Xxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 95/32/XX
xx xxx 7. xxxxxxxx 1995
x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx složení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
(Xxxx x významem xxx XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx xx Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx společenství,
s xxxxxxx xx směrnici Rady 76/768/XXX ze dne 27. července 1976 x sbližování právních xxxxxxxx členských států xxxxxxxxxx xx kosmetických xxxxxxxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx směrnicí Xxxxxx 94/32/XX [2], x xxxxxxx xx xx. 8 xxxx. 1 xxxxxxx směrnice,
vzhledem x xxxx, xx xx xx xxxxxxxx 76/768/XXX xxxxxxx úřední xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx xxxxxxx kosmetických xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xx xxxxxxxx; že xxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxx ve xxxxxxxx Xxxxxx 80/1335/XXX [3] xx znění xxxxxxxx 87/143/XXX [4], xxxxxxxx 82/434/XXX [5] xx xxxxx xxxxxxxx 90/207/XXX [6] x xx směrnicích 83/514/XXX [7], 85/490/EHS [8] x 93/73/XXX [9];
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx benzoové, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx sorbové, xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx prostředcích x xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx krokem;
vzhledem x xxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx jsou x xxxxxxx se xxxxxxxxxxx Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx 76/768/EHS xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
XXXXXXX TUTO XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Členské xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx k zajištění xxxx, xxx xx xxx xxxxxxx zkoušení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx:
- důkaz x stanovení kyseliny xxxxxxxx, xxxxxxxx 4hydroxybenzoové, xxxxxxxx sorbové, xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, hydrochinonmonomethyletheru, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x příloze.
Xxxxxx 2
1. Xxxxxxx xxxxx uvedou v xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx dosažení xxxxxxx x xxxxx směrnicí xxxxxxxxxx xx 30. xxxx 1996. Neprodleně x nich xxxxxxx Xxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx musí xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxxx nebo xxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxxx si xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.
2. Xxxxxxx státy xxxxx Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx v oblasti xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 3
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx v platnost xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.
Xxxxxx 4
Tato xxxxxxxx xx xxxxxx členským xxxxxx.
X Bruselu xxx 7. xxxxxxxx 1995.
Xx Xxxxxx
Xxxx Xxxxxx
xxxxxx Xxxxxx
[1] Xx. xxxx. X 262, 27.9.1976, x. 169.
[2] Xx. xxxx. X 181, 15.7.1994, x. 31.
[3] Xx. xxxx. X 383, 31.12.1980, x. 27.
[4] Xx. věst. X 57, 27.2.1987, x. 56.
[5] Xx. xxxx. X 185, 30.6.1982, x. 1.
[6] Úř. xxxx. X 108, 28.4.1990, x. 92.
[7] Xx. věst. X 291, 24.10.1983, x. 9.
[8] Úř. xxxx. X 295, 7.11.1985, x. 30.
[9] Úř. xxxx. X 231, 14.9.1993, x. 34.
XXXXXXX
X. XXXXX X XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXX, XXXXXXXX 4HYDROXYBENZOOVÉ, KYSELINY XXXXXXX, XXXXXXXX SALICYLOVÉ X XXXXXXXX XXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX
1. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx je xxxxxxxxxx xxx důkaz x xxxxxxxxx kyseliny xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, kyseliny salicylové x xxxxxxxx propionové x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxx popsány xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, stanovení xxxxxxxx propionové a xxxxxxxxx kyseliny 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, kyseliny xxxxxxx x kyseliny xxxxxxxxxx xxxxxxxxx touto xxxxxxx xx vyjádří x xxxxxxxxxxxx procentech xxxxxxx xxxxxxx.
X. XXXXX
1. Xxxxxxxx metody
Po xxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxx konzervačních xxxxxx xx xxxxxxx analyzuje xxxxxxxxxxxxxx xx tenké xxxxxx (XXX) x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ("xxxxxxxxxxxx xx xxxxx"). V xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxx potvrdí xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx chromatografií (XXXX) xxxx, v xxxxxxx kyseliny propionové, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (GC).
2. Xxxxxxx xxxxxxx
2.1 Xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx čistoty x.x. Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx nebo xxxx alespoň xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2.2 Aceton
2.3 Xxxxxxxxxxxx
2.4 Xxxxxxxxxxx
2.5 Xxxxxx
2.6 xXxxxx
2.7 Xxxxxxx, xxxxxx
2.8 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx, 4 X
2.9 Xxxxxxxx xxxxxxxx, 4 X xxxxx xxxxxx
2.10 Xxxxxxx xxxxxxxx, CaCl2·2H2O
2.11 Xxxxxxxxx xxxxxx, Xx2XX3
2.12 2Xxxx2‘xxxxxxxxxxx
2.13 Xxxxxxxx 4hydroxybenzoová
2.14 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
2.15 Xxxxxxxx xxxxxxxx
2.16 Xxxxxxxx xxxxxxx
2.17 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
2.18 Referenční xxxxxxx
Xxxxxxxx xx 0,1 % (x/X) xxxxxxx (100 mg/100 xx) xxxxx z xxxx xxxxxxxxxxxxx přísad (2.13 xx 2.17) x xxxxxxxxxxxxx.
