Xxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 95/32/XX
xx xxx 7. xxxxxxxx 1995
x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx složení kosmetických xxxxxxxxxx
(Xxxx s významem xxx EHP)
KOMISE XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx směrnici Xxxx 76/768/XXX xx xxx 27. xxxxxxxx 1976 x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx kosmetických xxxxxxxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx xxxxxxxx Komise 94/32/XX [2], x xxxxxxx xx xx. 8 xxxx. 1 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx k xxxx, xx xx xx xxxxxxxx 76/768/XXX xxxxxxx úřední xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx zajistit dodržení xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx předpisy Xxxxxxxxxxxx, které xx xxxxxx složení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xx nejdříve; xx xxxxxxx metody již xxxx přijaty xx xxxxxxxx Xxxxxx 80/1335/XXX [3] xx xxxxx xxxxxxxx 87/143/EHS [4], xxxxxxxx 82/434/EHS [5] xx xxxxx xxxxxxxx 90/207/XXX [6] x xx směrnicích 83/514/XXX [7], 85/490/EHS [8] x 93/73/EHS [9];
xxxxxxxx x xxxx, že xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, kyseliny 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx prostředcích x xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, hydrochinonmonomethyletheru, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxx pro xxxxxxxxxxxx směrnice 76/768/XXX xxxxxxxxxxx pokroku,
PŘIJALA XXXX XXXXXXXX:
Článek 1
Členské xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxx xxxxxxx zkoušení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx:
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, kyseliny 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, kyseliny xxxxxxxxxx x kyseliny xxxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx.
Článek 2
1. Členské xxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx předpisy nezbytné xxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx do 30. xxxx 1996. Xxxxxxxxxx x nich xxxxxxx Xxxxxx.
Xxxx opatření přijatá xxxxxxxxx státy musí xxxxxxxxx odkaz na xxxx směrnici xxxx xxxx takový xxxxx xxx xxxxxx při xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx státy.
2. Xxxxxxx xxxxx xxxxx Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx směrnice.
Článek 3
Xxxx směrnice xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxx Evropských xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 4
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X Xxxxxxx dne 7. xxxxxxxx 1995.
Za Xxxxxx
Xxxx Bonino
členka Komise
[1] Xx. xxxx. X 262, 27.9.1976, x. 169.
[2] Xx. xxxx. X 181, 15.7.1994, x. 31.
[3] Xx. xxxx. X 383, 31.12.1980, x. 27.
[4] Úř. xxxx. X 57, 27.2.1987, x. 56.
[5] Xx. věst. X 185, 30.6.1982, x. 1.
[6] Úř. xxxx. X 108, 28.4.1990, x. 92.
[7] Xx. xxxx. X 291, 24.10.1983, x. 9.
[8] Xx. věst. X 295, 7.11.1985, x. 30.
[9] Xx. xxxx. X 231, 14.9.1993, x. 34.
XXXXXXX
X. DŮKAZ A XXXXXXXXX XXXXXXXX BENZOOVÉ, XXXXXXXX 4XXXXXXXXXXXXXXX, XXXXXXXX XXXXXXX, XXXXXXXX XXXXXXXXXX X KYSELINY XXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX PROSTŘEDCÍCH
1. Xxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxxx je xxxxxxxxxx xxx důkaz x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, kyseliny xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx x kyseliny propionové x xxxxxxxxxxxx prostředcích. Xxxxxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx důkazu těchto xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, kyseliny xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxx kyseliny xxxxxxxx, kyseliny 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx salicylové, kyseliny xxxxxxx x kyseliny xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
X. XXXXX
1. Xxxxxxxx metody
Po kyselé/zásadité xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx (TLC) x xxxxxxx chromatografií ("xxxxxxxxxxxx xx xxxxx"). V xxxxxxxxxx na výsledcích xx xxxxx potvrdí xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx, v xxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (GC).
2. Xxxxxxx činidla
2.1 Xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx činidla musí xxx xxxxxxx p.a. Xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2.2 Xxxxxx
2.3 Xxxxxxxxxxxx
2.4 Xxxxxxxxxxx
2.5 Xxxxxx
2.6 xXxxxx
2.7 Xxxxxxx, tekutý
2.8 Kyselina xxxxxxxxxxxxxx, 4 X
2.9 Xxxxxxxx draselný, 4 X vodný roztok
2.10 Xxxxxxx xxxxxxxx, XxXx2·2X2X
2.11 Xxxxxxxxx xxxxxx, Xx2XX3
2.12 2Xxxx2‘xxxxxxxxxxx
2.13 Kyselina 4xxxxxxxxxxxxxxx
2.14 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
2.15 Xxxxxxxx xxxxxxxx
2.16 Xxxxxxxx sorbová
2.17 Xxxxxxxx propionová
2.18 Referenční xxxxxxx
Xxxxxxxx xx 0,1 % (m/V) roztoky (100 xx/100 xx) xxxxx z xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (2.13 xx 2.17) x xxxxxxxxxxxxx.
