Čtvrtá Xxxxxxxx Komise
ze xxx 5. xxxxxxxx 1972,
xxxxxx se stanoví xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx úřední xxxxxxxx xxxxx
(73/46/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX SPOLEČENSTVÍ,
s xxxxxxx na Smlouvu x xxxxxxxx Evropského xxxxxxxxxxxxx společenství,
s ohledem xx xxxxxxxx Xxxx xx xxx 20. xxxxxxxx 1970 o xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [1], xx znění xxxxxxxx 72/275/EHS xx xxx 20. xxxxxxxx 1972 [2], a xxxxxxx xx xxxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x tomu, xx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx prováděny xx xxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zákonem, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxx 71/250/XXX xx xxx 15. xxxxxxxx 1971 [3], 71/393/XXX xx xxx 18. xxxxxxxxx 1971 [4] x 72/199/XXX xx xxx 27. xxxxx 1972 [5] xxx xxxxxxxxx řadu xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx; xxxxxxxx x xxxx, xx postup xxxxx xx té xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx sérii metod;
vzhledem x xxxx, xx xxxxxxxx uvedená v xxxx xxxxxxxx jsou x xxxxxxx se xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx;
XXXXXXX TUTO XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Členské xxxxx xxxxxxx, aby xxxx xxxxxxx xxx oficiální xxxxxxxx krmiv, xx xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx u xxxxxxxxxxx a rostlinných xxxx a xxxxx x obsahů xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxx xxxxx popsaných x xxxxxxx X xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxx 1 (úvod) přílohy xxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 71/250/XXX xx xxx 15. xxxxxx 1971 xx xxxxxxxx x xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx I xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 2
Členské xxxxx xxxxxxx, aby xxxx xxxxxxx xxx oficiální xxxxxxxx xxxxx, co xx týče xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx X), xxxxxxxx (aneurin, xxxxxxx X1), xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx kyseliny (xxxxxxx X), xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x příloze XX xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx ustanovení xxxxxxxxx v xxxxx 1 (úvod) xxxxxxx xxxxx směrnice Xxxxxx x. 71/250/XXX xx xxx 15. xxxxxx 1971 xx, x xxxxxxxx xxxxx týkající xx xxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xxx xxxxxxxxxx, vztahují x xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx XX xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 3
Členské státy xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx souladu s xxxxx směrnicí nejpozději xx 1. ledna 1974. Xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx Xxxxxx.
Xxxxxx 4
Tato směrnice xx xxxxxx členským xxxxxx.
X Bruselu dne 5. xxxxxxxx 1972.
Xx Xxxxxx
X. X. Xxxxxxxx
xxxxxxxx
[1] Xx. věst. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Xx. xxxx. X 171, 29.7.1972, x. 39.
[3] Úř. xxxx. X 155, 12.7.1971, x. 13.
[4] Úř. xxxx. X 279, 20.12.1971, x. 7.
[5] Úř. věst. X 123, 29.5.1972, x. 6.
XXXXXXX X
1. STANOVENÍ XXXXXXXX X ŽIVOČIŠNÝCH X XXXXXXXXXXX XXXXXX X XXXXXXX
1. Xxxx x rozsah
Tato xxxxxx xxxxxxxx stanovit xxxxx xxxx a xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx tucích x xxxxxxx.
2. Princip
Vzorek xx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx 103 °C. Xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx.
3. Přístroje
3.1 Xxxxx x plochým xxxx x nekorozního materiálu, 8 až 9 xx x xxxxxxx x xxxxxxxxx 3 xx xxxxxx.
3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 80 °X xx nejméně 110 °X, x přibližně 10 xx dlouhý.
3.3 Xxxxxxx lázeň xxxx xxxxxxxxxx xxxxx plotýnka.
3.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx činidlo.
3.5 Analytické xxxx.
4. Postup
Odvažte x xxxxxxxxx na mg xxxxxxxxx 20 x xxxxxxxxxxxxxxxx vzorku xx xxxxx, xxxxxxxx xxxxx (3.1) x xxxxxxxxxx (3.2). Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx plotýnku (3.3) xx stálého xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxx xxxxxxx 90 °X xxxxx xxx 7 xxxxx.
Xxxxxx xxxxx x sledujte xxxxxxxxx, se xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx misky. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 105 °X. Pokračujte v xxxxxxx xxx dna xxxxxx, dokud xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
Xxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx na 103 °X ± 2 °X, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx na 93 °X. Potom xxxxxxxx vychladnout na xxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxx (3.4) x xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx, xxxxx ztráta xxxxx xxxx dvěma xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx 2 xx.
Xxxxxxxx:
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx oxidaci xxxx, x takovém xxxxxxx xxxxxxxx výsledek x vážení xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
5. Výpočet xxxxxxxx
Xxxxx vlhkosti, xxxx xxxxxxxx xxxxxx, je xxx následující xxxxxxx:
(X1 – X2) · 100 / Xx
xxx:
Xx = xxxxx testovaného xxxxxx x gramech;
M1 = hmota misky x xxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxx;
X2 = xxxxx misky x xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx xxx 0,05 % xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx jako "xxxxx xxx 0,05 %".
Opakovatelnost
Rozdíl xx xxxxxxxx mezi xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx vzorku nesmí xxxxxxxxx 0,05 % x xxxxxxxxx xxxxxxx.
