Xxxxxx Xxxxxxxx Komise
ze xxx 5. xxxxxxxx 1972,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx metody Xxxxxxxxxxxx xxx úřední kontrolu xxxxx
(73/46/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x ohledem xx xxxxxxxx Rady xx dne 20. xxxxxxxx 1970 x xxxxxxxx metod odběru xxxxxx a analytických xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx krmiv [1], ve xxxxx xxxxxxxx 72/275/EHS xx xxx 20. xxxxxxxx 1972 [2], a xxxxxxx xx xxxxxx 2 xxxxxxx směrnice,
vzhledem x xxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx použití xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx za xxxxxx xxxxxxxx souladu xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x složení xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx směrnice 71/250/XXX xx xxx 15. xxxxxxxx 1971 [3], 71/393/XXX xx xxx 18. listopadu 1971 [4] x 72/199/EHS xx dne 27. xxxxx 1972 [5] xxx xxxxxxxxx řadu xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx; xxxxxxxx k xxxx, xx postup xxxxx xx xx xxxx xxxx vhodným xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxx x souladu xx xxxxxxxxxxx Stálého výboru xxx xxxxxx;
XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:
Článek 1
Xxxxxxx státy xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxx oficiální xxxxxxxx krmiv, co xx týče xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx a olejů x xxxxxx xxxxxxx x hrubé xxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx X xxxx směrnice.
Obecná xxxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxx 1 (xxxx) přílohy xxxxx xxxxxxxx Komise 71/250/XXX xx xxx 15. června 1971 xx vztahují i xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx X xxxx směrnice.
Xxxxxx 2
Členské xxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, co xx xxxx jejich xxxxxx xxxxxxxx (vitamín X), thiaminu (xxxxxxx, xxxxxxx X1), xxxxxxxxx x dehydroaskorbové xxxxxxxx (xxxxxxx X), prováděny xxxxx xxxxx popsaných x xxxxxxx II xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxx 1 (xxxx) xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxx x. 71/250/XXX ze xxx 15. xxxxxx 1971 xx, x xxxxxxxx části xxxxxxxx xx přípravy xxxxxx, xxx xx xxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx i xx metody popsané x příloze XX xxxx směrnice.
Článek 3
Xxxxxxx státy xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x správní xxxxxxxx nezbytné pro xxxxxxxx xxxxxxx s xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 1. xxxxx 1974. Neprodleně x xxxx xxxxxxx Komisi.
Článek 4
Tato směrnice xx xxxxxx členským xxxxxx.
V Bruselu dne 5. xxxxxxxx 1972.
Xx Xxxxxx
X. X. Xxxxxxxx
xxxxxxxx
[1] Xx. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Xx. xxxx. X 171, 29.7.1972, x. 39.
[3] Xx. xxxx. X 155, 12.7.1971, x. 13.
[4] Xx. xxxx. X 279, 20.12.1971, x. 7.
[5] Xx. xxxx. X 123, 29.5.1972, x. 6.
PŘÍLOHA X
1. XXXXXXXXX XXXXXXXX X ŽIVOČIŠNÝCH X XXXXXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXX
1. Xxxx x xxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx obsah xxxx x xxxxxxxx xxxxx x živočišných x rostlinných tucích x xxxxxxx.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx 103 °C. Xxxxxx xxxxxxxxx se stanoví xxxxxxx.
3. Přístroje
3.1 Xxxxx x xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, 8 xx 9 xx v průměru x xxxxxxxxx 3 xx vysoká.
3.2 Rtuťový xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxx xxxxx, odstupňovaný přibližně xx 80 °X xx xxxxxxx 110 °X, x přibližně 10 xx dlouhý.
3.3 Xxxxxxx lázeň xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx.
3.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx výkonné xxxxxx xxxxxxx.
3.5 Xxxxxxxxxx xxxx.
4. Xxxxxx
Xxxxxxx s xxxxxxxxx xx mg xxxxxxxxx 20 x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx, odvážené xxxxx (3.1) x xxxxxxxxxx (3.2). Zahřejte xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx (3.3) xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx tak, xxx xxxxxxx xxxxxxx 90 °X xxxxx xxx 7 minut.
Snižte xxxxx x sledujte xxxxxxxxx, xx kterou xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 105 °X. Xxxxxxxxxx x xxxxxxx ode dna xxxxxx, dokud xx xxxxxxxxxxx tvořit xxxxxxx.
Xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx na 103 °X ± 2 °X, mezi následnými xxxxxx xxxxxxxx na 93 °X. Potom xxxxxxxx vychladnout na xxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx (3.4) x xxxxxx. Opakujte tuto xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx mezi dvěma xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx 2 mg.
Poznámka:
Vzestup xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, v xxxxxxx xxxxxxx počítáme xxxxxxxx x vážení provedeného xxxxxxxx xxxx xxx, xxx xx hmotnost xxxxxx xxxxxxxxx.
5. Výpočet xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx, jako xxxxxxxx vzorku, xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
(X1 – X2) · 100 / Xx
xxx:
Xx = xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x gramech;
M1 = xxxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxx;
X2 = xxxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx xxx 0,05 % xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx "xxxxx xxx 0,05 %".
Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx dvou paralelních xxxxxxxxx provedených x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 0,05 % x xxxxxxxxx hodnotě.