2.19 Derivatizační xxxxxxx
0,5 % xxxxxx 2xxxx2‘xxxxxxxxxxxx (2.12) v acetonitrilu (2.4) (50 mg/10 xx). Tento roztok xx xxx být xxxxxxxxxxx xxxxx týden x uchováván x xxxxxxxx.
2.20 Roztok katalyzátoru
0,3 % (m/V) roztok xxxxxxxxxx lithného (2.11) xx vodě (300 xx/100 ml). Tento xxxxxx xx měl xxx připravován xxxxxxx.
2.21 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxx (2.5)/aceton (2.2) (20: 0,5, X/X)
2.22 Tekutý parafin (2.7)/xxxxxx (2.6) (1:2, X/X)
3. Přístroje x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
3.1 Xxxxx lázeň xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx 60 °X
3.2 Vyvíjecí xxxxxx
3.3 Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx 254 x 366 xx
3.4 Xxxxxx desky xxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, Xxxxxxxxx 60, bez xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, 20 × 20 xx, xxxxxxxx xxxxxx 0,25 xx x xxxxxxxxxxxx xxxxx 2,5 × 20 xx (Xxxx 11845 xxxx ekvivalentní)
3.5 Xxxxxxxxxxxxxx xx 10 μx
3.6 Xxxxxxxxxxxxxx na 25 μx
3.7 Sušárna nastavitelná xx xxxxxxx xx 105 °X
3.8 Xxxxxxxxxxxxx xxxxx na 50 x 200 xx xx zabroušenou zátkou
3.9 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx 90 xx, Xxxxxxxxxx &xxx; Xxxüxx, Weissband Xx. 5892, xxxx xxxxxxxxxxxx
3.10 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xX 1 – 11
3.11 Skleněné xxxxxxxxxx xxxxxxxx na 5 xx
3.12 Xxxxxxx xxxxxxx odparka (Xxxxxxxxx xxxx ekvivalentní)
3.13 Topná xxxxx
4. Xxxxxx
4.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xx Erlenmeyerovy baňky xx 50 ml xx zabroušenou xxxxxx (3.8) xx xxxxxx xxxxxxxxx 1 g xxxxxx. Přidají se xxxxx kapky 4 X xxxxxxxx chlorovodíkové (2.8) x 40 xx acetonu (2.2). X xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx mýdlo, by xxxx xxx xxxxxxx 20 xxxxx 4 X kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (2.8). Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) se xxxxxxxxxxx, xxx xx xX xxxxxxxxx 2. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xx xxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx protřepává.
Jeli xxxxxxxx xxxxxxxx extrakci xxxxxxxxxxxxx přísad do xxxxxxxxx xxxx, xxxx xx opatrně xxxxxxx xx xxx 60 °X, aby se xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xx zchladí xx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (3.9) xx Xxxxxxxxxxxxx baňky.
20 xx xxxxxxxx se xxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 200 xx, xxxxx xx 20 xx xxxx x xxxxxxxx se. pH xxxxx xx upraví xxxxxxxxx xx 10 xxxxxx 4 X xxxxxxxxx draselného (2.9) xx použití xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10).
Xxxxx xx 1 g xxxxxxxx xxxxxxxxxx (2.10) x xxxxx xx protřepe. Xxxxxxxxx xx přes xxxxxxxxx xxxxx (3.9) xx dělicí xxxxxxx xx 250 xx xxxxxxxxxx 75 xx xxxxxxxxxxxxx (2.3) a xxxxx se xxxxx xxxxx xxxxxx. Vrstvy xx nechají xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx na 250 ml. Etherová xxxxxx se xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx indikátorového xxxxxxx (3.10) xx xX xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx přibližně 2 xxxxxxxxxx 4 X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (2.8). Xxxxx se 10 xx xxxxxxxxxxxxx (2.3), xxxxx se xxxxxxxxx a silně xxxxxxxxxx jednu xxxxxx; xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx odparky (3.12). Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xx odpaří xxxxx xx sucha a xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x 1 xx xxxxxxxxxxxxx (2.3). Xxxxxx xx převede xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.11).
4.2 Chromatografie xx xxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx zóny xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx (3.4) se xx xxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x roztoků xxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx, nanese xxxxxxxxxx (3.5) xx xxxxxxxx xxxxxxxxx vždy xx 3 μl xxxxxxxxxx lithného (2.20) x vysuší se x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx deska xx xxxxxxx na xxxxxx xxxxx (3.13) xxxxxxxx xx 40 °X, xxx se xxxxxx xxxxxxx xx nejmenší. Xxxxxxxxxxxxxxx (3.5) xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx 10 μx každého xxxxxxxxxxxx xxxxxx (2.18) x roztoku xxxxxx (4.1) xxxxxx xx xxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx přesně xx xxxx, kam xxxx naneseny referenční xxxxxxx/xxxxxxx vzorku x xxxxxx uhličitanu xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx 15 μx derivatizačního xxxxxxx (2.19) (xxxxxx 2brom2‘acetonaftonu).
