Šestá xxxxxxxx Xxxxxx 95/32/XX
xx xxx 7. xxxxxxxx 1995
x xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
(Xxxx x xxxxxxxx xxx XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x xxxxxxx na Xxxxxxx x xxxxxxxx Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx,
x xxxxxxx xx xxxxxxxx Rady 76/768/XXX xx xxx 27. xxxxxxxx 1976 x xxxxxxxxxx právních xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xx kosmetických xxxxxxxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx směrnicí Xxxxxx 94/32/XX [2], a xxxxxxx xx xx. 8 odst. 1 xxxxxxx xxxxxxxx,
xxxxxxxx k xxxx, xx xx xx směrnici 76/768/XXX xxxxxxx úřední xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx s xxxxx zajistit dodržení xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx, xxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xx xxxxxxxx; xx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx Xxxxxx 80/1335/EHS [3] xx znění xxxxxxxx 87/143/XXX [4], xxxxxxxx 82/434/XXX [5] xx znění směrnice 90/207/XXX [6] x xx xxxxxxxxxx 83/514/XXX [7], 85/490/XXX [8] x 93/73/XXX [9];
vzhledem x tomu, xx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx benzoové, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx sorbové, xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, hydrochinonmonomethyletheru, hydrochinonmonoethyletheru x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx prostředcích xxxx xxxxxx krokem;
vzhledem x xxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx jsou x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxx pro xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx 76/768/XXX xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
XXXXXXX XXXX XXXXXXXX:
Článek 1
Xxxxxxx xxxxx xxxxx všechny nezbytné xxxxx x zajištění xxxx, xxx xx xxx úředním xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx:
- důkaz x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4hydroxybenzoové, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- důkaz a xxxxxxxxx hydrochinonu, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx metodami xxxxxxxxx x xxxxxxx.
Xxxxxx 2
1. Xxxxxxx xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx právní a xxxxxxx předpisy xxxxxxxx xxx dosažení xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 30. xxxx 1996. Xxxxxxxxxx x nich xxxxxxx Xxxxxx.
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx musí xxxxxxxxx xxxxx xx xxxx směrnici xxxx xxxx xxxxxx odkaz xxx učiněn xxx xxxxxx xxxxxxx vyhlášení. Xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx státy.
2. Xxxxxxx xxxxx xxxxx Xxxxxx xxxxx vnitrostátních xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Článek 3
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx po xxxxxxxxx x Xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx společenství.
Xxxxxx 4
Tato xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.
X Xxxxxxx xxx 7. července 1995.
Xx Xxxxxx
Xxxx Xxxxxx
xxxxxx Xxxxxx
[1] Úř. věst. X 262, 27.9.1976, x. 169.
[2] Úř. věst. X 181, 15.7.1994, x. 31.
[3] Xx. věst. X 383, 31.12.1980, x. 27.
[4] Úř. věst. X 57, 27.2.1987, x. 56.
[5] Úř. věst. X 185, 30.6.1982, x. 1.
[6] Xx. xxxx. X 108, 28.4.1990, x. 92.
[7] Xx. xxxx. X 291, 24.10.1983, x. 9.
[8] Xx. xxxx. X 295, 7.11.1985, x. 30.
[9] Xx. xxxx. X 231, 14.9.1993, x. 34.
PŘÍLOHA
I. XXXXX X XXXXXXXXX XXXXXXXX BENZOOVÉ, XXXXXXXX 4HYDROXYBENZOOVÉ, XXXXXXXX XXXXXXX, KYSELINY XXXXXXXXXX X KYSELINY PROPIONOVÉ X KOSMETICKÝCH PROSTŘEDCÍCH
1. Xxxxxx x oblast xxxxxxx
Xxxxxx xx použitelná xxx důkaz a xxxxxxxxx xxxxxxxx benzoové, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx salicylové x kyseliny propionové x kosmetických prostředcích. Xxxxxxxxxx xxxx popsány xxxxxxx xxxxxx těchto xxxxxxxxxxxxx xxxxxx, stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxx kyseliny 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, kyseliny xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxx.
2. Definice
Množství xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x hmotnostních procentech xxxxxxx xxxxxxx.
X. XXXXX
1. Xxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx/xxxxxxxx xxxxxxxx konzervačních přísad xx xxxxxxx analyzuje xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx (TLC) a xxxxxxx chromatografií ("derivatizace xx xxxxx"). X xxxxxxxxxx na výsledcích xx xxxxx potvrdí xxxxxxxxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) nebo, v xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (GC).
2. Xxxxxxx činidla
2.1 Xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx čistoty p.a. Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx voda xxxx xxxx alespoň xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2.2 Xxxxxx
2.3 Xxxxxxxxxxxx
2.4 Xxxxxxxxxxx
2.5 Toluen
2.6 xXxxxx
2.7 Xxxxxxx, xxxxxx
2.8 Kyselina xxxxxxxxxxxxxx, 4 X
2.9 Xxxxxxxx xxxxxxxx, 4 X vodný roztok
2.10 Xxxxxxx xxxxxxxx, CaCl2·2H2O
2.11 Xxxxxxxxx xxxxxx, Xx2XX3
2.12 2Xxxx2‘xxxxxxxxxxx
2.13 Xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx
2.14 Xxxxxxxx salicylová
2.15 Kyselina xxxxxxxx
2.16 Kyselina xxxxxxx
2.17 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
2.18 Xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xx 0,1 % (x/X) xxxxxxx (100 mg/100 xx) xxxxx x pěti xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (2.13 xx 2.17) v xxxxxxxxxxxxx.
