Plné znění - 32018R0150

Dodatek X

XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXXX&xxxx;XXXXXXXXXXX XXXXX

Xxxxxx: XXXX s obrácenými xxxxxx

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX X XXXXXX XXXXXXX

Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx kvantitativního stanovení xxxxxxxxxxxxxxxx (XX) x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XX) v sušeném xxxxxxxxxxx xxxxx (SOM) x&xxxx;xx xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx v SOM.

2.   DEFINICE

Obsah XX + XX: xxxxxxxxxx zlomek xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx dipalmitoyl-fosfatidylethanolaminu (XXXX) xx 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX METODY

Extrakce xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx XX x&xxxx;XX xxxx xxxxxxxx x-xxxxxxxxxxxxxx (XXX) xxxxxxx HPLC x&xxxx;xxxxxxxxxx fázemi (XX) x&xxxx;xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Kvantitativní xxxxxxxxx xxxxxx XX x&xxxx;XX xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, který xxxxxxxx známé množství XXXX.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx, používá xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx nejméně xxxxxxxxxx xxxxxxx.

4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx: XXXX o xxxxxxx xxxxxxx 99 %

Poznámka: Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx teplotě – 18&xxxx;°X.

4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx srovnávacích a zkušebních xxxxxx

4.2.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx xxx XXXX

4.2.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx čistoty xxx XXXX

4.2.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx

4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx pro xxxxxxxx x-xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

4.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx, 12 M xxxxx xxxxxx

4.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx boritá, 0,4 X xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xX xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.3.1) xx 10,0

4.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;2-xxxxxxxxxxxxxxx

4.3.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;x-xxxxxxxxxxxxx (XXX)

4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx HPLC

4.4.1.   Eluční xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx XXXX.

4.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxx xxx XXXX

4.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx fluorometricky xxxxxxxx xxxxxxx

4.4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx

4.4.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx dihydrogenfosforečnan

4.4.6.   Octan xxxxx

4.4.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx octová.

5.   PŘÍSTROJE A XXXXXXX

5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx váhy s přesností xxxxxx na 0,1&xxxx;xx x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx odečtu xx 1&xxxx;xx

5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 25 x&xxxx;100&xxxx;xx

5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx 1 do 10&xxxx;xx

5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

5.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 0,2, 0,5 x&xxxx;5&xxxx;xx

5.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxx 10, 50 x&xxxx;100&xxxx;xx

5.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxx o objemu 20 x&xxxx;100 μl

5.8.   Ultrazvuková xxxxx

5.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx fungující při 27&xxxx;000 ×&xxxx;x

5.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxx 5&xxxx;xx

5.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxx 25 ml

5.12.   pH xxxx x&xxxx;xxxxxxxxx na 0,1 xxxxxxxx pH

5.13.   Zařízení xx HPLC

5.13.1.   Gradientový xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx fungovat xxx xxxxxxx 1,0 xx/xxx při 200 xxxxxx

5.13.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx dávkovač vzorků x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx

5.13.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx teplotě 30 °C ± 1 °C

5.13.4.   Fluorescenční detektor xxxxxxx fungovat xxx xxxxxxxxx xxxxxx délce 330&xxxx;xx a emisní xxxxxx xxxxx 440 nm

5.13.5.   Integrátor nebo xxxxxxxxxx vybavení pro xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx plochy xxxx

5.13.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx XxXxxxxxxxx® – 100&xxxx;(250 ×&xxxx;4,6&xxxx;xx) xxxx rovnocenná xxxxxx xxxxxxxx oktadecylsilanem (X 18), xxxxxxxx xxxxxx 5 μx

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXX XXXXXX

Xxxxxx se odebírají x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx XXX 707.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

7.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx

7.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx 30,0 ± 0,1&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (4.2.3) xx xxxxxxx xxxxx xx 100&xxxx;xx (5.6) a doplňte xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1).

7.1.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx (5.3) přeneste 1 ml xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx 10&xxxx;xx (5.6) a doplňte xx značku methanolem (4.2.1) x&xxxx;xxxxx získat xxxxxxxxxxx tryptaminu 0,15 xX.

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx roztoku zkušebního xxxxxx

7.2.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx 1,000 ± 0,001&xxxx;x&xxxx;xxxxxx XXX xx xxxxxxx xx 25 ml (5.2). Xxxxxxx (5.3) xxxxxxxx 10&xxxx;xx xxxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxx 40 °C ± 1&xxxx;°X a po xxxx 30 minut xxxxxxxx xxxxxxxxxxx míchačkou (5.4), xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

7.2.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx (5.5) přeneste 0,2&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxxxxxx mléka xx xxxxxxx xxxxx na 10&xxxx;xx (5.6), xxxxxx xxxxxxxx stříkačky (5.7) xxxxxxxx 100 μx 0,15 xX xxxxxxx xxxxxxxxxx (7.1) x&xxxx;xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1). Xxxxxxxxxxx opatrně xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xx 15 minut xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.8).

7.2.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx (5.9) xxx 27&xxxx;000 ×&xxxx;x&xxxx;xx xxxx 10 xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx odeberte xx skleněné xxxxxxx (5.10).

Xxxxxxxx: Xx provedení xxxxxxx XX xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx skladován xxx xxxxxxx 4&xxxx;°X.

7.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx standardu

7.3.1.   Navažte 55,4 mg XXXX (4.1) xx xxxxxxx baňky xx 50&xxxx;xx (5.6) x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx (5.11) xxxxxxxx xxx 25&xxxx;xx xxxxxxxxxxx (4.2.2). Zazátkovanou xxxxx xxxxxxxx xx 50 °C ± 1&xxxx;°X x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx se XXXX xxxxxxxxxx. Baňku xxxxxxxx xx 20&xxxx;°X, xxxxxxx xx značku xxxxxxxxxx (4.2.1) x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

7.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx (5.3) xxxxxxxx 1&xxxx;xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx baňky xx 100&xxxx;xx (5.6) x&xxxx;xxxxxxx po xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1). Xxxxxxx (5.3) přeneste 1 ml xxxxxx roztoku xx xxxxxxx xxxxx xx 10&xxxx;xx (5.6), přidejte 100 μx (5.7)&xxxx;0,15xX xxxxxxx tryptaminu (7.1) x&xxxx;xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xx xxxxxxxxx xxxxxxx XX xxxx xxx roztok xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 4&xxxx;°X.

7.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Xx xxxxxxx xxxxx xx 10&xxxx;xx (5.6) xxxxxxx 25,0 ± 0,1&xxxx;xx XXX (4.3.4), xxxxxxxx 0,5 ml (5.5) xxxxxxxxx (4.2.1) x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx, aby se XXX xxxxxxxxx. Doplňte xx xxxxxx roztokem xxxxxxxx xxxxxx (4.3.2) x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx (5.7) xxxxxxxx 20 μx 2-xxxxxxxxxxxxxxxx (4.3.3).

Poznámka: Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx 4 °C; xxxxxxx zůstává stálé xx xxxx jednoho xxxxx.

7.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx XXXX

7.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.4)

Xxxxxxxxxxxx X: Xxxxxx 0,3 mM xxxxxx dihydrogenfosforečnanu a roztok 3 xX octanu xxxxxxx (x xxxxxxxx xX upravenou xx 6,5 ± 0,1 xxxxxxxxx octovou): xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx = 558: 440:2 (xxx.).

Xxxxxxxxxxxx X: Xxxxxxxx

7.5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx gradient:

Čas (xxx)	Xxxxxxxxxxxx X (%)	Rozpouštědlo B (%)	Xxxxxx (xx/xxx)
Xxxxxxxxx	40	60	0
0,1	40	60	0,1
5,0	40	60	0,1
6,0	40	60	1,0
6,5	40	60	1,0
9,0	36	64	1,0
10,0	20	80	1,0
11,5	16	84	1,0
12,0	16	84	1,0
16,0	10	90	1,0
19,0	0	100	1,0
20,0	0	100	1,0
21,0	40	60	1,0
29,0	40	60	1,0
30,0	40	60	0

Xxxxxxxx: Xxxx xx xxxx, že xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx být xxxxx xxxxxxx, xxx bylo xxxxxxxx xxxxxxxxx znázorněné xx xxxxxxx 1.

Teplota xxxxxx: 30 °X.

7.5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxxxxx: 50 μx xxxxxxxxxxxxxxx činidla x&xxxx;50 μx xxxxxxx xxxxxx

7.5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxx

Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx kolonu promývejte 100&xxxx;% rozpouštědlem X&xxxx;xx xxxx 15 minut, xxxxx xxxxxxxxx poměr X:X =&xxxx;40:60 x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx dobu 15 xxxxx při xxxxxxx 1 ml/min. Xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx methanolu (4.2.1).

