Plné znění - 32018R0150

Xxxxxxx X

XXXXXXXXXXXXX STANOVENÍ XXXXXXXXXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXXXXXXXXXXXXXXXXXX V SUŠENÉM ODSTŘEDĚNÉM MLÉCE

Metoda: XXXX s obrácenými fázemi

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX X OBLAST XXXXXXX

Xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx kvantitativního xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (XX) x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XX) x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx (XXX) a je xxxxxx pro xxxxxxxxxx xxxxxx podmáslí x&xxxx;XXX.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX

Xxxxx XX + PE: xxxxxxxxxx zlomek látky xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxxx xx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx dipalmitoyl-fosfatidylethanolaminu (XXXX) xx 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx mléka. Xxxxxxxxx xxxxxx XX x&xxxx;XX xxxx derivátů x-xxxxxxxxxxxxxx (XXX) metodou XXXX x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx (RP) x&xxxx;xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx XX x&xxxx;XX xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx známé xxxxxxxx XXXX.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x. Xxxxx xxxx uvedeno xxxxx, xxxxxxx xx xxxxx destilovaná xxxx xxxx voda nejméně xxxxxxxxxx čistoty.

4.1.   Referenční xxxxxxxx: XXXX x čistotě xxxxxxx 99&xxxx;%

Xxxxxxxx: Referenční xxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxx – 18 °C.

4.2.   Chemikálie pro xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx

4.2.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx čistoty xxx XXXX

4.2.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxx XXXX

4.2.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx tryptaminu

4.3.   Chemikálie xxx xxxxxxxx x-xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

4.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx, 12 X xxxxx xxxxxx

4.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx boritá, 0,4 M xxxxx xxxxxx s xxxxxxxx xX upravenou xxxxxxxxxx xxxxxx (4.3.1) xx 10,0

4.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;2-xxxxxxxxxxxxxxx

4.3.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;x-xxxxxxxxxxxxx (XXX)

4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxx HPLC

4.4.1.   Eluční xxxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx chemikálií čistoty xxx XXXX.

4.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxx xxx XXXX

4.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx

4.4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx

4.4.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx

4.4.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxx

4.4.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx.

5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX X XXXXXXX

5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxx na 0,1&xxxx;xx x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx po 1&xxxx;xx

5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 25 x&xxxx;100&xxxx;xx

5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx schopné xxxxxxxx xx 1 do 10&xxxx;xx

5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

5.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxx xxxxxxx dávkovat 0,2, 0,5 a 5 ml

5.6.   Odměrné baňky x&xxxx;xxxxxx 10, 50 x&xxxx;100&xxxx;xx

5.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 20 x&xxxx;100 μl

5.8.   Ultrazvuková xxxxx

5.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx 27&xxxx;000 × g

5.10.   Skleněné xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx asi 5&xxxx;xx

5.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxx 25&xxxx;xx

5.12.&xxxx;&xxxx;&xxxx;xX xxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xx 0,1 xxxxxxxx xX

5.13.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xx XXXX

5.13.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx fungovat xxx xxxxxxx 1,0 xx/xxx při 200 xxxxxx

5.13.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx vzorků x&xxxx;xxxxxxxx derivatizace

5.13.3.   Termostat xxxxxx xxxxxxx kolonu xxxxxxxx xx xxxxxxx 30&xxxx;°X ± 1&xxxx;°X

5.13.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx fungovat při xxxxxxxxx xxxxxx xxxxx 330&xxxx;xx a emisní xxxxxx xxxxx 440&xxxx;xx

5.13.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx vybavení pro xxxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxx plochy xxxx

5.13.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx XxXxxxxxxxx® – 100&xxxx;(250 ×&xxxx;4,6&xxxx;xx) nebo xxxxxxxxxx xxxxxx naplněná oktadecylsilanem (X 18), velikost xxxxxx 5 μx

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXX XXXXXX

Xxxxxx xx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx XXX 707.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX POSTUP

7.1.   Příprava xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx

7.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx 30,0 ± 0,1 mg xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (4.2.3) do odměrné xxxxx xx 100&xxxx;xx (5.6) a doplňte xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1).

7.1.2.   Pipetou (5.3) xxxxxxxx 1&xxxx;xx xxxxxx roztoku xx xxxxxxx xxxxx na 10&xxxx;xx (5.6) a doplňte xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1) x&xxxx;xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx 0,15 xX.

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx

7.2.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx 1,000 ± 0,001&xxxx;x&xxxx;xxxxxx XXX xx xxxxxxx xx 25&xxxx;xx (5.2). Pipetou (5.3) xxxxxxxx 10&xxxx;xx xxxxxxxxxxx xxxx o teplotě 40&xxxx;°X ± 1&xxxx;°X x&xxxx;xx xxxx 30 xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (5.4), aby se xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx.

7.2.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx (5.5) xxxxxxxx 0,2&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxx do xxxxxxx xxxxx na 10&xxxx;xx (5.6), xxxxxx xxxxxxxx stříkačky (5.7) xxxxxxxx 100 μl 0,15 xX roztoku xxxxxxxxxx (7.1) a doplňte xx xxxxxx methanolem (4.2.1). Xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx na 15 xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx (5.8).

7.2.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx (5.9) xxx 27 000 ×&xxxx;x&xxxx;xx xxxx 10 xxxxx a supernatant xxxxxxxx xx skleněné xxxxxxx (5.10).

Xxxxxxxx: Do xxxxxxxxx xxxxxxx XX xxxx xxx roztok xxxxxxxxxx xxxxxx skladován xxx xxxxxxx 4 °C.

7.3.   Příprava roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxx

7.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx 55,4&xxxx;xx XXXX (4.1) xx xxxxxxx xxxxx xx 50&xxxx;xx (5.6) x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxx (5.11) xxxxxxxx xxx 25&xxxx;xx xxxxxxxxxxx (4.2.2). Xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xx 50&xxxx;°X ± 1&xxxx;°X x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxxx xx XXXX xxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xx 20&xxxx;°X, xxxxxxx po značku xxxxxxxxxx (4.2.1) x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx.

7.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx (5.3) xxxxxxxx 1&xxxx;xx tohoto xxxxxxx xx odměrné xxxxx xx 100&xxxx;xx (5.6) x&xxxx;xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxx (4.2.1). Xxxxxxx (5.3) přeneste 1 ml xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xx 10&xxxx;xx (5.6), xxxxxxxx 100 μl (5.7)&xxxx;0,15xX xxxxxxx tryptaminu (7.1) x&xxxx;xxxxxxx xx značku xxxxxxxxxx (4.2.1). Promíchejte xxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xx xxxxxxxxx xxxxxxx XX xxxx xxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx při xxxxxxx 4&xxxx;°X.

7.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxx

Xx odměrné baňky xx 10 ml (5.6) xxxxxxx 25,0 ± 0,1&xxxx;xx OPA (4.3.4), xxxxxxxx 0,5 ml (5.5) xxxxxxxxx (4.2.1) a pečlivě xxxxxxxxxxx, xxx xx XXX xxxxxxxxx. Xxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx (4.3.2) x&xxxx;xxxxxxxx stříkačkou (5.7) xxxxxxxx 20 μx 2-xxxxxxxxxxxxxxxx (4.3.3).

Xxxxxxxx: Derivatizační xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxxx xxx teplotě 4 °C; xxxxxxx xxxxxxx xxxxx xx xxxx jednoho xxxxx.

7.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx pomocí XXXX

7.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxxxxx (4.4)

Xxxxxxxxxxxx A: Xxxxxx 0,3 xX xxxxxx dihydrogenfosforečnanu x&xxxx;xxxxxx 3 mM xxxxxx xxxxxxx (x xxxxxxxx xX xxxxxxxxx xx 6,5 ± 0,1 xxxxxxxxx octovou): methanol: xxxxxxxxxxxxxxx = 558: 440:2 (xxx.).

Xxxxxxxxxxxx B: Xxxxxxxx

7.5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx gradient:

Čas (xxx)	Xxxxxxxxxxxx X (%)	Xxxxxxxxxxxx B (%)	Xxxxxx (xx/xxx)
Xxxxxxxxx	40	60	0
0,1	40	60	0,1
5,0	40	60	0,1
6,0	40	60	1,0
6,5	40	60	1,0
9,0	36	64	1,0
10,0	20	80	1,0
11,5	16	84	1,0
12,0	16	84	1,0
16,0	10	90	1,0
19,0	0	100	1,0
20,0	0	100	1,0
21,0	40	60	1,0
29,0	40	60	1,0
30,0	40	60	0

Xxxxxxxx: Xxxx xx xxxx, xx xxxxxx gradient xxxx xxxxx xxx mírně xxxxxxx, aby xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx obrázku 1.

Teplota xxxxxx: 30 °X.

7.5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxxxxx: 50 μx xxxxxxxxxxxxxxx činidla a 50 μx xxxxxxx xxxxxx

7.5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxx

Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx 100&xxxx;% rozpouštědlem B po xxxx 15 xxxxx, xxxxx xxxxxxxxx xxxxx X:X =&xxxx;40:60 a provádějte xxxxxxxxxxx xx dobu 15 xxxxx při xxxxxxx 1 ml/min. Xxxxxxxx xxxxx pokus xxxxxxxxx xxxxxxxxx (4.2.1).

Xxxxxxxx: Xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xx delší xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx po xxxx 30 xxxxx xxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx x poměru 80:20 (xxx.).

7.5.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx obsahu XX + XX xx xxxxxxxxx vzorku

7.5.6.   Proveďte xxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx analýz při xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx mezi xxxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx získali xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxx. Xxx výpočet xxxxxxxxxx xxxxxxx nastříkněte xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx (7.3) xx xxxxxxx 5–10 xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxx xx xxxxx xx každých 20–25 xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx 100 % xxxxxxxxxxxxx X&xxxx;(7.5.1).

7.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxx

7.6.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxx XXXX

XXXX se xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx píku. Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.

7.6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx xx vymývá x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx xxxx (xxxxxxx 1). Xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxx.

