Xxxxxxxx Xxxxxx 98/64/XX
xx xxx 3. xxxx 1998,
xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx aminokyselin, xxxx a olachindoxu x xxxxxxxx x xxxxxx xx mění xxxxxxxx 71/393/XXX
(Xxxx x xxxxxxxx pro XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x ohledem xx Xxxxxxx o xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxx 70/373/XXX xx xxx 20. xxxxxxxx 1970 o zavedení xxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx Aktem x přistoupení Xxxxxxxx, Xxxxxx x Xxxxxxx, x xxxxxxx na xxxxxx 2 uvedené xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx 70/373/XXX xxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx za xxxxxx kontroly, xxx xxxxxx splňují požadavky xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x správních předpisů xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx a složení, xx provádí xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx x analýzy xxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx Xxxx 79/373/XXX xx dne 2. xxxxx 1979 x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx trh [2], xxxxxxxxx xxxxxxxxx směrnicí Xxxxxx 97/47/ES [3], x xxxxxxxx Xxxx 93/74/XXX ze dne 13. xxxx 1993 x krmivech xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx [4], naposledy xxxxxxxxx směrnicí 96/25/XX [5], stanoví, xx xxxxx aminokyselin a xxxx xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx Xxxx 70/524/XXX xx xxx 23. xxxxxxxxx 1970 x xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx [6], xxxxxxxxx pozměněná xxxxxxxx Xxxxxx 98/19/ES [7], xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx musí být xxxxxx na xxxxxxxx, xxxxx je xxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx xxxxx xxxxxxxx Komise 71/393/XXX xx xxx 18. xxxxxxxxx 1971, kterou xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Společenství pro xxxxxx xxxxxxxx krmiv [8], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 84/4/EHS [9], stanoví xxxxxx xxxxxxx mimo jiné x xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx; že xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx upravit;
vzhledem x xxxx, xx xxxx xxx xxxxxxxxx analytické xxxxxx Společenství pro xxxxxxxx xxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x tomu, že xxxxxxxx této směrnice xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Stálého xxxxxx xxx krmiva,
PŘIJALA XXXX SMĚRNICI:
Článek 1
Členské xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxx úřední xxxxxxxx xxxxxx aminokyselin, tuku x obsahu xxxxxxxxxxx x krmivech se xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 2
X příloze xxxxxxxx Komise 71/393/EHS xx bod "4. Xxxxxxxxx xxxxxx tuku" xxxxxxxxx xxxxx X xxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Článek 3
1. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx právní x xxxxxxx předpisy xxxxxxxx xxx dosažení xxxxxxx x touto xxxxxxxx xxxxxxxxxx do 31. xxxxxxxx 1998. Uvědomí x xxxx xxxxxxxxxx Xxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx 1. xxxxx 1999.
Tato xxxxxxxx xxxxxxx členskými státy xxxx obsahovat xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxx musí xxx xxxxxx odkaz xxxxxx xxx xxxxxx úředním xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx stanoví xxxxxxx xxxxx.
2. Členské xxxxx xxxxx Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 4
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx v Úředním xxxxxxxx Xxxxxxxxxx společenství.
Xxxxxx 5
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X Xxxxxxx dne 3. xxxx 1998.
Xx Xxxxxx
Xxxxx Fischler
člen Xxxxxx
[1] Xx. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Xx. xxxx. X 86, 6.4.1979, x. 30.
[3] Úř. xxxx. X 211, 5.8.1977, x. 45.
[4] Úř. xxxx. X 237, 22.9.1993, x. 23.
[5] Úř. věst. X 125, 23.5.1996, x. 35.
[6] Xx. věst. X 270, 14.12.1970, x. 1.
[7] Xx. věst. X 96, 28.3.1998, x. 39.
[8] Xx. věst. X 279, 2.12.1971, x. 7.
[9] Xx. xxxx. X 15, 18.1.1984, x. 28.
XXXXXXX
XXXX X
Xxxxxxxxx aminokyselin
1. Xxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxx slouží xx stanovení xxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx) x xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxx x xxxxx) xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xx použitelná xxx xxxx xxxxxxxxxxxxx: cyst(e)in, xxxxxxxxx, xxxxx, threonin, xxxxxx, xxxxxxx, kyselinu xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx glutamovou, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxx, fenylalanin, xxxxxx, xxxxx, tyrosin x xxxxx.
Xxxx metoda xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx také x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx formami D x X. Xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx hydroxy xxxxxxx aminokyselin.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxxx aminokyseliny
Volné xxxxxxxxxxxxx xx extrahují xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx upraví xx pH 2,20. Xxxxxxxxxxxxx se separují xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xx xx xxxxxx s ninhydrinem xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 570 xx.
2.2 Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxx(x)xx x methionin xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx musí xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx v bodě 1 xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxx x xxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxx při 0 xX xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx dvojsíranem xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx vzorek xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx chlorovodíkovou (x = 6 xxx/x) po 23 xxxxx. Hydrolyzát xx xxxxxx xx pH 2,20. Aminokyseliny se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx chromatografií x xxxxxxxxx xx xx xxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 570 xx (440 nm pro xxxxxx).
3. Xxxxxxx
Xxxx xxx xxxxxxx dvakrát xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxx jakosti (xxxxxxxx &xx; 10 μS).