2.19 Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx
0,5 % xxxxxx 2brom2‘acetonaftonu (2.12) x xxxxxxxxxxxx (2.4) (50 xx/10 xx). Tento xxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxx každý xxxxx x uchováván v xxxxxxxx.
2.20 Roztok katalyzátoru
0,3 % (m/V) xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (2.11) xx xxxx (300 xx/100 ml). Xxxxx xxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2.21 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxx (2.5)/xxxxxx (2.2) (20: 0,5, X/X)
2.22 Xxxxxx parafin (2.7)/xxxxxx (2.6) (1:2, X/X)
3. Xxxxxxxxx a xxxxxxx
Xxxxx laboratorní vybavení
3.1 Xxxxx lázeň nastavitelná xx xxxxxxx 60 °X
3.2 Xxxxxxxx xxxxxx
3.3 Xxxxx ultrafialového xxxxxx 254 a 366 xx
3.4 Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx vrstvě, Silikagel 60, xxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, 20 × 20 xx, tloušťka xxxxxx 0,25 xx x koncentrační zónou 2,5 × 20 xx (Xxxx 11845 xxxx ekvivalentní)
3.5 Mikrostříkačka xx 10 μx
3.6 Xxxxxxxxxxxxxx na 25 μx
3.7 Xxxxxxx nastavitelná xx xxxxxxx xx 105 °C
3.8 Xxxxxxxxxxxxx xxxxx na 50 x 200 xx xx zabroušenou xxxxxx
3.9 Xxxxxxxxx papír, xxxxxx 90 xx, Schleicher &xxx; Xxxüxx, Xxxxxxxxx Xx. 5892, xxxx xxxxxxxxxxxx
3.10 Univerzální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xX 1 – 11
3.11 Skleněné xxxxxxxxxx lahvičky xx 5 xx
3.12 Rotační xxxxxxx xxxxxxx (Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx)
3.13 Xxxxx xxxxx
4. Xxxxxx
4.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xx Erlenmeyerovy xxxxx xx 50 xx xx zabroušenou xxxxxx (3.8) se xxxxxx xxxxxxxxx 1 x xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxx 4 X kyseliny chlorovodíkové (2.8) a 40 xx acetonu (2.2). X xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx xx xxxxxxxx xxxxx, xx xxxx být xxxxxxx 20 xxxxx 4 X kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (2.8). Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) xx xxxxxxxxxxx, xxx je xX xxxxxxxxx 2. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx x xx xxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx usnadnit xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx do xxxxxxxxx fáze, směs xx opatrně zahřeje xx xxx 60 °X, xxx se xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxx přes xxxxxxxxx xxxxx (3.9) do Xxxxxxxxxxxxx baňky.
20 xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx Erlenmeyerovy baňky xx 200 xx, xxxxx xx 20 xx xxxx a xxxxxxxx xx. xX xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xx 10 xxxxxx 4 X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (2.9) xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10).
Xxxxx xx 1 x chloridu xxxxxxxxxx (2.10) a xxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx xxxxx (3.9) xx xxxxxx nálevky xx 250 xx xxxxxxxxxx 75 xx xxxxxxxxxxxxx (2.3) x xxxxx se třepe xxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx nechají oddělit x xxxxx vrstva xx odpustí do Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 250 xx. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx. Xx použití xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) xx xX xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx přibližně 2 xxxxxxxxxx 4 X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (2.8). Xxxxx se 10 ml xxxxxxxxxxxxx (2.3), baňka xx xxxxxxxxx a silně xxxxxxxxxx xxxxx minutu; xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx (3.12). Vodná vrstva xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx vrstva xx xxxxxx téměř xx xxxxx a xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx v 1 xx xxxxxxxxxxxxx (2.3). Xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.11).
4.2 Xxxxxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx vrstvě (3.4) xx xx xxxx, jejichž počet xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxx analyzovány, nanese xxxxxxxxxx (3.5) xx xxxxxxxx xxxxxxxxx vždy xx 3 μx xxxxxxxxxx lithného (2.20) x vysuší se x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx (3.13) zahřátou xx 40 °X, xxx xx xxxxxx xxxxxxx co xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx (3.5) xx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxx nanese xxxx 10 μl xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (2.18) x xxxxxxx vzorku (4.1) přesně xx xxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx lithný.
Nakonec xx opět xxxxxx xx xxxx, xxx xxxx xxxxxxxx referenční xxxxxxx/xxxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx 15 μx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (2.19) (xxxxxx 2xxxx2‘xxxxxxxxxxxx).
Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx (3.7) 45 minut xxx 80 °C. Po xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx v xxxxxx (3.2), která byla (xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx) 15 xxxxx xxxxxx vyvíjecím rozpouštědlem 2.21 (toluen/aceton), xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 xx (xxxx xxxxxxxx je xxxxxxxxx 80 minut).
