Plné znění - 31996L0045

Xxxxx Xxxxxxxx Komise 96/45/XX

xx xxx 2. xxxxxxxx 1996

x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx složení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx

(Xxxx x xxxxxxxx xxx EHP)

KOMISE EVROPSKÝCH XXXXXXXXXXXX,

x xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx společenství,

s xxxxxxx xx xxxxxxxx Rady 76/768/XXX xx dne 27. xxxxxxxx 1976 x sbližování xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 95/34/XX [2], a xxxxxxx xx xx. 8 xxxx. 1 xxxxxxx směrnice,

vzhledem x xxxx, xx xx xx xxxxxxxx 76/768/XXX xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx zajistit xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx, které xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;

xxxxxxxx x xxxx, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx; xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx Komise 80/1335/XXX [3] ve xxxxx xxxxxxxx 87/143/XXX [4], xxxxxxxx Xxxxxx 82/434/EHS [5] ve xxxxx xxxxxxxx 90/207/XXX [6] x ve xxxxxxxxxx Xxxxxx 83/514/XXX [7], 85/490/XXX [8], 93/73/EHS [9] x 95/32/XX [10];

xxxxxxxx k xxxx, xx xxxxx x xxxxxxxxx 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, xxxxxx, ethyl, xxxxxx, xxxxx x benzyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx;

xxxxxxxx k xxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx stanoviskem Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx 76/768/XXX xxxxxxxxxxx xxxxxxx,

XXXXXXX XXXX SMĚRNICI:

Xxxxxx 1

Členské xxxxx xxxxx všechny nezbytné xxxxx x xxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxx úředním xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, xxxxxx, ethyl, xxxxxx, xxxxx x xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx popsanými x xxxxxxx.

Článek 2

1. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx předpisy xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx směrnicí xxxxxxxxxx xx 30. xxxx 1997. Xxxxxxxxxx x nich xxxxxxx Xxxxxx.

2. Xxxx opatření xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx obsahovat odkaz xx tuto směrnici xxxx musí takový xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx odkazu xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

3. Xxxxxxx státy xxxxx Komisi xxxxx xxxxxxxxxxxxxx právních xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxx této xxxxxxxx.

Xxxxxx 3

Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxx dnem xx xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxx Evropských xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxx 4

Tato xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

X Xxxxxxx dne 2. xxxxxxxx 1996.

Xx Xxxxxx

Xxxx Bonino

členka Xxxxxx

[1] Xx. xxxx. X 262, 27.9.1976, x. 169.

[2] Úř. xxxx. X 167, 18.7.1995, x. 19.

[3] Úř. xxxx. X 383, 31.12.1980, x. 27.

[4] Xx. xxxx. X 57, 27.2.1987, x. 56.

[5] Xx. xxxx. X 185, 30.6.1982, x. 1.

[6] Xx. věst. X 108, 28.4.1990, x. 92.

[7] Xx. věst. X 291, 24.10.1983, x. 9.

[8] Xx. xxxx. X 295, 7.11.1985, x. 30.

[9] Xx. věst. X 231, 14.9.1993, x. 34.

[10] Xx. xxxx. X 178, 28.7.1995, x. 20.

XXXXXXX

XXXXX X XXXXXXXXX 2-XXXXXXXXXXXXXX, 1-XXXXXXXXXXXX-2-XXX, METHYL, XXXXX, PROPYL, XXXXX X BENZYL 4-HYDROXYBENZOÁTU X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX

X. XXXXX

1. Rozsah x xxxxxx xxxxxxx

X této xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx, xxxxx x kombinaci x xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx X xxxxxx xxxxx 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, butyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx x benzyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx prostředcích.

2. Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx acetonem. Po xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx s xxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx x xxxxxxxxxx prostředí xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxx směs xxxxxx/xxxx xx xxxxxxxxxxx diethyletherem, xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx látky. Xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx část xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx nanese xx xxxxx pokrytou xxxxxx vrstvou xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxxx se xxxxxxx chromatogram pozoruje x XX světle x zviditelní se xx použití Millonova xxxxxxx.

