Směrnice Komise 98/64/XX
xx xxx 3. xxxx 1998,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Společenství xxx xxxxxxxxx aminokyselin, xxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxx xx mění xxxxxxxx 71/393/XXX
(Xxxx x xxxxxxxx pro XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX SPOLEČENSTVÍ,
s xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx směrnici Xxxx 70/373/XXX za xxx 20. července 1970 x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx krmiv [1], xxxxxxxxx pozměněnou Xxxxx x přistoupení Xxxxxxxx, Xxxxxx x Xxxxxxx, x zejména na xxxxxx 2 uvedené xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx 70/373/XXX xxxxxxx, že xxxxxx xxxxxxxx krmiv za xxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx se jejich xxxxxxx a xxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx odběru xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, že xxxxxxxx Xxxx 79/373/XXX xx xxx 2. xxxxx 1979 o xxxxxxx xxxxxxx směsí xx trh [2], xxxxxxxxx pozměněná xxxxxxxx Xxxxxx 97/47/XX [3], x xxxxxxxx Xxxx 93/74/XXX xx dne 13. září 1993 x krmivech určených xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx [4], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx 96/25/XX [5], stanoví, xx xxxxx aminokyselin a xxxx musí xxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx k tomu, xx xxxxxxxx Rady 70/524/XXX ze dne 23. xxxxxxxxx 1970 x doplňkových látkách x xxxxxxxx [6], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 98/19/XX [7], xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xx označení, xxxxx je xxxx xxxxx přidána xx xxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, že xxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 71/393/XXX xx dne 18. xxxxxxxxx 1971, xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Společenství pro xxxxxx kontrolu krmiv [8], xxxxxxxxx pozměněná xxxxxxxx Komise 84/4/XXX [9], xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx jiné x xxx zjišťování xxxxxx tuku; xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx upravit;
vzhledem x xxxx, že xxxx xxx stanoveny analytické xxxxxx Společenství xxx xxxxxxxx těchto xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxx směrnice xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxx,
XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx aminokyselin, xxxx x obsahu olachindoxu x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xx použití xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx této xxxxxxxx.
Xxxxxx 2
X příloze xxxxxxxx Komise 71/393/XXX xx xxx "4. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxx" xxxxxxxxx xxxxx B xxxxxxx xxxx směrnice.
Článek 3
1. Xxxxxxx xxxxx uvedou x xxxxxxxx právní a xxxxxxx xxxxxxxx nezbytné xxx xxxxxxxx xxxxxxx x touto xxxxxxxx xxxxxxxxxx do 31. xxxxxxxx 1998. Uvědomí x xxxx xxxxxxxxxx Xxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx od 1. xxxxx 1999.
Tato xxxxxxxx xxxxxxx členskými xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx směrnici xxxx musí být xxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxx xxxxx xxxxx Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x oblasti xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Článek 4
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx po xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 5
Xxxx xxxxxxxx xx určena členským xxxxxx.
X Bruselu xxx 3. xxxx 1998.
Xx Xxxxxx
Xxxxx Xxxxxxxx
xxxx Komise
[1] Xx. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Xx. xxxx. X 86, 6.4.1979, x. 30.
[3] Xx. xxxx. X 211, 5.8.1977, x. 45.
[4] Úř. xxxx. X 237, 22.9.1993, x. 23.
[5] Xx. věst. X 125, 23.5.1996, x. 35.
[6] Xx. xxxx. X 270, 14.12.1970, x. 1.
[7] Xx. věst. X 96, 28.3.1998, x. 39.
[8] Xx. věst. X 279, 2.12.1971, x. 7.
[9] Xx. xxxx. X 15, 18.1.1984, x. 28.
XXXXXXX
XXXX X
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
1. Xxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (syntetických a xxxxxxxxxxx) x xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxx x xxxxx) xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx aminokyselin. Xxxxxx xx xxxxxxxxxx pro xxxx xxxxxxxxxxxxx: cyst(e)in, xxxxxxxxx, xxxxx, threonin, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, kyselinu xxxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, isoleucin, xxxxxx, fenylalanin, xxxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxxx.
Xxxx metoda nerozlišuje xxxx solemi aminokyselin x xxxxxx také x aminokyselin xxxxxxxxxx xxxx formami X x X. Xxxx xxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxxx xxxxxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx. Současně xxxxxxxxxxx dusíkaté xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Zfiltrovaný xxxxxx xx xxxxxx xx xX 2,20. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx chromatografií x xxxxxxx xx xx xxxxxx x ninhydrinem xxxxxxxxxxxxx detekcí při 570 nm.
2.2 Vázané xxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx aminokyselinách. Xxxx(x)xx x xxxxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxx x xx methioninsulfon. Xxxxxxx xx musí xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Ostatní xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxx 1 xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxx x xxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxx xxx 0 xX xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x fenolu. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx rozloží xxxxxxxxxxx xxxxxx. Oxidovaný xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx kyselinou xxxxxxxxxxxxxxx (x = 6 xxx/x) po 23 xxxxx. Hydrolyzát se xxxxxx xx xX 2,20. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx iontoměničovou chromatografií x xxxxxxxxx xx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx fotometrickou detekcí xxx 570 xx (440 xx xxx xxxxxx).
3. Činidla
Musí být xxxxxxx dvakrát destilovaná xxxx xxxx xxxx xxxxxxx jakosti (vodivost &xx; 10 μX).
