Xxxx xxxxxxxx Xxxxxx
xx xxx 15. června 1978,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx
(78/633/XXX)
XXXXXX EVROPSKÝCH SPOLEČENSTVÍ,
s xxxxxxx xx Smlouvu x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx společenství,
s xxxxxxx xx směrnici Rady 70/373/XXX xx xxx 20. xxxxxxxx 1970 x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxx Společenství xxx xxxxxx kontrolu xxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx xxxxx o xxxxxxxxxxx, x zejména xx článek 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxx, že směrnice xxxxxxx, xxx byla xxxxxxxxx kontrola xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx odběru vzorků x analytických xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx účely xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx krmiv;
vzhledem x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx 71/250/EHS xx xxx 15. června 1971 [2], 71/393/XXX xx dne 18. xxxxxxxxx 1971 [3], 72/199/XXX ze xxx 27. xxxxx 1972 [4], 73/46/XXX ze xxx 5. prosince 1972 [5], 74/203/EHS xx xxx 25. xxxxxx 1974 [6], 75/84/XXX xx dne 20. xxxxxxxx 1974 [7] a 76/372/XXX xx dne 1. xxxxxx 1976 [8] xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx; xx xxxxxx x xxxxx xx xx doby činí xxxxxxx přijmout xxxxx xxxxx xxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx xxxxxxxx xxxx směrnice xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx,
XXXXXXX TUTO XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
1. Členské xxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu krmiv, xx xx xxxx xxxxxx obsahů xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx, železa, xxxx, xxxxxxx x zinku, xxxxxxxxx x xxxxxxx x metodami xxxxxxxxx x příloze xxxx xxxxxxxx.
2. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx 1 "Xxxx" xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 71/250/XXX, xx x výjimkou xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx, jež xx xxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx směrnice.
Xxxxxx 2
Xxxxxxx xxxxx xxxxxx 1. ledna 1979 v xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx. Neprodleně x xxxx xxxxxxx Xxxxxx.
Xxxxxx 3
Xxxx směrnice xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X Bruselu xxx 15. xxxxxx 1978.
Za Xxxxxx
Xxxx Gundelach
místopředseda
[1] Xx. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Xx. věst. X 155, 12.7.1971, x. 13.
[3] Úř. xxxx. X 279, 20.12.1971, x. 7.
[4] Xx. věst. X 123, 29.5.1972, x. 6.
[5] Úř. věst. X 83, 30.3.1973, x. 21.
[6] Úř. xxxx. X 108, 22.4.1974, x. 7.
[7] Úř. věst. X 32, 5.2.1975, x. 26.
[8] Xx. věst. X 102, 15.4.1976, x. 8.
XXXXXXX
1. XXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXX XXXXXX XX XXXXX
1. XXXX X ROZSAH
Tato xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxx zinkbacitracinu x xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xx 5 xx/xx (5 xxx) [1]. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx ovlivňujících xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx.
2. PRINCIP
Vzorek je xxxxxxxxxx xxx pH 2 xxxxx xxxxxxxx/xxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx je xxxxxxx na xX 6,5, xxxxxxxxxxxx (xxxxx xx xx nutné) x zředěn. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx mikroorganizmem Xxxxxxxxxxx xxxxxx (Xxx. X. xxxxxx). Xxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx inhibičních xxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx zón je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx koncentrace nad xxxxxx použitých xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXXXXXXXX: MICROCOCCUS XXXXXX XXXX 10240
3.1. Xxxxxxxxx xxxxxxx kultury
Naočkujte Xxxxxxxxxxx luteus xx xxxxxxxx xx šikmým xxxxxx (4.1). Inkubujte 24 hodin při 30 xx 37 °X, skladujte x xxxxxxxxxx xxx 4 °X x znovu xxxxxxxxxx každé xxx xxxxx xx xxxxx xxxx.
3.2. Příprava xxxxxxxxxxx xxxxxxxx [2]
Xxxxxx xxxxxxxx xx zkumavky xx xxxxxx xxxxxx (3.1) xx xxxxxxx 2 xx 3 ml xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3). Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx k naočkování 250 xx kultivačního xxxxx (4.1) v Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx 18 až 20 xxxxx xxx 30 až 37 °X. Smyjte xxxxxxxxxxxxxxx xx 25 xx xxxxxxx chloridu xxxxxxx (4.3) a xxxxxxxxxxx. Xxxxxx suspenzi na xxxxx xxxxxxxx roztokem xxxxxxxx sodného (4.3). Xxxxxxxx xxxxxxxxx suspenze xxxx xxx xxxxx 75 %, xxxxxx xxx 650 nm x 1 cm xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3).
4. XXXXXXXXXX XXXXX A XXXXXXXXXX
4.1. Xxxxxxxxxx xxxx [3]
|
Xxxxxx x xxxx |
6,0 x |
|
Xxxxxxx |
4,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxxxxx |
3,0 x |
|
Xxxxxxx z xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
15,0 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
xX 6,5 xx 6,6 (po xxxxxxxxxxx) |
|
|
4.2. Xxxxxxxx xxxx [4] |
|
|
Xxxxxxx |
10,0 g |
|
Extrakt z xxxxxxx |
3,0 g |
|
Extrakt x xxxx |
1,5 g |
|
Glukosa |
1,0 g |
|
Agar |
20,0 x |
|
Xxxxx 80 |
1 xx |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
xX 6,5 (xx xxxxxxxxxxx) |
|
4.3. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 0,8 % (xxxxxx-xxxxxxxxxx): xxxxxxxxx 8 x chloridu xxxxxxx x.x. xx xxxx x zřeďte do 1000 ml; sterilizujte.
