Plné znění - 31981L0715

Xxxxxx směrnice Komise

ze xxx 31. července 1981,

xxxxxx xx stanoví xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx úřední xxxxxxxx xxxxx

(81/715/XXX)

XXXXXX EVROPSKÝCH XXXXXXXXXXXX,

x xxxxxxx na Smlouvu x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,

x xxxxxxx xx směrnici Rady 70/373/XXX xx xxx 20. xxxxxxxx 1970, xxxxxx se zavádí xxxxxx odběru xxxxxx x xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx kontrolu xxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx Aktem o xxxxxxxxxxx Xxxxx, x xxxxxxx na článek 2 xxxxxxx xxxxxxxx,

xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx 70/373/XXX xxxxxxx, xx úřední xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xx jakost x xxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxx za použití xxxxx Společenství xxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx;

xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxx Xxxxxx 71/250/XXX [2], 71/393/XXX [3], 72/199/XXX [4], 73/46/XXX [5], 74/203/EHS [6], 75/84/XXX [7], 76/372/XXX [8] x 78/633/XXX [9], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxx 30. xxxxxxxx 1981, xxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx stanovily; xx xxxx xx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx metod;

vzhledem x xxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx jsou x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx,

XXXXXXX TUTO XXXXXXXX:

Článek 1

Členské státy xxxxxxx, xx xxxxxxx xxx xxxxxx kontrolu xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx popsanými x xxxxxxx.

Xxxxxx 2

Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x účinnost xxxxxx a správní xxxxxxxx nezbytné xxx xxxxxxxx souladu s xxxxx xxxxxxxx do 1. xxxxxxxx 1981. Xxxxxxxxxx o nich xxxxxxx Xxxxxx.

Xxxxxx 3

Tato směrnice xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

X Xxxxxxx xxx 31. července 1981.

Xx Xxxxxx

Xxxxxx Thorn

předseda

[1] Xx. věst. X 170, 3.8.1970, x. 2.

[2] Úř. xxxx. X 155, 12.7.1971, x. 13.

[3] Úř. xxxx. X 279, 20.12.1971, x. 7.

[4] Úř. věst. X 123, 29.5.1972, x. 6.

[5] Xx. věst. X 83, 30.3.1973, x. 21.

[6] Úř. věst. X 108, 22.4.1974, x. 7.

[7] Xx. xxxx. X 32, 5.2.1975, x. 26.

[8] Xx. věst. X 102, 15.4.1976, x. 8.

[9] Xx. věst. X 206, 29.7.1978, x. 43.

XXXXXXX

1. XXXXXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXX X AGAROVÉM XXXXXXXXXXX XXXXX

1. ÚČEL X XXXXXX XXXXXXX

Xxxx xxxxxx umožňuje stanovení xxxxxxxxxx x krmivech x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx hranice xxxxxxxxxxxxxxx xx 2 xx/xx (2 xxx). Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx může xx stanovení xxxxxxx xxxxxx.

2. XXXXXXX

Xx xxxxx xxxxxx/xxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx odstředí. Jeho xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx médiu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Bacillus subtilis. Xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zónami xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xx xxx xxxxxx použitých xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx za xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx koncentrace xxxxxxxxxxx.

3. XXXXXXXXXXXXXXX: XXXXXXXX XXXXXXXX ATCC 6633 (XXXX 8054)

3.1 Uchovávání xxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1) v xxxxxxx zkumavkách se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx xxx xx při 30 °C xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxx 4 °C x xxxxx měsíc xx xxxxx xxxxxxxx.

3.2. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx [1]

Xxxxxxx kultura v xxxxxxxx médiu (3.1) xx xxxxx 2-3 xx xxxxxxxx vody. Xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx 300 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1), x xx xxxx 3 až 5 xxx xx xxxxxxxx xxx 30 °X. Xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx 15 xx ethanolu (4.2) x xxxxxxxxxxxxx se. Xxxx suspenze xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxxxxx při 4 °X.

4. XXXXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXX

4.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx [2]

4.2 Xxxxxxx 20 %-xx (x/x): 200 ml xxxxxxxx xx xxxxx 800 xx xxxx.

4.3 Xxxxxxxx chlorovodíková, x: 1,18–1,19.

4.4 Roztok xxxxxxxxx xxxxxxx, 2M.

4.5 Xxxxxxxxx xxxx 0,1 X:

xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, KH₂ PO₄: 13,6 x

xxxx: 1000 xx

xX xxxxxxx na 4,5.

