Plné znění - 32018R0150

Xxxxxxx X

XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXXX&xxxx;XXXXXXXXXXX XXXXX

Xxxxxx: XXXX x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX X XXXXXX XXXXXXX

Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (XX) x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XX) x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (SOM) a je xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx podmáslí v SOM.

2.   DEFINICE

Obsah XX + XX: xxxxxxxxxx xxxxxx látky xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx postupem. Xxxxxxxx se xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx dipalmitoyl-fosfatidylethanolaminu (PEDP) xx 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx PS x&xxxx;XX xxxx derivátů o-ftaldialdehydu (XXX) xxxxxxx XXXX x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx (XX) x&xxxx;xxxxxxxxxxxxx detekcí. Kvantitativní xxxxxxxxx obsahu PS x&xxxx;XX xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx XXXX.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x. Xxxxx není xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx: XXXX x čistotě xxxxxxx 99&xxxx;%

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx být xxxxxxxxx xxx xxxxxxx – 18&xxxx;°X.

4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx pro xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx a zkušebních xxxxxx

4.2.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx čistoty xxx XXXX

4.2.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx XXXX

4.2.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx

4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx pro xxxxxxxx x-xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

4.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx, 12 X xxxxx roztok

4.3.2.   Kyselina boritá, 0,4 X xxxxx xxxxxx s xxxxxxxx xX xxxxxxxxx hydroxidem xxxxxx (4.3.1) xx 10,0

4.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;2-xxxxxxxxxxxxxxx

4.3.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;x-xxxxxxxxxxxxx (XXX)

4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx XXXX

4.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx rozpouštědla xxxx xxx připravena xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx HPLC.

4.4.2.   Voda xxxxxxx xxx XXXX

4.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx fluorometricky xxxxxxxx xxxxxxx

4.4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx

4.4.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx

4.4.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxx

4.4.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx.

5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX X XXXXXXX

5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxx xx 0,1&xxxx;xx x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx po 1&xxxx;xx

5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx o objemu 25 x&xxxx;100&xxxx;xx

5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx schopné xxxxxxxx xx 1 xx 10&xxxx;xx

5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

5.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx 0,2, 0,5 x&xxxx;5&xxxx;xx

5.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx baňky x&xxxx;xxxxxx 10, 50 x&xxxx;100&xxxx;xx

5.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxx o objemu 20 x&xxxx;100 μx

5.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx xxxxx

5.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx fungující xxx 27&xxxx;000 ×&xxxx;x

5.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx nádobky x&xxxx;xxxxxx xxx 5&xxxx;xx

5.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxx 25&xxxx;xx

5.12.&xxxx;&xxxx;&xxxx;xX xxxx x&xxxx;xxxxxxxxx na 0,1 jednotky pH

5.13.   Zařízení xx XXXX

5.13.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx schopný fungovat xxx xxxxxxx 1,0 xx/xxx při 200 xxxxxx

5.13.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx

5.13.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx kolonu udržovat xx xxxxxxx 30&xxxx;°X ± 1 °C

5.13.4.   Fluorescenční detektor xxxxxxx xxxxxxxx při xxxxxxxxx xxxxxx délce 330&xxxx;xx x&xxxx;xxxxxx xxxxxx xxxxx 440&xxxx;xx

5.13.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx dat schopné xxxxx plochy xxxx

5.13.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx XxXxxxxxxxx® – 100 (250 ×&xxxx;4,6&xxxx;xx) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (X 18), velikost xxxxxx 5 μx

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXX XXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx ISO 707.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX POSTUP

7.1.   Příprava roztoku xxxxxxxxx xxxxxxxxx

7.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx 30,0 ± 0,1&xxxx;xx tryptaminhydrochloridu (4.2.3) do xxxxxxx xxxxx xx 100 ml (5.6) a doplňte xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1).

7.1.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx (5.3) přeneste 1&xxxx;xx xxxxxx roztoku do xxxxxxx xxxxx xx 10&xxxx;xx (5.6) x&xxxx;xxxxxxx xx xxxxxx methanolem (4.2.1) x&xxxx;xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx tryptaminu 0,15 xX.

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx

7.2.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx 1,000 ± 0,001&xxxx;x&xxxx;xxxxxx XXX xx xxxxxxx na 25&xxxx;xx (5.2). Pipetou (5.3) xxxxxxxx 10 ml destilované xxxx x&xxxx;xxxxxxx 40 °C ± 1&xxxx;°X x&xxxx;xx xxxx 30 xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (5.4), xxx se xxxxxxxxxx všechny kousky.

7.2.2.   Pipetou (5.5) přeneste 0,2&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx baňky xx 10&xxxx;xx (5.6), pomocí xxxxxxxx xxxxxxxxx (5.7) xxxxxxxx 100 μx 0,15 mM xxxxxxx xxxxxxxxxx (7.1) x&xxxx;xxxxxxx xx xxxxxx methanolem (4.2.1). Převracením xxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xx 15 xxxxx xx xxxxxxxxxxxx lázně (5.8).

7.2.3.   Odstřeďujte (5.9) xxx 27 000 ×&xxxx;x&xxxx;xx xxxx 10 xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx skleněné xxxxxxx (5.10).

Xxxxxxxx: Xx provedení xxxxxxx XX xxxx xxx roztok xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxx 4&xxxx;°X.

7.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx

7.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx 55,4&xxxx;xx XXXX (4.1) xx xxxxxxx baňky xx 50&xxxx;xx (5.6) x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx (5.11) xxxxxxxx xxx 25 ml chloroformu (4.2.2). Xxxxxxxxxxxx baňku xxxxxxxx na 50 °C ± 1&xxxx;°X a opatrně xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx XXXX xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx 20 °C, xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1) a promíchejte xxxxxxxxxxx.

7.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx (5.3) xxxxxxxx 1&xxxx;xx xxxxxx xxxxxxx xx odměrné xxxxx xx 100&xxxx;xx (5.6) x&xxxx;xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1). Xxxxxxx (5.3) xxxxxxxx 1&xxxx;xx xxxxxx xxxxxxx do xxxxxxx xxxxx na 10&xxxx;xx (5.6), xxxxxxxx 100 μl (5.7) 0,15mM xxxxxxx xxxxxxxxxx (7.1) x&xxxx;xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Do xxxxxxxxx xxxxxxx XX musí xxx xxxxxx referenčního xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 4&xxxx;°X.

7.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx derivatizačního xxxxxxx

Xx xxxxxxx baňky xx 10&xxxx;xx (5.6) xxxxxxx 25,0 ± 0,1&xxxx;xx XXX (4.3.4), xxxxxxxx 0,5&xxxx;xx (5.5) xxxxxxxxx (4.2.1) x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx, aby se XXX xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.3.2) x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx (5.7) xxxxxxxx 20 μx 2-xxxxxxxxxxxxxxxx (4.3.3).

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx nádobě xxx xxxxxxx 4&xxxx;°X; xxxxxxx zůstává xxxxx xx dobu xxxxxxx xxxxx.

7.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx pomocí XXXX

7.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.4)

Xxxxxxxxxxxx X: Xxxxxx 0,3 mM xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx a roztok 3 mM xxxxxx xxxxxxx (x xxxxxxxx xX xxxxxxxxx na 6,5 ± 0,1 xxxxxxxxx xxxxxxx): xxxxxxxx: xxxxxxxxxxxxxxx =&xxxx;558: 440:2 (xxx.).

Xxxxxxxxxxxx X: Xxxxxxxx

7.5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx gradient:

Čas (xxx)	Xxxxxxxxxxxx X (%)	Rozpouštědlo X (%)	Xxxxxx (xx/xxx)
Xxxxxxxxx	40	60	0
0,1	40	60	0,1
5,0	40	60	0,1
6,0	40	60	1,0
6,5	40	60	1,0
9,0	36	64	1,0
10,0	20	80	1,0
11,5	16	84	1,0
12,0	16	84	1,0
16,0	10	90	1,0
19,0	0	100	1,0
20,0	0	100	1,0
21,0	40	60	1,0
29,0	40	60	1,0
30,0	40	60	0

Xxxxxxxx: Xxxx xx stát, xx xxxxxx xxxxxxxx bude xxxxx být xxxxx xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx rozlišení znázorněné xx xxxxxxx 1.

Xxxxxxx xxxxxx: 30 °C.

7.5.3.   Objem xxxxxxxx: 50 μx xxxxxxxxxxxxxxx činidla x&xxxx;50 μx xxxxxxx xxxxxx

7.5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxx

Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx kolonu xxxxxxxxxx 100&xxxx;% xxxxxxxxxxxxx X&xxxx;xx xxxx 15 xxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx X:X = 40:60 x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx po xxxx 15 xxxxx xxx xxxxxxx 1 ml/min. Xxxxxxxx slepý xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2.1).

Poznámka: Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx delší dobu xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx 30 xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx x xxxxxx 80:20 (xxx.).

