Čtvrtá Xxxxxxxx Xxxxxx
xx xxx 5. prosince 1972,
xxxxxx se stanoví xxxxxxxxxx metody Společenství xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx
(73/46/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx x založení Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxx xx xxx 20. xxxxxxxx 1970 o xxxxxxxx xxxxx odběru xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx Společenství xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [1], ve xxxxx xxxxxxxx 72/275/EHS xx xxx 20. července 1972 [2], a xxxxxxx xx článek 2 xxxxxxx směrnice,
vzhledem x xxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx byly xxxxxxxxx xxxxxxxx krmiv xxxxxxxxx xx použití xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx souladu xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx nebo správním xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx 71/250/XXX xx xxx 15. xxxxxxxx 1971 [3], 71/393/XXX xx xxx 18. xxxxxxxxx 1971 [4] x 72/199/XXX xx xxx 27. xxxxx 1972 [5] xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx Společenství; xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxx xxxxx xx xx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx uvedená x xxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx se xxxxxxxxxxx Xxxxxxx výboru xxx xxxxxx;
XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Xxxxxxx státy xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xx xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx x olejů x xxxxxx hořčíku x xxxxx vlákniny x xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxxx popsaných x xxxxxxx I xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx ustanovení xxxxxxxxx v xxxxx 1 (xxxx) přílohy xxxxx směrnice Xxxxxx 71/250/XXX ze dne 15. xxxxxx 1971 xx xxxxxxxx x xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx X xxxx xxxxxxxx.
Článek 2
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xx xx xxxx xxxxxx xxxxxx retinolu (xxxxxxx X), thiaminu (aneurin, xxxxxxx X1), askorbové x dehydroaskorbové xxxxxxxx (xxxxxxx C), xxxxxxxxx xxxxx xxxxx popsaných x příloze II xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx 1 (úvod) xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxx x. 71/250/XXX xx xxx 15. xxxxxx 1971 se, s xxxxxxxx xxxxx týkající xx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxx xxxxxxxxxx, vztahují x xx metody xxxxxxx x xxxxxxx II xxxx směrnice.
Xxxxxx 3
Xxxxxxx státy xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx nezbytné xxx xxxxxxxx souladu s xxxxx xxxxxxxx nejpozději xx 1. xxxxx 1974. Xxxxxxxxxx o xxxx xxxxxxx Xxxxxx.
Článek 4
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx členským xxxxxx.
X Xxxxxxx dne 5. xxxxxxxx 1972.
Xx Xxxxxx
X. X. Xxxxxxxx
xxxxxxxx
[1] Úř. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Xx. xxxx. X 171, 29.7.1972, x. 39.
[3] Xx. xxxx. X 155, 12.7.1971, x. 13.
[4] Úř. xxxx. X 279, 20.12.1971, x. 7.
[5] Xx. xxxx. X 123, 29.5.1972, x. 6.
XXXXXXX I
1. STANOVENÍ XXXXXXXX X XXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXX
1. Xxxx x xxxxxx
Xxxx metoda xxxxxxxx stanovit obsah xxxx x těkavých xxxxx x živočišných x rostlinných tucích x olejích.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxx hmotnosti xxx 103 °X. Ztráta xxxxxxxxx xx stanoví xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx
3.1 Miska x plochým dnem x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, 8 xx 9 xx v xxxxxxx x xxxxxxxxx 3 xx xxxxxx.
3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x expanzní xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx, odstupňovaný xxxxxxxxx xx 80 °X xx nejméně 110 °X, a přibližně 10 xx xxxxxx.
3.3 Xxxxxxx lázeň xxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx.
3.4 Xxxxxxxxx obsahující xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
3.5 Xxxxxxxxxx xxxx.
4. Xxxxxx
Xxxxxxx x xxxxxxxxx na xx xxxxxxxxx 20 x xxxxxxxxxxxxxxxx vzorku xx xxxxx, xxxxxxxx misky (3.1) x xxxxxxxxxx (3.2). Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx plotýnku (3.3) xx stálého xxxxxxx teploměrem tak, xxx xxxxxxx dosáhla 90 °X xxxxx xxx 7 xxxxx.
Xxxxxx xxxxx a sledujte xxxxxxxxx, se xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 105 °X. Xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxx xxx xxxxxx, dokud xx xxxxxxxxxxx xxxxxx bubliny.
Aby xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx vlhkosti, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 103 °X ± 2 °X, mezi xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx 93 °X. Potom xxxxxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxxxx teplotu v xxxxxxxxxx (3.4) x xxxxxx. Opakujte tuto xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxx nepřekračuje 2 xx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx hmotnosti xxxxxx xx opakovaném xxxxxx naznačuje xxxxxxx xxxx, x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx před xxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
5. Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx vlhkosti, xxxx xxxxxxxx xxxxxx, je xxx následující rovnicí:
(M1 – X2) · 100 / Xx
xxx:
Xx = hmota testovaného xxxxxx v xxxxxxx;
X1 = xxxxx xxxxx x obsahem x xxxxxxx před xxxxxxx;
X2 = xxxxx misky x xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx xxx 0,05 % se musejí xxxxxxxxxxxx xxxx "xxxxx xxx 0,05 %".
Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xx vlhkosti xxxx xxxxxxxx xxxx paralelních xxxxxxxxx provedených u xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 0,05 % x xxxxxxxxx xxxxxxx.
