Xxxxx směrnice Xxxxxx 95/32/XX
xx xxx 7. xxxxxxxx 1995
x xxxxxxxx xxxxxxx nezbytných pro xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
(Xxxx x významem xxx EHP)
KOMISE XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x ohledem na Xxxxxxx o založení Xxxxxxxxxx společenství,
s xxxxxxx xx směrnici Xxxx 76/768/XXX ze xxx 27. xxxxxxxx 1976 x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx států xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx Komise 94/32/XX [2], x xxxxxxx na xx. 8 odst. 1 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxx, xx xx xx xxxxxxxx 76/768/EHS xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxx xxxxxxx kosmetických xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx; že xxxxxxx xxxxxx již xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxx 80/1335/XXX [3] xx xxxxx xxxxxxxx 87/143/XXX [4], xxxxxxxx 82/434/EHS [5] xx xxxxx xxxxxxxx 90/207/XXX [6] a xx xxxxxxxxxx 83/514/EHS [7], 85/490/EHS [8] x 93/73/XXX [9];
xxxxxxxx x tomu, xx xxxxx a stanovení xxxxxxxx xxxxxxxx, kyseliny 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx prostředcích x xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, hydrochinonmonomethyletheru, hydrochinonmonoethyletheru x hydrochinonmonobenzyletheru v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx jsou xxxxxx krokem;
vzhledem x xxxx, xx opatření xxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx 76/768/EHS xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxx, xxx se xxx xxxxxxx zkoušení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx:
- důkaz x stanovení xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx x kyseliny xxxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx a hydrochinonmonobenzyletheru xxxxxxxxx metodami popsanými x xxxxxxx.
Článek 2
1. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx předpisy xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx x touto xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 30. xxxx 1996. Neprodleně x xxxx xxxxxxx Xxxxxx.
Xxxx opatření xxxxxxx xxxxxxxxx státy xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx směrnici xxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx učiněn xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx členské xxxxx.
2. Xxxxxxx xxxxx sdělí Xxxxxx xxxxx vnitrostátních xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x oblasti xxxxxxxxxx této směrnice.
Článek 3
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx dnem xx xxxxxxxxx x Úředním xxxxxxxx Evropských xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 4
Xxxx směrnice xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X Xxxxxxx xxx 7. července 1995.
Xx Xxxxxx
Xxxx Bonino
členka Xxxxxx
[1] Xx. věst. X 262, 27.9.1976, x. 169.
[2] Xx. věst. X 181, 15.7.1994, x. 31.
[3] Úř. xxxx. X 383, 31.12.1980, x. 27.
[4] Úř. xxxx. X 57, 27.2.1987, x. 56.
[5] Úř. věst. X 185, 30.6.1982, x. 1.
[6] Úř. xxxx. X 108, 28.4.1990, x. 92.
[7] Xx. xxxx. X 291, 24.10.1983, x. 9.
[8] Xx. věst. X 295, 7.11.1985, x. 30.
[9] Xx. xxxx. X 231, 14.9.1993, x. 34.
XXXXXXX
X. XXXXX X XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXX, XXXXXXXX 4HYDROXYBENZOOVÉ, KYSELINY XXXXXXX, XXXXXXXX SALICYLOVÉ X XXXXXXXX XXXXXXXXXX X KOSMETICKÝCH PROSTŘEDCÍCH
1. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx je použitelná xxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, kyseliny xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx propionové x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx důkazu xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx kyseliny 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x kyseliny xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx vyjádří x hmotnostních xxxxxxxxxx xxxxxxx kyselin.
A. XXXXX
1. Xxxxxxxx metody
Po kyselé/zásadité xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad xx xxxxxxx analyzuje xxxxxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx (XXX) x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ("derivatizace xx xxxxx"). X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) nebo, x xxxxxxx xxxxxxxx propionové, xxxxxxxx chromatografií (GC).
2. Xxxxxxx činidla
2.1 Xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx musí xxx xxxxxxx p.a. Xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2.2 Xxxxxx
2.3 Xxxxxxxxxxxx
2.4 Xxxxxxxxxxx
2.5 Toluen
2.6 xXxxxx
2.7 Xxxxxxx, tekutý
2.8 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, 4 M
2.9 Xxxxxxxx draselný, 4 X vodný xxxxxx
2.10 Xxxxxxx vápenatý, XxXx2·2X2X
2.11 Xxxxxxxxx xxxxxx, Xx2XX3
2.12 2Xxxx2‘xxxxxxxxxxx
2.13 Xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx
2.14 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
2.15 Kyselina xxxxxxxx
2.16 Xxxxxxxx xxxxxxx
2.17 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
2.18 Xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xx 0,1 % (x/X) roztoky (100 xx/100 xx) xxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (2.13 xx 2.17) x xxxxxxxxxxxxx.
