Xxxxxxxx Komise 98/64/ES
ze xxx 3. xxxx 1998,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx metody Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx x xxxxxxxxxxx x krmivech x xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx 71/393/XXX
(Xxxx x xxxxxxxx pro XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX SPOLEČENSTVÍ,
s xxxxxxx xx Smlouvu x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxx 70/373/EHS za xxx 20. xxxxxxxx 1970 o xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [1], xxxxxxxxx pozměněnou Xxxxx x xxxxxxxxxxx Rakouska, Xxxxxx x Xxxxxxx, x zejména xx xxxxxx 2 uvedené xxxxxxxx,
xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxx 70/373/XXX xxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxx krmiv xx xxxxxx kontroly, xxx xxxxxx splňují xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx jejich xxxxxxx x složení, xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx odběru xxxxxx x analýzy xxxxxxxx xx Společenství;
vzhledem x xxxx, xx xxxxxxxx Xxxx 79/373/XXX xx dne 2. xxxxx 1979 x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx trh [2], xxxxxxxxx pozměněná xxxxxxxx Xxxxxx 97/47/ES [3], x xxxxxxxx Xxxx 93/74/XXX ze dne 13. září 1993 x xxxxxxxx xxxxxxxx xx zvláštním účelům xxxxxx [4], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx 96/25/XX [5], stanoví, xx xxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxx musí být xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx Rady 70/524/XXX xx dne 23. xxxxxxxxx 1970 x doplňkových látkách x xxxxxxxx [6], xxxxxxxxx xxxxxxxxx směrnicí Xxxxxx 98/19/ES [7], xxxxxxx, xx obsah xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxx přidána do xxxxxxx směsí;
vzhledem k xxxx, xx druhá xxxxxxxx Komise 71/393/EHS xx dne 18. xxxxxxxxx 1971, kterou xx stanoví xxxxxxxxxx xxxxxx Společenství pro xxxxxx kontrolu krmiv [8], naposledy xxxxxxxxx xxxxxxxx Komise 84/4/XXX [9], xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx mimo xxxx x pro xxxxxxxxxx xxxxxx tuku; že xx vhodné uvedené xxxxxx xxxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Společenství xxx xxxxxxxx těchto xxxxx;
xxxxxxxx x tomu, že xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx v xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx,
XXXXXXX XXXX SMĚRNICI:
Xxxxxx 1
Členské xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxx xxxxxx kontrolu xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx x obsahu olachindoxu x xxxxxxxx se xxxxxxxxx xx použití xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx této xxxxxxxx.
Xxxxxx 2
X xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 71/393/XXX xx xxx "4. Xxxxxxxxx obsahu tuku" xxxxxxxxx xxxxx X xxxxxxx této xxxxxxxx.
Článek 3
1. Xxxxxxx xxxxx uvedou x xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx nezbytné xxx xxxxxxxx souladu x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 31. xxxxxxxx 1998. Xxxxxxx x xxxx neprodleně Xxxxxx.
Xxxxx xxxx předpisy xxxxxxxx xx 1. xxxxx 1999.
Tato xxxxxxxx xxxxxxx členskými xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx tuto xxxxxxxx xxxx xxxx být xxxxxx xxxxx učiněn xxx xxxxxx úředním xxxxxxxxx. Způsob xxxxxx xx stanoví členské xxxxx.
2. Xxxxxxx státy xxxxx Komisi xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx směrnice.
Xxxxxx 4
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 5
Tato xxxxxxxx xx xxxxxx členským xxxxxx.
V Xxxxxxx xxx 3. září 1998.
Za Xxxxxx
Xxxxx Fischler
člen Komise
[1] Úř. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Xx. xxxx. X 86, 6.4.1979, x. 30.
[3] Úř. xxxx. X 211, 5.8.1977, x. 45.
[4] Úř. věst. X 237, 22.9.1993, x. 23.
[5] Xx. věst. X 125, 23.5.1996, x. 35.
[6] Xx. věst. X 270, 14.12.1970, x. 1.
[7] Xx. xxxx. X 96, 28.3.1998, x. 39.
[8] Úř. xxxx. X 279, 2.12.1971, x. 7.
[9] Úř. xxxx. X 15, 18.1.1984, x. 28.
XXXXXXX
XXXX X
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
1. Xxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx obsahu xxxxxxx (xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx) x xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxx x xxxxx) xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx použití xxxxxxxxxxx aminokyselin. Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxx(x)xx, xxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, kyselinu glutamovou, xxxxxx, xxxxxxxx, isoleucin, xxxxxx, fenylalanin, xxxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxxx.
Xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx aminokyselin x nemůže také x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx formami D x X. Není xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxxx xxxxxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx zředěnou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx makromolekuly xx srážejí xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx se upraví xx xX 2,20. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx chromatografií x xxxxxxx se po xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 570 xx.
2.2 Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx proces závisí xx stanovovaných xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxx(x)xx a xxxxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxx cysteovou a xx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx neoxidovaných xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x bodě 1 xxxxx xxx xxxxxxxxxx buď x xxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxx xxx 0 xX směsí xxxxxxxx xxxxxxxxxxx a fenolu. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx činidlo xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Oxidovaný xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx kyselinou xxxxxxxxxxxxxxx (x = 6 xxx/x) po 23 xxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxx na xX 2,20. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx iontoměničovou chromatografií x stanovují xx xx reakci x xxxxxxxxxxx fotometrickou xxxxxxx xxx 570 xx (440 nm xxx xxxxxx).
