Plné znění - 31996L0045

Xxxxx Xxxxxxxx Xxxxxx 96/45/XX

xx xxx 2. xxxxxxxx 1996

o metodách xxxxxxx nezbytných pro xxxxxxxx složení kosmetických xxxxxxxxxx

(Xxxx x xxxxxxxx xxx XXX)

XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,

x ohledem xx Xxxxxxx x založení Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,

x ohledem xx xxxxxxxx Rady 76/768/XXX xx xxx 27. července 1976 x xxxxxxxxxx právních xxxxxxxx xxxxxxxxx států xxxxxxxxxx xx kosmetických xxxxxxxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx směrnicí Xxxxxx 95/34/XX [2], x xxxxxxx xx čl. 8 odst. 1 xxxxxxx xxxxxxxx,

xxxxxxxx x xxxx, xx xx xx xxxxxxxx 76/768/XXX xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx s xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx složení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;

xxxxxxxx x xxxx, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx analýzy xxxx být xxxxxxxxx xx nejdříve; xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxx 80/1335/XXX [3] xx xxxxx xxxxxxxx 87/143/EHS [4], xxxxxxxx Xxxxxx 82/434/XXX [5] xx xxxxx xxxxxxxx 90/207/XXX [6] x ve xxxxxxxxxx Xxxxxx 83/514/XXX [7], 85/490/XXX [8], 93/73/XXX [9] x 95/32/ES [10];

xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxx x xxxxxxxxx 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, xxxxxx, xxxxx, xxxxxx, xxxxx x benzyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx;

xxxxxxxx x tomu, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx jsou v xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxx xxx přizpůsobení xxxxxxxx 76/768/EHS xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:

Článek 1

Xxxxxxx státy xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx k xxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxx xxxxxxx zkoušení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, xxxxxx, xxxxx, xxxxxx, butyl x xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxx.

Xxxxxx 2

1. Členské xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx předpisy xxxxxxxx xxx xxxxxxxx souladu x touto směrnicí xxxxxxxxxx xx 30. xxxx 1997. Xxxxxxxxxx x nich uvědomí Xxxxxx.

2. Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx státy xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx odkazu xx stanoví členské xxxxx.

3. Členské státy xxxxx Komisi xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx působnosti xxxx xxxxxxxx.

Xxxxxx 3

Tato xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx dnem xx xxxxxxxxx v Xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxx 4

Xxxx směrnice xx xxxxxx členským xxxxxx.

X Xxxxxxx dne 2. xxxxxxxx 1996.

Za Xxxxxx

Xxxx Xxxxxx

xxxxxx Xxxxxx

[1] Úř. věst. X 262, 27.9.1976, x. 169.

[2] Xx. xxxx. X 167, 18.7.1995, x. 19.

[3] Xx. xxxx. X 383, 31.12.1980, x. 27.

[4] Xx. xxxx. X 57, 27.2.1987, x. 56.

[5] Xx. věst. X 185, 30.6.1982, x. 1.

[6] Xx. věst. X 108, 28.4.1990, x. 92.

[7] Xx. věst. X 291, 24.10.1983, x. 9.

[8] Xx. xxxx. X 295, 7.11.1985, x. 30.

[9] Úř. xxxx. X 231, 14.9.1993, x. 34.

[10] Xx. xxxx. X 178, 28.7.1995, x. 20.

XXXXXXX

XXXXX X XXXXXXXXX 2-XXXXXXXXXXXXXX, 1-FENOXYPROPAN-2-OLU, XXXXXX, XXXXX, XXXXXX, XXXXX X BENZYL 4-HYDROXYBENZOÁTU X KOSMETICKÝCH XXXXXXXXXXXX

X. XXXXX

1. Rozsah a xxxxxx použití

V xxxx xxxxxx je xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx, xxxxx x kombinaci s xxxxxxx stanovení popsanou x xxxxxx X xxxxxx důkaz 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, methyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, propyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

2. Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx kosmetických xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx se acetonový xxxxxx xxxxxx s xxxxx x mastné xxxxxxxx xx v xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx vápenaté soli. Xxxxxxxxx xxxx xxxxxx/xxxx xx extrahována xxxxxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xx xxxxxxxxx se konzervační xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxx diethyletherového xxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxx pokrytou xxxxxx vrstvou silikagelu. Xx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxx pozoruje x XX xxxxxx x xxxxxxxxxx xx xx použití Millonova xxxxxxx.

3. Xxxxxxx činidla

3.1 Xxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx p.a. Musí xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx voda xxxxxxx xxxxxx čistoty.

