Šestá xxxxxxxx Xxxxxx 95/32/XX
xx dne 7. xxxxxxxx 1995
o xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxx kosmetických xxxxxxxxxx
(Xxxx x významem xxx XXX)
XXXXXX EVROPSKÝCH XXXXXXXXXXXX,
x ohledem xx Xxxxxxx x založení Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x ohledem xx směrnici Rady 76/768/XXX xx dne 27. xxxxxxxx 1976 x sbližování právních xxxxxxxx členských xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx [1], xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 94/32/XX [2], x xxxxxxx xx xx. 8 xxxx. 1 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx k xxxx, že xx xx xxxxxxxx 76/768/XXX xxxxxxx xxxxxx zkoušení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx předepsaných xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx, které xx xxxxxx xxxxxxx kosmetických xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx k xxxx, xx by xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx být stanoveny xx nejdříve; xx xxxxxxx metody již xxxx přijaty xx xxxxxxxx Xxxxxx 80/1335/XXX [3] xx znění xxxxxxxx 87/143/XXX [4], xxxxxxxx 82/434/EHS [5] xx znění směrnice 90/207/XXX [6] x xx xxxxxxxxxx 83/514/XXX [7], 85/490/XXX [8] x 93/73/XXX [9];
xxxxxxxx x tomu, xx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, hydrochinonmonomethyletheru, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx prostředcích xxxx xxxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx opatření xxxx směrnice xxxx x xxxxxxx se xxxxxxxxxxx Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx 76/768/XXX xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
XXXXXXX TUTO XXXXXXXX:
Článek 1
Xxxxxxx xxxxx xxxxx všechny nezbytné xxxxx x xxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx:
- xxxxx x stanovení xxxxxxxx xxxxxxxx, kyseliny 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, kyseliny xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- důkaz a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxx 2
1. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx dosažení souladu x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 30. xxxx 1996. Neprodleně x nich uvědomí Xxxxxx.
Xxxx opatření xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx musí xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx směrnici nebo xxxx takový odkaz xxx xxxxxx při xxxxxx xxxxxxx vyhlášení. Xxxxxx xxxxxx si xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxx státy xxxxx Xxxxxx znění xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, které xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxxxxxx této směrnice.
Xxxxxx 3
Tato směrnice xxxxxxxx x platnost xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x Úředním xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 4
Xxxx směrnice xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X Bruselu xxx 7. xxxxxxxx 1995.
Za Xxxxxx
Xxxx Xxxxxx
xxxxxx Xxxxxx
[1] Xx. xxxx. X 262, 27.9.1976, x. 169.
[2] Xx. xxxx. X 181, 15.7.1994, x. 31.
[3] Úř. xxxx. X 383, 31.12.1980, x. 27.
[4] Xx. věst. X 57, 27.2.1987, x. 56.
[5] Xx. xxxx. X 185, 30.6.1982, x. 1.
[6] Xx. xxxx. X 108, 28.4.1990, x. 92.
[7] Úř. xxxx. X 291, 24.10.1983, x. 9.
[8] Úř. věst. X 295, 7.11.1985, x. 30.
[9] Xx. xxxx. X 231, 14.9.1993, x. 34.
PŘÍLOHA
I. XXXXX A XXXXXXXXX KYSELINY XXXXXXXX, XXXXXXXX 4XXXXXXXXXXXXXXX, KYSELINY XXXXXXX, XXXXXXXX XXXXXXXXXX X XXXXXXXX XXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX
1. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, kyseliny xxxxxxx, xxxxxxxx salicylové x xxxxxxxx propionové x xxxxxxxxxxxx prostředcích. Xxxxxxxxxx jsou xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad, xxxxxxxxx xxxxxxxx propionové a xxxxxxxxx kyseliny 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx salicylové, kyseliny xxxxxxx x kyseliny xxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx salicylové, kyseliny xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx vyjádří x xxxxxxxxxxxx procentech xxxxxxx kyselin.
A. DŮKAZ
1. Xxxxxxxx metody
Po xxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad xx xxxxxxx analyzuje xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx (XXX) x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ("derivatizace xx desce"). X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx důkaz xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx, x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx chromatografií (XX).
2. Xxxxxxx činidla
2.1 Obecně
Všechna xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x.x. Xxxx xxx použita xxxxxxxxxxx xxxx nebo xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2.2 Xxxxxx
2.3 Diethylether
2.4 Xxxxxxxxxxx
2.5 Toluen
2.6 xXxxxx
2.7 Xxxxxxx, tekutý
2.8 Kyselina xxxxxxxxxxxxxx, 4 M
2.9 Xxxxxxxx xxxxxxxx, 4 X xxxxx xxxxxx
2.10 Xxxxxxx xxxxxxxx, XxXx2·2X2X
2.11 Xxxxxxxxx xxxxxx, Li2CO3
2.12 2Xxxx2‘xxxxxxxxxxx
2.13 Kyselina 4xxxxxxxxxxxxxxx
2.14 Xxxxxxxx salicylová
2.15 Xxxxxxxx xxxxxxxx
2.16 Xxxxxxxx sorbová
2.17 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
2.18 Xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xx 0,1 % (x/X) roztoky (100 xx/100 xx) xxxxx x pěti xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (2.13 xx 2.17) x xxxxxxxxxxxxx.
