamenáno xx xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxx xxxx možné přímky xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxxxx.

10. XXXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxx xxxx výsledky xxxx xxxxxxx jednoho xxxxxxxxx xxx xxxxx x téže xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx:

- 20 % xxxxx xxxxxxx výsledku xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xx 25 xx/xx,

- 5 xx/xx xxxxxxxxx hodnoty xxx xxxxxx 25 xx 50 xx/xx,

- 10 % xxxxx hodnoty xxxxxxxx při xxxxxx xxx 50 xx/xx.

[1] Xxxxx být xxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

[2] Xxxx být xxxxxxx jakékoliv xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, které xxxxxxxx xxxxxx výsledky.

[3] 1 xx monensinu xxxxxxx xxxxxxxx 1000 jednotkám XX.

[4] Xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx spór.

[5] Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.