Xxxxxx Xxxxxxxx Xxxxxx
xx xxx 5. prosince 1972,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx metody Společenství xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx
(73/46/XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Smlouvu x založení Evropského xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x ohledem xx xxxxxxxx Xxxx xx dne 20. xxxxxxxx 1970 x xxxxxxxx metod xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [1], xx xxxxx xxxxxxxx 72/275/EHS xx xxx 20. xxxxxxxx 1972 [2], x xxxxxxx xx xxxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x tomu, xx xxx směrnice xxxxxxxx, xxx byly oficiální xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx metod Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx za xxxxxx kontroly xxxxxxx xxxxxxxxx stanovených xxxxxxx, xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx xxxxxxxx 71/250/XXX xx xxx 15. xxxxxxxx 1971 [3], 71/393/XXX xx xxx 18. xxxxxxxxx 1971 [4] x 72/199/EHS xx xxx 27. xxxxx 1972 [5] xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx; xxxxxxxx k xxxx, xx postup prací xx té xxxx xxxx xxxxxxx přijmout xxxxxxx sérii xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, že xxxxxxxx xxxxxxx v xxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx se xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx;
XXXXXXX TUTO XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Členské státy xxxxxxx, aby xxxx xxxxxxx xxx oficiální xxxxxxxx xxxxx, co xx týče xxxxxx xxxxxx vlhkosti x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx x olejů x obsahů xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx x krmivech, xxxxxxxxx xxxxx xxxxx popsaných x xxxxxxx X xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx 1 (xxxx) xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 71/250/XXX xx dne 15. xxxxxx 1971 xx xxxxxxxx i xx xxxxxx popsané x příloze X xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 2
Členské xxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xx xx xxxx jejich xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx X), xxxxxxxx (aneurin, xxxxxxx X1), xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx kyseliny (xxxxxxx X), xxxxxxxxx xxxxx xxxxx popsaných x xxxxxxx XX xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx 1 (xxxx) přílohy xxxxx xxxxxxxx Xxxxxx x. 71/250/XXX xx xxx 15. xxxxxx 1971 se, x xxxxxxxx xxxxx týkající xx xxxxxxxx xxxxxx, xxx má být xxxxxxxxxx, xxxxxxxx x xx xxxxxx xxxxxxx x příloze XX xxxx xxxxxxxx.
Článek 3
Členské xxxxx xxxxxx x účinnost xxxxxx a správní xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx souladu x xxxxx xxxxxxxx nejpozději xx 1. xxxxx 1974. Xxxxxxxxxx x xxxx uvědomí Xxxxxx.
Xxxxxx 4
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X Xxxxxxx dne 5. xxxxxxxx 1972.
Xx Xxxxxx
X. X. Mansholt
předseda
[1] Xx. věst. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Xx. xxxx. X 171, 29.7.1972, x. 39.
[3] Xx. xxxx. X 155, 12.7.1971, x. 13.
[4] Xx. xxxx. X 279, 20.12.1971, x. 7.
[5] Xx. xxxx. X 123, 29.5.1972, x. 6.
XXXXXXX X
1. XXXXXXXXX XXXXXXXX V ŽIVOČIŠNÝCH X XXXXXXXXXXX TUCÍCH X XXXXXXX
1. Xxxx x rozsah
Tato xxxxxx xxxxxxxx stanovit obsah xxxx x těkavých xxxxx x xxxxxxxxxxx x rostlinných xxxxxx x xxxxxxx.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx 103 °X. Xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx
3.1 Xxxxx x xxxxxxx dnem x xxxxxxxxxxx materiálu, 8 xx 9 xx v průměru x xxxxxxxxx 3 xx xxxxxx.
3.2 Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx přibližně xx 80 °X xx nejméně 110 °X, x přibližně 10 cm xxxxxx.
3.3 Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx varná plotýnka.
3.4 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx činidlo.
3.5 Xxxxxxxxxx xxxx.
4. Xxxxxx
Xxxxxxx s xxxxxxxxx na xx xxxxxxxxx 20 x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx, xxxxxxxx xxxxx (3.1) x xxxxxxxxxx (3.2). Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx (3.3) za xxxxxxx xxxxxxx teploměrem tak, xxx xxxxxxx xxxxxxx 90 °C během xxx 7 xxxxx.
Xxxxxx xxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxx, se xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxx misky. Teplota xxxxx xxxxxxxxx 105 °X. Xxxxxxxxxx x xxxxxxx ode xxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxx tvořit xxxxxxx.
Xxx xxxx xxxxxxxxx úplné xxxxxxxxxx xxxxxxxx, zahřejte xxxxxxxxxx na 103 °X ± 2 °X, xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx na 93 °X. Xxxxx xxxxxxxx vychladnout xx xxxxxxxxx teplotu x xxxxxxxxxx (3.4) x xxxxxx. Opakujte tuto xxxxxxx, dokud ztráta xxxxx mezi dvěma xxxxxxxx již nepřekračuje 2 mg.
Poznámka:
Vzestup xxxxxxxxx xxxxxx po opakovaném xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx, v xxxxxxx xxxxxxx počítáme výsledek x vážení provedeného xxxxxxxx xxxx xxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.
5. Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx, jako xxxxxxxx vzorku, je xxx následující rovnicí:
(M1 – X2) · 100 / Xx
xxx:
Xx = xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx;
X1 = hmota xxxxx x obsahem x xxxxxxx před ohřevem;
M2 = hmota xxxxx x xxxxxxx x xxxxxxx xx ohřevu.
Výsledky xxxxx xxx 0,05 % xx musejí xxxxxxxxxxxx jako "xxxxx xxx 0,05 %".
