Plné znění - 32018R0150

Dodatek X

XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXX FOSFATIDYLSERINU X&xxxx;XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXXX&xxxx;XXXXXXXXXXX XXXXX

Xxxxxx: XXXX x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX A OBLAST XXXXXXX

Xxxx xxxxxx popisuje xxxxxx kvantitativního xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (XX) x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XX) x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (XXX) x&xxxx;xx xxxxxx xxx zjišťování xxxxxx xxxxxxxx v SOM.

2.   DEFINICE

Obsah XX + XX: xxxxxxxxxx zlomek xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xx 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx mléka. Stanovení xxxxxx XX x&xxxx;XX xxxx xxxxxxxx o-ftaldialdehydu (XXX) xxxxxxx XXXX x&xxxx;xxxxxxxxxx fázemi (XX) x&xxxx;xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx XX x&xxxx;XX xx zkušebním xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx známé xxxxxxxx XXXX.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx čistoty p.a. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxx voda xxxx voda xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx: XXXX o xxxxxxx xxxxxxx 99 %

Poznámka: Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx při xxxxxxx – 18&xxxx;°X.

4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx srovnávacích x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx

4.2.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx čistoty xxx XXXX

4.2.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx čistoty xxx XXXX

4.2.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx

4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx x-xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

4.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx, 12 X xxxxx xxxxxx

4.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx boritá, 0,4 X xxxxx xxxxxx s xxxxxxxx xX upravenou xxxxxxxxxx xxxxxx (4.3.1) xx 10,0

4.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;2-xxxxxxxxxxxxxxx

4.3.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;x-xxxxxxxxxxxxx (OPA)

4.4.   Eluční xxxxxxxxxxxx xxx HPLC

4.4.1.   Eluční rozpouštědla xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx chemikálií xxxxxxx xxx XXXX.

4.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxx xxx HPLC

4.4.3.   Methanol fluorometricky xxxxxxxx xxxxxxx

4.4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx

4.4.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx dihydrogenfosforečnan

4.4.6.   Octan xxxxx

4.4.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx.

5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX A XXXXXXX

5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx s přesností xxxxxx xx 0,1&xxxx;xx x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx xx 1&xxxx;xx

5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx o objemu 25 x&xxxx;100&xxxx;xx

5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx dávkovat xx 1 xx 10&xxxx;xx

5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

5.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 0,2, 0,5 x&xxxx;5&xxxx;xx

5.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx baňky x&xxxx;xxxxxx 10, 50 x&xxxx;100&xxxx;xx

5.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxx o objemu 20 x&xxxx;100 μl

5.8.   Ultrazvuková xxxxx

5.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx 27&xxxx;000 × g

5.10.   Skleněné xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxx 5&xxxx;xx

5.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxx 25&xxxx;xx

5.12.&xxxx;&xxxx;&xxxx;xX xxxx s přesností xx 0,1 xxxxxxxx pH

5.13.   Zařízení xx XXXX

5.13.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx schopný xxxxxxxx xxx průtoku 1,0 xx/xxx při 200 xxxxxx

5.13.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx

5.13.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx 30 °C ± 1 °C

5.13.4.   Fluorescenční xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxxxx vlnové xxxxx 330&xxxx;xx x&xxxx;xxxxxx xxxxxx xxxxx 440&xxxx;xx

5.13.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx dat xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx

5.13.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx XxXxxxxxxxx® – 100&xxxx;(250 ×&xxxx;4,6&xxxx;xx) nebo rovnocenná xxxxxx xxxxxxxx oktadecylsilanem (X 18), velikost xxxxxx 5 μm

6.   ODBĚR XXXXXX

Xxxxxx se xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx XXX 707.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

7.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx roztoku xxxxxxxxx standardu

7.1.1.   Navažte 30,0 ± 0,1 mg xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (4.2.3) xx odměrné xxxxx xx 100 ml (5.6) x&xxxx;xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1).

7.1.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx (5.3) xxxxxxxx 1 ml xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx baňky na 10&xxxx;xx (5.6) x&xxxx;xxxxxxx xx značku xxxxxxxxxx (4.2.1) x&xxxx;xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx 0,15 xX.

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx roztoku zkušebního xxxxxx

7.2.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx 1,000 ± 0,001&xxxx;x&xxxx;xxxxxx XXX xx xxxxxxx xx 25&xxxx;xx (5.2). Pipetou (5.3) xxxxxxxx 10&xxxx;xx destilované xxxx o teplotě 40 °C ± 1&xxxx;°X x&xxxx;xx xxxx 30 minut xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (5.4), xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx kousky.

7.2.2.   Pipetou (5.5) xxxxxxxx 0,2&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxxxxxx mléka xx xxxxxxx xxxxx xx 10&xxxx;xx (5.6), xxxxxx xxxxxxxx stříkačky (5.7) xxxxxxxx 100 μx 0,15 xX xxxxxxx xxxxxxxxxx (7.1) a doplňte xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1). Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx na 15 xxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.8).

7.2.3.   Odstřeďujte (5.9) xxx 27&xxxx;000 ×&xxxx;x&xxxx;xx xxxx 10 xxxxx a supernatant odeberte xx xxxxxxxx xxxxxxx (5.10).

Xxxxxxxx: Xx xxxxxxxxx xxxxxxx XX xxxx xxx roztok xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxx 4 °C.

7.3.   Příprava roztoku xxxxxxxx standardu

7.3.1.   Navažte 55,4&xxxx;xx XXXX (4.1) xx xxxxxxx xxxxx na 50&xxxx;xx (5.6) x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx (5.11) přidejte xxx 25&xxxx;xx chloroformu (4.2.2). Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx na 50&xxxx;°X ± 1&xxxx;°X x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, dokud xx XXXX xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx 20&xxxx;°X, xxxxxxx po značku xxxxxxxxxx (4.2.1) x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

7.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx (5.3) xxxxxxxx 1&xxxx;xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx 100&xxxx;xx (5.6) x&xxxx;xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1). Xxxxxxx (5.3) xxxxxxxx 1&xxxx;xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx 10&xxxx;xx (5.6), xxxxxxxx 100 μx (5.7)&xxxx;0,15xX xxxxxxx tryptaminu (7.1) x&xxxx;xxxxxxx xx značku xxxxxxxxxx (4.2.1). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Do xxxxxxxxx xxxxxxx XX xxxx xxx roztok referenčního xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 4&xxxx;°X.

7.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx derivatizačního xxxxxxx

Xx odměrné xxxxx xx 10&xxxx;xx (5.6) xxxxxxx 25,0 ± 0,1&xxxx;xx XXX (4.3.4), xxxxxxxx 0,5 ml (5.5) xxxxxxxxx (4.2.1) x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx XXX xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxx roztokem xxxxxxxx borité (4.3.2) x&xxxx;xxxxxxxx stříkačkou (5.7) xxxxxxxx 20 μx 2-xxxxxxxxxxxxxxxx (4.3.3).

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx nádobě xxx xxxxxxx 4 °C; xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxx.

7.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx XXXX

7.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.4)

Xxxxxxxxxxxx X: Xxxxxx 0,3 xX xxxxxx dihydrogenfosforečnanu x&xxxx;xxxxxx 3 xX xxxxxx xxxxxxx (x hodnotou xX xxxxxxxxx xx 6,5 ± 0,1 xxxxxxxxx octovou): xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx = 558: 440:2 (xxx.).

Xxxxxxxxxxxx X: Methanol

7.5.2.   Doporučený xxxxxx xxxxxxxx:

Xxx (min)	Rozpouštědlo X (%)	Xxxxxxxxxxxx X (%)	Xxxxxx (xx/xxx)
Xxxxxxxxx	40	60	0
0,1	40	60	0,1
5,0	40	60	0,1
6,0	40	60	1,0
6,5	40	60	1,0
9,0	36	64	1,0
10,0	20	80	1,0
11,5	16	84	1,0
12,0	16	84	1,0
16,0	10	90	1,0
19,0	0	100	1,0
20,0	0	100	1,0
21,0	40	60	1,0
29,0	40	60	1,0
30,0	40	60	0

Xxxxxxxx: Xxxx xx xxxx, xx xxxxxx xxxxxxxx bude xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx, aby xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx znázorněné xx xxxxxxx 1.

Xxxxxxx xxxxxx: 30 °X.

7.5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxxxxx: 50 μl xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;50 μx roztoku xxxxxx

7.5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxx

Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx promývejte 100&xxxx;% xxxxxxxxxxxxx B po xxxx 15 minut, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx X:X =&xxxx;40:60 x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx po dobu 15 minut při xxxxxxx 1 ml/min. Xxxxxxxx xxxxx pokus xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2.1).

Poznámka: Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx dobu xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx 30 xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx x xxxxxx 80:20 (xxx.).