2. XXXXXXXXX HOŘČÍKU
— xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx —
1. Xxxx a pole xxxxxxxxxx
Xxxx metoda xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x krmivech. Xx xxxxxxx vhodná xxx xxxxxxxxx obsahu hořčíku xxxxxxx než 5 %.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxx kyselině xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx látky, xx xxxxxxxxx přímo xx xxxxxxx kyselině xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx se xxxxxxx x obsah xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx spektrofotometrií xxx xxxxxx délce 285,2 xx.
3. Xxxxxxxxxx
3.1 Kyselina xxxxxxxxxxxxxx x.x. x: 1,16.
3.2 Xxxxxxxxxxxxx kyselina xxxxxxxxxxxxxx x.x. d: 1,19.
3.3 Hořčíkový xxxxx xxxx drát, xxxx XxXX4 7X2X, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx.
3.4 Xxxxxx xxxx stroncia (xxxxxxx xxxx dusičnan) 2,5 % (76,08 x XxXx2 6X2X x.x., xxxx 60,38 x Xx(Xx3)2 x.x.).
3.5 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx: xxxxxxx s xxxxxxxxx xx xx 1 x xxxxxxx (3.3), x kterého byla xxxxxx opatrně odstraněna xxxxxxxx xxxxxx, nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (10,143 x) XxXX47X2X (3.3). Xxxxxx do 1000 xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx 80 ml xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.1), xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx do 1000 xx xxxxx. 1 xx tohoto xxxxxxx xxxxxxxx 1,000 mg xxxxxxx.
4. Přístroje
4.1 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx porcelánové xxxxxxxxx xxxxxxx.
4.2 Termostaticky xxxxxx xxxxxxxxxx muflová xxx.
4.3 Atomový absorpční xxxxxxxxxxxxxxx.
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxx vzorku
5.1.1 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx z xxxxxxxxxxx látek
Odvažte x xxxxxxxxx na mg 5 x xxxxxx xx 500 ml xxxxxxx xxxxx x 250 xx 300 xx xxxx. Xxxxxxxx 40 xx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (3.1), xxxxxx xx xxxx a xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx xx xxxx 30 minut. Xxxxxxxx vychladnout, xxxxxxx xxxxx na objem, xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxxx kádinky xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Vyřaďte prvních 30 xx xxxxxxxx. X přítomnosti xxxxxxx xxxxxxxxx 5 x xxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (15-30 xx) xxxxxxxx chlorovodíkové (3.2), xxxxxxx xx sucha xx xxxxx xxxxx x xxxxxx xx xxxxx hodinu xx xxxxxxx o 105 °X. Xxxxxxxxxx, jak xx xxxxxxx od xxxxx věty x 5.1.2.
5.1.2 Krmiva xxxxxxx xxxxxxxx z minerálních xxxxx
Xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xx 5 x vzorku xx xxxxxxx x zpopelněte xxx 550 °X x muflové xxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxx, který xx xxx xxxxxxxxxx částic, x xxxxxxxx vychladnout. Xxx byl odstraněn xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (15-30 xx) kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (3.2), xxxxxxx xx xxxxx na xxxxx xxxxx x xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx sušárny x 105 °X. Xxxxxx xxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxx chlorovodíkové (3.1) a xxxxxxxx xx 500 ml xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxx na xxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx do suché xxxxxxx přes xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Vyřaďte xxxxxxx 30 xx xxxxxxxx.
5.1.3 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xx 5 x xxxxxx xx xxxxxxx x zpopelněte xxx 550 °C x xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxx uhlíkatých xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2), odpařte xx xxxxx xx xxxxx xxxxx a xxxxxxxx xx xxxxx hodinu xx xxxxxxx o 105 °X, xxx xx xxxxxxxxxx křemíku xxxxx xxxxxxxxxxxxx. Popel xxxxxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.1), xxxxxxxx xx 250 xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx, xxxxxx xx xxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx na xxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx 30 xx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxx xxxxxxxx absorpcí
Rozředěním xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5) xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxxxxxxxx roztoků x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx rozsahu xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 10 xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx (3.4) a xxxxx xxxxxxx objem xx 100 xx xxxxx. Rozřeďte xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx podle 5.1.1, 5.1.2 nebo 5.1.3 tak, že xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx x úrovni xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx roztoku nesmí xxxxxxxxx 0,4 X. Xxxxxxxx 10 xx xxxxxxx soli xxxxxxxx (3.4) a xxxxx xxxxxxx xxxxx do 100 xx vodou. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx má být xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx 285,2 xx.
6. Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx vzorku xxxxxxxxxx x referenčními xxxxxx. Výsledek xxxxxxxxx xxxx procento xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx provedených x stejného xxxxxx xxxxx překročit 5 % rel.
3. XXXXXXXXX XXXXX VLÁKNINY
1. Účel x rozsah
Tato xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx obsah xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx, jež xxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx x jsou xxxxxxxxx xxxxxxxx jako xxxxx vláknina.
2. Princip
Odtučněný xxxxxx, xxx je xx xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx přítomnosti azbestu, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxxx xxx 900 °C. Ztráta xxxx vyplývající ze xxxxxxxxxx odpovídá xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx.
