Plné znění - 31996L0045

Xxxxx Xxxxxxxx Xxxxxx 96/45/XX

xx dne 2. xxxxxxxx 1996

o metodách xxxxxxx xxxxxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxx kosmetických xxxxxxxxxx

(Xxxx x xxxxxxxx xxx XXX)

XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,

x ohledem xx Xxxxxxx o založení Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,

x xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxx 76/768/XXX xx dne 27. xxxxxxxx 1976 x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx států xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 95/34/XX [2], x xxxxxxx na xx. 8 xxxx. 1 xxxxxxx xxxxxxxx,

xxxxxxxx x xxxx, že xx xx xxxxxxxx 76/768/XXX xxxxxxx úřední zkoušení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx, které xx xxxxxx xxxxxxx kosmetických xxxxxxxxxx;

xxxxxxxx x xxxx, xx by xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxx stanoveny xx nejdříve; že xxxxxxx metody xxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxx 80/1335/XXX [3] xx xxxxx xxxxxxxx 87/143/XXX [4], xxxxxxxx Komise 82/434/EHS [5] xx znění xxxxxxxx 90/207/XXX [6] x xx xxxxxxxxxx Xxxxxx 83/514/EHS [7], 85/490/XXX [8], 93/73/XXX [9] x 95/32/ES [10];

xxxxxxxx x tomu, xx xxxxx x xxxxxxxxx 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, xxxxxx, xxxxx, xxxxxx, xxxxx x xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx je sedmým xxxxxx;

xxxxxxxx k tomu, xx xxxxxxxx této xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx stanoviskem Xxxxxx xxx přizpůsobení xxxxxxxx 76/768/XXX xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

XXXXXXX TUTO XXXXXXXX:

Xxxxxx 1

Xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx k xxxxxxxxx xxxx, aby se xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx důkaz x xxxxxxxxx 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, xxxxxx, ethyl, xxxxxx, xxxxx x xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxxx 2

1. Xxxxxxx xxxxx uvedou x xxxxxxxx právní x xxxxxxx xxxxxxxx nezbytné xxx xxxxxxxx souladu x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 30. xxxx 1997. Xxxxxxxxxx x nich xxxxxxx Xxxxxx.

2. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx směrnici xxxx xxxx takový xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxx úředním xxxxxxxxx. Xxxxxx odkazu xx stanoví xxxxxxx xxxxx.

3. Xxxxxxx státy xxxxx Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx působnosti xxxx xxxxxxxx.

Článek 3

Tato xxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Článek 4

Tato xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

V Bruselu dne 2. července 1996.

Xx Xxxxxx

Xxxx Bonino

členka Komise

[1] Xx. xxxx. X 262, 27.9.1976, x. 169.

[2] Xx. xxxx. X 167, 18.7.1995, x. 19.

[3] Úř. věst. X 383, 31.12.1980, x. 27.

[4] Xx. xxxx. X 57, 27.2.1987, x. 56.

[5] Xx. xxxx. X 185, 30.6.1982, x. 1.

[6] Xx. věst. X 108, 28.4.1990, x. 92.

[7] Xx. xxxx. X 291, 24.10.1983, x. 9.

[8] Xx. xxxx. X 295, 7.11.1985, x. 30.

[9] Xx. věst. X 231, 14.9.1993, x. 34.

[10] Xx. xxxx. X 178, 28.7.1995, x. 20.

XXXXXXX

XXXXX X XXXXXXXXX 2-XXXXXXXXXXXXXX, 1-FENOXYPROPAN-2-OLU, XXXXXX, XXXXX, XXXXXX, XXXXX X XXXXXX 4-HYDROXYBENZOÁTU X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX

X. XXXXX

1. Rozsah a xxxxxx použití

V xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx, který x kombinaci x xxxxxxx stanovení popsanou x xxxxxx X xxxxxx důkaz 2-fenoxyethanolu, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-hydroxybenzoátu, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-hydroxybenzoátu x xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx x kosmetických xxxxxxxxxxxx.

2. Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx extrahují x xxxxxxxxxxx xxxxxx kosmetických xxxxxxxxxx acetonem. Po xxxxxxxx xx acetonový xxxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx se x xxxxxxxxxx prostředí vysrážejí xxxx vápenaté soli. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxx/xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Po xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xx desku pokrytou xxxxxx xxxxxxx silikagelu. Xx xxxxxxxx xx xxxxxxx chromatogram xxxxxxxx x XX xxxxxx x xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxx.

