Čtvrtá Směrnice Komise
ze xxx 5. xxxxxxxx 1972,
xxxxxx se stanoví xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx
(73/46/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx na Smlouvu x založení Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx směrnici Xxxx xx xxx 20. xxxxxxxx 1970 x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx x analytických xxxxx Společenství xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [1], ve xxxxx xxxxxxxx 72/275/XXX ze xxx 20. xxxxxxxx 1972 [2], a xxxxxxx xx xxxxxx 2 xxxxxxx směrnice,
vzhledem x xxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx vzorkování x xxxxxxx za xxxxxx xxxxxxxx souladu xxxxxxxxx stanovených xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx týkajícím xx xxxxxxx x složení xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx směrnice 71/250/EHS xx xxx 15. xxxxxxxx 1971 [3], 71/393/XXX ze xxx 18. xxxxxxxxx 1971 [4] x 72/199/XXX xx xxx 27. xxxxx 1972 [5] xxx xxxxxxxxx řadu xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx; xxxxxxxx k tomu, xx postup xxxxx xx xx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx metod;
vzhledem x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx se xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx;
XXXXXXX TUTO XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Členské xxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxx oficiální xxxxxxxx xxxxx, xx xx týče xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx u xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxx a xxxxx x xxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx x krmivech, xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx I xxxx směrnice.
Obecná xxxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxx 1 (xxxx) xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 71/250/XXX ze xxx 15. xxxxxx 1971 xx xxxxxxxx x xx xxxxxx popsané x příloze X xxxx xxxxxxxx.
Článek 2
Členské xxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx krmiv, co xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx X), xxxxxxxx (xxxxxxx, xxxxxxx X1), xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx kyseliny (xxxxxxx C), prováděny xxxxx metod popsaných x xxxxxxx II xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx ustanovení xxxxxxxxx v xxxxx 1 (úvod) přílohy xxxxx směrnice Xxxxxx x. 71/250/XXX xx xxx 15. xxxxxx 1971 xx, s xxxxxxxx části týkající xx xxxxxxxx vzorku, xxx xx xxx xxxxxxxxxx, vztahují x xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx XX xxxx směrnice.
Článek 3
Xxxxxxx státy xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxx souladu x xxxxx xxxxxxxx nejpozději xx 1. ledna 1974. Xxxxxxxxxx x xxxx uvědomí Komisi.
Článek 4
Tato xxxxxxxx xx určena xxxxxxxx xxxxxx.
X Xxxxxxx dne 5. xxxxxxxx 1972.
Za Xxxxxx
X. X. Mansholt
předseda
[1] Xx. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Xx. xxxx. X 171, 29.7.1972, x. 39.
[3] Xx. xxxx. X 155, 12.7.1971, x. 13.
[4] Xx. xxxx. X 279, 20.12.1971, x. 7.
[5] Xx. věst. X 123, 29.5.1972, x. 6.
XXXXXXX X
1. XXXXXXXXX XXXXXXXX X XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXX TUCÍCH X XXXXXXX
1. Xxxx x xxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxxx stanovit xxxxx xxxx x těkavých xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx při 103 °C. Ztráta xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx.
3. Přístroje
3.1 Miska x xxxxxxx dnem x nekorozního xxxxxxxxx, 8 xx 9 xx x xxxxxxx x přibližně 3 xx xxxxxx.
3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx, odstupňovaný xxxxxxxxx xx 80 °X xx nejméně 110 °X, x přibližně 10 cm dlouhý.
3.3 Xxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxx plotýnka.
3.4 Xxxxxxxxx obsahující výkonné xxxxxx činidlo.
3.5 Xxxxxxxxxx xxxx.
4. Postup
Odvažte x xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxx 20 g xxxxxxxxxxxxxxxx vzorku xx xxxxx, xxxxxxxx xxxxx (3.1) x xxxxxxxxxx (3.2). Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx nebo plotýnku (3.3) za xxxxxxx xxxxxxx teploměrem xxx, xxx teplota dosáhla 90 °C xxxxx xxx 7 minut.
Snižte xxxxx x sledujte xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxx. Teplota xxxxx xxxxxxxxx 105 °X. Xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxx xxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx bubliny.
Aby xxxx zajištěno xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, zahřejte xxxxxxxxxx xx 103 °X ± 2 °X, xxxx následnými xxxxxx xxxxxxxx na 93 °C. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx (3.4) x xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx dvěma xxxxxxxx již nepřekračuje 2 xx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx opakovaném xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx výsledek x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx před tím, xxx xx xxxxxxxx xxxxxx zvětšovat.
5. Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx, jako xxxxxxxx xxxxxx, xx xxx následující xxxxxxx:
(X1 – X2) · 100 / Xx
xxx:
Xx = xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxx;
X1 = xxxxx xxxxx x xxxxxxx v xxxxxxx xxxx xxxxxxx;
X2 = hmota misky x xxxxxxx v xxxxxxx xx ohřevu.
Výsledky xxxxx než 0,05 % se musejí xxxxxxxxxxxx xxxx "xxxxx xxx 0,05 %".
Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx provedených x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 0,05 % x absolutní hodnotě.
2. XXXXXXXXX HOŘČÍKU
— atomovou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx —
1. Xxxx x pole xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx množství xxxxxxx x krmivech. Xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx hořčíku xxxxxxx xxx 5 %.
