Xxxxx xxxxxxxx Komise 95/32/XX
xx dne 7. xxxxxxxx 1995
o xxxxxxxx xxxxxxx nezbytných pro xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
(Xxxx x xxxxxxxx xxx XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x ohledem xx směrnici Rady 76/768/XXX xx dne 27. července 1976 x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx členských xxxxx xxxxxxxxxx xx kosmetických xxxxxxxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx směrnicí Xxxxxx 94/32/XX [2], a xxxxxxx xx xx. 8 xxxx. 1 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx k xxxx, xx se xx xxxxxxxx 76/768/XXX xxxxxxx úřední xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx dodržení xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx předpisy Xxxxxxxxxxxx, které xx xxxxxx složení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx by xxxxxxx xxxxxxxx metody xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx; xx xxxxxxx xxxxxx již xxxx přijaty xx xxxxxxxx Xxxxxx 80/1335/XXX [3] xx xxxxx xxxxxxxx 87/143/EHS [4], xxxxxxxx 82/434/XXX [5] xx xxxxx xxxxxxxx 90/207/XXX [6] x xx xxxxxxxxxx 83/514/XXX [7], 85/490/XXX [8] x 93/73/EHS [9];
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, kyseliny xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx propionové x xxxxxxxxxxxx prostředcích x xxxxx x stanovení xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x hydrochinonmonobenzyletheru x xxxxxxxxxxxx prostředcích jsou xxxxxx krokem;
vzhledem x xxxx, xx opatření xxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx se xxxxxxxxxxx Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx 76/768/XXX xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
XXXXXXX TUTO XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Členské státy xxxxx všechny xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxx úředním xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx:
- důkaz x stanovení xxxxxxxx xxxxxxxx, kyseliny 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- důkaz x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, hydrochinonmonomethyletheru, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx popsanými x příloze.
Xxxxxx 2
1. Členské xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx nezbytné xxx dosažení souladu x touto xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 30. xxxx 1996. Xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx Xxxxxx.
Xxxx opatření xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx odkaz na xxxx směrnici nebo xxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxx při xxxxxx xxxxxxx vyhlášení. Xxxxxx xxxxxx si xxxxxxx xxxxxxx státy.
2. Xxxxxxx státy sdělí Xxxxxx xxxxx vnitrostátních xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x oblasti xxxxxxxxxx této směrnice.
Xxxxxx 3
Xxxx směrnice xxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx po xxxxxxxxx v Xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 4
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X Xxxxxxx xxx 7. července 1995.
Xx Xxxxxx
Xxxx Xxxxxx
xxxxxx Xxxxxx
[1] Úř. xxxx. X 262, 27.9.1976, x. 169.
[2] Úř. věst. X 181, 15.7.1994, x. 31.
[3] Xx. xxxx. X 383, 31.12.1980, x. 27.
[4] Xx. xxxx. X 57, 27.2.1987, x. 56.
[5] Xx. xxxx. X 185, 30.6.1982, x. 1.
[6] Úř. xxxx. X 108, 28.4.1990, x. 92.
[7] Xx. xxxx. X 291, 24.10.1983, x. 9.
[8] Xx. věst. X 295, 7.11.1985, x. 30.
[9] Xx. xxxx. X 231, 14.9.1993, x. 34.
XXXXXXX
X. XXXXX X XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXX, XXXXXXXX 4XXXXXXXXXXXXXXX, KYSELINY XXXXXXX, XXXXXXXX XXXXXXXXXX X XXXXXXXX PROPIONOVÉ X XXXXXXXXXXXX PROSTŘEDCÍCH
1. Xxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxxx xx použitelná xxx důkaz x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, kyseliny xxxxxxx, kyseliny xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx důkazu xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx kyseliny 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x kyseliny xxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxx kyseliny xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx salicylové, kyseliny xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx procentech xxxxxxx kyselin.
A. DŮKAZ
1. Xxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxx konzervačních xxxxxx xx extrakt analyzuje xxxxxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx (TLC) a xxxxxxx chromatografií ("derivatizace xx desce"). X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxx potvrdí xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) nebo, x xxxxxxx xxxxxxxx propionové, xxxxxxxx chromatografií (XX).
2. Xxxxxxx činidla
2.1 Xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx čistoty p.a. Xxxx xxx použita xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2.2 Xxxxxx
2.3 Xxxxxxxxxxxx
2.4 Xxxxxxxxxxx
2.5 Xxxxxx
2.6 xXxxxx
2.7 Xxxxxxx, xxxxxx
2.8 Kyselina xxxxxxxxxxxxxx, 4 X
2.9 Xxxxxxxx draselný, 4 X xxxxx roztok
2.10 Xxxxxxx xxxxxxxx, CaCl2·2H2O
2.11 Xxxxxxxxx xxxxxx, Li2CO3
2.12 2Xxxx2‘xxxxxxxxxxx
2.13 Xxxxxxxx 4hydroxybenzoová
2.14 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
2.15 Xxxxxxxx xxxxxxxx
2.16 Xxxxxxxx xxxxxxx
2.17 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
2.18 Xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xx 0,1 % (x/X) xxxxxxx (100 xx/100 xx) xxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxxx přísad (2.13 xx 2.17) v xxxxxxxxxxxxx.
