Plné znění - 32018R0150

Xxxxxxx X

XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXX FOSFATIDYLSERINU X&xxxx;XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX V SUŠENÉM ODSTŘEDĚNÉM XXXXX

Xxxxxx: XXXX x&xxxx;xxxxxxxxxx fázemi

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX X XXXXXX XXXXXXX

Xxxx metoda popisuje xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (PS) x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XX) v sušeném xxxxxxxxxxx xxxxx (XXX) x&xxxx;xx xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;XXX.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX

Xxxxx XX + XX: xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxx popisovaným postupem. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx dipalmitoyl-fosfatidylethanolaminu (XXXX) xx 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxx xxxxxx XX x&xxxx;XX xxxx xxxxxxxx o-ftaldialdehydu (XXX) xxxxxxx XXXX x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx (XX) x&xxxx;xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx obsahu PS x&xxxx;XX xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx XXXX.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxxxxxx xx pouze xxxxxxxxxx xxxxxxx p.a. Xxxxx není xxxxxxx xxxxx, xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx materiál: XXXX x čistotě xxxxxxx 99&xxxx;%

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx – 18&xxxx;°X.

4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx srovnávacích x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx

4.2.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx xxx XXXX

4.2.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxx pro XXXX

4.2.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx

4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx x-xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

4.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx, 12 X xxxxx xxxxxx

4.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx boritá, 0,4 X xxxxx xxxxxx s xxxxxxxx xX xxxxxxxxx hydroxidem xxxxxx (4.3.1) xx 10,0

4.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;2-xxxxxxxxxxxxxxx

4.3.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;x-xxxxxxxxxxxxx (XXX)

4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx rozpouštědla xxx XXXX

4.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx rozpouštědla xxxx být xxxxxxxxxx xxxxxx chemikálií čistoty xxx XXXX.

4.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx čistoty xxx XXXX

4.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx čistoty

4.4.4.   Tetrahydrofuran

4.4.5.   Natrium xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx

4.4.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxx

4.4.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx.

5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX X XXXXXXX

5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxx na 0,1 mg x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx po 1&xxxx;xx

5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 25 x&xxxx;100&xxxx;xx

5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx dávkovat xx 1 do 10&xxxx;xx

5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

5.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx pipety xxxxxxx dávkovat 0,2, 0,5 x&xxxx;5&xxxx;xx

5.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxx 10, 50 x&xxxx;100&xxxx;xx

5.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 20 x&xxxx;100 μx

5.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx xxxxx

5.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx fungující xxx 27&xxxx;000 × g

5.10.   Skleněné nádobky x&xxxx;xxxxxx xxx 5&xxxx;xx

5.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxx 25&xxxx;xx

5.12.&xxxx;&xxxx;&xxxx;xX xxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xx 0,1 xxxxxxxx xX

5.13.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xx XXXX

5.13.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxx 1,0 xx/xxx xxx 200 xxxxxx

5.13.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx vzorků x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx

5.13.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx kolonu xxxxxxxx xx xxxxxxx 30&xxxx;°X ± 1 °C

5.13.4.   Fluorescenční xxxxxxxx xxxxxxx fungovat při xxxxxxxxx vlnové xxxxx 330&xxxx;xx a emisní xxxxxx xxxxx 440&xxxx;xx

5.13.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx plochy xxxx

5.13.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx XxXxxxxxxxx® – 100&xxxx;(250 ×&xxxx;4,6&xxxx;xx) xxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (X 18), xxxxxxxx xxxxxx 5 μx

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXX XXXXXX

Xxxxxx xx odebírají x&xxxx;xxxxxxx s normou XXX 707.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

7.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx roztoku xxxxxxxxx xxxxxxxxx

7.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx 30,0 ± 0,1&xxxx;xx tryptaminhydrochloridu (4.2.3) xx odměrné xxxxx xx 100&xxxx;xx (5.6) x&xxxx;xxxxxxx po xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1).

7.1.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx (5.3) xxxxxxxx 1&xxxx;xx xxxxxx roztoku xx xxxxxxx xxxxx xx 10&xxxx;xx (5.6) x&xxxx;xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1) x&xxxx;xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx tryptaminu 0,15 xX.

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx zkušebního xxxxxx

7.2.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx 1,000 ± 0,001&xxxx;x&xxxx;xxxxxx SOM do xxxxxxx xx 25&xxxx;xx (5.2). Xxxxxxx (5.3) xxxxxxxx 10&xxxx;xx xxxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxx 40&xxxx;°X ± 1&xxxx;°X x&xxxx;xx xxxx 30 minut xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (5.4), xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

7.2.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx (5.5) xxxxxxxx 0,2 ml xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx 10&xxxx;xx (5.6), xxxxxx xxxxxxxx stříkačky (5.7) xxxxxxxx 100 μx 0,15 xX xxxxxxx xxxxxxxxxx (7.1) a doplňte xx značku xxxxxxxxxx (4.2.1). Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx na 15 xxxxx xx xxxxxxxxxxxx lázně (5.8).

7.2.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx (5.9) xxx 27&xxxx;000 ×&xxxx;x&xxxx;xx xxxx 10 xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx odeberte xx skleněné xxxxxxx (5.10).

Xxxxxxxx: Xx xxxxxxxxx xxxxxxx XX xxxx xxx roztok zkušebního xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 4 °C.

7.3.   Příprava xxxxxxx xxxxxxxx standardu

7.3.1.   Navažte 55,4&xxxx;xx XXXX (4.1) do xxxxxxx xxxxx na 50&xxxx;xx (5.6) x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx (5.11) přidejte xxx 25 ml xxxxxxxxxxx (4.2.2). Zazátkovanou xxxxx xxxxxxxx na 50&xxxx;°X ± 1 °C x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx XXXX xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx 20&xxxx;°X, xxxxxxx xx značku xxxxxxxxxx (4.2.1) a promíchejte xxxxxxxxxxx.

7.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx (5.3) xxxxxxxx 1&xxxx;xx xxxxxx roztoku xx xxxxxxx xxxxx xx 100&xxxx;xx (5.6) x&xxxx;xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1). Pipetou (5.3) xxxxxxxx 1&xxxx;xx xxxxxx xxxxxxx do xxxxxxx baňky na 10&xxxx;xx (5.6), xxxxxxxx 100 μx (5.7)&xxxx;0,15xX xxxxxxx xxxxxxxxxx (7.1) x&xxxx;xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1). Promíchejte xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xx provedení xxxxxxx XX xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx 4&xxxx;°X.

7.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Xx xxxxxxx xxxxx xx 10&xxxx;xx (5.6) xxxxxxx 25,0 ± 0,1&xxxx;xx XXX (4.3.4), xxxxxxxx 0,5&xxxx;xx (5.5) xxxxxxxxx (4.2.1) x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx, aby se XXX xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.3.2) x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx (5.7) xxxxxxxx 20 μx 2-xxxxxxxxxxxxxxxx (4.3.3).

Xxxxxxxx: Derivatizační xxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxx 4&xxxx;°X; xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxx.

7.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx pomocí HPLC

7.5.1.   Eluční xxxxxxxxxxxx (4.4)

Xxxxxxxxxxxx X: Xxxxxx 0,3 xX xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 3 xX xxxxxx xxxxxxx (s hodnotou xX xxxxxxxxx xx 6,5 ± 0,1 xxxxxxxxx octovou): methanol: xxxxxxxxxxxxxxx = 558: 440:2 (xxx.).

Xxxxxxxxxxxx B: Methanol

7.5.2.   Doporučený xxxxxx xxxxxxxx:

Xxx (xxx)	Xxxxxxxxxxxx X (%)	Xxxxxxxxxxxx B (%)	Xxxxxx (ml/min)
Počáteční	40	60	0
0,1	40	60	0,1
5,0	40	60	0,1
6,0	40	60	1,0
6,5	40	60	1,0
9,0	36	64	1,0
10,0	20	80	1,0
11,5	16	84	1,0
12,0	16	84	1,0
16,0	10	90	1,0
19,0	0	100	1,0
20,0	0	100	1,0
21,0	40	60	1,0
29,0	40	60	1,0
30,0	40	60	0

Poznámka: Může xx xxxx, že xxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxx mírně xxxxxxx, xxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx znázorněné xx xxxxxxx 1.

Xxxxxxx xxxxxx: 30 °X.

7.5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxxxxx: 50 μl xxxxxxxxxxxxxxx činidla a 50 μx roztoku vzorku

7.5.4.   Ekvilibrace xxxxxx

Xxx každodenním xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 100&xxxx;% xxxxxxxxxxxxx B po xxxx 15 xxxxx, xxxxx xxxxxxxxx poměr X:X =&xxxx;40:60 x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx dobu 15 xxxxx xxx xxxxxxx 1 xx/xxx. Xxxxxxxx xxxxx pokus xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2.1).

Poznámka: Xxxx xxxxxxxxxxx kolony xx xxxxx dobu xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx 30 minut xxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx x xxxxxx 80:20 (xxx.).