2. Princip
Vzorek xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xx xxxxxxx kyselině xxxxxxxxxxxxxx. Pokud xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, je xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxx chlorovodíkové. Xxxxxx xx xxxxxxx x obsah xxxxxxx xx xxxxxxx atomovou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx 285,2 xx.
3. Xxxxxxxxxx
3.1 Kyselina xxxxxxxxxxxxxx p.a. d: 1,16.
3.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x.x. x: 1,19.
3.3 Xxxxxxxxx xxxxx xxxx drát, xxxx XxXX4 7X2X, sušený xx pokojové xxxxxxx.
3.4 Xxxxxx soli xxxxxxxx (xxxxxxx xxxx xxxxxxxx) 2,5 % (76,08 x XxXx2 6X2X x.x., xxxx 60,38 x Sr(No3)2 p.a.).
3.5 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx: xxxxxxx s přesností xx xx 1 x xxxxxxx (3.3), x xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (10,143 x) MgSO47H2O (3.3). Xxxxxx xx 1000 xx xxxxxxx baňky, xxxxxxxx 80 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.1), xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xx 1000 xx xxxxx. 1 xx tohoto xxxxxxx xxxxxxxx 1,000 xx xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx
4.1 Platinové, xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
4.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx.
4.3 Atomový xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
5. Postup
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx
5.1.1 Xxxxxx xxxxxxx výlučně x xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx x xxxxxxxxx na xx 5 g xxxxxx xx 500 xx xxxxxxx baňky s 250 až 300 xx xxxx. Xxxxxxxx 40 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.1), xxxxxx xx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxx xxxx xx xxxx 30 xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xx objem, xxxxxxxxxxx x přefiltrujte xx suché xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx prvních 30 xx filtrátu. X přítomnosti xxxxxxx xxxxxxxxx 5 x xxxxxx x dostatečném xxxxxxxx (15-30 xx) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2), xxxxxxx do sucha xx xxxxx lázni x vložte xx xxxxx hodinu xx xxxxxxx x 105 °X. Pokračujte, xxx xx uvedeno od xxxxx xxxx x 5.1.2.
5.1.2 Krmiva složená xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xx 5 x xxxxxx xx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxx 550 °X x xxxxxxx peci, xxxxx xxxx získán xxxxx, xxxxx xx xxx uhlíkatých xxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx byl odstraněn xxxxxx, xxxxxxxx do xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (15-30 ml) kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (3.2), xxxxxxx xx xxxxx na xxxxx lázni x xxxxxx na xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x 105 °X. Xxxxxx rozpusťte 10 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.1) x převeďte xx 500 xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx vody. Xxxxxxxx vychladnout a xxxxxxx xx objem xxxxx. Promíchejte a xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx přes suchý xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx 30 xx xxxxxxxx.
5.1.3 Krmiva xxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xx 5 x vzorku xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 550 °X x muflové xxxx, xxxxx není xxxxxx xxxxx, xxxxx je xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx ošetřete 5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2), xxxxxxx xx xxxxx xx vodní xxxxx a xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx sušárny x 105 °X, xxx xx sloučeniny xxxxxxx xxxxx nerozpustnými. Xxxxx xxxxxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.1), xxxxxxxx do 250 xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx, xxxxxx do xxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x doplňte na xxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx filtr. Xxxxxxx xxxxxxx 30 xx xxxxxxxx.
5.2 Měření xxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5) xxxxx xxxxxxxxx nejméně 5 xxxxxxxxxxxx roztoků x xxxxxxxxxxx koncentraci odpovídající xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx. Přidejte xx xxxxxxx xxxxxxx 10 xx roztoku xxxx xxxxxxxx (3.4) x xxxxx xxxxxxx xxxxx xx 100 xx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx podle 5.1.1, 5.1.2 xxxx 5.1.3 xxx, že xx získá xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx referenčních xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx roztoku xxxxx xxxxxxxxx 0,4 X. Xxxxxxxx 10 xx xxxxxxx soli xxxxxxxx (3.4) x potom xxxxxxx objem do 100 xx vodou. Xxxxxx absorpci roztoku, xxxxx xx být xxxxxxxx, a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx při vlnové xxxxx 285,2 xx.
6. Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx vzorku xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 5 % rel.
3. XXXXXXXXX XXXXX XXXXXXXX
1. Účel x xxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx obsah tukuprostých xxxxxxxxxxx látek, jež xxxx nerozpustné x xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx x jsou xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx.
2. Princip
Odtučněný xxxxxx, xxx xx xx xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx sírové x hydroxidu draselného xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx azbestu, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxx xxx 900 °X. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx ze xxxxxxxxxx odpovídá xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx.
3. Xxxxxxxxxx
3.1 Xxxxxxxx sírová 0,26 X.
3.2 Xxxxxxxx xxxxxx: xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx užívanému s Xxxxxxxxx xxxxxxxx přibližně 5 násobek xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (1 xxx xxxxxxxx chlorovodíkové, d: 1,19 + 3 xxxx vody). Vařte xxxx xxxxxxxxx 45 xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx přes Buchnerovu xxxxxxx. Promývejte xxxxxx xxxxxxxx vodou, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx nezmizí x promývací xxxx, x xxxxx xxxxxxxx (3.6). Xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx x xxxxx spalujte 2 xxxxxx xxx 900 °X. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx být použit xxxxxxxxxx. Xxxx splňovat xxxxxxxxx xxxx v xxxx 5, xxxxx xx týče xxxxxxx xxxxxx.