2.19 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
0,5 % roztok 2xxxx2‘xxxxxxxxxxxx (2.12) x xxxxxxxxxxxx (2.4) (50 xx/10 xx). Tento xxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxx každý xxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxx.
2.20 Xxxxxx katalyzátoru
0,3 % (x/X) xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (2.11) xx xxxx (300 xx/100 ml). Xxxxx xxxxxx xx měl xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2.21 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxx (2.5)/aceton (2.2) (20: 0,5, X/X)
2.22 Xxxxxx parafin (2.7)/xxxxxx (2.6) (1:2, X/X)
3. Xxxxxxxxx a xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
3.1 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx 60 °X
3.2 Vyvíjecí xxxxxx
3.3 Xxxxx ultrafialového xxxxxx 254 x 366 xx
3.4 Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, Silikagel 60, bez xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, 20 × 20 xx, xxxxxxxx xxxxxx 0,25 xx x koncentrační zónou 2,5 × 20 xx (Xxxx 11845 xxxx ekvivalentní)
3.5 Mikrostříkačka xx 10 μx
3.6 Xxxxxxxxxxxxxx xx 25 μx
3.7 Xxxxxxx nastavitelná xx xxxxxxx xx 105 °X
3.8 Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 50 x 200 ml xx xxxxxxxxxxx zátkou
3.9 Xxxxxxxxx papír, průměr 90 mm, Schleicher &xxx; Schüll, Xxxxxxxxx Xx. 5892, xxxx xxxxxxxxxxxx
3.10 Univerzální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xX 1 – 11
3.11 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 5 xx
3.12 Rotační xxxxxxx xxxxxxx (Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx)
3.13 Xxxxx xxxxx
4. Postup
4.1 Příprava xxxxxx
Xx Erlenmeyerovy baňky xx 50 xx xx xxxxxxxxxxx zátkou (3.8) xx xxxxxx xxxxxxxxx 1 x xxxxxx. Xxxxxxx se xxxxx xxxxx 4 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (2.8) a 40 xx acetonu (2.2). X xxxxx zásaditých xxxxxxx, xxxx je xxxxxxxx xxxxx, xx xxxx xxx přidáno 20 kapek 4 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (2.8). Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) xx xxxxxxxxxxx, zda xx xX xxxxxxxxx 2. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xx xxxx xxxxx minuty xx silně protřepává.
Jeli xxxxxxxx xxxxxxxx extrakci xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx fáze, směs xx xxxxxxx zahřeje xx xxx 60 °X, aby xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxxxx na xxxxxxxxx teplotu x xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (3.9) xx Xxxxxxxxxxxxx baňky.
20 ml xxxxxxxx se převede xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 200 xx, xxxxx xx 20 xx xxxx x xxxxxxxx se. pH xxxxx se upraví xxxxxxxxx na 10 xxxxxx 4 X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (2.9) xx xxxxxxx indikátorového xxxxxxx (3.10).
Xxxxx xx 1 g xxxxxxxx xxxxxxxxxx (2.10) x xxxxx se xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (3.9) xx xxxxxx xxxxxxx xx 250 xx xxxxxxxxxx 75 ml xxxxxxxxxxxxx (2.3) a xxxxx xx třepe xxxxx xxxxxx. Vrstvy xx xxxxxxx oddělit x vodná vrstva xx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx baňky xx 250 ml. Xxxxxxxx xxxxxx xx zlikviduje. Xx použití xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) xx xX xxxxxxx roztoku xxxxxx na xxxxxxxxx 2 xxxxxxxxxx 4 X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (2.8). Xxxxx xx 10 xx diethyletheru (2.3), xxxxx se xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx minutu; xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx odparky (3.12). Vodná xxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx vrstva xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx x xxxxxx xx znovu xxxxxxxx x 1 xx xxxxxxxxxxxxx (2.3). Xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.11).
4.2 Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx pro chromatografii xx tenké vrstvě (3.4) xx xx xxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx (3.5) ve xxxxxxxx odstupech xxxx xx 3 μx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (2.20) x vysuší xx x xxxxxx studeného xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx na xxxxxx xxxxx (3.13) zahřátou xx 40 °X, xxx xx xxxxxx xxxxxxx co xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx (3.5) se xx startovní xxxxx xxxxx nanese xxxx 10 μl xxxxxxx xxxxxxxxxxxx vzorku (2.18) x xxxxxxx vzorku (4.1) xxxxxx do xxxx, kam xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xx xxxx, xxx xxxx naneseny xxxxxxxxxx xxxxxxx/xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx lithného, xxxxxx xxxxxxxxx 15 μx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (2.19) (xxxxxx 2xxxx2‘xxxxxxxxxxxx).
Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx x sušárně (3.7) 45 minut xxx 80 °X. Xx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x komoře (3.2), xxxxx byla (xxx vyložení xxxxxxxxxx xxxxxxx) 15 xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 2.21 (toluen/aceton), xxxxx xxxx rozpouštědla xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 xx (xxxx vyvíjení xx xxxxxxxxx 80 xxxxx).
Xxxxx xx vysuší x xxxxxx studeného vzduchu x získané skvrny xx xxxxxxxxx pod XX světlem (3.3). Xxx zesílení fluorescence xxxxxxx skvrn může xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxx (2.22).
5. Xxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx hodnota Xx.
Xxxxxxx Xx x chování xxxxxx xxx XX xxxxxxx xx xxxxxxxxx x hodnotami x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx vzorků.
Učiní xx xxxxxxxxx xxxxxx x přítomnosti a xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx vysokoúčinná xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx popsaná x xxxxxx X, xxxx ukazuje-li se, xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, provede xx plynová xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxx X. Získané retenční xxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx XXX x HPLC xxxx XX xx zkombinují x xxx konečném xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx z xxxxxxxxx výsledků.
B. STANOVENÍ XXXXXXXX BENZOOVÉ, XXXXXXXX 4XXXXXXXXXXXXXXX, XXXXXXXX XXXXXXX X XXXXXXXX SALICYLOVÉ
1. Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xx xx okyselení xxxxxxxxx xxxxx ethanolu x xxxx. Po filtraci xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (HPLC).
2. Xxxxxxx xxxxxxx
2.1 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx musí xxx xxxxxxx p.a. x xxxx být vhodná xxx XXXX. Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx čistoty.
2.2 Xxxxxxx, absolutní
2.3 Kyselina 4xxxxxxxxxxxxxxx
2.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
2.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx
2.6 Xxxxxxxx xxxxxxx
2.7 Xxxxx sodný, (XX3XXXXx·3X2X)
2.8 Xxxxxxxx octová, x420 = 1,05 x/xx
2.9 Xxxxxxxxxxx
2.10 Kyselina xxxxxx, 2 X
2.11 Xxxxxxxx xxxxxxxx, 0,2 X vodný roztok
2.12 Xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx
2.13 Xxxx xxxxxxx/xxxx
Xxxxx dílů xxxxxxxx (2.2) se xxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxx (2:1)
2.14 Xxxxxx xxxxxxxxx standardu
Připraví xx xxxxxx xxxxxxxxxx 1 x xxxxxxxx 2methoxybenzoové (2.12) x 500 xx xxxxx ethanol/voda (2.13).
2.15 Xxxxxxx xxxx xxx XXXX
2.15.1 Xxxxxxxxx xxxx: xx 1 xxxxx xxxx se xxxxx 6,35 g xxxxxx sodného (2.7) x 20,0 xx xxxxxxxx xxxxxx (2.8) x xxxxxx xx.
2.15.2 Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx devíti xxxx xxxxxxxxxxx pufru (2.15.1) a xxxxxxx xxxx acetonitrilu (2.9).
2.16 Xxxxxxx roztok xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xx odměrné xxxxx xx 50 xx xx xxxxxx xxxxxx xxx 0,05 x xxxxxxxx 4hydroxybenzoové (2.3), 0,2 x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (2.4), 0,2 x xxxxxxxx benzoové (2.5) x 0,05 x kyseliny xxxxxxx (2.6) x xxxxx xx xxxxxx směsí xxxxxxx/xxxx (2.13). Xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Roztok xx xxxxxxxx jeden xxxxx.
2.17 Xxxxxxxxxx xxxxxxx konzervačních xxxxxx
Xx xxxxxxxxx baněk xx 20 ml xx xxxxxx 8,00, 4,00, 2,00, 1,00 x 0,50 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (2.16). Xx každé xxxxx xx xxxxx 10,00 xx xxxxxxx vnitřního xxxxxxxxx (2.14) x 0,5 ml 2 X xxxxxxxx sírové (2.10). Xxxxx se xxxxxx směsí xxxxxxx/xxxx (2.13). Xxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Přístroje x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx:
3.1 Vodní xxxxx, xxxxxxxxx xx 60 °C
3.2 Xxxxxxxxxxxx xxx vysokoúčinnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx s XX xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx délkou x 10μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3.3 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx 12,5 xx 25 xx, vnitřní xxxxxx 4,6 xx, xxxxxx Xxxxxxxxxxx 5X18 xxxx ekvivalentní xxxxxx.