4.4. Xxxx čistého methanolu/vody/kyseliny xxxxxxxxxxxxxx x.x. (x: 1,18 až 1,19): 80/17,5/2,5 (xxxxxxxx).
4.5. Xxxxxxxxx xxxx, xX 6,5
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx X2XXX4 x.x. (22,15 g).
Dihydrogen xxxxxxxxxxx xxxxxxxx X2XXX4 x.x (27,85 x).
Xxxx xx 1000 ml.
4.6. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx p.a. (x: 1,18 xx 1,19).
4.7. Kyselina chlorovodíková x.x. (0,1 X).
4.8. X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x.x.
4.9. Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx 0,04 % (xxxxxx-xxxxxxxxxx): rozpusťte 0,1 g xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x 18,5 xx 0,01 X xxxxxxx hydroxidu sodného. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx 250 xx x xxxxxxxxxxx.
4.10. Xxxxxxxxxx xxxxx: zinkbacitracin x xxxxx xxxxxxxx (x x.x.).
5. XXXXXXXXXX XXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxx standardního zinkbacitracinu (4.10) xxxxxxxxxxxx 1050 x.x. (xxxxx uvedené xxxxxxxx). Přidejte 5 xx 0,1 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (4.7) x xxxxxxxx ustát 15 xxxxx. Xxxxxxxx 30 xx xxxx, xxxxxxx xX xx 4,5 xxxxxxxxxx pufrem xX 6,5 (4.5) (xxxxx 4 xx), xxxxxxx vodou xx xxxxxx 50 ml x dobře xxxxxxxxxxx (1 xx = 21 i.u.).
Z xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx pufrem xX 6,5 (4.5) xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
|
X8 |
0,42 |
x.x./xx |
|
X4 |
0,21 |
x.x./xx |
|
X2 |
0,105 |
x.x./xx |
|
X1 |
0,0525 |
x.x./xx |
6. XXXXXXXX XXXXXXXX
6.1. Xxxxxxxx
6.1.1. Xxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx množství xxxxxx 2,0 až 5,0 x, xxxxxxxx 30 xx xxxxx (4.4) x xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx, xx je xX xxxxx 2. Xxxxxxxx 10 xxxxx, xxxxxxxx 30 xx xxxxxxxxxxx xxxxx xX 6,5 (4.5) x xxxxxxxx 15 xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5), xxxxxx obdrželi xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx 0,42 x.x./xx) (= X8).
6.1.2. Bílkovinné xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx 10,0 x, xxxxxxxx 50 xx xxxxx (4.4) x krátce xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx, xx je xX okolo 2. Xxxxxxxx 10 xxxxx, xxxxxxxx 50 ml xxxxxxxxxxx xxxxx pH 6,5 (4.5) a xxxxxxxx 15 minut. Xxxxxx xxxxxxxxxx pufrem (4.5), xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx 0,42 i.u./ml) (= X8).
6.1.3. Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx 10,0 x xxxxxx (20,0 g xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx 5 mg/kg), xxxxxxxx 25 xx xxxxx (4.4) x xxxxxxxxxxxxx xxx 10 xxxxx. Přidejte 25 xx fosfátového pufru xX 6,5 (4.5), xxxxxxxx 15 xxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx 20 ml xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xX xx 6,5 x použitím 1 X xxxxxxx hydroxidu xxxxxxx (4.8) x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.9) xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx přibližně 4 xx xx xxxxxxxx odpařovači xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 35 °X. Xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx 0,42 x.x./xx (= X8).
6.2. Zkušební roztoky
Z xxxxxxx X8 připravte xxxxxx U4 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,21 i.u./ml), X2 (xxxxxxxxx obsah: 0,105 x.x./xx) a X1 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,0525 x.x./xx) x xxxxxxxx xxxxxxxxxx ředění (1 + 1) xxxxxxxxxx pufrem (4.5).
7. XXXXXXXX XXXXXX
7.1. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx média
Očkujte xxxxxxxx xxxxxx (4.2) xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.2) xxx xxx 50 °C. Xxxxxxxxxxx pokusy xx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx (4.2) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, které poskytne xxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx s xxxxxxx koncentracemi zinkbacitracinu.
7.2. Xxxxxxxx misek
Difúze xx xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx čtyřech xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X8, X4, X2, X1) x čtyřech koncentrací xxxxxxxxxx roztoku (X8, X4, X2, X1). Xxxx čtyři koncentrace xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx do xxxxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxx vyberte xxxxxx, xxxxx jsou dostatečně xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxx 8 otvorů x xxxxxxx 10 xx 13 xx x xxxxxxx 30 xx xxxx jejich xxxxxx. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxxxx desek xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx plastovým xxxxxxxx, umístěným xx xxxxx, 200 mm x xxxxxxx x 20 xx výšky.
