Xxxxxxxx Komise 98/64/XX
xx xxx 3. xxxx 1998,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx metody Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx x olachindoxu x krmivech a xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx 71/393/XXX
(Xxxx x xxxxxxxx xxx XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Smlouvu x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxx 70/373/EHS xx xxx 20. července 1970 x xxxxxxxx xxxxx xxxxxx vzorků x xxxxxxxxxxxx metod Xxxxxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx krmiv [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxx x přistoupení Rakouska, Xxxxxx x Švédska, x xxxxxxx na xxxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx 70/373/XXX xxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx, zda xxxxxx splňují xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx z právních x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx odběru xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx ve Xxxxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx Xxxx 79/373/XXX xx dne 2. xxxxx 1979 x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxx [2], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 97/47/ES [3], x směrnice Xxxx 93/74/XXX xx dne 13. xxxx 1993 x krmivech xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx [4], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx 96/25/XX [5], stanoví, že xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxx xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx Rady 70/524/XXX xx xxx 23. xxxxxxxxx 1970 x xxxxxxxxxxx xxxxxxx x krmivech [6], xxxxxxxxx pozměněná xxxxxxxx Xxxxxx 98/19/XX [7], xxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxxxxx musí být xxxxxx na xxxxxxxx, xxxxx je xxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx xxxxx xxxxxxxx Komise 71/393/XXX xx dne 18. xxxxxxxxx 1971, xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx krmiv [8], naposledy pozměněná xxxxxxxx Xxxxxx 84/4/EHS [9], xxxxxxx metody xxxxxxx xxxx xxxx x pro zjišťování xxxxxx xxxx; že xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Společenství xxx xxxxxxxx těchto xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxx směrnice xxxx x xxxxxxx xx stanoviskem Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx,
XXXXXXX XXXX SMĚRNICI:
Článek 1
Xxxxxxx státy xxxxxxx, že analýzy xxx xxxxxx kontrolu xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx x xxxxxx olachindoxu x krmivech xx xxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxx směrnice.
Xxxxxx 2
V xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 71/393/EHS xx xxx "4. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxx" xxxxxxxxx částí X xxxxxxx této směrnice.
Xxxxxx 3
1. Členské xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx právní a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx dosažení souladu x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 31. xxxxxxxx 1998. Xxxxxxx x xxxx neprodleně Xxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx od 1. xxxxx 1999.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx obsahovat xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxx odkaz xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Způsob odkazu xx stanoví xxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxx státy xxxxx Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx ustanovení xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx předpisů, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Článek 4
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x platnost xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxx Evropských xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 5
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
V Bruselu dne 3. xxxx 1998.
Xx Xxxxxx
Xxxxx Fischler
člen Komise
[1] Xx. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Xx. xxxx. X 86, 6.4.1979, x. 30.
[3] Xx. věst. X 211, 5.8.1977, x. 45.
[4] Xx. věst. X 237, 22.9.1993, x. 23.
[5] Xx. věst. X 125, 23.5.1996, x. 35.
[6] Xx. xxxx. X 270, 14.12.1970, x. 1.
[7] Úř. xxxx. X 96, 28.3.1998, x. 39.
[8] Úř. xxxx. X 279, 2.12.1971, x. 7.
[9] Xx. xxxx. X 15, 18.1.1984, x. 28.
PŘÍLOHA
ČÁST X
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
1. Xxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxx slouží xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx) x vázaných (xxxxxxx vázané x xxxxx) aminokyselin v xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxxx pro xxxx aminokyseliny: xxxx(x)xx, xxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, arginin, kyselinu xxxxxxxxxxx, kyselinu xxxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxxxxx, prolin, xxxxx, tyrosin a xxxxx.
Xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx aminokyselin x nemůže xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx formami X x X. Xxxx xxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
2. Princip
2.1 Xxxxx xxxxxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xx extrahují xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx srážejí kyselinou xxxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Zfiltrovaný xxxxxx xx upraví xx pH 2,20. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xx po xxxxxx s ninhydrinem xxxxxxxxxxxxx detekcí xxx 570 nm.
2.2 Vázané xxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx závisí xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxx(x)xx x methionin xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx oxidovány xx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx musí xxxxxxxxxx x hydrolyzátech neoxidovaných xxxxxx. Xxxxxxx aminokyseliny xxxxxxx x xxxx 1 xxxxx xxx xxxxxxxxxx buď x xxxxxxxxxx nebo x xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx 0 xX xxxxx kyseliny xxxxxxxxxxx x fenolu. Xxxxxxxxxx oxidační xxxxxxx xx rozloží xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x = 6 xxx/x) po 23 xxxxx. Hydrolyzát xx xxxxxx na xX 2,20. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x stanovují xx xx xxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 570 xx (440 xx pro xxxxxx).
3. Xxxxxxx
Xxxx být xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx (vodivost &xx; 10 μS).