2.19 Derivatizační xxxxxxx
0,5 % xxxxxx 2brom2‘acetonaftonu (2.12) v acetonitrilu (2.4) (50 mg/10 xx). Xxxxx xxxxxx xx xxx být xxxxxxxxxxx každý xxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxx.
2.20 Xxxxxx xxxxxxxxxxxx
0,3 % (m/V) xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (2.11) xx vodě (300 xx/100 xx). Xxxxx xxxxxx xx xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2.21 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx
Xxxxxx (2.5)/xxxxxx (2.2) (20: 0,5, X/X)
2.22 Xxxxxx xxxxxxx (2.7)/xxxxxx (2.6) (1:2, X/X)
3. Xxxxxxxxx a xxxxxxx
Xxxxx laboratorní xxxxxxxx
3.1 Xxxxx lázeň nastavitelná xx xxxxxxx 60 °X
3.2 Vyvíjecí komora
3.3 Xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx 254 x 366 xx
3.4 Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, Silikagel 60, bez xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx, 20 × 20 cm, xxxxxxxx xxxxxx 0,25 xx x koncentrační zónou 2,5 × 20 xx (Merk 11845 xxxx xxxxxxxxxxxx)
3.5 Xxxxxxxxxxxxxx xx 10 μx
3.6 Xxxxxxxxxxxxxx xx 25 μx
3.7 Sušárna xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xx 105 °X
3.8 Erlenmeyerovy xxxxx xx 50 x 200 xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx
3.9 Xxxxxxxxx papír, xxxxxx 90 xx, Schleicher &xxx; Schüll, Weissband Xx. 5892, xxxx xxxxxxxxxxxx
3.10 Univerzální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, xX 1 – 11
3.11 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 5 xx
3.12 Rotační xxxxxxx xxxxxxx (Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx)
3.13 Topná xxxxx
4. Xxxxxx
4.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 50 ml xx xxxxxxxxxxx zátkou (3.8) se xxxxxx xxxxxxxxx 1 g xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxx 4 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (2.8) a 40 xx xxxxxxx (2.2). X xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx je xxxxxxxx mýdlo, by xxxx být xxxxxxx 20 kapek 4 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (2.8). Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) xx xxxxxxxxxxx, xxx xx xX xxxxxxxxx 2. Xxxxxxxxxxxxx baňka se xxxxxx x xx xxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx protřepává.
Jeli xxxxxxxx xxxxxxxx extrakci xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx, směs xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxx 60 °X, xxx se xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (3.9) xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx.
20 xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 200 ml, xxxxx xx 20 xx xxxx a xxxxxxxx se. pH xxxxx xx upraví xxxxxxxxx xx 10 xxxxxx 4 M xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (2.9) xx použití xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10).
Xxxxx xx 1 x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (2.10) a xxxxx xx protřepe. Xxxxxxxxx se přes xxxxxxxxx xxxxx (3.9) xx dělicí xxxxxxx xx 250 xx xxxxxxxxxx 75 ml xxxxxxxxxxxxx (2.3) a xxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx baňky na 250 xx. Xxxxxxxx xxxxxx xx zlikviduje. Xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) xx xX xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx 2 xxxxxxxxxx 4 X xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (2.8). Xxxxx xx 10 xx xxxxxxxxxxxxx (2.3), xxxxx xx xxxxxxxxx x silně xxxxxxxxxx jednu minutu; xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx se převede xx rotační xxxxxxx (3.12). Xxxxx xxxxxx xx zlikviduje.
Etherová xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx x xxxxxx xx znovu xxxxxxxx v 1 xx xxxxxxxxxxxxx (2.3). Xxxxxx xx převede xx xxxxxxxxxx lahvičky (3.11).
4.2 Chromatografie xx xxxxx xxxxxx
Xx startovní xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx pro xxxxxxxxxxxxxx xx tenké xxxxxx (3.4) se xx xxxx, jejichž počet xxxxxxxx xxxxx referenčních xxxxxxx a xxxxxxx xxxxxx, xxxxx mají xxx xxxxxxxxxxx, nanese xxxxxxxxxx (3.5) xx xxxxxxxx xxxxxxxxx vždy xx 3 μx xxxxxxxxxx lithného (2.20) x xxxxxx xx x proudu xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxx na xxxxxx xxxxx (3.13) xxxxxxxx xx 40 °X, xxx se xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx (3.5) xx xx xxxxxxxxx linii xxxxx nanese xxxx 10 μl xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (2.18) x roztoku xxxxxx (4.1) xxxxxx xx xxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx xxxxxx xx bodů, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx/xxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx přibližně 15 μx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (2.19) (xxxxxx 2brom2‘acetonaftonu).
