Plné znění - 31996L0045

Sedmá Xxxxxxxx Komise 96/45/XX

xx dne 2. xxxxxxxx 1996

o xxxxxxxx xxxxxxx nezbytných xxx xxxxxxxx složení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx

(Xxxx x významem xxx EHP)

KOMISE EVROPSKÝCH XXXXXXXXXXXX,

x xxxxxxx xx Xxxxxxx x založení Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,

x ohledem xx xxxxxxxx Xxxx 76/768/XXX ze xxx 27. července 1976 x sbližování xxxxxxxx xxxxxxxx členských států xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx Komise 95/34/XX [2], x xxxxxxx xx xx. 8 odst. 1 xxxxxxx xxxxxxxx,

xxxxxxxx k xxxx, xx xx xx xxxxxxxx 76/768/XXX xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx dodržení xxxxxxxx předepsaných xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;

xxxxxxxx k xxxx, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxx stanoveny xx xxxxxxxx; xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxx ve xxxxxxxx Xxxxxx 80/1335/XXX [3] ve xxxxx xxxxxxxx 87/143/XXX [4], xxxxxxxx Komise 82/434/XXX [5] xx xxxxx xxxxxxxx 90/207/EHS [6] x xx xxxxxxxxxx Xxxxxx 83/514/EHS [7], 85/490/XXX [8], 93/73/EHS [9] a 95/32/ES [10];

xxxxxxxx k xxxx, xx xxxxx x xxxxxxxxx 2-fenoxyethanolu, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, xxxxxx, ethyl, xxxxxx, xxxxx x benzyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx x kosmetických xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx;

xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx se xxxxxxxxxxx Xxxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx 76/768/XXX xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

XXXXXXX TUTO XXXXXXXX:

Xxxxxx 1

Členské xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx k zajištění xxxx, xxx xx xxx xxxxxxx zkoušení xxxxxxxxxxxx prostředků xxxxx x stanovení 2-fenoxyethanolu, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, xxxxxx, xxxxx, xxxxxx, xxxxx a xxxxxx 4-hydroxybenzoátu xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Článek 2

1. Členské xxxxx uvedou v xxxxxxxx právní x xxxxxxx xxxxxxxx nezbytné xxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx směrnicí xxxxxxxxxx do 30. xxxx 1997. Xxxxxxxxxx x xxxx uvědomí Xxxxxx.

2. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx odkaz xx xxxx směrnici xxxx xxxx xxxxxx xxxxx být xxxxxx xxx xxxxxx úředním xxxxxxxxx. Xxxxxx odkazu xx stanoví xxxxxxx xxxxx.

3. Xxxxxxx xxxxx xxxxx Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx právních předpisů, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx působnosti xxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx 3

Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx po xxxxxxxxx v Úředním xxxxxxxx Xxxxxxxxxx společenství.

Článek 4

Tato směrnice xx určena xxxxxxxx xxxxxx.

V Xxxxxxx dne 2. xxxxxxxx 1996.

Xx Xxxxxx

Xxxx Xxxxxx

xxxxxx Komise

[1] Xx. xxxx. X 262, 27.9.1976, x. 169.

[2] Xx. xxxx. X 167, 18.7.1995, x. 19.

[3] Xx. xxxx. X 383, 31.12.1980, x. 27.

[4] Úř. xxxx. X 57, 27.2.1987, x. 56.

[5] Xx. xxxx. X 185, 30.6.1982, x. 1.

[6] Úř. xxxx. X 108, 28.4.1990, x. 92.

[7] Xx. xxxx. X 291, 24.10.1983, x. 9.

[8] Xx. xxxx. X 295, 7.11.1985, x. 30.

[9] Xx. xxxx. X 231, 14.9.1993, x. 34.

[10] Xx. věst. X 178, 28.7.1995, x. 20.

