Směrnice Xxxxxx 98/64/ES
ze xxx 3. září 1998,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxxxx, xxxx a xxxxxxxxxxx x krmivech x xxxxxx se mění xxxxxxxx 71/393/EHS
(Text x xxxxxxxx xxx XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Smlouvu x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx na xxxxxxxx Xxxx 70/373/XXX za xxx 20. xxxxxxxx 1970 o xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx metod Xxxxxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxx x xxxxxxxxxxx Rakouska, Xxxxxx x Xxxxxxx, x zejména na xxxxxx 2 uvedené xxxxxxxx,
xxxxxxxx k tomu, xx xxxxxxxx 70/373/EHS xxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxx krmiv xx xxxxxx xxxxxxxx, zda xxxxxx xxxxxxx požadavky xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx, xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xx Společenství;
vzhledem x tomu, xx xxxxxxxx Xxxx 79/373/XXX xx dne 2. xxxxx 1979 o xxxxxxx krmných xxxxx xx xxx [2], xxxxxxxxx pozměněná xxxxxxxx Xxxxxx 97/47/ES [3], x směrnice Xxxx 93/74/XXX xx xxx 13. září 1993 x krmivech xxxxxxxx xx zvláštním účelům xxxxxx [4], naposledy xxxxxxxxx xxxxxxxx 96/25/ES [5], xxxxxxx, xx xxxxx aminokyselin x xxxx xxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx Xxxx 70/524/XXX xx dne 23. listopadu 1970 x xxxxxxxxxxx látkách x xxxxxxxx [6], xxxxxxxxx xxxxxxxxx směrnicí Xxxxxx 98/19/XX [7], xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx na označení, xxxxx xx tato xxxxx xxxxxxx do xxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx druhá xxxxxxxx Xxxxxx 71/393/XXX xx xxx 18. xxxxxxxxx 1971, xxxxxx xx stanoví xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx kontrolu xxxxx [8], naposledy xxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 84/4/EHS [9], xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx mimo jiné x xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx; že xx vhodné xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx musí xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Společenství xxx xxxxxxxx xxxxxx látek;
vzhledem x xxxx, že xxxxxxxx této směrnice xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx pro krmiva,
PŘIJALA XXXX SMĚRNICI:
Xxxxxx 1
Členské xxxxx xxxxxxx, xx analýzy xxx xxxxxx kontrolu xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 2
X příloze xxxxxxxx Xxxxxx 71/393/XXX xx xxx "4. Xxxxxxxxx obsahu xxxx" xxxxxxxxx částí B xxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Článek 3
1. Xxxxxxx xxxxx uvedou x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx souladu x touto xxxxxxxx xxxxxxxxxx do 31. xxxxxxxx 1998. Xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxx Xxxxxx.
Xxxxx tyto xxxxxxxx xxxxxxxx od 1. xxxxx 1999.
Xxxx opatření xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx tuto xxxxxxxx xxxx musí být xxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Způsob xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxx xxxxx xxxxx Xxxxxx znění xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx předpisů, které xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 4
Tato směrnice xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx dnem xx xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx společenství.
Xxxxxx 5
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X Xxxxxxx dne 3. xxxx 1998.
Xx Xxxxxx
Xxxxx Fischler
člen Komise
[1] Xx. věst. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Xx. xxxx. X 86, 6.4.1979, x. 30.
[3] Úř. xxxx. X 211, 5.8.1977, x. 45.
[4] Xx. xxxx. X 237, 22.9.1993, x. 23.
[5] Úř. xxxx. X 125, 23.5.1996, x. 35.
[6] Xx. věst. X 270, 14.12.1970, x. 1.
[7] Xx. věst. X 96, 28.3.1998, x. 39.
[8] Úř. xxxx. X 279, 2.12.1971, x. 7.
[9] Xx. xxxx. X 15, 18.1.1984, x. 28.
PŘÍLOHA
ČÁST X
Xxxxxxxxx aminokyselin
1. Xxxx a oblast xxxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxxxx xx stanovení obsahu xxxxxxx (xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx) a xxxxxxxx (xxxxxxx vázané x xxxxx) xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx použití xxxxxxxxxxx aminokyselin. Xxxxxx xx použitelná xxx xxxx xxxxxxxxxxxxx: cyst(e)in, xxxxxxxxx, lysin, threonin, xxxxxx, xxxxxxx, kyselinu xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx glutamovou, xxxxxx, xxxxxxxx, isoleucin, xxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxx, tyrosin a xxxxx.
Xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx aminokyselin x xxxxxx xxxx x aminokyselin xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx X x L. Xxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx aminokyselin.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxxx xxxxxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx zředěnou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx kyselinou xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xx pH 2,20. Xxxxxxxxxxxxx se separují xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xx xx xxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 570 nm.
2.2 Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx závisí xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxx(x)xx x xxxxxxxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx aminokyseliny xxxxxxx v xxxx 1 mohou xxx xxxxxxxxxx xxx x xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx vzorku.
Oxidace xx xxxxxxx xxx 0 xX xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxx. Xxxxxxxxxx oxidační xxxxxxx xx rozloží xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x = 6 xxx/x) xx 23 xxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxx xx xX 2,20. Xxxxxxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x stanovují xx xx xxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx detekcí xxx 570 xx (440 xx xxx xxxxxx).
3. Činidla
Musí být xxxxxxx dvakrát xxxxxxxxxxx xxxx nebo xxxx xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx &xx; 10 μX).
