Čtvrtá Xxxxxxxx Xxxxxx
xx xxx 5. prosince 1972,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx úřední xxxxxxxx xxxxx
(73/46/XXX)
XXXXXX EVROPSKÝCH XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx x založení Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx xxxxxxxx Rady xx xxx 20. xxxxxxxx 1970 o xxxxxxxx metod xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx kontrolu xxxxx [1], ve znění xxxxxxxx 72/275/XXX ze xxx 20. xxxxxxxx 1972 [2], x xxxxxxx na xxxxxx 2 xxxxxxx směrnice,
vzhledem x xxxx, xx xxx xxxxxxxx požaduje, xxx byly xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx metod Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx x analýzy za xxxxxx xxxxxxxx souladu xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zákonem, xxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxx 71/250/XXX xx xxx 15. xxxxxxxx 1971 [3], 71/393/XXX xx dne 18. xxxxxxxxx 1971 [4] a 72/199/XXX xx dne 27. xxxxx 1972 [5] xxx xxxxxxxxx řadu xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx; xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxx xxxxx xx xx xxxx xxxx vhodným xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx metod;
vzhledem x xxxx, že xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx jsou x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx;
XXXXXXX TUTO XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxx oficiální xxxxxxxx krmiv, xx xx týče xxxxxx xxxxxx vlhkosti u xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx a olejů x xxxxxx xxxxxxx x hrubé xxxxxxxx x krmivech, xxxxxxxxx xxxxx xxxxx popsaných x xxxxxxx I xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxx 1 (xxxx) xxxxxxx xxxxx směrnice Komise 71/250/XXX ze xxx 15. xxxxxx 1971 xx vztahují i xx xxxxxx popsané x příloze X xxxx směrnice.
Článek 2
Členské státy xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxx oficiální xxxxxxxx xxxxx, xx xx xxxx xxxxxx xxxxxx retinolu (xxxxxxx X), thiaminu (aneurin, xxxxxxx X1), xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx kyseliny (xxxxxxx C), prováděny xxxxx metod popsaných x příloze XX xxxx směrnice.
Obecná xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x části 1 (xxxx) xxxxxxx xxxxx směrnice Komise x. 71/250/XXX xx xxx 15. xxxxxx 1971 xx, s xxxxxxxx části xxxxxxxx xx přípravy xxxxxx, xxx xx xxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx i xx metody popsané x příloze XX xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 3
Xxxxxxx státy xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx souladu x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 1. xxxxx 1974. Xxxxxxxxxx o xxxx xxxxxxx Xxxxxx.
Článek 4
Xxxx xxxxxxxx xx určena členským xxxxxx.
X Bruselu xxx 5. xxxxxxxx 1972.
Za Xxxxxx
X. L. Xxxxxxxx
xxxxxxxx
[1] Xx. věst. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Úř. xxxx. X 171, 29.7.1972, x. 39.
[3] Xx. věst. X 155, 12.7.1971, x. 13.
[4] Xx. xxxx. X 279, 20.12.1971, x. 7.
[5] Xx. věst. X 123, 29.5.1972, x. 6.
XXXXXXX I
1. STANOVENÍ XXXXXXXX X XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXX
1. Xxxx x xxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxxx stanovit xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxx v xxxxxxxxxxx x rostlinných tucích x xxxxxxx.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx 103 °X. Ztráta xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx.
3. Přístroje
3.1 Xxxxx x plochým dnem x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, 8 xx 9 xx x xxxxxxx x přibližně 3 xx xxxxxx.
3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx xx zesílenou xxxxxx a expanzní xxxxxxx xx horním xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 80 °X xx xxxxxxx 110 °X, x xxxxxxxxx 10 xx dlouhý.
3.3 Xxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx.
3.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
3.5 Xxxxxxxxxx xxxx.
4. Xxxxxx
Xxxxxxx s xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxx 20 x xxxxxxxxxxxxxxxx vzorku do xxxxx, xxxxxxxx misky (3.1) x xxxxxxxxxx (3.2). Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxx (3.3) za xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxx dosáhla 90 °C xxxxx xxx 7 minut.
Snižte xxxxx x sledujte xxxxxxxxx, xx kterou xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx misky. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 105 °X. Xxxxxxxxxx x xxxxxxx ode dna xxxxxx, xxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, zahřejte xxxxxxxxxx xx 103 °X ± 2 °X, xxxx následnými xxxxxx xxxxxxxx xx 93 °C. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx (3.4) a xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx, dokud xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx 2 xx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx oxidaci xxxx, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx provedeného xxxxxxxx xxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
5. Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx, xx xxx xxxxxxxxxxx rovnicí:
(M1 – M2) · 100 / Xx
xxx:
Xx = xxxxx testovaného xxxxxx v xxxxxxx;
X1 = hmota xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx před xxxxxxx;
X2 = hmota misky x obsahem x xxxxxxx xx ohřevu.
Výsledky xxxxx než 0,05 % xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx "xxxxx xxx 0,05 %".
Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 0,05 % x absolutní xxxxxxx.
2. XXXXXXXXX XXXXXXX
— atomovou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx —
1. Xxxx x xxxx xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx hořčíku x xxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx než 5 %.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxx kyselině xxxxxxxxxxxxxx. Pokud xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx kyselině xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx se xxxxxxx x xxxxx hořčíku xx stanoví xxxxxxxx xxxxxxxxx spektrofotometrií xxx xxxxxx xxxxx 285,2 xx.
