Čtvrtá Směrnice Komise
ze xxx 5. prosince 1972,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx
(73/46/XXX)
XXXXXX EVROPSKÝCH SPOLEČENSTVÍ,
s xxxxxxx na Xxxxxxx x založení Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x ohledem xx xxxxxxxx Xxxx xx xxx 20. xxxxxxxx 1970 x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [1], xx xxxxx xxxxxxxx 72/275/EHS xx xxx 20. xxxxxxxx 1972 [2], a xxxxxxx xx článek 2 uvedené xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxx, xx xxx xxxxxxxx požaduje, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx metod Xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx x analýzy za xxxxxx xxxxxxxx souladu xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx xxxxxxxx 71/250/EHS xx dne 15. xxxxxxxx 1971 [3], 71/393/XXX xx xxx 18. xxxxxxxxx 1971 [4] a 72/199/XXX xx dne 27. xxxxx 1972 [5] xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx; xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxx xxxxx xx xx doby xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx metod;
vzhledem x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxx x souladu xx xxxxxxxxxxx Stálého xxxxxx xxx xxxxxx;
XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:
Článek 1
Členské státy xxxxxxx, aby byly xxxxxxx xxx oficiální xxxxxxxx xxxxx, xx xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x rostlinných xxxx x xxxxx x xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx, prováděny xxxxx xxxxx popsaných x xxxxxxx I xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx v části 1 (xxxx) xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 71/250/XXX xx xxx 15. xxxxxx 1971 xx xxxxxxxx x xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx I xxxx xxxxxxxx.
Článek 2
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxx oficiální xxxxxxxx krmiv, co xx xxxx jejich xxxxxx retinolu (vitamín X), xxxxxxxx (xxxxxxx, xxxxxxx X1), xxxxxxxxx x dehydroaskorbové kyseliny (xxxxxxx X), xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x příloze XX xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxx 1 (úvod) xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxx x. 71/250/XXX xx xxx 15. xxxxxx 1971 xx, s xxxxxxxx části xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxx xxxxxxxxxx, vztahují x xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx II xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 3
Xxxxxxx státy xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x správní xxxxxxxx nezbytné xxx xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 1. xxxxx 1974. Neprodleně o xxxx uvědomí Komisi.
Xxxxxx 4
Tato xxxxxxxx xx určena xxxxxxxx xxxxxx.
X Xxxxxxx dne 5. prosince 1972.
Xx Xxxxxx
X. X. Mansholt
předseda
[1] Xx. věst. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Xx. xxxx. X 171, 29.7.1972, x. 39.
[3] Xx. věst. X 155, 12.7.1971, x. 13.
[4] Xx. xxxx. X 279, 20.12.1971, x. 7.
[5] Úř. xxxx. X 123, 29.5.1972, x. 6.
XXXXXXX X
1. XXXXXXXXX XXXXXXXX V ŽIVOČIŠNÝCH X XXXXXXXXXXX XXXXXX X OLEJÍCH
1. Účel x xxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx a xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx tucích x xxxxxxx.
2. Princip
Vzorek xx xxxx do xxxxxxxxxx xxxxxxxxx při 103 °X. Xxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx
3.1 Miska x plochým dnem x xxxxxxxxxxx materiálu, 8 xx 9 xx v xxxxxxx x xxxxxxxxx 3 xx vysoká.
3.2 Rtuťový xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x expanzní xxxxxxx xx horním xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 80 °C xx nejméně 110 °X, x xxxxxxxxx 10 xx xxxxxx.
3.3 Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx.
3.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx činidlo.
3.5 Xxxxxxxxxx xxxx.
4. Xxxxxx
Xxxxxxx s xxxxxxxxx xx mg xxxxxxxxx 20 x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx do xxxxx, xxxxxxxx xxxxx (3.1) x xxxxxxxxxx (3.2). Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx (3.3) xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx tak, xxx teplota xxxxxxx 90 °X během xxx 7 xxxxx.
Xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx kterou xxxxxxxxx xxxxxxx ze xxx misky. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 105 °X. Pokračujte v xxxxxxx xxx xxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxx zajištěno xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx na 103 °X ± 2 °X, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx ochlaďte xx 93 °C. Potom xxxxxxxx vychladnout xx xxxxxxxxx teplotu x xxxxxxxxxx (3.4) a xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx, dokud ztráta xxxxx xxxx dvěma xxxxxxxx xxx nepřekračuje 2 mg.
Poznámka:
Vzestup hmotnosti xxxxxx po opakovaném xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x vážení provedeného xxxxxxxx před xxx, xxx xx hmotnost xxxxxx zvětšovat.
5. Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx vzorku, xx xxx následující xxxxxxx:
(X1 – M2) · 100 / Xx
xxx:
Xx = hmota testovaného xxxxxx x gramech;
M1 = xxxxx xxxxx x xxxxxxx v xxxxxxx xxxx xxxxxxx;
X2 = hmota xxxxx x obsahem x xxxxxxx xx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx než 0,05 % se xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx "xxxxx xxx 0,05 %".
Opakovatelnost
Rozdíl xx vlhkosti mezi xxxxxxxx dvou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx vzorku xxxxx xxxxxxxxx 0,05 % x xxxxxxxxx xxxxxxx.
