Xxxx xxxxxxxx Xxxxxx
xx xxx 15. xxxxxx 1978,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx metody Společenství xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx
(78/633/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx na Xxxxxxx x založení Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx společenství,
s xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxx 70/373/XXX ze xxx 20. xxxxxxxx 1970 x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx úřední xxxxxxxx xxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxx 2 xxxxxxx směrnice,
vzhledem x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx byla xxxxxxxxx kontrola xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx odběru xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx pro účely xxxxxxxx souladu požadavků xxxxxxxxxxx právními xxxx xxxxxxxx předpisy xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxx 71/250/XXX ze xxx 15. xxxxxx 1971 [2], 71/393/EHS xx xxx 18. xxxxxxxxx 1971 [3], 72/199/XXX xx xxx 27. xxxxx 1972 [4], 73/46/XXX xx xxx 5. xxxxxxxx 1972 [5], 74/203/XXX xx xxx 25. xxxxxx 1974 [6], 75/84/XXX xx xxx 20. xxxxxxxx 1974 [7] a 76/372/XXX xx xxx 1. xxxxxx 1976 [8] xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx metod Xxxxxxxxxxxx; xx xxxxxx x xxxxx od xx doby xxxx xxxxxxx přijmout xxxxx xxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx jsou x souladu xx xxxxxxxxxxx Stálého výboru xxx xxxxxx,
XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
1. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, aby xxxx analýzy xxx xxxxxxxxx kontrolu xxxxx, xx xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx, xxxx, xxxxxxx x xxxxx, xxxxxxxxx v xxxxxxx x xxxxxxxx popsanými x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
2. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxx 1 "Xxxx" přílohy xxxxx směrnice 71/250/XXX, xx s xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx, jež xx xxx analyzován, xxxxxxxx i xx xxxxxx popsané x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Článek 2
Xxxxxxx státy xxxxxx 1. xxxxx 1979 v xxxxxxxx xxxxxx a správní xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx souladu x xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx x nich xxxxxxx Xxxxxx.
Xxxxxx 3
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X Xxxxxxx xxx 15. června 1978.
Xx Xxxxxx
Xxxx Gundelach
místopředseda
[1] Xx. věst. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Úř. xxxx. X 155, 12.7.1971, x. 13.
[3] Úř. xxxx. X 279, 20.12.1971, x. 7.
[4] Úř. xxxx. X 123, 29.5.1972, x. 6.
[5] Úř. xxxx. X 83, 30.3.1973, x. 21.
[6] Xx. věst. X 108, 22.4.1974, x. 7.
[7] Xx. xxxx. X 32, 5.2.1975, x. 26.
[8] Xx. věst. X 102, 15.4.1976, x. 8.
PŘÍLOHA
1. XXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXX XXXXXX NA XXXXX
1. XXXX X XXXXXX
Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxx stanovení zinkbacitracinu x krmivech, xxxxxxxxxxxxx x premixech. Xxxxx xxx xxxxxxxxx je 5 xx/xx (5 xxx) [1]. Metoda xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx ovlivňujících xxxxx, xxxxxxx velkých xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx.
2. PRINCIP
Vzorek xx xxxxxxxxxx při xX 2 xxxxx xxxxxxxx/xxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx je xxxxxxx xx xX 6,5, koncentrován (xxxxx xx to nutné) x zředěn. Xxxx xxxxxxxxxxxx aktivita xx xxxxxxx měřením difúze xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxx (Xxx. X. xxxxxx). Xxxxxx se xxxxxxxxx formací inhibičních xxx xxxxxxxxxxxxxx. Průměr xxxxxx xxx xx xxxxx úměrný xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx použitých xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3. MIKROORGANISMUS: XXXXXXXXXXX XXXXXX ATCC 10240
3.1. Xxxxxxxxx zásobní kultury
Naočkujte Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx (4.1). Xxxxxxxxx 24 hodin xxx 30 xx 37 °X, skladujte x xxxxxxxxxx při 4 °X x znovu xxxxxxxxxx xxxxx dva xxxxx xx xxxxx xxxx.
3.2. Xxxxxxxx bakteriální xxxxxxxx [2]
Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx (3.1) xx xxxxxxx 2 xx 3 xx xxxxxxx xxxxxxxx sodného (4.3). Tuto xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx 250 ml xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1) v Xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx 18 xx 20 hodin při 30 až 37 °X. Smyjte mikroorganizmus xx 25 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3) a xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx roztokem xxxxxxxx sodného (4.3). Xxxxxxxx transmise xxxxxxxx xxxx xxx okolo 75 %, xxxxxx xxx 650 xx x 1 cm xxxxxx xxxxx roztoku xxxxxxxx xxxxxxx (4.3).
4. XXXXXXXXXX MÉDIA X XXXXXXXXXX
4.1. Kultivační xxxx [3]
|
Xxxxxx x xxxx |
6,0 x |
|
Xxxxxxx |
4,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxxxxx |
3,0 x |
|
Xxxxxxx z xxxx |
1,5 g |
|
Glukosa |
1,0 x |
|
Xxxx |
15,0 x |
|
Xxxx |
1000 ml |
|
pH 6,5 xx 6,6 (xx xxxxxxxxxxx) |
|
|
4.2. Xxxxxxxx xxxx [4] |
|
|
Xxxxxxx |
10,0 x |
|
Xxxxxxx z xxxxxxx |
3,0 x |
|
Xxxxxxx z xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
20,0 x |
|
Xxxxx 80 |
1 ml |
|
Voda |
1000 xx |
|
xX 6,5 (xx xxxxxxxxxxx) |
|
4.3. Roztok chloridu xxxxxxx 0,8 % (xxxxxx-xxxxxxxxxx): rozpusťte 8 x xxxxxxxx sodného x.x. ve xxxx x xxxxxx xx 1000 xx; sterilizujte.
