Plné znění - 31981L0715

Xxxxxx xxxxxxxx Komise

ze xxx 31. xxxxxxxx 1981,

xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx

(81/715/XXX)

XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,

x xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,

x xxxxxxx xx směrnici Xxxx 70/373/XXX xx dne 20. xxxxxxxx 1970, xxxxxx se xxxxxx xxxxxx xxxxxx vzorků x xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx úřední xxxxxxxx xxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx Xxxxx x xxxxxxxxxxx Řecka, a xxxxxxx na článek 2 xxxxxxx xxxxxxxx,

xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx 70/373/EHS xxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx za účelem xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx předpisů xx jakost a xxxxxxx krmiv, xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx Společenství pro xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx;

xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx Xxxxxx 71/250/XXX [2], 71/393/XXX [3], 72/199/XXX [4], 73/46/XXX [5], 74/203/XXX [6], 75/84/XXX [7], 76/372/EHS [8] a 78/633/XXX [9], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxx 30. července 1981, xxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx; xx stav xx xx doby xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx;

xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxx směrnice xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Stálého xxxxxx xxx krmiva,

PŘIJALA XXXX XXXXXXXX:

Xxxxxx 1

Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxx xxxxxx kontrolu xxxxx na xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx popsanými v xxxxxxx.

Xxxxxx 2

Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x účinnost xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxx xxxxxxxx do 1. prosince 1981. Xxxxxxxxxx x nich xxxxxxx Xxxxxx.

Xxxxxx 3

Tato xxxxxxxx xx určena xxxxxxxx xxxxxx.

X Xxxxxxx xxx 31. xxxxxxxx 1981.

Za Xxxxxx

Xxxxxx Xxxxx

xxxxxxxx

[1] Xx. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.

[2] Úř. xxxx. X 155, 12.7.1971, x. 13.

[3] Úř. xxxx. X 279, 20.12.1971, x. 7.

[4] Xx. xxxx. X 123, 29.5.1972, x. 6.

[5] Úř. xxxx. X 83, 30.3.1973, x. 21.

[6] Xx. věst. X 108, 22.4.1974, x. 7.

[7] Úř. věst. X 32, 5.2.1975, x. 26.

[8] Xx. xxxx. X 102, 15.4.1976, x. 8.

[9] Úř. xxxx. X 206, 29.7.1978, x. 43.

PŘÍLOHA

1. XXXXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXX V XXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX

1. XXXX X XXXXXX XXXXXXX

Xxxx xxxxxx xxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxx stanovitelnosti xx 2 mg/kg (2 ppm). Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx antibiotik xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

2. XXXXXXX

Xx xxxxx xxxxxx/xxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxx vzorek. Xxxxxxx xx odstředí. Jeho xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx měřením difúze xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx se dokáže xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx inhibičních xxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx přímo xxxxxx logaritmu koncentrace xxxxxxxxxxx.

3. XXXXXXXXXXXXXXX: XXXXXXXX XXXXXXXX XXXX 6633 (XXXX 8054)

3.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1) v xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxx se xxx 30 °X inkubuje. Xxxxxxx se xxxxxxxx x xxxxxxxxxx při xxx 4 °C x xxxxx měsíc xx xxxxx xxxxxxxx.

3.2. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx [1]

Xxxxxxx kultura v xxxxxxxx xxxxx (3.1) xx omyje 2-3 xx xxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxxxx obsahuje 300 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1), x xx xxxx 3 xx 5 xxx se xxxxxxxx při 30 °X. Xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx kultura xxxxx do 15 xx xxxxxxxx (4.2) x zhomogenizuje xx. Xxxx suspenze může xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxxxxx xxx 4 °C.

4. XXXXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXX

4.1 Xxxxxxxxxx médium [2]

4.2 Xxxxxxx 20 %-xx (x/x): 200 xx xxxxxxxx xx zředí 800 xx vody.

4.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, d: 1,18–1,19.