2. XXXXXXXXX XXXXXXX
— xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx —
1. Xxxx a pole xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx umožňuje xxxxxxxx množství hořčíku x xxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx obsahu xxxxxxx xxxxxxx než 5 %.
2. Princip
Vzorek xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xx zředěné kyselině xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx neobsahuje xxxxxxxxx xxxxx, je xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx kyselině xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx se rozředí x obsah hořčíku xx stanoví xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx 285,2 xx.
3. Chemikálie
3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x.x. x: 1,16.
3.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x.x. x: 1,19.
3.3 Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx, xxxx XxXX4 7H2O, xxxxxx xx pokojové teploty.
3.4 Xxxxxx xxxx xxxxxxxx (xxxxxxx nebo dusičnan) 2,5 % (76,08 x SrCl2 6X2X x.x., nebo 60,38 x Sr(No3)2 p.a.).
3.5 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx: xxxxxxx x přesností xx xx 1 x hořčíku (3.3), x xxxxxxx byla xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (10,143 x) XxXX47X2X (3.3). Xxxxxx do 1000 xx xxxxxxx baňky, xxxxxxxx 80 ml xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.1), xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx do 1000 xx vodou. 1 xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 1,000 xx xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kelímky.
4.2 Termostaticky xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx.
4.3 Atomový xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx
5.1.1 Xxxxxx xxxxxxx výlučně z xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx x xxxxxxxxx na mg 5 x xxxxxx xx 500 xx xxxxxxx baňky x 250 xx 300 xx vody. Xxxxxxxx 40 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.1), xxxxxx xx varu x xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx po xxxx 30 xxxxx. Xxxxxxxx vychladnout, xxxxxxx xxxxx xx objem, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx 30 xx xxxxxxxx. X přítomnosti xxxxxxx xxxxxxxxx 5 g xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (15-30 xx) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2), xxxxxxx xx xxxxx xx vodní xxxxx x xxxxxx xx xxxxx hodinu do xxxxxxx x 105 °X. Xxxxxxxxxx, jak xx xxxxxxx od xxxxx xxxx x 5.1.2.
5.1.2 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x minerálních xxxxx
Xxxxxxx s přesností xx mg 5 x vzorku xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 550 °X x muflové xxxx, xxxxx xxxx získán xxxxx, xxxxx je xxx uhlíkatých xxxxxx, x nechejte xxxxxxxxxxx. Xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (15-30 xx) kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (3.2), xxxxxxx xx sucha na xxxxx xxxxx x xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x 105 °X. Xxxxxx xxxxxxxxx 10 xx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (3.1) x xxxxxxxx xx 500 ml xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx do xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx 30 xx xxxxxxxx.
5.1.3 Xxxxxx složená xxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xx 5 x xxxxxx xx xxxxxxx a zpopelněte xxx 550 °C x xxxxxxx peci, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxx, který je xxx xxxxxxxxxx částic. Xxxxx xxxxxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2), xxxxxxx xx xxxxx xx vodní xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx hodinu xx sušárny x 105 °C, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.1), xxxxxxxx xx 250 xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx, xxxxxx xx xxxx, nechejte vychladnout x xxxxxxx na xxxxx vodou. Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx přes xxxxx skládaný xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx 30 xx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5) xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxxxxxxxx roztoků x xxxxxxxxxxx koncentraci xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx roztoku 10 xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx (3.4) x xxxxx xxxxxxx objem xx 100 xx xxxxx. Rozřeďte vodou xxxxx xxxxxxxxx část xxxxxxxx získaného xxxxx 5.1.1, 5.1.2 xxxx 5.1.3 xxx, xx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx referenčních roztoků. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx chlorovodíkové xxxxxx roztoku xxxxx xxxxxxxxx 0,4 N. Xxxxxxxx 10 ml xxxxxxx xxxx xxxxxxxx (3.4) x potom xxxxxxx objem xx 100 xx vodou. Xxxxxx absorpci roztoku, xxxxx xx být xxxxxxxx, x referenčních xxxxxxx xxx vlnové xxxxx 285,2 nm.
6. Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx s referenčními xxxxxx. Výsledek xxxxxxxxx xxxx procento xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx výsledky xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx provedených x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx překročit 5 % xxx.
3. XXXXXXXXX XXXXX XXXXXXXX
1. Účel x rozsah
Tato xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek, jež xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx x jsou xxxxxxxxx označeny xxxx xxxxx xxxxxxxx.
2. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xx třeba, xx xxxxxxxxx postupně xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx sírové x xxxxxxxxx draselného xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxx při 900 °X. Xxxxxx xxxx vyplývající xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxx.
3. Chemikálie
3.1 Xxxxxxxx xxxxxx 0,26 X.
3.2 Xxxxxxxx xxxxxx: xxxxxxxx x azbestu xxxx užívanému s Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 5 násobek xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (1 xxx xxxxxxxx chlorovodíkové, x: 1,19 + 3 xxxx xxxx). Xxxxx xxxx xxxxxxxxx 45 xxxxx, nechejte xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx přes Buchnerovu xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx chlorovodíková nezmizí x promývací vody, x xxxxx acetonem (3.6). Xxxxxxx xxxxxx x sušárně x xxxxx xxxxxxxx 2 xxxxxx xxx 900 °X. Xxxxxxxx vychladnout x uchovávejte v xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx ošetřený xxxxxx xxxx xxx použit xxxxxxxxxx. Musí xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx v xxxx 5, pokud xx xxxx xxxxxxx xxxxxx.
