Plné znění - 31996L0045

Xxxxx Směrnice Komise 96/45/XX

xx xxx 2. xxxxxxxx 1996

o xxxxxxxx xxxxxxx nezbytných xxx xxxxxxxx xxxxxxx kosmetických xxxxxxxxxx

(Xxxx x významem xxx EHP)

KOMISE XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,

x xxxxxxx xx Xxxxxxx x založení Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,

x xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxx 76/768/XXX xx dne 27. xxxxxxxx 1976 x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx Komise 95/34/XX [2], a xxxxxxx xx xx. 8 xxxx. 1 xxxxxxx směrnice,

vzhledem k xxxx, xx xx xx xxxxxxxx 76/768/XXX xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;

xxxxxxxx x xxxx, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx být stanoveny xx xxxxxxxx; xx xxxxxxx xxxxxx již xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxx 80/1335/XXX [3] xx xxxxx xxxxxxxx 87/143/EHS [4], xxxxxxxx Xxxxxx 82/434/XXX [5] xx xxxxx xxxxxxxx 90/207/XXX [6] x xx směrnicích Xxxxxx 83/514/EHS [7], 85/490/XXX [8], 93/73/EHS [9] x 95/32/ES [10];

xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxx x xxxxxxxxx 2-fenoxyethanolu, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, xxxxxx, ethyl, xxxxxx, xxxxx x benzyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx x kosmetických xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx;

xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx jsou x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxx xxx přizpůsobení xxxxxxxx 76/768/XXX xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:

Článek 1

Xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx k zajištění xxxx, xxx xx xxx xxxxxxx zkoušení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx 2-fenoxyethanolu, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, xxxxxx, ethyl, xxxxxx, xxxxx x xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxxx 2

1. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 30. xxxx 1997. Xxxxxxxxxx x nich xxxxxxx Xxxxxx.

2. Xxxx opatření xxxxxxx členskými státy xxxx obsahovat odkaz xx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxx takový xxxxx xxx učiněn xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx členské xxxxx.

3. Xxxxxxx xxxxx xxxxx Komisi xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx předpisů, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx této xxxxxxxx.

Xxxxxx 3

Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx po xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxx Evropských xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxx 4

Tato xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

X Xxxxxxx xxx 2. xxxxxxxx 1996.

Za Xxxxxx

Xxxx Xxxxxx

xxxxxx Komise

[1] Xx. xxxx. X 262, 27.9.1976, x. 169.

[2] Xx. xxxx. X 167, 18.7.1995, x. 19.

[3] Úř. xxxx. X 383, 31.12.1980, x. 27.

[4] Úř. věst. X 57, 27.2.1987, x. 56.

[5] Úř. xxxx. X 185, 30.6.1982, x. 1.

[6] Xx. xxxx. X 108, 28.4.1990, x. 92.

[7] Xx. xxxx. X 291, 24.10.1983, x. 9.

[8] Xx. věst. X 295, 7.11.1985, x. 30.

[9] Xx. xxxx. X 231, 14.9.1993, x. 34.

[10] Xx. xxxx. X 178, 28.7.1995, x. 20.

PŘÍLOHA

DŮKAZ A XXXXXXXXX 2-XXXXXXXXXXXXXX, 1-XXXXXXXXXXXX-2-XXX, XXXXXX, XXXXX, XXXXXX, XXXXX X XXXXXX 4-XXXXXXXXXXXXXXX X KOSMETICKÝCH PROSTŘEDCÍCH

A. XXXXX

1. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx

X této xxxxxx xx specifikován xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx vrstvě, xxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx X xxxxxx xxxxx 2-fenoxyethanolu, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, methyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, propyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

2. Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx vzorků xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Po xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x xxxxx a xxxxxx xxxxxxxx se x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxx/xxxx xx extrahována xxxxxxxxxxxxxx, xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Po xxxxxxxxx xx konzervační xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx část diethyletherového xxxxxxxx xx nanese xx xxxxx pokrytou xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pozoruje x XX světle x xxxxxxxxxx xx xx použití Millonova xxxxxxx.

3. Reakční xxxxxxx

3.1 Xxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx reakční xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x.x. Xxxx xxx xxxxxxx destilovaná xxxx nebo xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.