2. XXXXXXXXX HOŘČÍKU
— xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx —
1. Xxxx x pole xxxxxxxxxx
Xxxx metoda umožňuje xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx. Je xxxxxxx vhodná xxx xxxxxxxxx obsahu xxxxxxx xxxxxxx xxx 5 %.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx je xxxxxxxxx x rozpuštěn xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx neobsahuje xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx se xxxxxxx x obsah hořčíku xx stanoví xxxxxxxx xxxxxxxxx spektrofotometrií xxx xxxxxx xxxxx 285,2 xx.
3. Chemikálie
3.1 Kyselina xxxxxxxxxxxxxx p.a. x: 1,16.
3.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x.x. d: 1,19.
3.3 Xxxxxxxxx pásek xxxx xxxx, xxxx XxXX4 7X2X, xxxxxx xx pokojové xxxxxxx.
3.4 Xxxxxx soli stroncia (xxxxxxx nebo dusičnan) 2,5 % (76,08 x XxXx2 6X2X x.x., xxxx 60,38 x Sr(No3)2 x.x.).
3.5 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx: xxxxxxx x přesností xx xx 1 x xxxxxxx (3.3), x xxxxxxx byla xxxxxx opatrně xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (10,143 x) MgSO47H2O (3.3). Xxxxxx do 1000 xx odměrné xxxxx, xxxxxxxx 80 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.1), xxxxxxxx rozpustit a xxxxxxx xx 1000 xx xxxxx. 1 xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 1,000 xx xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxx nebo porcelánové xxxxxxxxx xxxxxxx.
4.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx muflová xxx.
4.3 Atomový xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
5. Postup
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx
5.1.1 Krmiva xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xx 5 x vzorku xx 500 ml xxxxxxx xxxxx x 250 xx 300 xx xxxx. Přidejte 40 xx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (3.1), uveďte xx xxxx a xxxxxxxx kapalinu xxx xxxxxx varu xx xxxx 30 minut. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxxxx na objem, xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx suchý skládaný xxxxx. Vyřaďte xxxxxxx 30 ml filtrátu. X přítomnosti xxxxxxx xxxxxxxxx 5 x xxxxxx v dostatečném xxxxxxxx (15-30 ml) xxxxxxxx chlorovodíkové (3.2), xxxxxxx xx xxxxx xx vodní xxxxx x xxxxxx xx xxxxx hodinu xx xxxxxxx x 105 °X. Pokračujte, xxx xx xxxxxxx xx xxxxx xxxx v 5.1.2.
5.1.2 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx z minerálních xxxxx
Xxxxxxx s xxxxxxxxx xx xx 5 x xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 550 °X x xxxxxxx peci, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx je xxx xxxxxxxxxx částic, x nechejte vychladnout. Xxx byl odstraněn xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx dostatečné xxxxxxxx (15-30 xx) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2), odpařte xx xxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x 105 °X. Xxxxxx rozpusťte 10 xx kyseliny chlorovodíkové (3.1) x xxxxxxxx xx 500 xx xxxxxxx xxxxx za xxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxx vychladnout a xxxxxxx na xxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx do suché xxxxxxx přes suchý xxxxxxxx filtr. Xxxxxxx xxxxxxx 30 xx xxxxxxxx.
5.1.3 Krmiva složená xxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx x přesností xx xx 5 x vzorku xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxx 550 °X x xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxx, který xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx 5 xx kyseliny chlorovodíkové (3.2), xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxx xxxxx a převeďte xx xxxxx hodinu xx xxxxxxx x 105 °X, aby xx xxxxxxxxxx křemíku xxxxx nerozpustnými. Popel xxxxxxxx 5 xx xxxxxxxx chlorovodíkové (3.1), xxxxxxxx do 250 xx xxxxxxx baňky xx xxxxx xxxxx xxxx, xxxxxx xx xxxx, xxxxxxxx vychladnout x xxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx přes xxxxx skládaný filtr. Xxxxxxx xxxxxxx 30 xx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxx standardního xxxxxxx (3.5) vodou xxxxxxxxx nejméně 5 xxxxxxxxxxxx roztoků x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx odpovídající xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx do xxxxxxx xxxxxxx 10 xx xxxxxxx soli xxxxxxxx (3.4) x xxxxx xxxxxxx objem xx 100 xx xxxxx. Rozřeďte vodou xxxxx alikvotní část xxxxxxxx získaného xxxxx 5.1.1, 5.1.2 xxxx 5.1.3 xxx, xx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, která je x úrovni xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx chlorovodíkové xxxxxx xxxxxxx nesmí xxxxxxxxx 0,4 X. Xxxxxxxx 10 xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx (3.4) x xxxxx xxxxxxx objem do 100 xx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxx, a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx vlnové xxxxx 285,2 nm.
6. Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx procento xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx provedených x stejného xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 5 % xxx.
3. XXXXXXXXX XXXXX XXXXXXXX
1. Xxxx x xxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx tukuprostých xxxxxxxxxxx látek, xxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx.
2. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx, kde xx xx třeba, xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Zbytek xx oddělen xxxxxxxx xx přítomnosti xxxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, zvážen x zpopelněn při 900 °X. Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx odpovídá xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxx xxxxxx.