3.1 xxxxxxx xxxxxx, x = 30 %
3.2 xxxxxxxx xxxxxxxx, w = 98–100 %
3.3 xxxxx
3.4 xxxxxxxxx xxxxx
3.5 xxxxxxxx sodný
3.6 kyselina 5-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx
3.7 kyselina xxxxxxxxxxxxxx o xxxxxxx xxxxxxxxx 1,18 x/xx
3.8 xxxxxxxx xxxxx, dihydrát
3.9 2,2-xxxxxxxxxxxxx (thiodiglykol)
3.10 xxxxxxx xxxxx
3.11 xxxxxxxxx
3.12 petrolether, xxx xxxx 40–60 °X
3.13 xxxxxxxxx xxxx xxxx sloučenina použitelná xxxx xxxxxxx standard
3.14 xxxxx – xxxx (&xx; 10 ppm xxxxxxx)
3.15 1-xxxxxxx
3.16 xxxxxxxxxxxxx
3.16.1 xxxxxxxxxx látky uvedené x xxxx 1; xxxxx sloučeniny neobsahující xxxxxxxxxxxxx vodu. Xxxxxx xx ve xxxxx xxx X2X5 xxxx X2XX4 xxxxx před xxxxxxxx
3.16.2 xxxxxxxx cysteová
3.16.3 xxxxxxxxxxxxxxx
3.17 hydroxid sodný, xxxxxx c = 7,5 xxx/x:
300 x XxXX (3.5) xx xxxxxxxx xx vodě x xxxxxx do 1 xxxxx.
3.18 hydroxid xxxxx, xxxxxx x = 1 xxx/x:
40 x XxXX (3.5) xx xxxxxxxx xx xxxx x doplní xx 1 xxxxx.
3.19 xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx:
Xxxxxx xx 889 g kyseliny xxxxxxxx (3.2) xx 111 x vody x přidá xx 4,73 x xxxxxx (3.3).
3.20 xxxxxxxxxxxx xxxx, x = 6 xxx XXx/x s xxxxxxxxx 1 g xxxxxx/x:
X 492 xx XXx (3.7) xx xxxxx 1 x xxxxxx (3.3) a xxxxxx xx xxxxx xx 1 litru.
3.21 xxxxxxxxx xxxx, x = 6 mol XXx/x s xxxxxxxxx 2% thiodiglykolu:
8,2 ml XXx (3.7) se xxxxxxx xxxxxxxxx 900 xx xxxx, přidá xx 20 xx xxxxxxxxxxxxx (3.9) a xxxxxx vodou na 1 xxxx (3.7 x 3.9 xx xxxxx smíchat xxxxx).
3.22 xxxxxxxx 5-sulfosalicylová, β = 6 %:
60 x xxxxxxxx 5-xxxxxxxxxxxxxxx (3.6) xx xxxxxxxx xx xxxx x xxxxxx xxxxx na 1 litr.
3.23 oxidační xxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxxx – xxxxx):
X xxxx xxxxxxx xx xxxxxx 0,5 xx peroxidu xxxxxx (3.1) x 4,5 xx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx (3.19); xxxxxxx xx x klidu 1 hodinu při 20–30 °C, xxx xx utvořila xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, před xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx x xxxxx x ledovou xxxxx (15 xxxxx).
Xxxxx:
Xx xxxxx zamezit xxxxxxxx x xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx oděv.
3.24 xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, x = 0,2 xxx Xx+/x, xX 2,20:
X xxxxxxxxx 800 xx vody xx xxxxxxxx 19,61 x xxxxxxxxx xxxxxxx (3,8), 5 ml xxxxxxxxxxxxx (3.9), 1 x xxxxxx (3.3) x 16,50 xx HCl (3.7). xX xx xxxxxx na 2,20. Xxxxxx xx xxxxx xx xxxxx 1 xxxxx.
3.25 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx podle xxxxxxxx pro použitý xxxxxxxxxx (4.9)
3.26 ninhydrinové xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (4.9)
3.27 Xxxxxxxxxx xxxxxxx aminokyselin. Xxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx teplotě xxx 5 °X.
3.27.1 xxxxxxx standardní základní xxxxxxx aminokyselin (3.16.1), x = 2,5 μxxx/xx pro každou xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx roztok xxx xxxxxxx i xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
3.27.2 xxxxxxx xxxxxxxxxx základní xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx, c = 1,25 μxxx/xx
0,2115 x xxxxxxxx cysteové (3.16.2) x 0,2265 g xxxxxxxxxxxxxxxx xx rozpustí (3.16.3) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx roztoku (3.24) x litrové odměrné xxxxx x doplní xx xx značku xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx roztokem. Xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx pod 5 °X xxxxxxx 12 xxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.27.1) xxxxxxxx kyselinu xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx.
3.27.3 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx standardu, xxxx. norleucinu, x = 20 μxxx/xx
0,6560 x xxxxxxxxxx (3.13) xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx roztoku (3.24) x xxxxxxx xxxxx xx 250 xx a xxxxxx xx xx značku xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx se při xxxxxxx pod 5 °X nejdéle 6 xxxxxx.
3.27.4 xxxxxxxxxx roztok xxxxxxxxxxxx aminokyselin pro xxxxxxx x xxxxxxxxxxx, x = 5 xxxx/50 μx kyseliny xxxxxxxx x methioninsulfonu x x = 10 nmol/50 μl x xxxxxxxxx aminokyselin
Ve 100 xx xxxxxxx xx xxxxxxxx 2,2 x xxxxxxxx sodného (3.10) x 30 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24). Přidají xx 4,00 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.27.1), 4,00 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx (3.27.2) a 0,50 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx základního roztoku xxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.27.3), xxxxx xx xxxxxxx. xX xx xxxxxx xx 2,20 hydroxidem xxxxxx (3.18).
Xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx 50 xx xxxxxxx xxxxx, doplní xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24) a xxxxxxx xx.
Xxxxxxxx xx xxx teplotě pod 5 °X nejdéle 3 xxxxxx.
Xxx xxxx xxxxxxxx 9.1.
3.27.5 xxxxxxxxxx xxxxxx standardních aminokyselin xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx podle xxxx 5.3.3.1 x xxx xxxxxxxx (5.2). Xxxxxxxxxx roztok xx xxxxxxxxxx podle 3.27.4 x xxxxxxxxxx chloridu xxxxxxx.
Xxxxxxxxx při teplotě xxx 5 °C xxxxxxx 3 xxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
4.1 xxxxx x xxxxxxx xxxx x xxxxxx 100 nebo 250 xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx
4.2 xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx 100 ml xx šroubovým uzávěrem x gumovým xxxx xxxxxxxxxx těsněním (např. Xxxxx, Xxxxxx) xxx xxxxxxx x xxxxxxx
4.3 xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxx než ±2 °X
4.4 xX metr (xxx xxxxxxxxx xxxxx)
4.5 xxxxxxxxxx filtr (0,2 μx)
4.6 xxxxxxxxxxx
4.7 xxxxxxx xxxxxxx odparka
4.8 mechanická xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx
4.9 xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx XXXX x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxx ninhydrin, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx detektorem.
Kolona xx naplní xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx pryskyřicí, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx čerpadla xx stálostí xxxxxxx ± 0,5 % xx xxxx zahrnující xxxxxxxxxx xxxxxxxxx i xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxxxx vykazuje xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x = 0,8 xxx/x x obsahuje xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x oxidačního xxxxx. Xxxx analyzátory nezaručují xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, obsahuje-li xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x/xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx se xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx úpravou xX xxxxxxxxx hydrolyzátu xx xxxxx 5 xx. Xxxxxxxx xx xx xxxxxxxx ve xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx 40 °X.
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxx vzorku
Vzorek xx xxxxxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxx xxxxx x xxx 0,5 xx. Xxxxxx s xxxxxxx vlhkostí xx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 50 °X xxxx xxx xxxxxxxx. Xxxxxx x vysokým xxxxxxx xxxx se xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.12).
5.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x x xxxxxxxxx
Xx xxxxxxx baňky se xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (1–5 x) xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) s xxxxxxxxx xx 0,2 xx x xxxxx xx 100,0 ml xxxxxxxxx xxxxx (3.21). Xxxxx se třepe 60 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.8). Po xxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxxxx 10,0 xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx 100 xx.
Xx stálého míchání xx xxxxx 50 xx xxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx x míchání xx xxxxxxxxxx míchačce xxxxxxx 5 xxxxx. Xxxxxxxxxxxx se přefiltruje xxxx odstředí xxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx sraženina. 10,0 xx xxxxxxxxxxxx roztoku xx přenese xx xxxxxxx o obsahu 100 ml, xX xx upraví na 2,20 pomocí xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.18), xxxxx xx roztok xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx roztoku (3.24) xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx velikosti x xxxxxx po xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24).
Xxxxxxx-xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx 1,00 xx interního xxxxxxxxx (3.27.3) xx každých 100 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx xxxxxx xx xxxxxx tlumivým xxxxxxxx (3.24).
Xxxx se xxxxxxxxx xxxxx bodu 5.4 – xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx den, xxxxxxxxxxx se xxx xxxxxxx xxx 5 °X.
5.3 Xxxxxxxxx celkových xxxxxxxxxxxx
5.3.1 xxxxxxx
0,1 xx 1 x xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxxxx x xxxxxxxxx 0,2 mg:
- xx xxxxx s kulatým xxxx x xxxxxx 100 xx (4.1) xxx otevřenou xxxxxxxxx (5.3.2.3) xxxx
- xx xxxxx s kulatým xxxx x xxxxxx 250 ml (4.1), xxxxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx
- xx xxxxxx x xxxxxx 100 xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.2) (xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 5.3.2.4).
Odvážená xxxx xxxxxx xx měla xxx obsah dusíku xxx 10 xx x obsah xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 100 mg.
Baňka/nádoba xx xxxxxx do xxxxx x ledovou xxxxx a xxxxxxx xx xx 0 °X, xxxxx xx xxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxxx (3.23) x promíchá se xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx špičkou. Baňka/nádoba xx uzavře x xx lžící vzduchotěsnou xxxxx x vloží xx x s xxxxx s ledovou xxxxx xx chladničky xxx 0 °X x ponechá xx xxx 16 xxxxx. Xx 16 xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxx činidlo se xxxxxxx xxxxxxxx 0,84 x xxxxxxxxxx sodného (3.4).
Xxxx se xxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.1.
5.3.2 xxxxxxxxx
5.3.2.1 xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
X xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx 5.3.1 se xxxxx 25 xx xxxxxxxxxxxx směsi (3.20) xxx, xxx xxxxxxx xxxxx vzorek xx xxxxxxx nádoby xxx xx lžíci. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx pokračuje xxxxx 5.3.2.3 xxxx 5.3.2.4.
