Plné znění - 31996L0045

Xxxxx Xxxxxxxx Xxxxxx 96/45/XX

xx dne 2. xxxxxxxx 1996

x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx složení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx

(Xxxx x xxxxxxxx xxx XXX)

XXXXXX EVROPSKÝCH XXXXXXXXXXXX,

x xxxxxxx na Xxxxxxx o xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,

x xxxxxxx xx směrnici Xxxx 76/768/XXX ze xxx 27. xxxxxxxx 1976 x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx členských států xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx Komise 95/34/XX [2], x xxxxxxx xx čl. 8 xxxx. 1 xxxxxxx směrnice,

vzhledem x xxxx, xx se xx směrnici 76/768/XXX xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx prostředků x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx, které se xxxxxx složení kosmetických xxxxxxxxxx;

xxxxxxxx x xxxx, xx by xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx analýzy xxxx xxx stanoveny xx xxxxxxxx; xx xxxxxxx metody xxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxx 80/1335/XXX [3] ve xxxxx xxxxxxxx 87/143/XXX [4], xxxxxxxx Xxxxxx 82/434/XXX [5] xx xxxxx xxxxxxxx 90/207/XXX [6] x xx xxxxxxxxxx Xxxxxx 83/514/XXX [7], 85/490/XXX [8], 93/73/XXX [9] x 95/32/XX [10];

xxxxxxxx x xxxx, xx důkaz a xxxxxxxxx 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, xxxxxx, xxxxx, xxxxxx, xxxxx x xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx x kosmetických xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx;

xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx se stanoviskem Xxxxxx xxx přizpůsobení xxxxxxxx 76/768/XXX xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:

Xxxxxx 1

Xxxxxxx státy xxxxx všechny nezbytné xxxxx x xxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx důkaz x xxxxxxxxx 2-fenoxyethanolu, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, methyl, xxxxx, xxxxxx, xxxxx x xxxxxx 4-hydroxybenzoátu xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxxx 2

1. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx nezbytné xxx dosažení souladu x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 30. xxxx 1997. Neprodleně x xxxx uvědomí Xxxxxx.

2. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx tuto xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx učiněn xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Způsob xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

3. Xxxxxxx xxxxx xxxxx Komisi znění xxxxxxxxxxxxxx právních xxxxxxxx, xxxxx přijmou x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.

Článek 3

Xxxx směrnice xxxxxxxx x platnost xxxxxxxx xxxx po xxxxxxxxx v Úředním xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Článek 4

Tato xxxxxxxx xx určena xxxxxxxx xxxxxx.

V Xxxxxxx dne 2. července 1996.

Xx Xxxxxx

Xxxx Xxxxxx

xxxxxx Komise

[1] Xx. věst. X 262, 27.9.1976, x. 169.

[2] Xx. xxxx. X 167, 18.7.1995, x. 19.

[3] Úř. xxxx. X 383, 31.12.1980, x. 27.

[4] Xx. věst. X 57, 27.2.1987, x. 56.

[5] Úř. xxxx. X 185, 30.6.1982, x. 1.

[6] Úř. xxxx. X 108, 28.4.1990, x. 92.

[7] Xx. xxxx. X 291, 24.10.1983, x. 9.

[8] Xx. xxxx. X 295, 7.11.1985, x. 30.

[9] Úř. xxxx. X 231, 14.9.1993, x. 34.

[10] Úř. věst. X 178, 28.7.1995, x. 20.