2.19 Derivatizační xxxxxxx
0,5 % xxxxxx 2xxxx2‘xxxxxxxxxxxx (2.12) v xxxxxxxxxxxx (2.4) (50 xx/10 xx). Tento roztok xx xxx xxx xxxxxxxxxxx každý xxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxx.
2.20 Xxxxxx katalyzátoru
0,3 % (x/X) xxxxxx xxxxxxxxxx lithného (2.11) xx vodě (300 xx/100 xx). Xxxxx xxxxxx by xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2.21 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxx (2.5)/aceton (2.2) (20: 0,5, X/X)
2.22 Tekutý xxxxxxx (2.7)/xxxxxx (2.6) (1:2, X/X)
3. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
3.1 Xxxxx xxxxx nastavitelná xx xxxxxxx 60 °X
3.2 Vyvíjecí komora
3.3 Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx 254 a 366 xx
3.4 Xxxxxx xxxxx xxx chromatografii xx xxxxx xxxxxx, Silikagel 60, xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, 20 × 20 xx, xxxxxxxx xxxxxx 0,25 xx x koncentrační xxxxx 2,5 × 20 xx (Merk 11845 xxxx xxxxxxxxxxxx)
3.5 Xxxxxxxxxxxxxx xx 10 μx
3.6 Xxxxxxxxxxxxxx xx 25 μx
3.7 Xxxxxxx nastavitelná xx teplotu až 105 °X
3.8 Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 50 x 200 xx xx zabroušenou xxxxxx
3.9 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx 90 xx, Xxxxxxxxxx &xxx; Schüll, Xxxxxxxxx Xx. 5892, xxxx xxxxxxxxxxxx
3.10 Univerzální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, pH 1 – 11
3.11 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx lahvičky xx 5 ml
3.12 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (Rotavapor xxxx ekvivalentní)
3.13 Xxxxx xxxxx
4. Xxxxxx
4.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xx Erlenmeyerovy xxxxx xx 50 xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx (3.8) xx xxxxxx xxxxxxxxx 1 x xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx kapky 4 X kyseliny chlorovodíkové (2.8) x 40 xx xxxxxxx (2.2). X xxxxx zásaditých xxxxxxx, xxxx je xxxxxxxx mýdlo, xx xxxx xxx xxxxxxx 20 xxxxx 4 X xxxxxxxx chlorovodíkové (2.8). Xxxxxx indikátorového xxxxxxx (3.10) xx xxxxxxxxxxx, xxx je xX xxxxxxxxx 2. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xx xxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx protřepává.
Jeli xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad xx xxxxxxxxx xxxx, xxxx xx opatrně xxxxxxx xx asi 60 °X, aby xx xxxxxx fáze rozpustila.
Roztok xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx filtrační xxxxx (3.9) xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
20 xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 200 xx, xxxxx xx 20 xx xxxx a xxxxxxxx xx. xX xxxxx se upraví xxxxxxxxx na 10 xxxxxx 4 M xxxxxxxxx draselného (2.9) xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10).
Xxxxx se 1 g chloridu xxxxxxxxxx (2.10) x xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (3.9) xx dělicí xxxxxxx xx 250 xx xxxxxxxxxx 75 xx xxxxxxxxxxxxx (2.3) a xxxxx xx třepe xxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx baňky na 250 ml. Etherová xxxxxx xx zlikviduje. Xx xxxxxxx indikátorového xxxxxxx (3.10) se xX xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx přibližně 2 xxxxxxxxxx 4 X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (2.8). Xxxxx se 10 xx xxxxxxxxxxxxx (2.3), xxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx; xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (3.12). Xxxxx vrstva xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xx odpaří xxxxx xx xxxxx a xxxxxx se xxxxx xxxxxxxx v 1 xx xxxxxxxxxxxxx (2.3). Xxxxxx xx převede xx vzorkovací lahvičky (3.11).
4.2 Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx vrstvě
Na xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx zóny xxxxx xxx chromatografii xx tenké xxxxxx (3.4) se xx xxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxx analyzovány, nanese xxxxxxxxxx (3.5) ve xxxxxxxx odstupech vždy xx 3 μx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (2.20) x vysuší se x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx na xxxxxx xxxxx (3.13) xxxxxxxx xx 40 °X, xxx xx xxxxxx xxxxxxx co nejmenší. Xxxxxxxxxxxxxxx (3.5) se xx xxxxxxxxx linii xxxxx nanese vždy 10 μx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (2.18) x xxxxxxx xxxxxx (4.1) přesně do xxxx, kam xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xx xxxx, xxx xxxx naneseny xxxxxxxxxx xxxxxxx/xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx uhličitanu lithného, xxxxxx xxxxxxxxx 15 μx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (2.19) (xxxxxx 2brom2‘acetonaftonu).
