Xxxx xxxxxxxx Xxxxxx
xx xxx 15. června 1978,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Společenství xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx
(78/633/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX SPOLEČENSTVÍ,
s xxxxxxx xx Xxxxxxx x založení Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxx 70/373/XXX xx xxx 20. července 1970 x zavedení xxxxx xxxxxx vzorků a xxxxxxxxxxxx xxxxx Společenství xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx aktem x xxxxxxxxxxx, x xxxxxxx xx článek 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxx, xx směrnice xxxxxxx, xxx byla xxxxxxxxx kontrola krmiv xxxxxxxxx x použitím xxxxx odběru xxxxxx x analytických xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx souladu požadavků xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx předpisy xxxxxxxxx xx jakosti x xxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, že směrnice xxxxxx 71/250/XXX xx xxx 15. června 1971 [2], 71/393/XXX xx dne 18. xxxxxxxxx 1971 [3], 72/199/XXX ze dne 27. xxxxx 1972 [4], 73/46/EHS xx xxx 5. xxxxxxxx 1972 [5], 74/203/EHS xx xxx 25. xxxxxx 1974 [6], 75/84/XXX ze xxx 20. xxxxxxxx 1974 [7] a 76/372/XXX xx xxx 1. xxxxxx 1976 [8] xxx ustanovily xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx metod Xxxxxxxxxxxx; xx xxxxxx x práci xx xx xxxx xxxx xxxxxxx přijmout xxxxx xxxxx metod;
vzhledem x xxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Stálého výboru xxx krmiva,
PŘIJALA XXXX XXXXXXXX:
Článek 1
1. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, aby xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu xxxxx, xx xx týče xxxxxx xxxxxx zinkbacitracinu, xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx, xxxx, xxxxxxx x xxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx popsanými x příloze xxxx xxxxxxxx.
2. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx 1 "Xxxx" přílohy xxxxx xxxxxxxx 71/250/XXX, xx s xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx vzorku, xxx xx xxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x na xxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx této xxxxxxxx.
Xxxxxx 2
Xxxxxxx xxxxx xxxxxx 1. xxxxx 1979 v xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx souladu x xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx x xxxx uvědomí Xxxxxx.
Xxxxxx 3
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X Xxxxxxx xxx 15. xxxxxx 1978.
Za Xxxxxx
Xxxx Gundelach
místopředseda
[1] Úř. věst. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Xx. věst. X 155, 12.7.1971, x. 13.
[3] Xx. xxxx. X 279, 20.12.1971, x. 7.
[4] Xx. xxxx. X 123, 29.5.1972, x. 6.
[5] Xx. xxxx. X 83, 30.3.1973, x. 21.
[6] Úř. věst. X 108, 22.4.1974, x. 7.
[7] Xx. xxxx. X 32, 5.2.1975, x. 26.
[8] Úř. xxxx. X 102, 15.4.1976, x. 8.
XXXXXXX
1. STANOVENÍ XXXXXXXXXXXXXXX XXXXXX XX AGARU
1. XXXX X ROZSAH
Tato xxxxxx je určena xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x krmivech, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Dolní xxx stanovení je 5 xx/xx (5 xxx) [1]. Xxxxxx xxxx použitelná x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx.
2. XXXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxxxx při xX 2 směsí xxxxxxxx/xxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx na xX 6,5, xxxxxxxxxxxx (xxxxx xx xx xxxxx) x zředěn. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxx (Xxx. M. xxxxxx). Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3. MIKROORGANISMUS: MICROCOCCUS XXXXXX ATCC 10240
3.1. Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx luteus do xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx (4.1). Inkubujte 24 xxxxx při 30 až 37 °X, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 4 °X a znovu xxxxxxxxxx každé dva xxxxx xx šikmý xxxx.
3.2. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx [2]
Xxxxxx xxxxxxxx xx zkumavky se xxxxxx xxxxxx (3.1) xx použití 2 xx 3 xx xxxxxxx xxxxxxxx sodného (4.3). Tuto xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx 250 xx kultivačního xxxxx (4.1) x Xxxxxxx baňce a xxxxxxxxx 18 xx 20 xxxxx při 30 xx 37 °X. Xxxxxx mikroorganizmus xx 25 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3) x promíchejte. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx desetinu roztokem xxxxxxxx sodného (4.3). Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx okolo 75 %, xxxxxx xxx 650 nm x 1 cm xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3).
4. XXXXXXXXXX XXXXX A XXXXXXXXXX
4.1. Xxxxxxxxxx xxxx [3]
|
Xxxxxx x xxxx |
6,0 x |
|
Xxxxxxx |
4,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxxxxx |
3,0 g |
|
Extrakt x xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
15,0 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
xX 6,5 xx 6,6 (xx xxxxxxxxxxx) |
|
|
4.2. Xxxxxxxx půda [4] |
|
|
Xxxxxxx |
10,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxxxxx |
3,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxx |
1,0 g |
|
Agar |
20,0 x |
|
Xxxxx 80 |
1 xx |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
xX 6,5 (po xxxxxxxxxxx) |
|
4.3. Xxxxxx chloridu xxxxxxx 0,8 % (xxxxxx-xxxxxxxxxx): rozpusťte 8 x chloridu xxxxxxx x.x. xx vodě x xxxxxx xx 1000 xx; xxxxxxxxxxxx.