XXXXXXX

XXXXX X STANOVENÍ 2-XXXXXXXXXXXXXX, 1-XXXXXXXXXXXX-2-XXX, XXXXXX, XXXXX, XXXXXX, XXXXX X BENZYL 4-HYDROXYBENZOÁTU X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX

X. XXXXX

1. Xxxxxx x xxxxxx použití

V xxxx xxxxxx xx specifikován xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx B xxxxxx důkaz 2-fenoxyethanolu, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, xxxxxx 4-hydroxybenzoátu, xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, propyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-hydroxybenzoátu x benzyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

2. Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxxxx přísady xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx vzorků xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx acetonem. Po xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx s xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx se x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx vápenaté soli. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxx/xxxx xx extrahována xxxxxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xx xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxx extrahují diethyletherem. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xx xxxxxxx chromatogram pozoruje x XX xxxxxx x xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx Millonova xxxxxxx.

3. Reakční xxxxxxx

3.1 Xxxxxx

Xxxxxxx použitá xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x.x. Musí xxx xxxxxxx destilovaná xxxx xxxx xxxx xxxxxxx stejné xxxxxxx.

3.2 Xxxxxx

3.3 Diethylether

3.4 x-Xxxxxx

3.5 Xxxxxxxx

3.6 Ledová kyselina xxxxxx

3.7 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, x(XXx) = 4 mol/l

3.8 Roztok xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, c(KOH) = 4 xxx/x

3.9 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (XxXx₂ . 2X₂X)

3.10 Xxxxxxxx xxxxxxx: Xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxx činidlo (dusičnan xxxxxxxx) xx komerčně xxxxxxxx xxxxxx (Fluka 69820).

3.11 2-Fenoxyethanol

3.12 1-Xxxxxxxxxxxx-2-xx

3.13 Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (methylparaben)

3.14 Xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx)

3.15 x-Xxxxxx 4-hydroxybenzoát (xxxxxxxxxxxxx)

3.16 x-Xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx)

3.17 Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (benzylparaben)

3.18 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxx xx 0,1 % (x/X) xxxxxxx každé z xxxxxxxxxxxx xxxxx 3.11, 3.12, 3.13, 3.14, 3.15, 3.16 a 3.17 x xxxxxxxxx.

3.19 Xxxxxxxx rozpouštědlo

Smíchá xx 88 xxxx xxxxxxxx (3.4) s 12 xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.6).

4. Přístroje x pomůcky

Běžné laboratorní xxxxxxxx a dále:

4.1 Xxxxx lázeň nastavitelná xx teplotu 60 °X

4.2 Xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx)

4.3 Xxxxx ultrafialového světla, 254 xx

4.4 Hotové xxxxx 20 cm × 20 xx, xxxxxx xxxxxxxx 0,25 xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 60F254 (254 xx xxxxxx indexem 60X) x xxxxxxxxxxxx xxxxx (Merck Xx 11798, Xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx)

4.5 Xxxxxxx nastavitelná xx teplotu až xx 105 °X

4.6 Xxxxxxxxxxxx vysoušeč vlasů

4.7 Xxxxxx malířský váleček x xxxxx xxxxxxxxx 10 cm, vnější xxxxxx přibližně 3,5 xx. Xxxxxx vrstva xx xxxx xxx 2 xx 3 xx silná. Xxxxx xxxxxxx xx vlna xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxx v xxxx 5.2.

4.8 Xxxxxxxx xxxxxxxx na 50 xx se šroubovacími xxxxxxx.

4.9 Elektrická xxxxx xxxxx x termostatem. Xxxxxxxxx teploty: xxx 80 °X. Xxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx deskou o xxxxxxxxx 20 xx × 20 xx x xxxxxxxx xxx 6 mm, čímž xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

5. Xxxxxx

5.1 Xxxxxxxx xxxxxx

Xx skleněné xxxxxxxx xx 50 xx se šroubovacím xxxxxxxx (4.8) xx xxxxxx xxxxxxxxx 1 x xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx kapky xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.7) x 40 xx xxxxxxx.

X xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx kosmetických xxxxxxxxxx, jako xx xxxxxxxx xxxxx, se xxxxx 20 kapek xxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx uzavře, xxxx xx xxxxxx xxxxxxx na xxx 60 °X, aby xx usnadnila xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx látek xx xxxxxxxxx fáze, a 1 xxxxxx xx xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xX xxxxxxx a xxxxxx xx na hodnotu ≤ 3 roztokem xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Znovu xx 1 minutu xxxxx xxxxx.

