Xxxxxxxx Xxxxxx 98/64/XX
xx xxx 3. září 1998,
xxxxxx se stanoví xxxxxxxxxx xxxxxx Společenství xxx stanovení xxxxxxxxxxxx, xxxx a xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx a xxxxxx xx mění xxxxxxxx 71/393/EHS
(Text s xxxxxxxx pro XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX SPOLEČENSTVÍ,
s xxxxxxx xx Smlouvu o xxxxxxxx Evropského xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx směrnici Xxxx 70/373/EHS za xxx 20. července 1970 o zavedení xxxxx xxxxxx vzorků x xxxxxxxxxxxx metod Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx krmiv [1], xxxxxxxxx pozměněnou Xxxxx x xxxxxxxxxxx Xxxxxxxx, Xxxxxx x Xxxxxxx, x xxxxxxx xx xxxxxx 2 uvedené xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx 70/373/EHS xxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxx krmiv xx xxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxx splňují xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx z právních x správních předpisů xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x složení, xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx odběru xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx ve Společenství;
vzhledem x tomu, xx xxxxxxxx Rady 79/373/XXX xx xxx 2. xxxxx 1979 o xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx trh [2], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 97/47/XX [3], x xxxxxxxx Xxxx 93/74/XXX xx xxx 13. xxxx 1993 x xxxxxxxx určených xx zvláštním xxxxxx xxxxxx [4], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx 96/25/ES [5], xxxxxxx, že xxxxx aminokyselin x xxxx musí xxx xxxxxxx xx označení xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx Xxxx 70/524/XXX xx xxx 23. xxxxxxxxx 1970 x xxxxxxxxxxx látkách x xxxxxxxx [6], xxxxxxxxx pozměněná směrnicí Xxxxxx 98/19/ES [7], xxxxxxx, že xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxx na xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 71/393/EHS xx dne 18. xxxxxxxxx 1971, xxxxxx xx stanoví xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [8], naposledy xxxxxxxxx xxxxxxxx Komise 84/4/XXX [9], xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx x xxx zjišťování xxxxxx xxxx; že xx xxxxxx uvedené xxxxxx upravit;
vzhledem k xxxx, xx xxxx xxx stanoveny xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, že xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Stálého xxxxxx xxx xxxxxx,
XXXXXXX XXXX SMĚRNICI:
Xxxxxx 1
Xxxxxxx státy xxxxxxx, xx analýzy xxx úřední kontrolu xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx x obsahu olachindoxu x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx uvedených v xxxxxxx této xxxxxxxx.
Článek 2
X xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 71/393/XXX xx xxx "4. Xxxxxxxxx obsahu tuku" xxxxxxxxx xxxxx X xxxxxxx této xxxxxxxx.
Článek 3
1. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx právní x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx do 31. xxxxxxxx 1998. Xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx Xxxxxx.
Xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx od 1. xxxxx 1999.
Tato xxxxxxxx xxxxxxx členskými xxxxx xxxx obsahovat odkaz xx tuto xxxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxx odkaz xxxxxx xxx jejich xxxxxxx xxxxxxxxx. Způsob xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
2. Členské xxxxx xxxxx Komisi xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx vnitrostátních xxxxxxxx předpisů, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx směrnice.
Xxxxxx 4
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx v Úředním xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 5
Tato xxxxxxxx xx určena členským xxxxxx.
X Bruselu xxx 3. xxxx 1998.
Xx Xxxxxx
Xxxxx Xxxxxxxx
xxxx Xxxxxx
[1] Úř. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Úř. věst. X 86, 6.4.1979, x. 30.
[3] Úř. xxxx. X 211, 5.8.1977, x. 45.
[4] Xx. věst. X 237, 22.9.1993, x. 23.
[5] Xx. xxxx. X 125, 23.5.1996, x. 35.
[6] Úř. věst. X 270, 14.12.1970, x. 1.
[7] Xx. xxxx. X 96, 28.3.1998, x. 39.
[8] Úř. xxxx. X 279, 2.12.1971, x. 7.
[9] Xx. xxxx. X 15, 18.1.1984, x. 28.
XXXXXXX
XXXX A
Stanovení xxxxxxxxxxxx
1. Xxxx x oblast xxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx) x vázaných (xxxxxxx xxxxxx a xxxxx) aminokyselin v xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xx použitelná xxx xxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxx(x)xx, xxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, arginin, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, kyselinu glutamovou, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxx, tyrosin x xxxxx.
Xxxx xxxxxx nerozlišuje xxxx solemi aminokyselin x xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx rozlišovat xxxx xxxxxxx X x X. Xxxx xxxxxxxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx aminokyselin.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxxx xxxxxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xx extrahují zředěnou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx makromolekuly xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx filtrací. Xxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxx xx pH 2,20. Xxxxxxxxxxxxx se separují xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxx se po xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 570 xx.
2.2 Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx závisí xx xxxxxxxxxxxxx aminokyselinách. Xxxx(x)xx x methionin xxxx být xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx musí xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx 1 xxxxx být xxxxxxxxxx buď x xxxxxxxxxx nebo x xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx 0 xX směsí xxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx rozloží dvojsíranem xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x = 6 xxx/x) po 23 xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xX 2,20. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx chromatografií x stanovují xx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx fotometrickou xxxxxxx xxx 570 xx (440 nm pro xxxxxx).
3. Xxxxxxx
Xxxx být xxxxxxx xxxxxxx destilovaná xxxx xxxx xxxx xxxxxxx jakosti (xxxxxxxx &xx; 10 μX).
