Osmá xxxxxxxx Xxxxxx
xx xxx 15. xxxxxx 1978,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Společenství xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx
(78/633/XXX)
XXXXXX EVROPSKÝCH SPOLEČENSTVÍ,
s xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Evropského xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx směrnici Rady 70/373/XXX ze xxx 20. xxxxxxxx 1970 x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx metod Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx, x zejména xx xxxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxx, že xxxxxxxx xxxxxxx, aby byla xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x použitím xxxxx xxxxxx vzorků x xxxxxxxxxxxx metod Xxxxxxxxxxxx pro xxxxx xxxxxxxx souladu xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx předpisy týkajícím xx xxxxxxx x xxxxxxx krmiv;
vzhledem x xxxx, xx směrnice xxxxxx 71/250/EHS xx xxx 15. xxxxxx 1971 [2], 71/393/EHS xx dne 18. xxxxxxxxx 1971 [3], 72/199/XXX ze dne 27. xxxxx 1972 [4], 73/46/XXX ze xxx 5. xxxxxxxx 1972 [5], 74/203/XXX xx xxx 25. xxxxxx 1974 [6], 75/84/XXX xx dne 20. xxxxxxxx 1974 [7] x 76/372/XXX xx xxx 1. xxxxxx 1976 [8] xxx ustanovily určitý xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx; xx xxxxxx x práci od xx xxxx xxxx xxxxxxx přijmout osmou xxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx x souladu xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx,
XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
1. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx krmiv, xx xx týče xxxxxx obsahů xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx, mědi, xxxxxxx x xxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx popsanými x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
2. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x části 1 "Xxxx" přílohy xxxxx xxxxxxxx 71/250/XXX, xx x xxxxxxxx xxxxx týkající xx xxxxxxxx xxxxxx, jež xx xxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xx xxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 2
Xxxxxxx xxxxx xxxxxx 1. xxxxx 1979 v účinnost xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx nezbytné xxx xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxx směrnicí. Neprodleně x xxxx xxxxxxx Xxxxxx.
Xxxxxx 3
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
V Xxxxxxx xxx 15. xxxxxx 1978.
Xx Xxxxxx
Xxxx Xxxxxxxxx
xxxxxxxxxxxxx
[1] Úř. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Xx. věst. X 155, 12.7.1971, x. 13.
[3] Xx. xxxx. X 279, 20.12.1971, x. 7.
[4] Xx. xxxx. X 123, 29.5.1972, x. 6.
[5] Xx. xxxx. X 83, 30.3.1973, x. 21.
[6] Xx. věst. X 108, 22.4.1974, x. 7.
[7] Úř. věst. X 32, 5.2.1975, x. 26.
[8] Úř. věst. X 102, 15.4.1976, x. 8.
PŘÍLOHA
1. STANOVENÍ XXXXXXXXXXXXXXX XXXXXX NA XXXXX
1. XXXX A XXXXXX
Xxxx xxxxxx xx určena xxx xxxxxxxxx zinkbacitracinu x xxxxxxxx, koncentrátech x xxxxxxxxx. Dolní xxx xxxxxxxxx xx 5 xx/xx (5 xxx) [1]. Xxxxxx xxxx použitelná x xxxxxxxxxxx ovlivňujících látek, xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
2. XXXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxxxx při xX 2 směsí methanol/voda/kyselina xxxxxxxxxxxxxx. Extrakt xx xxxxxxx xx pH 6,5, xxxxxxxxxxxx (pokud xx xx xxxxx) x xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx mikroorganizmem Micrococcus xxxxxx (Syn. M. xxxxxx). Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx inhibičních xxx xxxxxxxxxxxxxx. Průměr xxxxxx xxx xx xxxxx úměrný xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx koncentrace xxx xxxxxx použitých xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3. MIKROORGANISMUS: XXXXXXXXXXX XXXXXX XXXX 10240
3.1. Xxxxxxxxx xxxxxxx kultury
Naočkujte Xxxxxxxxxxx xxxxxx do xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx (4.1). Xxxxxxxxx 24 xxxxx xxx 30 xx 37 °X, skladujte v xxxxxxxxxx xxx 4 °X a znovu xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xx šikmý xxxx.
3.2. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx [2]
Xxxxxx xxxxxxxx xx zkumavky se xxxxxx xxxxxx (3.1) xx xxxxxxx 2 xx 3 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3). Tuto xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx 250 xx kultivačního xxxxx (4.1) x Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx 18 xx 20 xxxxx xxx 30 xx 37 °X. Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 25 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3) a xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx roztokem xxxxxxxx xxxxxxx (4.3). Xxxxxxxx xxxxxxxxx suspenze xxxx xxx xxxxx 75 %, xxxxxx xxx 650 xx x 1 xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3).
4. XXXXXXXXXX XXXXX X XXXXXXXXXX
4.1. Xxxxxxxxxx půda [3]
|
Xxxxxx x xxxx |
6,0 x |
|
Xxxxxxx |
4,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxxxxx |
3,0 g |
|
Extrakt z xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxx |
1,0 g |
|
Agar |
15,0 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
xX 6,5 xx 6,6 (xx xxxxxxxxxxx) |
|
|
4.2. Xxxxxxxx xxxx [4] |
|
|
Xxxxxxx |
10,0 g |
|
Extrakt x xxxxxxx |
3,0 g |
|
Extrakt x xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
20,0 x |
|
Xxxxx 80 |
1 xx |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
xX 6,5 (xx xxxxxxxxxxx) |
|
4.3. Roztok xxxxxxxx xxxxxxx 0,8 % (xxxxxx-xxxxxxxxxx): xxxxxxxxx 8 x chloridu sodného x.x. xx vodě x xxxxxx xx 1000 xx; xxxxxxxxxxxx.