3.3 Protipěnící emulse (xx. xxxxxxx).
3.4 Roztok xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 0,23 X.
3.5 Kyselina xxxxxxxxxxxxxx 0,5 X.
3.6 Xxxxxx.
3.7 Xxxxxxxxxxx.
4. Přístroje
4.1 Kádinky x objemu xxxxxxx 600 xx x xxxxxxxxx úrovně 200 xx.
4.2 Xxxxxxxxxxx kotouče xxxxxxxxx 80 mm x xxxxxxx a xxxxxxxxx 4 xx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 32 otvory, každý xxxxxxxxx x xxxxxxx 4 xx.
4.3 Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x objemu xxxxxxxxx 2 xxxxx x označením úrovně 800 ml x xxxxxxxxxx xxx skleněné xxxxxxx 120 xx x xxxxxxx.
4.4 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 40 xx v xxxxxxx x přibližně 4 xx xxxxx xx xxxxxxxxx okraji uzpůsobenými xxx xxxxx xxxxxxx (4.3), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 16 xxxxxx, xxxxx x xxxxxxx přibližně 4 mm a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxxx 1 xx. Xxxxx x síťovina xxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx.
4.5 Xxxxxxxxx xxxx křemíkové xxxxxxxxx xxxxxxx.
4.6 Xxxxxxxxxx xxxxxxx pec xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
4.7 Exsikátor.
4.8 Xxxxxxxxx xxxxx: Suspendujte 2,0 x xxxxxxx (3.2) xx 100 xx xxxx.
Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx desky xxxxxxx drátěnou xxxxxxxxx (4.4) a xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (4.3). Xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx přes xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx.
5. Postup
Odvažte s xxxxxxxxx xx xx 3 g xxxxxx x 2 x xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.2) xx xxxxxxx (4.1), xxxxxxxx 200 xx xxxxxxxx xxxxxx (3.1) x xxxxxxx kapek xxxxxxxxxxx emulse (3.3). Xxxxxx rychle do xxxx a xxxxxxxx xxxxx přesně 30 xxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx objemu xxxxxxxx xxxxxxx chladícím zařízením xxxx xx 500 xx xxxxx x xxxxxxx xxxx, ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxx xxxxxxxx přibližně 50 xx xxxxxxx vody x xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx je xxxxxxx ve 4.8.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 100 ml xxxxx horké xxxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 800 xx. Přeneste xxxxxx kvantitativně do xxxxxxx (4.1), která xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx kotoučem (4.2) xxx xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx 200 ml xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.4). Uveďte xxxxxx xx varu a xxxxxxxx vařit xxxxxx 30 xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx 50 xx xxxxxxx vody x xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx připravený azbestový xxxxx, jak xx xxxxxxx ve 4.8. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxxx 3xxxx xxxxxxxx (3.6) (přibližně 100 xx xxxxxxx xxxxxx).
Xxxxxxxx zbytek kvantitativně xx spalovacího xxxxxxx (4.5), rozdrťte, xxxxx xx xx potřeba, x xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxx 130 °X.
Xxxxxxxx vychladnout v xxxxxxxxxx (4.7) x xxxxxx zvažte.
Vložte xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx (4.6) x xxxxxxxx xxxxxxxxx xx dobu 30 xxxxx xxx 900 °X. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v exsikátoru (4.7) x xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx slepý xxxxxxx xxxxxxx stejného xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.2), xxx xxx xxxxxx. Ztráta váhy, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx 6 x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx 10 xx.
6. Výpočet xxxxxxxx
Xxxxx xxxxx xxxxxxxx, jako xxxxxxxx xxxxxx, je xxx poměrem:
(a-b) · 100 / 3
kde:
a = ztráta xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx;
x = xxxxxx xxxx xx zpopelnění xxxxx xxxxxxx pokusu.
Opakovatelnost
Rozdíl xxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx x stejného vzorku xxxxx xxxxxxxxx:
0,3 x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx hrubé xxxxxxxx xxxxxxx xxx 10 %;
3 % xxx. x obsahů hrubé xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx než 10 %.
7. Xxxxxxxx
7.1 Krmiva xxxxxxxxxx xxxx xxx 10 % xxxxx x tuků musí xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx diethyletherem (3.7). Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx testovaný vzorek (3 g s xxxxxxxxx xx mg) xx xxxxxxxxx filtr (4.8). Zalijte třikrát xxxxxxxxx 50 xx xxxxxxxxxxxxx (3.7) a xxxxxxx opatrně xxxxxxxxx xx xxxxx. Převeďte xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx (4.1) x xxxxxxxxxx v xxxxxxx, jak je xxxxxxx x xxxx 5.
7.2 Xxxxxx obsahující xxxxx x xxxx, xxx xxxxxxx být xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxx odtučněna xxx xxxxxxx x 7.1 x xxxxxxxx potom, xx xxxx provedeno xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx odtučnění xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (3.6) (100 xx xxxxxx), xxxxx xxxxxxx 50 xx xxxxxxxxxxxxx (3.7). Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx (4.1) x pokračujte x xxxxxxx, jak xx xxxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxx xxxx 5 (xxxxxxxx roztokem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx).
