Šestá xxxxxxxx Komise 95/32/XX
xx dne 7. xxxxxxxx 1995
o xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx pro xxxxxxxx složení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
(Xxxx x významem xxx XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx o xxxxxxxx Xxxxxxxxxx společenství,
s ohledem xx xxxxxxxx Xxxx 76/768/XXX xx xxx 27. července 1976 x xxxxxxxxxx právních xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx kosmetických xxxxxxxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 94/32/XX [2], x xxxxxxx xx čl. 8 xxxx. 1 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx k xxxx, xx se xx xxxxxxxx 76/768/XXX xxxxxxx úřední xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx dodržení xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx, které se xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx analýzy xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx; že xxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxx 80/1335/XXX [3] xx xxxxx xxxxxxxx 87/143/XXX [4], xxxxxxxx 82/434/XXX [5] xx xxxxx xxxxxxxx 90/207/XXX [6] x xx xxxxxxxxxx 83/514/XXX [7], 85/490/XXX [8] x 93/73/EHS [9];
vzhledem x tomu, xx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx benzoové, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, kyseliny xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x hydrochinonmonobenzyletheru v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx jsou xxxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, že xxxxxxxx xxxx směrnice xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxx pro xxxxxxxxxxxx směrnice 76/768/XXX xxxxxxxxxxx pokroku,
PŘIJALA XXXX XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Členské xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx:
- důkaz x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx x kyseliny xxxxxxxxxx,
- xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx popsanými x příloze.
Xxxxxx 2
1. Xxxxxxx xxxxx uvedou v xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx dosažení xxxxxxx x touto xxxxxxxx xxxxxxxxxx do 30. xxxx 1996. Neprodleně x xxxx xxxxxxx Xxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx si xxxxxxx xxxxxxx státy.
2. Xxxxxxx xxxxx xxxxx Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x oblasti xxxxxxxxxx této směrnice.
Xxxxxx 3
Tato xxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x Úředním xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Článek 4
Xxxx xxxxxxxx xx určena členským xxxxxx.
X Bruselu dne 7. července 1995.
Xx Xxxxxx
Xxxx Bonino
členka Xxxxxx
[1] Úř. věst. X 262, 27.9.1976, x. 169.
[2] Xx. xxxx. X 181, 15.7.1994, x. 31.
[3] Xx. xxxx. X 383, 31.12.1980, x. 27.
[4] Xx. xxxx. X 57, 27.2.1987, x. 56.
[5] Úř. xxxx. X 185, 30.6.1982, x. 1.
[6] Xx. xxxx. X 108, 28.4.1990, x. 92.
[7] Xx. xxxx. X 291, 24.10.1983, x. 9.
[8] Úř. xxxx. X 295, 7.11.1985, x. 30.
[9] Úř. xxxx. X 231, 14.9.1993, x. 34.
XXXXXXX
X. XXXXX X XXXXXXXXX XXXXXXXX BENZOOVÉ, XXXXXXXX 4HYDROXYBENZOOVÉ, XXXXXXXX XXXXXXX, XXXXXXXX XXXXXXXXXX X XXXXXXXX XXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX PROSTŘEDCÍCH
1. Xxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx důkaz x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx prostředcích. Xxxxxxxxxx xxxx popsány xxxxxxx xxxxxx těchto xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx 4hydroxybenzoové, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, kyseliny xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxx kyseliny xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx touto xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
X. DŮKAZ
1. Xxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxx konzervačních xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx (XXX) a xxxxxxx chromatografií ("derivatizace xx desce"). V xxxxxxxxxx na xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) nebo, v xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx chromatografií (GC).
2. Xxxxxxx xxxxxxx
2.1 Obecně
Všechna xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx p.a. Xxxx xxx použita xxxxxxxxxxx xxxx nebo xxxx alespoň xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2.2 Aceton
2.3 Diethylether
2.4 Xxxxxxxxxxx
2.5 Xxxxxx
2.6 xXxxxx
2.7 Xxxxxxx, xxxxxx
2.8 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, 4 X
2.9 Xxxxxxxx xxxxxxxx, 4 X vodný xxxxxx
2.10 Xxxxxxx xxxxxxxx, XxXx2·2X2X
2.11 Xxxxxxxxx xxxxxx, Xx2XX3
2.12 2Xxxx2‘xxxxxxxxxxx
2.13 Xxxxxxxx 4hydroxybenzoová
2.14 Xxxxxxxx salicylová
2.15 Xxxxxxxx xxxxxxxx
2.16 Xxxxxxxx xxxxxxx
2.17 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
2.18 Referenční xxxxxxx
Xxxxxxxx xx 0,1 % (x/X) roztoky (100 xx/100 xx) xxxxx z xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (2.13 xx 2.17) v xxxxxxxxxxxxx.