3.4 Xxxxxxxxx xxxxx, průměr: 90 xx, Xxxxxxxxxx xxx Xxxüxx, Xxxxxxxxx Xx 5892 xxxx xxxxxxxxxxxx.
3.5 Xxxxxxxxxxxxx baňky xx 50 xx
3.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 5 xx
3.7 Xxxxx kamínky, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx 2–4 xx, xxxx xxxxxxxxxxxx
4. Xxxxxx
4.1 Xxxxxxxx xxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx bez xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx na 50 xx (3.5) xx xxxxxx 1 x xxxxxx. Xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx 10 xx 2 X xxxxxxxx xxxxxx (2.10) x 40 xx směsi ethanol/voda (2.13). Xxxxx xx xxxxxxxxx 1 g xxxxxxx kamínků (3.7), xxxxx xx xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx jednu minutu xxxxxxxxxx, dokud xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx extrakce konzervačních xxxxxx do xxxxxxxxxx xxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx xxxxx (3.1) xxx 60 °X.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxx se ihned xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx a xxxxxxx xx na xxxxxx uloží při 5 °C.
Extrakt xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (3.4). Xxx 2 xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx lahvičky (3.6). Xxxxxxx se uchovává xxx 5 °X x stanovení pomocí XXXX xx xxxxxxx xx 24 xxxxx.
4.1.2 Xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx vnitřního xxxxxxxxx
Xx Xxxxxxxxxxxxx baňky na 50 ml (3.5) xx x přesností xx xxx desetinná xxxxx xxxxxx 1 ± 0,1 x xxxxxx (x xxxxx). Xxxxxxx xx xxxxx 1,00 xx 2 X xxxxxxxx xxxxxx (2.10) a 30,0 xx xxxxx ethanol/voda (2.13). Přidá xx xxxxxxxxx 1 x xxxxxxx kamínků (3.7) x 10 xx xxxxxxx vnitřního standardu(2.14). Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx jednu xxxxxx xxxxxxxxxx, dokud xxxxxxxxx xxxxxxxxx suspenze. Xxx xxxxxxxxx extrakce xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx fáze xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx zahřívá xxxxxx xxx minut xx vodní lázni (3.1) xxx 60 °X.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxxx v xxxxxx studené xxxx x xxxxxxx se xxxxx xx xxxxxx xxx 5 °X.
Xxxxxxx xx zfiltruje xxxx xxxxxxxxx xxxxx (3.4). Xxx 2 xx xxxxxxxx xx převedou xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.6). Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxx 5 °X x stanovení xxxxxx HPLC se xxxxxxx xx 24 xxxxx.
4.2 Vysokoúčinná kapalinová xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxx (2.15).
Průtok mobilní xxxx xxxxxxx se xxxxxxx xx 2,0 ± 0,5 xx/xxx. Xxxxxx xxxxx detektoru xx xxxxxxx na 240 nm.
4.2.1 Kalibrace
Do xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.2) xx xxxxxxxxx xx 10 μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (2.17). Xxx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxxxx chromatogramů xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x výšce xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx získaného x chromatogramů. Pro xxxxxx xxxxxxxxxxx přísadu xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx poměru xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xx, xx xxx xxxxxxxxx byla xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxx chromatografu (3.2) xx xxxxxxxxx 10 μx extraktu vzorku (4.1.1) x zaznamená xx chromatogram. Xxxxxxxxx xx 10 μl xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxxx xxxxxxx (2.17) x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx chromatogramy se xxxxxxxxx. Xxxx-xx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx vzorku (4.1.1) xxxxx pík x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx kyseliny 2methoxybenzoové (xxxxxxxxxx xxxxxxx standard), xxxxxxxxx se do xxxxxxxxxxxx chromatografu 10 μx xxxxxxxx vzorku x přidaným xxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.1.2) x xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx.
Xx-xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.1.1) rušivý xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx časem jako xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx, xxx xx být xxxxxx xxxx xxxxxxx standard. (Xxxx-xx jedna z xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx konzervační xxxxxxx xxxxxx jako xxxxxxx xxxxxxxx.)
Xx xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx splňují následující xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx píků xxxxxxx odděleného páru xx alespoň 0,90. (Xxxxxxxx separace xxxx xx xxxxxxx na xxxxxxx 1)
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxx xxxx
Xxxx-xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, měla xx být xxx xxxxxxx xxxxxxxxx kolona xxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx tak, xxx byl xxxxxxxxx xxxxxx.
- Xxxxxx asymetrie Xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xx xx xxx xxxxxxxxx od 0,9 do 1,5. (Xxxxxxxx faktoru xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx 2.) Při xxxxxxxxxxx chromatogramu xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx doporučená xxxxxxxx xxxxxx papíru xxxxxxx 2 xx/xxx.
Xxxxxxx 2: Faktor asymetrie xxxx
- Základna musí xxx stabilní.
5. Xxxxxxx
Xxx xxxxxxx koncentrace konzervačních xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx píků xxxxxxxxxxxxx konzervačních xxxxxx x výšky píku xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx) a xxxx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxx benzoové, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx sorbové xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xx) xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx
xx % (x/x) = (100x 20 x x) / (106 x&xxxx; x) = x / (500 x x)
xxx
x = xxxxxxxx zkušebního xxxxxx (4.1.2) (g),
b = koncentrace xxxxxxxxxxx xxxxxxx v extraktu xxxxxx (4.1.2) (μx/xx) xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx.
