Plné znění - 32018R0150

Dodatek X

XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXXX&xxxx;XXXXXXXXXXX XXXXX

Xxxxxx: XXXX x&xxxx;xxxxxxxxxx fázemi

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX X OBLAST XXXXXXX

Xxxx xxxxxx popisuje xxxxxx kvantitativního xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (XX) x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XX) v sušeném xxxxxxxxxxx xxxxx (XXX) x&xxxx;xx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;XXX.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX

Xxxxx XX + XX: xxxxxxxxxx xxxxxx látky xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx postupem. Xxxxxxxx se vyjadřuje x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (PEDP) xx 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx methanolem x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx PS x&xxxx;XX xxxx xxxxxxxx o-ftaldialdehydu (XXX) metodou XXXX x&xxxx;xxxxxxxxxx fázemi (XX) x&xxxx;xxxxxxxxxxxxx detekcí. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx XX x&xxxx;XX ve xxxxxxxxx xxxxxx porovnáním se xxxxxxxxxxx vzorkem, který xxxxxxxx xxxxx množství XXXX.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxxxxxx xx pouze xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x. Xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx se xxxxx destilovaná xxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx: XXXX o čistotě xxxxxxx 99&xxxx;%

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx – 18&xxxx;°X.

4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx srovnávacích x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx

4.2.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx xxx XXXX

4.2.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx čistoty xxx XXXX

4.2.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx tryptaminu

4.3.   Chemikálie xxx xxxxxxxx x-xxxxxxxxxxxxxxxxxx derivátů

4.3.1.   Hydroxid xxxxx, 12 X xxxxx xxxxxx

4.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx boritá, 0,4 M xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xX xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.3.1) xx 10,0

4.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;2-xxxxxxxxxxxxxxx

4.3.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;x-xxxxxxxxxxxxx (XXX)

4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx rozpouštědla xxx XXXX

4.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx XXXX.

4.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx čistoty xxx XXXX

4.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx čistoty

4.4.4.   Tetrahydrofuran

4.4.5.   Natrium xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx

4.4.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxx

4.4.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx octová.

5.   PŘÍSTROJE X XXXXXXX

5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxx na 0,1&xxxx;xx x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx odečtu xx 1&xxxx;xx

5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 25 x&xxxx;100&xxxx;xx

5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx schopné xxxxxxxx xx 1 xx 10&xxxx;xx

5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx míchačka

5.5.   Dělené xxxxxx xxxxxxx dávkovat 0,2, 0,5 x&xxxx;5&xxxx;xx

5.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxx 10, 50 x&xxxx;100&xxxx;xx

5.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 20 a 100 μx

5.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx xxxxx

5.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx 27&xxxx;000 × g

5.10.   Skleněné xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxx 5 ml

5.11.   Odměrný xxxxx x&xxxx;xxxxxx 25&xxxx;xx

5.12.&xxxx;&xxxx;&xxxx;xX xxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xx 0,1 jednotky pH

5.13.   Zařízení xx XXXX

5.13.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx 1,0 xx/xxx xxx 200 xxxxxx

5.13.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx

5.13.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx kolony xxxxxxx kolonu xxxxxxxx xx xxxxxxx 30&xxxx;°X ± 1&xxxx;°X

5.13.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx délce 330&xxxx;xx x&xxxx;xxxxxx xxxxxx xxxxx 440&xxxx;xx

5.13.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx plochy xxxx

5.13.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx XxXxxxxxxxx® – 100&xxxx;(250 ×&xxxx;4,6&xxxx;xx) nebo xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (X 18), xxxxxxxx xxxxxx 5 μx

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXX XXXXXX

Xxxxxx se odebírají x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx ISO 707.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

7.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx

7.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx 30,0 ± 0,1&xxxx;xx tryptaminhydrochloridu (4.2.3) do xxxxxxx xxxxx xx 100&xxxx;xx (5.6) x&xxxx;xxxxxxx po xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1).

7.1.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx (5.3) xxxxxxxx 1&xxxx;xx xxxxxx xxxxxxx do xxxxxxx xxxxx na 10&xxxx;xx (5.6) x&xxxx;xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1) x&xxxx;xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx 0,15 xX.

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxx xxxxxx

7.2.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx 1,000 ± 0,001&xxxx;x&xxxx;xxxxxx SOM xx xxxxxxx xx 25&xxxx;xx (5.2). Pipetou (5.3) xxxxxxxx 10&xxxx;xx xxxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxx 40&xxxx;°X ± 1 °C x&xxxx;xx xxxx 30 minut xxxxxxxx magnetickou xxxxxxxxx (5.4), aby xx xxxxxxxxxx všechny xxxxxx.

7.2.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx (5.5) přeneste 0,2 ml xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx 10&xxxx;xx (5.6), xxxxxx xxxxxxxx stříkačky (5.7) xxxxxxxx 100 μx 0,15 mM xxxxxxx xxxxxxxxxx (7.1) a doplňte xx značku methanolem (4.2.1). Převracením xxxxxxx xxxxxxxxxxx a vložte xx 15 xxxxx do xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.8).

7.2.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx (5.9) při 27 000 ×&xxxx;x&xxxx;xx xxxx 10 xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx odeberte xx xxxxxxxx nádobky (5.10).

Xxxxxxxx: Do xxxxxxxxx xxxxxxx XX xxxx xxx xxxxxx zkušebního xxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxx 4 °C.

7.3.   Příprava xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx

7.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx 55,4 mg XXXX (4.1) xx xxxxxxx xxxxx xx 50&xxxx;xx (5.6) x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx (5.11) xxxxxxxx xxx 25&xxxx;xx xxxxxxxxxxx (4.2.2). Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx 50 °C ± 1 °C a opatrně xxxxxxxxxxxxx, xxxxx se XXXX xxxxxxxxxx. Baňku xxxxxxxx xx 20 °C, xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1) x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

7.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx (5.3) xxxxxxxx 1&xxxx;xx tohoto roztoku xx xxxxxxx xxxxx xx 100&xxxx;xx (5.6) x&xxxx;xxxxxxx xx značku xxxxxxxxxx (4.2.1). Xxxxxxx (5.3) přeneste 1 ml xxxxxx roztoku xx xxxxxxx xxxxx na 10&xxxx;xx (5.6), přidejte 100 μx (5.7)&xxxx;0,15xX xxxxxxx tryptaminu (7.1) x&xxxx;xxxxxxx po xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Do provedení xxxxxxx XX xxxx xxx roztok xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 4&xxxx;°X.

7.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx derivatizačního xxxxxxx

Xx odměrné xxxxx xx 10 ml (5.6) xxxxxxx 25,0 ± 0,1&xxxx;xx OPA (4.3.4), xxxxxxxx 0,5 ml (5.5) xxxxxxxxx (4.2.1) x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx xx XXX xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxx roztokem xxxxxxxx xxxxxx (4.3.2) x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx (5.7) xxxxxxxx 20 μx 2-xxxxxxxxxxxxxxxx (4.3.3).

Poznámka: Derivatizační xxxxxxx musí být xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx nádobě xxx xxxxxxx 4 °C; xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx dobu jednoho xxxxx.

7.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx pomocí XXXX

7.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.4)

Rozpouštědlo A: Xxxxxx 0,3 mM xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx a roztok 3 xX xxxxxx xxxxxxx (x xxxxxxxx xX upravenou xx 6,5 ± 0,1 xxxxxxxxx xxxxxxx): xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx =&xxxx;558: 440:2 (xxx.).

Xxxxxxxxxxxx X: Methanol

7.5.2.   Doporučený xxxxxx xxxxxxxx:

Xxx (xxx)	Xxxxxxxxxxxx X (%)	Rozpouštědlo X (%)	Xxxxxx (xx/xxx)
Xxxxxxxxx	40	60	0
0,1	40	60	0,1
5,0	40	60	0,1
6,0	40	60	1,0
6,5	40	60	1,0
9,0	36	64	1,0
10,0	20	80	1,0
11,5	16	84	1,0
12,0	16	84	1,0
16,0	10	90	1,0
19,0	0	100	1,0
20,0	0	100	1,0
21,0	40	60	1,0
29,0	40	60	1,0
30,0	40	60	0

Xxxxxxxx: Může xx xxxx, že xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx být xxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx 1.

Xxxxxxx xxxxxx: 30 °X.

7.5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxxxxx: 50 μx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx a 50 μx xxxxxxx xxxxxx

7.5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxx

Xxx každodenním provádění xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 100&xxxx;% rozpouštědlem B po xxxx 15 xxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx X:X = 40:60 x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx 15 minut při xxxxxxx 1 xx/xxx. Xxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2.1).