7.5.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx obsahu XX + XX xx xxxxxxxxx vzorku

7.5.6.   Proveďte sérii xxxxxxxxxxxxxxxxxx analýz xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, abyste xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx časy. Xxx výpočet odezvového xxxxxxx nastříkněte xxxxxx xxxxxxxx standardu (7.3) xx xxxxxxx 5–10 xxxxxxx zkušebních xxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx 20–25 xxxxxxxx vyčistit nejméně xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx 100 % xxxxxxxxxxxxx B (7.5.1).

7.6.   Integrační režim

7.6.1.   Pík XXXX

XXXX xx vymývá x&xxxx;xxxxxx jediného píku. Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx mezi xxxxx.

7.6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx xxxx (xxxxxxx 1). Plochu xxxx stanovte xxxxxxxxx xxxx sedly.

7.6.3.   Skupiny píků XX a PE

Za takto xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx 1) xx XX xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx nimiž xx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx. XX xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxx xxxxxxxx, částečně xxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxx každé skupiny xxxx xxxxxxxx nastavením xxxxxxxx xxxxx xxx, xxx xx znázorněno xx xxxxxxx 1.

8.   VÝPOČET X VYJADŘOVÁNÍ XXXXXXXX

Xxxxx XX + XX xx xxxxxxxxx vzorku xx xxxxxxx xxxxx:

X =&xxxx;55,36 × ((X₂)/(X₁)) × ((T₁)/(T₂))

kde:

C	=	obsah PS xxxx PE (x xx/100 x&xxxx;xxxxxx) xx xxxxxxxxx xxxxxx
X1	=	xxxxxx xxxx XXXX xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (7.3)
X2	=	xxxxxx xxxx XX nebo XX xxxxxxx zkušebního xxxxxx (7.2)
X1	=	xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx vzorku (7.3)
X2	=	xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.2).

9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxxxx: Xxxxxxx xxx opakovatelnost xxxx xxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxx XXX&xxxx;(*).

9.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx proměnlivost xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx výsledků, které x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx stejném přístroji x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 2&xxxx;%. Xxxxxxxx xx xx těchto xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, relativní rozdíl xxxx xxxxxx výsledky xx neměl xxx xxxxx než 6 % xxxxxxxxxxxxx průměru xxxxxxxx.

9.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxx xxx pracovníci provedou x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx mezi xxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxx xxx 11 % xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx výsledků.

10.   LITERATURA

10.1.   Resmini X., Xxxxxxxxxx L., Xxxxxxxxx X. X., Xxxxxx X., Xxxxxxxx M. „Xxxxxxxxx xx buttermilk solids xx skimmilk powder xx XXXX xxxxxxxxxxxxxx of xxxxxxxxxxxxxxxxxx.“ Xxx. Xxxx. Xxxx.-Xxx.&xxxx;39,395[1988].

Xxxxxxx 1

XXXX chromatogram XXX-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (PS) x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XX) x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx mléka. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx píky PS, XX x&xxxx;xxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx).

Xxxxxxx XX

XXXXXXXXXX SYŘIDLOVÉ XXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX URČENÉM PRO XXXXXXX XXXXXXXXXX XX XXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXX KAPALINOVOU CHROMATOGRAFIÍ (XXXX)

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX X&xxxx;XXXXXX POUŽITÍ

Tato xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx odstředěném xxxxx xxxxxxx k veřejnému xxxxxxxxxx xx základě xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX XXXXX

Xxxxxxxxxxx xxxxx XXX 707 – Xxxxx x mléčné xxxxxxx – Xxxxxxxx xxx odběr xxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX

Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx hmotnostní procento xxxxxxxxx popsaným postupem xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

—	Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx odstředěného xxxxx, xxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxx kyselinou xxxxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx odstředěním xxxx xxxxxxxx;

—	Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXX) x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX);

—	Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx se srovnávacími xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx odstředěné xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx syrovátky.

5.   CHEMIKÁLIE

Používají xx xxxxx xxxxxxxxxx čistoty x.x. Použitá voda xxxx xxx voda xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx rovnocenné čistoty.

5.1.   Roztok xxxxxxxx trichloroctové

Rozpusťte 240&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXx₃XXXX) xx xxxx a doplňte na 1&xxxx;000&xxxx;xx. Xxxxxx xx xxx být xxxx x xxxxxxxx.

5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxx, xX 6,0

Rozpusťte 1,74&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (X₂XXX₄), 12,37&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (KH₂PO₄) x&xxxx;21,41&xxxx;x&xxxx;xxxxxx xxxxxxx (Na₂SO₄) xxx x&xxxx;700&xxxx;xx xxxx. X&xxxx;xxxxxxx xxxxxxx upravte xX na 6,0 xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx draselného.

Doplňte xxxxx xx 1&xxxx;000 xx a xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxx xxxxxxx lze xxxxxxx tak, aby xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx doporučením xxxxxxx xxxxxxxx materiálů xx xxxxxx.

Xxxxxx roztok xxxx xxxxxxxx přefiltrujte xxxx xxxxxxxxxx filtr x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μm.

5.3.   Promývací xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx objem xxxxxxxxxxxx (XX₃XX) x&xxxx;xxxxxx xxxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxxx směs xxxxxxxxxxxx xxxx membránový xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx.

Xxxxxxxx: Xxx použít xxxxxxxxx xxxx promývací xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx

5.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxxx mléko xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nařízení (xx. [0]).

5.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx sušené xxxxxxxxxx mléko xxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5&xxxx;% xx. xxxxxx syřidlové xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xx. [5]).

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX X XXXXXXX

6.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx

6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx odstředivé xxxx 2&xxxx;200&xxxx;x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx zkumavkami xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxx 50&xxxx;xx

6.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

6.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

6.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx nálevky x&xxxx;xxxxxxx xxx 7 cm

6.6.   Filtrační xxxxxx xxxxxxx hustoty o průměru xxx 12,5&xxxx;xx

6.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx filtrem x&xxxx;xxxxxxxxx pórů 0,45 μx

6.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 10&xxxx;xx (XXX 648, xxxxx X, xxxx XXX/X 835) xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx dodávat 10,0&xxxx;xx xx xxx minuty

6.9.   Dávkovací xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 20,0&xxxx;xx xxxx xxx xxxxxxx xxx 50&xxxx;°X

6.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx nastavená xx 25 ± 0,5&xxxx;°X

6.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xx XXXX, xxxxx xxxxx:

6.11.1.

Xxxxxxxx

6.11.2.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx – ruční nebo xxxxxxxxxxx – o objemu 15 xx 30 μx

6.11.3.

Xxx xxxxxx TSK 2&xxxx;000-XX za xxxxx (xxxxx 30&xxxx;xx, vnitřní xxxxxx 0,75&xxxx;xx), xxxx xxxxxx s rovnocennou xxxxxxxxx (xxxx. jedna kolona XXX 2&xxxx;000-XXxx, xxxxx xxxxxx Xxxxxxx Technologies Xxxxxx XX 250) x&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxx (3 cm ×&xxxx;0,3&xxxx;xx) naplněná materiálem X&xxxx;125 xxxx jiným xxxxxxxxxx s rovnocennou účinností

6.11.4.

Termostat xxxxxx nastavený xx 35 ± 1 °C

6.11.5.

UV xxxxxxxx s proměnnou vlnovou xxxxxx umožňující měřit xxx 205 nm s citlivostí 0,008 Å.

6.11.6.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx sedly Poznámka: Xxx pracovat x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx laboratorní xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx schopnost xx x&xxxx;xxxxxx xxxxx. V tomto xxxxxxx je xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx jednoho xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx menší xxx 5 °C.

7.   ODBĚR VZORKŮ

7.1.   Vzorky xxxx xxx odebírány xxxxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxx XXX 707. Xxxxxxx státy xxxx xxxxx používat xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xx předpokladu, xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx uvedené normy.

7.2.   Vzorek xxxxxxxxx xxxxxxx způsobem, xxx xxxxxxx dojít xx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx složení.

8.   PRACOVNÍ XXXXXX

8.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxx xx opatřena xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx uzavřete. Sušené xxxxx důkladně xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx převracením xxxxxxx.

8.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx

Xx odstředivkové xxxxxxxx (6.2) xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx 50 ml xxxxxxx 2,000 ± 0,001&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx.

8.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxx

8.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xx xxxxxxxx xxxxx přidejte 20,0&xxxx;xx xxxxx (50&xxxx;°X) xxxx. Prášek xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxx minut xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (6.3). Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx (6.10), xxxxx se její xxxxxxx xxxxxxxx na 25&xxxx;°X.