4.4. Xxxx čistého xxxxxxxxx/xxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx p.a. (x: 1,18 xx 1,19): 80/17,5/2,5 (objemově).
4.5. Xxxxxxxxx xxxx, xX 6,5
Hydrogen xxxxxxxxxxx draselný X2XXX4 x.x. (22,15 g).
Dihydrogen xxxxxxxxxxx xxxxxxxx X2XXX4 x.x (27,85 x).
Xxxx xx 1000 xx.
4.6. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x.x. (x: 1,18 xx 1,19).
4.7. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x.x. (0,1 N).
4.8. X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x.x.
4.9. Roztok xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx 0,04 % (xxxxxx-xxxxxxxxxx): xxxxxxxxx 0,1 x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx v 18,5 xx 0,01 N xxxxxxx hydroxidu sodného. Xxxxxxx vodou xx xxxxxx 250 ml x xxxxxxxxxxx.
4.10. Xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxxxx x xxxxx aktivitě (x x.x.).
5. STANDARDNÍ ROZTOKY
Odvažte xxxxxxxx standardního xxxxxxxxxxxxxxx (4.10) odpovídající 1050 x.x. (xxxxx uvedené xxxxxxxx). Přidejte 5 xx 0,1 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (4.7) x xxxxxxxx xxxxx 15 xxxxx. Přidejte 30 xx xxxx, xxxxxxx xX xx 4,5 fosfátovým xxxxxx xX 6,5 (4.5) (xxxxx 4 ml), xxxxxxx xxxxx do xxxxxx 50 xx x xxxxx xxxxxxxxxxx (1 xx = 21 x.x.).
X xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx postupným xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xX 6,5 (4.5) xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
|
X8 |
0,42 |
x.x./xx |
|
X4 |
0,21 |
x.x./xx |
|
X2 |
0,105 |
x.x./xx |
|
X1 |
0,0525 |
x.x./xx |
6. XXXXXXXX XXXXXXXX
6.1. Xxxxxxxx
6.1.1. Xxxxxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx vzorku 2,0 xx 5,0 x, xxxxxxxx 30 xx směsi (4.4) x krátce xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx, xx je xX okolo 2. Xxxxxxxx 10 minut, xxxxxxxx 30 xx xxxxxxxxxxx xxxxx xX 6,5 (4.5) a xxxxxxxx 15 minut. Xxxxxx fosfátovým xxxxxx (4.5), xxxxxx obdrželi xxxxxxxxx xxxxx zinkbacitracinu 0,42 x.x./xx) (= X8).
6.1.2. Bílkovinné xxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx 10,0 x, přidejte 50 xx xxxxx (4.4) x xxxxxx protřepejte. Xxxxxxxxxxxx, že xx xX okolo 2. Xxxxxxxx 10 xxxxx, xxxxxxxx 50 xx xxxxxxxxxxx xxxxx xX 6,5 (4.5) x xxxxxxxx 15 xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5), xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx obsah zinkbacitracinu 0,42 i.u./ml) (= X8).
6.1.3. Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx 10,0 g xxxxxx (20,0 g xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx 5 xx/xx), xxxxxxxx 25 ml xxxxx (4.4) a xxxxxxxxxxxxx asi 10 xxxxx. Xxxxxxxx 25 xx xxxxxxxxxxx pufru xX 6,5 (4.5), xxxxxxxx 15 minut x odstřeďte. Xxxxxxxx 20 xx roztoku xxxxxxxxxxxx a xxxxxxx xX xx 6,5 x xxxxxxxx 1 X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.8) x xxxxxxxx bromokresolové xxxxxxx (4.9) xxxx indikátorem. Xxxxxxx xx přibližně 4 xx na xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx nepřesahující 35 °X. Xxxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx obsah xxxxxxxxxxxxxxx 0,42 i.u./ml (= X8).
6.2. Xxxxxxxx roztoky
Z xxxxxxx X8 xxxxxxxxx xxxxxx X4 (očekávaný xxxxx: 0,21 x.x./xx), X2 (očekávaný xxxxx: 0,105 x.x./xx) x X1 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,0525 x.x./xx) x xxxxxxxx postupného xxxxxx (1 + 1) xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5).
7. XXXXXXXX XXXXXX
7.1. Očkování xxxxxxxxxx média
Očkujte xxxxxxxx xxxxxx (4.2) xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.2) při xxx 50 °X. Xxxxxxxxxxx pokusy xx xxxxxxx se zkušebním xxxxxx (4.2) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, které poskytne xxxxxxxx x nejjasnější xxxxxxxxx zóny s xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
7.2. Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (S8, X4, X2, X1) x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoku (X8, X4, U2, X1). Xxxx xxxxx koncentrace xxxxxxxx x standardu xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx dostatečně xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxx 8 xxxxxx x průměru 10 xx 13 xx x nejméně 30 xx mezi xxxxxx xxxxxx. Pokus může xxx xxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx skleněných desek xxxxxxxxxx dokonale rovným xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxx, 200 mm x xxxxxxx a 20 mm xxxxx.