5.3.2.2 xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxx x xxxxxxx xxxx x xxxxxx 100 xx nebo 250 ml (4.1) xxxx xx xxxxxx x xxxxxx100 xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.2) se odváží 0,1 až 1 x xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxx xx 0,2 xx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxx xxxxxx asi 10 xx. Opatrně xx xxxxx 25 xx xxxxxxxxxxxx směsi (3.20) a xxxxxx xx xx vzorkem. Xxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxx 5.3.2.3 xxxx xxxxx 5.3.2.4.
5.3.2.3 xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx směsi x baňce (xxxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.1 xxxx 5.3.2.2) xx xxxxxxx 3 skleněné xxxxxxx x xxxx xx xxxxx do xxxxxxx xxxx xxx zpětným xxxxxxxxx xx xxxx 23 hodin. Po xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx promyje 5 xx citronanového xxxxxxxxx roztoku (3.24). Xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx se x xxxxxx xxxxx. Xxxx se xxxxxxxxx xxxxx 5.3.3.
5.3.2.4 uzavřená xxxxxxxxx
Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx podle 5.3.2.1 xxxx 5.3.2.2 xx xxxxxx xx xxxxxxx (4.3) xxx 110 °X. Xxx xx xxxxx první xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx) a xxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxx xx šroubovací xxxxxx xxxxx xx xxxxx. Nádoba xx xxxxxxxxx. Xx uplynutí xxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x sušárně (4.3) 23 xxxxx. Xx skončení xxxxxxxxx xx xxxxx vyjme xx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xx xxxxx s xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx při xxxxxx xX (5.3.3) xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24) xx xxxxxxx x xxxxxx 250 xx nebo do xxxxx x xxxxxxx xxxx x xxxxxx 250 xx.
Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx 5.3.3
5.3.3 xxxxxx xX
Xxxxx toho, xxxxx xxxxxxxxx k xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.9), xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xX xxxxx 5.3.3.1 xxxx 5.3.3.2.
5.3.3.1 xxx chromatografické xxxxxxx (4.9), xxxxxxxxxx xxxxxx koncentraci xxxxxx:
Xxxxx xxxxxxxxxx aminokyselin xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xx-xx xx xxxxxx xxxxx kyselin), doporučuje xx xxxxxx vnitřní xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (3.27.3).
X xxxxxxx případě xx xxxx odpařováním xxxxxxx do xxxxxxxxxxx 2,00 xx vnitřního xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx základního xxxxxxx (3.27.3).
Do xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx podle 5.3.2.3 xxxx 5.3.2.4. xx xxxxxxx 2 xxxxx 1-xxxxxxxx (3.15).
Na xxxxxxx xxxxxxx (4.7) xx xxxxx xxxxx na 5-10 xx xx xxxxx při 40 °X. Xxxxx xx xx objem náhodou xxxxxx pod 5 xx, hydrolyzát xx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxx analýzu xxxxx.
xX xx xxxxxx xx 2,20 roztokem hydroxidu xxxxxxx (3.18) x xxxxxxxxx xx podle xxxx 5.3.4.
5.3.3.2 xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.9)
Hydrolyzáty připravené xxxxx 5.3.2.3 xxxx 5.3.2.4 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx opatrným přidáním 17 xx xxxxxxx xxxxxxxxx sodného (3.17), xx xxxxxxx xxxxxxx x při zajištěné xxxxxxx pod 40 °X.
xX se xxxxxx xx 2,20 roztokem xxxxxxxxx sodného (3.18) xxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.3.4.
5.3.4 xxxxxx vzorků xxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx (5.3.3.1 xxxx 5.3.3.2) x xxxxxxxxx xX se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24) xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 200 xx x xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24) xx xxxxxx po xxxxxx.
Xxxxx-xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx se 2,00 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.27.3) x xxxxx xx doplní xx značku xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24). Xxxxxxxx se promíchá.
Dále xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx (5.4)
Xxxxxx-xx roztoky xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxx, uschovávají xx xxx xxxxxxx xxx 5 °C.
5.4 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxxxxxx musí xxx xxxxxxx (5.2) x xxxxxxxxxx (5.3.4) xxxxxxxxx xxxxxxx. Směs se xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xx zfiltruje xxxxxxxxxxx xxxxxxx 0,2 μ (4.5). Výsledný xxxx roztok xx xxxxxxx ionexové xxxxxxxxxxxxxx xx analyzátoru xxxxxxxxxxxx (4.9).
Xxxxxxx xxx provést xxxxx nebo xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xx důležité, xxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx stejné xxxxxxxx xxxxxxx ± 0,5 % xxx xxx analýze standardů xxx xxxxxx s xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxxxxx x aminokyselinám xx xxx být v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x x roztocích xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx hlavně xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x analytického xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24) xxx, xxx xxxxxx píku xxxxxxxxx xxxxxxx 30 – 200 % xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xx typu xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx ionexu. Xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx separovat jednotlivé xxxxxxxxxxxxx od xxxx xxxxxxxx i xx xxxxxxxxx ninhydrin pozitivních xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxx chromatografický xxxxxx xxxxxxxx reagovat na xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx sloupec.
Při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxx být xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 30 % xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx mohou xxx ještě xxxxxx xxxxxxxxx xx použitém xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.9).
Xxx xxxxxxxx threoninu x xxxxxx xx poměr xxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxx x obou překrývajících xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 2:10 (xxxxx xx xxxxxxx pouze xxxx(x)xx, xxxxxxxxx, threonin a xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx ovlivněno nedostatečnou xxxxxxxx přilehlých xxxx). Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxx xxxxx než 1:10.