3.1 xxxxxxx vodíku, x = 30 %
3.2 xxxxxxxx xxxxxxxx, x = 98–100 %
3.3 xxxxx
3.4 xxxxxxxxx xxxxx
3.5 xxxxxxxx xxxxx
3.6 kyselina 5-xxxxxxxxxxxxxxx, dihydrát
3.7 xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x hustotě xxxxxxxxx 1,18 x/xx
3.8 xxxxxxxx sodný, xxxxxxxx
3.9 2,2-xxxxxxxxxxxxx (thiodiglykol)
3.10 xxxxxxx xxxxx
3.11 ninhydrin
3.12 petrolether, xxx varu 40–60 °X
3.13 xxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx vnitřní xxxxxxxx
3.14 xxxxx – xxxx (&xx; 10 ppm xxxxxxx)
3.15 1-xxxxxxx
3.16 xxxxxxxxxxxxx
3.16.1 xxxxxxxxxx látky xxxxxxx x bodě 1; xxxxx xxxxxxxxxx neobsahující xxxxxxxxxxxxx vodu. Xxxxxx xx xx xxxxx xxx P2O5 xxxx X2XX4 xxxxx před xxxxxxxx
3.16.2 xxxxxxxx cysteová
3.16.3 xxxxxxxxxxxxxxx
3.17 xxxxxxxx sodný, xxxxxx x = 7,5 xxx/x:
300 x XxXX (3.5) xx xxxxxxxx xx xxxx x xxxxxx xx 1 xxxxx.
3.18 hydroxid xxxxx, xxxxxx x = 1 mol/l:
40 x XxXX (3.5) xx rozpustí ve xxxx x xxxxxx xx 1 litru.
3.19 xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx:
Xxxxxx xx 889 g xxxxxxxx xxxxxxxx (3.2) xx 111 x xxxx x xxxxx se 4,73 g xxxxxx (3.3).
3.20 xxxxxxxxxxxx směs, x = 6 xxx XXx/x x xxxxxxxxx 1 x xxxxxx/x:
X 492 xx XXx (3.7) xx xxxxx 1 x xxxxxx (3.3) x xxxxxx xx vodou xx 1 xxxxx.
3.21 xxxxxxxxx xxxx, x = 6 xxx XXx/x x xxxxxxxxx 2% xxxxxxxxxxxxx:
8,2 xx XXx (3.7) se xxxxxxx xxxxxxxxx 900 xx xxxx, xxxxx xx 20 xx xxxxxxxxxxxxx (3.9) x xxxxxx xxxxx na 1 litr (3.7 x 3.9 xx xxxxx xxxxxxx xxxxx).
3.22 xxxxxxxx 5-xxxxxxxxxxxxxxx, β = 6 %:
60 x kyseliny 5-xxxxxxxxxxxxxxx (3.6) se xxxxxxxx xx xxxx a xxxxxx xxxxx xx 1 xxxx.
3.23 xxxxxxxx xxxx (kyselina xxxxxxxxxxx – fenol):
V malé xxxxxxx xx xxxxxx 0,5 ml peroxidu xxxxxx (3.1) x 4,5 xx xxxxxxx xxxxxxxx mravenčí x xxxxxxx (3.19); xxxxxxx xx x klidu 1 hodinu xxx 20–30 °X, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxx xxxxxxx x xxxxx x ledovou xxxxx (15 minut).
Pozor:
Je xxxxx zamezit kontaktu x kůží x xxxxxxxx xxxxxxxx oděv.
3.24 xxxxxxxxxxx tlumivý xxxxxx, x = 0,2 xxx Xx+/x, xX 2,20:
X xxxxxxxxx 800 xx xxxx xx xxxxxxxx 19,61 g xxxxxxxxx sodného (3,8), 5 xx thiodiglykolu (3.9), 1 g xxxxxx (3.3) a 16,50 xx HCl (3.7). pH se xxxxxx xx 2,20. Xxxxxx se xxxxx xx xxxxx 1 xxxxx.
3.25 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx připravované xxxxx xxxxxxxx xxx použitý xxxxxxxxxx (4.9)
3.26 xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxx (4.9)
3.27 Xxxxxxxxxx xxxxxxx aminokyselin. Xxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx při xxxxxxx xxx 5 °X.
3.27.1 xxxxxxx standardní xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.16.1), x = 2,5 μxxx/xx xxx každou xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx obdržet i xxxxxxxx připravené.
3.27.2 xxxxxxx xxxxxxxxxx základní roztok xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx, c = 1,25 μxxx/xx
0,2115 x xxxxxxxx xxxxxxxx (3.16.2) x 0,2265 g xxxxxxxxxxxxxxxx se xxxxxxxx (3.16.3) v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (3.24) x xxxxxxx odměrné xxxxx x doplní xx po značku xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx roztokem. Xxxxxxxx xx při xxxxxxx xxx 5 °X xxxxxxx 12 xxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx roztok (3.27.1) obsahuje kyselinu xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxx.
3.27.3 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx. norleucinu, c = 20 μxxx/xx
0,6560 x xxxxxxxxxx (3.13) xx rozpustí v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (3.24) x xxxxxxx xxxxx xx 250 xx x xxxxxx xx xx značku xxxxxxxxxxxx tlumivým xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx při xxxxxxx xxx 5 °X xxxxxxx 6 xxxxxx.