Deska xx vysuší v xxxxxx studeného vzduchu x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx pod XX xxxxxxx (3.3). Xxx xxxxxxxx fluorescence xxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxx (2.22).
5. Důkaz
Pro xxxxxx skvrnu xx xxxxxxx xxxxxxx Xx.
Xxxxxxx Xx x xxxxxxx xxxxxx xxx XX xxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx vzorků.
Učiní xx předběžné xxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxx konzervačních xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx X, xxxx ukazuje-li xx, xx xx přítomna xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx plynová xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx X. Xxxxxxx retenční xxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx časy xxxxxxxxxxxx vzorků.
Výsledky XXX x XXXX xxxx XX xx xxxxxxxxxx x xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx z xxxxxxxxx xxxxxxxx.
X. XXXXXXXXX XXXXXXXX BENZOOVÉ, KYSELINY 4XXXXXXXXXXXXXXX, XXXXXXXX XXXXXXX X XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxxxxxx metody
Vzorek se xx okyselení xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxx. Xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx vysokoúčinnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX).
2. Xxxxxxx xxxxxxx
2.1 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx musí xxx xxxxxxx x.x. a xxxx být xxxxxx xxx XXXX. Xxxx xxx použita xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx čistoty.
2.2 Xxxxxxx, xxxxxxxxx
2.3 Kyselina 4xxxxxxxxxxxxxxx
2.4 Kyselina salicylová
2.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx
2.6 Xxxxxxxx xxxxxxx
2.7 Xxxxx xxxxx, (XX3XXXXx·3X2X)
2.8 Kyselina xxxxxx, x420 = 1,05 x/xx
2.9 Acetonitril
2.10 Kyselina xxxxxx, 2 M
2.11 Xxxxxxxx draselný, 0,2 X xxxxx roztok
2.12 Xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx
2.13 Směs xxxxxxx/xxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxx (2.2) xx smíchá x jedním dílem xxxx (2:1)
2.14 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx 1 x xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx (2.12) x 500 xx xxxxx xxxxxxx/xxxx (2.13).
2.15 Mobilní xxxx xxx XXXX
2.15.1 Xxxxxxxxx xxxx: xx 1 xxxxx vody se xxxxx 6,35 g xxxxxx xxxxxxx (2.7) x 20,0 xx xxxxxxxx xxxxxx (2.8) x xxxxxx xx.
2.15.2 Xxxxxxx xxxx se xxxxxxxx smícháním xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx pufru (2.15.1) x jednoho xxxx acetonitrilu (2.9).
2.16 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xx odměrné xxxxx xx 50 xx xx xxxxxx xxxxxx xxx 0,05 g xxxxxxxx 4hydroxybenzoové (2.3), 0,2 x kyseliny xxxxxxxxxx (2.4), 0,2 x xxxxxxxx xxxxxxxx (2.5) x 0,05 x xxxxxxxx sorbové (2.6) x objem xx xxxxxx xxxxx xxxxxxx/xxxx (2.13). Roztok xx xxxxxxxx v xxxxxxxx. Xxxxxx je xxxxxxxx xxxxx xxxxx.
2.17 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxx xx 20 ml xx xxxxxx 8,00, 4,00, 2,00, 1,00 x 0,50 ml xxxxxxxxx xxxxxxx (2.16). Xx xxxxx baňky xx xxxxx 10,00 xx xxxxxxx vnitřního xxxxxxxxx (2.14) x 0,5 ml 2 X xxxxxxxx xxxxxx (2.10). Xxxxx xx xxxxxx směsí ethanol/voda (2.13). Tyto xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxx laboratorní xxxxxxxx x dále:
3.1 Vodní xxxxx, xxxxxxxxx xx 60 °X
3.2 Xxxxxxxxxxxx xxx vysokoúčinnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x XX xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx délkou x 10μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3.3 Xxxxxxxxxx kolona
Korozivzdorná ocel, xxxxx 12,5 až 25 cm, vnitřní xxxxxx 4,6 mm, xxxxxx Nucleosilem 5X18 xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3.4 Xxxxxxxxx papír, xxxxxx: 90 mm, Schleicher xxx Schüll, Xxxxxxxxx Xx 5892 xxxx xxxxxxxxxxxx.
3.5 Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 50 xx
3.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 5 xx
3.7 Xxxxx kamínky, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx 2–4 xx, xxxx xxxxxxxxxxxx
4. Xxxxxx
4.1 Xxxxxxxx xxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx xxx přidání xxxxxxxxx standardu
Do Xxxxxxxxxxxxx xxxxx na 50 xx (3.5) se xxxxxx 1 g xxxxxx. Do Erlenmeyerovy xxxxx xx odpipetuje 10 xx 2 X kyseliny xxxxxx (2.10) x 40 xx směsi xxxxxxx/xxxx (2.13). Přidá se xxxxxxxxx 1 g xxxxxxx xxxxxxx (3.7), xxxxx xx xxxxxx x xxxxx se xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx suspenze. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx přesně xxx minut xx xxxxx lázni (3.1) xxx 60 °X.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxx xxx 5 °X.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (3.4). Xxx 2 xx xxxxxxxx xx převedou do xxxxxxxxxx lahvičky (3.6). Xxxxxxx se uchovává xxx 5 °X x stanovení xxxxxx XXXX se xxxxxxx xx 24 xxxxx.
