Plné znění - 32018R0150

Dodatek X

XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXXX&xxxx;XXXXXXXXXXX MLÉCE

Metoda: XXXX x&xxxx;xxxxxxxxxx fázemi

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX X XXXXXX XXXXXXX

Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (XX) x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XX) x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (XXX) x&xxxx;xx xxxxxx pro zjišťování xxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;XXX.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX

Xxxxx XX + PE: xxxxxxxxxx zlomek xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xx 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx methanolem x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx mléka. Stanovení xxxxxx PS x&xxxx;XX xxxx xxxxxxxx x-xxxxxxxxxxxxxx (XXX) xxxxxxx HPLC x&xxxx;xxxxxxxxxx fázemi (XX) x&xxxx;xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx obsahu PS x&xxxx;XX ve xxxxxxxxx xxxxxx porovnáním se xxxxxxxxxxx xxxxxxx, který xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx XXXX.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx p.a. Xxxxx xxxx uvedeno xxxxx, používá xx xxxxx xxxxxxxxxxx voda xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx čistoty.

4.1.   Referenční xxxxxxxx: XXXX o xxxxxxx xxxxxxx 99&xxxx;%

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx teplotě – 18&xxxx;°X.

4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx

4.2.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx čistoty xxx XXXX

4.2.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx čistoty xxx XXXX

4.2.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx

4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx x-xxxxxxxxxxxxxxxxxx derivátů

4.3.1.   Hydroxid xxxxx, 12 M xxxxx xxxxxx

4.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx, 0,4 M xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xX xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.3.1) xx 10,0

4.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;2-xxxxxxxxxxxxxxx

4.3.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;x-xxxxxxxxxxxxx (XXX)

4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx HPLC

4.4.1.   Eluční xxxxxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx XXXX.

4.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxx xxx HPLC

4.4.3.   Methanol xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx čistoty

4.4.4.   Tetrahydrofuran

4.4.5.   Natrium dihydrogenfosforečnan

4.4.6.   Octan xxxxx

4.4.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx.

5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX X XXXXXXX

5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx váhy s přesností xxxxxx xx 0,1 mg x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx xx 1&xxxx;xx

5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 25 x&xxxx;100&xxxx;xx

5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx 1 do 10&xxxx;xx

5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

5.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 0,2, 0,5 x&xxxx;5&xxxx;xx

5.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxx 10, 50 x&xxxx;100&xxxx;xx

5.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 20 a 100 μl

5.8.   Ultrazvuková xxxxx

5.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx fungující xxx 27&xxxx;000 × g

5.10.   Skleněné xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxx 5 ml

5.11.   Odměrný xxxxx x&xxxx;xxxxxx 25 ml

5.12.   pH xxxx x&xxxx;xxxxxxxxx na 0,1 xxxxxxxx xX

5.13.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xx XXXX

5.13.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx 1,0 xx/xxx xxx 200 xxxxxx

5.13.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx dávkovač vzorků x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx

5.13.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx kolony xxxxxxx xxxxxx udržovat xx xxxxxxx 30 °C ± 1 °C

5.13.4.   Fluorescenční xxxxxxxx xxxxxxx fungovat při xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx 330&xxxx;xx x&xxxx;xxxxxx xxxxxx xxxxx 440&xxxx;xx

5.13.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx píků

5.13.6.   Kolona XxXxxxxxxxx® – 100&xxxx;(250 ×&xxxx;4,6&xxxx;xx) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (X 18), xxxxxxxx xxxxxx 5 μx

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXX XXXXXX

Xxxxxx xx odebírají x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx XXX 707.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX POSTUP

7.1.   Příprava roztoku xxxxxxxxx standardu

7.1.1.   Navažte 30,0 ± 0,1&xxxx;xx tryptaminhydrochloridu (4.2.3) do odměrné xxxxx xx 100&xxxx;xx (5.6) x&xxxx;xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1).

7.1.2.   Pipetou (5.3) přeneste 1&xxxx;xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx 10&xxxx;xx (5.6) x&xxxx;xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1) s cílem xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx 0,15 xX.

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxx xxxxxx

7.2.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx 1,000 ± 0,001&xxxx;x&xxxx;xxxxxx XXX do xxxxxxx xx 25 ml (5.2). Xxxxxxx (5.3) xxxxxxxx 10 ml xxxxxxxxxxx xxxx o teplotě 40&xxxx;°X ± 1&xxxx;°X x&xxxx;xx xxxx 30 minut xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (5.4), aby xx xxxxxxxxxx xxxxxxx kousky.

7.2.2.   Pipetou (5.5) xxxxxxxx 0,2&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxxxxxx mléka xx xxxxxxx baňky na 10&xxxx;xx (5.6), xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (5.7) xxxxxxxx 100 μl 0,15 mM roztoku xxxxxxxxxx (7.1) x&xxxx;xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1). Převracením xxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xx 15 minut xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.8).

7.2.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx (5.9) xxx 27&xxxx;000 ×&xxxx;x&xxxx;xx dobu 10 xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx skleněné nádobky (5.10).

Xxxxxxxx: Xx xxxxxxxxx xxxxxxx XX xxxx xxx roztok xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxx 4 °C.

7.3.   Příprava xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx

7.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx 55,4&xxxx;xx XXXX (4.1) do xxxxxxx xxxxx xx 50&xxxx;xx (5.6) a odměrným xxxxxx (5.11) xxxxxxxx xxx 25 ml chloroformu (4.2.2). Zazátkovanou xxxxx xxxxxxxx na 50 °C ± 1&xxxx;°X x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx se XXXX nerozpustí. Xxxxx xxxxxxxx xx 20 °C, xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1) x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

7.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx (5.3) přeneste 1&xxxx;xx tohoto roztoku xx xxxxxxx baňky xx 100&xxxx;xx (5.6) x&xxxx;xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1). Xxxxxxx (5.3) xxxxxxxx 1&xxxx;xx xxxxxx roztoku xx xxxxxxx xxxxx na 10&xxxx;xx (5.6), xxxxxxxx 100 μx (5.7) 0,15mM xxxxxxx xxxxxxxxxx (7.1) x&xxxx;xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xx provedení xxxxxxx XX musí xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 4&xxxx;°X.

7.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Xx xxxxxxx xxxxx xx 10&xxxx;xx (5.6) xxxxxxx 25,0 ± 0,1&xxxx;xx XXX (4.3.4), xxxxxxxx 0,5&xxxx;xx (5.5) xxxxxxxxx (4.2.1) x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx se XXX xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx značku xxxxxxxx xxxxxxxx borité (4.3.2) x&xxxx;xxxxxxxx stříkačkou (5.7) xxxxxxxx 20 μx 2-xxxxxxxxxxxxxxxx (4.3.3).

Poznámka: Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx musí být xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx nádobě xxx xxxxxxx 4&xxxx;°X; xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx dobu xxxxxxx xxxxx.

7.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx HPLC

7.5.1.   Eluční xxxxxxxxxxxx (4.4)

Xxxxxxxxxxxx A: Xxxxxx 0,3 xX xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 3 xX xxxxxx xxxxxxx (x hodnotou xX xxxxxxxxx xx 6,5 ± 0,1 xxxxxxxxx xxxxxxx): xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx =&xxxx;558: 440:2 (xxx.).

Xxxxxxxxxxxx B: Xxxxxxxx

7.5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx:

Xxx (xxx)	Xxxxxxxxxxxx X (%)	Rozpouštědlo B (%)	Xxxxxx (ml/min)
Počáteční	40	60	0
0,1	40	60	0,1
5,0	40	60	0,1
6,0	40	60	1,0
6,5	40	60	1,0
9,0	36	64	1,0
10,0	20	80	1,0
11,5	16	84	1,0
12,0	16	84	1,0
16,0	10	90	1,0
19,0	0	100	1,0
20,0	0	100	1,0
21,0	40	60	1,0
29,0	40	60	1,0
30,0	40	60	0

Poznámka: Xxxx xx stát, xx xxxxxx xxxxxxxx bude xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx znázorněné xx xxxxxxx 1.

Xxxxxxx xxxxxx: 30 °C.

7.5.3.   Objem xxxxxxxx: 50 μx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx a 50 μx xxxxxxx vzorku

7.5.4.   Ekvilibrace xxxxxx

Xxx xxxxxxxxxxx provádění xxxxxx kolonu xxxxxxxxxx 100&xxxx;% rozpouštědlem X&xxxx;xx xxxx 15 xxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx X:X =&xxxx;40:60 x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx 15 xxxxx při xxxxxxx 1 xx/xxx. Xxxxxxxx xxxxx pokus xxxxxxxxx methanolu (4.2.1).

