Plné znění - 31996L0045

Xxxxx Xxxxxxxx Xxxxxx 96/45/XX

xx xxx 2. xxxxxxxx 1996

x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx

(Xxxx x xxxxxxxx xxx XXX)

XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,

x xxxxxxx na Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx společenství,

s xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxx 76/768/XXX xx dne 27. července 1976 x sbližování xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx států xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx směrnicí Komise 95/34/XX [2], x xxxxxxx xx čl. 8 xxxx. 1 xxxxxxx xxxxxxxx,

xxxxxxxx x xxxx, že xx xx xxxxxxxx 76/768/XXX xxxxxxx xxxxxx zkoušení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx, které se xxxxxx složení kosmetických xxxxxxxxxx;

xxxxxxxx x xxxx, xx xx všechny xxxxxxxx metody analýzy xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx; xx xxxxxxx xxxxxx již xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxx 80/1335/XXX [3] xx xxxxx xxxxxxxx 87/143/XXX [4], xxxxxxxx Xxxxxx 82/434/XXX [5] xx xxxxx xxxxxxxx 90/207/EHS [6] x xx směrnicích Xxxxxx 83/514/EHS [7], 85/490/XXX [8], 93/73/XXX [9] x 95/32/XX [10];

xxxxxxxx x tomu, xx xxxxx x xxxxxxxxx 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, xxxxxx, xxxxx, xxxxxx, xxxxx x xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx sedmým xxxxxx;

xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx této xxxxxxxx xxxx v xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx 76/768/EHS technickému xxxxxxx,

XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:

Xxxxxx 1

Xxxxxxx státy xxxxx xxxxxxx nezbytné xxxxx x xxxxxxxxx xxxx, aby xx xxx úředním zkoušení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x stanovení 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, xxxxxx, ethyl, xxxxxx, xxxxx x xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx popsanými x xxxxxxx.

Xxxxxx 2

1. Xxxxxxx xxxxx uvedou v xxxxxxxx právní x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx dosažení xxxxxxx x xxxxx směrnicí xxxxxxxxxx xx 30. xxxx 1997. Xxxxxxxxxx x xxxx uvědomí Xxxxxx.

2. Xxxx opatření xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxx takový xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

3. Xxxxxxx xxxxx xxxxx Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx této xxxxxxxx.

Xxxxxx 3

Xxxx směrnice xxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxx dnem xx xxxxxxxxx x Úředním xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxx 4

Xxxx xxxxxxxx xx určena xxxxxxxx xxxxxx.

X Xxxxxxx xxx 2. července 1996.

Za Xxxxxx

Xxxx Xxxxxx

xxxxxx Xxxxxx

[1] Úř. xxxx. X 262, 27.9.1976, x. 169.

[2] Xx. xxxx. X 167, 18.7.1995, x. 19.

[3] Úř. xxxx. X 383, 31.12.1980, x. 27.

[4] Xx. xxxx. X 57, 27.2.1987, x. 56.

[5] Xx. xxxx. X 185, 30.6.1982, x. 1.

[6] Úř. xxxx. X 108, 28.4.1990, x. 92.

[7] Xx. věst. X 291, 24.10.1983, x. 9.

[8] Úř. xxxx. X 295, 7.11.1985, x. 30.

[9] Xx. věst. X 231, 14.9.1993, x. 34.

[10] Úř. xxxx. X 178, 28.7.1995, x. 20.

PŘÍLOHA

DŮKAZ A STANOVENÍ 2-XXXXXXXXXXXXXX, 1-XXXXXXXXXXXX-2-XXX, XXXXXX, XXXXX, PROPYL, XXXXX X BENZYL 4-HYDROXYBENZOÁTU X XXXXXXXXXXXX PROSTŘEDCÍCH

A. XXXXX

1. Xxxxxx a xxxxxx použití

V xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx vrstvě, xxxxx x kombinaci x xxxxxxx stanovení xxxxxxxx x xxxxxx X xxxxxx důkaz 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx x benzyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx prostředcích.

2. Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx acetonem. Xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx vysrážejí xxxx xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx směs aceton/voda xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxx xx odstraní xxxxxxxxx xxxxx. Po xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx diethyletherem. Xxxxxxxxx xxxx diethyletherového xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx vrstvou silikagelu. Xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x UV xxxxxx x xxxxxxxxxx xx xx použití Millonova xxxxxxx.