Xxxxxxxx xx misky xxxxxxxx xxxxx (4.2), xxxxxxxxxxxx xxxx v xxxx 7.1, xxx vytvořilo xxxxxx asi 2 xx xxxxxx (50 xx xx xxxxx x xxxxxxx 200 xx). Xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxx a xxxxxxxx do nich xxxxxx xxxxxxxx objemy xxxxxxxxxx x standardních xxxxxxx (mezi 0,10 x 0,15 ml xx xxxx, xxxxx xxxxxxx).
Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx čtyřikrát xxx, xx xxxxxxx stanovení xxxxxxx xxxxxxxxxxx 32 xxxxxxxxxxx xxx.
7.3. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx 16 xx 18 hodin při 28 až 30 °X.
8. VYHODNOCENÍ
Změřte xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxxxx xx 0,1 xx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxx xx semilogaritmickém xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx k xxxxxxxx xxxxxxxxxxx zón. Narýsujte xxxxxxxxxxxx křivky standardního xxxxxxx x extraktu, xxxxxxxxx xxxx xx xx xxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxx xxx xxxxxxxx úroveň xxxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxxx:
(x) XX = 7 S1 + 4 X2 + X4 - 2 X8 / 10
Xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" bod xxx xxxxxxxx úroveň xxxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxxx:
(x) SH = 7 X8 + 4 S4 + X2 - 2 X1 / 10
Xxxxxxx xxxxxxxxx "nejvhodnější" xxxx xxx xxxxxxxx úroveň xxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (XX) nahrazením X1, X2, U4 x X8 za X1, X2, X4 x X8 x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx XX a XX na xxxxxx xxxxxxxx papír a xxxxxx xx, xxxxxx xxxxxxxx "nejvhodnější" křivku xxx roztok standardu. Xxxxxxx zaznamenejte UL x XX x xxxxxx xx, xxxxxx xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" křivku xxx xxxxxxx.
X xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx. Pro xxxxxxxxx xxxxx xxxxx být xxxxxx považovány za xxxxxxxxx, pokud se xxxxxxx (SH-SL) x (XX-XX) xxxxxx o xxxx xxx 10 % xx xxxxxx xxxxxxx hodnoty.
Pokud xxxx xxxxxx xxxxxxxx jako xxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx buď U1 x X1 nebo X8 x S8 x SL, SH, XX a XX xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx alternativní "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx:
x´) SL = 5 S1 + 2 S2 - X4 / 6 xxxx 5 S2 + 2 S4 - X8 / 6
x´) XX = 5 S4 + 2 X2 - X1 / 6 xxxx 5 X8 + 2 X4 - S2 / 6
x podobně pro XX a XX. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xx paralelnost xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx, že xxx xxxxxxxx počítán xx tří úrovní, xxxx být xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, vypočtěte xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx. X) pomocí xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxx úrovně
(c) xxx X = (X1 + X2 + U4 + X8 - S1 - X2 - X4 - X8) × 0,602 / X4 + X8 + X4 + X8 - X1 - X2 - X1 - X2
Xxx xxx úrovně
(d) log X = (U1 + X2 + X4 - S1 - X2 - X4) × 0,401 / X4 + X4 - X1 - X1
xxxx
x´) log X = (U2 + U4 + X8 - X2 - S4 - X8) × 0,401 / X8 + X8 - U2 - X2
Xxxxxxxx xxxxxxxx = xxxxxxxxxxxxx aktivita x relativní xxxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx. Pokud není xxxxxxxxxxx stále xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (log. X) xxxxxx xxxxxxx x). Xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx považován xx xxxxxxxxx a xxxx xxxx xxx xxxxxxx x závěrečné xxxxxx.
9. XXXXXXXXXXXXXX
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx u stejného xxxxxx xxxxxxx analytikem xxxxx xxxxxxxxx:
20 % xxx. z xxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 5 x xx 25 xx/xx;
5 xx/xx v xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxx 25 x xx 50 xx/xx;
10 % xxx. x xxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxx 50 mg/kg.
2. XXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXXX XXXXXX XX XXXXX
1. XXXX X XXXXXX
Xxxx metoda xx určena xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxx, koncentrátech a xxxxxxxxx. Dolní xxx xxxxxxxxx xx 1 xx/xx (1 xxx).
2. XXXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx pod xxxxxxx xxxxxxxxx. Po xxxxxxxxxx xx extrakt přečištěn (xxx je xx xxxxx) xx xxxxxx x xxxxxx. Jeho xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx měřením difúze xxxxxxxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxxxxxxx mikroorganizmem Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxx formací inhibičních xxx mikroorganizmu. Průměr xxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3. MIKROORGANISMUS: XXXXXXXXXXXXXX XXXXXX XXXX 6538 X
3.1. Xxxxxxxxx zásobní xxxxxxx
Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx agarem (4.1). Xxxxxxxxx 24 xxxxx xxx 37 °X, xxxxxxxxx x chladničce xxx 4 °X x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx na xxxxx xxxx.
3.2. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx suspenze [5]
Xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (3.1) x xxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx 24 xxxxx xxx 37 °X a skladujte x chladničce xxx xxx 4 °X.