3.2 Xxxxxx

3.3 Xxxxxxxxxxxx

3.4 n-Pentan

3.5 Xxxxxxxx

3.6 Ledová kyselina xxxxxx

3.7 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, c(HCl) = 4 mol/l

3.8 Xxxxxx xxxxxxxxx draselného, x(XXX) = 4 xxx/x

3.9 Xxxxxxx xxxxxxxx dihydrát (XxXx₂ . 2X₂X)

3.10 Xxxxxxxx činidlo: Xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxx (dusičnan xxxxxxxx) je xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (Fluka 69820).

3.11 2-Xxxxxxxxxxxxx

3.12 1-Xxxxxxxxxxxx-2-xx

3.13 Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx)

3.14 Xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx)

3.15 x-Xxxxxx 4-hydroxybenzoát (propylparaben)

3.16 x-Xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx)

3.17 Xxxxxx 4-hydroxybenzoát (xxxxxxxxxxxxx)

3.18 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxx xx 0,1 % (x/X) xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx 3.11, 3.12, 3.13, 3.14, 3.15, 3.16 x 3.17 x xxxxxxxxx.

3.19 Xxxxxxxx rozpouštědlo

Smíchá se 88 xxxx xxxxxxxx (3.4) x 12 xxxx xxxxxx kyseliny xxxxxx (3.6).

4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx

Xxxxx laboratorní xxxxxxxx x dále:

4.1 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx 60 °X

4.2 Xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx)

4.3 Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, 254 nm

4.4 Xxxxxx xxxxx 20 xx × 20 xx, xxxxxx potažené 0,25 xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 60X254 (254 xx xxxxxx xxxxxxx 60X) x koncentrační xxxxx (Merck Xx 11798, Xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx)

4.5 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx teplotu xx xx 105 °X

4.6 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx

4.7 Xxxxxx malířský xxxxxxx x délce xxxxxxxxx 10 cm, xxxxxx xxxxxx přibližně 3,5 xx. Xxxxxx xxxxxx xx měla xxx 2 xx 3 xx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx.

Xxx poznámka v xxxx 5.2.

4.8 Xxxxxxxx xxxxxxxx na 50 xx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

4.9 Elektrická topná xxxxx s termostatem. Xxxxxxxxx teploty: asi 80 °X. Xxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx o xxxxxxxxx 20 xx × 20 cm x xxxxxxxx asi 6 xx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

5. Xxxxxx

5.1 Xxxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx 50 xx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.8) xx xxxxxx přibližně 1 x xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx kapky xxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (3.7) a 40 xx xxxxxxx.

X xxxxxxx xxxxx zásaditých xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx je xxxxxxxx xxxxx, se xxxxx 20 xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx uzavře, xxxx se zlehka xxxxxxx xx asi 60 °C, xxx xx usnadnila extrakce xxxxxxxxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxx xxxx, x 1 xxxxxx se xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxxxx papírkem xx změří xX xxxxxxx x xxxxxx xx xx xxxxxxx ≤ 3 roztokem xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Znovu xx 1 xxxxxx xxxxx třepe.

Roztok se xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxx do Xxxxxxxxxxxxx xxxxx. 20 xx xxxxxxxx se xxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx baňky xx 200 xx, xxxxx xx 60 xx xxxx a xxxxxxxx. Xxxxxxx xX xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.8) xxxxxxxxx xx 10 xx použití indikátorového xxxxxxx.

Xxxxx xx 1 x xxxxxxxx vápenatého xxxxxxxxx (3.9) a xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxx xx zfiltruje xxxx filtrační papír xx dělicí xxxxxxx xx 250 xx, xxxxx obsahuje 75 xx xxxxxxxxxxxxx, x xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxx xx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx baňky xx 200 xx. Xxxxxxx xX xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 2 za xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxx xx xxxxx 10 xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xx jednu xxxxxx protřepává. Fáze xx xxxxxxx xxxxxxx x asi 2 xx fáze diethyletheru xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 5 xx.

5.2 Chromatografie xx tenké vrstvě (XXX)

XXX xxxxx xx xxxxxx xx zahřátou xxxxxxxxxx xxxxx (4.9). Xx startovní linii xxxxxxxxxxxx xxxx XXX xxxxx se xxxxxx 10 μx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx roztoků x 100 μx xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx) (5.1).

Xxxxx potřeby xxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx vzduchu. TLC xxxxx xx odstraní x xxxxx xxxxx x xxxxx xx xxxxxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx komora (4.2) se xxxxxx 100 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.19).

XXX xxxxx xx xxxxx xxxxx xx nenasycené xxxxxx x vyvíjí se xxx xxxxxxxx teplotě, xxxxx čelo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx 15 xx xx základní xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx x proudu horkého xxxxxxx pomocí xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vlasů.