Rozlijte xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx (4.2), xxxxxxxxxxxx xxxx v bodě 7.1, aby xxxxxxxxx xxxxxx asi 2 xx xxxxxx (50 xx xx xxxxx x průměru 200 xx). Xxxxxxxx ustát x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xx xxxx xxxxxx odměřené xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 xx xx xxxx, xxxxx xxxxxxx).
Xxxxxx koncentraci xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xx každému xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx 32 xxxxxxxxxxx zón.
7.3. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx 16 až 18 xxxxx xxx 28 xx 30 °X.
8. XXXXXXXXXXX
Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx s xxxxxxxxx na 0,1 xx. Xxxxxxxxxxxx střední xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxx xx semilogaritmickém xxxxxxxxx xxxxxx, znázorňujíc xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx zón. Narýsujte xxxxxxxxxxxx křivky standardního xxxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xx xx xxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx standardu (XX) x xxxxxxxx xxxxxxx:
(x) SL = 7 X1 + 4 X2 + X4 - 2 X8 / 10
Xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxxx:
(x) SH = 7 X8 + 4 X4 + X2 - 2 X1 / 10
Xxxxxxx xxxxxxxxx "nejvhodnější" body xxx xxxxxxxx úroveň xxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (XX) xxxxxxxxxx X1, X2, X4 x X8 za X1, X2, S4 x X8 v xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx vypočítané xxxxxxx XX x XX na stejný xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xx, xxxxxx xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" křivku xxx roztok xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx XX x UH x xxxxxx xx, xxxxxx xxxxxxxx "nejvhodnější" xxxxxx xxx xxxxxxx.
X xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx být xxxxxx xxxxxxxxx. Xxx praktické xxxxx xxxxx xxx xxxxxx považovány xx xxxxxxxxx, pokud xx xxxxxxx (SH-SL) x (XX-XX) xxxxxx x xxxx než 10 % od xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxx shledány jako xxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx buď U1 x S1 xxxx X8 x X8 x XX, XX, XX x XX xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx alternativní "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx:
x´) XX = 5 X1 + 2 X2 - X4 / 6 xxxx 5 X2 + 2 X4 - S8 / 6
x´) XX = 5 X4 + 2 X2 - X1 / 6 xxxx 5 S8 + 2 S4 - S2 / 6
x xxxxxxx xxx XX x XX. Xxxxxxxxxxxx nejvhodnější xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx tří úrovní, xxxx xxx xxxxxxx x závěrečné xxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx aktivity (xxx. X) xxxxxx xxxxx s xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx čtyři úrovně
(c) xxx X = (X1 + X2 + U4 + X8 - X1 - X2 - X4 - X8) × 0,602 / X4 + X8 + X4 + X8 - X1 - X2 - X1 - X2
Xxx xxx xxxxxx
(x) log X = (X1 + X2 + X4 - X1 - X2 - X4) × 0,401 / X4 + X4 - X1 - X1
xxxx
x´) xxx X = (X2 + U4 + X8 - X2 - X4 - X8) × 0,401 / U8 + X8 - X2 - X2
Xxxxxxxx xxxxxxxx = xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx neparalelní, opakujte xxxxxxxxx. Pokud není xxxxxxxxxxx stále xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx relativní xxxxxxxx (log. X) xxxxxx rovnice x). Xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xx přibližný x xxxx musí xxx xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxx.
9. XXXXXXXXXXXXXX
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx stejným xxxxxxxxxx xxxxx překročit:
20 % xxx. x vyšší xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 5 x xx 25 xx/xx;
5 xx/xx x xxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxx xxx 25 x do 50 xx/xx;
10 % xxx. x xxxxx xxxxxxx pro obsahy xxx 50 xx/xx.
2. XXXXXXXXX FLAVOFOSFOLIPOLU XXXXXX XX AGARU
1. XXXX X XXXXXX
Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xx 1 xx/xx (1 xxx).
2. XXXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx methanolem xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Po xxxxxxxxxx xx extrakt přečištěn (xxx je xx xxxxx) xx ionexu x xxxxxx. Jeho xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx na agaru xxxxxxxxxxx mikroorganizmem Staphylococcus xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxx je xxxxx úměrný logaritmu xxxxxxxxxxxx koncentrace x xxxxxxx použitých antibiotických xxxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXXXXXXXX: XXXXXXXXXXXXXX XXXXXX XXXX 6538 X
3.1. Xxxxxxxxx zásobní xxxxxxx
Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx aureus xx zkumavky xx xxxxxx agarem (4.1). Xxxxxxxxx 24 xxxxx xxx 37 °C, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 4 °X x xxxxx přeočkujte xxxxx xxxxx xx xxxxx agar.
3.2. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx [5]
Oddělte xxx xxxxxxxx obsahující xxxxxxx kulturu (3.1) x xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx 24 xxxxx xxx 37 °X x skladujte x xxxxxxxxxx xxx xxx 4 °X.
24 xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xx čtyři xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1). Xxxxxxxxx 16 až 18 hodin xxx 37 °X. Vytvořte xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3). Xxxxxxxx transmitance xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx 40 %, xxxxxx xxx 578 xx v 1 xx kyvetě proti xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3).
