Šestá xxxxxxxx Komise 95/32/XX
xx xxx 7. xxxxxxxx 1995
x xxxxxxxx xxxxxxx nezbytných xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
(Xxxx s významem xxx EHP)
KOMISE EVROPSKÝCH XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx x založení Xxxxxxxxxx společenství,
s ohledem xx xxxxxxxx Rady 76/768/XXX xx xxx 27. července 1976 x xxxxxxxxxx právních xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx xxxxxxxx Komise 94/32/XX [2], x xxxxxxx na xx. 8 xxxx. 1 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx x xxxx, xx xx xx xxxxxxxx 76/768/EHS xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx prostředků x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx předepsaných předpisy Xxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xx všechny xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx; xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxx ve xxxxxxxx Komise 80/1335/XXX [3] xx znění xxxxxxxx 87/143/EHS [4], xxxxxxxx 82/434/XXX [5] xx znění xxxxxxxx 90/207/XXX [6] a xx xxxxxxxxxx 83/514/XXX [7], 85/490/XXX [8] x 93/73/EHS [9];
xxxxxxxx x tomu, xx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx sorbové, xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, hydrochinonmonoethyletheru x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx jsou x xxxxxxx se xxxxxxxxxxx Výboru xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx 76/768/XXX xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
XXXXXXX TUTO XXXXXXXX:
Článek 1
Xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxx, aby xx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx prostředků:
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx sorbové, kyseliny xxxxxxxxxx a kyseliny xxxxxxxxxx,
- důkaz x xxxxxxxxx hydrochinonu, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x hydrochinonmonobenzyletheru xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxx 2
1. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx v xxxxxxxx právní x xxxxxxx předpisy xxxxxxxx xxx dosažení souladu x xxxxx směrnicí xxxxxxxxxx do 30. xxxx 1996. Xxxxxxxxxx x xxxx uvědomí Xxxxxx.
Xxxx opatření xxxxxxx xxxxxxxxx státy musí xxxxxxxxx odkaz xx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxx takový xxxxx xxx učiněn při xxxxxx úředním xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx státy.
2. Xxxxxxx xxxxx xxxxx Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx předpisů, xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 3
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 4
Xxxx směrnice xx určena xxxxxxxx xxxxxx.
V Xxxxxxx dne 7. července 1995.
Za Xxxxxx
Xxxx Xxxxxx
xxxxxx Xxxxxx
[1] Úř. xxxx. X 262, 27.9.1976, x. 169.
[2] Xx. xxxx. X 181, 15.7.1994, x. 31.
[3] Úř. věst. X 383, 31.12.1980, x. 27.
[4] Úř. xxxx. X 57, 27.2.1987, x. 56.
[5] Xx. xxxx. X 185, 30.6.1982, x. 1.
[6] Xx. věst. X 108, 28.4.1990, x. 92.
[7] Úř. věst. X 291, 24.10.1983, x. 9.
[8] Xx. xxxx. X 295, 7.11.1985, x. 30.
[9] Xx. xxxx. X 231, 14.9.1993, x. 34.
XXXXXXX
X. DŮKAZ A XXXXXXXXX KYSELINY XXXXXXXX, XXXXXXXX 4XXXXXXXXXXXXXXX, XXXXXXXX XXXXXXX, XXXXXXXX XXXXXXXXXX X XXXXXXXX XXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX
1. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx důkaz a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, kyseliny xxxxxxx, xxxxxxxx salicylové x xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx důkazu těchto xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, stanovení xxxxxxxx propionové a xxxxxxxxx xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, kyseliny xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxx kyseliny xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx salicylové, xxxxxxxx xxxxxxx x kyseliny xxxxxxxxxx stanovená xxxxx xxxxxxx se vyjádří x xxxxxxxxxxxx procentech xxxxxxx xxxxxxx.
X. DŮKAZ
1. Xxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx analyzuje xxxxxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx (XXX) x xxxxxxx chromatografií ("xxxxxxxxxxxx xx xxxxx"). X xxxxxxxxxx xx výsledcích xx důkaz potvrdí xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx, x xxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxx, xxxxxxxx chromatografií (XX).
2. Xxxxxxx činidla
2.1 Xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx činidla musí xxx xxxxxxx x.x. Xxxx xxx použita xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx alespoň xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2.2 Xxxxxx
2.3 Diethylether
2.4 Xxxxxxxxxxx
2.5 Xxxxxx
2.6 xXxxxx
2.7 Xxxxxxx, xxxxxx
2.8 Kyselina xxxxxxxxxxxxxx, 4 X
2.9 Xxxxxxxx xxxxxxxx, 4 X vodný xxxxxx
2.10 Xxxxxxx vápenatý, XxXx2·2X2X
2.11 Xxxxxxxxx lithný, Xx2XX3
2.12 2Xxxx2‘xxxxxxxxxxx
2.13 Xxxxxxxx 4hydroxybenzoová
2.14 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
2.15 Xxxxxxxx xxxxxxxx
2.16 Xxxxxxxx sorbová
2.17 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
2.18 Referenční xxxxxxx
Xxxxxxxx xx 0,1 % (x/X) roztoky (100 xx/100 xx) xxxxx x pěti xxxxxxxxxxxxx přísad (2.13 xx 2.17) x xxxxxxxxxxxxx.
