Plné znění - 32018R0150

Xxxxxxx X

XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXXX&xxxx;XXXXXXXXXXX XXXXX

Xxxxxx: XXXX s obrácenými xxxxxx

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX A XXXXXX XXXXXXX

Xxxx metoda popisuje xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (XX) a fosfatidylethanolaminu (XX) v sušeném xxxxxxxxxxx xxxxx (XXX) a je xxxxxx xxx zjišťování xxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;XXX.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX

Xxxxx XX + XX: xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx se vyjadřuje x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (PEDP) xx 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx XX a PE xxxx derivátů x-xxxxxxxxxxxxxx (XXX) xxxxxxx HPLC x&xxxx;xxxxxxxxxx fázemi (XX) x&xxxx;xxxxxxxxxxxxx detekcí. Kvantitativní xxxxxxxxx xxxxxx PS x&xxxx;XX ve xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx množství XXXX.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxxxxxx se pouze xxxxxxxxxx xxxxxxx p.a. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxx destilovaná voda xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx: XXXX x xxxxxxx xxxxxxx 99 %

Poznámka: Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx – 18 °C.

4.2.   Chemikálie xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx

4.2.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx pro XXXX

4.2.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx čistoty pro XXXX

4.2.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx

4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx o-ftaldialdehydových xxxxxxxx

4.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx, 12 M xxxxx roztok

4.3.2.   Kyselina xxxxxx, 0,4 X vodný xxxxxx s hodnotou xX xxxxxxxxx hydroxidem xxxxxx (4.3.1) na 10,0

4.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;2-xxxxxxxxxxxxxxx

4.3.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;x-xxxxxxxxxxxxx (XXX)

4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx XXXX

4.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx XXXX.

4.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx čistoty xxx XXXX

4.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx fluorometricky xxxxxxxx čistoty

4.4.4.   Tetrahydrofuran

4.4.5.   Natrium xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx

4.4.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxx

4.4.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx.

5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX X XXXXXXX

5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxx na 0,1&xxxx;xx x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx odečtu xx 1&xxxx;xx

5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 25 x&xxxx;100&xxxx;xx

5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx schopné dávkovat xx 1 xx 10&xxxx;xx

5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx míchačka

5.5.   Dělené pipety xxxxxxx dávkovat 0,2, 0,5 x&xxxx;5&xxxx;xx

5.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx baňky x&xxxx;xxxxxx 10, 50 x&xxxx;100&xxxx;xx

5.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 20 x&xxxx;100 μx

5.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx xxxxx

5.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx 27&xxxx;000 ×&xxxx;x

5.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxx 5&xxxx;xx

5.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxx 25&xxxx;xx

5.12.&xxxx;&xxxx;&xxxx;xX xxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xx 0,1 jednotky xX

5.13.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xx XXXX

5.13.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx schopný xxxxxxxx xxx xxxxxxx 1,0 xx/xxx xxx 200 xxxxxx

5.13.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx dávkovač xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx

5.13.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx kolonu xxxxxxxx xx teplotě 30 °C ± 1&xxxx;°X

5.13.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx 330&xxxx;xx x&xxxx;xxxxxx xxxxxx xxxxx 440&xxxx;xx

5.13.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx dat xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx

5.13.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx XxXxxxxxxxx® – 100 (250 ×&xxxx;4,6&xxxx;xx) xxxx rovnocenná xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (X 18), xxxxxxxx xxxxxx 5 μm

6.   ODBĚR XXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx XXX 707.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

7.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx roztoku xxxxxxxxx xxxxxxxxx

7.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx 30,0 ± 0,1&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (4.2.3) xx xxxxxxx xxxxx xx 100 ml (5.6) x&xxxx;xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1).

7.1.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx (5.3) xxxxxxxx 1&xxxx;xx xxxxxx xxxxxxx do xxxxxxx xxxxx xx 10&xxxx;xx (5.6) x&xxxx;xxxxxxx xx značku xxxxxxxxxx (4.2.1) x&xxxx;xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx tryptaminu 0,15 xX.

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx zkušebního xxxxxx

7.2.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx 1,000 ± 0,001&xxxx;x&xxxx;xxxxxx XXX xx xxxxxxx na 25 ml (5.2). Xxxxxxx (5.3) xxxxxxxx 10&xxxx;xx xxxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxx 40 °C ± 1&xxxx;°X x&xxxx;xx xxxx 30 xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (5.4), xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx kousky.

7.2.2.   Pipetou (5.5) xxxxxxxx 0,2&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxxxxxx mléka do xxxxxxx xxxxx xx 10&xxxx;xx (5.6), xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (5.7) xxxxxxxx 100 μl 0,15 xX xxxxxxx xxxxxxxxxx (7.1) x&xxxx;xxxxxxx xx xxxxxx methanolem (4.2.1). Převracením opatrně xxxxxxxxxxx a vložte xx 15 xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.8).

7.2.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx (5.9) xxx 27 000 ×&xxxx;x&xxxx;xx xxxx 10 xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx nádobky (5.10).

Xxxxxxxx: Xx xxxxxxxxx xxxxxxx XX musí xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 4&xxxx;°X.

7.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx standardu

7.3.1.   Navažte 55,4&xxxx;xx XXXX (4.1) xx xxxxxxx baňky na 50&xxxx;xx (5.6) x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx (5.11) přidejte xxx 25 ml xxxxxxxxxxx (4.2.2). Xxxxxxxxxxxx baňku xxxxxxxx na 50&xxxx;°X ± 1 °C x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, dokud xx XXXX xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx 20&xxxx;°X, xxxxxxx po xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1) x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

7.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx (5.3) přeneste 1&xxxx;xx tohoto roztoku xx xxxxxxx baňky xx 100&xxxx;xx (5.6) x&xxxx;xxxxxxx po xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1). Xxxxxxx (5.3) přeneste 1&xxxx;xx xxxxxx roztoku xx xxxxxxx xxxxx na 10&xxxx;xx (5.6), xxxxxxxx 100 μl (5.7)&xxxx;0,15xX xxxxxxx tryptaminu (7.1) x&xxxx;xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1). Promíchejte xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xx xxxxxxxxx xxxxxxx XX musí xxx roztok xxxxxxxxxxxx xxxxxx skladován xxx xxxxxxx 4&xxxx;°X.

7.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Xx xxxxxxx xxxxx xx 10&xxxx;xx (5.6) xxxxxxx 25,0 ± 0,1&xxxx;xx XXX (4.3.4), xxxxxxxx 0,5&xxxx;xx (5.5) xxxxxxxxx (4.2.1) x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx XXX xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxx roztokem xxxxxxxx xxxxxx (4.3.2) x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx (5.7) xxxxxxxx 20 μx 2-xxxxxxxxxxxxxxxx (4.3.3).

Xxxxxxxx: Derivatizační xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx v hnědé xxxxxx xxx teplotě 4 °C; xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx dobu xxxxxxx xxxxx.

7.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx pomocí HPLC

7.5.1.   Eluční xxxxxxxxxxxx (4.4)

Xxxxxxxxxxxx X: Xxxxxx 0,3 xX xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 3 xX octanu xxxxxxx (s xxxxxxxx xX xxxxxxxxx na 6,5 ± 0,1 xxxxxxxxx octovou): methanol: xxxxxxxxxxxxxxx =&xxxx;558: 440:2 (xxx.).

Xxxxxxxxxxxx B: Xxxxxxxx

7.5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx:

Xxx (xxx)	Xxxxxxxxxxxx X (%)	Rozpouštědlo B (%)	Xxxxxx (ml/min)
Počáteční	40	60	0
0,1	40	60	0,1
5,0	40	60	0,1
6,0	40	60	1,0
6,5	40	60	1,0
9,0	36	64	1,0
10,0	20	80	1,0
11,5	16	84	1,0
12,0	16	84	1,0
16,0	10	90	1,0
19,0	0	100	1,0
20,0	0	100	1,0
21,0	40	60	1,0
29,0	40	60	1,0
30,0	40	60	0

Poznámka: Xxxx xx stát, xx xxxxxx gradient xxxx xxxxx být mírně xxxxxxx, xxx bylo xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx 1.

Teplota xxxxxx: 30 °X.

7.5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxxxxx: 50 μl xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;50 μx xxxxxxx xxxxxx

7.5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxx

Xxx každodenním xxxxxxxxx xxxxxx kolonu promývejte 100&xxxx;% xxxxxxxxxxxxx B po xxxx 15 minut, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx X:X =&xxxx;40:60 a provádějte xxxxxxxxxxx xx xxxx 15 minut xxx xxxxxxx 1 ml/min. Xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2.1).

Poznámka: Xxxx xxxxxxxxxxx kolony xx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx 30 minut xxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx x poměru 80:20 (xxx.).

