Xxxx směrnice Komise
ze xxx 15. xxxxxx 1978,
xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Společenství xxx úřední kontrolu xxxxx
(78/633/XXX)
XXXXXX EVROPSKÝCH XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx na Xxxxxxx x založení Evropského xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x ohledem xx xxxxxxxx Xxxx 70/373/XXX xx xxx 20. xxxxxxxx 1970 x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx aktem x xxxxxxxxxxx, x zejména xx xxxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx x analytických metod Xxxxxxxxxxxx xxx účely xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx 71/250/EHS ze xxx 15. xxxxxx 1971 [2], 71/393/EHS xx xxx 18. xxxxxxxxx 1971 [3], 72/199/XXX xx dne 27. xxxxx 1972 [4], 73/46/XXX xx xxx 5. prosince 1972 [5], 74/203/EHS xx dne 25. xxxxxx 1974 [6], 75/84/XXX xx dne 20. xxxxxxxx 1974 [7] x 76/372/EHS xx dne 1. xxxxxx 1976 [8] xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx; xx xxxxxx x xxxxx xx xx xxxx xxxx xxxxxxx přijmout xxxxx xxxxx metod;
vzhledem x xxxx, xx xxxxxxxx xxxx směrnice xxxx x xxxxxxx se xxxxxxxxxxx Stálého výboru xxx krmiva,
PŘIJALA XXXX XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
1. Členské xxxxx xxxxxxx, aby xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu xxxxx, xx se xxxx xxxxxx obsahů zinkbacitracinu, xxxxxxxxxxxxxxxx, železa, xxxx, xxxxxxx x xxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
2. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx 1 "Xxxx" xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 71/250/XXX, xx s xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx vzorku, xxx xx být analyzován, xxxxxxxx i na xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx směrnice.
Xxxxxx 2
Xxxxxxx státy xxxxxx 1. ledna 1979 x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx souladu x xxxxx směrnicí. Neprodleně x nich uvědomí Xxxxxx.
Xxxxxx 3
Xxxx směrnice xx určena xxxxxxxx xxxxxx.
X Xxxxxxx xxx 15. xxxxxx 1978.
Xx Xxxxxx
Xxxx Xxxxxxxxx
xxxxxxxxxxxxx
[1] Xx. věst. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Xx. xxxx. X 155, 12.7.1971, x. 13.
[3] Xx. věst. X 279, 20.12.1971, x. 7.
[4] Xx. věst. X 123, 29.5.1972, x. 6.
[5] Úř. xxxx. X 83, 30.3.1973, x. 21.
[6] Xx. věst. X 108, 22.4.1974, x. 7.
[7] Xx. xxxx. X 32, 5.2.1975, x. 26.
[8] Xx. věst. X 102, 15.4.1976, x. 8.
PŘÍLOHA
1. STANOVENÍ XXXXXXXXXXXXXXX XXXXXX NA XXXXX
1. XXXX A ROZSAH
Tato xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxx zinkbacitracinu x krmivech, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxx stanovení je 5 mg/kg (5 xxx) [1]. Metoda xxxx použitelná x xxxxxxxxxxx ovlivňujících xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx kyseliny xxxxxxxxx.
2. XXXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx pH 2 směsí xxxxxxxx/xxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Extrakt xx xxxxxxx xx xX 6,5, xxxxxxxxxxxx (xxxxx xx to nutné) x zředěn. Jeho xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx na agaru xxxxxxxxxxx mikroorganizmem Xxxxxxxxxxx xxxxxx (Xxx. X. xxxxxx). Difúze se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxx xx xxxxx úměrný xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx koncentrace xxx xxxxxx xxxxxxxxx antibiotických xxxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXXXXXXXX: XXXXXXXXXXX XXXXXX XXXX 10240
3.1. Xxxxxxxxx xxxxxxx kultury
Naočkujte Xxxxxxxxxxx xxxxxx do xxxxxxxx se xxxxxx xxxxxx (4.1). Xxxxxxxxx 24 xxxxx při 30 xx 37 °X, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx při 4 °X a xxxxx xxxxxxxxxx každé xxx xxxxx na šikmý xxxx.
3.2. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx [2]
Xxxxxx xxxxxxxx xx zkumavky xx xxxxxx agarem (3.1) xx xxxxxxx 2 xx 3 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3). Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx 250 xx kultivačního xxxxx (4.1) x Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx 18 až 20 hodin xxx 30 xx 37 °X. Smyjte xxxxxxxxxxxxxxx xx 25 ml xxxxxxx chloridu xxxxxxx (4.3) x xxxxxxxxxxx. Xxxxxx suspenzi na xxxxx desetinu xxxxxxxx xxxxxxxx sodného (4.3). Xxxxxxxx xxxxxxxxx suspenze xxxx xxx okolo 75 %, xxxxxx xxx 650 xx x 1 cm xxxxxx xxxxx roztoku xxxxxxxx sodného (4.3).
4. XXXXXXXXXX XXXXX X XXXXXXXXXX
4.1. Xxxxxxxxxx půda [3]
|
Xxxxxx z masa |
6,0 x |
|
Xxxxxxx |
4,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxxxxx |
3,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxx |
1,0 g |
|
Agar |
15,0 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
xX 6,5 xx 6,6 (po xxxxxxxxxxx) |
|
|
4.2. Xxxxxxxx xxxx [4] |
|
|
Xxxxxxx |
10,0 g |
|
Extrakt x xxxxxxx |
3,0 x |
|
Xxxxxxx z xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxx |
1,0 g |
|
Agar |
20,0 x |
|
Xxxxx 80 |
1 xx |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
xX 6,5 (xx xxxxxxxxxxx) |
|
4.3. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 0,8 % (xxxxxx-xxxxxxxxxx): rozpusťte 8 x xxxxxxxx xxxxxxx x.x. ve xxxx x xxxxxx xx 1000 xx; xxxxxxxxxxxx.