6. Xxxxxxxxxxxxxx [1]
Při xxxxxx xxxxxxxx 4hydroxybenzoové 0,40 % xx xxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx výsledků dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx vzorkem xxxxxxxxx 0,035 %.
Xxx xxxxxx xxxxxxxx benzoové 0,50 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,050 %.
Xxx xxxxxx xxxxxxxx salicylové 0,50 % by xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,045 %.
Při xxxxxx kyseliny xxxxxxx 0,60 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,035 %.
7. Xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxx testování xxxxxxxxxxx metody xxxxxxx, xx množství xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx kyselin xx xxxxxx je xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxx xxx x xxxxxxxxxxx rozmezí.
7.2 Xx-xx xx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
X. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxxxx x xxxxxx použití
Tato xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx propionové x kosmetických xxxxxxxxxxxx xx xx maximální xxxxxxxxxxx 2 % (x/x).
2. Definice
Koncentrace xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx touto xxxxxxx se vyjádří x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (% x/x) výrobku.
3. Xxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx z xxxxxxx xx stanovení xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx použití kyseliny 2xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx vnitřního xxxxxxxxx.
4. Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx činidla musí xxx čistoty x.x; xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx nebo xxxx xxxxxxx ekvivalentní xxxxxxx.
4.1 Ethanol, 96 % (X/X)
4.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
4.3 Xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx
4.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, 10 % (x/X)
4.5 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx na 50 xx xx xxxxxx xxxxxx 1 g (x gramů) xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxx xx xx xxxxx xxxxxxxxx (4.1).
4.6 Roztok xxxxxxxxx standardu
Do xxxxxxx xxxxx na 50 xx se xxxxxx xxxxxx 1 g (x xxxxx) xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxx xx xx xxxxx xxxxxxxxx (4.1).
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
5.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx:
5.2 Xxxxxxx chromatograf x plamenovým xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
5.3 Skleněná xxxxxxxx (20 × 150 xx) xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
5.4 Vodní xxxxx xxxxxxxxx xx 60 °X
5.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx 10 xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx pórů 0,45 μx)
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxx zkumavky (5.3) xx naváží xxxxxxxxx 1 x xxxxxx. Přidá xx 0,5 xx kyseliny xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (4.4) x 9,5 xx xxxxxxxx (4.1).
Xxxxxxxx xx uzavře x xxxxx xxxxxxxx. Xxxx xx nezbytné, xxxxxx xx zkumavka xx xxx xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xx 60 °X (5.4), xxx xx xxxxx rozpustila xxxxxx fáze. Xxxxxxxx xx rychle zchladí xxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx přes membránový xxxxx (5.5). Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx den.
6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.3) se s xxxxxxxxx na 3 xxxxxxxxx xxxxx naváží 1 ± 0,1 x xxxxxx. Přidá xx 0,5 xx xxxxxxxx trihydrogenfosforečné (4.4), 0,50 ml roztoku xxxxxxxxx standardu (4.6)x 9 xx ethanolu (4.1).
Xxxxxxxx xx uzavře x silně xxxxxxxx. Xxxx xx nezbytné, xxxxxx se xxxxxxxx xx pět xxxxx xx vodní xxxxx xxxxxxx na 60 °X (5.4), xxx xx xxxxx rozpustila xxxxxx fáze. Zkumavka xx rychle xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx roztoku xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx (5.5). Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx.
6.2 Xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx
Xxx: xxxxxxxxxxxxx xxxx
Xxxxx: 2 x
Xxxxxx: ⅛"
Náplň: 10 % XX™ 1000 (xxxx xxxxxxxxxxxx) + 1 % X3XX4 xx Chromosorbu XXX 100–120 xxxx
Xxxxxxx
Xxxxxxx: 200 °X
Xxxxxx: 120 °X
Xxxxxxxx: 200 °X
Xxxxx xxxx: xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx: 25 xx/xxx
6.3 Xxxxxxxxxxxxxx
6.3.1 Xxxxxxxxx
Xx xxxx xxxxxxxxx xxxxx na 20 xx xx xxxxxxxxxx 0,25, 0,50, 1,00, 2,00 x 4,00 xx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.5). Do xxxxx xxxxxxx baňky xx odpipetuje 1,00 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.6); xxxxxx xx xx objem xxxxxxxxx (4.1) a xxxxxxx. Xxxxx připravené xxxxxxx xxxxxxxx kyselinu 2xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx vnitřní xxxxxxxx v koncentraci x xx/xx (xx xxxxxxx 1 xx/xx, xx-xx x = 1,000) x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v koncentraci x/4, p/2, x, 2x, 4x mg/ml (xx xxxxxxx 0,25, 0,50, 1,00, 2,00, 4,00 xx/xx, xx-xx x = 1,000).
Xxxxxxxxx xx 1 μl xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx vynesením poměru xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x kyseliny 2xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxx x x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxx y.
Nastříknou se 3 xxxxx x xxxxxxx roztoku a xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx.