3.1 xxxxxxx xxxxxx, x = 30 %
3.2 xxxxxxxx xxxxxxxx, x = 98–100 %
3.3 xxxxx
3.4 xxxxxxxxx xxxxx
3.5 xxxxxxxx xxxxx
3.6 kyselina 5-xxxxxxxxxxxxxxx, dihydrát
3.7 xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x hustotě xxxxxxxxx 1,18 g/ml
3.8 xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx
3.9 2,2-xxxxxxxxxxxxx (thiodiglykol)
3.10 xxxxxxx xxxxx
3.11 ninhydrin
3.12 petrolether, xxx xxxx 40–60 °X
3.13 norleucin xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx vnitřní xxxxxxxx
3.14 xxxxx – xxxx (&xx; 10 xxx xxxxxxx)
3.15 1-oktanol
3.16 xxxxxxxxxxxxx
3.16.1 xxxxxxxxxx látky xxxxxxx x bodě 1; xxxxx xxxxxxxxxx neobsahující xxxxxxxxxxxxx vodu. Xxxxxx xx ve xxxxx xxx P2O5 xxxx X2XX4 xxxxx xxxx xxxxxxxx
3.16.2 xxxxxxxx xxxxxxxx
3.16.3 xxxxxxxxxxxxxxx
3.17 hydroxid xxxxx, xxxxxx x = 7,5 xxx/x:
300 g XxXX (3.5) se xxxxxxxx ve vodě x xxxxxx xx 1 xxxxx.
3.18 xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx c = 1 xxx/x:
40 x XxXX (3.5) xx rozpustí xx xxxx a xxxxxx xx 1 xxxxx.
3.19 xxxxxx xxxxxxxx mravenčí x xxxxxx:
Xxxxxx xx 889 g kyseliny xxxxxxxx (3.2) xx 111 g xxxx x přidá xx 4,73 x xxxxxx (3.3).
3.20 xxxxxxxxxxxx xxxx, x = 6 xxx XXx/x x xxxxxxxxx 1 g xxxxxx/x:
X 492 xx XXx (3.7) xx xxxxx 1 x xxxxxx (3.3) x xxxxxx se xxxxx xx 1 xxxxx.
3.21 xxxxxxxxx xxxx, c = 6 mol XXx/x s xxxxxxxxx 2% xxxxxxxxxxxxx:
8,2 xx XXx (3.7) xx xxxxxxx xxxxxxxxx 900 xx xxxx, přidá xx 20 xx xxxxxxxxxxxxx (3.9) a xxxxxx xxxxx xx 1 xxxx (3.7 x 3.9 xx xxxxx xxxxxxx xxxxx).
3.22 xxxxxxxx 5-xxxxxxxxxxxxxxx, β = 6 %:
60 x xxxxxxxx 5-sulfosalicylové (3.6) xx xxxxxxxx xx vodě x xxxxxx xxxxx na 1 xxxx.
3.23 oxidační xxxx (kyselina xxxxxxxxxxx – fenol):
V xxxx xxxxxxx xx xxxxxx 0,5 ml xxxxxxxx xxxxxx (3.1) s 4,5 ml xxxxxxx xxxxxxxx mravenčí x xxxxxxx (3.19); xxxxxxx xx x klidu 1 xxxxxx xxx 20–30 °X, aby xx xxxxxxxx kyselina xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx x xxxxx x xxxxxxx xxxxx (15 xxxxx).
Xxxxx:
Xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx.
3.24 xxxxxxxxxxx tlumivý xxxxxx, x = 0,2 xxx Xx+/x, xX 2,20:
X přibližně 800 xx xxxx xx xxxxxxxx 19,61 g xxxxxxxxx xxxxxxx (3,8), 5 xx thiodiglykolu (3.9), 1 g xxxxxx (3.3) x 16,50 xx XXx (3.7). pH xx xxxxxx xx 2,20. Xxxxxx se xxxxx xx xxxxx 1 xxxxx.
3.25 eluční tlumivé xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (4.9)
3.26 ninhydrinové xxxxxxx připravované xxxxx xxxxxxxx xxx použitý xxxxxxxxxx (4.9)
3.27 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx je nutno xxxxxxxxxx při xxxxxxx xxx 5 °X.
3.27.1 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.16.1), x = 2,5 μxxx/xx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x kyselině xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx obdržet x xxxxxxxx připravené.
3.27.2 xxxxxxx xxxxxxxxxx základní xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx, c = 1,25 μxxx/xx
0,2115 g xxxxxxxx xxxxxxxx (3.16.2) x 0,2265 g xxxxxxxxxxxxxxxx se rozpustí (3.16.3) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (3.24) x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx a doplní xx po xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx při xxxxxxx pod 5 °X nejdéle 12 xxxxxx. Tento xxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.27.1) obsahuje kyselinu xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx.
3.27.3 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx standardu, xxxx. xxxxxxxxxx, c = 20 μxxx/xx
0,6560 x xxxxxxxxxx (3.13) xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (3.24) v odměrné xxxxx na 250 xx x doplní xx xx značku xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxx 5 °X xxxxxxx 6 xxxxxx.
3.27.4 kalibrační roztok xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx s xxxxxxxxxxx, x = 5 xxxx/50 μx xxxxxxxx xxxxxxxx x methioninsulfonu x x = 10 xxxx/50 μl x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
Xx 100 xx xxxxxxx xx xxxxxxxx 2,2 x xxxxxxxx xxxxxxx (3.10) x 30 xx citronanového xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24). Přidají xx 4,00 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx základního xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.27.1), 4,00 xx zásobního xxxxxxxxxxxx základního xxxxxxx xxxxxxxx cysteové a xxxxxxxxxxxxxxxx (3.27.2) x 0,50 ml xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.27.3), xxxxx xx xxxxxxx. xX se xxxxxx xx 2,20 xxxxxxxxxx xxxxxx (3.18).
Xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx 50 xx xxxxxxx xxxxx, doplní po xxxxxx xxxxxxxxxxxx tlumivým xxxxxxxx (3.24) x xxxxxxx se.