4.4. Xxxx xxxxxxx methanolu/vody/kyseliny xxxxxxxxxxxxxx x.x. (d: 1,18 až 1,19): 80/17,5/2,5 (xxxxxxxx).
4.5. Xxxxxxxxx xxxx, xX 6,5
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx draselný X2XXX4 x.x. (22,15 g).
Dihydrogen xxxxxxxxxxx xxxxxxxx X2XXX4 x.x (27,85 g).
Voda xx 1000 ml.
4.6. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x.x. (x: 1,18 až 1,19).
4.7. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x.x. (0,1 N).
4.8. X roztok xxxxxxxxx xxxxxxx x.x.
4.9. Roztok xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx 0,04 % (váhově-objemových): xxxxxxxxx 0,1 x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx v 18,5 xx 0,01 X xxxxxxx hydroxidu xxxxxxx. Xxxxxxx vodou xx xxxxxx 250 xx x xxxxxxxxxxx.
4.10. Xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxxxx x xxxxx aktivitě (v x.x.).
5. STANDARDNÍ ROZTOKY
Odvažte xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (4.10) xxxxxxxxxxxx 1050 x.x. (podle uvedené xxxxxxxx). Přidejte 5 xx 0,1 N xxxxxxxx chlorovodíkové (4.7) x xxxxxxxx xxxxx 15 xxxxx. Přidejte 30 xx xxxx, xxxxxxx pH xx 4,5 fosfátovým xxxxxx xX 6,5 (4.5) (xxxxx 4 ml), xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx 50 xx x dobře promíchejte (1 xx = 21 x.x.).
X xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xX 6,5 (4.5) xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
|
X8 |
0,42 |
x.x./xx |
|
X4 |
0,21 |
x.x./xx |
|
X2 |
0,105 |
x.x./xx |
|
X1 |
0,0525 |
x.x./xx |
6. XXXXXXXX XXXXXXXX
6.1. Xxxxxxxx
6.1.1. Xxxxxxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx 2,0 xx 5,0 x, xxxxxxxx 30 xx xxxxx (4.4) x xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx, že xx xX xxxxx 2. Xxxxxxxx 10 minut, xxxxxxxx 30 xx xxxxxxxxxxx xxxxx xX 6,5 (4.5) x xxxxxxxx 15 xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx pufrem (4.5), xxxxxx obdrželi xxxxxxxxx obsah xxxxxxxxxxxxxxx 0,42 x.x./xx) (= X8).
6.1.2. Bílkovinné koncentráty
Odvažte xxxxxxxx xxxxxx 10,0 x, přidejte 50 xx směsi (4.4) x xxxxxx protřepejte. Xxxxxxxxxxxx, xx xx xX okolo 2. Xxxxxxxx 10 xxxxx, xxxxxxxx 50 xx xxxxxxxxxxx xxxxx pH 6,5 (4.5) x xxxxxxxx 15 minut. Xxxxxx fosfátovým xxxxxx (4.5), abyste xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx zinkbacitracinu 0,42 x.x./xx) (= X8).
6.1.3. Xxxxxxx krmiva
Odvažte xxxxxxxx 10,0 x xxxxxx (20,0 x xxx xxxxxxxxx obsah xxxxxxxxxxxxxxx 5 mg/kg), xxxxxxxx 25 ml xxxxx (4.4) x xxxxxxxxxxxxx asi 10 xxxxx. Xxxxxxxx 25 xx xxxxxxxxxxx xxxxx xX 6,5 (4.5), xxxxxxxx 15 xxxxx x odstřeďte. Xxxxxxxx 20 xx roztoku xxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xX xx 6,5 x použitím 1 X xxxxxxx hydroxidu xxxxxxx (4.8) x xxxxxxxx bromokresolové xxxxxxx (4.9) xxxx indikátorem. Xxxxxxx na xxxxxxxxx 4 xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 35 °X. Xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx obsah xxxxxxxxxxxxxxx 0,42 i.u./ml (= X8).
6.2. Xxxxxxxx roztoky
Z xxxxxxx X8 xxxxxxxxx xxxxxx U4 (očekávaný xxxxx: 0,21 x.x./xx), X2 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,105 x.x./xx) x X1 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,0525 x.x./xx) x xxxxxxxx postupného xxxxxx (1 + 1) xxxxxxxxxx pufrem (4.5).
7. XXXXXXXX XXXXXX
7.1. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.2) bakteriální xxxxxxxx (3.2) xxx xxx 50 °X. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx (4.2) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, které poskytne xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx s xxxxxxx koncentracemi xxxxxxxxxxxxxxx.
7.2. Xxxxxxxx misek
Difúze xx xxxxx xx prováděna x xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (X8, X4, X2, X1) x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (X8, X4, X2, X1). Xxxx xxxxx koncentrace xxxxxxxx a standardu xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx. Pro tento xxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx jsou dostatečně xxxxx, aby xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxx 8 otvorů x xxxxxxx 10 xx 13 mm x nejméně 30 xx xxxx xxxxxx xxxxxx. Pokus xxxx xxx prováděn xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx rovným xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxx, 200 mm x xxxxxxx a 20 xx výšky.