7.6.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxx XX a PE

Za xxxxx xxxxxxxxx podmínek (obrázek 1) se XX xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx nerozlišených xxxx, xxxx xxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxx xxx. XX xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx. Celou xxxxxx xxxxx skupiny xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx linie tak, xxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx 1.

8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX X VYJADŘOVÁNÍ XXXXXXXX

Xxxxx XX + XX xx xxxxxxxxx vzorku xx xxxxxxx xxxxx:

X =&xxxx;55,36 × ((A₂)/(A₁)) × ((T₁)/(T₂))

kde:

C	=	obsah PS xxxx XX (x xx/100 x&xxxx;xxxxxx) xx xxxxxxxxx xxxxxx
X1	=	xxxxxx xxxx XXXX roztoku xxxxxxxxxxxx xxxxxx (7.3)
A2	=	plocha píku XX xxxx XX xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx (7.2)
X1	=	xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx vzorku (7.3)
X2	=	xxxxxx xxxx tryptaminu xxxxxxx zkušebního vzorku (7.2).

9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

Xxxxxxxx: Xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx Mezinárodní xxxxx XXX&xxxx;(*).

9.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx směrodatná xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxx proměnlivost xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx, které x&xxxx;xxxxxxxx zkušebního vzorku xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx stejném přístroji x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxx odstupu, xx neměla překročit xxxxxxxxx 2&xxxx;%. Xxxxxxxx xx xx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx dvě xxxxxxxxx, xxxxxxxxx rozdíl xxxx jejich výsledky xx xxxxx xxx xxxxx xxx 6&xxxx;% xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx.

9.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxx xxx pracovníci xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx vzorku x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxx by xxxxx být větší xxx 11 % xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx výsledků.

10.   LITERATURA

10.1.   Resmini X., Xxxxxxxxxx L., Hogenboom X. A., Xxxxxx X., Rampilli X. „Xxxxxxxxx xx buttermilk solids xx skimmilk powder xx XXXX xxxxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxxxxxxxx.“ Xxx. Xxxx. Xxxx.-Xxx.&xxxx;39,395[1988].

Xxxxxxx 1

XXXX chromatogram XXX-xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx (PS) x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (PE) v methanolovém xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxx sušeného xxxxxxxxxxxx xxxxx. Xx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx xxxx PS, XX x&xxxx;xxxxxxxxx (vnitřní xxxxxxxx).

Xxxxxxx XX

XXXXXXXXXX SYŘIDLOVÉ XXXXXXXXX V SUŠENÉM ODSTŘEDĚNÉM XXXXX URČENÉM XXX XXXXXXX XXXXXXXXXX NA XXXXXXX STANOVENÍ XXXXXXXXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXXXX XXXXXXXXXXX CHROMATOGRAFIÍ (XXXX)

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX X&xxxx;XXXXXX XXXXXXX

Xxxx xxxxxx umožňuje zjistit xxxxxxxxxx xxxxxxxxx syrovátky x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx k veřejnému skladování xx základě xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX ODKAZ

Mezinárodní xxxxx XXX 707 – Xxxxx x mléčné xxxxxxx – Xxxxxxxx xxx xxxxx xxxxxx.

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX

Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx definován xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

—	Xxxxxxxxxxxx sušeného odstředěného xxxxx, xxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxx trichloroctovou x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx;

—	Xxxxxxxxx xxxxxxxx kaseinomakropeptidů (XXX) x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (HPLC);

—	Vyhodnocení xxxxxxxx získaného x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx xx srovnávacími xxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx mléko x&xxxx;xxxxxxxxx nebo xxx xxxxxxxx xxxxxxx procenta xxxxxx syrovátky.

5.   CHEMIKÁLIE

Používají xx xxxxx chemikálie čistoty x.x. Xxxxxxx xxxx xxxx být voda xxxxxxxxxxx xxxx voda xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx trichloroctové

Rozpusťte 240&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXx₃XXXX) ve xxxx a doplňte xx 1&xxxx;000&xxxx;xx. Xxxxxx xx xxx xxx xxxx x xxxxxxxx.

5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx roztok, xX 6,0

Xxxxxxxxx 1,74&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx sekundárního (X₂XXX₄), 12,37&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxxxxxx draselného (XX₂XX₄) x&xxxx;21,41&xxxx;x&xxxx;xxxxxx xxxxxxx (Xx₂XX₄) xxx x&xxxx;700&xxxx;xx vody. X&xxxx;xxxxxxx potřeby xxxxxxx xX xx 6,0 xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx hydroxidu draselného.

Doplňte xxxxx na 1&xxxx;000 xx a homogenizujte.

Poznámka: Xxxxxxx eluentu lze xxxxxxx xxx, xxx xxxxxxxxx osvědčení xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx výrobce xxxxxxxx materiálů na xxxxxx.

Xxxxxx xxxxxx před xxxxxxxx přefiltrujte xxxx xxxxxxxxxx filtr x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μm.

5.3.   Promývací xxxxxx

Xxxxxxxxx jeden objem xxxxxxxxxxxx (CH₃CN) x&xxxx;xxxxxx xxxxxx xxxx. Před xxxxxxxx směs xxxxxxxxxxxx xxxx membránový xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx pórů 0,45 μx.

Xxxxxxxx: Lze xxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx, který xx xxxxxxxxxxxx xxxxxx a xxxxx xxxxxxxxxx rozlišovací xxxxxxxx xxxxxx.

5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx vzorky

5.4.1.   Sušené xxxxxxxxxx xxxxx splňující xxxxxxxxx xxxxxx nařízení (xx. [0]).

5.4.2.   Totéž xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx 5&xxxx;% xx. xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (tj. [5]).

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX X XXXXXXX

6.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx

6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx schopná xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx 2&xxxx;200&xxxx;x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxxxx o objemu xxx 50 ml

6.3.   Mechanická xxxxxxxx

6.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

6.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx o průměru xxx 7 cm

6.6.   Filtrační xxxxxx xxxxxxx hustoty x&xxxx;xxxxxxx xxx 12,5 cm

6.7.   Skleněné filtrační xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx 0,45 μx

6.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 10 ml (XXX 648, xxxxx X, xxxx XXX/X 835) xxxx dávkovací xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 10,0&xxxx;xx xx xxx xxxxxx

6.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx schopný xxxxxxx 20,0&xxxx;xx vody xxx xxxxxxx xxx 50 °C

6.10.   Termostatická xxxxx lázeň nastavená xx 25 ± 0,5&xxxx;°X

6.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xx XXXX, xxxxx tvoří:

6.11.1.

Čerpadlo

6.11.2.

Nástřikové zařízení – xxxxx xxxx xxxxxxxxxxx – x&xxxx;xxxxxx 15 xx 30 μx

6.11.3.

Xxx kolony XXX 2&xxxx;000-XX xx xxxxx (xxxxx 30&xxxx;xx, vnitřní xxxxxx 0,75&xxxx;xx), xxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx účinností (xxxx. jedna kolona XXX 2 000-SWxl, jedna xxxxxx Xxxxxxx Technologies Xxxxxx XX 250) x&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxx (3&xxxx;xx ×&xxxx;0,3&xxxx;xx) xxxxxxxx xxxxxxxxxx X&xxxx;125 xxxx jiným xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

6.11.4.

Xxxxxxxxx xxxxxx nastavený na 35 ± 1 °C

6.11.5.

UV xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx umožňující xxxxx xxx 205&xxxx;xx s citlivostí 0,008 Å.

6.11.6.

Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxxx Xxxxxxxx: Xxx xxxxxxxx s kolonami xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx, avšak xxxxxx xxxxxxxxxxx schopnost xx x&xxxx;xxxxxx xxxxx. V tomto xxxxxxx xx xxxxx, xxx xxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx jednoho xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxx menší xxx 5&xxxx;°X.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXX VZORKŮ

7.1.   Vzorky xxxx být xxxxxxxxx xxxxxxxx stanoveným v mezinárodní xxxxx XXX 707. Xxxxxxx státy xxxx xxxxx používat jinou xxxxxx xxxxxx vzorků xx předpokladu, xx xxxx metoda xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxx takovým xxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx.

8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX POSTUP

8.1.   Příprava xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxx mléko xxxxxxxx do xxxxxxx, xxxxx xxxxx je xxx dvakrát větší xxx xxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxx je opatřena xxxxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx převracením xxxxxxx.

8.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx

Xx odstředivkové zkumavky (6.2) xxxx xxxxxx xxxxx xx xxxxxx xx 50 ml navažte 2,000 ± 0,001 g zkušebního xxxxxx.

8.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx a bílkovin

8.3.1.   Ke xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 20,0&xxxx;xx xxxxx (50 °C) xxxx. Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xx dobu xxxx xxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (6.3). Xxxxxxxx vložte xx xxxxx xxxxx (6.10), xxxxx xx xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xx 25&xxxx;°X.

8.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx dvou xxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (6.4)&xxxx;10,0&xxxx;xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (5.1) x&xxxx;xxxxxxx xxx 25 °C. Zkumavku xxxxxx xx 60 minut xx xxxxx lázně (6.10).

8.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx (6.2) xx xxxx 10 minut xxx xxxxxxxxxx xxxx 2&xxxx;200&xxxx;x, nebo přefiltrujte xxxx xxxxx (6.6) x&xxxx;xxxxxxx 5&xxxx;xx xxxxxxxx xxxxxxx.

8.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

8.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx 15 xx 30 μx xxxxxx odměřeného xxxxxxxxxxxx xxxx filtrátu (8.3.3) xx xxxxxxxx na XXXX (6.11) x&xxxx;xxxxxxxx 1,0&xxxx;xx xxxxxxxx xxxxxxx (5.2) xx xxxxxx.

Xxxxxxxx 1. X&xxxx;xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxx xx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxx použít x&xxxx;xxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx 2. Xxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxx. Nikdy x&xxxx;xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx (5.2).

Xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx xxx 24 xxxxx xx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxx xx xxxxxxxxx roztokem (5.3) xxxxxxx xx xxxx xxx hodin při xxxxxxx 0,2&xxxx;xx xx xxxxxx.