24 xxxxx xxxx zkouškou xxxxxxxxx touto xxxxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxxxx obsahující šikmé xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1). Xxxxxxxxx 16 xx 18 xxxxx při 37 °X. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3). Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxx 40 %, xxxxxx xxx 578 xx v 1 xx kyvetě xxxxx xxxxxxx chloridu sodného (4.3).
4. KULTIVAČNÍ XXXXX X XXXXXXXXXX
4.1. Xxxxxxxxxx xxxxxx [6]
|
Xxxxxx x xxxx |
6,0 g |
|
Trypton |
4,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxxxxx |
3,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxx |
1,5 g |
|
Glukosa |
1,0 x |
|
Xxxx |
15,0 g |
|
Voda |
1000 xx |
|
xX 6,5 (xx sterilizaci) |
|
|
4.2. Xxxxxxxx xxxxxx |
|
|
4.2.1. Základní xxxxxx [7] |
|
|
Xxxxxx z xxxx |
6,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxxxxx |
3,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxx |
1,5 x |
|
Xxxx |
10,0 g |
|
Voda |
1000 xx |
|
xX 6,5 (xx xxxxxxxxxxx) |
|
4.2.2. Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxx x xxxx 4.1, x xxxxxxxxx 2,0 x silikonové xxxxxxxxxxx xxxxxx [8].
4.3. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 0,4 % (xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx): xxxxxxxxx 4 g chloridu xxxxxxx p.a. ve xxxx x xxxxxx xx 1000 xx; xxxxxxxxxxxx.
4.4. Xxxxxxxx, xxxxx.
4.5. Xxxxxxxx 50 % (xxxxxxxxxx): zřeďte 500 xx xxxxxxxxx (4.4) 500 xx vody.
4.6. Xxxxxxxx 80 % (xxxxxxxxxx): xxxxxx 800 xx methanolu (4.4) 200 ml xxxx.
4.7. Xxxx (xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx x.x.
4.8. Methanolový xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1,5 % (váhově-objemových): xxxxxxxxx 1,5 x xxxxxxxx xxxxxxxxxx p.a. ve 20 xx xxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx (4.4) xx xxxxxx 100 xx.
4.9. Kationtový xxxxx: Xxxxx 50 Xx8, 20 až 50 xxxx, Xx xxxxx (xxx. Serva x. 41600) nebo ekvivalent.
4.10. Xxxxxxxxx xxxxx: Xxxxx 1x2, 50 xx 100 mesh, Xx xxxxx (xxx. Serva x. 41010) xxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx 12 xx 14 xxxxx v 80 % xxxxxxxxx (4.6).
4.11. Skelná xxxx.
4.12. xX xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xX 6,06 xx 8.1).
4.13. Kyselina xxxxxxxxx.
4.14. Xxxxxxxxxx xxxxx: flavofosfolipol x xxxxx aktivitě.
5. XXXXXXXXX
5.1. Skleněné xxxxxxx xxx chromatografii, xxxxxxx xxxxxx: 9 xx, xxxxx 150 xx 200 xx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx dolního xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx (ke xxxxxxx x dávkovací nálevkou (5.2)) x xxxxx xxxxx.
5.2. Xxxxxxxxx xxxxxxx 250 xx, vybavená xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx.
5.3. 250 xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx zábrusem.
5.4. Xxxxxx chladič xx xxxxxxxxx zábrusem.
6. XXXXXXXXXX XXXXXXX
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.14) v 50 % methanolu (4.5) x xxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx zásobní roztok xxxxxxxxxx 100 μg xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxx xx tento xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxx 4 °X, xx xxxxxxxx až xxx xxxxxx.
X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 50 % xxxxxxxxxx (4.5) následující xxxxxxx:
|
X8 |
0,2 |
μx/xx |
|
X4 |
0,1 |
μx/xx |
|
X2 |
0,05 |
μx/xx |
|
X1 |
0,025 |
μx/xx |
7. PŘÍPRAVA EXTRAKTU
7.1. Xxxxxxxx
7.1.1. Koncentráty, premixy x minerální xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx 2,0 xx 5,0 x, xxxxxxxx asi 150 xx kyseliny xxxxxxxxx (4.13). Homogenizujte se 150 xx 50 % xxxxxxxxx (4.5) x xxxxxxx xxxxx (5.3) x xxxxxxx xX xx 8,1 xx 8,2 xxx 400 xx tris (xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxxx (4.7). Xxxxxxxxxxxx pH xxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.12). Xxxxxxxx xxxxx 15 minut, xxxxx xxxxx xxxxxxx xX xx 8,1 xx 8,2 tris (xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxxx (4.7) x xxxxx 10 xxxxx xxx zpětným xxxxxxxxx (5.4) xxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.1.2. Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx 5,0 xx 30,0 x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx 30 μg xxxxxxxxxxxxxxxx. Homogenizujte xx 150 xx 50 % xxxxxxxxx (4.5) x kónické baňce (5.3) x xxxxxxx xX na 8,1 xx 8,2 xxx 400 xx tris (xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxxx (4.7). Xxxxxxxxxxxx pH indikačním xxxxxxxx (4.12). Xxxxxxxx xxxxx 15 xxxxx, xxxxx znovu xxxxxxx xX xx 8,1 xx 8,2 xxxx (xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxxx (4.7) x xxxxx 10 xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx (5.4) xxx xxxxxx míchání. Nechejte xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2. Xxxxxxxxxx (tento krok xxxx xxx xxxxxxx x koncentrátů, xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxxxxx 110 ml extraktu x 11 x xxxxxxxxxxxx xxxxxx (4.9), xxxxx jednu xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx (5.4) xxx xxxxxx xxxxxxx. Oddělte xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx 100 xx xxxxxxxx xx 150 xx xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxxxxx xxxxxx 12 xx 15 xxxxx xxx 4 °C. Odfiltrujte xxxxxxxxxxx xxxxx dokud xx xxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxx (4.11) xx xxxxxxxx xxxxx skleněné xxxxxxx (5.1), xxxxxx xx xxxxxxx 5 xx xxxxxxxxxxx xxxxxx (4.10) x xxxxxxxx xxxxxx 100 xx 80 % xxxxxxxxx (4.6). X použitím xxxxxxx (5.2), xxxxxxxx xx xxxxxx nejméně 100 ml xxxxxxxx, x kterého xx xxxxxxx, že xxxxxxxx 16 μx flavofosfolipolu (200 ml xx 30 x xxxxxx xxxxxx xxx 1 xxx). Xxx xx xx xxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxx aplikací xx kolony 80 % xxxxxxxxxx (4.6), xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx 16 μx/100 xx. Průtok xxxxxxx xx xxx 2 ml/minutu. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Jímejte 50 xx 80 % xxxxxxxxx (4.6) a xxxxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxx flavofosfolipol xxxxxxxxxxxx roztokem xxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.8) xxx xxxxxxx asi 2 xx/xxxxxx. Xxxxxxx 50 xx xxxxxx xx xxxxxxx baňky, xxxxxxxx 30 ml xxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxx xxx xxxxx flavofosfolipolu 0,2 μg/ml (= X8).
7.3. Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xx to xxxxx (xx. xxxx bylo xxxxxxxx xxxxxxxxxxx), xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx 7.1.1 50 % xxxxxxxxxx (4.5), xxxxxx obdrželi xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx 0,2 μx/xx (= X8).
X xxxxxxx U8 připravte xxxxxx X4 (očekávaný xxxxx: 0,1 μg/ml), X2 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,05 μx/xx) x X1 (očekávaný obsah: 0,025 μg/ml) x xxxxxxxx postupného ředění (1 + 1) 50 % xxxxxxxxxx (4.5).
8. XXXXXXXX XXXXXX
8.1. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx média
Očkujte xxxxxxxx médium (4.2.2) xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.2) xxx xxx 50 °X. Předběžnými pokusy xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx médiem (4.2.2) xxxxxxxx množství xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zóny x xxxxxxx koncentracemi xxxxxxxxxxxxxxxx (asi 30 xx/xxxx).
8.2. Příprava xxxxx
Xxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxx x miskách xx xxxxxxx čtyřech xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (X8, X4, X2, X1) x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (X8, U4, X2, X1). Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx extraktu x xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxx umístěny xx xxxxx xxxxxx. Xxx xxxxx účel vyberte xxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx udělat v xxxxx xxxxxxx 8 xxxxxx x xxxxxxx 10 až 13 xx x nejméně 30 xx xxxx xxxxxx středy. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx sestávajících x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx vybavených xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx 200 xx x xxxxxxx x 20 xx xxxxx.
Xxxxxxxx xx plotny xxxxxxxx xxxxx (4.2.1), xxx xxxxxxxxx vrstvu xxx 1,5 xx xxxxxx (45 xx xx xxxxx x xxxxxxx 200 mm). Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx pozici a xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (4.2.2) xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxx 8.1, aby xxxxxxxxx xxxxxx 1 xx xxxxxx (30 xx xx xxxxx x xxxxxxx 200 xx). Xxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx nich xxxxxx odměřené xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 xx xx díru, podle xxxxxxx).
Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx čtyřikrát tak, xx xxxxxxx stanovení xxxxxxx vyhodnocení 32 xxxxxxxxxxx zón.
8.3. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx 16 xx 18 xxxxx xxx 28 xx 30 °X.
9. XXXXXXXXXXX
Xxxxxx průměr xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxxxx xx 0,1 xx. Zaznamenejte střední xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx je xx xxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxx xxx xxxxxxxx úroveň xxxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxxx:
(x) XX = 7 X1 + 4 X2 + X4 - 2 X8 / 10
(x) XX = 7 X8 + 4 X4 + X2 - 2 S1 / 10
Xxxxxxx xxxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxxx xxx xxxxxxxx úroveň extraktu (XX) x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (UH) xxxxxxxxxx U1, U2, X4 x X8 xx X1, X2, X4 x X8 xx výše xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx XX a XX xx xxxxxx grafický xxxxx a xxxxxx xx, xxxxxx xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx xxx xxxxxx standardu. Podobně xxxxxxxxxxxx XX a XX x xxxxxx xx, abyste obdrželi "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx xxx xxxxxxx.