Rozlijte xx xxxxx množství xxxxx (4.2), xxxxxxxxxxxx xxxx x bodě 7.1, xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx 2 xx xxxxxx (50 xx na misku x průměru 200 xx). Nechejte xxxxx x rovnovážné xxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx do xxxx xxxxxx odměřené xxxxxx xxxxxxxxxx x standardních xxxxxxx (mezi 0,10 x 0,15 ml xx xxxx, podle xxxxxxx).
Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx 32 xxxxxxxxxxx xxx.
7.3. Inkubace
Inkubujte xxxxxx 16 až 18 xxxxx při 28 xx 30 °X.
8. XXXXXXXXXXX
Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxxxx xx 0,1 xx. Xxxxxxxxxxxx střední xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxx k xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx křivky standardního xxxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx jako xx xx uvedeno níže.
Stanovte "xxxxxxxxxxxx" xxx pro xxxxxxxx xxxxxx standardu (XX) s xxxxxxxx xxxxxxx:
(x) XX = 7 X1 + 4 S2 + X4 - 2 X8 / 10
Stanovte "xxxxxxxxxxxx" xxx pro xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (XX) x použitím xxxxxxx:
(x) XX = 7 X8 + 4 S4 + X2 - 2 X1 / 10
Xxxxxxx xxxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxx extraktu (XX) nahrazením X1, X2, U4 x X8 za S1, X2, S4 x X8 x xxxxxx xxxxxxxxx rovnicích.
Zaznamenejte xxxxxxxxxx xxxxxxx SL x XX na stejný xxxxxxxx papír x xxxxxx xx, xxxxxx xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx XX x UH x xxxxxx xx, xxxxxx xxxxxxxx "nejvhodnější" xxxxxx xxx xxxxxxx.
X nepřítomnosti xxxxxxxxxx ovlivnění by xxxx být xxxxxx xxxxxxxxx. Xxx praktické xxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx (XX-XX) x (XX-XX) xxxxxx x xxxx než 10 % xx jejich xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx jsou xxxxxx xxxxxxxx jako xxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxx X1 x X1 xxxx X8 a X8 x XX, XX, XX a XX xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, které xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx:
x´) SL = 5 S1 + 2 X2 - X4 / 6 xxxx 5 X2 + 2 X4 - X8 / 6
x´) SH = 5 S4 + 2 S2 - X1 / 6 xxxx 5 S8 + 2 X4 - X2 / 6
x xxxxxxx xxx XX a UH. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx kontrolovány xx xxxxxxxxxxx jako xxxxxxx. Xxxxxxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxx, xxxx být uvedena x závěrečné xxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx považovány xx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx. X) xxxxxx xxxxx s následujících xxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxx
(x) xxx X = (X1 + U2 + X4 + X8 - X1 - X2 - X4 - X8) × 0,602 / X4 + X8 + X4 + X8 - X1 - U2 - X1 - X2
Xxx xxx úrovně
(d) xxx X = (U1 + X2 + X4 - X1 - S2 - X4) × 0,401 / U4 + X4 - U1 - X1
xxxx
x´) xxx X = (U2 + U4 + X8 - X2 - X4 - X8) × 0,401 / U8 + X8 - X2 - S2
Skutečná xxxxxxxx = xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx aktivita.
Když xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx neparalelní, xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx docílena, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx. X) xxxxxx xxxxxxx x). Xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxx xxxx být xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx.
9. XXXXXXXXXXXXXX
Xxxxxx mezi xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx analytikem xxxxx xxxxxxxxx:
20 % xxx. x vyšší xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx od 5 x xx 25 xx/xx;
5 mg/kg x xxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxx než 25 a xx 50 mg/kg;
10 % xxx. x vyšší xxxxxxx pro obsahy xxx 50 mg/kg.
2. XXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXXX DIFÚZÍ XX XXXXX
1. XXXX X XXXXXX
Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx. Xxxxx mez xxxxxxxxx je 1 xx/xx (1 xxx).
2. XXXXXXX
Xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxx methanolem xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Po xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx (xxx je xx xxxxx) na xxxxxx x xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx difúze xxxxxxxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx inhibičních xxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx zón je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx koncentrace x xxxxxxx použitých xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXXXXXXXX: STAPHYLOCOCCUS XXXXXX XXXX 6538 X
3.1. Udržování zásobní xxxxxxx
Xxxxxxxxx Staphylococcus xxxxxx xx zkumavky se xxxxxx agarem (4.1). Xxxxxxxxx 24 xxxxx xxx 37 °X, xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxx 4 °C x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxx agar.
3.2. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx [5]
Xxxxxxx xxx xxxxxxxx obsahující xxxxxxx xxxxxxx (3.1) x týdně xx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx 24 xxxxx při 37 °X a xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx při xxx 4 °X.
24 xxxxx před zkouškou xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx až xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1). Xxxxxxxxx 16 xx 18 xxxxx xxx 37 °X. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3). Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx 40 %, xxxxxx při 578 xx x 1 xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3).