4.4 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx, 2X.

4.5 Xxxxxxxxx xxxx 0,1 X:

xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, XX₂ XX₄: 13,6 x

xxxx: 1000 xx

xX upravit na 4,5.

4.6 Xxxx xxxxxxx/xxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (4.3): 65/32,5/2,5 (x/x/x)

4.7 Xxxxxxxxxx substance: xxxxxxxxxxxxxxx o xxxxx xxxxxxxx

5. STANDARDNÍ ROZTOKY

Přesně xxxxxxxx množství xxx 10 mg xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.7) se xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx (4.5) a xxxxx pufrem xxxxxx, xxx vznikl xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 100 μx xxxxxxxxxx x 1 ml. Xxx xxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxx x při 4 °X, xxxxxxx xxxxx xxxxxx použitelný 7 xxx.

5.1 Pro xxxxxxxxxx premixy

Z xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx postupným rozřeďováním xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

5.2 Pro xxxxxx

X xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx fosfátovým xxxxxx xxxxxxxxxxx roztoky:

6. XXXXXXXX XXXXXXXX X XXXXXXXXXXX ROZTOKU

6.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxx xxxxxxxx množství 10 xx vzorku, xxxxx obsahuje 10-100 xx xxxxxxxxxx, xx x xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 100 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x 60 xx xxxxx (4.6) xx xxxx 15 xxxxx. Xxxxxxx xX xx xxxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxx chlorovodíkovou (4.3) xx xxxxxxx 2. Xxxxx (4.6) xx xxxxxx objem x homogenizuje se. Xxx se dílčí xxxxxxxx přefiltruje přes xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx. Xxxxxxx č. 1) x xxxxxxx 5 xx filtrátu xx xxxxx. Odebere xx xxxxxxx xxxx x xX xx xxxxxxxx xxxxxxxxx sodného (4.4) upraví na xxxxxxx 4,5. Xxxxx xxxxxx xx zředí xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5), xxx xx dosáhlo xxxxxxxxxxx obsahu xxxxxxxxxx 4 μx/xx ( = U₈).

Z xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (1+1) fosfátovým xxxxxx (4.5) připraví xxxxxxx X4 (očekávaný xxxxx: 2 μx/xx), X2 (xxxxxxxxx xxxxx: 1 μx/xx) x X₁ (xxxxxxxxx xxxxx: 0,5 μx/xx).

6.2 Xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxxxx 50 x xx xxxxx xx 100 ml xxxxx (4.6) x xx xxxx 30 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Extrakt xx xxxxx odstředěním (v xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx). Poměrná xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx odebere (xxx. xxxxxxxxxxx tabulka) x xxxxxxx xX xx xxxxxxxx xxxxxxxxx sodného (4.4) upraví xx 4,5. Xxxxx xxxxxx xx naředí xxxxxxxxxx xxxxxx (4,5), aby xx získal xxxxxx X8 (xxx. xxxxxxxxxxx xxxxxxx).

X xxxxxx roztoku xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (1+1) fosfátovým xxxxxx (4.5) připraví xxxxxxx X4 (xxxxxxxxx xxxxx: 1,0 μx/xx), X₂ (xxxxxxxxx xxxxx: 0,5 μx/xx) a X₁ (xxxxxxxxx xxxxx: 0,25 μx/xx).

7. POSTUP XXXXX

7.1 Xxxxxxxxxx kultivačního xxxxx

Xxxxxxxx xxxxxx (4.1) xx xxxxxxxx suspenzí xxxx (3.2) xxx xxxxxxx 50–60 °X. Xxxxxxxxxxx pokusy xx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx (4.1) se xxxxxxx množství xxxxxxx, xxxxx xxxxxx co xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx ostré xxxxxxxxx xxxx xxx různých xxxxxxxxx koncentracích avoparcinu.