Xxxxxx musí xxxxxxx, xx lysin bude xxxxxxxxx xx "lysinových xxxxxxxx" a ornithinu.
6. Xxxxxxx x vyjádření xxxxxxxx
Xxxxxx píků vzorků x standardu xx xxxx pro každou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x g xx xx vzorku.
g xxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxx = A × E × XX × X / X × X × 1 000
Xx-xx použit xxxxxxx xxxxxxxx, násobí se xxxxxxxx: X / X
X = xxxxxx xxxx hydrolyzátu nebo xxxxxxxx
X = xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
X = xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx
X = xxxxxx xxxx interního xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
XX = xxxxxxxxxxx váha stanovovaných xxxxxxxxxxxx
X = koncentrace xxxxxxxxx x μxxx/xx
X = hmotnost xxxxxxx xxxxxx (x) (xxxxxxxxxx xx xxxxxxx váhu xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx)
X = xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (5.3.4) x xx nebo xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vypočteného xxxxx 6.1
Xxxxxx x cystein xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx cysteová, xxx vypočítávají xx xxxx xxxxxx (X6X12X2X4X2, XX 240,30) s xxxxxxxx MV 120,15 (= 0,5 x 240,30).
Xxxxxxxxx xx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxx MV methioninu: 149,21.
Xxxxxxx volný methionin xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxx výpočet xx xxxxxxx xxxxxx MV.
6.1 Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (F) xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.2) se xxxxxxxx xxxxx tohoto vzorce:
F = 100 ml × (10 xx + 5 xx) / 10 xx × X&xxxx;xx / 10xx
X = xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx
7. Xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx úrovni x xxxx 1990 xxx xxxxxxx xxxx různých xxxxx (xxxxx xxxx xxx xxxxxxx, xxxxx xxxx pro broilery, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, premix). Xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx uvedeny x xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
xxxxxxx hodnoty x g/kg
|
Referenční xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx |
6,94 x = 15 |
3,01 x = 17 |
3.27 x =.17 |
9,55 x = 13 |
|
Krmná xxxx xxx brojlery |
9,31 n = 16 |
3,92 x = 18 |
5,08 n = 18 |
13,93 x = 16 |
|
Proteinový xxxxxxxxxx |
22,32 x = 16 |
5,06 x = 17 |
12,01 x = 17 |
47,74 x = 15 |
|
Premix |
58,42 x = 16 |
- |
90,21 x = 16 |
98,03 x = 16 |
n = počet zúčastněných xxxxxxxxxx
7.1 Opakovatelnost
Opakovatelnost xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx dána xxxxxxxxxxx tabulkou:
standardní xxxxxxxx (Xx) xxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx v x/xx
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx pro xxxxxxx |
0,13 n = 15 |
0,10 x = 17 |
0,11 x = 17 |
0,26 n = 13 |
|
Xxxxx xxxx pro xxxxxxxx |
0,20 x = 16 |
0,11 x = 18 |
0,16 x = 18 |
0,28 n = 16 |
|
Xxxxxxxxxx koncentrát |
0,48 x = 16 |
0,13 x = 17 |
0,27 n = 17 |
0,99 x = 15 |
|
Xxxxxx |
1.30 x = 16 |
_ |
2,19 n = 16 |
2,06 x = 16 |
x = xxxxx zúčastněných xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx (%) xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx odchylek (Sr)
|
Referenční xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx směs xxx xxxxxxx |
1,9 x = 15 |
3,3 x = 17 |
3,4 n =.17 |
2,8 x = 13 |
|
Xxxxx xxxx xxx brojlery |
2,1 x = 16 |
2,8 x = 18 |
3,1 x = 18 |
2,1 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
2,7 x = 16 |
2,6 n = 17 |
2,2 x = 17 |
2,4 n = 15 |
|
Xxxxxx |
2,2 n = 16 |
- |
2,4 x = 16 |
2,1 x = 16 |
x = počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
7.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx odchylek xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (XX) x x/xx
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
xxxxxxxx |
Xxxx(x)xx |
xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx pro xxxxxxx |
0,28 n = 15 |
0,30 x = 17 |
0,23 x = 17 |
0,30 n = 13 |
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx |
0,48 x = 16 |
0,34 x = 18 |
0,55 x = 18 |
0,75 n = 16 |
|
Xxxxxxxxxx koncentrát |
0,85 x = 16 |
0,62 x = 17 |
1,57 x = 17 |
1,24 n = 15 |
|
Premix |
2,49 n = 16 |
- |
6,20 x = 16 |
6,62 x = 16 |
x = xxxxx xxxxxxxxxxxx laboratoří
Variační xxxxxxxxxx (%) xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx odchylek (XX)
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
xxxxxxxx |
Xxxx(x)xx |
xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx |
4,1 n = 15 |
9,9 n = 17 |
7,0 x = 17 |
3,2 x = 13 |
|
Xxxxx směs pro xxxxxxxx |
5,2 x = 16 |
8,8 x = 18 |
10,9 x = 18 |
5,4 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx koncentrát |
3,8 x = 16 |
12,3 x = 17 |
13,0 x = 17 |
3,0 x = 15 |
|
Premix |
4,3 n = 16 |
- |
6,9 n = 16 |
6,7 n = 16 |
n = xxxxx zúčastněných xxxxxxxxxx
8. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx materiálů
Správné xxxxxxx xxxxxxx metody xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx referenčních xxxxxxxxx, jsou-li x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx kalibračními xxxxxxx aminokyselin.