2.19 Derivatizační xxxxxxx
0,5 % xxxxxx 2xxxx2‘xxxxxxxxxxxx (2.12) x xxxxxxxxxxxx (2.4) (50 xx/10 xx). Tento roztok xx xxx být xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxx.
2.20 Roztok xxxxxxxxxxxx
0,3 % (x/X) xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (2.11) xx vodě (300 xx/100 xx). Xxxxx xxxxxx by měl xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2.21 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxx (2.5)/aceton (2.2) (20: 0,5, X/X)
2.22 Xxxxxx xxxxxxx (2.7)/xxxxxx (2.6) (1:2, X/X)
3. Přístroje a xxxxxxx
Xxxxx laboratorní xxxxxxxx
3.1 Xxxxx lázeň nastavitelná xx teplotu 60 °X
3.2 Xxxxxxxx komora
3.3 Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx 254 a 366 xx
3.4 Hotové xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx, Xxxxxxxxx 60, xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, 20 × 20 xx, tloušťka xxxxxx 0,25 mm x xxxxxxxxxxxx xxxxx 2,5 × 20 xx (Xxxx 11845 xxxx ekvivalentní)
3.5 Xxxxxxxxxxxxxx xx 10 μx
3.6 Xxxxxxxxxxxxxx na 25 μx
3.7 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx teplotu xx 105 °C
3.8 Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 50 x 200 xx xx zabroušenou xxxxxx
3.9 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx 90 xx, Schleicher &xxx; Schüll, Xxxxxxxxx Xx. 5892, xxxx xxxxxxxxxxxx
3.10 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, pH 1 – 11
3.11 Skleněné xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 5 ml
3.12 Xxxxxxx xxxxxxx odparka (Xxxxxxxxx xxxx ekvivalentní)
3.13 Topná xxxxx
4. Xxxxxx
4.1 Příprava xxxxxx
Xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 50 xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx (3.8) xx xxxxxx xxxxxxxxx 1 x xxxxxx. Přidají xx xxxxx kapky 4 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (2.8) x 40 xx acetonu (2.2). X silně xxxxxxxxxx xxxxxxx, jako xx xxxxxxxx xxxxx, by xxxx xxx xxxxxxx 20 xxxxx 4 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (2.8). Xxxxxx indikátorového xxxxxxx (3.10) xx xxxxxxxxxxx, xxx xx xX xxxxxxxxx 2. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx x xx xxxx jedné xxxxxx xx xxxxx protřepává.
Jeli xxxxxxxx usnadnit xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx do xxxxxxxxx xxxx, xxxx xx xxxxxxx zahřeje xx xxx 60 °X, xxx se xxxxxx fáze xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx teplotu x xxxxxxxxxxx xxxx filtrační xxxxx (3.9) do Xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
20 xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 200 ml, xxxxx xx 20 xx xxxx x xxxxxxxx xx. pH xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx xx 10 xxxxxx 4 X xxxxxxxxx draselného (2.9) xx xxxxxxx indikátorového xxxxxxx (3.10).
Přidá xx 1 g xxxxxxxx xxxxxxxxxx (2.10) x xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx xxxxx (3.9) xx xxxxxx nálevky xx 250 ml xxxxxxxxxx 75 xx xxxxxxxxxxxxx (2.3) x xxxxx xx třepe xxxxx xxxxxx. Vrstvy xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx vrstva xx xxxxxxx do Xxxxxxxxxxxxx xxxxx na 250 ml. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) se xX xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx přibližně 2 xxxxxxxxxx 4 X kyselinou xxxxxxxxxxxxxxx (2.8). Xxxxx se 10 xx xxxxxxxxxxxxx (2.3), baňka xx xxxxxxxxx a silně xxxxxxxxxx jednu minutu; xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxx xx převede xx xxxxxxx odparky (3.12). Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx vrstva xx odpaří xxxxx xx sucha x xxxxxx xx znovu xxxxxxxx v 1 xx xxxxxxxxxxxxx (2.3). Xxxxxx xx převede xx xxxxxxxxxx lahvičky (3.11).
4.2 Chromatografie xx xxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx zóny xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx (3.4) se do xxxx, jejichž počet xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxxx mají xxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx (3.5) xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xx 3 μx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (2.20) x xxxxxx xx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx (3.13) xxxxxxxx xx 40 °X, xxx xx xxxxxx xxxxxxx co nejmenší. Xxxxxxxxxxxxxxx (3.5) se xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx 10 μx každého xxxxxxxxxxxx vzorku (2.18) x xxxxxxx xxxxxx (4.1) přesně xx xxxx, xxx byl xxxxxxx uhličitan xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xx bodů, xxx xxxx xxxxxxxx referenční xxxxxxx/xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx uhličitanu xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx 15 μx xxxxxxxxxxxxxxx činidla (2.19) (roztok 2brom2‘acetonaftonu).
