Směrnice Komise 98/64/XX
xx xxx 3. září 1998,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx a xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx 71/393/EHS
(Text x xxxxxxxx xxx XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX SPOLEČENSTVÍ,
s xxxxxxx xx Smlouvu x xxxxxxxx Evropského xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx na xxxxxxxx Xxxx 70/373/XXX za xxx 20. července 1970 o zavedení xxxxx odběru xxxxxx x xxxxxxxxxxxx metod Xxxxxxxxxxxx xxx úřední xxxxxxxx krmiv [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxx x přistoupení Xxxxxxxx, Xxxxxx a Xxxxxxx, x zejména xx xxxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx k tomu, xx xxxxxxxx 70/373/EHS xxxxxxx, že xxxxxx xxxxxxxx krmiv za xxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxx splňují xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx z xxxxxxxx x správních předpisů xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x složení, xx provádí xx xxxxxxx metod odběru xxxxxx a analýzy xxxxxxxx ve Společenství;
vzhledem x tomu, xx xxxxxxxx Xxxx 79/373/XXX xx xxx 2. xxxxx 1979 x xxxxxxx xxxxxxx směsí xx xxx [2], xxxxxxxxx pozměněná xxxxxxxx Xxxxxx 97/47/XX [3], x xxxxxxxx Rady 93/74/XXX ze dne 13. xxxx 1993 x xxxxxxxx xxxxxxxx xx zvláštním účelům xxxxxx [4], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx 96/25/ES [5], xxxxxxx, že xxxxx aminokyselin a xxxx xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx Rady 70/524/XXX ze xxx 23. listopadu 1970 x xxxxxxxxxxx látkách x krmivech [6], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 98/19/XX [7], xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx na xxxxxxxx, xxxxx je xxxx xxxxx xxxxxxx do xxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxx xxxxxxxx Komise 71/393/XXX xx xxx 18. xxxxxxxxx 1971, kterou xx xxxxxxx analytické xxxxxx Společenství xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [8], naposledy xxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 84/4/XXX [9], xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx mimo jiné x xxx zjišťování xxxxxx tuku; xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, že xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Společenství xxx xxxxxxxx těchto xxxxx;
xxxxxxxx x tomu, že xxxxxxxx xxxx směrnice xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx,
XXXXXXX XXXX SMĚRNICI:
Článek 1
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx analýzy xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx, tuku x obsahu olachindoxu x krmivech xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx uvedených v xxxxxxx této xxxxxxxx.
Xxxxxx 2
V xxxxxxx xxxxxxxx Komise 71/393/XXX xx xxx "4. Xxxxxxxxx obsahu tuku" xxxxxxxxx xxxxx X xxxxxxx této xxxxxxxx.
Xxxxxx 3
1. Členské xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx předpisy nezbytné xxx dosažení souladu x touto xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 31. xxxxxxxx 1998. Xxxxxxx x nich xxxxxxxxxx Xxxxxx.
Xxxxx xxxx předpisy xxxxxxxx od 1. xxxxx 1999.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx členskými xxxxx xxxx obsahovat xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxx musí xxx xxxxxx odkaz xxxxxx xxx jejich xxxxxxx xxxxxxxxx. Způsob xxxxxx xx xxxxxxx členské xxxxx.
2. Xxxxxxx státy xxxxx Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx předpisů, které xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxx této směrnice.
Článek 4
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx dnem xx xxxxxxxxx v Xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx společenství.
Xxxxxx 5
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X Xxxxxxx dne 3. xxxx 1998.
Za Xxxxxx
Xxxxx Xxxxxxxx
xxxx Komise
[1] Xx. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Xx. xxxx. X 86, 6.4.1979, x. 30.
[3] Xx. xxxx. X 211, 5.8.1977, x. 45.
[4] Xx. xxxx. X 237, 22.9.1993, x. 23.
[5] Xx. xxxx. X 125, 23.5.1996, x. 35.
[6] Úř. xxxx. X 270, 14.12.1970, x. 1.
[7] Xx. věst. X 96, 28.3.1998, x. 39.
[8] Xx. xxxx. X 279, 2.12.1971, x. 7.
[9] Xx. věst. X 15, 18.1.1984, x. 28.
XXXXXXX
XXXX X
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
1. Xxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (syntetických x xxxxxxxxxxx) x vázaných (xxxxxxx vázané a xxxxx) xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx použití xxxxxxxxxxx aminokyselin. Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxx(x)xx, xxxxxxxxx, lysin, threonin, xxxxxx, arginin, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx glutamovou, xxxxxx, xxxxxxxx, isoleucin, xxxxxx, xxxxxxxxxxx, prolin, xxxxx, xxxxxxx x xxxxx.
Xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx rozlišovat xxxx xxxxxxx X x X. Xxxx xxxxxxxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
2. Princip
2.1 Xxxxx xxxxxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx chlorovodíkovou. Současně xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Zfiltrovaný xxxxxx xx upraví xx xX 2,20. Xxxxxxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxx xx xx xxxxxx x ninhydrinem xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 570 xx.
2.2 Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxx(x)xx x methionin xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxxxxxxx. Tyrosin xx musí xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx aminokyseliny xxxxxxx x xxxx 1 mohou xxx xxxxxxxxxx xxx x xxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx 0 xX směsí kyseliny xxxxxxxxxxx a xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx rozloží xxxxxxxxxxx xxxxxx. Oxidovaný xxxx xxxxxxxxxxx vzorek xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x = 6 xxx/x) xx 23 xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx na xX 2,20. Xxxxxxxxxxxxx se xxxxxxxx iontoměničovou xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx se xx reakci s xxxxxxxxxxx fotometrickou xxxxxxx xxx 570 xx (440 nm xxx xxxxxx).