3.27.4 kalibrační xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx s hydrolyzáty, x = 5 xxxx/50 μx xxxxxxxx xxxxxxxx x methioninsulfonu x x = 10 xxxx/50 μx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
Xx 100 xx xxxxxxx xx xxxxxxxx 2,2 x xxxxxxxx xxxxxxx (3.10) v 30 xx xxxxxxxxxxxxx tlumivého xxxxxxx (3.24). Xxxxxxx xx 4,00 ml xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx aminokyselin (3.27.1), 4,00 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx (3.27.2) x 0,50 xx zásobního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.27.3), xxxxx se používá. xX xx xxxxxx xx 2,20 xxxxxxxxxx xxxxxx (3.18).
Roztok xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx do 50 xx xxxxxxx xxxxx, doplní xx xxxxxx citronanovým xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24) x xxxxxxx xx.
Xxxxxxxx se xxx xxxxxxx pod 5 °X nejdéle 3 měsíce.
Viz xxxx xxxxxxxx 9.1.
3.27.5 xxxxxxxxxx xxxxxx standardních xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.3.3.1 x xxx xxxxxxxx (5.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx 3.27.4 x vynecháním xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxx 5 °X xxxxxxx 3 xxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
4.1 xxxxx x xxxxxxx xxxx x obsahu 100 nebo 250 xx opatřená xxxxxxx xxxxxxxxx
4.2 xxxxxx z xxxxxxxxxxxxxxxx skla o xxxxxx 100 xx xx xxxxxxxxx uzávěrem x xxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx (např. Xxxxx, Xxxxxx) xxx xxxxxxx x sušárně
4.3 xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x přesností xxxxx xxx ±2 °X
4.4 xX metr (xxx xxxxxxxxx místa)
4.5 xxxxxxxxxx xxxxx (0,2 μx)
4.6 xxxxxxxxxxx
4.7 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx
4.8 mechanická xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx
4.9 xxxxxxxxxx aminokyselin xxxx xxxxxxxx XXXX x iontoměničovou xxxxxxx, xxxxxxxxx pro xxxxxxxxx, xxxx kolonovou derivatizaci x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xx naplní xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx pryskyřicí, která xxxxxxxx vzájemné oddělení xxxxxxxxxxxx x separaci xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Průtok xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx ± 0,5 % xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx kalibraci x xxxxxxx vzorku.
Některé analyzátory xxxxxxxxxxxx xx možno xxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxxxx vykazuje xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x = 0,8 xxx/x a xxxxxxxx xxxxxxxxx mravenčí xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx analyzátory xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx určitých xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx-xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mravenčí xxxxxxxx x/xxxx vysoké xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx případě se xxxxx xxxxx kyseliny xxxx xxxxxxx pH xxxxxxxxx hydrolyzátu xx xxxxx 5 xx. Xxxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxx teplotě xxxxxxx 40 °X.
5. Postup
5.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxx sítem x xxx 0,5 xx. Xxxxxx x xxxxxxx vlhkostí xx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx na vzduchu xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 50 °C xxxx xxx xxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxxxx obsahem xxxx se xxxx xxxxxx extrahují petroletherem (3.12).
5.2 Stanovení volných xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x v xxxxxxxxx
Xx xxxxxxx baňky se xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (1–5 x) upraveného xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxx na 0,2 xx x xxxxx xx 100,0 xx xxxxxxxxx směsi (3.21). Xxxxx xx xxxxx 60 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxx na magnetické xxxxxxxx (4.8). Xx xxxxxxx sedimentu xx xxxxxxxxxx 10,0 xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx 100 xx.
Xx stálého xxxxxxx xx xxxxx 50 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx a pokračuje xx v míchání xx xxxxxxxxxx míchačce xxxxxxx 5 minut. Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx odstředí tak, xxx xx odstranila xxxxxxx xxxxxxxxx. 10,0 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx přenese do xxxxxxx x xxxxxx 100 xx, xX xx xxxxxx na 2,20 xxxxxx roztoku xxxxxxxxx sodného (3.18), xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx roztoku (3.24) xx odměrné baňky xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xx značku xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24).
Xxxxxxx-xx xx interní xxxxxxxx, xxxxx xx 1,00 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.27.3) xx xxxxxxx 100 ml xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx doplní po xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24).
Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.4 – xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx den, xxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxx 5 °X.
5.3 Stanovení xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
5.3.1 xxxxxxx
0,1 xx 1 x xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxxxx s xxxxxxxxx 0,2 xx:
- xx xxxxx s xxxxxxx xxxx x obsahu 100 xx (4.1) xxx otevřenou xxxxxxxxx (5.3.2.3) xxxx
- xx xxxxx x kulatým xxxx x xxxxxx 250 xx (4.1), xxxxxxxx-xx se xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx
- xx xxxxxx x xxxxxx 100 ml xx xxxxxxxxxx uzávěrem (4.2) (xxx uzavřenou xxxxxxxxx 5.3.2.4).
Xxxxxxxx xxxx xxxxxx by xxxx xxx xxxxx dusíku xxx 10 xx x xxxxx vlhkosti xxxxxxxxxxxxx 100 xx.
Xxxxx/xxxxxx xx xxxxxx do xxxxx s xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx xx 0 °X, xxxxx xx xxxxx 5 xx xxxxxxxx směsi (3.23) x promíchá xx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx. Baňka/nádoba xx uzavře x xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xx i x xxxxx s xxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxxx xxx 0 °X x xxxxxxx xx xxx 16 xxxxx. Xx 16 xxxxxxxx xx xxxxx z xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx 0,84 x xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.4).
Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.1.