4.6 Xxxx xxxxxxx/xxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (4.3): 65/32,5/2,5 (x/x/x)

4.7 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx o xxxxx xxxxxxxx

5. XXXXXXXXXX ROZTOKY

Přesně xxxxxxxx xxxxxxxx asi 10 mg standardní xxxxxxxxx (4.7) xx xxxxxxxx ve xxxxxxxxxx xxxxx (4.5) a xxxxx pufrem xxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 100 μx xxxxxxxxxx x 1 ml. Při xxxxxxxx x uzavřené xxxxx a při 4 °X, zůstane xxxxx roztok xxxxxxxxxx 7 xxx.

5.1 Xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx

X xxxxxx xxxxxxxxx roztoku xx xxxxxxxx xxxxxxxxx rozřeďováním xxxxxxxxxx pufrem xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

5.2 Xxx xxxxxx

X výchozího xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx fosfátovým xxxxxx xxxxxxxxxxx roztoky:

6. XXXXXXXX EXTRAKTU X XXXXXXXXXXX XXXXXXX

6.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx 10 xx vzorku, xxxxx obsahuje 10-100 xx xxxxxxxxxx, xx x xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 100 xx mechanicky xxxxxxxx x 60 ml xxxxx (4.6) po xxxx 15 xxxxx. Xxxxxxx pH xx xxxxxxxxxxx a xxxxx xx třeba, xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (4.3) xx xxxxxxx 2. Směsí (4.6) xx xxxxxx objem x xxxxxxxxxxxx xx. Xxx se dílčí xxxxxxxx přefiltruje přes xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxx. Xxxxxxx x. 1) a xxxxxxx 5 ml filtrátu xx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx x xX xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) upraví xx xxxxxxx 4,5. Tento xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx pufrem (4.5), xxx xx dosáhlo xxxxxxxxxxx xxxxxx avoparcinu 4 μg/ml ( = X₈).

X xxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (1+1) xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5) xxxxxxxx xxxxxxx U4 (xxxxxxxxx xxxxx: 2 μg/ml), X2 (xxxxxxxxx obsah: 1 μg/ml) x X₁ (xxxxxxxxx xxxxx: 0,5 μx/xx).

6.2 Xxxxxx

Xxxxxx x xxxxxxxxx 50 x xx xxxxx xx 100 xx xxxxx (4.6) x xx dobu 30 xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx (x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx). Xxxxxxx xxxx čistého xxxxxxxx xx xxxxxxx (xxx. xxxxxxxxxxx tabulka) a xxxxxxx xX xx xxxxxxxx hydroxidu xxxxxxx (4.4) xxxxxx xx 4,5. Xxxxx xxxxxx xx naředí fosfátovým xxxxxx (4,5), xxx xx získal xxxxxx X8 (viz. xxxxxxxxxxx xxxxxxx).

X xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (1+1) xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5) xxxxxxxx xxxxxxx X4 (xxxxxxxxx xxxxx: 1,0 μg/ml), X₂ (xxxxxxxxx obsah: 0,5 μx/xx) a U₁ (xxxxxxxxx obsah: 0,25 μx/xx).

7. POSTUP XXXXX

7.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxx xxxxxx (4.1) xx naočkuje suspenzí xxxx (3.2) při xxxxxxx 50–60 °X. Xxxxxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx se zkušebním xxxxxx (4.1) se xxxxxxx množství xxxxxxx, xxxxx vykáže xx xxxxx největší ale xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx při xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

7.2 Xxxxxxxx xxxxx

Xxxx xx xxxxxx jako xxxxxxx xxxx na xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X₈, X₄, X₂, X₁) x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (X8, U4, X2, U1).Na xxxxxx xxxxx xxxx být xxxxxxxx bezpodmínečně xxxxxxx xxxxx koncentrace xxxxxxxxx x xxxxxxxx. Z xxxx xxxxxx xxxx xxx miska xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxx vytvořit ve xxxxxx kultivačního xxxxxxxxx xxxxxxx xxx otvorů x xxxxxxx 10-13 xx s xxxxxxxxxx xxxxxx minimálně 30 xx. Xxxx xx xxx být prováděn xxxxxxxxx xx miskách, xxxxx xxxx xxxxxxxx xx skleněné xxxxx, xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx 20 xx x xxxxxxx 200 xx.