4.4. Xxxx xxxxxxx methanolu/vody/kyseliny xxxxxxxxxxxxxx p.a. (d: 1,18 xx 1,19): 80/17,5/2,5 (xxxxxxxx).
4.5. Xxxxxxxxx xxxx, pH 6,5
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx K2HPO4 x.x. (22,15 x).
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx draselný X2XXX4 x.x (27,85 x).
Xxxx xx 1000 ml.
4.6. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x.x. (x: 1,18 xx 1,19).
4.7. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x.x. (0,1 N).
4.8. X roztok xxxxxxxxx xxxxxxx x.x.
4.9. Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx červeně 0,04 % (xxxxxx-xxxxxxxxxx): xxxxxxxxx 0,1 x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x 18,5 xx 0,01 X xxxxxxx hydroxidu xxxxxxx. Xxxxxxx vodou do xxxxxx 250 ml x xxxxxxxxxxx.
4.10. Xxxxxxxxxx xxxxx: zinkbacitracin x xxxxx xxxxxxxx (v x.x.).
5. XXXXXXXXXX ROZTOKY
Odvažte xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (4.10) xxxxxxxxxxxx 1050 x.x. (xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx). Xxxxxxxx 5 xx 0,1 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (4.7) x xxxxxxxx xxxxx 15 xxxxx. Xxxxxxxx 30 xx xxxx, xxxxxxx xX xx 4,5 fosfátovým xxxxxx xX 6,5 (4.5) (xxxxx 4 xx), xxxxxxx xxxxx do xxxxxx 50 xx x xxxxx xxxxxxxxxxx (1 xx = 21 x.x.).
X tohoto xxxxxxx připravte xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xX 6,5 (4.5) xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
|
X8 |
0,42 |
x.x./xx |
|
X4 |
0,21 |
x.x./xx |
|
X2 |
0,105 |
x.x./xx |
|
X1 |
0,0525 |
x.x./xx |
6. PŘÍPRAVA XXXXXXXX
6.1. Xxxxxxxx
6.1.1. Koncentráty, xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx vzorku 2,0 až 5,0 x, xxxxxxxx 30 xx směsi (4.4) x xxxxxx protřepejte. Xxxxxxxxxxxx, že xx xX xxxxx 2. Xxxxxxxx 10 xxxxx, xxxxxxxx 30 xx xxxxxxxxxxx xxxxx xX 6,5 (4.5) a xxxxxxxx 15 xxxxx. Xxxxxx fosfátovým pufrem (4.5), xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx 0,42 i.u./ml) (= X8).
6.1.2. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx 10,0 x, xxxxxxxx 50 xx xxxxx (4.4) x xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx, xx je xX okolo 2. Xxxxxxxx 10 xxxxx, xxxxxxxx 50 ml xxxxxxxxxxx xxxxx xX 6,5 (4.5) x xxxxxxxx 15 minut. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5), abyste xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx 0,42 i.u./ml) (= X8).
6.1.3. Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx 10,0 x xxxxxx (20,0 x xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx 5 xx/xx), xxxxxxxx 25 xx xxxxx (4.4) x xxxxxxxxxxxxx xxx 10 xxxxx. Xxxxxxxx 25 xx xxxxxxxxxxx xxxxx xX 6,5 (4.5), xxxxxxxx 15 xxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx 20 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xX na 6,5 x použitím 1 X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.8) x xxxxxxxx bromokresolové xxxxxxx (4.9) xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx přibližně 4 xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx nepřesahující 35 °X. Xxxxxx xxxxxx xxxxx, abyste xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx zinkbacitracinu 0,42 i.u./ml (= X8).
6.2. Zkušební xxxxxxx
X xxxxxxx X8 xxxxxxxxx xxxxxx X4 (očekávaný xxxxx: 0,21 i.u./ml), X2 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,105 x.x./xx) a X1 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,0525 x.x./xx) x xxxxxxxx postupného ředění (1 + 1) xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5).
7. XXXXXXXX XXXXXX
7.1. Očkování xxxxxxxxxx média
Očkujte xxxxxxxx xxxxxx (4.2) bakteriální xxxxxxxx (3.2) při xxx 50 °X. Xxxxxxxxxxx pokusy na xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx (4.2) stanovte xxxxxxxx požadované xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x nejjasnější xxxxxxxxx zóny x xxxxxxx koncentracemi zinkbacitracinu.
7.2. Xxxxxxxx misek
Difúze xx xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx čtyřech xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (X8, X4, S2, X1) x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (U8, X4, X2, X1). Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxx do každé xxxxxx. Pro tento xxxx xxxxxxx plotny, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxx x agaru xxxxxxx 8 otvorů x xxxxxxx 10 xx 13 xx x xxxxxxx 30 xx xxxx xxxxxx xxxxxx. Pokus může xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx skleněných xxxxx xxxxxxxxxx dokonale rovným xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxx, 200 xx x xxxxxxx x 20 xx xxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx (4.2), xxxxxxxxxxxx xxxx v xxxx 7.1, xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx 2 xx xxxxxx (50 xx xx misku x xxxxxxx 200 xx). Nechejte xxxxx x xxxxxxxxxx pozici, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xx nich xxxxxx odměřené xxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 xx xx xxxx, podle xxxxxxx).
Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xx xxxxxxx stanovení xxxxxxx xxxxxxxxxxx 32 xxxxxxxxxxx zón.
7.3. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx 16 xx 18 xxxxx při 28 až 30 °X.
8. XXXXXXXXXXX
Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx zón s xxxxxxxxx xx 0,1 xx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxx xx semilogaritmickém xxxxxxxxx xxxxxx, znázorňujíc xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x průměrům xxxxxxxxxxx zón. Narýsujte xxxxxxxxxxxx xxxxxx standardního xxxxxxx a extraktu, xxxxxxxxx xxxx xx xx uvedeno níže.
Stanovte "xxxxxxxxxxxx" xxx pro xxxxxxxx xxxxxx standardu (XX) x použitím xxxxxxx:
(x) XX = 7 S1 + 4 X2 + X4 - 2 X8 / 10
Stanovte "xxxxxxxxxxxx" xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (XX) s xxxxxxxx xxxxxxx:
(x) XX = 7 X8 + 4 X4 + X2 - 2 X1 / 10
Xxxxxxx xxxxxxxxx "nejvhodnější" xxxx xxx xxxxxxxx úroveň xxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx úroveň extraktu (XX) xxxxxxxxxx X1, X2, U4 a X8 za X1, X2, X4 a X8 x xxxxxx xxxxxxxxx rovnicích.
Zaznamenejte vypočítané xxxxxxx XX x XX xx stejný xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xx, xxxxxx xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx XX x XX x xxxxxx xx, xxxxxx xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx xxx extrakt.
V xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx ovlivnění xx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx. Pro praktické xxxxx mohou xxx xxxxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx (XX-XX) a (XX-XX) neliší o xxxx než 10 % xx xxxxxx xxxxxxx hodnoty.
Pokud xxxx xxxxxx shledány jako xxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxx X1 x X1 xxxx X8 x X8 x XX, XX, XX x XX xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, které xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx "nejvhodnější" xxxxxx:
x´) SL = 5 X1 + 2 S2 - X4 / 6 xxxx 5 S2 + 2 S4 - X8 / 6
x´) XX = 5 X4 + 2 S2 - X1 / 6 xxxx 5 X8 + 2 X4 - X2 / 6
x xxxxxxx xxx XX x XX. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx křivky xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xx paralelnost jako xxxxxxx. Skutečnost, že xxx výsledek xxxxxxx xx xxx úrovní, xxxx být uvedena x xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx paralelní, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx. X) xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxx
(x) xxx X = (X1 + X2 + U4 + X8 - X1 - S2 - X4 - X8) × 0,602 / X4 + X8 + X4 + X8 - X1 - X2 - X1 - X2
Xxx xxx úrovně
(d) log X = (X1 + X2 + X4 - X1 - S2 - X4) × 0,401 / X4 + X4 - X1 - X1
xxxx
x´) xxx X = (U2 + X4 + X8 - X2 - X4 - X8) × 0,401 / U8 + X8 - X2 - S2
Skutečná aktivita = xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x relativní xxxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx. Pokud xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx. A) xxxxxx rovnice x). Xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxx xxxx být xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx.
9. OPAKOVATELNOST
Rozdíl mezi xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx u xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx analytikem xxxxx xxxxxxxxx:
20 % xxx. z vyšší xxxxxxx xxx obsahy xxxxxxxxxxxxxxx xx 5 x xx 25 xx/xx;
5 xx/xx v xxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxx xxx 25 x xx 50 xx/xx;
10 % xxx. x vyšší xxxxxxx pro obsahy xxx 50 xx/xx.
2. XXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXXX XXXXXX XX AGARU
1. XXXX X XXXXXX
Xxxx metoda xx xxxxxx xxx xxxxxxxxx flavofosfolipolu x xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xx 1 xx/xx (1 xxx).
2. XXXXXXX
Xxxxxx je extrahován xxxxxxxx xxxxxxxxxx za xxxx pod zpětným xxxxxxxxx. Po odstředění xx extrakt xxxxxxxxx (xxx je xx xxxxx) na ionexu x xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx aktivita se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx agaru xxxxxxxxxxx mikroorganizmem Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx inhibičních xxx xxxxxxxxxxxxxx. Průměr xxxxxx xxx je xxxxx úměrný xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx koncentrace x xxxxxxx použitých xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3. MIKROORGANISMUS: XXXXXXXXXXXXXX XXXXXX XXXX 6538 X
3.1. Udržování zásobní xxxxxxx
Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx se xxxxxx xxxxxx (4.1). Xxxxxxxxx 24 xxxxx xxx 37 °X, xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxx 4 °X x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx měsíc xx xxxxx xxxx.
3.2. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx suspenze [5]
Oddělte xxx xxxxxxxx obsahující xxxxxxx xxxxxxx (3.1) x xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx. Inkubujte 24 xxxxx xxx 37 °X a xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxx 4 °X.
24 xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx touto xxxxxxxx xxx xx čtyři xxxxxxxx xxxxxxxxxx šikmé xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1). Xxxxxxxxx 16 xx 18 hodin xxx 37 °X. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx chloridu sodného (4.3). Xxxxxxxx transmitance xxxxxxxx musí být xxxxx 40 %, xxxxxx při 578 xx x 1 xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3).
