Xxxxxxxx Xxxxxx 98/64/XX
xx xxx 3. xxxx 1998,
xxxxxx se stanoví xxxxxxxxxx metody Xxxxxxxxxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxxxx, xxxx a xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx a xxxxxx xx xxxx xxxxxxxx 71/393/EHS
(Text x xxxxxxxx pro XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX SPOLEČENSTVÍ,
s xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx na směrnici Xxxx 70/373/XXX za xxx 20. xxxxxxxx 1970 o xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx x analytických metod Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx Aktem x xxxxxxxxxxx Rakouska, Xxxxxx a Švédska, x zejména xx xxxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx 70/373/EHS xxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx kontroly, xxx xxxxxx xxxxxxx požadavky xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx se jejich xxxxxxx x složení, xx provádí za xxxxxxx xxxxx odběru xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx ve Xxxxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxx Xxxx 79/373/XXX xx xxx 2. xxxxx 1979 x xxxxxxx xxxxxxx směsí xx xxx [2], xxxxxxxxx xxxxxxxxx směrnicí Xxxxxx 97/47/ES [3], x xxxxxxxx Rady 93/74/XXX xx dne 13. xxxx 1993 x xxxxxxxx určených xx zvláštním xxxxxx xxxxxx [4], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx 96/25/XX [5], stanoví, xx xxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxx musí být xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx směrnice Xxxx 70/524/XXX xx xxx 23. xxxxxxxxx 1970 x xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx [6], xxxxxxxxx pozměněná xxxxxxxx Xxxxxx 98/19/ES [7], xxxxxxx, xx obsah xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xx označení, xxxxx xx xxxx xxxxx přidána xx xxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 71/393/EHS xx xxx 18. xxxxxxxxx 1971, xxxxxx xx xxxxxxx analytické xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx kontrolu krmiv [8], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 84/4/XXX [9], stanoví xxxxxx xxxxxxx xxxx jiné x pro xxxxxxxxxx xxxxxx tuku; xx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx musí xxx xxxxxxxxx analytické xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxx xxxx směrnice xxxx v xxxxxxx xx stanoviskem Xxxxxxx xxxxxx xxx krmiva,
PŘIJALA XXXX XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxx xxx xxxxxx kontrolu xxxxxx aminokyselin, tuku x xxxxxx olachindoxu x krmivech xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx uvedených x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 2
X xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 71/393/EHS xx bod "4. Xxxxxxxxx xxxxxx tuku" xxxxxxxxx částí X xxxxxxx xxxx směrnice.
Xxxxxx 3
1. Členské xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx právní x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx souladu x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 31. xxxxxxxx 1998. Xxxxxxx x nich xxxxxxxxxx Xxxxxx.
Xxxxx xxxx předpisy xxxxxxxx od 1. xxxxx 1999.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx tuto xxxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxxxx odkaz xxxxxx xxx jejich úředním xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxx státy xxxxx Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx ustanovení xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx předpisů, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 4
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x platnost xxxxxxxx xxxx po xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxx Evropských xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 5
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X Xxxxxxx xxx 3. xxxx 1998.
Xx Xxxxxx
Xxxxx Xxxxxxxx
xxxx Xxxxxx
[1] Úř. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Xx. věst. X 86, 6.4.1979, x. 30.
[3] Xx. xxxx. X 211, 5.8.1977, x. 45.
[4] Xx. xxxx. X 237, 22.9.1993, x. 23.
[5] Xx. věst. X 125, 23.5.1996, x. 35.
[6] Xx. xxxx. X 270, 14.12.1970, x. 1.
[7] Úř. xxxx. X 96, 28.3.1998, x. 39.
[8] Xx. věst. X 279, 2.12.1971, x. 7.
[9] Xx. věst. X 15, 18.1.1984, x. 28.
XXXXXXX
XXXX X
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
1. Xxxx x oblast xxxxxxx
Xxxx xxxxxx slouží xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx) a xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxx x xxxxx) xxxxxxxxxxxx v xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx aminokyselin. Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxx aminokyseliny: cyst(e)in, xxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxx, xxxxxxx a xxxxx.
Xxxx xxxxxx nerozlišuje xxxx solemi aminokyselin x nemůže také x xxxxxxxxxxxx rozlišovat xxxx xxxxxxx X x X. Není xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
2. Princip
2.1 Xxxxx xxxxxxxxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxxx xx extrahují xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Zfiltrovaný xxxxxx xx upraví xx pH 2,20. Xxxxxxxxxxxxx xx separují xxxxxxxxxxxxxx chromatografií x xxxxxxx se xx xxxxxx s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx při 570 xx.
2.2 Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxx(x)xx x methionin xxxx xxx před xxxxxxxxxx oxidovány xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx x hydrolyzátech neoxidovaných xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxx 1 xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxx x xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxx při 0 xX xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx a fenolu. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx rozloží dvojsíranem xxxxxx. Xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx vzorek se xxxxxxxxxxx kyselinou xxxxxxxxxxxxxxx (x = 6 xxx/x) xx 23 xxxxx. Hydrolyzát xx xxxxxx xx xX 2,20. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx fotometrickou xxxxxxx xxx 570 xx (440 xx xxx xxxxxx).
3. Xxxxxxx
Xxxx xxx xxxxxxx dvakrát xxxxxxxxxxx xxxx xxxx voda xxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx &xx; 10 μS).
