Xxxxxxxx Komise 98/64/XX
xx xxx 3. xxxx 1998,
xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx metody Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxx xx mění xxxxxxxx 71/393/XXX
(Xxxx x xxxxxxxx xxx EHP)
KOMISE XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx společenství,
s xxxxxxx na směrnici Xxxx 70/373/EHS xx xxx 20. xxxxxxxx 1970 x zavedení xxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx krmiv [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx Aktem x xxxxxxxxxxx Xxxxxxxx, Xxxxxx x Xxxxxxx, x xxxxxxx na xxxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx k tomu, xx xxxxxxxx 70/373/XXX xxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxx krmiv za xxxxxx xxxxxxxx, zda xxxxxx splňují xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x složení, xx xxxxxxx za xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx a analýzy xxxxxxxx ve Společenství;
vzhledem x xxxx, že xxxxxxxx Xxxx 79/373/EHS xx dne 2. xxxxx 1979 o xxxxxxx xxxxxxx směsí xx xxx [2], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 97/47/XX [3], x xxxxxxxx Xxxx 93/74/XXX xx xxx 13. xxxx 1993 x xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx [4], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx 96/25/ES [5], xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxx xxxx být xxxxxxx na označení xxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx xxxxxxxx Xxxx 70/524/XXX xx xxx 23. xxxxxxxxx 1970 x xxxxxxxxxxx xxxxxxx x krmivech [6], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 98/19/XX [7], xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx musí být xxxxxx xx označení, xxxxx je xxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx směsí;
vzhledem x xxxx, xx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 71/393/XXX xx dne 18. xxxxxxxxx 1971, kterou xx stanoví xxxxxxxxxx xxxxxx Společenství pro xxxxxx kontrolu xxxxx [8], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx Komise 84/4/XXX [9], xxxxxxx metody xxxxxxx xxxx xxxx x xxx zjišťování xxxxxx xxxx; že xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx musí xxx xxxxxxxxx analytické xxxxxx Společenství pro xxxxxxxx těchto látek;
vzhledem x xxxx, že xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx v souladu xx stanoviskem Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx,
XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:
Článek 1
Xxxxxxx státy xxxxxxx, že analýzy xxx úřední xxxxxxxx xxxxxx aminokyselin, tuku x xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxx této směrnice.
Xxxxxx 2
V xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 71/393/XXX xx xxx "4. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxx" xxxxxxxxx xxxxx B xxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 3
1. Členské xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx předpisy nezbytné xxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 31. xxxxxxxx 1998. Uvědomí x xxxx xxxxxxxxxx Xxxxxx.
Xxxxx xxxx předpisy xxxxxxxx od 1. xxxxx 1999.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx členskými xxxxx xxxx xxxxxxxxx odkaz xx tuto xxxxxxxx xxxx xxxx být xxxxxx xxxxx xxxxxx xxx jejich xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx stanoví xxxxxxx xxxxx.
2. Členské xxxxx xxxxx Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx předpisů, xxxxx xxxxxxx x oblasti xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 4
Tato směrnice xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx v Xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx společenství.
Xxxxxx 5
Tato xxxxxxxx xx určena členským xxxxxx.
X Xxxxxxx xxx 3. xxxx 1998.
Xx Xxxxxx
Xxxxx Xxxxxxxx
xxxx Xxxxxx
[1] Xx. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Xx. věst. X 86, 6.4.1979, x. 30.
[3] Xx. věst. X 211, 5.8.1977, x. 45.
[4] Úř. xxxx. X 237, 22.9.1993, x. 23.
[5] Xx. věst. X 125, 23.5.1996, x. 35.
[6] Xx. xxxx. X 270, 14.12.1970, x. 1.
[7] Xx. věst. X 96, 28.3.1998, x. 39.
[8] Úř. xxxx. X 279, 2.12.1971, x. 7.
[9] Xx. věst. X 15, 18.1.1984, x. 28.
XXXXXXX
XXXX A
Stanovení aminokyselin
1. Xxxx x oblast xxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxx xx stanovení obsahu xxxxxxx (xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx) x vázaných (xxxxxxx vázané x xxxxx) aminokyselin v xxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xx použitelná pro xxxx aminokyseliny: xxxx(x)xx, xxxxxxxxx, xxxxx, threonin, xxxxxx, xxxxxxx, kyselinu xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx, histidin, xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxxxxx, prolin, xxxxx, xxxxxxx x xxxxx.
Xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx aminokyselin x xxxxxx také x xxxxxxxxxxxx rozlišovat xxxx xxxxxxx X x X. Xxxx xxxxxxxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxx xxxx hydroxy xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxxx aminokyseliny
Volné xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx. Současně xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Zfiltrovaný xxxxxx se upraví xx xX 2,20. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx chromatografií a xxxxxxx se xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 570 xx.
2.2 Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx stanovovaných xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxx(x)xx x xxxxxxxxx xxxx xxx před xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx cysteovou x xx methioninsulfon. Xxxxxxx xx musí xxxxxxxxxx x hydrolyzátech xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Ostatní xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx 1 xxxxx xxx xxxxxxxxxx buď v xxxxxxxxxx xxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx 0 xX xxxxx kyseliny xxxxxxxxxxx x fenolu. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx činidlo xx rozloží xxxxxxxxxxx xxxxxx. Oxidovaný nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x = 6 xxx/x) xx 23 xxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxx xx pH 2,20. Aminokyseliny xx xxxxxxxx iontoměničovou xxxxxxxxxxxxxx x stanovují xx xx xxxxxx s xxxxxxxxxxx fotometrickou xxxxxxx xxx 570 xx (440 xx xxx xxxxxx).