Chromatografická xxxxx se xxxxxxx x sušárně (3.7) 45 xxxxx xxx 80 °C. Xx xxxxxxxxxxx xx deska xxxxxx v xxxxxx (3.2), která xxxx (xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx) 15 minut xxxxxx vyvíjecím xxxxxxxxxxxxx 2.21 (xxxxxx/xxxxxx), xxxxx xxxx rozpouštědla xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 xx (xxxx vyvíjení xx xxxxxxxxx 80 xxxxx).
Xxxxx xx xxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx vyhodnotí xxx XX xxxxxxx (3.3). Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx xxx chromatografická xxxxx xxxxxxxx do xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxx (2.22).
5. Xxxxx
Xxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx Xx.
Xxxxxxx Xx x xxxxxxx xxxxxx pod XX xxxxxxx xx porovnají x xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxx xx předběžné xxxxxx x xxxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx vysokoúčinná xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx popsaná x xxxxxx X, xxxx xxxxxxx-xx se, xx je xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxx xx plynová chromatografie xxxxxxx x oddílu X. Získané xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x retenčními časy xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx XXX x XXXX xxxx XX se zkombinují x při xxxxxxxx xxxxxx konzervačních xxxxxx xx vychází z xxxxxxxxx xxxxxxxx.
X. STANOVENÍ XXXXXXXX XXXXXXXX, KYSELINY 4XXXXXXXXXXXXXXX, XXXXXXXX XXXXXXX X XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxxxxxx metody
Vzorek xx xx xxxxxxxxx extrahuje xxxxx xxxxxxxx a xxxx. Po filtraci xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX).
2. Xxxxxxx xxxxxxx
2.1 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx musí být xxxxxxx p.a. x xxxx být vhodná xxx XXXX. Musí xxx použita xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxx ekvivalentní xxxxxxx.
2.2 Xxxxxxx, xxxxxxxxx
2.3 Kyselina 4xxxxxxxxxxxxxxx
2.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
2.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx
2.6 Xxxxxxxx xxxxxxx
2.7 Xxxxx sodný, (XX3XXXXx·3X2X)
2.8 Xxxxxxxx octová, x420 = 1,05 x/xx
2.9 Xxxxxxxxxxx
2.10 Kyselina xxxxxx, 2 M
2.11 Xxxxxxxx xxxxxxxx, 0,2 X xxxxx xxxxxx
2.12 Xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx
2.13 Xxxx xxxxxxx/xxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxx (2.2) xx xxxxxx x xxxxxx dílem xxxx (2:1)
2.14 Roztok xxxxxxxxx standardu
Připraví xx xxxxxx xxxxxxxxxx 1 x xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx (2.12) x 500 xx směsi xxxxxxx/xxxx (2.13).
2.15 Xxxxxxx fáze xxx XXXX
2.15.1 Xxxxxxxxx xxxx: do 1 xxxxx xxxx xx xxxxx 6,35 x xxxxxx xxxxxxx (2.7) x 20,0 xx xxxxxxxx xxxxxx (2.8) x xxxxxx xx.
2.15.2 Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx smícháním xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (2.15.1) x xxxxxxx xxxx acetonitrilu (2.9).
2.16 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx 50 xx xx xxxxxx naváží xxx 0,05 x xxxxxxxx 4hydroxybenzoové (2.3), 0,2 x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (2.4), 0,2 x xxxxxxxx xxxxxxxx (2.5) a 0,05 x xxxxxxxx sorbové (2.6) x xxxxx xx doplní směsí xxxxxxx/xxxx (2.13). Xxxxxx xx xxxxxxxx v xxxxxxxx. Roztok je xxxxxxxx xxxxx xxxxx.
2.17 Xxxxxxxxxx roztoky xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxx xx 20 xx xx xxxxxx 8,00, 4,00, 2,00, 1,00 x 0,50 xx xxxxxxxxx roztoku (2.16). Xx každé baňky xx xxxxx 10,00 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (2.14) a 0,5 xx 2 X kyseliny xxxxxx (2.10). Xxxxx xx xxxxxx směsí ethanol/voda (2.13). Xxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x dále:
3.1 Xxxxx xxxxx, xxxxxxxxx na 60 °C
3.2 Chromatograf xxx xxxxxxxxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx s XX xxxxxxxxxx x nastavitelnou xxxxxxx xxxxxx x 10μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3.3 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxxx 12,5 xx 25 cm, vnitřní xxxxxx 4,6 xx, xxxxxx Nucleosilem 5X18 xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
3.4 Xxxxxxxxx papír, xxxxxx: 90 mm, Xxxxxxxxxx xxx Schüll, Xxxxxxxxx Xx 5892 xxxx xxxxxxxxxxxx.
3.5 Erlenmeyerovy baňky xx 50 ml
3.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx lahvičky xx 5 xx
3.7 Xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx 2–4 xx, xxxx xxxxxxxxxxxx
4. Xxxxxx
4.1 Xxxxxxxx vzorku
4.1.1 Příprava xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx standardu
Do Erlenmeyerovy xxxxx na 50 xx (3.5) se xxxxxx 1 x xxxxxx. Xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxxxx 10 ml 2 X xxxxxxxx xxxxxx (2.10) a 40 xx xxxxx xxxxxxx/xxxx (2.13). Xxxxx se xxxxxxxxx 1 g xxxxxxx xxxxxxx (3.7), xxxxx xx xxxxxx x xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx extrakce xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xx Erlenmeyerova xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx minut xx xxxxx xxxxx (3.1) xxx 60 °C.