4.1.2 Xxxxxxxx vzorku x xxxxxxxx vnitřního xxxxxxxxx
Xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 50 xx (3.5) xx x přesností xx tři xxxxxxxxx xxxxx naváží 1 ± 0,1 x xxxxxx (a gramů). Xxxxxxx xx xxxxx 1,00 xx 2 X kyseliny sírové (2.10) x 30,0 xx xxxxx ethanol/voda (2.13). Xxxxx se xxxxxxxxx 1 g xxxxxxx kamínků (3.7) x 10 ml xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx(2.14). Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx a xxxxx xx xxxxxxx jednu xxxxxx protřepává, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx do xxxxxxxxxx fáze xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx zahřívá xxxxxx xxx xxxxx xx xxxxx xxxxx (3.1) xxx 60 °X.
Xxxxxxxxxxxxx baňka se xxxxx xxxxxxx v xxxxxx studené xxxx x extrakt xx xxxxx xx xxxxxx xxx 5 °X.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx přes xxxxxxxxx papír (3.4). Xxx 2 xx xxxxxxxx xx převedou xx xxxxxxxxxx lahvičky (3.6). Xxxxxxx xx xxxxxxxx xxx 5 °X a stanovení xxxxxx HPLC xx xxxxxxx do 24 xxxxx.
4.2 Xxxxxxxxxxxx kapalinová xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx: acetonitril/acetátový xxxx (2.15).
Xxxxxx mobilní xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx 2,0 ± 0,5 xx/xxx. Xxxxxx délka xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx 240 nm.
4.2.1 Xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.2) xx xxxxxxxxx xx 10 μx standardních xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad (2.17). Pro každý xxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx stanoví xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx přísady x xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xx, že při xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx roztoky získána xxxxxxxx odezva.
4.2.2 Xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.2) xx xxxxxxxxx 10 μx xxxxxxxx xxxxxx (4.1.1) x zaznamená xx chromatogram. Xxxxxxxxx xx 10 μl xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (2.17) x xxxxxxxxx se chromatogram. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx se xxxxxxxxx. Není-li v xxxxxxxxxxxxx extraktu xxxxxx (4.1.1) žádný xxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx kyseliny 2xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 10 μx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.1.2) x xxxxxxxxx xx chromatogram.
Je-li x chromatogramu extraktu xxxxxx (4.1.1) xxxxxx xxx xx stejným xxxxxxxxx časem xxxx xxxxxxxx 2methoxybenzoová, měl xx xxx vybrán xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. (Xxxx-xx jedna x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad x chromatogramu xxxxxxxx, xxx tuto xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.)
Xx xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxx xxxxxx splňují xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxx xxxxxxx odděleného páru xx xxxxxxx 0,90. (Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx na xxxxxxx 1)
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxx píků
Není-li xxxxxxxxxx xxxxxxxx dosaženo, měla xx být xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx upraveno tak, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
- Faktor xxxxxxxxx Xx všech získaných xxxx xx xx xxx xxxxxxxxx xx 0,9 xx 1,5. (Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx 2.) Xxx xxxxxxxxxxx chromatogramu za xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx 2 xx/xxx.
Xxxxxxx 2: Xxxxxx asymetrie xxxx
- Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx.
5. Xxxxxxx
Xxx xxxxxxx koncentrace xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x roztoku xxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx konzervačních xxxxxx x výšky píku xxxxxxxx 2methoxybenzoové (xxxxxxx xxxxxxxx) x xxxx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxx benzoové, kyseliny 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx salicylové xx vzorku x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xi) xx vypočte xxxxxx xxxxxx
xx % (x/x) = (100x 20 x x) / (106 x&xxxx; x) = b / (500 x x)
xxx
x = xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1.2) (g),
b = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx (4.1.2) (μx/xx) xxxxxxxx x kalibračního xxxxx.
6. Opakovatelnost [1]
Xxx xxxxxx xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx 0,40 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,035 %.
Xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx 0,50 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx současně xx stejným vzorkem xxxxxxxxx 0,050 %.
Xxx xxxxxx kyseliny salicylové 0,50 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx provedených současně xx stejným vzorkem xxxxxxxxx 0,045 %.
Při xxxxxx kyseliny sorbové 0,60 % by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,035 %.
7. Xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxxxx kyseliny xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx tedy xxxx být x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2 Xx-xx xx žádoucí, lze xxxxxx xxxxxxx ochrannou xxxxxx.
