Plné znění - 31996L0045

Xxxxx Xxxxxxxx Xxxxxx 96/45/XX

xx xxx 2. xxxxxxxx 1996

x xxxxxxxx xxxxxxx nezbytných xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx

(Xxxx x xxxxxxxx xxx XXX)

XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,

x xxxxxxx na Xxxxxxx o založení Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,

x xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxx 76/768/XXX ze xxx 27. xxxxxxxx 1976 x sbližování právních xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 95/34/XX [2], x xxxxxxx xx xx. 8 xxxx. 1 xxxxxxx směrnice,

vzhledem x xxxx, xx xx xx xxxxxxxx 76/768/XXX xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx prostředků s xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx předpisy Xxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx kosmetických xxxxxxxxxx;

xxxxxxxx x xxxx, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx metody xxxxxxx xxxx xxx stanoveny xx xxxxxxxx; xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxx ve xxxxxxxx Xxxxxx 80/1335/XXX [3] xx znění xxxxxxxx 87/143/EHS [4], xxxxxxxx Xxxxxx 82/434/XXX [5] ve xxxxx xxxxxxxx 90/207/XXX [6] x xx xxxxxxxxxx Xxxxxx 83/514/EHS [7], 85/490/XXX [8], 93/73/EHS [9] a 95/32/XX [10];

xxxxxxxx k xxxx, xx xxxxx x xxxxxxxxx 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, xxxxxx, xxxxx, propyl, xxxxx x benzyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx;

xxxxxxxx x xxxx, xx opatření xxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx stanoviskem Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx 76/768/XXX technickému xxxxxxx,

XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:

Xxxxxx 1

Xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxx, aby xx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x stanovení 2-fenoxyethanolu, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, xxxxxx, xxxxx, xxxxxx, butyl x xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx prováděly xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx.

Xxxxxx 2

1. Xxxxxxx xxxxx uvedou v xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx předpisy xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx x touto xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 30. xxxx 1997. Neprodleně x nich uvědomí Xxxxxx.

2. Tato xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx obsahovat xxxxx xx xxxx směrnici xxxx musí xxxxxx xxxxx xxx učiněn xxx jejich úředním xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

3. Xxxxxxx xxxxx xxxxx Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx této xxxxxxxx.

Xxxxxx 3

Xxxx směrnice xxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxx 4

Tato xxxxxxxx xx xxxxxx členským xxxxxx.

X Xxxxxxx xxx 2. xxxxxxxx 1996.

Xx Xxxxxx

Xxxx Xxxxxx

xxxxxx Komise

[1] Úř. xxxx. X 262, 27.9.1976, x. 169.

[2] Úř. xxxx. X 167, 18.7.1995, x. 19.

[3] Xx. xxxx. X 383, 31.12.1980, x. 27.

[4] Úř. věst. X 57, 27.2.1987, x. 56.

[5] Úř. věst. X 185, 30.6.1982, x. 1.

[6] Xx. věst. X 108, 28.4.1990, x. 92.

[7] Úř. xxxx. X 291, 24.10.1983, x. 9.

[8] Úř. xxxx. X 295, 7.11.1985, x. 30.

[9] Xx. xxxx. X 231, 14.9.1993, x. 34.

[10] Úř. věst. X 178, 28.7.1995, x. 20.

XXXXXXX

XXXXX X STANOVENÍ 2-XXXXXXXXXXXXXX, 1-XXXXXXXXXXXX-2-XXX, METHYL, XXXXX, PROPYL, BUTYL X XXXXXX 4-XXXXXXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX PROSTŘEDCÍCH

A. XXXXX

1. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx

X xxxx xxxxxx je xxxxxxxxxxxx xxxxxx chromatografie xx xxxxx xxxxxx, xxxxx x kombinaci x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx B xxxxxx důkaz 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, butyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx 4-hydroxybenzoátu x xxxxxxxxxxxx prostředcích.

2. Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx acetonem. Xx xxxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx s xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx se v xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx soli. Xxxxxxxxx směs xxxxxx/xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxxx xx konzervační xxxxxxx extrahují xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx diethyletherového xxxxxxxx se nanese xx xxxxx pokrytou xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xx xxxxxxx chromatogram pozoruje x XX světle x zviditelní xx xx xxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxx.

3. Reakční xxxxxxx

3.1 Xxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx reakční xxxxxxx xxxx být xxxxxxx p.a. Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx voda xxxxxxx stejné čistoty.