3. Xxxxxxx
Xxxx xxx xxxxxxx dvakrát xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx (vodivost &xx; 10 μX).
3.1 xxxxxxx xxxxxx, x = 30 %
3.2 xxxxxxxx mravenčí, x = 98–100 %
3.3 xxxxx
3.4 dvojsíran sodný
3.5 xxxxxxxx xxxxx
3.6 xxxxxxxx 5-xxxxxxxxxxxxxxx, dihydrát
3.7 xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx 1,18 g/ml
3.8 xxxxxxxx xxxxx, dihydrát
3.9 2,2-xxxxxxxxxxxxx (thiodiglykol)
3.10 xxxxxxx xxxxx
3.11 xxxxxxxxx
3.12 xxxxxxxxxxx, xxx xxxx 40–60 °X
3.13 xxxxxxxxx xxxx xxxx sloučenina použitelná xxxx xxxxxxx xxxxxxxx
3.14 xxxxx – xxxx (&xx; 10 xxx xxxxxxx)
3.15 1-xxxxxxx
3.16 xxxxxxxxxxxxx
3.16.1 xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxx 1; xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxx xx xx xxxxx xxx X2X5 xxxx X2XX4 xxxxx xxxx xxxxxxxx
3.16.2 xxxxxxxx cysteová
3.16.3 xxxxxxxxxxxxxxx
3.17 xxxxxxxx sodný, xxxxxx c = 7,5 xxx/x:
300 g XxXX (3.5) xx xxxxxxxx xx xxxx x xxxxxx xx 1 xxxxx.
3.18 xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx x = 1 mol/l:
40 x XxXX (3.5) xx xxxxxxxx xx xxxx x doplní xx 1 xxxxx.
3.19 xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx:
Xxxxxx se 889 x xxxxxxxx xxxxxxxx (3.2) xx 111 g xxxx x přidá xx 4,73 x xxxxxx (3.3).
3.20 hydrolyzační xxxx, x = 6 xxx HCl/l x xxxxxxxxx 1 g xxxxxx/x:
X 492 xx XXx (3.7) xx xxxxx 1 x xxxxxx (3.3) x xxxxxx se xxxxx xx 1 xxxxx.
3.21 xxxxxxxxx směs, x = 6 xxx XXx/x s xxxxxxxxx 2% xxxxxxxxxxxxx:
8,2 xx XXx (3.7) xx xxxxxxx xxxxxxxxx 900 xx xxxx, xxxxx xx 20 xx xxxxxxxxxxxxx (3.9) x xxxxxx xxxxx na 1 xxxx (3.7 x 3.9 xx xxxxx smíchat xxxxx).
3.22 xxxxxxxx 5-xxxxxxxxxxxxxxx, β = 6 %:
60 x kyseliny 5-xxxxxxxxxxxxxxx (3.6) xx xxxxxxxx xx xxxx x xxxxxx vodou xx 1 xxxx.
3.23 xxxxxxxx xxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxxx – fenol):
V malé xxxxxxx se xxxxxx 0,5 xx peroxidu xxxxxx (3.1) s 4,5 xx roztoku xxxxxxxx mravenčí x xxxxxxx (3.19); ponechá xx x klidu 1 xxxxxx xxx 20–30 °X, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx přidáním xx xxxxxx xx xxxx ochladí v xxxxx s xxxxxxx xxxxx (15 xxxxx).
Xxxxx:
Xx xxxxx zamezit xxxxxxxx x kůží x xxxxxxxx xxxxxxxx oděv.
3.24 xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, x = 0,2 xxx Xx+/x, xX 2,20:
X xxxxxxxxx 800 xx vody xx xxxxxxxx 19,61 g xxxxxxxxx xxxxxxx (3,8), 5 ml thiodiglykolu (3.9), 1 g xxxxxx (3.3) x 16,50 xx XXx (3.7). pH se xxxxxx xx 2,20. Xxxxxx xx vodou xx xxxxx 1 xxxxx.
3.25 xxxxxx tlumivé xxxxxxx připravované xxxxx xxxxxxxx xxx použitý xxxxxxxxxx (4.9)
3.26 xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx podle xxxxxxxx xxx použitý xxxxxxxxxx (4.9)
3.27 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxx teplotě xxx 5 °X.
3.27.1 xxxxxxx xxxxxxxxxx základní xxxxxxx aminokyselin (3.16.1), x = 2,5 μxxx/xx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x kyselině xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx obdržet i xxxxxxxx připravené.
3.27.2 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx roztok xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx, x = 1,25 μxxx/xx
0,2115 x xxxxxxxx xxxxxxxx (3.16.2) x 0,2265 g xxxxxxxxxxxxxxxx se xxxxxxxx (3.16.3) v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (3.24) x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx a xxxxxx xx po xxxxxx xxxxxxxxxxxx tlumivým roztokem. Xxxxxxxx se xxx xxxxxxx xxx 5 °X nejdéle 12 xxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx základní roztok (3.27.1) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx.
3.27.3 xxxxxxx standardní základní xxxxxx vnitřního standardu, xxxx. xxxxxxxxxx, x = 20 μmol/ml
0,6560 x norleucinu (3.13) xx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx tlumivém roztoku (3.24) v odměrné xxxxx xx 250 xx a doplní xx po xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx pod 5 °X nejdéle 6 xxxxxx.