2. XXXXXXXXX XXXXXXX
— xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx —
1. Xxxx x xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx obsahu hořčíku xxxxxxx xxx 5 %.
2. Princip
Vzorek xx xxxxxxxxx x rozpuštěn xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx 285,2 xx.
3. Xxxxxxxxxx
3.1 Kyselina xxxxxxxxxxxxxx x.x. d: 1,16.
3.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx p.a. x: 1,19.
3.3 Xxxxxxxxx xxxxx xxxx drát, xxxx XxXX4 7H2O, xxxxxx xx xxxxxxxx teploty.
3.4 Xxxxxx soli xxxxxxxx (xxxxxxx xxxx xxxxxxxx) 2,5 % (76,08 x SrCl2 6X2X x.x., xxxx 60,38 x Xx(Xx3)2 x.x.).
3.5 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx: xxxxxxx x přesností xx mg 1 x hořčíku (3.3), x xxxxxxx byla xxxxxx opatrně xxxxxxxxxx xxxxxxxx vrstva, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (10,143 x) MgSO47H2O (3.3). Xxxxxx do 1000 xx odměrné baňky, xxxxxxxx 80 xx xxxxxxxx chlorovodíkové (3.1), xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx do 1000 xx vodou. 1 xx tohoto roztoku xxxxxxxx 1,000 mg xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx
4.1 Platinové, xxxxxxxxx xxxx porcelánové xxxxxxxxx kelímky.
4.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx elektrická muflová xxx.
4.3 Atomový absorpční xxxxxxxxxxxxxxx.
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx
5.1.1 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx s xxxxxxxxx xx xx 5 g xxxxxx xx 500 xx xxxxxxx xxxxx x 250 až 300 xx xxxx. Xxxxxxxx 40 xx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (3.1), xxxxxx xx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx po xxxx 30 xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx xx xxxxx, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx 30 ml xxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx křemíku xxxxxxxxx 5 x xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (15-30 xx) xxxxxxxx chlorovodíkové (3.2), xxxxxxx do sucha xx xxxxx xxxxx x vložte xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx o 105 °X. Xxxxxxxxxx, xxx xx uvedeno xx xxxxx xxxx x 5.1.2.
5.1.2 Krmiva xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx x přesností xx xx 5 x vzorku do xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 550 °X x xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxx uhlíkatých částic, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx do xxxxxx dostatečné množství (15-30 xx) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2), odpařte xx sucha xx xxxxx lázni a xxxxxx na xxxxx xxxxxx xx sušárny x 105 °X. Xxxxxx xxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.1) a xxxxxxxx xx 500 ml xxxxxxx baňky za xxxxx horké vody. Xxxxxxxx vychladnout a xxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx do suché xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx filtr. Xxxxxxx xxxxxxx 30 xx xxxxxxxx.
5.1.3 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx x přesností xx xx 5 x xxxxxx xx xxxxxxx x zpopelněte xxx 550 °X x xxxxxxx peci, xxxxx xxxx získán xxxxx, xxxxx je xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx 5 xx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (3.2), xxxxxxx do xxxxx xx vodní xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx sušárny o 105 °C, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.1), xxxxxxxx xx 250 xx odměrné xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx, uveďte do xxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx vodou. Promíchejte x xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx přes xxxxx xxxxxxxx filtr. Xxxxxxx xxxxxxx 30 xx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxx xxxxxxxx absorpcí
Rozředěním standardního xxxxxxx (3.5) xxxxx xxxxxxxxx nejméně 5 xxxxxxxxxxxx roztoků x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 10 xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx (3.4) x xxxxx xxxxxxx xxxxx xx 100 xx xxxxx. Rozřeďte xxxxx xxxxx alikvotní xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx podle 5.1.1, 5.1.2 xxxx 5.1.3 xxx, že xx xxxxx koncentrace xxxxxxx, xxxxx xx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx chlorovodíkové xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 0,4 X. Xxxxxxxx 10 xx xxxxxxx xxxx stroncia (3.4) x xxxxx xxxxxxx objem xx 100 xx vodou. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx má xxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx vlnové xxxxx 285,2 xx.
6. Xxxxxxx výsledků
Vypočtěte xxxxxxxx xxxxxxx xx vzorku xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx vyjádřete xxxx procento vzorku.
Opakovatelnost
Rozdíl xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx vzorku xxxxx překročit 5 % xxx.
3. XXXXXXXXX XXXXX XXXXXXXX
1. Xxxx x rozsah
Tato xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx označeny xxxx xxxxx xxxxxxxx.
2. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx, kde xx xx xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx draselného xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Zbytek xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx azbestu, xxxxxxxx, xxxxxx, zvážen x xxxxxxxxx při 900 °X. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx přítomnosti xxxxx vlákniny v xxxxxxxxxx vzorku.
3. Xxxxxxxxxx
3.1 Xxxxxxxx xxxxxx 0,26 X.
3.2 Xxxxxxxx azbest: xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx užívanému x Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 5 xxxxxxx jeho xxxx xxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (1 díl xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, d: 1,19 + 3 xxxx vody). Xxxxx xxxx xxxxxxxxx 45 xxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx zbytek xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx, x xxxxx xxxxxxxx (3.6). Xxxxxxx azbest x sušárně x xxxxx xxxxxxxx 2 xxxxxx xxx 900 °X. Nechejte xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx. Tímto xxxxxxxx ošetřený azbest xxxx xxx použit xxxxxxxxxx. Musí xxxxxxxx xxxxxxxxx dané v xxxx 5, xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxx.
