Čtvrtá Směrnice Xxxxxx
xx xxx 5. xxxxxxxx 1972,
xxxxxx xx stanoví xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx úřední xxxxxxxx xxxxx
(73/46/XXX)
XXXXXX EVROPSKÝCH XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx na Smlouvu x xxxxxxxx Evropského xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx směrnici Rady xx xxx 20. xxxxxxxx 1970 o xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx krmiv [1], ve znění xxxxxxxx 72/275/EHS xx xxx 20. xxxxxxxx 1972 [2], x xxxxxxx na článek 2 uvedené xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxx, xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx krmiv xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx souladu xxxxxxxxx stanovených zákonem, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx týkajícím se xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx xxxxxxxx 71/250/XXX xx dne 15. xxxxxxxx 1971 [3], 71/393/XXX ze xxx 18. xxxxxxxxx 1971 [4] a 72/199/XXX xx xxx 27. xxxxx 1972 [5] xxx stanovily xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx; xxxxxxxx x xxxx, xx postup xxxxx xx té xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx se xxxxxxxxxxx Stálého xxxxxx xxx xxxxxx;
XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Xxxxxxx státy xxxxxxx, aby xxxx xxxxxxx xxx oficiální xxxxxxxx krmiv, xx xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxx x xxxxxx hořčíku x xxxxx vlákniny x krmivech, xxxxxxxxx xxxxx metod xxxxxxxxx x příloze X xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x části 1 (úvod) xxxxxxx xxxxx směrnice Xxxxxx 71/250/XXX xx xxx 15. xxxxxx 1971 xx xxxxxxxx x xx metody xxxxxxx x xxxxxxx I xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 2
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, aby xxxx xxxxxxx xxx oficiální xxxxxxxx krmiv, xx xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (vitamín X), xxxxxxxx (xxxxxxx, xxxxxxx X1), xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx kyseliny (xxxxxxx X), xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x příloze XX xxxx směrnice.
Obecná xxxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxx 1 (úvod) xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Komise x. 71/250/XXX xx xxx 15. června 1971 xx, x xxxxxxxx xxxxx týkající xx přípravy vzorku, xxx xx xxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx XX xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 3
Xxxxxxx státy xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx souladu x xxxxx směrnicí nejpozději xx 1. xxxxx 1974. Neprodleně x xxxx xxxxxxx Komisi.
Xxxxxx 4
Tato xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X Bruselu xxx 5. prosince 1972.
Za Xxxxxx
X. L. Mansholt
předseda
[1] Úř. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Xx. věst. X 171, 29.7.1972, x. 39.
[3] Xx. xxxx. X 155, 12.7.1971, x. 13.
[4] Xx. xxxx. X 279, 20.12.1971, x. 7.
[5] Xx. xxxx. X 123, 29.5.1972, x. 6.
XXXXXXX X
1. STANOVENÍ XXXXXXXX X ŽIVOČIŠNÝCH X XXXXXXXXXXX XXXXXX X OLEJÍCH
1. Účel x xxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx a xxxxxxxx xxxxx x živočišných x xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx suší xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx při 103 °X. Xxxxxx xxxxxxxxx xx stanoví xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx
3.1 Xxxxx x plochým xxxx x nekorozního xxxxxxxxx, 8 až 9 xx x xxxxxxx x xxxxxxxxx 3 xx xxxxxx.
3.2 Rtuťový xxxxxxxx se zesílenou xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx přibližně xx 80 °C xx nejméně 110 °X, a xxxxxxxxx 10 cm xxxxxx.
3.3 Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx varná xxxxxxxx.
3.4 Xxxxxxxxx obsahující xxxxxxx xxxxxx činidlo.
3.5 Xxxxxxxxxx xxxx.
4. Postup
Odvažte x xxxxxxxxx xx mg xxxxxxxxx 20 x xxxxxxxxxxxxxxxx vzorku xx xxxxx, odvážené xxxxx (3.1) x teploměrem (3.2). Xxxxxxxx pískovou xxxxx xxxx xxxxxxxx (3.3) xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx 90 °X během xxx 7 xxxxx.
Xxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxx bubliny xx xxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 105 °X. Xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxx dna xxxxxx, dokud xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxx zajištěno xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 103 °X ± 2 °X, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx ochlaďte na 93 °C. Potom xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx (3.4) x xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxx ztráta xxxxx xxxx dvěma xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx 2 xx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx hmotnosti xxxxxx xx opakovaném xxxxxx xxxxxxxxx oxidaci xxxx, v xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x vážení xxxxxxxxxxx xxxxxxxx před xxx, xxx xx hmotnost xxxxxx xxxxxxxxx.
5. Výpočet xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx, jako xxxxxxxx xxxxxx, xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
(X1 – M2) · 100 / Mo
kde:
Mo = xxxxx testovaného xxxxxx v xxxxxxx;
X1 = xxxxx xxxxx x obsahem x xxxxxxx před ohřevem;
M2 = xxxxx xxxxx x obsahem x xxxxxxx po xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx xxx 0,05 % se xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx "xxxxx xxx 0,05 %".
Opakovatelnost
Rozdíl xx vlhkosti xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 0,05 % x absolutní xxxxxxx.
2. XXXXXXXXX XXXXXXX
— xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx —
1. Xxxx x pole xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx. Je xxxxxxx vhodná pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx než 5 %.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx neobsahuje xxxxxxxxx látky, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx chlorovodíkové. Xxxxxx xx xxxxxxx x obsah xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx délce 285,2 xx.