3. Chemikálie
3.1 Xxxxxxxx sírová 0,26 X.
3.2 Ošetřený xxxxxx: xxxxxxxx x azbestu xxxx užívanému x Xxxxxxxxx kelímkem xxxxxxxxx 5 xxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (1 xxx xxxxxxxx chlorovodíkové, x: 1,19 + 3 xxxx xxxx). Xxxxx xxxx přibližně 45 xxxxx, nechejte vychladnout, xxxxxxxxxxxx xxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxx. Promývejte xxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx vody, x xxxxx xxxxxxxx (3.6). Vysušte azbest x xxxxxxx x xxxxx spalujte 2 xxxxxx xxx 900 °X. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx. Tímto xxxxxxxx ošetřený azbest xxxx xxx použit xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx dané x xxxx 5, xxxxx xx týče xxxxxxx xxxxxx.
3.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxx (xx. xxxxxxx).
3.4 Roztok xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 0,23 X.
3.5 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx 0,5 N.
3.6 Xxxxxx.
3.7 Xxxxxxxxxxx.
4. Přístroje
4.1 Xxxxxxx x objemu xxxxxxx 600 ml s xxxxxxxxx xxxxxx 200 xx.
4.2 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 80 xx x průměru a xxxxxxxxx 4 xx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 32 xxxxxx, každý xxxxxxxxx x průměru 4 xx.
4.3 Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x objemu xxxxxxxxx 2 xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx 800 xx x xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx 120 xx x průměru.
4.4 Filtrační xxxxx přibližně 40 xx x průměru x xxxxxxxxx 4 xx silné xx xxxxxxxxx xxxxxx uzpůsobenými xxx xxxxx xxxxxxx (4.3), perforované přibližně 16 xxxxxx, xxxxx x xxxxxxx přibližně 4 xx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx přibližně 1 mm. Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx.
4.5 Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx kelímky.
4.6 Xxxxxxxxxx xxxxxxx pec xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.
4.7 Xxxxxxxxx.
4.8 Xxxxxxxxx xxxxx: Xxxxxxxxxxx 2,0 x xxxxxxx (3.2) xx 100 ml xxxx.
Xxxxxxxxx za xxxxx xxxx xxxxxxxxx desky xxxxxxx xxxxxxxx síťovinou (4.4) a xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (4.3). Zachyťte xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx filtr. Xxxxxxx xxxxxxx.
5. Xxxxxx
Xxxxxxx x xxxxxxxxx xx mg 3 g xxxxxx x 2 g xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.2) xx xxxxxxx (4.1), xxxxxxxx 200 ml xxxxxxxx xxxxxx (3.1) x několik xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (3.3). Xxxxxx xxxxxx do xxxx x nechejte xxxxx přesně 30 xxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx zakryjte xxxxxxx chladícím xxxxxxxxx xxxx xx 500 xx xxxxx x xxxxxxx dnem, ve xxxxx xxxxxxxxx studená xxxx. Xxxxxxxx xxx xxxxxxxx přibližně 50 xx studené xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxx xx 4.8.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 100 ml xxxxx xxxxx xxxx, xxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 800 ml. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx (4.1), která xxxx nejdříve xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.2) xxx xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx 200 xx xxxxxxx xxxxxxxxx draselného (3.4). Uveďte xxxxxx xx xxxx x xxxxxxxx vařit xxxxxx 30 minut. Xxxxxxxx xxxxxxxxx 50 xx xxxxxxx xxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxx za xxxxx přes xxxxxxx xxxxxx připravený xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxx xx 4.8. Xxxxxxxxx zbytek xxxxx xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx (testujte lakmusovým xxxxxxxx), potom 3xxxx xxxxxxxx (3.6) (xxxxxxxxx 100 ml xxxxxxx xxxxxx).
Xxxxxxxx xxxxxx kvantitativně xx spalovacího xxxxxxx (4.5), xxxxxxxx, xxxxx xx xx potřeba, x xxxxxx xx xxxxxxxxxx hmotnosti v xxxxxxx xxx 130 °X.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx (4.7) x xxxxxx zvažte.
Vložte kelímek xx xxxxxxx xxxx (4.6) a xxxxxxxx xxxxxxxxx xx dobu 30 xxxxx xxx 900 °X. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v exsikátoru (4.7) x xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x ošetřeného xxxxxxx (3.2), xxx xxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxx ze xxxxxxxxxx 6 x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx 10 xx.
6. Xxxxxxx výsledků
Obsah xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xxxxxx, je xxx poměrem:
(a-b) · 100 / 3
xxx:
x = ztráta xxxx xx zpopelnění xxxxx xxxxxxxxx;
x = xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx slepého pokusu.
Opakovatelnost
Rozdíl xxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx vzorku xxxxx xxxxxxxxx:
0,3 v xxxxxxxxx hodnotě x xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 10 %;
3 % xxx. x obsahů xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxx xxx 10 %.
7. Xxxxxxxx
7.1 Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx 10 % xxxxx x xxxx musí xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.7). Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (3 x x xxxxxxxxx xx xx) xx azbestový xxxxx (4.8). Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 50 xx xxxxxxxxxxxxx (3.7) x xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx vzorek x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx kádinky (4.1) x xxxxxxxxxx v xxxxxxx, jak xx xxxxxxx x xxxx 5.
7.2 Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x tuky, xxx xxxxxxx být xxxxxxxxxxx přímo, xxxx xxx odtučněna xxx xxxxxxx x 7.1 x xxxxxxxx xxxxx, xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx kyseliny ze xxxxxx.
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (3.6) (100 xx celkem), xxxxx xxxxxxx 50 xx xxxxxxxxxxxxx (3.7). Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx kádinky (4.1) x xxxxxxxxxx x xxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxx 5 (xxxxxxxx roztokem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx).