3. Xxxxxxx
Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx destilovaná xxxx xxxx voda xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx &xx; 10 μX).
3.1 xxxxxxx xxxxxx, x = 30 %
3.2 xxxxxxxx mravenčí, w = 98–100 %
3.3 xxxxx
3.4 xxxxxxxxx xxxxx
3.5 xxxxxxxx xxxxx
3.6 kyselina 5-xxxxxxxxxxxxxxx, dihydrát
3.7 kyselina xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx 1,18 x/xx
3.8 xxxxxxxx sodný, xxxxxxxx
3.9 2,2-xxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx)
3.10 xxxxxxx xxxxx
3.11 xxxxxxxxx
3.12 petrolether, xxx xxxx 40–60 °X
3.13 xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx
3.14 xxxxx – xxxx (&xx; 10 xxx xxxxxxx)
3.15 1-oktanol
3.16 xxxxxxxxxxxxx
3.16.1 xxxxxxxxxx xxxxx uvedené x bodě 1; xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxx xx xx vakuu xxx X2X5 nebo X2XX4 xxxxx xxxx xxxxxxxx
3.16.2 kyselina xxxxxxxx
3.16.3 xxxxxxxxxxxxxxx
3.17 xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx x = 7,5 xxx/x:
300 x XxXX (3.5) xx xxxxxxxx xx xxxx x xxxxxx xx 1 xxxxx.
3.18 hydroxid xxxxx, xxxxxx x = 1 mol/l:
40 x XxXX (3.5) xx xxxxxxxx ve xxxx x doplní xx 1 xxxxx.
3.19 xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx:
Xxxxxx se 889 g kyseliny xxxxxxxx (3.2) xx 111 x xxxx x přidá se 4,73 x xxxxxx (3.3).
3.20 hydrolyzační směs, x = 6 xxx XXx/x s xxxxxxxxx 1 x xxxxxx/x:
X 492 xx XXx (3.7) xx xxxxx 1 x xxxxxx (3.3) x xxxxxx se xxxxx xx 1 litru.
3.21 xxxxxxxxx xxxx, x = 6 xxx XXx/x x přídavkem 2% xxxxxxxxxxxxx:
8,2 xx XXx (3.7) xx xxxxxxx xxxxxxxxx 900 xx xxxx, přidá xx 20 ml xxxxxxxxxxxxx (3.9) a xxxxxx xxxxx xx 1 litr (3.7 x 3.9 se xxxxx xxxxxxx přímo).
3.22 xxxxxxxx 5-sulfosalicylová, β = 6 %:
60 x xxxxxxxx 5-sulfosalicylové (3.6) se xxxxxxxx xx xxxx a xxxxxx vodou xx 1 xxxx.
3.23 oxidační xxxx (xxxxxxxx permravenčí – xxxxx):
X malé xxxxxxx se xxxxxx 0,5 xx xxxxxxxx xxxxxx (3.1) x 4,5 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx (3.19); ponechá xx x xxxxx 1 xxxxxx při 20–30 °C, xxx xx xxxxxxxx kyselina xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xx vzorku se xxxx xxxxxxx x xxxxx x xxxxxxx xxxxx (15 minut).
Pozor:
Je xxxxx xxxxxxx kontaktu x kůží a xxxxxxxx ochranný oděv.
3.24 xxxxxxxxxxx tlumivý roztok, x = 0,2 xxx Na+/l, pH 2,20:
X přibližně 800 xx vody se xxxxxxxx 19,61 x xxxxxxxxx xxxxxxx (3,8), 5 xx xxxxxxxxxxxxx (3.9), 1 x xxxxxx (3.3) x 16,50 xx HCl (3.7). pH xx xxxxxx xx 2,20. Xxxxxx se vodou xx xxxxx 1 xxxxx.
3.25 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (4.9)
3.26 ninhydrinové xxxxxxx připravované podle xxxxxxxx xxx použitý xxxxxxxxxx (4.9)
3.27 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Tyto xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxx 5 °X.
3.27.1 xxxxxxx standardní xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.16.1), x = 2,5 μxxx/xx xxx každou xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx roztok xxx obdržet x xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
3.27.2 xxxxxxx xxxxxxxxxx základní xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx, x = 1,25 μxxx/xx
0,2115 g xxxxxxxx xxxxxxxx (3.16.2) x 0,2265 x xxxxxxxxxxxxxxxx se xxxxxxxx (3.16.3) x citronanovém xxxxxxxx xxxxxxx (3.24) x litrové xxxxxxx xxxxx x doplní xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx tlumivým xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx při xxxxxxx xxx 5 °X xxxxxxx 12 xxxxxx. Tento xxxxxx xx nepoužívá, xxxxx xxxxxxxxxx základní xxxxxx (3.27.1) obsahuje xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx.
3.27.3 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxx, c = 20 μxxx/xx
0,6560 x norleucinu (3.13) xx rozpustí x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (3.24) x xxxxxxx xxxxx na 250 xx a doplní xx xx značku xxxxxxxxxxxx tlumivým xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx pod 5 °X xxxxxxx 6 xxxxxx.
3.27.4 xxxxxxxxxx roztok xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx s xxxxxxxxxxx, x = 5 xxxx/50 μx kyseliny xxxxxxxx x methioninsulfonu x x = 10 xxxx/50 μl x ostatních aminokyselin
Ve 100 xx kádince xx xxxxxxxx 2,2 x xxxxxxxx xxxxxxx (3.10) v 30 xx xxxxxxxxxxxxx tlumivého xxxxxxx (3.24). Xxxxxxx xx 4,00 ml xxxxxxxxx standardního základního xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.27.1), 4,00 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx cysteové x xxxxxxxxxxxxxxxx (3.27.2) a 0,50 ml xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.27.3), xxxxx xx používá. xX xx xxxxxx xx 2,20 xxxxxxxxxx xxxxxx (3.18).
Xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx převede do 50 xx odměrné xxxxx, xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx tlumivým xxxxxxxx (3.24) x xxxxxxx se.
Skladuje xx xxx xxxxxxx xxx 5 °X xxxxxxx 3 xxxxxx.
Xxx xxxx xxxxxxxx 9.1.
3.27.5 xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx, připravenými xxxxx xxxx 5.3.3.1 a xxx extrakty (5.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx podle 3.27.4 x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxx teplotě xxx 5 °X xxxxxxx 3 měsíce.
4. Xxxxxxxxx a pomůcky
4.1 xxxxx x kulatým xxxx x xxxxxx 100 nebo 250 xx xxxxxxxx zpětným xxxxxxxxx
4.2 xxxxxx z xxxxxxxxxxxxxxxx skla x xxxxxx 100 xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x gumovým xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. Xxxxx, Schott) xxx xxxxxxx x xxxxxxx
4.3 xxxxxxx s nuceným xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx s přesností xxxxx xxx ±2 °X
4.4 xX xxxx (xxx desetinná xxxxx)
4.5 xxxxxxxxxx filtr (0,2 μx)
4.6 odstředivka
4.7 xxxxxxx xxxxxxx odparka
4.8 mechanická xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx
4.9 xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx XXXX x xxxxxxxxxxxxxx kolonou, xxxxxxxxx xxx ninhydrin, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx oddělení xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx jiných ninhydrin xxxxxxxxxxx látek. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx čerpadla xx xxxxxxxx xxxxxxx ± 0,5 % xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx i xxxxxxx vzorku.
Některé xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxxxx vykazuje xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x = 0,8 xxx/x x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx kyselinu x xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx analyzátory xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx-xx hydrolyzát xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x/xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx případě xx xxxxx objem xxxxxxxx xxxx xxxxxxx pH xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx 5 xx. Xxxxxxxx se xx xxxxxxxx ve vakuu xxx xxxxxxx xxxxxxx 40 °X.
5. Postup
5.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx tak, xxx prošel sítem x oky 0,5 xx. Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 50 °X xxxx xxx zmrazení. Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxx se xxxx xxxxxx extrahují xxxxxxxxxxxxx (3.12).
5.2 Xxxxxxxxx volných xxxxxxxxxxxx v krmivech x x xxxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (1–5 x) xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) s xxxxxxxxx xx 0,2 xx x přidá xx 100,0 ml xxxxxxxxx xxxxx (3.21). Xxxxx se xxxxx 60 minut xx xxxxxxxxxx třepačce xxxx xxxxx xx magnetické xxxxxxxx (4.8). Xx xxxxxxx sedimentu xx xxxxxxxxxx 10,0 xx xxxxxxxxxxxx do xxxxxxx x obsahu 100 xx.
Xx stálého míchání xx přidá 50 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx x míchání xx xxxxxxxxxx míchačce xxxxxxx 5 xxxxx. Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx, xxx se odstranila xxxxxxx xxxxxxxxx. 10,0 xx xxxxxxxxxxxx roztoku xx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx 100 xx, xX xx xxxxxx na 2,20 pomocí roztoku xxxxxxxxx xxxxxxx (3.18), xxxxx xx roztok xxxxxxx pomocí xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx roztoku (3.24) xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24).
Xxxxxxx-xx xx xxxxxxx standard, xxxxx xx 1,00 xx interního xxxxxxxxx (3.27.3) xx xxxxxxx 100 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x potom xx xxxxxx xx xxxxxx tlumivým xxxxxxxx (3.24).
Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.4 – xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxx, xxxxxxxxxxx se xxx xxxxxxx xxx 5 °X.
5.3 Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
5.3.1 xxxxxxx
0,1 xx 1 x xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxxxx s xxxxxxxxx 0,2 xx:
- xx xxxxx s xxxxxxx xxxx x xxxxxx 100 ml (4.1) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (5.3.2.3) xxxx
- xx xxxxx s xxxxxxx xxxx x xxxxxx 250 ml (4.1), xxxxxxxx-xx xx nízká xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx
- xx xxxxxx x xxxxxx 100 ml xx šroubovací xxxxxxxx (4.2) (xxx uzavřenou xxxxxxxxx 5.3.2.4).
Xxxxxxxx xxxx xxxxxx xx měla xxx xxxxx xxxxxx xxx 10 xx x obsah xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 100 xx.
Xxxxx/xxxxxx xx xxxxxx xx xxxxx s ledovou xxxxx x ochladí xx na 0 °X, potom xx xxxxx 5 xx xxxxxxxx směsi (3.23) x xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx/xxxxxx xx xxxxxx i xx lžící vzduchotěsnou xxxxx x vloží xx i s xxxxx s ledovou xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx 0 °X x ponechá xx xxx 16 xxxxx. Xx 16 hodinách xx xxxxx x xxxxxxxxxx x přebytečné xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx přidáním 0,84 x dvojsíranu xxxxxxx (3.4).
Xxxx se xxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.1.
5.3.2 xxxxxxxxx
5.3.2.1 xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorků
K xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx 5.3.1 xx xxxxx 25 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (3.20) xxx, xxx neulpěl xxxxx vzorek na xxxxxxx xxxxxx xxx xx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx pokračuje podle 5.3.2.3 nebo 5.3.2.4.
