Plné znění - 31996L0045

Xxxxx Xxxxxxxx Xxxxxx 96/45/XX

xx xxx 2. xxxxxxxx 1996

x metodách xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx

(Xxxx x xxxxxxxx xxx XXX)

XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,

x ohledem na Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,

x xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxx 76/768/XXX ze xxx 27. xxxxxxxx 1976 x sbližování xxxxxxxx xxxxxxxx členských států xxxxxxxxxx xx kosmetických xxxxxxxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 95/34/XX [2], x xxxxxxx na xx. 8 xxxx. 1 xxxxxxx xxxxxxxx,

xxxxxxxx x xxxx, xx xx xx xxxxxxxx 76/768/XXX xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx s xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx předepsaných xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;

xxxxxxxx x xxxx, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx metody analýzy xxxx xxx xxxxxxxxx xx nejdříve; xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxx ve xxxxxxxx Xxxxxx 80/1335/XXX [3] xx xxxxx xxxxxxxx 87/143/EHS [4], xxxxxxxx Komise 82/434/EHS [5] ve xxxxx xxxxxxxx 90/207/XXX [6] x xx xxxxxxxxxx Xxxxxx 83/514/XXX [7], 85/490/XXX [8], 93/73/XXX [9] a 95/32/XX [10];

xxxxxxxx k xxxx, xx xxxxx a xxxxxxxxx 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, xxxxxx, xxxxx, xxxxxx, xxxxx x xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx x kosmetických xxxxxxxxxxxx je xxxxxx xxxxxx;

xxxxxxxx k xxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx jsou v xxxxxxx xx stanoviskem Xxxxxx pro přizpůsobení xxxxxxxx 76/768/XXX xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

XXXXXXX XXXX SMĚRNICI:

Xxxxxx 1

Členské xxxxx xxxxx xxxxxxx nezbytné xxxxx x xxxxxxxxx xxxx, aby xx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx prostředků xxxxx x xxxxxxxxx 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, xxxxxx, xxxxx, xxxxxx, xxxxx x xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx popsanými v xxxxxxx.

Článek 2

1. Xxxxxxx xxxxx uvedou v xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx nezbytné xxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 30. xxxx 1997. Xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx Xxxxxx.

2. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx směrnici xxxx musí xxxxxx xxxxx xxx učiněn xxx jejich úředním xxxxxxxxx. Způsob xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

3. Xxxxxxx státy xxxxx Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx přijmou v xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx 3

Xxxx směrnice xxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x Úředním xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxx 4

Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx členským xxxxxx.

V Xxxxxxx dne 2. xxxxxxxx 1996.

Xx Xxxxxx

Xxxx Xxxxxx

xxxxxx Komise

[1] Úř. xxxx. X 262, 27.9.1976, x. 169.

[2] Úř. xxxx. X 167, 18.7.1995, x. 19.

[3] Xx. věst. X 383, 31.12.1980, x. 27.

[4] Xx. xxxx. X 57, 27.2.1987, x. 56.

[5] Xx. xxxx. X 185, 30.6.1982, x. 1.

[6] Úř. xxxx. X 108, 28.4.1990, x. 92.

[7] Xx. xxxx. X 291, 24.10.1983, x. 9.

[8] Úř. xxxx. X 295, 7.11.1985, x. 30.

[9] Úř. xxxx. X 231, 14.9.1993, x. 34.

[10] Xx. xxxx. X 178, 28.7.1995, x. 20.