4. XXXXXXXXXX XXXXX X XXXXXXXXXX
4.1. Kultivační xxxxxx [6]
|
Pepton x xxxx |
6,0 g |
|
Trypton |
4,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxxxxx |
3,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
15,0 g |
|
Voda |
1000 ml |
|
pH 6,5 (po xxxxxxxxxxx) |
|
|
4.2. Xxxxxxxx xxxxxx |
|
|
4.2.1. Xxxxxxxx xxxxxx [7] |
|
|
Xxxxxx z xxxx |
6,0 x |
|
Xxxxxxx z xxxxxxx |
3,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxx |
1,5 x |
|
Xxxx |
10,0 g |
|
Voda |
1000 xx |
|
xX 6,5 (po xxxxxxxxxxx) |
|
4.2.2. Očkovací xxxxxx
Xxxx x bodě 4.1, x xxxxxxxxx 2,0 x xxxxxxxxxx protipěnící xxxxxx [8].
4.3. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 0,4 % (xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx): xxxxxxxxx 4 x chloridu xxxxxxx x.x. xx xxxx a zřeďte xx 1000 ml; xxxxxxxxxxxx.
4.4. Xxxxxxxx, xxxxx.
4.5. Xxxxxxxx 50 % (xxxxxxxxxx): xxxxxx 500 xx xxxxxxxxx (4.4) 500 xx vody.
4.6. Xxxxxxxx 80 % (xxxxxxxxxx): xxxxxx 800 xx xxxxxxxxx (4.4) 200 ml xxxx.
4.7. Xxxx (xxxxxxxxxxxx) aminometan x.x.
4.8. Methanolový xxxxxx xxxxxxxx draselného 1,5 % (váhově-objemových): rozpusťte 1,5 x chloridu xxxxxxxxxx x.x. xx 20 xx xxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx (4.4) xx objemu 100 xx.
4.9. Xxxxxxxxxx xxxxx: Xxxxx 50 Xx8, 20 xx 50 xxxx, Xx xxxxx (xxx. Xxxxx x. 41600) xxxx xxxxxxxxxx.
4.10. Xxxxxxxxx xxxxx: Dowex 1x2, 50 až 100 xxxx, Xx xxxxx (xxx. Xxxxx x. 41010) xxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx 12 xx 14 xxxxx v 80 % xxxxxxxxx (4.6).
4.11. Skelná vlna.
4.12. xX indikátorový xxxxxxx (xX 6,06 až 8.1).
4.13. Xxxxxxxx xxxxxxxxx.
4.14. Xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxx aktivitě.
5. XXXXXXXXX
5.1. Skleněné xxxxxxx xxx chromatografii, xxxxxxx xxxxxx: 9 xx, xxxxx 150 až 200 xx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx x skleněným xxxxxxxx (xx spojení x dávkovací nálevkou (5.2)) x horní xxxxx.
5.2. Xxxxxxxxx xxxxxxx 250 ml, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx zábrusem.
5.3. 250 xx kónická xxxxx xx xxxxxxxxx zábrusem.
5.4. Xxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx.
6. XXXXXXXXXX XXXXXXX
Xxxxxxxxx xxxxxx odvážené xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.14) x 50 % xxxxxxxxx (4.5) x zřeďte, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 100 μg xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxx xx tento xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxx 4 °X, je xxxxxxxx xx xxx xxxxxx.
X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx připravte postupným xxxxxxx 50 % xxxxxxxxxx (4.5) xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
|
X8 |
0,2 |
μx/xx |
|
X4 |
0,1 |
μx/xx |
|
X2 |
0,05 |
μx/xx |
|
X1 |
0,025 |
μx/xx |
7. XXXXXXXX XXXXXXXX
7.1. Xxxxxxxx
7.1.1. Koncentráty, xxxxxxx x xxxxxxxxx krmiva
Odvažte xxxxxxxx xxxxxx 2,0 xx 5,0 x, xxxxxxxx xxx 150 xx kyseliny xxxxxxxxx (4.13). Xxxxxxxxxxxxx xx 150 xx 50 % xxxxxxxxx (4.5) x xxxxxxx xxxxx (5.3) x xxxxxxx xX xx 8,1 xx 8,2 xxx 400 xx xxxx (xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxxx (4.7). Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.12). Nechejte xxxxx 15 minut, xxxxx znovu upravte xX xx 8,1 xx 8,2 xxxx (xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxxx (4.7) x vařte 10 xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx (5.4) xxx xxxxxx xxxxxxx. Nechejte xxxxxxxxxxx, odstřeďte xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.1.2. Xxxxxxx krmiva
Odvažte xxxxxxxx 5,0 xx 30,0 x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx 30 μx xxxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xx 150 xx 50 % xxxxxxxxx (4.5) x kónické baňce (5.3) x xxxxxxx xX xx 8,1 xx 8,2 xxx 400 xx xxxx (xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxxx (4.7). Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.12). Nechejte xxxxx 15 minut, xxxxx xxxxx xxxxxxx xX xx 8,1 xx 8,2 xxxx (xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxxx (4.7) x vařte 10 xxxxx xxx zpětným xxxxxxxxx (5.4) xxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx směs x xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2. Xxxxxxxxxx (xxxxx krok xxxx xxx xxxxxxx x koncentrátů, xxxxxxx x minerálních krmiv)
Rozmíchejte 110 ml extraktu x 11 g xxxxxxxxxxxx xxxxxx (4.9), xxxxx jednu minutu xxx zpětným xxxxxxxxx (5.4) při xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx 100 xx xxxxxxxx se 150 xx methanolu (4.4) x xxxxxxxxx xxxxxx 12 až 15 xxxxx při 4 °X. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx hmotu xxxxx xx roztok chladný.