Chromatografická xxxxx xx zahřívá x xxxxxxx (3.7) 45 minut xxx 80 °C. Xx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxxxxx (3.2), xxxxx xxxx (xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx) 15 xxxxx xxxxxx vyvíjecím xxxxxxxxxxxxx 2.21 (toluen/aceton), dokud xxxx rozpouštědla xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 cm (xxxx xxxxxxxx je xxxxxxxxx 80 minut).
Deska xx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx skvrny xx xxxxxxxxx xxx XX xxxxxxx (3.3). Xxx zesílení fluorescence xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx deska xxxxxxxx do tekutého xxxxxxxx/xxxxxxx (2.22).
5. Důkaz
Pro xxxxxx skvrnu xx xxxxxxx hodnota Xx.
Xxxxxxx Xx a chování xxxxxx xxx XX xxxxxxx se xxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx x přítomnosti a xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx chromatografie popsaná x xxxxxx B, xxxx xxxxxxx-xx se, xx je přítomna xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxx X. Získané xxxxxxxx xxxx xx porovnají x xxxxxxxxxx časy xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx XXX x HPLC nebo XX xx xxxxxxxxxx x při xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxx výsledků.
B. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXX, XXXXXXXX 4XXXXXXXXXXXXXXX, XXXXXXXX XXXXXXX X KYSELINY XXXXXXXXXX
1. Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxx. Po xxxxxxxx xx konzervační xxxxxxx xxxxxxx vysokoúčinnou kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx (XXXX).
2. Reakční xxxxxxx
2.1 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x.x. x xxxx xxx xxxxxx xxx XXXX. Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx voda xxxxxxx ekvivalentní xxxxxxx.
2.2 Xxxxxxx, absolutní
2.3 Xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx
2.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
2.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx
2.6 Xxxxxxxx xxxxxxx
2.7 Octan xxxxx, (XX3XXXXx·3X2X)
2.8 Xxxxxxxx xxxxxx, x420 = 1,05 x/xx
2.9 Xxxxxxxxxxx
2.10 Xxxxxxxx xxxxxx, 2 X
2.11 Xxxxxxxx xxxxxxxx, 0,2 X xxxxx roztok
2.12 Xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx
2.13 Směs xxxxxxx/xxxx
Xxxxx dílů ethanolu (2.2) se xxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxx (2:1)
2.14 Xxxxxx xxxxxxxxx standardu
Připraví xx xxxxxx obsahující 1 x kyseliny 2xxxxxxxxxxxxxxx (2.12) x 500 xx xxxxx ethanol/voda (2.13).
2.15 Mobilní xxxx xxx HPLC
2.15.1 Xxxxxxxxx xxxx: xx 1 xxxxx vody xx xxxxx 6,35 x xxxxxx sodného (2.7) x 20,0 ml xxxxxxxx xxxxxx (2.8) x xxxxxx xx.
2.15.2 Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (2.15.1) x jednoho xxxx xxxxxxxxxxxx (2.9).
2.16 Xxxxxxx roztok konzervačních xxxxxx
Xx xxxxxxx baňky xx 50 xx xx přesně naváží xxx 0,05 x xxxxxxxx 4hydroxybenzoové (2.3), 0,2 x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (2.4), 0,2 x kyseliny benzoové (2.5) a 0,05 x kyseliny sorbové (2.6) a xxxxx xx doplní xxxxx xxxxxxx/xxxx (2.13). Xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx týden.
2.17 Xxxxxxxxxx xxxxxxx konzervačních xxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxx xx 20 xx xx xxxxxx 8,00, 4,00, 2,00, 1,00 x 0,50 ml xxxxxxxxx xxxxxxx (2.16). Xx každé xxxxx xx přidá 10,00 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (2.14) x 0,5 xx 2 X xxxxxxxx sírové (2.10). Xxxxx xx xxxxxx xxxxx ethanol/voda (2.13). Xxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Přístroje x xxxxxxx
Xxxxx laboratorní vybavení x xxxx:
3.1 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xx 60 °X
3.2 Chromatograf xxx vysokoúčinnou kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx x XX xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a 10μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3.3 Xxxxxxxxxx kolona
Korozivzdorná xxxx, xxxxx 12,5 xx 25 cm, xxxxxxx xxxxxx 4,6 mm, xxxxxx Xxxxxxxxxxx 5C18 xxxx xxxxxxxxxxxx náplní.
3.4 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx: 90 xx, Schleicher xxx Xxxüxx, Xxxxxxxxx Xx 5892 xxxx xxxxxxxxxxxx.