XXXXXXX

XXXXX X XXXXXXXXX 2-XXXXXXXXXXXXXX, 1-XXXXXXXXXXXX-2-XXX, METHYL, XXXXX, XXXXXX, XXXXX X XXXXXX 4-XXXXXXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX

X. XXXXX

1. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx

X této xxxxxx je xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxx vrstvě, xxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxx stanovení xxxxxxxx x oddílu B xxxxxx důkaz 2-fenoxyethanolu, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-hydroxybenzoátu, propyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

2. Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx extrahují x xxxxxxxxxxx vzorků xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxx a xxxxxx xxxxxxxx se v xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxx aceton/voda xx xxxxxxxxxxx diethyletherem, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxxx xx konzervační xxxxxxx xxxxxxxxx diethyletherem. Xxxxxxxxx část xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xx desku pokrytou xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x XX xxxxxx x xxxxxxxxxx se xx použití Xxxxxxxxx xxxxxxx.

3. Xxxxxxx xxxxxxx

3.1 Xxxxxx

Xxxxxxx použitá xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x.x. Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.

3.2 Xxxxxx

3.3 Xxxxxxxxxxxx

3.4 x-Xxxxxx

3.5 Xxxxxxxx

3.6 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx

3.7 Roztok kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, c(HCl) = 4 mol/l

3.8 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, x(XXX) = 4 xxx/x

3.9 Xxxxxxx vápenatý xxxxxxxx (XxXx₂ . 2H₂O)

3.10 Xxxxxxxx xxxxxxx: Xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx) xx xxxxxxxx xxxxxxxx roztok (Xxxxx 69820).

3.11 2-Fenoxyethanol

3.12 1-Xxxxxxxxxxxx-2-xx

3.13 Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (methylparaben)

3.14 Xxxxx 4-hydroxybenzoát (xxxxxxxxxxxx)

3.15 x-Xxxxxx 4-hydroxybenzoát (xxxxxxxxxxxxx)

3.16 x-Xxxxx 4-hydroxybenzoát (xxxxxxxxxxxx)

3.17 Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (benzylparaben)

3.18 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxx xx 0,1 % (m/V) xxxxxxx xxxxx z xxxxxxxxxxxx látek 3.11, 3.12, 3.13, 3.14, 3.15, 3.16 a 3.17 x xxxxxxxxx.

3.19 Xxxxxxxx rozpouštědlo

Smíchá xx 88 xxxx xxxxxxxx (3.4) x 12 xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.6).

4. Xxxxxxxxx x pomůcky

Běžné laboratorní xxxxxxxx x dále:

4.1 Xxxxx lázeň nastavitelná xx xxxxxxx 60 °X

4.2 Xxxxxxxx komora (xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx)

4.3 Xxxxx ultrafialového světla, 254 nm

4.4 Xxxxxx xxxxx 20 cm × 20 xx, xxxxxx xxxxxxxx 0,25 xx tenkou xxxxxxx xxxxxxxxxx 60X254 (254 xx xxxxxx xxxxxxx 60X) x koncentrační xxxxx (Merck Xx 11798, Xxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxxxxx)

4.5 Xxxxxxx nastavitelná xx teplotu xx xx 105 °X

4.6 Xxxxxxxxxxxx vysoušeč vlasů

4.7 Xxxxxx malířský váleček x xxxxx xxxxxxxxx 10 xx, xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 3,5 xx. Vlněná xxxxxx xx měla xxx 2 xx 3 xx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxx v xxxx 5.2.

4.8 Xxxxxxxx xxxxxxxx xx 50 xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

4.9 Elektrická xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxx 80 °C. Xxxxx xxxxx se pokryje xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx 20 cm × 20 xx x xxxxxxxx asi 6 xx, xxxx xx xxxxxxx rovnoměrného xxxxxxxxx tepla.

5. Xxxxxx

5.1 Xxxxxxxx xxxxxx

Xx skleněné xxxxxxxx xx 50 xx xx šroubovacím xxxxxxxx (4.8) se xxxxxx xxxxxxxxx 1 x vzorku. Xxxxxxx xx xxxxx kapky xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.7) x 40 xx xxxxxxx.

X xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx je xxxxxxxx xxxxx, se xxxxx 20 xxxxx xxxxxxx kyseliny chlorovodíkové. Xxxxxxxx se uzavře, xxxx xx xxxxxx xxxxxxx na asi 60 °C, aby xx usnadnila xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx látek xx xxxxxxxxx fáze, a 1 xxxxxx se xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xX xxxxxxx x xxxxxx xx xx xxxxxxx ≤ 3 xxxxxxxx xxxxxxxx chlorovodíkové. Xxxxx xx 1 xxxxxx xxxxx xxxxx.

Xxxxxx xx xxxxxxx xx pokojovou xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx filtrační xxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx. 20 xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx baňky xx 200 ml, xxxxx se 60 xx vody x xxxxxxxx. Xxxxxxx xX xxxxx xx upraví xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.8) xxxxxxxxx na 10 xx xxxxxxx indikátorového xxxxxxx.

Xxxxx se 1 x chloridu xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.9) x xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx 250 xx, xxxxx xxxxxxxx 75 xx xxxxxxxxxxxxx, x xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx fáze xx xxxxxxx do Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 200 ml. Xxxxxxx xX xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx na xxxxxxxxx 2 za xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx přidá 10 xx diethyletheru a xxxxx xx xxxxx xxxxxx protřepává. Xxxx xx xxxxxxx oddělit x xxx 2 xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx převede do xxxxxxxxxx lahvičky xx 5 xx.

5.2 Chromatografie xx tenké xxxxxx (XXX)

XXX deska xx xxxxxx xx zahřátou xxxxxxxxxx xxxxx (4.9). Xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx XXX xxxxx se xxxxxx 10 μx xxxxxxx x referenčních xxxxxxx x 100 μx xxxxxxx vzorku (xxxxxx) (5.1).

Xxxxx xxxxxxx lze xxxxxxxx odpaření xxxxxxxxxxxx xxxxxxx vzduchu. TLC xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxx desky x xxxxx se xxxxxxxxxxx na pokojovou xxxxxxx. Xxxxxxxx komora (4.2) se xxxxxx 100 ml xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.19).

XXX xxxxx xx ihned xxxxx xx nenasycené komory x xxxxxx se xxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx 15 xx xx základní xxxxx. Xxxxx se x vyvíjecí xxxxxx xxxxx x vysuší x xxxxxx horkého xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxx se xxxxxxxxx x UV xxxxxx (4.3) x xxxxxx skvrn xx xxxxxxx. Deska xx xxxxxxx 30 minut x sušárně (4.5) xxx 100 °X, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx přísady v xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.10) xxx, xx xx XXX deska xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (4.7) xxxxxxxxx do xxxxxxx.

Xxxxxxxx:

Xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx kapky Xxxxxxxxx činidla xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx XX xxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, 2-xxxxxxxxxxxxx a 1-xxxxxxxxxxxx-2-xx xxxx xxxxx xxxxxx. Xx xxxx xxxxx xxxxx pozor xx xx, xx xxxxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx xxxx x xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx. Viz 7.3 x 7.4.

6. Xxxxx

Xxx každou skvrnu xx xxxxxxx xxxxxxx Xx. Xxxxxx xxxxxxx x roztoku xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxxxxxx roztoků, xxxxx xxx x jejich xxxxxxx Xx, xxxxxx xxxxxxx v UV xxxxxx a barvu xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx konzervačních xxxxxx.

Xxxxx xx xxx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (HPLC) xxxxxxxx x xxxxxx B. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx (XXX) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (HPLC) se xxxxxxxxxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx a parabenů.

7. Xxxxxxxx

7.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxx činidla xx xxxxxxxxxxxx aplikovat xxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx způsobů. Xxxxxxx se nedoporučuje.

7.2 Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx mohou xxxxxx xxx xxxxxx x Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx x hodnot Xx xxxxxxxxx pro xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx je xxxxxxx x xxxxx X. de Xxxxxx, X. X. H. Xxxx, L. A. Xxxxxxx-Xxxxxxxxx x X. Xxxxxxxx (1987): Determination xx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx products X: Xxxx-xxxxx chromatographic procedure xxx xxx identification xx preservatives xx xxxxxxxx products (X. Xxxxxxxxxxxxxx 410, 395-411).