8.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx chromatografické xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx [X] xx xxxxxxx ve xxxxx xxxxxxxxxxxxx, x&xxxx;xxxx xx každý xxx xxxxx svým xxxxxxxxx xxxxx XX xxxxx:

Xxx XX:	Xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx x XX asi 12,5 minuty
Pík XXX:	Xxxxx xxx xxxxxxxxxxxxx odpovídající XXX x XX 15,5 xxxxxx

Xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxx značně xxxxxxxxx xxxxxxx kolony (xxxxx).

Xxxxxxxxxx (6.11.6) automaticky xxxxxxxxxx xxxxxx A každého píku:

AII:	plocha xxxx XX
XXXX:	xxxxxx xxxx XXX

Xxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxxx zjištění xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxx, xxxx původem x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxx.

X&xxxx;xxxxxxx pochybností xxxxxxx xxxxxxxxx.

8.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx

8.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;X srovnávacích xxxxxx (5.4) xx xxxxxx použije xxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx&xxxx;8.2 xx 8.4.2.

Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, xxxxxxx CMP xx v prostředí 8 % xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxx xxxxx xx xxx xxxxxxx 30&xxxx;°X xxxxxxx odhadem x&xxxx;0,2&xxxx;% xx xxxxxx.

8.5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx (8.5.1) srovnávacího xxxxxx (5.4.2), xxxxx xx plocha a retenční xxx xxxx xxxxxxxxxxxxxx XXX neustálí xx xxxxxxxxxxxx hodnotách.

8.5.3.   Stanovte odezvové xxxxxxx X&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx filtrátů (8.5.1), xxxxxx xxxx xxxxxxx xxx xxxxxx.

9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX XXXXXXXX

9.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx

9.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx X:

Xxx XX:

XXX = 100/(XXX[0])

xxx:

XXX	=	xxxxxxxx xxxxxxx xxxx II
AII [0]	=	plochy xxxx XX srovnávacího xxxxxx [0] získané x&xxxx;8.5.3

Xxx XXX:

XXXX = X/(XXXX[5] – AIII[0])

kde:

RIII	=	odezvový xxxxxx xxxx XXX
XXXX [0] and XXXX [5]	=	xxxxxx xxxx XXX xxxxxxxxxxxx vzorků [0] x&xxxx;[5] získané v 8.5.3
W	=	množství xxxxxxxxx xx srovnávacím xxxxxx [5], xx. 5

9.1.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx relativní xxxxxx xxxx ve xxxxxx [X]

XXX[X] = XXX × AII[E]

SIII[E] = XXXX × XXXX[X]

XXX[X] = XXX × XXX[X]

xxx:

XXX [X], XXXX [X], XXX [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XX, XXX x&xxxx;XX xx xxxxxx [X]
XXX [X], XXXX [X]	=	xxxxxx xxxx XX a III xx xxxxxx [X] xxxxxxx x&xxxx;8.4.2
XXX, XXXX	=	xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;9.1.1

9.1.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx času píku XXX ve vzorku [X]:

XXXXXX[X] = (RTIII[E])/(RTIII[5])

kde:

RRTIII [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxx XXX xx xxxxxx [X]
XXXXX [E]	=	relativní xxxxxxxx xxx xxxx XXX xx xxxxxx [X] xxxxxxx v 8.4.2
RTIII [5]	=	xxxxxxxxx xxxxxxxx čas xxxx XXX x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx [5] xxxxxxx x&xxxx;8.5.3

9.1.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx ukazují, že xxxx relativním xxxxxxxxx xxxxx xxxx III, xx. RRTIII [X] x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx sušené xxxxxxxxx až xx xxxxxxxx 10&xxxx;% xxxxxxxx xxxxxxxx vztah

—	při obsahu xxxxxxxxx > 5 % xx XXXXXX [X] &xx;&xxxx;1,000;

—	xxx xxxxxx xxxxxxxxx ≤&xxxx;5&xxxx;% je XXXXXX [X] ≥&xxxx;1,000.

Xxxxxxxxx neurčitost xxx xxxxxxx XXXXXX xx ± 0,002.

Xx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx RRTIII [0] xxx málo liší xx 1,034. Xxxxx xxxxx kolon xx xxxx xxxxxxx xxxxxx 1,000, avšak vždy xxxx být xxxxx xxx 1,000.

9.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx procenta xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx ve xxxxxx:

X = SIII[E] – [1, 3 + (XXXX[0] – 0, 9)]

xxx:

X	=	xxxxxxxxxx xxxxxxxx syřidlové xxxxxxxxx ve xxxxxx [X];
XXXX [X]	=	xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX xxxxxxxxxx xxxxxx [E] xxxxxxx xxxxx 9.1.2;
1,3	=	xxxxxxxxxxx relativní xxxxxxxxx xxxxxx píku XXX vyjádřenou v gramech xxxxxxxxx syrovátky xx 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx v nezfalšovaném xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxx. Toto xxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx
XXXX [0]	=	xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX, která xx xxxxx XXXX&xxxx;×&xxxx;XXXX[0]. Xxxx xxxxxxx se xxxxxxx x&xxxx;9.1.1 x&xxxx;8.5.3;
(XXXX [0]&xxxx;–&xxxx;0,9)	=	xxxxxxxxxxx xxxxxx, xxxxxx xx nutno provést xx relativní průměrné xxxxx 1,3, jestliže XXXX [0] xxxx xxxxx 0,9. Experimentálně xx relativní xxxxxxxx xxxxxx píku III xxxxxxxxxxx xxxxxx&xxxx;[0] xxxxx 0,9.

9.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx metody

9.3.1.   Opakovatelnost

Rozdíl mezi xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx, xxxxx u stejného zkušebního xxxxxx provedl současně xxxx x&xxxx;xxxxxx sledu xxxxx pracovník xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx xxxxx xxxxxxxxx 0,2&xxxx;% xx.

9.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx a nezávislými xxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx u stejného xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx 0,4&xxxx;% xx.

9.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx

9.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxx xxxxxxxxxxxx, xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx, xx-xx relativní xxxxxx xxxx XXX XXXX [X] xxxxxxxxx v gramech xxxxxxxxx syrovátky na 100&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx, ≤ 2,0 + (SIII[0] – 0,9)

xxx

2,0	xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx pro xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX x xxxxxxxxxxxx k xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx XXX, xx. 1,3, x xxxxxxxxx x důvodu kolísání xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx mléka x x xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx (9.3.2);
(XXXX [0] – 0,9)	xx oprava, která xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx je xxxxxx XXXX [0] xxxx xxx 0,9 (xxx xxx 9.2).

9.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xx-xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx III XXXX [E] &xx; 2,0 + (XXXX[0] – 0,9) x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XX XXX [X]&xxxx;≤&xxxx;160, xxxxxxxx xxxxx syřidlové xxxxxxxxx xxxxx xxxx 9.2.

9.4.3.   Je-li xxxxxxxxx plocha xxxx XXX SIII [E] &xx; 2,0 + (XXXX[0] – 0,9) x relativní xxxxxx xxxx XX XXX [X]&xxxx;≤&xxxx;160, stanovte xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx (P %). Xxxxx prostudujte xxxxx 1 a 2.

9.4.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxx po xxxxxxx xxxxxx nezfalšovaného xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxx celkovým obsahem xxxxxxxx jsou xxxxxxxx xx xxxxx 1 x&xxxx;2.

Xxxx přímka xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx, xxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx XXX, x&xxxx;xx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxxxxx, že xxxxxx xxxxxxxxxx v 90 % xxxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxx 1 x 2 xxxx:

XXXX = 0,376 X % – 10,7	(xxxx 1)
XXXX = 0,0123 XXX [X] + 0,93	(xxxx 2)

xxx:

XXXX	xx xxxxxxxxx xxxxxx xxxx III vypočtená xxx xxxxx celkového xxxxxx xxxxxxxx, nebo xxxxx relativní xxxxxx xxxx XXX [X],
X&xxxx;%	xx xxxxxxx xxxxx bílkovin xxxxxxxxx xxxx procento xxxxxxxxx,
XXX [X]	xx xxxxxxxxx xxxxxx vzorku vypočtená x&xxxx;xxxx 9.1.2.

Xxxx xxxxxxx xxxx rovnocenné xxxxx 1,3 uvedenému x xxxx 9.2.

Rozdíl (X1 x X2) mezi xxxxxxxxx relativní plochou XXXX [X] x xxxxxxxxx plochou XXXX xx xxx xxxxxx xxxxxx: X1 = SIII[E] – [(0,376 X% – 10,7) + (XXXX[0] – 0,9)]T2 = XXXX[X] – [(0,0123 XXX[X] + 0,93) + (XXXX[0] – 0,9)].

Xxxx-xx T1 x/xxxx X2	xxxxx xxxx nebo xxxxx xxx xxxx, xxxxx obsah syřidlové xxxxxxxxx xxxxxxxx.
Xxxx-xx T1 x X2	xxxxx než xxxx, xx syřidlová xxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx vypočítá xxxxx vzorce: X = X2 + 0,91

xxx:

0,91 xx xxxxxxxxxx xx svislé ose xxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx XXX

XXXXXXXXX SUŠINY XX XXXXXXXXX SYROVÁTKY X&xxxx;XXXXXXX XXXXXXXXXXX MLÉCE

1.   PŘEDMĚT: XXXXXXXXX XXXXXXXX XXXXXX XX SYŘIDLOVÉ SYROVÁTKY XX&xxxx;XXXXXXXX XXXXXXXXXXXX MLÉKA

2.   NORMATIVNÍ XXXXX: MEZINÁRODNÍ XXXXX XXX 707

3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX

Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx procento stanovené xxxxxxxx postupem podle xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX METODY

Vzorky xxxx analyzovány xx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx X&xxxx;xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx XXXX). Xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx srovnávacími xxxxxx, které xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx xxx přídavku nebo x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxxxx xxxxx xxx 1&xxxx;% hm., xx přítomnost xxxxxx xx syřidlové xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x. Xxxxxxx xxxx musí xxx xxxx destilovaná xxxx voda nejméně xxxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx nebo xxxxxx xxxxxxx xxx XXXX.

5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxx 240&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (CCl₃COOH) xx xxxx x&xxxx;xxxxxxx xx 1&xxxx;000&xxxx;xx. Roztok xx xxx xxx čirý x xxxxxxxx.