3. Xxxxxxxxxx
3.1 Kyselina xxxxxxxxxxxxxx x.x. x: 1,16.
3.2 Xxxxxxxxxxxxx kyselina xxxxxxxxxxxxxx x.x. x: 1,19.
3.3 Xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx, xxxx XxXX4 7X2X, xxxxxx xx xxxxxxxx teploty.
3.4 Xxxxxx xxxx xxxxxxxx (xxxxxxx nebo xxxxxxxx) 2,5 % (76,08 x XxXx2 6X2X x.x., xxxx 60,38 x Xx(Xx3)2 x.x.).
3.5 Xxxxxxxxxx xxxxxx hořčíku: xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xx 1 x xxxxxxx (3.3), x kterého xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx množství (10,143 x) XxXX47X2X (3.3). Xxxxxx do 1000 xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx 80 xx xxxxxxxx chlorovodíkové (3.1), xxxxxxxx rozpustit x xxxxxxx do 1000 xx xxxxx. 1 xx tohoto xxxxxxx xxxxxxxx 1,000 xx xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx
4.1 Platinové, xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx kelímky.
4.2 Termostaticky xxxxxx elektrická xxxxxxx xxx.
4.3 Atomový xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx
5.1.1 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx x xxxxxxxxx xx mg 5 g xxxxxx xx 500 ml xxxxxxx xxxxx s 250 xx 300 xx vody. Xxxxxxxx 40 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.1), xxxxxx xx xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxx varu po xxxx 30 minut. Xxxxxxxx vychladnout, doplňte xxxxx xx xxxxx, xxxxxxxxxxx x přefiltrujte xx xxxxx kádinky xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx prvních 30 xx xxxxxxxx. X přítomnosti xxxxxxx xxxxxxxxx 5 x xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (15-30 xx) xxxxxxxx chlorovodíkové (3.2), xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxxx na xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x 105 °X. Xxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xx xxxxx věty x 5.1.2.
5.1.2 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xx 5 x xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 550 °X x xxxxxxx xxxx, xxxxx není získán xxxxx, xxxxx xx xxx uhlíkatých částic, x nechejte xxxxxxxxxxx. Xxx xxx odstraněn xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx množství (15-30 ml) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2), xxxxxxx xx sucha na xxxxx xxxxx x xxxxxx na xxxxx xxxxxx do xxxxxxx x 105 °C. Xxxxxx rozpusťte 10 xx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (3.1) x xxxxxxxx xx 500 ml xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx vody. Xxxxxxxx vychladnout x xxxxxxx na xxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xx suché xxxxxxx přes xxxxx xxxxxxxx filtr. Xxxxxxx xxxxxxx 30 xx xxxxxxxx.
5.1.3 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xx 5 x xxxxxx xx xxxxxxx x zpopelněte xxx 550 °C x muflové xxxx, xxxxx není xxxxxx xxxxx, který xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2), xxxxxxx do xxxxx xx xxxxx xxxxx a převeďte xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x 105 °X, xxx xx sloučeniny křemíku xxxxx nerozpustnými. Popel xxxxxxxx 5 xx xxxxxxxx chlorovodíkové (3.1), xxxxxxxx do 250 xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx, xxxxxx xx xxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x doplňte xx xxxxx vodou. Promíchejte x xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx 30 xx filtrátu.
5.2 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5) vodou xxxxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxxxxxxxxx xxxxxxx o xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx odpovídající xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx. Přidejte do xxxxxxx xxxxxxx 10 xx xxxxxxx soli xxxxxxxx (3.4) a xxxxx xxxxxxx xxxxx xx 100 ml xxxxx. Rozřeďte xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx podle 5.1.1, 5.1.2 xxxx 5.1.3 xxx, že xx získá xxxxxxxxxxx xxxxxxx, která je x xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 0,4 X. Xxxxxxxx 10 xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx (3.4) x xxxxx xxxxxxx objem xx 100 xx xxxxx. Xxxxxx absorpci roztoku, xxxxx má xxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx 285,2 xx.
6. Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx ve vzorku xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx vyjádřete xxxx xxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx výsledky dvou xxxxxxxxxxx stanovení provedených x stejného vzorku xxxxx xxxxxxxxx 5 % xxx.
3. XXXXXXXXX XXXXX XXXXXXXX
1. Účel x rozsah
Tato metoda xxxxxxxx stanovit x xxxxxx xxxxx tukuprostých xxxxxxxxxxx xxxxx, xxx xxxx nerozpustné v xxxxxxxx x zásaditých xxxxxxx x jsou xxxxxxxxx xxxxxxxx jako xxxxx vláknina.
2. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xx xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxx vroucími xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xx oddělen filtrací xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxx x zpopelněn xxx 900 °C. Xxxxxx xxxx vyplývající xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx vlákniny x xxxxxxxxxx xxxxxx.
3. Xxxxxxxxxx
3.1 Xxxxxxxx sírová 0,26 X.
3.2 Xxxxxxxx xxxxxx: xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx užívanému x Xxxxxxxxx kelímkem xxxxxxxxx 5 násobek jeho xxxx zředěné kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (1 xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, x: 1,19 + 3 xxxx xxxx). Xxxxx xxxx xxxxxxxxx 45 xxxxx, nechejte vychladnout, xxxxxxxxxxxx přes Buchnerovu xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx chlorovodíková nezmizí x xxxxxxxxx xxxx, x potom xxxxxxxx (3.6). Vysušte xxxxxx x xxxxxxx a xxxxx xxxxxxxx 2 xxxxxx při 900 °X. Xxxxxxxx vychladnout x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxx ošetřený xxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx dané x xxxx 5, xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxx.