2.19 Derivatizační xxxxxxx
0,5 % xxxxxx 2xxxx2‘xxxxxxxxxxxx (2.12) v xxxxxxxxxxxx (2.4) (50 mg/10 xx). Xxxxx xxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxx.
2.20 Xxxxxx xxxxxxxxxxxx
0,3 % (x/X) roztok xxxxxxxxxx lithného (2.11) xx xxxx (300 xx/100 ml). Xxxxx xxxxxx xx xxx xxx připravován xxxxxxx.
2.21 Xxxxxxxx rozpouštědlo
Toluen (2.5)/xxxxxx (2.2) (20: 0,5, X/X)
2.22 Xxxxxx parafin (2.7)/xxxxxx (2.6) (1:2, X/X)
3. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx vybavení
3.1 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx teplotu 60 °X
3.2 Xxxxxxxx xxxxxx
3.3 Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx 254 a 366 xx
3.4 Hotové desky xxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, Xxxxxxxxx 60, bez fluorescenčního xxxxxxxxxx, 20 × 20 cm, xxxxxxxx xxxxxx 0,25 xx x xxxxxxxxxxxx xxxxx 2,5 × 20 xx (Xxxx 11845 xxxx ekvivalentní)
3.5 Xxxxxxxxxxxxxx xx 10 μl
3.6 Xxxxxxxxxxxxxx xx 25 μx
3.7 Xxxxxxx nastavitelná xx xxxxxxx xx 105 °X
3.8 Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 50 x 200 ml xx zabroušenou zátkou
3.9 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx 90 xx, Xxxxxxxxxx &xxx; Xxxüxx, Weissband Xx. 5892, xxxx xxxxxxxxxxxx
3.10 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xX 1 – 11
3.11 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx na 5 xx
3.12 Xxxxxxx xxxxxxx odparka (Rotavapor xxxx ekvivalentní)
3.13 Xxxxx xxxxx
4. Postup
4.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 50 ml xx xxxxxxxxxxx xxxxxx (3.8) xx xxxxxx xxxxxxxxx 1 g xxxxxx. Přidají se xxxxx kapky 4 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (2.8) x 40 xx acetonu (2.2). X xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxx být přidáno 20 kapek 4 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (2.8). Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) se xxxxxxxxxxx, zda xx xX xxxxxxxxx 2. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x xx xxxx xxxxx minuty xx silně protřepává.
Jeli xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxx 60 °X, xxx xx xxxxxx fáze xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xx zchladí xx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (3.9) do Xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
20 xx xxxxxxxx se xxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx baňky xx 200 xx, xxxxx xx 20 xx xxxx x xxxxxxxx xx. xX xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xx 10 xxxxxx 4 X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (2.9) xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10).
Xxxxx se 1 x chloridu xxxxxxxxxx (2.10) x xxxxx se protřepe. Xxxxxxxxx xx přes xxxxxxxxx papír (3.9) xx xxxxxx xxxxxxx xx 250 xx xxxxxxxxxx 75 xx xxxxxxxxxxxxx (2.3) x xxxxx se xxxxx xxxxx minutu. Vrstvy xx nechají xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx baňky xx 250 ml. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) xx xX xxxxxxx roztoku xxxxxx xx xxxxxxxxx 2 okyselením 4 X kyselinou chlorovodíkovou (2.8). Přidá se 10 xx diethyletheru (2.3), xxxxx se xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx; xxxxxx xx nechají xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (3.12). Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx a xxxxxx xx znovu xxxxxxxx v 1 xx diethyletheru (2.3). Xxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxxxxx lahvičky (3.11).
4.2 Chromatografie xx xxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx zóny xxxxx pro xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx (3.4) xx xx xxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxxx mají xxx xxxxxxxxxxx, nanese xxxxxxxxxx (3.5) xx xxxxxxxx xxxxxxxxx vždy xx 3 μx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (2.20) x xxxxxx se x proudu xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx deska se xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx (3.13) zahřátou xx 40 °X, xxx xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx (3.5) xx xx xxxxxxxxx linii xxxxx xxxxxx vždy 10 μx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (2.18) x xxxxxxx xxxxxx (4.1) xxxxxx xx xxxx, xxx byl xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xx xxxx, xxx xxxx naneseny referenční xxxxxxx/xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx 15 μx xxxxxxxxxxxxxxx činidla (2.19) (xxxxxx 2xxxx2‘xxxxxxxxxxxx).
Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx se zahřívá x sušárně (3.7) 45 xxxxx xxx 80 °C. Po xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x komoře (3.2), která xxxx (xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx) 15 minut xxxxxx vyvíjecím xxxxxxxxxxxxx 2.21 (xxxxxx/xxxxxx), xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 xx (xxxx vyvíjení xx xxxxxxxxx 80 minut).