3. Xxxxxxx
Xxxx xxx xxxxxxx dvakrát xxxxxxxxxxx xxxx xxxx voda xxxxxxx jakosti (xxxxxxxx &xx; 10 μX).
3.1 xxxxxxx xxxxxx, x = 30 %
3.2 xxxxxxxx xxxxxxxx, w = 98–100 %
3.3 xxxxx
3.4 dvojsíran sodný
3.5 xxxxxxxx sodný
3.6 xxxxxxxx 5-xxxxxxxxxxxxxxx, dihydrát
3.7 xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx o xxxxxxx xxxxxxxxx 1,18 x/xx
3.8 xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx
3.9 2,2-xxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx)
3.10 chlorid xxxxx
3.11 ninhydrin
3.12 petrolether, xxx varu 40–60 °X
3.13 norleucin xxxx xxxx sloučenina xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx standard
3.14 xxxxx – plyn (&xx; 10 xxx xxxxxxx)
3.15 1-xxxxxxx
3.16 xxxxxxxxxxxxx
3.16.1 xxxxxxxxxx látky uvedené x xxxx 1; xxxxx xxxxxxxxxx neobsahující xxxxxxxxxxxxx vodu. Vysuší xx xx xxxxx xxx X2X5 xxxx X2XX4 xxxxx xxxx xxxxxxxx
3.16.2 xxxxxxxx cysteová
3.16.3 xxxxxxxxxxxxxxx
3.17 xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx x = 7,5 xxx/x:
300 x XxXX (3.5) xx xxxxxxxx ve xxxx x doplní xx 1 xxxxx.
3.18 hydroxid xxxxx, xxxxxx c = 1 xxx/x:
40 x NaOH (3.5) xx xxxxxxxx ve xxxx x xxxxxx xx 1 litru.
3.19 xxxxxx xxxxxxxx mravenčí x xxxxxx:
Xxxxxx xx 889 g xxxxxxxx xxxxxxxx (3.2) xx 111 x xxxx x přidá xx 4,73 g xxxxxx (3.3).
3.20 hydrolyzační xxxx, x = 6 xxx XXx/x x xxxxxxxxx 1 x xxxxxx/x:
X 492 xx XXx (3.7) se xxxxx 1 x xxxxxx (3.3) x xxxxxx xx xxxxx xx 1 xxxxx.
3.21 xxxxxxxxx xxxx, c = 6 xxx XXx/x x xxxxxxxxx 2% xxxxxxxxxxxxx:
8,2 xx XXx (3.7) xx xxxxxxx xxxxxxxxx 900 xx xxxx, přidá xx 20 xx xxxxxxxxxxxxx (3.9) x xxxxxx vodou xx 1 litr (3.7 x 3.9 se xxxxx xxxxxxx xxxxx).
3.22 xxxxxxxx 5-sulfosalicylová, β = 6 %:
60 x xxxxxxxx 5-xxxxxxxxxxxxxxx (3.6) xx xxxxxxxx xx xxxx x xxxxxx xxxxx na 1 litr.
3.23 xxxxxxxx xxxx (kyselina xxxxxxxxxxx – xxxxx):
X malé xxxxxxx se xxxxxx 0,5 ml peroxidu xxxxxx (3.1) x 4,5 ml xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx s xxxxxxx (3.19); xxxxxxx xx v klidu 1 xxxxxx xxx 20–30 °C, xxx xx xxxxxxxx kyselina xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xx vzorku xx xxxx ochladí x xxxxx x xxxxxxx xxxxx (15 minut).
Pozor:
Je xxxxx zamezit xxxxxxxx x kůží x xxxxxxxx ochranný oděv.
3.24 xxxxxxxxxxx tlumivý xxxxxx, x = 0,2 xxx Na+/l, xX 2,20:
X xxxxxxxxx 800 xx xxxx xx xxxxxxxx 19,61 x xxxxxxxxx xxxxxxx (3,8), 5 xx thiodiglykolu (3.9), 1 x xxxxxx (3.3) x 16,50 ml XXx (3.7). xX se xxxxxx xx 2,20. Xxxxxx xx vodou xx xxxxx 1 xxxxx.
3.25 xxxxxx tlumivé xxxxxxx připravované xxxxx xxxxxxxx xxx použitý xxxxxxxxxx (4.9)
3.26 xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx použitý xxxxxxxxxx (4.9)
3.27 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx je nutno xxxxxxxxxx xxx teplotě xxx 5 °X.
3.27.1 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx aminokyselin (3.16.1), x = 2,5 μxxx/xx xxx každou xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx roztok xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
3.27.2 zásobní xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx, x = 1,25 μxxx/xx
0,2115 x xxxxxxxx cysteové (3.16.2) x 0,2265 x xxxxxxxxxxxxxxxx se rozpustí (3.16.3) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx roztoku (3.24) x xxxxxxx odměrné xxxxx x xxxxxx xx po xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx se při xxxxxxx xxx 5 °X xxxxxxx 12 xxxxxx. Tento xxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx roztok (3.27.1) xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx.
3.27.3 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxx, c = 20 μxxx/xx
0,6560 x xxxxxxxxxx (3.13) xx rozpustí x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (3.24) x odměrné xxxxx xx 250 xx a doplní xx po značku xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx se při xxxxxxx xxx 5 °X xxxxxxx 6 xxxxxx.
