Xxxxx xxxxxxxx Xxxxxx 95/32/XX
xx dne 7. xxxxxxxx 1995
x metodách xxxxxxx xxxxxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxx kosmetických xxxxxxxxxx
(Xxxx x xxxxxxxx xxx XXX)
XXXXXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX,
x ohledem na Xxxxxxx o xxxxxxxx Xxxxxxxxxx společenství,
s xxxxxxx xx xxxxxxxx Rady 76/768/XXX ze xxx 27. xxxxxxxx 1976 x xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx členských xxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx [1], naposledy xxxxxxxxxx směrnicí Komise 94/32/XX [2], x xxxxxxx na xx. 8 odst. 1 xxxxxxx směrnice,
vzhledem x xxxx, xx xx xx směrnici 76/768/EHS xxxxxxx xxxxxx zkoušení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxx zajistit dodržení xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx předpisy Xxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxx složení xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx;
xxxxxxxx x tomu, xx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxx xxx stanoveny xx xxxxxxxx; že xxxxxxx xxxxxx xxx xxxx xxxxxxx ve xxxxxxxx Komise 80/1335/XXX [3] xx znění xxxxxxxx 87/143/EHS [4], xxxxxxxx 82/434/XXX [5] xx xxxxx xxxxxxxx 90/207/XXX [6] a xx směrnicích 83/514/XXX [7], 85/490/XXX [8] x 93/73/XXX [9];
xxxxxxxx x tomu, že xxxxx a stanovení xxxxxxxx benzoové, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, hydrochinonmonoethyletheru x hydrochinonmonobenzyletheru x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxx;
xxxxxxxx x xxxx, xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx Xxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx 76/768/XXX xxxxxxxxxxx xxxxxxx,
XXXXXXX TUTO XXXXXXXX:
Xxxxxx 1
Členské xxxxx xxxxx xxxxxxx nezbytné xxxxx x xxxxxxxxx xxxx, xxx xx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx:
- xxxxx x stanovení xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxx xxxxxxxxxx,
- xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, hydrochinonmonomethyletheru, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx.
Článek 2
1. Členské xxxxx uvedou x xxxxxxxx právní a xxxxxxx předpisy xxxxxxxx xxx xxxxxxxx souladu x xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx 30. xxxx 1996. Neprodleně x xxxx xxxxxxx Xxxxxx.
Xxxx opatření xxxxxxx xxxxxxxxx státy musí xxxxxxxxx odkaz na xxxx směrnici nebo xxxx takový odkaz xxx učiněn xxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx odkazu si xxxxxxx xxxxxxx státy.
2. Xxxxxxx xxxxx xxxxx Xxxxxx znění xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx předpisů, které xxxxxxx x oblasti xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx.
Xxxxxx 3
Xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx v Xxxxxxx xxxxxxxx Xxxxxxxxxx společenství.
Xxxxxx 4
Tato xxxxxxxx xx určena xxxxxxxx xxxxxx.
X Bruselu xxx 7. xxxxxxxx 1995.
Xx Xxxxxx
Xxxx Xxxxxx
xxxxxx Xxxxxx
[1] Úř. věst. X 262, 27.9.1976, x. 169.
[2] Xx. xxxx. X 181, 15.7.1994, x. 31.
[3] Xx. xxxx. X 383, 31.12.1980, x. 27.
[4] Xx. xxxx. X 57, 27.2.1987, x. 56.
[5] Úř. xxxx. X 185, 30.6.1982, x. 1.
[6] Xx. věst. X 108, 28.4.1990, x. 92.
[7] Xx. věst. X 291, 24.10.1983, x. 9.
[8] Úř. xxxx. X 295, 7.11.1985, x. 30.
[9] Xx. xxxx. X 231, 14.9.1993, x. 34.
PŘÍLOHA
I. XXXXX X XXXXXXXXX KYSELINY BENZOOVÉ, XXXXXXXX 4HYDROXYBENZOOVÉ, XXXXXXXX XXXXXXX, KYSELINY SALICYLOVÉ X XXXXXXXX XXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX
1. Xxxxxx a xxxxxx xxxxxxx
Xxxxxx je použitelná xxx xxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx x kyseliny propionové x kosmetických prostředcích. Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad, stanovení xxxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxx 4hydroxybenzoové, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx.
2. Xxxxxxxx
Xxxxxxxx kyseliny xxxxxxxx, kyseliny 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxx stanovená xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x hmotnostních xxxxxxxxxx xxxxxxx kyselin.
A. DŮKAZ
1. Xxxxxxxx metody
Po kyselé/zásadité xxxxxxxx konzervačních xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx (TLC) x xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx ("xxxxxxxxxxxx xx xxxxx"). X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xxxx, v xxxxxxx xxxxxxxx propionové, xxxxxxxx chromatografií (GC).
2. Xxxxxxx činidla
2.1 Xxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x.x. Xxxx být použita xxxxxxxxxxx xxxx nebo xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2.2 Xxxxxx
2.3 Xxxxxxxxxxxx
2.4 Xxxxxxxxxxx
2.5 Toluen
2.6 xXxxxx
2.7 Xxxxxxx, xxxxxx
2.8 Kyselina xxxxxxxxxxxxxx, 4 X
2.9 Xxxxxxxx draselný, 4 X xxxxx roztok
2.10 Xxxxxxx vápenatý, XxXx2·2X2X
2.11 Xxxxxxxxx xxxxxx, Xx2XX3
2.12 2Xxxx2‘xxxxxxxxxxx
2.13 Kyselina 4hydroxybenzoová
2.14 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
2.15 Xxxxxxxx xxxxxxxx
2.16 Kyselina sorbová
2.17 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx
2.18 Xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxx xx 0,1 % (m/V) xxxxxxx (100 mg/100 xx) xxxxx x xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx (2.13 xx 2.17) x xxxxxxxxxxxxx.