Deska xx vysuší x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx pod XX xxxxxxx (3.3). Xxx zesílení fluorescence xxxxxxx xxxxx xxxx xxx chromatografická xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxx (2.22).
5. Důkaz
Pro xxxxxx skvrnu xx xxxxxxx xxxxxxx Xx.
Xxxxxxx Xx a chování xxxxxx xxx XX xxxxxxx se porovnají x hodnotami a xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx vzorků.
Učiní xx xxxxxxxxx závěry x xxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx X, xxxx xxxxxxx-xx xx, xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx X. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx TLC x XXXX xxxx XX se xxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad xx vychází x xxxxxxxxx xxxxxxxx.
X. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXX, XXXXXXXX 4XXXXXXXXXXXXXXX, XXXXXXXX SORBOVÉ X KYSELINY XXXXXXXXXX
1. Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx se xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx ethanolu a xxxx. Po xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx přísady xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx (XXXX).
2. Xxxxxxx xxxxxxx
2.1 Všechna reakční xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x.x. x xxxx být vhodná xxx XXXX. Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx nebo xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2.2 Xxxxxxx, absolutní
2.3 Xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx
2.4 Xxxxxxxx salicylová
2.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx
2.6 Kyselina xxxxxxx
2.7 Xxxxx xxxxx, (XX3XXXXx·3X2X)
2.8 Kyselina xxxxxx, x420 = 1,05 x/xx
2.9 Xxxxxxxxxxx
2.10 Xxxxxxxx xxxxxx, 2 M
2.11 Xxxxxxxx xxxxxxxx, 0,2 X vodný xxxxxx
2.12 Xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx
2.13 Směs xxxxxxx/xxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxx (2.2) xx smíchá x xxxxxx xxxxx xxxx (2:1)
2.14 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx xx xxxxxx obsahující 1 x xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx (2.12) x 500 xx xxxxx xxxxxxx/xxxx (2.13).
2.15 Xxxxxxx xxxx xxx XXXX
2.15.1 Acetátový xxxx: xx 1 xxxxx vody se xxxxx 6,35 x xxxxxx xxxxxxx (2.7) x 20,0 xx xxxxxxxx xxxxxx (2.8) x xxxxxx xx.
2.15.2 Xxxxxxx fáze xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx acetátového xxxxx (2.15.1) x jednoho xxxx xxxxxxxxxxxx (2.9).
2.16 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx 50 ml xx xxxxxx naváží xxx 0,05 x xxxxxxxx 4hydroxybenzoové (2.3), 0,2 g xxxxxxxx xxxxxxxxxx (2.4), 0,2 x xxxxxxxx benzoové (2.5) a 0,05 x xxxxxxxx xxxxxxx (2.6) x xxxxx xx doplní směsí xxxxxxx/xxxx (2.13). Xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Roztok je xxxxxxxx xxxxx xxxxx.
2.17 Xxxxxxxxxx xxxxxxx konzervačních xxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxx xx 20 xx xx odměří 8,00, 4,00, 2,00, 1,00 x 0,50 ml xxxxxxxxx xxxxxxx (2.16). Xx xxxxx baňky xx přidá 10,00 xx roztoku xxxxxxxxx xxxxxxxxx (2.14) a 0,5 xx 2 X xxxxxxxx sírové (2.10). Xxxxx xx xxxxxx směsí ethanol/voda (2.13). Xxxx xxxxxxx xxxx xxx připravovány xxxxxxx.
3. Přístroje x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx vybavení x xxxx:
3.1 Xxxxx xxxxx, nastavená na 60 °X
3.2 Xxxxxxxxxxxx xxx vysokoúčinnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x XX xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx délkou a 10μx nastřikovací smyčkou.
3.3 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx ocel, xxxxx 12,5 xx 25 cm, vnitřní xxxxxx 4,6 xx, xxxxxx Xxxxxxxxxxx 5X18 xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3.4 Xxxxxxxxx papír, xxxxxx: 90 xx, Xxxxxxxxxx xxx Schüll, Xxxxxxxxx Xx 5892 xxxx xxxxxxxxxxxx.
3.5 Xxxxxxxxxxxxx baňky xx 50 ml
3.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx lahvičky xx 5 ml
3.7 Xxxxx kamínky, karborundum, xxxxxxxx 2–4 mm, xxxx ekvivalentní
4. Postup
4.1 Xxxxxxxx xxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx xxx přidání xxxxxxxxx standardu
Do Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 50 xx (3.5) xx xxxxxx 1 x xxxxxx. Xx Erlenmeyerovy xxxxx xx xxxxxxxxxx 10 xx 2 X xxxxxxxx xxxxxx (2.10) x 40 xx xxxxx xxxxxxx/xxxx (2.13). Xxxxx xx xxxxxxxxx 1 g xxxxxxx xxxxxxx (3.7), xxxxx se uzavře x silně xx xxxxxxx xxxxx minutu xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx konzervačních xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx na xxxxx xxxxx (3.1) xxx 60 °X.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxx se na xxxxxx xxxxx xxx 5 °X.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (3.4). Xxx 2 xx extraktu xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx lahvičky (3.6). Xxxxxxx se xxxxxxxx xxx 5 °X x xxxxxxxxx xxxxxx XXXX se xxxxxxx xx 24 xxxxx.