7.3 Xxxxxxx Rf xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx jako xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx lze xxxxxx:

7.4 X xxxxxxx kyseliny 4-xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx ani x xxxxxxx benzylparabenu x ethylparabenu nedochází x xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxx být xxxxxxxx xxxxxxx XXXX xxxxxxxx x oddíle B x porovnáním xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx.

X. XXXXXXXXX

1. Rozsah x xxxxxx použití

V xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, methyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx a benzyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx x kosmetických xxxxxxxxxxxx.

2. Definice

Množství xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx touto xxxxxxx se vyjádří x hmotnostních xxxxxxxxxx.

3. Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxx ethanolu x xxxx. Směs xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx tukové xxxx, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) x obrácenou xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

4. Xxxxxxx xxxxxxx

4.1 Xxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x.x. x podle xxxxxxx musí xxx xxxxxx pro XXXX. Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx voda nebo xxxx xxxxxxx stejné xxxxxxx.

4.2 Ethanol, xxxxxxxxx

4.3 2-Xxxxxxxxxxxxx

4.4 1-Xxxxxxxxxxxx-2-xx

4.5 Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (methylparaben)

4.6 Ethyl 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx)

4.7 x-Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx)

4.8 Xxxxxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxxxx)

4.9 x-Xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (butylparaben)

4.10 Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx)

4.11 Xxxxxxxxxxxxxxx

4.12 Xxxxxxxx

4.13 Xxxxxxxxxxx

4.14 Xxxxxx xxxxxxxx sírové x(X₂XX₄) = 2 xxx/x

4.15 Xxxx xxxxxxx/xxxx

Xxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx (4.2) x xxxxx xxx vody.

4.16 Roztok xxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx 0,25 x xxxxxxxxxxxxxxxxx (4.8), xxxxxxx se xx xxxxxxx xxxxx xx 500 xx, rozpustí xx a xxxxxx xx směsí ethanol/voda (4.15) xx objem.

4.17 Xxxxxxx xxxx: xxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxx/xxxxxxxx/xxxxxxxxxxx

Xxxxxx se 5 xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, 60 xxxx xxxx, 10 xxxx methanolu a 25 dílů xxxxxxxxxxxx.

4.18 Xxxxxxx roztok xxxxxxxxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxxx xxxxx xx 100 xx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 0,2 g 2-xxxxxxxxxxxxxx, 0,2 g 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, 0,05 x xxxxxxxxxxxxxx, 0,05 g xxxxxxxxxxxxx, 0,05 x xxxxxxxxxxxxxx, 0,05 x xxxxxxxxxxxxx x 0,025 x xxxxxxxxxxxxxx, rozpustí xx x xxxxxx xxxxx ethanol/voda xx xxxxx.

Xxxxxx se xxxxxxxx x xxxxxxxx a xx stabilní 1 xxxxx.

4.19 Standardní xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad

Do xxxxxxxxx xxxxx na 50 xx se ze xxxxxxxxx xxxxxxx (4.18) xxxxxxx 20,00 ml, 10,00 ml, 5,00 xx, 2,00 xx x 1,00 xx. Xx každé xxxxx xx xxxxx 10,00 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.16) x 1,0 xx roztoku xxxxxxxx xxxxxx (4.14) x xxxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxx xx xxxxx. Xxxx roztoky xx xxxxxxxxxx čerstvé.

5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, a xxxx:

5.1 Xxxxx xxxxx nastavitelná xx xxxxxxx 60 °X ± 1 °X.

5.2 XXXX chromatograf x UV xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx 280 xx

5.3 Xxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx 25 xx, vnitřní xxxxxx 4,6 mm (xxxx xxxxx 12,5 xx x xxxxxxx xxxxxx 4,6 xx), xxxxxxxx Xxxxxxxxxxx 5X18, nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxx 10.1).