Chromatografická xxxxx xx zahřívá x sušárně (3.7) 45 xxxxx xxx 80 °X. Po xxxxxxxxxxx xx deska xxxxxx v xxxxxx (3.2), xxxxx xxxx (xxx xxxxxxxx filtračním xxxxxxx) 15 xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 2.21 (xxxxxx/xxxxxx), dokud xxxx rozpouštědla xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 xx (xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx 80 minut).
Deska xx vysuší v xxxxxx xxxxxxxxx vzduchu x získané skvrny xx xxxxxxxxx xxx XX světlem (3.3). Xxx xxxxxxxx fluorescence xxxxxxx skvrn může xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxx (2.22).
5. Xxxxx
Xxx xxxxxx skvrnu xx xxxxxxx xxxxxxx Rf.
Hodnoty Xx x xxxxxxx xxxxxx xxx UV xxxxxxx se porovnají x hodnotami x xxxxxxxx referenčních vzorků.
Učiní xx předběžné xxxxxx x xxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx popsaná x xxxxxx B, xxxx ukazuje-li xx, xx je xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, provede xx xxxxxxx chromatografie xxxxxxx v xxxxxx X. Získané xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx vzorků.
Výsledky TLC x XXXX xxxx XX xx zkombinují x při konečném xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx vychází x xxxxxxxxx xxxxxxxx.
X. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXX, XXXXXXXX 4XXXXXXXXXXXXXXX, XXXXXXXX SORBOVÉ X XXXXXXXX SALICYLOVÉ
1. Xxxxxxxx metody
Vzorek se xx okyselení xxxxxxxxx xxxxx ethanolu x xxxx. Po xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX).
2. Reakční xxxxxxx
2.1 Všechna reakční xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x.x. x xxxx xxx xxxxxx xxx XXXX. Xxxx xxx xxxxxxx destilovaná xxxx xxxx voda xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2.2 Xxxxxxx, absolutní
2.3 Xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx
2.4 Xxxxxxxx salicylová
2.5 Xxxxxxxx benzoová
2.6 Xxxxxxxx xxxxxxx
2.7 Octan xxxxx, (XX3XXXXx·3X2X)
2.8 Kyselina xxxxxx, x420 = 1,05 x/xx
2.9 Xxxxxxxxxxx
2.10 Xxxxxxxx xxxxxx, 2 M
2.11 Xxxxxxxx xxxxxxxx, 0,2 X xxxxx xxxxxx
2.12 Xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx
2.13 Směs xxxxxxx/xxxx
Xxxxx xxxx ethanolu (2.2) xx smíchá x xxxxxx dílem xxxx (2:1)
2.14 Roztok xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx 1 x xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx (2.12) v 500 xx xxxxx xxxxxxx/xxxx (2.13).
2.15 Xxxxxxx xxxx xxx XXXX
2.15.1 Xxxxxxxxx xxxx: do 1 xxxxx xxxx xx xxxxx 6,35 g xxxxxx xxxxxxx (2.7) x 20,0 xx xxxxxxxx xxxxxx (2.8) x xxxxxx xx.
2.15.2 Xxxxxxx fáze xx xxxxxxxx smícháním xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (2.15.1) a xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx (2.9).
2.16 Xxxxxxx xxxxxx konzervačních xxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx 50 ml xx přesně xxxxxx xxx 0,05 g xxxxxxxx 4hydroxybenzoové (2.3), 0,2 x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (2.4), 0,2 x kyseliny benzoové (2.5) a 0,05 x xxxxxxxx xxxxxxx (2.6) x xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxx (2.13). Xxxxxx xx uchovává v xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx týden.
2.17 Xxxxxxxxxx xxxxxxx konzervačních xxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxx xx 20 xx xx odměří 8,00, 4,00, 2,00, 1,00 x 0,50 ml xxxxxxxxx roztoku (2.16). Xx xxxxx baňky xx xxxxx 10,00 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (2.14) a 0,5 ml 2 X xxxxxxxx xxxxxx (2.10). Xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxx (2.13). Xxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x dále:
3.1 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xx 60 °X
3.2 Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx x XX xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a 10μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3.3 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx 12,5 xx 25 xx, vnitřní xxxxxx 4,6 xx, xxxxxx Xxxxxxxxxxx 5C18 xxxx ekvivalentní náplní.
3.4 Xxxxxxxxx xxxxx, průměr: 90 xx, Xxxxxxxxxx xxx Xxxüxx, Xxxxxxxxx Xx 5892 nebo xxxxxxxxxxxx.
3.5 Erlenmeyerovy baňky xx 50 xx
3.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx lahvičky xx 5 xx
3.7 Xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx 2–4 xx, xxxx ekvivalentní
4. Xxxxxx
4.1 Xxxxxxxx xxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx bez xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx Erlenmeyerovy xxxxx xx 50 xx (3.5) xx xxxxxx 1 g xxxxxx. Do Erlenmeyerovy xxxxx xx odpipetuje 10 xx 2 X xxxxxxxx xxxxxx (2.10) x 40 xx xxxxx ethanol/voda (2.13). Xxxxx xx xxxxxxxxx 1 x xxxxxxx kamínků (3.7), xxxxx xx xxxxxx x silně se xxxxxxx jednu xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx suspenze. Pro xxxxxxxxx extrakce xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx ethanolové xxxx xx Erlenmeyerova xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx xxxxx (3.1) xxx 60 °C.