Deska xx xxxxxxxxx x UV xxxxxx (4.3) x xxxxxx xxxxx se xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx 30 xxxxx x sušárně (4.5) xxx 100 °X, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xx zviditelní Xxxxxxxxxx činidlem (3.10) xxx, xx xx XXX xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (4.7) xxxxxxxxx xx xxxxxxx.

Xxxxxxxx:

Xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx kapky Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx XX světlem.

Estery xxxxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, 2-xxxxxxxxxxxxx x 1-xxxxxxxxxxxx-2-xx xxxx xxxxx xxxxxx. Je však xxxxx xxxxx xxxxx xx xx, xx xxxxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx látka nebo xxxxxxx rozkladu xxxxxxxx, xx xxxx x xxxx xxxxxxx jako xxxxxxx xxxxxx. Viz 7.3 a 7.4.

6. Xxxxx

Xxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx hodnota Xx. Skvrny xxxxxxx x roztoku xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, pokud xxx o jejich xxxxxxx Xx, xxxxxx xxxxxxx x XX xxxxxx a xxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Učiní xx xxxxxxxxx závěry x identitě xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx xx zdá, xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxx vysokoúčinnou kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) popsanou x oddíle B. Xxxxxxxx chromatografie na xxxxx xxxxxx (TLC) x vysokoúčinné xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (HPLC) xx xxxxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx a parabenů.

7. Xxxxxxxx

7.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx aplikovat xxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx způsobů. Xxxxxxx xx nedoporučuje.

7.2 Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx skupiny xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx x Millonovým činidlem xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx Xx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx je xxxxxxx v xxxxx X. xx Kruijf, X. X. H. Xxxx, X. A. Xxxxxxx-Xxxxxxxxx x X. Xxxxxxxx (1987): Xxxxxxxxxxxxx xx preservatives in xxxxxxxx xxxxxxxx X: Xxxx-xxxxx chromatographic procedure xxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (X. Xxxxxxxxxxxxxx 410, 395-411).

7.3 Xxxxxxx Xx uvedené x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx lze xxxxxx:

7.4 X xxxxxxx kyseliny 4-hydroxybenzoové x xxxxxxxxxxxxxx xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx sloučenin by xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx HPLC xxxxxxxx x xxxxxx X x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx standardů.

B. XXXXXXXXX

1. Rozsah x xxxxxx xxxxxxx

X xxxx xxxxxx xx specifikován xxxxxx xxx xxxxxxxxx 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-fenoxypropan-2-olu, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, butyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

2. Xxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx procentech.

3. Xxxxxxxx metody

Vzorek xx xxxxxxx xxxxxxxx kyseliny xxxxxx x poté xx xxxxxxxxxx xx xxxxx ethanolu x xxxx. Xxxx se xxxxxxx zahřeje xx xxxxxxxxxx xxxxxx fáze, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) x obrácenou xxxx xx použití xxxxxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

4. Xxxxxxx činidla

4.1 Xxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx činidla xxxx xxx čistoty x.x. x podle xxxxxxx musí xxx xxxxxx xxx XXXX. Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.

4.2 Xxxxxxx, xxxxxxxxx

4.3 2-Xxxxxxxxxxxxx

4.4 1-Xxxxxxxxxxxx-2-xx

4.5 Methyl 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx)

4.6 Xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx)

4.7 x-Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx)

4.8 Isopropyl 4-xxxxxxxxxxxxxx (isopropylparaben)

4.9 n-Butyl 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx)

4.10 Benzyl 4-xxxxxxxxxxxxxx (benzylparaben)

4.11 Xxxxxxxxxxxxxxx

4.12 Xxxxxxxx

4.13 Acetonitril

4.14 Roztok xxxxxxxx xxxxxx x(X₂XX₄) = 2 xxx/x

4.15 Xxxx ethanol/voda

Smíchá se xxxxx xxxx ethanolu (4.2) x xxxxx xxx vody.

4.16 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxxx xx xxxxxx přibližně 0,25 x xxxxxxxxxxxxxxxxx (4.8), xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx xx 500 xx, xxxxxxxx xx x xxxxxx xx směsí xxxxxxx/xxxx (4.15) xx xxxxx.

4.17 Xxxxxxx fáze: xxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxx/xxxxxxxx/xxxxxxxxxxx

Xxxxxx se 5 xxxx tetrahydrofuranu, 60 xxxx xxxx, 10 xxxx xxxxxxxxx a 25 dílů xxxxxxxxxxxx.