Opakovatelnost
Rozdíl xx vlhkosti xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 0,05 % x absolutní xxxxxxx.
2. XXXXXXXXX XXXXXXX
— atomovou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx —
1. Xxxx x pole xxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x krmivech. Xx xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx 5 %.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx je xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Pokud xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx chlorovodíkové. Xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx atomovou xxxxxxxxx spektrofotometrií při xxxxxx délce 285,2 xx.
3. Xxxxxxxxxx
3.1 Kyselina xxxxxxxxxxxxxx x.x. x: 1,16.
3.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x.x. x: 1,19.
3.3 Xxxxxxxxx pásek xxxx xxxx, xxxx XxXX4 7H2O, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx.
3.4 Xxxxxx xxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xxxx dusičnan) 2,5 % (76,08 x XxXx2 6H2O x.x., xxxx 60,38 x Xx(Xx3)2 x.x.).
3.5 Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx: xxxxxxx x xxxxxxxxx xx mg 1 x xxxxxxx (3.3), x kterého xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx vrstva, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (10,143 x) MgSO47H2O (3.3). Xxxxxx do 1000 xx xxxxxxx baňky, xxxxxxxx 80 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.1), xxxxxxxx rozpustit x xxxxxxx do 1000 xx vodou. 1 xx xxxxxx roztoku xxxxxxxx 1,000 xx xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxx, xxxxxxxxx nebo porcelánové xxxxxxxxx kelímky.
4.2 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx muflová xxx.
4.3 Xxxxxxx absorpční xxxxxxxxxxxxxxx.
5. Postup
5.1 Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx
5.1.1 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx látek
Odvažte x xxxxxxxxx xx xx 5 g xxxxxx xx 500 xx xxxxxxx xxxxx x 250 xx 300 xx xxxx. Xxxxxxxx 40 ml xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.1), uveďte xx varu x xxxxxxxx kapalinu xxx xxxxxx xxxx xx xxxx 30 xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, doplňte xxxxx xx xxxxx, xxxxxxxxxxx x přefiltrujte xx suché xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx prvních 30 xx filtrátu. X xxxxxxxxxxx křemíku xxxxxxxxx 5 g xxxxxx v dostatečném xxxxxxxx (15-30 xx) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2), xxxxxxx xx xxxxx xx vodní lázni x xxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x 105 °X. Pokračujte, jak xx xxxxxxx xx xxxxx věty v 5.1.2.
5.1.2 Xxxxxx složená xxxxxxxx x minerálních xxxxx
Xxxxxxx s xxxxxxxxx xx xx 5 x xxxxxx xx xxxxxxx x zpopelněte xxx 550 °X x xxxxxxx xxxx, xxxxx není xxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxx do xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (15-30 xx) xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2), odpařte xx sucha xx xxxxx lázni x xxxxxx xx xxxxx xxxxxx do xxxxxxx x 105 °X. Xxxxxx xxxxxxxxx 10 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.1) a převeďte xx 500 xx xxxxxxx baňky xx xxxxx xxxxx xxxx. Xxxxxxxx vychladnout x xxxxxxx na xxxxx xxxxx. Promíchejte x xxxxxxxxxxxx xx suché xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx 30 xx xxxxxxxx.
5.1.3 Krmiva xxxxxxx xxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxx
Xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xx 5 x xxxxxx xx xxxxxxx x zpopelněte xxx 550 °X x xxxxxxx peci, xxxxx xxxx získán xxxxx, xxxxx je xxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx 5 xx xxxxxxxx chlorovodíkové (3.2), odpařte xx xxxxx na vodní xxxxx a xxxxxxxx xx jednu hodinu xx xxxxxxx x 105 °X, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx nerozpustnými. Xxxxx xxxxxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.1), xxxxxxxx xx 250 xx odměrné xxxxx xx xxxxx horké xxxx, uveďte xx xxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx skládaný filtr. Xxxxxxx xxxxxxx 30 xx filtrátu.
5.2 Xxxxxx xxxxxxxx absorpcí
Rozředěním xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5) xxxxx xxxxxxxxx nejméně 5 xxxxxxxxxxxx roztoků x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx měření xxxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx do xxxxxxx xxxxxxx 10 xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx (3.4) x xxxxx xxxxxxx objem xx 100 ml xxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx 5.1.1, 5.1.2 nebo 5.1.3 xxx, xx xx xxxxx koncentrace xxxxxxx, xxxxx xx x úrovni limitů xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoků. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 0,4 X. Xxxxxxxx 10 ml xxxxxxx xxxx xxxxxxxx (3.4) x xxxxx xxxxxxx xxxxx xx 100 xx xxxxx. Xxxxxx absorpci roztoku, xxxxx xx xxx xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx při xxxxxx xxxxx 285,2 nm.
6. Xxxxxxx výsledků
Vypočtěte množství xxxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Výsledek vyjádřete xxxx procento vzorku.
Opakovatelnost
Rozdíl xxxx výsledky dvou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 5 % rel.
3. XXXXXXXXX XXXXX XXXXXXXX
1. Xxxx x xxxxxx
Xxxx metoda xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek, xxx xxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx a jsou xxxxxxxxx označeny xxxx xxxxx xxxxxxxx.
2. Xxxxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxx, xxx xx xx třeba, xx xxxxxxxxx postupně vroucími xxxxxxx xxxxxxxx sírové x hydroxidu draselného xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx přítomnosti azbestu, xxxxxxxx, xxxxxx, zvážen x zpopelněn při 900 °C. Xxxxxx xxxx vyplývající xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx vlákniny x xxxxxxxxxx xxxxxx.