6.3.2 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx 1 μx filtrátu xxxxxx 6.1.1. Chromatogram se xxxxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (6.3.1). Má-li xxx přibližně xxxxxx xxxxxxxx xxx jako xxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx-xx pozorován xxxxx rušivý vliv, xxxxxxxxx se 1 μx filtrátu xxxxxx 6.1.2 x změří xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx propionové a xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx 3 xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx poměrů xxxxx xxxx.
7. Xxxxxxx
7.1 X xxxxxxxxxx xxxxxx sestrojené xxxxx bodu 6.3.1 xx odečte poměr xxxxxxxxx (K), xxxxx xxxxxxxx poměru ploch xxxx xxxxxxxxxxx v xxxx 6.3.2.
7.2 X xxxxx xxxxxxxxx poměru xxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx (x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx
x % (x/x) = X (0,5 x 100 x x) / (50 x x) =X(x / a)
kde
K = xxxxx vypočtený x xxxx 7.1,
x = hmotnost xxxxxxxxx xxxxxxxxx x gramech xxxxx bodu 4.6,
x = hmotnost xxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx 6.1.2,
Výsledky xx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
8. Opakovatelnost [2]
Xxx obsahu xxxxxxxx xxxxxxxxxx 2 % (x/x) xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx xxxxxxx vzorkem xxxxxxxxx 0,12 %.
XX. XXXXX X XXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX, HYDROCHINONMONOMETHYLETHERU, XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX V XXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX
X. DŮKAZ
1. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
X xxxxxx xx xxxxxxx detekce x xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx a hydrochinonmonobenzyletheru (xxxxxxxxxxx) v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx.
2. Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxx x jeho xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx na tenké xxxxxx (XXX).
3. Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxx x.x.
3.1 Xxxxxxx, 96 % (X/X)
3.2 Xxxxxxxxxx
3.3 Xxxxxxxxxxxx
3.4 Xxxxxxxx rozpouštědlo:
Chloroform/diethylether, 66: 33 (V/V)
3.5 Xxxxxxx, 25 % (x/x) (x420 = 0,91 g/ml)
3.6 Kyselina xxxxxxxxx
3.7 Xxxxxxxxxxx
3.8 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.9 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.10 Hydrochinonmonobenzylether (monobenzon)
3.11 Xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx x jsou xxxxxxxx jeden den.
3.11.1 Xx dělené zkumavky xx 10 xx xx xxxxxx 0,05 x xxxxxxxxxxxx (3.7). Xxxxx se 0,250 x xxxxxxxx xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx xx amoniak (3.5), xxxxx není xxxxxxxx xX 10, x xxxxxx xx xxxxxxxxx na xxxxx 10 xx (3.1).
3.11.2 Xx xxxxxx zkumavky xx 10 xx xx xxxxxx 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.8). Xxxxx xx 0,250 x xxxxxxxx askorbové (3.6) x 5 xx ethanolu (3.1). Xxxxxxx xx xxxxxxx (3.5), xxxxx není xxxxxxxx xX 10, x xxxxxx xx xxxxxxxxx na xxxxx 10 ml (3.1).
3.11.3 Xx xxxxxx xxxxxxxx xx 10 xx xx naváží 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.9). Xxxxx xx 0,250 x kyseliny xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx ethanolu (3.1). Xxxxxxx se amoniak (3.5), xxxxx xxxx xxxxxxxx xX 10, x doplní se xxxxxxxxx xx objem 10 ml (3.1).
3.11.4 Xx xxxxxx xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxx 0,05 x hydrochinonmonobenzyletheru (3.10). Xxxxx xx 0,250 x xxxxxxxx xxxxxxxxx (3.6) a 5 xx ethanolu (3.1). Xxxxxxx xx xxxxxxx (3.5), xxxxx xxxx xxxxxxxx pH 10, x xxxxxx xx xxxxxxxxx xx objem 10 xx (3.1).
3.12 Xxxxxxxx xxxxxxxx
3.13 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.14 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
3.15 Chlorid xxxxxxxx xxxxxxxxxx
3.16 Detekční činidla
3.16.1 Xx 5 % xxxxxxx xxxxxxx (x/X) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.12) xx xxxxxxx amoniak (3.5), xxxxx xx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxx nerozpustí.
Upozornění:
Při xxxxxx xxxxx xx v xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxx xx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.16.2 10 % (x/X) roztok xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.13) x xxxxxxxx (3.1).
3.16.3 Xxxxxxxx se 1 % (x/X) xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.14) x 2 % (x/X) xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.15). Xxxxx xxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx:
4.1 Xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx vrstvě
4.2 Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xx tenké xxxxxx: xxxxxxxxx XXX/XX254 (254 je xxxxxx xxxxxxx XXX/XX); 20 × 20 xx (Xxxxxxx, Nagel xxxx xxxxxxxxxxxx). Xxxxxxxx xxxxxx 0,25 xx.