3. Xxxxxxxxxx
3.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x.x. x: 1,16.
3.2 Xxxxxxxxxxxxx kyselina xxxxxxxxxxxxxx p.a. x: 1,19.
3.3 Hořčíkový pásek xxxx drát, nebo XxXX4 7X2X, xxxxxx xx xxxxxxxx teploty.
3.4 Xxxxxx xxxx stroncia (xxxxxxx xxxx dusičnan) 2,5 % (76,08 x XxXx2 6X2X x.x., xxxx 60,38 x Sr(No3)2 p.a.).
3.5 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx: xxxxxxx s xxxxxxxxx xx xx 1 x hořčíku (3.3), x kterého xxxx xxxxxx xxxxxxx odstraněna xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (10,143 x) XxXX47X2X (3.3). Xxxxxx do 1000 xx xxxxxxx baňky, xxxxxxxx 80 xx xxxxxxxx chlorovodíkové (3.1), xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xx 1000 xx xxxxx. 1 xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 1,000 mg xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
4.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx muflová xxx.
4.3 Atomový absorpční xxxxxxxxxxxxxxx.
5. Xxxxxx
5.1 Příprava xxxxxxx vzorku
5.1.1 Xxxxxx xxxxxxx výlučně z xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx x xxxxxxxxx na mg 5 x xxxxxx xx 500 xx xxxxxxx baňky s 250 až 300 xx xxxx. Xxxxxxxx 40 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.1), xxxxxx xx xxxx a xxxxxxxx kapalinu xxx xxxxxx xxxx po xxxx 30 xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, doplňte xxxxx na objem, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Vyřaďte prvních 30 xx xxxxxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 5 g xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (15-30 ml) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2), xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxx lázni x xxxxxx xx xxxxx hodinu xx xxxxxxx x 105 °X. Pokračujte, xxx xx xxxxxxx xx xxxxx věty v 5.1.2.
5.1.2 Xxxxxx složená xxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xx 5 x vzorku xx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxx 550 °X x xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx je xxx uhlíkatých xxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (15-30 xx) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2), xxxxxxx xx xxxxx na xxxxx xxxxx x xxxxxx na jednu xxxxxx xx sušárny x 105 °X. Xxxxxx xxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.1) x xxxxxxxx xx 500 xx xxxxxxx baňky xx xxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxx xx objem xxxxx. Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx suché xxxxxxx xxxx suchý xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx 30 xx xxxxxxxx.
5.1.3 Krmiva složená xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx x přesností xx xx 5 x xxxxxx xx xxxxxxx x zpopelněte xxx 550 °C x xxxxxxx xxxx, xxxxx není získán xxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx částic. Xxxxx xxxxxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2), odpařte xx xxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx sušárny x 105 °X, xxx xx xxxxxxxxxx křemíku xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx 5 ml xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.1), xxxxxxxx xx 250 xx xxxxxxx xxxxx xx užití horké xxxx, xxxxxx do xxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x doplňte na xxxxx vodou. Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx prvních 30 xx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5) vodou xxxxxxxxx nejméně 5 xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx do xxxxxxx xxxxxxx 10 xx roztoku soli xxxxxxxx (3.4) x xxxxx xxxxxxx xxxxx xx 100 xx xxxxx. Xxxxxxxx vodou xxxxx alikvotní xxxx xxxxxxxx získaného xxxxx 5.1.1, 5.1.2 nebo 5.1.3 tak, xx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, která xx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx kyseliny chlorovodíkové xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 0,4 X. Xxxxxxxx 10 ml xxxxxxx soli xxxxxxxx (3.4) x xxxxx xxxxxxx xxxxx xx 100 ml xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxx, a referenčních xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx 285,2 xx.
6. Xxxxxxx výsledků
Vypočtěte xxxxxxxx xxxxxxx xx vzorku xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx vyjádřete xxxx xxxxxxxx vzorku.
Opakovatelnost
Rozdíl xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 5 % rel.
3. XXXXXXXXX XXXXX VLÁKNINY
1. Xxxx x xxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxxx stanovit x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x zásaditých xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx jako xxxxx xxxxxxxx.
2. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx, kde xx xx xxxxx, xx xxxxxxxxx postupně xxxxxxxx xxxxxxx kyseliny sírové x xxxxxxxxx draselného xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xx oddělen xxxxxxxx xx přítomnosti xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxx x zpopelněn xxx 900 °X. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxx.
3. Xxxxxxxxxx
3.1 Xxxxxxxx xxxxxx 0,26 X.
3.2 Xxxxxxxx xxxxxx: xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx užívanému x Xxxxxxxxx kelímkem xxxxxxxxx 5 xxxxxxx xxxx xxxx zředěné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (1 xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, d: 1,19 + 3 xxxx vody). Xxxxx xxxx přibližně 45 xxxxx, xxxxxxxx vychladnout, xxxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx vodou, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx, x xxxxx xxxxxxxx (3.6). Xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx 2 xxxxxx xxx 900 °X. Xxxxxxxx vychladnout x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx láhvi. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx azbest xxxx být použit xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxx 5, xxxxx xx týče xxxxxxx xxxxxx.
3.3 Protipěnící emulse (xx. silikon).
3.4 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 0,23 X.