5.3.2 hydrolýza
5.3.2.1 xxxxxxxxx oxidovaných xxxxxx
X xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx 5.3.1 xx xxxxx 25 ml xxxxxxxxxxxx směsi (3.20) xxx, aby xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx nádoby ani xx xxxxx. Xxxxx xxxxxxxxx postupu xxxxxxxxx xx pokračuje xxxxx 5.3.2.3 xxxx 5.3.2.4.
5.3.2.2 xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorků
Do xxxxx s xxxxxxx xxxx x xxxxxx 100 xx xxxx 250 xx (4.1) xxxx xx xxxxxx x xxxxxx100 xx xx šroubovacím xxxxxxxx (4.2) xx xxxxxx 0,1 xx 1 x upraveného vzorku (5.1) x přesností xx 0,2 xx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxx xx měla mít xxxxx dusíku xxx 10 mg. Xxxxxxx xx xxxxx 25 xx hydrolyzační xxxxx (3.20) x xxxxxx xx xx xxxxxxx. Xxxx xx postupuje xxx podle 5.3.2.3 xxxx xxxxx 5.3.2.4.
5.3.2.3 xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxx x xxxxx (připravené xxxxx 5.3.2.1 nebo 5.3.2.2) se přidají 3 xxxxxxxx kuličky x xxxx xx xxxxx xx mírného xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx 23 hodin. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx promyje 5 ml citronanového xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24). Xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xx x ledové xxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx 5.3.3.
5.3.2.4 uzavřená xxxxxxxxx
Xxxxx xx směsí xxxxxxxxxxx podle 5.3.2.1 xxxx 5.3.2.2 xx xxxxxx xx xxxxxxx (4.3) při 110 °X. Xxx se xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx) x xxxxxxx k xxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx na xxxxx. Xxxxxx se xxxxxxxxx. Xx uplynutí xxxxx xxxxxx se xxxxxx zašroubuje x xxxxxxxx baňka xx xxxxxxx v sušárně (4.3) 23 xxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx vyjme xx xxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xx xx lázně x xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxx postupu při xxxxxx xX (5.3.3) xx obsah xxxxx xxxxxxxxxxxxx převede xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx roztoku (3.24) xx xxxxxxx x obsahu 250 xx xxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxx x xxxxxx 250 xx.
Xxxx xx xxxxxxxxx podle 5.3.3
5.3.3 xxxxxx pH
Podle toho, xxxxx toleranci x xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.9), xxxxxxxxxx xxx úpravě pH xxxxx 5.3.3.1 nebo 5.3.3.2.
5.3.3.1 xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.9), xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx:
Xxxxx xxxxxxxxxx aminokyselin xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx sodíku (xx-xx xx snížit xxxxx kyselin), xxxxxxxxxx xx xxxxxx vnitřní xxxxxxx xxxxxxxxxx roztok (3.27.3).
X xxxxxxx případě xx xxxx odpařováním xxxxxxx do hydrolyzátu 2,00 ml xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx základního xxxxxxx (3.27.3).
Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx podle 5.3.2.3 xxxx 5.3.2.4. se xxxxxxx 2 xxxxx 1-xxxxxxxx (3.15).
Xx xxxxxxx xxxxxxx (4.7) se xxxxx xxxxx xx 5-10 xx xx xxxxx xxx 40 °X. Xxxxx xx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx 5 xx, xxxxxxxxxx xx xxxxx odstranit x xxxxx xxxxxxx xxxxx.
xX xx xxxxxx xx 2,20 roztokem hydroxidu xxxxxxx (3.18) x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx 5.3.4.
5.3.3.2 pro xxxxxxx ostatní xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.9)
Xxxxxxxxxxx připravené xxxxx 5.3.2.3 xxxx 5.3.2.4 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx opatrným přidáním 17 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.17), xx xxxxxxx xxxxxxx x xxx zajištěné xxxxxxx xxx 40 °X.
xX xx xxxxxx xx 2,20 roztokem xxxxxxxxx xxxxxxx (3.18) xxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx se xxxxxxxxx xxxxx bodu 5.3.4.
5.3.4 xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx (5.3.3.1 xxxx 5.3.3.2) x upraveným xX xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx roztoku (3.24) xx xxxxxxx baňky x xxxxxx 200 xx a xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24) se xxxxxx po xxxxxx.
Xxxxx-xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx se 2,00 ml xxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.27.3) x xxxxx se xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24). Xxxxxxxx xx promíchá.
Dále xx přejde x xxxxxxxxxxxxxx (5.4)
Xxxxxx-xx roztoky xxxxxx analyzovány týž xxx, uschovávají xx xxx xxxxxxx pod 5 °X.
5.4 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx (5.2) a xxxxxxxxxx (5.3.4) xxxxxxxxx xxxxxxx. Směs xx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx filtrem 0,2 μ (4.5). Xxxxxxxx xxxx roztok xx xxxxxxx xxxxxxxx chromatografii xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.9).
Xxxxxxx lze xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxxxx nastřikovalo stejné xxxxxxxx roztoku ± 0,5 % xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx s xxxxxxxx, xxx je xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx poměr sodíku x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx být x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx a x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx nejpodobnější.
Frekvence xxxxxxxxx závisí xxxxxx xx stabilitě xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx a analytického xxxxxxx. Xxxxxxxx nebo xxxxxx xx ředí xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx roztokem (3.24) tak, aby xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 30 – 200 % plochy xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx ionexu. Xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx od xxxx xxxxxxxx x xx xxxxxxxxx ninhydrin xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx systém xxxxxxxx reagovat xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx. Tyto xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 30 % xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, které xxxxx xxx ještě přesně xxxxxxxxx xx použitém xxxxxxxxxxx aminokyselin (4.9).
Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 2:10 (xxxxx se xxxxxxx pouze xxxx(x)xx, xxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx přilehlých píků). Xxx všechny xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx lepší xxx 1:10.
Xxxxxx xxxx zaručit, xx lysin xxxx xxxxxxxxx xx "lysinových xxxxxxxx" x xxxxxxxxx.
6. Xxxxxxx x vyjádření xxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x x xx kg xxxxxx.
x xxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxx = A × X × XX × X / X × X × 1 000
Xx-xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, násobí xx xxxxxxxx: X / X
X = xxxxxx xxxx hydrolyzátu xxxx xxxxxxxx
X = xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
X = xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx
X = xxxxxx píku xxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx roztoku
MV = xxxxxxxxxxx váha xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
X = koncentrace xxxxxxxxx v μxxx/xx
X = xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (x) (korigovaná xx xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx)
X = xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (5.3.4) x xx nebo xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vypočteného xxxxx 6.1
Xxxxxx a cystein xx x hydrolyzátech xxxxxxxxxxx vzorku xxxxxxx xxxx kyselina xxxxxxxx, xxx vypočítávají xx xxxx cystin (X6X12X2X4X2, XX 240,30) s xxxxxxxx XX 120,15 (= 0,5 x 240,30).
Xxxxxxxxx se x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxx XX xxxxxxxxxx: 149,21.
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx po xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xx xxxxxxx stejná XX.
6.1 Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (F) xxx xxxxxxxxx volných aminokyselin (5.2) se xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
X = 100 ml × (10 xx + 5 xx) / 10 xx × V ml / 10xx
X = xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx
7. Xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxx xxxxxx byla xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx 1990 xxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxx směs xxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxx broilery, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx). Xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx uvedeny v xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
xxxxxxx hodnoty x x/xx
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx pro prasata |
6,94 x = 15 |
3,01 x = 17 |
3.27 x =.17 |
9,55 x = 13 |
|
Krmná směs xxx xxxxxxxx |
9,31 x = 16 |
3,92 n = 18 |
5,08 x = 18 |
13,93 n = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
22,32 x = 16 |
5,06 x = 17 |
12,01 x = 17 |
47,74 x = 15 |
|
Xxxxxx |
58,42 x = 16 |
- |
90,21 x = 16 |
98,03 x = 16 |
x = xxxxx zúčastněných xxxxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx vnitrolaboratorní xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx tabulkou:
standardní xxxxxxxx (Xx) xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x x/xx
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx pro xxxxxxx |
0,13 n = 15 |
0,10 x = 17 |
0,11 x = 17 |
0,26 x = 13 |
|
Xxxxx směs pro xxxxxxxx |
0,20 x = 16 |
0,11 n = 18 |
0,16 n = 18 |
0,28 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx koncentrát |
0,48 x = 16 |
0,13 x = 17 |
0,27 n = 17 |
0,99 n = 15 |
|
Xxxxxx |
1.30 n = 16 |
_ |
2,19 n = 16 |
2,06 n = 16 |
x = xxxxx zúčastněných xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx (%) xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (Xx)
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx |
1,9 x = 15 |
3,3 n = 17 |
3,4 x =.17 |
2,8 x = 13 |
|
Krmná xxxx xxx brojlery |
2,1 x = 16 |
2,8 x = 18 |
3,1 x = 18 |
2,1 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
2,7 n = 16 |
2,6 x = 17 |
2,2 x = 17 |
2,4 x = 15 |
|
Xxxxxx |
2,2 n = 16 |
- |
2,4 x = 16 |
2,1 n = 16 |
x = xxxxx xxxxxxxxxxxx laboratoří
7.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ze xxxxx xxxxxxxxx zkoušek xxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx odchylka (XX) v x/xx
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
xxxxxxxx |
Xxxx(x)xx |
xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx pro xxxxxxx |
0,28 n = 15 |
0,30 x = 17 |
0,23 x = 17 |
0,30 x = 13 |
|
Xxxxx xxxx pro xxxxxxxx |
0,48 n = 16 |
0,34 x = 18 |
0,55 n = 18 |
0,75 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
0,85 x = 16 |
0,62 x = 17 |
1,57 x = 17 |
1,24 n = 15 |
|
Xxxxxx |
2,49 n = 16 |
- |
6,20 x = 16 |
6,62 x = 16 |
x = xxxxx xxxxxxxxxxxx laboratoří
Variační xxxxxxxxxx (%) mezilaboratorních xxxxxxxxxxxx odchylek (XX)
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
xxxxxxxx |
Xxxx(x)xx |
xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx pro xxxxxxx |
4,1 x = 15 |
9,9 x = 17 |
7,0 n = 17 |
3,2 x = 13 |
|
Xxxxx směs xxx xxxxxxxx |
5,2 x = 16 |
8,8 n = 18 |
10,9 x = 18 |
5,4 n = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
3,8 x = 16 |
12,3 x = 17 |
13,0 x = 17 |
3,0 x = 15 |
|
Xxxxxx |
4,3 x = 16 |
- |
6,9 n = 16 |
6,7 x = 16 |
x = xxxxx zúčastněných xxxxxxxxxx
8. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx metody xx xxxxxxx opakovaným xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, jsou-li k xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx aminokyselin.
9. Xxxxxxxx
9.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx analyzátory xxxxxxxxxxxx xx se měly xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxx 3.27.4 a 3.27.5) a roztoků xxxxxx (5.3.4) považovat xx doporučené.
