Plné znění - 31998L0064

Xxxxxxxx Xxxxxx 98/64/XX

xx xxx 3. září 1998,

xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx metody Společenství xxx stanovení xxxxxxxxxxxx, xxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx x xxxxxx se mění xxxxxxxx 71/393/XXX

(Xxxx x xxxxxxxx pro EHP)

KOMISE XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,

x xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Evropského xxxxxxxxxxxx,

x xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxx 70/373/XXX xx xxx 20. xxxxxxxx 1970 o xxxxxxxx xxxxx odběru xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx krmiv [1], xxxxxxxxx pozměněnou Aktem x xxxxxxxxxxx Xxxxxxxx, Xxxxxx a Švédska, x xxxxxxx na xxxxxx 2 xxxxxxx xxxxxxxx,

xxxxxxxx x xxxx, xx směrnice 70/373/XXX xxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx kontroly, xxx xxxxxx splňují xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx z právních x xxxxxxxxx předpisů xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx x složení, xx xxxxxxx xx xxxxxxx metod odběru xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx ve Xxxxxxxxxxxx;

xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx Xxxx 79/373/XXX xx xxx 2. xxxxx 1979 o xxxxxxx krmných xxxxx xx xxx [2], xxxxxxxxx pozměněná xxxxxxxx Xxxxxx 97/47/XX [3], x xxxxxxxx Xxxx 93/74/XXX xx xxx 13. xxxx 1993 x xxxxxxxx xxxxxxxx xx zvláštním xxxxxx xxxxxx [4], naposledy xxxxxxxxx xxxxxxxx 96/25/XX [5], xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxx xxxx být xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx;

xxxxxxxx k xxxx, xx směrnice Rady 70/524/XXX xx xxx 23. xxxxxxxxx 1970 x doplňkových xxxxxxx x krmivech [6], xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 98/19/XX [7], xxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxxxx musí xxx xxxxxx na xxxxxxxx, xxxxx je xxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx směsí;

vzhledem k xxxx, že xxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 71/393/XXX xx xxx 18. xxxxxxxxx 1971, xxxxxx xx xxxxxxx analytické xxxxxx Xxxxxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxx xxxxx [8], naposledy xxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 84/4/EHS [9], stanoví xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxx x pro xxxxxxxxxx xxxxxx tuku; xx xx xxxxxx uvedené xxxxxx upravit;

vzhledem x xxxx, xx xxxx xxx stanoveny analytické xxxxxx Xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxx xxxxx;

xxxxxxxx x xxxx, že xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx v souladu xx xxxxxxxxxxx Stálého xxxxxx xxx xxxxxx,

XXXXXXX XXXX SMĚRNICI:

Xxxxxx 1

Xxxxxxx státy xxxxxxx, xx analýzy xxx úřední xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxx x obsahu xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx se xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx 2

X příloze xxxxxxxx Komise 71/393/XXX xx bod "4. Xxxxxxxxx xxxxxx xxxx" xxxxxxxxx částí B xxxxxxx xxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx 3

1. Členské xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx směrnicí xxxxxxxxxx xx 31. xxxxxxxx 1998. Xxxxxxx x nich neprodleně Xxxxxx.

Xxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx od 1. xxxxx 1999.

Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx odkaz xx tuto směrnici xxxx xxxx být xxxxxx xxxxx xxxxxx xxx jejich xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

2. Xxxxxxx xxxxx xxxxx Komisi xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.

Článek 4

Xxxx směrnice xxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxx dnem po xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Článek 5

Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

X Xxxxxxx xxx 3. xxxx 1998.

Xx Xxxxxx

Xxxxx Fischler

člen Komise

---

[1] Xx. xxxx. X 170, 3.8.1970, x. 2.

[2] Xx. xxxx. X 86, 6.4.1979, x. 30.

[3] Xx. věst. X 211, 5.8.1977, x. 45.

[4] Xx. xxxx. X 237, 22.9.1993, x. 23.

[5] Úř. xxxx. X 125, 23.5.1996, x. 35.

[6] Úř. věst. X 270, 14.12.1970, x. 1.

[7] Xx. věst. X 96, 28.3.1998, x. 39.

[8] Xx. xxxx. X 279, 2.12.1971, x. 7.

[9] Úř. xxxx. X 15, 18.1.1984, x. 28.

---

PŘÍLOHA

ČÁST X

Xxxxxxxxx aminokyselin

1. Xxxx x xxxxxx xxxxxxx

Xxxx metoda slouží xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx) a vázaných (xxxxxxx xxxxxx x xxxxx) aminokyselin x xxxxxxxx xx použití xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxx xx použitelná pro xxxx xxxxxxxxxxxxx: xxxx(x)xx, xxxxxxxxx, xxxxx, xxxxxxxx, xxxxxx, xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx glutamovou, xxxxxx, xxxxxxxx, isoleucin, xxxxxx, xxxxxxxxxxx, prolin, xxxxx, xxxxxxx a xxxxx.

Xxxx metoda nerozlišuje xxxx solemi aminokyselin x nemůže také x aminokyselin xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx D x X. Xxxx xxxxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

2. Xxxxxxx

2.1 Xxxxx aminokyseliny

Volné xxxxxxxxxxxxx xx extrahují xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxx dusíkaté xxxxxxxxxxxxx xx srážejí xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xx pH 2,20. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx xx xx xxxxxx x ninhydrinem xxxxxxxxxxxxx detekcí xxx 570 xx.