Erlenmeyerova xxxxx xx xxxxx xxxxxxx x proudu xxxxxxx xxxx a xxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxx při 5 °X.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx přes xxxxxxxxx xxxxx (3.4). Xxx 2 xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.6). Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxx 5 °X x stanovení xxxxxx XXXX xx xxxxxxx xx 24 xxxxx.
4.1.2 Xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx vnitřního xxxxxxxxx
Xx Xxxxxxxxxxxxx baňky na 50 xx (3.5) xx x xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxx naváží 1 ± 0,1 g xxxxxx (a xxxxx). Xxxxxxx se xxxxx 1,00 xx 2 X xxxxxxxx xxxxxx (2.10) a 30,0 xx xxxxx xxxxxxx/xxxx (2.13). Přidá xx xxxxxxxxx 1 x xxxxxxx xxxxxxx (3.7) x 10 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx(2.14). Xxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx protřepává, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx extrakce xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx fáze se Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx pět minut xx xxxxx xxxxx (3.1) xxx 60 °X.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx x extrakt xx xxxxx xx hodinu xxx 5 °X.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx přes xxxxxxxxx xxxxx (3.4). Xxx 2 xx xxxxxxxx se převedou xx xxxxxxxxxx lahvičky (3.6). Extrakt xx xxxxxxxx xxx 5 °X x xxxxxxxxx xxxxxx XXXX se xxxxxxx xx 24 xxxxx.
4.2 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx: acetonitril/acetátový xxxx (2.15).
Xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx 2,0 ± 0,5 ml/min. Xxxxxx délka xxxxxxxxx xx xxxxxxx na 240 nm.
4.2.1 Kalibrace
Do xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.2) xx xxxxxxxxx xx 10 μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (2.17). Pro každý xxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx píku xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx. Pro xxxxxx xxxxxxxxxxx přísadu xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xx, že xxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxx chromatografu (3.2) xx xxxxxxxxx 10 μx xxxxxxxx vzorku (4.1.1) x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx 10 μl xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (2.17) a xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx se xxxxxxxxx. Xxxx-xx x xxxxxxxxxxxxx extraktu xxxxxx (4.1.1) xxxxx xxx x přibližně stejným xxxxxxxxx časem xxxx xxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx vnitřní standard), xxxxxxxxx se do xxxxxxxxxxxx chromatografu 10 μx xxxxxxxx xxxxxx x přidaným xxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.1.2) x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.
Xx-xx x chromatogramu xxxxxxxx xxxxxx (4.1.1) xxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx, měl xx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. (Xxxx-xx jedna z xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx standard.)
Je třeba xxxxxx, xxx chromatogramy xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxx splňují následující xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx píků xxxxxxx odděleného xxxx xx alespoň 0,90. (Xxxxxxxx separace píků xx xxxxxxx na xxxxxxx 1)
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxx xxxx
Xxxx-xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxx xxx xxxxxxx účinnější xxxxxx xxxx xx xxxx xxx složení xxxxxxx xxxx xxxxxxxx tak, xxx xxx požadavek xxxxxx.
- Xxxxxx xxxxxxxxx Xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx by xx xxx xxxxxxxxx od 0,9 xx 1,5. (Xxxxxxxx faktoru asymetrie xx xxxxxxx xx xxxxxxx 2.) Xxx xxxxxxxxxxx chromatogramu xx xxxxxx stanovení faktoru xxxxxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxx posuvu papíru xxxxxxx 2 xx/xxx.
Xxxxxxx 2: Xxxxxx asymetrie xxxx
- Základna xxxx xxx xxxxxxxx.
5. Xxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx konzervačních xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx píku xxxxxxxx 2methoxybenzoové (xxxxxxx xxxxxxxx) x dále xxxxxxxxxx xxxx. Obsah xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, kyseliny xxxxxxx xxxx xxxxxxxx salicylové xx vzorku x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xi) xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx
xx % (m/m) = (100x 20 x x) / (106 x&xxxx; x) = x / (500 x x)
xxx
x = xxxxxxxx zkušebního xxxxxx (4.1.2) (g),
b = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx (4.1.2) (μx/xx) xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx.
6. Opakovatelnost [1]
Xxx xxxxxx xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx 0,40 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx výsledků dvou xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,035 %.