3. Xxxxxxx xxxxxxx

3.1 Xxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx musí xxx xxxxxxx x.x. Musí xxx xxxxxxx destilovaná xxxx xxxx voda xxxxxxx stejné čistoty.

3.2 Xxxxxx

3.3 Diethylether

3.4 x-Xxxxxx

3.5 Xxxxxxxx

3.6 Ledová xxxxxxxx xxxxxx

3.7 Roztok kyseliny xxxxxxxxxxxxxx, x(XXx) = 4 mol/l

3.8 Roztok xxxxxxxxx xxxxxxxxxx, c(KOH) = 4 xxx/x

3.9 Xxxxxxx xxxxxxxx dihydrát (XxXx₂ . 2X₂X)

3.10 Xxxxxxxx xxxxxxx: Millonovo xxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxx (dusičnan xxxxxxxx) je xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (Xxxxx 69820).

3.11 2-Xxxxxxxxxxxxx

3.12 1-Xxxxxxxxxxxx-2-xx

3.13 Xxxxxx 4-hydroxybenzoát (xxxxxxxxxxxxx)

3.14 Xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx)

3.15 x-Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx)

3.16 x-Xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (butylparaben)

3.17 Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx)

3.18 Xxxxxxxxxx roztoky

Připraví se 0,1 % (m/V) xxxxxxx xxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxx 3.11, 3.12, 3.13, 3.14, 3.15, 3.16 x 3.17 x methanolu.

3.19 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xx 88 xxxx xxxxxxxx (3.4) s 12 xxxx ledové xxxxxxxx xxxxxx (3.6).

4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx

Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx:

4.1 Xxxxx lázeň xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx 60 °X

4.2 Vyvíjecí komora (xxxxxxxxxx filtračním xxxxxxx)

4.3 Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx, 254 xx

4.4 Xxxxxx xxxxx 20 cm × 20 xx, xxxxxx potažené 0,25 xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx 60X254 (254 xx xxxxxx indexem 60X) s xxxxxxxxxxxx xxxxx (Merck Xx 11798, Xxxxxxxxx, nebo xxxxxxxxxxxx)

4.5 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx až xx 105 °C

4.6 Xxxxxxxxxxxx vysoušeč vlasů

4.7 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx x délce xxxxxxxxx 10 cm, vnější xxxxxx xxxxxxxxx 3,5 xx. Xxxxxx xxxxxx xx měla xxx 2 xx 3 xx xxxxx. Xxxxx xxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx.

Xxx xxxxxxxx v xxxx 5.2.

4.8 Xxxxxxxx xxxxxxxx xx 50 xx xx šroubovacími xxxxxxx.

4.9 Xxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x termostatem. Xxxxxxxxx xxxxxxx: xxx 80 °X. Topná xxxxx xx pokryje xxxxxxxxxx xxxxxx o xxxxxxxxx 20 xx × 20 xx x xxxxxxxx xxx 6 xx, čímž xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx tepla.

5. Xxxxxx

5.1 Xxxxxxxx vzorku

Do xxxxxxxx xxxxxxxx xx 50 xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.8) xx xxxxxx xxxxxxxxx 1 x xxxxxx. Přidají xx xxxxx kapky xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (3.7) a 40 xx acetonu.

V xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxx je xxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx 20 xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx chlorovodíkové. Xxxxxxxx xx xxxxxx, xxxx xx zlehka xxxxxxx xx asi 60 °C, aby xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx látek do xxxxxxxxx fáze, x 1 xxxxxx se xxxxx třepe.

Indikátorovým xxxxxxxx xx xxxxx xX xxxxxxx x xxxxxx xx xx xxxxxxx ≤ 3 roztokem xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Znovu xx 1 minutu xxxxx xxxxx.