4. XXXXXXXXXX MÉDIA X XXXXXXXXXX
4.1. Xxxxxxxxxx xxxxxx [6]
|
Xxxxxx x xxxx |
6,0 x |
|
Xxxxxxx |
4,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxxxxx |
3,0 g |
|
Extrakt x masa |
1,5 x |
|
Xxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
15,0 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
xX 6,5 (xx xxxxxxxxxxx) |
|
|
4.2. Xxxxxxxx xxxxxx |
|
|
4.2.1. Xxxxxxxx xxxxxx [7] |
|
|
Pepton x xxxx |
6,0 g |
|
Extrakt x xxxxxxx |
3,0 g |
|
Extrakt x xxxx |
1,5 x |
|
Xxxx |
10,0 g |
|
Voda |
1000 xx |
|
xX 6,5 (xx xxxxxxxxxxx) |
|
4.2.2. Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxx x xxxx 4.1, x xxxxxxxxx 2,0 x silikonové xxxxxxxxxxx xxxxxx [8].
4.3. Roztok xxxxxxxx xxxxxxx 0,4 % (xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx): xxxxxxxxx 4 g xxxxxxxx xxxxxxx x.x. xx xxxx a xxxxxx xx 1000 xx; xxxxxxxxxxxx.
4.4. Xxxxxxxx, čistý.
4.5. Xxxxxxxx 50 % (xxxxxxxxxx): zřeďte 500 xx xxxxxxxxx (4.4) 500 xx vody.
4.6. Xxxxxxxx 80 % (xxxxxxxxxx): xxxxxx 800 xx xxxxxxxxx (4.4) 200 ml xxxx.
4.7. Xxxx (xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx x.x.
4.8. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1,5 % (xxxxxx-xxxxxxxxxx): rozpusťte 1,5 g xxxxxxxx xxxxxxxxxx x.x. xx 20 ml xxxx, xxxxxxx methanolem (4.4) xx objemu 100 xx.
4.9. Xxxxxxxxxx xxxxx: Xxxxx 50 Wx8, 20 xx 50 xxxx, Xx xxxxx (xxx. Xxxxx č. 41600) xxxx xxxxxxxxxx.
4.10. Xxxxxxxxx xxxxx: Dowex 1x2, 50 xx 100 xxxx, Xx xxxxx (kat. Xxxxx x. 41010) xxxx xxxxxxxxxx. Před xxxxxxxx xxxxxxxx 12 až 14 xxxxx x 80 % methanolu (4.6).
4.11. Skelná vlna.
4.12. xX indikátorový papírek (xX 6,06 až 8.1).
4.13. Kyselina xxxxxxxxx.
4.14. Xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx x známé xxxxxxxx.
5. XXXXXXXXX
5.1. Xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx: 9 xx, xxxxx 150 xx 200 xx, xxxxxxxx xxxxxxxxx kohoutem xx xxxxxx xxxxx dolního xxxxx x skleněným xxxxxxxx (ke xxxxxxx x xxxxxxxxx nálevkou (5.2)) x xxxxx xxxxx.
5.2. Xxxxxxxxx xxxxxxx 250 xx, vybavená xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx zábrusem.
5.3. 250 xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx zábrusem.
5.4. Xxxxxx chladič se xxxxxxxxx xxxxxxxx.
6. STANDARDNÍ XXXXXXX
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx standardní xxxxx (4.14) x 50 % methanolu (4.5) x xxxxxx, abyste xxxxxxxx zásobní roztok xxxxxxxxxx 100 μg xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxx je xxxxx xxxxxx skladován x xxxxxxxxxxx xxxxx xxx 4 °X, je xxxxxxxx xx dva xxxxxx.
X tohoto zásobního xxxxxxx připravte postupným xxxxxxx 50 % xxxxxxxxxx (4.5) následující xxxxxxx:
|
X8 |
0,2 |
μx/xx |
|
X4 |
0,1 |
μx/xx |
|
X2 |
0,05 |
μx/xx |
|
X1 |
0,025 |
μx/xx |
7. XXXXXXXX XXXXXXXX
7.1. Xxxxxxxx
7.1.1. Koncentráty, premixy x minerální krmiva
Odvažte xxxxxxxx xxxxxx 2,0 xx 5,0 x, xxxxxxxx xxx 150 xx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.13). Homogenizujte xx 150 xx 50 % methanolu (4.5) x kónické baňce (5.3) x xxxxxxx xX na 8,1 xx 8,2 asi 400 xx tris (xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxxx (4.7). Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.12). Xxxxxxxx xxxxx 15 minut, xxxxx xxxxx xxxxxxx xX xx 8,1 xx 8,2 tris (xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxxx (4.7) x xxxxx 10 xxxxx xxx zpětným xxxxxxxxx (5.4) xxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx směs x xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.1.2. Xxxxxxx krmiva
Odvažte xxxxxxxx 5,0 xx 30,0 x vzorku obsahujícího xxxxxxx 30 μx xxxxxxxxxxxxxxxx. Homogenizujte xx 150 ml 50 % xxxxxxxxx (4.5) x xxxxxxx xxxxx (5.3) a xxxxxxx xX na 8,1 xx 8,2 asi 400 mg xxxx (xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxxx (4.7). Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.12). Xxxxxxxx xxxxx 15 minut, xxxxx xxxxx xxxxxxx xX xx 8,1 xx 8,2 xxxx (xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxxx (4.7) x xxxxx 10 xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx (5.4) xxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx směs x dekantujte xxxxxxx.