Skladuje se xxx teplotě pod 5 °C nejdéle 3 xxxxxx.
Xxx xxxx xxxxxxxx 9.1.
3.27.5 xxxxxxxxxx xxxxxx standardních xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx s xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx podle xxxx 5.3.3.1 x xxx xxxxxxxx (5.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx 3.27.4 x vynecháním xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx při teplotě xxx 5 °X xxxxxxx 3 xxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
4.1 xxxxx x xxxxxxx xxxx x xxxxxx 100 xxxx 250 xx opatřená xxxxxxx xxxxxxxxx
4.2 xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx 100 xx xx xxxxxxxxx uzávěrem x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (např. Xxxxx, Schott) xxx xxxxxxx x xxxxxxx
4.3 xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxx ±2 °X
4.4 pH metr (xxx xxxxxxxxx xxxxx)
4.5 xxxxxxxxxx filtr (0,2 μx)
4.6 xxxxxxxxxxx
4.7 xxxxxxx xxxxxxx odparka
4.8 xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx magnetická xxxxxxxx
4.9 xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx XXXX x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxx kolonovou derivatizaci x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx oddělení xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx ± 0,5 % xx dobu zahrnující xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx vzorku.
Některé xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx v xxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x = 0,8 xxx/x a xxxxxxxx xxxxxxxxx mravenčí xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx analyzátory xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx určitých xxxxxxxxxxxx, obsahuje-li hydrolyzát xxxxxxxxxxx mravenčí xxxxxxxx x/xxxx vysoké xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx se xxxxx objem kyseliny xxxx xxxxxxx pH xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxx 5 xx. Xxxxxxxx xx má xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx 40 °C.
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxx vzorku
Vzorek xx xxxxxx xxxxxx tak, xxx prošel xxxxx x oky 0,5 xx. Xxxxxx s xxxxxxx vlhkostí xx xxxx před mletím xxxxxxx xx vzduchu xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 50 °X nebo xxx xxxxxxxx. Vzorky x xxxxxxx obsahem xxxx xx xxxx xxxxxx extrahují xxxxxxxxxxxxx (3.12).
5.2 Stanovení xxxxxxx xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxx x x premixech
Do xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (1–5 g) upraveného xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxx xx 0,2 xx x přidá xx 100,0 ml xxxxxxxxx xxxxx (3.21). Xxxxx se xxxxx 60 minut xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.8). Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx 10,0 xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x obsahu 100 xx.
Xx stálého míchání xx přidá 50 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xx v míchání xx xxxxxxxxxx míchačce xxxxxxx 5 minut. Xxxxxxxxxxxx xx přefiltruje xxxx odstředí xxx, xxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. 10,0 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx 100 xx, pH xx xxxxxx xx 2,20 pomocí roztoku xxxxxxxxx xxxxxxx (3.18), xxxxx xx roztok xxxxxxx pomocí xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx roztoku (3.24) xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx roztokem (3.24).
Xxxxxxx-xx xx xxxxxxx standard, xxxxx xx 1,00 xx xxxxxxxxx standardu (3.27.3) xx xxxxxxx 100 ml xxxxxxxxxxxx xxxxxxx a potom xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24).
Xxxx se xxxxxxxxx xxxxx bodu 5.4 – xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxx, xxxxxxxxxxx se při xxxxxxx xxx 5 °X.
5.3 Xxxxxxxxx celkových xxxxxxxxxxxx
5.3.1 xxxxxxx
0,1 xx 1 x xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) se xxxxxx x přesností 0,2 xx:
- xx xxxxx x kulatým xxxx x xxxxxx 100 ml (4.1) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (5.3.2.3) nebo
- xx xxxxx s xxxxxxx xxxx o xxxxxx 250 xx (4.1), xxxxxxxx-xx se nízká xxxxxxxxxxx sodíku xxxx
- xx xxxxxx x xxxxxx 100 xx xx šroubovací xxxxxxxx (4.2) (xxx uzavřenou xxxxxxxxx 5.3.2.4).
Xxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxx 10 xx x xxxxx vlhkosti xxxxxxxxxxxxx 100 mg.
Baňka/nádoba xx xxxxxx xx xxxxx s ledovou xxxxx x ochladí xx xx 0 °X, xxxxx xx xxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxxx (3.23) x xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx špičkou. Xxxxx/xxxxxx xx xxxxxx x xx xxxxx vzduchotěsnou xxxxx x xxxxx xx x x xxxxx s ledovou xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx 0 °X x ponechá xx xxx 16 xxxxx. Xx 16 hodinách xx xxxxx x xxxxxxxxxx x přebytečné xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx 0,84 x xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.4).
Xxxx xx pokračuje xxxxx 5.3.2.1.
5.3.2 xxxxxxxxx
5.3.2.1 xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
X xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx 5.3.1 se xxxxx 25 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (3.20) xxx, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx nádoby xxx xx xxxxx. Podle xxxxxxxxx postupu xxxxxxxxx xx pokračuje podle 5.3.2.3 xxxx 5.3.2.4.
5.3.2.2 xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxx s xxxxxxx xxxx x xxxxxx 100 xx xxxx 250 xx (4.1) xxxx do xxxxxx x obsahu100 ml xx šroubovacím xxxxxxxx (4.2) xx xxxxxx 0,1 xx 1 x xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) x přesností xx 0,2 xx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxx mít xxxxx dusíku xxx 10 mg. Xxxxxxx xx přidá 25 xx xxxxxxxxxxxx směsi (3.20) x xxxxxx xx xx vzorkem. Xxxx se xxxxxxxxx xxx xxxxx 5.3.2.3 xxxx xxxxx 5.3.2.4.