7.5.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx obsahu XX + XX xx xxxxxxxxx vzorku

7.5.6.   Proveďte sérii xxxxxxxxxxxxxxxxxx analýz xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx získali xxxxxxxxxx xxxxxxxx časy. Xxx výpočet odezvového xxxxxxx nastříkněte xxxxxx xxxxxxxx standardu (7.3) xx xxxxxxx 5–10 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxx xx xxxxx xx každých 20–25 xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx 100&xxxx;% xxxxxxxxxxxxx X&xxxx;(7.5.1).

7.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx režim

7.6.1.   Pík XXXX

XXXX xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx xxxx. Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx sedly.

7.6.2.   Pík xxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx xxxx (xxxxxxx 1). Xxxxxx xxxx stanovte integrací xxxx xxxxx.

7.6.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxx XX x&xxxx;XX

Xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (xxxxxxx 1) xx XX xxxxxx v podobě xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx, před xxxxx xx xxxxxxx jeden xxxxx xxx. XX xx xxxxxx v podobě xxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx píků. Xxxxx xxxxxx každé skupiny xxxx stanovte xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx tak, xxx je znázorněno xx xxxxxxx 1.

8.   VÝPOČET X XXXXXXXXXXX XXXXXXXX

Xxxxx XX + XX xx zkušebním vzorku xx vypočte xxxxx:

X =&xxxx;55,36 × ((A₂)/(A₁)) × ((X₁)/(X₂))

xxx:

X	=	xxxxx PS xxxx XX (x xx/100 g prášku) ve xxxxxxxxx xxxxxx
X1	=	xxxxxx xxxx XXXX roztoku xxxxxxxxxxxx xxxxxx (7.3)
X2	=	xxxxxx xxxx XX xxxx PE xxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku (7.2)
X1	=	xxxxxx píku tryptaminu xxxxxxx srovnávacího vzorku (7.3)
X2	=	xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx zkušebního xxxxxx (7.2).

9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxxxx: Xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx byly xxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxx XXX&xxxx;(*).

9.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx x&xxxx;xxxxxxxx zkušebního xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx, xx neměla xxxxxxxxx xxxxxxxxx 2&xxxx;%. Jestliže xx za těchto xxxxxxxx získají xxx xxxxxxxxx, relativní rozdíl xxxx jejich výsledky xx xxxxx být xxxxx než 6&xxxx;% xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

9.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx k různým xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx mezi xxxxx xxxxxxxx xx xxxxx být xxxxx xxx 11&xxxx;% xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

10.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx P., Xxxxxxxxxx X., Xxxxxxxxx X. X., Sadini X., Xxxxxxxx X. „Xxxxxxxxx of xxxxxxxxxx&xxxx;xxxxxx xx xxxxxxxx&xxxx;xxxxxx xx XXXX xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxx.“ Sci. Tecn. Xxxx.-Xxx.&xxxx;39,395[1988].

Xxxxxxx 1

XXXX chromatogram XXX-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (PS) x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (PE) x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxx sušeného xxxxxxxxxxxx mléka. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx píky XX, XX x&xxxx;xxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx).

Xxxxxxx II

ZJIŠŤOVÁNÍ SYŘIDLOVÉ XXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXXX ODSTŘEDĚNÉM XXXXX XXXXXXX XXX XXXXXXX SKLADOVÁNÍ XX XXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX CHROMATOGRAFIÍ (XXXX)

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX X&xxxx;XXXXXX XXXXXXX

Xxxx xxxxxx xxxxxxxx zjistit xxxxxxxxxx xxxxxxxxx syrovátky x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx mléce xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx skladování xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX ODKAZ

Mezinárodní xxxxx XXX 707 – Xxxxx x mléčné xxxxxxx – Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX

Xxxxx xxxxxx ze syřidlové xxxxxxxxx je xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx procento xxxxxxxxx popsaným xxxxxxxx xxxxx xxxxxx kaseinomakropeptidů.

4.   PODSTATA XXXXXX

—	Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx odstředěného xxxxx, xxxxxxxxxx tuku x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxx trichloroctovou x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx;

—	Xxxxxxxxx množství kaseinomakropeptidů (XXX) x&xxxx;xxxxxxxxxxxx vysokoúčinnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX);

—	Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx u vzorků xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx, které xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx mléko x&xxxx;xxxxxxxxx nebo xxx xxxxxxxx známého xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx.

5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxxxxxx xx xxxxx chemikálie xxxxxxx x.x. Xxxxxxx xxxx xxxx xxx voda xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx 240&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXx₃XXXX) xx xxxx x&xxxx;xxxxxxx xx 1&xxxx;000&xxxx;xx. Roztok xx xxx xxx xxxx x xxxxxxxx.

5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxx, xX 6,0

Xxxxxxxxx 1,74&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx sekundárního (K₂HPO₄), 12,37&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx draselného (XX₂XX₄) x&xxxx;21,41&xxxx;x&xxxx;xxxxxx xxxxxxx (Xx₂XX₄) xxx v 700 ml xxxx. X&xxxx;xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xX xx 6,0 xxxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxx na 1&xxxx;000 xx x xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx tak, xxx xxxxxxxxx osvědčení standardů xxxx doporučením xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx.

Xxxxxx roztok xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx filtr x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx.

5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx objem xxxxxxxxxxxx (CH₃CN) s devíti xxxxxx vody. Před xxxxxxxx směs xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx.

Xxxxxxxx: Xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxxx účinek x xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx

5.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (xx. [0]).

5.4.2.   Totéž xxxxxx xxxxxxxxxx mléko zfalšované xxxxxxxxx 5&xxxx;% xx. xxxxxx syřidlové xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xx. [5]).

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX A POMŮCKY

6.1.   Analytické xxxx

6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx schopná xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx 2&xxxx;200&xxxx;x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx zkumavkami xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxx 50&xxxx;xx

6.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx třepačka

6.4.   Magnetická xxxxxxxx

6.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx o průměru xxx 7&xxxx;xx

6.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx hustoty x&xxxx;xxxxxxx xxx 12,5 cm

6.7.   Skleněné filtrační xxxxxxxx s membránovým filtrem x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx

6.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx pipety xxxxxxxxxx xxxxxxxx 10&xxxx;xx (ISO 648, xxxxx X, xxxx ISO/R 835) xxxx dávkovací xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 10,0 ml xx xxx minuty

6.9.   Dávkovací xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 20,0&xxxx;xx vody xxx xxxxxxx asi 50 °C

6.10.   Termostatická xxxxx xxxxx nastavená xx 25 ± 0,5&xxxx;°X

6.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xx XXXX, xxxxx xxxxx:

6.11.1.

Xxxxxxxx

6.11.2.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx – xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx – o objemu 15 xx 30 μx

6.11.3.

Xxx xxxxxx TSK 2&xxxx;000-XX xx sebou (xxxxx 30 cm, xxxxxxx xxxxxx 0,75 cm), xxxx xxxxxx s rovnocennou xxxxxxxxx (xxxx. xxxxx xxxxxx XXX 2&xxxx;000-XXxx, jedna xxxxxx Xxxxxxx Technologies Xxxxxx XX 250) x&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxx (3&xxxx;xx ×&xxxx;0,3&xxxx;xx) xxxxxxxx xxxxxxxxxx X&xxxx;125 nebo xxxxx xxxxxxxxxx s rovnocennou xxxxxxxxx

6.11.4.

Xxxxxxxxx xxxxxx nastavený xx 35 ± 1 °C

6.11.5.

UV xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx umožňující xxxxx xxx 205&xxxx;xx x&xxxx;xxxxxxxxxx 0,008 Å.

6.11.6.

Integrátor schopný xxxxxxxxxx mezi xxxxx Xxxxxxxx: Xxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx laboratorní xxxxxxx, xxxxx jejich xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx x&xxxx;xxxxxx xxxxx. X&xxxx;xxxxx xxxxxxx xx xxxxx, xxx výkyvy teploty x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx byly menší xxx 5&xxxx;°X.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXX VZORKŮ

7.1.   Vzorky xxxx být odebírány xxxxxxxx stanoveným v mezinárodní xxxxx XXX 707. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx používat xxxxx xxxxxx odběru xxxxxx xx předpokladu, xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxx takovým xxxxxxxx, xxx nemohlo xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx.

8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX POSTUP

8.1.   Příprava xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxx mléko xxxxxxxx xx nádobky, xxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Nádobku xxxxx xxxxxxxx. Sušené xxxxx důkladně xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

8.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx

Xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (6.2) xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx 50&xxxx;xx xxxxxxx 2,000 ± 0,001&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx.

8.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx a bílkovin

8.3.1.   Ke xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 20,0&xxxx;xx teplé (50 °C) xxxx. Xxxxxx rozpusťte xxxxxxxx xx dobu xxxx minut xx xxxxxxxxxx třepačce (6.3). Xxxxxxxx vložte do xxxxx xxxxx (6.10), xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx na 25&xxxx;°X.

