Xxxxxxxx Xxxxxx 98/64/ES
ze xxx 3. září 1998,
xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx x olachindoxu x xxxxxxxx x xxxxxx se mění xxxxxxxx 71/393/XXX
(Xxxx s xxxxxxxx pro XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x ohledem xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx směrnici Xxxx 70/373/XXX xx xxx 20. xxxxxxxx 1970 x xxxxxxxx xxxxx odběru xxxxxx x analytických xxxxx Xxxxxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxx x xxxxxxxxxxx Xxxxxxxx, Xxxxxx x Xxxxxxx, x zejména na xxxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxx 70/373/EHS xxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxx krmiv xx xxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x právních x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x složení, xx xxxxxxx za xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx Rady 79/373/EHS xx dne 2. xxxxx 1979 x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxx [2], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 97/47/ES [3], x xxxxxxxx Rady 93/74/XXX xx xxx 13. xxxx 1993 x krmivech xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx [4], naposledy xxxxxxxxx směrnicí 96/25/XX [5], xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxx xxxx být xxxxxxx na xxxxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx směrnice Rady 70/524/XXX xx xxx 23. xxxxxxxxx 1970 x xxxxxxxxxxx látkách x xxxxxxxx [6], xxxxxxxxx xxxxxxxxx směrnicí Xxxxxx 98/19/XX [7], xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx na xxxxxxxx, xxxxx xx xxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx směsí;
vzhledem k xxxx, xx xxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 71/393/XXX xx dne 18. xxxxxxxxx 1971, kterou xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Společenství xxx xxxxxx kontrolu krmiv [8], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx Komise 84/4/XXX [9], stanoví xxxxxx xxxxxxx mimo jiné x xxx xxxxxxxxxx xxxxxx tuku; že xx xxxxxx uvedené xxxxxx xxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxx směrnice xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx,
XXXXXXX XXXX SMĚRNICI:
Článek 1
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxx, že analýzy xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx, tuku x obsahu olachindoxu x krmivech xx xxxxxxxxx za xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 2
V xxxxxxx xxxxxxxx Komise 71/393/EHS xx bod "4. Xxxxxxxxx xxxxxx tuku" xxxxxxxxx xxxxx X xxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 3
1. Členské xxxxx uvedou v xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx směrnicí xxxxxxxxxx xx 31. xxxxxxxx 1998. Xxxxxxx x nich xxxxxxxxxx Xxxxxx.
Xxxxx tyto xxxxxxxx xxxxxxxx od 1. xxxxx 1999.
Xxxx opatření xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx obsahovat xxxxx xx tuto xxxxxxxx xxxx xxxx být xxxxxx odkaz xxxxxx xxx jejich úředním xxxxxxxxx. Xxxxxx odkazu xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
2. Členské xxxxx xxxxx Komisi znění xxxxxxxx ustanovení xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Článek 4
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx dnem po xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxx Evropských xxxxxxxxxxxx.
Článek 5
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X Xxxxxxx xxx 3. xxxx 1998.
Xx Xxxxxx
Xxxxx Xxxxxxxx
xxxx Xxxxxx
[1] Xx. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.
[2] Xx. xxxx. X 86, 6.4.1979, x. 30.
[3] Xx. xxxx. X 211, 5.8.1977, x. 45.
[4] Xx. věst. X 237, 22.9.1993, x. 23.
[5] Xx. xxxx. X 125, 23.5.1996, x. 35.
[6] Úř. xxxx. X 270, 14.12.1970, x. 1.
[7] Úř. xxxx. X 96, 28.3.1998, x. 39.
[8] Xx. xxxx. X 279, 2.12.1971, x. 7.
[9] Úř. věst. X 15, 18.1.1984, x. 28.
XXXXXXX
XXXX X
Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
1. Xxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxx slouží xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (syntetických x xxxxxxxxxxx) x xxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxx x xxxxx) aminokyselin x xxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xx použitelná pro xxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxx(x)xx, xxxxxxxxx, lysin, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, kyselinu xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxx, xxxxx, xxxxxxx x xxxxx.
Xxxx metoda xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx X x X. Xxxx xxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
2. Princip
2.1 Xxxxx aminokyseliny
Volné xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx srážejí kyselinou xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Zfiltrovaný xxxxxx xx xxxxxx xx xX 2,20. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xx po xxxxxx x ninhydrinem xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 570 nm.
2.2 Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx aminokyselinách. Xxxx(x)xx x methionin xxxx být xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxx cysteovou a xx xxxxxxxxxxxxxxx. Tyrosin xx xxxx xxxxxxxxxx x hydrolyzátech neoxidovaných xxxxxx. Xxxxxxx aminokyseliny xxxxxxx x xxxx 1 xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxx x xxxxxxxxxx nebo v xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxx xxx 0 xX xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x fenolu. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Oxidovaný nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x = 6 xxx/x) xx 23 xxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxx xx xX 2,20. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx se xx reakci s xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 570 xx (440 xx pro xxxxxx).
3. Xxxxxxx
Xxxx být xxxxxxx dvakrát xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx (vodivost &xx; 10 μS).
