Xxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 95/32/XX
xx xxx 7. xxxxxxxx 1995
x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
(Xxxx x významem xxx XXX)
XXXXXX EVROPSKÝCH XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx společenství,
s xxxxxxx xx směrnici Xxxx 76/768/XXX ze xxx 27. xxxxxxxx 1976 x sbližování xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 94/32/XX [2], x xxxxxxx xx xx. 8 xxxx. 1 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx k xxxx, xx se xx xxxxxxxx 76/768/XXX xxxxxxx úřední xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx předepsaných xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx kosmetických xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx k tomu, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xx xxxxxxxx; xx xxxxxxx metody již xxxx xxxxxxx ve xxxxxxxx Xxxxxx 80/1335/XXX [3] ve znění xxxxxxxx 87/143/EHS [4], xxxxxxxx 82/434/XXX [5] xx znění xxxxxxxx 90/207/XXX [6] x xx xxxxxxxxxx 83/514/XXX [7], 85/490/EHS [8] x 93/73/EHS [9];
vzhledem x tomu, xx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, kyseliny 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx sorbové, xxxxxxxx salicylové x xxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxx x stanovení xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, hydrochinonmonoethyletheru x hydrochinonmonobenzyletheru x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx krokem;
vzhledem k xxxx, xx opatření xxxx xxxxxxxx xxxx x souladu se xxxxxxxxxxx Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx 76/768/XXX xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
XXXXXXX TUTO XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Členské xxxxx xxxxx všechny nezbytné xxxxx x xxxxxxxxx xxxx, aby xx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx:
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4hydroxybenzoové, xxxxxxxx xxxxxxx, kyseliny xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxx 2
1. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx předpisy xxxxxxxx xxx dosažení xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 30. xxxx 1996. Neprodleně x nich xxxxxxx Xxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx přijatá xxxxxxxxx státy xxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx směrnici nebo xxxx xxxxxx odkaz xxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx státy.
2. Xxxxxxx xxxxx sdělí Xxxxxx znění vnitrostátních xxxxxxxx předpisů, xxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 3
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx společenství.
Xxxxxx 4
Xxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
V Xxxxxxx xxx 7. července 1995.
Za Xxxxxx
Xxxx Bonino
členka Komise
[1] Xx. xxxx. X 262, 27.9.1976, x. 169.
[2] Úř. xxxx. X 181, 15.7.1994, x. 31.
[3] Úř. xxxx. X 383, 31.12.1980, x. 27.
[4] Xx. xxxx. X 57, 27.2.1987, x. 56.
[5] Xx. věst. X 185, 30.6.1982, x. 1.
[6] Xx. věst. X 108, 28.4.1990, x. 92.
[7] Xx. xxxx. X 291, 24.10.1983, x. 9.
[8] Xx. věst. X 295, 7.11.1985, x. 30.
[9] Xx. věst. X 231, 14.9.1993, x. 34.
PŘÍLOHA
I. XXXXX A XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXX, XXXXXXXX 4HYDROXYBENZOOVÉ, KYSELINY XXXXXXX, KYSELINY SALICYLOVÉ X XXXXXXXX XXXXXXXXXX X KOSMETICKÝCH XXXXXXXXXXXX
1. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx x kyseliny xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx popsány xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x kyseliny xxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, kyseliny 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x kyseliny xxxxxxxxxx stanovená xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx.
X. XXXXX
1. Xxxxxxxx xxxxxx
Xx kyselé/zásadité xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx extrakt xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx (XXX) a xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ("derivatizace xx xxxxx"). V xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx, v xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XX).
2. Xxxxxxx xxxxxxx
2.1 Xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx musí xxx xxxxxxx x.x. Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx voda xxxx xxxx alespoň xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2.2 Aceton
2.3 Diethylether
2.4 Xxxxxxxxxxx
2.5 Xxxxxx
2.6 xXxxxx
2.7 Xxxxxxx, tekutý
2.8 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, 4 M
2.9 Xxxxxxxx draselný, 4 X vodný xxxxxx
2.10 Xxxxxxx vápenatý, CaCl2·2H2O
2.11 Xxxxxxxxx xxxxxx, Li2CO3
2.12 2Xxxx2‘xxxxxxxxxxx
2.13 Kyselina 4hydroxybenzoová
2.14 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
2.15 Xxxxxxxx xxxxxxxx
2.16 Xxxxxxxx xxxxxxx
2.17 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
2.18 Xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xx 0,1 % (m/V) roztoky (100 xx/100 ml) xxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (2.13 xx 2.17) v xxxxxxxxxxxxx.
2.19 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
0,5 % xxxxxx 2xxxx2‘xxxxxxxxxxxx (2.12) v xxxxxxxxxxxx (2.4) (50 xx/10 xx). Tento roztok xx měl xxx xxxxxxxxxxx xxxxx týden x xxxxxxxxx x xxxxxxxx.
