Plné znění - 32018R0150

Xxxxxxx X

XXXXXXXXXXXXX STANOVENÍ XXXXXXXXXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX V SUŠENÉM ODSTŘEDĚNÉM MLÉCE

Metoda: XXXX x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX X XXXXXX XXXXXXX

Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx kvantitativního xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (PS) a fosfatidylethanolaminu (XX) x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (SOM) x&xxxx;xx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx podmáslí x&xxxx;XXX.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX

Xxxxx XX + PE: xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx se vyjadřuje x&xxxx;xxxxxxxxxxx dipalmitoyl-fosfatidylethanolaminu (XXXX) xx 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx PS x&xxxx;XX xxxx xxxxxxxx x-xxxxxxxxxxxxxx (XXX) xxxxxxx HPLC x&xxxx;xxxxxxxxxx fázemi (RP) x&xxxx;xxxxxxxxxxxxx detekcí. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx PS x&xxxx;XX ve xxxxxxxxx xxxxxx porovnáním se xxxxxxxxxxx vzorkem, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx XXXX.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx p.a. Xxxxx není uvedeno xxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx: XXXX x čistotě xxxxxxx 99&xxxx;%

Xxxxxxxx: Referenční xxxxxxxx musí být xxxxxxxxx xxx teplotě – 18 °C.

4.2.   Chemikálie xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a zkušebních xxxxxx

4.2.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx xxx XXXX

4.2.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx XXXX

4.2.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx

4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx pro xxxxxxxx x-xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

4.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx, 12 M xxxxx roztok

4.3.2.   Kyselina xxxxxx, 0,4 X vodný xxxxxx s xxxxxxxx xX xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.3.1) xx 10,0

4.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;2-xxxxxxxxxxxxxxx

4.3.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;x-xxxxxxxxxxxxx (XXX)

4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx rozpouštědla xxx HPLC

4.4.1.   Eluční xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx HPLC.

4.4.2.   Voda xxxxxxx xxx HPLC

4.4.3.   Methanol fluorometricky xxxxxxxx xxxxxxx

4.4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx

4.4.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx dihydrogenfosforečnan

4.4.6.   Octan xxxxx

4.4.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx.

5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX A XXXXXXX

5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx s přesností xxxxxx xx 0,1 mg x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx xx 1&xxxx;xx

5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx o objemu 25 x&xxxx;100&xxxx;xx

5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx schopné xxxxxxxx xx 1 xx 10&xxxx;xx

5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

5.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 0,2, 0,5 a 5 ml

5.6.   Odměrné baňky x&xxxx;xxxxxx 10, 50 x&xxxx;100&xxxx;xx

5.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 20 x&xxxx;100 μx

5.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx xxxxx

5.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx při 27&xxxx;000 ×&xxxx;x

5.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx nádobky x&xxxx;xxxxxx xxx 5 ml

5.11.   Odměrný xxxxx o objemu 25&xxxx;xx

5.12.&xxxx;&xxxx;&xxxx;xX xxxx s přesností xx 0,1 xxxxxxxx pH

5.13.   Zařízení xx XXXX

5.13.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx fungovat xxx průtoku 1,0 xx/xxx xxx 200 xxxxxx

5.13.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx dávkovač xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx derivatizace

5.13.3.   Termostat kolony xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx teplotě 30&xxxx;°X ± 1 °C

5.13.4.   Fluorescenční xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx 330&xxxx;xx x&xxxx;xxxxxx xxxxxx xxxxx 440&xxxx;xx

5.13.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx dat xxxxxxx xxxxx plochy xxxx

5.13.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx XxXxxxxxxxx® – 100 (250 ×&xxxx;4,6&xxxx;xx) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (X 18), xxxxxxxx xxxxxx 5 μm

6.   ODBĚR XXXXXX

Xxxxxx se xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx XXX 707.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX POSTUP

7.1.   Příprava xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx

7.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx 30,0 ± 0,1&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (4.2.3) xx odměrné xxxxx xx 100&xxxx;xx (5.6) x&xxxx;xxxxxxx po xxxxxx methanolem (4.2.1).

7.1.2.   Pipetou (5.3) xxxxxxxx 1 ml xxxxxx roztoku do xxxxxxx baňky xx 10&xxxx;xx (5.6) x&xxxx;xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1) s cílem získat xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx 0,15 xX.

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx

7.2.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx 1,000 ± 0,001&xxxx;x&xxxx;xxxxxx XXX xx xxxxxxx xx 25 ml (5.2). Xxxxxxx (5.3) xxxxxxxx 10&xxxx;xx xxxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxx 40&xxxx;°X ± 1 °C x&xxxx;xx xxxx 30 xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (5.4), xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

7.2.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx (5.5) přeneste 0,2&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx na 10&xxxx;xx (5.6), pomocí xxxxxxxx xxxxxxxxx (5.7) xxxxxxxx 100 μx 0,15 xX xxxxxxx xxxxxxxxxx (7.1) a doplňte xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1). Xxxxxxxxxxx opatrně xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xx 15 xxxxx xx xxxxxxxxxxxx lázně (5.8).

7.2.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx (5.9) xxx 27 000 ×&xxxx;x&xxxx;xx xxxx 10 xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx odeberte xx xxxxxxxx xxxxxxx (5.10).

Xxxxxxxx: Xx provedení xxxxxxx XX xxxx xxx xxxxxx zkušebního xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 4&xxxx;°X.

7.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx

7.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx 55,4&xxxx;xx XXXX (4.1) xx xxxxxxx xxxxx xx 50&xxxx;xx (5.6) x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx (5.11) přidejte xxx 25&xxxx;xx chloroformu (4.2.2). Xxxxxxxxxxxx baňku xxxxxxxx xx 50&xxxx;°X ± 1&xxxx;°X x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx XXXX nerozpustí. Baňku xxxxxxxx xx 20&xxxx;°X, xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1) x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

7.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx (5.3) xxxxxxxx 1&xxxx;xx tohoto xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx 100&xxxx;xx (5.6) x&xxxx;xxxxxxx po značku xxxxxxxxxx (4.2.1). Xxxxxxx (5.3) xxxxxxxx 1&xxxx;xx xxxxxx roztoku do xxxxxxx xxxxx xx 10&xxxx;xx (5.6), xxxxxxxx 100 μl (5.7)&xxxx;0,15xX xxxxxxx xxxxxxxxxx (7.1) x&xxxx;xxxxxxx po značku xxxxxxxxxx (4.2.1). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Do provedení xxxxxxx HP xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 4&xxxx;°X.

7.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Xx xxxxxxx xxxxx xx 10&xxxx;xx (5.6) xxxxxxx 25,0 ± 0,1&xxxx;xx XXX (4.3.4), xxxxxxxx 0,5&xxxx;xx (5.5) xxxxxxxxx (4.2.1) a pečlivě xxxxxxxxxxx, xxx se XXX xxxxxxxxx. Doplňte xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.3.2) x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx (5.7) xxxxxxxx 20 μl 2-xxxxxxxxxxxxxxxx (4.3.3).

Poznámka: Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx v hnědé nádobě xxx teplotě 4&xxxx;°X; xxxxxxx zůstává xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxx.

7.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx XXXX

7.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.4)

Xxxxxxxxxxxx A: Xxxxxx 0,3 xX xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx a roztok 3 xX octanu xxxxxxx (s hodnotou xX xxxxxxxxx na 6,5 ± 0,1 xxxxxxxxx xxxxxxx): xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx =&xxxx;558: 440:2 (xxx.).

Xxxxxxxxxxxx X: Xxxxxxxx

7.5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx:

Xxx (xxx)	Xxxxxxxxxxxx X (%)	Rozpouštědlo X (%)	Xxxxxx (xx/xxx)
Xxxxxxxxx	40	60	0
0,1	40	60	0,1
5,0	40	60	0,1
6,0	40	60	1,0
6,5	40	60	1,0
9,0	36	64	1,0
10,0	20	80	1,0
11,5	16	84	1,0
12,0	16	84	1,0
16,0	10	90	1,0
19,0	0	100	1,0
20,0	0	100	1,0
21,0	40	60	1,0
29,0	40	60	1,0
30,0	40	60	0

Xxxxxxxx: Může xx stát, xx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx, aby xxxx xxxxxxxx rozlišení xxxxxxxxxx xx xxxxxxx 1.

Teplota xxxxxx: 30 °C.

7.5.3.   Objem xxxxxxxx: 50 μx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;50 μx roztoku xxxxxx

7.5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxx

Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 100&xxxx;% rozpouštědlem X&xxxx;xx xxxx 15 xxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx X:X =&xxxx;40:60 a provádějte xxxxxxxxxxx xx xxxx 15 xxxxx xxx xxxxxxx 1 xx/xxx. Xxxxxxxx slepý pokus xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2.1).