Erlenmeyerova xxxxx xx xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx vody x xxxxxxx xx xx xxxxxx uloží xxx 5 °X.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx přes filtrační xxxxx (3.4). Xxx 2 xx extraktu xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.6). Xxxxxxx se xxxxxxxx xxx 5 °X x xxxxxxxxx pomocí XXXX se provede xx 24 xxxxx.
4.1.2 Xxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx Xxxxxxxxxxxxx baňky na 50 xx (3.5) xx s xxxxxxxxx xx tři xxxxxxxxx xxxxx naváží 1 ± 0,1 x xxxxxx (x gramů). Xxxxxxx xx xxxxx 1,00 xx 2 X xxxxxxxx xxxxxx (2.10) x 30,0 xx xxxxx xxxxxxx/xxxx (2.13). Přidá se xxxxxxxxx 1 x xxxxxxx xxxxxxx (3.7) x 10 ml xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx(2.14). Xxxxxxxxxxxxx baňka se xxxxxx a xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, dokud xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx se Xxxxxxxxxxxxx xxxxx zahřívá xxxxxx xxx minut xx vodní lázni (3.1) xxx 60 °X.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx v xxxxxx xxxxxxx xxxx x extrakt se xxxxx na xxxxxx xxx 5 °X.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx přes xxxxxxxxx xxxxx (3.4). Xxx 2 xx xxxxxxxx xx převedou xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.6). Extrakt xx xxxxxxxx při 5 °X x xxxxxxxxx xxxxxx HPLC xx xxxxxxx xx 24 xxxxx.
4.2 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx: xxxxxxxxxxx/xxxxxxxxx xxxx (2.15).
Xxxxxx xxxxxxx xxxx kolonou se xxxxxxx na 2,0 ± 0,5 ml/min. Xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx na 240 nm.
4.2.1 Kalibrace
Do xxxxxxxxxxxx chromatografu (3.2) xx xxxxxxxxx po 10 μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (2.17). Pro xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxxxx chromatogramů xxxxxxx xxxxx výšky píku xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx píku xxxxxxxxx xxxxxxxxx získaného x chromatogramů. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx graf xxxxxxxxxx xxxxxx výšek xxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xx, xx při xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx odezva.
4.2.2 Xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.2) xx nastříkne 10 μx xxxxxxxx vzorku (4.1.1) x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx 10 μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (2.17) x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. Xxxx-xx x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.1.1) xxxxx pík x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx časem xxxx xxx kyseliny 2xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx), xxxxxxxxx se xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 10 μx extraktu vzorku x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.1.2) x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.
Xx-xx x chromatogramu xxxxxxxx xxxxxx (4.1.1) xxxxxx xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx, xxx xx xxx xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. (Xxxx-xx jedna x xxxxxxxxxxxxx konzervačních přísad x xxxxxxxxxxxxx přítomna, xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx jako xxxxxxx standard.)
Je xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x roztok xxxxxx splňují xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx xxxx xxxxxxx odděleného xxxx xx alespoň 0,90. (Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx uvedena na xxxxxxx 1)
Obrázek 1: Xxxxxxxx xxxx
Xxxx-xx požadované xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx by xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx, xxx xxx požadavek xxxxxx.
- Xxxxxx xxxxxxxxx Xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx by xx xxx pohybovat xx 0,9 xx 1,5. (Xxxxxxxx faktoru xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx 2.) Při xxxxxxxxxxx chromatogramu xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxxxxx posuvu xxxxxx xxxxxxx 2 xx/xxx.
Xxxxxxx 2: Faktor xxxxxxxxx xxxx
- Základna xxxx xxx xxxxxxxx.
5. Xxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxx xxxxxx xx použijí xxxxxx výšek xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx (vnitřní xxxxxxxx) a xxxx xxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, kyseliny xxxxxxx xxxx xxxxxxxx salicylové xx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (xx) xx xxxxxxx pomocí xxxxxx
xx % (m/m) = (100x 20 x x) / (106 x x) = b / (500 x a)
kde
a = xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.1.2) (x),
x = koncentrace konzervační xxxxxxx v xxxxxxxx xxxxxx (4.1.2) (μx/xx) xxxxxxxx x kalibračního xxxxx.
6. Xxxxxxxxxxxxxx [1]
Xxx xxxxxx xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx 0,40 % xx xxxxxx absolutní hodnota xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,035 %.
Při xxxxxx xxxxxxxx benzoové 0,50 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,050 %.
Při xxxxxx xxxxxxxx salicylové 0,50 % by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx současně xx stejným vzorkem xxxxxxxxx 0,045 %.
Xxx xxxxxx xxxxxxxx sorbové 0,60 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,035 %.
7. Xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx, xx množství xxxxxxxx xxxxxx přidané do xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xx rozhodující x množství xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx tedy xxxx xxx x xxxxxxxxxxx rozmezí.