3. Xxxxxxx činidla

3.1 Xxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx reakční xxxxxxx musí xxx xxxxxxx p.a. Xxxx xxx použita destilovaná xxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.

3.2 Xxxxxx

3.3 Xxxxxxxxxxxx

3.4 x-Xxxxxx

3.5 Xxxxxxxx

3.6 Ledová xxxxxxxx xxxxxx

3.7 Roztok xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, x(XXx) = 4 xxx/x

3.8 Xxxxxx xxxxxxxxx draselného, x(XXX) = 4 xxx/x

3.9 Xxxxxxx vápenatý xxxxxxxx (XxXx₂ . 2X₂X)

3.10 Xxxxxxxx xxxxxxx: Millonovo xxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx) xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (Xxxxx 69820).

3.11 2-Fenoxyethanol

3.12 1-Xxxxxxxxxxxx-2-xx

3.13 Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx)

3.14 Xxxxx 4-hydroxybenzoát (ethylparaben)

3.15 x-Xxxxxx 4-hydroxybenzoát (xxxxxxxxxxxxx)

3.16 x-Xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx)

3.17 Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx)

3.18 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxx se 0,1 % (x/X) xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx 3.11, 3.12, 3.13, 3.14, 3.15, 3.16 x 3.17 x xxxxxxxxx.

3.19 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx

Xxxxxx se 88 xxxx xxxxxxxx (3.4) x 12 xxxx xxxxxx kyseliny xxxxxx (3.6).

4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx:

4.1 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx 60 °X

4.2 Xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx)

4.3 Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, 254 xx

4.4 Xxxxxx xxxxx 20 xx × 20 xx, xxxxxx xxxxxxxx 0,25 xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 60F254 (254 xx dolním xxxxxxx 60X) s koncentrační xxxxx (Xxxxx Xx 11798, Xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx)

4.5 Xxxxxxx nastavitelná xx xxxxxxx až xx 105 °X

4.6 Xxxxxxxxxxxx vysoušeč xxxxx

4.7 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx 10 xx, xxxxxx xxxxxx přibližně 3,5 xx. Vlněná xxxxxx xx měla xxx 2 xx 3 xx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx vlna xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxx x xxxx 5.2.

4.8 Skleněné xxxxxxxx xx 50 xx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

4.9 Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxx 80 °X. Xxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx deskou o xxxxxxxxx 20 xx × 20 cm x tloušťce xxx 6 xx, čímž xx dosáhne xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

5. Postup

5.1 Xxxxxxxx xxxxxx

Xx skleněné xxxxxxxx xx 50 xx xx šroubovacím xxxxxxxx (4.8) xx xxxxxx xxxxxxxxx 1 x xxxxxx. Přidají xx čtyři xxxxx xxxxxxx kyseliny chlorovodíkové (3.7) x 40 xx acetonu.

V případě xxxxx xxxxxxxxxx kosmetických xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx mýdlo, xx xxxxx 20 xxxxx xxxxxxx kyseliny chlorovodíkové. Xxxxxxxx xx uzavře, xxxx se xxxxxx xxxxxxx xx xxx 60 °X, aby xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx látek do xxxxxxxxx xxxx, a 1 xxxxxx se xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xX xxxxxxx x upraví xx xx xxxxxxx ≤ 3 roztokem xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xx 1 xxxxxx xxxxx xxxxx.

Xxxxxx se xxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx Erlenmeyerovy xxxxx. 20 xx xxxxxxxx se převede xx Erlenmeyerovy baňky xx 200 ml, xxxxx se 60 xx xxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxx xX xxxxx xx upraví xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.8) xxxxxxxxx na 10 xx xxxxxxx indikátorového xxxxxxx.

Xxxxx xx 1 x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.9) x xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx dělicí nálevky xx 250 xx, xxxxx xxxxxxxx 75 xx xxxxxxxxxxxxx, x xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Fáze xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxx xx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx na 200 ml. Xxxxxxx xX roztoku xx xxxxxx xxxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx na xxxxxxxxx 2 xx použití xxxxxxxxxxxxxx papírku. Poté xx přidá 10 xx xxxxxxxxxxxxx a xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Fáze xx nechají oddělit x xxx 2 xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx převede do xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 5 xx.

5.2 Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx vrstvě (XXX)

XXX deska se xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.9). Xx startovní xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx XXX xxxxx se nanese 10 μx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x 100 μx xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx) (5.1).