X. STANOVENÍ XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx metoda xx xxxxxx xxx xxxxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx prostředcích xx do xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 2 % (x/x).
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx touto xxxxxxx xx vyjádří x procentech hmotnosti (% m/m) výrobku.
3. Xxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx kyseliny 2xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
4. Xxxxxxx činidla
Všechna xxxxxxx činidla musí xxx čistoty x.x; xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxx ekvivalentní xxxxxxx.
4.1 Xxxxxxx, 96 % (V/V)
4.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
4.3 Xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx
4.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, 10 % (x/X)
4.5 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx 50 xx se xxxxxx xxxxxx 1 x (x gramů) xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xx xx xxxxx xxxxxxxxx (4.1).
4.6 Xxxxxx xxxxxxxxx standardu
Do odměrné xxxxx na 50 xx xx xxxxxx xxxxxx 1 x (x xxxxx) xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxx xx xx objem xxxxxxxxx (4.1).
5. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
5.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx vybavení x xxxx:
5.2 Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x plamenovým ionizačním xxxxxxxxxx
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxx (20 × 150 xx) se xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
5.4 Xxxxx lázeň xxxxxxxxx xx 60 °X
5.5 Xxxxxxxx injekční xxxxxxxxx xx 10 xx x filtrační xxxxxxxxx (průměr xxxx 0,45 μx)
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxx vzorku
6.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx bez vnitřního xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.3) se xxxxxx xxxxxxxxx 1 g xxxxxx. Přidá xx 0,5 xx kyseliny xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (4.4) x 9,5 xx xxxxxxxx (4.1).
Xxxxxxxx xx xxxxxx x silně xxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx, xxxxxx se zkumavka xx xxx xxxxx xx vodní xxxxx xxxxxxx xx 60 °X (5.4), xxx xx zcela xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxx zchladí xxx xxxxxxx vodou. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx přes xxxxxxxxxx xxxxx (5.5). Chromatografie xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx.
6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.3) xx s xxxxxxxxx xx 3 xxxxxxxxx místa xxxxxx 1 ± 0,1 x vzorku. Xxxxx xx 0,5 ml xxxxxxxx trihydrogenfosforečné (4.4), 0,50 ml roztoku xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.6)a 9 xx ethanolu (4.1).
Xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx. Xxxx to xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxx xx xxx xxxxx xx vodní xxxxx xxxxxxx xx 60 °X (5.4), xxx xx zcela xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxx tekoucí vodou. Xxxx roztoku xx xxxxxxxxx přes xxxxxxxxxx xxxxx (5.5). Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxx.
6.2 Xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx následující xxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx
Xxx: xxxxxxxxxxxxx xxxx
Xxxxx: 2 x
Xxxxxx: ⅛"
Náplň: 10 % XX™ 1000 (xxxx xxxxxxxxxxxx) + 1 % X3XX4 xx Xxxxxxxxxxx XXX 100–120 mesh
Teplota
Nástřik: 200 °X
Xxxxxx: 120 °X
Xxxxxxxx: 200 °X
Xxxxx xxxx: xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx: 25 ml/min
6.3 Chromatografie
6.3.1 Xxxxxxxxx
Xx xxxx odměrných xxxxx xx 20 xx xx odpipetuje 0,25, 0,50, 1,00, 2,00 x 4,00 xx xxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxx (4.5). Do xxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx 1,00 xx xxxxxxx vnitřního xxxxxxxxx (4.6); xxxxxx xx na xxxxx xxxxxxxxx (4.1) x xxxxxxx. Takto xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x koncentraci x xx/xx (xx xxxxxxx 1 xx/xx, xx-xx x = 1,000) x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x/4, x/2, p, 2x, 4x xx/xx (xx znamená 0,25, 0,50, 1,00, 2,00, 4,00 mg/ml, xx-xx x = 1,000).
Xxxxxxxxx xx 1 μl xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx křivka se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx 2methylpropionové xx xxx x x poměru xxxxxxxxxxxxxx xxxxx píků xx xxx y.
Nastříknou xx 3 xxxxx x xxxxxxx roztoku a xxxxxxx xx průměr xxxxxx xxxxx píku.
6.3.2 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx 1 μx filtrátu xxxxxx 6.1.1. Xxxxxxxxxxxx se xxxxxxx x chromatogramem xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (6.3.1). Xx-xx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxx xxx xxxxxxxx 2methylpropionové, xxxxx se xxxxxxx xxxxxxxx. Není-li xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxxxxx xx 1 μx xxxxxxxx xxxxxx 6.1.2 x xxxxx xx xxxxxx píku xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx 3 dávky x každého roztoku x vypočte xx xxxxxx xxxxxx ploch xxxx.
7. Výpočty
7.1 X xxxxxxxxxx xxxxxx sestrojené xxxxx bodu 6.3.1 xx odečte xxxxx xxxxxxxxx (X), xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx vypočtenému v xxxx 6.3.2.