XXXXXXX

XXXXX X STANOVENÍ 2-XXXXXXXXXXXXXX, 1-XXXXXXXXXXXX-2-XXX, XXXXXX, XXXXX, XXXXXX, BUTYL X XXXXXX 4-XXXXXXXXXXXXXXX X KOSMETICKÝCH XXXXXXXXXXXX

X. XXXXX

1. Rozsah x xxxxxx použití

V xxxx xxxxxx xx specifikován xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx, xxxxx x kombinaci x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx B xxxxxx důkaz 2-fenoxyethanolu, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, butyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx x kosmetických prostředcích.

2. Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx extrahují x xxxxxxxxxxx vzorků xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxx x mastné xxxxxxxx xx v xxxxxxxxxx prostředí xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx soli. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxx/xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx extrahují diethyletherem. Xxxxxxxxx část xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx nanese xx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx vrstvou xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x XX světle x xxxxxxxxxx xx xx xxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxx.

3. Reakční xxxxxxx

3.1 Xxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxx x.x. Xxxx xxx xxxxxxx destilovaná xxxx xxxx voda xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.

3.2 Xxxxxx

3.3 Diethylether

3.4 n-Pentan

3.5 Xxxxxxxx

3.6 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx

3.7 Roztok xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, x(XXx) = 4 mol/l

3.8 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, c(KOH) = 4 mol/l

3.9 Xxxxxxx vápenatý dihydrát (XxXx₂ . 2H₂O)

3.10 Xxxxxxxx činidlo: Xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxxx) je komerčně xxxxxxxx roztok (Xxxxx 69820).

3.11 2-Xxxxxxxxxxxxx

3.12 1-Fenoxypropan-2-ol

3.13 Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx)

3.14 Xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx)

3.15 x-Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx)

3.16 x-Xxxxx 4-hydroxybenzoát (xxxxxxxxxxxx)

3.17 Xxxxxx 4-hydroxybenzoát (xxxxxxxxxxxxx)

3.18 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxx xx 0,1 % (m/V) xxxxxxx každé x xxxxxxxxxxxx látek 3.11, 3.12, 3.13, 3.14, 3.15, 3.16 a 3.17 x xxxxxxxxx.

3.19 Xxxxxxxx rozpouštědlo

Smíchá xx 88 xxxx xxxxxxxx (3.4) x 12 xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.6).

4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx

Xxxxx laboratorní xxxxxxxx a dále:

4.1 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx 60 °X

4.2 Xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx)

4.3 Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, 254 xx

4.4 Xxxxxx xxxxx 20 xx × 20 xx, xxxxxx xxxxxxxx 0,25 xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 60F254 (254 xx dolním indexem 60X) s xxxxxxxxxxxx xxxxx (Merck No 11798, Xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx)

4.5 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xx 105 °C

4.6 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx

4.7 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx 10 xx, xxxxxx xxxxxx přibližně 3,5 xx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxx xxx 2 xx 3 xx xxxxx. Podle xxxxxxx se vlna xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxx x xxxx 5.2.

4.8 Skleněné xxxxxxxx xx 50 xx se šroubovacími xxxxxxx.

4.9 Xxxxxxxxxx topná xxxxx x termostatem. Xxxxxxxxx xxxxxxx: asi 80 °X. Xxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx deskou x xxxxxxxxx 20 xx × 20 cm x xxxxxxxx asi 6 xx, čímž xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

5. Postup

5.1 Xxxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx 50 xx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.8) se xxxxxx xxxxxxxxx 1 x vzorku. Xxxxxxx xx čtyři kapky xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.7) x 40 xx xxxxxxx.

X případě xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx 20 xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx chlorovodíkové. Xxxxxxxx se xxxxxx, xxxx xx xxxxxx xxxxxxx xx asi 60 °X, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx látek do xxxxxxxxx xxxx, x 1 xxxxxx xx xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xX xxxxxxx x xxxxxx xx xx xxxxxxx ≤ 3 xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xx 1 xxxxxx xxxxx xxxxx.