3.1 xxxxxxx vodíku, x = 30 %
3.2 xxxxxxxx mravenčí, x = 98–100 %
3.3 xxxxx
3.4 xxxxxxxxx xxxxx
3.5 xxxxxxxx xxxxx
3.6 kyselina 5-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx
3.7 kyselina xxxxxxxxxxxxxx o xxxxxxx xxxxxxxxx 1,18 x/xx
3.8 xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxx
3.9 2,2-xxxxxxxxxxxxx (thiodiglykol)
3.10 chlorid xxxxx
3.11 xxxxxxxxx
3.12 xxxxxxxxxxx, xxx xxxx 40–60 °X
3.13 xxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxx použitelná xxxx xxxxxxx xxxxxxxx
3.14 xxxxx – xxxx (&xx; 10 xxx xxxxxxx)
3.15 1-oktanol
3.16 xxxxxxxxxxxxx
3.16.1 xxxxxxxxxx látky xxxxxxx x bodě 1; xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxx xx ve xxxxx xxx X2X5 xxxx X2XX4 týden xxxx xxxxxxxx
3.16.2 kyselina cysteová
3.16.3 xxxxxxxxxxxxxxx
3.17 hydroxid xxxxx, xxxxxx x = 7,5 mol/l:
300 x XxXX (3.5) xx xxxxxxxx ve xxxx x xxxxxx do 1 xxxxx.
3.18 xxxxxxxx xxxxx, roztok x = 1 mol/l:
40 x XxXX (3.5) xx xxxxxxxx ve xxxx a doplní xx 1 litru.
3.19 xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x fenolu:
Smíchá xx 889 x xxxxxxxx xxxxxxxx (3.2) xx 111 g xxxx x xxxxx xx 4,73 x fenolu (3.3).
3.20 hydrolyzační xxxx, x = 6 xxx XXx/x x xxxxxxxxx 1 x xxxxxx/x:
X 492 xx XXx (3.7) xx xxxxx 1 g xxxxxx (3.3) x xxxxxx xx vodou xx 1 xxxxx.
3.21 xxxxxxxxx směs, x = 6 mol XXx/x x xxxxxxxxx 2% xxxxxxxxxxxxx:
8,2 xx XXx (3.7) se xxxxxxx xxxxxxxxx 900 xx vody, xxxxx xx 20 ml xxxxxxxxxxxxx (3.9) x xxxxxx xxxxx xx 1 litr (3.7 x 3.9 xx xxxxx xxxxxxx xxxxx).
3.22 xxxxxxxx 5-xxxxxxxxxxxxxxx, β = 6 %:
60 x xxxxxxxx 5-xxxxxxxxxxxxxxx (3.6) xx xxxxxxxx xx xxxx x xxxxxx xxxxx xx 1 xxxx.
3.23 xxxxxxxx xxxx (kyselina permravenčí – xxxxx):
X malé xxxxxxx xx smíchá 0,5 xx xxxxxxxx xxxxxx (3.1) x 4,5 ml xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx (3.19); xxxxxxx xx x xxxxx 1 xxxxxx xxx 20–30 °C, xxx xx xxxxxxxx kyselina xxxxxxxxxxx, před přidáním xx vzorku se xxxx xxxxxxx x xxxxx x xxxxxxx xxxxx (15 minut).
Pozor:
Je xxxxx zamezit kontaktu x xxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx.
3.24 xxxxxxxxxxx tlumivý xxxxxx, x = 0,2 xxx Xx+/x, pH 2,20:
X xxxxxxxxx 800 xx vody xx xxxxxxxx 19,61 g xxxxxxxxx sodného (3,8), 5 xx xxxxxxxxxxxxx (3.9), 1 g xxxxxx (3.3) x 16,50 ml XXx (3.7). xX xx xxxxxx xx 2,20. Xxxxxx se xxxxx xx xxxxx 1 xxxxx.
3.25 eluční tlumivé xxxxxxx xxxxxxxxxxxx podle xxxxxxxx xxx použitý xxxxxxxxxx (4.9)
3.26 ninhydrinové xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (4.9)
3.27 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxx teplotě xxx 5 °X.
3.27.1 xxxxxxx standardní základní xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.16.1), x = 2,5 μxxx/xx pro každou xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx i xxxxxxxx xxxxxxxxxx.
3.27.2 zásobní xxxxxxxxxx xxxxxxxx roztok xxxxxxxx cysteové a xxxxxxxxxxxxxxxx, c = 1,25 μmol/ml
0,2115 x xxxxxxxx xxxxxxxx (3.16.2) x 0,2265 g xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx (3.16.3) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (3.24) x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx a xxxxxx xx po xxxxxx xxxxxxxxxxxx tlumivým roztokem. Xxxxxxxx xx při xxxxxxx pod 5 °X xxxxxxx 12 xxxxxx. Tento roztok xx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.27.1) obsahuje kyselinu xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxx.
3.27.3 xxxxxxx standardní xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx. norleucinu, x = 20 μxxx/xx
0,6560 x norleucinu (3.13) xx rozpustí x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx roztoku (3.24) v odměrné xxxxx xx 250 xx a xxxxxx xx po xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx při xxxxxxx pod 5 °X xxxxxxx 6 xxxxxx.
3.27.4 xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx aminokyselin xxx xxxxxxx s xxxxxxxxxxx, x = 5 xxxx/50 μl xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx x x = 10 nmol/50 μl x xxxxxxxxx aminokyselin
Ve 100 xx xxxxxxx xx xxxxxxxx 2,2 x xxxxxxxx xxxxxxx (3.10) x 30 xx xxxxxxxxxxxxx tlumivého xxxxxxx (3.24). Přidají xx 4,00 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx základního xxxxxxx aminokyselin (3.27.1), 4,00 ml zásobního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxx (3.27.2) a 0,50 ml xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.27.3), xxxxx xx používá. xX se upraví xx 2,20 hydroxidem xxxxxx (3.18).
Roztok xx xxxxxxxxxxxxx převede do 50 ml xxxxxxx xxxxx, doplní po xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24) x xxxxxxx se.
Skladuje se xxx teplotě pod 5 °X nejdéle 3 xxxxxx.
Xxx xxxx xxxxxxxx 9.1.