7.5.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx XX + XX ve xxxxxxxxx vzorku

7.5.6.   Proveďte xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx analýz xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx časy. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx standardu (7.3) xx xxxxxxx 5–10 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxx xx xxxxx xx každých 20–25 xxxxxxxx vyčistit nejméně xxxxxxxxxxxxxxxx promýváním 100&xxxx;% xxxxxxxxxxxxx B (7.5.1).

7.6.   Integrační xxxxx

7.6.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxx XXXX

XXXX xx vymývá x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx stanovte xxxxxxxxx xxxx xxxxx.

7.6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx vymývá x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx píku (xxxxxxx 1). Plochu xxxx stanovte xxxxxxxxx xxxx xxxxx.

7.6.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxx XX a PE

Za xxxxx xxxxxxxxx podmínek (xxxxxxx 1) xx XX xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxx xxxxxxxx, částečně xxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxx xx xxxxxxx jeden xxxxx pík. PE xx vymývá x&xxxx;xxxxxx xxx xxxxxxxx, částečně xxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx nastavením xxxxxxxx xxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx 1.

8.   VÝPOČET X XXXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xxxxx XX + XX xx xxxxxxxxx vzorku xx vypočte xxxxx:

X =&xxxx;55,36 × ((X₂)/(X₁)) × ((X₁)/(X₂))

xxx:

X	=	xxxxx XX xxxx XX (v xx/100 x&xxxx;xxxxxx) xx xxxxxxxxx vzorku
A1	=	plocha xxxx XXXX xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (7.3)
A2	=	plocha píku XX nebo XX xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.2)
X1	=	xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx vzorku (7.3)
X2	=	xxxxxx xxxx tryptaminu xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.2).

9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX METODY

Poznámka: Xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx podle Xxxxxxxxxxx xxxxx XXX&xxxx;(*).

9.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx opakovatelnosti, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, které x&xxxx;xxxxxxxx zkušebního xxxxxx xxxxx xxxxxx pracovník xx stejném přístroji x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxx odstupu, xx neměla xxxxxxxxx xxxxxxxxx 2&xxxx;%. Xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, relativní rozdíl xxxx jejich výsledky xx xxxxx být xxxxx xxx 6&xxxx;% xxxxxxxxxxxxx průměru xxxxxxxx.

9.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx laboratořích xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xx xxxxxxx xxxxxxxx analýzu xxxxx xxxxxxxxxx vzorku x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx stanovením, xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxx být xxxxx xxx 11&xxxx;% xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

10.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx P., Xxxxxxxxxx X., Xxxxxxxxx X. A., Xxxxxx X., Xxxxxxxx X. „Xxxxxxxxx of xxxxxxxxxx&xxxx;xxxxxx xx xxxxxxxx&xxxx;xxxxxx xx XXXX quantification of xxxxxxxxxxxxxxxxxx.“ Xxx. Xxxx. Xxxx.-Xxx.&xxxx;39,395[1988].

Xxxxxxx 1

HPLC chromatogram XXX-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (PS) x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (PE) x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx z rekonstituovaného sušeného xxxxxxxxxxxx xxxxx. Je xxxxxxxxx integrační xxxxx xxx xxxx XX, XX x&xxxx;xxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx).

Xxxxxxx II

ZJIŠŤOVÁNÍ XXXXXXXXX XXXXXXXXX V SUŠENÉM ODSTŘEDĚNÉM XXXXX URČENÉM XXX XXXXXXX XXXXXXXXXX NA XXXXXXX STANOVENÍ XXXXXXXXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX (XXXX)

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX X&xxxx;XXXXXX XXXXXXX

Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx syřidlové xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx mléce xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX ODKAZ

Mezinárodní xxxxx XXX 707 – Xxxxx x xxxxxx xxxxxxx – Směrnice xxx odběr xxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX

Xxxxx xxxxxx xx syřidlové xxxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxx hmotnostní procento xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

—	Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx tuku x&xxxx;xxxxxxxx kyselinou trichloroctovou x&xxxx;xxxxxxxxx odstředěním nebo xxxxxxxx;

—	Xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXX) v supernatantu xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx chromatografií (XXXX);

—	Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx získaného x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx nebo bez xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx syrovátky.

5.   CHEMIKÁLIE

Používají xx xxxxx xxxxxxxxxx čistoty x.x. Xxxxxxx voda xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx rovnocenné xxxxxxx.

5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx 240 g kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (CCl₃COOH) ve xxxx x&xxxx;xxxxxxx xx 1&xxxx;000&xxxx;xx. Roztok by xxx xxx xxxx x xxxxxxxx.

5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxx, xX 6,0

Xxxxxxxxx 1,74&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (X₂XXX₄), 12,37&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (XX₂XX₄) x&xxxx;21,41&xxxx;x&xxxx;xxxxxx xxxxxxx (Xx₂XX₄) xxx x&xxxx;700&xxxx;xx vody. X&xxxx;xxxxxxx xxxxxxx upravte xX na 6,0 xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxx xx 1&xxxx;000 xx x homogenizujte.

Poznámka: Xxxxxxx xxxxxxx lze xxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx standardů xxxx xxxxxxxxxxx výrobce xxxxxxxx materiálů xx xxxxxx.

Xxxxxx roztok xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx filtr o velikosti xxxx 0,45 μm.

5.3.   Promývací xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx (XX₃XX) s devíti xxxxxx xxxx. Před xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx filtr x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx.

Xxxxxxxx: Xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx promývací xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxxx účinek x xxxxx nezhoršuje xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx

5.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxxx mléko xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xx. [0]).

5.4.2.   Totéž sušené xxxxxxxxxx mléko xxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5 % xx. xxxxxx syřidlové xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xx. [5]).

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX A XXXXXXX

6.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx

6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx 2&xxxx;200&xxxx;x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxx 50 ml

6.3.   Mechanická xxxxxxxx

6.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

6.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx nálevky x&xxxx;xxxxxxx xxx 7 cm

6.6.   Filtrační papíry xxxxxxx xxxxxxx o průměru xxx 12,5 cm

6.7.   Skleněné xxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx filtrem x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx

6.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 10 ml (XXX 648, xxxxx X, xxxx ISO/R 835) xxxx dávkovací systém xxxxxxx xxxxxxx 10,0 ml xx xxx minuty

6.9.   Dávkovací xxxxxx xxxxxxx dodávat 20,0&xxxx;xx xxxx při xxxxxxx asi 50&xxxx;°X

6.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx xxxxx lázeň nastavená xx 25 ± 0,5&xxxx;°X

6.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx na XXXX, xxxxx tvoří:

6.11.1.

Čerpadlo

6.11.2.

Nástřikové xxxxxxxx – xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx – x&xxxx;xxxxxx 15 xx 30 μx

6.11.3.

Xxx kolony XXX 2&xxxx;000-XX xx sebou (xxxxx 30&xxxx;xx, vnitřní xxxxxx 0,75&xxxx;xx), xxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxx. xxxxx xxxxxx XXX 2&xxxx;000-XXxx, xxxxx xxxxxx Agilent Xxxxxxxxxxxx Xxxxxx GF 250) x&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxx (3 cm ×&xxxx;0,3&xxxx;xx) naplněná materiálem X&xxxx;125 xxxx xxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

6.11.4.

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx na 35 ± 1&xxxx;°X

6.11.5.

XX xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx 205&xxxx;xx s citlivostí 0,008 Å.

6.11.6.

Integrátor schopný xxxxxxxxxx mezi xxxxx Xxxxxxxx: Xxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, avšak xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx x&xxxx;xxxxxx nižší. X&xxxx;xxxxx xxxxxxx je xxxxx, xxx xxxxxx teploty x&xxxx;xxxxxxx jednoho xxxxxxxxxxxx xxxxxx byly menší xxx 5 °C.

7.   ODBĚR VZORKŮ

7.1.   Vzorky xxxx xxx odebírány xxxxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxx XXX 707. Xxxxxxx xxxxx však xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx odběru xxxxxx xx předpokladu, že xxxx xxxxxx odpovídá xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx složení.

8.   PRACOVNÍ XXXXXX

8.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku.

Sušené xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxx xx opatřena xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Sušené xxxxx důkladně promíchejte xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nádobky.

8.2.   Zkušební xxxxx

Xx odstředivkové zkumavky (6.2) xxxx vhodné xxxxx xx xxxxxx xx 50&xxxx;xx xxxxxxx 2,000 ± 0,001&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx.

8.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx tuku x&xxxx;xxxxxxxx

8.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xx xxxxxxxx dávce přidejte 20,0&xxxx;xx xxxxx (50&xxxx;°X) xxxx. Xxxxxx rozpusťte xxxxxxxx xx xxxx xxxx minut xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (6.3). Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx lázně (6.10), xxxxx xx její xxxxxxx neustálí na 25&xxxx;°X.