2.19 Derivatizační xxxxxxx
0,5 % xxxxxx 2xxxx2‘xxxxxxxxxxxx (2.12) v acetonitrilu (2.4) (50 xx/10 xx). Xxxxx roztok xx xxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx x xxxxxxxxx x xxxxxxxx.
2.20 Xxxxxx katalyzátoru
0,3 % (x/X) xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (2.11) xx vodě (300 xx/100 ml). Xxxxx xxxxxx by měl xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
2.21 Xxxxxxxx rozpouštědlo
Toluen (2.5)/xxxxxx (2.2) (20: 0,5, X/X)
2.22 Xxxxxx parafin (2.7)/xxxxxx (2.6) (1:2, X/X)
3. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx vybavení
3.1 Xxxxx lázeň xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx 60 °X
3.2 Vyvíjecí xxxxxx
3.3 Xxxxx ultrafialového světla 254 a 366 xx
3.4 Xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, Xxxxxxxxx 60, xxx fluorescenčního xxxxxxxxxx, 20 × 20 xx, xxxxxxxx xxxxxx 0,25 xx x xxxxxxxxxxxx xxxxx 2,5 × 20 xx (Xxxx 11845 xxxx xxxxxxxxxxxx)
3.5 Xxxxxxxxxxxxxx xx 10 μl
3.6 Xxxxxxxxxxxxxx na 25 μx
3.7 Sušárna xxxxxxxxxxxx xx teplotu xx 105 °C
3.8 Erlenmeyerovy xxxxx xx 50 x 200 xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx
3.9 Xxxxxxxxx papír, xxxxxx 90 xx, Xxxxxxxxxx &xxx; Xxxüxx, Xxxxxxxxx Xx. 5892, xxxx xxxxxxxxxxxx
3.10 Univerzální xxxxxxxxxxxx xxxxxxx, pH 1 – 11
3.11 Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 5 xx
3.12 Xxxxxxx xxxxxxx odparka (Rotavapor xxxx ekvivalentní)
3.13 Xxxxx xxxxx
4. Postup
4.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xx Erlenmeyerovy baňky xx 50 xx xx zabroušenou xxxxxx (3.8) xx odváží xxxxxxxxx 1 g xxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxx 4 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (2.8) x 40 xx acetonu (2.2). X silně xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxx je xxxxxxxx xxxxx, xx xxxx xxx přidáno 20 kapek 4 X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (2.8). Xxxxxx indikátorového xxxxxxx (3.10) se xxxxxxxxxxx, xxx xx xX přibližně 2. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxx a po xxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxx protřepává.
Jeli xxxxxxxx usnadnit xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx do xxxxxxxxx xxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxx 60 °X, aby xx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxx xx xxxxxxx na xxxxxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (3.9) xx Xxxxxxxxxxxxx baňky.
20 xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 200 ml, xxxxx se 20 xx xxxx x xxxxxxxx xx. xX xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx na 10 xxxxxx 4 X xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (2.9) xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10).
Xxxxx se 1 g xxxxxxxx xxxxxxxxxx (2.10) x xxxxx xx protřepe. Xxxxxxxxx se přes xxxxxxxxx xxxxx (3.9) xx xxxxxx xxxxxxx xx 250 xx xxxxxxxxxx 75 ml xxxxxxxxxxxxx (2.3) a xxxxx xx třepe xxxxx xxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxx oddělit x xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx do Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 250 xx. Xxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx. Xx použití indikátorového xxxxxxx (3.10) xx xX xxxxxxx xxxxxxx xxxxxx na přibližně 2 xxxxxxxxxx 4 X kyselinou chlorovodíkovou (2.8). Přidá se 10 xx xxxxxxxxxxxxx (2.3), xxxxx se xxxxxxxxx x silně xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx; xxxxxx se nechají xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xx rotační xxxxxxx (3.12). Vodná xxxxxx xx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx xx xxxxx x xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx x 1 xx diethyletheru (2.3). Xxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.11).
4.2 Chromatografie xx xxxxx vrstvě
Na xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx zóny xxxxx pro xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx (3.4) se do xxxx, xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx referenčních xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxx analyzovány, nanese xxxxxxxxxx (3.5) ve xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xx 3 μx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (2.20) x xxxxxx se x xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxxxxxxx deska xx xxxxxxx na xxxxxx xxxxx (3.13) zahřátou xx 40 °C, xxx se xxxxxx xxxxxxx co xxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxx (3.5) xx xx startovní xxxxx xxxxx xxxxxx vždy 10 μl xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (2.18) x roztoku xxxxxx (4.1) xxxxxx xx xxxx, xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxx přesně xx xxxx, xxx xxxx naneseny xxxxxxxxxx xxxxxxx/xxxxxxx vzorku a xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx 15 μx derivatizačního činidla (2.19) (xxxxxx 2xxxx2‘xxxxxxxxxxxx).
Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxx (3.7) 45 xxxxx xxx 80 °C. Xx xxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx v xxxxxx (3.2), která xxxx (xxx xxxxxxxx filtračním xxxxxxx) 15 minut xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 2.21 (xxxxxx/xxxxxx), xxxxx xxxx rozpouštědla xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 cm (xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx 80 xxxxx).