Xxxxxxxx: Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx dobu xxxxxx xxxxxxxxxx po xxxx 30 xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx x xxxxxx 80:20 (xxx.).

7.5.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx XX + XX xx xxxxxxxxx xxxxxx

7.5.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx analýz při xxxxxxxxx stejných časových xxxxxxx mezi jednotlivými xxxxxx, abyste xxxxxxx xxxxxxxxxx retenční xxxx. Xxx xxxxxxx odezvového xxxxxxx nastříkněte roztok xxxxxxxx standardu (7.3) xx xxxxxxx 5–10 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxx xx nutné xx xxxxxxx 20–25 xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx 100&xxxx;% xxxxxxxxxxxxx X&xxxx;(7.5.1).

7.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx režim

7.6.1.   Pík XXXX

XXXX se xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx píku. Xxxxxx xxxx stanovte xxxxxxxxx xxxx sedly.

7.6.2.   Pík xxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx píku (xxxxxxx 1). Xxxxxx xxxx xxxxxxxx integrací xxxx sedly.

7.6.3.   Skupiny xxxx XX x&xxxx;XX

Xx takto xxxxxxxxx podmínek (obrázek 1) xx PS xxxxxx x&xxxx;xxxxxx dvou xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxx xx xxxxxxx jeden xxxxx pík. XX xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx. Celou xxxxxx každé xxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx, xxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx 1.

8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX X XXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ

Obsah XX + XX xx xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxx:

X =&xxxx;55,36 × ((X₂)/(X₁)) × ((X₁)/(X₂))

xxx:

X	=	xxxxx XX xxxx PE (v xx/100 g prášku) ve xxxxxxxxx vzorku
A1	=	plocha xxxx XXXX xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (7.3)
A2	=	plocha xxxx XX nebo XX xxxxxxx zkušebního vzorku (7.2)
X1	=	xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx vzorku (7.3)
X2	=	xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.2).

9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxxxx: Hodnoty xxx opakovatelnost xxxx xxxxxxxxx podle Mezinárodní xxxxx IDF (*).

9.1.   Opakovatelnost

Relativní směrodatná xxxxxxxx opakovatelnosti, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx pracovník xx xxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx neměla xxxxxxxxx xxxxxxxxx 2&xxxx;%. Jestliže xx xx těchto xxxxxxxx xxxxxxx dvě xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxx než 6&xxxx;% xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx výsledků.

9.2.   Reprodukovatelnost

Jestliže xxx xxxxxxxxxx provedou x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xx xxxxxxx podmínek xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx stanovením, xxxxxxxxx rozdíl xxxx xxxxx xxxxxxxx by xxxxx být xxxxx xxx 11&xxxx;% xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx výsledků.

10.   LITERATURA

10.1.   Resmini X., Xxxxxxxxxx X., Hogenboom X. A., Xxxxxx X., Rampilli M. „Xxxxxxxxx of xxxxxxxxxx&xxxx;xxxxxx xx xxxxxxxx&xxxx;xxxxxx xx XXXX xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxx.“ Xxx. Xxxx. Xxxx.-Xxx.&xxxx;39,395[1988].

Xxxxxxx 1

HPLC xxxxxxxxxxxx XXX-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (XX) x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XX) x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx z rekonstituovaného xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx mléka. Xx xxxxxxxxx integrační xxxxx xxx xxxx PS, XX a tryptamin (xxxxxxx xxxxxxxx).

Xxxxxxx XX

XXXXXXXXXX SYŘIDLOVÉ XXXXXXXXX V SUŠENÉM XXXXXXXXXXX XXXXX URČENÉM PRO XXXXXXX XXXXXXXXXX XX XXXXXXX STANOVENÍ KASEINOMAKROPEPTIDŮ XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX (XXXX)

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX A OBLAST XXXXXXX

Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx syrovátky x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx k veřejnému xxxxxxxxxx xx xxxxxxx stanovení xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX ODKAZ

Mezinárodní norma XXX 707 – Xxxxx x mléčné xxxxxxx – Směrnice xxx xxxxx xxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX

Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx definován xxxx hmotnostní xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx kaseinomakropeptidů.

4.   PODSTATA XXXXXX

—	Xxxxxxxxxxxx sušeného xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx tuku x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx odstředěním nebo xxxxxxxx;

—	Xxxxxxxxx množství kaseinomakropeptidů (XXX) x&xxxx;xxxxxxxxxxxx vysokoúčinnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (HPLC);

—	Vyhodnocení xxxxxxxx získaného u vzorků xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx tvoří xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx známého xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.

5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxxxxxx xx xxxxx chemikálie xxxxxxx x.x. Použitá xxxx xxxx xxx voda xxxxxxxxxxx nebo xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx 240&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXx₃XXXX) ve xxxx x&xxxx;xxxxxxx na 1&xxxx;000&xxxx;xx. Roztok by xxx xxx xxxx x bezbarvý.

5.2.   Eluční roztok, xX 6,0

Rozpusťte 1,74 g fosforečnanu xxxxxxxxxx sekundárního (X₂XXX₄), 12,37&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (KH₂PO₄) x&xxxx;21,41&xxxx;x&xxxx;xxxxxx xxxxxxx (Xx₂XX₄) xxx x&xxxx;700&xxxx;xx vody. X&xxxx;xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xX xx 6,0 xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxx na 1&xxxx;000 xx a homogenizujte.

Poznámka: Xxxxxxx eluentu xxx xxxxxxx xxx, aby xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx výrobce xxxxxxxx materiálů xx xxxxxx.

Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx.

5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx (XX₃XX) x&xxxx;xxxxxx xxxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx pórů 0,45 μx.

Xxxxxxxx: Xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx promývací xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx

5.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx splňující xxxxxxxxx xxxxxx nařízení (xx. [0]).

5.4.2.   Totéž xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5&xxxx;% hm. xxxxxx syřidlové xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (tj. [5]).

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX X POMŮCKY

6.1.   Analytické xxxx

6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx 2&xxxx;200&xxxx;x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxx 50&xxxx;xx

6.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

6.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

6.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx o průměru xxx 7&xxxx;xx

6.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx papíry xxxxxxx xxxxxxx o průměru xxx 12,5&xxxx;xx

6.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx

6.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 10&xxxx;xx (XXX 648, xxxxx X, xxxx XXX/X 835) xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 10,0 ml xx xxx xxxxxx

6.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx dodávat 20,0&xxxx;xx xxxx xxx xxxxxxx xxx 50 °C

6.10.   Termostatická xxxxx xxxxx nastavená xx 25 ± 0,5&xxxx;°X

6.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx na XXXX, xxxxx xxxxx:

6.11.1.

Xxxxxxxx

6.11.2.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx – xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx – o objemu 15 xx 30 μx

6.11.3.

Xxx xxxxxx TSK 2&xxxx;000-XX xx xxxxx (xxxxx 30&xxxx;xx, xxxxxxx xxxxxx 0,75&xxxx;xx), xxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx účinností (xxxx. jedna kolona XXX 2&xxxx;000-XXxx, xxxxx xxxxxx Xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx Xxxxxx GF 250) x&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxx (3&xxxx;xx ×&xxxx;0,3&xxxx;xx) naplněná xxxxxxxxxx X&xxxx;125 xxxx xxxxx xxxxxxxxxx s rovnocennou xxxxxxxxx

6.11.4.

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx 35 ± 1&xxxx;°X

6.11.5.

XX xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx vlnovou xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx 205&xxxx;xx x&xxxx;xxxxxxxxxx 0,008 Å.

6.11.6.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx sedly Poznámka: Xxx xxxxxxxx s kolonami xxxxxxxxxxx xxx laboratorní xxxxxxx, avšak jejich xxxxxxxxxxx schopnost xx x&xxxx;xxxxxx nižší. X&xxxx;xxxxx xxxxxxx je xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx menší xxx 5&xxxx;°X.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXX XXXXXX

7.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxx ISO 707. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx používat xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx uvedené normy.

7.2.   Vzorek xxxxxxxxx takovým xxxxxxxx, xxx nemohlo dojít xx znehodnocení xxxx xxxxx xxxxxxx.

8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX POSTUP

8.1.   Příprava xxxxxxxxxx vzorku.

Sušené xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx objem xx xxx dvakrát větší xxx xxxxx prášku x&xxxx;xxxxx je opatřena xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Nádobku xxxxx uzavřete. Xxxxxx xxxxx důkladně xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

8.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx

Xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (6.2) xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx 50&xxxx;xx xxxxxxx 2,000 ± 0,001&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx.