Xxx xxxxxx kyseliny xxxxxxxx 0,50 % by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx výsledků dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejným vzorkem xxxxxxxxx 0,050 %.
Xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 0,50 % xx xxxxxx absolutní hodnota xxxxxxx výsledků dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejným xxxxxxx xxxxxxxxx 0,045 %.
Xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 0,60 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejným vzorkem xxxxxxxxx 0,035 %.
7. Xxxxxxxx
7.1 Výsledky xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx metody ukazují, xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx přidané xx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xx rozhodující x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxx xxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2 Xx-xx xx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
X. STANOVENÍ XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Rozsah x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x kosmetických prostředcích xx do maximální xxxxxxxxxxx 2 % (x/x).
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (% x/x) xxxxxxx.
3. Xxxxxxxx xxxxxx
Xx extrakci xxxxxxxx propionové x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx chromatografií xx použití kyseliny 2xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
4. Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx činidla musí xxx xxxxxxx x.x; xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.1 Ethanol, 96 % (V/V)
4.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
4.3 Xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx
4.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, 10 % (m/V)
4.5 Roztok xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xx odměrné xxxxx na 50 xx xx přesně xxxxxx 1 x (x xxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xx na xxxxx xxxxxxxxx (4.1).
4.6 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx 50 xx se přesně xxxxxx 1 x (x gramů) xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxx xx xx objem xxxxxxxxx (4.1).
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
5.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxx:
5.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x plamenovým xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxx (20 × 150 xx) xx šroubovacím xxxxxxxx
5.4 Vodní lázeň xxxxxxxxx na 60 °X
5.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na 10 xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (průměr xxxx 0,45 μx)
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 Příprava xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx skleněné zkumavky (5.3) xx xxxxxx xxxxxxxxx 1 x xxxxxx. Přidá xx 0,5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (4.4) x 9,5 ml ethanolu (4.1).
Xxxxxxxx xx xxxxxx x silně xxxxxxxx. Xxxx xx nezbytné, xxxxxx se xxxxxxxx xx xxx minut xx xxxxx xxxxx xxxxxxx na 60 °X (5.4), xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx fáze. Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxx tekoucí xxxxx. Xxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx přes xxxxxxxxxx xxxxx (5.5). Chromatografie xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx.
6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.3) xx x xxxxxxxxx xx 3 xxxxxxxxx místa xxxxxx 1 ± 0,1 x xxxxxx. Xxxxx xx 0,5 ml xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (4.4), 0,50 ml xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.6)x 9 xx ethanolu (4.1).
Xxxxxxxx se xxxxxx x silně protřepe. Xxxx to nezbytné, xxxxxx se xxxxxxxx xx pět minut xx xxxxx lázně xxxxxxx na 60 °X (5.4), xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxx zchladí xxx xxxxxxx vodou. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx (5.5). Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx den.
6.2 Xxxxxxxx xxx plynovou xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx
Xxx: xxxxxxxxxxxxx ocel
Délka: 2 m
Průměr: ⅛"
Xxxxx: 10 % XX™ 1000 (xxxx xxxxxxxxxxxx) + 1 % X3XX4 xx Xxxxxxxxxxx XXX 100–120 xxxx
Xxxxxxx
Xxxxxxx: 200 °X
Xxxxxx: 120 °X
Xxxxxxxx: 200 °X
Xxxxx xxxx: xxxxx
Xxxxxxxxx rychlost: 25 ml/min
6.3 Xxxxxxxxxxxxxx
6.3.1 Xxxxxxxxx
Xx xxxx odměrných xxxxx xx 20 xx se xxxxxxxxxx 0,25, 0,50, 1,00, 2,00 x 4,00 xx roztoku kyseliny xxxxxxxxxx (4.5). Xx xxxxx xxxxxxx baňky xx xxxxxxxxxx 1,00 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.6); xxxxxx xx xx xxxxx xxxxxxxxx (4.1) a xxxxxxx. Takto připravené xxxxxxx obsahují kyselinu 2xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx vnitřní xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx x xx/xx (xx xxxxxxx 1 xx/xx, xx-xx x = 1,000) x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x/4, x/2, p, 2x, 4x xx/xx (xx znamená 0,25, 0,50, 1,00, 2,00, 4,00 mg/ml, je-li x = 1,000).
Xxxxxxxxx xx 1 μl xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx propionové x xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxx x x poměru xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxx x.
Xxxxxxxxxx xx 3 xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx.
6.3.2 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx 1 μx filtrátu xxxxxx 6.1.1. Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx standardních xxxxxxx (6.3.1). Xx-xx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxx xxx xxxxxxxx 2methylpropionové, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx-xx xxxxxxxxx xxxxx rušivý xxxx, xxxxxxxxx xx 1 μx filtrátu xxxxxx 6.1.2 a změří xx xxxxxx píku xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx vnitřního standardu.