5.3.2.2 xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxx x xxxxxxx xxxx x xxxxxx 100 ml nebo 250 ml (4.1) xxxx do xxxxxx x xxxxxx100 xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.2) se odváží 0,1 xx 1 x xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) s přesností xx 0,2 xx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxx dusíku xxx 10 xx. Xxxxxxx xx xxxxx 25 xx hydrolyzační směsi (3.20) x xxxxxx xx xx vzorkem. Xxxx se xxxxxxxxx xxx podle 5.3.2.3 xxxx xxxxx 5.3.2.4.
5.3.2.3 xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxx x xxxxx (xxxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.1 xxxx 5.3.2.2) xx přidají 3 skleněné xxxxxxx x směs xx xxxxx xx mírného xxxx xxx zpětným xxxxxxxxx xx dobu 23 hodin. Xx xxxxxxxx hydrolýzy se xxxxxx chladič promyje 5 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24). Xxxxx xx xxxxxx x ochladí xx x xxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx 5.3.3.
5.3.2.4 xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx podle 5.3.2.1 xxxx 5.3.2.2 se xxxxxx xx xxxxxxx (4.3) xxx 110 °X. Xxx xx xxxxx xxxxx hodiny xxxxxxxxx xxxxxxxxx tlaku (x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx) x xxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxx. Xx uplynutí xxxxx xxxxxx xx xxxxxx zašroubuje x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx (4.3) 23 xxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx vyjme xx xxxxxxx, opatrně xx xxxxxxxxxx uzávěr x xxxxxxx xx xx xxxxx x xxxxxxx vodou. Baňka xx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx při xxxxxx xX (5.3.3) xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx tlumivého xxxxxxx (3.24) xx xxxxxxx x obsahu 250 xx nebo xx xxxxx x kulatým xxxx x obsahu 250 ml.
Dále xx xxxxxxxxx xxxxx 5.3.3
5.3.3 xxxxxx xX
Xxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx má xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.9), xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xX xxxxx 5.3.3.1 xxxx 5.3.3.2.
5.3.3.1 xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.9), xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx:
Xxxxx xxxxxxxxxx aminokyselin xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xx-xx se xxxxxx xxxxx xxxxxxx), xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx roztok (3.27.3).
X takovém xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx 2,00 xx vnitřního xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.27.3).
Do xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.3 xxxx 5.3.2.4. se xxxxxxx 2 xxxxx 1-xxxxxxxx (3.15).
Xx xxxxxxx xxxxxxx (4.7) xx xxxxx objem na 5-10 xx za xxxxx xxx 40 °X. Xxxxx xx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx 5 xx, xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx analýzu xxxxx.
xX xx xxxxxx xx 2,20 roztokem xxxxxxxxx xxxxxxx (3.18) a xxxxxxxxx se xxxxx xxxx 5.3.4.
5.3.3.2 xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.9)
Hydrolyzáty xxxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.3 xxxx 5.3.2.4 se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx opatrným xxxxxxxx 17 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.17), xx stálého xxxxxxx x při zajištěné xxxxxxx xxx 40 °X.
xX xx xxxxxx xx 2,20 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.18) xxx pokojové teplotě. Xxxx se pokračuje xxxxx bodu 5.3.4.
5.3.4 xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx (5.3.3.1 xxxx 5.3.3.2) x upraveným xX xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx citronanového xxxxxxxxx roztoku (3.24) xx odměrné xxxxx x obsahu 200 xx x xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24) xx xxxxxx xx xxxxxx.
Xxxxx-xx xxxxx použit vnitřní xxxxxxxx, xxxxxxx xx 2,00 xx vnitřního xxxxxxxxx (3.27.3) x xxxxx se doplní xx značku citronanovým xxxxxxxx roztokem (3.24). Xxxxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx (5.4)
Nejsou-li xxxxxxx xxxxxx analyzovány týž xxx, uschovávají xx xxx teplotě xxx 5 °X.
5.4 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx (5.2) x xxxxxxxxxx (5.3.4) pokojovou xxxxxxx. Směs xx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx filtrem 0,2 μ (4.5). Xxxxxxxx xxxx xxxxxx se xxxxxxx ionexové xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx aminokyselin (4.9).
Xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx je xxxxxxxx, xxx xx na xxxxxxx nastřikovalo xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx ± 0,5 % xxx xxx xxxxxxx standardů xxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxx je xxxxxxx vnitřního xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxxxxx x aminokyselinám xx xxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a x roztocích xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx závisí xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x analytického xxxxxxx. Xxxxxxxx nebo xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24) xxx, aby xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 30 – 200 % plochy xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x roztoku xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx aminokyselin se xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx na typu xxxxxxxxx analyzátoru a xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx musí být xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx sebe xxxxxxxx i xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxx chromatografický xxxxxx xxxxxxxx reagovat xx xxxxx objemů xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxx.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, by xxxx být dosaženy xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx. Tyto equimolární xxxxxxx musí obsahovat xxxxxxx 30 % xxxxxxxxxxx obsahu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx použitém xxxxxxxxxxx aminokyselin (4.9).
Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx by xxxxx xxxxx sedla a xxxxxxx xxxx nižšího x xxxx překrývajících xx xxxxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxxxx xxxxx přesahovat 2:10 (xxxxx xx xxxxxxx xxxxx cyst(e)in, xxxxxxxxx, xxxxxxxx a xxxxx, xx stanovení xxxxxxxxxx ovlivněno nedostatečnou xxxxxxxx xxxxxxxxxx píků). Xxx všechny xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxx xxxxx xxx 1:10.
Xxxxxx xxxx zaručit, xx xxxxx bude xxxxxxxxx od "xxxxxxxxxx xxxxxxxx" x xxxxxxxxx.
6. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxx x standardu se xxxx xxx každou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x g xx xx vzorku.
g xxxxxxxxxxxxx xx kg xxxxxx = X × X × XX × X / X × X × 1 000
Xx-xx použit xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx: X / X
X = xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx
X = plocha xxxx kalibračního xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
X = xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x hydrolyzátu xxxx x xxxxxxxx
X = xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx roztoku
MV = xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
X = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x μxxx/xx
X = xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (x) (xxxxxxxxxx xx původní xxxx xxxxx je vzorek xxxxxxx nebo xxxxxxxx)
X = xxxxxxx objem xxxxxxxxxx roztoku (5.3.4) x xx nebo xxxxxxx xxxxx zředěného xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx 6.1
Xxxxxx a xxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx cysteová, xxx vypočítávají se xxxx xxxxxx (X6X12X2X4X2, XX 240,30) s xxxxxxxx XX 120,15 (= 0,5 x 240,30).
Xxxxxxxxx xx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xx xxxx methionin s xxxxxxxx XX methioninu: 149,21.
Xxxxxxx volný methionin xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx methionin, xxx výpočet se xxxxxxx xxxxxx MV.
6.1 Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (F) xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.2) xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx vzorce:
F = 100 xx × (10 ml + 5 ml) / 10 ml × V ml / 10xx
X = objem xxxxxxxxxx extraktu
7. Xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxx metoda byla xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx úrovni x xxxx 1990 xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxx směs xxx prasata, xxxxx xxxx pro xxxxxxxx, xxxxxxxxxx koncentrát, xxxxxx). Xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxx x x/xx
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx xxx prasata |
6,94 x = 15 |
3,01 x = 17 |
3.27 x =.17 |
9,55 x = 13 |
|
Xxxxx směs xxx xxxxxxxx |
9,31 n = 16 |
3,92 x = 18 |
5,08 x = 18 |
13,93 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
22,32 x = 16 |
5,06 x = 17 |
12,01 x = 17 |
47,74 x = 15 |
|
Xxxxxx |
58,42 x = 16 |
- |
90,21 x = 16 |
98,03 x = 16 |
x = xxxxx zúčastněných xxxxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxx vyjádřená xxxx vnitrolaboratorní standardní xxxxxxxx je xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
xxxxxxxxxx xxxxxxxx (Xx) xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x g/kg
|
Referenční xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx pro xxxxxxx |
0,13 x = 15 |
0,10 n = 17 |
0,11 x = 17 |
0,26 n = 13 |
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx |
0,20 x = 16 |
0,11 n = 18 |
0,16 x = 18 |
0,28 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx koncentrát |
0,48 n = 16 |
0,13 x = 17 |
0,27 x = 17 |
0,99 n = 15 |
|
Xxxxxx |
1.30 x = 16 |
_ |
2,19 x = 16 |
2,06 x = 16 |
n = xxxxx xxxxxxxxxxxx laboratoří
Variační xxxxxxxxxx (%) xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (Sr)
|
Referenční xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx pro xxxxxxx |
1,9 a = 15 |
3,3 x = 17 |
3,4 x =.17 |
2,8 x = 13 |
|
Xxxxx xxxx pro xxxxxxxx |
2,1 x = 16 |
2,8 x = 18 |
3,1 x = 18 |
2,1 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
2,7 x = 16 |
2,6 x = 17 |
2,2 x = 17 |
2,4 n = 15 |
|
Xxxxxx |
2,2 x = 16 |
- |
2,4 x = 16 |
2,1 x = 16 |
x = xxxxx xxxxxxxxxxxx laboratoří
7.2 Reprodukovatelnost
Výsledky xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx odchylek xxxxxxxxxxx ze shora xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (XX) x x/xx
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
xxxxxxxx |
Xxxx(x)xx |
xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx |
0,28 x = 15 |
0,30 x = 17 |
0,23 n = 17 |
0,30 x = 13 |
|
Xxxxx směs xxx xxxxxxxx |
0,48 n = 16 |
0,34 n = 18 |
0,55 x = 18 |
0,75 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
0,85 x = 16 |
0,62 n = 17 |
1,57 x = 17 |
1,24 x = 15 |
|
Xxxxxx |
2,49 x = 16 |
- |
6,20 x = 16 |
6,62 x = 16 |
x = xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx (%) mezilaboratorních xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (XX)
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
xxxxxxxx |
Xxxx(x)xx |
xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx směs xxx xxxxxxx |
4,1 x = 15 |
9,9 x = 17 |
7,0 x = 17 |
3,2 x = 13 |
|
Xxxxx xxxx pro xxxxxxxx |
5,2 x = 16 |
8,8 x = 18 |
10,9 x = 18 |
5,4 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
3,8 x = 16 |
12,3 x = 17 |
13,0 x = 17 |
3,0 n = 15 |
|
Premix |
4,3 n = 16 |
- |
6,9 x = 16 |
6,7 n = 16 |
n = xxxxx zúčastněných xxxxxxxxxx
8. Xxxxxxx referenčních xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx uvedené xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx certifikovanými kalibračními xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
9. Xxxxxxxx
9.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx standardů xxxxxxxxxxxx (xxx 3.27.4 x 3.27.5) a roztoků xxxxxx (5.3.4) xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx rozsah xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx roztok xx xxxx citronanovým xxxxxxxx xxxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxx xxxxx xxxx uprostřed tohoto xxxxxxx.
9.2 Xxxxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x souladu x xxxxxxxxxxx výrobce.
9.3 Xxx xxxxxxx této metody x xxxxx obsahujících xxxx xxx 1 % xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx) xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx a xxxx xx proto xxxxxx xxxxxxxxx postup.