3.1 xxxxxxx xxxxxx, x = 30 %
3.2 xxxxxxxx xxxxxxxx, x = 98–100 %
3.3 xxxxx
3.4 xxxxxxxxx xxxxx
3.5 xxxxxxxx xxxxx
3.6 xxxxxxxx 5-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx
3.7 xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x hustotě xxxxxxxxx 1,18 x/xx
3.8 xxxxxxxx sodný, dihydrát
3.9 2,2-xxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx)
3.10 xxxxxxx xxxxx
3.11 ninhydrin
3.12 xxxxxxxxxxx, xxx xxxx 40–60 °X
3.13 xxxxxxxxx xxxx xxxx sloučenina xxxxxxxxxx xxxx vnitřní standard
3.14 xxxxx – plyn (&xx; 10 xxx xxxxxxx)
3.15 1-xxxxxxx
3.16 xxxxxxxxxxxxx
3.16.1 xxxxxxxxxx xxxxx uvedené x bodě 1; xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxx xx ve vakuu xxx X2X5 xxxx X2XX4 xxxxx xxxx xxxxxxxx
3.16.2 xxxxxxxx cysteová
3.16.3 xxxxxxxxxxxxxxx
3.17 xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx x = 7,5 mol/l:
300 x XxXX (3.5) xx xxxxxxxx xx vodě x doplní xx 1 litru.
3.18 xxxxxxxx xxxxx, roztok x = 1 xxx/x:
40 x NaOH (3.5) xx xxxxxxxx xx xxxx x doplní xx 1 litru.
3.19 xxxxxx kyseliny mravenčí x fenolu:
Smíchá xx 889 x xxxxxxxx xxxxxxxx (3.2) se 111 x xxxx x xxxxx xx 4,73 g xxxxxx (3.3).
3.20 hydrolyzační xxxx, x = 6 xxx XXx/x s xxxxxxxxx 1 x xxxxxx/x:
X 492 xx XXx (3.7) xx xxxxx 1 x xxxxxx (3.3) a xxxxxx se xxxxx xx 1 litru.
3.21 xxxxxxxxx xxxx, x = 6 xxx XXx/x s xxxxxxxxx 2% xxxxxxxxxxxxx:
8,2 xx XXx (3.7) xx xxxxxxx xxxxxxxxx 900 xx xxxx, xxxxx xx 20 ml xxxxxxxxxxxxx (3.9) x xxxxxx vodou xx 1 litr (3.7 x 3.9 xx xxxxx smíchat xxxxx).
3.22 xxxxxxxx 5-sulfosalicylová, β = 6 %:
60 x xxxxxxxx 5-xxxxxxxxxxxxxxx (3.6) se xxxxxxxx xx xxxx x xxxxxx xxxxx na 1 litr.
3.23 xxxxxxxx xxxx (kyselina xxxxxxxxxxx – xxxxx):
X xxxx xxxxxxx xx xxxxxx 0,5 xx xxxxxxxx xxxxxx (3.1) s 4,5 xx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxx (3.19); xxxxxxx xx x klidu 1 xxxxxx xxx 20–30 °X, xxx xx xxxxxxxx kyselina xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx se xxxx xxxxxxx x xxxxx x ledovou xxxxx (15 minut).
Pozor:
Je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x kůží x xxxxxxxx xxxxxxxx oděv.
3.24 xxxxxxxxxxx tlumivý roztok, x = 0,2 xxx Xx+/x, xX 2,20:
X přibližně 800 xx xxxx se xxxxxxxx 19,61 x xxxxxxxxx xxxxxxx (3,8), 5 xx xxxxxxxxxxxxx (3.9), 1 g xxxxxx (3.3) x 16,50 xx XXx (3.7). xX se xxxxxx xx 2,20. Xxxxxx xx xxxxx xx objem 1 xxxxx.
3.25 xxxxxx tlumivé xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxx (4.9)
3.26 xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxx (4.9)
3.27 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx nutno xxxxxxxxxx xxx teplotě xxx 5 °C.
3.27.1 xxxxxxx xxxxxxxxxx základní xxxxxxx aminokyselin (3.16.1), x = 2,5 μxxx/xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx roztok xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
3.27.2 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx roztok xxxxxxxx cysteové x xxxxxxxxxxxxxxxx, x = 1,25 μmol/ml
0,2115 x xxxxxxxx cysteové (3.16.2) x 0,2265 x xxxxxxxxxxxxxxxx se xxxxxxxx (3.16.3) x citronanovém xxxxxxxx roztoku (3.24) x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx a xxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx roztokem. Xxxxxxxx se při xxxxxxx xxx 5 °X xxxxxxx 12 xxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.27.1) xxxxxxxx kyselinu xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx.
3.27.3 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx vnitřního xxxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxx, x = 20 μxxx/xx
0,6560 x norleucinu (3.13) xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (3.24) v xxxxxxx xxxxx xx 250 xx a xxxxxx xx po značku xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx se xxx xxxxxxx xxx 5 °X nejdéle 6 xxxxxx.
3.27.4 xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx, x = 5 xxxx/50 μx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx x x = 10 xxxx/50 μx x xxxxxxxxx aminokyselin
Ve 100 xx xxxxxxx xx xxxxxxxx 2,2 x chloridu xxxxxxx (3.10) v 30 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24). Přidají xx 4,00 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.27.1), 4,00 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx (3.27.2) x 0,50 ml zásobního xxxxxxxxxxxx základního xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.27.3), xxxxx xx xxxxxxx. xX xx upraví xx 2,20 xxxxxxxxxx xxxxxx (3.18).
Xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx 50 xx xxxxxxx xxxxx, doplní xx xxxxxx citronanovým xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24) a xxxxxxx xx.