7.2 Xxxxxxxx misek

Test xx xxxxxx xxxx difúzní xxxx xx miskách xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx standardního xxxxxxx (X₈, X₄, S₂, X₁) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (X8, X4, X2, X1).Xx xxxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxx bezpodmínečně všechny xxxxx koncentrace standardu x xxxxxxxx. X xxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx takové xxxxxxx, aby xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx prostředí xxxxxxx osm otvorů x xxxxxxx 10-13 xx x xxxxxxxxxx xxxxxx minimálně 30 xx. Xxxx by xxx xxx prováděn xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xx skleněné xxxxx, xx xxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxx kroužky x xxxxx 20 xx x průměru 200 xx.

Xx misku xx xxxxxx takové xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxxxx xxxxx 7.1, xxx xx vytvořila xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 2 xx (60 xx xx misku x průměru 200 xx). Xxxx, co xxxxxx ztuhne, vyhloubí xx xxxxxx, do xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx přesné množství xxxxxxxxxxxx a testovacího xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 ml xx otvor, xxxxx xxxxxxx xxxxxx). Každá xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx čtyřikrát, xxxxx xxx xxxxx xxxx se xxxxxxxxx 32 inhibičních zón.

7.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx xxxx 16 xx 18 xxxxx při 30 °X.

8. VYHODNOCENÍ

Průměr xxxxxxxxxxx xxx xx xxxxx x xxxxxxxxx na 0,1 mm. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxx hodnoty zanesou xx xxxxxxxxxxxxxxxxxx papíru, xxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx k xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx např. xxxx uvedeným způsobem.

Nejvhodnější xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XX) xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorce:

a) XX = 7S₈ + 4X₄ + X₂ – 2S₁ / 10

Nejvhodnější xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XX) xx xxxxxxx podle xxxxxxxxxxxxx vzorce:

SH = 7X₈ + 4X₄ + X₂ – 2X₁ / 10

Xxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx pro xxxxxxxx (UL) x xxxxxxxx xxxxxx (UH) xxxxxxxx, xxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx X₁, X₂, X₄ a X₈ namísto X₁, X₂, X₄ x X₈.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx XX x XX se xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx standardní xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx pro xxxxxxx XX x UH x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx extrakt.

Pokud xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx by xxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxx, xxxxx se hodnoty (XX-XX) x (XX-XX) xxxxxxxxxxx xxxx xxx x 10 % xx xxxxxxx hodnoty.

Pokud xxxxxx nejsou xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxx X₁ a X₁ xxxx X₈ x X₈. Xxx xx xxxxxxx XX, XX, XX x XX xxxx pomocí xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xx obdržely xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxxxx xx xxxxxxx xxx hodnoty UL x UH. X xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx rovněž xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Výsledky, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, by xxxx být xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx A) pomocí xxxxxxx z následujících xxxxxx:

Xxx 4 úrovně

(c) xxx X = (X₁+ U₂+ X₄+ X₈ – X₁ – X₂ – X₄ – S₈) × 0,602 / X₄+ X₈+ X₄+ X₈ – X₁ – X₂ –

Xxx 3 xxxxxx

(x) xxx X = (X₁+ X₂+ U₄ – X₁ – X₂ – S₄) × 0,401 / X₄+ X₄ – X₁ – X₁

xxxx

x´) xxx X = (X₂+ X₄+ U₈ – X₂ – X₄ – X₈) × 0,401 / U₈+ X₈ – X₂ – X₂

Xxxxxxxx aktivita = xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx х xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxx 0,5–2,0, xxxxxxx xx xxxxxxxx při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxxxxx roztoků. Xxxxx není xxxxx xxxxxx relativní xxxxxxxx x xxxxxxx požadovaných xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, x xx xx xxxx být xxxxxxxxxxx xx protokolu x xxxxxxx.

Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx rovnoběžné, zkouška xx xxxxxxxx. Pokud xx xxx pak xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx výsledek xxxxxxxxx xx neuspokojivý.

9. XXXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx analytika xxx xxxxx x xxxx zkoušce xx xxxxxx xxxxxxxxxxx:

- 2 xx/xx absolutní xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx 2 xx 10 xx/xx,

- 20 % xxxxx xxxxxxx výsledku xxx xxxxxx 10 xx 25 mg/kg,

- 5 xx/xx absolutní xxxxxxx xxx obsahu 25 xx 50 xx/xx,

- 10 % xxxxx hodnoty xxxxxxxx xxx xxxxxx nad 50 xx/xx.

2. XXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXX XXXXXX X AGAROVÉM XXXXXXXXXXX XXXXX

1. XXXX A XXXXXX POUŽITÍ

Metoda xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx premixech. Xxxxxx xxxxxxx stanovitelnosti xx 10 xx/xx (10 xxx) [3].

2. XXXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxxxxx 90 %-xxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx vhodnému xxxxxxx xxxxx obsahu xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxx antibiotická xxxxxxxx se stanoví xxxxxxx xxxxxx monensinu xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx médiu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Bacillus xxxxxxxx. Xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx těchto xxxxxxxxxxx xxx xx x xxxxxxx použitých xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx za xxxxx úměrný xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

3. XXXXXXXXXXXXXXX: XXXXXXXX XXXXXXXX XXXX 6633 (NICB 8054)

3.1 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1) v xxxxxxx xxxxxxxxxx se naočkuje xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx subtilis x přes xxx xx xxxxxxxx xxx 30 °X. Xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx asi 4 °C x xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.

3.2 Příprava xxxxxxxx xxxx [4]

Xxxxxxx xxxxxxx na xxxxx (3.1) x xxxxx xxxxxxxx xx xxxxx 2-3 xx sterilní xxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx, která xxxxxxxx 300 ml kultivačního xxxxx (4.1), x xx dobu 3 xx 5 dní xx xxxxxxxx xxx 30 °X. Po xxxxxxxx xxxxxx spór xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx do 15 xx ethanolu (4.3) x zhomogenizuje xx. Xxxx xxxxxxxx xxxx xxx uchována xxxxxxxxx 5 xxxxxx xxx 4 °X.

4. XXXXXXXXXX XXXXXX A XXXXXXX

4.3 Ethanol 20 %-ní (x/x): 200 ml xxxxxxxx xx xxxxx 800 xx vody.

4.4 Xxxxxxxx, xxxxxxx.

4.5 Xxxxxxxx 90 %-xx (v/v): 900xx xxxxxxxxx (4.4) xx xxxxx 100 xx xxxx.

4.6 Xxxxxxxx 50 %-xx (x/x): 500xx xxxxxxxxx (4.4) xx xxxxx 500 xx xxxx.

4.7 Xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx (xxxxx X, 20 mesh; xxxxxxxxx xxxxxxx XX1: F. Xxxxxxxxx xxx Co., xxxx xxxxxxxxxx).

4.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxxx sodný x xxxxx xxxxxxxx (xxxx xxxx xxxxxxxxxx x International Laboratory xxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxx, Xxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx, Xxxxxxxxx, Xxxxxx XX15 3XX, Velká Xxxxxxxx).

5. XXXXXXXXX

5.1 Xxxxxxx rotační xxxxxxx s 250xx xxxxxxx baňkou.

5.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx chromatografii, xxxxxxx průměr: 25 xx, délka: 400 xx, s xxxxxxx x xxxxxxx 2 xx na xxxxxx xxxxx.

5.3 Skleněná xxxxxxxx xxx chromatografii, xxxxxxx xxxxxx: 11 xx, xxxxx: xxxxxxxxx 300 xx, s xxxxxxx x xxxxxxx 2 xx xx xxxxxx xxxxx.

6. XXXXXXXXXX XXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx asi 10 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.8) xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxx, xxx xxxxxx výchozí xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 800 μx/xx. Při xxxxxxxx x uzavřené láhvi x xxx 4 xX, xxxxxxx xxxxx xxxxxx použitelný 2 xxxxx.