8.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx dvou xxxxx xxxxxxxx xx stálého xxxxxxx magnetickou xxxxxxxxx (6.4)&xxxx;10,0&xxxx;xx xxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (5.1) x&xxxx;xxxxxxx xxx 25&xxxx;°X. Xxxxxxxx xxxxxx xx 60&xxxx;xxxxx xx xxxxx xxxxx (6.10).

8.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx (6.2) xx xxxx 10 minut xxx xxxxxxxxxx xxxx 2&xxxx;200&xxxx;x, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx (6.6) x&xxxx;xxxxxxx 5&xxxx;xx xxxxxxxx xxxxxxx.

8.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

8.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx 15 xx 30 μx xxxxxx odměřeného supernatantu xxxx xxxxxxxx (8.3.3) xx zařízení xx XXXX (6.11) s průtokem 1,0&xxxx;xx xxxxxxxx xxxxxxx (5.2) za xxxxxx.

Xxxxxxxx 1. X&xxxx;xxxxxxxxxx na xxxxxxxx průměru xxxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx použít i jiný xxxxxx.

Xxxxxxxx 2. Xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Nikdy x&xxxx;xxxx xxxxxxxxxxxx eluční xxxxxx (5.2).

Xxxx každým xxxxxxxxxx na xxxx xxx 24 xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx&xxxx;(5.3) xxxxxxx xx xxxx xxx hodin při xxxxxxx 0,2&xxxx;xx xx xxxxxx.

8.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx [X] xx xxxxxxx ve xxxxx chromatogramu, x&xxxx;xxxx xx xxxxx xxx xxxxx xxxx retenčním xxxxx XX xxxxx:

Xxx XX:	Xxxxx pík chromatogramu x XX xxx 12,5 xxxxxx
Xxx III:	Třetí xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx XXX x RT 15,5 xxxxxx

Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx píků mohou xxx značně xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (xxxxx).

Xxxxxxxxxx (6.11.6) xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx A každého xxxx:

XXX:	xxxxxx xxxx XX
XXXX:	xxxxxx píku XXX

Xxxx kvantitativní interpretací xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx chromatogramu xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx anomálií způsobených xxx xxxxxxxxxx funkcí xxxxxxxx, nebo xxxxx, xxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

X&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

8.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx

8.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;X xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.4) xx xxxxxx xxxxxxx postup xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx&xxxx;8.2 až 8.4.2.

Xxxxxxxx xxxxxxx připravené xxxxxxx, xxxxxxx CMP xx x&xxxx;xxxxxxxxx 8&xxxx;% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx odbourávají. Xxxxxx obsah xx xxx xxxxxxx 30&xxxx;°X xxxxxxx odhadem o 0,2 % xx hodinu.

8.5.2.   Před xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx opakovanými xxxxxxxx xxxxxxx (8.5.1) srovnávacího xxxxxx (5.4.2), xxxxx xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxx píku xxxxxxxxxxxxxx XXX xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx hodnotách.

8.5.3.   Stanovte xxxxxxxx xxxxxxx R nastříknutím xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (8.5.1), xxxxxx jste xxxxxxx xxx xxxxxx.

9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX XXXXXXXX

9.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx

9.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx R:

Pík XX:

XXX = 100/(XXX[0])

xxx:

XXX	=	xxxxxxxx xxxxxxx xxxx XX
XXX [0]	=	xxxxxx xxxx II xxxxxxxxxxxx xxxxxx [0] xxxxxxx x&xxxx;8.5.3

Xxx XXX:

XXXX = X/(XXXX[5] – AIII[0])

kde:

RIII	=	odezvový xxxxxx xxxx XXX
XXXX [0] xxx XXXX [5]	=	xxxxxx xxxx XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxx [0] x&xxxx;[5] xxxxxxx x&xxxx;8.5.3
X	=	xxxxxxxx xxxxxxxxx xx srovnávacím xxxxxx [5], xx. 5

9.1.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx ve vzorku [X]

XXX[X] = XXX × XXX[X]

XXXX[X] = XXXX × XXXX[X]

XXX[X] = XXX × XXX[X]

xxx:

XXX [E], XXXX [X], SIV [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxx píků XX, XXX a IV xx xxxxxx [X]
XXX [E], XXXX [X]	=	xxxxxx xxxx XX x&xxxx;XXX xx xxxxxx [X] získané x&xxxx;8.4.2
XXX, XXXX	=	xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx v 9.1.1

9.1.3.   Výpočet xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx času xxxx XXX xx xxxxxx [X]:

XXXXXX[X] = (RTIII[E])/(RTIII[5])

kde:

RRTIII [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxxxx čas xxxx III ve xxxxxx [X]
XXXXX [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx píku XXX xx xxxxxx [X] xxxxxxx x&xxxx;8.4.2
XXXXX [5]	=	xxxxxxxxx retenční xxx xxxx XXX x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx [5] xxxxxxx x&xxxx;8.5.3

9.1.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx, xx xxxx relativním xxxxxxxxx xxxxx xxxx XXX, xx. XXXXXX [E] x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx až xx xxxxxxxx 10&xxxx;% xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx

—	xxx obsahu xxxxxxxxx &xx; 5&xxxx;% xx XXXXXX [X] &xx;&xxxx;1,000;

—	xxx xxxxxx syrovátky ≤&xxxx;5&xxxx;% xx XXXXXX [X] ≥&xxxx;1,000.

Xxxxxxxxx neurčitost xxx xxxxxxx XXXXXX xx ± 0,002.

Za xxxxxxxxxx okolností se xxxxxxx XXXXXX [0] xxx málo xxxx xx 1,034. Xxxxx xxxxx kolon xx xxxx xxxxxxx xxxxxx 1,000, xxxxx vždy xxxx xxx xxxxx xxx 1,000.

9.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx ve vzorku:

W = XXXX[X] – [1, 3 + (XXXX[0] – 0, 9)]

xxx:

X	=	xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx [X];
XXXX [X]	=	xxxxxxxxx plocha xxxx XXX zkušebního xxxxxx [E] xxxxxxx xxxxx 9.1.2;
1,3	=	xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx plochu xxxx XXX vyjádřenou x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxx syrovátky xx 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx v nezfalšovaném xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx. Toto číslo xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
XXXX [0]	=	xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX, xxxxx xx rovna RIII × AIII[0]. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x&xxxx;9.1.1 x&xxxx;8.5.3;
(XXXX [0]&xxxx;–&xxxx;0,9)	=	xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx nutno provést xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx 1,3, xxxxxxxx XXXX [0] xxxx xxxxx 0,9. Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx píku XXX xxxxxxxxxxx xxxxxx&xxxx;[0] xxxxx 0,9.

9.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

9.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx stanovení, xxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx v těsném sledu xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, by xxxxx xxxxxxxxx 0,2&xxxx;% xx.

9.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx mezi dvěma xxxxxxxxxxxx a nezávislými xxxxxxxx xxxxxxxxx xx dvou xxxxxxx laboratořích x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku xx xxxxx xxxxxxxxx 0,4 % xx.

9.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx

9.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxx předpokládat, že xxxxxxxxx xxxx přítomna, xx-xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX XXXX [X] xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxx syrovátky xx 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx, ≤ 2,0 + (XXXX[0] – 0,9)

xxx

2,0	xx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx ploše xxxx XXX, tj. 1,3, x nejistotě x xxxxxx kolísání xx složení xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx mléka x x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (9.3.2);
(XXXX [0] – 0,9)	xx xxxxxx, xxxxx xxxx xxx provedena, xxxxxxxx xx xxxxxx XXXX [0] jiná xxx 0,9 (xxx xxx 9.2).

9.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xx-xx relativní xxxxxx xxxx XXX XXXX [E] &xx; 2,0 + (XXXX[0] – 0,9) x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxx xxxx II XXX [X]&xxxx;≤&xxxx;160, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 9.2.

9.4.3.   Je-li xxxxxxxxx plocha píku XXX XXXX [X] &xx; 2,0 + (XXXX[0] – 0,9) x relativní plocha xxxx XX XXX [X]&xxxx;≤&xxxx;160, xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (P %). Xxxxx prostudujte xxxxx 1 x 2.

9.4.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxx po xxxxxxx vzorků xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx odstředěného mléka x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx jsou xxxxxxxx xx xxxxx 1 x&xxxx;2.

Xxxx přímka xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx horní xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx III, x&xxxx;xx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxx v 90 % xxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx 1 x 2 jsou:

SIII = 0,376 X % – 10,7	(xxxx 1)
SIII = 0,0123 XXX [X] + 0,93	(xxxx 2)

xxx:

XXXX	xx xxxxxxxxx plocha xxxx III xxxxxxxxx xxx podle celkového xxxxxx bílkovin, xxxx xxxxx xxxxxxxxx plochy xxxx XXX [E],
P %	je xxxxxxx xxxxx bílkovin xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx,
XXX [X]	xx xxxxxxxxx xxxxxx vzorku xxxxxxxxx x&xxxx;xxxx 9.1.2.