2.20 Xxxxxx xxxxxxxxxxxx
0,3 % (x/X) xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (2.11) xx xxxx (300 xx/100 xx). Xxxxx xxxxxx xx měl xxx xxxxxxxxxxx čerstvý.
2.21 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxx (2.5)/xxxxxx (2.2) (20: 0,5, X/X)
2.22 Xxxxxx parafin (2.7)/xxxxxx (2.6) (1:2, X/X)
3. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
3.1 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx teplotu 60 °X
3.2 Vyvíjecí xxxxxx
3.3 Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx světla 254 x 366 xx
3.4 Hotové desky xxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx, Silikagel 60, xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, 20 × 20 xx, tloušťka xxxxxx 0,25 xx x xxxxxxxxxxxx xxxxx 2,5 × 20 xx (Merk 11845 xxxx xxxxxxxxxxxx)
3.5 Xxxxxxxxxxxxxx xx 10 μx
3.6 Xxxxxxxxxxxxxx xx 25 μx
3.7 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx 105 °X
3.8 Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 50 x 200 xx xx zabroušenou xxxxxx
3.9 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx 90 xx, Xxxxxxxxxx &xxx; Xxxüxx, Weissband Xx. 5892, xxxx xxxxxxxxxxxx
3.10 Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xX 1 – 11
3.11 Skleněné xxxxxxxxxx lahvičky xx 5 xx
3.12 Xxxxxxx xxxxxxx odparka (Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx)
3.13 Xxxxx xxxxx
4. Postup
4.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xx Erlenmeyerovy xxxxx xx 50 xx xx xxxxxxxxxxx zátkou (3.8) se xxxxxx xxxxxxxxx 1 x xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxx 4 X xxxxxxxx chlorovodíkové (2.8) a 40 xx xxxxxxx (2.2). X silně xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx mýdlo, by xxxx být xxxxxxx 20 xxxxx 4 X kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (2.8). Pomocí xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) se xxxxxxxxxxx, zda xx xX xxxxxxxxx 2. Xxxxxxxxxxxxx baňka xx xxxxxx a xx xxxx jedné xxxxxx xx xxxxx protřepává.
Jeli xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad xx xxxxxxxxx fáze, směs xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxx 60 °X, xxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (3.9) do Xxxxxxxxxxxxx baňky.
20 ml xxxxxxxx xx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx baňky xx 200 xx, xxxxx xx 20 xx xxxx a xxxxxxxx se. xX xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx na 10 xxxxxx 4 X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (2.9) xx xxxxxxx indikátorového xxxxxxx (3.10).
Přidá xx 1 g xxxxxxxx xxxxxxxxxx (2.10) a xxxxx xx protřepe. Xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (3.9) xx xxxxxx xxxxxxx xx 250 xx xxxxxxxxxx 75 xx xxxxxxxxxxxxx (2.3) x xxxxx se xxxxx xxxxx minutu. Xxxxxx xx nechají xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx do Xxxxxxxxxxxxx baňky xx 250 xx. Xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx. Xx použití xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) xx xX xxxxxxx roztoku xxxxxx xx přibližně 2 xxxxxxxxxx 4 X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (2.8). Přidá se 10 xx xxxxxxxxxxxxx (2.3), xxxxx se xxxxxxxxx x silně xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx; xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (3.12). Xxxxx vrstva xx zlikviduje.
Etherová vrstva xx xxxxxx xxxxx xx sucha x xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x 1 xx diethyletheru (2.3). Xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.11).
4.2 Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx zóny xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xx tenké xxxxxx (3.4) xx xx xxxx, xxxxxxx počet xxxxxxxx xxxxx referenčních xxxxxxx x roztoků xxxxxx, které xxxx xxx xxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxxx (3.5) xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xx 3 μx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (2.20) x xxxxxx xx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx (3.13) zahřátou xx 40 °X, xxx xx skvrny xxxxxxx co xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx (3.5) xx xx startovní xxxxx xxxxx nanese xxxx 10 μx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (2.18) x xxxxxxx vzorku (4.1) xxxxxx xx xxxx, xxx byl xxxxxxx uhličitan xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xx xxxx, xxx xxxx naneseny xxxxxxxxxx xxxxxxx/xxxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx 15 μx derivatizačního činidla (2.19) (xxxxxx 2xxxx2‘xxxxxxxxxxxx).
Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx (3.7) 45 minut při 80 °X. Po xxxxxxxxxxx se deska xxxxxx v xxxxxx (3.2), xxxxx xxxx (xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx) 15 xxxxx xxxxxx vyvíjecím rozpouštědlem 2.21 (toluen/aceton), xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 xx (xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx 80 xxxxx).
Xxxxx xx vysuší v xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx vyhodnotí pod XX xxxxxxx (3.3). Xxx zesílení xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx deska xxxxxxxx xx tekutého xxxxxxxx/xxxxxxx (2.22).
5. Xxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx Rf.
Hodnoty Xx x xxxxxxx xxxxxx pod XX xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx vzorků.
Učiní xx předběžné xxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx popsaná x xxxxxx X, xxxx xxxxxxx-xx xx, xx xx xxxxxxxx xxxxxxxx propionová, xxxxxxx xx plynová xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx X. Xxxxxxx retenční xxxx xx porovnají x retenčními xxxx xxxxxxxxxxxx vzorků.
Výsledky XXX x HPLC xxxx XX xx xxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad xx xxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxx.
X. STANOVENÍ XXXXXXXX XXXXXXXX, KYSELINY 4XXXXXXXXXXXXXXX, XXXXXXXX XXXXXXX X XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx se xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxx. Xx xxxxxxxx xx konzervační xxxxxxx xxxxxxx vysokoúčinnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX).
2. Xxxxxxx xxxxxxx
2.1 Xxxxxxx reakční xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx p.a. x xxxx xxx xxxxxx xxx XXXX. Musí xxx použita xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2.2 Xxxxxxx, absolutní
2.3 Xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx
2.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
2.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx
2.6 Kyselina xxxxxxx
2.7 Xxxxx sodný, (XX3XXXXx·3X2X)
2.8 Kyselina xxxxxx, x420 = 1,05 x/xx
2.9 Xxxxxxxxxxx
2.10 Kyselina xxxxxx, 2 M
2.11 Xxxxxxxx xxxxxxxx, 0,2 X vodný roztok
2.12 Xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx
2.13 Směs xxxxxxx/xxxx
Xxxxx xxxx ethanolu (2.2) xx xxxxxx x xxxxxx dílem xxxx (2:1)
2.14 Roztok xxxxxxxxx standardu
Připraví xx xxxxxx obsahující 1 x xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx (2.12) v 500 xx xxxxx xxxxxxx/xxxx (2.13).
2.15 Mobilní fáze xxx XXXX
2.15.1 Xxxxxxxxx xxxx: xx 1 xxxxx xxxx xx xxxxx 6,35 g xxxxxx sodného (2.7) x 20,0 xx xxxxxxxx xxxxxx (2.8) x xxxxxx xx.
2.15.2 Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx smícháním xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx pufru (2.15.1) x xxxxxxx xxxx acetonitrilu (2.9).
2.16 Xxxxxxx roztok xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xx odměrné xxxxx xx 50 ml xx xxxxxx xxxxxx xxx 0,05 x xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx (2.3), 0,2 g xxxxxxxx xxxxxxxxxx (2.4), 0,2 x kyseliny benzoové (2.5) x 0,05 x xxxxxxxx xxxxxxx (2.6) x xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxx (2.13). Roztok xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Roztok je xxxxxxxx xxxxx xxxxx.
2.17 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xx odměrných xxxxx xx 20 xx xx xxxxxx 8,00, 4,00, 2,00, 1,00 x 0,50 xx xxxxxxxxx xxxxxxx (2.16). Xx xxxxx xxxxx xx xxxxx 10,00 xx roztoku xxxxxxxxx xxxxxxxxx (2.14) a 0,5 xx 2 X xxxxxxxx xxxxxx (2.10). Objem xx xxxxxx směsí xxxxxxx/xxxx (2.13). Tyto xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx vybavení x xxxx:
3.1 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xx 60 °X
3.2 Chromatograf xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x XX xxxxxxxxxx s nastavitelnou xxxxxxx délkou a 10μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3.3 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx ocel, xxxxx 12,5 až 25 xx, xxxxxxx xxxxxx 4,6 xx, xxxxxx Xxxxxxxxxxx 5C18 xxxx ekvivalentní náplní.
3.4 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx: 90 xx, Xxxxxxxxxx xxx Xxxüxx, Xxxxxxxxx Xx 5892 nebo xxxxxxxxxxxx.
3.5 Erlenmeyerovy xxxxx xx 50 xx
3.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx lahvičky xx 5 ml
3.7 Xxxxx xxxxxxx, karborundum, xxxxxxxx 2–4 mm, xxxx ekvivalentní
4. Xxxxxx
4.1 Xxxxxxxx xxxxxx
4.1.1 Příprava xxxxxx xxx přidání xxxxxxxxx standardu
Do Xxxxxxxxxxxxx xxxxx na 50 xx (3.5) xx xxxxxx 1 x xxxxxx. Xx Erlenmeyerovy xxxxx xx xxxxxxxxxx 10 ml 2 X xxxxxxxx xxxxxx (2.10) a 40 xx směsi xxxxxxx/xxxx (2.13). Přidá xx xxxxxxxxx 1 x xxxxxxx xxxxxxx (3.7), xxxxx xx xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx xxxxx minutu xxxxxxxxxx, xxxxx nevznikne xxxxxxxxx xxxxxxxx. Pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx minut xx xxxxx xxxxx (3.1) xxx 60 °X.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx v xxxxxx xxxxxxx vody x xxxxxxx xx na xxxxxx xxxxx xxx 5 °X.
Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxx filtrační xxxxx (3.4). Asi 2 xx xxxxxxxx xx převedou xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.6). Xxxxxxx xx uchovává xxx 5 °C x xxxxxxxxx pomocí XXXX xx provede xx 24 xxxxx.
4.1.2 Xxxxxxxx vzorku s xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 50 ml (3.5) xx s přesností xx xxx xxxxxxxxx xxxxx naváží 1 ± 0,1 x xxxxxx (x gramů). Xxxxxxx xx xxxxx 1,00 xx 2 X xxxxxxxx xxxxxx (2.10) x 30,0 xx xxxxx ethanol/voda (2.13). Přidá se xxxxxxxxx 1 g xxxxxxx kamínků (3.7) x 10 xx xxxxxxx vnitřního standardu(2.14). Xxxxxxxxxxxxx baňka xx xxxxxx x silně xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx protřepává, dokud xxxxxxxxx homogenní xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad do xxxxxxxxxx xxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx pět xxxxx xx xxxxx xxxxx (3.1) xxx 60 °X.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx studené xxxx x xxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxx xxx 5 °C.
Extrakt xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (3.4). Xxx 2 xx xxxxxxxx xx převedou xx vzorkovací xxxxxxxx (3.6). Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxx 5 °X x stanovení xxxxxx XXXX xx xxxxxxx xx 24 xxxxx.
4.2 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx: acetonitril/acetátový xxxx (2.15).
Xxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx 2,0 ± 0,5 ml/min. Xxxxxx xxxxx detektoru xx nastaví na 240 xx.
4.2.1 Xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxx chromatografu (3.2) xx nastříkne po 10 μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (2.17). Xxx xxxxx xxxxxx se ze xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx stanoví xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx přísady x výšce xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x chromatogramů. Pro xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx výšek xxxx xx koncentraci xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xx, že xxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Stanovení
Do xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.2) xx xxxxxxxxx 10 μx xxxxxxxx vzorku (4.1.1) x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Nastříkne xx 10 μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (2.17) a xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx chromatogramy se xxxxxxxxx. Xxxx-xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.1.1) žádný xxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxxx standard), xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 10 μx xxxxxxxx xxxxxx x přidaným xxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.1.2) a xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.
Xx-xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.1.1) xxxxxx xxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx, měl xx xxx xxxxxx xxxx vnitřní standard. (Xxxx-xx jedna x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx přítomna, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.)
Xx xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx pro standardní xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx následující xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx píků xxxxxxx odděleného xxxx xx xxxxxxx 0,90. (Xxxxxxxx xxxxxxxx píků xx xxxxxxx xx xxxxxxx 1)
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxx píků
Není-li požadované xxxxxxxx dosaženo, xxxx xx být xxx xxxxxxx účinnější xxxxxx xxxx xx xxxx xxx složení xxxxxxx xxxx xxxxxxxx tak, xxx byl xxxxxxxxx xxxxxx.
- Xxxxxx asymetrie Xx xxxxx získaných xxxx by se xxx xxxxxxxxx od 0,9 xx 1,5. (Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx uvedena xx xxxxxxx 2.) Při xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx za xxxxxx xxxxxxxxx faktoru xxxxxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxx posuvu xxxxxx xxxxxxx 2 xx/xxx.
Xxxxxxx 2: Xxxxxx asymetrie xxxx
- Základna xxxx xxx stabilní.
5. Xxxxxxx
Xxx xxxxxxx koncentrace xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x roztoku xxxxxx xx použijí xxxxxx výšek xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad x výšky xxxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx) x dále xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, kyseliny xxxxxxx xxxx xxxxxxxx salicylové xx xxxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xi) xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx
xx % (x/x) = (100x 20 x b) / (106 x&xxxx; x) = x / (500 x x)
xxx
x = xxxxxxxx zkušebního xxxxxx (4.1.2) (x),
x = xxxxxxxxxxx konzervační xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx (4.1.2) (μg/ml) xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx.
6. Opakovatelnost [1]
Při xxxxxx xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx 0,40 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx stejným vzorkem xxxxxxxxx 0,035 %.
Xxx xxxxxx kyseliny xxxxxxxx 0,50 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,050 %.
Při xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 0,50 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx výsledků dvou xxxxxxxxx provedených současně xx stejným vzorkem xxxxxxxxx 0,045 %.
Při xxxxxx kyseliny sorbové 0,60 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx stejným vzorkem xxxxxxxxx 0,035 %.
7. Xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xx množství kyseliny xxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxx kyselin xx xxxxxx je xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx zpracovávaného xxxxxx by xxxx xxxx xxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2 Xx-xx xx xxxxxxx, lze xxxxxx vhodnou xxxxxxxxx xxxxxx.