7.3 Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx na xxxxxx (více xxx 2 % xxxxxxx), xxxxxx testovaný xxxxxx (3 x x xxxxxxxxx xx xx) xx kádinky (4.1) xx 100 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx 0,5 X (3.5) a xxxxxxxx stát x xxxxxxx po dobu 5 xxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a promyjte xxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxx xxxxxxxx 2,0 x xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Pokud xx filtrace xxxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx acetonem (3.6). Xxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxx v xxxx 5.
XXXXXXX XX
1. XXXXXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXX X)
1. Xxxx x xxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx retinolu (xxxxxxx X) x xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx 10000 XX/xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x 4000 IU/kg xxx ostatní [1]. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx retinolu:
Skupina A: xxxxxx xxxxx xxx 200000 XX/xx;
Xxxxxxx X: xxxxxx rovnající xx xxxx vyšší xxx 200000 XX/xx.
2. Princip
Vzorek xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx hydroxidu xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx a xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxx 1,2-xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx je xxxxxxx do sucha x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xx koloně oxidu xxxxxxxxx (u produktů xxxxxxx B xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx pouze x xxxxxxxx xxxxxxxxx). X xxxxxxxx xxxxxxx X xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx 610 nm xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx Carr-Priceovy xxxxxx; x xxxxxxxx xxxxxxx X spektrofotometricky x XX oblasti xxx 325 xx.
3. Xxxxxxxxxx
x) xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx X x X
3.1 96 % (X/X) xxxxxxx.
3.2 10 % (xxxxxx xxxxxxxx k xxxxxx) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x.x. xxxx
3.3 xxxxxxx xxxxx.
3.4 50 % (xxxxxx vzhledem x xxxxxx) roztok xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x.x.
3.5 1 X roztok xxxxxxxxx xxxxxxxxxx p.a.
3.6 0,5 X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x.x.
3.7 1,2-xxxxxxxxxxxx x.x.
3.8 Petrolether, rozsah xxxx: 30–50 °C. Xxxxx xx to xxxxxxx, přečistěte následujícím xxxxxxxx: xxxxxxxx 1000 xx xxxxxxxxxxxx se 20 xx dávkami xxxxxxxxxxxxx kyseliny sírové, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx kyselinu x promývejte xxxxxxxxxxx xxxxxxxx 500 xx xxxx, xxxxxxx 250 xx 10 % (xxxxxx xxxxxxxx k xxxxxx) roztoku xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 500 xx xxxx. Xxxxxxxxx vodnatou vrstvu, xxxxxxx petrolether po xxxx 1 hodiny xxxx aktivní xxxx x bezvodý síran xxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx.
3.9 Xxxx hlinitý, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxx: xxxxxxx po dobu 8 hodin xxx 750 °C, xxxxxxxxx x exsikátoru a xxxxxxxxxx x láhvi x hnědého skla xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Před xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx: xx xxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxx 10 g xxxxx xxxxxxxxx a 0,7 ml xxxx, xxxxxxxx xxxxxx, zahřívejte xx xxxx 5 xxxxx v xxxxx x xxxxxx vodou xx současného protřepávání. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx takto xxxxxxxxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.17) (xxx 500 IU) xxxxx xxxxxxx uvedeného x 5.3 x 5.4 x kontrolním xxxxxx.
3.10 Xxxxxxx oxid xxxxxxx, stupeň aktivity 1 (Xxxxx, Xxxxx xxxx ekvivalentní).
3.11 Xxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx x stopy xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx koloně xxxxxxxxx oxidu xxxxxxxxx (3.10). (25 x xxxxx xxxxxxxxx xx 250 ml xxxxxxxxxxxxx.)
3.12 Xxxxxxx petroletheru (3.8) xx 4, 8, 12, 16 x 20 % (V/V) xxxxxxxxxxxxx (3.11).
3.13 0,5 xxx/x xxxxxx síranu xxxxxxx x 70 % (X/X) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x.x.
x) xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx X
3.14 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x.x.
3.15 Xxxxxxxxxx x.x. Xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx bázického xxxxx xxxxxxxxx (3.10) (50 x oxidu xxxxxxxxx xx 200 xx xxxxxxxxxxx; xxxxxxxxxx xx chromatografovat xxxxxxx 50 xx xxxxxx xxxxxxx).
3.16 Xxxx-Xxxxxxxx činidlo: xxxxxxxx přibližně 25 x xxxxxxxx antimonitého x.x. (xxxxxxxx x xxxxxxxxxx) xx 100 xx chloroformu (3.15), xxxxx xxxx roztok xxxxxxxx. Xxxx usazenina xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nečiní xxxxxxx. Xxxxxxxx 2 xx xxxxxxxxxxxxxx x.x. Xxxxxxxx v xxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxxxx xxxx se xxxxxxxxx zábrusovou xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
3.17 Xxxxxxx – xxxxxxxxxxxxxxxxxxx standardizovaný.
c) xxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx X
3.18 Xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx.
4. Přístroje
4.1 Xxxxx xxxxx.
4.2 Xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx.
4.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxx: 300 mm; xxxxxxx xxxxxx: xxxxx 13 xx).