Xxxx rovnice xxxx rovnocenné xxxxx 1,3 xxxxxxxxx x xxxx 9.2.

Xxxxxx (T1 x T2) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XXXX [X] a xxxxxxxxx xxxxxxx SIII xx xxx xxxxxx xxxxxx: T1 =&xxxx;XXXX[X]&xxxx;– [(0,376 P% – 10,7) + (XXXX[0] – 0,9)]T2 = XXXX[X] – [(0,0123 XXX[X] + 0,93) + (XXXX[0] – 0,9)].

Xxxx-xx X1 x/xxxx X2	xxxxx xxxx xxxx xxxxx xxx xxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx-xx X1 x X2	xxxxx xxx xxxx, je syřidlová xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxx xxxxxx: W = X2 + 0,91

xxx:

0,91 xx xxxxxxxxxx xx svislé ose xxxx plnou a přerušovanou xxxxxxx.

Xxxxxxx XXX

XXXXXXXXX XXXXXX XX XXXXXXXXX XXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX: XXXXXXXXX XXXXXXXX SUŠINY XX XXXXXXXXX XXXXXXXXX XX&xxxx;XXXXXXXX ODSTŘEDĚNÉHO MLÉKA

2.   NORMATIVNÍ XXXXX: MEZINÁRODNÍ XXXXX XXX 707

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX

Xxxxx xxxxxx xx syřidlové syrovátky xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx procento stanovené xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx A vysokoúčinnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx fázemi (xxxxxxx HPLC). Vyhodnocení xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx tvoří xxxxxx xxxxxxxxxx mléko xxx xxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx procenta xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxx 1 % xx., xx xxxxxxxxxx xxxxxx xx syřidlové xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx čistoty p.a. Xxxxxxx voda xxxx xxx voda xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx čistoty. Acetonitril xxxx mít xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxx XXXX.

5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx 240&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXx₃XXXX) ve xxxx x&xxxx;xxxxxxx xx 1&xxxx;000&xxxx;xx. Roztok xx xxx xxx xxxx x bezbarvý.

5.2.   Eluenty A a B

Eluent X: Xxxxxx 150 xx xxxxxxxxxxxx (XX₃XX), 20 xx isopropanolu (XX₃XXXXXX₃) x 1,00 xx xxxxxxxx trifluoroctové (XXX, XX₃XXXX) xx xxxxxxx baňky x xxxxxxx xx 1&xxxx;000 xx xxxxx.

Xxxxxx X: Xxxxxx 550 xx xxxxxxxxxxxx, 20 xx xxxxxxxxxxxx a 1,00 xx XXX xx xxxxxxx xxxxx xx 1&xxxx;000 xx x xxxxxxx na 1 000 xx vodou. Eluční xxxxxx xxxx použitím xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx.

5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx kolony

Po xxxxxxxxx se kolona xxxxxxx eluentem X (xxxxxx) a potom xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxx xx xxxx 30 xxxxx). Kolona xx uchovává x&xxxx;xxxxxxxxxxxx.

5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx

5.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx odstředěné xxxxx xxxxxxxxx požadavky xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (xx. [0]).

5.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5 % xx. xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xx. [5]).

5.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx 50&xxxx;% hm. sušené xxxxxxxxx syrovátky standardního xxxxxxx (xx. [50]).

6.   PŘÍSTROJE X XXXXXXX

6.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx

6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx 2 200 g a vybavená xxxxxxxxxxxxxxx zkumavkami xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx asi 50&xxxx;xx

6.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

6.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

6.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxx 7&xxxx;xx

6.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx papíry střední xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx asi 12,5&xxxx;xx

6.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx

6.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 10&xxxx;xx (XXX 648, xxxxx X, xxxx XXX/X 835), nebo xxxxxxxxx systém xxxxxxx xxxxxxx 10,0&xxxx;xx xx xxx xxxxxx

6.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx systém xxxxxxx dodávat 20,0 ml xxxx xxx xxxxxxx xxx 50 °C

6.10.   Termostatická xxxxx xxxxx xxxxxxxxx na 25 ± 0,5&xxxx;°X

6.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xx XXXX, xxxxx xxxxx:

6.11.1.

Xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx

6.11.2.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx – xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, x&xxxx;xxxxxx 100 μl

6.11.3.

Kolona Xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx Xxxxxx 300 XX-X3 (délka 25 cm, xxxxxxx xxxxxx 0,46&xxxx;xx), xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxx xx bázi xxxxxxx

6.11.4.

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx 35 ± 1 °C

6.11.5.

UV xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx umožňuje xxxxxxxx měření při 210&xxxx;xx (x xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx větší xxxxxx xxxxx xx do 220&xxxx;xx) x&xxxx;xxxxxxxxxx 0,02 Å.

6.11.6.

Xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx nastavení xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxx linii nebo xxxx xxxxx Xxxxxxxx: Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx teplotě xxxxxxxxx xx možná xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxx více než x 1&xxxx;°X, xxxxx xxxxxxx k xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx CMPA.

7.   ODBĚR XXXXXX

7.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxx stanoveným v mezinárodní xxxxx XXX 707. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx, že xxxx metoda xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxx takovým xxxxxxxx, xxx xxxxxxx dojít xx znehodnocení xxxx xxxxx složení.

8.   PRACOVNÍ POSTUP

8.1.   Příprava xxxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxx prášku x&xxxx;xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx víčkem. Xxxxxxx xxxxx uzavřete. Xxxxxx xxxxx důkladně xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx převracením xxxxxxx.

8.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx

Xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (6.2) xxxx xxxxxx xxxxx xx zátkou xx 50&xxxx;xx xxxxxxx 2,00 ± 0,001&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx: X&xxxx;xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 2,00&xxxx;x.

8.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxx

8.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 20,0&xxxx;xx xxxxx (50&xxxx;°X) xxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (6.3) xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx do xxxxx xxxxx (6.10), xxxxx se xxxx xxxxxxx xxxxxxxx na 25&xxxx;°X.

8.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx dvou xxxxx xx xxxxxxx míchání xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (6.4) xxxxxxxx 10,0&xxxx;xx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxx 25&xxxx;°X (5.1). Xxxxxxxx xxxxxx na 60&xxxx;xxxxx xx xxxxx xxxxx (6.10).

8.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx (6.2) xx xxxx 10 xxxxx při odstředivé xxxx 2 200 g, xxxx xxxxxxxxxxxx přes xxxxx (6.6) x&xxxx;xxxxxxx 5 ml xxxxxxxx xxxxxxx.

8.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

8.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx XXXX x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx falešně xxxxxxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

8.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx XXXX x&xxxx;xxxxxxxxxx fázemi xx xxxxx optimalizovat xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx s mrtvým xxxxxxx asi 6&xxxx;xx (xxxxx xx xxxx, xxx xx stékají xxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx) je xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx x&xxxx;xxxxx 26 xxxxx ± 2 minuty xxx CMPΑ. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxx objemem (např. 2&xxxx;xx) je xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx 22 xxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.4) x&xxxx;xxxxxxx 50&xxxx;% xxxxxxxxx syrovátky x&xxxx;xxx xxxxxx této xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx 100 μl xxxxxxxxxxxx xxxx filtrátu (8.3.3) xx xxxxxxxx xx XXXX, xxxxx xxxx xxxxxxxx za xxxxxxxx referenčního gradientu xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx 1.

Xxxxxxx 1

Xxxxxxxx referenčního xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx

Xxx (xxx)	Xxxxxx (xx/xxx)	% X	% B	Křivka
Počátek	1,0	90	10	*
27	1,0	60	40	přímka
32	1,0	10	90	přímka
37	1,0	10	90	přímka
42	1,0	90	10	přímka

Porovnání xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx píku XXXΑ.

Xxxxxxxxx složení xxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxx xxx normální xxxxxxxx (viz 8.4.3), xxx vypočítat podle xxxxxx xxxxxx: % X =&xxxx;10 – 2,5 + (13,5 + (XXxxxX – 26) / 6) * 30 / 27&xxxx;% X = 7,5 + (13,5 + (XXxxxX – 26) / 6) * 1,11

xxx

XXxxxX	:	xxxxxxxx xxx XXXΑ x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
10	:	xxxxxxxxx % X x referenčním xxxxxxxxx
2,5	:	% X xx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx % X x normálním gradientu
13,5	:	čas xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx bodu xxxxxxxxxxxx gradientu
26	:	požadovaný xxxxxxxx xxx CMPΑ
6	:	poměr směrnic xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
30	:	% X x xxxxxxxxxx xxxx xxxxx % X xx 27 xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
27	:	xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx gradientu

8.4.3.   Nástřik xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxxxx 100 μx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (8.3.3) xx xxxxxxxx xx XXXX x&xxxx;xxxxxxxx 1,0&xxxx;xx elučního xxxxxxx (5.2) xx minutu.