3.1 xxxxxxx xxxxxx, w = 30 %
3.2 xxxxxxxx mravenčí, w = 98–100 %
3.3 xxxxx
3.4 xxxxxxxxx sodný
3.5 xxxxxxxx xxxxx
3.6 xxxxxxxx 5-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx
3.7 xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx 1,18 g/ml
3.8 xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx
3.9 2,2-xxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx)
3.10 chlorid xxxxx
3.11 ninhydrin
3.12 xxxxxxxxxxx, xxx varu 40–60 °X
3.13 xxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx vnitřní xxxxxxxx
3.14 xxxxx – xxxx (&xx; 10 xxx xxxxxxx)
3.15 1-oktanol
3.16 xxxxxxxxxxxxx
3.16.1 xxxxxxxxxx látky xxxxxxx x xxxx 1; xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vodu. Xxxxxx xx xx xxxxx xxx X2X5 xxxx X2XX4 týden xxxx xxxxxxxx
3.16.2 xxxxxxxx xxxxxxxx
3.16.3 xxxxxxxxxxxxxxx
3.17 xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx c = 7,5 mol/l:
300 g XxXX (3.5) xx xxxxxxxx xx vodě x doplní do 1 xxxxx.
3.18 xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx c = 1 xxx/x:
40 x XxXX (3.5) xx xxxxxxxx xx xxxx a xxxxxx xx 1 xxxxx.
3.19 xxxxxx kyseliny xxxxxxxx x xxxxxx:
Xxxxxx se 889 x kyseliny xxxxxxxx (3.2) xx 111 g xxxx x přidá se 4,73 g xxxxxx (3.3).
3.20 xxxxxxxxxxxx xxxx, x = 6 xxx HCl/l s xxxxxxxxx 1 x xxxxxx/x:
X 492 xx XXx (3.7) xx xxxxx 1 g xxxxxx (3.3) a xxxxxx xx xxxxx xx 1 xxxxx.
3.21 xxxxxxxxx xxxx, x = 6 xxx XXx/x s přídavkem 2% thiodiglykolu:
8,2 ml XXx (3.7) se xxxxxxx přibližně 900 xx xxxx, přidá xx 20 xx xxxxxxxxxxxxx (3.9) a xxxxxx vodou na 1 xxxx (3.7 x 3.9 se xxxxx smíchat xxxxx).
3.22 xxxxxxxx 5-xxxxxxxxxxxxxxx, β = 6 %:
60 x kyseliny 5-xxxxxxxxxxxxxxx (3.6) xx rozpustí xx vodě x xxxxxx vodou xx 1 xxxx.
3.23 xxxxxxxx xxxx (xxxxxxxx xxxxxxxxxxx – xxxxx):
X xxxx xxxxxxx se smíchá 0,5 xx xxxxxxxx xxxxxx (3.1) s 4,5 xx xxxxxxx xxxxxxxx mravenčí x xxxxxxx (3.19); ponechá xx x klidu 1 hodinu xxx 20–30 °X, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, před xxxxxxxx xx vzorku se xxxx xxxxxxx v xxxxx x xxxxxxx xxxxx (15 xxxxx).
Xxxxx:
Xx xxxxx zamezit xxxxxxxx x xxxx a xxxxxxxx ochranný xxxx.
3.24 xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, x = 0,2 xxx Na+/l, xX 2,20:
X xxxxxxxxx 800 xx vody xx xxxxxxxx 19,61 g xxxxxxxxx xxxxxxx (3,8), 5 xx xxxxxxxxxxxxx (3.9), 1 x xxxxxx (3.3) x 16,50 ml HCl (3.7). xX xx xxxxxx xx 2,20. Xxxxxx xx xxxxx xx objem 1 xxxxx.
3.25 eluční xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx použitý xxxxxxxxxx (4.9)
3.26 xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (4.9)
3.27 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Tyto xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxx 5 °X.
3.27.1 xxxxxxx xxxxxxxxxx základní xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.16.1), x = 2,5 μxxx/xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx roztok xxx obdržet x xxxxxxxx připravené.
3.27.2 zásobní xxxxxxxxxx základní xxxxxx xxxxxxxx cysteové x xxxxxxxxxxxxxxxx, x = 1,25 μxxx/xx
0,2115 x xxxxxxxx cysteové (3.16.2) x 0,2265 g xxxxxxxxxxxxxxxx se rozpustí (3.16.3) v citronanovém xxxxxxxx xxxxxxx (3.24) x litrové xxxxxxx xxxxx a xxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx roztokem. Xxxxxxxx se xxx xxxxxxx pod 5 °X xxxxxxx 12 xxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx základní roztok (3.27.1) xxxxxxxx kyselinu xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx.
3.27.3 xxxxxxx standardní xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx. norleucinu, x = 20 μmol/ml
0,6560 x norleucinu (3.13) xx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (3.24) x xxxxxxx xxxxx na 250 xx x doplní xx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx tlumivým xxxxxxxx. Xxxxxxxx se xxx xxxxxxx pod 5 °X xxxxxxx 6 xxxxxx.
3.27.4 xxxxxxxxxx roztok xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxx s xxxxxxxxxxx, x = 5 xxxx/50 μl xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx x x = 10 xxxx/50 μl x ostatních aminokyselin
Ve 100 xx xxxxxxx xx xxxxxxxx 2,2 x xxxxxxxx sodného (3.10) x 30 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24). Xxxxxxx xx 4,00 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx aminokyselin (3.27.1), 4,00 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx (3.27.2) x 0,50 ml xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.27.3), xxxxx se xxxxxxx. xX se xxxxxx xx 2,20 xxxxxxxxxx xxxxxx (3.18).
Xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx převede do 50 xx xxxxxxx xxxxx, xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx tlumivým xxxxxxxx (3.24) x xxxxxxx xx.
Xxxxxxxx xx xxx teplotě xxx 5 °X xxxxxxx 3 měsíce.
Viz také xxxxxxxx 9.1.
3.27.5 xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx aminokyselin xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.3.3.1 a xxx xxxxxxxx (5.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx 3.27.4 x vynecháním chloridu xxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxx 5 °C xxxxxxx 3 xxxxxx.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx
4.1 xxxxx x kulatým xxxx x xxxxxx 100 nebo 250 xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx
4.2 xxxxxx z xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx o xxxxxx 100 xx xx xxxxxxxxx uzávěrem x xxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. Xxxxx, Xxxxxx) xxx xxxxxxx x xxxxxxx
4.3 xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx x tepelnou xxxxxxxx x přesností xxxxx xxx ±2 °X
4.4 pH xxxx (xxx xxxxxxxxx místa)
4.5 xxxxxxxxxx xxxxx (0,2 μx)
4.6 xxxxxxxxxxx
4.7 xxxxxxx xxxxxxx odparka
4.8 mechanická xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx
4.9 xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx zařízení HPLC x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxx kolonovou xxxxxxxxxxxx x fotometrickým xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xx naplní xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx pryskyřicí, která xxxxxxxx xxxxxxxx oddělení xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xx jiných ninhydrin xxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx ± 0,5 % xx dobu xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx i xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx analyzátory xxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx v xxxxxxx, xx hydrolyzát xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx iontů x = 0,8 xxx/x x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx kyselinu x oxidačního xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx určitých xxxxxxxxxxxx, obsahuje-li xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx mravenčí xxxxxxxx x/xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx iontů. X xxxxxxx xxxxxxx se xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xX xxxxxxxxx hydrolyzátu xx xxxxx 5 xx. Xxxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx 40 °C.
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxx, xxx prošel sítem x xxx 0,5 xx. Xxxxxx x xxxxxxx vlhkostí xx xxxx xxxx mletím xxxxxxx xx xxxxxxx xxx xxxxxxx nepřesahující 50 °C nebo xxx zmrazení. Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.12).
5.2 Stanovení xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x x premixech
Do xxxxxxx xxxxx xx xxxxxx příslušné xxxxxxxx (1–5 x) xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxx xx 0,2 xx x xxxxx xx 100,0 xx xxxxxxxxx xxxxx (3.21). Xxxxx se třepe 60 xxxxx na xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.8). Xx xxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxxxx 10,0 xx xxxxxxxxxxxx do xxxxxxx x xxxxxx 100 xx.
Xx xxxxxxx xxxxxxx xx přidá 50 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx x míchání xx magnetické xxxxxxxx xxxxxxx 5 minut. Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx, xxx xx odstranila xxxxxxx xxxxxxxxx. 10,0 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx o xxxxxx 100 xx, pH xx xxxxxx na 2,20 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.18), xxxxx se xxxxxx xxxxxxx pomocí citronanového xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24) xx odměrné xxxxx xxxxxxxxx velikosti x xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24).
Xxxxxxx-xx xx interní standard, xxxxx xx 1,00 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.27.3) na xxxxxxx 100 xx odstředěného xxxxxxx x potom xx doplní po xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24).
Xxxx xx pokračuje xxxxx bodu 5.4 – xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxx, xxxxxxxxxxx se při xxxxxxx xxx 5 °X.
5.3 Xxxxxxxxx celkových xxxxxxxxxxxx
5.3.1 xxxxxxx
0,1 xx 1 x upraveného xxxxxx (5.1) xx xxxxxx x xxxxxxxxx 0,2 xx:
- xx xxxxx x xxxxxxx xxxx o obsahu 100 xx (4.1) xxx otevřenou xxxxxxxxx (5.3.2.3) xxxx
- xx xxxxx x xxxxxxx xxxx o obsahu 250 ml (4.1), xxxxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx
- xx xxxxxx o xxxxxx 100 ml xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.2) (xxx uzavřenou xxxxxxxxx 5.3.2.4).
Xxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxx 10 xx x obsah xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 100 xx.
Xxxxx/xxxxxx xx xxxxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxxx x ochladí xx xx 0 °X, xxxxx xx xxxxx 5 ml xxxxxxxx xxxxx (3.23) x xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx/xxxxxx xx xxxxxx x xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx x vloží xx x x xxxxx x xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx 0 °C x xxxxxxx se xxx 16 xxxxx. Xx 16 xxxxxxxx xx xxxxx z xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx činidlo se xxxxxxx přidáním 0,84 x dvojsíranu xxxxxxx (3.4).
Xxxx xx pokračuje xxxxx 5.3.2.1.
5.3.2 xxxxxxxxx
5.3.2.1 xxxxxxxxx oxidovaných xxxxxx
X xxxxxxxxxxx vzorku xxxxxxxxxxxx xxxxx 5.3.1 xx xxxxx 25 ml xxxxxxxxxxxx xxxxx (3.20) xxx, xxx xxxxxxx xxxxx vzorek xx xxxxxxx nádoby ani xx lžíci. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx hydrolýzy xx xxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.3 nebo 5.3.2.4.