2.2 Xxxxxx xxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx aminokyselinách. Xxxx(x)xx x methionin xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxx oxidovány na xxxxxxxx xxxxxxxxx x xx xxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx aminokyseliny xxxxxxx v xxxx 1 xxxxx xxx xxxxxxxxxx buď v xxxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx vzorku.

Oxidace xx xxxxxxx xxx 0 xX xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x fenolu. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx. Oxidovaný xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (x = 6 xxx/x) xx 23 xxxxx. Hydrolyzát xx xxxxxx xx xX 2,20. Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx chromatografií x stanovují xx xx reakci x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx 570 nm (440 xx xxx xxxxxx).

3. Xxxxxxx

Xxxx xxx xxxxxxx dvakrát xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxx jakosti (xxxxxxxx &xx; 10 μX).

3.1 xxxxxxx xxxxxx, x = 30 %

3.2 xxxxxxxx xxxxxxxx, x = 98–100 %

3.3 xxxxx

3.4 xxxxxxxxx sodný

3.5 xxxxxxxx xxxxx

3.6 xxxxxxxx 5-xxxxxxxxxxxxxxx, dihydrát

3.7 xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx o xxxxxxx xxxxxxxxx 1,18 x/xx

3.8 xxxxxxxx sodný, dihydrát

3.9 2,2-xxxxxxxxxxxxx (thiodiglykol)

3.10 xxxxxxx xxxxx

3.11 xxxxxxxxx

3.12 petrolether, xxx varu 40–60 °X

3.13 norleucin xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx

3.14 xxxxx – plyn (&xx; 10 ppm xxxxxxx)

3.15 1-xxxxxxx

3.16 xxxxxxxxxxxxx

3.16.1 xxxxxxxxxx látky xxxxxxx x xxxx 1; xxxxx sloučeniny xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx. Vysuší xx xx vakuu xxx X₂X₅ xxxx X₂XX₄ xxxxx xxxx xxxxxxxx

3.16.2 xxxxxxxx cysteová

3.16.3 xxxxxxxxxxxxxxx

3.17 xxxxxxxx xxxxx, xxxxxx x = 7,5 xxx/x:

300 x XxXX (3.5) xx xxxxxxxx ve xxxx x doplní xx 1 litru.

3.18 hydroxid xxxxx, xxxxxx x = 1 mol/l:

40 x XxXX (3.5) xx xxxxxxxx xx xxxx a xxxxxx xx 1 litru.

3.19 xxxxxx xxxxxxxx mravenčí x fenolu:

Smíchá xx 889 x xxxxxxxx xxxxxxxx (3.2) xx 111 x xxxx x xxxxx xx 4,73 g xxxxxx (3.3).

3.20 xxxxxxxxxxxx xxxx, x = 6 xxx HCl/l s xxxxxxxxx 1 x xxxxxx/x:

X 492 xx XXx (3.7) xx xxxxx 1 g xxxxxx (3.3) x xxxxxx xx vodou xx 1 xxxxx.

3.21 xxxxxxxxx xxxx, c = 6 mol XXx/x x xxxxxxxxx 2% xxxxxxxxxxxxx:

8,2 xx XXx (3.7) se xxxxxxx přibližně 900 xx xxxx, xxxxx xx 20 xx xxxxxxxxxxxxx (3.9) a xxxxxx xxxxx na 1 xxxx (3.7 x 3.9 se xxxxx smíchat xxxxx).

3.22 xxxxxxxx 5-sulfosalicylová, β = 6 %:

60 x xxxxxxxx 5-xxxxxxxxxxxxxxx (3.6) xx rozpustí xx vodě x xxxxxx vodou na 1 litr.

3.23 xxxxxxxx xxxx (kyselina permravenčí – fenol):

V xxxx xxxxxxx se smíchá 0,5 xx peroxidu xxxxxx (3.1) x 4,5 xx xxxxxxx xxxxxxxx mravenčí s xxxxxxx (3.19); ponechá xx x klidu 1 hodinu xxx 20–30 °X, xxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxx xx vzorku xx xxxx xxxxxxx v xxxxx x xxxxxxx xxxxx (15 minut).

Pozor:

Je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxx x xxxxxxxx ochranný xxxx.

3.24 xxxxxxxxxxx xxxxxxx roztok, x = 0,2 xxx Na+/l, xX 2,20:

X xxxxxxxxx 800 xx xxxx se xxxxxxxx 19,61 x xxxxxxxxx xxxxxxx (3,8), 5 xx xxxxxxxxxxxxx (3.9), 1 g xxxxxx (3.3) x 16,50 xx XXx (3.7). xX se xxxxxx xx 2,20. Xxxxxx xx xxxxx xx xxxxx 1 xxxxx.

3.25 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx připravované podle xxxxxxxx xxx použitý xxxxxxxxxx (4.9)

3.26 ninhydrinové xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxxx (4.9)

3.27 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxx 5 °C.

3.27.1 xxxxxxx standardní základní xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.16.1), x = 2,5 μxxx/xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Tento roztok xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx.

3.27.2 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx roztok xxxxxxxx cysteové x xxxxxxxxxxxxxxxx, c = 1,25 μxxx/xx

0,2115 x xxxxxxxx xxxxxxxx (3.16.2) x 0,2265 g xxxxxxxxxxxxxxxx se xxxxxxxx (3.16.3) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (3.24) x litrové xxxxxxx xxxxx x xxxxxx xx po xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxx 5 °X xxxxxxx 12 xxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx nepoužívá, xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.27.1) xxxxxxxx kyselinu xxxxxxxxx a methioninsulfon.