3.2 Xxxxxx

3.3 Xxxxxxxxxxxx

3.4 x-Xxxxxx

3.5 Xxxxxxxx

3.6 Xxxxxx kyselina xxxxxx

3.7 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, x(XXx) = 4 xxx/x

3.8 Xxxxxx xxxxxxxxx draselného, x(XXX) = 4 xxx/x

3.9 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (XxXx₂ . 2X₂X)

3.10 Xxxxxxxx xxxxxxx: Xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxxx činidlo (xxxxxxxx xxxxxxxx) xx komerčně xxxxxxxx xxxxxx (Xxxxx 69820).

3.11 2-Xxxxxxxxxxxxx

3.12 1-Fenoxypropan-2-ol

3.13 Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx)

3.14 Xxxxx 4-hydroxybenzoát (xxxxxxxxxxxx)

3.15 x-Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx)

3.16 x-Xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx)

3.17 Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx)

3.18 Xxxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxxx se 0,1 % (x/X) xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx 3.11, 3.12, 3.13, 3.14, 3.15, 3.16 a 3.17 x xxxxxxxxx.

3.19 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx

Xxxxxx se 88 xxxx xxxxxxxx (3.4) x 12 xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (3.6).

4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x dále:

4.1 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx 60 °X

4.2 Xxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx)

4.3 Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, 254 nm

4.4 Hotové xxxxx 20 xx × 20 cm, xxxxxx xxxxxxxx 0,25 xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 60X254 (254 xx xxxxxx xxxxxxx 60X) x xxxxxxxxxxxx xxxxx (Xxxxx Xx 11798, Xxxxxxxxx, xxxx xxxxxxxxxxxx)

4.5 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xx 105 °X

4.6 Xxxxxxxxxxxx vysoušeč xxxxx

4.7 Xxxxxx malířský váleček x délce xxxxxxxxx 10 cm, xxxxxx xxxxxx přibližně 3,5 xx. Xxxxxx xxxxxx xx měla být 2 xx 3 xx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxx x xxxx 5.2.

4.8 Xxxxxxxx xxxxxxxx na 50 xx xx šroubovacími xxxxxxx.

4.9 Xxxxxxxxxx topná xxxxx s xxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx teploty: asi 80 °X. Xxxxx xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx 20 xx × 20 cm x xxxxxxxx asi 6 xx, čímž xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

5. Xxxxxx

5.1 Xxxxxxxx vzorku

Do xxxxxxxx xxxxxxxx na 50 xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.8) xx xxxxxx xxxxxxxxx 1 x xxxxxx. Xxxxxxx xx čtyři xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.7) x 40 xx xxxxxxx.

X případě xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx 20 xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx chlorovodíkové. Xxxxxxxx xx uzavře, xxxx se zlehka xxxxxxx xx asi 60 °X, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx do xxxxxxxxx xxxx, x 1 xxxxxx xx xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx změří pH xxxxxxx x xxxxxx xx xx hodnotu ≤ 3 xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Znovu xx 1 minutu xxxxx xxxxx.

Xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xx přes filtrační xxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx. 20 ml xxxxxxxx xx xxxxxxx xx Erlenmeyerovy xxxxx xx 200 xx, xxxxx se 60 xx vody x xxxxxxxx. Xxxxxxx xX xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.8) xxxxxxxxx xx 10 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx se 1 x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.9) x xxxxx se protřepe. Xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx dělicí xxxxxxx xx 250 xx, xxxxx obsahuje 75 xx diethyletheru, x xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xx nechají xxxxxxx x xxxxx xxxx xx vypustí xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 200 xx. Xxxxxxx xX roztoku se xxxxxx xxxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx na xxxxxxxxx 2 xx použití xxxxxxxxxxxxxx papírku. Xxxx xx xxxxx 10 xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxx protřepává. Xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxx 2 xx xxxx diethyletheru xx převede xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx na 5 ml.

5.2 Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx (XXX)

XXX xxxxx se xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.9). Xx startovní xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx TLC xxxxx se xxxxxx 10 μl xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x 100 μx xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx) (5.1).

Xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx odpaření xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx. XXX xxxxx xx xxxxxxxx x topné desky x xxxxx xx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx komora (4.2) se xxxxxx 100 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.19).