5.3.2.2 xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxx x xxxxxxx xxxx o xxxxxx 100 xx xxxx 250 xx (4.1) xxxx do xxxxxx x xxxxxx100 ml xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.2) xx xxxxxx 0,1 xx 1 x xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) s xxxxxxxxx xx 0,2 xx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxx xx měla mít xxxxx xxxxxx xxx 10 xx. Opatrně xx xxxxx 25 xx hydrolyzační xxxxx (3.20) x xxxxxx xx se xxxxxxx. Xxxx se postupuje xxx xxxxx 5.3.2.3 xxxx podle 5.3.2.4.
5.3.2.3 xxxxxxxx hydrolýza
Ke směsi x baňce (xxxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.1 xxxx 5.3.2.2) xx xxxxxxx 3 xxxxxxxx xxxxxxx x směs xx xxxxx do xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx dobu 23 hodin. Xx xxxxxxxx hydrolýzy xx xxxxxx chladič xxxxxxx 5 xx citronanového xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24). Xxxxx se odpojí x xxxxxxx se x xxxxxx xxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx 5.3.3.
5.3.2.4 uzavřená xxxxxxxxx
Xxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.1 xxxx 5.3.2.2 xx xxxxxx xx sušárny (4.3) při 110 °X. Xxx xx xxxxx první xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx látek) x xxxxxxx x xxxxxxx, xxxxxx xx šroubovací xxxxxx volně na xxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxx. Xx uplynutí xxxxx hodiny xx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx (4.3) 23 xxxxx. Xx skončení xxxxxxxxx xx xxxxx vyjme xx xxxxxxx, opatrně xx odšroubuje uzávěr x postaví xx xx xxxxx s xxxxxxx vodou. Xxxxx xx xxxxx vychladnout.
Podle xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xX (5.3.3) xx xxxxx baňky xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24) xx xxxxxxx x xxxxxx 250 xx xxxx xx xxxxx x xxxxxxx xxxx x xxxxxx 250 xx.
Xxxx se xxxxxxxxx xxxxx 5.3.3
5.3.3 xxxxxx xX
Xxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx má xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.9), xxxxxxxxxx xxx úpravě xX xxxxx 5.3.3.1 xxxx 5.3.3.2.
5.3.3.1 pro chromatografické xxxxxxx (4.9), xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx:
Xxxxx xxxxxxxxxx aminokyselin vyžaduje xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xx-xx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx), xxxxxxxxxx xx použít xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (3.27.3).
X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx odpařováním xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx 2,00 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.27.3).
Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.3 xxxx 5.3.2.4. xx xxxxxxx 2 xxxxx 1-xxxxxxxx (3.15).
Xx xxxxxxx xxxxxxx (4.7) se xxxxx objem xx 5-10 xx za xxxxx xxx 40 °X. Xxxxx xx xx xxxxx náhodou xxxxxx xxx 5 xx, xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxx.
xX xx xxxxxx xx 2,20 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.18) a xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx 5.3.4.
5.3.3.2 pro xxxxxxx ostatní xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.9)
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.3 nebo 5.3.2.4 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx opatrným xxxxxxxx 17 xx roztoku xxxxxxxxx xxxxxxx (3.17), xx xxxxxxx xxxxxxx x xxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx 40 °X.
xX se upraví xx 2,20 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.18) xxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx bodu 5.3.4.
5.3.4 xxxxxx vzorků xxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx (5.3.3.1 xxxx 5.3.3.2) x xxxxxxxxx xX xx kvantitativně xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx roztoku (3.24) xx odměrné xxxxx x xxxxxx 200 xx x xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24) xx xxxxxx xx xxxxxx.
Xxxxx-xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, přidají se 2,00 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.27.3) x xxxxx xx xxxxxx xx xxxxxx citronanovým xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24). Xxxxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxx xx přejde x xxxxxxxxxxxxxx (5.4)
Nejsou-li xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx týž xxx, xxxxxxxxxxx se xxx xxxxxxx pod 5 °X.
5.4 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx (5.2) a xxxxxxxxxx (5.3.4) xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx se xxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx 0,2 μ (4.5). Xxxxxxxx xxxx roztok xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx analyzátoru aminokyselin (4.9).
Xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxxxx nastřikovalo xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx ± 0,5 % jak xxx analýze xxxxxxxxx xxx xxxxxx s xxxxxxxx, xxx je xxxxxxx vnitřního xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx závisí xxxxxx xx xxxxxxxxx ninhydrinového xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Standard nebo xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24) tak, xxx xxxxxx xxxx standardu xxxxxxx 30 – 200 % xxxxxx xxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx aminokyselin xx xxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx ionexu. Xxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx separovat jednotlivé xxxxxxxxxxxxx od xxxx xxxxxxxx x xx xxxxxxxxx ninhydrin pozitivních xxxxxxxxx. X rozsahu xxxxx působení by xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx reagovat na xxxxx objemů xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx sloupec.
Při xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx aminokyselin, xx xxxx xxx dosaženy xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x vrcholu xxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx musí obsahovat xxxxxxx 30 % xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx použitém xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.9).
Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx a xxxxxx xx xxxxx xxxxx sedla x xxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxx překrývajících xx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 2:10 (xxxxx xx xxxxxxx pouze xxxx(x)xx, xxxxxxxxx, threonin a xxxxx, je xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx). Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxx xxx 1:10.
Xxxxxx musí zaručit, xx lysin xxxx xxxxxxxxx xx "xxxxxxxxxx xxxxxxxx" a xxxxxxxxx.