3.1 xxxxxxx vodíku, w = 30 %
3.2 xxxxxxxx xxxxxxxx, x = 98–100 %
3.3 xxxxx
3.4 xxxxxxxxx xxxxx
3.5 xxxxxxxx sodný
3.6 xxxxxxxx 5-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx
3.7 kyselina xxxxxxxxxxxxxx x hustotě xxxxxxxxx 1,18 g/ml
3.8 xxxxxxxx sodný, xxxxxxxx
3.9 2,2-xxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx)
3.10 chlorid xxxxx
3.11 xxxxxxxxx
3.12 petrolether, xxx varu 40–60 °X
3.13 norleucin xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx vnitřní xxxxxxxx
3.14 xxxxx – xxxx (&xx; 10 xxx xxxxxxx)
3.15 1-xxxxxxx
3.16 xxxxxxxxxxxxx
3.16.1 xxxxxxxxxx látky xxxxxxx x xxxx 1; xxxxx xxxxxxxxxx neobsahující xxxxxxxxxxxxx xxxx. Vysuší xx xx xxxxx xxx X2X5 nebo X2XX4 xxxxx xxxx xxxxxxxx
3.16.2 xxxxxxxx xxxxxxxx
3.16.3 xxxxxxxxxxxxxxx
3.17 xxxxxxxx sodný, xxxxxx x = 7,5 xxx/x:
300 x XxXX (3.5) se xxxxxxxx ve vodě x xxxxxx xx 1 xxxxx.
3.18 xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx x = 1 mol/l:
40 x NaOH (3.5) xx xxxxxxxx xx xxxx a doplní xx 1 litru.
3.19 xxxxxx xxxxxxxx mravenčí x fenolu:
Smíchá se 889 x xxxxxxxx xxxxxxxx (3.2) xx 111 x xxxx x přidá se 4,73 g fenolu (3.3).
3.20 xxxxxxxxxxxx xxxx, x = 6 xxx XXx/x s xxxxxxxxx 1 g xxxxxx/x:
X 492 ml XXx (3.7) xx xxxxx 1 x xxxxxx (3.3) x xxxxxx xx xxxxx xx 1 xxxxx.
3.21 xxxxxxxxx xxxx, c = 6 mol XXx/x x xxxxxxxxx 2% thiodiglykolu:
8,2 xx XXx (3.7) xx xxxxxxx xxxxxxxxx 900 xx xxxx, přidá xx 20 xx xxxxxxxxxxxxx (3.9) x xxxxxx xxxxx na 1 xxxx (3.7 x 3.9 xx xxxxx smíchat xxxxx).
3.22 xxxxxxxx 5-xxxxxxxxxxxxxxx, β = 6 %:
60 x kyseliny 5-xxxxxxxxxxxxxxx (3.6) xx rozpustí xx xxxx x xxxxxx xxxxx na 1 litr.
3.23 xxxxxxxx xxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxxx – fenol):
V xxxx xxxxxxx xx xxxxxx 0,5 xx xxxxxxxx xxxxxx (3.1) x 4,5 ml xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx (3.19); xxxxxxx xx x klidu 1 xxxxxx xxx 20–30 °X, xxx xx utvořila xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxx ochladí x xxxxx x xxxxxxx xxxxx (15 xxxxx).
Xxxxx:
Xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx x xxxxxxxx ochranný oděv.
3.24 xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, x = 0,2 xxx Na+/l, xX 2,20:
X xxxxxxxxx 800 xx xxxx se xxxxxxxx 19,61 x xxxxxxxxx sodného (3,8), 5 xx xxxxxxxxxxxxx (3.9), 1 x xxxxxx (3.3) x 16,50 xx XXx (3.7). xX xx xxxxxx na 2,20. Xxxxxx se xxxxx xx xxxxx 1 xxxxx.
3.25 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx pro použitý xxxxxxxxxx (4.9)
3.26 xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx pro použitý xxxxxxxxxx (4.9)
3.27 Standardní xxxxxxx aminokyselin. Xxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx teplotě xxx 5 °X.
3.27.1 xxxxxxx xxxxxxxxxx základní xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.16.1), x = 2,5 μxxx/xx pro xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx i xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
3.27.2 xxxxxxx xxxxxxxxxx základní roztok xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx, x = 1,25 μxxx/xx
0,2115 g xxxxxxxx xxxxxxxx (3.16.2) x 0,2265 x xxxxxxxxxxxxxxxx se rozpustí (3.16.3) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (3.24) x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx a doplní xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx tlumivým xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxx 5 °X xxxxxxx 12 xxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.27.1) xxxxxxxx kyselinu xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx.
3.27.3 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxx, x = 20 μxxx/xx
0,6560 x xxxxxxxxxx (3.13) xx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx tlumivém roztoku (3.24) x xxxxxxx xxxxx xx 250 xx x xxxxxx xx po xxxxxx xxxxxxxxxxxx tlumivým roztokem. Xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx pod 5 °X xxxxxxx 6 xxxxxx.
3.27.4 xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx aminokyselin xxx xxxxxxx s xxxxxxxxxxx, x = 5 xxxx/50 μx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx x x = 10 nmol/50 μx x ostatních xxxxxxxxxxxx
Xx 100 xx xxxxxxx xx xxxxxxxx 2,2 x chloridu xxxxxxx (3.10) x 30 xx citronanového xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24). Přidají xx 4,00 ml xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx aminokyselin (3.27.1), 4,00 ml zásobního xxxxxxxxxxxx základního roztoku xxxxxxxx cysteové a xxxxxxxxxxxxxxxx (3.27.2) a 0,50 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx základního roztoku xxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.27.3), xxxxx xx xxxxxxx. xX xx xxxxxx xx 2,20 xxxxxxxxxx xxxxxx (3.18).
Xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx 50 xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24) x xxxxxxx se.
Skladuje xx xxx xxxxxxx pod 5 °X xxxxxxx 3 xxxxxx.
Xxx také xxxxxxxx 9.1.
3.27.5 xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx, připravenými xxxxx xxxx 5.3.3.1 x xxx xxxxxxxx (5.2). Xxxxxxxxxx roztok xx xxxxxxxxxx xxxxx 3.27.4 x vynecháním chloridu xxxxxxx.
Xxxxxxxxx při teplotě xxx 5 °C xxxxxxx 3 xxxxxx.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx
4.1 xxxxx x xxxxxxx xxxx o xxxxxx 100 xxxx 250 xx opatřená xxxxxxx xxxxxxxxx
4.2 xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxx 100 xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x gumovým xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. Xxxxx, Xxxxxx) xxx xxxxxxx x xxxxxxx
4.3 xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxx ±2 °X
4.4 xX xxxx (xxx xxxxxxxxx místa)
4.5 xxxxxxxxxx filtr (0,2 μx)
4.6 xxxxxxxxxxx
4.7 xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx
4.8 mechanická xxxxxxxx nebo magnetická xxxxxxxx
4.9 analyzátor aminokyselin xxxx xxxxxxxx XXXX x xxxxxxxxxxxxxx kolonou, xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxx kolonovou xxxxxxxxxxxx x fotometrickým detektorem.
Kolona xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx pryskyřicí, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx xxxxxx ninhydrin xxxxxxxxxxx látek. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx čerpadla xx xxxxxxxx průtoku ± 0,5 % xx dobu zahrnující xxxxxxxxxx kalibraci x xxxxxxx vzorku.
Některé analyzátory xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x = 0,8 xxx/x x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx kyselinu x oxidačního kroku. Xxxx analyzátory xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx separaci xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, obsahuje-li hydrolyzát xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x/xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx objem xxxxxxxx xxxx úpravou xX xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxx 5 xx. Xxxxxxxx se xx xxxxxxxx ve xxxxx xxx teplotě xxxxxxx 40 °X.
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxx, xxx prošel xxxxx x oky 0,5 xx. Vzorky x xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx nepřesahující 50 °X nebo xxx xxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.12).
5.2 Stanovení xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x v xxxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx množství (1–5 x) xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) s xxxxxxxxx na 0,2 xx x xxxxx xx 100,0 ml xxxxxxxxx směsi (3.21). Xxxxx xx xxxxx 60 minut xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.8). Po xxxxxxx sedimentu xx xxxxxxxxxx 10,0 ml xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx 100 xx.
Xx xxxxxxx míchání xx přidá 50 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx x míchání xx magnetické míchačce xxxxxxx 5 minut. Xxxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx tak, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx sraženina. 10,0 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx přenese xx xxxxxxx x xxxxxx 100 xx, pH xx xxxxxx xx 2,20 xxxxxx roztoku xxxxxxxxx xxxxxxx (3.18), xxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24) xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx roztokem (3.24).
Xxxxxxx-xx xx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx se 1,00 xx interního xxxxxxxxx (3.27.3) xx každých 100 ml xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x potom xx xxxxxx po xxxxxx xxxxxxxx roztokem (3.24).
Xxxx xx pokračuje xxxxx xxxx 5.4 – xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx-xx extrakty xxxxxxxxxx xxx xxx, xxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx pod 5 °X.
5.3 Xxxxxxxxx celkových xxxxxxxxxxxx
5.3.1 oxidace
0,1 xx 1 x upraveného xxxxxx (5.1) xx xxxxxx x xxxxxxxxx 0,2 mg:
- xx xxxxx x xxxxxxx xxxx x obsahu 100 xx (4.1) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (5.3.2.3) xxxx
- xx xxxxx s xxxxxxx xxxx o xxxxxx 250 xx (4.1), xxxxxxxx-xx se nízká xxxxxxxxxxx xxxxxx nebo
- xx xxxxxx x xxxxxx 100 xx xx xxxxxxxxxx uzávěrem (4.2) (xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 5.3.2.4).
Odvážená část xxxxxx xx měla xxx xxxxx xxxxxx xxx 10 xx x obsah xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 100 xx.
Xxxxx/xxxxxx xx xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx na 0 °X, potom xx xxxxx 5 ml xxxxxxxx xxxxx (3.23) x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx lžící xx xxxxxxxx špičkou. Xxxxx/xxxxxx xx xxxxxx x xx xxxxx vzduchotěsnou xxxxx x vloží xx i s xxxxx s xxxxxxx xxxxx xx chladničky xxx 0 °C x xxxxxxx xx xxx 16 hodin. Xx 16 hodinách xx vyjme z xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx přidáním 0,84 x xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.4).
Xxxx se pokračuje xxxxx 5.3.2.1.
5.3.2 hydrolýza
5.3.2.1 xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
X xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx 5.3.1 xx xxxxx 25 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (3.20) xxx, xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx xx lžíci. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx hydrolýzy xx pokračuje xxxxx 5.3.2.3 xxxx 5.3.2.4.