4.1.2 Xxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx na 50 ml (3.5) xx x přesností xx xxx desetinná xxxxx xxxxxx 1 ± 0,1 x xxxxxx (x gramů). Xxxxxxx xx xxxxx 1,00 ml 2 X xxxxxxxx xxxxxx (2.10) a 30,0 xx xxxxx ethanol/voda (2.13). Xxxxx xx xxxxxxxxx 1 g xxxxxxx xxxxxxx (3.7) x 10 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx(2.14). Xxxxxxxxxxxxx baňka xx xxxxxx x silně xx xxxxxxx jednu xxxxxx xxxxxxxxxx, dokud xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx extrakce xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx xxxxx (3.1) při 60 °X.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx ochladí x xxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxx xxx 5 °C.
Extrakt xx zfiltruje přes xxxxxxxxx xxxxx (3.4). Xxx 2 ml xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.6). Xxxxxxx se xxxxxxxx xxx 5 °X x xxxxxxxxx xxxxxx XXXX xx xxxxxxx xx 24 xxxxx.
4.2 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx fáze: acetonitril/acetátový xxxx (2.15).
Xxxxxx mobilní xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx 2,0 ± 0,5 ml/min. Xxxxxx xxxxx detektoru xx xxxxxxx na 240 xx.
4.2.1 Xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.2) xx nastříkne xx 10 μx standardních xxxxxxx konzervačních xxxxxx (2.17). Xxx xxxxx xxxxxx xx ze xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx stanoví xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx konzervační xxxxxxx x xxxxx píku xxxxxxxxx standardu xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx výšek xxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xx, xx při xxxxxxxxx xxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.2) xx nastříkne 10 μx extraktu vzorku (4.1.1) x xxxxxxxxx xx chromatogram. Xxxxxxxxx xx 10 μl xxxxxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxxx xxxxxxx (2.17) x xxxxxxxxx se chromatogram. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. Není-li v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.1.1) xxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx jako xxx xxxxxxxx 2methoxybenzoové (xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 10 μx xxxxxxxx xxxxxx x přidaným vnitřním xxxxxxxxxx (4.1.2) x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.
Xx-xx x chromatogramu xxxxxxxx xxxxxx (4.1.1) xxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx časem xxxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx, xxx xx být xxxxxx xxxx xxxxxxx standard. (Xxxx-xx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx konzervačních přísad x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx tuto xxxxxxxxxxx xxxxxxx použít xxxx xxxxxxx standard.)
Je třeba xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- separace xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx alespoň 0,90. (Xxxxxxxx separace píků xx xxxxxxx na xxxxxxx 1)
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxx xxxx
Xxxx-xx požadované xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx být xxx xxxxxxx xxxxxxxxx kolona xxxx xx mělo xxx xxxxxxx mobilní xxxx xxxxxxxx xxx, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
- Xxxxxx xxxxxxxxx Xx všech xxxxxxxxx xxxx by xx xxx xxxxxxxxx xx 0,9 xx 1,5. (Xxxxxxxx faktoru asymetrie xx xxxxxxx xx xxxxxxx 2.) Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx faktoru xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx posuvu xxxxxx xxxxxxx 2 cm/min.
Obrázek 2: Faktor xxxxxxxxx xxxx
- Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx.
5. Xxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx konzervačních xxxxxx v roztoku xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx výšek xxxx xxxxxxxxxxxxx konzervačních xxxxxx x xxxxx píku xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx (vnitřní xxxxxxxx) x dále xxxxxxxxxx graf. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, kyseliny 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx sorbové xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx v xxxxxxxxxxxx procentech (xx) xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx
xx % (m/m) = (100x 20 x b) / (106 x&xxxx; x) = x / (500 x x)
xxx
x = xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1.2) (x),
x = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx (4.1.2) (μx/xx) xxxxxxxx x kalibračního xxxxx.
6. Opakovatelnost [1]
Xxx xxxxxx kyseliny 4hydroxybenzoové 0,40 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx xxxxxxx vzorkem xxxxxxxxx 0,035 %.
Xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx 0,50 % by xxxxxx absolutní hodnota xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx stejným xxxxxxx xxxxxxxxx 0,050 %.
Xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 0,50 % by xxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx současně xx stejným vzorkem xxxxxxxxx 0,045 %.
Xxx xxxxxx xxxxxxxx sorbové 0,60 % by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,035 %.
7. Xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xx rozhodující x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxx xxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2 Je-li xx xxxxxxx, xxx xxxxxx vhodnou xxxxxxxxx xxxxxx.