3.5 Kyselina xxxxxxxxxxxxxx 0,5 N.
3.6 Xxxxxx.
3.7 Xxxxxxxxxxx.
4. Přístroje
4.1 Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx 600 xx s xxxxxxxxx xxxxxx 200 xx.
4.2 Porcelánové xxxxxxx xxxxxxxxx 80 xx x xxxxxxx a xxxxxxxxx 4 mm xxxxx, xxxxxxxxxxx přibližně 32 xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx 4 xx.
4.3 Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx 2 litry x označením xxxxxx 800 xx x xxxxxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxx 120 xx x průměru.
4.4 Filtrační xxxxx xxxxxxxxx 40 xx v xxxxxxx x xxxxxxxxx 4 xx xxxxx se xxxxxxxxx okraji xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx (4.3), perforované xxxxxxxxx 16 otvory, xxxxx x průměru přibližně 4 xx x xxxxxxx xxxxxxxx síťovinou, xxxxxxxx ok přibližně 1 mm. Desky x síťovina musejí xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx.
4.5 Xxxxxxxxx nebo křemíkové xxxxxxxxx kelímky.
4.6 Elektrická xxxxxxx pec xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
4.7 Exsikátor.
4.8 Asbestový xxxxx: Xxxxxxxxxxx 2,0 x azbestu (3.2) xx 100 ml xxxx.
Xxxxxxxxx xx vakua xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx drátěnou xxxxxxxxx (4.4) x xxxxxxxxx x nálevce xxxxxxx xxxxx (4.3). Xxxxxxxx xxxxxxx x filtrujte xxxxx jednou xxxx xxxxxx filtr. Xxxxxxx xxxxxxx.
5. Xxxxxx
Xxxxxxx s xxxxxxxxx xx xx 3 g xxxxxx x 2 x xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.2) xx kádinky (4.1), xxxxxxxx 200 ml xxxxxxxx xxxxxx (3.1) x xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx emulse (3.3). Xxxxxx rychle xx xxxx a xxxxxxxx xxxxx xxxxxx 30 xxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xx 500 xx láhev x xxxxxxx xxxx, ve xxxxx cirkuluje xxxxxxx xxxx. Zastavte xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 50 xx studené vody x xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, jak je xxxxxxx xx 4.8.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxx dávkami xxxxxxxxx 100 ml xxxxx xxxxx xxxx, xxx xx získal xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 800 xx. Přeneste xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx (4.1), xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx kotoučem (4.2) xxx xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx 200 ml xxxxxxx hydroxidu xxxxxxxxxx (3.4). Xxxxxx rychle xx xxxx x xxxxxxxx xxxxx přesně 30 xxxxx. Přidejte xxxxxxxxx 50 xx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxx xx 4.8. Xxxxxxxxx zbytek xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx voda xxxxxxxxx (xxxxxxxx lakmusovým xxxxxxxx), potom 3xxxx xxxxxxxx (3.6) (xxxxxxxxx 100 ml xxxxxxx xxxxxx).
Xxxxxxxx xxxxxx kvantitativně xx xxxxxxxxxxx kelímku (4.5), xxxxxxxx, xxxxx xx to xxxxxxx, x xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx při 130 °X.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx (4.7) x xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx (4.6) x xxxxxxxx xxxxxxxxx xx dobu 30 xxxxx xxx 900 °C. Nechejte xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx (4.7) x xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx slepý xxxxxxx xxxxxxx stejného xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.2), xxx xxx xxxxxx. Ztráta váhy, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx 6 x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx 10 xx.
6. Výpočet xxxxxxxx
Xxxxx xxxxx vlákniny, xxxx xxxxxxxx xxxxxx, xx xxx xxxxxxx:
(x-x) · 100 / 3
xxx:
x = ztráta váhy xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx;
x = xxxxxx xxxx po xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx pokusu.
Opakovatelnost
Rozdíl xxxx výsledky dvou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x stejného xxxxxx xxxxx překročit:
0,3 v xxxxxxxxx hodnotě u xxxxxx hrubé xxxxxxxx xxxxxxx než 10 %;
3 % rel. x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx xxx 10 %.
7. Poznámky
7.1 Krmiva xxxxxxxxxx více než 10 % xxxxx x xxxx xxxx xxx před xxxxxxxx xxxxxxxxx diethyletherem (3.7). Xxx xxxxxxxxx odtučnění xxxxxx xxxxxxxxx vzorek (3 x x xxxxxxxxx xx xx) xx xxxxxxxxx filtr (4.8). Xxxxxxx třikrát xxxxxxxxx 50 ml xxxxxxxxxxxxx (3.7) x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx vakua. Převeďte xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx kádinky (4.1) x xxxxxxxxxx x xxxxxxx, xxx xx xxxxxxx x xxxx 5.
7.2 Krmiva xxxxxxxxxx xxxxx x xxxx, xxx nemohou být xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxx odtučněna xxx xxxxxxx x 7.1 x následně potom, xx bylo xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx ze xxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx třikrát xxxxxxxx (3.6) (100 xx celkem), potom xxxxxxx 50 xx xxxxxxxxxxxxx (3.7). Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx (4.1) x xxxxxxxxxx x xxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxx 5 (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx).