Xxxxxxxx xx xxx teplotě xxx 5 °X xxxxxxx 3 měsíce.
Viz xxxx xxxxxxxx 9.1.
3.27.5 xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx aminokyselin xxx použití x xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx podle xxxx 5.3.3.1 x xxx xxxxxxxx (5.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx 3.27.4 x vynecháním xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxx 5 °C xxxxxxx 3 xxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
4.1 xxxxx s xxxxxxx xxxx o obsahu 100 nebo 250 xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx
4.2 xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx skla x xxxxxx 100 xx xx šroubovým uzávěrem x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. Xxxxx, Xxxxxx) xxx xxxxxxx x xxxxxxx
4.3 xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxx ±2 °X
4.4 pH xxxx (xxx xxxxxxxxx místa)
4.5 xxxxxxxxxx xxxxx (0,2 μx)
4.6 odstředivka
4.7 rotační xxxxxxx xxxxxxx
4.8 xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx
4.9 xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx HPLC x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx detektorem.
Kolona xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx oddělení xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx čerpadla xx xxxxxxxx xxxxxxx ± 0,5 % xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx i xxxxxxx vzorku.
Některé analyzátory xxxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxxxx vykazuje xxxxxxxxxxx sodíkových xxxxx x = 0,8 xxx/x a xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx nezaručují xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx-xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mravenčí kyselinu x/xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx iontů. V xxxxxxx případě xx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xX xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxx 5 xx. Xxxxxxxx xx xx xxxxxxxx ve vakuu xxx xxxxxxx nejvýše 40 °X.
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx tak, xxx xxxxxx xxxxx x xxx 0,5 xx. Vzorky s xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxx mletím xxxxxxx na xxxxxxx xxx teplotě xxxxxxxxxxxxx 50 °X xxxx xxx xxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxx se xxxx xxxxxx extrahují xxxxxxxxxxxxx (3.12).
5.2 Xxxxxxxxx volných xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x x xxxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (1–5 g) upraveného xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxx xx 0,2 xx x xxxxx xx 100,0 xx xxxxxxxxx xxxxx (3.21). Xxxxx se xxxxx 60 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxx xx magnetické xxxxxxxx (4.8). Po xxxxxxx sedimentu xx xxxxxxxxxx 10,0 ml xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x obsahu 100 xx.
Xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx 50 xx xxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxx míchačce xxxxxxx 5 xxxxx. Xxxxxxxxxxxx xx přefiltruje xxxx xxxxxxxx tak, xxx xx odstranila xxxxxxx sraženina. 10,0 xx xxxxxxxxxxxx roztoku xx xxxxxxx xx xxxxxxx o xxxxxx 100 ml, xX xx upraví na 2,20 xxxxxx roztoku xxxxxxxxx xxxxxxx (3.18), xxxxx xx roztok xxxxxxx pomocí xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24) xx odměrné baňky xxxxxxxxx velikosti x xxxxxx po xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24).
Xxxxxxx-xx xx interní standard, xxxxx se 1,00 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.27.3) na každých 100 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24).
Xxxx xx pokračuje xxxxx xxxx 5.4 – chromatografie.
Nejsou-li xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx den, xxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx pod 5 °X.
5.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
5.3.1 oxidace
0,1 xx 1 g upraveného xxxxxx (5.1) xx xxxxxx x xxxxxxxxx 0,2 mg:
- xx xxxxx x xxxxxxx xxxx x xxxxxx 100 xx (4.1) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (5.3.2.3) xxxx
- do xxxxx x xxxxxxx xxxx o xxxxxx 250 xx (4.1), xxxxxxxx-xx se xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx
- xx nádoby x xxxxxx 100 xx xx xxxxxxxxxx uzávěrem (4.2) (xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 5.3.2.4).
Xxxxxxxx část xxxxxx by xxxx xxx xxxxx dusíku xxx 10 xx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 100 xx.
Xxxxx/xxxxxx xx xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxx a ochladí xx na 0 °X, xxxxx xx xxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxxx (3.23) x promíchá se xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx špičkou. Baňka/nádoba xx uzavře x xx xxxxx vzduchotěsnou xxxxx x xxxxx xx i x xxxxx x xxxxxxx xxxxx xx chladničky xxx 0 °X x xxxxxxx xx xxx 16 hodin. Xx 16 xxxxxxxx xx vyjme x xxxxxxxxxx a přebytečné xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx 0,84 x dvojsíranu xxxxxxx (3.4).
Xxxx se pokračuje xxxxx 5.3.2.1.
5.3.2 xxxxxxxxx
5.3.2.1 xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
X xxxxxxxxxxx vzorku xxxxxxxxxxxx xxxxx 5.3.1 xx xxxxx 25 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (3.20) xxx, xxx neulpěl xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx nádoby ani xx lžíci. Podle xxxxxxxxx xxxxxxx hydrolýzy xx xxxxxxxxx podle 5.3.2.3 nebo 5.3.2.4.
5.3.2.2 xxxxxxxxx neoxidovaných xxxxxx
Xx xxxxx x kulatým xxxx x xxxxxx 100 ml xxxx 250 ml (4.1) xxxx do xxxxxx x xxxxxx100 xx xx šroubovacím uzávěrem (4.2) se xxxxxx 0,1 xx 1 x xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) x přesností xx 0,2 mg. Xxxxxxxx xxxx xxxxxx xx měla xxx xxxxx xxxxxx xxx 10 mg. Opatrně xx xxxxx 25 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (3.20) x xxxxxx xx se xxxxxxx. Xxxx se xxxxxxxxx xxx podle 5.3.2.3 xxxx xxxxx 5.3.2.4.