Nastříknou xx 3 xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x vypočte se xxxxxx xxxxxx ploch xxxx.
7. Xxxxxxx
7.1 X xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx 6.3.1 xx xxxxxx poměr xxxxxxxxx (K), xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx vypočtenému x xxxx 6.3.2.
7.2 X xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx propionové xx xxxxxx (x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx
x % (x/x) = X (0,5 x 100 x x) / (50 x x) =X(x / x)
xxx
X = xxxxx xxxxxxxxx x xxxx 7.1,
x = xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx bodu 4.6,
x = xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx podle xxxx 6.1.2,
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx na jedno xxxxxxxxx xxxxx.
8. Xxxxxxxxxxxxxx [2]
Xxx xxxxxx kyseliny xxxxxxxxxx 2 % (x/x) xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,12 %.
II. XXXXX X XXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX, XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX, HYDROCHINONMONOETHYLETHERU X XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX PROSTŘEDCÍCH
A. DŮKAZ
1. Xxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
X xxxxxx je xxxxxxx detekce x xxxxx hydrochinonu, hydrochinonmonomethyletheru, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx zesvětlení xxxx.
2. Podstata xxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx na tenké xxxxxx (XXX).
3. Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx činidla xxxx být xxxxxxx x.x.
3.1 Ethanol, 96 % (X/X)
3.2 Chloroform
3.3 Xxxxxxxxxxxx
3.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx, 66: 33 (V/V)
3.5 Xxxxxxx, 25 % (x/x) (d420 = 0,91 g/ml)
3.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxx
3.7 Hydrochinon
3.8 Hydrochinonmonomethylether
3.9 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.10 Hydrochinonmonobenzylether (xxxxxxxxxx)
3.11 Xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx se připravují xxxxxxx x jsou xxxxxxxx jeden xxx.
3.11.1 Xx dělené zkumavky xx 10 xx xx naváží 0,05 x xxxxxxxxxxxx (3.7). Xxxxx xx 0,250 x kyseliny askorbové (3.6) x 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx xx amoniak (3.5), xxxxx není xxxxxxxx xX 10, x doplní xx xxxxxxxxx na objem 10 ml (3.1).
3.11.2 Xx xxxxxx zkumavky xx 10 ml xx xxxxxx 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.8). Xxxxx xx 0,250 x kyseliny xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx ethanolu (3.1). Xxxxxxx xx amoniak (3.5), xxxxx není xxxxxxxx xX 10, x xxxxxx xx xxxxxxxxx na objem 10 xx (3.1).
3.11.3 Xx xxxxxx xxxxxxxx xx 10 ml xx xxxxxx 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.9). Xxxxx se 0,250 x kyseliny xxxxxxxxx (3.6) a 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx xx xxxxxxx (3.5), dokud xxxx xxxxxxxx pH 10, x doplní xx xxxxxxxxx xx xxxxx 10 ml (3.1).
3.11.4 Xx xxxxxx xxxxxxxx xx 10 xx xx naváží 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.10). Xxxxx se 0,250 x kyseliny xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx xx xxxxxxx (3.5), dokud xxxx xxxxxxxx pH 10, x xxxxxx xx xxxxxxxxx xx objem 10 xx (3.1).
3.12 Xxxxxxxx xxxxxxxx
3.13 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.14 Kyanoželezitan xxxxxxxx xxxxxxxxxx
3.15 Chlorid železitý xxxxxxxxxx
3.16 Xxxxxxxx xxxxxxx
3.16.1 Xx 5 % xxxxxxx xxxxxxx (x/X) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.12) xx xxxxxxx amoniak (3.5), dokud se xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx:
Xxx xxxxxx xxxxx xx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x měl xx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.16.2 10 % (x/X) roztok xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.13) x ethanolu (3.1).
3.16.3 Xxxxxxxx xx 1 % (x/X) xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx draselného (3.14) x 2 % (x/X) xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.15). Těsně xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx díly xxxx xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx vybavení, x xxxx:
4.1 Xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx
4.2 Xxxxxx desky xxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx: xxxxxxxxx XXX/XX254 (254 xx xxxxxx xxxxxxx XXX/XX); 20 × 20 cm (Xxxxxxx, Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx). Tloušťka vrstvy 0,25 mm.
4.3 Ultrazvuková xxxxx
4.4 Xxxxxxxxxxx
4.5 XX xxxxx, 254 nm
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxx vzorku
Do xxxxxx xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxx 3 x xxxxxx. Xxxxx se 0,250 x kyseliny xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx xxxxxxxx (3.1). xX xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx (3.5) xx 10. Xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx (3.1) xx 10 xx. Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx x homogenizuje se 10 minut x xxxxxxxxxxxx lázni. Xxxxxxxxx xx xxxx filtrační xxxxx xxxx se xxxxxxxx xxx 3000 xx./xxx.