Xxxxxx se xxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxx xx přes xxxxxxxxx xxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx. 20 xx xxxxxxxx se xxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 200 xx, xxxxx xx 60 xx xxxx x xxxxxxxx. Hodnota xX xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.8) xxxxxxxxx xx 10 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xx 1 x chloridu xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.9) a xxxxx se xxxxxxxx. Xxxxxx xx zfiltruje xxxx xxxxxxxxx papír xx dělicí xxxxxxx xx 250 xx, xxxxx xxxxxxxx 75 xx xxxxxxxxxxxxx, a xxxxx se xxxxx xxxxxx protřepává. Xxxx xx nechají oddělit x xxxxx fáze xx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx baňky xx 200 xx. Xxxxxxx xX xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx přibližně 2 za použití xxxxxxxxxxxxxx papírku. Xxxx xx xxxxx 10 xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxx protřepává. Xxxx xx xxxxxxx oddělit x xxx 2 xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx lahvičky xx 5 ml.

5.2 Xxxxxxxxxxxxxx xx tenké vrstvě (XXX)

XXX deska xx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.9). Xx xxxxxxxxx linii xxxxxxxxxxxx zóny TLC xxxxx se xxxxxx 10 μl každého x referenčních roztoků x 100 μl xxxxxxx vzorku (xxxxxx) (5.1).

Xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. TLC xxxxx se odstraní x topné desky x xxxxx xx xxxxxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx (4.2) se naplní 100 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.19).

XXX xxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx komory x xxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx 15 xx od základní xxxxx. Deska xx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx x xxxxxx horkého xxxxxxx xxxxxx horkovzdušného xxxxxxxxx vlasů.

Deska xx xxxxxxxxx x XX xxxxxx (4.3) x xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx 30 minut x sušárně (4.5) xxx 100 °X, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx octová. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.10) xxx, že xx XXX deska xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (4.7) xxxxxxxxx xx činidla.

Poznámka:

Skvrny xxx rovněž zviditelnit xxxxxxxx nanesením xxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx UV světlem.

Estery xxxxxxxx 4-hydroxybenzoové xx xxxxxxx xxxx červené xxxxxx, 2-xxxxxxxxxxxxx x 1-xxxxxxxxxxxx-2-xx xxxx žluté xxxxxx. Xx xxxx xxxxx xxxxx xxxxx xx to, xx xxxxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx přítomná xx xxxxxxxx jako xxxxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxx rozkladu xxxxxxxx, xx xxxx x xxxx xxxxxxx jako xxxxxxx xxxxxx. Xxx 7.3 x 7.4.

6. Xxxxx

Xxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx hodnota Xx. Xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx vzorku xx porovnají xx xxxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxxxxxx roztoků, pokud xxx o xxxxxx xxxxxxx Xx, xxxxxx xxxxxxx x UV xxxxxx x barvu xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x identitě konzervačních xxxxxx.

Xxxxx xx xxx, xx xxxx přítomny xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx vysokoúčinnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) popsanou x oddíle X. Xxxxxxxx chromatografie xx xxxxx xxxxxx (TLC) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xx xxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx přítomnost 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx x parabenů.

7. Xxxxxxxx

7.1 Vzhledem x xxxxxxxx Xxxxxxxxx činidla xx nejvhodnější xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxxxxxxx.

7.2 Xxxx sloučeniny obsahující xxxxxxxxxxx xxxxxxx mohou xxxxxx při xxxxxx x Millonovým činidlem xxxxxxxxxx zbarvení. Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx Xx xxxxxxxxx xxx xxxx konzervačních xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx je xxxxxxx x xxxxx X. de Kruijf, X. X. X. Xxxx, L. X. Xxxxxxx-Xxxxxxxxx x X. Xxxxxxxx (1987): Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx I: Xxxx-xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx identification xx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (X. Xxxxxxxxxxxxxx 410, 395-411).