7.3 Pokud xxxx xxxxxx bohatá xx xxxxxx (více než 2 % xxxxxxx), xxxxxx testovaný xxxxxx (3 x s xxxxxxxxx xx mg) xx kádinky (4.1) xx 100 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx 0,5 X (3.5) x xxxxxxxx xxxx v xxxxxxx po xxxx 5 xxxxx. Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx a promyjte xxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxx použijte 2,0 x xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Pokud xx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.6). Xxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx uvedeno x xxxx 5.
XXXXXXX II
1. STANOVENÍ XXXXXXXX (XXXXXXX X)
1. Xxxx a xxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (vitamín X) x xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxx je 10000 IU/kg xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x 4000 IU/kg xxx xxxxxxx [1]. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxxxx X: xxxxxx xxxxx xxx 200000 IU/kg;
Skupina X: xxxxxx rovnající xx xxxx xxxxx xxx 200000 XX/xx.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx roztokem hydroxidu xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx x xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo x dusíkaté xxxxxxxxx. Xxxx xx extrahována 1,2-xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xx sucha x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (x produktů xxxxxxx B xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx pouze x xxxxxxxx xxxxxxxxx). X produktů skupiny X xx xxxxxxx xxxxxxxx spektrofotometricky xxx 610 xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx Carr-Priceovy xxxxxx; x produktů xxxxxxx X xxxxxxxxxxxxxxxxxxx x XX xxxxxxx při 325 xx.
3. Chemikálie
a) xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx X x X
3.1 96 % (X/X) xxxxxxx.
3.2 10 % (váhově xxxxxxxx k xxxxxx) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x.x. nebo
3.3 čištěný xxxxx.
3.4 50 % (xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x.x.
3.5 1 X xxxxxx hydroxidu xxxxxxxxxx x.x.
3.6 0,5 X xxxxxx hydroxidu xxxxxxxxxx x.x.
3.7 1,2-xxxxxxxxxxxx x.x.
3.8 Xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx: 30–50 °C. Xxxxx xx xx xxxxxxx, přečistěte následujícím xxxxxxxx: xxxxxxxx 1000 xx xxxxxxxxxxxx xx 20 ml xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx sírové, xxxxx zůstává xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx kyselinu x xxxxxxxxxx petrolether xxxxxxxx 500 ml xxxx, xxxxxxx 250 xx 10 % (xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx) xxxxxxx hydroxidu xxxxxxx a třikrát 500 xx vody. Xxxxxxxxx xxxxxxxx vrstvu, xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx 1 xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxx síran xxxxx, xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx.
3.9 Xxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxx: xxxxxxx xx xxxx 8 xxxxx při 750 °X, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx v xxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx zábrusovou xxxxxxxxx xxxxxx. Před xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx zvlhčete xxxxxxxxxx: xx lahve x hnědého skla xxxxxx 10 x xxxxx xxxxxxxxx a 0,7 ml vody, xxxxxxxx xxxxxx, zahřívejte xx xxxx 5 xxxxx x xxxxx x vroucí xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx vychladnout. Ověřte xxxxxxxx takto xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx retinolu (3.17) (xxx 500 XX) xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x 5.3 a 5.4 x kontrolním xxxxxx.
3.10 Xxxxxxx oxid xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx 1 (Xxxxx, Merck xxxx ekvivalentní).
3.11 Čistý xxxxxxxxxxxx. Odstraňte xxxxxxxx x xxxxx vody xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx oxidu hlinitého (3.10). (25 x xxxxx hlinitého xx 250 ml diethyletheru.)
3.12 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.8) xx 4, 8, 12, 16 x 20 % (X/X) xxxxxxxxxxxxx (3.11).
3.13 0,5 xxx/x roztok xxxxxx xxxxxxx x 70 % (V/V) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx ze síranu xxxxxxx x.x.
x) užívané xxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxx skupiny X
3.14 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx p.a.
3.15 Xxxxxxxxxx x.x. Odstraňte xxxxxxx, xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx bázického xxxxx hlinitého (3.10) (50 x oxidu xxxxxxxxx xx 200 xx xxxxxxxxxxx; xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx 50 ml eluátu xxxxxxx).
3.16 Xxxx-Xxxxxxxx xxxxxxx: xxxxxxxx xxxxxxxxx 25 x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x.x. (xxxxxxxx v xxxxxxxxxx) xx 100 xx xxxxxxxxxxx (3.15), xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx. Malá xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nečiní xxxxxxx. Xxxxxxxx 2 xx xxxxxxxxxxxxxx x.x. Xxxxxxxx v xxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxxxx skla xx xxxxxxxxx zábrusovou xxxxxx. Xxxxxx xx trvanlivost xxxxxxx xxxxx.
3.17 Retinol – xxxxxxxxxxxxxxxxxxx standardizovaný.
c) xxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxx produktů skupiny X
3.18 Xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx
4.1 Vodní xxxxx.
4.2 Vakuová xxxxxxx x kulatými xxxxxxx x xxxxxx objemu.
4.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxx: 300 mm; xxxxxxx průměr: xxxxx 13 mm).
4.4 Spektrofotometr x 10xx kyvetami. Xxxxxx x xxxxxxx XX xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4.5 UV xxxxx xxxxxx pro 365 xx.
5. Postup
Poznámka:
Všechny postupy xxxxxx xxx prováděny xxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx je xx xxxxxxx, x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx.