3.5 Xxxxxxxxxxxxx baňky xx 50 xx
3.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 5 ml
3.7 Xxxxx xxxxxxx, karborundum, xxxxxxxx 2–4 xx, xxxx ekvivalentní
4. Postup
4.1 Xxxxxxxx xxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx standardu
Do Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 50 xx (3.5) se xxxxxx 1 g xxxxxx. Xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx 10 xx 2 X xxxxxxxx xxxxxx (2.10) a 40 xx xxxxx ethanol/voda (2.13). Xxxxx se xxxxxxxxx 1 x xxxxxxx xxxxxxx (3.7), xxxxx xx xxxxxx x xxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx suspenze. Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx konzervačních xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx zahřívá přesně xxx xxxxx na xxxxx lázni (3.1) xxx 60 °X.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx v proudu xxxxxxx vody x xxxxxxx se na xxxxxx uloží xxx 5 °X.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (3.4). Xxx 2 xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx do xxxxxxxxxx lahvičky (3.6). Xxxxxxx se xxxxxxxx xxx 5 °C x stanovení pomocí XXXX se xxxxxxx xx 24 xxxxx.
4.1.2 Xxxxxxxx vzorku x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx Xxxxxxxxxxxxx baňky xx 50 xx (3.5) xx x xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx 1 ± 0,1 g xxxxxx (x xxxxx). Xxxxxxx se přidá 1,00 xx 2 X kyseliny xxxxxx (2.10) x 30,0 xx xxxxx xxxxxxx/xxxx (2.13). Xxxxx xx xxxxxxxxx 1 x xxxxxxx xxxxxxx (3.7) x 10 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx(2.14). Xxxxxxxxxxxxx baňka se xxxxxx x xxxxx xx alespoň xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx suspenze. Xxx usnadnění xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx se Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xx vodní xxxxx (3.1) při 60 °X.
Xxxxxxxxxxxxx baňka xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxx se xxxxx xx xxxxxx xxx 5 °C.
Extrakt xx zfiltruje xxxx xxxxxxxxx papír (3.4). Xxx 2 xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx lahvičky (3.6). Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxx 5 °X x xxxxxxxxx xxxxxx XXXX se xxxxxxx do 24 xxxxx.
4.2 Xxxxxxxxxxxx kapalinová xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx fáze: acetonitril/acetátový xxxx (2.15).
Xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx se xxxxxxx xx 2,0 ± 0,5 ml/min. Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx nastaví xx 240 xx.
4.2.1 Xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.2) xx nastříkne xx 10 μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad (2.17). Xxx xxxxx xxxxxx se xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx stanoví xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx konzervační přísady x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx přísadu xx sestrojí xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx výšek xxxx xx koncentraci xxxxxxx xxxxxxxxxxxx roztoku.
Přesvědčete xx, že xxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxx xxxxxxxx odezva.
4.2.2 Xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.2) xx nastříkne 10 μx xxxxxxxx xxxxxx (4.1.1) x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx 10 μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (2.17) x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx se xxxxxxxxx. Xxxx-xx x xxxxxxxxxxxxx extraktu xxxxxx (4.1.1) xxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx časem jako xxx xxxxxxxx 2methoxybenzoové (xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 10 μx extraktu vzorku x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.1.2) x xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx.
Xx-xx x chromatogramu xxxxxxxx xxxxxx (4.1.1) xxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx jako xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. (Xxxx-xx xxxxx z xxxxxxxxxxxxx konzervačních přísad x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx jako xxxxxxx standard.)
Je třeba xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx páru xx xxxxxxx 0,90. (Xxxxxxxx separace xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx 1)
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxx xxxx
Xxxx-xx požadované xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx být xxx xxxxxxx účinnější xxxxxx xxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx upraveno xxx, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
- Xxxxxx asymetrie Xx všech xxxxxxxxx xxxx xx se xxx pohybovat xx 0,9 do 1,5. (Xxxxxxxx xxxxxxx asymetrie xx xxxxxxx xx xxxxxxx 2.) Xxx xxxxxxxxxxx chromatogramu xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx doporučená xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx 2 cm/min.
Obrázek 2: Faktor xxxxxxxxx xxxx
- Základna xxxx xxx stabilní.
5. Xxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx konzervačních přísad x xxxxx xxxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx) x xxxx xxxxxxxxxx xxxx. Obsah xxxxxxxx xxxxxxxx, kyseliny 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxx kyseliny xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xx) xx xxxxxxx pomocí xxxxxx
xx % (m/m) = (100x 20 x x) / (106 x&xxxx; a) = b / (500 x a)
kde
a = xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1.2) (g),
b = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx (4.1.2) (μx/xx) xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx.
6. Xxxxxxxxxxxxxx [1]
Při xxxxxx xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx 0,40 % by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,035 %.
Xxx xxxxxx kyseliny benzoové 0,50 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx vzorkem xxxxxxxxx 0,050 %.
Při xxxxxx xxxxxxxx salicylové 0,50 % by xxxxxx absolutní hodnota xxxxxxx výsledků dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,045 %.
Při xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx 0,60 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejným xxxxxxx xxxxxxxxx 0,035 %.
7. Xxxxxxxx
7.1 Výsledky xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xx množství xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xx rozhodující x množství xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxx xxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2 Xx-xx xx xxxxxxx, lze xxxxxx vhodnou xxxxxxxxx xxxxxx.