4.4. Xxxx čistého methanolu/vody/kyseliny xxxxxxxxxxxxxx x.x. (x: 1,18 xx 1,19): 80/17,5/2,5 (xxxxxxxx).
4.5. Fosfátový xxxx, xX 6,5
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx draselný K2HPO4 x.x. (22,15 g).
Dihydrogen xxxxxxxxxxx xxxxxxxx K2HPO4 x.x (27,85 x).
Xxxx xx 1000 xx.
4.6. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x.x. (x: 1,18 až 1,19).
4.7. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x.x. (0,1 N).
4.8. X roztok xxxxxxxxx xxxxxxx p.a.
4.9. Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx 0,04 % (xxxxxx-xxxxxxxxxx): xxxxxxxxx 0,1 x bromokresolové xxxxxxx x 18,5 xx 0,01 X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx 250 xx x promíchejte.
4.10. Xxxxxxxxxx xxxxx: zinkbacitracin o xxxxx xxxxxxxx (x x.x.).
5. STANDARDNÍ XXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxx standardního zinkbacitracinu (4.10) xxxxxxxxxxxx 1050 x.x. (podle xxxxxxx xxxxxxxx). Xxxxxxxx 5 xx 0,1 N xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (4.7) x xxxxxxxx xxxxx 15 minut. Xxxxxxxx 30 xx vody, xxxxxxx xX xx 4,5 xxxxxxxxxx xxxxxx xX 6,5 (4.5) (xxxxx 4 xx), xxxxxxx vodou do xxxxxx 50 xx x xxxxx xxxxxxxxxxx (1 xx = 21 x.x.).
X xxxxxx xxxxxxx připravte postupným xxxxxxx fosfátovým xxxxxx xX 6,5 (4.5) xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
|
X8 |
0,42 |
x.x./xx |
|
X4 |
0,21 |
x.x./xx |
|
X2 |
0,105 |
x.x./xx |
|
X1 |
0,0525 |
x.x./xx |
6. PŘÍPRAVA XXXXXXXX
6.1. Xxxxxxxx
6.1.1. Xxxxxxxxxxx, xxxxxxx x minerální xxxxxx
Xxxxxxx množství vzorku 2,0 až 5,0 x, xxxxxxxx 30 xx xxxxx (4.4) x krátce protřepejte. Xxxxxxxxxxxx, že xx xX xxxxx 2. Xxxxxxxx 10 xxxxx, xxxxxxxx 30 ml xxxxxxxxxxx xxxxx pH 6,5 (4.5) a xxxxxxxx 15 xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx pufrem (4.5), xxxxxx obdrželi xxxxxxxxx xxxxx zinkbacitracinu 0,42 i.u./ml) (= X8).
6.1.2. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx vzorku 10,0 x, xxxxxxxx 50 xx směsi (4.4) x xxxxxx protřepejte. Xxxxxxxxxxxx, xx xx xX xxxxx 2. Xxxxxxxx 10 xxxxx, xxxxxxxx 50 xx xxxxxxxxxxx xxxxx xX 6,5 (4.5) x xxxxxxxx 15 xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5), abyste xxxxxxxx xxxxxxxxx obsah xxxxxxxxxxxxxxx 0,42 i.u./ml) (= X8).
6.1.3. Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx 10,0 g xxxxxx (20,0 g xxx očekávaný xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx 5 mg/kg), xxxxxxxx 25 xx xxxxx (4.4) x xxxxxxxxxxxxx xxx 10 xxxxx. Přidejte 25 xx xxxxxxxxxxx xxxxx xX 6,5 (4.5), xxxxxxxx 15 xxxxx x odstřeďte. Xxxxxxxx 20 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x upravte xX xx 6,5 x xxxxxxxx 1 X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.8) s xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.9) jako xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx 4 xx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx nepřesahující 35 °X. Zřeďte xxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx obsah xxxxxxxxxxxxxxx 0,42 x.x./xx (= X8).
6.2. Xxxxxxxx xxxxxxx
X xxxxxxx U8 xxxxxxxxx xxxxxx U4 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,21 i.u./ml), X2 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,105 i.u./ml) x X1 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,0525 x.x./xx) x xxxxxxxx postupného xxxxxx (1 + 1) xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5).
7. XXXXXXXX POSTUP
7.1. Očkování xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.2) xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.2) xxx xxx 50 °C. Xxxxxxxxxxx pokusy xx xxxxxxx se zkušebním xxxxxx (4.2) xxxxxxxx xxxxxxxx požadované bakteriální xxxxxxxx, xxxxx poskytne xxxxxxxx a nejjasnější xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx zinkbacitracinu.
7.2. Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx xx xxxxx je prováděna x xxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (X8, X4, S2, S1) x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoku (U8, X4, X2, X1). Xxxx xxxxx koncentrace xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxx vyberte plotny, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx umožnily xxxxxx x xxxxx xxxxxxx 8 xxxxxx x xxxxxxx 10 xx 13 xx x nejméně 30 xx mezi xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxx, 200 xx x xxxxxxx x 20 mm xxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx (4.2), naočkovaného xxxx x xxxx 7.1, aby vytvořilo xxxxxx xxx 2 xx silnou (50 xx xx misku x xxxxxxx 200 xx). Xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xx xxxx xxxxxx odměřené xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 xx xx xxxx, xxxxx xxxxxxx).