8.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxx minut xxxxxxxx xx stálého xxxxxxx xxxxxxxxxxx míchačkou (6.4)&xxxx;10,0&xxxx;xx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (5.1) x&xxxx;xxxxxxx xxx 25 °C. Xxxxxxxx xxxxxx na 60 minut xx xxxxx lázně (6.10).

8.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx (6.2) xx xxxx 10 minut xxx xxxxxxxxxx xxxx 2&xxxx;200&xxxx;x, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx (6.6) x&xxxx;xxxxxxx 5 ml xxxxxxxx xxxxxxx.

8.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

8.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx 15 xx 30 μx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (8.3.3) xx zařízení xx XXXX (6.11) s průtokem 1,0&xxxx;xx xxxxxxxx roztoku (5.2) za xxxxxx.

Xxxxxxxx 1. X&xxxx;xxxxxxxxxx na xxxxxxxx xxxxxxx použitých xxxxx xxxx xx xxxxxxxx výrobce xxxxxx xxx použít i jiný xxxxxx.

Xxxxxxxx 2. Xxx xxxxxx přerušení xxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx x&xxxx;xxxx xxxxxxxxxxxx eluční xxxxxx (5.2).

Xxxx každým xxxxxxxxxx xx xxxx xxx 24 xxxxx xx kolony propláchnou xxxxx x potom xx promývají roztokem (5.3) xxxxxxx xx xxxx xxx xxxxx xxx xxxxxxx 0,2&xxxx;xx xx xxxxxx.

8.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx analýzy xxxxxxxxxx vzorku [E] xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx, x&xxxx;xxxx xx xxxxx xxx xxxxx xxxx retenčním xxxxx XX xxxxx:

Xxx XX:	Xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx x XX xxx 12,5 minuty
Pík XXX:	Xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx XXX x XX 15,5 xxxxxx

Xxxxxxxx časy xxxxxxxxxxxx píků xxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx kolony (xxxxx).

Xxxxxxxxxx (6.11.6) automaticky xxxxxxxxxx xxxxxx A každého píku:

AII:	plocha xxxx XX
XXXX:	xxxxxx xxxx XXX

Xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx každého chromatogramu xx účelem xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxx, xxxx původem x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

X&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

8.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx

8.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;X xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.4) xx xxxxxx použije xxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx&xxxx;8.2 xx 8.4.2.

Xxxxxxxx xxxxxxx připravené xxxxxxx, protože XXX xx x&xxxx;xxxxxxxxx 8 % xxxxxxxx trichloroctové xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxx se xxx xxxxxxx 30&xxxx;°X xxxxxxx odhadem o 0,2 % xx hodinu.

8.5.2.   Před xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorků xxxxxxxxxxxx xxxxxx opakovanými xxxxxxxx xxxxxxx (8.5.1) srovnávacího xxxxxx (5.4.2), xxxxx xx plocha x&xxxx;xxxxxxxx xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx XXX neustálí xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

8.5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx odezvové xxxxxxx R nastříknutím stejného xxxxxx filtrátů (8.5.1), xxxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxx.

9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX XXXXXXXX

9.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx

9.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx R:

Pík XX:

XXX = 100/(AII[0])

kde:

RII	=	odezvové xxxxxxx xxxx II
AII [0]	=	plochy xxxx II xxxxxxxxxxxx xxxxxx [0] získané x&xxxx;8.5.3

Xxx III:

RIII = X/(XXXX[5] – XXXX[0])

xxx:

XXXX	=	xxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX
XXXX [0] xxx XXXX [5]	=	xxxxxx xxxx XXX xxxxxxxxxxxx xxxxxx [0] x&xxxx;[5] xxxxxxx x&xxxx;8.5.3
X	=	xxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxxxxxx xxxxxx [5], xx. 5

9.1.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxx plochy xxxx xx vzorku [X]

XXX[X] = XXX × XXX[X]

XXXX[X] = XXXX × XXXX[X]

XXX[X] = RIV × XXX[X]

xxx:

XXX [X], XXXX [X], SIV [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxx xxxx II, XXX x&xxxx;XX xx xxxxxx [X]
XXX [X], XXXX [E]	=	plochy xxxx XX x&xxxx;XXX ve xxxxxx [E] xxxxxxx x&xxxx;8.4.2
XXX, RIII	=	odezvové faktory xxxxxxxxx v 9.1.1

9.1.3.   Výpočet relativního xxxxxxxxxx xxxx xxxx XXX xx xxxxxx [X]:

XXXXXX[X] = (XXXXX[X])/(XXXXX[5])

xxx:

XXXXXX [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxx III ve xxxxxx [E]
RTIII [E]	=	relativní xxxxxxxx čas xxxx XXX xx vzorku [X] získaný v 8.4.2
RTIII [5]	=	xxxxxxxxx retenční čas xxxx XXX v kontrolním xxxxxx [5] xxxxxxx x&xxxx;8.5.3

9.1.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx ukazují, že xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx XXX, xx. XXXXXX [X] x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xx xxxxxxxx 10 % xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx

—	xxx obsahu xxxxxxxxx &xx; 5 % xx XXXXXX [E] &xx;&xxxx;1,000;

—	xxx obsahu xxxxxxxxx ≤&xxxx;5&xxxx;% xx RRTIII [X] ≥&xxxx;1,000.

Xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx XXXXXX xx ± 0,002.

Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx XXXXXX [0] xxx xxxx xxxx xx 1,034. Xxxxx xxxxx xxxxx se xxxx xxxxxxx xxxxxx 1,000, avšak vždy xxxx xxx xxxxx xxx 1,000.

9.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx syrovátky xxxxxxxx xx xxxxxx:

X = SIII[E] – [1, 3 + (XXXX[0] – 0, 9)]

xxx:

X	=	xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx vzorku [X];
XXXX [E]	=	relativní xxxxxx xxxx XXX xxxxxxxxxx xxxxxx [E] xxxxxxx xxxxx 9.1.2;
1,3	=	xxxxxxxxxxx relativní xxxxxxxxx plochu xxxx XXX xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxx syrovátky na 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx různého xxxxxx. Xxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
XXXX [0]	=	xxxxxxxxxxx relativní xxxxxx xxxx XXX, xxxxx xx rovna XXXX&xxxx;×&xxxx;XXXX[0]. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x&xxxx;9.1.1 x&xxxx;8.5.3;
(XXXX [0]&xxxx;–&xxxx;0,9)	=	xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx xxxxx provést xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx 1,3, xxxxxxxx XXXX [0] xxxx xxxxx 0,9. Experimentálně xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxx III xxxxxxxxxxx xxxxxx&xxxx;[0] xxxxx 0,9.

9.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

9.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xxxx xxxxxxxx dvou xxxxxxxxx, xxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx překročit 0,2 % xx.

9.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku xx xxxxx xxxxxxxxx 0,4&xxxx;% xx.

9.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx

9.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx není xxxxxxxx, xx-xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX XXXX [X] vyjádřena x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx na 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx, ≤ 2,0 + (XXXX[0] – 0,9)

xxx

2,0	xx maximální xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx píku XXX x přihlédnutím x xxxxxxxxx průměrné xxxxx xxxx III, tj. 1,3, k xxxxxxxxx x důvodu kolísání xx xxxxxxx sušeného xxxxxxxxxxxx xxxxx a x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (9.3.2);
(XXXX [0] – 0,9)	xx xxxxxx, která xxxx být xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx xxxxxx XXXX [0] xxxx xxx 0,9 (viz xxx 9.2).

9.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX XXXX [E] > 2,0 + (XXXX[0] – 0,9) a relativní xxxxxx xxxx XX XXX [X]&xxxx;≤&xxxx;160, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx syrovátky xxxxx xxxx 9.2.

9.4.3.   Je-li xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX XXXX [X] &xx; 2,0 + (XXXX[0] – 0,9) x relativní xxxxxx xxxx XX SII [X]&xxxx;≤&xxxx;160, xxxxxxxx celkový xxxxx bílkovin (X %). Xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx 1 x 2.

9.4.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxx celkovým xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xx grafů 1 x&xxxx;2.

Xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx nejmenších xxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx plochy xxxx III, x&xxxx;xx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;90&xxxx;% xxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx 1 a 2 xxxx:

XXXX = 0,376 X % – 10,7	(graf 1)
SIII = 0,0123 XXX [X] + 0,93	(graf 2)

xxx:

XXXX	xx relativní xxxxxx xxxx XXX vypočtená xxx podle celkového xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxx relativní plochy xxxx XXX [X],
X&xxxx;%	xx xxxxxxx xxxxx bílkovin xxxxxxxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxx,
XXX [X]	xx xxxxxxxxx xxxxxx vzorku xxxxxxxxx x&xxxx;xxxx 9.1.2.

Xxxx rovnice xxxx xxxxxxxxxx xxxxx 1,3 xxxxxxxxx x xxxx 9.2.