Xx xxxxx se xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxxxx xxxxx 7.1, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx přibližně 2 xx (60 xx xx xxxxx x xxxxxxx 200 xx). Xxxx, xx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx otvory, xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx přesné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (mezi 0,10 x 0,15 ml xx xxxxx, xxxxx xxxxxxx otvoru). Xxxxx xxxxxxxxxxx musí xxx xxxxxxx xxxxxxxxx čtyřikrát, xxxxx xxx xxxxx xxxx xx vyhodnotí 32 inhibičních xxx.

7.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx po dobu 16 xx 18 xxxxx při 30 °X.

8. XXXXXXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xx xxxxx x přesností xx 0,1 mm. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx hodnoty zanesou xx semilogaritmického papíru, xxxxxxx se zanáší xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx. Xxx xxxxxxxxxx xxxxxx stejně xxxx xxx extrakt xx xxxxxxxx nejpříhodnější xxxxxx, xxxxxxxxxx xxxx. xxxx uvedeným xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (XX) xx stanoví xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) XX = 7X₈ + 4X₄ + X₂ – 2X₁ / 10

Nejvhodnější xxx xxx xxxxxxxx úroveň xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (SH) xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

XX = 7X₈ + 4X₄ + X₂ – 2X₁ / 10

Xxxxxx xxx xx stanoví xxxxxxxxxxxx body xxx xxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxx (UH) xxxxxxxx, xxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx dosadí X₁, X₂, X₄ x X₈ namísto X₁, X₂, X₄ x X₈.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx XX x XX xx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxx vznikne nejvhodnější xxxxxx pro standardní xxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx xxx hodnoty XX x XX x xxxxxxx nejvhodnější xxxxxx xxx xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxxx by xxx přímky xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx (XX-XX) x (UH-UL) xxxxxxxxxxx xxxx xxx x 10 % xx xxxxxxx hodnoty.

Pokud xxxxxx xxxxxx rovnoběžné, xx xxxxx xxxxxxxx xxx X₁ x X₁ nebo X₈ x S₈. Xxx xx xxxxxxx SL, XX, XX a XX xxxx pomocí xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxxx alternativní xxxxxxxxxxxx přímky:

Xxxxx se xxxxxxx xxx xxxxxxx UL x XX. U xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx rovněž zkontroluje xxxxxxxxxxxx. Výsledky, xxxxx xxxx stanoveny xx xxx xxxxxx, xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, vypočítá xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx aktivity (xxx X) xxxxxx xxxxxxx z xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxx 4 xxxxxx

(x) xxx X = (X₁+ U₂+ X₄+ X₈ – X₁ – X₂ – X₄ – X₈) × 0,602 / X₄+ U₈+ X₄+ X₈ – U₁ – X₂ –

Pro 3 xxxxxx

(x) xxx X = (X₁+ X₂+ X₄ – X₁ – X₂ – X₄) × 0,401 / X₄+ X₄ – U₁ – X₁

xxxx

x´) xxx X = (X₂+ X₄+ U₈ – X₂ – X₄ – S₈) × 0,401 / U₈+ X₈ – X₂ – X₂

Xxxxxxxx xxxxxxxx = xxxxxxxxxxxxx aktivita х xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx hodnot 0,5–2,0, xxxxxxx se xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx. standardních xxxxxxx. Xxxxx xxxx možné xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, výsledek xx xxxxx považovat za xxxxxxxxx, x xx xx xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x analýze.

Pokud není xxxxx přímky xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, zkouška xx xxxxxxxx. Xxxxx xx ani xxx xxxxxxxxx rovnoběžnosti, xx xxxxx výsledek xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.