7.5.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx XX + XX ve xxxxxxxxx xxxxxx

7.5.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx analýz xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx mezi jednotlivými xxxxxx, abyste xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx časy. Xxx xxxxxxx odezvového xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx standardu (7.3) xx xxxxxxx 5–10 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxx xx xxxxx xx xxxxxxx 20–25 xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx 100&xxxx;% xxxxxxxxxxxxx B (7.5.1).

7.6.   Integrační xxxxx

7.6.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxx XXXX

XXXX xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx xxxx. Xxxxxx píku xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx sedly.

7.6.2.   Pík xxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx se xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx xxxx (xxxxxxx 1). Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.

7.6.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx píků XX x&xxxx;XX

Xx xxxxx xxxxxxxxx podmínek (obrázek 1) xx XX xxxxxx v podobě xxxx xxxxxxxx, částečně xxxxxxxxxxxxx xxxx, xxxx xxxxx xx xxxxxxx jeden xxxxx pík. XX xx xxxxxx v podobě xxx hlavních, částečně xxxxxxxxxxxxx xxxx. Celou xxxxxx každé skupiny xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx linie xxx, xxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx 1.

8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX X XXXXXXXXXXX VÝSLEDKŮ

Obsah XX + PE xx zkušebním vzorku xx vypočte takto:

C =&xxxx;55,36 × ((A₂)/(A₁)) × ((X₁)/(X₂))

xxx:

X	=	xxxxx PS xxxx XX (x xx/100 g prášku) xx xxxxxxxxx xxxxxx
X1	=	xxxxxx xxxx XXXX roztoku xxxxxxxxxxxx xxxxxx (7.3)
A2	=	plocha xxxx XX xxxx PE xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.2)
X1	=	xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx srovnávacího xxxxxx (7.3)
X2	=	xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku (7.2).

9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxxxx: Hodnoty xxx opakovatelnost xxxx xxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxxxx xxxxx IDF (*).

9.1.   Opakovatelnost

Relativní xxxxxxxxxx xxxxxxxx opakovatelnosti, která xxxxxxxxx proměnlivost xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx přístroji x&xxxx;xxxxxxx časovém odstupu, xx xxxxxx překročit xxxxxxxxx 2 %. Xxxxxxxx xx xx těchto xxxxxxxx xxxxxxx dvě xxxxxxxxx, relativní xxxxxx xxxx jejich xxxxxxxx xx xxxxx xxx xxxxx než 6&xxxx;% xxxxxxxxxxxxx průměru výsledků.

9.2.   Reprodukovatelnost

Jestliže xxx xxxxxxxxxx provedou x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxxx a za xxxxxxx xxxxxxxx analýzu xxxxx zkušebního xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx rozdíl xxxx xxxxx výsledky xx xxxxx být větší xxx 11&xxxx;% xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

10.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx X., Xxxxxxxxxx L., Xxxxxxxxx X. A., Xxxxxx X., Xxxxxxxx X. „Xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx&xxxx;xxxxxx xx xxxxxxxx&xxxx;xxxxxx xx XXXX xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxx.“ Sci. Tecn. Xxxx.-Xxx.&xxxx;39,395[1988].

Xxxxxxx 1

XXXX chromatogram XXX-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (XX) x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XX) v methanolovém xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx mléka. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx píky XX, XX x&xxxx;xxxxxxxxx (xxxxxxx xxxxxxxx).

Xxxxxxx XX

XXXXXXXXXX SYŘIDLOVÉ XXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX XXXXXXX XXX XXXXXXX XXXXXXXXXX XX XXXXXXX XXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXXX (XXXX)

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX X&xxxx;XXXXXX XXXXXXX

Xxxx xxxxxx xxxxxxxx zjistit xxxxxxxxxx syřidlové xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx mléce xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX XXXXX

Xxxxxxxxxxx xxxxx XXX 707 – Xxxxx x mléčné xxxxxxx – Xxxxxxxx xxx xxxxx vzorků.

3.   DEFINICE

Obsah xxxxxx ze xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx hmotnostní xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx postupem xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

—	Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx, odstranění xxxx x&xxxx;xxxxxxxx kyselinou xxxxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx odstředěním xxxx xxxxxxxx;

—	Xxxxxxxxx xxxxxxxx kaseinomakropeptidů (XXX) v supernatantu vysokoúčinnou xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXXX);

—	Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx se srovnávacími xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx syrovátky.

5.   CHEMIKÁLIE

Používají se xxxxx chemikálie čistoty x.x. Použitá xxxx xxxx xxx voda xxxxxxxxxxx xxxx voda xxxxxxx xxxxxxxxxx čistoty.

5.1.   Roztok xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx 240 g kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (CCl₃COOH) xx xxxx a doplňte na 1&xxxx;000&xxxx;xx. Roztok xx xxx xxx xxxx x xxxxxxxx.

5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxx, xX 6,0

Xxxxxxxxx 1,74 g fosforečnanu xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx (X₂XXX₄), 12,37&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx draselného (XX₂XX₄) x&xxxx;21,41&xxxx;x&xxxx;xxxxxx xxxxxxx (Na₂SO₄) xxx x&xxxx;700&xxxx;xx vody. X&xxxx;xxxxxxx xxxxxxx upravte xX xx 6,0 xxxxxxxx kyseliny xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxx xx 1 000 xx a xxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxx xxx, aby xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx výrobce xxxxxxxx materiálů na xxxxxx.

Xxxxxx xxxxxx před xxxxxxxx přefiltrujte xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx.

5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx (XX₃XX) x&xxxx;xxxxxx xxxxxx xxxx. Před xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx.

Xxxxxxxx: Lze použít xxxxxxxxx xxxx promývací xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxx xxxxxxxxxx rozlišovací xxxxxxxx kolony.

5.4.   Srovnávací vzorky

5.4.1.   Sušené xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx nařízení (xx. [0]).

5.4.2.   Totéž xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5&xxxx;% xx. xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx složení (tj. [5]).

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX X XXXXXXX

6.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx

6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx odstředivka xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx 2&xxxx;200&xxxx;x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx zkumavkami xx zátkou x&xxxx;xxxxxx xxx 50 ml

6.3.   Mechanická xxxxxxxx

6.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

6.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxx 7&xxxx;xx

6.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx papíry xxxxxxx xxxxxxx o průměru xxx 12,5&xxxx;xx

6.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx filtrační xxxxxxxx s membránovým xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx

6.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx pipety xxxxxxxxxx xxxxxxxx 10&xxxx;xx (XXX 648, třída X, xxxx XXX/X 835) xxxx xxxxxxxxx systém xxxxxxx dodávat 10,0&xxxx;xx xx xxx minuty

6.9.   Dávkovací xxxxxx schopný xxxxxxx 20,0&xxxx;xx vody při xxxxxxx xxx 50&xxxx;°X

6.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx nastavená xx 25 ± 0,5&xxxx;°X

6.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xx HPLC, xxxxx tvoří:

6.11.1.

Čerpadlo

6.11.2.

Nástřikové xxxxxxxx – xxxxx nebo xxxxxxxxxxx – x&xxxx;xxxxxx 15 až 30 μx

6.11.3.

Xxx xxxxxx TSK 2&xxxx;000-XX xx sebou (xxxxx 30&xxxx;xx, xxxxxxx xxxxxx 0,75&xxxx;xx), xxxx xxxxxx s rovnocennou účinností (xxxx. jedna xxxxxx XXX 2&xxxx;000-XXxx, jedna xxxxxx Xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx Xxxxxx GF 250) x&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxx (3&xxxx;xx ×&xxxx;0,3&xxxx;xx) xxxxxxxx xxxxxxxxxx X&xxxx;125 nebo jiným xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

6.11.4.

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx na 35 ± 1&xxxx;°X

6.11.5.

XX xxxxxxxx s proměnnou xxxxxxx xxxxxx umožňující xxxxx xxx 205&xxxx;xx s citlivostí 0,008 Å.

6.11.6.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx sedly Poznámka: Xxx pracovat x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx x&xxxx;xxxxxx xxxxx. X&xxxx;xxxxx xxxxxxx je třeba, xxx xxxxxx teploty x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx menší xxx 5 °C.

7.   ODBĚR VZORKŮ

7.1.   Vzorky xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxx XXX 707. Xxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xx xxxx metoda odpovídá xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx dojít xx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxx.

8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

8.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx objem je xxx xxxxxxx xxxxx xxx xxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Nádobku xxxxx uzavřete. Sušené xxxxx xxxxxxxx promíchejte xxxxxxxxxx převracením nádobky.

8.2.   Zkušební xxxxx

Xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (6.2) nebo xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx 50&xxxx;xx navažte 2,000 ± 0,001 g zkušebního xxxxxx.

8.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx tuku a bílkovin

8.3.1.   Ke xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 20,0&xxxx;xx xxxxx (50&xxxx;°X) xxxx. Prášek xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx třepačce (6.3). Xxxxxxxx vložte xx xxxxx lázně (6.10), xxxxx se její xxxxxxx xxxxxxxx na 25&xxxx;°X.

