Xxxx xxxxxxxx Xxxxxx
xx xxx 15. června 1978,
xxxxxx se stanoví xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx úřední kontrolu xxxxx
(78/633/XXX)
XXXXXX EVROPSKÝCH XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx na Xxxxxxx x xxxxxxxx Evropského xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxx 70/373/XXX xx xxx 20. července 1970 x zavedení xxxxx xxxxxx vzorků x xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx úřední xxxxxxxx xxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxx 2 xxxxxxx směrnice,
vzhledem x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxx, aby byla xxxxxxxxx kontrola krmiv xxxxxxxxx s xxxxxxxx xxxxx xxxxxx vzorků x xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx pro účely xxxxxxxx souladu xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx právními xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx a xxxxxxx krmiv;
vzhledem x xxxx, že xxxxxxxx xxxxxx 71/250/XXX xx xxx 15. xxxxxx 1971 [2], 71/393/EHS xx dne 18. xxxxxxxxx 1971 [3], 72/199/XXX xx xxx 27. xxxxx 1972 [4], 73/46/XXX ze xxx 5. xxxxxxxx 1972 [5], 74/203/XXX xx xxx 25. xxxxxx 1974 [6], 75/84/XXX xx dne 20. prosince 1974 [7] x 76/372/XXX xx dne 1. xxxxxx 1976 [8] xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx; že xxxxxx x práci xx xx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxx metod;
vzhledem x xxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx x souladu se xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx,
XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
1. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, aby xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx kontrolu krmiv, xx se xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx, xxxx, xxxxxxx x xxxxx, xxxxxxxxx v xxxxxxx x metodami xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
2. Obecná xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx 1 "Xxxx" xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 71/250/XXX, xx s xxxxxxxx xxxxx týkající se xxxxxxxx vzorku, xxx xx být analyzován, xxxxxxxx x xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 2
Xxxxxxx xxxxx xxxxxx 1. ledna 1979 x xxxxxxxx xxxxxx a správní xxxxxxxx nezbytné pro xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx x xxxx uvědomí Xxxxxx.
Xxxxxx 3
Xxxx směrnice xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X Xxxxxxx xxx 15. června 1978.
Xx Xxxxxx
Xxxx Gundelach
místopředseda
[1] Xx. věst. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Xx. xxxx. X 155, 12.7.1971, x. 13.
[3] Úř. xxxx. X 279, 20.12.1971, x. 7.
[4] Xx. xxxx. X 123, 29.5.1972, x. 6.
[5] Xx. věst. X 83, 30.3.1973, x. 21.
[6] Xx. věst. X 108, 22.4.1974, x. 7.
[7] Úř. xxxx. X 32, 5.2.1975, x. 26.
[8] Xx. věst. X 102, 15.4.1976, x. 8.
PŘÍLOHA
1. XXXXXXXXX ZINKBACITRACINU XXXXXX XX XXXXX
1. XXXX X XXXXXX
Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxxxxxxx x krmivech, koncentrátech x xxxxxxxxx. Xxxxx xxx stanovení xx 5 mg/kg (5 xxx) [1]. Metoda xxxx použitelná x xxxxxxxxxxx ovlivňujících xxxxx, xxxxxxx xxxxxxx množství xxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx.
2. XXXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xX 2 xxxxx methanol/voda/kyselina xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xx xX 6,5, koncentrován (xxxxx xx xx xxxxx) x zředěn. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx agaru xxxxxxxxxxx mikroorganizmem Micrococcus xxxxxx (Syn. X. xxxxxx). Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx mikroorganizmu. Průměr xxxxxx xxx xx xxxxx xxxxxx logaritmu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nad xxxxxx xxxxxxxxx antibiotických xxxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXXXXXXXX: XXXXXXXXXXX XXXXXX XXXX 10240
3.1. Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xx šikmým xxxxxx (4.1). Inkubujte 24 xxxxx xxx 30 xx 37 °X, skladujte x xxxxxxxxxx při 4 °X x xxxxx xxxxxxxxxx každé dva xxxxx xx šikmý xxxx.
3.2. Příprava xxxxxxxxxxx xxxxxxxx [2]
Smyjte xxxxxxxx xx zkumavky xx xxxxxx agarem (3.1) xx xxxxxxx 2 xx 3 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3). Tuto suspenzi xxxxxxxx x xxxxxxxxxx 250 xx kultivačního xxxxx (4.1) x Xxxxxxx baňce x xxxxxxxxx 18 xx 20 hodin xxx 30 až 37 °X. Smyjte xxxxxxxxxxxxxxx xx 25 xx xxxxxxx xxxxxxxx sodného (4.3) x xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx roztokem xxxxxxxx sodného (4.3). Xxxxxxxx xxxxxxxxx suspenze xxxx xxx okolo 75 %, xxxxxx xxx 650 xx x 1 xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3).
4. XXXXXXXXXX MÉDIA A XXXXXXXXXX
4.1. Kultivační xxxx [3]
|
Xxxxxx x xxxx |
6,0 x |
|
Xxxxxxx |
4,0 g |
|
Extrakt z xxxxxxx |
3,0 x |
|
Xxxxxxx z xxxx |
1,5 x |
|
Xxxxxxx |
1,0 g |
|
Agar |
15,0 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
xX 6,5 xx 6,6 (xx xxxxxxxxxxx) |
|
|
4.2. Xxxxxxxx půda [4] |
|
|
Xxxxxxx |
10,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxxxxx |
3,0 g |
|
Extrakt x xxxx |
1,5 g |
|
Glukosa |
1,0 x |
|
Xxxx |
20,0 x |
|
Xxxxx 80 |
1 xx |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
xX 6,5 (xx xxxxxxxxxxx) |
|
4.3. Roztok xxxxxxxx xxxxxxx 0,8 % (xxxxxx-xxxxxxxxxx): xxxxxxxxx 8 x xxxxxxxx xxxxxxx x.x. xx xxxx x zřeďte xx 1000 xx; xxxxxxxxxxxx.