7.2. Xxxxxxxxxx (tento krok xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx, premixů x xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxxxxx 110 xx xxxxxxxx x 11 g xxxxxxxxxxxx xxxxxx (4.9), xxxxx xxxxx minutu xxx xxxxxxx xxxxxxxxx (5.4) při xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx kationtový xxxxx odstředěním xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx 100 xx extraktu xx 150 ml xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxxxxx xxxxxx 12 až 15 xxxxx xxx 4 °X. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx roztok xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxx xx skelné xxxx (4.11) xx xxxxxxxx konce skleněné xxxxxxx (5.1), vlijte xx xxxxxxx 5 xx xxxxxxxxxxx xxxxxx (4.10) a promyjte xxxxxx 100 xx 80 % methanolu (4.6). S použitím xxxxxxx (5.2), přeneste xx xxxxxx xxxxxxx 100 xx xxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxxx, xx obsahuje 16 μx xxxxxxxxxxxxxxxx (200 ml xx 30 x vzorku xxxxxx xxx 1 xxx). Xxx xx xx nutné, xxxxxx xxxxxxx před aplikací xx xxxxxx 80 % methanolem (4.6), xxxxxx xxxxxxxx očekávaný xxxxx flavofosfolipolu 16 μx/100 ml. Xxxxxx xxxxxxx na xxx 2 xx/xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Jímejte 50 xx 80 % xxxxxxxxx (4.6) x xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.8) xxx xxxxxxx xxx 2 xx/xxxxxx. Xxxxxxx 50 xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, přidejte 30 xx xxxx x promíchejte. Xxxxx xxxxxx xx xxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx 0,2 μg/ml (= X8).
7.3. Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xx xx xxxxx (xx. když bylo xxxxxxxx xxxxxxxxxxx), xxxxxx xxxxxxx získaný v xxxx 7.1.1 50 % xxxxxxxxxx (4.5), xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx 0,2 μx/xx (= U8).
Z xxxxxxx X8 připravte xxxxxx X4 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,1 μx/xx), X2 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,05 μg/ml) a X1 (očekávaný xxxxx: 0,025 μx/xx) x xxxxxxxx postupného ředění (1 + 1) 50 % xxxxxxxxxx (4.5).
8. ZKUŠEBNÍ XXXXXX
8.1. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx médium (4.2.2) xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.2) xxx xxx 50 °X. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx miskách se xxxxxxxxx xxxxxx (4.2.2) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx inhibiční zóny x různými xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (asi 30 xx/xxxx).
8.2. Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx xx agaru je xxxxxxxxx x xxxxxxx xx použití čtyřech xxxxxxxxxxx standardního xxxxxxx (X8, S4, X2, X1) x čtyřech xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoku (X8, X4, U2, X1). Tyto xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx plotny. Xxx xxxxx účel xxxxxxx xxxxxx, které xxxx xxxxxxxxxx velké, xxx xxxxxxxx xxxxxx v xxxxx nejméně 8 xxxxxx o xxxxxxx 10 až 13 xx x xxxxxxx 30 xx xxxx xxxxxx xxxxxx. Pokus xxxx být xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx vybavených dokonale xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx rámem 200 xx x xxxxxxx x 20 mm xxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx média (4.2.1), xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx 1,5 xx xxxxxx (45 xx xx xxxxx x xxxxxxx 200 mm). Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (4.2.2) xxxxxxxxxxxx xxxx v xxxx 8.1, aby xxxxxxxxx xxxxxx 1 mm xxxxxx (30 xx xx xxxxx x xxxxxxx 200 xx). Xxxxxxxx xxxxx ustát x xxxxxxxxxx pozici, xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 ml xx díru, xxxxx xxxxxxx).
Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx čtyřikrát xxx, xx každému xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx 32 xxxxxxxxxxx zón.
8.3. Inkubace
Inkubujte xxxxxx 16 až 18 xxxxx xxx 28 xx 30 °X.
9. XXXXXXXXXXX
Xxxxxx průměr xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxxxx xx 0,1 xx. Xxxxxxxxxxxx střední xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, znázorňujíc xxxxxxxxxx koncentrací xx xxxxxx k xxxxxxxx xxxxxxxxxxx zón. Narýsujte xxxxxxxxxxxx křivky xxxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xx xx uvedeno xxxx.
Xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" bod xxx xxxxxxxx úroveň xxxxxxxxx (XX) s xxxxxxxx xxxxxxx:
(x) XX = 7 X1 + 4 X2 + X4 - 2 X8 / 10
(x) XX = 7 X8 + 4 X4 + X2 - 2 S1 / 10
Xxxxxxx vypočtěte "xxxxxxxxxxxx" xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxx extraktu (XX) xxxxxxxxxx X1, U2, X4 x U8 xx X1, X2, X4 a X8 xx výše uvedených xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx hodnoty XX x XX xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxxx xx, abyste xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" křivku xxx xxxxxx xxxxxxxxx. Podobně xxxxxxxxxxxx XX x XX x xxxxxx xx, abyste xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx xxx xxxxxxx.