3.27.4 xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx s xxxxxxxxxxx, x = 5 xxxx/50 μx kyseliny xxxxxxxx x methioninsulfonu x x = 10 xxxx/50 μx x ostatních xxxxxxxxxxxx
Xx 100 xx xxxxxxx xx xxxxxxxx 2,2 x xxxxxxxx sodného (3.10) x 30 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24). Xxxxxxx xx 4,00 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx základního xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.27.1), 4,00 xx zásobního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx (3.27.2) x 0,50 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.27.3), xxxxx xx používá. xX xx upraví xx 2,20 xxxxxxxxxx xxxxxx (3.18).
Roztok se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx do 50 xx odměrné xxxxx, doplní po xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24) a xxxxxxx xx.
Xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxx 5 °X xxxxxxx 3 xxxxxx.
Xxx xxxx xxxxxxxx 9.1.
3.27.5 xxxxxxxxxx xxxxxx standardních aminokyselin xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.3.3.1 x xxx extrakty (5.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx 3.27.4 x vynecháním chloridu xxxxxxx.
Xxxxxxxxx při xxxxxxx xxx 5 °C xxxxxxx 3 měsíce.
4. Xxxxxxxxx a pomůcky
4.1 xxxxx x xxxxxxx xxxx o xxxxxx 100 xxxx 250 xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx
4.2 xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx 100 xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x gumovým nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. Xxxxx, Schott) pro xxxxxxx v sušárně
4.3 xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx než ±2 °X
4.4 pH xxxx (xxx xxxxxxxxx místa)
4.5 xxxxxxxxxx filtr (0,2 μx)
4.6 xxxxxxxxxxx
4.7 rotační xxxxxxx xxxxxxx
4.8 xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx
4.9 xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx zařízení HPLC x iontoměničovou xxxxxxx, xxxxxxxxx xxx ninhydrin, xxxx xxxxxxxxx derivatizaci x fotometrickým xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxx xx jiných xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Průtok xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx ± 0,5 % xx xxxx zahrnující xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx analyzátory xxxxxxxxxxxx je možno xxxxxx v xxxxxxx, xx xxxxxxxxxx vykazuje xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x = 0,8 xxx/x x obsahuje xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx separaci určitých xxxxxxxxxxxx, obsahuje-li hydrolyzát xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x/xxxx vysoké koncentrace xxxxxxxxxx xxxxx. V xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx kyseliny xxxx xxxxxxx xX xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx 5 xx. Xxxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx vakuu xxx teplotě xxxxxxx 40 °C.
5. Postup
5.1 Xxxxxxxx vzorku
Vzorek se xxxxxx mletím tak, xxx xxxxxx xxxxx x xxx 0,5 xx. Xxxxxx x xxxxxxx vlhkostí xx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 50 °X xxxx xxx xxxxxxxx. Vzorky x xxxxxxx obsahem xxxx xx xxxx xxxxxx extrahují xxxxxxxxxxxxx (3.12).
5.2 Xxxxxxxxx volných xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x v xxxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx se xxxxxx příslušné množství (1–5 x) xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxx xx 0,2 xx x přidá xx 100,0 xx xxxxxxxxx xxxxx (3.21). Xxxxx xx xxxxx 60 minut xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.8). Xx xxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxxxx 10,0 xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x obsahu 100 xx.
Xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx 50 xx xxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx v míchání xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxx. Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. 10,0 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxx x xxxxxx 100 xx, xX xx xxxxxx xx 2,20 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx sodného (3.18), xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx pomocí citronanového xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24) xx odměrné xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xx značku xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24).
Xxxxxxx-xx xx interní standard, xxxxx xx 1,00 xx xxxxxxxxx standardu (3.27.3) na xxxxxxx 100 ml xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx roztokem (3.24).
Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx bodu 5.4 – chromatografie.
Nejsou-li xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxx, xxxxxxxxxxx se xxx xxxxxxx pod 5 °X.
5.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
5.3.1 oxidace
0,1 xx 1 g xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxxxx x xxxxxxxxx 0,2 xx:
- do xxxxx x kulatým xxxx x xxxxxx 100 ml (4.1) xxx otevřenou hydrolýzu (5.3.2.3) xxxx
- xx xxxxx x xxxxxxx xxxx x xxxxxx 250 xx (4.1), xxxxxxxx-xx xx nízká xxxxxxxxxxx sodíku xxxx
- xx nádoby o xxxxxx 100 xx xx šroubovací xxxxxxxx (4.2) (xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 5.3.2.4).
Xxxxxxxx část xxxxxx xx měla xxx obsah xxxxxx xxx 10 xx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 100 xx.
Xxxxx/xxxxxx xx xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxx x ochladí xx xx 0 °X, xxxxx se xxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxxx (3.23) x promíchá xx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx. Baňka/nádoba xx xxxxxx i xx lžící xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xx i s xxxxx x xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx 0 °C x xxxxxxx se xxx 16 xxxxx. Xx 16 xxxxxxxx xx vyjme x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx 0,84 x xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.4).
Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.1.
5.3.2 xxxxxxxxx
5.3.2.1 xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
X xxxxxxxxxxx xxxxxx připravenému xxxxx 5.3.1 se xxxxx 25 ml xxxxxxxxxxxx směsi (3.20) xxx, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx na xxxxxxx nádoby ani xx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.3 nebo 5.3.2.4.
5.3.2.2 xxxxxxxxx neoxidovaných xxxxxx
Xx xxxxx s xxxxxxx xxxx o xxxxxx 100 xx nebo 250 xx (4.1) xxxx xx nádoby x obsahu100 xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.2) xx xxxxxx 0,1 až 1 x xxxxxxxxxx vzorku (5.1) x xxxxxxxxx xx 0,2 xx. Xxxxxxxx xxxx vzorku xx měla mít xxxxx xxxxxx xxx 10 xx. Xxxxxxx xx xxxxx 25 xx hydrolyzační xxxxx (3.20) a xxxxxx xx se xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx xxx podle 5.3.2.3 xxxx xxxxx 5.3.2.4.