Xxxxxx koncentraci xxxxxxxx xxxxxxx čtyřikrát xxx, xx xxxxxxx stanovení xxxxxxx vyhodnocení 32 xxxxxxxxxxx zón.
7.3. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx 16 xx 18 hodin xxx 28 xx 30 °X.
8. VYHODNOCENÍ
Změřte xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxxxx xx 0,1 xx. Zaznamenejte xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, znázorňujíc xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx k xxxxxxxx xxxxxxxxxxx zón. Narýsujte xxxxxxxxxxxx křivky xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x extraktu, xxxxxxxxx jako je xx xxxxxxx níže.
Stanovte "xxxxxxxxxxxx" bod pro xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (XX) s použitím xxxxxxx:
(x) XX = 7 X1 + 4 X2 + X4 - 2 X8 / 10
Stanovte "xxxxxxxxxxxx" xxx pro xxxxxxxx úroveň xxxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxxx:
(x) XX = 7 X8 + 4 S4 + X2 - 2 X1 / 10
Xxxxxxx xxxxxxxxx "nejvhodnější" xxxx xxx xxxxxxxx úroveň xxxxxxxx (UL) x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (XX) xxxxxxxxxx X1, X2, X4 a X8 xx X1, X2, S4 x X8 x nahoře xxxxxxxxx rovnicích.
Zaznamenejte xxxxxxxxxx xxxxxxx SL x XX xx stejný xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xx, xxxxxx xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" křivku xxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxx zaznamenejte UL x XX x xxxxxx je, xxxxxx xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx xxx xxxxxxx.
X xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx být xxxxxx xxxxxxxxx. Pro praktické xxxxx mohou xxx xxxxxx považovány za xxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx (SH-SL) a (XX-XX) xxxxxx x xxxx než 10 % od jejich xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxx X1 x S1 nebo X8 a X8 x XX, XX, XX x UH xxxxxxxxx za použití xxxxxxxxxxxxxx rovnic, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx "nejvhodnější" xxxxxx:
x´) XX = 5 X1 + 2 S2 - X4 / 6 xxxx 5 X2 + 2 X4 - X8 / 6
x´) SH = 5 X4 + 2 X2 - X1 / 6 xxxx 5 X8 + 2 X4 - X2 / 6
x xxxxxxx xxx XX x XX. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Skutečnost, xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxx úrovní, xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx paralelní, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx aktivity (xxx. X) xxxxxx xxxxx x následujících xxxxxx.
Xxx xxxxx úrovně
(c) xxx A = (X1 + X2 + X4 + X8 - S1 - S2 - X4 - S8) × 0,602 / X4 + X8 + X4 + X8 - U1 - X2 - X1 - X2
Xxx xxx xxxxxx
(x) xxx X = (U1 + X2 + X4 - S1 - S2 - X4) × 0,401 / U4 + X4 - X1 - X1
xxxx
x´) xxx X = (U2 + U4 + X8 - X2 - X4 - X8) × 0,401 / U8 + X8 - X2 - X2
Xxxxxxxx xxxxxxxx = předpokládaná aktivita x xxxxxxxxx aktivita.
Když xxxx xxxxxx považovány xx neparalelní, opakujte xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx docílena, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx. A) xxxxxx xxxxxxx x). Xxxxxxx, obdržený výsledek xxxx být považován xx xxxxxxxxx x xxxx musí být xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx.
9. XXXXXXXXXXXXXX
Xxxxxx mezi xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx u stejného xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
20 % xxx. x xxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx od 5 x do 25 xx/xx;
5 xx/xx x xxxxxxxxx hodnotě xxx xxxxxx větší než 25 x xx 50 xx/xx;
10 % xxx. x xxxxx xxxxxxx xxx obsahy xxx 50 mg/kg.
2. XXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXXX DIFÚZÍ XX XXXXX
1. XXXX X XXXXXX
Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx xx 1 xx/xx (1 xxx).
2. XXXXXXX
Xxxxxx xx extrahován xxxxxxxx xxxxxxxxxx za xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx (xxx xx to xxxxx) xx ionexu x xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx difúze xxxxxxxxxxxxxxxx xx agaru xxxxxxxxxxx mikroorganizmem Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Difúze se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx mikroorganizmu. Průměr xxxxxx xxx xx xxxxx úměrný logaritmu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxx antibiotických xxxxxxxxxxx.
3. MIKROORGANISMUS: XXXXXXXXXXXXXX XXXXXX XXXX 6538 X
3.1. Xxxxxxxxx zásobní xxxxxxx
Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx agarem (4.1). Xxxxxxxxx 24 xxxxx xxx 37 °X, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 4 °C x znovu přeočkujte xxxxx xxxxx na xxxxx xxxx.
3.2. Příprava xxxxxxxxxxx xxxxxxxx [5]
Oddělte xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (3.1) x týdně ji xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx 24 xxxxx xxx 37 °X x xxxxxxxxx x chladničce xxx xxx 4 °X.
24 xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx kulturou xxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1). Xxxxxxxxx 16 xx 18 hodin xxx 37 °X. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3). Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx musí být xxxxx 40 %, xxxxxx při 578 xx x 1 xx kyvetě xxxxx xxxxxxx chloridu xxxxxxx (4.3).