8.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx dvou xxxxx xxxxxxxx xx stálého xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (6.4)&xxxx;10,0&xxxx;xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (5.1) x&xxxx;xxxxxxx xxx 25&xxxx;°X. Zkumavku xxxxxx xx 60&xxxx;xxxxx xx xxxxx xxxxx (6.10).

8.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx (6.2) xx xxxx 10 minut xxx odstředivé xxxx 2&xxxx;200&xxxx;x, nebo xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx (6.6) x&xxxx;xxxxxxx 5 ml xxxxxxxx xxxxxxx.

8.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx stanovení

8.4.1.   Nastříkněte 15 xx 30 μx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (8.3.3) xx xxxxxxxx na XXXX (6.11) x&xxxx;xxxxxxxx 1,0&xxxx;xx xxxxxxxx xxxxxxx (5.2) xx minutu.

Poznámka 1. V závislosti na xxxxxxxx xxxxxxx použitých xxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx kolony xxx použít x&xxxx;xxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx 2. Xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Xxxxx x&xxxx;xxxx nenechávejte eluční xxxxxx (5.2).

Před xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxx 24 xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xx xxxxxxxxx roztokem (5.3) xxxxxxx xx dobu xxx xxxxx xxx xxxxxxx 0,2&xxxx;xx xx xxxxxx.

8.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx analýzy xxxxxxxxxx xxxxxx [E] xx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx, v němž xx xxxxx xxx xxxxx svým retenčním xxxxx XX xxxxx:

Xxx XX:	Xxxxx xxx chromatogramu x XX xxx 12,5 xxxxxx
Xxx XXX:	Xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx odpovídající XXX s RT 15,5 minuty

Retenční xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx značně ovlivněny xxxxxxx xxxxxx (kolon).

Integrátor (6.11.6) automaticky vypočítává xxxxxx X&xxxx;xxxxxxx píku:

AII:	plocha xxxx XX
XXXX:	xxxxxx xxxx XXX

Xxxx kvantitativní xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx způsobených xxx nesprávnou funkcí xxxxxxxx, nebo kolon, xxxx xxxxxxx a povahou xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

X&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

8.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx

8.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;X srovnávacích xxxxxx (5.4) xx xxxxxx použije postup xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx&xxxx;8.2 xx 8.4.2.

Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx CMP xx v prostředí 8 % xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx odbourávají. Xxxxxx obsah xx xxx xxxxxxx 30 °C xxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;0,2&xxxx;% xx hodinu.

8.5.2.   Před chromatografickým xxxxxxxxxx vzorků xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (8.5.1) srovnávacího xxxxxx (5.4.2), xxxxx xx xxxxxx a retenční xxx píku xxxxxxxxxxxxxx XXX xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

8.5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx odezvové xxxxxxx R nastříknutím stejného xxxxxx xxxxxxxx (8.5.1), xxxxxx xxxx použili xxx xxxxxx.

9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX XXXXXXXX

9.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx

9.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx odezvového xxxxxxx R:

Pík XX:

XXX = 100/(XXX[0])

xxx:

XXX	=	xxxxxxxx faktory xxxx XX
XXX [0]	=	plochy xxxx XX srovnávacího xxxxxx [0] xxxxxxx x&xxxx;8.5.3

Xxx III:

RIII = X/(XXXX[5] – AIII[0])

kde:

RIII	=	odezvový xxxxxx xxxx III
AIII [0] xxx XXXX [5]	=	xxxxxx píku III xxxxxxxxxxxx xxxxxx [0] x&xxxx;[5] xxxxxxx x&xxxx;8.5.3
X	=	xxxxxxxx xxxxxxxxx ve srovnávacím xxxxxx [5], xx. 5

9.1.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx ve xxxxxx [X]

XXX[X] = XXX × AII[E]

SIII[E] = XXXX × XXXX[X]

XXX[X] = XXX × XXX[X]

xxx:

XXX [E], XXXX [X], SIV [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XX, XXX x&xxxx;XX ve xxxxxx [X]
XXX [X], XXXX [X]	=	xxxxxx xxxx XX a III ve xxxxxx [X] xxxxxxx x&xxxx;8.4.2
XXX, RIII	=	odezvové xxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;9.1.1

9.1.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx XXX xx vzorku [X]:

XXXXXX[X] = (XXXXX[X])/(XXXXX[5])

xxx:

XXXXXX [X]	=	xxxxxxxxx retenční xxx xxxx XXX xx xxxxxx [E]
RTIII [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxx XXX xx xxxxxx [X] xxxxxxx x&xxxx;8.4.2
XXXXX [5]	=	xxxxxxxxx xxxxxxxx čas xxxx XXX v kontrolním xxxxxx [5] xxxxxxx x&xxxx;8.5.3

9.1.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx ukazují, že xxxx xxxxxxxxxx retenčním xxxxx xxxx XXX, xx. XXXXXX [X] x&xxxx;xxxxxxxxx přidané xxxxxx xxxxxxxxx xx do xxxxxxxx 10&xxxx;% xxxxxxxx xxxxxxxx vztah

—	při xxxxxx xxxxxxxxx &xx; 5 % xx XXXXXX [X] &xx;&xxxx;1,000;

—	xxx obsahu xxxxxxxxx ≤&xxxx;5&xxxx;% xx XXXXXX [X] ≥ 1,000.

Přípustná xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx RRTIII xx ± 0,002.

Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx RRTIII [0] xxx málo xxxx xx 1,034. Xxxxx xxxxx kolon xx xxxx xxxxxxx xxxxxx 1,000, xxxxx xxxx xxxx xxx xxxxx xxx 1,000.

9.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxx:

X = SIII[E] – [1, 3 + (XXXX[0] – 0, 9)]

xxx:

X	=	xxxxxxxxxx procento syřidlové xxxxxxxxx ve vzorku [X];
XXXX [E]	=	relativní xxxxxx xxxx XXX xxxxxxxxxx xxxxxx [X] xxxxxxx xxxxx 9.1.2;
1,3	=	xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxx syrovátky na 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxx sušeném xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx. Xxxx xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
XXXX [0]	=	xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx III, xxxxx xx xxxxx RIII × AIII[0]. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x&xxxx;9.1.1 x&xxxx;8.5.3;
(XXXX [0]&xxxx;–&xxxx;0,9)	=	xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx nutno xxxxxxx xx xxxxxxxxx průměrné xxxxx 1,3, jestliže XXXX [0] není xxxxx 0,9. Xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx píku XXX xxxxxxxxxxx vzorku [0] xxxxx 0,9.

9.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

9.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx x&xxxx;xxxxxxxx zkušebního xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx v těsném sledu xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx 0,2 % xx.

9.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx 0,4 % xx.

9.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx

9.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxx přítomna, xx-xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX XXXX [X] xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxx syrovátky na 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx, ≤ 2,0 + (SIII[0] – 0,9)

xxx

2,0	xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxx relativní xxxxxx xxxx XXX x přihlédnutím x xxxxxxxxx průměrné xxxxx xxxx XXX, xx. 1,3, x xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx sušeného xxxxxxxxxxxx mléka x x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx metody (9.3.2);
(XXXX [0] – 0,9)	xx xxxxxx, xxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx je xxxxxx XXXX [0] xxxx xxx 0,9 (xxx xxx 9.2).

9.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX XXXX [X] &xx; 2,0 + (SIII[0] – 0,9) x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxx xxxx II XXX [X]&xxxx;≤&xxxx;160, xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx 9.2.

9.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX XXXX [X] &xx; 2,0 + (XXXX[0] – 0,9) x xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XX SII [X]&xxxx;≤&xxxx;160, stanovte xxxxxxx xxxxx bílkovin (X %). Xxxxx prostudujte xxxxx 1 x 2.

9.4.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxx po xxxxxxx vzorků xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx odstředěného xxxxx x&xxxx;xxxxxxx celkovým obsahem xxxxxxxx jsou xxxxxxxx xx grafů 1 x&xxxx;2.

Xxxx xxxxxx představuje xxxxxxxx regresi, jejíž xxxxxxxxxxx xx vypočítají xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX, x&xxxx;xx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxx, xx xxxxxx xxxxxxxxxx v 90 % případů.

Rovnice xxxxxxxxxxx xxxxxx v xxxxxxx 1 x 2 xxxx:

XXXX = 0,376 X % – 10,7	(graf 1)
SIII = 0,0123 XXX [X] + 0,93	(xxxx 2)

xxx:

XXXX	xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx III xxxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxx relativní plochy xxxx SII [X],
X&xxxx;%	xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx jako xxxxxxxx xxxxxxxxx,
XXX [E]	je relativní xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxx 9.1.2.

Tyto xxxxxxx xxxx rovnocenné xxxxx 1,3 xxxxxxxxx x xxxx 9.2.

Rozdíl (T1 x X2) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx XXXX [X] x xxxxxxxxx plochou XXXX xx dán xxxxxx xxxxxx: X1 =&xxxx;XXXX[X]&xxxx;– [(0,376 X% – 10,7) + (XXXX[0] – 0,9)]X2 = XXXX[X] – [(0,0123 XXX[X] + 0,93) + (XXXX[0] – 0,9)].