Xxxxxx se xxxxxxx na pokojovou xxxxxxx x zfiltruje xx xxxx filtrační xxxxx xx Erlenmeyerovy xxxxx. 20 xx xxxxxxxx se převede xx Erlenmeyerovy baňky xx 200 xx, xxxxx xx 60 xx xxxx x xxxxxxxx. Xxxxxxx pH xxxxx se upraví xxxxxxxxxx draselným (3.8) xxxxxxxxx na 10 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx xx 1 x chloridu xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.9) a xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxx xx zfiltruje xxxx filtrační xxxxx xx xxxxxx nálevky xx 250 xx, xxxxx obsahuje 75 xx diethyletheru, x xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x vodná xxxx xx vypustí xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 200 xx. Hodnota xX roztoku xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx 2 xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx papírku. Xxxx xx přidá 10 xx xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx. Xxxx xx nechají oddělit x xxx 2 xx fáze diethyletheru xx převede xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 5 xx.

5.2 Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx (XXX)

XXX xxxxx se xxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (4.9). Xx startovní xxxxx xxxxxxxxxxxx zóny XXX xxxxx se xxxxxx 10 μx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x 100 μx xxxxxxx xxxxxx (xxxxxx) (5.1).

Xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxx odpaření xxxxxxxxxxxx xxxxxxx vzduchu. TLC xxxxx se odstraní x topné xxxxx x xxxxx xx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx komora (4.2) xx naplní 100 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (3.19).

XXX xxxxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx komory x vyvíjí se xxx xxxxxxxx teplotě, xxxxx čelo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx 15 xx od základní xxxxx. Xxxxx xx x xxxxxxxx komory xxxxx a xxxxxx x xxxxxx horkého xxxxxxx xxxxxx horkovzdušného xxxxxxxxx xxxxx.

Xxxxx se xxxxxxxxx x XX xxxxxx (4.3) a xxxxxx xxxxx se xxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx 30 xxxxx x sušárně (4.5) xxx 100 °X, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx octová. Xxxxxxxxxxx přísady x xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.10) xxx, xx xx XXX deska rovnoměrně xxxxxxx xxxxxxxx (4.7) xxxxxxxxx xx xxxxxxx.

Xxxxxxxx:

Xxxxxx xxx rovněž xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx XX světlem.

Estery xxxxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx jako červené xxxxxx, 2-xxxxxxxxxxxxx x 1-xxxxxxxxxxxx-2-xx xxxx xxxxx xxxxxx. Xx xxxx xxxxx xxxxx pozor xx xx, xx xxxxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxxx parabenů, xx xxxx x xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx. Viz 7.3 a 7.4.

6. Xxxxx

Xxx každou xxxxxx xx vypočte xxxxxxx Xx. Xxxxxx získané x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx získanými z xxxxxxxxxxxx roztoků, xxxxx xxx x jejich xxxxxxx Rf, xxxxxx xxxxxxx x XX xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Učiní xx xxxxxxxxx xxxxxx x identitě konzervačních xxxxxx.

Xxxxx xx xxx, xx jsou xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxxxxxx x xxxxxx X. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxx vrstvě (XXX) x vysokoúčinné kapalinové xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) se xxxxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx a xxxxxxxx.

7. Xxxxxxxx

7.1 Xxxxxxxx x xxxxxxxx Millonova xxxxxxx xx nejvhodnější xxxxxxxxx xxxx činidlo xxxxxx x xxxxxxxxx způsobů. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.

7.2 Xxxx sloučeniny xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx skupiny xxxxx xxxxxx xxx xxxxxx x Xxxxxxxxxx činidlem xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx a hodnot Xx xxxxxxxxx pro xxxx konzervačních xxxxxx xxxxxxxx chromatografie na xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x práci X. de Kruijf, X. X. X. Xxxx, X. A. Xxxxxxx-Xxxxxxxxx x A. Xxxxxxxx (1987): Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx products I: Xxxx-xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx procedure xxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx (X. Xxxxxxxxxxxxxx 410, 395-411).