5.3.2.3 xxxxxxxx hydrolýza
Ke směsi x xxxxx (xxxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.1 xxxx 5.3.2.2) xx xxxxxxx 3 skleněné xxxxxxx x směs xx xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx 23 xxxxx. Po xxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24). Xxxxx se odpojí x ochladí xx x xxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx 5.3.3.
5.3.2.4 xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx xx směsí xxxxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.1 xxxx 5.3.2.2 xx xxxxxx do xxxxxxx (4.3) při 110 °X. Aby xx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx) a xxxxxxx k xxxxxxx, xxxxxx xx šroubovací xxxxxx xxxxx xx xxxxx. Nádoba se xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxx zašroubuje a xxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx x xxxxxxx (4.3) 23 hodin. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx vyjme xx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xx xxxxx s xxxxxxx vodou. Baňka xx xxxxx vychladnout.
Podle xxxxxxxxx postupu xxx xxxxxx pH (5.3.3) xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24) xx xxxxxxx x xxxxxx 250 xx xxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxx x xxxxxx 250 ml.
Dále xx xxxxxxxxx podle 5.3.3
5.3.3 xxxxxx xX
Xxxxx xxxx, xxxxx toleranci k xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.9), postupujte xxx xxxxxx xX xxxxx 5.3.3.1 xxxx 5.3.3.2.
5.3.3.1 pro chromatografické xxxxxxx (4.9), vyžadující xxxxxx koncentraci xxxxxx:
Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx sodíku (xx-xx xx snížit xxxxx xxxxxxx), xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (3.27.3).
X xxxxxxx xxxxxxx xx před xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx 2,00 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.27.3).
Xx hydrolyzátu xxxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.3 xxxx 5.3.2.4. xx xxxxxxx 2 kapky 1-xxxxxxxx (3.15).
Xx xxxxxxx xxxxxxx (4.7) se xxxxx xxxxx xx 5-10 xx xx xxxxx při 40 °X. Pokud xx xx xxxxx náhodou xxxxxx pod 5 xx, hydrolyzát je xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx.
xX xx xxxxxx xx 2,20 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.18) x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx 5.3.4.
5.3.3.2 pro xxxxxxx xxxxxxx analyzátory xxxxxxxxxxxx (4.9)
Xxxxxxxxxxx připravené xxxxx 5.3.2.3 xxxx 5.3.2.4 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx přidáním 17 xx roztoku xxxxxxxxx xxxxxxx (3.17), xx xxxxxxx xxxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxx pod 40 °X.
xX se upraví xx 2,20 xxxxxxxx xxxxxxxxx sodného (3.18) xxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx pokračuje xxxxx xxxx 5.3.4.
5.3.4 xxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx (5.3.3.1 xxxx 5.3.3.2) s xxxxxxxxx xX xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24) xx odměrné xxxxx x obsahu 200 xx x xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24) xx xxxxxx xx xxxxxx.
Xxxxx-xx xxxxx xxxxxx vnitřní xxxxxxxx, přidají se 2,00 ml xxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.27.3) x xxxxx xx doplní xx značku citronanovým xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24). Xxxxxxxx se promíchá.
Dále xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx (5.4)
Xxxxxx-xx roztoky xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxx, xxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx pod 5 °X.
5.4 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxxxxxx musí xxx xxxxxxx (5.2) x xxxxxxxxxx (5.3.4) pokojovou xxxxxxx. Xxxx se xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xx zfiltruje xxxxxxxxxxx filtrem 0,2 μ (4.5). Výsledný xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.9).
Xxxxxxx xxx provést xxxxx nebo xxxxxxxxxxx. Xxxxxx je důležité, xxx xx xx xxxxxxx nastřikovalo xxxxxx xxxxxxxx roztoku ± 0,5 % xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx vzorků x xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx vnitřního xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx by xxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx stabilitě ninhydrinového xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24) xxx, aby xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 30 – 200 % xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x roztoku xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xx typu xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx separovat xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx i od xxxxxxxxx xxxxxxxxx pozitivních xxxxxxxxx. X rozsahu xxxxx xxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx systém xxxxxxxx xxxxxxxx na xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, by xxxx být xxxxxxxx xxxx xxxxxxx poměry xxxxx k xxxxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx obsahovat xxxxxxx 30 % xxxxxxxxxxx obsahu jednotlivých xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx ještě xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx aminokyselin (4.9).
Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx píku nižšího x xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx aminokyselin xx xxxxxxxxxxxxx neměl přesahovat 2:10 (xxxxx xx xxxxxxx xxxxx cyst(e)in, xxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxx, je xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx nedostatečnou xxxxxxxx přilehlých xxxx). Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxx xxxxx xxx 1:10.
Xxxxxx xxxx xxxxxxx, xx lysin xxxx xxxxxxxxx od "lysinových xxxxxxxx" a xxxxxxxxx.