5.3.2.3 xxxxxxxx hydrolýza
Ke směsi x xxxxx (xxxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.1 xxxx 5.3.2.2) xx xxxxxxx 3 skleněné xxxxxxx x směs se xxxxx do xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx 23 xxxxx. Po xxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxx promyje 5 xx citronanového xxxxxxxxx roztoku (3.24). Xxxxx se odpojí x xxxxxxx se x xxxxxx lázni. Xxxx se xxxxxxxxx xxxxx 5.3.3.
5.3.2.4 xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx xx směsí xxxxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.1 xxxx 5.3.2.2 xx xxxxxx xx sušárny (4.3) při 110 °X. Xxx se xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx narůstání tlaku (x xxxxxxxx vyvíjení xxxxxxxx xxxxx) x xxxxxxx x výbuchu, xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxx. Xx uplynutí xxxxx hodiny xx xxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx baňka xx xxxxxxx x sušárně (4.3) 23 xxxxx. Xx skončení hydrolýzy xx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx, opatrně xx odšroubuje xxxxxx x xxxxxxx se xx xxxxx x xxxxxxx xxxxx. Baňka xx xxxxx vychladnout.
Podle xxxxxxxxx xxxxxxx při xxxxxx xX (5.3.3) xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24) xx xxxxxxx x obsahu 250 xx xxxx do xxxxx x xxxxxxx xxxx x obsahu 250 xx.
Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx 5.3.3
5.3.3 xxxxxx xX
Xxxxx xxxx, xxxxx toleranci x xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.9), postupujte xxx úpravě xX xxxxx 5.3.3.1 nebo 5.3.3.2.
5.3.3.1 xxx chromatografické xxxxxxx (4.9), xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx sodíku:
Pokud xxxxxxxxxx aminokyselin xxxxxxxx xxxxxx koncentraci xxxxxx (xx-xx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx), doporučuje xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (3.27.3).
X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx odpařováním xxxxxxx xx hydrolyzátu 2,00 ml xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.27.3).
Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx podle 5.3.2.3 xxxx 5.3.2.4. xx xxxxxxx 2 xxxxx 1-xxxxxxxx (3.15).
Xx xxxxxxx xxxxxxx (4.7) se xxxxx xxxxx xx 5-10 xx xx xxxxx při 40 °X. Xxxxx by xx xxxxx náhodou xxxxxx pod 5 xx, hydrolyzát xx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx.
xX xx upraví na 2,20 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.18) x xxxxxxxxx se xxxxx xxxx 5.3.4.
5.3.3.2 pro xxxxxxx ostatní xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.9)
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.3 nebo 5.3.2.4 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx opatrným xxxxxxxx 17 ml xxxxxxx xxxxxxxxx sodného (3.17), xx xxxxxxx xxxxxxx x při xxxxxxxxx xxxxxxx pod 40 °X.
xX xx xxxxxx xx 2,20 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.18) xxx xxxxxxxx teplotě. Xxxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.3.4.
5.3.4 xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx (5.3.3.1 nebo 5.3.3.2) s xxxxxxxxx xX xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx citronanového xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24) xx odměrné xxxxx x obsahu 200 xx x xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24) xx xxxxxx xx xxxxxx.
Xxxxx-xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx 2,00 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.27.3) x xxxxx xx doplní xx značku xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24). Xxxxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx (5.4)
Xxxxxx-xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx týž xxx, xxxxxxxxxxx se xxx teplotě xxx 5 °X.
5.4 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx (5.2) x xxxxxxxxxx (5.3.4) xxxxxxxxx xxxxxxx. Směs se xxxxxxxx x potřebné xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx 0,2 μ (4.5). Výsledný xxxx roztok xx xxxxxxx xxxxxxxx chromatografii xx analyzátoru xxxxxxxxxxxx (4.9).
Xxxxxxx lze xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx je xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx stejné xxxxxxxx xxxxxxx ± 0,5 % jak xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx s xxxxxxxx, kdy je xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxxxxx x aminokyselinám xx xxx být v xxxxxxxxxxxx roztocích x x roztocích xxxxxx xx xxxxx nejpodobnější.
Frekvence xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx ninhydrinového xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxx se ředí xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx roztokem (3.24) xxx, aby xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 30 – 200 % xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx v xxxxxxxxxx xx typu xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx ionexu. Xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx separovat xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx i xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. V rozsahu xxxxx xxxxxxxx xx xxx chromatografický xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx.
Xxx xxxxxxx equimolárního xxxxxx xxxxxxxxxx aminokyselin, xx xxxx být xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx. Tyto xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 30 % xxxxxxxxxxx obsahu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, které mohou xxx xxxxx přesně xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.9).
Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xx poměr xxxxx sedla a xxxxxxx píku xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxxxx xxxxx přesahovat 2:10 (pokud xx xxxxxxx xxxxx xxxx(x)xx, xxxxxxxxx, threonin a xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx ovlivněno nedostatečnou xxxxxxxx xxxxxxxxxx píků). Xxx všechny ostatní xxxxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx lepší xxx 1:10.
Xxxxxx xxxx xxxxxxx, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx od "xxxxxxxxxx xxxxxxxx" a xxxxxxxxx.
6. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx píků xxxxxx x standardu se xxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx v x xx kg xxxxxx.
x xxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxx = X × X × XX × X / B × X × 1 000
Xx-xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx: X / X
X = xxxxxx xxxx hydrolyzátu xxxx xxxxxxxx
X = xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx standardního xxxxxxx
X = xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx x extraktu
D = xxxxxx xxxx interního xxxxxxxxx x kalibračním xxxxxxxxxxx xxxxxxx
XX = xxxxxxxxxxx váha xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
X = koncentrace xxxxxxxxx x μxxx/xx
X = hmotnost navážky xxxxxx (x) (xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxx je xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx)
X = xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (5.3.4) x ml xxxx xxxxxxx objem xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx 6.1
Xxxxxx x xxxxxxx xx x hydrolyzátech xxxxxxxxxxx vzorku xxxxxxx xxxx kyselina xxxxxxxx, xxx vypočítávají xx xxxx xxxxxx (X6X12X2X4X2, XX 240,30) x xxxxxxxx XX 120,15 (= 0,5 x 240,30).
Xxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku xxxxxxx xxxx methioninsulfon, xxx xxxxxxxxxx xx xxxx methionin x xxxxxxxx XX xxxxxxxxxx: 149,21.
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx po xxxxxxxx xxxx methionin, xxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx XX.
6.1 Xxxxxxx objem xxxxxxxxx xxxxxxxx (X) xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.2) xx vypočítá xxxxx tohoto xxxxxx:
X = 100 xx × (10 xx + 5 ml) / 10 xx × X&xxxx;xx / 10xx
X = xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx
7. Vyhodnocení xxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx porovnáním xx xxxxxxxxxxx úrovni x xxxx 1990 xxx xxxxxxx čtyř různých xxxxx (xxxxx xxxx xxx xxxxxxx, xxxxx xxxx pro xxxxxxxx, xxxxxxxxxx koncentrát, xxxxxx). Xx xxxxxxxxx extrémů xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
xxxxxxx hodnoty x x/xx
|
Xxxxxxxxxx materiál |
Aminokyselina |
|||
|
Threonin |
cyst(e)in |
Methionin |
lysin |
|
|
Krmná xxxx xxx prasata |
6,94 x = 15 |
3,01 x = 17 |
3.27 x =.17 |
9,55 n = 13 |
|
Krmná xxxx xxx xxxxxxxx |
9,31 x = 16 |
3,92 x = 18 |
5,08 x = 18 |
13,93 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
22,32 x = 16 |
5,06 x = 17 |
12,01 x = 17 |
47,74 x = 15 |
|
Xxxxxx |
58,42 x = 16 |
- |
90,21 x = 16 |
98,03 x = 16 |
x = xxxxx zúčastněných xxxxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxx vyjádřená xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx tabulkou:
standardní xxxxxxxx (Xx) opakovatelnosti x xxxxxxxxxx x g/kg
|
Referenční xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx |
0,13 n = 15 |
0,10 x = 17 |
0,11 x = 17 |
0,26 x = 13 |
|
Xxxxx směs pro xxxxxxxx |
0,20 x = 16 |
0,11 x = 18 |
0,16 x = 18 |
0,28 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx koncentrát |
0,48 n = 16 |
0,13 n = 17 |
0,27 x = 17 |
0,99 x = 15 |
|
Xxxxxx |
1.30 n = 16 |
_ |
2,19 n = 16 |
2,06 x = 16 |
x = xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx (%) xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (Xx)
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx směs xxx xxxxxxx |
1,9 x = 15 |
3,3 x = 17 |
3,4 x =.17 |
2,8 x = 13 |
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx |
2,1 x = 16 |
2,8 x = 18 |
3,1 x = 18 |
2,1 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
2,7 x = 16 |
2,6 x = 17 |
2,2 n = 17 |
2,4 x = 15 |
|
Xxxxxx |
2,2 x = 16 |
- |
2,4 x = 16 |
2,1 x = 16 |
x = xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
7.2 Reprodukovatelnost
Výsledky xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx zkoušek jsou xxxxxxxx x následující xxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (XX) x x/xx
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
xxxxxxxx |
Xxxx(x)xx |
xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx pro xxxxxxx |
0,28 x = 15 |
0,30 n = 17 |
0,23 n = 17 |
0,30 n = 13 |
|
Xxxxx xxxx pro xxxxxxxx |
0,48 x = 16 |
0,34 x = 18 |
0,55 x = 18 |
0,75 n = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
0,85 x = 16 |
0,62 x = 17 |
1,57 x = 17 |
1,24 x = 15 |
|
Xxxxxx |
2,49 x = 16 |
- |
6,20 x = 16 |
6,62 n = 16 |
x = xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx (%) xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (SR)
|
Referenční xxxxxxx |
xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
xxxxxxxx |
Xxxx(x)xx |
xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx směs xxx xxxxxxx |
4,1 x = 15 |
9,9 x = 17 |
7,0 x = 17 |
3,2 n = 13 |
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx |
5,2 x = 16 |
8,8 n = 18 |
10,9 n = 18 |
5,4 n = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
3,8 x = 16 |
12,3 x = 17 |
13,0 n = 17 |
3,0 n = 15 |
|
Xxxxxx |
4,3 n = 16 |
- |
6,9 n = 16 |
6,7 x = 16 |
x = xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
8. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx certifikovaných xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
9. Poznámky
9.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxx koncentrace kalibračních xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxx 3.27.4 x 3.27.5) x xxxxxxx xxxxxx (5.3.4) považovat xx doporučené.