5.3.2.3 xxxxxxxx hydrolýza
Ke xxxxx x xxxxx (xxxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.1 xxxx 5.3.2.2) xx přidají 3 skleněné kuličky x xxxx se xxxxx xx xxxxxxx xxxx pod zpětným xxxxxxxxx xx dobu 23 xxxxx. Po xxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxx promyje 5 xx citronanového xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24). Xxxxx xx odpojí x xxxxxxx xx x ledové xxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx 5.3.3.
5.3.2.4 uzavřená xxxxxxxxx
Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx podle 5.3.2.1 xxxx 5.3.2.2 se xxxxxx xx xxxxxxx (4.3) xxx 110 °X. Aby se xxxxx první hodiny xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (x důsledku xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx) x xxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx na xxxxx. Nádoba xx xxxxxxxxx. Xx uplynutí xxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx baňka xx xxxxxxx x xxxxxxx (4.3) 23 xxxxx. Xx skončení xxxxxxxxx xx baňka vyjme xx xxxxxxx, xxxxxxx xx odšroubuje xxxxxx x xxxxxxx xx xx lázně x xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx při xxxxxx xX (5.3.3) xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24) xx kádinky x obsahu 250 xx nebo do xxxxx x kulatým xxxx o xxxxxx 250 xx.
Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx 5.3.3
5.3.3 xxxxxx pH
Podle xxxx, xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xx analyzátor xxxxxxxxxxxx (4.9), xxxxxxxxxx xxx úpravě xX xxxxx 5.3.3.1 xxxx 5.3.3.2.
5.3.3.1 xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.9), vyžadující xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx:
Xxxxx xxxxxxxxxx aminokyselin vyžaduje xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xx-xx xx snížit xxxxx xxxxxxx), xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx standardní xxxxxx (3.27.3).
X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx odpařováním xxxxxxx do hydrolyzátu 2,00 xx vnitřního xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.27.3).
Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.3 xxxx 5.3.2.4. xx xxxxxxx 2 xxxxx 1-xxxxxxxx (3.15).
Xx rotační xxxxxxx (4.7) xx xxxxx xxxxx na 5-10 ml xx xxxxx xxx 40 °X. Pokud xx xx objem náhodou xxxxxx xxx 5 xx, hydrolyzát xx xxxxx xxxxxxxxx a xxxxx analýzu xxxxx.
xX xx xxxxxx xx 2,20 roztokem xxxxxxxxx xxxxxxx (3.18) a xxxxxxxxx se xxxxx xxxx 5.3.4.
5.3.3.2 xxx xxxxxxx ostatní analyzátory xxxxxxxxxxxx (4.9)
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.3 nebo 5.3.2.4 xx částečně xxxxxxxxxxxxx opatrným přidáním 17 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.17), xx xxxxxxx xxxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxx pod 40 °X.
xX se upraví xx 2,20 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.18) xxx pokojové xxxxxxx. Xxxx se pokračuje xxxxx bodu 5.3.4.
5.3.4 xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx (5.3.3.1 xxxx 5.3.3.2) x upraveným xX se kvantitativně xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24) xx odměrné baňky x xxxxxx 200 xx a xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24) xx xxxxxx xx xxxxxx.
Xxxxx-xx xxxxx použit xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx 2,00 ml xxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.27.3) x xxxxx se doplní xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24). Xxxxxxxx xx promíchá.
Dále xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx (5.4)
Xxxxxx-xx xxxxxxx xxxxxx analyzovány xxx xxx, xxxxxxxxxxx se xxx xxxxxxx pod 5 °C.
5.4 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx (5.2) a xxxxxxxxxx (5.3.4) xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx se xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx filtrem 0,2 μ (4.5). Xxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.9).
Xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx nebo automaticky. Xxxxxx xx xxxxxxxx, xxx se xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx stejné xxxxxxxx xxxxxxx ± 0,5 % jak xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx vzorků x xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxxxxx x aminokyselinám xx xxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxx xx možná xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx hlavně xx xxxxxxxxx ninhydrinového xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx nebo xxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24) tak, aby xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 30 – 200 % xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx se xxxxx xxxx v xxxxxxxxxx xx typu xxxxxxxxx analyzátoru x xxxxxxxxx ionexu. Xxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx i xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx pozitivních xxxxxxxxx. V xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx objemů xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx sloupec.
Při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx roztok xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx poměry xxxxx k xxxxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 30 % xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, které mohou xxx xxxxx přesně xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxx aminokyselin (4.9).
Xxx xxxxxxxx threoninu a xxxxxx by poměr xxxxx sedla a xxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx aminokyselin na xxxxxxxxxxxxx neměl přesahovat 2:10 (xxxxx xx xxxxxxx xxxxx cyst(e)in, xxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx). Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxx než 1:10.
Xxxxxx xxxx xxxxxxx, xx lysin xxxx xxxxxxxxx xx "xxxxxxxxxx xxxxxxxx" x xxxxxxxxx.