4. XXXXXXXXXX XXXXX X CHEMIKÁLIE
4.1. Kultivační xxxxxx [6]
|
Xxxxxx z xxxx |
6,0 x |
|
Xxxxxxx |
4,0 x |
|
Xxxxxxx x kvasnic |
3,0 x |
|
Xxxxxxx x masa |
1,5 x |
|
Xxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
15,0 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
xX 6,5 (po xxxxxxxxxxx) |
|
|
4.2. Xxxxxxxx xxxxxx |
|
|
4.2.1. Xxxxxxxx xxxxxx [7] |
|
|
Pepton z xxxx |
6,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxxxxx |
3,0 g |
|
Extrakt x xxxx |
1,5 x |
|
Xxxx |
10,0 g |
|
Voda |
1000 xx |
|
xX 6,5 (xx xxxxxxxxxxx) |
|
4.2.2. Xxxxxxxx vrstva
Jako x bodě 4.1, x přídavkem 2,0 x silikonové protipěnící xxxxxx [8].
4.3. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 0,4 % (xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx): xxxxxxxxx 4 x xxxxxxxx xxxxxxx x.x. xx xxxx x zřeďte xx 1000 xx; xxxxxxxxxxxx.
4.4. Methanol, xxxxx.
4.5. Xxxxxxxx 50 % (xxxxxxxxxx): xxxxxx 500 xx xxxxxxxxx (4.4) 500 xx vody.
4.6. Xxxxxxxx 80 % (xxxxxxxxxx): xxxxxx 800 xx methanolu (4.4) 200 xx xxxx.
4.7. Xxxx (xxxxxxxxxxxx) aminometan x.x.
4.8. Xxxxxxxxxxx roztok xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1,5 % (váhově-objemových): rozpusťte 1,5 x xxxxxxxx xxxxxxxxxx p.a. xx 20 xx vody, xxxxxxx methanolem (4.4) xx objemu 100 xx.
4.9. Xxxxxxxxxx xxxxx: Xxxxx 50 Xx8, 20 xx 50 xxxx, Na xxxxx (xxx. Xxxxx x. 41600) xxxx xxxxxxxxxx.
4.10. Xxxxxxxxx měnič: Xxxxx 1x2, 50 xx 100 xxxx, Xx xxxxx (xxx. Xxxxx x. 41010) xxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx 12 až 14 hodin x 80 % xxxxxxxxx (4.6).
4.11. Xxxxxx xxxx.
4.12. xX xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xX 6,06 xx 8.1).
4.13. Xxxxxxxx askorbová.
4.14. Xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx x známé aktivitě.
5. XXXXXXXXX
5.1. Xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx: 9 xx, xxxxx 150 až 200 xx, vybavené xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx části xxxxxxx xxxxx x skleněným xxxxxxxx (ke xxxxxxx x dávkovací xxxxxxxx (5.2)) x horní xxxxx.
5.2. Xxxxxxxxx xxxxxxx 250 ml, vybavená xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx zábrusem.
5.3. 250 xx kónická baňka xx skleněným zábrusem.
5.4. Xxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx.
6. STANDARDNÍ XXXXXXX
Xxxxxxxxx xxxxxx odvážené xxxxxxxx standardní xxxxx (4.14) v 50 % xxxxxxxxx (4.5) x xxxxxx, abyste xxxxxxxx xxxxxxx roztok xxxxxxxxxx 100 μx xxxxxxxxxxxxxxxx na xxxxxxxx. Xxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxx 4 °X, xx xxxxxxxx xx xxx xxxxxx.
X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 50 % xxxxxxxxxx (4.5) následující xxxxxxx:
|
X8 |
0,2 |
μx/xx |
|
X4 |
0,1 |
μx/xx |
|
X2 |
0,05 |
μx/xx |
|
X1 |
0,025 |
μx/xx |
7. XXXXXXXX EXTRAKTU
7.1. Xxxxxxxx
7.1.1. Koncentráty, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx 2,0 xx 5,0 x, xxxxxxxx asi 150 xx kyseliny askorbové (4.13). Xxxxxxxxxxxxx xx 150 ml 50 % xxxxxxxxx (4.5) x xxxxxxx xxxxx (5.3) x xxxxxxx xX na 8,1 xx 8,2 asi 400 xx xxxx (xxxxxxxxxxxx) aminometanem (4.7). Xxxxxxxxxxxx xX indikačním xxxxxxxx (4.12). Xxxxxxxx xxxxx 15 xxxxx, xxxxx znovu xxxxxxx xX na 8,1 xx 8,2 xxxx (xxxxxxxxxxxx) aminometanem (4.7) x xxxxx 10 xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx (5.4) xxx xxxxxx míchání. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.1.2. Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx 5,0 xx 30,0 x vzorku xxxxxxxxxxxx xxxxxxx 30 μx xxxxxxxxxxxxxxxx. Homogenizujte xx 150 xx 50 % methanolu (4.5) x xxxxxxx xxxxx (5.3) a upravte xX na 8,1 xx 8,2 asi 400 xx xxxx (xxxxxxxxxxxx) aminometanem (4.7). Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.12). Xxxxxxxx xxxxx 15 minut, xxxxx xxxxx upravte xX na 8,1 xx 8,2 tris (xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxxx (4.7) x xxxxx 10 xxxxx pod xxxxxxx xxxxxxxxx (5.4) xxx xxxxxx xxxxxxx. Nechejte xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx směs x xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2. Xxxxxxxxxx (xxxxx xxxx xxxx být xxxxxxx x xxxxxxxxxxx, premixů x xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxxxxx 110 xx xxxxxxxx x 11 x xxxxxxxxxxxx xxxxxx (4.9), xxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx (5.4) xxx stálém xxxxxxx. Xxxxxxx kationtový xxxxx odstředěním nebo xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx 100 xx xxxxxxxx xx 150 xx methanolu (4.4) x skladujte xxxxxx 12 xx 15 hodin xxx 4 °C. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx roztok chladný.
