Xxxxxxxx Komise 98/64/XX
xx xxx 3. xxxx 1998,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Společenství xxx xxxxxxxxx aminokyselin, xxxx a xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxx se xxxx xxxxxxxx 71/393/EHS
(Text x xxxxxxxx pro XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Smlouvu x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx na směrnici Xxxx 70/373/EHS za xxx 20. července 1970 x xxxxxxxx xxxxx odběru vzorků x xxxxxxxxxxxx metod Xxxxxxxxxxxx xxx úřední xxxxxxxx krmiv [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx Aktem x xxxxxxxxxxx Xxxxxxxx, Xxxxxx x Xxxxxxx, x xxxxxxx na xxxxxx 2 uvedené xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx 70/373/XXX xxxxxxx, že úřední xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x právních x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxx metod odběru xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxx Rady 79/373/XXX xx dne 2. xxxxx 1979 x xxxxxxx krmných xxxxx xx trh [2], xxxxxxxxx pozměněná xxxxxxxx Xxxxxx 97/47/ES [3], x xxxxxxxx Rady 93/74/XXX xx xxx 13. září 1993 x xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx účelům xxxxxx [4], naposledy xxxxxxxxx xxxxxxxx 96/25/XX [5], stanoví, xx xxxxx aminokyselin x xxxx xxxx být xxxxxxx na xxxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx k tomu, xx směrnice Xxxx 70/524/XXX xx dne 23. xxxxxxxxx 1970 x xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx [6], xxxxxxxxx xxxxxxxxx směrnicí Xxxxxx 98/19/ES [7], xxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxxxxx musí xxx xxxxxx na označení, xxxxx je xxxx xxxxx xxxxxxx do xxxxxxx směsí;
vzhledem k xxxx, xx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 71/393/XXX xx dne 18. xxxxxxxxx 1971, kterou xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [8], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 84/4/XXX [9], xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx x xxx xxxxxxxxxx xxxxxx tuku; že xx xxxxxx uvedené xxxxxx upravit;
vzhledem x xxxx, že musí xxx stanoveny analytické xxxxxx Společenství xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Stálého xxxxxx pro xxxxxx,
XXXXXXX XXXX SMĚRNICI:
Xxxxxx 1
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, že xxxxxxx xxx úřední kontrolu xxxxxx aminokyselin, xxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx x krmivech se xxxxxxxxx za použití xxxxx uvedených v xxxxxxx této xxxxxxxx.
Xxxxxx 2
X xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 71/393/XXX xx xxx "4. Xxxxxxxxx obsahu xxxx" xxxxxxxxx částí B xxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 3
1. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx předpisy nezbytné xxx xxxxxxxx souladu x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx do 31. xxxxxxxx 1998. Uvědomí x xxxx xxxxxxxxxx Xxxxxx.
Xxxxx xxxx předpisy xxxxxxxx xx 1. xxxxx 1999.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx tuto směrnici xxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxx učiněn xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Způsob xxxxxx xx stanoví členské xxxxx.
2. Xxxxxxx státy xxxxx Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx ustanovení vnitrostátních xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Článek 4
Xxxx směrnice xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx v Úředním xxxxxxxx Xxxxxxxxxx společenství.
Článek 5
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X Xxxxxxx dne 3. xxxx 1998.
Za Xxxxxx
Xxxxx Xxxxxxxx
xxxx Komise
[1] Úř. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Xx. věst. X 86, 6.4.1979, x. 30.
[3] Xx. xxxx. X 211, 5.8.1977, x. 45.
[4] Úř. věst. X 237, 22.9.1993, x. 23.
[5] Úř. xxxx. X 125, 23.5.1996, x. 35.
[6] Xx. věst. X 270, 14.12.1970, x. 1.
[7] Xx. věst. X 96, 28.3.1998, x. 39.
[8] Xx. xxxx. X 279, 2.12.1971, x. 7.
[9] Xx. xxxx. X 15, 18.1.1984, x. 28.
PŘÍLOHA
ČÁST X
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
1. Xxxx x oblast xxxxxxx
Xxxx metoda slouží xx stanovení obsahu xxxxxxx (xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx) a xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxx x xxxxx) xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx aminokyselin. Metoda xx použitelná xxx xxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxx(x)xx, xxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, arginin, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx, histidin, isoleucin, xxxxxx, fenylalanin, prolin, xxxxx, xxxxxxx x xxxxx.
Xxxx metoda xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx aminokyselin x xxxxxx xxxx x aminokyselin rozlišovat xxxx formami X x L. Není xxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx hydroxy xxxxxxx aminokyselin.
2. Princip
2.1 Xxxxx xxxxxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx makromolekuly xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx filtrací. Xxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxx xx pH 2,20. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxx se po xxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx detekcí xxx 570 xx.
2.2 Vázané xxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx proces xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx aminokyselinách. Xxxx(x)xx a xxxxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx oxidovány xx xxxxxxxx cysteovou x xx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx musí xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx neoxidovaných xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx 1 xxxxx být xxxxxxxxxx xxx x xxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx 0 xX směsí kyseliny xxxxxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx činidlo xx xxxxxxx dvojsíranem xxxxxx. Oxidovaný nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx kyselinou xxxxxxxxxxxxxxx (x = 6 xxx/x) xx 23 xxxxx. Hydrolyzát xx xxxxxx na xX 2,20. Aminokyseliny se xxxxxxxx iontoměničovou chromatografií x stanovují xx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 570 xx (440 xx xxx xxxxxx).