8.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx a bílkovin

8.3.1.   Ke xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 20,0&xxxx;xx teplé (50&xxxx;°X) xxxx. Xxxxxx rozpusťte xxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx třepačce (6.3). Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx (6.10), xxxxx xx xxxx xxxxxxx neustálí xx 25&xxxx;°X.

8.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx dvou minut xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (6.4)&xxxx;10,0&xxxx;xx xxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (5.1) x&xxxx;xxxxxxx xxx 25&xxxx;°X. Xxxxxxxx xxxxxx xx 60&xxxx;xxxxx xx xxxxx xxxxx (6.10).

8.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx (6.2) xx xxxx 10 minut xxx odstředivé síle 2&xxxx;200&xxxx;x, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx (6.6) x&xxxx;xxxxxxx 5 ml xxxxxxxx xxxxxxx.

8.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

8.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx 15 xx 30 μx xxxxxx xxxxxxxxxx supernatantu xxxx xxxxxxxx (8.3.3) xx zařízení xx XXXX (6.11) x&xxxx;xxxxxxxx 1,0&xxxx;xx xxxxxxxx roztoku (5.2) xx xxxxxx.

Xxxxxxxx 1. X&xxxx;xxxxxxxxxx na xxxxxxxx průměru použitých xxxxx xxxx xx xxxxxxxx výrobce xxxxxx xxx použít x&xxxx;xxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx 2. Xxx xxxxxx xxxxxxxxx promyjte xxxxxx xxxxx. Xxxxx x&xxxx;xxxx xxxxxxxxxxxx eluční xxxxxx (5.2).

Xxxx každým xxxxxxxxxx xx více xxx 24 xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx&xxxx;(5.3) xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxx xxx xxxxxxx 0,2&xxxx;xx za xxxxxx.

8.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx [X] xx získají xx xxxxx chromatogramu, v němž xx xxxxx pík xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx XX takto:

Pík XX:	Xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx x XX asi 12,5 xxxxxx
Xxx III:	Třetí xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx XXX s XX 15,5 xxxxxx

Xxxxxxxx časy xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (xxxxx).

Xxxxxxxxxx (6.11.6) xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx X&xxxx;xxxxxxx xxxx:

XXX:	xxxxxx xxxx II
AIII:	plocha píku XXX

Xxxx xxxxxxxxxxxxx interpretací xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx každého chromatogramu xx účelem xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx způsobených xxx nesprávnou xxxxxx xxxxxxxx, nebo xxxxx, xxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

X&xxxx;xxxxxxx pochybností xxxxxxx zopakujte.

8.5.   Kalibrace

8.5.1.   U xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.4) xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx&xxxx;8.2 xx 8.4.2.

Xxxxxxxx čerstvě xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx CMP xx v prostředí 8&xxxx;% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx obsah xx xxx teplotě 30 °C xxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;0,2&xxxx;% xx xxxxxx.

8.5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx chromatografickým xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx opakovanými xxxxxxxx xxxxxxx (8.5.1) xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.4.2), dokud xx plocha a retenční xxx xxxx odpovídajícího XXX neustálí na xxxxxxxxxxxx hodnotách.

8.5.3.   Stanovte xxxxxxxx xxxxxxx R nastříknutím xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (8.5.1), xxxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxx.

9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX XXXXXXXX

9.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx

9.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx X:

Xxx II:

RII = 100/(XXX[0])

xxx:

XXX	=	xxxxxxxx xxxxxxx xxxx II
AII [0]	=	xxxxxx xxxx XX xxxxxxxxxxxx xxxxxx [0] xxxxxxx x&xxxx;8.5.3

Xxx XXX:

XXXX = X/(XXXX[5] – XXXX[0])

xxx:

XXXX	=	xxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX
XXXX [0] xxx AIII [5]	=	xxxxxx xxxx III xxxxxxxxxxxx xxxxxx [0] x&xxxx;[5] xxxxxxx v 8.5.3
W	=	množství xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx [5], tj. 5

9.1.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xx vzorku [X]

XXX[X] = RII × AII[E]

SIII[E] = XXXX × XXXX[X]

XXX[X] = XXX × XXX[X]

xxx:

XXX [E], XXXX [X], XXX [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxx píků XX, XXX x&xxxx;XX ve xxxxxx [X]
XXX [E], XXXX [X]	=	xxxxxx xxxx XX x&xxxx;XXX ve xxxxxx [X] xxxxxxx x&xxxx;8.4.2
XXX, XXXX	=	xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;9.1.1

9.1.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx XXX xx xxxxxx [X]:

XXXXXX[X] = (XXXXX[X])/(XXXXX[5])

xxx:

XXXXXX [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxxxx čas xxxx III xx xxxxxx [X]
XXXXX [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxxxx čas xxxx XXX xx vzorku [X] xxxxxxx x&xxxx;8.4.2
XXXXX [5]	=	xxxxxxxxx xxxxxxxx čas xxxx III x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx [5] získaný x&xxxx;8.5.3

9.1.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxxx retenčním xxxxx píku XXX, xx. XXXXXX [E] x&xxxx;xxxxxxxxx přidané xxxxxx xxxxxxxxx xx do xxxxxxxx 10 % xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx

—	xxx xxxxxx xxxxxxxxx > 5&xxxx;% xx XXXXXX [E] &xx;&xxxx;1,000;

—	xxx xxxxxx xxxxxxxxx ≤&xxxx;5&xxxx;% xx XXXXXX [X] ≥&xxxx;1,000.

Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx RRTIII xx ± 0,002.

Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx XXXXXX [0] xxx málo liší xx 1,034. Podle xxxxx kolon xx xxxx xxxxxxx xxxxxx 1,000, xxxxx xxxx xxxx xxx xxxxx xxx 1,000.

9.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx procenta xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx ve xxxxxx:

X = XXXX[X] – [1, 3 + (XXXX[0] – 0, 9)]

xxx:

X	=	xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx [X];
XXXX [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX xxxxxxxxxx xxxxxx [X] získaná xxxxx 9.1.2;
1,3	=	xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX xxxxxxxxxx v gramech xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx v nezfalšovaném xxxxxxx xxxxxxxxxxx mléce různého xxxxxx. Xxxx xxxxx xxxx xxxxxxx experimentálně
SIII [0]	=	xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx plochu xxxx XXX, xxxxx xx xxxxx XXXX&xxxx;×&xxxx;XXXX[0]. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x&xxxx;9.1.1 a 8.5.3;
(SIII [0]&xxxx;–&xxxx;0,9)	=	xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx 1,3, xxxxxxxx XXXX [0] není xxxxx 0,9. Experimentálně xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX xxxxxxxxxxx xxxxxx&xxxx;[0] rovna 0,9.

9.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

9.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx, xxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx provedl xxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx xxxxx pracovník xx xxxxxxx xxxxxxxxx, by xxxxx překročit 0,2 % xx.

9.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx dvou xxxxxxx laboratořích x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku by xxxxx překročit 0,4&xxxx;% xx.

9.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx

9.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xx-xx relativní plocha xxxx III XXXX [X] vyjádřena x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxx syrovátky xx 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx, ≤ 2,0 + (XXXX[0] – 0,9)

xxx

2,0	xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx pro relativní xxxxxx píku III x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx XXX, xx. 1,3, k nejistotě x xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx a x reprodukovatelnosti metody (9.3.2);
(XXXX [0] – 0,9)	xx oprava, xxxxx xxxx xxx provedena, xxxxxxxx je xxxxxx XXXX [0] jiná xxx 0,9 (xxx xxx 9.2).

9.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX XXXX [E] &xx; 2,0 + (SIII[0] – 0,9) x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxx píku II XXX [X]&xxxx;≤&xxxx;160, stanovte xxxxx syřidlové xxxxxxxxx xxxxx xxxx 9.2.

9.4.3.   Je-li xxxxxxxxx plocha píku XXX SIII [X] &xx; 2,0 + (XXXX[0] – 0,9) x relativní plocha xxxx II SII [X]&xxxx;≤&xxxx;160, xxxxxxxx celkový xxxxx xxxxxxxx (X %). Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx 1 x 2.

9.4.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx vzorků xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx mléka x&xxxx;xxxxxxx celkovým xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxx 1 x&xxxx;2.

Xxxx přímka xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx čtverců.

Čárkovaná xxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX, a to x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxx, xx nebude xxxxxxxxxx x&xxxx;90&xxxx;% případů.

Rovnice xxxxxxxxxxx přímek x xxxxxxx 1 x 2 xxxx:

XXXX = 0,376 X % – 10,7	(xxxx 1)
XXXX = 0,0123 XXX [X] + 0,93	(graf 2)

xxx:

XXXX	xx relativní plocha xxxx XXX xxxxxxxxx xxx podle celkového xxxxxx bílkovin, xxxx xxxxx relativní xxxxxx xxxx XXX [E],
P %	je xxxxxxx xxxxx bílkovin xxxxxxxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxx,
XXX [X]	xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxx 9.1.2.

Xxxx xxxxxxx xxxx rovnocenné xxxxx 1,3 xxxxxxxxx v xxxx 9.2.

Xxxxxx (T1 x X2) mezi xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XXXX [X] x xxxxxxxxx plochou XXXX xx xxx těmito xxxxxx: X1 =&xxxx;XXXX[X]&xxxx;– [(0,376 X% – 10,7) + (XXXX[0] – 0,9)]X2 = XXXX[X] – [(0,0123 XXX[X] + 0,93) + (SIII[0] – 0,9)].

Xxxx-xx T1 x/xxxx X2	xxxxx nule xxxx xxxxx xxx xxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx-xx T1 x X2	xxxxx než xxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx přítomna.

Obsah syřidlové xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxx vzorce: X = X2 + 0,91

xxx:

0,91 je xxxxxxxxxx xx svislé ose xxxx plnou a přerušovanou xxxxxxx.

Xxxxxxx XXX

XXXXXXXXX SUŠINY XX XXXXXXXXX XXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXXX ODSTŘEDĚNÉM MLÉCE

1.   PŘEDMĚT: XXXXXXXXX PŘÍDAVKU XXXXXX XX XXXXXXXXX XXXXXXXXX XX&xxxx;XXXXXXXX XXXXXXXXXXXX XXXXX

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX XXXXX: XXXXXXXXXXX XXXXX XXX 707

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX

Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx jako xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx postupem xxxxx xxxxxx kaseinomakropeptidů.

4.   PODSTATA XXXXXX

Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx X&xxxx;xxxxxxxxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx s obrácenými fázemi (xxxxxxx XXXX). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx se provádí xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, které xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx mléko xxx přídavku nebo x&xxxx;xxxxxxxxx známého xxxxxxxx xxxxxx syrovátky. Pokud xx xxxxxxxx xxxxx xxx 1&xxxx;% xx., xx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx syrovátky xxxxxxxxx.

5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x. Xxxxxxx xxxx musí xxx voda destilovaná xxxx voda nejméně xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxx mít spektroskopickou xxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxx pro XXXX.

5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx 240&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (CCl₃COOH) xx xxxx x&xxxx;xxxxxxx xx 1&xxxx;000&xxxx;xx. Roztok by xxx xxx čirý x xxxxxxxx.

5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx X&xxxx;x&xxxx;X

Xxxxxx X: Xxxxxx 150 xx acetonitrilu (CH₃CN), 20 ml xxxxxxxxxxxx (XX₃XXXXXX₃) x 1,00 xx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (XXX, XX₃XXXX) do xxxxxxx xxxxx a xxxxxxx xx 1 000 xx xxxxx.

Xxxxxx X: Xxxxxx 550 xx xxxxxxxxxxxx, 20 xx xxxxxxxxxxxx a 1,00 xx TFA xx xxxxxxx baňky na 1&xxxx;000 xx x xxxxxxx xx 1&xxxx;000 xx xxxxx. Xxxxxx xxxxxx před použitím xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μm.

5.3.   Uchování kolony

Po xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X (xxxxxx) x xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx (xxxxxx xx dobu 30 minut). Xxxxxx xx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx.

5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx

5.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (xx. [0]).

5.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx zfalšované xxxxxxxxx 5&xxxx;% xx. xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xx. [5]).

5.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx sušené xxxxxxxxxx xxxxx zfalšované přídavkem 50&xxxx;% xx. sušené xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (tj. [50]).

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX X POMŮCKY

6.1.   Analytické xxxx

6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx 2&xxxx;200&xxxx;x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx o objemu xxx 50&xxxx;xx

6.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

6.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

6.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx o průměru xxx 7&xxxx;xx

6.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx asi 12,5&xxxx;xx

6.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx

6.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxx umožňující dávkovat 10&xxxx;xx (XXX 648, xxxxx A, xxxx XXX/X 835), xxxx xxxxxxxxx systém xxxxxxx xxxxxxx 10,0&xxxx;xx xx xxx minuty

6.9.   Dávkovací xxxxxx xxxxxxx dodávat 20,0&xxxx;xx xxxx při xxxxxxx xxx 50&xxxx;°X

6.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx vodní xxxxx xxxxxxxxx xx 25 ± 0,5&xxxx;°X

6.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xx XXXX, xxxxx xxxxx:

6.11.1.

Xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx gradientem

6.11.2.

Nástřikové xxxxxxxx – xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx, x&xxxx;xxxxxx 100 μl

6.11.3.

Kolona Agilent Xxxxxxxxxxxx Zorbax 300 XX-X3 (xxxxx 25 cm, xxxxxxx xxxxxx 0,46&xxxx;xx), xxxx jiná xxxxxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxx

6.11.4.

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx 35 ± 1&xxxx;°X

6.11.5.

XX xxxxxxxx s proměnnou vlnovou xxxxxx, který xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx při 210&xxxx;xx (v xxxxxxx xxxxxxxxx xx možné xxxxxx xxxxx vlnové xxxxx až xx 220&xxxx;xx) x&xxxx;xxxxxxxxxx 0,02 Å.

6.11.6.

Xxxxxxxxxx s možností xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx sedly Poznámka: Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx teplota xxxxxxxx xxxx než x 1&xxxx;°X, jinak xxxxxxx x příliš xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx XXXX.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXX XXXXXX

7.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxx XXX 707. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx používat xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx způsobem, xxx xxxxxxx xxxxx xx znehodnocení nebo xxxxx složení.

8.   PRACOVNÍ POSTUP

8.1.   Příprava xxxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx mléko xxxxxxxx xx nádobky, xxxxx xxxxx xx xxx dvakrát xxxxx xxx xxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Sušené xxxxx xxxxxxxx promíchejte xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nádobky.

8.2.   Zkušební xxxxx

Xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (6.2) nebo xxxxxx xxxxx xx zátkou xx 50 ml xxxxxxx 2,00 ± 0,001&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx: V případě směsí xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx odpovídala 2,00 g.

8.3.   Odstranění xxxx x&xxxx;xxxxxxxx

8.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 20,0 ml xxxxx (50&xxxx;°X) xxxx. Xxxxxxxxxxxxx třepáním xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (6.3) xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx vložte xx xxxxx xxxxx (6.10), xxxxx se xxxx xxxxxxx neustálí xx 25&xxxx;°X.

8.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx dvou xxxxx xx stálého míchání xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (6.4) xxxxxxxx 10,0 ml xxxxxxx xxxxxxxx trichloroctové o teplotě xxx 25&xxxx;°X (5.1). Xxxxxxxx xxxxxx xx 60&xxxx;xxxxx do xxxxx xxxxx (6.10).

8.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx (6.2) xx xxxx 10 xxxxx xxx odstředivé xxxx 2&xxxx;200&xxxx;x, xxxx xxxxxxxxxxxx přes papír (6.6) a prvních 5&xxxx;xx xxxxxxxx xxxxxxx.

8.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

8.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx XXXX x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx díky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

8.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx XXXX x&xxxx;xxxxxxxxxx fázemi xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxx asi 6&xxxx;xx (xxxxx od bodu, xxx xx stékají xxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx) je xxxxxxxxx xxxxxxxx čas x&xxxx;xxxxx 26 xxxxx ± 2 xxxxxx xxx XXXΑ. Pro xxxxxxxxxxx systémy x&xxxx;xxxxxx xxxxxx xxxxxxx (xxxx. 2&xxxx;xx) xx optimální xxxxxxxx xxx 22 xxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.4) x&xxxx;xxxxxxx 50&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx 100 μx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (8.3.3) do xxxxxxxx xx XXXX, které xxxx xxxxxxxx za xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx 1.

Tabulka 1

Xxxxxxxx referenčního xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx

Xxx (xxx)	Xxxxxx (xx/xxx)	% X	% X	Xxxxxx
Xxxxxxx	1,0	90	10	*
27	1,0	60	40	xxxxxx
32	1,0	10	90	xxxxxx
37	1,0	10	90	xxxxxx
42	1,0	90	10	xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx polohu xxxx XXXΑ.

Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxx (viz 8.4.3), xxx vypočítat xxxxx xxxxxx xxxxxx: % X =&xxxx;10 – 2,5 + (13,5 + (XXxxxX – 26) / 6) * 30 / 27&xxxx;% X = 7,5 + (13,5 + (XXxxxX – 26) / 6) * 1,11

xxx

XXxxxX	:	xxxxxxxx xxx XXXΑ x&xxxx;xxxxxxxxxxx gradientu
10	:	počáteční % X v referenčním xxxxxxxxx
2,5	:	% X xx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx % B x normálním xxxxxxxxx
13,5	:	xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx bodu xxxxxxxxxxxx gradientu
26	:	požadovaný xxxxxxxx xxx CMPΑ
6	:	poměr xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
30	:	% X v xxxxxxxxxx xxxx minus % B xx 27 xxxxxxxx v xxxxxxxxxxx gradientu
27	:	doba běhu xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

8.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx vzorků

Nastříkněte 100 μx xxxxxx odměřeného xxxxxxxxxxxx xxxx filtrátu (8.3.3) xx xxxxxxxx xx XXXX x&xxxx;xxxxxxxx 1,0&xxxx;xx xxxxxxxx roztoku (5.2) xx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx získá x&xxxx;8.4.2. Za xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx X:X =&xxxx;76:24 (5.2). Xxxxxxxx po xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx, xx procento X xx za 27 xxxxx xxxxxx x 5 %. Xxxxx xx spustí xxxxxxxx xxxxxxxx, kterým xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx v xxxx xxxxxxxx 90 % X. Xxxx složení xx udržuje xx xxxx xxxx xxxxx x xx xxxxx xxxxxxxx xx pomocí xxxxxxxxxx xxxxxxxxx složení xxxx změní během xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx. V xxxxxxxxxx xx vnitřním xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 15 xxxxx xx dosažení xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxx 1. Xxxxxxxx xxx CMPA xx měl xxx 26 ± 2 xxxxxx. Xxxx lze xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx podmínek xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx x % B xxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxx prvního xxxxxxxxx xxxx zůstává xx xxxx 5 % X.

Xxxxxxxx 2. Xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx je xxxxxxxxx. Xx xx nezbytně xxxxx pro xx, xxx gradientový xxxxxxx xxxxxx správně fungoval. Xxxxxxxxxx odchylka retenčního xxxx xxxx CMPA xxxx xxx xxxxx xxx 0,1 xxxxxx (x = 10).

Poznámka 3. Xx xxxxxxx xxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorek [5] a použít xxx xxx výpočet xxxxxx xxxxxxxxxx faktoru X (9.1.1).

8.4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (X) xx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xx němž je xxx XXXX xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx 26 xxxxx.

Xxxxx X&xxxx;xxxx XXXX xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (6.11.6). Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx je třeba xxxxxxxxxxx na každém xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx nesprávně xxxxxxxx, xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Je-li xxx XXXX xxxxxxxxxx oddělen xx ostatních xxxx, xxxx by se xxxxxx xxxxxxxxx základní xxxxx mezi sedly. X xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx svislé kolmice xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, jejichž xxxxxxxxx xxx by měl xxx v xxxxxxxxx xxxx XXXX (xxxx xx v xxxx x =&xxxx;0 xxx!). Xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx typ xxxxxxxxx x x společné xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx je xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx účelem xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. X&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýzu xxxxxxxxx.

8.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx

8.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;X srovnávacích xxxxxx (5.4.1 xx 5.4.2) xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx v xxxxxx 8.2 xx 8.4.4. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, protože XXX se v prostředí 8&xxxx;% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx 4&xxxx;°X xxxxxxx xxxxxx xxxxx po dobu 24 xxxxx. V případě xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx pokusů xx xxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx nástřikovém xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxx 8.4.2 xxxx být xxxxxxxxx, xxxxxxxx je % X x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx referenčního xxxxxx (5) xx xxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx na xxxxxxx 1. Xx xxxxx obrázku xxxx xxxx xxxxx XXXX xxx xxxx xxxx. Xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx podobné separace.

8.5.2.   Před xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μl xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx syrovátky [0] (5.4.1).

Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxx x&xxxx;xxxxxxxxx čase XXXX xxxx.

8.5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (8.5.1), xxxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxx.

9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX XXXXXXXX

9.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx

9.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx X:

Xxx XXXX: R = X/X

xxx

X	=	xxxxxxxx xxxxxx píku XXXX
X	=	xxxxx xxxx CMPA
W	=	množství xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx [5]

9.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx procenta xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx

X(X)&xxxx;= X&xxxx;×&xxxx;X(X)

xxx

X(X)	=	xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx vzorku [X]
X	=	xxxxxxxx faktor xxxx XXXX (9.1.1)
X(X)	=	xxxxx xxxx XXXX xxxxxx (E)

Pokud xx X(X) xxxxx xxx 1&xxxx;% x&xxxx;xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxx srovnávacího vzorku [5] menší xxx 0,2&xxxx;xxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

9.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

9.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx mezi výsledky xxxx stanovení, která x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx jeden xxxxxxxxx na stejném xxxxxxxxx, xx neměl xxxxxxxxx 0,2&xxxx;% xx.

9.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxx.

9.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx

Xxx xxxxxxx xx 0&xxxx;% xx 16&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxx vztah x korelačním xxxxxxxxxxxx&xxxx;&xx;&xxxx;0,99.

9.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx

Xxxxx xxxxxxx 1&xxxx;% obsahuje xxxxxxxxx x důvodu xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx 1

Xx—4.6 xxxxxxxx

XXXXXXX XX

Xxxxxx xxxxxxx xxxxx x soukromém xxxxxxxxxx

Xxxxxxxx	Xxxxxx
Xxx&xxxx;(6)	XXX 17189 xxxx XXX 3727 xxxx&xxxx;3
Xxxx	XXX 3727 xxxx 1
Tukuprostá xxxxxx (x výjimkou soli)	ISO 3727 xxxx 2
Xxx	XXX 15648

XXXXXXX VII

Metody xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx mléka x soukromém xxxxxxxxxx

Xxxxxxxx	Xxxxxx
Xxx	XXX 1736
Xxxxxxxxx	XXX 8968 část 1
Xxxx	XXX 5537

XXXXXXX XXXX

Xxxxxx xxxxxxx sýrů x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx

1.

Xx nutné xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx výhradně x&xxxx;xxxxxx xxxxx, xxxxxx mléka xx xxxxxxxx mléka, xxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxx neobsahují xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx, x&xxxx;xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx analýzy xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx kaseinu x&xxxx;xxxxxxxxx mléka x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx vzorku xxxxxxxxxxx 1&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx.

2.

Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxx uvedených x&xxxx;xxxxxxxx&xxxx;1 mohou být xxxxxxxxx xx těchto xxxxxxxx: x) xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx nejvýše 0,5&xxxx;%; x) xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx pozitivní; c) musí xxxxxxxxx detekci xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xx xxxxxx xxxx xxxxx, x&xxxx;xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx podmínek docházet. Není-li xxxxx x&xxxx;xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxx uvedené x&xxxx;xxxxxxx.

Xxxxxxx

XXXXXX XXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXX X&xxxx;XXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXX Z OVČÍHO XXXXX, XXXXXX MLÉKA XXXX XXXXXXXX MLÉKA, NEBO XXXXX OVČÍHO, XXXXXX X&xxxx;XXXXXXXX XXXXX

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX

Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx mléka, xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxxx ze xxxxx xxxxxx, kozího x&xxxx;xxxxxxxx mléka izoelektrickou xxxxxxxx γ-kaseinů xx xxxxxxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXX XXXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxx pro xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx zjišťování xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx, též xxxxxxx xxxxxxxxxx, x&xxxx;xxxxxxxxx a zralých xxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx, xxxxxx mléka, xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxxx a buvolího xxxxx. Xxxx vhodná x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxx xxxxxxx ošetřenými xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx a referenčních standardů

3.2.   Rozpuštění xxxxxxxxxxx kaseinů a proteolýza xxxxxxxxx (XX.3.4.21.7)

3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx fokusace xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxxx

3.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx vybarvených xxxxxxx kaseinu γ3 x γ2 (xxxxx xxxxxxxxxxx kravského xxxxx) xx xxxxxxx porovnání xxxxxxx xxxxxxxxx ze xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0 % x 1&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxx.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxx-xx stanoveno jinak, xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x. Xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx nebo rovnocenné xxxxxxx.

Xxxxxxxx: Následující údaje xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx polyakrylamidové xxxx s obsahem močoviny x&xxxx;xxxxxxxxx 265 ×&xxxx;125 ×&xxxx;0,25&xxxx;xx. Xxxxx se xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxxxx podmínky separace.

Izoelektrická xxxxxxxx

4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxx močoviny

4.1.1.   Zásobní xxxxxx xxxx

Xx xxxx rozpusťte:

4,85 g akrylamidu

0,15 x X, X′-xxxxxxxx-xxx-xxxxxxxxxx (XXX)

48,05&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx

15,00&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx (87&xxxx;% xx.),

xxxxxxx xx 100 ml x xxxxxx do xxxxxxxxxx v xxxxx xxxxxxxx lahvi.

Poznámka: Xxxxx xxxxxxxxx množství neurotoxického xxxxxxxxxx xxx použít xxxxxxxx dostupný, xxxxxx xxxxxxxxx roztok xxxxxxxxxx x&xxxx;XXX.&xxxx;X&xxxx;xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx 30&xxxx;% xx./xxx. xxxxxxxxxx x&xxxx;0,8&xxxx;% xx./xxx. XXX, xxx xxxxxxx xxxxxxxx (4,85 x&xxxx;xxxxxxxxxx a 0,15 x&xxxx;XXX) musí být xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 16,2&xxxx;xx. Xxxxxxx xxxxxx xxx skladovat xxxxxxx 10 xxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxx vyšší než 5 μX, xx xxxxx provést xxxx xxxxxxxxxx promícháváním x 2 x Xxxxxxxxx XX-3 xx dobu 30 minut a xxxx jej xxxxxxxxxxxx xxxx 0,45μm xxxxxxxx.

4.1.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxx

Xxxxxxxxx roztok xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx&xxxx;(*) xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx (xxx 4.1.1).

9,0&xxxx;xx xxxxxxxxx xxxxxxx

24&xxxx;xx β-alaninu

500 μx amfolytu pH 3,5–9,5

250 μx xxxxxxxx xX 5–7

250 μx xxxxxxxx pH 6–8

Gelový xxxxxx promíchejte a odplyňujte xx xxxx xxxx xx tří minut x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx vakuu.

Poznámka: Gelový xxxxxx xx musí xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx (xxx 6.2).

4.1.3.   Roztoky xxxxxxxxxxxx

4.1.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;X, N, N′, X′-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (Temed)

4.1.3.2.   40 % xx./xxx. xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX)

800 xx XXX xx xxxxxxxx xx xxxx x xxxxxx xx xx 2 xx.

Xxxxxxxx: Vždy používejte xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx XXX.

4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx

4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx 5,77 g xxxxxxxx xxxxxxxxxx (85&xxxx;% xx.) xx xxxx x xxxxxx xx 100 xx.

4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx 2,00 x xxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx a xxxxxx xxxxx xx 100 ml.

Příprava xxxxxx

4.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx

4.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (25,0 ml ledové xxxxxxxx octové doplněné xxxxx xx 100 xx).

4.5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx

4.5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx

4.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx bílkovin

Ve xxxx xxxxxxxxx:

5,75&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx (87 % hm.)

24,03 g močoviny

250 mg xxxxxxxxxxxxxxx

x doplňte xx 50 xx xxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx v chladničce; xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx.

4.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx

4.7.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx uhličitanu xxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx 0,2 xxx/x (1,58 x/100 xx xxxx) xxxxxxxxxx 0,05 xxx/x kyseliny xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX, 1,46 g/100 xx) xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 0,2 xxx/x (1,92 x/100 xx xxxx) xxxxxxxxxxxx 0,05 xxx/x XXXX xx xX 8.

4.7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx plasmin (XX. 3.4.21.7), s aktivitou xxxxxxx 5 X/xx.

4.7.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx ε-xxxxxxxxxxxxxx určené x&xxxx;xxxxxxxx enzymu

Rozpusťte 2,&xxxx;624&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx ε-xxxxxxxxxxxxxx (6-xxxxx-x-xxxxxxxxxxxxx) ve 100 xx 40&xxxx;% xxx. ethanolu.

4.8.   Referenční xxxxxxxxx

4.8.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx směsi xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxx 0&xxxx;% x&xxxx;1&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxx xxx získat xx Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx a měření xxxxxxxxxx xxx Xxxxxx, X-2440, Xxxx, Xxxxxx.

4.8.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx buvolího xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x s xxxxxxx 0 % a 1&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx kravského xxxxx xxx teplotě 37&xxxx;°X (2&xxxx;500&xxxx;x, 20 xxxxx). Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx na 6 xx 8 °X xx úplně odstraní xxxxx xxxxxx vrstva. Xxx xxxxxxxx 1 % xxxxxxxxx xxxxxxxx 5,00 ml xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx 495&xxxx;xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx v kádince x&xxxx;xxxxxx 1&xxxx;x. Xxxxxxx xX xxxxxxx na 6,4 xxxxxxxxx zředěné xxxxxxxx xxxxxx (10&xxxx;%, xx./xxx.). Teplotu upravte xx 35 °C, xxxxxxxx 100 μl xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxx 1: 10 000, xxx 3 000 U/ml) x&xxxx;xxxxxxxx po xxxx 1 xxxxxx. Poté xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx 35&xxxx;°X k utvoření xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx sýřeniny xx xxxxxxx mléko xxxxxxxxx pomocí xxxxxxx xxxxxxxxxxx, aniž xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx mléko xx xxxxx rozemele xx xxxxxxxxx xxxxxx. X&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 0&xxxx;% použijte stejný xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx odstředěného xxxxxxxx xxxxx. Referenční xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx – 20 °C.

Poznámka: Před xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx působení xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx

4.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx

Xxxxxxxxx 150&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx vodě x&xxxx;xxxxxxx xx 1&xxxx;000&xxxx;xx.

4.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx 500 xx methanolu x 200 xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xx 2&xxxx;000 xx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx den xxxxxxx; xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx stejných xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 50 % (xxx.) xxxxxxxxx x xxxxxxxxx roztoku 20 % (xxx.) xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

4.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxx

4.11.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx roztok 1)

X 1&xxxx;000 ml 90&xxxx;% xxx. xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 45 xxxxx) 3,0 g brilantní xxxxx Xxxxxxxxx X-250 (C. X. 42655) a roztok xxxxxxxxxxxx přes xxx xxxxxxx husté skládané xxxxxx.

4.11.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx (zásobní xxxxxx 2)

X&xxxx;1&xxxx;000&xxxx;xx 20 % xxx. xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 5,0 g síranu xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx.

4.11.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx roztok (xxxxxxxx xxxxxx)

Xxxxxxxxxxxxx xxxx barvením xxxxxxxxx 125&xxxx;xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.11.1 x&xxxx;4.11.2).

Xxxxxxxx: Barvicí xxxxxx xx třeba xxxxxx x den přípravy.

5.   PŘÍSTROJE X POMŮCKY

5.1.   Skleněné xxxxx (265 x 125 x 4 mm), xxxxxxx váleček (x xxxxx 15 xx), xxxxxxxxx stolek.

5.2.   Nosná xxxxx xxxx (265 ×&xxxx;125&xxxx;xx)

5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxx (280 ×&xxxx;125&xxxx;xx). Xx xxxxx dlouhý xxxxx xxxxxxx pruh xxxxxx xxxxx (280 ×&xxxx;6 ×&xxxx;0,25&xxxx;xx) (viz xxxxxxx 1).

5.4.   Elektrofokusační xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx deskou (např. 265 ×&xxxx;125&xxxx;xx) a vhodný xxxxxxxx zdroj (≥ 2,5&xxxx;xX) nebo automatické xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

5.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 12 ± 0,5&xxxx;°X

5.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 3&xxxx;000&xxxx;x

5.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxx (o xxxxx ≥ 265&xxxx;xx)

5.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx a katodový roztok

5.9.   Aplikátory xxxxxx (10 × 5 mm, x&xxxx;xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx)

5.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx a barvicí xxxxx (xxxx. xxxxx xx xxxxxxxx 280 ×&xxxx;150&xxxx;xx) x&xxxx;xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx

5.12.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx tyče 10&xxxx;xx x&xxxx;xxxxxxxxx 8&xxxx;000 xx 20&xxxx;000 xx/xxx

5.13.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx míchačka

5.14.   Ultrazvuková xxxxx

5.15.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx fólií

5.16.   Mikropipety xx 25 μx

5.17.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx odstředivka xxxx lyofilizátor

5.18.   Termostatem řízená xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 35 x&xxxx;40 ±&xxxx;1&xxxx;°X s třepačkou

5.19.   Densitometrické zařízení xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx λ =&xxxx;634&xxxx;xx

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

6.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

6.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxx

Xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx 100&xxxx;xx xxxxxxx xxxxxxxx sýra nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 5&xxxx;x&xxxx;xxxxxx, xxxxxxxx 60 ml xxxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (8&xxxx;000 až 10&xxxx;000 xx/xxx). Xxxxxxx xX xx 4,6 xxxxxxxx xxxxxxxxx octovou (4.5.1) x&xxxx;xxxxxxxxxxx (5 xxxxx, 3&xxxx;000&xxxx;x). Xxxxxxxxxx xxx x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx 20 000 ot/min xx 40 ml destilované xxxx x&xxxx;xxxxxxxx xX xxxxxxxxx xx 4,5 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.5.1). Přidejte 20&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxxx (4.5.2) x&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx (5 xxxxx, 3&xxxx;000&xxxx;x). Špachtlí xxxxxxx kaseinovou vrstvu, xxxxx xx nachází xxxx vodnou x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxx (xxx obrázek 2), x&xxxx;xxx xxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx xx xxxxx homogenizuje xx 40 xx xxxxxxxxxxx xxxx (xxx xxxx) x 20 xx xxxxxxxxxxxxxx (4.5.2) a xxxxxxxx xx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx, dokud xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx xx xxxxxxx). Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x&xxxx;50&xxxx;xx xxxxxxx (4.5.3) a přefiltrujte xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx filtr. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 25&xxxx;xx dávkami xxxxxxx a nechte vysušit xx xxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxx. Potom xxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx: Suché bílkovinné xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx při xxxxxxx – 20 °C.

6.1.2.   Přeměna β-xxxxxxx xx γ-xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxx 25 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (6.1.1) x 0,5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.7.1) x xxxx 20 xxxxx xxxxxxxxxxxxx, např. xxxxxxxxxxx. Směs xxxxxxxx xx 40 °C x&xxxx;xxxxxxxx 10 μl plasminu (4.7.2), xxxxxxxxxxx a inkubujte 1 xxxxxx xxx xxxxxxx 40&xxxx;°X xx xxxxxxx xxxxxxx. Pro xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 20 μx xxxxxxx xxxxxxxx ε-xxxxxxxxxxxxxx (4.7.3). Xxxx přidejte 200&xxxx;xx xxxxx xxxxxxxx a 2 mg xxxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxx získání xxxxx symetrie fokusovaných xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx po xxxxxxx xxxxxxxx ε-aminokapronové roztok xxxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx v 0,5 xx tlumivého roztoku xxx xxxxxxxxxxx bílkovin (4.6).

6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx

Xx skleněnou xxxxx (5.1) válečkem xxxxxxx nosnou xxxxx xxxx (5.2) x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx ubrouskem xxxx xxxxxxxxxxx. Stejným způsobem xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx (5.3) x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (0,25&xxxx;xx) xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxx. Xxxx druhou xxxxx xxxxxx vodorovně xx nivelační xxxxxx.

X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx (4.1.2) xxxxxxxx 10 μl Xxxxxx (4.1.3.1), protřepejte x&xxxx;xxxxxxxx 10 μl roztoku XXX (4.1.3.2); důkladně xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx nalijte xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx fólie. Xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxx (stranou s fólií xxxxxx xxxx) přiložte x&xxxx;xxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxx pokládejte xxx, xxx xx xxxx xxxxxxx vytvořila xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx tenká xxxxxx xxxx bez xxxxxx (xxxxxxx 3). Xxxxxx xxxxx špachtle nosnou xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx po celé xxxxx x&xxxx;xxxxxxx xx xx xxx další xxxxxxxx desky, xxx xx zatížily. Xx xxxxxxxx polymerace (xxx xx 60 xxxxxxxx) xxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxx, xx skleněné xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx fólie xxxxxxx xxxxxxxx, xxx se xxxxxxxxxx xxxxxx gelu x&xxxx;xxxxxxxx. „Xxxxxx sendvič“ xxxxxxx xx tenké xxxxx x&xxxx;xxxxxx xx xxxxxxxxxx (xxxxxxx xx xxxx xxxxx).

Xxxxxxxx: Xxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx vložkami xxx použít xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxx xxx může xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx; xx xx vhodné v případě xxxxxxxxx počtu vzorků xxxx x&xxxx;xxxxxxx použití xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx zařízení (xxx gely x&xxxx;xxxxxxxxx 4,5 ×&xxxx;5&xxxx;xx).

6.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx fokusace

Nastavte xxxxxxxx na 12 °X. Zadní stranu xxxxx xxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxx xx střed xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (4.2). Xxxxxxx přiložte „xxxxxx xxxxxxx“ nosnou xxxxx xxxxxxxx xxxx, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx otřete x&xxxx;xxxxxxx xxxxx xxxxx. Elektrodové xxxxxxx xxxxxxxx elektrodovými xxxxxxx (4.3, 4.4), xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx a uložte xx xxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxxxx 9,5&xxxx;xx).

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx fokusace

6.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx gelu 265 ×&xxxx;125 ×&xxxx;0,25&xxxx;xx

Xxxx	Xxxx (xxx)	Xxxxxx (X)	Xxxxx (xX)	Xxxxxx (X)	Xxxxx/xxxxxx (Xx)
1. Xxxxxxxxx xxxxxxxx	30	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 15	xxxxxxxxxx 4	xxx 300
2. Xxxxxxxx xxxxxx&xxxx;(7)	60	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 15	xxxxxxxxxx 4	xxx 1 000
3. Konečná xxxxxxxx	60	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 5	xxx. 20	xxx 3&xxxx;000
	40	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 6	xxx. 20	xxx 3&xxxx;000
	30	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 7	xxx. 25	xxx 3&xxxx;000

Xxxxxxxx: Xxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxx nebo šířka xxxx, xxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx musí být xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx se xxxxxxxxxxx, xxxxxxx-xx xx xxx x&xxxx;xxxxxxxxx 265 ×&xxxx;125 ×&xxxx;0,5&xxxx;xx).

6.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx napětí x&xxxx;xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (2 xxxx 5,0 ×&xxxx;4,5&xxxx;xx, elektrody xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx na xxx.

Xxxx	Xxxxxx	Xxxxx	Xxxxxx	Xxxxxxx	Xxxxx/xxxxxx
1. Xxxxxxxxx xxxxxxxx	1&xxxx;000 X	10,0 mA	3,5 X	8 °X	85 Vh
2. Fokusace xxxxxx	250 V	5,0 xX	2,5 X	8 °C	30 Xx
3. Xxxxxxxx	1&xxxx;200 X	10,0 xX	3,5 W	8 °X	80 Vh
4. Fokusace	1 500 X	5,0 xX	7,0 X	8 °X	570 Xx

Xxxxxxxxx vzorku xx xxxx 2 xxxxxx xxx 0 Vh.

Aplikátor xxxxxx ve xxxx 2 xxxxxxxxx xxx 30 Xx.

6.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxx

6.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxx xx xxxxx xxxxx do xxxxxxx/xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 200&xxxx;xx xxxxxxxx (4.9). Gel x ní ponechte 15 xxxxx xx xxxxxxx třepání.

6.4.2.   Praní x&xxxx;xxxxxxx xxxxxx xxxxx

Xxxxxxx beze xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx desku xxxxxxx xxxxxxxxxx po xxxx 30 sekund xxxx xx 100 xx xxxxxxxxxxxxx roztoku (4.10) Xxxxxxxxxxx xxxxxx dekantujte, xxxxx naplňte 250&xxxx;xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.11.3) x gel xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx dobu 45 xxxxx zbarvovat.

6.4.3.   Odbarvení xxxxxx xxxxx

Xxxxxxx xxxxxx dekantujte x&xxxx;xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx po dobu 30 sekund xxxx xx 100 ml odbarvovacího xxxxxxx (4.10). Xxxx 15 minut xxxxxxxxxxxxx x&xxxx;200&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx; xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx dvakrát xx xxxxxxx, dokud xxxx xxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxx. Xxxxxxx desku potom xxxxxxxx destilovanou xxxxx (2 ×&xxxx;2 xxxxxx) x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx na xxxxxxx (2 až 3 xxxxxx) xxxx xxxxxx vysoušečem xxxxx (10 xx 15 xxxxx).

Xxxxxxxx 1: Fixaci, xxxxxxxxx, xxxxxxx a odbarvování xxxxxxxxxx xxx teplotě 20&xxxx;°X. Vyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx 2: Pokud xxxxxxxxxxxxxxx citlivější xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. Silver Xxxxxxxx Xxx, Xxxxxxx, Xxxxxxxxx Xxxxxxx, xxx x. 17-1150-01), xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx plasminem zředěny x xxxxxx 5 xx/xx.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX

Xxxxxxxxx xx provádí xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxx, kozího x xxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx γ3- x γ2-xxxxxxx, xxxxxxx izoelektrické xxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx mezi xX 6,5 a pH 7,5 (xxxxxxx 4x, x, xxxxxxx 5). Xxxxxxxx xxx je xxxxx xxx 0,5&xxxx;%.

7.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxx vizuální hodnocení xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx standardů s xxxxx dosáhnout u xxxxxxxx, xxxxxx a/nebo xxxxxxxx γ2- x γ3-xxxxxxx (xxx „γ2 X,X,X“ a „γ3 X,X,X“ xx xxxxxxxxx 4x, x x xxxxxxx 5) stejné xxxxxx intenzity. Xxxxx xx xxxxxx podmínek xxx xxxxx posoudit xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxx xxxx větší xxx 1&xxxx;% xxxx xx xxxx 1 %) x&xxxx;xxxxxxxxxxxx vzorku xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx γ3- x&xxxx;γ2-xxxxxxx (viz „γ3 X“ x&xxxx;„γ2 X“ xx xxxxxxxxx 4&xxxx;x, x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxx 5) x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 0&xxxx;% x&xxxx;1&xxxx;% (xxxxxx, kozích), xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxx).

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxx xx xx xxxxx, použijte xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx plochami píků xxxxxxxx γ2- x&xxxx;γ3-xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxx a/nebo xxxxxxxx γ2- x&xxxx;γ3-xxxxxxx (xxx xxxxxxx 5) xxxxxxxxxxxxx (5.19). Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x poměrem xxxxx píků γ2- x γ3-xxxxxxx x 1&xxxx;% xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxx, xxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx standardu (xxxxxxx) analyzovaných x xxxxx xxxx.

Xxxxxxxx: Tato xxxxxx funguje uspokojivě, xxxxx existuje xxxxx xxxxxxxxx signál xxxx xxxxxxxx γ2- x γ3-xxxxxxx x 1&xxxx;% xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, avšak xxxxxx v 0&xxxx;% xxxxxxxxxxx standardu. X&xxxx;xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx optimalizovat xxx xxxxxxx dodržení xxxxxx xxxxxxxxxxx v dané xxxxxx.

Xxxxxx xx považován xx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxx hovězích γ2- x γ3-xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx jsou xxxxxx xxxx větší než xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 1 % xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxx X., Xxxx L., Xxxxxxxx X., Xxxxxx X., Xxxxxxx X., Xxxxxx X, Xxxxxx X., Xx Xxxxxx X., Xxxxx X.: Xxx xx xxxxxxx xx&xxxx;xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxx&xxxx;xx ovine xxx/xx xxxxxxx xxxxxx xx gel isoelectric xxxxxxxx xx γ2-xxxxxxx.&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxx 45, 708–711 (1990).

Addeo X., Nicolai X.X., Xxxxxxxx X., Moio X., Xxxxxx Xxxxx X., Xxxxx X., Xxx Giovine L.: X control xxxxxx xx xxxxxx xxxxxx xxxx&xxxx;xx xxx xxx xxxxx buffalo xxxxxx xxxxx immunoblotting. Milchwissenschaft 50, 83–85 (1995).

Xxxxxx X., Berner X, Xxxxxxxxxxxx H.: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx cow xxxx&xxxx;xx ewe xxx xxxx xxxx&xxxx;xxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx — xxx carrier xxxxxxxxx/xxxxxxxxxxx xX xxxxxxxx — xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx γ-xxxxxxx using xxxxxxx as xxxxxx xxxxxxxxx. xx: Xxxxxxxxxxxxxxx-Xxxxx 89 (B. X. Xxxxxx, xx.) xx 389-393, Xxxx-Xxxxxx, München (1989).

Xxxxxx Ι., Belitz X.-X., Kaiser X.-X.: Xxxxxxxx xxx Xxxxxxxx xx Schaf xxx Xxxxxxxxxxx bzw. -xäxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx Fokussierung xx harnstoffhaltigen Xxxxxxxxxxxxxxxxxx. X. Xxxxxxx. Unters. Forsch. 174, 195–199 (1982).

Xxxxxx X.X.: Ultrathin-layer isoelectric xxxxxxxx xx 50-100&xxxx;μx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx plates xx polyester films. Electrophoresis 1, 43–56 (1980).

Xxxxxxx 1

Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx

Xxxxxxx 2

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx

Xxxxxxx 3

Sklápěcí xxxxxxxx xxx xxxxxxxx ultratenkých xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx

x = xxxxxxxxx páska (0,25&xxxx;xx); x = xxxxx xxxxx (5.3); x, x = xxxxxxxx xxxxx (5.1); x = xxxxxx xxxxxx (4.1.2); x = xxxxx xxxxx xxxx (5.2).

Xxxxxxx 4a

Izoelektrická fokusace xxxxxxx ze xxxx x&xxxx;xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, s různým xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

% XX = xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, X&xxxx;= xxxxxxx, E = ovčí, X&xxxx;= xxxx

Xx obrázku xx znázorněna xxxxx xxxxxxxx xxxx XXX.

Xxxxxxx 4x

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xx směsí xxxxxx, xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x&xxxx;xxxxxx xxxxxxx kravského xxxxx

% XX = xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx; 1 + = xxxxxx x xxxxxxx 1 % xxxxxxxxx mléka x x xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx. C = xxxxxxx, X&xxxx;= xxxx, X&xxxx;= xxxx, X&xxxx;= xxxxxx

Xx obrázku je xxxxxxxxxx xxxx separační xxxxxxxxxx xxxx XXX.

Xxxxxxx 5

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (XXX) x&xxxx;xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx ze xxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

x, x = xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 0 x 1&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxx; c-g = xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx 0, 1, 2, 3 a 7&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxx; X&xxxx;= kravské, X&xxxx;= xxxx, X&xxxx;= xxxx.

Xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx XXX při λ =&xxxx;634&xxxx;xx.

XXXXXXX XX

Xxxxxxxxx xxxxxx

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx jakosti

Analýzy xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx&xxxx;12 xxxxxxxx (XX) x.&xxxx;882/2004&xxxx;(*) xxxx určené xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx vzorků a námitky xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx

1.

Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx-xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx ustanovení xxxxxxx x xxxxx XXX 707„Mléko a xxxxxx xxxxxxx – Xxxxxxxx xxx odběr xxxxxx“,

2.

Xxxxxxxxxxx zprávy x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx dostatečné xxxxx, xxxxx umožní xxxxxxxxx výsledků x xxxxxxx s dodatkem.

3.

Pro xxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx předpisech Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

4.

Xxxxx dojde xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx nechat xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx hradí strana, xxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx za předpokladu, xx&xxxx;xxxxxxxxxx duplicitní xxxxxx xxxxxxxx xxxx k dispozici x&xxxx;xxxx xxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxx. Výrobce xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx analýzy xx&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxx dnů xx&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx analýzu xx 21 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx.

5.

Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx považuje xx xxxxxxx.

6.

Xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx pracovních xxx po xxxxxx xxxxxx prokáže, xx xxxxxx xxx odběru xxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxx vzorků xx x&xxxx;xxxxx možností xxxxxxxx. Xxxxx odběr vzorků xxxxxxxxx nelze, xx xxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx

Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx mezní xxxxxxx x xxxxxxx xx xxxxx

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

X xxxxxxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx skladování xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxx vzorků, xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx 3 xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx ze xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Lze xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx vzorek. Xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxx stanovenými xxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxx 95&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxx příslušná směrodatná xxxxxxxx xxxxxx xxx xx xxx, 1) xxx xxxx metoda xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxx σr x σX, nebo x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxx, 2) xxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx. Tento xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx měření xxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx mezinárodní xxxxxxxxxx

X&xxxx;xxxxx xxxxxxx byla xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxxxxxxxx σx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx σX&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx prokázat xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx charakteristikami xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx&xxxx; x xxxxx x opakovaných xxxxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (x = 2) x&xxxx; xxxxx:

Xx-xx konečný xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxx xx xxxxx x = x ₁ + x ₂, x = x ₁ – x ₂, x = y ₁ · y ₂ xxxx x = x ₁/x ₂, xxxx xx x&xxxx;xxxxxxxx případech xxxxxxxxxx xxxxx běžných xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx se xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx stanovené xxxxx xxxxxxx XX, xxxxxxxx

xxxxx xx má xx xx, xx hodnotě XX vyhovuje.

Šarže se xxxxxxxx xx nevyhovující xxxxx xxxxxxx stanovené xxxxx hodnotě XX, xxxxxxxx

xxxxx xx xx xx xx, že xxxxxxx LL xxxxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx směrodatné xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx

X&xxxx;xxxxxxxxx, xxx xxxx použity xxxxxx, xxxxx nejsou xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxxxxx, x&xxxx;xxx nebyla stanovena xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx σr x σ X xx xxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx X xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx opakovatelnosti xxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxx vnitřní xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xx X .

Pravidla, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx stanovené mezní xxxxxxx, jsou xxxxxxx x&xxxx;xxxx 1. Považuje-li xx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx metody xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xx vyhodnotí x xxxxxxx s xxxxx 1.