Vložte xxxxx xx xxxxxx xxxx (4.11) do xxxxxxxx xxxxx skleněné xxxxxxx (5.1), xxxxxx xx xxxxxxx 5 xx xxxxxxxxxxx xxxxxx (4.10) a xxxxxxxx xxxxxx 100 ml 80 % xxxxxxxxx (4.6). S xxxxxxxx xxxxxxx (5.2), xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx 100 xx xxxxxxxx, x xxxxxxx se xxxxxxx, xx xxxxxxxx 16 μg xxxxxxxxxxxxxxxx (200 xx xx 30 x vzorku xxxxxx xxx 1 xxx). Xxx xx xx xxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxx aplikací xx xxxxxx 80 % methanolem (4.6), xxxxxx obdrželi očekávaný xxxxx flavofosfolipolu 16 μx/100 xx. Průtok xxxxxxx na xxx 2 xx/xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx 50 xx 80 % xxxxxxxxx (4.6) x xxxxxxxxx výtok.
Eluujte xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx chloridu xxxxxxxxxx (4.8) při xxxxxxx xxx 2 xx/xxxxxx. Xxxxxxx 50 xx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx, přidejte 30 xx xxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx měl xxx xxxxx flavofosfolipolu 0,2 μx/xx (= X8).
7.3. Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xx xx nutné (xx. když xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx), zřeďte xxxxxxx získaný x xxxx 7.1.1 50 % methanolem (4.5), xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx 0,2 μx/xx (= X8).
X xxxxxxx X8 připravte xxxxxx X4 (očekávaný xxxxx: 0,1 μg/ml), X2 (xxxxxxxxx obsah: 0,05 μg/ml) x X1 (očekávaný xxxxx: 0,025 μg/ml) s xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (1 + 1) 50 % methanolem (4.5).
8. ZKUŠEBNÍ XXXXXX
8.1. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.2.2) xxxxxxxxxxx suspenzí (3.2) xxx xxx 50 °X. Xxxxxxxxxxx pokusy xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx médiem (4.2.2) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx největší x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x různými koncentracemi xxxxxxxxxxxxxxxx (asi 30 xx/xxxx).
8.2. Příprava xxxxx
Xxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxx x miskách xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X8, X4, X2, X1) a xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoku (X8, X4, X2, X1). Tyto xxxxx xxxxxxxxxxx extraktu x xxxxxxxxx musí být xxxxxxxx umístěny do xxxxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxxx, aby xxxxxxxx udělat v xxxxx nejméně 8 xxxxxx o xxxxxxx 10 až 13 xx a nejméně 30 xx xxxx xxxxxx středy. Pokus xxxx být xxxxxxxx xx xxxxxxx sestávajících x plochých skleněných xxxxxx vybavených dokonale xxxxxx hliníkovým xxxx xxxxxxxxx rámem 200 xx x xxxxxxx x 20 mm xxxxx.
Xxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxx xxxxx (4.2.1), xxx vytvořilo vrstvu xxx 1,5 xx xxxxxx (45 xx xx misku x xxxxxxx 200 mm). Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx pozici x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (4.2.2) xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxx 8.1, xxx xxxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxx (30 xx xx xxxxx x xxxxxxx 200 xx). Xxxxxxxx xxxxx xxxxx x rovnovážné xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xx nich xxxxxx odměřené xxxxxx xxxxxxxxxx a standardních xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 ml xx díru, xxxxx xxxxxxx).
Xxxxxx koncentraci xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx vyhodnocení 32 xxxxxxxxxxx xxx.
8.3. Inkubace
Inkubujte xxxxxx 16 xx 18 xxxxx xxx 28 xx 30 °X.
9. VYHODNOCENÍ
Změřte průměr xxxxxxxxxxx xxx s xxxxxxxxx xx 0,1 xx. Zaznamenejte střední xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx papíře, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x průměrům xxxxxxxxxxx xxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx standardního xxxxxxx x extraktu, xxxxxxxxx xxxx xx xx xxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxx xxx xxxxxxxx úroveň xxxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxxx:
(x) XX = 7 X1 + 4 X2 + X4 - 2 X8 / 10
(x) XX = 7 X8 + 4 X4 + S2 - 2 X1 / 10
Xxxxxxx vypočtěte "xxxxxxxxxxxx" body xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (XX) xxxxxxxxxx X1, X2, X4 x X8 xx X1, X2, X4 x S8 xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx XX x SH xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xx, xxxxxx xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx xxx xxxxxx standardu. Podobně xxxxxxxxxxxx UL x XX x xxxxxx xx, xxxxxx xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx xxx xxxxxxx.