X. STANOVENÍ XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Rozsah x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x kosmetických prostředcích xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 2 % (x/x).
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx touto xxxxxxx se vyjádří x procentech xxxxxxxxx (% m/m) xxxxxxx.
3. Xxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx propionové x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx plynovou xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx kyseliny 2xxxxxxxxxxxxxxxx jako xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
4. Reakční xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx čistoty x.x; xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx alespoň xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.1 Xxxxxxx, 96 % (X/X)
4.2 Kyselina xxxxxxxxxx
4.3 Kyselina 2xxxxxxxxxxxxxxxx
4.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, 10 % (x/X)
4.5 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx na 50 xx se xxxxxx xxxxxx 1 g (x xxxxx) kyseliny xxxxxxxxxx a xxxxxx xx na xxxxx xxxxxxxxx (4.1).
4.6 Xxxxxx xxxxxxxxx standardu
Do odměrné xxxxx xx 50 xx xx xxxxxx xxxxxx 1 x (x xxxxx) kyseliny 2xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xx xx objem xxxxxxxxx (4.1).
5. Přístroje x xxxxxxx
5.1 Běžné xxxxxxxxxxx vybavení x xxxx:
5.2 Plynový xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx ionizačním xxxxxxxxxx
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxx (20 × 150 xx) xx šroubovacím xxxxxxxx
5.4 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxx na 60 °X
5.5 Xxxxxxxx injekční xxxxxxxxx na 10 xx s xxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxx xxxx 0,45 μx)
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxx vzorku
6.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx bez vnitřního xxxxxxxxx
Xx skleněné xxxxxxxx (5.3) se xxxxxx xxxxxxxxx 1 g xxxxxx. Přidá xx 0,5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (4.4) x 9,5 xx xxxxxxxx (4.1).
Xxxxxxxx xx xxxxxx x silně protřepe. Xxxx to nezbytné, xxxxxx xx xxxxxxxx xx pět xxxxx xx xxxxx lázně xxxxxxx xx 60 °X (5.4), xxx xx zcela xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx. Zkumavka xx rychle xxxxxxx xxx tekoucí vodou. Xxxx roztoku xx xxxxxxxxx xxxx membránový xxxxx (5.5). Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxx.
6.1.2 Příprava xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xx skleněné xxxxxxxx (5.3) se x xxxxxxxxx xx 3 xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx 1 ± 0,1 x vzorku. Xxxxx xx 0,5 xx xxxxxxxx trihydrogenfosforečné (4.4), 0,50 ml roztoku xxxxxxxxx standardu (4.6)x 9 ml xxxxxxxx (4.1).
Xxxxxxxx xx uzavře x xxxxx xxxxxxxx. Xxxx to nezbytné, xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxx xxxxx xx vodní xxxxx xxxxxxx xx 60 °X (5.4), xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxx zchladí xxx tekoucí xxxxx. Xxxx roztoku xx xxxxxxxxx přes membránový xxxxx (5.5). Chromatografie xxxxxxxx xx provede xxxxxx den.
6.2 Xxxxxxxx xxx plynovou xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx následující xxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx
Xxx: xxxxxxxxxxxxx ocel
Délka: 2 m
Průměr: ⅛"
Xxxxx: 10 % XX™ 1000 (nebo ekvivalentní) + 1 % X3XX4 xx Xxxxxxxxxxx XXX 100–120 xxxx
Xxxxxxx
Xxxxxxx: 200 °C
Kolona: 120 °X
Xxxxxxxx: 200 °C
Nosný xxxx: xxxxx
Xxxxxxxxx rychlost: 25 xx/xxx
6.3 Xxxxxxxxxxxxxx
6.3.1 Xxxxxxxxx
Xx xxxx xxxxxxxxx xxxxx na 20 xx se xxxxxxxxxx 0,25, 0,50, 1,00, 2,00 x 4,00 xx xxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxx (4.5). Do xxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx 1,00 xx xxxxxxx vnitřního xxxxxxxxx (4.6); doplní xx xx xxxxx xxxxxxxxx (4.1) x xxxxxxx. Takto xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx kyselinu 2xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx x xx/xx (xx xxxxxxx 1 xx/xx, xx-xx e = 1,000) x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x/4, x/2, x, 2x, 4x xx/xx (xx xxxxxxx 0,25, 0,50, 1,00, 2,00, 4,00 xx/xx, xx-xx x = 1,000).
Xxxxxxxxx xx 1 μl xxxxxx roztoků a xxxxxxxxxx křivka xx xxxxxxxx vynesením xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxx x x poměru xxxxxxxxxxxxxx xxxxx píků xx xxx x.
Xxxxxxxxxx se 3 xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxx xx průměr xxxxxx xxxxx píku.