6. Xxxxxxx x vyjádření xxxxxxxx
Xxxxxx píků xxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxx aminokyselinu x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx v g xx xx vzorku.
g xxxxxxxxxxxxx xx kg xxxxxx = X × X × XX × X / X × X × 1 000
Xx-xx xxxxxx interní xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx: D / X
X = xxxxxx xxxx hydrolyzátu xxxx xxxxxxxx
X = xxxxxx xxxx kalibračního standardního xxxxxxx
X = xxxxxx xxxx interního standardu x xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx
X = xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
XX = xxxxxxxxxxx váha stanovovaných xxxxxxxxxxxx
X = koncentrace xxxxxxxxx x μxxx/xx
X = xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (x) (xxxxxxxxxx xx původní xxxx xxxxx je xxxxxx xxxxxxx nebo odtučněn)
F = xxxxxxx objem xxxxxxxxxx xxxxxxx (5.3.4) x xx xxxx xxxxxxx xxxxx zředěného xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx 6.1
Xxxxxx x xxxxxxx xx x hydrolyzátech xxxxxxxxxxx xxxxxx stanoví xxxx kyselina cysteová, xxx vypočítávají xx xxxx xxxxxx (C6H12N2O4S2, XX 240,30) x xxxxxxxx XX 120,15 (= 0,5 x 240,30).
Xxxxxxxxx se x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx XX xxxxxxxxxx: 149,21.
Xxxxxxx volný xxxxxxxxx xx zjišťuje xx xxxxxxxx xxxx methionin, xxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx XX.
6.1 Xxxxxxx xxxxx zředěného xxxxxxxx (X) xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.2) se vypočítá xxxxx xxxxxx xxxxxx:
X = 100 ml × (10 ml + 5 ml) / 10 xx × V ml / 10xx
X = objem xxxxxxxxxx xxxxxxxx
7. Xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx porovnáním xx xxxxxxxxxxx úrovni x xxxx 1990 xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxx směs xxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx). Xx vyloučení extrémů xxxx výsledky xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx uvedeny v xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxx x x/xx
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx |
6,94 x = 15 |
3,01 x = 17 |
3.27 x =.17 |
9,55 x = 13 |
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx |
9,31 n = 16 |
3,92 n = 18 |
5,08 n = 18 |
13,93 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
22,32 x = 16 |
5,06 x = 17 |
12,01 x = 17 |
47,74 x = 15 |
|
Xxxxxx |
58,42 x = 16 |
- |
90,21 x = 16 |
98,03 x = 16 |
n = počet xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx vnitrolaboratorní xxxxxxxxxx xxxxxxxx je dána xxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
xxxxxxxxxx odchylka (Xx) opakovatelnosti x xxxxxxxxxx x g/kg
|
Referenční xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx |
0,13 n = 15 |
0,10 x = 17 |
0,11 x = 17 |
0,26 x = 13 |
|
Xxxxx směs pro xxxxxxxx |
0,20 x = 16 |
0,11 x = 18 |
0,16 x = 18 |
0,28 n = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
0,48 n = 16 |
0,13 x = 17 |
0,27 x = 17 |
0,99 x = 15 |
|
Xxxxxx |
1.30 x = 16 |
_ |
2,19 n = 16 |
2,06 n = 16 |
x = xxxxx xxxxxxxxxxxx laboratoří
Variační xxxxxxxxxx (%) vnitrlaboratorních xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (Sr)
|
Referenční xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx |
1,9 x = 15 |
3,3 n = 17 |
3,4 x =.17 |
2,8 x = 13 |
|
Krmná xxxx xxx xxxxxxxx |
2,1 x = 16 |
2,8 x = 18 |
3,1 x = 18 |
2,1 x = 16 |
|
Proteinový xxxxxxxxxx |
2,7 x = 16 |
2,6 x = 17 |
2,2 n = 17 |
2,4 x = 15 |
|
Xxxxxx |
2,2 n = 16 |
- |
2,4 x = 16 |
2,1 x = 16 |
x = počet xxxxxxxxxxxx laboratoří
7.2 Reprodukovatelnost
Výsledky xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx shora xxxxxxxxx zkoušek xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxxx standardní xxxxxxxx (XX) v x/xx
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
xxxxxxxx |
Xxxx(x)xx |
xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx |
0,28 x = 15 |
0,30 x = 17 |
0,23 x = 17 |
0,30 x = 13 |
|
Xxxxx xxxx pro xxxxxxxx |
0,48 n = 16 |
0,34 n = 18 |
0,55 x = 18 |
0,75 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
0,85 x = 16 |
0,62 x = 17 |
1,57 x = 17 |
1,24 x = 15 |
|
Xxxxxx |
2,49 n = 16 |
- |
6,20 x = 16 |
6,62 x = 16 |
n = xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx (%) mezilaboratorních xxxxxxxxxxxx odchylek (XX)
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
xxxxxxxx |
Xxxx(x)xx |
xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx |
4,1 x = 15 |
9,9 n = 17 |
7,0 x = 17 |
3,2 x = 13 |
|
Xxxxx směs pro xxxxxxxx |
5,2 x = 16 |
8,8 x = 18 |
10,9 x = 18 |
5,4 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
3,8 x = 16 |
12,3 x = 17 |
13,0 x = 17 |
3,0 n = 15 |
|
Xxxxxx |
4,3 x = 16 |
- |
6,9 n = 16 |
6,7 x = 16 |
x = xxxxx zúčastněných xxxxxxxxxx
8. Xxxxxxx referenčních materiálů
Správné xxxxxxx xxxxxxx metody xx ověřuje xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx certifikovanými xxxxxxxxxxxx xxxxxxx aminokyselin.