3. Xxxxxxxxxx
3.1 Xxxxxxxx xxxxxx 0,26 X.
3.2 Ošetřený xxxxxx: xxxxxxxx k xxxxxxx xxxx užívanému x Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 5 násobek xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (1 xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, x: 1,19 + 3 xxxx xxxx). Xxxxx xxxx xxxxxxxxx 45 xxxxx, nechejte xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx vodou, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx vody, x xxxxx xxxxxxxx (3.6). Xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx a xxxxx xxxxxxxx 2 xxxxxx xxx 900 °X. Nechejte xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxx. Tímto xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx splňovat xxxxxxxxx xxxx x xxxx 5, xxxxx xx týče xxxxxxx xxxxxx.
3.3 Protipěnící emulse (xx. xxxxxxx).
3.4 Roztok xxxxxxxxx draselného 0,23 X.
3.5 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx 0,5 X.
3.6 Xxxxxx.
3.7 Xxxxxxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx
4.1 Xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx 600 xx s xxxxxxxxx úrovně 200 xx.
4.2 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 80 mm x xxxxxxx x xxxxxxxxx 4 xx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 32 xxxxxx, každý xxxxxxxxx x průměru 4 xx.
4.3 Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx 2 xxxxx x označením xxxxxx 800 ml a xxxxxxxxxx pro skleněné xxxxxxx 120 xx x xxxxxxx.
4.4 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 40 xx x xxxxxxx x xxxxxxxxx 4 xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx (4.3), perforované xxxxxxxxx 16 otvory, každá x průměru xxxxxxxxx 4 xx x xxxxxxx drátěnou xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxxx 1 mm. Desky x síťovina xxxxxx xxx odolné xxxxx xxxxxxxxx x zásadám.
4.5 Xxxxxxxxx nebo křemíkové xxxxxxxxx xxxxxxx.
4.6 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
4.7 Xxxxxxxxx.
4.8 Asbestový xxxxx: Suspendujte 2,0 x xxxxxxx (3.2) xx 100 ml xxxx.
Xxxxxxxxx za vakua xxxx xxxxxxxxx desky xxxxxxx drátěnou xxxxxxxxx (4.4) a umístněné x nálevce xxxxxxx xxxxx (4.3). Xxxxxxxx xxxxxxx x filtrujte xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx. Vyřaďte xxxxxxx.
5. Xxxxxx
Xxxxxxx x xxxxxxxxx na xx 3 x xxxxxx x 2 x xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.2) xx xxxxxxx (4.1), xxxxxxxx 200 xx xxxxxxxx xxxxxx (3.1) x několik xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (3.3). Xxxxxx xxxxxx xx xxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx 30 xxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx zakryjte xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xx 500 xx xxxxx s xxxxxxx dnem, xx xxxxx cirkuluje studená xxxx. Zastavte xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 50 xx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xx vakua přes xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxx xx 4.8.
Vymývejte xxxxxx xxxx dávkami xxxxxxxxx 100 xx xxxxx xxxxx xxxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx filtrátu 800 xx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx (4.1), xxxxx xxxx nejdříve xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx kotoučem (4.2) xxx xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx 200 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.4). Xxxxxx xxxxxx xx xxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx 30 xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx 50 xx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx přes xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx je xxxxxxx ve 4.8. Xxxxxxxxx zbytek xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxx lakmusovým xxxxxxxx), xxxxx 3xxxx xxxxxxxx (3.6) (xxxxxxxxx 100 xx xxxxxxx xxxxxx).
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx spalovacího xxxxxxx (4.5), xxxxxxxx, xxxxx xx xx potřeba, x xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxx 130 °X.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx (4.7) x xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx xx muflové pece (4.6) x nechejte xxxxxxxxx xx xxxx 30 xxxxx při 900 °X. Nechejte xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx (4.7) a xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx pokusza xxxxxxx xxxxxxxx postupu x ošetřeného xxxxxxx (3.2), xxx xxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxx ze xxxxxxxxxx 6 x xxxxxxx, xxxxx překročit 10 xx.
6. Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx vzorku, je xxx xxxxxxx:
(x-x) · 100 / 3
xxx:
x = xxxxxx xxxx xx zpopelnění xxxxx xxxxxxxxx;
x = xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
0,3 x xxxxxxxxx hodnotě x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx než 10 %;
3 % xxx. x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx xxx 10 %.
7. Xxxxxxxx
7.1 Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx 10 % xxxxx x tuků musí xxx před xxxxxxxx xxxxxxxxx diethyletherem (3.7). Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx testovaný vzorek (3 x x xxxxxxxxx xx xx) xx xxxxxxxxx xxxxx (4.8). Zalijte xxxxxxx xxxxxxxxx 50 xx xxxxxxxxxxxxx (3.7) a xxxxxxx xxxxxxx filtrujte xx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx vzorek x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx (4.1) x xxxxxxxxxx v xxxxxxx, jak xx xxxxxxx v xxxx 5.
7.2 Xxxxxx obsahující xxxxx a xxxx, xxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx přímo, musí xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx x 7.1 x xxxxxxxx potom, xx xxxx provedeno xxxxxxx xxxxxxxx ze xxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx odtučnění xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (3.6) (100 xx xxxxxx), potom xxxxxxx 50 xx xxxxxxxxxxxxx (3.7). Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx (4.1) x xxxxxxxxxx x xxxxxxx, xxx je xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxx 5 (xxxxxxxx xxxxxxxx hydroxidu xxxxxxxxxx).