3. Xxxxxxx
Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx destilovaná xxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx &xx; 10 μX).
3.1 xxxxxxx xxxxxx, x = 30 %
3.2 xxxxxxxx xxxxxxxx, x = 98–100 %
3.3 xxxxx
3.4 xxxxxxxxx xxxxx
3.5 xxxxxxxx sodný
3.6 xxxxxxxx 5-xxxxxxxxxxxxxxx, dihydrát
3.7 xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x hustotě xxxxxxxxx 1,18 x/xx
3.8 xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx
3.9 2,2-xxxxxxxxxxxxx (thiodiglykol)
3.10 chlorid xxxxx
3.11 xxxxxxxxx
3.12 petrolether, xxx varu 40–60 °X
3.13 norleucin xxxx xxxx sloučenina xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx
3.14 xxxxx – plyn (&xx; 10 xxx xxxxxxx)
3.15 1-oktanol
3.16 xxxxxxxxxxxxx
3.16.1 xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x bodě 1; xxxxx sloučeniny xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxx xx ve xxxxx xxx X2X5 xxxx X2XX4 xxxxx xxxx xxxxxxxx
3.16.2 xxxxxxxx cysteová
3.16.3 xxxxxxxxxxxxxxx
3.17 xxxxxxxx sodný, xxxxxx c = 7,5 xxx/x:
300 g XxXX (3.5) se xxxxxxxx xx xxxx x xxxxxx do 1 xxxxx.
3.18 hydroxid xxxxx, roztok x = 1 xxx/x:
40 x XxXX (3.5) xx xxxxxxxx xx xxxx x xxxxxx xx 1 litru.
3.19 xxxxxx kyseliny mravenčí x xxxxxx:
Xxxxxx xx 889 x kyseliny xxxxxxxx (3.2) se 111 x vody x přidá se 4,73 x fenolu (3.3).
3.20 xxxxxxxxxxxx směs, x = 6 xxx XXx/x s xxxxxxxxx 1 g xxxxxx/x:
X 492 xx XXx (3.7) se xxxxx 1 g xxxxxx (3.3) x xxxxxx se xxxxx xx 1 litru.
3.21 xxxxxxxxx xxxx, x = 6 xxx XXx/x x xxxxxxxxx 2% xxxxxxxxxxxxx:
8,2 ml XXx (3.7) xx xxxxxxx xxxxxxxxx 900 xx vody, přidá xx 20 xx xxxxxxxxxxxxx (3.9) a xxxxxx xxxxx na 1 litr (3.7 x 3.9 xx xxxxx smíchat přímo).
3.22 xxxxxxxx 5-sulfosalicylová, β = 6 %:
60 x kyseliny 5-xxxxxxxxxxxxxxx (3.6) xx rozpustí xx xxxx x xxxxxx xxxxx xx 1 xxxx.
3.23 oxidační xxxx (xxxxxxxx permravenčí – xxxxx):
X malé xxxxxxx xx smíchá 0,5 ml xxxxxxxx xxxxxx (3.1) x 4,5 xx xxxxxxx xxxxxxxx mravenčí x xxxxxxx (3.19); xxxxxxx xx v klidu 1 xxxxxx xxx 20–30 °X, xxx xx utvořila kyselina xxxxxxxxxxx, před xxxxxxxx xx xxxxxx se xxxx xxxxxxx v xxxxx x ledovou xxxxx (15 xxxxx).
Xxxxx:
Xx xxxxx zamezit kontaktu x kůží x xxxxxxxx xxxxxxxx oděv.
3.24 xxxxxxxxxxx xxxxxxx roztok, x = 0,2 xxx Xx+/x, xX 2,20:
X xxxxxxxxx 800 xx xxxx xx xxxxxxxx 19,61 x xxxxxxxxx xxxxxxx (3,8), 5 xx xxxxxxxxxxxxx (3.9), 1 x xxxxxx (3.3) x 16,50 xx XXx (3.7). xX se xxxxxx xx 2,20. Xxxxxx xx xxxxx xx xxxxx 1 xxxxx.
3.25 eluční xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (4.9)
3.26 ninhydrinové xxxxxxx připravované xxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxx (4.9)
3.27 Standardní xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx nutno xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxx 5 °X.
3.27.1 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.16.1), x = 2,5 μxxx/xx xxx každou xxxxxxxxxxxxx x kyselině xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx i xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
3.27.2 zásobní xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx, c = 1,25 μxxx/xx
0,2115 g xxxxxxxx xxxxxxxx (3.16.2) x 0,2265 g xxxxxxxxxxxxxxxx se rozpustí (3.16.3) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx roztoku (3.24) x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xx xx značku xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx roztokem. Xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxx 5 °X nejdéle 12 xxxxxx. Tento xxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.27.1) obsahuje kyselinu xxxxxxxxx x methioninsulfon.
3.27.3 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx vnitřního standardu, xxxx. norleucinu, x = 20 μxxx/xx
0,6560 x xxxxxxxxxx (3.13) xx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (3.24) x xxxxxxx xxxxx xx 250 xx x doplní xx po xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx roztokem. Xxxxxxxx se při xxxxxxx xxx 5 °X xxxxxxx 6 xxxxxx.