3.27.5 kalibrační xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx, připravenými xxxxx xxxx 5.3.3.1 x xxx xxxxxxxx (5.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx 3.27.4 x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxx při xxxxxxx xxx 5 °X xxxxxxx 3 xxxxxx.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx
4.1 xxxxx x xxxxxxx xxxx o xxxxxx 100 nebo 250 xx opatřená zpětným xxxxxxxxx
4.2 nádoba z xxxxxxxxxxxxxxxx skla x xxxxxx 100 xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. Xxxxx, Xxxxxx) xxx xxxxxxx x xxxxxxx
4.3 xxxxxxx x nuceným xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxx ±2 °X
4.4 xX metr (xxx xxxxxxxxx xxxxx)
4.5 xxxxxxxxxx filtr (0,2 μx)
4.6 xxxxxxxxxxx
4.7 rotační xxxxxxx odparka
4.8 mechanická xxxxxxxx nebo magnetická xxxxxxxx
4.9 analyzátor xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx XXXX x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx pro xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x fotometrickým xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, která xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx látek. Xxxxxx xxxxxxxxx roztoku x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx čerpadla xx xxxxxxxx xxxxxxx ± 0,5 % xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx i xxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx iontů x = 0,8 xxx/x x xxxxxxxx xxxxxxxxx mravenčí xxxxxxxx x oxidačního xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, obsahuje-li xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kyselinu x/xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx se xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx úpravou pH xxxxxxxxx hydrolyzátu xx xxxxx 5 ml. Xxxxxxxx xx má xxxxxxxx xx xxxxx xxx teplotě xxxxxxx 40 °X.
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxx, xxx xxxxxx xxxxx x xxx 0,5 xx. Xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 50 °X nebo xxx xxxxxxxx. Xxxxxx x vysokým obsahem xxxx xx před xxxxxx extrahují xxxxxxxxxxxxx (3.12).
5.2 Stanovení xxxxxxx xxxxxxxxxxxx v krmivech x x xxxxxxxxx
Xx xxxxxxx baňky xx xxxxxx příslušné množství (1–5 x) xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxx na 0,2 xx x xxxxx xx 100,0 xx xxxxxxxxx xxxxx (3.21). Xxxxx se xxxxx 60 xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.8). Xx xxxxxxx sedimentu xx xxxxxxxxxx 10,0 ml xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx 100 xx.
Xx stálého xxxxxxx xx přidá 50 xx xxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxxx a pokračuje xx x míchání xx xxxxxxxxxx míchačce xxxxxxx 5 minut. Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx tak, xxx xx odstranila xxxxxxx sraženina. 10,0 xx xxxxxxxxxxxx roztoku xx přenese do xxxxxxx o xxxxxx 100 xx, xX xx xxxxxx xx 2,20 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.18), xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx citronanového xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24) xx xxxxxxx baňky xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24).
Použije-li xx interní standard, xxxxx xx 1,00 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.27.3) na xxxxxxx 100 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24).
Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.4 – xxxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx-xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxx, xxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx pod 5 °X.
5.3 Stanovení xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
5.3.1 oxidace
0,1 až 1 x xxxxxxxxxx xxxxxx (5.1) xx xxxxxx x přesností 0,2 xx:
- xx xxxxx x xxxxxxx xxxx o xxxxxx 100 xx (4.1) xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (5.3.2.3) xxxx
- xx xxxxx x xxxxxxx xxxx x obsahu 250 xx (4.1), xxxxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx nebo
- xx xxxxxx x xxxxxx 100 xx xx šroubovací xxxxxxxx (4.2) (xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 5.3.2.4).
Xxxxxxxx xxxx xxxxxx by xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxx 10 xx x obsah xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 100 xx.
Xxxxx/xxxxxx xx xxxxxx do xxxxx x ledovou xxxxx x ochladí xx xx 0 °X, xxxxx xx xxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxxx (3.23) x xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx/xxxxxx xx xxxxxx x xx xxxxx vzduchotěsnou xxxxx x xxxxx xx x s xxxxx x xxxxxxx xxxxx xx chladničky xxx 0 °X x xxxxxxx xx xxx 16 xxxxx. Xx 16 hodinách xx vyjme z xxxxxxxxxx x přebytečné xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx 0,84 x dvojsíranu xxxxxxx (3.4).
Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.1.
5.3.2 xxxxxxxxx
5.3.2.1 xxxxxxxxx oxidovaných xxxxxx
X xxxxxxxxxxx xxxxxx připravenému xxxxx 5.3.1 xx xxxxx 25 xx xxxxxxxxxxxx směsi (3.20) xxx, aby neulpěl xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx ani xx lžíci. Xxxxx xxxxxxxxx postupu xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.3 xxxx 5.3.2.4.
5.3.2.2 xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorků
Do xxxxx x xxxxxxx xxxx o xxxxxx 100 xx xxxx 250 ml (4.1) xxxx xx xxxxxx x obsahu100 xx xx xxxxxxxxxxx uzávěrem (4.2) se xxxxxx 0,1 xx 1 x upraveného xxxxxx (5.1) x přesností xx 0,2 mg. Xxxxxxxx část xxxxxx xx měla xxx xxxxx dusíku xxx 10 mg. Xxxxxxx xx xxxxx 25 xx hydrolyzační xxxxx (3.20) x smíchá xx se xxxxxxx. Xxxx xx postupuje xxx podle 5.3.2.3 xxxx xxxxx 5.3.2.4.
5.3.2.3 xxxxxxxx hydrolýza
Ke xxxxx x xxxxx (xxxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.1 xxxx 5.3.2.2) xx xxxxxxx 3 skleněné kuličky x směs xx xxxxx do xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx 23 xxxxx. Xx xxxxxxxx hydrolýzy se xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 5 ml citronanového xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24). Xxxxx se odpojí x xxxxxxx se x xxxxxx lázni. Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx 5.3.3.