3. Xxxxxxxxxx
3.1 Xxxxxxxx sírová 0,26 X.
3.2 Xxxxxxxx xxxxxx: xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx s Xxxxxxxxx kelímkem přibližně 5 xxxxxxx jeho xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (1 xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, x: 1,19 + 3 xxxx xxxx). Xxxxx xxxx xxxxxxxxx 45 xxxxx, nechejte xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxx Buchnerovu xxxxxxx. Xxxxxxxxxx zbytek xxxxxxxx xxxxx, dokud xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x promývací xxxx, x xxxxx acetonem (3.6). Vysušte xxxxxx x xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx 2 xxxxxx xxx 900 °X. Xxxxxxxx vychladnout x xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx láhvi. Tímto xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx splňovat xxxxxxxxx dané v xxxx 5, xxxxx xx xxxx slepého xxxxxx.
3.3 Xxxxxxxxxxx xxxxxx (xx. silikon).
3.4 Roztok xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 0,23 X.
3.5 Kyselina chlorovodíková 0,5 X.
3.6 Aceton.
3.7 Xxxxxxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx
4.1 Kádinky x xxxxxx xxxxxxx 600 xx s xxxxxxxxx úrovně 200 xx.
4.2 Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 80 mm x xxxxxxx x xxxxxxxxx 4 xx xxxxx, xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 32 xxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx o xxxxxxx 4 xx.
4.3 Vakuové xxxxx xxxxxxxx gumovými xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx 2 litry x označením úrovně 800 xx x xxxxxxxxxx xxx skleněné xxxxxxx 120 xx x xxxxxxx.
4.4 Xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx 40 xx x průměru x přibližně 4 xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx uzpůsobenými xxx xxxxx nálevky (4.3), xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 16 xxxxxx, xxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx 4 xx x xxxxxxx xxxxxxxx síťovinou, xxxxxxxx ok xxxxxxxxx 1 xx. Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx.
4.5 Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
4.6 Elektrická xxxxxxx xxx regulovaná xxxxxxxxxxx.
4.7 Xxxxxxxxx.
4.8 Asbestový xxxxx: Xxxxxxxxxxx 2,0 x xxxxxxx (3.2) xx 100 ml xxxx.
Xxxxxxxxx za vakua xxxx filtrační desky xxxxxxx drátěnou síťovinou (4.4) a xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (4.3). Zachyťte xxxxxxx x filtrujte xxxxx jednou xxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx.
5. Xxxxxx
Xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xx 3 x xxxxxx x 2 x xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.2) xx xxxxxxx (4.1), xxxxxxxx 200 ml xxxxxxxx sírové (3.1) x několik xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (3.3). Xxxxxx xxxxxx xx xxxx a nechejte xxxxx xxxxxx 30 xxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx objemu xxxxxxxx xxxxxxx chladícím zařízením xxxx xx 500 xx xxxxx s xxxxxxx xxxx, ve xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx var xxxxxxxx xxxxxxxxx 50 xx studené vody x xxxxxxxxx okamžitě xx xxxxx přes xxxxxx připravený azbestový xxxxx, xxx xx xxxxxxx ve 4.8.
Xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 100 xx xxxxx xxxxx vody, xxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 800 ml. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx (4.1), xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx kotoučem (4.2) xxx xxxxxxxx varu. Xxxxxxxx 200 ml xxxxxxx hydroxidu xxxxxxxxxx (3.4). Uveďte xxxxxx xx varu x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx 30 xxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxx 50 ml xxxxxxx vody x xxxxxxxxxxxx xxxxx za xxxxx přes xxxxxxx xxxxxx připravený xxxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxx xx 4.8. Xxxxxxxxx xxxxxx velmi xxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx (testujte lakmusovým xxxxxxxx), xxxxx 3krát xxxxxxxx (3.6) (přibližně 100 ml acetonu xxxxxx).
Xxxxxxxx xxxxxx kvantitativně xx xxxxxxxxxxx kelímku (4.5), rozdrťte, xxxxx xx xx xxxxxxx, x usušte do xxxxxxxxxx hmotnosti v xxxxxxx při 130 °X.
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx (4.7) x xxxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx (4.6) a nechejte xxxxxxxxx po dobu 30 minut xxx 900 °C. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x exsikátoru (4.7) a rychle xxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxx pokusza xxxxxxx stejného xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.2), xxx xxx xxxxxx. Xxxxxx xxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx 6 x xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx 10 xx.
6. Výpočet xxxxxxxx
Xxxxx xxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx vzorku, je xxx xxxxxxx:
(x-x) · 100 / 3
xxx:
x = xxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx během xxxxxxxxx;
x = xxxxxx xxxx po xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx pokusu.
Opakovatelnost
Rozdíl xxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx provedených x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
0,3 x xxxxxxxxx xxxxxxx u xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx 10 %;
3 % xxx. x obsahů hrubé xxxxxxxx rovných nebo xxxxxxx xxx 10 %.
7. Xxxxxxxx
7.1 Krmiva xxxxxxxxxx xxxx xxx 10 % olejů x xxxx xxxx xxx před analýzou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.7). Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx (3 g x xxxxxxxxx xx xx) xx xxxxxxxxx xxxxx (4.8). Zalijte xxxxxxx xxxxxxxxx 50 xx xxxxxxxxxxxxx (3.7) a xxxxxxx xxxxxxx filtrujte xx xxxxx. Převeďte xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x azbest xxxxxxxxxxxxx xx kádinky (4.1) x pokračujte x xxxxxxx, xxx xx xxxxxxx x xxxx 5.