7.3 Xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx na xxxxxx (xxxx než 2 % xxxxxxx), xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (3 x x xxxxxxxxx na mg) xx kádinky (4.1) xx 100 ml xxxxxxxx chlorovodíkové 0,5 X (3.5) x xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xxxx 5 minut. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxx použijte 2,0 x azbestu určeného xxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxx obtížnou, xxxxxxxx xxxxxxxx acetonem (3.6). Xxxxx postupujte xxx, xxx xxxxxxx x xxxx 5.
PŘÍLOHA II
1. STANOVENÍ XXXXXXXX (VITAMÍN X)
1. Xxxx x rozsah
Tato xxxxxx xxxxxxxx stanovit xxxxxxxx xxxxxxxx (vitamín X) v xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx detekce xx 10000 XX/xx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x 4000 XX/xx xxx xxxxxxx [1]. Xxxxxxxx jsou xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx, xxxxx jejich xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxxxx A: xxxxxx xxxxx než 200000 IU/kg;
Skupina X: xxxxxx xxxxxxxxx se xxxx xxxxx xxx 200000 XX/xx.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx hydroxidu xxxxxxxxxx v ethanolovém xxxxx x xx xxxxxxxxxxx antioxidantu xxxx x dusíkaté xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxx 1,2-xxxxxxxxxxxxxx. Extrakt xx xxxxxxx xx xxxxx x ošetřen petroletherem. Xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx oxidu xxxxxxxxx (u produktů xxxxxxx B je xxxxxxxxxxxxxx požadována pouze x xxxxxxxx xxxxxxxxx). X xxxxxxxx xxxxxxx X xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx 610 xx po xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx Carr-Priceovy reakce; x produktů xxxxxxx X xxxxxxxxxxxxxxxxxxx x XX oblasti xxx 325 xx.
3. Chemikálie
a) xxxxxxx pro analýzu xxxxxxxx xxxxxx X x X
3.1 96 % (X/X) ethanol.
3.2 10 % (xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x.x. nebo
3.3 xxxxxxx xxxxx.
3.4 50 % (xxxxxx vzhledem x xxxxxx) roztok xxxxxxxxx xxxxxxxxxx p.a.
3.5 1 X xxxxxx hydroxidu xxxxxxxxxx x.x.
3.6 0,5 X xxxxxx hydroxidu xxxxxxxxxx x.x.
3.7 1,2-dichlorethan x.x.
3.8 Petrolether, xxxxxx xxxx: 30–50 °X. Xxxxx xx xx xxxxxxx, přečistěte xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxx 1000 xx xxxxxxxxxxxx xx 20 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kyseliny sírové, xxxxx xxxxxxx kyselina xxxxxxxx. Xxxxxxxxx kyselinu x promývejte petrolether xxxxxxxx 500 xx xxxx, xxxxxxx 250 xx 10 % (xxxxxx vzhledem x xxxxxx) roztoku hydroxidu xxxxxxx x xxxxxxx 500 xx xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx vrstvu, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx 1 xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxx síran xxxxx, přefiltrujte a xxxxxxxxxx.
3.9 Oxid hlinitý, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxx: xxxxxxx po xxxx 8 hodin při 750 °X, vychlaďte x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxx x hnědého xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx: xx xxxxx x hnědého xxxx xxxxxx 10 x xxxxx xxxxxxxxx x 0,7 xx vody, xxxxxxxx zátkou, zahřívejte xx xxxx 5 xxxxx x lázni x vroucí xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx vychladnout. Ověřte xxxxxxxx takto xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.17) (xxx 500 XX) xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x 5.3 x 5.4 x xxxxxxxxxx xxxxxx.
3.10 Bázický xxxx xxxxxxx, xxxxxx aktivity 1 (Xxxxx, Merck xxxx xxxxxxxxxxxx).
3.11 Xxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx peroxidy x stopy xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (3.10). (25 x xxxxx xxxxxxxxx na 250 ml diethyletheru.)
3.12 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.8) xx 4, 8, 12, 16 x 20 % (X/X) xxxxxxxxxxxxx (3.11).
3.13 0,5 xxx/x roztok xxxxxx xxxxxxx x 70 % (X/X) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx p.a.
b) xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx X
3.14 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx benzen p.a.
3.15 Xxxxxxxxxx p.a. Xxxxxxxxx xxxxxxx, fosgen a xxxxx vody chromatograficky xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (3.10) (50 g xxxxx xxxxxxxxx na 200 xx chloroformu; xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx prvních 50 xx xxxxxx xxxxxxx).
3.16 Carr-Priceovo xxxxxxx: xxxxxxxx xxxxxxxxx 25 x chloridu xxxxxxxxxxxx x.x. (udržujte x xxxxxxxxxx) xx 100 xx xxxxxxxxxxx (3.15), xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nečiní xxxxxxx. Přidejte 2 xx acethanhydridu p.a. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxxxx skla xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx trvanlivost xxxxxxx týdnů.
3.17 Retinol – spektrofotometricky xxxxxxxxxxxxxxx.
x) xxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxx skupiny X
3.18 Xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx
4.1 Vodní xxxxx.
4.2 Xxxxxxx odparka x xxxxxxxx lahvemi x xxxxxx xxxxxx.
4.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx trubice (xxxxx: 300 mm; xxxxxxx xxxxxx: xxxxx 13 mm).
4.4 Xxxxxxxxxxxxxxx x 10ml xxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxxxx XX xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4.5 XX xxxxx xxxxxx xxx 365 xx.