X nepřítomnosti xxxxxxxxxx xxxxxxxxx by xxxx xxx xxxxxx paralelní. Xxx praktické účely xxxxx být xxxxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxxxx, xxxxx xx hodnoty (XX-XX) a (XX-XX) xxxxxx x xxxx xxx 10 % xx jejich střední xxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx jako neparalelní, xxxx být xxxxxxxx xxx X1 x X1 xxxx U8 x S8 a XX, XX, XX x XX vypočteny xx použití xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx:
x´) XX = 5 X1 + 2 X2 - S4 / 6 xxxx 5 X2 + 2 S4 - X8 / 6
x´) XX = 5 X4 + 2 X2 - X1 / 6 nebo 5 X8 + 2 X4 - X2 / 6
x xxxxxxx pro XX x XX. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx, že byl xxxxxxxx počítán xx xxx xxxxxx, xxxx xxx uvedena v xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxx jsou xxxxxx považovány za xxxxxxxxx, xxxxxxxxx logaritmus xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx. X) xxxxxx jedné x xxxxxxxxxxxxx rovnic.
Pro xxxxx xxxxxx
(x) xxx X = (X1 + X2 + X4 + X8 - S1 - X2 - S4 - X8) × 0,602 / X4 + X8 + X4 + X8 - X1 - X2 - X1 - S2
Pro xxx xxxxxx
(x) xxx X = (U1 + X2 + X4 - X1 - X2 - X4) × 0,401 / X4 + X4 - X1 - X1
xxxx
x´) xxx A = (X2 + X4 + U8 - X2 - X4 - X8) × 0,401 / X8 + S8 - X2 - X2
Xxxxxxxx aktivita = xxxxxxxxxxxxx aktivita x xxxxxxxxx aktivita.
Když xxxx xxxxxx považovány za xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, vypočítejte xxxxxxxxxx relativní xxxxxxxx (xxx. X) xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx c). Xxxxxxx, xxxxxxxx výsledek xxxx xxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxx x toto xxxx být xxxxxxx x závěrečném xxxxxxx.
10. XXXXXXXXXXXXXX
Xxxxxx mezi výsledky xxxx stanovení provedených x xxxxxxxx vzorku xxxxxxx analytikem xxxxx xxxxxxxxx:
0,5 mg/kg x xxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx flavofosfolipolu xx 1 xx 2 xx/xx;
25 % rel. x xxxxx xxxxxxx xxx obsahy xxxxx xxx 2 xx10 xx/xx;
20 % xxx. x vyšší xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxx 10 xx 25 xx/xx;
5 xx/xx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx větší xxx 25 xx 50 xx/xx;
10 % xxx. x xxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxx 50 xx/xx.
3. XXXXXXXXX STOPOVÝCH XXXXX XXXXXX, XXXX, MANGANU X XXXXX
1. XXXX X XXXXXX
Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx stopové xxxxx železo, xxx, xxxxxx x zinek x krmivech. Dolní xxxx stanovení jsou:
železo (Xx): 20 xx/xx
xxx (Xx): 10 xx/xx
xxxxxx (Xx): 20 mg/kg
zinek (Xx): 20 mg/kg
2. XXXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx kyselinou xxxxxxxxxxxxxxx xx destrukci xxxxxxxxx xxxxx, pokud xx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx, xxx, xxxxxx x xxxxx jsou xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx atomovou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXXX
Xxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxxxxxx xxxx, x které xxxx xxxxxxxxx, xx xx bez xxxxxxxx, xxxxxxxx buď xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vody v xxxxxxxxxxxxxxx xxxx křemíkatém xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx kvality (x.x.). Xxxxxxxxxxxx prvků, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxx být kontrolována xxxxxx pokusem. Pokud xx xx xxxxx, xxxx být xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx níže, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx standardní roztoky xx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx byly xxxxxxxxxxxxxxx.
3.1. Xxxxxxxx chlorovodíková x.x. (x: 1,19).
3.2. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx p.a. (6 N).
3.3. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x.x. (0,5 X).
3.4. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx 38 až 40 % (xxxxxxxxxx) xxxxxx xxxxx železa menší xxx 1 xx Xx/xxxx x xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxx 10 xx (xxxx xxxxxx)/xxxx.
3.5. Kyselina xxxxxx x.x. (x: 1,84).
3.6. Xxxxxxx xxxxxx x.x. (xxxxxxxxx 100 xxxxxx xxxxxxx (30 % hmotnostně)).
3.7. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx (1000 μx Xx/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: xxxxxxxxx 1 x xxxxxxxxx xxxxx x.x. xx 200 xx 6 N xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2), xxxxxxxx 16 xx xxxxxxxx xxxxxx (3.6) x xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx vodou.
3.7.1. Xxxxxxxx standardní roztok xxxxxx (100 μx Xx/xx) xxxxxxxxxx zředěním xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.7) 1 + 9 xxxxx.
3.8. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx (1000 μg Xx/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: xxxxxxxxx 1 x xxxx x práškové xxxxx (x.x.) ve 25 ml 6 X kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (3.2), přidejte 5 xx peroxidu xxxxxx (3.6) x xxxxxxx xx jednoho xxxxx xxxxx.
3.8.1. Xxxxxxxx standardní xxxxxx mědi (10 μx Xx/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxxx standardního roztoku (3.8) 1 + 9 vodou x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 1 + 9 xxxxx.
3.9. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (1000 μx Xx/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: xxxxxxxxx 1 x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx (x.x.) xx 25 xx 6 X kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (3.2), přidejte 5 ml peroxidu xxxxxx (3.6) x xxxxxxx do xxxxxxx xxxxx vodou.
3.9.1. Pracovní xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (10 μg Mn/ml) xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.9) 1 + 9 vodou x potom zředěním xxxxxxxxxx roztoku 1 + 9 xxxxx.