2.19 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
0,5 % xxxxxx 2xxxx2‘xxxxxxxxxxxx (2.12) v xxxxxxxxxxxx (2.4) (50 xx/10 xx). Xxxxx xxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx týden x xxxxxxxxx x xxxxxxxx.
2.20 Xxxxxx xxxxxxxxxxxx
0,3 % (x/X) xxxxxx xxxxxxxxxx lithného (2.11) xx vodě (300 xx/100 xx). Xxxxx xxxxxx xx měl xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2.21 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxx (2.5)/xxxxxx (2.2) (20: 0,5, X/X)
2.22 Tekutý xxxxxxx (2.7)/xxxxxx (2.6) (1:2, X/X)
3. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
3.1 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx 60 °X
3.2 Vyvíjecí komora
3.3 Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx 254 x 366 xx
3.4 Hotové xxxxx xxx chromatografii na xxxxx xxxxxx, Xxxxxxxxx 60, xxx fluorescenčního xxxxxxxxxx, 20 × 20 xx, xxxxxxxx xxxxxx 0,25 mm x xxxxxxxxxxxx xxxxx 2,5 × 20 xx (Xxxx 11845 xxxx xxxxxxxxxxxx)
3.5 Xxxxxxxxxxxxxx xx 10 μl
3.6 Xxxxxxxxxxxxxx xx 25 μx
3.7 Sušárna xxxxxxxxxxxx xx teplotu až 105 °C
3.8 Erlenmeyerovy xxxxx xx 50 x 200 xx xx zabroušenou zátkou
3.9 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx 90 xx, Xxxxxxxxxx &xxx; Xxxüxx, Xxxxxxxxx Xx. 5892, xxxx xxxxxxxxxxxx
3.10 Univerzální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xX 1 – 11
3.11 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx lahvičky xx 5 xx
3.12 Rotační xxxxxxx odparka (Xxxxxxxxx xxxx ekvivalentní)
3.13 Topná xxxxx
4. Postup
4.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xx Erlenmeyerovy baňky xx 50 xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx (3.8) se xxxxxx xxxxxxxxx 1 g xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxx 4 X kyseliny chlorovodíkové (2.8) a 40 xx xxxxxxx (2.2). X xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx je xxxxxxxx mýdlo, xx xxxx xxx xxxxxxx 20 xxxxx 4 X kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (2.8). Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) xx xxxxxxxxxxx, xxx xx xX xxxxxxxxx 2. Xxxxxxxxxxxxx baňka xx xxxxxx a po xxxx jedné xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx extrakci xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx, xxxx xx opatrně xxxxxxx xx asi 60 °X, xxx xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx teplotu x xxxxxxxxxxx přes xxxxxxxxx xxxxx (3.9) do Xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
20 ml xxxxxxxx xx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 200 xx, xxxxx xx 20 xx vody x xxxxxxxx xx. xX xxxxx xx upraví xxxxxxxxx xx 10 xxxxxx 4 M xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (2.9) xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10).
Přidá xx 1 x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (2.10) x xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx přes xxxxxxxxx papír (3.9) xx dělicí xxxxxxx xx 250 xx xxxxxxxxxx 75 xx xxxxxxxxxxxxx (2.3) x xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx. Vrstvy xx xxxxxxx oddělit x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 250 xx. Etherová xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xx použití xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) xx xX vodného roztoku xxxxxx xx xxxxxxxxx 2 xxxxxxxxxx 4 X kyselinou chlorovodíkovou (2.8). Přidá se 10 xx diethyletheru (2.3), xxxxx se xxxxxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxx jednu xxxxxx; xxxxxx xx nechají xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (3.12). Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx téměř xx xxxxx a xxxxxx se xxxxx xxxxxxxx v 1 xx xxxxxxxxxxxxx (2.3). Xxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxxxxx lahvičky (3.11).
4.2 Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx
Xx startovní xxxxx xxxxxxxxxxxx zóny xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx vrstvě (3.4) se xx xxxx, jejichž xxxxx xxxxxxxx počtu xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, které xxxx xxx xxxxxxxxxxx, nanese xxxxxxxxxx (3.5) xx xxxxxxxx odstupech xxxx xx 3 μl xxxxxxxxxx lithného (2.20) x vysuší se x xxxxxx studeného xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx na xxxxxx xxxxx (3.13) xxxxxxxx xx 40 °X, xxx xx skvrny xxxxxxx xx nejmenší. Xxxxxxxxxxxxxxx (3.5) xx xx startovní xxxxx xxxxx xxxxxx xxxx 10 μl xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (2.18) x roztoku vzorku (4.1) xxxxxx xx xxxx, xxx byl xxxxxxx xxxxxxxxx lithný.
Nakonec xx xxxx xxxxxx xx xxxx, kam xxxx xxxxxxxx referenční xxxxxxx/xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx uhličitanu xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx 15 μx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (2.19) (roztok 2brom2‘acetonaftonu).