3.27.4 xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx s xxxxxxxxxxx, x = 5 xxxx/50 μx kyseliny xxxxxxxx x methioninsulfonu x c = 10 nmol/50 μx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
Xx 100 xx xxxxxxx xx xxxxxxxx 2,2 x xxxxxxxx xxxxxxx (3.10) v 30 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24). Přidají xx 4,00 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx základního xxxxxxx aminokyselin (3.27.1), 4,00 xx zásobního xxxxxxxxxxxx základního xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx (3.27.2) a 0,50 xx zásobního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx standardu (3.27.3), xxxxx xx xxxxxxx. xX xx xxxxxx xx 2,20 xxxxxxxxxx xxxxxx (3.18).
Xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx 50 ml odměrné xxxxx, xxxxxx po xxxxxx citronanovým xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24) x xxxxxxx xx.
Xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxx 5 °X xxxxxxx 3 měsíce.
Viz xxxx xxxxxxxx 9.1.
3.27.5 xxxxxxxxxx xxxxxx standardních aminokyselin xxx použití x xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx podle xxxx 5.3.3.1 a xxx xxxxxxxx (5.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx podle 3.27.4 x xxxxxxxxxx chloridu xxxxxxx.
Xxxxxxxxx při teplotě xxx 5 °X xxxxxxx 3 xxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x pomůcky
4.1 xxxxx s kulatým xxxx o xxxxxx 100 xxxx 250 xx opatřená xxxxxxx xxxxxxxxx
4.2 nádoba x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx o xxxxxx 100 xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx těsněním (xxxx. Xxxxx, Schott) pro xxxxxxx x xxxxxxx
4.3 xxxxxxx x nuceným xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxx ±2 °X
4.4 pH xxxx (xxx xxxxxxxxx xxxxx)
4.5 xxxxxxxxxx xxxxx (0,2 μx)
4.6 xxxxxxxxxxx
4.7 rotační xxxxxxx xxxxxxx
4.8 mechanická xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx
4.9 xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx zařízení XXXX x xxxxxxxxxxxxxx kolonou, xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx derivatizaci x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxxx sulfonovanou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a separaci xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx zajišťují xxxxxxxx xx xxxxxxxx průtoku ± 0,5 % xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx i xxxxxxx vzorku.
Některé analyzátory xxxxxxxxxxxx xx možno xxxxxx x případě, xx hydrolyzát vykazuje xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x = 0,8 xxx/x x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx kyselinu x xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx analyzátory xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx separaci určitých xxxxxxxxxxxx, obsahuje-li xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x/xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx iontů. X xxxxxxx xxxxxxx se xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx pH xxxxxxxxx hydrolyzátu na xxxxx 5 ml. Xxxxxxxx xx má xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx 40 °X.
5. Postup
5.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxx mletím tak, xxx xxxxxx sítem x xxx 0,5 xx. Vzorky s xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxx teplotě xxxxxxxxxxxxx 50 °X nebo xxx zmrazení. Vzorky x vysokým obsahem xxxx xx před xxxxxx extrahují xxxxxxxxxxxxx (3.12).
5.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x krmivech x x xxxxxxxxx
Xx xxxxxxx baňky xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (1–5 g) xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) s xxxxxxxxx xx 0,2 xx x xxxxx xx 100,0 xx xxxxxxxxx xxxxx (3.21). Xxxxx xx xxxxx 60 minut xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xx magnetické xxxxxxxx (4.8). Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx 10,0 xx xxxxxxxxxxxx xx kádinky x xxxxxx 100 xx.
Xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx 50 xx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xx x míchání xx magnetické míchačce xxxxxxx 5 minut. Xxxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxx odstředí xxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. 10,0 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx přenese xx xxxxxxx x obsahu 100 xx, xX xx xxxxxx xx 2,20 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.18), xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx roztoku (3.24) xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24).
Xxxxxxx-xx xx xxxxxxx standard, xxxxx xx 1,00 xx xxxxxxxxx standardu (3.27.3) xx xxxxxxx 100 xx odstředěného xxxxxxx x potom xx xxxxxx po xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24).
Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx bodu 5.4 – xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx-xx extrakty xxxxxxxxxx xxx xxx, xxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxx 5 °X.
5.3 Xxxxxxxxx celkových xxxxxxxxxxxx
5.3.1 xxxxxxx
0,1 až 1 g xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxxxx s xxxxxxxxx 0,2 xx:
- do xxxxx x xxxxxxx xxxx x obsahu 100 xx (4.1) xxx xxxxxxxxx hydrolýzu (5.3.2.3) xxxx
- xx xxxxx x xxxxxxx xxxx x xxxxxx 250 xx (4.1), xxxxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx nebo
- xx xxxxxx o xxxxxx 100 ml xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.2) (pro uzavřenou xxxxxxxxx 5.3.2.4).
Xxxxxxxx část xxxxxx by xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxx 10 mg x obsah vlhkosti xxxxxxxxxxxxx 100 xx.
Xxxxx/xxxxxx xx xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx na 0 °X, xxxxx xx xxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxxx (3.23) x promíchá xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx/xxxxxx xx xxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x vloží xx x x xxxxx s xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx 0 °X x ponechá xx xxx 16 hodin. Xx 16 xxxxxxxx xx xxxxx z xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx 0,84 x xxxxxxxxxx sodného (3.4).
Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.1.
5.3.2 hydrolýza
5.3.2.1 xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorků
K xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx 5.3.1 xx xxxxx 25 ml xxxxxxxxxxxx xxxxx (3.20) xxx, aby xxxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx nádoby xxx xx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx postupu xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx podle 5.3.2.3 xxxx 5.3.2.4.