4.4. Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx/xxxx/xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x.x. (d: 1,18 až 1,19): 80/17,5/2,5 (xxxxxxxx).
4.5. Xxxxxxxxx xxxx, pH 6,5
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx X2XXX4 x.x. (22,15 x).
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx K2HPO4 x.x (27,85 g).
Voda xx 1000 xx.
4.6. Xxxxxxxx chlorovodíková x.x. (x: 1,18 xx 1,19).
4.7. Kyselina xxxxxxxxxxxxxx x.x. (0,1 N).
4.8. X xxxxxx hydroxidu xxxxxxx x.x.
4.9. Roztok xxxxxxxxxxxxxx červeně 0,04 % (xxxxxx-xxxxxxxxxx): xxxxxxxxx 0,1 x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x 18,5 xx 0,01 X xxxxxxx xxxxxxxxx sodného. Xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx 250 xx x xxxxxxxxxxx.
4.10. Standardní xxxxx: xxxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx (x x.x.).
5. XXXXXXXXXX XXXXXXX
Xxxxxxx xxxxxxxx standardního xxxxxxxxxxxxxxx (4.10) xxxxxxxxxxxx 1050 x.x. (xxxxx uvedené xxxxxxxx). Xxxxxxxx 5 xx 0,1 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (4.7) x xxxxxxxx xxxxx 15 minut. Xxxxxxxx 30 xx xxxx, xxxxxxx pH na 4,5 fosfátovým pufrem xX 6,5 (4.5) (xxxxx 4 ml), xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx 50 xx x xxxxx promíchejte (1 xx = 21 x.x.).
X tohoto xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xX 6,5 (4.5) xxxxxxxxxxx roztoky:
|
S8 |
0,42 |
i.u./ml |
|
S4 |
0,21 |
i.u./ml |
|
S2 |
0,105 |
i.u./ml |
|
S1 |
0,0525 |
i.u./ml |
6. PŘÍPRAVA XXXXXXXX
6.1. Xxxxxxxx
6.1.1. Koncentráty, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx vzorku 2,0 xx 5,0 x, přidejte 30 xx xxxxx (4.4) x xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx, xx xx xX okolo 2. Xxxxxxxx 10 xxxxx, xxxxxxxx 30 ml xxxxxxxxxxx xxxxx xX 6,5 (4.5) a xxxxxxxx 15 minut. Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5), xxxxxx obdrželi xxxxxxxxx obsah xxxxxxxxxxxxxxx 0,42 x.x./xx) (= X8).
6.1.2. Xxxxxxxxxx koncentráty
Odvažte xxxxxxxx xxxxxx 10,0 x, xxxxxxxx 50 xx xxxxx (4.4) x krátce protřepejte. Xxxxxxxxxxxx, že xx xX xxxxx 2. Xxxxxxxx 10 xxxxx, xxxxxxxx 50 xx xxxxxxxxxxx pufru pH 6,5 (4.5) a xxxxxxxx 15 xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxxx pufrem (4.5), xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx 0,42 x.x./xx) (= X8).
6.1.3. Xxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx 10,0 x xxxxxx (20,0 x xxx očekávaný obsah xxxxxxxxxxxxxxx 5 mg/kg), xxxxxxxx 25 xx xxxxx (4.4) a xxxxxxxxxxxxx xxx 10 xxxxx. Přidejte 25 xx xxxxxxxxxxx pufru xX 6,5 (4.5), xxxxxxxx 15 xxxxx x xxxxxxxxx. Odeberte 20 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x upravte xX na 6,5 x xxxxxxxx 1 X xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.8) x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.9) jako xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx 4 xx xx xxxxxxxx odpařovači xxx xxxxxxx nepřesahující 35 °X. Zřeďte xxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx zinkbacitracinu 0,42 x.x./xx (= X8).
6.2. Xxxxxxxx xxxxxxx
X xxxxxxx U8 xxxxxxxxx xxxxxx X4 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,21 x.x./xx), X2 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,105 x.x./xx) x X1 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,0525 x.x./xx) x xxxxxxxx xxxxxxxxxx ředění (1 + 1) xxxxxxxxxx xxxxxx (4.5).
7. XXXXXXXX POSTUP
7.1. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.2) xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.2) při xxx 50 °X. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx zkušebním xxxxxx (4.2) xxxxxxxx xxxxxxxx požadované bakteriální xxxxxxxx, které xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx zóny x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx zinkbacitracinu.
7.2. Xxxxxxxx xxxxx
Xxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxx x miskách za xxxxxxx čtyřech xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (X8, X4, X2, X1) x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (X8, X4, X2, X1). Xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx. Xxx xxxxx xxxx xxxxxxx plotny, xxxxx xxxx dostatečně xxxxx, aby xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxx 8 xxxxxx x xxxxxxx 10 xx 13 mm x xxxxxxx 30 xx xxxx jejich xxxxxx. Xxxxx může xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx sestávajících z xxxxxxxx skleněných xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxx, 200 xx x průměru a 20 xx xxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx (4.2), xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxx 7.1, xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxx 2 xx xxxxxx (50 xx xx xxxxx x xxxxxxx 200 xx). Xxxxxxxx ustát x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xxxx a xxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx objemy xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxx 0,10 x 0,15 ml xx díru, xxxxx xxxxxxx).
Xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx, xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx 32 xxxxxxxxxxx zón.
7.3. Inkubace
Inkubujte xxxxxx 16 xx 18 xxxxx při 28 xx 30 °X.
8. VYHODNOCENÍ
Změřte xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxxxx xx 0,1 xx. Xxxxxxxxxxxx střední xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx křivky xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx je xx xxxxxxx xxxx.
Xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxx xxx xxxxxxxx úroveň xxxxxxxxx (XX) s použitím xxxxxxx:
(x) XX = 7 X1 + 4 X2 + X4 - 2 X8 / 10
Xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxx pro xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (XX) s xxxxxxxx xxxxxxx:
(x) SH = 7 X8 + 4 X4 + X2 - 2 X1 / 10
Xxxxxxx xxxxxxxxx "nejvhodnější" xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxx extraktu (XX) xxxxxxxxxx U1, X2, X4 a X8 xx X1, X2, X4 x X8 x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx XX x XX xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx a xxxxxx je, xxxxxx xxxxxxxx "nejvhodnější" xxxxxx xxx roztok standardu. Xxxxxxx zaznamenejte XX x UH x xxxxxx xx, xxxxxx xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxxxxx xxx xxxxxxx.
X xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxx mohou xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, pokud xx xxxxxxx (XX-XX) a (XX-XX) xxxxxx x xxxx xxx 10 % xx xxxxxx xxxxxxx hodnoty.
Pokud jsou xxxxxx shledány jako xxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxx X1 x X1 xxxx X8 x X8 x SL, XX, XX a XX xxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx "nejvhodnější" xxxxxx:
x´) SL = 5 X1 + 2 S2 - X4 / 6 xxxx 5 X2 + 2 X4 - X8 / 6
x´) XX = 5 X4 + 2 S2 - X1 / 6 xxxx 5 X8 + 2 X4 - S2 / 6
x xxxxxxx pro XX x UH. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx, xx xxx xxxxxxxx počítán xx tří xxxxxx, xxxx být xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxx xxxx křivky považovány xx paralelní, xxxxxxxxx xxxxxxxxxx relativní xxxxxxxx (xxx. A) xxxxxx xxxxx x následujících xxxxxx.
Xxx xxxxx úrovně
(c) xxx X = (X1 + X2 + X4 + X8 - X1 - X2 - X4 - X8) × 0,602 / X4 + U8 + X4 + X8 - X1 - X2 - X1 - X2
Xxx xxx xxxxxx
(x) xxx X = (X1 + X2 + X4 - X1 - X2 - X4) × 0,401 / X4 + X4 - X1 - X1
xxxx
x´) xxx X = (X2 + X4 + X8 - X2 - X4 - X8) × 0,401 / X8 + X8 - X2 - X2
Xxxxxxxx xxxxxxxx = xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx relativní xxxxxxxx (xxx. X) xxxxxx xxxxxxx x). Xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxx xxxx xxx xxxxxxx v xxxxxxxxx xxxxxx.
9. XXXXXXXXXXXXXX
Xxxxxx mezi xxxxxxxx xxxx stanovení xxxxxxxxxxx u xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
20 % xxx. x vyšší xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx od 5 x xx 25 xx/xx;
5 mg/kg x xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx větší xxx 25 a xx 50 mg/kg;
10 % xxx. z xxxxx xxxxxxx pro obsahy xxx 50 xx/xx.
2. XXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXXX XXXXXX XX XXXXX
1. ÚČEL X ROZSAH
Tato xxxxxx xx určena pro xxxxxxxxx flavofosfolipolu v xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxx je 1 xx/xx (1 xxx).
2. XXXXXXX
Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx za xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Po odstředění xx extrakt přečištěn (xxx je xx xxxxx) na xxxxxx x xxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx difúze xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx Staphylococcus xxxxxx. Difúze xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx. Průměr xxxxxx xxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxx použitých xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXXXXXXXX: XXXXXXXXXXXXXX XXXXXX XXXX 6538 X
3.1. Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxx Staphylococcus aureus xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx (4.1). Xxxxxxxxx 24 xxxxx xxx 37 °X, xxxxxxxxx x chladničce xxx 4 °X x znovu přeočkujte xxxxx měsíc xx xxxxx xxxx.
3.2. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx [5]
Xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (3.1) x týdně xx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx 24 xxxxx při 37 °X a xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx xxx 4 °C.
24 xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx kulturou xxx xx xxxxx xxxxxxxx obsahující xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1). Xxxxxxxxx 16 až 18 xxxxx při 37 °X. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxx sodného (4.3). Světelná xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxx 40 %, xxxxxx xxx 578 xx x 1 xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (4.3).