3.27.3 xxxxxxx xxxxxxxxxx základní xxxxxx vnitřního standardu, xxxx. norleucinu, c = 20 μxxx/xx

0,6560 x norleucinu (3.13) xx rozpustí v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (3.24) v odměrné xxxxx xx 250 xx a xxxxxx xx po xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxx 5 °X xxxxxxx 6 xxxxxx.

3.27.4 xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx aminokyselin xxx xxxxxxx s xxxxxxxxxxx, x = 5 xxxx/50 μx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxx x x = 10 xxxx/50 μx x ostatních aminokyselin

Ve 100 ml xxxxxxx xx xxxxxxxx 2,2 x chloridu sodného (3.10) v 30 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24). Xxxxxxx xx 4,00 xx xxxxxxxxx standardního xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.27.1), 4,00 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx cysteové a xxxxxxxxxxxxxxxx (3.27.2) x 0,50 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.27.3), xxxxx xx používá. xX xx xxxxxx xx 2,20 xxxxxxxxxx xxxxxx (3.18).

Xxxxxx se xxxxxxxxxxxxx převede do 50 xx odměrné xxxxx, xxxxxx po xxxxxx citronanovým xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24) x xxxxxxx xx.

Xxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxx 5 °X xxxxxxx 3 xxxxxx.

Xxx xxxx xxxxxxxx 9.1.

3.27.5 xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx použití x xxxxxxxxxxx, připravenými xxxxx xxxx 5.3.3.1 x xxx xxxxxxxx (5.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx podle 3.27.4 x xxxxxxxxxx chloridu xxxxxxx.

Xxxxxxxxx při xxxxxxx xxx 5 °C xxxxxxx 3 xxxxxx.

4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx

4.1 xxxxx s kulatým xxxx x xxxxxx 100 xxxx 250 xx opatřená xxxxxxx xxxxxxxxx

4.2 nádoba x xxxxxxxxxxxxxxxx skla x xxxxxx 100 ml xx šroubovým uzávěrem x xxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx (např. Xxxxx, Xxxxxx) xxx xxxxxxx v xxxxxxx

4.3 xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx xxx ±2 °X

4.4 xX xxxx (xxx xxxxxxxxx místa)

4.5 xxxxxxxxxx xxxxx (0,2 μx)

4.6 xxxxxxxxxxx

4.7 xxxxxxx xxxxxxx odparka

4.8 mechanická xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx

4.9 xxxxxxxxxx aminokyselin xxxx xxxxxxxx XXXX x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxx kolonovou derivatizaci x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxx xx xxxxxx sulfonovanou xxxxxxxxxxxxxx pryskyřicí, která xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxx xx jiných xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx. Průtok xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx ± 0,5 % xx dobu xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx x xxxxxxx, xx xxxxxxxxxx vykazuje xxxxxxxxxxx sodíkových iontů x = 0,8 xxx/x x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx separaci xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, obsahuje-li xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x/xxxx xxxxxx koncentrace xxxxxxxxxx iontů. X xxxxxxx případě se xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx úpravou pH xxxxxxxxx hydrolyzátu xx xxxxx 5 xx. Xxxxxxxx xx xx xxxxxxxx xx vakuu xxx xxxxxxx xxxxxxx 40 °X.

5. Xxxxxx

5.1 Xxxxxxxx vzorku

Vzorek xx xxxxxx xxxxxx tak, xxx xxxxxx sítem x xxx 0,5 xx. Xxxxxx x xxxxxxx vlhkostí xx xxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 50 °C xxxx xxx xxxxxxxx. Xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.12).

5.2 Xxxxxxxxx volných xxxxxxxxxxxx v krmivech x x xxxxxxxxx

Xx xxxxxxx xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (1–5 x) upraveného xxxxxx (5.1) x xxxxxxxxx xx 0,2 xx x přidá xx 100,0 xx xxxxxxxxx xxxxx (3.21). Xxxxx xx xxxxx 60 minut xx xxxxxxxxxx třepačce xxxx xxxxx na magnetické xxxxxxxx (4.8). Po xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx 10,0 ml xxxxxxxxxxxx do xxxxxxx x obsahu 100 xx.

Xx xxxxxxx xxxxxxx xx přidá 50 xx xxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 5 xxxxx. Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxx odstředí tak, xxx xx odstranila xxxxxxx sraženina. 10,0 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx přenese xx xxxxxxx o obsahu 100 ml, xX xx upraví xx 2,20 xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx sodného (3.18), xxxxx xx roztok xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx roztoku (3.24) xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx po xxxxxx xxxxxxxx roztokem (3.24).

Použije-li xx xxxxxxx standard, xxxxx xx 1,00 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.27.3) na každých 100 xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xx doplní xx xxxxxx xxxxxxxx roztokem (3.24).

Xxxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.4 – xxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxx-xx extrakty xxxxxxxxxx xxx den, xxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxx xxx 5 °X.

5.3 Xxxxxxxxx celkových xxxxxxxxxxxx

5.3.1 xxxxxxx

0,1 xx 1 x upraveného xxxxxx (5.1) xx xxxxxx x přesností 0,2 xx:

- xx xxxxx s xxxxxxx xxxx x xxxxxx 100 ml (4.1) xxx otevřenou xxxxxxxxx (5.3.2.3) nebo

- xx xxxxx x kulatým xxxx o xxxxxx 250 ml (4.1), xxxxxxxx-xx xx xxxxx xxxxxxxxxxx sodíku xxxx

- xx xxxxxx x xxxxxx 100 xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.2) (xxx uzavřenou xxxxxxxxx 5.3.2.4).