7.2 Xxxxxx obsahující xxxxx x tuky, xxx nemohou xxx xxxxxxxxxxx xxxxx, musí xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx x 7.1 x xxxxxxxx potom, xx xxxx provedeno xxxxxxx kyseliny xx xxxxxx.
Xxx provedení odtučnění xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (3.6) (100 xx xxxxxx), xxxxx xxxxxxx 50 xx xxxxxxxxxxxxx (3.7). Xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx kádinky (4.1) x xxxxxxxxxx x xxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx bodu 5 (xxxxxxxx xxxxxxxx hydroxidu xxxxxxxxxx).
7.3 Xxxxx jsou xxxxxx bohatá xx xxxxxx (více než 2 % xxxxxxx), xxxxxx testovaný xxxxxx (3 x x xxxxxxxxx xx xx) xx kádinky (4.1) xx 100 ml xxxxxxxx chlorovodíkové 0,5 X (3.5) x xxxxxxxx xxxx v xxxxxxx xx xxxx 5 xxxxx. Přefiltrujte xxxxxxxx x promyjte xxxxxxxx xxxxx. Jako xxxxx xxxxxxxx 2,0 x azbestu xxxxxxxx xxx xxx s xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.6). Xxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xxxxxxx x xxxx 5.
XXXXXXX XX
1. STANOVENÍ XXXXXXXX (VITAMÍN X)
1. Xxxx a rozsah
Tato xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx retinolu (xxxxxxx X) x xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx x premixech. Xxxxx xxxxxxx je 10000 IU/kg xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x 4000 XX/xx xxx xxxxxxx [1]. Xxxxxxxx jsou xxxxxxxxx xx xxxx skupin, xxxxx jejich předpokládaného xxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxxxx X: xxxxxx nižší než 200000 XX/xx;
Xxxxxxx X: xxxxxx xxxxxxxxx se xxxx xxxxx než 200000 XX/xx.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx hydrolyzován za xxxxx roztokem xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x ethanolovém xxxxx a xx xxxxxxxxxxx antioxidantu nebo x xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx je xxxxxxxxxxx 1,2-xxxxxxxxxxxxxx. Extrakt xx xxxxxxx xx sucha x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xx koloně oxidu xxxxxxxxx (x xxxxxxxx xxxxxxx B xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx). X produktů xxxxxxx X xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxx 610 xx xx xxxxxxxxx barevného xxxxxxxx xxxxx Xxxx-Xxxxxxxx xxxxxx; x xxxxxxxx skupiny X xxxxxxxxxxxxxxxxxxx v XX xxxxxxx xxx 325 xx.
3. Xxxxxxxxxx
x) xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx A x B
3.1 96 % (X/X) xxxxxxx.
3.2 10 % (xxxxxx xxxxxxxx x objemu) xxxxxx askorbanu xxxxxxx x.x. nebo
3.3 čištěný xxxxx.
3.4 50 % (xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx) xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x.x.
3.5 1 X xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x.x.
3.6 0,5 X xxxxxx hydroxidu xxxxxxxxxx x.x.
3.7 1,2-dichlorethan x.x.
3.8 Xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxx: 30–50 °X. Xxxxx xx xx xxxxxxx, přečistěte následujícím xxxxxxxx: xxxxxxxx 1000 xx xxxxxxxxxxxx se 20 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx, xxxxx zůstává xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx petrolether xxxxxxxx 500 xx xxxx, xxxxxxx 250 xx 10 % (xxxxxx xxxxxxxx k xxxxxx) xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx 500 xx xxxx. Xxxxxxxxx vodnatou xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxx po xxxx 1 hodiny xxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx.
3.9 Xxxx hlinitý, xxxxxxxxxxxxxxx xxxxx Brockmanna: xxxxxxx xx dobu 8 xxxxx při 750 °X, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx skleněnou xxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx: xx lahve x hnědého xxxx xxxxxx 10 g xxxxx xxxxxxxxx x 0,7 xx xxxx, xxxxxxxx zátkou, zahřívejte xx xxxx 5 xxxxx x xxxxx x xxxxxx vodou xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Ověřte xxxxxxxx xxxxx připraveného xxxxxxx xxxxxx známého xxxxxxxx retinolu (3.17) (xxx 500 XX) xxxxx xxxxxxx uvedeného x 5.3 x 5.4 x xxxxxxxxxx xxxxxx.
3.10 Xxxxxxx oxid xxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxx 1 (Xxxxx, Merck xxxx xxxxxxxxxxxx).
3.11 Xxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx x stopy xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxx oxidu xxxxxxxxx (3.10). (25 x xxxxx xxxxxxxxx xx 250 xx xxxxxxxxxxxxx.)
3.12 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.8) xx 4, 8, 12, 16 x 20 % (X/X) xxxxxxxxxxxxx (3.11).
3.13 0,5 xxx/x xxxxxx síranu xxxxxxx x 70 % (X/X) glycerinu xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x.x.
x) xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx A
3.14 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x.x.
3.15 Xxxxxxxxxx x.x. Xxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx a xxxxx xxxx chromatograficky xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (3.10) (50 x xxxxx xxxxxxxxx xx 200 xx xxxxxxxxxxx; xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx 50 xx xxxxxx xxxxxxx).
3.16 Xxxx-Xxxxxxxx činidlo: xxxxxxxx xxxxxxxxx 25 x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x.x. (udržujte v xxxxxxxxxx) xx 100 xx xxxxxxxxxxx (3.15), xxxxx není roztok xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nečiní xxxxxxx. Přidejte 2 xx xxxxxxxxxxxxxx p.a. Xxxxxxxx x xxxxxxxxxx x láhvi x xxxxxxx xxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
3.17 Xxxxxxx – xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx.
x) xxxxxxx výlučně xxx xxxxxxx produktů xxxxxxx X
3.18 Xxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx
4.1 Xxxxx xxxxx.
4.2 Xxxxxxx odparka x kulatými xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx.
4.3 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxx: 300 mm; xxxxxxx průměr: okolo 13 mm).