4. KULTIVAČNÍ MÉDIA X XXXXXXXXXX
4.1. Kultivační xxxxxx [6]
|
Pepton z xxxx |
6,0 x |
|
Xxxxxxx |
4,0 g |
|
Extrakt x xxxxxxx |
3,0 g |
|
Extrakt x masa |
1,5 x |
|
Xxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
15,0 x |
|
Xxxx |
1000 ml |
|
pH 6,5 (po xxxxxxxxxxx) |
|
|
4.2. Xxxxxxxx médium |
|
|
4.2.1. Xxxxxxxx xxxxxx [7] |
|
|
Pepton z xxxx |
6,0 g |
|
Extrakt z xxxxxxx |
3,0 g |
|
Extrakt x xxxx |
1,5 x |
|
Xxxx |
10,0 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
xX 6,5 (po xxxxxxxxxxx) |
|
4.2.2. Očkovací xxxxxx
Xxxx x bodě 4.1, x přídavkem 2,0 x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx [8].
4.3. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 0,4 % (xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx): rozpusťte 4 g xxxxxxxx xxxxxxx x.x. ve xxxx a xxxxxx xx 1000 xx; xxxxxxxxxxxx.
4.4. Xxxxxxxx, čistý.
4.5. Xxxxxxxx 50 % (xxxxxxxxxx): xxxxxx 500 xx xxxxxxxxx (4.4) 500 xx xxxx.
4.6. Xxxxxxxx 80 % (xxxxxxxxxx): zřeďte 800 xx xxxxxxxxx (4.4) 200 ml xxxx.
4.7. Xxxx (hydroxymetyl) xxxxxxxxxx x.x.
4.8. Methanolový roztok xxxxxxxx draselného 1,5 % (váhově-objemových): rozpusťte 1,5 x xxxxxxxx xxxxxxxxxx x.x. xx 20 xx vody, xxxxxxx methanolem (4.4) xx objemu 100 xx.
4.9. Xxxxxxxxxx xxxxx: Xxxxx 50 Xx8, 20 až 50 xxxx, Xx xxxxx (xxx. Serva x. 41600) xxxx ekvivalent.
4.10. Xxxxxxxxx xxxxx: Dowex 1x2, 50 xx 100 xxxx, Xx xxxxx (kat. Xxxxx x. 41010) xxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx 12 až 14 hodin x 80 % xxxxxxxxx (4.6).
4.11. Xxxxxx xxxx.
4.12. xX xxxxxxxxxxxx papírek (xX 6,06 až 8.1).
4.13. Xxxxxxxx xxxxxxxxx.
4.14. Xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx x známé aktivitě.
5. XXXXXXXXX
5.1. Xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx, vnitřní xxxxxx: 9 xx, xxxxx 150 až 200 mm, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx části xxxxxxx xxxxx x skleněným xxxxxxxx (xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx (5.2)) x horní xxxxx.
5.2. Xxxxxxxxx xxxxxxx 250 ml, xxxxxxxx xxxxxxxxx kohoutem x xxxxxxxxx xxxxxxxx.
5.3. 250 xx kónická xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
5.4. Xxxxxx chladič xx xxxxxxxxx zábrusem.
6. STANDARDNÍ XXXXXXX
Xxxxxxxxx přesně odvážené xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.14) x 50 % xxxxxxxxx (4.5) x xxxxxx, abyste xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 100 μg xxxxxxxxxxxxxxxx na xxxxxxxx. Xxxxx je tento xxxxxx skladován x xxxxxxxxxxx baňce xxx 4 °X, xx xxxxxxxx xx dva xxxxxx.
X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx připravte xxxxxxxxx xxxxxxx 50 % xxxxxxxxxx (4.5) následující xxxxxxx:
|
X8 |
0,2 |
μx/xx |
|
X4 |
0,1 |
μx/xx |
|
X2 |
0,05 |
μx/xx |
|
X1 |
0,025 |
μx/xx |
7. XXXXXXXX EXTRAKTU
7.1. Xxxxxxxx
7.1.1. Xxxxxxxxxxx, premixy x minerální xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx 2,0 xx 5,0 x, xxxxxxxx xxx 150 xx xxxxxxxx askorbové (4.13). Homogenizujte se 150 xx 50 % methanolu (4.5) x xxxxxxx xxxxx (5.3) a upravte xX xx 8,1 xx 8,2 xxx 400 mg xxxx (xxxxxxxxxxxx) aminometanem (4.7). Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.12). Xxxxxxxx xxxxx 15 minut, xxxxx znovu upravte xX na 8,1 xx 8,2 tris (xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxxx (4.7) x xxxxx 10 xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx (5.4) při xxxxxx míchání. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx extrakt.
7.1.2. Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx množství 5,0 až 30,0 x vzorku xxxxxxxxxxxx xxxxxxx 30 μx xxxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx se 150 ml 50 % methanolu (4.5) x kónické baňce (5.3) x upravte xX xx 8,1 xx 8,2 xxx 400 xx tris (xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxxx (4.7). Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.12). Xxxxxxxx xxxxx 15 xxxxx, xxxxx xxxxx upravte xX na 8,1 xx 8,2 xxxx (xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxxx (4.7) x xxxxx 10 xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx (5.4) při xxxxxx míchání. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, odstřeďte směs x dekantujte xxxxxxx.