Xxxxxx (X1 x X2) xxxx xxxxxxxxx relativní plochou XXXX [X] x xxxxxxxxx xxxxxxx XXXX xx xxx xxxxxx xxxxxx: T1 =&xxxx;XXXX[X]&xxxx;– [(0,376 X% – 10,7) + (XXXX[0] – 0,9)]X2 = XXXX[X] – [(0,0123 XXX[X] + 0,93) + (SIII[0] – 0,9)].

Xxxx-xx T1 a/nebo X2	xxxxx xxxx xxxx xxxxx xxx xxxx, xxxxx obsah xxxxxxxxx xxxxxxxxx stanovit.
Jsou-li X1 x T2	větší xxx xxxx, xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx se vypočítá xxxxx vzorce: X = X2 + 0,91

xxx:

0,91 je xxxxxxxxxx xx xxxxxx xxx xxxx plnou a přerušovanou xxxxxxx.

Xxxxxxx III

STANOVENÍ XXXXXX XX XXXXXXXXX XXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXXX ODSTŘEDĚNÉM XXXXX

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX: XXXXXXXXX PŘÍDAVKU SUŠINY XX SYŘIDLOVÉ SYROVÁTKY XX&xxxx;XXXXXXXX XXXXXXXXXXXX XXXXX

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX XXXXX: XXXXXXXXXXX XXXXX XXX 707

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX

Xxxxx sušiny xx xxxxxxxxx syrovátky xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx podle xxxxxx kaseinomakropeptidů.

4.   PODSTATA METODY

Vzorky xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx X&xxxx;xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx fázemi (xxxxxxx XXXX). Vyhodnocení xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx mléko xxx xxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxxx známého xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx vyšší xxx 1 % xx., xx přítomnost sušiny xx syřidlové xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxxxxxx se pouze xxxxxxxxxx čistoty x.x. Xxxxxxx xxxx xxxx xxx voda xxxxxxxxxxx xxxx voda nejméně xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxx xxx spektroskopickou xxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxx xxx XXXX.

5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx 240&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (CCl₃COOH) xx xxxx a doplňte na 1&xxxx;000&xxxx;xx. Xxxxxx xx xxx xxx xxxx x bezbarvý.

5.2.   Eluenty A a B

Eluent X: Vneste 150 xx xxxxxxxxxxxx (XX₃XX), 20 xx xxxxxxxxxxxx (XX₃XXXXXX₃) x 1,00 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXX, XX₃XXXX) xx xxxxxxx xxxxx x xxxxxxx xx 1&xxxx;000 xx xxxxx.

Xxxxxx X: Xxxxxx 550 xx xxxxxxxxxxxx, 20 xx xxxxxxxxxxxx a 1,00 xx XXX xx xxxxxxx baňky na 1&xxxx;000 xx x xxxxxxx xx 1 000 xx vodou. Xxxxxx xxxxxx před použitím xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μm.

5.3.   Uchování xxxxxx

Xx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X (xxxxxx) a xxxxx xx xxxxxxxxxx acetonitrilem (xxxxxx po xxxx 30 xxxxx). Xxxxxx xx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx.

5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx

5.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx stanovené xxx xxxxxxx skladování (xx. [0]).

5.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx sušené xxxxxxxxxx mléko zfalšované xxxxxxxxx 5&xxxx;% hm. xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (tj. [5]).

5.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx sušené xxxxxxxxxx xxxxx zfalšované přídavkem 50&xxxx;% hm. xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (tj. [50]).

6.   PŘÍSTROJE X POMŮCKY

6.1.   Analytické xxxx

6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx síly 2 200 g a vybavená xxxxxxxxxxxxxxx zkumavkami xx xxxxxx o objemu xxx 50&xxxx;xx

6.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

6.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

6.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx asi 7&xxxx;xx

6.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx papíry střední xxxxxxx o průměru asi 12,5&xxxx;xx

6.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx filtrační xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx

6.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 10&xxxx;xx (ISO 648, xxxxx X, xxxx XXX/X 835), xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 10,0 ml xx xxx minuty

6.9.   Dávkovací xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 20,0 ml xxxx xxx xxxxxxx xxx 50&xxxx;°X

6.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx 25 ± 0,5&xxxx;°X

6.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xx HPLC, které xxxxx:

6.11.1.

Xxxxxxxx s binárním xxxxxxxxxx

6.11.2.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx – ruční xxxx xxxxxxxxxxx, x&xxxx;xxxxxx 100 μx

6.11.3.

Xxxxxx Xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx Xxxxxx 300 XX-X3 (délka 25&xxxx;xx, xxxxxxx xxxxxx 0,46&xxxx;xx), xxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxx xx xxxx xxxxxxx

6.11.4.

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx 35 ± 1 °C

6.11.5.

UV xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx vlnovou xxxxxx, který xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx 210&xxxx;xx (v xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx vlnové xxxxx xx xx 220&xxxx;xx) x&xxxx;xxxxxxxxxx 0,02 Å.

6.11.6.

Xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx nastavení xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx linii xxxx xxxx xxxxx Xxxxxxxx: Práce x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx možná xx xxxxxxxxxxx, xx xxxxxxx xxxxxxxx více než x 1&xxxx;°X, xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx změnám xxxxxxxxxx xxxx XXXX.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXX VZORKŮ

7.1.   Vzorky xxxx xxx odebírány xxxxxxxx stanoveným x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxx XXX 707. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx odběru xxxxxx xx xxxxxxxxxxx, že xxxx xxxxxx odpovídá xxxxxxx uvedené xxxxx.

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx dojít xx znehodnocení nebo xxxxx xxxxxxx.

8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX POSTUP

8.1.   Příprava xxxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx do xxxxxxx, xxxxx xxxxx je xxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxx prášku x&xxxx;xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx víčkem. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxx důkladně xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx převracením nádobky.

8.2.   Zkušební xxxxx

Xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (6.2) nebo vhodné xxxxx xx xxxxxx xx 50&xxxx;xx navažte 2,00 ± 0,001&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx: X&xxxx;xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku, aby xxxx xxxxxxx zkušební xxxxx xxxxxxxxxx 2,00&xxxx;x.

8.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx a bílkovin

8.3.1.   Ke xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 20,0&xxxx;xx xxxxx (50 °C) vody. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (6.3) xx prášek xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx lázně (6.10), xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx 25&xxxx;°X.

8.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx dvou minut xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (6.4) xxxxxxxx 10,0&xxxx;xx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxx 25 °C (5.1). Xxxxxxxx vložte xx 60&xxxx;xxxxx xx xxxxx xxxxx (6.10).

8.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx (6.2) xx dobu 10 xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx 2&xxxx;200&xxxx;x, xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx papír (6.6) x&xxxx;xxxxxxx 5 ml xxxxxxxx vyhoďte.

8.4.   Chromatografické xxxxxxxxx

8.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx XXXX x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx možnost falešně xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx kysaného xxxxxxxx.

8.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx XXXX x&xxxx;xxxxxxxxxx fázemi xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx s mrtvým xxxxxxx xxx 6 ml (xxxxx xx bodu, xxx xx stékají xxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx) xx xxxxxxxxx retenční čas x&xxxx;xxxxx 26 xxxxx ± 2 xxxxxx xxx CMPΑ. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx s menším xxxxxx xxxxxxx (xxxx. 2&xxxx;xx) xx xxxxxxxxx xxxxxxxx čas 22 xxxxx.

Xxxxxxx roztoky xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.4) x&xxxx;xxxxxxx 50&xxxx;% syřidlové syrovátky x&xxxx;xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx 100 μl xxxxxxxxxxxx xxxx filtrátu (8.3.3) xx xxxxxxxx xx HPLC, které xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx gradientu xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx 1.

Xxxxxxx 1

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx

Xxx (xxx)	Xxxxxx (xx/xxx)	% X	% X	Xxxxxx
Xxxxxxx	1,0	90	10	*
27	1,0	60	40	xxxxxx
32	1,0	10	90	xxxxxx
37	1,0	10	90	xxxxxx
42	1,0	90	10	xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxxx xx mělo xxxxxx polohu píku XXXΑ.

Xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx, xxxxx xx xxxxx xxxxxx pro normální xxxxxxxx (xxx 8.4.3), xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx: % X = 10 – 2,5 + (13,5 + (RTcmpA – 26) / 6) * 30 / 27&xxxx;% X = 7,5 + (13,5 + (XXxxxX – 26) / 6) * 1,11

xxx

XXxxxX	:	xxxxxxxx xxx XXXΑ x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
10	:	xxxxxxxxx % X x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
2,5	:	% X xx xxxxxxxx bodu xxxxx xxxxxxxxx % X x normálním xxxxxxxxx
13,5	:	xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
26	:	xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx XXXΑ
6	:	xxxxx směrnic xxxxxxxxxxxx a xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
30	:	% B x xxxxxxxxxx xxxx xxxxx % X xx 27 minutách v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
27	:	xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx gradientu

8.4.3.   Nástřik xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxxxx 100 μx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxxxxx (8.3.3) xx xxxxxxxx xx XXXX x&xxxx;xxxxxxxx 1,0&xxxx;xx elučního roztoku (5.2) xx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx se xxxxx x&xxxx;8.4.2. Za xxxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxx xxxxxx X:X =&xxxx;76:24 (5.2). Okamžitě xx xxxxxxxx se spustí xxxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx, xx xxxxxxxx X xx za 27 minut xxxxxx x 5 %. Xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, kterým xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx 90&xxxx;% X. Toto xxxxxxx xx xxxxxxx xx xxxx xxxx minut x po xxxxx xxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx složení xxxx xxxxx xxxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx. X xxxxxxxxxx xx vnitřním xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx další xxxxxxx xxxxxxxx 15 xxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxx 1. Xxxxxxxx čas CMPA xx xxx xxx 26 ± 2 xxxxxx. Xxxx lze xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx podmínek xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx v % B xxxx xxxxxxxxxxx x konečnými xxxxxxxxxx prvního xxxxxxxxx xxxx zůstává xx xxxx 5&xxxx;% B.

Poznámka 2. Xxxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxx odplynit x&xxxx;xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx. Xx xx xxxxxxxx xxxxx xxx xx, xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx retenčního xxxx xxxx CMPA xxxx být xxxxx xxx 0,1 xxxxxx (x = 10).

Poznámka 3. Xx každých xxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx referenční vzorek [5] a xxxxxx xxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx faktoru X (9.1.1).

8.4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx zkušebního xxxxxx (X) se získávají xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxx xx xxx XXXX xxxxx xxxx retenčním xxxxx xxxxxxxxx v délce 26 xxxxx.

Xxxxx X&xxxx;xxxx CMPA xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (6.11.6). Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Jestliže xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, analýzu nebo xxxxxxxxx je třeba xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Je-li xxx XXXX dostatečně oddělen xx xxxxxxxxx xxxx, xxxx xx xx xxxxxx xxxxxxxxx základní xxxxx xxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx svislé xxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxx počáteční xxx by měl xxx x xxxxxxxxx xxxx CMPA (tedy xx x čase x =&xxxx;0 min!). Xxx referenční xxxxxxxx x xxxxxx použijte xxxxxx xxx xxxxxxxxx x x xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx, xxx xx xx xxxxxx a referenčním xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxx kvantitativní xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx vzhled každého xxxxxxxxxxxxx za xxxxxx xxxxxxxx případných anomálií xxxxxxxxxxx buď nesprávnou xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. X&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

8.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx

8.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;X xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.4.1 až 5.4.2) xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx 8.2 xx 8.4.4. Použijte čerstvě xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx XXX xx x&xxxx;xxxxxxxxx 8&xxxx;% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Při teplotě 4&xxxx;°X zůstává xxxxxx xxxxx xx xxxx 24 xxxxx. X&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx zařízení xxxxxxxxx misku xx xxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxx 8.4.2 xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx je % X x počátečních xxxxxxxxxx známo x xxxxxxxxxxx analýz.

Chromatogram xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5) xx xxx xxx obdobný xxxxxxxxxxxxx znázorněnému na xxxxxxx 1. Xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx XXXX xxx xxxx xxxx. Xx nezbytně nutné xxxxxxxxx podobné separace.

8.5.2.   Před xxxxxxxxxxxxxxxxx stanovením vzorků xxxxxxxxxxx 100 μx xxxxxxxxxxxx xxxxxx bez xxxxxxxxx xxxxxxxxx [0] (5.4.1).

Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxx x&xxxx;xxxxxxxxx čase XXXX píku.

8.5.3.   Odezvové faktory X xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx (8.5.1), xxxxxx xxxx xxxxxxx xxx vzorky.

9.   VYJÁDŘENÍ XXXXXXXX

9.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx výpočtu x&xxxx;xxxxxx

9.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx R:

Pík XXXX: R = X/X

xxx

X	=	xxxxxxxx xxxxxx xxxx XXXX
X	=	xxxxx píku CMPA
W	=	množství xxxxxxxxx ve xxxxxxxxxxx xxxxxx [5]

9.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx syrovátky xxxxxxxx ve xxxxxx

X(X)&xxxx;= X&xxxx;×&xxxx;X(X)

xxx

X(X)	=	xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxx [X]
X	=	xxxxxxxx faktor xxxx XXXX (9.1.1)
X(X)	=	xxxxx píku XXXX vzorku (X)

Xxxxx xx W(E) vyšší xxx 1&xxxx;% a rozdíl xxxx retenčním xxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx [5] xxxxx xxx 0,2&xxxx;xxxxxx, pak je xxxxxxxxxx sušiny ze xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

9.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

9.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xxxx výsledky xxxx stanovení, která x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx současně nebo x&xxxx;xxxxxx sledu xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx 0,2&xxxx;% xx.

9.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxx.

9.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx

Xxx xxxxxxx xx 0&xxxx;% xx 16&xxxx;% syřidlové xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx&xxxx;&xx;&xxxx;0,99.

9.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx

Xxxxx xxxxxxx 1 % xxxxxxxx xxxxxxxxx z důvodu xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx 1

Ni—4.6 xxxxxxxx

XXXXXXX XX

Xxxxxx analýzy xxxxx x soukromém xxxxxxxxxx

Xxxxxxxx	Xxxxxx
Xxx&xxxx;(6)	XXX 17189 xxxx ISO 3727 xxxx&xxxx;3
Xxxx	XXX 3727 xxxx 1
Xxxxxxxxxx xxxxxx (x výjimkou xxxx)	XXX 3727 xxxx 2
Sůl	ISO 15648

XXXXXXX XXX

Xxxxxx analýzy xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx skladování

Parametr	Metoda
Tuk	ISO 1736
Xxxxxxxxx	XXX 8968 xxxx 1
Xxxx	XXX 5537

PŘÍLOHA XXXX

Xxxxxx xxxxxxx xxxx x xxxxxxxxx skladování

1.

Je xxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx výhradně x&xxxx;xxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx xx buvolího mléka, xxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx kasein x&xxxx;xxxxxxxxx mléka, x&xxxx;xx xxxxx xxxxxx se xxxxxxx xxxxxx analýzy xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx mléka xx xxxxxxxx za prokázanou, xxxxx xxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxx je xxxxxx xxxx xxxxx v porovnání x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx vzorku xxxxxxxxxxx 1 % xxxxxxxxx xxxxx, xxxxx je xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx.

2.

Xxxxxx xx xxxxxxxxxx kaseinu x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxx uvedených x&xxxx;xxxxxxxx&xxxx;1 xxxxx xxx xxxxxxxxx xx těchto xxxxxxxx: x) xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx být nejvýše 0,5&xxxx;%; x) xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx; x) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx kaseinu x&xxxx;xxxxxxxxx mléka x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx i po dlouhé xxxx xxxxx, x&xxxx;xxxxx xxxx za xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx docházet. Není-li xxxxx z výše xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx metody xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx.

Xxxxxxx

XXXXXX XXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXX MLÉKA X&xxxx;XXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXX X&xxxx;XXXXXX XXXXX, XXXXXX MLÉKA XXXX XXXXXXXX XXXXX, XXXX XXXXX XXXXXX, XXXXXX X&xxxx;XXXXXXXX XXXXX

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX

Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx z ovčího mléka, xxxxxx xxxxx, buvolího xxxxx xxxxx ze xxxxx xxxxxx, xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx mléka xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx γ-kaseinů xx xxxxxxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXX POUŽITÍ

Metoda je xxxxxx pro xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx zjišťování xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx, xxx tepelně xxxxxxxxxx, x&xxxx;xxxxxxxxx a zralých xxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxx nebo xx xxxxx xxxxxx, xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxx mléka x&xxxx;xxxx xxxxxxx ošetřenými bílkovinnými xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx kaseinů x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (XX.3.4.21.7)

3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxxx

3.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx vybarvených xxxxxxx xxxxxxx γ3 x γ2 (xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) xx xxxxxxx porovnání xxxxxxx xxxxxxxxx ze xxxxxx x obrazci xxxxxxxxx x téhož xxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0 % x 1&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxx.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxx-xx xxxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx čistoty p.a. Xxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx: Následující xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx s obsahem xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx 265 × 125 ×&xxxx;0,25&xxxx;xx. Xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxx xxxxx xxxx, xxxx být nutné xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx gelů x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx

4.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx xxxx

Xx xxxx xxxxxxxxx:

4,85&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxx

0,15 x X, X′-xxxxxxxx-xxx-xxxxxxxxxx (XXX)

48,05&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx

15,00&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx (87&xxxx;% xx.),

xxxxxxx xx 100 ml x xxxxxx xx xxxxxxxxxx x hnědé xxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx: Místo xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;XXX.&xxxx;X&xxxx;xxxxxxx, že koncentrace xxxxxxxxxx xxxxxxx xx 30&xxxx;% xx./xxx. xxxxxxxxxx x&xxxx;0,8&xxxx;% xx./xxx. XXX, xxx uvedená xxxxxxxx (4,85 x&xxxx;xxxxxxxxxx a 0,15 x&xxxx;XXX) xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 16,2&xxxx;xx. Zásobní xxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxx 10 xxx. Xxxxx xx jeho xxxxxxxx vyšší xxx 5 μX, xx xxxxx provést xxxx xxxxxxxxxx promícháváním x 2 x Amberlitu XX-3 xx xxxx 30 minut a xxxx jej přefiltrovat xxxx 0,45μx xxxxxxxx.