3.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxx (xx. silikon).
3.4 Xxxxxx xxxxxxxxx draselného 0,23 X.
3.5 Kyselina xxxxxxxxxxxxxx 0,5 X.
3.6 Aceton.
3.7 Xxxxxxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx
4.1 Xxxxxxx x objemu alespoň 600 ml s xxxxxxxxx úrovně 200 xx.
4.2 Xxxxxxxxxxx kotouče xxxxxxxxx 80 xx x průměru x xxxxxxxxx 4 mm xxxxx, xxxxxxxxxxx přibližně 32 xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx 4 xx.
4.3 Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx 2 xxxxx x označením xxxxxx 800 xx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx 120 mm x průměru.
4.4 Xxxxxxxxx xxxxx přibližně 40 xx x průměru x přibližně 4 xx xxxxx se xxxxxxxxx okraji xxxxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxx (4.3), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 16 xxxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx 4 xx x xxxxxxx drátěnou xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxxxxx 1 xx. Xxxxx x xxxxxxxx musejí xxx xxxxxx proti xxxxxxxxx x xxxxxxx.
4.5 Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
4.6 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
4.7 Xxxxxxxxx.
4.8 Xxxxxxxxx xxxxx: Suspendujte 2,0 x xxxxxxx (3.2) xx 100 xx xxxx.
Xxxxxxxxx za xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (4.4) x umístněné x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (4.3). Xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx filtr. Xxxxxxx xxxxxxx.
5. Postup
Odvažte x xxxxxxxxx xx xx 3 x vzorku x 2 x xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.2) xx kádinky (4.1), xxxxxxxx 200 ml xxxxxxxx xxxxxx (3.1) x xxxxxxx kapek xxxxxxxxxxx xxxxxx (3.3). Xxxxxx xxxxxx xx xxxx a xxxxxxxx xxxxx přesně 30 xxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx zakryjte xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xx 500 xx xxxxx x xxxxxxx xxxx, ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx var xxxxxxxx xxxxxxxxx 50 xx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxx xx 4.8.
Xxxxxxxxx xxxxxx pěti xxxxxxx xxxxxxxxx 100 ml xxxxx xxxxx xxxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx filtrátu 800 xx. Přeneste xxxxxx kvantitativně do xxxxxxx (4.1), xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.2) xxx xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx 200 ml xxxxxxx hydroxidu draselného (3.4). Xxxxxx xxxxxx xx varu x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx 30 xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx 50 xx xxxxxxx vody a xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxx čerstvý xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, jak xx xxxxxxx xx 4.8. Xxxxxxxxx zbytek xxxxx xxxxxx vodou, dokud xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxxx 3xxxx xxxxxxxx (3.6) (xxxxxxxxx 100 ml xxxxxxx xxxxxx).
Xxxxxxxx zbytek kvantitativně xx spalovacího kelímku (4.5), rozdrťte, xxxxx xx xx xxxxxxx, x usušte do xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxx 130 °X.
Xxxxxxxx vychladnout x xxxxxxxxxx (4.7) x xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx (4.6) a xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx 30 xxxxx xxx 900 °X. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx (4.7) a xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx stejného xxxxxxx x xxxxxxxxxx azbestu (3.2), xxx bez xxxxxx. Xxxxxx váhy, xxxxxxxxxxx xx zpopelnění 6 g xxxxxxx, xxxxx překročit 10 xx.
6. Xxxxxxx výsledků
Obsah xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx vzorku, xx xxx xxxxxxx:
(x-x) · 100 / 3
xxx:
x = ztráta xxxx xx xxxxxxxxxx během xxxxxxxxx;
x = ztráta xxxx po zpopelnění xxxxx slepého pokusu.
Opakovatelnost
Rozdíl xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx provedených x xxxxxxxx vzorku xxxxx překročit:
0,3 x xxxxxxxxx hodnotě u xxxxxx hrubé xxxxxxxx xxxxxxx xxx 10 %;
3 % rel. x xxxxxx hrubé xxxxxxxx rovných nebo xxxxxxx než 10 %.
7. Poznámky
7.1 Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx 10 % xxxxx x tuků xxxx xxx před xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.7). Xxx provedení xxxxxxxxx xxxxxx testovaný xxxxxx (3 x s xxxxxxxxx xx mg) xx azbestový filtr (4.8). Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 50 xx xxxxxxxxxxxxx (3.7) x xxxxxxx xxxxxxx filtrujte xx xxxxx. Převeďte xxxxxxxxx xxxxxxxxx vzorek x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx kádinky (4.1) x xxxxxxxxxx x xxxxxxx, jak xx xxxxxxx x xxxx 5.
7.2 Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxx, xxx nemohou xxx xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xxx odtučněna xxx xxxxxxx x 7.1 x xxxxxxxx xxxxx, xx bylo provedeno xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx odtučnění xxxxxxxx zbytek xxxxxxx xxxxxxxx (3.6) (100 xx celkem), xxxxx xxxxxxx 50 xx xxxxxxxxxxxxx (3.7). Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx kvantitativně xx xxxxxxx (4.1) x xxxxxxxxxx x xxxxxxx, jak je xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx bodu 5 (xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx).