3.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxx (xx. silikon).
3.4 Roztok xxxxxxxxx draselného 0,23 X.
3.5 Kyselina xxxxxxxxxxxxxx 0,5 X.
3.6 Xxxxxx.
3.7 Xxxxxxxxxxx.
4. Přístroje
4.1 Xxxxxxx x xxxxxx alespoň 600 ml s xxxxxxxxx úrovně 200 xx.
4.2 Xxxxxxxxxxx kotouče xxxxxxxxx 80 xx x průměru a xxxxxxxxx 4 mm xxxxx, perforované xxxxxxxxx 32 xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx o průměru 4 xx.
4.3 Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx o objemu xxxxxxxxx 2 xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 800 xx a xxxxxxxxxx pro skleněné xxxxxxx 120 mm x xxxxxxx.
4.4 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 40 xx x xxxxxxx x přibližně 4 xx silné xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx kužel xxxxxxx (4.3), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 16 xxxxxx, xxxxx x průměru xxxxxxxxx 4 xx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx ok přibližně 1 xx. Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxx odolné xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx.
4.5 Xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
4.6 Xxxxxxxxxx xxxxxxx pec regulovaná xxxxxxxxxxx.
4.7 Xxxxxxxxx.
4.8 Xxxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx 2,0 x xxxxxxx (3.2) xx 100 xx xxxx.
Xxxxxxxxx xx vakua xxxx filtrační desky xxxxxxx drátěnou xxxxxxxxx (4.4) x umístněné x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (4.3). Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx filtr. Xxxxxxx xxxxxxx.
5. Xxxxxx
Xxxxxxx x xxxxxxxxx na mg 3 g xxxxxx x 2 x xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.2) xx xxxxxxx (4.1), xxxxxxxx 200 xx xxxxxxxx xxxxxx (3.1) x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (3.3). Xxxxxx xxxxxx xx xxxx x nechejte xxxxx xxxxxx 30 xxxxx. Xxx udržení xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx chladícím zařízením xxxx xx 500 xx xxxxx x xxxxxxx dnem, xx xxxxx cirkuluje studená xxxx. Xxxxxxxx var xxxxxxxx xxxxxxxxx 50 xx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx okamžitě xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxx xx 4.8.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 100 xx xxxxx xxxxx vody, xxx se xxxxxx xxxxxxx xxxxx filtrátu 800 xx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx (4.1), xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.2) xxx xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx 200 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.4). Xxxxxx xxxxxx xx xxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx 30 xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx 50 xx xxxxxxx vody x xxxxxxxxxxxx ihned xx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx azbestový xxxxx, xxx xx xxxxxxx ve 4.8. Xxxxxxxxx xxxxxx velmi xxxxxx vodou, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx (testujte xxxxxxxxxx xxxxxxxx), potom 3xxxx xxxxxxxx (3.6) (xxxxxxxxx 100 xx xxxxxxx xxxxxx).
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.5), xxxxxxxx, pokud xx to potřeba, x xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxx 130 °X.
Xxxxxxxx vychladnout x xxxxxxxxxx (4.7) x xxxxxx zvažte.
Vložte kelímek xx xxxxxxx xxxx (4.6) a nechejte xxxxxxxxx xx dobu 30 minut při 900 °C. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx (4.7) x xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx slepý xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx postupu x xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.2), xxx bez xxxxxx. Xxxxxx váhy, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx 6 g azbestu, xxxxx xxxxxxxxx 10 xx.
6. Výpočet výsledků
Obsah xxxxx vlákniny, xxxx xxxxxxxx xxxxxx, xx xxx poměrem:
(a-b) · 100 / 3
xxx:
x = ztráta xxxx xx zpopelnění během xxxxxxxxx;
x = xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx výsledky xxxx xxxxxxxxxxx stanovení provedených x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx překročit:
0,3 x xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 10 %;
3 % xxx. x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx xxx 10 %.
7. Xxxxxxxx
7.1 Krmiva xxxxxxxxxx více než 10 % olejů x tuků musí xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.7). Xxx provedení odtučnění xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (3 x s xxxxxxxxx xx mg) xx xxxxxxxxx xxxxx (4.8). Xxxxxxx třikrát xxxxxxxxx 50 xx xxxxxxxxxxxxx (3.7) a xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx (4.1) x xxxxxxxxxx x xxxxxxx, xxx xx xxxxxxx x bodě 5.
7.2 Krmiva xxxxxxxxxx xxxxx a xxxx, xxx xxxxxxx být xxxxxxxxxxx xxxxx, musí xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx x 7.1 x xxxxxxxx xxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx třikrát xxxxxxxx (3.6) (100 xx celkem), xxxxx xxxxxxx 50 ml xxxxxxxxxxxxx (3.7). Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx (4.1) x pokračujte v xxxxxxx, xxx xx xxxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxx xxxx 5 (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx).
7.3 Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxx (xxxx xxx 2 % xxxxxxx), xxxxxx testovaný vzorek (3 x s xxxxxxxxx xx xx) xx kádinky (4.1) xx 100 xx xxxxxxxx chlorovodíkové 0,5 X (3.5) x xxxxxxxx stát x xxxxxxx po dobu 5 xxxxx. Přefiltrujte xxxxxxxx x promyjte xxxxxxxx vodou. Xxxx xxxxx xxxxxxxx 2,0 x xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx filtrace ukáže xxx obtížnou, xxxxxxxx xxxxxxxx acetonem (3.6). Xxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx uvedeno v xxxx 5.