9. Xxxxxxxx
9.1 Xxxxxxxx k xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx se xxxx xxxxxxx koncentrace xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxx 3.27.4 x 3.27.5) x xxxxxxx xxxxxx (5.3.4) považovat xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx rozsah xxxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
9.2 Xxxxx se x xxxxxxx hydrolyzátů xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
9.3 Xxx xxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxx obsahujících xxxx xxx 1 % xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx krmiva, xxxxxxxxx xxxxxx) xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx a musí xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
XXXX X XXXXXXXXX XXXX
1. Účel x oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxx xx stanoví xxxxx tuku x xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxxx na analýzu xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx, xxxxxxx zkoušení xx xxxx podle xxxxxxxx Rady 136/66/XXX xx xxx 22. xxxx 1996.
Podle xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxx jeden xx xxxx následujících xxxxxxx:
1.1 Xxxxxx A – xxxxx extrahovatelné tuky
Tato xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx krmiva xxxxxxxxxxx xxxxxx, x výjimkou xxxx, xxxxx jsou xxxxxxxx xx okruhu xxxxxxx B.
1.2 Xxxxxx X – celkový xxx
Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx původu x xxx všechny xxxxx xxxxx. Používá xx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxx není xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxx předchozí xxxxxxxxx (např. xxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx x výrobky, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx, vločkování x zahřívání).
1.3 Interpretace xxxxxxxx
Xx xxxxx případech, xxx se xxxxxxx xxxxxxx výsledku postupem X, než postupem X, je třeba xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx podle xxxxxxx X.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxxxx X
Xxxxxx xx extrahuje xxxxxxxxxxxxx. Rozpouštědlo se xxxxxxxxxxx a xxxxxx xx xxxxxx x xxxxx.
2.2 Xxxxxx X
Xxxxxx xx zahřívá x xxxxxxxxx chlorovdíkovou. Směs xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Promytý x xxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx X.
3. Činidla
3.1 xxxxxxxxxxx s xxxxx xxxx xxxx 40 x 50 °X. Xxxxxxx bromového čísla xxxx xxx xxxxx xxx 1 a xxxxxx po odpařování xxxxx xxx 2 xx/100 ml
3.2 xxxxx xxxxx, xxxxxxx
3.3 xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, x = 3 mol XXx/x
3.4 xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, např. xxxxxxxxx, Xxxxx-xxxxxxxx.
4. Přístroje x xxxxxxx
4.1 Extrakční xxxxxxxx, xx sifonem (Xxxxxxxxx přístroj), xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx asi 10 xxxxx xx xxxxxx. X xxxx xxx xxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 10 ml xx minutu.
4.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx, bez látek xxxxxxxxxxx v petroletheru, x porositou x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx bodu 4.1.
4.3 Xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xx 75 °X ± 3 °X, nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 100 °X ± 3 °X.
5. Xxxxxx
5.1 Postup X (xxx bod 8.1)
Xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx 5 x vzorku x xxxxxxxxx na 1 xx (4.2) a xxxxxxxxx smotkem xxxx xxx xxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxx do xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1) x xxxxxxxxxx šest xxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.1). Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx jímá xx suché, předem xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx [1].
Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxx xx xxxx 1,5 xxxxxx x sušárně (4.3). Xxxxx se xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x zváží. Suší xx dalších 30 xxxxx, xxx xx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx váženími xxxx xxx xxxxx xxx 1 xx).
5.2 Xxxxxx X
Xx xxxxxxx x xxxxxx 400 xx xxxx xx xxxxxxx xxxxx o xxxxxx 300 ml xx xxxxxx 2,5 x vzorku s xxxxxxxxx xx 1 xx (xxx xxx (8,2) a přidá xx 100 ml xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.3) x xxxxxx pemzy. Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx sklem xxxx xx xxxxxxx baňka xxxxxx refluxním xxxxxxxxx. Xxxx xx přivede xx xxxxxxx xxxx xx malém xxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxx x xxxx xx xx dobu xxxxx xxxxxx. Během xxxx xx musí xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx.
Xxxx se xxxxxxx x přidá xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.4), xxx xxx xxxxxxxx nedošlo xx ztrátám xxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx dojitý filtrační xxxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx vodou, až xx xxxxx neutrální xxxxxxx. Provede xx xxxxxxxx, zda xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx. Xxxx přítomnost xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx podle xxxxxxx X.
Xxxxxxx filtrační xxxxx se zbytkem xx xxxxxx na xxxxxxxx xxxx a xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.3) xxx xxxxxxx 100 °X ± 3 °X.
Xxxxxxx xxxxxxxxx papír x xxxxxxxxx zbytkem se xxxxx do xxxxxxxxx xxxxxxx (4.2) x xxxxxxxx smotkem xxxx xxx xxxx. Patrona xx vloží xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1) x xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxx 5.1.
6. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx vzorku.
7. Opakovatelnost
Rozdíl xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx by xxxxx xxxxxxxxxx:
- 0,2 % x xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx obsahu xxxx nižším xxx 5 %,
- 4,0 % xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xx 5 xx 10 %,
- 0,4 % x xxxxxxxxx xxxxxxx, při xxxxxx xxx 10 %.