Xxxx-xx X1 x/xxxx X2	xxxxx nule xxxx xxxxx než xxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx-xx X1 x X2	xxxxx než xxxx, je xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxx xxxxxx: W = X2 + 0,91

xxx:

0,91 je xxxxxxxxxx xx svislé xxx xxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx III

STANOVENÍ XXXXXX XX SYŘIDLOVÉ SYROVÁTKY X&xxxx;XXXXXXX XXXXXXXXXXX XXXXX

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX: XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX XX XXXXXXXXX XXXXXXXXX XX&xxxx;XXXXXXXX ODSTŘEDĚNÉHO MLÉKA

2.   NORMATIVNÍ XXXXX: MEZINÁRODNÍ XXXXX XXX 707

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX

Xxxxx sušiny xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx postupem podle xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx X&xxxx;xxxxxxxxxxxxx kapalinovou xxxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx fázemi (xxxxxxx XXXX). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx provádí xxxxxxxxxx xx srovnávacími xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx procenta xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx vyšší xxx 1&xxxx;% xx., xx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx syrovátky xxxxxxxxx.

5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxxxxxx se pouze xxxxxxxxxx čistoty x.x. Xxxxxxx xxxx musí xxx xxxx xxxxxxxxxxx xxxx voda nejméně xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx nebo jakost xxxxxxx pro XXXX.

5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx 240&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (CCl₃COOH) xx xxxx x&xxxx;xxxxxxx xx 1&xxxx;000&xxxx;xx. Xxxxxx xx xxx xxx čirý x xxxxxxxx.

5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx X&xxxx;x&xxxx;X

Xxxxxx X: Vneste 150 xx acetonitrilu (XX₃XX), 20 xx xxxxxxxxxxxx (XX₃XXXXXX₃) x 1,00 xx kyseliny xxxxxxxxxxxxxx (XXX, CF₃COOH) do xxxxxxx baňky a xxxxxxx xx 1&xxxx;000 xx xxxxx.

Xxxxxx X: Xxxxxx 550 ml xxxxxxxxxxxx, 20 xx xxxxxxxxxxxx a 1,00 xx XXX xx xxxxxxx xxxxx xx 1&xxxx;000 xx a xxxxxxx na 1 000 xx xxxxx. Eluční xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx pórů 0,45 μx.

5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

Xx xxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxx eluentem X (xxxxxx) x xxxxx xx propláchne xxxxxxxxxxxxx (xxxxxx po xxxx 30 xxxxx). Xxxxxx xx xxxxxxxx v acetonitrilu.

5.4.   Srovnávací xxxxxx

5.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxxx mléko xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx skladování (xx. [0]).

5.4.2.   Totéž sušené xxxxxxxxxx xxxxx zfalšované xxxxxxxxx 5&xxxx;% hm. xxxxxx syřidlové xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx složení (xx. [5]).

5.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx sušené xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx 50&xxxx;% xx. xxxxxx xxxxxxxxx syrovátky xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xx. [50]).

6.   PŘÍSTROJE X POMŮCKY

6.1.   Analytické váhy

6.2.   Volitelná xxxxxxxxxxx schopná xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx 2 200 g a vybavená xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx o objemu xxx 50&xxxx;xx

6.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

6.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

6.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx asi 7&xxxx;xx

6.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx o průměru asi 12,5&xxxx;xx

6.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxx zařízení x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx

6.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxx umožňující dávkovat 10&xxxx;xx (XXX 648, xxxxx X, xxxx XXX/X 835), xxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 10,0&xxxx;xx za xxx xxxxxx

6.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx systém xxxxxxx dodávat 20,0&xxxx;xx xxxx xxx xxxxxxx xxx 50&xxxx;°X

6.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx 25 ± 0,5&xxxx;°X

6.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xx XXXX, xxxxx xxxxx:

6.11.1.

Xxxxxxxx s binárním xxxxxxxxxx

6.11.2.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx – ruční xxxx xxxxxxxxxxx, x&xxxx;xxxxxx 100 μx

6.11.3.

Xxxxxx Agilent Xxxxxxxxxxxx Xxxxxx 300 XX-X3 (xxxxx 25 cm, xxxxxxx průměr 0,46 cm), xxxx jiná xxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxx póry xx bázi křemene

6.11.4.

Termostat xxxxxx xxxxxxxxx na 35 ± 1 °C

6.11.5.

UV xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx 210&xxxx;xx (v xxxxxxx xxxxxxxxx je xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xx xx 220&xxxx;xx) x&xxxx;xxxxxxxxxx 0,02 Å.

6.11.6.

Xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx nastavení xxxxxxxxx xx obecnou xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxx Xxxxxxxx: Xxxxx x xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx xx možná xx xxxxxxxxxxx, xx teplota xxxxxxxx více než x 1&xxxx;°X, xxxxx xxxxxxx x xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx CMPA.

7.   ODBĚR VZORKŮ

7.1.   Vzorky xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxx ISO 707. Xxxxxxx státy xxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx vzorků xx xxxxxxxxxxx, xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx uvedené xxxxx.

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx způsobem, xxx xxxxxxx dojít xx xxxxxxxxxxxx nebo xxxxx xxxxxxx.

8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

8.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx do nádobky, xxxxx objem xx xxx xxxxxxx větší xxx xxxxx prášku x&xxxx;xxxxx xx opatřena xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx uzavřete. Sušené xxxxx důkladně xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx převracením xxxxxxx.

8.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx

Xx xxxxxxxxxxxxx zkumavky (6.2) xxxx vhodné xxxxx xx xxxxxx xx 50 ml navažte 2,00 ± 0,001 g zkušebního xxxxxx.

Xxxxxxxx: X&xxxx;xxxxxxx xxxxx xxxxxxx takové množství xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx 2,00&xxxx;x.

8.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxx

8.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 20,0 ml xxxxx (50 °C) xxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (6.3) xx xxxxxx rozpustí. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx (6.10), xxxxx se xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx 25&xxxx;°X.

8.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx dvou xxxxx xx stálého xxxxxxx xxxxxxxxxxx míchačkou (6.4) xxxxxxxx 10,0 ml roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxx 25&xxxx;°X (5.1). Xxxxxxxx xxxxxx xx 60&xxxx;xxxxx xx xxxxx xxxxx (6.10).

8.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx (6.2) xx dobu 10 xxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxx 2&xxxx;200&xxxx;x, nebo xxxxxxxxxxxx xxxx papír (6.6) a prvních 5 ml xxxxxxxx vyhoďte.

8.4.   Chromatografické stanovení

8.4.1.   Metoda XXXX x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx výsledků díky xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

8.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx XXXX x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx optimalizovat xxxxxxxx gradientu. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx s mrtvým xxxxxxx xxx 6&xxxx;xx (xxxxx xx bodu, xxx se stékají xxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx nástřikové xxxxxx xxxxxx) xx xxxxxxxxx retenční xxx x&xxxx;xxxxx 26 xxxxx ± 2 xxxxxx xxx CMPΑ. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxx xxxxxxx (např. 2&xxxx;xx) xx optimální xxxxxxxx čas 22 xxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx srovnávacích xxxxxx (5.4) x&xxxx;xxxxxxx 50&xxxx;% syřidlové xxxxxxxxx x&xxxx;xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx 100 μx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (8.3.3) xx xxxxxxxx xx XXXX, xxxxx xxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx referenčního xxxxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx 1.

Tabulka 1

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx gradientu xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx

Xxx (xxx)	Xxxxxx (xx/xxx)	% X	% B	Křivka
Počátek	1,0	90	10	*
27	1,0	60	40	přímka
32	1,0	10	90	přímka
37	1,0	10	90	přímka
42	1,0	90	10	přímka

Porovnání xxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxxx xxxxxx xxxx XXXΑ.

Xxxxxxxxx složení xxxxxxxxxxxx, xxxxx je xxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 8.4.3), xxx vypočítat xxxxx xxxxxx xxxxxx: % X =&xxxx;10 – 2,5 + (13,5 + (RTcmpA – 26) / 6) * 30 / 27&xxxx;% X =&xxxx;7,5 + (13,5 + (XXxxxX – 26) / 6) * 1,11

xxx

XXxxxX	:	xxxxxxxx xxx CMPΑ x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
10	:	xxxxxxxxx % X v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
2,5	:	% X xx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxx % X x xxxxxxxxx xxxxxxxxx
13,5	:	xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx bodu xxxxxxxxxxxx gradientu
26	:	požadovaný xxxxxxxx xxx XXXΑ
6	:	xxxxx směrnic xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
30	:	% X v xxxxxxxxxx bodu minus % X xx 27 xxxxxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
27	:	xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

8.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx roztoků xxxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxxxx 100 μx xxxxxx odměřeného xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx (8.3.3) xx xxxxxxxx xx HPLC s průtokem 1,0&xxxx;xx xxxxxxxx roztoku (5.2) za xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx se xxxxx x&xxxx;8.4.2. Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx blíží xxxxxx X:X =&xxxx;76:24 (5.2). Xxxxxxxx xx xxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxx gradient, xxx xxxxxxx, xx procento X xx xx 27 minut zvětší x 5 %. Potom xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, kterým složení xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx 90&xxxx;% X. Xxxx xxxxxxx xx xxxxxxx po xxxx xxxx minut x po jejím xxxxxxxx xx pomocí xxxxxxxxxx gradientu xxxxxxx xxxx xxxxx během xxxx minut xx xxxxxxx počáteční. X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx systému xxxx xxx xxxxx xxxxxxx proveden 15 xxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxx podmínek.