4. XXXXXXXXXX XXXXX X CHEMIKÁLIE
4.1. Kultivační xxxxxx [6]
|
Xxxxxx x xxxx |
6,0 x |
|
Xxxxxxx |
4,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxxxxx |
3,0 x |
|
Xxxxxxx x masa |
1,5 x |
|
Xxxxxxx |
1,0 x |
|
Xxxx |
15,0 x |
|
Xxxx |
1000 ml |
|
pH 6,5 (xx sterilizaci) |
|
|
4.2. Xxxxxxxx xxxxxx |
|
|
4.2.1. Xxxxxxxx xxxxxx [7] |
|
|
Xxxxxx x xxxx |
6,0 x |
|
Xxxxxxx z xxxxxxx |
3,0 x |
|
Xxxxxxx x xxxx |
1,5 g |
|
Agar |
10,0 x |
|
Xxxx |
1000 xx |
|
xX 6,5 (xx xxxxxxxxxxx) |
|
4.2.2. Xxxxxxxx vrstva
Jako x bodě 4.1, x xxxxxxxxx 2,0 x silikonové xxxxxxxxxxx xxxxxx [8].
4.3. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 0,4 % (xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx): xxxxxxxxx 4 g chloridu xxxxxxx x.x. xx xxxx x xxxxxx xx 1000 xx; xxxxxxxxxxxx.
4.4. Methanol, xxxxx.
4.5. Xxxxxxxx 50 % (xxxxxxxxxx): zřeďte 500 xx xxxxxxxxx (4.4) 500 xx vody.
4.6. Xxxxxxxx 80 % (xxxxxxxxxx): zřeďte 800 xx xxxxxxxxx (4.4) 200 xx xxxx.
4.7. Xxxx (xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxx x.x.
4.8. Xxxxxxxxxxx roztok xxxxxxxx xxxxxxxxxx 1,5 % (xxxxxx-xxxxxxxxxx): xxxxxxxxx 1,5 x xxxxxxxx xxxxxxxxxx x.x. xx 20 xx xxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxx (4.4) xx objemu 100 xx.
4.9. Xxxxxxxxxx xxxxx: Xxxxx 50 Wx8, 20 xx 50 xxxx, Xx xxxxx (xxx. Xxxxx x. 41600) xxxx ekvivalent.
4.10. Xxxxxxxxx xxxxx: Xxxxx 1x2, 50 xx 100 xxxx, Xx xxxxx (xxx. Serva x. 41010) xxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx 12 až 14 xxxxx x 80 % xxxxxxxxx (4.6).
4.11. Skelná xxxx.
4.12. xX xxxxxxxxxxxx papírek (xX 6,06 xx 8.1).
4.13. Xxxxxxxx askorbová.
4.14. Xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx x známé xxxxxxxx.
5. XXXXXXXXX
5.1. Xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx: 9 xx, xxxxx 150 xx 200 xx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxx x skleněným xxxxxxxx (ke spojení x xxxxxxxxx nálevkou (5.2)) x horní xxxxx.
5.2. Xxxxxxxxx xxxxxxx 250 xx, xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx.
5.3. 250 xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
5.4. Xxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx.
6. XXXXXXXXXX XXXXXXX
Xxxxxxxxx přesně xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx látky (4.14) x 50 % xxxxxxxxx (4.5) x xxxxxx, abyste xxxxxxxx zásobní roztok xxxxxxxxxx 100 μg xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxx je xxxxx xxxxxx skladován v xxxxxxxxxxx baňce při 4 °X, xx xxxxxxxx xx xxx xxxxxx.
X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 50 % xxxxxxxxxx (4.5) xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
|
X8 |
0,2 |
μx/xx |
|
X4 |
0,1 |
μx/xx |
|
X2 |
0,05 |
μx/xx |
|
X1 |
0,025 |
μx/xx |
7. PŘÍPRAVA XXXXXXXX
7.1. Xxxxxxxx
7.1.1. Koncentráty, xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx 2,0 xx 5,0 x, xxxxxxxx asi 150 xx kyseliny xxxxxxxxx (4.13). Homogenizujte xx 150 xx 50 % xxxxxxxxx (4.5) x xxxxxxx xxxxx (5.3) x xxxxxxx xX na 8,1 xx 8,2 xxx 400 mg xxxx (xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxxx (4.7). Xxxxxxxxxxxx xX indikačním xxxxxxxx (4.12). Xxxxxxxx xxxxx 15 xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxx xX xx 8,1 xx 8,2 tris (xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxxx (4.7) x xxxxx 10 xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx (5.4) xxx xxxxxx míchání. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx x dekantujte xxxxxxx.
7.1.2. Xxxxxxx krmiva
Odvažte xxxxxxxx 5,0 xx 30,0 x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx 30 μx xxxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx se 150 ml 50 % xxxxxxxxx (4.5) x xxxxxxx xxxxx (5.3) x xxxxxxx xX xx 8,1 xx 8,2 xxx 400 mg xxxx (xxxxxxxxxxxx) aminometanem (4.7). Xxxxxxxxxxxx xX xxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.12). Xxxxxxxx xxxxx 15 xxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxx xX na 8,1 xx 8,2 tris (xxxxxxxxxxxx) xxxxxxxxxxxx (4.7) x xxxxx 10 xxxxx xxx zpětným xxxxxxxxx (5.4) při xxxxxx míchání. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx extrakt.
7.2. Xxxxxxxxxx (tento krok xxxx xxx pominut x koncentrátů, premixů x xxxxxxxxxxx xxxxx)
Xxxxxxxxxxx 110 ml xxxxxxxx x 11 x xxxxxxxxxxxx měniče (4.9), xxxxx jednu xxxxxx xxx zpětným xxxxxxxxx (5.4) xxx stálém xxxxxxx. Xxxxxxx kationtový xxxxx odstředěním xxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx 100 xx xxxxxxxx xx 150 xx xxxxxxxxx (4.4) a skladujte xxxxxx 12 xx 15 xxxxx xxx 4 °X. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xx roztok xxxxxxx.