6.3.2 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx se 1 μx filtrátu vzorku 6.1.1. Xxxxxxxxxxxx se xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (6.3.1). Xx-xx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxx xxx kyseliny 2xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx. Není-li xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxxxxx se 1 μx filtrátu xxxxxx 6.1.2 x xxxxx xx plochy xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx 3 xxxxx x xxxxxxx roztoku x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx.
7. Xxxxxxx
7.1 X xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx bodu 6.3.1 xx odečte poměr xxxxxxxxx (X), xxxxx xxxxxxxx poměru ploch xxxx xxxxxxxxxxx v xxxx 6.3.2.
7.2 X xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx kyseliny propionové xx xxxxxx (x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx vzorce
x % (x/x) = X (0,5 x 100 x x) / (50 x x) =X(x / x)
xxx
X = xxxxx xxxxxxxxx x xxxx 7.1,
x = hmotnost xxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx bodu 4.6,
x = xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx 6.1.2,
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
8. Opakovatelnost [2]
Xxx xxxxxx kyseliny xxxxxxxxxx 2 % (x/x) by xxxxx xxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx současně xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,12 %.
XX. XXXXX A XXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX, XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX, HYDROCHINONMONOETHYLETHERU X HYDROCHINONMONOBENZYLETHERU X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX
X. XXXXX
1. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
X xxxxxx je xxxxxxx xxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxx.
2. Podstata xxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx (TLC).
3. Reakční xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxx x.x.
3.1 Xxxxxxx, 96 % (V/V)
3.2 Chloroform
3.3 Xxxxxxxxxxxx
3.4 Vyvíjecí xxxxxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx, 66: 33 (X/X)
3.5 Xxxxxxx, 25 % (x/x) (x420 = 0,91 g/ml)
3.6 Kyselina xxxxxxxxx
3.7 Xxxxxxxxxxx
3.8 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.9 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.10 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx)
3.11 Xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx.
3.11.1 Xx dělené xxxxxxxx xx 10 ml xx xxxxxx 0,05 x hydrochinonu (3.7). Xxxxx xx 0,250 x kyseliny xxxxxxxxx (3.6) a 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx xx xxxxxxx (3.5), dokud xxxx xxxxxxxx xX 10, x xxxxxx xx xxxxxxxxx na xxxxx 10 xx (3.1).
3.11.2 Xx xxxxxx xxxxxxxx xx 10 xx xx naváží 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.8). Xxxxx se 0,250 x xxxxxxxx xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx ethanolu (3.1). Xxxxxxx se xxxxxxx (3.5), xxxxx xxxx xxxxxxxx xX 10, x doplní se xxxxxxxxx xx xxxxx 10 xx (3.1).
3.11.3 Xx xxxxxx xxxxxxxx xx 10 ml xx naváží 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.9). Xxxxx xx 0,250 x xxxxxxxx xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx xx xxxxxxx (3.5), xxxxx xxxx xxxxxxxx pH 10, x doplní xx xxxxxxxxx xx xxxxx 10 xx (3.1).
3.11.4 Xx dělené xxxxxxxx xx 10 xx xx naváží 0,05 x hydrochinonmonobenzyletheru (3.10). Xxxxx xx 0,250 x xxxxxxxx xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx ethanolu (3.1). Xxxxxxx se xxxxxxx (3.5), xxxxx není xxxxxxxx xX 10, x xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx 10 xx (3.1).
3.12 Xxxxxxxx stříbrný
3.13 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.14 Xxxxxxxxxxxxxx draselný xxxxxxxxxx
3.15 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
3.16 Xxxxxxxx xxxxxxx
3.16.1 Xx 5 % xxxxxxx xxxxxxx (x/X) xxxxxxxxx stříbrného (3.12) xx xxxxxxx amoniak (3.5), xxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx:
Xxx xxxxxx xxxxx xx v xxxxxxx xxxxx výbušné xxxxxxxxxx x xxx xx být xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.16.2 10 % (x/X) xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.13) x ethanolu (3.1).
3.16.3 Xxxxxxxx se 1 % (m/V) vodný xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.14) a 2 % (x/X) vodný xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.15). Těsně xxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxx laboratorní xxxxxxxx, x dále:
4.1 Xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx
4.2 Xxxxxx desky pro xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx: silikagel XXX/XX254 (254 xx dolním xxxxxxx XXX/XX); 20 × 20 xx (Xxxxxxx, Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx). Xxxxxxxx xxxxxx 0,25 mm.
4.3 Ultrazvuková xxxxx
4.4 Xxxxxxxxxxx
4.5 XX xxxxx, 254 xx
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxx 3 g xxxxxx. Přidá se 0,250 x xxxxxxxx xxxxxxxxx (3.6) x 5 ml xxxxxxxx (3.1). pH roztoku xx xxxxxx xxxxxxxxx (3.5) xx 10. Xxxxx se doplní xxxxxxxxx (3.1) na 10 xx. Xxxxxxxx xx xxxxxx zátkou x homogenizuje xx 10 xxxxx x xxxxxxxxxxxx lázni. Xxxxxxxxx xx přes filtrační xxxxx nebo xx xxxxxxxx xxx 3000 xx./xxx.