Poznámka 1. Xxxxxxxx xxx CMPA xx xxx xxx 26 ± 2 xxxxxx. Toho lze xxxxxxxxx změnou počátečních x&xxxx;xxxxxxxxx podmínek xxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxx x % X xxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxx prvního xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxx 5 % B.

Poznámka 2. Xxxxxxx xx xxxxx dostatečně xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx je odplyněné. Xx xx nezbytně xxxxx xxx to, xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxxxx odchylka retenčního xxxx xxxx XXXX xxxx být xxxxx xxx 0,1 xxxxxx (x =&xxxx;10).

Xxxxxxxx 3. Xx xxxxxxx xxx xxxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorek [5] x xxxxxx xxx pro výpočet xxxxxx odezvového xxxxxxx X (9.1.1).

8.4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx zkušebního vzorku (X) se získávají xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xx xxxx je xxx CMPA xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx 26 xxxxx.

Xxxxx X&xxxx;xxxx CMPA xxxxxxxxxxx vypočítává integrátor (6.11.6). Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxx nesprávně xxxxxxxx, analýzu nebo xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Je-li xxx XXXX dostatečně oddělen xx xxxxxxxxx píků, xxxx by se xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxx. X xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx kolmice xx xxxxxxxx základní xxxxx, xxxxxxx počáteční xxx xx xxx xxx x xxxxxxxxx xxxx XXXX (tedy xx x čase x =&xxxx;0 xxx!). Xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x vzorky xxxxxxxx xxxxxx typ integrace x u xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx zkontrolujte, xxx xx xx xxxxxx x referenčním xxxxxxxxxx konzistentní.

Před xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx nezbytné xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx nesprávnou xxxxxx zařízení, xxxx xxxxxx, xxxx původem x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorku. X&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx.

8.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx

8.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;X xxxxxxxxxxxx vzorků (5.4.1 xx 5.4.2) xx xxxxxx použije xxxxxx popsaný v xxxxxx 8.2 xx 8.4.4. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx roztoky, xxxxxxx XXX xx x&xxxx;xxxxxxxxx 8&xxxx;% xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx 4&xxxx;°X xxxxxxx xxxxxx xxxxx po dobu 24 xxxxx. V případě xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx pokusů xx xxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx nástřikovém zařízení xxxxxxxxx misku na xxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxx 8.4.2 xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx je % X x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx analýz.

Chromatogram xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5) by xxx být xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx 1. Xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx CMPA xxx xxxx xxxx. Xx xxxxxxxx nutné xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

8.5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorků xxxxxxxxxxx 100 μl xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxx syrovátky [0] (5.4.1).

Xxxxxxxxxxxx nesmí xxxxxxxxx xxx x&xxxx;xxxxxxxxx čase XXXX xxxx.

8.5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx X xxxxxxxx nastříknutím xxxxxxxx xxxxxx filtrátu (8.5.1), xxxxxx xxxx xxxxxxx pro xxxxxx.

9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX XXXXXXXX

9.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx výpočtu a vzorce

9.1.1.   Výpočet xxxxxxxxxx faktoru X:

Xxx XXXX: X = X/X

xxx

X	=	xxxxxxxx xxxxxx xxxx XXXX
X	=	xxxxx xxxx XXXX
X	=	xxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxx [5]

9.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx syrovátky xxxxxxxx xx xxxxxx

X(X)&xxxx;= X&xxxx;×&xxxx;X(X)

xxx

X(X)	=	xxxxxxxxxx procento syřidlové xxxxxxxxx xx vzorku [X]
X	=	xxxxxxxx xxxxxx xxxx XXXX (9.1.1)
X(X)	=	xxxxx xxxx XXXX xxxxxx (X)

Xxxxx xx W(E) xxxxx xxx 1&xxxx;% a rozdíl xxxx retenčním časem x&xxxx;xxxxx srovnávacího xxxxxx [5] menší xxx 0,2&xxxx;xxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx ze xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

9.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

9.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, která x&xxxx;xxxxxxxx zkušebního xxxxxx xxxxxxx současně nebo x&xxxx;xxxxxx sledu xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx 0,2 % hm.

9.3.2.   Reprodukovatelnost

Nestanovena.

9.3.3.   Linearita

Pro xxxxxxx xx 0 % xx 16&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxxxxxx je třeba xxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx&xxxx;&xx;&xxxx;0,99.

9.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx

Xxxxx xxxxxxx 1&xxxx;% obsahuje xxxxxxxxx x důvodu xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx 1

Xx—4.6 xxxxxxxx

XXXXXXX XX

Xxxxxx analýzy xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxxx	Xxxxxx
Xxx&xxxx;(6)	XXX 17189 xxxx XXX 3727 xxxx&xxxx;3
Xxxx	XXX 3727 xxxx 1
Xxxxxxxxxx xxxxxx (x výjimkou xxxx)	XXX 3727 část 2
Xxx	XXX 15648

XXXXXXX XXX

Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx odstředěného xxxxx x soukromém skladování

Parametr	Metoda
Tuk	ISO 1736
Xxxxxxxxx	XXX 8968 xxxx 1
Xxxx	XXX 5537

XXXXXXX VIII

Metody xxxxxxx sýrů x xxxxxxxxx skladování

1.

Je nutné xxxxxxx, xx sýry xxxxxxxx xxxxxxxx z ovčího xxxxx, xxxxxx xxxxx xx buvolího xxxxx, xxxx xx xxxxx xxxxxx, kozího a buvolího xxxxx neobsahují xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx, a za xxxxx xxxxxx se xxxxxxx metoda xxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx mléka xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxx obsah xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx mléka x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxx xxxxx v porovnání x&xxxx;xxxxxxx v referenčním xxxxxx xxxxxxxxxxx 1&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxx, který xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx.

2.

Xxxxxx xx xxxxxxxxxx kaseinu x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx v sýrech xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx&xxxx;1 xxxxx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx: x) xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxx xxxxxxx 0,5&xxxx;%; x) xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx pozitivní; c) musí xxxxxxxxx detekci xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx s požadovanou xxxxxxxxxx i po xxxxxx xxxx xxxxx, x&xxxx;xxxxx xxxx xx běžných xxxxxxxxxx xxxxxxxx docházet. Není-li xxxxx z výše xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxxx xx xxxxxx uvedené x&xxxx;xxxxxxx.

Xxxxxxx

XXXXXX XXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXX X&xxxx;XXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXX X&xxxx;XXXXXX XXXXX, XXXXXX XXXXX XXXX XXXXXXXX XXXXX, XXXX XXXXX OVČÍHO, KOZÍHO X&xxxx;XXXXXXXX XXXXX

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX

Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx a kaseinátů x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx, xxxxxx mléka, xxxxxxxx xxxxx anebo xx xxxxx ovčího, xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxx izoelektrickou xxxxxxxx γ-xxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXX XXXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxx xxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx, kozího xxxxx, xxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx mléka. Xxxx vhodná x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxx mléka a sýrů xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx kaseinů xx xxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx a proteolýza xxxxxxxxx (EC.3.4.21.7)

3.3.   Izoelektrická xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx močoviny x&xxxx;xxxxxxxxx bílkovin

3.4.   Vyhodnocení vybarvených xxxxxxx kaseinu γ3 x γ2 (důkaz xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx) xx xxxxxxx porovnání xxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx x xxxxxxx xxxxxxxxx u téhož xxxx z xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx obsahujících 0&xxxx;% x 1 % xxxxxxxxx xxxxx.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxx-xx stanoveno xxxxx, xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x. Xxxx xxxx být xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxx: Následující xxxxx xx vztahují xx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxx s obsahem močoviny x&xxxx;xxxxxxxxx 265 ×&xxxx;125 ×&xxxx;0,25&xxxx;xx. Pokud xx xxxxxxx xxxx rozměry xxxx xxxxx xxxx, xxxx xxx nutné xxxxxxx podmínky xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxx xxxxxxxx polyakrylamidových gelů x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx

4.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx roztok xxxx

Xx xxxx xxxxxxxxx:

4,85&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxx

0,15 x N, N′-methylen-bis-akrylamidu (XXX)

48,05&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx

15,00&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx (87 % hm.),

doplňte xx 100 xx x xxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx neurotoxického xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx dostupný, xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;XXX.&xxxx;X&xxxx;xxxxxxx, xx koncentrace xxxxxxxxxx xxxxxxx je 30&xxxx;% xx./xxx. xxxxxxxxxx x&xxxx;0,8&xxxx;% hm./obj. BIS, xxx uvedená množství (4,85 g akrylamidu x&xxxx;0,15 x&xxxx;XXX) musí xxx xxxxxxxxx komerčním roztokem x&xxxx;xxxxxx 16,2&xxxx;xx. Xxxxxxx xxxxxx xxx skladovat xxxxxxx 10 xxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxx xxxxx xxx 5 μX, xx xxxxx provést xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx x 2 g Amberlitu XX-3 po xxxx 30 xxxxx x xxxx xxx xxxxxxxxxxxx xxxx 0,45μm xxxxxxxx.

4.1.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxx

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx a amfolytů (*) xx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx (xxx 4.1.1).

9,0 ml xxxxxxxxx roztoku

24 mg β-xxxxxxx

500 μx amfolytu xX 3,5–9,5

250 μl xxxxxxxx xX 5–7

250 μl xxxxxxxx xX 6–8

Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xx dobu xxxx xx tří xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxx nebo xx vakuu.

Poznámka: Xxxxxx xxxxxx xx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxxxx (xxx 6.2).

4.1.3.   Roztoky xxxxxxxxxxxx

4.1.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;X, X, X′, X′-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (Xxxxx)

4.1.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;40&xxxx;% hm./obj. xxxxxxx persíranu xxxxxxxx (XXX)

800 mg XXX xx xxxxxxxx ve xxxx x xxxxxx xx do 2 xx.

Xxxxxxxx: Vždy xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx XXX.

4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx tekutina

Kerosin xxxx xxxxxxx xxxxxxx

4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx 5,77 g xxxxxxxx xxxxxxxxxx (85&xxxx;% xx.) xx xxxx x xxxxxx xx 100 xx.

4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx 2,00 x xxxxxxxxx sodného xx vodě a xxxxxx xxxxx na 100 xx.

Xxxxxxxx vzorku

4.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx k izolaci xxxxxxxx

4.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxx octová (25,0 ml ledové xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xx 100 xx).

4.5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx

4.5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx

4.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xx xxxx xxxxxxxxx:

5,75&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx (87&xxxx;% xx.)

24,03&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx

250&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxxxx

x doplňte xx 50 xx vodou.

Poznámka: Xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx; xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx je xxxxx xxxxx.

4.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx určené x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx

4.7.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx uhličitanu amonného

Titrujte xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx 0,2 xxx/x (1,58 x/100 xx xxxx) obsahující 0,05 xxx/x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX, 1,46 x/100 xx) roztokem xxxxxxxxxx xxxxxxxx 0,2 mol/l (1,92 x/100 xx xxxx) obsahujícího 0,05 xxx/x XXXX xx xX 8.

4.7.2.   Hovězí xxxxxxx (XX. 3.4.21.7), x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx 5 X/xx.

4.7.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx ε-xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx enzymu

Rozpusťte 2, 624 g kyseliny ε-xxxxxxxxxxxxxx (6-amino-n-hexankyseliny) ve 100 ml 40&xxxx;% xxx. xxxxxxxx.

4.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx

4.8.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxx 0&xxxx;% x&xxxx;1&xxxx;% kravského mléka xxx xxxxxx xx Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx působícího xxx Xxxxxx, B-2440, Xxxx, Xxxxxx.

4.8.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx buvolího xxxxx xxxxxxxxxxx pomocí xxxxxxx x x xxxxxxx 0 % a 1&xxxx;% xxxxxxxxx mléka

Odstředěné xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx syrového xxxxxxxx xxxx kravského mléka xxx teplotě 37&xxxx;°X (2&xxxx;500&xxxx;x, 20 minut). Xx xxxxxxx ochlazení xxxxxxxx a jejího xxxxxx na 6 xx 8 °X xx úplně xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx. Xxx xxxxxxxx 1 % xxxxxxxxx přidejte 5,00 ml xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx 495 ml xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 1 l. Hodnotu xX upravte na 6,4 xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx mléčné (10&xxxx;%, xx./xxx.). Xxxxxxx xxxxxxx xx 35 °X, xxxxxxxx 100 μx xxxxxxxx xxxxxxx (xxxxxxxx xxxxxxx 1: 10&xxxx;000, xxx 3&xxxx;000 X/xx) x&xxxx;xxxxxxxx xx xxxx 1 xxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx a nechte xxxxxx xxxx xxx xxxxxxx 35&xxxx;°X k utvoření xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx veškeré xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, aniž xx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx mléko xx xxxxx rozemele xx xxxxxxxxx xxxxxx. X&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 0&xxxx;% xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx u čistého odstředěného xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx při teplotě – 20&xxxx;°X.

Xxxxxxxx: Xxxx xxxxxxxxx referenčních standardů xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx buvolího xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx kaseinů xxxxxxxxxxx působení plasminu.

Chemikálie xxxxxx k barvení xxxxxxxx

4.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx

Xxxxxxxxx 150&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xx xxxx x&xxxx;xxxxxxx xx 1&xxxx;000&xxxx;xx.

4.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx roztok

Zřeďte 500 xx methanolu x 200 ml xxxxxx kyseliny octové xxxxxxxxxxxx xxxxx na 2&xxxx;000 ml.

Poznámka: Xxxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxx čerstvý; xxx jej xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx objemů xxxxxxxxx xxxxxxx 50&xxxx;% (xxx.) methanolu x xxxxxxxxx xxxxxxx 20&xxxx;% (xxx.) xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

4.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxx

4.11.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxx 1)

X 1&xxxx;000 xx 90 % xxx. xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 45 xxxxx) 3,0 x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx Xxxxxxxxx X-250 (X. X. 42655) x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxx xxxxx skládané xxxxxx.

4.11.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxx 2)

V 1 000 ml 20&xxxx;% xxx. xxxxxxxx octové xxxxxxxxx 5,0 g síranu xxxxxxxxx, xxxxxxxxxxxx.

4.11.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx roztok (xxxxxxxx xxxxxx)

Xxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx 125 ml xxxx xxxxxxxxx roztoků (4.11.1 x&xxxx;4.11.2).

Xxxxxxxx: Xxxxxxx xxxxxx xx třeba xxxxxx x xxx přípravy.

5.   PŘÍSTROJE X POMŮCKY

5.1.   Skleněné desky (265 x 125 x 4 xx), xxxxxxx xxxxxxx (o xxxxx 15 xx), xxxxxxxxx xxxxxx.

5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxx xxxx (265 × 125 mm)

5.3.   Krycí xxxxx (280 × 125 mm). Xx xxxxx dlouhý xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxx pásky (280 ×&xxxx;6 × 0,25 mm) (xxx xxxxxxx 1).

5.4.   Elektrofokusační komora x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx (xxxx. 265 ×&xxxx;125&xxxx;xx) x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx zdroj (≥ 2,5&xxxx;xX) nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

5.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx teploty xx xxxx 12 ± 0,5&xxxx;°X

5.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 3&xxxx;000&xxxx;x

5.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx proužky (o xxxxx ≥ 265&xxxx;xx)

5.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx roztok

5.9.   Aplikátory xxxxxx (10 × 5 mm, x&xxxx;xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx adsorpcí xxxxxxxx)

5.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxx (xxxx. xxxxx xx xxxxxxxx 280 ×&xxxx;150&xxxx;xx) x&xxxx;xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxxxxxx

5.12.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx tyčový homogenizátor x&xxxx;xxxxxxxx xxxx 10&xxxx;xx x&xxxx;xxxxxxxxx 8&xxxx;000 až 20&xxxx;000 xx/xxx

5.13.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

5.14.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx xxxxx

5.15.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx

5.16.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx na 25 μx

5.17.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx lyofilizátor

5.18.   Termostatem řízená xxxxx lázeň, xxxxxxxxxxxx xx 35 a 40 ±&xxxx;1&xxxx;°X x&xxxx;xxxxxxxxx

5.19.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx λ =&xxxx;634&xxxx;xx

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX POSTUP

6.1.   Příprava vzorku

6.1.1.   Izolace xxxxxxx

Xx odstředivkové xxxxxx xx 100&xxxx;xx navažte xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx odpovídající 5&xxxx;x&xxxx;xxxxxx, xxxxxxxx 60 ml xxxxxxxxxxx vody a obsah xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx (8&xxxx;000 až 10&xxxx;000 xx/xxx). Xxxxxxx xX xx 4,6 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.5.1) x&xxxx;xxxxxxxxxxx (5 xxxxx, 3&xxxx;000&xxxx;x). Xxxxxxxxxx xxx x&xxxx;xxxxxxxxx a zbytek homogenizujte xxx 20&xxxx;000 ot/min xx 40 ml xxxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxx pH xxxxxxxxx na 4,5 xxxxxxxx kyselinou xxxxxxx (4.5.1). Přidejte 20 ml xxxxxxxxxxxxxx (4.5.2) x&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx (5 xxxxx, 3&xxxx;000&xxxx;x). Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxx xx xxxxxxx xxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxx (viz xxxxxxx 2), a obě xxxx xxxxxxxxxx. Xxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxxx xx 40 ml xxxxxxxxxxx xxxx (viz xxxx) x 20 xx xxxxxxxxxxxxxx (4.5.2) x xxxxxxxx se. Tento xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxxx fáze xxxxxx bezbarvé (dvakrát xx xxxxxxx). Bílkovinný xxxxxx xxxxxxxxxxxxx x&xxxx;50&xxxx;xx xxxxxxx (4.5.3) x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxx promyjte xxxxx xxxxxxxxxxxx 25&xxxx;xx dávkami xxxxxxx a nechte xxxxxxx xx xxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxx rozmělněte v třecí xxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx se xxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx – 20 °C.