Xxxxxxxx část xxxxxx by xxxx xxx obsah xxxxxx xxx 10 xx x xxxxx vlhkosti xxxxxxxxxxxxx 100 xx.

Xxxxx/xxxxxx xx xxxxxx xx xxxxx x ledovou xxxxx x xxxxxxx xx xx 0 °X, xxxxx xx xxxxx 5 xx xxxxxxxx xxxxx (3.23) x xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxx/xxxxxx xx xxxxxx x xx lžící xxxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xx x s xxxxx x ledovou xxxxx xx xxxxxxxxxx xxx 0 °X x xxxxxxx xx xxx 16 hodin. Xx 16 xxxxxxxx xx xxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx 0,84 x xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.4).

Xxxx se xxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.1.

5.3.2 hydrolýza

5.3.2.1 xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx

X xxxxxxxxxxx vzorku xxxxxxxxxxxx xxxxx 5.3.1 se xxxxx 25 xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (3.20) xxx, aby neulpěl xxxxx vzorek xx xxxxxxx xxxxxx ani xx lžíci. Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.3 xxxx 5.3.2.4.

5.3.2.2 xxxxxxxxx neoxidovaných vzorků

Do xxxxx x xxxxxxx xxxx o xxxxxx 100 xx xxxx 250 ml (4.1) xxxx do xxxxxx x xxxxxx100 ml xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.2) se xxxxxx 0,1 až 1 x xxxxxxxxxx vzorku (5.1) x xxxxxxxxx xx 0,2 xx. Xxxxxxxx část xxxxxx xx xxxx xxx xxxxx xxxxxx xxx 10 mg. Opatrně xx xxxxx 25 xx hydrolyzační směsi (3.20) a xxxxxx xx se xxxxxxx. Xxxx se xxxxxxxxx xxx xxxxx 5.3.2.3 xxxx podle 5.3.2.4.

5.3.2.3 xxxxxxxx xxxxxxxxx

Xx xxxxx x xxxxx (xxxxxxxxxx xxxxx 5.3.2.1 xxxx 5.3.2.2) xx xxxxxxx 3 xxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xx xxxxx xx mírného xxxx xxx zpětným xxxxxxxxx xx dobu 23 hodin. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 5 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24). Xxxxx se odpojí x xxxxxxx xx x ledové lázni. Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx 5.3.3.

5.3.2.4 uzavřená xxxxxxxxx

Xxxxx xx směsí xxxxxxxxxxx podle 5.3.2.1 xxxx 5.3.2.2 se xxxxxx xx sušárny (4.3) při 110 °X. Xxx se xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx tlaku (x xxxxxxxx vyvíjení xxxxxxxx xxxxx) x xxxxxxx k výbuchu, xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx volně xx xxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxx. Xx uplynutí xxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx v xxxxxxx (4.3) 23 xxxxx. Xx skončení xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xx sušárny, xxxxxxx xx odšroubuje uzávěr x postaví se xx lázně x xxxxxxx vodou. Xxxxx xx nechá xxxxxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx postupu při xxxxxx xX (5.3.3) xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx tlumivého xxxxxxx (3.24) xx xxxxxxx x obsahu 250 xx xxxx do xxxxx x kulatým xxxx o obsahu 250 xx.

Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx 5.3.3

5.3.3 xxxxxx xX

Xxxxx xxxx, xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.9), postupujte xxx xxxxxx pH xxxxx 5.3.3.1 xxxx 5.3.3.2.

5.3.3.1 pro chromatografické xxxxxxx (4.9), vyžadující xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxxxx xxxxxxxxxx aminokyselin xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx sodíku (xx-xx xx xxxxxx xxxxx kyselin), xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx standardní roztok (3.27.3).

X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx 2,00 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx standardního xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.27.3).

Xx hydrolyzátu xxxxxxxxxx podle 5.3.2.3 xxxx 5.3.2.4. xx xxxxxxx 2 xxxxx 1-xxxxxxxx (3.15).

Xx xxxxxxx xxxxxxx (4.7) xx xxxxx objem xx 5-10 xx xx xxxxx xxx 40 °X. Xxxxx by xx objem náhodou xxxxxx xxx 5 xx, hydrolyzát xx xxxxx odstranit a xxxxx xxxxxxx xxxxx.

xX xx upraví na 2,20 xxxxxxxx hydroxidu xxxxxxx (3.18) a xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx 5.3.4.

5.3.3.2 xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.9)

Xxxxxxxxxxx připravené xxxxx 5.3.2.3 nebo 5.3.2.4 se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx opatrným přidáním 17 xx xxxxxxx xxxxxxxxx sodného (3.17), xx xxxxxxx míchání x při xxxxxxxxx xxxxxxx xxx 40 °X.

xX xx upraví xx 2,20 roztokem xxxxxxxxx xxxxxxx (3.18) xxx pokojové xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.3.4.

5.3.4 xxxxxx vzorků xxx xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxx (5.3.3.1 xxxx 5.3.3.2) x upraveným xX se kvantitativně xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (3.24) xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 200 xx a xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24) xx xxxxxx xx značku.

Nebyl-li xxxxx použit xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx 2,00 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.27.3) a xxxxx xx doplní xx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (3.24). Xxxxxxxx xx xxxxxxxx.

Xxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx (5.4)

Xxxxxx-xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxx, uschovávají se xxx teplotě xxx 5 °C.

5.4 Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx (5.2) x xxxxxxxxxx (5.3.4) xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx 0,2 μ (4.5). Výsledný xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.9).

Xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxx, xxx xx na xxxxxxx nastřikovalo stejné xxxxxxxx roztoku ± 0,5 % jak xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx standardu. Xxxxxx xxxxx sodíku x aminokyselinám xx xxx xxx v xxxxxxxxxxxx roztocích x x xxxxxxxxx xxxxxx xx možná nejpodobnější.

Frekvence xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx nebo xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx roztokem (3.24) xxx, aby xxxxxx píku standardu xxxxxxx 30 – 200 % plochy xxxx xxx jednotlivé xxxxxxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxxx aminokyselin se xxxxx xxxx v xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx ionexu. Zvolený xxxxxx xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxx x xx xxxxxxxxx ninhydrin xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx by xxx xxxxxxxxxxxxxxxx systém xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxx.

Xxx xxxxxxx equimolárního xxxxxx xxxxxxxxxx aminokyselin, by xxxx být xxxxxxxx xxxx uvedené xxxxxx xxxxx k xxxxxxx xxxx. Xxxx equimolární xxxxxxx xxxx obsahovat xxxxxxx 30 % xxxxxxxxxxx xxxxxx jednotlivých xxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxx ještě xxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxx aminokyselin (4.9).

Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx by poměr xxxxx xxxxx x xxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxxxx xx aminokyselin xx xxxxxxxxxxxxx xxxxx přesahovat 2:10 (pokud xx xxxxxxx pouze xxxx(x)xx, xxxxxxxxx, threonin x xxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx píků). Xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxx lepší než 1:10.

Xxxxxx xxxx xxxxxxx, xx lysin bude xxxxxxxxx od "lysinových xxxxxxxx" a xxxxxxxxx.

6. Xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxx píků xxxxxx x xxxxxxxxx se xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx aminokyselinu a xxxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x x xx xx vzorku.

g xxxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxx = X × X × XX × F / X × X × 1 000

Xx-xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx: X / X

X = xxxxxx xxxx hydrolyzátu xxxx xxxxxxxx

X = xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx standardního xxxxxxx

X = plocha xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx x extraktu

D = xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx roztoku

MV = xxxxxxxxxxx váha xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx

X = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x μmol/ml

V = hmotnost xxxxxxx xxxxxx (x) (xxxxxxxxxx xx původní xxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx nebo xxxxxxxx)

X = xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx roztoku (5.3.4) x xx nebo xxxxxxx objem zředěného xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx 6.1

Xxxxxx a xxxxxxx xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx kyselina xxxxxxxx, xxx vypočítávají xx xxxx xxxxxx (X₆X₁₂X₂X₄X₂, XX 240,30) x xxxxxxxx XX 120,15 (= 0,5 x 240,30).

Xxxxxxxxx se x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx se xxxx methionin s xxxxxxxx MV methioninu: 149,21.

Xxxxxxx volný xxxxxxxxx xx zjišťuje xx xxxxxxxx jako xxxxxxxxx, xxx výpočet xx xxxxxxx xxxxxx MV.

6.1 Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (X) při xxxxxxxxx volných aminokyselin (5.2) xx vypočítá xxxxx tohoto xxxxxx:

X = 100 xx × (10 ml + 5 ml) / 10 ml × V ml / 10xx

X = objem xxxxxxxxxx xxxxxxxx

7. Xxxxxxxxxxx xxxxxx

Xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx porovnáním xx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx 1990 při xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx (xxxxx směs xxx prasata, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxx). Xx xxxxxxxxx extrémů xxxx výsledky xxxxxxxxx xxxxxx x standardních xxxxxxxx uvedeny v xxxxxxxxxxx tabulce:

střední xxxxxxx x x/xx

n = xxxxx zúčastněných xxxxxxxxxx

7.1 Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx vnitrolaboratorní standardní xxxxxxxx xx dána xxxxxxxxxxx tabulkou:

standardní xxxxxxxx (X_x) xxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxx v x/xx

n = xxxxx zúčastněných laboratoří

Variační xxxxxxxxxx (%) xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx odchylek (X_x)

x = xxxxx xxxxxxxxxxxx laboratoří

7.2 Xxxxxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx ze shora xxxxxxxxx xxxxxxx jsou xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (XX) x x/xx

n = xxxxx xxxxxxxxxxxx laboratoří

Variační xxxxxxxxxx (%) xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx odchylek (XX)

n = xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx

8. Xxxxxxx referenčních materiálů

Správné xxxxxxx uvedené metody xx xxxxxxx opakovaným xxxxxxx certifikovaných xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx-xx k xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx aminokyselin.

9. Poznámky

9.1 Xxxxxxxx x rozdílům xxxx analyzátory xxxxxxxxxxxx xx xx měly xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (xxx 3.27.4 x 3.27.5) x xxxxxxx xxxxxx (5.3.4) považovat xx doporučené.

Lineární rozsah xxxxxxxxx se musí xxxxxxxxxxxx xxx všechny xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx citronanovým xxxxxxxx xxxxxxxx xxx, xxx xx xxxxxxx xxxxx xxxx uprostřed tohoto xxxxxxx.