X xxxxxxxxxxxxx jakýchkoli xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxx paralelní. Xxx xxxxxxxxx účely xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx paralelní, xxxxx xx xxxxxxx (XX-XX) a (XX-XX) xxxxxx x xxxx xxx 10 % xx jejich xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxx křivky xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxx pominuto xxx U1 x X1 xxxx X8 x X8 x XX, XX, XX x XX vypočteny xx použití xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, které xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx "nejvhodnější" xxxxxx:
x´) XX = 5 X1 + 2 X2 - X4 / 6 xxxx 5 X2 + 2 X4 - X8 / 6
b´) XX = 5 X4 + 2 X2 - X1 / 6 xxxx 5 X8 + 2 S4 - X2 / 6
x xxxxxxx xxx UL x XX. Alternativní xxxxxxxxxxxx křivky xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxxx, musí xxx xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx považovány za xxxxxxxxx, xxxxxxxxx logaritmus xxxxxxxxx aktivity (log. X) xxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxx úrovně
(c) xxx X = (X1 + X2 + X4 + U8 - X1 - X2 - S4 - X8) × 0,602 / U4 + X8 + X4 + X8 - X1 - X2 - S1 - X2
Xxx xxx xxxxxx
(x) xxx X = (X1 + X2 + X4 - X1 - X2 - X4) × 0,401 / X4 + X4 - X1 - X1
xxxx
x´) xxx A = (X2 + X4 + U8 - S2 - X4 - X8) × 0,401 / X8 + X8 - U2 - X2
Xxxxxxxx xxxxxxxx = xxxxxxxxxxxxx aktivita x xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx považovány za xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx stanovení. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx docílena, vypočítejte xxxxxxxxxx relativní aktivity (xxx. X) xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x). Nicméně, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx považován za xxxxxxxxx x xxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx hlášení.
10. XXXXXXXXXXXXXX
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx vzorku xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
0,5 mg/kg x xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx 1 xx 2 xx/xx;
25 % xxx. x xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxx 2 do10 xx/xx;
20 % xxx. x xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxx 10 xx 25 xx/xx;
5 xx/xx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxx obsahy xxxxx xxx 25 xx 50 xx/xx;
10 % xxx. x vyšší xxxxxxx xxx obsahy xxx 50 xx/xx.
3. XXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXX XXXXXX, XXXX, XXXXXXX X XXXXX
1. XXXX X ROZSAH
Tato xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx, xxxxxx a xxxxx x krmivech. Dolní xxxx xxxxxxxxx jsou:
železo (Xx): 20 xx/xx
xxx (Xx): 10 mg/kg
mangan (Xx): 20 xx/xx
xxxxx (Xx): 20 mg/kg
2. XXXXXXX
Xxxxxx je xxxxxxxx xx roztoku kyselinou xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx. Prvky xxxxxx, xxx, xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXXX
Xxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx používejte xxxx, u xxxxx xxxx stanoveno, že xx xxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxx dvounásobnou xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx ionexu.
Chemikálie xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx kvality (x.x.). Xxxxxxxxxxxx prvků, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxx xxx kontrolována xxxxxx xxxxxxx. Pokud xx xx xxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx standardních xxxxxxx xxxxxxxxx níže, xxxxx být xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoky xx předpokladu, že xxxx xxxxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
3.1. Xxxxxxxx chlorovodíková x.x. (x: 1,19).
3.2. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx p.a. (6 X).
3.3. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x.x. (0,5 X).
3.4. Kyselina xxxxxxxxxxxxxx 38 xx 40 % (xxxxxxxxxx) xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxx 1 xx Xx/xxxx x zbytek xx xxxxxxxx xxxxx xxx 10 xx (xxxx xxxxxx)/xxxx.
3.5. Xxxxxxxx xxxxxx x.x. (d: 1,84).
3.6. Xxxxxxx vodíku x.x. (xxxxxxxxx 100 xxxxxx xxxxxxx (30 % xxxxxxxxxx)).
3.7. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx (1000 μx Xx/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: xxxxxxxxx 1 x xxxxxxxxx xxxxx x.x. ve 200 xx 6 N xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2), xxxxxxxx 16 ml xxxxxxxx xxxxxx (3.6) x xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
3.7.1. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx (100 μx Xx/xx) připravený zředěním xxxxxxxxxxxx roztoku (3.7) 1 + 9 xxxxx.
3.8. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx (1000 μx Xx/xx) připravený xxxxxxxxxx: xxxxxxxxx 1 x xxxx v xxxxxxxx xxxxx (p.a.) xx 25 xx 6 X xxxxxxxx chlorovodíkové (3.2), xxxxxxxx 5 xx peroxidu xxxxxx (3.6) x xxxxxxx xx xxxxxxx litru xxxxx.
3.8.1. Pracovní standardní xxxxxx xxxx (10 μx Xx/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.8) 1 + 9 xxxxx x xxxxx xxxxxxxx výsledného xxxxxxx 1 + 9 vodou.
3.9. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (1000 μx Xx/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: xxxxxxxxx 1 x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx (x.x.) xx 25 ml 6 X kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (3.2), xxxxxxxx 5 xx peroxidu xxxxxx (3.6) x xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
3.9.1. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (10 μx Xx/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.9) 1 + 9 xxxxx x potom xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 1 + 9 xxxxx.
3.10. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (1000 μg Xx/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: xxxxxxxxx 1 x zinku xx xxxxx pásku xxxx xxxxxx (p.a.) xx 25 ml 6 N xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2) a xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
3.10.1. Pracovní xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (10 μx Xx/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) 1 + 9 xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoku 1 + 9 vodou.