7.3 Xxxxxxx Xx xxxxxxx x následující xxxxxxx xxxxxx jako ukazatele xxxxxx, xxxxx xxx xxxxxx:

7.4 V xxxxxxx kyseliny 4-xxxxxxxxxxxxxxx x methylparabenu ani x xxxxxxx benzylparabenu x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x oddělení. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx by xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx XXXX xxxxxxxx x xxxxxx B x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx standardů.

B. XXXXXXXXX

1. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx

X xxxx xxxxxx je xxxxxxxxxxxx xxxxxx pro stanovení 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx x kosmetických xxxxxxxxxxxx.

2. Xxxxxxxx

Xxxxxxxx konzervačních xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x hmotnostních xxxxxxxxxx.

3. Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx xx xxxxxxx přidáním xxxxxxxx xxxxxx x xxxx xx xxxxxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxx x xxxx. Xxxx xx xxxxxxx zahřeje xx xxxxxxxxxx xxxxxx fáze, xxx xx zajistila xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, a xxxx xx zfiltruje.

Konzervační xxxxx ve filtrátu xx stanoví xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx chromatografií (XXXX) x xxxxxxxxx fází xx xxxxxxx xxxxxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx jako xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

4. Xxxxxxx xxxxxxx

4.1 Xxxxxx

Xxxxxxx reakční činidla xxxx být čistoty x.x. a xxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxx xxx HPLC. Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx voda xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.

4.2 Xxxxxxx, xxxxxxxxx

4.3 2-Xxxxxxxxxxxxx

4.4 1-Fenoxypropan-2-ol

4.5 Methyl 4-xxxxxxxxxxxxxx (methylparaben)

4.6 Ethyl 4-xxxxxxxxxxxxxx (ethylparaben)

4.7 n-Propyl 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx)

4.8 Isopropyl 4-xxxxxxxxxxxxxx (isopropylparaben)

4.9 n-Butyl 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx)

4.10 Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx)

4.11 Xxxxxxxxxxxxxxx

4.12 Xxxxxxxx

4.13 Acetonitril

4.14 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x(X₂XX₄) = 2 mol/l

4.15 Xxxx xxxxxxx/xxxx

Xxxxxx se xxxxx xxxx ethanolu (4.2) x xxxxx xxx vody.

4.16 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxxx xx xxxxxx přibližně 0,25 x isopropylparabenu (4.8), xxxxxxx se xx xxxxxxx baňky xx 500 xx, xxxxxxxx xx x xxxxxx xx směsí ethanol/voda (4.15) xx xxxxx.

4.17 Xxxxxxx xxxx: směs xxxxxxxxxxxxxxx/xxxx/xxxxxxxx/xxxxxxxxxxx

Xxxxxx se 5 xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, 60 xxxx vody, 10 xxxx xxxxxxxxx x 25 dílů xxxxxxxxxxxx.

4.18 Xxxxxxx xxxxxx konzervačních xxxxxx

Xx xxxxxxx xxxxx xx 100 xx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 0,2 x 2-xxxxxxxxxxxxxx, 0,2 x 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, 0,05 g xxxxxxxxxxxxxx, 0,05 x xxxxxxxxxxxxx, 0,05 g xxxxxxxxxxxxxx, 0,05 x xxxxxxxxxxxxx x 0,025 x benzylparabenu, xxxxxxxx xx a xxxxxx xxxxx ethanol/voda xx xxxxx.

Xxxxxx se xxxxxxxx x ledničce x xx xxxxxxxx 1 xxxxx.

4.19 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxxxxx xxxxx xx 50 xx xx xx xxxxxxxxx roztoku (4.18) xxxxxxx 20,00 xx, 10,00 ml, 5,00 xx, 2,00 xx x 1,00 xx. Xx xxxxx xxxxx xx xxxxx 10,00 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.16) x 1,0 xx xxxxxxx xxxxxxxx sírové (4.14) x doplní xxxxx xxxxxxx/xxxx na xxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

5. Xxxxxxxxx x pomůcky

Běžné xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, a xxxx:

5.1 Xxxxx lázeň xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx 60 °X ± 1 °X.

5.2 HPLC chromatograf x UV detektorem, xxxxxx xxxxx 280 xx

5.3 Xxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx 25 xx, vnitřní průměr 4,6 xx (xxxx xxxxx 12,5 xx x xxxxxxx průměr 4,6 mm), xxxxxxxx Xxxxxxxxxxx 5X18, xxxx xxxxxxxxxxxxx sorbentem (viz 10.1).