3. Xxxxxxx xxxxxxx

3.1 Xxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x.x. Xxxx xxx xxxxxxx destilovaná xxxx nebo xxxx xxxxxxx stejné xxxxxxx.

3.2 Xxxxxx

3.3 Xxxxxxxxxxxx

3.4 x-Xxxxxx

3.5 Xxxxxxxx

3.6 Xxxxxx kyselina xxxxxx

3.7 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, x(XXx) = 4 mol/l

3.8 Roztok xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, x(XXX) = 4 xxx/x

3.9 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (XxXx₂ . 2X₂X)

3.10 Xxxxxxxx xxxxxxx: Xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxx (dusičnan xxxxxxxx) je komerčně xxxxxxxx xxxxxx (Xxxxx 69820).

3.11 2-Xxxxxxxxxxxxx

3.12 1-Xxxxxxxxxxxx-2-xx

3.13 Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx)

3.14 Xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx)

3.15 x-Xxxxxx 4-hydroxybenzoát (propylparaben)

3.16 x-Xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx)

3.17 Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx)

3.18 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxx xx 0,1 % (x/X) xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx 3.11, 3.12, 3.13, 3.14, 3.15, 3.16 x 3.17 v xxxxxxxxx.

3.19 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xx 88 xxxx xxxxxxxx (3.4) x 12 xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.6).

4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx:

4.1 Xxxxx lázeň xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx 60 °X

4.2 Vyvíjecí xxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx papírem)

4.3 Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx světla, 254 xx

4.4 Xxxxxx xxxxx 20 cm × 20 xx, xxxxxx potažené 0,25 xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 60F254 (254 xx dolním indexem 60X) x xxxxxxxxxxxx xxxxx (Xxxxx Xx 11798, Xxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxxxxx)

4.5 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx teplotu xx xx 105 °X

4.6 Xxxxxxxxxxxx vysoušeč xxxxx

4.7 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx 10 cm, xxxxxx xxxxxx přibližně 3,5 xx. Vlněná vrstva xx xxxx xxx 2 xx 3 xx silná. Podle xxxxxxx xx vlna xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxx v xxxx 5.2.

4.8 Skleněné xxxxxxxx xx 50 xx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

4.9 Elektrická topná xxxxx x termostatem. Xxxxxxxxx xxxxxxx: asi 80 °X. Topná xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx deskou o xxxxxxxxx 20 xx × 20 cm x tloušťce xxx 6 mm, xxxx xx xxxxxxx rovnoměrného xxxxxxxxx xxxxx.

5. Xxxxxx

5.1 Xxxxxxxx vzorku

Do skleněné xxxxxxxx na 50 xx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.8) xx xxxxxx xxxxxxxxx 1 x xxxxxx. Xxxxxxx xx čtyři kapky xxxxxxx kyseliny chlorovodíkové (3.7) a 40 xx xxxxxxx.

X xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx mýdlo, xx xxxxx 20 kapek xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx uzavře, xxxx se zlehka xxxxxxx xx xxx 60 °X, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx xxxx, a 1 xxxxxx xx xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxxxx papírkem xx změří pH xxxxxxx a xxxxxx xx na xxxxxxx ≤ 3 xxxxxxxx xxxxxxxx chlorovodíkové. Znovu xx 1 xxxxxx xxxxx xxxxx.

Xxxxxx se xxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx x zfiltruje xx xxxx filtrační xxxxx xx Erlenmeyerovy xxxxx. 20 xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 200 ml, xxxxx se 60 xx vody a xxxxxxxx. Hodnota pH xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.8) xxxxxxxxx xx 10 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xx 1 x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.9) x xxxxx se protřepe. Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx dělicí xxxxxxx xx 250 xx, xxxxx obsahuje 75 xx diethyletheru, x xxxxx xx jednu xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxx xx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx baňky na 200 xx. Xxxxxxx xX roztoku xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 2 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxx 10 xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxx protřepává. Fáze xx xxxxxxx xxxxxxx x xxx 2 xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx do xxxxxxxxxx xxxxxxxx na 5 xx.

5.2 Chromatografie xx xxxxx xxxxxx (XXX)

XXX deska se xxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.9). Xx xxxxxxxxx linii xxxxxxxxxxxx xxxx XXX xxxxx xx xxxxxx 10 μl xxxxxxx x referenčních roztoků x 100 μx xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx) (5.1).

Xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. XXX xxxxx se xxxxxxxx x xxxxx desky x xxxxx se xxxxxxxxxxx xx pokojovou xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx (4.2) xx xxxxxx 100 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.19).

XXX xxxxx xx ihned vloží xx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx se xxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx asi 15 xx od xxxxxxxx xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxx se xxxxxxxxx v XX xxxxxx (4.3) a xxxxxx xxxxx se xxxxxxx. Deska xx xxxxxxx 30 minut x xxxxxxx (4.5) xxx 100 °C, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx přísady x xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.10) xxx, xx xx XXX deska xxxxxxxxxx xxxxxxx válečkem (4.7) xxxxxxxxx xx činidla.

Poznámka:

Skvrny xxx rovněž xxxxxxxxxxx xxxxxxxx nanesením xxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx skvrnu xxxxxxxxx xxx XX světlem.

Estery xxxxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx červené xxxxxx, 2-xxxxxxxxxxxxx x 1-xxxxxxxxxxxx-2-xx xxxx xxxxx xxxxxx. Je však xxxxx xxxxx pozor xx to, xx xxxxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx být xxxxxxxx xx vzorcích jako xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx parabenů, xx xxxx x xxxx xxxxxxx jako xxxxxxx xxxxxx. Viz 7.3 a 7.4.

6. Xxxxx

Xxx každou skvrnu xx xxxxxxx hodnota Xx. Skvrny xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxx o jejich xxxxxxx Xx, xxxxxx xxxxxxx v XX xxxxxx a xxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx xx zdá, xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, provede xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) popsanou x xxxxxx X. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx vrstvě (TLC) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) se xxxxxxxxxx, aby se xxxxxxxxx přítomnost 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx x xxxxxxxx.

7. Xxxxxxxx

7.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxx činidla xx xxxxxxxxxxxx aplikovat xxxx činidlo xxxxxx x xxxxxxxxx způsobů. Xxxxxxx se xxxxxxxxxxxx.

7.2 Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxx reakci x Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Tabulka xxxxx x xxxxxx Xx získaných pro xxxx xxxxxxxxxxxxx přísad xxxxxxxx chromatografie xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxx X. xx Xxxxxx, X. X. H. Xxxx, X. X. Xxxxxxx-Xxxxxxxxx x X. Xxxxxxxx (1987): Determination xx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx X: Xxxx-xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx identification xx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (X. Xxxxxxxxxxxxxx 410, 395-411).

7.3 Xxxxxxx Xx uvedené x následující xxxxxxx xxxxxx jako xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxx xxxxxx:

7.4 V xxxxxxx kyseliny 4-xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx ani x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x ethylparabenu xxxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx sloučenin by xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx HPLC xxxxxxxx x xxxxxx X x porovnáním retenčních xxxx vzorku s xxxxxxxxxx xxxx standardů.

B. XXXXXXXXX

1. Xxxxxx a xxxxxx xxxxxxx

X této xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx pro stanovení 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, ethyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx 4-hydroxybenzoátu, butyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

2. Xxxxxxxx

Xxxxxxxx konzervačních xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx procentech.

3. Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxx ethanolu a xxxx. Směs se xxxxxxx zahřeje xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx extrakce, a xxxx xx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx vysokoúčinnou xxxxxxxxxxx chromatografií (XXXX) x obrácenou fází xx xxxxxxx xxxxxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

4. Xxxxxxx xxxxxxx

4.1 Xxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x.x. x xxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxx HPLC. Xxxx xxx použita xxxxxxxxxxx xxxx nebo xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.

4.2 Ethanol, absolutní

4.3 2-Xxxxxxxxxxxxx

4.4 1-Fenoxypropan-2-ol

4.5 Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx)

4.6 Ethyl 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx)

4.7 x-Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (propylparaben)

4.8 Xxxxxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxxxx)

4.9 x-Xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx)

4.10 Benzyl 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx)

4.11 Xxxxxxxxxxxxxxx

4.12 Xxxxxxxx

4.13 Acetonitril

4.14 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x(X₂XX₄) = 2 xxx/x

4.15 Xxxx xxxxxxx/xxxx

Xxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxxxx (4.2) x xxxxx xxx xxxx.

4.16 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxxx xx xxxxxx přibližně 0,25 x xxxxxxxxxxxxxxxxx (4.8), xxxxxxx xx do xxxxxxx xxxxx xx 500 ml, xxxxxxxx xx a xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx/xxxx (4.15) xx xxxxx.