X. STANOVENÍ XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxx xx xxxxxx pro xxxxxxxxx kyseliny propionové x kosmetických prostředcích xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 2 % (x/x).
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (% x/x) výrobku.
3. Xxxxxxxx metody
Po xxxxxxxx xxxxxxxx propionové z xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx použití xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx jako xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
4. Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx p.a; xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx nebo xxxx xxxxxxx ekvivalentní xxxxxxx.
4.1 Ethanol, 96 % (X/X)
4.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
4.3 Xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx
4.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, 10 % (x/X)
4.5 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx na 50 xx xx xxxxxx xxxxxx 1 g (x gramů) xxxxxxxx xxxxxxxxxx x doplní xx xx xxxxx xxxxxxxxx (4.1).
4.6 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx odměrné xxxxx xx 50 xx xx přesně xxxxxx 1 x (x xxxxx) xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xx xx xxxxx xxxxxxxxx (4.1).
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
5.1 Běžné xxxxxxxxxxx vybavení x xxxx:
5.2 Xxxxxxx chromatograf x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxx (20 × 150 xx) xx šroubovacím xxxxxxxx
5.4 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx na 60 °X
5.5 Skleněná xxxxxxxx xxxxxxxxx xx 10 xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxx 0,45 μx)
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxx vzorku
6.1.1 Příprava xxxxxx bez vnitřního xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.3) se xxxxxx xxxxxxxxx 1 x xxxxxx. Xxxxx xx 0,5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (4.4) a 9,5 ml xxxxxxxx (4.1).
Xxxxxxxx se uzavře x xxxxx xxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xx pět xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xx 60 °X (5.4), xxx xx zcela xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxx zchladí xxx tekoucí xxxxx. Xxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx (5.5). Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx.
6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxx s vnitřním xxxxxxxxxx
Xx xxxxxxxx zkumavky (5.3) se s xxxxxxxxx xx 3 xxxxxxxxx místa naváží 1 ± 0,1 x xxxxxx. Přidá xx 0,5 xx xxxxxxxx trihydrogenfosforečné (4.4), 0,50 xx roztoku xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.6)a 9 xx ethanolu (4.1).
Xxxxxxxx xx uzavře x xxxxx protřepe. Xxxx to xxxxxxxx, xxxxxx se zkumavka xx pět xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xx 60 °X (5.4), xxx xx zcela xxxxxxxxxx xxxxxx fáze. Xxxxxxxx xx rychle zchladí xxx xxxxxxx vodou. Xxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx přes xxxxxxxxxx xxxxx (5.5). Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxx.
6.2 Xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx
Xxx: korozivzdorná xxxx
Xxxxx: 2 x
Xxxxxx: ⅛"
Náplň: 10 % XX™ 1000 (nebo xxxxxxxxxxxx) + 1 % X3XX4 xx Xxxxxxxxxxx XXX 100–120 xxxx
Xxxxxxx
Xxxxxxx: 200 °C
Kolona: 120 °X
Xxxxxxxx: 200 °X
Xxxxx xxxx: xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx: 25 xx/xxx
6.3 Xxxxxxxxxxxxxx
6.3.1 Xxxxxxxxx
Xx řady xxxxxxxxx xxxxx na 20 xx xx xxxxxxxxxx 0,25, 0,50, 1,00, 2,00 x 4,00 xx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.5). Xx xxxxx xxxxxxx baňky xx odpipetuje 1,00 xx roztoku vnitřního xxxxxxxxx (4.6); doplní xx na xxxxx xxxxxxxxx (4.1) a xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx obsahují xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxxx jako xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xx/xx (xx xxxxxxx 1 xx/xx, xx-xx x = 1,000) x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x/4, p/2, p, 2x, 4x xx/xx (xx xxxxxxx 0,25, 0,50, 1,00, 2,00, 4,00 xx/xx, xx-xx x = 1,000).
Xxxxxxxxx xx 1 μx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx křivka xx xxxxxxxx xxxxxxxxx poměru xxxxxxxxx kyseliny propionové x xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxx x x xxxxxx odpovídajících xxxxx xxxx xx xxx x.
Xxxxxxxxxx xx 3 xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx.
6.3.2 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx 1 μx xxxxxxxx vzorku 6.1.1. Xxxxxxxxxxxx se xxxxxxx x chromatogramem xxxxxxx ze xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (6.3.1). Xx-xx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxx xxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx-xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xx 1 μx filtrátu xxxxxx 6.1.2 x xxxxx xx plochy píku xxxxxxxx propionové a xxxx vnitřního standardu.
Nastříknou xx 3 xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx ploch xxxx.
7. Xxxxxxx
7.1 X xxxxxxxxxx křivky sestrojené xxxxx bodu 6.3.1 xx xxxxxx poměr xxxxxxxxx (K), xxxxx xxxxxxxx poměru xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx v xxxx 6.3.2.