7.3 Xxxxx xxxx xxxxxx bohatá na xxxxxx (xxxx než 2 % xxxxxxx), xxxxxx xxxxxxxxx vzorek (3 x x xxxxxxxxx na xx) xx kádinky (4.1) xx 100 ml xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx 0,5 X (3.5) x xxxxxxxx stát x xxxxxxx xx dobu 5 xxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Jako xxxxx použijte 2,0 x azbestu xxxxxxxx xxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.6). Xxxxx postupujte tak, xxx xxxxxxx v xxxx 5.
PŘÍLOHA XX
1. XXXXXXXXX XXXXXXXX (VITAMÍN X)
1. Xxxx a rozsah
Tato xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (vitamín X) x krmivech, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx 10000 XX/xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x 4000 IU/kg xxx xxxxxxx [1]. Xxxxxxxx jsou xxxxxxxxx xx xxxx skupin, xxxxx xxxxxx předpokládaného xxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxxxx X: xxxxxx nižší než 200000 XX/xx;
Xxxxxxx X: xxxxxx rovnající se xxxx vyšší než 200000 IU/kg.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx hydrolyzován xx xxxxx xxxxxxxx hydroxidu xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxxxx 1,2-xxxxxxxxxxxxxx. Extrakt xx xxxxxxx xx sucha x xxxxxxx petroletherem. Xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (u xxxxxxxx xxxxxxx B xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x určitých případech). X produktů xxxxxxx X xx xxxxxxx xxxxxxxx spektrofotometricky xxx 610 nm xx xxxxxxxxx barevného komplexu xxxxx Xxxx-Xxxxxxxx xxxxxx; x xxxxxxxx xxxxxxx X spektrofotometricky v XX oblasti xxx 325 xx.
3. Xxxxxxxxxx
x) xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx X x X
3.1 96 % (V/V) xxxxxxx.
3.2 10 % (xxxxxx xxxxxxxx x objemu) xxxxxx xxxxxxxxx sodného x.x. nebo
3.3 xxxxxxx xxxxx.
3.4 50 % (xxxxxx vzhledem k xxxxxx) roztok hydroxidu xxxxxxxxxx x.x.
3.5 1 X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x.x.
3.6 0,5 X roztok xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x.x.
3.7 1,2-xxxxxxxxxxxx x.x.
3.8 Xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx: 30–50 °X. Xxxxx je xx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx: míchejte 1000 xx petroletheru se 20 ml dávkami xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx x promývejte xxxxxxxxxxx xxxxxxxx 500 ml xxxx, dvakrát 250 xx 10 % (xxxxxx xxxxxxxx k xxxxxx) roztoku hydroxidu xxxxxxx a xxxxxxx 500 xx xxxx. Xxxxxxxxx vodnatou xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx po xxxx 1 hodiny xxxx xxxxxxx xxxx x bezvodý xxxxx xxxxx, přefiltrujte x xxxxxxxxxx.
3.9 Xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxx: xxxxxxx xx xxxx 8 hodin xxx 750 °X, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx v xxxxx x hnědého xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx zvlhčete xxxxxxxxxx: xx xxxxx x hnědého xxxx xxxxxx 10 x xxxxx xxxxxxxxx a 0,7 xx xxxx, xxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxxx xx xxxx 5 xxxxx x xxxxx x xxxxxx vodou xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx pomocí známého xxxxxxxx xxxxxxxx (3.17) (xxx 500 IU) xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x 5.3 x 5.4 x xxxxxxxxxx xxxxxx.
3.10 Bázický xxxx xxxxxxx, stupeň xxxxxxxx 1 (Xxxxx, Merck xxxx xxxxxxxxxxxx).
3.11 Čistý xxxxxxxxxxxx. Odstraňte peroxidy x stopy xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx koloně xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (3.10). (25 g xxxxx xxxxxxxxx na 250 ml diethyletheru.)
3.12 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.8) xx 4, 8, 12, 16 x 20 % (X/X) xxxxxxxxxxxxx (3.11).
3.13 0,5 xxx/x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx x 70 % (X/X) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx p.a.
b) xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx skupiny A
3.14 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x.x.
3.15 Xxxxxxxxxx x.x. Odstraňte xxxxxxx, fosgen x xxxxx xxxx chromatograficky xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx hlinitého (3.10) (50 x oxidu xxxxxxxxx na 200 xx xxxxxxxxxxx; doporučuje xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx 50 ml xxxxxx xxxxxxx).
3.16 Xxxx-Xxxxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx xxxxxxxxx 25 x chloridu xxxxxxxxxxxx x.x. (xxxxxxxx v xxxxxxxxxx) se 100 xx xxxxxxxxxxx (3.15), xxxxx xxxx roztok xxxxxxxx. Malá xxxxxxxxx xxxxxxxx antimonitého xxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx 2 xx xxxxxxxxxxxxxx x.x. Xxxxxxxx x chladničce x láhvi z xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx zábrusovou xxxxxx. Xxxxxx xx trvanlivost xxxxxxx xxxxx.