7.3 Xxxxxxx Xx uvedené x xxxxxxxxxxx tabulce xxxxxx xxxx ukazatele xxxxxx, xxxxx xxx xxxxxx:

7.4 V xxxxxxx xxxxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx x methylparabenu xxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx. Důkaz xxxxxx xxxxxxxxx xx xxx být xxxxxxxx xxxxxxx XXXX popsanou x xxxxxx X x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxx s xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx.

X. XXXXXXXXX

1. Rozsah x xxxxxx xxxxxxx

X xxxx xxxxxx je xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, ethyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx, butyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

2. Xxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx stanovená xxxxx xxxxxxx xx vyjádří x xxxxxxxxxxxx procentech.

3. Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx kyseliny xxxxxx x poté xx xxxxxxxxxx xx xxxxx ethanolu a xxxx. Směs xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx tukové xxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx xx zfiltruje.

Konzervační xxxxx xx filtrátu xx stanoví xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (HPLC) x obrácenou xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx jako vnitřního xxxxxxxxx.

4. Xxxxxxx xxxxxxx

4.1 Xxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxx činidla xxxx xxx xxxxxxx x.x. a podle xxxxxxx musí být xxxxxx xxx HPLC. Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.

4.2 Ethanol, xxxxxxxxx

4.3 2-Xxxxxxxxxxxxx

4.4 1-Fenoxypropan-2-ol

4.5 Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx)

4.6 Xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx)

4.7 x-Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx)

4.8 Isopropyl 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxxxxx)

4.9 n-Butyl 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxx)

4.10 Xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxxxx)

4.11 Xxxxxxxxxxxxxxx

4.12 Xxxxxxxx

4.13 Acetonitril

4.14 Roztok xxxxxxxx xxxxxx x(X₂XX₄) = 2 xxx/x

4.15 Xxxx xxxxxxx/xxxx

Xxxxxx se xxxxx xxxx xxxxxxxx (4.2) x xxxxx xxx xxxx.

4.16 Roztok xxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx 0,25 x xxxxxxxxxxxxxxxxx (4.8), xxxxxxx se xx xxxxxxx xxxxx xx 500 ml, xxxxxxxx xx x xxxxxx xx xxxxx ethanol/voda (4.15) xx objem.

4.17 Xxxxxxx fáze: xxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxx/xxxxxxxx/xxxxxxxxxxx

Xxxxxx xx 5 xxxx tetrahydrofuranu, 60 xxxx xxxx, 10 xxxx methanolu x 25 xxxx xxxxxxxxxxxx.

4.18 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx

Xx odměrné baňky xx 100 xx xx přesně xxxxxx xxxxxxxxx 0,2 x 2-xxxxxxxxxxxxxx, 0,2 g 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, 0,05 g xxxxxxxxxxxxxx, 0,05 x xxxxxxxxxxxxx, 0,05 x xxxxxxxxxxxxxx, 0,05 x xxxxxxxxxxxxx a 0,025 x xxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xx a xxxxxx xxxxx ethanol/voda xx xxxxx.

Xxxxxx xx uchovává x xxxxxxxx x xx xxxxxxxx 1 xxxxx.

4.19 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxxxxx xxxxx na 50 xx xx ze xxxxxxxxx xxxxxxx (4.18) xxxxxxx 20,00 xx, 10,00 ml, 5,00 xx, 2,00 xx x 1,00 xx. Xx xxxxx xxxxx xx přidá 10,00 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.16) x 1,0 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.14) x doplní směsí xxxxxxx/xxxx na xxxxx. Xxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx.

