Šestá směrnice Xxxxxx 95/32/XX
xx dne 7. xxxxxxxx 1995
o xxxxxxxx xxxxxxx nezbytných xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
(Xxxx x xxxxxxxx xxx EHP)
KOMISE XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x ohledem xx xxxxxxxx Rady 76/768/XXX ze xxx 27. xxxxxxxx 1976 x sbližování xxxxxxxx xxxxxxxx členských xxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 94/32/XX [2], x xxxxxxx xx čl. 8 xxxx. 1 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx k xxxx, xx xx xx xxxxxxxx 76/768/XXX xxxxxxx xxxxxx zkoušení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx s xxxxx zajistit xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx složení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx analýzy xxxx xxx xxxxxxxxx xx nejdříve; že xxxxxxx metody xxx xxxx xxxxxxx ve xxxxxxxx Xxxxxx 80/1335/XXX [3] xx xxxxx xxxxxxxx 87/143/XXX [4], xxxxxxxx 82/434/XXX [5] xx xxxxx xxxxxxxx 90/207/XXX [6] a xx xxxxxxxxxx 83/514/XXX [7], 85/490/XXX [8] x 93/73/EHS [9];
vzhledem x tomu, xx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, kyseliny 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx propionové x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxx a stanovení xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx prostředcích xxxx xxxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, že xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx jsou x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx 76/768/XXX xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Xxxxxxx xxxxx xxxxx všechny xxxxxxxx xxxxx k xxxxxxxxx xxxx, aby se xxx úředním xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx prostředků:
- xxxxx x stanovení xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- důkaz a xxxxxxxxx hydrochinonu, hydrochinonmonomethyletheru, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx metodami xxxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxx 2
1. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx v xxxxxxxx právní a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx dosažení xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 30. xxxx 1996. Neprodleně x xxxx xxxxxxx Xxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx přijatá xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx odkaz xx xxxx směrnici xxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx si xxxxxxx členské xxxxx.
2. Xxxxxxx státy xxxxx Xxxxxx znění xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx předpisů, které xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Článek 3
Xxxx směrnice xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx po xxxxxxxxx v Xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx společenství.
Xxxxxx 4
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X Bruselu xxx 7. července 1995.
Xx Xxxxxx
Xxxx Xxxxxx
xxxxxx Xxxxxx
[1] Xx. xxxx. X 262, 27.9.1976, x. 169.
[2] Úř. xxxx. X 181, 15.7.1994, x. 31.
[3] Xx. xxxx. X 383, 31.12.1980, x. 27.
[4] Úř. xxxx. X 57, 27.2.1987, x. 56.
[5] Xx. věst. X 185, 30.6.1982, x. 1.
[6] Úř. xxxx. X 108, 28.4.1990, x. 92.
[7] Xx. xxxx. X 291, 24.10.1983, x. 9.
[8] Xx. xxxx. X 295, 7.11.1985, x. 30.
[9] Xx. xxxx. X 231, 14.9.1993, x. 34.
XXXXXXX
X. DŮKAZ A XXXXXXXXX KYSELINY BENZOOVÉ, XXXXXXXX 4XXXXXXXXXXXXXXX, XXXXXXXX XXXXXXX, XXXXXXXX XXXXXXXXXX X XXXXXXXX XXXXXXXXXX X KOSMETICKÝCH XXXXXXXXXXXX
1. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxx x xxxxxxxxx kyseliny xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, kyseliny xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx těchto xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxxxx propionové x xxxxxxxxx xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4hydroxybenzoové, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, kyseliny xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx vyjádří x hmotnostních xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
X. XXXXX
1. Xxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxx konzervačních přísad xx extrakt xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx (XXX) x xxxxxxx chromatografií ("derivatizace xx xxxxx"). X xxxxxxxxxx xx výsledcích xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) nebo, x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XX).
2. Xxxxxxx xxxxxxx
2.1 Obecně
Všechna xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx čistoty x.x. Xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx alespoň xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2.2 Xxxxxx
2.3 Diethylether
2.4 Xxxxxxxxxxx
2.5 Xxxxxx
2.6 nHexan
2.7 Xxxxxxx, xxxxxx
2.8 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, 4 X
2.9 Xxxxxxxx xxxxxxxx, 4 X vodný roztok
2.10 Xxxxxxx xxxxxxxx, CaCl2·2H2O
2.11 Xxxxxxxxx xxxxxx, Xx2XX3
2.12 2Xxxx2‘xxxxxxxxxxx
2.13 Xxxxxxxx 4hydroxybenzoová
2.14 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
2.15 Xxxxxxxx xxxxxxxx
2.16 Kyselina sorbová
2.17 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
2.18 Xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xx 0,1 % (m/V) roztoky (100 xx/100 xx) xxxxx x pěti xxxxxxxxxxxxx přísad (2.13 xx 2.17) v xxxxxxxxxxxxx.
2.19 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
0,5 % xxxxxx 2brom2‘acetonaftonu (2.12) x xxxxxxxxxxxx (2.4) (50 mg/10 xx). Xxxxx roztok xx xxx být xxxxxxxxxxx každý xxxxx x xxxxxxxxx v xxxxxxxx.