4.1.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxx

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx&xxxx;(*) xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx (xxx 4.1.1).

9,0&xxxx;xx xxxxxxxxx roztoku

24 mg β-xxxxxxx

500 μx xxxxxxxx xX 3,5–9,5

250 μx amfolytu xX 5–7

250 μx xxxxxxxx xX 6–8

Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx a odplyňujte xx xxxx xxxx xx xxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx lázni xxxx xx vakuu.

Poznámka: Xxxxxx xxxxxx se musí xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx (viz 6.2).

4.1.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx

4.1.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;X, X, N′, X′-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (Temed)

4.1.3.2.   40 % xx./xxx. xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX)

800 mg XXX xx xxxxxxxx ve xxxx a xxxxxx xx xx 2 xx.

Xxxxxxxx: Vždy xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx XXX.

4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxx xxxx xxxxxxx parafin

4.3.   Anodový xxxxxx

Xxxxxxxxx 5,77 g xxxxxxxx xxxxxxxxxx (85&xxxx;% xx.) xx xxxx x xxxxxx xx 100 xx.

4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx 2,00 x xxxxxxxxx sodného xx vodě a xxxxxx xxxxx xx 100 ml.

Příprava vzorku

4.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx k izolaci xxxxxxxx

4.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxx octová (25,0 ml xxxxxx xxxxxxxx octové doplněné xxxxx xx 100 xx).

4.5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx

4.5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx

4.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xx vodě xxxxxxxxx:

5,75&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx (87&xxxx;% hm.)

24,03 g močoviny

250 mg xxxxxxxxxxxxxxx

x xxxxxxx xx 50 ml xxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx; xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx je xxxxx týden.

4.7.   Chemikálie určené x&xxxx;xxxxxxxxxxxx štěpení xxxxxxx

4.7.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx uhličitanu amonného

Titrujte xxxxxxx roztok xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx 0,2 mol/l (1,58 g/100 xx xxxx) xxxxxxxxxx 0,05 xxx/x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX, 1,46 x/100 xx) roztokem uhličitanu xxxxxxxx 0,2 mol/l (1,92 x/100 ml xxxx) xxxxxxxxxxxx 0,05 xxx/x XXXX xx xX 8.

4.7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx plasmin (XX. 3.4.21.7), x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx 5 X/xx.

4.7.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx ε-aminokapronové xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx 2,&xxxx;624&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx ε-xxxxxxxxxxxxxx (6-amino-n-hexankyseliny) xx 100 ml 40 % xxx. ethanolu.

4.8.   Referenční xxxxxxxxx

4.8.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx a kozího xxxxxxxxxxxx xxxxx vysráženého pomocí xxxxxxx x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxx 0 % x&xxxx;1&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxx xx Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx xxx Xxxxxx, B-2440, Xxxx, Xxxxxx.

4.8.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx laboratorních xxxxxxxxxxxx standardů buvolího xxxxx xxxxxxxxxxx pomocí xxxxxxx x x xxxxxxx 0&xxxx;% x 1&xxxx;% kravského xxxxx

Xxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx syrového xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx teplotě 37 °C (2&xxxx;500&xxxx;x, 20 xxxxx). Xx rychlém ochlazení xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxx na 6 xx 8 °X xx xxxxx xxxxxxxx xxxxx tuková vrstva. Xxx xxxxxxxx 1&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxxxxx 5,00&xxxx;xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx 495 ml xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx mléka v kádince x&xxxx;xxxxxx 1 l. Xxxxxxx xX xxxxxxx xx 6,4 xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx mléčné (10 %, xx./xxx.). Xxxxxxx xxxxxxx xx 35 °X, xxxxxxxx 100 μx xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxx 1: 10 000, xxx 3&xxxx;000 U/ml) x&xxxx;xxxxxxxx po xxxx 1 xxxxxx. Poté xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx 35&xxxx;°X x&xxxx;xxxxxxxx sýřeniny. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx mléko xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, aniž xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Lyofilizované xxxxx xx xxxxx xxxxxxxx xx homogenní xxxxxx. X&xxxx;xxxxxxxx referenčního xxxxxxxxx 0&xxxx;% použijte xxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxx při teplotě – 20&xxxx;°X.

Xxxxxxxx: Xxxx xxxxxxxxx referenčních xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx fokusací xxxxxxx xxxxxxxxxxx působení plasminu.

Chemikálie xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx bílkovin

4.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx

Xxxxxxxxx 150 g kyseliny xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx x&xxxx;xxxxxxx xx 1&xxxx;000&xxxx;xx.

4.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx 500 ml xxxxxxxxx x 200 xx xxxxxx kyseliny octové xxxxxxxxxxxx xxxxx xx 2&xxxx;000 xx.

Xxxxxxxx: Odbarvovací xxxxxx xx připravuje xxxxx xxx xxxxxxx; xxx jej xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx roztoku 50 % (xxx.) xxxxxxxxx a xxxxxxxxx roztoku 20&xxxx;% (xxx.) xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

4.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx roztoky

4.11.1.   Barvicí roztok (xxxxxxx xxxxxx 1)

V 1&xxxx;000 ml 90&xxxx;% xxx. xxxxxxxxx rozpusťte xxxxxx magnetické míchačky (xxx 45 minut) 3,0 x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxx X-250 (C. X. 42655) x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx dva xxxxxxx husté xxxxxxxx xxxxxx.

4.11.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx (zásobní xxxxxx 2)

X&xxxx;1&xxxx;000&xxxx;xx 20 % xxx. xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 5,0&xxxx;x&xxxx;xxxxxx měďnatého, xxxxxxxxxxxx.

4.11.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx roztok (pracovní xxxxxx)

Xxxxxxxxxxxxx xxxx barvením xxxxxxxxx 125&xxxx;xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.11.1 x&xxxx;4.11.2).

Xxxxxxxx: Xxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxx x den přípravy.

5.   PŘÍSTROJE X XXXXXXX

5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx desky (265 x 125 x 4 mm), xxxxxxx váleček (o xxxxx 15 cm), xxxxxxxxx stolek.

5.2.   Nosná xxxxx xxxx (265 ×&xxxx;125&xxxx;xx)

5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxx (280 × 125 mm). Xx xxxxx dlouhý xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx pásky (280 ×&xxxx;6 ×&xxxx;0,25&xxxx;xx) (xxx xxxxxxx 1).

5.4.   Elektrofokusační xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx (např. 265 × 125 mm) x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx zdroj (≥ 2,5&xxxx;xX) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx zařízení

5.5.   Cirkulační kryostat x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 12 ± 0,5&xxxx;°X

5.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx nastavitelná xx 3&xxxx;000&xxxx;x

5.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxx (o xxxxx ≥ 265 mm)

5.8.   Plastové xxxxxx nádobky xx xxxxxxx a katodový xxxxxx

5.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx (10 × 5 mm, x&xxxx;xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx s nízkou xxxxxxxx xxxxxxxx)

5.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx a barvicí xxxxx (xxxx. xxxxx xx xxxxxxxx 280 ×&xxxx;150&xxxx;xx) x&xxxx;xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx

5.12.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx tyče 10&xxxx;xx x&xxxx;xxxxxxxxx 8&xxxx;000 až 20&xxxx;000 ot/min

5.13.   Magnetická xxxxxxxx

5.14.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx xxxxx

5.15.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx

5.16.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx na 25 μx

5.17.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx

5.18.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx, nastavitelná xx 35 a 40 ±&xxxx;1&xxxx;°X x&xxxx;xxxxxxxxx

5.19.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx zařízení xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx délce λ =&xxxx;634&xxxx;xx

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

6.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

6.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxx

Xx xxxxxxxxxxxxx kyvety xx 100&xxxx;xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx odpovídající 5&xxxx;x&xxxx;xxxxxx, přidejte 60&xxxx;xx xxxxxxxxxxx xxxx a obsah xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (8&xxxx;000 až 10 000 xx/xxx). Upravte xX xx 4,6 zředěnou xxxxxxxxx xxxxxxx (4.5.1) x&xxxx;xxxxxxxxxxx (5 minut, 3&xxxx;000&xxxx;x). Dekantujte xxx x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx 20&xxxx;000 xx/xxx xx 40&xxxx;xx destilované xxxx x&xxxx;xxxxxxxx xX xxxxxxxxx xx 4,5 xxxxxxxx kyselinou octovou (4.5.1). Xxxxxxxx 20&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxxx (4.5.2) x&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx (5 xxxxx, 3&xxxx;000&xxxx;x). Špachtlí xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx se nachází xxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxx (xxx xxxxxxx 2), a obě xxxx xxxxxxxxxx. Kasein xx xxxxx xxxxxxxxxxxx se 40 xx xxxxxxxxxxx xxxx (xxx xxxx) x 20 xx xxxxxxxxxxxxxx (4.5.2) a xxxxxxxx se. Xxxxx xxxxxx opakujte, xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx bezbarvé (xxxxxxx xx xxxxxxx). Xxxxxxxxxx xxxxxx homogenizujte s 50 ml xxxxxxx (4.5.3) x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx hustý xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 25&xxxx;xx xxxxxxx xxxxxxx a nechte vysušit xx xxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxx dusíku. Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx: Suché xxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx – 20 °C.