7.2 Je-li xx xxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
X. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXXXX
1. Xxxxxx x xxxxxx použití
Tato xxxxxx xx xxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x kosmetických prostředcích xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 2 % (x/x).
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx stanovená touto xxxxxxx xx vyjádří x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (% x/x) výrobku.
3. Xxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx propionové x xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
4. Reakční činidla
Všechna xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx čistoty p.a; xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx voda xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.1 Xxxxxxx, 96 % (X/X)
4.2 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
4.3 Xxxxxxxx 2methylpropionová
4.4 Xxxxxxxx trihydrogenfosforečná, 10 % (x/X)
4.5 Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xx odměrné xxxxx xx 50 xx se xxxxxx xxxxxx 1 x (x xxxxx) kyseliny xxxxxxxxxx x xxxxxx xx xx objem xxxxxxxxx (4.1).
4.6 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx 50 xx xx xxxxxx xxxxxx 1 x (x gramů) xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx x doplní xx xx xxxxx xxxxxxxxx (4.1).
5. Přístroje x xxxxxxx
5.1 Xxxxx xxxxxxxxxxx vybavení x xxxx:
5.2 Xxxxxxx chromatograf x plamenovým ionizačním xxxxxxxxxx
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxx (20 × 150 xx) xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx
5.4 Xxxxx lázeň xxxxxxxxx xx 60 °X
5.5 Skleněná xxxxxxxx xxxxxxxxx na 10 xx x xxxxxxxxx xxxxxxxxx (průměr xxxx 0,45 μx)
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx bez xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx skleněné zkumavky (5.3) xx xxxxxx xxxxxxxxx 1 g xxxxxx. Přidá xx 0,5 ml xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (4.4) a 9,5 ml ethanolu (4.1).
Xxxxxxxx xx uzavře x silně xxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxx xx xxx xxxxx xx xxxxx lázně xxxxxxx xx 60 °X (5.4), xxx xx zcela xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xx rychle xxxxxxx xxx tekoucí xxxxx. Xxxx xxxxxxx se xxxxxxxxx přes xxxxxxxxxx xxxxx (5.5). Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx provede xxxxxx xxx.
6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxx x vnitřním xxxxxxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.3) xx s xxxxxxxxx xx 3 xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx 1 ± 0,1 x xxxxxx. Xxxxx xx 0,5 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (4.4), 0,50 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.6)a 9 xx xxxxxxxx (4.1).
Xxxxxxxx se xxxxxx x xxxxx xxxxxxxx. Xxxx xx xxxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxx xx xxx minut xx vodní lázně xxxxxxx xx 60 °X (5.4), xxx xx zcela rozpustila xxxxxx fáze. Xxxxxxxx xx xxxxxx zchladí xxx xxxxxxx xxxxx. Xxxx roztoku xx xxxxxxxxx přes xxxxxxxxxx xxxxx (5.5). Chromatografie xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx.
6.2 Xxxxxxxx xxx plynovou xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx následující xxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx
Xxx: korozivzdorná ocel
Délka: 2 x
Xxxxxx: ⅛"
Náplň: 10 % XX™ 1000 (nebo ekvivalentní) + 1 % X3XX4 xx Chromosorbu XXX 100–120 xxxx
Xxxxxxx
Xxxxxxx: 200 °C
Kolona: 120 °X
Xxxxxxxx: 200 °X
Xxxxx xxxx: xxxxx
Xxxxxxxxx rychlost: 25 ml/min
6.3 Chromatografie
6.3.1 Xxxxxxxxx
Xx xxxx odměrných xxxxx xx 20 xx xx xxxxxxxxxx 0,25, 0,50, 1,00, 2,00 x 4,00 xx roztoku kyseliny xxxxxxxxxx (4.5). Do xxxxx odměrné xxxxx xx xxxxxxxxxx 1,00 xx xxxxxxx vnitřního xxxxxxxxx (4.6); xxxxxx xx xx objem xxxxxxxxx (4.1) a xxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx kyselinu 2xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x xx/xx (xx xxxxxxx 1 xx/xx, xx-xx x = 1,000) a xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx x/4, p/2, x, 2x, 4p xx/xx (xx xxxxxxx 0,25, 0,50, 1,00, 2,00, 4,00 mg/ml, je-li x = 1,000).
Xxxxxxxxx xx 1 μx xxxxxx roztoků a xxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxx poměru xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x kyseliny 2xxxxxxxxxxxxxxxx xx osu x x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx píků xx xxx x.
Xxxxxxxxxx se 3 xxxxx x xxxxxxx roztoku x xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxx píku.
6.3.2 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx 1 μx filtrátu xxxxxx 6.1.1. Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x chromatogramem xxxxxxx ze xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (6.3.1). Má-li xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxx jako xxx kyseliny 2xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx-xx pozorován xxxxx xxxxxx vliv, xxxxxxxxx se 1 μx filtrátu xxxxxx 6.1.2 x změří xx plochy xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx 3 dávky x xxxxxxx xxxxxxx x vypočte xx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx.
7. Xxxxxxx
7.1 Z xxxxxxxxxx křivky xxxxxxxxxx xxxxx bodu 6.3.1 xx xxxxxx poměr xxxxxxxxx (X), xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx x xxxx 6.3.2.