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx vrstvě (XXX)
5.2.1 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx rozpouštědlem (3.4).
5.2.2 Xx desku xx nanese xx 2 μl xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.11) a 2 μx xxxxxxx xxxxxx (5.1). Xxxxxx xx xx tmě xxx xxxxxxx okolí, xxxxx xxxx rozpouštědla xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 xx xx xxxxxx.
5.2.3 Xxxxx xx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
5.3 Xxxxxxx
5.3.1 Xxxxx se xxxxxxxx xxx XX xxxxxx při 254 xx x xxxxxx xxxxx xx xxxxxx.
5.3.2 Xxxxx xx xxxxxxxx
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.16.1), xxxx
- xxxxxxxxx dodekamolybdofosforečnou (3.16.2); xxxxxxx xx xx xxx 120 °X, nebo
- roztokem xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx chloridu železitého (3.16.3).
6. Důkaz
Spočítá se xxxxxxx Xx xxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx vzorku se xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx, pokud xxx x xxxxxx hodnoty Xx, barvu skvrn x XX světle x xxxxx skvrn xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xx vysokoúčinná xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx (X) x xxxxxxxxx xx retenční časy xxxxxxx xxx pík (xxxx) xxxxxx s xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx roztoků.
Výsledky x XXX x HPLC xx zkombinují s xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx.
7. Xxxxxxxx
Xx uvedených xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx Rf:
hydrochinon: 0,32
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: 0,53
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: 0,55
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: 0,58
X. XXXXXXXXX
1. Xxxxxx x oblast xxxxxxx
X xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx prostředcích pro xxxxxxxxxx kůže.
2. Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx voda/methanol xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx provede xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx x XX xxxxxxx.
3. Xxxxxxx xxxxxxx
3.1 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxx x.x. Musí xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx voda xxxx voda xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3.2 Methanol
3.3 Xxxxxxxxxxx
3.4 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.5 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.6 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (monobenzon)
3.7 Tetrahydrofuran, xxxxxxx pro XXXX
3.8 Xxxx voda/methanol 1:1 (X/X). Xxxxxx xx xxxxx xxx vody x xxxxx díl xxxxxxxxx (3.2)
3.9 Xxxxxxx xxxx: xxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxx 45:55 (V/V). Smíchá xx 45 dílů xxxxxxxxxxxxxxxx (3.7) a 55 xxxx vody.
3.10 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx 50 xx xx xxxxxx 0,06 g xxxxxxxxxxxx (3.3), 0,08 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.4), 0,10 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.5) x 0,12 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.6). Rozpustí xx x xxxxxx xx xx objem xxxxxxxxxx (3.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx 10 xx xxxxxx xxxxxxx xx 50 xx xxxxx xxxx/xxxxxxxx (3.8). Xxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx.
4. Přístroje x xxxxxxx
Xxxxx laboratorní vybavení x xxxx:
4.1 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx 60 °X
4.2 Xxxxxxxxxxxx xxx vysokoúčinnou xxxxxxxxxxx chromatografii x XX detektorem x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x 10μx nastřikovací xxxxxxx
4.3 Xxxxxxxxxx kolona:
Chromatografická xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx 250 xx, xxxxxxx průměr 4,6 xx, xxxxxx Xxxxxx fenylem (xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx Xxxxxxx XXX, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxx 6 μx, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Nepoužívá xx xxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx kolony x ekvivalentní xxxxxx.
4.4 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx 90 xx, Schleicher xxx Schüll, Xxxxxxxxx Xx 5892 xxxx xxxxxxxxxxxx
5. Postup
5.1 Příprava xxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx 50 xx xx s xxxxxxxxx xx tři xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx 1 ± 0,1 x (x gramů) xxxxxx. Xxxxxx xx rozptýlí xx 25 xx xxxxx xxxx/xxxxxxxx (3.8). Xxxxx xx xxxxxx x silně xxxxxxxx, xxxxx xx nevytvoří xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx alespoň xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxx xx 60 °X, xxx se usnadnila xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx x doplní xx na objem xxxxx xxxx/xxxxxxxx (3.8). Xxxxxxx xx zfiltruje xxxx filtrační xxxxx (4.4). Xxxxx HPLC xx provede xx 24 xxxxx xx xxxxxxxx extraktu.
5.2 Vysokoúčinná xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
5.2.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx mobilní xxxx (3.9) xx upraví xx 1,0 xx/xxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx 295 xx.
5.2.2 Xxxxxxxxx xx 10 μx roztoku vzorku xxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.1 x zaznamená xx xxxxxxxxxxxx. Změří xx xxxxxx xxxx. Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx bodu 5.2.3. Xxxxxxxxx xx chromatogramy xxxxxxx xxx vzorek x referenční xxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx se použijí xxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx (XX) xxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.2.3.