7.3 Pokud xxxx xxxxxx xxxxxx na xxxxxx (xxxx než 2 % xxxxxxx), xxxxxx testovaný vzorek (3 x x xxxxxxxxx na mg) xx xxxxxxx (4.1) xx 100 ml xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx 0,5 X (3.5) x xxxxxxxx stát x xxxxxxx po xxxx 5 minut. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x promyjte xxxxxxxx vodou. Xxxx xxxxx xxxxxxxx 2,0 x xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Pokud xx xxxxxxxx xxxxx xxx obtížnou, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.6). Xxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxx x xxxx 5.
XXXXXXX XX
1. XXXXXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXX A)
1. Xxxx x rozsah
Tato xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx X) x xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx x premixech. Xxxxx xxxxxxx xx 10000 XX/xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx krmiva x 4000 XX/xx xxx xxxxxxx [1]. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx skupin, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx retinolu:
Skupina A: xxxxxx xxxxx než 200000 XX/xx;
Xxxxxxx X: xxxxxx rovnající xx xxxx vyšší než 200000 IU/kg.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx hydrolyzován xx xxxxx roztokem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxx 1,2-xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx do xxxxx x xxxxxxx petroletherem. Xxxxxx je xxxxxxxxxxxxxxxx xx koloně xxxxx xxxxxxxxx (x produktů xxxxxxx X xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx případech). X xxxxxxxx skupiny X xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx při 610 xx po xxxxxxxxx barevného komplexu xxxxx Xxxx-Xxxxxxxx xxxxxx; x xxxxxxxx skupiny X xxxxxxxxxxxxxxxxxxx x XX oblasti xxx 325 xx.
3. Xxxxxxxxxx
x) xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx skupin A x X
3.1 96 % (X/X) xxxxxxx.
3.2 10 % (xxxxxx xxxxxxxx k objemu) xxxxxx askorbanu xxxxxxx x.x. xxxx
3.3 xxxxxxx xxxxx.
3.4 50 % (xxxxxx xxxxxxxx k xxxxxx) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x.x.
3.5 1 X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x.x.
3.6 0,5 X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x.x.
3.7 1,2-xxxxxxxxxxxx x.x.
3.8 Petrolether, xxxxxx xxxx: 30–50 °X. Xxxxx xx xx xxxxxxx, přečistěte xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx: xxxxxxxx 1000 xx xxxxxxxxxxxx se 20 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kyseliny xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Odstraňte xxxxxxxx x promývejte petrolether xxxxxxxx 500 xx xxxx, dvakrát 250 xx 10 % (xxxxxx vzhledem k xxxxxx) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a třikrát 500 xx xxxx. Xxxxxxxxx vodnatou xxxxxx, xxxxxxx petrolether po xxxx 1 hodiny xxxx aktivní uhlí x bezvodý síran xxxxx, přefiltrujte a xxxxxxxxxx.
3.9 Xxxx hlinitý, xxxxxxxxxxxxxxx podle Brockmanna: xxxxxxx xx dobu 8 hodin xxx 750 °C, vychlaďte x xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx x láhvi x xxxxxxx skla xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx: do xxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxx 10 x xxxxx hlinitého x 0,7 xx xxxx, xxxxxxxx zátkou, xxxxxxxxxx xx xxxx 5 xxxxx x xxxxx x xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx vychladnout. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.17) (xxx 500 IU) xxxxx xxxxxxx uvedeného x 5.3 a 5.4 x xxxxxxxxxx xxxxxx.
3.10 Xxxxxxx oxid xxxxxxx, stupeň xxxxxxxx 1 (Xxxxx, Merck xxxx xxxxxxxxxxxx).
3.11 Čistý xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx koloně xxxxxxxxx xxxxx hlinitého (3.10). (25 x xxxxx hlinitého na 250 xx xxxxxxxxxxxxx.)
3.12 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.8) xx 4, 8, 12, 16 x 20 % (X/X) xxxxxxxxxxxxx (3.11).
3.13 0,5 xxx/x roztok síranu xxxxxxx x 70 % (X/X) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x.x.
x) užívané xxxxxxx pro analýzu xxxxxxxx xxxxxxx X
3.14 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx benzen p.a.
3.15 Xxxxxxxxxx x.x. Xxxxxxxxx xxxxxxx, fosgen a xxxxx vody xxxxxxxxxxxxxxxx xx koloně bázického xxxxx xxxxxxxxx (3.10) (50 x oxidu xxxxxxxxx xx 200 xx chloroformu; doporučuje xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx 50 xx xxxxxx xxxxxxx).
3.16 Xxxx-Xxxxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx xxxxxxxxx 25 x xxxxxxxx antimonitého x.x. (udržujte x xxxxxxxxxx) xx 100 xx xxxxxxxxxxx (3.15), xxxxx xxxx roztok xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nečiní xxxxxxx. Xxxxxxxx 2 xx xxxxxxxxxxxxxx p.a. Xxxxxxxx x chladničce x láhvi x xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx zátkou. Xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
3.17 Xxxxxxx – xxxxxxxxxxxxxxxxxxx standardizovaný.
c) xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx produktů xxxxxxx X
3.18 Xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx
4.1 Xxxxx xxxxx.
4.2 Vakuová xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx objemu.
4.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxx: 300 xx; xxxxxxx xxxxxx: okolo 13 xx).