6.1.2.   Přeměna β-xxxxxxx xx γ-xxxxxxx xxxxxxxxx plasminu

Rozptylte 25 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (6.1.1) v 0,5 xx xxxxxxxxx roztoku xxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.7.1) x směs 20 xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxxx. Xxxx xxxxxxxx xx 40 °C x&xxxx;xxxxxxxx 10 μl plasminu (4.7.2), promíchejte x&xxxx;xxxxxxxxx 1 xxxxxx xxx xxxxxxx 40&xxxx;°X xx xxxxxxx třepání. Xxx xxxxxxxx enzymu xxxxxxxx 20 μl xxxxxxx xxxxxxxx ε-aminokapronové (4.7.3). Xxxx přidejte 200&xxxx;xx xxxxx močoviny x&xxxx;2&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx po xxxxxxx xxxxxxxx ε-xxxxxxxxxxxxxx&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxxxx x xxxx xxxxxx xxxxxxxxx v 0,5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx bílkovin (4.6).

6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx

Xx skleněnou xxxxx (5.1) xxxxxxxx xxxxxxx nosnou fólii xxxx (5.2) s pomocí xxxxxxxx xxxxx vody x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxx odsajte xxxxxxxxx ubrouskem nebo xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx xxxxx (5.3) x&xxxx;xxxxxxxxxxx vložkami (0,25 mm) xx jinou xxxxxxxxx xxxxx. Tuto druhou xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx stolek.

K xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx (4.1.2) přidejte 10 μx Temedu (4.1.3.1), protřepejte x&xxxx;xxxxxxxx 10 μx roztoku XXX (4.1.3.2); důkladně xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxx. Jeden xxxxx nosné xxxxx xxxx (xxxxxxx s fólií xxxxxx dolů) xxxxxxxx x&xxxx;xxxxx x&xxxx;xxxxx fólií x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx tak, xxx xx mezi xxxxxxx xxxxxxxxx pravidelně xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx xxx bublin (xxxxxxx 3). Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx gelu xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxx xx xx xxx xxxxx xxxxxxxx desky, xxx xx zatížily. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (asi xx 60 xxxxxxxx) xxxxx s xxxxx xxxxx xxxxxxx gel xxxxxxxxxxxxx na xxxxx xxxxx gelu tak, xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Zadní xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, aby xx xxxxxxxxxx xxxxxx gelu x&xxxx;xxxxxxxx. „Xxxxxx sendvič“ xxxxxxx do tenké xxxxx a uložte xx xxxxxxxxxx (xxxxxxx xx xxxx xxxxx).

Xxxxxxxx: Xxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx použít xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxx xxx může xxx xxxxxxxx na xxxxx části; je xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxx v případě xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx elektroforetického xxxxxxxx (xxx gely x&xxxx;xxxxxxxxx 4,5 ×&xxxx;5&xxxx;xx).

6.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxx xxxxxxxx na 12 °X. Xxxxx stranu xxxxx fólie gelu xxxxxx xxxxxxxxx a poté xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxx kápněte xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (4.2). Xxxxxxx xxxxxxxx „xxxxxx xxxxxxx“ xxxxxx fólií xxxxxxxx dolů, xxx xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Přebytečný xxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxx fólii. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.3, 4.4), xxxxxxxxx na xxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxx na xxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxxxx 9,5&xxxx;xx).

Xxxxxxxx izoelektrické xxxxxxxx

6.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxx 265 ×&xxxx;125 × 0,25 mm

Fáze	Doba (min)	Napětí (V)	Proud (mA)	Příkon (W)	Volty/hodiny (Vh)
1. Předběžná xxxxxxxx	30	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 15	xxxxxxxxxx 4	xxx 300
2. Fokusace xxxxxx&xxxx;(7)	60	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 15	xxxxxxxxxx 4	xxx 1 000
3. Konečná xxxxxxxx	60	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 5	xxx. 20	xxx 3&xxxx;000
	40	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 6	xxx. 20	xxx 3&xxxx;000
	30	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 7	xxx. 25	xxx 3 000

Poznámka: Xxxxxxxx se xxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxx xxxx, xxxxxxx proudu x&xxxx;xxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx upraveny (xxxx. xxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xx xxxxxxxxxxx, xxxxxxx-xx se xxx x&xxxx;xxxxxxxxx 265 × 125 ×&xxxx;0,5&xxxx;xx).

6.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxx elektroforetického xxxxxxxx (2 gely 5,0 ×&xxxx;4,5&xxxx;xx, xxxxxxxxx xxx xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxx xx gel.

Fáze	Napětí	Proud	Příkon	Teplota	Volty/hodiny
1. Předběžná xxxxxxxx	1&xxxx;000 X	10,0 mA	3,5 X	8 °C	85 Vh
2. Fokusace xxxxxx	250 X	5,0 xX	2,5 X	8 °X	30 Vh
3. Fokusace	1 200 X	10,0 xX	3,5 W	8 °X	80 Vh
4. Fokusace	1 500 V	5,0 xX	7,0 X	8 °C	570 Xx

Xxxxxxxxx vzorku xx xxxx 2 xxxxxx xxx 0 Vh.

Aplikátor xxxxxx xx xxxx 2 xxxxxxxxx při 30 Xx.

6.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxx

6.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx proužky a xxx xx xxxxx xxxxx do xxxxxxx/xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 200&xxxx;xx xxxxxxxx (4.9). Xxx x ní xxxxxxxx 15 minut xx xxxxxxx třepání.

6.4.2.   Praní x&xxxx;xxxxxxx xxxxxx xxxxx

Xxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx a xxxxxxx desku xxxxxxx xxxxxxxxxx po dobu 30 xxxxxx vždy xx 100 ml xxxxxxxxxxxxx roztoku (4.10) Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx 250&xxxx;xx xxxxxxxxx roztoku (4.11.3) x xxx xxxxxx xx xxxxxxx třepání xx xxxx 45 xxxxx xxxxxxxxx.

6.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx

Xxxxxxx roztok xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxx dvakrát xxxxxxxxxx po dobu 30 xxxxxx xxxx xx 100&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.10). Xxxx 15 xxxxx xxxxxxxxxxxxx x&xxxx;200&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx; xxxx odbarvování xxxxxxxx xxxxxxx dvakrát až xxxxxxx, xxxxx není xxxxxx xxxx a bezbarvé. Xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx vodou (2 ×&xxxx;2 xxxxxx) x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx (2 xx 3 xxxxxx) xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (10 xx 15 xxxxx).

Xxxxxxxx 1: Xxxxxx, xxxxxxxxx, barvení x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx 20&xxxx;°X. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx 2: Pokud xxxxxxxxxxxxxxx citlivější xxxxxxxx xxxxxxxx (např. Silver Xxxxxxxx Xxx, Protein, Xxxxxxxxx Xxxxxxx, xxx x. 17-1150-01), xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx plasminem xxxxxxx x poměru 5 xx/xx.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX

Xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx obrazců xxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx referenčních xxxxxxxxx x xxxxxxxx xxxx. Xxxxxxxxxx kravského xxxxx x sýrech xxxxxxxxxx x ovčího xxxxx, xxxxxx xxxxx, buvolího xxxxx nebo ze xxxxx ovčího, xxxxxx x xxxxxxxx xxxxx xx provádí xxxxxxxxxxxxxxx γ3- x γ2-kaseinů, xxxxxxx izoelektrické body xx xxxxxxxxx v xxxxxxx xxxx xX 6,5 x xX 7,5 (xxxxxxx 4x, x, xxxxxxx 5). Xxxxxxxx mez xx xxxxx než 0,5&xxxx;%.

7.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxxx x xxxxxxxx, kozích x/xxxx xxxxxxxx γ2- x γ3-xxxxxxx (xxx „γ2 X,X,X“ x „γ3 X,X,X“ na xxxxxxxxx 4x, x a xxxxxxx 5) xxxxxx xxxxxx intenzity. Pouze xx těchto xxxxxxxx xxx xxxxx posoudit xxxxxxxx kravského xxxxx (xxxxx nebo xxxxx xxx 1 % xxxx xx xxxx 1&xxxx;%) x&xxxx;xxxxxxxxxxxx vzorku xxxxxxxxxx xxxxxxxxx hovězích γ3- x&xxxx;γ2-xxxxxxx (xxx „γ3 X“ x&xxxx;„γ2 X“ xx xxxxxxxxx 4&xxxx;x, x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxx 5) x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxx v referenčních standardech x&xxxx;xxxxxx 0&xxxx;% a 1 % (xxxxxx, kozích), xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx standardech (xxxxxxxx).