Xxxxxx se xxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxx filtrační xxxxx xx Erlenmeyerovy xxxxx. 20 ml xxxxxxxx xx převede xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 200 xx, xxxxx se 60 xx vody x xxxxxxxx. Xxxxxxx xX xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx draselným (3.8) xxxxxxxxx xx 10 xx xxxxxxx indikátorového xxxxxxx.

Xxxxx xx 1 x chloridu xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.9) a xxxxx xx protřepe. Xxxxxx se xxxxxxxxx xxxx filtrační xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx 250 xx, xxxxx xxxxxxxx 75 xx xxxxxxxxxxxxx, a xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xx nechají xxxxxxx x xxxxx fáze xx vypustí do Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 200 ml. Xxxxxxx xX xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxxxxxx 2 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxx 10 xx diethyletheru a xxxxx xx xxxxx xxxxxx protřepává. Fáze xx nechají oddělit x xxx 2 xx fáze xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 5 xx.

5.2 Xxxxxxxxxxxxxx xx tenké xxxxxx (XXX)

XXX xxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx desku (4.9). Xx startovní linii xxxxxxxxxxxx xxxx XXX xxxxx xx nanese 10 μx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x 100 μx xxxxxxx vzorku (xxxxxx) (5.1).

Xxxxx xxxxxxx lze xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. TLC xxxxx se odstraní x xxxxx xxxxx x nechá xx xxxxxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx (4.2) xx naplní 100 ml vyvíjecího xxxxxxxxxxxx (3.19).

XXX xxxxx xx xxxxx vloží xx nenasycené xxxxxx x xxxxxx xx xxx pokojové xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx 15 xx od základní xxxxx. Xxxxx se x xxxxxxxx komory xxxxx x xxxxxx x xxxxxx horkého xxxxxxx pomocí xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vlasů.

Deska xx xxxxxxxxx x XX xxxxxx (4.3) x xxxxxx xxxxx se xxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx 30 xxxxx x xxxxxxx (4.5) xxx 100 °C, xxx xx odstranila xxxxxxxxxx xxxxxxxx octová. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxxxxxxx se zviditelní Xxxxxxxxxx činidlem (3.10) xxx, xx se XXX xxxxx rovnoměrně xxxxxxx xxxxxxxx (4.7) xxxxxxxxx do xxxxxxx.

Xxxxxxxx:

Xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nanesením xxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx XX xxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, 2-xxxxxxxxxxxxx x 1-xxxxxxxxxxxx-2-xx xxxx žluté xxxxxx. Je však xxxxx xxxxx xxxxx xx xx, že xxxxxxxx 4-hydroxybenzoová, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xx vzorcích xxxx xxxxxxxxxxx látka xxxx xxxxxxx xxxxxxxx parabenů, xx sama x xxxx projeví xxxx xxxxxxx skvrna. Viz 7.3 x 7.4.

6. Xxxxx

Xxx každou skvrnu xx xxxxxxx xxxxxxx Xx. Xxxxxx získané x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxx Xx, xxxxxx xxxxxxx x XX xxxxxx a xxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Učiní xx xxxxxxxxx xxxxxx x identitě xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx se xxx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, provede se xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxxxxxx x xxxxxx X. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx (XXX) x vysokoúčinné xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) se xxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 2-fenoxyethanolu, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx a parabenů.

7. Xxxxxxxx

7.1 Vzhledem x xxxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx jedním x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.

7.2 Xxxx xxxxxxxxxx obsahující xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx x Millonovým xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx Xx získaných xxx xxxx konzervačních xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x práci X. xx Xxxxxx, X. X. H. Xxxx, X. A. Xxxxxxx-Xxxxxxxxx a A. Xxxxxxxx (1987): Xxxxxxxxxxxxx xx preservatives xx xxxxxxxx xxxxxxxx I: Xxxx-xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx the xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx products (J. Xxxxxxxxxxxxxx 410, 395-411).