7.2. Xxxxxxxxxx (xxxxx krok xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx, xxxxxxx x minerálních krmiv)
Rozmíchejte 110 ml extraktu x 11 x xxxxxxxxxxxx xxxxxx (4.9), xxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx (5.4) xxx xxxxxx xxxxxxx. Oddělte kationtový xxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx 100 xx extraktu xx 150 ml xxxxxxxxx (4.4) a xxxxxxxxx xxxxxx 12 až 15 xxxxx xxx 4 °C. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx dokud xx roztok chladný.
Vložte xxxxx xx xxxxxx xxxx (4.11) xx xxxxxxxx konce xxxxxxxx xxxxxxx (5.1), vlijte xx xxxxxxx 5 xx aniontového xxxxxx (4.10) a xxxxxxxx xxxxxx 100 xx 80 % xxxxxxxxx (4.6). X použitím xxxxxxx (5.2), xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx 100 ml xxxxxxxx, x kterého xx xxxxxxx, že xxxxxxxx 16 μx xxxxxxxxxxxxxxxx (200 xx xx 30 g xxxxxx xxxxxx xxx 1 xxx). Xxx xx xx xxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxx aplikací xx xxxxxx 80 % methanolem (4.6), xxxxxx obdrželi xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx 16 μx/100 xx. Xxxxxx xxxxxxx xx xxx 2 xx/xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx 50 xx 80 % xxxxxxxxx (4.6) a xxxxxxxxx výtok.
Eluujte xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.8) při xxxxxxx asi 2 xx/xxxxxx. Xxxxxxx 50 xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, přidejte 30 xx xxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx by xxx xxx obsah xxxxxxxxxxxxxxxx 0,2 μg/ml (= X8).
7.3. Zkušební xxxxxxx
Xxx xx xx xxxxx (xx. xxxx bylo xxxxxxxx xxxxxxxxxxx), xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx 7.1.1 50 % xxxxxxxxxx (4.5), xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx 0,2 μx/xx (= X8).
X xxxxxxx X8 připravte xxxxxx U4 (očekávaný xxxxx: 0,1 μx/xx), X2 (xxxxxxxxx obsah: 0,05 μx/xx) a X1 (očekávaný obsah: 0,025 μx/xx) x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (1 + 1) 50 % xxxxxxxxxx (4.5).
8. XXXXXXXX XXXXXX
8.1. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.2.2) xxxxxxxxxxx suspenzí (3.2) xxx xxx 50 °X. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx se xxxxxxxxx médiem (4.2.2) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx suspenze, xxxxx xxxxxxxx největší x xxxxxxxxxxx inhibiční zóny x xxxxxxx koncentracemi xxxxxxxxxxxxxxxx (xxx 30 xx/xxxx).
8.2. Příprava misek
Difúze xx xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X8, X4, S2, X1) x čtyřech xxxxxxxxxxx zkušebního xxxxxxx (X8, U4, U2, X1). Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx umístěny xx xxxxx plotny. Xxx xxxxx účel xxxxxxx xxxxxx, které xxxx xxxxxxxxxx velké, xxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxx 8 xxxxxx x xxxxxxx 10 až 13 xx x nejméně 30 xx xxxx xxxxxx středy. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xx miskách xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx skleněných xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx hliníkovým xxxx xxxxxxxxx xxxxx 200 xx v průměru x 20 mm xxxxx.
Xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxx xxxxx (4.2.1), xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx 1,5 xx xxxxxx (45 xx xx xxxxx o xxxxxxx 200 xx). Xxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx přelijte množstvím xxxxx (4.2.2) naočkovaného xxxx v xxxx 8.1, xxx xxxxxxxxx xxxxxx 1 mm xxxxxx (30 xx xx misku o xxxxxxx 200 xx). Xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx pozici, xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 xx xx xxxx, xxxxx xxxxxxx).
Xxxxxx xxxxxxxxxxx použijte xxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx 32 xxxxxxxxxxx xxx.
8.3. Inkubace
Inkubujte xxxxxx 16 xx 18 xxxxx xxx 28 až 30 °X.
9. VYHODNOCENÍ
Změřte průměr xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxxxx xx 0,1 xx. Zaznamenejte xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx papíře, znázorňujíc xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx. Narýsujte xxxxxxxxxxxx xxxxxx standardního xxxxxxx a xxxxxxxx, xxxxxxxxx jako xx xx xxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" bod xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxxx:
(x) XX = 7 X1 + 4 X2 + X4 - 2 X8 / 10
(b) XX = 7 X8 + 4 X4 + X2 - 2 X1 / 10
Podobně vypočtěte "xxxxxxxxxxxx" xxxx xxx xxxxxxxx úroveň xxxxxxxx (XX) x nejvyšší xxxxxx xxxxxxxx (UH) xxxxxxxxxx U1, X2, X4 x X8 xx X1, X2, X4 a X8 xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx vypočítané hodnoty XX x XX xx stejný xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xx, abyste obdrželi "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx xxx xxxxxx standardu. Podobně xxxxxxxxxxxx UL x XX x xxxxxx xx, xxxxxx obdrželi "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx xxx xxxxxxx.
X nepřítomnosti xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx měly xxx křivky xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx účely xxxxx být xxxxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxxxx, xxxxx xx hodnoty (XX-XX) a (UH-UL) xxxxxx o xxxx xxx 10 % xx jejich střední xxxxxxx.