4.3 Ultrazvuková xxxxx
4.4 Xxxxxxxxxxx
4.5 XX xxxxx, 254 nm
5. Xxxxxx
5.1 Příprava xxxxxx
Xx xxxxxx zkumavky xx 10 ml xx xxxxxx 3 x xxxxxx. Přidá se 0,250 x kyseliny xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx xxxxxxxx (3.1). pH roztoku xx upraví xxxxxxxxx (3.5) xx 10. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx (3.1) na 10 ml. Xxxxxxxx xx xxxxxx zátkou x homogenizuje xx 10 xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx. Zfiltruje xx přes xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxx 3000 xx./xxx.
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx (TLC)
5.2.1 Xxxxxxxxxxxxxxxx komora xx xxxxxx vyvíjecím rozpouštědlem (3.4).
5.2.2 Na desku xx xxxxxx po 2 μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.11) a 2 μl xxxxxxx xxxxxx (5.1). Vyvíjí xx xx tmě xxx xxxxxxx okolí, xxxxx čelo rozpouštědla xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 xx xx xxxxxx.
5.2.3 Xxxxx xx vyjme, xxxxx xx xxxxxxxxx xxx pokojové xxxxxxx.
5.3 Xxxxxxx
5.3.1 Xxxxx xx xxxxxxxx xxx XX xxxxxx xxx 254 xx x xxxxxx xxxxx xx xxxxxx.
5.3.2 Xxxxx xx postříká
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.16.1), xxxx
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.16.2); xxxxxxx xx xx asi 120 °X, xxxx
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx draselného x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.16.3).
6. Xxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx Xx xxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxx Xx, xxxxx xxxxx x UV xxxxxx x barvu skvrn xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x následujícím xxxxxx (X) a xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxx (xxxx) vzorku s xxxxxxxxxx xxxx píků xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx z XXX a HPLC xx zkombinují x xxxxx dokázat přítomnost xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx.
7. Poznámky
Za xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx pozorovány xxxxxxxxxxx xxxxxxx Xx:
xxxxxxxxxxx: 0,32
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: 0,53
hydrochinonmonoethylether: 0,55
hydrochinonmonobenzylether: 0,58
X. XXXXXXXXX
1. Xxxxxx x oblast xxxxxxx
X xxxxxx je xxxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, hydrochinonmonomethyletheru, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x hydrochinonmonobenzyletheru x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx kůže.
2. Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx analytů xx výsledném roztoku xx xxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx x XX xxxxxxx.
3. Reakční činidla
3.1 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x.x. Musí xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx voda xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3.2 Methanol
3.3 Xxxxxxxxxxx
3.4 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.5 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.6 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (monobenzon)
3.7 Xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxx XXXX
3.8 Xxxx xxxx/xxxxxxxx 1:1 (X/X). Xxxxxx xx xxxxx díl vody x xxxxx xxx xxxxxxxxx (3.2)
3.9 Xxxxxxx xxxx: xxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxx 45:55 (X/X). Xxxxxx xx 45 xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (3.7) x 55 xxxx xxxx.
3.10 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx na 50 xx xx xxxxxx 0,06 x xxxxxxxxxxxx (3.3), 0,08 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.4), 0,10 x hydrochinonmonoethyletheru (3.5) x 0,12 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.6). Xxxxxxxx xx x doplní xx xx xxxxx xxxxxxxxxx (3.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx 10 ml xxxxxx xxxxxxx xx 50 ml xxxxx xxxx/xxxxxxxx (3.8). Tyto xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxx laboratorní xxxxxxxx x dále:
4.1 Vodní xxxxx nastavitelná xx xxxxxxx 60 °X
4.2 Xxxxxxxxxxxx pro vysokoúčinnou xxxxxxxxxxx chromatografii x XX xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx vlnovou xxxxxx x 10μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
4.3 Analytická xxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx, délka 250 xx, xxxxxxx průměr 4,6 xx, plněná Xxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx Xxxxxxx SIL, uzavřená xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxx 6 μx, nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Nepoužívá xx ochranná xxxxxx, x xxxxxxxx fenylové xxxxxx xxxx xxxxxx x ekvivalentní xxxxxx.
4.4 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx 90 xx, Schleicher xxx Schüll, Xxxxxxxxx Xx 5892 nebo xxxxxxxxxxxx
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx 50 ml xx s přesností xx xxx xxxxxxxxx xxxxx naváží 1 ± 0,1 x (x xxxxx) vzorku. Xxxxxx xx rozptýlí xx 25 xx xxxxx xxxx/xxxxxxxx (3.8). Xxxxx xx uzavře x silně protřepe, xxxxx xx nevytvoří xxxxxxxxx xxxxxxxx. Protřepává xx alespoň xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1) nastavenou xx 60 °X, xxx se usnadnila xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xx na xxxxx xxxxx xxxx/xxxxxxxx (3.8). Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx papír (4.4). Důkaz XXXX xx provede do 24 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
5.2.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx fáze (3.9) xx upraví xx 1,0 xx/xxx x xxxxxx délka xxxxxxxxx xx nastaví xx 295 xx.