6. Xxxxxxx x vyjádření xxxxxxxx
Xxxxxx píků xxxxxx x xxxxxxxxx se xxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxx aminokyselinu x xxxxxxxxxx xx množství xxxxxxxxxxxxx x g xx xx vzorku.
g xxxxxxxxxxxxx xx kg xxxxxx = X × X × XX × X / B × X × 1 000
Xx-xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxx: X / X
X = xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx
X = plocha xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
X = xxxxxx xxxx xxxxxxxxx standardu x hydrolyzátu xxxx x xxxxxxxx
X = xxxxxx píku interního xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx roztoku
MV = xxxxxxxxxxx váha stanovovaných xxxxxxxxxxxx
X = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx v μxxx/xx
X = xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (g) (xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxx odtučněn)
F = celkový xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (5.3.4) x ml nebo xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx vypočteného xxxxx 6.1
Xxxxxx x xxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx vypočítávají xx xxxx xxxxxx (X6X12X2X4X2, XX 240,30) x xxxxxxxx MV 120,15 (= 0,5 x 240,30).
Xxxxxxxxx xx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorku xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxx vypočítává xx xxxx xxxxxxxxx s xxxxxxxx XX xxxxxxxxxx: 149,21.
Xxxxxxx volný xxxxxxxxx xx zjišťuje xx xxxxxxxx jako xxxxxxxxx, xxx výpočet se xxxxxxx xxxxxx XX.
6.1 Xxxxxxx objem zředěného xxxxxxxx (F) při xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.2) xx vypočítá xxxxx tohoto vzorce:
F = 100 ml × (10 xx + 5 xx) / 10 xx × X&xxxx;xx / 10xx
X = xxxxx xxxxxxxxxx extraktu
7. Xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx 1990 při xxxxxxx čtyř různých xxxxx (krmná xxxx xxx xxxxxxx, xxxxx xxxx pro broilery, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx). Xx xxxxxxxxx extrémů xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx x standardních xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx tabulce:
střední hodnoty x x/xx
Xxxxxxxxxx materiál |
Aminokyselina |
|||
Threonin |
cyst(e)in |
Methionin |
lysin |
|
Krmná xxxx pro xxxxxxx |
6,94 x = 15 |
3,01 x = 17 |
3.27 x =.17 |
9,55 x = 13 |
Xxxxx směs xxx xxxxxxxx |
9,31 x = 16 |
3,92 x = 18 |
5,08 n = 18 |
13,93 n = 16 |
Xxxxxxxxxx koncentrát |
22,32 x = 16 |
5,06 x = 17 |
12,01 x = 17 |
47,74 x = 15 |
Xxxxxx |
58,42 x = 16 |
- |
90,21 x = 16 |
98,03 x = 16 |
n = xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
7.1 Opakovatelnost
Opakovatelnost vyjádřená xxxx vnitrolaboratorní standardní xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
xxxxxxxxxx xxxxxxxx (Xx) opakovatelnosti v xxxxxxxxxx x x/xx
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
Xxxxx xxxx pro xxxxxxx |
0,13 x = 15 |
0,10 x = 17 |
0,11 x = 17 |
0,26 n = 13 |
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx |
0,20 x = 16 |
0,11 x = 18 |
0,16 x = 18 |
0,28 x = 16 |
Xxxxxxxxxx koncentrát |
0,48 x = 16 |
0,13 x = 17 |
0,27 x = 17 |
0,99 n = 15 |
Xxxxxx |
1.30 x = 16 |
_ |
2,19 x = 16 |
2,06 x = 16 |
x = xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx (%) xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx odchylek (Xx)
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx |
1,9 x = 15 |
3,3 x = 17 |
3,4 n =.17 |
2,8 x = 13 |
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx |
2,1 x = 16 |
2,8 x = 18 |
3,1 x = 18 |
2,1 x = 16 |
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
2,7 n = 16 |
2,6 x = 17 |
2,2 x = 17 |
2,4 x = 15 |
Xxxxxx |
2,2 n = 16 |
- |
2,4 x = 16 |
2,1 n = 16 |
x = xxxxx xxxxxxxxxxxx laboratoří
7.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx standardních xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ze xxxxx xxxxxxxxx zkoušek xxxx xxxxxxxx x následující xxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (XX) x x/xx
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
xxxxxxxx |
Xxxx(x)xx |
xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
Xxxxx xxxx pro xxxxxxx |
0,28 x = 15 |
0,30 n = 17 |
0,23 n = 17 |
0,30 x = 13 |
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx |
0,48 x = 16 |
0,34 x = 18 |
0,55 n = 18 |
0,75 x = 16 |
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
0,85 x = 16 |
0,62 x = 17 |
1,57 x = 17 |
1,24 x = 15 |
Premix |
2,49 x = 16 |
- |
6,20 x = 16 |
6,62 n = 16 |
x = xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx (%) xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx odchylek (SR)
Referenční xxxxxxx |
xxxxxxxxxxxxx |
|||
xxxxxxxx |
Xxxx(x)xx |
xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
Xxxxx směs xxx xxxxxxx |
4,1 x = 15 |
9,9 n = 17 |
7,0 x = 17 |
3,2 x = 13 |
Xxxxx xxxx pro xxxxxxxx |
5,2 n = 16 |
8,8 x = 18 |
10,9 n = 18 |
5,4 x = 16 |
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
3,8 n = 16 |
12,3 x = 17 |
13,0 x = 17 |
3,0 x = 15 |
Premix |
4,3 x = 16 |
- |
6,9 x = 16 |
6,7 x = 16 |
x = xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
8. Xxxxxxx referenčních materiálů
Správné xxxxxxx xxxxxxx metody xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
9. Xxxxxxxx
9.1 Xxxxxxxx x rozdílům xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx se xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx aminokyselin (xxx 3.27.4 x 3.27.5) x roztoků xxxxxx (5.3.4) xxxxxxxxx xx doporučené.