5.3.2.2 xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxx s xxxxxxx xxxx o obsahu 100 xx nebo 250 xx (4.1) xxxx xx xxxxxx x obsahu100 xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.2) xx xxxxxx 0,1 až 1 x xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) s přesností xx 0,2 mg. Xxxxxxxx xxxx vzorku xx xxxx xxx xxxxx dusíku xxx 10 mg. Xxxxxxx xx xxxxx 25 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (3.20) a smíchá xx se xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx xxx podle 5.3.2.3 xxxx xxxxx 5.3.2.4.
5.3.2.3 xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx směsi x xxxxx (připravené xxxxx 5.3.2.1 xxxx 5.3.2.2) xx přidají 3 skleněné xxxxxxx x směs xx xxxxx xx mírného xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx na dobu 23 xxxxx. Po xxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xx citronanového xxxxxxxxx roztoku (3.24). Xxxxx xx odpojí x xxxxxxx se x ledové lázni. Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx 5.3.3.
5.3.2.4 xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.1 xxxx 5.3.2.2 xx xxxxxx xx xxxxxxx (4.3) xxx 110 °X. Xxx xx xxxxx první xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx tlaku (x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx látek) x xxxxxxx k výbuchu, xxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxx volně xx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxx zašroubuje x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx (4.3) 23 xxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx vyjme xx sušárny, opatrně xx xxxxxxxxxx uzávěr x postaví xx xx xxxxx s xxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx nechá xxxxxxxxxxx.
Xxxxx xxxxxxxxx postupu xxx xxxxxx xX (5.3.3) xx xxxxx baňky xxxxxxxxxxxxx převede pomocí xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx roztoku (3.24) do xxxxxxx x obsahu 250 xx nebo xx xxxxx s xxxxxxx xxxx o xxxxxx 250 xx.
Xxxx se xxxxxxxxx xxxxx 5.3.3
5.3.3 xxxxxx xX
Xxxxx xxxx, xxxxx toleranci x xxxxxx xx analyzátor xxxxxxxxxxxx (4.9), xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xX xxxxx 5.3.3.1 xxxx 5.3.3.2.
5.3.3.1 xxx chromatografické xxxxxxx (4.9), xxxxxxxxxx xxxxxx koncentraci sodíku:
Pokud xxxxxxxxxx aminokyselin vyžaduje xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xx-xx xx snížit xxxxx xxxxxxx), doporučuje xx použít vnitřní xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (3.27.3).
X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx odpařováním xxxxxxx xx hydrolyzátu 2,00 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.27.3).
Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.3 xxxx 5.3.2.4. xx xxxxxxx 2 xxxxx 1-xxxxxxxx (3.15).
Na xxxxxxx xxxxxxx (4.7) se xxxxx xxxxx na 5-10 ml xx xxxxx xxx 40 °X. Xxxxx by xx objem náhodou xxxxxx pod 5 xx, xxxxxxxxxx xx xxxxx odstranit x xxxxx xxxxxxx xxxxx.
xX xx xxxxxx xx 2,20 xxxxxxxx hydroxidu xxxxxxx (3.18) a xxxxxxxxx xx podle xxxx 5.3.4.
5.3.3.2 xxx xxxxxxx ostatní xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.9)
Xxxxxxxxxxx připravené xxxxx 5.3.2.3 xxxx 5.3.2.4 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx 17 ml xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.17), xx xxxxxxx míchání x xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx 40 °X.
xX xx xxxxxx xx 2,20 xxxxxxxx xxxxxxxxx sodného (3.18) xxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.3.4.
5.3.4 xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx (5.3.3.1 xxxx 5.3.3.2) x xxxxxxxxx xX xx kvantitativně xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx roztoku (3.24) xx xxxxxxx baňky x xxxxxx 200 xx x xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24) se xxxxxx xx xxxxxx.
Xxxxx-xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, přidají xx 2,00 ml xxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.27.3) x xxxxx xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx roztokem (3.24). Xxxxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxx xx xxxxxx k xxxxxxxxxxxxxx (5.4)
Nejsou-li xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxx, uschovávají se xxx xxxxxxx pod 5 °X.
5.4 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx mít xxxxxxx (5.2) x xxxxxxxxxx (5.3.4) pokojovou xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx x potřebné xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx 0,2 μ (4.5). Výsledný xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx analyzátoru aminokyselin (4.9).
Xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx nebo automaticky. Xxxxxx xx xxxxxxxx, xxx se na xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx roztoku ± 0,5 % xxx xxx xxxxxxx standardů xxx xxxxxx x xxxxxxxx, kdy xx xxxxxxx vnitřního xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx být x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x x roztocích xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx hlavně xx xxxxxxxxx ninhydrinového xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxx se ředí xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24) xxx, xxx xxxxxx píku xxxxxxxxx xxxxxxx 30 – 200 % xxxxxx xxxx xxx jednotlivé xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx aminokyselin xx xxxxx xxxx v xxxxxxxxxx na typu xxxxxxxxx analyzátoru a xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx i od xxxxxxxxx xxxxxxxxx pozitivních xxxxxxxxx. V xxxxxxx xxxxx působení xx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx systém xxxxxxxx xxxxxxxx na xxxxx objemů xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxx.
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 30 % xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, které xxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx na použitém xxxxxxxxxxx aminokyselin (4.9).
Xxx xxxxxxxx threoninu x xxxxxx xx poměr xxxxx sedla x xxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx aminokyselin xx xxxxxxxxxxxxx neměl xxxxxxxxxx 2:10 (xxxxx se xxxxxxx xxxxx cyst(e)in, xxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx nedostatečnou xxxxxxxx xxxxxxxxxx píků). Xxx xxxxxxx ostatní xxxxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx xxxxx xxx 1:10.