X. XXXXXXXXX KYSELINY XXXXXXXXXX
1. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxx xx vhodná xxx xxxxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx prostředcích xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 2 % (x/x).
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx stanovená xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (% x/x) xxxxxxx.
3. Xxxxxxxx metody
Po xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx chromatografií xx xxxxxxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx jako xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
4. Reakční činidla
Všechna xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx čistoty x.x; xxxx xxx použita xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx alespoň ekvivalentní xxxxxxx.
4.1 Xxxxxxx, 96 % (X/X)
4.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
4.3 Xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx
4.4 Xxxxxxxx trihydrogenfosforečná, 10 % (m/V)
4.5 Roztok xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx 50 xx xx xxxxxx xxxxxx 1 g (x xxxxx) kyseliny xxxxxxxxxx x doplní xx xx objem xxxxxxxxx (4.1).
4.6 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx 50 xx xx xxxxxx xxxxxx 1 x (x xxxxx) kyseliny 2xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xx na xxxxx xxxxxxxxx (4.1).
5. Přístroje x pomůcky
5.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx:
5.2 Plynový xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx ionizačním xxxxxxxxxx
5.3 Skleněná xxxxxxxx (20 × 150 xx) se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
5.4 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx 60 °X
5.5 Skleněná xxxxxxxx xxxxxxxxx xx 10 xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxx 0,45 μx)
6. Postup
6.1 Xxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 Příprava xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxx zkumavky (5.3) xx xxxxxx xxxxxxxxx 1 g xxxxxx. Xxxxx xx 0,5 xx kyseliny xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (4.4) x 9,5 ml xxxxxxxx (4.1).
Xxxxxxxx se uzavře x xxxxx xxxxxxxx. Xxxx xx nezbytné, xxxxxx se zkumavka xx xxx xxxxx xx vodní lázně xxxxxxx xx 60 °X (5.4), aby xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx fáze. Xxxxxxxx xx rychle xxxxxxx xxx xxxxxxx vodou. Xxxx roztoku xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx (5.5). Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se provede xxxxxx xxx.
6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxx x vnitřním xxxxxxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.3) xx x xxxxxxxxx xx 3 xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx 1 ± 0,1 x vzorku. Xxxxx xx 0,5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (4.4), 0,50 xx xxxxxxx xxxxxxxxx standardu (4.6)x 9 ml xxxxxxxx (4.1).
Xxxxxxxx xx xxxxxx x silně xxxxxxxx. Xxxx to xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxx xx xxx xxxxx xx vodní xxxxx xxxxxxx na 60 °X (5.4), xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx fáze. Xxxxxxxx xx xxxxxx zchladí xxx tekoucí xxxxx. Xxxx roztoku xx xxxxxxxxx přes xxxxxxxxxx xxxxx (5.5). Chromatografie xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxx.
6.2 Xxxxxxxx xxx plynovou chromatografii
Doporučují xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx
Xxx: xxxxxxxxxxxxx xxxx
Xxxxx: 2 x
Xxxxxx: ⅛"
Xxxxx: 10 % XX™ 1000 (xxxx ekvivalentní) + 1 % X3XX4 xx Xxxxxxxxxxx XXX 100–120 xxxx
Xxxxxxx
Xxxxxxx: 200 °C
Kolona: 120 °X
Xxxxxxxx: 200 °C
Nosný xxxx: xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx: 25 xx/xxx
6.3 Chromatografie
6.3.1 Xxxxxxxxx
Xx xxxx odměrných xxxxx xx 20 xx xx xxxxxxxxxx 0,25, 0,50, 1,00, 2,00 x 4,00 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.5). Do xxxxx odměrné xxxxx xx xxxxxxxxxx 1,00 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.6); xxxxxx xx xx xxxxx xxxxxxxxx (4.1) x xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx kyselinu 2xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx vnitřní xxxxxxxx x koncentraci x xx/xx (xx xxxxxxx 1 xx/xx, xx-xx x = 1,000) x kyselinu xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x/4, x/2, x, 2x, 4p xx/xx (xx xxxxxxx 0,25, 0,50, 1,00, 2,00, 4,00 mg/ml, xx-xx x = 1,000).
Xxxxxxxxx xx 1 μx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx křivka se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx propionové x kyseliny 2xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxx x x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxx y.
Nastříknou se 3 dávky x xxxxxxx roztoku x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx.
6.3.2 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx 1 μx xxxxxxxx vzorku 6.1.1. Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx s xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx standardních xxxxxxx (6.3.1). Má-li xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxx xxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx-xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xx 1 μx filtrátu xxxxxx 6.1.2 a změří xx plochy xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx 3 xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x vypočte xx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx.
7. Výpočty
7.1 Z xxxxxxxxxx xxxxxx sestrojené xxxxx xxxx 6.3.1 xx odečte xxxxx xxxxxxxxx (X), který xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx vypočtenému x xxxx 6.3.2.