Lineární xxxxxx xxxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxxx xxx všechny xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx, aby xx dosáhlo xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
9.2 Xxxxx se x analýze hydrolyzátů xxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx, musí xxx xxxxxxxx zkoušek xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
9.3 Při xxxxxxx xxxx xxxxxx x krmiv xxxxxxxxxxxx xxxx xxx 1 % chloridu (koncentráty, xxxxxxxxx krmiva, xxxxxxxxx xxxxxx) xxxx xxxxx x podhodnocení obsahu xxxxxxxxxx x musí xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx postup.
ČÁST X XXXXXXXXX TUKŮ
1. Xxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxx xx stanoví xxxxx xxxx x xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx semen x xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxxx Rady 136/66/XXX xx xxx 22. xxxx 1996.
Podle druhu x složení xxxxxx xx pro analýzu xxxxxxx jeden xx xxxx xxxxxxxxxxxxx postupů:
1.1 Xxxxxx X – xxxxx extrahovatelné tuky
Tato xxxxxx je xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, s xxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx do okruhu xxxxxxx X.
1.2 Xxxxxx X – xxxxxxx xxx
Xxxx metoda xx xxxxxxxxxx pro krmiva xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxx všechny xxxxx xxxxx. Používá xx xxx všechny xxxxxxxxx, x nichž xxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (např. lepky, xxxxxxxx, bramborové xxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxx podrobeny zpracování, xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x zahřívání).
1.3 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxx případech, xxx xx dosáhlo xxxxxxx xxxxxxxx postupem X, xxx xxxxxxxx X, xx xxxxx xxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxx podle xxxxxxx X.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxxxx X
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxx x xxxxx.
2.2 Xxxxxx B
Vzorek xx xxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Promytý a xxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxxxxx podle xxxxxxx X.
3. Xxxxxxx
3.1 xxxxxxxxxxx s xxxxx xxxx xxxx 40 x 50 °X. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxx xxx 1 a xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxx 2 xx/100 xx
3.2 xxxxx xxxxx, xxxxxxx
3.3 xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, x = 3 xxx XXx/x
3.4 xxxxxxxxx prostředky, např. xxxxxxxxx, Xxxxx-xxxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
4.1 Extrakční xxxxxxxx, se xxxxxxx (Xxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxx by xxxx xxxxxxx asi 10 xxxxx xx xxxxxx. X xxxx xxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 10 ml xx xxxxxx.
4.2 Extrakční xxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx x petroletheru, x porositou v xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx 4.1.
4.3 Xxxxxxx, xxx vakuová xxxxxxxx xx 75 °X ± 3 °X, nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 100 °X ± 3 °X.
5. Xxxxxx
5.1 Postup X (viz bod 8.1)
Xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx 5 x xxxxxx x xxxxxxxxx xx 1 xx (4.2) x xxxxxxxxx smotkem xxxx xxx xxxx.
Xxxxxxx se xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1) x xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.1). Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx jímá xx xxxxx, xxxxxx xxxxxxx baňky, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx [1].
Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxxx x baňce xx suší 1,5 xxxxxx x xxxxxxx (4.3). Xxxxx xx xxxxxxxxxxx x exsikátoru x zváží. Xxxx xx xxxxxxx 30 xxxxx, xxx xx xxxxxxxx, zda je xxxxxxxx tuku xxxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx menší xxx 1 xx).
5.2 Xxxxxx X
Xx kádinky x xxxxxx 400 xx xxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 300 xx xx odváží 2,5 x xxxxxx x xxxxxxxxx na 1 xx (xxx xxx (8,2) x xxxxx xx 100 ml xxxxxxxx chlorovodíkové (3.3) x úlomky xxxxx. Xxxxxxx se přikryje xxxxxxxxx xxxxx nebo xx kónická xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx chladičem. Xxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx na xxxxx xxxxx x vaří xx xx xxxx xxxxx hodiny. Xxxxx xxxx xx musí xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx.
Xxxx xx xxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.4), xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx ztrátám tuku. Xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx xxxxxx filtrační xxxxx zbavený xxxx. Xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xx xx získá xxxxxxxxx xxxxxxx. Provede xx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xx se xxxxxx xxxx před xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx X.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx sklo x xxxx xx půldruhé xxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.3) xxx xxxxxxx 100 °X ± 3 °X.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxx zbytkem xx xxxxx xx extrakční xxxxxxx (4.2) x xxxxxxxx smotkem vaty xxx xxxx. Xxxxxxx xx vloží xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1) x xxxx se xxxxxxxxx podle xxxxxxx x třetího odstavce xxxx 5.1.
6. Vyjádření xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx vzorku.
7. Opakovatelnost
Rozdíl xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx pracovníkem xx xxxxx xxxxxxxxxx:
- 0,2 % v xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxx nižším xxx 5 %,
- 4,0 % xxxxxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxx od 5 xx 10 %,
- 0,4 % v xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx nad 10 %.
8. Poznámky
8.1 U xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx odebrat xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xx postupuje následujícím xxxxxxxx:
Xxxxxx xx 20 x xxxxxx s xxxxxxxxx xx 1 xx x smíchá xx x 10 xxxx x xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (3.2). Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx (3.1) xxxxx xxxx 5.1. Xxxxxxxx extrakt se xxxxxx xx 500 xx xxxxxxxxxxxxx (3.1) x xxxxxxxx xx. 50 xx roztoku xx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxx baňky, obsahující xxxxxx pemzy [2].
Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx, baňka xx vysuší x xxxxxxxxx xx podle xxxxxxxxxx odstavce bodu 5.1.
Xxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx procento xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:
(10 x + x) × 5
xxx:
x = xxxxxxxx xxxxxx po xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx (xxxxxxx xxxx extraktu)
b = xxxxxxxx xxxxxx xx druhé xxxxxxxx x xxxxxxx
8.2 U xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx obsah xxxx xx xxxx navážka xxxxxxxxxx vzorku xxxxxx xx 5 g.
8.3 Xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx mají xxxxxx obsah vody, xx musí před xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx X xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
8.4 X xxxx 5.2 xx xxxx na xxxxxxxxxx xxxxxx xx filtraci xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx vody xxxxxxx.
8.5 U některých xxxxx se musí xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx 1,5 xxx. Xx xxxx třeba xxxxxxx přílišnému xxxxxxxxx, xxxxx může xxxx x xxxxxx výsledkům. Xx možno použít x xxxxxxxxxxx xxxxxx.
8.6 Xxx xxxxxx xxxx xxx 15 % xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx hydrolýzou extrakci xxxxx xxxxxxx X x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx postupu B. Xxxxxx xx xx xxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxx tuku v xxxxxx.
XXXX X
XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX
(2-[X-2-(xxxxxxxxxxxx)xxxxxxxxx]-3-xxxxxxxxxxxxxxxx-X1,X4-xxxxxx)
1. Xxxx a oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx x krmivech. Dolní xxx stanovitelnosti je 5 xx/xx.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx x methanolu. Xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (HPLC) xx xxxxxxxx fázi xx xxxxxxx XX xxxxxxxxx.
3. Činidla
3.1 methanol
3.2 xxxxxxxx, xxx HPCL
3.3 xxxx, xxx XXXX
3.4 xxxxxxx xxxx xxx XXXX:
Xxxx xxxx (3.3) x methanolu (3.2), 900 + 100 (X + V)
3.5 xxxxxxxxxx látka: xxxxx xxxxxxxxxx 2-[X-2-(xxxxxxxxxxxx)xxxxxxxxx]-3-xxxxxxxxxxxxxxxx-X1,X4-xxxxxx, E 851
3.5.1 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx olachindoxu, 250 μx/xx
Xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 200 xx se xxxxxx 50 xx xxxxxxxxxxx (3.5) x xxxxxxxxx xx 0,1 xx x xxxxx xxx 190 xx xxxx. Xxxxx se xxxxxxx xx 20 xxxxx xx ultrazvukové xxxxx (4.1). Xx xxxxxxx x ultrazvukové xxxxx xx roztok xxxxxxx na laboratorní xxxxxxx, xxxxxx xxxxx xx značku x xxxxxxx. Xxxxx se xxxxx hliníkovou xxxxx x xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx. Xxxxx roztok xx musí xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
3.5.2 xxxxxxxx standardní xxxxxx xxxxxxxxxxx, 25 μx/xx
10,0 xx xxxxxxxxx standardního xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.1) xx přenese xx xxxxxxx xxxxx o xxxxxx 100 xx, xxxxxx xx po xxxxxx xxxxxxx xxxx (3.4) a promíchá. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx fólií a xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxx připravovat xxxxx xxxxxxx.
3.5.3 xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x obsahu 50 xx xx odpipetuje 1,0, 2,0, 5,0, 10,0, 15,0 x 20,0 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (3.5.2). Xxxxxx se mobilní xxxx (3.4) po xxxxxx x promíchá. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx fólií. Tyto xxxxxxx odpovídají 0,5, 1,0, 2,5, 5,0, 7,5 x 10,0 μx xxxxxxxxxxx na xx.
Xxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
4. Přístroje x xxxxxxx
4.1 ultrazvuková lázeň
4.2 xxxxxxxxxx xxxxxxxx
4.3 xxxxxxxx XXXX x proměnnou xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx
4.3.1 xxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, 250 xx x 4 xx, xxxxxxx X18, 10 μx, xxxx srovnatelná xxxxxx
4.4 xxxxxxxxxx xxxxxx x póry 0,45 μx
5. Postup
Poznámka:
Olachindox je xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx se xxxx xxxxxxxx při xxxxxxxx xxxxxx xxxx x nádobách z xxxxxxx xxxx.
5.1 Xxxxxx
5.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, zda xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
5.1.2 Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx analýzou xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx množství xxxxxxxxxxx, které xxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxx X fortifikaci xx úroveň 50 xx/xx se odpipetuje 10,0 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.1) xx xxxxxxx xxxxx x obsahu 250 ml x xxxxxx xx xxxxxx xx xxx 0,5 xx. Xxxxx se 50 x modelového xxxxxx, xxxxx se xxxxxxxx x xxxxx xx 10 minut xxxxxx, přičemž xx xxxxx několikrát promíchá. Xxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx (5.2).
Poznámka:
Pro xxxxx této xxxxxx xx xxx modelové xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx zkoušený xxxxxx x xxxxx obsahovat xxxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxx 50 x xxxxxx x xxxxxxxxx xx 0,01 g. Xxxxxxx se do xxxxxxx baňky o xxxxxx 1000 xx, xxxxx xx 100 xx xxxxxxxxx (3.1) x baňka se xxxxxx na xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1). Xxxxx xx 410 xx xxxx a ponechá xx x ultrazvukové xxxxx xxxxxxx 15 xxxxx. Baňka xx xxxxx x ultrazvukové xxxxx, dále se xxxxx 30 xxxxx xx xxxxxxxx (4.2) x xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. 10,0 xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx baňky o xxxxxx 20 xx, xxxxxx xx vodou xx xxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) (viz xxx 9. Xxxxxxxx). Xxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXXX (5.3).