Xxxxx xx xxxxxx v xxxxxx xxxxxxxxx vzduchu x xxxxxxx skvrny xx xxxxxxxxx pod XX xxxxxxx (3.3). Xxx xxxxxxxx fluorescence xxxxxxx xxxxx může xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx/xxxxxxx (2.22).
5. Důkaz
Pro xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx Rf.
Hodnoty Xx x chování xxxxxx pod XX xxxxxxx xx xxxxxxxxx x hodnotami x xxxxxxxx referenčních vzorků.
Učiní xx xxxxxxxxx závěry x xxxxxxxxxxx a xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xx vysokoúčinná xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x oddílu X, xxxx xxxxxxx-xx xx, xx je xxxxxxxx xxxxxxxx propionová, xxxxxxx xx plynová chromatografie xxxxxxx x xxxxxx X. Získané retenční xxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
Xxxxxxxx TLC x HPLC xxxx XX xx xxxxxxxxxx x xxx konečném xxxxxx konzervačních přísad xx xxxxxxx z xxxxxxxxx výsledků.
B. XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXXXX, XXXXXXXX 4XXXXXXXXXXXXXXX, XXXXXXXX XXXXXXX X KYSELINY XXXXXXXXXX
1. Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx x xxxx. Po xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx vysokoúčinnou kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx (XXXX).
2. Xxxxxxx xxxxxxx
2.1 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx musí být xxxxxxx x.x. x xxxx být xxxxxx xxx HPLC. Xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxx ekvivalentní čistoty.
2.2 Xxxxxxx, xxxxxxxxx
2.3 Xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx
2.4 Kyselina xxxxxxxxxx
2.5 Xxxxxxxx benzoová
2.6 Xxxxxxxx xxxxxxx
2.7 Xxxxx xxxxx, (XX3XXXXx·3X2X)
2.8 Kyselina octová, x420 = 1,05 x/xx
2.9 Xxxxxxxxxxx
2.10 Xxxxxxxx xxxxxx, 2 X
2.11 Xxxxxxxx xxxxxxxx, 0,2 X xxxxx xxxxxx
2.12 Xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx
2.13 Xxxx xxxxxxx/xxxx
Xxxxx xxxx xxxxxxxx (2.2) xx xxxxxx x jedním dílem xxxx (2:1)
2.14 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx 1 x kyseliny 2xxxxxxxxxxxxxxx (2.12) v 500 xx xxxxx ethanol/voda (2.13).
2.15 Xxxxxxx xxxx xxx XXXX
2.15.1 Xxxxxxxxx xxxx: xx 1 xxxxx vody se xxxxx 6,35 g xxxxxx sodného (2.7) x 20,0 ml xxxxxxxx xxxxxx (2.8) x xxxxxx xx.
2.15.2 Xxxxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (2.15.1) x xxxxxxx xxxx acetonitrilu (2.9).
2.16 Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx 50 xx xx xxxxxx naváží xxx 0,05 g xxxxxxxx 4xxxxxxxxxxxxxxx (2.3), 0,2 x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (2.4), 0,2 x xxxxxxxx xxxxxxxx (2.5) x 0,05 x xxxxxxxx xxxxxxx (2.6) x objem xx doplní směsí xxxxxxx/xxxx (2.13). Xxxxxx xx xxxxxxxx x xxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx týden.
2.17 Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx
Xx odměrných xxxxx xx 20 xx xx odměří 8,00, 4,00, 2,00, 1,00 x 0,50 ml xxxxxxxxx xxxxxxx (2.16). Xx xxxxx xxxxx xx xxxxx 10,00 xx roztoku xxxxxxxxx xxxxxxxxx (2.14) a 0,5 xx 2 X kyseliny xxxxxx (2.10). Objem xx xxxxxx xxxxx ethanol/voda (2.13). Xxxx roztoky xxxx být připravovány xxxxxxx.
3. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxx vybavení x xxxx:
3.1 Vodní xxxxx, xxxxxxxxx xx 60 °C
3.2 Xxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx s XX xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x 10μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3.3 Xxxxxxxxxx xxxxxx
Xxxxxxxxxxxxx ocel, xxxxx 12,5 xx 25 xx, xxxxxxx xxxxxx 4,6 mm, xxxxxx Xxxxxxxxxxx 5C18 xxxx ekvivalentní xxxxxx.
3.4 Xxxxxxxxx papír, xxxxxx: 90 mm, Schleicher xxx Xxxüxx, Xxxxxxxxx Xx 5892 nebo xxxxxxxxxxxx.
3.5 Erlenmeyerovy xxxxx xx 50 xx
3.6 Xxxxxxxx vzorkovací lahvičky xx 5 xx
3.7 Xxxxx xxxxxxx, xxxxxxxxxxx, xxxxxxxx 2–4 xx, xxxx xxxxxxxxxxxx
4. Xxxxxx
4.1 Xxxxxxxx xxxxxx
4.1.1 Xxxxxxxx xxxxxx xxx přidání xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx 50 xx (3.5) se xxxxxx 1 x xxxxxx. Xx Erlenmeyerovy xxxxx se xxxxxxxxxx 10 ml 2 X xxxxxxxx xxxxxx (2.10) x 40 xx směsi xxxxxxx/xxxx (2.13). Xxxxx xx xxxxxxxxx 1 g xxxxxxx xxxxxxx (3.7), xxxxx xx uzavře x silně xx xxxxxxx xxxxx minutu xxxxxxxxxx, dokud nevznikne xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xx Erlenmeyerova xxxxx xxxxxxx přesně xxx minut xx xxxxx xxxxx (3.1) xxx 60 °X.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxx se xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxxx vody a xxxxxxx xx xx xxxxxx uloží při 5 °X.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx (3.4). Xxx 2 xx extraktu xx převedou do xxxxxxxxxx xxxxxxxx (3.6). Xxxxxxx xx uchovává xxx 5 °X x xxxxxxxxx pomocí XXXX xx xxxxxxx xx 24 xxxxx.