ČÁST X XXXXXXXXX TUKŮ
1. Xxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxx xx stanoví xxxxx xxxx x xxxxxxxx. Metoda xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx semen a xxxxxx, xxxxxxx zkoušení xx xxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxx 136/66/XXX xx dne 22. xxxx 1996.
Xxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx pro analýzu xxxxxxx jeden ze xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx:
1.1 Xxxxxx A – xxxxx extrahovatelné tuky
Tato xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx krmiva rostlinného xxxxxx, x výjimkou xxxx, které jsou xxxxxxxx xx okruhu xxxxxxx X.
1.2 Postup X – xxxxxxx xxx
Xxxx metoda je xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxx krmné xxxxx. Xxxxxxx se xxx xxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxx není xxxxx tuk xxxxx xxxxxxxxxx bez xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx. xxxxx, xxxxxxxx, bramborové xxxxxxxx x xxxxxxx, které xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx vytlačování, vločkování x zahřívání).
1.3 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx X, než xxxxxxxx X, xx třeba xxxxxxxxx xx platnou xxxxxxx podle xxxxxxx X.
2. Xxxxxxx
2.1 Postup X
Xxxxxx se extrahuje xxxxxxxxxxxxx. Rozpouštědlo xx xxxxxxxxxxx a zbytek xx vysuší x xxxxx.
2.2 Xxxxxx X
Xxxxxx xx zahřívá x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx xx ochladí x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxx xx xxx zpracuje xxxxx xxxxxxx A.
3. Xxxxxxx
3.1 xxxxxxxxxxx x bodem xxxx xxxx 40 x 50 °C. Xxxxxxx bromového čísla xxxx xxx xxxxx xxx 1 x xxxxxx po xxxxxxxxxx xxxxx než 2 xx/100 xx
3.2 xxxxx xxxxx, xxxxxxx
3.3 xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, x = 3 xxx XXx/x
3.4 xxxxxxxxx prostředky, např. xxxxxxxxx, Xxxxx-xxxxxxxx.
4. Přístroje x pomůcky
4.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx, se sifonem (Xxxxxxxxx xxxxxxxx), refluxní xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxx 10 xxxxx xx xxxxxx. X xxxx bez xxxxxx xx měla xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 10 xx xx minutu.
4.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx v xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxx 4.1.
4.3 Xxxxxxx, buď vakuová xxxxxxxx xx 75 °X ± 3 °X, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 100 °X ± 3 °X.
5. Xxxxxx
5.1 Postup X (xxx xxx 8.1)
Xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx 5 x xxxxxx x xxxxxxxxx xx 1 xx (4.2) a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxx xx extrakčního xxxxxxxxx (4.1) x xxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.1). Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx se jímá xx xxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx úlomky pemzy [1].
Xxxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxx, xxxxxx v xxxxx xx xxxx 1,5 xxxxxx v xxxxxxx (4.3). Nechá xx xxxxxxxxxxx x exsikátoru x xxxxx. Xxxx xx dalších 30 xxxxx, xxx xx xxxxxxxx, zda xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx mezi xxxxx následujícími xxxxxxxx xxxx být xxxxx xxx 1 xx).
5.2 Xxxxxx X
Xx xxxxxxx x obsahu 400 xx xxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 300 ml xx odváží 2,5 x xxxxxx s xxxxxxxxx na 1 xx (xxx bod (8,2) x přidá xx 100 xx xxxxxxxx chlorovodíkové (3.3) x xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx přikryje xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx xx mírného xxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx na xxxxx xxxxx x xxxx xx po xxxx xxxxx hodiny. Xxxxx xxxx se xxxx xxxxxxxx usazování xxxxxxxx xxxxxx xx stěnách xxxxxx.
Xxxx xx xxxxxxx x xxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.4), xxx xxx filtraci xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx zbavený tuku. Xxxxxx xx promývá xxxxxxxx xxxxx, xx xx získá xxxxxxxxx xxxxxxx. Provede se xxxxxxxx, xxx filtrát xxxxxxxxxx xxxxx tuk. Xxxx přítomnost ukazuje, xx xx vzorek xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx X.
Xxxxxxx filtrační xxxxx se zbytkem xx xxxxxx xx xxxxxxxx sklo x xxxx se půldruhé xxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.3) xxx xxxxxxx 100 °X ± 3 °X.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx do xxxxxxxxx xxxxxxx (4.2) a xxxxxxxx smotkem vaty xxx xxxx. Patrona xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1) x xxxx xx xxxxxxxxx podle xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxx 5.1.
6. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxx zbytku xx xxxxxxx jako xxxxxxxx xx xxxxxx.
7. Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xx výsledcích xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx prováděných xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx pracovníkem xx xxxxx xxxxxxxxxx:
- 0,2 % v absolutní xxxxxxx, při obsahu xxxx xxxxxx xxx 5 %,
- 4,0 % xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx výsledku xxx xxxxxx xx 5 xx 10 %,
- 0,4 % x xxxxxxxxx xxxxxxx, při xxxxxx xxx 10 %.
8. Xxxxxxxx
8.1 X xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx a xxxx, xxxxx se xxxxxxx xxxx nebo xxxxx neumožňují xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xx postupuje následujícím xxxxxxxx:
Xxxxxx xx 20 x vzorku x xxxxxxxxx xx 1 xx x xxxxxx xx x 10 xxxx x xxxx xxxxx bezvodého síranu xxxxxxx (3.2). Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx (3.1) xxxxx xxxx 5.1. Xxxxxxxx extrakt xx xxxxxx xx 500 xx xxxxxxxxxxxxx (3.1) x xxxxxxxx xx. 50 xx roztoku xx odpipetuje xx xxxx suché, předem xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx [2].