4.4 Xxxxxxxxxxxxxxx x 10xx kyvetami. Xxxxxx x xxxxxxx XX xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4.5 UV lampy xxxxxx xxx 365 xx.
5. Postup
Poznámka:
Všechny postupy xxxxxx xxx prováděny xxxx xxxxx světlo, xxxxx xx to xxxxxxx, x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx.
5.1 Xxxxxxxxx xxxxxx
X xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx k xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx retinolu, xxxxx:
0,1–1,0 x xxx xxxxxxxxxxx (xxxxxx xxxxx než 20000 IU/g);
3,0–5,0 x xxx premixy (xxxxxx xxxx 400 a 20000 IU/g);
10–20 x xxx minerální xxxxx;
30 x xxx xxxxxxxx xxxxxxx A.
Ihned xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx do 500 ml xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
5.2 Xxxxxxxxx a xxxxxxxx [2]
Xxxxxxxx xxxxxxxx x testovanému xxxxxx 40 xx xxxxxxxx (3.1), 2 xx xxxxxxx xxxxxxxxx sodného (3.2) [3], 10 xx roztoku hydroxidu xxxxxxxxxx (3.4) x 2 xx roztoku xxxxxx sodného (3.13).
Xxxxxxxxxx xx xxxx 30 xxxxx při 70-80 °X pod xxxxxxx xxxxxxxxx x potom xxxxxxxx vychladnout xxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx 50 xx ethanolu (3.1) x 100 xx 1,2-xxxxxxxxxxxxx (3.7) (xxxxxxxxxxx pipetou). Xxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxx kapalný xxxxxxxxxxx xx dekantační xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxx 150 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.5), xxxxxxxxxxx xx xxxx 30 xxxxxx x xxxxxxxx xxxx, dokud xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx vrstvu xxxxxxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxx) xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx 40 ml roztoku xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.6), xxxxxxxxxxx po xxxx 10 xxxxxx a xxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx vrstvu dichlorethanu xx xxxxxxxxxx nádoby x xxxxxxxxxxxx 6–8 xxxx 40 xx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx zásaditost (xxxxxxxxxxxxxxx xxxx). Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx poslední stopy xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx za xxxxx x ve xxxxx lázni při 40 °X. Xxxxxx xxxxxxxx zbytek 5 xx petroletheru (3.8).
Xxx xxxxxxxx skupiny X xxxxxxxxxxxxxxxx podle xxxxxxx xxxxxxxxx x 5.3.1.
Xxx xxxxxxxx xxxxxxx B xxxxxxxx roztok xx 50 ml odměrné xxxxx, doplňte xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.8), xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxx v 5.4.2.
5.3 Xxxxxxxxxxxxxx
5.3.1 Produkty xxxxxxx A
Naplňte chromatografickou xxxxxxx (4.3) xx xxxx 200 mm 10 x oxidu xxxxxxxxx (3.9) xxxxxx xxxxxxxxxxxx x petroletherem (3.8). Xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x 5.2 x xxxxx xxxxxxxx 20 xx xxxxxxxxxxxx (3.8). Xxxxxxxxx xxxxxxxx 10 xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx ve 4, 8, 12, 16 a 20 % diethyletheru (3.12) xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx vakua, úroveň xxxxxxx xx 2 xx 3 xxxxx xx vteřinu.
Nejdříve je xxxxxxxxx xxxxxxx [4]. Xxxxxxx xx obecně xxxxxxxxx xxxxxxxx petroletheru xx 20 % xxxxxxxxxxxxx (3.12). Xxxxxxxxxx xxxxxxx za UV xxxxxxxxx (krátké xxxxxxx xxxxxxx rtuťovou výbojkou). Xxxxxxxxxxxxx zóna xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx zón xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx obsahující xxxxxxx xxxxxxxxxxx do Xxxxxxxxxxxxx baňky.
5.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxx X
Xxxxxxxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx měření xxxxxxx xxxxxxx získaná x 5.4.2 xxxxxxxxx požadavky xxxx x 5.4.2.
Xxxxx xx ukáže xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx kolony xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, získaného x 5.2, obsahujícího xxxxxxxxx 500 IU xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx postupu xxxxxxxxx x 5.3.1.
5.4 Xxxxxx xxxxxxx hustoty
5.4.1 Produkty xxxxxxx A
Odpařte xx xxxxx xx xxxxx xxxxx obsahující retinol xxxxxxx x 5.3.1. Xxxxxxxx xxxxxx 2 xx benzenu (3.14). Xxxxxxxx 0,3 xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx 3 xx Xxxx-Xxxxxxxx xxxxxxx (3.16). Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx. Změřte optickou xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx při 610 nm xxxxxx 30 xxxxxx poté, xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx retinolu xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx roztoků x xxxxxxxxxxxxx standardních xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx ošetřených Carr-Priceovým xxxxxxxx (2 xx 16 IU standard-retinolu (3.17) na 0,3 xx xxxxxxx (3.14) + 3 xx Xxxx-Xxxxxxxx xxxxxxx (3.16)). Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx kontrolována pravidelně x často xx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx připraveného xxxxxxx Xxxx-Xxxxxxxx xxxxxxx.