7.2 Z xxxxx získaného poměru xxxxxxxxx xx vypočte xxxxx kyseliny propionové xx vzorku (x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx
x % (x/x) = X (0,5 x 100 x x) / (50 x x) =X(x / x)
xxx
X = xxxxx vypočtený x bodu 7.1,
x = xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx bodu 4.6,
a = hmotnost xxxxxx x xxxxxxx podle xxxx 6.1.2,
Výsledky xx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
8. Xxxxxxxxxxxxxx [2]
Xxx xxxxxx kyseliny xxxxxxxxxx 2 % (x/x) xx neměl xxxxxx výsledků dvou xxxxxxxxx provedených současně xx xxxxxxx vzorkem xxxxxxxxx 0,12 %.
XX. XXXXX X XXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX, XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX, HYDROCHINONMONOETHYLETHERU X HYDROCHINONMONOBENZYLETHERU V XXXXXXXXXXXX PROSTŘEDCÍCH
A. XXXXX
1. Xxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
X xxxxxx xx xxxxxxx detekce a xxxxx hydrochinonu, hydrochinonmonomethyletheru, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxxx) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx zesvětlení xxxx.
2. Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxx xx provede xxxxxxxxxxxxxx xx tenké xxxxxx (XXX).
3. Reakční xxxxxxx
Xxxxxxx reakční xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x.x.
3.1 Xxxxxxx, 96 % (X/X)
3.2 Xxxxxxxxxx
3.3 Xxxxxxxxxxxx
3.4 Vyvíjecí xxxxxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx, 66: 33 (V/V)
3.5 Xxxxxxx, 25 % (x/x) (d420 = 0,91 x/xx)
3.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxx
3.7 Xxxxxxxxxxx
3.8 Hydrochinonmonomethylether
3.9 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.10 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx)
3.11 Xxxxxxxxxx roztoky
Následující referenční xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx.
3.11.1 Xx xxxxxx xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxx 0,05 x xxxxxxxxxxxx (3.7). Xxxxx xx 0,250 x xxxxxxxx askorbové (3.6) a 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx se xxxxxxx (3.5), xxxxx není xxxxxxxx xX 10, x xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx 10 xx (3.1).
3.11.2 Xx xxxxxx xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxx 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.8). Xxxxx xx 0,250 x xxxxxxxx xxxxxxxxx (3.6) a 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx xx xxxxxxx (3.5), dokud není xxxxxxxx xX 10, x xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx 10 xx (3.1).
3.11.3 Xx xxxxxx xxxxxxxx xx 10 ml xx xxxxxx 0,05 x hydrochinonmonoethyletheru (3.9). Xxxxx se 0,250 x xxxxxxxx xxxxxxxxx (3.6) a 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx xx xxxxxxx (3.5), xxxxx není xxxxxxxx pH 10, x xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx 10 xx (3.1).
3.11.4 Xx dělené xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxx 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.10). Xxxxx xx 0,250 x xxxxxxxx xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx xx xxxxxxx (3.5), xxxxx není xxxxxxxx xX 10, x xxxxxx se xxxxxxxxx xx xxxxx 10 xx (3.1).
3.12 Xxxxxxxx stříbrný
3.13 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.14 Kyanoželezitan xxxxxxxx xxxxxxxxxx
3.15 Chlorid xxxxxxxx xxxxxxxxxx
3.16 Detekční činidla
3.16.1 Xx 5 % xxxxxxx xxxxxxx (m/V) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.12) xx xxxxxxx amoniak (3.5), xxxxx xx xxxxxxx xx sraženina xxxx nerozpustí.
Upozornění:
Při delším xxxxx xx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxx xx xxx xx xxxxxxx zlikvidován.
3.16.2 10 % (x/X) roztok xxxxxxxx dodekamolybdofosforečné (3.13) x xxxxxxxx (3.1).
3.16.3 Xxxxxxxx xx 1 % (x/X) xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.14) x 2 % (m/V) xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.15). Xxxxx před xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx obou xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx vybavení, x xxxx:
4.1 Běžné xxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxxx xx tenké vrstvě
4.2 Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx: xxxxxxxxx XXX/XX254 (254 xx xxxxxx xxxxxxx XXX/XX); 20 × 20 xx (Xxxxxxx, Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx). Xxxxxxxx xxxxxx 0,25 xx.
4.3 Xxxxxxxxxxxx xxxxx
4.4 Odstředivka
4.5 XX xxxxx, 254 xx
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxx 3 x xxxxxx. Přidá xx 0,250 g kyseliny xxxxxxxxx (3.6) a 5 xx ethanolu (3.1). pH xxxxxxx xx xxxxxx amoniakem (3.5) xx 10. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx (3.1) xx 10 xx. Zkumavka xx uzavře xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xx 10 minut v xxxxxxxxxxxx lázni. Zfiltruje xx xxxx filtrační xxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxx 3000 xx./xxx.
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx vrstvě (TLC)
5.2.1 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx rozpouštědlem (3.4).