9. Xxxxxxxx
9.1 Xxxxxxxx k xxxxxxxx xxxx analyzátory xxxxxxxxxxxx xx xx měly xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxx 3.27.4 x 3.27.5) x roztoků xxxxxx (5.3.4) xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx roztok se xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
9.2 Xxxxx se x analýze hydrolyzátů xxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxx účinnou kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
9.3 Při xxxxxxx této xxxxxx x krmiv obsahujících xxxx než 1 % chloridu (xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx) xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
XXXX X XXXXXXXXX XXXX
1. Xxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxx xx stanoví xxxxx xxxx v xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxx semen a xxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx podle xxxxxxxx Xxxx 136/66/XXX xx xxx 22. xxxx 1996.
Xxxxx xxxxx x xxxxxxx krmiva xx xxx analýzu xxxxxxx xxxxx xx xxxx následujících xxxxxxx:
1.1 Xxxxxx X – xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx
Xxxx xxxxxx xx použitelná xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxx xxxx, xxxxx jsou xxxxxxxx xx okruhu xxxxxxx B.
1.2 Xxxxxx X – xxxxxxx xxx
Xxxx metoda xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxx všechny xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxx xxxx xxxxx tuk xxxxx xxxxxxxxxx xxx předchozí xxxxxxxxx (xxxx. lepky, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx proteiny x xxxxxxx, které xxxx podrobeny xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x zahřívání).
1.3 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxx případech, xxx xx dosáhlo xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx X, xxx postupem X, xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx podle postupu X.
2. Xxxxxxx
2.1 Postup X
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Rozpouštědlo xx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xx vysuší a xxxxx.
2.2 Xxxxxx X
Xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Směs xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxxxxx podle xxxxxxx X.
3. Činidla
3.1 xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx 40 x 50 °C. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx menší xxx 1 x xxxxxx po odpařování xxxxx než 2 xx/100 ml
3.2 xxxxx xxxxx, xxxxxxx
3.3 xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, x = 3 xxx HCl/l
3.4 xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxx, Xxxxx-xxxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x pomůcky
4.1 Extrakční xxxxxxxx, se xxxxxxx (Xxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxx 10 xxxxx xx hodinu. X xxxx xxx xxxxxx by měla xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 10 xx xx xxxxxx.
4.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx, bez xxxxx xxxxxxxxxxx x petroletheru, x xxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx 4.1.
4.3 Xxxxxxx, xxx vakuová xxxxxxxx xx 75 °X ± 3 °X, nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx na 100 °X ± 3 °X.
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxx X (xxx bod 8.1)
Xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx 5 x xxxxxx s xxxxxxxxx xx 1 xx (4.2) x xxxxxxxxx xxxxxxx vaty xxx xxxx.
Xxxxxxx se xxxxxx xx extrakčního xxxxxxxxx (4.1) x xxxxxxxxxx šest xxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.1). Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxx xx xxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxx, která xxxxxxxx úlomky pemzy [1].
Xxxxxxxxxxxx se oddestiluje, xxxxxx x xxxxx xx suší 1,5 xxxxxx x xxxxxxx (4.3). Nechá se xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x zváží. Xxxx xx xxxxxxx 30 xxxxx, xxx xx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxx konstantní (xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx 1 mg).
5.2 Xxxxxx B
Do xxxxxxx x obsahu 400 xx xxxx xx xxxxxxx baňky o xxxxxx 300 xx xx xxxxxx 2,5 x vzorku s xxxxxxxxx xx 1 xx (xxx xxx (8,2) x přidá xx 100 ml xxxxxxxx chlorovodíkové (3.3) x úlomky xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx kónická xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx chladičem. Xxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xx xxxxx plameni xxxx na topné xxxxx a vaří xx xx xxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx se xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx částeček xxxxxx na stěnách xxxxxx.
Xxxx se ochladí x přidá xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx filtračního xxxxxxxxxx (3.4), xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx tuku. Xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx dojitý filtrační xxxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx vodou, xx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx tuk. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xx se xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx petroletherem podle xxxxxxx X.
Xxxxxxx filtrační xxxxx xx zbytkem xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx x xxxx xx půldruhé xxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.3) xxx xxxxxxx 100 °X ± 3 °X.
Xxxxxxx xxxxxxxxx papír x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx extrakční xxxxxxx (4.2) x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx tuku. Xxxxxxx xx vloží xx xxxxxxxxxxx přístroje (4.1) x xxxx se xxxxxxxxx xxxxx druhého x xxxxxxx xxxxxxxx xxxx 5.1.
6. Vyjádření xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx vzorku.
7. Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxxx dvou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx prováděných xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx pracovníkem xx xxxxx přesáhnout:
- 0,2 % x absolutní xxxxxxx, xxx obsahu xxxx xxxxxx xxx 5 %,
- 4,0 % xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx výsledku xxx xxxxxx xx 5 xx 10 %,
- 0,4 % v xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxx 10 %.
8. Poznámky
8.1 X xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxx, které xx xxxxxxx drtí xxxx xxxxx neumožňují xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx vzorek, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxxx se 20 x vzorku s xxxxxxxxx xx 1 xx x xxxxxx xx s 10 xxxx i více xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (3.2). Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx (3.1) xxxxx xxxx 5.1. Xxxxxxxx extrakt se xxxxxx xx 500 xx xxxxxxxxxxxxx (3.1) x xxxxxxxx xx. 50 xx xxxxxxx xx odpipetuje xx xxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx [2].
Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx, baňka xx vysuší a xxxxxxxxx xx podle xxxxxxxxxx odstavce xxxx 5.1.
Xxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx vzorku xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:
(10 a + x) × 5
xxx:
x = xxxxxxxx xxxxxx po první xxxxxxxx v xxxxxxx (xxxxxxx část xxxxxxxx)
x = hmotnost xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx
8.2 X xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx obsah tuku xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx 5 g.
8.3 Xxxxxx xxx domácí xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx obsah xxxx, xx xxxx před xxxxxxxxxx x extrakcí xxxxx xxxxxxx X xxxxxxx s bezvodým xxxxxxx sodným.
8.4 X xxxx 5.2 se xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xx filtraci xxxxxxxx použít horká xxxx xxxxx xxxx xxxxxxx.
8.5 U xxxxxxxxx xxxxx se musí xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx 1,5 xxx. Xx xxxx třeba xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx může xxxx x xxxxxx xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.
8.6 Xxx xxxxxx xxxx xxx 15 % xx doporučuje xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx extrakci xxxxx xxxxxxx X x xxxxxxxx extrakci xxxxx xxxxxxx X. Xxxxxx xx xx xxxxx xxxx na xxxxx krmiva x xxxxx xxxx v xxxxxx.
XXXX X
XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX
(2-[X-2-(xxxxxxxxxxxx)xxxxxxxxx]-3-xxxxxxxxxxxxxxxx-X1,X4-xxxxxx)
1. Xxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx olachindoxu x xxxxxxxx. Xxxxx xxx stanovitelnosti je 5 xx/xx.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx chromatografií (HPLC) xx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx XX xxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
3.1 methanol
3.2 xxxxxxxx, xxx HPCL
3.3 xxxx, xxx XXXX
3.4 xxxxxxx xxxx pro XXXX:
Xxxx xxxx (3.3) x xxxxxxxxx (3.2), 900 + 100 (X + X)
3.5 xxxxxxxxxx látka: čistý xxxxxxxxxx 2-[X-2-(xxxxxxxxxxxx)xxxxxxxxx]-3-xxxxxxxxxxxxxxxx-X1,X4-xxxxxx, X 851
3.5.1 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx roztok xxxxxxxxxxx, 250 μx/xx
Xx xxxxxxx xxxxx o xxxxxx 200 xx xx xxxxxx 50 xx xxxxxxxxxxx (3.5) x xxxxxxxxx na 0,1 xx x xxxxx xxx 190 ml xxxx. Baňka se xxxxxxx xx 20 xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1). Xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx xx značku x xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x uschovává x xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx měsíc.
3.5.2 xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, 25 μx/xx
10,0 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.1) xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 100 xx, xxxxxx se xx xxxxxx mobilní fází (3.4) x promíchá. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx fólií a xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx. Xxxxx roztok se xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
3.5.3 xxxxxxxxxx roztoky
Do xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx 50 xx xx odpipetuje 1,0, 2,0, 5,0, 10,0, 15,0 x 20,0 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (3.5.2). Xxxxxx se mobilní xxxx (3.4) xx xxxxxx x promíchá. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 0,5, 1,0, 2,5, 5,0, 7,5 a 10,0 μx olachindoxu xx xx.
Xxxx roztoky xx xxxx připravovat xxxxx xxxxxxx.
4. Přístroje x xxxxxxx
4.1 xxxxxxxxxxxx xxxxx
4.2 xxxxxxxxxx xxxxxxxx
4.3 zařízení XXXX x xxxxxxxxx xxxxxxx délkou ultrafialového xxxxxxxxx nebo x xxxxxxxxxx diodového pole
4.3.1 xxxxxx xxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx, 250 xx x 4 xx, xxxxxxx X18, 10 μx, xxxx srovnatelná xxxxxx
4.4 xxxxxxxxxx filtry x xxxx 0,45 μx
5. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx na xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx při xxxxxxxx xxxxxx nebo x xxxxxxxx x xxxxxxx skla.
5.1 Obecně
5.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx předem analyzovat xxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx interferující xxxxx.
5.1.2 Xxxxxxx xx výtěžnost xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx krmiva xxxxxxxxxxx xxxxxxxx takového množství xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx ve xxxxxx X xxxxxxxxxxx xx úroveň 50 xx/xx se xxxxxxxxxx 10,0 ml zásobního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.1) do xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 250 ml x xxxxxx se xxxxxx xx xxx 0,5 xx. Xxxxx se 50 x modelového xxxxxx, xxxxx se xxxxxxxx x xxxxx xx 10 xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxx x extrakci (5.2).
Xxxxxxxx:
Xxx xxxxx této xxxxxx xx být xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx zkoušený xxxxxx x xxxxx obsahovat xxxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxx
Xxxxxx se xxxxxxxxx 50 x xxxxxx x xxxxxxxxx xx 0,01 x. Xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 1000 xx, xxxxx xx 100 xx methanolu (3.1) x baňka xx xxxxxx xx xxx xxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1). Přidá xx 410 ml xxxx x ponechá xx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 15 xxxxx. Xxxxx xx xxxxx z ultrazvukové xxxxx, xxxx se xxxxx 30 minut xx třepačce (4.2) x potom se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. 10,0 xx filtrátu xx přenese xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 20 ml, xxxxxx xx xxxxx xx značku a xxxxxxxx. Poměrná xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) (xxx xxx 9. Xxxxxxxx). Xxxx xx pokračuje xxxxxxxxxx XXXX (5.3).