4.18 Xxxxxxx roztok konzervačních xxxxxx

Xx xxxxxxx xxxxx xx 100 xx xx přesně xxxxxx xxxxxxxxx 0,2 x 2-xxxxxxxxxxxxxx, 0,2 x 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, 0,05 g xxxxxxxxxxxxxx, 0,05 x xxxxxxxxxxxxx, 0,05 g xxxxxxxxxxxxxx, 0,05 g xxxxxxxxxxxxx a 0,025 x xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx x xxxxxx xxxxx ethanol/voda xx xxxxx.

Xxxxxx se xxxxxxxx x xxxxxxxx a xx xxxxxxxx 1 xxxxx.

4.19 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx

Xx odměrných xxxxx na 50 xx se xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.18) xxxxxxx 20,00 ml, 10,00 xx, 5,00 xx, 2,00 ml x 1,00 xx. Xx xxxxx xxxxx xx xxxxx 10,00 xx roztoku xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.16) x 1,0 xx roztoku xxxxxxxx sírové (4.14) x xxxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxx xx objem. Xxxx roztoky xx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx

Xxxxx laboratorní xxxxxxxx, x xxxx:

5.1 Xxxxx lázeň xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx 60 °X ± 1 °X.

5.2 XXXX xxxxxxxxxxxx x XX xxxxxxxxxx, xxxxxx délka 280 xx

5.3 Xxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx 25 xx, vnitřní xxxxxx 4,6 xx (xxxx xxxxx 12,5 xx x vnitřní xxxxxx 4,6 mm), xxxxxxxx Xxxxxxxxxxx 5X18, nebo xxxxxxxxxxxxx sorbentem (viz 10.1).

5.4 Xxxxxxxx xxxxxxxx xx 100 ml xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx

5.5 Xxxxx kamínky, karborundum, xxxxxxxx 2 xx 4 mm xxxx xxxxxxxxxxxx

6. Xxxxxx

6.1 Xxxxxxxx xxxxxx

6.1.1 Příprava xxxxxx xxx přidání vnitřního xxxxxxxxx

Xx xxxxxxxx na 100 xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxx xxx 1,0 x vzorku. Do xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx 1,0 ml xxxxxxx kyseliny xxxxxx (4.14) x 50,0 xx směsi xxxxxxx/xxxx (4.15). Přidá se xxxxxxxxx 1 x xxxxxxx xxxxxxx (5.5), xxxxxxxx se xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx suspenze. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xx 5 xxxxx do vodní xxxxx (5.1) o xxxxxxx 60 °X ± 1 °X, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx konzervačních xxxxxx xx xxxxxxxxxx fáze.

Zkumavka xx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx x extrakt xx uloží xx xxxxx xxxxxx do xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx 2 xx xxxxxxxx se xxxxxxxx xx 5 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx XXXX xx provede xx 24 hodin.

6.1.2 Příprava xxxxxx včetně přidání xxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xx xxxxxxxx xxxxxxxx na 100 xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx s xxxxxxxxx na xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx 1,0 x ± 0,1 x vzorku.

Do xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx 1,0 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x 40,0 ml xxxxx xxxxxxx/xxxx. Přidá xx přibližně 1 x varných xxxxxxx (5.5) x xxxxxx 10,00 xx roztoku xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Zkumavka xx xxxxxx x xxxxx se xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx homogenní xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx minutu. Xxxxxxxx xx xxxxx xx 5 xxxxx xx xxxxx lázně x xxxxxxx 60 °X ± 1 °X, xxx se xxxxxxxxx extrakce konzervačních xxxxxx do xxxxxxxxxx xxxx.

Xxxxxxxx se xxxxx xxxxxxx pod proudem xxxxxxx xxxx a xxxxxxx se xxxxx xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxx 2 xx xxxxxxxx se xxxxxxxx do 5 xx vzorkovací lahvičky (xxxxxxxx xxxxxx). Xxxxxxx xx xxxxx do xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx XXXX xx xxxxxxx xx 24 xxxxx.

6.2 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX)

6.2.1 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

- Xxxxxxx fáze: xxxx tetrahydrofuran/voda/methanol/acetonitril (4.17)

- Xxxxxxxxx rychlost: 1,5 xx za minutu

- Xxxxxxxx vlnová xxxxx: 280 xx

6.2.2 Xxxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx 10 μx xxxxxxx xx standardních xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (4.19). Ze xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx se stanoví xxxxx výšek píků xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx přísadu xx xxxxxxxx křivka xxxxxxxxxx těchto xxxxxx xx koncentraci standardních xxxxxxx.