3.27.4 kalibrační roztok xxxxxxxxxxxx aminokyselin pro xxxxxxx x xxxxxxxxxxx, x = 5 xxxx/50 μx xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx x x = 10 xxxx/50 μx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
Xx 100 xx kádince xx xxxxxxxx 2,2 x xxxxxxxx xxxxxxx (3.10) v 30 xx citronanového xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24). Přidají xx 4,00 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx základního xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.27.1), 4,00 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx základního roztoku xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx (3.27.2) a 0,50 xx zásobního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.27.3), xxxxx xx xxxxxxx. xX xx xxxxxx xx 2,20 xxxxxxxxxx xxxxxx (3.18).
Xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx převede xx 50 xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx po xxxxxx citronanovým xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24) x xxxxxxx xx.
Xxxxxxxx xx xxx teplotě pod 5 °X xxxxxxx 3 xxxxxx.
Xxx také xxxxxxxx 9.1.
3.27.5 xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx použití x xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx podle xxxx 5.3.3.1 x xxx xxxxxxxx (5.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx 3.27.4 x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxx 5 °X xxxxxxx 3 měsíce.
4. Xxxxxxxxx a pomůcky
4.1 xxxxx x xxxxxxx xxxx x xxxxxx 100 xxxx 250 xx xxxxxxxx zpětným xxxxxxxxx
4.2 xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx o xxxxxx 100 xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. Xxxxx, Xxxxxx) xxx xxxxxxx v sušárně
4.3 xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxx x přesností xxxxx xxx ±2 °X
4.4 xX metr (xxx xxxxxxxxx místa)
4.5 xxxxxxxxxx xxxxx (0,2 μx)
4.6 xxxxxxxxxxx
4.7 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx
4.8 xxxxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx
4.9 xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx XXXX x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxx ninhydrin, xxxx kolonovou derivatizaci x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xx naplní xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx pryskyřicí, xxxxx xxxxxxxx vzájemné xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx jiných ninhydrin xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx roztoku x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx stálostí xxxxxxx ± 0,5 % xx dobu zahrnující xxxxxxxxxx kalibraci x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx možno xxxxxx x případě, xx xxxxxxxxxx vykazuje xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x = 0,8 xxx/x a xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx kyselinu x xxxxxxxxxx kroku. Xxxx analyzátory xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx určitých xxxxxxxxxxxx, obsahuje-li xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mravenčí kyselinu x/xxxx vysoké xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxx kyseliny xxxx xxxxxxx pH xxxxxxxxx hydrolyzátu xx xxxxx 5 xx. Xxxxxxxx xx xx xxxxxxxx ve xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx 40 °X.
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx se xxxxxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxx xxxxx x xxx 0,5 xx. Vzorky x xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxx teplotě nepřesahující 50 °C xxxx xxx xxxxxxxx. Xxxxxx x vysokým xxxxxxx xxxx xx před xxxxxx xxxxxxxxx petroletherem (3.12).
5.2 Xxxxxxxxx volných xxxxxxxxxxxx v krmivech x v premixech
Do xxxxxxx baňky se xxxxxx příslušné množství (1–5 x) xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) s xxxxxxxxx na 0,2 xx x přidá xx 100,0 ml xxxxxxxxx směsi (3.21). Xxxxx xx xxxxx 60 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx nebo xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.8). Po xxxxxxx sedimentu xx xxxxxxxxxx 10,0 xx xxxxxxxxxxxx xx kádinky x obsahu 100 xx.
Xx stálého xxxxxxx xx xxxxx 50 xx xxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx x míchání xx magnetické míchačce xxxxxxx 5 xxxxx. Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx sraženina. 10,0 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx x obsahu 100 ml, xX xx upraví na 2,20 pomocí xxxxxxx xxxxxxxxx sodného (3.18), xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx citronanového xxxxxxxxx roztoku (3.24) xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xx značku xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24).
Xxxxxxx-xx xx interní xxxxxxxx, xxxxx se 1,00 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.27.3) na xxxxxxx 100 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx xxxxxx po xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24).
Xxxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.4 – xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxx, xxxxxxxxxxx xx při xxxxxxx xxx 5 °X.
5.3 Xxxxxxxxx celkových xxxxxxxxxxxx
5.3.1 xxxxxxx
0,1 až 1 x xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxxxx s xxxxxxxxx 0,2 xx:
- do xxxxx x xxxxxxx xxxx x xxxxxx 100 xx (4.1) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (5.3.2.3) nebo
- xx xxxxx s xxxxxxx xxxx x xxxxxx 250 xx (4.1), xxxxxxxx-xx xx nízká xxxxxxxxxxx xxxxxx nebo
- xx xxxxxx x xxxxxx 100 ml xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.2) (pro xxxxxxxxx xxxxxxxxx 5.3.2.4).
Xxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxx dusíku xxx 10 xx x obsah xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 100 xx.
Xxxxx/xxxxxx xx umístí xx xxxxx s ledovou xxxxx a xxxxxxx xx xx 0 °X, potom se xxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxxx (3.23) x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx špičkou. Xxxxx/xxxxxx xx uzavře x xx xxxxx vzduchotěsnou xxxxx x vloží xx x s xxxxx x ledovou xxxxx xx chladničky xxx 0 °X x ponechá xx xxx 16 xxxxx. Xx 16 xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx činidlo se xxxxxxx xxxxxxxx 0,84 x xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.4).
Xxxx xx pokračuje xxxxx 5.3.2.1.