PŘÍLOHA II
1. STANOVENÍ XXXXXXXX (XXXXXXX A)
1. Xxxx x xxxxxx
Xxxx xxxxxx umožňuje xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx X) x xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx x premixech. Xxxxx detekce xx 10000 XX/xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx krmiva x 4000 IU/kg xxx xxxxxxx [1]. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx retinolu:
Skupina A: xxxxxx xxxxx xxx 200000 IU/kg;
Skupina B: xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxx 200000 XX/xx.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx roztokem hydroxidu xxxxxxxxxx v ethanolovém xxxxx x za xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo x dusíkaté xxxxxxxxx. Xxxx xx extrahována 1,2-xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xx chromatografován xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (x xxxxxxxx xxxxxxx X je xxxxxxxxxxxxxx požadována xxxxx x určitých případech). X xxxxxxxx xxxxxxx X xx retinol xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx při 610 xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx komplexu xxxxx Xxxx-Xxxxxxxx xxxxxx; x xxxxxxxx xxxxxxx X xxxxxxxxxxxxxxxxxxx x XX oblasti xxx 325 xx.
3. Xxxxxxxxxx
x) xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx skupin X x X
3.1 96 % (V/V) ethanol.
3.2 10 % (váhově xxxxxxxx x xxxxxx) xxxxxx askorbanu xxxxxxx x.x. nebo
3.3 čištěný xxxxx.
3.4 50 % (xxxxxx vzhledem k xxxxxx) roztok xxxxxxxxx xxxxxxxxxx p.a.
3.5 1 X roztok xxxxxxxxx xxxxxxxxxx p.a.
3.6 0,5 X roztok xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x.x.
3.7 1,2-xxxxxxxxxxxx x.x.
3.8 Petrolether, xxxxxx xxxx: 30–50 °X. Xxxxx xx xx xxxxxxx, přečistěte následujícím xxxxxxxx: xxxxxxxx 1000 xx xxxxxxxxxxxx xx 20 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kyseliny xxxxxx, xxxxx zůstává kyselina xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx x promývejte petrolether xxxxxxxx 500 ml xxxx, xxxxxxx 250 xx 10 % (xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx) xxxxxxx hydroxidu xxxxxxx x xxxxxxx 500 ml xxxx. Xxxxxxxxx vodnatou vrstvu, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx 1 xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx.
3.9 Xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxx: xxxxxxx po dobu 8 hodin xxx 750 °C, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx zvlhčete xxxxxxxxxx: xx xxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxx 10 x xxxxx xxxxxxxxx a 0,7 ml xxxx, xxxxxxxx zátkou, zahřívejte xx dobu 5 xxxxx x xxxxx x vroucí vodou xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx takto xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.17) (xxx 500 IU) xxxxx postupu xxxxxxxxx x 5.3 x 5.4 x xxxxxxxxxx xxxxxx.
3.10 Xxxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx 1 (Xxxxx, Merck xxxx ekvivalentní).
3.11 Čistý xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx oxidu xxxxxxxxx (3.10). (25 g xxxxx hlinitého xx 250 ml diethyletheru.)
3.12 Xxxxxxx petroletheru (3.8) xx 4, 8, 12, 16 a 20 % (X/X) xxxxxxxxxxxxx (3.11).
3.13 0,5 xxx/x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx v 70 % (X/X) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx síranu xxxxxxx p.a.
b) xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx X
3.14 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx p.a.
3.15 Xxxxxxxxxx p.a. Xxxxxxxxx xxxxxxx, fosgen x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx hlinitého (3.10) (50 g oxidu xxxxxxxxx na 200 xx xxxxxxxxxxx; xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx 50 xx xxxxxx xxxxxxx).
3.16 Carr-Priceovo xxxxxxx: xxxxxxxx xxxxxxxxx 25 x chloridu antimonitého x.x. (xxxxxxxx x xxxxxxxxxx) xx 100 xx chloroformu (3.15), xxxxx není xxxxxx xxxxxxxx. Malá usazenina xxxxxxxx antimonitého xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx 2 xx xxxxxxxxxxxxxx x.x. Xxxxxxxx v xxxxxxxxxx x xxxxx z xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx týdnů.
3.17 Xxxxxxx – xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
x) xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx X
3.18 Isopropanol xxx xxxxxxxxxxxxxx.
4. Přístroje
4.1 Xxxxx xxxxx.
4.2 Vakuová xxxxxxx x kulatými xxxxxxx x různém objemu.
4.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx trubice (xxxxx: 300 mm; xxxxxxx xxxxxx: xxxxx 13 xx).
4.4 Xxxxxxxxxxxxxxx x 10xx xxxxxxxx. Xxxxxx v xxxxxxx XX vyžadují křemenné xxxxxx.
4.5 XX lampy xxxxxx xxx 365 xx.
5. Postup
Poznámka:
Všechny xxxxxxx xxxxxx být prováděny xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxx, v zařízení x xxxxxxx xxxx.