5. Postup
Poznámka:
Všechny postupy xxxxxx xxx prováděny xxxx přímé xxxxxx, xxxxx je to xxxxxxx, x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx.
5.1 Xxxxxxxxx xxxxxx
X jemně xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx:
0,1–1,0 x xxx koncentráty (xxxxxx xxxxx xxx 20000 XX/x);
3,0–5,0 x xxx premixy (xxxxxx xxxx 400 x 20000 XX/x);
10–20 x xxx xxxxxxxxx směsi;
30 x pro xxxxxxxx xxxxxxx X.
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx vzorek xx 500 xx xxxxx xx skleněnou xxxxxxxxxx xxxxxx.
5.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxx [2]
Xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx 40 ml xxxxxxxx (3.1), 2 xx xxxxxxx askorbanu xxxxxxx (3.2) [3], 10 xx roztoku xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.4) a 2 xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (3.13).
Zahřívejte xx dobu 30 xxxxx při 70-80 °X pod zpětným xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx pod xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx 50 xx xxxxxxxx (3.1) x 100 xx 1,2-xxxxxxxxxxxxx (3.7) (xxxxxxxxxxx xxxxxxx). Xxxxx xxxxxxxxxxx x potom xxxxxxxx xxxxxxx supernatant xx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxx 150 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.5), xxxxxxxxxxx po xxxx 30 vteřin x xxxxxxxx xxxx, dokud xxxxxx vrstvy odděleny. Xxxxxxxx vrstvu xxxxxxxxxxxxx (xxxxxx vrstva) xx xxxxxxxxxx nádoby, přidejte 40 ml xxxxxxx xxxxxxxxx draselného (3.6), xxxxxxxxxxx po xxxx 10 vteřin x xxxxxxxx xxxx, dokud xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x propláchněte 6–8 xxxx 40 xx xxxxxxx vody, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxxx test). Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx filtračního xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxx a xx xxxxx lázni xxx 40 °X. Xxxxxx xxxxxxxx zbytek 5 xx xxxxxxxxxxxx (3.8).
Xxx xxxxxxxx skupiny A xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x 5.3.1.
Xxx xxxxxxxx skupiny X xxxxxxxx xxxxxx xx 50 xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.8), xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx hustotu, xxx xx uvedeno x 5.4.2.
5.3 Xxxxxxxxxxxxxx
5.3.1 Produkty xxxxxxx X
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.3) do xxxx 200 mm 10 g xxxxx xxxxxxxxx (3.9) xxxxxx xxxxxxxxxxxx x petroletherem (3.8). Do trubice xxxxxxxx xxxxxx získaný x 5.2 x xxxxx přidejte 20 xx petroletheru (3.8). Xxxxxxxxx postupně 10 xx xxxxxxx roztoků xxxxxxx petroleje ve 4, 8, 12, 16 a 20 % xxxxxxxxxxxxx (3.12) xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx vakua, xxxxxx xxxxxxx je 2 xx 3 kapky xx vteřinu.
Nejdříve xx xxxxxxxxx xxxxxxx [4]. Xxxxxxx xx obecně xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 20 % xxxxxxxxxxxxx (3.12). Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx UV xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx rtuťovou xxxxxxxx). Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx jasně xxxxxxxx xx žlutých xxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx frakci xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx do Xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
5.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxx B
Chromatografie xxxx xxx prováděna pouze, xxxxx měření optické xxxxxxx xxxxxxx x 5.4.2 xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x 5.4.2.
Pokud xx ukáže xxx xxxxxxxxxxxxxx nezbytnou, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx kolony xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x 5.2, obsahujícího xxxxxxxxx 500 XX xxxxxxxx, x chromatografujte xxxxx xxxxxxx uvedeného x 5.3.1.
5.4 Měření xxxxxxx xxxxxxx
5.4.1 Produkty xxxxxxx A
Odpařte xx xxxxx za vakua xxxxx obsahující retinol xxxxxxx x 5.3.1. Xxxxxxxx zbytek 2 xx xxxxxxx (3.14). Xxxxxxxx 0,3 ml xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx 3 xx Xxxx-Xxxxxxxx činidla (3.16). Xxxxxxx se xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx při 610 nm xxxxxx 30 xxxxxx poté, xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx obsah xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx získanou x xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxx-Xxxxxxxxx xxxxxxxx (2 xx 16 XX standard-retinolu (3.17) xx 0,3 xx xxxxxxx (3.14) + 3 xx Xxxx-Xxxxxxxx xxxxxxx (3.16)). Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx kontrolována xxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx připraveného xxxxxxx Xxxx-Xxxxxxxx činidla.
5.4.2 Xxxxxxxx xxxxxxx X
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x 5.2, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 200 XX retinolu. Xxxxxxx xx xxxxx xx vakua a xxxxxxxx xxxxxx 25 xx xxxxxxxxxxxx (3.18) Xxxxxx xxxxxxxx hustotu xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxx 325, 310 a 334 xx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx 325 xx. Xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx:
X325 · 18,30 = IU xxxxxxxx/xx
Xxxxxxx, xxxxx optických hustot
E310 : X325 x X334 : X325
xxxx xxx 6 : 7 = 0,857.
Pokud xx xxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xx této xxxxxxx (&xx; 0,830 xxxx >0,880), xxxx xxxxxx xxxxxxx hustoty xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx x metodou xxxxx v 5.3.2. Xxxxx xxxxxx optické xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx ukáže, xx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx liší xx hodnoty 0,857 (&xx; 0,830 xxxx &xx; 0,880), musí xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx danou pro xxxxxxxx xxxxxxx A.
6. Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx obsah xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx v xxxxx xxxx testovaného xxxxxx x ředění xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx x IU xxxxxxxx xx kg xxxxxx nebo xx xx koncentrátu nebo xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx paralelních xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx překročit:
- 20 % rel. x obsahů xxxxxxxx xxxxxxx než 75000 XX/xx,
- 15000 XX x xxxxxx mezi 75000 x 150000 XX/xx,
- 10 % xxx. x xxxxxx xxxx 150000 x 250000 XX/xx,
- 25000 XX x xxxxxx xxxx 250000 x 500000 IU/kg,
- 5 % xxx. u xxxxxx xxxxxxx xxx 500000 XX/xx.
2. XXXXXXXXX XXXXXXXX (VITAMÍN X1, XXXXXXX)
1. Xxxx a xxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx obsah thiaminu (xxxxxxxx, xxxxxxxx B1) x krmivech, koncentrátech x premixech. Limit xxxxxxx je 5 xxx.
2. Princip
Roztok xx xx horka xxxxxxx xxxxxxx kyselinou sírovou x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Získaný xxxxxx xx xxxxxxxx alkalické xxxxxxx. Xxxxxxx thiochróm xx xxxxxxxxxx isobutanolem x xxxxxxxx fluorimetricky.
3. Xxxxxxxxxx
3.1 Xxxxxxxxxx roztok xxxxxxxx 100 μx/xx: xxxxxxxxx 112,3 xx xxxxxxxx-XXX, xxxxxx usušeného xx xxxxx xx xxxxxx xxxx, v 1000 ml 0,2 X kyseliny xxxxxx (3.2). Pokud je xxxxxx uchováván na xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxx.
3.2 0,2 X xxxxxxxx xxxxxx.
3.3 Xxxxx xxxxxxxx xxxxx.
3.4 20 % (xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx) xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x.x.
3.5 25 % (xxxxxx xxxxxxxx x objemu) xxxxxx xxxxxxxxx draselného x.x.
3.6 Xxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxx 2 ml xxxxxxx hexakyanoželezitanu draselného (3.4) se 48 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.5). Tato xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxx 4 hodiny.
3.7 Xxxxxxxxxx x.x.
3.8 2,5 X roztok xxxxxx xxxxxxx.
3.9 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx (např. xxxxxxx).
3.10 96 % (X/X) xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx
4.1 Xxxxx xxxxx.
4.2 Xxxxxxxxxxx (3500 xx./xxx.) xx 3 xx 50 xx trubicemi xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxx.
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxx ze xxxx 250 xx xxxxxxxxx xxxxx X x X vložte xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx obsahujícího xxxxxxxxx 100 μg xxxxxxxx x 125 xx xxxxxxxx sírové (3.2). Xxxxxxxx rovněž, xxxxx xx xxxxx X, 1,0 ml xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.1) (xxxxxxx xxxxxxxx).
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx je xx vroucí vodní xxxxx x udržujte xx xxx po xxxx 15 xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 45 xX. Xxxxxxxx xx každé xxxxx 20 ml xxxxxxx octanu sodného (3.8) x 0,5 x xxxxxxxxxxxxxxxxxx přípravku (3.9), xxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxx 20 minut za xxxxxxxx teploty. Xxxxxxxx 20 xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (3.8), xxxxxxx xx xxxxx xxxxx, homogenizujte x xxxxxxxxx. Odeberte xxxxxxxx X a B xxxx, xx jste xxxxxxxxx xxxxxxx 15 xx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
5.1.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx X
Xx trubice xxxxxxxxxxx (4.2) dejte 5 xx xxxxxxxx X x xxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.3). Ponořte trubici xx xxxxxx xxxxx xxxxx xx 15 xxxxx x xxxxx xxxxxxxx vychladnout xxx xxxxxxxx teplotě.
5.1.2 Xxxxxxx X (xxxxxxx xxxxxxxx) x X (vzorek)
Do xxxxxxx xxxxxxxxxxx (4.2) xxxxx 5 xx xxxxxxxx A x 5 xx xxxxxxxx X xx xxxx xxxxxxx odstředivky (4.2).
5.2 Xxxxxxx
Xxxxxxxx x xxxxxxxx X, A x X 5 xx xxxxxxxx směsi (3.6) x x minutu xxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxxx (3.7). Xxxxxxxxxx xxxxxxx a silně xxxxxxxxxxx 5 xxxxxx. Xxxxxxxx stát xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 5 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vrstvy do xxxxx 25 ml xxxxxxx xxxxx, doplňte xx xxxxx ethanolem (3.10) x homogenizujte (= xxxxxxxx X, X x X).
5.3 Xxxxxx fluorescence
Proveďte měření xxx xxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx optimální xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx trichrómu. Xxxxxxxx při xxxxxxxxx 365 xx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx X. Xxxxxx xxxxxxxxx fluorescence xxxxxxxx A x X.
6. Xxxxxxx výsledků
Obsah xxxxxxxx x xx/xx xxxxxx xx dán xxxxxxx:
x · b / (a-b) x
xxx:
x = intenzita fluorescence xxxxxxxx A (xxxxxxx xxxxxxxx);
x = intenzita xxxxxxxxxxxx extraktu B (xxxxxx);
x = váha xxxxxxxxxxx xxxxxx x x;
x = xxxxxxxx xxxxxxxx x μg xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx).
Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx výsledky dvou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
10 % xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxx 500 mg/kg x
5 % xxx. u xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxx 500 xx/xx.
3. XXXXXXXXX XXXXXXXX ASKORBOVÉ A XXXXXXXXXXXXXXXX XXXX (VITAMÍN X)
1. Xxxx a xxxxxx
Xxxx xxxxxx umožňuje xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx askorbové x xxxxxxxx dehydroaskorbové (xxxxxxx X) v krmivech, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx 5 xxx. Produkty xxxx zařazeny xx xxxx skupin podle xxxxxx předpokládaného xxxxxx xxxxxxxx X:
Xxxxxxx X: xxxxxx nižší xxx 10 x/xx;
Xxxxxxx X: xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx větší xxx 10 g/kg.
2. Princip
Vzorek xx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxx, aby xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx 2,4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx hydrazon xx extrahován směsí xxxxx xxxxxxx, ledové xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx. Roztok je xxxxxxxxxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxx xxxx, extrakt xxxxxxx do xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx hustota xxxxxxx je xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxx 509 xx.
X xxxxxxxx xxxxxxx X xx xxxxxxx xxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx podroben xxxxxxxxxxx chromatografii na xxxxx vrstvě, xxx xx izoloval hydrazon.
3. Xxxxxxxxxx
3.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx 0,05 % kyseliny X-xxxxxxxxx: xxxxxxxxx 50 xx xxxxxxxx X-xxxxxxxxx x.x. v xxxxxxxxx 20 xx roztoku xxxxxxxx metafosforečné (3.2) x xxxxxxx do xxxxxx 100 xx xxxxx. Připravujte xxxxxxxxxxxxx xxxx použitím.
3.2 10 % (váhově xxxxxxxx x xxxxxx) roztok xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx: po xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxx 200 x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x.x. x doplňte xx 2000 xx vodou. Xxxxxxxxx xxx 4oC. Xxxxxx je stabilní xx xxxx jednoho xxxxx.
3.3 Xxxxxxxxxx x.x.
3.4 0,5 % (xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx) xxxxxx 2,6-dichlorophenol-indophenolu p.a. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
3.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (X. a X. x. 121 nebo xxxxxxxxxx)
3.6 2 % xxxxxx xxxxxx (váhově xxxxxxxx x xxxxxx) 2,4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxx 2 x 2,4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx ve 100 ml zředěné xxxxxxxx sírové (25 xx kyseliny xxxxxx x.x., x: 1,84, xxxxxx xxxxxxxxx xx 100 ml xxxxx). Xxxxx xxxxxx, xx-xx xxxxxxxxx x chladnu, xxxxxx jeden xxxxx.
3.7 Xxxxx xxxx
3.8 Kysličník xxxxxxxx.
3.9 Xxxx xxxxx xxxxxxx x.x./xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx x.x.: 96/2/2 xxxxxxxx.
3.10 Xxxx dichloromethanu x.x./xxxxxx kyseliny octové: 97/3 objemově.
3.11 Silika xxx, xxxxxxxx částic: 0,05 xx 0,2 xx.
3.12 Xxxxx xxxxxx xxx stupeň H xxx tenkovrstvou xxxxxxxxxxxxxx.
3.13 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx 105 xx xxxx xx 200 xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx sírovou x.x., x: 1,84.
3.14 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxx 75 xx diethyletheru p.a., 25 xx xxxxx xxxxxxx x.x. x 4,0 xx 96 % (xxxxxx xxxxxxxx x objemu) xxxxxxxx xxxxxx x.x. Xxxxxxx xx 2 xx 3 xxxxxxxxxxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx
4.1 Xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 20 °X.
4.2 Odstředivka (3500 xx./xxx.) xx 40 až 50 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.3 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x 250 xx xxxxxxx.
4.4 Skleněné chromatografické xxxxxxx (délka: 100 xx, xxxxxxx xxxxxx: 20 xx), xx xxxxxxxxx xxxxxx (např. Xxxxxxxxx trubice).
4.5 Spektrofotometr xxxx kolorimetr s xxxxxx x 10xx xxxxxxxx.
4.6 Přístroj pro xxxxxxxxxxxx chromatografii se xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (3.12) xxxxxxxxx xx xxxxxxx 0,5 až 0,6 xx. (Vhodné xxxx xxx vyrobené xxxxx.) Xxxxx desky xx 2 a xxx xx 3 xxxxxx x xxxxxxx xxx 120 xx 130 °X. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xx xxxxxxx 24 xxxxx před použitím.
4.7 Xxxxxxx nastavená na 120 až 130 °X.
5. Postup
5.1 Extrakce
Do xxxxx ze dvou 250 ml xxxxxxxxx xxxxx (se skleněnými xxxxxxxxxxx xxxxxxx) X x X xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx vzorku xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 200 μx xxxxxxxx C. Xxxxxxxx, xxxxx do baňky X, 0,4 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.1) x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx).
Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx 30 xx chloroformu (3.3) a 25 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2) při 4 °C. Krátce xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx 10 až 15 xxxxx. Xxxxxxxx 25 xx xxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xx 10 xxxxxx x xxxxxxxx xxxx 10 až 15 minut xx xxxxx xxxxx (4.1). Xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx vodní fáze xx xxxxxxxxxxxxx fáze. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xx popsáno xxxx, u vodních xxxxxxxx X (xxxxxxx xxxxxxxx) a X.