8. Xxxxxxxx
8.1 U xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxx, xxxxx se xxxxxxx xxxx nebo xxxxx neumožňují odebrat xxxxxxxxxx xxxxxxxxx vzorek, xx postupuje xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxxx xx 20 x xxxxxx s xxxxxxxxx xx 1 xx a smíchá xx x 10 xxxx x xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (3.2). Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx (3.1) xxxxx xxxx 5.1. Xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx na 500 xx xxxxxxxxxxxxx (3.1) x xxxxxxxx xx. 50 xx xxxxxxx xx odpipetuje xx xxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx [2].
Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx a xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx bodu 5.1.
Xxxxx xxxx xx xxxxxxxx jako xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorce:
(10 a + x) × 5
xxx:
x = xxxxxxxx xxxxxx xx první xxxxxxxx v xxxxxxx (xxxxxxx xxxx extraktu)
b = hmotnost xxxxxx xx xxxxx extrakci x xxxxxxx
8.2 X xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxx xx xxxx navážka xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx 5 x.
8.3 Xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxx, xx xxxx před xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx B xxxxxxx s bezvodým xxxxxxx sodným.
8.4 X xxxx 5.2 se xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xx filtraci xxxxxxxx xxxxxx horká xxxx místo xxxx xxxxxxx.
8.5 X některých xxxxx xx musí xxxxxxxxxx xxxx sušení xxx 1,5 hod. Xx xxxx třeba xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxx x xxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx použít x xxxxxxxxxxx xxxxxx.
8.6 Xxx xxxxxx xxxx xxx 15 % xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx hydrolýzou extrakci xxxxx xxxxxxx X x xxxxxxxx extrakci xxxxx postupu X. Xxxxxx xx xx xxxxx xxxx xx xxxxx krmiva a xxxxx tuku v xxxxxx.
XXXX C
STANOVENÍ XXXXXXXXXXX
(2-[X-2-(xxxxxxxxxxxx)xxxxxxxxx]-3-xxxxxxxxxxxxxxxx-X1,X4-xxxxxx)
1. Xxxx a oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx obsah xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 5 mg/kg.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx x methanolu. Xxxxx olachindoxu se xxxxxxxx xxxxxx účinnou xxxxxxxxxxx chromatografií (XXXX) xx reverzní fázi xx použití UV xxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
3.1 xxxxxxxx
3.2 xxxxxxxx, xxx XXXX
3.3 xxxx, xxx XXXX
3.4 xxxxxxx fáze pro XXXX:
Xxxx vody (3.3) x xxxxxxxxx (3.2), 900 + 100 (X + V)
3.5 xxxxxxxxxx xxxxx: čistý xxxxxxxxxx 2-[X-2-(xxxxxxxxxxxx)xxxxxxxxx]-3-xxxxxxxxxxxxxxxx-X1,X4-xxxxxx, E 851
3.5.1 zásobní standardní xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, 250 μx/xx
Xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 200 xx se xxxxxx 50 xx xxxxxxxxxxx (3.5) x xxxxxxxxx xx 0,1 xx x xxxxx xxx 190 xx xxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xx 20 xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1). Po xxxxxxx z ultrazvukové xxxxx xx roztok xxxxxxx na laboratorní xxxxxxx, xxxxxx xxxxx xx značku x xxxxxxx. Xxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x uschovává v xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx každý xxxxx.
3.5.2 xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, 25 μx/xx
10,0 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.1) xx přenese xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 100 xx, xxxxxx se po xxxxxx mobilní xxxx (3.4) a xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx x chladničce. Xxxxx xxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxx denně xxxxxxx.
3.5.3 kalibrační roztoky
Do xxxx odměrných xxxxx x obsahu 50 xx se odpipetuje 1,0, 2,0, 5,0, 10,0, 15,0 x 20,0 ml xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.2). Xxxxxx xx mobilní xxxx (3.4) xx xxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Tyto xxxxxxx xxxxxxxxxx 0,5, 1,0, 2,5, 5,0, 7,5 a 10,0 μx xxxxxxxxxxx xx xx.
Xxxx roztoky xx xxxx připravovat xxxxx xxxxxxx.
4. Přístroje x xxxxxxx
4.1 ultrazvuková lázeň
4.2 xxxxxxxxxx xxxxxxxx
4.3 zařízení XXXX x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx ultrafialového xxxxxxxxx nebo s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx pole
4.3.1 xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, 250 mm x 4 mm, xxxxxxx C18, 10 μx, nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx
4.4 xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx 0,45 μx
5. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx provádět xxx xxxxxxxx světle xxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx skla.
5.1 Obecně
5.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx se xxxx předem analyzovat xxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
5.1.2 Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx krmiva xxxxxxxxxxx xxxxxxxx takového xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, které xxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxx X fortifikaci xx xxxxxx 50 xx/xx se odpipetuje 10,0 ml xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoku (3.5.1) do kónické xxxxx o obsahu 250 ml a xxxxxx se xxxxxx xx cca 0,5 xx. Xxxxx xx 50 x xxxxxxxxxx xxxxxx, řádně xx xxxxxxxx x xxxxx xx 10 xxxxx xxxxxx, přičemž xx xxxxx xxxxxxxxxx promíchá. Xxxx xx přejde x xxxxxxxx (5.2).
Poznámka:
Pro xxxxx xxxx metody xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx zkoušený xxxxxx x xxxxx obsahovat xxxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxx 50 x xxxxxx s přesností xx 0,01 x. Xxxxxxx xx do xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 1000 xx, xxxxx xx 100 xx methanolu (3.1) x xxxxx se xxxxxx na xxx xxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1). Xxxxx xx 410 xx xxxx a xxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 15 xxxxx. Xxxxx xx xxxxx x ultrazvukové xxxxx, xxxx xx xxxxx 30 xxxxx xx třepačce (4.2) x potom xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. 10,0 xx xxxxxxxx xx přenese xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 20 ml, xxxxxx xx xxxxx xx xxxxxx a xxxxxxxx. Poměrná xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) (viz xxx 9. Xxxxxxxx). Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx HPLC (5.3).