7.2 X xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx se vypočte xxxxx kyseliny propionové xx xxxxxx (x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx vzorce
x % (x/x) = K (0,5 x 100 x x) / (50 x x) =X(x / x)
xxx
X = xxxxx xxxxxxxxx x xxxx 7.1,
x = hmotnost xxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx xxxx 4.6,
x = xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx 6.1.2,
Xxxxxxxx se xxxxxxxxxx na jedno xxxxxxxxx xxxxx.
8. Opakovatelnost [2]
Xxx xxxxxx kyseliny xxxxxxxxxx 2 % (x/x) xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx současně xx stejným xxxxxxx xxxxxxxxx 0,12 %.
II. XXXXX X XXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX, XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX, HYDROCHINONMONOETHYLETHERU X HYDROCHINONMONOBENZYLETHERU X XXXXXXXXXXXX PROSTŘEDCÍCH
A. XXXXX
1. Xxxxxx x oblast xxxxxxx
X xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx hydrochinonu, hydrochinonmonomethyletheru, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) v kosmetických xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx.
2. Podstata xxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx tenké xxxxxx (XXX).
3. Reakční xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx činidla xxxx xxx čistoty x.x.
3.1 Xxxxxxx, 96 % (X/X)
3.2 Xxxxxxxxxx
3.3 Xxxxxxxxxxxx
3.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx, 66: 33 (X/X)
3.5 Xxxxxxx, 25 % (x/x) (d420 = 0,91 x/xx)
3.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxx
3.7 Xxxxxxxxxxx
3.8 Hydrochinonmonomethylether
3.9 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.10 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx)
3.11 Xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx x jsou xxxxxxxx xxxxx xxx.
3.11.1 Xx xxxxxx xxxxxxxx xx 10 ml xx xxxxxx 0,05 x hydrochinonu (3.7). Xxxxx xx 0,250 x xxxxxxxx xxxxxxxxx (3.6) a 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx xx xxxxxxx (3.5), dokud xxxx xxxxxxxx xX 10, x xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx 10 xx (3.1).
3.11.2 Xx dělené zkumavky xx 10 ml xx naváží 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.8). Xxxxx xx 0,250 x xxxxxxxx askorbové (3.6) x 5 xx ethanolu (3.1). Xxxxxxx xx xxxxxxx (3.5), dokud není xxxxxxxx xX 10, x xxxxxx se xxxxxxxxx xx xxxxx 10 xx (3.1).
3.11.3 Xx xxxxxx zkumavky xx 10 xx xx naváží 0,05 x hydrochinonmonoethyletheru (3.9). Xxxxx se 0,250 x xxxxxxxx xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx xx xxxxxxx (3.5), xxxxx není xxxxxxxx xX 10, x doplní xx xxxxxxxxx xx xxxxx 10 xx (3.1).
3.11.4 Xx xxxxxx zkumavky xx 10 xx xx xxxxxx 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.10). Xxxxx se 0,250 x xxxxxxxx xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx xx amoniak (3.5), xxxxx není xxxxxxxx xX 10, x doplní xx xxxxxxxxx xx objem 10 ml (3.1).
3.12 Xxxxxxxx xxxxxxxx
3.13 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.14 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
3.15 Xxxxxxx železitý xxxxxxxxxx
3.16 Detekční xxxxxxx
3.16.1 Xx 5 % xxxxxxx xxxxxxx (x/X) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.12) xx xxxxxxx xxxxxxx (3.5), xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx:
Xxx xxxxxx xxxxx se v xxxxxxx tvoří xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxx xx být xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.16.2 10 % (m/V) roztok xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.13) x ethanolu (3.1).
3.16.3 Xxxxxxxx se 1 % (m/V) xxxxx xxxxxx kyanoželezitanu xxxxxxxxxx (3.14) a 2 % (x/X) xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx železitého (3.15). Xxxxx xxxx xxxxxxxx xx smíchají xxxxxx xxxx obou xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x dále:
4.1 Xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx
4.2 Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xx tenké xxxxxx: silikagel XXX/XX254 (254 je dolním xxxxxxx XXX/XX); 20 × 20 xx (Xxxxxxx, Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx). Tloušťka xxxxxx 0,25 mm.
4.3 Ultrazvuková xxxxx
4.4 Odstředivka
4.5 UV xxxxx, 254 xx
5. Xxxxxx
5.1 Příprava xxxxxx
Xx xxxxxx xxxxxxxx na 10 xx se xxxxxx 3 x xxxxxx. Xxxxx xx 0,250 x kyseliny xxxxxxxxx (3.6) x 5 ml xxxxxxxx (3.1). pH xxxxxxx xx upraví xxxxxxxxx (3.5) xx 10. Xxxxx xx doplní xxxxxxxxx (3.1) xx 10 xx. Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx se 10 xxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xx přes xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxx při 3000 xx./xxx.
5.2 Chromatografie na xxxxx xxxxxx (TLC)
5.2.1 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.4).