Chromatografická xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx (3.7) 45 minut při 80 °X. Xx xxxxxxxxxxx se deska xxxxxx v komoře (3.2), xxxxx byla (xxx xxxxxxxx filtračním xxxxxxx) 15 xxxxx xxxxxx vyvíjecím rozpouštědlem 2.21 (xxxxxx/xxxxxx), xxxxx xxxx rozpouštědla xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 xx (xxxx vyvíjení xx xxxxxxxxx 80 xxxxx).
Xxxxx xx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx vzduchu x xxxxxxx skvrny xx xxxxxxxxx xxx XX xxxxxxx (3.3). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx chromatografická xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxx (2.22).
5. Xxxxx
Xxx xxxxxx skvrnu xx xxxxxxx xxxxxxx Rf.
Hodnoty Xx x xxxxxxx xxxxxx xxx XX xxxxxxx xx porovnají x hodnotami a xxxxxxxx referenčních vzorků.
Učiní xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad. Xxxxxxx xx vysokoúčinná xxxxxxxxxx chromatografie xxxxxxx x oddílu X, xxxx xxxxxxx-xx se, xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxx X. Xxxxxxx retenční xxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx vzorků.
Výsledky TLC x XXXX nebo XX xx zkombinují x xxx xxxxxxxx xxxxxx konzervačních xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx.
X. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXX, KYSELINY 4XXXXXXXXXXXXXXX, KYSELINY XXXXXXX X XXXXXXXX SALICYLOVÉ
1. Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx se xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxx. Xx xxxxxxxx xx konzervační xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx (XXXX).
2. Xxxxxxx xxxxxxx
2.1 Všechna reakční xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx p.a. x xxxx xxx vhodná xxx XXXX. Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx voda xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2.2 Xxxxxxx, absolutní
2.3 Kyselina 4xxxxxxxxxxxxxxx
2.4 Kyselina xxxxxxxxxx
2.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx
2.6 Xxxxxxxx xxxxxxx
2.7 Xxxxx xxxxx, (XX3XXXXx·3X2X)
2.8 Xxxxxxxx xxxxxx, x420 = 1,05 x/xx
2.9 Xxxxxxxxxxx
2.10 Kyselina xxxxxx, 2 X
2.11 Xxxxxxxx xxxxxxxx, 0,2 X xxxxx roztok
2.12 Xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx
2.13 Směs xxxxxxx/xxxx
Xxxxx xxxx ethanolu (2.2) xx xxxxxx x jedním dílem xxxx (2:1)
2.14 Roztok xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx 1 x xxxxxxxx 2methoxybenzoové (2.12) x 500 xx xxxxx ethanol/voda (2.13).
2.15 Xxxxxxx xxxx xxx HPLC
2.15.1 Xxxxxxxxx xxxx: xx 1 xxxxx xxxx xx xxxxx 6,35 g xxxxxx sodného (2.7) x 20,0 xx xxxxxxxx xxxxxx (2.8) x xxxxxx xx.
2.15.2 Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx acetátového xxxxx (2.15.1) x xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx (2.9).
2.16 Xxxxxxx xxxxxx konzervačních xxxxxx
Xx xxxxxxx baňky xx 50 xx xx xxxxxx naváží xxx 0,05 g xxxxxxxx 4hydroxybenzoové (2.3), 0,2 g xxxxxxxx xxxxxxxxxx (2.4), 0,2 x kyseliny benzoové (2.5) x 0,05 x xxxxxxxx xxxxxxx (2.6) x xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxx (2.13). Xxxxxx xx xxxxxxxx v xxxxxxxx. Xxxxxx je xxxxxxxx xxxxx týden.
2.17 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxx xx 20 xx xx xxxxxx 8,00, 4,00, 2,00, 1,00 x 0,50 xx xxxxxxxxx roztoku (2.16). Xx každé xxxxx xx xxxxx 10,00 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (2.14) x 0,5 xx 2 X xxxxxxxx xxxxxx (2.10). Objem se xxxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxx (2.13). Xxxx roztoky xxxx být xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Přístroje x xxxxxxx
Xxxxx laboratorní xxxxxxxx x dále:
3.1 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx na 60 °C
3.2 Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx x XX xxxxxxxxxx s nastavitelnou xxxxxxx xxxxxx a 10μx xxxxxxxxxxxx smyčkou.
3.3 Xxxxxxxxxx kolona
Korozivzdorná xxxx, xxxxx 12,5 xx 25 cm, xxxxxxx xxxxxx 4,6 mm, xxxxxx Xxxxxxxxxxx 5X18 xxxx xxxxxxxxxxxx náplní.
3.4 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx: 90 xx, Schleicher xxx Schüll, Xxxxxxxxx Xx 5892 nebo xxxxxxxxxxxx.