Chromatografická xxxxx xx xxxxxxx x sušárně (3.7) 45 xxxxx při 80 °C. Po xxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxxx v xxxxxx (3.2), xxxxx xxxx (xxx vyložení filtračním xxxxxxx) 15 xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx rozpouštědlem 2.21 (toluen/aceton), xxxxx xxxx rozpouštědla nedosáhne xxxxxxxxxxx 15 xx (xxxx vyvíjení xx xxxxxxxxx 80 minut).
Deska xx xxxxxx v xxxxxx studeného vzduchu x xxxxxxx skvrny xx vyhodnotí xxx XX světlem (3.3). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx skvrn xxxx xxx chromatografická xxxxx xxxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxx (2.22).
5. Xxxxx
Xxx xxxxxx skvrnu xx xxxxxxx xxxxxxx Xx.
Xxxxxxx Xx a chování xxxxxx xxx UV xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx a xxxxxxxx referenčních vzorků.
Učiní xx xxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad. Xxxxxxx se vysokoúčinná xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx X, xxxx xxxxxxx-xx xx, xx je přítomna xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx plynová xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx X. Získané retenční xxxx se porovnají x retenčními časy xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx TLC x XXXX xxxx XX se xxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx vychází x xxxxxxxxx xxxxxxxx.
X. XXXXXXXXX XXXXXXXX BENZOOVÉ, XXXXXXXX 4XXXXXXXXXXXXXXX, KYSELINY XXXXXXX X XXXXXXXX SALICYLOVÉ
1. Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx a xxxx. Po xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx vysokoúčinnou kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx (XXXX).
2. Xxxxxxx xxxxxxx
2.1 Všechna xxxxxxx xxxxxxx musí být xxxxxxx p.a. x xxxx xxx xxxxxx xxx XXXX. Musí xxx použita xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxx ekvivalentní xxxxxxx.
2.2 Xxxxxxx, absolutní
2.3 Xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx
2.4 Kyselina salicylová
2.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx
2.6 Xxxxxxxx xxxxxxx
2.7 Xxxxx xxxxx, (XX3XXXXx·3X2X)
2.8 Xxxxxxxx octová, x420 = 1,05 x/xx
2.9 Xxxxxxxxxxx
2.10 Xxxxxxxx xxxxxx, 2 X
2.11 Xxxxxxxx xxxxxxxx, 0,2 X xxxxx roztok
2.12 Xxxxxxxx 2methoxybenzoová
2.13 Xxxx xxxxxxx/xxxx
Xxxxx dílů xxxxxxxx (2.2) xx xxxxxx x xxxxxx xxxxx xxxx (2:1)
2.14 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx 1 x xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx (2.12) x 500 xx xxxxx xxxxxxx/xxxx (2.13).
2.15 Xxxxxxx xxxx xxx HPLC
2.15.1 Xxxxxxxxx xxxx: xx 1 xxxxx xxxx xx xxxxx 6,35 x xxxxxx sodného (2.7) x 20,0 xx xxxxxxxx xxxxxx (2.8) x xxxxxx se.
2.15.2 Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx smícháním xxxxxx xxxx acetátového xxxxx (2.15.1) x jednoho xxxx xxxxxxxxxxxx (2.9).
2.16 Xxxxxxx xxxxxx konzervačních xxxxxx
Xx xxxxxxx baňky xx 50 xx xx xxxxxx xxxxxx xxx 0,05 x xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx (2.3), 0,2 x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (2.4), 0,2 x kyseliny xxxxxxxx (2.5) a 0,05 x xxxxxxxx xxxxxxx (2.6) x xxxxx xx doplní směsí xxxxxxx/xxxx (2.13). Xxxxxx xx uchovává v xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxx.
2.17 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xx odměrných xxxxx xx 20 xx xx xxxxxx 8,00, 4,00, 2,00, 1,00 x 0,50 ml xxxxxxxxx roztoku (2.16). Xx xxxxx xxxxx xx přidá 10,00 xx xxxxxxx vnitřního xxxxxxxxx (2.14) x 0,5 ml 2 X xxxxxxxx xxxxxx (2.10). Xxxxx xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxx (2.13). Xxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Přístroje a xxxxxxx
Xxxxx laboratorní vybavení x xxxx:
3.1 Vodní xxxxx, xxxxxxxxx na 60 °C
3.2 Chromatograf xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx s XX xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a 10μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3.3 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx ocel, xxxxx 12,5 až 25 xx, vnitřní xxxxxx 4,6 mm, xxxxxx Nucleosilem 5X18 xxxx ekvivalentní xxxxxx.
3.4 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx: 90 xx, Schleicher xxx Xxxüxx, Weissband Xx 5892 xxxx xxxxxxxxxxxx.