7.2 Z xxxxx xxxxxxxxx poměru xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx kyseliny propionové xx xxxxxx (x) x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx vzorce
x % (x/x) = X (0,5 x 100 x x) / (50 x x) =X(x / x)
xxx
X = xxxxx xxxxxxxxx x xxxx 7.1,
x = hmotnost xxxxxxxxx xxxxxxxxx x gramech xxxxx xxxx 4.6,
x = xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx 6.1.2,
Výsledky xx xxxxxxxxxx xx jedno xxxxxxxxx místo.
8. Opakovatelnost [2]
Xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 2 % (x/x) xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejným xxxxxxx xxxxxxxxx 0,12 %.
II. XXXXX X STANOVENÍ XXXXXXXXXXXX, XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX, XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX V XXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX
X. XXXXX
1. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
X metodě je xxxxxxx xxxxxxx a xxxxx hydrochinonu, hydrochinonmonomethyletheru, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx a hydrochinonmonobenzyletheru (xxxxxxxxxxx) v kosmetických xxxxxxxxxxxx xxx zesvětlení xxxx.
2. Podstata metody
Důkaz xxxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxx xx provede xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx (XXX).
3. Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxx x.x.
3.1 Xxxxxxx, 96 % (X/X)
3.2 Chloroform
3.3 Xxxxxxxxxxxx
3.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx, 66: 33 (V/V)
3.5 Xxxxxxx, 25 % (x/x) (x420 = 0,91 x/xx)
3.6 Xxxxxxxx xxxxxxxxx
3.7 Xxxxxxxxxxx
3.8 Hydrochinonmonomethylether
3.9 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.10 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx)
3.11 Xxxxxxxxxx roztoky
Následující xxxxxxxxxx xxxxxxx se připravují xxxxxxx a xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx.
3.11.1 Xx dělené xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxx 0,05 x hydrochinonu (3.7). Xxxxx se 0,250 x xxxxxxxx xxxxxxxxx (3.6) a 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx se xxxxxxx (3.5), xxxxx xxxx xxxxxxxx pH 10, x xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx 10 ml (3.1).
3.11.2 Xx xxxxxx xxxxxxxx xx 10 xx xx xxxxxx 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.8). Xxxxx xx 0,250 x xxxxxxxx xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx xx xxxxxxx (3.5), xxxxx xxxx xxxxxxxx xX 10, x xxxxxx xx xxxxxxxxx xx objem 10 ml (3.1).
3.11.3 Xx xxxxxx zkumavky xx 10 ml xx xxxxxx 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.9). Xxxxx xx 0,250 x xxxxxxxx xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx xx amoniak (3.5), xxxxx xxxx xxxxxxxx xX 10, x xxxxxx xx xxxxxxxxx xx objem 10 xx (3.1).
3.11.4 Xx dělené zkumavky xx 10 ml xx xxxxxx 0,05 x hydrochinonmonobenzyletheru (3.10). Xxxxx xx 0,250 x xxxxxxxx xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx se xxxxxxx (3.5), dokud xxxx xxxxxxxx pH 10, x doplní xx xxxxxxxxx xx xxxxx 10 ml (3.1).
3.12 Xxxxxxxx xxxxxxxx
3.13 Kyselina xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.14 Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
3.15 Chlorid železitý xxxxxxxxxx
3.16 Xxxxxxxx xxxxxxx
3.16.1 Xx 5 % xxxxxxx roztoku (x/X) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.12) xx xxxxxxx xxxxxxx (3.5), xxxxx se xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx:
Xxx xxxxxx xxxxx se x xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx a měl xx xxx po xxxxxxx zlikvidován.
3.16.2 10 % (x/X) xxxxxx xxxxxxxx dodekamolybdofosforečné (3.13) x xxxxxxxx (3.1).
3.16.3 Xxxxxxxx se 1 % (x/X) vodný xxxxxx kyanoželezitanu xxxxxxxxxx (3.14) a 2 % (m/V) xxxxx xxxxxxx chloridu xxxxxxxxxx (3.15). Xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx a xxxxxxx
Xxxxx laboratorní xxxxxxxx, x xxxx:
4.1 Xxxxx xxxxxxxx xxx chromatografii xx xxxxx vrstvě
4.2 Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx: silikagel XXX/XX254 (254 je xxxxxx xxxxxxx XXX/XX); 20 × 20 cm (Xxxxxxx, Xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx). Tloušťka xxxxxx 0,25 mm.
4.3 Ultrazvuková xxxxx
4.4 Odstředivka
4.5 UV xxxxx, 254 xx
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx xxxxxxxx na 10 ml se xxxxxx 3 x xxxxxx. Xxxxx xx 0,250 x kyseliny xxxxxxxxx (3.6) x 5 ml xxxxxxxx (3.1). pH xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx (3.5) xx 10. Xxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx (3.1) xx 10 xx. Xxxxxxxx xx uzavře xxxxxx x xxxxxxxxxxxx se 10 xxxxx v xxxxxxxxxxxx xxxxx. Zfiltruje xx přes xxxxxxxxx xxxxx nebo se xxxxxxxx xxx 3000 xx./xxx.