3.5 Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 50 xx
3.6 Xxxxxxxx vzorkovací xxxxxxxx xx 5 xx
3.7 Xxxxx kamínky, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx 2–4 xx, xxxx xxxxxxxxxxxx
4. Xxxxxx
4.1 Xxxxxxxx xxxxxx
4.1.1 Příprava xxxxxx bez xxxxxxx xxxxxxxxx standardu
Do Xxxxxxxxxxxxx xxxxx na 50 xx (3.5) se xxxxxx 1 x xxxxxx. Xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx 10 xx 2 X kyseliny sírové (2.10) x 40 xx směsi xxxxxxx/xxxx (2.13). Xxxxx xx xxxxxxxxx 1 x xxxxxxx xxxxxxx (3.7), xxxxx se xxxxxx x silně xx xxxxxxx xxxxx minutu xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx konzervačních xxxxxx xx ethanolové xxxx se Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx přesně xxx minut xx xxxxx lázni (3.1) xxx 60 °X.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx ihned xxxxxxx v xxxxxx xxxxxxx vody x xxxxxxx xx xx xxxxxx uloží xxx 5 °X.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (3.4). Xxx 2 xx extraktu xx převedou xx xxxxxxxxxx lahvičky (3.6). Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxx 5 °C x xxxxxxxxx xxxxxx XXXX xx xxxxxxx xx 24 hodin.
4.1.2 Xxxxxxxx vzorku x xxxxxxxx vnitřního xxxxxxxxx
Xx Xxxxxxxxxxxxx baňky na 50 xx (3.5) xx x xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxx naváží 1 ± 0,1 x xxxxxx (x xxxxx). Xxxxxxx xx xxxxx 1,00 xx 2 X kyseliny xxxxxx (2.10) x 30,0 xx xxxxx xxxxxxx/xxxx (2.13). Přidá se xxxxxxxxx 1 g xxxxxxx xxxxxxx (3.7) x 10 ml xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx(2.14). Xxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx x silně xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx usnadnění extrakce xxxxxxxxxxxxx přísad do xxxxxxxxxx xxxx xx Xxxxxxxxxxxxx baňka zahřívá xxxxxx xxx minut xx vodní lázni (3.1) xxx 60 °X.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx x extrakt xx xxxxx xx xxxxxx xxx 5 °X.
Xxxxxxx xx zfiltruje xxxx xxxxxxxxx xxxxx (3.4). Xxx 2 xx xxxxxxxx se xxxxxxxx xx vzorkovací xxxxxxxx (3.6). Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxx 5 °X x xxxxxxxxx xxxxxx XXXX xx xxxxxxx xx 24 xxxxx.
4.2 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxx (2.15).
Xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx 2,0 ± 0,5 ml/min. Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx nastaví xx 240 xx.
4.2.1 Xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxx chromatografu (3.2) xx xxxxxxxxx po 10 μx standardních xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (2.17). Xxx xxxxx xxxxxx se xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx přísady x xxxxx xxxx xxxxxxxxx standardu xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx přísadu xx xxxxxxxx graf xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx na koncentraci xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xx, xx xxx xxxxxxxxx xxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx získána xxxxxxxx odezva.
4.2.2 Stanovení
Do xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.2) xx nastříkne 10 μx xxxxxxxx xxxxxx (4.1.1) x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx 10 μx xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxxx xxxxxxx (2.17) a xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx chromatogramy xx xxxxxxxxx. Není-li x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.1.1) xxxxx pík x xxxxxxxxx stejným xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx 2methoxybenzoové (xxxxxxxxxx xxxxxxx standard), xxxxxxxxx se xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 10 μx xxxxxxxx vzorku x xxxxxxxx vnitřním xxxxxxxxxx (4.1.2) x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.
Xx-xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.1.1) xxxxxx xxx xx stejným xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx, měl xx xxx vybrán xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. (Xxxx-xx jedna z xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x chromatogramu xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx jako xxxxxxx xxxxxxxx.)
Xx xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x roztok xxxxxx xxxxxxx následující xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx píků xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx 0,90. (Xxxxxxxx separace xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx 1)
Obrázek 1: Xxxxxxxx xxxx
Xxxx-xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxx buď xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx by xxxx xxx složení xxxxxxx xxxx xxxxxxxx tak, xxx byl xxxxxxxxx xxxxxx.
- Faktor xxxxxxxxx Xx všech xxxxxxxxx xxxx by xx xxx pohybovat xx 0,9 do 1,5. (Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx uvedena xx xxxxxxx 2.) Xxx xxxxxxxxxxx chromatogramu xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx 2 cm/min.
Obrázek 2: Faktor asymetrie xxxx
- Xxxxxxxx xxxx xxx stabilní.
5. Výpočet
Pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x roztoku xxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x výšky xxxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx) a dále xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, kyseliny 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxx kyseliny xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx procentech (xx) xx vypočte xxxxxx xxxxxx
xx % (m/m) = (100x 20 x x) / (106 x x) = b / (500 x x)
xxx
x = xxxxxxxx zkušebního xxxxxx (4.1.2) (x),
x = koncentrace xxxxxxxxxxx xxxxxxx x extraktu xxxxxx (4.1.2) (μx/xx) xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx.
6. Xxxxxxxxxxxxxx [1]
Při xxxxxx xxxxxxxx 4hydroxybenzoové 0,40 % by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx provedených současně xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,035 %.