3.5 Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 50 xx
3.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx lahvičky xx 5 xx
3.7 Xxxxx kamínky, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx 2–4 xx, xxxx xxxxxxxxxxxx
4. Postup
4.1 Xxxxxxxx vzorku
4.1.1 Příprava xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 50 xx (3.5) xx xxxxxx 1 g xxxxxx. Xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx 10 xx 2 X xxxxxxxx sírové (2.10) x 40 xx xxxxx ethanol/voda (2.13). Přidá xx xxxxxxxxx 1 x xxxxxxx xxxxxxx (3.7), xxxxx xx xxxxxx x silně xx xxxxxxx xxxxx minutu xxxxxxxxxx, xxxxx nevznikne xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx ethanolové xxxx xx Erlenmeyerova xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx minut na xxxxx lázni (3.1) xxx 60 °X.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxxx x proudu xxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxx při 5 °X.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (3.4). Xxx 2 xx xxxxxxxx xx xxxxxxxx do xxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.6). Xxxxxxx xx uchovává xxx 5 °X x stanovení pomocí XXXX xx xxxxxxx xx 24 hodin.
4.1.2 Xxxxxxxx vzorku x xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 50 xx (3.5) xx x xxxxxxxxx xx xxx desetinná xxxxx xxxxxx 1 ± 0,1 x xxxxxx (x xxxxx). Xxxxxxx xx přidá 1,00 xx 2 X xxxxxxxx xxxxxx (2.10) a 30,0 xx xxxxx xxxxxxx/xxxx (2.13). Xxxxx xx xxxxxxxxx 1 g xxxxxxx xxxxxxx (3.7) x 10 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx(2.14). Xxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx protřepává, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx extrakce xxxxxxxxxxxxx xxxxxx do xxxxxxxxxx fáze xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx zahřívá xxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx lázni (3.1) xxx 60 °X.
Xxxxxxxxxxxxx baňka xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxx se xxxxx xx xxxxxx xxx 5 °X.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (3.4). Xxx 2 ml xxxxxxxx xx převedou xx xxxxxxxxxx lahvičky (3.6). Xxxxxxx se xxxxxxxx xxx 5 °X x xxxxxxxxx xxxxxx XXXX se xxxxxxx xx 24 xxxxx.
4.2 Xxxxxxxxxxxx kapalinová xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx fáze: xxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxx (2.15).
Xxxxxx mobilní xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx na 2,0 ± 0,5 xx/xxx. Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx nastaví na 240 xx.
4.2.1 Xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.2) xx xxxxxxxxx po 10 μx standardních xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (2.17). Pro xxxxx xxxxxx se xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx stanoví xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx konzervační přísady x výšce píku xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx. Pro xxxxxx xxxxxxxxxxx přísadu xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xx koncentraci xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xx, že při xxxxxxxxx byla xxx xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxx chromatografu (3.2) xx xxxxxxxxx 10 μx xxxxxxxx xxxxxx (4.1.1) x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx 10 μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (2.17) x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. Xxxx-xx v xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.1.1) xxxxx pík x xxxxxxxxx stejným xxxxxxxxx časem xxxx xxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxxxx se do xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 10 μx extraktu vzorku x xxxxxxxx vnitřním xxxxxxxxxx (4.1.2) x xxxxxxxxx se chromatogram.
Je-li x chromatogramu xxxxxxxx xxxxxx (4.1.1) rušivý xxx se xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx jako xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx, měl xx být vybrán xxxx vnitřní xxxxxxxx. (Xxxx-xx xxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx tuto xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx standard.)
Je třeba xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx splňují xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx alespoň 0,90. (Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx na xxxxxxx 1)
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxx píků
Není-li požadované xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx být buď xxxxxxx xxxxxxxxx kolona xxxx by xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
- Xxxxxx asymetrie Xx všech xxxxxxxxx xxxx by xx xxx xxxxxxxxx xx 0,9 do 1,5. (Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx uvedena xx xxxxxxx 2.) Xxx xxxxxxxxxxx chromatogramu za xxxxxx stanovení xxxxxxx xxxxxxxxx xx doporučená xxxxxxxx posuvu xxxxxx xxxxxxx 2 xx/xxx.
Xxxxxxx 2: Xxxxxx xxxxxxxxx xxxx
- Xxxxxxxx xxxx xxx stabilní.
5. Xxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxx výšek xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx) x xxxx xxxxxxxxxx graf. Xxxxx xxxxxxxx benzoové, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xi) xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx
xx % (m/m) = (100x 20 x x) / (106 x&xxxx; x) = b / (500 x x)
xxx
x = hmotnost zkušebního xxxxxx (4.1.2) (g),
b = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x extraktu xxxxxx (4.1.2) (μx/xx) xxxxxxxx x kalibračního xxxxx.
6. Xxxxxxxxxxxxxx [1]
Xxx xxxxxx xxxxxxxx 4hydroxybenzoové 0,40 % by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx vzorkem xxxxxxxxx 0,035 %.
Xxx xxxxxx kyseliny xxxxxxxx 0,50 % by xxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx provedených současně xx stejným vzorkem xxxxxxxxx 0,050 %.
Při xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 0,50 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,045 %.
Xxx xxxxxx kyseliny sorbové 0,60 % by xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx výsledků dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx současně xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,035 %.
7. Xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xx množství kyseliny xxxxxx xxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxx ze xxxxxx xx rozhodující x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx tedy xxxx být x xxxxxxxxxxx rozmezí.
7.2 Xx-xx xx xxxxxxx, lze xxxxxx vhodnou ochrannou xxxxxx.
X. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxxxx x xxxxxx použití
Tato metoda xx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 2 % (x/x).
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx stanovená xxxxx xxxxxxx se xxxxxxx x procentech hmotnosti (% x/x) výrobku.
3. Xxxxxxxx xxxxxx
Xx extrakci xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx chromatografií xx xxxxxxx kyseliny 2xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
4. Xxxxxxx činidla
Všechna xxxxxxx xxxxxxx musí xxx čistoty p.a; xxxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx alespoň xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.1 Xxxxxxx, 96 % (X/X)
4.2 Kyselina xxxxxxxxxx
4.3 Xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx
4.4 Xxxxxxxx trihydrogenfosforečná, 10 % (m/V)
4.5 Xxxxxx xxxxxxxx propionové
Do odměrné xxxxx na 50 xx se xxxxxx xxxxxx 1 g (x xxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxx xx na xxxxx xxxxxxxxx (4.1).
4.6 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx na 50 xx xx xxxxxx xxxxxx 1 g (x xxxxx) kyseliny 2xxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxx xx xx xxxxx xxxxxxxxx (4.1).
5. Xxxxxxxxx x pomůcky
5.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx vybavení a xxxx:
5.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx ionizačním xxxxxxxxxx
5.3 Skleněná zkumavka (20 × 150 xx) xx šroubovacím xxxxxxxx
5.4 Xxxxx lázeň xxxxxxxxx xx 60 °X
5.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx na 10 xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (průměr pórů 0,45 μx)
6. Postup
6.1 Xxxxxxxx vzorku
6.1.1 Příprava xxxxxx xxx vnitřního xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxx zkumavky (5.3) se xxxxxx xxxxxxxxx 1 g xxxxxx. Xxxxx se 0,5 ml kyseliny xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (4.4) a 9,5 xx ethanolu (4.1).
Xxxxxxxx xx xxxxxx x silně protřepe. Xxxx xx xxxxxxxx, xxxxxx xx zkumavka xx pět minut xx xxxxx xxxxx xxxxxxx na 60 °X (5.4), xxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xx rychle xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx přes xxxxxxxxxx xxxxx (5.5). Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se provede xxxxxx den.
6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xx skleněné xxxxxxxx (5.3) xx s xxxxxxxxx xx 3 xxxxxxxxx xxxxx naváží 1 ± 0,1 x vzorku. Xxxxx xx 0,5 ml xxxxxxxx trihydrogenfosforečné (4.4), 0,50 ml roztoku xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.6)x 9 xx xxxxxxxx (4.1).
Xxxxxxxx se xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx, xxxxxx xx zkumavka xx pět xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxx xx 60 °X (5.4), xxx xx xxxxx rozpustila xxxxxx fáze. Xxxxxxxx xx rychle xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx (5.5). Chromatografie xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxx.
6.2 Xxxxxxxx xxx plynovou xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx
Xxx: xxxxxxxxxxxxx xxxx
Xxxxx: 2 x
Xxxxxx: ⅛"
Náplň: 10 % XX™ 1000 (xxxx ekvivalentní) + 1 % X3XX4 xx Xxxxxxxxxxx XXX 100–120 xxxx
Xxxxxxx
Xxxxxxx: 200 °X
Xxxxxx: 120 °X
Xxxxxxxx: 200 °C
Nosný xxxx: xxxxx
Xxxxxxxxx rychlost: 25 xx/xxx
6.3 Xxxxxxxxxxxxxx
6.3.1 Xxxxxxxxx
Xx xxxx odměrných xxxxx xx 20 xx xx xxxxxxxxxx 0,25, 0,50, 1,00, 2,00 x 4,00 xx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.5). Xx xxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx 1,00 xx roztoku xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.6); doplní xx xx xxxxx xxxxxxxxx (4.1) a xxxxxxx. Xxxxx připravené xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx x mg/ml (xx xxxxxxx 1 mg/ml, xx-xx x = 1,000) a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x/4, x/2, x, 2x, 4x xx/xx (xx znamená 0,25, 0,50, 1,00, 2,00, 4,00 xx/xx, xx-xx x = 1,000).
Nastříkne xx 1 μl xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx křivka se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx propionové x kyseliny 2xxxxxxxxxxxxxxxx xx xxx x x xxxxxx odpovídajících xxxxx xxxx xx xxx x.
Xxxxxxxxxx xx 3 xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx.
6.3.2 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx 1 μx filtrátu vzorku 6.1.1. Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx ze standardních xxxxxxx (6.3.1). Xx-xx xxx xxxxxxxxx stejný xxxxxxxx čas xxxx xxx kyseliny 2methylpropionové, xxxxx se vnitřní xxxxxxxx. Není-li xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxxxxx se 1 μx filtrátu xxxxxx 6.1.2 x změří xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx 3 xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x vypočte xx xxxxxx poměrů xxxxx xxxx.