5.3.2.4 xxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.1 xxxx 5.3.2.2 xx xxxxxx do xxxxxxx (4.3) při 110 °X. Aby xx xxxxx první hodiny xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx) x xxxxxxx k výbuchu, xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxx. Po xxxxxxxx xxxxx hodiny se xxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx baňka xx xxxxxxx x xxxxxxx (4.3) 23 xxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx sušárny, opatrně xx xxxxxxxxxx uzávěr x xxxxxxx se xx xxxxx x xxxxxxx xxxxx. Baňka xx nechá vychladnout.
Podle xxxxxxxxx postupu xxx xxxxxx xX (5.3.3) xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx roztoku (3.24) do xxxxxxx x obsahu 250 xx nebo do xxxxx s xxxxxxx xxxx x obsahu 250 ml.
Dále se xxxxxxxxx podle 5.3.3
5.3.3 xxxxxx pH
Podle xxxx, xxxxx toleranci x xxxxxx xx analyzátor xxxxxxxxxxxx (4.9), postupujte xxx xxxxxx xX xxxxx 5.3.3.1 xxxx 5.3.3.2.
5.3.3.1 xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.9), xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx sodíku:
Pokud xxxxxxxxxx aminokyselin xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xx-xx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx), doporučuje xx xxxxxx vnitřní xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (3.27.3).
X xxxxxxx případě xx xxxx odpařováním xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx 2,00 xx vnitřního xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.27.3).
Xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx podle 5.3.2.3 xxxx 5.3.2.4. se xxxxxxx 2 xxxxx 1-xxxxxxxx (3.15).
Xx xxxxxxx xxxxxxx (4.7) se xxxxx xxxxx xx 5-10 xx za xxxxx xxx 40 °X. Pokud by xx xxxxx xxxxxxx xxxxxx pod 5 xx, xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxx xxxxx.
xX xx xxxxxx xx 2,20 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.18) x xxxxxxxxx xx podle xxxx 5.3.4.
5.3.3.2 xxx xxxxxxx xxxxxxx analyzátory xxxxxxxxxxxx (4.9)
Xxxxxxxxxxx připravené xxxxx 5.3.2.3 xxxx 5.3.2.4 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx opatrným přidáním 17 xx roztoku xxxxxxxxx sodného (3.17), xx xxxxxxx míchání x při xxxxxxxxx xxxxxxx pod 40 °X.
xX se xxxxxx xx 2,20 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.18) xxx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.3.4.
5.3.4 xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx (5.3.3.1 nebo 5.3.3.2) s upraveným xX xx kvantitativně xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24) xx odměrné baňky x xxxxxx 200 xx a tlumivým xxxxxxxx (3.24) se xxxxxx xx xxxxxx.
Xxxxx-xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx 2,00 ml vnitřního xxxxxxxxx (3.27.3) x xxxxx xx xxxxxx xx značku xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx roztokem (3.24). Xxxxxxxx xx xxxxxxxx.
Xxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx (5.4)
Xxxxxx-xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx týž xxx, uschovávají xx xxx xxxxxxx xxx 5 °X.
5.4 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxx xxxxxxxxxxxxxx musí xxx xxxxxxx (5.2) a xxxxxxxxxx (5.3.4) xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx se xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx filtrem 0,2 μ (4.5). Xxxxxxxx xxxx roztok xx xxxxxxx xxxxxxxx chromatografii xx analyzátoru aminokyselin (4.9).
Xxxxxxx lze provést xxxxx nebo xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxx, xxx xx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx ± 0,5 % jak xxx analýze xxxxxxxxx xxx xxxxxx s xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx poměr xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xx xxx xxx x xxxxxxxxxxxx roztocích x x roztocích xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx hlavně xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Standard nebo xxxxxx se ředí xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx roztokem (3.24) xxx, xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 30 – 200 % xxxxxx xxxx pro jednotlivé xxxxxxxxxxxxx x roztoku xxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxx liší x xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxx musí xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx x xx xxxxxxxxx ninhydrin xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. V rozsahu xxxxx působení by xxx xxxxxxxxxxxxxxxx systém xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx objemů xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxx.
Xxx xxxxxxx equimolárního xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, by xxxx xxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx. Xxxx equimolární xxxxxxx musí xxxxxxxxx xxxxxxx 30 % xxxxxxxxxxx xxxxxx jednotlivých xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx na použitém xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.9).
Při xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx by xxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxxxx neměl xxxxxxxxxx 2:10 (pokud xx xxxxxxx xxxxx xxxx(x)xx, xxxxxxxxx, xxxxxxxx x xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx nedostatečnou xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx). Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx lepší než 1:10.
Xxxxxx xxxx zaručit, xx lysin xxxx xxxxxxxxx od "lysinových xxxxxxxx" x xxxxxxxxx.
6. Xxxxxxx x vyjádření xxxxxxxx
Xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx xxx každou xxxxxxxxxxx aminokyselinu x xxxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x g xx kg vzorku.
g xxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxx = A × X × XX × F / X × X × 1 000
Xx-xx xxxxxx interní xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxx: X / X
X = xxxxxx xxxx hydrolyzátu xxxx xxxxxxxx
X = xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx standardního xxxxxxx
X = plocha xxxx interního xxxxxxxxx x hydrolyzátu nebo x extraktu
D = xxxxxx xxxx interního xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx
XX = xxxxxxxxxxx váha xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
X = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx v μxxx/xx
X = xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (g) (xxxxxxxxxx xx původní váhu xxxxx xx vzorek xxxxxxx xxxx xxxxxxxx)
X = xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx roztoku (5.3.4) x xx xxxx xxxxxxx objem zředěného xxxxxxxx vypočteného xxxxx 6.1
Xxxxxx x cystein xx v hydrolyzátech xxxxxxxxxxx vzorku xxxxxxx xxxx kyselina xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxx se xxxx xxxxxx (C6H12N2O4S2, XX 240,30) s xxxxxxxx XX 120,15 (= 0,5 x 240,30).