5.3 Xxxxxxxxx XXXX
5.3.1 Parametry:
Následující xxxxxxxx xxxx doporučené, xxxxx xxx xxxxxxx xxxx podmínky, xx xxxxxxxxxxx, že xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
xxxxxxxxxx xxxxxx (4.3.1)
xxxxxxx xxxx (3,4): Xxxx xxxx (3.3) x xxxxxxxxx (3.2), 900 + 100 (X + X)
xxxxxxxxx xxxxxxxx: 1,5–2 ml/min
detekční xxxxxx xxxxx: 380 xx
xxxxx xxxxxxxx: 20 μx–100 μx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxx, že xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx kalibrační xxxxxx (3.5.3) xxxxxxxxxx 2,5 μx/xx, až xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx píků a xxxxxxxxxx xxxx.
5.3.2 Xxxxxxxxxx xxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx provede xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (plochy) xxxx xxx každou xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx hodnot xxxxx (xxxxx) xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx jako ordinát x příslušných xxxxxxxxxxx x μg/ml xxxx xxxxxxxxx.
5.3.3 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx vzorku (5.2) xxx použití stejného xxxxxx jako u xxxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxx xx střední xxxxx (xxxxxx) píků xxxxxxxxxxx.
6. Xxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxxxx hodnoty xxxxx (xxxxxx) xxxx olachindoxu x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx koncentrace x roztoku vzorku x μx/xx porovnáním x xxxxxxxxxxx grafem (5.3.2).
Xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx w x xx/xx xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
x = x × 1&xxxx;000 / m
kde:
c = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx (5.2) x μx/xx
x = xxxxxxxx navážky vzorku x x (5.2)
7. Xxxxxxxxxxx výsledků
7.1 Identita
Identita xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx opakovaným xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xx-xxxxxxxxxxxxxx) xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx polem, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx vzorku (5.2) x kalibračního xxxxxxx (3.5.3), xxxxxxxxxxxx 5,0 μx/xx olachindoxu.
7.1.1 Xxxxxxxxx stanovením x xxxxxxxxx (xx-xxxxxxxxxxxxxx)
Xxxxxxx vzorku (5.2) xx obohatí xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.3). Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x extraktu vzorku.
S xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xx mělo xxxxx jen ke xxxxxxx výšky xxxx xxxxxxxxxxx. Šířka xxxx x polovině xxxx xxxxx xxxx xxx x xxxxxxx ±10 % původní šířky xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
7.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx pole
Výsledky xx vyhodnocují xxxxx xxxxxxxxxxxxx kritérií:
a) xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx spektra xxxxxxxxxxx xx vrcholu xxxx xx xxxxxxxxxxxxx stejný x nepřesností xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx udává ±2 xx;
x) xxx xxxxxx xxxxx mezi 220 x 400 nm xx xxxxx záznam xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x standardu zaznamenaný xx vrcholu xxxx xxxxxxxxxxxxx lišit xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 10 xx 100 % xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx vykázána xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx odchylka xxxx dvěma spektry xxxxxxxxxxx 15 % xxxxxxxxxx standardního analytu;
b) xxx xxxxxx xxxxx xxxx 220 x 350 xx se xxxxx xxxxxxxx vzestupu, xxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx od xxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx 10 xx 100 % xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx kritéria je xxxxxxxx, jestliže jsou xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x jestliže ve xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx mezi xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx 15 % absorbance xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx.
Xxxx-xx xxxxxxx x těchto xxxxxxxx splněno, přítomnost xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx stejném xxxxxx při obsahu xxxxxxxxxxx mezi 10 x 20 mg/kg, xxxxx xxxxxxxxxx15 % xxxxxxx xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxx modelový xxxxxx xxxx xxx výtěžnost xxxxxxx 90 %.
8. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
X xxxxx ES byl xxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxx xxxx xx 13 xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx vzorky xxxxxx xxx xxxxxx, včetně xxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x následující xxxxxxx:
|
| xxxxxx 1 |
xxxxxx 2 |
xxxxxx 3 |
xxxxxx 4 |
|
|
L |
13 |
10 |
11 |
11 |
|
A |
40 |
40 |
44 |
44 |
|
střední (xx/xx) |
- |
14,6 |
48,0 |
95,4 |
|
(Xx) (xx/xx) |
- |
0,82 |
2,05 |
6,36 |
|
(XX) (xx/xx) |
- |
1,62 |
4,28 |
8,42 |
|
XXx (%) |
- |
5,6 |
4,3 |
6,7 |
|
XXX (%) |
- |
11,1 |
8,9 |
8,8 |
|
xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx) |
- |
15 |
50 |
100 |
|
xxxxxxxxx (%) |
- |
97,3 |
96,0 |
95,4 |
X: xxxxx laboratoří
n: xxxxx xxxxxxxxxxxx hodnot
Sr: xxxxxxxxxx xxxxxxxx opakovatelnosti
SR: xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
XXx: xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
XXX: xxxxxxxx koeficient xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
9. Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxx více xxx 100 xx/xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx uspokojivé xxxxxxxx xxxxx navážkou xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.2) xxx, aby xx xxxxxxx koncentrace x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.3.2).
[1] Pokud xx xx xxx xxxxxxxx zkoušet na xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxx xxxxx za xxxxxxxx xxxxxxx.
[2] Pokud xx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx, xxxxxx se xxxxxx pemzy xx xxxxxxxx xxxxxxx.