Xxxxx potřeby xxx xxxxxxxx odpaření rozpouštědla xxxxxxx xxxxxxx. XXX xxxxx se odstraní x xxxxx desky x xxxxx se xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx (4.2) xx xxxxxx 100 ml vyvíjecího xxxxxxxxxxxx (3.19).

XXX deska xx ihned vloží xx nenasycené xxxxxx x vyvíjí se xxx pokojové teplotě, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx 15 xx od základní xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxx komory xxxxx x xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx horkovzdušného xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxxx x XX xxxxxx (4.3) x xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx. Deska xx xxxxxxx 30 xxxxx x sušárně (4.5) xxx 100 °C, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx se zviditelní Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.10) xxx, xx xx XXX xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (4.7) xxxxxxxxx xx xxxxxxx.

Xxxxxxxx:

Xxxxxx xxx rovněž xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx kapky Xxxxxxxxx činidla xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx XX světlem.

Estery xxxxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, 2-xxxxxxxxxxxxx a 1-xxxxxxxxxxxx-2-xx xxxx xxxxx xxxxxx. Xx však xxxxx xxxxx pozor xx xx, xx xxxxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, která xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx látka nebo xxxxxxx xxxxxxxx parabenů, xx xxxx x xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxx 7.3 x 7.4.

6. Xxxxx

Xxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx hodnota Xx. Xxxxxx xxxxxxx x roztoku vzorku xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, pokud xxx x xxxxxx xxxxxxx Rf, jejich xxxxxxx x UV xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx závěry x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx xx zdá, xx xxxx přítomny xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (HPLC) xxxxxxxx x oddíle X. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx (TLC) x xxxxxxxxxxxx kapalinové xxxxxxxxxxxxxx (HPLC) xx xxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx přítomnost 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx x xxxxxxxx.

7. Xxxxxxxx

7.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx Millonova xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx aplikovat xxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx nedoporučuje.

7.2 Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx při xxxxxx x Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx x hodnot Xx získaných pro xxxx konzervačních xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx v xxxxx X. xx Xxxxxx, X. A. H. Xxxx, L. X. Xxxxxxx-Xxxxxxxxx x X. Xxxxxxxx (1987): Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx products X: Xxxx-xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx procedure xxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (X. Xxxxxxxxxxxxxx 410, 395-411).

7.3 Xxxxxxx Xx uvedené x následující xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxx xxxxxx:

7.4 X xxxxxxx xxxxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx x methylparabenu xxx x xxxxxxx benzylparabenu x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x oddělení. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxx být xxxxxxxx xxxxxxx HPLC popsanou x xxxxxx B x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx časy xxxxxxxxx.

X. XXXXXXXXX

1. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx

X této xxxxxx je specifikován xxxxxx xxx xxxxxxxxx 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-hydroxybenzoátu, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx x kosmetických xxxxxxxxxxxx.

2. Xxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx touto xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

3. Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxx xx suspenduje ve xxxxx xxxxxxxx a xxxx. Xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx tukové fáze, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx se xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) x xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx isopropyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx jako xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

4. Xxxxxxx xxxxxxx

4.1 Xxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x.x. a podle xxxxxxx xxxx být xxxxxx xxx XXXX. Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx alespoň stejné xxxxxxx.

4.2 Xxxxxxx, xxxxxxxxx

4.3 2-Xxxxxxxxxxxxx

4.4 1-Xxxxxxxxxxxx-2-xx

4.5 Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx)

4.6 Ethyl 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx)

4.7 x-Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (propylparaben)

4.8 Isopropyl 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxxxx)

4.9 x-Xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (butylparaben)

4.10 Benzyl 4-xxxxxxxxxxxxxx (benzylparaben)

4.11 Xxxxxxxxxxxxxxx

4.12 Xxxxxxxx

4.13 Xxxxxxxxxxx

4.14 Xxxxxx xxxxxxxx sírové x(X₂XX₄) = 2 xxx/x

4.15 Xxxx ethanol/voda

Smíchá se xxxxx xxxx xxxxxxxx (4.2) x xxxxx xxx xxxx.

4.16 Xxxxxx xxxxxxxxx standardu

Přesně se xxxxxx xxxxxxxxx 0,25 x xxxxxxxxxxxxxxxxx (4.8), xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx xx 500 xx, xxxxxxxx xx x xxxxxx xx směsí ethanol/voda (4.15) xx objem.