X tohoto výchozího xxxxxxx xx připraví xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6) xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

7. XXXXXXXX XXXXXXXX X XXXXXXXXXXX XXXXXXX

7.1 Xxxxxxxx

7.1.1 Xxxxxxxxxx premixy

Vzorek o xxxxxxxxx 2,0 xx xx xxxxx x 100 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx (4.5), xxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxx se zředí 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6), xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X₈).

7.1.2 Xxxxxx, x xxxxx xxxxx monensinu xxxx xxxxx xxx 50 xxx

Xxxxxx x xxxxxxxxx 10 xx 20 x se xxxxx k 100 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx (4.5), 15 xxxxx xxxxxxxx x xxxxx ustát.

Vatová xxxxx xx xxxxxx do xxxxxxxx trubičky (5.2) x xx lehkého xxxxxxxxxxx trubičkou se xxxxxx do xxxx 75–80 mm oxidem xxxxxxxx (4.7).

Xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xx xxxxxxx. 30 xx filtrátu xx xxxxx 50 xx xxxx. Hned xxxx se zředí 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6), xxx xxxx xxxxxxxx očekávané koncentrace xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X₈).

7.1.3 Krmiva x xxxxx podíl xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 50 xxx (xxxxxx xxxxxxx 10 xxx)

Xxxxxx x xxxxxxxxx 10 až 20 x xx xxxxx x 100 xx 90 %-xxxx methanolu (4.5), 15 minut xxxxxxxx a odstřeďuje xxxxx xx xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxx x podílem xxxxxxxxx 20 xxx xx xxxxxxx 40 xx zbytku; xxx 10 ppm se xxxxxxx 80 xx. Xxxxxx xx xxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 40 °X v xxxxxxxx xxxxxxx (5.1). Xxxxxxxx xx rozpustí x 10 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxx zátka xx xxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx (5.3) x za xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx do xxxx 75–80 mm xxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x filtrát xx xxxxxxx. Xxxxxx se xxxxxxx 10 ml 90xxxxxxxxxxx methanolu a xxxxxxx filtrát xx xxxxx k xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx xx odpaří xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 40 °X x xxxxxxx xxxxxxx (5.1). Xxxxxxxx xx rozpustí x 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xx 20 xx. Roztok xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxxxx při minimálních xxxxxxxx 4000 ot/min. Xxxx xxxx se xxxxx 50 %-ním xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx očekávané xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X₈).

7.2. Testovací xxxxxx

X xxxxxxx X8 se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (1 + 1) 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6) xxxxxxxx roztoky X4 (xxxxxxxxx podíl: 4 μx/xx), X2 (xxxxxxxxx xxxxx: 2 μg/ml), X1 (očekávaný xxxxx: 1 μx/xx).

8. XXXXXX XXXXX

8.1 Naočkování xxxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxx médium (4.2) xx xxxxxxxx suspenzí xxxx (3.2) při 50 xx 60 °X. Předběžnými xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx (4.2) xx stanoví množství xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx možná xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx koncentracemi xxxxxxxxx sodného.

8.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxx test xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X₈, X₄, S₂, X₁) x testovacího xxxxxxx (X₈, U₄, X₂, X₁). Xx každou xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx koncentrace xxxxxxxxx x xxxxxxxx. Z xxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx kultivačního média xxxxxxx osm xxxxxx x průměru 10-13 xx x rozestupem xxxxxx minimálně 30 xx. Xxxx by xxx být prováděn xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxx xx xxxxxxxx desky, xx xxxxx je xxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx 20 xx x xxxxxxx 200 xx.

Xx misku se xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx média (4.1) xxxxxxxxxxxx podle 8.1, xxx se xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 2 mm (60 xx xx xxxxx x průměru 200 xx). Poté co xxxxxx ztuhne, vyhloubí xx xxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx přesné množství xxxxxxxxxxxx a testovacího xxxxxxx (mezi 0,10 x 0,15 ml xx xxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxx). Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx čtyřikrát, xxxxx pro xxxxx xxxx xx vyhodnotí 32 inhibičních xxx.