3.2 Xxxxxx

3.3 Diethylether

3.4 n-Pentan

3.5 Xxxxxxxx

3.6 Ledová kyselina xxxxxx

3.7 Xxxxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, x(XXx) = 4 mol/l

3.8 Roztok xxxxxxxxx draselného, x(XXX) = 4 xxx/x

3.9 Xxxxxxx vápenatý xxxxxxxx (XxXx₂ . 2X₂X)

3.10 Xxxxxxxx činidlo: Millonovo xxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxx (dusičnan xxxxxxxx) je xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (Fluka 69820).

3.11 2-Xxxxxxxxxxxxx

3.12 1-Xxxxxxxxxxxx-2-xx

3.13 Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (methylparaben)

3.14 Xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (ethylparaben)

3.15 x-Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (propylparaben)

3.16 x-Xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (butylparaben)

3.17 Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (benzylparaben)

3.18 Xxxxxxxxxx roztoky

Připraví se 0,1 % (m/V) xxxxxxx každé z xxxxxxxxxxxx xxxxx 3.11, 3.12, 3.13, 3.14, 3.15, 3.16 x 3.17 x xxxxxxxxx.

3.19 Xxxxxxxx rozpouštědlo

Smíchá se 88 dílů npentanu (3.4) s 12 xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.6).

4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a dále:

4.1 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx 60 °X

4.2 Vyvíjecí xxxxxx (xxxxxxxxxx filtračním xxxxxxx)

4.3 Xxxxx ultrafialového xxxxxx, 254 xx

4.4 Hotové xxxxx 20 xx × 20 xx, xxxxxx xxxxxxxx 0,25 xx tenkou xxxxxxx xxxxxxxxxx 60F254 (254 xx xxxxxx xxxxxxx 60X) x koncentrační xxxxx (Xxxxx No 11798, Darmstadt, xxxx xxxxxxxxxxxx)

4.5 Xxxxxxx nastavitelná xx xxxxxxx xx xx 105 °C

4.6 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx

4.7 Xxxxxx xxxxxxxx váleček x délce xxxxxxxxx 10 xx, xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 3,5 xx. Xxxxxx xxxxxx xx měla xxx 2 xx 3 xx xxxxx. Podle xxxxxxx xx vlna xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxx v xxxx 5.2.

4.8 Xxxxxxxx xxxxxxxx xx 50 xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

4.9 Xxxxxxxxxx topná xxxxx x xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx: asi 80 °X. Xxxxx xxxxx se pokryje xxxxxxxxxx deskou o xxxxxxxxx 20 xx × 20 xx x tloušťce xxx 6 xx, xxxx xx xxxxxxx rovnoměrného xxxxxxxxx xxxxx.

5. Postup

5.1 Xxxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx 50 xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.8) xx xxxxxx xxxxxxxxx 1 x xxxxxx. Xxxxxxx xx čtyři kapky xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.7) a 40 xx xxxxxxx.

X xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx 20 xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxxx, xxxx xx zlehka xxxxxxx xx xxx 60 °C, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxx fáze, a 1 xxxxxx xx xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xX xxxxxxx a xxxxxx xx xx hodnotu ≤ 3 xxxxxxxx xxxxxxxx chlorovodíkové. Znovu xx 1 xxxxxx xxxxx xxxxx.

Xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx x zfiltruje xx přes filtrační xxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx. 20 ml xxxxxxxx se xxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx baňky xx 200 ml, xxxxx se 60 xx vody x xxxxxxxx. Xxxxxxx pH xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx draselným (3.8) xxxxxxxxx na 10 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xx 1 x chloridu xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.9) x xxxxx se xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx papír xx xxxxxx nálevky xx 250 xx, xxxxx xxxxxxxx 75 xx xxxxxxxxxxxxx, x xxxxx se xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xx nechají xxxxxxx x xxxxx xxxx xx vypustí do Xxxxxxxxxxxxx baňky xx 200 xx. Xxxxxxx xX xxxxxxx xx xxxxxx roztokem xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx přibližně 2 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx papírku. Poté xx xxxxx 10 xx diethyletheru x xxxxx se xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x asi 2 xx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx převede xx xxxxxxxxxx lahvičky xx 5 ml.

5.2 Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx vrstvě (XXX)

XXX xxxxx se xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx desku (4.9). Xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx zóny XXX xxxxx xx xxxxxx 10 μx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x 100 μl xxxxxxx xxxxxx (vzorků) (5.1).

Xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx odpaření rozpouštědla xxxxxxx xxxxxxx. TLC xxxxx xx xxxxxxxx x topné xxxxx x nechá xx xxxxxxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx komora (4.2) xx xxxxxx 100 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.19).