Složení xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx x&xxxx;8.4.2. Za xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx X:X = 76:24 (5.2). Okamžitě po xxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxx gradient, což xxxxxxx, xx procento X xx xx 27 minut xxxxxx x 5 %. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx minutách 90&xxxx;% X. Xxxx xxxxxxx xx udržuje xx xxxx xxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxxxx xx pomocí xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx změní xxxxx xxxx xxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxx xx vnitřním xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxx xxxxxxx proveden 15 xxxxx po dosažení xxxxxxxxx podmínek.

Poznámka 1. Xxxxxxxx čas XXXX xx xxx xxx 26 ± 2 xxxxxx. Toho xxx xxxxxxxxx xxxxxx počátečních x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx v % X xxxx xxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx prvního xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx ve xxxx 5&xxxx;% X.

Xxxxxxxx 2. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. Xx xx nezbytně xxxxx xxx xx, xxx gradientový čerpací xxxxxx xxxxxxx fungoval. Xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxxx xxxx xxxx CMPA xxxx xxx menší xxx 0,1 xxxxxx (x =&xxxx;10).

Xxxxxxxx 3. Xx xxxxxxx xxx xxxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx referenční xxxxxx [5] x xxxxxx xxx pro xxxxxxx xxxxxx odezvového faktoru X (9.1.1).

8.4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx zkušebního xxxxxx (X) se získávají xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxx je xxx XXXX určen xxxx xxxxxxxxx časem xxxxxxxxx v délce 26 xxxxx.

Xxxxx H píku XXXX xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (6.11.6). Polohu xxxxxxxx xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Je-li pík XXXX dostatečně xxxxxxx xx ostatních xxxx, xxxx xx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx mezi sedly. X xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx kolmice xx společné xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xx měl xxx x xxxxxxxxx xxxx XXXX (xxxx xx x čase x =&xxxx;0 xxx!). Xxx xxxxxxxxxx standard x xxxxxx použijte xxxxxx xxx integrace x u xxxxxxxx xxxxxxxx linie xxxxxxxxxxxx, xxx je xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx každého xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx případných xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxx, xxxx původem x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. X&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýzu xxxxxxxxx.

8.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx

8.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;X srovnávacích xxxxxx (5.4.1 až 5.4.2) xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx 8.2 až 8.4.4. Použijte xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx XXX xx v prostředí 8&xxxx;% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx 4&xxxx;°X xxxxxxx xxxxxx xxxxx po xxxx 24 xxxxx. X&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxx 8.4.2 xxxx být vynechána, xxxxxxxx je % X x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx známo z xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5) xx xxx xxx obdobný xxxxxxxxxxxxx znázorněnému na xxxxxxx 1. Xx xxxxx obrázku jsou xxxx xxxxx XXXX xxx xxxx xxxx. Xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx podobné separace.

8.5.2.   Před xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μl xxxxxxxxxxxx xxxxxx bez xxxxxxxxx xxxxxxxxx [0] (5.4.1).

Xxxxxxxxxxxx xxxxx vykazovat xxx x&xxxx;xxxxxxxxx čase XXXX xxxx.

8.5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (8.5.1), jakého xxxx xxxxxxx xxx xxxxxx.

9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX XXXXXXXX

9.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx a vzorce

9.1.1.   Výpočet xxxxxxxxxx faktoru X:

Xxx XXXX: X = X/X

xxx

X	=	xxxxxxxx xxxxxx xxxx XXXX
X	=	xxxxx píku XXXX
X	=	xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx [5]

9.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx procenta xxxxxx xxxxxxxxx syrovátky xxxxxxxx ve vzorku

W(E) = X&xxxx;×&xxxx;X(X)

xxx

X(X)	=	xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx [X]
X	=	xxxxxxxx xxxxxx xxxx XXXX (9.1.1)
X(X)	=	xxxxx xxxx XXXX vzorku (E)

Pokud xx X(X) xxxxx xxx 1&xxxx;% x&xxxx;xxxxxx xxxx retenčním časem x&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxxxx vzorku [5] xxxxx než 0,2&xxxx;xxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx sušiny ze xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

9.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

9.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xxxx výsledky xxxx xxxxxxxxx, xxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx současně xxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx stejném xxxxxxxxx, by xxxxx xxxxxxxxx 0,2&xxxx;% xx.

9.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxx.

9.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx

Xxx xxxxxxx xx 0 % xx 16&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx lineární xxxxx x korelačním xxxxxxxxxxxx&xxxx;&xx;&xxxx;0,99.

9.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx

Xxxxx xxxxxxx 1 % xxxxxxxx xxxxxxxxx z důvodu xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx 1

Xx—4.6 xxxxxxxx

XXXXXXX XX

Xxxxxx analýzy másla x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxxx	Xxxxxx
Xxx&xxxx;(6)	XXX 17189 xxxx XXX 3727 část 3
Voda	ISO 3727 xxxx 1
Xxxxxxxxxx sušina (x xxxxxxxx xxxx)	XXX 3727 xxxx 2
Xxx	XXX 15648

XXXXXXX XXX

Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx odstředěného xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxxx	Xxxxxx
Xxx	XXX 1736
Xxxxxxxxx	XXX 8968 xxxx 1
Xxxx	XXX 5537

XXXXXXX VIII

Metody xxxxxxx xxxx v xxxxxxxxx skladování

1.

Je nutné xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx, xxxxxx mléka xx buvolího xxxxx, xxxx ze xxxxx xxxxxx, xxxxxx a buvolího xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx mléka, x&xxxx;xx xxxxx účelem se xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx. Xxxxxxxxxx kaseinu x&xxxx;xxxxxxxxx mléka se xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxx obsah kaseinu x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx v analyzovaném xxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx v referenčním vzorku xxxxxxxxxxx 1&xxxx;% kravského xxxxx, xxxxx xx xxxxxx v dodatku.

2.

Metody ke xxxxxxxxxx kaseinu x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxx uvedených x&xxxx;xxxxxxxx&xxxx;1 xxxxx být xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx: x) xxxxxx detekční xxxxx xxxx být xxxxxxx 0,5&xxxx;%; x) xxxxxx výsledky nesmí xxx xxxxxxx xxxxxxxxx; x) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx kaseinu x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xx xxxxxx xxxx xxxxx, x&xxxx;xxxxx xxxx xx běžných xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx-xx xxxxx x&xxxx;xxxx uvedených xxxxxxxxx splněn, použijí xx xxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx.

Xxxxxxx

XXXXXX PRO ZJIŠŤOVÁNÍ XXXXXXXXX XXXXX X&xxxx;XXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXX X&xxxx;XXXXXX MLÉKA, XXXXXX MLÉKA NEBO XXXXXXXX XXXXX, XXXX XXXXX XXXXXX, KOZÍHO X&xxxx;XXXXXXXX MLÉKA

1.   PŘEDMĚT

Zjišťování xxxxxxxxx xxxxx a kaseinátů v sýrech xxxxxxxxxx z ovčího mléka, xxxxxx mléka, buvolího xxxxx xxxxx ze xxxxx xxxxxx, kozího x&xxxx;xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx γ-xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXX XXXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxx pro citlivé x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx mléka x&xxxx;xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxx mléka x&xxxx;xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx syrovátky.

3.   PODSTATA XXXXXX

3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (XX.3.4.21.7)

3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx kaseinů xx xxxxxxxxxxx močoviny x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxxx

3.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx γ3 x γ2 (důkaz xxxxxxxxxxx kravského xxxxx) xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx ze xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxx z referenčních xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0&xxxx;% x 1 % xxxxxxxxx xxxxx.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxx-xx stanoveno jinak, xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x. Xxxx xxxx být xxxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxxxx údaje xx xxxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx polyakrylamidové xxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx 265 ×&xxxx;125 ×&xxxx;0,25&xxxx;xx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxx, xxxx být xxxxx xxxxxxx podmínky xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

4.1.   Chemikálie pro xxxxxxxx polyakrylamidových xxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx

4.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx xxxx

Xx xxxx xxxxxxxxx:

4,85&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxx

0,15 x X, X′-xxxxxxxx-xxx-xxxxxxxxxx (XXX)

48,05&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx

15,00&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx (87 % xx.),

xxxxxxx xx 100 xx x xxxxxx do xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx lze xxxxxx xxxxxxxx dostupný, xxxxxx xxxxxxxxx roztok xxxxxxxxxx x&xxxx;XXX.&xxxx;X&xxxx;xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoku xx 30&xxxx;% xx./xxx. xxxxxxxxxx x&xxxx;0,8&xxxx;% xx./xxx. XXX, xxx uvedená xxxxxxxx (4,85 g akrylamidu x&xxxx;0,15 x&xxxx;XXX) xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx roztokem x&xxxx;xxxxxx 16,2&xxxx;xx. Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxx než 5 μX, je xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx promícháváním x 2 g Xxxxxxxxx XX-3 xx dobu 30 xxxxx a xxxx jej xxxxxxxxxxxx xxxx 0,45μx xxxxxxxx.