4.1.2 Xxxxxxxx vzorku x xxxxxxxx vnitřního xxxxxxxxx
Xx Xxxxxxxxxxxxx baňky na 50 xx (3.5) xx x přesností xx xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx 1 ± 0,1 x xxxxxx (a gramů). Xxxxxxx xx xxxxx 1,00 xx 2 X xxxxxxxx sírové (2.10) x 30,0 xx xxxxx xxxxxxx/xxxx (2.13). Xxxxx se xxxxxxxxx 1 x xxxxxxx kamínků (3.7) x 10 xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx(2.14). Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx x silně xx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx do xxxxxxxxxx xxxx se Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxx xx vodní xxxxx (3.1) xxx 60 °X.
Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx ochladí x xxxxxx xxxxxxx vody x extrakt xx xxxxx xx hodinu xxx 5 °X.
Xxxxxxx xx zfiltruje xxxx xxxxxxxxx xxxxx (3.4). Xxx 2 xx xxxxxxxx xx převedou xx vzorkovací xxxxxxxx (3.6). Xxxxxxx se xxxxxxxx při 5 °X x xxxxxxxxx xxxxxx HPLC xx xxxxxxx xx 24 xxxxx.
4.2 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxx xxxx: acetonitril/acetátový xxxx (2.15).
Průtok xxxxxxx xxxx kolonou xx xxxxxxx xx 2,0 ± 0,5 ml/min. Xxxxxx délka detektoru xx nastaví xx 240 xx.
4.2.1 Xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.2) xx xxxxxxxxx po 10 μl xxxxxxxxxxxx xxxxxxx konzervačních xxxxxx (2.17). Xxx xxxxx xxxxxx xx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx stanoví xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx konzervační xxxxxxx x xxxxx píku xxxxxxxxx standardu xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxx. Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx výšek xxxx xx koncentraci xxxxxxx standardního xxxxxxx.
Xxxxxxxxxxx xx, že xxx xxxxxxxxx byla xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx získána xxxxxxxx xxxxxx.
4.2.2 Stanovení
Do xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.2) xx xxxxxxxxx 10 μx xxxxxxxx xxxxxx (4.1.1) x zaznamená xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxx xx 10 μl xxxxxxxxxxxx xxxxxxx konzervační xxxxxxx (2.17) x xxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx chromatogramy se xxxxxxxxx. Není-li x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.1.1) xxxxx xxx x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxxx 2methoxybenzoové (xxxxxxxxxx vnitřní xxxxxxxx), xxxxxxxxx se xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx 10 μx xxxxxxxx vzorku x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.1.2) a xxxxxxxxx xx chromatogram.
Je-li x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.1.1) rušivý xxx se xxxxxxx xxxxxxxxx časem xxxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx, měl xx být xxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx. (Xxxx-xx xxxxx z xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx přísad x xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx tuto xxxxxxxxxxx xxxxxxx použít xxxx xxxxxxx xxxxxxxx.)
Xx xxxxx xxxxxx, zda chromatogramy xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx a roztok xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx:
- separace xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xx alespoň 0,90. (Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xx uvedena na xxxxxxx 1)
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxx píků
Není-li xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxx xxx xxxxxxx účinnější kolona xxxx by xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx upraveno xxx, xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx.
- Xxxxxx xxxxxxxxx Xx všech xxxxxxxxx xxxx by xx xxx pohybovat xx 0,9 do 1,5. (Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx uvedena xx xxxxxxx 2.) Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx stanovení xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx posuvu xxxxxx xxxxxxx 2 xx/xxx.
Xxxxxxx 2: Xxxxxx xxxxxxxxx xxxx
- Základna musí xxx xxxxxxxx.
5. Xxxxxxx
Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx výšek píků xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx) x xxxx xxxxxxxxxx graf. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, kyseliny 4xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxx sorbové xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx vzorku x xxxxxxxxxxxx procentech (xx) xx xxxxxxx pomocí xxxxxx
xx % (m/m) = (100x 20 x x) / (106 x&xxxx; x) = x / (500 x x)
xxx
x = xxxxxxxx zkušebního xxxxxx (4.1.2) (x),
x = koncentrace xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxx (4.1.2) (μx/xx) xxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxx.
6. Xxxxxxxxxxxxxx [1]
Xxx xxxxxx kyseliny 4xxxxxxxxxxxxxxx 0,40 % by xxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,035 %.
Xxx xxxxxx kyseliny xxxxxxxx 0,50 % by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,050 %.
Xxx xxxxxx kyseliny xxxxxxxxxx 0,50 % by xxxxxx absolutní xxxxxxx xxxxxxx výsledků dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,045 %.
Při xxxxxx kyseliny xxxxxxx 0,60 % by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx stejným xxxxxxx xxxxxxxxx 0,035 %.
7. Xxxxxxxx
7.1 Xxxxxxxx testování xxxxxxxxxxx metody xxxxxxx, xx xxxxxxxx kyseliny xxxxxx přidané do xxxxxxxx kyselin ze xxxxxx xx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxx zpracovávaného xxxxxx xx tedy xxxx být x xxxxxxxxxxx xxxxxxx.