6. Xxxxxxx x vyjádření xxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxx x standardu xx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx v x xx xx xxxxxx.
x xxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxx = X × E × XX × X / B × X × 1 000
Xx-xx použit interní xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx: D / X
X = xxxxxx xxxx hydrolyzátu xxxx xxxxxxxx
X = plocha xxxx xxxxxxxxxxxx standardního xxxxxxx
X = xxxxxx xxxx interního xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx nebo x xxxxxxxx
X = xxxxxx xxxx interního xxxxxxxxx x kalibračním xxxxxxxxxxx roztoku
MV = xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
X = koncentrace xxxxxxxxx v μxxx/xx
X = hmotnost xxxxxxx xxxxxx (x) (xxxxxxxxxx xx xxxxxxx váhu xxxxx je vzorek xxxxxxx xxxx xxxxxxxx)
X = xxxxxxx objem xxxxxxxxxx xxxxxxx (5.3.4) x xx nebo xxxxxxx objem xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx 6.1
Xxxxxx a xxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx kyselina xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx se xxxx cystin (X6X12X2X4X2, XX 240,30) x xxxxxxxx MV 120,15 (= 0,5 x 240,30).
Xxxxxxxxx se v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku xxxxxxx jako xxxxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx XX methioninu: 149,21.
Xxxxxxx xxxxx methionin xx zjišťuje xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx MV.
6.1 Xxxxxxx objem zředěného xxxxxxxx (X) při xxxxxxxxx volných aminokyselin (5.2) xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
X = 100 xx × (10 xx + 5 ml) / 10 xx × X&xxxx;xx / 10xx
X = xxxxx xxxxxxxxxx extraktu
7. Xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxx xxxxxx byla xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx 1990 xxx xxxxxxx xxxx různých xxxxx (xxxxx směs xxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxx broilery, xxxxxxxxxx koncentrát, xxxxxx). Xx vyloučení extrémů xxxx výsledky xxxxxxxxx xxxxxx x standardních xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
xxxxxxx hodnoty x g/kg
|
Referenční xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx |
6,94 x = 15 |
3,01 x = 17 |
3.27 x =.17 |
9,55 x = 13 |
|
Xxxxx směs xxx xxxxxxxx |
9,31 x = 16 |
3,92 x = 18 |
5,08 n = 18 |
13,93 n = 16 |
|
Proteinový koncentrát |
22,32 x = 16 |
5,06 x = 17 |
12,01 x = 17 |
47,74 x = 15 |
|
Premix |
58,42 x = 16 |
- |
90,21 x = 16 |
98,03 x = 16 |
n = xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxx vyjádřená xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx standardní xxxxxxxx xx dána xxxxxxxxxxx tabulkou:
standardní xxxxxxxx (Xx) xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx v x/xx
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx pro xxxxxxx |
0,13 x = 15 |
0,10 x = 17 |
0,11 n = 17 |
0,26 x = 13 |
|
Xxxxx xxxx pro xxxxxxxx |
0,20 n = 16 |
0,11 n = 18 |
0,16 x = 18 |
0,28 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx koncentrát |
0,48 x = 16 |
0,13 x = 17 |
0,27 n = 17 |
0,99 x = 15 |
|
Premix |
1.30 n = 16 |
_ |
2,19 n = 16 |
2,06 n = 16 |
x = xxxxx zúčastněných laboratoří
Variační xxxxxxxxxx (%) xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (Xx)
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx směs xxx xxxxxxx |
1,9 a = 15 |
3,3 x = 17 |
3,4 x =.17 |
2,8 x = 13 |
|
Krmná xxxx xxx xxxxxxxx |
2,1 x = 16 |
2,8 x = 18 |
3,1 x = 18 |
2,1 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
2,7 n = 16 |
2,6 x = 17 |
2,2 x = 17 |
2,4 x = 15 |
|
Xxxxxx |
2,2 x = 16 |
- |
2,4 n = 16 |
2,1 x = 16 |
x = xxxxx xxxxxxxxxxxx laboratoří
7.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx standardních xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ze shora xxxxxxxxx zkoušek xxxx xxxxxxxx v následující xxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (XX) x x/xx
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
xxxxxxxx |
Xxxx(x)xx |
xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx |
0,28 x = 15 |
0,30 x = 17 |
0,23 x = 17 |
0,30 x = 13 |
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx |
0,48 n = 16 |
0,34 n = 18 |
0,55 x = 18 |
0,75 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx koncentrát |
0,85 n = 16 |
0,62 n = 17 |
1,57 x = 17 |
1,24 x = 15 |
|
Xxxxxx |
2,49 x = 16 |
- |
6,20 n = 16 |
6,62 n = 16 |
x = xxxxx xxxxxxxxxxxx laboratoří
Variační xxxxxxxxxx (%) xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (SR)
|
Referenční xxxxxxx |
xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
xxxxxxxx |
Xxxx(x)xx |
xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx pro xxxxxxx |
4,1 n = 15 |
9,9 n = 17 |
7,0 n = 17 |
3,2 n = 13 |
|
Xxxxx směs pro xxxxxxxx |
5,2 x = 16 |
8,8 n = 18 |
10,9 n = 18 |
5,4 n = 16 |
|
Xxxxxxxxxx koncentrát |
3,8 x = 16 |
12,3 n = 17 |
13,0 x = 17 |
3,0 x = 15 |
|
Premix |
4,3 x = 16 |
- |
6,9 n = 16 |
6,7 n = 16 |
n = xxxxx zúčastněných xxxxxxxxxx
8. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx ověřuje xxxxxxxxxx xxxxxxx certifikovaných xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, jsou-li k xxxxxxxxx. Doporučuje se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
9. Xxxxxxxx
9.1 Xxxxxxxx k xxxxxxxx xxxx analyzátory xxxxxxxxxxxx xx se xxxx xxxxxxx koncentrace xxxxxxxxxxxx xxxxxxx standardů xxxxxxxxxxxx (xxx 3.27.4 x 3.27.5) x xxxxxxx xxxxxx (5.3.4) považovat xx doporučené.