XXX xxxxx xx xxxxx xxxxx xx nenasycené xxxxxx x vyvíjí se xxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx čelo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx 15 xx od xxxxxxxx xxxxx. Deska xx x xxxxxxxx xxxxxx xxxxx x xxxxxx x proudu xxxxxxx xxxxxxx pomocí xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxxx x XX xxxxxx (4.3) x xxxxxx xxxxx se xxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx 30 minut x xxxxxxx (4.5) xxx 100 °X, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx kyselina octová. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xx zviditelní Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.10) xxx, xx xx XXX xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx (4.7) xxxxxxxxx xx xxxxxxx.

Xxxxxxxx:

Xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx skvrnu označenou xxx UV xxxxxxx.

Xxxxxx xxxxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxx červené xxxxxx, 2-fenoxyethanol a 1-xxxxxxxxxxxx-2-xx xxxx žluté xxxxxx. Xx xxxx xxxxx xxxxx xxxxx xx xx, xx xxxxxxxx 4-hydroxybenzoová, xxxxx xxxx být xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxx rozkladu xxxxxxxx, xx xxxx x xxxx projeví xxxx xxxxxxx xxxxxx. Viz 7.3 a 7.4.

6. Xxxxx

Xxx každou skvrnu xx xxxxxxx xxxxxxx Xx. Xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx vzorku xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx roztoků, pokud xxx o xxxxxx xxxxxxx Rf, jejich xxxxxxx v XX xxxxxx x xxxxx xx zviditelnění. Učiní xx xxxxxxxxx xxxxxx x identitě xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxx se xxx, xx jsou přítomny xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (HPLC) xxxxxxxx x xxxxxx X. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx vrstvě (XXX) x xxxxxxxxxxxx kapalinové xxxxxxxxxxxxxx (HPLC) se xxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx x parabenů.

7. Xxxxxxxx

7.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxx xx nejvhodnější xxxxxxxxx xxxx činidlo jedním x xxxxxxxxx způsobů. Xxxxxxx xx nedoporučuje.

7.2 Xxxx xxxxxxxxxx obsahující xxxxxxxxxxx skupiny xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx x Millonovým xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx x xxxxxx Xx xxxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx chromatografie xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x práci X. xx Kruijf, X. X. X. Xxxx, X. A. Xxxxxxx-Xxxxxxxxx x X. Xxxxxxxx (1987): Xxxxxxxxxxxxx xx preservatives xx xxxxxxxx xxxxxxxx X: Xxxx-xxxxx chromatographic xxxxxxxxx xxx the xxxxxxxxxxxxxx xx preservatives in xxxxxxxx products (X. Xxxxxxxxxxxxxx 410, 395-411).

7.3 Xxxxxxx Rf xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, které xxx xxxxxx:

7.4 V xxxxxxx xxxxxxxx 4-hydroxybenzoové x methylparabenu xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx. Důkaz xxxxxx xxxxxxxxx by xxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx HPLC popsanou x oddíle X x porovnáním xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx standardů.

B. XXXXXXXXX

1. Xxxxxx a xxxxxx použití

V xxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, ethyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx v kosmetických xxxxxxxxxxxx.

2. Xxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx stanovená touto xxxxxxx se vyjádří x hmotnostních xxxxxxxxxx.

3. Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx kyseliny xxxxxx x xxxx xx suspenduje xx xxxxx xxxxxxxx x xxxx. Xxxx se xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx tukové xxxx, xxx xx zajistila xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, a xxxx se xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx xxxxx ve xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (HPLC) x xxxxxxxxx xxxx xx použití isopropyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

4. Reakční činidla

4.1 Xxxxxx

Xxxxxxx reakční činidla xxxx xxx xxxxxxx x.x. x xxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxx xxx XXXX. Xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx alespoň xxxxxx xxxxxxx.

4.2 Xxxxxxx, absolutní

4.3 2-Xxxxxxxxxxxxx

4.4 1-Fenoxypropan-2-ol

4.5 Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx)

4.6 Xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx)

4.7 x-Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (propylparaben)

4.8 Isopropyl 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxxxx)

4.9 x-Xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx)

4.10 Benzyl 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx)

4.11 Xxxxxxxxxxxxxxx

4.12 Xxxxxxxx

4.13 Acetonitril

4.14 Roztok xxxxxxxx sírové x(X₂XX₄) = 2 xxx/x

4.15 Xxxx xxxxxxx/xxxx

Xxxxxx xx xxxxx xxxx ethanolu (4.2) a jeden xxx xxxx.

4.16 Roztok xxxxxxxxx standardu

Přesně xx xxxxxx xxxxxxxxx 0,25 x xxxxxxxxxxxxxxxxx (4.8), xxxxxxx se do xxxxxxx xxxxx na 500 ml, xxxxxxxx xx a xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx/xxxx (4.15) xx objem.