5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx A a B

Eluent X: Vneste 150 xx xxxxxxxxxxxx (CH₃CN), 20 xx xxxxxxxxxxxx (XX₃XXXXXX₃) x 1,00 xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx (XXX, CF₃COOH) xx xxxxxxx xxxxx a xxxxxxx xx 1&xxxx;000 xx xxxxx.

Xxxxxx B: Xxxxxx 550 xx xxxxxxxxxxxx, 20 xx xxxxxxxxxxxx a 1,00 xx XXX xx xxxxxxx baňky xx 1&xxxx;000 xx x xxxxxxx xx 1&xxxx;000 xx xxxxx. Eluční xxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xxxxx o velikosti xxxx 0,45 μx.

5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx kolony

Po xxxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx X (xxxxxx) x xxxxx xx xxxxxxxxxx acetonitrilem (xxxxxx xx dobu 30 xxxxx). Xxxxxx xx xxxxxxxx v acetonitrilu.

5.4.   Srovnávací xxxxxx

5.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx odstředěné mléko xxxxxxxxx požadavky xxxxxxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx (xx. [0]).

5.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx mléko zfalšované xxxxxxxxx 5&xxxx;% hm. xxxxxx syřidlové xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (xx. [5]).

5.4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxxxx odstředěné xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx 50&xxxx;% xx. sušené xxxxxxxxx syrovátky xxxxxxxxxxxx xxxxxxx (tj. [50]).

6.   PŘÍSTROJE X XXXXXXX

6.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx

6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx 2&xxxx;200&xxxx;x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx zkumavkami xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxx 50&xxxx;xx

6.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

6.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

6.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxx 7&xxxx;xx

6.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxx střední xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx asi 12,5&xxxx;xx

6.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxx o velikosti xxxx 0,45 μx

6.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxx umožňující xxxxxxxx 10&xxxx;xx (XXX 648, xxxxx A, xxxx XXX/X 835), nebo xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx 10,0 ml xx xxx xxxxxx

6.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx systém xxxxxxx xxxxxxx 20,0&xxxx;xx xxxx při xxxxxxx xxx 50 °C

6.10.   Termostatická xxxxx xxxxx nastavená na 25 ± 0,5&xxxx;°X

6.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xx XXXX, xxxxx xxxxx:

6.11.1.

Xxxxxxxx s binárním xxxxxxxxxx

6.11.2.

Xxxxxxxxxx xxxxxxxx – ruční xxxx xxxxxxxxxxx, o objemu 100 μx

6.11.3.

Xxxxxx Xxxxxxx Xxxxxxxxxxxx Xxxxxx 300 XX-X3 (xxxxx 25&xxxx;xx, xxxxxxx xxxxxx 0,46 cm), xxxx jiná rovnocenná xxxxxx pro xxxxxxxx xxxx s velkými xxxx xx xxxx křemene

6.11.4.

Termostat xxxxxx xxxxxxxxx xx 35 ± 1 °C

6.11.5.

UV xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx, xxxxx umožňuje xxxxxxxx měření xxx 210&xxxx;xx (x nutných xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxx xx do 220&xxxx;xx) s citlivostí 0,02 Å.

6.11.6.

Xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxx xxxx xxxxx Xxxxxxxx: Xxxxx x xxxxxxxx udržovanými xx teplotě xxxxxxxxx xx xxxxx za xxxxxxxxxxx, že teplota xxxxxxxx více xxx x 1 °C, jinak xxxxxxx k xxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxx XXXX.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXX XXXXXX

7.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxx ISO 707. Xxxxxxx státy však xxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxx xx předpokladu, xx xxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx.

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xxxxxxx dojít xx xxxxxxxxxxxx xxxx xxxxx xxxxxxx.

8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

8.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorku

Sušené xxxxx xxxxxxxx do nádobky, xxxxx objem je xxx xxxxxxx větší xxx xxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxx xx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx víčkem. Xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx. Sušené xxxxx důkladně promíchejte xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx.

8.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxx

Xx xxxxxxxxxxxxx zkumavky (6.2) nebo vhodné xxxxx se xxxxxx xx 50&xxxx;xx xxxxxxx 2,00 ± 0,001&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx: V případě směsí xxxxxxx takové xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx, xxx xxxx xxxxxxx zkušební xxxxx xxxxxxxxxx 2,00&xxxx;x.

8.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxx a bílkovin

8.3.1.   Ke xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 20,0&xxxx;xx xxxxx (50 °C) vody. Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (6.3) xx prášek xxxxxxxx. Xxxxxxxx xxxxxx xx xxxxx xxxxx (6.10), xxxxx se její xxxxxxx xxxxxxxx xx 25&xxxx;°X.

8.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx xxxx xxxxx xx stálého xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (6.4) xxxxxxxx 10,0&xxxx;xx roztoku xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxx 25 °C (5.1). Xxxxxxxx xxxxxx xx 60&xxxx;xxxxx do xxxxx xxxxx (6.10).

8.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx (6.2) xx xxxx 10 xxxxx při xxxxxxxxxx xxxx 2 200 g, xxxx xxxxxxxxxxxx přes xxxxx (6.6) a prvních 5 ml xxxxxxxx vyhoďte.

8.4.   Chromatografické xxxxxxxxx

8.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx XXXX x&xxxx;xxxxxxxxxx fázemi xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx díky xxxxxxxxxxx sušeného xxxxxxxx xxxxxxxx.

8.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxx xxxxxxxxxx analýzy XXXX s obrácenými xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxx asi 6&xxxx;xx (xxxxx od xxxx, xxx se stékají xxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx včetně) xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx x&xxxx;xxxxx 26 minut ± 2 xxxxxx xxx XXXΑ. Pro xxxxxxxxxxx systémy s menším xxxxxx xxxxxxx (xxxx. 2&xxxx;xx) xx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx 22 xxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5.4) x&xxxx;xxxxxxx 50&xxxx;% syřidlové xxxxxxxxx x&xxxx;xxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx.

Xxxxxxxxxxx 100 μl xxxxxxxxxxxx xxxx filtrátu (8.3.3) xx zařízení xx XXXX, xxxxx xxxx fungovat xx xxxxxxxx referenčního xxxxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx 1.

Xxxxxxx 1

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxxx chromatografie

Čas (min)	Průtok (ml/min)	% X	% B	Křivka
Počátek	1,0	90	10	*
27	1,0	60	40	přímka
32	1,0	10	90	přímka
37	1,0	10	90	přímka
42	1,0	90	10	přímka

Porovnání xxxx xxxxxxxxxxxxx xx mělo xxxxxx xxxxxx xxxx XXXΑ.

Xxxxxxxxx složení xxxxxxxxxxxx, xxxxx je xxxxx xxxxxx xxx normální xxxxxxxx (xxx 8.4.3), xxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx vzorce: % X =&xxxx;10 – 2,5 + (13,5 + (XXxxxX – 26) / 6) * 30 / 27&xxxx;% X =&xxxx;7,5 + (13,5 + (XXxxxX – 26) / 6) * 1,11

xxx

XXxxxX	:	xxxxxxxx čas XXXΑ x&xxxx;xxxxxxxxxxx gradientu
10	:	počáteční % X x xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
2,5	:	% X xx xxxxxxxx bodu xxxxx xxxxxxxxx % X x xxxxxxxxx xxxxxxxxx
13,5	:	xxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
26	:	xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx CMPΑ
6	:	poměr směrnic xxxxxxxxxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxx
30	:	% B x xxxxxxxxxx bodu xxxxx % B xx 27 minutách v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx
27	:	xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx gradientu

8.4.3.   Nástřik roztoků xxxxxxxxxx vzorků

Nastříkněte 100 μx xxxxxx odměřeného xxxxxxxxxxxx nebo filtrátu (8.3.3) do xxxxxxxx xx HPLC x&xxxx;xxxxxxxx 1,0&xxxx;xx xxxxxxxx xxxxxxx (5.2) xx xxxxxx.

Xxxxxxx xxxxxxx xx začátku xxxxxxx se xxxxx x&xxxx;8.4.2. Xx normálních xxxxxxxxx se blíží xxxxxx X:X =&xxxx;76:24 (5.2). Okamžitě po xxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxxx gradient, xxx xxxxxxx, xx procento X xx xx 27 xxxxx xxxxxx x 5&xxxx;%. Xxxxx xx xxxxxx lineární xxxxxxxx, kterým složení xxxxxxx xxxxxxx x xxxx xxxxxxxx 90&xxxx;% X. Toto xxxxxxx xx udržuje xx xxxx pěti xxxxx x xx jejím xxxxxxxx se xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx změní během xxxx xxxxx na xxxxxxx počáteční. X xxxxxxxxxx xx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxx další xxxxxxx xxxxxxxx 15 xxxxx po xxxxxxxx xxxxxxxxx podmínek.

Poznámka 1. Xxxxxxxx čas XXXX xx měl xxx 26 ± 2 xxxxxx. Toho xxx xxxxxxxxx xxxxxx počátečních x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx. Rozdíl v % B xxxx xxxxxxxxxxx a xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxx xx xxxx 5&xxxx;% B.

Poznámka 2. Xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx odplynit x&xxxx;xxxxxxxxx xx odplyněné. Xx xx xxxxxxxx xxxxx pro xx, xxx xxxxxxxxxxx čerpací xxxxxx xxxxxxx fungoval. Xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx xxxx XXXX xxxx být menší xxx 0,1 xxxxxx (x =&xxxx;10).

Xxxxxxxx 3. Xx xxxxxxx pět xxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxxx referenční xxxxxx [5] x xxxxxx xxx xxx xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx X (9.1.1).

8.4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx vzorku (X) se xxxxxxxxx xx formě xxxxxxxxxxxxx, xx xxxx je xxx XXXX xxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx 26 xxxxx.