5.2.2 Xx xxxxx xx nanese xx 2 μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.11) x 2 μx xxxxxxx xxxxxx (5.1). Xxxxxx xx xx xxx xxx teplotě xxxxx, xxxxx xxxx rozpouštědla xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 xx xx xxxxxx.
5.2.3 Xxxxx xx vyjme, xxxxx se xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
5.3 Xxxxxxx
5.3.1 Xxxxx xx xxxxxxxx xxx UV xxxxxx xxx 254 xx x xxxxxx xxxxx xx xxxxxx.
5.3.2 Xxxxx se postříká
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.16.1), xxxx
- kyselinou xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.16.2); zahřeje xx xx xxx 120 °X, nebo
- roztokem xxxxxxxxxxxxxxx draselného a xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.16.3).
6. Xxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx Xx každé xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx pro referenční xxxxxxx, pokud xxx x xxxxxx xxxxxxx Xx, barvu xxxxx x XX xxxxxx x xxxxx skvrn xx zviditelnění xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx oddílu (X) a xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxx pík (xxxx) xxxxxx s xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx x XXX x XXXX xx zkombinují s xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx jeho xxxxxx.
7. Xxxxxxxx
Xx uvedených xxxxxxxx byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx Xx:
xxxxxxxxxxx: 0,32
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: 0,53
hydrochinonmonoethylether: 0,55
hydrochinonmonobenzylether: 0,58
X. XXXXXXXXX
1. Rozsah x oblast xxxxxxx
X xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, hydrochinonmonoethyletheru x hydrochinonmonobenzyletheru x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxx.
2. Podstata xxxxxx
Xxxxxx xx extrahován xxxxx voda/methanol xx xxxxxxx zahřátí, kterým xx xxxxxxxx tukový xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx provede xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx s obrácenou xxxx s XX xxxxxxx.
3. Reakční xxxxxxx
3.1 Xxxxxxx xxxxxxx činidla xxxx být čistoty x.x. Xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxx voda xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3.2 Methanol
3.3 Xxxxxxxxxxx
3.4 Hydrochinonmonomethylether
3.5 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.6 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (monobenzon)
3.7 Xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxx XXXX
3.8 Xxxx xxxx/xxxxxxxx 1:1 (X/X). Xxxxxx xx xxxxx xxx xxxx x jeden díl xxxxxxxxx (3.2)
3.9 Mobilní xxxx: xxxx tetrahydrofuran/voda 45:55 (X/X). Xxxxxx xx 45 xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (3.7) x 55 dílů xxxx.
3.10 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx 50 xx xx xxxxxx 0,06 g hydrochinonu (3.3), 0,08 g xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.4), 0,10 x hydrochinonmonoethyletheru (3.5) x 0,12 g xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.6). Xxxxxxxx xx x doplní xx na xxxxx xxxxxxxxxx (3.2). Referenční xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx 10 xx xxxxxx xxxxxxx xx 50 ml xxxxx xxxx/xxxxxxxx (3.8). Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxx laboratorní xxxxxxxx x xxxx:
4.1 Vodní xxxxx xxxxxxxxxxxx na xxxxxxx 60 °X
4.2 Xxxxxxxxxxxx pro vysokoúčinnou xxxxxxxxxxx chromatografii x XX detektorem s xxxxxxxxxxxxx vlnovou xxxxxx x 10μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
4.3 Xxxxxxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx 250 xx, vnitřní xxxxxx 4,6 xx, xxxxxx Xxxxxx fenylem (chemicky xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx na Xxxxxxx SIL, uzavřená xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx částic 6 μm, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx ochranná kolona, x výjimkou xxxxxxxx xxxxxx xxxx kolony x xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.4 Xxxxxxxxx xxxxx, průměr 90 xx, Xxxxxxxxxx xxx Schüll, Xxxxxxxxx Xx 5892 xxxx xxxxxxxxxxxx
5. Xxxxxx
5.1 Příprava xxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx 50 ml xx s xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxx naváží 1 ± 0,1 x (x gramů) vzorku. Xxxxxx xx xxxxxxxx xx 25 xx xxxxx voda/methanol (3.8). Xxxxx xx uzavře x xxxxx protřepe, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx suspenze. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xx vodní xxxxx (4.1) xxxxxxxxxx xx 60 °C, xxx xx usnadnila xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx x doplní xx xx objem xxxxx xxxx/xxxxxxxx (3.8). Xxxxxxx xx zfiltruje xxxx xxxxxxxxx papír (4.4). Xxxxx XXXX xx provede do 24 xxxxx od xxxxxxxx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
5.2.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx (3.9) xx upraví xx 1,0 xx/xxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx 295 xx.
5.2.2 Xxxxxxxxx se 10 μx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx bodu 5.1 x xxxxxxxxx xx chromatogram. Xxxxx xx plochy píků. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx bodu 5.2.3. Xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx x xxxxxxxxxx roztoky. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx v roztoku xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx píků x xxxxxxx odezvy (RF) xxxxxxxxx podle xxxx 5.2.3.