Xxxxxxxxx se x xxxxxxxxxxxxx oxidovaného vzorku xxxxxxx xxxx methioninsulfon, xxx xxxxxxxxxx xx xxxx methionin x xxxxxxxx XX methioninu: 149,21.
Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx po xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxx výpočet xx xxxxxxx stejná XX.
6.1 Xxxxxxx xxxxx zředěného xxxxxxxx (X) při xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (5.2) xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx:
X = 100 xx × (10 xx + 5 ml) / 10 xx × V ml / 10xx
X = xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx
7. Xxxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxx metoda xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxx úrovni v xxxx 1990 xxx xxxxxxx čtyř xxxxxxx xxxxx (xxxxx xxxx xxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx koncentrát, premix). Xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
xxxxxxx xxxxxxx x g/kg
|
Referenční xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx |
6,94 x = 15 |
3,01 x = 17 |
3.27 x =.17 |
9,55 x = 13 |
|
Krmná xxxx xxx xxxxxxxx |
9,31 x = 16 |
3,92 x = 18 |
5,08 x = 18 |
13,93 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx |
22,32 x = 16 |
5,06 x = 17 |
12,01 x = 17 |
47,74 x = 15 |
|
Xxxxxx |
58,42 x = 16 |
- |
90,21 x = 16 |
98,03 x = 16 |
n = počet zúčastněných xxxxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx standardní xxxxxxxx je xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
xxxxxxxxxx odchylka (Xx) xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx x x/xx
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx |
0,13 x = 15 |
0,10 x = 17 |
0,11 x = 17 |
0,26 n = 13 |
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx |
0,20 n = 16 |
0,11 x = 18 |
0,16 n = 18 |
0,28 n = 16 |
|
Xxxxxxxxxx koncentrát |
0,48 x = 16 |
0,13 x = 17 |
0,27 n = 17 |
0,99 x = 15 |
|
Xxxxxx |
1.30 n = 16 |
_ |
2,19 x = 16 |
2,06 x = 16 |
x = xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx (%) xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (Xx)
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
Xxxxxxxx |
xxxx(x)xx |
Xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx směs xxx xxxxxxx |
1,9 a = 15 |
3,3 x = 17 |
3,4 n =.17 |
2,8 x = 13 |
|
Xxxxx xxxx pro xxxxxxxx |
2,1 x = 16 |
2,8 x = 18 |
3,1 x = 18 |
2,1 x = 16 |
|
Proteinový xxxxxxxxxx |
2,7 x = 16 |
2,6 x = 17 |
2,2 x = 17 |
2,4 x = 15 |
|
Xxxxxx |
2,2 x = 16 |
- |
2,4 x = 16 |
2,1 n = 16 |
x = xxxxx xxxxxxxxxxxx laboratoří
7.2 Reprodukovatelnost
Výsledky xxxxxxxxxxxxxxxxx standardních odchylek xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx odchylka (XX) v x/xx
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxxx |
Xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
xxxxxxxx |
Xxxx(x)xx |
xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx pro xxxxxxx |
0,28 x = 15 |
0,30 x = 17 |
0,23 x = 17 |
0,30 x = 13 |
|
Xxxxx směs pro xxxxxxxx |
0,48 x = 16 |
0,34 n = 18 |
0,55 x = 18 |
0,75 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx koncentrát |
0,85 n = 16 |
0,62 n = 17 |
1,57 x = 17 |
1,24 x = 15 |
|
Xxxxxx |
2,49 x = 16 |
- |
6,20 x = 16 |
6,62 n = 16 |
x = xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxxxx (%) xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (XX)
|
Xxxxxxxxxx xxxxxxx |
xxxxxxxxxxxxx |
|||
|
xxxxxxxx |
Xxxx(x)xx |
xxxxxxxxx |
xxxxx |
|
|
Xxxxx xxxx xxx xxxxxxx |
4,1 x = 15 |
9,9 x = 17 |
7,0 x = 17 |
3,2 n = 13 |
|
Xxxxx xxxx pro xxxxxxxx |
5,2 x = 16 |
8,8 x = 18 |
10,9 x = 18 |
5,4 x = 16 |
|
Xxxxxxxxxx koncentrát |
3,8 x = 16 |
12,3 x = 17 |
13,0 x = 17 |
3,0 n = 15 |
|
Xxxxxx |
4,3 x = 16 |
- |
6,9 x = 16 |
6,7 n = 16 |
x = xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
8. Xxxxxxx referenčních materiálů
Správné xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx ověřuje xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx-xx x xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
9. Xxxxxxxx
9.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx kalibračních xxxxxxx xxxxxxxxx aminokyselin (xxx 3.27.4 a 3.27.5) x roztoků xxxxxx (5.3.4) xxxxxxxxx xx doporučené.
Lineární xxxxxx xxxxxxxxx xx musí xxxxxxxxxxxx xxx všechny xxxxxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx roztok xx xxxx citronanovým xxxxxxxx xxxxxxxx xxx, xxx xx dosáhlo xxxxx xxxx uprostřed xxxxxx xxxxxxx.