7.3 Xxxxxxx Xx xxxxxxx x následující xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, které xxx xxxxxx:

7.4 V xxxxxxx xxxxxxxx 4-hydroxybenzoové x xxxxxxxxxxxxxx ani x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx. Důkaz xxxxxx xxxxxxxxx by xxx být xxxxxxxx xxxxxxx HPLC xxxxxxxx x oddíle B x porovnáním xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx.

X. XXXXXXXXX

1. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx

X xxxx xxxxxx je xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, ethyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx 4-hydroxybenzoátu, butyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx x benzyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

2. Xxxxxxxx

Xxxxxxxx konzervačních xxxxxx stanovená xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

3. Xxxxxxxx metody

Vzorek xx xxxxxxx xxxxxxxx kyseliny xxxxxx x xxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxx. Xxxx xx xxxxxxx zahřeje xx xxxxxxxxxx tukové xxxx, xxx xx zajistila xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xx zfiltruje.

Konzervační xxxxx ve xxxxxxxx xx stanoví vysokoúčinnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) x xxxxxxxxx fází xx xxxxxxx isopropyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

4. Xxxxxxx xxxxxxx

4.1 Xxxxxx

Xxxxxxx reakční činidla xxxx být xxxxxxx x.x. x xxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxx xxx XXXX. Xxxx xxx použita xxxxxxxxxxx voda nebo xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.

4.2 Ethanol, xxxxxxxxx

4.3 2-Xxxxxxxxxxxxx

4.4 1-Xxxxxxxxxxxx-2-xx

4.5 Methyl 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx)

4.6 Ethyl 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx)

4.7 n-Propyl 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx)

4.8 Xxxxxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (isopropylparaben)

4.9 x-Xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (butylparaben)

4.10 Benzyl 4-xxxxxxxxxxxxxx (benzylparaben)

4.11 Xxxxxxxxxxxxxxx

4.12 Xxxxxxxx

4.13 Acetonitril

4.14 Xxxxxx xxxxxxxx sírové x(X₂XX₄) = 2 xxx/x

4.15 Xxxx xxxxxxx/xxxx

Xxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx (4.2) x jeden xxx xxxx.

4.16 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx 0,25 x xxxxxxxxxxxxxxxxx (4.8), xxxxxxx se xx xxxxxxx xxxxx xx 500 ml, rozpustí xx x doplní xx xxxxx xxxxxxx/xxxx (4.15) na xxxxx.

4.17 Xxxxxxx xxxx: xxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxx/xxxxxxxx/xxxxxxxxxxx

Xxxxxx se 5 xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, 60 xxxx xxxx, 10 xxxx methanolu a 25 xxxx xxxxxxxxxxxx.

4.18 Xxxxxxx xxxxxx konzervačních xxxxxx

Xx xxxxxxx xxxxx xx 100 xx xx přesně xxxxxx xxxxxxxxx 0,2 g 2-xxxxxxxxxxxxxx, 0,2 x 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, 0,05 g xxxxxxxxxxxxxx, 0,05 g xxxxxxxxxxxxx, 0,05 g xxxxxxxxxxxxxx, 0,05 x xxxxxxxxxxxxx x 0,025 x xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx a xxxxxx xxxxx ethanol/voda na xxxxx.

Xxxxxx xx uchovává x xxxxxxxx x xx xxxxxxxx 1 xxxxx.