5.4.2 Xxxxxxxx xxxxxxx X
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx roztoku x xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x 5.2, obsahujícího přibližně 200 XX xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxx a xxxxxxxx xxxxxx 25 xx xxxxxxxxxxxx (3.18) Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx spektrofotometru xxx 325, 310 a 334 xx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx nachází xx 325 xx. Xxxxx retinolu v xxxxxxx xx vypočítá xxxxxxxxxx:
X325 · 18,30 = XX xxxxxxxx/xx
Xxxxxxx, xxxxx optických hustot
E310 : E325 a X334 : X325
xxxx xxx 6 : 7 = 0,857.
Xxxxx xx xxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xx této xxxxxxx (&xx; 0,830 xxxx &xx;0,880), xxxx xxxxxx optické xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx x 5.3.2. Xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx ukáže, že xx uvedený xxxxx xxxxx znatelně xxxx xx hodnoty 0,857 (&xx; 0,830 xxxx &xx; 0,880), xxxx xxx stanovení provedeno x xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx X.
6. Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx obsah xxxxxxxx ve vzorku xxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx x XX xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxx na xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx mezi xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx u xxxxxxxx xxxxxx nesmí překročit:
- 20 % xxx. x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 75000 XX/xx,
- 15000 XX x xxxxxx xxxx 75000 x 150000 XX/xx,
- 10 % xxx. u xxxxxx xxxx 150000 x 250000 XX/xx,
- 25000 XX x obsahů xxxx 250000 x 500000 XX/xx,
- 5 % xxx. x xxxxxx xxxxxxx než 500000 IU/kg.
2. XXXXXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXX X1, XXXXXXX)
1. Xxxx x xxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx obsah thiaminu (xxxxxxxx, vitamínu B1) x krmivech, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Limit xxxxxxx xx 5 xxx.
2. Princip
Roztok xx xx horka ošetřen xxxxxxx kyselinou xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Získaný roztok xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Vzniklý xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxxxx
3.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 100 μg/ml: xxxxxxxxx 112,3 xx xxxxxxxx-XXX, předem xxxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxx xxxx, x 1000 xx 0,2 X kyseliny xxxxxx (3.2). Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx x tmavém xxxxx, je xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxx.
3.2 0,2 X xxxxxxxx xxxxxx.
3.3 Xxxxx xxxxxxxx xxxxx.
3.4 20 % (váhově xxxxxxxx x xxxxxx) xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx p.a.
3.5 25 % (váhově xxxxxxxx x xxxxxx) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x.x.
3.6 Oxidační xxxx: xxxxxxxxx 2 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.4) xx 48 xx xxxxxxx hydroxidu xxxxxxxxxx (3.5). Tato xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxx 4 xxxxxx.
3.7 Xxxxxxxxxx p.a.
3.8 2,5 X xxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
3.9 Multienzymatický xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx (xxxx. xxxxxxx).
3.10 96 % (X/X) ethanol.
4. Přístroje
4.1 Xxxxx xxxxx.
4.2 Xxxxxxxxxxx (3500 xx./xxx.) xx 3 xx 50 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx zábrusovými xxxxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxx.
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx každé ze xxxx 250 xx xxxxxxxxx xxxxx A x B xxxxxx xxxxxxx množství xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 100 μx xxxxxxxx x 125 xx xxxxxxxx xxxxxx (3.2). Xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx do xxxxx X, 1,0 xx xxxxxxxxxxxx roztoku (3.1) (xxxxxxx standard).
Silně xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xx xx xxxxxx vodní xxxxx x udržujte xx xxx xx xxxx 15 minut x příležitostně xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx vychladnout na xxxxxxxxx 45 xX. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx 20 xx xxxxxxx octanu xxxxxxx (3.8) x 0,5 x multienzymatického přípravku (3.9), xxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxx 20 xxxxx xx xxxxxxxx teploty. Xxxxxxxx 20 xx roztoku xxxxxx sodného (3.8), xxxxxxx na objem xxxxx, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx X a X xxxx, xx xxxx xxxxxxxxx prvních 15 xx. Připravte xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
5.1.1 Referenční xxxxxx X
Xx trubice xxxxxxxxxxx (4.2) xxxxx 5 xx xxxxxxxx X x xxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.3). Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx vodní xxxxx na 15 xxxxx a xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
5.1.2 Xxxxxxx X (xxxxxxx standard) x X (xxxxxx)
Xx xxxxxxx odstředivky (4.2) xxxxx 5 xx xxxxxxxx A a 5 xx xxxxxxxx X xx jiné xxxxxxx xxxxxxxxxxx (4.2).
5.2 Xxxxxxx
Xxxxxxxx x xxxxxxxx X, X x X 5 xx xxxxxxxx xxxxx (3.6) x x xxxxxx xxxxxxx 10 ml xxxxxxxxxxx (3.7). Xxxxxxxxxx xxxxxxx x silně xxxxxxxxxxx 5 vteřin. Xxxxxxxx stát jednu xxxxxx x xxxxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 5 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx 25 xx xxxxxxx baňky, doplňte xx objem xxxxxxxxx (3.10) x xxxxxxxxxxxxx (= xxxxxxxx X, X x B).
5.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx xxx vlnové délce, xxx kterou xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx odezvu xx fluorescenci xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 365 xx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx X. Xxxxxx intenzitu fluorescence xxxxxxxx X x X.
6. Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx x mg/kg xxxxxx xx xxx xxxxxxx:
x · b / (a-b) x
xxx:
x = xxxxxxxxx fluorescence xxxxxxxx A (xxxxxxx xxxxxxxx);
x = xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx X (xxxxxx);
x = xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x x;
x = množství xxxxxxxx x μg xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx).
Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x stejného xxxxxx xxxxx překročit:
10 % xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx než 500 mg/kg x
5 % rel. x xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx než 500 xx/xx.
3. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXXXXXX XXXX (VITAMÍN X)
1. Účel a xxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx celkové množství xxxxxxxx askorbové a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxx X) v krmivech, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx je 5 xxx. Produkty xxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxx podle xxxxxx předpokládaného xxxxxx xxxxxxxx X:
Xxxxxxx X: xxxxxx nižší xxx 10 x/xx;
Xxxxxxx X: xxxxxx rovnající xx xxxx xxxxx xxx 10 x/xx.
2. Princip
Vzorek xx xxxxxxxxxxx ve xxxxxxxx xxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx kyselinu dehydroaskorbovou, x potom xxxxxxxx 2,4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx hydrazon xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxxxxx do sucha x zbytek xxxxxxxxx xx zředěné xxxxxxxx xxxxxx. Optická xxxxxxx xxxxxxx xx měřena xxxxxxxxxxxxxxxxx xxx 509 xx.
X xxxxxxxx xxxxxxx X xx xxxxxxx xxxxxx x kolonové xxxxxxxxxxxxxx dále xxxxxxxx xxxxxxxxxxx chromatografii xx xxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Xxxxxxxxxx
3.1 Standardní roztok 0,05 % kyseliny X-xxxxxxxxx: xxxxxxxxx 50 xx kyseliny X-xxxxxxxxx x.x. x xxxxxxxxx 20 ml roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2) x xxxxxxx do xxxxxx 100 ml xxxxx. Připravujte bezprostředně xxxx použitím.
3.2 10 % (xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx) xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx: po xxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx 200 x xxxxxxxx metafosforečné p.a. x xxxxxxx xx 2000 xx xxxxx. Xxxxxxxxx při 4xX. Xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxx jednoho xxxxx.
3.3 Xxxxxxxxxx x.x.
3.4 0,5 % (váhově xxxxxxxx k objemu) xxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxx p.a. Xxxxxxxxx bezprostředně před xxxxxxxx.
3.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (X. x S. x. 121 nebo xxxxxxxxxx)
3.6 2 % xxxxxx xxxxxx (váhově xxxxxxxx x xxxxxx) 2,4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxx 2 x 2,4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx ve 100 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (25 xx xxxxxxxx xxxxxx x.x., x: 1,84, xxxxxx xxxxxxxxx xx 100 xx xxxxx). Xxxxx xxxxxx, xx-xx xxxxxxxxx x chladnu, xxxxxx xxxxx týden.
3.7 Xxxxx xxxx
3.8 Xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3.9 Xxxx ethyl xxxxxxx x.x./xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx x.x.: 96/2/2 xxxxxxxx.
3.10 Směs xxxxxxxxxxxxxxx x.x./xxxxxx xxxxxxxx octové: 97/3 objemově.
3.11 Xxxxxx xxx, velikost částic: 0,05 xx 0,2 xx.
3.12 Xxxxx xxxxxx xxx stupeň X xxx tenkovrstvou chromatografii.
3.13 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx 105 xx xxxx xx 200 xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx p.a., x: 1,84.
3.14 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx tenkovrstvou xxxxxxxxxxxxxx: smíchejte 75 xx xxxxxxxxxxxxx x.x., 25 xx xxxxx xxxxxxx x.x. x 4,0 xx 96 % (váhově xxxxxxxx x xxxxxx) kyseliny xxxxxx x.x. Obnovte xx 2 xx 3 chromatogafiích.
4. Xxxxxxxxx
4.1 Xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx nastaveným xx 20 °X.
4.2 Xxxxxxxxxxx (3500 xx./xxx.) xx 40 xx 50 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.3 Xxxxxxx xxxxxxx odparka x 250 ml xxxxxxx.
4.4 Skleněné chromatografické xxxxxxx (délka: 100 xx, xxxxxxx xxxxxx: 20 mm), se xxxxxxxxx xxxxxx (xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx).
4.5 Xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx x 10ml xxxxxxxx.
4.6 Přístroj xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx gelovými xxxxxxx (3.12) pokrytými xx xxxxxxx 0,5 xx 0,6 mm. (Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx.) Xxxxx desky xx 2 x xxx xx 3 xxxxxx x xxxxxxx xxx 120 xx 130 °X. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx a potom xxxxxxxx x exsikátoru xx xxxxxxx 24 xxxxx xxxx použitím.
4.7 Xxxxxxx xxxxxxxxx xx 120 xx 130 °X.
5. Postup
5.1 Extrakce
Do xxxxx xx xxxx 250 xx xxxxxxxxx xxxxx (se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx) X x B xxxxxx xxxxxxx množství xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx obsahujícího xxxxxxxxx 200 μx xxxxxxxx C. Xxxxxxxx, xxxxx do xxxxx X, 0,4 xx xxxxxxxxxxxx roztoku (3.1) x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx).
Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx 30 xx xxxxxxxxxxx (3.3) x 25 xx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2) xxx 4 °C. Xxxxxx xxxxxxxxx a nechejte xxxx 10 až 15 minut. Xxxxxxxx 25 xx xxxx, xxxxxxxxxx lahve, silně xxxxxxxxxxx xx 10 xxxxxx a nechejte xxxx 10 xx 15 xxxxx ve xxxxx lázni (4.1). Xxxxxxxxx, aby se xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xx popsáno xxxx, u xxxxxxx xxxxxxxx X (xxxxxxx xxxxxxxx) a X.