9.2 Xxxxx se x xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx účinnou kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx, xxxx být xxxxxxxx xxxxxxx optimalizovány x souladu x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
9.3 Při xxxxxxx této metody x krmiv obsahujících xxxx xxx 1 % chloridu (xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx) xxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx obsahu xxxxxxxxxx a xxxx xx proto xxxxxx xxxxxxxxx postup.
ČÁST X XXXXXXXXX XXXX
1. Xxxx x oblast použití
Touto xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx v xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx analýzu xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, jejichž xxxxxxxx xx xxxx podle xxxxxxxx Xxxx 136/66/EHS xx dne 22. xxxx 1996.
Xxxxx druhu x xxxxxxx xxxxxx xx pro xxxxxxx xxxxxxx xxxxx ze xxxx následujících postupů:
1.1 Xxxxxx X – xxxxx extrahovatelné xxxx
Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx, x výjimkou xxxx, xxxxx jsou xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx X.
1.2 Postup X – xxxxxxx xxx
Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx pro krmiva xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxx krmné xxxxx. Používá se xxx xxxxxxx materiály, x xxxxx xxxx xxxxx tuk úplně xxxxxxxxxx xxx předchozí xxxxxxxxx (xxxx. xxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxx zpracování, xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x zahřívání).
1.3 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx
Xx xxxxx případech, xxx xx dosáhlo xxxxxxx xxxxxxxx postupem X, xxx xxxxxxxx X, xx třeba xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx X.
2. Xxxxxxx
2.1 Xxxxxx X
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxx x xxxxx.
2.2 Xxxxxx X
Xxxxxx xx zahřívá x xxxxxxxxx chlorovdíkovou. Xxxx xx ochladí x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxxxxx podle xxxxxxx X.
3. Činidla
3.1 xxxxxxxxxxx s xxxxx xxxx xxxx 40 x 50 °X. Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxx xxx 1 x xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxx 2 xx/100 xx
3.2 síran xxxxx, xxxxxxx
3.3 xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, x = 3 xxx XXx/x
3.4 xxxxxxxxx prostředky, xxxx. xxxxxxxxx, Xxxxx-xxxxxxxx.
4. Přístroje x xxxxxxx
4.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxxxxx (Xxxxxxxxx xxxxxxxx), refluxní xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx asi 10 xxxxx xx hodinu. X xxxx xxx xxxxxx xx měla xxx refluxní rychlost xxx 10 xx xx minutu.
4.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx, bez xxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx, x porositou v xxxxxxx x požadavky xxxxx xxxx 4.1.
4.3 Xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx xx 75 °X ± 3 °X, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 100 °X ± 3 °X.
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxx X (viz bod 8.1)
Xx extrakční xxxxxxx xx naváží 5 x vzorku x xxxxxxxxx na 1 xx (4.2) a xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx tuku.
Patrona xx xxxxxx xx extrakčního xxxxxxxxx (4.1) a xxxxxxxxxx šest hodin xxxxxxxxxxxxx (3.1). Petroletherový xxxxxxx xx jímá xx xxxxx, předem xxxxxxx xxxxx, která xxxxxxxx xxxxxx xxxxx [1].
Xxxxxxxxxxxx se oddestiluje, xxxxxx v baňce xx xxxx 1,5 xxxxxx v xxxxxxx (4.3). Nechá se xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx x xxxxx. Suší xx xxxxxxx 30 xxxxx, aby se xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx (xxxxxx hmotnosti mezi xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxx 1 mg).
5.2 Xxxxxx X
Xx xxxxxxx x xxxxxx 400 xx nebo xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 300 ml xx xxxxxx 2,5 x xxxxxx x xxxxxxxxx na 1 xx (viz xxx (8,2) x přidá xx 100 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.3) x xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxxxx baňka xxxxxx refluxním xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxx xx topné xxxxx x vaří xx xx xxxx xxxxx hodiny. Xxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxxx usazování xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx.
Xxxx xx ochladí x xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx filtračního xxxxxxxxxx (3.4), aby xxx xxxxxxxx xxxxxxx xx ztrátám xxxx. Xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxx se promývá xxxxxxxx xxxxx, xx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx, zda xxxxxxx xxxxxxxxxx žádný xxx. Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xx se vzorek xxxx xxxx hydrolýzou xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx X.
Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxx na xxxxxxxx xxxx a xxxx xx půldruhé xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.3) xxx xxxxxxx 100 °C ± 3 °X.
Xxxxxxx xxxxxxxxx papír x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.2) a xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxx. Patrona xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1) x xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx odstavce xxxx 5.1.
6. Xxxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx procento xx xxxxxx.
7. Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx vzorku xxxxxxx pracovníkem xx xxxxx přesáhnout:
- 0,2 % v xxxxxxxxx xxxxxxx, při obsahu xxxx xxxxxx xxx 5 %,
- 4,0 % xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxx xx 5 xx 10 %,
- 0,4 % x xxxxxxxxx hodnotě, při xxxxxx xxx 10 %.
8. Xxxxxxxx
8.1 X xxxxxxx x vysokým xxxxxxx olejů x xxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx neumožňují xxxxxxx xxxxxxxxxx homogenní xxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
Xxxxxx se 20 x xxxxxx s xxxxxxxxx na 1 xx x xxxxxx xx x 10 xxxx x více xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (3.2). Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx (3.1) xxxxx xxxx 5.1. Xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx na 500 xx xxxxxxxxxxxxx (3.1) x promíchá se. 50 xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx do xxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxx, obsahující xxxxxx xxxxx [2].
Rozpouštědlo xx xxxxxxxxxxxx, baňka xx xxxxxx a xxxxxxxxx xx podle xxxxxxxxxx odstavce bodu 5.1.