9. OPAKOVATELNOST

Rozdíly xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx analytika xxx jedné x xxxx xxxxxxx xx xxxxxx překračovat:

- 2 xx/xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx avoparcinu 2 xx 10 xx/xx,

- 20 % xxxxx xxxxxxx výsledku xxx xxxxxx 10 xx 25 mg/kg,

- 5 xx/xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx obsahu 25 xx 50 xx/xx,

- 10 % xxxxx xxxxxxx výsledku xxx obsahu xxx 50 mg/kg.

2. STANOVENÍ XXXXXXXXX XXXXXXX XXXXXX X AGAROVÉM XXXXXXXXXXX XXXXX

1. XXXX X XXXXXX POUŽITÍ

Metoda xxxxxxxx xxxxxxxxx monensinu sodného x krmivech x xxxxxxxxxxxx premixech. Xxxxxx xxxxxxx stanovitelnosti xx 10 xx/xx (10 xxx) [3].

2. PRINCIP

Vzorek xx extrahuje 90 %-xxx methanolem. Xxxxxxx xx podrobí xxxxxxxx xxxxxxx podle xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx monensinu xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx médiu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xx prokáže xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zónami xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx je x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx za xxxxx úměrný logaritmu xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx sodných xxxxx.

3. XXXXXXXXXXXXXXX: XXXXXXXX SUBTILIS XXXX 6633 (XXXX 8054)

3.1 Xxxxxxxx kmenové xxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1) v šikmých xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxx xxxxxxxx x přes xxx xx inkubuje xxx 30 °X. Xxxxxxx xx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxx asi 4 °X x xxxxx měsíc se xxxxx xxxxxxxx.

3.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx [4]

Čerstvá xxxxxxx na xxxxx (3.1) v xxxxx xxxxxxxx xx omyje 2-3 ml sterilní xxxx. Touto xxxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxxx xxxxx, xxxxx obsahuje 300 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1), x xx dobu 3 xx 5 xxx xx xxxxxxxx xxx 30 °X. Xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx xx 15 ml xxxxxxxx (4.3) a xxxxxxxxxxxxx xx. Xxxx suspenze xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxxxxx xxx 4 °C.

4. XXXXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXX

4.3 Ethanol 20 %-xx (x/x): 200 xx xxxxxxxx xx xxxxx 800 xx xxxx.

4.4 Methanol, xxxxxxx.

4.5 Methanol 90 %-xx (x/x): 900xx xxxxxxxxx (4.4) xx xxxxx 100 xx xxxx.

4.6 Methanol 50 %-xx (x/x): 500xx xxxxxxxxx (4.4) xx xxxxx 500 xx xxxx.

4.7 Xxxx hlinitý, xxxxxxxxxxx (alcoa X, 20 xxxx; activated xxxxxxx XX1: X. Xxxxxxxxx xxx Co., xxxx xxxxxxxxxx).

4.8 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx: monensin xxxxx x xxxxx xxxxxxxx (xxxx xxxx xxxxxxxxxx x International Xxxxxxxxxx xxx Xxxxxxxxxx Standards, Xxxxxxx Xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx, Xxxxxxxxx, Surrey KT15 3XX, Xxxxx Xxxxxxxx).

5. XXXXXXXXX

5.1 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x 250xx xxxxxxx xxxxxx.

5.2 Xxxxxxxx xxxxxxxx pro chromatografii, xxxxxxx xxxxxx: 25 xx, xxxxx: 400 xx, x xxxxxxx x xxxxxxx 2 xx na xxxxxx xxxxx.

5.3 Skleněná xxxxxxxx xxx chromatografii, vnitřní xxxxxx: 11 xx, xxxxx: xxxxxxxxx 300 xx, x xxxxxxx x xxxxxxx 2 xx xx jednom xxxxx.

6. XXXXXXXXXX XXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxx množství xxx 10 xx standardní xxxxxxxxx (4.8) xx xxxxxxxx v xxxxxxxxx (4.4) a xxxxxx, xxx xxxxxx výchozí xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxx sodného 800 μx/xx. Při xxxxxxxx x xxxxxxxx láhvi x při 4 xX, zůstane tento xxxxxx xxxxxxxxxx 2 xxxxx.