5.4 Xxxxxxxx xxxxxxxx xx 100 ml xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx

5.5 Xxxxx kamínky, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx 2 až 4 mm xxxx xxxxxxxxxxxx

6. Xxxxxx

6.1 Xxxxxxxx xxxxxx

6.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx xxx přidání vnitřního xxxxxxxxx

Xx xxxxxxxx na 100 ml xx xxxxxxxxxxx uzávěrem se xxxxxx xxx 1,0 x xxxxxx. Xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 1,0 ml xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.14) a 50,0 xx směsi ethanol/voda (4.15). Přidá xx xxxxxxxxx 1 x xxxxxxx xxxxxxx (5.5), xxxxxxxx xx xxxxxx x silně xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx suspenze. Protřepává xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Zkumavka se xxxxx na 5 xxxxx xx xxxxx xxxxx (5.1) x xxxxxxx 60 °X ± 1 °C, xxx xx podpořila xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx fáze.

Zkumavka xx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx a xxxxxxx xx uloží xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx. Extrakt se xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Asi 2 xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx 5 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx HPLC xx xxxxxxx xx 24 xxxxx.

6.1.2 Příprava xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx standardu

Do xxxxxxxx xxxxxxxx xx 100 xx se šroubovacím xxxxxxxx xx s xxxxxxxxx na xxx xxxxxxxxx místa xxxxxx 1,0 g ± 0,1 x xxxxxx.

Xx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx 1,0 ml xxxxxxx xxxxxxxx sírové x 40,0 xx xxxxx xxxxxxx/xxxx. Přidá xx xxxxxxxxx 1 x xxxxxxx kamínků (5.5) a přesně 10,00 xx xxxxxxx xxxxxxxxx standardu. Zkumavka xx xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx nevznikne xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxx xx 5 xxxxx xx xxxxx xxxxx x xxxxxxx 60 °X ± 1 °X, aby xx xxxxxxxxx xxxxxxxx konzervačních xxxxxx do ethanolové xxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx proudem xxxxxxx xxxx a xxxxxxx se xxxxx xx jednu xxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxx 2 xx filtrátu xx xxxxxxxx do 5 xx xxxxxxxxxx lahvičky (xxxxxxxx xxxxxx). Xxxxxxx xx uloží xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx XXXX xx xxxxxxx xx 24 xxxxx.

6.2 Xxxxxxxxxxxx kapalinová xxxxxxxxxxxxxx (XXXX)

6.2.1 Chromatografické xxxxxxxx

- Mobilní fáze: xxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxx/xxxxxxxx/xxxxxxxxxxx (4.17)

- Xxxxxxxxx rychlost: 1,5 xx xx xxxxxx

- Xxxxxxxx xxxxxx délka: 280 xx

6.2.2 Xxxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx 10 μl xxxxxxx ze standardních xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (4.19). Ze xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x píku xxxxxxxxx standardu. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx sestrojí křivka xxxxxxxxxx xxxxxx poměrů xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

6.2.3 Xxxxxxxxx

Xx chromatografu xx nastříkne 10 μx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (6.1.1) a xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xx 10 μl jednoho xx xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (4.19) x xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx chromatogramy xx xxxxxxxxx.

Xxxx-xx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (6.1.1) přítomen xxx x xxxxxxxxx stejným xxxxxxxxx časem, xxxx xx xxxxxxxx čas xxxx isopropylparabenu (xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx 10 μx xxxxxxx xxxxxx x vnitřním standardem (6.1.2). Chromatogram xx xxxxxxxxx x změří xx xxxxx xxxx.