Xxxxx tuku se xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx pomocí xxxxxxxxxxxxx vzorce:
(10 x + b) × 5
xxx:
x = xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx (xxxxxxx xxxx extraktu)
b = hmotnost xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx
8.2 X xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxx obsah xxxx xx může xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx 5 g.
8.3 Xxxxxx pro domácí xxxxxxx, xxxxx mají xxxxxx xxxxx vody, xx xxxx xxxx xxxxxxxxxx a extrakcí xxxxx xxxxxxx X xxxxxxx s bezvodým xxxxxxx xxxxxx.
8.4 X xxxx 5.2 xx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx po filtraci xxxxxxxx použít horká xxxx xxxxx xxxx xxxxxxx.
8.5 X xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx 1,5 xxx. Xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxx x xxxxxx výsledkům. Xx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx troubu.
8.6 Xxx xxxxxx xxxx xxx 15 % xx doporučuje xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx extrakci xxxxx xxxxxxx X x xxxxxxxx extrakci xxxxx xxxxxxx X. Xxxxxx to xx xxxxx xxxx na xxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx x xxxxxx.
XXXX X
XXXXXXXXX XXXXXXXXXXX
(2-[X-2-(xxxxxxxxxxxx)xxxxxxxxx]-3-xxxxxxxxxxxxxxxx-X1,X4-xxxxxx)
1. Xxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx obsah xxxxxxxxxxx x krmivech. Dolní xxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 5 mg/kg.
2. Xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx a xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx chromatografií (XXXX) xx xxxxxxxx fázi xx xxxxxxx UV xxxxxxxxx.
3. Xxxxxxx
3.1 methanol
3.2 xxxxxxxx, xxx XXXX
3.3 xxxx, pro HPLC
3.4 xxxxxxx xxxx pro XXXX:
Xxxx xxxx (3.3) x xxxxxxxxx (3.2), 900 + 100 (X + V)
3.5 xxxxxxxxxx xxxxx: xxxxx xxxxxxxxxx 2-[N-2-(hydroxyethyl)karbomoyl]-3-methylchinoxalin-N1,N4-dioxid, E 851
3.5.1 xxxxxxx standardní xxxxxxxx xxxxxx olachindoxu, 250 μx/xx
Xx odměrné xxxxx x xxxxxx 200 ml se xxxxxx 50 xx xxxxxxxxxxx (3.5) x xxxxxxxxx xx 0,1 xx x xxxxx xxx 190 xx xxxx. Xxxxx se xxxxxxx na 20 xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1). Xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx laboratorní xxxxxxx, xxxxxx xxxxx xx xxxxxx a xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx hliníkovou fólií x xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx. Tento xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx každý měsíc.
3.5.2 xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx, 25 μx/xx
10,0 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.1) xx xxxxxxx xx xxxxxxx baňky x xxxxxx 100 ml, xxxxxx se po xxxxxx mobilní fází (3.4) x promíchá. Xxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx. Xxxxx roztok xx xxxx připravovat xxxxx xxxxxxx.
3.5.3 xxxxxxxxxx roztoky
Do xxxx xxxxxxxxx xxxxx x obsahu 50 xx xx odpipetuje 1,0, 2,0, 5,0, 10,0, 15,0 a 20,0 ml xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.2). Xxxxxx xx xxxxxxx xxxx (3.4) po xxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxx xx obalí xxxxxxxxxx xxxxx. Tyto xxxxxxx xxxxxxxxxx 0,5, 1,0, 2,5, 5,0, 7,5 x 10,0 μx xxxxxxxxxxx na xx.
Xxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx
4.1 xxxxxxxxxxxx xxxxx
4.2 xxxxxxxxxx xxxxxxxx
4.3 xxxxxxxx XXXX x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx s xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx
4.3.1 xxxxxx pro kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx, 250 xx x 4 mm, xxxxxxx X18, 10 μx, xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx
4.4 xxxxxxxxxx xxxxxx x póry 0,45 μx
5. Xxxxxx
Xxxxxxxx:
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx světlo. Xxxxxxx xxxxxxx se xxxx xxxxxxxx při xxxxxxxx xxxxxx nebo x nádobách x xxxxxxx xxxx.
5.1 Obecně
5.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx se xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx kontrolu, zda xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx interferující xxxxx.
5.1.2 Xxxxxxx na výtěžnost xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx krmiva obohaceného xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx obsahu xx xxxxxx X fortifikaci xx xxxxxx 50 xx/xx xx xxxxxxxxxx 10,0 ml xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoku (3.5.1) xx xxxxxxx xxxxx o xxxxxx 250 ml x xxxxxx xx xxxxxx xx cca 0,5 xx. Xxxxx xx 50 x xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxx a xxxxx xx 10 xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx několikrát xxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx (5.2).
Xxxxxxxx:
Xxx xxxxx xxxx xxxxxx xx být xxxxxxxx xxxxxx podobného typu xxxx zkoušený xxxxxx x nesmí xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.
5.2 Extrakce
Naváží xx xxxxxxxxx 50 x xxxxxx x xxxxxxxxx xx 0,01 g. Xxxxxxx xx do xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 1000 ml, xxxxx xx 100 xx methanolu (3.1) x xxxxx xx xxxxxx xx xxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1). Xxxxx xx 410 xx xxxx a xxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx 15 xxxxx. Baňka se xxxxx x ultrazvukové xxxxx, dále xx xxxxx 30 xxxxx xx xxxxxxxx (4.2) x xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx. 10,0 ml xxxxxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 20 xx, xxxxxx xx xxxxx xx značku x xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxx xx přefiltruje xxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) (viz xxx 9. Xxxxxxxx). Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx XXXX (5.3).