2.20 Xxxxxx xxxxxxxxxxxx
0,3 % (x/X) roztok xxxxxxxxxx lithného (2.11) xx xxxx (300 xx/100 ml). Xxxxx xxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxx čerstvý.
2.21 Xxxxxxxx rozpouštědlo
Toluen (2.5)/aceton (2.2) (20: 0,5, X/X)
2.22 Tekutý xxxxxxx (2.7)/xxxxxx (2.6) (1:2, X/X)
3. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx vybavení
3.1 Xxxxx lázeň xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx 60 °X
3.2 Vyvíjecí xxxxxx
3.3 Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx 254 x 366 xx
3.4 Xxxxxx desky xxx chromatografii na xxxxx xxxxxx, Xxxxxxxxx 60, xxx fluorescenčního xxxxxxxxxx, 20 × 20 xx, tloušťka xxxxxx 0,25 xx x koncentrační xxxxx 2,5 × 20 xx (Merk 11845 xxxx ekvivalentní)
3.5 Mikrostříkačka xx 10 μl
3.6 Xxxxxxxxxxxxxx xx 25 μx
3.7 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx 105 °X
3.8 Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 50 x 200 xx xx zabroušenou xxxxxx
3.9 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx 90 xx, Xxxxxxxxxx &xxx; Schüll, Xxxxxxxxx Xx. 5892, nebo xxxxxxxxxxxx
3.10 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, pH 1 – 11
3.11 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx na 5 ml
3.12 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx (Xxxxxxxxx xxxx ekvivalentní)
3.13 Topná xxxxx
4. Postup
4.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xx Erlenmeyerovy baňky xx 50 xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx (3.8) se xxxxxx xxxxxxxxx 1 x xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx kapky 4 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (2.8) a 40 xx acetonu (2.2). X xxxxx zásaditých xxxxxxx, jako xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxx xxx xxxxxxx 20 kapek 4 X xxxxxxxx chlorovodíkové (2.8). Pomocí xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) se xxxxxxxxxxx, zda je xX xxxxxxxxx 2. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx a xx xxxx jedné xxxxxx xx silně xxxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx usnadnit extrakci xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxx 60 °X, xxx se xxxxxx xxxx rozpustila.
Roztok xx xxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx přes xxxxxxxxx xxxxx (3.9) xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
20 xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 200 ml, xxxxx se 20 xx xxxx a xxxxxxxx se. pH xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx xx 10 xxxxxx 4 X xxxxxxxxx draselného (2.9) xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10).
Přidá se 1 g xxxxxxxx xxxxxxxxxx (2.10) x xxxxx xx protřepe. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (3.9) xx xxxxxx xxxxxxx xx 250 xx xxxxxxxxxx 75 xx xxxxxxxxxxxxx (2.3) x xxxxx xx xxxxx xxxxx minutu. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx do Xxxxxxxxxxxxx baňky xx 250 xx. Xxxxxxxx xxxxxx xx zlikviduje. Xx xxxxxxx indikátorového xxxxxxx (3.10) xx xX vodného xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx 2 xxxxxxxxxx 4 X kyselinou xxxxxxxxxxxxxxx (2.8). Xxxxx xx 10 ml xxxxxxxxxxxxx (2.3), baňka xx xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx; xxxxxx xx nechají xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx se převede xx xxxxxxx xxxxxxx (3.12). Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xx odpaří xxxxx xx sucha a xxxxxx xx znovu xxxxxxxx v 1 xx diethyletheru (2.3). Xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.11).
4.2 Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx
Xx startovní xxxxx koncentrační xxxx xxxxx pro chromatografii xx xxxxx vrstvě (3.4) xx xx xxxx, xxxxxxx počet xxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxx analyzovány, xxxxxx xxxxxxxxxx (3.5) xx xxxxxxxx xxxxxxxxx vždy xx 3 μl xxxxxxxxxx lithného (2.20) x xxxxxx xx x xxxxxx studeného xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx xx topnou xxxxx (3.13) zahřátou xx 40 °C, xxx xx skvrny xxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx (3.5) se xx xxxxxxxxx linii xxxxx nanese xxxx 10 μx každého xxxxxxxxxxxx xxxxxx (2.18) x xxxxxxx xxxxxx (4.1) xxxxxx xx xxxx, kam xxx xxxxxxx xxxxxxxxx lithný.
Nakonec xx opět xxxxxx xx xxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx/xxxxxxx vzorku x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx 15 μx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (2.19) (xxxxxx 2xxxx2‘xxxxxxxxxxxx).
Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx x xxxxxxx (3.7) 45 xxxxx xxx 80 °X. Po xxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxx x komoře (3.2), xxxxx xxxx (xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx) 15 minut xxxxxx vyvíjecím xxxxxxxxxxxxx 2.21 (xxxxxx/xxxxxx), xxxxx xxxx rozpouštědla xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 xx (xxxx vyvíjení xx xxxxxxxxx 80 minut).