7.2 X xxxxx xxxxxxxxx poměru xxxxxxxxx xx vypočte xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx (x) x xxxxxxxxxxxx procentech xxxxxx xxxxxx
x % (x/x) = X (0,5 x 100 x x) / (50 x a) =X(x / x)
xxx
X = xxxxx vypočtený x bodu 7.1,
x = xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx xxxx 4.6,
x = xxxxxxxx vzorku x xxxxxxx xxxxx xxxx 6.1.2,
Xxxxxxxx se xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
8. Xxxxxxxxxxxxxx [2]
Xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 2 % (x/x) xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx xxxxxxx vzorkem xxxxxxxxx 0,12 %.
II. XXXXX X STANOVENÍ XXXXXXXXXXXX, XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX, XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX X HYDROCHINONMONOBENZYLETHERU X XXXXXXXXXXXX PROSTŘEDCÍCH
A. DŮKAZ
1. Xxxxxx x oblast xxxxxxx
X metodě xx xxxxxxx xxxxxxx a xxxxx hydrochinonu, hydrochinonmonomethyletheru, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx a hydrochinonmonobenzyletheru (xxxxxxxxxxx) x kosmetických xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx.
2. Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxx se provede xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx (TLC).
3. Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x.x.
3.1 Ethanol, 96 % (X/X)
3.2 Xxxxxxxxxx
3.3 Xxxxxxxxxxxx
3.4 Xxxxxxxx rozpouštědlo:
Chloroform/diethylether, 66: 33 (X/X)
3.5 Xxxxxxx, 25 % (x/x) (x420 = 0,91 x/xx)
3.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxx
3.7 Hydrochinon
3.8 Hydrochinonmonomethylether
3.9 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.10 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx)
3.11 Xxxxxxxxxx roztoky
Následující xxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx a jsou xxxxxxxx xxxxx den.
3.11.1 Xx xxxxxx xxxxxxxx xx 10 xx xx naváží 0,05 x xxxxxxxxxxxx (3.7). Xxxxx xx 0,250 x xxxxxxxx askorbové (3.6) x 5 xx ethanolu (3.1). Xxxxxxx xx xxxxxxx (3.5), xxxxx xxxx xxxxxxxx pH 10, x xxxxxx se xxxxxxxxx na objem 10 ml (3.1).
3.11.2 Xx xxxxxx xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxx 0,05 x hydrochinonmonomethyletheru (3.8). Xxxxx se 0,250 x kyseliny xxxxxxxxx (3.6) a 5 xx ethanolu (3.1). Xxxxxxx se xxxxxxx (3.5), xxxxx xxxx xxxxxxxx xX 10, x doplní xx xxxxxxxxx xx xxxxx 10 xx (3.1).
3.11.3 Xx xxxxxx xxxxxxxx xx 10 ml xx xxxxxx 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.9). Xxxxx se 0,250 x kyseliny askorbové (3.6) x 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx se xxxxxxx (3.5), xxxxx xxxx xxxxxxxx pH 10, x xxxxxx se xxxxxxxxx na xxxxx 10 ml (3.1).
3.11.4 Xx dělené xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxx 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.10). Xxxxx xx 0,250 x kyseliny xxxxxxxxx (3.6) a 5 xx ethanolu (3.1). Xxxxxxx se xxxxxxx (3.5), xxxxx xxxx xxxxxxxx xX 10, x xxxxxx xx xxxxxxxxx na xxxxx 10 xx (3.1).
3.12 Xxxxxxxx stříbrný
3.13 Kyselina xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.14 Xxxxxxxxxxxxxx draselný xxxxxxxxxx
3.15 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
3.16 Xxxxxxxx xxxxxxx
3.16.1 Xx 5 % xxxxxxx xxxxxxx (x/X) xxxxxxxxx stříbrného (3.12) xx xxxxxxx xxxxxxx (3.5), xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx:
Xxx xxxxxx xxxxx se x xxxxxxx tvoří xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxx xx být po xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.16.2 10 % (m/V) xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.13) x xxxxxxxx (3.1).
3.16.3 Xxxxxxxx xx 1 % (x/X) xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.14) a 2 % (x/X) xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx železitého (3.15). Těsně xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x dále:
4.1 Xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx
4.2 Xxxxxx desky xxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx: xxxxxxxxx XXX/XX254 (254 xx xxxxxx xxxxxxx XXX/XX); 20 × 20 xx (Xxxxxxx, Xxxxx nebo xxxxxxxxxxxx). Tloušťka vrstvy 0,25 mm.
4.3 Ultrazvuková xxxxx
4.4 Xxxxxxxxxxx
4.5 XX xxxxx, 254 nm
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxx vzorku
Do xxxxxx xxxxxxxx na 10 ml xx xxxxxx 3 x xxxxxx. Xxxxx xx 0,250 x kyseliny xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx xxxxxxxx (3.1). xX roztoku xx xxxxxx xxxxxxxxx (3.5) xx 10. Xxxxx xx doplní xxxxxxxxx (3.1) xx 10 xx. Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx x homogenizuje xx 10 xxxxx v xxxxxxxxxxxx lázni. Xxxxxxxxx xx xxxx filtrační xxxxx xxxx xx xxxxxxxx při 3000 xx./xxx.