4.17 Xxxxxxx xxxx: xxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxx/xxxxxxxx/xxxxxxxxxxx

Xxxxxx xx 5 xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, 60 xxxx xxxx, 10 xxxx xxxxxxxxx a 25 xxxx xxxxxxxxxxxx.

4.18 Xxxxxxx xxxxxx konzervačních xxxxxx

Xx xxxxxxx baňky xx 100 xx xx přesně xxxxxx xxxxxxxxx 0,2 x 2-xxxxxxxxxxxxxx, 0,2 x 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, 0,05 g xxxxxxxxxxxxxx, 0,05 g xxxxxxxxxxxxx, 0,05 g xxxxxxxxxxxxxx, 0,05 x xxxxxxxxxxxxx x 0,025 x xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx a xxxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxx xx xxxxx.

Xxxxxx xx xxxxxxxx x ledničce x xx stabilní 1 xxxxx.

4.19 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad

Do xxxxxxxxx xxxxx xx 50 xx xx xx xxxxxxxxx roztoku (4.18) xxxxxxx 20,00 ml, 10,00 xx, 5,00 xx, 2,00 xx x 1,00 xx. Xx xxxxx xxxxx xx přidá 10,00 xx xxxxxxx vnitřního xxxxxxxxx (4.16) x 1,0 xx roztoku xxxxxxxx xxxxxx (4.14) x doplní xxxxx xxxxxxx/xxxx xx xxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx:

5.1 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx 60 °X ± 1 °X.

5.2 XXXX xxxxxxxxxxxx x XX xxxxxxxxxx, xxxxxx délka 280 xx

5.3 Xxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxxxxxxxxxxxx xxxx, délka 25 xx, xxxxxxx xxxxxx 4,6 xx (nebo xxxxx 12,5 xx x vnitřní xxxxxx 4,6 mm), xxxxxxxx Xxxxxxxxxxx 5X18, xxxx xxxxxxxxxxxxx sorbentem (xxx 10.1).

5.4 Xxxxxxxx xxxxxxxx xx 100 xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx

5.5 Xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx 2 až 4 mm nebo xxxxxxxxxxxx

6. Postup

6.1 Xxxxxxxx xxxxxx

6.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx xxx přidání vnitřního xxxxxxxxx

Xx zkumavky na 100 ml xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxx 1,0 x vzorku. Xx xxxxxxxx xx pipetou xxxxx 1,0 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.14) a 50,0 xx směsi ethanol/voda (4.15). Xxxxx xx xxxxxxxxx 1 x xxxxxxx xxxxxxx (5.5), xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx alespoň xxxxx xxxxxx. Zkumavka se xxxxx xx 5 xxxxx xx vodní xxxxx (5.1) x xxxxxxx 60 °X ± 1 °C, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx fáze.

Zkumavka xx ihned xxxxxxx xxx proudem xxxxxxx xxxx a extrakt xx xxxxx xx xxxxx hodinu xx xxxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxx filtrační xxxxx. Asi 2 xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx 5 xx vzorkovací lahvičky. Xxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx HPLC xx xxxxxxx xx 24 xxxxx.

6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx přidání xxxxxxxxx standardu

Do skleněné xxxxxxxx xx 100 xx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx s xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx 1,0 x ± 0,1 x xxxxxx.

Xx xxxxxxxx se pipetou xxxxx 1,0 xx xxxxxxx xxxxxxxx sírové x 40,0 ml xxxxx xxxxxxx/xxxx. Přidá xx přibližně 1 x xxxxxxx kamínků (5.5) x přesně 10,00 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Zkumavka xx xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx se xxxxxxx jednu minutu. Xxxxxxxx xx xxxxx xx 5 minut xx xxxxx lázně x xxxxxxx 60 °X ± 1 °X, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx do xxxxxxxxxx xxxx.

Xxxxxxxx xx ihned xxxxxxx pod xxxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxx se xxxxx xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx papír.

Asi 2 xx filtrátu se xxxxxxxx xx 5 xx xxxxxxxxxx lahvičky (xxxxxxxx xxxxxx). Extrakt xx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx XXXX xx xxxxxxx xx 24 xxxxx.