Deska xx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x získané xxxxxx xx vyhodnotí xxx XX světlem (3.3). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx skvrn xxxx xxx chromatografická xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxx (2.22).
5. Xxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx Xx.
Xxxxxxx Xx a xxxxxxx xxxxxx pod XX xxxxxxx xx porovnají x xxxxxxxxx a xxxxxxxx referenčních vzorků.
Učiní xx předběžné xxxxxx x xxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad. Xxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx X, xxxx xxxxxxx-xx xx, xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxx X. Získané xxxxxxxx xxxx xx porovnají x xxxxxxxxxx časy xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx XXX x XXXX nebo XX xx xxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad xx vychází x xxxxxxxxx xxxxxxxx.
X. STANOVENÍ XXXXXXXX XXXXXXXX, KYSELINY 4XXXXXXXXXXXXXXX, XXXXXXXX XXXXXXX X XXXXXXXX SALICYLOVÉ
1. Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx se xx okyselení xxxxxxxxx xxxxx ethanolu x xxxx. Po xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx přísady xxxxxxx vysokoúčinnou kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx (XXXX).
2. Xxxxxxx xxxxxxx
2.1 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x.x. a xxxx xxx xxxxxx xxx XXXX. Musí xxx použita xxxxxxxxxxx xxxx nebo xxxx xxxxxxx ekvivalentní čistoty.
2.2 Xxxxxxx, xxxxxxxxx
2.3 Xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx
2.4 Xxxxxxxx salicylová
2.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx
2.6 Xxxxxxxx xxxxxxx
2.7 Xxxxx sodný, (XX3XXXXx·3X2X)
2.8 Xxxxxxxx xxxxxx, x420 = 1,05 x/xx
2.9 Xxxxxxxxxxx
2.10 Xxxxxxxx xxxxxx, 2 M
2.11 Xxxxxxxx xxxxxxxx, 0,2 X xxxxx xxxxxx
2.12 Xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx
2.13 Směs xxxxxxx/xxxx
Xxxxx xxxx ethanolu (2.2) se xxxxxx x xxxxxx dílem xxxx (2:1)
2.14 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx 1 x xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx (2.12) x 500 xx xxxxx xxxxxxx/xxxx (2.13).
2.15 Xxxxxxx fáze xxx XXXX
2.15.1 Xxxxxxxxx xxxx: xx 1 xxxxx xxxx xx xxxxx 6,35 x xxxxxx xxxxxxx (2.7) x 20,0 xx xxxxxxxx xxxxxx (2.8) x xxxxxx se.
2.15.2 Xxxxxxx xxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (2.15.1) a jednoho xxxx acetonitrilu (2.9).
2.16 Xxxxxxx xxxxxx konzervačních xxxxxx
Xx odměrné xxxxx xx 50 xx xx přesně naváží xxx 0,05 x xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx (2.3), 0,2 x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (2.4), 0,2 x xxxxxxxx xxxxxxxx (2.5) x 0,05 x xxxxxxxx xxxxxxx (2.6) a xxxxx xx doplní xxxxx xxxxxxx/xxxx (2.13). Xxxxxx xx uchovává x xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx.
2.17 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxx xx 20 xx xx xxxxxx 8,00, 4,00, 2,00, 1,00 x 0,50 ml xxxxxxxxx roztoku (2.16). Xx každé baňky xx xxxxx 10,00 xx roztoku vnitřního xxxxxxxxx (2.14) x 0,5 xx 2 X kyseliny xxxxxx (2.10). Objem se xxxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxx (2.13). Xxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx a xxxxxxx
Xxxxx laboratorní xxxxxxxx x xxxx:
3.1 Xxxxx xxxxx, nastavená xx 60 °X
3.2 Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx s UV xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x 10μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3.3 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx 12,5 xx 25 xx, vnitřní xxxxxx 4,6 xx, xxxxxx Xxxxxxxxxxx 5C18 xxxx ekvivalentní xxxxxx.
3.4 Xxxxxxxxx papír, xxxxxx: 90 xx, Schleicher xxx Xxxüxx, Xxxxxxxxx Xx 5892 xxxx xxxxxxxxxxxx.
3.5 Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 50 ml
3.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 5 xx
3.7 Xxxxx xxxxxxx, karborundum, xxxxxxxx 2–4 xx, xxxx xxxxxxxxxxxx
4. Xxxxxx
4.1 Xxxxxxxx vzorku
4.1.1 Příprava xxxxxx xxx přidání xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx Erlenmeyerovy xxxxx na 50 xx (3.5) se xxxxxx 1 x xxxxxx. Xx Erlenmeyerovy xxxxx xx xxxxxxxxxx 10 ml 2 X xxxxxxxx xxxxxx (2.10) x 40 xx směsi xxxxxxx/xxxx (2.13). Xxxxx se xxxxxxxxx 1 x xxxxxxx xxxxxxx (3.7), xxxxx xx uzavře x xxxxx xx xxxxxxx jednu minutu xxxxxxxxxx, dokud nevznikne xxxxxxxxx suspenze. Xxx xxxxxxxxx extrakce xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx minut xx xxxxx xxxxx (3.1) xxx 60 °X.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxxx v xxxxxx xxxxxxx xxxx a xxxxxxx se xx xxxxxx uloží xxx 5 °X.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx filtrační xxxxx (3.4). Asi 2 xx extraktu xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.6). Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxx 5 °C x xxxxxxxxx pomocí XXXX xx xxxxxxx xx 24 xxxxx.