7.2 Je-li xx žádoucí, lze xxxxxx xxxxxxx ochrannou xxxxxx.
X. STANOVENÍ KYSELINY XXXXXXXXXX
1. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
Xxxx xxxxxx xx vhodná xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx propionové x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xx maximální xxxxxxxxxxx 2 % (x/x).
2. Definice
Koncentrace xxxxxxxx xxxxxxxxxx stanovená touto xxxxxxx xx vyjádří x procentech hmotnosti (% x/x) xxxxxxx.
3. Xxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xx stanovení xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
4. Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx musí xxx xxxxxxx p.a; xxxx xxx použita xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
4.1 Ethanol, 96 % (X/X)
4.2 Kyselina xxxxxxxxxx
4.3 Xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx
4.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, 10 % (x/X)
4.5 Roztok xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx 50 xx xx přesně xxxxxx 1 g (x xxxxx) xxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xx xx xxxxx xxxxxxxxx (4.1).
4.6 Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx 50 xx se přesně xxxxxx 1 g (x gramů) xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx x doplní xx xx objem xxxxxxxxx (4.1).
5. Xxxxxxxxx x pomůcky
5.1 Běžné xxxxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxx:
5.2 Xxxxxxx chromatograf x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx
5.3 Xxxxxxxx xxxxxxxx (20 × 150 xx) se šroubovacím xxxxxxxx
5.4 Vodní xxxxx xxxxxxxxx na 60 °X
5.5 Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx 10 xx s filtrační xxxxxxxxx (xxxxxx xxxx 0,45 μm)
6. Xxxxxx
6.1 Xxxxxxxx xxxxxx
6.1.1 Příprava xxxxxx bez xxxxxxxxx xxxxxxxxx
Xx xxxxxxxx xxxxxxxx (5.3) se naváží xxxxxxxxx 1 g xxxxxx. Přidá xx 0,5 xx kyseliny xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (4.4) x 9,5 ml xxxxxxxx (4.1).
Xxxxxxxx se xxxxxx x xxxxx protřepe. Xxxx to xxxxxxxx, xxxxxx xx zkumavka xx xxx xxxxx xx xxxxx lázně xxxxxxx xx 60 °X (5.4), aby xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx. Xxxxxxxx xx rychle xxxxxxx xxx tekoucí vodou. Xxxx roztoku xx xxxxxxxxx přes membránový xxxxx (5.5). Chromatografie xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxx.
6.1.2 Xxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxx xxxxxxxxxx
Xx skleněné zkumavky (5.3) xx x xxxxxxxxx xx 3 xxxxxxxxx místa naváží 1 ± 0,1 x xxxxxx. Xxxxx xx 0,5 ml xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (4.4), 0,50 xx xxxxxxx xxxxxxxxx standardu (4.6)x 9 xx xxxxxxxx (4.1).
Xxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxx protřepe. Xxxx xx xxxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xx xxx minut xx vodní xxxxx xxxxxxx xx 60 °X (5.4), aby xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx. Zkumavka xx xxxxxx zchladí xxx tekoucí xxxxx. Xxxx roztoku xx xxxxxxxxx xxxx membránový xxxxx (5.5). Xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx provede xxxxxx xxx.
6.2 Xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
Xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx
Xxxxxx
Xxx: korozivzdorná ocel
Délka: 2 x
Xxxxxx: ⅛"
Xxxxx: 10 % XX™ 1000 (xxxx xxxxxxxxxxxx) + 1 % X3XX4 xx Chromosorbu XXX 100–120 xxxx
Xxxxxxx
Xxxxxxx: 200 °X
Xxxxxx: 120 °X
Xxxxxxxx: 200 °X
Xxxxx xxxx: xxxxx
Xxxxxxxxx xxxxxxxx: 25 xx/xxx
6.3 Xxxxxxxxxxxxxx
6.3.1 Xxxxxxxxx
Xx řady xxxxxxxxx xxxxx xx 20 xx se xxxxxxxxxx 0,25, 0,50, 1,00, 2,00 a 4,00 xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (4.5). Xx xxxxx odměrné xxxxx xx xxxxxxxxxx 1,00 xx roztoku vnitřního xxxxxxxxx (4.6); xxxxxx xx na objem xxxxxxxxx (4.1) a xxxxxxx. Takto xxxxxxxxxx xxxxxxx obsahují xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx vnitřní xxxxxxxx v koncentraci x xx/xx (to xxxxxxx 1 mg/ml, xx-xx x = 1,000) x kyselinu xxxxxxxxxxx x koncentraci x/4, p/2, x, 2x, 4p xx/xx (xx xxxxxxx 0,25, 0,50, 1,00, 2,00, 4,00 mg/ml, xx-xx x = 1,000).
Nastříkne xx 1 μl xxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxx vynesením xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx propionové x kyseliny 2methylpropionové xx xxx x x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxx y.
Nastříknou se 3 xxxxx z xxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx průměr xxxxxx xxxxx xxxx.
6.3.2 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx xx 1 μx filtrátu xxxxxx 6.1.1. Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx ze xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (6.3.1). Xx-xx xxx přibližně xxxxxx xxxxxxxx čas xxxx xxx xxxxxxxx 2xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx. Není-li xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx, xxxxxxxxx se 1 μx xxxxxxxx xxxxxx 6.1.2 x změří xx xxxxxx xxxx xxxxxxxx propionové x xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx xx 3 xxxxx x xxxxxxx xxxxxxx x vypočte xx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx.
7. Výpočty
7.1 Z xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx bodu 6.3.1 xx odečte poměr xxxxxxxxx (X), který xxxxxxxx poměru xxxxx xxxx vypočtenému x xxxx 6.3.2.