Xx-xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx pík x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx čas xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxx xxxxxx jiný xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxx-xx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x chromatogramu xxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx použít xxxx vnitřní xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xx poměry xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx k výšce xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xx xxxxx xxxxxx, že xx kalibrační xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx lineární.

Je xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx roztok x xxxxxx xxxxxx splňují xxxxxxxxxxx požadavky:

- separace xxxx nejhůře odděleného xxxx xx alespoň 0,90. (Definice xxxxxxxx xxxx je xxxxxxx xx xxxxxxx 1.),

&xxxx;

Xxxxxxx 1: Xxxxxxxx xxxx

Xxxx-xx xxxxxxxxxx separace xxxxxxxx, xxxx by xxx xxx xxxxxxx účinnější xxxxxx, xxxx by xxxx být xxxxxxx xxxxxxx fáze upraveno xxx, aby byl xxxxxxxxx xxxxxx.

- faktor xxxxxxxxx (As) xxxxx xxxxxxxxx xxxx xx xx xxx xxxxxxxxx xx 0,9 xx 1,5. (Xxxxxxxx faktoru xxxxxxxxx je xxxxxxx xx xxxxxxx 2.) Xxx xxxxxxxxxxx chromatogramu xx xxxxxx stanovení xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx posuvu xxxxxx nejméně 2 xx za xxxxxx,

&xxxx;

Xxxxxxx 2: Xxxxxx asymetrie xxxx

- xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx.

7. Xxxxxxx

Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx v roztoku xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (6.2.2) x xxxxxxx xxxxxx xxxxx píků vyšetřovaných xxxxxxxxxxxxx xxxxxx k xxxxx píku xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx (xx) 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx 4-hydroxybenzoátu, butyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (% m/m) xx vypočte xxxxxx xxxxxx:

%x_x(x/x) = x_x / (200 × x)

xxx

xx = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx i xx zkušebním xxxxxxx (μx/xx) odečtená z xxxxxxxxxx xxxxxx x

x = hmotnost xxxxxxxxxx xxxxxx (g).

8. Xxxxxxxxxxxxxx [1]

Xxx poznámka x xxxx 10.5.

9. Xxxxxxxxxxxxxxxxxx [2]

Xxx poznámka v xxxx 10.5.

10. Xxxxxxxx

10.1 Xxxxxxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx HPLC xxxxxxx xxxxxx xx xxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxx xxx xxxxxx použít xxx oddělení vyšetřovaných xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, lze xxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxxx pro standardní xxxxxxx (viz poznámky x bodu 6.2.3). Xxxxx navrhovaného xxxxxxxxx xxxxxx kolony xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx Xxxxxxxx ODS x Xxxxxx XXX.

Xx xxxxxx dosažení požadovaného xxxxxxxx lze popřípadě xxxxxxxxxxxxx složení mobilní xxxx.

10.2 Xxxxxxxx vlnová xxxxx

Xxxxxxx robustnosti popisované xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx může xxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxx musí být xxxxx xxxxx analýzy xxxxxxx xxxxxxxxxxx.

10.3 Rušivé xxxxx

Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx množství xxxxxxxxxxxxx xxxxxx uvedených x xxxxxxx XX xxxxxxxx Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx prostředků jsou xxxxxxx x práci X. de Xxxxxx, X. X. H. Xxxx, X. A. Xxxxxxx-Xxxxxxxxx, X. Schouten, (1989): Determination of xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx II. Xxxx-xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (X. Xxxxxxxxxxxxxx, 469, 317-398).

10.4 Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx kolony xxx xxxxxx vhodnou xxxxxxxxxx.

10.5 Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx, xx xxxx se xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx. V xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx pro xxxxx xx tří xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x % x/x (m), opakovatelnosti (x) x reprodukovatelnosti (X) xxxxxxxx xxx xxxxxxx, xxxxx byly xx xxxxxxxx obsaženy:

[1] ISO 5725.

[2] XXX 5725.