9.2 Xxxxx se x xxxxxxx hydrolyzátů xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, musí být xxxxxxxx zkoušek xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

9.3 Xxx xxxxxxx této xxxxxx x xxxxx obsahujících xxxx než 1 % chloridu (koncentráty, xxxxxxxxx xxxxxx, doplňková xxxxxx) xxxx dojít x podhodnocení obsahu xxxxxxxxxx a xxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.

XXXX X XXXXXXXXX XXXX

1. Xxxx x xxxxxx xxxxxxx

Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx tuku v xxxxxxxx. Metoda xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx, jejichž zkoušení xx řídí xxxxx xxxxxxxx Rady 136/66/XXX xx xxx 22. xxxx 1996.

Xxxxx druhu x složení xxxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxxxx postupů:

1.1 Xxxxxx X – xxxxx extrahovatelné tuky

Tato xxxxxx je použitelná xxx krmiva rostlinného xxxxxx, x xxxxxxxx xxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx do xxxxxx xxxxxxx B.

1.2 Xxxxxx X – xxxxxxx xxx

Xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx pro xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxx krmné xxxxx. Používá se xxx všechny xxxxxxxxx, x nichž xxxx xxxxx tuk xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx. xxxxx, xxxxxxxx, xxxxxxxxxx proteiny x výrobky, které xxxx podrobeny xxxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxx x zahřívání).

1.3 Interpretace xxxxxxxx

Xx xxxxx případech, xxx xx dosáhlo xxxxxxx xxxxxxxx postupem X, xxx postupem X, je třeba xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx podle xxxxxxx X.

2. Xxxxxxx

2.1 Postup X

Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx a xxxxxx xx xxxxxx x xxxxx.

2.2 Postup B

Vzorek xx xxxxxxx s xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Směs xx ochladí x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx se xxx zpracuje xxxxx xxxxxxx X.

3. Xxxxxxx

3.1 xxxxxxxxxxx x xxxxx xxxx mezi 40 x 50 °X. Xxxxxxx bromového čísla xxxx být xxxxx xxx 1 x xxxxxx xx odpařování xxxxx xxx 2 xx/100 xx

3.2 xxxxx xxxxx, bezvodý

3.3 xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, c = 3 xxx XXx/x

3.4 xxxxxxxxx prostředky, xxxx. xxxxxxxxx, Xxxxx-xxxxxxxx.

4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx

4.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx, xx sifonem (Xxxxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxxxx xx měla xxxxxxx xxx 10 xxxxx xx hodinu. X xxxx bez xxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx 10 xx xx minutu.

4.2 Xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx látek xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxx bodu 4.1.

4.3 Xxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxx na 75 °X ± 3 °X, xxxx horkovzdušná xxxxxxxx xx 100 °X ± 3 °X.

5. Postup

5.1 Xxxxxx X (xxx xxx 8.1)

Xx extrakční patrony xx xxxxxx 5 x xxxxxx x xxxxxxxxx xx 1 xx (4.2) x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx tuku.

Patrona se xxxxxx do xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1) x xxxxxxxxxx xxxx hodin xxxxxxxxxxxxx (3.1). Petroletherový xxxxxxx xx xxxx xx xxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx [1].

Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxxx x xxxxx xx xxxx 1,5 xxxxxx v xxxxxxx (4.3). Xxxxx se xxxxxxxxxxx x exsikátoru x zváží. Xxxx xx xxxxxxx 30 xxxxx, aby xx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxx tuku konstantní (xxxxxx xxxxxxxxx mezi xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxx xxx 1 xx).

5.2 Xxxxxx B

Do xxxxxxx x xxxxxx 400 xx xxxx xx xxxxxxx baňky o xxxxxx 300 xx xx xxxxxx 2,5 x xxxxxx x xxxxxxxxx na 1 xx (xxx xxx (8,2) x xxxxx xx 100 ml xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.3) x xxxxxx xxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx xx mírného xxxx xx malém plameni xxxx xx topné xxxxx x xxxx xx xx xxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxx xx musí xxxxxxxx usazování částeček xxxxxx na stěnách xxxxxx.

Xxxx se ochladí x xxxxx xx xxxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.4), xxx xxx filtraci xxxxxxx xx xxxxxxx tuku. Xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx dojitý xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx. Xxxxxx xx promývá xxxxxxxx xxxxx, xx xx získá neutrální xxxxxxx. Provede xx xxxxxxxx, xxx filtrát xxxxxxxxxx xxxxx tuk. Xxxx přítomnost ukazuje, xx xx vzorek xxxx xxxx hydrolýzou xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx X.

Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx položí xx xxxxxxxx sklo a xxxx xx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.3) xxx xxxxxxx 100 °X ± 3 °C.

Dvojitý xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx zbytkem xx xxxxx do xxxxxxxxx xxxxxxx (4.2) x xxxxxxxx smotkem vaty xxx tuku. Xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.1) x xxxx xx xxxxxxxxx podle druhého x třetího xxxxxxxx xxxx 5.1.

6. Xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx.

7. Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xx výsledcích dvou xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx pracovníkem by xxxxx xxxxxxxxxx:

- 0,2 % x xxxxxxxxx xxxxxxx, xxx obsahu xxxx nižším než 5 %,

- 4,0 % xxxxxxxxx k xxxxxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxx xx 5 xx 10 %,

- 0,4 % x xxxxxxxxx xxxxxxx, při xxxxxx xxx 10 %.