Xxxxxx xxxxx ze skelné xxxx (4.11) xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (5.1), xxxxxx xx xxxxxxx 5 xx xxxxxxxxxxx xxxxxx (4.10) a promyjte xxxxxx 100 xx 80 % xxxxxxxxx (4.6). S xxxxxxxx xxxxxxx (5.2), přeneste xx kolony xxxxxxx 100 ml filtrátu, x xxxxxxx se xxxxxxx, xx xxxxxxxx 16 μg xxxxxxxxxxxxxxxx (200 xx xx 30 x vzorku xxxxxx při 1 xxx). Xxx xx xx xxxxx, xxxxxx xxxxxxx před aplikací xx xxxxxx 80 % xxxxxxxxxx (4.6), xxxxxx xxxxxxxx očekávaný xxxxx flavofosfolipolu 16 μx/100 ml. Průtok xxxxxxx xx xxx 2 xx/xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx 50 xx 80 % xxxxxxxxx (4.6) a xxxxxxxxx výtok.
Eluujte xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx chloridu xxxxxxxxxx (4.8) při xxxxxxx xxx 2 xx/xxxxxx. Seberte 50 xx xxxxxx do xxxxxxx baňky, přidejte 30 xx xxxx x promíchejte. Xxxxx xxxxxx xx xxx xxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx 0,2 μx/xx (= X8).
7.3. Xxxxxxxx xxxxxxx
Xxx xx xx nutné (xx. xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx), zřeďte xxxxxxx získaný v xxxx 7.1.1 50 % xxxxxxxxxx (4.5), xxxxxx obdrželi xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx 0,2 μx/xx (= U8).
Z xxxxxxx U8 xxxxxxxxx xxxxxx X4 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,1 μx/xx), X2 (očekávaný xxxxx: 0,05 μx/xx) x X1 (xxxxxxxxx xxxxx: 0,025 μx/xx) x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (1 + 1) 50 % methanolem (4.5).
8. ZKUŠEBNÍ XXXXXX
8.1. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.2.2) xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.2) xxx xxx 50 °X. Předběžnými xxxxxx xx miskách xx xxxxxxxxx médiem (4.2.2) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx suspenze, které xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx inhibiční xxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (xxx 30 xx/xxxx).
8.2. Xxxxxxxx misek
Difúze xx xxxxx je xxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx standardního xxxxxxx (X8, S4, X2, X1) a xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoku (X8, X4, X2, X1). Xxxx čtyři xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx umístěny xx xxxxx plotny. Pro xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxxxxxx xxxxxx v xxxxx xxxxxxx 8 xxxxxx x xxxxxxx 10 xx 13 xx a xxxxxxx 30 xx xxxx xxxxxx středy. Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx hliníkovým xxxx xxxxxxxxx rámem 200 xx v xxxxxxx x 20 mm xxxxx.
Xxxxxxxx xx plotny xxxxxxxx xxxxx (4.2.1), xxx xxxxxxxxx vrstvu xxx 1,5 mm xxxxxx (45 xx xx xxxxx o xxxxxxx 200 xx). Xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx pozici x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (4.2.2) xxxxxxxxxxxx xxxx x bodě 8.1, xxx xxxxxxxxx xxxxxx 1 mm xxxxxx (30 xx xx xxxxx x xxxxxxx 200 mm). Xxxxxxxx znovu ustát x xxxxxxxxxx pozici, xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx nich xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (mezi 0,10 x 0,15 xx xx xxxx, xxxxx xxxxxxx).
Xxxxxx koncentraci xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx tak, xx každému stanovení xxxxxxx vyhodnocení 32 xxxxxxxxxxx zón.
8.3. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx 16 xx 18 hodin xxx 28 xx 30 °X.
9. VYHODNOCENÍ
Změřte průměr xxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxxxx xx 0,1 xx. Xxxxxxxxxxxx střední xxxxxxx pro každou xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx zón. Narýsujte xxxxxxxxxxxx xxxxxx standardního xxxxxxx x extraktu, xxxxxxxxx xxxx xx xx uvedeno xxxx.
Xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" xxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxxx:
(x) SL = 7 S1 + 4 X2 + X4 - 2 X8 / 10
(x) XX = 7 X8 + 4 X4 + X2 - 2 X1 / 10
Xxxxxxx vypočtěte "xxxxxxxxxxxx" xxxx pro xxxxxxxx úroveň xxxxxxxx (XX) x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (XX) xxxxxxxxxx X1, X2, X4 x X8 xx X1, X2, X4 x S8 xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx hodnoty XX x SH xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xx, xxxxxx obdrželi "xxxxxxxxxxxx" křivku xxx xxxxxx standardu. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx XX a XX a xxxxxx xx, xxxxxx xxxxxxxx "xxxxxxxxxxxx" křivku xxx xxxxxxx.
X xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx by xxxx xxx xxxxxx paralelní. Xxx xxxxxxxxx účely xxxxx být křivky xxxxxxxxxx za paralelní, xxxxx xx hodnoty (XX-XX) a (XX-XX) xxxxxx x xxxx xxx 10 % xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx jako xxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxx X1 x X1 xxxx X8 x X8 x XX, XX, XX x XX vypočteny xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, které xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx "nejvhodnější" křivky:
a´) XX = 5 X1 + 2 X2 - S4 / 6 xxxx 5 X2 + 2 S4 - X8 / 6
x´) XX = 5 X4 + 2 X2 - S1 / 6 xxxx 5 S8 + 2 X4 - X2 / 6
a xxxxxxx xxx XX x UH. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx musí xxx kontrolovány xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx, že byl xxxxxxxx xxxxxxx xx xxx úrovní, xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx považovány za xxxxxxxxx, xxxxxxxxx logaritmus xxxxxxxxx aktivity (xxx. X) xxxxxx jedné x následujících xxxxxx.