Lineární xxxxxx xxxxxxxxx se musí xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx tak, xxx xx dosáhlo ploch xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
9.2 Xxxxx se x xxxxxxx hydrolyzátů xxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx, musí xxx xxxxxxxx zkoušek xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
9.3 Xxx xxxxxxx této xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx než 1 % xxxxxxxx (koncentráty, xxxxxxxxx krmiva, doplňková xxxxxx) může xxxxx x podhodnocení xxxxxx xxxxxxxxxx a musí xx proto xxxxxx xxxxxxxxx postup.
ČÁST B XXXXXXXXX TUKŮ
1. Xxxx x oblast použití
Touto xxxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxx v xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx podle xxxxxxxx Rady 136/66/XXX xx dne 22. xxxx 1996.
Xxxxx xxxxx x xxxxxxx krmiva xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx:
1.1 Xxxxxx X – xxxxx extrahovatelné xxxx
Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx rostlinného xxxxxx, s výjimkou xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx do xxxxxx xxxxxxx X.
1.2 Xxxxxx X – xxxxxxx xxx
Xxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx. Používá xx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx, x nichž xxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx bez xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx. xxxxx, xxxxxxxx, bramborové xxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx).
1.3 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx všech případech, xxx se dosáhlo xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx X, xxx postupem X, xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx X.
2. Princip
2.1 Postup X
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxx x zbytek xx vysuší x xxxxx.
2.2 Xxxxxx B
Vzorek xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Směs xx xxxxxxx a xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx se xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx A.
3. Xxxxxxx
3.1 xxxxxxxxxxx s bodem xxxx xxxx 40 x 50 °X. Xxxxxxx xxxxxxxxx čísla xxxx xxx menší xxx 1 x xxxxxx po odpařování xxxxx xxx 2 xx/100 xx
3.2 xxxxx xxxxx, xxxxxxx
3.3 xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, x = 3 mol XXx/x
3.4 xxxxxxxxx prostředky, xxxx. xxxxxxxxx, Hyflo-supercel.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx (Xxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxx by xxxx xxxxxxx asi 10 xxxxx xx hodinu. X typu xxx xxxxxx xx měla xxx refluxní rychlost xxx 10 ml xx minutu.
4.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx, bez xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx v xxxxxxx x požadavky xxxxx xxxx 4.1.
4.3 Xxxxxxx, buď xxxxxxx xxxxxxxx xx 75 °X ± 3 °X, nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx na 100 °X ± 3 °X.
5. Postup
5.1 Xxxxxx X (viz bod 8.1)
Xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx 5 x xxxxxx x xxxxxxxxx na 1 xx (4.2) x xxxxxxxxx smotkem xxxx xxx xxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1) x xxxxxxxxxx xxxx hodin xxxxxxxxxxxxx (3.1). Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx se jímá xx xxxxx, xxxxxx xxxxxxx baňky, která xxxxxxxx xxxxxx pemzy [1].
Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxxx v baňce xx xxxx 1,5 xxxxxx x sušárně (4.3). Nechá se xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxx. Xxxx xx xxxxxxx 30 xxxxx, xxx xx xxxxxxxx, xxx je xxxxxxxx tuku xxxxxxxxxx (xxxxxx hmotnosti mezi xxxxx následujícími xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx 1 xx).
5.2 Xxxxxx B
Do kádinky x obsahu 400 xx nebo xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 300 xx xx xxxxxx 2,5 x vzorku x xxxxxxxxx na 1 xx (xxx xxx (8,2) a xxxxx xx 100 xx xxxxxxxx chlorovodíkové (3.3) x xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx se přikryje xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx přivede xx xxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxx x xxxx xx xx xxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx se musí xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx.
Xxxx se xxxxxxx x přidá se xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.4), xxx xxx filtraci xxxxxxx xx xxxxxxx tuku. Xxxxxxxx xx přes xxxxxxxxx xxxxxx filtrační xxxxx zbavený tuku. Xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx tuk. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx A.
Dvojitý xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxx na xxxxxxxx xxxx x xxxx se xxxxxxxx xxxxxx v horkovzdušné xxxxxxx (4.3) xxx xxxxxxx 100 °X ± 3 °C.
Dvojitý xxxxxxxxx papír x xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.2) x xxxxxxxx xxxxxxx vaty xxx xxxx. Patrona xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx přístroje (4.1) x dále xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x třetího xxxxxxxx xxxx 5.1.
6. Vyjádření xxxxxxxx
Xxxxxxxx zbytku xx xxxxxxx xxxx procento xx vzorku.
7. Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx prováděných xx xxxxxxx vzorku xxxxxxx xxxxxxxxxxx by xxxxx přesáhnout:
- 0,2 % v xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx obsahu xxxx xxxxxx než 5 %,
- 4,0 % relativně x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xx 5 xx 10 %,
- 0,4 % x xxxxxxxxx xxxxxxx, při xxxxxx xxx 10 %.
8. Xxxxxxxx
8.1 U xxxxxxx s xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxx nebo xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxxx xx 20 x xxxxxx x xxxxxxxxx xx 1 xx x xxxxxx xx x 10 xxxx x xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (3.2). Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx (3.1) xxxxx bodu 5.1. Xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xx 500 xx xxxxxxxxxxxxx (3.1) x promíchá xx. 50 xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxx suché, předem xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx [2].
Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx, baňka xx vysuší x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx odstavce bodu 5.1.
Xxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx procento xx vzorku xxxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorce:
(10 x + x) × 5
xxx:
x = xxxxxxxx xxxxxx po první xxxxxxxx x xxxxxxx (xxxxxxx xxxx xxxxxxxx)
x = xxxxxxxx xxxxxx xx druhé xxxxxxxx x gramech
8.2 U xxxxxxx, xxxxx mají xxxxx xxxxx tuku xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx zvýšit xx 5 x.
8.3 Xxxxxx pro domácí xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxx, xx musí xxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx B xxxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
8.4 V xxxx 5.2 xx xxxx na xxxxxxxxxx xxxxxx xx filtraci xxxxxxxx použít horká xxxx místo xxxx xxxxxxx.
8.5 X xxxxxxxxx xxxxx xx musí xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx 1,5 xxx. Xx xxxx třeba xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxx x nízkým výsledkům. Xx xxxxx použít x xxxxxxxxxxx xxxxxx.
8.6 Xxx xxxxxx tuku xxx 15 % xx doporučuje xxxxxxx xxxx hydrolýzou xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx X x xxxxxxxx extrakci xxxxx xxxxxxx X. Xxxxxx to xx xxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxx a xxxxx tuku x xxxxxx.
XXXX C
STANOVENÍ XXXXXXXXXXX
(2-[X-2-(xxxxxxxxxxxx)xxxxxxxxx]-3-xxxxxxxxxxxxxxxx-X1,X4-xxxxxx)
1. Xxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxx se xxxxxxx obsah xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx. Dolní xxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 5 mg/kg.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx a xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx vysoce xxxxxxx xxxxxxxxxxx chromatografií (XXXX) xx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx UV xxxxxxxxx.
3. Činidla
3.1 xxxxxxxx
3.2 xxxxxxxx, xxx XXXX
3.3 xxxx, xxx XXXX
3.4 xxxxxxx xxxx pro XXXX:
Xxxx xxxx (3.3) x xxxxxxxxx (3.2), 900 + 100 (X + V)
3.5 xxxxxxxxxx látka: xxxxx xxxxxxxxxx 2-[X-2-(xxxxxxxxxxxx)xxxxxxxxx]-3-xxxxxxxxxxxxxxxx-X1,X4-xxxxxx, X 851
3.5.1 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, 250 μx/xx
Xx odměrné xxxxx x obsahu 200 xx xx xxxxxx 50 xx xxxxxxxxxxx (3.5) x xxxxxxxxx na 0,1 xx x přidá xxx 190 xx xxxx. Baňka xx xxxxxxx na 20 xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1). Xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx na laboratorní xxxxxxx, doplní xxxxx xx značku a xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx fólií x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx každý měsíc.
3.5.2 xxxxxxxx standardní xxxxxx xxxxxxxxxxx, 25 μx/xx
10,0 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.1) xx přenese xx xxxxxxx baňky x xxxxxx 100 ml, xxxxxx se xx xxxxxx mobilní fází (3.4) x xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxx připravovat denně xxxxxxx.
3.5.3 kalibrační roztoky
Do xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx 50 xx xx odpipetuje 1,0, 2,0, 5,0, 10,0, 15,0 a 20,0 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.2). Xxxxxx xx mobilní xxxx (3.4) po xxxxxx a xxxxxxxx. Xxxxx xx obalí xxxxxxxxxx xxxxx. Tyto xxxxxxx xxxxxxxxxx 0,5, 1,0, 2,5, 5,0, 7,5 x 10,0 μx xxxxxxxxxxx xx xx.
Xxxx roztoky se xxxx připravovat xxxxx xxxxxxx.
4. Přístroje x xxxxxxx
4.1 xxxxxxxxxxxx xxxxx
4.2 xxxxxxxxxx xxxxxxxx
4.3 zařízení XXXX x proměnnou xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx
4.3.1 xxxxxx pro kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx, 250 mm x 4 xx, xxxxxxx X18, 10 μx, xxxx srovnatelná xxxxxx
4.4 xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx 0,45 μx
5. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx světle nebo x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx.
5.1 Obecně
5.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx analyzovat xxx kontrolu, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
5.1.2 Xxxxxxx xx výtěžnost xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxx K xxxxxxxxxxx xx xxxxxx 50 xx/xx xx xxxxxxxxxx 10,0 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx základního xxxxxxx (3.5.1) xx kónické xxxxx x xxxxxx 250 xx x xxxxxx se odpaří xx xxx 0,5 xx. Přidá se 50 x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx a xxxxx xx 10 xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xx přejde x xxxxxxxx (5.2).
Poznámka:
Pro xxxxx této xxxxxx xx xxx modelové xxxxxx podobného xxxx xxxx zkoušený xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxx
Xxxxxx se xxxxxxxxx 50 x xxxxxx s xxxxxxxxx xx 0,01 x. Xxxxxxx xx do xxxxxxx xxxxx o xxxxxx 1000 ml, xxxxx xx 100 xx xxxxxxxxx (3.1) x xxxxx xx xxxxxx xx xxx xxxxx xx ultrazvukové xxxxx (4.1). Přidá xx 410 xx xxxx x ponechá xx x xxxxxxxxxxxx xxxxx dalších 15 xxxxx. Baňka xx xxxxx x ultrazvukové xxxxx, xxxx se xxxxx 30 xxxxx xx xxxxxxxx (4.2) x potom xx xxxxxxxxxxx složeným xxxxxxx. 10,0 xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx baňky o xxxxxx 20 ml, xxxxxx xx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxx xx přefiltruje xxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) (xxx xxx 9. Xxxxxxxx). Xxxx xx pokračuje xxxxxxxxxx XXXX (5.3).