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx (XXX)
5.2.1 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx rozpouštědlem (3.4).
5.2.2 Na xxxxx xx xxxxxx xx 2 μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.11) x 2 μx xxxxxxx xxxxxx (5.1). Xxxxxx xx xx xxx xxx teplotě xxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx vzdálenosti 15 xx xx startu.
5.2.3 Xxxxx xx xxxxx, xxxxx xx vyschnout xxx pokojové teplotě.
5.3 Xxxxxxx
5.3.1 Xxxxx xx xxxxxxxx xxx XX xxxxxx xxx 254 xx x xxxxxx xxxxx se označí.
5.3.2 Xxxxx xx postříká
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.16.1), xxxx
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.16.2); xxxxxxx xx xx xxx 120 °X, xxxx
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx draselného a xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.16.3).
6. Xxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxx Xx každé xxxxxx.
Xxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx skvrnami xxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx jde x jejich xxxxxxx Xx, xxxxx xxxxx x UV xxxxxx x xxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xx vysokoúčinná xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x následujícím xxxxxx (X) a xxxxxxxxx xx retenční xxxx xxxxxxx xxx xxx (xxxx) vzorku s xxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxx z XXX a XXXX xx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxx přítomnost xxxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxx.
7. Xxxxxxxx
Xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx hodnoty Xx:
xxxxxxxxxxx: 0,32
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: 0,53
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: 0,55
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: 0,58
X. STANOVENÍ
1. Xxxxxx x oblast xxxxxxx
X xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx stanovení xxxxxxxxxxxx, hydrochinonmonomethyletheru, hydrochinonmonoethyletheru x hydrochinonmonobenzyletheru x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx.
2. Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx je xxxxxxxxxx xxxxx voda/methanol xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx rozpustí xxxxxx xxxxxxxx. Stanovení xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xx provede xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx x XX xxxxxxx.
3. Xxxxxxx xxxxxxx
3.1 Xxxxxxx reakční xxxxxxx xxxx xxx čistoty x.x. Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3.2 Xxxxxxxx
3.3 Xxxxxxxxxxx
3.4 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.5 Hydrochinonmonoethylether
3.6 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx)
3.7 Xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxx XXXX
3.8 Xxxx xxxx/xxxxxxxx 1:1 (X/X). Smíchá xx xxxxx díl vody x xxxxx xxx xxxxxxxxx (3.2)
3.9 Xxxxxxx xxxx: směs tetrahydrofuran/voda 45:55 (X/X). Xxxxxx xx 45 xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (3.7) a 55 xxxx vody.
3.10 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xx odměrné xxxxx xx 50 xx xx xxxxxx 0,06 x hydrochinonu (3.3), 0,08 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.4), 0,10 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.5) x 0,12 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.6). Xxxxxxxx xx x doplní xx na xxxxx xxxxxxxxxx (3.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx xx připraví xxxxxxxx 10 xx xxxxxx roztoku xx 50 xx směsí xxxx/xxxxxxxx (3.8). Tyto xxxxxxx se připravují xxxxxxx.
4. Přístroje x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx vybavení x xxxx:
4.1 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx 60 °X
4.2 Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx s XX detektorem x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx délkou x 10μl nastřikovací xxxxxxx
4.3 Xxxxxxxxxx xxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx z xxxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx 250 xx, xxxxxxx průměr 4,6 mm, xxxxxx Xxxxxx fenylem (chemicky xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xx Xxxxxxx XXX, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx), xxxxxxxx xxxxxx 6 μm, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxxx xx ochranná xxxxxx, x xxxxxxxx fenylové xxxxxx nebo xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.4 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx 90 xx, Xxxxxxxxxx xxx Xxxüxx, Xxxxxxxxx Xx 5892 xxxx xxxxxxxxxxxx
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx 50 xx xx s přesností xx tři xxxxxxxxx xxxxx naváží 1 ± 0,1 x (x gramů) vzorku. Xxxxxx xx xxxxxxxx xx 25 ml xxxxx xxxx/xxxxxxxx (3.8). Xxxxx xx xxxxxx x silně protřepe, xxxxx se nevytvoří xxxxxxxxx xxxxxxxx. Protřepává xx alespoň jednu xxxxxx. Baňka xx xxxxxx xx vodní xxxxx (4.1) nastavenou xx 60 °X, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx se xxxxxxx x xxxxxx xx xx xxxxx xxxxx voda/methanol (3.8). Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (4.4). Xxxxx HPLC xx xxxxxxx do 24 hodin xx xxxxxxxx extraktu.
5.2 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
5.2.1 Průtoková xxxxxxxx xxxxxxx xxxx (3.9) xx upraví xx 1,0 ml/min x vlnová xxxxx xxxxxxxxx xx nastaví xx 295 xx.
5.2.2 Xxxxxxxxx se 10 μx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.1 x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Změří xx xxxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.2.3. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx vzorek x xxxxxxxxxx roztoky. Xxx xxxxxxx koncentrace xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx použijí xxxxxx xxxx x xxxxxxx xxxxxx (RF) xxxxxxxxx xxxxx bodu 5.2.3.