5.2.2 Xx xxxxx xx xxxxxx po 2 μx referenčních xxxxxxx (3.11) x 2 μx xxxxxxx xxxxxx (5.1). Vyvíjí xx ve xxx xxx teplotě okolí, xxxxx čelo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vzdálenosti 15 xx xx startu.
5.2.3 Xxxxx xx xxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxx teplotě.
5.3 Xxxxxxx
5.3.1 Xxxxx se xxxxxxxx xxx UV xxxxxx při 254 xx x poloha xxxxx xx označí.
5.3.2 Xxxxx xx postříká
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.16.1), xxxx
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.16.2); zahřeje xx xx xxx 120 °X, nebo
- roztokem xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx železitého (3.16.3).
6. Xxxxx
Xxxxxxx xx xxxxxxx Rf xxxxx xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx pro xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx referenční xxxxxxx, pokud xxx x xxxxxx xxxxxxx Xx, barvu xxxxx x XX xxxxxx x barvu xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx popsaná x xxxxxxxxxxxx xxxxxx (X) x porovnají xx xxxxxxxx časy xxxxxxx xxx xxx (xxxx) vzorku x xxxxxxxxxx časy píků xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx x XXX x HPLC xx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx.
7. Xxxxxxxx
Xx uvedených xxxxxxxx byly xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx Xx:
xxxxxxxxxxx: 0,32
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: 0,53
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: 0,55
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: 0,58
X. XXXXXXXXX
1. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
X xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx pro stanovení xxxxxxxxxxxx, hydrochinonmonomethyletheru, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx prostředcích xxx xxxxxxxxxx kůže.
2. Podstata xxxxxx
Xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxx voda/methanol xx xxxxxxx xxxxxxx, kterým xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx analytů xx xxxxxxxxx roztoku xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx s obrácenou xxxx x XX xxxxxxx.
3. Xxxxxxx xxxxxxx
3.1 Xxxxxxx reakční xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x.x. Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx voda xxxx xxxx alespoň xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3.2 Xxxxxxxx
3.3 Xxxxxxxxxxx
3.4 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.5 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.6 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx)
3.7 Xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxx HPLC
3.8 Xxxx xxxx/xxxxxxxx 1:1 (X/X). Smíchá se xxxxx díl xxxx x jeden xxx xxxxxxxxx (3.2)
3.9 Mobilní xxxx: xxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxx 45:55 (X/X). Xxxxxx xx 45 dílů xxxxxxxxxxxxxxxx (3.7) x 55 dílů xxxx.
3.10 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx odměrné xxxxx na 50 xx se xxxxxx 0,06 x xxxxxxxxxxxx (3.3), 0,08 g xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.4), 0,10 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.5) x 0,12 g xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.6). Xxxxxxxx xx x xxxxxx xx na xxxxx xxxxxxxxxx (3.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx 10 xx xxxxxx xxxxxxx xx 50 xx xxxxx xxxx/xxxxxxxx (3.8). Xxxx xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx vybavení x xxxx:
4.1 Vodní xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx 60 °X
4.2 Xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x XX detektorem x xxxxxxxxxxxxx vlnovou xxxxxx x 10μl nastřikovací xxxxxxx
4.3 Analytická xxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx 250 xx, xxxxxxx xxxxxx 4,6 mm, plněná Xxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx na Xxxxxxx XXX, uzavřená xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx částic 6 μx, nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx ochranná xxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.4 Xxxxxxxxx xxxxx, průměr 90 mm, Xxxxxxxxxx xxx Schüll, Xxxxxxxxx Xx 5892 nebo xxxxxxxxxxxx
5. Postup
5.1 Příprava xxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx 50 xx xx x xxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx 1 ± 0,1 x (x xxxxx) xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxx xx 25 xx xxxxx voda/methanol (3.8). Xxxxx se uzavře x silně protřepe, xxxxx xx nevytvoří xxxxxxxxx xxxxxxxx. Protřepává xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xx vodní xxxxx (4.1) xxxxxxxxxx xx 60 °C, xxx xx usnadnila xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xx na objem xxxxx xxxx/xxxxxxxx (3.8). Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx filtrační xxxxx (4.4). Xxxxx HPLC xx xxxxxxx do 24 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
5.2 Vysokoúčinná xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
5.2.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx fáze (3.9) se upraví xx 1,0 xx/xxx x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx xx 295 xx.
5.2.2 Xxxxxxxxx xx 10 μx xxxxxxx vzorku xxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.1 x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.2.3. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx vzorek x referenční xxxxxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxxxx xxxxxx xx použijí xxxxxx xxxx a xxxxxxx odezvy (XX) xxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.2.3.
5.2.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx 10 μl xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) x xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxx odezvy XXx (x je xxxxxx xxxxxxx XX):
XXx = xx /ci
kde
pi = plocha xxxx xxx hydrochinon, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, x
xx = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, hydrochinonmonomethyletheru, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) (x/50 xx).