Při xxxxxx kyseliny xxxxxxxx 0,50 % xx xxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx stejným vzorkem xxxxxxxxx 0,050 %.
Při xxxxxx kyseliny salicylové 0,50 % by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx xxxxxxx vzorkem xxxxxxxxx 0,045 %.
Xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 0,60 % by xxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx současně xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,035 %.
7. Xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx kyselin xx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx zpracovávaného xxxxxx xx xxxx xxxx xxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2 Xx-xx xx xxxxxxx, lze xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
X. STANOVENÍ XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Rozsah x xxxxxx použití
Tato xxxxxx xx vhodná pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x kosmetických xxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 2 % (x/x).
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxxxx hmotnosti (% m/m) výrobku.
3. Xxxxxxxx xxxxxx
Xx extrakci xxxxxxxx propionové x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx plynovou xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx kyseliny 2xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
4. Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx čistoty p.a; xxxx být použita xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxx ekvivalentní xxxxxxx.
4.1 Ethanol, 96 % (X/X)
4.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
4.3 Xxxxxxxx 2methylpropionová
4.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, 10 % (m/V)
4.5 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx 50 xx xx přesně xxxxxx 1 x (x xxxxx) kyseliny xxxxxxxxxx a xxxxxx xx na objem xxxxxxxxx (4.1).
4.6 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx odměrné xxxxx xx 50 xx xx xxxxxx xxxxxx 1 x (x xxxxx) xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxx xx na xxxxx xxxxxxxxx (4.1).
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
5.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxx:
5.2 Xxxxxxx chromatograf x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
5.3 Xxxxxxxx zkumavka (20 × 150 xx) xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
5.4 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx na 60 °X
5.5 Skleněná xxxxxxxx xxxxxxxxx xx 10 xx s xxxxxxxxx xxxxxxxxx (průměr xxxx 0,45 μx)
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxx vzorku
6.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx bez vnitřního xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.3) xx xxxxxx xxxxxxxxx 1 x xxxxxx. Xxxxx se 0,5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (4.4) x 9,5 xx ethanolu (4.1).
Xxxxxxxx se xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxx xx pět minut xx xxxxx xxxxx xxxxxxx na 60 °X (5.4), xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx. Zkumavka xx xxxxxx xxxxxxx xxx tekoucí xxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx membránový xxxxx (5.5). Chromatografie xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxx.
6.1.2 Příprava xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xx xxxxxxxx zkumavky (5.3) xx s xxxxxxxxx xx 3 xxxxxxxxx xxxxx naváží 1 ± 0,1 x vzorku. Přidá xx 0,5 ml xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (4.4), 0,50 xx roztoku xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.6)a 9 ml xxxxxxxx (4.1).
Xxxxxxxx xx uzavře x xxxxx xxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx, xxxxxx se zkumavka xx xxx minut xx xxxxx xxxxx xxxxxxx na 60 °X (5.4), xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xx rychle zchladí xxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxx membránový xxxxx (5.5). Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx provede xxxxxx xxx.
6.2 Xxxxxxxx xxx plynovou chromatografii
Doporučují xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx
Xxx: korozivzdorná xxxx
Xxxxx: 2 m
Průměr: ⅛"
Xxxxx: 10 % XX™ 1000 (nebo ekvivalentní) + 1 % X3XX4 xx Xxxxxxxxxxx XXX 100–120 xxxx
Xxxxxxx
Xxxxxxx: 200 °C
Kolona: 120 °X
Xxxxxxxx: 200 °X
Xxxxx xxxx: xxxxx
Xxxxxxxxx rychlost: 25 ml/min
6.3 Xxxxxxxxxxxxxx
6.3.1 Xxxxxxxxx
Xx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx 20 xx xx xxxxxxxxxx 0,25, 0,50, 1,00, 2,00 a 4,00 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.5). Xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xx odpipetuje 1,00 xx roztoku xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.6); xxxxxx xx xx xxxxx xxxxxxxxx (4.1) a xxxxxxx. Takto xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxxx jako xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx x xx/xx (to xxxxxxx 1 xx/xx, xx-xx x = 1,000) x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x/4, x/2, x, 2x, 4x xx/xx (xx xxxxxxx 0,25, 0,50, 1,00, 2,00, 4,00 xx/xx, je-li x = 1,000).
Xxxxxxxxx xx 1 μl xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxx vynesením xxxxxx xxxxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxx x kyseliny 2methylpropionové xx xxx x x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx píků na xxx x.
Xxxxxxxxxx xx 3 xxxxx z xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx se xxxxxx xxxxxx ploch xxxx.
6.3.2 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx 1 μx xxxxxxxx xxxxxx 6.1.1. Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx s chromatogramem xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (6.3.1). Xx-xx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx čas jako xxx kyseliny 2xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx-xx pozorován xxxxx rušivý xxxx, xxxxxxxxx se 1 μx filtrátu xxxxxx 6.1.2 a xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx 3 xxxxx x každého xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx poměrů xxxxx xxxx.
7. Xxxxxxx
7.1 X xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx 6.3.1 xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (K), který xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxx 6.3.2.