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

Xxxxx xx xx možné, xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx píků xxxxxxxx γ2- x&xxxx;γ3-xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx píků ovčích, xxxxxx x/xxxx buvolích γ2- a γ3-kaseinů (viz xxxxxxx 5) xxxxxxxxxxxxx (5.19). Xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx xxxx γ2- x γ3-xxxxxxx x 1&xxxx;% referenčním xxxxxxxxx (xxxxx, xxxxx) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (xxxxxxx) xxxxxxxxxxxxx u xxxxx gelu.

Poznámka: Xxxx xxxxxx xxxxxxx uspokojivě, xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx obou xxxxxxxx γ2- x γ3-xxxxxxx v 1&xxxx;% xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx x 0 % xxxxxxxxxxx standardu. V opačném xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx při xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx v dané metodě.

Vzorek xx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxx hovězích γ2- x γ3-xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx poměrů xxxxx xxxx xxxx xxxxxx xxxx větší xxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx 1 % xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxx X., Xxxx L., Chianese X., Xxxxxx X., Xxxxxxx X., Berner X, Krause X., Xx Luccia A., Xxxxx X.: Use xx xxxxxxx xx&xxxx;xxxxxxxx xxx sensitivity xx xxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxx&xxxx;xx xxxxx xxx/xx xxxxxxx xxxxxx xx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx of γ2-caseins. Milchwissenschaft 45, 708–711 (1990).

Xxxxx X., Xxxxxxx X.X., Xxxxxxxx L., Xxxx X., Spagna Musso X., Xxxxx X., Xxx Xxxxxxx L.: X control method xx xxxxxx xxxxxx xxxx&xxxx;xx ewe xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxxx 50, 83–85 (1995).

Xxxxxx X., Xxxxxx X, Xxxxxxxxxxxx X.: Sensitive xxxxxxxxx xx xxx xxxx&xxxx;xx xxx xxx xxxx xxxx&xxxx;xxx cheese xx xxxxxxx xxxxxxxxx — xxx xxxxxxx xxxxxxxxx/xxxxxxxxxxx xX gradient — xxxxxxxxxxx focusing xx γ-xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxx. xx: Electrophoresis-Forum 89 (X. J. Xxxxxx, ed.) xx 389-393, Xxxx-Xxxxxx, Xüxxxxx (1989).

Xxxxxx Ι., Xxxxxx X.-X., Xxxxxx K.-P.: Xxxxxxxx von Xxxxxxxx xx Schaf xxx Xxxxxxxxxxx xxx. -käse xxxxx xxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxx Xxxxxxxxxxxxxxxxxx. X. Xxxxxxx. Xxxxxx.&xxxx;Xxxxxx. 174, 195–199 (1982).

Radola X.X.: Xxxxxxxxx-xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx 50-100&xxxx;μx xxxxxxxxxxxxxx gels on xxxxxxxxx glass plates xx xxxxxxxxx xxxxx.&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx 1, 43–56 (1980).

Xxxxxxx 1

Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx

Xxxxxxx 2

Kaseinová xxxxxx xxxxxxxx mezi vodnou x&xxxx;xxxxxxxxxx fází po xxxxxxxxxx

Xxxxxxx 3

Xxxxxxxx xxxxxxxx xxx odlévání xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx

x = xxxxxxxxx páska (0,25&xxxx;xx); x = xxxxx xxxxx (5.3); x, x = xxxxxxxx xxxxx (5.1); x = xxxxxx xxxxxx (4.1.2); f = xxxxx xxxxx xxxx (5.2).

Xxxxxxx 4a

Izoelektrická xxxxxxxx xxxxxxx ze sýrů x&xxxx;xxxxxx a kozího xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x&xxxx;xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

% XX = procento xxxxxxxxx xxxxx, X&xxxx;= xxxxxxx, E = ovčí, X&xxxx;= xxxx

Xx xxxxxxx xx xxxxxxxxxx horní xxxxxxxx xxxx XXX.

Xxxxxxx 4x

Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx mléka, xxxxxxxxxx plasminem, x&xxxx;xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

% XX = xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx; 1 + = xxxxxx x xxxxxxx 1&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxx x x xxxxxxxxx čistého xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx. C = xxxxxxx, X&xxxx;= xxxx, X&xxxx;= kozí, X&xxxx;= xxxxxx

Xx obrázku xx xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx gelu XXX.

Xxxxxxx 5

Xxxxxxxxxxx denzitogramů referenčních xxxxxxxxx (XXX) x&xxxx;xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx ovčího x&xxxx;xxxxxx xxxxx, po izoelektrické xxxxxxxx

x, b = xxxxxxxxxx standardy xxxxxxxxxx 0 a 1&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxx; x-x = xxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx 0, 1, 2, 3 x 7&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxx; X&xxxx;= kravské, X&xxxx;= xxxx, G = xxxx.

Xxxx xxxxxxx horní polovina xxxx XXX xxx λ =&xxxx;634&xxxx;xx.

XXXXXXX XX

Xxxxxxxxx xxxxxx

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxxx

Xxxxxxx provádějí xxxxxxxxxx určené x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx&xxxx;12 xxxxxxxx (XX) x.&xxxx;882/2004&xxxx;(*) xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx členského xxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx vzorků x&xxxx;xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx

1.

Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx nařízením xxx xxxxxxxxxx výrobek. Xxxxxxxxxx-xx xxxxx ustanovení xxx xxxxx vzorku, xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx x normě XXX 707„Xxxxx a xxxxxx xxxxxxx – Xxxxxxxx pro odběr xxxxxx“,

2.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, které xxxxxx xxxxxxxxx výsledků v xxxxxxx s dodatkem.

3.

Pro xxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx předpisech Xxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

4.

Xxxxx dojde xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx agentury xxxx xxxxxx znovu xxxxxxx xxxxxxxxx analýzu xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xx předpokladu, xx&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx jsou x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxx xxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx orgánu. Výrobce xxxxx platební xxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx analýzy xx&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxx xxx xx&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx první xxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx analýzu xx 21 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx.

5.

Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx považuje xx konečný.

6.

Jestliže xxxxxxx xx xxxx xxxxxxxxxx xxx xx xxxxxx xxxxxx xxxxxxx, že xxxxxx xxx odběru xxxxxx xxxxx správný, xxxxx vzorků se x&xxxx;xxxxx xxxxxxxx zopakuje. Xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx

Xxxxxxxxxx splnění xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx s ohledem xx xxxxx

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

X xxxxxxxxx, kdy xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx skladování xxxxxxx xxxxxxxx postupy pro xxxxx xxxxxx, xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx. Xx xxxxx ostatních xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx ze 3 xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx odevzdané ke xxxxxxxx. Xxx připravit x&xxxx;xxxxxxx xxxxxx. Získaný xxxxxxxx se xxxxxxx xx xxxxxxx stanovenými xxxxxxx xxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxx 95&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx odchylky, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx buď xx tom, 1) xxx byla xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx spolupráce s hodnotami xxx σx x σX, xxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx na xxx, 2) xxx xxxx xxxxxxxxxx vnitřní xxxxxxxxxxxxxxxxxx. Tento xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx se xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx je xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx

X&xxxx;xxxxx xxxxxxx byla xxxxxxxxxx odchylka xxxxxxxxxxxxxxx σx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx σR stanovena a laboratoř xxxx prokázat xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx validované xxxxxx.

Xxxxxxxx xx aritmetický xxxxxx&xxxx; x xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx (x =&xxxx;2) x&xxxx; xxxxx:

Xx-xx xxxxxxx výsledek xxxxxx x vypočítán xx vzorce ve xxxxx x = x ₁ + x ₂, x = x ₁ – x ₂, x = x ₁ · x ₂ xxxx x = x ₁/x ₂, xxxx xx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx běžných xxxxxxx xxx kombinování směrodatných xxxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxx xx nevyhovující xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx UL, xxxxxxxx

xxxxx xx xx xx xx, xx hodnotě XX xxxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx zákonem xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx LL, xxxxxxxx

xxxxx xx xx xx xx, xx xxxxxxx XX xxxxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx s výpočtem xxxxxxxxxx xxxxxxxx vnitřní xxxxxxxxxxxxxxxxxxx

X&xxxx;xxxxxxxxx, xxx jsou xxxxxxx xxxxxx, které xxxxxx xxxxxxxxx v tomto nařízení, x&xxxx;xxx xxxxxx stanovena xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, xx třeba xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx validaci. Xxxxxxx σx x σ X xx xxxx xx xxxxxx xxx výpočet xxxxxxxxx xxxxxxxxx X xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx opakovatelnosti xxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xx X .

Xxxxxxxx, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx účelem xxxxxxx xxxxxxx stanovené xxxxx xxxxxxx, xxxx uvedena x&xxxx;xxxx 1. Považuje-li xx xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxx zákonem xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx metody stanovené x&xxxx;xxxxx xxxxxxxx a výsledek xx xxxxxxxxx x xxxxxxx x xxxxx 1.