5.3 Xxxxxxxxx XXXX
5.3.1 Xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxxx podmínky, xx xxxxxxxxxxx, že xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
xxxxxxxxxx kolona (4.3.1)
xxxxxxx fáze (3,4): Xxxx vody (3.3) x xxxxxxxxx (3.2), 900 + 100 (X + X)
xxxxxxxxx xxxxxxxx: 1,5–2 ml/min
detekční xxxxxx xxxxx: 380 xx
xxxxx nástřiku: 20 μx–100 μl
Stabilita xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx, že xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx kalibrační xxxxxx (3.5.3) xxxxxxxxxx 2,5 μg/ml, xx xx xxxxxxx konstantních xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx časů.
5.3.2 Kalibrační xxxx
Xxx xxxxx kalibrační xxxxxx xx provede xxxxxxx nástřiků a xxxxxx xx střední xxxxxxx xxxxx (xxxxxx) xxxx xxx každou xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxx) píků xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx koncentrací x μx/xx xxxx xxxxxxxxx.
5.3.3 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx několik nástřiků xxxxxxxx vzorku (5.2) xxx xxxxxxx stejného xxxxxx jako u xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xx střední xxxxx (plocha) xxxx xxxxxxxxxxx.
6. Xxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxx) píků xxxxxxxxxxx x xxxxxxx vzorku xx zjistí koncentrace x xxxxxxx xxxxxx x μx/xx xxxxxxxxxx x kalibračním xxxxxx (5.3.2).
Xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x x xx/xx xx dán xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
x = x × 1 000 / x
xxx:
x = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxx vzorku (5.2) x μg/ml
m = xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x x (5.2)
7. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Identita
Identita xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xx-xxxxxxxxxxxxxx) xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx porovnávají xxxxxxx xxxxxxxx vzorku (5.2) x kalibračního xxxxxxx (3.5.3), xxxxxxxxxxxx 5,0 μx/xx xxxxxxxxxxx.
7.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xx-xxxxxxxxxxxxxx)
Xxxxxxx xxxxxx (5.2) se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (3.5.3). Xxxxxxxx xxxxxxxxx olachindoxu xx mělo xxxxxxxxx xxxxxxxx olachindoxu xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
X xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxx x zředění xxxxxxxx xx mělo xxxxx xxx ke xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx xxx x xxxxxxx ±10 % xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
7.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx pole
Výsledky xx vyhodnocují xxxxx xxxxxxxxxxxxx kritérií:
a) xxx xxxxxx délce maximální xxxxxxxx xxxxxx i xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx píku xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx danou xxxxxxxxxxx schopností xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxx x xxxxxxxx polem xx xxxxx ±2 xx;
x) při vlnové xxxxx xxxx 220 x 400 xx xx nesmí záznam xxxxxxx zkoušeného xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx vrcholu xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx spektra x xxxxxxx 10 xx 100 % xxxxxxxxx absorbance. Tohoto xxxxxxxx je dosaženo, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx nikde xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 % xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx;
x) xxx xxxxxx xxxxx xxxx 220 x 350 xx xx xxxxx spektrum xxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxx zkoušeného xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxx částí xxxxxxx x rozsahu 10 až 100 % relativní xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx stejná maxima x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx bodech xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx nikde 15 % xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx píku.
Není-li xxxxxxx x těchto xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx není potvrzena.
7.2 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx stanovení, xxxxxxxxxxx xx stejném xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx 10 x 20 mg/kg, xxxxx xxxxxxxxxx15 % xxxxxxx xxxxxxxx.
7.3 Výtěžnost
Pro xxxxxxxxx modelový vzorek xxxx xxx výtěžnost xxxxxxx 90 %.
8. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
X xxxxx XX xxx xxxxxxxx xxxxxxx test, xxx xxxx xx 13 xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, včetně xxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx tabulce:
|
| xxxxxx 1 |
xxxxxx 2 |
xxxxxx 3 |
xxxxxx 4 |
|
|
L |
13 |
10 |
11 |
11 |
|
A |
40 |
40 |
44 |
44 |
|
střední (xx/xx) |
- |
14,6 |
48,0 |
95,4 |
|
(Xx) (xx/xx) |
- |
0,82 |
2,05 |
6,36 |
|
(XX) (xx/xx) |
- |
1,62 |
4,28 |
8,42 |
|
XXx (%) |
- |
5,6 |
4,3 |
6,7 |
|
CVR (%) |
- |
11,1 |
8,9 |
8,8 |
|
xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx) |
- |
15 |
50 |
100 |
|
xxxxxxxxx (%) |
- |
97,3 |
96,0 |
95,4 |
X: počet xxxxxxxxxx
x: xxxxx jednotlivých hodnot
Sr: xxxxxxxxxx xxxxxxxx opakovatelnosti
SR: xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
XXx: xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
XXX: xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
9. Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx ověřena xxx xxxxxx xxxxxxxxxx více xxx 100 xx/xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx uspokojivé xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx vzorku x/xxxx xxxxxxxx extraktu (5.2) tak, xxx xx xxxxxxx koncentrace x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.3.2).
[1] Xxxxx xx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxx xxxxx za xxxxxxxx xxxxxxx.
[2] Xxxxx xx má tuk xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxx pemzy xx xxxxxxxx xxxxxxx.