4.17 Xxxxxxx fáze: xxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxx/xxxxxxxx/xxxxxxxxxxx

Xxxxxx se 5 xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, 60 xxxx xxxx, 10 xxxx xxxxxxxxx a 25 xxxx xxxxxxxxxxxx.

4.18 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxxx xxxxx xx 100 xx xx přesně naváží xxxxxxxxx 0,2 g 2-xxxxxxxxxxxxxx, 0,2 x 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, 0,05 g xxxxxxxxxxxxxx, 0,05 x xxxxxxxxxxxxx, 0,05 x xxxxxxxxxxxxxx, 0,05 g xxxxxxxxxxxxx x 0,025 x xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxx xx xxxxx.

Xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xx xxxxxxxx 1 xxxxx.

4.19 Standardní xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx

Xx odměrných xxxxx xx 50 xx xx xx xxxxxxxxx roztoku (4.18) xxxxxxx 20,00 xx, 10,00 xx, 5,00 xx, 2,00 ml x 1,00 xx. Xx xxxxx baňky xx xxxxx 10,00 xx xxxxxxx vnitřního xxxxxxxxx (4.16) a 1,0 ml xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.14) x xxxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxx xx xxxxx. Xxxx roztoky xx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x dále:

5.1 Xxxxx xxxxx nastavitelná xx teplotu 60 °X ± 1 °X.

5.2 XXXX xxxxxxxxxxxx x UV detektorem, xxxxxx délka 280 xx

5.3 Xxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx 25 xx, xxxxxxx průměr 4,6 xx (nebo xxxxx 12,5 xx x xxxxxxx xxxxxx 4,6 xx), naplněná Xxxxxxxxxxx 5X18, nebo xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxx 10.1).

5.4 Skleněné xxxxxxxx xx 100 ml xx šroubovacím xxxxxxxx

5.5 Xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx 2 xx 4 xx nebo xxxxxxxxxxxx

6. Postup

6.1 Xxxxxxxx xxxxxx

6.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx vnitřního xxxxxxxxx

Xx xxxxxxxx xx 100 ml xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxx 1,0 x vzorku. Xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 1,0 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.14) x 50,0 xx xxxxx xxxxxxx/xxxx (4.15). Přidá xx xxxxxxxxx 1 x xxxxxxx xxxxxxx (5.5), xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx jednu xxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxx xx 5 xxxxx do xxxxx xxxxx (5.1) x xxxxxxx 60 °C ± 1 °X, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad xx ethanolové xxxx.

Xxxxxxxx xx ihned xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx x extrakt xx uloží xx xxxxx hodinu xx xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx 2 xx filtrátu xx xxxxxxxx do 5 xx xxxxxxxxxx lahvičky. Xxxxxxxx xx xxxxx xx ledničky x xxxxxxxxx metodou HPLC xx xxxxxxx do 24 xxxxx.

6.1.2 Příprava xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx standardu

Do xxxxxxxx xxxxxxxx na 100 xx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se x xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx místa xxxxxx 1,0 g ± 0,1 x xxxxxx.

Xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 1,0 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x 40,0 ml xxxxx xxxxxxx/xxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx 1 x xxxxxxx xxxxxxx (5.5) x přesně 10,00 ml roztoku xxxxxxxxx standardu. Xxxxxxxx xx uzavře x xxxxx se protřepe, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Protřepává se xxxxxxx jednu minutu. Xxxxxxxx xx xxxxx xx 5 minut xx vodní xxxxx x xxxxxxx 60 °X ± 1 °X, aby se xxxxxxxxx extrakce xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx ethanolové xxxx.

Xxxxxxxx se ihned xxxxxxx pod proudem xxxxxxx vody x xxxxxxx se uloží xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx papír.

Asi 2 xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx do 5 xx vzorkovací xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxx). Xxxxxxx xx uloží do xxxxxxxx a stanovení xxxxxxx XXXX xx xxxxxxx xx 24 xxxxx.

6.2 Vysokoúčinná xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX)

6.2.1 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

- Xxxxxxx xxxx: xxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxx/xxxxxxxx/xxxxxxxxxxx (4.17)

- Xxxxxxxxx rychlost: 1,5 xx xx minutu

- Xxxxxxxx vlnová xxxxx: 280 xx

6.2.2 Xxxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx 10 μl xxxxxxx ze standardních xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (4.19). Xx získaných xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx roztoků konzervačních xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx standardu. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx koncentraci xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

6.2.3 Stanovení

Do chromatografu xx xxxxxxxxx 10 μx xxxxxxx vzorku xxx vnitřního xxxxxxxxx (6.1.1) x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xx 10 μl xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (4.19) x zaznamená xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.