7.2 X xxxxx získaného xxxxxx xxxxxxxxx xx vypočte xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx (x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx
x % (x/x) = X (0,5 x 100 x x) / (50 x x) =X(x / x)
xxx
X = poměr xxxxxxxxx x xxxx 7.1,
e = xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx 4.6,
a = hmotnost xxxxxx x gramech xxxxx xxxx 6.1.2,
Xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx místo.
8. Xxxxxxxxxxxxxx [2]
Xxx xxxxxx kyseliny xxxxxxxxxx 2 % (x/x) by xxxxx xxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejným vzorkem xxxxxxxxx 0,12 %.
XX. XXXXX A STANOVENÍ XXXXXXXXXXXX, XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX, XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX X HYDROCHINONMONOBENZYLETHERU V XXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX
X. XXXXX
1. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
X xxxxxx xx xxxxxxx detekce a xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) x kosmetických xxxxxxxxxxxx xxx zesvětlení xxxx.
2. Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx (XXX).
3. Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x.x.
3.1 Xxxxxxx, 96 % (X/X)
3.2 Xxxxxxxxxx
3.3 Xxxxxxxxxxxx
3.4 Vyvíjecí xxxxxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx, 66: 33 (V/V)
3.5 Xxxxxxx, 25 % (x/x) (x420 = 0,91 g/ml)
3.6 Kyselina xxxxxxxxx
3.7 Xxxxxxxxxxx
3.8 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.9 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.10 Hydrochinonmonobenzylether (monobenzon)
3.11 Xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx a jsou xxxxxxxx jeden den.
3.11.1 Xx xxxxxx zkumavky xx 10 xx xx naváží 0,05 x hydrochinonu (3.7). Xxxxx xx 0,250 x kyseliny askorbové (3.6) a 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx xx xxxxxxx (3.5), xxxxx xxxx xxxxxxxx xX 10, x doplní xx xxxxxxxxx na xxxxx 10 ml (3.1).
3.11.2 Xx xxxxxx xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxx 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.8). Xxxxx se 0,250 x xxxxxxxx xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx xx amoniak (3.5), xxxxx není xxxxxxxx xX 10, x xxxxxx xx xxxxxxxxx na xxxxx 10 xx (3.1).
3.11.3 Xx xxxxxx zkumavky xx 10 ml xx naváží 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.9). Xxxxx se 0,250 x kyseliny xxxxxxxxx (3.6) a 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx xx xxxxxxx (3.5), dokud xxxx xxxxxxxx xX 10, x xxxxxx se xxxxxxxxx xx xxxxx 10 xx (3.1).
3.11.4 Xx dělené xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxx 0,05 x hydrochinonmonobenzyletheru (3.10). Xxxxx xx 0,250 x xxxxxxxx askorbové (3.6) x 5 xx ethanolu (3.1). Xxxxxxx xx amoniak (3.5), xxxxx xxxx xxxxxxxx xX 10, x doplní xx xxxxxxxxx xx xxxxx 10 xx (3.1).
3.12 Xxxxxxxx stříbrný
3.13 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.14 Xxxxxxxxxxxxxx draselný xxxxxxxxxx
3.15 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
3.16 Xxxxxxxx činidla
3.16.1 Xx 5 % xxxxxxx xxxxxxx (m/V) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.12) xx xxxxxxx amoniak (3.5), dokud xx xxxxxxx se sraženina xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx:
Xxx xxxxxx xxxxx xx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxx xx být po xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.16.2 10 % (x/X) xxxxxx xxxxxxxx dodekamolybdofosforečné (3.13) x xxxxxxxx (3.1).
3.16.3 Xxxxxxxx xx 1 % (m/V) xxxxx xxxxxx kyanoželezitanu draselného (3.14) a 2 % (x/X) xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.15). Xxxxx před xxxxxxxx xx smíchají xxxxxx xxxx obou xxxxxxx.
4. Přístroje x xxxxxxx
Xxxxx laboratorní xxxxxxxx, x xxxx:
4.1 Xxxxx xxxxxxxx pro chromatografii xx xxxxx xxxxxx
4.2 Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx na tenké xxxxxx: xxxxxxxxx XXX/XX254 (254 xx xxxxxx xxxxxxx XXX/XX); 20 × 20 xx (Xxxxxxx, Xxxxx nebo xxxxxxxxxxxx). Xxxxxxxx xxxxxx 0,25 xx.
4.3 Xxxxxxxxxxxx xxxxx
4.4 Odstředivka
4.5 XX xxxxx, 254 nm
5. Xxxxxx
5.1 Příprava xxxxxx
Xx xxxxxx zkumavky xx 10 xx xx xxxxxx 3 x xxxxxx. Xxxxx se 0,250 g xxxxxxxx xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx xxxxxxxx (3.1). xX roztoku xx xxxxxx xxxxxxxxx (3.5) xx 10. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx (3.1) xx 10 xx. Zkumavka xx uzavře zátkou x homogenizuje se 10 xxxxx x xxxxxxxxxxxx lázni. Xxxxxxxxx xx přes xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxx 3000 xx./xxx.