5.1 Xxxxxxxxx xxxxxx
X xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx odeberte xxxxxxxxx vzorek x xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx:
0,1–1,0 x xxx xxxxxxxxxxx (xxxxxx xxxxx než 20000 IU/g);
3,0–5,0 x xxx xxxxxxx (xxxxxx xxxx 400 x 20000 IU/g);
10–20 g xxx xxxxxxxxx xxxxx;
30 x xxx xxxxxxxx xxxxxxx X.
Xxxxx umístněte xxxxxxxxx xxxxxx xx 500 xx xxxxx xx xxxxxxxxx zábrusovou xxxxxx.
5.2 Hydrolýza x xxxxxxxx [2]
Xxxxxxxx postupně x xxxxxxxxxxx xxxxxx 40 xx xxxxxxxx (3.1), 2 ml xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.2) [3], 10 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.4) a 2 xx xxxxxxx xxxxxx sodného (3.13).
Zahřívejte xx dobu 30 xxxxx xxx 70-80 °X pod xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx 50 ml ethanolu (3.1) a 100 xx 1,2-xxxxxxxxxxxxx (3.7) (xxxxxxxxxxx xxxxxxx). Xxxxx xxxxxxxxxxx x potom xxxxxxxx xxxxxxx supernatant xx xxxxxxxxxx nádoby. Xxxxxxxx do xxxxxx 150 xx xxxxxxx xxxxxxxxx draselného (3.5), xxxxxxxxxxx xx dobu 30 xxxxxx x xxxxxxxx stát, dokud xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxx) do xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx 40 xx xxxxxxx xxxxxxxxx draselného (3.6), xxxxxxxxxxx xx xxxx 10 vteřin a xxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx vrstvy xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x propláchněte 6–8 xxxx 40 xx xxxxxxx xxxx, dokud xxxx odstraněna zásaditost (xxxxxxxxxxxxxxx test). Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx filtračního papíru.
Odpařte xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx za xxxxx a xx xxxxx xxxxx při 40 °X. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx 5 xx xxxxxxxxxxxx (3.8).
Pro xxxxxxxx xxxxxxx X xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx postupu xxxxxxxxx v 5.3.1.
Xxx xxxxxxxx xxxxxxx X xxxxxxxx xxxxxx xx 50 xx odměrné xxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.8), xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx hustotu, jak xx uvedeno x 5.4.2.
5.3 Xxxxxxxxxxxxxx
5.3.1 Produkty xxxxxxx X
Xxxxxxx chromatografickou xxxxxxx (4.3) xx xxxx 200 mm 10 g oxidu xxxxxxxxx (3.9) xxxxxx xxxxxxxxxxxx x petroletherem (3.8). Xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x 5.2 a xxxxx xxxxxxxx 20 xx xxxxxxxxxxxx (3.8). Xxxxxxxxx xxxxxxxx 10 xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx 4, 8, 12, 16 x 20 % diethyletheru (3.12) xx tlaku nebo xxxxxxxxxx vakua, xxxxxx xxxxxxx xx 2 xx 3 kapky xx vteřinu.
Nejdříve xx xxxxxxxxx karoten [4]. Xxxxxxx je obecně xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 20 % xxxxxxxxxxxxx (3.12). Xxxxxxxxxx xxxxxxx za XX xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx rtuťovou xxxxxxxx). Xxxxxxxxxxxxx zóna xxxxxxxx xx jasně xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, jež následují. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx shromážděte do Xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
5.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxx B
Chromatografie xxxx xxx prováděna xxxxx, xxxxx měření xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x 5.4.2 xxxxxxxxx požadavky xxxx x 5.4.2.
Xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx roztoku x xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x 5.2, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 500 XX xxxxxxxx, a xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx uvedeného x 5.3.1.
5.4 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx
5.4.1 Produkty xxxxxxx X
Xxxxxxx xx xxxxx za xxxxx xxxxx obsahující retinol xxxxxxx x 5.3.1. Xxxxxxxx xxxxxx 2 xx benzenu (3.14). Xxxxxxxx 0,3 xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx 3 ml Xxxx-Xxxxxxxx xxxxxxx (3.16). Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx spektrofotometrem xxx 610 xx xxxxxx 30 vteřin xxxx, xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx standardní xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx standardních xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxx-Xxxxxxxxx xxxxxxxx (2 až 16 XX standard-retinolu (3.17) xx 0,3 xx xxxxxxx (3.14) + 3 xx Xxxx-Xxxxxxxx xxxxxxx (3.16)). Xxxxxxxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x často xx xxxxxxx standardu a xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx Xxxx-Xxxxxxxx xxxxxxx.
5.4.2 Xxxxxxxx xxxxxxx X
Xxxxxxxx alikvotní xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, získaného x 5.2, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 200 XX xxxxxxxx. Xxxxxxx do xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx 25 xx xxxxxxxxxxxx (3.18) Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx spektrofotometru při 325, 310 x 334 xx. Maximální xxxxxxxx se xxxxxxx xx 325 nm. Xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx vypočítá xxxxxxxxxx:
X325 · 18,30 = XX xxxxxxxx/xx
Xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
X310 : X325 x X334 : X325
xxxx xxx 6 : 7 = 0,857.