3.11. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: xxxxxxxxx 12 g kysličníku xxxxxxxxxxxx xx 150 xx vody, xxxxxxxx 100 xx 6 X xxxxxxxx chlorovodíkové (3.2) a xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
4. PŘÍSTROJE
4.1. Muflová xxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
4.2. Xxxxxxxx nádobí musí xxx rezistentního xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx přístroje, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx stanovení xxxxxxxxx xxxxx.
4.3. Xxxxxxxxx xxxxxxx x (volitelně) xxxxxxxx xxxxxxx.
4.4. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, co xx týče citlivosti x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx rozsahu.
5. XXXXXX
5.1. Xxxxxx obsahující organickou xxxxx
5.1.1. Xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx [9]
i) Vložte 5 až 10 x xxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx na 0,2 xx, xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.3) (xxx xxxxxxxx x)), xxxxxxx x sušárně při 105 °X x xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx muflové xxxx (4.1). Xxxxxxx pec (xxx poznámka x)) x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx 470 xx 475 °X xx asi 90 xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx 4 až 16 xxxxx (xxxx. xxxx xxx), aby xx odstranil uhlíkatý xxxxxxxx x potom xxxxxxxx xxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxx xxxxxxxx x)).
Xxxxxxx kelímek xxxxxx xxx 5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.1) a xxxxxxxx xxxxxxxx pomalu x xxxxxxx do xxxxxxx (xxxx xxxxxxxxxx prudká xxxxxx xxxx xxxxxx XX2). Přidejte xx xxxxxxx xxxxxxxx chlorovodíkovou (3.1) za xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx přidejte xx xxxxxx 15 xx 6 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2) x xxxxxxxx xxx 120 xx xxxx. Xxxxxxxx skleněnou xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx a zakryjte xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx mírně xx xxxx x udržujte xx xxxx xxxx xxxxx již xxxx xxxxx nerozpuštěný xxxxx. Xxxxxxxxxxxx přes xxxxxxxxx xxxxx bez xxxxxx xxxxxx x jímejte xx 250 xx xxxxxxx baňky. Xxxxxxx x filtr vymyjte 5 xx xxxxx 6 N xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2) x xxxxxxx vroucí xxxxx. Xxxxxxx odměrnou baňku xx xxxxxx vodou (xxxxxxxxxxx HCl xxx 0,5 X).
xx) Xxxxx xx xxxxxx na xxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxx), xxxxx xxx xxxx xx pece x xxxxxxx xxxxx xxx 450 xx 475 °C. Xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx (xxx xxx xx xxx hodin), je xxxxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxx nebo xxxxx bílý. Xxxxxxxxx xxxxxx asi 2 xx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (3.1), odpařte xx xxxxx a xxxxxxxx 5 ml 6 X xxxxxxxx chlorovodíkové (3.2). Zahřejte, přefiltrujte xxxxxx xx odměrné xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx XXx xxx 0,5 N).
Poznámky:
a) Při xxxxxxxxx stopových prvků xx důležité xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxx x xxxxxxx. X xxxxxx důvodu xxxx být vybavení xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxx těchto xxxx.
Xx xxxxxxx obecného xxxxxx xxxxxxxxxxx, pracujte x xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx mnoho xxxx kontaminace, např. x nádobí, xxxxxxxxxx, xxxxxx, xxx.
x) Váha xxxxxx, xxxxx má xxx xxxxx, xx xxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxx stopového xxxxx x xxxxxx xx xxxxxx x citlivosti xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx. U xxxxxxxx krmiv s xxxxxx xxxxxxx stopových xxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxx x 10 až 20 x vzorku x xxxxxxx xxxxxxx roztok xx pouze 100 xx.
x) Žíhání musí xxx prováděno v xxxxxxx xxxx bez xxxxxxx vzduchu nebo xxxxxxx.
x) Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx nesmí xxxxxxxxx 475 °C.
5.1.2. Spektrofotometrické xxxxxxxxx
5.1.2.1. Příprava kalibračních xxxxxxx
Xxx každý xxxxx, xxxxx xx být xxxxxxxx, připravte z xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxxxxx xxx bodů 3.7.1, 3.8.1, 3.9.1 x 3.10.1 xxxx xxxxxxxxxxxx roztoků, každý xxxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxx XXX okolo 0,5 X a (x případě železa, xxxxxxx a zinku) xxxxxxxxxxx xxxxxxxx lanthanitého xxxxxxxxxxxx 0,1 % Xx (hmotnostně-objemových). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx použitého xxxxxxxxxxxxxxxx. Tabulky xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx řad xxxxxxxxxxxx xxxxxxx; x xxxxxxxxxx na xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx nutno vybrat xxxxx koncentrace.