5.3 Xxxxxxxxx XXXX
5.3.1 Xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx doporučené, xxxxx xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx, xx dávají xxxxxxxxxx výsledky.
analytická xxxxxx (4.3.1)
xxxxxxx xxxx (3,4): Xxxx vody (3.3) x methanolu (3.2), 900 + 100 (X + V)
průtoková xxxxxxxx: 1,5–2 ml/min
detekční xxxxxx xxxxx: 380 xx
xxxxx nástřiku: 20 μx–100 μl
Stabilita chromatografického xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx, xx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (3.5.3) xxxxxxxxxx 2,5 μx/xx, až xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx píků x xxxxxxxxxx xxxx.
5.3.2 Xxxxxxxxxx xxxx
Xxx xxxxx kalibrační xxxxxx xx provede xxxxxxx nástřiků a xxxxxx xx střední xxxxxxx xxxxx (xxxxxx) xxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxx. Sestrojí se xxxx za xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxx) xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx ordinát x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x μg/ml xxxx xxxxxxxxx.
5.3.3 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx několik nástřiků xxxxxxxx xxxxxx (5.2) xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx.
6. Výpočet výsledků
Ze xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxx) píků xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx zjistí koncentrace x xxxxxxx xxxxxx x μx/xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx grafem (5.3.2).
Xxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxx w v xx/xx xx dán xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
x = x × 1 000 / x
xxx:
x = xxxxxxxxxxx olachindoxu v xxxxxxxx xxxxxx (5.2) x μg/ml
m = xxxxxxxx navážky xxxxxx x x (5.2)
7. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx může být xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x přídavkem (co-chromatography) xxxxx xxxxxxxx detektoru x xxxxxxxx polem, xxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxx extraktu vzorku (5.2) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.3), obsahujícího 5,0 μg/ml xxxxxxxxxxx.
7.1.1 Xxxxxxxxx stanovením x xxxxxxxxx (co-chromatography)
Extrakt xxxxxx (5.2) xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxx roztoku (3.5.3). Xxxxxxxx xxxxxxxxx olachindoxu xx mělo odpovídat xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx vzorku.
S xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxx jen ke xxxxxxx výšky xxxx xxxxxxxxxxx. Šířka xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx xxx x xxxxxxx ±10 % xxxxxxx šířky xxxx olachindoxu x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
7.1.2 Xxxxxxxx diodového pole
Výsledky xx vyhodnocují xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
x) xxx xxxxxx xxxxx maximální xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx být xxxxxx spektra xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx píku xx chromatogramu xxxxxx x xxxxxxxxxxx danou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx udává ±2 xx;
x) xxx xxxxxx xxxxx xxxx 220 x 400 nm xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx píku xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx částí xxxxxxx x xxxxxxx 10 xx 100 % xxxxxxxxx absorbance. Tohoto xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx vykázána xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx spektry xxxxxxxxxxx 15 % xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx;
x) xxx vlnové xxxxx xxxx 220 a 350 xx se xxxxx spektrum xxxxxxxx, xxxxxxx x sestupu xxxx xxxxxxxxxx vzorku xxxxx od xxxxxxxxx x této částí xxxxxxx x xxxxxxx 10 xx 100 % relativní absorbance. Xxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxx, xxxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx ve xxxxx sledovaných xxxxxx xxxxxxxx mezi xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx 15 % absorbance xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx.
Xxxx-xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx potvrzena.
7.2 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx výsledky xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx mezi 10 x 20 xx/xx, xxxxx xxxxxxxxxx15 % xxxxxxx xxxxxxxx.
7.3 Výtěžnost
Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx výtěžnost xxxxxxx 90 %.
8. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
X xxxxx XX byl xxxxxxxx kruhový test, xxx němž až 13 xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx jsou xxxxxxx x následující tabulce:
|
| xxxxxx 1 |
xxxxxx 2 |
xxxxxx 3 |
xxxxxx 4 |
|
|
L |
13 |
10 |
11 |
11 |
|
A |
40 |
40 |
44 |
44 |
|
střední (xx/xx) |
- |
14,6 |
48,0 |
95,4 |
|
(Xx) (xx/xx) |
- |
0,82 |
2,05 |
6,36 |
|
(XX) (mg/kg) |
- |
1,62 |
4,28 |
8,42 |
|
CVr (%) |
- |
5,6 |
4,3 |
6,7 |
|
CVR (%) |
- |
11,1 |
8,9 |
8,8 |
|
xxxxxxxxx obsah (mg/kg) |
- |
15 |
50 |
100 |
|
výtěžnost (%) |
- |
97,3 |
96,0 |
95,4 |
X: xxxxx laboratoří
n: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xx: xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
XX: xxxxxxxxxx xxxxxxxx reprodukovatelnosti
CVr: xxxxxxxx koeficient xxxxxxxxxxxxxxx
XXX: xxxxxxxx koeficient xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
9. Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx metoda xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx 100 xx/xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx vzorku x/xxxx zředěním xxxxxxxx (5.2) tak, aby xx xxxxxxx koncentrace x rozsahu kalibračního xxxxx (5.3.2).
[1] Xxxxx xx xx tuk xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx kuličky.
[2] Xxxxx xx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxx pemzy xx xxxxxxxx xxxxxxx.