7.2 X xxxxx získaného xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx (x) x hmotnostních procentech xxxxxx xxxxxx
x % (x/x) = K (0,5 x 100 x x) / (50 x x) =X(x / a)
kde
K = xxxxx vypočtený x xxxx 7.1,
x = hmotnost xxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx 4.6,
x = xxxxxxxx vzorku x gramech xxxxx xxxx 6.1.2,
Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx.
8. Xxxxxxxxxxxxxx [2]
Xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx 2 % (x/x) xx xxxxx xxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx provedených současně xx stejným vzorkem xxxxxxxxx 0,12 %.
II. XXXXX X XXXXXXXXX XXXXXXXXXXXX, HYDROCHINONMONOMETHYLETHERU, HYDROCHINONMONOETHYLETHERU X XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX X XXXXXXXXXXXX PROSTŘEDCÍCH
A. XXXXX
1. Xxxxxx x oblast xxxxxxx
X xxxxxx xx xxxxxxx detekce a xxxxx xxxxxxxxxxxx, hydrochinonmonomethyletheru, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx a hydrochinonmonobenzyletheru (xxxxxxxxxxx) v xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxx.
2. Xxxxxxxx xxxxxx
Xxxxx xxxxxxxxxxxx x jeho xxxxxx xx provede xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx (XXX).
3. Xxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x.x.
3.1 Xxxxxxx, 96 % (X/X)
3.2 Xxxxxxxxxx
3.3 Xxxxxxxxxxxx
3.4 Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx:
Xxxxxxxxxx/xxxxxxxxxxxx, 66: 33 (X/X)
3.5 Xxxxxxx, 25 % (x/x) (x420 = 0,91 g/ml)
3.6 Kyselina xxxxxxxxx
3.7 Hydrochinon
3.8 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.9 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.10 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx)
3.11 Xxxxxxxxxx xxxxxxx
Xxxxxxxxxxx referenční xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx.
3.11.1 Xx xxxxxx zkumavky xx 10 xx xx xxxxxx 0,05 x hydrochinonu (3.7). Xxxxx xx 0,250 x xxxxxxxx xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx xx amoniak (3.5), dokud není xxxxxxxx xX 10, x doplní xx xxxxxxxxx xx xxxxx 10 xx (3.1).
3.11.2 Xx xxxxxx zkumavky xx 10 xx xx xxxxxx 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.8). Xxxxx xx 0,250 x kyseliny xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx xx xxxxxxx (3.5), dokud xxxx xxxxxxxx xX 10, x xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxx 10 xx (3.1).
3.11.3 Xx dělené xxxxxxxx xx 10 ml xx xxxxxx 0,05 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.9). Xxxxx xx 0,250 x xxxxxxxx xxxxxxxxx (3.6) x 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx se xxxxxxx (3.5), dokud xxxx xxxxxxxx pH 10, x xxxxxx se xxxxxxxxx xx xxxxx 10 ml (3.1).
3.11.4 Xx xxxxxx zkumavky xx 10 xx xx naváží 0,05 x hydrochinonmonobenzyletheru (3.10). Xxxxx xx 0,250 x kyseliny askorbové (3.6) a 5 xx xxxxxxxx (3.1). Xxxxxxx xx xxxxxxx (3.5), xxxxx xxxx xxxxxxxx xX 10, x xxxxxx xx xxxxxxxxx na xxxxx 10 ml (3.1).
3.12 Xxxxxxxx xxxxxxxx
3.13 Kyselina xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.14 Kyanoželezitan xxxxxxxx xxxxxxxxxx
3.15 Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx
3.16 Xxxxxxxx činidla
3.16.1 Xx 5 % xxxxxxx xxxxxxx (x/X) xxxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.12) xx xxxxxxx xxxxxxx (3.5), xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx.
Xxxxxxxxxx:
Xxx xxxxxx xxxxx xx x xxxxxxx xxxxx výbušné xxxxxxxxxx a xxx xx xxx po xxxxxxx xxxxxxxxxxx.
3.16.2 10 % (m/V) xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.13) x xxxxxxxx (3.1).
3.16.3 Xxxxxxxx se 1 % (x/X) xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx draselného (3.14) x 2 % (m/V) vodný xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.15). Xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxx laboratorní xxxxxxxx, x xxxx:
4.1 Běžné xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxx vrstvě
4.2 Xxxxxx xxxxx pro xxxxxxxxxxxxxx na tenké xxxxxx: xxxxxxxxx GHR/UV254 (254 xx xxxxxx xxxxxxx GHR/UV); 20 × 20 xx (Xxxxxxx, Xxxxx nebo xxxxxxxxxxxx). Xxxxxxxx xxxxxx 0,25 mm.
4.3 Xxxxxxxxxxxx xxxxx
4.4 Xxxxxxxxxxx
4.5 UV xxxxx, 254 xx
5. Xxxxxx
5.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxx zkumavky xx 10 xx xx xxxxxx 3 x xxxxxx. Xxxxx xx 0,250 x xxxxxxxx xxxxxxxxx (3.6) x 5 ml xxxxxxxx (3.1). xX roztoku xx xxxxxx xxxxxxxxx (3.5) xx 10. Xxxxx se doplní xxxxxxxxx (3.1) xx 10 xx. Xxxxxxxx xx uzavře zátkou x homogenizuje xx 10 xxxxx x xxxxxxxxxxxx lázni. Zfiltruje xx přes filtrační xxxxx xxxx se xxxxxxxx při 3000 xx./xxx.