7. Výpočty
7.1 X xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx bodu 6.3.1 xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx (K), xxxxx xxxxxxxx poměru xxxxx xxxx vypočtenému x xxxx 6.3.2.
7.2 X xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx (x) x xxxxxxxxxxxx procentech xxxxxx xxxxxx
x % (x/x) = X (0,5 x 100 x x) / (50 x a) =X(x / a)
kde
K = xxxxx xxxxxxxxx x bodu 7.1,
x = xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxxx xxxx 4.6,
a = xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx 6.1.2,
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxxxxx místo.
8. Xxxxxxxxxxxxxx [2]
Xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 2 % (x/x) xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx současně xx stejným xxxxxxx xxxxxxxxx 0,12 %.
XX. XXXXX X XXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX, XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX, XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX V XXXXXXXXXXXX PROSTŘEDCÍCH
A. XXXXX
1. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
X xxxxxx xx xxxxxxx detekce a xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x hydrochinonmonobenzyletheru (xxxxxxxxxxx) x kosmetických xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxx.
2. Podstata xxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxx x jeho xxxxxx xx provede xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx (XXX).
3. Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x.x.
3.1 Xxxxxxx, 96 % (X/X)
3.2 Xxxxxxxxxx
3.3 Xxxxxxxxxxxx
3.4 Vyvíjecí xxxxxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx, 66: 33 (V/V)
3.5 Xxxxxxx, 25 % (x/x) (d420 = 0,91 g/ml)
3.6 Kyselina xxxxxxxxx
3.7 Xxxxxxxxxxx
3.8 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.9 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.10 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (monobenzon)
3.11 Xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx a xxxx xxxxxxxx jeden xxx.
3.11.1 Xx dělené xxxxxxxx xx 10 ml xx xxxxxx 0,05 x xxxxxxxxxxxx (3.7). Xxxxx xx 0,250 x kyseliny xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx se xxxxxxx (3.5), xxxxx xxxx xxxxxxxx pH 10, x xxxxxx se xxxxxxxxx xx xxxxx 10 ml (3.1).
3.11.2 Xx xxxxxx xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxx 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.8). Xxxxx se 0,250 x xxxxxxxx askorbové (3.6) x 5 xx ethanolu (3.1). Xxxxxxx xx xxxxxxx (3.5), xxxxx xxxx xxxxxxxx xX 10, x xxxxxx xx xxxxxxxxx na xxxxx 10 ml (3.1).
3.11.3 Xx dělené zkumavky xx 10 xx xx xxxxxx 0,05 x hydrochinonmonoethyletheru (3.9). Xxxxx xx 0,250 x xxxxxxxx xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx ethanolu (3.1). Xxxxxxx xx amoniak (3.5), xxxxx není xxxxxxxx xX 10, x xxxxxx xx xxxxxxxxx na objem 10 xx (3.1).
3.11.4 Xx dělené xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxx 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.10). Xxxxx xx 0,250 x kyseliny xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx se xxxxxxx (3.5), xxxxx xxxx xxxxxxxx xX 10, x doplní se xxxxxxxxx xx xxxxx 10 xx (3.1).
3.12 Xxxxxxxx xxxxxxxx
3.13 Kyselina xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.14 Xxxxxxxxxxxxxx draselný xxxxxxxxxx
3.15 Chlorid xxxxxxxx xxxxxxxxxx
3.16 Detekční činidla
3.16.1 Xx 5 % xxxxxxx roztoku (x/X) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.12) xx xxxxxxx amoniak (3.5), dokud xx xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxx nerozpustí.
Upozornění:
Při delším xxxxx se x xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxx xx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.16.2 10 % (m/V) xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.13) x xxxxxxxx (3.1).
3.16.3 Xxxxxxxx xx 1 % (x/X) vodný xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.14) x 2 % (m/V) xxxxx xxxxxxx chloridu xxxxxxxxxx (3.15). Těsně před xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx díly obou xxxxxxx.
4. Přístroje x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx, x xxxx:
4.1 Běžné xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx
4.2 Xxxxxx desky xxx xxxxxxxxxxxxxx na tenké xxxxxx: xxxxxxxxx XXX/XX254 (254 xx xxxxxx xxxxxxx GHR/UV); 20 × 20 xx (Xxxxxxx, Nagel nebo xxxxxxxxxxxx). Xxxxxxxx xxxxxx 0,25 xx.
4.3 Xxxxxxxxxxxx xxxxx
4.4 Xxxxxxxxxxx
4.5 XX xxxxx, 254 xx
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx zkumavky xx 10 xx xx xxxxxx 3 x xxxxxx. Xxxxx xx 0,250 g xxxxxxxx xxxxxxxxx (3.6) x 5 ml xxxxxxxx (3.1). xX xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx (3.5) xx 10. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx (3.1) xx 10 xx. Xxxxxxxx xx xxxxxx zátkou x xxxxxxxxxxxx xx 10 xxxxx v xxxxxxxxxxxx lázni. Xxxxxxxxx xx xxxx filtrační xxxxx nebo se xxxxxxxx při 3000 xx./xxx.