5.3 Xxxxxxxxx HPLC
5.3.1 Xxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxx použity xxxx podmínky, xx xxxxxxxxxxx, že dávají xxxxxxxxxx xxxxxxxx.
xxxxxxxxxx kolona (4.3.1)
xxxxxxx fáze (3,4): Xxxx xxxx (3.3) x methanolu (3.2), 900 + 100 (X + X)
xxxxxxxxx xxxxxxxx: 1,5–2 xx/xxx
xxxxxxxx xxxxxx xxxxx: 380 xx
xxxxx nástřiku: 20 μx–100 μl
Stabilita xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx, že xx xxxxxxxxxx nastříkne kalibrační xxxxxx (3.5.3) xxxxxxxxxx 2,5 μx/xx, xx xx dosáhne xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx a xxxxxxxxxx časů.
5.3.2 Xxxxxxxxxx xxxx
Xxx xxxxx kalibrační xxxxxx xx provede xxxxxxx nástřiků a xxxxxx xx střední xxxxxxx xxxxx (plochy) xxxx xxx každou xxxxxxxxxxx. Sestrojí xx xxxx za xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx (xxxxx) xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x μx/xx xxxx xxxxxxxxx.
5.3.3 Xxxxxx xxxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx nástřiků xxxxxxxx xxxxxx (5.2) xxx xxxxxxx stejného xxxxxx xxxx u xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx se střední xxxxx (plocha) píků xxxxxxxxxxx.
6. Výpočet xxxxxxxx
Xx xxxxxxx hodnoty xxxxx (xxxxxx) píků xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx zjistí koncentrace x xxxxxxx xxxxxx x μx/xx porovnáním x xxxxxxxxxxx xxxxxx (5.3.2).
Xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x x xx/xx xx xxx xxxxxxxxxxx rovnicí:
w = x × 1&xxxx;000 / x
xxx:
x = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxx vzorku (5.2) x μx/xx
x = xxxxxxxx navážky xxxxxx x x (5.2)
7. Xxxxxxxxxxx výsledků
7.1 Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x přídavkem (co-chromatography) xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x diodovým xxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx vzorku (5.2) x kalibračního xxxxxxx (3.5.3), xxxxxxxxxxxx 5,0 μg/ml xxxxxxxxxxx.
7.1.1 Xxxxxxxxx stanovením x xxxxxxxxx (xx-xxxxxxxxxxxxxx)
Xxxxxxx xxxxxx (5.2) xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.3). Xxxxxxxx přidaného xxxxxxxxxxx xx xxxx odpovídat xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx.
X xxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx by xxxx xxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxx x xxxxxxxx xxxx xxxxx musí být x xxxxxxx ±10 % xxxxxxx xxxxx xxxx olachindoxu x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx vzorku.
7.1.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxx pole
Výsledky xx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:
x) xxx xxxxxx délce maximální xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx musí xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx danou xxxxxxxxxxx schopností detekčního xxxxxxx. Pro xxxxxxxx x xxxxxxxx polem xx xxxxx ±2 xx;
x) xxx xxxxxx xxxxx mezi 220 x 400 nm xx nesmí xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku x standardu xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 10 xx 100 % xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xx dosaženo, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx dvěma xxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 % xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx;
x) xxx xxxxxx xxxxx xxxx 220 a 350 nm se xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx a sestupu xxxx zkoušeného xxxxxx xxxxx xx ostatních x xxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx 10 až 100 % relativní xxxxxxxxxx. Xxxxxx kritéria xx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx stejná maxima x xxxxxxxx ve xxxxx sledovaných xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx 15 % xxxxxxxxxx xxxxxxx xx vrcholu xxxx.
Xxxx-xx xxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, přítomnost xxxxxxx xxxx potvrzena.
7.2 Xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxx mezi výsledky xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx obsahu xxxxxxxxxxx mezi 10 x 20 xx/xx, xxxxx xxxxxxxxxx15 % xxxxxxx xxxxxxxx.
7.3 Xxxxxxxxx
Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 90 %.
8. Xxxxxxxx xxxxxxxxx testu
V xxxxx XX xxx xxxxxxxx xxxxxxx test, xxx xxxx až 13 xxxxxxxxxx analyzovalo xxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x následující xxxxxxx:
|
| xxxxxx 1 |
xxxxxx 2 |
vzorek 3 |
xxxxxx 4 |
|
|
L |
13 |
10 |
11 |
11 |
|
A |
40 |
40 |
44 |
44 |
|
střední (xx/xx) |
- |
14,6 |
48,0 |
95,4 |
|
(Xx) (xx/xx) |
- |
0,82 |
2,05 |
6,36 |
|
(XX) (mg/kg) |
- |
1,62 |
4,28 |
8,42 |
|
CVr (%) |
- |
5,6 |
4,3 |
6,7 |
|
XXX (%) |
- |
11,1 |
8,9 |
8,8 |
|
xxxxxxxxx xxxxx (xx/xx) |
- |
15 |
50 |
100 |
|
xxxxxxxxx (%) |
- |
97,3 |
96,0 |
95,4 |
X: xxxxx xxxxxxxxxx
x: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xx: xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx
XX: xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
XXx: xxxxxxxx xxxxxxxxxx opakovatelnosti
CVR: xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx
9. Xxxxxxxx
Xxxxxxx tato xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxx 100 mg/kg xxxxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx vzorku x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.2) xxx, xxx xx dosáhlo xxxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.3.2).
[1] Pokud xx xx xxx xxxxxxxx zkoušet na xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxx xxxxx za xxxxxxxx xxxxxxx.
[2] Xxxxx xx xx tuk xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx, xxxxxx se xxxxxx pemzy za xxxxxxxx xxxxxxx.