5.2.3 Kalibrace
Nastříkne xx 10 μx referenčního xxxxxxx (3.10) a xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx provede xxxxxxxxxx, xxxxx není xxxxxx xxxx konstantní.
Stanoví xx xxxxxx xxxxxx XXx (x xx xxxxxx xxxxxxx XX):
XXx = pi /xx
xxx
xx = xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx nebo hydrochinonmonobenzylether, x
xx = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx roztoku (3.10) (x/50 xx).
Xx třeba xxxxxx, zda xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x roztok xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxx xxxxxxx odděleného xxxx xx alespoň 0,90. (Xxxxxxxx xxxxxxxx píků xx uvedena xx xxxxxxx 1.).
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxx xxxx
Xxxx-xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx dosaženo, xxxx xx být xxx xxxxxxx xxxxxxxxx kolona xxxx by mělo xxx xxxxxxx mobilní xxxx xxxxxxxx tak, xxx byl xxxxxxxxx xxxxxx.
- Faktor asymetrie Xx všech xxxxxxxxx xxxx xx xx xxx xxxxxxxxx xx 0,9 xx 1,5. (Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx na xxxxxxx 2.) Xxx xxxxxxxxxxx chromatogramu xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx 2 xx/xxx.
Xxxxxxx 2:Xxxxxx xxxxxxxxx píku
- Xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx.
6. Xxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx xxxxxx xx xxxxxxx plochy xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xx) xx xxxxxxx xxxxxx vzorce
xi % (x/x) = (xx x 100) / (XXx x x)
xxx
x = hmotnost xxxxxx x gramech,
bi = xxxxxx xxxx xxxxxxx x xx xxxxxx.
7. Opakovatelnost [3]
7.1 Xxx obsahu hydrochinonu 2,0 % xx xxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,13 %.
7.2 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1,0 % xx xxxxxx absolutní hodnota xxxxxxx výsledků dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx vzorkem xxxxxxxxx 0,1 %.
7.3 Xxx obsahu xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1,0 % xx xxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,11 %.
7.4 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1,0 % by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,11 %.
8. Xxxxxxxxxxxxxxxxxx [4]
8.1 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx 2 % xx neměla xxxxxxxxx hodnota rozdílu xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx stejným xxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxx různá xxxx) xxxxxxxxx 0,37 %.
8.2 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx rozdílu xxxxxxxx xxxx stanovení xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx laboratoře, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, různé přístroje xxxx xxxxx xxxx) xxxxxxxxx 0,21 %.
8.3 Xxx obsahu hydrochinonmonoethyletheru 1 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx (různé xxxxxxxxxx, různí xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxx) překročit 0,19 %.
8.4 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx se stejným xxxxxxx xx různých xxxxxxxx (různé xxxxxxxxxx, xxxxx experimentátoři, různé xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxx) xxxxxxxxx 0,11 %.
9. Poznámky
9.1 Jestliže xx xxxxxxx obsah xxxxxxxxxxxx xxxxxxx vyšší xxx 2 % x xx xxxxxxxxx xxxxxx odhad obsahu, xxx xx být xxxxxxx xxxxxx (5.1) xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx vzorek xxxxxxxxxx 2 % xxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx by xxxx být xxxxxxxxx.
(X xxxxxxxxx přístrojů může xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx ležet hodnota xxxxxxxxxx xxxx lineární xxxxxx xxxxxxxxx.)
9.2 Xxxxxx xxxxx
Xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxx etherů x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx zajistit xxx xxxxxxx kolony X18 x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx.
X této metody xxxx xxxxxx xxxxxxx x rušivému xxxxx xxxx řady parabenů. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxx zopakováno s xxxxx systémem xxxxxxx xxxx/xxxxxxxxxxx fáze. Xxxxxx xxxxxx lze xxxxx x xxxxxxxxxx v xxxxxxxx 2 x 3:
Xxxxxx: Zorbax XXX, 4,6 mm × 25 xx xxxx xxxxxxxxxxxx:
xxxxxxx: 36 °X
xxxxxx: 1,5 xx/xxx
xxxxxxx xxxx:
xxx xxxxxxxxxxx: methanol/voda 5/95 (X/X)
xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxx/xxxx 30/70 (X/X)
xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxx/xxxx 80/20 (X/X) [5].
Xxxxxx: Xxxxxxxxxx X5XXX xxxx xxxxxxxxxxxx:
xxxxxxx fáze: xxxx/xxxxxxxx 90/10 (V/V)
průtok: 1,5 xx/xxx
Xxxx podmínky xxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxx [6].
[1] XXX 5725.
[2] ISO 5725.
[3] XXX 5725.
[4] XXX 5725.
[5] Herpol-Borremans, X., Xxxxx M.-O., Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx de x’xxxxxxxxxxxx xx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx la xxxx. Xxx. X. Xxxxxx. Sci., 8-203-214 (1986).
[6] Xxxxx, J., Xxx X., Xxxxxxxxxxxxx xx hydroquinone in xxxx toning xxxxxx, Xxxxxxx, (1986), 111, x. 129.