TLC xxxxx xx xxxxx vloží xx nenasycené xxxxxx x xxxxxx xx xxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxx rozpouštědla xxxxxxxxxx xxx 15 xx od základní xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx a vysuší x xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx horkovzdušného xxxxxxxxx vlasů.

Deska xx xxxxxxxxx x UV xxxxxx (4.3) x xxxxxx xxxxx xx xxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx 30 minut x xxxxxxx (4.5) xxx 100 °X, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.10) xxx, xx se XXX xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (4.7) xxxxxxxxx do xxxxxxx.

Xxxxxxxx:

Xxxxxx xxx rovněž xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx kapky Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx XX xxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx jako xxxxxxx xxxxxx, 2-fenoxyethanol a 1-xxxxxxxxxxxx-2-xx xxxx xxxxx xxxxxx. Xx však xxxxx dávat pozor xx xx, xx xxxxxxxx 4-hydroxybenzoová, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xx sama x xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx skvrna. Xxx 7.3 x 7.4.

6. Xxxxx

Xxx každou xxxxxx xx vypočte hodnota Xx. Xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx porovnají xx xxxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxx o xxxxxx xxxxxxx Xx, jejich xxxxxxx x XX xxxxxx x barvu xx xxxxxxxxxxxx. Učiní xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx konzervačních xxxxxx.

Xxxxx xx zdá, xx jsou xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx (HPLC) xxxxxxxx x xxxxxx B. Xxxxxxxx chromatografie na xxxxx xxxxxx (TLC) x vysokoúčinné xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (HPLC) se xxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 2-fenoxyethanolu, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx a xxxxxxxx.

7. Xxxxxxxx

7.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx Millonova xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx aplikovat xxxx činidlo xxxxxx x xxxxxxxxx způsobů. Xxxxxxx se nedoporučuje.

7.2 Xxxx sloučeniny obsahující xxxxxxxxxxx xxxxxxx mohou xxxxxx xxx reakci x Xxxxxxxxxx činidlem xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx x hodnot Xx xxxxxxxxx xxx xxxx konzervačních xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx vrstvě xx xxxxxxx x xxxxx X. xx Xxxxxx, X. A. X. Xxxx, X. A. Xxxxxxx-Xxxxxxxxx a X. Xxxxxxxx (1987): Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx X: Xxxx-xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxx identification xx xxxxxxxxxxxxx in xxxxxxxx xxxxxxxx (X. Xxxxxxxxxxxxxx 410, 395-411).

7.3 Xxxxxxx Xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx tabulce xxxxxx xxxx ukazatele xxxxxx, xxxxx xxx xxxxxx:

7.4 X xxxxxxx xxxxxxxx 4-hydroxybenzoové x xxxxxxxxxxxxxx xxx x případě xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx nedochází x xxxxxxxx. Důkaz xxxxxx xxxxxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx XXXX popsanou x xxxxxx X x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx vzorku s xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx.

X. XXXXXXXXX

1. Rozsah x xxxxxx xxxxxxx

X této xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx pro stanovení 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-fenoxypropan-2-olu, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, ethyl 4-hydroxybenzoátu, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, butyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx x kosmetických xxxxxxxxxxxx.

2. Definice

Množství xxxxxxxxxxxxx xxxxxx stanovená xxxxx xxxxxxx xx vyjádří x xxxxxxxxxxxx procentech.

3. Xxxxxxxx metody

Vzorek xx xxxxxxx přidáním xxxxxxxx xxxxxx x xxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x xxxx. Xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx tukové xxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx se xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (HPLC) x xxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx isopropyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

4. Xxxxxxx xxxxxxx

4.1 Xxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxx x.x. x xxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxx xxx XXXX. Xxxx xxx použita xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx alespoň xxxxxx xxxxxxx.

4.2 Ethanol, absolutní

4.3 2-Xxxxxxxxxxxxx

4.4 1-Xxxxxxxxxxxx-2-xx

4.5 Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx)

4.6 Ethyl 4-xxxxxxxxxxxxxx (ethylparaben)

4.7 x-Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (propylparaben)

4.8 Xxxxxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxxxx)

4.9 x-Xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx)

4.10 Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (benzylparaben)

4.11 Xxxxxxxxxxxxxxx

4.12 Xxxxxxxx

4.13 Xxxxxxxxxxx

4.14 Xxxxxx xxxxxxxx sírové x(X₂XX₄) = 2 xxx/x

4.15 Xxxx ethanol/voda

Smíchá xx xxxxx dílů ethanolu (4.2) x jeden xxx xxxx.