Xxx xxxxx xxxxxx
(x) xxx X = (X1 + X2 + X4 + X8 - X1 - X2 - X4 - S8) × 0,602 / X4 + X8 + X4 + S8 - X1 - X2 - X1 - X2
Xxx xxx xxxxxx
(x) log X = (X1 + X2 + X4 - X1 - X2 - X4) × 0,401 / X4 + X4 - X1 - X1
xxxx
x´) log X = (X2 + X4 + X8 - X2 - X4 - X8) × 0,401 / X8 + S8 - U2 - X2
Xxxxxxxx xxxxxxxx = xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx za xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx stanovení. Xxxxx xxxx paralelnost xxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx relativní aktivity (xxx. A) prostřednictvím xxxxxxx x). Xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx za xxxxxxxxx a xxxx xxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx hlášení.
10. XXXXXXXXXXXXXX
Xxxxxx xxxx výsledky xxxx stanovení xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx vzorku xxxxxxx analytikem xxxxx xxxxxxxxx:
0,5 xx/xx v xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx od 1 xx 2 xx/xx;
25 % xxx. x xxxxx xxxxxxx xxx obsahy xxxxx xxx 2 xx10 xx/xx;
20 % rel. x xxxxx xxxxxxx xxx obsahy větší xxx 10 do 25 xx/xx;
5 xx/xx x absolutní xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxx 25 xx 50 mg/kg;
10 % xxx. z vyšší xxxxxxx pro obsahy xxx 50 xx/xx.
3. XXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXX XXXXXX, XXXX, XXXXXXX X XXXXX
1. XXXX X XXXXXX
Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx stopové xxxxx xxxxxx, xxx, xxxxxx x xxxxx x xxxxxxxx. Xxxxx xxxx xxxxxxxxx jsou:
železo (Xx): 20 xx/xx
xxx (Xx): 10 xx/xx
xxxxxx (Xx): 20 mg/kg
zinek (Xx): 20 xx/xx
2. XXXXXXX
Xxxxxx xx převeden xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx obsažena. Prvky xxxxxx, xxx, xxxxxx x zinek xxxx xxxxxxxxx po xxxxxxxxxx xxxxxxx atomovou absorpční xxxxxxxxxxxxxxxxx.
3. XXXXXXXXXX
Xxxxxx xxxxxxxx
Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxxxxxx xxxx, u které xxxx xxxxxxxxx, xx xx bez kationtů, xxxxxxxx buď xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vody x xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx přístroji xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxx být nejméně xxxxxxxxxx xxxxxxx (x.x.). Xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx pokusem. Pokud xx xx nutné, xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx standardních xxxxxxx xxxxxxxxx níže, xxxxx být použity xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxx garantovány x xxxx použitím byly xxxxxxxxxxxxxxx.
3.1. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x.x. (d: 1,19).
3.2. Xxxxxxxx chlorovodíková p.a. (6 N).
3.3. Kyselina xxxxxxxxxxxxxx p.a. (0,5 X).
3.4. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx 38 až 40 % (objemových) mající xxxxx xxxxxx xxxxx xxx 1 xx Xx/xxxx x zbytek xx odpaření menší xxx 10 xx (xxxx xxxxxx)/xxxx.
3.5. Xxxxxxxx xxxxxx x.x. (x: 1,84).
3.6. Xxxxxxx vodíku x.x. (přibližně 100 xxxxxx kyslíku (30 % xxxxxxxxxx)).
3.7. Standardní xxxxxx xxxxxx (1000 μx Fe/ml) xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: xxxxxxxxx 1 x xxxxxxxxx drátu x.x. xx 200 xx 6 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2), xxxxxxxx 16 xx xxxxxxxx xxxxxx (3.6) x doplňte do xxxxxxx xxxxx vodou.
3.7.1. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx roztok xxxxxx (100 μg Xx/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (3.7) 1 + 9 xxxxx.
3.8. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx (1000 μx Xx/xx) xxxxxxxxxx následovně: xxxxxxxxx 1 x xxxx v práškové xxxxx (x.x.) ve 25 ml 6 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2), xxxxxxxx 5 xx peroxidu xxxxxx (3.6) a doplňte xx jednoho xxxxx xxxxx.
3.8.1. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx (10 μx Cu/ml) xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (3.8) 1 + 9 vodou a xxxxx xxxxxxxx výsledného xxxxxxx 1 + 9 vodou.
3.9. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (1000 μx Mn/ml) připravený xxxxxxxxxx: xxxxxxxxx 1 x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx (p.a.) xx 25 xx 6 N xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2), přidejte 5 xx xxxxxxxx xxxxxx (3.6) x xxxxxxx xx jednoho xxxxx vodou.
3.9.1. Pracovní xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (10 μx Xx/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxxx standardního xxxxxxx (3.9) 1 + 9 vodou x potom xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 1 + 9 vodou.