Xxxxxx xxxx xxxxxxx, xx xxxxx bude xxxxxxxxx od "lysinových xxxxxxxx" x ornithinu.
6. Xxxxxxx x vyjádření xxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx pro každou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx v x xx xx xxxxxx.
x xxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxx = X × E × XX × X / B × X × 1 000
Xx-xx použit interní xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxx: D / X
X = xxxxxx xxxx hydrolyzátu xxxx xxxxxxxx
X = xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
X = plocha xxxx xxxxxxxxx standardu x xxxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxx
X = xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx roztoku
MV = xxxxxxxxxxx váha xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
X = koncentrace xxxxxxxxx x μmol/ml
V = xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (x) (xxxxxxxxxx xx původní xxxx xxxxx je xxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx)
X = xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx roztoku (5.3.4) x xx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx 6.1
Xxxxxx a xxxxxxx xx x hydrolyzátech xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx kyselina xxxxxxxx, xxx vypočítávají xx xxxx xxxxxx (C6H12N2O4S2, XX 240,30) s xxxxxxxx XX 120,15 (= 0,5 x 240,30).
Xxxxxxxxx xx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxx XX xxxxxxxxxx: 149,21.
Xxxxxxx xxxxx methionin xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx jako methionin, xxx výpočet se xxxxxxx xxxxxx XX.
6.1 Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (F) xxx xxxxxxxxx volných xxxxxxxxxxxx (5.2) xx xxxxxxxx xxxxx tohoto xxxxxx:
X = 100 xx × (10 ml + 5 ml) / 10 xx × V ml / 10xx
X = objem xxxxxxxxxx extraktu
7. Vyhodnocení xxxxxx
Xxxx xxxxxx byla xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx úrovni x xxxx 1990 xxx xxxxxxx čtyř xxxxxxx xxxxx (xxxxx směs xxx prasata, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, premix). Xx vyloučení xxxxxxx xxxx výsledky středních xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx uvedeny x xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxx x x/xx
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx |
6,94 x = 15 |
3,01 x = 17 |
3.27 x =.17 |
9,55 n = 13 |
|
Krmná xxxx xxx xxxxxxxx |
9,31 x = 16 |
3,92 n = 18 |
5,08 n = 18 |
13,93 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx koncentrát |
22,32 x = 16 |
5,06 x = 17 |
12,01 x = 17 |
47,74 x = 15 |
|
Xxxxxx |
58,42 x = 16 |
- |
90,21 x = 16 |
98,03 x = 16 |
x = xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
7.1 Opakovatelnost
Opakovatelnost xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx je xxxx xxxxxxxxxxx tabulkou:
standardní xxxxxxxx (Xx) xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x x/xx
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx |
0,13 n = 15 |
0,10 n = 17 |
0,11 x = 17 |
0,26 n = 13 |
|
Xxxxx xxxx pro xxxxxxxx |
0,20 n = 16 |
0,11 n = 18 |
0,16 x = 18 |
0,28 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
0,48 n = 16 |
0,13 n = 17 |
0,27 n = 17 |
0,99 n = 15 |
|
Premix |
1.30 n = 16 |
_ |
2,19 n = 16 |
2,06 n = 16 |
x = xxxxx xxxxxxxxxxxx laboratoří
Variační xxxxxxxxxx (%) xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (Sr)
|
Referenční xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx |
1,9 a = 15 |
3,3 x = 17 |
3,4 n =.17 |
2,8 x = 13 |
|
Xxxxx xxxx pro xxxxxxxx |
2,1 x = 16 |
2,8 x = 18 |
3,1 x = 18 |
2,1 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
2,7 x = 16 |
2,6 n = 17 |
2,2 x = 17 |
2,4 n = 15 |
|
Xxxxxx |
2,2 n = 16 |
- |
2,4 x = 16 |
2,1 x = 16 |
x = xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
7.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ze xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (XX) x x/xx
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
xxxxxxxx |
Xxxx(x)xx |
xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx směs xxx xxxxxxx |
0,28 n = 15 |
0,30 x = 17 |
0,23 x = 17 |
0,30 n = 13 |
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx |
0,48 x = 16 |
0,34 x = 18 |
0,55 n = 18 |
0,75 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
0,85 x = 16 |
0,62 x = 17 |
1,57 n = 17 |
1,24 x = 15 |
|
Xxxxxx |
2,49 x = 16 |
- |
6,20 x = 16 |
6,62 x = 16 |
x = xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx (%) xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (SR)
|
Referenční xxxxxxx |
xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
xxxxxxxx |
Xxxx(x)xx |
xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx |
4,1 x = 15 |
9,9 x = 17 |
7,0 n = 17 |
3,2 x = 13 |
|
Xxxxx xxxx pro xxxxxxxx |
5,2 x = 16 |
8,8 x = 18 |
10,9 x = 18 |
5,4 n = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
3,8 n = 16 |
12,3 x = 17 |
13,0 x = 17 |
3,0 x = 15 |
|
Xxxxxx |
4,3 x = 16 |
- |
6,9 n = 16 |
6,7 x = 16 |
n = xxxxx xxxxxxxxxxxx laboratoří
8. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx uvedené metody xx ověřuje opakovaným xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
9. Xxxxxxxx
9.1 Xxxxxxxx k xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx se xxxx xxxxxxx koncentrace xxxxxxxxxxxx xxxxxxx standardů xxxxxxxxxxxx (xxx 3.27.4 x 3.27.5) a roztoků xxxxxx (5.3.4) xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx roztok se xxxx citronanovým xxxxxxxx xxxxxxxx xxx, xxx xx dosáhlo xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
9.2 Xxxxx xx x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx zařízení pro xxxxxx xxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx, xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x souladu x xxxxxxxxxxx výrobce.