4.1.2 Xxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 50 xx (3.5) xx s přesností xx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx 1 ± 0,1 g xxxxxx (x xxxxx). Xxxxxxx xx přidá 1,00 ml 2 X kyseliny xxxxxx (2.10) x 30,0 xx xxxxx ethanol/voda (2.13). Xxxxx xx xxxxxxxxx 1 x xxxxxxx xxxxxxx (3.7) x 10 xx xxxxxxx xxxxxxxxx standardu(2.14). Xxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx x silně xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx protřepává, xxxxx xxxxxxxxx homogenní xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx fáze xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx zahřívá xxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx lázni (3.1) xxx 60 °X.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxx xxx 5 °X.
Xxxxxxx xx zfiltruje přes xxxxxxxxx papír (3.4). Xxx 2 xx xxxxxxxx xx převedou xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.6). Xxxxxxx xx xxxxxxxx při 5 °X x xxxxxxxxx xxxxxx XXXX se xxxxxxx xx 24 xxxxx.
4.2 Vysokoúčinná kapalinová xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx: acetonitril/acetátový xxxx (2.15).
Xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx na 2,0 ± 0,5 ml/min. Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx nastaví na 240 nm.
4.2.1 Xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.2) xx nastříkne xx 10 μx standardních xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (2.17). Xxx každý xxxxxx se xx xxxxxxxxx chromatogramů stanoví xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx přísady x xxxxx píku xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxx konzervační xxxxxxx xx xxxxxxxx graf xxxxxxxxxx xxxxxx výšek xxxx xx koncentraci xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku.
Přesvědčete xx, že při xxxxxxxxx byla xxx xxxxxxxxxx roztoky získána xxxxxxxx odezva.
4.2.2 Stanovení
Do xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.2) xx nastříkne 10 μx extraktu vzorku (4.1.1) a xxxxxxxxx xx chromatogram. Xxxxxxxxx xx 10 μl xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (2.17) x xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. Není-li x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.1.1) xxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx jako xxx xxxxxxxx 2methoxybenzoové (xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxxxx xx do xxxxxxxxxxxx chromatografu 10 μx xxxxxxxx vzorku x přidaným vnitřním xxxxxxxxxx (4.1.2) x xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx.
Xx-xx x chromatogramu extraktu xxxxxx (4.1.1) rušivý xxx xx stejným xxxxxxxxx časem xxxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx, xxx xx být xxxxxx xxxx vnitřní standard. (Xxxx-xx jedna z xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx přítomna, xxx xxxx konzervační xxxxxxx použít xxxx xxxxxxx standard.)
Je xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx píků xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx 0,90. (Xxxxxxxx xxxxxxxx píků xx uvedena xx xxxxxxx 1)
Obrázek 1: Xxxxxxxx píků
Není-li xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxx xxx xxxxxxx účinnější xxxxxx xxxx xx xxxx xxx složení mobilní xxxx xxxxxxxx tak, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
- Xxxxxx xxxxxxxxx Xx xxxxx získaných xxxx by xx xxx xxxxxxxxx od 0,9 xx 1,5. (Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx uvedena xx xxxxxxx 2.) Xxx xxxxxxxxxxx chromatogramu xx xxxxxx stanovení faktoru xxxxxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx papíru xxxxxxx 2 xx/xxx.
Xxxxxxx 2: Faktor asymetrie xxxx
- Xxxxxxxx musí xxx stabilní.
5. Xxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxx výšek xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxx 2methoxybenzoové (vnitřní xxxxxxxx) x dále xxxxxxxxxx xxxx. Obsah xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx sorbové xxxx xxxxxxxx salicylové xx vzorku x xxxxxxxxxxxx procentech (xx) xx vypočte pomocí xxxxxx
xx % (x/x) = (100x 20 x x) / (106 x x) = x / (500 x a)
kde
a = xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1.2) (x),
x = koncentrace konzervační xxxxxxx x extraktu xxxxxx (4.1.2) (μx/xx) xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx.
6. Xxxxxxxxxxxxxx [1]
Při xxxxxx xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx 0,40 % by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx provedených současně xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,035 %.
Xxx xxxxxx kyseliny benzoové 0,50 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,050 %.
Xxx xxxxxx kyseliny xxxxxxxxxx 0,50 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx xxxxxxx vzorkem xxxxxxxxx 0,045 %.
Při xxxxxx kyseliny xxxxxxx 0,60 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,035 %.
7. Xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx ukazují, xx množství xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx kyselin xx xxxxxx je xxxxxxxxxxx x množství zpracovávaného xxxxxx xx xxxx xxxx xxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2 Je-li xx xxxxxxx, xxx xxxxxx vhodnou xxxxxxxxx xxxxxx.
X. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Rozsah x xxxxxx použití
Tato metoda xx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx prostředcích xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 2 % (x/x).
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx se vyjádří x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (% m/m) xxxxxxx.
3. Xxxxxxxx xxxxxx
Xx extrakci xxxxxxxx propionové x xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
4. Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx činidla xxxx xxx xxxxxxx x.x; xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx nebo xxxx alespoň xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.1 Xxxxxxx, 96 % (X/X)
4.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
4.3 Kyselina 2xxxxxxxxxxxxxxxx
4.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, 10 % (x/X)
4.5 Xxxxxx xxxxxxxx propionové
Do xxxxxxx xxxxx xx 50 xx se xxxxxx xxxxxx 1 x (x gramů) xxxxxxxx xxxxxxxxxx x doplní xx xx xxxxx xxxxxxxxx (4.1).
4.6 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx odměrné xxxxx na 50 xx xx přesně xxxxxx 1 x (x xxxxx) xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xx na xxxxx xxxxxxxxx (4.1).
5. Přístroje x xxxxxxx
5.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxx:
5.2 Plynový xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx ionizačním xxxxxxxxxx
5.3 Skleněná xxxxxxxx (20 × 150 xx) xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
5.4 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx na 60 °X
5.5 Skleněná injekční xxxxxxxxx na 10 xx x filtrační xxxxxxxxx (průměr xxxx 0,45 μx)
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxx zkumavky (5.3) se naváží xxxxxxxxx 1 g xxxxxx. Přidá se 0,5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (4.4) a 9,5 xx xxxxxxxx (4.1).
Xxxxxxxx xx xxxxxx x silně protřepe. Xxxx xx nezbytné, xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxx xxxxx xx vodní xxxxx xxxxxxx xx 60 °X (5.4), aby xx zcela rozpustila xxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxx zchladí xxx tekoucí xxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx membránový xxxxx (5.5). Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx provede xxxxxx xxx.
6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.3) xx x xxxxxxxxx na 3 xxxxxxxxx místa naváží 1 ± 0,1 x xxxxxx. Xxxxx xx 0,5 ml xxxxxxxx trihydrogenfosforečné (4.4), 0,50 xx roztoku xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.6)a 9 ml xxxxxxxx (4.1).
Xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx. Xxxx xx nezbytné, xxxxxx se xxxxxxxx xx xxx xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xx 60 °X (5.4), xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx fáze. Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxx tekoucí xxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx membránový xxxxx (5.5). Chromatografie xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx.
6.2 Podmínky xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx následující provozní xxxxxxxx
Xxxxxx
Xxx: xxxxxxxxxxxxx ocel
Délka: 2 x
Xxxxxx: ⅛"
Xxxxx: 10 % SP™ 1000 (nebo xxxxxxxxxxxx) + 1 % X3XX4 xx Xxxxxxxxxxx XXX 100–120 mesh
Teplota
Nástřik: 200 °X
Xxxxxx: 120 °X
Xxxxxxxx: 200 °C
Nosný xxxx: xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx: 25 xx/xxx
6.3 Chromatografie
6.3.1 Xxxxxxxxx
Xx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx 20 xx xx xxxxxxxxxx 0,25, 0,50, 1,00, 2,00 x 4,00 xx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.5). Xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx 1,00 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.6); xxxxxx xx xx xxxxx xxxxxxxxx (4.1) x xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx kyselinu 2xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x koncentraci x xx/xx (xx xxxxxxx 1 mg/ml, xx-xx x = 1,000) a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x/4, x/2, p, 2x, 4x xx/xx (xx znamená 0,25, 0,50, 1,00, 2,00, 4,00 xx/xx, je-li x = 1,000).
Xxxxxxxxx xx 1 μx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx křivka xx xxxxxxxx vynesením poměru xxxxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxx x xxxxxxxx 2methylpropionové xx osu x x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxx y.
Nastříknou se 3 xxxxx z xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx průměr xxxxxx ploch xxxx.
6.3.2 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx se 1 μx xxxxxxxx vzorku 6.1.1. Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx ze xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (6.3.1). Xx-xx xxx přibližně stejný xxxxxxxx xxx xxxx xxx kyseliny 2xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx-xx pozorován xxxxx rušivý xxxx, xxxxxxxxx xx 1 μx xxxxxxxx vzorku 6.1.2 x xxxxx xx plochy xxxx xxxxxxxx propionové x xxxx vnitřního xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx 3 xxxxx x každého xxxxxxx x xxxxxxx se xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx.
7. Xxxxxxx
7.1 Z xxxxxxxxxx křivky xxxxxxxxxx xxxxx bodu 6.3.1 xx xxxxxx poměr xxxxxxxxx (X), který xxxxxxxx poměru ploch xxxx xxxxxxxxxxx x xxxx 6.3.2.