4.16 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx 0,25 x xxxxxxxxxxxxxxxxx (4.8), xxxxxxx se xx xxxxxxx baňky xx 500 xx, xxxxxxxx xx a xxxxxx xx směsí xxxxxxx/xxxx (4.15) xx xxxxx.

4.17 Xxxxxxx xxxx: xxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxx/xxxxxxxx/xxxxxxxxxxx

Xxxxxx se 5 xxxx tetrahydrofuranu, 60 xxxx xxxx, 10 xxxx methanolu x 25 xxxx xxxxxxxxxxxx.

4.18 Xxxxxxx roztok konzervačních xxxxxx

Xx xxxxxxx xxxxx xx 100 xx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 0,2 x 2-xxxxxxxxxxxxxx, 0,2 x 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, 0,05 x xxxxxxxxxxxxxx, 0,05 g xxxxxxxxxxxxx, 0,05 x xxxxxxxxxxxxxx, 0,05 x xxxxxxxxxxxxx a 0,025 x xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx x doplní xxxxx ethanol/voda xx xxxxx.

Xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx x xx xxxxxxxx 1 xxxxx.

4.19 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx

Xx odměrných xxxxx xx 50 xx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.18) xxxxxxx 20,00 xx, 10,00 xx, 5,00 xx, 2,00 ml x 1,00 ml. Xx každé baňky xx přidá 10,00 xx xxxxxxx vnitřního xxxxxxxxx (4.16) x 1,0 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.14) x xxxxxx směsí xxxxxxx/xxxx na xxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx

Xxxxx laboratorní xxxxxxxx, a dále:

5.1 Xxxxx lázeň xxxxxxxxxxxx xx teplotu 60 °X ± 1 °X.

5.2 XXXX chromatograf x UV xxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx 280 xx

5.3 Xxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx 25 xx, xxxxxxx xxxxxx 4,6 xx (xxxx xxxxx 12,5 cm x vnitřní xxxxxx 4,6 xx), xxxxxxxx Xxxxxxxxxxx 5X18, xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (viz 10.1).

5.4 Skleněné xxxxxxxx xx 100 xx xx xxxxxxxxxxx uzávěrem

5.5 Xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx 2 až 4 xx xxxx xxxxxxxxxxxx

6. Xxxxxx

6.1 Xxxxxxxx xxxxxx

6.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xx zkumavky na 100 xx xx xxxxxxxxxxx uzávěrem xx xxxxxx asi 1,0 x xxxxxx. Xx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx 1,0 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.14) x 50,0 xx xxxxx xxxxxxx/xxxx (4.15). Xxxxx xx xxxxxxxxx 1 x xxxxxxx xxxxxxx (5.5), xxxxxxxx xx xxxxxx x silně xx xxxxxxxx, dokud xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Protřepává xx alespoň jednu xxxxxx. Zkumavka xx xxxxx xx 5 xxxxx xx xxxxx xxxxx (5.1) x xxxxxxx 60 °X ± 1 °X, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx konzervačních přísad xx ethanolové xxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx a extrakt xx xxxxx na xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxxxx přes filtrační xxxxx. Xxx 2 xx xxxxxxxx se xxxxxxxx xx 5 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx se xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx XXXX xx xxxxxxx xx 24 hodin.

6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx standardu

Do skleněné xxxxxxxx xx 100 xx xx šroubovacím xxxxxxxx se s xxxxxxxxx na xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx 1,0 x ± 0,1 g vzorku.

Do xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 1,0 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x 40,0 xx xxxxx ethanol/voda. Xxxxx xx přibližně 1 x xxxxxxx xxxxxxx (5.5) a xxxxxx 10,00 ml roztoku xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx uzavře a xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx nevznikne xxxxxxxxx xxxxxxxx. Protřepává xx xxxxxxx jednu xxxxxx. Xxxxxxxx xx vloží xx 5 minut xx vodní xxxxx x xxxxxxx 60 °X ± 1 °X, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx konzervačních xxxxxx xx ethanolové xxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xxxxx xx jednu xxxxxx xx ledničky. Extrakt xx zfiltruje přes xxxxxxxxx xxxxx.

Xxx 2 xx filtrátu se xxxxxxxx xx 5 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxx). Xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxx HPLC xx xxxxxxx do 24 xxxxx.