5.3.2 xxxxxxxxx
5.3.2.1 xxxxxxxxx oxidovaných vzorků
K xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx 5.3.1 xx xxxxx 25 ml xxxxxxxxxxxx xxxxx (3.20) xxx, aby xxxxxxx xxxxx vzorek xx xxxxxxx nádoby ani xx xxxxx. Podle xxxxxxxxx xxxxxxx hydrolýzy xx pokračuje xxxxx 5.3.2.3 nebo 5.3.2.4.
5.3.2.2 xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxx x kulatým xxxx x xxxxxx 100 xx xxxx 250 xx (4.1) xxxx do xxxxxx x xxxxxx100 ml xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.2) se xxxxxx 0,1 xx 1 x upraveného xxxxxx (5.1) x přesností xx 0,2 mg. Xxxxxxxx část xxxxxx xx měla xxx xxxxx xxxxxx asi 10 xx. Xxxxxxx xx přidá 25 xx hydrolyzační xxxxx (3.20) x xxxxxx xx xx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx xxx podle 5.3.2.3 xxxx xxxxx 5.3.2.4.
5.3.2.3 xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxx x baňce (xxxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.1 xxxx 5.3.2.2) xx xxxxxxx 3 xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xx xxxxx xx xxxxxxx xxxx pod xxxxxxx xxxxxxxxx xx dobu 23 xxxxx. Po xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx chladič xxxxxxx 5 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx roztoku (3.24). Xxxxx se xxxxxx x xxxxxxx se x xxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx 5.3.3.
5.3.2.4 xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx podle 5.3.2.1 xxxx 5.3.2.2 se xxxxxx xx xxxxxxx (4.3) xxx 110 °X. Aby se xxxxx první hodiny xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx) x xxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxx. Po xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx baňka se xxxxxxx v xxxxxxx (4.3) 23 hodin. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx, xxxxxxx xx odšroubuje xxxxxx x xxxxxxx xx xx xxxxx s xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx xxxxx vychladnout.
Podle xxxxxxxxx postupu xxx xxxxxx pH (5.3.3) xx xxxxx baňky xxxxxxxxxxxxx převede xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24) xx xxxxxxx x xxxxxx 250 xx xxxx do xxxxx s xxxxxxx xxxx x xxxxxx 250 xx.
Xxxx xx xxxxxxxxx podle 5.3.3
5.3.3 xxxxxx pH
Podle toho, xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.9), xxxxxxxxxx xxx xxxxxx pH xxxxx 5.3.3.1 xxxx 5.3.3.2.
5.3.3.1 pro chromatografické xxxxxxx (4.9), xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx sodíku:
Pokud xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xx-xx xx snížit xxxxx xxxxxxx), doporučuje xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (3.27.3).
X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxxxxx 2,00 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx standardního xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.27.3).
Xx hydrolyzátu xxxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.3 xxxx 5.3.2.4. xx xxxxxxx 2 kapky 1-xxxxxxxx (3.15).
Na xxxxxxx xxxxxxx (4.7) xx xxxxx xxxxx na 5-10 ml za xxxxx při 40 °X. Xxxxx xx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx 5 xx, hydrolyzát je xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx.
xX xx xxxxxx xx 2,20 xxxxxxxx hydroxidu xxxxxxx (3.18) x xxxxxxxxx se xxxxx xxxx 5.3.4.
5.3.3.2 pro xxxxxxx ostatní xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.9)
Xxxxxxxxxxx připravené xxxxx 5.3.2.3 nebo 5.3.2.4 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx 17 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.17), xx xxxxxxx xxxxxxx x při xxxxxxxxx xxxxxxx xxx 40 °X.
xX xx xxxxxx xx 2,20 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.18) xxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx bodu 5.3.4.
5.3.4 xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx (5.3.3.1 xxxx 5.3.3.2) x xxxxxxxxx xX xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx roztoku (3.24) xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 200 xx x xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24) xx xxxxxx po xxxxxx.
Xxxxx-xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, přidají xx 2,00 xx vnitřního xxxxxxxxx (3.27.3) x xxxxx se xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24). Xxxxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx (5.4)
Nejsou-li xxxxxxx xxxxxx analyzovány xxx xxx, xxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxx 5 °X.
5.4 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx (5.2) x xxxxxxxxxx (5.3.4) pokojovou xxxxxxx. Směs se xxxxxxxx x potřebné xxxxxxxx se zfiltruje xxxxxxxxxxx xxxxxxx 0,2 μ (4.5). Xxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxxx ionexové xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.9).
Xxxxxxx xxx provést xxxxx xxxx automaticky. Xxxxxx xx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxxxx nastřikovalo xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx ± 0,5 % jak xxx analýze xxxxxxxxx xxx xxxxxx s xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x x roztocích vzorků xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx stabilitě ninhydrinového xxxxxxx x analytického xxxxxxx. Xxxxxxxx nebo xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24) xxx, aby xxxxxx xxxx standardu xxxxxxx 30 – 200 % xxxxxx xxxx xxx jednotlivé xxxxxxxxxxxxx x roztoku xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx liší v xxxxxxxxxx xx typu xxxxxxxxx analyzátoru x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx sebe xxxxxxxx i xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxx xxxxx působení xx xxx chromatografický xxxxxx xxxxxxxx reagovat xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxx.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxx být xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx musí obsahovat xxxxxxx 30 % xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, které xxxxx xxx ještě xxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxx aminokyselin (4.9).
Při xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx by xxxxx xxxxx sedla a xxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxxxx neměl xxxxxxxxxx 2:10 (pokud xx xxxxxxx pouze xxxx(x)xx, xxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx píků). Xxx všechny xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxx než 1:10.
Xxxxxx musí zaručit, xx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xx "xxxxxxxxxx xxxxxxxx" x xxxxxxxxx.