5.2 Xxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 40 xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx) xxxxxxxxx x 5.1 xx xxxxxxx trubice xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx 0,5 xx 1 ml xxxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxx (3.4) a xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx zbarvení, které xx mělo xxxxxxxx xxxxxxx 15 xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 300 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.5), xxxxxxxxxxx x filtrujte xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx být xxxxx čistý.
5.3 Xxxxxx x 2,4-dinitrophenylhydrazinem a xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx použití xxxxxx xxxxxxxx 10 xx xxxxxxxx získaného x 5.2 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (4.2), xxxxxxxx 2 xx xxxxxxx 2,4-dinitrophenylhydrazinu (3.6) x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx proud xxxxxx (3.7) nebo xxxxxxxxx xxxxxxxx (3.8) xx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx xx xxxxxxxxx 15 xxxxx (xxxx noc) xx vodní xxxxx (4.1).
Xxxxx přidejte 3 xx vody, 20 xx xxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxxxx kyseliny xxxxxx/xxxxxxx (3.9) a přibližně 800 mg xxxxxxxxx xxxxxxx (3.5). Xxxxxxxxxx xxxxxxx, silně protřepejte xx xxxx 30 xxxxxx x odstřeďte. Xx lahve odparky xxxxxxxx 15 xx xxxxxxxxxxxx a xx xxxxxxxxx xxxxx odpařujte xx xxxxxxx odparce (4.3), xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx zbytek. Rozpusťte xxxxxx xx 2 xx xxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx (3.9) xx xxxxxx xx 50 °C, xxxxxxxx vychladnout, xxxxxxxx 10 xx směsi xxxxxxxxxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.10) a promíchejte.
5.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) do xxxxxx 30 xx xxxxx dichloromethanu/ledové xxxxxxxx xxxxxx (3.10). Suspendujte (xxxxx protřepávaje) 5 x xxxxxx xxxx (3.11) xx 30 xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.10); xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx stát x xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx (3.7) xxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx do xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x 5.3, vypláchněte xxxxx xxxxx množstvím xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx octové (3.10) x přelijte xx trubice, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (3.10) x pokračujte xx vyplachování trubice xxxxxxx xxxxx (3 xx 4 xxxxx xxxxxxxxx 5 xx), xxxxx xxxx získán xxxxxxxx eluát. Xxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx zónu na xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx acetátu/ledové xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx (3.9), xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx.
5.4.1 X xxxxxxxx xxxxxxx X (xxxxx xxxxxxxx X xxxxx než 10 x/xx), xxxxxxxxx zbytek xx 2,0 ml xxxxx xxxxx acetátu/ledové xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx (3.9) x xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xxx xx uvedeno x 5.5.
5.4.2 X xxxxxxxx skupiny X (xxxxx vitamínu X xx xxxxx xxxx xx větší xxx 10 x/xx), ošetřete xxxxxxxx zbytek 4,0 xx xxxxxxx kyseliny xxxxxx (3.13), xxxxx xxxxxxxxxxx, xxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx optickou xxxxxxx, xxx je xxxxxxx v 5.6.
5.5 Xxxxxxxxxxxxxx xx tenké xxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx 0,5 xx xxxxxxx xxxxxxxxx x 5.4.4 x xxxxx čáře na xxxxxxxx (4.6). Xx xxxxxxx extrakčního xxxxxxxxxxxx (3.14) xxxxxxxxx po xxxxxxx 20 xxxxx x tanku vyplněném xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Označte xxxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx přeneste xxxxxxxxxxxxx xx chromatografické xxxxxxx (4.4).
Xxxxxxx xxxxxxxx jednou 2 xx x xxxxxxx 1,5 xx xxxxx xxxxx acetátu/ledové xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx (3.9). Xxxxxxx xxxxx do xxxx xxxxx (xxxxxxxx xxx musí xxx xxxxxxxx). Xxxxxxx xx xxxxx, ošetřete xxxxxxxx xxxxxx 4,0 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.13), xxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
5.6 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxx 509 nm 20 xx 30 xxxxx xx rozpuštění xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx měření xxxxxxxxxx xx zředěnou xxxxxxxxx xxxxxxx (3.13).
5.7 Xxxxx pokus
Proveďte slepý xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, ale xxx xxxxxx.
6. Výpočet xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx X xx vzorku x x na xx xx xxx xxxxxxx:
(x – x) · 2 / (b – c) · 10x
xxx:
x = xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx vzorku;
b = xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx interního standardu;
c = xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx;
x = xxxx xxxxxxxxxxx vzorku x xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx mezi xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx provedených u xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
10 % rel. x xxxxxx xxxxxxxx X xxxxxxx než 10 g/kg a
5 % xxx. u xxxxxx rovnajících xx xxxx xxxxxxx než 10 x/xx.
[1] 1 XX = 0,3 μx xxxxxxxx.
[2] X xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x tendencí xxxxxxxxx se xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx uvedených x xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx bodu 5.2.
[3] Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx hydrolýza v xxxxxxxx atmosféře.
[4] Obsah xxxxxxxx může xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx 450 xx; X 1% / 1xx = 2600.