4.17 Xxxxxxx fáze: xxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxx/xxxxxxxx/xxxxxxxxxxx

Xxxxxx xx 5 xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, 60 xxxx xxxx, 10 xxxx methanolu a 25 xxxx acetonitrilu.

4.18 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxxx xxxxx xx 100 xx xx přesně naváží xxxxxxxxx 0,2 g 2-xxxxxxxxxxxxxx, 0,2 x 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, 0,05 x xxxxxxxxxxxxxx, 0,05 x xxxxxxxxxxxxx, 0,05 x xxxxxxxxxxxxxx, 0,05 x xxxxxxxxxxxxx a 0,025 x xxxxxxxxxxxxxx, rozpustí xx a xxxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxx xx xxxxx.

Xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx a xx stabilní 1 xxxxx.

4.19 Xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxxxxx xxxxx na 50 xx se xx xxxxxxxxx roztoku (4.18) xxxxxxx 20,00 xx, 10,00 ml, 5,00 xx, 2,00 xx x 1,00 ml. Xx xxxxx baňky xx přidá 10,00 xx roztoku xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.16) x 1,0 xx roztoku xxxxxxxx sírové (4.14) x xxxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxx na xxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

5. Xxxxxxxxx x pomůcky

Běžné xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx:

5.1 Xxxxx lázeň xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx 60 °X ± 1 °X.

5.2 HPLC chromatograf x UV xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx 280 xx

5.3 Xxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxxxxxxxxxxxx xxxx, délka 25 xx, xxxxxxx průměr 4,6 xx (xxxx xxxxx 12,5 xx x vnitřní průměr 4,6 xx), xxxxxxxx Xxxxxxxxxxx 5C18, xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (viz 10.1).

5.4 Xxxxxxxx xxxxxxxx xx 100 xx xx šroubovacím xxxxxxxx

5.5 Xxxxx xxxxxxx, karborundum, xxxxxxxx 2 až 4 mm xxxx xxxxxxxxxxxx

6. Xxxxxx

6.1 Xxxxxxxx xxxxxx

6.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx xxx přidání xxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xx xxxxxxxx na 100 xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxx 1,0 x xxxxxx. Xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 1,0 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.14) a 50,0 xx směsi xxxxxxx/xxxx (4.15). Xxxxx se xxxxxxxxx 1 x xxxxxxx kamínků (5.5), xxxxxxxx xx uzavře x silně xx xxxxxxxx, xxxxx nevznikne xxxxxxxxx suspenze. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xx 5 xxxxx xx xxxxx xxxxx (5.1) x xxxxxxx 60 °X ± 1 °X, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad xx xxxxxxxxxx xxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxx ochladí xxx proudem xxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxx hodinu xx xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx 2 xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx 5 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx XXXX xx provede do 24 xxxxx.

6.1.2 Příprava xxxxxx včetně xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xx xxxxxxxx xxxxxxxx na 100 xx se šroubovacím xxxxxxxx xx s xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx 1,0 g ± 0,1 x vzorku.

Do xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx 1,0 xx xxxxxxx xxxxxxxx sírové x 40,0 xx xxxxx xxxxxxx/xxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx 1 x xxxxxxx xxxxxxx (5.5) x přesně 10,00 xx roztoku xxxxxxxxx standardu. Xxxxxxxx xx xxxxxx a xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx nevznikne xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xx 5 minut xx xxxxx xxxxx x teplotě 60 °X ± 1 °X, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx.

Xxxxxxxx xx ihned xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx vody a xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxx xxxxxx xx ledničky. Xxxxxxx xx zfiltruje přes xxxxxxxxx xxxxx.

Xxx 2 xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx 5 xx vzorkovací xxxxxxxx (xxxxxxxx roztok). Extrakt xx xxxxx xx xxxxxxxx a stanovení xxxxxxx XXXX se xxxxxxx do 24 xxxxx.

6.2 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX)

6.2.1 Chromatografické xxxxxxxx

- Xxxxxxx fáze: xxxx tetrahydrofuran/voda/methanol/acetonitril (4.17)

- Xxxxxxxxx xxxxxxxx: 1,5 xx xx minutu

- Xxxxxxxx vlnová délka: 280 xx

6.2.2 Xxxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx 10 μl xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (4.19). Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx píků xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx sestrojí křivka xxxxxxxxxx xxxxxx poměrů xx koncentraci xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

6.2.3 Xxxxxxxxx

Xx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 10 μx roztoku xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (6.1.1) x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx se 10 μl xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxxxxxxxxx přísad (4.19) x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Získané chromatogramy xx xxxxxxxxx.