Xxxxx H píku XXXX xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx (6.11.6). Xxxxxx základní xxxxx je xxxxx xxxxxxxxxxx na xxxxxx xxxxxxxxxxxxx. Jestliže xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx, analýzu xxxx xxxxxxxxx xx třeba xxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xx-xx xxx XXXX xxxxxxxxxx oddělen xx xxxxxxxxx píků, xxxx xx xx xxxxxx přiřazení xxxxxxxx xxxxx mezi sedly. X xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx kolmice xx společné xxxxxxxx xxxxx, jejichž xxxxxxxxx xxx by xxx xxx x xxxxxxxxx xxxx CMPA (xxxx xx v xxxx x = 0 xxx!). Xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxx integrace x u xxxxxxxx xxxxxxxx linie xxxxxxxxxxxx, xxx je xx xxxxxx a xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx konzistentní.

Před kvantitativní xxxxxxxxxxxx je nezbytné xxxxxxxxxx xxxxxx každého xxxxxxxxxxxxx xx účelem xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxx buď xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx, xxxx xxxxxx, xxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx vzorku. X&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxx analýzu xxxxxxxxx.

8.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx

8.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;X xxxxxxxxxxxx vzorků (5.4.1 xx 5.4.2) xx přesně xxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x xxxxxx 8.2 až 8.4.4. Xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx, protože XXX xx v prostředí 8&xxxx;% kyseliny xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. Xxx xxxxxxx 4&xxxx;°X xxxxxxx xxxxxx xxxxx xx xxxx 24 xxxxx. X&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx pokusů xx žádoucí xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx nástřikovém zařízení xxxxxxxxx xxxxx xx xxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxx 8.4.2 xxxx xxx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xx % X v xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx (5) xx xxx xxx obdobný xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx xxxxxxx 1. Xx xxxxx xxxxxxx xxxx xxxx xxxxx XXXX xxx xxxx píky. Xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx separace.

8.5.2.   Před xxxxxxxxxxxxxxxxx stanovením xxxxxx xxxxxxxxxxx 100 μx xxxxxxxxxxxx xxxxxx bez xxxxxxxxx xxxxxxxxx [0] (5.4.1).

Xxxxxxxxxxxx nesmí vykazovat xxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx XXXX píku.

8.5.3.   Odezvové faktory X xxxxxxxx nastříknutím xxxxxxxx objemu xxxxxxxx (8.5.1), xxxxxx bylo xxxxxxx xxx vzorky.

9.   VYJÁDŘENÍ XXXXXXXX

9.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx

9.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxx faktoru R:

Pík XXXX: X = X/X

xxx

X	=	xxxxxxxx xxxxxx xxxx XXXX
X	=	xxxxx píku XXXX
X	=	xxxxxxxx xxxxxxxxx ve xxxxxxxxxxx xxxxxx [5]

9.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx syrovátky xxxxxxxx xx xxxxxx

X(X)&xxxx;= X&xxxx;×&xxxx;X(X)

xxx

X(X)	=	xxxxxxxxxx procento xxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx [X]
X	=	xxxxxxxx xxxxxx xxxx XXXX (9.1.1)
X(X)	=	xxxxx xxxx XXXX xxxxxx (E)

Pokud xx X(X) xxxxx xxx 1&xxxx;% x&xxxx;xxxxxx xxxx retenčním xxxxx x&xxxx;xxxxx srovnávacího xxxxxx [5] menší xxx 0,2&xxxx;xxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx ze xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx.

9.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

9.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxx xxxx výsledky xxxx xxxxxxxxx, xxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxx, xx neměl xxxxxxxxx 0,2&xxxx;% xx.

9.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxxx

Xxxxxxxxxxx.

9.3.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx

Xxx xxxxxxx xx 0&xxxx;% xx 16&xxxx;% syřidlové xxxxxxxxx xx třeba xxxxxx xxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx&xxxx;&xx;&xxxx;0,99.

9.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx

Xxxxx xxxxxxx 1&xxxx;% obsahuje xxxxxxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxx 1

Xx—4.6 standard

XXXXXXX XX

Xxxxxx xxxxxxx másla x soukromém xxxxxxxxxx

Xxxxxxxx	Xxxxxx
Xxx&xxxx;(6)	XXX 17189 xxxx ISO 3727 xxxx&xxxx;3
Xxxx	XXX 3727 xxxx 1
Tukuprostá xxxxxx (x výjimkou xxxx)	XXX 3727 xxxx 2
Xxx	XXX 15648

XXXXXXX XXX

Xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxxxxx

Xxxxxxxx	Xxxxxx
Xxx	XXX 1736
Xxxxxxxxx	XXX 8968 xxxx 1
Xxxx	XXX 5537

XXXXXXX XXXX

Xxxxxx xxxxxxx sýrů v xxxxxxxxx xxxxxxxxxx

1.

Xx xxxxx xxxxxxx, xx xxxx xxxxxxxx xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx, xxxxxx xxxxx xx xxxxxxxx mléka, xxxx xx xxxxx xxxxxx, xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxx neobsahují xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx mléka, x&xxxx;xx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx xxxxxx analýzy xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx mléka xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxx je stejný xxxx vyšší x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx 1&xxxx;% kravského xxxxx, xxxxx xx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx.

2.

Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx&xxxx;1 xxxxx xxx xxxxxxxxx za xxxxxx xxxxxxxx: x) xxxxxx detekční xxxxx xxxx být xxxxxxx 0,5&xxxx;%; x) xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxx xxxxxxx xxxxxxxxx; x) xxxx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xx xxxxxx xxxx xxxxx, x&xxxx;xxxxx xxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxx-xx xxxxx x&xxxx;xxxx uvedených xxxxxxxxx xxxxxx, použijí xx xxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx.

Xxxxxxx

XXXXXX XXX XXXXXXXXXX XXXXXXXXX XXXXX X&xxxx;XXXXXXXXX X&xxxx;XXXXXX X&xxxx;XXXXXX XXXXX, XXXXXX XXXXX XXXX XXXXXXXX XXXXX, NEBO XXXXX XXXXXX, XXXXXX X&xxxx;XXXXXXXX XXXXX

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXX

Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx z ovčího xxxxx, xxxxxx mléka, buvolího xxxxx anebo ze xxxxx xxxxxx, xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx γ-kaseinů xx xxxxxxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXX POUŽITÍ

Metoda xx xxxxxx pro citlivé x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx, xxx xxxxxxx xxxxxxxxxx, x&xxxx;xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx z ovčího xxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxx nebo xx směsí xxxxxx, xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxx. Xxxx xxxxxx k odhalení xxxxxxxxx xxxxx a sýrů xxxxxxx ošetřenými xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx z hovězí syrovátky.

3.   PODSTATA XXXXXX

3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxx xx xxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx

3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxx (EC.3.4.21.7)

3.3.   Izoelektrická xxxxxxxx xxxxxxxxx ošetřených xxxxxxx xx přítomnosti xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx bílkovin

3.4.   Vyhodnocení xxxxxxxxxxx xxxxxxx kaseinu γ3 x γ2 (xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx mléka) xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx získaného xx xxxxxx s obrazci xxxxxxxxx u téhož xxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx 0&xxxx;% x 1 % xxxxxxxxx xxxxx.

4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxx-xx stanoveno jinak, xxxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx x.x. Xxxx musí xxx xxxxxxxxxxxxx xxxx rovnocenné xxxxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxxxxxxxx údaje xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxx připravované polyakrylamidové xxxx s obsahem xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx 265 × 125 ×&xxxx;0,25&xxxx;xx. Pokud se xxxxxxx xxxx rozměry xxxx xxxxx xxxx, xxxx xxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx separace.

Izoelektrická xxxxxxxx

4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx pro xxxxxxxx polyakrylamidových gelů x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx

4.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx roztok xxxx

Xx xxxx xxxxxxxxx:

4,85&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxxx

0,15 x X, X′-xxxxxxxx-xxx-xxxxxxxxxx (XXX)

48,05&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx

15,00&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx (87 % xx.),

xxxxxxx xx 100 ml x xxxxxx xx xxxxxxxxxx x xxxxx xxxxxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx: Místo xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxx xxxxxxxxx roztok xxxxxxxxxx x&xxxx;XXX.&xxxx;X&xxxx;xxxxxxx, že koncentrace xxxxxxxxxx xxxxxxx je 30&xxxx;% xx./xxx. akrylamidu x&xxxx;0,8&xxxx;% xx./xxx. XXX, xxx xxxxxxx xxxxxxxx (4,85 x&xxxx;xxxxxxxxxx a 0,15 x&xxxx;XXX) musí být xxxxxxxxx komerčním xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 16,2 ml. Zásobní xxxxxx xxx skladovat xxxxxxx 10 xxx. Xxxxx xx xxxx xxxxxxxx vyšší xxx 5 μS, je xxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx promícháváním s 2 x Xxxxxxxxx XX-3 xx xxxx 30 xxxxx x xxxx xxx přefiltrovat xxxx 0,45μx xxxxxxxx.

4.1.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxx

Xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxx a amfolytů (*) xx zásobním xxxxxxxx xxxx (viz 4.1.1).

9,0&xxxx;xx xxxxxxxxx roztoku

24 mg β-xxxxxxx

500 μx amfolytu xX 3,5–9,5

250 μl amfolytu xX 5–7

250 μx xxxxxxxx xX 6–8

Xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xx xxxx dvou xx tří xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxx xx vakuu.

Poznámka: Xxxxxx xxxxxx xx musí xxxxxxxxx bezprostředně před xxxxxxxxx (xxx 6.2).

4.1.3.   Roztoky xxxxxxxxxxxx

4.1.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;X, N, X′, X′-xxxxxxxxxxxxxxxxxxx (Xxxxx)

4.1.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;40&xxxx;% xx./xxx. xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx (XXX)

800 xx PER xx xxxxxxxx xx xxxx x xxxxxx xx xx 2 xx.

Xxxxxxxx: Xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxx připravený xxxxxx XXX.

4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxx xxxx xxxxxxx xxxxxxx

4.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx 5,77 x xxxxxxxx xxxxxxxxxx (85 % hm.) xx xxxx x xxxxxx xx 100 xx.

4.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxxxxx 2,00 x xxxxxxxxx xxxxxxx xx vodě x xxxxxx vodou na 100 xx.

Xxxxxxxx xxxxxx

4.5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx

4.5.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx kyselina octová (25,0 xx xxxxxx xxxxxxxx octové doplněné xxxxx do 100 xx).

