Šestá směrnice Komise 95/32/XX
xx xxx 7. xxxxxxxx 1995
o xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
(Xxxx s xxxxxxxx xxx XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x ohledem xx Xxxxxxx o založení Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxx 76/768/XXX xx dne 27. xxxxxxxx 1976 x sbližování xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 94/32/XX [2], x xxxxxxx xx xx. 8 xxxx. 1 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx k xxxx, xx xx xx xxxxxxxx 76/768/XXX xxxxxxx úřední zkoušení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx dodržení xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx předpisy Xxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx kosmetických xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx by všechny xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx být stanoveny xx nejdříve; že xxxxxxx metody xxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx Komise 80/1335/EHS [3] xx znění xxxxxxxx 87/143/XXX [4], xxxxxxxx 82/434/XXX [5] xx xxxxx směrnice 90/207/XXX [6] x xx xxxxxxxxxx 83/514/XXX [7], 85/490/EHS [8] x 93/73/EHS [9];
vzhledem x xxxx, xx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, kyseliny 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx x stanovení xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x hydrochinonmonobenzyletheru x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx jsou xxxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx jsou x souladu xx xxxxxxxxxxx Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx 76/768/EHS xxxxxxxxxxx pokroku,
PŘIJALA XXXX XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Xxxxxxx xxxxx xxxxx všechny nezbytné xxxxx x xxxxxxxxx xxxx, xxx se xxx úředním zkoušení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx:
- xxxxx x xxxxxxxxx kyseliny xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx sorbové, xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- důkaz x xxxxxxxxx hydrochinonu, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx a hydrochinonmonobenzyletheru xxxxxxxxx metodami xxxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxx 2
1. Členské xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx nezbytné xxx xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx do 30. xxxx 1996. Xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx Xxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx státy xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxx při xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxx xxxxx sdělí Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx předpisů, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 3
Xxxx směrnice xxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx v Xxxxxxx xxxxxxxx Evropských xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 4
Xxxx xxxxxxxx xx určena xxxxxxxx xxxxxx.
X Xxxxxxx dne 7. července 1995.
Xx Xxxxxx
Xxxx Bonino
členka Komise
[1] Xx. xxxx. X 262, 27.9.1976, x. 169.
[2] Úř. xxxx. X 181, 15.7.1994, x. 31.
[3] Xx. věst. X 383, 31.12.1980, x. 27.
[4] Xx. xxxx. X 57, 27.2.1987, x. 56.
[5] Xx. věst. X 185, 30.6.1982, x. 1.
[6] Úř. xxxx. X 108, 28.4.1990, x. 92.
[7] Xx. xxxx. X 291, 24.10.1983, x. 9.
[8] Xx. xxxx. X 295, 7.11.1985, x. 30.
[9] Xx. xxxx. X 231, 14.9.1993, x. 34.
PŘÍLOHA
I. DŮKAZ X XXXXXXXXX XXXXXXXX BENZOOVÉ, XXXXXXXX 4XXXXXXXXXXXXXXX, XXXXXXXX XXXXXXX, KYSELINY XXXXXXXXXX X XXXXXXXX XXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX
1. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx je použitelná xxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx salicylové x xxxxxxxx propionové x xxxxxxxxxxxx prostředcích. Xxxxxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, kyseliny 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx procentech xxxxxxx kyselin.
A. XXXXX
1. Xxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx extrakt xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx tenké xxxxxx (XXX) x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ("derivatizace xx xxxxx"). X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx, x xxxxxxx kyseliny propionové, xxxxxxxx chromatografií (GC).
2. Xxxxxxx xxxxxxx
2.1 Obecně
Všechna xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x.x. Xxxx xxx použita xxxxxxxxxxx voda xxxx xxxx alespoň xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2.2 Xxxxxx
2.3 Xxxxxxxxxxxx
2.4 Xxxxxxxxxxx
2.5 Xxxxxx
2.6 xXxxxx
2.7 Xxxxxxx, xxxxxx
2.8 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, 4 X
2.9 Xxxxxxxx draselný, 4 X vodný roztok
2.10 Xxxxxxx vápenatý, XxXx2·2X2X
2.11 Xxxxxxxxx lithný, Li2CO3
2.12 2Xxxx2‘xxxxxxxxxxx
2.13 Xxxxxxxx 4hydroxybenzoová
2.14 Xxxxxxxx salicylová
2.15 Xxxxxxxx xxxxxxxx
2.16 Kyselina sorbová
2.17 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
2.18 Xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx se 0,1 % (x/X) xxxxxxx (100 mg/100 xx) xxxxx z xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (2.13 xx 2.17) x xxxxxxxxxxxxx.
2.19 Derivatizační xxxxxxx
0,5 % roztok 2xxxx2‘xxxxxxxxxxxx (2.12) v acetonitrilu (2.4) (50 mg/10 xx). Xxxxx roztok xx xxx xxx xxxxxxxxxxx každý xxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxx.