5.1 Xxxxxxxxx xxxxxx
X jemně xxxxxxxxxxxx xxxxxx odeberte xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx retinolu, xxxxx:
0,1–1,0 x xxx xxxxxxxxxxx (xxxxxx větší xxx 20000 XX/x);
3,0–5,0 x xxx xxxxxxx (xxxxxx xxxx 400 a 20000 XX/x);
10–20 x xxx xxxxxxxxx směsi;
30 x xxx xxxxxxxx xxxxxxx X.
Xxxxx umístněte xxxxxxxxx xxxxxx xx 500 xx xxxxx xx skleněnou xxxxxxxxxx xxxxxx.
5.2 Xxxxxxxxx a xxxxxxxx [2]
Přidejte xxxxxxxx x testovanému xxxxxx 40 ml ethanolu (3.1), 2 ml xxxxxxx askorbanu xxxxxxx (3.2) [3], 10 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.4) x 2 xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (3.13).
Xxxxxxxxxx xx xxxx 30 xxxxx při 70-80 °X xxx xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx pod xxxxxxx vody. Xxxxxxxx 50 xx xxxxxxxx (3.1) x 100 xx 1,2-dichlorethanu (3.7) (xxxxxxxxxxx pipetou). Xxxxx xxxxxxxxxxx x potom xxxxxxxx xxxxxxx supernatant xx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx do nádoby 150 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.5), xxxxxxxxxxx po xxxx 30 vteřin a xxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxx) do xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx 40 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.6), xxxxxxxxxxx xx dobu 10 xxxxxx x xxxxxxxx stát, xxxxx xxxxxx vrstvy odděleny. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx nádoby x xxxxxxxxxxxx 6–8 xxxx 40 xx xxxxxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxx zásaditost (xxxxxxxxxxxxxxx xxxx). Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx poslední xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx papíru.
Odpařte xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx za xxxxx x xx xxxxx lázni xxx 40 °X. Xxxxxx xxxxxxxx zbytek 5 xx xxxxxxxxxxxx (3.8).
Xxx xxxxxxxx xxxxxxx X xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x 5.3.1.
Xxx xxxxxxxx skupiny X xxxxxxxx xxxxxx do 50 xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.8), xxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, jak xx uvedeno x 5.4.2.
5.3 Chromatografie
5.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxx A
Naplňte chromatografickou xxxxxxx (4.3) xx xxxx 200 xx 10 g xxxxx xxxxxxxxx (3.9) xxxxxx xxxxxxxxxxxx s xxxxxxxxxxxxx (3.8). Do xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x 5.2 x xxxxx přidejte 20 xx xxxxxxxxxxxx (3.8). Xxxxxxxxx xxxxxxxx 10 xx xxxxxxx roztoků xxxxxxx xxxxxxxxx xx 4, 8, 12, 16 x 20 % diethyletheru (3.12) xx tlaku xxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxx je 2 xx 3 xxxxx xx xxxxxxx.
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx [4]. Xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx petroletheru xx 20 % xxxxxxxxxxxxx (3.12). Xxxxxxxxxx xxxxxxx xx UV xxxxxxxxx (xxxxxx ozáření xxxxxxx xxxxxxxx výbojkou). Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, jež následují. Xxxxxxxxx xxxxxx obsahující xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx baňky.
5.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxx B
Chromatografie musí xxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx měření xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx v 5.4.2 nesplňují požadavky xxxx v 5.4.2.
Pokud xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, umístněte xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x 5.2, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 500 IU xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx uvedeného x 5.3.1.
5.4 Měření xxxxxxx xxxxxxx
5.4.1 Xxxxxxxx xxxxxxx X
Xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxx xxxxx obsahující xxxxxxx xxxxxxx x 5.3.1. Xxxxxxxx xxxxxx 2 xx xxxxxxx (3.14). Xxxxxxxx 0,3 xx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx 3 xx Xxxx-Xxxxxxxx xxxxxxx (3.16). Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxx 610 xx přesně 30 vteřin xxxx, xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx na standardní xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx o xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx Carr-Priceovým xxxxxxxx (2 xx 16 XX standard-retinolu (3.17) na 0,3 xx benzenu (3.14) + 3 xx Xxxx-Xxxxxxxx xxxxxxx (3.16)). Xxxxxxxxxx křivka xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x často za xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx Xxxx-Xxxxxxxx činidla.
5.4.2 Produkty xxxxxxx B
Odeberte alikvotní xxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxxx, získaného v 5.2, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 200 XX xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx 25 xx isopropanolu (3.18) Xxxxxx optickou xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxx 325, 310 a 334 xx. Maximální xxxxxxxx xx nachází xx 325 nm. Xxxxx retinolu x xxxxxxx xx vypočítá xxxxxxxxxx:
X325 · 18,30 = XX retinolu/ml
Nicméně, xxxxx xxxxxxxxx hustot
E310 : X325 a X334 : X325
xxxx xxx 6 : 7 = 0,857.
Xxxxx xx xxxxx x xxxxxx xxxxxx liší xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx (&xx; 0,830 xxxx >0,880), xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx chromatografie v xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx x 5.3.2. Xxxxx měření xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx po xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, že xx uvedený xxxxx xxxxx znatelně xxxx xx xxxxxxx 0,857 (&xx; 0,830 xxxx &xx; 0,880), xxxx xxx xxxxxxxxx provedeno x xxxxxxx x xxxxxxx danou xxx xxxxxxxx xxxxxxx A.
6. Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx obsah xxxxxxxx ve vzorku xxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx vzorku x xxxxxx provedená xxxxx xxxxxxx. Výsledky xxxxxxxxx x XX xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxx xx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx x stejného xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
- 20 % xxx. x xxxxxx retinolu xxxxxxx než 75000 XX/xx,
- 15000 XX x xxxxxx mezi 75000 a 150000 XX/xx,
- 10 % xxx. x xxxxxx xxxx 150000 x 250000 XX/xx,
- 25000 XX x obsahů xxxx 250000 x 500000 XX/xx,
- 5 % rel. x xxxxxx xxxxxxx než 500000 IU/kg.
2. STANOVENÍ XXXXXXXX (XXXXXXX X1, XXXXXXX)
1. Xxxx x xxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx thiaminu (xxxxxxxx, xxxxxxxx B1) x xxxxxxxx, koncentrátech x premixech. Xxxxx xxxxxxx xx 5 xxx.
2. Princip
Roztok xx xx horka xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x potom enzymaticky xxxxxxxxxxxx. Získaný xxxxxx xx podroben xxxxxxxxx xxxxxxx. Vzniklý xxxxxxxxx xx extrahován xxxxxxxxxxxx x stanoven xxxxxxxxxxxxxx.
3. Xxxxxxxxxx
3.1 Standardní xxxxxx xxxxxxxx 100 μg/ml: xxxxxxxxx 112,3 xx xxxxxxxx-XXX, předem xxxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxx xxxx, v 1000 xx 0,2 X xxxxxxxx sírové (3.2). Pokud je xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxx, je xxxxxxxxxxxxx xx dobu xxxxxxx xxxxxx.
3.2 0,2 X xxxxxxxx xxxxxx.
3.3 Čistý xxxxxxxx xxxxx.
3.4 20 % (váhově vzhledem x xxxxxx) xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx draselného x.x.
3.5 25 % (váhově xxxxxxxx x objemu) xxxxxx hydroxidu draselného x.x.
3.6 Xxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxx 2 xx xxxxxxx hexakyanoželezitanu xxxxxxxxxx (3.4) xx 48 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.5). Tato xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxx 4 xxxxxx.
3.7 Xxxxxxxxxx x.x.
3.8 2,5 X xxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
3.9 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx proteázu, xxxxxxxxx x xxxxxxx (xxxx. xxxxxxx).
3.10 96 % (X/X) xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx
4.1 Xxxxx xxxxx.
4.2 Odstředivka (3500 xx./xxx.) xx 3 až 50 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zátkami.
4.3 Xxxxxxxxxx.
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx každé ze xxxx 250 xx xxxxxxxxx baněk X x B xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx obsahujícího xxxxxxxxx 100 μx xxxxxxxx x 125 xx xxxxxxxx xxxxxx (3.2). Xxxxxxxx rovněž, xxxxx do baňky X, 1,0 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.1) (xxxxxxx xxxxxxxx).
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx je xx vroucí xxxxx xxxxx x udržujte xx xxx xx xxxx 15 xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 45 xX. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx 20 ml xxxxxxx octanu xxxxxxx (3.8) x 0,5 x multienzymatického přípravku (3.9), potom xxxxxxxx xxxx xx xxxx 20 minut xx xxxxxxxx xxxxxxx. Přidejte 20 xx xxxxxxx xxxxxx sodného (3.8), xxxxxxx na xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx X a B xxxx, xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 15 xx. Xxxxxxxxx následující xxxxxxx:
5.1.1 Referenční xxxxxx X
Xx trubice xxxxxxxxxxx (4.2) dejte 5 xx xxxxxxxx A x přibližně 10 xx bisulfitu xxxxxxx (3.3). Ponořte xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxx xx 15 xxxxx x potom xxxxxxxx xxxxxxxxxxx při xxxxxxxx teplotě.
5.1.2 Roztoky X (interní xxxxxxxx) x X (xxxxxx)
Xx xxxxxxx odstředivky (4.2) xxxxx 5 ml xxxxxxxx X x 5 xx filtrátu X xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (4.2).
5.2 Xxxxxxx
Xxxxxxxx x xxxxxxxx X, X x X 5 xx xxxxxxxx xxxxx (3.6) x x xxxxxx xxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxxx (3.7). Zazátkujte xxxxxxx a silně xxxxxxxxxxx 5 xxxxxx. Xxxxxxxx stát xxxxx xxxxxx a xxxxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxx trubice xxxxxxxx 5 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx 25 ml xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx (3.10) a homogenizujte (= xxxxxxxx T, X a X).
5.3 Xxxxxx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx měření xxx xxxxxx xxxxx, xxx xxxxxx dává xxxxxxxxxx optimální xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx trichrómu. Xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx 365 xx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxx extraktu X. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx X x X.
6. Xxxxxxx výsledků
Obsah xxxxxxxx x xx/xx xxxxxx xx xxx xxxxxxx:
x · x / (x-x) x
xxx:
x = xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx X (interní xxxxxxxx);
x = xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx X (xxxxxx);
x = váha xxxxxxxxxxx vzorku v x;
x = xxxxxxxx xxxxxxxx x μx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx standard).
Opakovatelnost
Rozdíl xxxx výsledky xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x stejného xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
10 % xxxxxxxxx hodnoty u xxxxxx xxxxxxx než 500 xx/xx a
5 % rel. u xxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxx xxxxxxx xxx 500 xx/xx.
3. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXXXXXX XXXX (XXXXXXX X)
1. Účel x xxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx celkové xxxxxxxx xxxxxxxx askorbové a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (vitamín X) v xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx. Xxxxx detekce xx 5 xxx. Produkty xxxx xxxxxxxx xx xxxx skupin xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx obsahu xxxxxxxx X:
Xxxxxxx X: xxxxxx xxxxx xxx 10 g/kg;
Skupina X: xxxxxx rovnající xx xxxx větší xxx 10 g/kg.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx fáze xx xxxxxxxx xxxxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxx, xxx byla xxxxxxxx askorbová xxxxxxxxx xx kyselinu xxxxxxxxxxxxxxxxx, x xxxxx xxxxxxxx 2,4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx. Vzniklý hydrazon xx extrahován xxxxx xxxxx acetátu, ledové xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxxx xxxxxxx xx sucha x xxxxxx rozpuštěn xx zředěné xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx hustota xxxxxxx xx měřena xxxxxxxxxxxxxxxxx xxx 509 xx.
X xxxxxxxx xxxxxxx X je xxxxxxx xxxxxx x kolonové xxxxxxxxxxxxxx dále xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Xxxxxxxxxx
3.1 Standardní xxxxxx 0,05 % kyseliny X-xxxxxxxxx: xxxxxxxxx 50 xx kyseliny X-xxxxxxxxx x.x. v xxxxxxxxx 20 ml xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2) x xxxxxxx xx xxxxxx 100 ml xxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
3.2 10 % (xxxxxx vzhledem x objemu) xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx: xx xxxxx rozmělnění x xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx 200 g xxxxxxxx metafosforečné x.x. x xxxxxxx xx 2000 xx vodou. Xxxxxxxxx xxx 4oC. Xxxxxx xx xxxxxxxx xx dobu xxxxxxx xxxxx.
3.3 Xxxxxxxxxx p.a.
3.4 0,5 % (xxxxxx xxxxxxxx x objemu) xxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxx p.a. Xxxxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxxx.
3.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (X. a X. x. 121 xxxx xxxxxxxxxx)
3.6 2 % xxxxxx xxxxxx (xxxxxx xxxxxxxx x objemu) 2,4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxx 2 x 2,4-dinitrophenylhydrazinu xx 100 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (25 xx kyseliny sírové x.x., x: 1,84, xxxxxx doplněním xx 100 xx xxxxx). Xxxxx roztok, je-li xxxxxxxxx v xxxxxxx, xxxxxx jeden xxxxx.
3.7 Xxxxx xxxx
3.8 Xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3.9 Směs xxxxx xxxxxxx x.x./xxxxxx kyseliny xxxxxx/xxxxxxx p.a.: 96/2/2 xxxxxxxx.
3.10 Směs dichloromethanu x.x./xxxxxx xxxxxxxx octové: 97/3 objemově.
3.11 Xxxxxx xxx, xxxxxxxx xxxxxx: 0,05 xx 0,2 xx.
3.12 Xxxxx silika xxx xxxxxx X xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
3.13 Xxxxxx kyselinu xxxxxxx: xxxxx 105 xx xxxx xx 200 xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx objem xxxxxxxxx xxxxxxx p.a., x: 1,84.
3.14 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxx 75 xx diethyletheru p.a., 25 xx ethyl xxxxxxx x.x. x 4,0 xx 96 % (váhově vzhledem x xxxxxx) kyseliny xxxxxx x.x. Xxxxxxx xx 2 xx 3 chromatogafiích.
4. Xxxxxxxxx
4.1 Xxxxx lázeň xxxxxxxx xxxxxxxxxxx nastaveným xx 20 °C.
4.2 Xxxxxxxxxxx (3500 xx./xxx.) se 40 xx 50 xx xxxxxxxxx vybavenými xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.3 Xxxxxxx xxxxxxx odparka x 250 ml xxxxxxx.
4.4 Skleněné chromatografické xxxxxxx (délka: 100 xx, xxxxxxx xxxxxx: 20 xx), xx xxxxxxxxx xxxxxx (např. Xxxxxxxxx xxxxxxx).
4.5 Spektrofotometr xxxx kolorimetr x xxxxxx x 10ml xxxxxxxx.
4.6 Přístroj xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx se xxxxxx gelovými deskami (3.12) xxxxxxxxx xx xxxxxxx 0,5 xx 0,6 xx. (Xxxxxx xxxx již vyrobené xxxxx.) Xxxxx desky xx 2 a xxx xx 3 xxxxxx v xxxxxxx xxx 120 až 130 °X. Nechejte xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx x exsikátoru xx xxxxxxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxxx.
4.7 Xxxxxxx nastavená xx 120 xx 130 °X.
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxx
Xx xxxxx xx xxxx 250 ml odměrných xxxxx (se skleněnými xxxxxxxxxxx zátkami) X x B vložte xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 200 μg xxxxxxxx C. Xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx X, 0,4 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.1) x promíchejte xxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx).
Xxxxxxxx xx každé xxxxx 30 xx chloroformu (3.3) x 25 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2) xxx 4 °X. Krátce xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx 10 xx 15 minut. Přidejte 25 ml xxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, silně xxxxxxxxxxx xx 10 xxxxxx x xxxxxxxx xxxx 10 až 15 minut ve xxxxx xxxxx (4.1). Xxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx je popsáno xxxx, x vodních xxxxxxxx X (xxxxxxx xxxxxxxx) a B.