8.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx 18 xxxxx xxx 35 xx 37 °X.

9. XXXXXXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xx xxxxx x xxxxxxxxx xx 0,1 xx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx hodnoty xxxxxxx xx semilogaritmického xxxxxx, přičemž se xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx inhibičních zón. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx jako xxx xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx. níže xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx xxx pro xxxxxxxx xxxxxx standardního xxxxxxx (XX) xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) SL = 7X₁ + 4S₂ + S₄ – 2X₈ / 10

Xxxxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (XX) xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) XX = 7S₈ + 4X₄+ X₂ + 2X₁ / 10

Xxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxx (XX) xxxxxxxx, přičemž xx xx výše xxxxxxxxx vzorců xxxxxx X₁, X₂, X₄ x U₈ xxxxxxx X₁, X₂, S₄ x X₈.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx XX x SH xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx bodů xxxxxxx xxxxxxxxxxxx přímka pro xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx UL x XX x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx přímky xxx xxxxxxx.

Xxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, měly xx být xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx považovat xx xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx (XX-XX) a (XX-XX) neodchylují xxxx xxx o 10 % od střední xxxxxxx.

Xxxxx přímky nejsou xxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxx xxx U1 x X1 nebo X8 a S8. Xxx se xxxxxxx XX, XX, UL x XX určí xxxxxx následujících vzorců, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) XX = 5S₁ + 2X₂ – X₄ / 6 xxxx 5X₂ + 2X₄ – X₈ / 6

b ) XX = 5X₄ + 2X₂ − X₁ / 6 xxxx 5X₈ + 2X₄ − X₂ / 6

Totéž se xxxxxxx pro xxxxxxx XX x UH. X xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx rovněž xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Výsledky, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxx xxxxxx, xx měly být xxxxxxxxxxx do xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx rovnoběžné, xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx X) xxxxxx jednoho x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxx 4 xxxxxx

x) log X = (X₁+ U₂+ X₄+ X₈ – X₁ – S₂ – S₄ – X₈) × 0,602 / U₄+ U₈+ X₄+ X₈ – X₁ – U₂ – S₁ – X₂

Xxx 3 xxxxxx

x) xxx A = (X₁+ X₂+ X₄ – X₁ – X₂ – S₄) × 0,401 / X₄+ X₄ – X₁ – X₁

xxxx

x) xxx A = (X₂+ X₄+ U₈ – S₂ – X₄ – S₈) × 0,401 / X₈+ X₈ – X₂ – X₂

Xxxxxxxx xxxxxxxx = xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx х xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx aktivita xxxx xxxx rozsah xxxxxx 0,5–2,0, test xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx přizpůsobení koncentrací xxxxxxxx příp. xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx relativní xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx hodnot, výsledek xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, a xx by xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx o xxxxxxx.

Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx za rovnoběžné, xxxx se zopakuje. Xxxxx xx ani xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxxx výsledek xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.

10. XXXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx jednoho xxxxxxxxx při xxxxx x xxxx zkoušce xx neměly xxxxxxxxxxx:

- 20 % xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xx 25 xx/xx,

- 5 mg/kg xxxxxxxxx hodnoty xxx xxxxxx 25 xx 50 xx/xx,

- 10 % xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxx 50 mg/kg.

[1] Xxxxx xxx xxxxxxx xxxx metody, které xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

[2] Xxxx být xxxxxxx jakékoliv xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx odpovídajícího xxxxxxx, xxxxx poskytne xxxxxx xxxxxxxx.

[3] 1 xx xxxxxxxxx sodného xxxxxxxx 1000 xxxxxxxxx XX.

[4] Mohou xxx xxxxxxx jiné xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx.

[5] Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx médium xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, které xxxxxxxxx stejné xxxxxxxx.