7.2 X xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx vypočte xxxxx kyseliny xxxxxxxxxx xx xxxxxx (x) x hmotnostních procentech xxxxxx xxxxxx
x % (x/x) = X (0,5 x 100 x x) / (50 x x) =X(x / x)
xxx
X = poměr xxxxxxxxx x xxxx 7.1,
x = xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx xxxx 4.6,
a = xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx 6.1.2,
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
8. Opakovatelnost [2]
Xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 2 % (x/x) xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx stejným xxxxxxx xxxxxxxxx 0,12 %.
II. XXXXX X XXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX, HYDROCHINONMONOMETHYLETHERU, HYDROCHINONMONOETHYLETHERU X HYDROCHINONMONOBENZYLETHERU X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX
X. XXXXX
1. Xxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
X xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxx.
2. Podstata xxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx (XXX).
3. Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx činidla xxxx xxx xxxxxxx x.x.
3.1 Xxxxxxx, 96 % (V/V)
3.2 Xxxxxxxxxx
3.3 Xxxxxxxxxxxx
3.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx, 66: 33 (V/V)
3.5 Xxxxxxx, 25 % (x/x) (d420 = 0,91 x/xx)
3.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxx
3.7 Hydrochinon
3.8 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.9 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.10 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx)
3.11 Xxxxxxxxxx roztoky
Následující referenční xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx jeden xxx.
3.11.1 Xx dělené zkumavky xx 10 xx xx xxxxxx 0,05 x hydrochinonu (3.7). Xxxxx xx 0,250 x kyseliny xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx ethanolu (3.1). Xxxxxxx se xxxxxxx (3.5), xxxxx xxxx xxxxxxxx pH 10, x xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx 10 xx (3.1).
3.11.2 Xx xxxxxx zkumavky xx 10 xx xx xxxxxx 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.8). Xxxxx xx 0,250 x xxxxxxxx askorbové (3.6) x 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx se amoniak (3.5), dokud není xxxxxxxx xX 10, x doplní xx xxxxxxxxx xx xxxxx 10 xx (3.1).
3.11.3 Xx xxxxxx xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxx 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.9). Xxxxx se 0,250 x kyseliny xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx xx xxxxxxx (3.5), xxxxx xxxx xxxxxxxx xX 10, x doplní se xxxxxxxxx na objem 10 ml (3.1).
3.11.4 Xx xxxxxx xxxxxxxx xx 10 xx xx naváží 0,05 x hydrochinonmonobenzyletheru (3.10). Xxxxx se 0,250 x xxxxxxxx xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx xx xxxxxxx (3.5), xxxxx není xxxxxxxx xX 10, x xxxxxx se xxxxxxxxx xx objem 10 xx (3.1).
3.12 Xxxxxxxx xxxxxxxx
3.13 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.14 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
3.15 Xxxxxxx železitý xxxxxxxxxx
3.16 Xxxxxxxx xxxxxxx
3.16.1 Xx 5 % xxxxxxx xxxxxxx (m/V) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.12) xx přidává amoniak (3.5), xxxxx xx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx:
Xxx delším xxxxx xx x xxxxxxx tvoří xxxxxxx xxxxxxxxxx a měl xx xxx xx xxxxxxx zlikvidován.
3.16.2 10 % (x/X) xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.13) x ethanolu (3.1).
3.16.3 Xxxxxxxx xx 1 % (m/V) xxxxx xxxxxx kyanoželezitanu xxxxxxxxxx (3.14) x 2 % (x/X) vodný xxxxxxx chloridu železitého (3.15). Xxxxx před xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx obou xxxxxxx.
4. Přístroje x xxxxxxx
Xxxxx laboratorní xxxxxxxx, x xxxx:
4.1 Xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx vrstvě
4.2 Xxxxxx xxxxx pro xxxxxxxxxxxxxx na tenké xxxxxx: xxxxxxxxx XXX/XX254 (254 xx xxxxxx xxxxxxx XXX/XX); 20 × 20 xx (Xxxxxxx, Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx). Xxxxxxxx xxxxxx 0,25 xx.
4.3 Ultrazvuková xxxxx
4.4 Xxxxxxxxxxx
4.5 UV xxxxx, 254 nm
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxx vzorku
Do xxxxxx zkumavky na 10 xx xx xxxxxx 3 g xxxxxx. Xxxxx se 0,250 g kyseliny xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx ethanolu (3.1). pH xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx (3.5) xx 10. Xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx (3.1) na 10 xx. Xxxxxxxx xx xxxxxx zátkou x xxxxxxxxxxxx xx 10 xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx se xxxxxxxx při 3000 xx./xxx.
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx na xxxxx vrstvě (XXX)
5.2.1 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx vyvíjecím xxxxxxxxxxxxx (3.4).
5.2.2 Na xxxxx xx nanese xx 2 μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.11) x 2 μx xxxxxxx xxxxxx (5.1). Xxxxxx xx xx tmě xxx teplotě okolí, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 xx xx xxxxxx.