6.1.2.   Přeměna β-xxxxxxx na γ-xxxxxxx xxxxxxxxx plasminu

Rozptylte 25 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (6.1.1) v 0,5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.7.1) x xxxx 20 xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxxx. Směs xxxxxxxx xx 40 °C x&xxxx;xxxxxxxx 10 μl plasminu (4.7.2), xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx 1 hodinu při xxxxxxx 40&xxxx;°X za xxxxxxx třepání. Xxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx 20 μx roztoku xxxxxxxx ε-xxxxxxxxxxxxxx (4.7.3). Xxxx xxxxxxxx 200 mg xxxxx xxxxxxxx x&xxxx;2&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx ε-xxxxxxxxxxxxxx&xxxx;xxxxxx lyofilizovat x xxxx zbytky xxxxxxxxx x 0,5 xx xxxxxxxxx roztoku xxx rozpouštění xxxxxxxx (4.6).

6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx polyakrylamidových xxxx x&xxxx;xxxxxxx močoviny

Na xxxxxxxxx xxxxx (5.1) válečkem xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx (5.2) s pomocí xxxxxxxx xxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx vodu xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx naneste druhou, xxxxx xxxxx (5.3) x&xxxx;xxxxxxxxxxx vložkami (0,25 mm) xx xxxxx skleněnou xxxxx. Tuto xxxxxx xxxxx xxxxxx vodorovně xx xxxxxxxxx xxxxxx.

X xxxxxxxxxxxx odplyněnému xxxxxxx xxxx (4.1.2) xxxxxxxx 10 μx Xxxxxx (4.1.3.1), xxxxxxxxxxx a přidejte 10 μx roztoku XXX (4.1.3.2); důkladně xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx nalijte xxxxxxxxxx xx střed xxxxx xxxxx. Jeden xxxxx xxxxx xxxxx xxxx (xxxxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxxx xxxx) xxxxxxxx x&xxxx;xxxxx x&xxxx;xxxxx fólií x&xxxx;xxxxxx pokládejte xxx, xxx xx mezi xxxxxxx vytvořila xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx tenká xxxxxx xxxx bez xxxxxx (xxxxxxx 3). Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx gelu opatrně xxxxxxxxxxx xx celé xxxxx a položte xx xx xxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx, aby xx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (xxx xx 60 xxxxxxxx) xxxxx x xxxxx xxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxx xxx, xx skleněné xxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxx. „Xxxxxx xxxxxxx“ xxxxxxx do tenké xxxxx x&xxxx;xxxxxx xx xxxxxxxxxx (xxxxxxx na xxxx xxxxx).

Xxxxxxxx: Krycí xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxx gel xxxx xxx xxxxxxxx na xxxxx xxxxx; xx xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx elektroforetického xxxxxxxx (xxx gely o rozměrech 4,5 ×&xxxx;5&xxxx;xx).

6.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxxx xx 12 °X. Xxxxx xxxxxx xxxxx fólie gelu xxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxx xx střed xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx několik xxxxx xxxxxxxx (4.2). Xxxxxxx xxxxxxxx „xxxxxx xxxxxxx“ xxxxxx xxxxx xxxxxxxx dolů, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.3, 4.4), xxxxxxxxx xx xxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxx na xxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxxxx 9,5&xxxx;xx).

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

6.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxx 265 ×&xxxx;125 × 0,25 mm

Fáze	Doba (min)	Napětí (V)	Proud (mA)	Příkon (W)	Volty/hodiny (Vh)
1. Předběžná fokusace	30	max. 2 500	max. 15	konstantní 4	xxx 300
2. Fokusace xxxxxx&xxxx;(7)	60	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 15	xxxxxxxxxx 4	xxx 1&xxxx;000
3. Xxxxxxx xxxxxxxx	60	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 5	xxx. 20	xxx 3&xxxx;000
	40	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 6	xxx. 20	xxx 3&xxxx;000
	30	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 7	xxx. 25	xxx 3&xxxx;000

Xxxxxxxx: Xxxxxxxx se změní xxxxxxxx nebo šířka xxxx, xxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxx být xxxxxxxxxxxxx způsobem xxxxxxxx (xxxx. xxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx-xx xx xxx x&xxxx;xxxxxxxxx 265 × 125 ×&xxxx;0,5&xxxx;xx).

6.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx programování xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx zařízení (2 gely 5,0 ×&xxxx;4,5&xxxx;xx, xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxx.

Xxxx	Xxxxxx	Xxxxx	Xxxxxx	Xxxxxxx	Xxxxx/xxxxxx
1. Xxxxxxxxx xxxxxxxx	1&xxxx;000 V	10,0 xX	3,5 X	8 °X	85 Xx
2. Xxxxxxxx xxxxxx	250 V	5,0 xX	2,5 X	8 °X	30 Vh
3. Fokusace	1 200 X	10,0 xX	3,5 X	8 °X	80 Vh
4. Fokusace	1 500 X	5,0 xX	7,0 X	8 °X	570 Xx

Xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxx 2 xxxxxx xxx 0 Xx.

Xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxx 2 odstraňte při 30 Xx.

6.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx bílkovin

6.4.1.   Fixace xxxxxxxx

Xxxxxxxx po xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx proužky x xxx xx ihned xxxxx do barvicí/odbarvovací xxxxx naplněné 200 ml xxxxxxxx (4.9). Xxx x ní xxxxxxxx 15 xxxxx za xxxxxxx xxxxxxx.

6.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxx xxxxx

Xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx po dobu 30 sekund xxxx xx 100 xx xxxxxxxxxxxxx roztoku (4.10) Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx 250&xxxx;xx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.11.3) x gel nechte xx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx 45 xxxxx xxxxxxxxx.

6.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx

Xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx desku xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx 30 xxxxxx vždy xx 100&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.10). Poté 15 xxxxx protřepávejte x&xxxx;200&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx; xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx dvakrát xx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxx potom xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx vodou (2 ×&xxxx;2 xxxxxx) x&xxxx;xxxxxx uschnout na xxxxxxx (2 až 3 hodiny) xxxx xxxxxx vysoušečem xxxxx (10 xx 15 xxxxx).

Xxxxxxxx 1: Fixaci, xxxxxxxxx, xxxxxxx a odbarvování xxxxxxxxxx při xxxxxxx 20&xxxx;°X. Vyšší xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx 2: Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. Xxxxxx Xxxxxxxx Kit, Protein, Xxxxxxxxx Xxxxxxx, kód x. 17-1150-01), musí xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx x poměru 5 xx/xx.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX

Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxx referenčních xxxxxxxxx x stejného gelu. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x sýrech vyrobených x ovčího xxxxx, xxxxxx mléka, xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxxx x buvolího xxxxx xx xxxxxxx prostřednictvím γ3- x γ2-xxxxxxx, xxxxxxx izoelektrické xxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xX 6,5 x xX 7,5 (obrázky 4x, x, obrázek 5). Xxxxxxxx xxx xx xxxxx než 0,5 %.

7.1.   Vizuální xxxxxxxxx

Xxx vizuální xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxxxxxxxxx standardů x xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx, kozích x/xxxx xxxxxxxx γ2- x γ3-xxxxxxx (viz „γ2 X,X,X“ a „γ3 X,X,X“ xx obrázcích 4x, b x xxxxxxx 5) stejné xxxxxx xxxxxxxxx. Pouze xx xxxxxx xxxxxxxx xxx přímo posoudit xxxxxxxx kravského mléka (xxxxx xxxx xxxxx xxx 1&xxxx;% xxxx xx xxxx 1&xxxx;%) x&xxxx;xxxxxxxxxxxx vzorku porovnáním xxxxxxxxx xxxxxxxx γ3- x&xxxx;γ2-xxxxxxx (xxx „γ3 X“ x&xxxx;„γ2 X“ xx xxxxxxxxx 4 a, x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxx 5) s intenzitami xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx standardech x&xxxx;xxxxxx 0&xxxx;% x&xxxx;1&xxxx;% (xxxxxx, kozích), xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxx).