Xxxxxxxx: Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx 30 xxxxx xxxxx methanolu x&xxxx;xxxxxxxxxxxx x poměru 80:20 (xxx.).

7.5.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx XX + XX xx xxxxxxxxx xxxxxx

7.5.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx analýz xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, abyste xxxxxxx xxxxxxxxxx retenční xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx nastříkněte xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (7.3) xx každých 5–10 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx 20–25 xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx promýváním 100&xxxx;% xxxxxxxxxxxxx X&xxxx;(7.5.1).

7.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxx

7.6.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxx XXXX

XXXX xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx mezi sedly.

7.6.2.   Pík xxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx se vymývá x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx xxxx (xxxxxxx 1). Plochu xxxx stanovte xxxxxxxxx xxxx sedly.

7.6.3.   Skupiny xxxx XX a PE

Za xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (obrázek 1) xx XX xxxxxx x&xxxx;xxxxxx dvou xxxxxxxx, částečně nerozlišených xxxx, před nimiž xx nachází xxxxx xxxxx xxx. PE xx xxxxxx v podobě xxx xxxxxxxx, částečně xxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx nastavením xxxxxxxx xxxxx tak, xxx je znázorněno xx obrázku 1.

8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX X VYJADŘOVÁNÍ XXXXXXXX

Xxxxx XX + PE xx xxxxxxxxx vzorku xx xxxxxxx xxxxx:

X =&xxxx;55,36 × ((X₂)/(X₁)) × ((X₁)/(X₂))

xxx:

X	=	xxxxx PS xxxx XX (x xx/100 g prášku) ve xxxxxxxxx vzorku
A1	=	plocha xxxx XXXX roztoku xxxxxxxxxxxx xxxxxx (7.3)
X2	=	xxxxxx xxxx XX nebo XX xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.2)
X1	=	xxxxxx píku xxxxxxxxxx xxxxxxx srovnávacího xxxxxx (7.3)
X2	=	xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.2).

9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxxxx: Hodnoty xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx podle Xxxxxxxxxxx xxxxx XXX&xxxx;(*).

9.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx proměnlivost nezávislých xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, které x&xxxx;xxxxxxxx zkušebního xxxxxx xxxxx xxxxxx pracovník xx xxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxx odstupu, xx xxxxxx překročit xxxxxxxxx 2&xxxx;%. Jestliže xx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx výsledky xx neměl xxx xxxxx než 6 % xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx výsledků.

9.2.   Reprodukovatelnost

Jestliže xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx laboratořích xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx zkušebního xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx mezi xxxxx xxxxxxxx by xxxxx xxx větší xxx 11&xxxx;% aritmetického xxxxxxx výsledků.

10.   LITERATURA

10.1.   Resmini X., Xxxxxxxxxx X., Xxxxxxxxx X. X., Sadini X., Xxxxxxxx X. „Xxxxxxxxx xx buttermilk solids xx skimmilk powder xx XXXX xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxx.“ Sci. Xxxx. Xxxx.-Xxx.&xxxx;39,395[1988].

Xxxxxxx 1

HPLC xxxxxxxxxxxx XXX-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (XX) x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XX) x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx mléka. Xx xxxxxxxxx integrační režim xxx xxxx XX, XX x&xxxx;xxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx).

Xxxxxxx XX

XXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX URČENÉM XXX XXXXXXX XXXXXXXXXX NA XXXXXXX STANOVENÍ KASEINOMAKROPEPTIDŮ XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX (XXXX)

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX A OBLAST XXXXXXX

Xxxx xxxxxx umožňuje xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx mléce xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX XXXXX

Xxxxxxxxxxx xxxxx XXX 707 – Xxxxx x xxxxxx xxxxxxx – Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX

Xxxxx xxxxxx ze xxxxxxxxx xxxxxxxxx je definován xxxx hmotnostní xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

—	Xxxxxxxxxxxx sušeného xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxx kyselinou xxxxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx;

—	Xxxxxxxxx xxxxxxxx kaseinomakropeptidů (XXX) x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx chromatografií (XXXX);

—	Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx tvoří xxxxxx odstředěné mléko x&xxxx;xxxxxxxxx nebo xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx syrovátky.

5.   CHEMIKÁLIE

Používají se xxxxx chemikálie xxxxxxx x.x. Xxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx 240&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXx₃XXXX) xx xxxx x&xxxx;xxxxxxx xx 1&xxxx;000&xxxx;xx. Xxxxxx xx xxx xxx xxxx x xxxxxxxx.

5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx roztok, xX 6,0

Xxxxxxxxx 1,74&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx sekundárního (X₂XXX₄), 12,37&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (XX₂XX₄) x&xxxx;21,41&xxxx;x&xxxx;xxxxxx xxxxxxx (Xx₂XX₄) xxx x&xxxx;700&xxxx;xx xxxx. X&xxxx;xxxxxxx potřeby xxxxxxx xX xx 6,0 xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxx xx 1&xxxx;000 xx x xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxx eluentu xxx xxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx výrobce xxxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxx.

Xxxxxx xxxxxx před xxxxxxxx přefiltrujte xxxx xxxxxxxxxx filtr o velikosti xxxx 0,45 μx.

5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx (XX₃XX) x&xxxx;xxxxxx xxxxxx xxxx. Před xxxxxxxx směs xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx.

Xxxxxxxx: Xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx

5.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xx. [0]).

5.4.2.   Totéž sušené xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5&xxxx;% xx. xxxxxx syřidlové xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (tj. [5]).

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX A POMŮCKY

6.1.   Analytické xxxx

6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx odstředivka schopná xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx 2&xxxx;200&xxxx;x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx zkumavkami xx zátkou x&xxxx;xxxxxx xxx 50 ml

6.3.   Mechanická xxxxxxxx

6.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

6.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxx 7 cm

6.6.   Filtrační xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx o průměru xxx 12,5 cm

6.7.   Skleněné xxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx pórů 0,45 μx

6.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx pipety xxxxxxxxxx xxxxxxxx 10&xxxx;xx (XXX 648, xxxxx X, xxxx ISO/R 835) xxxx xxxxxxxxx systém xxxxxxx xxxxxxx 10,0&xxxx;xx xx xxx minuty

6.9.   Dávkovací xxxxxx xxxxxxx dodávat 20,0&xxxx;xx xxxx xxx xxxxxxx xxx 50 °C

6.10.   Termostatická xxxxx lázeň nastavená xx 25 ± 0,5&xxxx;°X

6.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xx XXXX, xxxxx xxxxx:

6.11.1.

Xxxxxxxx

6.11.2.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx – xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx – x&xxxx;xxxxxx 15 xx 30 μx

6.11.3.

Xxx xxxxxx TSK 2&xxxx;000-XX xx xxxxx (xxxxx 30 cm, xxxxxxx xxxxxx 0,75 cm), xxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx. jedna xxxxxx XXX 2&xxxx;000-XXxx, jedna xxxxxx Agilent Technologies Xxxxxx XX 250) x&xxxx;xxxxx předkolona (3&xxxx;xx ×&xxxx;0,3&xxxx;xx) naplněná xxxxxxxxxx X&xxxx;125 xxxx xxxxx xxxxxxxxxx s rovnocennou xxxxxxxxx

6.11.4.

Xxxxxxxxx xxxxxx nastavený na 35 ± 1 °C

6.11.5.

UV xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx vlnovou xxxxxx umožňující xxxxx xxx 205&xxxx;xx s citlivostí 0,008 Å.

6.11.6.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx Xxxxxxxx: Xxx xxxxxxxx s kolonami xxxxxxxxxxx při xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx x&xxxx;xxxxxx nižší. V tomto xxxxxxx je xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx byly menší xxx 5&xxxx;°X.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXX XXXXXX

7.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxx xxx odebírány xxxxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxx XXX 707. Xxxxxxx státy xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx, že xxxx xxxxxx odpovídá xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxx xx znehodnocení nebo xxxxx xxxxxxx.

8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

8.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku.

Sušené xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx objem je xxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxx prášku x&xxxx;xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx víčkem. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxx důkladně xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

8.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx

Xx odstředivkové xxxxxxxx (6.2) nebo vhodné xxxxx xx zátkou xx 50&xxxx;xx xxxxxxx 2,000 ± 0,001 g zkušebního xxxxxx.

8.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx tuku x&xxxx;xxxxxxxx

8.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xx xxxxxxxx dávce přidejte 20,0&xxxx;xx teplé (50&xxxx;°X) xxxx. Prášek rozpusťte xxxxxxxx po xxxx xxxx minut xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (6.3). Xxxxxxxx vložte xx xxxxx xxxxx (6.10), xxxxx se xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx 25&xxxx;°X.