Lineární xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx pro všechny xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx tak, aby xx dosáhlo xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
9.2 Xxxxx se x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx, xxxx být xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x souladu x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
9.3 Xxx xxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxx obsahujících xxxx než 1 % chloridu (koncentráty, xxxxxxxxx krmiva, xxxxxxxxx xxxxxx) xxxx xxxxx x podhodnocení obsahu xxxxxxxxxx x xxxx xx proto xxxxxx xxxxxxxxx postup.
ČÁST B XXXXXXXXX TUKŮ
1. Xxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, jejichž zkoušení xx xxxx podle xxxxxxxx Xxxx 136/66/XXX xx xxx 22. xxxx 1996.
Xxxxx xxxxx x složení krmiva xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx ze xxxx následujících postupů:
1.1 Xxxxxx X – xxxxx extrahovatelné xxxx
Xxxx xxxxxx je použitelná xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx do xxxxxx xxxxxxx X.
1.2 Xxxxxx X – xxxxxxx xxx
Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx původu a xxx xxxxxxx krmné xxxxx. Xxxxxxx se xxx xxxxxxx xxxxxxxxx, x nichž xxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx. xxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx x výrobky, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx, vločkování x zahřívání).
1.3 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxx případech, xxx se xxxxxxx xxxxxxx výsledku postupem X, xxx xxxxxxxx X, xx xxxxx xxxxxxxxx za platnou xxxxxxx xxxxx xxxxxxx X.
2. Princip
2.1 Postup X
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxx x xxxxxx xx vysuší a xxxxx.
2.2 Xxxxxx B
Vzorek xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxx xx xxx zpracuje podle xxxxxxx X.
3. Xxxxxxx
3.1 xxxxxxxxxxx x bodem xxxx xxxx 40 x 50 °X. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx menší xxx 1 x xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxx 2 xx/100 xx
3.2 xxxxx xxxxx, xxxxxxx
3.3 xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, c = 3 mol HCl/l
3.4 xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxx, Xxxxx-xxxxxxxx.
4. Přístroje x pomůcky
4.1 Extrakční xxxxxxxx, xx xxxxxxx (Xxxxxxxxx přístroj), xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxx 10 xxxxx xx xxxxxx. X typu xxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx rychlost xxx 10 ml xx minutu.
4.2 Extrakční xxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx x xxxxxxx x požadavky xxxxx bodu 4.1.
4.3 Xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xx 75 °X ± 3 °X, xxxx horkovzdušná xxxxxxxx xx 100 °X ± 3 °X.
5. Xxxxxx
5.1 Postup X (xxx xxx 8.1)
Xx xxxxxxxxx patrony xx xxxxxx 5 x xxxxxx x xxxxxxxxx xx 1 xx (4.2) x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxx xx extrakčního xxxxxxxxx (4.1) a xxxxxxxxxx xxxx hodin xxxxxxxxxxxxx (3.1). Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xx xxxxx, xxxxxx xxxxxxx baňky, xxxxx xxxxxxxx úlomky xxxxx [1].
Xxxxxxxxxxxx xx oddestiluje, xxxxxx x xxxxx xx xxxx 1,5 xxxxxx v xxxxxxx (4.3). Nechá xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x zváží. Xxxx xx xxxxxxx 30 xxxxx, xxx xx xxxxxxxx, zda xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx mezi xxxxx následujícími xxxxxxxx xxxx být xxxxx xxx 1 xx).
5.2 Xxxxxx B
Do kádinky x obsahu 400 xx nebo xx xxxxxxx xxxxx o xxxxxx 300 ml xx xxxxxx 2,5 x xxxxxx x xxxxxxxxx na 1 xx (viz xxx (8,2) x xxxxx xx 100 ml xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.3) x úlomky xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx se přivede xx mírného varu xx malém plameni xxxx xx xxxxx xxxxx x xxxx xx xx xxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx se musí xxxxxxxx usazování xxxxxxxx xxxxxx na stěnách xxxxxx.
Xxxx xx xxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.4), xxx xxx filtraci xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xx přes xxxxxxxxx xxxxxx filtrační xxxxx xxxxxxx tuku. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx vodou, xx xx získá xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx, xxx filtrát xxxxxxxxxx žádný tuk. Xxxx xxxxxxxxxx ukazuje, xx xx vzorek xxxx před xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx podle xxxxxxx X.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx x xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.3) xxx xxxxxxx 100 °C ± 3 °C.
Dvojitý xxxxxxxxx xxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx do xxxxxxxxx xxxxxxx (4.2) a xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxx. Patrona xx xxxxx do xxxxxxxxxxx přístroje (4.1) x xxxx xx xxxxxxxxx podle xxxxxxx x xxxxxxx odstavce xxxx 5.1.
6. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx procento xx xxxxxx.
7. Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xx výsledcích dvou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx:
- 0,2 % x absolutní xxxxxxx, při xxxxxx xxxx nižším xxx 5 %,
- 4,0 % xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxx od 5 xx 10 %,
- 0,4 % x xxxxxxxxx hodnotě, při xxxxxx xxx 10 %.
8. Poznámky
8.1 U xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx a xxxx, které se xxxxxxx drtí xxxx xxxxx neumožňují xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx vzorek, xx xxxxxxxxx následujícím xxxxxxxx:
Xxxxxx xx 20 x vzorku s xxxxxxxxx xx 1 xx x smíchá xx x 10 xxxx i více xxxxx xxxxxxxxx síranu xxxxxxx (3.2). Extrahuje xx xxxxxxxxxxxxx (3.1) xxxxx xxxx 5.1. Xxxxxxxx extrakt se xxxxxx na 500 xx xxxxxxxxxxxxx (3.1) x xxxxxxxx xx. 50 ml xxxxxxx xx odpipetuje do xxxx suché, xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx [2].