5.2 Xxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 40 xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxxx zakalený) xxxxxxxxx x 5.1 do xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx zátkou. Xxxxxxxx 0,5 xx 1 xx roztoku 2,6-xxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxx (3.4) a xxxxxxxxxxx. Vytvoří se xxxxxxx zbarvení, které xx mělo přetrvat xxxxxxx 15 minut. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 300 mg xxxxxxxxx xxxxxxx (3.5), protřepejte x xxxxxxxxx xxxx xxxxx skládaný filtr. Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxx.
5.3 Xxxxxx x 2,4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 10 xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x 5.2 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (4.2), xxxxxxxx 2 xx xxxxxxx 2,4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.6) x promíchejte. Xxxxxxx xxxxxx proud xxxxxx (3.7) nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx (3.8) xx xxxxxxx, xxxxxxxxxx trubici x ponořte xx xx xxxxxxxxx 15 xxxxx (xxxx xxx) xx xxxxx xxxxx (4.1).
Xxxxx přidejte 3 xx xxxx, 20 xx xxxxx ethyl xxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx (3.9) x xxxxxxxxx 800 mg xxxxxxxxx xxxxxxx (3.5). Xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx 30 xxxxxx x odstřeďte. Xx xxxxx odparky xxxxxxxx 15 xx xxxxxxxxxxxx a xx xxxxxxxxx xxxxx odpařujte xx xxxxxxx odparce (4.3), xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx zbytek. Xxxxxxxxx xxxxxx xx 2 xx směsi xxxxx xxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx (3.9) xx xxxxxx xx 50 °X, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx 10 xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx octové (3.10) x xxxxxxxxxxx.
5.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) xx xxxxxx 30 xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.10). Suspendujte (xxxxx protřepávaje) 5 x xxxxxx xxxx (3.11) xx 30 xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.10); xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx. Nechejte stát x potom xxxxxxx xxx dusíkem (3.7) xxx xxxxxx tlaku. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx získaný x 5.3, xxxxxxxxxxx láhev xxxxx množstvím směsi xxxxxxxxxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.10) x xxxxxxxx xx trubice, xxxxx xxxxxxx trubici xxxxx (3.10) x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (3 xx 4 dávky xxxxxxxxx 5 xx), xxxxx xxxx získán xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx eluátu, xxxxx xx zbarven xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx zónu na xxxxxxx trubice směsí xxxxx xxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx (3.9), odeberte xxxxx x odpařte xx xxxxx.
5.4.1 U xxxxxxxx xxxxxxx A (xxxxx vitamínu X xxxxx xxx 10 x/xx), rozpusťte zbytek xx 2,0 xx xxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx (3.9) x ihned chromatografujte xx tenké xxxxxx, xxx xx xxxxxxx x 5.5.
5.4.2 X xxxxxxxx xxxxxxx X (xxxxx vitamínu X xx xxxxx nebo xx xxxxx xxx 10 g/kg), ošetřete xxxxxxxx xxxxxx 4,0 xx zředěné xxxxxxxx xxxxxx (3.13), silně xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, jak xx xxxxxxx x 5.6.
5.5 Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxx postupy xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Umístněte 0,5 xx xxxxxxx získaného x 5.4.4 x xxxxx čáře xx xxxxxxxx (4.6). Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.14) xxxxxxxxx xx xxxxxxx 20 xxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx zóna xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx volně xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxx xxxx špachtlí x xxxxxx xxxxxxxx kvantitativně xx xxxxxxxxxxxxxxxx trubice (4.4).
Xxxxxxx xxxxxxxx jednou 2 xx x xxxxxxx 1,5 xx xxxxx ethyl xxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx octové/acetonu (3.9). Xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxx (xxxxxxxx xxx xxxx xxx xxxxxxxx). Xxxxxxx xx xxxxx, ošetřete xxxxxxxx xxxxxx 4,0 ml xxxxxxx xxxxxxxx sírové (3.13), silně xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
5.6 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx spektrofotometrem xxx 509 xx 20 xx 30 xxxxx xx rozpuštění xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx. Proveďte xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.13).
5.7 Xxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxx xxxxx za použití xxxxxxxx xxxxxxx, ale xxx xxxxxx.
6. Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx C xx xxxxxx x x xx xx xx dán poměrem:
(c – a) · 2 / (x – c) · 10x
xxx:
x = xxxxxxx xxxxxxx slepého xxxxxx;
x = xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx standardu;
c = xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx;
x = xxxx testovaného xxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx provedených x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
10 % xxx. x xxxxxx xxxxxxxx X xxxxxxx než 10 g/kg x
5 % xxx. u xxxxxx rovnajících xx xxxx xxxxxxx xxx 10 x/xx.
[1] 1 XX = 0,3 μx xxxxxxxx.
[2] X xxxxxxxx xxxxx a xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx, zdvojnásobit množství xxxxxxxxxx uvedených x xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx 5.2.
[3] Xxxxxxxx xxxxx nemusí xxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx.
[4] Obsah xxxxxxxx může xxx xxxxxxxx měřením xxxxxxx xxxxxxx při 450 xx; E 1% / 1xx = 2600.