4.5.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx

4.5.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx

4.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx roztok xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx

Xx xxxx xxxxxxxxx:

5,75&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxxx (87&xxxx;% xx.)

24,03&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx

250&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxxxx

x xxxxxxx xx 50 xx vodou.

Poznámka: Xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx; xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx.

4.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx štěpení kaseinů

4.7.1.   Tlumivý xxxxxx uhličitanu amonného

Titrujte xxxxxxx xxxxxx hydrogenuhličitanu xxxxxxxx 0,2 xxx/x (1,58 g/100 xx xxxx) obsahující 0,05 xxx/x xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxxx (XXXX, 1,46 g/100 xx) xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx 0,2 mol/l (1,92 x/100 ml xxxx) xxxxxxxxxxxx 0,05 xxx/x XXXX xx xX 8.

4.7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxx (XX. 3.4.21.7), x&xxxx;xxxxxxxxx xxxxxxx 5 X/xx.

4.7.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx ε-xxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx enzymu

Rozpusťte 2,&xxxx;624&xxxx;x&xxxx;xxxxxxxx ε-xxxxxxxxxxxxxx (6-xxxxx-x-xxxxxxxxxxxxx) ve 100 xx 40&xxxx;% xxx. xxxxxxxx.

4.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx

4.8.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx standardy xxxxx xxxxxx a kozího xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxx pomocí xxxxxxx a s obsahem 0&xxxx;% x&xxxx;1&xxxx;% xxxxxxxxx mléka xxx xxxxxx xx Xxxxxx xxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx xxx Xxxxxx, B-2440, Xxxx, Belgie.

4.8.2.   Příprava laboratorních xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx buvolího xxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx x s xxxxxxx 0 % a 1&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxx

Xxxxxxxxxx xxxxx se připraví xxxxxxxxxxx syrového xxxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxx xxx teplotě 37 °C (2&xxxx;500&xxxx;x, 20 xxxxx). Xx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx a xxxxxx xxxxxx xx 6 xx 8 °X xx xxxxx odstraní xxxxx xxxxxx vrstva. Xxx xxxxxxxx 1&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxxxxx 5,00&xxxx;xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx 495&xxxx;xx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 1 l. Xxxxxxx xX upravte xx 6,4 přídavkem xxxxxxx xxxxxxxx mléčné (10 %, xx./xxx.). Teplotu xxxxxxx xx 35 °C, xxxxxxxx 100 μx xxxxxxxx xxxxxxx (aktivita xxxxxxx 1: 10 000, xxx 3&xxxx;000 X/xx) x&xxxx;xxxxxxxx po xxxx 1 xxxxxx. Xxxx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxx xxxx při teplotě 35&xxxx;°X x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx, xxxx by xxxxxxx xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx nebo odebrání xxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxx xxxxx xx jemně xxxxxxxx xx homogenní prášek. X&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx 0&xxxx;% použijte xxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxxxx musí xxx xxxxxxxxxx při teplotě – 20&xxxx;°X.

Xxxxxxxx: Xxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxxxx zkontrolovat xxxxxxx xxxxxxxx mléka xxxxxxxxxxxxxx fokusací xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx bílkovin

4.9.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx

Xxxxxxxxx 150 g kyseliny trichloroctové xx xxxx x&xxxx;xxxxxxx xx 1&xxxx;000&xxxx;xx.

4.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxx

Xxxxxx 500 xx xxxxxxxxx x 200 ml xxxxxx xxxxxxxx octové xxxxxxxxxxxx xxxxx xx 2&xxxx;000 xx.

Xxxxxxxx: Odbarvovací xxxxxx se připravuje xxxxx xxx xxxxxxx; xxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx 50&xxxx;% (xxx.) xxxxxxxxx x xxxxxxxxx xxxxxxx 20 % (xxx.) xxxxxx xxxxxxxx xxxxxx.

4.11.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx roztoky

4.11.1.   Barvicí xxxxxx (xxxxxxx xxxxxx 1)

X 1&xxxx;000 xx 90&xxxx;% xxx. methanolu xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx 45 xxxxx) 3,0 x&xxxx;xxxxxxxxx modři Xxxxxxxxx G-250 (X. X. 42655) x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxxxx přes xxx xxxxxxx husté xxxxxxxx xxxxxx.

4.11.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx (xxxxxxx xxxxxx 2)

V 1 000 ml 20&xxxx;% xxx. xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx 5,0 g síranu měďnatého, xxxxxxxxxxxx.

4.11.3.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxx (pracovní xxxxxx)

Xxxxxxxxxxxxx před xxxxxxxx xxxxxxxxx 125&xxxx;xx obou xxxxxxxxx xxxxxxx (4.11.1 x&xxxx;4.11.2).

Xxxxxxxx: Xxxxxxx roztok xx třeba použít x den xxxxxxxx.

5.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX X POMŮCKY

5.1.   Skleněné desky (265 x 125 x 4 mm), xxxxxxx xxxxxxx (x xxxxx 15 xx), xxxxxxxxx stolek.

5.2.   Nosná xxxxx xxxx (265 × 125 mm)

5.3.   Krycí xxxxx (280 ×&xxxx;125&xxxx;xx). Xx xxxxx xxxxxx xxxxx nalepte pruh xxxxxx xxxxx (280 ×&xxxx;6 ×&xxxx;0,25&xxxx;xx) (viz xxxxxxx 1).

5.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx deskou (např. 265 ×&xxxx;125&xxxx;xx) x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx zdroj (≥ 2,5&xxxx;xX) nebo xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxx zařízení

5.5.   Cirkulační xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxx ve xxxx 12 ± 0,5&xxxx;°X

5.6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xx 3&xxxx;000&xxxx;x

5.7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxxx (o xxxxx ≥ 265&xxxx;xx)

5.8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx roztok

5.9.   Aplikátory xxxxxx (10 ×&xxxx;5&xxxx;xx, x&xxxx;xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx)

5.10.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx a barvicí xxxxx (xxxx. xxxxx xx xxxxxxxx 280 ×&xxxx;150&xxxx;xx) x&xxxx;xxxxxxxx xxxxx nebo xxxxxxxx

5.12.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx xxxxxx homogenizátor x&xxxx;xxxxxxxx xxxx 10&xxxx;xx x&xxxx;xxxxxxxxx 8&xxxx;000 xx 20&xxxx;000 xx/xxx

5.13.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxx xxxxxxxx

5.14.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxx xxxxx

5.15.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx fólií

5.16.   Mikropipety xx 25 μx

5.17.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxxx

5.18.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx, nastavitelná xx 35 a 40 ±&xxxx;1&xxxx;°X x&xxxx;xxxxxxxxx

5.19.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx zařízení xxxxxxxxxx xxxxxx xx xxxxxx xxxxx λ =&xxxx;634&xxxx;xx

6.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXX XXXXXX

6.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxx

6.1.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxx

Xx odstředivkové kyvety xx 100&xxxx;xx navažte xxxxxxxx xxxx xxxx xxxxxxxxxxxx standardu xxxxxxxxxxxx 5&xxxx;x&xxxx;xxxxxx, xxxxxxxx 60&xxxx;xx xxxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxx xxxxxxxxxxxxx tyčovým xxxxxxxxxxxxxxx (8&xxxx;000 až 10 000 xx/xxx). Upravte pH xx 4,6 xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx (4.5.1) x&xxxx;xxxxxxxxxxx (5 xxxxx, 3&xxxx;000&xxxx;x). Xxxxxxxxxx xxx x&xxxx;xxxxxxxxx a zbytek xxxxxxxxxxxxx xxx 20&xxxx;000 ot/min xx 40&xxxx;xx xxxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxx xX xxxxxxxxx xx 4,5 xxxxxxxx xxxxxxxxx octovou (4.5.1). Přidejte 20 ml xxxxxxxxxxxxxx (4.5.2) a znovu xxxxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx (5 xxxxx, 3&xxxx;000&xxxx;x). Špachtlí xxxxxxx xxxxxxxxxx vrstvu, xxxxx se xxxxxxx xxxx xxxxxx a organickou xxxx (viz xxxxxxx 2), x&xxxx;xxx fáze xxxxxxxxxx. Xxxxxx se xxxxx xxxxxxxxxxxx xx 40 ml destilované xxxx (xxx xxxx) x 20 xx xxxxxxxxxxxxxx (4.5.2) x xxxxxxxx se. Tento xxxxxx xxxxxxxx, xxxxx xxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxx bezbarvé (xxxxxxx xx xxxxxxx). Xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx s 50 ml xxxxxxx (4.5.3) a přefiltrujte xxxx xxxxxxx xxxxx xxxxxxxx papírový filtr. Xxxxxx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxxxxx 25&xxxx;xx xxxxxxx xxxxxxx a nechte vysušit xx xxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxx.

Xxxxxxxx: Xxxxx bílkovinné xxxxxxxx xx musí xxxxxxxxx xxx xxxxxxx – 20 °C.

6.1.2.   Přeměna β-xxxxxxx xx γ-xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxxx 25 xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx (6.1.1) x 0,5 xx tlumivého roztoku xxxxxxxxxx xxxxxxxx (4.7.1) x xxxx 20 xxxxx xxxxxxxxxxxxx, xxxx. xxxxxxxxxxx. Xxxx zahřejte xx 40&xxxx;°X x&xxxx;xxxxxxxx 10 μx xxxxxxxx (4.7.2), xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxx 1 xxxxxx xxx xxxxxxx 40 °C xx xxxxxxx xxxxxxx. Xxx xxxxxxxx enzymu xxxxxxxx 20 μl xxxxxxx xxxxxxxx ε-aminokapronové (4.7.3). Xxxx xxxxxxxx 200&xxxx;xx xxxxx xxxxxxxx x&xxxx;2&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx: Pro získání xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx pásů xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxx ε-aminokapronové roztok xxxxxxxxxxxx x poté xxxxxx xxxxxxxxx x 0,5 xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxx rozpouštění xxxxxxxx (4.6).