5.2 Chromatografie xx xxxxx xxxxxx (TLC)
5.2.1 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxx vyvíjecím rozpouštědlem (3.4).
5.2.2 Xx xxxxx xx nanese xx 2 μl xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.11) a 2 μx xxxxxxx xxxxxx (5.1). Vyvíjí xx xx tmě xxx xxxxxxx okolí, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 xx od xxxxxx.
5.2.3 Xxxxx se xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxx pokojové xxxxxxx.
5.3 Xxxxxxx
5.3.1 Xxxxx se xxxxxxxx xxx XX xxxxxx xxx 254 xx x xxxxxx xxxxx xx označí.
5.3.2 Xxxxx xx xxxxxxxx
- xxxxxxxxxx stříbrným (3.16.1), xxxx
- kyselinou dodekamolybdofosforečnou (3.16.2); xxxxxxx xx xx xxx 120 °X, xxxx
- roztokem xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.16.3).
6. Xxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxx Rf xxxxx xxxxxx.
Xxxxxx získané xxx xxxxxx vzorku xx xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxx x jejich xxxxxxx Xx, barvu skvrn x XX xxxxxx x xxxxx xxxxx xx zviditelnění xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xx vysokoúčinná xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx popsaná x následujícím xxxxxx (X) a xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxx (xxxx) xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx roztoků.
Výsledky z XXX x XXXX xx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxx.
7. Xxxxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxx byly pozorovány xxxxxxxxxxx xxxxxxx Rf:
hydrochinon: 0,32
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: 0,53
hydrochinonmonoethylether: 0,55
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: 0,58
X. XXXXXXXXX
1. Xxxxxx x oblast xxxxxxx
X xxxxxx je specifikován xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx.
2. Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxx/xxxxxxxx xx xxxxxxx zahřátí, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx provede xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx s XX xxxxxxx.
3. Xxxxxxx činidla
3.1 Xxxxxxx reakční xxxxxxx xxxx být xxxxxxx x.x. Musí být xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3.2 Xxxxxxxx
3.3 Xxxxxxxxxxx
3.4 Hydrochinonmonomethylether
3.5 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.6 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (monobenzon)
3.7 Xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx pro XXXX
3.8 Xxxx xxxx/xxxxxxxx 1:1 (X/X). Xxxxxx xx xxxxx xxx xxxx x xxxxx díl xxxxxxxxx (3.2)
3.9 Xxxxxxx xxxx: xxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxx 45:55 (X/X). Smíchá xx 45 xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (3.7) x 55 dílů xxxx.
3.10 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx na 50 xx xx xxxxxx 0,06 x xxxxxxxxxxxx (3.3), 0,08 g xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.4), 0,10 x hydrochinonmonoethyletheru (3.5) x 0,12 g xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.6). Xxxxxxxx xx x doplní xx xx xxxxx xxxxxxxxxx (3.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx 10 ml xxxxxx xxxxxxx xx 50 xx xxxxx xxxx/xxxxxxxx (3.8). Tyto xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx.
4. Přístroje x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x dále:
4.1 Xxxxx xxxxx nastavitelná xx xxxxxxx 60 °X
4.2 Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx chromatografii x XX detektorem s xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx délkou x 10μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
4.3 Xxxxxxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x korozivzdorné xxxxx, xxxxx 250 xx, vnitřní xxxxxx 4,6 xx, xxxxxx Xxxxxx fenylem (xxxxxxxx xxxxxxx fenethylsilanem xx Xxxxxxx XXX, uzavřená xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxx 6 μx, nebo xxxxxxxxxxxx náplní. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx x ekvivalentní xxxxxx.
4.4 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx 90 xx, Xxxxxxxxxx xxx Xxxüxx, Xxxxxxxxx Xx 5892 xxxx xxxxxxxxxxxx
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xx odměrné baňky xx 50 xx xx x xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxx naváží 1 ± 0,1 g (x xxxxx) xxxxxx. Xxxxxx xx rozptýlí xx 25 ml xxxxx xxxx/xxxxxxxx (3.8). Xxxxx xx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx, xxxxx xx nevytvoří xxxxxxxxx xxxxxxxx. Protřepává xx alespoň jednu xxxxxx. Baňka xx xxxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1) nastavenou xx 60 °C, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Baňka xx xxxxxxx a doplní xx xx objem xxxxx xxxx/xxxxxxxx (3.8). Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxx filtrační xxxxx (4.4). Důkaz XXXX xx xxxxxxx xx 24 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
5.2.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx mobilní xxxx (3.9) xx xxxxxx xx 1,0 ml/min x xxxxxx délka xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx 295 xx.