5.4 Skleněné zkumavky xx 100 xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx

5.5 Xxxxx kamínky, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx 2 až 4 xx nebo xxxxxxxxxxxx

6. Xxxxxx

6.1 Xxxxxxxx xxxxxx

6.1.1 Příprava xxxxxx xxx přidání xxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xx xxxxxxxx xx 100 ml xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxx 1,0 x xxxxxx. Do xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 1,0 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.14) a 50,0 xx xxxxx xxxxxxx/xxxx (4.15). Přidá xx xxxxxxxxx 1 g xxxxxxx xxxxxxx (5.5), xxxxxxxx se xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxx, dokud xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xx 5 xxxxx do xxxxx xxxxx (5.1) x xxxxxxx 60 °C ± 1 °X, xxx se podpořila xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx ethanolové fáze.

Zkumavka xx xxxxx xxxxxxx xxx proudem xxxxxxx xxxx x extrakt xx uloží xx xxxxx xxxxxx do xxxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxx filtrační xxxxx. Asi 2 xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx 5 xx vzorkovací xxxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxx xx ledničky x xxxxxxxxx xxxxxxx XXXX xx xxxxxxx xx 24 xxxxx.

6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx 100 xx se šroubovacím xxxxxxxx xx x xxxxxxxxx na xxx xxxxxxxxx místa xxxxxx 1,0 x ± 0,1 g vzorku.

Do xxxxxxxx se pipetou xxxxx 1,0 ml xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x 40,0 xx xxxxx ethanol/voda. Xxxxx xx přibližně 1 x xxxxxxx xxxxxxx (5.5) x přesně 10,00 xx xxxxxxx xxxxxxxxx standardu. Zkumavka xx uzavře x xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx nevznikne homogenní xxxxxxxx. Protřepává xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xx 5 xxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxxxx 60 °X ± 1 °X, aby se xxxxxxxxx xxxxxxxx konzervačních xxxxxx xx ethanolové xxxx.

Xxxxxxxx se xxxxx xxxxxxx pod proudem xxxxxxx vody x xxxxxxx xx uloží xx xxxxx xxxxxx xx ledničky. Extrakt xx xxxxxxxxx přes xxxxxxxxx xxxxx.

Xxx 2 xx xxxxxxxx se xxxxxxxx xx 5 xx xxxxxxxxxx lahvičky (xxxxxxxx xxxxxx). Extrakt xx uloží do xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx HPLC xx xxxxxxx xx 24 xxxxx.

6.2 Vysokoúčinná xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (HPLC)

6.2.1 Chromatografické xxxxxxxx

- Xxxxxxx xxxx: xxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxx/xxxxxxxx/xxxxxxxxxxx (4.17)

- Xxxxxxxxx rychlost: 1,5 xx za xxxxxx

- Xxxxxxxx vlnová xxxxx: 280 xx

6.2.2 Xxxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx 10 μx xxxxxxx xx standardních xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad (4.19). Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Pro xxxxxx xxxxxxxxxxx přísadu xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx standardních xxxxxxx.

6.2.3 Xxxxxxxxx

Xx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 10 μx xxxxxxx xxxxxx xxx vnitřního xxxxxxxxx (6.1.1) x zaznamená xx chromatogram.

Nastříkne xx 10 μx jednoho xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad (4.19) x zaznamená se xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx chromatogramy xx xxxxxxxxx.

Xxxx-xx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (6.1.1) xxxxxxxx pík x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, jako xx xxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx 10 μx roztoku xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (6.1.2). Chromatogram xx xxxxxxxxx x xxxxx xx výšky xxxx.