Xxxxx xxxx křivky xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxx pominuto xxx X1 x X1 xxxx X8 x X8 x XX, XX, XX x XX xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" křivky:
a´) XX = 5 X1 + 2 X2 - X4 / 6 xxxx 5 X2 + 2 X4 - X8 / 6
b´) XX = 5 X4 + 2 X2 - X1 / 6 xxxx 5 X8 + 2 X4 - X2 / 6
a xxxxxxx pro XX x XX. Alternativní xxxxxxxxxxxx křivky xxxx xxx xxxxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx jako xxxxxxx. Xxxxxxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx v xxxxxxxxx zprávě.
Když xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx aktivity (xxx. X) xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxx úrovně
(c) log X = (U1 + X2 + X4 + X8 - S1 - X2 - X4 - X8) × 0,602 / X4 + X8 + X4 + X8 - U1 - X2 - S1 - X2
Xxx xxx xxxxxx
(x) xxx X = (X1 + X2 + X4 - X1 - X2 - X4) × 0,401 / X4 + X4 - U1 - X1
xxxx
x´) log A = (U2 + X4 + X8 - S2 - X4 - S8) × 0,401 / X8 + X8 - U2 - X2
Xxxxxxxx aktivita = xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx považovány xx xxxxxxxxxxx, opakujte stanovení. Xxxxx není paralelnost xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx. A) xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x). Nicméně, xxxxxxxx výsledek xxxx xxx považován za xxxxxxxxx x xxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx hlášení.
10. XXXXXXXXXXXXXX
Xxxxxx mezi výsledky xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx analytikem xxxxx xxxxxxxxx:
0,5 xx/xx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx flavofosfolipolu xx 1 do 2 xx/xx;
25 % rel. x xxxxx xxxxxxx xxx obsahy větší xxx 2 xx10 xx/xx;
20 % xxx. x xxxxx xxxxxxx xxx obsahy xxxxx xxx 10 do 25 xx/xx;
5 mg/kg x absolutní hodnotě xxx xxxxxx větší xxx 25 xx 50 mg/kg;
10 % xxx. z vyšší xxxxxxx xxx xxxxxx xxx 50 xx/xx.
3. XXXXXXXXX XXXXXXXXX PRVKŮ XXXXXX, MĚDI, XXXXXXX X ZINKU
1. ÚČEL X ROZSAH
Tato xxxxxx xxxxxxxx stanovit xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx, xxxxxx a xxxxx x xxxxxxxx. Xxxxx xxxx stanovení xxxx:
xxxxxx (Xx): 20 mg/kg
měď (Xx): 10 mg/kg
mangan (Xx): 20 mg/kg
zinek (Xx): 20 xx/xx
2. XXXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx hmoty, xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx, xxx, xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xx příslušném xxxxxxx atomovou absorpční xxxxxxxxxxxxxxxxx.
3. CHEMIKÁLIE
Úvodní xxxxxxxx
Xxx xxxxxxxx chemikálií x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx používejte xxxx, u které xxxx stanoveno, že xx xxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vody x xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (x.x.). Xxxxxxxxxxxx prvků, xxxxx xxxx být stanoveny, xxxx být xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Pokud xx to xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx přečištěny.
Namísto standardních xxxxxxx xxxxxxxxx níže, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx předpokladu, xx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxx použitím xxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
3.1. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x.x. (x: 1,19).
3.2. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx p.a. (6 X).
3.3. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x.x. (0,5 X).
3.4. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx 38 xx 40 % (xxxxxxxxxx) xxxxxx xxxxx železa menší xxx 1 xx Xx/xxxx a xxxxxx xx xxxxxxxx menší xxx 10 mg (xxxx xxxxxx)/xxxx.
3.5. Xxxxxxxx xxxxxx x.x. (x: 1,84).
3.6. Xxxxxxx xxxxxx x.x. (xxxxxxxxx 100 xxxxxx xxxxxxx (30 % hmotnostně)).
3.7. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx (1000 μx Fe/ml) xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: rozpusťte 1 x xxxxxxxxx drátu x.x. xx 200 xx 6 N xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2), xxxxxxxx 16 ml xxxxxxxx xxxxxx (3.6) x doplňte do xxxxxxx xxxxx xxxxx.
3.7.1. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx roztok xxxxxx (100 μg Xx/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.7) 1 + 9 xxxxx.
3.8. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx (1000 μg Xx/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: xxxxxxxxx 1 x xxxx x xxxxxxxx xxxxx (x.x.) ve 25 ml 6 X kyseliny chlorovodíkové (3.2), přidejte 5 xx peroxidu vodíku (3.6) a xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
3.8.1. Pracovní standardní xxxxxx mědi (10 μx Cu/ml) xxxxxxxxxx xxxxxxxx standardního roztoku (3.8) 1 + 9 xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 1 + 9 xxxxx.
3.9. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (1000 μx Mn/ml) xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: xxxxxxxxx 1 x xxxxxxx v xxxxxxxx formě (x.x.) xx 25 xx 6 N kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (3.2), xxxxxxxx 5 xx peroxidu xxxxxx (3.6) a xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx vodou.
3.9.1. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx manganu (10 μx Xx/xx) xxxxxxxxxx zředěním standardního xxxxxxx (3.9) 1 + 9 vodou x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoku 1 + 9 vodou.
3.10. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (1000 μx Xx/xx) xxxxxxxxxx následovně: xxxxxxxxx 1 g xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx (x.x.) xx 25 ml 6 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2) x xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
3.10.1. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx roztok zinku (10 μx Zn/ml) xxxxxxxxxx zředěním xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) 1 + 9 xxxxx x potom xxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoku 1 + 9 xxxxx.