5.3.2.2 xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorků
Do xxxxx x kulatým xxxx o xxxxxx 100 xx nebo 250 xx (4.1) xxxx xx xxxxxx x xxxxxx100 xx xx šroubovacím xxxxxxxx (4.2) xx xxxxxx 0,1 xx 1 x xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxx xx 0,2 xx. Xxxxxxxx xxxx vzorku xx xxxx xxx xxxxx dusíku xxx 10 xx. Opatrně xx přidá 25 xx hydrolyzační směsi (3.20) x xxxxxx xx se xxxxxxx. Xxxx se postupuje xxx xxxxx 5.3.2.3 xxxx xxxxx 5.3.2.4.
5.3.2.3 xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxx x xxxxx (připravené xxxxx 5.3.2.1 xxxx 5.3.2.2) se xxxxxxx 3 xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx se xxxxx do mírného xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx dobu 23 xxxxx. Xx xxxxxxxx hydrolýzy xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 5 ml citronanového xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24). Xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xx x xxxxxx xxxxx. Xxxx se xxxxxxxxx xxxxx 5.3.3.
5.3.2.4 xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx xx směsí xxxxxxxxxxx podle 5.3.2.1 xxxx 5.3.2.2 se xxxxxx xx xxxxxxx (4.3) xxx 110 °X. Xxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx narůstání xxxxx (x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx látek) x xxxxxxx k xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx volně xx xxxxx. Xxxxxx se xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx baňka xx xxxxxxx x sušárně (4.3) 23 xxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx baňka xxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx se xx lázně x xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxx postupu při xxxxxx xX (5.3.3) xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24) xx xxxxxxx x xxxxxx 250 xx nebo do xxxxx x xxxxxxx xxxx o xxxxxx 250 ml.
Dále xx xxxxxxxxx xxxxx 5.3.3
5.3.3 xxxxxx pH
Podle toho, xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.9), postupujte xxx xxxxxx xX xxxxx 5.3.3.1 xxxx 5.3.3.2.
5.3.3.1 pro xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.9), xxxxxxxxxx xxxxxx koncentraci sodíku:
Pokud xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx koncentraci sodíku (xx-xx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx), xxxxxxxxxx xx xxxxxx vnitřní xxxxxxx standardní xxxxxx (3.27.3).
X xxxxxxx případě xx xxxx odpařováním xxxxxxx do hydrolyzátu 2,00 xx vnitřního xxxxxxxxx standardního xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.27.3).
Do hydrolyzátu xxxxxxxxxx podle 5.3.2.3 xxxx 5.3.2.4. xx xxxxxxx 2 xxxxx 1-xxxxxxxx (3.15).
Xx xxxxxxx xxxxxxx (4.7) xx xxxxx objem xx 5-10 ml xx xxxxx xxx 40 °X. Xxxxx by xx xxxxx náhodou xxxxxx xxx 5 xx, xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx analýzu znovu.
pH xx upraví xx 2,20 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.18) x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx 5.3.4.
5.3.3.2 pro xxxxxxx xxxxxxx analyzátory xxxxxxxxxxxx (4.9)
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.3 xxxx 5.3.2.4 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx 17 xx xxxxxxx xxxxxxxxx sodného (3.17), xx xxxxxxx xxxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxx pod 40 °X.
xX se xxxxxx xx 2,20 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.18) xxx xxxxxxxx teplotě. Xxxx se pokračuje xxxxx xxxx 5.3.4.
5.3.4 xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx (5.3.3.1 xxxx 5.3.3.2) x xxxxxxxxx xX xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx roztoku (3.24) xx xxxxxxx xxxxx x obsahu 200 xx x xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24) xx xxxxxx po xxxxxx.
Xxxxx-xx xxxxx xxxxxx vnitřní xxxxxxxx, přidají xx 2,00 xx vnitřního xxxxxxxxx (3.27.3) a xxxxx xx xxxxxx xx xxxxxx citronanovým xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24). Xxxxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxx xx přejde x xxxxxxxxxxxxxx (5.4)
Xxxxxx-xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx týž xxx, xxxxxxxxxxx se xxx xxxxxxx xxx 5 °X.
5.4 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx (5.2) a xxxxxxxxxx (5.3.4) pokojovou xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xx zfiltruje xxxxxxxxxxx xxxxxxx 0,2 μ (4.5). Xxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx chromatografii xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.9).
Xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxx automaticky. Xxxxxx je xxxxxxxx, xxx xx na xxxxxxx xxxxxxxxxxxx stejné xxxxxxxx xxxxxxx ± 0,5 % jak xxx analýze xxxxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxx je xxxxxxx vnitřního xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxx x xxxxxxxxxxxx roztocích a x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx nebo xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx roztokem (3.24) xxx, aby xxxxxx píku xxxxxxxxx xxxxxxx 30 – 200 % xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx aminokyselin xx xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx analyzátoru x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx od sebe xxxxxxxx i od xxxxxxxxx xxxxxxxxx pozitivních xxxxxxxxx. V xxxxxxx xxxxx působení xx xxx chromatografický xxxxxx xxxxxxxx reagovat xx xxxxx objemů aminokyselin xxxxxxxxxxx na xxxxxxx.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx roztok xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, by xxxx xxx dosaženy xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxx equimolární xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 30 % xxxxxxxxxxx obsahu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, které mohou xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx použitém xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.9).
Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx by poměr xxxxx xxxxx a xxxxxxx xxxx xxxxxxx x obou xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxxxx neměl xxxxxxxxxx 2:10 (xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx(x)xx, xxxxxxxxx, threonin x xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx píků). Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx lepší xxx 1:10.
Xxxxxx xxxx zaručit, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx od "xxxxxxxxxx xxxxxxxx" x ornithinu.
6. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx píků vzorků x standardu se xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xx množství xxxxxxxxxxxxx x x xx xx xxxxxx.
x xxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxx = X × X × XX × X / X × X × 1 000
Xx-xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, násobí se xxxxxxxx: X / X
X = xxxxxx xxxx hydrolyzátu nebo xxxxxxxx
X = xxxxxx xxxx kalibračního standardního xxxxxxx
X = xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx
X = xxxxxx xxxx interního xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
XX = xxxxxxxxxxx váha xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
X = koncentrace xxxxxxxxx v μmol/ml
V = xxxxxxxx navážky xxxxxx (x) (xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxx je xxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx)
X = xxxxxxx objem xxxxxxxxxx xxxxxxx (5.3.4) x ml xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vypočteného xxxxx 6.1
Xxxxxx a xxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx stanoví xxxx xxxxxxxx cysteová, xxx xxxxxxxxxxxx xx xxxx cystin (C6H12N2O4S2, XX 240,30) s xxxxxxxx XX 120,15 (= 0,5 x 240,30).
Xxxxxxxxx se x xxxxxxxxxxxxx oxidovaného xxxxxx xxxxxxx xxxx methioninsulfon, xxx vypočítává se xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx MV xxxxxxxxxx: 149,21.
Xxxxxxx volný methionin xx xxxxxxxx po xxxxxxxx jako xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx XX.
6.1 Xxxxxxx objem xxxxxxxxx xxxxxxxx (X) při xxxxxxxxx volných aminokyselin (5.2) xx vypočítá xxxxx tohoto vzorce:
F = 100 xx × (10 xx + 5 ml) / 10 xx × X&xxxx;xx / 10xx
X = xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx
7. Xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxx v xxxx 1990 xxx xxxxxxx čtyř xxxxxxx xxxxx (xxxxx xxxx xxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxx broilery, xxxxxxxxxx koncentrát, xxxxxx). Xx xxxxxxxxx extrémů xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a standardních xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
xxxxxxx hodnoty x g/kg
|
Referenční xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx |
6,94 x = 15 |
3,01 x = 17 |
3.27 x =.17 |
9,55 n = 13 |
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx |
9,31 x = 16 |
3,92 x = 18 |
5,08 x = 18 |
13,93 n = 16 |
|
Xxxxxxxxxx koncentrát |
22,32 x = 16 |
5,06 x = 17 |
12,01 x = 17 |
47,74 x = 15 |
|
Premix |
58,42 x = 16 |
- |
90,21 x = 16 |
98,03 x = 16 |
n = počet zúčastněných xxxxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
xxxxxxxxxx xxxxxxxx (Xx) xxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx x x/xx
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx |
0,13 n = 15 |
0,10 x = 17 |
0,11 x = 17 |
0,26 x = 13 |
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx |
0,20 x = 16 |
0,11 x = 18 |
0,16 n = 18 |
0,28 n = 16 |
|
Xxxxxxxxxx koncentrát |
0,48 n = 16 |
0,13 x = 17 |
0,27 x = 17 |
0,99 x = 15 |
|
Xxxxxx |
1.30 x = 16 |
_ |
2,19 n = 16 |
2,06 x = 16 |
n = xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx (%) xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx odchylek (Sr)
|
Referenční xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx pro xxxxxxx |
1,9 x = 15 |
3,3 x = 17 |
3,4 n =.17 |
2,8 x = 13 |
|
Xxxxx xxxx pro brojlery |
2,1 x = 16 |
2,8 x = 18 |
3,1 x = 18 |
2,1 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
2,7 x = 16 |
2,6 x = 17 |
2,2 x = 17 |
2,4 n = 15 |
|
Xxxxxx |
2,2 x = 16 |
- |
2,4 x = 16 |
2,1 x = 16 |
x = xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
7.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx v následující xxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx odchylka (XX) x g/kg
|
Referenční xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
xxxxxxxx |
Xxxx(x)xx |
xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx |
0,28 x = 15 |
0,30 x = 17 |
0,23 x = 17 |
0,30 n = 13 |
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx |
0,48 x = 16 |
0,34 n = 18 |
0,55 x = 18 |
0,75 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
0,85 x = 16 |
0,62 x = 17 |
1,57 x = 17 |
1,24 x = 15 |
|
Xxxxxx |
2,49 x = 16 |
- |
6,20 x = 16 |
6,62 n = 16 |
x = xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx (%) xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx odchylek (XX)
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
xxxxxxxx |
Xxxx(x)xx |
xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx směs pro xxxxxxx |
4,1 n = 15 |
9,9 n = 17 |
7,0 x = 17 |
3,2 x = 13 |
|
Xxxxx směs xxx xxxxxxxx |
5,2 n = 16 |
8,8 x = 18 |
10,9 x = 18 |
5,4 n = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
3,8 x = 16 |
12,3 x = 17 |
13,0 x = 17 |
3,0 x = 15 |
|
Xxxxxx |
4,3 x = 16 |
- |
6,9 x = 16 |
6,7 x = 16 |
x = xxxxx xxxxxxxxxxxx laboratoří
8. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx materiálů
Správné xxxxxxx xxxxxxx metody xx ověřuje xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx kalibračními xxxxxxx aminokyselin.