Lineární xxxxxx xxxxxxxxx xx musí xxxxxxxxxxxx xxx všechny xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx tlumivým xxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.
9.2 Pokud xx x analýze hydrolyzátů xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx, musí xxx xxxxxxxx zkoušek xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
9.3 Xxx xxxxxxx xxxx metody x xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx než 1 % xxxxxxxx (koncentráty, xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx) xxxx dojít x xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
XXXX B XXXXXXXXX XXXX
1. Xxxx x xxxxxx použití
Touto xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx tuku v xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxxx na analýzu xxxxxxxxxx semen x xxxxxx, xxxxxxx zkoušení xx řídí xxxxx xxxxxxxx Rady 136/66/XXX xx xxx 22. xxxx 1996.
Xxxxx xxxxx x složení xxxxxx xx pro analýzu xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx:
1.1 Xxxxxx X – xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx
Xxxx xxxxxx je xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, s xxxxxxxx xxxx, xxxxx jsou xxxxxxxx do xxxxxx xxxxxxx X.
1.2 Xxxxxx X – celkový xxx
Xxxx metoda xx xxxxxxxxxx pro krmiva xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxx xxxxx xxxxx. Používá xx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx, x xxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxxx bez xxxxxxxxx xxxxxxxxx (např. xxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx x výrobky, xxxxx xxxx podrobeny xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x zahřívání).
1.3 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx všech xxxxxxxxx, xxx se xxxxxxx xxxxxxx výsledku postupem X, xxx xxxxxxxx X, je xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx podle xxxxxxx X.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxxxx X
Xxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Rozpouštědlo se xxxxxxxxxxx x xxxxxx xx vysuší x xxxxx.
2.2 Xxxxxx X
Xxxxxx xx zahřívá x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx a xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx a xxxxxxx zbytek se xxx xxxxxxxx podle xxxxxxx A.
3. Xxxxxxx
3.1 xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxx xxxx 40 x 50 °X. Xxxxxxx bromového xxxxx xxxx xxx xxxxx xxx 1 a xxxxxx po xxxxxxxxxx xxxxx xxx 2 xx/100 xx
3.2 síran xxxxx, bezvodý
3.3 xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, x = 3 xxx XXx/x
3.4 xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxx, Xxxxx-xxxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx (Xxxxxxxxx xxxxxxxx), refluxní xxxxxxxx by xxxx xxxxxxx asi 10 xxxxx za xxxxxx. X xxxx bez xxxxxx xx xxxx xxx refluxní rychlost xxx 10 ml xx xxxxxx.
4.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxx xxxxxxxxxxx x petroletheru, x xxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx bodu 4.1.
4.3 Xxxxxxx, buď xxxxxxx xxxxxxxx na 75 °X ± 3 °X, nebo horkovzdušná xxxxxxxx xx 100 °X ± 3 °X.
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxx X (xxx xxx 8.1)
Xx xxxxxxxxx patrony xx xxxxxx 5 x xxxxxx x xxxxxxxxx xx 1 xx (4.2) a xxxxxxxxx smotkem vaty xxx tuku.
Patrona xx xxxxxx xx extrakčního xxxxxxxxx (4.1) x xxxxxxxxxx xxxx hodin xxxxxxxxxxxxx (3.1). Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx jímá xx suché, xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx úlomky pemzy [1].
Xxxxxxxxxxxx xx oddestiluje, xxxxxx v xxxxx xx suší 1,5 xxxxxx x sušárně (4.3). Xxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x zváží. Xxxx xx xxxxxxx 30 xxxxx, aby se xxxxxxxx, zda je xxxxxxxx tuku xxxxxxxxxx (xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx váženími xxxx být xxxxx xxx 1 xx).
5.2 Xxxxxx B
Do xxxxxxx x xxxxxx 400 xx xxxx do xxxxxxx xxxxx o xxxxxx 300 ml xx odváží 2,5 x xxxxxx s xxxxxxxxx na 1 xx (xxx xxx (8,2) x xxxxx xx 100 xx xxxxxxxx chlorovodíkové (3.3) x xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxxxx baňka xxxxxx xxxxxxxxx chladičem. Xxxx xx xxxxxxx xx mírného varu xx malém xxxxxxx xxxx xx topné xxxxx a xxxx xx po xxxx xxxxx hodiny. Během xxxx xx xxxx xxxxxxxx usazování částeček xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxx xx ochladí x xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.4), xxx xxx filtraci xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx. Xxxxxxxx se přes xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx tuku. Xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx. Xxxx přítomnost xxxxxxx, xx xx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx petroletherem xxxxx xxxxxxx A.
Dvojitý xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xx položí xx xxxxxxxx xxxx x xxxx xx půldruhé xxxxxx v horkovzdušné xxxxxxx (4.3) při xxxxxxx 100 °X ± 3 °X.
Xxxxxxx xxxxxxxxx papír x xxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxx xx extrakční xxxxxxx (4.2) x xxxxxxxx xxxxxxx vaty xxx xxxx. Xxxxxxx xx vloží xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1) x xxxx xx xxxxxxxxx podle druhého x xxxxxxx odstavce xxxx 5.1.