6.2.3 Xxxxxxxxx

Xx chromatografu xx xxxxxxxxx 10 μx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (6.1.1) x xxxxxxxxx xx chromatogram.

Nastříkne se 10 μx jednoho xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (4.19) x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Získané xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.

Xxxx-xx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (6.1.1) xxxxxxxx pík x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx časem, jako xx xxxxxxxx xxx xxxx isopropylparabenu (xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx 10 μx roztoku xxxxxx x vnitřním xxxxxxxxxx (6.1.2). Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxx xx xxxxx xxxx.

Xx-xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxx xxxxxx jiný xxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxx-xx xxxxx z xxxxxxxxxxxxx konzervačních xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, lze tuto xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx vnitřní xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xx poměry xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx k xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xx xxxxx ověřit, že xx kalibrační xxxxxx xxxxxxxxx standardu lineární.

Je xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx roztok x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx 0,90. (Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx je xxxxxxx xx xxxxxxx 1.),

Obrázek 1: Xxxxxxxx xxxx

Xxxx-xx xxxxxxxxxx separace xxxxxxxx, xxxx xx xxx xxx použita účinnější xxxxxx, nebo xx xxxx být xxxxxxx xxxxxxx xxxx upraveno xxx, aby xxx xxxxxxxxx splněn.

- xxxxxx xxxxxxxxx (Xx) xxxxx xxxxxxxxx xxxx by xx měl xxxxxxxxx xx 0,9 xx 1,5. (Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx 2.) Xxx zaznamenání xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx 2 xx za xxxxxx,

&xxxx;

Xxxxxxx 2: Xxxxxx xxxxxxxxx xxxx

- základna musí xxx stabilní.

7. Xxxxxxx

Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx konzervačních xxxxxx v xxxxxxx xxxxxx se použije xxxxxxxxxx křivka (6.2.2) x hodnoty xxxxxx xxxxx píků vyšetřovaných xxxxxxxxxxxxx přísad x xxxxx xxxx vnitřního xxxxxxxxx. Xxxxx (xx) 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (% m/m) xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx:

%x_x(x/x) = x_x / (200 × x)

xxx

xx = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx i xx zkušebním xxxxxxx (μx/xx) xxxxxxxx x xxxxxxxxxx křivky x

x = hmotnost zkušebního xxxxxx (x).

8. Xxxxxxxxxxxxxx [1]

Xxx xxxxxxxx x xxxx 10.5.

9. Reprodukovatelnost [2]

Xxx xxxxxxxx v xxxx 10.5.

10. Xxxxxxxx

10.1 Xxxxxxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx HPLC xxxxxxx xxxxxx na xxxx, xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Zda xxx xxxxxx použít xxx oddělení xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, lze xxxxxxx x výsledků xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (viz poznámky x bodu 6.2.3). Xxxxx navrhovaného xxxxxxxxx xxxxxx kolony xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx také xxxxxxxxx Xxxxxxxx XXX x Xxxxxx XXX.

Xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx složení mobilní xxxx.

10.2 Detekční vlnová xxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx významný xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxx analýzy xxxxxxx kontrolován.

10.3 Xxxxxx xxxxx

Xx podmínek xxxxxxxxx x xxxx xxxxxx xx eluováno mnoho xxxxxxx xxxxxxxxx, jako xxxx xxxxx konzervační xxxxxxx x kosmetické xxxxxxx. Retenční xxxx xxxxxxx množství xxxxxxxxxxxxx xxxxxx uvedených x xxxxxxx XX xxxxxxxx Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx jsou xxxxxxx x xxxxx X. xx Kruijf, X. X. X. Xxxx, X. X. Xxxxxxx-Xxxxxxxxx, X. Xxxxxxxx, (1989): Determination of xxxxxxxxxxxxx in xxxxxxxx xxxxxxxx XX. Xxxx-xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (X. Chromatography, 469, 317-398).

10.4 Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx lze xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

10.5 Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx, xx němž xx xxxxxxxx devět laboratoří. Xxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx. X xxxxxxxxxxx xxxxxxx jsou xxx xxxxx xx tří xxxxxx uvedeny xxxxxxx xxxxxxx x % x/x (x), xxxxxxxxxxxxxxx (x) x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) xxxxxxxx xxx xxxxxxx, které byly xx xxxxxxxx xxxxxxxx:

[1] XXX 5725.

[2] XXX 5725.