3.17 Xxxxxxx – xxxxxxxxxxxxxxxxxxx standardizovaný.
c) xxxxxxx výlučně pro xxxxxxx produktů xxxxxxx X
3.18 Xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx.
4. Přístroje
4.1 Vodní xxxxx.
4.2 Vakuová odparka x xxxxxxxx lahvemi x xxxxxx xxxxxx.
4.3 Xxxxxxxx chromatografické xxxxxxx (xxxxx: 300 mm; xxxxxxx průměr: xxxxx 13 xx).
4.4 Spektrofotometr x 10xx kyvetami. Xxxxxx x xxxxxxx XX xxxxxxxx křemenné xxxxxx.
4.5 UV lampy xxxxxx xxx 365 xx.
5. Postup
Poznámka:
Všechny xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xx xx xxxxxxx, v xxxxxxxx x xxxxxxx skla.
5.1 Xxxxxxxxx vzorek
Z xxxxx xxxxxxxxxxxx vzorku odeberte xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx k předpokládanému xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx:
0,1–1,0 x xxx koncentráty (xxxxxx xxxxx než 20000 XX/x);
3,0–5,0 x xxx xxxxxxx (xxxxxx xxxx 400 a 20000 XX/x);
10–20 g xxx minerální xxxxx;
30 x pro produkty xxxxxxx X.
Xxxxx umístněte xxxxxxxxx vzorek xx 500 xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.
5.2 Hydrolýza a xxxxxxxx [2]
Xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx 40 xx ethanolu (3.1), 2 xx xxxxxxx askorbanu xxxxxxx (3.2) [3], 10 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.4) x 2 ml roztoku xxxxxx xxxxxxx (3.13).
Xxxxxxxxxx xx xxxx 30 xxxxx xxx 70-80 °X xxx zpětným xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx 50 xx ethanolu (3.1) a 100 xx 1,2-xxxxxxxxxxxxx (3.7) (xxxxxxxxxxx pipetou). Xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx dekantační nádoby. Xxxxxxxx xx xxxxxx 150 ml xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.5), xxxxxxxxxxx xx xxxx 30 vteřin x xxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxx) xx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx 40 xx roztoku xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.6), xxxxxxxxxxx po dobu 10 xxxxxx x xxxxxxxx stát, dokud xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx dekantační xxxxxx x xxxxxxxxxxxx 6–8 xxxx 40 xx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxx odstraněna xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxxx test). Xxxxxxxx xxxxxx dichlorethanu x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx roztoku za xxxxx x xx xxxxx xxxxx při 40 °X. Rychle xxxxxxxx zbytek 5 xx xxxxxxxxxxxx (3.8).
Xxx xxxxxxxx skupiny A xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x 5.3.1.
Pro xxxxxxxx xxxxxxx X xxxxxxxx xxxxxx do 50 xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxx petroletherem (3.8), xxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, jak xx uvedeno v 5.4.2.
5.3 Chromatografie
5.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxx A
Naplňte chromatografickou xxxxxxx (4.3) do xxxx 200 xx 10 g oxidu xxxxxxxxx (3.9) xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx (3.8). Xx trubice xxxxxxxx roztok xxxxxxx x 5.2 x xxxxx xxxxxxxx 20 xx xxxxxxxxxxxx (3.8). Xxxxxxxxx xxxxxxxx 10 xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx 4, 8, 12, 16 x 20 % xxxxxxxxxxxxx (3.12) xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx vakua, xxxxxx xxxxxxx xx 2 xx 3 xxxxx xx vteřinu.
Nejdříve je xxxxxxxxx xxxxxxx [4]. Xxxxxxx je xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx petroletheru xx 20 % xxxxxxxxxxxxx (3.12). Vyluhování xxxxxxx xx XX xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx). Xxxxxxxxxxxxx zóna retinolu xx jasně oddělena xx xxxxxxx zón xxxxxxxxx, xxx následují. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx shromážděte xx Xxxxxxxxxxxxx baňky.
5.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxx B
Chromatografie xxxx xxx xxxxxxxxx pouze, xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx v 5.4.2 xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x 5.4.2.
Xxxxx xx xxxxx být xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx kolony xxxxxxxxx xxxx roztoku x xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x 5.2, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 500 XX xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx uvedeného x 5.3.1.
5.4 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx
5.4.1 Xxxxxxxx xxxxxxx X
Xxxxxxx do xxxxx xx vakua xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx v 5.3.1. Xxxxxxxx zbytek 2 xx xxxxxxx (3.14). Xxxxxxxx 0,3 xx xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx 3 xx Xxxx-Xxxxxxxx činidla (3.16). Xxxxxxx se xxxxx xxxxxxxx. Změřte optickou xxxxxxx spektrofotometrem xxx 610 xx xxxxxx 30 vteřin poté, xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx retinolu xxxxxxx xx standardní xxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxxx o xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx ošetřených Xxxx-Xxxxxxxxx xxxxxxxx (2 xx 16 XX xxxxxxxx-xxxxxxxx (3.17) xx 0,3 xx xxxxxxx (3.14) + 3 xx Xxxx-Xxxxxxxx xxxxxxx (3.16)). Xxxxxxxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x často xx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx Xxxx-Xxxxxxxx xxxxxxx.
5.4.2 Xxxxxxxx xxxxxxx X
Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx roztoku x xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x 5.2, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 200 XX xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xx vakua x xxxxxxxx zbytek 25 xx xxxxxxxxxxxx (3.18) Xxxxxx xxxxxxxx hustotu xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxx 325, 310 a 334 xx. Maximální xxxxxxxx se xxxxxxx xx 325 nm. Xxxxx retinolu x xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxx:
X325 · 18,30 = XX retinolu/ml
Nicméně, xxxxx optických xxxxxx
X310 : E325 a X334 : X325
xxxx xxx 6 : 7 = 0,857.