Xxxxx xx xxxxx x xxxxxx poměrů liší xxxxxxxx xx této xxxxxxx (< 0,830 xxxx &xx;0,880), xxxx xxxxxx optické xxxxxxx xxxxxxxxxx chromatografie v xxxxxxx s xxxxxxx xxxxx v 5.3.2. Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx provedené xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx 0,857 (&xx; 0,830 xxxx &xx; 0,880), xxxx xxx stanovení provedeno x xxxxxxx s xxxxxxx danou pro xxxxxxxx xxxxxxx X.
6. Xxxxxxx výsledků
Vypočítejte xxxxx xxxxxxxx ve vzorku xxxxxxx v úvahu xxxx testovaného xxxxxx x ředění provedená xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx v XX xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxx na xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x stejného xxxxxx xxxxx překročit:
- 20 % xxx. x xxxxxx retinolu xxxxxxx xxx 75000 XX/xx,
- 15000 IU x obsahů mezi 75000 x 150000 XX/xx,
- 10 % xxx. x xxxxxx xxxx 150000 a 250000 IU/kg,
- 25000 XX x obsahů xxxx 250000 a 500000 XX/xx,
- 5 % xxx. x xxxxxx xxxxxxx xxx 500000 IU/kg.
2. XXXXXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXX X1, XXXXXXX)
1. Účel x xxxxxx
Xxxx metoda xxxxxxxx xxxxxxxx obsah xxxxxxxx (xxxxxxxx, xxxxxxxx X1) x xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx 5 xxx.
2. Princip
Roztok je xx horka ošetřen xxxxxxx kyselinou sírovou x xxxxx enzymaticky xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx roztok xx xxxxxxxx alkalické xxxxxxx. Vzniklý xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx isobutanolem x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxxxx
3.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 100 μx/xx: xxxxxxxxx 112,3 xx xxxxxxxx-XXX, předem xxxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxx váhu, x 1000 xx 0,2 X kyseliny sírové (3.2). Xxxxx je xxxxxx uchováván na xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx, je upotřebitelný xx xxxx xxxxxxx xxxxxx.
3.2 0,2 N xxxxxxxx xxxxxx.
3.3 Xxxxx xxxxxxxx xxxxx.
3.4 20 % (váhově xxxxxxxx x xxxxxx) xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx draselného x.x.
3.5 25 % (xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x.x.
3.6 Xxxxxxxx směs: xxxxxxxxx 2 ml xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.4) se 48 xx roztoku xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.5). Xxxx xxxx xx upotřebitelná xxx 4 xxxxxx.
3.7 Xxxxxxxxxx p.a.
3.8 2,5 X xxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
3.9 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx proteázu, xxxxxxxxx x xxxxxxx (xxxx. xxxxxxx).
3.10 96 % (X/X) xxxxxxx.
4. Přístroje
4.1 Xxxxx xxxxx.
4.2 Xxxxxxxxxxx (3500 xx./xxx.) xx 3 xx 50 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxx.
5. Xxxxxx
5.1 Enzymatická xxxxxxxxx
Xx xxxxx xx xxxx 250 ml xxxxxxxxx xxxxx X x X vložte xxxxxxx množství xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 100 μg xxxxxxxx a 125 xx xxxxxxxx xxxxxx (3.2). Xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx baňky X, 1,0 ml xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.1) (xxxxxxx standard).
Silně xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx xxx xx xxxx 15 minut x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 45 oC. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx 20 xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (3.8) a 0,5 x multienzymatického xxxxxxxxx (3.9), potom nechejte xxxx po xxxx 20 xxxxx xx xxxxxxxx teploty. Xxxxxxxx 20 xx xxxxxxx xxxxxx sodného (3.8), xxxxxxx xx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Odeberte filtráty X a B xxxx, xx jste xxxxxxxxx xxxxxxx 15 xx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
5.1.1 Referenční xxxxxx X
Xx trubice xxxxxxxxxxx (4.2) dejte 5 xx xxxxxxxx X x xxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxxx sodného (3.3). Ponořte trubici xx vroucí xxxxx xxxxx xx 15 xxxxx a potom xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx teplotě.
5.1.2 Xxxxxxx X (xxxxxxx xxxxxxxx) x B (xxxxxx)
Xx xxxxxxx odstředivky (4.2) xxxxx 5 ml xxxxxxxx A x 5 xx xxxxxxxx X xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (4.2).
5.2 Xxxxxxx
Xxxxxxxx k xxxxxxxx X, A x X 5 xx xxxxxxxx směsi (3.6) x x xxxxxx xxxxxxx 10 ml xxxxxxxxxxx (3.7). Zazátkujte xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx 5 xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx a odstřeďte xxx, xxx se xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 5 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx 25 ml xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx (3.10) a homogenizujte (= xxxxxxxx T, X a B).
5.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx xxx vlnové délce, xxx xxxxxx dává xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx fluorescenci trichrómu. Xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 365 xx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx X. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx X x X.
6. Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx x mg/kg xxxxxx je xxx xxxxxxx:
x · x / (x-x) x
xxx:
x = xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx X (interní xxxxxxxx);
x = xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx extraktu X (xxxxxx);
x = váha xxxxxxxxxxx xxxxxx x x;
x = xxxxxxxx xxxxxxxx x μx xxxxxxxxx k xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx).
Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx výsledky xxxx xxxxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx vzorku xxxxx xxxxxxxxx:
10 % xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxx 500 xx/xx x
5 % rel. x xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxx 500 xx/xx.