X nepřítomnosti jakýchkoli xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx účely xxxxx být křivky xxxxxxxxxx za xxxxxxxxx, xxxxx xx hodnoty (XX-XX) x (XX-XX) xxxxxx x xxxx xxx 10 % xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx jsou xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxx pominuto xxx U1 a X1 xxxx X8 x X8 a XX, XX, UL x UH xxxxxxxxx xx použití xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx poskytují xxxxxxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx:
x´) XX = 5 X1 + 2 X2 - X4 / 6 xxxx 5 X2 + 2 X4 - X8 / 6
b´) XX = 5 X4 + 2 X2 - S1 / 6 nebo 5 X8 + 2 X4 - X2 / 6
x xxxxxxx pro XX x UH. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx křivky musí xxx kontrolovány na xxxxxxxxxxx xxxx předtím. Xxxxxxxxxx, že xxx xxxxxxxx počítán ze xxx úrovní, xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx aktivity (log. X) xxxxxx jedné x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxx
(x) xxx X = (X1 + X2 + X4 + X8 - X1 - X2 - X4 - X8) × 0,602 / U4 + U8 + X4 + X8 - U1 - X2 - X1 - X2
Xxx xxx xxxxxx
(x) xxx X = (X1 + X2 + X4 - X1 - X2 - S4) × 0,401 / X4 + X4 - U1 - X1
xxxx
x´) log X = (U2 + X4 + X8 - X2 - X4 - X8) × 0,401 / X8 + X8 - X2 - X2
Xxxxxxxx xxxxxxxx = xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx aktivita.
Když xxxx xxxxxx považovány za xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx docílena, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx. X) xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x). Xxxxxxx, xxxxxxxx výsledek musí xxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxx x xxxx xxxx xxx xxxxxxx x závěrečném hlášení.
10. XXXXXXXXXXXXXX
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx provedených x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
0,5 xx/xx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx od 1 do 2 xx/xx;
25 % xxx. x xxxxx hodnoty xxx xxxxxx xxxxx xxx 2 xx10 xx/xx;
20 % xxx. x vyšší hodnoty xxx obsahy větší xxx 10 do 25 mg/kg;
5 xx/xx x absolutní xxxxxxx xxx xxxxxx větší xxx 25 xx 50 xx/xx;
10 % xxx. z xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxx 50 xx/xx.
3. XXXXXXXXX STOPOVÝCH XXXXX XXXXXX, XXXX, XXXXXXX X XXXXX
1. XXXX X ROZSAH
Tato xxxxxx xxxxxxxx stanovit stopové xxxxx železo, xxx, xxxxxx a xxxxx x xxxxxxxx. Dolní xxxx xxxxxxxxx xxxx:
xxxxxx (Xx): 20 xx/xx
xxx (Xx): 10 xx/xx
xxxxxx (Xx): 20 xx/xx
xxxxx (Xx): 20 xx/xx
2. XXXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxx xx roztoku xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx, xxx, xxxxxx x xxxxx jsou xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXXX
Xxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxxxx chemikálií a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx používejte xxxx, u které xxxx xxxxxxxxx, xx xx bez xxxxxxxx, xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxx kvality (p.a.). Xxxxxxxxxxxx prvků, které xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxx být kontrolována xxxxxx pokusem. Pokud xx to nutné, xxxx být xxxxxxxxxx xxxx přečištěny.
Namísto xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx níže, xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx předpokladu, xx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
3.1. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x.x. (x: 1,19).
3.2. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx p.a. (6 X).
3.3. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x.x. (0,5 X).
3.4. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx 38 až 40 % (xxxxxxxxxx) xxxxxx xxxxx železa xxxxx xxx 1 xx Xx/xxxx a xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxx 10 xx (xxxx xxxxxx)/xxxx.
3.5. Xxxxxxxx xxxxxx x.x. (x: 1,84).
3.6. Xxxxxxx xxxxxx x.x. (přibližně 100 xxxxxx kyslíku (30 % hmotnostně)).
3.7. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx (1000 μx Fe/ml) připravený xxxxxxxxxx: xxxxxxxxx 1 x xxxxxxxxx xxxxx x.x. xx 200 xx 6 N xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2), xxxxxxxx 16 xx xxxxxxxx vodíku (3.6) x xxxxxxx xx xxxxxxx litru xxxxx.
3.7.1. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx roztok xxxxxx (100 μg Xx/xx) připravený xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.7) 1 + 9 xxxxx.
3.8. Standardní xxxxxx xxxx (1000 μx Xx/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: xxxxxxxxx 1 g xxxx x práškové xxxxx (p.a.) xx 25 xx 6 X xxxxxxxx chlorovodíkové (3.2), xxxxxxxx 5 xx xxxxxxxx vodíku (3.6) x doplňte xx xxxxxxx litru xxxxx.
3.8.1. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx (10 μx Xx/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (3.8) 1 + 9 xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 1 + 9 xxxxx.
3.9. Standardní xxxxxx xxxxxxx (1000 μx Xx/xx) připravený xxxxxxxxxx: rozpusťte 1 x manganu x xxxxxxxx xxxxx (x.x.) xx 25 xx 6 N kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (3.2), xxxxxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxxxx (3.6) a xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
3.9.1. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (10 μg Xx/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.9) 1 + 9 vodou x potom xxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoku 1 + 9 vodou.
3.10. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (1000 μx Xx/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: xxxxxxxxx 1 x xxxxx xx xxxxx pásku xxxx xxxxxx (x.x.) xx 25 xx 6 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2) x xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
3.10.1. Pracovní xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (10 μg Zn/ml) xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) 1 + 9 xxxxx x potom xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 1 + 9 xxxxx.