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx na xxxxx vrstvě (TLC)
5.2.1 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.4).
5.2.2 Xx xxxxx xx xxxxxx po 2 μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.11) x 2 μx xxxxxxx xxxxxx (5.1). Xxxxxx xx xx xxx xxx teplotě xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 xx xx xxxxxx.
5.2.3 Xxxxx xx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxx pokojové teplotě.
5.3 Xxxxxxx
5.3.1 Deska xx xxxxxxxx pod XX xxxxxx xxx 254 xx a xxxxxx xxxxx se xxxxxx.
5.3.2 Xxxxx se xxxxxxxx
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.16.1), xxxx
- kyselinou xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.16.2); xxxxxxx xx xx asi 120 °X, xxxx
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx chloridu xxxxxxxxxx (3.16.3).
6. Důkaz
Spočítá se xxxxxxx Rf každé xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxx se skvrnami xxxxxxxxx xxx referenční xxxxxxx, xxxxx xxx x jejich xxxxxxx Xx, xxxxx skvrn x XX světle x xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xx vysokoúčinná xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx popsaná x xxxxxxxxxxxx xxxxxx (X) x porovnají xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxx (xxxx) xxxxxx x xxxxxxxxxx časy xxxx xxxxxxxxxxxx roztoků.
Výsledky z XXX x XXXX xx zkombinují x xxxxx dokázat xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx jeho xxxxxx.
7. Poznámky
Za uvedených xxxxxxxx xxxx pozorovány xxxxxxxxxxx xxxxxxx Xx:
xxxxxxxxxxx: 0,32
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: 0,53
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: 0,55
hydrochinonmonobenzylether: 0,58
X. XXXXXXXXX
1. Xxxxxx x oblast xxxxxxx
X xxxxxx je specifikován xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx prostředcích xxx xxxxxxxxxx xxxx.
2. Podstata xxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx/xxxxxxxx za xxxxxxx zahřátí, kterým xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx výsledném roztoku xx provede xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx x XX xxxxxxx.
3. Reakční činidla
3.1 Xxxxxxx xxxxxxx činidla xxxx být xxxxxxx x.x. Xxxx být xxxxxxx destilovaná xxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3.2 Xxxxxxxx
3.3 Xxxxxxxxxxx
3.4 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.5 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.6 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx)
3.7 Xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxx XXXX
3.8 Xxxx xxxx/xxxxxxxx 1:1 (X/X). Xxxxxx xx xxxxx xxx vody x xxxxx xxx xxxxxxxxx (3.2)
3.9 Xxxxxxx xxxx: směs tetrahydrofuran/voda 45:55 (X/X). Xxxxxx xx 45 xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (3.7) x 55 xxxx vody.
3.10 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx na 50 xx xx xxxxxx 0,06 x xxxxxxxxxxxx (3.3), 0,08 g xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.4), 0,10 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.5) x 0,12 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.6). Rozpustí xx x xxxxxx xx xx objem xxxxxxxxxx (3.2). Referenční xxxxxx xx připraví xxxxxxxx 10 xx xxxxxx roztoku xx 50 xx xxxxx xxxx/xxxxxxxx (3.8). Xxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx.
4. Přístroje x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx:
4.1 Vodní xxxxx nastavitelná xx xxxxxxx 60 °X
4.2 Xxxxxxxxxxxx xxx vysokoúčinnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x XX detektorem x xxxxxxxxxxxxx vlnovou xxxxxx x 10μx nastřikovací xxxxxxx
4.3 Xxxxxxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x korozivzdorné xxxxx, xxxxx 250 xx, vnitřní průměr 4,6 mm, xxxxxx Xxxxxx fenylem (xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx Xxxxxxx XXX, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxx 6 μm, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Nepoužívá xx xxxxxxxx kolona, x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx náplní.
4.4 Xxxxxxxxx xxxxx, průměr 90 xx, Xxxxxxxxxx xxx Xxxüxx, Xxxxxxxxx Xx 5892 xxxx xxxxxxxxxxxx
5. Xxxxxx
5.1 Příprava xxxxxx
Xx odměrné xxxxx xx 50 ml xx x přesností xx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx 1 ± 0,1 x (x xxxxx) xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxx xx 25 xx xxxxx xxxx/xxxxxxxx (3.8). Xxxxx se xxxxxx x silně xxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxx suspenze. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx jednu xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xx vodní xxxxx (4.1) xxxxxxxxxx xx 60 °C, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Baňka se xxxxxxx a xxxxxx xx xx xxxxx xxxxx xxxx/xxxxxxxx (3.8). Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx filtrační papír (4.4). Xxxxx XXXX xx xxxxxxx xx 24 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
5.2 Vysokoúčinná xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
5.2.1 Průtoková xxxxxxxx xxxxxxx xxxx (3.9) xx upraví xx 1,0 xx/xxx x xxxxxx délka xxxxxxxxx se xxxxxxx xx 295 nm.
5.2.2 Xxxxxxxxx xx 10 μx roztoku xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx bodu 5.1 x xxxxxxxxx xx chromatogram. Xxxxx xx xxxxxx xxxx. Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.2.3. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxx koncentrace xxxxxxx x roztoku xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx píků x xxxxxxx xxxxxx (RF) xxxxxxxxx podle bodu 5.2.3.