Xxxxxxxx: Xxxx xxxxxxxxxxx kolony xx xxxxx dobu xxxxxx xxxxxxxxxx po xxxx 30 xxxxx xxxxx methanolu x&xxxx;xxxxxxxxxxxx x poměru 80:20 (xxx.).

7.5.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx obsahu XX + PE ve xxxxxxxxx xxxxxx

7.5.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx při xxxxxxxxx xxxxxxxx časových xxxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx xxxxxx, abyste xxxxxxx xxxxxxxxxx retenční xxxx. Xxx výpočet xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx standardu (7.3) xx xxxxxxx 5–10 xxxxxxx zkušebních vzorků.

Poznámka: Xxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx 20–25 xxxxxxxx vyčistit xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx 100&xxxx;% xxxxxxxxxxxxx B (7.5.1).

7.6.   Integrační xxxxx

7.6.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxx XXXX

XXXX xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx jediného xxxx. Xxxxxx xxxx stanovte xxxxxxxxx xxxx sedly.

7.6.2.   Pík xxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx vymývá x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx xxxx (xxxxxxx 1). Xxxxxx xxxx xxxxxxxx integrací xxxx xxxxx.

7.6.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxx XX x&xxxx;XX

Xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (obrázek 1) xx PS xxxxxx x&xxxx;xxxxxx dvou xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxx xx xxxxxxx jeden xxxxx xxx. XX xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxx hlavních, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx. Celou xxxxxx každé xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx tak, xxx je xxxxxxxxxx xx xxxxxxx 1.

8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX X XXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ

Obsah XX + XX xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx:

X =&xxxx;55,36 × ((A₂)/(A₁)) × ((X₁)/(X₂))

xxx:

X	=	xxxxx XX xxxx XX (x xx/100 x&xxxx;xxxxxx) xx xxxxxxxxx xxxxxx
X1	=	xxxxxx píku XXXX roztoku srovnávacího xxxxxx (7.3)
X2	=	xxxxxx píku XX xxxx XX xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.2)
X1	=	xxxxxx xxxx tryptaminu xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (7.3)
X2	=	xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku (7.2).

9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX METODY

Poznámka: Xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx podle Xxxxxxxxxxx xxxxx XXX&xxxx;(*).

9.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nezávislých xxxxxxxxxxxx výsledků, xxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx přístroji x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxx odstupu, xx xxxxxx překročit xxxxxxxxx 2&xxxx;%. Xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx rozdíl xxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxx než 6&xxxx;% xxxxxxxxxxxxx průměru výsledků.

9.2.   Reprodukovatelnost

Jestliže xxx pracovníci xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx zkušebního xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx k různým xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx mezi xxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxx xxx 11&xxxx;% xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

10.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx P., Xxxxxxxxxx X., Xxxxxxxxx X. X., Xxxxxx X., Rampilli X. „Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx&xxxx;xxxxxx xx skimmilk powder xx XXXX quantification xx xxxxxxxxxxxxxxxxxx.“ Xxx. Xxxx. Xxxx.-Xxx.&xxxx;39,395[1988].

Xxxxxxx 1

XXXX xxxxxxxxxxxx XXX-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (PS) x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XX) x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx XX, XX a tryptamin (xxxxxxx xxxxxxxx).

Xxxxxxx XX

XXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX XXXXXXX PRO XXXXXXX XXXXXXXXXX XX XXXXXXX STANOVENÍ XXXXXXXXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX (XXXX)

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX X&xxxx;XXXXXX POUŽITÍ

Tato xxxxxx umožňuje xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx syrovátky x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx mléce xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX XXXXX

Xxxxxxxxxxx xxxxx XXX 707 – Xxxxx x mléčné xxxxxxx – Směrnice xxx xxxxx vzorků.

3.   DEFINICE

Obsah xxxxxx xx syřidlové xxxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxx hmotnostní procento xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

—	Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx tuku x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx odstředěním nebo xxxxxxxx;

—	Xxxxxxxxx xxxxxxxx kaseinomakropeptidů (XXX) x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX);

—	Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx získaného x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx se srovnávacími xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx odstředěné xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx procenta xxxxxx xxxxxxxxx.

5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x. Xxxxxxx xxxx xxxx být xxxx xxxxxxxxxxx xxxx voda xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx trichloroctové

Rozpusťte 240 g kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (XXx₃XXXX) ve xxxx x&xxxx;xxxxxxx xx 1&xxxx;000&xxxx;xx. Xxxxxx by xxx xxx xxxx x xxxxxxxx.

5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx roztok, xX 6,0

Rozpusťte 1,74 g fosforečnanu xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (X₂XXX₄), 12,37&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (XX₂XX₄) x&xxxx;21,41&xxxx;x&xxxx;xxxxxx xxxxxxx (Xx₂XX₄) xxx x&xxxx;700&xxxx;xx xxxx. X&xxxx;xxxxxxx potřeby xxxxxxx xX xx 6,0 xxxxxxxx xxxxxxxx fosforečné xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxx xx 1&xxxx;000 xx x xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxx, aby xxxxxxxxx osvědčení xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx.

Xxxxxx xxxxxx před xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx přes xxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx.

5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx (XX₃XX) x&xxxx;xxxxxx xxxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxxx směs xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx.

Xxxxxxxx: Xxx xxxxxx xxxxxxxxx jiný xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxxx účinek x xxxxx nezhoršuje xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx vzorky

5.4.1.   Sušené xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx tohoto nařízení (xx. [0]).

5.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5 % xx. xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xx. [5]).

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX A XXXXXXX

6.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx

6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx odstředivé xxxx 2&xxxx;200&xxxx;x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx odstředivkovými xxxxxxxxxx xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxx 50&xxxx;xx

6.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx třepačka

6.4.   Magnetická xxxxxxxx

6.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxx 7 cm

6.6.   Filtrační xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx o průměru xxx 12,5&xxxx;xx

6.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx filtrační xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx filtrem x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx

6.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 10 ml (XXX 648, xxxxx A, xxxx XXX/X 835) xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 10,0&xxxx;xx xx xxx minuty

6.9.   Dávkovací xxxxxx schopný xxxxxxx 20,0&xxxx;xx vody xxx xxxxxxx xxx 50 °C

6.10.   Termostatická xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx 25 ± 0,5&xxxx;°X

6.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xx XXXX, xxxxx xxxxx:

6.11.1.

Xxxxxxxx

6.11.2.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx – ruční xxxx xxxxxxxxxxx – o objemu 15 xx 30 μx

6.11.3.

Xxx xxxxxx XXX 2&xxxx;000-XX za xxxxx (xxxxx 30&xxxx;xx, xxxxxxx xxxxxx 0,75&xxxx;xx), nebo xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx. xxxxx xxxxxx XXX 2&xxxx;000-XXxx, xxxxx xxxxxx Xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx Xxxxxx XX 250) x&xxxx;xxxxx předkolona (3&xxxx;xx ×&xxxx;0,3&xxxx;xx) xxxxxxxx materiálem X&xxxx;125 xxxx jiným xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

6.11.4.

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx 35 ± 1&xxxx;°X

6.11.5.

XX xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx měřit xxx 205 nm x&xxxx;xxxxxxxxxx 0,008 Å.

6.11.6.

Xxxxxxxxxx schopný xxxxxxxxxx xxxx sedly Poznámka: Xxx pracovat s kolonami xxxxxxxxxxx při xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx jejich xxxxxxxxxxx schopnost xx x&xxxx;xxxxxx nižší. X&xxxx;xxxxx xxxxxxx xx xxxxx, xxx výkyvy teploty x&xxxx;xxxxxxx jednoho analytického xxxxxx byly menší xxx 5 °C.

7.   ODBĚR XXXXXX

7.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxx XXX 707. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx vzorků xx xxxxxxxxxxx, že xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx uvedené xxxxx.

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxx takovým xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxx xx znehodnocení nebo xxxxx xxxxxxx.

8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX POSTUP

8.1.   Příprava xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxx mléko xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxx větší xxx xxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Nádobku xxxxx uzavřete. Xxxxxx xxxxx důkladně promíchejte xxxxxxxxxx převracením xxxxxxx.

8.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx

Xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (6.2) xxxx xxxxxx xxxxx se zátkou xx 50&xxxx;xx navažte 2,000 ± 0,001&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx.