2.20 Xxxxxx xxxxxxxxxxxx
0,3 % (m/V) xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (2.11) xx xxxx (300 xx/100 xx). Tento xxxxxx by měl xxx připravován xxxxxxx.
2.21 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxx (2.5)/xxxxxx (2.2) (20: 0,5, X/X)
2.22 Xxxxxx parafin (2.7)/xxxxxx (2.6) (1:2, X/X)
3. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx vybavení
3.1 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx teplotu 60 °X
3.2 Xxxxxxxx xxxxxx
3.3 Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx 254 a 366 xx
3.4 Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx, Silikagel 60, bez fluorescenčního xxxxxxxxxx, 20 × 20 cm, xxxxxxxx xxxxxx 0,25 xx x xxxxxxxxxxxx xxxxx 2,5 × 20 xx (Xxxx 11845 xxxx xxxxxxxxxxxx)
3.5 Mikrostříkačka xx 10 μx
3.6 Xxxxxxxxxxxxxx na 25 μx
3.7 Sušárna xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx 105 °X
3.8 Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 50 x 200 ml xx xxxxxxxxxxx xxxxxx
3.9 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx 90 xx, Schleicher &xxx; Xxxüxx, Weissband Xx. 5892, xxxx xxxxxxxxxxxx
3.10 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xX 1 – 11
3.11 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx lahvičky xx 5 ml
3.12 Xxxxxxx xxxxxxx odparka (Rotavapor xxxx xxxxxxxxxxxx)
3.13 Topná xxxxx
4. Xxxxxx
4.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xx Erlenmeyerovy xxxxx xx 50 xx xx zabroušenou zátkou (3.8) se xxxxxx xxxxxxxxx 1 x xxxxxx. Přidají xx xxxxx xxxxx 4 X kyseliny chlorovodíkové (2.8) a 40 xx xxxxxxx (2.2). X xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, jako xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxx xxx xxxxxxx 20 xxxxx 4 X xxxxxxxx chlorovodíkové (2.8). Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) se xxxxxxxxxxx, xxx xx xX přibližně 2. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx a xx xxxx jedné xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx extrakci xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx fáze, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx asi 60 °X, xxx se xxxxxx xxxx rozpustila.
Roztok xx zchladí na xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx filtrační xxxxx (3.9) xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
20 xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx Erlenmeyerovy baňky xx 200 xx, xxxxx xx 20 xx xxxx x xxxxxxxx se. xX xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx na 10 xxxxxx 4 X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (2.9) xx xxxxxxx indikátorového xxxxxxx (3.10).
Xxxxx xx 1 g chloridu xxxxxxxxxx (2.10) x xxxxx se xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (3.9) xx xxxxxx nálevky xx 250 ml xxxxxxxxxx 75 xx xxxxxxxxxxxxx (2.3) x xxxxx se třepe xxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx nechají xxxxxxx x xxxxx vrstva xx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 250 xx. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) xx xX vodného xxxxxxx xxxxxx na přibližně 2 xxxxxxxxxx 4 X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (2.8). Xxxxx xx 10 xx xxxxxxxxxxxxx (2.3), xxxxx xx xxxxxxxxx x silně xxxxxxxxxx xxxxx minutu; xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (3.12). Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx a xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x 1 xx xxxxxxxxxxxxx (2.3). Xxxxxx xx převede xx xxxxxxxxxx lahvičky (3.11).
4.2 Chromatografie na xxxxx vrstvě
Na startovní xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx (3.4) se xx xxxx, jejichž xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx (3.5) xx xxxxxxxx xxxxxxxxx vždy xx 3 μx xxxxxxxxxx lithného (2.20) x xxxxxx xx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx deska xx xxxxxxx na topnou xxxxx (3.13) xxxxxxxx xx 40 °C, xxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx (3.5) xx xx startovní xxxxx xxxxx nanese vždy 10 μx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (2.18) x roztoku vzorku (4.1) přesně xx xxxx, xxx xxx xxxxxxx uhličitan xxxxxx.
Xxxxxxx xx opět xxxxxx xx bodů, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx/xxxxxxx vzorku a xxxxxx uhličitanu lithného, xxxxxx xxxxxxxxx 15 μx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (2.19) (xxxxxx 2xxxx2‘xxxxxxxxxxxx).
Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x sušárně (3.7) 45 xxxxx xxx 80 °C. Xx xxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxx x xxxxxx (3.2), která xxxx (xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx) 15 minut xxxxxx vyvíjecím rozpouštědlem 2.21 (toluen/aceton), xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx nedosáhne xxxxxxxxxxx 15 xx (xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx 80 xxxxx).
Xxxxx xx xxxxxx x xxxxxx studeného xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx vyhodnotí xxx XX světlem (3.3). Xxx xxxxxxxx fluorescence xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx deska xxxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxx (2.22).
5. Xxxxx
Xxx xxxxxx skvrnu xx xxxxxxx xxxxxxx Rf.
Hodnoty Xx a xxxxxxx xxxxxx xxx UV xxxxxxx xx porovnají x xxxxxxxxx x xxxxxxxx referenčních xxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x přítomnosti x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad. Xxxxxxx se vysokoúčinná xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx X, xxxx xxxxxxx-xx se, xx je přítomna xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx X. Získané xxxxxxxx xxxx se porovnají x retenčními xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx TLC x XXXX xxxx XX xx xxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xxxxxx konzervačních xxxxxx xx vychází x xxxxxxxxx výsledků.
B. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXX, KYSELINY 4XXXXXXXXXXXXXXX, KYSELINY SORBOVÉ X XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxxxxxx metody
Vzorek xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxx. Xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx (XXXX).
2. Reakční xxxxxxx
2.1 Xxxxxxx reakční xxxxxxx musí xxx xxxxxxx x.x. a xxxx být vhodná xxx XXXX. Xxxx xxx použita destilovaná xxxx nebo xxxx xxxxxxx ekvivalentní xxxxxxx.
2.2 Xxxxxxx, xxxxxxxxx
2.3 Kyselina 4xxxxxxxxxxxxxxx
2.4 Kyselina xxxxxxxxxx
2.5 Xxxxxxxx benzoová
2.6 Xxxxxxxx xxxxxxx
2.7 Xxxxx xxxxx, (XX3XXXXx·3X2X)
2.8 Xxxxxxxx xxxxxx, x420 = 1,05 x/xx
2.9 Acetonitril
2.10 Xxxxxxxx xxxxxx, 2 X
2.11 Xxxxxxxx xxxxxxxx, 0,2 X xxxxx xxxxxx
2.12 Xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx
2.13 Xxxx xxxxxxx/xxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxx (2.2) xx smíchá x jedním xxxxx xxxx (2:1)
2.14 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx se xxxxxx obsahující 1 x xxxxxxxx 2methoxybenzoové (2.12) x 500 xx směsi ethanol/voda (2.13).
2.15 Mobilní fáze xxx HPLC
2.15.1 Acetátový xxxx: do 1 xxxxx xxxx xx xxxxx 6,35 x xxxxxx xxxxxxx (2.7) x 20,0 ml xxxxxxxx octové (2.8) x xxxxxx xx.
2.15.2 Xxxxxxx fáze xx xxxxxxxx smícháním xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx pufru (2.15.1) a jednoho xxxx xxxxxxxxxxxx (2.9).
2.16 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxx baňky xx 50 xx xx přesně xxxxxx xxx 0,05 x xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx (2.3), 0,2 x kyseliny xxxxxxxxxx (2.4), 0,2 x xxxxxxxx benzoové (2.5) x 0,05 x xxxxxxxx xxxxxxx (2.6) x xxxxx xx doplní xxxxx xxxxxxx/xxxx (2.13). Xxxxxx xx xxxxxxxx v xxxxxxxx. Roztok je xxxxxxxx jeden xxxxx.
2.17 Xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxx xx 20 xx xx xxxxxx 8,00, 4,00, 2,00, 1,00 x 0,50 ml xxxxxxxxx xxxxxxx (2.16). Xx každé baňky xx přidá 10,00 xx roztoku xxxxxxxxx xxxxxxxxx (2.14) x 0,5 xx 2 X xxxxxxxx sírové (2.10). Objem xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxx (2.13). Xxxx roztoky xxxx být připravovány xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx a xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx:
3.1 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx na 60 °X
3.2 Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx x UV xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a 10μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3.3 Xxxxxxxxxx kolona
Korozivzdorná ocel, xxxxx 12,5 xx 25 cm, xxxxxxx xxxxxx 4,6 xx, xxxxxx Xxxxxxxxxxx 5X18 xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3.4 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx: 90 mm, Schleicher xxx Xxxüxx, Xxxxxxxxx Xx 5892 xxxx xxxxxxxxxxxx.
3.5 Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 50 ml
3.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 5 ml
3.7 Xxxxx xxxxxxx, karborundum, xxxxxxxx 2–4 xx, xxxx xxxxxxxxxxxx
4. Postup
4.1 Xxxxxxxx xxxxxx
4.1.1 Příprava xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 50 xx (3.5) se xxxxxx 1 x xxxxxx. Xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx 10 xx 2 X xxxxxxxx xxxxxx (2.10) x 40 xx směsi ethanol/voda (2.13). Xxxxx se xxxxxxxxx 1 x xxxxxxx kamínků (3.7), xxxxx se xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx xxxxx minutu xxxxxxxxxx, xxxxx nevznikne xxxxxxxxx xxxxxxxx. Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx do ethanolové xxxx se Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx xxxxx (3.1) xxx 60 °X.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxx se ihned xxxxxxx v xxxxxx xxxxxxx vody a xxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxx xxx 5 °X.
Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (3.4). Xxx 2 xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx do xxxxxxxxxx lahvičky (3.6). Xxxxxxx se uchovává xxx 5 °C x stanovení xxxxxx XXXX se xxxxxxx xx 24 xxxxx.
4.1.2 Xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx vnitřního xxxxxxxxx
Xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 50 xx (3.5) xx x xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx 1 ± 0,1 x xxxxxx (x gramů). Xxxxxxx se xxxxx 1,00 xx 2 X kyseliny xxxxxx (2.10) x 30,0 xx směsi ethanol/voda (2.13). Xxxxx xx xxxxxxxxx 1 x xxxxxxx xxxxxxx (3.7) x 10 xx xxxxxxx vnitřního standardu(2.14). Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x silně xx xxxxxxx jednu xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx homogenní suspenze. Xxx usnadnění xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xx Xxxxxxxxxxxxx baňka xxxxxxx xxxxxx xxx minut xx vodní xxxxx (3.1) xxx 60 °X.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx vody x xxxxxxx xx xxxxx xx hodinu xxx 5 °X.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx přes xxxxxxxxx xxxxx (3.4). Xxx 2 ml xxxxxxxx se xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.6). Xxxxxxx xx xxxxxxxx při 5 °X x xxxxxxxxx xxxxxx XXXX xx xxxxxxx xx 24 xxxxx.
4.2 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxx (2.15).
Xxxxxx xxxxxxx xxxx kolonou xx xxxxxxx na 2,0 ± 0,5 ml/min. Xxxxxx délka xxxxxxxxx xx xxxxxxx na 240 xx.
4.2.1 Xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.2) xx xxxxxxxxx po 10 μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (2.17). Xxx xxxxx xxxxxx se xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx přísadu xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku.
Přesvědčete xx, xx při xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx získána xxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxx chromatografu (3.2) xx xxxxxxxxx 10 μx extraktu vzorku (4.1.1) x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Nastříkne xx 10 μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx konzervační xxxxxxx (2.17) x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx se xxxxxxxxx. Xxxx-xx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx vzorku (4.1.1) žádný pík x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx časem jako xxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 10 μx xxxxxxxx xxxxxx x přidaným vnitřním xxxxxxxxxx (4.1.2) x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.
Xx-xx x chromatogramu xxxxxxxx xxxxxx (4.1.1) xxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxx vybrán xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. (Xxxx-xx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx konzervačních xxxxxx x chromatogramu přítomna, xxx xxxx konzervační xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx standard.)
Je třeba xxxxxx, xxx chromatogramy xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x roztok xxxxxx splňují xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx 0,90. (Xxxxxxxx separace xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx 1)
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxx xxxx
Xxxx-xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxx buď xxxxxxx účinnější kolona xxxx xx mělo xxx složení xxxxxxx xxxx xxxxxxxx tak, xxx xxx požadavek xxxxxx.
- Faktor xxxxxxxxx Xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xx se xxx xxxxxxxxx xx 0,9 xx 1,5. (Xxxxxxxx faktoru xxxxxxxxx xx xxxxxxx na xxxxxxx 2.) Xxx xxxxxxxxxxx chromatogramu za xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx je doporučená xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx 2 xx/xxx.
Xxxxxxx 2: Xxxxxx xxxxxxxxx xxxx
- Základna xxxx xxx xxxxxxxx.
5. Xxxxxxx
Xxx xxxxxxx koncentrace konzervačních xxxxxx v xxxxxxx xxxxxx se použijí xxxxxx xxxxx píků xxxxxxxxxxxxx konzervačních přísad x xxxxx píku xxxxxxxx 2methoxybenzoové (xxxxxxx xxxxxxxx) x dále xxxxxxxxxx graf. Obsah xxxxxxxx benzoové, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, kyseliny xxxxxxx xxxx kyseliny salicylové xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx procentech (xx) xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx
xx % (x/x) = (100x 20 x x) / (106 x&xxxx; a) = b / (500 x x)
xxx
x = xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1.2) (g),
b = koncentrace konzervační xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx (4.1.2) (μg/ml) xxxxxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxx.
6. Xxxxxxxxxxxxxx [1]
Xxx xxxxxx kyseliny 4xxxxxxxxxxxxxxx 0,40 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx xxxxxxx vzorkem xxxxxxxxx 0,035 %.
Xxx xxxxxx xxxxxxxx benzoové 0,50 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx současně xx xxxxxxx vzorkem xxxxxxxxx 0,050 %.
Xxx xxxxxx kyseliny salicylové 0,50 % xx xxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejným xxxxxxx xxxxxxxxx 0,045 %.
Xxx xxxxxx xxxxxxxx sorbové 0,60 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejným vzorkem xxxxxxxxx 0,035 %.
7. Xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xx množství kyseliny xxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxx kyselin ze xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x množství xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx tedy xxxx xxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2 Je-li xx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx ochrannou xxxxxx.
X. STANOVENÍ XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Rozsah a xxxxxx použití
Tato metoda xx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx propionové x xxxxxxxxxxxx prostředcích xx do xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 2 % (x/x).
2. Definice
Koncentrace xxxxxxxx xxxxxxxxxx stanovená xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (% x/x) výrobku.
3. Xxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx kyseliny 2xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
4. Reakční xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx činidla xxxx xxx xxxxxxx p.a; xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx alespoň xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.1 Ethanol, 96 % (V/V)
4.2 Kyselina xxxxxxxxxx
4.3 Kyselina 2xxxxxxxxxxxxxxxx
4.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, 10 % (x/X)
4.5 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx 50 xx se xxxxxx xxxxxx 1 x (x gramů) xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xx xx objem xxxxxxxxx (4.1).
4.6 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx odměrné xxxxx xx 50 xx xx xxxxxx xxxxxx 1 x (x gramů) xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xx na xxxxx xxxxxxxxx (4.1).
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
5.1 Běžné xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx:
5.2 Plynový chromatograf x plamenovým ionizačním xxxxxxxxxx
5.3 Skleněná zkumavka (20 × 150 xx) xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
5.4 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx 60 °X
5.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx 10 xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx pórů 0,45 μm)
6. Postup
6.1 Xxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 Příprava xxxxxx bez vnitřního xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.3) xx xxxxxx xxxxxxxxx 1 x xxxxxx. Xxxxx se 0,5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (4.4) x 9,5 xx xxxxxxxx (4.1).
Xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx protřepe. Xxxx xx nezbytné, xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxx xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xx 60 °X (5.4), aby xx xxxxx rozpustila xxxxxx fáze. Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx přes xxxxxxxxxx xxxxx (5.5). Chromatografie xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx den.
6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xx xxxxxxxx zkumavky (5.3) xx s xxxxxxxxx xx 3 xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx 1 ± 0,1 x xxxxxx. Xxxxx xx 0,5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (4.4), 0,50 xx roztoku xxxxxxxxx standardu (4.6)x 9 xx xxxxxxxx (4.1).
Xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxx xx xxx xxxxx xx xxxxx lázně xxxxxxx na 60 °X (5.4), xxx xx zcela xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx. Zkumavka xx xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx vodou. Xxxx roztoku xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx (5.5). Chromatografie xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx den.
6.2 Xxxxxxxx xxx plynovou xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx
Xxx: xxxxxxxxxxxxx xxxx
Xxxxx: 2 x
Xxxxxx: ⅛"
Náplň: 10 % XX™ 1000 (xxxx xxxxxxxxxxxx) + 1 % X3XX4 na Xxxxxxxxxxx XXX 100–120 mesh
Teplota
Nástřik: 200 °X
Xxxxxx: 120 °X
Xxxxxxxx: 200 °X
Xxxxx xxxx: xxxxx
Xxxxxxxxx rychlost: 25 ml/min
6.3 Xxxxxxxxxxxxxx
6.3.1 Xxxxxxxxx
Xx řady xxxxxxxxx xxxxx na 20 xx xx xxxxxxxxxx 0,25, 0,50, 1,00, 2,00 a 4,00 xx xxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxx (4.5). Xx xxxxx odměrné xxxxx xx odpipetuje 1,00 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.6); xxxxxx xx na objem xxxxxxxxx (4.1) x xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx vnitřní xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xx/xx (xx xxxxxxx 1 xx/xx, xx-xx e = 1,000) a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x/4, x/2, x, 2x, 4x xx/xx (xx xxxxxxx 0,25, 0,50, 1,00, 2,00, 4,00 xx/xx, xx-xx x = 1,000).
Xxxxxxxxx xx 1 μl xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxx x x xxxxxx odpovídajících xxxxx xxxx xx xxx x.
Xxxxxxxxxx xx 3 xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx.
6.3.2 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx 1 μx xxxxxxxx xxxxxx 6.1.1. Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x chromatogramem xxxxxxx xx standardních xxxxxxx (6.3.1). Xx-xx xxx xxxxxxxxx stejný xxxxxxxx xxx xxxx xxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx vnitřní xxxxxxxx. Není-li xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxxxxx se 1 μx filtrátu vzorku 6.1.2 x xxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx propionové x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx 3 dávky x každého roztoku x xxxxxxx se xxxxxx poměrů ploch xxxx.
7. Výpočty
7.1 Z xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx bodu 6.3.1 xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (K), xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx vypočtenému x xxxx 6.3.2.
7.2 X xxxxx xxxxxxxxx poměru xxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx kyseliny xxxxxxxxxx xx xxxxxx (x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx vzorce
x % (x/x) = X (0,5 x 100 x e) / (50 x x) =X(x / x)
xxx
X = poměr xxxxxxxxx x xxxx 7.1,
x = xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx 4.6,
x = xxxxxxxx xxxxxx x gramech podle xxxx 6.1.2,
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
8. Xxxxxxxxxxxxxx [2]
Xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 2 % (x/x) xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx současně xx stejným xxxxxxx xxxxxxxxx 0,12 %.
XX. XXXXX X XXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX, HYDROCHINONMONOMETHYLETHERU, XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX X HYDROCHINONMONOBENZYLETHERU V XXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX
X. DŮKAZ
1. Xxxxxx a oblast xxxxxxx
X xxxxxx xx xxxxxxx detekce x xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx.
2. Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxx x jeho xxxxxx se provede xxxxxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx (XXX).
3. Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx čistoty x.x.
3.1 Ethanol, 96 % (X/X)
3.2 Chloroform
3.3 Xxxxxxxxxxxx
3.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx, 66: 33 (V/V)
3.5 Xxxxxxx, 25 % (x/x) (x420 = 0,91 x/xx)
3.6 Kyselina xxxxxxxxx
3.7 Xxxxxxxxxxx
3.8 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.9 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.10 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx)
3.11 Xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx připravují xxxxxxx a xxxx xxxxxxxx jeden den.
3.11.1 Xx xxxxxx zkumavky xx 10 ml xx xxxxxx 0,05 x hydrochinonu (3.7). Xxxxx se 0,250 x xxxxxxxx xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx xx xxxxxxx (3.5), dokud xxxx xxxxxxxx pH 10, x xxxxxx xx xxxxxxxxx xx objem 10 xx (3.1).
3.11.2 Xx xxxxxx xxxxxxxx xx 10 xx xx naváží 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.8). Xxxxx xx 0,250 x kyseliny xxxxxxxxx (3.6) a 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx xx xxxxxxx (3.5), dokud xxxx xxxxxxxx pH 10, x xxxxxx se xxxxxxxxx xx xxxxx 10 xx (3.1).
3.11.3 Xx dělené zkumavky xx 10 ml xx naváží 0,05 x hydrochinonmonoethyletheru (3.9). Xxxxx xx 0,250 x xxxxxxxx xxxxxxxxx (3.6) a 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx se xxxxxxx (3.5), xxxxx není xxxxxxxx xX 10, x doplní xx xxxxxxxxx xx objem 10 xx (3.1).
3.11.4 Xx xxxxxx zkumavky xx 10 xx xx naváží 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.10). Xxxxx se 0,250 x kyseliny askorbové (3.6) a 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx xx amoniak (3.5), xxxxx xxxx xxxxxxxx pH 10, x xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx 10 xx (3.1).
3.12 Xxxxxxxx stříbrný
3.13 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.14 Kyanoželezitan xxxxxxxx xxxxxxxxxx
3.15 Chlorid železitý xxxxxxxxxx
3.16 Xxxxxxxx xxxxxxx
3.16.1 Xx 5 % xxxxxxx xxxxxxx (m/V) xxxxxxxxx stříbrného (3.12) xx přidává xxxxxxx (3.5), dokud xx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx:
Xxx xxxxxx xxxxx xx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x měl xx xxx xx xxxxxxx zlikvidován.
3.16.2 10 % (m/V) roztok xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.13) x xxxxxxxx (3.1).
3.16.3 Xxxxxxxx se 1 % (x/X) vodný xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.14) a 2 % (x/X) vodný xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.15). Xxxxx před xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx obou xxxxxxx.
4. Přístroje a xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x dále:
4.1 Xxxxx xxxxxxxx pro chromatografii xx xxxxx xxxxxx
4.2 Xxxxxx desky xxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx: xxxxxxxxx XXX/XX254 (254 xx dolním xxxxxxx XXX/XX); 20 × 20 xx (Xxxxxxx, Nagel xxxx xxxxxxxxxxxx). Xxxxxxxx vrstvy 0,25 mm.
4.3 Xxxxxxxxxxxx xxxxx
4.4 Xxxxxxxxxxx
4.5 UV xxxxx, 254 nm
5. Xxxxxx
5.1 Příprava xxxxxx
Xx xxxxxx zkumavky xx 10 xx xx xxxxxx 3 g xxxxxx. Xxxxx se 0,250 x kyseliny xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx xxxxxxxx (3.1). pH xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx (3.5) xx 10. Xxxxx xx doplní xxxxxxxxx (3.1) xx 10 xx. Zkumavka xx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx se 10 minut x xxxxxxxxxxxx lázni. Zfiltruje xx přes xxxxxxxxx xxxxx xxxx se xxxxxxxx xxx 3000 xx./xxx.
5.2 Chromatografie xx xxxxx xxxxxx (XXX)
5.2.1 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.4).
5.2.2 Xx xxxxx xx xxxxxx xx 2 μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.11) a 2 μx xxxxxxx xxxxxx (5.1). Xxxxxx xx xx xxx xxx teplotě xxxxx, xxxxx xxxx rozpouštědla xxxxxxxxx vzdálenosti 15 xx xx xxxxxx.
5.2.3 Xxxxx se xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxx pokojové xxxxxxx.
5.3 Xxxxxxx
5.3.1 Deska xx xxxxxxxx xxx XX xxxxxx xxx 254 xx x xxxxxx xxxxx xx označí.
5.3.2 Xxxxx xx xxxxxxxx
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.16.1), xxxx
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.16.2); xxxxxxx se xx xxx 120 °X, nebo
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx draselného x xxxxxxxx chloridu xxxxxxxxxx (3.16.3).
6. Xxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx Xx každé xxxxxx.
Xxxxxx získané xxx xxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxx x jejich hodnoty Xx, xxxxx xxxxx x UV xxxxxx x barvu skvrn xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx chromatografie xxxxxxx x následujícím oddílu (X) x porovnají xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxx (xxxx) xxxxxx x xxxxxxxxxx časy píků xxxxxxxxxxxx roztoků.
Výsledky z XXX x XXXX xx xxxxxxxxxx s xxxxx dokázat xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx.
7. Xxxxxxxx
Xx uvedených xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx Xx:
xxxxxxxxxxx: 0,32
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: 0,53
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: 0,55
hydrochinonmonobenzylether: 0,58
X. XXXXXXXXX
1. Rozsah x xxxxxx xxxxxxx
X xxxxxx je specifikován xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, hydrochinonmonoethyletheru x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx.
2. Podstata xxxxxx
Xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxx xxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx, kterým xx xxxxxxxx tukový xxxxxxxx. Stanovení xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxx x XX xxxxxxx.
3. Reakční činidla
3.1 Xxxxxxx reakční xxxxxxx xxxx xxx čistoty x.x. Xxxx xxx xxxxxxx destilovaná xxxx xxxx voda xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3.2 Xxxxxxxx
3.3 Xxxxxxxxxxx
3.4 Hydrochinonmonomethylether
3.5 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.6 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx)
3.7 Tetrahydrofuran, xxxxxxx pro XXXX
3.8 Xxxx voda/methanol 1:1 (X/X). Xxxxxx se xxxxx xxx vody x jeden xxx xxxxxxxxx (3.2)
3.9 Xxxxxxx xxxx: xxxx tetrahydrofuran/voda 45:55 (X/X). Xxxxxx xx 45 dílů xxxxxxxxxxxxxxxx (3.7) x 55 xxxx vody.
3.10 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx 50 xx se xxxxxx 0,06 x xxxxxxxxxxxx (3.3), 0,08 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.4), 0,10 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.5) x 0,12 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.6). Rozpustí xx x xxxxxx xx xx xxxxx xxxxxxxxxx (3.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxx 10 ml xxxxxx xxxxxxx xx 50 ml xxxxx xxxx/xxxxxxxx (3.8). Xxxx xxxxxxx xx připravují xxxxxxx.
4. Přístroje x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x dále:
4.1 Xxxxx xxxxx nastavitelná xx xxxxxxx 60 °X
4.2 Xxxxxxxxxxxx pro vysokoúčinnou xxxxxxxxxxx chromatografii x XX xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x 10μl xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
4.3 Xxxxxxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx, délka 250 xx, xxxxxxx xxxxxx 4,6 xx, xxxxxx Xxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx Xxxxxxx XXX, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx), velikost částic 6 μx, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx ochranná xxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x ekvivalentní xxxxxx.
4.4 Xxxxxxxxx papír, průměr 90 xx, Xxxxxxxxxx xxx Schüll, Xxxxxxxxx Xx 5892 xxxx xxxxxxxxxxxx
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx 50 ml xx x xxxxxxxxx xx tři xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx 1 ± 0,1 g (x xxxxx) vzorku. Xxxxxx xx rozptýlí xx 25 xx xxxxx voda/methanol (3.8). Xxxxx xx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx jednu xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xx vodní xxxxx (4.1) xxxxxxxxxx xx 60 °C, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx a xxxxxx xx xx xxxxx xxxxx xxxx/xxxxxxxx (3.8). Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxx filtrační xxxxx (4.4). Důkaz XXXX xx provede xx 24 xxxxx xx xxxxxxxx extraktu.
5.2 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
5.2.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx (3.9) xx xxxxxx xx 1,0 xx/xxx x xxxxxx délka xxxxxxxxx se nastaví xx 295 nm.
5.2.2 Xxxxxxxxx xx 10 μx roztoku xxxxxx xxxxxxxxx podle xxxx 5.1 x zaznamená xx xxxxxxxxxxxx. Změří xx xxxxxx xxxx. Xxxxxxx xx kalibrace xxxxx bodu 5.2.3. Xxxxxxxxx xx chromatogramy xxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx (RF) xxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.2.3.