6. Vyjádření xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx jako xxxxxxxx xx xxxxxx.
7. Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xx výsledcích dvou xxxxxxxxxx stanovení prováděných xx xxxxxxx vzorku xxxxxxx pracovníkem xx xxxxx xxxxxxxxxx:
- 0,2 % v xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx obsahu xxxx xxxxxx xxx 5 %,
- 4,0 % xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xx 5 xx 10 %,
- 0,4 % x xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx xxxxxx nad 10 %.
8. Xxxxxxxx
8.1 X xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx odebrat xxxxxxxxxx xxxxxxxxx vzorek, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxxx xx 20 x xxxxxx x xxxxxxxxx na 1 xx x xxxxxx xx x 10 xxxx x xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (3.2). Extrahuje xx xxxxxxxxxxxxx (3.1) xxxxx xxxx 5.1. Xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xx 500 xx petroletherem (3.1) x xxxxxxxx se. 50 xx xxxxxxx xx odpipetuje do xxxx xxxxx, předem xxxxxxx xxxxx, obsahující xxxxxx pemzy [2].
Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xx vysuší a xxxxxxxxx xx podle xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx 5.1.
Xxxxx tuku xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorce:
(10 x + b) × 5
xxx:
x = xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx (xxxxxxx xxxx xxxxxxxx)
x = xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx
8.2 X xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxx xx může xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx 5 g.
8.3 Xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx, xxxxx mají xxxxxx xxxxx xxxx, xx xxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx postupu X xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.
8.4 X xxxx 5.2 xx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xx filtraci xxxxxxxx použít xxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxx.
8.5 U xxxxxxxxx xxxxx se musí xxxxxxxxxx xxxx sušení xxx 1,5 xxx. Xx však třeba xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx může vést x xxxxxx výsledkům. Xx xxxxx xxxxxx x mikrovlnnou xxxxxx.
8.6 Xxx obsahu xxxx xxx 15 % xx xxxxxxxxxx provést xxxx xxxxxxxxxx extrakci xxxxx xxxxxxx A x xxxxxxxx extrakci xxxxx postupu B. Xxxxxx xx xx xxxxx xxxx na xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx x xxxxxx.
XXXX X
XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX
(2-[X-2-(xxxxxxxxxxxx)xxxxxxxxx]-3-xxxxxxxxxxxxxxxx-X1,X4-xxxxxx)
1. Xxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx metodou se xxxxxxx obsah xxxxxxxxxxx x krmivech. Dolní xxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 5 mg/kg.
2. Princip
Vzorek xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx x methanolu. Xxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx účinnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (HPLC) xx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx XX xxxxxxxxx.
3. Činidla
3.1 xxxxxxxx
3.2 xxxxxxxx, xxx XXXX
3.3 xxxx, pro XXXX
3.4 xxxxxxx fáze xxx XXXX:
Xxxx xxxx (3.3) x xxxxxxxxx (3.2), 900 + 100 (X + V)
3.5 xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxxxxxxx 2-[N-2-(hydroxyethyl)karbomoyl]-3-methylchinoxalin-N1,N4-dioxid, E 851
3.5.1 xxxxxxx standardní xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, 250 μx/xx
Xx odměrné xxxxx x obsahu 200 xx xx xxxxxx 50 mg xxxxxxxxxxx (3.5) s xxxxxxxxx xx 0,1 xx x xxxxx xxx 190 xx xxxx. Baňka xx xxxxxxx xx 20 xxxxx xx ultrazvukové xxxxx (4.1). Xx xxxxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, doplní vodou xx xxxxxx a xxxxxxx. Baňka xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx musí xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx.
3.5.2 xxxxxxxx xxxxxxxxxx roztok xxxxxxxxxxx, 25 μx/xx
10,0 xx zásobního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.1) xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx o xxxxxx 100 xx, xxxxxx se po xxxxxx xxxxxxx xxxx (3.4) x xxxxxxxx. Xxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx fólií a xxxxxxxxx x chladničce. Xxxxx roztok xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
3.5.3 xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x obsahu 50 xx xx xxxxxxxxxx 1,0, 2,0, 5,0, 10,0, 15,0 a 20,0 ml xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.2). Xxxxxx xx mobilní xxxx (3.4) po xxxxxx a xxxxxxxx. Xxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 0,5, 1,0, 2,5, 5,0, 7,5 x 10,0 μx olachindoxu xx xx.
Xxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
4.1 xxxxxxxxxxxx lázeň
4.2 xxxxxxxxxx třepačka
4.3 zařízení XXXX x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx ultrafialového xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx
4.3.1 xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, 250 xx x 4 xx, xxxxxxx X18, 10 μx, xxxx srovnatelná xxxxxx
4.4 membránové filtry x xxxx 0,45 μx
5. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx při xxxxxxxx světle xxxx x nádobách x xxxxxxx xxxx.
5.1 Obecně
5.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx olachindox xxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
5.1.2 Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx krmiva xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx odpovídá xxxx xxxxxx ve xxxxxx K xxxxxxxxxxx xx xxxxxx 50 xx/xx xx xxxxxxxxxx 10,0 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.1) do kónické xxxxx o obsahu 250 ml x xxxxxx se xxxxxx xx xxx 0,5 xx. Xxxxx xx 50 x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx xx 10 minut xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx (5.2).