3.10. Xxxxxxxxxx xxxxxx zinku (1000 μg Xx/xx) xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: rozpusťte 1 x xxxxx xx xxxxx pásku xxxx xxxxxx (p.a.) xx 25 ml 6 N xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2) x xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
3.10.1. Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (10 μx Xx/xx) xxxxxxxxxx zředěním standardního xxxxxxx (3.10) 1 + 9 xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx 1 + 9 xxxxx.
3.11. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx: xxxxxxxxx 12 x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 150 xx xxxx, xxxxxxxx 100 xx 6 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2) x xxxxxxx xx xxxxxxx litru xxxxx.
4. XXXXXXXXX
4.1. Xxxxxxx xxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx.
4.2. Xxxxxxxx nádobí xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx a xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx jsou výlučně xxxxxxxxxxx xxx stanovení xxxxxxxxx prvků.
4.3. Xxxxxxxxx xxxxxxx a (volitelně) xxxxxxxx xxxxxxx.
4.4. Xxxxxxx xxxxxxxxx spektrofotometr xxxxxxxxx xxxxxxxxx metody, xx xx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx rozsahu.
5. XXXXXX
5.1. Xxxxxx xxxxxxxxxx organickou xxxxx
5.1.1. Žíhání x xxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx [9]
i) Vložte 5 až 10 x vzorku, odváženého x přesností na 0,2 xx, xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.3) (xxx xxxxxxxx b)), vysušte x xxxxxxx xxx 105 °C a xxxxxx kelímek do xxxxxxx xxxxxxx xxxx (4.1). Xxxxxxx xxx (xxx poznámka c)) x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx 470 xx 475 °X xx xxx 90 xxxxx. Xxxxxxxx tuto xxxxxxx 4 až 16 hodin (např. xxxx noc), xxx xx odstranil xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxx xxxxxxxx d)).
Vymyjte kelímek xxxxxx xxx 5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.1) x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xx kádinky (xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx díky tvorbě XX2). Přidejte xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (3.1) za xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx šumění. Xxxxxxx xx sucha xx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx přidejte xx xxxxxx 15 xx 6 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2) x xxxxxxxx xxx 120 xx xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxx ponechána v xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxx do xxxx x xxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xxx není xxxxx nerozpuštěný popel. Xxxxxxxxxxxx přes xxxxxxxxx xxxxx bez xxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xx 250 xx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx 5 xx horké 6 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2) x xxxxxxx vroucí xxxxx. Xxxxxxx odměrnou xxxxx xx značku xxxxx (xxxxxxxxxxx XXx xxx 0,5 X).
xx) Xxxxx xx zbytek xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxx), xxxxx xxx xxxx xx pece x xxxxxxx znovu xxx 450 xx 475 °X. Xxxx xxxxxx, xxxxx vyžaduje xxxxx několik xxxxx (xxx xxx xx xxx xxxxx), xx xxxxxxxxx, xxxx xx xxxxx bílý xxxx xxxxx xxxx. Rozpusťte xxxxxx xxx 2 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.1), odpařte do xxxxx a xxxxxxxx 5 xx 6 X kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (3.2). Zahřejte, xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx odměrné xxxxx a doplňte xx xxxxxx vodou (xxxxxxxxxxx XXx xxx 0,5 X).
Xxxxxxxx:
x) Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx být xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx zinkem, xxxx a xxxxxxx. X xxxxxx důvodu xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx přípravě xxxxxx xxx xxxxxx xxxx.
Xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, pracujte x bezprašné xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx čistým xxxxxxxxx x pečlivě xxxxxxxx nádobím. Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxx kontaminace, xxxx. x xxxxxx, chemikálií, xxxxxx, atd.
b) Xxxx xxxxxx, který má xxx žíhán, je xxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxx stopového xxxxx x krmivu xx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx spektrofotometru. X xxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx může xxx xxxxxxxx začít s 10 až 20 x vzorku x xxxxxxx konečný xxxxxx xx xxxxx 100 xx.
x) Žíhání musí xxx prováděno x xxxxxxx peci xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx.
x) Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx nesmí xxxxxxxxx 475 °C.
5.1.2. Spektrofotometrické xxxxxxxxx
5.1.2.1. Xxxxxxxx kalibračních xxxxxxx
Xxx xxxxx prvek, xxxxx xx xxx xxxxxxxx, připravte z xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx dle xxxx 3.7.1, 3.8.1, 3.9.1 x 3.10.1 řadu xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, každý xxxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxx XXX xxxxx 0,5 X x (x xxxxxxx železa, xxxxxxx x xxxxx) xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0,1 % Xx (xxxxxxxxxx-xxxxxxxxxx). Koncentrace xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx ležet x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx; x xxxxxxxxxx xx typu x citlivosti xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxx nutno xxxxxx xxxxx koncentrace.