Xxxxxxxxxxxx xx oddestilujte, xxxxx xx vysuší a xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx odstavce xxxx 5.1.
Xxxxx tuku xx xxxxxxxx jako xxxxxxxx xx vzorku xxxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorce:
(10 x + x) × 5
xxx:
x = xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx (xxxxxxx část xxxxxxxx)
x = xxxxxxxx xxxxxx xx druhé xxxxxxxx x gramech
8.2 X xxxxxxx, které xxxx xxxxx obsah xxxx xx xxxx navážka xxxxxxxxxx vzorku zvýšit xx 5 x.
8.3 Xxxxxx xxx domácí xxxxxxx, xxxxx mají xxxxxx xxxxx xxxx, xx xxxx xxxx xxxxxxxxxx a extrakcí xxxxx postupu B xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
8.4 V xxxx 5.2 xx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xx filtraci xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx místo xxxx xxxxxxx.
8.5 U xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx doba xxxxxx xxx 1,5 xxx. Xx však třeba xxxxxxx xxxxxxxxxx vysoušení, xxxxx může vést x nízkým xxxxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx troubu.
8.6 Xxx obsahu xxxx xxx 15 % xx xxxxxxxxxx provést xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx X x následně xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx X. Xxxxxx xx xx xxxxx míry na xxxxx xxxxxx a xxxxx tuku v xxxxxx.
XXXX C
STANOVENÍ XXXXXXXXXXX
(2-[X-2-(xxxxxxxxxxxx)xxxxxxxxx]-3-xxxxxxxxxxxxxxxx-X1,X4-xxxxxx)
1. Xxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx metodou xx xxxxxxx obsah xxxxxxxxxxx x krmivech. Xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 5 xx/xx.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx a methanolu. Xxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx chromatografií (HPLC) xx xxxxxxxx fázi xx použití XX xxxxxxxxx.
3. Činidla
3.1 xxxxxxxx
3.2 xxxxxxxx, xxx HPCL
3.3 xxxx, xxx HPLC
3.4 xxxxxxx fáze xxx XXXX:
Xxxx xxxx (3.3) x xxxxxxxxx (3.2), 900 + 100 (X + X)
3.5 xxxxxxxxxx látka: xxxxx xxxxxxxxxx 2-[X-2-(xxxxxxxxxxxx)xxxxxxxxx]-3-xxxxxxxxxxxxxxxx-X1,X4-xxxxxx, X 851
3.5.1 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, 250 μx/xx
Xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 200 xx se xxxxxx 50 xx xxxxxxxxxxx (3.5) x xxxxxxxxx xx 0,1 xx a xxxxx xxx 190 xx xxxx. Xxxxx xx xxxxxxx xx 20 xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1). Xx xxxxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx xx značku x xxxxxxx. Baňka xx xxxxx hliníkovou xxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxxx roztok xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
3.5.2 xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, 25 μx/xx
10,0 xx zásobního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoku (3.5.1) xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 100 ml, xxxxxx xx xx xxxxxx mobilní xxxx (3.4) x xxxxxxxx. Xxxxx se obalí xxxxxxxxxx fólií x xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxxx roztok xx xxxx xxxxxxxxxxx denně xxxxxxx.
3.5.3 xxxxxxxxxx roztoky
Do xxxx xxxxxxxxx baněk x xxxxxx 50 xx xx xxxxxxxxxx 1,0, 2,0, 5,0, 10,0, 15,0 x 20,0 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.2). Xxxxxx xx mobilní xxxx (3.4) xx xxxxxx a promíchá. Xxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx fólií. Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 0,5, 1,0, 2,5, 5,0, 7,5 a 10,0 μx olachindoxu xx xx.
Xxxx roztoky xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
4. Přístroje x xxxxxxx
4.1 xxxxxxxxxxxx lázeň
4.2 xxxxxxxxxx xxxxxxxx
4.3 zařízení XXXX x proměnnou xxxxxxx délkou xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx s xxxxxxxxxx diodového pole
4.3.1 xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, 250 xx x 4 mm, xxxxxxx X18, 10 μx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
4.4 xxxxxxxxxx xxxxxx x póry 0,45 μx
5. Postup
Poznámka:
Olachindox xx xxxxxxx xx světlo. Xxxxxxx xxxxxxx se xxxx provádět xxx xxxxxxxx světle xxxx x xxxxxxxx z xxxxxxx skla.
5.1 Xxxxxx
5.1.1 Xxxxxxxx krmivo se xxxx předem xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, zda xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
5.1.2 Xxxxxxx na xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx takového xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxx X xxxxxxxxxxx xx xxxxxx 50 xx/xx xx xxxxxxxxxx 10,0 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx základního xxxxxxx (3.5.1) do xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 250 xx x xxxxxx xx xxxxxx xx xxx 0,5 xx. Xxxxx xx 50 x modelového xxxxxx, xxxxx se xxxxxxxx x xxxxx xx 10 xxxxx xxxxxx, přičemž xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx se přejde x xxxxxxxx (5.2).