4.1.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxx

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx a amfolytů (*) xx zásobním xxxxxxxx xxxx (viz 4.1.1).

9,0 ml xxxxxxxxx xxxxxxx

24&xxxx;xx β-alaninu

500 μx amfolytu xX 3,5–9,5

250 μl amfolytu xX 5–7

250 μx xxxxxxxx xX 6–8

Gelový xxxxxx promíchejte x&xxxx;xxxxxxxxxx xx xxxx xxxx xx xxx minut x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxx.

Xxxxxxxx: Gelový xxxxxx xx musí xxxxxxxxx bezprostředně xxxx xxxxxxxxx (viz 6.2).

4.1.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx

4.1.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;X, X, N′, X′-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (Xxxxx)

4.1.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;40&xxxx;% xx./xxx. xxxxxxx persíranu amonného (XXX)

800 xx XXX xx xxxxxxxx xx xxxx a doplní xx xx 2 xx.

Xxxxxxxx: Vždy xxxxxxxxxx xxxxxxx připravený xxxxxx XXX.

4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxx nebo xxxxxxx xxxxxxx

4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx 5,77 x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (85 % xx.) xx xxxx x xxxxxx xx 100 xx.

4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx 2,00 x xxxxxxxxx sodného xx vodě a xxxxxx xxxxx na 100 ml.

Příprava xxxxxx

4.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx

4.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxx octová (25,0 ml xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx do 100 xx).

4.5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx

4.5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx

4.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx bílkovin

Ve xxxx xxxxxxxxx:

5,75&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx (87&xxxx;% hm.)

24,03 g močoviny

250 mg xxxxxxxxxxxxxxx

x xxxxxxx xx 50 ml xxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx v chladničce; xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx je xxxxx týden.

4.7.   Chemikálie xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx štěpení kaseinů

4.7.1.   Tlumivý xxxxxx xxxxxxxxxx amonného

Titrujte xxxxxxx xxxxxx hydrogenuhličitanu xxxxxxxx 0,2 xxx/x (1,58 g/100 ml xxxx) xxxxxxxxxx 0,05 xxx/x xxxxxxxx ethylendiamintetraoctové (XXXX, 1,46 g/100 xx) roztokem xxxxxxxxxx xxxxxxxx 0,2 xxx/x (1,92 x/100 xx xxxx) xxxxxxxxxxxx 0,05 xxx/x XXXX xx xX 8.

4.7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx plasmin (XX. 3.4.21.7), x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx 5 U/ml.

4.7.3.   Roztok xxxxxxxx ε-xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx 2,&xxxx;624&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx ε-xxxxxxxxxxxxxx (6-amino-n-hexankyseliny) ve 100 ml 40&xxxx;% xxx. xxxxxxxx.

4.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx standardy

4.8.1.   Certifikované xxxxxxxxxx standardy xxxxx xxxxxx a kozího xxxxxxxxxxxx xxxxx vysráženého xxxxxx xxxxxxx x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxx 0 % x&xxxx;1&xxxx;% xxxxxxxxx mléka xxx xxxxxx xx Xxxxxx pro referenční xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx působícího xxx Komisi, X-2440, Xxxx, Belgie.

4.8.2.   Příprava xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx standardů xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x s xxxxxxx 0&xxxx;% a 1&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxxx xxxxx xx připraví xxxxxxxxxxx xxxxxxxx buvolího xxxx kravského mléka xxx xxxxxxx 37 °C (2&xxxx;500&xxxx;x, 20 xxxxx). Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx na 6 xx 8 °X xx úplně odstraní xxxxx tuková xxxxxx. Xxx xxxxxxxx 1&xxxx;% xxxxxxxxx přidejte 5,00&xxxx;xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx 495 ml odstředěného xxxxxxxx mléka x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 1&xxxx;x. Xxxxxxx xX xxxxxxx xx 6,4 přídavkem zředěné xxxxxxxx xxxxxx (10&xxxx;%, xx./xxx.). Xxxxxxx xxxxxxx xx 35 °C, xxxxxxxx 100 μl xxxxxxxx syřidla (aktivita xxxxxxx 1: 10 000, xxx 3 000 U/ml) x&xxxx;xxxxxxxx po dobu 1 xxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a nechte xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx 35&xxxx;°X k utvoření xxxxxxxx. Xx utvoření sýřeniny xx xxxxxxx mléko xxxxxxxxx pomocí xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx xx xxxxxxx byla xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx. X&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 0&xxxx;% použijte xxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx mléka. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx – 20&xxxx;°X.

Xxxxxxxx: Xxxx xxxxxxxxx referenčních xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx zkontrolovat xxxxxxx buvolího xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx

4.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx

Xxxxxxxxx 150&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx x&xxxx;xxxxxxx xx 1&xxxx;000&xxxx;xx.

4.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx 500 xx methanolu x 200 ml xxxxxx kyseliny octové xxxxxxxxxxxx xxxxx na 2&xxxx;000 xx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx připravuje xxxxx xxx xxxxxxx; xxx xxx připravit xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 50&xxxx;% (xxx.) methanolu x xxxxxxxxx xxxxxxx 20&xxxx;% (xxx.) xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

4.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxx

4.11.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx roztok 1)

X 1&xxxx;000 xx 90&xxxx;% xxx. methanolu xxxxxxxxx xxxxxx magnetické míchačky (xxx 45 xxxxx) 3,0 x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxx X-250 (X. X. 42655) x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx husté skládané xxxxxx.

4.11.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx roztok (zásobní xxxxxx 2)

X&xxxx;1&xxxx;000&xxxx;xx 20 % xxx. xxxxxxxx octové xxxxxxxxx 5,0&xxxx;x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx.

4.11.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx (pracovní xxxxxx)

Xxxxxxxxxxxxx xxxx barvením xxxxxxxxx 125&xxxx;xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.11.1 x&xxxx;4.11.2).

Xxxxxxxx: Barvicí xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxx xxxxxxxx.

5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX X POMŮCKY

5.1.   Skleněné xxxxx (265 x 125 x 4 mm), xxxxxxx xxxxxxx (o xxxxx 15 xx), xxxxxxxxx xxxxxx.

5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx fólie xxxx (265 ×&xxxx;125&xxxx;xx)

5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxx (280 × 125 mm). Xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx (280 ×&xxxx;6 × 0,25 mm) (xxx xxxxxxx 1).

5.4.   Elektrofokusační xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx (xxxx. 265 × 125 mm) x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx xxxxx (≥ 2,5&xxxx;xX) nebo automatické xxxxxxxxxxxxxxxx zařízení

5.5.   Cirkulační kryostat x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 12 ± 0,5&xxxx;°X

5.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 3&xxxx;000&xxxx;x

5.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxx (x xxxxx ≥ 265&xxxx;xx)

5.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx

5.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx (10 × 5 mm, x&xxxx;xxxxxxx xxxx filtračního xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx)

5.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxx xx xxxxxxxx 280 × 150 mm) x&xxxx;xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx

5.12.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx xxxxxx homogenizátor x&xxxx;xxxxxxxx xxxx 10&xxxx;xx x&xxxx;xxxxxxxxx 8 000 xx 20&xxxx;000 xx/xxx

5.13.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx míchačka

5.14.   Ultrazvuková xxxxx

5.15.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx

5.16.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xx 25 μx

5.17.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx

5.18.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx řízená xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 35 x&xxxx;40 ±&xxxx;1&xxxx;°X x&xxxx;xxxxxxxxx

5.19.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx měření na xxxxxx délce λ =&xxxx;634&xxxx;xx

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX POSTUP

6.1.   Příprava xxxxxx

6.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxx

Xx xxxxxxxxxxxxx kyvety xx 100 ml xxxxxxx xxxxxxxx xxxx nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx odpovídající 5&xxxx;x&xxxx;xxxxxx, xxxxxxxx 60&xxxx;xx xxxxxxxxxxx xxxx a obsah xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (8&xxxx;000 až 10 000 xx/xxx). Xxxxxxx pH xx 4,6 zředěnou xxxxxxxxx xxxxxxx (4.5.1) x&xxxx;xxxxxxxxxxx (5 minut, 3&xxxx;000&xxxx;x). Dekantujte xxx x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx 20&xxxx;000 ot/min xx 40&xxxx;xx xxxxxxxxxxx xxxx s hodnotou xX xxxxxxxxx xx 4,5 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.5.1). Xxxxxxxx 20&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxxx (4.5.2) x&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxxxxx a odstřeďuje (5 xxxxx, 3&xxxx;000&xxxx;x). Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx nachází xxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxx (xxx xxxxxxx 2), x&xxxx;xxx fáze xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxx xx 40 xx xxxxxxxxxxx xxxx (viz xxxx) x 20 xx xxxxxxxxxxxxxx (4.5.2) x xxxxxxxx se. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxxx fáze xxxxxx bezbarvé (dvakrát xx xxxxxxx). Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx s 50 ml xxxxxxx (4.5.3) x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx papírový xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 25 ml xxxxxxx xxxxxxx a nechte vysušit xx xxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxx dusíku. Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxx bílkovinné xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx – 20 °C.

6.1.2.   Přeměna β-xxxxxxx xx γ-xxxxxxx xxxxxxxxx plasminu

Rozptylte 25 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (6.1.1) x 0,5 xx tlumivého roztoku xxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.7.1) x směs 20 xxxxx homogenizujte, xxxx. xxxxxxxxxxx. Směs xxxxxxxx xx 40&xxxx;°X x&xxxx;xxxxxxxx 10 μx xxxxxxxx (4.7.2), xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx 1 xxxxxx při xxxxxxx 40&xxxx;°X xx xxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 20 μl xxxxxxx xxxxxxxx ε-xxxxxxxxxxxxxx (4.7.3). Xxxx xxxxxxxx 200&xxxx;xx xxxxx močoviny x&xxxx;2&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxx xxxxxxx xxxxx symetrie fokusovaných xxxxxxxxxxx xxxx se xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx ε-xxxxxxxxxxxxxx&xxxx;xxxxxx lyofilizovat x poté xxxxxx xxxxxxxxx x 0,5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.6).

6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxx močoviny

Na xxxxxxxxx xxxxx (5.1) válečkem xxxxxxx xxxxxx fólii xxxx (5.2) x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx xxxxx vody x&xxxx;xxxxxxxxxxx vodu xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Stejným xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx druhou, xxxxx xxxxx (5.3) x&xxxx;xxxxxxxxxxx vložkami (0,25&xxxx;xx) xx jinou skleněnou xxxxx. Xxxx druhou xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.

X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx (4.1.2) přidejte 10 μx Temedu (4.1.3.1), xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx 10 μx xxxxxxx XXX (4.1.3.2); xxxxxxxx xxxxxxxxxxx a okamžitě nalijte xxxxxxxxxx na xxxxx xxxxx xxxxx. Jeden xxxxx xxxxx xxxxx xxxx (xxxxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxxx dolů) xxxxxxxx x&xxxx;xxxxx x&xxxx;xxxxx fólií x&xxxx;xxxxxx pokládejte xxx, xxx xx xxxx xxxxxxx vytvořila xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx (xxxxxxx 3). Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx nosnou xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx po xxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxx xx xx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx zatížily. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (asi xx 60 minutách) xxxxx x krycí xxxxx sejměte xxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx gelu xxx, xx xxxxxxxx desky xxxxxxxxx. Zadní stranu xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx se xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxx. „Xxxxxx xxxxxxx“ xxxxxxx do xxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxx xx xxxxxxxxxx (xxxxxxx xx xxxx xxxxx).

Xxxxxxxx: Xxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx použít xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxx gel xxxx xxx xxxxxxxx na xxxxx xxxxx; je xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxx použití xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxxx 4,5 ×&xxxx;5&xxxx;xx).

6.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxxx xx 12 °X. Zadní stranu xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx kerosinem a poté xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx kápněte xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (4.2). Xxxxxxx xxxxxxxx „gelový xxxxxxx“ xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx, xxx xx vytlačily xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxx fólii. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.3, 4.4), xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxx na xxxxx (xxxxxxxxxx elektrod 9,5&xxxx;xx).

Xxxxxxxx izoelektrické xxxxxxxx

6.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxx 265 ×&xxxx;125 × 0,25 mm

Fáze	Doba (min)	Napětí (V)	Proud (mA)	Příkon (W)	Volty/hodiny (Vh)
1. Předběžná xxxxxxxx	30	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 15	xxxxxxxxxx 4	xxx 300
2. Xxxxxxxx xxxxxx&xxxx;(7)	60	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 15	xxxxxxxxxx 4	xxx 1 000
3. Konečná xxxxxxxx	60	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 5	xxx. 20	xxx 3&xxxx;000
	40	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 6	xxx. 20	xxx 3 000
	30	max. 2 500	max. 7	max. 25	cca 3&xxxx;000

Xxxxxxxx: Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx nebo xxxxx xxxx, xxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx způsobem xxxxxxxx (xxxx. xxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx se xxxxxxxxxxx, xxxxxxx-xx xx xxx x&xxxx;xxxxxxxxx 265 ×&xxxx;125 ×&xxxx;0,5&xxxx;xx).

6.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxx elektroforetického zařízení (2 xxxx 5,0 ×&xxxx;4,5&xxxx;xx, elektrody xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxx.

Xxxx	Xxxxxx	Xxxxx	Xxxxxx	Xxxxxxx	Xxxxx/xxxxxx
1. Xxxxxxxxx xxxxxxxx	1&xxxx;000 X	10,0 mA	3,5 X	8 °C	85 Xx
2. Xxxxxxxx xxxxxx	250 X	5,0 mA	2,5 X	8 °C	30 Xx
3. Xxxxxxxx	1&xxxx;200 X	10,0 xX	3,5 X	8 °X	80 Xx
4. Xxxxxxxx	1&xxxx;500 X	5,0 xX	7,0 X	8 °X	570 Xx

Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx 2 xxxxxx xxx 0 Xx.

Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx 2 odstraňte xxx 30 Vh.

6.4.   Barvení xxxxxxxx

6.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxx se ihned xxxxx xx barvicí/odbarvovací xxxxx xxxxxxxx 200&xxxx;xx xxxxxxxx (4.9). Gel x xx xxxxxxxx 15 minut xx xxxxxxx třepání.

6.4.2.   Praní x&xxxx;xxxxxxx xxxxxx desky

Fixatér xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx desku xxxxxxx xxxxxxxxxx po dobu 30 xxxxxx xxxx xx 100 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.10) Xxxxxxxxxxx xxxxxx dekantujte, xxxxx xxxxxxx 250&xxxx;xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.11.3) x gel xxxxxx xx mírného xxxxxxx xx dobu 45 xxxxx xxxxxxxxx.

6.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx

Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxx dvakrát xxxxxxxxxx xx dobu 30 xxxxxx vždy xx 100&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.10). Xxxx 15 xxxxx xxxxxxxxxxxxx x&xxxx;200&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx; xxxx odbarvování opakujte xxxxxxx dvakrát až xxxxxxx, dokud xxxx xxxxxx čiré x&xxxx;xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx potom xxxxxxxx destilovanou xxxxx (2 ×&xxxx;2 minuty) x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx na xxxxxxx (2 xx 3 hodiny) xxxx xxxxxx vysoušečem xxxxx (10 až 15 xxxxx).

Xxxxxxxx 1: Fixaci, xxxxxxxxx, xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx 20&xxxx;°X. Vyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx 2: Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. Silver Xxxxxxxx Kit, Xxxxxxx, Xxxxxxxxx Xxxxxxx, xxx x. 17-1150-01), xxxx xxx kaseinové vzorky xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx 5 xx/xx.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX

Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx obrazců xxxxxxxxxx vzorku s xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x stejného gelu. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx vyrobených x xxxxxx mléka, xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxx xxxxxx, kozího x xxxxxxxx mléka xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx γ3- a γ2-kaseinů, xxxxxxx izoelektrické xxxx xx xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxx xX 6,5 x pH 7,5 (obrázky 4x, x, obrázek 5). Xxxxxxxx xxx je xxxxx než 0,5&xxxx;%.

7.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorků x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxx dosáhnout u xxxxxxxx, xxxxxx a/nebo xxxxxxxx γ2- x γ3-xxxxxxx (xxx „γ2 X,X,X“ a „γ3 X,X,X“ xx xxxxxxxxx 4x, x a xxxxxxx 5) xxxxxx xxxxxx intenzity. Xxxxx xx xxxxxx podmínek xxx přímo posoudit xxxxxxxx kravského mléka (xxxxx xxxx xxxxx xxx 1 % xxxx xx xxxx 1&xxxx;%) x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx γ3- x&xxxx;γ2-xxxxxxx (xxx „γ3 X“ x&xxxx;„γ2 X“ xx obrázcích 4&xxxx;x, x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxx 5) x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 0&xxxx;% x&xxxx;1&xxxx;% (xxxxxx, xxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxx).

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxx xx xx xxxxx, xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx plochami píků xxxxxxxx γ2- a γ3-kaseinů x&xxxx;xxxxxxxx xxxx ovčích, xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx γ2- x&xxxx;γ3-xxxxxxx (viz xxxxxxx 5) xxxxxxxxxxxxx (5.19). Tuto hodnotu xxxxxxxxxx x poměrem xxxxx píků γ2- x γ3-xxxxxxx v 1&xxxx;% referenčním standardu (xxxxx, kozím) xxxx xxxxxxxxxxx laboratorním xxxxxxxxx (xxxxxxx) analyzovaných x xxxxx xxxx.

Xxxxxxxx: Xxxx xxxxxx xxxxxxx uspokojivě, xxxxx existuje jasný xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx γ2- x γ3-xxxxxxx x 1&xxxx;% xxxxxxxxxxx standardu, xxxxx xxxxxx v 0&xxxx;% xxxxxxxxxxx standardu. X&xxxx;xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx optimalizovat xxx xxxxxxx dodržení xxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxx xxxxxx.

Xxxxxx xx xxxxxxxxx za xxxxxxxxx, xxxxxxxx hodnoty xxxx hovězích γ2- x γ3-xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx ploch xxxx jsou stejné xxxx větší xxx xxxxxxx odpovídající 1 % xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxx F., Xxxx L., Xxxxxxxx X., Xxxxxx C., Xxxxxxx P., Xxxxxx X, Xxxxxx X., Xx Luccia X., Xxxxx X.: Xxx xx plasmin xx&xxxx;xxxxxxxx xxx sensitivity of xxx detection of xxxxxx milk in xxxxx xxx/xx xxxxxxx cheese xx xxx isoelectric xxxxxxxx xx γ2-caseins. Milchwissenschaft 45, 708–711 (1990).

Xxxxx X., Xxxxxxx M.A., Xxxxxxxx X., Xxxx X., Xxxxxx Musso X., Xxxxx A., Xxx Giovine X.: X xxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx bovine xxxx&xxxx;xx xxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxxx 50, 83–85 (1995).

Xxxxxx X., Berner X, Xxxxxxxxxxxx X.: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx cow xxxx&xxxx;xx ewe xxx xxxx milk and cheese xx carrier xxxxxxxxx — and xxxxxxx xxxxxxxxx/xxxxxxxxxxx xX xxxxxxxx — xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx γ-caseins xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx. xx: Xxxxxxxxxxxxxxx-Xxxxx 89 (B. X. Xxxxxx, xx.) xx 389-393, Xxxx-Xxxxxx, Xüxxxxx (1989).

Xxxxxx Ι., Belitz X.-X., Xxxxxx X.-X.: Xxxxxxxx xxx Xxxxxxxx xx Xxxxx xxx Xxxxxxxxxxx xxx. -xäxx xxxxx isoelektrische Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxxxxxx. X. Xxxxxxx. Xxxxxx.&xxxx;Xxxxxx. 174, 195–199 (1982).

Xxxxxx X.X.: Ultrathin-layer xxxxxxxxxxx xxxxxxxx in 50-100&xxxx;μx xxxxxxxxxxxxxx gels on xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx films. Electrophoresis 1, 43–56 (1980).

Xxxxxxx 1

Xxxxxxxxxxx xxxxxx krycí xxxxx

Xxxxxxx 2

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx fází xx xxxxxxxxxx

Xxxxxxx 3

Sklápěcí technika xxx odlévání xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx

x = xxxxxxxxx páska (0,25&xxxx;xx); x = krycí xxxxx (5.3); c, x = xxxxxxxx xxxxx (5.1); d = xxxxxx xxxxxx (4.1.2); x = xxxxx fólie xxxx (5.2).

Xxxxxxx 4x

Xxxxxxxxxxxxx fokusace xxxxxxx ze xxxx x&xxxx;xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, s různým xxxxxxx kravského xxxxx

% XX = xxxxxxxx xxxxxxxxx mléka, C = xxxxxxx, E = xxxx, X&xxxx;= kozí

Na xxxxxxx xx znázorněna xxxxx xxxxxxxx gelu XXX.

Xxxxxxx 4x

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx vyrobených xx směsí ovčího, xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, s různým xxxxxxx kravského mléka

% XX = xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx; 1 + = xxxxxx x xxxxxxx 1 % xxxxxxxxx xxxxx x x přídavkem čistého xxxxxxxx kaseinu ve xxxxxx xxxxx. C = xxxxxxx, X&xxxx;= xxxx, X&xxxx;= xxxx, X&xxxx;= xxxxxx

Xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx separační xxxxxxxxxx xxxx IEF.

Obrázek 5

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (XXX) a vzorků xxxx vyrobeného xx xxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx, po izoelektrické xxxxxxxx

x, x = xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 0 x 1 % xxxxxxxxx xxxxx; x-x = xxxxxx sýra xxxxxxxxxxxx 0, 1, 2, 3 x 7&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxx; X&xxxx;= kravské, X&xxxx;= xxxx, G = xxxx.

Xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx XXX xxx λ =&xxxx;634&xxxx;xx.

XXXXXXX IX

Hodnocení xxxxxx

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx jakosti

Analýzy xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx v souladu x&xxxx;xxxxxxx&xxxx;12 xxxxxxxx (XX) x.&xxxx;882/2004&xxxx;(*) xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx analýzy

1.

Odběr xxxxxx xx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx posuzovaný xxxxxxx. Xxxxxxxxxx-xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx odběr xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxx XXX 707„Xxxxx a xxxxxx výrobky – Xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx“,

2.

Xxxxxxxxxxx zprávy o výsledcích xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx výsledků x xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx.

3.

Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorky.

4.

Pokud dojde xx sporu xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx hradí xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxx se xxxxxxx za xxxxxxxxxxx, xx&xxxx;xxxxxxxxxx duplicitní vzorky xxxxxxxx jsou k dispozici x&xxxx;xxxx xxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxx. Výrobce xxxxx platební xxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx xx&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxx xxx xx&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx první xxxxxxx. Platební xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx 21 xxx xx xxxxxxxx žádosti.

5.

Výsledek xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx.

6.

Xxxxxxxx výrobce xx xxxx pracovních xxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, že xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx se x&xxxx;xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx nelze, xx xxxxx přijata.

Dodatek

Zhodnocení splnění xxxxxxx xxxxxxxxx mezní xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

X xxxxxxxxx, xxx právní xxxxxxxx týkající xx xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx tyto postupy. Xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx používá xxxxxx nejméně xx 3 xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx ze xxxxx xxxxxxxxx ke xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx vzorek. Získaný xxxxxxxx xx xxxxxxx xx zákonem xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 95 % xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx jakožto xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx příslušná směrodatná xxxxxxxx xxxxxx xxx xx xxx, 1) xxx byla metoda xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx s hodnotami xxx σx x σX, xxxx v případě xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxx, 2) xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx se potom xxxxx xxxxxxxxx měření xxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx

X&xxxx;xxxxx xxxxxxx byla xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx σx a směrodatná xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx σX&xxxx;xxxxxxxxx a laboratoř xxxx xxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx&xxxx; x počtu x opakovaných xxxxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (x =&xxxx;2) x&xxxx; xxxxx:

Xx-xx konečný xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxx ve xxxxx x = x ₁ + x ₂, x = y ₁ – x ₂, x = y ₁ · y ₂ nebo x = x ₁/x ₂, xxxx xx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxx postupovat xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx se xxxxxxxx xx nevyhovující xxxxx xxxxxxx stanovené xxxxx xxxxxxx XX, xxxxxxxx

xxxxx xx xx xx xx, xx xxxxxxx XX xxxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx zákonem stanovené xxxxx xxxxxxx LL, xxxxxxxx

xxxxx xx má xx xx, xx xxxxxxx XX xxxxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx směrodatné xxxxxxxx vnitřní xxxxxxxxxxxxxxxxxxx

X&xxxx;xxxxxxxxx, xxx jsou xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxxxxx, x&xxxx;xxx nebyla xxxxxxxxx xxxxxxxx pro zajištění xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx validaci. Xxxxxxx σr x σ X xx xxxx xx xxxxxx pro výpočet xxxxxxxxx nejistoty X xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx si X .

Xxxxxxxx, xxx xx třeba xxxxxxxxx xx xxxxxx splnění xxxxxxx stanovené xxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxx 1. Xxxxxxxx-xx xx xxxx šarže xx nesplňující xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxxxxx a výsledek xx xxxxxxxxx x xxxxxxx s xxxxx 1.