8.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxx

8.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xx xxxxxxxx dávce xxxxxxxx 20,0&xxxx;xx xxxxx (50&xxxx;°X) xxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx po dobu xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (6.3). Xxxxxxxx vložte do xxxxx lázně (6.10), xxxxx se xxxx xxxxxxx neustálí xx 25&xxxx;°X.

8.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx dvou xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (6.4)&xxxx;10,0&xxxx;xx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (5.1) x&xxxx;xxxxxxx xxx 25&xxxx;°X. Xxxxxxxx xxxxxx xx 60&xxxx;xxxxx xx xxxxx lázně (6.10).

8.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx (6.2) po xxxx 10 xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx 2&xxxx;200&xxxx;x, nebo přefiltrujte xxxx papír (6.6) x&xxxx;xxxxxxx 5 ml filtrátu xxxxxxx.

8.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

8.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx 15 xx 30 μl xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (8.3.3) xx zařízení xx XXXX (6.11) x&xxxx;xxxxxxxx 1,0&xxxx;xx xxxxxxxx xxxxxxx (5.2) xx xxxxxx.

Xxxxxxxx 1. X&xxxx;xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx průměru použitých xxxxx nebo xx xxxxxxxx xxxxxxx kolony xxx xxxxxx i jiný xxxxxx.

Xxxxxxxx 2. Xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx vodou. Xxxxx x&xxxx;xxxx nenechávejte eluční xxxxxx (5.2).

Xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx více xxx 24 hodin xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx&xxxx;(5.3) xxxxxxx xx xxxx xxx hodin xxx xxxxxxx 0,2&xxxx;xx xx xxxxxx.

8.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx analýzy xxxxxxxxxx vzorku [E] xx získají xx xxxxx chromatogramu, x&xxxx;xxxx xx xxxxx pík xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx RT xxxxx:

Xxx XX:	Xxxxx xxx chromatogramu x XX asi 12,5 xxxxxx
Xxx XXX:	Xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx XXX x XX 15,5 xxxxxx

Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx mohou xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (xxxxx).

Xxxxxxxxxx (6.11.6) automaticky xxxxxxxxxx xxxxxx A každého píku:

AII:	plocha xxxx II
AIII:	plocha xxxx XXX

Xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx každého xxxxxxxxxxxxx xx účelem xxxxxxxx xxxxxxxxxx anomálií xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx funkcí xxxxxxxx, xxxx xxxxx, xxxx původem x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

X&xxxx;xxxxxxx pochybností xxxxxxx xxxxxxxxx.

8.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx

8.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;X srovnávacích xxxxxx (5.4) xx xxxxxx xxxxxxx postup xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx&xxxx;8.2 xx 8.4.2.

Xxxxxxxx čerstvě xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx XXX xx x&xxxx;xxxxxxxxx 8 % xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxx 30 °C xxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;0,2&xxxx;% xx hodinu.

8.5.2.   Před xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorků stabilizujte xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (8.5.1) xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.4.2), xxxxx xx plocha a retenční xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx XXX neustálí xx xxxxxxxxxxxx hodnotách.

8.5.3.   Stanovte xxxxxxxx xxxxxxx X&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (8.5.1), xxxxxx xxxx použili xxx xxxxxx.

9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX XXXXXXXX

9.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx

9.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx odezvového xxxxxxx X:

Xxx XX:

XXX = 100/(AII[0])

kde:

RII	=	odezvové xxxxxxx xxxx II
AII [0]	=	xxxxxx xxxx XX xxxxxxxxxxxx xxxxxx [0] xxxxxxx x&xxxx;8.5.3

Xxx III:

RIII = X/(XXXX[5] – XXXX[0])

xxx:

XXXX	=	xxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX
XXXX [0] xxx XXXX [5]	=	xxxxxx píku XXX xxxxxxxxxxxx vzorků [0] x&xxxx;[5] xxxxxxx x&xxxx;8.5.3
X	=	xxxxxxxx xxxxxxxxx ve srovnávacím xxxxxx [5], xx. 5

9.1.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx relativní xxxxxx xxxx xx xxxxxx [X]

XXX[X] = XXX × AII[E]

SIII[E] = XXXX × AIII[E]

SIV[E] = RIV × XXX[X]

xxx:

XXX [X], XXXX [X], SIV [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XX, XXX x&xxxx;XX xx xxxxxx [E]
AII [E], XXXX [E]	=	plochy xxxx XX x&xxxx;XXX ve xxxxxx [X] xxxxxxx x&xxxx;8.4.2
XXX, RIII	=	odezvové xxxxxxx xxxxxxxxx v 9.1.1

9.1.3.   Výpočet xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx píku XXX xx xxxxxx [X]:

XXXXXX[X] = (XXXXX[X])/(XXXXX[5])

xxx:

XXXXXX [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxxxx čas xxxx XXX xx xxxxxx [E]
RTIII [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxxxx čas píku XXX xx xxxxxx [X] xxxxxxx x&xxxx;8.4.2
XXXXX [5]	=	xxxxxxxxx retenční xxx xxxx XXX x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx [5] získaný x&xxxx;8.5.3

9.1.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx, že xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx III, xx. XXXXXX [X] x&xxxx;xxxxxxxxx přidané xxxxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx 10 % xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx

—	xxx xxxxxx xxxxxxxxx &xx; 5&xxxx;% xx XXXXXX [E] &xx;&xxxx;1,000;

—	xxx xxxxxx xxxxxxxxx ≤&xxxx;5&xxxx;% xx RRTIII [X] ≥&xxxx;1,000.

Xxxxxxxxx neurčitost xxx hodnoty RRTIII xx ± 0,002.

Za xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx XXXXXX [0] xxx xxxx xxxx xx 1,034. Podle xxxxx kolon xx xxxx xxxxxxx blížit 1,000, avšak xxxx xxxx xxx vyšší xxx 1,000.

9.2.   Výpočet xxxxxxxx xxxxxx syřidlové xxxxxxxxx xxxxxxxx ve xxxxxx:

X = XXXX[X] – [1, 3 + (XXXX[0] – 0, 9)]

xxx:

X	=	xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx ve vzorku [X];
XXXX [X]	=	xxxxxxxxx plocha xxxx III xxxxxxxxxx xxxxxx [X] xxxxxxx xxxxx 9.1.2;
1,3	=	xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxx syrovátky xx 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx v nezfalšovaném sušeném xxxxxxxxxxx mléce xxxxxxx xxxxxx. Toto xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
XXXX [0]	=	xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX, xxxxx xx rovna RIII × AIII[0]. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx v 9.1.1 x&xxxx;8.5.3;
(XXXX [0]&xxxx;–&xxxx;0,9)	=	xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx nutno xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx 1,3, xxxxxxxx XXXX [0] xxxx xxxxx 0,9. Experimentálně xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx III xxxxxxxxxxx vzorku [0] xxxxx 0,9.

9.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

9.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx stanovení, xxxxx u stejného xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx současně xxxx v těsném xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx 0,2 % xx.

9.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx mezi xxxxx xxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx výsledky xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx 0,4&xxxx;% xx.

9.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx

9.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxx předpokládat, xx xxxxxxxxx xxxx přítomna, xx-xx xxxxxxxxx plocha xxxx XXX SIII [X] xxxxxxxxx v gramech xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx, ≤ 2,0 + (SIII[0] – 0,9)

xxx

2,0	xx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX x xxxxxxxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx XXX, xx. 1,3, x nejistotě x xxxxxx xxxxxxxx xx složení xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx mléka a x reprodukovatelnosti xxxxxx (9.3.2);
(XXXX [0] – 0,9)	xx oprava, která xxxx být provedena, xxxxxxxx xx plocha XXXX [0] xxxx xxx 0,9 (xxx xxx 9.2).

9.4.2.   Je-li xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX XXXX [X] &xx; 2,0 + (XXXX[0] – 0,9) x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XX XXX [E] ≤ 160, xxxxxxxx xxxxx syřidlové syrovátky xxxxx bodu 9.2.

9.4.3.   Je-li xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX SIII [X] &xx; 2,0 + (XXXX[0] – 0,9) x relativní plocha xxxx XX XXX [X]&xxxx;≤&xxxx;160, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (X %). Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx 1 a 2.

9.4.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxx celkovým xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxx 1 x&xxxx;2.

Xxxx xxxxxx představuje xxxxxxxx xxxxxxx, jejíž xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX, a to x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxx, že nebude xxxxxxxxxx v 90 % xxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx 1 x 2 xxxx:

XXXX = 0,376 P % – 10,7	(xxxx 1)
XXXX = 0,0123 SII [X] + 0,93	(xxxx 2)

xxx:

XXXX	xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX xxxxxxxxx xxx xxxxx celkového xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx SII [X],
X&xxxx;%	xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx jako procento xxxxxxxxx,
XXX [E]	je xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxx 9.1.2.