5.2.3 Kalibrace
Nastříkne se 10 μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) x xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx není xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx XXx (x je xxxxxx xxxxxxx XX):
XXx = pi /xx
xxx
xx = plocha píku xxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx hydrochinonmonobenzylether, x
xx = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, hydrochinonmonoethyletheru xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx roztoku (3.10) (x/50 xx).
Xx xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx píků xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx 0,90. (Xxxxxxxx separace píků xx xxxxxxx xx xxxxxxx 1.).
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxx xxxx
Xxxx-xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx být xxx xxxxxxx xxxxxxxxx kolona xxxx by xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx upraveno tak, xxx byl xxxxxxxxx xxxxxx.
- Xxxxxx asymetrie Xx všech xxxxxxxxx xxxx xx xx xxx xxxxxxxxx od 0,9 xx 1,5. (Xxxxxxxx xxxxxxx asymetrie xx uvedena na xxxxxxx 2.) Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx faktoru xxxxxxxxx xx doporučená xxxxxxxx xxxxxx papíru xxxxxxx 2 cm/min.
Obrázek 2:Xxxxxx asymetrie xxxx
- Xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx.
6. Xxxxxxx
Xxx výpočet xxxxxxxxxxx xxxxxxx (koncentrací xxxxxxx) xx vzorku xx použijí xxxxxx xxxx xxxxxxx. Koncentrace xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xi) se xxxxxxx xxxxxx vzorce
xi % (x/x) = (xx x 100) / (XXx x x)
xxx
x = xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx,
xx = plocha xxxx xxxxxxx x xx xxxxxx.
7. Xxxxxxxxxxxxxx [3]
7.1 Xxx xxxxxx hydrochinonu 2,0 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx vzorkem xxxxxxxxx 0,13 %.
7.2 Xxx obsahu xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1,0 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,1 %.
7.3 Xxx xxxxxx hydrochinonmonoethyletheru 1,0 % by xxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,11 %.
7.4 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1,0 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,11 %.
8. Xxxxxxxxxxxxxxxxxx [4]
8.1 Xxx xxxxxx hydrochinonu 2 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx rozdílu xxxxxxxx xxxx stanovení xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, různé xxxxxxxxx nebo různá xxxx) překročit 0,37 %.
8.2 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, různí xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx přístroje xxxx xxxxx xxxx) xxxxxxxxx 0,21 %.
8.3 Xxx xxxxxx hydrochinonmonoethyletheru 1 % by xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx provedených xx xxxxxxx vzorkem za xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx přístroje nebo xxxxx xxxx) xxxxxxxxx 0,19 %.
8.4 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % xx neměla xxxxxxxxx xxxxxxx rozdílu xxxxxxxx xxxx stanovení xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (různé xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx) xxxxxxxxx 0,11 %.
9. Poznámky
9.1 Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx výrazně vyšší xxx 2 % x je xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx obsahu, xxx xx xxx xxxxxxx xxxxxx (5.1) xxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx 2 % hydrochinonu, x xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx.
(X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx ležet hodnota xxxxxxxxxx mimo xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.)
9.2 Rušivé xxxxx
Xxxx xxxxxxx metoda xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxx x jednom xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx fenylové xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, kterou xxxxx zajistit při xxxxxxx kolony C18 x uvedenou xxxxxxx xxxx.
X xxxx xxxxxx xxxx snadno xxxxxxx x xxxxxxxx vlivu xxxx xxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx případě xx stanovení xxxx xxx zopakováno s xxxxx xxxxxxxx mobilní xxxx/xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx x xxxxxxxxxx v xxxxxxxx 2 x 3:
Xxxxxx: Zorbax XXX, 4,6 xx × 25 mm nebo xxxxxxxxxxxx:
xxxxxxx: 36 °X
xxxxxx: 1,5 xx/xxx
xxxxxxx xxxx:
xxx xxxxxxxxxxx: xxxxxxxx/xxxx 5/95 (X/X)
xxx hydrochinonmonomethylether: xxxxxxxx/xxxx 30/70 (V/V)
pro xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxx/xxxx 80/20 (V/V) [5].
Xxxxxx: Spherisorb X5XXX xxxx xxxxxxxxxxxx:
xxxxxxx xxxx: xxxx/xxxxxxxx 90/10 (X/X)
xxxxxx: 1,5 xx/xxx
Xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxx [6].
[1] XXX 5725.
[2] XXX 5725.
[3] XXX 5725.
[4] XXX 5725.
[5] Xxxxxx-Xxxxxxxxx, X., Xxxxx X.-X., Identification xx xxxxxx xx x’xxxxxxxxxxxx xx xx xxx xxxxxx méthylique xx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx la xxxx. Xxx. X. Xxxxxx. Sci., 8-203-214 (1986).
[6] Xxxxx, X., Xxx I., Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx creams, Xxxxxxx, (1986), 111, x. 129.