4.4 Spektrofotometr x 10xx xxxxxxxx. Xxxxxx x oblasti XX vyžadují křemenné xxxxxx.
4.5 XX xxxxx xxxxxx xxx 365 xx.
5. Postup
Poznámka:
Všechny xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx světlo, xxxxx xx to xxxxxxx, v xxxxxxxx x hnědého xxxx.
5.1 Xxxxxxxxx xxxxxx
X xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx retinolu, takto:
0,1–1,0 x pro xxxxxxxxxxx (xxxxxx xxxxx než 20000 XX/x);
3,0–5,0 x xxx xxxxxxx (xxxxxx xxxx 400 x 20000 XX/x);
10–20 x xxx xxxxxxxxx xxxxx;
30 x pro xxxxxxxx xxxxxxx X.
Xxxxx umístněte xxxxxxxxx vzorek do 500 ml láhve xx skleněnou zábrusovou xxxxxx.
5.2 Xxxxxxxxx x xxxxxxxx [2]
Xxxxxxxx postupně x xxxxxxxxxxx xxxxxx 40 ml ethanolu (3.1), 2 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.2) [3], 10 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.4) x 2 ml roztoku xxxxxx sodného (3.13).
Xxxxxxxxxx xx xxxx 30 xxxxx xxx 70-80 °X xxx xxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxx. Přidejte 50 ml ethanolu (3.1) x 100 xx 1,2-xxxxxxxxxxxxx (3.7) (xxxxxxxxxxx xxxxxxx). Xxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx supernatant xx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx nádoby 150 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.5), xxxxxxxxxxx po xxxx 30 xxxxxx x xxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxx odděleny. Xxxxxxxx xxxxxx dichlorethanu (xxxxxx xxxxxx) xx xxxxxxxxxx xxxxxx, přidejte 40 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.6), xxxxxxxxxxx xx xxxx 10 xxxxxx a xxxxxxxx stát, xxxxx xxxxxx vrstvy xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx 6–8 xxxx 40 xx xxxxxxx xxxx, dokud xxxx odstraněna xxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxxx xxxx). Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx poslední stopy xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxx alikvotní xxxx xxxxxxx xx xxxxx x xx xxxxx xxxxx při 40 °C. Rychle xxxxxxxx zbytek 5 xx petroletheru (3.8).
Xxx xxxxxxxx skupiny A xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x 5.3.1.
Xxx xxxxxxxx xxxxxxx X xxxxxxxx xxxxxx do 50 xx xxxxxxx xxxxx, doplňte xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.8), xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx hustotu, xxx xx xxxxxxx v 5.4.2.
5.3 Xxxxxxxxxxxxxx
5.3.1 Xxxxxxxx xxxxxxx X
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.3) do xxxx 200 xx 10 x oxidu xxxxxxxxx (3.9) xxxxxx xxxxxxxxxxxx x petroletherem (3.8). Xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x 5.2 a xxxxx přidejte 20 xx xxxxxxxxxxxx (3.8). Xxxxxxxxx postupně 10 xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx petroleje ve 4, 8, 12, 16 x 20 % xxxxxxxxxxxxx (3.12) xx xxxxx xxxx xxxxxxxxxx vakua, úroveň xxxxxxx je 2 xx 3 kapky xx vteřinu.
Nejdříve je xxxxxxxxx xxxxxxx [4]. Xxxxxxx je obecně xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 20 % xxxxxxxxxxxxx (3.12). Xxxxxxxxxx xxxxxxx za XX xxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx výbojkou). Xxxxxxxxxxxxx zóna xxxxxxxx xx xxxxx oddělena xx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx shromážděte xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
5.3.2 Xxxxxxxx xxxxxxx X
Xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx měření xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx v 5.4.2 xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx v 5.4.2.
Xxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xx chromatografické kolony xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, získaného x 5.2, xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 500 XX xxxxxxxx, x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x 5.3.1.
5.4 Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx
5.4.1 Xxxxxxxx xxxxxxx A
Odpařte xx xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx retinol xxxxxxx x 5.3.1. Xxxxxxxx zbytek 2 xx xxxxxxx (3.14). Xxxxxxxx 0,3 ml xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx 3 xx Xxxx-Xxxxxxxx činidla (3.16). Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx spektrofotometrem při 610 xx xxxxxx 30 xxxxxx poté, xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx retinolu xxxxxxx xx standardní xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx roztoků o xxxxxxxxxxxxx standardních xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx ošetřených Xxxx-Xxxxxxxxx xxxxxxxx (2 xx 16 IU xxxxxxxx-xxxxxxxx (3.17) xx 0,3 xx benzenu (3.14) + 3 xx Xxxx-Xxxxxxxx xxxxxxx (3.16)). Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx standardu a xxxxxxx připraveného roztoku Xxxx-Xxxxxxxx xxxxxxx.
5.4.2 Produkty xxxxxxx B
Odeberte xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx x 5.2, xxxxxxxxxxxx přibližně 200 IU retinolu. Xxxxxxx do sucha xx xxxxx x xxxxxxxx xxxxxx 25 xx xxxxxxxxxxxx (3.18) Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx xxx 325, 310 x 334 xx. Xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx 325 xx. Xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xx vypočítá xxxxxxxxxx:
X325 · 18,30 = IU xxxxxxxx/xx
Xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx
X310 : X325 x X334 : X325
xxxx xxx 6 : 7 = 0,857.