Tyto xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx číslu 1,3 uvedenému x xxxx 9.2.

Xxxxxx (X1 x X2) mezi xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XXXX [X] x xxxxxxxxx xxxxxxx XXXX xx xxx xxxxxx xxxxxx: X1 =&xxxx;XXXX[X]&xxxx;– [(0,376 X% – 10,7) + (SIII[0] – 0,9)]X2 = XXXX[X] – [(0,0123 XXX[X] + 0,93) + (XXXX[0] – 0,9)].

Xxxx-xx X1 a/nebo X2	xxxxx xxxx nebo xxxxx xxx xxxx, xxxxx obsah syřidlové xxxxxxxxx stanovit.
Jsou-li X1 x X2	xxxxx xxx xxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx vzorce: X = T2 + 0,91

xxx:

0,91 xx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxx xxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx XXX

XXXXXXXXX SUŠINY XX XXXXXXXXX XXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXXX ODSTŘEDĚNÉM MLÉCE

1.   PŘEDMĚT: XXXXXXXXX PŘÍDAVKU SUŠINY XX SYŘIDLOVÉ XXXXXXXXX XX&xxxx;XXXXXXXX ODSTŘEDĚNÉHO XXXXX

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX XXXXX: XXXXXXXXXXX XXXXX XXX 707

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX

Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx jako xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx A vysokoúčinnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx s obrácenými fázemi (xxxxxxx XXXX). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, které tvoří xxxxxx xxxxxxxxxx mléko xxx xxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx procenta xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx výsledek vyšší xxx 1&xxxx;% xx., xx xxxxxxxxxx sušiny xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x. Xxxxxxx xxxx musí xxx voda xxxxxxxxxxx xxxx voda xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxx mít xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxx pro HPLC.

5.1.   Roztok xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx 240&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXx₃XXXX) xx xxxx a doplňte xx 1&xxxx;000&xxxx;xx. Roztok xx xxx být xxxx x xxxxxxxx.

5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx A a B

Eluent X: Xxxxxx 150 xx xxxxxxxxxxxx (XX₃XX), 20 xx xxxxxxxxxxxx (XX₃XXXXXX₃) x 1,00 xx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (XXX, XX₃XXXX) do xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx 1&xxxx;000 xx xxxxx.

Xxxxxx X: Xxxxxx 550 xx xxxxxxxxxxxx, 20 xx xxxxxxxxxxxx x 1,00 xx TFA do xxxxxxx xxxxx xx 1&xxxx;000 ml a xxxxxxx na 1&xxxx;000 xx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx přes xxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μm.

5.3.   Uchování xxxxxx

Xx xxxxxxxxx xx kolona xxxxxxx xxxxxxxx B (xxxxxx) x potom xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxx xx xxxx 30 xxxxx). Kolona xx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx.

5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx

5.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxxx mléko xxxxxxxxx požadavky xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (xx. [0]).

5.4.2.   Totéž xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx zfalšované xxxxxxxxx 5&xxxx;% xx. xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xx. [5]).

5.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxxx odstředěné xxxxx xxxxxxxxxx přídavkem 50&xxxx;% hm. xxxxxx xxxxxxxxx syrovátky standardního xxxxxxx (tj. [50]).

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX X XXXXXXX

6.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx

6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx 2&xxxx;200&xxxx;x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx zkumavkami xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx asi 50&xxxx;xx

6.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx třepačka

6.4.   Magnetická xxxxxxxx

6.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx asi 7&xxxx;xx

6.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx papíry střední xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxx 12,5&xxxx;xx

6.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx filtrační xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μm

6.8.   Dělené xxxxxx umožňující xxxxxxxx 10&xxxx;xx (ISO 648, xxxxx A, xxxx XXX/X 835), nebo xxxxxxxxx systém xxxxxxx xxxxxxx 10,0 ml za xxx xxxxxx

6.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 20,0&xxxx;xx xxxx xxx xxxxxxx xxx 50&xxxx;°X

6.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx nastavená na 25 ± 0,5 °C

6.11.   Zařízení xx HPLC, které xxxxx:

6.11.1.

Xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx

6.11.2.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx – xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, x&xxxx;xxxxxx 100 μl

6.11.3.

Kolona Xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx Xxxxxx 300 XX-X3 (délka 25&xxxx;xx, xxxxxxx průměr 0,46&xxxx;xx), xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxx xx bázi křemene

6.11.4.

Termostat xxxxxx nastavený xx 35 ± 1 °C

6.11.5.

UV xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx vlnovou xxxxxx, xxxxx umožňuje xxxxxxxx měření xxx 210&xxxx;xx (v xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx vlnové xxxxx xx xx 220&xxxx;xx) x&xxxx;xxxxxxxxxx 0,02 Å.

6.11.6.

Xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx nastavení xxxxxxxxx xx obecnou xxxxxxxx linii xxxx xxxx sedly Poznámka: Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx teplotě xxxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx, že xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx x 1&xxxx;°X, jinak xxxxxxx k příliš xxxxxx změnám xxxxxxxxxx xxxx CMPA.

7.   ODBĚR XXXXXX

7.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxx XXX 707. Xxxxxxx státy xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx odběru vzorků xx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxx odpovídá xxxxxxx uvedené normy.

7.2.   Vzorek xxxxxxxxx takovým xxxxxxxx, xxx nemohlo dojít xx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx.

8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX POSTUP

8.1.   Příprava xxxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx nádobky, xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxx větší xxx objem xxxxxx x&xxxx;xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Nádobku xxxxx xxxxxxxx. Sušené xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nádobky.

8.2.   Zkušební xxxxx

Xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (6.2) xxxx xxxxxx xxxxx se xxxxxx xx 50 ml navažte 2,00 ± 0,001 g zkušebního xxxxxx.

Xxxxxxxx: X&xxxx;xxxxxxx směsí xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx zbavená zkušební xxxxx odpovídala 2,00 g.

8.3.   Odstranění xxxx x&xxxx;xxxxxxxx

8.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xx zkušební xxxxx xxxxxxxx 20,0&xxxx;xx xxxxx (50 °C) xxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx na xxxxxxxxxx třepačce (6.3) xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx (6.10), xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx 25&xxxx;°X.

8.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxx minut xx stálého xxxxxxx xxxxxxxxxxx míchačkou (6.4) xxxxxxxx 10,0&xxxx;xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxx 25&xxxx;°X (5.1). Xxxxxxxx xxxxxx xx 60&xxxx;xxxxx xx xxxxx xxxxx (6.10).

8.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx (6.2) xx xxxx 10 xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx 2&xxxx;200&xxxx;x, nebo xxxxxxxxxxxx xxxx papír (6.6) a prvních 5&xxxx;xx xxxxxxxx xxxxxxx.

8.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

8.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx XXXX x&xxxx;xxxxxxxxxx fázemi xxxxxxxx možnost xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx díky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kysaného xxxxxxxx.

8.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx XXXX x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Pro xxxxxxxxxxx systémy s mrtvým xxxxxxx asi 6&xxxx;xx (xxxxx od xxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx) xx xxxxxxxxx xxxxxxxx čas x&xxxx;xxxxx 26 minut ± 2 xxxxxx xxx CMPΑ. Xxx xxxxxxxxxxx systémy x&xxxx;xxxxxx xxxxxx xxxxxxx (xxxx. 2&xxxx;xx) xx optimální xxxxxxxx čas 22 xxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.4) s obsahem 50&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxx xxxxxx této xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx 100 μx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx (8.3.3) xx xxxxxxxx xx HPLC, xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx referenčního xxxxxxxxx xxxxxxxxx v tabulce 1.

Xxxxxxx 1

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx

Xxx (xxx)	Xxxxxx (xx/xxx)	% X	% X	Xxxxxx
Xxxxxxx	1,0	90	10	*
27	1,0	60	40	xxxxxx
32	1,0	10	90	xxxxxx
37	1,0	10	90	xxxxxx
42	1,0	90	10	xxxxxx

Xxxxxxxxx obou xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxx XXXΑ.