5.2.3 Kalibrace
Nastříkne se 10 μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) x xxxxxxxxx xx chromatogram. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx není xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx XXx (x xx xxxxxx xxxxxxx RF):
RFi = xx /xx
xxx
xx = xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx, hydrochinonmonomethylether, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, x
xx = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) (x/50 ml).
Je xxxxx xxxxxx, xxx chromatogramy xxxxxxx pro standardní xxxxxx x xxxxxx xxxxxx splňují xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx píků xxxxxxx xxxxxxxxxx páru xx xxxxxxx 0,90. (Xxxxxxxx xxxxxxxx píků xx xxxxxxx na xxxxxxx 1.).
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxx xxxx
Xxxx-xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx mělo xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx upraveno tak, xxx byl xxxxxxxxx xxxxxx.
- Xxxxxx xxxxxxxxx Xx všech xxxxxxxxx xxxx xx xx xxx pohybovat od 0,9 xx 1,5. (Xxxxxxxx xxxxxxx asymetrie xx xxxxxxx xx xxxxxxx 2.) Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx je doporučená xxxxxxxx xxxxxx papíru xxxxxxx 2 xx/xxx.
Xxxxxxx 2:Xxxxxx asymetrie xxxx
- Xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx.
6. Výpočet
Pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxx) ve vzorku xx xxxxxxx plochy xxxx xxxxxxx. Koncentrace xxxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxxx x hmotnostních xxxxxxxxxx (xi) xx xxxxxxx xxxxxx vzorce
xi % (m/m) = (xx x 100) / (XXx x x)
xxx
x = hmotnost xxxxxx v xxxxxxx,
xx = xxxxxx píku xxxxxxx x ve xxxxxx.
7. Xxxxxxxxxxxxxx [3]
7.1 Xxx xxxxxx hydrochinonu 2,0 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,13 %.
7.2 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1,0 % by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx stejným xxxxxxx xxxxxxxxx 0,1 %.
7.3 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1,0 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx vzorkem xxxxxxxxx 0,11 %.
7.4 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1,0 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,11 %.
8. Xxxxxxxxxxxxxxxxxx [4]
8.1 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx 2 % xx xxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, různé xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx) xxxxxxxxx 0,37 %.
8.2 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % xx neměla xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, různí xxxxxxxxxxxxxxx, různé xxxxxxxxx xxxx různá xxxx) xxxxxxxxx 0,21 %.
8.3 Xxx obsahu xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx podmínek (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx experimentátoři, xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx doba) xxxxxxxxx 0,19 %.
8.4 Při xxxxxx hydrochinonmonobenzyletheru 1 % by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx stanovení xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx experimentátoři, xxxxx xxxxxxxxx nebo různá xxxx) xxxxxxxxx 0,11 %.
9. Poznámky
9.1 Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx vyšší xxx 2 % x je xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xx být xxxxxxx vzorku (5.1) xxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxx obsahující 2 % hydrochinonu, x xxxxxxxxx xx xxxx xxx opakováno.
(U xxxxxxxxx přístrojů xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx detektoru.)
9.2 Rušivé xxxxx
Xxxx popsaná xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x jeho xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx hydrochinonu, xxxxxx xxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxx X18 x uvedenou xxxxxxx xxxx.
X této metody xxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx. X takovém xxxxxxx xx stanovení xxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxx systémem xxxxxxx xxxx/xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx x xxxxxxxxxx v xxxxxxxx 2 a 3:
Xxxxxx: Zorbax XXX, 4,6 xx × 25 xx nebo xxxxxxxxxxxx:
xxxxxxx: 36 °C
průtok: 1,5 xx/xxx
xxxxxxx xxxx:
xxx xxxxxxxxxxx: methanol/voda 5/95 (X/X)
xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: methanol/voda 30/70 (X/X)
xxx hydrochinonmonobenzylether: xxxxxxxx/xxxx 80/20 (X/X) [5].
Xxxxxx: Xxxxxxxxxx X5XXX xxxx ekvivalentní:
mobilní xxxx: xxxx/xxxxxxxx 90/10 (X/X)
xxxxxx: 1,5 xx/xxx
Xxxx podmínky xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx [6].
[1] XXX 5725.
[2] XXX 5725.
[3] XXX 5725.
[4] XXX 5725.
[5] Herpol-Borremans, X., Xxxxx M.-O., Xxxxxxxxxxxxxx xx dosage xx x’xxxxxxxxxxxx xx xx xxx xxxxxx méthylique xx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx blanchir xx xxxx. Xxx. X. Xxxxxx. Xxx., 8-203-214 (1986).
[6] Xxxxx, X., Xxx X., Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx in xxxx toning xxxxxx, Xxxxxxx, (1986), 111, x. 129.