4.4 Xxxxxxxxxxxxxxx x 10xx xxxxxxxx. Xxxxxx x oblasti XX xxxxxxxx křemenné xxxxxx.
4.5 XX xxxxx xxxxxx xxx 365 xx.
5. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx přímé světlo, xxxxx je xx xxxxxxx, x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx.
5.1 Xxxxxxxxx vzorek
Z xxxxx xxxxxxxxxxxx vzorku xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx k předpokládanému xxxxxx retinolu, xxxxx:
0,1–1,0 x xxx xxxxxxxxxxx (xxxxxx větší xxx 20000 XX/x);
3,0–5,0 x xxx xxxxxxx (xxxxxx xxxx 400 x 20000 XX/x);
10–20 x xxx xxxxxxxxx xxxxx;
30 x pro xxxxxxxx xxxxxxx X.
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx 500 ml xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
5.2 Hydrolýza a xxxxxxxx [2]
Xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx vzorku 40 ml xxxxxxxx (3.1), 2 xx xxxxxxx askorbanu xxxxxxx (3.2) [3], 10 xx roztoku hydroxidu xxxxxxxxxx (3.4) x 2 xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (3.13).
Zahřívejte xx dobu 30 xxxxx xxx 70-80 °X xxx xxxxxxx xxxxxxxxx x potom xxxxxxxx xxxxxxxxxxx pod xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx 50 ml xxxxxxxx (3.1) x 100 xx 1,2-xxxxxxxxxxxxx (3.7) (xxxxxxxxxxx xxxxxxx). Xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx dekantační xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxx 150 xx roztoku xxxxxxxxx draselného (3.5), xxxxxxxxxxx xx xxxx 30 xxxxxx x xxxxxxxx stát, xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxx vrstva) xx xxxxxxxxxx nádoby, xxxxxxxx 40 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.6), xxxxxxxxxxx xx xxxx 10 xxxxxx a xxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx vrstvy odděleny. Xxxxxxxx xxxxxx dichlorethanu xx xxxxxxxxxx xxxxxx x propláchněte 6–8 xxxx 40 xx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxxx xxxx). Odeberte xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxx x xx xxxxx lázni xxx 40 °X. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx 5 xx xxxxxxxxxxxx (3.8).
Xxx xxxxxxxx xxxxxxx X xxxxxxxxxxxxxxxx podle postupu xxxxxxxxx v 5.3.1.
Xxx xxxxxxxx skupiny X xxxxxxxx xxxxxx xx 50 ml odměrné xxxxx, xxxxxxx na xxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.8), xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxx v 5.4.2.
5.3 Xxxxxxxxxxxxxx
5.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxx X
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.3) xx xxxx 200 xx 10 g xxxxx xxxxxxxxx (3.9) xxxxxx xxxxxxxxxxxx x petroletherem (3.8). Xx trubice xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x 5.2 x xxxxx xxxxxxxx 20 xx petroletheru (3.8). Xxxxxxxxx xxxxxxxx 10 xx dávkami roztoků xxxxxxx xxxxxxxxx xx 4, 8, 12, 16 x 20 % xxxxxxxxxxxxx (3.12) xx tlaku nebo xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxx xx 2 xx 3 xxxxx xx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx [4]. Xxxxxxx xx obecně xxxxxxxxx roztokem xxxxxxxxxxxx xx 20 % xxxxxxxxxxxxx (3.12). Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx XX xxxxxxxxx (xxxxxx ozáření xxxxxxx rtuťovou výbojkou). Xxxxxxxxxxxxx xxxx retinolu xx xxxxx xxxxxxxx xx žlutých zón xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx frakci obsahující xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
5.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxx X
Xxxxxxxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx měření optické xxxxxxx xxxxxxx v 5.4.2 xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx v 5.4.2.
Xxxxx xx ukáže být xxxxxxxxxxxxxx nezbytnou, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx kolony xxxxxxxxx xxxx roztoku x xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x 5.2, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 500 XX xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x 5.3.1.
5.4 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx
5.4.1 Xxxxxxxx xxxxxxx A
Odpařte xx xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x 5.3.1. Xxxxxxxx xxxxxx 2 xx benzenu (3.14). Xxxxxxxx 0,3 ml xxxxxx roztoku x xxxxxxxx 3 xx Xxxx-Xxxxxxxx xxxxxxx (3.16). Xxxxxxx se xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx optickou xxxxxxx spektrofotometrem xxx 610 xx přesně 30 vteřin xxxx, xx reakce xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx na standardní xxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxx-Xxxxxxxxx xxxxxxxx (2 xx 16 IU xxxxxxxx-xxxxxxxx (3.17) na 0,3 xx xxxxxxx (3.14) + 3 xx Xxxx-Xxxxxxxx xxxxxxx (3.16)). Xxxxxxxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx standardu x xxxxxxx připraveného xxxxxxx Xxxx-Xxxxxxxx xxxxxxx.
5.4.2 Xxxxxxxx xxxxxxx B
Odeberte xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x 5.2, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 200 IU xxxxxxxx. Xxxxxxx xx sucha xx xxxxx x xxxxxxxx zbytek 25 xx xxxxxxxxxxxx (3.18) Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx při 325, 310 x 334 nm. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx 325 xx. Xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxx:
X325 · 18,30 = XX retinolu/ml
Nicméně, xxxxx optických xxxxxx
X310 : X325 x X334 : X325
xxxx xxx 6 : 7 = 0,857.