X tohoto xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx rozřeďováním 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6) xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

7. XXXXXXXX EXTRAKTU X XXXXXXXXXXX XXXXXXX

7.1 Extrakce

7.1.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxx o xxxxxxxxx 2,0 mg xx přidá k 100 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx (4.5), xxxxxxx minut xx xxxxxxxx a odstředí. Xxxxxx se xxxxx 50 %-xxx xxxxxxxxxx (4.6), xxx xxxx xxxxxxxx očekávané xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X₈).

7.1.2 Xxxxxx, x xxxxx podíl xxxxxxxxx xxxx nižší než 50 ppm

Vzorek o xxxxxxxxx 10 až 20 x se xxxxx k 100 xx 90 %-ního xxxxxxxxx (4.5), 15 xxxxx protřese x xxxxx xxxxx.

Xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.2) x xx lehkého xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx do xxxx 75–80 xx xxxxxx xxxxxxxx (4.7).

Xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx. 30 xx xxxxxxxx xx xxxxx 50 xx xxxx. Hned xxxx xx xxxxx 50 %-xxx methanolem (4.6), xxx xxxx xxxxxxxx očekávané xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 8 μx/xx ( = X₈).

7.1.3 Xxxxxx x xxxxx xxxxx monensinu xxxxxxxxxx 50 xxx (xxxxxx xxxxxxx 10 xxx)

Xxxxxx x xxxxxxxxx 10 až 20 x xx přidá x 100 xx 90 %-xxxx methanolu (4.5), 15 xxxxx xxxxxxxx a odstřeďuje xxxxx xx xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx 20 ppm xx xxxxxxx 40 xx xxxxxx; xxx 10 xxx xx xxxxxxx 80 ml. Xxxxxx se xxxxxx xx vakuu xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 40 °X v xxxxxxxx xxxxxxx (5.1). Xxxxxxxx xx rozpustí x 10 xx 90 %-xxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxx xxxxx xx zavede xx xxxxxxxx trubičky (5.3) x xx xxxxxxx xxxxxxx xx trubička xxxxxx xx xxxx 75–80 xx xxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx roztok zbytku xx převede xx xxxxxxx xxxxx hlinitého x xxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxx se xxxxxxx 10 ml 90xxxxxxxxxxx methanolu x xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx xx odpaří xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 40 °X v xxxxxxx xxxxxxx (5.1). Zůstatek xx xxxxxxxx v 10 ml xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxx xx doplní xxxxx xx 20 xx. Roztok xx xxxxxxxxxx minimálně 5 xxxxx při minimálních xxxxxxxx 4000 xx/xxx. Xxxx xxxx se xxxxx 50 %-xxx xxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx sodného 8 μx/xx ( = X₈).

7.2. Xxxxxxxxx roztok

Z xxxxxxx X8 se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (1 + 1) 50 %-xxx methanolem (4.6) xxxxxxxx xxxxxxx X4 (xxxxxxxxx podíl: 4 μx/xx), U2 (očekávaný xxxxx: 2 μx/xx), X1 (očekávaný xxxxx: 1 μx/xx).

8. XXXXXX XXXXX

8.1 Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxx xxxxxx (4.2) xx xxxxxxxx suspenzí xxxx (3.2) xxx 50 až 60 °X. Xxxxxxxxxxx pokusy xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx médiem (4.2) xx stanoví xxxxxxxx xxxxxxx, které vykáže xx xxxxx největší xxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx koncentracemi xxxxxxxxx sodného.

8.2 Příprava xxxxx

Xxxx se xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx koncentračních stupních xxxxxxxxxxxx roztoku (X₈, X₄, X₂, S₁) x xxxxxxxxxxx roztoku (X₈, X₄, X₂, X₁). Xx xxxxxx xxxxx musí xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx koncentrace xxxxxxxxx x extraktu. X xxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxxx ve xxxxxx kultivačního xxxxx xxxxxxx xxx otvorů x xxxxxxx 10-13 xx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 30 xx. Test by xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxx xx xxxxxxxx desky, xx nichž xx xxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx 20 xx x průměru 200 xx.

Xx misku se xxxxxx takové xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxxxx xxxxx 8.1, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxx silná přibližně 2 xx (60 xx xx xxxxx x průměru 200 xx). Xxxx xx xxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx, do xxxxxxx xx pipetou xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a testovacího xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 ml xx otvor, podle xxxxxxx xxxxxx). Každá xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxx minimálně xxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxx xxxx se xxxxxxxxx 32 xxxxxxxxxxx xxx.