Xxxx-xx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (6.1.1) xxxxxxxx xxx x přibližně xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, jako xx retenční čas xxxx isopropylparabenu (doporučený xxxxxxx xxxxxxxx), pokračuje xx xxxxxxxxxxxx 10 μx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (6.1.2). Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxx xx výšky xxxx.

Xx-xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx x xxxxxxxxx časem xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxx by xxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxx-xx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx vzorku xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxx přísadu xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxx vyšetřovaných xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxx standardu.

Je xxxxx ověřit, že xx kalibrační xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xx xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx vzorku splňují xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxx xxxx xxxxxxx odděleného xxxx xx xxxxxxx 0,90. (Definice separace xxxx je uvedena xx xxxxxxx 1.),

&xxxx;

Xxxxxxx 1: Xxxxxxxx xxxx

Xxxx-xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxx xxx použita účinnější xxxxxx, nebo xx xxxx být xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.

- xxxxxx xxxxxxxxx (Xx) všech xxxxxxxxx xxxx xx xx xxx xxxxxxxxx xx 0,9 do 1,5. (Definice faktoru xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx obrázku 2.) Xxx zaznamenání xxxxxxxxxxxxx xx účelem stanovení xxxxxxx asymetrie xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx 2 xx xx xxxxxx,

&xxxx;

Xxxxxxx 2: Faktor xxxxxxxxx xxxx

- základna xxxx xxx xxxxxxxx.

7. Xxxxxxx

Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x roztoku xxxxxx xx použije xxxxxxxxxx křivka (6.2.2) x xxxxxxx poměrů xxxxx xxxx vyšetřovaných xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx vnitřního xxxxxxxxx. Xxxxx (xx) 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, methyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx x hmotnostních xxxxxxxxxx (% x/x) xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx:

%x_x(x/x) = x_x / (200 × x)

xxx

xx = koncentrace xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xx xxxxxxxxx xxxxxxx (μx/xx) xxxxxxxx x xxxxxxxxxx křivky x

x = xxxxxxxx zkušebního xxxxxx (x).

8. Xxxxxxxxxxxxxx [1]

Xxx xxxxxxxx x xxxx 10.5.

9. Reprodukovatelnost [2]

Xxx xxxxxxxx v xxxx 10.5.

10. Poznámky

10.1 Xxxxxxxxxxx fáze

Retenční xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx látek při xxxxxxxxxxx XXXX xxxxxxx xxxxxx na typu, xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxx xxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx pro standardní xxxxxxx (xxx poznámky x xxxx 6.2.3). Xxxxx xxxxxxxxxxxx materiálu xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx Hypersil XXX x Zorbax ODS.

Za xxxxxx xxxxxxxx požadovaného xxxxxxxx xxx popřípadě xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx.

10.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx

Xxxxxxx robustnosti xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx detekční xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx vliv xx výsledky xxxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.

10.3 Rušivé xxxxx

Xx xxxxxxxx popsaných x xxxx xxxxxx xx xxxxxxxx mnoho xxxxxxx sloučenin, xxxx xxxx další xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx časy xxxxxxx množství xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx VI xxxxxxxx Xxxx týkající se xxxxxxxxxxxx prostředků xxxx xxxxxxx x xxxxx X. xx Xxxxxx, X. A. X. Xxxx, X. X. Xxxxxxx-Xxxxxxxxx, X. Xxxxxxxx, (1989): Xxxxxxxxxxxxx of xxxxxxxxxxxxx in xxxxxxxx xxxxxxxx XX. High-performance xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (X. Xxxxxxxxxxxxxx, 469, 317-398).

10.4 Xxx ochranu xxxxxxxxxx xxxxxx lze xxxxxx xxxxxxx předkolonu.

10.5 Xxxxxx byla xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx, xx xxxx se xxxxxxxx xxxxx laboratoří. Xxxx analyzovány xxx xxxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xx tří xxxxxx uvedeny xxxxxxx xxxxxxx x % x/x (m), xxxxxxxxxxxxxxx (x) x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) xxxxxxxx xxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx:

[1] ISO 5725.

[2] XXX 5725.