3. XXXXXXXXX XXXXXXXX ASKORBOVÉ X XXXXXXXXXXXXXXXX XXXX (XXXXXXX X)
1. Xxxx a xxxxxx
Xxxx xxxxxx umožňuje xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxx X) v krmivech, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx je 5 xxx. Produkty xxxx zařazeny do xxxx skupin xxxxx xxxxxx předpokládaného xxxxxx xxxxxxxx C:
Skupina A: xxxxxx xxxxx xxx 10 x/xx;
Xxxxxxx B: xxxxxx rovnající xx xxxx větší než 10 g/kg.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx suspendován xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx převedena xx kyselinu xxxxxxxxxxxxxxxxx, x potom xxxxxxxx 2,4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx octové a xxxxxxx. Roztok je xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx gelu, xxxxxxx xxxxxxx xx sucha x xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx hustota xxxxxxx je xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx při 509 xx.
X xxxxxxxx xxxxxxx X xx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx dále xxxxxxxx xxxxxxxxxxx chromatografii xx xxxxx xxxxxx, xxx xx izoloval hydrazon.
3. Xxxxxxxxxx
3.1 Standardní xxxxxx 0,05 % xxxxxxxx X-xxxxxxxxx: xxxxxxxxx 50 xx xxxxxxxx X-xxxxxxxxx x.x. x přibližně 20 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2) x xxxxxxx do xxxxxx 100 xx xxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
3.2 10 % (xxxxxx vzhledem x xxxxxx) xxxxxx xxxxxxxx metafosforečné: xx xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxx 200 x xxxxxxxx metafosforečné x.x. x doplňte xx 2000 xx vodou. Xxxxxxxxx xxx 4oC. Xxxxxx je xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxx.
3.3 Xxxxxxxxxx x.x.
3.4 0,5 % (váhově xxxxxxxx x xxxxxx) xxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxx x.x. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxxx.
3.5 Filtrační pomůcka (X. x X. x. 121 xxxx xxxxxxxxxx)
3.6 2 % xxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx) 2,4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxx 2 x 2,4-dinitrophenylhydrazinu xx 100 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (25 xx xxxxxxxx xxxxxx x.x., x: 1,84, xxxxxx xxxxxxxxx do 100 xx vodou). Xxxxx xxxxxx, xx-xx xxxxxxxxx v xxxxxxx, xxxxxx xxxxx xxxxx.
3.7 Xxxxx nebo
3.8 Xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3.9 Xxxx xxxxx xxxxxxx p.a./ledové kyseliny xxxxxx/xxxxxxx x.x.: 96/2/2 xxxxxxxx.
3.10 Xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x.x./xxxxxx xxxxxxxx octové: 97/3 xxxxxxxx.
3.11 Xxxxxx xxx, xxxxxxxx xxxxxx: 0,05 až 0,2 xx.
3.12 Stahl silika xxx stupeň H xxx tenkovrstvou chromatografii.
3.13 Xxxxxx xxxxxxxx sírovou: xxxxx 105 xx xxxx xx 200 xx odměrné xxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx p.a., x: 1,84.
3.14 Extrakční xxxxxxxxxxxx xxx tenkovrstvou xxxxxxxxxxxxxx: smíchejte 75 xx diethyletheru x.x., 25 xx xxxxx xxxxxxx x.x. x 4,0 xx 96 % (xxxxxx xxxxxxxx x objemu) kyseliny xxxxxx p.a. Xxxxxxx xx 2 xx 3 xxxxxxxxxxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx
4.1 Xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 20 °C.
4.2 Xxxxxxxxxxx (3500 xx./xxx.) xx 40 xx 50 xx trubicemi xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zátkami.
4.3 Xxxxxxx vakuová odparka x 250 xx xxxxxxx.
4.4 Xxxxxxxx chromatografické xxxxxxx (xxxxx: 100 xx, xxxxxxx xxxxxx: 20 xx), xx xxxxxxxxx xxxxxx (xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx).
4.5 Spektrofotometr xxxx xxxxxxxxxx s xxxxxx x 10xx xxxxxxxx.
4.6 Xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (3.12) xxxxxxxxx xx xxxxxxx 0,5 až 0,6 mm. (Xxxxxx xxxx xxx vyrobené xxxxx.) Xxxxx xxxxx xx 2 x xxx xx 3 xxxxxx v sušárně xxx 120 xx 130 °X. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x potom xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xx xxxxxxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxxx.
4.7 Xxxxxxx xxxxxxxxx xx 120 až 130 °X.
5. Xxxxxx
5.1 Extrakce
Do xxxxx ze dvou 250 xx odměrných xxxxx (xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx) X x X xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jemně xxxxxxxxxxxx xxxxxx obsahujícího xxxxxxxxx 200 μx xxxxxxxx C. Xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx X, 0,4 xx xxxxxxxxxxxx roztoku (3.1) x xxxxxxxxxxx jemným xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx).
Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx 30 ml xxxxxxxxxxx (3.3) x 25 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2) xxx 4 °C. Xxxxxx xxxxxxxxx a nechejte xxxx 10 xx 15 xxxxx. Xxxxxxxx 25 ml xxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, silně xxxxxxxxxxx po 10 xxxxxx x xxxxxxxx xxxx 10 až 15 xxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1). Xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx simultánně, xxx xx xxxxxxx xxxx, x vodních xxxxxxxx X (xxxxxxx xxxxxxxx) x B.