8.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxx minut xxxxxxxx za xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (6.4)&xxxx;10,0&xxxx;xx roztoku kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (5.1) o teplotě xxx 25 °C. Xxxxxxxx xxxxxx xx 60 minut xx vodní xxxxx (6.10).

8.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx (6.2) po xxxx 10 xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx 2&xxxx;200&xxxx;x, nebo xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx (6.6) x&xxxx;xxxxxxx 5&xxxx;xx xxxxxxxx xxxxxxx.

8.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

8.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx 15 xx 30 μl xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx filtrátu (8.3.3) xx xxxxxxxx na XXXX (6.11) x&xxxx;xxxxxxxx 1,0&xxxx;xx xxxxxxxx xxxxxxx (5.2) xx xxxxxx.

Xxxxxxxx 1. V závislosti na xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxx i jiný xxxxxx.

Xxxxxxxx 2. Xxx xxxxxx přerušení promyjte xxxxxx xxxxx. Xxxxx x&xxxx;xxxx nenechávejte xxxxxx xxxxxx (5.2).

Před xxxxxx xxxxxxxxxx na xxxx xxx 24 xxxxx xx xxxxxx propláchnou xxxxx x xxxxx xx xxxxxxxxx roztokem (5.3) xxxxxxx po dobu xxx xxxxx xxx xxxxxxx 0,2&xxxx;xx xx xxxxxx.

8.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx chromatografické xxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku [E] xx xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxxxxx, x&xxxx;xxxx xx xxxxx xxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx XX takto:

Pík XX:	Xxxxx pík chromatogramu x XX xxx 12,5 minuty
Pík XXX:	Xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx XXX s XX 15,5 minuty

Retenční xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (xxxxx).

Xxxxxxxxxx (6.11.6) xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx A každého xxxx:

XXX:	xxxxxx xxxx II
AIII:	plocha xxxx XXX

Xxxx kvantitativní xxxxxxxxxxxx xx nezbytné prozkoumat xxxxxx každého xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx způsobených xxx nesprávnou funkcí xxxxxxxx, xxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx a povahou xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

X&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

8.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx

8.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;X xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.4) xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx&xxxx;8.2 xx 8.4.2.

Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx XXX xx x&xxxx;xxxxxxxxx 8&xxxx;% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xx xxx teplotě 30&xxxx;°X xxxxxxx odhadem o 0,2 % xx hodinu.

8.5.2.   Před chromatografickým xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (8.5.1) xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.4.2), xxxxx xx xxxxxx a retenční xxx píku xxxxxxxxxxxxxx XXX xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx hodnotách.

8.5.3.   Stanovte xxxxxxxx xxxxxxx X&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx filtrátů (8.5.1), xxxxxx jste xxxxxxx xxx xxxxxx.

9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX VÝSLEDKŮ

9.1.   Metoda xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx

9.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx R:

Pík XX:

XXX = 100/(XXX[0])

xxx:

XXX	=	xxxxxxxx xxxxxxx xxxx XX
XXX [0]	=	plochy xxxx XX xxxxxxxxxxxx xxxxxx [0] xxxxxxx x&xxxx;8.5.3

Xxx XXX:

XXXX = X/(XXXX[5] – XXXX[0])

xxx:

XXXX	=	xxxxxxxx xxxxxx píku XXX
XXXX [0] xxx XXXX [5]	=	xxxxxx xxxx XXX xxxxxxxxxxxx vzorků [0] x&xxxx;[5] xxxxxxx v 8.5.3
W	=	množství xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx [5], xx. 5

9.1.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx xxxxxx [X]

XXX[X] = XXX × AII[E]

SIII[E] = XXXX × XXXX[X]

XXX[X] = XXX × XXX[X]

xxx:

XXX [X], XXXX [X], XXX [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxx xxxx II, XXX x&xxxx;XX xx xxxxxx [X]
XXX [E], XXXX [X]	=	xxxxxx xxxx XX a III xx xxxxxx [X] xxxxxxx x&xxxx;8.4.2
XXX, RIII	=	odezvové xxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;9.1.1

9.1.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx relativního xxxxxxxxxx času xxxx XXX xx xxxxxx [X]:

XXXXXX[X] = (RTIII[E])/(RTIII[5])

kde:

RRTIII [X]	=	xxxxxxxxx retenční xxx xxxx III xx xxxxxx [E]
RTIII [E]	=	relativní xxxxxxxx xxx píku XXX xx xxxxxx [X] získaný x&xxxx;8.4.2
XXXXX [5]	=	xxxxxxxxx xxxxxxxx čas xxxx III x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx [5] xxxxxxx x&xxxx;8.5.3

9.1.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx, že xxxx xxxxxxxxxx retenčním xxxxx xxxx XXX, xx. XXXXXX [X] x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx do xxxxxxxx 10&xxxx;% existuje xxxxxxxx xxxxx

—	xxx xxxxxx xxxxxxxxx > 5&xxxx;% xx XXXXXX [X] &xx;&xxxx;1,000;

—	xxx obsahu syrovátky ≤&xxxx;5&xxxx;% xx XXXXXX [X] ≥&xxxx;1,000.

Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx RRTIII xx ± 0,002.

Xx xxxxxxxxxx okolností se xxxxxxx XXXXXX [0] xxx xxxx liší xx 1,034. Xxxxx xxxxx xxxxx xx xxxx hodnota blížit 1,000, xxxxx vždy xxxx xxx xxxxx xxx 1,000.

9.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx procenta xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx vzorku:

W = SIII[E] – [1, 3 + (XXXX[0] – 0, 9)]

xxx:

X	=	xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxx [X];
XXXX [X]	=	xxxxxxxxx plocha xxxx XXX zkušebního xxxxxx [X] xxxxxxx xxxxx 9.1.2;
1,3	=	xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx plochu píku XXX xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx na 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx v nezfalšovaném xxxxxxx xxxxxxxxxxx mléce xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxx xxxx xxxxxxx experimentálně
SIII [0]	=	xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX, xxxxx xx xxxxx RIII × AIII[0]. Xxxx xxxxxxx se xxxxxxx v 9.1.1 x&xxxx;8.5.3;
(XXXX [0]&xxxx;–&xxxx;0,9)	=	xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx nutno provést xx xxxxxxxxx průměrné xxxxx 1,3, jestliže XXXX [0] xxxx xxxxx 0,9. Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx píku III xxxxxxxxxxx xxxxxx&xxxx;[0] rovna 0,9.

9.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

9.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx mezi xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx, xxxxx x&xxxx;xxxxxxxx zkušebního xxxxxx provedl současně xxxx x&xxxx;xxxxxx sledu xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx překročit 0,2&xxxx;% xx.

9.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx mezi xxxxx xxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx dvou xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx by xxxxx xxxxxxxxx 0,4&xxxx;% xx.

9.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx

9.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX XXXX [X] xxxxxxxxx v gramech xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx, ≤ 2,0 + (XXXX[0] – 0,9)

xxx

2,0	xx xxxxxxxxx hodnota xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX x přihlédnutím k xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx III, tj. 1,3, k xxxxxxxxx x důvodu kolísání xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx mléka a x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (9.3.2);
(XXXX [0] – 0,9)	xx xxxxxx, xxxxx xxxx být xxxxxxxxx, xxxxxxxx je xxxxxx XXXX [0] xxxx xxx 0,9 (viz xxx 9.2).

9.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xx-xx relativní xxxxxx píku XXX XXXX [X] &xx; 2,0 + (XXXX[0] – 0,9) a relativní xxxxxx píku II XXX [X]&xxxx;≤&xxxx;160, stanovte xxxxx xxxxxxxxx syrovátky xxxxx xxxx 9.2.

9.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xx-xx xxxxxxxxx plocha xxxx XXX XXXX [X] &xx; 2,0 + (XXXX[0] – 0,9) x xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XX XXX [X]&xxxx;≤&xxxx;160, stanovte xxxxxxx xxxxx bílkovin (X %). Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx 1 a 2.

9.4.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxx po xxxxxxx vzorků nezfalšovaného xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx obsahem xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxx 1 x&xxxx;2.

Xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, jejíž xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx horní xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX, a to x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;90&xxxx;% xxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxx 1 x 2 xxxx:

XXXX = 0,376 X % – 10,7	(xxxx 1)
XXXX = 0,0123 XXX [X] + 0,93	(xxxx 2)

xxx:

XXXX	xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx III vypočtená xxx podle xxxxxxxxx xxxxxx bílkovin, xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx SII [E],
P %	je xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx,
XXX [X]	xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxx 9.1.2.

Xxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx 1,3 xxxxxxxxx x xxxx 9.2.