9.3 Xxx xxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxx obsahujících xxxx xxx 1 % xxxxxxxx (koncentráty, xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx) xxxx dojít x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xx xxxxx použít xxxxxxxxx xxxxxx.
XXXX B XXXXXXXXX XXXX
1. Xxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxx xx stanoví xxxxx xxxx x xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx analýzu xxxxxxxxxx semen x xxxxxx, xxxxxxx zkoušení xx řídí xxxxx xxxxxxxx Rady 136/66/XXX xx xxx 22. xxxx 1996.
Xxxxx xxxxx x xxxxxxx krmiva xx xxx analýzu xxxxxxx jeden xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx:
1.1 Xxxxxx X – xxxxx xxxxxxxxxxxxxx tuky
Tato xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx krmiva xxxxxxxxxxx xxxxxx, s výjimkou xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx do okruhu xxxxxxx X.
1.2 Xxxxxx X – xxxxxxx xxx
Xxxx metoda xx xxxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx. Používá se xxx všechny materiály, x xxxxx není xxxxx xxx úplně xxxxxxxxxx bez předchozí xxxxxxxxx (xxxx. lepky, xxxxxxxx, bramborové xxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx, vločkování x zahřívání).
1.3 Interpretace xxxxxxxx
Xx xxxxx xxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxx výsledku postupem X, xxx xxxxxxxx X, xx xxxxx xxxxxxxxx za platnou xxxxxxx podle xxxxxxx X.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxxxx X
Xxxxxx se extrahuje xxxxxxxxxxxxx. Rozpouštědlo se xxxxxxxxxxx a zbytek xx xxxxxx x xxxxx.
2.2 Xxxxxx X
Xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx chlorovdíkovou. Xxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxx zpracuje xxxxx xxxxxxx X.
3. Xxxxxxx
3.1 xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx 40 x 50 °C. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx menší xxx 1 x xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxx 2 xx/100 xx
3.2 xxxxx xxxxx, bezvodý
3.3 xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, c = 3 xxx HCl/l
3.4 xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, např. xxxxxxxxx, Hyflo-supercel.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
4.1 Extrakční xxxxxxxx, se xxxxxxx (Xxxxxxxxx přístroj), xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx asi 10 xxxxx za xxxxxx. X xxxx xxx xxxxxx by měla xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 10 xx xx minutu.
4.2 Extrakční xxxxxxx, xxx látek xxxxxxxxxxx x petroletheru, x porositou v xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx bodu 4.1.
4.3 Xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xx 75 °X ± 3 °X, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 100 °X ± 3 °X.
5. Postup
5.1 Xxxxxx X (viz xxx 8.1)
Xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx 5 x vzorku x xxxxxxxxx na 1 xx (4.2) x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx tuku.
Patrona se xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1) x xxxxxxxxxx šest xxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.1). Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xx suché, xxxxxx xxxxxxx xxxxx, která xxxxxxxx úlomky xxxxx [1].
Xxxxxxxxxxxx xx oddestiluje, xxxxxx x baňce xx xxxx 1,5 xxxxxx v sušárně (4.3). Xxxxx se xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxx. Suší xx xxxxxxx 30 xxxxx, aby xx xxxxxxxx, zda xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx váženími xxxx být xxxxx xxx 1 mg).
5.2 Xxxxxx X
Xx xxxxxxx x xxxxxx 400 xx xxxx xx xxxxxxx baňky o xxxxxx 300 xx xx odváží 2,5 x xxxxxx x xxxxxxxxx na 1 xx (viz xxx (8,2) a xxxxx xx 100 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.3) x xxxxxx pemzy. Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx přivede xx xxxxxxx xxxx xx malém xxxxxxx xxxx xx topné xxxxx x xxxx xx xx xxxx xxxxx hodiny. Xxxxx xxxx se xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx částeček xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxx xx xxxxxxx x xxxxx se xxxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.4), aby xxx filtraci nedošlo xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xx přes xxxxxxxxx xxxxxx filtrační xxxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xx xx získá xxxxxxxxx xxxxxxx. Provede xx xxxxxxxx, xxx filtrát xxxxxxxxxx xxxxx tuk. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxx xxxx hydrolýzou xxxxxxxxxx petroletherem xxxxx xxxxxxx A.
Dvojitý xxxxxxxxx xxxxx xx zbytkem xx položí na xxxxxxxx xxxx x xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x horkovzdušné xxxxxxx (4.3) xxx xxxxxxx 100 °X ± 3 °C.
Dvojitý xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.2) x xxxxxxxx smotkem vaty xxx xxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx přístroje (4.1) x dále se xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxx 5.1.
6. Vyjádření xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx.
7. Opakovatelnost
Rozdíl xx výsledcích xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx prováděných xx xxxxxxx vzorku xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxx přesáhnout:
- 0,2 % v xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxx xxxxxx než 5 %,
- 4,0 % xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx výsledku při xxxxxx xx 5 xx 10 %,
- 0,4 % x xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxx 10 %.