8. Xxxxxxxx

8.1 X xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxx xxxxx a xxxx, které xx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:

Xxxxxx xx 20 x vzorku x xxxxxxxxx xx 1 xx x smíchá xx s 10 xxxx i xxxx xxxxx bezvodého xxxxxx xxxxxxx (3.2). Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx (3.1) xxxxx bodu 5.1. Xxxxxxxx extrakt xx xxxxxx xx 500 xx xxxxxxxxxxxxx (3.1) x promíchá se. 50 ml roztoku xx xxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxx pemzy [2].

Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx a xxxxxxxxx se podle xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx 5.1.

Xxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxx procento xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorce:

(10 x + x) × 5

xxx:

x = hmotnost xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx (xxxxxxx xxxx xxxxxxxx)

x = hmotnost zbytku xx druhé extrakci x xxxxxxx

8.2 X xxxxxxx, které xxxx xxxxx xxxxx xxxx xx může navážka xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx 5 x.

8.3 Xxxxxx pro xxxxxx xxxxxxx, která xxxx xxxxxx obsah xxxx, xx xxxx xxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx postupu X xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

8.4 X xxxx 5.2 xx xxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxx xxxxxxx.

8.5 X xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx 1,5 xxx. Xx xxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx vysoušení, xxxxx xxxx xxxx x nízkým xxxxxxxxx. Xx možno použít x xxxxxxxxxxx xxxxxx.

8.6 Xxx obsahu xxxx xxx 15 % xx doporučuje xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx A x následně xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx B. Xxxxxx xx do xxxxx xxxx na xxxxx xxxxxx x xxxxx tuku v xxxxxx.

XXXX X

XXXXXXXXX OLACHINDOXU

(2-[N-2-(hydroxyethyl)karbamoyl]-3-methylchinoxalin-N1,N4-dioxid)

1. Xxxx x oblast xxxxxxx

Xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx obsah xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxx xx 5 mg/kg.

2. Princip

Vzorek xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx x xxxxxxxxx. Xxxxx olachindoxu xx xxxxxxxx vysoce xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx XX xxxxxxxxx.

3. Xxxxxxx

3.1 xxxxxxxx

3.2 xxxxxxxx, pro XXXX

3.3 xxxx, pro HPLC

3.4 xxxxxxx xxxx xxx XXXX:

Xxxx vody (3.3) x methanolu (3.2), 900 + 100 (X + X)

3.5 xxxxxxxxxx látka: xxxxx xxxxxxxxxx 2-[N-2-(hydroxyethyl)karbomoyl]-3-methylchinoxalin-N1,N4-dioxid, E 851

3.5.1 zásobní xxxxxxxxxx xxxxxxxx roztok olachindoxu, 250 μx/xx

Xx odměrné xxxxx o obsahu 200 xx xx xxxxxx 50 xx xxxxxxxxxxx (3.5) s xxxxxxxxx na 0,1 xx x xxxxx xxx 190 xx xxxx. Xxxxx se xxxxxxx xx 20 xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1). Xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx laboratorní xxxxxxx, doplní xxxxx xx značku a xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx v xxxxxxxxxx. Xxxxx roztok xx musí xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx měsíc.

3.5.2 xxxxxxxx standardní xxxxxx xxxxxxxxxxx, 25 μx/xx

10,0 xx zásobního xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.1) xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx o xxxxxx 100 ml, xxxxxx xx xx xxxxxx mobilní fází (3.4) a xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx fólií a xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

3.5.3 xxxxxxxxxx roztoky

Do xxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx 50 xx xx xxxxxxxxxx 1,0, 2,0, 5,0, 10,0, 15,0 x 20,0 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.2). Xxxxxx se mobilní xxxx (3.4) po xxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx fólií. Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 0,5, 1,0, 2,5, 5,0, 7,5 x 10,0 μx olachindoxu xx xx.

Xxxx roztoky xx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx.

4. Přístroje a xxxxxxx

4.1 ultrazvuková lázeň

4.2 xxxxxxxxxx třepačka

4.3 xxxxxxxx XXXX x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx x xxxxxxxxxx diodového pole

4.3.1 xxxxxx pro xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, 250 xx x 4 xx, xxxxxxx X18, 10 μx, xxxx srovnatelná xxxxxx

4.4 membránové filtry x xxxx 0,45 μx

5. Postup

Poznámka:

Olachindox je xxxxxxx xx xxxxxx. Xxxxxxx postupy xx xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxx x xxxxxxx skla.

5.1 Xxxxxx

5.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxxx olachindox xxxx xxxx interferující xxxxx.

5.1.2 Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xx provede xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xx xxxxxx X xxxxxxxxxxx xx xxxxxx 50 xx/xx xx odpipetuje 10,0 xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.1) xx xxxxxxx xxxxx x obsahu 250 ml a xxxxxx xx odpaří xx xxx 0,5 xx. Xxxxx xx 50 x xxxxxxxxxx xxxxxx, řádně se xxxxxxxx x xxxxx xx 10 minut xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx (5.2).

Poznámka:

Pro xxxxx xxxx xxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx typu xxxx zkoušený xxxxxx x nesmí xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

5.2 Xxxxxxxx

Xxxxxx xx xxxxxxxxx 50 x xxxxxx x přesností xx 0,01 x. Xxxxxxx se xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 1000 xx, xxxxx xx 100 xx xxxxxxxxx (3.1) x xxxxx xx xxxxxx xx xxx xxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxx (4.1). Xxxxx xx 410 ml xxxx a ponechá xx x ultrazvukové xxxxx dalších 15 xxxxx. Baňka xx xxxxx x ultrazvukové xxxxx, dále se xxxxx 30 xxxxx xx xxxxxxxx (4.2) x xxxxx xx xxxxxxxxxxx složeným filtrem. 10,0 ml xxxxxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxx baňky o xxxxxx 20 ml, xxxxxx xx xxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxx xx přefiltruje xxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.4) (xxx xxx 9. Xxxxxxxx). Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx HPLC (5.3).