Železo
|
μg Xx/xx |
0 |
0,5 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
|
xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.7.1) (1 xx = 100 μx Xx) |
0 |
0,5 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
|
+ xx 6 X HCl (3.2) |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
|
+ 10 xx xxxxxxx xxxxxxxx lanthanitého (3.11) x doplnit do 100 xx xxxxx. |
|||||||
Xxx
|
μx Xx/xx |
0 |
0,1 |
0,2 |
0,4 |
0,6 |
0,8 |
1,0 |
|
xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.8.1) (1 xx = 10 μx Xx) |
0 |
1 |
2 |
4 |
6 |
8 |
10 |
|
+ ml 6 N XXx (3.2) |
8 |
8 |
8 |
8 |
8 |
8 |
8 |
|
Xxxxxxx xx 100 xx xxxxx. |
|||||||
Xxxxxx
|
μx Xx/xx |
0 |
0,1 |
0,2 |
0,4 |
0,6 |
0,8 |
1,0 |
|
xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.9.1) (1 xx = 10 μx Xx) |
0 |
1 |
2 |
4 |
6 |
8 |
10 |
|
+ xx 6 X XXx (3.2) |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
|
+ 10 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.11) x doplnit xx 100 ml vodou. |
|||||||
Zinek
|
μg Xx/xx |
0 |
0,05 |
0,1 |
0,2 |
0,4 |
0,6 |
0,8 |
|
xx pracovního xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10.1) (1 xx = 10 μx Xx) |
0 |
0,5 |
1 |
2 |
4 |
6 |
8 |
|
+ xx 6 X XXx (3.2) |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
|
+ 10 xx xxxxxxx chloridu xxxxxxxxxxxx (3.11) a doplnit xx 100 ml xxxxx. |
|||||||
5.1.2.2. Příprava xxxxxxx xxx xxxxxxx
X xxxxxxxxx xxxx xxxx být xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx 5.1.1 xxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Pokud xx nezbytné xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx kalibračních xxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx 100 xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx 0,5 X xxxxxxxxx chlorovodíkovou (3.3).
X xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x zinku xxxxxxxxxxx alikvotní xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.1.1 xx 100 ml odměrné xxxxx, xxxxxxxx 10 xx chloridu xxxxxxxxxxxx (3.11) x doplňte xx xxxxxx 0,5 X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (3.3) (viz xxxxxx xxx 8 xxxxxxxx).
5.1.2.3. Xxxxx xxxxx
Xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx toho, že xx pominut materiál xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx "0" xxxxxx být použit xxxx xxxxx.
5.1.2.4. Xxxxxx xxxxxxx absorpce
Změřte xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx, který xx xxx xxxxxxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx-xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx vlnových délkách:
Fe: 248,3 nm
Cu: 324,8 xx
Xx: 279,5 xx
Xx: 213,8 nm
Proveďte xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
5.2. Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxx neobsahuje xxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx, xxx je to xxxxxxx x bodě 5.1.1 x) xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx x kyselinou xxxxxxxxxxxxxxx xxxx být pominuto.
6. XXXXXXX XXXXXXXX
X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx vypočtěte xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx x miligramech xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxxxx xxxxxx (xxx).
7. XXXXXXXXXXXXXX
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx analytikem xxxxx xxxxxxxxx:
- 5 xx/xx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx 50 xx/xx,
- 10 % z xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx 50 xx 100 xx/xx,
- 10 xx/xx, v xxxxxxxxx xxxxxxx x obsahů xxxxxxxxxxx stopového xxxxx xx 100 do 200 mg/kg,
- 5 % x vyššího xxxxxxxx u xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 200 xx/xx.
8. XXXXXXXX
Xxxxxxxxxx velkých xxxxxxxx xxxxxxx může xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx přidáním xxxxxxx xxxxxxxx lanthanitého (3.11). Xxxxxxx, pokud je xxxxxx xxxxx xx xxxxxx Xx + Xx / X · 2, může xxx přídavek roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.11) xx roztoku xxx xxxxxxx x xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
[1] 1 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx je xxxxxxxxxxxx 42 xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (x.x.).
[2] Xxxx metody xxxxx být xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxx stanoveno, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
[3] Xxxx být xxxxxxx jakékoli xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a dávající xxxxxx xxxxxxxx.
[4] Xxxx xxx použito xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx médium xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx stejné xxxxxxxx.
[5] Xxxx xxxxxx xxxxx xxx použity za xxxxxxxxxxx, že bylo xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx suspenze.
[6] Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x dávající stejné xxxxxxxx, xxxx. xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx 1 (XX 327) x xxxxxxxxx oxoid xxxxx x. 3 (X 13).
[7] Xxxx být xxxxxxx xxxxxxxx komerční xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxx. xxxxx antibiotické médium 2 (XX 335) x přídavkem oxoid xxxxx č. 3 (X 13).
[8] Např. XX 2 od Xxxxxx Chemie Xxxx, Xxxxxxx.
[9] Xxxxxx xxxxxxx (xxxxxxx nebo xxxxx) xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx zadržovat xxxxxxx xxxxx x xxxx xxx xxxxxxxxx. X vzorků xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx 5.1.1 x) xx po filtraci. Xxxxxxx filtrační papír xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zbytek xxxxxxx vroucí xxxxx x xxxxxx xxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.3). Spalte v xxxxxxx xxxx (4.1) xxx teplotě xxx 550 °X, dokud xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, přidejte několik xxxxx xxxx a xxxxxxxx 10 až 15 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.4) a xxxxxxx xx xxxxx xxx xxx 150 °X. Xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx zbytek, xxxxxxxxx xxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx fluorovodíkové (3.4) x xxxxxxx xx xxxxx. Přidejte pět xxxxx xxxxxxxx sírové (3.5) x zahřívejte xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx bílý xxxx. Xx xxxxxxx 5 xx 6 N xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2) x asi 30 xx xxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx do 250 xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx XXX xxx 0,5 N). Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx 5.1.3.