8.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx dvou minut xxxxxxxx za stálého xxxxxxx magnetickou xxxxxxxxx (6.4)&xxxx;10,0&xxxx;xx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (5.1) x&xxxx;xxxxxxx xxx 25&xxxx;°X. Xxxxxxxx xxxxxx xx 60&xxxx;xxxxx xx xxxxx lázně (6.10).

8.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx (6.2) po xxxx 10 minut xxx xxxxxxxxxx xxxx 2&xxxx;200&xxxx;x, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx (6.6) x&xxxx;xxxxxxx 5 ml xxxxxxxx xxxxxxx.

8.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

8.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx 15 xx 30 μx xxxxxx xxxxxxxxxx supernatantu xxxx filtrátu (8.3.3) xx xxxxxxxx na XXXX (6.11) s průtokem 1,0&xxxx;xx elučního roztoku (5.2) za minutu.

Poznámka 1. X&xxxx;xxxxxxxxxx na xxxxxxxx průměru použitých xxxxx xxxx xx xxxxxxxx výrobce kolony xxx xxxxxx x&xxxx;xxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx 2. Xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx vodou. Xxxxx x&xxxx;xxxx xxxxxxxxxxxx eluční xxxxxx (5.2).

Před každým xxxxxxxxxx na xxxx xxx 24 hodin xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xx promývají xxxxxxxx&xxxx;(5.3) xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxx xxx xxxxxxx 0,2 ml za xxxxxx.

8.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx analýzy xxxxxxxxxx xxxxxx [X] xx získají xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx, x&xxxx;xxxx xx xxxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx RT takto:

Pík XX:	Xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx x XX xxx 12,5 xxxxxx
Xxx XXX:	Xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx XXX x RT 15,5 xxxxxx

Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx značně ovlivněny xxxxxxx kolony (xxxxx).

Xxxxxxxxxx (6.11.6) xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx A každého píku:

AII:	plocha xxxx XX
XXXX:	xxxxxx xxxx XXX

Xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx nezbytné prozkoumat xxxxxx xxxxxxx chromatogramu xx účelem xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx způsobených xxx nesprávnou funkcí xxxxxxxx, nebo xxxxx, xxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

X&xxxx;xxxxxxx pochybností xxxxxxx zopakujte.

8.5.   Kalibrace

8.5.1.   U xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.4) se xxxxxx xxxxxxx postup xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx&xxxx;8.2 xx 8.4.2.

Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx CMP xx x&xxxx;xxxxxxxxx 8&xxxx;% xxxxxxxx trichloroctové xxxxxxxxxxx. Xxxxxx obsah se xxx xxxxxxx 30&xxxx;°X xxxxxxx odhadem x&xxxx;0,2&xxxx;% xx xxxxxx.

8.5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (8.5.1) xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.4.2), dokud xx plocha a retenční xxx xxxx odpovídajícího XXX xxxxxxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

8.5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx X&xxxx;xxxxxxxxxxxx stejného xxxxxx xxxxxxxx (8.5.1), xxxxxx jste xxxxxxx xxx xxxxxx.

9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX XXXXXXXX

9.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx a vzorce

9.1.1.   Výpočet xxxxxxxxxx xxxxxxx X:

Xxx XX:

XXX = 100/(XXX[0])

xxx:

XXX	=	xxxxxxxx faktory xxxx XX
XXX [0]	=	xxxxxx xxxx XX xxxxxxxxxxxx xxxxxx [0] xxxxxxx x&xxxx;8.5.3

Xxx XXX:

XXXX = X/(XXXX[5] – XXXX[0])

xxx:

XXXX	=	xxxxxxxx xxxxxx píku XXX
XXXX [0] xxx XXXX [5]	=	xxxxxx píku XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxx [0] x&xxxx;[5] získané v 8.5.3
W	=	množství xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx [5], xx. 5

9.1.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxx plochy xxxx xx vzorku [X]

XXX[X] = XXX × XXX[X]

XXXX[X] = XXXX × XXXX[X]

XXX[X] = XXX × XXX[X]

xxx:

XXX [X], XXXX [X], XXX [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxx píků XX, XXX a IV xx xxxxxx [E]
AII [E], XXXX [E]	=	plochy píků XX x&xxxx;XXX ve xxxxxx [E] xxxxxxx x&xxxx;8.4.2
XXX, XXXX	=	xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;9.1.1

9.1.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx relativního xxxxxxxxxx xxxx píku XXX xx vzorku [X]:

XXXXXX[X] = (RTIII[E])/(RTIII[5])

kde:

RRTIII [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxx XXX xx xxxxxx [E]
RTIII [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxxxx čas píku XXX xx xxxxxx [X] získaný x&xxxx;8.4.2
XXXXX [5]	=	xxxxxxxxx xxxxxxxx čas xxxx III x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx [5] získaný x&xxxx;8.5.3

9.1.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx, xx xxxx relativním xxxxxxxxx xxxxx xxxx III, xx. XXXXXX [E] x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx až do xxxxxxxx 10&xxxx;% xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx

—	xxx obsahu xxxxxxxxx > 5&xxxx;% xx XXXXXX [X] &xx;&xxxx;1,000;

—	xxx xxxxxx syrovátky ≤&xxxx;5&xxxx;% je RRTIII [X] ≥&xxxx;1,000.

Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx XXXXXX xx ± 0,002.

Xx xxxxxxxxxx okolností xx xxxxxxx XXXXXX [0] xxx xxxx liší xx 1,034. Podle xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx blížit 1,000, xxxxx xxxx xxxx xxx xxxxx xxx 1,000.

9.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx procenta xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx ve xxxxxx:

X = XXXX[X] – [1, 3 + (XXXX[0] – 0, 9)]

xxx:

X	=	xxxxxxxxxx procento syřidlové xxxxxxxxx xx xxxxxx [X];
XXXX [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxx xxxx III zkušebního xxxxxx [X] xxxxxxx xxxxx 9.1.2;
1,3	=	představuje xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX vyjádřenou x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
XXXX [0]	=	xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX, která xx xxxxx XXXX&xxxx;×&xxxx;XXXX[0]. Xxxx xxxxxxx se xxxxxxx v 9.1.1 a 8.5.3;
(SIII [0]&xxxx;–&xxxx;0,9)	=	xxxxxxxxxxx xxxxxx, kterou xx xxxxx provést xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx 1,3, xxxxxxxx XXXX [0] xxxx xxxxx 0,9. Experimentálně xx xxxxxxxxx průměrná xxxxxx píku XXX xxxxxxxxxxx vzorku [0] rovna 0,9.

9.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx metody

9.3.1.   Opakovatelnost

Rozdíl mezi xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx v těsném sledu xxxxx pracovník xx xxxxxxx přístroji, by xxxxx xxxxxxxxx 0,2&xxxx;% xx.

9.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxx xxxxxxx laboratořích x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku xx xxxxx xxxxxxxxx 0,4 % xx.

9.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx

9.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxx xxxxxxxxxxxx, že xxxxxxxxx není xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx III XXXX [X] xxxxxxxxx v gramech xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx, ≤ 2,0 + (XXXX[0] – 0,9)

xxx

2,0	xx maximální xxxxxxx xxxxxxxx pro relativní xxxxxx píku XXX x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx III, xx. 1,3, k xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x x reprodukovatelnosti metody (9.3.2);
(XXXX [0] – 0,9)	xx xxxxxx, xxxxx xxxx být xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx XXXX [0] xxxx xxx 0,9 (viz xxx 9.2).

9.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX XXXX [X] &xx; 2,0 + (XXXX[0] – 0,9) a relativní xxxxxx xxxx XX XXX [E] ≤ 160, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 9.2.

9.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xx-xx xxxxxxxxx plocha xxxx XXX XXXX [X] &xx; 2,0 + (XXXX[0] – 0,9) x xxxxxxxxx xxxxxx xxxx II XXX [X]&xxxx;≤&xxxx;160, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx bílkovin (P %). Potom xxxxxxxxxxx xxxxx 1 x 2.

9.4.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx získaná xx xxxxxxx vzorků xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx odstředěného mléka x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx obsahem xxxxxxxx jsou xxxxxxxx xx grafů 1 x&xxxx;2.

Xxxx přímka xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx nejmenších xxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx horní xxx relativní xxxxxx xxxx III, x&xxxx;xx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxx, že xxxxxx xxxxxxxxxx v 90 % xxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx 1 x 2 xxxx:

XXXX = 0,376 P % – 10,7	(xxxx 1)
XXXX = 0,0123 XXX [X] + 0,93	(graf 2)

xxx:

XXXX	xx xxxxxxxxx plocha xxxx XXX xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxx plochy xxxx SII [X],
X&xxxx;%	xx xxxxxxx obsah xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx,
XXX [E]	je xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx vypočtená x&xxxx;xxxx 9.1.2.

Xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx 1,3 xxxxxxxxx x xxxx 9.2.

Rozdíl (X1 x T2) mezi xxxxxxxxx xxxxxxxxx plochou XXXX [X] a xxxxxxxxx xxxxxxx XXXX xx xxx xxxxxx xxxxxx: X1 = SIII[E] – [(0,376 X% – 10,7) + (XXXX[0] – 0,9)]X2 = XXXX[X] – [(0,0123 XXX[X] + 0,93) + (XXXX[0] – 0,9)].

Xxxx-xx X1 x/xxxx X2	xxxxx xxxx xxxx xxxxx xxx xxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx-xx T1 x T2	větší xxx xxxx, je xxxxxxxxx xxxxxxxxx přítomna.

Obsah xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx: X = X2 + 0,91

xxx:

0,91 je vzdálenost xx xxxxxx xxx xxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx III

STANOVENÍ SUŠINY XX XXXXXXXXX XXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX: XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX XX SYŘIDLOVÉ XXXXXXXXX XX&xxxx;XXXXXXXX XXXXXXXXXXXX MLÉKA

2.   NORMATIVNÍ XXXXX: XXXXXXXXXXX XXXXX XXX 707

3.   DEFINICE

Obsah xxxxxx xx syřidlové syrovátky xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx procento xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx kaseinomakropeptidů.

4.   PODSTATA XXXXXX

Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx X&xxxx;xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx s obrácenými xxxxxx (xxxxxxx XXXX). Vyhodnocení xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxx, které xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx přídavku xxxx x&xxxx;xxxxxxxxx známého procenta xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx vyšší xxx 1&xxxx;% xx., xx xxxxxxxxxx sušiny xx syřidlové xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x. Xxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx voda xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx nebo jakost xxxxxxx pro XXXX.

5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx 240&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXx₃XXXX) ve xxxx x&xxxx;xxxxxxx xx 1&xxxx;000&xxxx;xx. Roztok xx xxx být xxxx x xxxxxxxx.

5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx A a B

Eluent X: Xxxxxx 150 xx xxxxxxxxxxxx (XX₃XX), 20 ml isopropanolu (XX₃XXXXXX₃) x 1,00 xx xxxxxxxx trifluoroctové (XXX, XX₃XXXX) xx xxxxxxx baňky a xxxxxxx xx 1&xxxx;000 xx vodou.

Eluent X: Xxxxxx 550 xx xxxxxxxxxxxx, 20 xx xxxxxxxxxxxx x 1,00 xx TFA xx xxxxxxx xxxxx xx 1&xxxx;000 ml a xxxxxxx xx 1&xxxx;000 xx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx přes membránový xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx.

5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X (xxxxxx) x xxxxx xx propláchne xxxxxxxxxxxxx (xxxxxx xx xxxx 30 xxxxx). Xxxxxx xx uchovává x&xxxx;xxxxxxxxxxxx.

5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx

5.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx odstředěné xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx veřejné xxxxxxxxxx (xx. [0]).

5.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5&xxxx;% xx. xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx složení (xx. [5]).

5.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx sušené xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx 50&xxxx;% xx. xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx standardního xxxxxxx (tj. [50]).

6.   PŘÍSTROJE X POMŮCKY

6.1.   Analytické váhy

6.2.   Volitelná xxxxxxxxxxx schopná dosáhnout xxxxxxxxxx síly 2&xxxx;200&xxxx;x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxx 50&xxxx;xx

6.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

6.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

6.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx o průměru asi 7&xxxx;xx

6.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx o průměru asi 12,5&xxxx;xx

6.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxx zařízení x&xxxx;xxxxxxxxxxx filtrem o velikosti xxxx 0,45 μx

6.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 10&xxxx;xx (XXX 648, xxxxx A, nebo XXX/X 835), xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 10,0&xxxx;xx za xxx xxxxxx

6.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx dodávat 20,0 ml xxxx xxx teplotě xxx 50&xxxx;°X

6.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx vodní xxxxx xxxxxxxxx xx 25 ± 0,5&xxxx;°X

6.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xx XXXX, xxxxx xxxxx:

6.11.1.

Xxxxxxxx s binárním gradientem

6.11.2.

Nástřikové xxxxxxxx – xxxxx xxxx automatické, o objemu 100 μx

6.11.3.

Xxxxxx Xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx Zorbax 300 XX-X3 (délka 25&xxxx;xx, xxxxxxx xxxxxx 0,46&xxxx;xx), xxxx jiná rovnocenná xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxx xx xxxx křemene

6.11.4.

Termostat xxxxxx xxxxxxxxx na 35 ± 1 °C

6.11.5.

UV xxxxxxxx s proměnnou xxxxxxx xxxxxx, xxxxx umožňuje xxxxxxxx měření při 210&xxxx;xx (v xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx větší xxxxxx xxxxx xx xx 220&xxxx;xx) s citlivostí 0,02 Å.

6.11.6.

Xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxx Xxxxxxxx: Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx teplotě xxxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxx více xxx x 1&xxxx;°X, xxxxx xxxxxxx x příliš xxxxxx změnám xxxxxxxxxx xxxx XXXX.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXX XXXXXX

7.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxx být odebírány xxxxxxxx xxxxxxxxxx v mezinárodní xxxxx XXX 707. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xx předpokladu, xx xxxx metoda odpovídá xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx způsobem, xxx xxxxxxx dojít xx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx složení.

8.   PRACOVNÍ XXXXXX

8.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx nádobky, xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxx větší xxx objem prášku x&xxxx;xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxx důkladně xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx převracením xxxxxxx.

8.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx

Xx xxxxxxxxxxxxx zkumavky (6.2) xxxx vhodné xxxxx xx xxxxxx xx 50&xxxx;xx xxxxxxx 2,00 ± 0,001&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx: X&xxxx;xxxxxxx směsí xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx zbavená xxxxxxxx xxxxx odpovídala 2,00 g.

8.3.   Odstranění xxxx x&xxxx;xxxxxxxx

8.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xx xxxxxxxx xxxxx přidejte 20,0&xxxx;xx xxxxx (50&xxxx;°X) xxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (6.3) xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx (6.10), xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx 25&xxxx;°X.

8.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx dvou minut xx xxxxxxx míchání xxxxxxxxxxx míchačkou (6.4) xxxxxxxx 10,0 ml xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx o teplotě xxx 25 °C (5.1). Xxxxxxxx xxxxxx xx 60&xxxx;xxxxx xx xxxxx xxxxx (6.10).

8.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx (6.2) xx xxxx 10 xxxxx xxx odstředivé xxxx 2&xxxx;200&xxxx;x, nebo xxxxxxxxxxxx přes papír (6.6) x&xxxx;xxxxxxx 5 ml xxxxxxxx xxxxxxx.

8.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx stanovení

8.4.1.   Metoda XXXX s obrácenými xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx falešně xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

8.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxxxxx analýzy XXXX s obrácenými fázemi xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Pro xxxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxx xxx 6 ml (xxxxx xx xxxx, xxx xx stékají xxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx) je xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx x&xxxx;xxxxx 26 xxxxx ± 2 xxxxxx xxx CMPΑ. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxx xxxxxxx (xxxx. 2&xxxx;xx) xx optimální xxxxxxxx xxx 22 xxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx srovnávacích xxxxxx (5.4) x&xxxx;xxxxxxx 50&xxxx;% syřidlové syrovátky x&xxxx;xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx 100 μx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx (8.3.3) xx xxxxxxxx xx XXXX, xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx v tabulce 1.

Xxxxxxx 1

Xxxxxxxx referenčního xxxxxxxxx xxx optimalizaci chromatografie

Čas (min)	Průtok (ml/min)	% X	% X	Xxxxxx
Xxxxxxx	1,0	90	10	*
27	1,0	60	40	xxxxxx
32	1,0	10	90	xxxxxx
37	1,0	10	90	xxxxxx
42	1,0	90	10	xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxx XXXΑ.

Xxxxxxxxx složení xxxxxxxxxxxx, xxxxx xx nutno xxxxxx xxx normální xxxxxxxx (xxx 8.4.3), xxx vypočítat podle xxxxxx vzorce: % X =&xxxx;10 – 2,5 + (13,5 + (XXxxxX – 26) / 6) * 30 / 27&xxxx;% B =&xxxx;7,5 + (13,5 + (XXxxxX – 26) / 6) * 1,11

xxx

XXxxxX	:	xxxxxxxx čas XXXΑ x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
10	:	xxxxxxxxx % X x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
2,5	:	% B ve xxxxxxxx bodu minus xxxxxxxxx % X x xxxxxxxxx xxxxxxxxx
13,5	:	xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx bodu xxxxxxxxxxxx gradientu
26	:	požadovaný retenční xxx XXXΑ
6	:	xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
30	:	% X x xxxxxxxxxx xxxx minus % X po 27 xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx gradientu
27	:	doba xxxx xxxxxxxxxxxx gradientu

8.4.3.   Nástřik xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxxxx 100 μx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx (8.3.3) xx zařízení xx XXXX x&xxxx;xxxxxxxx 1,0&xxxx;xx xxxxxxxx xxxxxxx (5.2) xx minutu.

Složení xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx x&xxxx;8.4.2. Xx normálních xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx X:X =&xxxx;76:24 (5.2). Okamžitě xx xxxxxxxx se spustí xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx, xx procento X se xx 27 xxxxx zvětší x 5&xxxx;%. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, kterým xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx 90&xxxx;% X. Toto xxxxxxx xx udržuje xx xxxx pěti minut x xx xxxxx xxxxxxxx xx pomocí xxxxxxxxxx xxxxxxxxx složení xxxx změní xxxxx xxxx xxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxx na vnitřním xxxxxx čerpacího systému xxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 15 xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxx 1. Xxxxxxxx xxx XXXX xx měl být 26 ± 2 xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx podmínek prvního xxxxxxxxx. Rozdíl x % X mezi xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx prvního xxxxxxxxx xxxx zůstává ve xxxx 5&xxxx;% X.

Xxxxxxxx 2. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx odplynit x&xxxx;xxxxxxxxx xx odplyněné. Xx xx nezbytně xxxxx xxx to, xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx správně xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxxx xxxx píku XXXX xxxx být menší xxx 0,1 minuty (x =&xxxx;10).

Xxxxxxxx 3. Xx každých pět xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx [5] x xxxxxx xxx xxx výpočet xxxxxx xxxxxxxxxx faktoru X (9.1.1).

8.4.4.   Výsledky xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (X) se získávají xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxx xx xxx CMPA xxxxx xxxx xxxxxxxxx časem xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx 26 xxxxx.

Xxxxx H píku XXXX xxxxxxxxxxx vypočítává xxxxxxxxxx (6.11.6). Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx na každém xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxx linie xxxxxxxxx xxxxxxxx, analýzu xxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Je-li pík XXXX xxxxxxxxxx xxxxxxx xx ostatních xxxx, xxxx xx xx xxxxxx přiřazení základní xxxxx mezi xxxxx. X opačném xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx společné xxxxxxxx xxxxx, jejichž počáteční xxx by měl xxx v xxxxxxxxx xxxx XXXX (xxxx xx x xxxx x =&xxxx;0 xxx!). Xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x vzorky použijte xxxxxx typ xxxxxxxxx x x společné xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx je xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx konzistentní.

Před xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx je nezbytné xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx případných anomálií xxxxxxxxxxx buď nesprávnou xxxxxx zařízení, xxxx xxxxxx, nebo xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. X&xxxx;xxxxxxx pochybností xxxxxxx xxxxxxxxx.

8.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx

8.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;X srovnávacích xxxxxx (5.4.1 xx 5.4.2) xx přesně xxxxxxx xxxxxx popsaný x xxxxxx 8.2 xx 8.4.4. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, protože XXX xx v prostředí 8&xxxx;% xxxxxxxx trichloroctové xxxxxxxxx. Při teplotě 4&xxxx;°X xxxxxxx xxxxxx xxxxx po xxxx 24 xxxxx. V případě xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx pokusů xx žádoucí xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zařízení xxxxxxxxx xxxxx na xxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxx 8.4.2 xxxx xxx vynechána, xxxxxxxx xx % X x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5) by xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx 1. Xx xxxxx xxxxxxx jsou xxxx xxxxx XXXX xxx malé xxxx. Xx xxxxxxxx nutné xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

8.5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μl xxxxxxxxxxxx xxxxxx bez xxxxxxxxx xxxxxxxxx [0] (5.4.1).

Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxx x&xxxx;xxxxxxxxx čase XXXX píku.

8.5.3.   Odezvové faktory X stanovte nastříknutím xxxxxxxx objemu xxxxxxxx (8.5.1), xxxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxx.

9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX XXXXXXXX

9.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx

9.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxx faktoru X:

Xxx XXXX: R = X/X

xxx

X	=	xxxxxxxx xxxxxx píku XXXX
X	=	xxxxx xxxx XXXX
X	=	xxxxxxxx xxxxxxxxx ve srovnávacím xxxxxx [5]

9.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx procenta xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx

X(X)&xxxx;= X&xxxx;×&xxxx;X(X)

xxx

X(X)	=	xxxxxxxxxx procento xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx [X]
X	=	xxxxxxxx faktor xxxx XXXX (9.1.1)
H(E)	=	výška xxxx XXXX xxxxxx (X)

Xxxxx xx W(E) xxxxx xxx 1&xxxx;% x&xxxx;xxxxxx xxxx retenčním xxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx [5] menší než 0,2&xxxx;xxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx prokázána.

9.3.   Přesnost xxxxxx

9.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xxxx výsledky xxxx xxxxxxxxx, xxxxx x&xxxx;xxxxxxxx zkušebního xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx 0,2 % hm.

9.3.2.   Reprodukovatelnost

Nestanovena.

9.3.3.   Linearita

Pro xxxxxxx od 0 % xx 16&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxxxx lineární xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx&xxxx;&xx;&xxxx;0,99.

9.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx

Xxxxx xxxxxxx 1&xxxx;% xxxxxxxx xxxxxxxxx x důvodu xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx 1

Xx—4.6 standard

XXXXXXX XX

Xxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx skladování

Parametr	Metoda
Tuk (6)	ISO 17189 nebo XXX 3727 část 3
Voda	ISO 3727 xxxx 1
Xxxxxxxxxx sušina (x výjimkou soli)	ISO 3727 xxxx 2
Xxx	XXX 15648

XXXXXXX XXX

Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx odstředěného xxxxx x soukromém skladování

Parametr	Metoda
Tuk	ISO 1736
Xxxxxxxxx	XXX 8968 xxxx 1
Xxxx	XXX 5537

PŘÍLOHA XXXX

Xxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx skladování

1.

Je xxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx výhradně x&xxxx;xxxxxx xxxxx, kozího xxxxx xx xxxxxxxx mléka, xxxx xx směsi xxxxxx, kozího a buvolího xxxxx xxxxxxxxxx kasein x&xxxx;xxxxxxxxx mléka, x&xxxx;xx xxxxx xxxxxx se xxxxxxx metoda xxxxxxx xxxxxxx v dodatku. Přítomnost kaseinu x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx kaseinu x&xxxx;xxxxxxxxx mléka x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxx xxxx vyšší v porovnání x&xxxx;xxxxxxx v referenčním xxxxxx xxxxxxxxxxx 1&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxx, který xx xxxxxx v dodatku.

2.

Metody ke xxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxx uvedených x&xxxx;xxxxxxxx&xxxx;1 xxxxx xxx xxxxxxxxx za xxxxxx xxxxxxxx: x) xxxxxx detekční limit xxxx být nejvýše 0,5&xxxx;%; x) xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx; x) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx i po xxxxxx xxxx zrání, x&xxxx;xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx docházet. Není-li xxxxx x&xxxx;xxxx uvedených xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx metody uvedené x&xxxx;xxxxxxx.

Xxxxxxx

XXXXXX XXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXX MLÉKA X&xxxx;XXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXX X&xxxx;XXXXXX XXXXX, XXXXXX MLÉKA XXXX XXXXXXXX MLÉKA, XXXX XXXXX XXXXXX, XXXXXX X&xxxx;XXXXXXXX MLÉKA

1.   PŘEDMĚT

Zjišťování kravského xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxx izoelektrickou xxxxxxxx γ-xxxxxxx po xxxxxxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXX XXXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxx xxx citlivé x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxx vyrobených z ovčího xxxxx, kozího xxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xx směsí xxxxxx, xxxxxx a buvolího mléka. Xxxx xxxxxx k odhalení xxxxxxxxx xxxxx a sýrů xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx z hovězí xxxxxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx kaseinů ze xxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (XX.3.4.21.7)

3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx fokusace xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxxx

3.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx γ3 x γ2 (xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx získaného xx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxx u xxxxx xxxx x referenčních xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0 % x 1&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxx.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxx-xx xxxxxxxxx jinak, xxxxxxxxx xx pouze xxxxxxxxxx čistoty x.x. Xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxxxx údaje xx vztahují na xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx polyakrylamidové xxxx x&xxxx;xxxxxxx močoviny x&xxxx;xxxxxxxxx 265 ×&xxxx;125 ×&xxxx;0,25&xxxx;xx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxx rozměry xxxx druhy gelu, xxxx být nutné xxxxxxx xxxxxxxx separace.

Izoelektrická xxxxxxxx

4.1.   Chemikálie xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx

4.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx roztok xxxx

Xx xxxx rozpusťte:

4,85 g akrylamidu

0,15 x N, X′-xxxxxxxx-xxx-xxxxxxxxxx (XXX)

48,05&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx

15,00&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx (87 % hm.),

doplňte xx 100 ml x uložte xx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx lze použít xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx akrylamidu x&xxxx;XXX.&xxxx;X&xxxx;xxxxxxx, že koncentrace xxxxxxxxxx xxxxxxx xx 30&xxxx;% xx./xxx. xxxxxxxxxx x&xxxx;0,8&xxxx;% xx./xxx. BIS, xxx uvedená xxxxxxxx (4,85 x&xxxx;xxxxxxxxxx x&xxxx;0,15 x&xxxx;XXX) musí xxx xxxxxxxxx komerčním roztokem x&xxxx;xxxxxx 16,2 ml. Xxxxxxx xxxxxx lze xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxx. Xxxxx je jeho xxxxxxxx vyšší xxx 5 μX, xx xxxxx provést jeho xxxxxxxxxx promícháváním x 2 x Xxxxxxxxx XX-3 xx xxxx 30 xxxxx x xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxx 0,45μx membránu.

4.1.2.   Roztok xxxx

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx přísad x&xxxx;xxxxxxxx&xxxx;(*) xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx (viz 4.1.1).

9,0&xxxx;xx xxxxxxxxx xxxxxxx

24&xxxx;xx β-xxxxxxx

500 μx xxxxxxxx xX 3,5–9,5

250 μl xxxxxxxx xX 5–7

250 μx xxxxxxxx xX 6–8

Gelový xxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xx tří xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxx xxxxxx xx musí xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx (viz 6.2).

4.1.3.   Roztoky xxxxxxxxxxxx

4.1.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;X, N, N′, X′-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (Xxxxx)

4.1.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;40&xxxx;% xx./xxx. xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX)

800 xx PER xx rozpustí xx xxxx a xxxxxx xx xx 2 xx.

Xxxxxxxx: Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx roztok XXX.

4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx tekutina

Kerosin nebo xxxxxxx xxxxxxx

4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx 5,77 g xxxxxxxx xxxxxxxxxx (85 % hm.) xx xxxx x xxxxxx xx 100 xx.

4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx 2,00 x hydroxidu xxxxxxx xx vodě a xxxxxx xxxxx xx 100 xx.

Xxxxxxxx vzorku

4.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx

4.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (25,0 xx xxxxxx xxxxxxxx octové xxxxxxxx xxxxx xx 100 xx).

4.5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx

4.5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx

4.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xx xxxx xxxxxxxxx:

5,75&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx (87&xxxx;% xx.)

24,03&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx

250&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxxxx

x xxxxxxx na 50 xx xxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx; maximální xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx.

4.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxx kaseinů

4.7.1.   Tlumivý xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx 0,2 xxx/x (1,58 x/100 xx xxxx) obsahující 0,05 xxx/x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX, 1,46 g/100 xx) xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 0,2 xxx/x (1,92 x/100 xx xxxx) xxxxxxxxxxxx 0,05 xxx/x XXXX xx xX 8.

4.7.2.   Hovězí xxxxxxx (XX. 3.4.21.7), x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx 5 X/xx.

4.7.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx ε-xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx 2,&xxxx;624&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx ε-xxxxxxxxxxxxxx (6-xxxxx-x-xxxxxxxxxxxxx) xx 100 xx 40 % xxx. xxxxxxxx.

4.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx standardy

4.8.1.   Certifikované xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx odstředěného xxxxx vysráženého pomocí xxxxxxx x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxx 0&xxxx;% x&xxxx;1&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx od Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx xxx Komisi, X-2440, Xxxx, Xxxxxx.

4.8.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx laboratorních xxxxxxxxxxxx standardů xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx pomocí xxxxxxx x x xxxxxxx 0 % x 1&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx syrového buvolího xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 37&xxxx;°X (2&xxxx;500&xxxx;x, 20 xxxxx). Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx na 6 xx 8 °X xx úplně xxxxxxxx xxxxx tuková xxxxxx. Xxx xxxxxxxx 1 % xxxxxxxxx xxxxxxxx 5,00&xxxx;xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx 495&xxxx;xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx v kádince x&xxxx;xxxxxx 1&xxxx;x. Xxxxxxx xX xxxxxxx na 6,4 xxxxxxxxx zředěné xxxxxxxx mléčné (10 %, xx./xxx.). Teplotu xxxxxxx xx 35 °C, xxxxxxxx 100 μx xxxxxxxx syřidla (xxxxxxxx xxxxxxx 1: 10&xxxx;000, xxx 3&xxxx;000 X/xx) x&xxxx;xxxxxxxx xx xxxx 1 minuty. Poté xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a nechte hodinu xxxx xxx teplotě 35&xxxx;°X k utvoření xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx mléko xxxxxxxxx xxxxxx syřidla xxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Lyofilizované xxxxx xx jemně xxxxxxxx xx xxxxxxxxx prášek. X&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 0&xxxx;% xxxxxxxx stejný xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Referenční xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx – 20 °C.

Poznámka: Xxxx xxxxxxxxx referenčních xxxxxxxxx xx doporučuje xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx mléka xxxxxxxxxxxxxx fokusací xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx bílkovin

4.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx

Xxxxxxxxx 150 g kyseliny xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx x&xxxx;xxxxxxx xx 1 000 ml.

4.10.   Odbarvovací roztok

Zřeďte 500 xx xxxxxxxxx x 200 xx xxxxxx kyseliny xxxxxx xxxxxxxxxxxx vodou xx 2&xxxx;000 xx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx připravuje xxxxx xxx čerstvý; xxx xxx připravit xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 50 % (xxx.) methanolu x xxxxxxxxx roztoku 20 % (xxx.) ledové kyseliny xxxxxx.

4.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxx

4.11.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxx 1)

X 1&xxxx;000 ml 90&xxxx;% xxx. xxxxxxxxx rozpusťte xxxxxx magnetické xxxxxxxx (xxx 45 xxxxx) 3,0 x&xxxx;xxxxxxxxx modři Xxxxxxxxx G-250 (C. X. 42655) x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxxxx přes xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

4.11.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx roztok (xxxxxxx xxxxxx 2)

X&xxxx;1&xxxx;000&xxxx;xx 20 % xxx. xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 5,0 g síranu měďnatého, xxxxxxxxxxxx.

4.11.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx roztok (xxxxxxxx xxxxxx)

Xxxxxxxxxxxxx xxxx barvením xxxxxxxxx 125&xxxx;xx xxxx xxxxxxxxx roztoků (4.11.1 x&xxxx;4.11.2).

Xxxxxxxx: Barvicí xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxx.

5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX X XXXXXXX

5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx (265 x 125 x 4 mm), xxxxxxx xxxxxxx (o xxxxx 15 xx), xxxxxxxxx xxxxxx.

5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxx xxxx (265 ×&xxxx;125&xxxx;xx)

5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxx (280 ×&xxxx;125&xxxx;xx). Xx xxxxx xxxxxx xxxxx nalepte pruh xxxxxx xxxxx (280 ×&xxxx;6 ×&xxxx;0,25&xxxx;xx) (viz xxxxxxx 1).

5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx deskou (xxxx. 265 × 125 mm) a vhodný xxxxxxxx xxxxx (≥ 2,5&xxxx;xX) nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

5.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx teploty xx xxxx 12 ± 0,5&xxxx;°X

5.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 3&xxxx;000&xxxx;x

5.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx proužky (o xxxxx ≥ 265&xxxx;xx)

5.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx roztok

5.9.   Aplikátory xxxxxx (10 ×&xxxx;5&xxxx;xx, x&xxxx;xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx s nízkou xxxxxxxx xxxxxxxx)

5.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxx xx xxxxxxxx 280 × 150 mm) x&xxxx;xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx

5.12.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx tyčový xxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx tyče 10&xxxx;xx x&xxxx;xxxxxxxxx 8 000 až 20&xxxx;000 xx/xxx

5.13.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

5.14.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx xxxxx

5.15.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx

5.16.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xx 25 μx

5.17.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx

5.18.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx řízená xxxxx lázeň, xxxxxxxxxxxx xx 35 x&xxxx;40 ±&xxxx;1&xxxx;°X x&xxxx;xxxxxxxxx

5.19.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx λ =&xxxx;634&xxxx;xx

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

6.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

6.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxx

Xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx 100 ml xxxxxxx xxxxxxxx xxxx nebo xxxxxxxxxxxx standardu xxxxxxxxxxxx 5&xxxx;x&xxxx;xxxxxx, xxxxxxxx 60 ml xxxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx homogenizátorem (8&xxxx;000 xx 10&xxxx;000 xx/xxx). Xxxxxxx xX xx 4,6 zředěnou xxxxxxxxx octovou (4.5.1) x&xxxx;xxxxxxxxxxx (5 minut, 3&xxxx;000&xxxx;x). Dekantujte tuk x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx homogenizujte xxx 20&xxxx;000 xx/xxx xx 40 ml destilované xxxx x&xxxx;xxxxxxxx pH xxxxxxxxx na 4,5 xxxxxxxx kyselinou xxxxxxx (4.5.1). Xxxxxxxx 20&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxxx (4.5.2) x&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx (5 xxxxx, 3&xxxx;000&xxxx;x). Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx nachází xxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxx (xxx obrázek 2), x&xxxx;xxx xxxx xxxxxxxxxx. Kasein xx xxxxx xxxxxxxxxxxx se 40 ml xxxxxxxxxxx xxxx (xxx výše) x 20 ml xxxxxxxxxxxxxx (4.5.2) x xxxxxxxx xx. Xxxxx xxxxxx opakujte, dokud xxx extrakční xxxx xxxxxx bezbarvé (xxxxxxx xx xxxxxxx). Bílkovinný xxxxxx homogenizujte x&xxxx;50&xxxx;xx xxxxxxx (4.5.3) a přefiltrujte xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx papírový filtr. Xxxxxx xxxxxxxx dvěma xxxxxxxxxxxx 25&xxxx;xx dávkami xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx v třecí xxxxx.

Xxxxxxxx: Suché xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx při teplotě – 20 °X.

6.1.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx β-xxxxxxx xx γ-kaseiny xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxx 25 xx izolovaných xxxxxxx (6.1.1) x 0,5 xx xxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxx amonného (4.7.1) x směs 20 xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx 40&xxxx;°X a přidejte 10 μx xxxxxxxx (4.7.2), xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx 1 hodinu xxx xxxxxxx 40&xxxx;°X za xxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxx enzymu xxxxxxxx 20 μx xxxxxxx xxxxxxxx ε-xxxxxxxxxxxxxx (4.7.3). Xxxx xxxxxxxx 200&xxxx;xx xxxxx xxxxxxxx x&xxxx;2&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Pro získání xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx po xxxxxxx xxxxxxxx ε-xxxxxxxxxxxxxx&xxxx;xxxxxx lyofilizovat x xxxx zbytky xxxxxxxxx x 0,5 xx tlumivého xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx bílkovin (4.6).

6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx

Xx skleněnou xxxxx (5.1) válečkem xxxxxxx nosnou xxxxx xxxx (5.2) s pomocí xxxxxxxx kapek xxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxx odsajte xxxxxxxxx ubrouskem nebo xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx (5.3) x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (0,25&xxxx;xx) xx jinou xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxx uložte xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.

X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx (4.1.2) xxxxxxxx 10 μx Xxxxxx (4.1.3.1), xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx 10 μx xxxxxxx XXX (4.1.3.2); xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx nalijte xxxxxxxxxx na xxxxx xxxxx xxxxx. Jeden xxxxx xxxxx xxxxx xxxx (xxxxxxx s fólií xxxxxx xxxx) přiložte x&xxxx;xxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx tenká xxxxxx xxxx xxx xxxxxx (xxxxxxx 3). Pomocí xxxxx xxxxxxxx nosnou xxxxx xxxx opatrně xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx a položte xx xx tři xxxxx xxxxxxxx desky, aby xx xxxxxxxx. Po xxxxxxxx polymerace (asi xx 60 xxxxxxxx) xxxxx x krycí xxxxx sejměte gel xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxx, xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Zadní xxxxxx xxxxx xxxxx pečlivě xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxx. „Gelový xxxxxxx“ xxxxxxx xx tenké xxxxx x&xxxx;xxxxxx do xxxxxxxxxx (xxxxxxx na xxxx xxxxx).

Xxxxxxxx: Xxxxx xxxxx s distančními xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxx gel xxxx xxx rozřezán xx xxxxx části; je xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx vzorků xxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx elektroforetického xxxxxxxx (xxx gely x&xxxx;xxxxxxxxx 4,5 ×&xxxx;5&xxxx;xx).

6.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx fokusace

Nastavte xxxxxxxx xx 12 °X. Xxxxx xxxxxx xxxxx fólie xxxx xxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx několik xxxxx xxxxxxxx (4.2). Xxxxxxx xxxxxxxx „gelový xxxxxxx“ xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx elektrodovými xxxxxxx (4.3, 4.4), xxxxxxxxx na délku xxxx x&xxxx;xxxxxx xx xxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxxxx 9,5&xxxx;xx).

Xxxxxxxx izoelektrické fokusace

6.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxx 265 ×&xxxx;125 ×&xxxx;0,25&xxxx;xx

Xxxx	Xxxx (xxx)	Xxxxxx (X)	Xxxxx (xX)	Xxxxxx (X)	Xxxxx/xxxxxx (Xx)
1. Xxxxxxxxx fokusace	30	max. 2 500	max. 15	konstantní 4	xxx 300
2. Xxxxxxxx xxxxxx&xxxx;(7)	60	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 15	xxxxxxxxxx 4	xxx 1&xxxx;000
3. Xxxxxxx xxxxxxxx	60	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 5	xxx. 20	xxx 3&xxxx;000
	40	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 6	xxx. 20	xxx 3&xxxx;000
	30	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 7	xxx. 25	xxx 3&xxxx;000

Xxxxxxxx: Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx, xxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx musí být xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx upraveny (xxxx. hodnoty proudu x&xxxx;xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx-xx xx gel x&xxxx;xxxxxxxxx 265 × 125 ×&xxxx;0,5&xxxx;xx).

6.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx zařízení (2 gely 5,0 ×&xxxx;4,5&xxxx;xx, xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xx gel.

Fáze	Napětí	Proud	Příkon	Teplota	Volty/hodiny
1. Předběžná xxxxxxxx	1&xxxx;000 V	10,0 xX	3,5 X	8 °X	85 Vh
2. Fokusace xxxxxx	250 X	5,0 xX	2,5 X	8 °X	30 Vh
3. Fokusace	1 200 X	10,0 mA	3,5 W	8 °X	80 Xx
4. Xxxxxxxx	1&xxxx;500 X	5,0 xX	7,0 W	8 °X	570 Xx

Xxxxxxxxx vzorku xx xxxx 2 vložte xxx 0 Vh.

Aplikátor xxxxxx xx fázi 2 xxxxxxxxx xxx 30 Vh.

6.4.   Barvení xxxxxxxx

6.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx/xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 200 ml xxxxxxxx (4.9). Gel x xx xxxxxxxx 15 xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx.

6.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxx xxxxx

Xxxxxxx beze xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx dvakrát xxxxxxxxxx xx xxxx 30 xxxxxx xxxx xx 100 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.10) Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx naplňte 250&xxxx;xx xxxxxxxxx roztoku (4.11.3) x gel xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 45 xxxxx xxxxxxxxx.

6.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx gelové xxxxx

Xxxxxxx xxxxxx dekantujte x&xxxx;xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx 30 sekund xxxx xx 100&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.10). Xxxx 15 xxxxx protřepávejte x&xxxx;200&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx; xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx dvakrát xx xxxxxxx, xxxxx není xxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx destilovanou xxxxx (2 ×&xxxx;2 minuty) x&xxxx;xxxxxx uschnout na xxxxxxx (2 xx 3 xxxxxx) xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (10 xx 15 xxxxx).

Xxxxxxxx 1: Xxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx při xxxxxxx 20&xxxx;°X. Vyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx 2: Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx obarvení xxxxxxxx (xxxx. Xxxxxx Xxxxxxxx Xxx, Xxxxxxx, Xxxxxxxxx Xxxxxxx, kód x. 17-1150-01), xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx 5 xx/xx.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX

Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx obrazců xxxxxxxxxx vzorku x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx mléka x xxxxxx vyrobených x xxxxxx mléka, xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxx xxxxxx, kozího x xxxxxxxx mléka xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx γ3- x γ2-kaseinů, xxxxxxx izoelektrické body xx xxxxxxxxx x xxxxxxx mezi xX 6,5 x xX 7,5 (xxxxxxx 4a, x, xxxxxxx 5). Xxxxxxxx xxx je xxxxx xxx 0,5&xxxx;%.

7.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx mléka xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorků a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx γ2- x γ3-xxxxxxx (xxx „γ2 X,X,X“ a „γ3 X,X,X“ na xxxxxxxxx 4x, x x xxxxxxx 5) stejné xxxxxx intenzity. Pouze xx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx kravského mléka (xxxxx nebo xxxxx xxx 1&xxxx;% xxxx xx výši 1 %) x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxx porovnáním xxxxxxxxx xxxxxxxx γ3- x&xxxx;γ2-xxxxxxx (viz „γ3 X“ a „γ2 C“ xx xxxxxxxxx 4 a, x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxx 5) x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 0&xxxx;% a 1 % (xxxxxx, kozích), xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxx).

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxx je xx možné, xxxxxxxx xxx stanovení xxxxxx xxxx plochami píků xxxxxxxx γ2- x&xxxx;γ3-xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx píků xxxxxx, xxxxxx a/nebo xxxxxxxx γ2- a γ3-kaseinů (xxx xxxxxxx 5) xxxxxxxxxxxxx (5.19). Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x poměrem xxxxx xxxx γ2- x γ3-kaseinů x 1&xxxx;% xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxx, kozím) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxx) analyzovaných x xxxxx xxxx.

Xxxxxxxx: Tato xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx obou xxxxxxxx γ2- a γ3-xxxxxxx v 1 % xxxxxxxxxxx standardu, xxxxx xxxxxx x 0&xxxx;% xxxxxxxxxxx standardu. X&xxxx;xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx při xxxxxxx dodržení xxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxx xxxxxx.

Xxxxxx xx považován xx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxx hovězích γ2- x γ3-kaseinů nebo xxxxxxxxxxx poměrů xxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxx než xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 1&xxxx;% xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxx X., Xxxx X., Xxxxxxxx X., Xxxxxx C., Xxxxxxx P., Xxxxxx X, Xxxxxx X., Xx Luccia X., Xxxxx A.: Xxx xx xxxxxxx xx&xxxx;xxxxxxxx xxx sensitivity of xxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxx&xxxx;xx xxxxx xxx/xx caprine cheese xx xxx isoelectric xxxxxxxx xx γ2-xxxxxxx.&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxx 45, 708–711 (1990).

Addeo X., Nicolai M.A., Xxxxxxxx X., Moio X., Xxxxxx Musso X., Bocca X., Xxx Xxxxxxx X.: X control xxxxxx xx xxxxxx bovine xxxx&xxxx;xx xxx xxx xxxxx buffalo xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxxx 50, 83–85 (1995).

Xxxxxx X., Xxxxxx X, Xxxxxxxxxxxx X.: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxx xxxx&xxxx;xx ewe xxx xxxx xxxx&xxxx;xxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx — xxx carrier xxxxxxxxx/xxxxxxxxxxx xX xxxxxxxx — xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx γ-caseins using xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx. in: Xxxxxxxxxxxxxxx-Xxxxx 89 (X. X. Xxxxxx, xx.) xx 389-393, Bode-Verlag, München (1989).

Xxxxxx Ι., Belitz X.-X., Kaiser X.-X.: Xxxxxxxx von Xxxxxxxx xx Xxxxx xxx Xxxxxxxxxxx xxx. -xäxx xxxxx isoelektrische Fokussierung xx harnstoffhaltigen Xxxxxxxxxxxxxxxxxx. X. Xxxxxxx. Unters. Forsch. 174, 195–199 (1982).

Xxxxxx X.X.: Xxxxxxxxx-xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 50-100 μm xxxxxxxxxxxxxx gels xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx polyester films. Electrophoresis 1, 43–56 (1980).

Xxxxxxx 1

Xxxxxxxxxxx xxxxxx krycí xxxxx

Xxxxxxx 2

Xxxxxxxxx vrstva xxxxxxxx xxxx vodnou x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx

Xxxxxxx 3

Sklápěcí technika xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx

x = xxxxxxxxx xxxxx (0,25&xxxx;xx); x = xxxxx xxxxx (5.3); x, x = xxxxxxxx xxxxx (5.1); x = gelový xxxxxx (4.1.2); x = xxxxx fólie xxxx (5.2).

Xxxxxxx 4x

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx x&xxxx;xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x&xxxx;xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

% XX = xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, X&xxxx;= xxxxxxx, X&xxxx;= ovčí, X&xxxx;= xxxx

Xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx XXX.

Xxxxxxx 4x

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx sýrů vyrobených xx xxxxx xxxxxx, xxxxxx a buvolího xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x&xxxx;xxxxxx xxxxxxx kravského xxxxx

% XX = procento xxxxxxxxx xxxxx; 1 + = xxxxxx x xxxxxxx 1 % xxxxxxxxx xxxxx x x přídavkem xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxx dráhy. X&xxxx;= xxxxxxx, X&xxxx;= xxxx, X&xxxx;= kozí, X&xxxx;= xxxxxx

Xx obrázku xx xxxxxxxxxx xxxx separační xxxxxxxxxx gelu XXX.

Xxxxxxx 5

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (XXX) a vzorků xxxx xxxxxxxxxx ze xxxxx ovčího x&xxxx;xxxxxx xxxxx, po xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

x, x = xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 0 a 1 % xxxxxxxxx mléka; x-x = vzorky xxxx xxxxxxxxxxxx 0, 1, 2, 3 a 7&xxxx;% kravského xxxxx; X&xxxx;= xxxxxxx, X&xxxx;= xxxx, G = kozí.

Byla xxxxxxx horní xxxxxxxx xxxx XXX při λ =&xxxx;634&xxxx;xx.

XXXXXXX XX

Xxxxxxxxx xxxxxx

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx jakosti

Analýzy xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx&xxxx;12 nařízení (ES) x.&xxxx;882/2004&xxxx;(*) nebo xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx členského xxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx

1.

Xxxxx xxxxxx xx provádí x&xxxx;xxxxxxx s příslušným nařízením xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx-xx xxxxx ustanovení xxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx ustanovení xxxxxxx x normě XXX 707„Xxxxx a xxxxxx xxxxxxx – Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx“,

2.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx dostatečné xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx výsledků v xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx.

3.

Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

4.

Xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx nechat znovu xxxxxxx nezbytnou xxxxxxx xxxxxxxxx produktu x xxxxxxx hradí xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xx předpokladu, xx&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorky xxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxx řádně xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx k provedení analýzy xx&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxx xxx xx&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx agentura xxxxxxx analýzu xx 21 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx.

5.

Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx konečný.

6.

Jestliže výrobce xx xxxx pracovních xxx po xxxxxx xxxxxx prokáže, xx xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx nebyl správný, xxxxx xxxxxx se x&xxxx;xxxxx možností xxxxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx nelze, xx xxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx

Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx stanovené xxxxx xxxxxxx x ohledem xx xxxxx

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx metody

V xxxxxxxxx, xxx právní xxxxxxxx týkající xx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx stanoví xxxxxxxx postupy xxx xxxxx vzorků, xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx nejméně xx 3 xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx náhodně xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxx připravit x&xxxx;xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx stanovenými xxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxx 95&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx xx tom, 1) xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxx σr a σX, xxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx na xxx, 2) xxx xxxx vypočítána vnitřní xxxxxxxxxxxxxxxxxx. Tento xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx nejistotě xxxxxx xxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx je xxxxxxxxxx xx základě xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx

X&xxxx;xxxxx případě xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx σx a směrodatná xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx σX&xxxx;xxxxxxxxx a laboratoř xxxx xxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx&xxxx; x xxxxx x xxxxxxxxxxx měření.

Vypočítá xx rozšířená xxxxxxxxx (x = 2) x&xxxx; xxxxx:

Xx-xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxx x = x ₁ + x ₂, x = x ₁ – x ₂, x = x ₁ · x ₂ nebo x = x ₁/x ₂, musí se x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxx postupovat xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx směrodatných xxxxxxxx.

Xxxxx se xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx UL, xxxxxxxx

xxxxx xx má xx xx, xx xxxxxxx XX xxxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx XX, xxxxxxxx

xxxxx xx xx xx xx, xx xxxxxxx XX xxxxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx vnitřní xxxxxxxxxxxxxxxxxxx

X&xxxx;xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx nejsou xxxxxxxxx v tomto xxxxxxxx, x&xxxx;xxx nebyla stanovena xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx σr x σ X xx musí xx xxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxx nejistoty X xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx si X .

Pravidla, xxx xx třeba xxxxxxxxx xx účelem xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, jsou uvedena x&xxxx;xxxx 1. Považuje-li xx xxxx šarže xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx hodnotu, xxxxxx se zopakují xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xx vyhodnotí x xxxxxxx x xxxxx 1.