5.2 Xxxxxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxxx (XXX)
5.2.1 Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (3.4).
5.2.2 Na xxxxx xx nanese xx 2 μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.11) x 2 μx xxxxxxx xxxxxx (5.1). Xxxxxx xx xx xxx xxx xxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxx rozpouštědla xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx 15 xx xx startu.
5.2.3 Xxxxx se xxxxx, xxxxx xx vyschnout xxx xxxxxxxx xxxxxxx.
5.3 Xxxxxxx
5.3.1 Xxxxx xx xxxxxxxx xxx XX xxxxxx při 254 xx x xxxxxx xxxxx se xxxxxx.
5.3.2 Xxxxx xx postříká
- xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (3.16.1), xxxx
- xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.16.2); xxxxxxx xx xx xxx 120 °X, xxxx
- xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (3.16.3).
6. Xxxxx
Xxxxxxx se xxxxxxx Xx každé xxxxxx.
Xxxxxx získané xxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx jde x jejich xxxxxxx Xx, xxxxx skvrn x XX xxxxxx x xxxxx skvrn xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxxxxxxxx oddílu (X) x xxxxxxxxx xx xxxxxxxx časy xxxxxxx pro xxx (xxxx) xxxxxx s xxxxxxxxxx časy xxxx xxxxxxxxxxxx roztoků.
Výsledky z XXX a HPLC xx xxxxxxxxxx x xxxxx dokázat xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx jeho xxxxxx.
7. Poznámky
Za uvedených xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx hodnoty Xx:
xxxxxxxxxxx: 0,32
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: 0,53
hydrochinonmonoethylether: 0,55
xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: 0,58
X. STANOVENÍ
1. Xxxxxx x xxxxxx xxxxxxx
X xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx v xxxxxxxxxxxx prostředcích xxx xxxxxxxxxx kůže.
2. Podstata xxxxxx
Xxxxxx xx extrahován xxxxx voda/methanol xx xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx rozpustí xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxxx xx výsledném roztoku xx xxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxx x UV xxxxxxx.
3. Reakční činidla
3.1 Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx x.x. Musí být xxxxxxx xxxxxxxxxxx voda xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.
3.2 Xxxxxxxx
3.3 Xxxxxxxxxxx
3.4 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.5 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx
3.6 Xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (xxxxxxxxxx)
3.7 Xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxx xxx XXXX
3.8 Xxxx xxxx/xxxxxxxx 1:1 (X/X). Xxxxxx xx xxxxx díl vody x jeden díl xxxxxxxxx (3.2)
3.9 Mobilní xxxx: xxxx xxxxxxxxxxxxxxx/xxxx 45:55 (X/X). Smíchá xx 45 xxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (3.7) x 55 xxxx vody.
3.10 Xxxxxxxxxx roztok
Do xxxxxxx xxxxx xx 50 xx xx xxxxxx 0,06 g xxxxxxxxxxxx (3.3), 0,08 g xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.4), 0,10 x xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.5) x 0,12 g xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (3.6). Xxxxxxxx xx a xxxxxx xx xx xxxxx xxxxxxxxxx (3.2). Xxxxxxxxxx xxxxxx se připraví xxxxxxxx 10 xx xxxxxx xxxxxxx xx 50 xx xxxxx xxxx/xxxxxxxx (3.8). Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx.
4. Xxxxxxxxx x xxxxxxx
Xxxxx laboratorní xxxxxxxx x xxxx:
4.1 Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx na xxxxxxx 60 °C
4.2 Xxxxxxxxxxxx pro xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx chromatografii x XX xxxxxxxxxx s xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx délkou x 10μx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx
4.3 Analytická xxxxxx:
Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxxx xxxxx, délka 250 xx, vnitřní xxxxxx 4,6 xx, plněná Xxxxxx fenylem (chemicky xxxxxxx fenethylsilanem xx Xxxxxxx XXX, uzavřená xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx), velikost xxxxxx 6 μx, xxxx xxxxxxxxxxxx náplní. Xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx, x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx nebo kolony x xxxxxxxxxxxx xxxxxx.
4.4 Xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx 90 mm, Xxxxxxxxxx xxx Xxxüxx, Xxxxxxxxx Xx 5892 xxxx xxxxxxxxxxxx
5. Postup
5.1 Xxxxxxxx xxxxxx
Xx xxxxxxx xxxxx xx 50 xx xx x přesností xx xxx desetinná xxxxx xxxxxx 1 ± 0,1 x (x gramů) xxxxxx. Xxxxxx se xxxxxxxx xx 25 xx xxxxx xxxx/xxxxxxxx (3.8). Xxxxx se xxxxxx x xxxxx protřepe, xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xx xxxxxxx jednu xxxxxx. Baňka se xxxxxx xx xxxxx xxxxx (4.1) xxxxxxxxxx xx 60 °X, xxx se xxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxx a xxxxxx xx na objem xxxxx voda/methanol (3.8). Xxxxxxx se xxxxxxxxx xxxx filtrační xxxxx (4.4). Xxxxx XXXX xx provede xx 24 hodin xx xxxxxxxx xxxxxxxx.
5.2 Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
5.2.1 Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx fáze (3.9) se upraví xx 1,0 ml/min x xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xx 295 xx.
5.2.2 Xxxxxxxxx se 10 μx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.1 x zaznamená xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.2.3. Xxxxxxxxx xx chromatogramy xxxxxxx xxx xxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxx koncentrace xxxxxxx x xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxx a xxxxxxx odezvy (XX) xxxxxxxxx xxxxx xxxx 5.2.3.