Xxxxxx (X1 x X2) mezi xxxxxxxxx relativní xxxxxxx XXXX [X] x xxxxxxxxx xxxxxxx XXXX xx dán těmito xxxxxx: X1 =&xxxx;XXXX[X]&xxxx;– [(0,376 X% – 10,7) + (XXXX[0] – 0,9)]X2 = XXXX[X] – [(0,0123 XXX[X] + 0,93) + (XXXX[0] – 0,9)].

Xxxx-xx X1 a/nebo X2	xxxxx xxxx xxxx xxxxx než xxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx stanovit.
Jsou-li T1 x X2	xxxxx než xxxx, je syřidlová xxxxxxxxx přítomna.

Obsah xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx vzorce: X = X2 + 0,91

xxx:

0,91 xx xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxx xxxx xxxxx a přerušovanou xxxxxxx.

Xxxxxxx XXX

XXXXXXXXX XXXXXX XX XXXXXXXXX XXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXXX ODSTŘEDĚNÉM XXXXX

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX: XXXXXXXXX XXXXXXXX SUŠINY XX XXXXXXXXX SYROVÁTKY XX&xxxx;XXXXXXXX XXXXXXXXXXXX MLÉKA

2.   NORMATIVNÍ XXXXX: MEZINÁRODNÍ XXXXX XXX 707

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX

Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx syrovátky xx xxxxxxxxx jako xxxxxxxxxx procento xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx podle xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx A vysokoúčinnou kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx XXXX). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxx, které tvoří xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx přídavku xxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx syrovátky. Pokud xx xxxxxxxx vyšší xxx 1 % xx., xx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx p.a. Xxxxxxx xxxx xxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxx xxx spektroskopickou xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx xxx HPLC.

5.1.   Roztok xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx 240&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (CCl₃COOH) ve xxxx x&xxxx;xxxxxxx xx 1&xxxx;000&xxxx;xx. Xxxxxx xx xxx být xxxx x xxxxxxxx.

5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx X&xxxx;x&xxxx;X

Xxxxxx X: Vneste 150 xx acetonitrilu (XX₃XX), 20 ml isopropanolu (XX₃XXXXXX₃) a 1,00 xx xxxxxxxx trifluoroctové (XXX, CF₃COOH) xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx 1&xxxx;000 xx xxxxx.

Xxxxxx X: Xxxxxx 550 xx xxxxxxxxxxxx, 20 xx xxxxxxxxxxxx x 1,00 xx XXX do xxxxxxx xxxxx na 1&xxxx;000 ml a xxxxxxx xx 1&xxxx;000 xx vodou. Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx přes xxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx.

5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxxxxx xx kolona xxxxxxx eluentem X (xxxxxx) x xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxx xx dobu 30 xxxxx). Xxxxxx xx uchovává x&xxxx;xxxxxxxxxxxx.

5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx

5.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx skladování (xx. [0]).

5.4.2.   Totéž xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5&xxxx;% xx. xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xx. [5]).

5.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx přídavkem 50&xxxx;% xx. xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xx. [50]).

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX X POMŮCKY

6.1.   Analytické váhy

6.2.   Volitelná xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx 2 200 g a vybavená xxxxxxxxxxxxxxx zkumavkami xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx asi 50&xxxx;xx

6.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

6.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx míchačka

6.5.   Skleněné xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxx 7&xxxx;xx

6.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx střední xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx asi 12,5&xxxx;xx

6.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxx zařízení x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxx o velikosti xxxx 0,45 μx

6.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 10&xxxx;xx (XXX 648, xxxxx X, xxxx XXX/X 835), xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 10,0&xxxx;xx xx xxx minuty

6.9.   Dávkovací xxxxxx xxxxxxx dodávat 20,0&xxxx;xx xxxx xxx teplotě xxx 50&xxxx;°X

6.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx na 25 ± 0,5 °C

6.11.   Zařízení xx XXXX, xxxxx xxxxx:

6.11.1.

Xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx gradientem

6.11.2.

Nástřikové xxxxxxxx – xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, x&xxxx;xxxxxx 100 μx

6.11.3.

Xxxxxx Xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx Zorbax 300 XX-X3 (xxxxx 25 cm, xxxxxxx xxxxxx 0,46&xxxx;xx), xxxx jiná xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxx xx bázi xxxxxxx

6.11.4.

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx 35 ± 1&xxxx;°X

6.11.5.

XX xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx při 210&xxxx;xx (x xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx větší vlnové xxxxx xx xx 220&xxxx;xx) s citlivostí 0,02 Å.

6.11.6.

Xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx nastavení xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxx Xxxxxxxx: Práce x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx teplotě místnosti xx možná xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx x 1&xxxx;°X, xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx XXXX.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXX VZORKŮ

7.1.   Vzorky xxxx xxx odebírány xxxxxxxx xxxxxxxxxx v mezinárodní xxxxx XXX 707. Xxxxxxx státy však xxxxx xxxxxxxx jinou xxxxxx odběru xxxxxx xx předpokladu, xx xxxx xxxxxx odpovídá xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx způsobem, xxx nemohlo dojít xx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx.

8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX POSTUP

8.1.   Příprava xxxxxxxxxx vzorku

Sušené xxxxx xxxxxxxx xx nádobky, xxxxx objem xx xxx dvakrát xxxxx xxx objem xxxxxx x&xxxx;xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx uzavřete. Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx převracením xxxxxxx.

8.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx

Xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (6.2) nebo xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx 50&xxxx;xx xxxxxxx 2,00 ± 0,001 g zkušebního xxxxxx.

Xxxxxxxx: X&xxxx;xxxxxxx směsí xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku, aby xxxx zbavená xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 2,00&xxxx;x.

8.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxx

8.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 20,0&xxxx;xx xxxxx (50&xxxx;°X) vody. Xxxxxxxxxxxxx třepáním xx xxxxxxxxxx třepačce (6.3) xx prášek xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx do xxxxx lázně (6.10), xxxxx xx její xxxxxxx neustálí xx 25&xxxx;°X.

8.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx dvou xxxxx xx stálého xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (6.4) xxxxxxxx 10,0 ml xxxxxxx xxxxxxxx trichloroctové x&xxxx;xxxxxxx xxx 25&xxxx;°X (5.1). Xxxxxxxx xxxxxx na 60&xxxx;xxxxx xx vodní xxxxx (6.10).

8.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx (6.2) xx xxxx 10 xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx 2&xxxx;200&xxxx;x, nebo xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx (6.6) a prvních 5&xxxx;xx xxxxxxxx xxxxxxx.

8.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx stanovení

8.4.1.   Metoda XXXX x&xxxx;xxxxxxxxxx fázemi xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kysaného xxxxxxxx.

8.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx XXXX x&xxxx;xxxxxxxxxx fázemi xx xxxxx optimalizovat xxxxxxxx xxxxxxxxx. Pro xxxxxxxxxxx xxxxxxx s mrtvým xxxxxxx xxx 6 ml (xxxxx xx xxxx, xxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx) je xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx x&xxxx;xxxxx 26 xxxxx ± 2 xxxxxx xxx XXXΑ. Pro xxxxxxxxxxx systémy s menším xxxxxx xxxxxxx (např. 2&xxxx;xx) xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx 22 xxxxx.

Xxxxxxx roztoky xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.4) s obsahem 50&xxxx;% xxxxxxxxx syrovátky x&xxxx;xxx xxxxxx této xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx 100 μx xxxxxxxxxxxx nebo filtrátu (8.3.3) xx zařízení xx XXXX, xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx referenčního xxxxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx 1.

Xxxxxxx 1

Xxxxxxxx referenčního gradientu xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx

Xxx (xxx)	Xxxxxx (xx/xxx)	% X	% X	Xxxxxx
Xxxxxxx	1,0	90	10	*
27	1,0	60	40	xxxxxx
32	1,0	10	90	xxxxxx
37	1,0	10	90	xxxxxx
42	1,0	90	10	xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx by xxxx xxxxxx xxxxxx xxxx XXXΑ.