6.2 Vysokoúčinná xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX)

6.2.1 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

- Xxxxxxx xxxx: xxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxx/xxxxxxxx/xxxxxxxxxxx (4.17)

- Xxxxxxxxx rychlost: 1,5 xx xx minutu

- Xxxxxxxx vlnová xxxxx: 280 nm

6.2.2 Xxxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx 10 μx xxxxxxx xx standardních xxxxxxx konzervačních přísad (4.19). Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx píků xxxxxxxxxxxx xxxxxxx konzervačních xxxxxx x píku xxxxxxxxx standardu. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx těchto xxxxxx xx koncentraci xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

6.2.3 Stanovení

Do chromatografu xx xxxxxxxxx 10 μx xxxxxxx vzorku xxx vnitřního xxxxxxxxx (6.1.1) a xxxxxxxxx xx chromatogram.

Nastříkne xx 10 μx jednoho xx xxxxxxxxxxxx roztoků xxxxxxxxxxxxx přísad (4.19) x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx chromatogramy xx xxxxxxxxx.

Xxxx-xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (6.1.1) xxxxxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx časem, xxxx xx xxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx), pokračuje xx xxxxxxxxxxxx 10 μx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx standardem (6.1.2). Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx x změří xx výšky xxxx.

Xx-xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxx x xxxxxxxxx časem xxxxxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxx xx být xxxxxx xxxx vnitřní xxxxxxxx.

Xxxx-xx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx konzervačních xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx vzorku xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx vnitřní xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx konzervačních xxxxxx k výšce xxxx vnitřního xxxxxxxxx.

Xx xxxxx xxxxxx, že xx kalibrační křivka xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xx xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxxx získané pro xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx vzorku xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxx xxxx nejhůře xxxxxxxxxx xxxx xx alespoň 0,90. (Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx uvedena xx xxxxxxx 1.),

&xxxx;

Xxxxxxx 1: Separace xxxx

Xxxx-xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx dosaženo, xxxx by xxx xxx použita xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx, aby byl xxxxxxxxx xxxxxx.

- xxxxxx xxxxxxxxx (Xx) všech xxxxxxxxx xxxx by xx xxx pohybovat xx 0,9 do 1,5. (Xxxxxxxx faktoru xxxxxxxxx je uvedena xx obrázku 2.) Xxx zaznamenání xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx 2 xx xx minutu,

Obrázek 2: Faktor xxxxxxxxx xxxx

- základna musí xxx stabilní.

7. Výpočet

Pro xxxxxxx koncentrace xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (6.2.2) x xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx vyšetřovaných xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx vnitřního xxxxxxxxx. Xxxxx (xx) 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx 4-hydroxybenzoátu, xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx x hmotnostních xxxxxxxxxx (% x/x) xx xxxxxxx pomocí xxxxxx:

%x_x(x/x) = b_i / (200 × x)

xxx

xx = koncentrace xxxxxxxxxxx přísady x xx xxxxxxxxx xxxxxxx (μx/xx) xxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx a

a = xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (x).

8. Xxxxxxxxxxxxxx [1]

Xxx poznámka x xxxx 10.5.

9. Xxxxxxxxxxxxxxxxxx [2]

Xxx poznámka x xxxx 10.5.

10. Xxxxxxxx

10.1 Xxxxxxxxxxx fáze

Retenční xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx HPLC xxxxxxx xxxxxx xx typu, xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx. Xxx xxx kolonu xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad, xxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx (viz xxxxxxxx x bodu 6.2.3). Xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx byly xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx Xxxxxxxx XXX x Xxxxxx ODS.

Za xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx.

10.2 Detekční xxxxxx xxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx délky xxxx xxx xxxxxxxx xxxx xx výsledky xxxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx během xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.

10.3 Xxxxxx xxxxx

Xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxx metodě xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, jako xxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx časy xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx XX xxxxxxxx Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx prostředků jsou xxxxxxx v práci X. de Xxxxxx, X. X. H. Xxxx, X. A. Xxxxxxx-Xxxxxxxxx, A. Xxxxxxxx, (1989): Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xx cosmetic xxxxxxxx XX. Xxxx-xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (X. Xxxxxxxxxxxxxx, 469, 317-398).

10.4 Xxx ochranu xxxxxxxxxx kolony lze xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

10.5 Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxx, xx xxxx xx xxxxxxxx xxxxx laboratoří. Xxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx. V následující xxxxxxx jsou xxx xxxxx ze xxx xxxxxx uvedeny xxxxxxx xxxxxxx v % x/x (m), opakovatelnosti (x) x reprodukovatelnosti (X) xxxxxxxx xxx xxxxxxx, xxxxx byly xx xxxxxxxx obsaženy:

[1] XXX 5725.

[2] XXX 5725.