Plné znění - 32010R0118

„XXXXXXX I

Enzymatické stanovení xxxxxx xxxxxx x xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx glukózy x&xxxx;xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx účinné xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX)

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx

Xxxx xxxxxx xxxxxxxx stanovení xxxxxx xxxxxx a xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxx „škrob“. Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx vysoce xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX) xx enzymatické přeměně xxxxxx x jeho xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxx glukózy xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx rozumí xxxxxxx Z vypočítaná podle xxxx 7.2.1 xxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx obsah xxxxxx x xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx.

Xxxxx škrobu/glukózy xxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx XXX xxxxxxxx (XX) x. 1460/96 xx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx X&xxxx;x jak xx xxxxxxxxx v čl. 2 xxxx 1 xxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxx (xxxx xxxxxxxx), jak xx xxxxxxx xx xxxxxxx 3&xxxx;xxxxxxx IV xxxxxxxx Xxxxxx (XX) č. 1043/2005 (1), se xxxxxxxx xx základě celkového xxxxxx glukózy Z, xxx je xxxxxxxxx x&xxxx;xx. 2 xxxx 2.1 nařízení Xxxxxx (XX) x.&xxxx;904/2008 (2).

Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx v bodě 1 xxxx přílohy xx xxxxxx xxxxxxx E xxxxxxxxxx podle bodu 7.2.2 xxxx přílohy. Xx vyjádřena x&xxxx;% (xx). Odpovídá xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx Z vyjádřenému xxxx škrob. Tato xxxxxxx E xxxx x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxx uvedenými xxxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx

Xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxx ve xxxx. Xxxxx x xxxx xxxxxxxxx produkty xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxx:

Xxxxxxxx s vysokým xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xx vyčeří x xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx XXXX.

Xxxxxxx xxxxx enzymatické xxxxxx xxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxx sacharózy, xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx XXXX, xxx xx xxxxxxxxx opravený xxxxx xxxxxxx.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx

Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxx.

4.1&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx, xxx. 99&xxxx;%.

4.2&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx, xxx. 99&xxxx;%.

4.3&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx, xxx. 99&xxxx;%.

4.4&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx monohydrát, xxx. 99&xxxx;%.

4.5&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx monohydrát, xxx. 99&xxxx;%.

4.6&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx tepelně xxxxx xxxx-xxxxxxx (1,4-xxxx-X-xxxxxx-xxxxxxxxxxxxxxxx) x&xxxx;xxxxxxxxx xxx 31&xxxx;000&xxxx;X/xx (1X xxxxxx 1,0 mg xxxxxxx xx škrobu xx 3 minuty xxx xX 6,9 a xxxxxxx 20&xxxx;°X). Xxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxxxxxx nebo xxxxxxxxx) x xxxxxx xxxxxxxx enzymů. Xxxxxxxxxx xxx teplotě xxx 4&xxxx;°X. Xxxxxxxx lze xxxxxx jiné zdroje xxxx-xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx aktivitou xxxxxx.

4.7&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx (1,4-xxxx-X-xxxxxx-xxxxxxxxxxxxxx) z xxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxx 120 U/mg nebo xxx 70 U/mg (1X xxxxxx 1 xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxxx xxx xX 4,8 x xxxxxxx 60 °C). Tento xxxxx xxxx obsahovat xxxx množství nečistot (xxxx. xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx) a jiných xxxxxxxx xxxxxx (např. xxxxxxxxx). Skladování xxx xxxxxxx xxx 4&xxxx;°X. Xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx enzymu.

4.8   Dihydrát xxxxxx xxxxxxxxxxx, x.x.

4.9&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxxxx draselný (X4[Xx(XX)]6.3X2X), xxxxx xxxxx.

4.10&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxx xxxxxxx, p.a.

4.11   Ledová xxxxxxxx xxxxxx, minimálně 96&xxxx;% (xxx.).

4.12&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx sodného (0,2&xxxx;xxx/x). 16,4 gramu octanu xxxxxxx (xxx 4.10) xx naváží xx xxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx xx xxxx x xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 1&xxxx;000&xxxx;xx. Xxxxxx xx xx xxxxxx xxxxx a xX xx upraví na 4,7 pomocí xxxxxxxx xxxxxx (s použitím xX xxxxx (bod 5.7)). Xxxxx roztok xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 4 °C xx xxxx xxxxxxxxx 6 xxxxxx.

4.13&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxx z práškové xxxxxxxxxxxxxxxx (xxx 4.7) x&xxxx;xxxxxxxx tlumivého xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx (xxx 4.12). Xxxxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx x xxxx xxxxxxxxx xxxxxx škrobu xx xxxxxx (xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx 600 U/ml xx xxxxxxxx xxxxxxxx&xxxx;0,5&xxxx;x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx s aktivitou 120 U/mg (xxx 4.7) x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx 100&xxxx;xx na 1&xxxx;x škrobu ve xxxxxx). Roztok xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxxx.

4.14&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xx vodné xxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxxx, sacharózy, xxxxxxx x xxxxxxx, xxxxx se xxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx metodou HPLC.

4.15   Činidlo x xxxxxxxx (Xxxxxxxxx xxxxxxx I). Xx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx 219,5 gramu xxxxxx zinečnatého (xxx 4.8) xx xxxx. Xxxxxxx xx xx xxxxxxx baňky x xxxxxx 1&xxxx;000&xxxx;xx x xxxxx se 30 ml xxxxxxxx xxxxxx (4.11). Xxxxxxxx se xxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxx vodou. Tento xxxxxx lze xxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx používat xx xxxx xxxxxxx 6 xxxxxx. X xxxxxxxx xxx použít x xxxx xxxxxxx rovnocenná Xxxxxxxxx činidlu.

4.16   Činidlo k xxxxxxxx (Xxxxxxxxx xxxxxxx XX). Ve xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxx 106,0 gramu xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (XX) (xxx 4.9) xx xxxx. Xxxxxxx xx xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxx 1&xxxx;000&xxxx;xx. Xxxxxxxx xx xxxxxxx x xxxxxx xx xxxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxxx xxx xxx skladování xxx xxxxxxxxxxx teplotě xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx 6 měsíců. X xxxxxxxx lze xxxxxx i xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx Xxxxxxxxx xxxxxxx.

4.17&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxx HPLC. Xxxxxxxx se mobilní xxxx, která xx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxx XXXX. Xxx xxxxxxx xxxxxx s xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxx xx xxxx. xxxxxxxx xxxxxxx fází xxxx xxxx a xxxxxxxxxxxx (xxx XXXX).

5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx a xxxxxxx

5.1&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx.

5.2&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx, xxxx. 185&xxxx;xx.

5.3&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx 0,45&xxxx;μx, xxxxxx xxx vodné xxxxxxx.

5.4&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxxx vzorkovač HPLC.

5.5   Odměrné xxxxx x objemu 100&xxxx;xx.

5.6&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx injekční xxxxxxxxx, 10&xxxx;xx.

5.7&xxxx;&xxxx;&xxxx;xX xxxx.

5.8&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx.

5.9&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx s nastavitelnou xxxxxxxx 60&xxxx;°X x 90&xxxx;°X.

5.10&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx XXXX xxxxxx xxx analýzu cukrů.

6.   Postup

6.1   Příprava xxxxxx pro xxxxxxx xxxxx produktů

Produkt se xxxxxxxxxxxx.

6.2&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxx xx odhadne xxxxx xxxxx o přísadách x podle xxxxxxxx xxxxxxx XXXX (xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx glukózy) x nepřesáhne:

Vzorek se xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx na 0,1&xxxx;xx.

6.3&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxxxxxx

Xxxxx zkouška xx xxxxxxx xxxxxx xxxxx analýzy (podle xxxx 6.4) bez xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxx výpočtu xxxxxx škrobu (bod 7.2).

6.4&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx

6.4.1&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx (bod 6.2) xx naváží xx xxxxxxx xxxxx (xxx 5.5) x xxxxx xx asi 70&xxxx;xx xxxxx vody.

Po xxxxxxxxxx xxxx vytvoření xxxxxxxx xx xxxxx 50 xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxx-xxxxxxx (xxx 4.6) x xx xxxx 30 xxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx 90&xxxx;°X xx vodní xxxxx (bod 5.9). Xx xxxxx xxxxx xx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx na xxxxxxx 60&xxxx;°X x xxxxx xx 5 ml roztoku xxxxxxxxxxxxxxxx (xxx 4.13). X vzorků, xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xX xxxxxxxxx roztoku, xx xxxxxxxxxx xX x x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xx 4,6 xx 4,8. Xxxxx xx reagovat xx xxxx 60 xxxxx xxx xxxxxxx 60&xxxx;°X. Xxxxxx xx xxxxxxx na xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

6.4.2&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx

Xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xx nutné vyčeřit xxxxxxxx 1 ml Xxxxxxxxx xxxxxxx X (xxx 4.15) xx xxxxxxx vzorku. Xxxxxxxx xx x přidá xx 1&xxxx;xx Xxxxxxxxx xxxxxxx XX (xxx 4.16). Xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx.

6.4.3&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx XXXX

Xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxx xx xxxxx xx xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx a xxxxxxxxxxx xxxx skládaný xxxxx (xxx 5.2). Xxxxxxx xxxxxx xx xxxx.

Xxxxxxxx xx přefiltrují xxxx injekční xxxxx (xxx 5.3) xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (bod 5.6) xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxx do lahviček (xxx 5.4).

6.5&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxx

XXXX xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxx XXXX xxxxxxx xxxxxxxx stopy xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx a výsledkem xx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxx glukózu.

7.   Výpočet x xxxxxxxxx výsledků

7.1   Výpočet xxxxxxxx HPLC

Pro xxxxxxx xxxxxx škrobu jsou xxxxxxxxx výsledky xxxx xxxxxx HPLC, tj. xxxxx přítomné ve xxxxxx před xxxxxxxxxxxx xxxxxxx („xxxxx xxxxx“) x xx xxxxxxxxxxx xxxxxx (xxx xx xxxxxxx v této metodě). Xx xxxxx xxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx, xxx xxxx xxxxx xxxxxxx opravu x xxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx.

Xxx xxxxxxx XXXX se xxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx a xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx s referenčními xxxxxxx (xxx 4.14). Xx&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxx (x/100&xxxx;xx) xx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (g/100 ml) zjištěná xxx xxxxx zkoušce. Xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx (x xxxxx/100&xxxx;x vzorku) x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xx:

7.2&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx xxxxxx

7.2.1&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx „X“

Xxxxx je xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx (Fe) xxxxx než xxxxx xxxxxxxx xxxx enzymatickou xxxxxxx (X), xxxxxxx xx, že sacharóza xxxxxxxx ve xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx fruktózu a xxxxxxx. Xx znamená, xx xx provede xxxxxx o xxxxxxxxx xxxxxxx (Xx – X).

X, konečný xxxxx xxxxxxx po xxxxxx x&xxxx;x/100&xxxx;x:

X = (Xx xxx) – (Xx – X)

7.2.2&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxx

X, xxxxx „xxxxxx“ x&xxxx;x/100&xxxx;x:

X = [(Xx xxx) – (Xx – X)] × 0,9

8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx

X&xxxx;xxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx údajů o xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx 2 xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx metody popsané x&xxxx;xxxx příloze.

Výsledky xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxxxx)

Xxxxxxxxxxxxxxx zkouška xxxx xxxxxxxxx x xxxx 2008 xx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx bylo xxxxxxxxx xxxxx Protocol for xxx design, xxxxxxx xxx interpretation xx xxxxxx-xxxxxxxxxxx xxxxxxx (Xxxxxxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxxxxx x xxxxxxxxxxxx studií xxxxxxxxx metod), X. Xxxxxxx, (xxxxxxxxx zpráva XXXXX), Pure &xxx; Xxxx. Xxxx., Xxx. 67, Xx 2, x.&xxxx;331–343, 1995.

Xxxxx o xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx x xxxxxxx.