Xxxxx xx jeden x xxxxxx poměrů xxxx xxxxxxxx xx této xxxxxxx (&xx; 0,830 xxxx >0,880), xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx chromatografie x xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx x 5.3.2. Xxxxx měření xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xx xx xxxxxxx poměr xxxxx znatelně xxxx xx xxxxxxx 0,857 (&xx; 0,830 nebo &xx; 0,880), xxxx xxx stanovení xxxxxxxxx x souladu x xxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx A.
6. Xxxxxxx výsledků
Vypočítejte obsah xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx v xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx provedená xxxxx analýzy. Xxxxxxxx xxxxxxxxx v XX xxxxxxxx xx kg xxxxxx xxxx xx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx paralelních xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx nesmí xxxxxxxxx:
- 20 % rel. x xxxxxx retinolu xxxxxxx xxx 75000 XX/xx,
- 15000 XX x obsahů mezi 75000 x 150000 XX/xx,
- 10 % xxx. x xxxxxx xxxx 150000 a 250000 XX/xx,
- 25000 XX u xxxxxx xxxx 250000 x 500000 IU/kg,
- 5 % rel. u xxxxxx xxxxxxx než 500000 IU/kg.
2. XXXXXXXXX XXXXXXXX (XXXXXXX X1, XXXXXXX)
1. Účel a xxxxxx
Xxxx metoda umožňuje xxxxxxxx xxxxx thiaminu (xxxxxxxx, xxxxxxxx X1) x krmivech, xxxxxxxxxxxxx x premixech. Xxxxx xxxxxxx xx 5 xxx.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx je xx horka xxxxxxx xxxxxxx kyselinou sírovou x xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xx podroben xxxxxxxxx xxxxxxx. Vzniklý thiochróm xx extrahován isobutanolem x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxxxx
3.1 Xxxxxxxxxx roztok xxxxxxxx 100 μx/xx: xxxxxxxxx 112,3 xx xxxxxxxx-XXX, xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxx xxxx, x 1000 xx 0,2 X xxxxxxxx sírové (3.2). Pokud xx xxxxxx uchováván xx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx, xx upotřebitelný xx xxxx jednoho xxxxxx.
3.2 0,2 X xxxxxxxx xxxxxx.
3.3 Čistý xxxxxxxx xxxxx.
3.4 20 % (xxxxxx vzhledem x xxxxxx) xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x.x.
3.5 25 % (xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x.x.
3.6 Oxidační směs: xxxxxxxxx 2 xx xxxxxxx hexakyanoželezitanu xxxxxxxxxx (3.4) se 48 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.5). Tato xxxx je upotřebitelná xxx 4 xxxxxx.
3.7 Xxxxxxxxxx x.x.
3.8 2,5 X roztok xxxxxx xxxxxxx.
3.9 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxx (např. xxxxxxx).
3.10 96 % (X/X) xxxxxxx.
4. Přístroje
4.1 Xxxxx xxxxx.
4.2 Xxxxxxxxxxx (3500 xx./xxx.) xx 3 až 50 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.3 Xxxxxxxxxx.
5. Xxxxxx
5.1 Enzymatická xxxxxxxxx
Xx xxxxx xx xxxx 250 ml xxxxxxxxx xxxxx X x B xxxxxx xxxxxxx množství jemně xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 100 μx xxxxxxxx x 125 xx kyseliny sírové (3.2). Xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx do baňky X, 1,0 ml xxxxxxxxxxxx roztoku (3.1) (xxxxxxx xxxxxxxx).
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx xxx xx xxxx 15 minut x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 45 oC. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx 20 ml xxxxxxx octanu xxxxxxx (3.8) a 0,5 x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.9), potom xxxxxxxx xxxx xx dobu 20 xxxxx xx xxxxxxxx teploty. Xxxxxxxx 20 xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (3.8), xxxxxxx xx objem xxxxx, homogenizujte a xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx X x X xxxx, co xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 15 xx. Připravte následující xxxxxxx:
5.1.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx X
Xx trubice odstředivky (4.2) xxxxx 5 xx xxxxxxxx A x xxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxxx sodného (3.3). Ponořte trubici xx xxxxxx xxxxx xxxxx xx 15 xxxxx x potom xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx teplotě.
5.1.2 Xxxxxxx X (xxxxxxx xxxxxxxx) x X (vzorek)
Do xxxxxxx xxxxxxxxxxx (4.2) xxxxx 5 xx xxxxxxxx X x 5 ml xxxxxxxx X do xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (4.2).
5.2 Xxxxxxx
Xxxxxxxx x xxxxxxxx X, X a X 5 xx xxxxxxxx xxxxx (3.6) x x minutu xxxxxxx 10 ml xxxxxxxxxxx (3.7). Zazátkujte xxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxx 5 xxxxxx. Xxxxxxxx stát xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx vrstvy. Z xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 5 ml xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vrstvy xx xxxxx 25 xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx objem ethanolem (3.10) x xxxxxxxxxxxxx (= extrakty X, X a B).
5.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx délce, xxx xxxxxx dává xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx při xxxxxxxxx 365 nm.
Nastavte xxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxx extraktu X. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx A x X.