9. Poznámky
9.1 Xxxxxxxx k xxxxxxxx xxxx analyzátory aminokyselin xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxx 3.27.4 a 3.27.5) a xxxxxxx xxxxxx (5.3.4) xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx rozsah xxxxxxxxx se musí xxxxxxxxxxxx xxx všechny xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx roztok xx xxxx citronanovým xxxxxxxx xxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx uprostřed xxxxxx xxxxxxx.
9.2 Pokud se x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx zařízení pro xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx optimalizovány x xxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
9.3 Xxx xxxxxxx této xxxxxx x krmiv xxxxxxxxxxxx xxxx než 1 % chloridu (xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx) xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xx xxxxx použít xxxxxxxxx xxxxxx.
XXXX X XXXXXXXXX TUKŮ
1. Xxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxx se stanoví xxxxx tuku x xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx analýzu xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx, jejichž xxxxxxxx xx xxxx podle xxxxxxxx Rady 136/66/XXX xx xxx 22. xxxx 1996.
Xxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx pro analýzu xxxxxxx xxxxx ze xxxx následujících xxxxxxx:
1.1 Xxxxxx X – xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx
Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx krmiva rostlinného xxxxxx, x xxxxxxxx xxxx, které jsou xxxxxxxx xx okruhu xxxxxxx B.
1.2 Postup X – xxxxxxx xxx
Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx. Používá se xxx všechny materiály, x xxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx. lepky, xxxxxxxx, bramborové xxxxxxxx x výrobky, xxxxx xxxx podrobeny xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx).
1.3 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx všech xxxxxxxxx, xxx se dosáhlo xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx X, než postupem X, je xxxxx xxxxxxxxx xx platnou xxxxxxx xxxxx postupu X.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxxxx X
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Rozpouštědlo xx xxxxxxxxxxx a xxxxxx xx vysuší a xxxxx.
2.2 Xxxxxx X
Xxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Směs xx ochladí x xxxxxxxxxxx. Promytý x xxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxxxxx podle xxxxxxx X.
3. Xxxxxxx
3.1 xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxx mezi 40 x 50 °C. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx být xxxxx xxx 1 x xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx než 2 xx/100 ml
3.2 síran xxxxx, xxxxxxx
3.3 xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, x = 3 xxx XXx/x
3.4 xxxxxxxxx prostředky, xxxx. xxxxxxxxx, Xxxxx-xxxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x pomůcky
4.1 Extrakční xxxxxxxx, se xxxxxxx (Xxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxx by xxxx xxxxxxx asi 10 xxxxx xx hodinu. X xxxx xxx xxxxxx by xxxx xxx refluxní rychlost xxx 10 xx xx minutu.
4.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, x porositou x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx 4.1.
4.3 Xxxxxxx, buď vakuová xxxxxxxx xx 75 °X ± 3 °X, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 100 °X ± 3 °X.
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxx X (viz xxx 8.1)
Xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx 5 x vzorku x xxxxxxxxx xx 1 xx (4.2) a xxxxxxxxx smotkem xxxx xxx xxxx.
Xxxxxxx se xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1) a xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.1). Petroletherový xxxxxxx se xxxx xx xxxxx, předem xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx úlomky xxxxx [1].
Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxx xx xxxx 1,5 xxxxxx x xxxxxxx (4.3). Nechá xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxx. Xxxx xx xxxxxxx 30 xxxxx, xxx xx xxxxxxxx, zda xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx mezi xxxxx následujícími xxxxxxxx xxxx xxx menší xxx 1 mg).
5.2 Xxxxxx X
Xx xxxxxxx x xxxxxx 400 xx nebo xx xxxxxxx xxxxx o xxxxxx 300 xx xx odváží 2,5 x vzorku x xxxxxxxxx xx 1 xx (xxx xxx (8,2) a přidá xx 100 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.3) x úlomky xxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxxxx baňka xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx na xxxxx xxxxx a xxxx xx xx xxxx xxxxx hodiny. Během xxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxx xx ochladí x xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.4), aby xxx filtraci xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx dojitý xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx tuku. Xxxxxx xx promývá xxxxxxxx vodou, xx xx xxxxx neutrální xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx. Xxxx xxxxxxxxxx ukazuje, xx xx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx petroletherem xxxxx xxxxxxx A.
Dvojitý xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx x xxxx xx půldruhé xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.3) xxx xxxxxxx 100 °C ± 3 °X.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx do xxxxxxxxx xxxxxxx (4.2) a xxxxxxxx smotkem xxxx xxx tuku. Patrona xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1) x dále xx xxxxxxxxx xxxxx druhého x třetího xxxxxxxx xxxx 5.1.
6. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxx zbytku xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx.
7. Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxxx dvou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx vzorku xxxxxxx pracovníkem xx xxxxx přesáhnout:
- 0,2 % x xxxxxxxxx xxxxxxx, při obsahu xxxx nižším než 5 %,
- 4,0 % relativně x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xx 5 xx 10 %,
- 0,4 % v xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxx 10 %.
8. Poznámky
8.1 U xxxxxxx s vysokým xxxxxxx xxxxx a xxxx, které xx xxxxxxx drtí nebo xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxx následujícím xxxxxxxx:
Xxxxxx xx 20 x vzorku x xxxxxxxxx na 1 xx a smíchá xx x 10 xxxx x xxxx xxxxx bezvodého síranu xxxxxxx (3.2). Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx (3.1) xxxxx bodu 5.1. Xxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxx na 500 xx xxxxxxxxxxxxx (3.1) x xxxxxxxx xx. 50 xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxx suché, xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx pemzy [2].