6. Xxxxxxx x vyjádření xxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxx x standardu xx xxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxx aminokyselinu a xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x g xx kg xxxxxx.
x xxxxxxxxxxxxx xx kg xxxxxx = X × X × XX × X / X × X × 1 000
Xx-xx xxxxxx interní xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx: X / X
X = xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx
X = xxxxxx xxxx kalibračního standardního xxxxxxx
X = plocha xxxx interního xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx
X = xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx roztoku
MV = xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
X = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx v μxxx/xx
X = xxxxxxxx navážky xxxxxx (x) (korigovaná xx xxxxxxx xxxx xxxxx je vzorek xxxxxxx xxxx xxxxxxxx)
X = celkový xxxxx xxxxxxxxxx roztoku (5.3.4) x xx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx 6.1
Xxxxxx x cystein xx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku stanoví xxxx kyselina xxxxxxxx, xxx vypočítávají xx xxxx xxxxxx (X6X12X2X4X2, XX 240,30) s xxxxxxxx XX 120,15 (= 0,5 x 240,30).
Xxxxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxx oxidovaného xxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxxxxxxxxx, xxx vypočítává se xxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxx XX methioninu: 149,21.
Xxxxxxx volný methionin xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx jako xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx XX.
6.1 Xxxxxxx xxxxx zředěného xxxxxxxx (X) při xxxxxxxxx volných aminokyselin (5.2) xx xxxxxxxx xxxxx tohoto xxxxxx:
X = 100 xx × (10 xx + 5 xx) / 10 xx × X&xxxx;xx / 10xx
X = xxxxx xxxxxxxxxx extraktu
7. Vyhodnocení xxxxxx
Xxxx xxxxxx byla xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxx v xxxx 1990 při xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxx xxxx xxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxx broilery, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, premix). Xx xxxxxxxxx extrémů xxxx xxxxxxxx středních xxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx uvedeny x xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxx x g/kg
|
Referenční xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx pro xxxxxxx |
6,94 x = 15 |
3,01 x = 17 |
3.27 x =.17 |
9,55 n = 13 |
|
Krmná xxxx xxx xxxxxxxx |
9,31 x = 16 |
3,92 x = 18 |
5,08 n = 18 |
13,93 x = 16 |
|
Proteinový koncentrát |
22,32 x = 16 |
5,06 x = 17 |
12,01 x = 17 |
47,74 x = 15 |
|
Xxxxxx |
58,42 x = 16 |
- |
90,21 x = 16 |
98,03 x = 16 |
n = xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
7.1 Opakovatelnost
Opakovatelnost vyjádřená xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx standardní xxxxxxxx je xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
xxxxxxxxxx odchylka (Xx) xxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx x g/kg
|
Referenční xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx směs xxx xxxxxxx |
0,13 x = 15 |
0,10 n = 17 |
0,11 x = 17 |
0,26 x = 13 |
|
Xxxxx směs xxx xxxxxxxx |
0,20 n = 16 |
0,11 n = 18 |
0,16 x = 18 |
0,28 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx koncentrát |
0,48 x = 16 |
0,13 x = 17 |
0,27 x = 17 |
0,99 x = 15 |
|
Xxxxxx |
1.30 x = 16 |
_ |
2,19 x = 16 |
2,06 x = 16 |
x = xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx (%) vnitrlaboratorních xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (Xx)
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx |
1,9 x = 15 |
3,3 x = 17 |
3,4 x =.17 |
2,8 x = 13 |
|
Xxxxx xxxx xxx brojlery |
2,1 x = 16 |
2,8 x = 18 |
3,1 x = 18 |
2,1 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
2,7 x = 16 |
2,6 n = 17 |
2,2 x = 17 |
2,4 n = 15 |
|
Xxxxxx |
2,2 x = 16 |
- |
2,4 n = 16 |
2,1 x = 16 |
x = xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
7.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx shora xxxxxxxxx zkoušek xxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (XX) v g/kg
|
Referenční xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
xxxxxxxx |
Xxxx(x)xx |
xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx směs xxx xxxxxxx |
0,28 x = 15 |
0,30 x = 17 |
0,23 x = 17 |
0,30 x = 13 |
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx |
0,48 n = 16 |
0,34 x = 18 |
0,55 n = 18 |
0,75 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx koncentrát |
0,85 x = 16 |
0,62 n = 17 |
1,57 x = 17 |
1,24 x = 15 |
|
Premix |
2,49 x = 16 |
- |
6,20 x = 16 |
6,62 n = 16 |
x = xxxxx zúčastněných laboratoří
Variační xxxxxxxxxx (%) xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (XX)
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
xxxxxxxx |
Xxxx(x)xx |
xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx |
4,1 x = 15 |
9,9 x = 17 |
7,0 x = 17 |
3,2 x = 13 |
|
Xxxxx směs xxx xxxxxxxx |
5,2 n = 16 |
8,8 x = 18 |
10,9 x = 18 |
5,4 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
3,8 x = 16 |
12,3 x = 17 |
13,0 x = 17 |
3,0 x = 15 |
|
Premix |
4,3 n = 16 |
- |
6,9 n = 16 |
6,7 x = 16 |
x = xxxxx zúčastněných xxxxxxxxxx
8. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx uvedené xxxxxx xx ověřuje xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx referenčních xxxxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx kalibračními xxxxxxx aminokyselin.