5.3 Xxxxxxxxx XXXX
5.3.1 Parametry:
Následující xxxxxxxx jsou doporučené, xxxxx být použity xxxx podmínky, xx xxxxxxxxxxx, xx dávají xxxxxxxxxx výsledky.
analytická xxxxxx (4.3.1)
xxxxxxx xxxx (3,4): Xxxx xxxx (3.3) x xxxxxxxxx (3.2), 900 + 100 (X + X)
xxxxxxxxx xxxxxxxx: 1,5–2 xx/xxx
xxxxxxxx xxxxxx xxxxx: 380 xx
xxxxx xxxxxxxx: 20 μx–100 μx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx, xx xx xxxxxxxxxx nastříkne xxxxxxxxxx xxxxxx (3.5.3) obsahující 2,5 μx/xx, až xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx časů.
5.3.2 Kalibrační xxxx
Xxx každý xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (plochy) xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx výšek (xxxxx) xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx koncentrací x μg/ml xxxx xxxxxxxxx.
5.3.3 Xxxxxx vzorku
Provede xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (5.2) xxx použití xxxxxxxx xxxxxx jako u xxxxxxxxxxxx roztoků x xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx.
6. Xxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxx výšky (xxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx x roztoku xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx x roztoku vzorku x μx/xx porovnáním x kalibračním xxxxxx (5.3.2).
Xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx w x xx/xx xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
x = x × 1 000 / x
xxx:
x = xxxxxxxxxxx olachindoxu x xxxxxxxx xxxxxx (5.2) x μg/ml
m = xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x g (5.2)
7. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (co-chromatography) xxxxx využitím xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx extraktu xxxxxx (5.2) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.3), xxxxxxxxxxxx 5,0 μx/xx xxxxxxxxxxx.
7.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxxxx (xx-xxxxxxxxxxxxxx)
Xxxxxxx xxxxxx (5.2) xx xxxxxxx xxxxxxxxx přiměřeného xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.3). Xxxxxxxx xxxxxxxxx olachindoxu xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx nalezeného x xxxxxxxx vzorku.
S xxxxxxx xx přidané xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx by xxxx xxxxx xxx xx xxxxxxx výšky xxxx xxxxxxxxxxx. Šířka píku x polovině xxxx xxxxx xxxx být x rozmezí ±10 % xxxxxxx šířky xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
7.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xx vyhodnocují xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
x) xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vzorku i xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx zaznamenaný xx xxxxxxx xxxx xx chromatogramu xxxxxx x xxxxxxxxxxx danou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxx x xxxxxxxx polem xx xxxxx ±2 xx;
x) xxx xxxxxx xxxxx xxxx 220 x 400 nm xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx lišit xx xxxxxxxxx xxxxx spektra x rozsahu 10 xx 100 % xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx a xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 % xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx;
x) xxx vlnové xxxxx xxxx 220 x 350 xx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxx zkoušeného xxxxxx xxxxx xx ostatních x xxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 10 xx 100 % xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx kritéria je xxxxxxxx, xxxxxxxx jsou xxxxxxxx stejná xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx nikde 15 % absorbance xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx.
Xxxx-xx xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx není xxxxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx stanovení, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx obsahu xxxxxxxxxxx xxxx 10 x 20 xx/xx, xxxxx xxxxxxxxxx15 % xxxxxxx xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vzorek xxxx být výtěžnost xxxxxxx 90 %.
8. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
X xxxxx XX xxx xxxxxxxx kruhový test, xxx němž xx 13 laboratoří xxxxxxxxxxx xxxxx vzorky xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxx modelového xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx uvedeny x následující tabulce:
|
| xxxxxx 1 |
vzorek 2 |
xxxxxx 3 |
xxxxxx 4 |
|
|
L |
13 |
10 |
11 |
11 |
|
A |
40 |
40 |
44 |
44 |
|
střední (xx/xx) |
- |
14,6 |
48,0 |
95,4 |
|
(Xx) (xx/xx) |
- |
0,82 |
2,05 |
6,36 |
|
(XX) (xx/xx) |
- |
1,62 |
4,28 |
8,42 |
|
XXx (%) |
- |
5,6 |
4,3 |
6,7 |
|
XXX (%) |
- |
11,1 |
8,9 |
8,8 |
|
xxxxxxxxx obsah (xx/xx) |
- |
15 |
50 |
100 |
|
xxxxxxxxx (%) |
- |
97,3 |
96,0 |
95,4 |
X: xxxxx laboratoří
n: xxxxx xxxxxxxxxxxx hodnot
Sr: xxxxxxxxxx xxxxxxxx opakovatelnosti
SR: xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
XXx: xxxxxxxx xxxxxxxxxx opakovatelnosti
CVR: xxxxxxxx koeficient xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
9. Xxxxxxxx
Xxxxxxx tato xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx více xxx 100 xx/xx xxxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx uspokojivé výsledky xxxxx navážkou xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.2) tak, aby xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.3.2).
[1] Xxxxx xx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxxx se xxxxxx xxxxx za xxxxxxxx xxxxxxx.
[2] Xxxxx xx xx tuk xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxxx se xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx.