Xxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 95/32/XX
xx xxx 7. xxxxxxxx 1995
o xxxxxxxx xxxxxxx nezbytných xxx xxxxxxxx xxxxxxx kosmetických xxxxxxxxxx
(Xxxx s xxxxxxxx xxx XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x ohledem xx Xxxxxxx o založení Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x ohledem xx xxxxxxxx Rady 76/768/XXX xx xxx 27. xxxxxxxx 1976 x sbližování xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx kosmetických xxxxxxxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx xxxxxxxx Komise 94/32/XX [2], x xxxxxxx na čl. 8 xxxx. 1 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxx, xx xx xx směrnici 76/768/XXX xxxxxxx xxxxxx zkoušení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx předepsaných předpisy Xxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx složení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx xx všechny xxxxxxxx metody xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xx xxxxxxxx; xx xxxxxxx metody xxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxx 80/1335/EHS [3] xx xxxxx xxxxxxxx 87/143/XXX [4], xxxxxxxx 82/434/EHS [5] xx xxxxx xxxxxxxx 90/207/XXX [6] x xx xxxxxxxxxx 83/514/XXX [7], 85/490/XXX [8] x 93/73/EHS [9];
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxx x stanovení xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx sorbové, xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx x stanovení xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x hydrochinonmonobenzyletheru v xxxxxxxxxxxx prostředcích xxxx xxxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx se xxxxxxxxxxx Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx 76/768/EHS xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
XXXXXXX TUTO XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Členské xxxxx xxxxx všechny xxxxxxxx xxxxx k xxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx prostředků:
- důkaz x xxxxxxxxx kyseliny xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, hydrochinonmonomethyletheru, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxx 2
1. Členské xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx nezbytné xxx xxxxxxxx souladu x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 30. xxxx 1996. Xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxx Xxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxx při xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx si xxxxxxx členské státy.
2. Xxxxxxx xxxxx xxxxx Xxxxxx znění vnitrostátních xxxxxxxx předpisů, které xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 3
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 4
Tato xxxxxxxx xx xxxxxx členským xxxxxx.
X Bruselu xxx 7. xxxxxxxx 1995.
Xx Xxxxxx
Xxxx Xxxxxx
xxxxxx Xxxxxx
[1] Úř. věst. X 262, 27.9.1976, x. 169.
[2] Xx. věst. X 181, 15.7.1994, x. 31.
[3] Úř. xxxx. X 383, 31.12.1980, x. 27.
[4] Xx. xxxx. X 57, 27.2.1987, x. 56.
[5] Xx. xxxx. X 185, 30.6.1982, x. 1.
[6] Úř. věst. X 108, 28.4.1990, x. 92.
[7] Xx. xxxx. X 291, 24.10.1983, x. 9.
[8] Xx. věst. X 295, 7.11.1985, x. 30.
[9] Xx. věst. X 231, 14.9.1993, x. 34.
XXXXXXX
X. XXXXX X XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXX, XXXXXXXX 4HYDROXYBENZOOVÉ, XXXXXXXX XXXXXXX, XXXXXXXX SALICYLOVÉ X XXXXXXXX XXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX
1. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx důkaz x xxxxxxxxx kyseliny benzoové, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, kyseliny xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx popsány xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx propionové a xxxxxxxxx xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx a kyseliny xxxxxxxx.
2. Definice
Množství xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, kyseliny xxxxxxx a kyseliny xxxxxxxxxx stanovená xxxxx xxxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx procentech xxxxxxx xxxxxxx.
X. XXXXX
1. Xxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx extrakt xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx (XXX) x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ("xxxxxxxxxxxx xx xxxxx"). X xxxxxxxxxx xx výsledcích xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx, v xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (GC).
2. Xxxxxxx činidla
2.1 Obecně
Všechna xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx čistoty x.x. Xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxx ekvivalentní xxxxxxx.
2.2 Xxxxxx
2.3 Xxxxxxxxxxxx
2.4 Xxxxxxxxxxx
2.5 Toluen
2.6 xXxxxx
2.7 Xxxxxxx, xxxxxx
2.8 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, 4 M
2.9 Xxxxxxxx xxxxxxxx, 4 X xxxxx xxxxxx
2.10 Xxxxxxx xxxxxxxx, XxXx2·2X2X
2.11 Xxxxxxxxx lithný, Xx2XX3
2.12 2Xxxx2‘xxxxxxxxxxx
2.13 Xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx
2.14 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
2.15 Kyselina xxxxxxxx
2.16 Kyselina sorbová
2.17 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
2.18 Xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xx 0,1 % (m/V) xxxxxxx (100 xx/100 xx) xxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxxx přísad (2.13 xx 2.17) v xxxxxxxxxxxxx.
2.19 Derivatizační xxxxxxx
0,5 % xxxxxx 2xxxx2‘xxxxxxxxxxxx (2.12) x xxxxxxxxxxxx (2.4) (50 xx/10 xx). Tento xxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x uchováván x xxxxxxxx.
2.20 Xxxxxx xxxxxxxxxxxx
0,3 % (x/X) xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (2.11) xx xxxx (300 xx/100 ml). Xxxxx xxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2.21 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxx (2.5)/xxxxxx (2.2) (20: 0,5, X/X)
2.22 Tekutý parafin (2.7)/xxxxxx (2.6) (1:2, X/X)
3. Přístroje x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx vybavení
3.1 Xxxxx xxxxx nastavitelná xx xxxxxxx 60 °X
3.2 Xxxxxxxx komora
3.3 Xxxxx ultrafialového xxxxxx 254 x 366 xx
3.4 Xxxxxx xxxxx xxx chromatografii xx xxxxx vrstvě, Xxxxxxxxx 60, bez xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, 20 × 20 cm, xxxxxxxx xxxxxx 0,25 mm x koncentrační zónou 2,5 × 20 xx (Xxxx 11845 xxxx xxxxxxxxxxxx)
3.5 Xxxxxxxxxxxxxx xx 10 μx
3.6 Xxxxxxxxxxxxxx na 25 μx
3.7 Xxxxxxx nastavitelná xx xxxxxxx xx 105 °C
3.8 Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 50 x 200 ml xx xxxxxxxxxxx zátkou
3.9 Xxxxxxxxx papír, xxxxxx 90 mm, Schleicher &xxx; Xxxüxx, Weissband Xx. 5892, nebo xxxxxxxxxxxx
3.10 Xxxxxxxxxxx indikátorový xxxxxxx, xX 1 – 11
3.11 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx lahvičky xx 5 ml
3.12 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx)
3.13 Topná xxxxx
4. Xxxxxx
4.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 50 xx xx xxxxxxxxxxx zátkou (3.8) se xxxxxx xxxxxxxxx 1 x xxxxxx. Přidají xx xxxxx xxxxx 4 X kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (2.8) x 40 xx xxxxxxx (2.2). X silně xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx mýdlo, xx xxxx být xxxxxxx 20 kapek 4 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (2.8). Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) xx xxxxxxxxxxx, xxx xx xX xxxxxxxxx 2. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx x xx xxxx xxxxx minuty xx xxxxx protřepává.
Jeli xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxx 60 °X, xxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx filtrační xxxxx (3.9) do Xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
20 xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 200 xx, xxxxx xx 20 xx xxxx x xxxxxxxx xx. xX xxxxx se upraví xxxxxxxxx xx 10 xxxxxx 4 M xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (2.9) xx použití indikátorového xxxxxxx (3.10).
Přidá se 1 x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (2.10) a xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (3.9) xx xxxxxx xxxxxxx xx 250 xx xxxxxxxxxx 75 xx xxxxxxxxxxxxx (2.3) x xxxxx xx třepe xxxxx xxxxxx. Vrstvy xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx vrstva xx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx baňky xx 250 xx. Etherová xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx indikátorového xxxxxxx (3.10) xx xX xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx 2 xxxxxxxxxx 4 X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (2.8). Xxxxx xx 10 xx xxxxxxxxxxxxx (2.3), xxxxx se xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx; xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xx převede xx xxxxxxx xxxxxxx (3.12). Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xx sucha x xxxxxx se xxxxx xxxxxxxx x 1 xx xxxxxxxxxxxxx (2.3). Xxxxxx xx xxxxxxx xx vzorkovací xxxxxxxx (3.11).
4.2 Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx vrstvě
Na xxxxxxxxx xxxxx koncentrační zóny xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xx tenké xxxxxx (3.4) se do xxxx, jejichž xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxx analyzovány, xxxxxx xxxxxxxxxx (3.5) xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xx 3 μl xxxxxxxxxx lithného (2.20) x vysuší xx x proudu xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx deska xx xxxxxxx xx topnou xxxxx (3.13) xxxxxxxx xx 40 °X, xxx se xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx (3.5) xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx nanese vždy 10 μx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (2.18) x xxxxxxx vzorku (4.1) xxxxxx xx xxxx, xxx xxx xxxxxxx uhličitan xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xx xxxx, kam xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx/xxxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx 15 μx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (2.19) (xxxxxx 2brom2‘acetonaftonu).
Chromatografická xxxxx se zahřívá x xxxxxxx (3.7) 45 xxxxx xxx 80 °X. Xx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x komoře (3.2), xxxxx xxxx (xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx) 15 xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx rozpouštědlem 2.21 (xxxxxx/xxxxxx), dokud xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 xx (xxxx xxxxxxxx je xxxxxxxxx 80 xxxxx).
Xxxxx xx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx vyhodnotí xxx XX xxxxxxx (3.3). Xxx zesílení fluorescence xxxxxxx skvrn může xxx xxxxxxxxxxxxxxxx deska xxxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxx (2.22).
5. Xxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx Xx.
Xxxxxxx Xx x xxxxxxx xxxxxx xxx XX xxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxx konzervačních přísad. Xxxxxxx xx vysokoúčinná xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x oddílu B, xxxx xxxxxxx-xx se, xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, provede xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x oddílu X. Xxxxxxx retenční xxxx xx porovnají x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx XXX x XXXX nebo XX xx zkombinují x xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx vychází z xxxxxxxxx xxxxxxxx.
X. STANOVENÍ XXXXXXXX XXXXXXXX, XXXXXXXX 4XXXXXXXXXXXXXXX, XXXXXXXX XXXXXXX X XXXXXXXX SALICYLOVÉ
1. Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xx xx okyselení xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxx. Xx filtraci xx konzervační xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx (XXXX).
2. Xxxxxxx xxxxxxx
2.1 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x.x. x xxxx být xxxxxx xxx XXXX. Musí xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2.2 Xxxxxxx, xxxxxxxxx
2.3 Xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx
2.4 Kyselina xxxxxxxxxx
2.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx
2.6 Kyselina xxxxxxx
2.7 Xxxxx xxxxx, (XX3XXXXx·3X2X)
2.8 Xxxxxxxx xxxxxx, x420 = 1,05 x/xx
2.9 Xxxxxxxxxxx
2.10 Xxxxxxxx xxxxxx, 2 M
2.11 Xxxxxxxx xxxxxxxx, 0,2 X xxxxx xxxxxx
2.12 Xxxxxxxx 2methoxybenzoová
2.13 Směs xxxxxxx/xxxx
Xxxxx dílů ethanolu (2.2) xx xxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxx (2:1)
2.14 Xxxxxx xxxxxxxxx standardu
Připraví se xxxxxx xxxxxxxxxx 1 x xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx (2.12) v 500 xx směsi ethanol/voda (2.13).
2.15 Mobilní fáze xxx XXXX
2.15.1 Xxxxxxxxx xxxx: xx 1 xxxxx xxxx xx xxxxx 6,35 x xxxxxx xxxxxxx (2.7) x 20,0 ml xxxxxxxx xxxxxx (2.8) x smíchá se.
2.15.2 Xxxxxxx xxxx se xxxxxxxx smícháním xxxxxx xxxx acetátového pufru (2.15.1) x jednoho xxxx acetonitrilu (2.9).
2.16 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx 50 xx xx xxxxxx naváží xxx 0,05 x xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx (2.3), 0,2 x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (2.4), 0,2 x kyseliny benzoové (2.5) x 0,05 x xxxxxxxx xxxxxxx (2.6) a xxxxx xx doplní směsí xxxxxxx/xxxx (2.13). Xxxxxx xx uchovává x xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx.
2.17 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xx odměrných baněk xx 20 xx xx odměří 8,00, 4,00, 2,00, 1,00 x 0,50 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (2.16). Xx každé baňky xx xxxxx 10,00 xx roztoku xxxxxxxxx xxxxxxxxx (2.14) x 0,5 xx 2 X kyseliny xxxxxx (2.10). Xxxxx se xxxxxx směsí ethanol/voda (2.13). Xxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Přístroje x xxxxxxx
Xxxxx laboratorní xxxxxxxx x xxxx:
3.1 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx na 60 °C
3.2 Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x XX xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a 10μx nastřikovací smyčkou.
3.3 Xxxxxxxxxx kolona
Korozivzdorná ocel, xxxxx 12,5 až 25 xx, xxxxxxx xxxxxx 4,6 xx, xxxxxx Xxxxxxxxxxx 5X18 xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3.4 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx: 90 mm, Xxxxxxxxxx xxx Xxxüxx, Xxxxxxxxx Xx 5892 xxxx xxxxxxxxxxxx.
3.5 Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 50 ml
3.6 Xxxxxxxx vzorkovací xxxxxxxx xx 5 xx
3.7 Xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx 2–4 xx, xxxx xxxxxxxxxxxx
4. Xxxxxx
4.1 Xxxxxxxx vzorku
4.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx bez xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 50 xx (3.5) se xxxxxx 1 x xxxxxx. Do Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx 10 xx 2 X xxxxxxxx xxxxxx (2.10) a 40 xx směsi ethanol/voda (2.13). Xxxxx se xxxxxxxxx 1 x xxxxxxx kamínků (3.7), xxxxx xx xxxxxx x xxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Pro xxxxxxxxx extrakce konzervačních xxxxxx do xxxxxxxxxx xxxx se Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx lázni (3.1) xxx 60 °X.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx a xxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxx xxx 5 °X.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (3.4). Xxx 2 xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.6). Xxxxxxx xx uchovává xxx 5 °X x stanovení xxxxxx XXXX se xxxxxxx xx 24 xxxxx.
4.1.2 Xxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxx standardu
Do Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 50 ml (3.5) xx x přesností xx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx 1 ± 0,1 g xxxxxx (x xxxxx). Xxxxxxx xx přidá 1,00 ml 2 X xxxxxxxx xxxxxx (2.10) x 30,0 xx směsi xxxxxxx/xxxx (2.13). Xxxxx xx xxxxxxxxx 1 x xxxxxxx xxxxxxx (3.7) x 10 xx xxxxxxx vnitřního xxxxxxxxx(2.14). Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx a silně xx alespoň xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx do xxxxxxxxxx xxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx lázni (3.1) při 60 °X.
Xxxxxxxxxxxxx baňka xx xxxxx xxxxxxx v xxxxxx xxxxxxx xxxx x extrakt xx xxxxx xx hodinu xxx 5 °C.
Extrakt xx zfiltruje přes xxxxxxxxx xxxxx (3.4). Xxx 2 xx xxxxxxxx se xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.6). Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxx 5 °X x stanovení xxxxxx XXXX xx xxxxxxx xx 24 xxxxx.
4.2 Vysokoúčinná xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxx (2.15).
Průtok xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx na 2,0 ± 0,5 xx/xxx. Xxxxxx délka xxxxxxxxx xx nastaví na 240 xx.
4.2.1 Xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.2) xx nastříkne po 10 μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad (2.17). Xxx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxxxx chromatogramů xxxxxxx xxxxx xxxxx píku xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx přísady x výšce píku xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x chromatogramů. Pro xxxxxx konzervační xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx výšek xxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku.
Přesvědčete xx, že xxx xxxxxxxxx byla pro xxxxxxxxxx xxxxxxx získána xxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.2) xx xxxxxxxxx 10 μx xxxxxxxx xxxxxx (4.1.1) x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Nastříkne xx 10 μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (2.17) x xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx se xxxxxxxxx. Xxxx-xx v xxxxxxxxxxxxx extraktu xxxxxx (4.1.1) žádný xxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx 2methoxybenzoové (xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxxxx xx do xxxxxxxxxxxx chromatografu 10 μx xxxxxxxx xxxxxx x přidaným vnitřním xxxxxxxxxx (4.1.2) x xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx.
Xx-xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.1.1) rušivý xxx se xxxxxxx xxxxxxxxx časem xxxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx, měl xx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. (Xxxx-xx jedna x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx tuto xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.)
Xx xxxxx xxxxxx, zda chromatogramy xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx splňují následující xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx píků xxxxxxx odděleného xxxx xx alespoň 0,90. (Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx na xxxxxxx 1)
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxx xxxx
Xxxx-xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx být buď xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxx xxx xxxxxxx mobilní xxxx upraveno tak, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
- Faktor asymetrie Xx všech xxxxxxxxx xxxx xx se xxx xxxxxxxxx xx 0,9 xx 1,5. (Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx 2.) Při xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx faktoru xxxxxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx 2 cm/min.
Obrázek 2: Faktor xxxxxxxxx xxxx
- Základna xxxx xxx xxxxxxxx.
5. Xxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x roztoku xxxxxx se použijí xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad x xxxxx xxxx xxxxxxxx 2methoxybenzoové (xxxxxxx xxxxxxxx) x xxxx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, kyseliny 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx sorbové xxxx kyseliny xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx procentech (xx) xx vypočte xxxxxx xxxxxx
xx % (x/x) = (100x 20 x x) / (106 x x) = x / (500 x x)
xxx
x = hmotnost xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1.2) (x),
x = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx (4.1.2) (μg/ml) xxxxxxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxx.
6. Opakovatelnost [1]
Xxx xxxxxx xxxxxxxx 4hydroxybenzoové 0,40 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,035 %.
Xxx xxxxxx xxxxxxxx benzoové 0,50 % by xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejným vzorkem xxxxxxxxx 0,050 %.
Xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 0,50 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,045 %.
Při xxxxxx kyseliny xxxxxxx 0,60 % by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,035 %.
7. Xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx ukazují, xx xxxxxxxx kyseliny xxxxxx přidané xx xxxxxxxx xxxxxxx ze xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxx xxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2 Xx-xx xx xxxxxxx, xxx xxxxxx vhodnou xxxxxxxxx xxxxxx.
X. STANOVENÍ KYSELINY XXXXXXXXXX
1. Xxxxxx x xxxxxx použití
Tato xxxxxx xx vhodná xxx xxxxxxxxx kyseliny propionové x kosmetických xxxxxxxxxxxx xx xx maximální xxxxxxxxxxx 2 % (x/x).
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxx xxxxxxxxx touto xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx hmotnosti (% x/x) xxxxxxx.
3. Xxxxxxxx metody
Po xxxxxxxx xxxxxxxx propionové x xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx vnitřního xxxxxxxxx.
4. Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx činidla musí xxx čistoty p.a; xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx alespoň ekvivalentní xxxxxxx.
4.1 Xxxxxxx, 96 % (X/X)
4.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
4.3 Kyselina 2xxxxxxxxxxxxxxxx
4.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, 10 % (m/V)
4.5 Xxxxxx xxxxxxxx propionové
Do xxxxxxx xxxxx na 50 xx xx přesně xxxxxx 1 x (x gramů) kyseliny xxxxxxxxxx x xxxxxx xx na objem xxxxxxxxx (4.1).
4.6 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx odměrné xxxxx na 50 xx xx xxxxxx xxxxxx 1 x (x xxxxx) xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx x doplní xx xx xxxxx xxxxxxxxx (4.1).
5. Přístroje x xxxxxxx
5.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx vybavení x xxxx:
5.2 Plynový chromatograf x xxxxxxxxxx ionizačním xxxxxxxxxx
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxx (20 × 150 xx) xx šroubovacím xxxxxxxx
5.4 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx 60 °X
5.5 Xxxxxxxx injekční xxxxxxxxx xx 10 xx x filtrační xxxxxxxxx (průměr pórů 0,45 μx)
6. Postup
6.1 Xxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx skleněné xxxxxxxx (5.3) se naváží xxxxxxxxx 1 x xxxxxx. Přidá xx 0,5 ml kyseliny xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (4.4) x 9,5 xx xxxxxxxx (4.1).
Xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx protřepe. Xxxx xx nezbytné, xxxxxx xx zkumavka xx xxx xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xx 60 °X (5.4), aby xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx fáze. Xxxxxxxx xx xxxxxx zchladí xxx xxxxxxx vodou. Xxxx roztoku xx xxxxxxxxx přes xxxxxxxxxx xxxxx (5.5). Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx.
6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.3) xx x xxxxxxxxx xx 3 xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx 1 ± 0,1 x xxxxxx. Xxxxx xx 0,5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (4.4), 0,50 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.6)x 9 ml ethanolu (4.1).
Xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxx minut xx vodní lázně xxxxxxx na 60 °X (5.4), aby xx xxxxx rozpustila xxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xx rychle xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx (5.5). Chromatografie xxxxxxxx xx provede xxxxxx den.
6.2 Podmínky xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx
Xxx: xxxxxxxxxxxxx xxxx
Xxxxx: 2 x
Xxxxxx: ⅛"
Xxxxx: 10 % XX™ 1000 (nebo xxxxxxxxxxxx) + 1 % X3XX4 xx Xxxxxxxxxxx XXX 100–120 xxxx
Xxxxxxx
Xxxxxxx: 200 °X
Xxxxxx: 120 °X
Xxxxxxxx: 200 °X
Xxxxx xxxx: xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx: 25 ml/min
6.3 Chromatografie
6.3.1 Xxxxxxxxx
Xx xxxx odměrných xxxxx xx 20 xx se xxxxxxxxxx 0,25, 0,50, 1,00, 2,00 x 4,00 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.5). Do xxxxx xxxxxxx baňky xx xxxxxxxxxx 1,00 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.6); xxxxxx xx na xxxxx xxxxxxxxx (4.1) x xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx obsahují xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x mg/ml (to xxxxxxx 1 mg/ml, xx-xx e = 1,000) a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx x/4, p/2, x, 2x, 4x xx/xx (xx znamená 0,25, 0,50, 1,00, 2,00, 4,00 xx/xx, je-li x = 1,000).
Xxxxxxxxx xx 1 μl xxxxxx roztoků a xxxxxxxxxx křivka se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxx x xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx xx osu x x poměru odpovídajících xxxxx xxxx na xxx x.
Xxxxxxxxxx se 3 xxxxx z xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx píku.
6.3.2 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx se 1 μx filtrátu xxxxxx 6.1.1. Xxxxxxxxxxxx se xxxxxxx s chromatogramem xxxxxxx ze xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (6.3.1). Xx-xx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx čas xxxx xxx xxxxxxxx 2methylpropionové, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx-xx pozorován xxxxx xxxxxx vliv, xxxxxxxxx xx 1 μx xxxxxxxx vzorku 6.1.2 x xxxxx xx plochy xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx 3 xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx poměrů xxxxx xxxx.
7. Xxxxxxx
7.1 X xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx bodu 6.3.1 xx odečte xxxxx xxxxxxxxx (K), který xxxxxxxx poměru xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxx 6.3.2.
7.2 X xxxxx xxxxxxxxx poměru xxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxx kyseliny propionové xx xxxxxx (x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx vzorce
x % (x/x) = K (0,5 x 100 x e) / (50 x a) =X(x / x)
xxx
X = xxxxx vypočtený x bodu 7.1,
e = hmotnost xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx 4.6,
x = xxxxxxxx vzorku x gramech podle xxxx 6.1.2,
Xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xx jedno xxxxxxxxx xxxxx.
8. Opakovatelnost [2]
Xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 2 % (x/x) xx neměl xxxxxx výsledků dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx současně xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,12 %.
XX. XXXXX X STANOVENÍ XXXXXXXXXXXX, XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX, HYDROCHINONMONOETHYLETHERU X XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX
X. XXXXX
1. Xxxxxx x oblast xxxxxxx
X xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx.
2. Podstata metody
Důkaz xxxxxxxxxxxx a jeho xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx (TLC).
3. Reakční xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx čistoty x.x.
3.1 Xxxxxxx, 96 % (X/X)
3.2 Chloroform
3.3 Xxxxxxxxxxxx
3.4 Vyvíjecí xxxxxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx, 66: 33 (V/V)
3.5 Xxxxxxx, 25 % (x/x) (x420 = 0,91 x/xx)
3.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxx
3.7 Hydrochinon
3.8 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.9 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.10 Hydrochinonmonobenzylether (xxxxxxxxxx)
3.11 Xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx referenční xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx.
3.11.1 Xx dělené zkumavky xx 10 ml xx xxxxxx 0,05 x xxxxxxxxxxxx (3.7). Xxxxx xx 0,250 x xxxxxxxx xxxxxxxxx (3.6) a 5 xx ethanolu (3.1). Xxxxxxx xx xxxxxxx (3.5), xxxxx není xxxxxxxx xX 10, x xxxxxx se xxxxxxxxx na objem 10 xx (3.1).
3.11.2 Xx xxxxxx zkumavky xx 10 xx xx xxxxxx 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.8). Xxxxx xx 0,250 x kyseliny askorbové (3.6) x 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx se xxxxxxx (3.5), xxxxx xxxx xxxxxxxx pH 10, x doplní se xxxxxxxxx xx xxxxx 10 xx (3.1).
3.11.3 Xx dělené zkumavky xx 10 xx xx naváží 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.9). Xxxxx xx 0,250 x xxxxxxxx askorbové (3.6) a 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx se xxxxxxx (3.5), xxxxx xxxx xxxxxxxx xX 10, x doplní xx xxxxxxxxx na xxxxx 10 ml (3.1).
3.11.4 Xx xxxxxx zkumavky xx 10 xx xx xxxxxx 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.10). Xxxxx se 0,250 x kyseliny xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx xx xxxxxxx (3.5), xxxxx xxxx xxxxxxxx xX 10, x xxxxxx se xxxxxxxxx na xxxxx 10 ml (3.1).
3.12 Xxxxxxxx xxxxxxxx
3.13 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.14 Kyanoželezitan xxxxxxxx xxxxxxxxxx
3.15 Chlorid xxxxxxxx xxxxxxxxxx
3.16 Xxxxxxxx xxxxxxx
3.16.1 Xx 5 % xxxxxxx roztoku (x/X) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.12) xx přidává amoniak (3.5), xxxxx se xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx:
Xxx delším xxxxx xx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x měl xx xxx xx xxxxxxx zlikvidován.
3.16.2 10 % (x/X) roztok xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.13) x xxxxxxxx (3.1).
3.16.3 Xxxxxxxx xx 1 % (m/V) vodný xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx draselného (3.14) a 2 % (m/V) xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.15). Těsně xxxx xxxxxxxx xx smíchají xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx vybavení, x xxxx:
4.1 Běžné xxxxxxxx xxx chromatografii xx xxxxx xxxxxx
4.2 Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx: xxxxxxxxx XXX/XX254 (254 je dolním xxxxxxx GHR/UV); 20 × 20 xx (Xxxxxxx, Nagel xxxx xxxxxxxxxxxx). Xxxxxxxx vrstvy 0,25 mm.
4.3 Xxxxxxxxxxxx xxxxx
4.4 Xxxxxxxxxxx
4.5 XX xxxxx, 254 xx
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx xxxxxxxx na 10 xx xx xxxxxx 3 x xxxxxx. Xxxxx xx 0,250 x kyseliny xxxxxxxxx (3.6) x 5 ml xxxxxxxx (3.1). xX xxxxxxx xx xxxxxx amoniakem (3.5) na 10. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx (3.1) xx 10 ml. Xxxxxxxx xx uzavře xxxxxx x xxxxxxxxxxxx se 10 xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx přes filtrační xxxxx xxxx se xxxxxxxx při 3000 xx./xxx.
5.2 Chromatografie na xxxxx xxxxxx (XXX)
5.2.1 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx vyvíjecím rozpouštědlem (3.4).
5.2.2 Xx xxxxx xx xxxxxx xx 2 μx referenčních xxxxxxx (3.11) x 2 μx roztoku xxxxxx (5.1). Vyvíjí xx ve tmě xxx xxxxxxx xxxxx, xxxxx čelo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vzdálenosti 15 xx xx xxxxxx.
5.2.3 Xxxxx xx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
5.3 Xxxxxxx
5.3.1 Deska xx xxxxxxxx pod XX xxxxxx xxx 254 xx a xxxxxx xxxxx xx xxxxxx.
5.3.2 Xxxxx se xxxxxxxx
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.16.1), xxxx
- kyselinou xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.16.2); xxxxxxx xx xx xxx 120 °X, xxxx
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.16.3).
6. Xxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx Xx xxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx referenční xxxxxxx, xxxxx jde x jejich xxxxxxx Xx, barvu xxxxx x UV světle x xxxxx skvrn xx zviditelnění xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx chromatografie xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx (X) x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxx (xxxx) vzorku x xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx x XXX a XXXX xx xxxxxxxxxx s xxxxx dokázat přítomnost xxxxxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxx.
7. Xxxxxxxx
Xx uvedených xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx hodnoty Rf:
hydrochinon: 0,32
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: 0,53
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: 0,55
hydrochinonmonobenzylether: 0,58
X. STANOVENÍ
1. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
X xxxxxx je specifikován xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x hydrochinonmonobenzyletheru v xxxxxxxxxxxx prostředcích pro xxxxxxxxxx kůže.
2. Podstata xxxxxx
Xxxxxx je extrahován xxxxx voda/methanol za xxxxxxx xxxxxxx, kterým xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Stanovení xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx x UV xxxxxxx.
3. Xxxxxxx činidla
3.1 Xxxxxxx reakční xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x.x. Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx voda xxxxxxx xxxxxxxxxxxx čistoty.
3.2 Xxxxxxxx
3.3 Xxxxxxxxxxx
3.4 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.5 Hydrochinonmonoethylether
3.6 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx)
3.7 Xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx pro HPLC
3.8 Xxxx voda/methanol 1:1 (X/X). Smíchá xx xxxxx xxx xxxx x xxxxx díl xxxxxxxxx (3.2)
3.9 Xxxxxxx xxxx: xxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxx 45:55 (X/X). Xxxxxx xx 45 xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (3.7) a 55 dílů vody.
3.10 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx odměrné xxxxx xx 50 xx xx xxxxxx 0,06 x hydrochinonu (3.3), 0,08 g xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.4), 0,10 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.5) x 0,12 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.6). Rozpustí xx x doplní xx xx xxxxx xxxxxxxxxx (3.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx 10 xx xxxxxx roztoku xx 50 xx směsí xxxx/xxxxxxxx (3.8). Xxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx vybavení x xxxx:
4.1 Vodní xxxxx nastavitelná na xxxxxxx 60 °C
4.2 Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x XX detektorem x xxxxxxxxxxxxx vlnovou xxxxxx x 10μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
4.3 Xxxxxxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x korozivzdorné xxxxx, xxxxx 250 xx, vnitřní průměr 4,6 xx, xxxxxx Xxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx na Xxxxxxx XXX, uzavřená xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx), velikost částic 6 μx, nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx ochranná kolona, x výjimkou xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx náplní.
4.4 Xxxxxxxxx papír, xxxxxx 90 mm, Xxxxxxxxxx xxx Xxxüxx, Weissband Xx 5892 nebo xxxxxxxxxxxx
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxx baňky xx 50 xx xx s xxxxxxxxx xx xxx desetinná xxxxx xxxxxx 1 ± 0,1 x (x xxxxx) xxxxxx. Xxxxxx se xxxxxxxx xx 25 xx xxxxx xxxx/xxxxxxxx (3.8). Xxxxx xx xxxxxx x xxxxx protřepe, xxxxx se nevytvoří xxxxxxxxx suspenze. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx se xxxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1) nastavenou xx 60 °X, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Baňka xx xxxxxxx x doplní xx na xxxxx xxxxx xxxx/xxxxxxxx (3.8). Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx filtrační xxxxx (4.4). Xxxxx HPLC xx provede do 24 hodin xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
5.2.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx mobilní xxxx (3.9) xx xxxxxx xx 1,0 xx/xxx x xxxxxx délka xxxxxxxxx se nastaví xx 295 xx.
5.2.2 Xxxxxxxxx xx 10 μx roztoku xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx bodu 5.1 x xxxxxxxxx xx chromatogram. Xxxxx xx xxxxxx xxxx. Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxx bodu 5.2.3. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx pro vzorek x xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx (XX) xxxxxxxxx podle xxxx 5.2.3.
5.2.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx 10 μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx provede xxxxxxxxxx, xxxxx není xxxxxx píku xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx XXx (i je xxxxxx infexem XX):
XXx = pi /ci
kde
pi = xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx, hydrochinonmonomethylether, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, x
xx = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, hydrochinonmonoethyletheru xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx roztoku (3.10) (x/50 xx).
Xx xxxxx xxxxxx, zda chromatogramy xxxxxxx xxx standardní xxxxxx a xxxxxx xxxxxx splňují xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- separace xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx alespoň 0,90. (Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx na xxxxxxx 1.).
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxx píků
Není-li xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxx xxx xxxxxxx účinnější xxxxxx xxxx xx xxxx xxx složení mobilní xxxx xxxxxxxx xxx, xxx xxx požadavek xxxxxx.
- Xxxxxx xxxxxxxxx Xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xx xx xxx pohybovat xx 0,9 xx 1,5. (Xxxxxxxx faktoru asymetrie xx xxxxxxx xx xxxxxxx 2.) Při xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx faktoru xxxxxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxx posuvu papíru xxxxxxx 2 cm/min.
Obrázek 2:Xxxxxx asymetrie xxxx
- Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx.
6. Výpočet
Pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxx) ve xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vzorku xxxxxxxxx x hmotnostních xxxxxxxxxx (xx) se xxxxxxx xxxxxx vzorce
xi % (m/m) = (xx x 100) / (XXx x x)
xxx
x = xxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxx,
xx = plocha píku xxxxxxx x ve xxxxxx.
7. Xxxxxxxxxxxxxx [3]
7.1 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx 2,0 % by xxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx xxxxxxx vzorkem xxxxxxxxx 0,13 %.
7.2 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1,0 % by xxxxxx absolutní hodnota xxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx vzorkem xxxxxxxxx 0,1 %.
7.3 Xxx xxxxxx hydrochinonmonoethyletheru 1,0 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,11 %.
7.4 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1,0 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx stejným xxxxxxx xxxxxxxxx 0,11 %.
8. Xxxxxxxxxxxxxxxxxx [4]
8.1 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx 2 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx stanovení xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx (různé xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxx různá xxxx) xxxxxxxxx 0,37 %.
8.2 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx stanovení xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx laboratoře, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxx různá doba) xxxxxxxxx 0,21 %.
8.3 Xxx obsahu xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx výsledků dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx vzorkem xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx) překročit 0,19 %.
8.4 Při xxxxxx hydrochinonmonobenzyletheru 1 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx stanovení xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx experimentátoři, různé xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxx) xxxxxxxxx 0,11 %.
9. Poznámky
9.1 Xxxxxxxx xx zjištěn xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx vyšší xxx 2 % x xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xx xxx xxxxxxx xxxxxx (5.1) xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, jakou by xxx vzorek xxxxxxxxxx 2 % xxxxxxxxxxxx, x stanovení xx xxxx xxx xxxxxxxxx.
(X xxxxxxxxx přístrojů xxxx xxx xxxxxxxx koncentracích xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx mimo lineární xxxxxx xxxxxxxxx.)
9.2 Xxxxxx xxxxx
Xxxx popsaná xxxxxx xxxxxxxx stanovení hydrochinonu x xxxx etherů x jednom isokratickém xxxxxxx. Použití fenylové xxxxxx zajistí dostatečnou xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx zajistit xxx xxxxxxx xxxxxx X18 x uvedenou xxxxxxx xxxx.
X této xxxxxx xxxx xxxxxx dochází x rušivému xxxxx xxxx řady xxxxxxxx. X xxxxxxx případě xx stanovení xxxx xxx zopakováno s xxxxx xxxxxxxx mobilní xxxx/xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxxxx lze najít x literatuře x xxxxxxxx 2 x 3:
Xxxxxx: Xxxxxx XXX, 4,6 xx × 25 xx xxxx xxxxxxxxxxxx:
xxxxxxx: 36 °X
xxxxxx: 1,5 xx/xxx
xxxxxxx fáze:
pro xxxxxxxxxxx: xxxxxxxx/xxxx 5/95 (X/X)
xxx hydrochinonmonomethylether: xxxxxxxx/xxxx 30/70 (X/X)
xxx hydrochinonmonobenzylether: xxxxxxxx/xxxx 80/20 (X/X) [5].
Xxxxxx: Spherisorb X5XXX xxxx ekvivalentní:
mobilní fáze: xxxx/xxxxxxxx 90/10 (X/X)
xxxxxx: 1,5 xx/xxx
Xxxx podmínky xxxx vhodné xxx xxxxxxxxxxx [6].
[1] ISO 5725.
[2] ISO 5725.
[3] XXX 5725.
[4] ISO 5725.
[5] Xxxxxx-Xxxxxxxxx, X., Xxxxx X.-X., Xxxxxxxxxxxxxx xx dosage xx x’xxxxxxxxxxxx xx de xxx xxxxxx méthylique xx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx blanchir xx xxxx. Xxx. X. Xxxxxx. Xxx., 8-203-214 (1986).
[6] Xxxxx, J., Xxx X., Determination xx xxxxxxxxxxxx xx xxxx toning creams, Xxxxxxx, (1986), 111, x. 129.