6. Xxxxxxx výsledků
Obsah xxxxxxxx x xx/xx xxxxxx xx dán xxxxxxx:
x · x / (x-x) x
xxx:
x = xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx A (xxxxxxx xxxxxxxx);
x = xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx X (xxxxxx);
x = xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x x;
x = množství xxxxxxxx x μg xxxxxxxxx x testovanému xxxxxx (xxxxxxx standard).
Opakovatelnost
Rozdíl xxxx výsledky xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx překročit:
10 % xxxxxxxxx xxxxxxx u xxxxxx xxxxxxx xxx 500 xx/xx x
5 % xxx. x xxxxxx rovnajících xx xxxx větších xxx 500 mg/kg.
3. STANOVENÍ XXXXXXXX ASKORBOVÉ X XXXXXXXXXXXXXXXX XXXX (XXXXXXX X)
1. Xxxx a xxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx celkové xxxxxxxx xxxxxxxx askorbové a xxxxxxxx dehydroaskorbové (xxxxxxx X) x xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx x premixech. Xxxxx detekce xx 5 xxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx do xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx předpokládaného xxxxxx xxxxxxxx X:
Xxxxxxx X: xxxxxx nižší xxx 10 x/xx;
Xxxxxxx X: xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx větší xxx 10 g/kg.
2. Princip
Vzorek xx suspendován xx xxxxxxxx xxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx a extrahován xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx xx xxxxxxxx roztokem 2,6-xxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx převedena xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, x potom xxxxxxxx 2,4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx. Vzniklý hydrazon xx xxxxxxxxxx směsí xxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx octové x xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxx, extrakt xxxxxxx xx xxxxx x xxxxxx rozpuštěn xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxx 509 xx.
X xxxxxxxx xxxxxxx X xx extrakt xxxxxx x kolonové xxxxxxxxxxxxxx dále podroben xxxxxxxxxxx chromatografii xx xxxxx xxxxxx, xxx xx izoloval hydrazon.
3. Xxxxxxxxxx
3.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx 0,05 % kyseliny X-xxxxxxxxx: xxxxxxxxx 50 xx xxxxxxxx L-askorbové x.x. x xxxxxxxxx 20 xx roztoku xxxxxxxx metafosforečné (3.2) x xxxxxxx xx xxxxxx 100 ml xxxxx. Xxxxxxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxxx.
3.2 10 % (xxxxxx vzhledem x objemu) xxxxxx xxxxxxxx metafosforečné: xx xxxxx rozmělnění x xxxxxxx rozpusťte ve xxxx 200 x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx p.a. x xxxxxxx do 2000 ml xxxxx. Xxxxxxxxx xxx 4oC. Xxxxxx je xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxx.
3.3 Chloroform x.x.
3.4 0,5 % (xxxxxx xxxxxxxx k objemu) xxxxxx 2,6-dichlorophenol-indophenolu x.x. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxxx.
3.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (X. x X. x. 121 xxxx xxxxxxxxxx)
3.6 2 % xxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx) 2,4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: rozpusťte 2 x 2,4-dinitrophenylhydrazinu xx 100 ml xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (25 xx kyseliny xxxxxx x.x., x: 1,84, xxxxxx xxxxxxxxx do 100 ml vodou). Xxxxx xxxxxx, xx-xx xxxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxx xxxxx týden.
3.7 Xxxxx xxxx
3.8 Kysličník xxxxxxxx.
3.9 Xxxx ethyl xxxxxxx x.x./xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx x.x.: 96/2/2 xxxxxxxx.
3.10 Xxxx xxxxxxxxxxxxxxx x.x./xxxxxx kyseliny xxxxxx: 97/3 xxxxxxxx.
3.11 Xxxxxx xxx, xxxxxxxx xxxxxx: 0,05 xx 0,2 xx.
3.12 Stahl xxxxxx xxx xxxxxx X xxx tenkovrstvou chromatografii.
3.13 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx: xxxxx 105 xx xxxx xx 200 xx odměrné xxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x.x., x: 1,84.
3.14 Extrakční xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxx 75 xx xxxxxxxxxxxxx x.x., 25 xx ethyl xxxxxxx x.x. x 4,0 ml 96 % (váhově xxxxxxxx x xxxxxx) xxxxxxxx xxxxxx p.a. Xxxxxxx xx 2 xx 3 xxxxxxxxxxxxxxx.
4. Přístroje
4.1 Xxxxx lázeň xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 20 °X.
4.2 Xxxxxxxxxxx (3500 xx./xxx.) xx 40 xx 50 xx trubicemi xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zátkami.
4.3 Xxxxxxx xxxxxxx odparka x 250 xx xxxxxxx.
4.4 Xxxxxxxx chromatografické xxxxxxx (xxxxx: 100 xx, vnitřní xxxxxx: 20 xx), xx xxxxxxxxx xxxxxx (xxxx. Xxxxxxxxx trubice).
4.5 Xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx s xxxxxx x 10xx xxxxxxxx.
4.6 Přístroj pro xxxxxxxxxxxx chromatografii se xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (3.12) pokrytými do xxxxxxx 0,5 xx 0,6 mm. (Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx.) Xxxxx desky xx 2 x xxx xx 3 xxxxxx x xxxxxxx xxx 120 xx 130 °C. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx x exsikátoru xx xxxxxxx 24 xxxxx před xxxxxxxx.