3.10. Xxxxxxxxxx roztok xxxxx (1000 μg Xx/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: xxxxxxxxx 1 x xxxxx xx xxxxx pásku xxxx plátku (p.a.) xx 25 xx 6 X kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (3.2) x xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
3.10.1. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx zinku (10 μx Zn/ml) xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) 1 + 9 xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoku 1 + 9 xxxxx.
3.11. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: xxxxxxxxx 12 x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 150 xx xxxx, přidejte 100 ml 6 X kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (3.2) a xxxxxxx xx jednoho xxxxx xxxxx.
4. PŘÍSTROJE
4.1. Muflová xxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
4.2. Xxxxxxxx nádobí musí xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx přístroje, xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
4.3. Xxxxxxxxx xxxxxxx x (xxxxxxxxx) xxxxxxxx kelímky.
4.4. Atomový xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xx xx týče xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
5. XXXXXX
5.1. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
5.1.1. Xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx [9]
i) Vložte 5 xx 10 x xxxxxx, odváženého x xxxxxxxxx xx 0,2 xx, xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.3) (xxx xxxxxxxx x)), xxxxxxx x sušárně xxx 105 °X x xxxxxx kelímek do xxxxxxx muflové xxxx (4.1). Xxxxxxx xxx (xxx xxxxxxxx x)) x postupně xxxxxxxx xxxxxxx xx 470 xx 475 °X xx xxx 90 xxxxx. Udržujte tuto xxxxxxx 4 xx 16 hodin (xxxx. xxxx xxx), xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx pec x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (viz xxxxxxxx x)).
Xxxxxxx kelímek xxxxxx xxx 5 xx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (3.1) x přidejte xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx kádinky (xxxx xxxxxxxxxx prudká xxxxxx díky xxxxxx XX2). Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (3.1) xx míchání, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxx míchání xxxxxxxxx tyčinkou.
Dále přidejte xx zbytku 15 xx 6 N xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2) x xxxxxxxx asi 120 ml xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx tyčinkou, xxxxx xx měla xxx ponechána x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxx xx xxxx a xxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxx přes xxxxxxxxx xxxxx xxx obsahu xxxxxx x xxxxxxx xx 250 ml xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx x filtr xxxxxxx 5 xx xxxxx 6 X kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (3.2) x xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx odměrnou xxxxx xx značku xxxxx (xxxxxxxxxxx XXx asi 0,5 N).
ii) Xxxxx xx xxxxxx xx xxxxxx zbarven černě (xxxxx), dejte xxx xxxx do xxxx x xxxxxxx znovu xxx 450 xx 475 °C. Xxxx xxxxxx, xxxxx vyžaduje xxxxx xxxxxxx xxxxx (xxx xxx xx xxx xxxxx), xx xxxxxxxxx, xxxx xx xxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxx. Rozpusťte xxxxxx asi 2 xx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (3.1), xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx 5 xx 6 X xxxxxxxx chlorovodíkové (3.2). Xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx odměrné xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx HCl xxx 0,5 N).
Poznámky:
a) Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx rizikům xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxx x xxxxxxx. X tohoto důvodu xxxx být xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxx.
Xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx čistým xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxx xxxxxxx na xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, např. x nádobí, xxxxxxxxxx, xxxxxx, xxx.
x) Xxxx xxxxxx, xxxxx má xxx xxxxx, xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx stopového xxxxx x xxxxxx xx xxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxxx spektrofotometru. X xxxxxxxx krmiv x xxxxxx obsahem xxxxxxxxx xxxxx může xxx xxxxxxxx začít s 10 xx 20 x xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx 100 xx.
x) Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx peci xxx xxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx.
x) Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx nesmí xxxxxxxxx 475 °X.
5.1.2. Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
5.1.2.1. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxx prvek, xxxxx xx xxx xxxxxxxx, připravte z xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxxxxx xxx bodů 3.7.1, 3.8.1, 3.9.1 x 3.10.1 xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx HCL okolo 0,5 X a (x xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x zinku) xxxxxxxxxxx chloridu lanthanitého xxxxxxxxxxxx 0,1 % Xx (xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx). Koncentrace xxxxxxxxx stopových prvků xxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx použitého xxxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx uvedené xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx řad xxxxxxxxxxxx xxxxxxx; v xxxxxxxxxx xx typu x citlivosti xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx koncentrace.
Železo
|
μg Fe/ml |
0 |
0,5 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
|
ml xxxxxxxxxx standardního roztoku (3.7.1) (1 xx = 100 μx Xx) |
0 |
0,5 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
|
+ xx 6 X XXx (3.2) |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
|
+ 10 ml xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.11) x xxxxxxx xx 100 xx vodou. |
|||||||
Měď
|
μg Xx/xx |
0 |
0,1 |
0,2 |
0,4 |
0,6 |
0,8 |
1,0 |
|
xx pracovního xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.8.1) (1 xx = 10 μx Cu) |
0 |
1 |
2 |
4 |
6 |
8 |
10 |
|
+ xx 6 X XXx (3.2) |
8 |
8 |
8 |
8 |
8 |
8 |
8 |
|
Xxxxxxx do 100 xx xxxxx. |
|||||||
Xxxxxx
|
μx Mn/ml |
0 |
0,1 |
0,2 |
0,4 |
0,6 |
0,8 |
1,0 |
|
ml xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.9.1) (1 xx = 10 μg Xx) |
0 |
1 |
2 |
4 |
6 |
8 |
10 |
|
+ xx 6 X XXx (3.2) |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
|
+ 10 xx roztoku xxxxxxxx lanthanitého (3.11) x xxxxxxx do 100 xx xxxxx. |
|||||||
Xxxxx
|
μx Xx/xx |
0 |
0,05 |
0,1 |
0,2 |
0,4 |
0,6 |
0,8 |
|
xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10.1) (1 xx = 10 μx Xx) |
0 |
0,5 |
1 |
2 |
4 |
6 |
8 |
|
+ xx 6 X XXx (3.2) |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
|
+ 10 ml xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.11) a xxxxxxx xx 100 xx xxxxx. |
|||||||
5.1.2.2. Příprava xxxxxxx xxx xxxxxxx
X stanovení xxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx z xxxx 5.1.1 xxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx přivést xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx kalibračních xxxxxxx, xxxx být xxxxxxxxx xxxx pipetována xx 100 xx xxxxxxx xxxxx a doplněna xx xxxxxx 0,5 X kyselinou xxxxxxxxxxxxxxx (3.3).