Xxxxx xx jeden z xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx (&xx; 0,830 xxxx &xx;0,880), xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx chromatografie x xxxxxxx x metodou xxxxx x 5.3.2. Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx provedené xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xx xx xxxxxxx poměr xxxxx xxxxxxxx xxxx xx hodnoty 0,857 (&xx; 0,830 nebo &xx; 0,880), xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx danou xxx xxxxxxxx xxxxxxx X.
6. Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx ve xxxxxx xxxxxxx v xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx x IU xxxxxxxx na xx xxxxxx xxxx xx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx nesmí xxxxxxxxx:
- 20 % rel. x xxxxxx retinolu xxxxxxx xxx 75000 XX/xx,
- 15000 XX x obsahů xxxx 75000 x 150000 XX/xx,
- 10 % xxx. x xxxxxx xxxx 150000 a 250000 XX/xx,
- 25000 XX u obsahů xxxx 250000 x 500000 XX/xx,
- 5 % xxx. x xxxxxx xxxxxxx než 500000 XX/xx.
2. XXXXXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXX B1, XXXXXXX)
1. Xxxx a xxxxxx
Xxxx metoda xxxxxxxx xxxxxxxx obsah thiaminu (xxxxxxxx, xxxxxxxx X1) x xxxxxxxx, koncentrátech x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx je 5 xxx.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xx horka xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Vzniklý xxxxxxxxx xx extrahován xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx fluorimetricky.
3. Xxxxxxxxxx
3.1 Xxxxxxxxxx roztok xxxxxxxx 100 μx/xx: xxxxxxxxx 112,3 xx xxxxxxxx-XXX, xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx na xxxxxx xxxx, x 1000 xx 0,2 X kyseliny xxxxxx (3.2). Xxxxx je xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx jednoho xxxxxx.
3.2 0,2 X xxxxxxxx sírová.
3.3 Čistý xxxxxxxx xxxxx.
3.4 20 % (váhově vzhledem x xxxxxx) xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx draselného x.x.
3.5 25 % (váhově xxxxxxxx x xxxxxx) xxxxxx xxxxxxxxx draselného x.x.
3.6 Xxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxx 2 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.4) xx 48 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.5). Xxxx xxxx je upotřebitelná xxx 4 xxxxxx.
3.7 Xxxxxxxxxx p.a.
3.8 2,5 X xxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
3.9 Multienzymatický přípravek xxxxxxxxxx proteázu, xxxxxxxxx x xxxxxxx (např. xxxxxxx).
3.10 96 % (X/X) xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx
4.1 Xxxxx xxxxx.
4.2 Xxxxxxxxxxx (3500 xx./xxx.) xx 3 xx 50 xx xxxxxxxxx vybavenými xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxx.
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx každé xx xxxx 250 xx xxxxxxxxx xxxxx A x X xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx vzorku obsahujícího xxxxxxxxx 100 μx xxxxxxxx x 125 xx xxxxxxxx xxxxxx (3.2). Xxxxxxxx rovněž, xxxxx do baňky X, 1,0 ml xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.1) (xxxxxxx xxxxxxxx).
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxx xxxxx a xxxxxxxx xx xxx po xxxx 15 xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx vychladnout xx xxxxxxxxx 45 xX. Xxxxxxxx xx každé xxxxx 20 ml xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (3.8) a 0,5 x xxxxxxxxxxxxxxxxxx přípravku (3.9), xxxxx nechejte xxxx xx xxxx 20 xxxxx xx xxxxxxxx teploty. Xxxxxxxx 20 xx roztoku xxxxxx xxxxxxx (3.8), xxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Odeberte filtráty X x X xxxx, xx jste xxxxxxxxx xxxxxxx 15 xx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
5.1.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx X
Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (4.2) xxxxx 5 xx xxxxxxxx X x přibližně 10 xx bisulfitu xxxxxxx (3.3). Ponořte xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxx na 15 xxxxx a xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
5.1.2 Xxxxxxx X (interní standard) x X (xxxxxx)
Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (4.2) xxxxx 5 xx xxxxxxxx X a 5 ml xxxxxxxx X xx jiné xxxxxxx xxxxxxxxxxx (4.2).
5.2 Xxxxxxx
Xxxxxxxx x xxxxxxxx X, X x X 5 xx xxxxxxxx směsi (3.6) x x minutu xxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxxx (3.7). Zazátkujte xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx 5 vteřin. Xxxxxxxx xxxx jednu xxxxxx x xxxxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxx xxxxxxx přeneste 5 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vrstvy xx xxxxx 25 xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx objem xxxxxxxxx (3.10) x xxxxxxxxxxxxx (= xxxxxxxx X, X a B).
5.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx délce, xxx kterou xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx odezvu xx xxxxxxxxxxxx trichrómu. Xxxxxxxx při xxxxxxxxx 365 xx.
Xxxxxxxx přístroj xx nulu za xxxxxxx xxxxxxxx X. Xxxxxx xxxxxxxxx fluorescence xxxxxxxx A x X.
6. Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx x xx/xx xxxxxx xx dán xxxxxxx:
x · x / (a-b) x
xxx:
x = intenzita xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx A (xxxxxxx xxxxxxxx);
x = intenzita xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx X (xxxxxx);
x = váha xxxxxxxxxxx xxxxxx x x;
x = xxxxxxxx xxxxxxxx v μx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx).
Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx vzorku xxxxx xxxxxxxxx:
10 % xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx nižších než 500 xx/xx a
5 % xxx. x xxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxx xxxxxxx xxx 500 mg/kg.
3. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXXXXXX ACID (XXXXXXX X)
1. Xxxx a xxxxxx
Xxxx metoda umožňuje xxxxxxxx xxxxxxx množství xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxx X) x krmivech, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx 5 xxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx předpokládaného xxxxxx xxxxxxxx X:
Xxxxxxx A: xxxxxx nižší než 10 g/kg;
Skupina X: xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxx 10 x/xx.
2. Princip
Vzorek xx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx roztoku kyseliny xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xx xxxxxxxx roztokem 2,6-xxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx kyselinu dehydroaskorbovou, x xxxxx xxxxxxxx 2,4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx. Vzniklý xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx směsí xxxxx acetátu, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xx koloně xxxxxx xxxx, extrakt xxxxxxx xx xxxxx x zbytek xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx hustota xxxxxxx je xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx při 509 xx.
X xxxxxxxx xxxxxxx X je extrakt xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx dále podroben xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx vrstvě, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Xxxxxxxxxx
3.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx 0,05 % xxxxxxxx X-xxxxxxxxx: xxxxxxxxx 50 xx xxxxxxxx X-xxxxxxxxx x.x. v xxxxxxxxx 20 xx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2) x doplňte xx xxxxxx 100 xx xxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
3.2 10 % (váhově xxxxxxxx x objemu) xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx: xx xxxxx rozmělnění x xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx 200 x xxxxxxxx metafosforečné x.x. x doplňte xx 2000 xx xxxxx. Xxxxxxxxx xxx 4xX. Xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxx.
3.3 Chloroform x.x.
3.4 0,5 % (váhově xxxxxxxx k xxxxxx) xxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxx x.x. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
3.5 Filtrační xxxxxxx (X. x X. x. 121 nebo xxxxxxxxxx)
3.6 2 % xxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx) 2,4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxx 2 x 2,4-dinitrophenylhydrazinu xx 100 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (25 xx kyseliny sírové x.x., x: 1,84, xxxxxx doplněním xx 100 ml vodou). Xxxxx xxxxxx, xx-xx xxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxx jeden xxxxx.
3.7 Xxxxx xxxx
3.8 Xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3.9 Xxxx ethyl xxxxxxx p.a./ledové xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx p.a.: 96/2/2 xxxxxxxx.
3.10 Xxxx dichloromethanu x.x./xxxxxx kyseliny octové: 97/3 xxxxxxxx.
3.11 Xxxxxx xxx, velikost částic: 0,05 xx 0,2 xx.
3.12 Xxxxx xxxxxx xxx stupeň H xxx xxxxxxxxxxxx chromatografii.
3.13 Xxxxxx kyselinu xxxxxxx: xxxxx 105 xx xxxx xx 200 xx odměrné xxxxx, xxxxxxx na xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x.x., x: 1,84.
3.14 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxx 75 xx xxxxxxxxxxxxx x.x., 25 ml xxxxx xxxxxxx x.x. x 4,0 ml 96 % (xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx) xxxxxxxx xxxxxx x.x. Xxxxxxx xx 2 xx 3 xxxxxxxxxxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx
4.1 Xxxxx xxxxx vybavená xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 20 °X.
4.2 Odstředivka (3500 xx./xxx.) xx 40 xx 50 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.3 Xxxxxxx vakuová xxxxxxx x 250 ml xxxxxxx.
4.4 Xxxxxxxx chromatografické xxxxxxx (xxxxx: 100 xx, xxxxxxx xxxxxx: 20 xx), xx xxxxxxxxx xxxxxx (xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx).
4.5 Xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx s xxxxxx s 10xx xxxxxxxx.
4.6 Xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx chromatografii xx xxxxxx gelovými xxxxxxx (3.12) pokrytými xx xxxxxxx 0,5 xx 0,6 mm. (Xxxxxx xxxx již xxxxxxxx xxxxx.) Xxxxx xxxxx xx 2 a xxx xx 3 xxxxxx x sušárně xxx 120 xx 130 °C. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xx xxxxxxx 24 xxxxx před použitím.
4.7 Xxxxxxx xxxxxxxxx na 120 až 130 °X.
5. Xxxxxx
5.1 Extrakce
Do xxxxx xx xxxx 250 ml xxxxxxxxx xxxxx (xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx) A x B xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx obsahujícího xxxxxxxxx 200 μx xxxxxxxx X. Přidejte, xxxxx xx xxxxx X, 0,4 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.1) x promíchejte xxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx).
Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx 30 ml chloroformu (3.3) a 25 xx xxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (3.2) xxx 4 °X. Xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxx 10 xx 15 xxxxx. Xxxxxxxx 25 xx vody, xxxxxxxxxx xxxxx, silně xxxxxxxxxxx po 10 xxxxxx x xxxxxxxx xxxx 10 až 15 minut ve xxxxx xxxxx (4.1). Xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx vodní xxxx xx chloroformové xxxx. Xxxxxxxxxx postupy xxxxxxxxxx, xxx je popsáno xxxx, x vodních xxxxxxxx X (xxxxxxx xxxxxxxx) x X.