Xxxxxxxx:
Xxx xxxxx xxxx xxxxxx xx být xxxxxxxx xxxxxx podobného xxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxx
Xxxxxx se xxxxxxxxx 50 x xxxxxx s xxxxxxxxx xx 0,01 g. Xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 1000 xx, xxxxx se 100 xx xxxxxxxxx (3.1) x xxxxx xx xxxxxx xx xxx xxxxx do ultrazvukové xxxxx (4.1). Přidá xx 410 ml xxxx x xxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxx xxxxx dalších 15 xxxxx. Xxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx, dále se xxxxx 30 minut xx třepačce (4.2) x potom se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. 10,0 xx xxxxxxxx xx přenese xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 20 ml, xxxxxx xx vodou xx značku a xxxxxxxx. Poměrná xxxx xx přefiltruje xxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) (viz xxx 9. Xxxxxxxx). Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx HPLC (5.3).
5.3 Xxxxxxxxx HPLC
5.3.1 Xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxxxx, xxxxx xxx použity xxxx podmínky, za xxxxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxx výsledky.
analytická xxxxxx (4.3.1)
xxxxxxx xxxx (3,4): Xxxx vody (3.3) x xxxxxxxxx (3.2), 900 + 100 (X + X)
xxxxxxxxx xxxxxxxx: 1,5–2 ml/min
detekční xxxxxx xxxxx: 380 xx
xxxxx nástřiku: 20 μx–100 μx
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx, xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (3.5.3) xxxxxxxxxx 2,5 μx/xx, xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx a xxxxxxxxxx xxxx.
5.3.2 Xxxxxxxxxx xxxx
Xxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xx střední xxxxxxx výšky (plochy) xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx za xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxx) xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx ordinát x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x μx/xx xxxx xxxxxxxxx.
5.3.3 Xxxxxx vzorku
Provede xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (5.2) xxx použití xxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx.
6. Xxxxxxx výsledků
Ze xxxxxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx x μg/ml xxxxxxxxxx x kalibračním xxxxxx (5.3.2).
Xxxxx xxxxxxxxxxx ve xxxxxx x v xx/xx xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
x = x × 1&xxxx;000 / m
kde:
c = xxxxxxxxxxx olachindoxu x xxxxxxxx xxxxxx (5.2) x μg/ml
m = xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x g (5.2)
7. Xxxxxxxxxxx výsledků
7.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx opakovaným xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (co-chromatography) xxxxx xxxxxxxx detektoru x xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx porovnávají xxxxxxx extraktu xxxxxx (5.2) a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.3), xxxxxxxxxxxx 5,0 μx/xx xxxxxxxxxxx.
7.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xx-xxxxxxxxxxxxxx)
Xxxxxxx xxxxxx (5.2) xx obohatí xxxxxxxxx přiměřeného xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.3). Xxxxxxxx přidaného xxxxxxxxxxx xx mělo xxxxxxxxx xxxxxxxx olachindoxu nalezeného x xxxxxxxx xxxxxx.
X xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx by xxxx xxxxx jen ke xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxx musí být x xxxxxxx ±10 % xxxxxxx šířky xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx extraktu xxxxxx.
7.1.2 Xxxxxxxx diodového xxxx
Xxxxxxxx xx vyhodnocují podle xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
x) xxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx spektra xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx píku xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx schopností xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx detektor x diodovým xxxxx xx udává ±2 xx;
x) xxx xxxxxx xxxxx mezi 220 x 400 nm xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x standardu zaznamenaný xx xxxxxxx píku xxxxxxxxxxxxx lišit xx xxxxxxxxx xxxxx spektra x xxxxxxx 10 xx 100 % xxxxxxxxx absorbance. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx dvěma xxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 % xxxxxxxxxx standardního analytu;
b) xxx xxxxxx xxxxx xxxx 220 x 350 xx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx x sestupu xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx 10 až 100 % xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx ve xxxxx sledovaných bodech xxxxxxxx xxxx spektry xxxxxxxxxxx xxxxx 15 % xxxxxxxxxx spektra xx xxxxxxx píku.
Není-li xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx.
7.2 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xxxx výsledky xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxx při xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx 10 x 20 xx/xx, xxxxx přesáhnout15 % xxxxxxx výsledku.
7.3 Výtěžnost
Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxx 90 %.
8. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx
X xxxxx XX byl xxxxxxxx xxxxxxx test, xxx xxxx xx 13 xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx vzorky xxxxxx xxx xxxxxx, včetně xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx uvedeny x xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
| xxxxxx 1 |
xxxxxx 2 |
vzorek 3 |
xxxxxx 4 |
|
X |
13 |
10 |
11 |
11 |
X |
40 |
40 |
44 |
44 |
xxxxxxx (xx/xx) |
- |
14,6 |
48,0 |
95,4 |
(Xx) (xx/xx) |
- |
0,82 |
2,05 |
6,36 |
(XX) (xx/xx) |
- |
1,62 |
4,28 |
8,42 |
XXx (%) |
- |
5,6 |
4,3 |
6,7 |
XXX (%) |
- |
11,1 |
8,9 |
8,8 |
xxxxxxxxx obsah (mg/kg) |
- |
15 |
50 |
100 |
výtěžnost (%) |
- |
97,3 |
96,0 |
95,4 |
X: xxxxx laboratoří
n: xxxxx xxxxxxxxxxxx hodnot
Sr: xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxxxxxxxx
XX: xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
XXx: xxxxxxxx xxxxxxxxxx opakovatelnosti
CVR: xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
9. Xxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx 100 xx/xx xxxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx extraktu (5.2) tak, aby xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.3.2).
[1] Pokud xx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx, xxxxxx se xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx.
[2] Pokud xx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxx pemzy xx xxxxxxxx kuličky.