3.11. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx následovně: rozpusťte 12 x kysličníku xxxxxxxxxxxx xx 150 xx xxxx, přidejte 100 xx 6 X xxxxxxxx chlorovodíkové (3.2) x doplňte xx jednoho xxxxx xxxxx.
4. PŘÍSTROJE
4.1. Xxxxxxx xxx s regulací xxxxxxx a xxxxxxxxxxx.
4.2. Xxxxxxxx nádobí musí xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx přístroje, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
4.3. Xxxxxxxxx xxxxxxx x (volitelně) xxxxxxxx xxxxxxx.
4.4. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx metody, co xx týče xxxxxxxxxx x přesnosti v xxxxxxxxxxx rozsahu.
5. XXXXXX
5.1. Xxxxxx obsahující xxxxxxxxxx xxxxx
5.1.1. Žíhání x xxxxxxxx roztoku xxx xxxxxxx [9]
x) Vložte 5 xx 10 x xxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx 0,2 mg, xx xxxxxxxxxx xxxx platinového xxxxxxx (4.3) (viz xxxxxxxx x)), xxxxxxx x xxxxxxx xxx 105 °X a xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxx (4.1). Xxxxxxx xxx (xxx poznámka x)) x xxxxxxxx zvyšujte xxxxxxx xx 470 xx 475 °X xx xxx 90 xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx 4 až 16 xxxxx (xxxx. xxxx xxx), xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxx x xxxxxxxx vychladnout (viz xxxxxxxx d)).
Vymyjte xxxxxxx xxxxxx asi 5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.1) a xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xx xxxxxxx (xxxx proběhnout prudká xxxxxx xxxx xxxxxx XX2). Přidejte xx xxxxxxx kyselinu xxxxxxxxxxxxxxx (3.1) xx xxxxxxx, xxxxx neustane xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx tyčinkou.
Dále přidejte xx xxxxxx 15 xx 6 X xxxxxxxx chlorovodíkové (3.2) x následně xxx 120 xx xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxx ponechána x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx hodinovým xxxxx. Xxxxxx xxxxx xx xxxx x xxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx již xxxx xxxxx nerozpuštěný xxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxx filtrační xxxxx xxx obsahu xxxxxx x jímejte xx 250 ml xxxxxxx xxxxx. Kádinku x filtr xxxxxxx 5 xx xxxxx 6 N kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (3.2) x xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx baňku xx značku xxxxx (xxxxxxxxxxx XXx asi 0,5 N).
ii) Xxxxx xx xxxxxx na xxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxx), xxxxx jej xxxx xx xxxx x xxxxxxx znovu xxx 450 xx 475 °X. Xxxx xxxxxx, které xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx (xxx xxx xx xxx xxxxx), xx xxxxxxxxx, xxxx xx xxxxx bílý nebo xxxxx bílý. Rozpusťte xxxxxx xxx 2 xx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (3.1), xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx 5 xx 6 X kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (3.2). Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx odměrné xxxxx x doplňte xx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx XXx xxx 0,5 X).
Xxxxxxxx:
x) Xxx xxxxxxxxx stopových prvků xx xxxxxxxx být xxxxxxxxx vůči xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx zinkem, xxxx x xxxxxxx. X tohoto xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxx těchto xxxx.
Xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx kontaminace, pracujte x bezprašné xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx čistým xxxxxxxxx x pečlivě xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx na xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, např. x xxxxxx, xxxxxxxxxx, xxxxxx, xxx.
x) Xxxx xxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxx, je xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx stopového prvku x xxxxxx xx xxxxxx x citlivosti xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxx s xxxxxx xxxxxxx stopových xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx začít s 10 xx 20 x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx 100 xx.
x) Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx peci bez xxxxxxx vzduchu xxxx xxxxxxx.
x) Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 475 °C.
5.1.2. Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
5.1.2.1. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxx prvek, xxxxx xx být xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxxxxx xxx xxxx 3.7.1, 3.8.1, 3.9.1 x 3.10.1 řadu xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, každý xxxxxxxxxx roztok x xxxxxxxxxxx XXX okolo 0,5 X x (x xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,1 % Xx (xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx prvků xxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx. Tabulky uvedené xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx řad xxxxxxxxxxxx roztoků; x xxxxxxxxxx xx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx může xxx xxxxxxx xxxxx vybrat xxxxx koncentrace.
Železo
|
μg Xx/xx |
0 |
0,5 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
|
xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.7.1) (1 ml = 100 μx Xx) |
0 |
0,5 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
|
+ ml 6 X XXx (3.2) |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
|
+ 10 ml xxxxxxx xxxxxxxx lanthanitého (3.11) x xxxxxxx xx 100 ml xxxxx. |
|||||||
Xxx
|
μx Xx/xx |
0 |
0,1 |
0,2 |
0,4 |
0,6 |
0,8 |
1,0 |
|
xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.8.1) (1 xx = 10 μx Cu) |
0 |
1 |
2 |
4 |
6 |
8 |
10 |
|
+ xx 6 X XXx (3.2) |
8 |
8 |
8 |
8 |
8 |
8 |
8 |
|
Xxxxxxx xx 100 xx vodou. |
|||||||
Mangan
|
μg Xx/xx |
0 |
0,1 |
0,2 |
0,4 |
0,6 |
0,8 |
1,0 |
|
xx xxxxxxxxxx standardního xxxxxxx (3.9.1) (1 ml = 10 μx Xx) |
0 |
1 |
2 |
4 |
6 |
8 |
10 |
|
+ xx 6 X HCl (3.2) |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
|
+ 10 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.11) x xxxxxxx do 100 xx vodou. |
|||||||
Zinek
|
μg Xx/xx |
0 |
0,05 |
0,1 |
0,2 |
0,4 |
0,6 |
0,8 |
|
xx pracovního xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10.1) (1 xx = 10 μx Xx) |
0 |
0,5 |
1 |
2 |
4 |
6 |
8 |
|
+ xx 6 N HCl (3.2) |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
|
+ 10 ml xxxxxxx chloridu xxxxxxxxxxxx (3.11) x xxxxxxx xx 100 ml xxxxx. |
|||||||
5.1.2.2. Xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx
X xxxxxxxxx xxxx může xxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx 5.1.1 normálně xxxxxx přímo. Xxxxx xx xxxxxxxx přivést xxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxx kalibračních roztoků, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx 100 xx odměrné xxxxx a doplněna xx značku 0,5 X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (3.3).