5.3 Xxxxxxxxx XXXX

5.3.1 Xxxxxxxxx:

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx jsou doporučené, xxxxx být xxxxxxx xxxx podmínky, za xxxxxxxxxxx, že xxxxxx xxxxxxxxxx výsledky.

analytická xxxxxx (4.3.1)

xxxxxxx fáze (3,4): Xxxx vody (3.3) x xxxxxxxxx (3.2), 900 + 100 (X + X)

xxxxxxxxx xxxxxxxx: 1,5–2 ml/min

detekční xxxxxx xxxxx: 380 xx

xxxxx xxxxxxxx: 20 μx–100 μx

Xxxxxxxxx chromatografického xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxx, xx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx kalibrační xxxxxx (3.5.3) xxxxxxxxxx 2,5 μx/xx, xx xx dosáhne konstantních xxxxx píků x xxxxxxxxxx xxxx.

5.3.2 Kalibrační xxxx

Xxx každý xxxxxxxxxx xxxxxx se provede xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx se střední xxxxxxx xxxxx (xxxxxx) xxxx xxx každou xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxx xx použití xxxxxxxxx hodnot xxxxx (xxxxx) xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx ordinát x příslušných koncentrací x μg/ml xxxx xxxxxxxxx.

5.3.3 Xxxxxx xxxxxx

Xxxxxxx xx několik xxxxxxxx xxxxxxxx vzorku (5.2) xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx (xxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx.

6. Xxxxxxx xxxxxxxx

Xx xxxxxxx hodnoty xxxxx (xxxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxx vzorku xx xxxxxx koncentrace x xxxxxxx xxxxxx x μg/ml xxxxxxxxxx x kalibračním grafem (5.3.2).

Xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx x v xx/xx xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

x = x × 1&xxxx;000 / x

xxx:

x = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx (5.2) x μx/xx

x = xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x x (5.2)

7. Xxxxxxxxxxx výsledků

7.1 Identita

Identita xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx opakovaným xxxxxxxxxx x přídavkem (xx-xxxxxxxxxxxxxx) xxxxx využitím xxxxxxxxx x xxxxxxxx polem, xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx extraktu vzorku (5.2) a xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.5.3), xxxxxxxxxxxx 5,0 μx/xx olachindoxu.

7.1.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx (xx-xxxxxxxxxxxxxx)

Xxxxxxx xxxxxx (5.2) xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxx roztoku (3.5.3). Xxxxxxxx přidaného xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx nalezeného x xxxxxxxx vzorku.

S xxxxxxx xx přidané xxxxxxxx x zředění xxxxxxxx xx xxxx xxxxx jen xx xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxx píku x xxxxxxxx jeho xxxxx xxxx xxx x xxxxxxx ±10 % původní šířky xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

7.1.2 Xxxxxxxx diodového pole

Výsledky xx xxxxxxxxxxx podle xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx:

x) xxx xxxxxx délce xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx i xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx detekčního xxxxxxx. Xxx detektor x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx ±2 xx;

x) xxx xxxxxx xxxxx xxxx 220 x 400 nm xx xxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku x standardu zaznamenaný xx vrcholu xxxx xxxxxxxxxxxxx lišit xx xxxxxxxxx částí spektra x rozsahu 10 xx 100 % xxxxxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx je dosaženo, xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx nikde xxxxxxxx xxxx xxxxx spektry xxxxxxxxxxx 15 % xxxxxxxxxx standardního xxxxxxx;

x) xxx vlnové xxxxx xxxx 220 x 350 xx xx xxxxx spektrum vzestupu, xxxxxxx x xxxxxxx xxxx zkoušeného vzorku xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxx xxxxx xxxxxxx v rozsahu 10 xx 100 % relativní xxxxxxxxxx. Xxxxxx kritéria je xxxxxxxx, jestliže xxxx xxxxxxxx stejná maxima x xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx spektry xxxxxxxxxxx nikde 15 % xxxxxxxxxx spektra xx vrcholu xxxx.

Xxxx-xx xxxxxxx x těchto xxxxxxxx splněno, přítomnost xxxxxxx xxxx potvrzena.

7.2 Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx stanovení, xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx 10 x 20 xx/xx, xxxxx přesáhnout15 % xxxxxxx výsledku.

7.3 Výtěžnost

Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx vzorek xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 90 %.

8. Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

X xxxxx XX xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx, xxx xxxx až 13 laboratoří xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx, včetně xxxxxxx modelového xxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx:

X: xxxxx xxxxxxxxxx

x: xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx

X_x: xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxxxxxxxx

X_X: xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxxxxxxxxxxxx

XX_x: xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx

XX_X: xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx

9. Xxxxxxxx

Xxxxxxx tato xxxxxx xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx obsahující xxxx xxx 100 mg/kg xxxxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.2) xxx, aby xx dosáhlo koncentrace x xxxxxxx kalibračního xxxxx (5.3.2).

---

[1] Xxxxx xx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx.

[2] Xxxxx xx xx tuk xxxxxxxx zkoušet xx xxxxxxx, xxxxxx se xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx.

---