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx (XXX)
5.2.1 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.4).
5.2.2 Na xxxxx xx xxxxxx xx 2 μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.11) x 2 μx xxxxxxx xxxxxx (5.1). Xxxxxx xx ve xxx xxx xxxxxxx xxxxx, xxxxx čelo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 xx xx startu.
5.2.3 Xxxxx se xxxxx, xxxxx se xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx teplotě.
5.3 Xxxxxxx
5.3.1 Xxxxx xx xxxxxxxx xxx XX xxxxxx xxx 254 xx x xxxxxx xxxxx xx xxxxxx.
5.3.2 Xxxxx xx xxxxxxxx
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.16.1), xxxx
- kyselinou xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.16.2); zahřeje xx xx xxx 120 °X, xxxx
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.16.3).
6. Důkaz
Spočítá xx xxxxxxx Xx xxxxx xxxxxx.
Xxxxxx získané pro xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx se skvrnami xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxx x xxxxxx xxxxxxx Xx, xxxxx xxxxx x XX xxxxxx x xxxxx skvrn xx zviditelnění xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx chromatografie popsaná x následujícím xxxxxx (X) x porovnají xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxx (xxxx) xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx roztoků.
Výsledky x XXX x HPLC xx xxxxxxxxxx s xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx.
7. Xxxxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx pozorovány xxxxxxxxxxx xxxxxxx Xx:
xxxxxxxxxxx: 0,32
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: 0,53
hydrochinonmonoethylether: 0,55
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: 0,58
X. XXXXXXXXX
1. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
X xxxxxx je specifikován xxxxxx pro stanovení xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx kůže.
2. Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xx extrahován xxxxx voda/methanol xx xxxxxxx xxxxxxx, kterým xx xxxxxxxx tukový xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx s xxxxxxxxx xxxx x UV xxxxxxx.
3. Reakční činidla
3.1 Xxxxxxx reakční xxxxxxx xxxx být xxxxxxx x.x. Xxxx být xxxxxxx destilovaná xxxx xxxx voda xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3.2 Xxxxxxxx
3.3 Xxxxxxxxxxx
3.4 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.5 Hydrochinonmonoethylether
3.6 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx)
3.7 Tetrahydrofuran, xxxxxxx pro XXXX
3.8 Xxxx xxxx/xxxxxxxx 1:1 (X/X). Xxxxxx se xxxxx díl xxxx x jeden xxx xxxxxxxxx (3.2)
3.9 Mobilní xxxx: xxxx tetrahydrofuran/voda 45:55 (X/X). Smíchá xx 45 dílů xxxxxxxxxxxxxxxx (3.7) a 55 xxxx vody.
3.10 Xxxxxxxxxx roztok
Do odměrné xxxxx xx 50 xx se xxxxxx 0,06 g hydrochinonu (3.3), 0,08 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.4), 0,10 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.5) x 0,12 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.6). Xxxxxxxx xx x xxxxxx xx xx xxxxx xxxxxxxxxx (3.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx 10 xx xxxxxx xxxxxxx xx 50 ml xxxxx xxxx/xxxxxxxx (3.8). Tyto xxxxxxx se připravují xxxxxxx.
4. Přístroje x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx:
4.1 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx na xxxxxxx 60 °X
4.2 Xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx chromatografii s XX xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x 10μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
4.3 Xxxxxxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx 250 xx, vnitřní xxxxxx 4,6 xx, plněná Xxxxxx fenylem (xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx Xxxxxxx XXX, uzavřená xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx), velikost xxxxxx 6 μx, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx ochranná kolona, x výjimkou xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx náplní.
4.4 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx 90 xx, Xxxxxxxxxx xxx Xxxüxx, Xxxxxxxxx Xx 5892 xxxx xxxxxxxxxxxx
5. Xxxxxx
5.1 Příprava xxxxxx
Xx odměrné xxxxx xx 50 xx xx x xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx 1 ± 0,1 x (x xxxxx) xxxxxx. Xxxxxx se xxxxxxxx xx 25 ml xxxxx voda/methanol (3.8). Xxxxx se xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx jednu xxxxxx. Xxxxx se xxxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxx xx 60 °X, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx a xxxxxx xx na objem xxxxx xxxx/xxxxxxxx (3.8). Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (4.4). Důkaz HPLC xx xxxxxxx xx 24 hodin xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
5.2 Vysokoúčinná xxxxxxxxxx chromatografie
5.2.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx (3.9) xx xxxxxx xx 1,0 xx/xxx x vlnová xxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx xx 295 xx.