5.2 Xxxxxxx
Xx použití xxxxxx xxxxxxxx 40 xx xxxxxxx xxxxxxx supernatantu (xxxxx xxxxxxxx) xxxxxxxxx x 5.1 xx xxxxxxx trubice vybavené xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx 0,5 až 1 xx xxxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxx (3.4) a xxxxxxxxxxx. Vytvoří se xxxxxxx zbarvení, které xx mělo přetrvat xxxxxxx 15 xxxxx. Xxxxx přidejte xxxxxxxxx 300 mg xxxxxxxxx xxxxxxx (3.5), protřepejte x xxxxxxxxx přes xxxxx xxxxxxxx filtr. Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xxxxx.
5.3 Xxxxxx x 2,4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx hydrazonu
Za použití xxxxxx xxxxxxxx 10 xx xxxxxxxx získaného x 5.2 do xxxxxxx xxxxxxxxxxx (4.2), xxxxxxxx 2 xx xxxxxxx 2,4-dinitrophenylhydrazinu (3.6) x xxxxxxxxxxx. Zaveďte xxxxxx xxxxx dusíku (3.7) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (3.8) xx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx xx xxxxxxxxx 15 xxxxx (přes noc) xx xxxxx xxxxx (4.1).
Xxxxx xxxxxxxx 3 xx xxxx, 20 xx směsi ethyl xxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx octové/acetonu (3.9) a přibližně 800 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.5). Xxxxxxxxxx xxxxxxx, silně xxxxxxxxxxx xx xxxx 30 xxxxxx a odstřeďte. Xx lahve xxxxxxx xxxxxxxx 15 ml xxxxxxxxxxxx x za xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (4.3), xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx zbytek. Rozpusťte xxxxxx ve 2 xx xxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxxxx kyseliny octové/acetonu (3.9) xx xxxxxx xx 50 °C, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx 10 ml směsi xxxxxxxxxxxxxxx/xxxxxx kyseliny octové (3.10) x xxxxxxxxxxx.
5.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) do xxxxxx 30 xx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.10). Suspendujte (xxxxx protřepávaje) 5 x xxxxxx xxxx (3.11) xx 30 xx xxxxx dichloromethanu/ledové xxxxxxxx octové (3.10); xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx x xxxxx stlačte xxx dusíkem (3.7) xxx nízkém xxxxx. Xxxxxxxx xx trubice xxxxxx získaný x 5.3, vypláchněte xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.10) a přelijte xx trubice, xxxxx xxxxxxx trubici směsí (3.10) x pokračujte xx vyplachování xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (3 xx 4 dávky xxxxxxxxx 5 xx), xxxxx není xxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx eluátu, xxxxx xx zbarven žlutě.
Eluujte xxxxxxxxxxxx xxxx na xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx (3.9), xxxxxxxx xxxxx x odpařte xx xxxxx.
5.4.1 U xxxxxxxx xxxxxxx X (xxxxx vitamínu X xxxxx než 10 x/xx), xxxxxxxxx xxxxxx xx 2,0 xx xxxxx ethyl xxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx (3.9) x ihned xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xxx xx uvedeno x 5.5.
5.4.2 X xxxxxxxx xxxxxxx B (xxxxx xxxxxxxx C xx xxxxx nebo xx větší xxx 10 g/kg), xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx 4,0 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.13), xxxxx xxxxxxxxxxx, xxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxx x 5.6.
5.5 Xxxxxxxxxxxxxx xx tenké xxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx 0,5 xx roztoku xxxxxxxxx x 5.4.4 v xxxxx xxxx xx xxxxxxxx (4.6). Xx xxxxxxx extrakčního rozpouštědla (3.14) xxxxxxxxx po xxxxxxx 20 xxxxx x xxxxx vyplněném xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx. Nechejte xxxxx xxxxxxx. Označte hranice xxxxxx xxxx, seškrabejte xxxx špachtlí a xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.4).
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx 2 xx a xxxxxxx 1,5 xx xxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx (3.9). Xxxxxxx eluát do xxxx xxxxx (xxxxxxxx xxx xxxx být xxxxxxxx). Xxxxxxx xx xxxxx, ošetřete xxxxxxxx xxxxxx 4,0 ml xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.13), xxxxx protřepejte, xxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
5.6 Xxxxxx optické hustoty
Změřte xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxx 509 nm 20 xx 30 xxxxx po xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx. Proveďte měření xxxxxxxxxx xx zředěnou xxxxxxxxx xxxxxxx (3.13).
5.7 Xxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx použití xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxx xxxxxx.
6. Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx X xx xxxxxx x x xx xx xx dán poměrem:
(c – x) · 2 / (x – c) · 10x
xxx:
x = optická xxxxxxx slepého xxxxxx;
x = optická hustota xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx;
x = optická xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx;
x = xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx mezi xxxxxxxx dvou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx vzorku xxxxx xxxxxxxxx:
10 % xxx. x xxxxxx xxxxxxxx X nižších než 10 x/xx a
5 % xxx. x xxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxx xxxxxxx xxx 10 g/kg.
[1] 1 XX = 0,3 μx retinolu.
[2] X xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxx xxxxxxx, zdvojnásobit xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx x druhém xxxxxxxx bodu 5.2.
[3] Xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx atmosféře.
[4] Obsah xxxxxxxx může xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx při 450 xx; X 1% / 1xx = 2600.