X stanovení xxxxxx, xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx podíl xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.1.1 xx 100 xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx 10 xx chloridu lanthanitého (3.11) a doplňte xx xxxxxx 0,5 X kyselinou xxxxxxxxxxxxxxx (3.3) (xxx xxxxxx xxx 8 xxxxxxxx).
5.1.2.3. Xxxxx pokus
Slepý xxxxx xxxx zahrnovat xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx postupu xxxxx toho, že xx xxxxxxx materiál xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx "0" xxxxxx xxx xxxxxx xxxx xxxxx.
5.1.2.4. Měření xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků x xxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx, x xxxxxxxx okysličujícího xxxxxxx vzduch-acetylen při xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx délkách:
Fe: 248,3 xx
Xx: 324,8 xx
Xx: 279,5 xx
Xx: 213,8 xx
Xxxxxxxx každé xxxxxx xxxxxxxxx.
5.2. Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx hmotu, není xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx, xxx xx to xxxxxxx x xxxx 5.1.1 x) xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Odpaření x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx.
6. XXXXXXX XXXXXXXX
X xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx vypočtěte xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx prvku x xxxxxxx, xxxxx xx xxx analyzován x vyjádřete xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx stopového xxxxx xx kilogram xxxxxx (xxx).
7. XXXXXXXXXXXXXX
Xxxxxx xxxx výsledky xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx provedených x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
- 5 xx/xx x absolutní hodnotě x xxxxxx příslušného xxxxxxxxx prvku xx 50 xx/xx,
- 10 % x xxxxxxx xxxxxxxx u xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx 50 do 100 xx/xx,
- 10 xx/xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx 100 xx 200 xx/xx,
- 5 % x xxxxxxx xxxxxxxx u xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 200 mg/kg.
8. XXXXXXXX
Xxxxxxxxxx xxxxxxx množství xxxxxxx může xxxxxxxxxx xxxxxxxxx železa, xxxxxxx x zinku. Takové xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx přidáním roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.11). Xxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxx ve xxxxxx Ca + Xx / X · 2, xxxx xxx přídavek xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.11) xx xxxxxxx xxx xxxxxxx a xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
[1] 1 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx 42 mezinárodním jednotkám (x.x.).
[2] Xxxx xxxxxx xxxxx být použity xx xxxxxxxxxxx, že xxxx stanoveno, xx xxxxxx podobné bakteriální xxxxxxxx.
[3] Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx médium podobného xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
[4] Může xxx použito xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx složení x xxxxxxxx stejné xxxxxxxx.
[5] Xxxx metody xxxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
[6] Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx komerční xxxxxxxxxx xxxxxx podobného složení x dávající xxxxxx xxxxxxxx, např. xxxxx xxxxxxxxxxxx médium 1 (XX 327) s xxxxxxxxx oxoid agaru x. 3 (X 13).
[7] Xxxx být xxxxxxx jakékoli komerční xxxxxxxxxx xxxxxx podobného xxxxxxx x dávající xxxxxx xxxxxxxx, xxxx. xxxxx antibiotické xxxxxx 2 (CM 335) x přídavkem oxoid xxxxx x. 3 (X 13).
[8] Xxxx. XX 2 xx Xxxxxx Xxxxxx Xxxx, Xxxxxxx.
[9] Xxxxxx pícniny (xxxxxxx nebo xxxxx) xxxxx obsahují velká xxxxxxxx xxxxxxxxxxx křemíku, xxxxx může xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxx xxx xxxxxxxxx. X vzorků xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxx dodržen xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx 5.1.1 x) xx po xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx papír xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx vodou x xxxxxx xxx xx platinového kelímku (4.3). Xxxxxx x xxxxxxx peci (4.1) xxx teplotě pod 550 °X, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Nechejte xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx a xxxxxxxx 10 xx 15 ml xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.4) x xxxxxxx xx sucha xxx xxx 150 °X. Pokud xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxx znovu x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.4) x odpařte xx xxxxx. Přidejte xxx xxxxx kyseliny xxxxxx (3.5) x zahřívejte xxxxx xx nepřestane xxxxxxxxx bílý kouř. Xx xxxxxxx 5 xx 6 N xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2) x xxx 30 xx vody, zahřejte, xxxxxxxxxxxx xxxxxx do 250 xx xxxxxxx xxxxx x doplňte xx značku xxxxx (xxxxxxxxxxx XXX asi 0,5 X). Xxxx xxxxxxxxxx stanovením od xxxx 5.1.3.