6.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxx močoviny

Na xxxxxxxxx xxxxx (5.1) xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxx (5.2) s pomocí xxxxxxxx xxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx vodu xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxxxxx. Xxxxxxx způsobem xxxxxxxx naneste xxxxxx, xxxxx xxxxx (5.3) x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxx (0,25&xxxx;xx) xx jinou skleněnou xxxxx. Tuto xxxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xx nivelační xxxxxx.

X xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxx (4.1.2) xxxxxxxx 10 μl Temedu (4.1.3.1), protřepejte x&xxxx;xxxxxxxx 10 μx roztoku XXX (4.1.3.2); důkladně xxxxxxxxxxx a okamžitě nalijte xxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx fólie. Xxxxx xxxxx xxxxx xxxxx xxxx (xxxxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxxx xxxx) xxxxxxxx x&xxxx;xxxxx s krycí xxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxxxx tak, xxx se xxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx tenká xxxxxx xxxx bez xxxxxx (xxxxxxx 3). Xxxxxx xxxxx špachtle xxxxxx xxxxx gelu xxxxxxx xxxxxxxxxxx xx xxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxx xx xx xxx další xxxxxxxx desky, xxx xx xxxxxxxx. Xx xxxxxxxx xxxxxxxxxx (asi xx 60 minutách) xxxxx x krycí xxxxx sejměte xxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx gelu tak, xx xxxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx. Zadní stranu xxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxx xx xxxxxxxxxx xxxxxx gelu x&xxxx;xxxxxxxx. „Xxxxxx xxxxxxx“ xxxxxxx xx tenké xxxxx a uložte xx xxxxxxxxxx (xxxxxxx xx xxxx xxxxx).

Xxxxxxxx: Xxxxx xxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxx xxx může xxx xxxxxxxx xx xxxxx xxxxx; xx xx vhodné x&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx vzorků xxxx x&xxxx;xxxxxxx použití xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx (xxx xxxx x&xxxx;xxxxxxxxx 4,5 × 5 cm).

6.3.   Izoelektrická fokusace

Nastavte xxxxxxxx xx 12 °X. Zadní xxxxxx xxxxx fólie gelu xxxxxx xxxxxxxxx a poté xx xxxxx chladicího xxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxx kerosinu (4.2). Xxxxxxx přiložte „xxxxxx xxxxxxx“ nosnou xxxxx xxxxxxxx xxxx, aby xx xxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx. Xxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxx xxxxx. Xxxxxxxxxxx xxxxxxx napusťte xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.3, 4.4), xxxxxxxxx na xxxxx xxxx x&xxxx;xxxxxx xx xxxxx (xxxxxxxxxx xxxxxxxx 9,5&xxxx;xx).

Xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

6.3.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxx 265 ×&xxxx;125 ×&xxxx;0,25&xxxx;xx

Xxxx	Xxxx (xxx)	Xxxxxx (X)	Xxxxx (xX)	Xxxxxx (X)	Xxxxx/xxxxxx (Xx)
1. Xxxxxxxxx xxxxxxxx	30	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 15	xxxxxxxxxx 4	xxx 300
2. Xxxxxxxx vzorku (7)	60	max. 2 500	max. 15	konstantní 4	xxx 1&xxxx;000
3. Xxxxxxx xxxxxxxx	60	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 5	xxx. 20	xxx 3&xxxx;000
	40	xxx. 2&xxxx;500	xxx. 6	xxx. 20	xxx 3 000
	30	max. 2 500	max. 7	max. 25	cca 3&xxxx;000

Xxxxxxxx: Xxxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxx nebo šířka xxxx, xxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxx xxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx (xxxx. xxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xx zdvojnásobí, xxxxxxx-xx xx xxx x&xxxx;xxxxxxxxx 265 ×&xxxx;125 ×&xxxx;0,5&xxxx;xx).

6.3.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxxx elektroforetického xxxxxxxx (2 gely 5,0 ×&xxxx;4,5&xxxx;xx, xxxxxxxxx bez xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xx xxx.

Xxxx	Xxxxxx	Xxxxx	Xxxxxx	Xxxxxxx	Xxxxx/xxxxxx
1. Xxxxxxxxx xxxxxxxx	1&xxxx;000 V	10,0 mA	3,5 X	8 °X	85 Xx
2. Xxxxxxxx xxxxxx	250 X	5,0 xX	2,5 X	8 °C	30 Xx
3. Xxxxxxxx	1&xxxx;200 X	10,0 mA	3,5 X	8 °X	80 Xx
4. Xxxxxxxx	1&xxxx;500 X	5,0 xX	7,0 X	8 °X	570 Xx

Xxxxxxxxx xxxxxx ve xxxx 2 xxxxxx xxx 0 Vh.

Aplikátor xxxxxx xx fázi 2 xxxxxxxxx při 30 Xx.

6.4.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxx xxxxxxxx

6.4.1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xxxxxxxx

Xxxxxxxx po xxxxxxx xxxxxxxx se xxxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx x xxx xx ihned xxxxx xx xxxxxxx/xxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx 200 ml xxxxxxxx (4.9). Xxx x ní xxxxxxxx 15 minut za xxxxxxx xxxxxxx.

6.4.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxx desky

Fixatér xxxx xxxxxx dekantujte x xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xx xxxx 30 xxxxxx xxxx xx 100 ml xxxxxxxxxxxxx roztoku (4.10) Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxx 250&xxxx;xx xxxxxxxxx roztoku (4.11.3) x gel xxxxxx xx xxxxxxx třepání xx dobu 45 xxxxx zbarvovat.

6.4.3.   Odbarvení xxxxxx xxxxx

Xxxxxxx roztok dekantujte x&xxxx;xxxxxxx desku xxxxxxx xxxxxxxxxx po xxxx 30 xxxxxx vždy xx 100&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx (4.10). Xxxx 15 minut xxxxxxxxxxxxx x&xxxx;200&xxxx;xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx; xxxx odbarvování xxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx, xxxxx xxxx xxxxxx xxxx a bezbarvé. Xxxxxxx xxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxx (2 × 2 xxxxxx) x&xxxx;xxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx (2 xx 3 hodiny) xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx (10 xx 15 xxxxx).

Xxxxxxxx 1: Xxxxxx, xxxxxxxxx, barvení x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxx teplotě 20&xxxx;°X. Xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxx.

Xxxxxxxx 2: Xxxxx xxxxxxxxxxxxxxx citlivější obarvení xxxxxxxx (xxxx. Silver Xxxxxxxx Xxx, Protein, Xxxxxxxxx Xxxxxxx, xxx x. 17-1150-01), xxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx plasminem xxxxxxx x poměru 5 xx/xx.

7.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXX

Xxxxxxxxx xx provádí xxxxxxxxxx proteinových obrazců xxxxxxxxxx xxxxxx s xxxxxxx xxxxxxxxxxxx standardů x stejného xxxx. Xxxxxxxxxx kravského xxxxx x xxxxxx xxxxxxxxxx x ovčího xxxxx, xxxxxx xxxxx, xxxxxxxx xxxxx nebo ze xxxxx xxxxxx, xxxxxx x buvolího mléka xx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx γ3- x γ2-xxxxxxx, xxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx x xxxxxxx xxxx xX 6,5 a xX 7,5 (obrázky 4x, x, xxxxxxx 5). Xxxxxxxx mez xx xxxxx xxx 0,5 %.

7.1.   Vizuální xxxxxxxxx

Xxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xx doporučuje xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx x xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx s xxxxx dosáhnout u xxxxxxxx, kozích x/xxxx xxxxxxxx γ2- x γ3-xxxxxxx (xxx „γ2 X,X,X“ x „γ3 X,X,X“ na xxxxxxxxx 4x, x x xxxxxxx 5) xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx. Xxxxx xx xxxxxx podmínek xxx přímo xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx (xxxxx nebo větší xxx 1 % nebo xx xxxx 1&xxxx;%) x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxx porovnáním xxxxxxxxx hovězích γ3- x&xxxx;γ2-xxxxxxx (viz „γ3 X“ a „γ2 X“ xx xxxxxxxxx 4&xxxx;x, x&xxxx;x&xxxx;xxxxxxx 5) s intenzitami xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxx 0&xxxx;% x&xxxx;1&xxxx;% (xxxxxx, xxxxxx), xxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxx (xxxxxxxx).

7.2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx hodnocení

Pokud xx xx možné, použijte xxx xxxxxxxxx poměru xxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxxxx γ2- a γ3-kaseinů x&xxxx;xxxxxxxx xxxx ovčích, xxxxxx x/xxxx buvolích γ2- a γ3-kaseinů (xxx xxxxxxx 5) denzitometrii (5.19). Xxxx hodnotu xxxxxxxxxx x xxxxxxx xxxxx píků γ2- x γ3-xxxxxxx v 1&xxxx;% referenčním xxxxxxxxx (xxxxx, kozím) xxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx standardu (xxxxxxx) xxxxxxxxxxxxx x xxxxx gelu.

Poznámka: Xxxx xxxxxx funguje xxxxxxxxxx, xxxxx xxxxxxxx jasný xxxxxxxxx xxxxxx xxxx xxxxxxxx γ2- x γ3-xxxxxxx v 1&xxxx;% xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx, xxxxx xxxxxx v 0&xxxx;% xxxxxxxxxxx xxxxxxxxx. X&xxxx;xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxx xxxxxxx dodržení xxxxxx xxxxxxxxxxx v dané metodě.

Vzorek xx považován xx xxxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxx xxxx xxxxxxxx γ2- x γ3-xxxxxxx nebo xxxxxxxxxxx poměrů ploch xxxx xxxx xxxxxx xxxx xxxxx xxx xxxxxxx odpovídající 1&xxxx;% xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx.

8.&xxxx;&xxxx;&xxxx;XXXXXXXXXX

Xxxxx F., Xxxx X., Xxxxxxxx X., Stingo X., Xxxxxxx P., Berner X, Xxxxxx X., Xx Xxxxxx A., Xxxxx X.: Xxx xx xxxxxxx xx&xxxx;xxxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx of xxx detection xx xxxxxx xxxx&xxxx;xx xxxxx xxx/xx caprine xxxxxx xx gel xxxxxxxxxxx xxxxxxxx of γ2-xxxxxxx.&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxxxx 45, 708–711 (1990).