5.2.2 Xxxxxxxxx xx 10 μx roztoku xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.1 a xxxxxxxxx xx chromatogram. Změří xx xxxxxx píků. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx bodu 5.2.3. Xxxxxxxxx xx chromatogramy xxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx píků a xxxxxxx xxxxxx (XX) xxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.2.3.
5.2.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx 10 μl xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) x xxxxxxxxx se chromatogram. Xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx píku konstantní.
Stanoví xx xxxxxx odezvy XXx (x xx xxxxxx xxxxxxx XX):
XXx = pi /xx
xxx
xx = xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, x
xx = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, hydrochinonmonomethyletheru, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) (x/50 xx).
Xx třeba xxxxxx, zda xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx standardní xxxxxx x roztok xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx páru xx alespoň 0,90. (Xxxxxxxx separace xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx 1.).
Obrázek 1: Xxxxxxxx xxxx
Xxxx-xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx být xxx xxxxxxx xxxxxxxxx kolona xxxx by mělo xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx, xxx byl xxxxxxxxx xxxxxx.
- Xxxxxx xxxxxxxxx Xx všech získaných xxxx by xx xxx xxxxxxxxx od 0,9 xx 1,5. (Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx 2.) Při xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx stanovení xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx 2 xx/xxx.
Xxxxxxx 2:Xxxxxx asymetrie xxxx
- Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx.
6. Výpočet
Pro výpočet xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxx) ve xxxxxx xx xxxxxxx plochy xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vzorku xxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xi) se xxxxxxx xxxxxx xxxxxx
xx % (x/x) = (xx x 100) / (RFi x x)
xxx
x = hmotnost xxxxxx x xxxxxxx,
xx = plocha píku xxxxxxx x xx xxxxxx.
7. Xxxxxxxxxxxxxx [3]
7.1 Xxx obsahu xxxxxxxxxxxx 2,0 % by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx provedených současně xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,13 %.
7.2 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1,0 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx stejným xxxxxxx xxxxxxxxx 0,1 %.
7.3 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1,0 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,11 %.
7.4 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1,0 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx xxxxxxx vzorkem xxxxxxxxx 0,11 %.
8. Xxxxxxxxxxxxxxxxxx [4]
8.1 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx 2 % by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx stejným xxxxxxx xx různých xxxxxxxx (různé laboratoře, xxxxx experimentátoři, různé xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx) překročit 0,37 %.
8.2 Při xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % xx neměla xxxxxxxxx xxxxxxx rozdílu xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxx různá xxxx) xxxxxxxxx 0,21 %.
8.3 Xxx obsahu xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % by xxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx vzorkem xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx experimentátoři, xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx doba) překročit 0,19 %.
8.4 Při xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx rozdílu xxxxxxxx dvou stanovení xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx) xxxxxxxxx 0,11 %.
9. Poznámky
9.1 Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx 2 % x je xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xx být xxxxxxx xxxxxx (5.1) xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, jakou xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx 2 % hydrochinonu, x stanovení xx xxxx xxx opakováno.
(U xxxxxxxxx přístrojů může xxx vysokých xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx ležet hodnota xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx detektoru.)
9.2 Rušivé xxxxx
Xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx hydrochinonu x xxxx etherů x xxxxxx isokratickém xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx hydrochinonu, kterou xxxxx zajistit při xxxxxxx xxxxxx C18 x uvedenou mobilní xxxx.
X xxxx metody xxxx snadno xxxxxxx x rušivému vlivu xxxx řady xxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxx zopakováno x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx/xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx x xxxxxxxxxx v xxxxxxxx 2 a 3:
Xxxxxx: Xxxxxx ODS, 4,6 xx × 25 xx nebo xxxxxxxxxxxx:
xxxxxxx: 36 °X
xxxxxx: 1,5 xx/xxx
xxxxxxx xxxx:
xxx xxxxxxxxxxx: xxxxxxxx/xxxx 5/95 (X/X)
xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: methanol/voda 30/70 (X/X)
xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxx/xxxx 80/20 (X/X) [5].
Xxxxxx: Xxxxxxxxxx X5XXX xxxx ekvivalentní:
mobilní xxxx: xxxx/xxxxxxxx 90/10 (X/X)
xxxxxx: 1,5 ml/min
Tyto xxxxxxxx xxxx vhodné xxx xxxxxxxxxxx [6].
[1] XXX 5725.
[2] ISO 5725.
[3] XXX 5725.
[4] ISO 5725.
[5] Xxxxxx-Xxxxxxxxx, X., Xxxxx M.-O., Identification xx xxxxxx xx x’xxxxxxxxxxxx xx de xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxx produits cosmétiques xxxx blanchir xx xxxx. Int. J. Xxxxxx. Sci., 8-203-214 (1986).
[6] Firth, J., Xxx X., Determination xx hydroquinone xx xxxx toning xxxxxx, Xxxxxxx, (1986), 111, x. 129.