Xxxx-xx v xxxxxxxxxxxxx extraktu vzorku (6.1.1) přítomen pík x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xxxx xx xxxxxxxx čas xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxxx standard), pokračuje xx xxxxxxxxxxxx 10 μx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (6.1.2). Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxx xx výšky xxxx.

Xx-xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx pík x retenčním xxxxx xxxxxxxxx stejným jako xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxx-xx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad x xxxxxxxxxxxxx vzorku xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx vnitřní xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xx xxxxxx výšek xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxx standardu.

Je xxxxx xxxxxx, xx xx kalibrační xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx lineární.

Je xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxxx získané xxx xxxxxxxxxx roztok x xxxxxx vzorku splňují xxxxxxxxxxx požadavky:

- xxxxxxxx xxxx nejhůře odděleného xxxx xx xxxxxxx 0,90. (Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx 1.),

&xxxx;

Xxxxxxx 1: Xxxxxxxx xxxx

Xxxx-xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxx být složení xxxxxxx fáze xxxxxxxx xxx, aby byl xxxxxxxxx xxxxxx.

- faktor xxxxxxxxx (Xx) xxxxx xxxxxxxxx xxxx xx xx měl xxxxxxxxx xx 0,9 xx 1,5. (Definice xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx obrázku 2.) Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx asymetrie xx xxxxxxxxxx rychlost posuvu xxxxxx nejméně 2 xx xx minutu,

Obrázek 2: Faktor xxxxxxxxx xxxx

- xxxxxxxx musí xxx stabilní.

7. Xxxxxxx

Xxx xxxxxxx koncentrace xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x roztoku xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (6.2.2) x xxxxxxx poměrů xxxxx xxxx vyšetřovaných xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx vnitřního xxxxxxxxx. Xxxxx (xx) 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-fenoxypropan-2-olu, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, ethyl 4-hydroxybenzoátu, xxxxxx 4-hydroxybenzoátu, xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (% x/x) xx vypočte pomocí xxxxxx:

%x_x(x/x) = x_x / (200 × x)

xxx

xx = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xx zkušebním xxxxxxx (μx/xx) xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx x

x = xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (x).

8. Opakovatelnost [1]

Xxx poznámka v xxxx 10.5.

9. Reprodukovatelnost [2]

Xxx xxxxxxxx x xxxx 10.5.

10. Xxxxxxxx

10.1 Xxxxxxxxxxx fáze

Retenční xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx HPLC výrazně xxxxxx na xxxx, xxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxx xxx kolonu xxxxxx xxx xxxxxxxx vyšetřovaných xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxx poznámky x xxxx 6.2.3). Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx vhodnými xxxx xxxxxxxxx Hypersil XXX x Zorbax ODS.

Za xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx složení mobilní xxxx.

10.2 Detekční xxxxxx xxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, že xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxx xx výsledky stanovení.

Tento xxxxxxxx musí xxx xxxxx xxxxx analýzy xxxxxxx xxxxxxxxxxx.

10.3 Xxxxxx xxxxx

Xx podmínek xxxxxxxxx x xxxx metodě xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, jako xxxx xxxxx konzervační xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx. Retenční xxxx xxxxxxx množství xxxxxxxxxxxxx xxxxxx uvedených x xxxxxxx XX směrnice Xxxx týkající xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx jsou xxxxxxx x práci X. de Xxxxxx, X. X. H. Xxxx, L. A. Xxxxxxx-Xxxxxxxxx, A. Xxxxxxxx, (1989): Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx XX. High-performance xxxxxx chromatographic xxxxxxxxxxxxxx (X. Chromatography, 469, 317-398).

10.4 Pro xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx lze xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

10.5 Xxxxxx byla xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx, xx xxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx analyzovány tři xxxxxx. V následující xxxxxxx jsou pro xxxxx xx tří xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x % x/x (x), xxxxxxxxxxxxxxx (x) x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) zjištěné xxx xxxxxxx, xxxxx byly xx xxxxxxxx xxxxxxxx:

[1] XXX 5725.

[2] XXX 5725.