Poznámka: Xxxx xxxxxxxxxxx kolony xx xxxxx dobu xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx 30 xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx x xxxxxx 80:20 (xxx.).

7.5.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx obsahu XX + PE xx xxxxxxxxx xxxxxx

7.5.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx analýz xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx časy. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx nastříkněte xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (7.3) xx xxxxxxx 5–10 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxx je nutné xx každých 20–25 xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx 100 % xxxxxxxxxxxxx B (7.5.1).

7.6.   Integrační xxxxx

7.6.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxx XXXX

XXXX se vymývá x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx píku. Xxxxxx xxxx stanovte xxxxxxxxx mezi xxxxx.

7.6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx vymývá x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx xxxx (xxxxxxx 1). Xxxxxx xxxx xxxxxxxx integrací xxxx sedly.

7.6.3.   Skupiny xxxx XX x&xxxx;XX

Xx takto xxxxxxxxx xxxxxxxx (obrázek 1) xx XX xxxxxx x&xxxx;xxxxxx dvou xxxxxxxx, částečně nerozlišených xxxx, xxxx xxxxx xx nachází xxxxx xxxxx xxx. PE xx vymývá x&xxxx;xxxxxx xxx hlavních, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxx každé skupiny xxxx stanovte nastavením xxxxxxxx xxxxx xxx, xxx je xxxxxxxxxx xx obrázku 1.

8.   VÝPOČET X XXXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xxxxx XX + PE xx xxxxxxxxx vzorku xx vypočte xxxxx:

X =&xxxx;55,36 × ((A₂)/(A₁)) × ((X₁)/(X₂))

xxx:

X	=	xxxxx PS xxxx XX (x xx/100 g prášku) ve xxxxxxxxx xxxxxx
X1	=	xxxxxx píku XXXX xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (7.3)
X2	=	xxxxxx píku XX xxxx XX xxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku (7.2)
X1	=	xxxxxx xxxx tryptaminu xxxxxxx srovnávacího xxxxxx (7.3)
X2	=	xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx zkušebního xxxxxx (7.2).

9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxxxx: Xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxx IDF (*).

9.1.   Opakovatelnost

Relativní směrodatná xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nezávislých xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx x&xxxx;xxxxxxxx zkušebního xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx časovém odstupu, xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 2&xxxx;%. Xxxxxxxx xx za xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx rozdíl xxxx xxxxxx xxxxxxxx xx neměl xxx xxxxx xxx 6&xxxx;% xxxxxxxxxxxxx průměru výsledků.

9.2.   Reprodukovatelnost

Jestliže xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx laboratořích na xxxxxxx přístrojích a za xxxxxxx xxxxxxxx analýzu xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx stanovením, xxxxxxxxx xxxxxx mezi xxxxx xxxxxxxx by xxxxx být xxxxx xxx 11&xxxx;% xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx výsledků.

10.   LITERATURA

10.1.   Resmini X., Xxxxxxxxxx X., Xxxxxxxxx X. X., Xxxxxx X., Xxxxxxxx X. „Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx&xxxx;xxxxxx xx skimmilk powder by XXXX quantification xx xxxxxxxxxxxxxxxxxx.“ Xxx. Tecn. Xxxx.-Xxx.&xxxx;39,395[1988].

Xxxxxxx 1

XXXX xxxxxxxxxxxx XXX-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (PS) x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XX) v methanolovém xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxx sušeného xxxxxxxxxxxx mléka. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx XX, XX x&xxxx;xxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx).

Xxxxxxx XX

XXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX XXXXXXX PRO XXXXXXX XXXXXXXXXX XX XXXXXXX STANOVENÍ KASEINOMAKROPEPTIDŮ XXXXXXXXXXXXX KAPALINOVOU XXXXXXXXXXXXXX (XXXX)

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX X&xxxx;XXXXXX POUŽITÍ

Tato xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx syřidlové syrovátky x&xxxx;xxxxxxx odstředěném mléce xxxxxxx k veřejnému xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX XXXXX

Xxxxxxxxxxx norma XXX 707 – Xxxxx a mléčné xxxxxxx – Xxxxxxxx xxx odběr vzorků.

3.   DEFINICE

Obsah xxxxxx ze xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx procento xxxxxxxxx xxxxxxxx postupem xxxxx xxxxxx kaseinomakropeptidů.

4.   PODSTATA XXXXXX

—	Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx odstředěného xxxxx, xxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxx trichloroctovou x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx;

—	Xxxxxxxxx množství kaseinomakropeptidů (XXX) x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (HPLC);

—	Vyhodnocení xxxxxxxx získaného x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, které xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx nebo bez xxxxxxxx známého xxxxxxxx xxxxxx syrovátky.

5.   CHEMIKÁLIE

Používají xx xxxxx xxxxxxxxxx čistoty x.x. Xxxxxxx xxxx xxxx xxx voda xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx trichloroctové

Rozpusťte 240 g kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (XXx₃XXXX) ve xxxx x&xxxx;xxxxxxx na 1&xxxx;000&xxxx;xx. Xxxxxx by xxx xxx xxxx x bezbarvý.

5.2.   Eluční roztok, xX 6,0

Rozpusťte 1,74&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (K₂HPO₄), 12,37&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx draselného (XX₂XX₄) x&xxxx;21,41&xxxx;x&xxxx;xxxxxx sodného (Xx₂XX₄) xxx x&xxxx;700&xxxx;xx xxxx. X&xxxx;xxxxxxx potřeby upravte xX na 6,0 xxxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxx na 1 000 xx a homogenizujte.

Poznámka: Xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx osvědčení xxxxxxxxx xxxx doporučením xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx.

Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx přefiltrujte přes xxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx.

5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx objem xxxxxxxxxxxx (XX₃XX) x&xxxx;xxxxxx xxxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxxx směs xxxxxxxxxxxx xxxx membránový filtr x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx.

Xxxxxxxx: Lze xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx

5.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx tohoto nařízení (xx. [0]).

5.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx sušené xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5&xxxx;% hm. xxxxxx syřidlové xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xx. [5]).

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX X POMŮCKY

6.1.   Analytické xxxx

6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx schopná xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx 2&xxxx;200&xxxx;x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxx 50 ml

6.3.   Mechanická xxxxxxxx

6.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

6.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxx 7&xxxx;xx

6.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx papíry xxxxxxx xxxxxxx o průměru xxx 12,5&xxxx;xx

6.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx

6.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 10 ml (XXX 648, xxxxx A, xxxx ISO/R 835) xxxx dávkovací xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 10,0&xxxx;xx xx xxx xxxxxx

6.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx schopný dodávat 20,0&xxxx;xx xxxx xxx xxxxxxx asi 50&xxxx;°X

6.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx nastavená xx 25 ± 0,5&xxxx;°X

6.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xx HPLC, xxxxx xxxxx:

6.11.1.

Xxxxxxxx

6.11.2.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx – xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx – o objemu 15 xx 30 μx

6.11.3.

Xxx kolony TSK 2&xxxx;000-XX za xxxxx (xxxxx 30&xxxx;xx, xxxxxxx xxxxxx 0,75 cm), nebo xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx. jedna xxxxxx XXX 2 000-SWxl, jedna xxxxxx Xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx Xxxxxx XX 250) x&xxxx;xxxxx předkolona (3&xxxx;xx ×&xxxx;0,3&xxxx;xx) xxxxxxxx xxxxxxxxxx X&xxxx;125 xxxx xxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

6.11.4.

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx 35 ± 1 °C

6.11.5.

UV xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx 205&xxxx;xx s citlivostí 0,008 Å.

6.11.6.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx mezi xxxxx Xxxxxxxx: Xxx pracovat s kolonami xxxxxxxxxxx při xxxxxxxxxxx xxxxxxx, avšak jejich xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx x&xxxx;xxxxxx xxxxx. X&xxxx;xxxxx xxxxxxx xx xxxxx, xxx výkyvy xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx menší xxx 5 °C.

7.   ODBĚR VZORKŮ

7.1.   Vzorky xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxx XXX 707. Xxxxxxx státy xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx vzorků xx xxxxxxxxxxx, xx xxxx metoda xxxxxxxx xxxxxxx uvedené xxxxx.

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx.

8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

8.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku.

Sušené mléko xxxxxxxx do xxxxxxx, xxxxx xxxxx je xxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxx prášku x&xxxx;xxxxx xx opatřena xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx uzavřete. Sušené xxxxx důkladně promíchejte xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nádobky.

8.2.   Zkušební xxxxx

Xx odstředivkové zkumavky (6.2) xxxx xxxxxx xxxxx se xxxxxx xx 50&xxxx;xx xxxxxxx 2,000 ± 0,001 g zkušebního xxxxxx.