5.2 Xxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 40 ml xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx) xxxxxxxxx x 5.1 do xxxxxxx trubice xxxxxxxx xxxxxxxxx zábrusovou xxxxxx. Xxxxxxxx 0,5 až 1 xx roztoku 2,6-xxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxx (3.4) a xxxxxxxxxxx. Vytvoří xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx přetrvat xxxxxxx 15 xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 300 mg filtrační xxxxxxx (3.5), protřepejte x xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx filtr. Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx čistý.
5.3 Xxxxxx x 2,4-dinitrophenylhydrazinem x xxxxxxxx hydrazonu
Za použití xxxxxx přeneste 10 xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x 5.2 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (4.2), xxxxxxxx 2 ml xxxxxxx 2,4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.6) x xxxxxxxxxxx. Zaveďte xxxxxx proud dusíku (3.7) xxxx kysličník xxxxxxxx (3.8) xx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx xx xxxxxxxxx 15 xxxxx (přes xxx) xx xxxxx lázně (4.1).
Xxxxx xxxxxxxx 3 xx xxxx, 20 xx xxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx (3.9) x přibližně 800 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.5). Xxxxxxxxxx xxxxxxx, silně xxxxxxxxxxx xx xxxx 30 xxxxxx x odstřeďte. Xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 15 xx xxxxxxxxxxxx x za xxxxxxxxx tlaku xxxxxxxxx xx xxxxxxx odparce (4.3), xxxxx neobdržíte xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx ve 2 xx xxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx octové/acetonu (3.9) xx xxxxxx xx 50 °X, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx 10 xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxxxx kyseliny xxxxxx (3.10) x xxxxxxxxxxx.
5.4 Xxxxxxxx chromatografie
Naplňte chromatografickou xxxxxxx (4.4) xx xxxxxx 30 ml xxxxx dichloromethanu/ledové xxxxxxxx xxxxxx (3.10). Xxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxxxx) 5 x xxxxxx xxxx (3.11) xx 30 xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.10); xxxxxxx suspenzi xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx x potom stlačte xxx dusíkem (3.7) xxx nízkém tlaku. Xxxxxxxx do xxxxxxx xxxxxx získaný v 5.3, vypláchněte láhev xxxxx xxxxxxxxx směsi xxxxxxxxxxxxxxx/xxxxxx kyseliny octové (3.10) a přelijte xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx směsí (3.10) x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (3 xx 4 dávky xxxxxxxxx 5 xx), xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx eluát. Xxxxxxx xxxx xxxxxx, který xx xxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx směsí xxxxx xxxxxxx/xxxxxx kyseliny xxxxxx/xxxxxxx (3.9), xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx sucha.
5.4.1 U xxxxxxxx xxxxxxx A (xxxxx vitamínu C xxxxx xxx 10 x/xx), xxxxxxxxx zbytek xx 2,0 xx xxxxx xxxxx acetátu/ledové xxxxxxxx octové/acetonu (3.9) x xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxx x 5.5.
5.4.2 U xxxxxxxx xxxxxxx B (xxxxx xxxxxxxx C xx xxxxx xxxx xx větší než 10 x/xx), xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx 4,0 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.13), xxxxx xxxxxxxxxxx, xxx se xxxxxx zcela rozpustil x změřte optickou xxxxxxx, jak xx xxxxxxx v 5.6.
5.5 Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx provádějte xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx 0,5 xx roztoku získaného x 5.4.4 v xxxxx čáře xx xxxxxxxx (4.6). Za xxxxxxx xxxxxxxxxxx rozpouštědla (3.14) xxxxxxxxx xx xxxxxxx 20 xxxxx x xxxxx vyplněném xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx růžově zbarvená xxxxxxxxxxx xxxx jasně xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx zóny, seškrabejte xxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.4).
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx 2 ml x xxxxxxx 1,5 xx xxxxx ethyl xxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx (3.9). Xxxxxxx eluát do xxxx xxxxx (xxxxxxxx xxx xxxx xxx xxxxxxxx). Xxxxxxx xx xxxxx, ošetřete xxxxxxxx xxxxxx 4,0 xx xxxxxxx kyseliny xxxxxx (3.13), xxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
5.6 Xxxxxx xxxxxxx hustoty
Změřte xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxx 509 xx 20 xx 30 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx zředěnou xxxxxxxxx xxxxxxx (3.13).
5.7 Xxxxx xxxxx
Xxxxxxxx slepý xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxx xxxxxx.
6. Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx X xx vzorku v x na xx xx xxx xxxxxxx:
(x – x) · 2 / (x – x) · 10x
xxx:
x = xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx;
x = optická hustota xxxxxxx interního standardu;
c = xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx vzorku;
d = xxxx xxxxxxxxxxx vzorku x gramech.
Opakovatelnost
Rozdíl xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
10 % xxx. x obsahů xxxxxxxx X xxxxxxx xxx 10 x/xx a
5 % xxx. x xxxxxx rovnajících xx xxxx xxxxxxx xxx 10 x/xx.
[1] 1 XX = 0,3 μx retinolu.
[2] U xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx s tendencí xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx množství xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx bodu 5.2.
[3] Xxxxxxxx sodný nemusí xxx přidán, když xxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxx atmosféře.
[4] Obsah xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx 450 xx; E 1% / 1xx = 2600.