Vložte xxxxx xx xxxxxx xxxx (4.11) xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5.1), vlijte xx trubice 5 xx xxxxxxxxxxx xxxxxx (4.10) x promyjte xxxxxx 100 xx 80 % xxxxxxxxx (4.6). X použitím xxxxxxx (5.2), xxxxxxxx xx kolony xxxxxxx 100 ml filtrátu, x kterého se xxxxxxx, že obsahuje 16 μx xxxxxxxxxxxxxxxx (200 xx xx 30 x xxxxxx xxxxxx při 1 xxx). Kde xx xx xxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxx aplikací xx kolony 80 % methanolem (4.6), xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx 16 μx/100 xx. Průtok xxxxxxx xx xxx 2 ml/minutu. Odstraňte xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx 50 xx 80 % xxxxxxxxx (4.6) x xxxxxxxxx výtok.
Eluujte flavofosfolipol xxxxxxxxxxxx roztokem xxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.8) xxx xxxxxxx asi 2 xx/xxxxxx. Seberte 50 xx eluátu xx xxxxxxx baňky, xxxxxxxx 30 ml xxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx 0,2 μg/ml (= X8).
7.3. Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xx to xxxxx (xx. když bylo xxxxxxxx předčištění), zřeďte xxxxxxx získaný v xxxx 7.1.1 50 % xxxxxxxxxx (4.5), xxxxxx xxxxxxxx očekávaný xxxxx flavofosfolipolu 0,2 μx/xx (= U8).
Z xxxxxxx X8 xxxxxxxxx xxxxxx X4 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,1 μx/xx), X2 (xxxxxxxxx obsah: 0,05 μg/ml) x X1 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,025 μg/ml) x xxxxxxxx postupného ředění (1 + 1) 50 % xxxxxxxxxx (4.5).
8. XXXXXXXX POSTUP
8.1. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx média
Očkujte xxxxxxxx xxxxxx (4.2.2) xxxxxxxxxxx suspenzí (3.2) xxx xxx 50 °X. Xxxxxxxxxxx pokusy xx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx (4.2.2) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx největší a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (asi 30 xx/xxxx).
8.2. Příprava misek
Difúze xx xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx použití čtyřech xxxxxxxxxxx standardního xxxxxxx (X8, S4, X2, X1) a xxxxxxx xxxxxxxxxxx zkušebního roztoku (X8, X4, X2, X1). Tyto čtyři xxxxxxxxxxx extraktu a xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx umístěny do xxxxx plotny. Xxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, které xxxx xxxxxxxxxx velké, xxx xxxxxxxx xxxxxx v xxxxx xxxxxxx 8 xxxxxx x xxxxxxx 10 až 13 xx x nejméně 30 xx xxxx xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xx miskách xxxxxxxxxxxxx x plochých skleněných xxxxxx vybavených xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx rámem 200 xx v xxxxxxx x 20 xx xxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx (4.2.1), xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx 1,5 xx xxxxxx (45 ml xx xxxxx o xxxxxxx 200 xx). Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (4.2.2) naočkovaného xxxx x bodě 8.1, aby xxxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxx (30 ml xx misku x xxxxxxx 200 xx). Xxxxxxxx znovu xxxxx x xxxxxxxxxx pozici, xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 xx xx díru, podle xxxxxxx).
Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx 32 xxxxxxxxxxx zón.
8.3. Inkubace
Inkubujte xxxxxx 16 xx 18 hodin při 28 xx 30 °X.
9. XXXXXXXXXXX
Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx zón s xxxxxxxxx xx 0,1 xx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx každou xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxx x průměrům xxxxxxxxxxx zón. Narýsujte xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx jako xx xx xxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (XX) s xxxxxxxx xxxxxxx:
(x) XX = 7 X1 + 4 X2 + X4 - 2 X8 / 10
(x) XX = 7 X8 + 4 X4 + X2 - 2 X1 / 10
Podobně xxxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxx extraktu (XX) xxxxxxxxxx X1, U2, X4 a U8 xx X1, X2, X4 x X8 xx výše uvedených xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx XX x SH xx xxxxxx grafický xxxxx a xxxxxx xx, abyste obdrželi "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx. Podobně xxxxxxxxxxxx UL a XX a xxxxxx xx, abyste xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx xxx xxxxxxx.
X nepřítomnosti xxxxxxxxxx xxxxxxxxx by xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxx xx hodnoty (XX-XX) x (XX-XX) xxxxxx x xxxx xxx 10 % xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx jsou křivky xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxx být xxxxxxxx xxx X1 x X1 xxxx X8 x X8 a XX, XX, UL x XX xxxxxxxxx xx xxxxxxx alternativních xxxxxx, které xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" křivky:
a´) XX = 5 X1 + 2 X2 - X4 / 6 xxxx 5 X2 + 2 S4 - X8 / 6
x´) XX = 5 X4 + 2 X2 - X1 / 6 xxxx 5 X8 + 2 X4 - X2 / 6
x xxxxxxx pro XX x UH. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx musí xxx kontrolovány xx xxxxxxxxxxx jako xxxxxxx. Xxxxxxxxxx, že xxx xxxxxxxx počítán xx xxx xxxxxx, xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx. X) pomocí jedné x xxxxxxxxxxxxx rovnic.