Železo
|
μg Xx/xx |
0 |
0,5 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
|
xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (3.7.1) (1 xx = 100 μg Xx) |
0 |
0,5 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
|
+ xx 6 X XXx (3.2) |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
|
+ 10 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.11) x doplnit xx 100 ml xxxxx. |
|||||||
Xxx
|
μx Xx/xx |
0 |
0,1 |
0,2 |
0,4 |
0,6 |
0,8 |
1,0 |
|
xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.8.1) (1 xx = 10 μx Xx) |
0 |
1 |
2 |
4 |
6 |
8 |
10 |
|
+ xx 6 X HCl (3.2) |
8 |
8 |
8 |
8 |
8 |
8 |
8 |
|
Xxxxxxx do 100 xx vodou. |
|||||||
Mangan
|
μg Xx/xx |
0 |
0,1 |
0,2 |
0,4 |
0,6 |
0,8 |
1,0 |
|
xx xxxxxxxxxx standardního xxxxxxx (3.9.1) (1 xx = 10 μx Xx) |
0 |
1 |
2 |
4 |
6 |
8 |
10 |
|
+ xx 6 X HCl (3.2) |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
|
+ 10 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.11) x xxxxxxx do 100 ml vodou. |
|||||||
Zinek
|
μg Xx/xx |
0 |
0,05 |
0,1 |
0,2 |
0,4 |
0,6 |
0,8 |
|
xx pracovního standardního xxxxxxx (3.10.1) (1 xx = 10 μx Xx) |
0 |
0,5 |
1 |
2 |
4 |
6 |
8 |
|
+ xx 6 X HCl (3.2) |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
7 |
|
+ 10 ml xxxxxxx xxxxxxxx lanthanitého (3.11) x xxxxxxx xx 100 xx xxxxx. |
|||||||
5.1.2.2. Příprava xxxxxxx xxx xxxxxxx
X xxxxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx 5.1.1 xxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Pokud xx nezbytné xxxxxxx xxxx koncentraci xx xxxxxx kalibračních xxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx do 100 xx xxxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xx značku 0,5 X xxxxxxxxx chlorovodíkovou (3.3).
X xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx x zinku xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.1.1 do 100 ml odměrné xxxxx, xxxxxxxx 10 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.11) x xxxxxxx xx xxxxxx 0,5 X kyselinou xxxxxxxxxxxxxxx (3.3) (xxx rovněž xxx 8 xxxxxxxx).
5.1.2.3. Xxxxx xxxxx
Xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx kroky xxxxxxx xxxxx toho, že xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxx roztok "0" xxxxxx xxx použit xxxx xxxxx.
5.1.2.4. Měření xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků x roztoku, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx, x použitím xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx-xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx:
Xx: 248,3 xx
Xx: 324,8 xx
Xx: 279,5 xx
Xx: 213,8 nm
Proveďte xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
5.2. Minerální xxxxxx
Xxxxx vzorek xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, není xxxxxxxx spalování. Xxxxxxxxxx, xxx je xx xxxxxxx x xxxx 5.1.1 x) počínaje xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx.
6. XXXXXXX VÝSLEDKŮ
S xxxxxxxx xxxxxxxxxx křivky xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx x vyjádřete xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx kilogram xxxxxx (ppm).
7. XXXXXXXXXXXXXX
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx stanovení provedených x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx analytikem xxxxx xxxxxxxxx:
- 5 xx/xx x xxxxxxxxx hodnotě x obsahů příslušného xxxxxxxxx xxxxx xx 50 mg/kg,
- 10 % x xxxxxxx xxxxxxxx u xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx 50 xx 100 xx/xx,
- 10 xx/xx, x absolutní xxxxxxx u obsahů xxxxxxxxxxx stopového xxxxx xx 100 xx 200 xx/xx,
- 5 % z vyššího xxxxxxxx u xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 200 xx/xx.
8. XXXXXXXX
Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx ovlivňovat xxxxxxxxx xxxxxx, manganu x xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx lanthanitého (3.11). Xxxxxxx, pokud xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx Xx + Xx / X · 2, xxxx xxx přídavek xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.11) xx xxxxxxx pro xxxxxxx x xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.
[1] 1 xx krmného xxxxxxxxxxxxxxx je xxxxxxxxxxxx 42 xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (x.x.).
[2] Jiné metody xxxxx xxx použity xx xxxxxxxxxxx, že xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx bakteriální xxxxxxxx.
[3] Xxxx xxx xxxxxxx jakékoli xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
[4] Může xxx použito jakékoli xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx složení x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.
[5] Xxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx.
[6] Xxxx být xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx kultivační xxxxxx xxxxxxxxx složení x xxxxxxxx stejné xxxxxxxx, např. oxoid xxxxxxxxxxxx xxxxxx 1 (XX 327) x xxxxxxxxx oxoid agaru x. 3 (X 13).
[7] Může být xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, např. xxxxx antibiotické médium 2 (CM 335) x xxxxxxxxx xxxxx xxxxx x. 3 (X 13).
[8] Např. XX 2 xx Xxxxxx Xxxxxx Xxxx, Xxxxxxx.
[9] Zelené xxxxxxx (xxxxxxx xxxx xxxxx) xxxxx obsahují xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxx xxx xxxxxxxxx. X xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxx dodržen xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx 5.1.1 i) xx xx filtraci. Xxxxxxx filtrační papír xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx vroucí vodou x xxxxxx xxx xx xxxxxxxxxxx kelímku (4.3). Spalte v xxxxxxx peci (4.1) xxx xxxxxxx pod 550 °X, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx materiál xxxxx xxxxxxxx. Nechejte xxxxxxxxxxx, přidejte několik xxxxx xxxx a xxxxxxxx 10 xx 15 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.4) x xxxxxxx do xxxxx xxx asi 150 °X. Xxxxx zůstane xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxx znovu x xxxxxxxx mililitrech xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.4) x xxxxxxx do xxxxx. Přidejte pět xxxxx kyseliny xxxxxx (3.5) x xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx bílý xxxx. Xx přidání 5 xx 6 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2) x xxx 30 xx xxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxx do 250 xx xxxxxxx xxxxx a xxxxxxx xx značku xxxxx (xxxxxxxxxxx XXX xxx 0,5 X). Poté xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx od xxxx 5.1.3.