8.3 Xxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx 18 xxxxx xxx 35 xx 37 °X.

9. XXXXXXXXXXX

Xxxxxx xxxxxxxxxxx zón se xxxxx x přesností xx 0,1 xx. Xxx každou koncentraci xx xxxxxxx hodnoty xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, přičemž xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx. Xxx xxxxxxxxxx roztok xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, vypočítané xxxx. xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx xxx pro xxxxxxxx xxxxxx standardního xxxxxxx (XX) se xxxxxxx xxxxx následujícího xxxxxx:

x) XX = 7X₁ + 4X₂ + S₄ – 2X₈ / 10

Xxxxxxxxxxxx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx standardního roztoku (XX) se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

x) XX = 7S₈ + 4S₄+ X₂ + 2X₁ / 10

Xxxxxx tak xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx (UL) x nejvyšší xxxxxx (XX) xxxxxxxx, přičemž xx do xxxx xxxxxxxxx xxxxxx dosadí X₁, U₂, X₄ x U₈ xxxxxxx X₁, S₂, S₄ x X₈.

Xxxxxxxxxx hodnoty XX x XX xx zanesou xx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx bodů xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx XX x XX x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx přímky xxx xxxxxxx.

Xxxxx se nevyskytují xxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Přímky je xxxxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx (XX-XX) x (XX-XX) neodchylují více xxx o 10 % od xxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx nejsou xxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxxx xxx X1 x S1 xxxx X8 x X8. Xxx xx xxxxxxx XX, XX, XX x XX xxxx xxxxxx následujících vzorců, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nejvhodnější přímky:

a) XX = 5S₁ + 2S₂ – X₄ / 6 xxxx 5X₂ + 2X₄ – X₈ / 6

b ) XX = 5S₄ + 2S₂ − X₁ / 6 xxxx 5S₈ + 2X₄ − S₂ / 6

Totéž xx xxxxxxx pro xxxxxxx XX x XX. X xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Výsledky, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxx úrovní, xx xxxx být xxxxxxxxxxx xx protokolu x xxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, vypočítá xx xxxxxxxxxx relativní xxxxxxxx (xxx X) xxxxxx jednoho z xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxx 4 xxxxxx

x) xxx X = (U₁+ X₂+ X₄+ U₈ – X₁ – X₂ – X₄ – X₈) × 0,602 / X₄+ X₈+ X₄+ X₈ – X₁ – X₂ – X₁ – X₂

Xxx 3 xxxxxx

x) xxx A = (X₁+ U₂+ X₄ – S₁ – X₂ – X₄) × 0,401 / X₄+ X₄ – X₁ – X₁

xxxx

x) xxx X = (X₂+ X₄+ X₈ – S₂ – X₄ – X₈) × 0,401 / X₈+ S₈ – X₂ – X₂

Xxxxxxxx xxxxxxxx = předpokládaná xxxxxxxx х xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx rozsah xxxxxx 0,5–2,0, xxxx xx xxxxxxxx při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx koncentrací xxxxxxxx xxxx. xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx není xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxx považovat xx xxxxxxxxx, a xx by xxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx o analýze.

Pokud xxxx možné xxxxxx xxxxxxxxx xx rovnoběžné, xxxx xx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxx xxx nedosáhne rovnoběžnosti, xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx neuspokojivý.

10. XXXXXXXXXXXXXX

Xxxxxxx mezi výsledky xxxx xxxxxxx jednoho xxxxxxxxx xxx xxxxx x xxxx xxxxxxx xx neměly překračovat:

- 20 % xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xx 25 xx/xx,

- 5 mg/kg xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx 25 xx 50 xx/xx,

- 10 % xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxx 50 xx/xx.

[1] Xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxx, které xxxxxxxxx odpovídající xxxxxxxx xxxxxxxx.

[2] Může být xxxxxxx jakékoliv xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, které xxxxxxxx xxxxxx výsledky.

[3] 1 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 1000 xxxxxxxxx XX.

[4] Xxxxx být xxxxxxx jiné metody, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx spór.

[5] Xxxx xxx použito xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx médium xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, které xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.