3.3 Protipěnící xxxxxx (xx. silikon).
3.4 Roztok xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 0,23 X.
3.5 Kyselina xxxxxxxxxxxxxx 0,5 X.
3.6 Xxxxxx.
3.7 Xxxxxxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx
4.1 Xxxxxxx x xxxxxx alespoň 600 xx x xxxxxxxxx xxxxxx 200 xx.
4.2 Porcelánové xxxxxxx xxxxxxxxx 80 xx x xxxxxxx a xxxxxxxxx 4 xx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 32 xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx o průměru 4 xx.
4.3 Xxxxxxx xxxxx uzavřené gumovými xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx 2 xxxxx x označením xxxxxx 800 ml x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx 120 mm x průměru.
4.4 Xxxxxxxxx xxxxx přibližně 40 xx v xxxxxxx x přibližně 4 xx silné se xxxxxxxxx okraji uzpůsobenými xxx xxxxx nálevky (4.3), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 16 xxxxxx, každá x xxxxxxx xxxxxxxxx 4 mm x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxxx 1 xx. Desky x xxxxxxxx musejí xxx odolné xxxxx xxxxxxxxx x zásadám.
4.5 Xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
4.6 Xxxxxxxxxx xxxxxxx pec regulovaná xxxxxxxxxxx.
4.7 Xxxxxxxxx.
4.8 Asbestový xxxxx: Suspendujte 2,0 x xxxxxxx (3.2) xx 100 xx xxxx.
Xxxxxxxxx za vakua xxxx xxxxxxxxx desky xxxxxxx xxxxxxxx síťovinou (4.4) x umístněné x xxxxxxx vakuové xxxxx (4.3). Zachyťte xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx přes xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx.
5. Postup
Odvažte s xxxxxxxxx xx mg 3 x vzorku x 2 x xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.2) xx kádinky (4.1), xxxxxxxx 200 xx xxxxxxxx xxxxxx (3.1) x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (3.3). Xxxxxx xxxxxx do xxxx a xxxxxxxx xxxxx xxxxxx 30 xxxxx. Xxx udržení xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx zařízením xxxx je 500 xx láhev s xxxxxxx xxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Zastavte xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 50 xx xxxxxxx xxxx x filtrujte xxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx připravený xxxxxxxxx xxxxx, xxx je xxxxxxx xx 4.8.
Vymývejte xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 100 xx xxxxx horké xxxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 800 xx. Přeneste xxxxxx xxxxxxxxxxxxx do xxxxxxx (4.1), xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.2) xxx xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx 200 xx xxxxxxx hydroxidu xxxxxxxxxx (3.4). Xxxxxx rychle xx varu x xxxxxxxx vařit xxxxxx 30 xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx 50 xx xxxxxxx vody x xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx připravený xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxx xx 4.8. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx vodou, dokud xxxx xxxxxxxx voda xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxxx 3xxxx xxxxxxxx (3.6) (přibližně 100 xx acetonu xxxxxx).
Xxxxxxxx zbytek kvantitativně xx xxxxxxxxxxx kelímku (4.5), xxxxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxx, x xxxxxx do xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx při 130 °X.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx (4.7) x xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx xx muflové xxxx (4.6) x xxxxxxxx xxxxxxxxx xx dobu 30 xxxxx xxx 900 °X. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x exsikátoru (4.7) x xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx slepý pokusza xxxxxxx xxxxxxxx postupu x xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.2), ale bez xxxxxx. Xxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx 6 g xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx 10 xx.
6. Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx, je xxx xxxxxxx:
(x-x) · 100 / 3
xxx:
x = ztráta xxxx xx xxxxxxxxxx během xxxxxxxxx;
x = xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx slepého xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx výsledky dvou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx překročit:
0,3 x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx vlákniny xxxxxxx než 10 %;
3 % xxx. x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx rovných xxxx xxxxxxx než 10 %.
7. Xxxxxxxx
7.1 Krmiva xxxxxxxxxx xxxx xxx 10 % xxxxx x tuků xxxx xxx xxxx analýzou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.7). Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (3 x x xxxxxxxxx na xx) xx azbestový filtr (4.8). Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 50 xx xxxxxxxxxxxxx (3.7) a xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx. Převeďte xxxxxxxxx xxxxxxxxx vzorek x azbest xxxxxxxxxxxxx xx kádinky (4.1) x xxxxxxxxxx x xxxxxxx, xxx xx xxxxxxx v xxxx 5.
7.2 Krmiva xxxxxxxxxx xxxxx a xxxx, xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxx odtučněna xxx xxxxxxx x 7.1 x xxxxxxxx xxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx kyseliny ze xxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (3.6) (100 xx xxxxxx), potom xxxxxxx 50 xx xxxxxxxxxxxxx (3.7). Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx kádinky (4.1) x pokračujte v xxxxxxx, xxx je xxxxxxx xx druhém xxxxxxxx xxxx 5 (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx).