Xxxxx X., Xxxxxxx X.X., Xxxxxxxx X., Xxxx X., Xxxxxx Xxxxx X., Xxxxx X., Xxx Giovine X.: X xxxxxxx method xx detect xxxxxx xxxx&xxxx;xx xxx xxx xxxxx xxxxxxx cheese xxxxx xxxxxxxxxxxxxx. Xxxxxxxxxxxxxxxxx 50, 83–85 (1995).

Xxxxxx X., Berner I, Xxxxxxxxxxxx H.: Sensitive xxxxxxxxx xx xxx xxxx&xxxx;xx xxx and xxxx xxxx&xxxx;xxx xxxxxx xx xxxxxxx ampholyte — xxx xxxxxxx xxxxxxxxx/xxxxxxxxxxx xX xxxxxxxx — xxxxxxxxxxx focusing xx γ-xxxxxxx xxxxx xxxxxxx xx signal xxxxxxxxx. xx: Xxxxxxxxxxxxxxx-Xxxxx 89 (B. J. Xxxxxx, ed.) xx 389-393, Bode-Verlag, Xüxxxxx (1989).

Xxxxxx Ι., Belitz X.-X., Kaiser K.-P.: Xxxxxxxx xxx Kuhmilch xx Xxxxx xxx Xxxxxxxxxxx bzw. -xäxx xxxxx isoelektrische Fokussierung xx harnstoffhaltigen Xxxxxxxxxxxxxxxxxx. X. Lebensm. Xxxxxx.&xxxx;Xxxxxx. 174, 195–199 (1982).

Xxxxxx X.X.: Xxxxxxxxx-xxxxx isoelectric xxxxxxxx xx 50-100&xxxx;μx xxxxxxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxx xx xxxxxxxxx xxxxx.&xxxx;Xxxxxxxxxxxxxxx 1, 43–56 (1980).

Xxxxxxx 1

Xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxx xxxxx

Xxxxxxx 2

Kaseinová vrstva xxxxxxxx xxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxx xx xxxxxxxxxx

Xxxxxxx 3

Xxxxxxxx technika xxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxx xxxx

x = xxxxxxxxx xxxxx (0,25&xxxx;xx); x = xxxxx xxxxx (5.3); x, x = skleněné xxxxx (5.1); d = xxxxxx xxxxxx (4.1.2); x = xxxxx fólie xxxx (5.2).

Xxxxxxx 4x

Xxxxxxxxxxxxx fokusace xxxxxxx ze xxxx x&xxxx;xxxxxx x&xxxx;xxxxxx xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, s různým xxxxxxx kravského xxxxx

% XX = xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, C = xxxxxxx, E = ovčí, X&xxxx;= kozí

Na xxxxxxx xx xxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxxx xxxx XXX.

Xxxxxxx 4x

Xxxxxxxxxxxxx fokusace kaseinů xx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx ovčího, xxxxxx a buvolího xxxxx, xxxxxxxxxx xxxxxxxxx, x&xxxx;xxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx

% XX = xxxxxxxx xxxxxxxxx mléka; 1 + = xxxxxx x xxxxxxx 1 % xxxxxxxxx mléka a x přídavkem xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxx xxxxx. X&xxxx;= xxxxxxx, E = xxxx, X&xxxx;= kozí, X&xxxx;= xxxxxx

Xx obrázku xx xxxxxxxxxx celá xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxx XXX.

Xxxxxxx 5

Xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxxx (STD) x&xxxx;xxxxxx xxxx xxxxxxxxxx xx xxxxx ovčího x&xxxx;xxxxxx xxxxx, xx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx

x, x = xxxxxxxxxx standardy xxxxxxxxxx 0 x 1 % xxxxxxxxx xxxxx; x-x = vzorky sýra xxxxxxxxxxxx 0, 1, 2, 3 x 7&xxxx;% xxxxxxxxx xxxxx; X&xxxx;= kravské, X&xxxx;= xxxx, G = kozí.

Byla xxxxxxx horní xxxxxxxx xxxx XXX při λ = 634 nm.

PŘÍLOHA XX

Xxxxxxxxx xxxxxx

1.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxxxxx jakosti

Analýzy xxxxxxxxx xxxxxxxxxx určené x&xxxx;xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx&xxxx;12 nařízení (ES) x.&xxxx;882/2004&xxxx;(*) xxxx xxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxx vzorků x&xxxx;xxxxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxx

1.

Xxxxx xxxxxx xx xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx s příslušným xxxxxxxxx xxx posuzovaný xxxxxxx. Xxxxxxxxxx-xx žádná ustanovení xxx xxxxx vzorku, xxxxxxx se xxxxxxxxxx xxxxxxx x normě XXX 707„Xxxxx x xxxxxx xxxxxxx – Xxxxxxxx pro odběr xxxxxx“,

2.

Xxxxxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx, které xxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxx x xxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx.

3.

Xxx xxxxxxx xxxxxxxxx v právních xxxxxxxxxx Xxxx se odebírají xxxxxxxxxx xxxxxx.

4.

Xxxxx xxxxx xx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxx, xxxxxxxx xxxxxxxx xxxx xxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx analýzu xxxxxxxxx produktu a xxxxxxx xxxxx xxxxxx, xxxxx spor prohraje. Výše xxxxxxx xxxxxxx xx xxxxxxx za xxxxxxxxxxx, xx&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxxx vzorky xxxxxxxx xxxx k dispozici x&xxxx;xxxx xxxxx uloženy x&xxxx;xxxxxxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxx platební agentuře xxxxxx k provedení xxxxxxx xx&xxxx;xxxxx pracovních dnů xx&xxxx;xxxxxxx xxxxxxxx první xxxxxxx. Platební agentura xxxxxxx xxxxxxx do 21 xxx xx xxxxxxxx xxxxxxx.

5.

Xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xx považuje xx xxxxxxx.

6.

Xxxxxxxx xxxxxxx xx pěti xxxxxxxxxx xxx xx xxxxxx xxxxxx prokáže, že xxxxxx xxx xxxxxx xxxxxx nebyl správný, xxxxx vzorků se x&xxxx;xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxx xxxxx xxxxxx xxxxxxxxx xxxxx, xx xxxxx xxxxxxx.

Xxxxxxx

Xxxxxxxxxx splnění xxxxxxx xxxxxxxxx mezní xxxxxxx x xxxxxxx xx šarži

1.   Podstata xxxxxx

X xxxxxxxxx, xxx právní xxxxxxxx xxxxxxxx xx xxxxxxx intervence x xxxxxxxxxx skladování xxxxxxx xxxxxxxx postupy pro xxxxx vzorků, xxxxxxxx xx xxxx xxxxxxx. Xx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx se používá xxxxxx xxxxxxx ze 3 jednotek vzorku xxxxxxxxxx xxxxxxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxxxx. Xxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxx xxxxxx. Xxxxxxx xxxxxxxx xx porovná xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxx hodnotami na xxxxxxx výpočtu 95 % xxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxx směrodatné odchylky, xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx buď xx tom, 1) xxx xxxx xxxxxx xxxxxxxxxx na xxxxxxx xxxxxxxxxxx spolupráce x&xxxx;xxxxxxxxx xxx σx x σX, nebo v případě xxxxxxxxxxxxxxxxx validace na xxx, 2) xxx xxxx xxxxxxxxxx vnitřní xxxxxxxxxxxxxxxxxx. Xxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxx xx xxxxx xxxxx xxxxxxxxx xxxxxx xxxxxxxx.

2.&xxxx;&xxxx;&xxxx;Xxxxxx xx xxxxxxxxxx xx xxxxxxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxx

X&xxxx;xxxxx případě xxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx σx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxxxx σR stanovena x&xxxx;xxxxxxxxx xxxx xxxxxxxx xxxxxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx validované xxxxxx.

Xxxxxxxx se xxxxxxxxxxx xxxxxx&xxxx; x xxxxx x xxxxxxxxxxx xxxxxx.

Xxxxxxxx xx rozšířená xxxxxxxxx (x =&xxxx;2) x&xxxx; xxxxx:

Xx-xx xxxxxxx xxxxxxxx xxxxxx x vypočítán xx xxxxxx xx xxxxx x = x ₁ + x ₂, x = x ₁ – x ₂, x = x ₁ · x ₂ xxxx x = x ₁/y ₂, xxxx xx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx běžných xxxxxxx xxx xxxxxxxxxxx xxxxxxxxxxxx xxxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx mezní xxxxxxx XX, xxxxxxxx

xxxxx xx xx xx xx, že xxxxxxx XX xxxxxxxx.

Xxxxx xx xxxxxxxx xx xxxxxxxxxxxx xxxxx zákonem xxxxxxxxx xxxxx hodnotě XX, xxxxxxxx

xxxxx xx xx xx xx, že xxxxxxx XX vyhovuje.

3.   Vnitrolaboratorní xxxxxxxx x&xxxx;xxxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx vnitřní reprodukovatelnosti

V případech, xxx xxxx použity xxxxxx, které xxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx xxxxxxxx, x&xxxx;xxx nebyla xxxxxxxxx xxxxxxxx xxx xxxxxxxxx xxxxxxxxx, je xxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxxxx xxxxxxxx. Xxxxxxx σr x σ X xx xxxx xx xxxxxx pro výpočet xxxxxxxxx xxxxxxxxx U xxxxxx xxxxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxx opakovatelnosti xxx x&xxxx;xxxxxxxxxx xxxxxxxx vnitřní xxxxxxxxxxxxxxxxxxx xx X .

Pravidla, xxx xx xxxxx xxxxxxxxx xx xxxxxx xxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxx xxxxx xxxxxxx, xxxx xxxxxxx x&xxxx;xxxx 1. Považuje-li xx však xxxxx xx xxxxxxxxxxx xxxxxxx xxxxxxxxxx xxxxx hodnotu, xxxxxx se xxxxxxxx xxxxxx xxxxxx xxxxxxxxx x&xxxx;xxxxx nařízení a výsledek xx vyhodnotí x xxxxxxx s xxxxx 1.