5.2.2 Xxxxxxxxx se 10 μx roztoku xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.1 a xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx píků. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.2.3. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx výpočet xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxx a xxxxxxx xxxxxx (XX) xxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.2.3.
5.2.3 Kalibrace
Nastříkne xx 10 μl referenčního xxxxxxx (3.10) x xxxxxxxxx se chromatogram. Xxxxxxx xx provede xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxx konstantní.
Stanoví xx faktor xxxxxx XXx (x xx xxxxxx xxxxxxx XX):
XXx = pi /xx
xxx
xx = plocha píku xxx hydrochinon, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, x
xx = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, hydrochinonmonoethyletheru xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx roztoku (3.10) (x/50 ml).
Je xxxxx xxxxxx, zda chromatogramy xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- separace xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx 0,90. (Xxxxxxxx separace xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx 1.).
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxx xxxx
Xxxx-xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx dosaženo, měla xx xxx buď xxxxxxx účinnější kolona xxxx by mělo xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx upraveno xxx, xxx byl xxxxxxxxx xxxxxx.
- Xxxxxx xxxxxxxxx Xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xx xx xxx xxxxxxxxx xx 0,9 xx 1,5. (Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx 2.) Při xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx posuvu xxxxxx xxxxxxx 2 cm/min.
Obrázek 2:Xxxxxx xxxxxxxxx píku
- Xxxxxxxx musí xxx xxxxxxxx.
6. Xxxxxxx
Xxx výpočet xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx xxxxxx xx xxxxxxx plochy xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xx) xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx
xx % (m/m) = (xx x 100) / (XXx x x)
xxx
x = xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx,
xx = xxxxxx xxxx xxxxxxx x xx xxxxxx.
7. Xxxxxxxxxxxxxx [3]
7.1 Xxx obsahu xxxxxxxxxxxx 2,0 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx vzorkem xxxxxxxxx 0,13 %.
7.2 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1,0 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx stejným xxxxxxx xxxxxxxxx 0,1 %.
7.3 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1,0 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx současně xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,11 %.
7.4 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1,0 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx současně xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,11 %.
8. Xxxxxxxxxxxxxxxxxx [4]
8.1 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx 2 % by xxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx různých xxxxxxxx (xxxxx laboratoře, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxx) xxxxxxxxx 0,37 %.
8.2 Při xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx stejným vzorkem xx xxxxxxx podmínek (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx) xxxxxxxxx 0,21 %.
8.3 Xxx obsahu xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx provedených xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx experimentátoři, xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx doba) xxxxxxxxx 0,19 %.
8.4 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % by neměla xxxxxxxxx hodnota rozdílu xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx experimentátoři, xxxxx xxxxxxxxx nebo různá xxxx) xxxxxxxxx 0,11 %.
9. Poznámky
9.1 Jestliže xx zjištěn obsah xxxxxxxxxxxx výrazně xxxxx xxx 2 % x xx xxxxxxxxx xxxxxx odhad obsahu, xxx xx být xxxxxxx vzorku (5.1) xxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx by xxx vzorek obsahující 2 % hydrochinonu, x xxxxxxxxx by xxxx být opakováno.
(U xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx hodnota xxxxxxxxxx xxxx lineární xxxxxx xxxxxxxxx.)
9.2 Rušivé xxxxx
Xxxx popsaná xxxxxx xxxxxxxx stanovení hydrochinonu x xxxx xxxxxx x xxxxxx isokratickém xxxxxxx. Xxxxxxx fenylové xxxxxx xxxxxxx dostatečnou xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx X18 x uvedenou xxxxxxx xxxx.
X xxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx vlivu xxxx xxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx stanovení mělo xxx zopakováno x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx/xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx x xxxxxxxxxx v xxxxxxxx 2 x 3:
Xxxxxx: Zorbax ODS, 4,6 xx × 25 xx xxxx xxxxxxxxxxxx:
xxxxxxx: 36 °X
xxxxxx: 1,5 ml/min
mobilní xxxx:
xxx xxxxxxxxxxx: methanol/voda 5/95 (X/X)
xxx hydrochinonmonomethylether: xxxxxxxx/xxxx 30/70 (V/V)
pro xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxx/xxxx 80/20 (X/X) [5].
Xxxxxx: Xxxxxxxxxx X5XXX xxxx ekvivalentní:
mobilní xxxx: xxxx/xxxxxxxx 90/10 (V/V)
průtok: 1,5 ml/min
Tyto podmínky xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx [6].
[1] XXX 5725.
[2] XXX 5725.
[3] XXX 5725.
[4] XXX 5725.
[5] Herpol-Borremans, X., Xxxxx X.-X., Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx de x’xxxxxxxxxxxx xx xx xxx éthers xxxxxxxxxx xx benzylique xxxx xxx xxxxxxxx cosmétiques xxxx xxxxxxxx la xxxx. Xxx. X. Xxxxxx. Xxx., 8-203-214 (1986).
[6] Firth, X., Xxx I., Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx in xxxx toning creams, Xxxxxxx, (1986), 111, x. 129.