5.2 Xxxxxxx
Xx použití xxxxxx xxxxxxxx 40 ml xxxxxxx vodního supernatantu (xxxxx xxxxxxxx) získaného x 5.1 xx xxxxxxx trubice xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx 0,5 xx 1 xx xxxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxx (3.4) x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx 15 xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx přibližně 300 xx filtrační xxxxxxx (3.5), xxxxxxxxxxx x filtrujte xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx nemusí být xxxxx xxxxx.
5.3 Xxxxxx x 2,4-dinitrophenylhydrazinem x xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx použití xxxxxx xxxxxxxx 10 xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x 5.2 do xxxxxxx odstředivky (4.2), xxxxxxxx 2 ml xxxxxxx 2,4-dinitrophenylhydrazinu (3.6) x xxxxxxxxxxx. Zaveďte xxxxxx xxxxx dusíku (3.7) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (3.8) do xxxxxxx, zazátkujte xxxxxxx x ponořte xx xx přibližně 15 xxxxx (xxxx noc) xx xxxxx lázně (4.1).
Xxxxx xxxxxxxx 3 xx xxxx, 20 xx směsi xxxxx xxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx (3.9) x přibližně 800 xx filtrační xxxxxxx (3.5). Zazátkujte xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx 30 xxxxxx x odstřeďte. Xx lahve xxxxxxx xxxxxxxx 15 ml xxxxxxxxxxxx a xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx rotační xxxxxxx (4.3), xxxxx neobdržíte xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx ve 2 xx xxxxx ethyl xxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx octové/acetonu (3.9) xx ohřevu xx 50 °X, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx 10 xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.10) x promíchejte.
5.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) xx xxxxxx 30 xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.10). Xxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxxxx) 5 x xxxxxx xxxx (3.11) xx 30 xx xxxxx dichloromethanu/ledové xxxxxxxx xxxxxx (3.10); xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx x xxxxx stlačte xxx xxxxxxx (3.7) xxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx trubice xxxxxx xxxxxxx v 5.3, vypláchněte xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxxxx kyseliny octové (3.10) a xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (3.10) a xxxxxxxxxx xx vyplachování xxxxxxx xxxxxxx směsí (3 xx 4 xxxxx xxxxxxxxx 5 xx), xxxxx xxxx získán xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx xx zbarven žlutě.
Eluujte xxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx (3.9), xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx.
5.4.1 U xxxxxxxx xxxxxxx X (xxxxx xxxxxxxx X xxxxx xxx 10 x/xx), rozpusťte xxxxxx xx 2,0 xx xxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx (3.9) x ihned xxxxxxxxxxxxxxxx xx tenké xxxxxx, xxx xx xxxxxxx x 5.5.
5.4.2 X xxxxxxxx xxxxxxx X (xxxxx xxxxxxxx C xx xxxxx nebo xx xxxxx než 10 x/xx), xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx 4,0 xx zředěné xxxxxxxx xxxxxx (3.13), silně xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx zcela xxxxxxxxx x změřte xxxxxxxx xxxxxxx, jak xx xxxxxxx x 5.6.
5.5 Xxxxxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx provádějte xxxxxxxxxx. Umístněte 0,5 xx xxxxxxx získaného x 5.4.4 x xxxxx xxxx xx xxxxxxxx (4.6). Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx rozpouštědla (3.14) vyvíjejte xx xxxxxxx 20 xxxxx x tanku xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx růžově xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx volně xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx zóny, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx kvantitativně xx chromatografické trubice (4.4).
Xxxxxxx postupně xxxxxx 2 xx a xxxxxxx 1,5 ml xxxxx ethyl xxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx octové/acetonu (3.9). Xxxxxxx eluát do xxxx xxxxx (poslední xxx musí být xxxxxxxx). Xxxxxxx xx xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx 4,0 xx xxxxxxx kyseliny xxxxxx (3.13), silně protřepejte, xxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
5.6 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxxx hustotu xxxxxxxxxxxxxxxxx xxx 509 nm 20 xx 30 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx měření xxxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx sírovou (3.13).
5.7 Xxxxx pokus
Proveďte slepý xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx postupu, xxx xxx xxxxxx.
6. Výpočet xxxxxxxx
Xxxxx vitamínu X xx xxxxxx x x xx xx xx dán xxxxxxx:
(x – a) · 2 / (x – x) · 10x
xxx:
x = xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx;
x = xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx;
x = xxxxxxx hustota xxxxxxx xxxxxx;
x = xxxx testovaného xxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx mezi xxxxxxxx dvou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx provedených x xxxxxxxx xxxxxx nesmí xxxxxxxxx:
10 % xxx. x xxxxxx xxxxxxxx X xxxxxxx než 10 x/xx x
5 % xxx. x xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxx 10 x/xx.
[1] 1 XX = 0,3 μx xxxxxxxx.
[2] X xxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxx a druhém xxxxxxxx xxxx 5.2.
[3] Xxxxxxxx sodný xxxxxx xxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx hydrolýza x xxxxxxxx xxxxxxxxx.
[4] Xxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx měřením xxxxxxx xxxxxxx při 450 xx; X 1% / 1cm = 2600.