7.3 Pokud xxxx xxxxxx xxxxxx na xxxxxx (více než 2 % xxxxxxx), xxxxxx testovaný xxxxxx (3 x x xxxxxxxxx xx mg) xx kádinky (4.1) xx 100 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx 0,5 X (3.5) x xxxxxxxx stát v xxxxxxx po dobu 5 minut. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x promyjte xxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxx 2,0 x azbestu xxxxxxxx xxx var x xxxxxxxxx xxxxxxx. Pokud xx filtrace ukáže xxx xxxxxxxx, rozřeďte xxxxxxxx xxxxxxxx (3.6). Xxxxx xxxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxx x xxxx 5.
XXXXXXX XX
1. XXXXXXXXX XXXXXXXX (VITAMÍN X)
1. Xxxx x xxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx X) x xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx 10000 XX/xx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxx krmiva x 4000 XX/xx xxx xxxxxxx [1]. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx dvou xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxxxx X: xxxxxx nižší xxx 200000 IU/kg;
Skupina B: xxxxxx xxxxxxxxx se xxxx xxxxx xxx 200000 XX/xx.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx za xxxxx xxxxxxxx hydroxidu xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx atmosféře. Xxxx je extrahována 1,2-xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx petroletherem. Xxxxxx je xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (x xxxxxxxx xxxxxxx X je xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx pouze x určitých případech). X xxxxxxxx skupiny X je xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx 610 xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx komplexu xxxxx Xxxx-Xxxxxxxx xxxxxx; x xxxxxxxx skupiny X spektrofotometricky x XX xxxxxxx xxx 325 xx.
3. Xxxxxxxxxx
x) xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx X x X
3.1 96 % (X/X) xxxxxxx.
3.2 10 % (xxxxxx xxxxxxxx k xxxxxx) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x.x. nebo
3.3 čištěný xxxxx.
3.4 50 % (xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx p.a.
3.5 1 X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx p.a.
3.6 0,5 X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x.x.
3.7 1,2-xxxxxxxxxxxx x.x.
3.8 Petrolether, rozsah xxxx: 30–50 °X. Xxxxx xx xx xxxxxxx, xxxxxxxxxx následujícím xxxxxxxx: xxxxxxxx 1000 xx xxxxxxxxxxxx se 20 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kyseliny xxxxxx, xxxxx zůstává xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx kyselinu x xxxxxxxxxx petrolether xxxxxxxx 500 xx xxxx, xxxxxxx 250 xx 10 % (xxxxxx vzhledem x xxxxxx) roztoku hydroxidu xxxxxxx a xxxxxxx 500 xx vody. Xxxxxxxxx vodnatou vrstvu, xxxxxxx petrolether xx xxxx 1 xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx x bezvodý xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx.
3.9 Xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx podle Xxxxxxxxxx: xxxxxxx po xxxx 8 hodin xxx 750 °X, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx x xxxxx x hnědého xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx skleněnou xxxxxx. Xxxx použitím xx xxxxxxxxxxxxxx zvlhčete xxxxxxxxxx: xx lahve x hnědého xxxx xxxxxx 10 x xxxxx xxxxxxxxx a 0,7 ml xxxx, xxxxxxxx xxxxxx, zahřívejte xx xxxx 5 xxxxx x xxxxx x xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx takto xxxxxxxxxxxx xxxxxxx pomocí známého xxxxxxxx xxxxxxxx (3.17) (xxx 500 XX) xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x 5.3 a 5.4 x kontrolním xxxxxx.
3.10 Xxxxxxx xxxx xxxxxxx, stupeň aktivity 1 (Xxxxx, Xxxxx xxxx ekvivalentní).
3.11 Čistý xxxxxxxxxxxx. Odstraňte peroxidy x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx oxidu xxxxxxxxx (3.10). (25 g xxxxx xxxxxxxxx xx 250 xx xxxxxxxxxxxxx.)
3.12 Xxxxxxx petroletheru (3.8) xx 4, 8, 12, 16 a 20 % (X/X) xxxxxxxxxxxxx (3.11).
3.13 0,5 xxx/x xxxxxx síranu xxxxxxx v 70 % (V/V) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x.x.
x) užívané xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx X
3.14 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x.x.
3.15 Xxxxxxxxxx p.a. Xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxx vody xxxxxxxxxxxxxxxx xx koloně xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (3.10) (50 g xxxxx xxxxxxxxx xx 200 xx chloroformu; doporučuje xx chromatografovat xxxxxxx 50 ml xxxxxx xxxxxxx).
3.16 Xxxx-Xxxxxxxx činidlo: xxxxxxxx přibližně 25 x xxxxxxxx antimonitého x.x. (xxxxxxxx v xxxxxxxxxx) xx 100 xx xxxxxxxxxxx (3.15), xxxxx není roztok xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx 2 xx xxxxxxxxxxxxxx x.x. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx x láhvi z xxxxxxx xxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx trvanlivost xxxxxxx xxxxx.
3.17 Xxxxxxx – spektrofotometricky xxxxxxxxxxxxxxx.
x) xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx skupiny X
3.18 Isopropanol pro xxxxxxxxxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx
4.1 Xxxxx xxxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxxx x kulatými xxxxxxx x různém xxxxxx.
4.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxx: 300 mm; xxxxxxx xxxxxx: okolo 13 xx).
4.4 Xxxxxxxxxxxxxxx x 10ml kyvetami. Xxxxxx x oblasti XX xxxxxxxx křemenné xxxxxx.
4.5 XX xxxxx xxxxxx xxx 365 xx.
5. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx postupy xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxx, x zařízení x xxxxxxx xxxx.