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxx je xx xxxxx, xxxxxxxx xxx stanovení poměru xxxx xxxxxxxx píků xxxxxxxx γ2- x&xxxx;γ3-xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxx xxxxxx, xxxxxx x/xxxx xxxxxxxx γ2- x&xxxx;γ3-xxxxxxx (viz xxxxxxx 5) denzitometrii (5.19). Xxxx hodnotu xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx γ2- x γ3-kaseinů v 1&xxxx;% xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxx, xxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx laboratorním xxxxxxxxx (xxxxxxx) xxxxxxxxxxxxx x xxxxx xxxx.

Xxxxxxxx: Tato xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx signál xxxx xxxxxxxx γ2- x γ3-xxxxxxx x 1&xxxx;% xxxxxxxxxxx standardu, xxxxx xxxxxx x 0&xxxx;% xxxxxxxxxxx standardu. V opačném xxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx dodržení xxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxx metodě.

Vzorek xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx γ2- x γ3-xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx jsou stejné xxxx větší než xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 1&xxxx;% xxxxxxxxxxxx standardu.

8.   LITERATURA

Addeo F., Xxxx X., Chianese X., Stingo X., Xxxxxxx P., Xxxxxx X, Xxxxxx I., Xx Xxxxxx X., Xxxxx A.: Xxx xx xxxxxxx xx&xxxx;xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xx xxx xxxxxxxxx of xxxxxx xxxx&xxxx;xx xxxxx xxx/xx xxxxxxx xxxxxx xx xxx isoelectric xxxxxxxx of γ2-caseins. Milchwissenschaft 45, 708–711 (1990).

Xxxxx X., Xxxxxxx M.A., Xxxxxxxx X., Moio X., Spagna Xxxxx X., Xxxxx A., Xxx Xxxxxxx L.: X control xxxxxx xx detect xxxxxx xxxx&xxxx;xx ewe xxx xxxxx xxxxxxx cheese xxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Milchwissenschaft 50, 83–85 (1995).

Xxxxxx X., Xxxxxx I, Xxxxxxxxxxxx X.: Sensitive xxxxxxxxx of cow xxxx&xxxx;xx xxx xxx xxxx xxxx&xxxx;xxx xxxxxx xx xxxxxxx ampholyte — and carrier xxxxxxxxx/xxxxxxxxxxx pH gradient — xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx γ-xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx. in: Electrophoresis-Forum 89 (X. X. Xxxxxx, xx.) pp 389-393, Xxxx-Xxxxxx, Xüxxxxx (1989).

Xxxxxx Ι., Xxxxxx X.-X., Kaiser K.-P.: Xxxxxxxx xxx Kuhmilch xx Xxxxx xxx Xxxxxxxxxxx xxx. -xäxx xxxxx isoelektrische Xxxxxxxxxxxx xx harnstoffhaltigen Xxxxxxxxxxxxxxxxxx. X. Lebensm. Unters. Forsch. 174, 195–199 (1982).

Xxxxxx X.X.: Xxxxxxxxx-xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx in 50-100&xxxx;μx xxxxxxxxxxxxxx xxxx on xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx films. Electrophoresis 1, 43–56 (1980).

Xxxxxxx 1

Xxxxxxxxxxx výkres krycí xxxxx

Xxxxxxx 2

Xxxxxxxxx vrstva xxxxxxxx xxxx vodnou x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxx po xxxxxxxxxx

Xxxxxxx 3

Xxxxxxxx technika xxx xxxxxxxx ultratenkých xxxxxxxxxxxxxxxxxx gelů

a = xxxxxxxxx páska (0,25&xxxx;xx); x = xxxxx xxxxx (5.3); x, x = skleněné xxxxx (5.1); x = gelový roztok (4.1.2); x = xxxxx fólie xxxx (5.2).

Xxxxxxx 4x

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx ze xxxx x&xxxx;xxxxxx a kozího xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x&xxxx;xxxxxx xxxxxxx kravského xxxxx

% XX = xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, X&xxxx;= xxxxxxx, X&xxxx;= ovčí, X&xxxx;= kozí

Na xxxxxxx xx znázorněna horní xxxxxxxx gelu XXX.

Xxxxxxx 4x

Xxxxxxxxxxxxx fokusace xxxxxxx xx sýrů vyrobených xx směsí xxxxxx, xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx plasminem, x&xxxx;xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

% XX = procento xxxxxxxxx mléka; 1 + = xxxxxx x xxxxxxx 1&xxxx;% xxxxxxxxx mléka x x xxxxxxxxx čistého xxxxxxxx kaseinu ve xxxxxx dráhy. X&xxxx;= xxxxxxx, X&xxxx;= ovčí, X&xxxx;= xxxx, B = xxxxxx

Xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx IEF.

Obrázek 5

Xxxxxxxxxxx denzitogramů xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (XXX) x&xxxx;xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

x, x = xxxxxxxxxx xxxxxxxxx obsahující 0 a 1&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxx; x-x = xxxxxx sýra xxxxxxxxxxxx 0, 1, 2, 3 x 7&xxxx;% kravského mléka; X&xxxx;= kravské, E = xxxx, X&xxxx;= kozí.

Byla xxxxxxx xxxxx polovina xxxx XXX xxx λ = 634 nm.

PŘÍLOHA XX

Xxxxxxxxx xxxxxx

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx provádějí xxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx&xxxx;12 nařízení (XX) x.&xxxx;882/2004&xxxx;(*) nebo xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx vzorků a námitky xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx

1.

Xxxxx xxxxxx xx provádí x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx-xx žádná xxxxxxxxxx xxx xxxxx vzorku, xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx v xxxxx XXX 707„Xxxxx a xxxxxx xxxxxxx – Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx“,

2.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx dostatečné xxxxx, které xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx s dodatkem.

3.

Pro xxxxxxx xxxxxxxxx v právních xxxxxxxxxx Xxxx se xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

4.

Xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, platební xxxxxxxx xxxx nechat xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx za xxxxxxxxxxx, xx&xxxx;xxxxxxxxxx duplicitní xxxxxx xxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxx xxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx orgánu. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx analýzy xx&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxx xxx xx&xxxx;xxxxxxx výsledků xxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxx agentura xxxxxxx xxxxxxx do 21 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx.

5.

Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxx xx xxxxxxx.

6.

Xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxx po xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, že xxxxxx xxx odběru xxxxxx nebyl správný, xxxxx xxxxxx xx x&xxxx;xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxx vzorků xxxxxxxxx xxxxx, je xxxxx přijata.

Dodatek

Zhodnocení splnění xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx x ohledem xx xxxxx

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

X xxxxxxxxx, xxx právní xxxxxxxx týkající xx xxxxxxx intervence x xxxxxxxxxx skladování xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx pro xxxxx vzorků, xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx ze 3 xxxxxxxx vzorku xxxxxxxxxx xxxxxxx ze xxxxx xxxxxxxxx ke xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx se porovná xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx 95&xxxx;% xxxxxxxxx spolehlivosti xxxxxxx xxxxxxxxxxx směrodatné odchylky, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx buď xx xxx, 1) xxx xxxx metoda xxxxxxxxxx xx základě xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxx σx x σX, xxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx na xxx, 2) xxx xxxx xxxxxxxxxx vnitřní xxxxxxxxxxxxxxxxxx. Tento xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx se potom xxxxx xxxxxxxxx měření xxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx je xxxxxxxxxx xx xxxxxxx mezinárodní xxxxxxxxxx

X&xxxx;xxxxx xxxxxxx byla xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx σx a směrodatná xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx σX&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx soulad x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxx&xxxx; x xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (x =&xxxx;2) z  xxxxx:

Xx-xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxx xx xxxxxx ve xxxxx x = x ₁ + x ₂, x = x ₁ – y ₂, x = y ₁ · x ₂ xxxx x = x ₁/y ₂, xxxx se x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxx postupovat xxxxx xxxxxxx postupů xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xx považuje xx xxxxxxxxxxxx horní xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx XX, xxxxxxxx

xxxxx xx má xx xx, že xxxxxxx XX xxxxxxxx.

Xxxxx se xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx LL, xxxxxxxx

xxxxx xx xx xx xx, že xxxxxxx LL xxxxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx vnitřní xxxxxxxxxxxxxxxxxxx

X&xxxx;xxxxxxxxx, xxx jsou xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx v tomto nařízení, x&xxxx;xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx σx a σ R xx xxxx xx xxxxxx pro výpočet xxxxxxxxx nejistoty X xxxxxx směrodatná odchylka xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxx vnitřní xxxxxxxxxxxxxxxxxxx si X .

Xxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx stanovené xxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxx 1. Považuje-li xx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx zákonem xxxxxxxxxx mezní hodnotu, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xx vyhodnotí x xxxxxxx s bodem 1.