Pro xxxxx úrovně
(c) xxx X = (X1 + X2 + X4 + U8 - X1 - X2 - X4 - X8) × 0,602 / X4 + U8 + X4 + X8 - X1 - X2 - X1 - X2
Xxx xxx xxxxxx
(x) log X = (X1 + X2 + U4 - X1 - X2 - X4) × 0,401 / X4 + S4 - U1 - X1
xxxx
x´) xxx A = (X2 + X4 + X8 - S2 - X4 - S8) × 0,401 / X8 + X8 - U2 - X2
Xxxxxxxx aktivita = xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx stanovení. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, vypočítejte xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx. X) xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx c). Xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx považován za xxxxxxxxx x toto xxxx být xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx.
10. XXXXXXXXXXXXXX
Xxxxxx mezi xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx provedených x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
0,5 xx/xx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx flavofosfolipolu xx 1 xx 2 xx/xx;
25 % xxx. x xxxxx hodnoty xxx xxxxxx větší xxx 2 xx10 xx/xx;
20 % xxx. x xxxxx hodnoty xxx xxxxxx xxxxx xxx 10 xx 25 mg/kg;
5 xx/xx x absolutní xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxx 25 do 50 mg/kg;
10 % xxx. x vyšší xxxxxxx xxx xxxxxx xxx 50 xx/xx.
3. XXXXXXXXX XXXXXXXXX PRVKŮ XXXXXX, XXXX, MANGANU X XXXXX
1. ÚČEL X ROZSAH
Tato xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx stopové xxxxx xxxxxx, xxx, xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxx. Xxxxx xxxx stanovení jsou:
železo (Xx): 20 xx/xx
xxx (Xx): 10 xx/xx
xxxxxx (Xx): 20 mg/kg
zinek (Xx): 20 xx/xx
2. XXXXXXX
Xxxxxx je xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx po xxxxxxxxx xxxxxxxxx hmoty, pokud xx obsažena. Prvky xxxxxx, xxx, xxxxxx x xxxxx jsou xxxxxxxxx po xxxxxxxxxx xxxxxxx atomovou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx.
3. CHEMIKÁLIE
Úvodní xxxxxxxx
Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx roztoků používejte xxxx, x které xxxx stanoveno, xx xx xxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxx dvounásobnou xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx přístroji xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (x.x.). Xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Pokud xx to nutné, xxxx xxx chemikálie xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx standardních xxxxxxx xxxxxxxxx níže, xxxxx být použity xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxx garantovány x xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
3.1. Xxxxxxxx chlorovodíková x.x. (x: 1,19).
3.2. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x.x. (6 X).
3.3. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x.x. (0,5 X).
3.4. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx 38 až 40 % (xxxxxxxxxx) mající xxxxx železa menší xxx 1 xx Xx/xxxx x xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxx 10 mg (xxxx xxxxxx)/xxxx.
3.5. Kyselina xxxxxx x.x. (x: 1,84).
3.6. Xxxxxxx xxxxxx x.x. (xxxxxxxxx 100 xxxxxx kyslíku (30 % xxxxxxxxxx)).
3.7. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx (1000 μx Xx/xx) připravený xxxxxxxxxx: xxxxxxxxx 1 x železného xxxxx x.x. xx 200 xx 6 N xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2), xxxxxxxx 16 xx xxxxxxxx xxxxxx (3.6) x xxxxxxx xx xxxxxxx litru xxxxx.
3.7.1. Xxxxxxxx standardní roztok xxxxxx (100 μg Xx/xx) xxxxxxxxxx zředěním xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.7) 1 + 9 xxxxx.
3.8. Standardní xxxxxx xxxx (1000 μx Xx/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: xxxxxxxxx 1 x xxxx v práškové xxxxx (x.x.) ve 25 xx 6 X xxxxxxxx chlorovodíkové (3.2), xxxxxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxxxx (3.6) x doplňte xx xxxxxxx litru xxxxx.
3.8.1. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx (10 μx Cu/ml) xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.8) 1 + 9 xxxxx a xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 1 + 9 vodou.
3.9. Standardní xxxxxx xxxxxxx (1000 μx Mn/ml) připravený xxxxxxxxxx: xxxxxxxxx 1 x xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxx (x.x.) xx 25 xx 6 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2), xxxxxxxx 5 xx peroxidu xxxxxx (3.6) x xxxxxxx xx jednoho xxxxx xxxxx.
3.9.1. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (10 μg Xx/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.9) 1 + 9 vodou x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 1 + 9 vodou.
3.10. Xxxxxxxxxx roztok xxxxx (1000 μx Xx/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: rozpusťte 1 x xxxxx xx formě xxxxx xxxx xxxxxx (p.a.) xx 25 xx 6 N kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (3.2) x xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx vodou.
3.10.1. Pracovní xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (10 μg Xx/xx) xxxxxxxxxx zředěním standardního xxxxxxx (3.10) 1 + 9 vodou x potom xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 1 + 9 xxxxx.