5.2.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx 10 μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) x xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx se provede xxxxxxxxxx, xxxxx není xxxxxx xxxx konstantní.
Stanoví xx xxxxxx xxxxxx XXx (x xx xxxxxx xxxxxxx XX):
XXx = xx /ci
kde
pi = xxxxxx xxxx xxx hydrochinon, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, x
xx = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx hydrochinonmonobenzyletheru v xxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) (x/50 xx).
Xx třeba xxxxxx, zda xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- separace xxxx xxxxxxx odděleného páru xx alespoň 0,90. (Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx 1.).
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxx píků
Není-li xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, měla xx být xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx by xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx tak, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
- Xxxxxx asymetrie Xx všech xxxxxxxxx xxxx by se xxx xxxxxxxxx xx 0,9 do 1,5. (Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx uvedena xx xxxxxxx 2.) Xxx xxxxxxxxxxx chromatogramu za xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxx posuvu xxxxxx xxxxxxx 2 cm/min.
Obrázek 2:Xxxxxx xxxxxxxxx xxxx
- Xxxxxxxx musí xxx xxxxxxxx.
6. Výpočet
Pro výpočet xxxxxxxxxxx xxxxxxx (koncentrací xxxxxxx) ve xxxxxx xx použijí xxxxxx xxxx xxxxxxx. Koncentrace xxxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xx) xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx
xx % (x/x) = (xx x 100) / (XXx x x)
xxx
x = xxxxxxxx xxxxxx x gramech,
bi = xxxxxx xxxx xxxxxxx x ve xxxxxx.
7. Opakovatelnost [3]
7.1 Xxx obsahu hydrochinonu 2,0 % by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,13 %.
7.2 Xxx xxxxxx hydrochinonmonomethyletheru 1,0 % by xxxxxx absolutní hodnota xxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx vzorkem xxxxxxxxx 0,1 %.
7.3 Xxx xxxxxx hydrochinonmonoethyletheru 1,0 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejným xxxxxxx xxxxxxxxx 0,11 %.
7.4 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1,0 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,11 %.
8. Xxxxxxxxxxxxxxxxxx [4]
8.1 Xxx xxxxxx hydrochinonu 2 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xx různých xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx experimentátoři, xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx) xxxxxxxxx 0,37 %.
8.2 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx výsledků xxxx stanovení xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx vzorkem xx xxxxxxx podmínek (xxxxx xxxxxxxxxx, různí xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx doba) xxxxxxxxx 0,21 %.
8.3 Xxx obsahu hydrochinonmonoethyletheru 1 % xx xxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx provedených se xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx) xxxxxxxxx 0,19 %.
8.4 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % xx neměla xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx stanovení xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx experimentátoři, xxxxx xxxxxxxxx nebo různá xxxx) xxxxxxxxx 0,11 %.
9. Poznámky
9.1 Jestliže xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx 2 % x xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx obsahu, xxx xx xxx xxxxxxx xxxxxx (5.1) xxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx 2 % xxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx.
(X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx koncentracích xxxxxxxxxxxx ležet xxxxxxx xxxxxxxxxx mimo xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.)
9.2 Xxxxxx xxxxx
Xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxx x jeho xxxxxx x jednom xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx zajistí xxxxxxxxxxx xxxxxxx hydrochinonu, xxxxxx xxxxx zajistit xxx xxxxxxx kolony X18 x xxxxxxxx mobilní xxxx.
X xxxx metody xxxx xxxxxx dochází x rušivému xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx případě xx xxxxxxxxx xxxx xxx zopakováno x xxxxx systémem xxxxxxx xxxx/xxxxxxxxxxx fáze. Xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxx 2 a 3:
Xxxxxx: Xxxxxx ODS, 4,6 xx × 25 xx nebo xxxxxxxxxxxx:
xxxxxxx: 36 °X
xxxxxx: 1,5 xx/xxx
xxxxxxx xxxx:
xxx xxxxxxxxxxx: xxxxxxxx/xxxx 5/95 (X/X)
xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxx/xxxx 30/70 (V/V)
pro hydrochinonmonobenzylether: xxxxxxxx/xxxx 80/20 (V/V) [5].
Xxxxxx: Spherisorb S5ODS xxxx ekvivalentní:
mobilní xxxx: xxxx/xxxxxxxx 90/10 (X/X)
xxxxxx: 1,5 ml/min
Tyto xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx [6].
[1] ISO 5725.
[2] XXX 5725.
[3] XXX 5725.
[4] ISO 5725.
[5] Xxxxxx-Xxxxxxxxx, M., Xxxxx X.-X., Identification xx xxxxxx xx x’xxxxxxxxxxxx xx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx cosmétiques xxxx xxxxxxxx xx xxxx. Int. J. Xxxxxx. Sci., 8-203-214 (1986).
[6] Xxxxx, X., Xxx I., Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx xxxx toning creams, Xxxxxxx, (1986), 111, x. 129.