5.2.2 Xxxxxxxxx xx 10 μx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx podle bodu 5.1 a xxxxxxxxx xx chromatogram. Xxxxx xx xxxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx bodu 5.2.3. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxx koncentrace xxxxxxx v roztoku xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx (RF) xxxxxxxxx podle bodu 5.2.3.
5.2.3 Kalibrace
Nastříkne xx 10 μx referenčního xxxxxxx (3.10) x xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, dokud xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx XXx (x je xxxxxx xxxxxxx XX):
XXx = pi /xx
xxx
xx = xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, x
xx = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) (x/50 xx).
Xx xxxxx xxxxxx, xxx chromatogramy xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x roztok xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- separace xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx páru xx xxxxxxx 0,90. (Xxxxxxxx separace xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx 1.).
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxx xxxx
Xxxx-xx požadované xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxx xxx xxxxxxx účinnější kolona xxxx xx xxxx xxx složení mobilní xxxx upraveno xxx, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
- Xxxxxx xxxxxxxxx Xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xx se xxx xxxxxxxxx xx 0,9 xx 1,5. (Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx 2.) Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx za xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxx posuvu xxxxxx xxxxxxx 2 xx/xxx.
Xxxxxxx 2:Xxxxxx xxxxxxxxx píku
- Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx.
6. Výpočet
Pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (koncentrací xxxxxxx) ve vzorku xx použijí xxxxxx xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxx xxxxxxxxx x hmotnostních xxxxxxxxxx (xx) xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx
xx % (m/m) = (xx x 100) / (XXx x x)
xxx
x = xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx,
xx = xxxxxx píku xxxxxxx i xx xxxxxx.
7. Opakovatelnost [3]
7.1 Xxx obsahu xxxxxxxxxxxx 2,0 % by xxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx stejným xxxxxxx xxxxxxxxx 0,13 %.
7.2 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1,0 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx vzorkem xxxxxxxxx 0,1 %.
7.3 Xxx obsahu hydrochinonmonoethyletheru 1,0 % by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,11 %.
7.4 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1,0 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx provedených současně xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,11 %.
8. Xxxxxxxxxxxxxxxxxx [4]
8.1 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx 2 % by neměla xxxxxxxxx hodnota rozdílu xxxxxxxx dvou stanovení xxxxxxxxxxx se stejným xxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx laboratoře, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxx) překročit 0,37 %.
8.2 Při xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % xx neměla absolutní xxxxxxx xxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx různých podmínek (xxxxx xxxxxxxxxx, různí xxxxxxxxxxxxxxx, různé přístroje xxxx různá xxxx) xxxxxxxxx 0,21 %.
8.3 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % xx xxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx výsledků dvou xxxxxxxxx provedených se xxxxxxx xxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, různí xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx přístroje nebo xxxxx xxxx) překročit 0,19 %.
8.4 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % by xxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx xxxxxxxx xxxx stanovení xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx) xxxxxxxxx 0,11 %.
9. Poznámky
9.1 Jestliže xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxx 2 % x xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx obsahu, xxx xx být xxxxxxx vzorku (5.1) xxxxxx na podobnou xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx 2 % hydrochinonu, x stanovení xx xxxx být xxxxxxxxx.
(X xxxxxxxxx xxxxxxxxx může xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx ležet hodnota xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx detektoru.)
9.2 Xxxxxx xxxxx
Xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx hydrochinonu x xxxx etherů x jednom isokratickém xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx zajistí xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx C18 x xxxxxxxx mobilní xxxx.
X xxxx xxxxxx xxxx snadno dochází x rušivému xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx. X takovém xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx s xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx/xxxxxxxxxxx fáze. Xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx x xxxxxxxxxx x xxxxxxxx 2 x 3:
Xxxxxx: Xxxxxx XXX, 4,6 xx × 25 xx nebo xxxxxxxxxxxx:
xxxxxxx: 36 °C
průtok: 1,5 xx/xxx
xxxxxxx fáze:
pro xxxxxxxxxxx: xxxxxxxx/xxxx 5/95 (X/X)
xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxx/xxxx 30/70 (X/X)
xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxx/xxxx 80/20 (X/X) [5].
Xxxxxx: Spherisorb X5XXX xxxx ekvivalentní:
mobilní fáze: xxxx/xxxxxxxx 90/10 (X/X)
xxxxxx: 1,5 xx/xxx
Xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx [6].
[1] XXX 5725.
[2] XXX 5725.
[3] XXX 5725.
[4] XXX 5725.
[5] Xxxxxx-Xxxxxxxxx, X., Xxxxx M.-O., Identification xx xxxxxx de x’xxxxxxxxxxxx xx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx cosmétiques xxxx xxxxxxxx xx xxxx. Int. X. Xxxxxx. Sci., 8-203-214 (1986).
[6] Xxxxx, J., Xxx I., Xxxxxxxxxxxxx xx hydroquinone in xxxx xxxxxx creams, Xxxxxxx, (1986), 111, x. 129.