Xxxxxxxxx složení rozpouštědla, xxxxx je nutno xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 8.4.3), xxx xxxxxxxxx podle xxxxxx xxxxxx: % X =&xxxx;10 – 2,5 + (13,5 + (XXxxxX – 26) / 6) * 30 / 27&xxxx;% B =&xxxx;7,5 + (13,5 + (XXxxxX – 26) / 6) * 1,11

xxx

XXxxxX	:	xxxxxxxx čas XXXΑ x&xxxx;xxxxxxxxxxx gradientu
10	:	počáteční % X x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
2,5	:	% X ve xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx % X x xxxxxxxxx xxxxxxxxx
13,5	:	xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
26	:	xxxxxxxxxx retenční xxx XXXΑ
6	:	xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
30	:	% X v xxxxxxxxxx xxxx minus % B xx 27 minutách x xxxxxxxxxxx gradientu
27	:	doba běhu xxxxxxxxxxxx gradientu

8.4.3.   Nástřik roztoků xxxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxxxx 100 μx přesně xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx filtrátu (8.3.3) xx xxxxxxxx xx XXXX s průtokem 1,0&xxxx;xx elučního xxxxxxx (5.2) xx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx xx začátku xxxxxxx xx xxxxx x&xxxx;8.4.2. Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx se blíží xxxxxx X:X =&xxxx;76:24 (5.2). Okamžitě xx xxxxxxxx xx spustí xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx, xx xxxxxxxx X xx xx 27 xxxxx xxxxxx x 5&xxxx;%. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, kterým xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx minutách 90&xxxx;% X. Xxxx složení xx udržuje xx xxxx pěti xxxxx x xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx během xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxxxxx xx vnitřním xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 15 xxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxx podmínek.

Poznámka 1. Xxxxxxxx čas CMPA xx xxx být 26 ± 2 xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx změnou xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxxx prvního xxxxxxxxx. Xxxxxx x % X xxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxx prvního gradientu xxxx zůstává xx xxxx 5&xxxx;% X.

Xxxxxxxx 2. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. Xx to nezbytně xxxxx xxx xx, xxx xxxxxxxxxxx čerpací xxxxxx xxxxxxx fungoval. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx XXXX xxxx xxx menší xxx 0,1 xxxxxx (x =&xxxx;10).

Xxxxxxxx 3. Xx xxxxxxx pět xxxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx [5] x použít xxx xxx výpočet xxxxxx xxxxxxxxxx faktoru X (9.1.1).

8.4.4.   Výsledky xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (X) se získávají xx formě chromatogramu, xx xxxx xx xxx CMPA určen xxxx xxxxxxxxx časem xxxxxxxxx v délce 26 xxxxx.

Xxxxx X&xxxx;xxxx XXXX xxxxxxxxxxx vypočítává integrátor (6.11.6). Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Jestliže xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx nebo xxxxxxxxx je třeba xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xx-xx xxx XXXX xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx, xxxx xx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx sedly. X xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx kolmice xx společné xxxxxxxx xxxxx, jejichž počáteční xxx by xxx xxx v blízkosti xxxx XXXX (xxxx xx x čase x =&xxxx;0 xxx!). Xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx použijte xxxxxx typ xxxxxxxxx x u xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx je se xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx konzistentní.

Před kvantitativní xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx za xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx anomálií xxxxxxxxxxx xxx nesprávnou xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxx, xxxx původem x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorku. X&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýzu xxxxxxxxx.

8.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx

8.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;X srovnávacích vzorků (5.4.1 až 5.4.2) xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx 8.2 až 8.4.4. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx XXX se v prostředí 8&xxxx;% xxxxxxxx trichloroctové xxxxxxxxx. Xxx teplotě 4&xxxx;°X xxxxxxx roztok xxxxx xx xxxx 24 xxxxx. X&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx používat x&xxxx;xxxxxxxxxxxx nástřikovém xxxxxxxx xxxxxxxxx misku xx xxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxx 8.4.2 xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx je % X v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx z xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5) xx xxx xxx obdobný xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx na xxxxxxx 1. Xx xxxxx xxxxxxx jsou xxxx xxxxx XXXX xxx malé xxxx. Xx xxxxxxxx nutné xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

8.5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx stanovením xxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx syrovátky [0] (5.4.1).

Xxxxxxxxxxxx nesmí xxxxxxxxx xxx v retenčním xxxx XXXX xxxx.

8.5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx objemu xxxxxxxx (8.5.1), xxxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxx.

9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX XXXXXXXX

9.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx

9.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx R:

Pík XXXX: R = X/X

xxx

X	=	xxxxxxxx xxxxxx xxxx XXXX
X	=	xxxxx píku XXXX
X	=	xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx [5]

9.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx vzorku

W(E) = X&xxxx;×&xxxx;X(X)

xxx

X(X)	=	xxxxxxxxxx xxxxxxxx syřidlové xxxxxxxxx xx vzorku [X]
X	=	xxxxxxxx xxxxxx xxxx XXXX (9.1.1)
X(X)	=	xxxxx píku XXXX xxxxxx (X)

Xxxxx xx W(E) xxxxx xxx 1 % x&xxxx;xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx [5] xxxxx xxx 0,2&xxxx;xxxxxx, pak xx xxxxxxxxxx xxxxxx ze xxxxxxxxx syrovátky xxxxxxxxx.

9.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

9.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx mezi xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku xxxxxxx xxxxxxxx nebo x&xxxx;xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx, xx neměl xxxxxxxxx 0,2&xxxx;% xx.

9.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxx.

9.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx

Xxx xxxxxxx xx 0 % xx 16&xxxx;% syřidlové xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx lineární xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx&xxxx;&xx;&xxxx;0,99.

9.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx

Xxxxx xxxxxxx 1&xxxx;% xxxxxxxx xxxxxxxxx z důvodu xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx 1

Xx—4.6 xxxxxxxx

XXXXXXX XX

Xxxxxx xxxxxxx másla x soukromém xxxxxxxxxx

Xxxxxxxx	Xxxxxx
Xxx&xxxx;(6)	XXX 17189 xxxx XXX 3727 xxxx&xxxx;3
Xxxx	XXX 3727 xxxx 1
Xxxxxxxxxx xxxxxx (x xxxxxxxx soli)	ISO 3727 xxxx 2
Sůl	ISO 15648

XXXXXXX XXX

Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x soukromém xxxxxxxxxx

Xxxxxxxx	Xxxxxx
Xxx	XXX 1736
Xxxxxxxxx	XXX 8968 xxxx 1
Xxxx	XXX 5537

PŘÍLOHA XXXX

Xxxxxx xxxxxxx xxxx v xxxxxxxxx xxxxxxxxxx

1.

Xx xxxxx xxxxxxx, xx sýry xxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx, xxxxxx mléka xx buvolího xxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx, x&xxxx;xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx mléka xx xxxxxxxx xx prokázanou, xxxxx xxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx stejný xxxx xxxxx v porovnání x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 1&xxxx;% kravského xxxxx, xxxxx xx xxxxxx v dodatku.

2.

Metody xx xxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxx uvedených x&xxxx;xxxxxxxx&xxxx;1 mohou být xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx: x) xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx nejvýše 0,5&xxxx;%; x) xxxxxx výsledky xxxxx xxx falešně xxxxxxxxx; x) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx kaseinu x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx s požadovanou xxxxxxxxxx x&xxxx;xx dlouhé xxxx xxxxx, x&xxxx;xxxxx xxxx za xxxxxxx xxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxx. Xxxx-xx xxxxx x&xxxx;xxxx uvedených xxxxxxxxx splněn, použijí xx xxxxxx uvedené x&xxxx;xxxxxxx.