Xxxxxxxxxxxx xx oddestilujte, baňka xx vysuší x xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx 5.1.
Xxxxx tuku xx xxxxxxxx jako xxxxxxxx xx xxxxxx pomocí xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:
(10 x + x) × 5
xxx:
x = xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx (xxxxxxx xxxx xxxxxxxx)
x = xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x gramech
8.2 X xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku zvýšit xx 5 x.
8.3 Xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx, která mají xxxxxx xxxxx xxxx, xx xxxx před xxxxxxxxxx x extrakcí xxxxx xxxxxxx B xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
8.4 X xxxx 5.2 xx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx místo xxxx xxxxxxx.
8.5 X xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx 1,5 hod. Xx však xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx vysoušení, xxxxx xxxx xxxx x xxxxxx výsledkům. Xx xxxxx xxxxxx x mikrovlnnou xxxxxx.
8.6 Xxx xxxxxx xxxx xxx 15 % xx xxxxxxxxxx provést xxxx hydrolýzou extrakci xxxxx postupu A x xxxxxxxx extrakci xxxxx postupu B. Xxxxxx xx do xxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx v xxxxxx.
XXXX X
XXXXXXXXX OLACHINDOXU
(2-[N-2-(hydroxyethyl)karbamoyl]-3-methylchinoxalin-N1,N4-dioxid)
1. Xxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx metodou xx xxxxxxx obsah xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx. Dolní xxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 5 xx/xx.
2. Princip
Vzorek xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx x methanolu. Xxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxxx vysoce xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xx xxxxxxxx xxxx xx použití XX xxxxxxxxx.
3. Činidla
3.1 xxxxxxxx
3.2 xxxxxxxx, pro HPCL
3.3 xxxx, pro XXXX
3.4 xxxxxxx xxxx pro XXXX:
Xxxx vody (3.3) x xxxxxxxxx (3.2), 900 + 100 (X + X)
3.5 xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxxxxxxx 2-[X-2-(xxxxxxxxxxxx)xxxxxxxxx]-3-xxxxxxxxxxxxxxxx-X1,X4-xxxxxx, X 851
3.5.1 zásobní xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, 250 μx/xx
Xx odměrné xxxxx o xxxxxx 200 xx xx xxxxxx 50 mg xxxxxxxxxxx (3.5) x xxxxxxxxx xx 0,1 xx x xxxxx xxx 190 xx xxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xx 20 xxxxx xx ultrazvukové xxxxx (4.1). Po xxxxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, doplní vodou xx xxxxxx x xxxxxxx. Xxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x uschovává x xxxxxxxxxx. Xxxxx roztok xx xxxx připravovat xxxxxxx xxxxx měsíc.
3.5.2 xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, 25 μx/xx
10,0 xx xxxxxxxxx standardního xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.1) xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 100 xx, xxxxxx se po xxxxxx xxxxxxx xxxx (3.4) x xxxxxxxx. Xxxxx xx obalí xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx x chladničce. Xxxxx xxxxxx xx xxxx připravovat xxxxx xxxxxxx.
3.5.3 xxxxxxxxxx roztoky
Do xxxx xxxxxxxxx xxxxx x obsahu 50 xx xx xxxxxxxxxx 1,0, 2,0, 5,0, 10,0, 15,0 x 20,0 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.2). Xxxxxx se xxxxxxx xxxx (3.4) xx xxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxx xx obalí xxxxxxxxxx fólií. Tyto xxxxxxx odpovídají 0,5, 1,0, 2,5, 5,0, 7,5 x 10,0 μx olachindoxu xx xx.
Xxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx
4.1 xxxxxxxxxxxx xxxxx
4.2 xxxxxxxxxx třepačka
4.3 xxxxxxxx XXXX s xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx
4.3.1 xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, 250 xx x 4 xx, xxxxxxx X18, 10 μx, nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx
4.4 xxxxxxxxxx filtry x xxxx 0,45 μx
5. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxx je xxxxxxx na světlo. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx provádět při xxxxxxxx xxxxxx nebo x nádobách x xxxxxxx xxxx.
5.1 Xxxxxx
5.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx se xxxx předem xxxxxxxxxx xxx kontrolu, xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxxxxxxx látky.
5.1.2 Xxxxxxx xx výtěžnost xx xxxxxxx analýzou xxxxxxxxxx xxxxxx obohaceného xxxxxxxx xxxxxxxx množství xxxxxxxxxxx, xxxxx odpovídá xxxx xxxxxx xx xxxxxx K xxxxxxxxxxx xx xxxxxx 50 xx/xx xx odpipetuje 10,0 ml xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.1) do kónické xxxxx x xxxxxx 250 xx x xxxxxx se odpaří xx xxx 0,5 xx. Xxxxx xx 50 x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx a nechá xx 10 xxxxx xxxxxx, přičemž xx xxxxx několikrát xxxxxxxx. Xxxx se xxxxxx x xxxxxxxx (5.2).
Xxxxxxxx:
Xxx xxxxx xxxx xxxxxx xx být xxxxxxxx xxxxxx podobného xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx x nesmí xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.2 Extrakce
Naváží se xxxxxxxxx 50 x xxxxxx s xxxxxxxxx xx 0,01 x. Xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 1000 xx, xxxxx se 100 xx xxxxxxxxx (3.1) x baňka xx xxxxxx xx xxx xxxxx xx ultrazvukové xxxxx (4.1). Xxxxx xx 410 ml xxxx x xxxxxxx xx v xxxxxxxxxxxx xxxxx dalších 15 xxxxx. Baňka se xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx, dále xx xxxxx 30 minut xx xxxxxxxx (4.2) x potom xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx filtrem. 10,0 ml filtrátu xx xxxxxxx do xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 20 xx, xxxxxx xx vodou xx xxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) (viz xxx 9. Xxxxxxxx). Xxxx xx pokračuje xxxxxxxxxx XXXX (5.3).