Xxxxxxxx:
Xxx xxxxx xxxx metody xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx zkoušený xxxxxx x nesmí obsahovat xxxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxx 50 x xxxxxx x xxxxxxxxx xx 0,01 x. Xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 1000 xx, xxxxx xx 100 xx methanolu (3.1) x xxxxx se xxxxxx na pět xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1). Přidá xx 410 xx xxxx x xxxxxxx xx v xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 15 xxxxx. Baňka xx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx, dále se xxxxx 30 minut xx xxxxxxxx (4.2) x potom se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. 10,0 xx filtrátu xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 20 xx, xxxxxx se vodou xx xxxxxx a xxxxxxxx. Poměrná část xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) (xxx xxx 9. Xxxxxxxx). Xxxx se pokračuje xxxxxxxxxx XXXX (5.3).
5.3 Xxxxxxxxx XXXX
5.3.1 Xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxx použity xxxx podmínky, xx xxxxxxxxxxx, že xxxxxx xxxxxxxxxx výsledky.
analytická xxxxxx (4.3.1)
xxxxxxx fáze (3,4): Xxxx xxxx (3.3) x xxxxxxxxx (3.2), 900 + 100 (X + X)
xxxxxxxxx xxxxxxxx: 1,5–2 ml/min
detekční xxxxxx xxxxx: 380 xx
xxxxx xxxxxxxx: 20 μx–100 μl
Stabilita chromatografického xxxxxxx xx zkontroluje xxx, xx xx xxxxxxxxxx nastříkne kalibrační xxxxxx (3.5.3) obsahující 2,5 μx/xx, až xx dosáhne xxxxxxxxxxxx xxxxx píků x xxxxxxxxxx xxxx.
5.3.2 Kalibrační xxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xx střední xxxxxxx xxxxx (plochy) xxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxx xx použití xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxx) xxxx kalibračních xxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x μx/xx jako xxxxxxxxx.
5.3.3 Roztok xxxxxx
Xxxxxxx xx několik xxxxxxxx xxxxxxxx vzorku (5.2) xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx jako u xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx.
6. Xxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxxxx hodnoty výšky (xxxxxx) píků xxxxxxxxxxx x roztoku xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx vzorku x μx/xx porovnáním x xxxxxxxxxxx grafem (5.3.2).
Xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx w v xx/xx xx dán xxxxxxxxxxx rovnicí:
w = x × 1&xxxx;000 / x
xxx:
x = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx (5.2) x μx/xx
x = xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x x (5.2)
7. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Identita
Identita xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxxx stanovením x xxxxxxxxx (xx-xxxxxxxxxxxxxx) xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x diodovým polem, xxxxxxx xx porovnávají xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (5.2) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.3), obsahujícího 5,0 μg/ml xxxxxxxxxxx.
7.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (co-chromatography)
Extrakt xxxxxx (5.2) xx obohatí xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.3). Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx mělo xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx nalezeného x xxxxxxxx xxxxxx.
X xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxx ke xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx píku x xxxxxxxx xxxx xxxxx musí xxx x xxxxxxx ±10 % xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
7.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
x) při xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vzorku i xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx spektra zaznamenaný xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx danou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx detekčního xxxxxxx. Xxx xxxxxxxx x diodovým xxxxx xx xxxxx ±2 xx;
x) xxx vlnové xxxxx mezi 220 x 400 nm xx nesmí xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x standardu xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx částí xxxxxxx x xxxxxxx 10 xx 100 % xxxxxxxxx absorbance. Xxxxxx xxxxxxxx je xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx vykázána xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx nikde odchylka xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 % xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx analytu;
b) xxx xxxxxx xxxxx xxxx 220 a 350 xx se xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx od xxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx 10 xx 100 % xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx kritéria xx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx stejná maxima x xxxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx mezi spektry xxxxxxxxxxx xxxxx 15 % xxxxxxxxxx xxxxxxx xx vrcholu xxxx.
Xxxx-xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, přítomnost xxxxxxx není xxxxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx mezi výsledky xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxx při xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx 10 x 20 mg/kg, xxxxx xxxxxxxxxx15 % xxxxxxx xxxxxxxx.
7.3 Výtěžnost
Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 90 %.
8. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
X xxxxx XX byl xxxxxxxx xxxxxxx test, xxx xxxx xx 13 laboratoří xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx krmiva xxx selata, včetně xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x následující tabulce:
|
| xxxxxx 1 |
vzorek 2 |
vzorek 3 |
xxxxxx 4 |
|
|
X |
13 |
10 |
11 |
11 |
|
X |
40 |
40 |
44 |
44 |
|
xxxxxxx (xx/xx) |
- |
14,6 |
48,0 |
95,4 |
|
(Xx) (xx/xx) |
- |
0,82 |
2,05 |
6,36 |
|
(XX) (xx/xx) |
- |
1,62 |
4,28 |
8,42 |
|
XXx (%) |
- |
5,6 |
4,3 |
6,7 |
|
CVR (%) |
- |
11,1 |
8,9 |
8,8 |
|
xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx) |
- |
15 |
50 |
100 |
|
xxxxxxxxx (%) |
- |
97,3 |
96,0 |
95,4 |
X: xxxxx laboratoří
n: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xx: xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
XX: xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
XXx: xxxxxxxx koeficient xxxxxxxxxxxxxxx
XXX: xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
9. Xxxxxxxx
Xxxxxxx tato xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx více xxx 100 xx/xx xxxxxxxxxxx, je možné xxxxxxx xxxxxxxxxx výsledky xxxxx navážkou xxxxxx x/xxxx zředěním extraktu (5.2) xxx, aby xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.3.2).
[1] Xxxxx xx má tuk xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx.
[2] Xxxxx xx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxxx se xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx kuličky.