9. Xxxxxxxx
9.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xx měly xxxxxxx koncentrace xxxxxxxxxxxx xxxxxxx standardů xxxxxxxxxxxx (xxx 3.27.4 a 3.27.5) a xxxxxxx xxxxxx (5.3.4) xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx roztok xx xxxx xxxxxxxxxxxx tlumivým xxxxxxxx xxx, aby xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
9.2 Xxxxx se x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx zařízení pro xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, musí xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x souladu x xxxxxxxxxxx výrobce.
9.3 Xxx xxxxxxx xxxx metody x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxx 1 % xxxxxxxx (xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx krmiva, doplňková xxxxxx) může xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x musí xx xxxxx použít xxxxxxxxx postup.
ČÁST X XXXXXXXXX TUKŮ
1. Účel x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxx, jejichž zkoušení xx xxxx xxxxx xxxxxxxx Xxxx 136/66/XXX xx dne 22. xxxx 1996.
Xxxxx xxxxx x složení xxxxxx xx pro xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx následujících postupů:
1.1 Xxxxxx X – xxxxx extrahovatelné xxxx
Xxxx xxxxxx je použitelná xxx krmiva xxxxxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx do xxxxxx xxxxxxx X.
1.2 Xxxxxx X – xxxxxxx xxx
Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx krmiva xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxx není xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxx předchozí xxxxxxxxx (xxxx. lepky, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, které xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx).
1.3 Interpretace xxxxxxxx
Xx všech xxxxxxxxx, xxx se dosáhlo xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx X, xxx postupem X, xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx podle xxxxxxx X.
2. Princip
2.1 Xxxxxx X
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Rozpouštědlo se xxxxxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxx x xxxxx.
2.2 Xxxxxx B
Vzorek xx xxxxxxx x xxxxxxxxx chlorovdíkovou. Směs xx xxxxxxx a xxxxxxxxxxx. Promytý a xxxxxxx zbytek xx xxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx X.
3. Činidla
3.1 xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx 40 x 50 °C. Xxxxxxx bromového xxxxx xxxx být xxxxx xxx 1 a xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx než 2 xx/100 xx
3.2 síran xxxxx, xxxxxxx
3.3 xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, x = 3 mol XXx/x
3.4 xxxxxxxxx prostředky, xxxx. xxxxxxxxx, Xxxxx-xxxxxxxx.
4. Přístroje x pomůcky
4.1 Extrakční xxxxxxxx, se xxxxxxx (Xxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxx by xxxx xxxxxxx asi 10 xxxxx za xxxxxx. X typu xxx xxxxxx xx xxxx xxx refluxní rychlost xxx 10 xx xx minutu.
4.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx, bez xxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx x xxxxxxx s požadavky xxxxx xxxx 4.1.
4.3 Xxxxxxx, xxx vakuová xxxxxxxx na 75 °X ± 3 °X, nebo horkovzdušná xxxxxxxx na 100 °X ± 3 °X.
5. Postup
5.1 Xxxxxx X (xxx bod 8.1)
Xx xxxxxxxxx patrony xx naváží 5 x xxxxxx s xxxxxxxxx xx 1 xx (4.2) x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx tuku.
Patrona se xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1) x xxxxxxxxxx xxxx hodin xxxxxxxxxxxxx (3.1). Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xx xxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx [1].
Xxxxxxxxxxxx xx oddestiluje, xxxxxx v xxxxx xx xxxx 1,5 xxxxxx x xxxxxxx (4.3). Xxxxx xx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx x xxxxx. Xxxx xx xxxxxxx 30 xxxxx, xxx xx xxxxxxxx, zda xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx mezi xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxx xxx 1 xx).
5.2 Xxxxxx B
Do xxxxxxx x obsahu 400 xx xxxx xx xxxxxxx baňky x xxxxxx 300 xx xx odváží 2,5 x xxxxxx x xxxxxxxxx na 1 xx (viz xxx (8,2) a xxxxx xx 100 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.3) x úlomky xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx baňka xxxxxx refluxním chladičem. Xxxx se přivede xx xxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxx x vaří xx po xxxx xxxxx xxxxxx. Během xxxx se xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx na xxxxxxx xxxxxx.
Xxxx xx xxxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.4), xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx ztrátám tuku. Xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx tuku. Xxxxxx se promývá xxxxxxxx xxxxx, xx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx, zda xxxxxxx xxxxxxxxxx žádný xxx. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xx se xxxxxx xxxx před xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx X.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxx a xxxx xx půldruhé xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.3) xxx xxxxxxx 100 °C ± 3 °C.
Dvojitý xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx zbytkem xx xxxxx do xxxxxxxxx xxxxxxx (4.2) x xxxxxxxx xxxxxxx vaty xxx xxxx. Xxxxxxx xx vloží xx xxxxxxxxxxx přístroje (4.1) x xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxx 5.1.
6. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx vzorku.
7. Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xx výsledcích xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx stejném xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx by xxxxx xxxxxxxxxx:
- 0,2 % x xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx obsahu xxxx xxxxxx xxx 5 %,
- 4,0 % xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx výsledku xxx xxxxxx xx 5 xx 10 %,
- 0,4 % v xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxx 10 %.
8. Poznámky
8.1 X xxxxxxx x vysokým xxxxxxx xxxxx x xxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx odebrat xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxxx xx 20 x xxxxxx x xxxxxxxxx na 1 xx x xxxxxx xx x 10 xxxx x xxxx xxxxx bezvodého síranu xxxxxxx (3.2). Extrahuje xx xxxxxxxxxxxxx (3.1) xxxxx bodu 5.1. Xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xx 500 xx petroletherem (3.1) x xxxxxxxx xx. 50 ml xxxxxxx xx odpipetuje do xxxx xxxxx, předem xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx pemzy [2].
Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx, baňka xx xxxxxx x xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx bodu 5.1.
Xxxxx xxxx xx xxxxxxxx jako xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:
(10 x + b) × 5
xxx:
x = xxxxxxxx xxxxxx po první xxxxxxxx x xxxxxxx (xxxxxxx xxxx extraktu)
b = xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx extrakci x xxxxxxx
8.2 U xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx obsah tuku xx může xxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku xxxxxx xx 5 x.
8.3 Xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, která xxxx xxxxxx obsah xxxx, xx musí xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx X xxxxxxx x bezvodým xxxxxxx xxxxxx.
8.4 V xxxx 5.2 xx xxxx na xxxxxxxxxx xxxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxx.
8.5 X xxxxxxxxx xxxxx se xxxx xxxxxxxxxx xxxx sušení xxx 1,5 xxx. Xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx vést x nízkým xxxxxxxxx. Xx xxxxx použít x mikrovlnnou xxxxxx.
8.6 Xxx xxxxxx xxxx xxx 15 % xx doporučuje provést xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx X x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx X. Xxxxxx xx xx xxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxx tuku x xxxxxx.
XXXX X
XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX
(2-[X-2-(xxxxxxxxxxxx)xxxxxxxxx]-3-xxxxxxxxxxxxxxxx-X1,X4-xxxxxx)
1. Xxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx metodou xx xxxxxxx obsah xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 5 mg/kg.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxx směsí xxxx a xxxxxxxxx. Xxxxx olachindoxu se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx chromatografií (XXXX) xx xxxxxxxx fázi xx xxxxxxx UV xxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
3.1 xxxxxxxx
3.2 xxxxxxxx, xxx HPCL
3.3 xxxx, xxx HPLC
3.4 xxxxxxx xxxx pro XXXX:
Xxxx xxxx (3.3) x methanolu (3.2), 900 + 100 (X + X)
3.5 xxxxxxxxxx xxxxx: čistý xxxxxxxxxx 2-[N-2-(hydroxyethyl)karbomoyl]-3-methylchinoxalin-N1,N4-dioxid, X 851
3.5.1 xxxxxxx standardní xxxxxxxx roztok xxxxxxxxxxx, 250 μx/xx
Xx odměrné xxxxx x obsahu 200 xx xx xxxxxx 50 xx xxxxxxxxxxx (3.5) x xxxxxxxxx xx 0,1 xx x xxxxx xxx 190 xx xxxx. Xxxxx xx xxxxxxx na 20 xxxxx do ultrazvukové xxxxx (4.1). Xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xxxxx xx xxxxxx a xxxxxxx. Xxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x uschovává v xxxxxxxxxx. Xxxxx roztok xx xxxx připravovat xxxxxxx xxxxx xxxxx.
3.5.2 xxxxxxxx standardní xxxxxx xxxxxxxxxxx, 25 μg/ml
10,0 xx zásobního standardního xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.1) xx přenese xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 100 xx, xxxxxx se po xxxxxx xxxxxxx fází (3.4) x promíchá. Xxxxx xx obalí xxxxxxxxxx fólií a xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxxx roztok xx xxxx xxxxxxxxxxx denně xxxxxxx.
3.5.3 kalibrační xxxxxxx
Xx xxxx xxxxxxxxx baněk x obsahu 50 xx xx odpipetuje 1,0, 2,0, 5,0, 10,0, 15,0 x 20,0 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.2). Xxxxxx se xxxxxxx xxxx (3.4) po xxxxxx x promíchá. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxx odpovídají 0,5, 1,0, 2,5, 5,0, 7,5 x 10,0 μx xxxxxxxxxxx xx xx.
Xxxx xxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxx denně xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
4.1 ultrazvuková xxxxx
4.2 xxxxxxxxxx třepačka
4.3 xxxxxxxx XXXX x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx diodového xxxx
4.3.1 xxxxxx xxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx, 250 xx x 4 mm, xxxxxxx C18, 10 μx, nebo srovnatelná xxxxxx
4.4 membránové xxxxxx x xxxx 0,45 μx
5. Postup
Poznámka:
Olachindox xx xxxxxxx na xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx světle nebo x xxxxxxxx z xxxxxxx xxxx.
5.1 Obecně
5.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, zda xxxxxxxxxx olachindox xxxx xxxx interferující xxxxx.
5.1.2 Xxxxxxx na xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx obohaceného xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx odpovídá xxxx obsahu xx xxxxxx X xxxxxxxxxxx xx úroveň 50 xx/xx se xxxxxxxxxx 10,0 xx zásobního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.1) xx kónické xxxxx x xxxxxx 250 xx x xxxxxx xx xxxxxx xx cca 0,5 xx. Xxxxx se 50 g modelového xxxxxx, xxxxx se xxxxxxxx a nechá xx 10 xxxxx xxxxxx, xxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xx přejde x extrakci (5.2).
Xxxxxxxx:
Xxx xxxxx xxxx xxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx podobného xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx obsahovat xxxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxx
Xxxxxx se xxxxxxxxx 50 x xxxxxx x xxxxxxxxx xx 0,01 g. Xxxxxxx se do xxxxxxx baňky o xxxxxx 1000 xx, xxxxx xx 100 xx xxxxxxxxx (3.1) x baňka xx xxxxxx xx pět xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1). Přidá xx 410 xx xxxx x xxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxx xxxxx dalších 15 xxxxx. Xxxxx se xxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx xxxxx 30 xxxxx xx xxxxxxxx (4.2) x xxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. 10,0 xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 20 xx, xxxxxx xx vodou xx xxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) (viz xxx 9. Xxxxxxxx). Xxxx xx pokračuje xxxxxxxxxx XXXX (5.3).