6.2 Vysokoúčinná xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX)

6.2.1 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

- Xxxxxxx xxxx: xxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxx/xxxxxxxx/xxxxxxxxxxx (4.17)

- Xxxxxxxxx xxxxxxxx: 1,5 xx xx xxxxxx

- Xxxxxxxx xxxxxx délka: 280 nm

6.2.2 Xxxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx 10 μl xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (4.19). Ze xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx stanoví xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx konzervačních xxxxxx x xxxx xxxxxxxxx standardu. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

6.2.3 Stanovení

Do xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 10 μx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (6.1.1) x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xx 10 μl jednoho xx standardních roztoků xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (4.19) x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx chromatogramy xx porovnají.

Není-li x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (6.1.1) xxxxxxxx pík x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx časem, xxxx xx xxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx), pokračuje xx xxxxxxxxxxxx 10 μx xxxxxxx xxxxxx x vnitřním standardem (6.1.2). Chromatogram se xxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxx píků.

Je-li x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx rušivý pík x xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx jako xxxxxxxx xxx isopropylparabenu, xxx xx xxx xxxxxx jiný vnitřní xxxxxxxx.

Xxxx-xx xxxxx z xxxxxxxxxxxxx konzervačních přísad x chromatogramu xxxxxx xxxxxxxx, lze tuto xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx vnitřní xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx konzervačních xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

Xx xxxxx xxxxxx, že xx kalibrační xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xx xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx alespoň 0,90. (Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xx obrázku 1.),

&xxxx;

Xxxxxxx 1: Xxxxxxxx píků

Není-li xxxxxxxxxx separace xxxxxxxx, xxxx by xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxx xx xxxx být složení xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx, aby xxx xxxxxxxxx xxxxxx.

- faktor xxxxxxxxx (Xx) xxxxx xxxxxxxxx píků xx xx xxx xxxxxxxxx xx 0,9 do 1,5. (Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx 2.) Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx stanovení xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx rychlost xxxxxx xxxxxx xxxxxxx 2 xx za minutu,

Obrázek 2: Xxxxxx asymetrie xxxx

- xxxxxxxx musí xxx xxxxxxxx.

7. Xxxxxxx

Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (6.2.2) x hodnoty poměrů xxxxx píků xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx (wi) 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-fenoxypropan-2-olu, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (% x/x) xx xxxxxxx pomocí xxxxxx:

%x_x(x/x) = b_i / (200 × x)

xxx

xx = koncentrace xxxxxxxxxxx přísady i xx xxxxxxxxx xxxxxxx (μx/xx) xxxxxxxx z xxxxxxxxxx xxxxxx a

a = xxxxxxxx zkušebního xxxxxx (x).

8. Xxxxxxxxxxxxxx [1]

Xxx poznámka x xxxx 10.5.

9. Xxxxxxxxxxxxxxxxxx [2]

Xxx xxxxxxxx x xxxx 10.5.

10. Xxxxxxxx

10.1 Xxxxxxxxxxx xxxx

Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxx HPLC xxxxxxx xxxxxx xx typu, xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx fáze. Xxx xxx kolonu xxxxxx xxx oddělení xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad, lze xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx standardní xxxxxxx (xxx xxxxxxxx x bodu 6.2.3). Xxxxx navrhovaného xxxxxxxxx xxxxxx kolony xxxx xxxxxxxx vhodnými xxxx xxxxxxxxx Hypersil XXX x Xxxxxx XXX.

Xx xxxxxx dosažení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx.

10.2 Xxxxxxxx vlnová xxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx ukázala, xx xxxxxxxx změna xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxx xx výsledky xxxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.

10.3 Rušivé xxxxx

Xx podmínek xxxxxxxxx x xxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx další xxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx konzervačních xxxxxx uvedených v xxxxxxx VI směrnice Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxx X. de Kruijf, X. X. H. Xxxx, L. A. Xxxxxxx-Xxxxxxxxx, X. Xxxxxxxx, (1989): Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx XX. High-performance xxxxxx chromatographic xxxxxxxxxxxxxx (X. Xxxxxxxxxxxxxx, 469, 317-398).

10.4 Xxx ochranu xxxxxxxxxx kolony xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

10.5 Xxxxxx byla zkoušena xxx xxxxxxxx xxxxxx, xx xxxx xx xxxxxxxx devět xxxxxxxxxx. Xxxx analyzovány tři xxxxxx. X následující xxxxxxx jsou xxx xxxxx xx xxx xxxxxx uvedeny xxxxxxx xxxxxxx v % x/x (m), opakovatelnosti (x) x reprodukovatelnosti (X) xxxxxxxx xxx xxxxxxx, které xxxx xx vzorcích xxxxxxxx:

[1] ISO 5725.

[2] XXX 5725.