4.19 Standardní roztoky xxxxxxxxxxxxx přísad

Do xxxxxxxxx xxxxx xx 50 xx xx xx xxxxxxxxx roztoku (4.18) xxxxxxx 20,00 xx, 10,00 xx, 5,00 xx, 2,00 xx x 1,00 ml. Xx xxxxx xxxxx xx xxxxx 10,00 xx xxxxxxx vnitřního xxxxxxxxx (4.16) x 1,0 xx xxxxxxx xxxxxxxx sírové (4.14) x doplní xxxxx xxxxxxx/xxxx xx xxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

5. Přístroje x pomůcky

Běžné laboratorní xxxxxxxx, a xxxx:

5.1 Xxxxx xxxxx nastavitelná xx teplotu 60 °X ± 1 °X.

5.2 XXXX xxxxxxxxxxxx x XX xxxxxxxxxx, xxxxxx délka 280 xx

5.3 Xxxxxxxxxx kolona:

Korozivzdorná xxxx, délka 25 xx, xxxxxxx xxxxxx 4,6 mm (xxxx xxxxx 12,5 xx x xxxxxxx průměr 4,6 mm), naplněná Xxxxxxxxxxx 5X18, xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxx 10.1).

5.4 Xxxxxxxx xxxxxxxx xx 100 xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx

5.5 Xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx 2 xx 4 xx xxxx xxxxxxxxxxxx

6. Xxxxxx

6.1 Příprava xxxxxx

6.1.1 Příprava xxxxxx xxx přidání xxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xx xxxxxxxx xx 100 xx se xxxxxxxxxxx uzávěrem se xxxxxx asi 1,0 x xxxxxx. Xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 1,0 ml xxxxxxx xxxxxxxx sírové (4.14) x 50,0 xx xxxxx ethanol/voda (4.15). Xxxxx xx xxxxxxxxx 1 x xxxxxxx xxxxxxx (5.5), xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx se xxxxxxxx, dokud xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Protřepává xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Zkumavka se xxxxx na 5 xxxxx xx vodní xxxxx (5.1) x xxxxxxx 60 °C ± 1 °X, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx ethanolové xxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxx ochladí xxx proudem studené xxxx x xxxxxxx xx xxxxx na xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx 2 xx filtrátu xx xxxxxxxx xx 5 xx vzorkovací lahvičky. Xxxxxxxx xx uloží xx ledničky x xxxxxxxxx metodou XXXX xx xxxxxxx do 24 xxxxx.

6.1.2 Příprava xxxxxx včetně xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xx skleněné xxxxxxxx xx 100 xx xx šroubovacím xxxxxxxx se x xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx 1,0 x ± 0,1 g xxxxxx.

Xx xxxxxxxx xx pipetou xxxxx 1,0 ml xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x 40,0 xx xxxxx xxxxxxx/xxxx. Přidá xx xxxxxxxxx 1 x xxxxxxx xxxxxxx (5.5) a xxxxxx 10,00 xx xxxxxxx xxxxxxxxx standardu. Xxxxxxxx xx uzavře x xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xx 5 xxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxxxx 60 °X ± 1 °X, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx a xxxxxxx se xxxxx xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx. Extrakt xx zfiltruje přes xxxxxxxxx xxxxx.

Xxx 2 xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx 5 xx xxxxxxxxxx lahvičky (xxxxxxxx xxxxxx). Xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx XXXX se xxxxxxx do 24 xxxxx.

6.2 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (HPLC)

6.2.1 Chromatografické xxxxxxxx

- Xxxxxxx xxxx: xxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxx/xxxxxxxx/xxxxxxxxxxx (4.17)

- Xxxxxxxxx xxxxxxxx: 1,5 xx xx xxxxxx

- Xxxxxxxx vlnová délka: 280 nm

6.2.2 Xxxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx 10 μx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx konzervačních xxxxxx (4.19). Xx získaných xxxxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx výšek xxxx xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx přísadu xx sestrojí xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

6.2.3 Xxxxxxxxx

Xx xxxxxxxxxxxxx xx nastříkne 10 μx xxxxxxx vzorku xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (6.1.1) x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx se 10 μx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (4.19) x zaznamená xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.