3.11. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx následovně: rozpusťte 12 x kysličníku xxxxxxxxxxxx ve 150 xx vody, přidejte 100 xx 6 X xxxxxxxx chlorovodíkové (3.2) x xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
4. PŘÍSTROJE
4.1. Muflová xxx s xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
4.2. Xxxxxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xx používat xxxxxxxxx, xxxxx xxxx výlučně xxxxxxxxxxx xxx stanovení xxxxxxxxx prvků.
4.3. Xxxxxxxxx xxxxxxx x (xxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxx.
4.4. Atomový xxxxxxxxx spektrofotometr xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xx xx týče xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
5. XXXXXX
5.1. Xxxxxx obsahující xxxxxxxxxx xxxxx
5.1.1. Žíhání a xxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx [9]
i) Vložte 5 xx 10 x vzorku, odváženého x přesností xx 0,2 mg, xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.3) (xxx xxxxxxxx x)), xxxxxxx x sušárně xxx 105 °X x xxxxxx kelímek xx xxxxxxx muflové xxxx (4.1). Xxxxxxx xxx (xxx xxxxxxxx x)) x xxxxxxxx zvyšujte xxxxxxx xx 470 xx 475 °X xx xxx 90 xxxxx. Xxxxxxxx tuto xxxxxxx 4 xx 16 hodin (xxxx. xxxx xxx), xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxx xxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxx xxxxxxxx x)).
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx 5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.1) x přidejte xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx do kádinky (xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx XX2). Xxxxxxxx po xxxxxxx kyselinu xxxxxxxxxxxxxxx (3.1) xx xxxxxxx, xxxxx neustane šumění. Xxxxxxx do sucha xx příležitostného míchání xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xx zbytku 15 xx 6 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2) x následně xxx 120 xx xxxx. Xxxxxxxx skleněnou xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxx ponechána x xxxxxxx a zakryjte xxxxxxx xxxxxxxxx sklem. Xxxxxx mírně do xxxx x xxxxxxxx xx xxxx varu xxxxx xxx xxxx xxxxx nerozpuštěný xxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxx filtrační xxxxx xxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx 250 ml xxxxxxx baňky. Xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx 5 xx xxxxx 6 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2) x xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx vodou (xxxxxxxxxxx XXx xxx 0,5 N).
ii) Xxxxx xx xxxxxx na xxxxxx zbarven xxxxx (xxxxx), dejte jej xxxx xx xxxx x žíhejte xxxxx xxx 450 xx 475 °C. Toto xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx (xxx xxx xx xxx xxxxx), je xxxxxxxxx, xxxx je xxxxx xxxx nebo xxxxx bílý. Xxxxxxxxx xxxxxx xxx 2 xx xxxxxxxx chlorovodíkové (3.1), xxxxxxx do xxxxx a xxxxxxxx 5 xx 6 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2). Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx HCl xxx 0,5 N).
Poznámky:
a) Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx prvků xx důležité xxx xxxxxxxxx vůči xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxx a xxxxxxx. X tohoto xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx bez xxxxxx xxxx.
Xx snížení xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx x bezprašné xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx čistým xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx zvláště xxxxxxx xx mnoho xxxx xxxxxxxxxxx, xxxx. x nádobí, xxxxxxxxxx, xxxxxx, xxx.
x) Váha xxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxx, xx xxxxxxxx z přibližného xxxxxx xxxxxxxxx prvku x krmivu xx xxxxxx k citlivosti xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx. U xxxxxxxx xxxxx s xxxxxx xxxxxxx stopových xxxxx může xxx xxxxxxxx xxxxx x 10 xx 20 x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx roztok xx xxxxx 100 xx.
x) Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx.
x) Teplota xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx překročit 475 °X.
5.1.2. Spektrofotometrické xxxxxxxxx
5.1.2.1. Xxxxxxxx kalibračních xxxxxxx
Xxx každý xxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx z xxxxxxxxxx standardních xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx 3.7.1, 3.8.1, 3.9.1 x 3.10.1 xxxx xxxxxxxxxxxx roztoků, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxx XXX xxxxx 0,5 X a (x xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,1 % Xx (xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx). Koncentrace xxxxxxxxx stopových xxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx příkladně xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx; x xxxxxxxxxx xx xxxx x xxxxxxxxxx použitého xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxx nutno xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx
|
μx Xx/xx |
0 |
0,5 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
|
xx xxxxxxxxxx standardního roztoku (3.7.1) (1 ml = 100 μx Xx) |
0 |
0,5 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
|
+ ml 6 X XXx (3.2) |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
|
+ 10 xx xxxxxxx xxxxxxxx lanthanitého (3.11) x xxxxxxx do 100 xx xxxxx. |
|||||||
Xxx
|
μx Xx/xx |
0 |
0,1 |
0,2 |
0,4 |
0,6 |
0,8 |
1,0 |
|
xx pracovního xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.8.1) (1 xx = 10 μx Cu) |
0 |
1 |
2 |
4 |
6 |
8 |
10 |
|
+ xx 6 X HCl (3.2) |
8 |
8 |
8 |
8 |
8 |
8 |
8 |
|
Xxxxxxx xx 100 xx xxxxx. |
|||||||
Xxxxxx
|
μx Xx/xx |
0 |
0,1 |
0,2 |
0,4 |
0,6 |
0,8 |
1,0 |
|
xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (3.9.1) (1 xx = 10 μg Xx) |
0 |
1 |
2 |
4 |
6 |
8 |
10 |
|
+ xx 6 X XXx (3.2) |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
|
+ 10 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.11) x xxxxxxx xx 100 ml vodou. |
|||||||
Zinek
|
μg Xx/xx |
0 |
0,05 |
0,1 |
0,2 |
0,4 |
0,6 |
0,8 |
|
xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10.1) (1 xx = 10 μx Xx) |
0 |
0,5 |
1 |
2 |
4 |
6 |
8 |
|
+ ml 6 X XXx (3.2) |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
|
+ 10 ml xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.11) x xxxxxxx xx 100 xx xxxxx. |
|||||||
5.1.2.2. Xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx
X xxxxxxxxx xxxx může být xxxxxx připravený x xxxx 5.1.1 xxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Pokud xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx koncentraci xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx 100 ml xxxxxxx xxxxx x doplněna xx značku 0,5 X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (3.3).
X xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx alikvotní podíl xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.1.1 xx 100 ml xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx 10 xx chloridu lanthanitého (3.11) x xxxxxxx xx xxxxxx 0,5 X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (3.3) (xxx xxxxxx xxx 8 xxxxxxxx).
5.1.2.3. Xxxxx pokus
Slepý xxxxx xxxx xxxxxxxxx všechny xxxxxxxxxx kroky postupu xxxxx toho, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx "0" xxxxxx xxx použit xxxx xxxxx.
5.1.2.4. Xxxxxx xxxxxxx absorpce
Změřte atomovou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků x xxxxxxx, který xx xxx xxxxxxxxxx, x xxxxxxxx okysličujícího xxxxxxx vzduch-acetylen při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx délkách:
Fe: 248,3 nm
Cu: 324,8 xx
Xx: 279,5 xx
Xx: 213,8 nm
Proveďte každé xxxxxx xxxxxxxxx.
5.2. Minerální xxxxxx
Xxxxx vzorek xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx hmotu, není xxxxxxxx xxxxxxxxx. Pokračujte, xxx xx xx xxxxxxx x xxxx 5.1.1 x) xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx.
6. XXXXXXX VÝSLEDKŮ
S xxxxxxxx xxxxxxxxxx křivky vypočtěte xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx prvku x xxxxxxx, který xx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx výsledek x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx kilogram xxxxxx (xxx).
7. OPAKOVATELNOST
Rozdíl xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx provedených x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
- 5 xx/xx x xxxxxxxxx hodnotě x xxxxxx příslušného xxxxxxxxx prvku xx 50 xx/xx,
- 10 % z xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx 50 do 100 xx/xx,
- 10 xx/xx, v absolutní xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx stopového prvku xx 100 xx 200 mg/kg,
- 5 % x xxxxxxx xxxxxxxx x obsahů xxxxxxxxxxx stopového prvku xxxx 200 xx/xx.
8. XXXXXXXX
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx může ovlivňovat xxxxxxxxx železa, manganu x xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.11). Xxxxxxx, pokud xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx Xx + Xx / X · 2, může xxx xxxxxxxx roztoku xxxxxxxx lanthanitého (3.11) xx xxxxxxx pro xxxxxxx a xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx pominuto.
[1] 1 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx je xxxxxxxxxxxx 42 xxxxxxxxxxxx jednotkám (x.x.).
[2] Xxxx xxxxxx xxxxx xxx použity xx xxxxxxxxxxx, že xxxx stanoveno, xx xxxxxx xxxxxxx bakteriální xxxxxxxx.
[3] Xxxx xxx xxxxxxx jakékoli komerční xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x dávající xxxxxx výsledky.
[4] Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
[5] Xxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx, xx dávají xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
[6] Xxxx být xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx podobného složení x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxx. xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx 1 (XX 327) s xxxxxxxxx oxoid xxxxx x. 3 (L 13).
[7] Může být xxxxxxx jakékoli komerční xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x dávající xxxxxx xxxxxxxx, xxxx. xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx 2 (XX 335) x xxxxxxxxx xxxxx xxxxx x. 3 (X 13).
[8] Např. XX 2 od Xxxxxx Chemie Xxxx, Xxxxxxx.
[9] Zelené pícniny (xxxxxxx xxxx xxxxx) xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx a xxxx xxx xxxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxx xxxxx musí být xxxxx xxxxxxx následující xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx 5.1.1 x) xx xx filtraci. Xxxxxxx filtrační papír xxxxxxxxxx nerozpustný zbytek xxxxxxx vroucí xxxxx x vlažte jej xx xxxxxxxxxxx kelímku (4.3). Xxxxxx x xxxxxxx xxxx (4.1) xxx teplotě xxx 550 °X, xxxxx xxxxxxx uhlíkatý materiál xxxxx nezmizel. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxx 10 xx 15 xx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (3.4) x xxxxxxx xx xxxxx xxx xxx 150 °X. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx jej xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.4) x xxxxxxx do xxxxx. Přidejte pět xxxxx kyseliny xxxxxx (3.5) x zahřívejte xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx. Xx xxxxxxx 5 xx 6 N xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2) x xxx 30 xx vody, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx roztok xx 250 xx xxxxxxx xxxxx x doplňte xx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx XXX xxx 0,5 X). Poté xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx od xxxx 5.1.3.