Xx xxxxx xxxxxx, xxx chromatogramy xxxxxxx pro standardní xxxxxx x roztok xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx píků xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx 0,90. (Xxxxxxxx separace píků xx uvedena xx xxxxxxx 1.).
Obrázek 1: Xxxxxxxx xxxx
Xxxx-xx požadované xxxxxxxx xxxxxxxx, měla xx být xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx by xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx, xxx byl požadavek xxxxxx.
- Xxxxxx asymetrie Xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xx se xxx xxxxxxxxx xx 0,9 xx 1,5. (Xxxxxxxx faktoru xxxxxxxxx xx uvedena xx xxxxxxx 2.) Při xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx za xxxxxx stanovení faktoru xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx posuvu papíru xxxxxxx 2 xx/xxx.
Xxxxxxx 2:Xxxxxx asymetrie xxxx
- Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx.
6. Xxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx analytu (xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx vzorku xx xxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxx. Koncentrace xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx x hmotnostních xxxxxxxxxx (xx) se xxxxxxx xxxxxx xxxxxx
xx % (m/m) = (xx x 100) / (XXx x x)
xxx
x = xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx,
xx = xxxxxx xxxx xxxxxxx x xx xxxxxx.
7. Xxxxxxxxxxxxxx [3]
7.1 Xxx xxxxxx hydrochinonu 2,0 % xx xxxxxx absolutní hodnota xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,13 %.
7.2 Xxx xxxxxx hydrochinonmonomethyletheru 1,0 % xx xxxxxx absolutní hodnota xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx stejným xxxxxxx xxxxxxxxx 0,1 %.
7.3 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1,0 % by xxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx provedených současně xx stejným vzorkem xxxxxxxxx 0,11 %.
7.4 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1,0 % by xxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,11 %.
8. Xxxxxxxxxxxxxxxxxx [4]
8.1 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx 2 % by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx) xxxxxxxxx 0,37 %.
8.2 Xxx obsahu xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % xx neměla absolutní xxxxxxx rozdílu výsledků xxxx stanovení xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx laboratoře, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, různé přístroje xxxx xxxxx doba) xxxxxxxxx 0,21 %.
8.3 Xxx xxxxxx hydrochinonmonoethyletheru 1 % by xxxxxx absolutní hodnota xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx provedených xx xxxxxxx vzorkem xx xxxxxxx podmínek (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxx) xxxxxxxxx 0,19 %.
8.4 Při xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % xx xxxxxx xxxxxxxxx hodnota rozdílu xxxxxxxx xxxx stanovení xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxxx (různé xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxx) xxxxxxxxx 0,11 %.
9. Poznámky
9.1 Xxxxxxxx xx xxxxxxx obsah xxxxxxxxxxxx xxxxxxx vyšší xxx 2 % x xx xxxxxxxxx xxxxxx odhad xxxxxx, xxx xx xxx xxxxxxx xxxxxx (5.1) xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx by xxx xxxxxx obsahující 2 % xxxxxxxxxxxx, x xxxxxxxxx xx xxxx xxx xxxxxxxxx.
(X xxxxxxxxx xxxxxxxxx může xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx ležet hodnota xxxxxxxxxx mimo xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.)
9.2 Rušivé xxxxx
Xxxx popsaná metoda xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxx x xxxxxx isokratickém xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx dostatečnou xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx X18 x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx.
X xxxx xxxxxx xxxx snadno xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxxxx. X xxxxxxx případě xx stanovení xxxx xxx xxxxxxxxxx s xxxxx systémem xxxxxxx xxxx/xxxxxxxxxxx fáze. Xxxxxx xxxxxx lze xxxxx x literatuře x xxxxxxxx 2 a 3:
Xxxxxx: Xxxxxx XXX, 4,6 xx × 25 xx xxxx xxxxxxxxxxxx:
xxxxxxx: 36 °X
xxxxxx: 1,5 ml/min
mobilní fáze:
pro xxxxxxxxxxx: xxxxxxxx/xxxx 5/95 (X/X)
xxx hydrochinonmonomethylether: xxxxxxxx/xxxx 30/70 (V/V)
pro xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxx/xxxx 80/20 (X/X) [5].
Xxxxxx: Spherisorb X5XXX xxxx xxxxxxxxxxxx:
xxxxxxx xxxx: xxxx/xxxxxxxx 90/10 (V/V)
průtok: 1,5 xx/xxx
Xxxx podmínky xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx [6].
[1] XXX 5725.
[2] XXX 5725.
[3] XXX 5725.
[4] XXX 5725.
[5] Xxxxxx-Xxxxxxxxx, M., Xxxxx M.-O., Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xx x’xxxxxxxxxxxx xx de xxx éthers méthylique xx xxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx cosmétiques xxxx xxxxxxxx la xxxx. Xxx. J. Xxxxxx. Sci., 8-203-214 (1986).
[6] Xxxxx, X., Xxx I., Xxxxxxxxxxxxx xx hydroquinone xx xxxx xxxxxx creams, Xxxxxxx, (1986), 111, x. 129.