Xxxxxxx

XXXXXX PRO XXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXX X&xxxx;XXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXX X&xxxx;XXXXXX MLÉKA, XXXXXX XXXXX XXXX XXXXXXXX XXXXX, NEBO XXXXX XXXXXX, KOZÍHO X&xxxx;XXXXXXXX XXXXX

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX

Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a kaseinátů v sýrech xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx mléka, xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx γ-xxxxxxx po xxxxxxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXX XXXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxx xxx citlivé x&xxxx;xxxxxxxxxx zjišťování xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx, též xxxxxxx xxxxxxxxxx, v čerstvých x&xxxx;xxxxxxx xxxxxx vyrobených x&xxxx;xxxxxx xxxxx, xxxxxx mléka, xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxx ovčího, xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx a referenčních standardů

3.2.   Rozpuštění xxxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (XX.3.4.21.7)

3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx fokusace xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx přítomnosti xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxxx

3.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx γ3 x γ2 (xxxxx xxxxxxxxxxx kravského xxxxx) xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx ze xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxx x referenčních xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0 % x 1&xxxx;% kravského xxxxx.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxx-xx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xx pouze xxxxxxxxxx xxxxxxx p.a. Xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxxxx údaje xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx 265 × 125 ×&xxxx;0,25&xxxx;xx. Xxxxx xx xxxxxxx jiné xxxxxxx xxxx druhy xxxx, xxxx být xxxxx xxxxxxx podmínky xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx pro xxxxxxxx polyakrylamidových gelů x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx

4.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx xxxx

Xx vodě xxxxxxxxx:

4,85&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxx

0,15 x X, X′-xxxxxxxx-xxx-xxxxxxxxxx (XXX)

48,05&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx

15,00&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx (87&xxxx;% xx.),

xxxxxxx xx 100 ml x xxxxxx do xxxxxxxxxx v hnědé xxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxx xxxxxxxxx množství neurotoxického xxxxxxxxxx lze použít xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;XXX.&xxxx;X&xxxx;xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx 30&xxxx;% xx./xxx. xxxxxxxxxx x&xxxx;0,8&xxxx;% xx./xxx. BIS, xxx xxxxxxx množství (4,85 x&xxxx;xxxxxxxxxx x&xxxx;0,15 x&xxxx;XXX) xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 16,2&xxxx;xx. Xxxxxxx xxxxxx xxx skladovat xxxxxxx 10 xxx. Xxxxx je jeho xxxxxxxx xxxxx než 5 μS, xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx s 2 x Xxxxxxxxx XX-3 po xxxx 30 xxxxx a xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxx 0,45μx xxxxxxxx.

4.1.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxx

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx a amfolytů (*) xx zásobním roztokem xxxx (xxx 4.1.1).

9,0&xxxx;xx xxxxxxxxx xxxxxxx

24&xxxx;xx β-alaninu

500 μx amfolytu xX 3,5–9,5

250 μx amfolytu xX 5–7

250 μl xxxxxxxx xX 6–8

Xxxxxx xxxxxx promíchejte a odplyňujte xx xxxx xxxx xx tří xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx lázni nebo xx vakuu.

Poznámka: Xxxxxx xxxxxx se xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx (viz 6.2).

4.1.3.   Roztoky xxxxxxxxxxxx

4.1.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;X, N, X′, X′-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (Xxxxx)

4.1.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;40&xxxx;% hm./obj. xxxxxxx xxxxxxxxx amonného (XXX)

800 xx PER xx xxxxxxxx ve xxxx x xxxxxx xx xx 2 xx.

Xxxxxxxx: Vždy xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx XXX.

4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx

4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx 5,77 g xxxxxxxx xxxxxxxxxx (85&xxxx;% xx.) xx xxxx a xxxxxx na 100 xx.

4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx 2,00 x hydroxidu sodného xx xxxx x xxxxxx xxxxx xx 100 xx.

Xxxxxxxx xxxxxx

4.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx k izolaci xxxxxxxx

4.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (25,0 ml ledové xxxxxxxx octové xxxxxxxx xxxxx do 100 xx).

4.5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx

4.5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx

4.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxx bílkovin

Ve xxxx xxxxxxxxx:

5,75&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx (87 % xx.)

24,03&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx

250&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxxxx

x doplňte xx 50 xx xxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx v chladničce; maximální xxxx uskladnění xx xxxxx týden.

4.7.   Chemikálie xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx

4.7.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx amonného

Titrujte xxxxxxx roztok xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx 0,2 xxx/x (1,58 x/100 ml xxxx) obsahující 0,05 xxx/x xxxxxxxx ethylendiamintetraoctové (XXXX, 1,46 g/100 xx) xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 0,2 xxx/x (1,92 g/100 xx xxxx) xxxxxxxxxxxx 0,05 xxx/x EDTA na xX 8.

4.7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx plasmin (XX. 3.4.21.7), x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx 5 X/xx.

4.7.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx ε-aminokapronové xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx 2, 624 g kyseliny ε-xxxxxxxxxxxxxx (6-xxxxx-x-xxxxxxxxxxxxx) xx 100 ml 40 % xxx. ethanolu.

4.8.   Referenční standardy

4.8.1.   Certifikované xxxxxxxxxx standardy směsi xxxxxx a kozího odstředěného xxxxx vysráženého xxxxxx xxxxxxx x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxx 0&xxxx;% x&xxxx;1&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xx Xxxxxx xxx referenční xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx působícího xxx Xxxxxx, B-2440, Xxxx, Xxxxxx.

4.8.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx laboratorních xxxxxxxxxxxx standardů buvolího xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx a x xxxxxxx 0&xxxx;% a 1&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx syrového xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx mléka xxx xxxxxxx 37 °C (2&xxxx;500&xxxx;x, 20 minut). Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x jejího xxxxxx xx 6 xx 8 °X xx úplně xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxx přípravu 1&xxxx;% xxxxxxxxx přidejte 5,00&xxxx;xx xxxxxxxxxxxx kravského xxxxx xx 495&xxxx;xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 1 l. Xxxxxxx xX xxxxxxx na 6,4 přídavkem xxxxxxx xxxxxxxx mléčné (10&xxxx;%, xx./xxx.). Teplotu upravte xx 35 °X, xxxxxxxx 100 μx xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxx 1: 10 000, xxx 3 000 U/ml) x&xxxx;xxxxxxxx po xxxx 1 xxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a nechte hodinu xxxx xxx teplotě 35&xxxx;°X k utvoření xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx pomocí syřidla xxxxxxxxxxx, xxxx by xxxxxxx byla xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx prášek. X&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 0&xxxx;% xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx u čistého xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx mléka. Referenční xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx – 20&xxxx;°X.

Xxxxxxxx: Xxxx xxxxxxxxx referenčních xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx mléka xxxxxxxxxxxxxx fokusací xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx

4.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx

Xxxxxxxxx 150&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx trichloroctové xx xxxx x&xxxx;xxxxxxx xx 1&xxxx;000&xxxx;xx.

4.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx 500 ml methanolu x 200 ml xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx vodou na 2&xxxx;000 xx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx; xxx xxx připravit xxxxxxxxx stejných objemů xxxxxxxxx xxxxxxx 50&xxxx;% (xxx.) methanolu x xxxxxxxxx xxxxxxx 20&xxxx;% (xxx.) ledové xxxxxxxx xxxxxx.

4.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxx

4.11.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxx 1)

X 1&xxxx;000 ml 90 % xxx. xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 45 xxxxx) 3,0 x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxx X-250 (X. X. 42655) x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxx skládané xxxxxx.

4.11.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx (zásobní xxxxxx 2)

X&xxxx;1&xxxx;000&xxxx;xx 20 % xxx. xxxxxxxx octové xxxxxxxxx 5,0&xxxx;x&xxxx;xxxxxx měďnatého, xxxxxxxxxxxx.

4.11.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx xxxxxx)

Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 125 ml xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.11.1 x&xxxx;4.11.2).

Xxxxxxxx: Xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxx přípravy.

5.   PŘÍSTROJE X POMŮCKY

5.1.   Skleněné desky (265 x 125 x 4 xx), xxxxxxx xxxxxxx (o xxxxx 15 xx), xxxxxxxxx xxxxxx.

5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxx xxxx (265 ×&xxxx;125&xxxx;xx)

5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxx (280 ×&xxxx;125&xxxx;xx). Xx každý dlouhý xxxxx xxxxxxx pruh xxxxxx xxxxx (280 ×&xxxx;6 × 0,25 mm) (viz xxxxxxx 1).

5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx deskou (xxxx. 265 × 125 mm) x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx xxxxx (≥ 2,5&xxxx;xX) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx zařízení

5.5.   Cirkulační kryostat x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxx ve xxxx 12 ± 0,5&xxxx;°X

5.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx na 3&xxxx;000&xxxx;x

5.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxx (o xxxxx ≥ 265&xxxx;xx)

5.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx

5.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx (10 ×&xxxx;5&xxxx;xx, x&xxxx;xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx)

5.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx a barvicí misky (xxxx. xxxxx na xxxxxxxx 280 ×&xxxx;150&xxxx;xx) x&xxxx;xxxxxxxx oceli xxxx xxxxxxxx

5.12.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx xxxxxx homogenizátor x&xxxx;xxxxxxxx xxxx 10&xxxx;xx x&xxxx;xxxxxxxxx 8&xxxx;000 xx 20&xxxx;000 xx/xxx

5.13.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx míchačka

5.14.   Ultrazvuková xxxxx

5.15.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx fólií

5.16.   Mikropipety xx 25 μl

5.17.   Vakuová odstředivka xxxx lyofilizátor

5.18.   Termostatem řízená xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 35 x&xxxx;40 ±&xxxx;1&xxxx;°X x&xxxx;xxxxxxxxx

5.19.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx délce λ =&xxxx;634&xxxx;xx

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX POSTUP

6.1.   Příprava xxxxxx

6.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxx

Xx odstředivkové xxxxxx xx 100&xxxx;xx xxxxxxx xxxxxxxx sýra xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx odpovídající 5&xxxx;x&xxxx;xxxxxx, xxxxxxxx 60&xxxx;xx xxxxxxxxxxx vody a obsah xxxxxxxxxxxxx tyčovým xxxxxxxxxxxxxxx (8&xxxx;000 xx 10&xxxx;000 xx/xxx). Xxxxxxx xX xx 4,6 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.5.1) x&xxxx;xxxxxxxxxxx (5 minut, 3&xxxx;000&xxxx;x). Xxxxxxxxxx tuk x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx 20&xxxx;000 xx/xxx xx 40&xxxx;xx xxxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxx xX xxxxxxxxx xx 4,5 xxxxxxxx xxxxxxxxx octovou (4.5.1). Xxxxxxxx 20&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxxx (4.5.2) x&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx (5 xxxxx, 3&xxxx;000&xxxx;x). Špachtlí xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxx vodnou x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxx (xxx obrázek 2), x&xxxx;xxx fáze xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx 40 xx xxxxxxxxxxx xxxx (xxx xxxx) x 20 ml xxxxxxxxxxxxxx (4.5.2) x xxxxxxxx xx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx extrakční xxxx xxxxxx bezbarvé (dvakrát xx xxxxxxx). Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x&xxxx;50&xxxx;xx xxxxxxx (4.5.3) a přefiltrujte xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx dvěma xxxxxxxxxxxx 25&xxxx;xx xxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxx xx vzduchu xxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxx. Potom xxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx při xxxxxxx – 20 °X.

6.1.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx β-xxxxxxx na γ-kaseiny xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxx 25 xx izolovaných xxxxxxx (6.1.1) x 0,5 xx tlumivého xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.7.1) x xxxx 20 xxxxx homogenizujte, xxxx. xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx 40&xxxx;°X x&xxxx;xxxxxxxx 10 μl xxxxxxxx (4.7.2), xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx 1 hodinu při xxxxxxx 40 °C xx xxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxx přidejte 20 μx xxxxxxx xxxxxxxx ε-aminokapronové (4.7.3). Xxxx přidejte 200&xxxx;xx xxxxx močoviny x&xxxx;2&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxx xxxxxxx xxxxx symetrie fokusovaných xxxxxxxxxxx pásů se xxxxxxxxxx po přidání xxxxxxxx ε-aminokapronové roztok lyofilizovat x poté xxxxxx xxxxxxxxx x 0,5 xx tlumivého xxxxxxx xxx rozpouštění xxxxxxxx (4.6).

6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxx močoviny

Na xxxxxxxxx xxxxx (5.1) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx (5.2) x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx xxxxx vody x&xxxx;xxxxxxxxxxx vodu odsajte xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx (5.3) x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (0,25 mm) xx jinou xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx druhou xxxxx uložte xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.

X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx (4.1.2) xxxxxxxx 10 μx Xxxxxx (4.1.3.1), xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx 10 μx xxxxxxx XXX (4.1.3.2); důkladně xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx nalijte xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx fólie. Xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxx (xxxxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxxx xxxx) xxxxxxxx x&xxxx;xxxxx s krycí xxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx tak, xxx se xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx pravidelně xxxxxxxxxxxx xxxxx vrstva xxxx bez xxxxxx (xxxxxxx 3). Pomocí xxxxx špachtle xxxxxx xxxxx gelu opatrně xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxx xx xx xxx xxxxx xxxxxxxx desky, xxx xx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxx xx 60 xxxxxxxx) xxxxx s xxxxx xxxxx sejměte xxx xxxxxxxxxxxxx na nosné xxxxx xxxx xxx, xx xxxxxxxx desky xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx fólie pečlivě xxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxx. „Xxxxxx xxxxxxx“ xxxxxxx xx tenké xxxxx a uložte do xxxxxxxxxx (nejdéle na xxxx xxxxx).

Xxxxxxxx: Krycí xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxx části; xx xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx elektroforetického xxxxxxxx (xxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxxx 4,5 ×&xxxx;5&xxxx;xx).

6.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxxx na 12 °X. Xxxxx stranu xxxxx fólie xxxx xxxxxx xxxxxxxxx a poté xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx kápněte xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (4.2). Xxxxxxx xxxxxxxx „gelový xxxxxxx“ xxxxxx xxxxx xxxxxxxx dolů, xxx xx vytlačily všechny xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx a sejměte xxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx napusťte elektrodovými xxxxxxx (4.3, 4.4), xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxx na xxxxx (xxxxxxxxxx elektrod 9,5&xxxx;xx).

Xxxxxxxx izoelektrické xxxxxxxx

6.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxx 265 ×&xxxx;125 ×&xxxx;0,25&xxxx;xx

Xxxx	Xxxx (xxx)	Xxxxxx (X)	Xxxxx (xX)	Xxxxxx (X)	Xxxxx/xxxxxx (Xx)
1. Xxxxxxxxx fokusace	30	max. 2 500	max. 15	konstantní 4	xxx 300
2. Fokusace xxxxxx&xxxx;(7)	60	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 15	xxxxxxxxxx 4	xxx 1 000
3. Konečná fokusace	60	max. 2 500	max. 5	max. 20	cca 3&xxxx;000
	40	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 6	xxx. 20	xxx 3&xxxx;000
	30	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 7	xxx. 25	xxx 3&xxxx;000

Xxxxxxxx: Xxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx, xxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxxx způsobem xxxxxxxx (xxxx. hodnoty xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx-xx se xxx x&xxxx;xxxxxxxxx 265 × 125 ×&xxxx;0,5&xxxx;xx).

6.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (2 xxxx 5,0 ×&xxxx;4,5&xxxx;xx, elektrody bez xxxxxxx xx přikládají xxxxx na xxx.

Xxxx	Xxxxxx	Xxxxx	Xxxxxx	Xxxxxxx	Xxxxx/xxxxxx
1. Xxxxxxxxx xxxxxxxx	1&xxxx;000 X	10,0 xX	3,5 X	8 °C	85 Vh
2. Fokusace xxxxxx	250 X	5,0 mA	2,5 X	8 °X	30 Xx
3. Xxxxxxxx	1&xxxx;200 X	10,0 xX	3,5 X	8 °X	80 Vh
4. Fokusace	1 500 X	5,0 xX	7,0 W	8 °X	570 Xx

Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx 2 xxxxxx xxx 0 Xx.

Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx 2 xxxxxxxxx xxx 30 Vh.

6.4.   Barvení xxxxxxxx

6.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxx xx xxxxx xxxxx xx barvicí/odbarvovací xxxxx xxxxxxxx 200&xxxx;xx xxxxxxxx (4.9). Xxx x xx ponechte 15 xxxxx xx xxxxxxx třepání.

6.4.2.   Praní x&xxxx;xxxxxxx xxxxxx xxxxx

Xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxx desku xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx 30 sekund xxxx xx 100 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.10) Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx naplňte 250&xxxx;xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.11.3) x xxx xxxxxx xx xxxxxxx třepání xx dobu 45 xxxxx xxxxxxxxx.

6.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx

Xxxxxxx xxxxxx dekantujte x&xxxx;xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx 30 xxxxxx xxxx xx 100&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.10). Poté 15 minut protřepávejte x&xxxx;200&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx; xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx čiré a bezbarvé. Xxxxxxx desku xxxxx xxxxxxxx destilovanou vodou (2 × 2 minuty) x&xxxx;xxxxxx uschnout na xxxxxxx (2 až 3 xxxxxx) xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (10 až 15 xxxxx).

Xxxxxxxx 1: Xxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx teplotě 20&xxxx;°X. Xxxxx teploty xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx 2: Pokud xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (např. Xxxxxx Xxxxxxxx Kit, Protein, Xxxxxxxxx Xxxxxxx, kód x. 17-1150-01), musí xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx plasminem xxxxxxx x xxxxxx 5 xx/xx.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX

Xxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx mléka, xxxxxx mléka, xxxxxxxx xxxxx xxxx ze xxxxx ovčího, xxxxxx x buvolího mléka xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx γ3- a γ2-xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxx xX 6,5 x xX 7,5 (obrázky 4x, x, xxxxxxx 5). Xxxxxxxx xxx xx xxxxx než 0,5 %.

7.1.   Vizuální xxxxxxxxx

Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx upravit xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx dosáhnout u xxxxxxxx, xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx γ2- a γ3-xxxxxxx (xxx „γ2 X,X,X“ x „γ3 X,X,X“ xx xxxxxxxxx 4x, b x xxxxxxx 5) xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Pouze xx těchto xxxxxxxx xxx přímo xxxxxxxx xxxxxxxx kravského xxxxx (xxxxx xxxx xxxxx xxx 1 % xxxx xx xxxx 1 %) x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx γ3- x&xxxx;γ2-xxxxxxx (xxx „γ3 X“ x&xxxx;„γ2 X“ xx xxxxxxxxx 4 a, x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxx 5) s intenzitami xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx standardech x&xxxx;xxxxxx 0&xxxx;% a 1 % (xxxxxx, xxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx standardech (xxxxxxxx).

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx poměru xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx γ2- x&xxxx;γ3-xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxx x/xxxx buvolích γ2- a γ3-kaseinů (xxx xxxxxxx 5) denzitometrii (5.19). Xxxx hodnotu xxxxxxxxxx s poměrem xxxxx píků γ2- x γ3-xxxxxxx v 1&xxxx;% xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxx, xxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxx) xxxxxxxxxxxxx x xxxxx gelu.

Poznámka: Xxxx xxxxxx funguje xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx jasný xxxxxxxxx xxxxxx obou xxxxxxxx γ2- x γ3-xxxxxxx x 1&xxxx;% xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x 0&xxxx;% xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. V opačném xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx optimalizovat při xxxxxxx xxxxxxxx pokynů xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxx xxxxxx.

Xxxxxx xx xxxxxxxxx za xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxx hovězích γ2- x γ3-xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxx než xxxxxxx odpovídající 1&xxxx;% xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxx F., Xxxx L., Xxxxxxxx X., Stingo X., Xxxxxxx X., Berner X, Krause I., Xx Luccia A., Xxxxx A.: Xxx xx xxxxxxx xx&xxxx;xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxx detection xx xxxxxx xxxx&xxxx;xx ovine xxx/xx xxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx of γ2-caseins. Milchwissenschaft 45, 708–711 (1990).

Addeo X., Xxxxxxx M.A., Xxxxxxxx L., Xxxx X., Spagna Xxxxx X., Xxxxx X., Xxx Xxxxxxx X.: X xxxxxxx method xx detect xxxxxx xxxx&xxxx;xx xxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx immunoblotting. Xxxxxxxxxxxxxxxxx 50, 83–85 (1995).

Xxxxxx X., Xxxxxx I, Xxxxxxxxxxxx H.: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx of xxx xxxx&xxxx;xx xxx xxx xxxx xxxx&xxxx;xxx xxxxxx xx carrier ampholyte — xxx xxxxxxx xxxxxxxxx/xxxxxxxxxxx pH xxxxxxxx — xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx γ-xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx signal xxxxxxxxx. in: Xxxxxxxxxxxxxxx-Xxxxx 89 (X. X. Xxxxxx, xx.) xx 389-393, Xxxx-Xxxxxx, München (1989).

Xxxxxx Ι., Belitz X.-X., Kaiser K.-P.: Xxxxxxxx xxx Xxxxxxxx xx Schaf and Xxxxxxxxxxx xxx. -xäxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxxxxxx. X. Xxxxxxx. Xxxxxx.&xxxx;Xxxxxx. 174, 195–199 (1982).

Radola X.X.: Xxxxxxxxx-xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 50-100&xxxx;μx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx.&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx 1, 43–56 (1980).

Xxxxxxx 1

Xxxxxxxxxxx xxxxxx krycí xxxxx

Xxxxxxx 2

Kaseinová xxxxxx xxxxxxxx mezi xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx

Xxxxxxx 3

Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx gelů

a = xxxxxxxxx xxxxx (0,25 mm); x = xxxxx xxxxx (5.3); c, x = skleněné xxxxx (5.1); d = xxxxxx roztok (4.1.2); x = xxxxx fólie gelu (5.2).

Xxxxxxx 4x

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx x&xxxx;xxxxxx a kozího xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x&xxxx;xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

% XX = xxxxxxxx xxxxxxxxx mléka, C = xxxxxxx, X&xxxx;= xxxx, X&xxxx;= kozí

Na xxxxxxx xx znázorněna horní xxxxxxxx gelu IEF.

Obrázek 4x

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx mléka, xxxxxxxxxx plasminem, x&xxxx;xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

% XX = xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx; 1 + = vzorek x xxxxxxx 1 % xxxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx. C = xxxxxxx, X&xxxx;= ovčí, X&xxxx;= xxxx, X&xxxx;= xxxxxx

Xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx celá separační xxxxxxxxxx gelu XXX.

Xxxxxxx 5

Xxxxxxxxxxx denzitogramů referenčních xxxxxxxxx (XXX) x&xxxx;xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

x, x = xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 0 a 1&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxx; x-x = xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx 0, 1, 2, 3 x 7&xxxx;% kravského mléka; X&xxxx;= xxxxxxx, X&xxxx;= xxxx, X&xxxx;= xxxx.

Xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx XXX xxx λ =&xxxx;634&xxxx;xx.

XXXXXXX XX

Xxxxxxxxx xxxxxx

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx&xxxx;12 xxxxxxxx (XX) x.&xxxx;882/2004&xxxx;(*) xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxxx a námitky xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx

1.

Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx nařízením xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx-xx žádná xxxxxxxxxx xxx odběr vzorku, xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx XXX 707„Xxxxx a xxxxxx výrobky – Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx“,

2.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx umožní xxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx.

3.

Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx v právních xxxxxxxxxx Xxxx se odebírají xxxxxxxxxx xxxxxx.

4.

Xxxxx xxxxx xx xxxxx ohledně xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx nezbytnou xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxx strana, xxxxx xxxx prohraje. Výše xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xx předpokladu, xx&xxxx;xxxxxxxxxx duplicitní xxxxxx xxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxx xxxxx uloženy x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx platební agentuře xxxxxx k provedení analýzy xx&xxxx;xxxxx pracovních xxx xx&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx agentura xxxxxxx analýzu xx 21 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx.

5.

Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx.

6.

Xxxxxxxx xxxxxxx xx pěti xxxxxxxxxx xxx po odběru xxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx nebyl xxxxxxx, xxxxx vzorků se x&xxxx;xxxxx možností xxxxxxxx. Xxxxx odběr vzorků xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx

Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx stanovené xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

X xxxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx stanoví xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx tyto xxxxxxx. Xx všech xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx ze 3 xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx náhodně xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Lze připravit x&xxxx;xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx porovná xx xxxxxxx stanovenými xxxxxxx hodnotami na xxxxxxx výpočtu 95&xxxx;% xxxxxxxxx spolehlivosti jakožto xxxxxxxxxxx směrodatné xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx buď xx xxx, 1) xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx s hodnotami xxx σx x σX, xxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx validace xx xxx, 2) zda xxxx vypočítána xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxx xxxxxxxxx měření xxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx je xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx

X&xxxx;xxxxx případě byla xxxxxxxxxx odchylka opakovatelnosti σx x&xxxx;xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxxxxxxxxxxxx σR stanovena a laboratoř xxxx xxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx&xxxx; x xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xx rozšířená xxxxxxxxx (x =&xxxx;2) x&xxxx; xxxxx:

Xx-xx konečný xxxxxxxx xxxxxx x vypočítán xx xxxxxx xx xxxxx x = x ₁ + x ₂, x = x ₁ – y ₂, x = y ₁ · x ₂ xxxx x = x ₁/y ₂, xxxx xx x&xxxx;xxxxxxxx případech xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx postupů xxx xxxxxxxxxxx směrodatných xxxxxxxx.

Xxxxx se xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx stanovené mezní xxxxxxx UL, xxxxxxxx

xxxxx xx xx xx xx, xx hodnotě XX xxxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx LL, xxxxxxxx

xxxxx se xx xx to, že xxxxxxx XX xxxxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx

X&xxxx;xxxxxxxxx, xxx xxxx použity xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx v tomto xxxxxxxx, x&xxxx;xxx xxxxxx stanovena xxxxxxxx xxx zajištění xxxxxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx σr x σ X xx musí xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx nejistoty X xxxxxx směrodatná xxxxxxxx xxxxxxx opakovatelnosti sir x&xxxx;xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx si X .

Xxxxxxxx, jež xx xxxxx dodržovat xx účelem xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx mezní xxxxxxx, jsou xxxxxxx x&xxxx;xxxx 1. Xxxxxxxx-xx xx xxxx šarže xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx stanovené x&xxxx;xxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxx 1.