5. Přístroje x pomůcky

Běžné xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, a xxxx:

5.1 Xxxxx lázeň xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx 60 °X ± 1 °X.

5.2 XXXX chromatograf x XX detektorem, xxxxxx délka 280 xx

5.3 Xxxxxxxxxx xxxxxx:

Xxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx 25 xx, xxxxxxx xxxxxx 4,6 mm (xxxx xxxxx 12,5 xx x xxxxxxx xxxxxx 4,6 xx), xxxxxxxx Xxxxxxxxxxx 5X18, xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (viz 10.1).

5.4 Xxxxxxxx zkumavky xx 100 xx xx šroubovacím xxxxxxxx

5.5 Xxxxx kamínky, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx 2 xx 4 xx xxxx xxxxxxxxxxxx

6. Xxxxxx

6.1 Příprava xxxxxx

6.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx xxx přidání vnitřního xxxxxxxxx

Xx zkumavky na 100 ml xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxx 1,0 x xxxxxx. Xx xxxxxxxx se pipetou xxxxx 1,0 ml xxxxxxx xxxxxxxx sírové (4.14) x 50,0 xx xxxxx xxxxxxx/xxxx (4.15). Xxxxx xx xxxxxxxxx 1 g xxxxxxx xxxxxxx (5.5), xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx jednu xxxxxx. Zkumavka se xxxxx xx 5 xxxxx xx vodní xxxxx (5.1) x xxxxxxx 60 °X ± 1 °X, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx konzervačních xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxx proudem xxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xxxxx na xxxxx hodinu xx xxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxx 2 xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx 5 xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx HPLC xx xxxxxxx do 24 xxxxx.

6.1.2 Příprava xxxxxx včetně xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xx skleněné xxxxxxxx na 100 xx se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx x xxxxxxxxx xx tři xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx 1,0 g ± 0,1 g xxxxxx.

Xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx 1,0 xx xxxxxxx kyseliny xxxxxx x 40,0 xx xxxxx xxxxxxx/xxxx. Xxxxx xx přibližně 1 x varných kamínků (5.5) a xxxxxx 10,00 xx xxxxxxx xxxxxxxxx standardu. Xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxx xx 5 minut xx xxxxx xxxxx x xxxxxxx 60 °X ± 1 °X, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx ethanolové xxxx.

Xxxxxxxx xx ihned xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx a xxxxxxx se xxxxx xx xxxxx xxxxxx xx ledničky. Extrakt xx zfiltruje xxxx xxxxxxxxx papír.

Asi 2 xx filtrátu xx xxxxxxxx do 5 xx xxxxxxxxxx lahvičky (xxxxxxxx xxxxxx). Xxxxxxx xx xxxxx do xxxxxxxx x stanovení xxxxxxx HPLC se xxxxxxx do 24 xxxxx.

6.2 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX)

6.2.1 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

- Xxxxxxx xxxx: xxxx tetrahydrofuran/voda/methanol/acetonitril (4.17)

- Xxxxxxxxx rychlost: 1,5 xx xx minutu

- Xxxxxxxx vlnová xxxxx: 280 xx

6.2.2 Xxxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx 10 μl xxxxxxx ze standardních xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad (4.19). Ze xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx výšek xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x píku xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxx konzervační xxxxxxx xx sestrojí xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx poměrů xx koncentraci xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

6.2.3 Xxxxxxxxx

Xx xxxxxxxxxxxxx xx nastříkne 10 μx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (6.1.1) x zaznamená xx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx se 10 μx xxxxxxx xx standardních xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad (4.19) x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Získané xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx.

Xxxx-xx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (6.1.1) xxxxxxxx xxx x přibližně stejným xxxxxxxxx časem, xxxx xx xxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx 10 μx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (6.1.2). Chromatogram xx xxxxxxxxx x změří xx xxxxx xxxx.

Xx-xx x chromatogramu xxxxxxx xxxxxx xxxxxx pík x retenčním xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx čas xxxxxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxx xxxxxx xxxx vnitřní xxxxxxxx.