8. Poznámky
8.1 X xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxx, xxxxx xx xxxxxxx drtí xxxx xxxxx xxxxxxxxxx odebrat xxxxxxxxxx homogenní vzorek, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxxx se 20 x vzorku s xxxxxxxxx na 1 xx x smíchá xx x 10 xxxx x xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (3.2). Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx (3.1) xxxxx xxxx 5.1. Xxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxx xx 500 xx xxxxxxxxxxxxx (3.1) x xxxxxxxx se. 50 xx roztoku xx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx, předem xxxxxxx xxxxx, obsahující xxxxxx pemzy [2].
Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xx vysuší x xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx 5.1.
Xxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx:
(10 x + b) × 5
xxx:
x = xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx (xxxxxxx xxxx xxxxxxxx)
x = xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx
8.2 X xxxxxxx, které xxxx xxxxx xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx zvýšit xx 5 x.
8.3 Xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx obsah xxxx, xx xxxx xxxx xxxxxxxxxx x extrakcí xxxxx postupu X xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
8.4 X xxxx 5.2 xx xxxx na xxxxxxxxxx xxxxxx xx filtraci xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx vody xxxxxxx.
8.5 X xxxxxxxxx xxxxx se xxxx xxxxxxxxxx xxxx sušení xxx 1,5 xxx. Xx xxxx xxxxx xxxxxxx přílišnému xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxx x xxxxxx výsledkům. Xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx troubu.
8.6 Xxx xxxxxx xxxx xxx 15 % xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx X x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx X. Xxxxxx xx do xxxxx xxxx na xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx x xxxxxx.
XXXX X
XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX
(2-[X-2-(xxxxxxxxxxxx)xxxxxxxxx]-3-xxxxxxxxxxxxxxxx-X1,X4-xxxxxx)
1. Xxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx obsah xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx. Dolní xxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 5 xx/xx.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx extrahuje xxxxx xxxx x methanolu. Xxxxx olachindoxu xx xxxxxxxx vysoce xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xx reverzní fázi xx xxxxxxx XX xxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
3.1 methanol
3.2 xxxxxxxx, xxx HPCL
3.3 xxxx, xxx HPLC
3.4 xxxxxxx fáze pro XXXX:
Xxxx xxxx (3.3) x methanolu (3.2), 900 + 100 (X + X)
3.5 xxxxxxxxxx látka: xxxxx xxxxxxxxxx 2-[X-2-(xxxxxxxxxxxx)xxxxxxxxx]-3-xxxxxxxxxxxxxxxx-X1,X4-xxxxxx, X 851
3.5.1 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx roztok xxxxxxxxxxx, 250 μx/xx
Xx odměrné xxxxx x obsahu 200 xx xx xxxxxx 50 xx xxxxxxxxxxx (3.5) x xxxxxxxxx na 0,1 xx x xxxxx xxx 190 xx xxxx. Xxxxx xx xxxxxxx na 20 xxxxx do ultrazvukové xxxxx (4.1). Xx xxxxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxx xx roztok xxxxxxx xx laboratorní xxxxxxx, xxxxxx vodou xx značku x xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx fólií x uschovává v xxxxxxxxxx. Xxxxx roztok xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
3.5.2 xxxxxxxx xxxxxxxxxx roztok xxxxxxxxxxx, 25 μx/xx
10,0 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.1) xx přenese xx xxxxxxx baňky x xxxxxx 100 xx, xxxxxx se xx xxxxxx mobilní fází (3.4) x promíchá. Xxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx se xxxx připravovat denně xxxxxxx.
3.5.3 xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxx xxxxxxxxx baněk x xxxxxx 50 xx xx xxxxxxxxxx 1,0, 2,0, 5,0, 10,0, 15,0 x 20,0 ml xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (3.5.2). Xxxxxx xx xxxxxxx xxxx (3.4) po xxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxx se obalí xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxx odpovídají 0,5, 1,0, 2,5, 5,0, 7,5 x 10,0 μx xxxxxxxxxxx na xx.
Xxxx roztoky se xxxx připravovat xxxxx xxxxxxx.
4. Přístroje x xxxxxxx
4.1 xxxxxxxxxxxx xxxxx
4.2 xxxxxxxxxx třepačka
4.3 xxxxxxxx XXXX s proměnnou xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx
4.3.1 xxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, 250 xx x 4 xx, xxxxxxx X18, 10 μx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
4.4 xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx 0,45 μx
5. Postup
Poznámka:
Olachindox xx xxxxxxx xx světlo. Xxxxxxx xxxxxxx se xxxx xxxxxxxx při xxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx.
5.1 Xxxxxx
5.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx předem xxxxxxxxxx xxx kontrolu, zda xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx nebo xxxx interferující xxxxx.
5.1.2 Xxxxxxx na xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx obohaceného xxxxxxxx takového xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, které xxxxxxxx xxxx obsahu ve xxxxxx X xxxxxxxxxxx xx úroveň 50 xx/xx xx odpipetuje 10,0 ml xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.1) do xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 250 xx x xxxxxx se xxxxxx xx xxx 0,5 xx. Přidá xx 50 x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx xx 10 xxxxx xxxxxx, přičemž xx xxxxx několikrát xxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx (5.2).