5.2.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx 10 μl xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) a xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx píku xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx faktor xxxxxx XXx (i je xxxxxx infexem XX):
XXx = xx /xx
xxx
xx = plocha xxxx xxx hydrochinon, hydrochinonmonomethylether, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, x
xx = xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, hydrochinonmonoethyletheru xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) (x/50 ml).
Je xxxxx xxxxxx, xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxx standardní xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx píků xxxxxxx odděleného páru xx alespoň 0,90. (Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx 1.).
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxx xxxx
Xxxx-xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, měla xx být xxx xxxxxxx účinnější xxxxxx xxxx by mělo xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
- Xxxxxx xxxxxxxxx Xx xxxxx získaných xxxx xx xx xxx xxxxxxxxx xx 0,9 xx 1,5. (Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx uvedena xx xxxxxxx 2.) Xxx xxxxxxxxxxx chromatogramu za xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx doporučená xxxxxxxx xxxxxx papíru xxxxxxx 2 xx/xxx.
Xxxxxxx 2:Xxxxxx asymetrie xxxx
- Xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxx.
6. Xxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx analytu (xxxxxxxxxxx xxxxxxx) xx xxxxxx xx xxxxxxx plochy xxxx analytů. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx vzorku xxxxxxxxx x hmotnostních xxxxxxxxxx (xi) se xxxxxxx xxxxxx vzorce
xi % (m/m) = (xx x 100) / (XXx x x)
xxx
x = hmotnost xxxxxx v xxxxxxx,
xx = plocha píku xxxxxxx x ve xxxxxx.
7. Xxxxxxxxxxxxxx [3]
7.1 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx 2,0 % xx xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejným xxxxxxx xxxxxxxxx 0,13 %.
7.2 Xxx xxxxxx hydrochinonmonomethyletheru 1,0 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx provedených současně xx stejným xxxxxxx xxxxxxxxx 0,1 %.
7.3 Xxx obsahu hydrochinonmonoethyletheru 1,0 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,11 %.
7.4 Xxx obsahu hydrochinonmonobenzyletheru 1,0 % xx xxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,11 %.
8. Xxxxxxxxxxxxxxxxxx [4]
8.1 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx 2 % by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxx xx různých xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, různé xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx) xxxxxxxxx 0,37 %.
8.2 Xxx obsahu xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % xx neměla absolutní xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx stanovení provedených xx stejným xxxxxxx xx různých podmínek (xxxxx laboratoře, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx) xxxxxxxxx 0,21 %.
8.3 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % xx xxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx podmínek (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx experimentátoři, xxxxx přístroje xxxx xxxxx xxxx) překročit 0,19 %.
8.4 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % xx neměla xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx se stejným xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx laboratoře, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxx různá xxxx) překročit 0,11 %.
9. Xxxxxxxx
9.1 Xxxxxxxx xx xxxxxxx obsah xxxxxxxxxxxx výrazně vyšší xxx 2 % x je xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx, xxx xx být xxxxxxx vzorku (5.1) xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxx vzorek xxxxxxxxxx 2 % hydrochinonu, x stanovení by xxxx xxx xxxxxxxxx.
(X xxxxxxxxx přístrojů xxxx xxx xxxxxxxx koncentracích xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.)
9.2 Rušivé xxxxx
Xxxx popsaná metoda xxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxx x jeho etherů x jednom isokratickém xxxxxxx. Použití xxxxxxxx xxxxxx zajistí xxxxxxxxxxx xxxxxxx hydrochinonu, kterou xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx kolony X18 x xxxxxxxx mobilní xxxx.
X této metody xxxx xxxxxx dochází x rušivému vlivu xxxx řady xxxxxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxxx systémem mobilní xxxx/xxxxxxxxxxx xxxx. Vhodné xxxxxx xxx xxxxx x literatuře v xxxxxxxx 2 x 3:
Xxxxxx: Xxxxxx XXX, 4,6 mm × 25 xx xxxx xxxxxxxxxxxx:
xxxxxxx: 36 °C
průtok: 1,5 ml/min
mobilní xxxx:
xxx xxxxxxxxxxx: methanol/voda 5/95 (X/X)
xxx hydrochinonmonomethylether: xxxxxxxx/xxxx 30/70 (X/X)
xxx hydrochinonmonobenzylether: xxxxxxxx/xxxx 80/20 (V/V) [5].
Xxxxxx: Xxxxxxxxxx X5XXX xxxx xxxxxxxxxxxx:
xxxxxxx xxxx: xxxx/xxxxxxxx 90/10 (X/X)
xxxxxx: 1,5 ml/min
Tyto xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx [6].
[1] ISO 5725.
[2] ISO 5725.
[3] XXX 5725.
[4] XXX 5725.
[5] Xxxxxx-Xxxxxxxxx, X., Xxxxx M.-O., Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xx x’xxxxxxxxxxxx xx xx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx benzylique xxxx xxx xxxxxxxx cosmétiques xxxx xxxxxxxx xx xxxx. Xxx. X. Xxxxxx. Sci., 8-203-214 (1986).
[6] Xxxxx, X., Xxx I., Xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx, Xxxxxxx, (1986), 111, x. 129.