Xxxxx xx jeden x xxxxxx poměrů xxxx xxxxxxxx od xxxx xxxxxxx (&xx; 0,830 xxxx &xx;0,880), musí xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx chromatografie v xxxxxxx x metodou xxxxx x 5.3.2. Xxxxx měření optické xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx, xx xx uvedený xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx 0,857 (&xx; 0,830 xxxx &xx; 0,880), musí xxx stanovení xxxxxxxxx x xxxxxxx s xxxxxxx xxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxx X.
6. Xxxxxxx výsledků
Vypočítejte xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx v úvahu xxxx testovaného vzorku x xxxxxx provedená xxxxx analýzy. Xxxxxxxx xxxxxxxxx v IU xxxxxxxx na xx xxxxxx xxxx na xx koncentrátu xxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx výsledky xxxx paralelních xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx překročit:
- 20 % xxx. x xxxxxx retinolu xxxxxxx xxx 75000 XX/xx,
- 15000 XX x xxxxxx mezi 75000 x 150000 XX/xx,
- 10 % xxx. x xxxxxx xxxx 150000 x 250000 IU/kg,
- 25000 XX x xxxxxx xxxx 250000 x 500000 XX/xx,
- 5 % rel. x xxxxxx větších než 500000 IU/kg.
2. STANOVENÍ XXXXXXXX (VITAMÍN X1, XXXXXXX)
1. Účel a xxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx thiaminu (xxxxxxxx, xxxxxxxx B1) x xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx x premixech. Limit xxxxxxx xx 5 xxx.
2. Princip
Roztok xx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx enzymaticky xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx fluorimetricky.
3. Xxxxxxxxxx
3.1 Standardní xxxxxx xxxxxxxx 100 μg/ml: xxxxxxxxx 112,3 xx xxxxxxxx-XXX, xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxx xxxx, x 1000 xx 0,2 X xxxxxxxx xxxxxx (3.2). Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxx x tmavém xxxxx, xx upotřebitelný xx dobu jednoho xxxxxx.
3.2 0,2 X xxxxxxxx xxxxxx.
3.3 Xxxxx xxxxxxxx xxxxx.
3.4 20 % (xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx) roztok xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x.x.
3.5 25 % (váhově xxxxxxxx x xxxxxx) xxxxxx xxxxxxxxx draselného x.x.
3.6 Xxxxxxxx xxxx: xxxxxxxxx 2 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.4) se 48 xx xxxxxxx hydroxidu xxxxxxxxxx (3.5). Xxxx xxxx xx upotřebitelná xxx 4 xxxxxx.
3.7 Xxxxxxxxxx p.a.
3.8 2,5 X xxxxxx octanu xxxxxxx.
3.9 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx proteázu, xxxxxxxxx x xxxxxxx (xxxx. xxxxxxx).
3.10 96 % (X/X) ethanol.
4. Xxxxxxxxx
4.1 Xxxxx lázeň.
4.2 Xxxxxxxxxxx (3500 xx./xxx.) se 3 až 50 xx trubicemi xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zátkami.
4.3 Xxxxxxxxxx.
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx každé xx xxxx 250 xx xxxxxxxxx xxxxx A x B vložte xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 100 μg xxxxxxxx x 125 xx xxxxxxxx xxxxxx (3.2). Xxxxxxxx rovněž, xxxxx xx xxxxx X, 1,0 xx xxxxxxxxxxxx roztoku (3.1) (xxxxxxx xxxxxxxx).
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx je xx vroucí xxxxx xxxxx x xxxxxxxx xx xxx xx xxxx 15 minut x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 45 xX. Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx 20 ml xxxxxxx xxxxxx sodného (3.8) x 0,5 x xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.9), potom nechejte xxxx xx xxxx 20 minut za xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx 20 ml xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (3.8), xxxxxxx xx objem xxxxx, xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxx filtráty X x X xxxx, xx jste xxxxxxxxx xxxxxxx 15 xx. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
5.1.1 Xxxxxxxxxx roztok X
Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (4.2) xxxxx 5 xx filtrátu X x přibližně 10 xx xxxxxxxxx sodného (3.3). Ponořte trubici xx xxxxxx xxxxx xxxxx xx 15 xxxxx x xxxxx xxxxxxxx vychladnout xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
5.1.2 Roztoky X (xxxxxxx standard) x X (vzorek)
Do xxxxxxx odstředivky (4.2) xxxxx 5 ml xxxxxxxx A a 5 xx xxxxxxxx X xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (4.2).
5.2 Xxxxxxx
Xxxxxxxx k roztokům X, A x X 5 xx xxxxxxxx xxxxx (3.6) x o xxxxxx xxxxxxx 10 xx xxxxxxxxxxx (3.7). Zazátkujte xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxx 5 xxxxxx. Xxxxxxxx stát jednu xxxxxx a xxxxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxxx xxxxxx. X xxxxx trubice xxxxxxxx 5 ml xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vrstvy xx xxxxx 25 ml xxxxxxx baňky, xxxxxxx xx objem xxxxxxxxx (3.10) x xxxxxxxxxxxxx (= xxxxxxxx X, X x X).
5.3 Xxxxxx fluorescence
Proveďte xxxxxx xxx xxxxxx xxxxx, xxx kterou xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx odezvu xx xxxxxxxxxxxx trichrómu. Xxxxxxxx při xxxxxxxxx 365 xx.
Xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx za xxxxxxx xxxxxxxx T. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx A a X.
6. Xxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx x xx/xx xxxxxx je xxx xxxxxxx:
x · b / (a-b) x
xxx:
x = xxxxxxxxx fluorescence xxxxxxxx X (xxxxxxx xxxxxxxx);
x = xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx B (xxxxxx);
x = váha xxxxxxxxxxx xxxxxx x x;
x = xxxxxxxx xxxxxxxx x μx xxxxxxxxx x testovanému xxxxxx (interní standard).
Opakovatelnost
Rozdíl xxxx výsledky xxxx xxxxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxx x stejného xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx:
10 % xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxx 500 mg/kg a
5 % xxx. x xxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxx xxxxxxx než 500 xx/xx.
3. XXXXXXXXX XXXXXXXX ASKORBOVÉ X XXXXXXXXXXXXXXXX XXXX (XXXXXXX X)
1. Účel a xxxxxx
Xxxx metoda xxxxxxxx xxxxxxxx celkové xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (vitamín X) x xxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxx x premixech. Xxxxx xxxxxxx je 5 xxx. Produkty xxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx C:
Skupina A: xxxxxx nižší xxx 10 x/xx;
Xxxxxxx B: xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx větší než 10 x/xx.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Vodní xxxx xx ošetřena xxxxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxx, xxx byla xxxxxxxx askorbová xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, x potom xxxxxxxx 2,4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx směsí xxxxx acetátu, xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxx gelu, xxxxxxx xxxxxxx do xxxxx x xxxxxx rozpuštěn xx xxxxxxx kyselině xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx je měřena xxxxxxxxxxxxxxxxx při 509 xx.
X xxxxxxxx skupiny X xx extrakt xxxxxx x kolonové xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
3. Xxxxxxxxxx
3.1 Xxxxxxxxxx xxxxxx 0,05 % xxxxxxxx X-xxxxxxxxx: rozpusťte 50 xx xxxxxxxx X-xxxxxxxxx x.x. x xxxxxxxxx 20 ml xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.2) x xxxxxxx do xxxxxx 100 xx xxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
3.2 10 % (xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx) xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx: po xxxxx rozmělnění x xxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxx 200 x xxxxxxxx metafosforečné x.x. x doplňte do 2000 xx xxxxx. Xxxxxxxxx xxx 4xX. Xxxxxx xx stabilní xx xxxx jednoho xxxxx.
3.3 Xxxxxxxxxx x.x.
3.4 0,5 % (xxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx) xxxxxx 2,6-dichlorophenol-indophenolu p.a. Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
3.5 Xxxxxxxxx xxxxxxx (X. a X. x. 121 nebo xxxxxxxxxx)
3.6 2 % xxxxxx xxxxxx (váhově xxxxxxxx k objemu) 2,4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxx 2 x 2,4-dinitrophenylhydrazinu xx 100 ml xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (25 xx xxxxxxxx xxxxxx x.x., d: 1,84, xxxxxx xxxxxxxxx xx 100 ml vodou). Xxxxx xxxxxx, xx-xx xxxxxxxxx v xxxxxxx, xxxxxx jeden xxxxx.
3.7 Xxxxx xxxx
3.8 Xxxxxxxxx xxxxxxxx.
3.9 Xxxx xxxxx xxxxxxx x.x./xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx x.x.: 96/2/2 xxxxxxxx.
3.10 Xxxx dichloromethanu x.x./xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx: 97/3 objemově.
3.11 Silika xxx, xxxxxxxx xxxxxx: 0,05 xx 0,2 xx.
3.12 Xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx H xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx.
3.13 Xxxxxx kyselinu xxxxxxx: xxxxx 105 xx xxxx xx 200 xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx objem xxxxxxxxx sírovou x.x., x: 1,84.
3.14 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxxx 75 xx xxxxxxxxxxxxx p.a., 25 xx ethyl xxxxxxx x.x. x 4,0 ml 96 % (xxxxxx vzhledem x xxxxxx) xxxxxxxx xxxxxx p.a. Xxxxxxx xx 2 až 3 xxxxxxxxxxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx
4.1 Xxxxx xxxxx vybavená xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 20 °X.
4.2 Xxxxxxxxxxx (3500 xx./xxx.) xx 40 až 50 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.3 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x 250 xx xxxxxxx.
4.4 Skleněné chromatografické xxxxxxx (délka: 100 xx, xxxxxxx průměr: 20 xx), xx xxxxxxxxx xxxxxx (xxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx).
4.5 Xxxxxxxxxxxxxxx xxxx kolorimetr s xxxxxx x 10xx xxxxxxxx.
4.6 Xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (3.12) xxxxxxxxx do xxxxxxx 0,5 xx 0,6 xx. (Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx.) Xxxxx desky xx 2 x xxx až 3 xxxxxx x xxxxxxx xxx 120 xx 130 °X. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxx 24 xxxxx xxxx xxxxxxxx.
4.7 Xxxxxxx xxxxxxxxx xx 120 xx 130 °X.
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxx
Xx xxxxx ze xxxx 250 ml odměrných xxxxx (se xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zátkami) X x X xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 200 μg xxxxxxxx C. Xxxxxxxx, xxxxx do baňky X, 0,4 ml xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.1) x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx).
Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx 30 xx chloroformu (3.3) x 25 xx xxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (3.2) xxx 4 °C. Xxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxx 10 xx 15 xxxxx. Xxxxxxxx 25 ml xxxx, xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx po 10 xxxxxx x nechejte xxxx 10 xx 15 xxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1). Xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxxx fáze xx chloroformové xxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxx xx popsáno xxxx, u xxxxxxx xxxxxxxx X (interní xxxxxxxx) a X.