5.2.3 Xxxxx xx xxxxx, xxxxx se vyschnout xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
5.3 Xxxxxxx
5.3.1 Deska se xxxxxxxx xxx XX xxxxxx při 254 xx a poloha xxxxx se označí.
5.3.2 Xxxxx se xxxxxxxx
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.16.1), xxxx
- xxxxxxxxx dodekamolybdofosforečnou (3.16.2); zahřeje se xx xxx 120 °X, xxxx
- roztokem xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxx železitého (3.16.3).
6. Xxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxx Xx xxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx referenční xxxxxxx, xxxxx xxx x xxxxxx hodnoty Xx, barvu xxxxx x XX xxxxxx x xxxxx xxxxx xx zviditelnění xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xx vysokoúčinná xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx popsaná x následujícím xxxxxx (X) x porovnají xx retenční časy xxxxxxx xxx xxx (xxxx) vzorku s xxxxxxxxxx xxxx píků xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx x XXX x HPLC xx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxx.
7. Poznámky
Za uvedených xxxxxxxx xxxx pozorovány xxxxxxxxxxx xxxxxxx Xx:
xxxxxxxxxxx: 0,32
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: 0,53
hydrochinonmonoethylether: 0,55
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: 0,58
X. STANOVENÍ
1. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
X xxxxxx xx specifikován xxxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, hydrochinonmonoethyletheru x hydrochinonmonobenzyletheru v xxxxxxxxxxxx prostředcích xxx xxxxxxxxxx kůže.
2. Podstata xxxxxx
Xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxx voda/methanol xx xxxxxxx xxxxxxx, kterým xx xxxxxxxx tukový xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx roztoku xx xxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx x XX xxxxxxx.
3. Xxxxxxx xxxxxxx
3.1 Xxxxxxx xxxxxxx činidla xxxx xxx xxxxxxx x.x. Musí xxx xxxxxxx destilovaná xxxx xxxx voda alespoň xxxxxxxxxxxx čistoty.
3.2 Methanol
3.3 Xxxxxxxxxxx
3.4 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.5 Hydrochinonmonoethylether
3.6 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx)
3.7 Xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx pro XXXX
3.8 Xxxx xxxx/xxxxxxxx 1:1 (X/X). Xxxxxx se xxxxx xxx xxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxx (3.2)
3.9 Xxxxxxx xxxx: směs xxxxxxxxxxxxxxx/xxxx 45:55 (X/X). Xxxxxx xx 45 xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (3.7) a 55 dílů vody.
3.10 Xxxxxxxxxx roztok
Do odměrné xxxxx xx 50 xx xx xxxxxx 0,06 x xxxxxxxxxxxx (3.3), 0,08 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.4), 0,10 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.5) x 0,12 g xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.6). Rozpustí xx a doplní xx na objem xxxxxxxxxx (3.2). Referenční xxxxxx xx připraví xxxxxxxx 10 xx xxxxxx xxxxxxx na 50 ml xxxxx xxxx/xxxxxxxx (3.8). Xxxx xxxxxxx xx připravují xxxxxxx.
4. Přístroje a xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx:
4.1 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx na xxxxxxx 60 °X
4.2 Xxxxxxxxxxxx pro vysokoúčinnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x XX detektorem s xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x 10μx nastřikovací xxxxxxx
4.3 Analytická xxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x korozivzdorné xxxxx, xxxxx 250 xx, xxxxxxx xxxxxx 4,6 xx, xxxxxx Xxxxxx fenylem (xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx Xxxxxxx XXX, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx částic 6 μm, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Nepoužívá xx xxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxx fenylové xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.4 Xxxxxxxxx xxxxx, průměr 90 mm, Xxxxxxxxxx xxx Xxxüxx, Weissband Xx 5892 xxxx xxxxxxxxxxxx
5. Postup
5.1 Příprava xxxxxx
Xx odměrné xxxxx xx 50 xx xx x xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxx naváží 1 ± 0,1 x (x xxxxx) xxxxxx. Xxxxxx se xxxxxxxx xx 25 ml xxxxx voda/methanol (3.8). Xxxxx xx xxxxxx x silně xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Protřepává xx xxxxxxx jednu xxxxxx. Xxxxx se xxxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1) nastavenou xx 60 °X, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xx xx xxxxx xxxxx xxxx/xxxxxxxx (3.8). Xxxxxxx xx zfiltruje xxxx xxxxxxxxx papír (4.4). Xxxxx HPLC xx xxxxxxx xx 24 xxxxx xx xxxxxxxx extraktu.
5.2 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx chromatografie
5.2.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx mobilní xxxx (3.9) xx xxxxxx xx 1,0 xx/xxx x xxxxxx délka xxxxxxxxx xx nastaví xx 295 xx.
5.2.2 Xxxxxxxxx xx 10 μx roztoku xxxxxx xxxxxxxxx podle bodu 5.1 a xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx bodu 5.2.3. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxxxxx roztoky. Xxx výpočet koncentrace xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxx píků x xxxxxxx xxxxxx (XX) xxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.2.3.
5.2.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx se 10 μl xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) a xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx faktor xxxxxx XXx (x je xxxxxx infexem RF):
RFi = xx /xx
xxx
xx = xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx, hydrochinonmonomethylether, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, x
xx = koncentrace xxxxxxxxxxxx, hydrochinonmonomethyletheru, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) (x/50 ml).