3.11. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx následovně: xxxxxxxxx 12 g kysličníku xxxxxxxxxxxx ve 150 xx xxxx, přidejte 100 xx 6 X xxxxxxxx chlorovodíkové (3.2) x xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
4. XXXXXXXXX
4.1. Muflová xxx s xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxx.
4.2. Xxxxxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxxx borosilikátového xxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
4.3. Xxxxxxxxx xxxxxxx x (xxxxxxxxx) xxxxxxxx xxxxxxx.
4.4. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx splňující xxxxxxxxx xxxxxx, xx xx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx rozsahu.
5. XXXXXX
5.1. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
5.1.1. Xxxxxx x xxxxxxxx roztoku xxx xxxxxxx [9]
i) Xxxxxx 5 xx 10 x xxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx 0,2 mg, do xxxxxxxxxx xxxx platinového xxxxxxx (4.3) (viz xxxxxxxx x)), vysušte x sušárně xxx 105 °C a xxxxxx kelímek do xxxxxxx xxxxxxx pece (4.1). Xxxxxxx xxx (xxx poznámka c)) x xxxxxxxx zvyšujte xxxxxxx xx 470 xx 475 °X xx xxx 90 xxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx 4 xx 16 xxxxx (xxxx. xxxx noc), xxx xx xxxxxxxxx uhlíkatý xxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxx xxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (viz xxxxxxxx x)).
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx 5 xx kyseliny chlorovodíkové (3.1) a přidejte xxxxxxxx pomalu x xxxxxxx xx kádinky (xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx XX2). Přidejte xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (3.1) xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xx příležitostného xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx přidejte xx zbytku 15 xx 6 X xxxxxxxx chlorovodíkové (3.2) x xxxxxxxx xxx 120 ml xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx měla xxx xxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxx xx xxxx a xxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xxx není xxxxx nerozpuštěný xxxxx. Xxxxxxxxxxxx přes xxxxxxxxx xxxxx xxx obsahu xxxxxx x xxxxxxx xx 250 ml xxxxxxx baňky. Xxxxxxx x xxxxx vymyjte 5 xx xxxxx 6 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2) x xxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx odměrnou xxxxx xx xxxxxx vodou (xxxxxxxxxxx XXx xxx 0,5 X).
xx) Xxxxx xx xxxxxx na xxxxxx zbarven xxxxx (xxxxx), xxxxx jej xxxx xx xxxx x xxxxxxx xxxxx xxx 450 až 475 °X. Toto xxxxxx, xxxxx vyžaduje xxxxx xxxxxxx xxxxx (xxx tři až xxx xxxxx), je xxxxxxxxx, xxxx je xxxxx xxxx nebo xxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxx 2 xx kyseliny chlorovodíkové (3.1), odpařte do xxxxx x xxxxxxxx 5 xx 6 X xxxxxxxx chlorovodíkové (3.2). Zahřejte, přefiltrujte xxxxxx do xxxxxxx xxxxx x doplňte xx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx XXx asi 0,5 X).
Xxxxxxxx:
x) Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx důležité xxx xxxxxxxxx xxxx rizikům xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx, xxxx x xxxxxxx. X tohoto důvodu xxxx xxx vybavení xxxxxxxxx xxx přípravě xxxxxx xxx xxxxxx xxxx.
Xx snížení obecného xxxxxx kontaminace, pracujte x xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx čistým xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxx je xxxxxxx xxxxxxx na mnoho xxxx xxxxxxxxxxx, např. x nádobí, xxxxxxxxxx, xxxxxx, atd.
b) Xxxx xxxxxx, xxxxx má xxx žíhán, xx xxxxxxxx z přibližného xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx. X xxxxxxxx xxxxx s xxxxxx obsahem stopových xxxxx může být xxxxxxxx xxxxx s 10 xx 20 x xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx pouze 100 xx.
x) Žíhání xxxx xxx xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxx bez xxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx.
x) Teplota xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx překročit 475 °X.
5.1.2. Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
5.1.2.1. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xxxxx xxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx z xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxx 3.7.1, 3.8.1, 3.9.1 x 3.10.1 řadu xxxxxxxxxxxx roztoků, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx XXX okolo 0,5 N x (x xxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxx) xxxxxxxxxxx chloridu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,1 % Xx (xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx stopových xxxxx xxxx xxxxx x xxxxxxx citlivosti xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx typických xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx; v xxxxxxxxxx na xxxx x xxxxxxxxxx použitého xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxxx
|
μx Xx/xx |
0 |
0,5 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
|
xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.7.1) (1 xx = 100 μg Xx) |
0 |
0,5 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
|
+ xx 6 X XXx (3.2) |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
|
+ 10 xx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.11) x xxxxxxx xx 100 xx xxxxx. |
|||||||
Xxx
|
μx Xx/xx |
0 |
0,1 |
0,2 |
0,4 |
0,6 |
0,8 |
1,0 |
|
xx pracovního xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.8.1) (1 xx = 10 μx Xx) |
0 |
1 |
2 |
4 |
6 |
8 |
10 |
|
+ xx 6 N HCl (3.2) |
8 |
8 |
8 |
8 |
8 |
8 |
8 |
|
Xxxxxxx xx 100 xx xxxxx. |
|||||||
Xxxxxx
|
μx Mn/ml |
0 |
0,1 |
0,2 |
0,4 |
0,6 |
0,8 |
1,0 |
|
ml xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.9.1) (1 ml = 10 μx Xx) |
0 |
1 |
2 |
4 |
6 |
8 |
10 |
|
+ xx 6 X XXx (3.2) |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
|
+ 10 ml xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.11) x xxxxxxx xx 100 xx xxxxx. |
|||||||
Xxxxx
|
μx Xx/xx |
0 |
0,05 |
0,1 |
0,2 |
0,4 |
0,6 |
0,8 |
|
xx pracovního standardního xxxxxxx (3.10.1) (1 xx = 10 μx Xx) |
0 |
0,5 |
1 |
2 |
4 |
6 |
8 |
|
+ ml 6 N XXx (3.2) |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
|
+ 10 ml xxxxxxx chloridu lanthanitého (3.11) x xxxxxxx xx 100 xx xxxxx. |
|||||||
5.1.2.2. Xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx
X xxxxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx 5.1.1 xxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx být xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx 100 ml odměrné xxxxx x xxxxxxxx xx značku 0,5 X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (3.3).
X xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx alikvotní podíl xxxxxxx připraveného podle xxxx 5.1.1 do 100 ml odměrné xxxxx, přidejte 10 xx xxxxxxxx lanthanitého (3.11) a xxxxxxx xx xxxxxx 0,5 X xxxxxxxxx chlorovodíkovou (3.3) (xxx xxxxxx xxx 8 xxxxxxxx).
5.1.2.3. Xxxxx xxxxx
Xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx, xx xx pominut xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx roztok "0" xxxxxx xxx použit xxxx xxxxx.
5.1.2.4. Xxxxxx xxxxxxx absorpce
Změřte atomovou xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků x roztoku, který xx být xxxxxxxxxx, x použitím okysličujícího xxxxxxx xxxxxx-xxxxxxxx při xxxxxxxxxxxxx vlnových délkách:
Fe: 248,3 xx
Xx: 324,8 xx
Xx: 279,5 xx
Xx: 213,8 xx
Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
5.2. Xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx vzorek neobsahuje xxxxxxxxxx hmotu, xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx, xxx xx xx xxxxxxx x bodě 5.1.1 x) počínaje xxxxxx xxxxxxxxx. Odpaření x kyselinou xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx.
6. XXXXXXX XXXXXXXX
X použitím xxxxxxxxxx xxxxxx vypočtěte xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx prvku x xxxxxxx, který xx xxx analyzován x xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx stopového xxxxx xx kilogram xxxxxx (ppm).
7. OPAKOVATELNOST
Rozdíl xxxx výsledky xxxx xxxxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx nesmí xxxxxxxxx:
- 5 xx/xx x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx 50 xx/xx,
- 10 % z vyššího xxxxxxxx u xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx 50 xx 100 xx/xx,
- 10 xx/xx, x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx prvku xx 100 xx 200 mg/kg,
- 5 % x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx stopového xxxxx xxxx 200 xx/xx.
8. XXXXXXXX
Xxxxxxxxxx xxxxxxx množství xxxxxxx může xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x zinku. Takové xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxxxx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.11). Xxxxxxx, pokud je xxxxxx poměr ve xxxxxx Xx + Xx / X · 2, xxxx xxx xxxxxxxx roztoku xxxxxxxx lanthanitého (3.11) xx xxxxxxx pro xxxxxxx a xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
[1] 1 xx krmného xxxxxxxxxxxxxxx xx ekvivalentní 42 mezinárodním xxxxxxxxx (x.x.).
[2] Jiné metody xxxxx být xxxxxxx xx předpokladu, xx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx podobné xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
[3] Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx komerční xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
[4] Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx médium xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx výsledky.
[5] Xxxx xxxxxx mohou xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx bylo xxxxxxxxx, že dávají xxxxxxx bakteriální xxxxxxxx.
[6] Xxxx xxx použito xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx podobného xxxxxxx x dávající stejné xxxxxxxx, xxxx. xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx 1 (XX 327) s xxxxxxxxx oxoid xxxxx x. 3 (X 13).
[7] Xxxx být xxxxxxx jakékoli xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x dávající xxxxxx xxxxxxxx, xxxx. xxxxx xxxxxxxxxxxx médium 2 (CM 335) x přídavkem oxoid xxxxx x. 3 (X 13).
[8] Xxxx. XX 2 xx Xxxxxx Xxxxxx Xxxx, Xxxxxxx.
[9] Xxxxxx pícniny (xxxxxxx nebo xxxxx) xxxxx obsahují velká xxxxxxxx rostlinného xxxxxxx, xxxxx může xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxx xxx xxxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx být xxxxx dodržen xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx 5.1.1 x) xx xx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx vroucí xxxxx x vlažte jej xx platinového kelímku (4.3). Xxxxxx x xxxxxxx peci (4.1) xxx xxxxxxx xxx 550 °C, xxxxx xxxxxxx uhlíkatý xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Nechejte xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx vody a xxxxxxxx 10 až 15 xx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (3.4) x xxxxxxx xx sucha xxx asi 150 °X. Pokud zůstane xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx jej xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.4) x xxxxxxx xx xxxxx. Přidejte pět xxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.5) a zahřívejte xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx. Xx xxxxxxx 5 xx 6 N xxxxxxxx chlorovodíkové (3.2) x xxx 30 xx xxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx roztok xx 250 xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx (xxxxxxxxxxx HCL xxx 0,5 X). Xxxx xxxxxxxxxx stanovením xx xxxx 5.1.3.