Xxxx-xx jedna z xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx standard.

Vypočítají xx poměry xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxx standardu.

Je xxxxx ověřit, že xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xx xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxxx získané pro xxxxxxxxxx roztok x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:

- separace xxxx nejhůře xxxxxxxxxx xxxx je xxxxxxx 0,90. (Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx je uvedena xx xxxxxxx 1.),

Obrázek 1: Xxxxxxxx xxxx

Xxxx-xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx dosaženo, xxxx by být xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, nebo by xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx, aby xxx xxxxxxxxx xxxxxx.

- xxxxxx xxxxxxxxx (As) všech xxxxxxxxx píků xx xx xxx xxxxxxxxx xx 0,9 xx 1,5. (Definice faktoru xxxxxxxxx je xxxxxxx xx xxxxxxx 2.) Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx 2 xx za minutu,

Obrázek 2: Faktor asymetrie xxxx

- xxxxxxxx musí xxx stabilní.

7. Výpočet

Pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x roztoku xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (6.2.2) x hodnoty poměrů xxxxx xxxx vyšetřovaných xxxxxxxxxxxxx přísad k xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx. Obsah (xx) 2-xxxxxxxxxxxxxx, 1-xxxxxxxxxxxx-2-xxx, methyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx, ethyl 4-xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxx 4-hydroxybenzoátu, xxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxx 4-xxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (% m/m) xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx:

%x_x(x/x) = b_i / (200 × x)

xxx

xx = koncentrace xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xx zkušebním roztoku (μx/xx) odečtená z xxxxxxxxxx křivky a

a = xxxxxxxx zkušebního xxxxxx (x).

8. Opakovatelnost [1]

Xxx xxxxxxxx x xxxx 10.5.

9. Reprodukovatelnost [2]

Xxx xxxxxxxx x xxxx 10.5.

10. Xxxxxxxx

10.1 Xxxxxxxxxxx fáze

Retenční xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx látek xxx xxxxxxxxxxx XXXX výrazně xxxxxx xx typu, xxxxxx x historii xxxxxxxxxxx fáze. Xxx xxx xxxxxx použít xxx oddělení xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxx z xxxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx (xxx xxxxxxxx x xxxx 6.2.3). Xxxxx xxxxxxxxxxxx materiálu xxxxxx kolony xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx Xxxxxxxx ODS x Xxxxxx XXX.

Xx xxxxxx xxxxxxxx požadovaného xxxxxxxx lze xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx složení xxxxxxx xxxx.

10.2 Detekční xxxxxx xxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, že xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx může xxx významný vliv xx výsledky xxxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxx musí být xxxxx xxxxx analýzy xxxxxxx kontrolován.

10.3 Xxxxxx xxxxx

Xx podmínek xxxxxxxxx x této xxxxxx xx eluováno mnoho xxxxxxx xxxxxxxxx, xxxx xxxx xxxxx konzervační xxxxxxx a kosmetické xxxxxxx. Retenční časy xxxxxxx xxxxxxxx konzervačních xxxxxx uvedených v xxxxxxx XX xxxxxxxx Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x práci X. de Xxxxxx, X. X. H. Xxxx, X. A. Xxxxxxx-Xxxxxxxxx, X. Xxxxxxxx, (1989): Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx in cosmetic xxxxxxxx II. High-performance xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (X. Chromatography, 469, 317-398).

10.4 Pro xxxxxxx xxxxxxxxxx kolony xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

10.5 Xxxxxx xxxx zkoušena xxx xxxxxxxx xxxxxx, xx xxxx se xxxxxxxx devět xxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxx. V xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxx ze xxx xxxxxx xxxxxxx střední xxxxxxx x % x/x (x), xxxxxxxxxxxxxxx (x) x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (X) xxxxxxxx pro xxxxxxx, xxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx:

[1] ISO 5725.

[2] XXX 5725.