Je třeba xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x roztok xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- separace píků xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx 0,90. (Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx 1.).
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxx xxxx
Xxxx-xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx dosaženo, měla xx být xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx by xxxx xxx xxxxxxx mobilní xxxx xxxxxxxx xxx, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
- Xxxxxx xxxxxxxxx Xx xxxxx získaných xxxx xx xx xxx xxxxxxxxx xx 0,9 xx 1,5. (Xxxxxxxx faktoru xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx 2.) Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx za xxxxxx stanovení xxxxxxx xxxxxxxxx xx doporučená xxxxxxxx xxxxxx papíru xxxxxxx 2 xx/xxx.
Xxxxxxx 2:Xxxxxx asymetrie xxxx
- Xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx.
6. Výpočet
Pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx analytu (xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx vzorku xx použijí xxxxxx xxxx xxxxxxx. Koncentrace xxxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxxx x hmotnostních xxxxxxxxxx (xi) se xxxxxxx xxxxxx xxxxxx
xx % (x/x) = (xx x 100) / (XXx x x)
xxx
x = hmotnost xxxxxx x xxxxxxx,
xx = plocha xxxx xxxxxxx i ve xxxxxx.
7. Xxxxxxxxxxxxxx [3]
7.1 Xxx obsahu xxxxxxxxxxxx 2,0 % xx xxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx výsledků dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,13 %.
7.2 Xxx obsahu hydrochinonmonomethyletheru 1,0 % xx xxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx provedených současně xx xxxxxxx vzorkem xxxxxxxxx 0,1 %.
7.3 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1,0 % by xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,11 %.
7.4 Xxx obsahu hydrochinonmonobenzyletheru 1,0 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx současně xx xxxxxxx vzorkem xxxxxxxxx 0,11 %.
8. Xxxxxxxxxxxxxxxxxx [4]
8.1 Při xxxxxx hydrochinonu 2 % by xxxxxx xxxxxxxxx hodnota rozdílu xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx stejným xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (různé laboratoře, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx) překročit 0,37 %.
8.2 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx stanovení provedených xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx přístroje xxxx xxxxx xxxx) xxxxxxxxx 0,21 %.
8.3 Xxx xxxxxx hydrochinonmonoethyletheru 1 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx provedených xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (různé xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx) xxxxxxxxx 0,19 %.
8.4 Při xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % by xxxxxx xxxxxxxxx hodnota rozdílu xxxxxxxx xxxx stanovení xxxxxxxxxxx xx stejným xxxxxxx za různých xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx) xxxxxxxxx 0,11 %.
9. Xxxxxxxx
9.1 Jestliže xx xxxxxxx obsah xxxxxxxxxxxx výrazně xxxxx xxx 2 % x je požadován xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xx xxx xxxxxxx vzorku (5.1) xxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx by xxx xxxxxx xxxxxxxxxx 2 % xxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx.
(X xxxxxxxxx přístrojů xxxx xxx vysokých koncentracích xxxxxxxxxxxx xxxxx hodnota xxxxxxxxxx mimo lineární xxxxxx xxxxxxxxx.)
9.2 Xxxxxx xxxxx
Xxxx xxxxxxx metoda xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxx etherů x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx fenylové xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx xxxxxxxx při xxxxxxx kolony X18 x uvedenou mobilní xxxx.
X této xxxxxx xxxx xxxxxx dochází x xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx případě xx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx s xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx/xxxxxxxxxxx xxxx. Vhodné xxxxxx xxx xxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxx 2 x 3:
Xxxxxx: Xxxxxx XXX, 4,6 xx × 25 xx xxxx xxxxxxxxxxxx:
xxxxxxx: 36 °X
xxxxxx: 1,5 xx/xxx
xxxxxxx xxxx:
xxx xxxxxxxxxxx: xxxxxxxx/xxxx 5/95 (X/X)
xxx hydrochinonmonomethylether: xxxxxxxx/xxxx 30/70 (X/X)
xxx hydrochinonmonobenzylether: xxxxxxxx/xxxx 80/20 (V/V) [5].
Xxxxxx: Xxxxxxxxxx X5XXX xxxx xxxxxxxxxxxx:
xxxxxxx fáze: xxxx/xxxxxxxx 90/10 (V/V)
průtok: 1,5 xx/xxx
Xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx [6].
[1] XXX 5725.
[2] XXX 5725.
[3] XXX 5725.
[4] ISO 5725.
[5] Xxxxxx-Xxxxxxxxx, X., Xxxxx X.-X., Xxxxxxxxxxxxxx xx dosage de x’xxxxxxxxxxxx xx de xxx éthers méthylique xx xxxxxxxxxx xxxx xxx produits cosmétiques xxxx xxxxxxxx xx xxxx. Xxx. J. Xxxxxx. Xxx., 8-203-214 (1986).
[6] Xxxxx, J., Xxx X., Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx, Xxxxxxx, (1986), 111, x. 129.