5.3 Xxxxxxxxx XXXX
5.3.1 Xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxxx podmínky, xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
xxxxxxxxxx xxxxxx (4.3.1)
xxxxxxx xxxx (3,4): Xxxx vody (3.3) x xxxxxxxxx (3.2), 900 + 100 (X + V)
průtoková xxxxxxxx: 1,5–2 xx/xxx
xxxxxxxx xxxxxx délka: 380 xx
xxxxx xxxxxxxx: 20 μx–100 μl
Stabilita xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxx, xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (3.5.3) xxxxxxxxxx 2,5 μg/ml, až xx xxxxxxx konstantních xxxxx xxxx a xxxxxxxxxx xxxx.
5.3.2 Kalibrační xxxx
Xxx každý kalibrační xxxxxx se provede xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx výšky (xxxxxx) xxxx pro každou xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xx použití xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxx) píků xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx x příslušných xxxxxxxxxxx x μg/ml xxxx xxxxxxxxx.
5.3.3 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx několik nástřiků xxxxxxxx xxxxxx (5.2) xxx použití xxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxxxx) píků xxxxxxxxxxx.
6. Xxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxxxx hodnoty xxxxx (xxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx koncentrace x xxxxxxx vzorku x μx/xx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx (5.3.2).
Xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx w x xx/xx xx xxx xxxxxxxxxxx rovnicí:
w = x × 1&xxxx;000 / x
xxx:
x = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxx vzorku (5.2) x μx/xx
x = xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x x (5.2)
7. Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (co-chromatography) xxxxx využitím detektoru x xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxx extraktu xxxxxx (5.2) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.3), xxxxxxxxxxxx 5,0 μx/xx olachindoxu.
7.1.1 Xxxxxxxxx stanovením x xxxxxxxxx (co-chromatography)
Extrakt xxxxxx (5.2) xx obohatí xxxxxxxxx přiměřeného xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.3). Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx mělo xxxxxxxxx xxxxxxxx olachindoxu xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
X xxxxxxx na přidané xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Šířka xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxx musí xxx x rozmezí ±10 % xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx vzorku.
7.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
x) xxx xxxxxx délce xxxxxxxxx xxxxxxxx vzorku x xxxxxxxxx musí xxx xxxxxx xxxxxxx zaznamenaný xx vrcholu xxxx xx chromatogramu xxxxxx x nepřesností xxxxx xxxxxxxxxxx schopností xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx detektor x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx ±2 xx;
x) xxx vlnové xxxxx xxxx 220 x 400 nm xx xxxxx záznam xxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku x standardu xxxxxxxxxxx xx vrcholu xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx od xxxxxxxxx částí xxxxxxx x rozsahu 10 xx 100 % xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 % xxxxxxxxxx standardního xxxxxxx;
x) xxx xxxxxx xxxxx xxxx 220 a 350 xx se xxxxx spektrum xxxxxxxx, xxxxxxx x sestupu xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx ostatních x xxxx xxxxx xxxxxxx x rozsahu 10 xx 100 % xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx kritéria xx xxxxxxxx, xxxxxxxx jsou xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx spektry xxxxxxxxxxx nikde 15 % xxxxxxxxxx xxxxxxx xx vrcholu xxxx.
Xxxx-xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx není xxxxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx souběžných xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx obsahu xxxxxxxxxxx xxxx 10 x 20 xx/xx, xxxxx xxxxxxxxxx15 % xxxxxxx xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vzorek xxxx xxx výtěžnost xxxxxxx 90 %.
8. Xxxxxxxx xxxxxxxxx testu
V xxxxx XX xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxx xxxx až 13 laboratoří xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx jsou xxxxxxx x následující tabulce:
|
| xxxxxx 1 |
xxxxxx 2 |
vzorek 3 |
xxxxxx 4 |
|
|
L |
13 |
10 |
11 |
11 |
|
A |
40 |
40 |
44 |
44 |
|
střední (xx/xx) |
- |
14,6 |
48,0 |
95,4 |
|
(Xx) (xx/xx) |
- |
0,82 |
2,05 |
6,36 |
|
(XX) (xx/xx) |
- |
1,62 |
4,28 |
8,42 |
|
XXx (%) |
- |
5,6 |
4,3 |
6,7 |
|
XXX (%) |
- |
11,1 |
8,9 |
8,8 |
|
xxxxxxxxx obsah (mg/kg) |
- |
15 |
50 |
100 |
|
výtěžnost (%) |
- |
97,3 |
96,0 |
95,4 |
X: xxxxx xxxxxxxxxx
x: xxxxx jednotlivých xxxxxx
Xx: xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxxxxxxxx
XX: xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
XXx: xxxxxxxx koeficient opakovatelnosti
CVR: xxxxxxxx xxxxxxxxxx reprodukovatelnosti
9. Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx metoda xxxxxx ověřena xxx xxxxxx xxxxxxxxxx více xxx 100 xx/xx xxxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx uspokojivé xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx extraktu (5.2) tak, aby xx xxxxxxx koncentrace x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.3.2).
[1] Xxxxx xx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx, zamění se xxxxxx pemzy xx xxxxxxxx xxxxxxx.
[2] Xxxxx xx má xxx xxxxxxxx zkoušet xx xxxxxxx, zamění xx xxxxxx xxxxx za xxxxxxxx xxxxxxx.