5.2.3 Xxxxxxxxx
Xxxxxxxxx se 10 μx referenčního xxxxxxx (3.10) x xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx píku xxxxxxxxxx.
Xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxx XXx (x xx xxxxxx infexem XX):
XXx = pi /xx
xxx
xx = plocha xxxx xxx xxxxxxxxxxx, hydrochinonmonomethylether, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx nebo hydrochinonmonobenzylether, x
xx = koncentrace xxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxx (3.10) (x/50 xx).
Xx xxxxx xxxxxx, xxx chromatogramy xxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxxx následující xxxxxxxxx:
- xxxxxxxx píků xxxxxxx xxxxxxxxxx páru xx alespoň 0,90. (Xxxxxxxx xxxxxxxx píků xx uvedena xx xxxxxxx 1.).
Xxxxxxx 1: Xxxxxxxx xxxx
Xxxx-xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx by xxxx xxx xxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxx, xxx byl požadavek xxxxxx.
- Faktor xxxxxxxxx Xx xxxxx xxxxxxxxx xxxx xx xx xxx pohybovat xx 0,9 do 1,5. (Xxxxxxxx xxxxxxx asymetrie xx xxxxxxx xx xxxxxxx 2.) Při xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx doporučená xxxxxxxx posuvu papíru xxxxxxx 2 xx/xxx.
Xxxxxxx 2:Xxxxxx xxxxxxxxx xxxx
- Xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx.
6. Výpočet
Pro xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (koncentrací xxxxxxx) xx xxxxxx xx xxxxxxx plochy xxxx analytů. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx ve vzorku xxxxxxxxx x hmotnostních xxxxxxxxxx (xi) xx xxxxxxx xxxxxx vzorce
xi % (m/m) = (xx x 100) / (XXx x x)
xxx
x = xxxxxxxx xxxxxx x gramech,
bi = xxxxxx píku xxxxxxx i xx xxxxxx.
7. Opakovatelnost [3]
7.1 Xxx xxxxxx hydrochinonu 2,0 % xx xxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx provedených xxxxxxxx xx stejným xxxxxxx xxxxxxxxx 0,13 %.
7.2 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1,0 % by xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,1 %.
7.3 Xxx xxxxxx hydrochinonmonoethyletheru 1,0 % xx xxxxxx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,11 %.
7.4 Xxx obsahu hydrochinonmonobenzyletheru 1,0 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx provedených současně xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx 0,11 %.
8. Xxxxxxxxxxxxxxxxxx [4]
8.1 Při xxxxxx xxxxxxxxxxxx 2 % by neměla xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx za různých xxxxxxxx (různé laboratoře, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx) překročit 0,37 %.
8.2 Xxx obsahu xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % xx neměla absolutní xxxxxxx xxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx vzorkem xx xxxxxxx podmínek (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx) xxxxxxxxx 0,21 %.
8.3 Xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx 1 % xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx výsledků dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx za xxxxxxx podmínek (xxxxx xxxxxxxxxx, různí xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx) xxxxxxxxx 0,19 %.
8.4 Xxx xxxxxx hydrochinonmonobenzyletheru 1 % xx neměla xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx (xxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxx xxxx) xxxxxxxxx 0,11 %.
9. Poznámky
9.1 Xxxxxxxx xx zjištěn obsah xxxxxxxxxxxx xxxxxxx vyšší xxx 2 % x je xxxxxxxxx xxxxxx odhad obsahu, xxx xx být xxxxxxx xxxxxx (5.1) xxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxxxxxx, jakou by xxx vzorek obsahující 2 % xxxxxxxxxxxx, x stanovení by xxxx xxx xxxxxxxxx.
(X xxxxxxxxx xxxxxxxxx může xxx xxxxxxxx koncentracích xxxxxxxxxxxx ležet xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.)
9.2 Xxxxxx xxxxx
Xxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx hydrochinonu x xxxx etherů x jednom isokratickém xxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxx C18 x xxxxxxxx xxxxxxx xxxx.
X xxxx xxxxxx xxxx snadno xxxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xxxx řady parabenů. X xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxx zopakováno s xxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx/xxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxxxx xxx najít x literatuře v xxxxxxxx 2 a 3:
Xxxxxx: Xxxxxx ODS, 4,6 mm × 25 xx nebo xxxxxxxxxxxx:
xxxxxxx: 36 °X
xxxxxx: 1,5 xx/xxx
xxxxxxx fáze:
pro xxxxxxxxxxx: methanol/voda 5/95 (X/X)
xxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxx/xxxx 30/70 (V/V)
pro xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx: xxxxxxxx/xxxx 80/20 (X/X) [5].
Xxxxxx: Spherisorb X5XXX xxxx xxxxxxxxxxxx:
xxxxxxx xxxx: xxxx/xxxxxxxx 90/10 (X/X)
xxxxxx: 1,5 xx/xxx
Xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxxx [6].
[1] XXX 5725.
[2] XXX 5725.
[3] XXX 5725.
[4] ISO 5725.
[5] Xxxxxx-Xxxxxxxxx, X., Xxxxx X.-X., Xxxxxxxxxxxxxx xx dosage de x’xxxxxxxxxxxx et xx xxx éthers xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx dans xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx blanchir xx xxxx. Xxx. J. Xxxxxx. Xxx., 8-203-214 (1986).
[6] Xxxxx, X., Xxx I., Xxxxxxxxxxxxx xx hydroquinone xx xxxx xxxxxx xxxxxx, Xxxxxxx, (1986), 111, x. 129.