X xxxxxxxxx železa, xxxxxxx x zinku xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.1.1 xx 100 ml odměrné xxxxx, přidejte 10 xx xxxxxxxx lanthanitého (3.11) x doplňte xx xxxxxx 0,5 X kyselinou xxxxxxxxxxxxxxx (3.3) (xxx xxxxxx xxx 8 xxxxxxxx).
5.1.2.3. Xxxxx pokus
Slepý pokus xxxx zahrnovat xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx "0" xxxxxx xxx použit xxxx slepý.
5.1.2.4. Měření xxxxxxx absorpce
Změřte atomovou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků x roztoku, který xx xxx xxxxxxxxxx, x použitím xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx-xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx vlnových xxxxxxx:
Xx: 248,3 xx
Xx: 324,8 xx
Xx: 279,5 xx
Xx: 213,8 xx
Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
5.2. Minerální xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxx spalování. Xxxxxxxxxx, xxx je xx xxxxxxx v xxxx 5.1.1 i) xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx x kyselinou fluorovodíkovou xxxx být xxxxxxxx.
6. XXXXXXX XXXXXXXX
X xxxxxxxx xxxxxxxxxx křivky xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx prvku x xxxxxxx, xxxxx xx být xxxxxxxxxx x vyjádřete xxxxxxxx x miligramech stopového xxxxx xx kilogram xxxxxx (xxx).
7. OPAKOVATELNOST
Rozdíl xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx provedených x xxxxxxxx vzorku xxxxxxx xxxxxxxxxx nesmí xxxxxxxxx:
- 5 xx/xx x absolutní hodnotě x obsahů příslušného xxxxxxxxx xxxxx xx 50 xx/xx,
- 10 % x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx prvku xx 50 xx 100 xx/xx,
- 10 xx/xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx 100 do 200 xx/xx,
- 5 % x xxxxxxx xxxxxxxx u xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 200 xx/xx.
8. XXXXXXXX
Xxxxxxxxxx velkých množství xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxx. Takové xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx lanthanitého (3.11). Xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx poměr xx xxxxxx Xx + Xx / X · 2, xxxx xxx xxxxxxxx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.11) xx roztoku xxx xxxxxxx x do xxxxxxxxxxxx roztoků pominuto.
[1] 1 xx krmného xxxxxxxxxxxxxxx xx ekvivalentní 42 xxxxxxxxxxxx jednotkám (x.x.).
[2] Jiné xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xx předpokladu, xx xxxx stanoveno, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
[3] Může být xxxxxxx xxxxxxxx komerční xxxxxxxxxx xxxxxx podobného xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
[4] Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx médium xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
[5] Xxxx metody xxxxx xxx použity xx xxxxxxxxxxx, že xxxx xxxxxxxxx, že xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx suspenze.
[6] Xxxx být xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx podobného xxxxxxx x xxxxxxxx stejné xxxxxxxx, xxxx. oxoid xxxxxxxxxxxx xxxxxx 1 (XX 327) x xxxxxxxxx xxxxx xxxxx x. 3 (X 13).
[7] Xxxx xxx xxxxxxx jakékoli xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxx výsledky, např. xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx 2 (CM 335) x xxxxxxxxx oxoid xxxxx č. 3 (X 13).
[8] Xxxx. XX 2 xx Xxxxxx Chemie Xxxx, Xxxxxxx.
[9] Zelené pícniny (xxxxxxx xxxx suché) xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx rostlinného xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx a xxxx xxx xxxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxx xxxxx musí xxx xxxxx xxxxxxx následující xxxxxxxxxxxx postup. Xxxxxxxx xxxxxxx 5.1.1 i) xx xx xxxxxxxx. Xxxxxxx filtrační xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx vroucí xxxxx x xxxxxx jej xx platinového xxxxxxx (4.3). Spalte x xxxxxxx xxxx (4.1) xxx xxxxxxx xxx 550 °X, xxxxx xxxxxxx uhlíkatý xxxxxxxx xxxxx nezmizel. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxx 10 až 15 xx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (3.4) a xxxxxxx xx xxxxx xxx xxx 150 °X. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx křemičitý xxxxxx, xxxxxxxxx xxx znovu x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.4) x xxxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.5) x xxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx. Xx přidání 5 xx 6 N xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2) x xxx 30 xx xxxx, zahřejte, xxxxxxxxxxxx xxxxxx do 250 xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx HCL asi 0,5 X). Poté xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx od xxxx 5.1.3.