Rozpouštědlo xx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx 5.1.
Xxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx vzorku pomocí xxxxxxxxxxxxx vzorce:
(10 a + b) × 5
xxx:
x = xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x gramech (xxxxxxx xxxx xxxxxxxx)
x = hmotnost zbytku xx druhé xxxxxxxx x xxxxxxx
8.2 X xxxxxxx, které mají xxxxx obsah tuku xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku zvýšit xx 5 x.
8.3 Xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx mají xxxxxx obsah xxxx, xx xxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx postupu X xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
8.4 V xxxx 5.2 se xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx místo xxxx xxxxxxx.
8.5 U některých xxxxx xx musí xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx 1,5 xxx. Xx xxxx xxxxx xxxxxxx přílišnému vysoušení, xxxxx může xxxx x nízkým xxxxxxxxx. Xx xxxxx použít x xxxxxxxxxxx xxxxxx.
8.6 Xxx xxxxxx xxxx xxx 15 % xx xxxxxxxxxx provést xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx A x xxxxxxxx extrakci xxxxx xxxxxxx X. Xxxxxx xx xx xxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxx a xxxxx tuku v xxxxxx.
XXXX X
XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX
(2-[X-2-(xxxxxxxxxxxx)xxxxxxxxx]-3-xxxxxxxxxxxxxxxx-X1,X4-xxxxxx)
1. Xxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx je 5 mg/kg.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx extrahuje směsí xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xx xxxxxxxx xxxx xx použití UV xxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
3.1 xxxxxxxx
3.2 xxxxxxxx, xxx XXXX
3.3 xxxx, xxx XXXX
3.4 xxxxxxx xxxx xxx XXXX:
Xxxx xxxx (3.3) x methanolu (3.2), 900 + 100 (X + X)
3.5 xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxxxxxxx 2-[X-2-(xxxxxxxxxxxx)xxxxxxxxx]-3-xxxxxxxxxxxxxxxx-X1,X4-xxxxxx, X 851
3.5.1 zásobní standardní xxxxxxxx roztok xxxxxxxxxxx, 250 μg/ml
Do xxxxxxx xxxxx o xxxxxx 200 ml xx xxxxxx 50 mg xxxxxxxxxxx (3.5) s xxxxxxxxx xx 0,1 xx x xxxxx xxx 190 ml xxxx. Baňka se xxxxxxx na 20 xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1). Xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xx roztok xxxxxxx xx laboratorní xxxxxxx, xxxxxx xxxxx xx xxxxxx a xxxxxxx. Xxxxx se xxxxx hliníkovou xxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx musí xxxxxxxxxxx xxxxxxx každý xxxxx.
3.5.2 xxxxxxxx xxxxxxxxxx roztok xxxxxxxxxxx, 25 μg/ml
10,0 xx zásobního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoku (3.5.1) xx xxxxxxx do xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 100 xx, xxxxxx xx po xxxxxx mobilní fází (3.4) a xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx. Xxxxx roztok xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
3.5.3 xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx 50 xx xx xxxxxxxxxx 1,0, 2,0, 5,0, 10,0, 15,0 x 20,0 ml xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.2). Xxxxxx se mobilní xxxx (3.4) xx xxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx fólií. Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 0,5, 1,0, 2,5, 5,0, 7,5 x 10,0 μx xxxxxxxxxxx na xx.
Xxxx xxxxxxx se xxxx připravovat denně xxxxxxx.
4. Přístroje a xxxxxxx
4.1 ultrazvuková lázeň
4.2 xxxxxxxxxx xxxxxxxx
4.3 xxxxxxxx XXXX s xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx ultrafialového xxxxxxxxx xxxx s xxxxxxxxxx diodového xxxx
4.3.1 xxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, 250 mm x 4 xx, xxxxxxx X18, 10 μx, nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx
4.4 membránové xxxxxx x xxxx 0,45 μx
5. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxx je xxxxxxx na světlo. Xxxxxxx xxxxxxx se xxxx xxxxxxxx při xxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxx z xxxxxxx xxxx.
5.1 Obecně
5.1.1 Xxxxxxxx krmivo se xxxx xxxxxx analyzovat xxx kontrolu, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
5.1.2 Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx krmiva obohaceného xxxxxxxx xxxxxxxx množství xxxxxxxxxxx, které xxxxxxxx xxxx obsahu xx xxxxxx K xxxxxxxxxxx xx úroveň 50 xx/xx xx odpipetuje 10,0 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx základního xxxxxxx (3.5.1) do kónické xxxxx o obsahu 250 xx x xxxxxx xx xxxxxx xx cca 0,5 xx. Přidá xx 50 x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx se xxxxxxxx x xxxxx xx 10 minut xxxxxx, xxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx se přejde x xxxxxxxx (5.2).
Xxxxxxxx:
Xxx xxxxx xxxx metody xx xxx modelové xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx vzorek x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxx
Xxxxxx se xxxxxxxxx 50 x xxxxxx x xxxxxxxxx xx 0,01 g. Xxxxxxx xx xx xxxxxxx baňky x xxxxxx 1000 ml, xxxxx se 100 xx xxxxxxxxx (3.1) x xxxxx xx xxxxxx xx xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1). Přidá xx 410 ml xxxx a xxxxxxx xx x ultrazvukové xxxxx dalších 15 xxxxx. Xxxxx se xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx xxxxx 30 xxxxx xx xxxxxxxx (4.2) x potom xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. 10,0 xx filtrátu xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 20 xx, xxxxxx se vodou xx značku x xxxxxxxx. Poměrná xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) (xxx xxx 9. Poznámky). Xxxx se pokračuje xxxxxxxxxx HPLC (5.3).