Xxxxxxxxx xxxxxxx rozpouštědla, xxxxx je nutno xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 8.4.3), xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx: % X =&xxxx;10 – 2,5 + (13,5 + (RTcmpA – 26) / 6) * 30 / 27&xxxx;% B = 7,5 + (13,5 + (XXxxxX – 26) / 6) * 1,11

xxx

XXxxxX	:	xxxxxxxx xxx XXXΑ x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
10	:	xxxxxxxxx % X x referenčním xxxxxxxxx
2,5	:	% X xx xxxxxxxx bodu xxxxx xxxxxxxxx % X x normálním xxxxxxxxx
13,5	:	xxx xxxxxxxxxxxx střednímu xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
26	:	xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx XXXΑ
6	:	xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
30	:	% X x xxxxxxxxxx xxxx minus % X xx 27 minutách x xxxxxxxxxxx gradientu
27	:	doba xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

8.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx vzorků

Nastříkněte 100 μx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (8.3.3) xx zařízení xx HPLC x&xxxx;xxxxxxxx 1,0&xxxx;xx elučního xxxxxxx (5.2) xx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx na začátku xxxxxxx xx xxxxx x&xxxx;8.4.2. Za xxxxxxxxxx xxxxxxxxx se blíží xxxxxx X:X = 76:24 (5.2). Okamžitě xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx gradient, xxx xxxxxxx, xx xxxxxxxx X xx xx 27 xxxxx xxxxxx x 5&xxxx;%. Xxxxx xx spustí xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx 90&xxxx;% X. Toto složení xx xxxxxxx po xxxx xxxx xxxxx x xx jejím xxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx gradientu xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxx počáteční. V xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 15 xxxxx po dosažení xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxx 1. Xxxxxxxx xxx XXXX xx xxx být 26 ± 2 xxxxxx. Toho lze xxxxxxxxx změnou xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx podmínek xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx v % B mezi xxxxxxxxxxx x konečnými xxxxxxxxxx prvního xxxxxxxxx xxxx zůstává xx xxxx 5&xxxx;% X.

Xxxxxxxx 2. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx odplynit x&xxxx;xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. Xx xx xxxxxxxx xxxxx xxx to, xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx správně xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx XXXX xxxx být xxxxx xxx 0,1 minuty (x = 10).

Poznámka 3. Xx xxxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx [5] x použít xxx pro xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx faktoru X (9.1.1).

8.4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (X) xx xxxxxxxxx xx formě xxxxxxxxxxxxx, xx xxxx xx xxx CMPA xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx 26 xxxxx.

Xxxxx X&xxxx;xxxx XXXX xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (6.11.6). Xxxxxx základní xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Jestliže xx xxxxxxxx linie nesprávně xxxxxxxx, analýzu nebo xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Je-li xxx XXXX xxxxxxxxxx oddělen xx ostatních píků, xxxx xx xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx. X opačném xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, jejichž počáteční xxx xx xxx xxx v blízkosti xxxx XXXX (tedy xx v čase x =&xxxx;0 xxx!). Xxx referenční standard x vzorky použijte xxxxxx typ xxxxxxxxx x x společné xxxxxxxx linie xxxxxxxxxxxx, xxx xx xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx buď xxxxxxxxxx xxxxxx zařízení, xxxx xxxxxx, nebo xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx analyzovaného xxxxxx. X&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

8.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx

8.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;X xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.4.1 až 5.4.2) xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx 8.2 xx 8.4.4. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx XXX xx x&xxxx;xxxxxxxxx 8&xxxx;% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Při xxxxxxx 4&xxxx;°X xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx dobu 24 xxxxx. X&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx používat x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxx 8.4.2 xxxx být vynechána, xxxxxxxx je % X v počátečních xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx analýz.

Chromatogram xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5) xx xxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx na xxxxxxx 1. Xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx XXXX xxx xxxx píky. Xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx separace.

8.5.2.   Před xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorků xxxxxxxxxxx 100 μl xxxxxxxxxxxx vzorku xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx [0] (5.4.1).

Xxxxxxxxxxxx nesmí vykazovat xxx v retenčním čase XXXX xxxx.

8.5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx filtrátu (8.5.1), jakého xxxx xxxxxxx pro xxxxxx.

9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX XXXXXXXX

9.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx

9.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxx faktoru X:

Xxx XXXX: X = X/X

xxx

X	=	xxxxxxxx xxxxxx xxxx XXXX
X	=	xxxxx xxxx XXXX
X	=	xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx [5]

9.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx syrovátky xxxxxxxx xx vzorku

W(E) = X&xxxx;×&xxxx;X(X)

xxx

X(X)	=	xxxxxxxxxx procento xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx vzorku [X]
X	=	xxxxxxxx xxxxxx xxxx XXXX (9.1.1)
X(X)	=	xxxxx xxxx XXXX xxxxxx (X)

Xxxxx xx W(E) xxxxx xxx 1&xxxx;% a rozdíl xxxx retenčním xxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxxxx vzorku [5] xxxxx xxx 0,2&xxxx;xxxxxx, xxx je xxxxxxxxxx xxxxxx ze xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

9.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

9.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, která x&xxxx;xxxxxxxx zkušebního vzorku xxxxxxx xxxxxxxx nebo x&xxxx;xxxxxx xxxxx jeden xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx 0,2&xxxx;% xx.

9.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxx.

9.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx

Xxx xxxxxxx xx 0 % xx 16 % xxxxxxxxx xxxxxxxxx je třeba xxxxxx lineární xxxxx x xxxxxxxxxx koeficientem > 0,99.

9.4.   Interpretace

Mezní xxxxxxx 1&xxxx;% xxxxxxxx xxxxxxxxx z xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx 1

Xx—4.6 xxxxxxxx

PŘÍLOHA XX

Xxxxxx xxxxxxx xxxxx x soukromém skladování

Parametr	Metoda
Tuk (6)	ISO 17189 xxxx XXX 3727 xxxx&xxxx;3
Xxxx	XXX 3727 xxxx 1
Xxxxxxxxxx xxxxxx (x výjimkou xxxx)	XXX 3727 xxxx 2
Xxx	XXX 15648

XXXXXXX VII

Metody analýzy xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx skladování

Parametr	Metoda
Tuk	ISO 1736
Xxxxxxxxx	XXX 8968 xxxx 1
Xxxx	XXX 5537

XXXXXXX XXXX

Xxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx skladování

1.

Je xxxxx xxxxxxx, xx sýry xxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx, kozího mléka xx buvolího mléka, xxxx ze xxxxx xxxxxx, xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxx neobsahují kasein x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx, x&xxxx;xx xxxxx účelem xx xxxxxxx metoda xxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx mléka se xxxxxxxx xx prokázanou, xxxxx obsah kaseinu x&xxxx;xxxxxxxxx mléka x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx stejný xxxx vyšší x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx v referenčním xxxxxx xxxxxxxxxxx 1 % xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx je xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx.

2.

Xxxxxx xx xxxxxxxxxx kaseinu x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx v sýrech uvedených x&xxxx;xxxxxxxx&xxxx;1 mohou xxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx: x) xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx 0,5&xxxx;%; x) xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx; x) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xx xxxxxx xxxx xxxxx, x&xxxx;xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx-xx xxxxx x&xxxx;xxxx uvedených xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx metody xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx.

Xxxxxxx

XXXXXX PRO ZJIŠŤOVÁNÍ XXXXXXXXX MLÉKA X&xxxx;XXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXX Z OVČÍHO XXXXX, XXXXXX XXXXX NEBO XXXXXXXX XXXXX, XXXX XXXXX XXXXXX, KOZÍHO X&xxxx;XXXXXXXX XXXXX

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX

Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx v sýrech xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx, xxxxxx mléka, xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx, kozího x&xxxx;xxxxxxxx xxxxx izoelektrickou xxxxxxxx γ-kaseinů po xxxxxxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXX XXXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxx xxx citlivé x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, x&xxxx;xxxxxxxxx a zralých xxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx, xxxxxx mléka, xxxxxxxx mléka xxxx xx směsí xxxxxx, xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx k odhalení xxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kaseinů x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (XX.3.4.21.7)

3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx bílkovin

3.4.   Vyhodnocení xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx γ3 x γ2 (xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) xx základě xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx ze xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxx x referenčních xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0&xxxx;% x 1&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxx.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxx-xx xxxxxxxxx jinak, xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x. Xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx polyakrylamidové xxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx 265 ×&xxxx;125 ×&xxxx;0,25&xxxx;xx. Xxxxx se xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx druhy gelu, xxxx xxx nutné xxxxxxx podmínky xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

4.1.   Chemikálie xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx gelů x&xxxx;xxxxxxx močoviny

4.1.1.   Zásobní xxxxxx xxxx

Xx vodě xxxxxxxxx:

4,85&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxx

0,15 x X, X′-xxxxxxxx-xxx-xxxxxxxxxx (XXX)

48,05&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx

15,00&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx (87 % hm.),

doplňte xx 100 xx x xxxxxx xx xxxxxxxxxx v hnědé xxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;XXX.&xxxx;X&xxxx;xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx roztoku xx 30&xxxx;% hm./obj. xxxxxxxxxx x&xxxx;0,8&xxxx;% xx./xxx. XXX, xxx xxxxxxx xxxxxxxx (4,85 x&xxxx;xxxxxxxxxx a 0,15 x&xxxx;XXX) xxxx xxx xxxxxxxxx komerčním roztokem x&xxxx;xxxxxx 16,2&xxxx;xx. Zásobní xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 dnů. Xxxxx xx jeho xxxxxxxx xxxxx xxx 5 μX, xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx s 2 g Amberlitu XX-3 xx dobu 30 minut x xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxx 0,45μx xxxxxxxx.

4.1.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxx

Xxxxxxxxx roztok gelu xxxxxxxxx přísad x&xxxx;xxxxxxxx&xxxx;(*) xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx (xxx 4.1.1).

9,0&xxxx;xx xxxxxxxxx xxxxxxx

24&xxxx;xx β-xxxxxxx

500 μx amfolytu xX 3,5–9,5

250 μx xxxxxxxx xX 5–7

250 μl xxxxxxxx pH 6–8

Xxxxxx xxxxxx promíchejte x&xxxx;xxxxxxxxxx xx dobu dvou xx xxx minut x&xxxx;xxxxxxxxxxxx lázni xxxx xx xxxxx.

Xxxxxxxx: Gelový xxxxxx xx musí xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx (xxx 6.2).

4.1.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx

4.1.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;X, X, X′, X′-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (Xxxxx)

4.1.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;40&xxxx;% xx./xxx. xxxxxxx persíranu xxxxxxxx (XXX)

800 xx XXX xx xxxxxxxx xx xxxx x xxxxxx xx xx 2 xx.

Xxxxxxxx: Vždy xxxxxxxxxx xxxxxxx připravený xxxxxx XXX.

4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxx nebo xxxxxxx parafin

4.3.   Anodový xxxxxx

Xxxxxxxxx 5,77 x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (85&xxxx;% xx.) xx vodě x xxxxxx na 100 xx.

4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx roztok

Rozpusťte 2,00 x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx a xxxxxx vodou na 100 xx.

Xxxxxxxx xxxxxx

4.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx

4.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (25,0 xx xxxxxx xxxxxxxx octové doplněné xxxxx do 100 xx).

4.5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx

4.5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx

4.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xx vodě xxxxxxxxx:

5,75&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx (87&xxxx;% hm.)

24,03 g močoviny

250 mg xxxxxxxxxxxxxxx

x xxxxxxx na 50 xx xxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx; xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx je xxxxx týden.

4.7.   Chemikálie xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxx kaseinů

4.7.1.   Tlumivý xxxxxx xxxxxxxxxx amonného

Titrujte xxxxxxx roztok hydrogenuhličitanu xxxxxxxx 0,2 xxx/x (1,58 x/100 xx xxxx) xxxxxxxxxx 0,05 xxx/x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX, 1,46 g/100 xx) xxxxxxxx uhličitanu xxxxxxxx 0,2 mol/l (1,92 x/100 ml xxxx) xxxxxxxxxxxx 0,05 xxx/x XXXX na xX 8.

4.7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx plasmin (XX. 3.4.21.7), x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx 5 X/xx.

4.7.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx ε-xxxxxxxxxxxxxx určené x&xxxx;xxxxxxxx enzymu

Rozpusťte 2,&xxxx;624&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx ε-xxxxxxxxxxxxxx (6-amino-n-hexankyseliny) xx 100 xx 40&xxxx;% xxx. xxxxxxxx.

4.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx

4.8.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx vysráženého pomocí xxxxxxx x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxx 0&xxxx;% x&xxxx;1&xxxx;% kravského xxxxx xxx získat od Xxxxxx xxx referenční xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx xxx Xxxxxx, B-2440, Xxxx, Xxxxxx.

4.8.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx pomocí xxxxxxx x x xxxxxxx 0&xxxx;% a 1&xxxx;% xxxxxxxxx mléka

Odstředěné xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx syrového buvolího xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx 37&xxxx;°X (2&xxxx;500&xxxx;x, 20 minut). Xx xxxxxxx ochlazení xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx na 6 xx 8 °X xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx vrstva. Xxx xxxxxxxx 1 % xxxxxxxxx přidejte 5,00 ml xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx 495 ml odstředěného xxxxxxxx mléka v kádince x&xxxx;xxxxxx 1&xxxx;x. Xxxxxxx xX xxxxxxx na 6,4 přídavkem zředěné xxxxxxxx xxxxxx (10 %, xx./xxx.). Xxxxxxx xxxxxxx xx 35 °X, xxxxxxxx 100 μl xxxxxxxx syřidla (xxxxxxxx xxxxxxx 1: 10&xxxx;000, xxx 3&xxxx;000 U/ml) x&xxxx;xxxxxxxx xx dobu 1 xxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxxx hliníkovou xxxxx x&xxxx;xxxxxx hodinu xxxx při teplotě 35&xxxx;°X x&xxxx;xxxxxxxx sýřeniny. Xx utvoření sýřeniny xx xxxxxxx mléko xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, aniž xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Lyofilizované mléko xx jemně rozemele xx homogenní prášek. X&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 0&xxxx;% použijte stejný xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx odstředěného xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxx při xxxxxxx – 20&xxxx;°X.

Xxxxxxxx: Před xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx standardů xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx fokusací kaseinů xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxx k barvení xxxxxxxx

4.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx

Xxxxxxxxx 150&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx trichloroctové xx vodě x&xxxx;xxxxxxx xx 1 000 ml.

4.10.   Odbarvovací xxxxxx

Xxxxxx 500 xx xxxxxxxxx x 200 ml xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx 2&xxxx;000 xx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx připravuje xxxxx den xxxxxxx; xxx xxx připravit xxxxxxxxx stejných objemů xxxxxxxxx xxxxxxx 50 % (xxx.) xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx 20 % (xxx.) xxxxxx kyseliny xxxxxx.

4.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxx

4.11.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx roztok (xxxxxxx roztok 1)

X 1&xxxx;000 ml 90 % xxx. xxxxxxxxx rozpusťte xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 45 xxxxx) 3,0 x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxx G-250 (X. X. 42655) a roztok xxxxxxxxxxxx xxxx dva xxxxxxx husté xxxxxxxx xxxxxx.

4.11.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx (zásobní xxxxxx 2)

X&xxxx;1&xxxx;000&xxxx;xx 20 % xxx. xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 5,0&xxxx;x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx.

4.11.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx roztok (pracovní xxxxxx)

Xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxxx xxxxxxxxx 125&xxxx;xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.11.1 x&xxxx;4.11.2).

Xxxxxxxx: Barvicí roztok xx xxxxx xxxxxx x den přípravy.

5.   PŘÍSTROJE X POMŮCKY

5.1.   Skleněné xxxxx (265 x 125 x 4 xx), xxxxxxx xxxxxxx (x xxxxx 15 cm), xxxxxxxxx xxxxxx.

5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxx xxxx (265 ×&xxxx;125&xxxx;xx)

5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxx (280 ×&xxxx;125&xxxx;xx). Xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx pásky (280 ×&xxxx;6 ×&xxxx;0,25&xxxx;xx) (xxx xxxxxxx 1).

5.4.   Elektrofokusační xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx deskou (např. 265 × 125 mm) x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx zdroj (≥ 2,5&xxxx;xX) xxxx automatické xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

5.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx teploty xx xxxx 12 ± 0,5&xxxx;°X

5.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx na 3&xxxx;000&xxxx;x

5.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx proužky (x xxxxx ≥ 265 mm)

5.8.   Plastové xxxxxx nádobky na xxxxxxx a katodový xxxxxx

5.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx (10 ×&xxxx;5&xxxx;xx, x&xxxx;xxxxxxx nebo filtračního xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx)

5.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx misky (xxxx. xxxxx xx xxxxxxxx 280 ×&xxxx;150&xxxx;xx) x&xxxx;xxxxxxxx oceli nebo xxxxxxxx

5.12.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxx 10&xxxx;xx x&xxxx;xxxxxxxxx 8 000 xx 20&xxxx;000 xx/xxx

5.13.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx míchačka

5.14.   Ultrazvuková xxxxx

5.15.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx

5.16.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xx 25 μx

5.17.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx odstředivka xxxx lyofilizátor

5.18.   Termostatem xxxxxx xxxxx xxxxx, nastavitelná xx 35 a 40 ±&xxxx;1&xxxx;°X x&xxxx;xxxxxxxxx

5.19.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx zařízení xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx délce λ =&xxxx;634&xxxx;xx

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

6.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

6.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxx

Xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx 100&xxxx;xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx nebo xxxxxxxxxxxx standardu odpovídající 5&xxxx;x&xxxx;xxxxxx, xxxxxxxx 60&xxxx;xx xxxxxxxxxxx xxxx a obsah xxxxxxxxxxxxx tyčovým xxxxxxxxxxxxxxx (8&xxxx;000 až 10&xxxx;000 xx/xxx). Xxxxxxx xX xx 4,6 zředěnou xxxxxxxxx octovou (4.5.1) x&xxxx;xxxxxxxxxxx (5 xxxxx, 3&xxxx;000&xxxx;x). Dekantujte xxx x&xxxx;xxxxxxxxx a zbytek xxxxxxxxxxxxx xxx 20&xxxx;000 xx/xxx xx 40&xxxx;xx xxxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxx xX xxxxxxxxx xx 4,5 xxxxxxxx kyselinou octovou (4.5.1). Xxxxxxxx 20 ml xxxxxxxxxxxxxx (4.5.2) x&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxxxxx a odstřeďuje (5 xxxxx, 3&xxxx;000&xxxx;x). Špachtlí xxxxxxx xxxxxxxxxx vrstvu, xxxxx xx xxxxxxx xxxx vodnou x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxx (xxx obrázek 2), a obě fáze xxxxxxxxxx. Kasein se xxxxx homogenizuje xx 40 ml xxxxxxxxxxx xxxx (xxx xxxx) x 20 xx xxxxxxxxxxxxxx (4.5.2) a xxxxxxxx se. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xx třikrát). Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x&xxxx;50&xxxx;xx xxxxxxx (4.5.3) a přefiltrujte xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx filtr. Xxxxxx promyjte xxxxx xxxxxxxxxxxx 25 ml xxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx vysušit xx vzduchu xxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxx rozmělněte x&xxxx;xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx: Suché xxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx – 20 °X.

6.1.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx β-xxxxxxx xx γ-kaseiny xxxxxxxxx plasminu

Rozptylte 25 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (6.1.1) x 0,5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx amonného (4.7.1) x xxxx 20 xxxxx xxxxxxxxxxxxx, např. xxxxxxxxxxx. Směs xxxxxxxx xx 40&xxxx;°X x&xxxx;xxxxxxxx 10 μx plasminu (4.7.2), xxxxxxxxxxx a inkubujte 1 xxxxxx při xxxxxxx 40&xxxx;°X xx xxxxxxx třepání. Xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 20 μx xxxxxxx xxxxxxxx ε-xxxxxxxxxxxxxx (4.7.3). Xxxx xxxxxxxx 200&xxxx;xx xxxxx xxxxxxxx x&xxxx;2&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Pro xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx fokusovaných xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx ε-xxxxxxxxxxxxxx&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxxxx x poté xxxxxx xxxxxxxxx x 0,5 xx xxxxxxxxx roztoku xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.6).

6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx

Xx xxxxxxxxx xxxxx (5.1) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx (5.2) x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx xxxxx vody x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx druhou, xxxxx fólii (5.3) x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (0,25&xxxx;xx) xx xxxxx skleněnou xxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxx uložte vodorovně xx nivelační stolek.

K xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx (4.1.2) xxxxxxxx 10 μx Temedu (4.1.3.1), protřepejte x&xxxx;xxxxxxxx 10 μx roztoku XXX (4.1.3.2); xxxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx nalijte xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxx nosné xxxxx xxxx (xxxxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxxx dolů) přiložte x&xxxx;xxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx xxx, xxx xx xxxx xxxxxxx vytvořila xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxx (xxxxxxx 3). Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx a položte xx xx tři xxxxx xxxxxxxx xxxxx, aby xx xxxxxxxx. Po xxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxx xx 60 minutách) xxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxx gel xxxxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxx xxxx tak, xx skleněné xxxxx xxxxxxxxx. Zadní xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, aby se xxxxxxxxxx xxxxxx gelu x&xxxx;xxxxxxxx. „Xxxxxx xxxxxxx“ xxxxxxx xx xxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxx xx xxxxxxxxxx (xxxxxxx xx xxxx xxxxx).

Xxxxxxxx: Krycí xxxxx s distančními xxxxxxxx xxx použít xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxx xxx může xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx; je xx xxxxxx v případě xxxxxxxxx počtu xxxxxx xxxx v případě xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx elektroforetického zařízení (xxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxxx 4,5 × 5 cm).

6.3.   Izoelektrická fokusace

Nastavte xxxxxxxx na 12 °X. Xxxxx xxxxxx xxxxx fólie xxxx xxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (4.2). Xxxxxxx přiložte „xxxxxx xxxxxxx“ nosnou fólií xxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx bubliny. Xxxxxxxxxx xxxxxxx otřete x&xxxx;xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx napusťte xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.3, 4.4), xxxxxxxxx na délku xxxx a uložte xx xxxxx (vzdálenost xxxxxxxx 9,5&xxxx;xx).

Xxxxxxxx izoelektrické xxxxxxxx

6.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx gelu 265 ×&xxxx;125 ×&xxxx;0,25&xxxx;xx

Xxxx	Xxxx (xxx)	Xxxxxx (X)	Xxxxx (xX)	Xxxxxx (X)	Xxxxx/xxxxxx (Xx)
1. Xxxxxxxxx fokusace	30	max. 2 500	max. 15	konstantní 4	xxx 300
2. Fokusace vzorku (7)	60	max. 2 500	max. 15	konstantní 4	xxx 1&xxxx;000
3. Xxxxxxx xxxxxxxx	60	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 5	xxx. 20	xxx 3&xxxx;000
	40	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 6	xxx. 20	xxx 3&xxxx;000
	30	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 7	xxx. 25	xxx 3&xxxx;000

Xxxxxxxx: Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx, hodnoty xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx musí být xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx upraveny (xxxx. hodnoty proudu x&xxxx;xxxxxxx se xxxxxxxxxxx, xxxxxxx-xx se gel x&xxxx;xxxxxxxxx 265 ×&xxxx;125 ×&xxxx;0,5&xxxx;xx).

6.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (2 xxxx 5,0 ×&xxxx;4,5&xxxx;xx, elektrody xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx na gel.

Fáze	Napětí	Proud	Příkon	Teplota	Volty/hodiny
1. Předběžná xxxxxxxx	1&xxxx;000 X	10,0 mA	3,5 X	8 °X	85 Xx
2. Xxxxxxxx xxxxxx	250 V	5,0 xX	2,5 X	8 °X	30 Vh
3. Fokusace	1 200 X	10,0 mA	3,5 X	8 °X	80 Vh
4. Fokusace	1 500 V	5,0 xX	7,0 X	8 °X	570 Xx

Xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxx 2 xxxxxx xxx 0 Xx.

Xxxxxxxxx xxxxxx xx fázi 2 odstraňte xxx 30 Vh.

6.4.   Barvení xxxxxxxx

6.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxx po xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx a xxx se xxxxx xxxxx do barvicí/odbarvovací xxxxx xxxxxxxx 200&xxxx;xx xxxxxxxx (4.9). Xxx x xx xxxxxxxx 15 minut xx xxxxxxx třepání.

6.4.2.   Praní x&xxxx;xxxxxxx xxxxxx xxxxx

Xxxxxxx xxxx xxxxxx dekantujte x xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx po xxxx 30 xxxxxx xxxx xx 100 xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.10) Xxxxxxxxxxx roztok dekantujte, xxxxx naplňte 250&xxxx;xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.11.3) x xxx xxxxxx xx mírného xxxxxxx xx dobu 45 xxxxx xxxxxxxxx.

6.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx

Xxxxxxx xxxxxx dekantujte x&xxxx;xxxxxxx desku xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx 30 xxxxxx xxxx xx 100&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.10). Xxxx 15 xxxxx xxxxxxxxxxxxx x&xxxx;200&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx; xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx až xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx čiré a bezbarvé. Xxxxxxx desku xxxxx xxxxxxxx destilovanou xxxxx (2 × 2 xxxxxx) x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx (2 xx 3 xxxxxx) nebo xxxxxx xxxxxxxxxx vlasů (10 xx 15 xxxxx).

Xxxxxxxx 1: Xxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx 20&xxxx;°X. Vyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx 2: Pokud xxxxxxxxxxxxxxx citlivější xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. Xxxxxx Xxxxxxxx Xxx, Xxxxxxx, Xxxxxxxxx Xxxxxxx, xxx x. 17-1150-01), xxxx xxx xxxxxxxxx vzorky xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x xxxxxx 5 xx/xx.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX

Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx proteinových xxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku s xxxxxxx referenčních xxxxxxxxx x xxxxxxxx gelu. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx vyrobených x xxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx ze xxxxx xxxxxx, xxxxxx x buvolího xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx γ3- a γ2-kaseinů, xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx body xx nacházejí v xxxxxxx xxxx pH 6,5 x xX 7,5 (xxxxxxx 4x, x, xxxxxxx 5). Xxxxxxxx xxx je xxxxx xxx 0,5&xxxx;%.

7.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxx xxxxxxxx hodnocení xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx vzorků x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx u xxxxxxxx, xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx γ2- a γ3-xxxxxxx (viz „γ2 X,X,X“ a „γ3 X,X,X“ xx xxxxxxxxx 4x, x x xxxxxxx 5) xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx posoudit xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxx xxxx xxxxx xxx 1&xxxx;% xxxx xx xxxx 1&xxxx;%) x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx γ3- x&xxxx;γ2-xxxxxxx (xxx „γ3 X“ x&xxxx;„γ2 X“ xx xxxxxxxxx 4&xxxx;x, x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxx 5) x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx standardech x&xxxx;xxxxxx 0 % x&xxxx;1&xxxx;% (xxxxxx, xxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxx).

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxx je xx možné, xxxxxxxx xxx stanovení xxxxxx xxxx plochami xxxx xxxxxxxx γ2- x&xxxx;γ3-xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxx ovčích, xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx γ2- x&xxxx;γ3-xxxxxxx (xxx xxxxxxx 5) xxxxxxxxxxxxx (5.19). Tuto xxxxxxx xxxxxxxxxx s poměrem xxxxx píků γ2- x γ3-xxxxxxx x 1&xxxx;% referenčním xxxxxxxxx (xxxxx, kozím) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx standardu (xxxxxxx) analyzovaných u xxxxx xxxx.

Xxxxxxxx: Xxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx existuje xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx γ2- x γ3-xxxxxxx x 1&xxxx;% xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x 0&xxxx;% xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. V opačném xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx optimalizovat při xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxx xxxxxx.

Xxxxxx xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxx hovězích γ2- x γ3-kaseinů xxxx xxxxxxxxxxx poměrů ploch xxxx jsou xxxxxx xxxx větší xxx xxxxxxx odpovídající 1&xxxx;% xxxxxxxxxxxx standardu.

8.   LITERATURA

Addeo F., Xxxx X., Xxxxxxxx X., Stingo X., Xxxxxxx X., Xxxxxx X, Xxxxxx X., Xx Xxxxxx A., Xxxxx A.: Xxx xx xxxxxxx xx&xxxx;xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxx milk in xxxxx xxx/xx caprine xxxxxx xx gel xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx γ2-xxxxxxx.&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxx 45, 708–711 (1990).

Xxxxx X., Xxxxxxx M.A., Xxxxxxxx X., Xxxx X., Spagna Musso X., Bocca X., Xxx Xxxxxxx L.: X control xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxx&xxxx;xx ewe xxx xxxxx buffalo xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Milchwissenschaft 50, 83–85 (1995).

Krause X., Xxxxxx X, Xxxxxxxxxxxx X.: Sensitive xxxxxxxxx of cow xxxx&xxxx;xx ewe xxx xxxx xxxx&xxxx;xxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx — xxx xxxxxxx xxxxxxxxx/xxxxxxxxxxx xX xxxxxxxx — isoelectric xxxxxxxx xx γ-caseins using xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx. in: Electrophoresis-Forum 89 (X. X. Xxxxxx, ed.) xx 389-393, Xxxx-Xxxxxx, Xüxxxxx (1989).

Xxxxxx Ι., Xxxxxx X.-X., Kaiser X.-X.: Xxxxxxxx xxx Xxxxxxxx xx Schaf xxx Xxxxxxxxxxx xxx. -käse xxxxx xxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxxxxxx. X. Xxxxxxx. Xxxxxx.&xxxx;Xxxxxx. 174, 195–199 (1982).

Radola X.X.: Ultrathin-layer xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 50-100&xxxx;μx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx films. Electrophoresis 1, 43–56 (1980).

Obrázek 1

Xxxxxxxxxxx výkres xxxxx xxxxx

Xxxxxxx 2

Kaseinová xxxxxx xxxxxxxx xxxx vodnou x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx

Xxxxxxx 3

Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx gelů

a = xxxxxxxxx páska (0,25&xxxx;xx); x = xxxxx xxxxx (5.3); x, x = xxxxxxxx xxxxx (5.1); x = xxxxxx roztok (4.1.2); f = xxxxx fólie xxxx (5.2).

Xxxxxxx 4a

Izoelektrická xxxxxxxx xxxxxxx ze xxxx x&xxxx;xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, s různým xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

% XX = xxxxxxxx xxxxxxxxx mléka, X&xxxx;= xxxxxxx, X&xxxx;= xxxx, X&xxxx;= kozí

Na obrázku xx znázorněna xxxxx xxxxxxxx xxxx XXX.

Xxxxxxx 4x

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx sýrů xxxxxxxxxx xx směsí xxxxxx, xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx plasminem, s různým xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

% XX = procento xxxxxxxxx mléka; 1 + = vzorek x xxxxxxx 1 % xxxxxxxxx mléka a x xxxxxxxxx čistého xxxxxxxx xxxxxxx ve xxxxxx dráhy. C = xxxxxxx, X&xxxx;= xxxx, X&xxxx;= xxxx, X&xxxx;= xxxxxx

Xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx XXX.

Xxxxxxx 5

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx referenčních xxxxxxxxx (XXX) x&xxxx;xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx ze xxxxx xxxxxx a kozího xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

x, x = xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 0 a 1 % xxxxxxxxx xxxxx; x-x = vzorky xxxx xxxxxxxxxxxx 0, 1, 2, 3 x 7&xxxx;% kravského xxxxx; X&xxxx;= xxxxxxx, E = xxxx, G = xxxx.

Xxxx xxxxxxx horní xxxxxxxx xxxx XXX při λ = 634 nm.

PŘÍLOHA IX

Hodnocení xxxxxx

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx určené x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx&xxxx;12 nařízení (XX) x.&xxxx;882/2004&xxxx;(*) xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx členského xxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxx výsledkům analýzy

1.

Odběr xxxxxx xx provádí x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx-xx xxxxx ustanovení xxx odběr vzorku, xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx v normě XXX 707„Xxxxx x xxxxxx výrobky – Xxxxxxxx pro xxxxx xxxxxx“,

2.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx o výsledcích xxxxxx xxxxxxxx dostatečné xxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx.

3.

Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx předpisech Xxxx xx odebírají xxxxxxxxxx xxxxxx.

4.

Xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx agentury xxxx nechat xxxxx xxxxxxx nezbytnou xxxxxxx xxxxxxxxx produktu a xxxxxxx xxxxx strana, xxxxx xxxx prohraje. Výše xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx předpokladu, xx&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxx řádně xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx orgánu. Xxxxxxx xxxxx platební agentuře xxxxxx k provedení xxxxxxx xx&xxxx;xxxxx pracovních dnů xx&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx 21 xxx od xxxxxxxx xxxxxxx.

5.

Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxx.

6.

Xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxx xx odběru xxxxxx xxxxxxx, že xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx nebyl správný, xxxxx xxxxxx xx x&xxxx;xxxxx xxxxxxxx zopakuje. Xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx nelze, je xxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx

Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx stanovené xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx metody

V xxxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx intervence x xxxxxxxxxx skladování xxxxxxx xxxxxxxx postupy xxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx používá xxxxxx xxxxxxx xx 3 xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx stanovenými xxxxxxx hodnotami na xxxxxxx xxxxxxx 95 % xxxxxxxxx spolehlivosti xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx závisí xxx xx tom, 1) xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx základě xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxx σx x σX, nebo v případě xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx na xxx, 2) xxx xxxx vypočítána xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx je validována xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx

X&xxxx;xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx σx a směrodatná xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx σX&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx se aritmetický xxxxxx&xxxx; x počtu x opakovaných xxxxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx nejistota (x =&xxxx;2) z  xxxxx:

Xx-xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x vypočítán xx xxxxxx xx xxxxx x = x ₁ + x ₂, x = y ₁ – x ₂, x = x ₁ · y ₂ nebo x = x ₁/y ₂, xxxx se x&xxxx;xxxxxxxx případech xxxxxxxxxx xxxxx běžných xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx stanovené mezní xxxxxxx XX, xxxxxxxx

xxxxx xx xx xx xx, xx xxxxxxx XX xxxxxxxx.

Xxxxx se xxxxxxxx za nevyhovující xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx hodnotě XX, xxxxxxxx

xxxxx xx má xx to, že xxxxxxx XX xxxxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx směrodatné xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx

X&xxxx;xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx v tomto xxxxxxxx, x&xxxx;xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx vnitrolaboratorní xxxxxxxx. Xxxxxxx σx x σ X xx xxxx xx xxxxxx pro xxxxxxx xxxxxxxxx nejistoty X xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx x&xxxx;xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx si X .

Pravidla, jež xx xxxxx xxxxxxxxx xx účelem splnění xxxxxxx xxxxxxxxx mezní xxxxxxx, jsou uvedena x&xxxx;xxxx 1. Xxxxxxxx-xx xx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx stanovené x&xxxx;xxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxx 1.