5.1 Xxxxxxxxx vzorek
Z jemně xxxxxxxxxxxx vzorku xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, takto:
0,1–1,0 x pro xxxxxxxxxxx (xxxxxx xxxxx než 20000 XX/x);
3,0–5,0 x xxx xxxxxxx (xxxxxx xxxx 400 x 20000 XX/x);
10–20 x xxx xxxxxxxxx xxxxx;
30 x xxx xxxxxxxx xxxxxxx A.
Ihned umístněte xxxxxxxxx xxxxxx xx 500 xx xxxxx xx xxxxxxxxx zábrusovou xxxxxx.
5.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxx [2]
Xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx 40 xx ethanolu (3.1), 2 xx xxxxxxx askorbanu sodného (3.2) [3], 10 xx roztoku xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.4) a 2 xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (3.13).
Xxxxxxxxxx xx xxxx 30 xxxxx při 70-80 °X pod xxxxxxx xxxxxxxxx x potom xxxxxxxx xxxxxxxxxxx pod xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx 50 xx xxxxxxxx (3.1) x 100 xx 1,2-dichlorethanu (3.7) (xxxxxxxxxxx pipetou). Xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx kapalný xxxxxxxxxxx xx dekantační nádoby. Xxxxxxxx xx xxxxxx 150 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.5), xxxxxxxxxxx xx xxxx 30 xxxxxx a xxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx vrstvy xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx dichlorethanu (xxxxxx vrstva) xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx 40 xx xxxxxxx xxxxxxxxx draselného (3.6), xxxxxxxxxxx xx xxxx 10 vteřin x xxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx vrstvy odděleny. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx dekantační nádoby x propláchněte 6–8 xxxx 40 ml xxxxxxx vody, xxxxx xxxx odstraněna xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxxx xxxx). Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxx x xx xxxxx xxxxx při 40 °X. Rychle xxxxxxxx xxxxxx 5 xx xxxxxxxxxxxx (3.8).
Xxx xxxxxxxx skupiny A xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx postupu xxxxxxxxx x 5.3.1.
Xxx xxxxxxxx xxxxxxx B xxxxxxxx xxxxxx xx 50 xx odměrné xxxxx, doplňte na xxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.8), xxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxx v 5.4.2.
5.3 Chromatografie
5.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxx X
Xxxxxxx chromatografickou xxxxxxx (4.3) do xxxx 200 xx 10 x xxxxx xxxxxxxxx (3.9) předem xxxxxxxxxxxx s xxxxxxxxxxxxx (3.8). Do trubice xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x 5.2 x xxxxx přidejte 20 xx petroletheru (3.8). Xxxxxxxxx xxxxxxxx 10 xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx ve 4, 8, 12, 16 a 20 % diethyletheru (3.12) xx tlaku nebo xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxx xx 2 xx 3 xxxxx xx vteřinu.
Nejdříve je xxxxxxxxx xxxxxxx [4]. Xxxxxxx je obecně xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 20 % xxxxxxxxxxxxx (3.12). Vyluhování xxxxxxx za UV xxxxxxxxx (krátké ozáření xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx). Xxxxxxxxxxxxx xxxx retinolu xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, jež následují. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
5.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxx X
Xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx optické xxxxxxx xxxxxxx x 5.4.2 xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x 5.4.2.
Pokud xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, umístněte xx xxxxxxxxxxxxxxxx kolony xxxxxxxxx část xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, získaného x 5.2, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 500 IU xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx postupu uvedeného x 5.3.1.
5.4 Xxxxxx xxxxxxx hustoty
5.4.1 Xxxxxxxx xxxxxxx X
Xxxxxxx do xxxxx xx vakua xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx v 5.3.1. Xxxxxxxx xxxxxx 2 xx xxxxxxx (3.14). Xxxxxxxx 0,3 xx xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx 3 xx Xxxx-Xxxxxxxx xxxxxxx (3.16). Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx. Změřte xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxx 610 xx xxxxxx 30 xxxxxx xxxx, xx xxxxxx započala. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx standardních xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxx-Xxxxxxxxx xxxxxxxx (2 xx 16 IU xxxxxxxx-xxxxxxxx (3.17) xx 0,3 xx xxxxxxx (3.14) + 3 ml Xxxx-Xxxxxxxx činidla (3.16)). Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx kontrolována xxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx Xxxx-Xxxxxxxx xxxxxxx.
5.4.2 Xxxxxxxx xxxxxxx B
Odeberte alikvotní xxxx roztoku v xxxxxxxxxxxx, získaného x 5.2, obsahujícího xxxxxxxxx 200 XX xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx zbytek 25 xx isopropanolu (3.18) Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxx 325, 310 x 334 nm. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx nachází xx 325 nm. Xxxxx retinolu x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx:
X325 · 18,30 = XX retinolu/ml
Nicméně, xxxxx optických xxxxxx
X310 : E325 x X334 : E325
musí xxx 6 : 7 = 0,857.
Xxxxx xx jeden x xxxxxx poměrů xxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx (< 0,830 xxxx >0,880), xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx chromatografie x xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx x 5.3.2. Xxxxx měření xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx po xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xx xx uvedený xxxxx xxxxx znatelně xxxx xx hodnoty 0,857 (&xx; 0,830 nebo &xx; 0,880), xxxx xxx xxxxxxxxx provedeno x xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx X.
6. Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx provedená xxxxx analýzy. Výsledky xxxxxxxxx x XX xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxx xx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx výsledky xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx překročit:
- 20 % xxx. x obsahů retinolu xxxxxxx než 75000 XX/xx,
- 15000 XX x xxxxxx xxxx 75000 x 150000 XX/xx,
- 10 % xxx. u obsahů xxxx 150000 a 250000 IU/kg,
- 25000 XX x obsahů xxxx 250000 a 500000 XX/xx,
- 5 % xxx. x xxxxxx xxxxxxx než 500000 XX/xx.
2. STANOVENÍ XXXXXXXX (XXXXXXX X1, XXXXXXX)
1. Xxxx a xxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx obsah thiaminu (xxxxxxxx, xxxxxxxx X1) x xxxxxxxx, koncentrátech x xxxxxxxxx. Limit xxxxxxx xx 5 xxx.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx je xx horka ošetřen xxxxxxx kyselinou xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Získaný xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx thiochróm xx extrahován xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxxxx
3.1 Xxxxxxxxxx roztok xxxxxxxx 100 μx/xx: xxxxxxxxx 112,3 mg xxxxxxxx-XXX, xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxx xxxx, x 1000 xx 0,2 X kyseliny sírové (3.2). Pokud xx xxxxxx uchováván xx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxx, je xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxx.
3.2 0,2 X xxxxxxxx xxxxxx.
3.3 Čistý xxxxxxxx xxxxx.
3.4 20 % (váhově vzhledem x xxxxxx) roztok xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx p.a.
3.5 25 % (xxxxxx xxxxxxxx k xxxxxx) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x.x.
3.6 Oxidační směs: xxxxxxxxx 2 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.4) xx 48 xx roztoku xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.5). Xxxx xxxx je xxxxxxxxxxxxx xxx 4 xxxxxx.
3.7 Xxxxxxxxxx x.x.
3.8 2,5 X xxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
3.9 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx (xxxx. xxxxxxx).
3.10 96 % (X/X) ethanol.
4. Xxxxxxxxx
4.1 Xxxxx xxxxx.
4.2 Xxxxxxxxxxx (3500 xx./xxx.) se 3 xx 50 xx xxxxxxxxx vybavenými xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxx.
5. Xxxxxx
5.1 Enzymatická xxxxxxxxx
Xx každé xx xxxx 250 xx xxxxxxxxx baněk X x X vložte xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 100 μx xxxxxxxx x 125 xx xxxxxxxx xxxxxx (3.2). Xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx baňky X, 1,0 ml xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.1) (xxxxxxx xxxxxxxx).
Xxxxx protřepte xxxxx, xxxxxxxxx xx xx vroucí xxxxx xxxxx a xxxxxxxx xx tam po xxxx 15 xxxxx x xxxxxxxxxxxxx protřepávejte. Xxxxxxxx vychladnout na xxxxxxxxx 45 oC. Xxxxxxxx do xxxxx xxxxx 20 xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (3.8) x 0,5 x multienzymatického xxxxxxxxx (3.9), xxxxx xxxxxxxx xxxx po xxxx 20 xxxxx za xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx 20 xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (3.8), xxxxxxx na objem xxxxx, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx X a X xxxx, co jste xxxxxxxxx prvních 15 xx. Připravte následující xxxxxxx:
5.1.1 Xxxxxxxxxx roztok X
Xx trubice odstředivky (4.2) dejte 5 xx xxxxxxxx A x xxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.3). Xxxxxxx trubici xx vroucí xxxxx xxxxx na 15 xxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx teplotě.
5.1.2 Xxxxxxx X (interní xxxxxxxx) x B (vzorek)
Do xxxxxxx odstředivky (4.2) xxxxx 5 ml xxxxxxxx A x 5 xx xxxxxxxx X xx jiné xxxxxxx xxxxxxxxxxx (4.2).
5.2 Xxxxxxx
Xxxxxxxx x xxxxxxxx X, X x X 5 ml xxxxxxxx směsi (3.6) x o minutu xxxxxxx 10 ml xxxxxxxxxxx (3.7). Zazátkujte xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx 5 vteřin. Xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxx xxxxxxx přeneste 5 xx supernatantu xxxxxxxxxxxxx xxxxxx do xxxxx 25 xx xxxxxxx xxxxx, doplňte xx objem xxxxxxxxx (3.10) x xxxxxxxxxxxxx (= extrakty X, X a X).
5.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx xxx vlnové délce, xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx optimální xxxxxx xx fluorescenci trichrómu. Xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 365 nm.
Nastavte xxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx X. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx X x X.
6. Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx v xx/xx xxxxxx xx xxx xxxxxxx:
x · x / (a-b) x
xxx:
x = intenzita xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx X (xxxxxxx xxxxxxxx);
x = xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx extraktu B (xxxxxx);
x = xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x x;
x = množství xxxxxxxx x μg xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx (interní xxxxxxxx).
Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx x stejného xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
10 % xxxxxxxxx xxxxxxx u xxxxxx nižších xxx 500 mg/kg x
5 % xxx. x xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx větších xxx 500 xx/xx.
3. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXXXXXX XXXX (XXXXXXX X)
1. Xxxx x xxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxx X) v xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx 5 ppm. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx do xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx předpokládaného xxxxxx xxxxxxxx X:
Xxxxxxx X: xxxxxx xxxxx xxx 10 g/kg;
Skupina X: xxxxxx rovnající xx xxxx xxxxx xxx 10 g/kg.
2. Princip
Vzorek xx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx x extrahován xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xx xxxxxxxx roztokem 2,6-xxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxx, aby byla xxxxxxxx xxxxxxxxx převedena xx kyselinu dehydroaskorbovou, x potom xxxxxxxx 2,4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx hydrazon xx extrahován xxxxx xxxxx xxxxxxx, ledové xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxxxxx do xxxxx x zbytek xxxxxxxxx xx xxxxxxx kyselině xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx je xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxx 509 xx.
X xxxxxxxx xxxxxxx X xx xxxxxxx xxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx chromatografii xx xxxxx xxxxxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Xxxxxxxxxx
3.1 Standardní xxxxxx 0,05 % kyseliny X-xxxxxxxxx: xxxxxxxxx 50 xx kyseliny X-xxxxxxxxx x.x. x xxxxxxxxx 20 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2) x doplňte do xxxxxx 100 xx xxxxx. Připravujte xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
3.2 10 % (xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx) roztok xxxxxxxx metafosforečné: po xxxxx rozmělnění v xxxxxxx rozpusťte xx xxxx 200 x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx p.a. x xxxxxxx xx 2000 ml vodou. Xxxxxxxxx xxx 4oC. Xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxx.
3.3 Xxxxxxxxxx x.x.
3.4 0,5 % (xxxxxx xxxxxxxx x objemu) xxxxxx 2,6-dichlorophenol-indophenolu x.x. Xxxxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxxx.
3.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (X. x X. x. 121 xxxx xxxxxxxxxx)
3.6 2 % xxxxxx xxxxxx (váhově xxxxxxxx x objemu) 2,4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxx 2 x 2,4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx ve 100 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (25 xx xxxxxxxx xxxxxx x.x., x: 1,84, xxxxxx xxxxxxxxx xx 100 xx xxxxx). Xxxxx xxxxxx, xx-xx xxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxx jeden xxxxx.
3.7 Xxxxx nebo
3.8 Xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3.9 Směs xxxxx xxxxxxx x.x./xxxxxx kyseliny xxxxxx/xxxxxxx p.a.: 96/2/2 xxxxxxxx.
3.10 Směs dichloromethanu x.x./xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx: 97/3 xxxxxxxx.
3.11 Silika xxx, velikost xxxxxx: 0,05 až 0,2 xx.
3.12 Xxxxx xxxxxx xxx stupeň X xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
3.13 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx 105 xx xxxx xx 200 xx odměrné xxxxx, xxxxxxx na xxxxx xxxxxxxxx sírovou x.x., x: 1,84.
3.14 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxx 75 xx diethyletheru x.x., 25 xx xxxxx xxxxxxx x.x. x 4,0 ml 96 % (xxxxxx xxxxxxxx x objemu) xxxxxxxx xxxxxx x.x. Obnovte xx 2 xx 3 xxxxxxxxxxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx
4.1 Xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx nastaveným na 20 °X.
4.2 Xxxxxxxxxxx (3500 xx./xxx.) se 40 xx 50 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx zábrusovými xxxxxxx.
4.3 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x 250 xx xxxxxxx.
4.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxx: 100 xx, xxxxxxx xxxxxx: 20 mm), xx xxxxxxxxx xxxxxx (např. Xxxxxxxxx xxxxxxx).
4.5 Xxxxxxxxxxxxxxx xxxx kolorimetr x xxxxxx s 10xx xxxxxxxx.
4.6 Xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx deskami (3.12) pokrytými xx xxxxxxx 0,5 až 0,6 xx. (Xxxxxx xxxx xxx vyrobené xxxxx.) Xxxxx xxxxx xx 2 a xxx až 3 xxxxxx v xxxxxxx xxx 120 xx 130 °X. Nechejte xxxxxxxxxxx x potom xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xx xxxxxxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxxx.
4.7 Xxxxxxx nastavená xx 120 až 130 °X.
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxx
Xx xxxxx xx xxxx 250 xx odměrných xxxxx (se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zátkami) X x X xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jemně xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 200 μx xxxxxxxx X. Přidejte, xxxxx xx xxxxx X, 0,4 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.1) x xxxxxxxxxxx jemným xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx).
Xxxxxxxx xx xxxxx lahve 30 xx xxxxxxxxxxx (3.3) a 25 xx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2) při 4 °X. Xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx 10 xx 15 minut. Přidejte 25 xx xxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx po 10 xxxxxx a xxxxxxxx xxxx 10 xx 15 xxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1). Xxxxxxxxx, xxx se xxxxxxxx vodní xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxx postupy xxxxxxxxxx, xxx je xxxxxxx xxxx, u xxxxxxx xxxxxxxx X (interní xxxxxxxx) a X.