Xx-xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx pík x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx stejným xxxx xxxxxxxx xxx isopropylparabenu, xxx xx být xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxx-xx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx konzervačních xxxxxx x chromatogramu xxxxxx xxxxxxxx, lze tuto xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx konzervačních xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xx xxxxx ověřit, xx xx xxxxxxxxxx křivka xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xx xxxxx ověřit, xxx xxxxxxxxxxxxx získané pro xxxxxxxxxx roztok a xxxxxx vzorku splňují xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxx xxxx nejhůře xxxxxxxxxx xxxx xx alespoň 0,90. (Definice xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx 1.),

&xxxx;

Xxxxxxx 1: Separace xxxx

Xxxx-xx xxxxxxxxxx separace xxxxxxxx, xxxx xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx by xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx, aby xxx xxxxxxxxx splněn.

- xxxxxx xxxxxxxxx (Xx) xxxxx xxxxxxxxx xxxx xx xx xxx xxxxxxxxx xx 0,9 xx 1,5. (Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxx xx obrázku 2.) Xxx xxxxxxxxxxx chromatogramu xx xxxxxx stanovení xxxxxxx asymetrie xx xxxxxxxxxx rychlost posuvu xxxxxx xxxxxxx 2 xx xx xxxxxx,

&xxxx;

Xxxxxxx 2: Xxxxxx asymetrie xxxx

- xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx.

7. Výpočet

Pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx konzervačních xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (6.2.2) x xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx vyšetřovaných xxxxxxxxxxxxx přísad x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx (xx) 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-fenoxypropan-2-olu, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-hydroxybenzoátu, xxxxxx 4-hydroxybenzoátu, xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx x benzyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx x hmotnostních xxxxxxxxxx (% m/m) xx vypočte xxxxxx xxxxxx:

%x_x(x/x) = b_i / (200 × x)

xxx

xx = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx přísady x xx zkušebním roztoku (μx/xx) odečtená x xxxxxxxxxx křivky x

x = xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (x).

8. Xxxxxxxxxxxxxx [1]

Xxx xxxxxxxx x xxxx 10.5.

9. Xxxxxxxxxxxxxxxxxx [2]

Xxx poznámka x xxxx 10.5.

10. Poznámky

10.1 Xxxxxxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx chování xxxxxxxxxxxxx xxxxx při xxxxxxxxxxx XXXX výrazně xxxxxx xx xxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxx xxx xxxxxx použít xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx z výsledků xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxx poznámky x bodu 6.2.3). Xxxxx xxxxxxxxxxxx materiálu xxxxxx xxxxxx byly xxxxxxxx vhodnými xxxx xxxxxxxxx Hypersil XXX x Xxxxxx XXX.

Xx xxxxxx dosažení požadovaného xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx složení xxxxxxx xxxx.

10.2 Xxxxxxxx vlnová xxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx ukázala, že xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx délky xxxx xxx významný vliv xx výsledky xxxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.

10.3 Xxxxxx xxxxx

Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x této metodě xx xxxxxxxx mnoho xxxxxxx sloučenin, jako xxxx xxxxx konzervační xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx uvedených v xxxxxxx VI xxxxxxxx Xxxx xxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx prostředků jsou xxxxxxx v xxxxx X. xx Kruijf, X. X. H. Xxxx, X. X. Xxxxxxx-Xxxxxxxxx, X. Xxxxxxxx, (1989): Xxxxxxxxxxxxx of xxxxxxxxxxxxx in xxxxxxxx xxxxxxxx XX. Xxxx-xxxxxxxxxxx xxxxxx chromatographic identification (X. Xxxxxxxxxxxxxx, 469, 317-398).

10.4 Pro xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

10.5 Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx okružním xxxxxx, xx xxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx tři xxxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxx jsou pro xxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x % x/x (x), xxxxxxxxxxxxxxx (x) x reprodukovatelnosti (X) xxxxxxxx xxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xx xxxxxxxx obsaženy:

[1] XXX 5725.

[2] XXX 5725.