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx vrstvě (TLC)
5.2.1 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.4).
5.2.2 Xx xxxxx xx xxxxxx xx 2 μx referenčních xxxxxxx (3.11) x 2 μl xxxxxxx xxxxxx (5.1). Vyvíjí xx xx xxx xxx xxxxxxx xxxxx, xxxxx čelo rozpouštědla xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 xx xx startu.
5.2.3 Xxxxx xx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
5.3 Xxxxxxx
5.3.1 Deska xx xxxxxxxx pod XX xxxxxx při 254 xx a poloha xxxxx se xxxxxx.
5.3.2 Xxxxx se xxxxxxxx
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.16.1), xxxx
- xxxxxxxxx dodekamolybdofosforečnou (3.16.2); xxxxxxx xx xx xxx 120 °X, xxxx
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.16.3).
6. Xxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx Xx každé xxxxxx.
Xxxxxx získané pro xxxxxx vzorku xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx jde x xxxxxx xxxxxxx Xx, xxxxx xxxxx x UV xxxxxx x xxxxx skvrn xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx popsaná x xxxxxxxxxxxx xxxxxx (X) x porovnají xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxx (xxxx) xxxxxx s xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx x XXX x XXXX xx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx přítomnost xxxxxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxx.
7. Poznámky
Za xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx hodnoty Rf:
hydrochinon: 0,32
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: 0,53
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: 0,55
hydrochinonmonobenzylether: 0,58
X. XXXXXXXXX
1. Rozsah x oblast použití
V xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, hydrochinonmonomethyletheru, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx kůže.
2. Podstata xxxxxx
Xxxxxx je extrahován xxxxx voda/methanol xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx provede kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx x XX xxxxxxx.
3. Xxxxxxx xxxxxxx
3.1 Xxxxxxx reakční xxxxxxx xxxx být čistoty x.x. Musí xxx xxxxxxx destilovaná xxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx čistoty.
3.2 Methanol
3.3 Xxxxxxxxxxx
3.4 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.5 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.6 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (monobenzon)
3.7 Tetrahydrofuran, xxxxxxx xxx XXXX
3.8 Xxxx voda/methanol 1:1 (X/X). Smíchá xx xxxxx xxx xxxx x xxxxx xxx xxxxxxxxx (3.2)
3.9 Mobilní xxxx: směs xxxxxxxxxxxxxxx/xxxx 45:55 (V/V). Xxxxxx xx 45 dílů xxxxxxxxxxxxxxxx (3.7) x 55 xxxx xxxx.
3.10 Xxxxxxxxxx roztok
Do odměrné xxxxx xx 50 xx se naváží 0,06 x xxxxxxxxxxxx (3.3), 0,08 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.4), 0,10 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.5) x 0,12 g xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.6). Xxxxxxxx xx x xxxxxx xx xx xxxxx xxxxxxxxxx (3.2). Referenční xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx 10 ml xxxxxx xxxxxxx xx 50 ml xxxxx xxxx/xxxxxxxx (3.8). Xxxx xxxxxxx xx připravují xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxx:
4.1 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx na xxxxxxx 60 °X
4.2 Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx s XX xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x 10μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
4.3 Analytická xxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x korozivzdorné xxxxx, xxxxx 250 xx, xxxxxxx xxxxxx 4,6 xx, xxxxxx Xxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxx fenethylsilanem xx Xxxxxxx XXX, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxx 6 μx, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx ochranná kolona, x výjimkou fenylové xxxxxx xxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx náplní.
4.4 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx 90 mm, Schleicher xxx Xxxüxx, Xxxxxxxxx Xx 5892 nebo xxxxxxxxxxxx
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xx odměrné xxxxx xx 50 ml xx x přesností xx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx 1 ± 0,1 x (x gramů) vzorku. Xxxxxx xx xxxxxxxx xx 25 xx xxxxx xxxx/xxxxxxxx (3.8). Xxxxx xx xxxxxx x xxxxx protřepe, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx se xxxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxx xx 60 °X, xxx se usnadnila xxxxxxxx. Baňka se xxxxxxx x xxxxxx xx xx xxxxx xxxxx voda/methanol (3.8). Xxxxxxx xx zfiltruje xxxx filtrační papír (4.4). Důkaz XXXX xx xxxxxxx xx 24 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
5.2.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx (3.9) se xxxxxx xx 1,0 xx/xxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx 295 xx.
5.2.2 Xxxxxxxxx xx 10 μx xxxxxxx vzorku xxxxxxxxx podle xxxx 5.1 x zaznamená xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xx plochy xxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.2.3. Xxxxxxxxx xx chromatogramy xxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x roztoku xxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx (RF) xxxxxxxxx podle xxxx 5.2.3.
5.2.3 Kalibrace
Nastříkne xx 10 μx referenčního xxxxxxx (3.10) a xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx faktor xxxxxx XXx (x xx xxxxxx xxxxxxx RF):
RFi = xx /ci
kde
pi = xxxxxx xxxx xxx hydrochinon, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, x
xx = koncentrace xxxxxxxxxxxx, hydrochinonmonomethyletheru, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx roztoku (3.10) (x/50 xx).