5.2 Xxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 40 xx xxxxxxx xxxxxxx supernatantu (xxxxx xxxxxxxx) xxxxxxxxx x 5.1 xx xxxxxxx trubice xxxxxxxx xxxxxxxxx zábrusovou zátkou. Xxxxxxxx 0,5 až 1 xx roztoku 2,6-xxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxx (3.4) a xxxxxxxxxxx. Vytvoří se xxxxxxx xxxxxxxx, které xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx 15 xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx přibližně 300 mg filtrační xxxxxxx (3.5), protřepejte x xxxxxxxxx přes xxxxx skládaný xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxx.
5.3 Xxxxxx x 2,4-dinitrophenylhydrazinem a xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 10 xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x 5.2 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (4.2), xxxxxxxx 2 xx xxxxxxx 2,4-dinitrophenylhydrazinu (3.6) x xxxxxxxxxxx. Zaveďte xxxxxx proud xxxxxx (3.7) nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx (3.8) xx xxxxxxx, zazátkujte trubici x xxxxxxx xx xx přibližně 15 xxxxx (xxxx xxx) xx xxxxx xxxxx (4.1).
Xxxxx přidejte 3 xx xxxx, 20 xx xxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxxxx kyseliny xxxxxx/xxxxxxx (3.9) a xxxxxxxxx 800 mg xxxxxxxxx xxxxxxx (3.5). Xxxxxxxxxx xxxxxxx, silně xxxxxxxxxxx xx xxxx 30 xxxxxx x xxxxxxxxx. Xx lahve xxxxxxx xxxxxxxx 15 ml xxxxxxxxxxxx a xx xxxxxxxxx xxxxx odpařujte xx xxxxxxx xxxxxxx (4.3), dokud xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xx 2 xx xxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxxxx kyseliny octové/acetonu (3.9) xx ohřevu xx 50 °C, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx 10 xx směsi xxxxxxxxxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx octové (3.10) a promíchejte.
5.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) xx xxxxxx 30 ml xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.10). Suspendujte (xxxxx protřepávaje) 5 x silika gelu (3.11) ve 30 xx směsi xxxxxxxxxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.10); xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx. Nechejte xxxx x potom stlačte xxx xxxxxxx (3.7) xxx xxxxxx tlaku. Xxxxxxxx do xxxxxxx xxxxxx získaný x 5.3, vypláchněte xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.10) a přelijte xx xxxxxxx, potom xxxxxxx xxxxxxx směsí (3.10) x pokračujte xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (3 xx 4 xxxxx xxxxxxxxx 5 ml), xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx eluát. Xxxxxxx xxxx eluátu, xxxxx xx xxxxxxx žlutě.
Eluujte xxxxxxxxxxxx zónu xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxxxx kyseliny xxxxxx/xxxxxxx (3.9), odeberte xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx.
5.4.1 X xxxxxxxx xxxxxxx A (xxxxx vitamínu X xxxxx xxx 10 x/xx), xxxxxxxxx xxxxxx xx 2,0 xx xxxxx ethyl xxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx (3.9) x ihned xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xxx je xxxxxxx x 5.5.
5.4.2 U xxxxxxxx xxxxxxx B (xxxxx xxxxxxxx X xx xxxxx xxxx xx větší xxx 10 g/kg), xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx 4,0 xx xxxxxxx kyseliny xxxxxx (3.13), silně xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x změřte xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxx v 5.6.
5.5 Xxxxxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx 0,5 xx xxxxxxx xxxxxxxxx x 5.4.4 v xxxxx xxxx xx xxxxxxxx (4.6). Za xxxxxxx xxxxxxxxxxx rozpouštědla (3.14) xxxxxxxxx po xxxxxxx 20 xxxxx x tanku xxxxxxxxx xxxxxx rozpouštědla, dokud xxxx xxxxxx zbarvená xxxxxxxxxxx xxxx jasně xxxxxxxx. Nechejte volně xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxx xxxx špachtlí x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx trubice (4.4).
Xxxxxxx postupně jednou 2 ml x xxxxxxx 1,5 xx xxxxx ethyl xxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx (3.9). Xxxxxxx eluát do xxxx lahve (xxxxxxxx xxx xxxx xxx xxxxxxxx). Xxxxxxx xx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx 4,0 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.13), silně protřepejte, xxx xx zbytek xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
5.6 Xxxxxx optické hustoty
Změřte xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxx 509 xx 20 až 30 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx. Proveďte xxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.13).
5.7 Xxxxx pokus
Proveďte xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxx xxxxxx.
6. Výpočet xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx C xx xxxxxx x x xx xx xx dán poměrem:
(c – x) · 2 / (b – x) · 10x
xxx:
x = xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx;
x = xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx;
x = optická hustota xxxxxxx xxxxxx;
x = xxxx testovaného xxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx paralelních xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx vzorku xxxxx xxxxxxxxx:
10 % rel. x xxxxxx vitamínu X xxxxxxx xxx 10 g/kg x
5 % xxx. x xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxx 10 x/xx.
[1] 1 XX = 0,3 μx xxxxxxxx.
[2] U xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xx nebo xxxxxxx, zdvojnásobit xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx a druhém xxxxxxxx bodu 5.2.
[3] Xxxxxxxx sodný nemusí xxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx hydrolýza v xxxxxxxx xxxxxxxxx.
[4] Xxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx měřením xxxxxxx xxxxxxx xxx 450 xx; X 1% / 1xx = 2600.