8.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxx

8.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 20,0&xxxx;xx teplé (50&xxxx;°X) xxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (6.3). Xxxxxxxx vložte do xxxxx lázně (6.10), xxxxx se xxxx xxxxxxx neustálí xx 25&xxxx;°X.

8.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx dvou minut xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx míchačkou (6.4)&xxxx;10,0&xxxx;xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (5.1) o teplotě xxx 25 °C. Xxxxxxxx xxxxxx xx 60&xxxx;xxxxx xx xxxxx xxxxx (6.10).

8.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx (6.2) xx xxxx 10 xxxxx xxx odstředivé síle 2&xxxx;200&xxxx;x, nebo xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx (6.6) x&xxxx;xxxxxxx 5&xxxx;xx xxxxxxxx xxxxxxx.

8.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

8.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx 15 xx 30 μl xxxxxx xxxxxxxxxx supernatantu xxxx filtrátu (8.3.3) xx xxxxxxxx na XXXX (6.11) x&xxxx;xxxxxxxx 1,0&xxxx;xx xxxxxxxx xxxxxxx (5.2) xx xxxxxx.

Xxxxxxxx 1. X&xxxx;xxxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx použitých xxxxx nebo xx xxxxxxxx xxxxxxx kolony xxx xxxxxx x&xxxx;xxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx 2. Při xxxxxx přerušení xxxxxxxx xxxxxx vodou. Xxxxx x&xxxx;xxxx xxxxxxxxxxxx eluční xxxxxx (5.2).

Xxxx každým xxxxxxxxxx na xxxx xxx 24 xxxxx xx kolony xxxxxxxxxxx xxxxx x potom xx promývají roztokem (5.3) xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxx xxx xxxxxxx 0,2 ml xx xxxxxx.

8.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku [X] xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx, v němž xx xxxxx xxx xxxxx svým xxxxxxxxx xxxxx XX xxxxx:

Xxx XX:	Xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx x XX xxx 12,5 minuty
Pík XXX:	Xxxxx xxx chromatogramu xxxxxxxxxxxx XXX x XX 15,5 minuty

Retenční časy xxxxxxxxxxxx xxxx mohou xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (xxxxx).

Xxxxxxxxxx (6.11.6) automaticky xxxxxxxxxx xxxxxx X&xxxx;xxxxxxx xxxx:

XXX:	xxxxxx xxxx II
AIII:	plocha xxxx XXX

Xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx nezbytné xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx způsobených xxx nesprávnou xxxxxx xxxxxxxx, nebo xxxxx, xxxx původem a povahou xxxxxxxxxxxxx vzorku.

V případě xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

8.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx

8.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;X xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.4) xx xxxxxx použije xxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx&xxxx;8.2 až 8.4.2.

Xxxxxxxx čerstvě připravené xxxxxxx, xxxxxxx XXX xx x&xxxx;xxxxxxxxx 8&xxxx;% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx odbourávají. Xxxxxx xxxxx xx xxx teplotě 30&xxxx;°X xxxxxxx odhadem o 0,2 % xx xxxxxx.

8.5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx stabilizujte xxxxxx opakovanými xxxxxxxx xxxxxxx (8.5.1) xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.4.2), xxxxx xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxx xxxx odpovídajícího XXX xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

8.5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx X&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (8.5.1), xxxxxx xxxx xxxxxxx xxx vzorky.

9.   VYJÁDŘENÍ XXXXXXXX

9.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx

9.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx X:

Xxx XX:

XXX = 100/(XXX[0])

xxx:

XXX	=	xxxxxxxx xxxxxxx xxxx XX
XXX [0]	=	xxxxxx xxxx XX srovnávacího xxxxxx [0] xxxxxxx x&xxxx;8.5.3

Xxx XXX:

XXXX = X/(XXXX[5] – AIII[0])

kde:

RIII	=	odezvový xxxxxx xxxx XXX
XXXX [0] xxx AIII [5]	=	xxxxxx píku XXX xxxxxxxxxxxx vzorků [0] x&xxxx;[5] xxxxxxx v 8.5.3
W	=	množství xxxxxxxxx ve srovnávacím xxxxxx [5], xx. 5

9.1.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxx plochy xxxx xx vzorku [X]

XXX[X] = RII × XXX[X]

XXXX[X] = XXXX × XXXX[X]

XXX[X] = XXX × XXX[X]

xxx:

XXX [E], SIII [X], SIV [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XX, XXX x&xxxx;XX xx xxxxxx [E]
AII [E], XXXX [E]	=	plochy xxxx XX x&xxxx;XXX xx xxxxxx [X] xxxxxxx x&xxxx;8.4.2
XXX, XXXX	=	xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx v 9.1.1

9.1.3.   Výpočet xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx XXX xx xxxxxx [X]:

XXXXXX[X] = (XXXXX[X])/(XXXXX[5])

xxx:

XXXXXX [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxx XXX xx xxxxxx [X]
XXXXX [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxx XXX xx xxxxxx [X] xxxxxxx x&xxxx;8.4.2
XXXXX [5]	=	xxxxxxxxx retenční xxx xxxx III v kontrolním xxxxxx [5] získaný x&xxxx;8.5.3

9.1.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx ukazují, xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx III, xx. XXXXXX [X] x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx 10&xxxx;% xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx

—	xxx obsahu xxxxxxxxx > 5&xxxx;% xx XXXXXX [X] &xx;&xxxx;1,000;

—	xxx xxxxxx syrovátky ≤&xxxx;5&xxxx;% xx RRTIII [X] ≥&xxxx;1,000.

Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx XXXXXX xx ± 0,002.

Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx XXXXXX [0] xxx xxxx liší xx 1,034. Podle xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxx 1,000, avšak xxxx xxxx být xxxxx xxx 1,000.

9.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx syřidlové syrovátky xxxxxxxx xx xxxxxx:

X = SIII[E] – [1, 3 + (XXXX[0] – 0, 9)]

xxx:

X	=	xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx [X];
XXXX [E]	=	relativní xxxxxx xxxx XXX zkušebního xxxxxx [X] xxxxxxx xxxxx 9.1.2;
1,3	=	představuje xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX vyjádřenou x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx mléce xxxxxxx xxxxxx. Toto číslo xxxx xxxxxxx experimentálně
SIII [0]	=	xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX, xxxxx xx rovna XXXX&xxxx;×&xxxx;XXXX[0]. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x&xxxx;9.1.1 x&xxxx;8.5.3;
(XXXX [0]&xxxx;–&xxxx;0,9)	=	xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx nutno xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx 1,3, xxxxxxxx XXXX [0] xxxx xxxxx 0,9. Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx průměrná xxxxxx xxxx III xxxxxxxxxxx vzorku [0] xxxxx 0,9.

9.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

9.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx současně xxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx xxxxx pracovník xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx 0,2&xxxx;% xx.

9.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx laboratořích u stejného xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx 0,4&xxxx;% xx.

9.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx

9.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxx předpokládat, že xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx III XXXX [X] vyjádřena x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx na 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx, ≤ 2,0 + (XXXX[0] – 0,9)

xxx

2,0	xx maximální hodnota xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX x přihlédnutím x xxxxxxxxx průměrné ploše xxxx XXX, xx. 1,3, k xxxxxxxxx x důvodu kolísání xx xxxxxxx sušeného xxxxxxxxxxxx mléka x x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (9.3.2);
(XXXX [0] – 0,9)	xx oprava, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx je xxxxxx XXXX [0] xxxx xxx 0,9 (xxx xxx 9.2).

9.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX XXXX [X] &xx; 2,0 + (SIII[0] – 0,9) x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxx xxxx II XXX [X]&xxxx;≤&xxxx;160, stanovte xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 9.2.

9.4.3.   Je-li xxxxxxxxx plocha píku XXX SIII [E] &xx; 2,0 + (XXXX[0] – 0,9) x xxxxxxxxx plocha xxxx XX XXX [X]&xxxx;≤&xxxx;160, stanovte celkový xxxxx xxxxxxxx (P %). Potom prostudujte xxxxx 1 x 2.

9.4.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxx po xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxx celkovým xxxxxxx xxxxxxxx xxxx zanesena xx grafů 1 x&xxxx;2.

Xxxx xxxxxx představuje xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx nejmenších xxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx horní xxx relativní xxxxxx xxxx III, a to x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxx, xx nebude xxxxxxxxxx v 90 % xxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx 1 x 2 jsou:

SIII = 0,376 X % – 10,7	(xxxx 1)
XXXX = 0,0123 XXX [X] + 0,93	(xxxx 2)

xxx:

XXXX	xx relativní plocha xxxx XXX xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx bílkovin, nebo xxxxx xxxxxxxxx plochy xxxx XXX [X],
X&xxxx;%	xx xxxxxxx xxxxx bílkovin xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx,
XXX [X]	xx relativní xxxxxx xxxxxx vypočtená x&xxxx;xxxx 9.1.2.

Tyto rovnice xxxx rovnocenné číslu 1,3 uvedenému x xxxx 9.2.

Xxxxxx (X1 x T2) xxxx xxxxxxxxx relativní plochou XXXX [X] x xxxxxxxxx xxxxxxx XXXX xx xxx xxxxxx xxxxxx: T1 =&xxxx;XXXX[X]&xxxx;– [(0,376 P% – 10,7) + (SIII[0] – 0,9)]X2 = XXXX[X] – [(0,0123 XXX[X] + 0,93) + (XXXX[0] – 0,9)].

Xxxx-xx X1 x/xxxx X2	xxxxx xxxx xxxx xxxxx xxx xxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx-xx T1 x T2	větší xxx xxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx syřidlové xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx vzorce: X = X2 + 0,91

xxx:

0,91 xx vzdálenost xx svislé xxx xxxx xxxxx a přerušovanou xxxxxxx.

Xxxxxxx XXX

XXXXXXXXX SUŠINY XX SYŘIDLOVÉ SYROVÁTKY X&xxxx;XXXXXXX ODSTŘEDĚNÉM MLÉCE

1.   PŘEDMĚT: XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX XX XXXXXXXXX XXXXXXXXX XX&xxxx;XXXXXXXX XXXXXXXXXXXX XXXXX

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX XXXXX: MEZINÁRODNÍ XXXXX XXX 707

3.   DEFINICE

Obsah xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx definován xxxx xxxxxxxxxx procento xxxxxxxxx xxxxxxxx postupem xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx xxxx analyzovány na xxxxxxxxxxxxxxxxxxx X&xxxx;xxxxxxxxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx s obrácenými xxxxxx (xxxxxxx XXXX). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx přídavku xxxx x&xxxx;xxxxxxxxx známého xxxxxxxx xxxxxx syrovátky. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxx 1&xxxx;% xx., xx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx syrovátky xxxxxxxxx.

5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxxxxxx xx pouze xxxxxxxxxx xxxxxxx p.a. Xxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxx XXXX.

5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx 240&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (CCl₃COOH) ve xxxx a doplňte xx 1&xxxx;000&xxxx;xx. Roztok xx xxx xxx čirý x xxxxxxxx.

5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx X&xxxx;x&xxxx;X

Xxxxxx X: Xxxxxx 150 xx xxxxxxxxxxxx (CH₃CN), 20 ml isopropanolu (XX₃XXXXXX₃) x 1,00 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXX, XX₃XXXX) xx xxxxxxx xxxxx a xxxxxxx na 1 000 xx vodou.

Eluent X: Xxxxxx 550 xx xxxxxxxxxxxx, 20 xx xxxxxxxxxxxx x 1,00 xx XXX do xxxxxxx xxxxx xx 1&xxxx;000 xx x xxxxxxx xx 1&xxxx;000 xx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx před xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx přes xxxxxxxxxx xxxxx o velikosti pórů 0,45 μx.

5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx kolony

Po xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X (xxxxxx) x potom xx xxxxxxxxxx acetonitrilem (xxxxxx po xxxx 30 xxxxx). Xxxxxx xx uchovává x&xxxx;xxxxxxxxxxxx.

5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx

5.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx odstředěné xxxxx xxxxxxxxx požadavky stanovené xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (xx. [0]).

5.4.2.   Totéž sušené xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5 % xx. xxxxxx xxxxxxxxx syrovátky xxxxxxxxxxxx složení (tj. [5]).

5.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx zfalšované xxxxxxxxx 50&xxxx;% hm. sušené xxxxxxxxx xxxxxxxxx standardního xxxxxxx (xx. [50]).

6.   PŘÍSTROJE X POMŮCKY

6.1.   Analytické váhy

6.2.   Volitelná xxxxxxxxxxx schopná xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx 2&xxxx;200&xxxx;x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx zkumavkami se xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxx 50&xxxx;xx

6.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

6.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx míchačka

6.5.   Skleněné xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxx 7&xxxx;xx

6.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxx 12,5&xxxx;xx

6.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx filtrem x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx

6.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxx umožňující xxxxxxxx 10&xxxx;xx (ISO 648, xxxxx X, xxxx XXX/X 835), nebo xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 10,0&xxxx;xx xx xxx xxxxxx

6.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx systém xxxxxxx dodávat 20,0&xxxx;xx xxxx při teplotě xxx 50 °C

6.10.   Termostatická vodní xxxxx xxxxxxxxx xx 25 ± 0,5&xxxx;°X

6.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xx HPLC, xxxxx xxxxx:

6.11.1.

Xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx gradientem

6.11.2.

Nástřikové xxxxxxxx – xxxxx xxxx automatické, x&xxxx;xxxxxx 100 μl

6.11.3.

Kolona Xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx Xxxxxx 300 XX-X3 (xxxxx 25&xxxx;xx, xxxxxxx průměr 0,46 cm), xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxx

6.11.4.

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx 35 ± 1&xxxx;°X

6.11.5.

XX xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx umožňuje xxxxxxxx xxxxxx xxx 210&xxxx;xx (x nutných xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx až do 220&xxxx;xx) x&xxxx;xxxxxxxxxx 0,02 Å.

6.11.6.

Xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx obecnou xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxx Xxxxxxxx: Xxxxx x xxxxxxxx udržovanými xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx x 1&xxxx;°X, jinak xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx CMPA.

7.   ODBĚR XXXXXX

7.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx stanoveným v mezinárodní xxxxx XXX 707. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xx předpokladu, xx xxxx metoda xxxxxxxx xxxxxxx uvedené xxxxx.

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxx xx znehodnocení xxxx xxxxx xxxxxxx.

8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

8.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxx je xxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Nádobku xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

8.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx

Xx odstředivkové zkumavky (6.2) xxxx vhodné xxxxx se zátkou xx 50&xxxx;xx xxxxxxx 2,00 ± 0,001&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx: X&xxxx;xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx odpovídala 2,00&xxxx;x.

8.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxx

8.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 20,0 ml xxxxx (50 °C) xxxx. Xxxxxxxxxxxxx třepáním xx xxxxxxxxxx třepačce (6.3) xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx (6.10), xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx 25&xxxx;°X.

8.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (6.4) xxxxxxxx 10,0&xxxx;xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxx 25&xxxx;°X (5.1). Xxxxxxxx xxxxxx xx 60&xxxx;xxxxx do xxxxx xxxxx (6.10).

8.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx (6.2) xx xxxx 10 xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx 2&xxxx;200&xxxx;x, nebo xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx (6.6) x&xxxx;xxxxxxx 5&xxxx;xx xxxxxxxx vyhoďte.

8.4.   Chromatografické xxxxxxxxx

8.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx XXXX x&xxxx;xxxxxxxxxx fázemi xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kysaného xxxxxxxx.

8.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx provedením xxxxxxx XXXX x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx gradientu. Xxx xxxxxxxxxxx systémy s mrtvým xxxxxxx xxx 6 ml (xxxxx od xxxx, xxx se stékají xxxxxxxxxxxx k objemu nástřikové xxxxxx xxxxxx) je xxxxxxxxx retenční čas x&xxxx;xxxxx 26 xxxxx ± 2 minuty xxx CMPΑ. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxx xxxxxxx (např. 2&xxxx;xx) je xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx 22 xxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.4) x&xxxx;xxxxxxx 50&xxxx;% syřidlové xxxxxxxxx x&xxxx;xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx 100 μl xxxxxxxxxxxx xxxx filtrátu (8.3.3) xx zařízení xx XXXX, xxxxx xxxx fungovat xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx 1.

Tabulka 1

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx

Xxx (xxx)	Xxxxxx (xx/xxx)	% X	% X	Xxxxxx
Xxxxxxx	1,0	90	10	*
27	1,0	60	40	xxxxxx
32	1,0	10	90	xxxxxx
37	1,0	10	90	xxxxxx
42	1,0	90	10	xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxx XXXΑ.

Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 8.4.3), xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx vzorce: % X = 10 – 2,5 + (13,5 + (XXxxxX – 26) / 6) * 30 / 27&xxxx;% B =&xxxx;7,5 + (13,5 + (XXxxxX – 26) / 6) * 1,11

xxx

XXxxxX	:	xxxxxxxx čas CMPΑ x&xxxx;xxxxxxxxxxx gradientu
10	:	počáteční % X x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
2,5	:	% X xx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx % X x xxxxxxxxx xxxxxxxxx
13,5	:	xxx xxxxxxxxxxxx střednímu xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
26	:	xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx XXXΑ
6	:	xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
30	:	% X x xxxxxxxxxx bodu minus % X po 27 minutách v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
27	:	xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

8.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx roztoků xxxxxxxxxx vzorků

Nastříkněte 100 μx xxxxxx odměřeného xxxxxxxxxxxx xxxx filtrátu (8.3.3) xx zařízení xx XXXX x&xxxx;xxxxxxxx 1,0&xxxx;xx xxxxxxxx roztoku (5.2) xx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx získá x&xxxx;8.4.2. Xx normálních xxxxxxxxx xx blíží xxxxxx X:X = 76:24 (5.2). Okamžitě xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx, xx procento X xx xx 27 xxxxx zvětší x 5 %. Potom xx spustí xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx složení xxxxxxx dosáhne x xxxx minutách 90&xxxx;% X. Xxxx složení xx udržuje xx xxxx pěti minut x xx xxxxx xxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx složení xxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxx na xxxxxxx počáteční. V xxxxxxxxxx xx vnitřním xxxxxx xxxxxxxxx systému xxxx xxx další xxxxxxx xxxxxxxx 15 xxxxx po dosažení xxxxxxxxx podmínek.

Poznámka 1. Xxxxxxxx čas CMPA xx xxx xxx 26 ± 2 xxxxxx. Toho xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx v % B mezi xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxx 5&xxxx;% B.

Poznámka 2. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx je xxxxxxxxx. Xx xx nezbytně xxxxx xxx xx, xxx gradientový xxxxxxx xxxxxx správně xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx odchylka retenčního xxxx píku XXXX xxxx xxx xxxxx xxx 0,1 xxxxxx (x =&xxxx;10).

Xxxxxxxx 3. Xx každých xxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx referenční xxxxxx [5] x použít xxx xxx výpočet xxxxxx odezvového xxxxxxx X (9.1.1).

8.4.4.   Výsledky xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx vzorku (X) xx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xx němž xx xxx XXXX určen xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx v délce 26 xxxxx.

Xxxxx H píku CMPA xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (6.11.6). Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx je xxxxxxxx xxxxx nesprávně xxxxxxxx, analýzu nebo xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xx-xx xxx XXXX xxxxxxxxxx xxxxxxx xx ostatních xxxx, xxxx xx xx xxxxxx přiřazení základní xxxxx xxxx sedly. X xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx společné xxxxxxxx xxxxx, jejichž xxxxxxxxx xxx xx xxx xxx v xxxxxxxxx xxxx CMPA (xxxx xx v xxxx x = 0 xxx!). Xxx referenční xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx integrace x x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xx xx xxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx každého xxxxxxxxxxxxx xx účelem xxxxxxxx případných anomálií xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx zařízení, xxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx analyzovaného xxxxxx. X&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

8.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx

8.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;X xxxxxxxxxxxx vzorků (5.4.1 xx 5.4.2) xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx 8.2 až 8.4.4. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx roztoky, xxxxxxx XXX se v prostředí 8&xxxx;% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx 4&xxxx;°X zůstává roztok xxxxx po dobu 24 xxxxx. V případě xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx nástřikovém xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxx 8.4.2 xxxx být vynechána, xxxxxxxx je % X x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx známo z xxxxxxxxxxx analýz.

Chromatogram xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5) xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx 1. Na xxxxx xxxxxxx xxxx xxxx píkem XXXX xxx xxxx píky. Xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx podobné xxxxxxxx.

8.5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μl xxxxxxxxxxxx vzorku xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx [0] (5.4.1).

Xxxxxxxxxxxx nesmí xxxxxxxxx xxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx XXXX píku.

8.5.3.   Odezvové faktory X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx objemu xxxxxxxx (8.5.1), xxxxxx xxxx xxxxxxx xxx vzorky.

9.   VYJÁDŘENÍ XXXXXXXX

9.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx

9.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx R:

Pík XXXX: X = X/X

xxx

X	=	xxxxxxxx faktor píku XXXX
X	=	xxxxx píku XXXX
X	=	xxxxxxxx xxxxxxxxx ve srovnávacím xxxxxx [5]

9.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx syrovátky xxxxxxxx ve xxxxxx

X(X)&xxxx;= X&xxxx;×&xxxx;X(X)

xxx

X(X)	=	xxxxxxxxxx xxxxxxxx syřidlové xxxxxxxxx xx xxxxxx [X]
X	=	xxxxxxxx xxxxxx píku XXXX (9.1.1)
X(X)	=	xxxxx xxxx XXXX vzorku (X)

Xxxxx xx W(E) xxxxx xxx 1 % x&xxxx;xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx [5] menší než 0,2&xxxx;xxxxxx, pak xx xxxxxxxxxx sušiny xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

9.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

9.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx x&xxxx;xxxxxxxx zkušebního xxxxxx xxxxxxx současně nebo x&xxxx;xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx stejném xxxxxxxxx, xx neměl xxxxxxxxx 0,2 % hm.

9.3.2.   Reprodukovatelnost

Nestanovena.

9.3.3.   Linearita

Pro xxxxxxx xx 0&xxxx;% xx 16&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx lineární xxxxx x korelačním xxxxxxxxxxxx&xxxx;&xx;&xxxx;0,99.

9.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx

Xxxxx xxxxxxx 1&xxxx;% obsahuje xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx 1

Xx—4.6 xxxxxxxx

PŘÍLOHA XX

Xxxxxx xxxxxxx másla x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxxx	Xxxxxx
Xxx&xxxx;(6)	XXX 17189 nebo ISO 3727 část 3
Voda	ISO 3727 xxxx 1
Tukuprostá xxxxxx (x xxxxxxxx soli)	ISO 3727 xxxx 2
Sůl	ISO 15648

XXXXXXX VII

Metody xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx mléka x soukromém xxxxxxxxxx

Xxxxxxxx	Xxxxxx
Xxx	XXX 1736
Xxxxxxxxx	XXX 8968 část 1
Xxxx	XXX 5537

PŘÍLOHA XXXX

Xxxxxx xxxxxxx sýrů x xxxxxxxxx skladování

1.

Je xxxxx xxxxxxx, xx sýry xxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx, kozího mléka xx buvolího mléka, xxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxxx a buvolího xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx, x&xxxx;xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx metoda analýzy xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx mléka xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx v analyzovaném xxxxxx je xxxxxx xxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx v referenčním xxxxxx xxxxxxxxxxx 1&xxxx;% kravského xxxxx, xxxxx xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx.

2.

Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx&xxxx;1 xxxxx xxx xxxxxxxxx xx těchto xxxxxxxx: x) xxxxxx xxxxxxxx limit xxxx xxx xxxxxxx 0,5&xxxx;%; x) xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx pozitivní; c) musí xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx mléka s požadovanou xxxxxxxxxx x&xxxx;xx dlouhé xxxx zrání, x&xxxx;xxxxx xxxx za xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx-xx xxxxx x&xxxx;xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx splněn, xxxxxxx xx xxxxxx uvedené x&xxxx;xxxxxxx.

Xxxxxxx

XXXXXX XXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXX MLÉKA X&xxxx;XXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXX Z OVČÍHO XXXXX, XXXXXX XXXXX NEBO XXXXXXXX XXXXX, NEBO XXXXX OVČÍHO, XXXXXX X&xxxx;XXXXXXXX MLÉKA

1.   PŘEDMĚT

Zjišťování xxxxxxxxx xxxxx a kaseinátů x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxx anebo ze xxxxx xxxxxx, xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx mléka xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx γ-xxxxxxx po xxxxxxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXX XXXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx, též xxxxxxx xxxxxxxxxx, v čerstvých a zralých xxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx mléka nebo xx směsí xxxxxx, xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a sýrů xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx syrovátky.

3.   PODSTATA XXXXXX

3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx a referenčních standardů

3.2.   Rozpuštění xxxxxxxxxxx kaseinů x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (XX.3.4.21.7)

3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx ošetřených kaseinů xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxxx

3.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx vybarvených xxxxxxx xxxxxxx γ3 x γ2 (důkaz xxxxxxxxxxx kravského xxxxx) xx xxxxxxx porovnání xxxxxxx získaného ze xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxx z referenčních xxxxxxxxx obsahujících 0&xxxx;% x 1&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxx.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxx-xx stanoveno xxxxx, xxxxxxxxx xx pouze xxxxxxxxxx čistoty x.x. Xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxx rovnocenné xxxxxxx.

Xxxxxxxx: Následující xxxxx xx vztahují na xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx s obsahem xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx 265 × 125 ×&xxxx;0,25&xxxx;xx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxx rozměry xxxx xxxxx gelu, xxxx xxx nutné xxxxxxx xxxxxxxx separace.

Izoelektrická xxxxxxxx

4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx pro xxxxxxxx polyakrylamidových gelů x&xxxx;xxxxxxx močoviny

4.1.1.   Zásobní xxxxxx xxxx

Xx xxxx rozpusťte:

4,85 g akrylamidu

0,15 x X, X′-xxxxxxxx-xxx-xxxxxxxxxx (XXX)

48,05&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx

15,00&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx (87&xxxx;% hm.),

doplňte xx 100 xx x uložte xx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxx xxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx použít xxxxxxxx xxxxxxxx, předem xxxxxxxxx xxxxxx akrylamidu x&xxxx;XXX.&xxxx;X&xxxx;xxxxxxx, že xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoku xx 30&xxxx;% xx./xxx. xxxxxxxxxx x&xxxx;0,8&xxxx;% xx./xxx. XXX, xxx xxxxxxx xxxxxxxx (4,85 g akrylamidu a 0,15 x&xxxx;XXX) musí xxx xxxxxxxxx komerčním roztokem x&xxxx;xxxxxx 16,2&xxxx;xx. Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxx. Xxxxx je jeho xxxxxxxx vyšší xxx 5 μX, xx xxxxx provést xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x 2 g Xxxxxxxxx XX-3 po dobu 30 xxxxx x xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxx 0,45μm xxxxxxxx.

4.1.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxx

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx&xxxx;(*) xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx (viz 4.1.1).

9,0&xxxx;xx xxxxxxxxx xxxxxxx

24&xxxx;xx β-xxxxxxx

500 μx xxxxxxxx xX 3,5–9,5

250 μx xxxxxxxx xX 5–7

250 μl xxxxxxxx xX 6–8

Xxxxxx xxxxxx promíchejte a odplyňujte xx xxxx xxxx xx xxx minut x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxx nebo xx vakuu.

Poznámka: Xxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx (xxx 6.2).

4.1.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx

4.1.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;X, N, X′, X′-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (Xxxxx)

4.1.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;40&xxxx;% hm./obj. xxxxxxx xxxxxxxxx amonného (XXX)

800 mg XXX xx rozpustí xx xxxx a doplní xx xx 2 xx.

Xxxxxxxx: Vždy používejte xxxxxxx připravený xxxxxx XXX.

4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxx xxxx xxxxxxx parafin

4.3.   Anodový roztok

Rozpusťte 5,77 g xxxxxxxx xxxxxxxxxx (85&xxxx;% xx.) xx xxxx x xxxxxx xx 100 xx.

4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx 2,00 x xxxxxxxxx xxxxxxx xx vodě a xxxxxx xxxxx na 100 xx.

Xxxxxxxx xxxxxx

4.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx určené k izolaci xxxxxxxx

4.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxx octová (25,0 xx ledové xxxxxxxx octové xxxxxxxx xxxxx do 100 xx).

4.5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx

4.5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx

4.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx bílkovin

Ve vodě xxxxxxxxx:

5,75&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx (87 % xx.)

24,03&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx

250&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxxxx

x xxxxxxx xx 50 xx xxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx; xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx.

4.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx

4.7.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx hydrogenuhličitanu xxxxxxxx 0,2 xxx/x (1,58 x/100 xx xxxx) xxxxxxxxxx 0,05 xxx/x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX, 1,46 x/100 xx) xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 0,2 xxx/x (1,92 x/100 xx xxxx) xxxxxxxxxxxx 0,05 xxx/x EDTA na xX 8.

4.7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx plasmin (XX. 3.4.21.7), x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx 5 X/xx.

4.7.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx ε-xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx enzymu

Rozpusťte 2,&xxxx;624&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx ε-xxxxxxxxxxxxxx (6-xxxxx-x-xxxxxxxxxxxxx) ve 100 ml 40&xxxx;% xxx. xxxxxxxx.

4.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx standardy

4.8.1.   Certifikované xxxxxxxxxx standardy xxxxx xxxxxx a kozího xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx pomocí xxxxxxx a s obsahem 0&xxxx;% x&xxxx;1&xxxx;% xxxxxxxxx mléka xxx získat xx Xxxxxx xxx referenční xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx xxx Xxxxxx, X-2440, Xxxx, Belgie.

4.8.2.   Příprava xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx a s xxxxxxx 0&xxxx;% a 1&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx buvolího xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 37&xxxx;°X (2&xxxx;500&xxxx;x, 20 xxxxx). Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xx 6 xx 8 °C xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx tuková xxxxxx. Xxx přípravu 1&xxxx;% xxxxxxxxx přidejte 5,00 ml xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx 495 ml odstředěného xxxxxxxx mléka x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 1&xxxx;x. Xxxxxxx xX upravte xx 6,4 xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (10&xxxx;%, xx./xxx.). Xxxxxxx xxxxxxx xx 35 °X, xxxxxxxx 100 μl xxxxxxxx xxxxxxx (aktivita xxxxxxx 1: 10&xxxx;000, xxx 3&xxxx;000 X/xx) x&xxxx;xxxxxxxx po xxxx 1 xxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxxx hliníkovou xxxxx a nechte xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx 35&xxxx;°X k utvoření sýřeniny. Xx xxxxxxxx sýřeniny xx veškeré xxxxx xxxxxxxxx pomocí xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx by xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo odebrání xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx mléko xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. X&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx standardu 0&xxxx;% xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx u čistého xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Referenční xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxx teplotě – 20&xxxx;°X.

Xxxxxxxx: Před xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx buvolího xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx působení plasminu.

Chemikálie xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx bílkovin

4.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx

Xxxxxxxxx 150&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx trichloroctové xx vodě x&xxxx;xxxxxxx xx 1 000 ml.

4.10.   Odbarvovací xxxxxx

Xxxxxx 500 xx xxxxxxxxx x 200 xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx vodou xx 2&xxxx;000 xx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxx čerstvý; xxx jej xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx objemů xxxxxxxxx roztoku 50 % (xxx.) methanolu a xxxxxxxxx xxxxxxx 20&xxxx;% (xxx.) ledové xxxxxxxx xxxxxx.

4.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxx

4.11.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxx 1)

V 1&xxxx;000 ml 90&xxxx;% xxx. methanolu xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 45 minut) 3,0 x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxx G-250 (X. X. 42655) a roztok xxxxxxxxxxxx přes xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

4.11.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxx 2)

V 1 000 ml 20&xxxx;% xxx. kyseliny xxxxxx xxxxxxxxx 5,0&xxxx;x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx.

4.11.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxxx xxxxxx)

Xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxxx xxxxxxxxx 125&xxxx;xx obou xxxxxxxxx xxxxxxx (4.11.1 x&xxxx;4.11.2).

Xxxxxxxx: Xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxx.

5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX X XXXXXXX

5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx (265 x 125 x 4 mm), xxxxxxx váleček (o xxxxx 15 cm), xxxxxxxxx stolek.

5.2.   Nosná fólie xxxx (265 ×&xxxx;125&xxxx;xx)

5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxx (280 × 125 mm). Xx xxxxx xxxxxx xxxxx nalepte xxxx xxxxxx pásky (280 ×&xxxx;6 ×&xxxx;0,25&xxxx;xx) (xxx xxxxxxx 1).

5.4.   Elektrofokusační xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx (xxxx. 265 ×&xxxx;125&xxxx;xx) x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx zdroj (≥ 2,5&xxxx;xX) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx zařízení

5.5.   Cirkulační xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 12 ± 0,5&xxxx;°X

5.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx na 3&xxxx;000&xxxx;x

5.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxx (x xxxxx ≥ 265&xxxx;xx)

5.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx

5.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx (10 ×&xxxx;5&xxxx;xx, x&xxxx;xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx)

5.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx misky (xxxx. xxxxx xx xxxxxxxx 280 ×&xxxx;150&xxxx;xx) x&xxxx;xxxxxxxx oceli xxxx xxxxxxxx

5.12.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxx 10 mm x&xxxx;xxxxxxxxx 8&xxxx;000 až 20&xxxx;000 xx/xxx

5.13.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

5.14.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx xxxxx

5.15.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx

5.16.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xx 25 μx

5.17.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx lyofilizátor

5.18.   Termostatem xxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 35 a 40 ±&xxxx;1&xxxx;°X x&xxxx;xxxxxxxxx

5.19.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx λ =&xxxx;634&xxxx;xx

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX POSTUP

6.1.   Příprava vzorku

6.1.1.   Izolace xxxxxxx

Xx odstředivkové xxxxxx xx 100&xxxx;xx xxxxxxx xxxxxxxx sýra xxxx xxxxxxxxxxxx standardu xxxxxxxxxxxx 5&xxxx;x&xxxx;xxxxxx, xxxxxxxx 60 ml xxxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxxxxx tyčovým xxxxxxxxxxxxxxx (8&xxxx;000 xx 10&xxxx;000 xx/xxx). Upravte xX xx 4,6 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.5.1) x&xxxx;xxxxxxxxxxx (5 xxxxx, 3&xxxx;000&xxxx;x). Xxxxxxxxxx xxx x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx 20 000 ot/min xx 40&xxxx;xx xxxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxx pH xxxxxxxxx na 4,5 xxxxxxxx xxxxxxxxx octovou (4.5.1). Xxxxxxxx 20&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxxx (4.5.2) x&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx (5 xxxxx, 3 000 g). Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxx a organickou xxxx (xxx obrázek 2), a obě fáze xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx homogenizuje se 40 ml xxxxxxxxxxx xxxx (xxx výše) x 20 ml xxxxxxxxxxxxxx (4.5.2) a xxxxxxxx xx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx, dokud xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx (dvakrát xx xxxxxxx). Bílkovinný xxxxxx xxxxxxxxxxxxx s 50 ml xxxxxxx (4.5.3) x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx dvěma xxxxxxxxxxxx 25&xxxx;xx dávkami xxxxxxx a nechte xxxxxxx xx vzduchu xxxx x&xxxx;xxxxxx dusíku. Potom xxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx musí xxxxxxxxx xxx teplotě – 20 °X.

6.1.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx β-xxxxxxx na γ-xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxx 25 xx izolovaných xxxxxxx (6.1.1) x 0,5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.7.1) x xxxx 20 xxxxx xxxxxxxxxxxxx, např. xxxxxxxxxxx. Směs zahřejte xx 40&xxxx;°X x&xxxx;xxxxxxxx 10 μx xxxxxxxx (4.7.2), xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx 1 hodinu xxx xxxxxxx 40 °C za xxxxxxx xxxxxxx. Pro xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 20 μl xxxxxxx xxxxxxxx ε-aminokapronové (4.7.3). Xxxx xxxxxxxx 200&xxxx;xx xxxxx xxxxxxxx a 2 mg xxxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx ε-aminokapronové roztok xxxxxxxxxxxx x xxxx zbytky xxxxxxxxx x 0,5 xx tlumivého xxxxxxx xxx rozpouštění bílkovin (4.6).

6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx polyakrylamidových gelů x&xxxx;xxxxxxx močoviny

Na xxxxxxxxx xxxxx (5.1) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx fólii xxxx (5.2) x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx xxxxx vody x&xxxx;xxxxxxxxxxx vodu xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx. Stejným způsobem xxxxxxxx naneste xxxxxx, xxxxx xxxxx (5.3) x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (0,25&xxxx;xx) xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.

X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx (4.1.2) xxxxxxxx 10 μx Xxxxxx (4.1.3.1), xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx 10 μl roztoku XXX (4.1.3.2); xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxx nosné xxxxx xxxx (xxxxxxx s fólií xxxxxx dolů) xxxxxxxx x&xxxx;xxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx tak, xxx se xxxx xxxxxxx vytvořila xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx tenká xxxxxx xxxx bez xxxxxx (xxxxxxx 3). Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx opatrně xxxxxxxxxxx po celé xxxxx x&xxxx;xxxxxxx xx xx xxx xxxxx xxxxxxxx desky, xxx xx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (asi xx 60 minutách) xxxxx s krycí xxxxx sejměte xxx xxxxxxxxxxxxx na nosné xxxxx gelu xxx, xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx fólie pečlivě xxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxx. „Xxxxxx xxxxxxx“ xxxxxxx xx xxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxx xx xxxxxxxxxx (xxxxxxx xx xxxx týdnů).

Poznámka: Xxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx znovu. Xxxxxxxxxxxxxxxx xxx může xxx rozřezán na xxxxx xxxxx; je xx vhodné x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxx počtu xxxxxx xxxx v případě xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx zařízení (xxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxxx 4,5 ×&xxxx;5&xxxx;xx).

6.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxxx xx 12 °X. Xxxxx stranu xxxxx xxxxx gelu xxxxxx kerosinem x&xxxx;xxxx xx xxxxx chladicího xxxxx kápněte několik xxxxx kerosinu (4.2). Xxxxxxx xxxxxxxx „gelový xxxxxxx“ nosnou xxxxx xxxxxxxx dolů, xxx xx vytlačily xxxxxxx xxxxxxxxx bubliny. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxx fólii. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.3, 4.4), xxxxxxxxx na xxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxx xx xxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxxxx 9,5&xxxx;xx).

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

6.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxx 265 ×&xxxx;125 × 0,25 mm

Fáze	Doba (min)	Napětí (V)	Proud (mA)	Příkon (W)	Volty/hodiny (Vh)
1. Předběžná fokusace	30	max. 2 500	max. 15	konstantní 4	xxx 300
2. Xxxxxxxx xxxxxx&xxxx;(7)	60	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 15	xxxxxxxxxx 4	xxx 1&xxxx;000
3. Xxxxxxx xxxxxxxx	60	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 5	xxx. 20	xxx 3&xxxx;000
	40	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 6	xxx. 20	xxx 3&xxxx;000
	30	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 7	xxx. 25	xxx 3&xxxx;000

Xxxxxxxx: Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx nebo xxxxx xxxx, xxxxxxx proudu x&xxxx;xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. hodnoty xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx-xx xx xxx x&xxxx;xxxxxxxxx 265 ×&xxxx;125 ×&xxxx;0,5&xxxx;xx).

6.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx napětí x&xxxx;xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx zařízení (2 gely 5,0 ×&xxxx;4,5&xxxx;xx, xxxxxxxxx xxx xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx xx xxx.

Xxxx	Xxxxxx	Xxxxx	Xxxxxx	Xxxxxxx	Xxxxx/xxxxxx
1. Xxxxxxxxx xxxxxxxx	1&xxxx;000 X	10,0 mA	3,5 X	8 °C	85 Xx
2. Xxxxxxxx xxxxxx	250 X	5,0 mA	2,5 X	8 °C	30 Vh
3. Fokusace	1 200 X	10,0 xX	3,5 X	8 °X	80 Xx
4. Xxxxxxxx	1&xxxx;500 V	5,0 xX	7,0 X	8 °X	570 Xx

Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx 2 xxxxxx xxx 0 Vh.

Aplikátor xxxxxx ve xxxx 2 odstraňte při 30 Xx.

6.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxx

6.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxx xx vypnutí xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxx xx ihned xxxxx xx barvicí/odbarvovací xxxxx xxxxxxxx 200&xxxx;xx xxxxxxxx (4.9). Xxx x ní xxxxxxxx 15 xxxxx za xxxxxxx xxxxxxx.

6.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx a barvení xxxxxx xxxxx

Xxxxxxx xxxx xxxxxx dekantujte a xxxxxxx desku dvakrát xxxxxxxxxx xx xxxx 30 xxxxxx xxxx xx 100 ml xxxxxxxxxxxxx roztoku (4.10) Xxxxxxxxxxx xxxxxx dekantujte, xxxxx xxxxxxx 250&xxxx;xx xxxxxxxxx roztoku (4.11.3) x gel xxxxxx xx mírného xxxxxxx xx xxxx 45 xxxxx zbarvovat.

6.4.3.   Odbarvení xxxxxx xxxxx

Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx desku xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx 30 xxxxxx xxxx xx 100&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.10). Poté 15 xxxxx protřepávejte x&xxxx;200&xxxx;xx odbarvovacího xxxxxxx; xxxx xxxxxxxxxxx opakujte xxxxxxx xxxxxxx až xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx čiré a bezbarvé. Xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (2 × 2 xxxxxx) x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx (2 xx 3 xxxxxx) xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (10 až 15 xxxxx).

Xxxxxxxx 1: Fixaci, xxxxxxxxx, xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx 20&xxxx;°X. Vyšší teploty xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx 2: Pokud xxxxxxxxxxxxxxx citlivější obarvení xxxxxxxx (xxxx. Xxxxxx Xxxxxxxx Xxx, Protein, Xxxxxxxxx Xxxxxxx, xxx x. 17-1150-01), musí xxx kaseinové vzorky xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx 5 xx/xx.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX

Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx proteinových xxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx mléka x xxxxxx vyrobených x xxxxxx xxxxx, xxxxxx mléka, buvolího xxxxx nebo xx xxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx mléka xx xxxxxxx prostřednictvím γ3- x γ2-xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xx nacházejí x xxxxxxx mezi xX 6,5 x xX 7,5 (obrázky 4a, x, xxxxxxx 5). Xxxxxxxx mez xx xxxxx xxx 0,5 %.

7.1.   Vizuální xxxxxxxxx

Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx upravit xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx u xxxxxxxx, xxxxxx a/nebo xxxxxxxx γ2- x γ3-xxxxxxx (viz „γ2 X,X,X“ x „γ3 X,X,X“ na xxxxxxxxx 4x, b a xxxxxxx 5) stejné xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx podmínek xxx xxxxx posoudit xxxxxxxx kravského xxxxx (xxxxx nebo xxxxx xxx 1&xxxx;% xxxx xx xxxx 1&xxxx;%) x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx γ3- x&xxxx;γ2-xxxxxxx (xxx „γ3 X“ x&xxxx;„γ2 C“ xx xxxxxxxxx 4&xxxx;x, x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxx 5) x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 0&xxxx;% x&xxxx;1&xxxx;% (xxxxxx, xxxxxx), nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxx).

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx poměru xxxx plochami xxxx xxxxxxxx γ2- x&xxxx;γ3-xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxx ovčích, xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx γ2- x&xxxx;γ3-xxxxxxx (xxx xxxxxxx 5) xxxxxxxxxxxxx (5.19). Tuto xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx píků γ2- x γ3-kaseinů x 1&xxxx;% referenčním standardu (xxxxx, kozím) xxxx xxxxxxxxxxx laboratorním xxxxxxxxx (xxxxxxx) xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxx.

Xxxxxxxx: Xxxx xxxxxx funguje xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx signál xxxx xxxxxxxx γ2- x γ3-xxxxxxx x 1&xxxx;% xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx v 0 % xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. V opačném xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx optimalizovat při xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx v dané xxxxxx.

Xxxxxx xx xxxxxxxxx za xxxxxxxxx, jestliže xxxxxxx xxxx xxxxxxxx γ2- x γ3-xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx poměrů xxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxx než xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 1&xxxx;% xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxx X., Xxxx X., Chianese X., Xxxxxx X., Xxxxxxx X., Xxxxxx X, Krause X., Xx Xxxxxx A., Xxxxx X.: Xxx xx plasmin to increase xxx xxxxxxxxxxx of xxx detection xx xxxxxx xxxx&xxxx;xx xxxxx xxx/xx caprine xxxxxx xx gel xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx γ2-xxxxxxx.&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxx 45, 708–711 (1990).

Xxxxx X., Xxxxxxx X.X., Xxxxxxxx X., Xxxx X., Xxxxxx Xxxxx X., Xxxxx X., Xxx Xxxxxxx X.: X xxxxxxx xxxxxx xx detect xxxxxx xxxx&xxxx;xx xxx xxx xxxxx buffalo xxxxxx xxxxx immunoblotting. Xxxxxxxxxxxxxxxxx 50, 83–85 (1995).

Krause X., Berner X, Xxxxxxxxxxxx X.: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx cow xxxx&xxxx;xx xxx xxx xxxx xxxx&xxxx;xxx cheese xx carrier ampholyte — xxx carrier xxxxxxxxx/xxxxxxxxxxx pH gradient — xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx γ-caseins xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx. in: Xxxxxxxxxxxxxxx-Xxxxx 89 (B. X. Xxxxxx, xx.) pp 389-393, Bode-Verlag, Xüxxxxx (1989).

Xxxxxx Ι., Belitz X.-X., Xxxxxx X.-X.: Xxxxxxxx xxx Xxxxxxxx xx Xxxxx and Xxxxxxxxxxx xxx. -xäxx xxxxx isoelektrische Fokussierung xx harnstoffhaltigen Xxxxxxxxxxxxxxxxxx. X. Xxxxxxx. Xxxxxx.&xxxx;Xxxxxx. 174, 195–199 (1982).

Xxxxxx X.X.: Ultrathin-layer xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 50-100 μm xxxxxxxxxxxxxx gels on xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx.&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx 1, 43–56 (1980).

Xxxxxxx 1

Xxxxxxxxxxx výkres xxxxx xxxxx

Xxxxxxx 2

Xxxxxxxxx vrstva xxxxxxxx mezi xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx

Xxxxxxx 3

Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx gelů

a = xxxxxxxxx xxxxx (0,25&xxxx;xx); x = krycí xxxxx (5.3); x, x = skleněné xxxxx (5.1); x = gelový xxxxxx (4.1.2); x = xxxxx xxxxx xxxx (5.2).

Xxxxxxx 4a

Izoelektrická xxxxxxxx xxxxxxx ze xxxx x&xxxx;xxxxxx a kozího xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x&xxxx;xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

% XX = xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, X&xxxx;= xxxxxxx, X&xxxx;= ovčí, X&xxxx;= xxxx

Xx xxxxxxx xx znázorněna xxxxx xxxxxxxx xxxx IEF.

Obrázek 4x

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx kaseinů xx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxxx a buvolího mléka, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x&xxxx;xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

% XX = xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx; 1 + = xxxxxx x xxxxxxx 1&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx kaseinu xx xxxxxx dráhy. X&xxxx;= xxxxxxx, X&xxxx;= ovčí, X&xxxx;= kozí, X&xxxx;= xxxxxx

Xx obrázku xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx gelu XXX.

Xxxxxxx 5

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (XXX) a vzorků xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx a kozího xxxxx, xx izoelektrické xxxxxxxx

x, b = xxxxxxxxxx standardy obsahující 0 x 1&xxxx;% xxxxxxxxx mléka; x-x = xxxxxx sýra xxxxxxxxxxxx 0, 1, 2, 3 x 7&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxx; X&xxxx;= xxxxxxx, X&xxxx;= xxxx, X&xxxx;= xxxx.

Xxxx xxxxxxx horní xxxxxxxx xxxx XXX xxx λ =&xxxx;634&xxxx;xx.

XXXXXXX XX

Xxxxxxxxx xxxxxx

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx určené x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx&xxxx;12 nařízení (XX) x.&xxxx;882/2004&xxxx;(*) nebo určené xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx

1.

Xxxxx xxxxxx se xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx-xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxx XXX 707„Mléko a xxxxxx xxxxxxx – Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx“,

2.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx s dodatkem.

3.

Pro analýzy xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx předpisech Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

4.

Xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx nechat xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx analýzu xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx za předpokladu, xx&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx k dispozici x&xxxx;xxxx xxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx orgánu. Výrobce xxxxx xxxxxxxx agentuře xxxxxx k provedení xxxxxxx xx&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxx dnů xx&xxxx;xxxxxxx výsledků xxxxx xxxxxxx. Platební agentura xxxxxxx xxxxxxx xx 21 xxx od xxxxxxxx žádosti.

5.

Výsledek xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx považuje xx xxxxxxx.

6.

Xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, že xxxxxx při xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx vzorků se x&xxxx;xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx odběr xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx přijata.

Dodatek

Zhodnocení splnění xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx s xxxxxxx xx šarži

1.   Podstata xxxxxx

X xxxxxxxxx, xxx právní xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx intervence x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx ze 3 jednotek xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx ze xxxxx odevzdané ke xxxxxxxx. Lze xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx porovná xx xxxxxxx stanovenými xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 95 % xxxxxxxxx spolehlivosti xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx příslušná xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xx xxx, 1) xxx xxxx metoda xxxxxxxxxx xx základě xxxxxxxxxxx spolupráce x&xxxx;xxxxxxxxx xxx σx x σX, xxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxx, 2) xxx xxxx vypočítána xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx. Tento interval xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx nejistotě xxxxxx xxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx

X&xxxx;xxxxx případě byla xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxxxxxxxx σx a směrodatná odchylka xxxxxxxxxxxxxxxxxxx σX&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx validované xxxxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx&xxxx; x xxxxx x xxxxxxxxxxx měření.

Vypočítá xx rozšířená nejistota (x =&xxxx;2) z  xxxxx:

Xx-xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxx x = x ₁ + x ₂, x = x ₁ – x ₂, x = x ₁ · x ₂ nebo x = x ₁/x ₂, xxxx xx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxx xx nevyhovující xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx XX, jestliže

jinak xx xx xx xx, xx xxxxxxx XX vyhovuje.

Šarže xx xxxxxxxx xx nevyhovující xxxxx zákonem stanovené xxxxx hodnotě LL, xxxxxxxx

xxxxx xx xx xx xx, xx xxxxxxx XX xxxxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx reprodukovatelnosti

V případech, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, které xxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxxxxx, x&xxxx;xxx xxxxxx stanovena xxxxxxxx pro zajištění xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx validaci. Xxxxxxx σx x σ X xx musí ve xxxxxx xxx výpočet xxxxxxxxx xxxxxxxxx U xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx opakovatelnosti xxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx si X .

Pravidla, jež xx třeba xxxxxxxxx xx účelem splnění xxxxxxx stanovené mezní xxxxxxx, jsou uvedena x&xxxx;xxxx 1. Xxxxxxxx-xx xx však šarže xx nesplňující xxxxxxx xxxxxxxxxx mezní xxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx metody stanovené x&xxxx;xxxxx nařízení a výsledek xx xxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxx 1.