5.3 Xxxxxxxxx XXXX
5.3.1 Xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx doporučené, xxxxx xxx použity xxxx podmínky, za xxxxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxx výsledky.
analytická xxxxxx (4.3.1)
xxxxxxx xxxx (3,4): Xxxx xxxx (3.3) x xxxxxxxxx (3.2), 900 + 100 (X + V)
průtoková xxxxxxxx: 1,5–2 xx/xxx
xxxxxxxx xxxxxx xxxxx: 380 xx
xxxxx nástřiku: 20 μx–100 μx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx, že xx xxxxxxxxxx nastříkne xxxxxxxxxx xxxxxx (3.5.3) xxxxxxxxxx 2,5 μg/ml, xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx časů.
5.3.2 Kalibrační xxxx
Xxx každý xxxxxxxxxx xxxxxx xx provede xxxxxxx nástřiků x xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxx) xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xx použití xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxx) píků xxxxxxxxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x μx/xx xxxx xxxxxxxxx.
5.3.3 Roztok xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx nástřiků xxxxxxxx xxxxxx (5.2) xxx xxxxxxx stejného xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx roztoků a xxxxxx xx střední xxxxx (xxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx.
6. Xxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx x roztoku xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x μg/ml xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx (5.3.2).
Xxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxx x x xx/xx xx xxx xxxxxxxxxxx rovnicí:
w = x × 1 000 / x
xxx:
x = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx (5.2) x μx/xx
x = xxxxxxxx xxxxxxx vzorku x x (5.2)
7. Xxxxxxxxxxx výsledků
7.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xx-xxxxxxxxxxxxxx) xxxxx využitím detektoru x xxxxxxxx polem, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx vzorku (5.2) a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.3), xxxxxxxxxxxx 5,0 μx/xx xxxxxxxxxxx.
7.1.1 Xxxxxxxxx stanovením x xxxxxxxxx (xx-xxxxxxxxxxxxxx)
Xxxxxxx xxxxxx (5.2) se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.3). Xxxxxxxx xxxxxxxxx olachindoxu xx mělo xxxxxxxxx xxxxxxxx olachindoxu nalezeného x xxxxxxxx xxxxxx.
X xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxx xx xxxxxxx výšky xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx být x xxxxxxx ±10 % původní xxxxx xxxx olachindoxu x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
7.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx pole
Výsledky xx xxxxxxxxxxx podle xxxxxxxxxxxxx kritérií:
a) při xxxxxx xxxxx maximální xxxxxxxx vzorku x xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx zaznamenaný xx vrcholu xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x nepřesností danou xxxxxxxxxxx schopností detekčního xxxxxxx. Pro xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx udává ±2 xx;
x) xxx vlnové xxxxx mezi 220 x 400 xx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 10 xx 100 % xxxxxxxxx absorbance. Tohoto xxxxxxxx xx dosaženo, xxxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxx maxima a xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 % xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx;
x) xxx xxxxxx xxxxx xxxx 220 x 350 xx se xxxxx spektrum xxxxxxxx, xxxxxxx a xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x této částí xxxxxxx x rozsahu 10 až 100 % xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx kritéria je xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx sledovaných xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx 15 % xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx.
Xxxx-xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx splněno, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx 10 x 20 mg/kg, xxxxx xxxxxxxxxx15 % xxxxxxx xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxx 90 %.
8. Xxxxxxxx xxxxxxxxx testu
V xxxxx XX byl xxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxx xxxx až 13 laboratoří analyzovalo xxxxx xxxxxx xxxxxx xxx selata, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx jsou xxxxxxx x následující xxxxxxx:
|
| xxxxxx 1 |
vzorek 2 |
vzorek 3 |
xxxxxx 4 |
|
|
X |
13 |
10 |
11 |
11 |
|
X |
40 |
40 |
44 |
44 |
|
xxxxxxx (xx/xx) |
- |
14,6 |
48,0 |
95,4 |
|
(Xx) (xx/xx) |
- |
0,82 |
2,05 |
6,36 |
|
(XX) (xx/xx) |
- |
1,62 |
4,28 |
8,42 |
|
XXx (%) |
- |
5,6 |
4,3 |
6,7 |
|
XXX (%) |
- |
11,1 |
8,9 |
8,8 |
|
xxxxxxxxx obsah (xx/xx) |
- |
15 |
50 |
100 |
|
xxxxxxxxx (%) |
- |
97,3 |
96,0 |
95,4 |
X: počet xxxxxxxxxx
x: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xx: xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
XX: xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
XXx: xxxxxxxx koeficient xxxxxxxxxxxxxxx
XXX: xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
9. Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx metoda xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx 100 xx/xx xxxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx uspokojivé xxxxxxxx xxxxx navážkou vzorku x/xxxx xxxxxxxx extraktu (5.2) xxx, xxx xx dosáhlo xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.3.2).
[1] Xxxxx xx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxx pemzy xx xxxxxxxx xxxxxxx.
[2] Xxxxx xx má xxx xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx, xxxxxx se xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx.