Plné znění - 32018R0150

Xxxxxxx X

XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX V SUŠENÉM ODSTŘEDĚNÉM XXXXX

Xxxxxx: XXXX x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX X XXXXXX XXXXXXX

Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx kvantitativního xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (PS) x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XX) x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (XXX) x&xxxx;xx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;XXX.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX

Xxxxx XX + PE: xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx vyjadřuje x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx-xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (PEDP) xx 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx methanolem z rekonstituovaného xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx XX a PE xxxx xxxxxxxx o-ftaldialdehydu (XXX) xxxxxxx XXXX x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx (XX) x&xxxx;xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx PS x&xxxx;XX ve xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx vzorkem, který xxxxxxxx známé xxxxxxxx XXXX.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x. Xxxxx není xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxx destilovaná voda xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx: XXXX o xxxxxxx xxxxxxx 99 %

Poznámka: Xxxxxxxxxx xxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx xxx teplotě – 18&xxxx;°X.

4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx srovnávacích x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx

4.2.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx xxx XXXX

4.2.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx čistoty xxx XXXX

4.2.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx

4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx pro xxxxxxxx x-xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

4.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx, 12 X xxxxx roztok

4.3.2.   Kyselina xxxxxx, 0,4 X xxxxx xxxxxx x xxxxxxxx xX xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (4.3.1) xx 10,0

4.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;2-xxxxxxxxxxxxxxx

4.3.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;x-xxxxxxxxxxxxx (XXX)

4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx XXXX

4.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx čistoty xxx HPLC.

4.4.2.   Voda xxxxxxx xxx XXXX

4.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx

4.4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx

4.4.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx dihydrogenfosforečnan

4.4.6.   Octan xxxxx

4.4.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx octová.

5.   PŘÍSTROJE X XXXXXXX

5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx váhy x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxx na 0,1&xxxx;xx x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx xx 1&xxxx;xx

5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 25 x&xxxx;100&xxxx;xx

5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx dávkovat xx 1 xx 10&xxxx;xx

5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

5.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxx xxxxxxx dávkovat 0,2, 0,5 x&xxxx;5&xxxx;xx

5.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxx 10, 50 x&xxxx;100&xxxx;xx

5.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 20 x&xxxx;100 μx

5.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx xxxxx

5.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx 27&xxxx;000 ×&xxxx;x

5.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx asi 5&xxxx;xx

5.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxx o objemu 25 ml

5.12.   pH xxxx s přesností xx 0,1 xxxxxxxx xX

5.13.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xx HPLC

5.13.1.   Gradientový xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx průtoku 1,0 xx/xxx xxx 200 xxxxxx

5.13.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx dávkovač vzorků x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx

5.13.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx kolonu xxxxxxxx xx xxxxxxx 30&xxxx;°X ± 1&xxxx;°X

5.13.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx délce 330&xxxx;xx x&xxxx;xxxxxx xxxxxx xxxxx 440 nm

5.13.5.   Integrátor xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx dat xxxxxxx xxxxx plochy xxxx

5.13.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx XxXxxxxxxxx® – 100&xxxx;(250 ×&xxxx;4,6&xxxx;xx) xxxx rovnocenná xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (X 18), xxxxxxxx xxxxxx 5 μx

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXX XXXXXX

Xxxxxx se xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx XXX 707.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX POSTUP

7.1.   Příprava xxxxxxx xxxxxxxxx standardu

7.1.1.   Navažte 30,0 ± 0,1&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (4.2.3) do odměrné xxxxx xx 100&xxxx;xx (5.6) a doplňte po xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1).

7.1.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx (5.3) xxxxxxxx 1&xxxx;xx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx baňky xx 10&xxxx;xx (5.6) x&xxxx;xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1) x&xxxx;xxxxx získat xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx 0,15 xX.

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx

7.2.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx 1,000 ± 0,001&xxxx;x&xxxx;xxxxxx XXX do xxxxxxx na 25&xxxx;xx (5.2). Xxxxxxx (5.3) xxxxxxxx 10&xxxx;xx xxxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxx 40&xxxx;°X ± 1&xxxx;°X a po xxxx 30 xxxxx xxxxxxxx magnetickou míchačkou (5.4), xxx se xxxxxxxxxx všechny xxxxxx.

7.2.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx (5.5) xxxxxxxx 0,2&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx baňky xx 10&xxxx;xx (5.6), pomocí xxxxxxxx xxxxxxxxx (5.7) xxxxxxxx 100 μx 0,15 xX xxxxxxx xxxxxxxxxx (7.1) x&xxxx;xxxxxxx xx značku xxxxxxxxxx (4.2.1). Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx na 15 minut xx xxxxxxxxxxxx lázně (5.8).

7.2.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx (5.9) xxx 27 000 ×&xxxx;x&xxxx;xx dobu 10 xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx skleněné nádobky (5.10).

Xxxxxxxx: Xx xxxxxxxxx xxxxxxx XX xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 4 °C.

7.3.   Příprava xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx

7.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx 55,4&xxxx;xx XXXX (4.1) do xxxxxxx xxxxx na 50&xxxx;xx (5.6) a odměrným xxxxxx (5.11) přidejte xxx 25&xxxx;xx xxxxxxxxxxx (4.2.2). Xxxxxxxxxxxx baňku xxxxxxxx xx 50&xxxx;°X ± 1&xxxx;°X x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx XXXX nerozpustí. Baňku xxxxxxxx xx 20&xxxx;°X, xxxxxxx po xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1) x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

7.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx (5.3) přeneste 1&xxxx;xx tohoto xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx 100 ml (5.6) x&xxxx;xxxxxxx xx značku xxxxxxxxxx (4.2.1). Pipetou (5.3) přeneste 1 ml xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx na 10&xxxx;xx (5.6), xxxxxxxx 100 μx (5.7)&xxxx;0,15xX xxxxxxx xxxxxxxxxx (7.1) x&xxxx;xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xx provedení xxxxxxx XX xxxx xxx roztok xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 4&xxxx;°X.

7.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Xx xxxxxxx baňky xx 10&xxxx;xx (5.6) xxxxxxx 25,0 ± 0,1&xxxx;xx XXX (4.3.4), xxxxxxxx 0,5&xxxx;xx (5.5) xxxxxxxxx (4.2.1) x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxx se XXX xxxxxxxxx. Doplňte xx xxxxxx roztokem xxxxxxxx borité (4.3.2) x&xxxx;xxxxxxxx stříkačkou (5.7) xxxxxxxx 20 μl 2-xxxxxxxxxxxxxxxx (4.3.3).

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx musí být xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxxx xxx teplotě 4&xxxx;°X; xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx dobu xxxxxxx xxxxx.

7.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx HPLC

7.5.1.   Eluční xxxxxxxxxxxx (4.4)

Xxxxxxxxxxxx X: Xxxxxx 0,3 xX xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx a roztok 3 xX xxxxxx xxxxxxx (x xxxxxxxx xX xxxxxxxxx xx 6,5 ± 0,1 xxxxxxxxx octovou): xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx = 558: 440:2 (xxx.).

Xxxxxxxxxxxx X: Xxxxxxxx

7.5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx:

Xxx (xxx)	Xxxxxxxxxxxx X (%)	Xxxxxxxxxxxx X (%)	Xxxxxx (xx/xxx)
Xxxxxxxxx	40	60	0
0,1	40	60	0,1
5,0	40	60	0,1
6,0	40	60	1,0
6,5	40	60	1,0
9,0	36	64	1,0
10,0	20	80	1,0
11,5	16	84	1,0
12,0	16	84	1,0
16,0	10	90	1,0
19,0	0	100	1,0
20,0	0	100	1,0
21,0	40	60	1,0
29,0	40	60	1,0
30,0	40	60	0

Xxxxxxxx: Může xx stát, že xxxxxx gradient xxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx rozlišení xxxxxxxxxx xx xxxxxxx 1.

Teplota xxxxxx: 30 °X.

7.5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxxxxx: 50 μl xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx a 50 μx xxxxxxx xxxxxx

7.5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxx

Xxx každodenním xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 100&xxxx;% xxxxxxxxxxxxx X&xxxx;xx xxxx 15 xxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx X:X = 40:60 a provádějte xxxxxxxxxxx xx xxxx 15 xxxxx při xxxxxxx 1 ml/min. Xxxxxxxx slepý pokus xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2.1).

Poznámka: Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxx xxxxxx promývejte xx xxxx 30 xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx x xxxxxx 80:20 (xxx.).

7.5.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx obsahu PS + XX ve xxxxxxxxx xxxxxx

7.5.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx sérii xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx při xxxxxxxxx stejných xxxxxxxx xxxxxxx mezi jednotlivými xxxxxx, xxxxxx získali xxxxxxxxxx retenční xxxx. Xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx nastříkněte xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (7.3) xx xxxxxxx 5–10 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx 20–25 xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx promýváním 100&xxxx;% xxxxxxxxxxxxx X&xxxx;(7.5.1).

7.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxx

7.6.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxx XXXX

XXXX xx vymývá x&xxxx;xxxxxx jediného píku. Xxxxxx píku xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.

7.6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx vymývá x&xxxx;xxxxxx jediného xxxx (xxxxxxx 1). Xxxxxx xxxx xxxxxxxx integrací xxxx xxxxx.

7.6.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxx XX a PE

Za xxxxx xxxxxxxxx podmínek (obrázek 1) se XX xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx nerozlišených xxxx, před xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx. XX xx vymývá v podobě xxx xxxxxxxx, částečně xxxxxxxxxxxxx xxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxx stanovte xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx, xxx je znázorněno xx obrázku 1.

8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX X VYJADŘOVÁNÍ VÝSLEDKŮ

Obsah XX + XX xx xxxxxxxxx xxxxxx xx vypočte takto:

C =&xxxx;55,36 × ((A₂)/(A₁)) × ((X₁)/(X₂))

xxx:

X	=	xxxxx XX xxxx XX (v xx/100 x&xxxx;xxxxxx) xx xxxxxxxxx xxxxxx
X1	=	xxxxxx píku XXXX xxxxxxx srovnávacího xxxxxx (7.3)
X2	=	xxxxxx píku XX nebo XX xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.2)
X1	=	xxxxxx píku xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx vzorku (7.3)
X2	=	xxxxxx píku xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku (7.2).

9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX METODY

Poznámka: Xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx byly xxxxxxxxx podle Xxxxxxxxxxx xxxxx IDF (*).

9.1.   Opakovatelnost

Relativní směrodatná xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, která xxxxxxxxx proměnlivost xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx x&xxxx;xxxxxxxx zkušebního xxxxxx xxxxx xxxxxx pracovník xx stejném xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx 2 %. Xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxx výsledky xx neměl být xxxxx xxx 6&xxxx;% xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

9.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxx xxx pracovníci xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxx na xxxxxxx přístrojích x&xxxx;xx xxxxxxx xxxxxxxx analýzu xxxxx xxxxxxxxxx vzorku x&xxxx;xxxxxxx k různým xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx výsledky xx xxxxx xxx větší xxx 11&xxxx;% xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

10.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx P., Xxxxxxxxxx L., Xxxxxxxxx X. A., Sadini X., Xxxxxxxx X. „Xxxxxxxxx xx buttermilk solids xx xxxxxxxx&xxxx;xxxxxx xx XXXX quantification of xxxxxxxxxxxxxxxxxx.“ Xxx. Tecn. Xxxx.-Xxx.&xxxx;39,395[1988].

Xxxxxxx 1

XXXX xxxxxxxxxxxx XXX-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (XX) x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XX) v methanolovém xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxx sušeného xxxxxxxxxxxx xxxxx. Je xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx PS, XX x&xxxx;xxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx).

Xxxxxxx XX

XXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX XXXXXXX PRO XXXXXXX SKLADOVÁNÍ XX XXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX (XXXX)

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX A OBLAST XXXXXXX

Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx mléce xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx základě stanovení xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX XXXXX

Xxxxxxxxxxx norma XXX 707 – Xxxxx x xxxxxx xxxxxxx – Xxxxxxxx xxx odběr vzorků.

3.   DEFINICE

Obsah xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx popsaným postupem xxxxx obsahu xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

—	Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxx kyselinou xxxxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx;

—	Xxxxxxxxx množství kaseinomakropeptidů (XXX) x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx chromatografií (XXXX);

—	Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx získaného x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, které tvoří xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx nebo xxx xxxxxxxx známého xxxxxxxx xxxxxx syrovátky.

5.   CHEMIKÁLIE

Používají xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x. Xxxxxxx voda xxxx xxx voda xxxxxxxxxxx xxxx voda xxxxxxx xxxxxxxxxx čistoty.

5.1.   Roztok xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx 240&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXx₃XXXX) ve xxxx a doplňte xx 1&xxxx;000&xxxx;xx. Roztok xx xxx xxx xxxx x bezbarvý.

5.2.   Eluční xxxxxx, xX 6,0

Xxxxxxxxx 1,74&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx sekundárního (X₂XXX₄), 12,37&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (KH₂PO₄) x&xxxx;21,41&xxxx;x&xxxx;xxxxxx sodného (Xx₂XX₄) xxx v 700 ml vody. X&xxxx;xxxxxxx xxxxxxx upravte xX xx 6,0 xxxxxxxx xxxxxxxx fosforečné xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxx xx 1 000 xx a xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxx eluentu lze xxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx osvědčení xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx materiálů xx xxxxxx.

Xxxxxx roztok před xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx filtr x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μm.

5.3.   Promývací xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx (XX₃XX) x&xxxx;xxxxxx xxxxxx xxxx. Xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx filtr x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx.

Xxxxxxxx: Lze xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, který xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kolony.

5.4.   Srovnávací vzorky

5.4.1.   Sušené xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xx. [0]).

5.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx sušené xxxxxxxxxx mléko zfalšované xxxxxxxxx 5&xxxx;% xx. xxxxxx syřidlové xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (tj. [5]).

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX X POMŮCKY

6.1.   Analytické xxxx

6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx odstředivka xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx 2&xxxx;200&xxxx;x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx zátkou x&xxxx;xxxxxx xxx 50 ml

6.3.   Mechanická třepačka

6.4.   Magnetická xxxxxxxx

6.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx nálevky x&xxxx;xxxxxxx xxx 7&xxxx;xx

6.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx papíry xxxxxxx hustoty x&xxxx;xxxxxxx xxx 12,5&xxxx;xx

6.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx filtrem x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx

6.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx pipety umožňující xxxxxxxx 10&xxxx;xx (XXX 648, xxxxx X, xxxx ISO/R 835) xxxx dávkovací xxxxxx xxxxxxx dodávat 10,0 ml xx xxx minuty

6.9.   Dávkovací xxxxxx xxxxxxx dodávat 20,0&xxxx;xx xxxx xxx xxxxxxx xxx 50 °C

6.10.   Termostatická xxxxx lázeň nastavená xx 25 ± 0,5&xxxx;°X

6.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xx XXXX, xxxxx xxxxx:

6.11.1.

Xxxxxxxx

6.11.2.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx – xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx – x&xxxx;xxxxxx 15 xx 30 μx

6.11.3.

Xxx kolony XXX 2&xxxx;000-XX za xxxxx (xxxxx 30&xxxx;xx, xxxxxxx xxxxxx 0,75 cm), nebo xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx účinností (xxxx. jedna xxxxxx XXX 2&xxxx;000-XXxx, xxxxx xxxxxx Xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx Xxxxxx XX 250) x&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxx (3 cm ×&xxxx;0,3&xxxx;xx) xxxxxxxx xxxxxxxxxx X&xxxx;125 xxxx xxxxx xxxxxxxxxx s rovnocennou účinností

6.11.4.

Termostat xxxxxx xxxxxxxxx na 35 ± 1 °C

6.11.5.

UV xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx měřit xxx 205&xxxx;xx s citlivostí 0,008 Å.

6.11.6.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx mezi sedly Poznámka: Xxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx x&xxxx;xxxxxx xxxxx. X&xxxx;xxxxx xxxxxxx je xxxxx, xxx výkyvy xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxx 5 °C.

7.   ODBĚR XXXXXX

7.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxx XXX 707. Xxxxxxx xxxxx však xxxxx používat xxxxx xxxxxx odběru xxxxxx xx xxxxxxxxxxx, že xxxx metoda xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx normy.

7.2.   Vzorek xxxxxxxxx takovým xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxx xx znehodnocení nebo xxxxx xxxxxxx.

8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX POSTUP

8.1.   Příprava xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxxx xx xxx dvakrát xxxxx xxx objem prášku x&xxxx;xxxxx je xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx víčkem. Nádobku xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx promíchejte xxxxxxxxxx převracením xxxxxxx.

8.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx

Xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (6.2) xxxx vhodné xxxxx se xxxxxx xx 50 ml navažte 2,000 ± 0,001&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx.

8.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx tuku x&xxxx;xxxxxxxx

8.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xx xxxxxxxx dávce xxxxxxxx 20,0&xxxx;xx xxxxx (50 °C) xxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx dobu xxxx minut na xxxxxxxxxx xxxxxxxx (6.3). Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx lázně (6.10), xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx 25&xxxx;°X.

8.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx dvou minut xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (6.4)&xxxx;10,0&xxxx;xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (5.1) x&xxxx;xxxxxxx xxx 25 °C. Zkumavku xxxxxx xx 60&xxxx;xxxxx xx vodní xxxxx (6.10).

8.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx (6.2) xx xxxx 10 xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx 2&xxxx;200&xxxx;x, nebo přefiltrujte xxxx papír (6.6) x&xxxx;xxxxxxx 5 ml filtrátu xxxxxxx.

8.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx stanovení

8.4.1.   Nastříkněte 15 xx 30 μx xxxxxx odměřeného xxxxxxxxxxxx xxxx filtrátu (8.3.3) xx xxxxxxxx xx XXXX (6.11) s průtokem 1,0&xxxx;xx xxxxxxxx xxxxxxx (5.2) za xxxxxx.

Xxxxxxxx 1. X&xxxx;xxxxxxxxxx na xxxxxxxx průměru použitých xxxxx xxxx xx xxxxxxxx výrobce xxxxxx xxx xxxxxx i jiný xxxxxx.

Xxxxxxxx 2. Při xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx x&xxxx;xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx (5.2).

Xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx na xxxx xxx 24 xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx a xxxxx xx promývají xxxxxxxx&xxxx;(5.3) xxxxxxx xx dobu xxx xxxxx při xxxxxxx 0,2&xxxx;xx xx xxxxxx.

8.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx chromatografické xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx [X] xx xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxxxxx, v němž xx xxxxx pík xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx XX xxxxx:

Xxx XX:	Xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx x XX asi 12,5 minuty
Pík XXX:	Xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx odpovídající XXX s XX 15,5 xxxxxx

Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx mohou xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx (kolon).

Integrátor (6.11.6) xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx X&xxxx;xxxxxxx xxxx:

XXX:	xxxxxx xxxx II
AIII:	plocha píku XXX

Xxxx xxxxxxxxxxxxx interpretací xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx chromatogramu xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx nesprávnou funkcí xxxxxxxx, xxxx xxxxx, xxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorku.

V případě pochybností xxxxxxx zopakujte.

8.5.   Kalibrace

8.5.1.   U xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.4) se xxxxxx použije xxxxxx xxxxxxx v bodech 8.2 xx 8.4.2.

Xxxxxxxx xxxxxxx připravené xxxxxxx, protože XXX xx x&xxxx;xxxxxxxxx 8&xxxx;% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxx se xxx xxxxxxx 30&xxxx;°X xxxxxxx odhadem x&xxxx;0,2&xxxx;% xx xxxxxx.

8.5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx chromatografickým xxxxxxxxxx vzorků xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (8.5.1) srovnávacího xxxxxx (5.4.2), dokud xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxx píku xxxxxxxxxxxxxx XXX xxxxxxxx na xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

8.5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx odezvové xxxxxxx X&xxxx;xxxxxxxxxxxx stejného xxxxxx filtrátů (8.5.1), xxxxxx xxxx použili xxx xxxxxx.

9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX XXXXXXXX

9.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx a vzorce

9.1.1.   Výpočet odezvového xxxxxxx R:

Pík II:

RII = 100/(AII[0])

kde:

RII	=	odezvové xxxxxxx xxxx XX
XXX [0]	=	xxxxxx xxxx II xxxxxxxxxxxx xxxxxx [0] získané x&xxxx;8.5.3

Xxx XXX:

XXXX = X/(XXXX[5] – XXXX[0])

xxx:

XXXX	=	xxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX
XXXX [0] and XXXX [5]	=	xxxxxx píku III xxxxxxxxxxxx xxxxxx [0] x&xxxx;[5] xxxxxxx x&xxxx;8.5.3
X	=	xxxxxxxx xxxxxxxxx xx srovnávacím xxxxxx [5], xx. 5

9.1.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxx plochy xxxx xx xxxxxx [X]

XXX[X] = XXX × XXX[X]

XXXX[X] = XXXX × XXXX[X]

XXX[X] = RIV × XXX[X]

xxx:

XXX [E], SIII [X], SIV [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxx xxxx II, XXX a IV ve xxxxxx [X]
XXX [X], XXXX [X]	=	xxxxxx píků XX a III xx xxxxxx [X] xxxxxxx x&xxxx;8.4.2
XXX, XXXX	=	xxxxxxxx faktory xxxxxxxxx x&xxxx;9.1.1

9.1.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx XXX xx xxxxxx [X]:

XXXXXX[X] = (RTIII[E])/(RTIII[5])

kde:

RRTIII [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxx XXX ve xxxxxx [X]
XXXXX [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxxxx čas xxxx XXX xx xxxxxx [X] získaný x&xxxx;8.4.2
XXXXX [5]	=	xxxxxxxxx retenční čas xxxx XXX v kontrolním xxxxxx [5] xxxxxxx x&xxxx;8.5.3

9.1.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx píku III, xx. XXXXXX [X] x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx 10&xxxx;% xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx

—	xxx obsahu xxxxxxxxx > 5 % xx RRTIII [X] &xx;&xxxx;1,000;

—	xxx xxxxxx xxxxxxxxx ≤&xxxx;5&xxxx;% je RRTIII [X] ≥ 1,000.

Přípustná xxxxxxxxxx xxx hodnoty XXXXXX xx ± 0,002.

Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx RRTIII [0] xxx málo xxxx xx 1,034. Xxxxx xxxxx xxxxx se xxxx hodnota xxxxxx 1,000, xxxxx xxxx xxxx xxx xxxxx xxx 1,000.

9.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx procenta xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx:

X = SIII[E] – [1, 3 + (XXXX[0] – 0, 9)]

xxx:

X	=	xxxxxxxxxx xxxxxxxx syřidlové xxxxxxxxx ve xxxxxx [X];
XXXX [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX zkušebního xxxxxx [X] xxxxxxx xxxxx 9.1.2;
1,3	=	představuje xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx píku XXX vyjádřenou x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxx syrovátky na 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx mléce xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxx xxxx získáno experimentálně
SIII [0]	=	xxxxxxxxxxx relativní xxxxxx xxxx XXX, xxxxx xx xxxxx XXXX&xxxx;×&xxxx;XXXX[0]. Xxxx hodnoty se xxxxxxx x&xxxx;9.1.1 x&xxxx;8.5.3;
(XXXX [0]&xxxx;–&xxxx;0,9)	=	xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx provést xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx 1,3, xxxxxxxx XXXX [0] xxxx xxxxx 0,9. Xxxxxxxxxxxxxx xx relativní xxxxxxxx xxxxxx xxxx III xxxxxxxxxxx xxxxxx&xxxx;[0] rovna 0,9.

9.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

9.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx x&xxxx;xxxxxxxx zkušebního xxxxxx provedl současně xxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx xxxxx pracovník na xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx 0,2 % xx.

9.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx a nezávislými xxxxxxxx xxxxxxxxx ve dvou xxxxxxx laboratořích x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx 0,4&xxxx;% xx.

9.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx

9.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxx xxxxxxxxxxxx, že xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX XXXX [X] vyjádřena x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx, ≤ 2,0 + (SIII[0] – 0,9)

xxx

2,0	xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx relativní xxxxxx xxxx XXX x xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxx ploše xxxx III, xx. 1,3, x xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx sušeného xxxxxxxxxxxx xxxxx x x reprodukovatelnosti metody (9.3.2);
(XXXX [0] – 0,9)	xx xxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx plocha XXXX [0] jiná xxx 0,9 (viz xxx 9.2).

9.4.2.   Je-li xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX XXXX [X] > 2,0 + (XXXX[0] – 0,9) x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxx píku XX XXX [E] ≤ 160, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx bodu 9.2.

9.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX SIII [E] &xx; 2,0 + (XXXX[0] – 0,9) x relativní xxxxxx xxxx XX XXX [X]&xxxx;≤&xxxx;160, xxxxxxxx celkový xxxxx bílkovin (P %). Potom xxxxxxxxxxx xxxxx 1 x 2.

9.4.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx obsahem xxxxxxxx xxxx zanesena xx grafů 1 x&xxxx;2.

Xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, jejíž xxxxxxxxxxx se vypočítají xxxxxxx nejmenších čtverců.

Čárkovaná xxxxxx určuje horní xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX, x&xxxx;xx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxx v 90 % případů.

Rovnice xxxxxxxxxxx přímek v xxxxxxx 1 x 2 jsou:

SIII = 0,376 X % – 10,7	(xxxx 1)
XXXX = 0,0123 XXX [X] + 0,93	(xxxx 2)

xxx:

XXXX	xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX vypočtená xxx xxxxx celkového xxxxxx bílkovin, xxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx SII [X],
X&xxxx;%	xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx procento xxxxxxxxx,
XXX [E]	je xxxxxxxxx xxxxxx vzorku vypočtená x&xxxx;xxxx 9.1.2.

Tyto xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx 1,3 uvedenému v xxxx 9.2.

Xxxxxx (X1 x X2) mezi xxxxxxxxx xxxxxxxxx plochou XXXX [X] x xxxxxxxxx plochou SIII xx xxx xxxxxx xxxxxx: X1 =&xxxx;XXXX[X]&xxxx;– [(0,376 X% – 10,7) + (SIII[0] – 0,9)]X2 = XXXX[X] – [(0,0123 XXX[X] + 0,93) + (XXXX[0] – 0,9)].

Xxxx-xx T1 x/xxxx X2	xxxxx xxxx nebo xxxxx xxx xxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx stanovit.
Jsou-li T1 x X2	xxxxx než xxxx, je xxxxxxxxx xxxxxxxxx přítomna.

Obsah syřidlové xxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx vzorce: X = T2 + 0,91

xxx:

0,91 xx vzdálenost xx xxxxxx xxx xxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx XXX

XXXXXXXXX SUŠINY XX XXXXXXXXX XXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXXX ODSTŘEDĚNÉM XXXXX

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX: XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX XX XXXXXXXXX XXXXXXXXX XX&xxxx;XXXXXXXX ODSTŘEDĚNÉHO XXXXX

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX XXXXX: XXXXXXXXXXX XXXXX XXX 707

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX

Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx procento stanovené xxxxxxxx xxxxxxxx podle xxxxxx kaseinomakropeptidů.

4.   PODSTATA METODY

Vzorky xxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxxxxxxxxxxxxxxx A vysokoúčinnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx fázemi (xxxxxxx XXXX). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx se srovnávacími xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx odstředěné xxxxx xxx xxxxxxxx nebo x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx procenta xxxxxx syrovátky. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxx 1&xxxx;% xx., xx xxxxxxxxxx sušiny xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx čistoty x.x. Xxxxxxx xxxx xxxx xxx voda xxxxxxxxxxx xxxx xxxx nejméně xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxx mít spektroskopickou xxxxxx nebo jakost xxxxxxx xxx XXXX.

5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx 240 g kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (XXx₃XXXX) xx xxxx x&xxxx;xxxxxxx xx 1&xxxx;000&xxxx;xx. Roztok by xxx xxx xxxx x xxxxxxxx.

5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx X&xxxx;x&xxxx;X

Xxxxxx X: Xxxxxx 150 xx acetonitrilu (XX₃XX), 20 xx xxxxxxxxxxxx (XX₃XXXXXX₃) x 1,00 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXX, CF₃COOH) do xxxxxxx xxxxx a xxxxxxx xx 1&xxxx;000 xx vodou.

Eluent X: Xxxxxx 550 xx xxxxxxxxxxxx, 20 ml xxxxxxxxxxxx x 1,00 xx TFA do xxxxxxx xxxxx xx 1&xxxx;000 xx a xxxxxxx na 1 000 xx vodou. Xxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx.

5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx kolony

Po xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X (xxxxxx) x potom xx propláchne acetonitrilem (xxxxxx xx dobu 30 minut). Xxxxxx xx xxxxxxxx v acetonitrilu.

5.4.   Srovnávací xxxxxx

5.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxxx mléko xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx veřejné xxxxxxxxxx (xx. [0]).

5.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx zfalšované xxxxxxxxx 5&xxxx;% xx. xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (tj. [5]).

5.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx sušené xxxxxxxxxx xxxxx zfalšované přídavkem 50&xxxx;% xx. sušené xxxxxxxxx syrovátky xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xx. [50]).

6.   PŘÍSTROJE X XXXXXXX

6.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx

6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx 2&xxxx;200&xxxx;x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxx o objemu xxx 50&xxxx;xx

6.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

6.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

6.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx o průměru xxx 7&xxxx;xx

6.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx asi 12,5&xxxx;xx

6.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx filtrem x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx

6.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx dávkovat 10&xxxx;xx (XXX 648, xxxxx X, nebo XXX/X 835), xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 10,0&xxxx;xx za xxx minuty

6.9.   Dávkovací xxxxxx xxxxxxx dodávat 20,0&xxxx;xx xxxx xxx xxxxxxx xxx 50 °C

6.10.   Termostatická vodní xxxxx nastavená xx 25 ± 0,5&xxxx;°X

6.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xx XXXX, které xxxxx:

6.11.1.

Xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx

6.11.2.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx – xxxxx xxxx automatické, o objemu 100 μx

6.11.3.

Xxxxxx Xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx Xxxxxx 300 XX-X3 (xxxxx 25 cm, xxxxxxx xxxxxx 0,46&xxxx;xx), xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx obrácené xxxx x&xxxx;xxxxxxx póry xx xxxx křemene

6.11.4.

Termostat xxxxxx xxxxxxxxx xx 35 ± 1&xxxx;°X

6.11.5.

XX xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx vlnovou xxxxxx, který xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx při 210&xxxx;xx (v nutných xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx až xx 220&xxxx;xx) x&xxxx;xxxxxxxxxx 0,02 Å.

6.11.6.

Xxxxxxxxxx s možností nastavení xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx nebo xxxx xxxxx Xxxxxxxx: Xxxxx x xxxxxxxx udržovanými xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx možná xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxx více xxx x 1 °C, xxxxx xxxxxxx k xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx XXXX.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXX XXXXXX

7.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx v mezinárodní xxxxx XXX 707. Xxxxxxx státy však xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xx předpokladu, že xxxx metoda odpovídá xxxxxxx uvedené xxxxx.

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx dojít xx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx složení.

8.   PRACOVNÍ POSTUP

8.1.   Příprava xxxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx mléko xxxxxxxx do nádobky, xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxx větší xxx xxxxx prášku x&xxxx;xxxxx je opatřena xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Nádobku xxxxx uzavřete. Sušené xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

8.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx

Xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (6.2) xxxx xxxxxx xxxxx xx zátkou xx 50 ml xxxxxxx 2,00 ± 0,001 g zkušebního xxxxxx.

Xxxxxxxx: V případě xxxxx xxxxxxx takové xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, aby xxxx zbavená xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 2,00 g.

8.3.   Odstranění xxxx x&xxxx;xxxxxxxx

8.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xx xxxxxxxx xxxxx přidejte 20,0 ml xxxxx (50&xxxx;°X) xxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx na xxxxxxxxxx třepačce (6.3) xx xxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx (6.10), xxxxx xx xxxx xxxxxxx neustálí xx 25&xxxx;°X.

8.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxx míchání xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (6.4) xxxxxxxx 10,0&xxxx;xx xxxxxxx xxxxxxxx trichloroctové x&xxxx;xxxxxxx xxx 25&xxxx;°X (5.1). Xxxxxxxx vložte xx 60&xxxx;xxxxx xx xxxxx xxxxx (6.10).

8.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx (6.2) xx xxxx 10 xxxxx při xxxxxxxxxx xxxx 2&xxxx;200&xxxx;x, nebo xxxxxxxxxxxx xxxx papír (6.6) x&xxxx;xxxxxxx 5&xxxx;xx xxxxxxxx xxxxxxx.

8.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

8.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx XXXX x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx sušeného xxxxxxxx xxxxxxxx.

8.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxxxxx analýzy XXXX x&xxxx;xxxxxxxxxx fázemi xx xxxxx optimalizovat xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxx systémy x&xxxx;xxxxxx xxxxxxx xxx 6 ml (xxxxx od bodu, xxx xx stékají xxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx) xx xxxxxxxxx xxxxxxxx čas x&xxxx;xxxxx 26 xxxxx ± 2 xxxxxx xxx XXXΑ. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxx xxxxxxx (např. 2&xxxx;xx) je xxxxxxxxx xxxxxxxx čas 22 xxxxx.

Xxxxxxx roztoky xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.4) x&xxxx;xxxxxxx 50&xxxx;% xxxxxxxxx syrovátky x&xxxx;xxx xxxxxx této xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx 100 μx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (8.3.3) xx xxxxxxxx xx XXXX, xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx 1.

Xxxxxxx 1

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx

Xxx (xxx)	Xxxxxx (xx/xxx)	% X	% B	Křivka
Počátek	1,0	90	10	*
27	1,0	60	40	přímka
32	1,0	10	90	přímka
37	1,0	10	90	přímka
42	1,0	90	10	přímka

Porovnání xxxx xxxxxxxxxxxxx by xxxx xxxxxx polohu xxxx XXXΑ.

Xxxxxxxxx složení xxxxxxxxxxxx, xxxxx je nutno xxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 8.4.3), xxx vypočítat podle xxxxxx xxxxxx: % X =&xxxx;10 – 2,5 + (13,5 + (RTcmpA – 26) / 6) * 30 / 27&xxxx;% B =&xxxx;7,5 + (13,5 + (XXxxxX – 26) / 6) * 1,11

xxx

XXxxxX	:	xxxxxxxx xxx XXXΑ x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
10	:	xxxxxxxxx % X x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
2,5	:	% X xx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx % X x normálním xxxxxxxxx
13,5	:	xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
26	:	xxxxxxxxxx retenční xxx XXXΑ
6	:	xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
30	:	% B v xxxxxxxxxx bodu xxxxx % X xx 27 minutách x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
27	:	xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

8.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx roztoků xxxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxxxx 100 μx xxxxxx odměřeného xxxxxxxxxxxx nebo filtrátu (8.3.3) xx xxxxxxxx xx XXXX x&xxxx;xxxxxxxx 1,0&xxxx;xx elučního xxxxxxx (5.2) za minutu.

Složení xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx x&xxxx;8.4.2. Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx A:B =&xxxx;76:24 (5.2). Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, což xxxxxxx, že procento X se xx 27 xxxxx zvětší x 5 %. Potom xx spustí xxxxxxxx xxxxxxxx, kterým xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx 90&xxxx;% X. Toto xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx x xx jejím xxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxx počáteční. X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx být xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 15 xxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxx 1. Xxxxxxxx xxx XXXX xx xxx být 26 ± 2 xxxxxx. Toho lze xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxxx prvního xxxxxxxxx. Xxxxxx v % X mezi xxxxxxxxxxx x konečnými xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxx 5&xxxx;% X.

Xxxxxxxx 2. Xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx odplynit x&xxxx;xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. Xx xx nezbytně xxxxx xxx to, xxx gradientový čerpací xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx XXXX xxxx xxx menší xxx 0,1 xxxxxx (x =&xxxx;10).

Xxxxxxxx 3. Xx xxxxxxx pět xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx [5] a xxxxxx xxx xxx výpočet xxxxxx xxxxxxxxxx faktoru X (9.1.1).

8.4.4.   Výsledky xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx vzorku (X) xx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxx xx xxx XXXX určen xxxx retenčním xxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx 26 xxxxx.

Xxxxx H píku XXXX xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx integrátor (6.11.6). Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx třeba xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx je xxxxxxxx xxxxx nesprávně xxxxxxxx, analýzu xxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xx-xx xxx XXXX xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx, xxxx xx se xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx. X opačném xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx kolmice xx xxxxxxxx základní xxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxx xxx xx měl xxx x xxxxxxxxx xxxx CMPA (xxxx xx x čase x =&xxxx;0 xxx!). Xxx xxxxxxxxxx standard x xxxxxx použijte xxxxxx xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx zkontrolujte, xxx je xx xxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx účelem xxxxxxxx xxxxxxxxxx anomálií xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx zařízení, xxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. X&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

8.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx

8.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;X xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.4.1 xx 5.4.2) xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx 8.2 až 8.4.4. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx roztoky, protože XXX se x&xxxx;xxxxxxxxx 8&xxxx;% kyseliny xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Při teplotě 4&xxxx;°X zůstává xxxxxx xxxxx po dobu 24 xxxxx. X&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx používat x&xxxx;xxxxxxxxxxxx nástřikovém xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx.

Xxxxxxxx: Fáze 8.4.2 xxxx být xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx % X x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx analýz.

Chromatogram referenčního xxxxxx (5) xx xxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx 1. Na xxxxx obrázku xxxx xxxx xxxxx XXXX xxx malé xxxx. Xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx podobné separace.

8.5.2.   Před xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorků xxxxxxxxxxx 100 μx xxxxxxxxxxxx vzorku xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx [0] (5.4.1).

Xxxxxxxxxxxx nesmí vykazovat xxx x&xxxx;xxxxxxxxx čase XXXX píku.

8.5.3.   Odezvové faktory X stanovte xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx filtrátu (8.5.1), xxxxxx bylo xxxxxxx pro vzorky.

9.   VYJÁDŘENÍ XXXXXXXX

9.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx a vzorce

9.1.1.   Výpočet xxxxxxxxxx xxxxxxx X:

Xxx XXXX: X = X/X

xxx

X	=	xxxxxxxx faktor píku XXXX
X	=	xxxxx píku XXXX
X	=	xxxxxxxx xxxxxxxxx xx srovnávacím xxxxxx [5]

9.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx procenta xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx

X(X)&xxxx;= X&xxxx;×&xxxx;X(X)

xxx

X(X)	=	xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx [X]
X	=	xxxxxxxx xxxxxx xxxx XXXX (9.1.1)
H(E)	=	výška píku XXXX xxxxxx (X)

Xxxxx xx W(E) xxxxx xxx 1&xxxx;% a rozdíl xxxx xxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxxxx vzorku [5] xxxxx xxx 0,2&xxxx;xxxxxx, pak xx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx prokázána.

9.3.   Přesnost xxxxxx

9.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xxxx výsledky xxxx stanovení, která x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxx sledu jeden xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx 0,2&xxxx;% xx.

9.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxx.

9.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx

Xxx xxxxxxx xx 0 % xx 16&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx lineární xxxxx x xxxxxxxxxx koeficientem > 0,99.

9.4.   Interpretace

Mezní xxxxxxx 1&xxxx;% xxxxxxxx xxxxxxxxx x důvodu xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx 1

Ni—4.6 standard

XXXXXXX XX

Xxxxxx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx skladování

Parametr	Metoda
Tuk (6)	ISO 17189 xxxx XXX 3727 xxxx&xxxx;3
Xxxx	XXX 3727 xxxx 1
Xxxxxxxxxx xxxxxx (x xxxxxxxx xxxx)	XXX 3727 xxxx 2
Xxx	XXX 15648

XXXXXXX VII

Metody xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxxx	Xxxxxx
Xxx	XXX 1736
Xxxxxxxxx	XXX 8968 xxxx 1
Xxxx	XXX 5537

PŘÍLOHA XXXX

Xxxxxx xxxxxxx xxxx v xxxxxxxxx skladování

1.

Je nutné xxxxxxx, xx sýry xxxxxxxx výhradně x&xxxx;xxxxxx xxxxx, xxxxxx mléka xx buvolího mléka, xxxx ze xxxxx xxxxxx, kozího x&xxxx;xxxxxxxx xxxxx neobsahují xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx, x&xxxx;xx xxxxx účelem se xxxxxxx xxxxxx analýzy xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx mléka se xxxxxxxx za xxxxxxxxxx, xxxxx obsah xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxx je stejný xxxx vyšší v porovnání x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 1&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxx, který xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx.

2.

Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxx uvedených x&xxxx;xxxxxxxx&xxxx;1 xxxxx být xxxxxxxxx za těchto xxxxxxxx: x) xxxxxx detekční limit xxxx xxx nejvýše 0,5&xxxx;%; x) xxxxxx xxxxxxxx nesmí xxx falešně xxxxxxxxx; x) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx s požadovanou xxxxxxxxxx x&xxxx;xx dlouhé xxxx xxxxx, x&xxxx;xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx podmínek xxxxxxxx. Xxxx-xx xxxxx x&xxxx;xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx splněn, xxxxxxx xx metody xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx.

Xxxxxxx

XXXXXX XXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXX MLÉKA A KASEINÁTŮ X&xxxx;XXXXXX Z OVČÍHO XXXXX, XXXXXX XXXXX XXXX XXXXXXXX MLÉKA, NEBO XXXXX OVČÍHO, XXXXXX X&xxxx;XXXXXXXX XXXXX

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX

Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a kaseinátů v sýrech xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx γ-xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXX XXXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxx xxx citlivé x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx, též xxxxxxx xxxxxxxxxx, x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx, xxxxxx mléka, xxxxxxxx mléka xxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxxx a buvolího xxxxx. Xxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a sýrů xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx kaseinů xx xxxx a referenčních xxxxxxxxx

3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx a proteolýza xxxxxxxxx (XX.3.4.21.7)

3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx ošetřených kaseinů xx xxxxxxxxxxx močoviny x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxxx

3.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx γ3 x γ2 (důkaz xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) xx základě xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxx x referenčních xxxxxxxxx obsahujících 0&xxxx;% x 1 % kravského xxxxx.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxx-xx xxxxxxxxx jinak, xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx čistoty x.x. Xxxx musí xxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx: Následující xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx polyakrylamidové xxxx s obsahem xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx 265 ×&xxxx;125 ×&xxxx;0,25&xxxx;xx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx druhy xxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxx močoviny

4.1.1.   Zásobní xxxxxx xxxx

Xx xxxx xxxxxxxxx:

4,85&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxx

0,15 x X, N′-methylen-bis-akrylamidu (XXX)

48,05&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx

15,00&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx (87 % xx.),

xxxxxxx xx 100 ml x xxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx dostupný, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;XXX.&xxxx;X&xxxx;xxxxxxx, xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx 30&xxxx;% xx./xxx. xxxxxxxxxx x&xxxx;0,8&xxxx;% hm./obj. BIS, xxx xxxxxxx xxxxxxxx (4,85 g akrylamidu x&xxxx;0,15 x&xxxx;XXX) xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 16,2&xxxx;xx. Zásobní xxxxxx xxx skladovat xxxxxxx 10 xxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxx vyšší xxx 5 μX, xx xxxxx provést jeho xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx s 2 g Amberlitu XX-3 xx xxxx 30 xxxxx x xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxx 0,45μx membránu.

4.1.2.   Roztok xxxx

Xxxxxxxxx xxxxxx gelu xxxxxxxxx přísad a amfolytů (*) xx xxxxxxxx roztokem xxxx (xxx 4.1.1).

9,0&xxxx;xx xxxxxxxxx roztoku

24 mg β-alaninu

500 μx amfolytu pH 3,5–9,5

250 μl xxxxxxxx xX 5–7

250 μx xxxxxxxx pH 6–8

Gelový xxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xx xxxx dvou xx xxx minut x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxx xxxxxx se musí xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxxxx (xxx 6.2).

4.1.3.   Roztoky xxxxxxxxxxxx

4.1.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;X, X, X′, X′-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (Xxxxx)

4.1.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;40&xxxx;% xx./xxx. xxxxxxx persíranu amonného (XXX)

800 xx XXX xx xxxxxxxx ve xxxx a xxxxxx xx do 2 xx.

Xxxxxxxx: Xxxx používejte xxxxxxx připravený xxxxxx XXX.

4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx

4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx roztok

Rozpusťte 5,77 x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (85&xxxx;% xx.) xx xxxx a xxxxxx xx 100 xx.

4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx 2,00 x xxxxxxxxx xxxxxxx xx vodě a xxxxxx xxxxx xx 100 xx.

Xxxxxxxx xxxxxx

4.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx

4.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (25,0 ml ledové xxxxxxxx octové xxxxxxxx xxxxx xx 100 xx).

4.5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx

4.5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx

4.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xx xxxx xxxxxxxxx:

5,75&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx (87&xxxx;% hm.)

24,03 g močoviny

250 mg xxxxxxxxxxxxxxx

x doplňte xx 50 xx xxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx; xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx týden.

4.7.   Chemikálie xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx

4.7.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx 0,2 mol/l (1,58 g/100 ml xxxx) xxxxxxxxxx 0,05 xxx/x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX, 1,46 x/100 xx) xxxxxxxx uhličitanu xxxxxxxx 0,2 xxx/x (1,92 x/100 xx xxxx) xxxxxxxxxxxx 0,05 xxx/x XXXX xx xX 8.

4.7.2.   Hovězí xxxxxxx (XX. 3.4.21.7), s aktivitou xxxxxxx 5 X/xx.

4.7.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx ε-xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx 2, 624 g kyseliny ε-xxxxxxxxxxxxxx (6-xxxxx-x-xxxxxxxxxxxxx) xx 100 xx 40 % xxx. ethanolu.

4.8.   Referenční xxxxxxxxx

4.8.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx a kozího xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx pomocí xxxxxxx a s obsahem 0&xxxx;% x&xxxx;1&xxxx;% kravského xxxxx xxx získat od Xxxxxx xxx referenční xxxxxxxxx a měření xxxxxxxxxx xxx Xxxxxx, B-2440, Xxxx, Xxxxxx.

4.8.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx laboratorních xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x s xxxxxxx 0&xxxx;% x 1&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxxx xxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx teplotě 37&xxxx;°X (2&xxxx;500&xxxx;x, 20 xxxxx). Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x jejího xxxxxx xx 6 xx 8 °X xx úplně odstraní xxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxx přípravu 1 % xxxxxxxxx xxxxxxxx 5,00&xxxx;xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx mléka xx 495&xxxx;xx odstředěného xxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 1 l. Hodnotu xX upravte xx 6,4 xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (10 %, xx./xxx.). Xxxxxxx xxxxxxx xx 35 °X, xxxxxxxx 100 μx xxxxxxxx xxxxxxx (aktivita xxxxxxx 1: 10&xxxx;000, xxx 3&xxxx;000 X/xx) x&xxxx;xxxxxxxx po xxxx 1 xxxxxx. Poté xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxx hodinu xxxx xxx xxxxxxx 35&xxxx;°X k utvoření xxxxxxxx. Xx utvoření xxxxxxxx xx xxxxxxx mléko xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx by xxxxxxx xxxx provedena xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx mléko xx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxx prášek. X&xxxx;xxxxxxxx referenčního xxxxxxxxx 0&xxxx;% xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx odstředěného xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxx při xxxxxxx – 20&xxxx;°X.

Xxxxxxxx: Xxxx xxxxxxxxx referenčních xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx buvolího mléka xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxx k barvení xxxxxxxx

4.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx

Xxxxxxxxx 150&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx vodě a doplňte xx 1&xxxx;000&xxxx;xx.

4.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx 500 xx xxxxxxxxx x 200 ml xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx na 2&xxxx;000 xx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxxxx xxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx; xxx jej xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx roztoku 50&xxxx;% (xxx.) xxxxxxxxx a xxxxxxxxx roztoku 20&xxxx;% (xxx.) xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

4.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxx

4.11.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx roztok (xxxxxxx xxxxxx 1)

X 1&xxxx;000 ml 90&xxxx;% xxx. xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 45 xxxxx) 3,0 g brilantní xxxxx Xxxxxxxxx X-250 (X. X. 42655) x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxxxx přes dva xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

4.11.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx (zásobní xxxxxx 2)

V 1 000 ml 20&xxxx;% xxx. xxxxxxxx octové xxxxxxxxx 5,0&xxxx;x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx.

4.11.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx (pracovní xxxxxx)

Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 125&xxxx;xx obou xxxxxxxxx xxxxxxx (4.11.1 x&xxxx;4.11.2).

Xxxxxxxx: Xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x xxx přípravy.

5.   PŘÍSTROJE X XXXXXXX

5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx desky (265 x 125 x 4 xx), xxxxxxx xxxxxxx (x xxxxx 15 cm), xxxxxxxxx stolek.

5.2.   Nosná xxxxx xxxx (265 × 125 mm)

5.3.   Krycí xxxxx (280 ×&xxxx;125&xxxx;xx). Xx každý xxxxxx xxxxx nalepte pruh xxxxxx xxxxx (280 ×&xxxx;6 ×&xxxx;0,25&xxxx;xx) (xxx xxxxxxx 1).

5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx komora x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx (např. 265 ×&xxxx;125&xxxx;xx) x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx xxxxx (≥ 2,5&xxxx;xX) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

5.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx kryostat x&xxxx;xxxxxxxx teploty ve xxxx 12 ± 0,5&xxxx;°X

5.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 3&xxxx;000&xxxx;x

5.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxx (o xxxxx ≥ 265&xxxx;xx)

5.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx nádobky na xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx roztok

5.9.   Aplikátory xxxxxx (10 ×&xxxx;5&xxxx;xx, x&xxxx;xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx adsorpcí xxxxxxxx)

5.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx misky (xxxx. xxxxx na xxxxxxxx 280 ×&xxxx;150&xxxx;xx) x&xxxx;xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx

5.12.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx xxxxxx homogenizátor x&xxxx;xxxxxxxx tyče 10 mm x&xxxx;xxxxxxxxx 8&xxxx;000 xx 20&xxxx;000 xx/xxx

5.13.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx míchačka

5.14.   Ultrazvuková xxxxx

5.15.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx fólií

5.16.   Mikropipety na 25 μx

5.17.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx odstředivka xxxx lyofilizátor

5.18.   Termostatem xxxxxx xxxxx xxxxx, xxxxxxxxxxxx xx 35 x&xxxx;40 ±&xxxx;1&xxxx;°X x&xxxx;xxxxxxxxx

5.19.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx λ =&xxxx;634&xxxx;xx

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX POSTUP

6.1.   Příprava vzorku

6.1.1.   Izolace xxxxxxx

Xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx xx 100 ml xxxxxxx xxxxxxxx sýra xxxx xxxxxxxxxxxx standardu xxxxxxxxxxxx 5&xxxx;x&xxxx;xxxxxx, přidejte 60 ml xxxxxxxxxxx xxxx a obsah xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (8&xxxx;000 xx 10&xxxx;000 xx/xxx). Upravte xX xx 4,6 zředěnou xxxxxxxxx octovou (4.5.1) x&xxxx;xxxxxxxxxxx (5 xxxxx, 3&xxxx;000&xxxx;x). Xxxxxxxxxx xxx x&xxxx;xxxxxxxxx a zbytek xxxxxxxxxxxxx xxx 20&xxxx;000 ot/min xx 40&xxxx;xx xxxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxx xX xxxxxxxxx xx 4,5 xxxxxxxx xxxxxxxxx octovou (4.5.1). Xxxxxxxx 20 ml xxxxxxxxxxxxxx (4.5.2) a znovu xxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx (5 xxxxx, 3 000 g). Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx vrstvu, xxxxx se xxxxxxx xxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxx (xxx obrázek 2), a obě xxxx xxxxxxxxxx. Kasein se xxxxx homogenizuje xx 40 ml destilované xxxx (xxx výše) x 20 xx xxxxxxxxxxxxxx (4.5.2) x xxxxxxxx xx. Xxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxxx fáze xxxxxx xxxxxxxx (dvakrát xx xxxxxxx). Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x&xxxx;50&xxxx;xx xxxxxxx (4.5.3) x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx papírový xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 25 ml xxxxxxx xxxxxxx a nechte xxxxxxx xx xxxxxxx nebo x&xxxx;xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxx rozmělněte x&xxxx;xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxx bílkovinné xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx při teplotě – 20 °X.

6.1.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx β-xxxxxxx xx γ-kaseiny xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxx 25 xx xxxxxxxxxxx kaseinů (6.1.1) x 0,5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx amonného (4.7.1) x xxxx 20 xxxxx homogenizujte, xxxx. xxxxxxxxxxx. Xxxx zahřejte xx 40&xxxx;°X x&xxxx;xxxxxxxx 10 μx plasminu (4.7.2), xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx 1 hodinu xxx xxxxxxx 40&xxxx;°X za xxxxxxx xxxxxxx. Pro xxxxxxxx xxxxxx přidejte 20 μl roztoku xxxxxxxx ε-xxxxxxxxxxxxxx (4.7.3). Xxxx xxxxxxxx 200&xxxx;xx xxxxx močoviny x&xxxx;2&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Pro získání xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx ε-aminokapronové roztok xxxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx v 0,5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx bílkovin (4.6).

6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx

Xx xxxxxxxxx xxxxx (5.1) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx (5.2) x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx kapek xxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx ubrouskem xxxx xxxxxxxxxxx. Stejným xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx druhou, xxxxx xxxxx (5.3) x&xxxx;xxxxxxxxxxx vložkami (0,25 mm) xx xxxxx skleněnou xxxxx. Xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxx.

X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx roztoku xxxx (4.1.2) přidejte 10 μl Xxxxxx (4.1.3.1), xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx 10 μx roztoku XXX (4.1.3.2); důkladně xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxx (xxxxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxxx xxxx) xxxxxxxx x&xxxx;xxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxx pokládejte tak, xxx xx xxxx xxxxxxx vytvořila pravidelně xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx bez xxxxxx (xxxxxxx 3). Pomocí xxxxx špachtle xxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx po xxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxx xx xx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxx xx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx polymerace (asi xx 60 minutách) xxxxx x xxxxx xxxxx sejměte xxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx gelu xxx, xx xxxxxxxx desky xxxxxxxxx. Zadní stranu xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxx. „Gelový xxxxxxx“ xxxxxxx xx tenké xxxxx a uložte do xxxxxxxxxx (xxxxxxx na xxxx týdnů).

Poznámka: Krycí xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx použít xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxx xxx xxxx xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx; xx xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxx počtu xxxxxx xxxx v případě xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxxx 4,5 ×&xxxx;5&xxxx;xx).

6.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx fokusace

Nastavte xxxxxxxx xx 12 °X. Xxxxx stranu xxxxx fólie xxxx xxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxx xx střed chladicího xxxxx kápněte několik xxxxx xxxxxxxx (4.2). Xxxxxxx xxxxxxxx „xxxxxx xxxxxxx“ nosnou xxxxx xxxxxxxx xxxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx bubliny. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx napusťte xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.3, 4.4), xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxx xx xxxxx (vzdálenost xxxxxxxx 9,5&xxxx;xx).

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

6.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxx 265 ×&xxxx;125 × 0,25 mm

Fáze	Doba (min)	Napětí (V)	Proud (mA)	Příkon (W)	Volty/hodiny (Vh)
1. Předběžná xxxxxxxx	30	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 15	xxxxxxxxxx 4	xxx 300
2. Xxxxxxxx vzorku (7)	60	max. 2 500	max. 15	konstantní 4	xxx 1&xxxx;000
3. Xxxxxxx fokusace	60	max. 2 500	max. 5	max. 20	cca 3&xxxx;000
	40	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 6	xxx. 20	xxx 3&xxxx;000
	30	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 7	xxx. 25	xxx 3 000

Poznámka: Xxxxxxxx se změní xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx, hodnoty xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx-xx xx xxx x&xxxx;xxxxxxxxx 265 × 125 ×&xxxx;0,5&xxxx;xx).

6.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxx elektroforetického zařízení (2 xxxx 5,0 ×&xxxx;4,5&xxxx;xx, xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxx.

Xxxx	Xxxxxx	Xxxxx	Xxxxxx	Xxxxxxx	Xxxxx/xxxxxx
1. Xxxxxxxxx xxxxxxxx	1&xxxx;000 V	10,0 mA	3,5 X	8 °C	85 Xx
2. Xxxxxxxx xxxxxx	250 X	5,0 xX	2,5 X	8 °X	30 Xx
3. Xxxxxxxx	1&xxxx;200 X	10,0 mA	3,5 X	8 °X	80 Xx
4. Xxxxxxxx	1&xxxx;500 X	5,0 xX	7,0 X	8 °C	570 Xx

Xxxxxxxxx xxxxxx xx xxxx 2 xxxxxx xxx 0 Xx.

Xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxx 2 xxxxxxxxx xxx 30 Vh.

6.4.   Barvení bílkovin

6.4.1.   Fixace xxxxxxxx

Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx odstraní xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxx xx xxxxx xxxxx xx xxxxxxx/xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 200 ml xxxxxxxx (4.9). Xxx x ní xxxxxxxx 15 xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx.

6.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxx xxxxx

Xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx desku dvakrát xxxxxxxxxx xx xxxx 30 xxxxxx xxxx xx 100 xx xxxxxxxxxxxxx roztoku (4.10) Xxxxxxxxxxx roztok xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx 250 ml xxxxxxxxx roztoku (4.11.3) x xxx xxxxxx xx mírného třepání xx xxxx 45 xxxxx xxxxxxxxx.

6.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx gelové xxxxx

Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx dobu 30 xxxxxx vždy xx 100&xxxx;xx odbarvovacího xxxxxxx (4.10). Poté 15 minut xxxxxxxxxxxxx x&xxxx;200&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxx roztoku; xxxx odbarvování opakujte xxxxxxx xxxxxxx až xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx čiré a bezbarvé. Xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (2 ×&xxxx;2 minuty) x&xxxx;xxxxxx uschnout xx xxxxxxx (2 xx 3 xxxxxx) xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (10 až 15 xxxxx).

Xxxxxxxx 1: Xxxxxx, xxxxxxxxx, xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx při teplotě 20&xxxx;°X. Xxxxx teploty xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx 2: Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx citlivější xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. Xxxxxx Xxxxxxxx Xxx, Xxxxxxx, Xxxxxxxxx Xxxxxxx, xxx x. 17-1150-01), xxxx xxx xxxxxxxxx vzorky xxxxxxxx plasminem zředěny x poměru 5 xx/xx.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX

Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx proteinových obrazců xxxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxxx standardů x xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxx kravského xxxxx x xxxxxx vyrobených x xxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxx xxxxxx, xxxxxx x xxxxxxxx mléka xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx γ3- x γ2-kaseinů, xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxx xX 6,5 x xX 7,5 (xxxxxxx 4a, x, xxxxxxx 5). Xxxxxxxx xxx xx xxxxx než 0,5 %.

7.1.   Vizuální xxxxxxxxx

Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx upravit xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx, xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx γ2- a γ3-xxxxxxx (xxx „γ2 X,X,X“ x „γ3 X,X,X“ na xxxxxxxxx 4x, b x xxxxxxx 5) xxxxxx xxxxxx intenzity. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxx nebo xxxxx xxx 1 % xxxx xx výši 1&xxxx;%) x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx γ3- x&xxxx;γ2-xxxxxxx (xxx „γ3 X“ x&xxxx;„γ2 X“ xx xxxxxxxxx 4&xxxx;x, x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxx 5) s intenzitami xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 0 % x&xxxx;1&xxxx;% (xxxxxx, kozích), nebo xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx standardech (xxxxxxxx).

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxx xx xx xxxxx, použijte xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx plochami píků xxxxxxxx γ2- x&xxxx;γ3-xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxx ovčích, xxxxxx a/nebo xxxxxxxx γ2- a γ3-kaseinů (viz xxxxxxx 5) denzitometrii (5.19). Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx s xxxxxxx xxxxx píků γ2- x γ3-kaseinů x 1&xxxx;% referenčním standardu (xxxxx, xxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx laboratorním xxxxxxxxx (xxxxxxx) xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxx.

Xxxxxxxx: Xxxx xxxxxx xxxxxxx uspokojivě, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx signál obou xxxxxxxx γ2- a γ3-xxxxxxx v 1&xxxx;% xxxxxxxxxxx standardu, xxxxx xxxxxx x 0&xxxx;% xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X&xxxx;xxxxxxx xxxxxxx xx nutné xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx v dané metodě.

Vzorek xx xxxxxxxxx za xxxxxxxxx, jestliže hodnoty xxxx hovězích γ2- x γ3-kaseinů xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx xxxx stejné xxxx xxxxx než xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 1&xxxx;% xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxx F., Xxxx L., Chianese X., Xxxxxx C., Xxxxxxx X., Xxxxxx X, Xxxxxx X., Xx Xxxxxx X., Xxxxx A.: Xxx xx plasmin xx&xxxx;xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx of xxxxxx xxxx&xxxx;xx xxxxx xxx/xx xxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx of γ2-xxxxxxx.&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxx 45, 708–711 (1990).

Xxxxx X., Xxxxxxx M.A., Xxxxxxxx L., Moio X., Xxxxxx Musso X., Xxxxx X., Xxx Xxxxxxx X.: X control method xx detect xxxxxx xxxx&xxxx;xx ewe xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx immunoblotting. Xxxxxxxxxxxxxxxxx 50, 83–85 (1995).

Krause X., Xxxxxx I, Xxxxxxxxxxxx X.: Xxxxxxxxx xxxxxxxxx of xxx xxxx&xxxx;xx xxx and xxxx xxxx&xxxx;xxx cheese xx xxxxxxx ampholyte — xxx xxxxxxx xxxxxxxxx/xxxxxxxxxxx pH xxxxxxxx — isoelectric focusing xx γ-caseins xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx. in: Electrophoresis-Forum 89 (X. J. Xxxxxx, ed.) xx 389-393, Xxxx-Xxxxxx, Xüxxxxx (1989).

Xxxxxx Ι., Xxxxxx X.-X., Xxxxxx X.-X.: Xxxxxxxx xxx Xxxxxxxx xx Xxxxx xxx Xxxxxxxxxxx xxx. -xäxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxxxxxx. X. Lebensm. Unters. Forsch. 174, 195–199 (1982).

Radola X.X.: Xxxxxxxxx-xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 50-100&xxxx;μx xxxxxxxxxxxxxx gels xx xxxxxxxxx xxxxx plates xx xxxxxxxxx xxxxx.&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx 1, 43–56 (1980).

Xxxxxxx 1

Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx

Xxxxxxx 2

Xxxxxxxxx vrstva xxxxxxxx xxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx fází xx xxxxxxxxxx

Xxxxxxx 3

Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxx ultratenkých xxxxxxxxxxxxxxxxxx gelů

a = xxxxxxxxx xxxxx (0,25&xxxx;xx); x = xxxxx xxxxx (5.3); c, x = xxxxxxxx xxxxx (5.1); x = gelový xxxxxx (4.1.2); x = xxxxx xxxxx gelu (5.2).

Xxxxxxx 4x

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx sýrů x&xxxx;xxxxxx a kozího xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x&xxxx;xxxxxx xxxxxxx kravského mléka

% XX = xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, X&xxxx;= xxxxxxx, E = ovčí, X&xxxx;= kozí

Na xxxxxxx xx xxxxxxxxxx horní xxxxxxxx xxxx IEF.

Obrázek 4x

Xxxxxxxxxxxxx fokusace kaseinů xx sýrů vyrobených xx xxxxx xxxxxx, xxxxxx a buvolího mléka, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, s různým xxxxxxx kravského xxxxx

% XX = xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx; 1 + = xxxxxx x obsahem 1 % xxxxxxxxx mléka x x přídavkem xxxxxxx xxxxxxxx kaseinu xx xxxxxx xxxxx. X&xxxx;= xxxxxxx, X&xxxx;= xxxx, X&xxxx;= kozí, X&xxxx;= xxxxxx

Xx obrázku xx xxxxxxxxxx celá xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx IEF.

Obrázek 5

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx referenčních xxxxxxxxx (XXX) a vzorků xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx ovčího x&xxxx;xxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

x, x = xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx 0 x 1 % xxxxxxxxx mléka; x-x = xxxxxx sýra xxxxxxxxxxxx 0, 1, 2, 3 x 7&xxxx;% kravského xxxxx; X&xxxx;= xxxxxxx, X&xxxx;= xxxx, X&xxxx;= kozí.

Byla xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx IEF při λ =&xxxx;634&xxxx;xx.

XXXXXXX XX

Xxxxxxxxx xxxxxx

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx jakosti

Analýzy provádějí xxxxxxxxxx xxxxxx v souladu x&xxxx;xxxxxxx&xxxx;12 xxxxxxxx (XX) x.&xxxx;882/2004&xxxx;(*) xxxx určené xxxxxxxxxxx orgány xxxxxxxxx xxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx vzorků a námitky xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx

1.

Xxxxx xxxxxx se xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx s příslušným xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx-xx xxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx ustanovení xxxxxxx x normě XXX 707„Xxxxx x xxxxxx xxxxxxx – Xxxxxxxx pro odběr xxxxxx“,

2.

Xxxxxxxxxxx zprávy o výsledcích xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, xxxxx umožní xxxxxxxxx xxxxxxxx v xxxxxxx s dodatkem.

3.

Pro xxxxxxx xxxxxxxxx v právních xxxxxxxxxx Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorky.

4.

Pokud xxxxx xx sporu ohledně xxxxxxxx, platební xxxxxxxx xxxx nechat xxxxx xxxxxxx nezbytnou analýzu xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx hradí strana, xxxxx spor xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx&xxxx;xxxxxxxxxx duplicitní xxxxxx xxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxx řádně uloženy x&xxxx;xxxxxxxxxxx orgánu. Výrobce xxxxx platební xxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx xx&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxx xxx xx&xxxx;xxxxxxx výsledků xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx analýzu xx 21 xxx od xxxxxxxx xxxxxxx.

5.

Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxx xx konečný.

6.

Jestliže xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxx po xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, že xxxxxx při xxxxxx xxxxxx nebyl správný, xxxxx xxxxxx xx x&xxxx;xxxxx možností xxxxxxxx. Xxxxx odběr xxxxxx xxxxxxxxx nelze, je xxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx

Xxxxxxxxxx splnění xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x xxxxxxx xx šarži

1.   Podstata metody

V xxxxxxxxx, kdy právní xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx intervence a xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx postupy xxx xxxxx xxxxxx, dodržují xx xxxx xxxxxxx. Xx všech xxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx 3 jednotek xxxxxx xxxxxxxxxx náhodně xx xxxxx xxxxxxxxx ke xxxxxxxx. Lze xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx se porovná xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx výpočtu 95&xxxx;% xxxxxxxxx spolehlivosti xxxxxxx xxxxxxxxxxx směrodatné xxxxxxxx, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx buď xx xxx, 1) xxx xxxx metoda xxxxxxxxxx na základě xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxx σx x σX, xxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx validace xx xxx, 2) zda xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx. Tento xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxx xxxxxxxxx měření xxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx je xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx

X&xxxx;xxxxx případě xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx σx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx σR stanovena a laboratoř xxxx xxxxxxxx soulad x&xxxx;xxxxxxxxxx charakteristikami validované xxxxxx.

Xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxx&xxxx; x počtu x opakovaných měření.

Vypočítá xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (x =&xxxx;2) x&xxxx; xxxxx:

Xx-xx konečný výsledek xxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxx ve xxxxx x = x ₁ + x ₂, x = x ₁ – x ₂, x = x ₁ · y ₂ nebo x = y ₁/x ₂, musí se x&xxxx;xxxxxxxx případech xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxx kombinování xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx mezní xxxxxxx XX, xxxxxxxx

xxxxx xx xx xx xx, že xxxxxxx XX xxxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxx xx nevyhovující xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx hodnotě LL, xxxxxxxx

xxxxx se xx xx xx, že xxxxxxx XX xxxxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx reprodukovatelnosti

V případech, xxx xxxx použity xxxxxx, které nejsou xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxxxxx, x&xxxx;xxx nebyla xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx zajištění xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx σx x σ X xx xxxx xx xxxxxx xxx výpočet xxxxxxxxx xxxxxxxxx X xxxxxx xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxx opakovatelnosti xxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxx vnitřní xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xx X .

Xxxxxxxx, jež xx xxxxx xxxxxxxxx xx účelem xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx mezní xxxxxxx, xxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxx 1. Xxxxxxxx-xx xx však šarže xx xxxxxxxxxxx zákonem xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx metody xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xx vyhodnotí x xxxxxxx s bodem 1.