5.2 Xxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 40 xx xxxxxxx xxxxxxx supernatantu (xxxxx xxxxxxxx) xxxxxxxxx x 5.1 do xxxxxxx trubice xxxxxxxx xxxxxxxxx zábrusovou zátkou. Xxxxxxxx 0,5 až 1 xx xxxxxxx 2,6-xxxxxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxx (3.4) a xxxxxxxxxxx. Vytvoří xx xxxxxxx xxxxxxxx, které xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxx 15 minut. Xxxxx přidejte přibližně 300 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.5), xxxxxxxxxxx x filtrujte přes xxxxx skládaný xxxxx. Xxxxxxx xxxxxx být xxxxx xxxxx.
5.3 Reakce x 2,4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 10 xx xxxxxxxx získaného x 5.2 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx (4.2), xxxxxxxx 2 xx xxxxxxx 2,4-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.6) x xxxxxxxxxxx. Zaveďte xxxxxx proud xxxxxx (3.7) xxxx kysličník xxxxxxxx (3.8) xx xxxxxxx, xxxxxxxxxx trubici x xxxxxxx xx xx xxxxxxxxx 15 xxxxx (xxxx xxx) xx xxxxx lázně (4.1).
Xxxxx xxxxxxxx 3 xx xxxx, 20 xx směsi ethyl xxxxxxx/xxxxxx kyseliny octové/acetonu (3.9) x přibližně 800 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.5). Xxxxxxxxxx xxxxxxx, silně protřepejte xx xxxx 30 xxxxxx x xxxxxxxxx. Xx lahve odparky xxxxxxxx 15 xx xxxxxxxxxxxx x xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx rotační xxxxxxx (4.3), xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx ve 2 xx směsi xxxxx xxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx octové/acetonu (3.9) za ohřevu xx 50 °C, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, přidejte 10 ml xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.10) x xxxxxxxxxxx.
5.4 Xxxxxxxx chromatografie
Naplňte xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) xx xxxxxx 30 ml xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.10). Suspendujte (xxxxx xxxxxxxxxxxx) 5 x xxxxxx xxxx (3.11) xx 30 xx směsi xxxxxxxxxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx octové (3.10); xxxxxxx suspenzi xx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx x xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx (3.7) xxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx xx trubice xxxxxx získaný x 5.3, vypláchněte xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.10) x přelijte xx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxx xxxxxxx směsí (3.10) x xxxxxxxxxx xx vyplachování xxxxxxx xxxxxxx směsí (3 xx 4 dávky xxxxxxxxx 5 ml), xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xxxx eluátu, xxxxx xx zbarven xxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx na xxxxxxx xxxxxxx směsí xxxxx xxxxxxx/xxxxxx kyseliny xxxxxx/xxxxxxx (3.9), xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xxxxx.
5.4.1 X xxxxxxxx xxxxxxx X (xxxxx vitamínu X xxxxx xxx 10 x/xx), xxxxxxxxx xxxxxx xx 2,0 ml xxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx/xxxxxxx (3.9) x xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx vrstvě, xxx xx uvedeno x 5.5.
5.4.2 X xxxxxxxx xxxxxxx B (xxxxx vitamínu C xx xxxxx xxxx xx xxxxx než 10 x/xx), ošetřete xxxxxxxx xxxxxx 4,0 xx zředěné xxxxxxxx xxxxxx (3.13), xxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxx xx xxxxxxx x 5.6.
5.5 Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxx postupy xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Umístněte 0,5 xx roztoku xxxxxxxxx x 5.4.4 x xxxxx čáře xx xxxxxxxx (4.6). Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx rozpouštědla (3.14) xxxxxxxxx po xxxxxxx 20 xxxxx x xxxxx vyplněném xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx růžově xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Označte hranice xxxxxx zóny, xxxxxxxxxxx xxxx špachtlí x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxx trubice (4.4).
Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx 2 xx x xxxxxxx 1,5 xx xxxxx ethyl xxxxxxx/xxxxxx xxxxxxxx octové/acetonu (3.9). Xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxx (xxxxxxxx xxx xxxx xxx xxxxxxxx). Odpařte xx xxxxx, xxxxxxxx olejnatý xxxxxx 4,0 xx xxxxxxx kyseliny xxxxxx (3.13), xxxxx xxxxxxxxxxx, xxx se xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx optickou xxxxxxx.
5.6 Xxxxxx xxxxxxx hustoty
Změřte xxxxxxxx xxxxxxx spektrofotometrem xxx 509 nm 20 xx 30 xxxxx po rozpuštění xxxxxx x kyselině xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.13).
5.7 Xxxxx xxxxx
Xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx postupu, ale xxx xxxxxx.
6. Výpočet xxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxx X xx xxxxxx x x xx xx xx xxx xxxxxxx:
(x – a) · 2 / (x – x) · 10x
xxx:
x = xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx vzorku;
b = xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx;
x = optická xxxxxxx xxxxxxx vzorku;
d = xxxx xxxxxxxxxxx vzorku x xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx mezi xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx u xxxxxxxx vzorku xxxxx xxxxxxxxx:
10 % xxx. x xxxxxx vitamínu X xxxxxxx xxx 10 x/xx x
5 % xxx. u xxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx než 10 x/xx.
[1] 1 XX = 0,3 μx xxxxxxxx.
[2] X xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxx x tendencí xxxxxxxxx xx nebo xxxxxxx, xxxxxxxxxxxx množství xxxxxxxxxx uvedených x xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxx 5.2.
[3] Xxxxxxxx xxxxx nemusí xxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx.
[4] Xxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx měřením xxxxxxx xxxxxxx xxx 450 xx; X 1% / 1cm = 2600.