Xxxx-xx v xxxxxxxxxxxxx extraktu xxxxxx (6.1.1) xxxxxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, jako xx xxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxxx standard), xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx 10 μx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (6.1.2). Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x změří xx xxxxx xxxx.

Xx-xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx rušivý pík x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxx čas xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxx by xxx xxxxxx xxxx vnitřní xxxxxxxx.

Xxxx-xx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx konzervačních xxxxxx x chromatogramu xxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx standard.

Vypočítají xx xxxxxx xxxxx xxxx vyšetřovaných konzervačních xxxxxx x výšce xxxx xxxxxxxxx standardu.

Je xxxxx ověřit, xx xx xxxxxxxxxx křivka xxxxxxxxx standardu lineární.

Je xxxxx xxxxxx, zda xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx požadavky:

- separace xxxx nejhůře xxxxxxxxxx xxxx xx alespoň 0,90. (Definice xxxxxxxx xxxx je uvedena xx obrázku 1.),

Obrázek 1: Separace xxxx

Xxxx-xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx dosaženo, xxxx xx xxx xxx použita xxxxxxxxx xxxxxx, nebo xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx upraveno xxx, aby byl xxxxxxxxx splněn.

- xxxxxx xxxxxxxxx (Xx) xxxxx xxxxxxxxx xxxx xx xx xxx xxxxxxxxx xx 0,9 xx 1,5. (Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx 2.) Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx stanovení xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxx posuvu xxxxxx xxxxxxx 2 xx xx xxxxxx,

&xxxx;

Xxxxxxx 2: Xxxxxx xxxxxxxxx xxxx

- základna xxxx xxx stabilní.

7. Výpočet

Pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx konzervačních xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (6.2.2) x hodnoty xxxxxx xxxxx píků xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad x xxxxx xxxx vnitřního xxxxxxxxx. Xxxxx (xx) 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-hydroxybenzoátu, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx x benzyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (% m/m) xx xxxxxxx pomocí xxxxxx:

%x_x(x/x) = b_i / (200 × x)

xxx

xx = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx i xx zkušebním roztoku (μx/xx) xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx x

x = hmotnost zkušebního xxxxxx (x).

8. Opakovatelnost [1]

Xxx poznámka x xxxx 10.5.

9. Xxxxxxxxxxxxxxxxxx [2]

Xxx xxxxxxxx x xxxx 10.5.

10. Poznámky

10.1 Xxxxxxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx látek při xxxxxxxxxxx XXXX xxxxxxx xxxxxx na typu, xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx fáze. Xxx xxx xxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad, xxx xxxxxxx z výsledků xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx (viz xxxxxxxx x bodu 6.2.3). Xxxxx navrhovaného xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx byly xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx Xxxxxxxx XXX x Xxxxxx XXX.

Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx lze xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx složení xxxxxxx xxxx.

10.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx popisované xxxxxx ukázala, že xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx významný xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxx během analýzy xxxxxxx xxxxxxxxxxx.

10.3 Rušivé xxxxx

Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxx konzervační xxxxxxx x kosmetické xxxxxxx. Retenční časy xxxxxxx xxxxxxxx konzervačních xxxxxx uvedených x xxxxxxx XX směrnice Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx v práci X. xx Xxxxxx, X. X. H. Xxxx, X. A. Xxxxxxx-Xxxxxxxxx, X. Schouten, (1989): Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx XX. Xxxx-xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (X. Xxxxxxxxxxxxxx, 469, 317-398).

10.4 Pro xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx lze xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

10.5 Xxxxxx xxxx zkoušena xxx xxxxxxxx pokusu, xx xxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx analyzovány tři xxxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxx jsou xxx xxxxx ze xxx xxxxxx uvedeny střední xxxxxxx v % x/x (m), opakovatelnosti (x) x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) xxxxxxxx xxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xx vzorcích xxxxxxxx:

[1] ISO 5725.

[2] XXX 5725.