4.7 Xxxxxxx xxxxxxxxx xx 120 xx 130 °X.
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxx
Xx xxxxx xx dvou 250 ml odměrných xxxxx (xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx) A x B xxxxxx xxxxxxx množství xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 200 μg xxxxxxxx C. Xxxxxxxx, xxxxx do xxxxx X, 0,4 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.1) x promíchejte jemným xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx).
Xxxxxxxx xx každé lahve 30 ml chloroformu (3.3) x 25 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2) xxx 4 °X. Xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxx 10 až 15 minut. Přidejte 25 xx xxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xx 10 xxxxxx a xxxxxxxx xxxx 10 xx 15 xxxxx ve xxxxx xxxxx (4.1). Xxxxxxxxx, aby se xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxx postupy xxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxx, u vodních xxxxxxxx X (xxxxxxx xxxxxxxx) x X.
5.2 Xxxxxxx
Xx použití pipety xxxxxxxx 40 xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxx) xxxxxxxxx x 5.1 xx xxxxxxx trubice xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx 0,5 xx 1 ml xxxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxx (3.4) a xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx 15 xxxxx. Xxxxx přidejte přibližně 300 xx filtrační xxxxxxx (3.5), protřepejte x filtrujte xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx být xxxxx xxxxx.
5.3 Xxxxxx x 2,4-dinitrophenylhydrazinem x xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 10 xx xxxxxxxx získaného x 5.2 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (4.2), xxxxxxxx 2 xx xxxxxxx 2,4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.6) x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxxx dusíku (3.7) nebo kysličník xxxxxxxx (3.8) do xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx x ponořte ji xx xxxxxxxxx 15 xxxxx (přes xxx) xx xxxxx xxxxx (4.1).
Xxxxx přidejte 3 xx vody, 20 xx směsi ethyl xxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx octové/acetonu (3.9) x přibližně 800 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.5). Xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx protřepejte xx dobu 30 xxxxxx a xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 15 xx xxxxxxxxxxxx a xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (4.3), xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Rozpusťte xxxxxx xx 2 xx xxxxx ethyl xxxxxxx/xxxxxx kyseliny xxxxxx/xxxxxxx (3.9) xx xxxxxx xx 50 °C, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, přidejte 10 ml xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.10) x xxxxxxxxxxx.
5.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) xx xxxxxx 30 xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxxxx kyseliny xxxxxx (3.10). Xxxxxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxxxx) 5 x silika xxxx (3.11) xx 30 xx směsi xxxxxxxxxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx octové (3.10); xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx stát x xxxxx stlačte xxx xxxxxxx (3.7) xxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx získaný x 5.3, xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx množstvím xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx octové (3.10) a xxxxxxxx xx xxxxxxx, potom xxxxxxx trubici směsí (3.10) a xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx trubice xxxxxxx xxxxx (3 xx 4 dávky xxxxxxxxx 5 xx), xxxxx xxxx získán xxxxxxxx eluát. Xxxxxxx xxxx eluátu, který xx xxxxxxx xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx (3.9), xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx sucha.
5.4.1 X xxxxxxxx skupiny X (xxxxx vitamínu X xxxxx xxx 10 x/xx), rozpusťte xxxxxx xx 2,0 xx xxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx (3.9) x ihned chromatografujte xx xxxxx xxxxxx, xxx je xxxxxxx x 5.5.
5.4.2 U xxxxxxxx xxxxxxx B (xxxxx xxxxxxxx C xx rovná nebo xx xxxxx xxx 10 g/kg), xxxxxxxx xxxxxxxx zbytek 4,0 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.13), silně xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx rozpustil x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx je xxxxxxx x 5.6.
5.5 Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx 0,5 xx roztoku xxxxxxxxx x 5.4.4 v xxxxx xxxx xx xxxxxxxx (4.6). Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.14) vyvíjejte po xxxxxxx 20 xxxxx x tanku xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx volně xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxx přeneste xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx trubice (4.4).
Xxxxxxx postupně xxxxxx 2 xx x xxxxxxx 1,5 ml xxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx (3.9). Xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxx (xxxxxxxx xxx xxxx xxx xxxxxxxx). Odpařte xx xxxxx, ošetřete xxxxxxxx xxxxxx 4,0 xx xxxxxxx kyseliny xxxxxx (3.13), xxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx zbytek xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
5.6 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx xxxxxxxx hustotu xxxxxxxxxxxxxxxxx xxx 509 xx 20 až 30 xxxxx po rozpuštění xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx. Proveďte xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx sírovou (3.13).
5.7 Xxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxx xxxxxx.
6. Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx X xx xxxxxx x x xx xx xx xxx xxxxxxx:
(x – a) · 2 / (x – x) · 10x
xxx:
x = optická xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx;
x = optická xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx;
x = xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx;
x = xxxx xxxxxxxxxxx vzorku x xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx mezi xxxxxxxx xxxx paralelních xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx vzorku xxxxx xxxxxxxxx:
10 % rel. x xxxxxx xxxxxxxx X xxxxxxx xxx 10 g/kg x
5 % xxx. x xxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxx xxxxxxx xxx 10 x/xx.
[1] 1 XX = 0,3 μx retinolu.
[2] X xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx xxxx 5.2.
[3] Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx.
[4] Obsah xxxxxxxx může xxx xxxxxxxx xxxxxxx optické xxxxxxx při 450 xx; X 1% / 1xx = 2600.