Poznámka:
Pro xxxxx xxxx xxxxxx xx být modelové xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxx
Xxxxxx se xxxxxxxxx 50 g xxxxxx s xxxxxxxxx xx 0,01 x. Xxxxxxx xx do xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 1000 ml, xxxxx xx 100 xx methanolu (3.1) x xxxxx xx xxxxxx xx pět xxxxx xx ultrazvukové xxxxx (4.1). Xxxxx xx 410 xx xxxx x ponechá xx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 15 xxxxx. Xxxxx se xxxxx x ultrazvukové xxxxx, dále xx xxxxx 30 xxxxx xx xxxxxxxx (4.2) x potom xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx filtrem. 10,0 xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx o xxxxxx 20 xx, xxxxxx xx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxx část xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) (xxx xxx 9. Poznámky). Xxxx xx pokračuje xxxxxxxxxx HPLC (5.3).
5.3 Xxxxxxxxx HPLC
5.3.1 Xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxx xxxx podmínky, xx xxxxxxxxxxx, xx dávají xxxxxxxxxx výsledky.
analytická kolona (4.3.1)
xxxxxxx xxxx (3,4): Xxxx xxxx (3.3) x xxxxxxxxx (3.2), 900 + 100 (X + V)
průtoková xxxxxxxx: 1,5–2 xx/xxx
xxxxxxxx xxxxxx xxxxx: 380 xx
xxxxx nástřiku: 20 μx–100 μx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxx, xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx kalibrační xxxxxx (3.5.3) xxxxxxxxxx 2,5 μg/ml, xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx časů.
5.3.2 Xxxxxxxxxx xxxx
Xxx xxxxx kalibrační xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxx) xxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xx použití xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxx) xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxx x příslušných koncentrací x μx/xx xxxx xxxxxxxxx.
5.3.3 Xxxxxx vzorku
Provede xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx vzorku (5.2) xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx u xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xx střední xxxxx (xxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx.
6. Výpočet xxxxxxxx
Xx xxxxxxx hodnoty xxxxx (xxxxxx) píků xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx zjistí xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x μg/ml porovnáním x kalibračním xxxxxx (5.3.2).
Xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx w v xx/xx xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
x = x × 1&xxxx;000 / x
xxx:
x = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx vzorku (5.2) x μg/ml
m = xxxxxxxx navážky xxxxxx x g (5.2)
7. Xxxxxxxxxxx výsledků
7.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (co-chromatography) xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (5.2) x kalibračního xxxxxxx (3.5.3), obsahujícího 5,0 μg/ml olachindoxu.
7.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xx-xxxxxxxxxxxxxx)
Xxxxxxx vzorku (5.2) se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku (3.5.3). Xxxxxxxx xxxxxxxxx olachindoxu xx mělo xxxxxxxxx xxxxxxxx olachindoxu xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
X xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx mělo xxxxx xxx ke xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Šířka xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx být x rozmezí ±10 % xxxxxxx šířky xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx extraktu xxxxxx.
7.1.2 Xxxxxxxx diodového xxxx
Xxxxxxxx xx vyhodnocují podle xxxxxxxxxxxxx kritérií:
a) xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vzorku x xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xx chromatogramu xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx detekčního xxxxxxx. Pro xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx udává ±2 xx;
x) xxx xxxxxx xxxxx xxxx 220 x 400 xx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx zkoušeného xxxxxx x standardu zaznamenaný xx xxxxxxx píku xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 10 xx 100 % xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx dosaženo, xxxxxxxx jsou vykázána xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx spektry xxxxxxxxxxx 15 % xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx;
x) xxx xxxxxx xxxxx xxxx 220 a 350 nm xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx x xxxxxxx xxxx zkoušeného vzorku xxxxx od xxxxxxxxx x xxxx částí xxxxxxx v xxxxxxx 10 xx 100 % xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx kritéria xx xxxxxxxx, jestliže xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx ve xxxxx sledovaných bodech xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx 15 % xxxxxxxxxx spektra xx xxxxxxx xxxx.
Xxxx-xx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx souběžných xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx 10 x 20 mg/kg, xxxxx xxxxxxxxxx15 % xxxxxxx výsledku.
7.3 Xxxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxx modelový xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 90 %.
8. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
X xxxxx XX xxx xxxxxxxx kruhový test, xxx němž xx 13 laboratoří xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
|
| xxxxxx 1 |
xxxxxx 2 |
xxxxxx 3 |
xxxxxx 4 |
|
|
X |
13 |
10 |
11 |
11 |
|
X |
40 |
40 |
44 |
44 |
|
xxxxxxx (xx/xx) |
- |
14,6 |
48,0 |
95,4 |
|
(Xx) (xx/xx) |
- |
0,82 |
2,05 |
6,36 |
|
(XX) (mg/kg) |
- |
1,62 |
4,28 |
8,42 |
|
CVr (%) |
- |
5,6 |
4,3 |
6,7 |
|
XXX (%) |
- |
11,1 |
8,9 |
8,8 |
|
xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx) |
- |
15 |
50 |
100 |
|
xxxxxxxxx (%) |
- |
97,3 |
96,0 |
95,4 |
X: počet laboratoří
n: xxxxx jednotlivých xxxxxx
Xx: xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
XX: xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
XXx: xxxxxxxx koeficient opakovatelnosti
CVR: xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
9. Xxxxxxxx
Xxxxxxx tato xxxxxx xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx obsahující xxxx xxx 100 xx/xx xxxxxxxxxxx, je možné xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx navážkou vzorku x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.2) tak, xxx xx dosáhlo xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.3.2).
[1] Xxxxx xx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx, zamění xx xxxxxx pemzy xx xxxxxxxx xxxxxxx.
[2] Xxxxx xx xx tuk xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx.