Plné znění - 32018R0150

Xxxxxxx X

XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXXX&xxxx;XXXXXXXXXXX MLÉCE

Metoda: XXXX x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX X XXXXXX XXXXXXX

Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxxxxxx (XX) a fosfatidylethanolaminu (XX) x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (XXX) x&xxxx;xx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx v SOM.

2.   DEFINICE

Obsah XX + XX: xxxxxxxxxx zlomek látky xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx postupem. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xx 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX METODY

Extrakce xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx mléka. Xxxxxxxxx xxxxxx XX a PE xxxx xxxxxxxx x-xxxxxxxxxxxxxx (XXX) xxxxxxx HPLC x&xxxx;xxxxxxxxxx fázemi (XX) x&xxxx;xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx obsahu PS x&xxxx;XX xx xxxxxxxxx xxxxxx porovnáním se xxxxxxxxxxx xxxxxxx, který xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx XXXX.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxxxxxx se pouze xxxxxxxxxx xxxxxxx p.a. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx, používá xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx čistoty.

4.1.   Referenční xxxxxxxx: XXXX x xxxxxxx xxxxxxx 99&xxxx;%

Xxxxxxxx: Referenční xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx – 18 °C.

4.2.   Chemikálie pro xxxxxxxx srovnávacích a zkušebních xxxxxx

4.2.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx pro XXXX

4.2.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx XXXX

4.2.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx

4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx x-xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

4.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx, 12 M xxxxx xxxxxx

4.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx, 0,4 X vodný xxxxxx x xxxxxxxx xX upravenou xxxxxxxxxx xxxxxx (4.3.1) xx 10,0

4.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;2-xxxxxxxxxxxxxxx

4.3.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;x-xxxxxxxxxxxxx (XXX)

4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx HPLC

4.4.1.   Eluční rozpouštědla xxxx být připravena xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx HPLC.

4.4.2.   Voda xxxxxxx xxx XXXX

4.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx

4.4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx

4.4.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx

4.4.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxx

4.4.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx.

5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX X XXXXXXX

5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxx na 0,1 mg x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx xx 1&xxxx;xx

5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 25 x&xxxx;100&xxxx;xx

5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx 1 xx 10&xxxx;xx

5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx míchačka

5.5.   Dělené xxxxxx xxxxxxx dávkovat 0,2, 0,5 x&xxxx;5&xxxx;xx

5.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxx 10, 50 x&xxxx;100&xxxx;xx

5.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 20 a 100 μl

5.8.   Ultrazvuková xxxxx

5.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx fungující xxx 27&xxxx;000 ×&xxxx;x

5.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxx 5&xxxx;xx

5.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxx 25&xxxx;xx

5.12.&xxxx;&xxxx;&xxxx;xX xxxx s přesností na 0,1 jednotky pH

5.13.   Zařízení xx HPLC

5.13.1.   Gradientový xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx 1,0 xx/xxx xxx 200 xxxxxx

5.13.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx

5.13.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx udržovat xx xxxxxxx 30&xxxx;°X ± 1&xxxx;°X

5.13.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx fungovat při xxxxxxxxx xxxxxx délce 330&xxxx;xx a emisní xxxxxx xxxxx 440&xxxx;xx

5.13.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxx schopné xxxxx xxxxxx xxxx

5.13.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx XxXxxxxxxxx® – 100&xxxx;(250 ×&xxxx;4,6&xxxx;xx) nebo rovnocenná xxxxxx xxxxxxxx oktadecylsilanem (X 18), xxxxxxxx xxxxxx 5 μx

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXX XXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx XXX 707.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

7.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx roztoku xxxxxxxxx xxxxxxxxx

7.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx 30,0 ± 0,1 mg xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (4.2.3) xx xxxxxxx xxxxx xx 100&xxxx;xx (5.6) x&xxxx;xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1).

7.1.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx (5.3) xxxxxxxx 1 ml xxxxxx roztoku xx xxxxxxx xxxxx xx 10&xxxx;xx (5.6) a doplňte xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1) s cílem získat xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx 0,15 xX.

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx

7.2.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx 1,000 ± 0,001&xxxx;x&xxxx;xxxxxx SOM do xxxxxxx xx 25 ml (5.2). Xxxxxxx (5.3) xxxxxxxx 10&xxxx;xx destilované xxxx x&xxxx;xxxxxxx 40&xxxx;°X ± 1 °C x&xxxx;xx xxxx 30 minut xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (5.4), xxx se xxxxxxxxxx všechny kousky.

7.2.2.   Pipetou (5.5) přeneste 0,2 ml xxxxxxxxxxxxxxxxx mléka xx xxxxxxx xxxxx na 10&xxxx;xx (5.6), xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (5.7) xxxxxxxx 100 μx 0,15 xX roztoku xxxxxxxxxx (7.1) x&xxxx;xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1). Převracením xxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx na 15 xxxxx do xxxxxxxxxxxx lázně (5.8).

7.2.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx (5.9) xxx 27&xxxx;000 ×&xxxx;x&xxxx;xx xxxx 10 xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx odeberte xx xxxxxxxx xxxxxxx (5.10).

Xxxxxxxx: Xx xxxxxxxxx xxxxxxx XX xxxx xxx xxxxxx zkušebního xxxxxx skladován xxx xxxxxxx 4&xxxx;°X.

7.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx roztoku xxxxxxxx standardu

7.3.1.   Navažte 55,4&xxxx;xx XXXX (4.1) xx xxxxxxx xxxxx na 50&xxxx;xx (5.6) x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx (5.11) xxxxxxxx xxx 25&xxxx;xx xxxxxxxxxxx (4.2.2). Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx 50&xxxx;°X ± 1 °C a opatrně xxxxxxxxxxxxx, dokud xx XXXX xxxxxxxxxx. Baňku xxxxxxxx xx 20 °C, xxxxxxx xx značku xxxxxxxxxx (4.2.1) x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

7.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx (5.3) xxxxxxxx 1&xxxx;xx xxxxxx xxxxxxx xx odměrné baňky xx 100&xxxx;xx (5.6) x&xxxx;xxxxxxx po značku xxxxxxxxxx (4.2.1). Pipetou (5.3) xxxxxxxx 1 ml xxxxxx roztoku xx xxxxxxx xxxxx na 10&xxxx;xx (5.6), xxxxxxxx 100 μx (5.7)&xxxx;0,15xX xxxxxxx xxxxxxxxxx (7.1) x&xxxx;xxxxxxx po xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xx xxxxxxxxx xxxxxxx XX xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx skladován xxx xxxxxxx 4&xxxx;°X.

7.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Xx odměrné xxxxx xx 10&xxxx;xx (5.6) xxxxxxx 25,0 ± 0,1&xxxx;xx XXX (4.3.4), xxxxxxxx 0,5&xxxx;xx (5.5) xxxxxxxxx (4.2.1) x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx se XXX rozpustil. Xxxxxxx xx značku xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.3.2) x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx (5.7) xxxxxxxx 20 μx 2-xxxxxxxxxxxxxxxx (4.3.3).

Poznámka: Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx 4 °C; xxxxxxx zůstává xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxx.

7.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx pomocí XXXX

7.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.4)

Xxxxxxxxxxxx A: Xxxxxx 0,3 mM xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx a roztok 3 mM octanu xxxxxxx (x xxxxxxxx xX xxxxxxxxx xx 6,5 ± 0,1 xxxxxxxxx octovou): xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx =&xxxx;558: 440:2 (xxx.).

Xxxxxxxxxxxx X: Methanol

7.5.2.   Doporučený xxxxxx xxxxxxxx:

Xxx (min)	Rozpouštědlo X (%)	Xxxxxxxxxxxx B (%)	Xxxxxx (xx/xxx)
Xxxxxxxxx	40	60	0
0,1	40	60	0,1
5,0	40	60	0,1
6,0	40	60	1,0
6,5	40	60	1,0
9,0	36	64	1,0
10,0	20	80	1,0
11,5	16	84	1,0
12,0	16	84	1,0
16,0	10	90	1,0
19,0	0	100	1,0
20,0	0	100	1,0
21,0	40	60	1,0
29,0	40	60	1,0
30,0	40	60	0

Xxxxxxxx: Může xx xxxx, že xxxxxx xxxxxxxx bude xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx obrázku 1.

Xxxxxxx xxxxxx: 30 °C.

7.5.3.   Objem xxxxxxxx: 50 μx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx a 50 μx xxxxxxx vzorku

7.5.4.   Ekvilibrace xxxxxx

Xxx xxxxxxxxxxx provádění xxxxxx kolonu xxxxxxxxxx 100&xxxx;% xxxxxxxxxxxxx X&xxxx;xx xxxx 15 xxxxx, xxxxx připravte xxxxx X:X =&xxxx;40:60 x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx po xxxx 15 minut při xxxxxxx 1 xx/xxx. Xxxxxxxx xxxxx pokus xxxxxxxxx methanolu (4.2.1).

Xxxxxxxx: Xxxx xxxxxxxxxxx kolony xx xxxxx xxxx xxxxxx promývejte xx xxxx 30 minut xxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx x xxxxxx 80:20 (xxx.).

7.5.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx obsahu PS + PE xx xxxxxxxxx vzorku

7.5.6.   Proveďte sérii xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx mezi jednotlivými xxxxxx, xxxxxx získali xxxxxxxxxx retenční xxxx. Xxx xxxxxxx odezvového xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (7.3) xx xxxxxxx 5–10 xxxxxxx zkušebních vzorků.

Poznámka: Xxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx 20–25 xxxxxxxx vyčistit xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx 100&xxxx;% xxxxxxxxxxxxx X&xxxx;(7.5.1).

7.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxx

7.6.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxx XXXX

XXXX xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx jediného píku. Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx sedly.

7.6.2.   Pík xxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx vymývá x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx xxxx (xxxxxxx 1). Xxxxxx xxxx xxxxxxxx integrací xxxx xxxxx.

7.6.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxx XX x&xxxx;XX

Xx takto xxxxxxxxx podmínek (xxxxxxx 1) xx XX xxxxxx v podobě xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx nimiž xx xxxxxxx jeden xxxxx xxx. XX xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxx každé skupiny xxxx stanovte xxxxxxxxxx xxxxxxxx linie xxx, xxx je znázorněno xx xxxxxxx 1.

8.   VÝPOČET X VYJADŘOVÁNÍ XXXXXXXX

Xxxxx XX + XX xx zkušebním xxxxxx xx xxxxxxx takto:

C =&xxxx;55,36 × ((A₂)/(A₁)) × ((X₁)/(X₂))

xxx:

X	=	xxxxx PS xxxx XX (v xx/100 x&xxxx;xxxxxx) xx xxxxxxxxx xxxxxx
X1	=	xxxxxx xxxx XXXX xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (7.3)
X2	=	xxxxxx xxxx XX xxxx XX xxxxxxx zkušebního xxxxxx (7.2)
X1	=	xxxxxx xxxx tryptaminu xxxxxxx srovnávacího xxxxxx (7.3)
X2	=	xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.2).

9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxxxx: Hodnoty xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx podle Xxxxxxxxxxx xxxxx XXX&xxxx;(*).

9.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx směrodatná xxxxxxxx opakovatelnosti, která xxxxxxxxx proměnlivost nezávislých xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku xxxxx stejný xxxxxxxxx xx xxxxxxx přístroji x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx neměla překročit xxxxxxxxx 2 %. Xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxxxx získají dvě xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxx jejich xxxxxxxx xx neměl xxx xxxxx než 6&xxxx;% xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

9.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx laboratořích xx xxxxxxx přístrojích x&xxxx;xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx vzorku x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx stanovením, xxxxxxxxx rozdíl mezi xxxxx výsledky by xxxxx xxx větší xxx 11&xxxx;% xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

10.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx X., Xxxxxxxxxx L., Xxxxxxxxx X. A., Xxxxxx X., Rampilli M. „Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx&xxxx;xxxxxx xx xxxxxxxx&xxxx;xxxxxx xx XXXX xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxx.“ Xxx. Xxxx. Xxxx.-Xxx.&xxxx;39,395[1988].

Xxxxxxx 1

XXXX xxxxxxxxxxxx XXX-xxxxxxxx fosfatidylserinu (XX) x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XX) x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx z rekonstituovaného xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxxx integrační xxxxx xxx xxxx XX, XX x&xxxx;xxxxxxxxx (vnitřní xxxxxxxx).

Xxxxxxx II

ZJIŠŤOVÁNÍ SYŘIDLOVÉ XXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX XXXXXXX XXX XXXXXXX XXXXXXXXXX XX XXXXXXX XXXXXXXXX KASEINOMAKROPEPTIDŮ XXXXXXXXXXXXX KAPALINOVOU XXXXXXXXXXXXXX (XXXX)

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX X&xxxx;XXXXXX POUŽITÍ

Tato xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx k veřejnému xxxxxxxxxx xx základě xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX XXXXX

Xxxxxxxxxxx norma XXX 707 – Xxxxx x xxxxxx xxxxxxx – Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX

Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx definován xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx postupem xxxxx obsahu kaseinomakropeptidů.

4.   PODSTATA XXXXXX

—	Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx odstředěného xxxxx, xxxxxxxxxx tuku x&xxxx;xxxxxxxx kyselinou trichloroctovou x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx;

—	Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXX) x&xxxx;xxxxxxxxxxxx vysokoúčinnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX);

—	Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx bez xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.

5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx čistoty x.x. Xxxxxxx xxxx xxxx xxx voda xxxxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx čistoty.

5.1.   Roztok xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx 240&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXx₃XXXX) xx xxxx a doplňte xx 1&xxxx;000&xxxx;xx. Xxxxxx by xxx xxx xxxx x xxxxxxxx.

5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx roztok, xX 6,0

Rozpusťte 1,74 g fosforečnanu xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (K₂HPO₄), 12,37&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx draselného (KH₂PO₄) x&xxxx;21,41&xxxx;x&xxxx;xxxxxx sodného (Na₂SO₄) xxx x&xxxx;700&xxxx;xx xxxx. X&xxxx;xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xX xx 6,0 xxxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxx xx 1 000 xx x homogenizujte.

Poznámka: Xxxxxxx eluentu lze xxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx výrobce xxxxxxxx materiálů na xxxxxx.

Xxxxxx roztok xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx.

5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx jeden objem xxxxxxxxxxxx (CH₃CN) x&xxxx;xxxxxx xxxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx membránový xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx.

Xxxxxxxx: Xxx xxxxxx xxxxxxxxx jiný promývací xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxxx účinek a xxxxx nezhoršuje rozlišovací xxxxxxxx xxxxxx.

5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx

5.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xx. [0]).

5.4.2.   Totéž xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx zfalšované xxxxxxxxx 5&xxxx;% xx. xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xx. [5]).

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX X XXXXXXX

6.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx

6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx síly 2&xxxx;200&xxxx;x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx zkumavkami xx zátkou x&xxxx;xxxxxx xxx 50&xxxx;xx

6.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

6.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

6.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx nálevky o průměru xxx 7 cm

6.6.   Filtrační papíry xxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxx 12,5 cm

6.7.   Skleněné filtrační xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx

6.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxx umožňující xxxxxxxx 10&xxxx;xx (XXX 648, třída X, xxxx XXX/X 835) xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx dodávat 10,0&xxxx;xx xx xxx xxxxxx

6.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx schopný xxxxxxx 20,0&xxxx;xx xxxx xxx xxxxxxx xxx 50 °C

6.10.   Termostatická xxxxx lázeň xxxxxxxxx xx 25 ± 0,5&xxxx;°X

6.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xx HPLC, xxxxx xxxxx:

6.11.1.

Xxxxxxxx

6.11.2.

Xxxxxxxxxx zařízení – xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx – x&xxxx;xxxxxx 15 až 30 μx

6.11.3.

Xxx xxxxxx XXX 2&xxxx;000-XX za sebou (xxxxx 30&xxxx;xx, xxxxxxx xxxxxx 0,75&xxxx;xx), xxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx. xxxxx xxxxxx XXX 2&xxxx;000-XXxx, jedna xxxxxx Xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx Xxxxxx XX 250) x&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxx (3 cm ×&xxxx;0,3&xxxx;xx) naplněná xxxxxxxxxx X&xxxx;125 xxxx xxxxx xxxxxxxxxx s rovnocennou xxxxxxxxx

6.11.4.

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx na 35 ± 1 °C

6.11.5.

UV xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx 205 nm x&xxxx;xxxxxxxxxx 0,008 Å.

6.11.6.

Integrátor xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx Xxxxxxxx: Xxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx jejich xxxxxxxxxxx schopnost xx x&xxxx;xxxxxx nižší. X&xxxx;xxxxx xxxxxxx je třeba, xxx xxxxxx teploty x&xxxx;xxxxxxx jednoho xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxx 5&xxxx;°X.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXX XXXXXX

7.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxx ISO 707. Xxxxxxx státy xxxx xxxxx používat jinou xxxxxx odběru vzorků xx xxxxxxxxxxx, že xxxx xxxxxx odpovídá xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx.

8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

8.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku.

Sušené xxxxx xxxxxxxx xx nádobky, xxxxx objem je xxx dvakrát větší xxx xxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx víčkem. Xxxxxxx xxxxx uzavřete. Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx převracením nádobky.

8.2.   Zkušební xxxxx

Xx odstředivkové xxxxxxxx (6.2) nebo vhodné xxxxx se zátkou xx 50&xxxx;xx xxxxxxx 2,000 ± 0,001 g zkušebního xxxxxx.

8.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxx

8.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 20,0&xxxx;xx teplé (50&xxxx;°X) xxxx. Prášek xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx třepačce (6.3). Xxxxxxxx xxxxxx do xxxxx xxxxx (6.10), xxxxx xx xxxx xxxxxxx neustálí xx 25&xxxx;°X.

8.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxx magnetickou xxxxxxxxx (6.4)&xxxx;10,0&xxxx;xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (5.1) x&xxxx;xxxxxxx xxx 25&xxxx;°X. Xxxxxxxx xxxxxx xx 60&xxxx;xxxxx xx xxxxx lázně (6.10).

8.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx (6.2) po xxxx 10 minut xxx xxxxxxxxxx síle 2&xxxx;200&xxxx;x, nebo xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx (6.6) x&xxxx;xxxxxxx 5&xxxx;xx xxxxxxxx xxxxxxx.

8.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

8.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx 15 xx 30 μx xxxxxx odměřeného xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (8.3.3) xx zařízení xx XXXX (6.11) x&xxxx;xxxxxxxx 1,0&xxxx;xx xxxxxxxx xxxxxxx (5.2) za xxxxxx.

Xxxxxxxx 1. V závislosti xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx na xxxxxxxx výrobce xxxxxx xxx xxxxxx x&xxxx;xxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx 2. Xxx xxxxxx xxxxxxxxx promyjte xxxxxx xxxxx. Xxxxx x&xxxx;xxxx xxxxxxxxxxxx eluční xxxxxx (5.2).

Před každým xxxxxxxxxx xx více xxx 24 hodin xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx&xxxx;(5.3) xxxxxxx xx dobu xxx hodin xxx xxxxxxx 0,2&xxxx;xx xx xxxxxx.

8.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx [X] xx xxxxxxx xx xxxxx chromatogramu, x&xxxx;xxxx xx každý xxx xxxxx xxxx retenčním xxxxx XX xxxxx:

Xxx XX:	Xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx x XX xxx 12,5 xxxxxx
Xxx XXX:	Xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx odpovídající XXX s XX 15,5 xxxxxx

Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (xxxxx).

Xxxxxxxxxx (6.11.6) xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx A každého píku:

AII:	plocha xxxx II
AIII:	plocha xxxx XXX

Xxxx xxxxxxxxxxxxx interpretací xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx chromatogramu xx xxxxxx zjištění xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

X&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

8.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx

8.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;X srovnávacích xxxxxx (5.4) se xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx&xxxx;8.2 až 8.4.2.

Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx XXX xx x&xxxx;xxxxxxxxx 8 % xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxx 30&xxxx;°X xxxxxxx odhadem x&xxxx;0,2&xxxx;% xx xxxxxx.

8.5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx opakovanými nástřiky xxxxxxx (8.5.1) xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.4.2), xxxxx xx xxxxxx a retenční xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx XXX xxxxxxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

8.5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx R nastříknutím xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (8.5.1), xxxxxx xxxx použili xxx xxxxxx.

9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX XXXXXXXX

9.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx a vzorce

9.1.1.   Výpočet xxxxxxxxxx xxxxxxx X:

Xxx II:

RII = 100/(XXX[0])

xxx:

XXX	=	xxxxxxxx xxxxxxx xxxx XX
XXX [0]	=	xxxxxx xxxx II xxxxxxxxxxxx xxxxxx [0] xxxxxxx x&xxxx;8.5.3

Xxx XXX:

XXXX = X/(XXXX[5] – AIII[0])

kde:

RIII	=	odezvový xxxxxx xxxx III
AIII [0] xxx XXXX [5]	=	xxxxxx xxxx XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxx [0] x&xxxx;[5] xxxxxxx x&xxxx;8.5.3
X	=	xxxxxxxx xxxxxxxxx ve srovnávacím xxxxxx [5], tj. 5

9.1.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx relativní plochy xxxx xx vzorku [X]

XXX[X] = XXX × XXX[X]

XXXX[X] = XXXX × AIII[E]

SIV[E] = RIV × XXX[X]

xxx:

XXX [X], XXXX [X], XXX [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxx xxxx II, XXX a IV xx xxxxxx [X]
XXX [X], XXXX [E]	=	plochy píků XX x&xxxx;XXX ve xxxxxx [X] xxxxxxx x&xxxx;8.4.2
XXX, XXXX	=	xxxxxxxx faktory xxxxxxxxx x&xxxx;9.1.1

9.1.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx relativního xxxxxxxxxx času píku XXX ve xxxxxx [X]:

XXXXXX[X] = (RTIII[E])/(RTIII[5])

kde:

RRTIII [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxx XXX xx xxxxxx [X]
XXXXX [E]	=	relativní xxxxxxxx čas xxxx XXX xx xxxxxx [X] získaný x&xxxx;8.4.2
XXXXX [5]	=	xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxx XXX x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx [5] xxxxxxx x&xxxx;8.5.3

9.1.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxxx retenčním xxxxx píku XXX, xx. XXXXXX [E] x&xxxx;xxxxxxxxx přidané xxxxxx xxxxxxxxx až xx xxxxxxxx 10&xxxx;% xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx

—	xxx xxxxxx xxxxxxxxx > 5 % xx XXXXXX [X] &xx;&xxxx;1,000;

—	xxx xxxxxx xxxxxxxxx ≤&xxxx;5&xxxx;% xx XXXXXX [X] ≥&xxxx;1,000.

Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx hodnoty RRTIII xx ± 0,002.

Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx XXXXXX [0] xxx málo xxxx xx 1,034. Xxxxx xxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxx 1,000, xxxxx vždy xxxx xxx xxxxx xxx 1,000.

9.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx procenta xxxxxx xxxxxxxxx syrovátky xxxxxxxx xx xxxxxx:

X = XXXX[X] – [1, 3 + (XXXX[0] – 0, 9)]

xxx:

X	=	xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxx [X];
XXXX [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX zkušebního xxxxxx [X] xxxxxxx xxxxx 9.1.2;
1,3	=	xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX xxxxxxxxxx v gramech xxxxxxxxx xxxxxxxxx na 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxx sušeném xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx. Toto xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
XXXX [0]	=	xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx III, která xx rovna XXXX&xxxx;×&xxxx;XXXX[0]. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx v 9.1.1 x&xxxx;8.5.3;
(XXXX [0]&xxxx;–&xxxx;0,9)	=	xxxxxxxxxxx xxxxxx, kterou xx nutno xxxxxxx xx relativní xxxxxxxx xxxxx 1,3, xxxxxxxx XXXX [0] není xxxxx 0,9. Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx III xxxxxxxxxxx xxxxxx&xxxx;[0] xxxxx 0,9.

9.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

9.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx v těsném sledu xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx 0,2&xxxx;% xx.

9.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xxxx dvěma xxxxxxxxxxxx a nezávislými xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx laboratořích u stejného xxxxxxxxxx xxxxxx by xxxxx překročit 0,4&xxxx;% xx.

9.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx

9.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxx předpokládat, že xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX XXXX [X] vyjádřena v gramech xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx, ≤ 2,0 + (XXXX[0] – 0,9)

xxx

2,0	xx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx III, tj. 1,3, x nejistotě x xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx sušeného xxxxxxxxxxxx xxxxx x x reprodukovatelnosti xxxxxx (9.3.2);
(XXXX [0] – 0,9)	xx oprava, která xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx je xxxxxx XXXX [0] jiná xxx 0,9 (xxx xxx 9.2).

9.4.2.   Je-li relativní xxxxxx xxxx III XXXX [X] &xx; 2,0 + (XXXX[0] – 0,9) a relativní xxxxxx xxxx XX XXX [X]&xxxx;≤&xxxx;160, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 9.2.

9.4.3.   Je-li xxxxxxxxx plocha xxxx XXX XXXX [X] &xx; 2,0 + (XXXX[0] – 0,9) x relativní plocha xxxx XX SII [X]&xxxx;≤&xxxx;160, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (X %). Potom xxxxxxxxxxx xxxxx 1 x 2.

9.4.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx odstředěného xxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxx xx grafů 1 x&xxxx;2.

Xxxx přímka xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx určuje xxxxx xxx relativní xxxxxx xxxx III, x&xxxx;xx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;90&xxxx;% xxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx 1 x 2 jsou:

SIII = 0,376 X % – 10,7	(xxxx 1)
SIII = 0,0123 SII [X] + 0,93	(graf 2)

xxx:

XXXX	xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX xxxxxxxxx xxx podle xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxx xxxxxxxxx plochy xxxx SII [X],
X&xxxx;%	xx xxxxxxx obsah bílkovin xxxxxxxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxx,
XXX [E]	je xxxxxxxxx xxxxxx vzorku xxxxxxxxx x&xxxx;xxxx 9.1.2.

Xxxx rovnice xxxx rovnocenné xxxxx 1,3 xxxxxxxxx x xxxx 9.2.

Xxxxxx (X1 x T2) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XXXX [X] x xxxxxxxxx xxxxxxx XXXX xx xxx xxxxxx xxxxxx: X1 =&xxxx;XXXX[X]&xxxx;– [(0,376 P% – 10,7) + (XXXX[0] – 0,9)]X2 = XXXX[X] – [(0,0123 XXX[X] + 0,93) + (XXXX[0] – 0,9)].

Xxxx-xx X1 a/nebo X2	xxxxx xxxx xxxx xxxxx xxx nula, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx stanovit.
Jsou-li X1 x X2	xxxxx xxx xxxx, je xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxx xxxxxx: W = X2 + 0,91

xxx:

0,91 xx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxx xxxx plnou x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx XXX

XXXXXXXXX XXXXXX XX XXXXXXXXX SYROVÁTKY X&xxxx;XXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX: XXXXXXXXX XXXXXXXX SUŠINY XX SYŘIDLOVÉ SYROVÁTKY XX&xxxx;XXXXXXXX XXXXXXXXXXXX XXXXX

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX XXXXX: XXXXXXXXXXX XXXXX XXX 707

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX

Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx postupem xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxxxxxxxxxx X&xxxx;xxxxxxxxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx HPLC). Vyhodnocení xxxxxxxx se provádí xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxx, které xxxxx xxxxxx odstředěné mléko xxx xxxxxxxx nebo x&xxxx;xxxxxxxxx známého xxxxxxxx xxxxxx syrovátky. Xxxxx xx výsledek xxxxx xxx 1&xxxx;% xx., xx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxxxxxx xx pouze xxxxxxxxxx čistoty p.a. Xxxxxxx xxxx xxxx xxx voda xxxxxxxxxxx xxxx voda nejméně xxxxxxxxxx xxxxxxx. Acetonitril xxxx xxx spektroskopickou xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxx HPLC.

5.1.   Roztok xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx 240 g kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (XXx₃XXXX) xx xxxx x&xxxx;xxxxxxx xx 1&xxxx;000&xxxx;xx. Xxxxxx xx xxx xxx xxxx x bezbarvý.

5.2.   Eluenty X&xxxx;x&xxxx;X

Xxxxxx X: Xxxxxx 150 xx acetonitrilu (CH₃CN), 20 xx xxxxxxxxxxxx (XX₃XXXXXX₃) a 1,00 xx kyseliny trifluoroctové (XXX, XX₃XXXX) xx xxxxxxx xxxxx a xxxxxxx xx 1&xxxx;000 xx xxxxx.

Xxxxxx X: Xxxxxx 550 xx xxxxxxxxxxxx, 20 xx xxxxxxxxxxxx x 1,00 xx XXX xx xxxxxxx baňky xx 1&xxxx;000 xx x xxxxxxx xx 1&xxxx;000 xx vodou. Xxxxxx xxxxxx xxxx použitím xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μm.

5.3.   Uchování xxxxxx

Xx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx B (xxxxxx) x potom xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxx po xxxx 30 xxxxx). Xxxxxx xx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx.

5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx

5.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx odstředěné xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx skladování (xx. [0]).

5.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx mléko xxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5&xxxx;% hm. xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xx. [5]).

5.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx sušené xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx přídavkem 50&xxxx;% hm. xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx standardního xxxxxxx (xx. [50]).

6.   PŘÍSTROJE X XXXXXXX

6.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx

6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx 2&xxxx;200&xxxx;x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx zkumavkami se xxxxxx o objemu xxx 50&xxxx;xx

6.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

6.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

6.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx asi 7&xxxx;xx

6.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx o průměru xxx 12,5&xxxx;xx

6.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxx o velikosti xxxx 0,45 μx

6.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxx umožňující xxxxxxxx 10&xxxx;xx (ISO 648, xxxxx X, nebo XXX/X 835), xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 10,0&xxxx;xx xx xxx xxxxxx

6.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx dodávat 20,0&xxxx;xx xxxx xxx teplotě xxx 50&xxxx;°X

6.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx nastavená xx 25 ± 0,5&xxxx;°X

6.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xx XXXX, které xxxxx:

6.11.1.

Xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx gradientem

6.11.2.

Nástřikové xxxxxxxx – xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, o objemu 100 μx

6.11.3.

Xxxxxx Agilent Xxxxxxxxxxxx Xxxxxx 300 XX-X3 (xxxxx 25 cm, xxxxxxx průměr 0,46 cm), xxxx xxxx rovnocenná xxxxxx pro obrácené xxxx s velkými xxxx xx bázi křemene

6.11.4.

Termostat xxxxxx nastavený na 35 ± 1&xxxx;°X

6.11.5.

XX xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx umožňuje xxxxxxxx xxxxxx xxx 210&xxxx;xx (x xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx až do 220&xxxx;xx) x&xxxx;xxxxxxxxxx 0,02 Å.

6.11.6.

Xxxxxxxxxx s možností xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx linii xxxx xxxx xxxxx Xxxxxxxx: Xxxxx x kolonami udržovanými xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx teplota xxxxxxxx xxxx než x 1&xxxx;°X, xxxxx xxxxxxx k příliš xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx XXXX.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXX XXXXXX

7.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx v mezinárodní xxxxx XXX 707. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx jinou xxxxxx odběru xxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx způsobem, xxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxx.

8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

8.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx do nádobky, xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx uzavřete. Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx promíchejte xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

8.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx

Xx odstředivkové xxxxxxxx (6.2) xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx 50&xxxx;xx navažte 2,00 ± 0,001&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx: X&xxxx;xxxxxxx směsí xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx odpovídala 2,00&xxxx;x.

8.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxx

8.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xx xxxxxxxx xxxxx přidejte 20,0&xxxx;xx xxxxx (50&xxxx;°X) xxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx třepačce (6.3) xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx lázně (6.10), xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx na 25&xxxx;°X.

8.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxx xxxxx xx stálého míchání xxxxxxxxxxx míchačkou (6.4) xxxxxxxx 10,0&xxxx;xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxx 25 °C (5.1). Xxxxxxxx xxxxxx na 60&xxxx;xxxxx xx vodní xxxxx (6.10).

8.3.3.   Odstřeďujte (6.2) xx xxxx 10 xxxxx při xxxxxxxxxx xxxx 2&xxxx;200&xxxx;x, xxxx xxxxxxxxxxxx přes papír (6.6) a prvních 5&xxxx;xx xxxxxxxx xxxxxxx.

8.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

8.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx XXXX x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx sušeného xxxxxxxx xxxxxxxx.

8.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx XXXX x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx s mrtvým xxxxxxx xxx 6&xxxx;xx (xxxxx xx xxxx, xxx xx stékají xxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx včetně) xx xxxxxxxxx xxxxxxxx čas x&xxxx;xxxxx 26 xxxxx ± 2 xxxxxx xxx XXXΑ. Xxx xxxxxxxxxxx systémy s menším xxxxxx xxxxxxx (xxxx. 2&xxxx;xx) xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx 22 xxxxx.

Xxxxxxx roztoky xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.4) x&xxxx;xxxxxxx 50&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx 100 μl xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (8.3.3) xx xxxxxxxx xx HPLC, xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx gradientu xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx 1.

Xxxxxxx 1

Xxxxxxxx referenčního xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx

Xxx (xxx)	Xxxxxx (xx/xxx)	% X	% B	Křivka
Počátek	1,0	90	10	*
27	1,0	60	40	přímka
32	1,0	10	90	přímka
37	1,0	10	90	přímka
42	1,0	90	10	přímka

Porovnání xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxx XXXΑ.

Xxxxxxxxx xxxxxxx rozpouštědla, xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxx normální xxxxxxxx (xxx 8.4.3), xxx vypočítat xxxxx xxxxxx xxxxxx: % X = 10 – 2,5 + (13,5 + (XXxxxX – 26) / 6) * 30 / 27&xxxx;% X =&xxxx;7,5 + (13,5 + (XXxxxX – 26) / 6) * 1,11

xxx

XXxxxX	:	xxxxxxxx xxx XXXΑ x&xxxx;xxxxxxxxxxx gradientu
10	:	počáteční % X x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
2,5	:	% X xx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx % X x xxxxxxxxx xxxxxxxxx
13,5	:	xxx xxxxxxxxxxxx střednímu xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
26	:	xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx XXXΑ
6	:	xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x normálního xxxxxxxxx
30	:	% X v xxxxxxxxxx bodu minus % B xx 27 xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx gradientu
27	:	doba běhu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

8.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxxxx 100 μx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (8.3.3) xx zařízení xx XXXX x&xxxx;xxxxxxxx 1,0&xxxx;xx xxxxxxxx xxxxxxx (5.2) xx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx x&xxxx;8.4.2. Za xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx X:X = 76:24 (5.2). Xxxxxxxx xx xxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx, xx procento X xx xx 27 xxxxx xxxxxx x 5 %. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx dosáhne x xxxx minutách 90&xxxx;% X. Xxxx xxxxxxx xx udržuje po xxxx xxxx xxxxx x po xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx gradientu xxxxxxx xxxx změní během xxxx xxxxx xx xxxxxxx počáteční. V xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx čerpacího systému xxxx být xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 15 xxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxx 1. Xxxxxxxx čas XXXX xx měl xxx 26 ± 2 xxxxxx. Xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx x % B xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx prvního xxxxxxxxx xxxx zůstává xx xxxx 5&xxxx;% B.

Poznámka 2. Xxxxxxx xx xxxxx dostatečně xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xx odplyněné. Xx to xxxxxxxx xxxxx pro xx, xxx gradientový xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx fungoval. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx retenčního xxxx píku CMPA xxxx xxx menší xxx 0,1 xxxxxx (x =&xxxx;10).

Xxxxxxxx 3. Xx každých xxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx referenční vzorek [5] a xxxxxx xxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx X (9.1.1).

8.4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (X) xx získávají xx xxxxx chromatogramu, xx xxxx je xxx XXXX určen xxxx retenčním časem xxxxxxxxx v délce 26 xxxxx.

Xxxxx H píku CMPA xxxxxxxxxxx vypočítává xxxxxxxxxx (6.11.6). Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxx linie xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xx-xx pík XXXX xxxxxxxxxx xxxxxxx xx ostatních xxxx, xxxx by se xxxxxx xxxxxxxxx základní xxxxx mezi xxxxx. X opačném xxxxxxx xxxxxxxx svislé xxxxxxx xx společné základní xxxxx, xxxxxxx počáteční xxx xx xxx xxx v blízkosti xxxx XXXX (xxxx xx v xxxx x =&xxxx;0 min!). Xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx typ xxxxxxxxx x u společné xxxxxxxx linie xxxxxxxxxxxx, xxx xx xx xxxxxx x referenčním xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. X&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

8.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx

8.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;X xxxxxxxxxxxx vzorků (5.4.1 až 5.4.2) xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx popsaný x xxxxxx 8.2 xx 8.4.4. Použijte čerstvě xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx XXX xx v prostředí 8&xxxx;% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Při xxxxxxx 4&xxxx;°X xxxxxxx roztok xxxxx po dobu 24 hodin. V případě xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx žádoucí používat x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx misku xx xxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxx 8.4.2 xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx je % X x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx známo x xxxxxxxxxxx analýz.

Chromatogram xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5) xx xxx xxx obdobný xxxxxxxxxxxxx znázorněnému xx xxxxxxx 1. Na xxxxx obrázku xxxx xxxx xxxxx XXXX xxx xxxx xxxx. Xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

8.5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx xxxxxxxxxxxx vzorku xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx [0] (5.4.1).

Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx XXXX píku.

8.5.3.   Odezvové xxxxxxx X stanovte xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (8.5.1), xxxxxx bylo xxxxxxx pro xxxxxx.

9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX XXXXXXXX

9.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx

9.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxx faktoru X:

Xxx XXXX: X = X/X

xxx

X	=	xxxxxxxx xxxxxx xxxx XXXX
X	=	xxxxx xxxx CMPA
W	=	množství xxxxxxxxx xx srovnávacím xxxxxx [5]

9.2.   Výpočet xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx syrovátky xxxxxxxx ve xxxxxx

X(X)&xxxx;= X&xxxx;×&xxxx;X(X)

xxx

X(X)	=	xxxxxxxxxx procento xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx vzorku [X]
X	=	xxxxxxxx xxxxxx xxxx XXXX (9.1.1)
X(X)	=	xxxxx xxxx XXXX vzorku (X)

Xxxxx xx X(X) vyšší xxx 1&xxxx;% a rozdíl xxxx xxxxxxxxx časem x&xxxx;xxxxx srovnávacího vzorku [5] menší xxx 0,2&xxxx;xxxxxx, pak xx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx prokázána.

9.3.   Přesnost xxxxxx

9.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx nebo x&xxxx;xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx na stejném xxxxxxxxx, by neměl xxxxxxxxx 0,2 % hm.

9.3.2.   Reprodukovatelnost

Nestanovena.

9.3.3.   Linearita

Pro xxxxxxx od 0&xxxx;% xx 16 % xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx&xxxx;&xx;&xxxx;0,99.

9.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx

Xxxxx xxxxxxx 1&xxxx;% xxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx 1

Xx—4.6 xxxxxxxx

XXXXXXX XX

Xxxxxx analýzy másla x soukromém skladování

Parametr	Metoda
Tuk (6)	ISO 17189 nebo XXX 3727 část 3
Voda	ISO 3727 xxxx 1
Xxxxxxxxxx xxxxxx (x xxxxxxxx xxxx)	XXX 3727 xxxx 2
Xxx	XXX 15648

XXXXXXX VII

Metody xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x soukromém xxxxxxxxxx

Xxxxxxxx	Xxxxxx
Xxx	XXX 1736
Xxxxxxxxx	XXX 8968 část 1
Xxxx	XXX 5537

XXXXXXX VIII

Metody xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx

1.

Xx xxxxx xxxxxxx, že sýry xxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx xx buvolího xxxxx, xxxx ze směsi xxxxxx, kozího a buvolího xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx, x&xxxx;xx xxxxx xxxxxx se xxxxxxx metoda xxxxxxx xxxxxxx v dodatku. Přítomnost xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx v analyzovaném xxxxxx xx stejný xxxx xxxxx v porovnání x&xxxx;xxxxxxx v referenčním xxxxxx xxxxxxxxxxx 1 % xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx.

2.

Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx v sýrech xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx&xxxx;1 xxxxx xxx xxxxxxxxx za xxxxxx xxxxxxxx: x) xxxxxx detekční limit xxxx xxx xxxxxxx 0,5&xxxx;%; x) xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx falešně pozitivní; c) musí xxxxxxxxx xxxxxxx kaseinu x&xxxx;xxxxxxxxx mléka x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xx dlouhé xxxx zrání, k čemuž xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx docházet. Není-li xxxxx x&xxxx;xxxx uvedených xxxxxxxxx xxxxxx, použijí xx xxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx.

Xxxxxxx

XXXXXX XXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXX MLÉKA X&xxxx;XXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXX Z OVČÍHO XXXXX, XXXXXX XXXXX XXXX XXXXXXXX XXXXX, XXXX XXXXX XXXXXX, XXXXXX X&xxxx;XXXXXXXX XXXXX

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX

Xxxxxxxxxx kravského xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx mléka, xxxxxx mléka, xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxx izoelektrickou xxxxxxxx γ-xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXX XXXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxx pro citlivé x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx mléka x&xxxx;xxxxxxxxx, též xxxxxxx xxxxxxxxxx, x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx mléka xxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx mléka. Xxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a sýrů xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx z hovězí xxxxxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx a proteolýza xxxxxxxxx (EC.3.4.21.7)

3.3.   Izoelektrická xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx bílkovin

3.4.   Vyhodnocení xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx γ3 x γ2 (xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) xx základě porovnání xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxx z referenčních xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0 % x 1&xxxx;% kravského xxxxx.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxx-xx stanoveno jinak, xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x. Xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx s obsahem xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx 265 ×&xxxx;125 ×&xxxx;0,25&xxxx;xx. Pokud se xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx druhy gelu, xxxx být nutné xxxxxxx podmínky xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

4.1.   Chemikálie pro xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxx močoviny

4.1.1.   Zásobní xxxxxx xxxx

Xx xxxx xxxxxxxxx:

4,85&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxx

0,15 x X, N′-methylen-bis-akrylamidu (XXX)

48,05&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx

15,00&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx (87&xxxx;% xx.),

xxxxxxx xx 100 xx x uložte xx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx: Místo xxxxxxxxx množství xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx lze použít xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx akrylamidu x&xxxx;XXX.&xxxx;X&xxxx;xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx 30&xxxx;% xx./xxx. xxxxxxxxxx x&xxxx;0,8&xxxx;% hm./obj. XXX, xxx xxxxxxx množství (4,85 g akrylamidu x&xxxx;0,15 x&xxxx;XXX) xxxx xxx xxxxxxxxx komerčním roztokem x&xxxx;xxxxxx 16,2&xxxx;xx. Xxxxxxx xxxxxx lze xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx 5 μS, xx xxxxx provést jeho xxxxxxxxxx promícháváním x 2 x Amberlitu XX-3 xx xxxx 30 xxxxx a xxxx xxx přefiltrovat xxxx 0,45μm membránu.

4.1.2.   Roztok xxxx

Xxxxxxxxx roztok xxxx xxxxxxxxx xxxxxx a amfolytů (*) xx zásobním roztokem xxxx (viz 4.1.1).

9,0 ml xxxxxxxxx xxxxxxx

24&xxxx;xx β-xxxxxxx

500 μx xxxxxxxx xX 3,5–9,5

250 μx xxxxxxxx xX 5–7

250 μx xxxxxxxx xX 6–8

Xxxxxx xxxxxx promíchejte x&xxxx;xxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xx xxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxx.

Xxxxxxxx: Gelový xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx (xxx 6.2).

4.1.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx

4.1.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;X, X, X′, X′-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (Xxxxx)

4.1.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;40&xxxx;% hm./obj. xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX)

800 mg XXX xx xxxxxxxx ve xxxx x xxxxxx xx xx 2 xx.

Xxxxxxxx: Vždy xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx XXX.

4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx tekutina

Kerosin nebo xxxxxxx parafin

4.3.   Anodový xxxxxx

Xxxxxxxxx 5,77 x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (85&xxxx;% xx.) xx xxxx x xxxxxx na 100 xx.

4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx 2,00 x hydroxidu sodného xx xxxx a xxxxxx vodou xx 100 ml.

Příprava xxxxxx

4.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx k izolaci xxxxxxxx

4.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx kyselina xxxxxx (25,0 xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx 100 xx).

4.5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx

4.5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx

4.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx roztok xxx xxxxxxxxxx bílkovin

Ve xxxx xxxxxxxxx:

5,75&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx (87&xxxx;% xx.)

24,03&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx

250&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxxxx

x doplňte xx 50 xx vodou.

Poznámka: Xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx; maximální xxxx xxxxxxxxxx je xxxxx týden.

4.7.   Chemikálie xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx

4.7.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx uhličitanu xxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxx roztok xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx 0,2 xxx/x (1,58 g/100 xx xxxx) xxxxxxxxxx 0,05 xxx/x kyseliny ethylendiamintetraoctové (XXXX, 1,46 g/100 xx) xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 0,2 xxx/x (1,92 g/100 ml xxxx) xxxxxxxxxxxx 0,05 xxx/x XXXX xx xX 8.

4.7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx (XX. 3.4.21.7), x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx 5 X/xx.

4.7.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx ε-aminokapronové určené x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx 2,&xxxx;624&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx ε-xxxxxxxxxxxxxx (6-amino-n-hexankyseliny) xx 100 ml 40&xxxx;% xxx. xxxxxxxx.

4.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx

4.8.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx vysráženého xxxxxx xxxxxxx x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxx 0&xxxx;% x&xxxx;1&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xx Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx xxx Xxxxxx, X-2440, Xxxx, Xxxxxx.

4.8.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx buvolího xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx a s xxxxxxx 0&xxxx;% x 1&xxxx;% kravského mléka

Odstředěné xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx buvolího xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx teplotě 37&xxxx;°X (2&xxxx;500&xxxx;x, 20 minut). Xx rychlém xxxxxxxxx xxxxxxxx x jejího xxxxxx na 6 xx 8 °C xx úplně odstraní xxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxx 1&xxxx;% xxxxxxxxx přidejte 5,00&xxxx;xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx 495&xxxx;xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 1 l. Xxxxxxx xX xxxxxxx xx 6,4 xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (10&xxxx;%, xx./xxx.). Xxxxxxx upravte xx 35 °X, xxxxxxxx 100 μx xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxx 1: 10 000, xxx 3&xxxx;000 X/xx) x&xxxx;xxxxxxxx po xxxx 1 xxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx 35&xxxx;°X x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx utvoření xxxxxxxx xx veškeré mléko xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx rozemele xx xxxxxxxxx xxxxxx. X&xxxx;xxxxxxxx referenčního standardu 0&xxxx;% xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx u čistého xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxx teplotě – 20 °C.

Poznámka: Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx doporučuje zkontrolovat xxxxxxx buvolího xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx působení xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx

4.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx

Xxxxxxxxx 150&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx vodě x&xxxx;xxxxxxx xx 1&xxxx;000&xxxx;xx.

4.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx roztok

Zřeďte 500 xx methanolu x 200 xx xxxxxx kyseliny octové xxxxxxxxxxxx xxxxx xx 2&xxxx;000 xx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx den xxxxxxx; xxx xxx připravit xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 50 % (xxx.) xxxxxxxxx x xxxxxxxxx roztoku 20&xxxx;% (xxx.) ledové xxxxxxxx xxxxxx.

4.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxx

4.11.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxx 1)

X 1&xxxx;000 xx 90&xxxx;% xxx. methanolu xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx míchačky (xxx 45 xxxxx) 3,0 x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxx X-250 (C. X. 42655) x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxx skládané xxxxxx.

4.11.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxx 2)

X&xxxx;1&xxxx;000&xxxx;xx 20 % xxx. xxxxxxxx octové xxxxxxxxx 5,0 g síranu xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx.

4.11.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx (pracovní xxxxxx)

Xxxxxxxxxxxxx před barvením xxxxxxxxx 125 ml xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.11.1 x&xxxx;4.11.2).

Xxxxxxxx: Xxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxx x den přípravy.

5.   PŘÍSTROJE X XXXXXXX

5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx (265 x 125 x 4 xx), xxxxxxx xxxxxxx (o xxxxx 15 cm), xxxxxxxxx xxxxxx.

5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxx xxxx (265 × 125 mm)

5.3.   Krycí xxxxx (280 ×&xxxx;125&xxxx;xx). Xx každý xxxxxx xxxxx xxxxxxx pruh xxxxxx pásky (280 ×&xxxx;6 ×&xxxx;0,25&xxxx;xx) (viz xxxxxxx 1).

5.4.   Elektrofokusační komora x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx (xxxx. 265 × 125 mm) a vhodný xxxxxxxx zdroj (≥ 2,5&xxxx;xX) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx zařízení

5.5.   Cirkulační xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 12 ± 0,5&xxxx;°X

5.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx nastavitelná xx 3&xxxx;000&xxxx;x

5.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxx (o xxxxx ≥ 265&xxxx;xx)

5.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx

5.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx (10 ×&xxxx;5&xxxx;xx, x&xxxx;xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx s nízkou xxxxxxxx xxxxxxxx)

5.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx misky (xxxx. misky xx xxxxxxxx 280 × 150 mm) x&xxxx;xxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxx

5.12.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx tyčový xxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx tyče 10&xxxx;xx x&xxxx;xxxxxxxxx 8&xxxx;000 až 20&xxxx;000 xx/xxx

5.13.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

5.14.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx xxxxx

5.15.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx

5.16.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx na 25 μl

5.17.   Vakuová odstředivka xxxx xxxxxxxxxxxx

5.18.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx lázeň, xxxxxxxxxxxx xx 35 x&xxxx;40 ±&xxxx;1&xxxx;°X s třepačkou

5.19.   Densitometrické zařízení xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx délce λ =&xxxx;634&xxxx;xx

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX POSTUP

6.1.   Příprava vzorku

6.1.1.   Izolace xxxxxxx

Xx odstředivkové xxxxxx xx 100&xxxx;xx navažte xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx odpovídající 5&xxxx;x&xxxx;xxxxxx, xxxxxxxx 60 ml xxxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (8&xxxx;000 xx 10&xxxx;000 xx/xxx). Xxxxxxx xX xx 4,6 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.5.1) x&xxxx;xxxxxxxxxxx (5 xxxxx, 3&xxxx;000&xxxx;x). Xxxxxxxxxx xxx x&xxxx;xxxxxxxxx a zbytek xxxxxxxxxxxxx xxx 20 000 xx/xxx xx 40 ml destilované xxxx x&xxxx;xxxxxxxx xX xxxxxxxxx xx 4,5 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.5.1). Přidejte 20&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxxx (4.5.2) a znovu xxxxxxxxxxxxx a odstřeďuje (5 xxxxx, 3&xxxx;000&xxxx;x). Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxx (xxx xxxxxxx 2), x&xxxx;xxx fáze xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx se 40 xx xxxxxxxxxxx xxxx (xxx xxxx) x 20 xx xxxxxxxxxxxxxx (4.5.2) x xxxxxxxx se. Tento xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx (dvakrát xx xxxxxxx). Bílkovinný xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x&xxxx;50&xxxx;xx xxxxxxx (4.5.3) a přefiltrujte xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx filtr. Xxxxxx xxxxxxxx dvěma xxxxxxxxxxxx 25&xxxx;xx dávkami xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx vysušit xx xxxxxxx nebo x&xxxx;xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx v třecí xxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx xxx teplotě – 20 °X.

6.1.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx β-xxxxxxx xx γ-xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxx 25 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (6.1.1) x 0,5 xx tlumivého roztoku xxxxxxxxxx amonného (4.7.1) x směs 20 xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxxx. Směs xxxxxxxx xx 40&xxxx;°X x&xxxx;xxxxxxxx 10 μx xxxxxxxx (4.7.2), xxxxxxxxxxx a inkubujte 1 xxxxxx xxx xxxxxxx 40 °C xx xxxxxxx třepání. Xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 20 μx roztoku xxxxxxxx ε-xxxxxxxxxxxxxx (4.7.3). Xxxx přidejte 200&xxxx;xx xxxxx xxxxxxxx x&xxxx;2&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx pásů se xxxxxxxxxx po xxxxxxx xxxxxxxx ε-xxxxxxxxxxxxxx&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx v 0,5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.6).

6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx polyakrylamidových xxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx

Xx xxxxxxxxx xxxxx (5.1) válečkem xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx (5.2) x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx kapek xxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxx odsajte xxxxxxxxx ubrouskem nebo xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx druhou, xxxxx fólii (5.3) x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (0,25&xxxx;xx) xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx nivelační xxxxxx.

X xxxxxxxxxxxx odplyněnému roztoku xxxx (4.1.2) xxxxxxxx 10 μx Temedu (4.1.3.1), protřepejte x&xxxx;xxxxxxxx 10 μl roztoku XXX (4.1.3.2); xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx střed xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxx (xxxxxxx s fólií xxxxxx dolů) xxxxxxxx x&xxxx;xxxxx x&xxxx;xxxxx fólií x&xxxx;xxxxxx pokládejte tak, xxx xx xxxx xxxxxxx vytvořila pravidelně xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx (xxxxxxx 3). Xxxxxx xxxxx špachtle xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxx xx xx tři xxxxx xxxxxxxx xxxxx, aby xx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (asi xx 60 xxxxxxxx) xxxxx x krycí xxxxx sejměte gel xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx gelu xxx, xx xxxxxxxx desky xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx fólie xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx zbytky xxxx x&xxxx;xxxxxxxx. „Gelový sendvič“ xxxxxxx do xxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxx xx xxxxxxxxxx (xxxxxxx na xxxx týdnů).

Poznámka: Xxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx vložkami xxx xxxxxx znovu. Xxxxxxxxxxxxxxxx xxx může xxx rozřezán xx xxxxx xxxxx; xx xx xxxxxx v případě xxxxxxxxx počtu vzorků xxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx zařízení (xxx xxxx o rozměrech 4,5 ×&xxxx;5&xxxx;xx).

6.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx fokusace

Nastavte xxxxxxxx xx 12 °X. Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx kerosinem a poté xx střed chladicího xxxxx kápněte xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (4.2). Xxxxxxx xxxxxxxx „xxxxxx xxxxxxx“ xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx bubliny. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxx xxxxx. Elektrodové xxxxxxx napusťte elektrodovými xxxxxxx (4.3, 4.4), xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxx xx xxxxx (xxxxxxxxxx elektrod 9,5&xxxx;xx).

Xxxxxxxx izoelektrické xxxxxxxx

6.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx gelu 265 ×&xxxx;125 ×&xxxx;0,25&xxxx;xx

Xxxx	Xxxx (xxx)	Xxxxxx (X)	Xxxxx (xX)	Xxxxxx (X)	Xxxxx/xxxxxx (Xx)
1. Xxxxxxxxx xxxxxxxx	30	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 15	xxxxxxxxxx 4	xxx 300
2. Fokusace vzorku (7)	60	max. 2 500	max. 15	konstantní 4	xxx 1&xxxx;000
3. Xxxxxxx xxxxxxxx	60	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 5	xxx. 20	xxx 3&xxxx;000
	40	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 6	xxx. 20	xxx 3&xxxx;000
	30	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 7	xxx. 25	xxx 3 000

Poznámka: Xxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx, hodnoty xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxxx způsobem xxxxxxxx (xxxx. xxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx-xx xx xxx x&xxxx;xxxxxxxxx 265 ×&xxxx;125 ×&xxxx;0,5&xxxx;xx).

6.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx programování xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxx elektroforetického xxxxxxxx (2 gely 5,0 ×&xxxx;4,5&xxxx;xx, elektrody xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxx.

Xxxx	Xxxxxx	Xxxxx	Xxxxxx	Xxxxxxx	Xxxxx/xxxxxx
1. Xxxxxxxxx xxxxxxxx	1&xxxx;000 X	10,0 xX	3,5 X	8 °X	85 Xx
2. Xxxxxxxx xxxxxx	250 V	5,0 mA	2,5 X	8 °X	30 Xx
3. Xxxxxxxx	1&xxxx;200 X	10,0 xX	3,5 X	8 °X	80 Vh
4. Fokusace	1 500 X	5,0 xX	7,0 W	8 °X	570 Xx

Xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxx 2 vložte xxx 0 Vh.

Aplikátor xxxxxx ve xxxx 2 odstraňte při 30 Xx.

6.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxx

6.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxx po xxxxxxx xxxxxxxx se odstraní xxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxx xx ihned xxxxx xx xxxxxxx/xxxxxxxxxxx xxxxx naplněné 200 ml xxxxxxxx (4.9). Xxx x xx xxxxxxxx 15 xxxxx xx xxxxxxx třepání.

6.4.2.   Praní x&xxxx;xxxxxxx xxxxxx xxxxx

Xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx dvakrát xxxxxxxxxx xx xxxx 30 sekund vždy xx 100 ml xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.10) Xxxxxxxxxxx roztok xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx 250 ml xxxxxxxxx xxxxxxx (4.11.3) x xxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx dobu 45 xxxxx xxxxxxxxx.

6.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx

Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx 30 sekund vždy xx 100&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.10). Poté 15 minut protřepávejte x&xxxx;200&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx; xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx, dokud xxxx xxxxxx xxxx a bezbarvé. Xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (2 × 2 xxxxxx) x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx na xxxxxxx (2 až 3 xxxxxx) xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx vlasů (10 xx 15 xxxxx).

Xxxxxxxx 1: Xxxxxx, xxxxxxxxx, barvení x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx 20&xxxx;°X. Vyšší teploty xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx 2: Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx obarvení xxxxxxxx (xxxx. Xxxxxx Xxxxxxxx Xxx, Protein, Xxxxxxxxx Biotech, xxx x. 17-1150-01), xxxx xxx xxxxxxxxx vzorky xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx 5 xx/xx.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX

Xxxxxxxxx se provádí xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx gelu. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x sýrech xxxxxxxxxx x ovčího xxxxx, xxxxxx mléka, xxxxxxxx xxxxx xxxx ze xxxxx xxxxxx, kozího x buvolího mléka xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx γ3- x γ2-kaseinů, xxxxxxx izoelektrické xxxx xx nacházejí x xxxxxxx xxxx xX 6,5 x xX 7,5 (obrázky 4a, x, obrázek 5). Xxxxxxxx mez xx xxxxx xxx 0,5 %.

7.1.   Vizuální xxxxxxxxx

Xxx xxxxxxxx hodnocení xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx upravit xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx standardů x xxxxx dosáhnout x xxxxxxxx, xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx γ2- a γ3-xxxxxxx (viz „γ2 X,X,X“ x „γ3 X,X,X“ na xxxxxxxxx 4x, b x xxxxxxx 5) stejné xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxx přímo posoudit xxxxxxxx kravského xxxxx (xxxxx nebo xxxxx xxx 1 % xxxx xx výši 1&xxxx;%) x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx γ3- x&xxxx;γ2-xxxxxxx (xxx „γ3 X“ a „γ2 C“ xx xxxxxxxxx 4 a, x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxx 5) s intenzitami xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 0&xxxx;% x&xxxx;1&xxxx;% (xxxxxx, kozích), nebo xxxxxxxxxxxx laboratorních standardech (xxxxxxxx).

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx hodnocení

Pokud xx xx xxxxx, použijte xxx xxxxxxxxx poměru xxxx xxxxxxxx píků xxxxxxxx γ2- a γ3-kaseinů x&xxxx;xxxxxxxx xxxx ovčích, xxxxxx x/xxxx buvolích γ2- x&xxxx;γ3-xxxxxxx (xxx xxxxxxx 5) xxxxxxxxxxxxx (5.19). Tuto hodnotu xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx píků γ2- x γ3-xxxxxxx x 1&xxxx;% xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxx, kozím) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxx) analyzovaných x xxxxx xxxx.

Xxxxxxxx: Tato xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx existuje xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx obou xxxxxxxx γ2- a γ3-xxxxxxx x 1&xxxx;% xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x 0&xxxx;% xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X&xxxx;xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx optimalizovat xxx xxxxxxx xxxxxxxx pokynů xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxx metodě.

Vzorek xx xxxxxxxxx za xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx γ2- x γ3-xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx poměrů ploch xxxx jsou xxxxxx xxxx větší xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 1&xxxx;% xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxx X., Xxxx X., Xxxxxxxx X., Xxxxxx X., Xxxxxxx X., Berner X, Xxxxxx X., Xx Luccia A., Xxxxx A.: Xxx xx xxxxxxx xx&xxxx;xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx of xxxxxx milk in xxxxx xxx/xx xxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx γ2-xxxxxxx.&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxx 45, 708–711 (1990).

Xxxxx X., Xxxxxxx M.A., Xxxxxxxx X., Moio X., Spagna Xxxxx X., Xxxxx X., Xxx Xxxxxxx X.: X xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxx&xxxx;xx xxx xxx xxxxx buffalo cheese xxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxxx 50, 83–85 (1995).

Krause X., Xxxxxx X, Xxxxxxxxxxxx H.: Sensitive xxxxxxxxx xx xxx xxxx&xxxx;xx xxx and xxxx milk and xxxxxx xx xxxxxxx ampholyte — xxx xxxxxxx xxxxxxxxx/xxxxxxxxxxx xX xxxxxxxx — xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx γ-xxxxxxx using xxxxxxx xx signal xxxxxxxxx. xx: Electrophoresis-Forum 89 (X. J. Xxxxxx, xx.) xx 389-393, Xxxx-Xxxxxx, Xüxxxxx (1989).

Xxxxxx Ι., Xxxxxx X.-X., Xxxxxx X.-X.: Xxxxxxxx xxx Xxxxxxxx xx Xxxxx xxx Xxxxxxxxxxx xxx. -xäxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx Fokussierung xx xxxxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxxxxxx. X. Xxxxxxx. Unters. Forsch. 174, 195–199 (1982).

Xxxxxx X.X.: Xxxxxxxxx-xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx in 50-100&xxxx;μx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx.&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx 1, 43–56 (1980).

Obrázek 1

Xxxxxxxxxxx výkres krycí xxxxx

Xxxxxxx 2

Kaseinová xxxxxx xxxxxxxx mezi xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxx po xxxxxxxxxx

Xxxxxxx 3

Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx odlévání xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx gelů

a = xxxxxxxxx páska (0,25 mm); x = krycí xxxxx (5.3); c, x = skleněné xxxxx (5.1); d = xxxxxx xxxxxx (4.1.2); x = xxxxx xxxxx xxxx (5.2).

Xxxxxxx 4x

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx sýrů x&xxxx;xxxxxx x&xxxx;xxxxxx mléka, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, s různým xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

% XX = xxxxxxxx xxxxxxxxx mléka, X&xxxx;= xxxxxxx, X&xxxx;= ovčí, X&xxxx;= kozí

Na xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx IEF.

Obrázek 4x

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xx směsí xxxxxx, xxxxxx a buvolího mléka, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, s různým xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

% XX = xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx; 1 + = xxxxxx x xxxxxxx 1&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxx čistého xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx. X&xxxx;= xxxxxxx, X&xxxx;= xxxx, X&xxxx;= xxxx, X&xxxx;= xxxxxx

Xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx separační xxxxxxxxxx xxxx IEF.

Obrázek 5

Xxxxxxxxxxx denzitogramů xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (STD) x&xxxx;xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx ze xxxxx ovčího x&xxxx;xxxxxx xxxxx, xx izoelektrické xxxxxxxx

x, x = xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 0 a 1&xxxx;% xxxxxxxxx mléka; x-x = xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx 0, 1, 2, 3 x 7&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxx; X&xxxx;= kravské, X&xxxx;= xxxx, X&xxxx;= xxxx.

Xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx XXX při λ =&xxxx;634&xxxx;xx.

XXXXXXX IX

Hodnocení xxxxxx

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx provádějí xxxxxxxxxx xxxxxx v souladu x&xxxx;xxxxxxx&xxxx;12 nařízení (XX) x.&xxxx;882/2004&xxxx;(*) xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx orgány členského xxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx vzorků a námitky xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx

1.

Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx posuzovaný výrobek. Xxxxxxxxxx-xx xxxxx ustanovení xxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx v normě XXX 707„Xxxxx x xxxxxx výrobky – Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx“,

2.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx obsahují xxxxxxxxxx xxxxx, které xxxxxx xxxxxxxxx výsledků x xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx.

3.

Xxx analýzy xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorky.

4.

Pokud xxxxx xx sporu xxxxxxx xxxxxxxx, platební xxxxxxxx xxxx xxxxxx znovu xxxxxxx nezbytnou xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx hradí strana, xxxxx spor xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx k dispozici x&xxxx;xxxx xxxxx uloženy x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx analýzy xx&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxx xxx xx&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Platební agentura xxxxxxx analýzu do 21 dnů xx xxxxxxxx xxxxxxx.

5.

Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx považuje xx konečný.

6.

Jestliže xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxx po odběru xxxxxx prokáže, xx xxxxxx při xxxxxx xxxxxx nebyl xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xx x&xxxx;xxxxx xxxxxxxx zopakuje. Xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx nelze, xx xxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx

Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx stanovené xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

X xxxxxxxxx, kdy právní xxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx intervence a xxxxxxxxxx skladování xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxx xxxxxx, dodržují xx xxxx xxxxxxx. Xx všech ostatních xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx nejméně xx 3 xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx ze xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 95&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx buď xx xxx, 1) xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx na základě xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxx σx x σX, xxxx v případě xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx na xxx, 2) xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx. Tento xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx je xxxxxxxxxx xx základě xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx

X&xxxx;xxxxx xxxxxxx byla xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx σx x&xxxx;xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxxxxxxxxxxxx σR stanovena a laboratoř xxxx xxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx se aritmetický xxxxxx&xxxx; x xxxxx x xxxxxxxxxxx měření.

Vypočítá xx xxxxxxxxx nejistota (x = 2) z  xxxxx:

Xx-xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x vypočítán xx vzorce xx xxxxx x = x ₁ + x ₂, x = y ₁ – x ₂, x = x ₁ · x ₂ nebo x = y ₁/x ₂, xxxx xx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx běžných xxxxxxx xxx kombinování xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxx xx nevyhovující horní xxxxxxx stanovené xxxxx xxxxxxx XX, jestliže

jinak xx xx za xx, že xxxxxxx XX xxxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx hodnotě LL, xxxxxxxx

xxxxx xx xx xx xx, xx xxxxxxx XX xxxxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx směrodatné xxxxxxxx xxxxxxx reprodukovatelnosti

V případech, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx nejsou xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx nařízení, x&xxxx;xxx nebyla xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, je třeba xxxxxxx vnitrolaboratorní xxxxxxxx. Xxxxxxx σr x σ X xx musí xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx nejistoty X xxxxxx směrodatná xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx si X .

Xxxxxxxx, xxx xx třeba xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, jsou xxxxxxx x&xxxx;xxxx 1. Xxxxxxxx-xx xx však šarže xx nesplňující zákonem xxxxxxxxxx mezní xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx stanovené x&xxxx;xxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xx xxxxxxxxx v xxxxxxx x bodem 1.