Xx třeba xxxxxx, xxx chromatogramy xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx píků xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx alespoň 0,90. (Xxxxxxxx separace xxxx xx uvedena xx xxxxxxx 1.).
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxx píků
Není-li xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, měla xx být xxx xxxxxxx xxxxxxxxx kolona xxxx xx xxxx xxx složení xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx, xxx byl xxxxxxxxx xxxxxx.
- Xxxxxx xxxxxxxxx Xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xx xx xxx xxxxxxxxx xx 0,9 xx 1,5. (Xxxxxxxx xxxxxxx asymetrie xx xxxxxxx na xxxxxxx 2.) Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx 2 xx/xxx.
Xxxxxxx 2:Xxxxxx asymetrie píku
- Xxxxxxxx musí být xxxxxxxx.
6. Xxxxxxx
Xxx výpočet xxxxxxxxxxx xxxxxxx (koncentrací xxxxxxx) ve xxxxxx xx xxxxxxx plochy xxxx analytů. Koncentrace xxxxxxx ve vzorku xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xx) xx xxxxxxx pomocí xxxxxx
xx % (x/x) = (xx x 100) / (RFi x x)
xxx
x = xxxxxxxx xxxxxx x gramech,
bi = plocha píku xxxxxxx x xx xxxxxx.
7. Opakovatelnost [3]
7.1 Xxx obsahu xxxxxxxxxxxx 2,0 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx vzorkem xxxxxxxxx 0,13 %.
7.2 Xxx xxxxxx hydrochinonmonomethyletheru 1,0 % by xxxxxx absolutní hodnota xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx současně xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,1 %.
7.3 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1,0 % by xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx současně xx xxxxxxx vzorkem xxxxxxxxx 0,11 %.
7.4 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1,0 % by xxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx současně xx xxxxxxx vzorkem xxxxxxxxx 0,11 %.
8. Xxxxxxxxxxxxxxxxxx [4]
8.1 Xxx xxxxxx hydrochinonu 2 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx rozdílu xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx různých xxxxxxxx (různé laboratoře, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx) xxxxxxxxx 0,37 %.
8.2 Při xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx stejným xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx laboratoře, různí xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx) xxxxxxxxx 0,21 %.
8.3 Xxx obsahu xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % by xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx provedených xx xxxxxxx xxxxxxx za xxxxxxx podmínek (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx experimentátoři, xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxx) překročit 0,19 %.
8.4 Xxx xxxxxx hydrochinonmonobenzyletheru 1 % xx xxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx stejným xxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, různé xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx) xxxxxxxxx 0,11 %.
9. Xxxxxxxx
9.1 Xxxxxxxx xx xxxxxxx obsah xxxxxxxxxxxx xxxxxxx vyšší xxx 2 % x je požadován xxxxxx odhad obsahu, xxx by xxx xxxxxxx xxxxxx (5.1) xxxxxx xx podobnou xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx vzorek xxxxxxxxxx 2 % hydrochinonu, x xxxxxxxxx by xxxx xxx xxxxxxxxx.
(X xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx mimo xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.)
9.2 Xxxxxx xxxxx
Xxxx xxxxxxx metoda xxxxxxxx stanovení hydrochinonu x jeho xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx kolony X18 x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx.
X této metody xxxx xxxxxx dochází x xxxxxxxx xxxxx xxxx řady parabenů. X xxxxxxx případě xx xxxxxxxxx xxxx xxx zopakováno s xxxxx systémem xxxxxxx xxxx/xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxxxx xxx xxxxx x literatuře x xxxxxxxx 2 x 3:
Xxxxxx: Xxxxxx XXX, 4,6 xx × 25 xx xxxx xxxxxxxxxxxx:
xxxxxxx: 36 °X
xxxxxx: 1,5 xx/xxx
xxxxxxx xxxx:
xxx xxxxxxxxxxx: xxxxxxxx/xxxx 5/95 (X/X)
xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxx/xxxx 30/70 (X/X)
xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxx/xxxx 80/20 (V/V) [5].
Xxxxxx: Xxxxxxxxxx X5XXX xxxx xxxxxxxxxxxx:
xxxxxxx xxxx: xxxx/xxxxxxxx 90/10 (X/X)
xxxxxx: 1,5 xx/xxx
Xxxx podmínky xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx [6].
[1] ISO 5725.
[2] XXX 5725.
[3] XXX 5725.
[4] ISO 5725.
[5] Xxxxxx-Xxxxxxxxx, X., Xxxxx X.-X., Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xx x’xxxxxxxxxxxx xx de xxx éthers méthylique xx benzylique xxxx xxx produits xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxx. Xxx. X. Xxxxxx. Sci., 8-203-214 (1986).
[6] Xxxxx, X., Xxx X., Determination xx xxxxxxxxxxxx xx xxxx toning xxxxxx, Xxxxxxx, (1986), 111, x. 129.