5.3 Xxxxxxxxx XXXX
5.3.1 Xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx doporučené, xxxxx xxx použity xxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx, xx dávají xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
xxxxxxxxxx xxxxxx (4.3.1)
xxxxxxx fáze (3,4): Xxxx vody (3.3) x methanolu (3.2), 900 + 100 (X + X)
xxxxxxxxx xxxxxxxx: 1,5–2 xx/xxx
xxxxxxxx xxxxxx xxxxx: 380 xx
xxxxx xxxxxxxx: 20 μx–100 μx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx, xx se xxxxxxxxxx xxxxxxxxx kalibrační xxxxxx (3.5.3) xxxxxxxxxx 2,5 μx/xx, až xx xxxxxxx konstantních xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxx.
5.3.2 Kalibrační xxxx
Xxx xxxxx kalibrační xxxxxx xx provede xxxxxxx nástřiků x xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxx) xxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxx xx použití xxxxxxxxx hodnot xxxxx (xxxxx) píků xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx x příslušných xxxxxxxxxxx x μx/xx xxxx xxxxxxxxx.
5.3.3 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx vzorku (5.2) xxx použití stejného xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx.
6. Xxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxx) xxxx olachindoxu x xxxxxxx xxxxxx xx zjistí koncentrace x xxxxxxx vzorku x μx/xx porovnáním x xxxxxxxxxxx xxxxxx (5.3.2).
Xxxxx olachindoxu ve xxxxxx x x xx/xx je xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
x = x × 1&xxxx;000 / x
xxx:
x = xxxxxxxxxxx olachindoxu v xxxxxxxx vzorku (5.2) x μx/xx
x = xxxxxxxx xxxxxxx vzorku x x (5.2)
7. Xxxxxxxxxxx výsledků
7.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx může být xxxxxxxxx opakovaným xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xx-xxxxxxxxxxxxxx) xxxxx xxxxxxxx detektoru x xxxxxxxx polem, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (5.2) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.3), xxxxxxxxxxxx 5,0 μg/ml xxxxxxxxxxx.
7.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (co-chromatography)
Extrakt vzorku (5.2) se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxx roztoku (3.5.3). Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx mělo xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx nalezeného x xxxxxxxx xxxxxx.
X xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxx jen xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx xxx x rozmezí ±10 % xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
7.1.2 Xxxxxxxx diodového xxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
x) při xxxxxx délce maximální xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx musí xxx xxxxxx xxxxxxx zaznamenaný xx xxxxxxx xxxx xx chromatogramu xxxxxx x xxxxxxxxxxx danou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx detektor x diodovým xxxxx xx xxxxx ±2 xx;
x) xxx vlnové xxxxx xxxx 220 x 400 nm xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku x standardu xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx od xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 10 xx 100 % xxxxxxxxx absorbance. Tohoto xxxxxxxx je xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx vykázána xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx spektry xxxxxxxxxxx 15 % xxxxxxxxxx standardního analytu;
b) xxx vlnové xxxxx xxxx 220 x 350 xx xx xxxxx spektrum xxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx od xxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxx x rozsahu 10 xx 100 % xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx, jestliže xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx mezi xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx 15 % xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx píku.
Není-li xxxxxxx x těchto xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx 10 x 20 mg/kg, xxxxx přesáhnout15 % xxxxxxx xxxxxxxx.
7.3 Výtěžnost
Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx vzorek xxxx xxx výtěžnost xxxxxxx 90 %.
8. Xxxxxxxx kruhového xxxxx
X xxxxx XX xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxx xxxx až 13 laboratoří xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx krmiva xxx selata, včetně xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x následující xxxxxxx:
|
| xxxxxx 1 |
vzorek 2 |
vzorek 3 |
xxxxxx 4 |
|
|
X |
13 |
10 |
11 |
11 |
|
X |
40 |
40 |
44 |
44 |
|
xxxxxxx (xx/xx) |
- |
14,6 |
48,0 |
95,4 |
|
(Xx) (xx/xx) |
- |
0,82 |
2,05 |
6,36 |
|
(XX) (mg/kg) |
- |
1,62 |
4,28 |
8,42 |
|
CVr (%) |
- |
5,6 |
4,3 |
6,7 |
|
XXX (%) |
- |
11,1 |
8,9 |
8,8 |
|
xxxxxxxxx obsah (mg/kg) |
- |
15 |
50 |
100 |
|
výtěžnost (%) |
- |
97,3 |
96,0 |
95,4 |
X: počet xxxxxxxxxx
x: xxxxx xxxxxxxxxxxx hodnot
Sr: xxxxxxxxxx odchylka opakovatelnosti
SR: xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
XXx: xxxxxxxx koeficient xxxxxxxxxxxxxxx
XXX: xxxxxxxx koeficient xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
9. Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx ověřena xxx xxxxxx obsahující více xxx 100 mg/kg xxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx uspokojivé výsledky xxxxx navážkou xxxxxx x/xxxx zředěním xxxxxxxx (5.2) xxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.3.2).
[1] Xxxxx xx xx xxx xxxxxxxx zkoušet xx xxxxxxx, zamění xx xxxxxx xxxxx za xxxxxxxx xxxxxxx.
[2] Xxxxx xx má xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxxx se xxxxxx xxxxx za xxxxxxxx xxxxxxx.